TW514537B

TW514537B - Adsorbent for removing hepatitis c virus and adsorption apparatus

Info

Publication number: TW514537B
Application number: TW087104518A
Authority: TW
Inventors: Eiji Ogino; Michio Nomura; Takashi Asahi; Shuichi Kaneko; Akito Sakai
Original assignee: Kanegafuchi Chemical Ind
Priority date: 1997-03-25
Filing date: 1998-03-25
Publication date: 2002-12-21
Also published as: KR20060015703A; KR20010005686A; WO1998042392A1; US6600014B2; CA2284619A1; US7056507B2; ID22902A; EP0972530A4; CN1251048A; EP0972530A1; US20030044769A1; CN1286535C; US20040006214A1

Description

514537 五、發明説明（）本發明係有關於一移除C型肝炎病毒（以下有時以 HCV簡稱）之吸附劑，該病毒能夠選擇性地自體液如血液、血漿等吸附HCV病毒，而能藉此加速對於C型肝炎病毒之治療，以及有關於一包含該吸附劑之吸附裝置，以及有關於一移除HCV病毒之吸附方法。習知技藝由於在1989年成功地選殖出HCV的RNA病毒基因組（參見 Q· L. Choo et al. : Science, 244，359，1989)，因此使用重組蛋白質來分析抗-HCV抗體已經成爲可能之事。由此，過去大多數的稱爲非-A，非-B肝炎都被發現其實是C型肝炎。估計今日在日本約有2,000,000 HCV帶原者，而其中1，400,000爲慢性肝炎，300,000爲肝硬化（參見 Shiro lino:胃腸病學-2之醫療實習Medical Practice in Gastroenterology-2，C 型肝炎 Hepatitis C，11-17， 1993)。經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注#事項再填寫本頁) 根據（日本）厚生省之人口統計學結果，1992年死於初期肝癌的死亡數目爲27000人（參見1992年人口統計學Demographic Statistics，厚生省統計資訊局 Minister of Health and Welfare Statistical Information Bureau，Vol. 1，1993)，而約 70% 的意外事件則是導因於與HCV感染有關之肝細胞癌，目前，一般認爲肝細胞癌症係緊緊跟隨著慢性肝炎以及肝硬化而發生。（參見 S. Kaneko et al·: Intervirology，3-1，108，1994 ; Eiki Matsushita et al·:日本臨床學雜誌 Japanese Journal of _____3____ ^氏張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇X 297公釐) 514537 Λ7 B7 五、發明説明（）

Clinics, ϋ 727，1995 特刊 Special Issue)。因此，C 型肝炎可以說是一會轉變成爲肝硬化以及肝細胞癌症的極難治療之疾病。傳統的C型肝炎治療法主要係休息治療、飮食治療以及使用肝臟保護劑及/或中藥的藥物治療等。然而，因爲肝炎病毒並不能藉由這種治療移除，所以其治愈率可以說是極低的。這也就是爲什麼在臨床治療上，其往往著重在藉由減輕局部組織的壞死情形，而阻止慢性肝炎的進一步惡化。因此，當疾病期間一拖長時，如上所述，許多病人就會由肝硬化，從而轉變爲最嚴熏的後果，亦即肝癌而死亡〇經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 然而，近年由於干擾素的終於可以大量生產，而這些干擾素蛋白質也被發現不僅在試管內具有抗HCV以及其類似物質RNA病毒的能力，（參見Yasuyuki Ninomiya et al·:臨床報告 The Clinical Report，19, 231，1985)，同時對於老鼠體內亦有保護其不受RNA病毒感染之效果。（參見 M. Kramer et al.:干擾素硏究雜誌 J. Interferon Res.，3-， 425, 1983)因此，在C型肝炎的臨床治療上使用干擾素已經吸引了眾人關心的目光。事實上，在一些非-A、非-B型肝炎中，藉由重組性干擾素-α來治療可以使血淸轉移酵素正常化，（參見J. Η Hoofnagel et al.: N. Eng. J. Med., 315, 1575，1986)，同時，在投與干擾素至C型肝炎病人時，有一些病例可發現到有血中HCV的RNA完全消失的現象（參見K. Chayama et 4 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 514537 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Λ7 B7___ 五、發明説明（） al·:肝臟學 Hepatology，13，1040，1991; Hideki Ogiwara et al·:日本腸胃病學雜誌 Japanese Journal of Gastroenterology， 88, 1420, 1991)。在這些結果中，可見到干擾素被廣泛地使用於臨床上。因此，C型肝炎之治療法已經由徵狀療法 (symptomatic therapy )轉而朝向趨病療法（etiotropic therapy)的方向，邁出了決定性的一步。然而，過去數年在日本國內，約200,000個慢性活性 C型肝炎病例的干擾素之治療中，只有約30%的病例其病毒可以被消滅而將疾病治愈，但剩餘之70%的病例其病毒則會存活，且該治療方法被發現完全無效或者還會復發。 (參見 Migito Yano:日本臨床學雜誌 Japanese Journal of Clinics，53, 986, 1995 特刊 Special Issue) 在評估一個治療方法的成功或失敗時，其HCV基因的型式、血液中病毒的數量、以及肝病發展的階段等，都是重要的決定因子，但是在所有的相關因子中，血液中病毒的數量則是重要的決定因子。舉例來說，當病人1毫升血液中的病毒數量少於1，000,000時，則病毒就可以從體內被消滅，同時，藉由投與干擾素其疾病的治愈率約有80% 的病例左右，然而當病人1毫升血液中的病毒數量多於 1，000,000時，則其疾病的治愈率只低到9%的病例左右而已。（參見Fumio Imazeki et al·日本臨床學雜誌 Japanese Journal of Clinics，53，1017，1995 ) 除了上述所提到的病毒數量之外，本發明之發明者們亦發現，病毒顆粒在血液中存在之型式，也在影響干擾素 __ 5 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 、11 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 514537 五、發明説明（）治療效果的過程中扮演極重要之角色。因此，曾經有報導指出血液中的HCV顆粒，其可以依照血液中的懸浮密度來加以分類，而被分類成爲具有高感染性之低密度的顆粒，以及具有低感染性之高密度的顆粒。所以，本發明之發明者們，在硏究了病毒顆粒密度上之變化，以及疾病嚴重程度和干擾素治療彼此之間的關係時，發現如果在低密度的顆粒相對於高密度的顆粒比率爲10 : 1時，其治愈率可以高達75%，但若該比率値爲1 : 10時，則病人之治愈率低到只有13%。吾人亦發現，血液中之低密度病毒顆粒會與脂蛋白結合，而高密度病毒顆粒則會與免疫球蛋白結合，從而以免疫複體的型式存在。（參見Akihito Sakai et al.:日本腸胃病學雜誌 Japanese Journal of Gastroenterology，92 特刊 (Special Issue)，1488，1995 ) 因此，很明白地，目前之干擾素療法具有缺點，亦即當血液之病毒數量越低或者免疫複體病毒的數量越低時，則治療的效果越好；相反地，當血液之病毒數量越高或者免疫複體病毒的數量越高時，則治療的效果越差。本發明之摘要及目的

本發明之目標係提供一可移除C型肝炎病毒之吸附劑，該吸附劑具有安全地由病人的體液，吸附HCV顆粒，特別是免疫複體HCV顆粒之能力，從而以高效率和高選擇性 .促進干擾素治療的效果；又係提供一包含該吸附技之HCV 6 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T φ. 514537 Λ7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作衽印製五、發明説明（）吸附裝置；以及提供一移除HCV之吸附方法。爲完成上述目的，本發明之發明者們密集探索了一種化合物，其特性須爲，當其被固定於非水溶性載體上並與病人血液互相接觸時，具有對於HCV極強之吸附親合力，但對於如白蛋白等蛋白質卻無任何之親合力。其結果，本發明者們發現一種吸附劑，其係藉由固定一能夠吸附HCV 之化合物而製成，其中特別是在非水溶性載體上，一種與免疫球蛋白及/或免疫複體具有結合親合力之化合物，其具有一顯著的高HCV-吸附能力。本發明係於上述發現的基礎之上所開展之發明成果。因此，本發明係直接針對一移除C型肝炎病毒之吸附劑，其係包含一種化合物，當該化合物被固定於非水溶性的載體之上時，爲一能夠吸附C型肝炎病毒之化合物。附圖之簡述圖1爲表示塡充有各種非水溶性載體之玻璃管柱，其流速與壓力差之間的相互關係之表示圖。縱座標爲流速（公分/分鐘），而橫座標則爲壓力差（公斤/平方公分）；圖二爲表示本發明之C型肝炎吸附裝置之橫切面的剖 .面圖；以及圖3爲表示載體pUCNTMK3P47之內容。本發明之詳述 1 根據本發明，該移除HCV的吸附劑，其係包含一非水 7 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 蜂· - - It— 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 514537 經濟部中央榡準局員工消費合作衽印製 Λ7 ΒΊ 五、發明説明（）溶性之載體，以及被固定於載體上之能夠吸附HCV的化合物。該能夠吸附HCV的化合物，其並非特別限制於使用在吸附HCV的情況下，而是該較佳之化合物具有一對於免疫球蛋白及/或免疫複體之結合親和性。在這些能夠吸附結合有HCV的免疫球蛋白及/或免疫複體之化合物中，理想之化合物係爲一種化合物，比起其吸附HCV顆粒之能力來說，其吸附結合有HCV的免疫球蛋白及/或免疫複體，則更特定地具有其親合力。較理想者，上述吸附結合有HCV的免疫球蛋白及/或免疫複體之化合物，其係爲一種結合有免疫球蛋白之蛋白質。結合有免疫球蛋白之蛋白質係包括（但並不限制於）蛋白質A、蛋白質G、蛋白質Η、蛋白質L、蛋白質Μ、風濕病因子、以及補體。更加理想者，上述吸附結合有HCV的免疫球蛋白及/ 或免疫複體之化合物，其係爲一種抗·免疫球蛋白抗體。最理想者，上述吸附結合有HCV的免疫球蛋白及/或免疫複體之化合物，其組成物係爲一種含有免疫球蛋白及 /或免疫複體結合位置的片段蛋白質或胜肽，或者爲一種前述蛋白質或胜肽的衍生、物。有關於非水溶性載體，其較理想之實施例爲有孔的載有關於非水溶性載體，其更理想之實施例爲具有 8 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X 297公釐） 514537 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Λ7 B7 五、發明説明（） 10〜1500nm直徑小孔的載體。該非水溶性載體的另一較理想之實施例爲，實際地非孔洞之載體。此外，該非水溶性載體較理想爲親水性的。根據本發明，作爲移除HCV之吸附劑其使用目的可以是，自包括血液和血漿等體液中移除HCV等。移除HCV之吸附劑其使用目的亦可以是，自包括血液和血漿等體液中移除HCV的免疫複體型式。根據本發明之HCV吸附裝置，其包含一具有出口、入口的裝置，該出入口可以使液體流進流出，亦可以貯藏上述的任何吸附劑，另外還包含一種方法，其可避免該HCV 吸附劑自裝置中浅漏出去。移除C型肝炎病毒之吸附方法，其係包含一個步驟，可使任何的該吸附劑，與含有C型肝炎病毒的體液互相接觸。根據本發明，被使用於移除HCV之方法中的含有C型肝炎病毒的體液，其係包括血液、血漿、以及其他的體液本發明之較佳實施例的詳細敘述以下詳細敘述有關於本發明之較佳實施例，但必須強調的是本發明並不限於以下的這些特殊的實施例。在本發明中用於吸附HCV之化合物，其能夠以一實質的方法吸附HCV，但並不限定於此。然而，其較理想者，應爲一可以特定地結合至免疫球蛋白及/或免疫複體的重 ___ 9 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）

514537 ' A7 B7 五、發明説明（）鏈或輕鏈之物質。上述能夠結合至免疫球蛋白及/或免疫複體的重鏈或輕鏈之物質，其特定地包含一般被稱爲與免疫球蛋白相結合之蛋白質，例如蛋白質A、蛋白質G、蛋白質Η、蛋白質 Μ、風濕病因子、補體，其中該補體可以與免疫球蛋白G 的重鏈之Fc區相結合，而蛋白質L則對於輕鏈具有結合親合力，（參見L· Bjorck:免疫學雜誌J· Immunol·，140, 1194，1988; Η· Gomi et al·:免疫學雜誌 J· Immunol·，144, 4046，1990; Hisayuki Doi: Meneki Rinsho (臨床免疫學 Clinical Immunology)，23, 896, 1991 )以及抗-免疫球蛋白抗體等。經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -Φ. 在此亦可提及的是，上述對於免疫球蛋白及/或免疫複體具有顯著的結合親合力之物質的片段，例如A蛋白質的 58-殘基的A到E區域相關之胜肽，該區域並爲免疫球蛋白結合之位置（參見M· Uhlen et al·:生化學雜誌J. Biol， Chem· 259, 1965, 1984)、例如FB29胜肽，其爲A蛋白質的B區域胜狀之進一步的縮減結果（參見J. S. Huston et al·:生物物理學雜誌 Biophysical J·，62, 87, 1992)、例如 G蛋白質的55-殘基的C1-C3區域相關之胜肽（參見Β· Guss et al.:胚胎學雜誌 EMBO J· 5_ 1567, 1986)、例如 Η 蛋白質的Α區域胜肽（參見Η· Gomi et al· : ibid)、例如 L蛋白質的B1-B5區域胜肽（參見Bjorck，Lamth，et al·， Japanese Kohyo Publication Hei-7-506573 )、以及例如補體Clq的CBP2胜肽（參見Μ· A· Baumann et al.:生化學 ______ίο __ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 514537 Λ7 B7 五、發明説明（）雜誌 J· Biol· Chem.，265，18414 (1990))等，另外甚至例如其他所謂的免疫球蛋白結合蛋白質的免疫球蛋白結合區域胜肽，還有其衍生物。進一步，風濕病因子或者抗-免疫球蛋白抗體的Fab 以及F(ab)2片段、單鏈的Fv聚胜肽等，其也都可以作爲代表性的例子。可以使用在本發明中的非水溶性載體，其並無特別限制，同時也包含無機載體例如玻璃珠、矽膠等；有機載體例如合成性聚合物等，亦即交聯性聚乙烯醇、交聯性聚丙烯酸鹽、交聯性聚丙烯醯酸鹽、交聯性聚苯乙烯等；聚糖類例如結晶纖維素、交聯纖維素、交聯瓊脂、以及交聯葡聚糖等；以及含有上述物質之有機-無機組成物之載體。特別較佳爲親水性載體，這些載體在非特異性吸附之特徵爲吸附量小且對於HCV的吸附選擇性高。在此所謂的「親水性載體」，係指一種載體，其組成化合物當以平板型式形成時，具有一不超過60度的與水面接觸之角度。經濟部中央榡準局員工消費合作衽印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 該種載體並無特別之限制，但包括由多醣類（如纖維素、脫乙醯殻多糖、瓊脂醣、葡聚糖等）、聚乙烯醇、皂化乙撐-乙烯醋酸共聚物、聚乙烯醯胺、聚丙烯酸、聚甲丙烯酸、聚（甲基甲丙烯酸）、聚丙烯酸-聚乙撐合金、玻璃等等。特別地，含有OH基之載體具有優越的吸附能力以及選擇性。此外，孔狀纖維素膠由於具有以下的優點（Ο〜 (4)，其爲一種最適合使用於本發明中之非水溶性載體。 ____π____ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐）經濟部中央標準局員工消費合作社印製 514537 Λ7 B7 五、發明説明（） 1·因爲膠體具有較高的機械強度以及韌性，該膠體不易藉由攪拌等被分解成爲似灰塵的微小顆粒，而當其被塡塞入管柱中，即使當體液（body fluid)以高流速流經該床面上時，其亦無法察覺到有堵住或塞緊的感覺。此外，因爲其孔狀結構，即使在蒸氣殺菌前，其亦不應進行立體上的改變。 2. 因爲其係由纖維素所製成，該膠體具有大量的羥基群並爲親水性的，該羥基群可以結合配基，並且其非特異吸附力較低。 3. 因爲即使孔洞體積增加，其都能保持較高之強度，其可能具有與軟膠相同之大的吸附能力。 4. 與合成的聚合體膠或其他膠體相比較時，此膠體之安全性較高。上面敘述之非水溶性載體可以單獨，亦可以將二或三種以適當的混合比率來使用。在考慮有關於本發明的作爲移除HCV之吸附劑以及其使用型式時，本發明所使用的非水溶性載體，其較佳爲具有一大表面積，同時較佳爲具有大量的孔洞，也就是多孔的。該多孔的非水溶性載體，其較佳之平均孔直徑爲 10〜1500nm之間。HCV顆粒之直徑爲50〜55mn之間，同時爲了讓這些濾過性病毒顆粒更有效率地被吸附於多孔的載體之上，該載體的孔洞分布情形較佳爲傾向於比病毒顆粒之直徑要大。如果孔洞直徑過大時’該載體之強度便會受 _ 12______ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、11 Φ. 經濟部中央榡準局員工消費合作衽印製 514537 Λ7 B7 _ 一 "丨· — ' ' "" " ·- 五、發明説明（）損而表面積減少。更加之平均顆粒直徑爲50〜1250nm之間 Ο 另一方面，即使當載體並不實質地具有孔洞’其亦可以吸附病毒。該種載體之優點在於’在體液（血液、血漿、血淸等）中對身體有用之蛋白質及其他組成物’在實質地缺少孔洞的存在下，將較不易被吸附。所謂的「實質地缺少孔洞」’在本說明書中’其亦包括具有微小孔洞之載體（例如少於10nm)。進一步，有關於該非水溶性載體之孔洞結構’以每單位體積之吸附劑的吸附能力而言，其較佳者，該孔洞不應限制於表面上，而應分布於載體全體，同時，其碎片孔洞體積不少於20%且特定表面積不少於m2/g。該非水溶性載體之型式無特別限制，但包含原珠狀、纖維狀，以及薄膜狀（包括中空纖維）等等。由體液的體外循環加氫動力學（hydrodynamics)來看，圓珠狀載體應爲最理想者。關於該圓珠狀載體之平均顆粒直徑，圓珠直徑介於1〇和2500/zm之間者最適於使用。然而，圓珠直徑在25〜800//m之間者則最爲理想。在非水溶性載體之表面上，存在一官能基可協助配位體之固定。這些官能基的代表例子包括羥基、胺基、醛基、羧基、硫代基、甲矽醇基、醯胺基、環氧基、亞氨琥珀酸基、酸酐、以及其他的官能基。上述的非水溶性載體可以是堅硬膠體亦可以是軟性膠 __ 13 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公楚） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 514537 Λ7 B7___ 五、發明説明（）體。在本發明中，因其作爲一體外循環治療之吸附劑，因其重點在於，當塡塞於管柱中時，其體液流經的路徑上不可以發生有堵塞的情形（亦即孔洞堵塞的情形）°因此’ 爲確保其具有完整的機械強度，該非水溶性的載體較佳爲一堅硬載體。在本發明之發明說明中，該堅硬載體係一種載體，其如圓珠狀的形式之膠體被整齊地塡塞入玻璃圓管中（直徑 9mm，長度150mm)，且其相關條件如以下所7^時’當水溶液流經塡塞管柱，吾人在壓力損失（△?)以及達到 0.3kg/cm2流速之間可得到一線性關係。舉例來說，若玻璃圓管任何一端（直徑9mm，長度 150mm) 15/zm (孔洞直徑）的濾片上塡充瓊脂膠（Bio_ Rad，產品名：生物膠-A5m，顆粒直徑50-100篩孔號（ mesh))、乙烯聚合膠（Toyo Soda，產品名：東洋珍珠 HW-65,顆粒直徑50-1000 /zm)、或者纖維素膠（Chisso Corporation，產品名：Cellulofine GC-700m，顆粒直徑 45-105/zm)，使用週邊恆定幫浦（peristaticpump)將水導入管柱中，畫出流速與壓力損失（ΛΡ)之間的關係圖（圖1 )^ 分別將流速（公分/分鐘）繪於縱座標以及壓力損失（公斤/公分2)。在圖1中，〇代表東洋珍珠11冒-65，八代表 Cellulofine GC-700m，#則代表生物膠-A5m。其結果，東洋珍珠HW-65與Cellulofine GC_700m的壓力增加，會與流速的增加形成一定的比値，而生物膠- _ 14 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 514537 經濟部中央榡準局員工消費合作衽印製 Λ7 Β7 五、發明説明（） A5m因爲有緊密的情形產生，其流速無法藉由壓力增加而增加。與本發明有關之非水溶性載體上，在其免疫球蛋白結合蛋白質或者胜肽之固定化過程中，該過程較理想是藉由親水性間子（hydrophilic spacer)來減少蛋白質或胜肽的空間阻礙，以便改善吸附效率並壓抑非專一性吸附作用。較佳的親水性間子（hydrophilic spacer)例如可以是聚烯烴氧化物的衍生物，其可藉由以羧基、胺基、醛基、或環氧基等取代基，來修飾該聚烯烴鍵的任一端而獲得。對於免疫球蛋白及/或免疫複體（其將要固定在非水溶性載體上，且有機化合物作爲間子的情形下）具有結合親和力之化合物，其可以使用任何適當的技術加以固定。在這些傳統使用於載體上蛋白質以及胜肽的固定化技術中，其方法例如有使用環氧化反應、Nic基反應、使用碳二醯胺試劑的縮合反應、活性酯反應、以及使用戊二醛試劑的載體交聯反應。在考慮本發明用於移除HCV之吸附劑時’ 該主要是使用於體外循環治療以及淸除血內毒質法（ hemocatharsis)之吸附劑，其較佳爲使用固定化方法以確保吸附劑之殺菌過程以及治療過程中，蛋白質等將不會迅速地由非水溶性載體而釋放出來。舉例來說，可以使用下列方法： 1.包含一種N-羥基琥珀醯亞銨鹽與載體之羧基反應的方法，其構成一琥珀醯亞銨化羧氧基，從而與蛋白質或胜肽之胺基反應。（活性酯法） ________15____ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇'〆297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

514537 經濟部中央榡隼局員工消費合作社印製 Λ7 ___ B7__ 五、發明説明（） 2·包含一種蛋白質或胜肽的胺基或羧基與載體之胺基或羧基反應的方法，其必須要在如二環己基碳二醯胺的縮合劑存在下來進行。（縮合法） 3. '使用具有兩個或更多的官能基（如戊二醛）之化合物，來進行蛋白質或胜肽之交聯反應。（載體交聯反應）爲了要避免蛋白質從載體上釋放或被洗滌下來，固定化作用較佳是以共價鍵結來完成。藉由將一攜帶有能夠吸附HCV的化合物之載體與血液、血漿或血淸等體液接觸，從而由身體移除HCV之吸附方法，其可以以各種方式來進行。特別是舉例來說，如有下列之方法： 1. 此方法包含由病人身體移除體液，注入該體液至一袋或類似物中，將該吸附劑與體液混合以移除HCV，過濾掉吸附劑並實質地將不具有HCV的體液導回身體中。 2. 此方法包含提供一箱型裝置，其具有一入口及出口，以及一可使體液過濾但不會使吸附劑滲出出口之過濾器，以吸附劑塡塞該箱型裝置，再使體液流經該被塡塞之吸附劑。雖然上述兩種方法都可被選擇性地使用，但其中第二種方法卻是較方便而具有簡易程序的。此外當該箱型裝置或管柱被內建於管狀系統以便進行體外循環之時，HCV可以更有效率地且直接地被移除至病人的體液外。同時，本發明之移除HCV的吸附劑適合使用第二種方法。 ______16____ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 514537 A7 B7 五、發明説明（）以下將包含有本發明之移除HCV吸附劑的HCV吸附裝置，利用附圖來進行進一步的參考說明。參考圖二中，裝置7具有一液體入口或出口 1、一液體出口或入口 2、發明3之HCV吸附劑、避免吸附劑洩漏之元件4及5、經由該裝置使體液及其組成物可以自由地流通只有吸附劑無法通過、以及管柱6。該裝置之幾何形狀及材質並無特別之限制。然而其較佳爲使用一圓筒裝置，該裝置具有20-400毫升之容量，且直徑約爲2-10公分。由下述實例可以更爲淸楚的知道，本發明提供一新穎之吸附劑，其具有選擇性吸附並移除存在於體液中的C型肝炎病毒之能力，及/或減少高密度HCV比低密度HCV之比率的能力。進一步，藉由將體液以塡塞有上述吸附劑的裝置進行處理，C型肝炎病毒就能夠被選擇性地由血液、血漿以及血淸等體液中移除。本發明之最佳實施型態經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 下述實施例將敘述進一步的細節，但其並不應該造成任何之限制。在本發明說明之中各種胺基酸殘基皆以下列縮寫來代表。

Ala:L-丙胺酸殘基、AsP:L_天門冬酸殘基、Asn:天冬醯胺殘基、Cys: L-半胱胺酸殘基、Gin: L-榖胺醯胺殘基、 GUk L-榖胺酸殘基、Giy:L-甘胺酸殘基、lie: L-異亮胺酸殘基、Leu: L-亮胺酸殘基、LyS:L-離胺酸殘基、Phe:L-苯丙 _____17__ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 514537 ' A7 B7 五、發明説明（）胺酸殘基、Thr: L-蘇胺酸殘基、Trp:L-白胺酸殘基、Tyr: L-酪胺酸殘基、Val·· L-纈胺酸殘基。在本發明中，胜肽之胺基酸序列係以傳統的方式描述，假定其胺基端（以下以N-端表之）位於左端’而其羧基端（以下以C-端表之）位於右端。實施例1 多孔載體（GCL2〇OOm)上IgG-結合蛋白質（蛋白質 A)的固定化 90毫升的纖維性多孔堅硬膠體GCL-2000m (Chisso Corporation製，球狀蛋白質之單一分子量爲3X106)，其以水加至180毫升，然後加入60毫升的2M氫氧化鈉’在調整溫度至40°C。加入21毫升的環氧氯丙烷，在40°C下執行環氧化反應1小時。當反應完成後，將膠體以水完全浸潤，從而提供一環氧基-活化之纖維素膠體。蛋白質A的固定化經濟部中央標準局員工消費合作社印製將4毫克的蛋白質A (西格瑪公司）溶解於0.5毫升的〇·〇5Μ硼酸緩衝液（PH値10.0)，加入0.01N氫氧化鈉水溶液而提昇pH値至10且其總體積爲1.0毫升（A蛋白質溶液）。將該蛋白質溶液（總量）加入1毫升上述環氧基活化的纖維素膠中，其混合物在37°C搖晃16小時，並以足量的PBS (加入有150mM氯化鈉的10mM磷酸緩衝液）洗滌，而提供GCL2000m_蛋白質A 〇在固定化反應前和反應後，以HPLC測量反應混合物中蛋白質A的濃度，計算反應速率以得出其固定化過程之 ____ 18____ 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Μ規格（2丨〇><297公釐） 514537 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（）量。其結果，每一毫升之蛋白質A-GCL2〇OOm中，有2.1 毫克的蛋白質A被固定。實施例2 多孔載體（GCL2000m)上IgG-結合蛋白質（蛋白質 G)的固定化以蛋白質G (法瑪西亞LKB)代替蛋白質A ’然後重複實施例1的步驟以提供GCL2000m-蛋白質G (3·2毫克/ 毫升）。實施例3 多孔載體（賽法洛斯6Β)上蛋白質G的IgG結合區域的固定化胜肽的合成利用固相方法，在胜肽合成器4170型（法瑪西亞 LKB)中，將半胱胺酸加入蛋白質G的C3區域之一具有 57個胺基酸殘基序列胜肽的N-端。使用一種帶有C-端榖胺醯酸的樹脂（Fmoo榖胺醯酸 NovaSyn KA) 0.1毫莫爾，在上述的胜狀合成器中’以朝向胜肽鍵N-端的方向，根據置入程序來重複進行一去保護和冷凝反應。然後，進行下列過程；由帶有六氫吡啶的胺基酸移除 α-胺基保護基（亦即9-氟化甲氧羰基（Fmoc))、以 N，N-二甲基醯胺（DMF)洗滌、以2- ( 1氫-苯基疊氮-1-基 )_1，1，3,3_四甲基糖醛酸鹽、四氟硼酸鹽、以及二異丙乙基胺進行冷凝反應、再以N，N-二甲基醯胺（DMF)洗滌。 19 ____ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

T 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 45 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Λ7 B7 五、發明説明（）所使用之胺基酸型式爲Fmoc-L-丙胺酸、Fmoc-L-天冬醯胺（Trt)、Fmoc-L-天門冬胺酸（OtBu)、Fmoc-L-半胱胺酸（Trt)、Fmoc-L-榖胺酶胺（Trt)、Fmoc-L•榖胺酸（OtBu) 、Fmoc-L-甘胺酸、Fmoc-L-異亮胺酸、 Fmoc_L-亮胺酸、Fmoc-L-離胺酸（Boc)、Fmoc-L_苯丙胺酸、Fmoc-L-蘇胺酸（tBu )、Fmoc_L_ 白胺酸、Fmoc-L-酪胺酸（tBu)、Fmoc-L-纈胺酸，各取其量爲試管中受質的約5莫爾當量（0.5毫莫爾）。同時，上述所謂的Trt、 OtBu、Boc以及tBu係各自代表三苯甲基、三級丁基酯、三級丁氧羰基、以及三級丁基。在完成所有的胺基酸的系列反應之後，連續地在3G-3 孔洞玻璃濾片以三級戊基醇、醋酸、以及二乙基酯進行洗滌，然後真空乾燥以產生一乾燥載體。在試管中將獲得的 1克乾燥載體、20毫升三氟醋酸（TFA)、260/zL的1，2-乙二硫醇、以及780//L的茴香醚分別加入，然後於室溫下攪拌混合物1.5小時。將混合物於3G-3孔洞玻璃濾片上過濾以移除載體，於35°C減壓之下將濾液濃縮。加入無水二乙醚至殘餘物中，預先冷卻，然後攪拌至停止發生沉澱物爲止。再離心以使得粗（產物）胜肽回復。用數次的無水二乙醚來浸潤該粗（產物）胜肽，真空乾燥而得到一標的粗（產物）胜肽〇胜肽之純化將上述粗（產物）胜肽溶解於0.1°/。TFA並以0.2/zm _____20-- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

514537 Λ7 B7 經濟部中央榡準局員工消費合作社印製五、發明説明（）薄膜濾片過濾，將濾液以高壓液體色譜法（HPLC：)進行分析。有關於該高壓液體色譜法（HPLC)，係以LC-10A系統（島津製作所）進行，而管柱則使用#邦打氏球面C18 (/zBondasphere C18，日本微孔-水（公司）製）作爲相反相（reversed phase)。有關於動相，則使用〇」％ TFA/水作爲A溶劑，以及〇·1°/。TFA-80% (V/V)乙腈/水作爲B 溶劑，然後以一線性梯度的方式由溶劑A到溶劑B進行洗滌。收集色層分析的峰値附近之觀出物。將部分的飽出液重複數次，將集中的部分冷凍乾燥以獲得一純化之胜肽。使用氣相蛋白質分析儀477 (應用生物系統）以及日立離子交換樹脂將該胜肽進行胺基酸序列分析，以確定其所獲得之胜肽具有如SEQ ID N0:1所表示之胺基酸序列。胜肽的固定化在如下所述多孔的賽法洛斯上，藉由將上述的胜肽固定化而製備吸附劑。有關於賽法洛斯係使用硫代丙基-賽法洛斯6B (法瑪西亞LKB)。將50毫克的硫代丙基-賽法洛斯6B加入50毫升的蒸餾水，同時將該混合物置於室溫下 15分鐘以使樹脂膨脹。然後，移除蒸館水並以0.5M氯化鈉-0·1Μ三羥甲基氨基甲烷緩衝劑（Tris)-氯化鈉（pH値 7.5)組合緩衝液取代。另一方面，將4毫克的上述已純化之胜肽溶解於400 //L的氯化鈉-0·1Μ三羥甲基氨基甲烷緩衝劑（Tris)-氯化鈉（pH値7.5)組合緩衝液中。再將150/zL上述膨脹的硫 ---21 本紙^尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210父297公^ - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部中央榡準局員工消費合作社印製 514537 Λ7 B7 __ 五、發明説明（）代丙基-賽法洛斯6B加入該溶液中，同時在4°C下攪拌該混合物12小時，由此獲得攜帶有已純化胜肽之吸附劑。將攜帶有已純化胜肽之吸附劑進行吸入過濾，藉由 HPLC來測定濾液中所含有之胜肽量，使用絕對校正曲線法來決定其胜肽之固定速率。將該攜帶有已純化胜肽之吸附劑充分地以150mM氯化鈉-10mM磷酸鹽緩衝液洗滌，再以吸入過濾法使得每毫升載體攜帶有3.6毫克胜肽之賽法洛斯6B-C3Ppt回復。實施例4 多孔載體（Kac)上IgG-結合胜肽（MK3P47)之固定化 MK3P47胜肽之生產操作並合成一編碼MK3P47胜肽之DNA (該胜肽具有 SEQ ID NO:2所表示之胺基酸序列），以使其能夠藉著利用5’端的Nde I限制位置以及3’端的Hind III限制位置，而接合至pUCNT載體上（參見日本公開刊物japanese Kokai Publication Hei-4-212692)。該合成 DNA 的核|酸序列係表示於SEQ ID NO:3。根據寶酒造公司之接合套組手冊（第二版），將具有上述序列之DNA接合至經過限制酵素Nde I以及Hind III (寶酒造公司製造）剪切的pUCNT載體，由此構築一 PUCNTMK3P47 載體（圖 3 )。接著，藉由已知技術將PUCNTMK3P47載體DNA再選殖至大腸桿菌仏⑶// HB101菌體中（ __ ____22_____ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

514537 經濟部中央榡準局員工消費合作社印製 Λ7 B7 五、發明説明（）

Irivitrogen)，再以抗生素安比西林作爲指示標的，來選擇一具有抗性之轉殖株。

將質體DNA由該轉殖株再萃取出來，以傳統的方法進行定序，以確定其是否帶有PUCNTMK3P47載體之DNA 序列。將該轉質體以6升的L-培養液（L-Broth，5克/升氯化鈉，10克/升Bactotrypsin，5克/升酵母菌萃取物）在37 °C進行搖動培養20小時，並以離心回收其細胞（曰立 RPR9-2 迴轉器，4°C，6000rpmX20 分鐘）。將得到之沉澱物再度懸浮於300毫升之TE緩衝液中 (30mM Tris_HCl，ImM EDTA; pH 値 7.5 )，超音波震盪（布蘭生250,冰浴，6分鐘X3)，離心（日立RPR16迴轉器，4°C，15000rpmX20分鐘），回收其懸浮液。將上述懸浮液以70°C熱處理10分鐘，離心（日立 RPR16 迴轉器，4°C，15000rpmX20 分鐘），得到 300 毫升之懸浮液。根據下列步驟分離出標的之MK3P47胜肽。藉由高壓液體色譜法（HPLC)進行分析（管柱使用華特茲 //邦打氏球面5 /z C18 300A，19.0X 150mm，使40毫升乙腈以5毫升/分的流速通過以活化管柱，然後，再以相同速度使300毫升之待測樣品通過。以200毫升之0.1% TFA+64%乙腈洗滌管柱，最後標的物之MK3P47胜肽被以 200毫升之0.1% TFA+40%乙腈洗滌出來。將此部分置於蒸發器上進行濃縮至毫升，冷凍乾燥，而提供一 1.2克的高純度胜肽樣品。 23___^_ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 514537 Λ7 五、發明説明（）纖維素膠的環氧化活化反應將90毫升（其上具有>5X106分子量之球型蛋白質）的原堅硬多孔纖維素膠Kac加水至18〇毫升。然後，加入 60毫升的2M氫氧化鈉並該膠的溫度升高至40°C。加入21 毫升之環氧氯丙烷至膠中，使該反應在40°C下進行1小時。反應完成之後，將膠完全地以水浸潤以獲得一環氧化活化之纖維素膠。 MK3P47的固定化作用以及經固定之蛋白質的定量除了以50毫克的MK3P47來代替4毫克的蛋白質A ，以及以環氧化活化之Kac來代替環氧化活化之GCL-2〇OOm之外，其餘之步驟均依照實施例1.進行而獲得一 Kac- MK3P47。實施例5 多孔載體（賽法戴克西S1000)上之IgG-結合胜肽（ MP47C)之固定化作用製備具有SEQ ID NO:4所示之胺基酸序列的胜肽 MP47C。經濟部中央榡準局員工消費合作衽印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 剪切一具有SEQ ID NO:5所示之核苷酸序列的DNA (編碼MP47C)，以使得該DNA可以被接合至實施例4 之pUCNT載體。然後，將上述DNA以實施例4所述之相同流程接合至pUCNT載體，以獲得一 pUCNTMP47C載體。以實施例4所描述之相同方法，構築一大腸桿菌的轉形體，並且藉由6升之培養液，獲取1.3克的該標的高純一 24 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）經濟部中央榡準局員工消費合作衽印製 514537 Λ7 B7 五、發明説明（）度胜肽以備下列各種目的之使用。賽法戴克西膠體之環氧化活化反應將堅硬多孔（孔直徑400nm)纖維素膠之賽法戴克西 S1000 (法瑪西亞LKB) 90毫升加水至18〇毫升。然後，加入60毫升的2M氫氧化鈉並該膠的溫度升高至4〇°C。加入21毫升之環氧氯丙烷至膠中，攪拌使該反應在40°C下進行1小時。反應完成之後’將膠完全地以水浸潤以獲得一環氧化活化之纖維素膠。、 MP47C的固定化作用以及經固定之蛋白質的定量除了以10毫克的MK3P47來代替4毫克的蛋白質A ，以及以環氧化活化之賽法戴克西膠來代替環氧化活化之 GCL-2000m之外，其餘之步驟均依照實施例1進行而獲得一 S1000-MP47C ( 7 毫克/毫升）。實施例6 實質地非多孔載體（Bac)上之IgG-結合胜肽（ MP47C)之固定化作用纖維素膠之環氧化活化反應將90毫升（其上具有<3X104分子量之球型蛋白質）的原堅硬非多孔纖維素膠載體（Bac)加水至180毫升。然後，加入60毫升的2M氫氧化鈉並該膠的溫度升高至40°C 。加入21毫升之環氧氯丙烷至膠中，使該反應在4(TC下攪拌進行1小時。反應完成之後，將膠完全地以水浸潤以獲得一環氧化活化之纖維素膠。 MP47C的固定化作用以及經固定之蛋白質的定量 ^_______25_ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 -蠢· 經濟部中央榡準局員工消費合作、社印製 514537 A7 __B7 五、發明説明（）除了以30毫克的MP47C來什親/ 一士街Λ I代替4 _克的蛋白質A，以及以環氧化活化之版來代替環氧化活化之GCL_2〇〇〇m 之外，其餘之步驟均依照實節而獲得一 B. MP47C(20毫克/毫升）。實施例7 多孔載體（C踰-活化之賽法洛斯6B)上之抗-IgG 抗體片段（Fab)之固定化作用將CNBr-活化之賽法洛斯4B (法瑪西亞]lKB) 4克，以小量的ImM氯化氫/水膨脹15分鐘，再以丨mM氯化氫/水以及組合緩衝液（pH値8·3，〇·5Μ NaCl，0.1M NaHC03)緩衝液的順序洗滌。將抗-人類IgG (Fab)抗體（結合位置c〇 )以木瓜蛋白酶分解（片段，純免疫Fab製備套組）所獲得之Fab 1 毫克溶於1毫升的組合緩衝液中。將上述經洗滌之膠體加入溶液中，使反應於4°C進行I6小時。在該反應混合物以組合緩衝液洗滌之後，加入中止緩衝液（pH 値 8.3，0·2Μ 甘胺酸，〇·5Μ NaCl，0.1M NaHC03)，於室溫反應2小時。將反應產物以兩種後處理緩衝液（pH値4.0，0.5 Μ NaCl，0_1Μ醋酸鈉-醋酸緩衝液以及ρΗ値8.0，0.5 Μ NaC卜0·1Μ Tris-HCl緩衝液），各自輪流三次洗滌，而獲得一賽法洛斯4B-抗-IgG Fab。實施例8 多孔載體（璀西東洋珍珠）上之抗-IgG抗體之固定 ___ 26_ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 514537 Μ Β7 五、發明説明（）化作用將抗-人類IgG (Fc)抗體（結合位置Co.) 1毫克，溶解於1毫升的組合緩衝液（0.5M NaCl，0.1M碳酸鹽緩衝液），再加入200毫克乾燥的AF-璀西東洋珍珠650。使該反應於4°C過夜進行（overnight)。在反應產物以〇.5M NaCl/水洗滌之後，加入中止緩衝液（pH 値 8.0，0_5M NaCn，0.1M Tris-HCl 緩衝液），於室溫反應2小時。將該反應混合物以0.5M NaCl/水洗滌以獲得一東洋珍珠-抗-IgG。實施例9 評估合成吸附劑對於C型肝炎病毒吸附之表現將各吸附劑1〇〇//L置入試驗瓶中，加入含有c型肝炎病毒之病人血淸100//L，隨後於37t震盪2小時。 C型肝炎病毒吸附能力之測定經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 將上述懸浮液以5〇〇〇rpm離心1分鐘，再以上層懸、浮液中的HCV RNA來測定C型肝炎病毒量。（日本羅氏^ ( 製藥）安普利可爾HCV監視器）。在對照實驗組方面，以1〇〇//L生理食鹽水來代替胃吸附劑置於試驗瓶中，重複上述程序以決定該溶液中c = 肝炎病毒量。根據下列方程式來計算C型肝炎病毒的吸附率} 〇吸附率（0/〇 ) 4(Vr - Vt)/Vr]Xl00 27

vi514537 ΑΊ Β7 五、發明説明（

Vr :控制組溶液之病毒濃度

Vt :吸附測試懸浮液中之病毒濃度該結果示於表1。表1 實施例吸附劑 HCV RNA吸附測試懸浮液（複製數/毫升） HCV RNA 控制組溶液（複製數/毫升 ) 吸附比率 (% ) 1 GCL2000m-蛋白質 A 2.70E+04 7.90E+04 66 2 GCL2000m-蛋白質 G 1.40E+04 7.90E+04 82 3 賽法洛斯6B-C3PPt 8.10E+04 1.12E+05 28 4 Kac-MK3P47 3.20E+04 1.05E+05 70 5 S1000-MP47C 1.00E+04 1.05E+05 91 6 Bac-MP47C 4.20E+04 1.05E+05 60 7 賽法洛斯4B-抗 IgGFab 4.80E+04 1.05E+05 54 8 東洋珍珠-抗IgG 3.60E+04 1.05E+05 66 實施例10 合成吸附劑之評估吸附測試將各吸附劑100//L置入試驗瓶中，加入含有C型肝 28 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）

訂經濟部中央標準局員工消費合作社印製 514537 Λ7 五、發明説明（）炎病毒之病人血淸100//L，隨後於37°C震盪2小時。高密度HCV/低密度HCV之測定將在各吸附實驗中所獲得之HCV懸浮液，以及使用生理食鹽水來代替該吸附劑相同方法所獲得之HCV懸浮液，各自與抗-LDL以及抗IgG抗體混合，反應於4°C進行16 小時。再將反應混合物以5000rpm離心15分鐘，回收其離心產物，再以上層懸浮液中的HCV RNA來測定C型肝炎病毒量。（日本羅氏（製藥）安普利可爾HCV監視器）。參考藉由與抗-LDL抗體（作爲低密度HCV)以及抗IgG 抗體（作爲高密度HCV)混合所獲得之HCV沉澱情形，來計算HCV RNA比率（T/B=高密度HCV/低密度HCV) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 該結果顯示於表2。表2 經濟部中央標準局員工消費合作社印製實施例吸附劑 T/B HCV吸附測試組 T/B HCV控制組 1 GCL2000m-蛋白質A 3/1 1/1 2 GCL2000m-蛋白質G 2/1 1/1 3 賽法洛斯6B-C3Ppt 1/1 1/1 4 Kac-MK3P47 1/1 1/10 5 S1000-MP47C 1/1 1/10 ___ 29_ 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） ίφ. 514537 Λ7 B7 五'發明説明（） ___6 Bac-MP47C 1/5 1/10 7 賽法洛斯4B-抗 1/3 1/10 IgGFab ^ 8 東洋珍珠-抗IgG 1/3 1/10 序列排列 SEQ ID No: 1 長度:58 型式:胺基酸 · 幾何性:線性種類:胜肽

Cys Thr Thr Tyr Lys Leu Val lie Asn Gly Lys Thr Leu Lys 1 5 10

Gly Glu Thr Thr Thr Lys Ala Val Asp Ala Ala Glu Thr Ala 15 20 25

Glu Lys Ala Phe Lys Gin Tyr Ala Asn Asp Asn Gly Val Asp 30 35 40 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) S.

Gly Val Trp Thr Tyr Asp Asp Ala Thr Lys Thr Phe Thr Val 45 50 55

Thr Glu SEQ ID No: 2 長度:60 型式:胺基酸幾何性:直鏈 30 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 514537 Λ7 B7 五、發明説明（）種類:胜肽

Met Lys Lys Lys Thr Thr Tyr Lys Leu Val lie Asn Gly Lys 1 5 10

Thr Leu Lys Gly Glu Thr ThrThr Lys Ala Val Asp Ala Glu 1 5 20 25

Thr Ala Glu Lys Ala Phe Lys Gin Tyr Ala Asn Asp Asn Gly 30 35 40

Val Asp Gly Val Trp Thr Tyr Asp Pro Ala Thr Lys Thr Phe 45 50 55

Thr Val Thr Glu 60 SEQ ID No: 3 長度:190 型式:核酸鏈型:雙鏈（股）幾何性:線性經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) CATATGAAAA AGAAGACCAC CTATAAACTG GTTATCAACG GTAAAACCCT GAAAGGTGAA GTATACTTTT TCTTCTGGTG GATATTTGAC CAATAGTTGC CATTTTGGGA CTTTCCACTT 60 ACCACCACCA AGGCTGTTGA CGCTGAAACC GCTGAAAAAG CATTTAAACA GTATGCTAAC TGGTGGTGGT TCCGACAACT GCGACTTTGG CGACTTTTTC GTAAATTTGT CATACGATTG 120 GACAACGGTG TCGACGGTGT TTGGACCTAT GACCCCGCTA CCAAAACCTT TACCGTTACC CTGTTGCCAC AGCTGCCACA AACCTGGATA CTGGGGCGAT GGTTTTGGAA ATGGCAATGG180 ____31_ ^紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）經濟部中央標準局員工消費合作社印製 514537 kl — _ B7 五、發明説明（）

GAATAAGCTT CTTATTCGAA 190 SEQ ID No: 4 長度:58 型式:胺基酸幾何性:線性種類:胜肽

Met Thr Thr Tyr Lys Leu Val lie Asn Gly Lys Thr Leu Lys 1 5 10

Gly Glu Thr Thr Thr Lys Ala Val Asp Ala Glu Thr Ala Glu 15 20 25

Lys Ala Phe Lys Gin Tyr Ala Asn Asp Asn Gly Val Asp Gly 30 35 40

Val Trp Thr Tyr Asp Pro Ala Thr Lys Thr Phe Thr Val Thr 45 50 55

Glu Cys SEQ ID No: 3 長度：190 型式:核酸鏈型:雙鏈（股）幾何性:線性 32 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T I·. 514537 Μ Β7 五、發明説明（） CATATGACCA CCTATAAACT GGTTATCAAC GGTAAAACCC TGAAAGGTGA AACCACCACC GTATACTGGT GGATATTTGA CCAATAGTTG CCATTTTGGG ACTTTCCACT TTGGTGGTGG 60 AAGGCTGTTG ACGCTGAAAC CGCTGAAAAA GCATTTAAAC AGTATGCTAA CGACAACGGT TTCCGACAAC TGCGACTTTG GCGACTTTTT CGTAAATTTG TCATACGATT GCTGTTGCCA 120 GTCGACGGTG TTTGGACCTA TGACCCCGCT ACCAAAACCT TTACCGTTAC CGAATGCTAA CAGCTGCCAC AAACCTGGAT ACTGGGGCGA TGGTTTTGGA AATGGCAATG GCTTACGATT 180

GCTT CGAA 184 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 33_ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格(210X297公釐）

Claims

514537 A8 ^ M C8 · iv|L a； I 08 ^le Z^A ^ r—^ 補調 - 六、申請專利範圍 ^“一—…一 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 1 · 一種移除c型肝炎病毒之吸附劑，其係包含一種固定於非水溶性載體上能夠吸附C型肝炎病毒之化合物。 2 ·根據申請專利範圍第1項之移除C型肝炎病毒之吸附劑，其中該能夠吸附C型肝炎病毒之化合物係爲一種對於免疫球蛋白及/或免疫複體(complex)具有結合性親合力的化合物。 3 · —種移除C型肝炎病毒之吸附劑，其係包含一種能夠吸附C型肝炎病毒之化合物，該C型肝炎病毒係結合於固定在非水溶性載體上的免疫球蛋白及/或免疫複體之上〇 4 ·根據申請專利範圍第2項之移除C型肝炎病毒之吸附劑，其中該對於免疫球蛋白及/或免疫複體具有結合性親合力之化合物係爲一種免疫球蛋白-結合蛋白質。 5 ·根據申請專利範圍第4項之移除C型肝炎病毒之 .吸附劑，其中該免疫球蛋白-結合蛋白質係爲至少一種由蛋白質A、蛋白質G、蛋白質Η、蛋白質L、蛋白質μ、風濕性因子、以及補體等群組中所選出的蛋白質。 6 ·根據申請專利範圍第2項之移除C型肝炎病毒之吸附劑’其中該對於免疫球蛋白及/或免疫複體具有結合性親合力之化合物係爲一種抗-免疫球蛋白抗體。 7 ·根據申請專利範圍第2項之移除C型肝炎病毒之吸附劑’其中該能夠吸附C型肝炎病毒之化合物係爲一種免疫球蛋白-結合蛋白質及/或抗-免疫球蛋白抗體的成分，該成分爲一含有結合免疫球蛋白及/或免疫複體結合位置的 ---1-- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格(210 X 297公^ -- 098892 ABCD 514537 六、申請專利範圍蛋白寘片段或胜肽，或爲該蛋白質片段或胜肽的衍生物。 8 ·根據申請專利範圍第1至7項中任一項之移除C 型肝炎病毒之吸附劑，其中該非水溶性載體係一多孔載體〇 9 ·根據申請專利範圍第8項之移除C型肝炎病毒之吸附劑，其中該多孔載體之平均孔直徑在10到1500nm之間。 1 0 ·根據申請專利範圍第1至7項中任一項之移除 C型肝炎病毒之吸附劑，其中該非水溶性載體係一實質地無孔涧載體。 1 1 ·根據申請專利範圍第1至7項中任一項之移除 C型肝炎病毒之吸附劑，其中該非水溶性載體係一親水性載體。 1 2 ·根據申請專利範圍第1至7項中任一項之移除 C型肝炎病毒之吸附劑，其係被使用於移除來自體液如血液、血漿或其類似物的c型肝炎病毒。 1 3 ·根據申請專利耜圍弟1至7項中任一 I旨之移除 C型肝炎病毒之吸附劑，其中該c型肝炎病毒係一種免疫複體病毒。 1 4 · 一種吸附C型肝炎病毒之裝置，其包含一個具有一以便液體之進入及釋出之入口及出Q且包圍根據申言靑專利範圍第1至7項中任一項之移除C型肝炎病毒之吸附劑之外殼(casing)，以及一種避免該移除C型肝炎病毒之吸附劑自外殼洩漏之機構(means)。 (請先閲讀背面之注意事項再塡寫本頁) 、ιέ]，線本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格(210 X 297公釐)