TWI398258B - 具有抑菌防腐及除臭功能之深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽之乳酸發酵物及其應用產品 - Google Patents
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Description
本發明係關於一種胜肽應用產品，尤其是指一種從深海下雜魚類製得之機能性胜肽、胜肽發酵物及其應用產品。
裸鰮類(Myctophidae)俗稱燈籠魚(lanternfishes)，主要分佈於海洋中、深水層的小型魚類，全球資源量估計在數億至數十億噸之間。這些裸鰮類除部分可供食用外，大部分作為養殖用生餌，或製成魚粉和魚油，但因食用價值低又容易腐敗，故多作為下雜魚或丟棄不用，不具經濟性，進而造成資源浪費與環境污染等問題。
習知技術之機能性胜肽應用於皮膚外用組成物或保健飲品時，使用高成本之胜肽來源，或在製造過程中難以萃取出高純度之胜肽。此外，傳統胜肽因其分子量過大，造成皮膚細胞吸收效果不佳，甚至會有引發過敏反應之風險。而在習知技術之添加機能性胜肽之保健食品，亦因製造過程，易導致產品帶有腥味而造成消費者接受度不佳。
此外，習知技術之抗菌劑或制菌劑之活性成分多添加有機或化學藥劑，無論在製造上或是使用上，均有造成環境污染之虞。
因此，在符合經濟效益及環保訴求的前提下，使用成本低廉之天然原料製造出一皮膚外用組成物或保健食品，以及製造出不添加有機或化學藥劑之抗菌劑，實為目前一重要的課題。
為解決上述問題，本發明係提供一種深海來源之機能性胜肽，其特徵在於，該機能性胜肽之來源係直接將裸鰮類進行酵素水解以取得酵素水解物，且分子量小於5000道耳。
本發明亦提供一種深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽之乳酸發酵物，
具有抑菌防腐及除臭功能，該乳酸發酵物係由深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽發酵製得，其特徵在於，該深海來源之下雜魚類蛋白係源自裸鰮類之酵素水解物，經過乳酸發酵後，取得乳酸發酵物來作為抑菌之有效活性成分。
本發明亦提供一種深海來源胜肽之應用產品，為皮膚外用組成物，包含機能性胜肽及用於均質分散該機能性胜肽之載劑，其特徵在於，該機能性胜肽係源自裸鰮類之酵素水解物，且分子量小於5000道耳，以藉由該機能性胜肽作為活化皮膚細胞之有效活性成分。
本發明亦提供一種深海來源胜肽之應用產品，為膠原蛋白合成促進劑，至少包含有機能性胜肽，其特徵在於，該機能性胜肽係源自裸鰮類之酵素水解物，且分子量小於5000道耳，藉此促進膠原蛋白合成。
本發明亦提供一種深海來源胜肽之應用產品，為保健食品素材，至少包含有機能性胜肽及可均質分散該機能性胜肽之食用性載劑，其特徵在於，該機能性胜肽係源自裸鰮類之酵素水解物，且分子量小於5000道耳，以藉由該機能性胜肽促進抗體分泌而達到免疫調節之保健機能。
本發明亦提供一種深海來源胜肽之應用產品，為免疫調節劑，至少包含有機能性胜肽及可均質分散該機能性胜肽之載劑，其特徵在於，該機能性胜肽係源自裸鰮類之酵素水解物，且分子量小於5000道耳，以藉由該機能性胜肽促進抗體分泌而達到免疫調節機能。
本發明亦提供一種深海來源胜肽之應用產品，為人體自由基之清除物質，至少包含有機能性胜肽及可均質分散該機能性胜肽之載劑，其特徵在於，該機能性胜肽係源自裸鰮類之酵素水解物，取得分子量小於5000道耳之機能性胜肽來作為清除人體自由基之有效活性成分。
本發明亦提供一種深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽之應用產品，為深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽發酵製得之食品防腐劑，其特徵在於，該胜肽係源自深海來源之下雜魚類蛋白之酵素水解物，經過乳酸發酵，取
得乳酸發酵物來作為該食品防腐劑之有效活性成分。
本發明亦提供一種深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽之應用產品，為深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽發酵製得之保健食品，其特徵在於，該胜肽係源自深海來源之下雜魚類蛋白之酵素水解物，經過乳酸發酵，取得具有乳酸菌的可食性乳酸發酵物，作為該保健食品維護腸胃道機能之天然有效活性成分。
本發明亦提供一種深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽之應用產品，為深海來源之下雜魚類蛋白水解之胜肽發酵製得之皮膚外用抑菌劑，其特徵在於，該胜肽係源自深海來源之下雜魚類蛋白之酵素水解物，經過乳酸發酵，取得乳酸發酵物來作為該皮膚外用抑菌劑之有效活性成分。
因此，本發明之主要目的在於提供一種具有可提高裸鰮附加價值、增加裸鰮水產品競爭力之深海來源之機能性胜肽。
本發明之另一目的在於提供一種純度高，且分子量小，易於吸收之深海來源之機能性胜肽。
本發明之另一目的在於提供一種萃取時間短且製造成本低之深海來源之機能性胜肽。
本發明之另一目的在於提供一種具有可提高裸鰮附加價值、增加裸鰮水產品競爭力之深海來源之下雜魚類蛋白之乳酸發酵物。
本發明之另一目的在於提供一種胜肽純度高，且分子量小，易於吸收之深海來源之下雜魚類蛋白之乳酸發酵物。
本發明之另一目的在於提供一種萃取時間短且製造成本低之深海來源之下雜魚類蛋白之乳酸發酵物。
本發明之另一目的在於提供一種兼具食用安全性及抑菌功能而能取代傳統防腐劑，杜絕食品添加物對人體產生危害性之深海來源之下雜魚類蛋白之乳酸發酵物。
本發明之另一目的在於提供一種可提高裸鰮附加價值、增加裸鰮水產品競爭力之深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽之應用產品。
本發明之另一目的在於提供一種胜肽純度高，且分子量小，易於吸收之深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽之應用產品。
本發明之另一目的在於提供一種萃取時間短且製造成本低之深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽之應用產品。
本發明之另一目的在於提供一種兼具食用安全性及抑菌功能而能取代傳統防腐劑，杜絕食品添加物對人體產生危害性之深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽之應用產品。
本發明之另一目的在於提供一種可供人體使用之抑菌物質，並且兼具維持消化道正常之深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽的保健應用產品。
總體來說，本發明係利用捕撈所得之裸鰮類，進行酵素水解，得到富含機能性胜肽的酵素水解物。其中，裸鰮類係選自包含燈籠魚科在內的多種深海魚類，且該機能性胜肽分子量小於5000道耳，取得的胜肽可進一步作為皮膚外用組成物、膠原蛋白合成促進劑、保健食品素材、免疫調節劑、以及人體自由基清除物質之有效活性成份。
此外，該酵素水解物可進一步利用多種乳酸菌進行乳酸發酵，以取得具有抑菌或消臭功能之乳酸發酵物，且該乳酸發酵物具有食用安全性、抗致突變性，可作為天然安全的食品防腐劑。再者，本發明實施例所採用之乳酸發酵為商業上常用乳酸菌，總乳酸菌數的含量符合保健食品要求含量每毫升107CFU以上，可再進一步作為食品防腐劑，以及健胃整腸用途的保健食品。
因此，以下配合各實施例分別說明本發明之深海來源之機能性胜肽、深海來源胜肽之皮膚外用組成物、膠原蛋白合成促進劑、可調節免疫功能之保健食品、免疫調節劑、人體自由基清除物質，或者進一步提供包含從深海來源胜肽經乳酸發酵產生之乳酸發酵物以及以乳酸發酵物作於皮膚外用抑菌劑、食品防腐劑和維護腸胃道正常機能的保健食品。其中，裸鰮類
之酵素水解、脫腥處理、乾燥製粉，以及各比較例中所採用之實驗程序步驟所利用之基本原理與基本架構，已為相關技術領域具有通常知識者所能明瞭，故以下文中之說明，不再作完整描述，合先敘明。
本發明之第一實施例係揭示一種深海來源之機能性胜肽，該機能性胜肽係將捕撈所得之裸鰮類直接加以酵素水解，待酵素水解完成，即取得富含機能性胜肽之酵素水解液。該機能性胜肽具有活化皮膚細胞、促進膠原蛋白合成、活化免疫細胞調節及清除人體自由基等功能。
其中，機能性胜肽之裸鰮類來源係選自底燈魚屬(Benthosema spp.)、眶燈魚屬(Diaphus spp.)、珍燈魚屬(Lampanyctus spp.)、角燈魚屬(Ceratoscoplus spp.)、炬燈魚屬(Lampadena spp.)、背燈魚屬(Notoscopelus spp.)、標燈魚屬(Symbolophrus spp.)、臂燈魚屬(Stenobrachius spp.)、燈籠魚屬(Myctophum spp.)及所組之組群。
經酵素水解所得之機能性胜肽，如七胜肽、六胜肽或五胜肽，分子量小於5000道耳，甚至較佳以分子量小於3000道耳之胜肽為收集對象，取得純度高於90%以上之機能性胜肽。由於分子越小，吸收之速度越快，該機能性胜肽之分子量較佳分佈範圍為小於3000道耳，而最佳範圍係為介於200至1000道耳。
本發明之第二實施例係為一種含有深海來源胜肽之皮膚外用組成物，該皮膚外用組成物之組成，包含有取得自裸鰮類之機能性胜肽及用於均質分散該機能性胜肽之載劑。取得該皮膚外用組成物之機能性胜肽步驟，如第1圖流程示意圖所示，首先將捕撈所得之裸鰮類直接加以酵素水解，待酵素水解完成，取得富含機能性胜肽之酵素水解液，之後再將該酵素水解
液進行脫腥步驟，以使得將來製成之皮膚外用組成物，不致因為含有來源為魚類生物之機能性胜肽而具有腥臭味，藉此提高消費者使用意願。最後脫腥完畢，取得該皮膚外用組成物活性成分。
其中，該機能性胜肽之裸鰮類來源係選自底燈魚屬(Benthosema spp.)、眶燈魚屬(Diaphus spp.)、珍燈魚屬(Lampanyctus spp.)、角燈魚屬(Ceratoscoplus spp.)、炬燈魚屬(Lampadena spp.)、背燈魚屬(Notoscopelus spp.)、標燈魚屬(Symbolophrus spp.)、臂燈魚屬(Stenobrachius spp.)、燈籠魚屬(Myctophum spp.)及所組之組群。
經酵素水解所得之機能性胜肽，如七胜肽、六胜肽或五胜肽，分子量小於5000道耳，甚至較佳以分子量小於3000道耳之胜肽為收集對象，取得純度高於90%以上，且可有效活化皮膚真皮層細胞之機能性胜肽。由於分子越小，皮膚吸收之速度越快，也越能滲透到真皮層，達到深層滋潤的效果，所以該機能性胜肽之分子量較佳分佈範圍為小於3000道耳，而最佳範圍係為介於200至1000道耳。
比較例一係分別從第2A圖及第2B圖比較本發明之第一實施例中取得深海來源之機能性胜肽與對照組之活化皮膚表層細胞及真皮層細胞當中，纖維母細胞(第2A圖)及角質細胞(第2A圖)之效益。
首先，參閱第2A圖所示，在經由酵素水解後取得裸鰮類之機能性胜肽，以不同濃度(0.025mg/ml、0.05mg/ml、0.1mg/ml、0.19mg/ml、0.37mg/ml、0.74mg/ml、1.47mg/ml、2.94mg/ml、5.88mg/ml)分別加入纖維母細胞(fibroblast)之培養液中，觀察其活化纖維母細胞生長之效果，並與一對照組比較。其結果如第2A圖所示，當對照組活化纖維母細胞生長效果為100%時，經由酵素水解所得之裸鰮類之機能性胜肽活化纖維母細胞生長之效果最高為160.2%，顯見本發明之深海來源之機能性胜肽可有效活化皮膚真皮
層之纖維母細胞。
再而，如第2B圖所示，以相同方式觀察在經由酵素水解後取得裸鰮類之機能性胜肽，以不同濃度(0.12mg/ml、0.23mg/ml、0.45mg/ml、0.89mg/ml、1.77mg/ml、3.53mg/ml、7.06mg/ml)分別加入含有角質細胞(keratinocyte)之培養液中，活化角質細胞生長之效果，其結果如第2B圖所示，當對照組活化角質細胞生長效果為100%時，經由酵素水解所得之裸鰮類之機能性胜肽活化角質細胞生長之效果最高為153.5%，顯見本發明之深海來源之機能性胜肽可有效促進表皮層細胞活性。
綜上所述，本發明由裸鰮類酵素水解取得之機能性胜肽，可有效活化皮膚表皮層及真皮層細胞。
本發明第三實施例係揭露一種膠原蛋白合成促進劑，具有改善皮膚粗糙度的效果及提高肌膚含水量的功能，可供外敷或內服使用，該膠原蛋白合成促進劑，係含有自裸鰮類經由酵素水解後，分子量小於5000道耳之機能性胜肽，並且在酵素水解後可以進一步實施脫腥步驟。惟酵素水解及脫腥步驟同於第二實施例中所述，首先係將捕撈所得之裸鰮類直接加以酵素水解，待酵素水解完成即取得富含機能性胜肽之酵素水解液，之後再將該酵素水解液進行脫腥步驟，以取得該具有促進膠原蛋白合成功能之機能性胜肽。
本實施例不同於前案之處，主要在於機能性胜肽係自裸鰮類取得，裸鰮類係來源係選自底燈魚屬(Benthosema spp.)、眶燈魚屬(Diaphus spp.)、珍燈魚屬(Lampanyctus spp.)、角燈魚屬(Ceratoscoplus spp.)、炬燈魚屬(Lampadena spp.)、背燈魚屬(Notoscopelus spp.)、標燈魚屬(Symbolophrus spp.)、臂燈魚屬(Stenobrachius spp.)、燈籠魚屬(Myctophum spp.)及所組之組群。經酵素水解取得純度高於90%以上之機能性胜肽，例如七胜
肽、六胜肽或五胜肽以及其他寡胜肽(Oligopeptides)，本實施例係以分子量小於5000道耳為收集對象，尤其分子越小，人體吸收速度越快，故該機能性胜肽之分子量較佳分佈範圍為小於3000道耳，而最佳範圍係為介於200至1000道耳。
比較例二係比較本發明之第三實施例中深海來源之機能性胜肽與對照組促進膠原蛋白合成作用之差異程度。
如第3A圖所示，經由酵素水解取得裸鰮類深海魚之機能性胜肽，以不同濃度(0.23mg/ml、0.45mg/ml、0.89mg/ml、1.77mg/ml、3.53mg/ml、7.06mg/ml)分別測試其促進合成膠原蛋白之效果，並與一對照組比較。其結果如第3A圖所示，當對照組之膠原蛋白合成促進作用為100%時，經由酵素水解之裸鰮類深海魚機能性胜肽對膠原蛋白合成促進作用最高為126.5%。
又，從第3B圖、第3C圖、第3D圖及第3E圖結果可知，從人體試驗觀察受試者使用裸鰮類之機能性胜肽酵素水解液15分鐘前後，在額頭、右眼尾和左臉頰等不同皮膚部位之彈力、緊實度、經皮水分散失、表皮水分含量差異，發現到受試者普遍皆有7%~67%的改善率，顯示裸鰮來源之機能性胜肽確實具有除皺、保濕和緊實的效果。
綜合上述結果顯見本發明之深海來源機能性胜肽可有效促進膠原蛋白之合成，並具有改善皮膚粗糙度的效果及提高肌膚含水量的功能。
本發明第四實施例係揭露一種具免疫調節機能之保健食品素材，至少包含有機能性胜肽及可均質分散該機能性胜肽之食用性載劑，機能性胜肽係自裸鰮類經由酵素水解後取得分子量小於5000道耳之胜肽，其步驟係直
接將捕撈所得之裸鰮類加以酵素水解，待酵素水解完成，取得富含機能性胜肽之酵素水解液，即獲得具有免疫調節機能之機能性胜肽。
本實施例不同於前案之處，主要在於機能性胜肽係自裸鰮類取得，裸鰮類來源係選自底燈魚屬(Benthosema spp.)、眶燈魚屬(Diaphus spp.)、珍燈魚屬(Lampanyctus spp.)、角燈魚屬(Ceratoscoplus spp.)、炬燈魚屬(Lampadena spp.)、背燈魚屬(Notoscopelus spp.)、標燈魚屬(Symbolophrus spp.)、臂燈魚屬(Stenobrachius spp.)、燈籠魚屬(Myctophum spp.)及所組之組群。經酵素水解取得純度高於90%以上之機能性胜肽，例如七胜肽、六胜肽或五胜肽以及其他寡胜肽(Oligopeptides)，本實施例係以分子量小於5000道耳為收集對象，尤其分子越小，人體吸收速度越快，故該機能性胜肽之分子量較佳分佈範圍為小於3000道耳，而最佳範圍係為介於200至1000道耳。而食用性載劑也可進一步包括動物膠、海藻膠、中草藥萃取液、明膠、澱粉、水或其他相分散物質。
本發明第五實施例係揭露一種深海來源胜肽之免疫調節劑，該免疫調節劑之組成係包含自裸鰮類經由酵素水解後取得之機能性胜肽以及可均質分散該機能性胜肽之載劑，其中，取得該機能性胜肽之酵素水解步驟及該機能性胜肽係出之於裸鰮類酵素水解物等說明，均同於第一實施例中所述，在此不再重複贅述。
經由酵素水解所收集到之該機能性胜肽分子量小於5000道耳，且取得之機能性胜肽純度極高，並可作為有效促進抗體分泌之免疫調節有效活性成分。並且，為達到讓使用者能夠有效吸收，該機能性胜肽之分子量分佈範圍較佳為小於3000道耳，而最佳範圍係為介於200至1000道耳。
比較例三係比較本發明之第四及第五實施例所述，比較取自深海來源之機能性胜肽與對照組在活化免疫細胞並促進抗體分泌之差異程度。
如第4A圖及第4B圖所示，本發明在經由酵素水解取得裸鰮類深海魚之機能性胜肽，以不同濃度(0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.79mg/ml、1.57mg/ml、3.14mg/ml、6.28mg/ml)分別加入免疫細胞(HB4C5)之培養液中，觀察其活化免疫細胞生長之效果，並分析免疫細胞IgM抗體之分泌量，與一對照組比較。第4A圖為活化免疫細胞HB4C5生長效果，第4B圖為免疫細胞HB4C5受到該機能性胜肽活化後IgM之分泌量。其中，當對照組活化免疫細胞HB4C5生長效果為100%時，經由酵素水解所得之裸鰮類機能性胜肽活化免疫細胞HB4C5生長之效果最高為134%；而當對照組活化免疫細胞HB4C5後IgM之分泌量為100%時，經由酵素水解所得之裸鰮類機能性胜肽活化免疫細胞HB4C5後IgM之分泌量最高為122%，顯見本發明之深海來源之機能性胜肽可有效活化免疫細胞並促進抗體分泌，達到免疫調節之功能。
本發明第六實施例係揭露一種深海來源且可清除細胞周圍之自由基，免除自由基傷害和增進體細胞抗氧化能力之人體自由基清除物質，此人體自由基清除物質可單獨使用或搭配其他可食性載劑或一般皮膚外用載劑共同開發成保健飲食品、保養品或抗氧化安定劑。其中，人體自由基清除物質係含有自裸鰮類經由酵素水解後取得分子量小於5000道耳之機能性胜肽，其中酵素水解及脫腥步驟同於第二實施例中所述，首先係直接將捕撈所得之裸鰮類加以酵素水解，待酵素水解完成，取得富含機能性胜肽之酵素水解液，之後再將該酵素水解液進行脫腥步驟，消除腥臭味而取得該具有清除自由基功能之機能性胜肽，該機能性胜肽能作為清除自由基之有效活性成分。
本實施例不同於前案之處，主要在於機能性胜肽係取得自裸鰮類，其來源係選自底燈魚屬(Benthosema spp.)、眶燈魚屬(Diaphus spp.)、珍燈魚屬(Lampanyctus spp.)、角燈魚屬(Ceratoscoplus spp.)、炬燈魚屬(Lampadena spp.)、背燈魚屬(Notoscopelus spp.)、標燈魚屬(Symbolophrus spp.)、臂燈魚屬(Stenobrachius spp.)、燈籠魚屬(Myctophum spp.)及所組之組群。萃取後經酵素水解取得純度高於90%以上之機能性胜肽，例如七胜肽、六胜肽或五胜肽以及其他寡胜肽(Oligopeptides)，本實施例係以分子量小於5000道耳為收集對象，尤其分子越小，人體吸收速度越快，故該機能性胜肽之分子量較佳分佈範圍為小於3000道耳，而最佳範圍係為介於200至1000道耳。
比較例四係比較本發明之第六實施例中取得之機能性胜肽與對照組清除自由基之活性之差異程度。
在經由酵素水解及脫腥步驟以後，取得裸鰮類機能性胜肽，分析其清除2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH)自由基之能力(DPPH清除力)及螯合鐵能力，且因已知維他命C為一具有強抗氧化力及能有效清除自由基之化合物，而EDTA為一已知具有強離子螯合力之抗氧化化合物，故分別以200ppm之維他命C以及200ppm之EDTA作為正對照組(抗氧化效力100%)，藉此比較該機能性胜肽清除自由基以及抗氧化之程度。
結果如表一所示，當200ppm的維他命C之DPPH清除力為95.18±0.62%時，經由酵素水解再脫腥步驟所得之裸鰮類深海機能性胜肽之DPPH清除力為93.88±0.66%，與正對照組之DPPH清除力相當(為正對照組維他命C之97%)；而同時200ppm之EDTA螯合鐵能力為99.76±0.12%時，經由酵素水解再脫腥步驟所得之裸鰮類深海機能性胜肽之螯合鐵能力為85.96±3.56%，亦與正對照組相去不遠(為正對照組EDTA之84%)，顯
見本發明之深海來源機能性胜肽能有效清除自由基及具有良好抗氧化能力。
本發明之第七實施例係為一種深海來源之下雜魚類蛋白之乳酸發酵物，係由裸鰮類經過酵素水解取得含有機能性胜肽之水解物，再利用乳酸發酵後獲得。該乳酸發酵物具有抑菌功能，可作為肌膚清潔制菌之活性有效成份，或加工後供作食品專用之防腐劑或是搭配乳酸菌一同作為天然保健食品之活性有效成份。
該深海來源之下雜魚類蛋白之乳酸發酵物取得步驟如同第5圖萃取流程示意圖所示，首先係將捕撈所得之裸鰮類加以酵素水解。待水解完成後取得富含機能性胜肽之酵素水解液，再將酵素水解液進行乳酸發酵，取得乳酸發酵產物。其中，進行乳酸發酵所使用之菌種，係選自乳酸桿菌屬(Lactobacillus spp.)、乳酸球菌屬(Lactococcus spp.)、足球菌屬(Pediococcus spp.)、鏈球菌屬(Streptococcus spp.)及雙歧桿菌屬(Bifidobacterium spp.)及所組之組群。
此外，該深海來源之下雜魚類蛋白係酵素水解自裸鰮類，此裸鰮類來源係選自底燈魚屬(Benthosema spp.)、眶燈魚屬(Diaphus spp.)、珍燈魚屬(Lampanyctus spp.)、角燈魚屬(Ceratoscoplus spp.)、炬燈魚屬(Lampadena spp.)、背燈魚屬(Notoscopelus spp.)、標燈魚屬(Symbolophrus spp.)、臂燈魚屬(Stenobrachius spp.)、燈籠魚屬(Myctophum spp.)及
所組之組群。
本發明之第八實施例係為一種含有裸鰮類來源乳酸發酵物之皮膚外用抑菌劑，該裸鰮類來源之皮膚外用抑菌劑係包含有由裸鰮類經酵素水解後取得含有機能性胜肽之水解物，經過乳酸發酵，得到具有抑菌效果之乳酸發酵物，以及可均質分散該乳酸發酵物之載劑，可以有效抑制上皮鏈球菌(Staphylococcus edipermidis)及痤瘡桿菌(Propicnibaterium acnes)等體表菌叢，達成肌膚清潔制菌之目的。
該裸鰮類來源之乳酸發酵物質，取得步驟如前述之第七實施例中第5圖萃取流程示意圖所示，首先係將捕撈所得之裸鰮類加以酵素水解。待水解完成後取得富含機能性胜肽之酵素水解液，再將酵素水解液進行乳酸發酵，最後以取得具有抑菌功能之乳酸發酵物。其中，進行乳酸發酵所使用之菌種，係選自乳酸桿菌屬(Lactobacillus spp.)、乳酸球菌屬(Lactococcus spp.)、足球菌屬(Pediococcus spp.)、鏈球菌屬(Streptococcus spp.)，及雙歧桿菌屬(Bifidobacterium spp.)及所組之組群，而該機能性胜肽之來源係取得自裸鰮類，來源係選自底燈魚屬(Benthosema spp.)、眶燈魚屬(Diaphus spp.)、珍燈魚屬(Lampanyctus spp.)、角燈魚屬(Ceratoscoplus spp.)、炬燈魚屬(Lampadena spp.)、背燈魚屬(Notoscopelus spp.)、標燈魚屬(Symbolophrus spp.)、臂燈魚屬(Stenobrachius spp.)、燈籠魚屬(Myctophum spp.)及所組之組群。
此外，本實施例中所取得之具有抑菌功能之乳酸發酵物製成之皮膚外用抑菌劑，可進一步製成具有消臭功能之皮膚外用消臭劑。
比較例五係顯示本發明之第七實施例、第八實施例及以下第九及第十
實施例中，裸鰮類來源之機能性胜肽經由乳酸發酵後產出的乳酸發酵物，與對照組相較，在李斯特菌(Listeria monocytogenes)和痤瘡桿菌(Propicnibaterium acnes)之抑菌結果。其中李斯特菌係為造成食物污染之一常見菌種，而痤瘡桿菌則為一誘發皮膚產生痤瘡之主要菌種。
如表二所示，裸鰮類來源之機能性胜肽乳酸發酵後產出的乳酸發酵物，對於李斯特菌的抑菌狀況，與對照組MRS基礎培養基相較，抑菌圈直徑由0.9公分提高為1.0公分；對於痤瘡桿菌的抑菌功效，與對照組MRS基礎培養基相較，抑菌圈直徑由1.7公分提高為1.9公分。顯見裸鰮類來源之機能性胜肽乳酸發酵物，對李斯特菌和痤瘡桿菌具有顯著的抑菌功效，故可作為皮膚外用抑菌劑及食品防腐或保健食品之活性有效成份。
本發明之第九實施例係為一種符合食用安全性而能廣泛應用於食品加工或食品保鮮中之食品防腐劑，食品防腐劑至少包含有由裸鰮類經由酵素水解取得含有機能性胜肽之水解物，經過乳酸發酵，取得乳酸發酵物，以有效抑制食品中所含有之致病菌種，如上述比較例五中所示，該乳酸發酵產物可以有效抑制食品污染中常見之李斯特菌(Listeria monocytogenes)，故可用於食品加工中，作為食品防腐劑之有效活性成份。
上述食品防腐劑之有效活性成分之取得步驟，如同前述第七實施例中所述，在此不再重複贅述。其中，進行乳酸發酵所使用之菌種，係選自乳酸桿菌屬(Lactobacillus spp.)、乳酸球菌屬(Lactococcus spp.)、足球菌屬
(Pediococcus spp.)、鏈球菌屬(Streptococcus spp.)，及雙歧桿菌屬(Bifidobacterium spp.)及所組之組群，而該機能性胜肽之來源係萃取自裸鰮類，來源係選自底燈魚屬(Benthosema spp.)、眶燈魚屬(Diaphus spp.)、珍燈魚屬(Lampanyctus spp.)、角燈魚屬(Ceratoscoplus spp.)、炬燈魚屬(Lampadena spp.)、背燈魚屬(Notoscopelus spp.)、標燈魚屬(Symbolophrus spp.)、臂燈魚屬(Stenobrachius spp.)、燈籠魚屬(Myctophum spp.)及所組之組群。
本發明之第十實施例係為一種符合食用安全性且能整腸健胃之保健食品，此保健食品之有效成份，係來自裸鰮類經由酵素水解後取得含有機能性胜肽之水解物，再經由乳酸發酵所取得之乳酸發酵物，將該乳酸發酵物添加至可均質分散該乳酸發酵物之食用性載劑後，即製成一保健食品。
其中，此保健食品之有效活性成份，如同前述第七實施例中所述，在此不再重複贅述，惟進行乳酸發酵所使用之菌種，係選自乳酸桿菌屬(Lactobacillus spp.)、乳酸球菌屬(Lactococcus spp.)、足球菌屬(Pediococcus spp.)、鏈球菌屬(Streptococcus spp.)，及雙歧桿菌屬(Bifidobacterium spp.)及所組之組群，而該機能性胜肽之來源係自裸鰮類酵素水解物，尤其裸鰮類係選自底燈魚屬(Benthosema spp.)、眶燈魚屬(Diaphus spp.)、珍燈魚屬(Lampanyctus spp.)、角燈魚屬(Ceratoscoplus spp.)、炬燈魚屬(Lampadena spp.)、背燈魚屬(Notoscopelus spp.)、標燈魚屬(Symbolophrus spp.)、臂燈魚屬(Stenobrachius spp.)、燈籠魚屬(Myctophum spp.)及所組之組群。裸鰮類來源之乳酸發酵物中含有多量的乳酸菌，而且總乳酸菌數的含量符合保健食品要求含量每毫升108 CFU以上，因此也可以作為平衡腸道有益菌、維持消化道正常機能之有效活性成份。
請參酌以下表五所示，將裸鰮類乳酸發酵物之水溶液施以適當的噴霧
乾燥處理，其中仍富含乳酸菌，亦可製成健胃整腸的保健食品。
比較例六係顯示本發明之第九及第十實施例中，裸鰮來源之機能性胜肽經由乳酸發酵後產出的乳酸發酵物具有食品安全性、抗致突變性及所含之乳酸菌數是否高於保健食品要求之乳酸菌數標準。
如表三所示，將裸鰮類水解後進行乳酸發酵所取得之乳酸發酵物，利用Ames test測試其食用安全性，觀察Sal.Typhimurium TA98及Sal.Typhimurium TA100兩種菌株之平均菌數(No.of surviving colonies/plate)。結果顯示，裸鰮類來源之乳酸發酵物之組中Sal.Typhimurium TA98及Sal.Typhimurium TA100兩種菌株之平均菌數(No.of surviving colonies/plate)分別為62.5±0.71 CFU/盤及73.0±1.41 CF盤，而同時對照組的平均菌數則為50.5±13.44 CFU/盤及69.5±6.36 CFU/盤，分別是對照組的124%及105%，顯見該裸鰮類來源之乳酸發酵物不具有食品毒性。
此外，如表四所示，測試不同濃度(0.05M、0.1M、0.2M)之裸鰮類來源酵素水解物及乳酸發酵物之抗致突變率。結果顯示，0.05M、0.1M、0.2M的裸鰮類來源之酵素水解液的抗致突變率分別為14.9%、24.8%及35.6%；相同濃度的裸鰮類來源之乳酸發酵物之抗致突變率則分別為101.0%、84.2
%及93.1%。顯見該二物質皆具有抗致突變性。
而參閱表五，不論是裸鰮類來源之乳酸發酵物或是進一步經過噴霧乾燥處理所製得之裸鰮類乳酸發酵噴乾粉，其中總乳酸菌數分別為每毫升1.4 x 1011CFU及3.4 x 1010CFU，均高於中國國家標準(CNS，為每毫升含菌落數107)。
綜上所述，本發明之裸鰮類來源之機能性胜肽經由乳酸發酵後產出的乳酸發酵物，經Ames test亦證實裸鰮類乳酸發酵物無毒性、具有抗致突變性，且乳酸菌數滿足保健食品的乳酸菌數含量標準，此乳酸發酵物不僅天然，用於食品安全無虞，而且乳酸發酵物中飽含豐富的乳酸菌，也可幫助人體達到健胃整腸的功效，並作為保健食品維護腸胃道機能之天然有效活性成
分。
以上所述僅為本發明之較佳實施例，並非用以限定本發明之權利範圍；同時以上的描述，對於熟知本技術領域之專門人士應可明瞭及實施，因此其他未脫離本發明所揭示之精神下所完成的等效改變或修飾，均應包含在下述之申請專利範圍中。
第1圖係為本發明第二實施例之流程示意圖；第2A圖係為本發明之深海來源之機能性胜肽與對照組之活化皮膚之纖維母細胞比較結果圖；第2B圖係為本發明之深海來源之機能性胜肽與對照組之活化皮膚之角質細胞比較結果圖；第3A圖係為本發明之深海來源之機能性胜肽與對照組之促進膠原蛋白合成作用之比較結果圖；第3B圖係為本發明之深海來源之機能性胜肽與對照組之皮膚彈性度之比較結果圖；第3C圖係為本發明之深海來源之機能性胜肽與對照組之皮膚水分散失改善度之比較結果圖；第3D圖係為本發明之深海來源之機能性胜肽與對照組之皮膚水分含量增加程度之比較結果圖；第3E圖係為本發明之深海來源之機能性胜肽與對照組之皮膚緊實度之比較結果圖；第4A圖係為本發明之深海來源之機能性胜肽與對照組之活化HB4C5
免疫細胞比較結果圖；第4B圖係為本發明之深海來源之機能性胜肽與對照組之活化HB4C5免疫細胞之IgM分泌量比較結果圖；第5圖係為本發明第七實施例之裸鰮類來源乳酸發酵物之取得流程圖。
Claims (4)
- 一種具有抑菌防腐及除臭功能之深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽乳酸發酵物，該乳酸發酵物係由深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽發酵製得，其特徵在於，該深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽係源自裸鰮類之酵素水解物，該深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽之純度高於90%且分子量小於5000道耳且經乳酸發酵所取得之乳酸發酵物係作為抑菌之有效活性成分，其中，該裸鰮類係選自底燈魚屬(Benthosema spp.)、眶燈魚屬(Diaphus spp.)、珍燈魚屬(Lampanyctus spp.)、角燈魚屬(Ceratoscoplus spp.)、炬燈魚屬(Lampadena spp.)、背燈魚屬(Notoscopelus spp.)、標燈魚屬(Symbolophrus spp.)、臂燈魚屬(Stenobrachius spp.)、燈籠魚屬(Myctophum spp.)所組之組群，且進行乳酸發酵所使用之菌種，係選自乳酸桿菌屬(Lactobacillus spp.)、乳酸球菌屬(Lactococcus spp.)、足球菌屬(Pediococcus spp.)、鏈球菌屬(Streptococcus spp.)及雙歧桿菌屬(Bifidobacterium spp.)及所組之組群。
- 一種深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽之食品防腐劑，為深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽發酵製得之食品防腐劑，其特徵在於，該深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽係源自深海來源之下雜魚類蛋白之酵素水解物，該深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽之純度高於90%且分子量小於5000道耳且經過乳酸發酵所取得之乳酸發酵物係作為該食品防腐劑之有效活性成分，其中，該食品防腐劑具有食用安全性，其平均菌數為62.5±0.71 CFU/盤以上，具有抗致突變性，其抗致突變率為84.2%以上，以及總乳酸菌數含量為3.4 x 1010 CFU以上，符合每毫升含菌落數107 CFU以上的標準，以及，該深海來源之下雜魚類為裸鰮類，其中該裸鰮類係選自底燈魚屬(Benthosema spp.)、眶燈魚屬(Diaphus spp.)、珍燈魚屬(Lampanyctus spp.)、角燈魚屬(Ceratoscoplus spp.)、炬燈魚屬(Lampadena spp.)、背燈魚屬(Notoscopelus spp.)、標燈魚屬 (Symbolophrus spp.)、臂燈魚屬(Stenobrachius spp.)、燈籠魚屬(Myctophum spp.)所組之組群，且進行乳酸發酵所使用之菌種，係選自乳酸桿菌屬(Lactobacillus spp.)、乳酸球菌屬(Lactococcus spp.)、足球菌屬(Pediococcus spp.)、鏈球菌屬(Streptococcus spp.)及雙歧桿菌屬(Bifidobacterium spp.)及所組之組群。
- 一種深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽之維護腸胃道機能的保健食品，為深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽發酵製得之保健食品，其特徵在於，該深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽係源自深海來源之下雜魚類蛋白之酵素水解物，該深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽之純度為90%以上且分子量小於5000道耳且經過乳酸發酵後所取得之具有乳酸菌的可食性乳酸發酵物係作為該保健食品維護腸胃道機能之天然有效活性成分，其中，該保健食品具有食用安全性，其平均菌數為62.5±0.71 CFU/盤以上，具有抗致突變性，其抗致突變率為84.2%以上，以及總乳酸菌數含量為3.4 x 1010 CFU以上，符合每毫升含菌落數107 CFU以上的標準，以及，該深海來源之下雜魚類為裸鰮類，其中該裸鰮類係選自底燈魚屬(Benthosema spp.)、眶燈魚屬(Diaphus spp.)、珍燈魚屬(Lampanyctus spp.)、角燈魚屬(Ceratoscoplus spp.)、炬燈魚屬(Lampadena spp.)、背燈魚屬(Notoscopelus spp.)、標燈魚屬(Symbolophrus spp.)、臂燈魚屬(Stenobrachius spp.)、燈籠魚屬(Myctophum spp.)所組之組群，且進行乳酸發酵所使用之菌種，係選自乳酸桿菌屬(Lactobacillus spp.)、乳酸球菌屬(Lactococcus spp.)、足球菌屬(Pediococcus spp.)、鏈球菌屬(Streptococcus spp.)及雙歧桿菌屬(Bifidobacterium spp.)及所組之組群。
- 一種深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽之皮膚外用抑菌劑，為深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽發酵製得之皮膚外用抑菌劑，其特徵在於，該深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽係源自深海來源之下雜魚類蛋白之 酵素水解物，該深海來源之下雜魚類蛋白水解胜肽之純度高於90%且分子量小於5000道耳且經過乳酸發酵後所取得之乳酸發酵物係作為該皮膚外用抑菌劑之有效活性成分，其中，該皮膚外用抑菌劑對於誘發食物與體表污染之菌種皆具備顯著的抑菌能力，其抑菌圈直徑皆明顯增加，以及，該深海來源之下雜魚類蛋白來源為裸鰮類，其中該裸鰮類係選自底燈魚屬(Benthosema spp.)、眶燈魚屬(Diaphus spp.)、珍燈魚屬(Lampanyctus spp.)、角燈魚屬(Ceratoscoplus spp.)、炬燈魚屬(Lampadena spp.)、背燈魚屬(Notoscopelus spp.)、標燈魚屬(Symbolophrus spp.)、臂燈魚屬(Stenobrachius spp.)、燈籠魚屬(Myctophum spp.)所組之組群，且進行乳酸發酵所使用之菌種，係選自乳酸桿菌屬(Lactobacillus spp.)、乳酸球菌屬(Lactococcus spp.)、足球菌屬(Pediococcus spp.)、鏈球菌屬(Streptococcus spp.)及雙歧桿菌屬(Bifidobacterium spp.)及所組之組群。
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| 2006年07月，海鱺魚皮明膠水解物之製備、分子大小評估及其抗氧化功能性之研究，何心怡，國立高雄海洋科技大學水產食品科學研究所碩士論文。 * |
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