TWI630929B - 微膠囊製劑及其製造方法 - Google Patents

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Abstract

本發明課題在於提供一種胜肽性生理活性物質之封入效率高的微膠囊製劑之製造方法,其係使用了可避免胜肽性生理活性物質直接與有機溶劑層接觸的活體內分解性聚合物。
本發明之解決手段是一種微膠囊製劑之製造方法,其含有下述步驟:步驟A:於含有胜肽性生理活性物質之重金屬鹽的水系溶劑中添加鹼性胺基酸,獲得含有胺基酸之S/W型懸浮液;步驟B:於含有活體內分解性聚合物之有機溶劑中添加鹼性胺基酸,獲得含有胺基酸之聚合物溶液;步驟C:將前述含有胺基酸之S/W型懸浮液分散於前述含有胺基酸之聚合物溶液亦即油相中,獲得S/W/O型乳化液;步驟D:將前述S/W/O型乳化液分散於水相中,獲得S/W/O/W型乳化液;及步驟E:去除前述S/W/O/W型乳化液中的有機溶劑。

Description

微膠囊製劑及其製造方法 發明領域
本發明有關於含有胜肽性生理活性物質之微膠囊製劑及其製造方法。
發明背景
從活體內消化酵素所行消化之接受容易度、親水性及不穩定性等來看,如激素、細胞激素、造血因子、生長因子、酵素、可溶性或可溶化(soluble or solubilized)受體、抗體、胜肽性抗原、血液凝固因子或黏著因子等之類的胜肽性生理活性物質具在其投予形態上,主要是使用透過注射等非經口投予方法。透過注射之投予,由於在投予時會伴隨疼痛,從改善患者之QOL(Quality of Life)及提升順從(compliance)的觀點來看,為了延長投予間隔並避免頻繁的投予,針對如上述之生理活性物質等,徐放性製劑化是受到期盼的(非專利文獻1及2)。
作為技術性解決如此問題之手段而言,有關於含有具生理活性作用及/或藥理活性作用之蛋白之微膠囊型徐放性製劑的研究已有多數報告,例如,專利文獻1揭示到 一種含有無晶型水溶性生理活性物質與高分子聚合物而成之微膠囊,且在實施例教示到將無晶型之抗血小板藥(S)-4-[(4-甲脒基苯甲醯基)甘胺醯基]-3-甲氧基羰基甲基-2-哌酮-1-乙酸((S)-4-[(4-amidinobenzoyl)glycyl]-3-methoxycarbonylmethyl-2-oxopiperazine-1-acetic acid)分散到預先已溶解L-精胺酸之乳酸.乙醇酸共聚物的二氯甲烷溶液中,並在以旋轉式均質機(polytron)微粒化之後,在氯化鈉水溶液中做成S/O/W型乳化液。
又,專利文獻2揭示到一種生理活性物質之初期釋放經抑制之徐放性製劑,其是將含有生理活性物質之基質與陽離子性物質及/或多元醇類組合而成,並且教示到將S/O型分散液進一步添加至水性溶劑(W相)來形成S/O/W型乳化液,前述S/O型分散液是使將生理活性物質溶液進行冷凍乾燥所得之粉體(S相)分散於溶解有活體內分解性聚合物之有機溶劑液(O相)中者。
除此之外,含有具生理活性作用及/或藥理活性作用之蛋白之微膠囊型徐放性製劑等亦有多數報告(專利文獻3及4以及非專利文獻3及4)。
先行技術文獻 專利文獻
專利文獻1:日本特開平8-151321號公報
專利文獻2:日本特開2002-255857號公報
專利文獻3:US 6083534號公報
專利文獻4:日本特開平8-217691號公報
非專利文獻
非專利文獻1:Drug Discovery Today. 7; 1184-1189 (2002)
非專利文獻2:J. Control. Rel. 87; 187-198 (2003)
非專利文獻3:European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics, 86 393-403 (2014)
非專利文獻4:Pharmaceutical Research, 14, 730-735 (1997)
非專利文獻5:Journal of Pharmaceutical Science, 88 1320-1325 (1999)
非專利文獻6:Journal of the Chinese Medical Association, 74 (2011), 544-551
發明概要
上述技術由於是透過在水相中分散含有PLA或PLGA之油相的步驟而形成油水界面,因此在蛋白之周緣部與內部會產生扭曲,3維構造被破壞,產生變性,而無法否定會有無法發揮生理活性作用之可能性(非專利文獻5)。因此,期盼有可避免胜肽性生理活性物質變性的方法。而吾人認為使用了活體內分解性聚合物之胜肽性生理活性物質封入效率高的製造方法,在技術上的有用性來說很高。並進一步期盼幾乎以固定比例釋放胜肽性生理活性物質之微膠囊製劑的製造方法。
本案發明者有鑑於上述課題而進行精心研究,結果發現,透過含有下述步驟可提供一種微膠囊製劑之製造方法,而該方法即是使用了即便在生理活性物質直接曝露在油水界面之情況下仍可避免其變性的活體內分解性聚合物,故該製造方法之生理活性物質等封入效率高;而該製造方法使用之步驟為:於含有胜肽性生理活性物質之重金屬鹽的水系溶劑中添加鹼性胺基酸而獲得含有胺基酸之S/W型懸浮液,並將該含有胺基酸之S/W型懸浮液分散於含有鹼性胺基酸及活體內分解性聚合物之含有胺基酸之聚合物溶液中,做成S/W/O型乳化液後,將其分散於水相而獲得S/W/O/W型乳化液並自其中去除有機溶劑。
此外,於本說明書中,除非另有說明,「胜肽性生理活性物質之重金屬鹽」意指混合胜肽性生理活性物質與重金屬鹽而生成之皆不溶於水及有機溶劑的不溶性沉澱物或凝集體。
本發明是基於如此見解並進一步進行探討而完成。亦即,本發明有關於以下之含有胜肽性生理活性物質之微膠囊製劑的製造方法。項1.一種微膠囊製劑之製造方法,含有下述步驟:步驟A:於含有胜肽性生理活性物質之重金屬鹽的水系溶劑中添加鹼性胺基酸,獲得含有胺基酸之S/W型懸浮液;步驟B:於含有活體內分解性聚合物之有機溶劑中添加鹼性胺基酸,獲得含有胺基酸之聚合物溶液; 步驟C:將前述含有胺基酸之S/W型懸浮液分散於前述含有胺基酸之聚合物溶液(亦即,油相)中,獲得S/W/O型乳化液;步驟D:將前述S/W/O型乳化液分散於水相中,獲得S/W/O/W型乳化液;及步驟E:將前述S/W/O/W型乳化液所含有之有機溶劑去除而獲得微膠囊製劑。
項2.如項1之製造方法,其中前述含有胺基酸之S/W型懸浮液中鹼性胺基酸之含量、與前述含有胺基酸之聚合物溶液中鹼性胺基酸之含量的莫耳比(含有胺基酸之S/W型懸浮液中鹼性胺基酸之含量:含有胺基酸之聚合物溶液中鹼性胺基酸之含量)為1:5~5:1。
項3.如項1或2之製造方法,其中前述胜肽性生理活性物質之重金屬鹽其平均粒徑為1μm以下,且對水及有機溶劑皆不溶。
項4.如項1~3中任一項之製造方法,其進一步含有下述步驟:於前述含有胜肽性生理活性物質之水系溶劑中添加重金屬鹽,獲得含有胜肽性生理活性物質之重金屬鹽的水系溶劑。
項5.如項1~4中任一項之製造方法,其中前述胜肽性生理活性物質具有IgG結構。
項6.如項1~5中任一項之製造方法,其中前述胜肽性生理活性物質為TuNEX。
項7.如項1~6中任一項之製造方法,其中前述重金屬鹽 為鋅鹽。
項8.如項1~7中任一項之製造方法,其中前述鹼性胺基酸為L-精胺酸或L-組胺酸。
項9.如項1~8中任一項之製造方法,其進一步含有步驟F:將前述步驟E中從S/W/O/W型乳化液去除有機溶劑而獲得的微膠囊進行冷凍乾燥或噴霧乾燥,而獲得粉末。
項10.如項1~9中任一項之製造方法,其中前述活體內分解性聚合物為聚乳酸、乳酸-乙醇酸共聚物或該等之混合物。
項11.如項10之製造方法,其中,前述活體內分解性聚合物中乳酸及乙醇酸之莫耳比(乳酸:乙醇酸)為99:1~50:50。
項12.如項11之製造方法,其中,前述活體內分解性聚合物中乳酸及乙醇酸之莫耳比(乳酸:乙醇酸)為75:25~50:50。
項13.如項1~12之製造方法,其中前述活體內分解性聚合物之重量平均分子量為3000~200000。
項14.如項13之製造方法,其中前述活體內分解性聚合物之重量平均分子量為3000~50000。
項15.如項14之製造方法,其中前述活體內分解性聚合物之重量平均分子量為5000~20000。
項16.一種微膠囊製劑,可藉由如項1~15中任一項之製造方法來製造。
若依據本發明,將可提供一種可避免胜肽性生理活性物質直接與有機溶劑層接觸的製造方法。又,可提供一種胜肽性生理活性物質之封入效率高的製造方法。
圖1是在實施例1及4獲得之微膠囊表面及剖面的掃描型顯微鏡(SEM)圖像。
圖2是顯示將實施例1及4對大鼠進行皮下投予時之血清中藥物濃度概況的圖表。
用以實施發明之形態
以下將針對本發明進行詳細說明。
此外,於本說明書中,除非另有說明,「室溫」意指1~30℃之範圍的溫度。
微膠囊製劑之製造方法
本發明之微膠囊製劑之製造方法含有以下步驟:步驟A:於含有胜肽性生理活性物質之重金屬鹽的水系溶劑中添加鹼性胺基酸,獲得含有胺基酸之S/W型懸浮液;步驟B:於含有活體內分解性聚合物之有機溶劑中添加鹼性胺基酸,獲得含有胺基酸之聚合物溶液;步驟C:將前述含有胺基酸之S/W型懸浮液分散於前述含有胺基酸之聚合物溶液(亦即,油相)中,獲得S/W/O型乳化液;步驟D:將前述S/W/O型乳化液分散於水相中,獲得S/W/O/W型乳化液;及 步驟E:去除前述S/W/O/W型乳化液中的有機溶劑。以下將針對各步驟進行說明。
步驟A
步驟A,是於含有胜肽性生理活性物質之重金屬鹽(以下,於本說明書中有時稱「胜肽鹽」。)的水系溶劑中添加鹼性胺基酸,獲得含有胺基酸之S/W型懸浮液。
胜肽性生理活性物質可舉具有由複數個胺基酸殘基構成之胜肽,且在活體內可顯示出有用生理活性之化合物。其分子量並無特別限定,即便是像超過15萬之胜肽性生理活性物質亦可適宜使用。胜肽性生理活性物質更具體可舉例如激素、細胞激素、造血因子、生長因子、酵素、可溶性或可溶化受體、抗體、構成抗體之一部份的區域、胜肽性抗原、血液凝固因子、黏著因子,或者透過結合該等而獲得之物質等。又,在一實施形態之中,胜肽性生理活性物質亦可為血清白蛋白(例如,人類血清白蛋白(HSA))。
激素可舉例如胰島素、生長激素、利尿鈉肽、胃泌素、泌乳素、促腎上腺皮質素(ACTH)、促甲狀腺素(TSH)、黃體成長激素(LH)、濾泡刺激素(FSH)、人絨毛膜促性腺激素(HCG)、腸動素、血管舒緩素(kallikrein)等。
細胞激素可舉例如淋巴因子(lymphokine)、單核因子(monokine)等。淋巴因子可舉例如干擾素(αβ、γ)、介白素(IL-2至IL-12)等。單核因子可舉例如例介白素1(IL-1)、腫瘤壞死因子等。
造血因子可舉例如紅血球生成素、顆粒球聚落刺激因子(G-CSF)、巨噬細胞聚落刺激因子(M-CSF)、促血小板生成素、血小板生長刺激因子、巨核細胞增效劑(megakaryocyte potentiators)等。
生長因子可舉例如鹼性或者酸性之纖維母細胞生長因子(FGF)或其等之家族(family)(例如,FGF-9等)、神經細胞生長因子(NGF)或其等之家族、類胰島素生長因子(例如,IGF-1、IGF-2等)、與骨生長相關之因子((BMP,骨成形性蛋白質)、肝細胞生長因子(HGF)或其等之家族等。
酵素可舉例如超氧化物歧化酶(SOD)、織性血漿蛋白原活化劑(tPA)等。
可溶性受體可舉可溶性介白素6(IL-6)受體、類胰島素生長因子結合蛋白(IGFBP)、可溶性腫瘤壞死因子受體、可溶性上皮成長因子受體、可溶性介白素1受體等。
可溶化受體可舉將眾所皆知的受體,例如介白素1受體、介白素6受體、腫瘤壞死因子受體、Fas配位子等以基因工程手法進行可溶化者等。
抗體可舉例如人類單株抗體、由源自小鼠之可變區與源自人類之恆定區構成之人類-小鼠嵌合單株抗體等。抗體之類型可舉例如IgM、IgG、IgE等。抗原可舉例如可透過前述抗體來辨識者等,進一步亦可舉血小板、病毒等。又,亦可舉透過結合抗體與細胞而獲得之物質、透過結合抗體與其他化合物而獲得之物質等。
血液凝固因子可舉如第VIII因子等。
黏著因子可舉纖維結合素(fibronectin)、ICAM-1等。
生理活性物質進一步亦可舉內皮素、Arg-Gly-Asp-Ser(RGDS)、腦垂體腺苷酸環化酶激活化肽(PACAP)等。
在上述胜肽性生理活性物質之中,作為使用IgG抗體之情況的一實施形態,可使用TuNEX,其為基因重組TNF-α受體蛋白,且為具有依那西普(Etanercept)或與依那西普類似之胺基酸序列之分子量約15萬的抗體。依那西普及TuNEX在活體內半衰期短,是特別期盼開發出徐放性製劑化的胜肽性生理活性物質之一(非專利文獻6)。
此外,胜肽性生理活性物質,在上述之中可僅使用1種,亦可使用2種以上。
又,形成胜肽鹽之重金屬可舉例如2價、3價或4價之金屬等,具體可舉鈣、鎂等鹼土類金屬,鐵、銅、鋅等過渡金屬,鋁、錫等。其中,宜為鹼土類金屬或過渡金屬,且以鋅特別為佳。
鹼性胺基酸並無特別限定,可舉精胺酸、離胺酸、組胺酸等。鹼性胺基酸可為D體及L體之任一,亦可混合D體與L體。該等之中宜為L-精胺酸或L-組胺酸,且以L-精胺酸特別為佳。在步驟A獲得之S/W型懸浮液,於該等鹼性胺基酸之中可僅含有1種,亦可含有2種以上。鹼性胺基酸必定為游離型,而非鹽的形態。
含有胜肽鹽之水系溶劑可藉由於胜肽性生理活 性物質之水溶液中添加重金屬鹽(以下,於本說明書中有時稱「添加用重金屬鹽」。)並混合來獲得。
胜肽鹽之調製方法可舉例如以下所示方法。但並非侷限於以下之方法。
首先,將含有胜肽性生理活性物質之水溶液與添加用重金屬鹽邊攪拌邊混合,使胜肽性生理活性物質之重金屬鹽沉澱。藉由透過將其離心來分離可獲得胜肽鹽。離心之條件並無特別限定,可設例如以7400rpm及在4℃下10分鐘。
含有胜肽性生理活性物質之水溶液中的肚肽性生理活性物質濃度通常宜設在5w/v%以下。
添加用重金屬鹽對胜肽性生理活性物質之莫耳比(添加用重金屬鹽/胜肽性生理活性物質)並無特別限定,若為1000以下之範圍內即可。其下限值宜為10,且以30為佳。其上限值宜為650,且以400為佳,以100特別為佳。當下限值為10時,上限值宜為650,且以400為佳,以100特別為佳。當下限值為30時,上限值宜為650,且以400為佳,以100特別為佳。
獲得之胜肽鹽宜冷凍乾燥做成粉末狀。藉此,可提升更長期間之化學穩定性。
接著,將該胜肽鹽分散於水系溶劑中。然後,透過於分散有該胜肽鹽之水系溶劑中添加鹼性胺基酸並混合,獲得供給至下述步驟B之含有胺基酸之S/W型懸浮液。
添加用重金屬鹽可做成含有該添加用重金屬鹽 之水溶液來添加。此時,含有該添加用重金屬鹽之水溶液中重金屬鹽之濃度依胜肽性生理活性物質之種類而異,然下限值可設為0.01w/v%,上限值可設為1w/v%,且以0.5w/v%為佳。亦即,可設為0.01~1w/v%,且以設為0.01~0.5w/v%為佳。
添加用重金屬鹽並無特別限定,可舉例如重金屬與有機酸之鹽,或重金屬與無機酸之鹽,且以與無機酸之鹽為佳。
前述與無機酸之鹽可舉例如鹵化鹽(例如氯化鋅、氯化鈣等)、硫酸鹽、硝酸鹽、硫氰酸鹽等,且以氯化鋅特別為佳。
前述與有機酸之鹽中的有機酸可舉例如脂肪族羧酸、芳香族酸。脂肪族羧酸宜為碳數2~9之脂肪族羧酸。脂肪族羧酸可舉例如脂肪族單羧酸、脂肪族二羧酸、脂肪族三羧酸等。該等脂肪族羧酸可為飽和亦可為不飽和。
當設胜肽鹽之量為100w/w%時,胜肽鹽中胜肽性生理活性物質之含量宜在1~30w/w%之範圍。
胜肽鹽之粒徑宜為1μm以下,且以更微細為佳。又,胜肽鹽之粒徑並無特別限定,其下限值可為100nm,其上限值宜為600nm。
前述含有胜肽性生理活性物質之水溶液及前述含有添加用重金屬鹽之水溶液的任一者或兩者,皆可進一步含有其他添加物。該添加物可舉聚乙烯醇(PVA)、聚山梨醇酯80等,其中,宜為PVA。透過進一步含有該添加物, 可將前述含有胜肽鹽之水系溶劑中的胜肽鹽粒徑做得更小。藉由將胜肽鹽之粒徑做得更小,則利用本發明所得之微膠囊製劑中,可獲得胜肽性生理活性物質更均一分散的製劑。
在將PVA添加至含有胜肽性生理活性物質之水溶液及含有添加用重金屬鹽之水溶液之任一時的PVA濃度並無特別限定,可設為0.05~2w/v%。
添加用重金屬鹽對胜肽性生理活性物質之莫耳比(添加用重金屬鹽/胜肽性生理活性物質)並無特別限定,宜為10~1250。
將前述胜肽鹽分散於水系溶劑中之方法可舉例如斷續震盪法、透過螺旋槳型攪拌機或渦輪型攪拌機等攪拌器的方法、膠體研磨法、均質法、超音波照射法等。
水系溶劑方面,若為非可溶解前述胜肽鹽之水系溶劑(例如,生理食鹽水等)的水系溶劑即可,可使用水、pH緩衝液等。
將前述胜肽鹽分散於水系溶劑中時,宜對前述含有胜肽鹽之水系溶劑進行超音波照射,藉此,可縮小獲得之胜肽鹽的粒徑。超音波照射之照射條件並無特別限定,可例如每20秒間隔5秒合計20分鐘,亦即,合計之超音波照射時間為16分鐘,且可以頻率20kHz來照射。
又,於前述分散有胜肽鹽之水系溶劑添加鹼性胺基酸並混合時,在不損害胜肽性生理活性物質所具有之活性及本案發明效果之程度下,可加溫前述水系溶劑。藉由 加溫,可使前述水系溶劑之黏度降低,並可使前述鹼性胺基酸之溶解度提升,因此可獲得胜肽性生理活性物質等更均一分散之含有胺基酸之S/W型懸浮液。
在不損害胜肽性生理活性物質所具有之活性及本案發明效果之程度下,以超音波照射取代加溫,或者除了加溫之外還進行超音波照射,也能有效使胜肽性生理活性物質等更均一分散。
將胜肽性生理活性物質在微膠囊製劑中更均一分散,由於有助於以固定速度釋放胜肽性生理活性物質,而可認為在該加溫條件下及/或超音波照射條件下添加及混合鹼性胺基酸之有用性高。
加溫時之溫度範圍的下限值設為25℃即可,且宜為30℃,以35℃為佳。又,其上限值設為45℃即可,且以40℃為佳。當下限值為25℃時,上限值設為45℃即可,且宜為40℃。當下限值為30℃時,上限值設為45℃即可,且宜為40℃。當下限值為35℃時,上限值設為45℃即可,且宜為40℃。藉由設在該溫度範圍,可維持胜肽性生理活性物質之活性,且同時可調製均一性更高之含有胺基酸之S/W型懸浮液。
前述胜肽鹽對水及有機溶劑皆不溶,但溶解於生理食鹽水中。透過將前述胜肽鹽溶解於生理食鹽水中而溶出之胜肽性生理活性物質,可表現出相對於成為胜肽鹽之前之胜肽性生理活性物質同等的生理活性。亦即,在將胜肽鹽投予至活體內時,胜肽鹽會在活體內溶解,而溶出之 胜肽性生理活性物質可表現出所欲之生理活性。
步驟B
步驟B,是於含有活體內分解性聚合物之有機溶劑中添加鹼性胺基酸,獲得含有胺基酸之聚合物溶液。
活體內分解性聚合物若為在活體內緩慢分解而可獲得所欲之徐放性能者即可,可舉例如脂肪族聚酯、聚-α-氰基丙烯酸酯、聚胺基酸等。宜為脂肪族聚酯。該等亦可以適宜比例混合使用。聚合之形式無規、崁段、接枝皆可,而以無規聚合最佳。
在活體內分解性聚合物方面,具體而言可舉例如聚乳酸、聚乙醇酸、乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)、聚檸檬酸、聚蘋果酸、乳酸-天門冬胺酸共聚物、乳酸-羥基己酸共聚物、乙醇酸-羥基己酸共聚物、聚丙內酯、聚丁內酯、聚戊內酯、聚己內酯、聚碳酸三亞甲酯、聚(對-二酮)(poly(p-dioxanone))、聚(a-氰基丙烯酸酯)、聚(β-羥基酪酸)、聚草酸三亞甲酯、聚原酸酯、聚原酸碳酸酯、聚乙烯碳酸酯、聚γ-芣基-L-麩胺酸、聚L-丙胺酸及聚海藻酸、聚碳酸酯、聚酯醯胺、聚胺基酸、聚伸烷基烷基化物(polyalkylene alkylate)、聚乙二醇、聚胺基甲酸酯等單獨聚合物及該等之共聚物。該等之中,宜為聚乳酸及乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)。該等活體分解性聚合物可1種單獨使用,亦可2種以上混合使用。
使用聚乳酸或乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)時,其重量平均分子量自廣泛範圍適宜選擇即可,例如 3000~200000左右,且宜為3000~50000左右,以5000~20000左右為佳。
又,上述乳酸-乙醇酸共聚物中乳酸:乙醇酸(lactic acid:glycolic acid)之比率並無特別限定,自廣泛範圍適宜選擇即可,一般而言乳酸:乙醇酸(lactic acid:glycolic acid)之莫耳比為99:1~50:50左右,且宜為75:25~50:50左右。
聚乳酸為聚-D-乳酸、聚-L-乳酸、聚-DL-乳酸之任一皆可,宜為聚-DL-乳酸。又,乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)為D-乳酸-乙醇酸共聚物、L-乳酸-乙醇酸共聚物、DL-乳酸-乙醇酸共聚物之任一皆可,宜為DL-乳酸-乙醇酸共聚物。
活體內分解性聚合物宜在末端具有遊離羧基。藉由具有遊離羧基,可認為在後述之步驟C中,活體內分解性聚合物將可在含有胺基酸之S/W型懸浮液與含有胺基酸之聚合物溶液之界面中發揮界面活性作用,而可形成更穩定之S/W/O型乳化液。
活體內分解性聚合物之濃度並無特別限定,其下限值設為5w/v%即可,且宜為20w/v%,以40w/v%為佳。又,其上限值設為30w/v%即可,且宜為40w/v%,以60w/v%為佳。當下限值為5w/v%時,上限值設為30w/v%即可,且宜為40w/v%,以60w/v%為佳。當下限值為20w/v%時,上限值設為30w/v%即可,且宜為40w/v%,以60w/v%為佳。當下限值為40w/v%時,上限值宜為60w/v%。
有機溶劑若為可溶解活體內分解性聚合物則無 特別限定,可舉例如氯仿、二氯乙烷、三氯乙烷、二氯甲烷、四氯化碳等鹵化烴;乙醚、異丙醚等醚類;乙酸乙酯、乙酸丁酯等脂肪酸酯;苯、甲苯、二甲苯等芳香族烴;乙醇、甲醇、異丙醇等醇類;乙腈等腈;二甲基甲醯胺等醯胺;二甲基酮、甲基乙基酮等丙酮類等。該等之中宜為對水呈非混和性之有機溶劑,且以二氯甲烷特別為佳。該等有機溶劑可僅使用1種,亦可2種以上混合使用。又,醚類及醇類宜做成2種以上之混合溶劑。
鹼性胺基酸可僅使用前述所掲之1種,亦可使用2種以上。又,步驟B中所使用之鹼性胺基酸亦可與步驟A中之鹼性胺基酸種類相異,然宜相同。
含有活體內分解性聚合物之有機溶劑,可藉由例如於有機溶劑中添加活體內分解性聚合物並攪拌來獲得。藉由在不損害本案發明效果之程度下進行超音波照射,有時活體內分解性聚合物之溶解會變容易。
含有胺基酸之聚合物溶液可藉由例如於前述含有活體內分解性聚合物之有機溶劑中添加鹼性胺基酸並使之溶解來調製。
使鹼性胺基酸溶解時,例如,於含有活體內分解性聚合物之有機溶劑中添加鹼性胺基酸並在室溫條件下放置一夜,亦可容易溶解活體內分解性聚合物及鹼性胺基酸。如此花費長時間使之溶解,對用以獲得均一溶解有活體內分解性聚合物與鹼性胺基酸之兩者的含有胺基酸之聚合物溶液是有效的。又,一夜放置後進一步進行超音波照射對 用以獲得上述之均一溶液亦有效。超音波照射之照射條件並無特別限定,可例如每20秒間隔5秒合計20分鐘,亦即,合計之超音波照射時間為16分鐘,且可以頻率20kHz來照射。
步驟C
步驟C,是將前述含有胺基酸之S/W型懸浮液分散於前述含有胺基酸之聚合物溶液(亦即,油相)中,獲得S/W/O型乳化液。
含有胺基酸之聚合物溶液中的有機溶劑是對水呈非混和性之溶劑時,前述含有胺基酸之S/W型懸浮液會在含有胺基酸之聚合物溶液中成為微細液滴並分散。
分散方法可舉例如斷續震盪法、透過螺旋槳型攪拌機或渦輪型攪拌機等攪拌器之方法、膠體研磨法、均質法、超音波照射法等。
S/W/O型乳化液之調製方法並無特別限定,例如可使用下述方法:以均質機等將含有胺基酸之S/W型懸浮液與前述含有胺基酸之聚合物溶液的混合物以適當旋轉速度攪拌,在水系溶劑中將S/W型懸浮液微細化做成S/W/O型乳化液之方法;於陶瓷過濾器等具有微細貫通孔之過濾器使含有胺基酸之S/W型懸浮液與含有胺基酸之聚合物溶液的混合物以固定速度通過,藉此微細化上述溶液做成S/W/O型乳化液之方法;於陶瓷過濾器等具有微細貫通孔之過濾器使含有胺基酸之S/W型懸浮液以固定速度通過並微細化上述溶液後,與含有胺基酸之聚合物溶液混合之方法等。
S/W/O型乳化液之調製方法的更具體方法可舉例如以下所示方法。但並非為以下方法所侷限。
首先,將前述含有胺基酸之S/W型懸浮液慢慢滴入至前述含有胺基酸之聚合物溶液中。
將添加了含有胺基酸之S/W型懸浮液的含有胺基酸之聚合物溶液使用均質機以9600rpm攪拌,獲得S/W/O型乳化液。
在含有胺基酸之S/W型懸浮液與含有胺基酸之聚合物溶液之混合比方面,若為可獲得S/W/O型乳化液之範圍則無特別限定,以容積比而言宜在1:3~1:30之範圍內,且以1:5~1:20為佳。
又,在S/W/O型乳化液中之鹼性胺基酸含量方面,相對於前述活體內分解性聚合物,宜為1~10w/w%,且以1~8w/w%為佳,以2~6w/w%更佳。
在步驟C,在不損害胜肽性生理活性物質所具有之活性及本案發明效果之程度下,對添加了含有胺基酸之S/W型鹽濁液的含有胺基酸之聚合物溶液進行超音波照射對用以使胜肽性生理活性物質更均一分散亦有效。由於藉由超音波照射可縮小在步驟C獲得之S/W/O型乳化液中液滴之粒徑,因此含有胺基酸之S/W型懸浮液能容易的在含有胺基酸之聚合物溶液中更均一分散。
胜肽性生理活性物質在微膠囊製劑中更均一分散一事,由於亦有助於以固定速度來釋放胜肽性生理活性物質,因此可認為將步驟C在該加溫條件下及/或超音波照 射條件下進行之有用性高。
在本發明之製造方法中,在含有胺基酸之S/W型懸浮液及含有胺基酸之聚合物溶液之兩者中含有鹼性胺基酸。
在含有胺基酸之S/W型懸浮液及含有胺基酸之聚合物溶液中所含有之鹼性胺基酸之分配比,以莫耳比(含有胺基酸之S/W型懸浮液所含有之鹼性胺基酸:含有胺基酸之聚合物溶液所含有之鹼性胺基酸)而言,可設在1:5~5:1之範圍,且宜為1:3~3:1,以1:1特別為佳。
鹼性胺基酸是使用精胺酸時,含有胺基酸之S/W型懸浮液及含有胺基酸之聚合物溶液所含有之鹼性胺基酸濃度可設在例如,在含有胺基酸之S/W型懸浮液為0.05~0.075w/v%、在含有胺基酸之聚合物溶液為0.01~0.03w/v%。在步驟C獲得之S/W/O型乳化液所含有之鹼性胺基酸之濃度下限值設為0.01w/v%即可,且宜為0.03w/v%,以0.05w/v%為佳。又,其上限值設為0.1w/v%即可,且宜為0.5w/v%,以1w/v%為佳。當下限值為0.01w/v%時,上限值設為0.1w/v%即可,且宜為0.5w/v%,以1w/v%為佳。當下限值為0.03w/v%時,上限值設為0.1w/v%即可,且宜為0.5w/v%,以1w/v%為佳。當下限值為0.05w/v%時,上限值設為0.1w/v%即可,且宜為0.5w/v%,以1w/v%為佳。
在活體內分解性聚合物是使用了PLGA之情況下,S/W/O型乳化液所含有之鹼性胺基酸與使用數平均分子量算出之PLGA之莫耳比(鹼性胺基酸:PLGA)宜為2:1~1:5, 且以2:1~1:2為佳。
藉由將前述鹼性胺基酸之分配比設在上述範圍,將可獲得使在S/W/O/W型乳化液中胜肽性生理活性物質的封入效率顯著提升如此驚人效果。
步驟D
步驟D,是將前述S/W/O型乳化液分散於水相中,獲得S/W/O/W型乳化液。
前述水相並無特別限定,可使用任意的水系溶劑,且宜使用水。
前述水相亦可含有乳化劑。乳化劑宜為可形成穩定之S/W/O/W型乳化液者,若為如此者則皆可,可使用例如油酸鈉、硬脂酸鈉、月桂基硫酸鈉等陰離子性界面活性劑;聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯、聚氧乙烯蓖麻油衍生物等非離子性界面活性劑;聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇(PVA)、羧甲基纖維素、卵磷脂、明膠、玻尿酸等。該等乳化劑可僅含有1種,亦可含有2種以上。
前述水相含有乳化劑時,其濃度並無特別限定,因乳化劑之種類而異。宜為臨界膠束濃度(critical micelle concentration)以上之濃度,且相對於水相,例如在非離子性界面活性之情況下,為0.005~0.5w/v%左右,且宜為0.01~0.1w/v%左右,以0.01~0.05w/v%左右為佳。在PVA之情況下,為0.01~0.5w/v%左右,且宜為0.01~0.1w/v%左右,以0.05~0.1w/v%左右為佳。
S/W/O/W型乳化液之調製方法並無特別限定,例 如可使用下述方法:以均質機等將S/W/O型乳化液與水相之水系溶劑的混合物以適當旋轉速度攪拌,在水系溶劑中將S/W/O型乳化液微細化做成S/W/O/W型乳化液之方法;於陶瓷過濾器等具有微細貫通孔之過濾器使S/W/O型乳化液與水相之水系溶劑的混合物以固定速度通過,藉此微細化上述溶液做成S/W/O/W型乳化液之方法;於陶瓷過濾器等具有微細貫通孔之過濾器使S/W/O型乳化液以固定速度通過並微細化上述溶液後,與水相之水系溶劑混合之方法等。此時,水相之溫度宜在20℃以下,且以15℃以下為佳。
S/W/O/W型乳化液之調製方法,更具體而言,可舉例如以下所示方法。但並非為以下方法所侷限。
首先,預先將水相設定至15℃以下,邊將其使用均質機攪拌,邊將S/W/O型乳化液慢慢於轉子(rotor)的正下方滴入至前述水系溶劑中。進一步將添加有S/W/O型乳化液之水相平穩的攪拌,可獲得S/W/O/W型乳化液。
用以使S/W/O型乳化液分散之水相的量,若為可獲得S/W/O/W型乳化液之範圍則無特別限定,相對於S/W/O型乳化液之量為過剩量即可,例如宜為5倍當量以上,且以10倍當量以上為佳。
步驟E
步驟E,是將在步驟D獲得之S/W/O/W型乳化液中的有機溶劑去除並獲得微膠囊製劑。
步驟E中去除有機溶劑之方法可採用通常使用之水中乾燥法等,可舉例如以槳式攪拌器(paddle mixer)或電 磁攪拌器(magnetic stirrer)等攪拌之方法;邊以槳式攪拌器或電磁攪拌器等攪拌邊緩慢減壓之方法使用;旋轉蒸發器等(rotary evaporator),並調節真空度之方法等。此時,S/W/O/W型乳化液之溫度為室溫即可,且宜在20℃以下,以在15℃以下為佳。
去除S/W/O/W型乳化液中之有機溶劑的方法更具體可舉例如以下所示方法。但並非為以下方法所侷限。
亦即,將在步驟D獲得之S/W/O/W型乳化液在室溫下使用槳式攪拌器以650rpm攪拌3小時。
藉由在步驟E從S/W/O/W型乳化液去除有機溶劑,可形成在內部分散有胜肽性生理活性物質之微膠囊。
步驟F
本發明之製造方法可進一步含有步驟F。
在步驟F中,是洗淨該微膠囊,並將其冷凍乾燥或噴霧乾燥而獲得粉末。
在前述步驟E中形成之微膠囊可藉由離心等方法來收集。經收集之微膠囊可利用水來洗淨。
微膠囊之冷凍乾燥條件及噴霧乾燥條件可適宜設定。將微膠囊進行冷凍乾燥或噴霧乾燥而獲得之粉末在使用時可透過添加注射用蒸餾水、注射用生理食鹽水、其他適當之分散劑,做成更適合投予之注射劑的微膠囊製劑來使用。
微膠囊製劑
若依本發明之製造方法,可提供一種胜肽性生理活性 物質之穩定且封入效率高的製造方法。又,利用本發明之製造方法獲得之微膠囊製劑可為在製劑中胜肽性生理活性物質是更均一分散者。更具體而言,可認為具有下述構造:微細之胜肽鹽在活體內分解性聚合物之基質中均一分散,而胜肽鹽與活體內分解性聚合物之基質的界面上存在有鹼性胺基酸。
在一適當之實施形態中,可獲得幾乎以固定比例釋放胜肽性生理活性物質之微膠囊製劑。
測定方法等
<從微膠囊製劑萃取胜肽性生理活性物質之方法>
採取微膠囊製劑5~10mg,分散於1mL之丙酮中。對此液於冰浴中進行20分鐘超音波照射。將獲得之液添加至9mL的0.9w/v%氯化鈉水溶液中並混和。對獲得之液於冰浴中進行20分鐘超音波照射。將此液離心,並去除沉澱物。令獲得之液為以下之micro BCA蛋白質定量法及ELISA法的測定對象。
從胜肽鹽萃取胜肽性生理活性物質時,將該胜肽鹽添加至0.9w/v%氯化鈉水溶液中並混和。對獲得之液於冰浴中進行20分鐘超音波照射。將此液離心,並去除沉澱物。令獲得之液為以下之micro BCA蛋白質定量法及ELISA法的測定對象。
<生理活性物質含量>測定方法:micro BCA(Bicinchoninic Acid)蛋白質定量法
測定條件:將micro BCA蛋白質定量法試劑A、B及C以 A:B:C=25:24:1之比例混合。將以2~50μg/mL之範圍調製好TuNEX之5段階濃度標準溶液的測定對象以及標準溶液各150μL滴入至96孔盤中,進一步,於各孔添加150μL的染色液並混和。在37℃下培養(incubate)2小時後,使用盤分析儀(plate reader)測定在570nm中的吸光度。根據利用標準溶液之吸光度獲得之標準曲線來算出蛋白質量。
<結合活性>
測定方法:ELISA法
測定機器:Thermo Scientific Multiskan Ascent(Thermo公司製盤分析儀)測定條件:將小鼠抗人類TNF RII/TNFRSF1B單株抗體固定(coating)在96孔盤的各孔中。另外採取1%牛血清白蛋白磷酸緩衝生理食鹽水(BSA-PBS),於其添加TuNEX(100μg/mL)並調製標準溶液,於各孔各滴入測定對象及標準溶液100μL。另外採取1%BSA-PBS,於其添加抗人類IgG Fc-HRP,並將此液於各孔各滴入100μL,於37℃下培養1小時。將各孔洗淨後,將鄰苯二胺(OPD)溶液於各孔各滴入100μL,並於37℃下邊平穩攪拌邊培養10分鐘。於各孔中各滴入硫酸50μL來停止酵素反應,使用微量盤分析儀(microplate reader)測定在波長490nm中的吸光度。從獲得之S型曲線(Sigmoid Curve)算出結合活性。
<測定平均粒徑>
測定機器:Beckmann Coulter Multisizer III(Beckmann 公司製)測定條件:將適量測定對象分散於生理食鹽水中,並藉由電阻奈米脈衝方法(electro sensing zone method,電 感應區方法)來測定。
<封入效率(EE)>
算出方法:TuNEX之封入效率是利用以下之算式來算出。
亦即,利用以下之式(1):算出藥物負荷量,
[式中,
DL:初期藥物負荷量(mg)
Mmc:含有TuNEX之鋅鹽及PLGA之微膠囊的重量(mg)
Mt:TuNEX的重量(mg)
Mp:PLGA的重量(mg)
Mtz:TuNEX之鋅鹽的重量(mg)
Mar:鹼性胺基酸的重量(mg)]
並使用其且利用以下之式(2)來算出:
[式中,
EE:封入效率(%)
Md:藉由micro BCA蛋白質定量法測定之藥物量(mg)
DL:初期藥物負荷量(mg)]。
實施例
以下舉實施例進一步詳細說明本發明。但本發明並非為該等實施例侷限。
實施例中使用之各種評價參數是根據上述之測定方法來測定。
實施例1(TPM048)
混合TuNEX(3.5mg/mL)20mL與氯化鋅水溶液(1.0mg/mL)4mL,獲得TuNEX之鋅鹽。離心此液分離出該鋅鹽,以水洗淨後進行冷凍乾燥。將經冷凍乾燥之該鋅鹽550mg分散於水1.1mL中,獲得含有該鋅鹽之水系溶劑。該鋅鹽之平均粒徑為約170nm。
於前述含有鋅鹽之水系溶劑中添加L-精胺酸(Sigma-Ardrich公司製)71.8mg。將其加溫至40℃,照射超音波溶解L-精胺酸,獲得含有胺基酸之S/W型懸浮液。另外,將乳酸.乙醇酸共聚物(PLGA)(和光純藥公司製、重量平均分子量約10000、乳酸.乙醇酸組成比50:50、含有遊離羧基。)2750mg溶解於二氯甲烷(DCM)5.5mL中,並進一步添加L-精胺酸(Sigma-Ardrich公司製)71.8mg。將其放置一晚來溶解L-精胺酸,獲得含有胺基酸之聚合物溶液。接著,將前述S/W型懸浮液添加至前述聚合物溶液中,並使用均質機(Homogenizer T10)以第6級(scale 6)攪拌1分鐘,獲得S/W/O型乳化液。接著,將前述S/W/O型乳化液添加至水相之含有0.1w/v%聚乙烯醇(PVA)的水溶液330mL中,並使用均質機(Homogenizer T10)以18000rpm攪拌3分鐘,獲得S/W/O/W型乳化液。將前述S/W/O/W型乳化液在室溫下使 用槳式攪拌器以650rpm攪拌3小時,使二氯甲烷氣化並去除,再以6000rpm離心2分鐘回收微膠囊,以水洗淨後,進行冷凍乾燥做成粉末狀之微膠囊製劑。
實施例2(TPM051R)
除了於前述含有鋅鹽之水系溶劑中添加L-精胺酸(Sigma-Ardrich公司製)35.9mg,以及於前述溶解有PLGA之DCM中添加L-精胺酸(Sigma-Ardrich公司製)107.7mg之外,其餘與實施例1相同來製造。
實施例3(TPM052R)
除了於前述含有鋅鹽之水系溶劑中添加L-精胺酸(Sigma-Ardrich公司製)107.7mg,以及於前述溶解有PLGA之DCM中添加L-精胺酸(Sigma-Ardrich公司製)35.9mg之外,其餘與實施例1相同來製造。
實施例4(TPM045)
混合TuNEX(3.5mg/mL)20mL與氯化鋅水溶液(1.0mg/mL)4mL,獲得TuNEX之鋅鹽。離心此液分離出該鋅鹽,以水洗淨後進行冷凍乾燥。將經冷凍乾燥之該鋅鹽302.5mg分散於水1.1mL中,獲得含有該鋅鹽之水系溶劑。該鋅鹽之平均粒徑為約170nm。於前述含有鋅鹽之水系溶劑中添加L-精胺酸(Sigma-Ardrich公司製)47.9mg。將其加溫至40℃,照射超音波溶解L-精胺酸,獲得含有胺基酸之S/W型懸浮液。另外,將乳酸.乙醇酸共聚物(PLGA)(和光純藥公司製、重量平均分子量約10000、乳酸.乙醇酸組成比50:50、含有遊離羧基。)2750mg溶解於二氯甲烷(DCM)5.5mL中, 並進一步添加L-精胺酸(Sigma-Ardrich公司製)47.9mg。將其加溫至40℃,照射超音波溶解L-精胺酸,獲得含有胺基酸之聚合物溶液。
接著,將前述S/W型懸浮液添加至前述聚合物溶液中並使用均質機攪拌,獲得S/W/O型乳化液。接著,將前述S/W/O型乳化液添加至水相之含有0.1w/v%聚乙烯醇(PVA)的水溶液330mL中並使用均質機攪拌,獲得S/W/O/W型乳化液。
將前述S/W/O/W型乳化液在室溫下使用槳式攪拌器慢慢攪拌3小時,使二氯甲烷氣化,以水洗淨後,進行冷凍乾燥做成粉末狀之微膠囊製劑。
比較例1(TP053R)
除了於前述含有鋅鹽之水系溶劑中溶解L-精胺酸(Sigma-Ardrich公司製)144mg,獲得含有胺基酸之S/W型懸浮液,以及不在前述溶解有PLGA之DCM中添加L-精胺酸(Sigma-Ardrich公司製)而獲得含有胺基酸之聚合物溶液之外,其餘與實施例1相同來製造。
比較例2(TPM026)
混合TuNEX(3.5mg/mL)20mL與氯化鋅水溶液(1.0mg/mL)4mL,獲得TuNEX之鋅鹽。離心此液分離出該鋅鹽,以水洗淨後進行冷凍乾燥。將經冷凍乾燥之該鋅鹽60mg分散於水0.6mL中,獲得含有該鋅鹽之水系溶劑。於前述含有鋅鹽之水系溶劑中添加L-精胺酸(Sigma-Ardrich公司製)90mg。將其加溫至40℃,照射超音波溶解L-精胺酸, 獲得含有胺基酸之S/W型懸浮液。另外,將乳酸.乙醇酸共聚物(PLGA)(和光純藥公司製、重量平均分子量約10000、乳酸.乙醇酸組成比50:50、含有遊離羧基。)300mg溶解於二氯甲烷(DCM)6mL中,獲得含有胺基酸之聚合物溶液。接著,將前述S/W型懸浮液添加至前述聚合物溶液中並使用均質機攪拌,獲得S/W/O型乳化液。接著,將前述S/W/O型乳化液添加至水相之含有0.1w/v%聚乙烯醇(PVA)的水溶液660mL中並使用均質機攪拌,獲得S/W/O/W型乳化液。將前述S/W/O/W型乳化液在室溫下使用槳式攪拌器慢慢攪拌3小時,使二氯甲烷氣化,以水洗淨後,進行冷凍乾燥做成粉末狀之微膠囊製劑。
試驗例1
算出以上述實施例及比較例獲得之粉末狀微膠囊製劑中TuNEX的封入效率。將各個封入效率及L-精胺酸之分配比(莫耳比)顯示在表1。
藉由使精胺酸分配並為S/W型懸浮液相與聚合物溶液相之兩方所含有,可獲得高TuNEX封入效率。
試驗例2
將實施例1及實施例4之粉末分散於分散介質中,並將其以100mg/kg之投予量皮下投予至體重230~240g之Lewis雄性大鼠。又,在對照方面,是將TuNEX(水溶液)相同的以5mg/kg之投予量皮下投予。前述分散介質是使用將含有羧甲基纖維素1.25w/v%及聚山梨醇酯80 0.05w/v%之磷酸緩衝生理食鹽水以熱壓爐滅菌者。投予之TuNEX量為100mg/kg。投予後經時的進行採血,並將血清中的TuNEX利用ELISA法來測定。將血清中之TuNEX濃度(μg/mL)對投予後之時間所製作出的藥物動態分布(profile)顯示於圖1。實施例1及實施例4中,在經過長期間仍可觀察到幾乎固定的血清中TuNEX濃度。
試驗例3
針對以下調製例1~10所示藉由各種調製方法獲得之TuNEX的鋅鹽,透過上述方法來測定其平均粒徑。又,針對調製例1、2、4及5,是評價將前述TuNEX之鋅鹽溶解於生理食鹽水時之TuNEX力價(結合活性)的活性比。
調製例1
對TuNEX(3.5mg/mL)1mL邊攪拌TuNEX邊慢慢添加氯化鋅水溶液(1.0mg/mL),生成不溶性物質。氯化鋅對TuNEX之莫耳比(氯化鋅/TuNEX)為31。透過離心(14000rpm,30min)此不溶性物質使之沈降、分離。將其洗淨,去除過量之氯化鋅等並冷凍乾燥,藉此獲得粉末狀之TuNEX鋅鹽。
調製例2
對TuNEX(3.5mg/mL)1mL邊攪拌TuNEX邊慢慢添加氯化鋅水溶液(1.0mg/mL),生成不溶性物質。氯化鋅對TuNEX之莫耳比(氯化鋅/TuNEX)為62。透過離心(14000rpm,30min)此不溶性物質使之沈降、分離。將其洗淨,去除過量之氯化鋅等並冷凍乾燥,藉此獲得粉末狀之TuNEX鋅鹽。
調製例3
於TuNEX(3.5mg/mL)1 mL溶解聚乙烯醇(PVA)使其成為0.05w/v%。邊攪拌此液,邊於其慢慢添加氯化鋅水溶液(10mg/mL),生成不溶性物質。氯化鋅對TuNEX之莫耳比(氯化鋅/TuNEX)為63。透過離心(14000rpm,30min)此不溶性物質使之沈降、分離。將其洗淨,去除過量之氯化鋅等並冷凍乾燥,藉此獲得粉末狀之TuNEX鋅鹽。
調製例4
對TuNEX(3.5mg/mL)1mL邊攪拌TuNEX邊慢慢添加氯化鋅水溶液(1.0mg/mL),生成不溶性物質。氯化鋅對TuNEX之莫耳比(氯化鋅/TuNEX)為67。透過離心(14000rpm,30min)此不溶性物質使之沈降、分離。將其洗淨,去除過量之氯化鋅等並冷凍乾燥,藉此獲得粉末狀之TuNEX鋅鹽。
調製例5
對TuNEX(3.5mg/mL)1mL邊攪拌TuNEX邊慢慢添加氯化鋅水溶液(1.0mg/mL),生成不溶性物質。氯化鋅對TuNEX之莫耳比(氯化鋅/TuNEX)為314。透過離心(14000rpm,30min)此不溶性物質使之沈降、分離。將其洗淨,去除過量之氯化鋅等並冷凍乾燥,藉此獲得粉末狀之TuNEX鋅 鹽。
調製例6
對TuNEX(3.5mg/mL)1mL邊攪拌TuNEX邊慢慢添加氯化鋅水溶液(50.0mg/mL),生成不溶性物質。氯化鋅對TuNEX之莫耳比(氯化鋅/TuNEX)為377。透過離心(14000rpm,30min)此不溶性物質使之沈降、分離。將其洗淨,去除過量之氯化鋅等並冷凍乾燥,藉此獲得粉末狀之TuNEX鋅鹽。
調製例7
對TuNEX(3.5mg/mL)1mL邊攪拌TuNEX邊慢慢添加氯化鋅水溶液(10.0mg/mL),生成不溶性物質。氯化鋅對TuNEX之莫耳比(氯化鋅/TuNEX)為628。透過離心(14000rpm,30min)此不溶性物質使之沈降、分離。將其洗淨,去除過量之氯化鋅等並冷凍乾燥,藉此獲得粉末狀之TuNEX鋅鹽。
調製例8
對TuNEX(3.5mg/mL)1mL邊攪拌TuNEX邊慢慢添加氯化鋅水溶液(20.0mg/mL),生成不溶性物質。氯化鋅對TuNEX之莫耳比(氯化鋅/TuNEX)為1257。透過離心(14000rpm,30min)此不溶性物質使之沈降、分離。將其洗淨,去除過量之氯化鋅等並冷凍乾燥,藉此獲得粉末狀之TuNEX鋅鹽。
調製例9
對TuNEX(3.5mg/mL)1mL邊攪拌TuNEX邊慢慢添加氯 化鋅水溶液(30.0mg/mL),生成不溶性物質。氯化鋅對TuNEX之莫耳比(氯化鋅/TuNEX)為1885。透過離心(14000rpm,30min)此不溶性物質使之沈降、分離。將其洗淨,去除過量之氯化鋅等並冷凍乾燥,藉此獲得粉末狀之TuNEX鋅鹽。
調製例10
對TuNEX(3.5mg/mL)1mL邊攪拌TuNEX邊慢慢添加氯化鋅水溶液(40.0mg/mL),生成不溶性物質。氯化鋅對TuNEX之莫耳比(氯化鋅/TuNEX)為2514。透過離心(14000rpm,30min)此不溶性物質使之沈降、分離。將其洗淨,去除過量之氯化鋅等並冷凍乾燥,藉此獲得粉末狀之TuNEX鋅鹽。
將藉由以上調製例而調製之粉末狀TuNEX鋅鹽的平均粒徑,以及調製時所混合之氯化鋅對TuNEX的莫耳比,顯示於表2。
[表2]
在調製例1、2、4及5中,將TuNEX之鋅鹽溶解於生理食鹽水時之TuNEX力價(結合活性)的活性比分別是90%、100%、100%及100%。
實施例5(L-His)
除了使用TuNEX鋅鹽412.4mg取代TuNEX鋅鹽550mg,使用L-組胺酸取代L-精胺酸之外,其餘與實施例1相同來獲得微膠囊製劑。針對此微製劑,在與試驗例1相同來測定封入效率後,為43.94%。
比較例3
除了對溶解有PLGA之DCM不添加L-組胺酸之外,其餘與實施例5相同來獲得微膠囊製劑。針對此微膠囊製劑,在與試驗例1相同來測定封入效率後,為5.52%。
實施例6(HSA)
混合HSA(3.5mg/mL)10mL與氯化鋅水溶液(30mg/mL)2mL,獲得HSA之鋅鹽。離心此液分離出該鋅鹽,以水洗淨後進行冷凍乾燥。將冷凍乾燥之該鋅鹽481.9mg分散於水1.1mL中,獲得含有該鋅鹽之水系溶劑。
於前述含有鋅鹽之水系溶劑中添加L-精胺酸(Sigma-Ardrich公司製)71.8mg。將其加溫至40℃,照射超音波溶解L-精胺酸,獲得含有胺基酸之S/W型懸浮液。另外,將乳酸.乙醇酸共聚物(PLGA)(和光純藥公司製、重量平均分子量約10000、乳酸.乙醇酸組成比50:50、含有遊離羧基。)2750mg溶解於二氯甲烷(DCM)5.5mL中,再進一步添加L-精胺酸(Sigma-Ardrich公司製)71.8mg。將其放置一晚來溶解L-精胺酸,獲得含有胺基酸之聚合物溶液。
接著,將前述S/W型懸浮液添加至前述聚合物溶液中,並使用均質機(Homogenizer T10)以第6級攪拌1分鐘,獲得S/W/O型乳化液。接著,將前述S/W/O型乳化液添加至水相之含有0.1w/v%聚乙烯醇(PVA)的水溶液330mL中,並使用均質機(Homogenizer T10)以18000rpm攪拌3分鐘,獲得S/W/O/W型乳化液。將前述S/W/O/W型乳化液在室溫下使用槳式攪拌器以650rpm攪拌3小時,使二氯甲烷氣化並去除,再以6000rpm離心2分鐘回收微膠囊,以水洗淨後,進行冷凍乾燥做成粉末狀之微膠囊製劑。針對獲得之微膠囊製劑,在與試驗例1相同來確認封入效率後,為48%。
比較例4(HSA)
除了未添加L-精胺酸之外,其餘與實施例6相同來獲得 微膠囊製劑。針對此微膠囊製劑,在與試驗例1相同來測定封入效率後,為8%。

Claims (16)

  1. 一種微膠囊製劑之製造方法,含有下述步驟:步驟A:於含有胜肽性生理活性物質之重金屬鹽的水系溶劑中添加鹼性胺基酸,獲得含有胺基酸之S/W型懸浮液;步驟B:於含有活體內分解性聚合物之有機溶劑中添加鹼性胺基酸,獲得含有胺基酸之聚合物溶液;步驟C:將前述含有胺基酸之S/W型懸浮液分散於前述含有胺基酸之聚合物溶液亦即油相中,獲得S/W/O型乳化液;步驟D:將前述S/W/O型乳化液分散於水相中,獲得S/W/O/W型乳化液;及步驟E:將前述S/W/O/W型乳化液所含有之有機溶劑去除而獲得微膠囊製劑。
  2. 如請求項1之製造方法,其中前述含有胺基酸之S/W型懸浮液中鹼性胺基酸之含量、與前述含有胺基酸之聚合物溶液中鹼性胺基酸之含量的莫耳比(含有胺基酸之S/W型懸浮液中鹼性胺基酸之含量:含有胺基酸之聚合物溶液中鹼性胺基酸之含量)為1:5~5:1。
  3. 如請求項1或2之製造方法,其中前述胜肽性生理活性物質之重金屬鹽其平均粒徑為1μm以下,且對水及有機溶劑皆不溶。
  4. 如請求項1或2之製造方法,其進一步含有下述步驟:於前述含有胜肽性生理活性物質之水系溶劑中添加重金屬鹽,獲得含有胜肽性生理活性物質之重金屬鹽的水系溶劑。
  5. 如請求項1或2之製造方法,其中前述胜肽性生理活性物質具有IgG結構。
  6. 如請求項1或2之製造方法,其中前述胜肽性生理活性物質為TuNEX。
  7. 如請求項1或2之製造方法,其中前述重金屬鹽為鋅鹽。
  8. 如請求項1或2之製造方法,其中前述鹼性胺基酸為L-精胺酸或L-組胺酸。
  9. 如請求項1或2之製造方法,其進一步含有步驟F:將前述步驟E中從S/W/O/W型乳化液去除有機溶劑而獲得的微膠囊進行冷凍乾燥或噴霧乾燥,而獲得粉末。
  10. 如請求項1或2之製造方法,其中前述活體內分解性聚合物為聚乳酸、乳酸-乙醇酸共聚物或該等之混合物。
  11. 如請求項10之製造方法,其中,前述活體內分解性聚合物中乳酸及乙醇酸之莫耳比(乳酸:乙醇酸)為99:1~50:50。
  12. 如請求項11之製造方法,其中,前述活體內分解性聚合物中乳酸及乙醇酸之莫耳比(乳酸:乙醇酸)為75:25~50:50。
  13. 如請求項1或2之製造方法,其中前述活體內分解性聚合物之重量平均分子量為3000~200000。
  14. 如請求項13之製造方法,其中前述活體內分解性聚合物之重量平均分子量為3000~50000。
  15. 如請求項14之製造方法,其中前述活體內分解性聚合物之重量平均分子量為5000~20000。
  16. 一種微膠囊製劑,可藉由如請求項1~15中任一項之製造方法來製造。
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Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2794124B8 (es) * 2019-05-17 2021-10-07 Grupo Agrotecnologia S L Método y procedimiento de obtención de microbiocápsulas de piretrinas naturales con alta estabilidad
CN115969039B (zh) * 2022-12-15 2024-06-25 天津科技大学 一种基于w/g/w结构的益生菌微胶囊、制备方法和应用
CN118593451B (zh) * 2024-08-08 2024-10-15 卡瑞济(北京)生命科技有限公司 一种包含l-精氨酸的抗肿瘤药物及其制备方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1054009A (zh) * 1990-02-13 1991-08-28 武田药品工业株式会社 缓释微胶囊
CN1157562A (zh) * 1994-09-09 1997-08-20 武田药品工业株式会社 含有一种肽金属盐的缓释制剂

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MY107937A (en) * 1990-02-13 1996-06-29 Takeda Chemical Industries Ltd Prolonged release microcapsules.
US6087324A (en) * 1993-06-24 2000-07-11 Takeda Chemical Industries, Ltd. Sustained-release preparation
JP3862304B2 (ja) * 1994-09-09 2006-12-27 武田薬品工業株式会社 徐放性製剤
JP3790567B2 (ja) * 1994-09-30 2006-06-28 武田薬品工業株式会社 徐放剤
IL112834A (en) 1995-03-01 2000-12-06 Yeda Res & Dev Pharmaceutical compositions for controlled release of soluble receptors
US6287587B2 (en) 1997-07-15 2001-09-11 Takeda Chemical Industries, Ltd. Process for producing sustained-release preparation by in-water drying
JP4758525B2 (ja) * 1998-03-20 2011-08-31 武田薬品工業株式会社 生理活性ポリペプチドの徐放性製剤およびその製造法
US6444223B1 (en) * 1999-05-28 2002-09-03 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Method of producing submicron particles of a labile agent and use thereof
US6743446B2 (en) * 1999-12-15 2004-06-01 The Ohio State University Research Foundation Methods for stabilizing biologically active agents encapsulated in biodegradable controlled-release polymers
JP5160005B2 (ja) * 2000-12-28 2013-03-13 武田薬品工業株式会社 徐放性製剤
TWI225416B (en) 2001-06-29 2004-12-21 Takeda Chemical Industries Ltd Sustained-release composition and process for producing the same
WO2005110369A2 (en) * 2004-04-30 2005-11-24 American Pharmaceutical Partners, Inc. Sustained-release microspheres and methods of making and using same
CN101721377B (zh) * 2010-01-18 2013-04-17 上海交通大学 乙醇包亲水油-亲水油包油-油包固体微球制备的方法
WO2012071013A1 (en) * 2010-11-24 2012-05-31 Nanyang Technological University Method for encapsulating particles
TW201325606A (zh) * 2011-10-18 2013-07-01 Coherus Biosciences Inc 用氯化鈉穩定化之依那西普調配物
SG11201500227SA (en) 2012-08-16 2015-02-27 Univ Nanyang Tech Floating capsules encapsulating particles loaded with one or more drugs

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1054009A (zh) * 1990-02-13 1991-08-28 武田药品工业株式会社 缓释微胶囊
CN1157562A (zh) * 1994-09-09 1997-08-20 武田药品工业株式会社 含有一种肽金属盐的缓释制剂

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