TWI242433B - Inhaled combination and pharmaceutical composition comprising a selective PDE4 inhibitor and an adrenergic beta2 receptor agonist - Google Patents

Description

1242433 玖、發明說明 (發明說3㈣明：㈣所屬遞領域、編術、内容、：^|㈣ 【發明所屬^技術領】 發明領域 〜本發明係、有關選擇性簡4抑制割與腎上㈣性々2接 5受器㈣劑之吸入性組合，本發明係關於醫藥組成物，包 括投藥裝置以及關於此種藥物組合之用途。

【先前技術]I 發明背景 選擇性P D E 4抑制劑與腎上腺激性万2接受器激動劑之 組合可用於治療呼吸道阻塞及其它發炎疾病，特別呼吸道 阻塞疾病氣喘、慢性阻塞性肺疾（c〇PD)及其它可能因支 礼官反射、發炎、支氣管過度敏感以及支氣管痙攣而惡化 之阻塞性呼吸道疾病。該藥物組合特別可用於治療c〇pD。 可使用本發明治療之特殊疾病例如包括呼吸道疾病氣 15喘、急性呼吸窘迫症候群、慢性肺發炎病、支氣管炎、慢 性支氣管炎、慢性阻塞性肺（呼吸道）疾病及矽肺病，以及 免疫系統疾病（例如過敏性鼻炎及慢性竇炎）。 3 ’，5’-環狀核苷酸磷酸二酯酶（pDEs)包含一大類酶， 被區分為至少十一個不同家族，各種酶家族之結構、生物 20化學及藥理學彼此有別n固家族之酶常稱作同功酶 (isoenzymes或iS0zymes)。此類共包括多於十五種基因產物 ，由產物之不同剪接及轉譯後處理獲得進一步多樣化變化 。本發明主要係有關四個PDEs家族亦即PDE4A、pDE4B、 PDE4C及PDE4D之四種基因產物。此等酶合稱為1>]〇£4同 1242433 玖、發明說明 功酶家族（PDE4s)之同質異形體或亞型。 PDE4S之特徵為第二信使環狀核苷酸亦即腺苷3，,環 狀一磷酸（cAMP)具有選擇性高度親和力水解分解，且以^ 羅麗普蘭（rolipram)抑制作用敏感為其特徵。近年來已經發 5現多種PDE4s之選擇性抑制齊卜由f亥抑制作用所得之有利 藥理效果顯示於多種疾病模式：例如參考下〇卬心等人，環 境衛生展望102補遺10, 79_84, 1994; Du*—等人，醫藥 化學期刊39 120-125, 1996; Schneider等人，藥理生物化學 表現 50 21 1-217，1995; Banner 及 Page，英國藥理期刊 114 93-98, 1995; Barnette等人，藥理實驗治療學期刊273 679, 1995; Wright等人「cp，633 一種選擇性鱗酸二醋酶斗 抑制劑之差異活體内及試管内支氣管鬆弛劑活性」，加拿 大生理藥理學期刊75 1001-1〇〇8, 等人「 KF 195 14 -種破酸二酯酶4及i抑制劑之抗發炎及支氣管擴 15張劑性質」，歐洲藥理期刊332 97_1〇7, 1997;以及勵搏 人「新穎強力選擇性碟酸二酯酶4抑制劑作為抗氣喘劑： 一系列1-咄啶基萘衍生物之合成與生物活性」，醫藥化學 期刊 42 1088-1099, 1999。 腎上腺激性錢受器出現於交感神經系統。至少有兩 2〇型接受器。腎上腺激性糾接受器出現於心臟，扮演透過 激動劑腎上腺素及新腎上腺素的作用而調節心搏率的角色 月上腺激性0 2接受器存在於肺臟之多個細胞類型⑽如 呼吸道平滑肌細胞、上皮細胞與多種發炎細胞），腎上腺 /放f生石2接文為激動劑為有效支氣管擴張劑，可造成呼吸 1242433 玖 '發明說明 10 15 道平滑肌的鬆弛。擬交感神經胺類長期用於治療以部分 逆性呼吸道縮窄為特徵之慢性呼吸道疾病（例如c〇pD及氣 喘），首先係以靜脈注射腎上腺素之形式用作為支氣管擴 張劑。後來使用吸入性/3腎上腺激性藥劑例如埃索普拿林 (isoprenaline)，該種藥劑對0 2接受器比占丨接受器為相對 非選擇性，因此於有效支氣管擴張劑劑量時造成心搏過速 。更為晚近使用吸入性/3腎上腺激性劑例如沙布塔莫 (salbUtamol)，該藥劑對点2接受劑較具有選擇性但作用時 間紐。吸入性万腎上腺激性劑佛莫特羅㈦⑽咖丨），队 [2-經基-5仆經基-2_((2♦甲氧基笨基）小甲基乙基）胺基 ):乙基）笨基]甲酸胺以及沙美特羅（salmeter〇1)對万2接受: 較具有選擇性且作用時間較長。 今日出乎意外地發現特殊選擇性PDE4抑制劑與腎上 腺4性/5 2接文器激動劑的組合比較單獨使用任一種藥劑 或比較其它已知的組合，用於治療阻塞性啤吸道以及其它 發炎疾病可提供更顯著效果。該組合之優點係對透過最適 合疾病病理之機轉，亦即腎上腺激性仰妾受器激動現象 ’連同有效抑制不當發炎而對呼吸道的口徑提供最理想控 制。错此方式經由校正驅使咳漱、黏膜產生以呼吸困難之 呼吸道神經不當反射而控制疾病症狀。經由透過吸入途徑 投予腎上腺激性_器激動劑與選擇性咖抑制劑的 ^合，可實現各類效果而不會造成非期望的周邊效應。此 本毛—月之心殊組合結果比任—類藥劑單獨使用時最大 ，劑量可獲得出乎意外的協同性作用，產生更高效果。 20 1242433 玖、發明說明 【明内溶^】 口此本务明提供一種吸入性組合，包含（a) —種式（I)選 擇性PDE4抑制劑

N—N (I) 5或其醫樂可接受性鹽或溶劑合物，其中： R1為Η、（cvc6)烷基、（Crc6)烷氧基、（c2_c4)烯基、苯基 、_n(ch3)2、（C3-C6)環烷基（Crc3)烷基或（CrC6)醯基，其 中該烧基、笨基或烯基可以至多兩個_〇H、（crc3)烷基或-C F3基或至多三個_原子取代； 10 R2及R3各自分別選自Η、（crc14)烷基、（crc7)烷氧基（cv C7)烧基、（c2-c14)烯基、（C3-C7)環烷基、（C3-C7)環烷基 (CrC2)烧基、飽和或未飽和（c4-C7)雜環（CH2)n基（其中 、1或2且含有一或二個選自氧、硫、磺醯基、氮組成的組 群之基團作為雜原子）以及NR4(此處R4為Η或（CrC4)烷基） 15 組成的組群；或式（II)基

其中a為1至5之整數；b及c為0或1 ; R5為Η、-OH、（Ci-C5) 烷基、（C2-C5)烯基、（CrC5)烷氧基、（C3-C6)環烷氧基、鹵 原子、_CF3、-C02r6、_c〇nr6r7、_NR6r7、_N〇2、或 _ 1242433 玖、發明說明 S02NR6R7其中R6及R7各自分別為Η或（CrC4)烷基；z為-0- -S-、-S02-、-C0-或-N(R8)-其中 R8 為 Η 或（CrC4)烧基 以及Y為視需要經以至多兩個（Crc7)烷基或（C3-C7)環烷基 取代之（CrC5)伸烷基或（C2-C6)伸烯基；其中烷基、烯基、 環烧基、烷氧烷基或雜環基各自可以1至丨4個且較佳1至5 個（CVC2)烧基、CF3或鹵原子取代；以及 R9及R1G各自分別係選自Η、（CrC6)烷基、（CrC6)烷氧基、 (C6-C1())芳基及（C6-C1())芳氧基組成的組群； 以及（b)—種腎上腺激性02接受器激動劑。 此外’本發明提供一種如前文定義之式⑴選擇性 PDE4抑制劑以及一種腎上腺激性^接受器激動劑之吸入 性組合用作為藥物之用途。 15 此外，本發明提供一種如前文定義之式（I)選擇性 P D E 4抑制劑與腎上腺激性D接受器激動劑之吸入性组合 供同時、循序或分開投藥用於治療呼吸道阻塞或其它發炎 疾病。 式⑴廷擇性PDE4抑制劑、腎上腺激性们接受琴激 及藥物可接受彳生睡、# $丨 又叫劑、稀釋劑或載劑藉吸入途徑投藥用 於…料吸道阻塞或其它發炎疾病。 此外本發明提供一種如前 抑制則忠跃 文疋義之式（I)選擇性PDE4 ^或月上腺激性$ 2接受哭兴私 途…^ 妾又…放動劑用於製造藥物之用 藥劑，用於、λ * 循序或分開投予兩種 用於治療呼吸道阻塞或其它發炎疾病。 20 1242433 玖、發明說明 :此外，本發明提供—種治療呼吸道阻塞或其它發炎疾 病t方法，包含藉吸人途徑投予需要此種治療之哺乳類， 擇性 "循序或77開投予有效量之如前文定義之式⑴選 pDE4抑制制以及腎上腺激性$ 2接受器激動劑。 /此外’本發明提供„種吸人裝置’該裝置係用於同時 、循序或分開投予如前文定義之式⑴選擇性PDE4抑制劑

以及腎上腺激性万2接受器激動齊卜用於治療呼吸道阻 基或其它發炎疾病。 式】 選擇性PDE4抑制劑為對pDE4同功酶具有比全部其它 已知PDE同功酶更高親和力之抑制劑。較佳根據本發明之 選擇性PDE4抑制劑對PDE4同功酶之親和力比較對其它 PDE4同功酶之親和力至少高1〇〇倍。

較佳式⑴化合物包括其中Ri為甲基、乙基或異丙基之 15化合物；以及其中R3為（CVC6)烷基、（c2_c6)烯基、（C3_C?) 環烧基、（Cs-C7)環烧基（CVC6)烧基或苯基，其視需要㉛以 1 或 2個選自 Η、-OH、（CVC5)烷基、（c2-c5)烯基、（Ci_C5) 烷氧基、鹵原子、三氟曱基、-co2r6、-C〇nr6r7 、-nr6r7、-no2、或-so2nr6r7(其中R6及r7各自分別為H 20 或（CrC4)烷基）組成的組群之基團取代之化合物。 較佳個別式（I)化合物包括： 9-環戍基一鼠-7-乙基-3-本基-911-〇比°圭弁4 三嗤并[4,3- α ]吼σ定； 9 -環戊基-5，6-二氫-7-乙基-3-(口失喃-2-基）-9Η- 口比σ坐并[3 4 10 1242433 玖、發明說明 (：]-1,2,4-三嗤并[4,3-0]吼咬； 9-壞戍基- 5,6 -二鼠-7-乙基-3-(2- 口比σ定基）-9h」比哇并[3，4 -c]-1，2,4-三唾并[4,3-“]口比咬； 9-環戊基-5,6-二氫-7-乙基-3-(4-吼啶基）-9H-吡唑并[3，4-c]-5 1，2,4-三唑并[4,3-α ]吼啶； 9-環戊基-5,6-二氫-7-乙基-3-(3-噻吩基）-9Η-咄唑并[3,4-c]-1，2,4-三哇并[4,3-α]σ 比 σ定； 3-嶋基-9-環戊基-5,6-二氫-7-乙基-9Η-咄唑并[3,4-c]-l，2,4-三σ坐并[4,3- α ]吼σ定； 10 9-環戊基-5,6-二氫-7-乙基-3-丙基-9Η-吼唑并[3,4-c]-l,2,4- 三嗤并[4,3- α ]°比σ定； 3,9-二環戊基-5,6-二氫-7-乙基-911-口比唑并[3,4<]-1，2,4-三 嗤并[4,3- α ]口比σ定； 9-環戊基-5,6-二氫-7-乙基-3-(1-甲基環己-1-基）-9Η-吼唑并 15 [3,4-(：]-1，2,4-三唑并[4,3-6^]吼啶； 3-(第三丁基）-9-環戊基-5,6-二氫-7-乙基-9仏吼唑并[3,4-(：]-1，2,4-三唑并[4,3-α ] 口比啶； 9-環戊基-5,6-二氫-7-乙基-3-(2-甲基笨基）-9Η-吼唑并[3,4-(：]-1，2,4-三°坐并[4,3-(^]口比0定； 20 9-環戊基-5,6-二氫-7-乙基-3-(2-甲氧基苯基）-9Η-吼唑并 [3,4<]-1，2,4-三唑并[4,3-〇!]吼啶； 今-環戍基^^-二鼠-了-乙基^-^基吩-二-基卜今^^-口比嗤弁!^，々- (：]-1，2,4-三嗤并[4,3-6^]口比0定； 3-(2-氣苯基）-9-環戊基-5,6-二氫-7-乙基-9H-。比唑并[3,4-c]- 1242433 玖、發明說明 1，2,4-三唑并[4,3_α ]口比啶； 袠戊基5,6-一氫-7-乙基-3-(2-碘苯基）_9^1-吡唑并[3,4<]-1，2,4-三唑并[4,3-α ]吼啶； 9-%戊基-5,6-二氫1乙基-3_(2-三氟f基苯基）领令坐并 [3,4-c]-l，2,4-二唑并[4,3-α]吼唆；以及 5,6-υ_乙基‘氟苯基）_3_(1_甲基環己小基）领-吼 唾并[3,4<]-1，2,4-三唑并[4,3-叶比啶；

及其w藥可接受性鹽及溶劑合物。 特佳式⑴化合物包括9_環戊基_5,6-二氫乙基_3_(2_ 10噻吩基）抓吼唾并从…’以-三唾并^叶比咬以及^ %戊基-5,6-二氫-7-乙基第三丁基）_9Η-咄唑并[He]· 1，2,4-三唑并[4,3-α；κ啶及其醫藥可接受性鹽及溶劑合物。 式⑴化合物之合成述於W〇_A_96/394〇8。

較佳根據本發明組合使用之腎上腺激性/3 2接受器激 15動劑為-種選擇性腎上腺万2接受器激動劑，換言之對腎 上腺激性石2接受器比對所有其它已知腎上腺激性万激動 有更^親和力α較佳此種選擇性腎上腺激性点2接受 器激動劑對腎上腺激性石2接受器激動劑之親和力比較其 對其它腎上腺激性万接受器之親和力至少高1〇〇倍。 2〇較佳用於本發明之腎上腺激性石2接受器激動劑包括 沙美特羅、佛莫特羅及其醫藥可接受性鹽及溶劑合物。 特佳組合包括·· 9-環戊基-5,6-二氫_7_乙基_3_(2_甲基苯基）卻_対并[π c]-l，2,4-二唾并[4,3 - α ]口比啶或J：嫛溢可蛀、◊以矢 」疋X，、西市可接叉性鹽或溶劑合 12 1242433 玖、發明說明 物以及沙美特羅或其醫藥可接受性鹽或溶劑合物； 9-環戊基-5,6-二氫-7-乙基-3-(2-甲基苯基）-9Η^比唑并[3,4-c]-l，2,4-三唑并[4,3-α ]吼啶或其醫藥可接受性鹽或溶劑合 物以及佛莫特羅或其醫藥可接受性鹽或溶劑合物； 5 9-環戊基-5,6-二氫-7-乙基-3-(第三丁基比唑并[3,4-c]- 1，2,4-三唑并[4,3- α ]吼啶或其醫藥可接受性鹽或溶劑合物 以及沙美特羅或其醫藥可接受性鹽或溶劑合物；以及 9-環戊基-5,6-二氫-7-乙基-3-(2-第三丁基）-9Η·-比唑并[3,4-c]-1，2,4-三唑并[4,3- α ]啦啶或其醫藥可接受性鹽或溶劑合 10 物以及佛莫特羅或其醫藥可接受性鹽或溶劑合物。 根據本發明使用之選擇性PDE4抑制劑或腎上腺激性 /3 2接受器激動劑可視需要地以醫藥可接受性鹽或溶劑合 物形式使用。此等鹽可為酸加成鹽或鹼鹽。 適當酸加成鹽係由可形成無毒鹽之酸生成之酸加成鹽 15 ，例如為氫氯酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、硫酸 氫鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、磷酸氫鹽、乙酸鹽、順丁烯二酸 鹽、反丁烯二酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、葡萄 糖酸鹽、丁二酸鹽、蔗糖酸鹽、苯曱酸鹽、甲烷磺酸鹽、 乙烷磺酸鹽、笨磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽及巴母酸鹽 20 (pamoate)等鹽類。 適當驗鹽係由可形成無毒鹽之驗生成，例如為鈉、if 、鋁、鈣、鎂、鋅及二乙醇胺等鹽類。 有關適當鹽類之綜論可參考Berge等人，製藥科學期 子丨J，逆，1-19, 1977。 13 1242433 玖、發明說明 根據本發明使用之選擇性PDE4抑制劑及腎上腺激性 /5 2接叉裔激動劑之醫藥可接受性溶劑合物或其鹽包括其 水合物。 本發明之選擇性PDE4抑制劑及腎上腺激性冷2接受器 激動劑可以一或多種多形性形式存在。 本發明之選擇性PDE4抑制劑及腎上腺激性0 2接受器 激動劑（後文稱作「本發明化合物」）可含有一或多個非對 稱碳原子，因此可以兩種或兩種以上之立體異構形式存在 φ (例如R,R，佛莫特羅為較佳具體實施例）。若此種化合物含 有烯基或㈣基，則也出現順/反（或Z/E)異構化現象。本 發明包括本發明化合物之個別立體異構物，以及若屬適當 ，包括其個別互變異構形連同其混合物。

本發明也包括全部適當本發明化合物或其醫藥可接受 。本發明化合物或其醫藥可接受性鹽 一個原子由另一個原子置換， 序’但具有與通常天然所見之 性鹽之同位素變化。本發明化名 同位素變化定義為其中至少一伯 該另一個原子具有相同原子序， 14 1242433 玖、發明說明 10 原子里不同的原子量。可攙混於本發 接X性鹽之同位丰4 γ $ G括虱、碳、氮、氧、磷 同位素例如分別為2Η、3η、13匸、l4〇 ' by、 、’一Ρ、35§、丨 万 ％ 4 C1。本發明化合物及其醫藥可接受把 W化合物夂其醫藥可 鼠及氯 70、：δ〇 里之某些同位素變化例如其中攙混3Η或14C之放射性同位 f變化可用於藥物及/或酶基質組織分佈研H化亦即 H以及石反-14亦即Uc同位素由於容易製造且容易偵測故為 車乂仏此外以a亦即2 H同位素取代由於代謝穩定性增高故 可獲得治錢勢，例如活體㈣半生期延長、或劑量需求 減低，因此以氘等同位素取代於某些情況為較佳。

15 可使用本發明組合治療之疾病類別包括但非限於氣喘 、k性或急性支氣管縮窄、慢性支氣管炎、小呼吸道阻塞 肺氣腫、k性阻塞性肺疾（C0PD)，關聯慢性支氣管炎 、肺氣腫或呼吸困難之C0PD、以及以不可逆性進行性呼 吸道阻塞為特徵之COPD。

氣喘 可使用本發明治療劑組合治療之最重要呼吸系統疾病 之一為氣喘，氣喘是一種慢性病，全球日漸普及，而其特 徵為間歇性可逆性呼吸道阻塞、呼吸道反應性過高及發炎 20 。氣°而之起因至今尚未確定，但氣喘最常見的病理表現是 呼吸道發炎’即使輕度氣喘病人的呼吸道也明顯發炎。此 種發炎驅動呼吸道反射，結果導致血漿蛋白外滲、呼吸困 難及支氣管縮窄。基於支氣管之生物剖檢以及灌洗研究， 明白顯示氣喘涉及肥大細胞、嗜伊紅細胞以及T淋巴細胞 15 1242433 玖、發明說明 浸潤於病人呼吸道。特應性氣喘病病人之支氣管肺泡灌洗 (BAL)顯示介白f (IL)_3、IL_4、u以及粒狀細胞/巨噬細 胞-群落刺激因子（GM_CSF)活化，提示存在有仿τ助手細 胞2 (Th-2) T細胞族群。 5 本發明之治療劑組合可用於治療特應性及非特應性氣 口而。「特應性」-詞表示一種遺傳上容易對環境常見抗原 發展出第I型（即刻型）過敏反應。特應性之最常見臨床表徵 為匕敏11鼻火’支氣官氣喘、異位性皮炎以及食物過敏車交 · 非常見。如此「特應性氣喘」一詞用於此處作為「過敏性 1〇氣喘」之同意字，換言之支氣管氣喘為敏化個體之過敏表 欲非彳寸應性氣喘」一詞用於此處表示全部其它氣喘， 特別主要為「真性」氣喘’真性氣喘係由於多項因素包括 激烈運動、刺激性粒子、心理壓力等因素所激發。 慢性阻塞性肺疾（C〇pd)

15 本發明治療劑之組合進一步可用於治療COPD或COAD 包括關聯慢性支氣管炎、肺氣腫或呼吸困難之c〇pD。 籲 COPD係以可逆性不良之進行性呼吸道阻塞為特徵。慢性 支氣管炎結合大型軟骨性呼吸道黏膜下層之黏液分泌腺過 度增生與肥厚。端末細支氣管常見杯狀細胞過度增生、黏 20膜及黏膜下層發炎細胞浸潤、水腫、纖維變性、黏膜阻塞 以及平滑肌增加。小型呼吸道已知為呼吸道阻塞的主要位 置。肺氣腫係以肺泡壁毁壞以及肺臟喪失彈性為特徵。已 經識別出多項與COPD之發生相關的風險因子。已經明確 瞭解抽私與COPD間的關聯。其它風險因子包括暴露於煤 16 1242433 玫、發明說明 灰以及多種遺傳因子。參考Sandford等人，「慢性阻塞性肺‘ 疾之运傳風險因子」歐洲呼吸期刊丨〇丨3 8〇_丨39丨，丨997。 COPD之發生率提高，造成工業化國家人民經濟負擔 顯著加重。COPD本身在臨床上的表徵也有寬廣變化，由 5不會造成病廢失能的單純慢性支氣管炎、至患有慢性呼吸 衰竭之嚴重病人。 如同氣喘’ COPD係以呼吸道發炎為特徵，但出現於 病人之支氣管肺泡灌洗液及痰的發炎細胞是嗜中性細胞以 及巨噬細胞而非嗜伊紅細胞。發炎媒介濃度升高也出現於 10 COPD病人包括IL-8、LTB4及丁 NF_a，此種病人支氣管表 面上皮以及上皮下層被τ淋巴細胞及巨嗤細胞所浸潤。經 由使用/3激動劑以及抗膽鹼激性支氣管擴張劑可對 病人提供症狀的緩解，但疾病的進行仍然維持不變。曾經 使用茶鹼治療COPD，但不太成功，至少部分原因是茶鹼 15可能誘發非期望的副作用。類固醇也無法作為c〇pD的成 功治療劑，原因在於類固醇是一種相對無效之抗發炎劑。 如此使用本發明治療劑之組合來治療（：〇]?]：)以及其相 關且包括之阻塞性呼吸道疾病代表業界的一大進展。本發 明非僅園限於任何特定作用模式，或囿限於利用本發明治 20療刎組合彳隻得預定治療目的方式之任何假說。 支氣管炎及支氣管擴張症 根據前述本發明之治療劑組合所擁有之特殊多樣化抑 制活性，本發明之治療劑組合可用於治療任何類型、任何 病因或任何病變之支氣管炎，例如包括急性支氣管炎，魚 17 1242433 坎、發明說明 S'生支氣官炎之病程短而嚴重，係由於暴露於寒冷、呼吸刺 激性物質或急性發炎所引起；卡它性支氣管炎，屬於一型 帶有大量黏膜膿性分泌物之急性支氣管炎；慢性支氣管炎 ’是一種長期連續的支氣管炎形式，由於急性支氣管炎或 5 慢性全身性疾病的反復攻擊，經過一段沉寂階段後，或多 或少顯著傾向於復發，係以咳嗽、少量或大量咳痰、以及 以肺臟組織之二次變化為其特徵；乾性支氣管炎，係以痰 分泌量少為特徵；感染性氣喘性支氣管炎，是氣喘病人於 乎吸道感染後發展出支氣管痙攣症狀為特徵之症候群；生 10痰性支氣管炎，是一種結合生痰性咳嚷:之支氣管炎。 本發明之治療劑組合治療特應性氣喘或非特應性氣喘 、COPD或其它慢性發炎性呼吸道疾病之功效可經由使用 業界已知之多種不同模式包括後述模式獲得驗證。 _ cAMP不僅涉及平滑肌的鬆弛，同時 15對呼吸道平滑肌的增生具有整體抑制作用，兩項作用皆可 能來自於本發明之酬4成分升高cAMp。σ乎吸道平滑肌肥 厚以及過度增生可藉cAMP調節，此等病情為慢性氣喘之 常見形態學特徵。 遂試驂支氣管痼蠻活槌 十，々_ 一· -_本發明之治療劑組合 20 可造成天竺鼠氣管平滑肌鬆弛^ ^ ^ ^ j於後述试驗程序獲得驗 證。天竺鼠（350·克）以戊基巴比妥鈉（丨_克/千克腹内 ，射）殺死。將氣管切開且切下—片長Μ厘米之氣管。氣 官於父替軟骨板於橫向方向切片 乃因而產生深3-5毫米之 組織環。拋棄近端環及遠端環。 们別％係直立架設於不銹 18 1242433 玖、發明說明 鋼支架上，其中一環係固定於器官浴底部，而另一環係接 到等長換能器。 環泡在克雷白氏（Krebs)溶液（組成β μ :碳酸氫鈉25 ;氣化鈉113 ;氯化鉀4.7 ;硫酸鎂•七水合物i 2 ;磷酸二 5氫鉀L2 ;氯化鈣2.5 ;葡萄糖11·7)，置於37t且以氧氣/二 氧化碳（95:5, v/v)通氣。藉此方式準備之環藉電場刺激而 收縮。為了確定解除痙攣活性，本發明之治療劑試驗組合 溶解於生理食鹽水，以5分鐘間隔以遞增數量添加至器官 洛’獲得累進濃度-功效曲線。 1〇 丽述試驗模式中，本發明之治療劑之組合通常可於 0.001至1.0 /z Μ範圍之濃度抑制電場刺激天竺鼠氣管環製 備品之收縮。 過度敏本發明之治療劑組合可防 止呼吸道對有害刺激物之反應性增冑，也稱作1氣管過敏 15 ，該功效係由測定藥劑對天竺鼠肺臟反應性之活性獲得驗 證。成天竺鼠（3〇〇-_克）根據Yead〇n等人，州2，肺臟藥 理學’ 5, 101-U2之方法前處理及製備。啤吸道對多種刺 激物質反應性係於基準線狀態以及於各項處理後監視，各 項處理導致肺臟機轉的改變。試驗物件係藉支氣管内投藥 2〇或於挑釁之前於不同時間藉喷霧投藥。對照動物接受= 前處理’結果導致肺臟反應性提高3_1〇〇倍’該過度S 性可藉本發明之治療劑組合以劑量相關方式封阻。 前述試驗模式中，本發明之治療劑組合通常 至0.3毫克/千克氣管阻塞劑量具有抗發炎活性。 19 1242433 玖、發明說明 人類支氣管鬆弛-癌症手術切下的人類肺臟試樣於3 天内取得。切開小支氣管（内徑約等於2至5毫米）切成小段 ’置於2毫升液態氮儲存安瓿内，安瓿内填裝胎牛血清 (FCS)含有1·8Μ二甲亞颯（DMS〇）及〇.1Μ蔗糖作為防凍劑。 5安訊置於波麗斯達羅（PolyStyrol)盒（11 X 11 X 22厘米）且利 用約〇.6°C/分鐘之平均冷卻速率於維持於_70。〇之冷凍機内 緩慢冷凍。經3-15小時後，安瓿移置液態氮（-196。(：），於 該處儲存至使用時為止。於使用前，組織暴露於經 歷30-60分鐘，隨後將安瓿置於37°c水浴中在2.5分鐘時間 10以内解凍。隨後支氣管段置於37 t含克雷白漢斯力特 (Krebs-Henseleit)溶液Μ :氯化鈉 118，氯化鉀4.7，硫 酸鎂1.2，氯化詞1 2，碟酸二氫卸1 · 2，碳酸氫鈉2 5，葡萄 糖11，EDTA 0.03)之i内清洗，切成環狀，懸浮於ι〇毫升 器官浴於前負載約1克記錄等長張力。透過施加電場刺激 15進一步提高張力，電場刺激已知可誘生呼吸道樣本之神經 活化’透過乙酿膽驗以及其它中性衍生媒介而產生張力。 藉累進添加產生濃度-反應曲線’當前個濃度產生最大效 果時繼續提高濃度。於濃度-反應曲線終點加入馨粟鹼（3 〇〇 // M) ’誘生支氣管環完全鬆弛。此種效果當中1⑼％鬆弛。 20 前述試驗模式中，本發明治療劑組合通常於〇.〇〇 1至 1·〇 // Μ範圍之濃度對人類支氣管環製備品產生濃度相關之 鬆弛效果，較佳具體實施例於5.0 ηΜ至500 ηΜ範圍之濃度 具有活性。 毽誘生.主縮窄之抑制作用_雄鄧肯哈特利 20 1242433 玖、發明說明 10 15 20 iDunkin-Hartley)天竺鼠（400_800克）於實驗前可自由接進食 物及引水，使用戊基巴比妥鈉（1〇〇毫克/千克i.p·[腹内注射 ])麻醉。動物藉肛溫計使用加熱墊維持於37°C，透過氣管 套管使用空氣與氧氣混合物（45:55 v/v)通氣（約8亳升/千克 ，1赫茲）。藉呼吸頻率描記器監視氣管的呼吸，描記器連 接至與呼吸幫浦連接於線上之差壓換能器。胸部的壓力變 化係透過胸内套管使用差壓換能器直接監控，因此可測量 且顯示氣管與胸部間之壓力差異。由空氣流量以及通過肺 臟壓力測量j直，對纟呼吸週期使用數位電子分析儀記算呼 吸迢阻力（汉〖厘米水柱/升/秒）以及順應性（Cddy。使用壓 力換能器由頸動脈記錄血壓及心搏率。 當基線值阻力以及順應性值穩定時，藉靜脈大劑量注 射辣椒素誘生支氣管縮窄的急性發作。辣椒素溶解於 100%乙醇且以磷酸鹽緩衝食鹽水稀釋。當對辣椒素的反 應穩定時’投予本發明之治療劑之試驗組合，對辣椒素的 反應係於投藥2-3次後以10分鐘間隔計算。經歷氣管内或 十二指腸内滴注或靜脈大劑量注射後丨_8小時時間評估支 氣管縮窄的回復。解除支氣管痙攣活性係以輪注辣椒素後 對初期最大阻力（Rd)之抑制百分比表示。ED5q值表示可抑 制辣椒素誘生阻力增高達5〇%之劑量。作用持續時間定義 為支氣管縮窄減少50%或以上之時間，以分鐘表示。對血 投藥後5分鐘測量可降低血壓或心搏率達鳩之劑量。 雨述試驗模式中，本發明治療劑之組合通常於0.001

21 1242433 玖、發明說明 至0.1毫克/千克i_t.[氣管内注射]範圍之劑量具有支氣管擴 張活性。進-步該組合經由氣管内輸送至少對支氣管癌擎 有加成抑制效果，單獨各項成分可抑制觀察得之對照反應 之50%以上。 ~ 5 肺臟之嗜中性細胞被召募 且被活化視為⑶胸及嚴重氣喘之重要病理現象。結果 於動物研究模式抑制此等終點之任一者或二者，證實本發 明之用途。 ' χ 雄威斯達白化症大鼠（15〇_25G克）或雄鄭肯哈特利天竺 亂（400 6GG克）單獨使用試驗物件或藉吸人使用組合或於簡 短的全身麻醉之下藉氣管内（u·)滴注使用單獨試驗物件^ 組合藥物前處理。投予化合物後經小時，隨後動物使 用吸入細菌性脂多則LPS)噴霧劑挑釁，該Lps噴霧劑劑量 足夠誘生隨後1-24小時之嚴重肺臟嗜中性血球增多。嗜中 15 [生血球增多可由支氣管洗液進行細胞數目計算、或測定肺 臟洗液或肺臟組織之嗜中性細胞產物評估。本試驗系統中 ，本發明之治療劑通常於0.0〇〇1至〇1毫克/千克i·,量範 圍具有抗發炎活性。出乎意外地，藥物組合經it•投藥至少 對發炎具有加成的效果，儘管實際上組合成分之一本身並 2〇 ^顯著抗炎效果亦如此。進-步組合成分之一於高劑 量時之抗炎效果可以低劑量組合本發明時觀察得，因而可 減低系統性非期望之副作用。 查敏f生天支_評估本發明之治療劑組合用於 呼吸困難及支氣管痙攣（亦即+吸困難或用力且㈣阻力 22 1242433 玖、發明說明 升高）、以及對於發炎症狀（亦即肺臟嗜中性細胞增多及嗜 伊紅細胞增多）的治療功效，本試驗使用鄧肯哈特利天竺 鼠（體重400-600克）。 本試驗使用之卵白蛋白(EA) V級，結晶及凍乾、氫氧 5化銘及美昆拉明（mePyramine)順丁稀二酸鹽為冑售商品。 挑釁以及隨後之呼吸讀值係於透明塑膠盒（内部尺寸 10x6x4吋）進行。塑膠盒之頭段與尾段分離。使用時將兩 段以夾具失緊在-起，二腔室間利用軟橡膠塾維持氣密封 。經由腔室頭端中心，透過氣密封插入霧化器，塑膠盒各 10端有個出口。將肺呼吸頻率描記器插入塑膠盒一端，轉合 至容積壓力換能器，然後經由適當之耗合器連結至動力描 記器。噴霧抗原時，出口開啟，呼吸頻率描記器與腔室隔 開。然後關閉出口，於呼吸圖形記錄期間連結啤吸頻率描 “與腔室。供挑覺’ 2毫升3%抗原於食鹽水溶液置於各 15喷霧器内M吏用小型隔膜幫浦於1〇㈣以及8升/分鐘流速 由空氣產生氣霧。 天竺鼠藉皮下注射及腹内注射丨毫升含丨毫克卵白蛋白 及2〇〇毫克氫氧化叙於食鹽水懸浮液而被敏化。天竺鼠係 在敏化後之第12日至24日間使用。為了去除反應之組織胺 20成77於使用2笔克/千克美提拉明作氣霧挑覺前分鐘， 天竺鼠接受腹内注射前處理。然後天竺鼠暴露於3%白蛋 白於食鹽水氣霧恰經歷！分鐘時間，然後記錄〇乎吸圖形又 :歷30刀知時間。隨後測定死亡後之肺臟發炎經歷小 犄由乎吸逼，己錄數字測量連續呼吸困難持續時間。 23 1242433 玖、發明說明 本發明之治療劑組合通常係於挑釁、前0.5-4小時藉U. 或藉氣務劑投予。化合物組合溶解於食鹽水或生物相容性 ’合J化合物活性係基於其比較媒劑處理對照組，減少呼 吸困難及支氣官瘦攣症狀之幅度及持續時間及/或降低肺 5臟發炎幅度決定。本發明之治療劑組合之試驗係於一系列 劑量評估，導出EDso, £〇5〇定義為可抑制症狀持續時間達 50%之劑量（毫克/千克）。 本發明之治療劑組合之抗炎活性係經由嗜伊紅 細胞或嗜中性細胞之活化抑制獲得證實。本檢定分析中， 10由非特應性自願者取得血樣（5 0毫升），帶有嗜伊紅i球數 目為約0.06至0·47 X 1〇9升-1。靜脈血採集入含5毫升檸檬酸 三鈉（3.8%，pH 7.4)之離心管。 經過抗凝血處理後的血液使用碟酸鹽緩衝食鹽水（PBS 不含鈣也不含鎂）稀釋（1:1，v:v)’且於5〇毫升離心管層疊 15至15毫升等張性波可（Percoll)(密度ι.〇82_1 085克/毫升， pH 7.4)上。離心（30分鐘，1〇〇〇 X g，2〇 °c)後，小心吸取 出血漿/波可界面之單核細胞及拋棄。 嗜中性細胞/嗜伊紅細胞/紅如球丸粒（約5毫升容積）溫 和再懸浮於35亳升等張氯化銨溶液（氯化銨i55mM ;碳酸 20 氫鉀10mM ; EDTA O.lmM ; 0-4°C )。15分鐘後，細胞於含 胎牛血清（2%，FCS)之PBS洗兩次（10分鐘，400 X g，4。〇。 磁性細胞分離系統用來分離嗜伊紅細胞及嗜中性細胞 。此種系統可根據表面標記分離懸浮液之細胞，此種系統 包含永久磁鐵，系統内放置含可磁化鋼基體之管枉。使用 24 1242433 玖、發明說明 前管柱使用PBS/FCS平衡丨小時，然後透過2〇毫升注射器 以逆行性基準使用冰冷PBS/FCS沖洗。21號皮下注射針: 附於管柱底端，讓U2毫升冰冷緩衝液通過針頭流出。、 粒狀細胞離心後，抽吸出上清液，細胞再度懸浮於 5 1〇〇微升磁粒子（抗CD16單株抗體軛合至超順磁粒子）。嗜 伊紅細胞/嗜中性細胞/抗CD16磁性粒子混合物於冰上培: 4〇分鐘，然後使用冰冷PBS/FCS稀釋成5毫升。細胞懸浮 液緩慢導入管柱頂端，打開龍頭讓細胞緩慢移動入鋼基體 。然後管柱以PBS/FCS (35毫升）洗滌，PBS/FCLh心加至 1〇管柱頂端，不干擾已經被捕捉於鋼基體之經過磁性標記嗜 中性細胞。未加標記的嗜伊紅細胞收集於5〇毫升離心管且 經洗滌（10分鐘，400 X g，4。〇。所得丸粒再度懸浮於5毫 升漢克氏（Hank’s)平衡鹽溶液（HBSS)，因此可於使用前評 估細胞數目及純度。分離管柱由磁鐵中去除，洗提出嗜中 15性細胞洗提分。然後管柱以PBS (50毫升）及乙醇（絕對乙醇 )洗滌及儲存於4°C。 全部細胞使用微細胞計數器計數。添加一滴經過溶菌 酶處理之溶液至樣本，30分鐘後重新計算數目，評估紅血 球的污染。於仙登賽妥斯賓（Shandon Cytospin) 2細胞離心 2〇機（1〇〇彳政升樣本，3分鐘，500 rpm)準備賽妥斯賓 (Cytospin)抹片。此等製備品經染色，藉光顯微鏡檢查差 異細胞數目，檢驗至少500個細胞。藉崔龐藍（trypan bhe) 排除來評估細胞存活率。 嗜伊紅細胞或嗜中性細胞於HBSS稀釋且以M〇 X 1〇3 25 1242433 玖、發明說明 細胞/孔吸量至96孔微力價孔板（MTP)。各孔含有2〇〇微升 樣本包含：1〇〇微升細胞懸浮液；50微升HBSS ; 1〇微升霖 西晶尼（lucigenin) ; 20毫升活化刺激物質；以及2〇微升試 驗化合物。 5 樣本於加入活化刺激物質fMLP (1-10〆M)或C5a (b ΙΟΟηΜ)溶解於二甲亞颯前1〇分鐘，以試驗化合物或媒劑共 同培養’隨後於緩衝液稀釋，故使用之最高溶劑濃度為 1%(於100// Μ試驗化合物）。MTP經攪動而輔助細胞與媒 劑的混合，ΜΤΡ置於照度計上。同時測量各孔之總化學發 10光以及時間曲線經歷20分鐘時間，結果係以任意單位、或 以無試驗化合物存在下之fMLP誘生化學發光的百分比表 示。結果代入希爾氏（Hill)方程式且自動求出IC5〇值。 本發明之治療劑組合通常於〇 _ 〇 〇 〇丨# M至〇 · 5 β M範圍 之濃度於前述試驗方法具有活性，較佳具體實施例中，於 15 〇·1 nM至1〇〇 nM範圍之濃度具有活性。 本發明之治療劑組合之抗炎活性可經由抑制大鼠呼吸 道之血漿外生進一步獲得驗證。本檢定分析中，取氣管組 織，測定血漿外滲程度。本檢定分析係等於其它慢性呼吸 道發炎疾病，但非僅限於C0PD，因此摘要報導於該章節。 2〇 威斯達白化症大鼠（150-200克）或鄧肯哈特利天竺鼠 (450-600克）使用戊基巴比酮鈉麻醉，安裝靜脈與動脈套管 。靜脈（30毫克/千克）投予伊凡氏藍染料來結合血漿蛋白。 ⑺分鐘後氣管内投予試驗劑，10分鐘後靜脈（3微克/千克） 投予辣椒素。30分鐘後取出氣管組織，於甲酿胺内隔夜萃 26 1242433 玖、發明說明 取.貝取方；620奈米之吸光比。若干實驗逆轉給藥順序， 故化合物係於伊凡氏藍及發炎刺激前投藥。 θ σ式’f双模式中，本發明之治療劑組合通常於〇.〇〇 1 至0.1毫克/千克氣管内投藥劑量具有抗炎活性。 、、由$文1明可知，本發明之治療劑組合可用於治療發 人或阻塞n乎吸迢疾病或其它涉及呼吸道阻塞疾病。特別 可用於治療支氣管氣喘。 有鑑於其抗炎活性以及對呼吸道過敏的影響，本發明 之治療劑組合可用於治療，特別預防阻塞性或發炎性呼吸 10道疾病。如此經由連續且常規地投予本發明化合物之組合 經歷-段長時間，可對支氣管縮窄的復發或因阻塞性或發 炎性呼吸道疾病造成的其它交感神經攻擊後果提供先進^ 護^果。本發明化合物之組合也可用於控制、改善或逆轉 此等疾病之基底狀態。 15 彳關其支氣f控張劑活性，本發明之治療劑組合可用 作為支氣管擴張劑，例如用於治療慢性或急性支氣管縮窄 乂及用於症候性治療阻塞性或發炎性呼吸道疾病。 本發明適用之阻塞性或發炎性呼吸道疾病包括氣喘； 塵肺病；慢性嗜伊紅血球增多性肺炎；慢性阻塞性呼吸道 20或肺臟疾病（CGAD或CQPD);以及成人呼吸箸迫症候群 (ARDS)以及由於其它藥物治療例如阿斯匹靈或冷_激動劑 冶療結果造成呼吸道過度敏感的惡化。 本發明之選擇性P D E 4抑制劑及腎上腺激性万2接受界 破動刎可單獨或組合投藥’但通常係混合適當藥物賦形劑 27 1242433 玖、發明說明 、稀釋劑或載劑投藥。 本發明之選擇性P D E 4抑制劑及腎上腺激性卢2接受器 ’放動劑較佳係藉吸入投藥，方便地係以乾粉形式（單獨或 呈混合物，例如與乳糖之混合物）由乾粉吸入劑投藥，或 5以氣霧劑喷霧形式由加壓容器、幫Μ、喷霧、粉化器（較 佳為使用電動油壓動力來產生細霧的粉化器）或霧化器噴 霧’使用或未使用適當推進劑例如二氣二氟甲烷、三氯氣 甲燒一氣四氟乙烧、氫氟烧例如1，1，1,2-四氟乙烧（HFA U4A[商品名])或u丄2,3,3,3-七氟丙烷（hfa 227εα[商品 〇名])、二氧化碳、其它全氟化烴例如波福朋（Perflubron)(商 。口名）或其它適當氣體。當使用加壓氣霧劑時，每個單位 劑量可藉設置一個閥門輸送定量決定。加壓容器、幫浦、 贺霧器、粉化器或霧化器含有活性化合物溶液或懸浮液， 例如使用乙醇（視需要為水性乙醇）或適當作用劑之混合物 15用於分散、溶解或增量釋放以及使用推進劑作為溶劑，其 可額外含有潤滑劑例如聚山梨酸三油酸酯。用於吸入器或 吹入器之膠囊、泡胞及卡匣（例如由明膠4HPMC製造）可 調配成含有本發明化合物之粉末混合物、適當粉末基劑如 乳糖或澱粉、以及性能改良劑如卜白胺酸、甘露糖醇或硬 2 〇 脂酸鎮。 本發明化合物於用於吸入用之乾粉調配物或懸浮調配 物之前，本發明化合物可被微粉化至適合吸入輸送之大小 (典型為小於5微米）。微粉化可藉多種方法達成例如螺旋喷 射研磨、流體床噴射研磨或使用超臨界流體結晶化。 28 1242433 玖、發明說明 適口用方；粉化态使用電動油壓來產生細霧之溶液調配 物，每次作動將含有丨微克至10毫克本發明化合物，每次 作動4和由1微升至丨〇〇微升。典型調配物包含本發明化合 為、丙一醇、無菌水、乙醇及氯化鈉。可使用其它溶劑來 5替代丙二醇例如甘油或聚乙二醇。 氣霧調配物或乾粉調配物較佳係設定成每個定量劑量 或每—人貞務」，含有1至4000微克本發明化合物輸送給病 人。氣霧劑之總每曰劑量為i微克至20毫克，可於一天一 次或更常見一天平分多次投藥。 10 選擇性PDE4抑制劑：腎上腺激性/3 2接受器激動劑之 較佳用量比例[重量比（w/w)]將依據檢驗之特定組合決定。 由於個別化合物之強度有差異。因此臨床醫師將決定最適 合個別病人之各種化合物實際劑量，該劑量將隨特定病人 年齡、體重及反應決定。 15 須瞭解此處所述治療包括治癒、姑息以及預防性處理。 料-抑制鱼i體人類嗜中性細胞釋放彈力蛋白醃 得自任何性別健康人類自願者之靜脈血（9〇毫升）收集 於10¾升3.8°/。（w/ν)檸檬酸鈉，每份8毫升配送於15毫升聚 丙烯離心管’管内各含4毫升6%葡萄聚糖（平均分子量 20丨48,〇〇〇)於漢克氏平衡鹽水溶液（Hbss)。葡萄聚糖/血液藉 翻轉溫和混合且讓其於室溫浸潰45分鐘而讓紅血球沉澱。 富含白血球上清液每份16毫升鋪在5 0亳升聚丙烯離心管之 10¾升費可〉母沛克（Ficoll-Hypaque)襯些上，離心管於400g 於2 1°C離心35分鐘。移開血漿、單核細胞層及費可而留下 29 1242433 玖、發明說明 富於粒狀細胞之丸粒。丸粒初步再懸浮於ι〇毫升冰冷蒸鶴 水45秒，溶解污染的紅4球，接著將ι〇毫彳冰冷雙倍濃縮 填酸鹽緩衝食鹽水（PBS)溶液添加至各試管而恢復渗透度 。懸浮液於代於2()()g再離心1〇分鐘產生嗜中性血球丸粒 5 。私出上巧液，丸粒使用巴氏吸量管溫和再懸浮於總容積 10毫升冰冷刪S。使用貝克曼庫特（Beckman c〇uiter) Ac. T5血液分析器對所得嗜中性血球懸浮液進行差異白企球計 算，細胞儲存於冰上直到用於檢定分析。恰在檢定分析前 ，取出伤嗜中性血球懸浮液，稀釋成4χΐ〇6嗜中性血球/ 10毫升冰冷HBSS且含有2單位/毫升腺苷脫胺酶。 抑制fMLP誘生彈力蛋白的釋放係使用⑽微升檢定分 析谷積於96孔聚笨乙稀微力價孔板進行。彈力蛋白酶的釋 放係使用合成酶基質Me〇Suc_AlaUr〇_Val_pNA之廓清 速率檢定分析。為了測量彈力蛋白酶之釋放，檢定分析孔 I5含有8微升100微克/亳升賽脫切辛㈣心—⑻B(於1〇% DMSO/90/。HBSS)，8微升試驗化合物（稀釋於HBSS)，4〇 微升嗜中性懸浮液以及96微升156 " M Me〇Suc_Aia-Ala-

Pro-Val-pNA(於HBSS)。於添加8微升fMLP(於HBSS) 刖，檢定分析孔板於37它培育1〇分鐘，酶基質廓清速率之 2〇測量係於λ=405奈米於37 °C進行3分鐘。藉加入8微升 HBSS替代fMLP而測定彈力蛋白酶釋放之基準線值。下表】 所不貧料為IC50值，亦即達成舰^誘生彈力蛋白酶釋放 抑制50 /〇需要之活性劑濃度（以nM表示）。於組合實驗之例 ，ΙΟΟΟηΜ 9-環戊基-5,6-二氫乙基-3-(2-噻吩基）-9Η·-比 30 1242433 玖、發明說明 唾开似斗以‘三哇并…-叶比咬⑹添加至檢定分析 ，然後對佛莫特羅（F)或沙美特羅⑻繚出濃度-反應曲線。

S 白 ’ “nM 表示） ] 一 I ^ 一 — " "~" - >1000

F >1000 10 證貧組合施用点2激動劑（佛莫特羅或沙美特羅）與 PDE4抑制劑（9-環戊基_5,6_二氫1乙基_3_(2_嗔吩基）_9仏 比坐并[3,4-c]]，2,4-三唾并[4,3_α ]口比唆）可產生發炎前期 曰中性血球功能之協同抑制效果。經由使用藥劑個別處理 可達成由離體人類嗜中性血球經過fMLP誘生釋放彈力蛋 白酶的U弱抑制效果（v M)，而藉由組合施用此種效果可 增強為高度強力抑制效果(nM)。 【圖式簡單說明】 【圖式之主要元件代表符號表】

A "%、 31

Claims (1)

1242433 li7]申請專利範圍 ，. 。V, | 一第911丨35479號專利申請案申請專利範圍修正本 修正日期：94年4月 1· 一種吸入性組合，包含（a)—種選擇性PDE4抑制劑係選自9 環戊基-5,6-二氫-7-乙基-3-(2-嚷吩基）-州-吡。坐并[34〇] 5 1，2,4-三唑并[4,3-α ]口比啶， 及（b)—種腎上腺激 2.如申請專利範圍第1項之組合，其中該腎上腺激性汐2接受 时激動劑係送自沙美特羅（Salmeter〇i)、佛莫特羅 (formoterol)及其醫藥可接受性鹽及溶劑合物。 10 15 20 3·如申請專利範圍第丨或2項之組合，其係用作為藥物。 4·如申請專利範圍第_項之組合，供同時、循序或分開投 予治療阻塞性呼吸道疾病或其它發炎疾病。 5. -種用於治療阻塞性㈣道疾病或其它發炎疾病之醫藥組 成物’其係經由吸入途徑投藥’該醫藥組成物包含如申靖 專利範圍第！項之選擇性咖抑制劑，一種腎上腺激性Μ 接叉讀動劑及醫藥可接受性賦形劑、稀釋劑或載劑。 種將如中。月專利蛇圍第}項之選擇性ρ刪抑制劑及腎上腺 激性/3 2接受器激動劑用於制、皮一 + 於同時衣"_ 用途，該藥物係用 —汗 入途徑投予該兩種藥劑，用以治 療阻基性呼吸道疾病或其它發炎疾病。 32