TWI462923B - Ｋｍｕｐ－３之心肌梗塞疾患用途 - Google Patents

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Description

KMUP-3之心肌梗塞疾患用途
本發明係涉及運用於心肌梗塞疾患之醫療功能。特別係KMUP-3可經由KATP通道之開啟而保護心肌梗塞後之心臟功能。
於高血壓大鼠所呈現之心肌保護作用，以及減少心肌肥厚和纖維化，如第一圖所示以茶鹼為骨架之黃嘌呤類衍生物之KMUP-1，其化學結構為(7-2-4-(2-氯苯)哌嗪基]乙基)-1,3-二甲基黃嘌呤(7-[2-[4-(2-chlorophenyl)piperazinyl]ethyl]-1,3-dimethylxanthine)已經證實具備療效(Wuet al .,2001;Yehet al .,2010)。其本體架構第七位氮基上進行修飾，帶有(2-氯苯)哌嗪基)乙基。KMUP-3係7-2-4-(2-硝基苯)哌嗪基)乙基]之取代系列衍生物(7-[2-[4-(4-nitrobenzene)piperazinyl]ethyl]-1,3-dimethyl-xanthine)。
KMUP-3比KMUP-1擁有更強之磷酸二酯酶抑制作用，以及加強人類臍靜脈內皮細胞(HUVECs)之內皮細胞一氧化氮合成酶(eNOS)能力(Wuet al .,2005;Linet al .,2006)。
KMUP-3可經KATP通道之開啟和增強內皮一氧化氮合成酶(eNOS)而誘使主動脈平滑肌之鬆弛。KATP通道阻斷劑glibenclamide減弱該主動脈平滑肌之鬆弛作用力，導致細胞外K+ 之含量升高(80 mM)(Wuet al .,2005;Linet al .,2006)。
左心室重塑和充血性心臟衰竭(CHF)仍係造成急性心肌梗塞(AMI)倖存者死亡之主要原因。不斷增加之證據顯示抑制心肌細胞凋亡以及減少炎症後期細胞因子，可增進心肌梗塞後心功能之改善(Liet al .,2009)。於心肌細胞，顯示高含量之ATP依賴性鉀通道(KATP)並參與保護作用。於急性症候KATP通道之開啟所呈現心肌之保護作用，可減少因缺血/再灌注之細胞損傷以及減小心肌梗塞之範圍(Leeet al .,2008)。最近已知長期投與KATP通道活化劑，可減弱心肌梗塞後之心室重塑。
此外經由一氧化氮之釋出，eNOS參與一系列之炎症反應。據最近報告eNOS高表達轉基因小鼠，對於bleomycin誘發肺纖維化模型，可經由抑制基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)而減少肺損傷(Yoshimuraet al .,2006)。顯示eNOS可能不僅涉及急性炎症，亦對於慢性纖維化具備療效。但是在慢性心衰竭，eNOS與基質金屬蛋白酶-9之關係則尚未建立。
發明人鑑於習知技術尚有所不完備處，經過悉心試驗與研究，並一本鍥而不捨之精神，終構思出本案「KMUP-3之心肌梗塞疾患用途」，能夠克服先前技術之不足，以下為本案之簡要說明。
本案「KMUP-3之心肌梗塞疾患用途」之一構想係一種治療心肌梗塞疾患之醫藥組合物，其係包含藥學上可接受之載體；以及一有效量之主成分，其係選自以下所組成群組之一；KMUP-3化合物、及其鹽類。
根據上述構想，係指KMUP-3化合物、及其鹽類，可經由增強內皮一氧化氮合酶(eNOS)改善心臟功能，而降低炎症、心肌梗塞，或預防心肌梗塞後之心室重塑，可改善心臟收縮功能等醫療功能。
根據上述構想，KMUP-3其鹽類，係將KMUP-3溶於混合著乙醇與無機酸或有機酸之溶液，於高於室溫下反應，室溫下添加甲醇放置過夜進行結晶，過濾獲得KMUP-3鹽類。將KMUP-3化合物及其鹽類於添加適量賦形劑成為一藥物組合物，經由製劑方式之處理製成適宜投與哺乳類動物體內各種劑型，而呈現上述改善心肌梗塞疾患之醫療功能。上述所稱無機酸係為鹽酸。所稱有機酸係為檸檬酸、菸鹼酸或甘草酸。所稱哺乳類動物係指人類或生物學所稱之哺乳類動物。
法拉明罕(Framingham)心臟研究，提升血漿中基質金屬蛋白酶-9含量，與舒張末期左心室內徑(left ventricular end-diastolic dimension,LVEDD)之增加和壁厚具關聯性，顯示基質金屬蛋白酶-9對於左心室重塑擔任重要角色(Linet al., 2007)。在急性期之心肌梗塞和慢性心衰竭，顯示該酶之活性增強。在已知之研究中，基質金屬蛋白酶-9標的之刪除或投與該酶之抑制劑，能防止左心室功能障礙。因此相信，該酶於心室重塑過程中發揮重大作用。基質金屬蛋白酶-9抑制劑，一種基質金屬蛋白酶組織抑制因子-1(tissue inhibitor of metallopmteinase-1,TIMP-1)顯示能調控心肌梗塞之心肌癒合(Halapaset al., 2008)，且缺乏TIMP-1之心肌梗塞小鼠其左心室重塑惡化(Creemerset al., 2003)。
依照本發明之實驗證實KMUP-3化合物及其鹽類，於心肌細胞，顯示高含量之ATP依賴性鉀通道(KATP)並參與保護作用。於急性症候KATP通道之開啟所呈現心肌之保護作用，可減少因缺血/再灌注之細胞損傷以及減小心肌梗塞之範圍(Leeet al., 2008)。本發明之KMUP-3化合物化合物及其鹽類，可協助心肌梗塞後之心室重塑。
上述鹽類，係包括KMUP-3化合物與礦物酸或有機酸所形成之鹽酸鹽、檸檬酸鹽或菸鹼酸鹽類。具體而言其製備方法係將KMUP-3溶於混合著甲醇、乙醇等C1 至C4 之醇類與礦物酸或有機酸之類溶液，於40 ℃~70 ℃以下溫度反應，室溫下添加醇類溶液結晶，過濾獲得KMUP-3鹽類。上述賦形劑或稱為『藥學上可接受之載體或賦形劑』、『生物可利用之載體或賦形劑』，係包括溶媒、分散劑、包衣、抗菌或抗真菌劑，保存或延緩吸收劑等任何習知用於製備成劑型之適當化合物。通常此類載體或賦形劑，本身不具備治療疾病之活性，且將本發明所揭示之衍生物，搭配藥學上可接受之載體或賦形劑，製備之各劑型，投與動物或人類不致於造成不良反應、過敏或其它不適當反應。因而本發明所揭示之衍生物，搭配藥學上可接受之載體或賦形劑，係適用於臨床及人類。運用本發明化合物之劑型經由靜脈、口服、吸入或經由鼻、直腸、陰道等局部或舌下等方式投藥，可達到治療效果。對於不同病症之患者，約每日投與0.1 mg至100 mg之活性成份。
該載體隨各劑型而不同，無菌注射之組成物可將溶液或懸浮於無毒之靜脈注射稀釋液或溶劑中，此類溶劑如1,3－丁二醇。其間可接受之載體可為甘露醇(Mannitol)或水。此外固定油或以合成之單或雙苷酸油酯懸浮介質，係一般習用之溶劑。脂肪酸，如油酸(Oleic acid)、橄欖油或蓖麻油等與其苷酸油酯衍生物，尤其經多氧乙基化之型態皆可作為製備注射劑並為天然醫藥可接受之油類。此等油類溶液或懸浮液可包含長鏈酒精稀釋液或分散劑、羧甲基纖維素或類似之分散劑。其他一般使用之介面活性劑如Tween、Spans或其他相似之乳化劑或係一般醫藥製造業所使用於醫藥可接受之固態、液態或其他可用於劑型開發之生物可利用增強劑。
用於口服投藥之組合物則係採用任何一種口服可接受之劑型，其型式包括膠囊、錠劑、片劑、乳化劑、液狀懸浮液、分散劑、溶劑。口服劑型一般所使用之載體，以錠劑為例可為乳糖、玉米澱粉、潤滑劑，如硬脂酸鎂為基本添加物。而膠囊使用之稀釋液包括乳糖與乾燥玉米澱粉。製成液狀懸浮液或乳化劑劑型，係將活性物質懸浮或溶解於結合乳化劑或懸浮劑之油狀介面，視需要添加適度之甜味劑，風味劑或係色素。
鼻用氣化噴霧劑或吸入劑組成物，可根據已知之製劑技術進行製備。例如，將組成物溶於生理食鹽水中，添加苯甲醇或其他適合之防腐劑，或促吸收劑以增強生物可利用性。本發明化合物之組合物亦可製成栓劑，進行經直腸或陰道之投藥方式。
本發明化合物亦可運用『靜脈投藥』，其係包括經由皮下、腹腔、靜脈、肌肉，或關節腔內、顱內、關節液內、脊髓內注射，主動脈注射，胸腔注射，疾病部位內注射，或其他適合之投藥技術。
心肌梗塞之實驗
雄性大鼠(250-300 g)由國家實驗室動物育種和研究中心(臺灣臺北)所提供，於恒溫和控制照明下飼養。食物和飲水都可自由攝取。
依照Lianget al., 2006方式，對冠狀動脈左前降支(Left anterior descending artery,LAD)施以結紮術引起心肌梗塞。簡述如下，由下腹腔以戊巴比妥鈉(30 mg‧kg-1 )進行全身麻醉，由左胸小切口取出心臟。在左前降支離基處2毫米以6.0絲帶結紮，且一次縫合傷口。手術後觀察動物，直到充分恢復意識。佯作對照組動物進行類似之開胸和心包手術，但不結紮冠狀動脈。
以皮下注射之鎮痛劑酮洛芬(ketoprofen)3 mg‧kg-1 及抗生素慶大黴素(gentamicin)0.7mg‧kg-1 ，投予動物2天。該研究經高雄醫學大學之動物保護和利用委員會核可。
存活之大鼠，恢復後立即以ALZET(Model 2ML4,DURECT Corporation,Cupertino,CA,USA)滲透性微泵(minipumps)進行植入。此時，大多數大鼠仍處於之前所投與戊巴比妥鈉之麻醉作用。必要時，再以丸劑量(15 mg‧kg-1 )之戊巴比妥鈉。2毫升Alzet滲透微泵，於4周內維持平均2.5 μL‧h-1 之抽換率。治療組，滲透微泵內充滿0.3 mg‧kg-1 ‧day-1 之KMUP-3鹽酸鹽。佯作對照組和心肌梗塞組動物，滲透微泵內充滿鹽水。
在術後4周，所有之動物進行超聲心動圖(Echocardiography)。每隻大鼠腹腔注射30 mg‧kg-1 戊巴比妥鈉加以麻醉。以聲耦合凝膠(acoustic coupling gel)剃除前胸毛。超聲心動圖系統裝置Hewlett-Packard Sonos 1500,5-MHz探針，經由Mmode縱向和橫向之胸骨旁視圖，以測量左心室端之收縮內徑(LV end-systolic dimension,LVESD)和舒張末期左心室內徑(LVEDD)。依照下列公式(Louhelainenet al., 2007)從左心室範圍分析左心室縮短分數(LV fractional shortening,LVFS)：LVFS={(LVEDD-LVESD)/LVEDD}×100超聲心動圖檢查後插入聚乙稀管(PE)50導管，經右頸動脈測量左心室收縮壓(LVSP)、左心室末期舒張壓(LVEDP)、心室內壓上升速率增加(+左心室dP/dt)和下降(-左心室dP/dt)之最高限額。於紀錄之終端切開下腔靜脈和肺靜脈，讓血液流出。將心臟離體，分開心房和右心室。將左心室部分嵌入儀器中，轉移其餘之組織於液態氮待進一步之評估。在整個實驗過程，更投予丸劑量戊巴比妥鈉(15 mg‧kg-1 )。
整個心臟進行組織學分析。隨機選擇大鼠依照Haradaet al. ,2005之埃文斯藍(Evan blue)染色，分析冠狀動脈結紮後之區域與風險。梗死體積經由2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色，顯示為表面積之梗死心肌和整個左心室之表面區域比率(Vandegriffet al. ,2008)。以三色染色(Masson’s trichrome)心肌切片部分，以評估上述之纖維化(Linet al. ,2009;Yehet al. ,2010)。TTC染色後心肌梗塞之白色區域和非梗死之紅色面積，可目視見之。心肌梗塞疤痕延長1毫米，定義為梗死周邊區域。每顆心臟區分為10段，以分析纖維化之百分比。心肌梗塞後平均纖維化之變動，以實驗組及三色染色之佯作對照組相比較。經由美國NIH imageJ,1.42q之治療組不知情之模式進行整體左心室、梗死面積和纖維化區域之測量。
人類心臟纖維化細胞(HCFs編碼：306 05f)從Cell Applications Inc.(San Deigo,Ca,USA)購置。細胞單分子地培養於37℃、濕度95%和5%二氧化碳，含10%胎牛血清之培養基(Dulbecco’s modified Eagle’s medium,DMEM)。經3-6世代之後細胞進行實驗。實驗前，以無血清培養液洗滌HCFs細胞兩次，再更換到無血清培養基培養24小時。進行基質金屬蛋白酶-9表達之刺激實驗，以10 ng‧mL-1轉化生長因數-β(TGF-β)培養24小時。HCFs先行以KMUP-3(10 μmol‧L-1)或併用Nω -硝基-L-精氨酸甲酯(100 μmol‧L-1)處理1小時，再經轉化生長因數-β(transforming growth factor-β,TGF-β)培養24小時，所有實驗均重複三次。
西方點墨法
將心臟置於含50 mmol‧L-1 三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽(Tris)經超音波震盪10秒2次，以4℃ 13000 rpm離心30分鐘。以牛血清白蛋白為標準液，測定上清蛋白濃度。以pH 6.8，含100 mmol‧L-1 三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽、20%甘油、4%硫酸十二酯鈉(SDS)和0.2%溴藍色之檢品緩衝液，依照4:1之比率煮沸細胞提取物。電泳是運用10% SDS-PAGE凝膠進行電泳，再轉移到硝化纖維膜(Millipore Corporation,Billerica,MA,USA)。在室溫下以含20 mmol‧L-1 之Tris和pH7.6 137 mmol‧L-1 氯化鈉組成之Tris緩衝液，與含0.1%吐溫-20及5%脫脂牛奶反應1h，以封閉該膜。以TTBS洗滌，然後在4℃下，置入基質金屬蛋白酶-9、TIMP-1(Millipore,Temecula,CA,USA)，或eNOS(BD Transduction Laboratories,Franklin Lakes,NJ,USA)之原發性抗體培養過夜。該膜再以辣根過氧化物酶結合抗體對抗老鼠或兔IgG(Santa Cruz Biotechnology,Santa Cruz,CA,USA)，培養1小時之前先經TTBS洗滌。然後該膜再以TTBS洗滌，並檢測特異性抗原之螢光。其強度可被量化。
所有組之大鼠，在6小時內出現嚴重之胸部出血(9%)，因此從最終分析中排除，此類早期手術之相似死亡。心肌梗塞治療期間，並無任何動物死亡。表1顯示心肌梗塞引起重大之心肌肥厚且心臟重量(HW)隨體量(BW)比率而增加。KMUP-3治療組，能預防心臟之重構過程。心肌梗塞組每天投與0.3 mg‧kg-1 KMUP-3持續4週，令左心室內壓上升速率(+dP/dt)下跌可改善心臟收縮功能。心肌梗塞組大鼠，呈現減少左心室收縮壓(LVSP)和左心室內壓下降速率(-dP/dt)之趨勢，但其差異不具統計意義。KMUP-3治療後可輕微增加心搏，但無統計上之顯著性。
MaxdP/dt：心室內壓最大速率(mmHg/s)*P <0.05,**P<0.01 Min dP/dt：心室內壓最小速率
如第三圖所示，梗死大鼠之舒張末期左心室內徑(LVEDD)與左心室端之收縮內徑(LVESD)均較佯作對照組增加。其縮短分數(fractional shortening,FS)之減少，顯現收縮功能亦下降。以KMUP-3治療4周可能預防心臟之重構以及功能減弱之過程。
冠狀動脈結紮後之風險區域運用埃文斯藍染色，和治療組之間無差異性(第四圖(1))。梗死面積經2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色，經KMUP-3治療後呈現顯著下跌，於第四圖(2)為33.6±1.7%，與心肌梗塞組47.4±3.7%比較為#P <0.05。KMUP-3可減弱心臟纖維化，經三色染色如第五圖所示之梗死中央區或周邊區域。KMUP-3更能於非梗死區域，達到如佯作對照組之纖維化之百分比。
於心肌梗塞大鼠其基質金屬蛋白酶-9之表達，比佯作對照組大鼠顯著地增加。如第七圖(1)所示，投與KMUP-3減少心肌梗塞大鼠之基質金屬蛋白酶-9表達。如第七圖(2)所示投與KMUP-3之治療，可大幅度增加MMP-9抑制劑TIMP-1之表達。於心肌梗塞大鼠eNOS之表達，呈現較溫和之跌幅。投與KMUP-3之治療後，比心肌梗塞組大鼠eNOS之表達更顯著地增加(第七圖(3))。
HCFs受TGF-β(10 ng‧mL-1 )刺激後，測量基資金屬蛋白酶-9及基質金屬蛋白酶組織抑制因子-1(TIMP-1)之表達以評估依賴eNOS保護心臟之體外機制。如第八圖(1)所示經TGF-β刺激基質金屬蛋白酶-9表達顯著增加，而投與KMUP-3(10μmol‧L-1 )則減弱MMP-9之表達。若以eNOS抑制劑Nω -硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME,100 μmol‧L-1 )預先處理，可扭轉基質金屬蛋白酶-9表達之抑制作用。如第八圖(2)所示同時投與KMUP-3之治療，可顯著地加強TIMP-1之表達。
實施例一　製備KMUP-3鹽酸鹽(7-[2-[4-(4-nitrobenzene)piperazinyl]ethyl]-1,3-dimethylxanthine HCl)
取KMUP-3(8.3 g)溶於混合著乙醇(10 mL)與1 N鹽酸(60 mL)之溶液，於50 ℃下反應20分鐘，室溫下添加甲醇放置過夜進行結晶，過濾獲得KMUP-3鹽酸鹽(6.4 g)。
實施例二　製備KMUP-3檸檬酸鹽(KMUP-3-Citric acid)
取KMUP-3(8.3 g)溶於混合著乙醇(10 mL)與檸檬酸(4 g)之溶液，於50 ℃下反應20分鐘，室溫下添加甲醇放置過夜進行結晶，過濾獲得KMUP-1檸檬酸鹽(10.5 g)。
實施例三　製備KMUP-3菸鹼酸鹽(KMUP-3-Nicotinic acid)
取KMUP-3(8.3 g)溶於混合著乙醇(10 mL)與菸鹼酸(2.4 g)之溶液，於50 ℃下反應20分鐘，室溫下添加甲醇放置過夜進行結晶，過濾獲得KMUP-1菸鹼酸鹽(8.3 g)。
實施例四　製備錠劑之組合物
分別依量秤取下列各成分，混和後充填於打錠機，製備成錠劑
KMUP-3-HCl　0.68 g
乳糖　qs
玉米粉　qs
實施例
1.一種治療心肌梗塞疾患之醫藥組合物，係包含：藥學上可接受之載體；以及一有效量之主成分，其係選自以下所組成群組之一；KMUP-3化合物、及其鹽類。
2.　一種減弱心臟纖維化之醫藥組合物，係包含：藥學上可接受之載體；以及一有效量之主成分，其係選自以下所組成群組之一；KMUP-3化合物、及其鹽類。
3.　一種減弱與預防心室重塑之醫藥組合物，係包含：藥學上可接受之載體；以及一有效量之主成分，其係選自以下所組成群組之一；KMUP-3化合物、及其鹽類。
4.　如上述任一實施例之組合物，其係運用於心肌梗塞後之症候。
5.　如上述任一實施例之組合物，其係減少基質金屬蛋白酶-9之表達。
6.　如上述任一實施例之組合物，其係增強內皮一氧化氮合酶(eNOS)之表達。
7.　如上述任一實施例之組合物，其主成分係選自以下所組成群組之一；KMUP-3鹽酸鹽、KMUP-3檸檬酸鹽或KMUP-3菸鹼酸鹽。
8.一種降低心臟炎症之醫藥組合物，係包含：藥學上可接受之載體；以及一有效量之主成分，其係選自以下所組成群組之一；KMUP-3化合物、及其鹽類。
9.如上述實施例之組合物，其主成分係選自以下所組成群組之一；KMUP-3鹽酸鹽、KMUP-3檸檬酸鹽或KMUP-3菸鹼酸鹽。
10.　如上述實施例之組合物，其係用於減弱與預防心室重塑之心臟炎症。
11.　一種KMUP-3鹽類化合物，係將KMUP-3溶於混合著乙醇與無機酸或有機酸之溶液，於高於室溫下反應，室溫下添加甲醇放置過夜進行結晶，過濾獲得KMUP-3鹽類。
12.如上述實施例之化合物，其無機酸係為鹽酸。
13.如上述實施例之化合物，其有機酸係選自檸檬酸、菸鹼酸或甘草酸。
參考文獻
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 第一圖　KMUP-1與KMUP-3之結構式 第二圖　KMUP-3對於左心室重構之影響
(1)　佯作對照組之超聲心動圖
(2)　心肌梗塞組之超聲心動圖
(3)　給予KMUP-3鹽酸鹽之超聲心動圖
第三圖　KMUP-3對於左心室重構之縮短分數及內徑作用
(1)　縮短分數
(2)　舒張末期左心室內徑
(3)　左心室端之收縮內徑
A：佯作對照
B：心肌梗塞組
C：給予KMUP-3鹽酸鹽
*P <0.05與對照組比較；
#P <0.05與心肌梗塞組比較
第四圖KMUP-3影響心肌梗塞之區域
(1)　冠狀動脈結紮後之風險區域運用埃文斯藍染色
(n =5)
(2)　梗死面積之百分率(n =10)
A：心肌梗塞組
B：給予KMUP-3鹽酸鹽
#P <0.05與心肌梗塞組比較
(3)　心肌梗塞組經2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色之照片
(4)　給予KMUP-3鹽酸鹽治療之心肌經2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色照片
第五圖　心肌梗塞區域纖維化切片之三色染色照片，放大x200倍
(1)　心肌梗塞呈現藍色纖維化之中央區域
(2)　給予KMUP-3鹽酸鹽治療之心肌梗塞中央區域
(3)　心肌梗塞之周邊區域
(4)　給予KMUP-3鹽酸鹽治療之心肌梗塞周邊區域
(5)　非心肌梗塞區域
(6)　給予KMUP-3鹽酸鹽治療之非心肌梗塞區域
黑線長度100 μm.
第六圖　心肌梗塞區域纖維化之比率
(1)　心肌梗塞中央區域之纖維化區域百分率(n =10)
A：心肌梗塞組
B：給予KMUP-3鹽酸鹽#P <0.05與心肌梗塞組比較(2)周邊心肌梗塞區域之纖維化區域百分率(n =10)A：心肌梗塞組B：給予KMUP-3鹽酸鹽#P <0.05與心肌梗塞組比較(3)非心肌梗塞區域之纖維化區域百分率(n =10)A：佯作對照組B：心肌梗塞組C：給予KMUP-3鹽酸鹽#P <0.05與心肌梗塞組比較
第七圖 運用西方墨點及光密度分析KMUP-3影響大鼠酶類於大鼠心臟之蛋白表達量(n =6)(1)基質金屬蛋白酶-9之西方墨點圖A：佯作對照組B：心肌梗塞組C：給予KMUP-3鹽酸鹽基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)/甘油醛-3-磷酸脫氫酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)百分率之相對密度A：佯作對照組B：心肌梗塞組C：給予KMUP-3鹽酸鹽*P <0.05與佯作對照組比較；
(2)　基質金屬蛋白酶組織抑制因子-1西方墨點圖
A：佯作對照組
B：心肌梗塞組
C：給予KMUP-3鹽酸鹽
基質金屬蛋白酶組織抑制因子-1(TIMP-1)/甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)百分率之相對密度
A：佯作對照組
B：心肌梗塞組
C：給予KMUP-3鹽酸鹽
#P <0.05與心肌梗塞組比較.
(3)　內皮細胞一氧化氮合成酶(eNOS)之西方墨點圖
A：佯作對照組
B：心肌梗塞組
C：給予KMUP-3鹽酸鹽
內皮細胞一氧化氮合成酶(eNOS)/甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)百分率之相對密度
A：佯作對照組
B：心肌梗塞組
C：給予KMUP-3鹽酸鹽
#P <0.05與心肌梗塞組比較.
第八圖各種酶於人類心臟纖維化細胞(human cardiac fibroblasts,HCFs)之蛋白表達量
(1)　基質金屬蛋白酶-9之西方墨點圖
A：佯作對照組
B：生長因數-β
C：給予KMUP-3鹽酸鹽
D：給予KMUP-3鹽酸鹽併用Nω -硝基-L-精氨酸甲酯
基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)/甘油醛-3-磷酸脫氫酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)百分率之相對密度
B：生長因數-β
C：給予KMUP-3鹽酸鹽
E：Nω -硝基-L-精氨酸甲酯
*P <0.05與佯作對照組比較
#P <0.05與TGF-β比較versus;
+P <0.05與KMUP-3、生長因數-β-Nω -硝基-L-精氨酸甲酯比較
(2)基質金屬蛋白酶組織抑制因子-1(TIMP-1)/甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)百分率之相對密度
基質金屬蛋白酶組織抑制因子-1之西方墨點圖
A：佯作對照組
B：生長因數-β
C：給予KMUP-3鹽酸鹽
D：給予KMUP-3鹽酸鹽併用Nω -硝基-L-精氨酸甲酯
基質金屬蛋白酶組織抑制因子-1(TIMP-1)/甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)百分率之相對密度
B：生長因數-β
C：給予KMUP-3鹽酸鹽
E：Nω -硝基-L-精氨酸甲酯
#P <0.05與TGF-β比較versus;
+P <0.05與KMUP-3、生長因數-β、Nω -硝基-L-精氨酸甲酯比較

Claims (9)

  1. 一種KMUP類組合物之用途，其係用於製備治療心肌梗塞疾患之藥劑，該組合物包含一有效量之7-[2-[4-(4-硝基苯基)哌嗪乙基〕-1,3二甲基黃嘌呤(KMUP-3)化合物、及其鹽類。
  2. 一種KMUP類組合物之用途，其係用於製備減弱心臟纖維化之藥劑，該組合物包含一有效量之7-[2-[4-(4-硝基苯基)哌嗪乙基〕-1,3二甲基黃嘌呤(KMUP-3)化合物、及其鹽類。
  3. 一種KMUP類組合物之用途，其係用於製備減弱與預防心室重塑之藥劑，該組合物包含一有效量之7-[2-[4-(4-硝基苯基)哌嗪乙基〕-1,3二甲基黃嘌呤(KMUP-3)化合物、及其鹽類。
  4. 如申請專利範圍第1、2或3項之用途，其係運用於心肌梗塞後之症候。
  5. 如申請專利範圍第1、2或3項之用途，其係減少基質金屬蛋白酶-9之表達。
  6. 如申請專利範圍第1、2或3項之用途，其係增強內皮一氧化氮合酶(eNOS)之表達。
  7. 如申請專利範圍第1、2或3項之用途，其主成分係選自以下所組成群組之一；KMUP-3鹽酸鹽、KMUP-3檸檬酸鹽或KMUP-3菸鹼酸鹽。
  8. 一種KMUP類組合物之用途，其係用於製備降低心臟炎症之藥劑，該組合物包含一有效量之7-[2-[4-(4-硝基苯基)哌嗪乙基〕-1,3二甲基黃嘌呤(KMUP-3)化合物、及其鹽類。
  9. 如申請專利範圍第8項之用途，其主成分係選自以下所組成群組之一；KMUP-3鹽酸鹽、KMUP-3檸檬酸鹽或KMUP-3菸鹼酸鹽。
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