TWI289450B

TWI289450B - Anticancer agents

Info

Publication number: TWI289450B
Application number: TW089120410A
Authority: TW
Inventors: Noboru Kaneko; Kazuto Nishio
Original assignee: Noboru Kaneko
Priority date: 1999-09-30
Filing date: 2000-09-30
Publication date: 2007-11-11
Also published as: EP1222924A1; EP1222924A4; EP1637140A1; EP1637140B1; CA2385996C; ATE359788T1; DE60032620T2; US6683083B1; DE60034494D1; DE60034494T2; WO2001022968A1; AU776745B2; CA2385996A1; EP1222924B1; ATE349212T1; AU7449800A; DE60032620D1

Description

經濟部智慧財產局員Η消費合阼汪印製 1289450 A7 ____B7_ 五、發明說明（1 ) 本發明係有關抑制癌生長之抗癌劑，亦即抗惡性腫瘤劑，特別有關含有二苯甲基哌嗪衍生物，抑制含人體之哺乳動物癌細胞生長之抗癌劑，亦即，抗惡性腫瘤劑者。又，本發明係有關爲了治療纖維芽細胞增殖後藉由做爲肺纖維症疾病及抗癌劑副作用之纖維芽細胞增殖後其肺纖維症疾病之增殖性病變的抑制纖維化劑者，特別是含有二苯甲基哌嗪衍生物之爲了治療包括人類之哺乳動物增殖性病變的抑制纖維化劑者。先行技術中，做爲抗癌劑或抗惡性腫瘤劑之例者如① 梅爾法蘭、氮芥，及環磷醯胺等氮芥類、②B C N U、 C C N U、methyl- C CNU及ACNU等亞硝基尿素類、 ③三胺硫磷、絲裂霉素A Z Q、卡巴醌、夫二水半乳糖醇及二溴衛茅醇等疊氮啉及環氧基類、④甲基苄肼、氮烯咪胺以及六甲蜜胺等之烷化劑、⑤氮甲蝶呤（Μ 丁 X )、6 一硫基嘌呤（6 — Μ Ρ )、6 —硫代鳥嘌呤（6 - T G ) 以及 5 —氟脲嘧啶（5 — F U )、 tegafur( F 丁）、U F Τ 、5 D F U R及H C F U等5 -氟嘧啶及其類緣化合物等代謝拮抗劑、⑤長春新驗、長春鹼及ν i n d e s i n e ( V D S )等長春花驗系化合物、etoposide及teniposide等 etoposide 系化合物、paclitaxel 及 Docetaxel 等之 taxan 類及 Jlhekan等等之喜樹鹼系化合物等之原於植物之抗癌劑、⑦ 阿霉素、cellvidin、更生霉素D、更生霉素、prenoxan、絲裂霉素、間霉素及novanuone等抗癌性抗生物質、⑧ Adenocholticoid、雌激素、黃體素、抗雌激素、Alomatase !丨丨1!5_! (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂·- %丨本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -4- 1289450 A7 _____B7 五、發明說明（2 ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 阻礙劑、雄激素、抗雄激素及L Η — R Η類比物等激素劑、⑨L 一天冬醯胺酶等酵素、⑩順氯胺鉑、羧氯胺鈾、及 nedaplatin ( 2 5 4 — S )等鉑絡合物、⑪非特異性免疫賦活物質、⑫干擾素及⑬T N F類等者。根據確立藉由此等抗癌劑之治療方法者，可使急性淋巴性白血病、Hodgkin病等相當類度下回歸病患之社會生活。惟’對於胃癌、肺癌及大腸癌等固形癌、大部份依賴外科療法、及放射線治療者。對於此等固形癌，該順氯胺鉑由於具有寬廣之抗腫瘤光譜，因此，順氯胺餡被用於固形癌之治療使用。惟，順氯胺鉑被確定有腎毒性、胃腸毒性、聽覺毒性及末梢神經毒性，且，治療率亦低等問題出現〇又，抗癌劑中倂發副作用之腺纖維症後，造成生命預後之嚴重影響乃爲公知者。本發明之目的在於解決此等抗癌劑之問題點者。經濟部智慧財產局員工消費合阼f£印製本發明係提供一種針對各種癌細胞具有極大抗癌活性 (亦即抗惡性腫瘤活性）或抑制肺纖維芽細胞增殖之性質者，或，對於各種癌細胞可兼備極大抗癌活性（亦即抗惡性壎瘤活性）及抑制肺纖維芽細胞增殖之性質者，毒性少之化合物及其鹽以及其衍生物者爲目的。本發明者發現一般式〔I〕 -5 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） [289450 A7 B7 五、發明說明（ 3

⑴ 式中，R代表〇〇. 或

C ------- 丨訂---------#to (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製者〕所不之化合物或其鹽及其衍生物或其前驅藥物不但毒性比順氯胺鉑小，且比較順氯胺銷後，其對於各種癌細胞具有極大抗癌作用，以及可抑制纖維芽細胞之增殖作用，進而完成本發明。亦即，本發明係以含有如一般式〔I〕所示之化合物及其鹽’及其衍生物，或其前驅藥物者爲特徵之抗癌劑者本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -6- 1289450

R

經濟部智慧財產局員X-消費合itFi巾沒 A7 B7 五、發明說明（4 〔I〕式中，R代表

或 C 1 者〔圖面之簡單說明〕圖1代表針對例2之該一般式〔I〕所示化合物等之纖維芽細胞顯示抑制細胞增殖作用之曲線圖者。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

1289450 A7 __B7五、發明說明（5 ) 經濟部智慧財產局員工消費合作钍印製

〔發明之最佳實施形態〕本發明中，一般式〔I〕

R ⑴ 〔式中，R代表

C I 者〕所示之化合物（以下，稱該一般式〔I〕所示之化合物）或其鹽及其衍生物，或其前驅藥物（以下，綜合此等，稱該一般式〔I〕所示之化合物等）及其製造方法被揭 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -8- 1289450 A7 B7 五、發明說明（6 ) 示於國際揭示號碼w〇 9 2 / 0 0 9 6 2號之國際揭示公報及特開平4 - 6 9 3 7 7號公報（以下稱該公報等）中。該公報等中，被揭示該一般式〔I〕所示之化合物等未伴隨心抑制作用，抑制心肌過收縮及過舒展後，具有保護因心肌壞死之作用者’以及具有治療及預防心肌梗塞之效果，且，具有抑制心肌壞死及預防之效果者。本發明者發現生體內（invivo)及生體外（in vitro ) 中，該一般式（I )所示之化合物比起順氯胺鉑及其其抗癌劑其針對各種癌細胞具有良好之抗癌作用，對於各種癌細胞顯示寬廣之抗癌光譜，同時發現該一般式〔I〕所示之化合物等，具有抑制纖維芽細胞增殖之作用。本發明中，抗癌劑之用語包括癌的治療劑及/或纖維化抑制劑者。本發明中，該一般式〔I〕所示化合物之「鹽」係指醫藥學上可容許鹽之意，例如：鹽酸鹽、溴化氫酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽或硝酸鹽等無機酸附加鹽；醋酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、二醇酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、草酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、馬來酸鹽、延胡索酸鹽、甲磺酸鹽、苯磺酸酸、對-甲苯磺酸鹽或抗壞向酸鹽等有機酸附加鹽，或天冬胺酸鹽或谷胺酸鹽等胺基酸附加鹽，更含有含水物及水和物，惟，並非僅限於此者。本發明中，該一般式〔I〕所示之化合物「前驅藥物」係指具有化學性或代謝性分解後取得之基者，藉由水解，加溶媒分解後，或於生理性條件下進行分解後，顯示做本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐〉 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) . 經濟部智慧財產局員工消費合作钍印製 -9- 1289450 A7 B7 五、發明說明（7 ) 爲抗癌劑之活性者，該一般式〔I〕所示化合物之衍生物者。本發明之該一般式〔I〕所示化合物等具有良好之抗癌作用者。亦即，本發明抗癌劑係含有以該一般式〔I〕所示化合物等做爲主藥者。本發明抗癌劑藉由倂用其他抗癌劑投服後，則即使對於耐藥性之癌仍可發揮抗癌劑之制癌作用。以本發明該一般式〔I〕所示化合物等做爲抗癌劑使用時’一般可以全身性或局部性或以口服或非經口服投用之。本發明之抗癌劑與其他抗癌劑同時投服亦可，或先於其他抗癌劑投服之前，或投服之後投服均可。投服量依其年齡、體重、症狀、治療效果、投服方法及處理時間等而不同，一般成人（平均體重6 〇 k g ) — 人一天量爲0 · Olmg〜lg之範圍者，更佳者爲 100m g〜50〇mg之範圍者，1日1次或1日分爲數次以口服或非經口投服之。以非經口投服時，可持續性維持1 2小時投與之。以本發明該一般式〔I〕所示化合物等做爲主藥調製口服投用之固體組成物時，可爲錠劑、九劑、散劑、顆粒劑等劑形。於此固體組成物中，可使1種或2種以上之主藥混合1以上活性之稀釋劑、分散劑、或吸附劑等，例如 :乳糖、甘露糖醇、葡萄糖、羥丙基纖維素、微晶性纖維素、澱粉、聚乙烯吡咯烷酮、甲基矽酸鋁酸鎂或無水矽酸粉末等者。又，組成物亦可依常法混合稀釋劑以外之添加劑。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

S . 經濟部智慧財產局員Η消費合作社印製 -10- 1289450 A7 B7 五、發明說明（8 ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 以本發明該一般式〔I〕所示化合物等做爲主藥調製錠劑或九劑時，必要時，亦可以自糖、明膠、羥丙基纖維素、或羥甲基纖維素苯二甲酸鹽等胃溶性或腸溶性物質之薄膜進行被覆之，亦可被覆2層以上者。更可藉由明膠，或乙基纖維素類之物質做成膠囊劑亦可。以本發明一般式〔I〕所示化合物等做爲主藥進行調製口服投用之液體組成物時，可爲藥劑上可容許之乳濁劑 ’溶解劑、懸浮劑、單糖劑或馳劑等劑形。此時，所使用之稀釋劑如：精製水、乙醇、植物油或乳化劑等者。又，此等組成物中除稀釋劑之外，亦可混合浸潤劑、懸浮劑、甜味劑、風味劑、芳香劑、或防腐劑等補助劑類者。以本發明該一般式〔I〕所示化合物等做爲主藥進行調製非經口投用之注射劑時，可使用無菌水性或非水性溶液劑、可溶化劑、懸浮劑或乳化劑。做爲水性溶液劑，可溶化劑、懸浮劑者如：注射用水、注射用蒸餾水、生理食鹽水、環糊精及其衍生物、三乙醇胺、二乙醇胺、單乙醇胺、三乙胺等有機胺類或無機鹼溶液等。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本發明該一般式〔I〕所示化合物等做爲主藥進行做成水溶性溶液劑時，亦可使用丙二醇、聚乙二醇、或橄欖油類之植物油、或乙醇類之醇類等。又，做爲可溶化劑者可使用聚環氧乙烷硬化篦麻子油，蔗糖脂肪酸酯等之界面活性劑（混合膠粒之形成），或卵磷脂、氫化卵磷脂（核糖核蛋白體形成）等者。亦可做成植物油等非水溶性溶解劑與卵磷脂、聚環氧乙烷硬化箆麻油或聚環氧乙烷聚氧丙本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -11 - 1289450 A7 B7 五、發明說明（9 ) 二醇等所成之乳化製劑者。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 做爲非經口投用之其他組成物者可以含1種或2種以上之主藥、亦即，該一航式〔I〕所示化合物藉由其本身公知之方法做成外用液劑、軟膏類之塗佈劑、栓劑或陰道栓劑等。〔實施例〕以下，針對以本發明該一般式〔I〕所示化合物等做爲抗癌之主藥做成之製劑例進行具體的說明。惟，本發明並非僅限定以下之說明者。例1 本實施例抗癌劑注射製劑中，做爲主藥之例者，可使用1 一〔 1 — 4 (二苯甲基）哌嗪基〕—3 —〔 1 —〔 4 一（4 一氯苯基）一 4 —羥基〕哌啶基〕一 2 —丙醇（以下，稱化合物1 )。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製針對該化合物1之合成例由以下進行說明。又，以下說明中，核磁共振光譜（N M R )之測定係以四甲基矽烷做爲內部標準進行後以p p m示之。份代表容量份。 (1) 1〜（二苯甲基）—4 一（1— (2 ，3 —環氧基 )丙基）暖嗦之合成將1 0 · 0 g之1 —(二苯甲基）哌嗪溶於5 0 之乙腈後，加入6 . 5 g之碳酸鈉及6 · 8 g之環氧溴丙院 -12- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1289450 A7 B7 五、發明說明（1Q) 之後，進行加熱 ί ：® 流 2 ♦ 5 小時〇將臨濟 πτι. Va^、別後，使濾液進行減壓濃縮〇以矽膠柱體色譜法 ( W acogel C-200 丨， 200 g ) 進行毕主 m 製殘留物藉由 9 9 份氯仿與1 份甲醇之混合溶媒進行溶出後取得 1 — ( 二苯甲基 )- 4 一（ 1 一（ 2 3 一環氧基 ) 丙基 ) 哌嗪 ( 5 • 9 g ) ο 核磁共振光 §並口曰 1 · Η - -] Μ M R ( C i D ( 1 ： 3、 5 〇〇 MHz )5 : 2 • 3 〇 2 • 8 〇 ( 1 2 Η m ) j 3 • 〇 6 3 • 1 〇 ( 1 Η j m ) 4 • 2 3 ( 1 Η ， S ) 5 7 • 1 6 ( 2 Η t > J = 7 • 3 Η z ) J 7 • 2 5 ( 4 Η 5 t J - 7 • 3 Η z ) J 7 4 0 ( 4 Η 5 d 5 J — 7 . 3 Η Z ) 0 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) i 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 (2) 1—〔1 — 4 —(二苯甲基）哌嗪基〕一 3 —〔 1 一〔4 — ( 4 —氯苯基）一 4 一羥基〕哌啶基〕一 2 -丙醇之合成將3 ·〇g之1—(二苯甲基）一4 — (1— (2 ， 3 —環氧基）丙基嗪及2 · 5 g之4 一（ 4 一氯苯基 )一 4 一羥基哌啶溶於2 0 2之鄰一二氯苯中，進行加熱還流2 . 5小時。放冷後，以砂膠柱體色層法（W a C 〇 - g e 1 C-200,1 00g )進行精製，取得 4 · 6 g 之 1 —〔 1 — 4 — (二苯甲基）哌啶基〕一 3 —〔 1 一 4 一（4 一氯苯基）一 4 一羥基〕I啦啶基〕—2 —丙醇（化合物1 )者。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -13- 經濟部智慧財產局員X消費合阼il印製 1289450 A7 _ B7_ 五、發明說明（11 ) 紅外級收光譜：I R v m a X ( c m — 1 ) K B r : 33 〇〇，2950， 2650， 162 0， 145 0, 11〇〇，91〇，830，75〇，71〇（鹽酸鹽者 ) 核磁共振光譜 'H-NMR (CDC Is. 500MHz) ό: 1 · 5 0 〜1 · 9 〇（4 Η，m )， 2 ·〇 1 〜2 · 2 1 ( 2 Η ，m )， 2.30 〜2.55(1 〇H，m)， 2.8〇〜2.9〇（2H，m)， 3·87 〜3.93(lH，m)， 4 · 2 2 ( 1 Η，s )， 7.16(2H，t，J=7.3Hz)， 7.26(4H，t，J 二 7·3Ηζ)， 7.3〇（2H，d，J = 8.5Hz)， 7.40(4H，d，J=7.3Hz)， 7.42(2H，d，J 二 8·5Ηζ)。 F D質譜 FD— MS (m/z) : 519，521(M+)。 (1 )化合物1的注射製劑化合物1 2〜4〇m g D —山梨糖醇 1〇〇〇m g 檸檬酸 1 0 m g 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) —訂-------- •14- 1289450 Α7 Β7 五、發明說明（12) 氫氧化鈉適量注射用水 ..注射用水加入做成2 0 · 0 2者。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 將D -山梨糖醇及檸檬酸溶於充份量之注射用水。使化合物1溶解於所取得之溶液後，以氫氧化鈉調節P Η爲 3 · 2〜3 · 3。再於攪拌同時加入殘量注射用水。過濾此溶液後塞入2 0 . 0 2安瓶中進行密封。此安瓶內容物以高壓鍋進行滅菌。 (2 )各種人體癌細胞株中，針對invhro抗腫瘤效果藉由 Μ T T試驗法進行檢討。經齊郎fe>曰慧时轰笱員1-肖費^乍：±1巾：^ 分別將人體非小細胞肺臟癌細胞株P C - 1 4、人體小細胞肺臟癌細胞株S B C - 3、人體乳癌細胞株M C F 一 7、人體卵巢癌細胞株S Κ〇V 3、人體白血病細胞株H L 6 0及人體大腸癌細胞株W i D R於R Ρ Μ I 1 6 4 0培養基中利用胰蛋白酶處理或細胞刮板做成單細胞，調製1 5 μ 1爲1 0 0個細胞浮遊液。此做爲抗癌劑化合物1者溶於二甲亞砸後，使化合物1之濃度加至〇· 5〜1 // m之範圍，將此於9 6孔之感光板爲1焊接各以1 5 0 μ 1置入。此感光板於3 7 °C之溫度下，5 % 二氧化碳濃度及飽和水蒸氣之條件下，維持9 6小時，進行培養之。培養後，於D — P B S (—)中加入2 0 // 1 之於5 m g / m 1濃度所溶解之Μ T T〔 3 -（ 4，5 — 二甲基噻唑一 2 -基）一 2，5 —二苯基四唑嗡溴化物（ 3— (4，5 —二甲基噻唑一 2 —烯基）一2，5 —二苯 -15- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1289450 A7 B7 五、發明說明（13 ) 基四唑嗡溴化物）〕試藥，更於3 7 °C下進行培養4小時。培養結束後，各感光板進行離心分離後，丟棄上淸液。加入2 0 0 // 1之二甲亞砸後，使黃色之Μ T T藉由癌細胞內線粒體之脫氫酵素作用所產生之紫色甲臢溶解後，將所生成之甲腊之量藉由多感光板讀取器測定針對波長 5 6 2〜6 3 0 n m之吸光度。陰性對照之平均發育率做爲0 %，陽性對照之平均發育率做爲1 0 0 %後，描出腫瘤容量發育曲線後，算出化合物1 ，5 0 %之抑制人體癌細胞增殖之濃度。結果如表1所示。表 1 細胞株達成I C 5。所需化合物1之量（// Μ ) P C - 1 4 (人體非小細胞肺癌株） 1 . 0 2 ± 0 . 2 0 S B C - 3 (人體小細胞肺癌株）〇.4 6 土 0 · 0 3 M C F - 7 (人體乳癌株） 0 . 6 0 ± 0 . 0 8 SKOV3 (人體卵巢癌株）〇· 8 5 ± 0 · 0 2 HL — 6 0 (人體白血病株） 1 · 1 8 ± 0 ·〇 5 Wi DR (人體大腸癌株）〇 . 4 1 ± 0 · 0 3 表1之値係於3次獨立使用化合物1之癌細胞培養實驗中Μ T T試驗5 0 %抑制癌細胞增値之濃度（I C 5 〇 ) 値以平均値土誤差範圍（μ Μ )代表之。如表1所示，化合物1於0 · 5〜1 · 1 μ Μ之濃度 -!!·#! (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) . 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -16- 經濟部智慧財產咼員1.消費^阼比中：^ 1289450 A7 _____ B7__ 五、發明說明（14 ) 下，針對各種癌細胞所顯示5 0 %抑制增殖之效果（I C 5 〇 )者。針對此化合物1之I C 5 〇値比起對於固形癌最有效之順氯胺鈾中Μ T T測試法後I c 5 〇値之2〜3 μ Μ，其値爲極低，由化合物1之I C 5。値可證明化合物1之制癌效果極大，可有效做爲抗癌劑者。另外，對於肺臟癌、乳癌、大腸癌、卵巢癌等固形癌細胞亦與對於白血病細胞之抗腫瘤效果顯現同等之程度爲具有寬廣抗腫瘤光譜者。例2 對照，分別於化合物1濃度爲1 X 1 0 — 6 Μ之系列及化合物1濃度爲3 X 1 0 6 Μ之系列中準備9片培養皿（合計2 7片）。於2 7片培養皿中分別加入每培養皿爲 4 · 4 X 1 0 5個之纖維芽細胞Ν I Η 3 Τ 3，分別加入含 1 0 % F B S (牛胎血淸）之D — Μ Ε Μ培養液。對照以加入相當化合物1添加量之水進行培養之。每2 4小時進行測定各系列3片細胞數，算取平均後，做成每培養皿之平均細胞數，其結果如圖1所示。如結果所示，化合物1 具有抗癌作用之同時，對於藉由纖維芽細胞之增殖後，造成的間質性肺炎、瘢痕瘤等增殖性病變亦有效。例3 於雌性無毛實驗鼠B A L B / c n u / n u ( 6週齡）中，以2 x 1 0 7個人體非小細胞肺藏癌株p c — 1 4 之細胞做爲生理食鹽水浮遊攸’植入背邰皮下後’觀察其 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) · 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -17- 1289450 A7

7 R 五、發明說明（16 ) 做爲第1天腫瘤容積之大小示之。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製表 2 系列號碼被檢體號碼第 1 曰第 2 曰第 3 曰第 4 曰第 5 曰第 6 曰第 7 曰第 8 曰 1 1 100.00 111.45 148.16 179.50 233.01 208.06 230.37 290.31 1 2 100.00 145.96 116.07 117.73 107.15 61.17 108.09 131.77 1 3 100.00 103.15 71.62 72.94 74.51 55.21 72.46 60.61 1 4 100.00 169.32 143.35 149.41 205.18 214.09 221.72 265.04 1 5 100.00 91.66 140.09 114.08 111.79 188.97 165.66 182.55 1 6 100.00 131.69 147.32 85.63 132.46 87.52 113.77 127.27 2 1 100.00 45.35 20.22 46.17 31.44 30.93 52.68 56.49 2 2 100.00 120.51 98.14 80.18 68.58 122.90 99.04 127.45 2 3 100.00 139.67 85.27 105.01 67.76 55.16 75.58 130.56 2 4 100.00 73.21 52.91 42.19 22.55 0.00 0.00 0.00 2 5 100.00 73.29 62.47 31.02 18.55 10.11 12.98 4.97 2 6 100.00 66.68 83.06 85.73 51.09 51.30 47.68 30.49 3 1 100.00 55.40 58.27 79.34 47.44 33.96 34.07 47.99 3 2 100.00 63.47 43.51 40.73 40.65 32.21 36.27 15.80 3 3 100.00 93.53 72.22 83.65 62.95 54.93 86.76 102.87 3 4 100.00 68.25 113.73 123.79 103.32 135.18 129.59 140.33 3 5 100.00 90.42 70.23 36.86 28.95 14.65 17.36 7.22 3 6 100.00 80.68 92.68 84.55 79.20 51.96 85.12 61.54 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -19- 1289450 A7 B7 五、發明說明（17) 表_3 系列號碼平均 (6隻）第 1 曰第 2 曰第 3 曰第 4 曰第 5 曰第 6 曰第 7 曰第 8 曰 1 100.00 121.23 124.35 121.20 147.83 143.83 159.88 165.10 2 100.00 89.79 67.01 68.38 46.68 47.73 42.99 58.33 3 100.00 78.63 75.11 74.99 60.45 53,82 64.86 62.63 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1—〔 1 一 4 一（二苯甲基）哌嗪基〕一3 —〔 1 一〔 4 一（4 —氯苯基）—4 一羥基〕哌啶基〕一 2 -丙醇由例1至例3結果證明化合物1具極大制癌效果。該例1至例3中，以化合物1之1 一〔一 4 —(二苯甲基）_嗪基〕—3 —〔 1 一〔 4 — ( 4 一氯苯基）一 4 一羥基〕_啶基〕一 2 —丙醇做爲主藥使用，而以1 —〔 2 — ( 1 ，2，3，4 —四氫）異喧啉基〕—3 —〔 1 — (4 一二苯甲基）哌嗪基〕一 2 -丙醇做爲主藥使用亦可，其結果相同。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製針對1 —〔 2 -（ 1 ，2，3，4 一四氫）異D奎啉基〕一 3 —〔 1 一（4 一二苯甲基）哌嗪基〕—2 —丙醇之合成例’於以下進行說明之。又，以下說明中，核磁氣共振光譜（N M R )之測定係以四甲基矽烷做爲內部標準進 ί了後’以P p m代表之。份代表容纛份。 (1) 2 —〔1— (2，3 —環氧基）丙基〕—1 ，2， 3 ，4 一四氫異咱啉之合成本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -20- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1289450 A7 ____B7_ 五、發明說明（18 ) 將2 5 · 0 g之1 ，2 ，3 ，4 —四氫異喹啉溶於 1〇0 2乙腈後，於此加入4 0 . 0 g之碳酸鈉及 3 1 . 0 g之環氧溴丙烷進行4小時加熱還流。將濾別鹽後之濾液進行減壓濃縮。以矽膠柱體色譜法（Waco gel-200 、500 g )精製殘留物，藉由9 9份氯仿與1份之甲醇混合溶媒進行溶出後，取得1 5 · 6 g之2 -〔 1 一（ 2， 3 —環氧基）丙基〕—1 ，2 ，3 ，4 一四氫異喹啉。核磁共振光譜 'H-NMR (CDC Is. 1 0 0 Μ Η z ) 5 ： 2.36 〜2.6〇（2H，m)， 2.73 〜3.〇3(6H，m)， 3.〇9〜3.29(lH，m)， 3.65 (lH，d，J = 14.9Hz)， 3 · 8 3 ( 1 H，d，例4 將3 ·〇g之2 — 〔1— (2 ，3 —環氧基）丙基〕 —1 ，2 ，3 ，4 —四氫異喹啉及4 · 4g之1—(二苯甲基）哌嗪溶於2 0 2之鄰一二氯苯後，進行2 . 5小時加熱還流。放冷後，以矽膠柱體色譜法（Waco gel C-200 、150 g )進行精製後，取得6 . 0 g之1 —〔 2 — ( 1 ，2 ，3 ，4 —四氫）異喹啉基〕一 3 —〔 1 一（ 4 一二苯甲基）呢嗦基〕一 2 -丙醇。紅外吸收光譜：I R m a X ( c m — 1 ) K B r : 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

-21 - 經濟部智慧財產局員Η消費合阼Fi印製 1289450 A7 ___B7_ 五、發明說明（19 ) 340〇，3〇〇〇，255〇，162 0， 145 0， 10 80 ，92〇，760 ，71〇（鹽酸鹽者）核磁共振光譜 1 Η - N M R ( C D C la, 1 〇 0 Μ H z ) 5 : 2.3 0 〜2.60(1.2H，m)， 2.75 〜2.95(4H，m)， 3.62 〜3.8〇（2H，m)， 3.92 〜4.03(lH，m)， 4 · 2 1 ( 1 H，s )， 7.〇〇〜7.51(14H，m)。 F D質譜 FD— MS (m/z) :441 (M+)。 (2) 1—〔2 — (1 ，2，3 ，4 一四氫）異喹啉基〕一 3 —〔 1 — ( 4 —二苯甲基）哌嗪基〕-2 —丙醇之合成將3 ·〇g之2 —〔1— (2 ，3 —環氧基）丙基〕 —1 ，2，3 ，4 —四氫異d奎啉及4 . 4g之1 一（二苯甲基）|帳嗪溶於2 0 2之鄰一二氯苯中後，進行2 · 5小時加熱還流。放冷後，以矽膠柱體色譜法（Waco gel C-200 、15 0 g )進行精製後，取得6 . 0 g之1 —〔 2 — ( 1 ’ 2，3，4 —四氫）異d奎啉基〕—3 —〔1_ (4 一二苯甲基）哌嗪基〕一 2 -丙醇化合物。紅外吸收光譜：I R v max (cm1) K B r · 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

-22 - 1289450 A7 B7 五、發明說明（20) 34〇〇，3〇〇〇，255〇，1620’ 1450’ 1〇8〇，92〇，76 0 ，71〇（鹽酸鹽者） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 核磁共振光譜 'H-NMR (CDC l3> 1 0 0 Μ Η z ) ά ： 2 · 3 0 〜2 · 6 0 ( 1 · 2 Η，m )， 2·75 〜2·95(4Η，ιώ) ’ 3.62 〜3.8〇（2H，m)， 3.92 〜4.03(lH，m)， 4 · 2 1 ( 1 Η，s )， 7·〇〇〜7·51 (l4H，m)。 F D質譜 FD— MS (m/z) : 441 (M+)。〔產業上可利用性〕經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本發明該一般式〔I〕所示化合物等比先行之抗癌劑如：順氯胺鈾之毒性較小，且比先行抗癌劑對於各種癌細胞更具極大制癌作用、顯示寬廣制癌光譜、比起先行抗癌劑其癌（固形癌）及其他惡性腫瘤等之癌治療上更具極大貢獻者。又，本發明具有抑制肺纖維症等之纖維芽細胞之增殖作用，比起先行之肺纖維症、瘢痕瘤等治療藥後’更具良好之纖維化抑制作用，於肺纖維症、瘢痕瘤治療上更具極大貢獻者。 -23- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）第89120410號專利申請案中文說明書修正頁 1289450 民國95年11月15日修正申請曰期 89 年 9 月 30 曰案號 89120410 類別論編，麵4 (·以上i欄去本局填註f 1 公4

4H C4 I 95. 11. 15 中文抗癌劑發明新型名稱英文

Anticancer agents 姓名國籍 (1) 金子舁 (2) 西尾和人 (1)日本 0 日本裝發明創作' (1)日本國東京都文京區春日二丁目二三番一二一四〇三號住、居所 0 §本國千葉縣印西市西©原一一二一四一三〇訂姓名 (名稱） (1)金子昇金子舁 _ 線經濟部智慧財產均員工消費合作社印製申請人國籍住、居所 (事務所）代表人姓名 (1)日本 (1)日本國東京都文京區春日二丁目二三番一: 四〇三號本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X：Z97公釐） 128945沪89120410號專利申請案中文說明書修正頁民鼸95年11月15日修正 B7 五、發明説明（彳5) 生存經過。選出移植後第7天腫癌狀態所確定後可試驗之個體，進行各個體之抽樣，分別以6隻分成對照系列，第 1被檢系列及第2被檢系列。將各被移植腫瘤之腫瘤容積進行測定腫瘤之短徑及腫瘤之長徑後，藉由腫瘤短徑之平方與腫瘤長徑之積，亦即，式：（腫瘤短徑）2 X (腫瘤長徑）進行求取之。腫瘤移植後，由第7天開始投用化合物 1 ° 將1.2mg化合物1溶於〇.〇 5J之二甲亞硕後，加入0 · 9 5W之0 · 5%山梨糖醇一 0.2%檸檬酸1水和物溶液（P Η 3 . 3 )使成均勻溶液後，做成化合物1注射液〇化合物1之投用係6隻系列號碼3之被檢體群中，於腫瘤移植後第7天、第8天、第9天、第10天及第 1 1天分別由無毛實驗鼠尾處以1日1次注射1 kg體重爲 5 mg之化合物1。做爲對照系列號碼1之被檢體群爲未投用化合物1之系列者，完全未投用化合物1及治療者。針對整體被檢體群由第1天化合物1投用至第8天於每日一次投用化合物1前者，及針對每日一次，觀察各實驗鼠之全身狀態及各老鼠體重及腫瘤容積進行測定。其實驗鼠全身狀態之觀察及體重所測定之結果系列號碼1至3之被檢體群間幾乎未有差異，而實驗鼠腫瘤容積其系列號碼1至 3之被檢體群間卻出現差異。腫瘤容積測定結果如表2所示，其每系列號碼之被檢體群腫瘤容積平均値如表3所示。表2及表3中，第2天以後腫瘤容積之大小係以1 0 〇本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） I — I!----0! (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部智慧財產局g(工消費合作社印製 -18-

Claims

1289450 ，.， 1· \ Α8 I.丨 Β8 ::J C8 ! D8 、申請專利範圍第8 9 1 2 04 1 0號專利申請案中文申請專利範圍修正本民國95年11月15日修正 1 . 一種使用於抑制癌細胞成長的醫藥組合物，其特徵係含有如一般式〔I〕所示1 — 〔 1 — 4 一（二苯甲基）_嗪基〕—3 — 〔1 一〔4 一（4 —氯苯基）一 4 一羥基〕哌啶基〕-2 -丙醇之化合物及其鹽

⑴ 〔式中，R代表

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製或

(請先閲·«背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家樣準（CNS ) Α4規格（210 X 297公釐） 1289450 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍者

C I (請先閲嘩背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）