TWI395590B - 相思樹抽出物及其成分作為抑制黃嘌呤氧化酶之應用 - Google Patents
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Description
本發明係有關於一種可用於抑制黃嘌呤氧化酶之組合物，其包括有效量來自相思樹屬之樹木抽出物。
食物攝取或人體內的嘌呤通過新陳代謝轉化為次黃嘌呤(Hypoxanthine)和黃嘌呤(Xanthine)，然後又在黃嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase，XO)的催化作用下生成尿酸。尿酸就是嘌呤在人體內分解代謝的最終產物。如體內的普林代謝異常，導致高尿酸血症(Hyperuricemia)，而使尿酸鹽(Urate crystals)在關節腔內沉積形成結晶，造成關節腫脹和變形，而造成痛風。國內目前三十歲以上的男性人口中痛風的盛行率竟高達百分之3.3，而最容易發生痛風的年齡層已經下降到三十幾歲。這表示隨著經濟的高度成長，國民對動物性蛋白、高熱量食物的攝取量逐年增加，使得肥胖的人口越來越多、越來越年輕化，迫使尿酸過高的人口急遽上升。
高尿酸引起之痛風，具有以下症狀，例如，肌肉痙攣、局部腫脹、發炎、關節疼痛、肌肉疲倦、壓力感及心肌梗塞。目前已有許多商業化藥物可用於治療痛風，例如，本補麻龍(Benzbromarone，(URINORM))、丙磺舒(Probenecid)、別嘌呤醇(Allopuhnol)、布可隆(Bucolome)、辛可芬(Cinchophan)以及秋水仙素(Colchicine)，其中係以別嘌呤醇為臨床上經常使用之藥物。這些藥物發揮功能之方式為抑制尿酸之形成、將多餘尿酸從體內移除、作用於腎臟以幫助身體減少尿酸、抑制將黃嘌呤轉化為尿酸之黃嘌呤氧化酶之活性以及加速尿酸從體內分泌出去。然而，這些尿酸促排藥劑同時具有一些副作用，例如，會引起尿路結石、胃腸障礙、黃疸、腎負擔、過敏以及貧血。因此，雖然已有許多用於治療痛風之藥劑，但仍有需要找出降低尿酸含量之新藥或飲食添加物，藉此治療痛風並調節痛風相關症狀。
而黃嘌呤氧化酶在體內，除了將黃嘌呤代謝為尿酸外，在黃嘌呤與黃嘌呤氧化酶的反應中，會產生超氧自由基(O2 -
)和過氧化氫(H2
O2
)。其生化反應過程如下所示：
自由基因其本質上之不穩定性，若在人體內極易和細胞及組織產生化學反應，這個化學反應統稱為氧化(Oxidation)，會使細胞失去正常功能，如氧化發生在細胞膜上的脂質，會使細胞膜通透性改變，養分及代謝物質無法進出細胞內造成細胞壞死，而細胞膜被破壞的速度大於細胞再生的速度，組織的功能就會受到明顯影響；若攻擊蛋白質，會使蛋白質失去正常生理功能而引起病變，如發生在皮下之膠原蛋白(Collagen)組織，則會令皮膚失去彈性及保濕功能而產生老化現象(Aging)。另外，自由基也會破壞DNA，造成DNA股的切斷或鹼基的改變，一旦DNA遭到切斷，人體在修補的過程中，可能會因為無法正常修復而產生突變。自由基攻擊鹼基後會衍生一些副產品，這些副產品往往會使遺傳發生錯誤而有致癌的可能。人體若長期受到上述一連串的傷害，各種慢性病、老化、癌症將可能陸續應運而生。
相思樹屬(Acacia
)為豆科(Leguminosae
)中的一屬，為常見的樹木，主要分布於低海拔山地與丘陵地。目前，有關相思樹的主要功用，除了可供作為傳統薪炭材之外，亦可作為部分結構用材。此外，相思樹為具植物相剋作用之樹種之一，其部份葉子抽出物之化合物，經海蝦致死試驗已證實具有生物活性；亦有一些研究發現相思樹屬之抽出物中，具有黃酮類物質，見Lai Yeap Foo,Phytochemistry,Vol. 26,No. 3,pp.813-817(1987)，Elfranco Malan,Phytochemistry,Vol. 33,No. 3,pp. 733-734(1993)，Wu et al.,Journal of Agricultural and Food Chemistry,Vol. 56,No. 5,pp. 1567-1573(2008)，Lee et al.,Journal of Natural Products,Vol. 63,No. 5,pp. 710-712(2000)，Tung et al.,Food Chemistry,Vol. 115,No. 3,pp. 1019-1024(2009)，Wu et al.,Journal of Agricultural and Food Chemistry,Vol. 56,No. 2,pp. 328-332(2008)，Lee et al.,Bot. stud,Vol. 47,pp. 37-43(2006)及Wu et al.,Journal of Agricultural and Food Chemistry,Vol.53,No.2,pp.5917-5921(2005)。然而，對於相思樹樹皮、心材甚至是葉子中所潛藏具抑制黃嘌呤氧化酶功能之化合物，截至目前為止並無人發現。
本發明係一種用於抑制黃嘌呤氧化酶活性之組合物，其包括有效量來自相思樹抽出物及醫藥上可接受之載體。此組合物可用於降低個體中之尿酸及降低自由基的產生。此組合物係由相思樹屬之樹木以有機溶劑如乙醇或水等萃取其中之有效成分。
本發明之相思樹之抽出物係由相思樹之心材、樹皮、枝條、花及葉子中萃取，其中抑制黃嘌呤氧化酶活性作用較佳者係由心材萃取，次佳為由樹皮中萃取。
本發明之有機溶劑(如乙醇等)萃取相思樹抽出物，續以乙酸乙酯、正丁醇及水進行液相-液相分配，分為乙酸乙酯可溶部、正丁醇可溶部及水可溶部。其中對於抑制黃嘌呤氧化酶作用較佳之乙酸乙酯可溶部，可分離出八種主成分，分別為：3,7,8,3'
,4'
-五羥基黃酮(3,7,8,3'
,4'
-Pentahydroxyflavone(麥拉諾千廷，Melanoxetin))、7,8,3'
,4'
-四羥基黃酮(7,8,3'
,4'
-Tetrahydroxyflavone)、3,4,2'
,3'
,4'
-五羥基反式查耳酮(3,4,2'
,3'
,4'
-Pentahydroxytrans
-chalcone(歐卡寧，Okanin))、7,8,3'
,4'
-四羥基-3-甲氧基黃酮(7,8,3'
,4'
-Tetrahydroxy-3-methoxyflavone(傳希廷，Transilitin))、3,7,8,3'
-四羥基-4'
-甲氧基黃酮(3,7,8,3'
-Tetrahydroxy-4'
-methoxyflavone)、7,8,3'
-三羥基-3,4'
-二甲氧基黃酮(7,8,3'
-Trihydroxy-3,4'
-dimethoxyflavone)、7,3'
,4'
-三羥基黃酮(7,3'
,4'
-Trihydroxyflavone)、7,3'
,4'
-三羥基-3-甲氧基黃酮(7,3'
,4'
-Trihydroxy-3-methoxyflavone)。而抑制黃嘌呤氧化酶活性作用較佳者係麥拉諾千廷(Melanoxetin)及歐卡寧(Okanin)，最佳者係歐卡寧(Okanin)，且其中麥拉諾千廷(Melanoxetin)及歐卡寧(Okanin)對於抑制黃嘌呤氧化酶的能力為現今常用治療痛風之別嘌呤醇(Allopurinol)的17及63倍，極具潛力取代有副作用的別嘌呤醇。
本發明之相思樹屬之樹木係包含但不限於下列樹種：拉特氏相思樹(Acacia acinacea
)、微白相思樹(Acacia albida
)、無脈相思樹(Acacia aneura
)、阿拉伯相思樹(Acacia arabica
)、直幹相思樹(Acacia auriculiformis
)、灰葉相思樹(Acacia baileyana
)、貝利氏相思樹(Acacia baileyana
)、銀荆相思樹(Acacia bealbat
)、雙生脈相思樹(Acacia binervia
)、銀葉相思樹(Acacia brachybotrya
)、小相思樹(Acacia bussei
)、白諾相思樹(Acacia bynoeana
)、藤相思樹(Acacia caesia
)、藤葉相思樹(Acacia calamifolia
)、心葉相思樹(Acacia cardiophylla
)、兒茶相思樹(Acacia catechu
)、加芬相思樹(Acacia cavenia
)、小合歡(Acacia concinna
)、臺灣相思樹(Acacia confusa
)、牛角相思樹(Acacia cornigera
)、刀狀相思樹(Acacia cultriformis
)、銀葉相思樹(Acacia cultriformis
)、澳洲相思樹(Acacia cyanophylla
)、巨相思樹(Acacia cyclopis
)、澳洲白粉相思樹(Acacia dealbara
)、美麗相思樹(Acacia decora
)、下延相思樹(Acacia decurrens
)、長莢相思樹(Acacia elongata
)、鎌莢相思樹(Acacia falcata
)、消息花相思樹(Acacia farnesiana
)、流蘇相思樹(Acacia fimbriata
)、吉臘夫氏相思樹(Acacia giraffae
)、貓爪相思樹(Acacia gregii
)、摩洛哥相思樹(Acacia gummifera
)、絨毛相思樹(Acacia holosericea
)、平展葉相思樹(Acacia homalophylla
)、非洲相思樹(Acacia horrida
)、何威特相思樹(Acacia howittii
)、交枝相思樹(Acacia implexa
)、柏葉相思樹(Acacia juniperina
)、卡路相思樹(Acacia karroo
)、凱特威氏相思樹(Acacia kettlewelliae
)、柯阿相思樹(Acacia koa
)、大葉栲皮相思樹(Acacia lenticularis
)、皮屑相思樹(Acacia leprosa
)、白韌相思樹(Acacia leucophloea
)、長葉相思樹(Acacia longifolia
)、大葉相思樹(Acacia mangium
)、黑荆相思樹(Acacia mearnsii
)、綠栲皮相思樹(Acacia melanoxylon
)、具蜜相思樹(Acacia mellifera
)、藤相思樹(Acacia merrillii
)、柔毛相思樹(Acacia mollissima
)、黑木相思樹(Acacia nigrescens
)、膠相思樹(Acacia nilotica
)、圓錐花序相思樹(Acacia paniculata
)、刺相思樹(Acacia paradoxa
)、垂枝相思樹(Acacia pendula
)、加力酸藤相思樹(Acacia pennata
)、羽脈相思樹(Acacia penninervis
)、珍珠相思樹(Acacia podalyriifolia
)、極彎相思樹(Acacia pravissima
)、凸起相思樹(Acacia prominens
)、粉莖相思樹(Acacia pruinosa
)、毛相思樹(Acacia pubescens
)、密花相思樹(Acacia pycnantha
)、樹膠狀相思樹(Acacia retinodes
)、臺灣樹(Acacia richii
)、剛硬相思樹(Acacia rigens
)、變紅相思樹(Acacia rubida
)、柳相思樹(Acacia salicina
)、塞內加爾相思樹(Acacia senegal
)、塞伊耳相思樹(Acacia seyal
)、藤相思樹(Acacia sinuata
)、顯著相思樹(Acacia spectabilis
)、螺果相思樹(Acacia spirocarpa
)、香甜相思樹(Acacia suaveolens
)、頂生相思樹(Acacia terminalis
)、被覆相思樹(Acacia vestita
)、勝利相思樹相思樹(Acacia victoriae
)、屋得相思樹(Acacia woodii
)，其中較佳之相思樹種係為綠栲皮相思樹(Acacia melanoxylon
)、黑木相思樹(Acacia nigrescens
)、臺灣相思樹(Acacia confusa
)，最佳係臺灣相思樹(Acacia confusa
)。
本發明之相思樹抽出物可作為藥物、保健食品或痛風患者無法多量食用之食品(如豆腐等)，以用於治療體內黃嘌呤氧化酶作用產生之尿酸引起的痛風或改善與高量尿酸相關之症狀，其係選自肌肉痙攣、局部腫脹、發炎、關節疼痛、肌肉疲倦、壓力感或心肌梗塞。另外，以前已有發表過相思樹抽出物有抑制自由基及抗氧化之功能，見Chang et al.,Journal of Agricultural and Food Chemistry,Vol. 49,pp. 3420-3424(2001)及Wu et al.,Journal of Agricultural and Food Chemistry,Vol.53,pp.5917-5921(2005)，Wu et al.,Journal of Agricultural and Food Chemistry,Vol. 56,No. 5,pp. 1567-1573(2008),Lee et al.,Bot. Stud.,Vol. 47,pp. 37-43(2006)，Tung et al.,Food Chemistry,Vol. 115,No. 3,pp. 1019-1024(2009)，Wu et al.,Journal of Agriculturaland Food Chemistry,Vol. 56,No. 2,pp. 328-332(2008)，Tung etal.,Bioresource Technology,Vol. 100,No. 1,pp. 509-514(2009)及Tung et al.,Bioresource Technology,Vol. 98,No. 5,pp. 1120-1123(2007)，然而，尚未有研究證實相思樹抽出物可抑制因黃嘌呤氧化酶作用於生物體內所產生之自由基。本發明之相思樹抽出物亦可作為藥物、保健食品或化妝品等用以抑制因黃嘌呤氧化酶作用時於個體內產生之自由基，其係可改善因體內自由基引起之相關疾病，如：1.破壞細胞膜，使細胞無法吸收養分造成之皮膚炎、面皰、青春痘、黑斑、老人斑及傷口不易癒合；2.攻擊膠原蛋白、彈力蛋白所造成之皮膚老化、皺紋及無光澤；3.破壞免疫系統造成之免疫力降低、容易感冒、呼吸道傷害、紅斑性狼瘡及乾癬；4.促使過氧化脂質形成，引起小動脈纖維化：動脈硬化，高血壓、心臟血管疾病，腦出血及中風；5.促使脂質沉積在各器官或其它結締組織造成之肝炎、脂肪肝、肝硬化、胰臟炎、胃炎、便秘、腎臟炎、急性腎衰竭。糖尿病、眼睛充血、視網膜病變、白內障、老年癡呆症、巴金森氏症及記憶力減退；6.破壞DNA、RNA，造成染色體改變、細胞突變造成之腫瘤及癌症。
本發明之組合物可進一步包括寡胜肽、游離胺基酸、肉鹼(Carnitine)及醫藥上或生理上可接受之賦形劑製成醫藥組合物。較佳之醫藥上可接受之賦形劑包括但不限於糊精、乳糖、澱粉、滑石、硬脂酸、酒石酸、酒精、甘油、蔬菜油及蠟。
如將本發明作為藥物，則本發明之組合物可藉由習知方法以適當的醫藥上可接受之賦型劑製備於適當的醫藥劑型，例如，錠劑、粉末、顆粒、膠囊、液體或懸浮液(其係用於不同的給藥途徑)。本發明之組合物可經由任何形式之途徑給藥，例如，口服或非經腸道之途徑，以降低個體中之尿酸，例如，哺乳動物，較佳為人類。具體而言，本發明之組合物可用於控制罹患痛風之個體中之尿酸含量，並改善與高量尿酸或自由基引起之相關症狀，例如，肌肉痙攣、局部腫脹、發炎、關節疼痛、肌肉疲倦、壓力感及心肌梗塞。
如將作為飲食添加物，本發明之組合物可藉由習知方法而賦形於用於口服施用之適當劑型中，例如，錠劑、粉末、顆粒、膠囊、液體及懸浮液，或製作成例如散劑、丹劑、條劑、線劑、熏劑或片劑等的外用劑型。口服劑型可進一步作成健康食品，而外用劑型可應用在例如面膜、化妝水、晶露、乳液或彩妝中。
許多已知用於冶療痛風之尿酸促排藥劑是商業上可獲得的，例如，本補麻龍、丙磺舒、別嘌呤醇、布可隆、辛可芬以及秋水仙素。本發明之組合物可與一或多種之前述尿酸促排藥劑結合使用，以用於降低尿酸。當進行此等結合使用時，本發明之組合物與該一或多種尿酸促排藥劑可依序或同時給藥或施用。例如，本發明之組合物可於單一劑型中進一步包括一或多種尿酸促排藥劑。或者，本發明之組合物與該一或多種尿酸促排藥劑係賦形為分開的劑型，而同時或依序給藥或施用於個體中。
本發明中之醫藥上可接受之載體，可適用於口服、舌下、直腸、鼻腔、陰道、腹腔、癌內、關節內、眼球內、眼球表面、表皮、經皮，及其他可能之投予方式如注射或貼片等。劑型可以是單位劑型，可以傳統製劑技術製備，這些技術包括將有效成分與醫藥載體或輔型劑結合。
本發明將因參考以下實例而臻於清楚明確。以下所說明之實例僅作為說明之用並非作為本發明之限制。
實施例1 臺灣相思樹各部位乙醇抽出物之黃嘌呤氧化酶抑制活性
不同部位之相思樹以乙醇冷浸萃取3次，每次浸泡7天，萃取液以Whatman＃1濾紙抽氣過濾以去除雜質，並將過濾所得萃取液以減壓濃縮機(Rotatory vacuum evaporator)濃縮，隨後移入冷凍乾燥機予以凍乾後進行黃嘌呤氧化酶抑制活性試驗。試驗之進行是以黃嘌呤(Xanthine)與黃嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase)反應生成尿酸，在紫外光295nm有特定吸收。因此，將2μL不同濃度之試驗樣品、798μL焦磷酸鈉緩衝液(pH 7.5)與0.1U黃嘌呤氧化酶，於37℃均勻混合5分鐘後，再加入200μL 0.6mM黃嘌呤，均勻振盪後，以紫外光/可見光分光光譜儀測量295nm吸收值之經時變化，並計算其反應速率以及抽出物之黃嘌呤氧化酶抑制率(%)。
圖1為臺灣相思樹各部位乙醇抽出物之黃嘌呤氧化酶抑制能力之結果，由此可見乙醇抽出物之抑制率隨濃度的增加而增大。比較各部位之抑制率，以心材抽出物之效果最佳，其半數有效濃度(EC50
)為11.7μg/mL，其次為樹皮抽出物。
實施例2臺灣相思樹心材乙醇抽出物及各可溶部之黃嘌呤氧化酶抑制活性
臺灣相思樹心材之乙醇抽出物續以不同極性之溶劑，包括以乙酸乙酯、正丁醇及水等，進行液相-液相分配，將相思樹心材乙醇抽出物初步分為乙酸乙酯可溶部、正丁醇可溶部及水可溶部3個可溶部，進行步驟如實施例1所述之黃嘌呤氧化酶抑制活性試驗。
此進一步評估心材抽出物中各可溶部之黃嘌呤氧化酶抑制活性，結果如圖2所示，以乙酸乙酯之效果最佳，其半數有效濃度(EC50
)為7.8μg/mL，而醫學上使用之已知黃嘌呤氧化酶抑制劑別嘌呤醇(Allopurinol)半數有效濃度(EC50
)則為1.2μg/mL。
實施例3臺灣相思樹心材乙醇抽出物之次分離部對黃嘌呤氧化酶抑制活性
更進一步利用管柱層析與高效能液相層析，以RP-18膠體管柱層析對具抑制黃嘌呤氧化酶之可溶部-乙酸乙酯可溶部50克進行初步分離，並將沖提所得之抽出物分為EA1(沖提液為10%至20%之甲醇/水(MeOH/H2
O))、EA2-EA3(30%甲醇/水(MeOH/H2
O))、EA4(30%至40%甲醇/水(MeOH/H2
O))、EA5(40%至50%甲醇/水(MeOH/H2
O))、EA6(50至60%甲醇/水(MeOH/H2
O))、EA7(60%甲醇/水(MeOH/H2
O))、EA8(70%至80%甲醇/水(MeOH/H2
O))、EA9(80%至100%甲醇/水(MeOH/H2
O))及EA10(100%四氫呋喃(THF))等10個次分離部。其沖提溶液及收率如表1所示，其中以EA5至EA8對黃嘌呤氧化酶抑制活性較佳，當濃度為5μg/mL，其抑制率約為74.8%至80.5%，而別嘌呤醇(Allopurinol)之抑制率為78%。
實施例4臺灣相思樹心材乙醇抽出物之主成分對黃嘌呤氧化酶抑
制活性
進一步將臺灣相思樹心材EA5至EA8次分離部分離純化所得之八種主成分，其化學式如圖3所示。此八種主成分如下：1. 3,7,8,3'
,4'
-五羥基黃酮(3,7,8,3'
,4'
-Pentahydroxyflavone(麥拉諾千廷，Melanoxetin))、2. 7,8,3'
,4'
-四羥基黃酮(7,8,3'
,4'
-Tetrahydroxyflavone)、3. 7,8,3'
,4'
-四羥基-3-甲氧基黃酮(7,8,3'
,4'
-Tetrahydroxy-3-methoxyflavone(傳希廷，Transilitin))、4. 3,4,2'
,3'
,4'
-五羥基反式查耳酮(3,4,2'
,3'
,4'
-Pentahydroxytrans
-chalcone(歐卡寧，Okanin))、5. 3,7,8,3'
-四羥基-4'
-甲氧基黃酮(3,7,8,3'
-Tetrahydroxy-4'
-methoxyflavone)、6. 7,8,3'
-三羥基-3,4'
-二甲氧基黃酮(7,8,3'
-Trihydroxy-3,4'
-dimethoxyflavone)、7. 7,3'
,4'
-三羥基黃酮(7,3'
,4'
-Trihydroxyflavone)、8. 7,3'
,4'
-三羥基-3-甲氧基黃酮(7,3'
,4'
-Trihydroxy-3-methoxyflavone)，將此八種成分進行黃嘌呤氧化酶抑制試驗，其試驗結果如圖4所示，結果顯示Melanoxetin及Okanin之黃嘌呤氧化酶抑制能力，其半數有效濃度(EC50
)分別為0.274及0.074 μM，甚較目前之別嘌呤醇(Allopurinol)為佳(EC50
為4.784 μM)，即Melanoxetin及Okanin之黃嘌呤氧化酶抑制能力為別嘌呤醇(Allopurinol)的17及63倍，因此，Melanoxetin及Okanin極具潛力取代有副作用之別嘌呤醇。
實施例5 雙倒數作圖(Lineweaver-Burk plot)測定抑制型態200 mM焦磷酸鈉/氯化鈉(Sodium pyrophosphate/HCl,pH 7.5)的緩沖液中含0.1單位
的黃嘌呤氧化酶798μ
L與2μ
L的待測化合物麥拉諾千廷(Melanoxetin)、7,8,3′,4′-四羥基黃酮(7,8,3′,4′-Tetrahydroxyflavone)或歐卡寧(Okanin)溶於二甲基亞碸(DMSO)，混合於96微孔盤中37℃作用五分鐘，分別加入濃度為0.3、0.4或0.6 mM之溶於二次水中之基質使反應開始。反應物於室溫下，每隔一分鐘以酵素免疫微盤分析儀(ELISA reader)偵測295 nm吸光值，測八分鐘。以Excel軟體分析所有酵素實驗結果。
圖5之雙倒數作圖顯示出麥拉諾千廷(Melanoxetin)及7,8,3′,4′-四羥基黃酮(7,8,3′,4′-Tetrahydroxyflavone)對於黃嘌呤氧化酶的抑制模式為競爭型，與別嘌呤醇(Allopurinol)的型態一樣，而歐卡寧(Okanin)在黃嘌呤為基質時，顯示出為非競爭型之抑制作用。
取1 g相思樹心材之乾燥粉末分別加入50 mL水中，以沸水煮2小時得到熱水抽出物，以Whatman #1濾紙抽氣過濾，然後去除雜質。將所得之熱水抽出物以減壓濃縮機(Rotatory vacuum evaporator)濃縮乾燥。進一步將臺灣相思樹心材熱水抽出物分離純化分析其主成分。
由圖6可見，以水萃取之抽出物與有機溶劑萃取抽出物之成分相同，具有可抑制黃嘌呤氧化酶抑制作用之化合物如3,7,8,3'
,4'
-五羥基黃酮(3,7,8,3'
,4'
-Pentahydroxyflavone(麥拉諾千廷，Melanoxetin))、7,8,3'
,4'
-四羥
基-3-甲氧基黃酮(7,8,3'
,4'
-Tetrahydroxy-3-methoxyflavone(傳希廷，Transilitin))、3,4,2'
,3'
,4'
-五羥基反式查耳酮(3,4,2'
,3'
,4'
-Pentahydroxytrans
-chalcone(歐卡寧，Okanin))等，故可知臺灣相思樹無論是以有機萃取或水萃取，其成分皆有可抑制黃嘌呤氧化酶之功效。
圖1、臺灣相思樹各部位乙醇抽出物之黃嘌呤氧化酶抑制活性
圖2、臺灣相思樹心材乙醇抽出物及各可溶部之黃嘌呤氧化酶抑制活性
圖3、臺灣相思樹心材乙醇抽出物次分離部純化所得之主成分
圖4、臺灣相思樹心材乙醇抽出物之主成分對黃嘌呤氧化酶抑制活性
圖5、麥拉諾千廷(Melanoxetin)、7,8,3'
,4'
-四羥基黃酮(7,8,3'
,4'
-Tetrahydroxyflavone)及歐卡寧(Okanin)對黃嘌呤氧化酶抑制之酵素動力雙倒數圖形。
圖6、臺灣相思樹心材熱水抽出物之指紋圖譜
Claims (15)
- 一種用於抑制黃嘌呤氧化酶之活性之組合物，其包括有效量之相思樹屬(Acacia )樹木抽出物及醫藥上可接受之載體，其中該相思樹屬樹木抽出物之成分包含：3,7,8,3' ,4' -五羥基黃酮(3,7,8,3' ,4' -Pentahydroxyflavone(麥拉諾千廷，Melanoxetin))、7,8,3' ,4' -四羥基黃酮(7,8,3' ,4' -Tetrahydroxyflavone)、3,4,2' ,3' ,4' -五羥基反式查耳酮(3,4,2' ,3' ,4' -Pentahydroxytrans -chalcone(歐卡寧，Okanin))、7,8,3' ,4' -四經基-3-甲氧基黃酮(7,8,3' ,4' -Tetrahydroxy-3-methoxyflavone(傳希廷，Transilitin))、3,7,8,3' -四羥基-4' -甲氧基黃酮(3,7,8,3' -Tetrahydroxy-4' -methoxyflavone)或7,8,3' -三羥基-3,4' -二甲氧基黃酮(7,8,3' -Trihydroxy-3,4' -dimethoxyflavone)。
- 如申請專利範圍第1項之組合物，其中相思樹屬樹木為臺灣相思樹(Acacia confusa )。
- 如申請專利範圍第1項之組合物，其中抽出物可降低個體中之尿酸濃度。
- 如申請專利範圍第3項之組合物，其中抽出物可作為藥物以用於治療痛風或改善與高量尿酸相關之症狀，其係選自肌肉痙攣、局部腫脹、發炎、關節疼痛、肌肉疲倦、壓力感及心肌梗塞。
- 如申請專利範圍第1項之組合物，其中抽出物可抑制因黃嘌呤氧化酶作用於生物體內而產生之自由基。
- 如申請專利範圍第1項之組合物，其中抽出物是以有機溶劑萃取。
- 如申請專利範圍第6項之組合物，其中有機溶劑為乙醇。
- 如申請專利範圍第1項之組合物，其中抽出物是以水萃取。
- 如申請專利範圍第1項之組合物，其中抽出物係由相思樹屬樹木之心材、樹皮、枝條、花或葉子中萃取。
- 如申請專利範圍第1項之組合物，其中抽出物係由相思樹屬樹木之心材萃取。
- 如申請專利範圍第7項之組合物，其中有機溶劑萃取相思樹抽出物可續以乙酸乙酯、正丁醇及水進行液相-液相分配，分為乙酸乙酯可溶部、正丁醇可溶部及水可溶部。
- 如申請專利範圍第11項之組合物，其中乙酸乙酯可溶部之黃嘌呤氧化酶抑制活性之主成分為3,7,8,3' ,4' -五羥基黃酮(3,7,8,3' ,4' -Pentahydroxyflavone(麥拉諾千廷，Melanoxetin))、7,8,3' ,4' -四羥基黃酮(7,8,3' ,4' -Tetrahydroxyflavone)、3,4,2' ,3' ,4' -五羥基反式查耳酮(3,4,2' ,3' ,4' -Pentahydroxytrans -chalcone(歐卡寧，Okanin))、7,8,3' ,4' -四羥基-3-甲氧基黃酮(7,8,3' ,4' -Tetrahydroxy-3-methoxyflavone(傳希廷，Transilitin))、 3,7,8,3' -四羥基-4' -甲氧基黃酮(3,7,8,3' -Tetrahydroxy-4' -methoxyflavone)、7,8,3' -三羥基-3,4' -二甲氧基黃酮(7,8,3' -Trihydroxy-3,4' -dimethoxyflavone)。
- 如申請專利範圍第12項之組合物，其中乙酸乙酯可溶部之黃嘌呤氧化酶抑制活性之主成分為3,7,8,3' ,4' -五羥基黃酮(3,7,8,3' ,4' -Pentahydroxyflavone(麥拉諾千廷，Melanoxetin))及3,4,2' ,3' ,4' -五羥基反式查耳酮(3,4,2' ,3' ,4' -Pentahydroxytrans -chalcone(歐卡寧，Okanin))。
- 如申請專利範圍第1項之組合物，其係可作為食品添加物。
- 如申請專利範圍第14項之組合物，其中食品係豆腐。
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