CN108774220B - 用于治疗心肌缺血的化合物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用于治疗心肌缺血的噁二唑类化合物，本发明还涉及所述化合物在治疗心肌缺血方面的应用。试验结果表明，本发明化合物可有效减少心肌梗死大鼠的心肌梗死面积，并显著降低其血清CK、AST及LDH活性，表明本发明化合物对于心肌梗死具有显著的预防和治疗作用，因此可用于心肌缺血的预防和治疗。

Description

用于治疗心肌缺血的化合物及其应用

技术领域

本发明涉及医药领域，具体来说，本发明涉及一种用于治疗心肌缺血的噁二唑类化合物，本发明还涉及所述化合物在治疗心肌缺血方面的应用。

背景技术

心肌缺血是发病率较高的一类心血管疾病，发作时，患者感觉心前区剧烈阵发性闷痛或绞痛；当反复发作及再灌注发生时还会引起心肌细胞的损伤和心脏功能的紊乱，主要表现为：心律失常、血管损伤甚至血液滞留、心肌功能丧失、加速缺血致损伤心肌细胞的坏死、心肌细胞水肿等。我国每年死于心脑血管疾病患者达300多万，而幸存下来的患者之中，75％不同程度的丧失劳动能力，4％重残，极大地影响了生活质量。

目前治疗心肌缺血性疾病的药物较多，常用的主要为化学药物，包括硝酸酯制剂、肾上腺素能β受体阻滞剂(β阻滞剂)、钙通道阻滞剂、抗血小板药物、调整血脂药物、抗凝药物。但西药治疗常常导致一些不良反应，如诱发支气管哮喘，抑制心脏，引起心力衰竭等。此外，治疗心肌缺血性疾病还经常采用中成药，比较常用的有丹参制剂、复方银杏制剂、速效救心丸等等，这些药品有一定的治疗作用，但是存在一定的问题，主要是不同患者个体体质不完全相同，所以治疗时药物的疗效也不完全相同，有的甚至没有作用，而且这些药品中有些药物具有一定的耐药性，患者需要终身带药，这样影响患者的生活质量。

可见，临床上依然缺乏治疗心肌缺血的有效药物，因此开发一种更多的抗心肌缺血药物显得非常迫切且具有重大的意义。

发明内容

本发明提供了一种用于预防和治疗心肌缺血的噁二唑类化合物。

在一方面，本发明提供了一种式(I)化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、氮氧化物或前药：

其中：

R₁选自C1-6烷基、卤代C1-6烷基或-COR’；

R’选自C1-4烷基、C1-4烷基氨基、二(C1-4)烷基氨基、C1-4烷氧基、C6-10芳基、5-7元杂环基，其中，所述C1-4烷基、C6-10芳基、5-7元杂环基任选被1-3个选自卤素、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、羟基、硝基、氰基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷氧基的基团所取代；

R₂、R₃、R₄、R₅各自独立地选自氢、卤素、硝基、氰基、C1-6烷基或C1-6烷氧基；

R₆、R₇、R₈、R₉各自独立地选自氢、卤素、硝基、氰基、C1-6烷基或C1-6烷氧基，其中，所述C1-6烷基、C1-6烷氧基任选被1-3个选自卤素、羟基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷氧基的基团所取代。

在本发明的一些优选实施方案中，所述R₁选自己基或-COR’，R’选自二甲氨基、5-甲基-噻吩-2-基或1-甲基-吡咯烷-3-基。

在本发明的一些优选实施方案中，所述R₂、R₃、R₄、R₅为氢。

在本发明的一些优选实施方案中，所述R₆、R₇、R₈、R₉各自独立地选自氢、溴、甲氧基乙氧基、三氟甲基或乙基。

在本发明的一些优选实施方案中，所述化合物选自：

另一方面，本发明提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含至少一种所述式(I)化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、氮氧化物或前药，以及药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂、辅剂、媒介物或其组合。

再一方面，本发明提供了一种所述化合物或所述药物组合物制备药物中的应用，所述药物用于预防和治疗心肌缺血。

发明详述

定义和一般术语

现在详细描述本发明的某些实施方案，其实例由随附的结构式和化学式说明。本发明意图涵盖所有的替代、修改和等同技术方案，它们均包括在如权利要求定义的本发明范围内。本领域技术人员应认识到，许多与本文所述类似或等同的方法和材料能够用于实践本发明。

本发明中，术语“卤素”是指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)或碘(I)。

本发明中，术语“烷基”表示含有1-20个碳原子的饱和直链或支链一价烃基基团。在一些实施方案中，烷基含有1-12个碳原子；在另一些实施方案中，烷基基团含有1-6个碳原子；在又一些实施方案中，烷基基团含有1-4个碳原子。烷基例如为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、正己基等。

本发明中，术语“芳基”表示含有6-14个环原子，或6-12个环原子，或6-10个环原子的单环、双环和三环的具有芳香性的碳环体系，且有一个或多个附着点与分子的其余部分相连。芳基例如为苯基、萘基等。

本发明中，术语“杂环基”表示含有1-5个碳原子和1-4个选自氧、硫和氮的杂原子的5-7元的单环饱和、部分不饱和以及芳香族环基，例如吡咯烷基、哌啶基、咪唑烷基、咪唑啉基、吡唑烷基、哌嗪基、高哌嗪基、吡唑啉基、四氢呋喃基、噁唑烷基、吗啉基、硫代吗啉基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基等。

本发明中，术语“药学上可接受的”表示那些化合物、材料、组合物和剂型，其可在正确医学判断的范围内，适用于与人类和动物组织接触而无过度毒性、刺激性或其它问题或并发症，合理利益/风险比相当。

本发明中，术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的有机盐和无机盐。药学上可接受的盐包括，但并不限于，与氨基基团反应形成的无机酸盐有盐酸盐，氢溴酸盐，磷酸盐，硫酸盐，高氯酸盐，和有机酸盐如乙酸盐，草酸盐，马来酸盐，酒石酸盐，柠檬酸盐，琥珀酸盐，丙二酸盐，己二酸盐，藻酸盐，抗坏血酸盐，天冬氨酸盐，苯磺酸盐，苯甲酸盐，重硫酸盐，硼酸盐，丁酸盐，樟脑酸盐，樟脑磺酸盐，环戊基丙酸盐，乙磺酸盐，甲酸盐，半硫酸盐，庚酸盐，己酸盐，氢碘酸盐，乳糖醛酸盐，乳酸盐，月桂酸盐，苹果酸盐等。

本发明中，本发明化合物在结构上包括所有立体异构体、对映异构体和非对映异构体。在不对称原子上的绝对构型是通过R或S表示的。其绝对构型未知的解析化合物可以由(+)或(-)表示。当确认特定立体异构体时，这表示所述立体异构体基本上不含其它异构体，即小于50％、优选小于20％、更优选小于5％、特别是小于2％或1％的其它异构体。

本发明化合物可以以异构体中的一个或它们的混合物，例如外消旋体和非对应异构体混合物的形式存在。光学活性的(R)-或(S)-异构体可使用手性合成子或手性试剂制备，或使用常规技术拆分。

本发明中，术语“互变异构体”是指具有不同能量的可通过低能垒互相转化的结构异构体。若互变异构是可能的，则可以达到互变异构体的化学平衡。例如，质子互变异构体也称为质子转移互变异构体包括通过质子迁移来进行的互相转化，如酮-烯醇异构化和亚胺-烯胺异构化。价键互变异构体包括通过一些成键电子的重组来进行的互相转化。

本发明中，术语“氮氧化物”是指当化合物含胺官能团时，可将1个或大于1个的氮原子氧化形成N-氧化物。N-氧化物的特殊实例是叔胺的N-氧化物或含氮杂环氮原子的N-氧化物。可用氧化剂例如过氧化氢或过酸(例如过氧羧酸)处理相应的胺形成N-氧化物。

本发明中，术语“前药”表示能够在体内转化为式(I)化合物的化合物。这样的转化受前体药物在血液中水解或在血液或组织中经酶转化为母体结构的影响。本发明前体药物类化合物可以是酯，在现有的发明中酯可以作为前体药物的有苯酯类、脂肪族酯类、酰氧基甲基酯类、碳酸酯、氨基甲酸酯类和氨基酸酯类。

药物组合物

本发明提供了适于药用的、包含至少一种本发明所述的活性化合物的药物组合物。该药物组合物还可以进一步包含药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂、辅剂、媒介物或其组合。所述药物组合物对心肌梗死具有预防和治疗作用，可用于预防和治疗心肌缺血。

本发明化合物或药物组合物的施用方式没有特别限制，代表性的施用方式包括但不限于：口服、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)和局部给药。

用于口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在这些固体剂型中，活性化合物与至少一种常规惰性赋形剂(或载体)混合，或与下述成分混合：(a)填料或增容剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(b)粘合剂，例如，羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；(c)崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐、和碳酸钠；(d)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；和(f)润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或其混合物。胶囊剂、片剂和丸剂中，剂型也可包含缓冲剂。

除了这些惰性稀释剂外，制剂也可包含助剂，如乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香料。

用于肠胃外注射的制剂可包含生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，和用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。适宜的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。

用于局部给药的本发明化合物的剂型包括软膏剂、散剂、贴剂、喷射剂和吸入剂。活性成分在无菌条件下与生理上可接受的载体及任何防腐剂、缓冲剂，或必要时可能需要的推进剂一起混合。

可将本发明化合物以单个每日剂量形式给药，或每日总剂量可分成每日两次、三次或四次剂量给药。此外，可以经鼻内的形式经由局部使用适宜的鼻内工具给予本发明化合物，或经由本领域普通技术人员熟悉的透皮贴片给予本发明化合物。为了以透皮传递系统的形式给药，在整个给药方案中给药剂量当然将是连续的而间歇性的。

对于本发明来说，合适的剂量水平通常为约0.001至100mg每kg患者体重每天，其可以单剂量或多剂量施用。优选地，剂量水平为约0.01至约25mg/kg每天；更优选地，约0.05至约10mg/kg每天。合适的剂量水平可以是约0.01至25mg/kg每天、约0.05至10mg/kg每天或约0.1至5mg/kg每天。在该范围内，剂量可以是0.005至0.05、0.05至0.5或0.5至5.0mg/kg每天。对于口服施用，制剂优选地以片剂形式提供，所述片剂包含1.0至1000毫克活性成分，特别是1.0、3.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、50.0、75.0、100.0、150.0、200.0、250.0、300.0、400.0、500.0、600.0、750.0、800.0、900.0和1000.0毫克活性成分，用于对待治疗患者的剂量的症状调整。化合物可以每天1至4次的治疗方案施用，优选地每天一次或每天两次。

给药的最佳剂量可由本领域专业人员易于确定并且将依具体使用的化合物、给药模式、制剂的强度、给药方式以及疾病状况的进展不同而异。另外，与具体被治疗的患者有关的因素，包括患者年龄、体重、饮食和给药次数，将会产生调整剂量的需求。

本发明化合物可与其他药剂组合或组合使用，所述其他药剂可用于治疗、预防、抑制或改善本发明化合物对其有用的疾病或状况，包括血肌缺血。所述其他药剂可选自：硝酸酯制剂、肾上腺素能β受体阻滞剂、钙通道阻滞剂、抗血小板药物、调整血脂药物或抗凝药物。

通用合成方法

一般地，本发明的化合物可以通过本发明所描述的方法制备得到，除非有进一步的说明，其中取代基的定义如式(I)化合物中所示。下面的反应方案和实施例用于进一步举例说明本发明的内容。

本发明的提供了制备式(I)化合物的方法，所述方法包括以下步骤：

步骤1：使式(II)所示的四氢喹啉羧酸与式(III)所示的吡啶甲酰肼在缩合剂、缚酸剂的存在下反应以生成式(IV)所示的双酰肼化合物：

步骤2：使式(IV)所示的双酰肼化合物在脱水剂的存在下反应以生成式(I)化合物：

其中，R₁-R₉的定义如本文所述。

进一步地，所述缩合剂为1-乙基-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)和1-羟基-苯并三氮唑(HOBt)；所述缚酸剂选自吡啶、3-甲基吡啶、4-甲基吡啶或三乙胺。

所述脱水剂为N-(三乙基铵磺酰)氨基甲酸甲酯(伯吉斯试剂)。

有益效果

本发明化合物可有效减少心肌梗死大鼠的心肌梗死面积，并显著降低其血清CK、AST及LDH活性，表明本发明化合物对于心肌梗死具有显著的预防和治疗作用，因此可用于心肌缺血的预防和治疗。

具体实施方式

在下文中更详细地描述了本发明以有助于对本发明的理解。

所属领域的技术人员将认识到：本发明所描述的化学反应可以用来合适地制备许多本发明的其他化合物，且用于制备本发明的化合物的其它方法都被认为是在本发明的范围之内。例如，根据本发明那些非例证的化合物的合成可以成功地被所属领域的技术人员通过修饰方法完成，如适当的保护干扰基团，通过利用其他已知的试剂除了本发明所描述的，或将反应条件做一些常规的修改。另外，本发明所公开的反应或已知的反应条件也公认地适用于本发明其他化合物的制备。

实施例1：(3-(5-(6-(2-甲氧基乙氧基)吡啶-2-基)-1,3,4-噁二唑-2-基)-3,4-二氢喹啉-1(2H)-基)(5-甲基噻吩-2-基)甲酮(化合物OADA-1)

步骤1：将1-(5-甲基噻吩-2-羰基)-1,2,3,4-四氢喹啉-3-羧酸(5.0mmol)和6-(2-甲氧基乙氧基)吡啶甲酰肼(5.0mmol)悬浮于50mL THF中，然后加入EDC(1.6g)、HOBt(1.1g)，再滴入吡啶(3mL)，室温下搅拌反应24小时，过滤，滤饼以四氢呋喃洗涤后得类白色固体，干燥后得双酰肼中间体，不经纯化用于下一步。

步骤2：将上步所得双酰肼悬浮于50mL干燥的四氢呋喃溶液中，加入N-(三乙基铵磺酰)氨基甲酸甲酯(伯吉斯试剂)(2g)，升温回流反应4小时，冷却后过滤，收集滤液，减压蒸干，加入二氯甲烷(50mL)，甲醇(10mL)和水(50mL)，搅拌10分钟后分去水相，收集有机相，减压浓缩至干，无水乙醇重结晶后得白色固体产物即目标化合物2.08g，二步总收率87.3％。

质谱(ESI)：477.15[M+H]⁺

元素分析：理论值C,63.01；H,5.08；N,11.76；O,13.43；S,6.73

实测值C,63.21；H,5.24；N,11.57；O,13.31；S,6.67

氢谱(400MHz，DMSO)δ7.81(t,1H),7.74(d,1H),7.41(d,1H),6.91-7.29(m,5H),6.54(d,1H),4.35(t,2H),3.79(t,2H),3.68(m,1H),3.35(d,2H),3.25(s,3H),2.92(t,2H),2.31(s,3H)。

实施例2：(3-(5-(3,5-二溴吡啶-2-基)-1,3,4-噁二唑-2-基)-3,4-二氢喹啉-1(2H)-基)(1-甲基吡咯烷-3-基)甲酮(化合物OADA-2)

采用与实施例1类似的方法合成，用1-(1-甲基吡咯烷-3-羰基)-1,2,3,4-四氢喹啉-3-羧酸代替1-(5-甲基噻吩-2-羰基)-1,2,3,4-四氢喹啉-3-羧酸，用3,5-二溴吡啶甲酰肼代替6-(2-甲氧基乙氧基)吡啶甲酰肼，获得目标化合物，二步总收率79.5％。

质谱(ESI)：546.01[M+H]⁺

元素分析：理论值C,48.28；H,3.87；Br,29.20；N,12.80；O,5.85

实测值C,48.41；H,3.99；Br,29.05；N,12.71；O,5.84。

实施例3：2-(1-己基-1,2,3,4-四氢喹啉-3-基)-5-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-1,3,4-噁二唑(化合物OADA-3)

采用与实施例1类似的方法合成，用1-己基-1,2,3,4-四氢喹啉-3-羧酸代替1-(5-甲基噻吩-2-羰基)-1,2,3,4-四氢喹啉-3-羧酸，用5-(三氟甲基)吡啶甲酰肼代替6-(2-甲氧基乙氧基)吡啶甲酰肼，获得目标化合物，二步总收率81.4％。

质谱(ESI)：431.20[M+H]⁺

元素分析：理论值C,64.17；H,5.85；F,13.24；N,13.02；O,3.72

实测值C,64.05；H,5.91；F,13.07；N,13.14；O,3.83。

实施例4：3-(5-(4-乙基吡啶-2-基)-1,3,4-噁二唑-2-基)-N,N-二甲基-3,4-二氢喹啉-1(2H)-甲酰胺(化合物OADA-4)

采用与实施例1类似的方法合成，用1-(二甲氨基羰基)-1,2,3,4-四氢喹啉-3-羧酸代替1-(5-甲基噻吩-2-羰基)-1,2,3,4-四氢喹啉-3-羧酸，用4-乙基吡啶甲酰肼代替6-(2-甲氧基乙氧基)吡啶甲酰肼，获得目标化合物，二步总收率83.7％。

质谱(ESI)：378.19[M+H]⁺

元素分析：理论值C,66.83；H,6.14；N,18.55；O,8.48

实测值C,66.59；H,6.30；N,18.42；O,8.69。

效果实施例1：体内抗心肌缺血作用研究

采用急性心肌梗死模型，通过测量心肌梗死大鼠的CK、AST、LDH和MIS进行所述研究。

将化合物OADA-1至OADA-4分别用5％DMSO，2％Tween80及93％的生理盐水配制成15mg/ml的混悬药液，使用前超声混匀；各大鼠均给予200μl/100g的给药体积，给药剂量均为25mg/kg·d。

取雌雄各半、体重为190±10g的雄性SD大鼠60只进行适应性饲养，一周后按照体重水平随机平均分组，分别为假手性组、模型组和给药组(OADA-1至OADA-4组)，每组10只。其中，OADA-1至OADA-4组分别灌胃化合物OADA-1至OADA-4，剂量25mg/kg·d×3d。作为对比，假手术组和模型组灌胃同等体积的溶剂。在最后一次给药后30min将OADA-1至OADA-4组和模型组大鼠用乙醚麻醉，开胸找出左冠状动脉前降支，于左心耳下2～3mm处用0号线立即结扎之，将心脏送回胸腔，迅速挤出胸腔内气体，拉紧荷包缝合线结扎以关闭胸腔，整个开胸时间不超过30秒，假手术组不结扎而只置手术线。结扎冠脉24h后，以戊巴比妥钠30mg/kg腹腔静脉麻醉，腹主动脉插管取血，用COBAS-FARA自动生化分析仪测血清CK、AST及LDH活性。取血后剖取大鼠心脏，用生理盐水洗净心腔内积血，去掉心房组织及脂肪，称重，将左心室心肌横切4～5片，然后浸入N-BT磷酸缓冲液中，置37℃恒温水浴，待染色完全后取出，正常组织染色，缺血组织不染色。切下缺血心肌称重，用缺血心肌与左心室湿重的百分比计算心肌梗死面积(MIS)。用SPSS 10.0统计软件处理实验数据，以均数±标准差(x±s)表示，多组间比较采用方差分析，两组间比较采用t检验。结果示于以下表1中：

表1：心肌梗死大鼠的CK、AST、LDH、MIS

组别	CK(u/L)	AST(u/L)	LDH(u/L)	MIS(％)
					假手性组	642.49±64.81*	722.48±80.26*	1509.93±243.55**	2.80±0.54**
模型组	1150.80±138.18	1046.56±120.33	2528.72±338.21	32.03±3.42
					OADA-1	691.29±70.34*	752.05±79.35*	1661.49±204.58**	19.31±2.39*
OADA-2	680.16±69.88*	726.79±80.21*	1642.16±210.15**	17.81±2.05*
					OADA-3	711.10±75.19*	761.64±85.64*	1663.45±198.77**	21.23±2.57*
OADA-4	703.54±74.15*	758.92±82.39*	1694.39±225.46**	20.27±2.63*

注：与模型组相比，*P<0.01，**P<0.001

试验结果表明，模型组大鼠的心肌梗死面积以及血清CK、AST及LDH活性与假手术组相比均显著增加，表明急性心肌梗死模型建模成功。而与模型组相比，化合物OADA-1至OADA-4组的大鼠显示出明显缩小的心肌梗死面积和显著降低的血清CK、AST及LDH活性，提示本发明化合物对于心肌梗死具有显著的预防和治疗作用，因此可用于心肌缺血的预防和治疗。

以上描述了本发明优选实施方式，然其并非用以限定本发明。本领域技术人员对在此公开的实施方案可进行并不偏离本发明范畴和精神的改进和变化。

Claims (11)

1.一种式(I)化合物或其药学上可接受的盐或互变异构体：

其中：

R₁选自C1-6烷基、卤代C1-6烷基或-COR’；

R’选自C1-4烷基、C1-4烷基氨基、二(C1-4)烷基氨基、C1-4烷氧基、5-7元杂环基，其中，所述C1-4烷基、5-7元杂环基任选被1-3个选自卤素、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、羟基、硝基、氰基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷氧基的基团所取代；

R₂、R₃、R₄、R₅各自独立地选自氢、卤素、硝基、氰基、C1-6烷基或C1-6烷氧基；

R₆、R₇、R₈、R₉各自独立地选自氢、卤素、硝基、氰基、C1-6烷基或C1-6烷氧基，其中，所述C1-6烷基、C1-6烷氧基任选被1-3个选自卤素、羟基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷氧基的基团所取代。

2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，R₁选自己基或-COR’，R’选自二甲氨基、5-甲基-噻吩-2-基或1-甲基-吡咯烷-3-基。

3.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述R₂、R₃、R₄、R₅为氢。

4.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述R₆、R₇、R₈、R₉各自独立地选自氢、溴、甲氧基乙氧基、三氟甲基或乙基。

5.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述化合物选自：

6.一种药物组合物，包含至少一种根据权利要求1所述的式(I)化合物或其药学上可接受的盐或互变异构体，以及药学上可接受的载体、赋形剂或其组合。

7.根据权利要求6所述的药物组合物，其特征在于，所述赋形剂为稀释剂。

8.根据权利要求1所述的式(I)化合物或其药学上可接受的盐或互变异构体或者根据权利要求6所述的药物组合物在制备药物中的应用，所述药物用于预防和治疗心肌缺血。

9.一种制备根据权利要求1所述的式(I)化合物的方法，所述方法包括以下步骤：

步骤1：使式(II)所示的四氢喹啉羧酸与式(III)所示的吡啶甲酰肼在缩合剂、缚酸剂的存在下反应以生成式(IV)所示的双酰肼化合物：

步骤2：使式(IV)所示的双酰肼化合物在脱水剂的存在下反应以生成式(I)化合物：

其中，R₁-R₉的定义如权利要求1中所述。

10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，步骤1中所述缩合剂为1-乙基-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)和1-羟基-苯并三氮唑(HOBt)；所述缚酸剂选自吡啶、3-甲基吡啶、4-甲基吡啶或三乙胺。

11.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，步骤2中所述脱水剂为N-(三乙基铵磺酰)氨基甲酸甲酯(伯吉斯试剂)。