TWI526534B - 葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜及應用於拋棄式感測試紙的葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜 - Google Patents

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Description

葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜及應用於拋棄式感測試紙的葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜
一種葡萄糖氧化酵素奈米纖維膜，特別是一種葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜。
既有的葡萄糖生物感測器是以葡萄糖氧化酵素(Glucose oxidase, GOx)與葡萄糖進行酵素反應，還原態酵素再與氧氣進行電子轉移生成過氧化氫(H 2O 2)，利用偵測過氧化氫的生成量進而估算葡萄糖含量。
然而，葡萄糖氧化酵素的粒徑非常小，且易被高分子包圍於內部，很難直接進行電子傳遞，需要藉由較小分子快速地進出酵素層傳遞電子促進其反應，故主要利用氧(O 2)當電子媒介物感測之。但偵測過氧化氫需要極高的氧化電位，同時會將血液中其他的電活性物質氧化而造成偵測上的干擾。
為了解決既有的葡萄糖生物感測器反應時需要過高的氧化電位，繼而使其他電活性物質氧化造成偵測上的差異，本發明藉由添加赤血鹽作為電子傳遞媒介物，降低酵素電化學反應所需施加之電位，並消除可能發生之電化學副反應及干擾電子，另外，更可避免氧氣參與反應，使其不受系統內部氧氣濃度的影響。
本發明為一種葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜，其包含複數葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維，該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維為內含葡萄糖氧化酵素及赤血鹽之聚乙烯醇靜電紡絲纖維，該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜係完成交聯反應固定化該葡萄糖氧化酵素，該交聯反應為一戊二醛蒸汽交聯反應或一熱處理交聯反應。
進一步地，該聚乙烯醇於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜中之固含量90％～96％；該葡萄糖氧化酵素於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜中之固含量1％～3％；以及該赤血鹽於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜中之固含量2％～8％。
進一步地，該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維包含一導電材料，該導電材料至少包含奈米金，其固定形成於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜。
進一步地，該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維包含一導電材料，該導電材料至少包含石墨烯或氧化石墨烯，其固定形成於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜。
一種拋棄式感測試紙，其包含一試紙本體、形成於該試紙本體之電極結構、以及固定形成於該電極結構之一葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜，該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維為內含葡萄糖氧化酵素及赤血鹽之聚乙烯醇靜電紡絲纖維，該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維係具備可抗測試血液中之干擾特性；以及該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜係完成交聯反應固定化該葡萄糖氧化酵素，該交聯反應為一戊二醛蒸汽交聯反應或一熱處理交聯反應。
進一步地，該聚乙烯醇於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜中之固含量90％～96％；該葡萄糖氧化酵素於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜中之固含量1％～3％；以及該赤血鹽於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜中之固含量2％～8％。
其中，該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜包含一導電材料，該導電材料至少包含奈米金，該拋棄式感測試紙為三極式網版印刷電極。
其中，該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜包含一導電材料，該導電材料至少包含石墨烯或氧化石墨烯，該拋棄式感測試紙為三極式網版印刷電極。
其中，該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜係完成交聯反應固定化該葡萄糖氧化酵素，該交聯反應為一戊二醛蒸汽交聯反應。
其中，該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜係完成交聯反應固定化該葡萄糖氧化酵素，該交聯反應為一熱處理交聯反應。
由上述說明可知，本發明具有以下優點：
1.本發明使用成本低廉的赤血鹽，藉由赤血鹽改善反應時產生的過氧化氫可能造成干擾的問題。
2.本發明藉由添加導電材料大幅提昇感測裝置的靈敏度。
3.本發明直接將葡萄糖氧化酵素、赤血鹽及導電材料混合聚乙烯醇靜電紡絲成奈米纖維膜，透過網印的方式將該奈米纖維膜印刷到可拋棄式的測試電極，使用上不但方便，也能普遍在商業上使用，達到節省成本、加速測試時間的優點。
一種葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜，其製造步驟包含： 配置一聚乙烯醇(PVA)水溶液； 添加一葡萄糖氧化酵素(Glucose oxidase, GOx)及一赤血鹽溶液(Potassium hexacyanoferrate(III), K 3[Fe(CN) 6])於該聚乙烯醇水溶液中形成一靜電紡絲液；以及 將該靜電紡絲液進行靜電紡絲形成該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜。
其中，可進一步添加一導電材料於該聚乙烯醇水溶液中，該導電材料可以是一奈米金或一石墨烯，添加該導電材料可增加本發明之電訊號；其中，該奈米金本身為一高導電性物質，增加導電度即可增加本發明傳導的電訊號強度；該石墨烯較佳是一氧化石墨烯，可將該葡萄糖氧化酵素外殼打開，使其活性中心體外露，進而增加與葡萄糖的反應量，藉此進一步提昇整體訊號量測品質。
其中，聚乙烯醇之較佳濃度不限定，可能依據製成環境、設備與靜電紡絲電壓不同而有所調整改變，本實施例之該聚乙烯醇水溶液的濃度較佳為5 wt%～10wt%，該聚乙烯醇分子量介於10000～20000。該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜中，該聚乙烯醇固含量為90％～96％，該葡萄糖氧化酵素固含量為1～3％，該赤血鹽固含量為2％～8％，該奈米金固含量為10～2000ppm，該石墨烯或該氧化石墨烯固含量為10～2000ppm。
本發明電紡後的奈米纖維膜可進一步進行交聯反應以固定化該葡萄糖氧化酵素，該交聯反應可以是一戊二醛超音波蒸汽交聯反應或是一熱處理交聯，讓葡萄糖氧化酵素完全與奈米纖維膜固定結合。
該戊二醛超音波蒸汽交聯反應，係將完成電紡後的奈米纖維膜置於戊二醛之蒸汽中，使其中的葡萄糖氧化酵素與聚乙烯醇靜電紡絲奈米纖維膜得以進行交聯反應。本實施例採用蒸汽進行交聯之原因，係因為聚乙烯醇為水溶性之高分子，而本實施例又將聚乙烯醇製作成比表面積非常大的奈米等級靜電紡絲，為了避免聚乙烯醇靜電紡絲置於交聯溶液在完成交聯之前就已經因為急速溶脹而溶解於交聯溶液中，本實施例遂將戊二醛交聯液蒸汽化對葡萄糖氧化酵素與聚乙烯醇混合紡織之靜電紡絲纖維進行交聯。
該熱處理交聯係將完成電紡後的奈米纖維膜以50 oC~145 oC之製程溫度加以熱處理交聯。
本發明進一步的可將靜電紡絲後或交聯後的葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合奈米纖維膜固定形成於可拋棄式的一感測試紙，該感測試紙包含一試紙本體及形成於該感測試紙本體之電極結構，該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合奈米纖維膜固定於該電極結構，其中，該感測試紙較佳為三極式網版印刷電極。
一般葡萄糖感測裝置的酵素反應如下： β-Glucose + GOx (ox)→  Gluconic acid + GOx (red)GOx (red)+ O 2→ GOx (ox)+ H 2O 2H 2O 2→ O 2+ 2H ++ 2e −
添加赤血鹽溶液可改變一般葡萄糖感測裝置之酵素反應如下： β-Glucose + GOX (ox)→ Gluconic acid + GOX (red)GOX (red)+ Fe 3+→ GOX (ox)+ Fe 2+Fe 2+→ Fe 3++ e -
本發明添加該赤血鹽溶液的目的為該赤血鹽溶液的氧化還原電位較低，可使電化學測試時所需施加的電壓下降，以減少干擾；該赤血鹽溶液本身可游離離子，可增加導電度，進而提升電化學訊號；一般葡萄糖感測裝置的酵素反應會產生過氧化氫(H 2O 2)，過氧化氫會與測試時血液中的干擾物質反應而干擾測試結果，但本發明之赤血鹽溶液於室溫下不與血液中的尿素、尿酸、抗壞血酸(Ascorbic acid, AA)或對乙醯氨基酚(Acetaminophen, AC)等干擾因素反應，對測試血液中葡萄糖具有高度的檢測性，可增加測試準確度，達成現有技術無法完成之優異量測效果。
以下列舉本發明靜電紡絲液配置之實施例：
【實施例一】聚乙烯醇/葡萄糖氧化酵素/赤血鹽靜電紡絲液：
步驟一、以7g聚乙烯醇加入93g去離子水配置7 wt%聚乙烯醇溶液。
步驟二、將上述該7 wt%聚乙烯醇水溶液取10g，加入14mg葡萄糖氧化酵素，再加入0.25M赤血鹽水溶液0.46g，均勻攪拌即得聚乙烯醇/葡萄糖氧化酵素/赤血鹽靜電紡絲液。
【實施例二】聚乙烯醇/葡萄糖氧化酵素/赤血鹽/奈米金靜電紡絲液：
步驟一、以7g聚乙烯醇加入93g去離子水配置7 wt%聚乙烯醇溶液。
步驟二、將上述該7 wt%聚乙烯醇水溶液取10g，加入14mg葡萄糖氧化酵素，再加入0.25M赤血鹽水溶液0.46g，再添加1000ppm奈米金水溶液取0.52g，均勻攪拌即得聚乙烯醇/葡萄糖氧化酵素/赤血鹽/奈米金靜電紡絲液。
【實施例三】聚乙烯醇/葡萄糖氧化酵素/赤血鹽/氧化石墨烯靜電紡絲液：
步驟一、以7g聚乙烯醇加入93g去離子水配置7 wt%聚乙烯醇溶液。
步驟二、將上述該7 wt%聚乙烯醇水溶液取10g，加入14mg葡萄糖氧化酵素，再加入0.25M赤血鹽水溶液0.46g，再添加0.5%氧化石墨烯水溶液0.41g，均勻攪拌得聚乙烯醇/葡萄糖氧化酵素/赤血鹽/奈米金靜電紡絲液。
以下為本發明靜電紡絲之實施例：
將上述之靜電紡絲液進行靜電紡絲之較佳實施例為利用一自組裝靜電紡絲機，其中，電紡參數為電壓10kV～40 kV、流速0.1 (ml/hr)～0.6(ml/hr)、接收屏距離針頭10cm～25cm、電紡時間1~2小時、相對濕度40+/-5％，將靜電紡絲纖維紡至透明的一聚对苯二甲酸乙二酯(PET)薄膜表面。前述的靜電紡絲參數，係僅為範例，透過調整不同的電壓、流速等等參數，可改變所產生的靜電紡絲材料之均勻性、寬度等等。
以下為本發明感測試紙製作之較佳實施例：
【實施例一】靜電紡絲感測試紙：
將上述電紡完成後之靜電紡絲奈米纖維膜自該PET薄膜上取下，放在網版碳電極進行固定，完成靜電紡絲感測試紙。
【實施例二】靜電紡絲交聯感測試紙：
將上述電紡完成後之靜電紡絲奈米纖維膜，經由超音波蒸汽以戊二醛進行交聯15分鐘，將交聯過後之靜電紡絲纖維膜自PET薄膜撕下，放在網版電極進行固定，完成靜電紡絲交聯感測試紙。
以下利用一恆電位儀(Electrochemical analyzer)、一掃描式電子顯微鏡(SEM)、一穿透式電子顯微鏡(TEM) 進行該感測試紙之觀察與電化學測試分析，一併比較傳統非靜電紡絲之聚乙烯醇薄膜與本發明之差異：
請參考圖1～圖2，其為本發明葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜與傳統非靜電紡絲聚乙烯醇薄膜之掃描式電子顯微鏡示意圖，本發明葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜之纖維平均直徑為296+/-48nm，且表面保持多孔結構，並相對於傳統非靜電紡絲聚乙烯醇薄膜表現出優異的高比表面積，可使其中的葡萄糖氧化酵素可與測試血液有充分的反應面積，提高測試的靈敏度；傳統非靜電紡絲聚乙烯醇薄膜可見其表面大部分為平坦狀，且由於水份經過風乾而揮發時間長，造成結晶，代表分散性不佳，其表面析出赤血鹽顆粒。
請參考圖3，其為本發明葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜之穿透式電子顯微鏡(TEM)示意圖，可看出所添加的赤血鹽能有效均勻分散到聚乙烯醇纖維中，能有效的利用於電子傳導。
請參考圖4，其為本發明葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜添加導電材料奈米金之穿透式電子顯微鏡(TEM)示意圖，可看出奈米金粒子及赤血鹽對比的情形，證實聚乙烯醇纖維中不僅包含赤血鹽，亦包含奈米金顆粒於其中，可借此判斷赤血鹽及奈米金可能會相互吸引，使電子傳輸效率上升。
請參考圖5～圖6，其為本發明葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜與傳統非靜電紡絲聚乙烯醇薄膜之電流與時間效應圖，以不同之葡萄糖溶液濃度檢測其電流值的變化，可看出本發明相對於傳統非靜電紡絲聚乙烯醇薄膜相同時間條件下，傳統非靜電紡絲聚乙烯醇薄膜電流值最高為1100nA；本發明最高電流值趨近於2000nA，可知本發明有效利用奈米纖維膜的多孔結構及高比表面積使葡萄糖酵素有效結合，使電流值上升，提昇靈敏度。
請參考圖7～圖10，請一併參考表1，其為本發明之一靈敏度測試分析，本發明相對於傳統非靜電紡絲聚乙烯醇薄膜具有較佳之靈敏度，且添加導電材料可進一步提昇本發明之靈敏度。 【表1】           表1 <TABLE border="1" borderColor="#000000" width="_0006"><TBODY><tr><td>   </td><td> 靈敏度(nA/mM) </td></tr><tr><td> 傳統非靜電紡絲聚乙烯醇薄膜(Dip) </td><td> 42.69 </td></tr><tr><td> 葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜 (ES) </td><td> 72.26 </td></tr><tr><td> 葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜-添加導電材料奈米金 (ES-Au) </td><td> 86.62 </td></tr><tr><td> 葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜-添加導電材料氧化石墨烯 (ES-GO) </td><td> 95.81 </td></tr></TBODY></TABLE>
請參考圖11～圖13，請一併參考表2，其為本發明交聯後之葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜之靈敏度分析。 【表2】           表2 <TABLE border="1" borderColor="#000000" width="_0007"><TBODY><tr><td>   </td><td> 靈敏度(nA/mM) </td></tr><tr><td> 交聯之葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜 (ES-C) </td><td> 262.13 </td></tr><tr><td> 交聯之葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜-添加導電材料奈米金 (ES-C-Au) </td><td> 308.84 </td></tr><tr><td> 交聯之葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜-添加導電材料氧化石墨烯 (ES-C-GO) </td><td> 293.79 </td></tr></TBODY></TABLE>
請參考圖14，請一併參考表3，其為本發明及本發明添加導電材料之電阻值比較(I-V Curve)，可看出本發明添加導電材料後可有效降低電阻值，證實添加導電材料後能加快傳遞電子的速度。 【表3】           表3 <TABLE border="1" borderColor="#000000" width="_0008"><TBODY><tr><td>   </td><td> 電阻值(Ω-cm) </td></tr><tr><td> 葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜(PVA/Fe<sup>3+</sup>) </td><td> 7.66E+009 </td></tr><tr><td> 葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜-添加導電材料奈米金(PVA/Fe<sup>3+</sup>/Au) </td><td> 1.43E+009 </td></tr><tr><td> 葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜-添加導電材料氧化石墨烯(PVA/Fe<sup>3+</sup>/GO) </td><td> 2.89E+009 </td></tr></TBODY></TABLE>
請參考圖15，請一併參考表4，其為本發明葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜對於尿素干擾測量值比較，一般人體血液及尿素皆為5mM，由於人體血液中存在的尿素會干擾測試時的電化學電流值，本發明因此進行使用5mM尿素/葡萄糖混合溶液進行測試分析，結果顯示電流值在測試時併無產生明顯干擾現象，其電流值皆在合理的誤差範圍內，可知本發明可抗測試血液中尿素干擾。 【表4】           表4 <TABLE border="1" borderColor="#000000" width="_0009"><TBODY><tr><td> 5mM葡萄糖電流值(nA) </td><td> 5mM葡萄糖/尿素電流值(nA) </td></tr><tr><td> 450.85+/-31.87 </td><td> 431.72+/-61.21 </td></tr></TBODY></TABLE>
既有的葡萄糖感測試紙因內含活性酵素之故，一般需保存於低溫環境，但保存時間過長依然會降低使用效率或是失效，請參考圖16，將本發明之拋棄式感測試紙保存於低溫4 oC之環境下，可看出本發明至第7天依然具有測量數值，顯示本發明之葡萄糖氧化酵素仍然具有活性，拋棄式感測試紙依然可以使用。
由上述說明可知，本發明具有以下優點：
1.本發明使用成本低廉的赤血鹽，藉由赤血鹽改善反應時產生的過氧化氫可能造成干擾的問題。
2.本發明藉由添加導電材料大幅提昇感測裝置的靈敏度。
3.本發明直接將葡萄糖氧化酵素、赤血鹽及導電材料混合聚乙烯醇靜電紡絲成奈米纖維膜，透過網印的方式將該奈米纖維膜成功印刷到可拋棄式的測試電極，使用上不但方便，也能普遍在商業上使用，達到節省成本、加速測試時間的優點。
圖1為本發明較佳實施例之葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜SEM圖。 圖2為本發明較佳實施例之傳統非靜電紡絲聚乙烯醇薄膜SEM圖。 圖3為本發明較佳實施例之葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維TEM圖。 圖4為本發明較佳實施例之葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維添加奈米金TEM圖。 圖5為本發明較佳實施例之葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜的電流-時間效應圖。 圖6為本發明較佳實施例之傳統非靜電紡絲聚乙烯醇薄膜的電流-時間效應圖。 圖7為本發明較佳實施例之傳統非靜電紡絲聚乙烯醇薄膜(Dip)靈敏度測試分析圖。 圖8為本發明較佳實施例之葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜(ES) 靈敏度測試分析圖。 圖9為本發明較佳實施例之葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜-添加導電材料奈米金 (ES-Au) 靈敏度測試分析圖。 圖10為本發明較佳實施例之葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜-添加導電材料氧化石墨烯 (ES-GO)靈敏度測試分析圖。 圖11為本發明較佳實施例之交聯後之葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜(ES-C) 靈敏度分析圖。 圖12為本發明較佳實施例之交聯之葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜-添加導電材料奈米金 (ES-C-Au) 靈敏度分析圖。 圖13為本發明較佳實施例之交聯之葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜-添加導電材料氧化石墨烯靈敏度分析圖。 圖14為本發明較佳實施例之葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜與添加導電材料之電阻值(I-V Curve)圖。 圖15為本發明較佳實施例之葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合靜電紡絲聚乙烯醇奈米纖維膜對於尿素干擾測量值電流圖。 圖16為本發明較佳實施例之天數與電流效應圖。

Claims (8)

  1. 一種葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜，其包含複數葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維，該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維為內含葡萄糖氧化酵素及赤血鹽之聚乙烯醇靜電紡絲纖維；以及 該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜係完成交聯反應固定化該葡萄糖氧化酵素，該交聯反應為一戊二醛蒸汽交聯反應或一熱處理交聯反應。
  2. 如申請專利範圍第1項之葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜中該聚乙烯醇於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜中之固含量90％～96％； 該葡萄糖氧化酵素於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜中之固含量1％～3％；以及 該赤血鹽於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜中之固含量2％～8％。
  3. 如申請專利範圍第1或2項之葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜，其包含一導電材料，該導電材料至少包含奈米金，其固定形成於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜，該奈米金於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜中之固含量為10～2000ppm。
  4. 如申請專利範圍第1或2項之葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜，其包含一導電材料，該導電材料至少包含石墨烯或氧化石墨烯，其固定形成於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜，該石墨烯或氧化石墨烯於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜中之固含量為10～2000ppm。
  5. 一種拋棄式感測試紙，其包含： 一試紙本體； 形成於該試紙本體之電極結構；及 固定形成於該電極結構之一葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜，該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜為包含複數個內含葡萄糖氧化酵素及赤血鹽之聚乙烯醇靜電紡絲纖維，該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維係具備可抗測試血液中之干擾特性； 其中，該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜係完成交聯反應固定化該葡萄糖氧化酵素，該交聯反應為一戊二醛蒸汽交聯反應或一熱處理交聯反應。
  6. 如申請專利範圍第5項之拋棄式感測試紙中該聚乙烯醇於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜中之固含量90％～96％；以及 該葡萄糖氧化酵素於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜中之固含量1％～3％；以及該赤血鹽於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜中之固含量2％～8％。
  7. 如申請專利範圍第5或6項之拋棄式感測試紙，該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維包含一導電材料，該導電材料至少包含奈米金，該奈米金於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜中之固含量為10～2000ppm；該拋棄式感測試紙為三極式網版印刷電極。
  8. 如申請專利範圍第5或6項之拋棄式感測試紙，該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維包含一導電材料，該導電材料至少包含石墨烯或氧化石墨烯，該石墨烯或氧化石墨烯於該葡萄糖氧化酵素/赤血鹽複合電紡聚乙烯醇奈米纖維膜中之固含量為10～2000ppm；該拋棄式感測試紙為三極式網版印刷電極。
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