CN102590305A - 一种电化学生物传感器敏感膜及其制备方法 - Google Patents

一种电化学生物传感器敏感膜及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN102590305A
CN102590305A CN2011100049334A CN201110004933A CN102590305A CN 102590305 A CN102590305 A CN 102590305A CN 2011100049334 A CN2011100049334 A CN 2011100049334A CN 201110004933 A CN201110004933 A CN 201110004933A CN 102590305 A CN102590305 A CN 102590305A
Authority
CN
China
Prior art keywords
ferrocene
mediator
electrode
electron
chitosan
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN2011100049334A
Other languages
English (en)
Inventor
戴志飞
付光磊
岳秀丽
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Harbin Institute of Technology
Original Assignee
Harbin Institute of Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Harbin Institute of Technology filed Critical Harbin Institute of Technology
Priority to CN2011100049334A priority Critical patent/CN102590305A/zh
Publication of CN102590305A publication Critical patent/CN102590305A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Landscapes

  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及一种共价键合生物活性物质并掺杂电子传递体和电子媒介体的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶电化学生物传感器敏感膜及其制备方法。通过硅烷偶联剂的溶胶-凝胶过程及其与生物活性物质以及壳聚糖的共价偶联，将生物活性物质共价键合于同步形成的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶三维网孔结构中。同时将电子传递体和电子媒介体掺杂到其中。同现有技术相比，本发明提供的电化学生物传感器敏感膜对传感器的稳定性、选择性和灵敏度都有显著提高。

Description

一种电化学生物传感器敏感膜及其制备方法
技术领域
本发明属于电化学生物传感器及其制备技术领域，特别设计一种共价键合生物活性物质并掺杂电子传递体和电子媒介体的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶电化学生物传感器敏感膜及其制备方法。
背景技术
电化学生物传感器以其高灵敏性、高选择性、低费用和操作简单等优点被广泛应用于临床诊断、食品和药物分析以及环境控制等领域。电化学生物传感器应用于实际分析和检测的同时还带来了可观的经济效益。电化学生物传感器敏感膜的制备是构建电化学生物传感器的关键步骤。
壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶以其优良的生物相容性、温度稳定性、化学惰性和成膜性等诸多优势被广泛用作电化学生物传感器敏感膜。生物活性物质可被固定在溶胶-凝胶膜的三维网孔中并保持其原有的生物构象和生物活性。但由于这种固定方法属于物理包埋法，长期使用会导致生物活性物质的流失，从而影响传感器的稳定性。另一方面，二氧化硅溶胶-凝胶膜的电子传导性相对较差，而且其所制备的电化学生物传感器尤其是基于检测H2O2的传感器通常需要高于+0.6V的工作电位，实际样品中共存的一些电活性物质如尿酸和抗坏血酸等会产生干扰，这些问题会影响传感器的灵敏度和选择性。
硅烷偶联剂如3-异氰酸酯基丙基三乙氧基硅烷和2-(3，4-环氧环己烷)乙基三甲氧基硅烷已被广泛应用于复合有机-无机材料的制备。如在文献(1)Journal of Materials Chemistry，2005，15：3952-3961中，Simone S.Silva等人将3-异氰酸酯基丙基三乙氧基硅烷同时作为壳聚糖的偶联剂和溶胶-凝胶前驱体，通过其异氰酸酯基和壳聚糖的氨基间的共价偶联及其同步溶胶-凝胶过程合成了具有良好生物活性的壳聚糖-二氧化硅复合物。同时异氰酸酯基和环氧基也是常见的生物活性物质的偶联基团。可见将这些硅烷偶联剂同时作为生物活性物质和壳聚糖的共价偶联剂以及溶胶-凝胶前驱体，通过共价偶联反应和同步溶胶-凝胶过程，可将生物活性物质牢固地共价键合在所形成的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶三维网孔结构中，进而可提高传感器的稳定性，但通过这种方法制备电化学生物传感器敏感膜还未见报道。电子传递体如碳纳米管和电子媒介体如普鲁士蓝等其优越的电化学性能引起了广泛的关注。如在文献(2)Electroanalysis，2009，21：2207-2212中，Junfeng Zhai等人将多壁碳纳米管于铁氰化钾、氯化铁和氯化钾的酸性溶液中搅拌12小时后制备了普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管复合物，多壁碳纳米管可显著提高普鲁士蓝的电化学行为，同时该复合物可有效地催化H2O2的还原，在低达-0.1V下可对H2O2产生明显的计时电流响应，响应的灵敏度为153.7μAmM-1cm-2，检测限为5.67×10-7M。但将这些电子传递体和电子媒介体掺杂到二氧化硅溶胶-凝胶中以提高电化学生物传感器的灵敏度和选择性还未见报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种电化学生物传感器敏感膜及其制备方法，采用硅烷偶联剂将生物活性物质牢固地共价键合于其同步形成的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶生物相容的三维网孔结构中，同时将电子传递体和电子媒介体掺杂到其中。
将硅烷偶联剂如3-异氰酸酯基丙基三乙氧基硅烷和2-(3，4-环氧环己烷)乙基三甲氧基硅烷同时作为生物活性物质和壳聚糖的共价偶联剂以及溶胶-凝胶前驱体，通过功能基团和氨基的共价偶联及同步溶胶-凝胶过程，可将生物活性物质牢固地共价键合在同步形成的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶生物相容的三维网孔结构中，从而有效地防止生物活性物质的流失，进而提高电化学生物传感器的稳定性。电子传递体和电子媒介体具有优良的电化学性能，同时将其掺杂到二氧化硅溶胶-凝胶中，可提高溶胶-凝胶膜的电子传导性，同时还可赋予其在低电位进行检测的性能，进而提高电化学生物传感器的灵敏度和选择性。因此本发明提供的共价键合生物活性物质并掺杂电子传递体和电子媒介体的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶电化学生物传感器敏感膜可显著提高电化学生物传感器的稳定性、灵敏度和选择性。
本发明提供的共价键合生物活性物质并掺杂电子传递体和电子媒介体的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶电化学生物传感器敏感膜是由电子传递体、电子媒介体和共价键合生物活性物质的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶组成，其中电子传递体的含量为0.05～2.0mg/cm2，电子媒介体的含量为0.01～2.0mg/cm2，生物活性物质的含量为0.01～2.0mg/cm2，壳聚糖的含量为0.02～5.0mg/cm2，其余为二氧化硅溶胶-凝胶。所述的电子传递体为单壁碳纳米管、多壁碳纳米管、富勒烯、金纳米粒子、银纳米粒子、铂纳米粒子、四氧化三铁纳米粒子中的一种；所述的电子媒介体为普鲁士蓝、铁氰化钾、二茂铁、乙酰基二茂铁、丙酰基二茂铁、丁酰基二茂铁、戊酰基二茂铁、己酰基二茂铁、辛酰基二茂铁、1，1′-双乙酰基二茂铁、1，1′-双己酰基二茂铁、乙基二茂铁、丙基二茂铁、丁基二茂铁、戊基二茂铁、己基二茂铁、1，1′-双丁基二茂铁、1，1′-双己基二茂铁、环戊烯基二茂铁、环己烯基二茂铁、3-二茂铁酰基丙酸、4-二茂铁酰基丁酸、4-二茂铁基丁酸、5-二茂铁基戊酸、二茂铁基甲醇、二茂铁基乙醇、二甲氨基甲基二茂铁、二茂铁甲酸、二茂铁乙酸、二茂铁丙酸、二茂铁酰胺、二茂铁酰氯、二茂铁硫代甲酰胺、氨基二茂铁、萘酚绿B、天青、四氰基对苯二醌二甲烷、四硫富瓦烯、四硫富瓦烯-四氰基二亚甲基苯醌、亚甲基蓝、新亚甲基蓝中的一种；所述的电子传递体和电子媒介体可被二者相互结合后的复合体所替代；所述的生物活性物质为葡糖糖氧化酶、胆固醇氧化酶、乙醇氧化酶、尿酸氧化酶、黄嘌呤氧化酶、辣根过氧化物酶、酪氨酸酶、肌红蛋白、细胞色素氧化酶、乙酰胆碱酯酶、乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶中的一种。
本发明提供的共价键合生物活性物质并掺杂电子传递体和电子媒介体的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶电化学生物传感器敏感膜的制备方法是：
A.掺杂电子传递体和电子媒介体的壳聚糖-二氧化硅溶胶的制备
按电子传递体和电子媒介体的终浓度分别为为0.5～10mg/mL和0.1～10mg/mL将其超声5～60min分散于0.1～1.0％的壳聚糖溶液中，然后按体积比为10∶1～2∶1的比例将电子传递体和电子媒介体的壳聚糖溶液与硅烷偶联剂混合，并在室温条件下剧烈搅拌1～6h得到掺杂电子传递体和电子媒介体的壳聚糖-二氧化硅溶胶；
B.生物活性物质的共价键合
按生物活性物质的终浓度为0.1～10mg/mL将其加入到A得到的溶胶中，并于0～10℃条件下缓慢搅拌1～4h，得到共价键合生物活性物质并掺杂电子传递体和电子媒介体的壳聚糖-二氧化硅溶胶；
C.敏感膜在电极表面的制备
按8～400μL/cm2将步骤B得到的溶胶滴到电极表面，并将电极于2～10℃条件下干燥5～24h，即可在电极表面形成一层共价键合生物活性物质并掺杂电子传递体和电子媒介体的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶电化学生物传感器敏感膜。
所述的电子传递体为单壁碳纳米管、多壁碳纳米管、富勒烯、金纳米粒子、银纳米粒子、铂纳米粒子、四氧化三铁纳米粒子中的一种；所述的电子媒介体为普鲁士蓝、铁氰化钾、二茂铁、乙酰基二茂铁、丙酰基二茂铁、丁酰基二茂铁、戊酰基二茂铁、己酰基二茂铁、辛酰基二茂铁、1，1′-双乙酰基二茂铁、1，1′-双己酰基二茂铁、乙基二茂铁、丙基二茂铁、丁基二茂铁、戊基二茂铁、己基二茂铁、1，1′-双丁基二茂铁、1，1′-双己基二茂铁、环戊烯基二茂铁、环己烯基二茂铁、3-二茂铁酰基丙酸、4-二茂铁酰基丁酸、4-二茂铁基丁酸、5-二茂铁基戊酸、二茂铁基甲醇、二茂铁基乙醇、二甲氨基甲基二茂铁、二茂铁甲酸、二茂铁乙酸、二茂铁丙酸、二茂铁酰胺、二茂铁酰氯、二茂铁硫代甲酰胺、氨基二茂铁、萘酚绿B、天青、四氰基对苯二醌二甲烷、四硫富瓦烯、四硫富瓦烯-四氰基二亚甲基苯醌、亚甲基蓝、新亚甲基蓝中的一种。
所述的电子传递体和电子媒介体可被二者相互结合后的复合体所替代。
所述的壳聚糖溶液为壳聚糖通过超声或搅拌溶解于0.5～2.0％的醋酸中的溶液。
所述的硅烷偶联剂为3-异氰酸酯基丙基三乙氧基硅烷、3-异氰酸酯基丙基三甲氧基硅烷、3-(2，3-环氧丙氧)丙基三甲氧基硅烷、3-(2，3-环氧丙氧)丙基三乙氧基硅烷、2-(3，4-环氧环己烷)乙基三甲氧基硅烷、3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷中的一种。
所述的生物活性物质为葡糖糖氧化酶、胆固醇氧化酶、乙醇氧化酶、尿酸氧化酶、黄嘌呤氧化酶、辣根过氧化物酶、酪氨酸酶、肌红蛋白、细胞色素氧化酶、乙酰胆碱酯酶、乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶中的一种。
所述的电极为玻碳电极、金电极、铂电极、热解石墨电极、石墨碳糊电极中的一种。
本发明的效果可以从本发明提供的敏感膜修饰的电极性能看出。采用上述方法在玻碳电极上采用3-异氰酸酯基丙基三乙氧基硅烷制备共价键合葡萄糖氧化酶并掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶敏感膜并以其作为工作电极，以饱和甘汞电极(SCE)作为参比电极，Pt电极作为对电极组成葡萄糖电化学生物传感器。将该传感器的三电极体系置于pH值为5.0～9.0的磷酸盐缓冲溶液中，采用美国PARSTAT 2273电化学工作站进行电化学测试。采用计时电流法(i-t)在-0.1V(vs.SCE)测试电极对葡萄糖的响应电流，结果如图3所示，修饰电极对葡萄糖具有良好的响应，响应时间小于10s，葡萄糖的线性响应浓度范围为2.5×10-5～1.3×10-3M，检测限为7.5×10-6M，灵敏度为15.2μAmM-1cm-2，该灵敏度明显高于文献(3)Analytical and Bioanalytical Chemistry，2005，381：500-507中所报道的电沉积普鲁士蓝层和物理包埋葡萄糖氧化酶的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶膜修饰电极的数值。采用i-t法测试修饰电极于-0.1V下的抗干扰能力，结果如图4所示，浓度均为0.1mM的尿酸和抗坏血酸均未对电极产生干扰。采用i-t法测试电极在储存于剧烈搅拌的磷酸盐缓冲液中对葡萄糖的响应稳定性，结果如图5所示，以四乙氧基硅烷(TEOS)作为溶胶-凝胶前驱体所形成的掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管和葡萄糖氧化酶的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶膜修饰的对照电极在储存24h前响应不断增大，24h后又开始下降，而本发明提供的敏感膜修饰的电极在整个储存过程中响应非常稳定。
同现有技术相比较，本发明提供的共价键合生物活性物质并掺杂电子传递体和电子媒介体的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶电化学生物传感器敏感膜应用于电化学生物传感器的突出优点是：
(1)通过共价键将生物活性物质牢固地键合于同步形成的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶生物相容的三维网孔结构中，在保证生物活性物质生物活性的前提下有效地防止其流失，显著提高传感器的稳定性。
(2)在敏感膜中掺杂电子传递体可显著提高其电子传导性，从而提高传感器的响应灵敏度。
(3)在敏感膜中掺杂电子媒介体还可同时赋予其在低电位下进行高效检测的性能，进而降低实际样品中共存的电活性物质所产生的干扰，提高传感器的选择性。
(4)基于该敏感膜的电化学生物传感器的制备工艺简单，且不涉及到有机溶剂，从而在保证传感器性能的前提下降低其制备成本并提高其制备的安全性，适合商用型电化学生物传感器的大规模生产。
附图说明
图1.基于本发明制备的共价键合葡萄糖氧化酶并掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶敏感膜的葡萄糖电化学生物传感器的EIS图谱
横坐标-阻抗实部Z′(单位：欧姆，O)
纵坐标-阻抗虚部Z″(单位：欧姆，O)
a.玻碳电极
b.壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶膜修饰玻碳电极
c.共价键合葡萄糖氧化酶的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶膜修饰玻碳电极
d.共价键合葡萄糖氧化酶并掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶膜修饰玻碳电极
图2.基于本发明制备的共价键合葡萄糖氧化酶并掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶敏感膜的葡萄糖电化学生物传感器对H2O2响应的i-t曲线
横坐标-时间t(单位：秒，s)
纵坐标-电流i(单位：微安，μA)
内插图：传感器响应电流与H2O2浓度的关系曲线
横坐标-H2O2浓度C(单位：毫摩尔，mM)
纵坐标-电流i(单位：微安，μA)
图3.基于本发明制备的共价键合葡萄糖氧化酶并掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶敏感膜的葡萄糖电化学生物传感器对葡萄糖响应的i-t曲线
横坐标-时间t(单位：秒，s)
纵坐标-电流i(单位：微安，μA)
内插图：传感器响应电流与葡萄糖浓度的关系曲线
横坐标-葡萄糖浓度C(单位：毫摩尔，mM)
纵坐标-电流i(单位：微安，μA)
图4.基于本发明制备的共价键合葡萄糖氧化酶并掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶敏感膜的葡萄糖电化学生物传感器的抗干扰i-t曲线
a.加入0.1mM葡萄糖
b.加入0.1mM尿酸
c.加入0.1mM抗坏血酸
d.加入0.1mM葡萄糖
横坐标-时间t(单位：秒，s)
纵坐标-电流i(单位：微安，μA)
图5.基于本发明制备的共价键合葡萄糖氧化酶并掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶敏感膜的葡萄糖电化学生物传感器在储存于剧烈搅拌的磷酸盐缓冲液中对0.1mM葡萄糖的响应稳定性曲线
a.基于本发明制备的敏感膜的葡萄糖电化学生物传感器
b.基于以TEOS作为溶胶-凝胶前驱体所制备的敏感膜的对照电化学生物传感器
横坐标-储存时间t(单位：小时，h)
纵坐标-电流i(单位：微安，μA)
具体实施方式
实施例1
A.掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶的制备
A-1.按多壁碳纳米管的终浓度为0.5mg/mL将其加入到积比为3∶1的浓硫酸和浓硝酸混酸中于室温条件下超声6h，14000转离心收集碳纳米管并用去离子水将其洗涤至中性，然后置真空干燥箱中于50℃条件下干燥12h；
A-2.将酸处理后的多壁碳纳米管超声0.5h分散于pH为1.5的去离子水中，使碳纳米管的终浓度为0.5mg/mL，然后加入氯化铁、铁氰化钾和氯化钾，使其终浓度分别为1.2、2.6、11.0mg/mL，然后于室温条件下搅拌24h，收集多壁纳米管复合物并充分洗涤至中性，置真空干燥箱中于50℃条件下干燥12h后即可得到普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管；
A-3.称取2.3mg普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管、80μL 3-异氰酸酯基丙基三乙氧基硅烷加入到500μL 0.25％的壳聚糖溶液中，在室温条件下剧烈搅拌4h得到掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶。
B.葡萄糖氧化酶的共价键合
将2.9mg葡萄糖氧化酶加入到A得到的溶胶中，并于4℃条件下缓慢搅拌1.5h，得到共价键合葡萄糖氧化酶并掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶。
C.敏感膜在玻碳电极表面的制备
取6μL步骤B得到的溶胶滴到电极表面，并将电极于4℃条件下干燥12h，即可在电极表面形成一层共价键合葡萄糖氧化酶并掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶敏感膜。
以修饰玻碳电极为工作电极，铂丝为对电极，SCE电极作为参比电极，实验温度为室温，测试体系为0.05M，pH 6.9的磷酸缓冲溶液，用i-t法在-0.1V(vs.SCE)检测电极对葡萄糖的响应。该传感器的响应时间小于10秒；线性范围为2.5×10-5～1.3×10-3M；线性相关系数为0.9998；根据信噪比大于3的原则，测得电极的最低检测限为7.5×10-6M；灵敏度为15.2μAmM-1cm-2，该灵敏度明显高于文献(3)Analytical and Bioanalytical Chemistry，2005，381：500-507中所报道的电沉积普鲁士蓝层和物理包埋葡萄糖氧化酶的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶膜修饰电极的数值；浓度均为0.1mM的尿酸和抗坏血酸均未对电极产生干扰；和基于TEOS为溶胶-凝胶前驱体所制备的敏感膜的对照传感器相比较，该传感器在储存于剧烈搅拌的磷酸盐缓冲液中的响应非常稳定。
实施例2
A.掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶的制备
A-1.按多壁碳纳米管的终浓度为0.5mg/mL将其加入到积比为3∶1的浓硫酸和浓硝酸混酸中于室温条件下超声6h，14000转离心收集碳纳米管并用去离子水将其洗涤至中性，然后置真空干燥箱中于50℃条件下干燥12h；
A-2.将酸处理后的多壁碳纳米管超声0.5h分散于pH为1.5的去离子水中，使碳纳米管的终浓度为0.5mg/mL，然后加入氯化铁、铁氰化钾和氯化钾，使其终浓度分别为1.2、2.6、11.0mg/mL，然后于室温条件下搅拌24h，收集多壁纳米管复合物并充分洗涤至中性，置真空干燥箱中于50℃条件下干燥12h后即可得到普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管；
A-3.称取2.3mg普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管、80μL 3-异氰酸酯基丙基三乙氧基硅烷加入到500μL0.25％的壳聚糖溶液中，在室温条件下剧烈搅拌4h得到掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶。
B.胆碱氧化酶的共价键合
将2.2mg胆碱氧化酶加入到A得到的溶胶中，并于4℃条件下缓慢搅拌1.5h，得到共价键合胆碱氧化酶并掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶。
C.敏感膜在玻碳电极表面的制备
取6μL步骤B得到的溶胶滴到电极表面，并将电极于4℃条件下干燥12h，即可在电极表面形成一层共价键合胆碱氧化酶并掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶敏感膜。
以修饰玻碳电极为工作电极，铂丝为对电极，SCE电极作为参比电极，实验温度为室温，测试体系为0.05M，pH 6.9的磷酸缓冲溶液，用i-t法在-0.1V(vs.SCE)检测电极对硫代胆碱的响应。该传感器对硫代胆碱具有良好的电化学响应，且灵敏度较高；浓度均为0.1mM的尿酸和抗坏血酸均未对电极产生干扰；电极的稳定性较高，可保持在一个半月以上。
实施例3
A.掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶的制备
A-1.按多壁碳纳米管的终浓度为0.5mg/mL将其加入到积比为3∶1的浓硫酸和浓硝酸混酸中于室温条件下超声6h，14000转离心收集碳纳米管并用去离子水将其洗涤至中性，然后置真空干燥箱中于50℃条件下干燥12h；
A-2.将酸处理后的多壁碳纳米管超声0.5h分散于pH为1.5的去离子水中，使碳纳米管的终浓度为0.5mg/mL，然后加入氯化铁、铁氰化钾和氯化钾，使其终浓度分别为1.2、2.6、11.0mg/mL，然后于室温条件下搅拌24h，收集多壁纳米管复合物并充分洗涤至中性，置真空干燥箱中于50℃条件下干燥12h后即可得到普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管；
A-3.称取2.3mg普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管、80μL 3-异氰酸酯基丙基三乙氧基硅烷加入到500μL 0.25％的壳聚糖溶液中，在室温条件下剧烈搅拌4h得到掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶。
B.胆固醇氧化酶的共价键合
将5.6mg胆固醇氧化酶加入到A得到的溶胶中，并于4℃条件下缓慢搅拌1.5h，得到共价键合胆固醇氧化酶并掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶。
C.取6μL步骤B得到的溶胶滴到电极表面，并将电极于4℃条件下干燥12h，即可在电极表面形成一层共价键合胆固醇氧化酶并掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶敏感膜。
以修饰玻碳电极为工作电极，铂丝为对电极，SCE电极作为参比电极，实验温度为室温，测试体系为0.05M，pH 6.9的磷酸缓冲溶液，用i-t法在-0.1V(vs.SCE)检测电极对胆固醇的响应。该传感器对胆固醇具有良好的电化学响应，且灵敏度较高；浓度均为0.1mM的尿酸和抗坏血酸均未对电极产生干扰；电极的稳定性较高，可保持在一个半月以上。
实施例4
A.掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶的制备
A-1.按多壁碳纳米管的终浓度为0.5mg/mL将其加入到积比为3∶1的浓硫酸和浓硝酸混酸中于室温条件下超声6h，14000转离心收集碳纳米管并用去离子水将其洗涤至中性，然后置真空干燥箱中于50℃条件下干燥12h；
A-2.将酸处理后的多壁碳纳米管超声0.5h分散于pH为1.5的去离子水中，使碳纳米管的终浓度为0.5mg/mL，然后加入氯化铁、铁氰化钾和氯化钾，使其终浓度分别为1.2、2.6、11.0mg/mL，然后于室温条件下搅拌24h，收集多壁纳米管复合物并充分洗涤至中性，置真空干燥箱中于50℃条件下干燥12h后即可得到普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管；
A-3.称取2.3mg普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管、80μL 3-异氰酸酯基丙基三乙氧基硅烷加入到500μL0.25％的壳聚糖溶液中，在室温条件下剧烈搅拌4h得到掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶。
B.乙醇氧化酶的共价键合
将5.6mg乙醇氧化酶加入到A得到的溶胶中，并于4℃条件下缓慢搅拌1.5h，得到共价键合乙醇氧化酶并掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶。
C.取6μL步骤B得到的溶胶滴到电极表面，并将电极于4℃条件下干燥12h，即可在电极表面形成一层共价键合乙醇氧化酶并掺杂普鲁士蓝修饰的多壁碳纳米管的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶敏感膜。
以修饰玻碳电极为工作电极，铂丝为对电极，SCE电极作为参比电极，实验温度为室温，测试体系为0.05M，pH 6.9的磷酸缓冲溶液，用i-t法在-0.1V(vs.SCE)检测电极对乙醇的响应。该传感器对乙醇具有良好的电化学响应，且灵敏度较高；浓度均为0.1mM的尿酸和抗坏血酸均未对电极产生干扰；电极的稳定性较高，可保持在一个半月以上。

Claims (9)

1.一种电化学生物传感器敏感膜，其特征在于：敏感膜是由电子传递体、电子媒介体和共价键合生物活性物质的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶组成，其中电子传递体的含量为0.05～2.0mg/cm2，电子媒介体的含量为0.01～2.0mg/cm2，生物活性物质的含量为0.01～2.0mg/cm2，壳聚糖的含量为0.02～5.0mg/cm2，其余为二氧化硅溶胶-凝胶。
2.根据权利要求1所述的一种电化学生物传感器敏感膜，其特征在于：所述的电子传递体为单壁碳纳米管、多壁碳纳米管、富勒烯、金纳米粒子、银纳米粒子、铂纳米粒子、四氧化三铁纳米粒子中的一种；所述的电子媒介体为普鲁士蓝、铁氰化钾、二茂铁、乙酰基二茂铁、丙酰基二茂铁、丁酰基二茂铁、戊酰基二茂铁、己酰基二茂铁、辛酰基二茂铁、1，1′-双乙酰基二茂铁、1，1′-双己酰基二茂铁、乙基二茂铁、丙基二茂铁、丁基二茂铁、戊基二茂铁、己基二茂铁、1，1′-双丁基二茂铁、1，1′-双己基二茂铁、环戊烯基二茂铁、环己烯基二茂铁、3-二茂铁酰基丙酸、4-二茂铁酰基丁酸、4-二茂铁基丁酸、5-二茂铁基戊酸、二茂铁基甲醇、二茂铁基乙醇、二甲氨基甲基二茂铁、二茂铁甲酸、二茂铁乙酸、二茂铁丙酸、二茂铁酰胺、二茂铁酰氯、二茂铁硫代甲酰胺、氨基二茂铁、萘酚绿B、天青、四氰基对苯二醌二甲烷、四硫富瓦烯、四硫富瓦烯-四氰基二亚甲基苯醌、亚甲基蓝、新亚甲基蓝中的一种；所述的生物活性物质为葡糖糖氧化酶、胆固醇氧化酶、乙醇氧化酶、尿酸氧化酶、黄嘌呤氧化酶、辣根过氧化物酶、酪氨酸酶、肌红蛋白、细胞色素氧化酶、乙酰胆碱酯酶、乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶中的一种。
3.根据权利要求1所述的一种电化学生物传感器敏感膜，其特征在于：所述的电子传递体和电子媒介体可被二者相互结合后的复合体所替代。
4.一种如权利要求1所述的电化学生物传感器敏感膜的制备方法，具体制备步骤如下：
A.掺杂电子传递体和电子媒介体的壳聚糖-二氧化硅溶胶的制备
按电子传递体和电子媒介体的终浓度分别为为0.5～10mg/mL和0.1～10mg/mL将其超声5～60min分散于0.1～1.0％的壳聚糖溶液中，然后按体积比为10∶1～2∶1的比例将电子传递体和电子媒介体的壳聚糖溶液与硅烷偶联剂混合，并在室温条件下剧烈搅拌1～6h得到掺杂电子传递体和电子媒介体的壳聚糖-二氧化硅溶胶；
B.生物活性物质的共价键合
按生物活性物质的终浓度为0.1～10mg/mL将其加入到A得到的溶胶中，并于0～10℃条件下缓慢搅拌1～4h，得到共价键合生物活性物质并掺杂电子传递体和电子媒介体的壳聚糖-二氧化硅溶胶；
C.敏感膜在电极表面的制备
按8～400μL/cm2将步骤B得到的溶胶滴到电极表面，并将电极于2～10℃条件下干燥5～24h，即可在电极表面形成一层共价键合生物活性物质并掺杂电子传递体和电子媒介体的壳聚糖-二氧化硅溶胶-凝胶电化学生物传感器敏感膜。
5.根据权利要求1所述的电化学生物传感器敏感膜的制备方法，其特征是：步骤A中所述的电子传递体为单壁碳纳米管、多壁碳纳米管、富勒烯、金纳米粒子、银纳米粒子、铂纳米粒子、四氧化三铁纳米粒子中的一种；所述的电子传递体为普鲁士蓝、铁氰化钾、二茂铁、乙酰基二茂铁、丙酰基二茂铁、丁酰基二茂铁、戊酰基二茂铁、己酰基二茂铁、辛酰基二茂铁、1，1′-双乙酰基二茂铁、1，1′-双己酰基二茂铁、乙基二茂铁、丙基二茂铁、丁基二茂铁、戊基二茂铁、己基二茂铁、1，1′-双丁基二茂铁、1，1′-双己基二茂铁、环戊烯基二茂铁、环己烯基二茂铁、3-二茂铁酰基闪酸、4-二茂铁酰基丁酸、4-二茂铁基丁酸、5-二茂铁基戊酸、二茂铁基甲醇、二茂铁基乙醇、二甲氨基甲基二茂铁、二茂铁甲酸、二茂铁乙酸、二茂铁丙酸、二茂铁酰胺、二茂铁酰氯、二茂铁硫代甲酰胺、氨基二茂铁、萘酚绿B、天青、四氰基对苯二醌二甲烷、四硫富瓦烯、四硫富瓦烯-四氰基二亚甲基苯醌、亚甲基蓝、新亚甲基蓝中的一种。
6.根据权利要求1所述的电化学生物传感器敏感膜的制备方法，其特征是：步骤A中所述的电子传递体和电子媒介体可被二者相互结合后的复合体所替代。
7.根据权利要求1所述的电化学生物传感器敏感膜的制备方法，其特征是：步骤A中所述的壳聚糖溶液为壳聚糖通过超声或搅拌溶解于0.5～2.0％的醋酸中的溶液；所述的硅烷偶联剂为3-异氰酸酯基丙基三乙氧基硅烷、3-异氰酸酯基丙基三甲氧基硅烷、3-(2，3-环氧丙氧)丙基三甲氧基硅烷、3-(2，3-环氧丙氧)丙基三乙氧基硅烷、2-(3，4-环氧环己烷)乙基三甲氧基硅烷、3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷中的一种。
8.根据权利要求1所述的电化学生物传感器敏感膜的制备方法，其特征是：步骤B中所述的生物活性物质为葡糖糖氧化酶、胆固醇氧化酶、乙醇氧化酶、尿酸氧化酶、黄嘌呤氧化酶、辣根过氧化物酶、酪氨酸酶、肌红蛋白、细胞色素氧化酶、乙酰胆碱酯酶、乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶中的一种。
9.根据权利要求1所述的电化学生物传感器敏感膜的制备方法，其特征是：步骤C中所述的电极为玻碳电极、金电极、铂电极、热解石墨电极、石墨碳糊电极中的一种。
CN2011100049334A 2011-01-12 2011-01-12 一种电化学生物传感器敏感膜及其制备方法 Pending CN102590305A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2011100049334A CN102590305A (zh) 2011-01-12 2011-01-12 一种电化学生物传感器敏感膜及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2011100049334A CN102590305A (zh) 2011-01-12 2011-01-12 一种电化学生物传感器敏感膜及其制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN102590305A true CN102590305A (zh) 2012-07-18

Family

ID=46479240

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2011100049334A Pending CN102590305A (zh) 2011-01-12 2011-01-12 一种电化学生物传感器敏感膜及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102590305A (zh)

Cited By (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104101633A (zh) * 2014-07-29 2014-10-15 无锡百灵传感技术有限公司 一种基于碳纳米管和乙烯基二茂铁改性碳糊电极的电化学传感器的制备方法
CN104458881A (zh) * 2014-11-10 2015-03-25 天津出入境检验检疫局工业产品安全技术中心 修饰电极检测对硝基苯酚的新型电极材料、制备方法及其对对硝基苯酚的检测
CN105158314A (zh) * 2015-08-19 2015-12-16 金湖福润禽业食品有限公司 一种血红蛋白电化学传感器的制备方法
CN105755523A (zh) * 2016-05-09 2016-07-13 扬州大学 疏水物质膜的一种制备方法
CN105806910A (zh) * 2016-03-18 2016-07-27 中国科学院成都生物研究所 一种AChE酶定向固定的生物传感器及其制备方法和应用
CN106501338A (zh) * 2016-11-01 2017-03-15 济南大学 一种基于c60复合材料检测对硝基苯酚的电化学方法
CN106770187A (zh) * 2016-11-21 2017-05-31 东南大学 一种电致变色传感器阵列及其制备、使用方法
CN107167502A (zh) * 2017-05-22 2017-09-15 阜阳师范学院 基于碳纳米管‑富勒烯复合物的非酶电化学传感器的构建方法及应用
CN107186219A (zh) * 2017-05-04 2017-09-22 东莞理工学院 一种枝状银‑钯钌复合材料的制备方法及其在电催化氧化乙醇中的应用
CN108241011A (zh) * 2018-01-31 2018-07-03 陕西师范大学 一种镶金的碳纳米管接枝二茂铁聚合物纳米复合电化学传感材料及其制备方法和应用
CN108440634A (zh) * 2018-04-12 2018-08-24 哈尔滨工业大学 多重刺激响应性豆甾醇衍生物小分子凝胶因子、有机凝胶及其制备方法
CN109270143A (zh) * 2018-10-10 2019-01-25 东南大学 一种高活性葡萄糖氧化酶的固定方法
CN110672691A (zh) * 2019-10-10 2020-01-10 四川轻化工大学 一种功能化石墨烯修饰玻碳电极的制备方法及用途
CN111422912A (zh) * 2020-04-11 2020-07-17 石河子大学 一种Fe3O4@C修饰电极材料的制备方法和用途
CN111443121A (zh) * 2020-04-16 2020-07-24 安徽师范大学 一种电化学生物传感器电极的制备方法
CN112574619A (zh) * 2020-12-01 2021-03-30 德莱森(北京)医疗科技有限公司 一种导电墨水功能材料及其制备方法
CN112625507A (zh) * 2020-12-01 2021-04-09 德莱森(北京)医疗科技有限公司 一种功能化导电墨水及其应用
CN112795243A (zh) * 2020-12-31 2021-05-14 德莱森(北京)医疗科技有限公司 媒介体结构在导电墨水功能材料中的应用
WO2022116880A1 (zh) * 2020-12-01 2022-06-09 德莱森(北京)医疗科技有限公司 一种导电墨水功能材料、应用及制备方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101832965A (zh) * 2010-04-28 2010-09-15 湖南大学 基于磁性碳纳米管和壳聚糖/二氧化硅凝胶的漆酶生物传感器及其制备方法和应用

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101832965A (zh) * 2010-04-28 2010-09-15 湖南大学 基于磁性碳纳米管和壳聚糖/二氧化硅凝胶的漆酶生物传感器及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
GUANGLEI FU,ET AL.: "Glucose biosensor based on covalent immobilization of enzyme in sol-gel composite film combined with Prussian blue/carbon nanotubes hybrid", 《BIOSENSORS AND BIOELECTRONICS》 *
SIMONE S. SILVA,ET AL.: "Functional nanostructured chitosan-siloxane hybrids", 《JOURNAL OF MATERIALS CHEMISTRY》 *
XUECAI TAN,ET AL.: "An amperometric cholesterol biosensor based on multiwalled carbon nanotubes and organically modified sol-gel/chitosan hybrid composite film", 《ANALYTICAL BIOCHEMISTRY》 *
XUE-CAI TAN,ET AL.: "Glucose biosensor based on glucose oxidase immobilized in sol–gel chitosan/silica hybrid composite film on Prussian blue modified glass carbon electrode", 《ANAL BIOANAL CHEM》 *
李文娟: "基于纳米材料构建介体型酶生物传感器的研究", 《西南大学硕士学位论文》 *

Cited By (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104101633A (zh) * 2014-07-29 2014-10-15 无锡百灵传感技术有限公司 一种基于碳纳米管和乙烯基二茂铁改性碳糊电极的电化学传感器的制备方法
CN104458881A (zh) * 2014-11-10 2015-03-25 天津出入境检验检疫局工业产品安全技术中心 修饰电极检测对硝基苯酚的新型电极材料、制备方法及其对对硝基苯酚的检测
CN104458881B (zh) * 2014-11-10 2015-10-28 天津出入境检验检疫局工业产品安全技术中心 修饰电极检测对硝基苯酚的新型电极材料、制备方法及其对对硝基苯酚的检测
CN105158314A (zh) * 2015-08-19 2015-12-16 金湖福润禽业食品有限公司 一种血红蛋白电化学传感器的制备方法
CN105158314B (zh) * 2015-08-19 2017-10-03 江苏省农业科学院 一种血红蛋白电化学传感器的制备方法
CN105806910A (zh) * 2016-03-18 2016-07-27 中国科学院成都生物研究所 一种AChE酶定向固定的生物传感器及其制备方法和应用
CN105806910B (zh) * 2016-03-18 2018-11-13 中国科学院成都生物研究所 一种AChE酶定向固定的生物传感器及其制备方法和应用
CN105755523B (zh) * 2016-05-09 2017-11-21 扬州大学 疏水物质膜的一种制备方法
CN105755523A (zh) * 2016-05-09 2016-07-13 扬州大学 疏水物质膜的一种制备方法
CN106501338A (zh) * 2016-11-01 2017-03-15 济南大学 一种基于c60复合材料检测对硝基苯酚的电化学方法
CN106501338B (zh) * 2016-11-01 2019-02-19 济南大学 一种基于c60复合材料检测对硝基苯酚的电化学方法
CN106770187A (zh) * 2016-11-21 2017-05-31 东南大学 一种电致变色传感器阵列及其制备、使用方法
CN107186219A (zh) * 2017-05-04 2017-09-22 东莞理工学院 一种枝状银‑钯钌复合材料的制备方法及其在电催化氧化乙醇中的应用
CN107186219B (zh) * 2017-05-04 2019-04-05 东莞理工学院 一种枝状银-钯钌复合材料的制备方法及其在电催化氧化乙醇中的应用
CN107167502A (zh) * 2017-05-22 2017-09-15 阜阳师范学院 基于碳纳米管‑富勒烯复合物的非酶电化学传感器的构建方法及应用
CN108241011B (zh) * 2018-01-31 2019-10-25 陕西师范大学 一种镶金的碳纳米管接枝二茂铁聚合物纳米复合电化学传感材料及其制备方法和应用
CN108241011A (zh) * 2018-01-31 2018-07-03 陕西师范大学 一种镶金的碳纳米管接枝二茂铁聚合物纳米复合电化学传感材料及其制备方法和应用
CN108440634A (zh) * 2018-04-12 2018-08-24 哈尔滨工业大学 多重刺激响应性豆甾醇衍生物小分子凝胶因子、有机凝胶及其制备方法
CN108440634B (zh) * 2018-04-12 2021-02-09 哈尔滨工业大学 多重刺激响应性豆甾醇衍生物小分子凝胶因子、有机凝胶及其制备方法
CN109270143B (zh) * 2018-10-10 2020-12-25 东南大学 一种高活性葡萄糖氧化酶的固定方法
CN109270143A (zh) * 2018-10-10 2019-01-25 东南大学 一种高活性葡萄糖氧化酶的固定方法
CN110672691A (zh) * 2019-10-10 2020-01-10 四川轻化工大学 一种功能化石墨烯修饰玻碳电极的制备方法及用途
CN111422912A (zh) * 2020-04-11 2020-07-17 石河子大学 一种Fe3O4@C修饰电极材料的制备方法和用途
CN111422912B (zh) * 2020-04-11 2023-04-21 石河子大学 一种Fe3O4@C修饰电极材料的制备方法和用途
CN111443121A (zh) * 2020-04-16 2020-07-24 安徽师范大学 一种电化学生物传感器电极的制备方法
CN112574619A (zh) * 2020-12-01 2021-03-30 德莱森(北京)医疗科技有限公司 一种导电墨水功能材料及其制备方法
CN112625507A (zh) * 2020-12-01 2021-04-09 德莱森(北京)医疗科技有限公司 一种功能化导电墨水及其应用
WO2022116880A1 (zh) * 2020-12-01 2022-06-09 德莱森(北京)医疗科技有限公司 一种导电墨水功能材料、应用及制备方法
CN112574619B (zh) * 2020-12-01 2022-08-09 德莱森(北京)医疗科技有限公司 一种导电墨水功能材料及其制备方法
CN112625507B (zh) * 2020-12-01 2022-08-12 德莱森(北京)医疗科技有限公司 一种功能化导电墨水及其应用
CN112795243A (zh) * 2020-12-31 2021-05-14 德莱森(北京)医疗科技有限公司 媒介体结构在导电墨水功能材料中的应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102590305A (zh) 一种电化学生物传感器敏感膜及其制备方法
Sun et al. Direct electrochemistry and electrocatalysis of hemoglobin on chitosan-room temperature ionic liquid-TiO2-graphene nanocomposite film modified electrode
Teymourian et al. Electrocatalytic oxidation of NADH at electrogenerated NAD+ oxidation product immobilized onto multiwalled carbon nanotubes/ionic liquid nanocomposite: application to ethanol biosensing
Tan et al. An amperometric cholesterol biosensor based on multiwalled carbon nanotubes and organically modified sol-gel/chitosan hybrid composite film
Savari et al. High sensitivity amperometric and voltammetric determination of persulfate with neutral red/nickel oxide nanowires modified carbon paste electrodes
Kang et al. Glucose biosensors based on platinum nanoparticles-deposited carbon nanotubes in sol–gel chitosan/silica hybrid
Qiu et al. Amperometric sensor based on ferrocene-modified multiwalled carbon nanotube nanocomposites as electron mediator for the determination of glucose
Ahmadalinezhad et al. High-performance electrochemical biosensor for the detection of total cholesterol
Teymourian et al. Low potential detection of NADH based on Fe3O4 nanoparticles/multiwalled carbon nanotubes composite: Fabrication of integrated dehydrogenase-based lactate biosensor
US9708640B2 (en) Electrospun nanofibrous membranes and disposable glucose biosensor
Zhang et al. Cerium oxide–graphene as the matrix for cholesterol sensor
MansouriMajd et al. Fabrication of electrochemical theophylline sensor based on manganese oxide nanoparticles/ionic liquid/chitosan nanocomposite modified glassy carbon electrode
Jeykumari et al. A novel nanobiocomposite based glucose biosensor using neutral red functionalized carbon nanotubes
Wang et al. Carbon nanotube/chitosan/gold nanoparticles-based glucose biosensor prepared by a layer-by-layer technique
Zhang et al. Amperometric glucose biosensor based on direct assembly of Prussian blue film with ionic liquid-chitosan matrix assisted enzyme immobilization
Tasviri et al. Amine functionalized TiO2 coated on carbon nanotube as a nanomaterial for direct electrochemistry of glucose oxidase and glucose biosensing
Rawal et al. Construction of amperometric uric acid biosensor based on uricase immobilized on PBNPs/cMWCNT/PANI/Au composite
Xiao et al. An reagentless glucose biosensor based on direct electrochemistry of glucose oxidase immobilized on poly (methylene blue) doped silica nanocomposites
Sheng et al. Direct electrochemistry of glucose oxidase immobilized on NdPO4 nanoparticles/chitosan composite film on glassy carbon electrodes and its biosensing application
CN105136885A (zh) 一种普鲁士蓝/n-掺杂碳纳米复合材料的制备及应用
Zhao et al. A novel glucose biosensor based on phosphonic acid-functionalized silica nanoparticles for sensitive detection of glucose in real samples
Wu et al. Sensitive enzymatic glucose biosensor fabricated by electrospinning composite nanofibers and electrodepositing Prussian blue film
CN103954660B (zh) 一种检测胆固醇的酶生物传感器及其制备方法与应用
Che et al. Amperometric glucose biosensor based on Prussian blue–multiwall carbon nanotubes composite and hollow PtCo nanochains
Jha et al. Entrapment of live microbial cells in electropolymerized polyaniline and their use as urea biosensor

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
DD01 Delivery of document by public notice

Addressee: Dai Zhifei

Document name: Notification that Application Deemed to be Withdrawn

C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20120718