TW202344249A - 驅動蛋白kif18a 抑制劑及其應用 - Google Patents

驅動蛋白kif18a 抑制劑及其應用 Download PDF

Info

Publication number
TW202344249A
TW202344249A TW112117564A TW112117564A TW202344249A TW 202344249 A TW202344249 A TW 202344249A TW 112117564 A TW112117564 A TW 112117564A TW 112117564 A TW112117564 A TW 112117564A TW 202344249 A TW202344249 A TW 202344249A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
mmol
alkyl
azaspiro
octane
compound
Prior art date
Application number
TW112117564A
Other languages
English (en)
Inventor
肖貽崧
谷曉輝
賴焜民
Original Assignee
大陸商上海湃隆生物科技有限公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 大陸商上海湃隆生物科技有限公司 filed Critical 大陸商上海湃隆生物科技有限公司
Publication of TW202344249A publication Critical patent/TW202344249A/zh

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/38—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/438—The ring being spiro-condensed with carbocyclic or heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/455—Nicotinic acids, e.g. niacin; Derivatives thereof, e.g. esters, amides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/63—Compounds containing para-N-benzenesulfonyl-N-groups, e.g. sulfanilamide, p-nitrobenzenesulfonyl hydrazide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C07D491/044—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring
    • C07D491/048—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring the oxygen-containing ring being five-membered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D513/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

本發明公開了一種驅動蛋白KIF18A抑制劑及其應用，所述化合物能夠調節KIF18A蛋白，從而影響細胞週期和細胞增殖過程以治療癌症和癌症相關疾病。本發明還包括包含所述化合物的藥物組合物以及用於治療與KIF18A活性相關的病況的方法。

Description

驅動蛋白KIF18A抑制劑及其應用
本發明屬於醫藥領域，涉及一類驅動蛋白KIF18A抑制劑及其作為抑制癌細胞增殖和治療癌症的用途。
本申請要求以下申請的優先權： 1）於2022年05月13日提交到中國國家智慧財產權局，申請號為202210520744.0，發明名稱為“驅動蛋白KIF18A抑制劑及其應用”的中國專利申請； 2）於2022年07月25日提交到中國國家智慧財產權局，申請號為202210878192.0，發明名稱為“驅動蛋白KIF18A抑制劑及其應用”的中國專利申請； 3）於2022年09月27日提交到中國國家智慧財產權局，申請號為202211183092.2，發明名稱為“驅動蛋白KIF18A抑制劑及其應用”的中國專利申請； 4）於2022年12月02日提交到中國國家智慧財產權局，申請號為202211537992.2，發明名稱為“驅動蛋白KIF18A抑制劑及其應用”的中國專利申請； 5）於2023年01月16日提交到中國國家智慧財產權局，申請號為202310071265.X，發明名稱為“驅動蛋白KIF18A抑制劑及其應用”的中國專利申請； 6）於2023年03月22日提交到中國國家智慧財產權局，申請號為202310288871.7，發明名稱為“驅動蛋白KIF18A抑制劑及其應用”的中國專利申請； 7）於2023年04月27日提交到中國國家智慧財產權局，申請號為202310475180.8，發明名稱為“驅動蛋白KIF18A抑制劑及其應用”的中國專利申請； 其全部內容均通過引用結合在本申請中。
KIF18A是驅動蛋白kinesin-8家族中的一員，在細胞內能夠依靠水解ATP釋放的能量，以微管為軌道向正極方向運動。同時，KIF18A定位在微管正極末端，可調控微管的動態不穩定性，發揮類似於微管解聚酶的活性。在有絲分裂過程中，KIF18A能夠調控紡錘體微管動力學和染色體振幅，對有絲分裂期染色體及時完成整列、維持基因組穩定和順利完成有絲分裂具有關鍵作用。
KIF18A基因屬於驅動蛋白kinesin-8亞家族並且是一個正端定向馬達。KIF18A被認為影響著絲粒微管的正端的動力學以控制正確的染色體定位和紡錘體張力。人KIF18A的耗盡在HeLa宮頸癌細胞中導致更長的紡錘體，在中期增加的染色體振盪(chromosome oscillation)以及有絲分裂紡錘體組裝檢查點的激活(MI Mayr等人，Current Biology[當代生物學]17，488–98，2007)。KIF18A似乎是癌症治療的可行靶標。KIF18A在多種類型的癌症中過表達，包括但不限於結腸癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、膀胱癌、頭癌、頸癌、子宮頸癌和卵巢癌。此外，在癌細胞系中，基因缺失或敲除或KIF18A抑制影響有絲分裂紡錘體裝置。特別地，已發現抑制KIF18A來誘導有絲分裂細胞停滯，這是一種已知的弱點，其可以通過凋亡、有絲分裂災變或多相驅動致死性或分裂間期中有絲分裂滑脫後的死亡來促進有絲分裂細胞死亡。因此，對尋找KIF18A蛋白的抑制劑存在著強烈的興趣。因此，KIF18A ATP酶活性的抑制是一種有前途的開發新的抗癌劑的方法。
本發明屬於醫藥領域，涉及一類驅動蛋白KIF18A抑制劑，具體涉及所述化合物或其立體異構體，互變異構體，內消旋體，外消旋體，對映異構體，非對映異構體或其混合物形式或其可藥用的鹽，共晶，代謝產物，溶劑化物，前藥或同位素標記物，其製備方法及含有該類化合物的藥物組合及其作為治療劑，尤其作為抑制癌細胞增殖和治療癌症的用途。
本發明提供了一類新的化合物，所述化合物單獨或在與微管的結合複合物中用於調節KIF18A蛋白，用以治療KIF18A介導的病症和/或疾病，包括癌症、炎症或纖毛病理學。
本發明提供的化合物具有基於MT的KIF18A調節活性，特別地，具有KIF18A抑制活性。為此，本發明還提供了這些化合物及其藥學上可接受的鹽在製備和製造用於治療性、預防性、急性或慢性治療KIF18A介導的疾病和障礙(包括但不限於癌症)的藥物組合物或藥物中的用途。
本發明提供了技術方案：具有式(I)結構的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物： 式(I) 其中，W 1表示CR W1或N； 其中，W 2表示CR W2或N； 其中，Z表示-CR TR T'或-NR SR S'； 其中，R T和R T'與與之共同相連的C原子一起形成具有選自以下結構的環： 其中，R S和R S'與與之共同相連的N原子一起形成具有選自以下結構的環： 其中，Y 1、Y 2、Y 3各自獨立地表示-(CR aR b) o-(NR a) p-(CR a'R b') q-； 其中，A、B各自獨立地表示-(CR aR b) m-； 其中，L 1表示5-6元雜芳基、 、 、 、 、 、 ； 其中，L 2表示不存在、-C 1-C 6亞烷基-、-NR a-、-NR a(C 1-C 6亞烷基)-、-C(O)NR a(C 1-C 6亞烷基)-、-O-、-O-(C 1-C 6亞烷基)、-S-、-S(O)-、-S(O) 2-、-S(O) 2NR a-或者-S(O)(NR a)-； 其中，R 1表示L 3-R 3或者 ； 其中，R 2表示氫、鹵素、氰基、硝基、羥基C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、鹵代C 1-C 6烷基、-OR a、-SO 3R a、-SR a、-SF 5、-S(O)R a、-O-鹵代C 1-C 6烷基或-NR aR b； 其中，L 3表示不存在、C 1-C 6亞烷基、-NR a-、-NR aSO 2-、-SO 2NR a-、-S(=O)(NR a)-、-P(O)(OR a) 2、-NR aP(O)(OR a) 2或-NR aP(O)(R a) 2； 其中，R 3表示不存在、氫或者被0-3個選自鹵素、-OR a、-NR aR b、氰基、-O-鹵代C 1-C 6烷基取代的C 1-C 6烷基或C 3-C 6環烷基； 其中，R W1和R W2各自獨立地表示氫、鹵素、氰基、硝基、羥基C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、鹵代C 1-C 6烷基、-OR a、-SO 3R a、-S(O)R a、-O-鹵代C 1-C 6烷基、-SR a、-SF 5或-NR aR b； 其中，Cy 1表示具有6-12元芳基或者5-12元雜芳基；並且所述的Cy 1還可以任意地被0-3個選自以下取代基的基團所取代：鹵素、C 1-C 6烷基、鹵代C 1-C 6烷基、羥基C 1-C 6烷基、OR a、-O-鹵代C 1-C 6烷基、5-6元雜芳基、苯基、-SR a、-SF 5、氰基、硝基、-NR aR b、-NH-(C 0-C 6烷基)-R M、-NR aC(O)R b、-C(O)NR aR b、-OC(O)R a、-C(O)R a、-P(O)R aR b、-C(O)OR a、-S(O)R a、-S(O) 2R a和-S(O) 2NR aR b； 其中，Cy 2表示3-12元飽和或不飽和的單環或者雙環，該環中可以任意地含有0-3個選自O、N和S的雜原子，並且所述的Cy 2還可以任意地被0-3個選自以下取代基的基團所取代：鹵素、C 1-C 6烷基、鹵代C 1-C 6烷基、羥基C 1-C 6烷基、-OR a、-O-鹵代C 1-C 6烷基、-SR a、-SF 5、氰基、硝基、-NR aR b、-NR aC(O)R b、-C(O)NR aR b、-OC(O)R a、-C(O)OR a、-S(O)R a、-S(O) 2R a和-S(O) 2NR aR b； 其中，R M表示-OR a、-NR aR b、5-6元雜環基、5-10元雜芳基、6-10元芳基； 其中，R a、R b、R a'、R b'各自獨立地表示氫、鹵素、C 1-C 6烷基、C 3-C 6環烷基、鹵代C 1-C 6烷基或羥基C 1-C 6烷基；或者R a、R b一起與與之相連的原子形成3-6元飽和或不飽和環，該環中可以任意地含有0-2個選自O、S和N的雜原子; 或者R a'、R b'一起與與之相連的原子形成3-6元飽和或不飽和環，該環中可以任意地含有0-2個選自O、S和N的雜原子； 其中，虛線表示單鍵或雙鍵； 其中，m、o、p、q表示0-3的整數。
在本發明的優選技術方案中，其中，W 1表示CH或N。
在本發明的優選技術方案中，其中，W 2表示CH或N。
在本發明的優選技術方案中，其中， L 3表示-NR aSO 2-、-SO 2NR a-或-S(=O)(NR a)-。
在本發明的優選技術方案中，其中， L 3表示-NR aSO 2-。
在本發明的優選技術方案中，其中，R 3表示氫或者被0-3個選自鹵素、-OR a、-NR aR b、氰基和-O-鹵代C 1-C 6烷基之基團取代的C 1-C 6烷基或C 3-C 6環烷基。
在本發明的優選技術方案中，其中，R 3表示被0-3個選自鹵素、-OR a、-NR aR b、氰基和-O-鹵代C 1-C 6烷基之基團取代的C 1-C 6烷基。
在本發明的優選技術方案中，其中，Z表示-NR SR S'。
在本發明的優選技術方案中，其中，Z表示： ； 其中，R a、R b各自獨立地表示氫、C 1-C 6烷基、C 3-C 6環烷基、鹵代C 1-C 6烷基或羥基C 1-C 6烷基；或者R a、R b一起與與之相連的原子形成3-6元飽和或不飽和環，該環中可以任意地含有0-2個選自O、S和N的雜原子。
在本發明的優選技術方案中，其中，Z表示： ，其中，R a、R b各自獨立地表示氫、C 1-C 6烷基、C 3-C 6環烷基、鹵代C 1-C 6烷基或羥基C 1-C 6烷基；或者R a、R b一起與與之相連的原子形成3-6元飽和或不飽和環，該環中可以任意地含有0-2個選自O、S和N的雜原子。
在本發明的優選技術方案中，其中，Z表示： 。
在本發明的優選技術方案中，其中，L 1表示5-6元雜芳基、 、 、 、 、 、 。
在本發明的優選技術方案中，其中，Cy 1表示被0-3個選自以下取代基：鹵素、C 1-C 6烷基、鹵代C 1-C 6烷基、羥基C 1-C 6烷基、OR a、-O-鹵代C 1-C 6烷基、5-6元雜芳基、苯基、-SR a、-SF 5、氰基、硝基、-NR aR b、-NR aC(O)R b、-C(O)NR aR b、-OC(O)R a、-C(O)R a、-P(O)R aR b、-C(O)OR a、-S(O)R a、-S(O) 2R a和-S(O) 2NR aR b取代的以下任意基團之一： 例如： 。
在本發明的優選技術方案中，其中，L 1表示： 5-6元雜芳基、 、 、 、 、 、 。
在本發明的優選技術方案中，其中，L 1表示以下任意基團之一： 。
在本發明的優選技術方案中，其中，Cy 1表示被0-3個選自以下取代基：鹵素、C 1-C 6烷基、鹵代C 1-C 6烷基、羥基C 1-C 6烷基、OR a、-O-鹵代C 1-C 6烷基、5-6元雜芳基、苯基、-SR a、-SF 5、氰基、硝基、-NR aR b、-NR aC(O)R b、-C(O)NR aR b、-OC(O)R a、-C(O)R a、-P(O)R aR b、-C(O)OR a、-S(O)R a、-S(O) 2R a和-S(O) 2NR aR b取代的以下任意基團之一： 。
在本發明的優選技術方案中，其中，Cy 1表示被0-3個選自以下取代基：鹵素、C 1-C 6烷基、鹵代C 1-C 6烷基、羥基C 1-C 6烷基、OR a、-O-鹵代C 1-C 6烷基、5-6元雜芳基、苯基、-SR a、-SF 5、氰基、硝基、-NR aR b、-NR aC(O)R b、-C(O)NR aR b、-OC(O)R a、-C(O)R a、-P(O)R aR b、-C(O)OR a、-S(O)R a、-S(O) 2R a和-S(O) 2NR aR b取代的 。
在本發明的優選技術方案中，其中，Cy 1表示被苯基、吡啶基、噻唑基、噁唑基、吡唑基、咪唑基、N-甲基吡唑基取代的 。
在本發明的優選技術方案中，其中，Cy 1表示以下基團： 。
在本發明的優選技術方案中，其中，L 2表示不存在、-C 1-C 6亞烷基-或-NH-。
在本發明的優選技術方案中，其中，L 2表示不存在。
在本發明的優選技術方案中，其中，Cy 2表示飽和，部分飽和或不飽和的3-、4-、5-、6-、7-元單環，或3-、4-、5-、6-、7-元并環，且含有0~3個N雜原子和0~2個O或S雜原子，同時單環或并環被0-3個選自以下取代基：鹵素、氰基、硝基、羥基C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、鹵代C 1-C 6烷基、-OR a、-SO 3R a、-S(O)R a、-O鹵代C 1-C 6烷基、-SR a、-SF 5或NR aR b取代的嗎啉基、呱啶基、氮雜環丁烷基、吡咯烷基、環丙基、環丁基、環戊基、環己基、呱嗪基或四氫呋喃基，其中，R a、R b各自獨立地表示氫、鹵素、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、鹵代C 1-C 6烷基或羥基C 1-C 6烷基；或者R a、R b一起與與之相連的原子形成3-6元環，該環中含有0-2個選自O、N和S的雜原子。
在本發明的優選技術方案中，其中，Cy 2表示： 。
具體地，本發明提供化合物，具有以下結構：
1 2
3 4
5 6
7 8
9 10
11 12
13 14           
15 16
17 18
19 20
21 22
23 24
25 26
27 28
29 30
31 32
33 34
35 36           
37 38
39 40
41 42
43 44
45 46
47 48
49 50
51 52
53 54
55 56
57 58
59 60
61 62
63 64
65 66
67 68
69 70
71 72
73 74
75 76
77 78
79 80
81 82
83 84
85 86
87A 87B
88 89
90 91
92 93
94 95
96 97
98 99
100 101
102 103
104 105
106
除此之外，本發明還提供了一種藥物組合物，其含有本發明技術方案中任意一種化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，以及其藥學上可接受的載體。
除此之外，本發明還提供了一種通過抑制KIF18A來治療腫瘤的方法，包括向有需要的個體施用本發明中任意一種化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物。
定義
如無相反指示，本發明的化合物除化合物具體結構之外，還可以被延伸解讀還包括該化合物藥學上可接受的鹽，其立體異構體、同位素異構體（例如氘代化物）、溶劑合物、水合物、前藥、代謝產物，也即是該化合物藥學上可接受的鹽，其立體異構體、同位素異構體、溶劑合物、水合物、前藥、代謝產物也落入化合物的保護範圍。
除非另有述及，否則於本專利說明書與權利請求中使用的下述術語具有下文所討論的意義。再者，此處定義的許多基團可選擇性地被取代。在此定義部分中典型取代基的清單是作為舉例，並非意欲限制本專利說明書與權利要求書中別處所定義的取代基。
術語“烷基”是指飽和脂族烴基團或連接臂，包括1至20個碳原子，優選為1至12個碳原子，更優選為1至8個碳原子，或1至6個碳原子，或1至4個碳原子的直鏈與支鏈基團。“低級烷基”特別指具有1至4個碳原子的烷基。烷基的實例包括-(CH 2) 3-，甲基、三氟甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、戊基等。烷基可為被取代或未被取代。典型取代基包括環烷基、芳基、雜芳基、雜環烷基、羥基、烷氧基、芳氧基、巰基、烷硫基、芳基硫基、氰基、鹵代基、羰基、硫代羰基、O-氨基甲醯基、N-氨基甲醯基、O-硫代氨基甲醯基、N-硫代氨基甲醯基、C-醯氨基、N-醯胺基、C-羧基、O-羧基、硝基、矽烷基、氨基及-NR xR y，其中R x與R y獨立選自包括氫、烷基、環烷基、芳基、羰基、乙醯基、磺醯基、三氟甲烷磺醯基及合併的5-或6-元雜環基環。
術語“烯基”表示含一個或更多個雙鍵且通常長度為2至20個碳原子的直鏈或支鏈的烴基。例如，“C 2-C 6烯基”含有兩個至六個碳原子。烯基包括但不限於例如乙烯基、丙烯基、丁烯基、1-甲基-2-丁烯-1-基等。
術語“炔基”表示含一個或更多個三鍵且通常長度為2至20個碳原子的直鏈或支鏈的烴基。例如，“C 2-C 6炔基”含有兩個至六個碳原子。代表性炔基包括但不限於例如乙炔基、1-丙炔基、1-丁炔基等。
術語“烷氧基”或“烷基氧基”是指-O-烷基。“C 1-C 6烷氧基”(或烷基氧基)意欲包括C 1、C 2、C 3、C 4、C 5、C 6烷氧基。烷氧基的實例包括但不限於甲氧基、乙氧基、丙氧基(例如正丙氧基和異丙氧基)和叔丁氧基。類似地，“烷基硫基”或“硫代烷氧基”表示具有指定數量碳原子的經硫橋連接的如上文所定義的烷基；例如甲基-S-和乙基-S-。
術語“環烷基”是指3至8元全碳單環狀環或二環結構，全碳5-元/6-元或6-元/6-元經稠合的雙環狀環，或多環狀稠合環(“經稠合”環系統是指在此系統中的每一個環系與此系統中的其它環至少共有一個相鄰碳原子)基團，其中一或多個環可含有一或多個雙鍵，但這樣的環均不具有完整的共軛π-電子系統，亦或雙環通過共用一個碳形成螺環。環烷基的實例是(但不限於)環丙烷、環丁烷、環戊烷、環戊烯、環己烷、環己二烯、金剛烷、環庚烷、環庚三烯等。二環的環狀烷基包括橋環、螺環或融合環的環烷 基。環烷基的說明性實例衍生自(但不限於)下列: 。
“芳基”是指6至12個碳原子的全碳單環狀或稠合環多環基團，具有完整共扼π-電子系統。芳基的實例是但不限於苯基、萘基及蒽基。芳基可為被取代或未被取代。典型取代基包括鹵代基、三鹵代甲基、烷基、羥基、烷氧基、芳氧基、巰基、烷硫基、芳基硫基、氰基、硝基、羰基、硫代羰基、C-羧基、O-氨基甲醯基、N-氨基甲醯基、O-硫代氨基甲醯基、N-硫代氨基甲醯基、C-醯氨基、N-醯胺基、亞磺醯基、磺醯基、氨基及-NR aR b，其中R a與R b系如上文定義。芳基稠合飽和或不飽和環烷基/飽和或不飽和雜環烷基可看作為芳基的特殊取代基，典型的實例包括但不限於： 。
“雜芳基”是指5至12個環原子的單環狀或稠合環，含有一、二、三或四個選自N、O及S的環雜原子，其餘環原子為C，且此外，具有完整共扼π-電子系統。典型的雜芳基的實例是但不限於吖啶基、氮雜環丁基、吖辛因基、苯並咪唑基、苯並呋喃基、苯並硫代呋喃基、苯並噻吩基、苯並噁唑基、苯並噁唑啉基、苯並噻唑基、苯並三唑基、苯並四唑基、苯並異噁唑基、苯並異噻唑基、苯並咪唑啉基、哢唑基、4aH-哢唑基、哢啉基、色滿基、色烯基、噌啉基、十氫喹啉基、2H,6H-1,5,2-二噻嗪基、二氫呋喃並[2,3-b]四氫呋喃基、呋喃基、呋咱 基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、1H-吲唑基、咪唑並吡啶基、假吲哚基(indolenyl)、二氫吲哚基、吲嗪基、吲哚基、3H-吲哚基、靛紅醯基(isatinoyl)、異苯並呋喃基、異色滿基、異吲唑基、異二氫吲哚基、異吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、異噻唑並吡啶基、異噁唑基、異噁唑並吡啶基、亞甲基二氧基苯基、嗎啉基、二氮雜萘基、八氫異喹啉基、噁二唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、噁唑烷基、噁唑基、噁唑並吡啶基、噁唑烷基、萘嵌間二氮雜苯基、羥吲哚基、嘧啶基、菲啶基、菲咯啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁噻基、吩噁嗪基、酞嗪基、呱嗪基、呱啶基、呱啶酮基、4-呱啶酮基、胡椒基、喋啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑並吡啶基、吡唑基、噠嗪基、吡啶並噁唑基、吡啶並咪唑基、吡啶並噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、2-吡咯烷酮基、2H-吡咯基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4H-喹嗪基、喹喔啉基、奎寧環基、四唑基、四氫呋喃基、四氫異喹啉基、四氫喹啉基、6H-1,2,5-噻二嗪基、1,2,3-噻二唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,5-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、噻吩基、噻唑並吡啶基、噻吩並噻唑基、噻吩並噁唑基、噻吩並咪唑基、噻吩基、三嗪基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,5-三唑基、1,3,4-三唑基和呫噸基、喹啉基、異喹啉基、酞嗪基、喹唑啉基、吲哚基、異吲哚基、二氫吲哚基、1H-吲唑基、苯並咪唑基、1,2,3,4-四氫喹啉基、1,2,3,4-四氫異喹啉基、5,6,7,8-四氫-喹啉基、2,3-二氫-苯並呋喃基、色滿基、1,2,3,4-四氫-喹喔啉基和1,2,3,4-四氫-喹唑啉基。術語“雜芳基”還可以包括由 上述所定義的“芳基”與單環“雜芳基”所形成的聯芳基結構，例如但不限於“-苯基聯吡啶基-”、“-苯基聯嘧啶基”、“-吡啶基聯苯基”、“-吡啶基聯嘧啶基-”、“-嘧啶基聯苯基-”；其中本發明還包括含有例如上述雜環的稠環和螺環化合物。
藥學上可接受的雜芳基是足夠穩定以被連接至本發明的化合物被配製成藥物組合物，及隨後被施用有需要的病患者。
除非另有定義，本發明的取代基的定義是各自獨立而非互相關聯的，例如對於取代基中R a(或者R b)而言，其在不同的取代基的定義中是各自獨立的。具體而言，對於R a(或者R b)在一種取代基中選擇一種定義時，並不意味著該R a(或者R b)在其他取代基中都具有該相同的定義。更具體而言，例如(僅列舉非窮舉)對於NR aR b中，當R a(或者R b)的定義選自氫時，其並不意味著在-C(O)-NR aR b中R a(或者R b)必然為氫。
“鹵代”或“鹵素”包括氟、氯、溴和碘。“鹵代烷基”意欲包括具有指定碳原子數且取代有1個或多個鹵素的支鏈和直鏈飽和脂族烴基團。鹵代烷基的實例包括但不限於氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氯甲基、五氟乙基、五氯乙基、2,2,2-三氟乙基、七氟丙基和七氯丙基。鹵代烷基的實例還包括意欲包括具有指定碳原子數且取代有1個或多個氟原子的支鏈和直鏈飽和脂族烴基團的“氟烷基”。
“鹵代烷氧基”或“鹵代烷基氧基”表示具有指定數量碳原子的經氧橋連接的如上文所定義的鹵代烷基。例如，“C 1-C 6鹵代烷氧基”意欲包括C 1、C 2、C 3、C 4、C 5、C 6鹵代烷氧基。鹵代烷氧基的實例包括但不限於三氟甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基和五氟乙氧基。類似地，“鹵代烷基硫基”或“硫代鹵代烷氧基”表示具有指定數量碳原子的經硫橋連接的如上文所定義的鹵代烷基；例如三氟甲基-S-和五氟乙基-S-。
本公開內容中，當提到一些取代基團時使用Cx1-Cx2的表述，這表示所述取代基團中的碳原子數可以是x1至x2個。例如，C0-C8表示所述基團含有0、1、2、3、4、5、6、7或8個碳原子，C1-C8 表示所述基團含有1、2、3、4、5、6、7或8個碳原子，C2-C8表示所述基團含有2、3、4、5、6、7或8個碳原子，C3-C8表示所述基團含有3、4、5、6、7或8個碳原子，C4-C8表示所述基團含有4、5、6、7或8個碳原子，C0-C6表示所述基團含有0、1、2、3、4、5或6個碳原子，C1-C6表示所述基團含有1、2、3、4、5或6個碳原子，C2-C6表示所述基團含有2、3、4、5或6個碳原子，C3-C6表示所述基團含有3、4、5或6個碳原子。
本公開內容中，當提到環狀基團(例如芳基、雜芳基、環烷基和雜環烷基)時使用“x1-x2元環”的表述，這表示該基團的環原子數可以是x1至x2個。例如，所述3-12元環狀基團可以是3、4、5、6、7、8、9、10、11或12元環，其環原子數可以是3、4、5、6、7、8、9、10、11或12個；3-6元環表示該環狀基團可以是3、4、5或6元環，其環原子數可以是3、4、5或6個；3-8元環表示該環狀基團可以是3、4、5、6、7或8元環，其環原子數可以是3、4、5、6、7或8個；3-9元環表示該環狀基團可以是3、4、5、6、7、8或9元環，其環原子數可以是3、4、5、6、7、8或9個；4-7元環表示該環狀基團可以是4、5、6或7元環，其環原子數可以是4、5、6或7個；5-8元環表示該環狀基團可以是5、6、7或8元環，其環原子數可以是5、6、7或8個；5-12元環表示該環狀基團可以是5、6、7、8、9、10、11或12元環，其環原子數可以是5、6、7、8、9、10、11或12個；6-12元環表示該環狀基團可以是6、7、8、9、10、11或12元環，其環原子數可以是6、7、8、9、10、11或12個。所述環原子可以是碳原子 或雜原子，例如選自N、O和S的雜原子。當所述環是雜環時，所述雜環可以含有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多個環雜原子，例如選自N、O和S的雜原子。
本發明內容中，一個或更多個鹵素可以各自獨立地選自氟、氯、溴和碘。
本文中所用的術語“取代”意指至少一個氫原子被非氫基團替代，條件是維持正常化合價且所述取代得到穩定的化合物。本文所用的環雙鍵為在兩個相鄰環原子之間形成的雙鍵(例如C＝C、C＝N或N＝N)。
在本發明化合物上存在氮原子(例如胺)的情形下，可通過使用氧化劑(例如mCPBA和/或過氧化氫)進行處理來將這些氮原子轉化成N-氧化物以獲得本發明的其它化合物。因此，所顯示和要求保護的氮原子視為均涵蓋所顯示氮及其N-氧化物以獲得本發明衍生物。
當任何變數在化合物的任何組成或式中出現一次以上時，其每次出現時的定義均獨立於其在其它每種情況下出現時的定義。因此，例如如果顯示基團取代有0-3個R，則所述基團可任選地取代有至多三個R基團，且在每次出現時R獨立地選自R的定義。此外，取代基和/或變數的組合僅在上述組合可產生穩定的化合物時才容許存在。
本文使用的術語“患者”是指通過本發明的方法進行治療的有機體。這類有機體優選包括但不限於哺乳動物(例如鼠類、猿/猴、馬、牛、豬、犬、貓等)且最優選是指人類。
本文使用的術語“有效量”意指將會引起例如研究人員或臨床醫師所尋求的組織、系統、動物或人的生物學或醫學回應的藥物或藥劑(即本發明化合物)的量。此外，術語“治療有效量”意指這樣的量：與未接受上述量的相應受試者相比，所述量導致改善的治療、治癒、預防或減輕疾病、病症或副作用，或降低在疾病或病症的進展速度。有效量可以一個或更多個給藥、施用或劑量給予且不意欲被特定的製劑或給藥途徑限制。該術語還包括在其範圍內的增強正常生理機能的有效量。
本文使用的術語“治療”包括其廣義上的含義，涵蓋對物件的治療性處理和/或預防性處理。具體而言，所述“治療”包括導致病症、疾病、障礙等的緩和、抑制、消除和改善和/或預防的任何處理，例如減輕、減少、調節、改善、消除、預防、防止或改善其症狀。所述治療性處理包括緩和、抑制或改善疾病的症狀或狀況；抑制併發症的產生；改善潛在代謝綜合症；抑制疾病或症狀的產生，如控制疾病或情況的發展；減輕疾病或症狀；使疾病或症狀減退；減輕由疾病或症狀引起的併發症，或治療由疾病或症狀引起的徵兆。所述預防性處理包括事先處理以防止、阻斷或延遲、減緩疾病或病症的發生或發展或者減弱疾病或病症的嚴重程度。
同樣，“治療劑”也包括對物件具有治療性處理和/或預防性處理的藥劑或試劑。
術語“藥用”或“藥學上可接受的”在本文中用於指如下那些化合物、物質、組合物和/或劑型：在合理醫學判斷的範圍內，其適於與人類和動物的組織接觸使用而無過高毒性、刺激性、過敏反應和/或其它問題或併發症，並與合理的益處/風險比相稱。
特定藥學及醫學術語
術語“癌症”，如本文所用，指一種不能控制的細胞的異常生長，並且在某種條件下能夠轉移(傳播)。這種類型的癌症包括但不限於，實體腫瘤(如膀胱、腸、腦、胸、子宮、心臟、腎、肺、淋巴組織(淋巴瘤)、卵巢、胰腺或其它內分泌器官(如甲狀腺)、前列腺、皮膚(黑色素瘤)或血液瘤(如非白血性白血病)。
術語“聯合給藥”或其類似術語，如本文所用，指將幾種所選的治療藥物給一個病人用藥，以相同或不同的給藥方式在相同或不同的時間給藥。
術語“增強”或“能增強”，如本文所用，指預期的結果能夠在效價或是持續時間方面都有增加或延長。因此，在增強藥物的治療效果方面，術語“能增強”指藥物在系統中有提高或延長效價或持續時間的能力。本文所用的“增效值”，指在理想的系統中，能夠最大限度地的增強另外一個治療藥物的能力。
術語“免疫性疾病”指對內源性或外源性抗原產生的不良或有害反應的疾病或症狀。結果通常會造成細胞的功能障礙、或因此而破壞並造成機能障礙、或破壞可能產生免疫症狀的器官或組織。
術語“試劑盒”與“產品包裝”是同義詞。
術語“對象”、“受試者”或“病人”包括哺乳動物和非哺乳動物。哺乳動物包括但不限於，哺乳類：人、非人靈長類如猩猩、猿及猴類；農業動物如牛、馬、山羊、綿羊、豬；家畜如兔、狗；實驗動物包括齧齒類，如大鼠、小鼠及豚鼠等。非哺乳類動物包括但不限於，鳥、魚等。在一優選例中，所選哺乳動物是人。
如本文所用，某一化合物或藥物組合物，給藥後，可以使某一疾病、症狀或情況得到改善，尤指其嚴重度得到改善，延遲發病，減緩病情進展，或減少病情持續時間。無論固定給藥或臨時給藥、持續給藥或斷續給藥，可以歸因於或與給藥有關的情況。
給藥途徑
適合的給藥途徑包括但不限於，口服、靜脈注射、直腸、氣霧劑、非腸道給藥、眼部給藥、肺部給藥、經皮給藥、陰道給藥、耳道給藥、鼻腔給藥及局部給藥。此外，僅作舉例說明，腸道外給藥，包括肌肉注射、皮下注射、靜脈注射、髓內注射、心室注射、腹膜內注射、淋巴管內注射、及鼻內注射。
本發明化合物給藥方式可以是局部的給藥方式。在特定的具體實施例中，長效製劑通過植入給藥(例如皮下或肌肉)或通過肌肉注射。此外，在另一具體化實施例中，藥物通過靶向藥物給藥系統來給藥。例如，由器官特異性抗體包裹的脂質體。在這種具體實施例中，所述脂質體被選擇性的導向特定器官並吸收。
藥物組合物和劑量
本文使用的短語“可藥用載體”意指藥用物質、組合物或媒介物，諸如液體或固體填充劑、稀釋劑、賦形劑、製造助劑(例如潤滑劑、滑石、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或硬脂酸鋅或硬脂酸)或溶劑包囊物質，其涉及將主題化合物從一個器官或身體的部分攜帶或運送至另一個器官或身體的部分。每種載體在與製劑的其它成分相容和對患者無害的意義上必須是“可接受的”。
術語“藥物組合物”意指包含本發明化合物與任選的其它可藥用載體的組合物。“可藥用載體”是指本領域中通常接受用於將生物活性劑遞送至動物(具體為哺乳動物)的介質，包括(即)佐劑、賦形劑或媒介物，諸如稀釋劑、防腐劑、填充劑、流動調控劑、崩解劑、潤濕劑、乳化劑、懸浮劑、增甜劑、矯味劑、芳香劑、抗細菌劑、抗真菌劑、潤滑劑和分散劑，這取決於給藥模式和劑型的性質。
本發明的藥用組合物可包含治療有效量的與任選的一種或多種可藥用載體(添加劑)和/或稀釋劑一起配製的一種或多種本發明的化合物，以及任選的一種或多種其它治療劑。可通過任意合適方式給予本發明化合物以用於任意上述用途，例如口服，諸如片劑、丸劑、粉劑、顆粒劑、酏劑、酊劑、懸浮液(包括奈米懸浮液、微懸浮液、噴霧乾燥的分散液)、糖漿和乳液；經舌下；含服；經腸胃外，諸如通過皮下、靜脈內、肌內或胸骨內注射或輸注技術(例如以無菌可注射水性或非水性溶液或懸浮液形式)；經鼻，包括向鼻膜給藥，諸如通過吸入噴霧；局部，諸如以乳膏劑或軟膏劑形式；或經直腸，諸如以栓劑形式；或經瘤內注射。它們可單獨給藥，但通常使用基於所選給藥途徑和標準藥學實踐選擇的藥物載體給藥。
根據本領域技術人員認識範圍內的諸多因素來調配可藥用載體。這些因素包括，但不限於：所調配活性劑的類型和性質；含有活性劑的組合物所要給藥的受試者；組合物的預期給藥途徑；及所靶向的治療適應症。藥用載體包括水性和非水性液體介質及各種固體和半固體劑型。
上述載體可包括除活性劑外的諸多不同成分和添加劑，上述其它成分出於本領域技術人員公知的各種原因包括於製劑中，例如穩定活性劑、黏合劑等。關於合適的藥用載體和載體選擇中所涉及的因素的描述可參見多個容易獲得的來源，例如Allen L.V.Jr.et al.Remington: The Science and Practice of Pharmacy(2 Volumes),22nd Edition(2012),Pharmaceutical Press。
當然，本發明化合物的劑量方案取決於已知因素而有所變化，諸如具體藥劑的藥效學特性及其給藥模式和途徑；接受者的物種、年齡、性別、健康狀況、醫學病狀和重量；症狀的性質和程度；同時治療的種類；治療頻率；給藥途徑、患者的腎和肝功能及期望效應。根據一般指導，當用於指定效應時，各活性成分的日口服劑量應為約0.001mg/天至約10-5000mg/天，優選地為約0.01mg/天至約1000mg/天，且最優選地為約0.1mg/天至約250mg/天。在恆速輸注期間，靜脈內最優選劑量應為約0.01mg/kg/分鐘至約10mg/kg/分鐘。本發明化合物可以單一日劑量給藥，或可以每日兩次、三次或四次的分開劑量給藥總日劑量。
所述化合物通常以與根據預期給藥形式(例如口服片劑、膠囊劑、酏劑和糖漿劑)適當地選擇且與常規藥學實踐相符合的合適藥物稀釋劑、賦形劑或載體(在本文中統稱為藥物載體)的混合物形式進行給藥。
適於給藥的劑型(藥物組合物)可含有約1毫克至約2000毫克活性成分/劑量單位。在這些醫藥組合物中，以組合物的總重量計，活性成分通常將以約0.1-95重量％的量存在。
本發明範圍包括(單獨或與可藥物載體組合)包含治療有效量的至少一種本發明化合物作為活性成分的藥物組合物。任選地，本發明化合物可單獨使用、與本發明其它化合物組合使用或與一種或多種其它治療劑(例如抗癌劑或其它藥學活性物質)組合使用。
不考慮所選擇的給藥路徑，通過本領域技術人員已知的常規方法來將本發明的化合物(其可以合適的水合形式使用)和/或本發明的藥物組合物配製成藥用劑量形式。
可改變活性成分在本發明的藥物組合物中的實際劑量水準，從而獲得對於實現特定患者的期望的治療回應、組成和給藥模式有效的而對患者無毒的活性成分量。
選定的劑量水準會取決於多種因素，包括所用的本發明的特定化合物或其酯、鹽或醯胺的活性；給藥路徑；給藥時間；所用的特定化合物的排泄速率；吸收速率和程度；治療的持續時間；與所用的特定化合物組合使用的其它藥物、化合物和/或物質；所治療的患者的年齡、性別、重量、狀況、一般健康和先前的醫學史等醫學領域公知的因素。
具有本領域普通技術的醫生或獸醫可容易地確定並開出有效量的所需藥物組合物。例如，為了達到所期望的治療效果，醫師或獸醫可在低於所需的水準開始藥物組合物中所用的本發明化合物的較量，並逐步增加劑量直至實現所期望的效果。通常，合適日劑量的本發明化合物將是有效產生治療效果的最低劑量的化合物的量。此種有效劑量通常取決於上述因素。通常，口服、靜脈內、腦室內和皮下劑量的用於患者的本發明化合物的範圍為約0.01至約50mg/kg體重/天。如果需要的話，有效日劑量的活性化合物可以兩個、三個、四個、五個、六個或更多個亞劑量在一天當中的適當的間隔分別給藥，任選地呈單位劑型形式。在本發明的某些方面中，服藥為每天一次給藥。
雖然本發明化合物可單獨給藥，但優選以藥物製劑(組合物)形式給予化合物。
試劑盒/產品包裝
為了用於上述適應症的治療，試劑盒/產品包裝也在此進行描述。這些試劑盒可以由輸送器、藥包或容器盒組成，容器盒可被劃分成多格，以容納一種或多種容器，如管形瓶、試管及類似物等，每個容器中包含所述方法中的單獨一種成分。合適的容器包括瓶子，管形瓶，注射器和試管等。容器由可接受的玻璃或塑膠等材料製作而成。
舉例來講，容器可裝有一種或多種在此所述的化合物，化合物可能以藥物組分形式存在，也可能與在本文中所述的其它成分組成混合物體存在。容器可有一個無菌輸出口(例如容器可為靜脈輸液包或瓶，瓶塞可被皮下注射器針頭刺破)。這樣的試劑盒可帶有一種化合物，及本文中所述的使用方法的說明、標籤或操作說明。
一個典型的試劑盒可包括一種或多種容器，為適應商業推廣和使用者對化合物使用的需求，每個容器裝有一種或多種材料(如試劑，也可以是濃縮的母液，和/或器械)。這些材料包括但不局限於緩衝液、稀釋液、濾器、針頭、注射器、輸送器、包、容器、瓶和/或試管，附有內容清單和/或使用說明書，內置包裝也附有說明書。整套的說明都要包括在內。
標籤可顯示在容器上或與容器緊密相關。標籤出現在容器上即指標籤字母、數位或其它特徵被黏貼、鑄模、刻在容器上；標籤也可出現在裝有多種容器的容器盒或運輸盒內，如在產品插頁中。一個標籤可用來提示內容物的某種特定治療用途。標籤也可標示內容物使用說明，諸如在上述方法中描述的。
在本說明書中被描述的所有特徵(包括任何所述的請求項、摘要和圖)，和/或任何方法或過程中涉及的所有步驟，均有可能以任意一種組合存在，除非某些特徵或步驟在同一組合中是相互排斥的。
本發明提到的上述特徵，或實施例提到的特徵可以任意組合。本案說明書所揭示的所有特徵可與任何組合物形式並用，說明書中所揭示的各個特徵，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特徵取代。因此除有特別說明，所揭示的特徵僅為均等或相似特徵的一般性例子。
下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用於說明本發明而不用於限制本發明的範圍。下列實施例中未註明具體條件的實驗方法，通常按照常規條件或按照製造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則所有的百分數、比率、比例、或份數按重量計。
本發明中的重量體積百分比中的單位是本領域技術人員所熟知的，例如是指在100毫升的溶液中溶質的重量。除非另行定義，文中所使用的所有專業與科學用語與本領域熟練人員所熟悉的意義相同。此外，任何與所記載內容相似或均等的方法及材料皆可應用於本發明方法中。文中所述的較佳實施方法與材料僅作示範之用。
下面通過實施例的方式進一步說明本發明，但並不因此將本發明限制在所述的實施例範圍之中。下列實施例中未註明具體條件的實驗方法，按照常規方法和條件，或按照商品說明書選擇。
NMR的測定是用Bruker AVANCE-400核磁儀。測定溶劑在譜圖解析中註明。
MS的測定用Agilent 1200-G1956A/1200-6110A/1200-6140A/1260-6125B/ Prime-6125B/1260-6120液質聯用儀，SHIMADZU 20A-2010/20A-2020液質聯用儀，Waters ACQ-QDA液質聯用儀。
HPLC分析使用SHIMADZU 20A 高效液相色譜儀。
SFC分析測定使用Waters UPCC with PDA Detector and QDa Detector超高效合相色譜儀，Waters UPC2 with PDA detector超高效合相色譜儀，Agilent 1260 with DAD detector高效液相色譜儀，Shimadzu LC-20AB with PDA detector高效液相色譜儀，Shimadzu LC-20AD with PDA detector高效液相色譜儀。
製備型HPLC分離使用Shimadzu LC-20AP pump，Shimadzu LH-40 Liquid Handler，Shimadzu SPD-20A Detector，Gilson GX-281 Liquid Handler，Gilson 322 pump，Gilson 156 UV Detector製備型色譜儀。
SFC分離使用The Berger MG II、MG III，Sepiatec's Prep SFC 100 system，Waters Prep 80Q SFC SYSTEM、Prep 150 AP SFC SYSTEM、Prep 200 SFC SYSTEM、Prep 350 SFC SYSTEM。
快速柱色譜分離使用Biotage IsoleraOne快速製備色譜儀。
薄層層析矽膠板使用安徽良臣矽源材料有限公司的GF254丙烯酸黏合劑矽膠板，薄層色譜法（TLC）使用的矽膠板採用的規格是0.25mm，薄層層析分離純化產品採用的規格是0.5mm。
加壓氫化反應氫化瓶和氫氣鋼瓶。
微波反應使用Biotage Initiator+ 微波合成儀。
手套箱使用德力斯DELLIX 定製手套箱。
下面通過實施例對本發明進行詳細描述，但並不意味著對本發明任何不利限制。本發明的化合物可以通過本領域技術人員所熟知的多種合成方法來製備，包括下面列舉的具體實施方式、其與其他化學合成方法的結合所形成的實施方式以及本領域技術上人員所熟知的等同替換方式，優選的實施方式包括但不限於本發明的實施例。對本領域的技術人員而言，在不脫離本發明精神和範圍的情況下針對本發明具體實施方式進行各種變化和改進將是顯而易見的。
實施例1：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-[(1Z)-2-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基]-2-氟乙烯基]苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
第一步：向2-氟-4-硝基苯甲醛(4.50 g，26.6 mmol)的二甲基亞碸(50 mL)溶液中加入6-氮雜螺[2.5]辛烷鹽酸鹽(4.32 g，29.3 mmol)和碳酸鉀(11.3 g，79.8 mmol)，混合物在100°C下攪拌6小時。將反應液冷卻至室溫，用水(150 mL)和乙酸乙酯(100 mL x 3)進行萃取，合併有機相，用飽和食鹽水(150 mL x 3)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-9%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到橙色固體2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-硝基苯甲醛(4.60 g，17.7 mmol，收率：66%)。LCMS (ESI): [M+H] += 261.2； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 10.19 (s, 1H), 7.90 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.88 - 7.82 (m, 2H), 3.23 - 3.15 (m, 4H), 1.61 - 1.51 (m, 4H), 0.37 (s, 4H)。
第二步：將2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-硝基苯甲醛(4.60 g，17.7 mmol)和三溴氟甲烷(12.8 g，47.3 mmol)加入至四氫呋喃(50 mL)中，緩慢滴加六甲基三胺基磷(8.74 g，53.0 mmol)。混合物在20°C下攪拌4小時。將反應液倒入水(150 mL)中，再乙酸乙酯(100 mL x 2)進行萃取，合併有機相，用飽和食鹽水(100 mL)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-6%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到橙色固體6-[2-(2-溴-2-氟乙烯基)-5-硝基苯基]-6-氮雜螺[2.5]辛烷(4.50 g， 12.7 mmol，收率：72%)。LCMS (ESI): [M+H] += 355.0； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 7.97 - 7.87 (m, 1H), 7.81 (dd, J= 2.4, 8.4 Hz, 1H), 7.76 (dd, J= 4.0, 8.4 Hz, 1H), 6.51 - 6.32 (m, 1H), 2.98 (br d, J= 4.4 Hz, 4H), 1.52 (br d, J= 3.6 Hz, 4H), 0.36 (s, 4H)。
第三步：向6-[2-(2-溴-2-氟乙烯基)-5-硝基苯基]-6-氮雜螺[2.5]辛烷(4.50 g，12.7 mmol)的二氧六環(50 mL)溶液中加入雙聯嚬哪醇硼酸酯(4.83 g, 19.0 mmol)，乙酸鉀(3.77 g，38.0 mmol)和[1,1-雙(二苯基磷)二茂鐵]二氯化鈀(0.96 g, 1.27 mmol)。將混合物用氮氣置換三次，並在氮氣氛圍下加熱至90°C攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，用水(50 mL)和乙酸乙酯(50 mL x 3)萃取。合併有機相，用飽和食鹽水(100 mL)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-20%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到橙色固體6-{2-[2-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊環-2-基)乙烯基]-5-硝基苯基}-6-氮雜螺[2.5]辛烷(2.10 g，5.22 mmol，收率：39%)。LCMS (ESI): [M+H] += 320.9； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 7.94 - 7.87 (m, 2H), 7.82 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.75 - 6.57 (m, 1H), 2.99 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 1.51 (br s, 4H), 1.28 (s, 12H), 0.37 (s, 4H)。
第四步：將6-溴-8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉(1.14 g, 3.48 mmol)和6-{2-[2-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊環-2-基)乙烯基]-5-硝基苯基}-6-氮雜螺[2.5]辛烷(2.10 g, 5.22 mmol)加入至二氧六環(40 mL)/水(8 mL)中，然後加入碳酸鉀(0.98 g, 6.96 mmol)和[1,1-雙(二苯基磷)二茂鐵]二氯化鈀(0.26 g, 0.35 mmol)。將混合物用氮氣置換三次，並在氮氣氛圍下加熱至80°C下攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫，過濾，濾餅用二氧六環(50 mL)/水(10 mL)洗滌，得到黃色固體6-[2-(2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-硝基苯基)-1-氟乙烯基]-8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉(1.10 g，2.10 mmol，收率：60%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 523.1； 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 8.94 (br d, J= 3.2 Hz, 1H), 8.21 (br d, J= 8.0 Hz, 1H), 8.08 (br d, J= 9.2 Hz, 1H), 8.01 - 7.91 (m, 2H), 7.81 (s, 1H), 7.50 - 7.40 (m, 2H), 7.01 - 6.85 (m, 1H), 3.63 - 3.55 (m, 4H), 3.17 - 3.06 (m, 4H), 2.42 - 2.31 (m, 4H), 1.71 - 1.61 (m, 4H), 0.43 (s, 4H)。
第五步：向6-[2-(2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-硝基苯基)-1-氟乙烯基]-8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉(1.10 g, 2.10 mmol)的甲醇(18 mL)/飽和氯化銨水溶液(6 mL)中加入鐵粉(1.19 g, 21.0 mmol)。混合物在60°C下攪拌16小時。將反應液趁熱抽濾，用水(50 mL)和乙酸乙酯(50 mL x 3)進行萃取，合併有機相，用飽和食鹽水(50 mL)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得到綠色固體3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{2-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基]-2-氟乙烯基}苯胺(0.25 g, 粗品)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 493.3。
第六步：向3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{2-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基]-2-氟乙烯基}苯胺(250 mg, 0.51 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(134 mg, 1.02 mmol)的二氯甲烷(5 mL)溶液中緩慢滴加2-(氯磺醯基)乙酸乙酯(114 mg, 0.61 mmol)。混合物在20°C攪拌2小時。反應液用水(20 mL)和乙酸乙酯(20 mL x 3)萃取。合併有機相，飽和食鹽水洗滌(20 mL)，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-33%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體2-[(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{2-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基]-2-氟乙烯基}苯基)氨磺醯]乙酸乙酯(150 mg，0.24 mmol，收率：46%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 643.2。
第七步：將2-[(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{2-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基]-2-氟乙烯基}苯基)氨磺醯]乙酸乙酯(150 mg, 0.24 mmol)加入至四氫呋喃(3 mL)溶液中，在0°C下分批加入四氫鋁鋰(12.8 mg, 0.36 mmol)，混合物在0°C攪拌1小時。反應液用水(0.02 mL)和10%氫氧化鈉水溶液(0.04 mL)淬滅，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘餘物用製備型HPLC (C18，48-88%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化，得到黃色固體化合物N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-[(1Z)-2-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基]-2-氟乙烯基]苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺(11.4 mg，0.02 mmol，收率：8%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 601.6； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.79 (s, 1H), 8.88 (br s, 1H), 8.42 (br d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.92 - 7.69 (m, 2H), 7.57 (br dd, J= 4.0, 8.0 Hz, 1H), 7.35 (br s, 1H), 7.01 (br s, 1H), 6.98 - 6.78 (m, 2H), 4.98 (s, 1H), 3.75 (br t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.60 - 3.50 (m, 4H), 3.28 (br s, 2H), 3.02 - 2.84 (m, 4H), 2.31 - 2.15 (m, 4H), 1.70 - 1.44 (m, 4H), 0.36 (s, 4H)。
實施例2：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-[(1Z)-2-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基]-1-氟乙烯基]苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
實施例3：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-[(1E)-2-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基]-1-氟乙烯基]苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
第一步：向6-溴-8-氟喹啉(5.00 g, 22.1 mmol)的N-甲基吡咯烷酮(50 mL)溶液中加入4,4-二氟呱啶鹽酸鹽(5.23 g, 33.2 mmol)和碳酸鉀(9.17 g, 66.4 mmol),混合物在180°C下攪拌48小時。將反應液冷卻至室溫，用水(100 mL)和乙酸乙酯(300 mL x 3)進行萃取，合併有機相，用飽和食鹽水(200 mL)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-20%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到無色油狀產物6-溴-8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉(6.80 g，20.8 mmol, 收率：94%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 326.9。
第二步：在-40°C下，向6-溴-8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉(5.00 g, 15.3 mmol)的四氫呋喃 (100 mL)溶液中滴加正丁基鋰(9.17 mL, 22.9 mmol)，滴加過程中溫度始終保持在-40°C以下，滴加結束後混合物在-40°C下攪拌半小時。將N,N-二甲基甲醯胺(10.00 mL)在該溫度下滴加到反應液中，繼續在該溫度下攪拌2小時。向反應液中加水(200 mL)和乙酸乙酯(300 mL x 3)進行萃取，合併有機相，用飽和食鹽水(200 mL)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-8%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到黃色固體8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-甲醛(1.60 g，5.81 mmol ，收率：38%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 277.0； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.12 (s, 1H), 9.04 (dd, J= 2.0, 4.4 Hz, 1H), 8.57 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 8.24 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.67 (dd, J= 4.0, 8.0 Hz, 1H), 7.52 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 3.53 (br t, J = 5.2 Hz, 4H), 2.28 - 2.13 (m, 4H)。
第三步：在0°C下，將8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-甲醛(5.00 g, 18.1 mmol)和三溴氟甲烷(14.7 g, 54.2 mmol)加入至四氫呋喃(100 mL)中，緩慢加入三苯基磷(14.2 g, 54.2 mmol)，然後再滴加二乙基鋅(54.2 mL, 54.2 mmol)溶液。混合物在0-25°C下攪拌2小時。將反應液倒入水(150 mL)中，再乙酸乙酯(100 mL x 2)進行萃取，合併有機相，用飽和食鹽水(100 mL)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-15%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到橙色固體6-[(1E)-2-溴-2-氟乙烯基]-8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉(3.60 g，9.77 mmol ，收率：54%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 372.8。
第四步： 向6-[(1E)-2-溴-2-氟乙烯基]-8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉(3.60 g, 9.70 mmol)的二氧六環(50 mL)溶液中加入雙聯嚬哪醇硼酸酯(3.69 g, 14.5 mmol)，乙酸鉀(2.88 g, 29.1 mmol)和[1,1-雙(二苯基磷)二茂鐵]二氯化鈀(0.73 g, 0.97 mmol)。將混合物用氮氣置換三次，並在氮氣氛圍下加熱至80°C攪拌12小時。將反應液冷卻至室溫，用水(150 mL)和乙酸乙酯(200 mL x 3)萃取。合併有機相，用飽和食鹽水(100 mL)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-15%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到橙色固體[(1Z)-2-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基]-1-氟乙烯基]硼酸(1.90 g，5.63 mmol，收率：58%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 337.1。
第五步：將2-氟-1-碘-4-硝基苯(2.14 g, 8.03 mmol)和[(1Z)-2-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基]-1-氟乙烯基]硼酸(1.80 g, 5.36 mmol)加入至二氧六環(40 mL)/水(8 mL)中，然後加入碳酸鉀(2.22 g, 16.1 mmol)和[1,1-雙(二苯基磷)二茂鐵]二氯化鈀(0.41 g, 0.54 mmol)。將混合物用氮氣置換三次，並在氮氣氛圍下加熱至80°C下攪拌6小時。將反應液冷卻至室溫，用水(150 mL)和乙酸乙酯(200 mL x 3)萃取。合併有機相，用飽和食鹽水(100 mL)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-15%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體6-[2-(2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-硝基苯基)-1-氟乙烯基]-8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉(0.83 g，1.93 mmol，收率：36%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 432.1。
第六步：向6-[2-(2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-硝基苯基)-1-氟乙烯基]-8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉(400 mg, 0.93 mmol)的二甲基亞碸 (8 mL)溶液中加入6-氮雜螺[2.5]辛烷鹽酸鹽(207 mg, 1.39 mmol)和碳酸鉀(384 mg, 2.78 mmol),混合物在120°C下攪拌12小時。將反應液冷卻至室溫，用水(20 mL)和乙酸乙酯(30 mL x 3)進行萃取，合併有機相，用飽和食鹽水(20 mL)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-8%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到黃色固體產物6-[(1Z)-2-(2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-硝基苯基)-2-氟乙烯基]-8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉(0.34 g，0.65 mmol ，收率：70%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 523.1。
第七步：向6-[(1Z)-2-(2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-硝基苯基)-2-氟乙烯基]-8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉(280 mg, 0.54 mmol)的醋酸溶液(6 mL)中加入鐵粉(302 mg, 5.36 mmol)。混合物在25°C下攪拌16小時。將反應液趁熱抽濾，用水(20 mL)和乙酸乙酯(20 mL x 3)進行萃取，合併有機相，用飽和食鹽水(20 mL)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-30%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到黃色固體3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-[(1Z)-2-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基]-1-氟乙烯基]苯胺(67.0 mg，0.14 mmol，收率：25%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 493.1。
第八步：向3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-[(1Z)-2-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基]-1-氟乙烯基]苯胺(150 mg, 0.30 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(80.3 mg, 0.61 mmol)的四氫呋喃(4 mL)溶液中緩慢滴加2-(氯磺醯基)乙酸乙酯(68.2 mg, 0.37 mmol)。混合物在20°C攪拌2小時。反應液用水(20 mL)和乙酸乙酯(20 mL x 3)萃取。合併有機相，飽和食鹽水洗滌(20 mL)，用無水硫酸鎂乾，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-30%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到黃色固體乙基 2-{[(4-{(1Z)-2-[8-(4,4-二氟呱啶基)(6-喹啉基)]-1-氟乙烯基}-3-(6-氮雜螺[2.5]辛-6-基)苯基)氨基]磺醯}醋酸鹽(120 mg，0.18 mmol，收率61%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 643.1。
第九步：將乙基 2-{[(4-{(1Z)-2-[8-(4,4-二氟呱啶基)(6-喹啉基)]-1-氟乙烯基}-3-(6-氮雜螺[2.5]辛-6-基)苯基)氨基]磺醯}醋酸鹽(100 mg, 0.16 mmol)加入至四氫呋喃(3 mL)溶液中，在0°C下分批加入四氫鋁鋰(8.33 mg, 0.23 mmol)，混合物在0°C攪拌2小時。反應液用水(0.02 mL)和10%氫氧化鈉水溶液(0.04 mL)淬滅，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘餘物先用製備型HPLC (C18，46-86%梯度的水(碳酸氫銨)/乙腈)純化，凍乾得到白色混合物，通過手性SFC(IG，體系：二氧化碳/乙醇(0.1%的氨水))分離，進一步得到N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-[(1Z)-2-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基]-1-氟乙烯基]苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺(12.0 mg，0.02 mmol，收率：13%)（實施例 2）和N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-[(1E)-2-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基]-1-氟乙烯基]苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺(5.00 mg，0.008 mmol，收率：5%)（實施例 3）。
實施例 2：LCMS (ESI): [M+H]+ = 601.2； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.98 (s, 1H), 8.77 (dd, J= 1.6, 4.0 Hz, 1H), 8.13 (dd, J= 1.6, 8.4 Hz, 1H), 7.44 (dd, J= 4.0, 8.4 Hz, 1H), 7.33 (br dd, J= 0.8, 8.8 Hz, 1H), 7.30 (br s, 1H), 6.93 - 6.86 (m, 2H), 6.71 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 6.67 - 6.59 (m, 1H), 4.99 (br s, 1H), 3.81 - 3.75 (m, 2H), 3.32 - 3.30 (m, 2H), 3.13 (br s, 4H), 2.87 (br s, 4H), 2.13 - 2.00 (m, 4H), 1.03 (br s, 4H), 0.16 (s, 4H)。
實施例 3：LCMS (ESI): [M+H]+ = 601.2； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.98 (s, 1H), 8.85 (br d, J= 3.2 Hz, 1H), 8.35 (br d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.51 (br d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.44 (s, 1H), 7.09 - 6.86 (m, 3H), 4.96 (br t, J= 5.6 Hz, 1H), 3.76 (q, J= 6.0 Hz, 2H), 3.50 (br s, 4H), 3.31 - 3.27 (m, 2H), 3.04 (br s, 4H), 2.31 - 2.15 (m, 4H), 1.52 (br s, 4H), 0.34 (s, 4H)。
實施例4：N-(4-(5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-1-基-2-羥基乙基磺醯胺
第一步：向2-氯-6-甲基嘧啶-4-甲腈(1.80 g, 11.7 mmol)的1-甲基-2-吡咯烷酮(30 mL)的溶液中加入鹽酸4,4-二氟呱啶(2.77 g, 17.5 mmol)和碳酸鉀(4.96 g, 35.1 mmol)。將混合物加熱至120°C攪拌16小時。向反應液中加入水(50 mL)，用二氯甲烷（50 mLx3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到殘渣。用快速矽膠層析法(矽膠，0~6%乙酸乙酯/石油醚)得到白色固體2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-甲腈(1.60 g，11.7 mmol，收率：57.3%)。LCMS (ESI): [M+H] += 239.0。
第二步：向2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-甲腈(1.50 g, 6.30 mmol)的乙醇(20.0 mL)溶液中加入水合肼(1.97 g, 31.48 mmol)。將混合物在25°C下攪拌16小時。反應液減壓濃縮，得到白色固體2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-甲醯亞胺醯肼(1.60 g，6.29 mmol，收率94.0%)。LCMS (ESI): [M+H] += 271.1。
第三步：向2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-甲醯亞胺醯肼(0.50 g, 1.85 mmol)的四氫呋喃(5.00 mL)溶液中加入4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯甲醯氯化(1.04 g, 2.77 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(0.73 g, 5.55 mmol)，將反應混合液加熱至60°C攪拌16小時。反應液減壓濃縮，得到白色固體N'-((2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)(氨亞基)甲基)-4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯並醯肼（1.2 g, 1.84mmol,粗品）。LCMS (ESI): [M+H] += 610.1。
第四步：將N'-((2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)(氨亞基)甲基)-4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯並醯肼(1.10 g, 1.80 mmol)加入到醋酸(20.0 mL)溶液中，將混合物加熱至100°C攪拌4小時，向反應液中加入水(10 mL)，用二氯甲烷(10 mLx3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到殘渣。用快速矽膠層析法(矽膠，0~7%乙酸乙酯/石油醚)得到白色固體6-(2-(5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷（0.56 g，1.80mmol，收率：54.3%）。LCMS (ESI): [M+H] += 592.2。
第五步：向6-(2-(5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(1.35 g, 2.28 mmol)的四氫呋喃(20.0 mL)溶液中加入三乙胺(0.71 g, 6.85 mmol)和(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基矽烷(0.46 g, 2.74 mmol)，將混合液加熱至55°C攪拌4小時，向反應液中加入水(50 mL)，用二氯甲烷(50 mLx3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到殘渣。用快速矽膠層析法(矽膠，0~6%乙酸乙酯/石油醚)得到無色透明油狀物6-(2-(5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-4-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷（0.43 g，2.28mmol，收率：26.1%）。LCMS (ESI): [M+H] += 722.3。
第六步：將2-羥基乙基磺醯氨(103 mg, 0.83 mmol)和肌氨酸(56.8 mg, 0.63 mmol)加入至N,N-二甲基甲醯胺(4.00 mL)溶液中，在25°C下加入碘化亞銅(61.9 mg, 0.32 mmol)和磷酸鉀(552 mg, 2.54 mmol)，並在50°C攪拌5分鐘。隨後將6-(2-(5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-4-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(460 mg, 0.63 mmol)分批加入，混合物在100°C攪拌16小時。向反應混合物中加入水(20 mL),用乙酸乙酯(30 mLx2)萃取，合併有機相，鹽水洗滌兩次，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得黃色油狀物N-(4-(5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-4-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-1-基-2-羥基乙磺醯胺（0.35 g, 0.63mmol,粗品）。LCMS (ESI): [M+H] += 719.7。
第七步：向三氟乙酸(2.00 mL)和二氯甲烷(2.00 mL)的混合液中加入N-(4-(5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-4-((2-(三甲基甲矽烷基)乙氧基)甲基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-1-基-2-羥基乙磺醯胺(0.35 g, 0.63mmol)，將混合物在25°C下攪拌4小時。向反應混合物中加入水(20 mL)和乙酸乙酯(60 mLx2 )萃取。合併有機相，鹽水洗滌兩次，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘渣。殘留物用製備型HPLC (C18，18-58%梯度的水(甲酸) /乙腈)純化，得到白色固體N-(4-(5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-1-基-2-羥基乙基磺醯胺（92 mg，0.59mmol，收率：26%）。LCMS (ESI): [M+H] += 589.5。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 14.19 (s, 1H), 9.99 (s, 1H), 7.72 (br d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.18 - 6.78 (m, 2H), 5.54 - 4.38 (m, 1H), 4.01 (br s, 4H), 3.76 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.30 (br s, 2H), 2.99 - 2.76 (m, 4H), 2.39 (s, 3H), 2.10 - 1.92 (m, 4H), 1.62-1.32 (m, 4H), 0.40 - 0.18 (m, 4H)。
實施例 5：(2-(6-氮雜螺[2.5]辛-6-基)-4-{[(2-羥基乙基)磺醯]氨基}苯基)-N-[5-(4,4-二氟呱啶基)(4-氫-1,2,4-三唑並[4,3-e]嘧啶-7-基)]甲醯胺
第一步：向1-(4-溴-2-氟苯基)乙酮(5.00 g, 23.0 mmol)和碳酸鉀(9.55 g, 69.1 mmol)的二甲基亞碸(50 mL)的溶液中加入6-氮雜螺[2.5]辛的鹽酸鹽(3.40 g, 23.0 mmol)，將混合物在130°C攪拌16小時。將反應混合物過濾後倒入水(300 mL)中。用乙酸乙酯(400 mL x 2)提取，合併有機相，用飽和食鹽水(250 mL)洗滌，用無水硫酸鎂進行乾燥，過濾，減壓濃縮，得到殘渣。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-15%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色油狀物1-(4-溴-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)乙酮(6.60 g，21.4 mmol，收率：93%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 309.9。
第二步：向甲基 2-氯-6-甲基嘧啶-4-甲酸基酯(5.00 g, 26.8 mmol)和三乙胺(8.13 g, 80.4 mmol)的二甲基亞碸(50 mL)的溶液中加入鹽酸4,4-二氟呱啶(4.22 g, 26.8 mmol)，將混合物在130°C攪拌16小時。將反應混合物倒入(300 mL)的水中。用乙酸乙酯(400 mL x 2)提取，合併有機相，用飽和食鹽水(250 mL)洗滌，用無水硫酸鎂進行乾燥，過濾，減壓濃縮，得到殘渣。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-15%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到白色固體甲基 2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-甲酸基酯 (2.70 g，9.92 mmol，收率：37%)。LCMS (ESI): [M+H] += 272.0。
第三步：在氮氣保護下，向1-乙醯基-2-(6-氮雜螺[2.5]辛-6-基)-4-溴苯(2.00 g, 6.49 mmol) 的四氫呋喃(40 mL)溶液中加入氫鈉 (0.39 g, 9.73 mmol, 純度60%)，將混合物在25°C下攪拌15分鐘。然後加入另一原料甲基 2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-甲酸基酯(1.76 g, 6.49 mmol)，反應液繼續在80°C下攪拌12小時。將反應混合物過濾後倒入(80 mL)的水中，用甲基叔丁基醚(100 mL x 3)提取混合物，分離併合並有機相，用飽和食鹽水(40 mL)洗滌，用無水硫酸鎂烘乾，過濾，減壓濃縮，得到殘渣。殘留物用快速柱色譜純化（矽膠，0-15%梯度的乙酸乙酯/石油醚）得到黃色固體1-(4-溴-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-3-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)丙烷-1,3-二酮(2.40 g，4.41 mmol，收率：68%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 548.8。
第四步：25°C下，向1-(4-溴-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-3-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)丙烷-1,3-二酮(1.00 g, 1.83 mmol)的乙醇(20 mL)溶液中加入鹽酸羥基胺(0.25 g, 3.65 mmol)，反應混合物在100°C下攪拌12小時。反應液緩慢滴加到水(50 mL)中，有沉澱析出，用砂芯漏斗過濾收集濾餅，濾餅用油泵乾燥，得到粗產品。粗產物經手性分離純化，得到白色固體化合物5-(4-溴-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-3-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)異噻唑(0.46 g，0.84 mmol，收率：46%)。LCMS (ESI): [M+H]+ =545.8。
第五步：25°C下，向2-羥基乙磺醯胺(55.2 mg, 0.44 mmol)，2-(甲基氨基)乙酸 (32.7 mg, 0.37 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)溶液中加入碘化亞銅(35.0 mg, 0.18 mmol)和磷酸鉀(312 mg, 1.47 mmol)，反應混合物在氮氣的保護下加熱到50°C攪拌5分鐘，然後在50°C下加入5-(4-溴-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-3-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)異噻唑(200 mg, 0.37 mmol)重新置換氮氣，最後反應液在100°C下攪拌16小時。將反應混合物減壓濃縮，去除溶劑，用N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)稀釋殘渣。稀釋液用製備型HPLC (C18，48-88%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化，得到白色固體化合物N-(4-(3-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)異噻唑-5-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺(120 mg， 0.20 mmol，收率：55%)。LCMS (ESI): [M+H] +=589.5。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.11 (s, 1H), 7.82 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.16 - 7.15 (m, 2H), 7.04 (dd, J = 1.9, 8.5 Hz, 1H), 4.94(br s, 1H), 4.08 - 3.91 (m, 4H), 3.76 (br t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.16- 3.05(m, 2H), 2.95 - 2.81 (m, 4H), 2.42 (s, 3H), 2.14 - 1.93 (m, 4H), 1.69 - 1.44 (m, 4H), 0.36 (s, 4H)。
實施例 6：N-(4-(5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺
第一步：25°C下，向1-(4-溴-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-3-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)丙烷-1,3-二酮(500 mg, 0.91 mmol)的乙醇(10 mL)溶液中加入單鹽酸肼(93.9 mg, 1.37 mmol)和碳酸鉀(190 mg, 2.74 mmol)，反應混合物在100°C下攪拌12小時。反應液緩慢滴加到水(50 mL)中，有沉澱析出，用砂芯漏斗過濾收集濾餅，濾餅用水(50 mL)洗滌，經油泵乾燥，得到亮黃色固體化合物6-(5-溴-2-(5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-基)苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(410 mg，0.76 mmol，收率：83%)。LCMS (ESI): [M+H] +=542.9。
第二步： 25°C下，向6-(5-溴-2-(5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-基)苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(250 mg, 0.46 mmol)的二氧六環(5 mL)溶液中加入2-羥基乙磺醯胺(57.6 mg, 0.46 mmol)，磷酸鉀(391 mg, 1.84 mmol)，二叔-丁基-[2-(2,4,6-三異丙基苯基)苯基]磷烷(39.1 mg, 0.09 mmol)和三(二亞苄基丙酮)二鈀(42.1 mg, 0.05 mmol)，反應混合物在氮氣的保護下加熱到100°C攪拌16小時。將反應混合物減壓濃縮，去除溶劑，用N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)稀釋殘渣。稀釋液用製備型HPLC (C18，24-64%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化，得到白色固體化合物N-(4-(5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺(133 mg， 0.23 mmol，收率：49%)。LCMS (ESI): [M+H] +=588.3。 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 14.52 - 12.29 (m, 1H), 9.84 (br s, 1H), 7.59 (br d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.50 (br s, 1H), 7.12 - 7.03 (m, 2H), 6.95 (t, J = 1.0 Hz, 1H), 4.08 - 3.92 (m, 4H), 3.76 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 3.35- 3.30 (m, 1H), 3.29 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.98 - 2.74 (m, 4H), 2.37 (s, 3H), 2.09 - 1.94 (m, 4H), 1.66 - 1.34 (m, 4H), 0.32 (s, 4H)。
實施例 7：N-(4-(3-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1,2,4-噁二唑-5-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺
第一步：在2-氯-6-甲基嘧啶-4-甲腈(5.00 g, 32.5 mmol)的二甲基亞碸(50.0 mL)溶液中加入鹽酸4,4-二氟呱啶(7.70 g, 48.8 mmol)和碳酸鉀(13.8 g, 97.6 mmol)。將混合物加熱至120°C下攪拌16小時。向反應液中加入水(50 mL)，用乙酸乙酯(50 mLx3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速矽膠層析法(矽膠，0-6%梯度的乙酸乙酯/石油醚）得到白色固體2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-甲腈(4.50 g，25.5mmol，收率：58%)。LCMS (ESI): [M+H] +=239.0。
第二步：向2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-甲腈（1.00 g, 4.20 mmol）和鹽酸羥胺(0.58 g, 8.39 mmol)的乙醇(20.0 mL)溶液中加三乙胺(1.30 g, 12.6 mmol)。將混合物加熱至80°C下攪拌16小時。向反應液中加入水(20 mL)，析出白色固體 ，過濾收集殘渣得到白色固體(Z)-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-N'-羥基-6-甲基嘧啶-4-甲脒(1.10 g， 4.19 mmol，收率：97%)。LCMS (ESI): [M+H] +=272.0。
第三步：向(Z)-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-N'-羥基-6-甲基嘧啶-4-甲脒(500 mg, 1.84 mmol)和4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯甲醯氯化(900 mg, 2.40 mmol)的四氫呋喃(4.00 mL)溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(729 mg, 5.53 mmol)。將混合物在25°C下攪拌2小時。反應液用水（5 mL）稀釋，用二氯甲烷(5 mLx3)萃取，有機層用飽和食鹽水(20 mL)洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓濃縮，得到殘渣，殘留物用快速矽膠層析法（矽膠，0-10%梯度的乙酸乙酯/石油醚）得到棕色固體(Z)-N-((2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)(肟基)甲基)-4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯甲醯胺(1.30 g, 1.80 mmol，收率79%)。LCMS (ESI): [M+H] +=611.1。
第四步：將(Z)-N-((2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)(肟基)甲基)-4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯甲醯胺（1.10 g, 1.80 mmol）的甲苯(10.00 mL)的混合溶液加熱至120°C攪拌16小時。向反應液中加入水(10 mL)，用二氯甲烷(10 mLx3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速矽膠層析法（矽膠，0-3%梯度的乙酸乙酯/石油醚）得到黃色固體3-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-5-(4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-1,2,4-噁二唑(420 mg, 1.80 mmol，收率：39%)。LCMS (ESI): [M+H] +=593.1。
第五步：向磷酸鉀(512 mg, 2.36 mmol)，2-羥基乙磺醯胺(148 mg, 1.18 mmol)和肌氨酸(53.7 mg, 0.59 mmol)的二甲基甲醯胺(5.00 mL)溶液中加入碘化亞銅(115 mg, 0.59 mmol)。將混合物加熱至50°C攪拌5分鐘。並將3-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-5-(4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-1,2,4-噁二唑(900 mg, 1.30 mmol)加入到混合物中，然後在氮氣的保護下加熱至100°C攪拌16小時。反應液用水(10 mL)稀釋，用二氯甲烷(10 mLx3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用製備型HPLC (C18，50-90%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化，得到白色固體化合物N-(4-(3-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1,2,4-噁二唑-5-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺(227 mg， 0.59 mmol，收率：65%)。LCMS (ESI): [M+H] +=590.5。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.27 (s, 1H), 8.00 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.10 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.99 (dd, J = 2.0, 8.8 Hz, 1H), 4.95 (br s, 1H), 4.00 (br t, J = 5.6 Hz, 4H), 3.78 (br t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.39 (br t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.98 (br t, J = 4.8 Hz, 4H), 2.45 (s, 3H), 2.13 - 1.98 (m, 4H), 1.55 (m, 4H), 0.35 (s, 4H)。
實施例 8：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{5-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-2H-1,2,3,4-四唑-2-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
第一步：向甲基 2-氯-6-甲基嘧啶-4-甲酸基酯 (5.00 g, 26.8 mmol)和N,N-二異丙基乙胺 (10.6 g , 80.4 mmol)的叔丁醇(100 mL) 的溶液中加入4,4-二氟呱啶鹽酸鹽(4.22 g , 26.8 mmol)。將混合物在100°C下攪拌16個小時。反應液用水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯(100 mL x 2)萃取，有機層用飽和食鹽水(100 mL x 2)洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓濃縮，得到殘渣。殘留物經過柱分離（矽膠，0-15%梯度的乙酸乙酯/石油醚）得到黃色固體甲基 2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-甲酸基酯(5.60 g，20.6 mmol，收率：77.0 %)。LCMS (ESI): [M+H] +=271.9。
第二步：向甲基 2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-甲酸基酯(6.00 g, 22.1 mmol)的甲醇（100 mL）溶液中加入硼氫化鈉(2.51 g , 66.3 mmol)，將混合物在25°C攪拌16小時。反應液用水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯(100 mL x 2)萃取，有機層用飽和食鹽水(100 mL x 2)洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗品[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]甲醇（5.00 g，20.5 mmol，收率：92.9 %）。LCMS (ESI): [M+H] +=244.1。
第三步：向[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]甲醇(5.00 g, 20.5 mmol)和三乙胺(10.4 g, 102 mmol)的二甲基亞碸(100 mL)溶液中加入吡啶三氧化硫 (9.81 g, 61.6 mmol)，將混合物在25°C攪拌16小時。反應液用水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯(100 mL x 2)萃取，有機層用飽和食鹽水(100 mL x 2)洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗品2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-甲醛（3.00 g，12.4 mmol，收率：60.5 %）。LCMS (ESI): [M+H] +=242.0。
第四步：向2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-甲醛(1.00 g, 4.14 mmol)的甲醇（20 mL）溶液中加入4-甲基苯-1-磺醯肼(0.77 g, 4.14 mmol)，將混合物在25°C攪拌2小時。反應液經過過濾，固體旋乾得到N'-[(Z)-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]甲亞基]-4-甲基苯-1-磺醯肼(0.68 g，1.66 mmol，收率：40.0 %)。LCMS (ESI): [M+H] +=410.2。
第五步：向2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-溴苯胺(453 mg, 1.61 mmol)的乙腈(6 mL)的溶液中加入亞硝酸叔丁酯(308 mg, 2.93 mmol)。將混合物在25°C下攪拌1小時。然後將N'-[(Z)-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]甲亞基]-4-甲基苯-1-磺醯肼(0.22 g, 0.44 mmol)的吡啶(6 mL)溶液加入到反應液中。將混合物在25°C下攪拌16小時。反應液用水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯(100 mL x 2)萃取，有機層用飽和食鹽水(100 mL x 2)洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓濃縮，得到殘留物。殘留物經過柱分離（矽膠，0~5%梯度的乙酸乙酯/石油醚）得到黃色固體6-(5-溴-2-{5-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-2H-1,2,3,4-四唑-2-基}苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(390 mg，0.72 mmol，收率：49.0 %)。LCMS (ESI): [M+H] +=545.1。
第六步：將6-(5-溴-2-{5-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-2H-1,2,3,4-四唑-2-基}苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(365 mg, 0.67 mmol)和2-羥基乙磺醯胺 (108 mg, 0.87 mmol)溶於二氧六環 (8.00 mL)中，加入磷酸鉀 (426 mg, 2.00 mmol), 2-二叔丁基膦-2′,4′,6′-三異丙基聯苯 (56.8 mg, 0.13 mmol)，三 (二亞苄基丙酮)二鈀 (61.3 mg, 0.06 mmol)。在氮氣氛圍下將混合物加熱到100 °C攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，用水(20 mL)和乙酸乙酯(20 mL x 2)進行萃取，合併有機相，用氨水(20 mL x 2)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用製備型HPLC (C18，36-76%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化，得到黃色固體N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{5-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-2H-1,2,3,4-四唑-2-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺 (220 mg，0.37 mmol，收率：55.7 %)。LCMS (ESI): [M+H] +=590.3， 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.96 (s, 1H), 7.35 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.93 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 6.79 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 5.32 - 4.63 (m, 1H), 3.76 (br t, J= 5.6 Hz, 4H), 3.55 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.18 - 3.15 (m, 2H), 2.55 - 2.49 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 1.88 - 1.74 (m, 4H), 1.00 - 0.93 (m, 4H), 0.00 (s, 4H)。
實施例 9：N-(4-(5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-2H-四氮唑-2-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺
實施例9參照實施例8的類似合成路線製備得到的：LCMS (ESI): [M+H] += 589.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 10.07 (s, 1H), 7.95 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.14 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.02 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 5.51 - 4.53 (m, 1H), 3.85 - 3.72 (m, 6H), 3.36 - 3.33 (m, 2H), 2.93 (br t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.48 (br s, 3H), 2.11 - 2.00 (m, 4H), 1.55 - 1.38 (m, 4H), 0.32 (s, 4H)。
實施例 10：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-咪唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
第一步：向2-氯-6-甲基嘧啶-4-甲酸甲酯(5.00 g, 26.8 mmol)的叔丁醇(50 mL)溶液中加入4,4-二氟呱啶鹽酸鹽(4.64 g, 29.5 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(10.6 g, 80.4 mmol)。混合物在100°C下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，用水(100 mL)和乙酸乙酯(100 mL x 3)進行萃取，合併有機相，用飽和食鹽水(100 mL)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得到黃色固體甲基 2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-甲酸基酯(6.20 g，22.9 mmol，收率：85%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 272.0。
第二步：將甲基 2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-甲酸基酯(6.20 g, 22.9 mmol)加入至甲醇(90 mL)/水(15 mL)中，在0°C下分批加入硼氫化鈉(2.56 g, 66.21 mmol)。混合物在20°C下攪拌16小時。將反應液緩慢倒入水(150 mL)中淬滅，再乙酸乙酯(100 mL x 2)進行萃取，合併有機相，用飽和食鹽水(100 mL)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得到黃色油狀物[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]甲醇(5.10 g，21.0 mmol，收率：92%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 244.0。
第三步：向[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]甲醇(5.10 g, 21.0 mmol)的二甲基亞碸(100 mL)溶液中滴加三乙胺(10.4 g, 103 mmol)，再分批緩慢加入吡啶三氧化硫絡合物(10.0 g, 62.9 mmol)。將混合物在20°C下攪拌5小時。將反應液用水(100 mL)和乙酸乙酯(200 mL x 3)萃取。合併有機相，用飽和食鹽水(100 mL x 2)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得到棕色油狀物2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-甲醛(5.00 g,粗品)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 242.1。
第四步：將N-[(E)-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]甲亞基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(5.00 g, 20.7 mmol)的二氯甲烷(60 mL)溶液中加入2-甲基-2-丙亞磺醯胺(2.64 g, 21.8 mmol)和碳酸銫(8.27 g, 24.9 mmol)。混合物在20°C下攪拌16小時。反應液加入水(100 mL)和乙酸乙酯(100 mL x 3)萃取。合併有機相，飽和食鹽水洗滌(100 mL)，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得到橙色固體N-[(E)-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]甲亞基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(6.20 g，18.0 mmol，收率：87%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 345.0。
第五步：向N-[(E)-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]甲亞基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(6.20 g, 18.0 mmol)的甲醇(70 mL)溶液中加入碳酸鉀(6.35 g, 45.0 mmol)和對甲基苯磺醯甲基異腈(3.87 g, 19.8 mmol)。混合物在20°C下攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫，用水(50 mL)和乙酸乙酯(50 mL x 3)進行萃取，合併有機相，用飽和食鹽水(50 mL)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-6%梯度的甲醇/二氯甲烷)得到灰白色固體2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-4-(1H-咪唑-4-基)-6-甲基嘧啶(4.20 g，, 15.12 mmol，收率：84%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 280.0。
第六步：向2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-4-(1H-咪唑-4-基)-6-甲基嘧啶(1.00 g, 3.58 mmol)的二甲基亞碸(20 mL)溶液中加入1,2-二氟-4-硝基苯(0.57 g, 3.58 mmol)和碳酸鉀(1.51 g, 10.7 mmol)。將混合物在60°C下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，用水(50 mL)和乙酸乙酯(50 mL x 3)萃取。合併有機相，用飽和食鹽水(50 mL x 2)洗滌，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-33%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到淡黃色固體2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-4-[1-(2-氟-4-硝基苯基)-1H-咪唑-4-基]-6-甲基嘧啶(1.20 g， 2.87 mmol，收率：87%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 419.1。
第七步：將2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-4-[1-(2-氟-4-硝基苯基)-1H-咪唑-4-基]-6-甲基嘧啶(1.20 g, 2.87 mmol)的二甲基亞碸(20 mL)溶液中加入6-氮雜螺[2.5]辛烷鹽酸鹽(0.47 g, 3.16 mmol)和碳酸鉀(1.21 g, 8.60 mmol)，混合物在120°C下攪拌16小時。反應液加入水(50 mL)和乙酸乙酯(50 mL x 3)萃取。合併有機相，飽和食鹽水洗滌(20 mL x 2)，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-50%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到白色固體6-(2-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-咪唑-1-基}-5-硝基苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(0.60 g，1.18 mmol，收率：41%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 510.3。
第八步：向6-(2-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-咪唑-1-基}-5-硝基苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(500 mg, 0.98 mmol)的甲醇(9 mL)/飽和氯化銨水溶液(3 mL)中分批加入鐵粉(332 mg, 5.89 mmol)。混合物在60°C下攪拌16小時。將反應液趁熱抽濾，用水(20 mL)和乙酸乙酯(20 mL x 3)進行萃取，合併有機相，用飽和食鹽水(20 mL)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-50%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-咪唑-1-基}苯胺(380 mg，0.75 mmol，收率：81%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 480.2。
第九步：向3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-咪唑-1-基}苯胺(350 mg, 0.73 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(193 mg, 1.46 mmol)的二氯甲烷(7 mL)溶液中緩慢滴加氯磺醯乙酸甲酯(294 mg, 1.58 mmol)。混合物在20°C攪拌2小時。反應液用水(20 mL)和乙酸乙酯(20 mL x 3)萃取。合併有機相，飽和食鹽水洗滌(20 mL)，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-50%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到白色固體甲基 2-[(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-咪唑-1-基}苯基)氨磺醯]醋酸鹽(210 mg，0.34 mmol, 收率47%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 616.2。
第十步：將甲基 2-[(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-咪唑-1-基}苯基)氨磺醯]醋酸鹽(200 mg, 0.32 mmol)加入至四氫呋喃(4 mL)溶液中，在0°C下分批加入四氫鋁鋰(34.8 mg, 0.97 mmol)，混合物在0°C攪拌1小時。反應液用水(0.03 mL)和10%氫氧化鈉水溶液(0.06 mL)淬滅，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘餘物用製備型HPLC (C18，32-72%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化，得到白色固體化合物N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-咪唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺(35.0 mg，0.06 mmol，收率：18%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 588.6， 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.88 (s, 1H), 8.30 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 8.09 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.39 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.10 - 7.03 (m, 2H), 6.96 (dd, J= 2.4, 8.4 Hz, 1H), 4.97 (s, 1H), 3.95 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 3.76 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.27 (br s, 2H), 2.71 - 2.64 (m, 4H), 2.34 (s, 3H), 2.06 - 1.91 (m, 4H), 1.32 (br s, 4H), 0.25 (s, 4H)。
實施例11：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲氧基嘧啶-4-基]-1H-咪唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 604.5； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.89 (s, 1H), 8.25 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 8.07 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.38 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.07 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 6.95 (dd, J= 2.4, 8.4 Hz, 1H), 6.53 (s, 1H), 4.97 (m, 1H), 3.95 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 3.88 (s, 3H), 3.76 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.30 - 3.26 (m, 2H), 2.69 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 2.09 - 1.91 (m, 4H), 1.32 (br s, 4H), 0.25 (s, 4H)。
實施例 12：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{1-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-咪唑-4-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
第一步：向2-(6-氮雜螺[2.5]辛-6-基)-4-碘苯甲醛(1.50 g, 4.40 mmol)的二氯甲烷(20 mL)溶液中加入2-甲基-2-丙亞磺醯胺(0.53 g, 4.40 mmol)和碳酸銫(1.61 g, 4.84 mmol)。混合物在25°C下攪拌16小時。將反應液用水(50 mL)和乙酸乙酯(50 mL x 3)進行萃取，合併有機相，用飽和食鹽水(50 mL)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-11%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到棕色固體N-[(E)-(2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-碘苯基)甲亞基]-2-甲基-2-丙亞磺醯胺(1.80 g，4.05 mmol，收率：92%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 445.0。
第二步：向N-[(E)-(2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-碘苯基)甲亞基]-2-甲基-2-丙亞磺醯胺(1.80 g, 4.05 mmol)的甲醇(30 mL)溶液中加入碳酸鉀(1.43 g, 10.1 mmol)和對甲基苯磺醯甲基異腈(5.10 g, 90.3 mmol)。混合物在60°C下攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫，用水(50 mL)和乙酸乙酯(50 mL x 3)進行萃取，合併有機相，用飽和食鹽水(50 mL)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-6%梯度的甲醇/二氯甲烷)得到灰白色固體6-[2-(1H-咪唑-4-基)-5-碘苯基]-6-氮雜螺[2.5]辛烷(0.90 g，2.38 mmol，收率：59%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 380.0。
第三步：向6-[2-(1H-咪唑-4-基)-5-碘苯基]-6-氮雜螺[2.5]辛烷(560 mg, 1.48 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)溶液中加入2-甲硫基-4-氯-6-甲基嘧啶(284 mg, 1.62 mmol)和碳酸鉀(312 mg, 2.21 mmol)。將混合物在100°C下攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，用水(50 mL)和乙酸乙酯(80 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-25%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到灰白色固體6-(5-碘-2-{1-[6-甲基-2-(甲基巰基)嘧啶-4-基]-1H-咪唑-4-基}苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(570 mg，1.15 mmol，收率：78%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 518.0。
第四步：將6-(5-碘-2-{1-[6-甲基-2-(甲基巰基)嘧啶-4-基]-1H-咪唑-4-基}苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(560 mg, 1.08 mmol)的叔丁醇(3 mL)/水(3 mL)溶液中加入單過硫酸氫鉀(455 mg, 2.71 mmol)，混合物在25°C下攪拌16小時。反應液加入水(20 mL)和乙酸乙酯(20 mL x 3)萃取。合併有機相，飽和食鹽水洗滌(20 mL)，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得到棕色固體6-{5-碘-2-[1-(2-甲亞磺醯基-6-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-4-基]苯基}-6-氮雜螺[2.5]辛烷(420 mg, 粗品)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 534.0。
第五步：向6-{5-碘-2-[1-(2-甲亞磺醯基-6-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-4-基]苯基}-6-氮雜螺[2.5]辛烷(400 mg, 0.75 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)溶液中加入4,4-二氟呱啶鹽酸鹽(126 mg, 0.80 mmol)和碳酸銫(363 mg, 1.09 mmol)，反應液在80°C攪拌16小時。將反應液冷卻至室溫，用水(30 mL)和乙酸乙酯(30 mL x 3)萃取。合併有機相，飽和食鹽水洗滌(30 mL)，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-25%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到白色固體6-(2-{1-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-咪唑-4-基}-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(130 mg，0.22 mmol，收率：29%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 591.1。
第六步： 將2-羥基乙基磺醯氨(33.1 mg, 0.26 mmol)和(1R,2R)-(-)-N,N-二甲基環己烷-1,2-二胺(29.2 mg, 0.20 mmol)加入至N,N-二甲基甲醯胺(2.5 mL)中，在25°C下加入碘化亞銅(19.8 mg, 0.10 mmol)和磷酸鉀(176 mg, 0.81 mmol)，並在50°C攪拌5分鐘。隨後將6-(2-{1-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-咪唑-4-基}-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(120 mg, 0.20 mmol)分批加入，將混合物用氮氣置換三次，並在氮氣氛圍下加熱至100°C攪拌3小時。反應液冷卻至室溫，用水(10 mL)和乙酸乙酯(10 mL x 3)萃取。合併有機相，飽和食鹽水洗滌(10 mL x 3)，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用製備型HPLC (C18，16-56%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化，得到白色固體N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{1-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-咪唑-4-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺(40.5 mg， 0.07 mmol，收率：34%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 590.3， 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.72 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.66 (s, 1H), 4.97 (s, 1H), 3.97 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 3.84 - 3.75 (m, 2H), 3.63 (br d, J= 2.8 Hz, 2H), 2.83 - 2.71 (m, 4H), 2.39 (s, 3H), 2.06 - 1.91 (m, 4H), 1.29 - 1.22 (m, 4H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 13：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{1-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基吡啶-4-基]-1H-咪唑-4-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 587.3； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 9.73 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.90 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.10 (s, 1H), 7.02 - 6.93 (m, 2H), 6.90 (s, 1H), 4.95 (br s, 1H), 3.86 - 3.69 (m, 6H), 3.26 (br t, J= 6.4 Hz, 2H), 2.95 – 2.80 (m, 4H), 2.39 (s, 3H), 2.07 - 1.93 (m, 4H), 1.6 - 1.4 (m, 4H), 0.34 (s, 4H)。
實施例 14：N-(4-(5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3-(6-氮雜螺環[2.5]辛-6-基)苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
第一步：2-氯-6-甲基嘧啶-4-羧酸甲酯(3.00 g, 16.08 mmol)，4,4-二氟呱啶鹽酸鹽(3.04 g, 19.29 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(7.46 g, 56.54 mmol)加到N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)中，反應液60°C攪拌3小時。反應液倒入飽和氯化銨水溶液(50 mL)中，乙酸乙酯(50 mLx3)萃取，有機相合併，飽和氯化鈉水溶液(50 mLx3)洗3次，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得粗品2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-羧酸甲酯(4.40 g， 收率：86%)。LCMS (ESI): [M+H] +=272.1。
第二步：2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-羧酸甲酯(4.40 g, 16.22 mmol) 加到85%水合肼(10 mL)中，反應液40°C攪拌2小時。反應液倒入水(50 mL)中，抽濾，濾得固體水(50 mLx3)洗，乾燥得粗品2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-碳醯肼(4.40 g， 收率：100%)。LCMS (ESI): [M+H] +=272.1。
第三步：2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-碳醯肼(2.00 g, 7.37 mmol)，4-溴-2-(6-氮雜螺[2.5]辛-6-基)苯甲酸(2.74 g, 8.85 mmol)，2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(5.72 g, 14.74 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(1.94 g, 14.74 mmol)加到N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)中，反應液25°C攪拌2小時。反應液倒入飽和氯化銨水溶液(50 mL)中，乙酸乙酯(50 mLx3)萃取，有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得粗品。粗品用甲醇(50 mLx3)洗得N'-(4-溴-2-(6-氮雜螺[2.5]辛基-6-基)苯甲醯基)-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-碳醯肼(3.50 g，收率：84%)。 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 13.82 (s, 1H), 10.69 (s, 1H), 8.13 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.51 – 7.42 (m, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.05 (dd, J = 6.8, 5.0 Hz, 4H), 3.05 (t, J = 5.4 Hz, 4H), 2.46 (s, 3H), 2.12 – 1.98 (m, 4H), 1.78 (s, 4H), 0.44 (s, 4H)。
第四步：N'-(4-溴-2-(6-氮雜螺[2.5]辛基-6-基)苯甲醯基)-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-碳醯肼(800 mg, 1.42 mmol)，勞森試劑(580 mg, 1.42 mmol)加到1,4-二氧六環(5 mL)中，反應液微波加熱110°C反應15分鐘。反應液倒入水(30 mL)中，乙酸乙酯(30 mLx3)萃取，有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得粗品。粗品快速柱色譜純化(矽膠, 0-10%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得2-(4-溴-2-(6-氮雜螺[2.5]辛-6-基)苯基)-5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基) -1,3,4-噻二唑(500 mg，收率：63%)。 1H NMR (400 MHz, Chloroform- d) δ 8.33 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.43 (d, J= 10.5 Hz, 2H), 4.07 (dd, J= 7.0, 4.7 Hz, 4H), 2.97 (t, J= 5.4 Hz, 4H), 2.12 – 1.98 (m, 4H), 1.67 (s, 4H), 0.41 (s, 4H)。
第五步：2-(4-溴-2-(6-氮雜螺[2.5]辛-6-基)苯基)-5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基) -1,3,4-噻二唑(400 mg, 0.71 mmol)，2-羥基-1-磺醯胺(136 mg, 1.07 mmol)，碘化亞銅(692 mg, 3.56 mmol)，磷酸鉀(463 mg, 2.14 mmol)，(1S,2S)-(+)-N,N'-二甲基-1,2-環己二胺(1.02 g, 7.12 mmol)加到N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)中，氮氣置換，反應液115°C反應4小時。反應液倒入飽和氯化銨水溶液(30 mL)中，乙酸乙酯(30 mL x 3)萃取，有機相合併，飽和氯化鈉水溶液(30 mL x 3)洗，有機相無水硫酸鈉乾燥，濃縮得粗品。粗品快速柱色譜純化(矽膠, 0-10%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得N-(4-(5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3-(6-氮雜螺環[2.5]辛-6-基)苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺(46 mg，收率： 11%)。LCMS (ESI): [M+H] +=606.4。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.20 (s, 1H), 8.29 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.38 – 7.31 (m, 2H), 7.17 (dd, J= 8.7, 2.2 Hz, 1H), 4.95 (s, 1H), 3.98 (t, J= 5.8 Hz, 4H), 3.77 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 3.36 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 2.89 (t, J= 5.3 Hz, 4H), 2.45 (s, 3H), 2.10 – 1.99 (m, 4H), 1.65 (d, J= 7.0 Hz, 4H), 0.39 (s, 4H)。
實施例15： N-(4-(5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1,3,4-惡二唑-2-基)-3-(6-氮雜螺環[2.5]辛-6-基)苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
第一步：2-氯-6-甲基嘧啶-4-羧酸甲酯(3.00 g, 16.08 mmol)，4,4-二氟呱啶鹽酸鹽(3.04 g, 19.29 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(7.46 g, 56.54 mmol)加到N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)中，反應液60°C攪拌3小時。反應液倒入飽和氯化銨水溶液(50 mL)中，乙酸乙酯(50 mLx3)萃取，有機相合併，飽和氯化鈉水溶液(50 mLx3)洗3次，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得粗品2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-羧酸甲酯(4.40 g， 收率：86%)。LCMS (ESI): [M+H] +=272.1。
第二步：2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-羧酸甲酯(4.40 g, 16.22 mmol) 加到85%水合肼(10 mL)中，反應液40°C攪拌2小時。反應液倒入水(50 mL)中，抽濾，濾得固體水(50 mLx3)洗，乾燥得粗品2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-碳醯肼(4.40 g，收率：100%)。LCMS (ESI): [M+H] +=272.1。
第三步：2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-碳醯肼(2.00 g, 7.37 mmol)，4-溴-2-(6-氮雜螺[2.5]辛-6-基)苯甲酸(2.74 g, 8.85 mmol)，2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(5.72 g, 14.74 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(1.94 g, 14.74 mmol)加到N,N-二甲基甲醯胺(10 mL)中，反應液25°C攪拌2小時。反應液倒入飽和氯化銨水溶液(50 mL)中，乙酸乙酯(50 mLx3)萃取，有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得粗品。粗品用甲醇(50 mLx3)洗得N'-(4-溴-2-(6-氮雜螺[2.5]辛基-6-基)苯甲醯基)-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-碳醯肼(3.50 g， 收率：84%)。 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 13.82 (s, 1H), 10.69 (s, 1H), 8.13 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.51 – 7.42 (m, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.05 (dd, J = 6.8, 5.0 Hz, 4H), 3.05 (t, J = 5.4 Hz, 4H), 2.46 (s, 3H), 2.12 – 1.98 (m, 4H), 1.78 (s, 4H), 0.44 (s, 4H)。
第四步：N'-(4-溴-2-(6-氮雜螺[2.5]辛基-6-基)苯甲醯基)-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-碳醯肼(800 mg, 1.42 mmol)和伯吉斯試劑(345 mg, 1.42 mmol)加到1,4-二氧六環(5 mL)中，反應液115°C微波反應2小時。反應液倒入水(30 mL)中，乙酸乙酯(30 mLx3)萃取，有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得粗品。粗品快速柱色譜純化(矽膠, 0-10%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得2-(4-溴-2-(6-氮雜螺[2.5]辛-6-基)苯基)-5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基) -1,3,4-惡二唑(450 mg，收率：58%)。 1H NMR (400 MHz, Chloroform- d) δ 7.90 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.38–7.30 (m, 2H), 7.26 – 7.23 (m, 1H), 4.12 (t, J= 5.8 Hz, 4H), 3.05 (t, J= 5.3 Hz, 4H), 2.49 (s, 3H), 2.06 (tt, J= 13.7, 5.9 Hz, 4H), 1.67 (d, J= 70.8 Hz, 4H), 0.35 (s, 4H)。
第五步：2-(4-溴-2-(6-氮雜螺[2.5]辛-6-基)苯基)-5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基) -1,3,4-惡二唑(400 mg, 0.73 mmol)，2-羥基-1-磺醯胺(140 mg, 1.10 mmol)，磷酸鉀(477 mg, 2.20 mmol)，碘化亞銅(427 mg, 2.20 mmol)，(1S,2S)-(+)-N,N'-二甲基-1,2-環己二胺(632 mg, 4.40 mmol)加到N,N-二甲基甲醯胺(4 mL)中，氮氣置換，反應液115°C反應4小時。反應液倒入飽和氯化銨水溶液(30 mL)中，乙酸乙酯(30 mL x3)萃取，有機相合併，飽和氯化鈉水溶液(30 mLx3)洗，有機相無水硫酸鈉乾燥，濃縮得粗品。粗品快速柱色譜純化(矽膠, 0-10%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得N-(4-(5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1,3,4-惡二唑-2-基)-3-(6-氮雜螺環[2.5]辛-6-基)苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺(78 mg，收率：18%)。LCMS (ESI): [M+H] +=590.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.18 (s, 1H), 7.92 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.07 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 6.97 (dd, J= 8.5, 2.1 Hz, 1H), 4.94 (s, 1H), 4.02 (td, J= 5.3, 2.4 Hz, 4H), 3.77 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 3.37 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 2.92 (t, J= 5.2 Hz, 4H), 2.44 (s, 3H), 2.05 (qd, J= 13.8, 13.1, 6.6 Hz,4H), 1.52 (s, 4H), 0.31 (s, 4H)。
實施例 16 ~實施例 27 參照實施例 15的合成方法製備得到的：
實施例 16：2-羥基-N-（4-5-（4-羥基-4-甲基呱啶-1-基）-6-甲基嘧啶-4-基）-1，3，4-噁二唑-2-基）-3-（6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基）苯基）乙烷-1-磺醯胺
LCMS（ESI）m/z: [M+H]+ = 558。1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.23 (s, 1H), 7.82 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.11 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.99 (dd, J = 8.4, 2.0 Hz, 1H), 5.02 (s, 2H), 3.77 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.55 (s, 2H), 3.37 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.97 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 2.44 (s, 3H), 1.53 – 1.44 (m, 4H), 1.40 (s, 6H), 0.30 (s, 4H)。
實施例 17：2-羥基-N-（5-2-（3-羥基呱啶-1-基）-6-甲基嘧啶-4-基-1，3，4-噁二唑-2-基）-3-（6-辛烷-6-基苯基）乙烷-1-磺醯胺
LCMS（ESI）m/z: [M+H]+ = 570。1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.21 (s, 1H), 7.90 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.10 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.98 (dd, J = 8.6, 2.0 Hz, 1H), 5.35 – 5.31 (m, 2H), 4.58 – 4.37 (m, 2H), 3.77 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.51 (dt, J = 8.8, 4.4 Hz, 1H), 3.37 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.17 (ddd, J = 13.2, 9.6, 2.8 Hz, 1H), 3.05 – 2.89 (m, 5H), 2.41 (s, 3H), 1.98 – 1.88 (m, 1H), 1.82 – 1.71 (m, 1H), 1.61 – 1.38 (m, 6H), 0.31 (s, 4H)。
實施例 18：（R）- 2-羥基-N-（4-（5-（6-甲基-2-甲基-2-甲基嗎啉基）嘧啶-4-基）-1，3，4-惡二唑-2-基）-3-（6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基）苯基乙烷-1-磺醯胺
LCMS（ESI）m/z: [M+H]+ = 570。1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.21 (s, 1H), 7.92 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.08 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.97 (dd, J = 8.4, 2.0 Hz, 1H), 4.59 (t, J = 14.0 Hz, 2H), 4.24 (s, 1H), 3.94 (dd, J = 11.2, 3.2 Hz, 1H), 3.77 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.59 – 3.48 (m, 2H), 3.37 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.02 (ddd, J = 15.2, 12.2, 3.6 Hz, 1H), 2.92 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 2.71 (dd, J = 13.4, 10.4 Hz, 1H), 2.43 (s, 3H), 1.53 (s, 4H), 1.18 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.31 (s, 4H)。
實施例 19：2-羥基-N-（4-5-（4-羥基-4-甲基呱啶-1-基）-6-甲基嘧啶-4-基）-1，3，4-噁二唑-2-基）-3-（6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基）苯基）乙烷-1-磺醯胺
LCMS（ESI）m/z: [M+H] += 584。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.20 (s, 1H), 7.90 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.08 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.97 (dd, J= 8.4, 2.0 Hz, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.36 (d, J= 12.4 Hz, 2H), 3.77 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.60 – 3.42 (m, 2H), 3.37 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 2.92 (t, J= 5.2 Hz, 4H), 2.40 (s, 3H), 1.61 – 1.22 (m, 8H), 1.17 (s, 3H), 0.31 (s, 4H)。
實施例 20：N-(4-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲氧基嘧啶-4-基)-1,3,4-惡二唑-2-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS(ESI)m/z: [M+H]+ =606.4，1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.19 (s, 1H), 7.89 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.95 (dd, J = 8.5, 2.0 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 4.98 (s, 1H), 4.02 (t, J = 5.8 Hz, 4H), 3.96 (s, 3H), 3.76 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.35 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.91 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 2.08 (q, J = 7.2, 5.8 Hz, 4H), 1.52 (s, 4H), 0.31 (s, 4H)。
實施例 21：N-(4-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-羥基嘧啶-4-基)-1,3,4-惡二唑-2-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS(ESI)m/z: [M+H]+ =592.6，1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.32 (s, 1H), 7.85 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.95 (dd, J = 8.5, 2.0 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 3.92 (q, J = 4.0, 3.0 Hz, 4H), 3.78 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.40 (s, 2H), 2.92 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 2.03 (d, J = 15.6 Hz, 4H), 1.53 (s, 4H), 0.33 (s, 4H)。
實施例 22：N-(4-(5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲氧基吡啶-4-基)-1,3,4-惡二唑-2-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ =605.5，1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.17 (s, 1H), 7.91 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.01 – 6.95 (m, 2H), 6.65 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 4.95 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.77 (dt, J = 12.3, 5.9 Hz, 6H), 3.36 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.93 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 2.06 (td, J = 13.7, 6.7 Hz, 4H), 1.47 (t, J = 5.1 Hz, 4H), 0.32 (s, 4H)。
實施例 23： N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{5-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-3-氟-6-甲基吡啶-4-基]-1,3,4-噁二唑-2-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 607.3；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.75 - 9.64 (m, 1H), 7.88 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.98 (br d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.31 - 4.55 (m, 1H), 3.76 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.62 (br t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.39 - 3.35 (m, 2H), 2.93 (br d, J = 4.8 Hz, 4H), 2.43 (s, 3H), 2.18 - 2.05 (m, 4H), 1.50 - 1.40 (m, 4H), 0.30 (s, 4H)。
實施例 24： N-(4-(5-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基吡啶-4-基)-1,3,4-惡二唑-2-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛基-6-基)苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 589.9。1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.17 (s, 1H), 7.92 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.10 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.99 (dd, J = 8.4, 2.0 Hz, 1H), 4.94 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 3.84-3.71 (m, 6H), 3.37 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.00-2.89 (m, 4H), 2.44 (s, 3H), 2.08 – 1.97 (m, 4H), 1.54-1.43 (m, 4H), 0.32 (s, 4H)。
實施例 25： N-(4-(5-(6-(4,4-二氟呱啶-1-基)-4-甲基吡啶-2-基)-1,3,4-惡二唑-2-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥乙烷-1-磺醯胺
LCMS(ESI): [M+H]+ =589.4。1HNMR (400MHz, DMSO-d6) δ 10.15 (s, 1H), 7.86 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.06 (d, J = 1.9 Hz, 2H), 6.96 (dd, J = 8.5, 2.0 Hz, 1H), 4.96 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 3.80 (dt, J = 28.5, 5.8 Hz, 6H), 3.30 (s, 2H), 2.92 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 2.37 (s, 3H), 2.11–1.98 (m, 4H), 1.51 (s, 4H), 0.31 (s, 4H)。
實施例 26： N-(4-(5-(3-氯-6-(4,4-二氟呱啶-1-基)-4-甲基吡啶-2-基)-1,3,4-惡二唑-2-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ =623.3。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.16 (s, 1H), 7.82 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.37 – 7.28 (m, 1H), 7.08 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.97 (dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H), 4.98 (s, 1H), 3.79 (q, J = 7.3, 6.7 Hz, 6H), 3.37 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.93 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 2.41 (s, 3H), 2.04 (dd, J = 13.0, 7.1 Hz, 4H), 1.46 (s, 4H), 0.30 (s, 4H)。
實施例 27： N-(4-(5-(4-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-2-基)-1,3,4-噁二唑-2-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 590.4。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11.04 - 8.85 (m, 1H), 7.88 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.10 - 7.02 (m, 2H), 6.96 (dd, J = 2.0, 8.4 Hz, 1H), 5.52 - 4.34 (m, 1H), 3.96 - 3.82 (m, 4H), 3.77 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.36 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.92 (br t, J = 4.8 Hz, 4H), 2.41 (s, 3H), 2.15 - 2.00 (m, 4H), 1.62 - 1.44 (m, 4H), 0.31 (s, 4H)。
實施例 28：2-（4-（5-2-（4，4-二氟呱啶-1-基）-6-甲基嘧啶-4-基）-1，3，4-噁二唑-2-基）-3-（6-辛烷-6-基）苯基苯基異噻唑烷
第一步：向4，4-二氟呱啶鹽酸鹽(20.47 g, 128.62 mmol) 和2-氯-6-甲基嘧啶-4-羧酸甲酯 (6.0 g, 32.15 mmol)的N,N-二甲基乙醯胺(60 mL)的溶液中加入碳酸鉀(13.6 g, 96.4 mmol) ，將混合物加熱至120°C攪拌12小時。待反應完成後，向反應混合物中加入水(120 mL)，用乙酸乙酯(120 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化（矽膠，0-25%梯度的乙酸乙酯/石油醚）得到黃色固體2-（4，4-二氟呱啶-1-基）-6-甲基嘧啶-4-甲酸甲酯（4.7 g，17.32 mmol，收率：53.89%）。LCMS (ESI): [M+H] += 272。
第二步： 將2-（4，4-二氟呱啶-1-基）-6-甲基嘧啶-4-甲酸甲酯(2.0 g, 7.37 mmol)加入到甲醇（20 mL）的溶液中，並於-10°C下攪拌5 分鐘後，將水合肼(1.15 g, 18.43 mmol)溶液緩慢滴加到混合物中，繼續攪拌4小時。待反應完成後，將混合物進行減壓濃縮成固體混合物，加入乙腈（4 mL）進行打漿，過濾固體，濾餅用乙腈（1 mL）淋洗2次，收集濾餅，乾燥得白色固體2-（4，4-二氟呱啶-1-基）-6-甲基嘧啶-4-甲醯肼（1.8 g，6.61 mmol，收率：90%）。LCMS (ESI): [M+H] += 272。
第三步： 向2-（4，4-二氟呱啶-1-基）-6-甲基嘧啶-4-甲醯肼(1.0 g, 3.6 mmol)和4-溴-2-（6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基）苯甲醯氯 (1.0 g, 3.6 mmol) 的四氫呋喃（20 mL）的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(2.37 g, 18.38 mmol)溶液，混合物於室溫下攪拌4小時。待有固體化合物析出後停止攪拌，過濾固體，濾餅用四氫呋喃（1 mL）淋洗，收集濾餅，乾燥得黃色固體4-溴-2-（6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基苯甲醯基）-2-（4，4-二氟呱啶-1-基）-6-甲基嘧啶-4-甲醯肼（1.1 g，1.95 mmol，收率：53.4%）。LCMS (ESI): [M+H] += 563。
第四步： 向4-溴-2-（6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基苯甲醯基）-2-（4，4-二氟呱啶-1-基）-6-甲基嘧啶-4-甲醯肼 (1.0 g, 1.77 mmol) 的二氧六環（10 mL）的溶液中加入伯吉斯試劑(1.69 g, 7.1 mmol)溶液，將混合物加熱至120°C攪拌12小時。待反應完成後，向反應混合物中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(40 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化（矽膠，0-50%梯度的乙酸乙酯/石油醚）得到黃色固體2-（4-溴-2-6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-苯基）-5-（4，4-二氟呱啶-1-基）-6-甲基嘧啶-4-基-1，3，4-惡二唑（400 mg，0.73 mmol，收率：41.3%）。LCMS (ESI): [M+H] += 545。
第五步：在氮氣氣氛下，將2-羥基乙烷-1-磺醯胺 (277 mg，2.17 mmol)，碘化亞銅(105 mg，0.54 mmol)，磷酸鉀(471 mg，2.2 mmol)和(1R,2R)-(-)-N,N'-二甲基-1,2-環己二胺 (316.1 mg，2.2 mmol)放入瓶中，N,N-二甲基甲醯胺(6 mL)加入反應瓶，混合物在50°C下攪拌0.5小時，再將2-（4-溴-2-6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-苯基）-5-（4，4-二氟呱啶-1-基）-6-甲基嘧啶-4-基-1，3，4-惡二唑(300 mg，0.55 mmol)加入瓶中，混合物在50°C下攪拌5分鐘後。將反應體系升高溫度至120°C攪拌12 小時。反應結束後將體系降溫室後，將體系倒入水(5 mL)中，用乙酸乙酯(30 mL×3)萃取，有機相加無水硫酸鈉乾燥，過濾，飽和氯化鈉水溶液（50 mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，粗產物用製備液相（柱子：BRIX-2860  AQ- C18，20×250 mm 10 um，流動相A：水，流動相B：乙腈，流速：20毫升/分鐘，洗脫梯度：30分鐘內流動相B從15%升至65%，檢測波長：220 nm，保留時間：40  min）純化後得到固體2-（4-（5-2-（4，4-二氟呱啶-1-基）-6-甲基嘧啶-4-基）-1，3，4-噁二唑-2-基）-3-（6-辛烷-6-基）苯基苯基異噻唑烷 (10 mg，0.544 mmol，收率：3.04 %)，為黃色固體。LCMS（ESI）m/z: [M+H] += 586。1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.00 – 7.95 (m, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.00 – 6.89 (m, 2H), 4.20 (s, 2H), 4.03 (t, J = 5.6 Hz, 4H), 3.85 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.60 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.44 (d, J = 4.0 Hz, 5H), 2.07 (td, J = 13.6, 6.4 Hz, 4H), 1.53 (d, J = 6.4 Hz, 4H), 0.32 (s, 4H)。
實施例 29： N-(4-(5-(8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-1,7-萘啶-6-基)-1,3,4-噁二唑-2-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺
第一步：將 3-甲基氰基吡啶 (10.0 g, 84.6 mmol)溶于叔丁醇 (30.0 mL)中，70 °C攪拌20分鐘，加入濃硫酸 (10.0 mL, 178 mmol)，70 °C攪拌30分鐘。反應液倒入水中150 mL (加 2 mL 氨水)，使用乙酸乙酯 (100 mL x 2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮，殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-8%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到黃色油狀物N-(叔-丁基)-3-甲基甲基吡啶醯胺 (14.5 g，72.8 mmol，收率：86%)。LCMS (ESI): [M+H] += 193.1。
第二步：將 N-(叔-丁基)-3-甲基甲基吡啶醯胺 (14.5 g, 75.4 mmol)溶於四氫呋喃 (400 mL)中，氮氣氛圍-70 °C下逐滴加入正丁基鋰 (10.6 g, 166 mmol)，逐滴加入 [2-(二甲氨基)乙基]二甲基胺 (8.85 g, 75.4 mmol)，反應液在 -70 °C攪拌30分鐘，逐滴加入溶於四氫呋喃 (200 mL)中的草酸二乙酯 (22.0 g, 151 mmol)，反應在-70 °C攪拌1小時。反應液倒入飽和氯化銨溶液 (500 mL)中淬滅，使用乙酸乙酯 (400 mL x 2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮，得到棕色油狀物乙基 3-(2-(叔-丁基氨基羰基)吡啶-3-基)-2-氧亞基丙酯 (29.1 g, 39.2 mmol ，收率：52%)，粗品直接用於下一步。LCMS (ESI): [M+H] += 293.1。
第三步：將乙基 3-(2-(叔-丁基氨基羰基)吡啶-3-基)-2-氧亞基丙酯 (29.0 g, 99.2 mmol)溶於乙酸 (290.0 mL)中，加入乙酸銨 (15.3 g, 198 mmol)，110 °C攪拌2小時。反應液減壓濃縮。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-4%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到棕色固體乙基 8-氧亞基-7,8-二氫-1,7-萘啶-6-甲酸基酯 (3.30 g, 14.9 mmol，收率：15%)。LCMS (ESI): [M+H] += 219.1。
第四步：向三氯氧磷 (35.0 mL)中加入乙基 8-氧亞基-7,8-二氫-1,7-萘啶-6-甲酸基酯 (3.30 g, 15.1 mmol)，110 °C 攪拌1小時。反應液減壓濃縮後加入二氯甲烷 (100 mL)稀釋，將稀釋液緩慢加入到攪拌狀態下的水中 (500 mL)，使用飽和碳酸氫鈉溶液調節pH=8，水相使用二氯甲烷 (500 mL x 2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮，得到棕色固體乙基 8-氯-1,7-萘啶-6-甲酸基酯 (3.30 g, 12.5 mmol， 收率：83%)，粗品直接用於下一步。LCMS (ESI): [M+H] += 237.0。
第五步：將乙基 8-氯-1,7-萘啶-6-甲酸基酯 (1.00 g, 4.23 mmol)和4,4-二氟呱啶鹽酸鹽 (1.20 g, 7.61 mmol)溶於二甲基亞碸 (20.0 mL)中，加入碳酸鉀 (1.75 g, 12.67 mmol)，100 °C攪拌16小時。反應液加入水 (100 mL)稀釋，使用乙酸乙酯400 mL (200 mL x 2)萃取，有機相使用飽和食鹽水 (300 mL)洗滌，乾燥過濾濃縮。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-14%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到黃色固體乙基 8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-1,7-萘啶-6-甲酸基酯 (0.72 g, 2.19 mmol，收率：52%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 322.1。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.97 (dd, J = 2.0, 4.4 Hz, 1H), 8.48 (dd, J = 2.0, 8.4 Hz, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.77 (dd, J = 4.0, 8.4 Hz, 1H), 4.35 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.20 - 4.12 (m, 4H), 2.23 - 2.09 (m, 4H), 1.34 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。
第六步：將乙基 8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-1,7-萘啶-6-甲酸基酯 (900 mg, 2.80 mmol)溶於無水乙醇 (18.0 mL)中，加入水合肼 (1200 mg, 23.5 mmol)，25 °C攪拌16小時。反應液減壓濃縮，得到白色固體8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-1,7-萘啶-6-甲醯肼 (840 mg, 2.68 mmol，收率：96%)，粗品直接用於下一步。LCMS (ESI): [M+H] += 308.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 9.70 (br s, 1H), 8.93 (dd, J= 1.6, 4.4 Hz, 1H), 8.46 (dd, J= 1.6, 8.4 Hz, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.74 (dd, J= 4.0, 8.0 Hz, 1H), 4.61 (br d, J= 2.8 Hz, 2H), 4.28 - 4.18 (m, 4H), 2.20 - 2.06 (m, 4H)。
第七步：將4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯甲酸 (2.00 g, 133%)溶於二氯甲烷 (30.0 mL)中，加入氯化亞碸 (0.99 g, 8.40 mmol)，加入N,N-二甲基甲醯胺 (0.03 g, 0.42 mmol)，25 °C攪拌16小時。反應液減壓濃縮，得到棕色固體4-碘-2-(6-氮雜螺 [2.5]辛烷-6-基)苯甲醯氯化 (2.00 g, 4.20 mmol, 粗品)，粗品直接用於下一步。LCMS (ESI): [M+H] += 371.9。
第八步：將8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-1,7-萘啶-6-甲醯肼 (0.89 g, 2.90 mmol)溶於四氫呋喃 (36.00 mL)中，加入二異丙基乙胺 (3.74 g, 28.9 mmol)，加入4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯甲醯氯化 (1.31 g, 3.48 mmol)，25 °C攪拌16小時。反應液減壓濃縮，使用二氯甲烷打漿純化，得到棕色固體8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-N'-(4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯甲醯)-1,7-萘啶-6-甲醯肼 (1.50 g, 2.31 mmol，收率：80%)。LCMS (ESI): [M+H] += 647.1。
第九步：將8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-N'-(4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯甲醯)-1,7-萘啶-6-甲醯肼 (700 mg, 1.08 mmol)溶於甲苯 (14.00 mL)中，加入伯吉斯試劑 (789 mg, 3.25 mmol)，120 °C攪拌3小時。反應液用快速柱色譜純化(矽膠，0-18%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到黃色固體2-(8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-1,7-萘啶-6-基)-5-(4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-1,3,4-噁二唑 (700 mg, 1.08 mmol，收率：100%)。LCMS (ESI): [M+H] += 629.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 8.74 (dd, J= 1.6, 4.0 Hz, 1H), 8.27 (dd, J= 1.6, 8.0 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.56 (dd, J= 4.0, 8.0 Hz, 1H), 7.41 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.31 - 7.25 (m, 2H), 4.05 - 3.98 (m, 4H), 2.26 - 2.24 (m, 4H), 2.02 - 1.92 (m, 4H), 1.34 - 1.20 (m, 4H), 0.05 (s, 4H)。
第十步： 將2-(8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-1,7-萘啶-6-基)-5-(4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-1,3,4-噁二唑 (700 mg, 1.11 mmol)和2-羥基乙磺醯胺 (278 mg, 2.23 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺 (14.0 mL)中，加入磷酸鉀 (709 mg, 3.34 mmol)，碘化亞銅 (212 mg, 1.11 mmol)和2-(甲基氨基)乙酸 (99.2 mg, 1.11 mmol)，氮氣氛圍下100 °C攪拌24小時，反應液加入水100 mL(1 mL NH 3H 2O)稀釋，使用乙酸乙酯 400 mL (200 mL x 2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮，殘留物用正相分離(NP-5，30-80%梯度的正己烷/乙醇（0.1%氨水)）純化，得到黃色固體N-(4-(5-(8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-1,7-萘啶-6-基)-1,3,4-噁二唑-2-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺 (38.0 mg，0.05 mmol，收率：5%)。LCMS (ESI): [M+H] += 626.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 10.64 - 9.66 (m, 1H), 8.98 (dd, J= 1.6, 4.0 Hz, 1H), 8.52 (dd, J= 1.6, 8.4 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.87 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.80 (dd, J= 4.0, 8.4 Hz, 1H), 7.06 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 6.96 (dd, J= 1.6, 8.4 Hz, 1H), 4.26 (br d, J= 4.8 Hz, 4H), 3.77 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.37 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 2.94 (br d, J= 4.4 Hz, 4H), 2.28 - 2.16 (m, 4H), 1.58 - 1.48 (m, 4H), 0.30 (s, 4H)。
實施例 30 ~ 實施例 33 參照 實施例 29，按照類似合成路線製備得到的：
實施例 30： N--(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{5-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-3-氟-6-甲基吡啶-4-基]-1,3,4-噁二唑-2-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 643.2； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 10.48 - 9.84 (m, 1H), 9.12 - 8.90 (m, 1H), 8.69 - 8.55 (m, 1H), 8.54 - 8.43 (m, 1H), 7.93 (br d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.64 (br d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.17 - 7.08 (m, 1H), 7.01 (br d, J= 7.6 Hz, 1H), 5.26 - 4.70 (m, 1H), 3.87 - 3.73 (m, 2H), 3.69 - 3.54 (m, 4H), 3.44 - 3.37 (m, 2H), 3.06 - 2.88 (m, 4H), 2.30 - 2.11 (m, 4H), 1.49 (br s, 4H), 0.30 (s, 4H)。
實施例 31：N-（4-（5-（6-（4,4-二氟呱啶-1-基）-5-（1-甲基-1H-吡唑-4-基）吡啶-2-基）-1,3,4-惡二唑-2-基）-3-（6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基）苯基）-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 655.4。 1H NMR (600 MHz, DMSO) δ 10.14 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.01 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.89 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.87 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.06 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.95 (dd, J= 8.4, 2.0 Hz, 1H), 4.94 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.77 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.37 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.27 (t, J= 5.6 Hz, 4H), 2.93 (t, J= 5.2 Hz, 4H), 2.22-2.09 (m, 4H), 1.54 (s, 4H), 0.30 (s, 4H)。
實施例32：N-(4-(5-(1-(4,4-二氟呱啶-1-基)吡咯並[1,2-c]嘧啶-3-基)-1,3,4-噁二唑-2-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 614.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) 10.14 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.87 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.70 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 7.11 - 7.03 (m, 2H), 6.96 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 6.89 - 6.87 (m, 1H), 4.95 (t, J= 5.6 Hz, 1H), 3.77 (q, J= 6.4 Hz, 2H), 3.63 - 3.50 (m, 4H), 3.41 - 3.34 (m, 2H), 3.00 - 2.88 (m, 4H)，2.38 - 2.23 (m, 4H), 1.70 - 1.41 (m, 4H), 0.31 (s, 4H)。
實施例 33：N-(4-(5-(7-(4,4-二氟呱啶-1-基)呋喃並[2,3-c]吡啶-5-基)-1,3,4-噁二唑-2-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 615.7。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 12.72 (br s, 1H), 10.14 (s, 1H), 8.26 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.14 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.84 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.16 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.06 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.96 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 4.95 (br s, 1H), 4.15 - 4.03 (m, 4H), 3.83 - 3.73 (m, 2H), 3.42 - 3.36 (m, 2H), 3.02 - 2.85 (m, 4H), 2.24 - 2.10 (m, 4H), 1.62 - 1.42 (m, 4H), 0.30 (s, 4H)。
實施例34：N-(4-(4-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺
第一步： 在-40°C時向2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-甲腈 (2.00 g, 8.39 mmol)的四氫呋喃溶液中加入二異丁基氫化鋁1M甲苯溶液(25.2 mL, 25.2 mmol)。將混合物緩慢升溫至25°C攪拌1個小時。將混合物加入到冰水(20 mL)中淬滅，用乙酸乙酯(20 mL x 2)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-8%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色油狀物2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-甲醛(0.35 g， 1.45 mmol，收率：17%)。LCMS (ESI): [M+H] +=241.9。
第二步：向2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-甲醛(0.35 g, 1.45 mmol)和碳酸鉀(0.40 g, 2.90 mmol)的甲醇(7 mL)溶液中加入二甲基 (1-重氮基-2-氧亞基丙基)膦酸基酯(0.33 g, 1.74 mmol)。將混合物在25°C攪拌16小時。向反應混合物中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL x 2)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得黃色油狀物2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-4-乙炔基-6-甲基嘧啶(0.30 g，1.26 mmol，收率：87%)。LCMS (ESI): [M+H] += 237.9。
第三步： 向2-氟-4-碘-1-硝基苯(3.00 g, 11.2 mmol)和碳酸鉀(4.65 g, 33.7 mmol)的二甲基亞碸(45 mL)溶液中加入6-氮雜螺[2.5]辛鹽酸(1.82 g, 12.3 mmol)。將混合物加熱至140°C攪拌16小時。將反應液中倒入水(100 mL)，用乙酸乙酯(100 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-10%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體6-(5-碘-2-硝基苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(3.00 g， 8.37 mmol，收率：75%)。LCMS (ESI): [M+H] += 358.8。
第四步： 向6-(5-碘-2-硝基苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(3.00 g, 8.37 mmol)的甲醇（60 mL）和水（20 mL）溶液中加入氯化銨(1.36 g, 25.1 mmol)和鐵粉 (4.73 g, 83.7 mmol)。將混合物加熱至60°C攪拌16小時。將反應液用矽藻土過濾，濾液用乙酸乙酯(100 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-10%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯胺 (2.20 g，6.69 mmol，收率：80%)。LCMS (ESI): [M+H] +=329.0。
第五步： 在0°C向4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯胺(2.26 g, 6.89 mmol)的乙腈（40 mL）溶液中加入亞硝酸叔丁酯 (1.09 g, 10.3 mmol)。然後將疊氮三甲基矽烷(1.19 g, 10.3 mmol)加入到反應液中，將混合物在25°C攪拌16小時。將反應液中倒入水(40 mL)中，用乙酸乙酯(40 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-10%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體6-(2-疊氮-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(1.75 g，4.95 mmol，收率：72%)。LCMS (ESI): [M+H] +=354.9。
第六步： 向6-(2-疊氮-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(500 mg, 1.41 mmol)，2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-4-乙炔基-6-甲基嘧啶(334 mg,1.41 mmol)的叔丁醇(5 mL)和水(5 mL)的溶液中加入硫酸銅(225 mg, 1.41 mmol)和抗壞血酸鈉(279 mg, 1.41 mmol)。將混合物在25°C攪拌16小時。向反應液中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-5%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體6-(2-(4-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(350 mg，0.59 mmol，收率：42%)。LCMS (ESI): [M+H] +=592.5。
第七步： 向2-羥基乙磺醯胺(82.5 mg, 0.66 mmol)，2-(甲基氨基)乙酸(45.2 mg, 0.51 mmol)，磷酸鉀(439 mg, 2.03 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(6 mL)溶液中加入碘化亞銅(49.2 mg, 0.25 mmol)。將混合物在50°C攪拌5分鐘。然後將6-(2-(4-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(300 mg, 0.51 mmol)在50°C加入到反應混合物中，將混合物在氮氣的保護下加熱至100°C攪拌16小時。向反應液中加入水(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL x 2)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用製備型HPLC(C18，44-84%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化，得到白色固體化合物N-(4-(4-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺(108 mg, 0.18 mmol，收率：36%)。LCMS (ESI): [M+H] += 589.5。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 10.04 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 7.58 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.14 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.04 (dd, J = 2.0, 8.4 Hz, 1H), 5.13 - 4.77 (m, 1H), 4.15 - 3.88 (m, 4H), 3.79 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.42 - 3.35 (m, 2H), 2.74 - 2.63 (m, 4H), 2.41 (s, 3H), 2.08 - 1.93 (m, 4H), 1.41 - 1.18 (m, 4H), 0.25 (s, 4H)。
實施例 35：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
第一步：向甲基 2-氯-6-甲基嘧啶-4-甲酸基酯(2.00 g, 10.7 mmol)，2-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊環(3.37 g, 16.1 mmol)和碳酸鉀(4.53 g, 32.2 mmol)的水(8.00 mL)和二氧六環(40.0 mL)的溶液中加入1,1-雙(二苯基磷)二茂鐵氯化鈀(0.81 g, 1.07 mmol)，用氮氣置換3次，並將混合物加熱至100°C攪拌16小時。向反應液中加入水(100 mL)，用乙酸乙酯(100 mL)萃取。水相用1mol/L的稀鹽酸溶液調節pH至3，有棕色固體析出。將固體收集，用水(40 mL)洗2遍後濾出固體，油泵拉乾得棕色固體2-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-6-甲基嘧啶-4-羧酸(2.50 g，10.7mmol，收率：100%)。LCMS (ESI): [M+H] += 221.0。
第二步：向2-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-6-甲基嘧啶-4-羧酸（2.00 g, 9.08 mmol）和1,1-羰基二咪唑(2.25 g, 13.6 mmol)的四氫呋喃(30.0 mL)溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(3.52 g, 27.2 mmol)，將反應混合物加熱到60°C攪拌1小時。向反應混合物中加入甲醇(10 mL)，在60°C繼續攪拌半小時後，加入硼氫化鈉(1.37 g, 36.3 mmol)和水(4 mL)，將混合物在25°C攪拌16小時。反應液加入水(100 mL)稀釋，使用乙酸乙酯和四氫呋喃的(1：1)混合溶液(200 mL x 2)萃取，合併有機相，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化 (矽膠，0-12%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到黃色固體[2-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-6-甲基嘧啶-4-基]甲醇(1.20 g，5.81 mmol，收率64%)。LCMS (ESI): [M+H] +=206.9。
第三步：向[2-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-6-甲基嘧啶-4-基]甲醇(860 mg, 4.17 mmol)和三乙胺(2.11 g, 20.9 mmol)的二甲基亞碸(8 mL)溶液中加入吡啶三氧化硫(1.99 g, 12.5 mmol)，將混合物在25°C攪拌12小時。反應液用水(80 mL)稀釋，用(氯仿：異丙醇=3：1)的混合溶液(80 mL x 2)萃取，有機層用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗品2-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-6-甲基嘧啶-4-甲醛(0.56 g，2.75 mmol，收率：66 %)。LCMS (ESI): [M+H] +=200.9。
第四步：將2-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-6-甲基嘧啶-4-甲醛(0.50 g, 2.45 mmol)和二甲基 (1-重氮基-2-氧亞基丙基)膦酸基酯(564 mg, 2.94 mmol)溶於甲醇(10.0 mL)中，加入碳酸鉀(1.02 g, 7.34 mmol)，25°C 攪拌12小時。反應液加入水(30 mL)稀釋，使用乙酸乙酯(40 mL x 2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮。殘留物用快速柱色譜純化 (矽膠，0-12%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到黃色固體2-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-4-乙炔基-6-甲基嘧啶(180 mg，0.91 mmol，收率：37%)。LCMS (ESI): [M+H] += 201.0。
第五步：將2-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-4-乙炔基-6-甲基嘧啶(150 mg, 0.75 mmol)和6-(2-疊氮-5-溴苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(184 mg, 0.43 mmol)溶于叔丁醇 (1.50 mL)和四氫呋喃 (1.50 mL)和純水 (1.50 mL)中，加入抗壞血酸鈉(148 mg, 0.75 mmol)和無水硫酸銅(120 mg, 0.75 mmol)，25 °C 攪拌4小時。反應液加入水 (20 mL)稀釋，使用乙酸乙酯(20 mL x 2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮。殘留物用快速柱色譜純化 (矽膠，0-12%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到黃色固體6-(5-溴-2-{4-[2-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(150 mg，0.29 mmol，收率：39%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 508.9。
第六步：向6-(5-溴-2-{4-[2-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(180. mg, 0.35 mmol)，2-羥基乙磺醯胺(54.4 mg, 0.43 mmol)，二叔-丁基-[2-(2,4,6-三異丙基苯基)苯基]磷烷(30.1 mg, 0.07 mmol)，磷酸鉀(307 mg, 1.42 mmol)的二氧六環(4.00 mL)溶液中加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(33.2 mg, 0.04 mmol)。用氮氣置換3次，並將混合物加熱至90°C攪拌16小時。向反應液中加入水(10 mL)，用乙酸乙酯(20 mL x 2)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用製備型HPLC (C18，26-66%梯度的水(氨水加碳酸氫胺)/乙腈)純化，得到白色固體化合物N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺(111 mg，0.20 mmol，收率：57%)。LCMS (ESI): [M+H] += 552.2，1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.89 (s, 1H), 9.29 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.60 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.31 (br s, 1H), 7.14 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.04 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 4.99 (s, 1H), 4.34 (br d, J= 2.4 Hz, 2H), 3.84 (t, J= 5.2 Hz, 2H), 3.79 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.36 (br s, 2H), 2.75 - 2.65 (m, 6H), 2.56 (s, 3H), 1.31 (br s, 4H), 0.25 (s, 4H)。
實施例 36： N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[6-甲基-2-(噁烷-4-基)嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
第一步： 25°C下，向N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺(80 mg, 0.15 mmol)的甲醇(2 mL)溶液中加入濕鈀碳 (5 mg, 品質分數20%)，反應混合物置換三次氬氣保護，再置換三次氫氣，最後在氫氣(50 Psi)的保護下攪拌16小時。反應混合物在真空下抽濾去除鈀碳，然後在真空下濃縮得到殘餘物。殘留物用N,N-二甲基甲醯胺(3 mL)稀釋殘渣，稀釋液用製備型HPLC (C18，24-64%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化，得到黃色固體化合物N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[6-甲基-2-(噁烷-4-基)嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺(60.00 mg， 0.11 mmol，收率：75%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 554.3， 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.27 - 9.75 (m, 1H), 9.23 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.58 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.13 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.03 (dd, J= 2.0, 8.8 Hz, 1H), 5.14 - 4.85 (m, 1H), 4.02 - 3.89 (m, 2H), 3.78 (br t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.48 (dt, J= 3.2, 10.8 Hz, 2H), 3.36 - 3.34 (m, 2H), 3.11 - 3.04 (m, 1H), 2.71 - 2.65 (m, 4H), 2.53 (br s, 3H), 1.93 - 1.85 (m, 4H), 1.29 (br s, 4H), 0.23 (s, 4H)。
實施例 37 ~ 實施例 39 參考 實施例 35 的類似合成路線製備得到的：
實施例 37： N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟環己-1-烯-1-烯-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 586.3， 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.28 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.58 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.24 - 7.10 (m, 2H), 7.04 (br d, J= 8.4 Hz, 1H), 3.78 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.32 - 3.29 (m, 2H), 2.94 - 2.77 (m, 4H), 2.73 - 2.62 (m, 4H), 2.59 - 2.52 (m, 3H), 2.26 - 2.13 (m, 2H), 1.30 (br s, 4H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 38：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(5,6-二氫-1,4-二噁己環-2-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 554.2， 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.89 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.28 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 6.89 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.78 (dd, J= 2.4, 8.8 Hz, 1H), 4.99 (s, 1H), 3.96 (br d, J= 3.2 Hz, 4H), 3.54 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.13 - 3.09 (m, 2H), 2.50 - 2.41 (m, 4H), 2.26 (s, 3H), 1.02 (br s, 4H), 0.23 (s, 4H)。
實施例 39：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 549.3; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.06 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.50 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.14 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.02 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 4.98 (br s, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.78 (br t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.38 - 3.34 (m, 2H), 2.72 - 2.64 (m, 4H), 2.54 (s, 3H), 1.25 (br s, 4H), 0.23 (s, 4H)。
實施例 40： N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(1,4-二噁烷-2-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
實施例 40 參照 實施例 36 的合成路線製備得到的；LCMS (ESI): [M+H]+ = 554.3， 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.27 - 9.75 (m, 1H), 9.23 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.58 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.13 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.03 (dd, J= 2.0, 8.8 Hz, 1H), 5.14 - 4.85 (m, 1H), 4.02 - 3.89 (m, 2H), 3.78 (br t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.48 (dt, J= 3.2, 10.8 Hz, 2H), 3.36 - 3.34 (m, 2H), 3.11 - 3.04 (m, 1H), 2.71 - 2.65 (m, 4H), 2.53 (br s, 3H), 1.93 - 1.85 (m, 4H), 1.29 (br s, 4H), 0.23 (s, 4H)。
實施例 41： 2-羥基-N-(4-(4-(6-甲基-2-(呱啶-1-基)嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)乙磺醯胺
第一步： 向2-氟-4-碘-1-硝基苯(3.00 g, 11.2 mmol)和碳酸鉀(4.65 g, 33.7 mmol)的二甲基亞碸(45 mL)溶液中加入6-氮雜螺[2.5]辛鹽酸(1.82 g, 12.3 mmol)。將混合物加熱至140°C攪拌16小時。將反應液中倒入水(100 mL)，用乙酸乙酯(100 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-10%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體6-(5-碘-2-硝基苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(3.00 g，8.37 mmol，收率：75%)。LCMS (ESI): [M+H] += 358.8。
第二步： 向6-(5-碘-2-硝基苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(3.00 g, 8.37 mmol)的甲醇（60 mL）和水（20 mL）溶液中加入氯化銨(1.36 g, 25.1 mmol)和鐵粉(4.73 g, 83.7 mmol)。將混合物加熱至60°C攪拌16小時。將反應液用矽藻土過濾，濾液用乙酸乙酯(100 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-10%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯胺 (2.20 g，6.69 mmol，收率：80%)。LCMS (ESI): [M+H] +=329.0。
第三步： 在0°C向4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯胺(2.26 g, 6.89 mmol)的乙腈（40 mL）溶液中加入亞硝酸叔丁酯(1.09 g, 10.3 mmol)。然後將疊氮三甲基矽烷(1.19 g, 10.3 mmol)加入到反應液中，將混合物在25°C攪拌16小時。將反應液中倒入水(40 mL)中，用乙酸乙酯(40 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-10%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體6-(2-疊氮-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(1.75 g，4.95 mmol，收率：72%)。LCMS (ESI): [M+H] +=354.9。
第四步：向四氫呋喃(100 mL)和三乙胺 (9.31 g, 92.02 mmol)中加入雙三苯基磷二氯化鈀 (0.11 g, 0.15 mmol)和三苯基膦 (0.08 g, 0.31 mmol)，氮氣氛圍下加入2,4-二氯-6-甲基嘧啶 (5.00 g, 30.7 mmol)和碘化亞銅 (0.06 g, 0.31 mmol)和乙炔基三甲基矽烷 (3.31 g, 33.74 mmol)，氮氣氛圍下70 °C攪拌16小時。反應液過濾後濾液倒入水 (100 mL)中，使用乙酸乙酯 (200 mLx2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮，殘留物用快速柱色譜純化 (矽膠，0-2%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到黃色油狀2-氯-4-甲基-6-((三甲基甲矽烷基)乙炔基)嘧啶 (5.60 g，15.95 mmol，收率：52%)。LCMS (ESI): [M+H] += 225.0。
第五步：將2-氯-4-甲基-6-((三甲基甲矽烷基)乙炔基)嘧啶 (500 mg, 2.22 mmol)和6-(2-疊氮-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷 (787 mg, 2.22 mmol)加入到叔丁醇 (3.50 mL)和四氫呋喃 (5.00 mL)和純水 (3.50 mL)中，加入抗壞血酸鈉 (440 mg, 2.22 mmol)和硫酸銅 (355 mg, 2.22 mmol)，25 °C攪拌16小時。反應液倒入水中50 mL，使用乙酸乙酯 (100 mLx2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮，殘留物用快速柱色譜純化 (矽膠，0-9%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到黃色固體6-(2-(4-(2-氯-6-甲基嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷 (760 mg，1.38 mmol，收率：62%)。LCMS (ESI): [M+H] += 507.0。
第六步： 在25°C下，向1-[2-(6-氮雜螺[2.5]辛-6-基)-4-碘苯基]-4-(2-氯-6-甲基嘧啶-4-基)-1,2,3-三唑(250 mg, 0.49 mmol)的叔丁醇(5 mL) 溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(191 mg, 1.48 mmol) 和呱啶(84 mg, 0.99 mmol)，反應混合物在80°C下攪拌12小時。反應體系用水(20 mL)稀釋，用乙酸乙酯(40 mL x 3)萃取，有機相用飽和氯化鈉(40 mL)洗滌。有機相用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化（矽膠，0-10%梯度的四氫呋喃/石油醚得黃色固體化合物1-[2-(6-氮雜螺[2.5]辛-6-基)-4-碘苯基]-4-(6-甲基-2-呱啶基嘧啶-4-基)-1,2,3-三唑(0.10 g，0.18 mmol，收率：36%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 556.4。
第七步： 25°C下，向2-羥基乙磺醯胺(40.6 mg, 0.32 mmol)，(1R,2R)-N1,N2-二甲基環己烷-1,2-二胺 (23.2 mg, 0.16 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(2 mL)溶液中加入碘化亞銅(15.4 mg, 0.08 mmol) 和磷酸鉀(138 mg, 0.65 mmol)，反應混合物在氮氣的保護下加熱到50°C攪拌5分鐘，然後在50°C下加入1-[2-(6-氮雜螺[2.5]辛-6-基)-4-碘苯基]-4-(6-甲基-2-呱啶基嘧啶-4-基)-1,2,3-三唑(90 mg, 0.16 mmol)重新置換氮氣，最後反應液在100°C下攪拌16小時。向反應混合物中加入氨水(5 mL)和水(15 mL)，用二氯甲烷(20 mL x 3)萃取。合併有機相，用飽和食鹽水(20 mL)洗一遍，有機相合併用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。用N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)稀釋殘渣。稀釋液用製備型HPLC (C18，46-86%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化，得到黃色固體化合物2-羥基-N-(4-(4-(6-甲基-2-(呱啶-1-基)嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)乙磺醯胺(43 mg，0.08 mmol，收率：48%)。LCMS (ESI): [M+H] += 553.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.06 (s, 1H), 9.18 (s, 1H), 7.60 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.14 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.04(dd, J= 2.0, 8.8 Hz, 1H), 3.87 - 3.80 (m, 4H), 3.78 (t, J= 6.4 Hz, 2H),3.34 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 2.68 (br t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.37 (s, 3H), 1.65 (br d, J= 4.4 Hz, 2H), 1.54 (br d, J= 4.0 Hz, 4H), 1.39 - 1.26 (m, 4H), 0.25 (s, 4H)。
實施例 42 ~ 實施例 50 參照 實施例41的類似合成路線製備得來的：
實施例42：2-羥基-N-(4-(4-(6-甲基-2-嗎啉代嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)乙磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 554.9。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.06 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 7.58 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.13 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.03(dd, J= 2.0, 6.4 Hz, 1H), 4.98 (t, J= 5.6 Hz, 1H), 3.89 - 3.73 (m, 6H), 3.72 - 3.63 (m, 4H), 3.37 - 3.34 (m, 2H), 2.68 (br t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.39 (s, 3H), 1.29 (br s, 4H), 0.25 (s, 4H)。
實施例43：2-羥基-N-(4-(4-(6-甲基-2-嗎啉代嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)乙磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 569.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.06 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 7.59 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.13 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.03(dd, J= 2.0, 8.8 Hz, 1H), 5.45 - 4.74 (m, 1H), 4.70 - 4.45 (m, 2H), 3.90 (dd, J= 2.4, 11.2 Hz, 1H), 3.78 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.54 - 3.47 (m, 2H), 3.33 - 3.31 (m, 2H), 3.01 - 2.91 (m, 1H), 2.75 - 2.64 (m, 5H), 2.39 (s, 3H), 1.30 (br s, 4H), 1.17 (d, J= 6.0 Hz, 3H), 0.25 (s, 4H)。
實施例 44： N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-(4-{2-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-6-甲基嘧啶-4-基}-1H-1,2,3-三唑-1-基)苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 583.3 ， 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.05 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 7.59 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.13 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.03 (dd, J= 2.0, 8.8 Hz, 1H), 5.33 - 4.77 (m, 1H), 4.64 (br d, J= 13.2 Hz, 2H), 3.78 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.64 - 3.53 (m, 2H), 3.34 - 3.31 (m, 4H), 2.67 (br t, J= 4.4 Hz, 4H), 2.38 (s, 3H), 1.30 (br s, 4H), 1.17 (d, J= 6.4 Hz, 6H), 0.25 (s, 4H)。
實施例 45：2-羥基-N-(4-(4-(6-甲基-2-（3-甲基嗎啉代嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)乙磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 569.5. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 10.05 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 7.60 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.13 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.03 (dd, J= 2.0, 8.8 Hz, 1H), 4.98 (br s, 1H), 4.75 (br dd, J= 1.6, 6.4 Hz, 1H), 4.38 (br d, J= 12.8 Hz, 1H), 3.92 (br dd, J= 2.8, 11.2 Hz, 1H), 3.81 - 3.69 (m, 3H), 3.60 (br dd, J= 2.8, 11.2 Hz, 1H), 3.49 - 3.40 (m, 1H), 3.35 (br s, 1H), 3.32 (s, 1H), 3.22 - 3.11 (m, 1H), 2.74 - 2.59 (m, 4H), 2.38 (s, 3H), 13.4 - 1.25 (m, 4H), 1.24 - 1.19 (m, 3H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 46： N-(4-(4-(2-（（3S,5R）-3，5-二甲基嗎啉）-6-甲基嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基) 2-羥基乙磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 583.5。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.05 (s, 1H), 9.18 (s, 1H), 7.62 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.13 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.04 (dd, J= 2.0, 8.8 Hz, 1H), 5.29 - 4.73 (m, 1H), 4.60 (br dd, J= 3.6, 6.8 Hz, 2H), 3.81 - 3.74 (m, 4H), 3.63 - 3.56 (m, 2H), 3.32 (br s, 2H), 2.71 - 2.61 (m, 4H), 2.39 (s, 3H), 1.39 - 1.22 (m, 10H), 0.23 (s, 4H)。
實施例 47： N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-[4-(6-甲基-2-{2-氧雜-5-氮雜二環[2.2.1]庚烷-5-基}嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 567.3， 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 10.05 (br s, 1H), 9.37 - 8.93 (m, 1H), 7.59 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.14 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.04 (dd, J= 2.0, 8.8 Hz, 1H), 5.16 - 4.90 (m, 2H), 4.68 (s, 1H), 3.91 - 3.63 (m, 4H), 3.55 - 3.43 (m, 2H), 3.38 - 3.34 (m, 2H), 2.74 - 2.63 (m, 4H), 2.38 (s, 3H), 2.02 - 1.84 (m, 2H), 1.30 (br s, 4H), 0.25 (s, 4H)。
實施例 48： N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-[4-(6-甲基-2-{3-氧雜-8-氮雜二環[3.2.1]辛烷-8-基}嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 581.3， 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.03 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 7.60 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.12 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.03 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 5.11 - 4.83 (m, 1H), 4.78 - 4.59 (m, 2H), 3.77 (br t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.69 - 3.53 (m, 4H), 3.33 (br s, 2H), 2.75 - 2.64 (m, 4H), 2.39 (s, 3H), 2.05 - 1.83 (m, 4H), 1.29 (br s, 4H), 0.24 (s, 4H) 。
實施例 49：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-[4-(6-甲基-2-{3-氧雜-6-氮雜二環[3.1.1]庚烷-6-基}嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 567.2； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.04 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 7.59 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.12 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.03 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 5.20 - 4.76 (m, 1H), 4.37 (br d, J= 6.0 Hz, 2H), 4.29 - 4.05 (m, 2H), 3.86 - 3.63 (m, 4H), 3.45 - 3.34 (m, 2H), 2.83 - 2.61 (m, 5H), 2.40 (s, 3H), 1.77 (br d, J= 8.4 Hz, 1H), 1.27 (br s, 4H), 0.25 (s, 4H)。
實施例 50 N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-(4-{2-[(2R,6S)-4,4-二氟-2,6-二甲基呱啶-1-基]-6-甲基嘧啶-4-基}-1H-1,2,3-三唑-1-基)苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
第一步：將3-氧亞基戊二酸(100 g, 684 mmol)，1-(4-甲氧苯基)甲胺 (93.9 g, 684 mmol)和 乙醛(150 g, 1368 mmol，40% 純度)的水（500 mL）溶液在25°C攪拌72小時。反應液加入水(1000 mL)稀釋，使用乙酸乙酯(1000 mL x 3)萃取，有機相乾燥過濾濃縮，殘留物用快速柱色譜純化 (矽膠，0-40%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到無色油狀物(2R,6S)-1-[(4-甲氧苯基)甲基]-2,6-二甲基呱啶-4-酮(77.0 g，310 mmol，收率：45.4%)。LCMS (ESI): [M+H] += 287.0； 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 7.32 (br d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.89 (br d, J= 8.8 Hz, 2H), 3.95 - 3.84 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.62 - 3.51 (m, 1H), 3.34 - 3.21 (m, 2H), 2.56 - 2.41 (m, 2H), 2.26 - 2.12 (m, 2H), 1.11 (s, 3H), 1.09 (s, 3H)。
第二步： 向(2R,6S)-1-[(4-甲氧苯基)甲基]-2,6-二甲基呱啶-4-酮(70.0 g, 283 mmol)和二-叔-丁基二碳酸鹽(66.2 g, 303 mmol)的乙醇(500 mL)中加入鈀/碳(10.0 g, 純度10%)。將混合物在50 Psi的氫氣壓力下加熱到80°C攪拌16小時。將反應液冷卻到室溫，用矽藻土過濾，濾液濃縮得到黃色固體叔-丁基 (2R,6S)-2,6-二甲基-4-氧亞基呱啶-1-甲酸基酯(70.0 g, 粗品)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 4.45 - 4.33 (m, 2H), 2.93 - 2.78 (m, 2H), 2.44 - 2.34 (m, 2H), 1.50 (s, 9H), 1.26 (s, 3H), 1.24 (s, 3H)。
第三步： 向叔-丁基 (2R,6S)-2,6-二甲基-4-氧亞基呱啶-1-甲酸基酯(40.0 g, 176 mmol)的二氧六環溶液(400 mL)中加入鹽酸二氧六環(400 mL，4M)，將混合物在25°C攪拌16小時。將反應液濃縮得到(2R,6S)-2,6-二甲基呱啶-4-酮鹽酸(28.0 g，粗品)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.21 - 9.74 (m, 2H), 3.92 - 3.80 (m, 2H), 2.72 (dd, J= 4.4, 15.2 Hz, 2H), 2.49 - 2.39 (m, 2H), 1.31 (s, 3H), 1.28 (s, 3H)。
第四步： 將(2R,6S)-2,6-二甲基呱啶-4-酮鹽酸(30.0 g, 183 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(96.7 g, 733 mmol)的二氯甲烷(400 mL)溶液中加入氯化酯苯甲基(31.2 g, 183 mmol)。將混合物在25°C攪拌16小時。反應液加入水(400 mL)稀釋，用二氯甲烷(400 mL x 2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-15%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到黃色油狀物苯甲基 (2R,6S)-2,6-二甲基-4-氧亞基呱啶-1-甲酸基酯(30.0 g，114 mmol，收率：62.6%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 7.47 - 7.38 (m, 5H), 5.28 - 5.12 (m, 2H), 4.55 - 4.42 (m, 2H), 2.88 (dd, J= 6.4, 18.0 Hz, 2H), 2.42 (dd, J= 1.6, 18.0 Hz, 2H), 1.30 (s, 3H), 1.27 (s, 3H)。
第五步： 向苯甲基 (2R,6S)-2,6-二甲基-4-氧亞基呱啶-1-甲酸基酯(46.0 g, 176 mmol)和三氟化硼乙醚(150 g, 1056 mmol)的二氯甲烷(1200 mL)溶液中加入乙二硫醇(49.7 g, 528 mmol)，在25 °C 攪拌1小時。反應液加入水(1000 mL)稀釋，使用二氯甲烷(1000 mL x 2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-8%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到黃色油狀物苯甲基 (7R,9S)-7,9-二甲基-1,4-二硫雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸基酯(46.0 g，135 mmol，收率：77.0%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 7.39 - 7.20 (m, 5H), 5.13 - 4.97 (m, 2H), 4.16 - 3.99 (m, 2H), 3.36 - 3.26 (m, 2H), 3.23 - 3.08 (m, 2H), 2.53 (dd, J= 5.2, 15.2 Hz, 2H), 2.23 (dd, J= 4.0, 15.2 Hz, 2H), 1.29 (s, 3H), 1.27 (s, 3H)。
第六步：在-70°C向1,3-二溴-5,5-二甲基乙內醯脲(25.4 g, 88.8 mmol)的二氯甲烷(200 mL)溶液中加入氫氟酸吡啶(41.9 g, 296 mmol,70%純度)，將反應液在-40°C攪拌0.5小時。隨後將苯甲基 (7R,9S)-7,9-二甲基-1,4-二硫雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸基酯(10.0 g, 29.6 mmol)的二氯甲烷(50 mL)溶液在-40°C加入到反應液中，並在-40°C攪拌10分鐘。反應液加入水 (100.0 mL)，用二氯甲烷 (100 mL x 2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮，殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-8%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到黃色油狀物 苯甲基 (2R,6S)-4,4-二氟-2,6-二甲基呱啶-1-甲酸基酯(1.20 g，12.4 mmol，收率：14.0%)。LCMS (ESI): [M+H] += 284.0； 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ ppm 7.34 - 7.22 (m, 3H), 5.13 - 5.00 (m, 2H), 4.25 - 4.10 (m, 2H), 2.44 - 2.20 (m, 2H), 2.16 - 2.02 (m, 2H), 1.23 (s, 3H), 1.21 (s, 3H)。
第七步： 向苯甲基 (2R,6S)-4,4-二氟-2,6-二甲基呱啶-1-甲酸基酯(3.60 g, 12.7 mmol)的四氫呋喃(200 mL)溶液中加入濕鈀/碳(1.0 g, 10%純度)。將混合物在50 Psi的氫氣壓力下在80°C攪拌16小時。用矽藻土過濾，向濾液中重新加入濕鈀/碳(1.0 g, 10%純度)，將混合物在50 Psi的氫氣壓力下在80°C攪拌16小時。重複3次後。用矽藻土過濾，將濾液濃縮得到白色固體 (2R,6S)-4,4-二氟-2,6-二甲基呱啶(1.60 g，10.6 mmol，收率：84%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 3.59 - 3.49 (m, 2H), 2.26 - 2.06 (m, 2H), 1.96 - 1.82 (m, 2H), 1.26 (s, 3H), 1.24 (s, 3H)。
第八步： 將(2R,6S)-4,4-二氟-2,6-二甲基呱啶(648 mg, 4.35 mmol)和6-{5-溴-2-[4-(2-氯-6-甲基嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]苯基}-6-氮雜螺[2.5]辛烷(200 mg, 0.435 mmol)在140°C攪拌48小時。混合物用快速柱色譜純化(矽膠，0-5%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到黃色固體6-[5-溴-2-(4-{2-[(2R,6S)-4,4-二氟-2,6-二甲基呱啶-1-基]-6-甲基嘧啶-4-基}-1H-1,2,3-三唑-1-基)苯基]-6-氮雜螺[2.5]辛烷 (40.0 mg，0.07 mmol，收率：16%)。LCMS (ESI): [M+H] += 574.2。
第九步： 25°C下，將6-[5-溴-2-(4-{2-[(2R,6S)-4,4-二氟-2,6-二甲基呱啶-1-基]-6-甲基嘧啶-4-基}-1H-1,2,3-三唑-1-基)苯基]-6-氮雜螺[2.5]辛烷(40 mg, 0.07 mmol)和2-羥基乙磺醯胺 (17.4 mg, 0.14 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺 (10 mL)中，加入磷酸鉀 (44.5 mg, 0.21 mmol)和 (1R,2R)-N1,N2-二甲基環己烷-1,2-二胺 (10.0 mg, 0.07 mmol)和碘化亞銅 (13.3 mg, 0.07 mmol)，氮氣氛圍下100 °C攪拌4小時。反應液加入水 (20.0 mL+0.50 mL 氨水)，使用乙酸乙酯 (20 mL x 2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮，殘留物用製備型HPLC(C18，50%-90%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化，得到白色固體化合物N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-(4-{2-[(2R,6S)-4,4-二氟-2,6-二甲基呱啶-1-基]-6-甲基嘧啶-4-基}-1H-1,2,3-三唑-1-基)苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺 (28.0 mg，0.04 mmol，收率：65.0 %)。LCMS (ESI): [M+H] += 617.6； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) 10.04 (s, 1H), 9.14 (s, 1H), 7.61 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.25 - 7.10 (m, 2H), 7.04 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 4.97 (br t, J= 5.2 Hz, 1H), 4.71 (br s, 2H), 3.85 - 3.71 (m, 2H), 3.33 - 3.25 (m, 2H), 2.78 - 2.57 (m, 6H), 2.43 - 2.30 (m, 5H), 1.36 - 1.22 (m, 10H), 0.23 (s, 4H)。
實施例 51：N-(4-(4-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺
第一步：向三乙胺 (5.09 g, 50.3 mmol)和四氫呋喃 (60 mL)中加入雙三苯基磷二氯化鈀 (0.06 g, 0.08 mmol)和三苯基膦 (0.04 g, 0.17 mmol)，氮氣氛圍下加入2,4-二氯-6-甲氧基嘧啶 (3.00 g, 16.7 mmol)，碘化亞銅 (0.03 g, 0.17 mmol)和乙炔基三甲基矽烷 (1.81 g, 18.4 mmol)，氮氣氛圍下70 °C攪拌16小時。反應液直接用於下一步。
第二步：向第一步反應液中加入鹽酸4,4-二氟呱啶 (3.14 g, 19.94 mmol)和二異丙基乙胺 (6.44 g, 49.8 mmol)，80 °C攪拌16小時。反應液加入水 (100 mL)稀釋，使用乙酸乙酯 400 mL (200 mLx 2)萃取，有機相使用飽和食鹽水 (300 mL)洗滌，乾燥過濾濃縮。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-5%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到棕色油狀2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-4-甲氧基-6-((三甲基甲矽烷基)乙炔基)嘧啶 (2.00 g，2.33 mmol，收率：14%)。LCMS (ESI): [M+H] += 326.2。
第三步：將2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-4-甲氧基-6-((三甲基甲矽烷基)乙炔基)嘧啶 (1.00 g, 3.07 mmol)和6-(2-疊氮-5-溴苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷 (0.94 g, 3.07 mmol)溶於叔丁醇 (10 mL)和四氫呋喃 (10 mL)和純水 (10.00 mL)中，加入抗壞血酸鈉 (0.61 g, 3.07 mmol)和無水硫酸銅 (0.49 g, 3.07 mmol)，將混合物在25 °C 攪拌16小時。反應液加入水 (50 mL)稀釋，使用乙酸乙酯 200 mL (100 mL x 2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-13%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到黃色固體6-(5-溴-2-(4-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷 (0.56 g，0.89 mmol，收率：29%)。LCMS (ESI): [M+H] += 562.3。 1H NMR (400 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 8.92 (s, 1H), 7.50 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.28 - 7.21 (m, 2H), 6.82 (s, 1H), 4.00 - 3.93 (m, 4H), 3.89 (s, 3H), 2.72 (t, J= 5.2 Hz, 4H), 2.03 - 1.85 (m, 4H), 1.35 - 1.25 (m, 4H), 0.23 (s, 4H)。
第四步：將6-(5-溴-2-(4-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷 (260 mg, 0.46 mmol)和2-羥基乙磺醯胺 (75.5 mg, 0.60 mmol)溶於二氧六環 (5.00 mL)中，加入磷酸鉀 (295 mg, 1.39 mmol)和2-二叔丁基膦-2′,4′,6′-三異丙基聯苯(39.4 mg, 0.09 mmol)和三(二亞苄基丙酮)二鈀 (42.5 mg, 0.05 mmol)，氮氣氛圍下80 °C 攪拌16小時。反應液加入水 (50 mL)稀釋，使用乙酸乙酯200 mL (100 mL x 2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮。殘留物用製備型HPLC (C18，40-80%梯度的水(氨水+碳酸氫銨)/乙腈)純化，得到白色固體N-(4-(4-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺 (110.60 mg，0.18 mmol，收率：39%)。LCMS (ESI): [M+H] += 605.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 9.17 (s, 1H), 7.57 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.14 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.04 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 6.69 (s, 1H), 5.39 - 4.57 (m, 1H), 3.98 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 3.92 (s, 3H), 3.78 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.34 - 3.30 (m, 2H), 2.67 (br t, J= 4.4 Hz, 4H), 2.08 - 1.94 (m, 4H), 1.36 - 1.24 (m, 4H), 0.25 (s, 4H)。
實施例 52： N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-羥基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
第一步：將6-(5-溴-2-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲氧基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(5.80 g, 10.3 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(120 mL)中，加入吡啶鹽酸鹽(23.9 g, 206 mmol)，110 °C攪拌48小時。反應液加入水（200 mL）稀釋，使用二氯甲烷(200 mL x 3)萃取，有機相乾燥過濾濃縮，殘留物用快速柱色譜純化 (矽膠，0-8%梯度的四氫呋喃/二氯甲烷)得到黃色固體6-[1-(2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-溴苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)嘧啶-4-酚 (4.67 g，7.14 mmol，收率：69%)。LCMS (ESI): [M+H] += 548.0， 1H NMR (400 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 13.07 - 11.51 (m, 1H), 8.87 (s, 1H), 7.50 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.26 - 7.21 (m, 2H), 6.62 (s, 1H), 3.90 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 2.70 (t, J= 5.2 Hz, 4H), 2.10 - 1.96 (m, 4H), 1.32 - 1.25 (m, 4H), 0.22 (s, 4H)。
第二步：將6-[1-(2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-溴苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)嘧啶-4-酚(500 mg, 0.92 mmol)和2-羥基乙烷-1-磺醯胺(229 mg, 1.83 mmol)溶於N,N二甲基甲醯胺(10.0 mL)中，加入磷酸鉀(582 mg, 2.75 mmol)和(1R,2R)-N1,N2-二甲基環己烷-1,2-二胺(131 mg, 0.92 mmol)和碘化亞銅(174 mg, 0.92 mmol)，100 °C攪拌16小時。反應液加入水(50 mL+0.5 mL 氨水 )稀釋，使用二氯甲烷(100 mL x 2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮。殘留物用製備型HPLC(C18，20-60%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化得到白色固體N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-羥基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺(76.9 mg，0.13 mmol，收率：14%)。LCMS (ESI): [M+H] += 591.2， 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 9.10 (s, 1H), 7.57 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.13 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.03 (dd, J= 2.8, 9.2 Hz, 1H), 6.39 (br s, 1H), 3.92 - 3.85 (m, 4H), 3.78 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.39 - 3.34 (m, 2H), 2.67 (br t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.09 - 1.97 (m, 4H), 1.34 - 1.26 (m, 4H), 0.26 (s, 4H)。
實施例 53：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-(4-{2-[(3R,5S)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]-6-甲氧基嘧啶-4-基}-1H-1,2,3-三唑-1-基)苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
第一步：將2,4-二氯-6-甲氧基嘧啶 (1.00 g, 5.59 mmol)和 (3R,5S)-3,5-二甲基嗎啉 (0.64 g, 5.59 mmol)在100 °C攪拌3天。混合物用快速柱色譜純化 (矽膠，0-4%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到 (3R,5S)-4-(4-氯-6-甲氧基嘧啶-2-基)-3,5-二甲基嗎啉 (0.20 g，0.71 mmol，收率：12.7%)。LCMS (ESI): [M+H] += 258.1； 1H NMR (400 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 6.02 (s, 1H), 4.52 (dd, J= 4.0, 7.2 Hz, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.82 (d, J= 11.6 Hz, 2H), 3.65 (dd, J= 3.6, 11.2 Hz, 2H), 1.36 (d, J= 6.8 Hz, 6H)。
第二步：將 (3R,5S)-4-(4-氯-6-甲氧基嘧啶-2-基)-3,5-二甲基嗎啉 (150 mg, 0.58 mmol)溶於乙腈 (3.00 mL)中，加入三乙胺 (235 mg, 2.33 mmol)和乙炔基三甲基矽烷 (571 mg, 5.82 mmol)和四三苯基膦鈀 (134 mg, 0.12 mmol)，氮氣氛圍下100 °C攪拌16小時。反應液加入水 (50.0 mL)稀釋，使用乙酸乙酯 200 mL (100 mL x 2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮，殘留物用快速柱色譜純化 (矽膠，0-4%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到白色固體 (3R,5S)-4-{4-甲氧基-6-[2-(三甲基甲矽烷基)乙炔基]嘧啶-2-基}-3,5-二甲基嗎啉 (120 mg，0.28 mmol，收率：49.0%)。LCMS (ESI): [M+H] += 320.1； 1H NMR (400 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 6.15 (s, 1H), 4.58 (br dd, J= 3.6, 6.8 Hz, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.81 (d, J= 11.2 Hz, 2H), 3.64 (dd, J= 3.6, 11.2 Hz, 2H), 1.36 (s, 3H), 1.35 (s, 3H), 0.26 (s, 9H)。
第三步：將 (3R,5S)-4-{4-甲氧基-6-[2-(三甲基甲矽烷基)乙炔基]嘧啶-2-基}-3,5-二甲基嗎啉 (100 mg, 0.31 mmol)和6-(2-疊氮-5-溴苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷 (96.1 mg, 0.31 mmol)溶於叔丁醇 (1.00 mL)和四氫呋喃 (1.00 mL)和純水 (1.00 mL)中，加入抗壞血酸鈉 (62.0 mg, 0.31 mmol)和無水硫酸銅 (49.9 mg, 0.31 mmol)，25 °C 攪拌16小時。反應液加入水 (50.0 mL)稀釋，使用乙酸乙酯 200 mL (100 mL x 2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮。殘留物用快速柱色譜純化 (矽膠，0-7%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到黃色固體6-[5-溴-2-(4-{2-[(3R,5S)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]-6-甲氧基嘧啶-4-基}-1H-1,2,3-三唑-1-基)苯基]-6-氮雜螺[2.5]辛烷 (160 m， 0.23 mmol，75.0%收率)。LCMS (ESI): [M+H] += 555.9； 1H NMR (400 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 8.97 (s, 1H), 7.56 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.27 - 7.24 (m, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 4.61 (br dd, J= 3.6, 6.8 Hz, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.81 (d, J= 11.2 Hz, 2H), 3.66 (dd, J= 4.0, 11.6 Hz, 2H), 2.74 (t, J= 5.2 Hz, 4H), 1.39 - 1.30 (m, 10H), 0.23 (s, 4H)。
第四步：將6-[5-溴-2-(4-{2-[(3R,5S)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]-6-甲氧基嘧啶-4-基}-1H-1,2,3-三唑-1-基)苯基]-6-氮雜螺[2.5]辛烷 (140 mg, 0.25 mmol)和2-羥基乙烷-1-磺醯胺 (41.1 mg, 0.33 mmol)溶於N,N二甲基甲醯胺 (3.00 mL)中，加入磷酸鉀 (160 mg, 0.76 mmol)和 (1R,2R)-N1,N2-二甲基環己烷-1,2-二胺 (36.2 mg, 0.25 mmol)和碘化亞銅(48.1 mg, 0.25 mmol)，100 °C攪拌4小時。反應液加入水 (50.0 mL+0.50 mL氨水)稀釋，使用乙酸乙酯200 mL (100 mL x 2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮。殘留物用製備型HPLC (C18，42%-82%梯度的水 (氨水+碳酸氫銨)/乙腈)純化，得到白色固體N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-(4-{2-[(3R,5S)-3,5-二甲基嗎啉-4-基]-6-甲氧基嘧啶-4-基}-1H-1,2,3-三唑-1-基)苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺 (90.9 mg，0.15 mmol， 收率：60.0%)。LCMS (ESI): [M+H] += 599.3； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 10.60 - 9.47 (m, 1H), 9.13 (s, 1H), 7.60 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.13 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.04 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 6.66 (s, 1H), 5.37 - 4.72 (m, 1H), 4.58 (br dd, J= 3.6, 6.4 Hz, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.83 - 3.74 (m, 4H), 3.60 (br dd, J= 3.6, 11.6 Hz, 2H), 3.36 - 3.33 (m, 2H), 2.66 (br t, J= 4.4 Hz, 4H), 1.38 - 1.22 (m, 10H), 0.23 (s, 4H)。
實施例54：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-(二甲氨基)嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
第一步：將6-[1-(2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-溴苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)嘧啶-4-酚(2.90 g, 5.31 mmol)溶於 N,N-二甲基甲醯胺(60.0 mL)中，加入1,1,1-三氟-N-苯基-N-三氟甲磺醯甲磺醯胺(2.84 g, 7.96 mmol)和二異丙基乙胺(3.43 g, 26.5 mmol)，25 °C攪拌16小時。反應液加入水100 mL稀釋，使用乙酸乙酯(200 mL x 2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮，殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-2%梯度的四氫呋喃/二氯甲烷)得到黃色油狀6-[1-(2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-溴苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)嘧啶-4-基三氟甲磺酸酯(3.50 g，5.10 mmol， 收率：96%)。LCMS (ESI): [M+H] += 679.8， 1H NMR (400 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 9.00 (s, 1H), 7.53 - 7.49 (m, 1H), 7.36 - 7.32 (m, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 3.96 (br s, 4H), 2.73 (br t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.05 - 1.91 (m, 4H), 1.34 - 1.25 (m, 4H), 0.24 (s, 4H)。
第二步：將二甲胺鹽酸鹽 (0.24 g, 2.95 mmol)溶於四氫呋喃(20. 0 mL)中，加入碳酸鉀(0.81 g, 5.90 mmol)和6-[1-(2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-溴苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)嘧啶-4-基三氟甲磺酸酯(1.00 g, 1.47 mmol)，80 °C攪拌2 小時。反應液加入水50 mL稀釋，使用乙酸乙酯(100 mL x 2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮，殘留物用快速柱色譜純化 (矽膠，0-11%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到白色固體6-[1-(2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-溴苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-N,N-二甲基嘧啶-4-胺(0.68 g，.08 mmol，收率：73%)。LCMS (ESI): [M+H] += 575.0， 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 9.14 (s, 1H), 7.58 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.47 - 7.39 (m, 2H), 6.65 (s, 1H), 3.93 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 3.10 (s, 6H), 2.75 - 2.67 (m, 4H), 2.03 - 1.90 (m, 4H), 1.33 - 1.25 (m, 4H), 0.24 (s, 4H)。
第三步：將6-[1-(2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-溴苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-N,N-二甲基嘧啶-4-胺(640 mg, 1.12 mmol)和2-羥基乙烷-1-磺醯胺(279 mg, 2.23 mmol)溶於N,N二甲基甲醯胺(12.0 mL)中，加入磷酸鉀(710 mg, 3.35 mmol)和(1R,2R)-N1,N2-二甲基環己烷-1,2-二胺(160 mg, 1.12 mmol)和碘化亞銅(212 mg, 1.12 mmol)，100 °C攪拌16小時。反應液加入水 (100 mL+1 mL 氨水)稀釋，用乙酸乙酯(100 mL x 2)萃取，有機相乾燥過濾濃縮。 HPLC(C18，26-66%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化，殘留物經正相分離(XB-CN，5%-35%梯度的正庚烷-乙醇(0.1% 氨水))純化得到白色固體N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-(二甲氨基)嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺(244 mg，0.39 mmol，收率：35%)。LCMS (ESI): [M+H] += 618.3， 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 10.49 - 9.60 (m, 1H), 9.05 (s, 1H), 7.57 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.12 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.03 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 6.64 (s, 1H), 5.17 - 4.76 (m, 1H), 3.94 - 3.86 (m, 4H), 3.78 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.34 - 3.30 (m, 2H), 3.09 (s, 6H), 2.66 (br t, J= 4.4 Hz, 4H), 2.02 - 1.89 (m, 4H), 1.35 - 1.22 (m, 4H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 55 ~ 實施例 61 參考 實施例 54 的類似合成路線製備得到的：
實施例 55：N-(4-{4-[6-氨基-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}-3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 590.3， 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 10.02 (s, 1H), 9.02 (br s, 1H), 7.58 (br d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.13 (br s, 1H), 7.03 (br d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.70 (br s, 2H), 6.52 (br s, 1H), 5.19 - 4.73 (m, 1H), 3.90 (br s, 4H), 3.78 (br s, 2H), 3.40 - 3.37 (m, 2H), 2.67 (br s, 4H), 2.05 - 1.85 (br s, 4H), 1.40 - 1.24 (m, 4H), 0.26 (br s, 4H)。
實施例 56： N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-(甲基氨基)嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 604.5， 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 9.01 (s, 1H), 7.55 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.26 (br s, 1H), 7.10 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.01 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 6.52 (s, 1H), 3.98 - 3.88 (m, 4H), 3.78 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.33 - 3.30 (m, 2H), 2.84 (d, J= 4.4 Hz, 3H), 2.67 (br t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.03 - 1.87 (m, 4H), 1.36 - 1.25 (m, 4H), 0.25 (s, 4H)。
實施例57：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-[(2-羥基乙基)氨基]嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 634.2， 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 10.51 - 9.43 (m, 1H), 9.00 (s, 1H), 7.57 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.36 (br s, 1H), 7.11 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.02 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.72 (br s, 2H), 3.95 - 3.86 (m, 4H), 3.77 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.58 - 3.51 (m, 2H), 3.43 - 3.36 (m, 2H), 3.33 - 3.27 (m, 2H), 2.70 - 2.61 (m, 4H), 2.01 - 1.89 (m, 4H), 1.35 - 1.24 (m, 4H), 0.24 (s, 4H)。
實施例58：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-[(噁烷-4-基)氨基]嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 674.7； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 9.01 (s, 1H), 7.57 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.38 - 7.23 (m, 1H), 7.12 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.02 (dd, J= 1.6, 8.4 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.12 - 3.95 (m, 1H), 3.95 - 3.83 (m, 6H), 3.78 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.49 - 3.39 (m, 2H), 3.32 (br s, 2H), 2.66 (br t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.54 - 2.52 (m, 1H), 2.02 - 1.85 (m, 6H), 1.54 - 1.40 (m, 2H), 1.34 - 1.26 (m, 4H), 0.25 (s, 4H)。
實施例59：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-{[(吡啶-2-基)甲基]氨基}嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 681.3； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 10.24 - 9.76 (m, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.51 (br d, J= 4.4 Hz, 1H), 8.02 (br s, 1H), 7.74 (br t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.57 (br d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.35 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.30 - 7.20 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.02 (br d, J= 8.8 Hz, 1H), 6.66 (br s, 1H), 4.98 (br d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.61 (br d, J= 3.6 Hz, 2H), 3.90 - 3.70 (m, 6H), 3.34 - 3.30 (m, 2H), 2.70 - 2.60 (m, 4H), 1.90 - 1.70 (m, 4H), 1.34 - 1.24 (m, 4H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 60：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-{[(吡啶-3-基)甲基]氨基}嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 681.3； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 10.03 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.76 - 8.39 (m, 2H), 7.96 (br d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.78 (br d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.57 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.39 (br d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.11 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.02 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 6.59 (br s, 1H), 4.97 (br s, 1H), 4.56 (br d, J= 5.6 Hz, 2H), 3.87 (br s, 4H), 3.77 (br t, J= 5.6 Hz, 2H), 2.68 - 2.62 (m, 4H), 2.52 (br d, J= 2.0 Hz, 2H), 1.98 - 1.78 (m, 4H), 1.35 - 1.22 (m, 4H), 0.24 (s, 4H)。
實施例61：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-{[(吡啶-2-基)甲基]氨基}嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 681.2； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 10.03 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.54 (br s, 2H), 8.03 (br s, 1H), 7.57 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.41 (br d, J= 4.8 Hz, 2H), 7.12 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.02 (dd, J= 2.4, 8.8 Hz, 1H), 6.65 (br s, 1H), 4.96 (br s, 1H), 4.58 (br d, J= 4.8 Hz, 2H), 3.91 - 3.74 (m, 6H), 3.35 - 3.30 (m, 2H), 2.71 - 2.62 (m, 4H), 1.93 - 1.63 (m, 4H), 1.36 - 1.24 (m, 4H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 62 ~ 實施例 65 參考 實施例 34 的類似合成路線製備得到的：
實施例62： N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲氧基吡啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 604.0； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 10.04 (s, 1H), 9.17 (s, 1H), 7.48 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.12 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.05 - 6.98 (m, 2H), 6.64 (s, 1H), 5.21 - 4.51 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.81 - 3.72 (m, 6H), 3.34 (br t, J= 6.4 Hz, 2H), 2.66 (br t, J= 4.4 Hz, 4H), 2.11 - 1.95 (m, 4H), 1.24 (br s, 4H), 0.23 (s, 4H)。
實施例63：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-3-氟-6-甲氧基吡啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 622.3； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.07 (s, 1H), 8.93 (d, J= 3.6 Hz, 1H), 7.53 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.15 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.04 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 6.91 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 4.98 (t, J= 5.6 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.79 (q, J= 6.4 Hz, 2H), 3.64 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 3.41 - 3.34 (m, 2H), 2.72 - 2.65 (m, 4H), 2.21 - 2.01 (m, 4H), 1.25 (br s, 4H), 0.25 (s, 4H)。
實施例 64： N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基吡啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 588.3， 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 9.84 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 7.25 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.90 (d, J= 2.8 Hz, 2H), 6.79 (dd, J= 2.0, 8.8 Hz, 1H), 4.77 (br s, 1H), 3.61 - 3.47 (m, 6H), 3.12 - 3.09 (m, 2H), 2.43 (br t, J= 4.4 Hz, 4H), 2.16 (s, 3H), 1.85 - 1.69 (m, 4H), 1.06 - 0.96 (m, 4H), 0.00 (s, 4H)。
實施例 65： N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-3-氟-6-甲基吡啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 606.3； 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 10.06 (br s, 1H), 8.91 (d, J= 3.6 Hz, 1H), 7.52 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.48 (d, J= 3.6 Hz, 1H), 7.14 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.03 (dd, J= 1.6, 8.4 Hz, 1H), 5.40 - 4.58 (m, 1H), 3.78 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.65 - 3.50 (m, 4H), 3.42 - 3.33 (m, 2H), 2.66 (br d, J= 4.8 Hz, 4H), 2.42 (s, 3H), 2.20 - 2.04 (m, 4H), 1.35 - 1.15 (m, 4H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 66：N-(6-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-5-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}吡啶-2-基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
第一步：向6-溴-2-氯-3-硝基吡啶(5.00 g, 21.0 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(8.33 g, 63.2 mmol)的叔丁醇 (100 mL)溶液中加入6-氮雜螺[2.5]辛鹽酸(2.34 g, 21.0 mmol)。將混合物加熱至80°C攪拌16小時。向反應混合物中加入水(200 mL)，用乙酸乙酯(200 mL x 2)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-30%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體6-(6-溴-3-硝基吡啶-2-基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(4.60 g， 15.0 mmol，收率：70%)。LCMS (ESI): [M+H] +=311.9。
第二步：向6-(6-溴-3-硝基吡啶-2-基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(2.00 g, 6.41 mmol)的甲醇（60 mL）和水（20 mL）溶液中加入氯化銨(1.36 g, 25.1 mmol)和鐵粉 (4.73 g, 83.7 mmol)。將混合物加熱至60°C攪拌16小時。將反應液用矽藻土過濾，濾液用乙酸乙酯(100 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-10%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-6-溴吡啶-3-胺 (1.50 g，5.3 mmol，收率：83%)。LCMS (ESI): [M+H]+ =283.9。
第三步：向2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-6-溴吡啶-3-胺(500 mg, 2.28 mmol)的乙腈（5.00 mL）溶液中加入亞硝酸叔丁酯(0.28 g, 2.66 mmol)。然後將疊氮三甲基矽烷(0.31 g, 2.66 mmol)加入到反應液中，將混合物在25°C攪拌16小時。將反應液中倒入水(10 mL)中，用乙酸乙酯(10 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-10%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色油狀物6-(3-疊氮-6-溴吡啶-2-基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(400 mg，1.29 mmol，收率：73%)。LCMS (ESI): [M+H]+ =309.9。
第四步：向6-(3-疊氮-6-溴吡啶-2-基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(200 mg, 0.65 mmol)，2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-4-乙炔基-6-甲基嘧啶(154 mg, 0.65 mmol)的叔丁醇(5 mL)，四氫呋喃（5mL）和水(5 mL)的溶液中加入硫酸銅(104 mg, 0.65 mmol)和抗壞血酸鈉(129 mg, 0.65 mmol)。將混合物在25°C攪拌16小時。向反應液中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-10%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體6-(6-溴-3-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}吡啶-2-基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(165 mg，0.30 mmol，收率：46%)。LCMS (ESI): [M+H]+ =547.2。
第五步：向2-羥基乙磺醯胺(52.7 mg, 0.41 mmol)，(1R,2R)-(-)-N,N-二甲基環己烷-1,2-二胺(39.5 mg, 0.27 mmol)，磷酸鉀(178 mg, 0.83 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(5.00 mL)溶液中加入碘化亞銅(26.7 mg, 0.14 mmol)。將混合物在50°C攪拌5分鐘。然後將6-(6-溴-3-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}吡啶-2-基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(150 mg, 0.28 mmol)在50°C加入到反應混合物中，將混合物在氮氣的保護下加熱至100°C攪拌16小時。向反應液中加入水(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL x 2)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用製備型HPLC(C18，42-82%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化，得到白色固體化合物N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{1-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺(53 mg，0.12 mmol，收率：44%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 590.3， 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.74 (s, 1H), 9.12 (s, 1H), 7.75 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.47 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 5.13 - 4.74 (m, 1H), 3.97 (br t, J= 5.6 Hz, 4H), 3.86 - 3.67 (m, 4H), 3.06 - 2.85 (m, 4H), 2.39 (s, 3H), 2.14 - 1.85 (m, 4H), 1.32 - 1.19 (m, 4H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 67 和實施例 68 參考 實施例 66 的類似合成路線製備得到的：
實施例 67：N-(4-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-5-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}吡啶-2-基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 590.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.72 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.66 (s, 1H), 4.97 (s, 1H), 3.97 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 3.84 - 3.75 (m, 2H), 3.63 (br d, J= 2.8 Hz, 2H), 2.83 - 2.71 (m, 4H), 2.39 (s, 3H), 2.06 - 1.91 (m, 4H), 1.29 - 1.22 (m, 4H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 68：N-(4-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-5-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基吡啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}吡啶-2-基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 589.5， 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.77 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.67 (s, 1H), 4.98 (s, 1H), 3.83 - 3.78 (m, 2H), 3.78 - 3.71 (m, 4H), 3.63 (br d, J = 5.2 Hz, 2H), 2.84 - 2.72 (m, 4H), 2.39 (s, 3H), 2.12 - 1.92 (m, 4H), 1.32 - 1.20 (m, 4H), 0.25 (s, 4H)。
實施例 69：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
第一步：向2,4-二氯-6-甲基嘧啶(25.0 g, 153 mmol)，乙炔基三甲基矽烷(15.1 g, 153 mmol)，碘化亞銅 (0.30 g, 1.53 mmol)和三苯基膦(0.40 g, 1.53 mmol)的三乙胺(39.6 g, 383 mmol)和四氫呋喃(500 mL)的溶液中加入二氯雙(三苯基膦)鈀(II) (1.09 g, 1.53 mmol)，用氮氣置換3次，並將混合物加熱至85°C攪拌16小時。將反應液過濾，濾液直接用於下一步。
第二步：向2-氯-4-甲基-6-[2-(三甲基甲矽烷基)乙炔基]嘧啶 (30.0 g, 133 mmol)的濾液中加入4,4-二氟呱啶鹽酸鹽(21.0 g, 133 mmol)和三乙胺(41.3 g, 400 mmol)。將混合物在氮氣保護下加熱到80°C攪拌16小時。向反應液中加入水(200 mL)，用乙酸乙酯(200 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速矽膠層析法（矽膠，0-5%梯度的乙酸乙酯/石油醚）得到黃色油狀物2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-4-甲基-6-[2-(三甲基甲矽烷基)乙炔基]嘧啶 (21.0 g，67.8 mmol，收率：51%)。LCMS (ESI): [M+H]+ =310.0。
第三步：向2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-4-甲基-6-[2-(三甲基甲矽烷基)乙炔基]嘧啶(17.5 g, 56.5 mmol)的甲醇(200 mL)溶液中加入氫氧化鉀(6.35 g, 113 mmol)，將混合物在25°C攪拌1小時。向反應液中加入水(200 mL)，用乙酸乙酯(200 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速矽膠層析法（矽膠，0-15%梯度的乙酸乙酯/石油醚）得到黃色固體2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-4-乙炔基-6-甲基嘧啶(8.00 g，1.30 mmol，收率：60%)。LCMS (ESI): [M+H]+ =238.0。
第四步：向6-(2-疊氮-5-溴苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(2.07 g, 6.75 mmol)的四氫呋喃(5 mL)溶液中加入銅(II) 高氯酯六水合物(5.00 g, 13.5 mmol)，三[(1-苯甲基-1H-1,2,3-三唑-4基)甲基]胺(0.36 g, 0.67 mmol)和碘化鉀(4.57 g, 26.9 mmol)。將混合物在25°C攪拌5分鐘。然後將2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-4-乙炔基-6-甲基嘧啶(1.76 g, 7.42 mmol)和1,8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯(1.04 g, 6.75 mmol)加入反應液中，將混合物加熱至60°C攪拌16小時。將反應液過濾，得到棕色固體6-(5-溴-2-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-5-碘-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(3.80 g，5.66 mmol，收率：84%)。LCMS (ESI): [M+H]+ =672.0； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 7.54 - 7.36 (m, 3H), 7.29 (br s, 1H), 4.14 - 3.93 (m, 4H), 2.74 (br s, 4H), 2.42 - 2.37 (m, 3H), 2.12 - 1.97 (m, 4H), 1.25 - 0.99 (m, 4H), 0.19 (br s, 4H)。
第五步：向6-(5-溴-2-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-5-碘-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(500.00 mg, 0.75 mmol)、三甲基-1,3,5,2,4,6-三噁三硼己環(28.09 mg, 0.22 mmol)和碳酸銫(729.08 mg, 2.24 mmol)的四氫呋喃(20.0 mL)的溶液中加入二氯雙(三苯基膦)鈀(II) (52.88 mg, 0.07 mmol)，用氮氣置換3次，並將混合物加熱至100°C攪拌16小時。向反應液中加入水(5 mL)，用乙酸乙酯(5 mLx3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速矽膠層析法（矽膠，0-8%梯度的乙酸乙酯/石油醚）得到白色固體6-(5-溴-2-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(180 mg，0.32mmol，收率：43%)。LCMS (ESI): [M+H] += 560.0。
第六步：向2-羥基乙磺醯胺(71.7 mg, 0.57 mmol)，反式-N,N-二甲基-1,2-環己二胺(41.2 mg, 0.29 mmol)，磷酸鉀 (243 mg, 1.15 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(4.00 mL)溶液中加入碘化亞銅(27.8 mg, 0.14 mmol)。將混合物在50°C攪拌5分鐘。然後將6-(5-溴-2-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(160 mg, 0.29 mmol)在50°C加入到反應混合物中，將混合物在氮氣的保護下加熱至100°C攪拌4小時。向反應液中加入水(5 mL)，用乙酸乙酯(5 mL x 2)萃取。合併有機相，用氨水(5 mL x 2)洗滌, 用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用製備型HPLC(C18，26%-66%梯度的水(鹽酸)/乙腈)純化，得到白色固體化合物N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺(17.0 mg，0.03 mmol，收率：10 %)。LCMS (ESI): [M+H] +=603.3； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 10.17 (s, 1H), 7.36 (d, J= 1.4 Hz, 2H), 7.13 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.04 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 4.02 - 3.92 (m, 4H), 3.79 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.37 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 2.77 - 2.61 (m, 4H), 2.52 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.14 - 1.97 (m, 4H), 1.19 - 1.02 (m, 4H), 0.20 (s, 4H)。
實施例70：N-(4-(4-(6-(4,4-二氟呱啶-1-基)-5-(2-羥基丙烷-2-基)吡啶-2-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺
第一步：向甲基 2,6-二氯尼古丁酯(10.0 g, 48.5 mmol)的二氧六環(100 mL)溶液中加入鹽酸4,4-二氟呱啶(11.5 g, 72.8 mmol)和碳酸鉀(20.5 g, 146 mmol)。將混合物加熱至100°C下攪拌16小時。向反應液中加入水(200 mL)，用乙酸乙酯(200 mLx3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速矽膠層析法(矽膠，0-10%梯度的乙酸乙酯/石油醚）得到黃色油狀物6-氯-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)尼古丁酯(11.0 g，37.8 mmol，收率：78%)。LCMS (ESI): [M+H] += 327.0。
第二步：向甲基 6-氯-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)尼古丁酯(5.00 g, 17.2 mmol)，乙炔基三甲基矽烷(1.86 g, 18.9 mmol)，碘化亞銅 (0.33 g, 1.72 mmol)和三苯基膦(0.45 g, 1.72 mmol)的三乙胺(30.0 mL)和四氫呋喃(20.0 mL)的溶液中加入二氯雙(三苯基膦)鈀(II) (1.86 g, 18.9 mmol)，用氮氣置換3次，並將混合物加熱至85°C攪拌16小時。向反應液中加入水(50 mL)，用乙酸乙酯(50 mL*3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速矽膠層析法（矽膠，0-10%梯度的乙酸乙酯/石油醚）得到黃色油狀物甲基 2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-((三甲基甲矽烷基)乙炔基)尼古丁酯(4.30 g，15.3mmol，收率：89%)。LCMS (ESI): [M+H] += 353.1。
第三步：向甲基 2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-((三甲基甲矽烷基)乙炔基)尼古丁酯(1.00 g, 3.57 mmol)的四氫呋喃(20.0 mL)溶液中加入甲基溴化鎂(3.57 mL, 10.7 mmol)，用氮氣置換3次，並將混合物在-20°C下攪拌1小時。向反應液中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(30 mLx3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速矽膠層析法（矽膠，0-5%梯度的乙酸乙酯/石油醚）得到黃色色固體-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-((三甲基甲矽烷基)乙炔基)吡啶-3-基)丙烷-2-醇(600 mg，2.13 mmol，收率：60%)。LCMS (ESI): [M+H]+ =353.1。
第四步：向6-(2-疊氮-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷 (500 mg, 1.41 mmol)，2-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-((三甲基甲矽烷基)乙炔基)吡啶-3-基)丙烷-2-醇(498 mg, 1.41 mmol)的叔丁醇(5 mL)，四氫呋喃（5mL）和水(5 mL)的溶液中加入硫酸銅(225 mg, 1.41 mmol)和抗壞血酸鈉(279 mg, 1.41 mmol)。將混合物在25°C攪拌16小時。向反應液中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-10%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體2-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-(1-(4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡啶-3-基)丙烷-2-醇(800 mg，1.24 mmol，收率：89%)。LCMS (ESI): [M+H]+ =635.1。
第五步：向2-羥基乙磺醯胺(118 mg, 0.95 mmol)，肌氨酸(43.0 mg, 0.47 mmol)，磷酸鉀(410 mg, 1.89 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(6 mL)溶液中加入碘化亞銅（91.9 mg, 0.47 mmol)。將混合物在50°C攪拌5分鐘。然後將2-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-(1-(4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡啶-3-基)丙烷-2-醇(300 mg, 0.47 mmol)在50°C加入到反應混合物中，將混合物在氮氣的保護下加熱至100°C攪拌16小時。向反應液中加入水(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL x 2)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用製備型HPLC(C18，32-72%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化，得到白色固體化合物N-(4-(4-(6-(4,4-二氟呱啶-1-基)-5-(2-羥基丙烷-2-基)吡啶-2-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺(133 mg，0.48 mmol，收率：45%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 632.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.05 (br d, J= 1.2 Hz, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.14 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.89 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.13 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.04 (dd, J= 2.4, 8.6 Hz, 1H), 6.05 (s, 1H), 4.98 (br s, 1H), 3.78 (br t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.37 - 3.34 (m, 2H), 3.17 - 3.06 (m, 4H), 2.74 - 2.61 (m, 4H), 2.23 - 2.07 (m, 4H), 1.58 (s, 6H), 1.43 - 1.30 (m, 4H), 0.25 (s, 4H)。
實施例71：N-(4-(4-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-(2-羥基丙烷-2-基)嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 633.5。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 10.05 (s, 1H), 9.24 (s, 1H), 7.69 - 7.50 (m, 2H), 7.13 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.03 (dd, J= 2.4, 8.4 Hz, 1H), 5.36 (s, 1H), 5.14 - 4.82 (m, 1H), 4.05 - 3.92 (m, 4H), 3.83 - 3.72 (m, 2H), 3.38 - 3.33 (m, 2H), 2.71 - 2.64 (m, 4H), 2.07 - 1.94 (m, 4H), 1.44 (s, 6H), 1.35 - 1.24 (m, 4H), 0.25 (s, 4H)。
實施例 72： N-(4-(4-(8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺
第一步：向6-溴-8-氟喹啉(5.00 g, 22.1 mmol)的1-甲基-2-吡咯烷酮(50.0 mL)溶液中加入鹽酸4,4-二氟呱啶(5.22 g, 33.2 mmol)和碳酸鉀(9.36 g, 66.4 mmol)。將混合物加熱至180°C下攪拌50小時。向反應液中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mLx3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速矽膠層析法(矽膠，0-1%梯度的乙酸乙酯/石油醚）得到黃色固體6-溴-8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉(4.30g，13mmol ，收率：59.4%)。LCMS (ESI): [M+H] += 327.0。
第二步：向6-溴-8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉(4.00 g, 12.2 mmol)，乙炔基三甲基矽烷(1.32 g, 13.4 mmol)，碘化亞銅 (0.24 g, 1.22 mmol)和三苯基膦(0.32 g, 1.22 mmol)的三乙胺(30.0 mL)和四氫呋喃(20.0 mL)的溶液中加入二氯雙(三苯基膦)鈀(II) (0.87 g, 1.22 mmol)，用氮氣置換3次，並將混合物加熱至85°C攪拌16小時。向反應液中加入水(50 mL)，用乙酸乙酯(50 mLx3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速矽膠層析法（矽膠，0-1%梯度的乙酸乙酯/石油醚）得到白色固體8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-((三甲基甲矽烷基)乙炔基)喹啉(2.5 g，9.15mmol，收率：75%)。LCMS (ESI): [M+H] += 345.1。
第三步：向6-(2-疊氮-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷 (500 mg, 1.41 mmol)，8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-((三甲基甲矽烷基)乙炔基)喹啉(490 mg,1.41 mmol)的叔丁醇(5 mL)，四氫呋喃（5mL）和水(5 mL)的溶液中加入硫酸銅(225 mg, 1.41 mmol)和抗壞血酸鈉(279 mg, 1.41 mmol)。將混合物在25°C攪拌16小時。向反應液中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-5%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-(1-(4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)喹啉(600 mg，0.95 mmol，收率：68%)。LCMS (ESI): [M+H]+ =627.0。
第四步：向2-羥基乙磺醯胺(120 mg, 0.96 mmol)，肌氨酸(43.5 mg, 0.48 mmol)，磷酸鉀(415 mg, 1.92 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(6 mL)溶液中加入碘化亞銅(93.1 mg, 0.48 mmol)。將混合物在50°C攪拌5分鐘。然後將8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-(1-(4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)喹啉(300 mg, 0.48 mmol)在50°C加入到反應混合物中，將混合物在氮氣的保護下加熱至100°C攪拌16小時。向反應液中加入水(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL x 2)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用製備型HPLC(C18，32-72%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化，得到白色固體化合物N-(4-(4-(8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺(133 mg，0.48 mmol，收率：45%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 648.3。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.06 (br s, 1H), 9.22 (s, 1H), 8.88 (br s, 1H), 8.40 (br d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.15 (br s, 1H), 7.76 (br s, 1H), 7.66 - 7.44 (m, 2H), 7.14 (br s, 1H), 7.03 (br d, J= 8.8 Hz, 1H), 5.23 - 4.72 (m, 1H), 3.88 - 3.72 (m, 2H), 3.67 - 3.45 (m, 4H), 3.39 - 3.34 (m, 2H), 2.82 - 2.61 (m, 4H), 2.39 - 2.12 (m, 4H), 1.37 - 1.18 (m, 4H), 0.23 (s, 4H)。
實施例 73 ~ 實施例 82 參照 實施例 72 的類似合成路線製備得到的：
實施例 73：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-7-氟喹啉-6-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 642.6， 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 10.17 (s, 1H), 9.30 (br d, J= 4.4 Hz, 2H), 9.07 (d, J= 4.0 Hz, 1H), 9.01 (br d, J= 6.4 Hz, 1H), 8.14 - 8.05 (m, 1H), 7.55 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.20 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.07 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 3.79 (br t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.43 - 3.32 (m, 6H), 2.76 - 2.67 (m, 4H), 2.47 - 2.30 (m, 4H), 1.33 - 1.19 (m, 4H), 0.23 (s, 4H)。
實施例 74： N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-2-甲基喹啉-6-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 638.3， 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 10.26 - 9.83 (m, 1H), 9.16 (s, 1H), 8.26 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 8.06 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.67 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.51 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.43 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.14 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.03 (dd, J= 2.4, 8.8 Hz, 1H), 5.00 (br s, 1H), 3.79 (br t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.62 - 3.50 (m, 4H), 3.40 - 3.35 (m, 2H), 2.74 - 2.65 (m, 7H), 2.32 - 2.19 (m, 4H), 1.35- 1.20 (m, 4H), 0.22 (s, 4H)。
實施例 75：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-7-氟-2-甲基喹啉-6-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 656.3， 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 10.68 - 9.47 (m, 1H), 8.87 (d, J= 4.4 Hz, 1H), 8.38 (dd, J= 3.2, 8.0 Hz, 2H), 7.61 - 7.38 (m, 2H), 7.15 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.04 (dd, J= 2.0, 8.8 Hz, 1H), 5.30 - 4.65 (m, 1H), 3.79 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.64 - 3.56 (m, 4H), 3.39 - 3.36 (m, 2H), 2.67 (br s, 7H), 2.28 - 2.13 (m, 4H), 1.35 - 1.24 (m, 4H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 76：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)噌啉-6-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 625.2， 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ ppm 10.39 - 9.65 (m, 1H), 9.45 - 9.24 (m, 2H), 8.18 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 8.13 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.79 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.52 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.15 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.04 (dd, J= 2.4, 8.4 Hz, 1H), 5.45 - 4.52 (m, 1H), 3.79 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.74 (br d, J= 4.4 Hz, 4H), 3.35 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 2.77 - 2.66 (m, 4H), 2.36 - 2.21 (m, 4H), 1.32 - 1.2 (br s, 4H), 0.22 (s, 4H)。
實施例 77：N-(4-{4-[3-氨基-8-(4,4-二氟呱啶-1-基)噌啉-6-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}-3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] +=640.3， 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ10.14 - 9.53 (m, 1H), 9.00 (s, 1H), 7.52 (br s, 1H), 7.28 (br d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.09 (br s, 1H), 6.91 (br s, 1H), 6.87 - 6.61 (m, 2H), 6.36 - 6.16 (m, 2H), 4.86 - 4.64 (m, 1H), 3.67 - 3.52 (m, 2H), 3.50 - 3.30 (m, 4H), 3.11 (br s, 2H), 2.53 - 2.42 (m, 4H), 2.05 - 1.90 (m, 4H), 1.05 (br s, 4H), 0.00 (s, 4H) 。
實施例 78：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[3-(4,4-二氟呱啶-1-基)-5-甲基-4-硝基苯基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 632.3， 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 10.05 (s, 1H), 9.18 (s, 1H), 7.92 - 7.77 (m, 2H), 7.48 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.13 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.02 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 5.19 - 4.75 (m, 1H), 3.78 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.36 (br s, 2H), 3.11 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 2.74 - 2.61 (m, 4H), 2.31 (s, 3H), 2.11 - 2.00 (m, 4H), 1.32 - 1.19 (m, 4H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 79：N-(4-{4-[5-氨基-6-(4,4-二氟呱啶-1-基)吡嗪-2-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}-3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] +=590.3， 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ10.20 - 9.84 (m, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.60 - 8.09 (m, 1H), 7.58 (br d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.12 (br s, 1H), 7.03 (br d, J= 8.4 Hz, 1H), 6.36 (br s, 2H), 5.11 - 4.84 (m, 1H), 3.78 (br t, J= 5.6 Hz, 2H), 3.33 - 3.22 (m, 6H), 2.68 (br t, J= 4.4 Hz, 4H), 2.27 - 2.13 (m, 4H), 1.34 (br s, 4H), 0.25 (s, 4H) 。
實施例 80：N-(4-{4-[2-氨基-8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-7-氟喹啉-6-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}-3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] +=657.3； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ13.17 - 11.36 (m, 1H), 10.05 (s, 1H), 8.92 - 8.66 (m, 1H), 8.42 - 7.92 (m, 2H), 7.53 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.14 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.03 (dd, J= 2.0, 8.8 Hz, 1H), 6.95 - 6.54 (m, 2H), 4.99 (t, J= 5.6 Hz, 1H), 3.78 (q, J= 6.4 Hz, 2H), 3.52 - 3.41 (m, 4H), 3.31 - 3.24 (m, 2H), 2.73 - 2.66 (m, 4H), 2.39 - 2.07 (m, 4H), 1.28 (br s, 4H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 81：N-(4-{4-[2-氨基-4-(4,4-二氟呱啶-1-基)-5-氟-1,3-苯並噻唑-6-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}-3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] +=663.2； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ10.05 (s, 1H), 8.68 (d, J= 3.9 Hz, 1H), 8.16 - 8.06 (m, 1H), 7.77 (br s, 2H), 7.51 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 7.13 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 7.02 (dd, J= 2.2, 8.6 Hz, 1H), 3.78 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 3.48 - 3.42 (m, 4H), 3.28 - 3.24 (m, 2H), 2.72 - 2.64 (m, 4H), 2.18 - 2.04 (m, 4H), 1.27 (br s, 4H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 82：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-[3,3'-聯吡啶]-6-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 651.3， 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.06 (br s, 1H), 9.16 (s, 1H), 8.87 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.59 (dd, J= 1.6, 4.8 Hz, 1H), 8.13 (td, J= 2.0, 8.0 Hz, 1H), 7.81 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.73 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.52 (dd, J= 5.2, 8.0 Hz, 1H), 7.14 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.05 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 5.00 (t, J= 5.6 Hz, 1H), 3.79 (q, J= 6.4 Hz, 2H), 3.33 (br s, 2H), 3.28 - 3.22 (m, 4H), 2.74 - 2.65 (m, 4H), 2.09 - 1.87 (m, 4H), 1.37 (br s, 4H), 0.26 (s, 4H)。
實施例 83：(2R)-N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-1-羥基丙烷-2-磺醯胺
實施例 84：(2S)-N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-1-羥基丙烷-2-磺醯胺
第一步：向雙(4-甲氧基苄基)胺(5.00 g, 19.4 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(5.12 g, 38.9 mmol)的二氯甲烷(50 mL)溶液中滴加2-(氯磺醯基)乙酸乙酯(3.63 g, 19.4 mmol)。混合物在20°C下攪拌2小時。反應液用水(100 mL)和二氯甲烷(100 mL x 3)萃取。合併有機相，飽和食鹽水洗滌(100 mL)，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-15%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到淡黃色油狀物2-{二[(4-甲氧苯基)甲基]氨磺醯}乙酸乙酯(3.10 g，7.60 mmol，收率：39%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.14 (d, J= 8.4 Hz, 4H), 6.86 (d, J=8.4 Hz, 4H), 4.29 (s, 2H), 4.25 (s, 4H), 3.73 (s, 8H), 1.21 (t, J= 7.2 Hz, 3H)。
第二步：向2-{二[(4-甲氧苯基)甲基]氨磺醯}乙酸乙酯(3.10 g, 7.60 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(40 mL)溶液中加入碳酸銫(3.79 g, 11.4 mmol)，再緩慢滴加碘甲烷(1.32 g, 9.13 mmol)。將混合物在20°C下攪拌16小時。將反應液用水(100 mL)和乙酸乙酯(100 mL x 3)萃取。合併有機相，用飽和食鹽水(100 mL x 2)洗滌，再用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得到殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-15%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到無色油狀物乙基 2-{二[(4-甲氧苯基)甲基]氨磺醯}丙酯(2.60 g，7.60 mmol，收率：81%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.13 (d, J= 8.4 Hz, 4H), 6.85 (d, J= 8.4 Hz, 4H), 4.36 - 4.23 (m, 3H), 4.23 - 4.11 (m, 4H), 3.73 (s, 6H), 1.46 (d, J= 7.2 Hz, 3H), 1.21 (t, J= 7.2 Hz, 3H)。
第三步：將乙基 2-{二[(4-甲氧苯基)甲基]氨磺醯}丙酯(1.20 g, 2.85 mmol)的三氟乙酸(10 mL)溶液中加入苯甲醚(2 mL)。混合物在20°C下攪拌3小時。將反應液濃縮，加入飽和碳酸氫鈉水溶液調pH至7，再用乙酸乙酯(25 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得到殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-25%梯度的四氫呋喃/石油醚)得到白色固體乙基 2-氨磺醯丙酯(0.42 g，1.92 mmol，收率：81%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.13 (s, 2H), 4.14 (q, J= 7.2 Hz, 2H), 3.97 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 1.44 (d, J= 6.8 Hz, 3H), 1.21 (t, J= 7.2 Hz, 3H)。
第四步：向6-(5-溴-2-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(800 mg, 1.47 mmol)和乙基 2-氨磺醯丙酯(399 mg, 2.20 mmol)的二氧六環(15 mL)溶液中加入2-二叔丁基膦-2',4',6'-三異丙基聯苯(125 mg, 0.29 mmol)，磷酸鉀(955 mg, 4.41 mmol)和三(二亞苄基丙酮)二鈀(137 mg, 0.15 mmol)。反應液用氮氣置換三次，並在氮氣氛圍下加熱至90°C攪拌2小時。將反應液冷卻至室溫，用水(30 mL)和乙酸乙酯(30 mL x 3)萃取。合併有機相，飽和食鹽水洗滌(30 mL)，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-33%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到白色固體乙基 2-[(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)氨磺醯]丙酯(830 mg，1.29 mmol，收率：88%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 645.4； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.53 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 7.59 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.05 (br d, J= 8.8 Hz, 1H), 4.27 (q, J= 6.8 Hz, 1H), 4.14 - 4.06 (m, 2H), 3.98 (br t, J= 5.6 Hz, 4H), 2.71 - 2.61 (m, 4H), 2.40 (s, 3H), 2.05 - 1.97 (m, 4H), 1.48 (d, J= 6.8 Hz, 3H), 1.28 (br s, 4H), 1.19 - 1.15 (m, 3H), 0.24 (s, 4H)。
第五步：將乙基 2-[(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)氨磺醯]丙酯(590 mg, 0.92 mmol)加入至四氫呋喃(12 mL)溶液中，在0°C下分批加入四氫鋁鋰(49.0 mg, 1.37 mmol)，混合物在0°C攪拌1小時。反應液用水(0.05 mL)和10%氫氧化鈉水溶液(0.10 mL)淬滅，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘餘物用製備型HPLC (C18，48-88%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化，通過手性SFC(IG，體系：二氧化碳/甲醇(0.1%的氨水))拆分，得到白色固體化合物(2R)-N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-1-羥基丙烷-2-磺醯胺(107 mg，0.17 mmol，收率：19%) （實施例 83）和(2S)-N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-1-羥基丙烷-2-磺醯胺(91.0 mg， 0.15 mmol，收率：17%)（實施例 84）。
實施例83：LCMS (ESI): [M+H]+ = 603.3； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.08 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 7.57 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.15 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.05 (dd, J= 2.4, 8.4 Hz, 1H), 5.04 (br t, J= 5.6 Hz, 1H), 3.98 (br t, J= 5.6 Hz, 4H), 3.90 - 3.83 (m, 1H), 3.49 (td, J= 6.8, 11.2 Hz, 1H), 3.30 - 3.21 (m, 1H), 2.66 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 2.40 (s, 3H), 2.07 - 1.93 (m, 4H), 1.36 - 1.24 (m, 7H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 84：LCMS (ESI): [M+H]+ = 603.3； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.03 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 7.56 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.14 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.04 (dd, J= 2.4, 8.4 Hz, 1H), 5.09 (s, 1H), 3.98 (br t, J= 5.6 Hz, 4H), 3.86 (dd, J= 4.4, 11.2 Hz, 1H), 3.49 (dd, J= 7.6, 11.2 Hz, 1H), 3.29 - 3.19 (m, 1H), 2.66 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 2.40 (s, 3H), 2.07 - 1.92 (m, 4H), 1.37 - 1.21 (m, 7H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 85 ~ 實施例 87 參照 實施例 84的類似合成路線製備得到的：
實施例 85：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-1-(羥甲基)環丙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 603.3； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.21 (s, 1H), 7.50 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.13 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.99 (dd, J= 2.0, 8.8 Hz, 1H), 3.98 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 3.76 (s, 2H), 2.65 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 2.40 (s, 3H), 2.06 - 1.88 (m, 4H), 1.28 (br s, 4H), 1.14 - 1.07 (m, 2H), 0.99 - 0.90 (m, 2H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 86：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-1-羥基-2-甲基丙烷-2-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 617.5； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 10.05 - 9.69 (m, 1H), 9.23 (s, 1H), 7.54 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.25 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.08 (dd, J= 2.4, 8.8 Hz, 1H), 5.21 - 5.03 (m, 1H), 3.98 (br t, J= 5.6 Hz, 4H), 3.57 (s, 2H), 2.70 - 2.62 (m, 4H), 2.40 (s, 3H), 2.15 - 1.91 (m, 4H), 1.35 - 1.18 (m, 10H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 87A：(2R)-N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-7-氟喹啉-6-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-1-羥基丙烷-2-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 656.1； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 10.07 (br d, J= 3.6 Hz, 1H), 9.04 - 8.84 (m, 2H), 8.65 - 8.31 (m, 2H), 7.88 - 7.37 (m, 2H), 7.17 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.06 (dd, J= 2.0, 8.8 Hz, 1H), 5.04 (br s, 1H), 3.87 (br d, J= 7.2 Hz, 1H), 3.59 (br t, J= 4.8 Hz, 4H), 3.53 - 3.43 (m, 1H), 3.30 - 3.26 (m, 1H), 2.70 (br t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.25 - 2.10 (m, 4H), 1.35 - 1.23 (m, 7H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 87B：(2S)-N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)-7-氟喹啉-6-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-1-羥基丙烷-2-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 656.1; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 10.08 (s, 1H), 9.02 - 8.81 (m, 2H), 8.49 (dd, J= 7.6, 18.4 Hz, 2H), 7.66 - 7.41 (m, 2H), 7.17 (d, J= 2.0Hz, 1H), 7.06 (dd, J= 2.0, 8.8 Hz, 1H), 5.05 (br s, 1H), 3.93 - 3.81 (m, 1H), 3.59 (br s, 4H), 3.53 - 3.44 (m, 1H), 3.29 - 3.24 (m, 1H), 2.70 (br t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.26 - 2.10 (m, 4H), 1.36 - 1.23 (m, 7H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 88：N-{3-[4-(二氟甲亞基)呱啶-1-基]-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基}-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
第一步：在-40°C時向叔-丁基 4-氧亞基呱啶-1-甲酸基酯(5.00 g, 25.1 mmol)和2-二氟甲磺醯吡啶(4.85 g, 25.1 mmol)的N，N-二甲基甲醯胺(100 mL)的溶液中緩慢滴加叔丁醇鉀(4.27 g, 37.6 mmol)的N，N-二甲基甲醯胺(100 mL)的溶液。將混合物在-40°C攪拌0.5小時。然後向反應液中加入飽和的氯化銨(12 mL)和3M的鹽酸（30mL)。然後緩慢升溫至室溫。用乙酸乙酯(100 mL x 2)萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-8%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到無色油狀物叔-丁基 4-(二氟甲亞基)呱啶-1-甲酸基酯(3.50 g，15.0 mmol，收率：60%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3.42 - 3.28 (m, 4H), 2.08 (br t, J = 5.6 Hz, 4H), 1.46 - 1.32 (m, 9H)。
第二步：向叔-丁基 4-(二氟甲亞基)呱啶-1-甲酸基酯(3.50 g, 15.0 mmol) 的二氧六環(35 mL)中加入鹽酸/二氧六環(35 mL，4M)。將混合物在25°C攪拌16小時。將反應液濃縮旋乾得到白色固體4-(二氟甲亞基)呱啶鹽酸(2.50 g，14.7 mmol，收率：98.2%)。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 9.52 - 9.06 (m, 2H), 3.14 - 3.02 (m, 4H), 2.45 - 2.32 (m, 4H)。
第三步：向4-溴-2-氟-1-硝基苯 (2.70 g, 12.3 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(4.86 g, 36.8 mmol)的乙腈(54 mL)溶液中加入4-(二氟甲亞基)呱啶鹽酸(2.08 g, 12.3 mmol)。將混合物在25°C攪拌16小時。將反應液濃縮旋乾得到得到黃色固體1-(5-溴-2-硝基苯基)-4-(二氟甲亞基)呱啶(3.80 g，11.4 mmol，收率：93%)。LCMS (ESI): [M+H] += 332.9； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 7.80 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.48 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.29 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 3.06 (t, J= 5.6 Hz, 4H), 2.31 - 2.21 (m, 4H)。
第四步： 向1-(5-溴-2-硝基苯基)-4-(二氟甲亞基)呱啶(3.70 g, 11.1 mmol)的甲醇(80 mL)和水(20 mL)溶液中加入氯化銨(1.80 g, 33.3 mmol)和鐵粉(3.13 g, 55.5 mmol)。將混合物加熱至60°C攪拌16小時。將反應液用矽藻土過濾，濾液用乙酸乙酯(100 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得到棕色固體4-溴-2-[4-(二氟甲亞基)呱啶-1-基]苯胺(3.35 g，10.9 mmol，收率：99%)。LCMS (ESI): [M+H] +=304.9； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 7.02 - 6.95 (m, 2H), 6.69 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 5.02 (s, 2H), 2.83 (br t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.36 (br t, J= 5.2 Hz, 4H)。
第五步： 在0°C向4-溴-2-[4-(二氟甲亞基)呱啶-1-基]苯胺(3.30 g, 10.9 mmol)的乙腈（60 mL）溶液中加入亞硝酸叔丁酯 (1.71 g, 16.3 mmol)。然後將疊氮三甲基矽烷(1.88 g, 16.3 mmol)加入到反應液中，將混合物在25°C攪拌16小時。將反應液中倒入水(100 mL)中，用乙酸乙酯(100 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-10%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體1-(2-疊氮-5-溴苯基)-4-(二氟甲亞基)呱啶(3.00 g，9.15 mmol，收率：84%)。LCMS (ESI): [M+H] +=330.9； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 7.31 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 7.24 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.16 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 3.04 (br t, J= 5.6 Hz, 4H), 2.35 (br t, J= 5.4 Hz, 4H)。
第六步： 向1-(2-疊氮-5-溴苯基)-4-(二氟甲亞基)呱啶(500 mg, 1.52 mmol)，2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-4-甲基-6-[2-(三甲基甲矽烷基)乙炔基]嘧啶(470 mg, 1.52 mmol)的叔丁醇(5 mL)和水(5 mL)的溶液中加入硫酸銅(242 mg, 1.52 mmol)和抗壞血酸鈉(301 mg, 1.51 mmol)。將混合物在25°C攪拌16小時。向反應液中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-15%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體4-(1-{4-溴-2-[4-(二氟甲亞基)呱啶-1-基]苯基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶(800 mg，1.41 mmol， 收率：93%)。LCMS (ESI): [M+H] +=568.0； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 8.78 (s, 1H), 7.48 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.31 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 7.24 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 4.01 - 3.96 (m, 4H), 2.73 (t, J= 5.6 Hz, 4H), 2.40 (s, 3H), 2.13 (br t, J= 5.6 Hz, 4H), 2.00 - 1.90 (m, 4H)。
第七步： 向2-羥基乙磺醯胺(177 mg, 1.41 mmol)，(1R,2R)-N1,N2-二甲基環己烷-1,2-二胺(101 mg, 0.71 mmol)，磷酸鉀(450 mg, 2.12 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(8 mL)溶液中加入碘化亞銅(134 mg, 0.71 mmol)。將混合物在50°C攪拌5分鐘。然後將4-(1-{4-溴-2-[4-(二氟甲亞基)呱啶-1-基]苯基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶(400 mg, 0.71 mmol)在50°C加入到反應混合物中，將混合物在氮氣的保護下加熱至100°C攪拌4小時。向反應液中加入水(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL x 2)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用製備型HPLC(C18，44-84%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化，得到白色固體化合物N-{3-[4-(二氟甲亞基)呱啶-1-基]-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基}-2-羥基乙烷-1-磺醯胺(210 mg，0.35 mmol，收率：49%)。LCMS (ESI): [M+H] += 611.1； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 10.10 (br s, 1H), 9.22 (s, 1H), 7.57 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.12 - 7.02 (m, 2H), 4.99 (br t, J= 5.6 Hz, 1H), 3.96 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 3.82 - 3.74 (m, 2H), 3.38 - 3.35 (m, 2H), 2.69 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 2.40 (s, 3H), 2.12 - 2.04 (m, 4H), 2.03 - 1.90 (m, 4H)。
實施例89：N-(4-(1-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺
第一步： 向2-氟-4-碘苯甲醛(1.00 g, 4.00 mmol)和碳酸鉀(1.65 g, 12.00 mmol)的二甲基亞碸(20 mL)溶液中加入6-氮雜螺[2.5]辛鹽酸 (0.49 g, 4.40 mmol)。將混合物加熱至120°C攪拌16小時。向反應混合物中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL x 2)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-8%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯甲醛(1.00 g， 2.93 mmol，收率：73%)。LCMS (ESI): [M+H] +=341.9。
第二步：向4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯甲醛(1.00 g, 2.93 mmol)和碳酸鉀(0.81 g, 5.86 mmol)的甲醇(20 mL)溶液中加入二甲基 (1-重氮基-2-氧亞基丙基)膦酸基酯(0.68 g, 3.52 mmol)。將混合物在25°C攪拌16小時。向反應混合物中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL x 2)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-5%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體6-(2-乙炔基-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(0.90 g，2.67 mmol，收率：91%)。LCMS (ESI): [M+H] += 338.0。
第三步： 向4-氯-6-甲基-2-(甲硫基)嘧啶 (4.50 g, 25.7 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(45 mL)溶液中加入疊氮鈉(2.54 g, 39.1 mmol)。將混合物在25°C攪拌16小時。向反應液中加入水(100 mL)，用乙酸乙酯(100 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-7%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體4-疊氮-6-甲基-2-(甲硫基)嘧啶(3.00 g，16.5 mmol，收率：64%)。LCMS (ESI): [M+H] += 181.9。
第四至五步： 向4-疊氮-6-甲基-2-(甲硫基)嘧啶(1.50 g, 8.28 mmol) 的二氯甲烷(45 mL)溶液中分批加入單過硫酸氫鉀(13.9 g, 82.8 mmol)。將混合物在25°C攪拌36小時。將混合物過濾。向濾液中加入鹽酸4,4-二氟呱啶(1.66 g, 10.5 mmol)和三乙胺(2.13 g, 21.1 mmol)。將混合物在25°C攪拌16小時。向反應液中加入水(50 mL)，用乙酸乙酯(50 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-12%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體4-疊氮-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶(1.00 g, 3.93 mmol，收率：56%)。LCMS (ESI): [M+H] += 254.9。
第六步： 向4-疊氮-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶(575 mg, 2.26 mmol)，6-(2-乙炔基-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(762 mg, 2.26 mmol)的叔丁醇(5 mL)，四氫呋喃(5 mL)和水(5 mL)的溶液中加入硫酸銅(360 mg, 2.26 mmol)和抗壞血酸鈉(448 mg, 2.26 mmol)。將混合物在25°C攪拌16小時。向反應液中加入水(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-12%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體6-(2-(1-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(500 mg，0.84 mmol，收率：37%)。LCMS (ESI): [M+H] +=592.0。
第七步： 向2-羥基乙磺醯胺(253 mg, 2.02 mmol)，2-(甲基氨基)乙酸(90.3 mg, 1.01 mmol)，磷酸鉀(878 mg, 4.05 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(12 mL)溶液中加入碘化亞銅(98.5 mg, 0.50 mmol)。將混合物在50°C攪拌5分鐘。然後將6-(2-(1-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(600 mg, 1.01 mmol)在50°C加入到反應混合物中，將混合物在氮氣的保護下加熱至100°C攪拌16小時。向反應液中加入水(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL x 2)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用製備型HPLC (C18，48-88%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化，得到白色固體化合物N-(4-(1-(2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙磺醯胺(324.6 mg，0.54 mmol，收率：54%)。LCMS (ESI): [M+H] += 589.5。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 9.80 (s, 1H), 9.56 (s, 1H), 8.09 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.18 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.07 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 4.95 (t, J= 5.6 Hz, 1H), 4.01 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 3.76 (q, J= 6.4 Hz, 2H), 3.32 - 3.28 (m, 2H), 2.84 (br t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.47 (s, 3H), 2.11 - 2.01 (m, 4H), 1.78 - 1.30 (m, 4H), 0.36 (s, 4H)。
實施例 90 和 實施例 91 參照 實施例 89 的類似合成路線製備得到的：
實施例 90：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{1-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲氧基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] += 605.1； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 9.89 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.08 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.18 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.07 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 6.72 (s, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.01 (br t, J= 5.6 Hz, 4H), 3.98 (s, 3H), 3.76 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.31 - 3.26 (m, 2H), 2.85 (br t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.21 - 2.00 (m, 4H), 1.75 - 1.31 (m, 4H), 0.37 (s, 4H)。
實施例 91： N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{2-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基吡啶-4-基]-2H-1,2,3,4-四唑-5-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] +=588.3， 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ9.62 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 7.56 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.01 (s, 1H), 6.94 (s, 1H), 6.88 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.76 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 5.04 - 4.38 (m, 1H), 3.60 - 3.49 (m, 6H), 3.05 - 3.03 (m, 2H), 2.58 (br t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.20 (s, 3H), 1.85 - 1.72 (m, 4H), 1.25 - 1.15 (m, 4H), 0.06 (s, 4H)。
實施例 92：(2R)-N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{1-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}苯基)-1-羥基丙烷-2-磺醯胺
實施例 93 (2S)-N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{1-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}苯基)-1-羥基丙烷-2-磺醯胺
實施例 92：LCMS (ESI): [M+H]+ = 603.3； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.92 (s, 1H), 9.46 (s, 1H), 8.08 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.20 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.08 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 4.99 (s, 1H), 4.01 (br t, J= 5.6 Hz, 4H), 3.85 (dd, J= 4.4, 10.8 Hz, 1H), 3.43 (m, 1H), 3.22 (m, 1H), 2.84 (br t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.47 (s, 3H), 2.14 - 1.96 (m, 4H), 1.55 (br s, 4H), 1.29 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.36 (s, 4H)。
實施例 93：LCMS (ESI): [M+H]+ = 603.1； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.91 (s, 1H), 9.46 (s, 1H), 8.08 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.20 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.08 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 4.99 (s, 1H), 4.01 (br t, J= 5.6 Hz, 4H), 3.85 (dd, J= 3.6, 10.8 Hz, 1H), 3.45 (br t, J= 8.4 Hz, 1H), 3.22 (m, 1H), 2.84 (br t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.47 (s, 3H), 2.14 - 1.96 (m, 4H), 1.55 (br s, 4H), 1.29 (d, J= 6.8 Hz, 3H), 0.36 (s, 4H)。
實施例 94：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{1-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
第一步：向2-氟-4-碘苯甲醛(2.00 g, 8.00 mmol)和碳酸鉀(3.31 g, 24.0 mmol)的二甲基亞碸(20.0 mL)溶液中加入6-氮雜螺[2.5]辛鹽酸(1.33 g, 12.0 mmol)。將混合物加熱至120°C攪拌16小時。向反應混合物中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL x 2)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-8%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯甲醛(1.70 g，4.95 mmol，收率：62%)。LCMS (ESI): [M+H] +=342.0。
第二步：向4-碘-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯甲醛(1.70 g, 4.98 mmol)和碳酸鉀(1.37 g, 9.97 mmol)的甲醇(20.0 mL)溶液中加入二甲基 (1-重氮基-2-氧亞基丙基)膦酸基酯(1.15 g, 5.98 mmol)。將混合物在25°C攪拌16小時。向反應混合物中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL x 2)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-5%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到黃色固體6-(2-乙炔基-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(1.50 g，4.43 mmol，收率：89%)。LCMS (ESI): [M+H] += 338.4。
第三步：向8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-胺(600 mg, 2.28 mmol)的乙腈（5.00 mL）溶液中加入亞硝酸叔丁酯(599 mg, 5.70 mmol)。然後將疊氮三甲基矽烷(525 mg, 4.56 mmol)加入到反應液中，將混合物在25°C攪拌16小時。將反應液中倒入水(10 mL)中，用乙酸乙酯(10 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-10%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到白色固體6-疊氮-8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉(240 mg，0.83 mmol，收率：36%)。LCMS (ESI): [M+H]+ =290.0。
第四步：向6-疊氮-8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉 (160 mg, 0.55 mmol)，6-(2-乙炔基-5-碘苯基)-6-氮雜螺[2.5]辛烷(224 mg, 0.66 mmol)的叔丁醇(5.00 mL)和水(5.00 mL)的溶液中加入硫酸銅(88.3 mg, 0.55 mmol)和抗壞血酸鈉(110 mg, 0.55 mmol)。將混合物在25°C攪拌16小時。向反應液中加入水(20 mL)，用乙酸乙酯(20 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用快速柱色譜純化(矽膠，0-5%梯度的乙酸乙酯/石油醚)得到棕色固體6-[4-(2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-碘苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]-8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉(240 mg，0.38 mmol，收率：69%)。LCMS (ESI): [M+H]+ =627.2。
第五步：向2-羥基乙磺醯胺(47.9 mg, 0.38 mmol)，(1R,2R)-(-)-N,N-二甲基環己烷-1,2-二胺(27.5 mg, 0.19 mmol)，磷酸鉀(163 mg, 0.77 mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(5.0 mL)溶液中加入碘化亞銅(18.6 mg, 0.10 mmol)。將混合物在50°C攪拌5分鐘。然後將6-[4-(2-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-碘苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]-8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉(120 mg, 0.19 mmol)在50°C加入到反應混合物中，將混合物在氮氣的保護下加熱至100°C攪拌16小時。向反應液中加入水(10 mL)，用乙酸乙酯(10 mL x 2)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液旋乾得殘餘物。殘留物用製備型HPLC(C18，36-76%梯度的水(甲酸)/乙腈)純化，得到白色固體化合物N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{1-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基]-1H-1,2,3-三唑-4-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺(53 mg，0.084 mmol，收率：44%)。LCMS (ESI): [M+H]+ = 624.3。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.88 (s, 1H), 9.26 (s, 1H), 8.96 (br d, J= 2.8 Hz, 1H), 8.51 (d, J= 0.8 Hz, 1H), 8.15 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.91 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.71 - 7.58 (m, 2H), 7.16 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.04 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 5.73 - 3.98 (m, 1H), 3.77 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.70 - 3.62 (m, 4H), 3.30 (t, J= 1.2 Hz, 2H), 2.92 - 2.82 (m, 4H), 2.32 - 2.21 (m, 4H), 1.60 - 1.43 (m, 4H), 0.33 (s, 4H)。
實施例 95：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-(2-羥基乙氧基)嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
實施例 95 參照 實施例 54 的類似合成路線製備得到；LCMS (ESI): [M+H]+ = 635.3； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.13 (s, 1H), 9.16 (s, 1H), 7.55 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.11 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.01 (dd, J= 2.0, 8.8 Hz, 1H), 6.68 (s, 1H), 5.29 (s, 1H), 4.88 (t, J= 5.6 Hz, 1H), 4.36 (t, J= 5.2 Hz, 2H), 3.96 (br s, 4H), 3.81 - 3.67 (m, 4H), 3.32 - 3.29 (m, 2H), 2.66 (br t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.11 - 1.90 (m, 4H), 1.29 (br s, 4H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 96：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-(噁戊環-3-氧基)嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
實施例 96 參照 實施例 54 的類似合成路線製備得到；LCMS (ESI): [M+H]+ = 661.2； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.13 (s, 1H), 9.17 (s, 1H), 7.56 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.13 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.03 (dd, J= 2.0, 8.8 Hz, 1H), 6.67 (s, 1H), 5.56 (tt, J= 2.4, 4.8 Hz, 1H), 5.14 - 4.79 (m, 1H), 4.01 - 3.92 (m, 5H), 3.90 - 3.80 (m, 2H), 3.80 - 3.71 (m, 3H), 3.35 - 3.33 (m, 2H), 2.66 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 2.32 - 2.22 (m, 1H), 2.11 - 1.95 (m, 5H), 1.29 (br s, 4H), 0.25 (s, 4H)。
實施例 97：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-[(噁戊環-3-基)甲氧基]嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
實施例 97 參照 實施例 54 的類似合成路線製備得到；LCMS (ESI): [M+H]+ = 675.2； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 10.54 - 9.69 (m, 1H), 9.16 (s, 1H), 7.57 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.21 - 6.92 (m, 2H), 6.68 (s, 1H), 5.19 - 4.78 (m, 1H), 4.49 - 4.13 (m, 2H), 3.97 (br s, 4H), 3.86 - 3.74 (m, 4H), 3.67 (q, J= 7.6 Hz, 1H), 3.55 (br dd, J= 5.6, 8.4 Hz, 2H), 2.67 (br s, 6H), 2.02 (br t, J= 12.8 Hz, 5H), 1.69 (td, J= 6.8, 12.8 Hz, 1H), 1.29 (br s, 4H), 0.25 (s, 4H)。
實施例 98：N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-1-羥基丁烷-2-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 617.3； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.99 (m, 1H), 9.21 (s, 1H), 7.56 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.14 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.03 (dd, J= 2.4, 8.4 Hz, 1H), 5.35 - 4.67 (m, 1H), 3.98 (br t, J= 5.6 Hz, 4H), 3.86 (dd, J= 4.8, 11.2 Hz, 1H), 3.67 (dd, J= 6.4, 11.6 Hz, 1H), 3.07 (br t, J= 5.6 Hz, 1H), 2.66 (br t, J= 5.2 Hz, 4H), 2.40 (s, 3H), 2.06 - 1.93 (m, 4H), 1.90 - 1.73 (m, 2H), 1.28 (br s, 4H), 1.00 (t, J= 7.2 Hz, 3H), 0.24 (s, 4H)。
實施例 99：(2R)-N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-1-羥基丙烷-2-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 638.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 10.56 - 9.63 (m, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.96 - 8.79 (m, 1H), 8.39 (br d, J= 7.2 Hz, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.62 - 7.44 (m, 2H), 7.16 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.04 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 5.45 - 4.58 (m, 1H), 3.88 (dd, J= 4.4, 11.2 Hz, 1H), 3.58 (br s, 4H), 3.50 (br dd, J= 8.0, 10.8 Hz, 1H), 3.29 - 3.22 (m, 1H), 2.70 (br s, 4H), 2.25 (br t, J= 13.2 Hz, 4H), 1.35 - 1.22 (m, 7H), 0.23 (s, 4H)。
實施例 100：(2S)-N-(3-{6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基}-4-{4-[8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}苯基)-1-羥基丙烷-2-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 638.1。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 10.85 - 9.40 (m, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.87 (dd, J= 2.0, 4.0 Hz, 1H), 8.38 (dd, J= 1.6, 8.4 Hz, 1H), 8.12 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.72 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.58 - 7.44 (m, 2H), 7.15 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.03 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 5.64 - 4.36 (m, 1H), 3.87 (dd, J= 4.4, 11.2 Hz, 1H), 3.58 (br s, 4H), 3.49 (dd, J= 8.0, 11.2 Hz, 1H), 3.30 - 3.23 (m, 1H), 2.69 (br t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.32 - 2.16 (m, 4H), 1.37 - 1.24 (m, 7H), 0.22 (s, 4H)。
實施例 101：N-(4-(4-(8-(4,4-二氟呱啶-1-基)喹啉-6-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-1-羥基-2-甲基丙烷-2-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H]+ = 652.1； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 10.20 - 9.55 (m, 1H), 9.22 (s, 1H), 8.87 (br d, J= 2.8 Hz, 1H), 8.38 (br d, J= 7.6 Hz, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.61 - 7.40 (m, 2H), 7.27 (s, 1H), 7.07 (dd, J= 1.2, 8.8 Hz, 1H), 5.63 - 4.61 (m, 1H), 3.58 (br s, 6H), 2.69 (br s, 4H), 2.25 (br t, J= 13.6 Hz, 4H), 1.27 (s, 10H), 0.22 (s, 4H)。
實施例 102：N-(4-(5-(2-(4，4-二氟呱啶-1-基)-6-甲氧基吡啶-4-基)-1,3,4-噁二唑-2-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-1-羥基丙烷-2-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] +=619.4; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.17 (s, 1H), 7.90 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 10.7 Hz, 2H), 6.65 (s, 1H), 5.04 (s, 1H), 3.95-3.82 (m, 4H), 3.79 (t, J = 5.7 Hz, 4H), 3.49 (dd, J = 11.1, 7.6 Hz, 1H), 3.28 (dd, J = 7.2, 4.5 Hz, 1H), 2.93 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 2.05 (tt, J = 13.4, 5.2 Hz, 4H), 1.47 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 1.30 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.32 (s, 4H)。
實施例 103：N-(4-(5-(2-(4，4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基吡啶-4-基)-1,3,4-惡二唑-2-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-1-羥基丙烷-2-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] +=603.5; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.18 (s, 1H), 7.91 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.12 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.01 (dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H), 5.04 (s, 1H), 3.85 (dd, J = 11.1, 4.4 Hz, 1H), 3.79 (t, J = 5.8 Hz, 4H), 3.49 (dd, J = 11.1, 7.7 Hz, 1H), 3.29 (dt, J = 7.2, 3.6 Hz, 1H), 2.93 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 2.44 (s, 3H), 2.08-1.95 (m, 4H), 1.48 (t, J = 5.3 Hz, 4H), 1.30 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.32 (s, 4H)。
實施例 104：N-(4-(5-(2-(4，4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基吡啶-4-基)-1,3,4-惡二唑-2-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基) -1-羥基-2-甲基丙烷-2-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] +=617.4; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.95 (s, 1H), 7.89 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.28-7.11 (m, 3H), 7.05 (dd, J = 8.6, 2.1 Hz, 1H), 5.12 (s, 1H), 3.79 (t, J = 5.7 Hz, 4H), 3.56 (s, 2H), 2.92 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 2.44 (s, 3H), 2.04 (td, J = 14.4, 13.6, 7.2 Hz, 4H), 1.48 (t, J = 5.3 Hz, 4H), 1.26 (s, 6H), 0.32 (s, 4H)。
實施例 105：N-(4-(5-(2-(4，4-二氟呱啶-1-基)-6-甲氧基吡啶-4-基)-1，3，4-惡二唑-2-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)- 1-羥基-2-甲基丙烷-2-磺醯胺
LCMS (ESI): [M+H] +=633.4; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.94 (s, 1H), 7.88 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.09-6.94 (m, 2H), 6.65 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 5.12 (s, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.79 (t, J = 5.6 Hz, 4H), 3.56 (s, 2H), 2.92 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 2.06 (ddt, J = 20.0, 14.0, 5.6 Hz, 4H), 1.47 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 1.26 (s, 6H), 0.32 (s, 4H)。
實施例 106：N-(4-(4-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基-3H-咪唑並[4,5-c]吡啶-2-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺
第一步： 含有2,4-二氯-6-甲基-3-硝基吡啶(5.00 g，24.15 mmol)、氨甲醇溶液(25 mL, 7M)和四氫呋喃(50 mL)的混合溶液在50°C下攪拌12 小時，將反應液倒入水(30 mL)中並用乙酸乙酯(30 mL x 3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮後經柱層析(矽膠，0-100%梯度的乙酸乙酯/石油醚)純化，得到化合物2-氯-6-甲基-3-硝基吡啶-4-胺 (1.90 g，10.13 mmol，收率:41.9%)，為淡黃色固體。LCMS (ESI): [M+H] +=188.2。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 7.26 (s, 2H), 6.66-6.62 (m, 1H), 2.33 -2.23 (m, 3H)。
第二步：含有2-氯-6-甲基-3-硝基-4-吡啶胺(1.90 g，10.13 mmol)、4,4-二氟呱啶鹽酸鹽(1.90 g、12.16 mmol)，碳酸鉀(4.30 g，30.39 mmol)和二甲基亞碸(20 mL)的混合溶液在100°C下攪拌12小時，將反應液倒入水中(30 mL)並用乙酸乙酯(30 mL x 3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮後經柱層析(矽膠，0-100%梯度的乙酸乙酯/石油醚)純化，得到化合物2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基-3-硝基吡啶-4-胺(2.30 g，8.45 mmol，收率：83.4%)，為淡黃色油狀。LCMS (ESI): [M+H] +=273.1。
第三步：含有2-(4,4-二氟呱啶基)-6-甲基-3-硝基-4-吡啶胺(2.30 g，8.45 mmol)、鐵粉(1.40 g，25.34 mmol)，氯化銨(1.40 g，25.34 mmol)，乙醇(20 mL)和水(4 mL)的混合溶液在60°C攪拌1小時，反應液趁熱過濾，濾液濃縮後用乙酸乙酯萃取(30 mL x 3)，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮後經柱層析(矽膠，0-30%梯度的甲醇/二氯甲烷)純化，得到化合物2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基吡啶-3,4-二胺(1.80 g，7.43 mmol，收率：87.9%)，為灰色固體。LCMS (ESI): [M+H] += 243.2。
第四步：含有2-(6-氮雜螺[2.5]辛-6-基)-4-溴苯甲酸(2.80 g，8.92 mmol)、2-(4,4-二氟呱啶基)-6-甲基吡啶-3.4-二胺(1.80 g，7.43 mmol)，2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(4.32 g，11.15 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(2.90 g，22.29 mmol)以及N,N-二甲基甲醯胺(20 mL)的混合溶液在20°C下攪拌12小時，將反應液倒入水(30 mL)中並用乙酸乙酯(30mL x 3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮後經柱層析(矽膠，0-100%梯度的乙酸乙酯/石油醚)純化，得到化合物N-(4-氨基-2-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基吡啶-3-基)-4-溴-2-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯甲醯胺(1.30 g，2.43 mmol，收率：32.7%)，為黃色固體。LCMS (ESI): [M+H] += 534.3； 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11.29 (s, 1H), 7.91 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.51 (dd, J = 8.4, 2.0 Hz, 1H), 6.29 (s, 1H), 5.62 (s, 2H), 3.14-3.02 (m, 8H), 2.21 (s, 3H), 1.96-1.85 (m, 4H), 1.44-1.39 (m, 4H), 0.33 (s, 4H)。
第五步：含有N-[4-氨基-2-(4,4-二氟呱啶基)-6-甲基(3-吡啶基)][2-(6-氮雜螺[2.5]辛-6-基)-4-溴苯基]甲醯胺(1.3 g，2.43 mmol)、乙酸(15 mL)的溶液在120°C下攪拌48小時，將反應液倒入水中(100 mL)並加入碳酸氫鈉水溶液(500 mL)調pH至8左右，然後用乙酸乙酯(100 mL x 3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮後經柱層析(矽膠，0-100%梯度的乙酸乙酯/石油醚)純化, 得到化合物2-(4-溴-2-(6-氮雜螺[2.5]辛-6-基)苯基)-4-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基-3H-咪唑並[4,5-c]吡啶(630 mg，1.22 mmol，收率：50.2%)，為黃色固體。LCMS (ESI): [M+H] += 516.3。
第六步：氮氣氛圍下， 含有2-(4-溴-2-(6-氮雜螺[2.5]辛-6-基)苯基)-4-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基-3H-咪唑並[4,5-c]吡啶(300 mg, 0.58 mmol)、2-羥基乙磺醯胺(148 mg，1.16 mmol)，磷酸鉀(377 mg, 1.74 mmol)，2-二-叔丁膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯(25 mg, 0.058 mmol)，三(二亞苄基丙酮)二鈀(54 mg，0.058 mmol)和二氧六環(5 mL)的反應液在100°C攪拌8小時，將反應液倒入水中(30 mL)並用乙酸乙酯(30 mL x 3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮後經柱層析(矽膠，0-100%梯度的乙酸乙酯/石油醚)，得到化合物N-(4-(4-(4,4-二氟呱啶-1-基)-6-甲基-3H-咪唑並[4,5-c]吡啶-2-基)-3-(6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-基)苯基)-2-羥基乙烷-1-磺醯胺(141.25 mg，0.25 mmol，收率：43.4%)，為白色固體。LCMS (ESI): [M+H] += 561.0；1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.22 (s, 1H), 9.94 (s, 1H), 7.79 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.99 (dd, J = 8.4, 2.0 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.39-4.16 (m, 4H), 3.76 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.32-3.25 (m, 2H), 2.81 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 2.38 (s, 3H), 2.12-2.00 (m, 4H), 1.47 (s, 4H), 0.30 (s, 4H)。
效果實施例1：酶學活性檢測實驗
材料：人源KIF18A (氨基酸序列1-417)，購於上海維亞生物科技有限公司；ADP-Glo TM蛋白激酶試劑盒購自美國普洛麥格公司；微管蛋白購自美國Cytoskeleton公司；384孔檢測板以及多功能酶標儀Envision購自美國珀金埃爾默公司。
酶學活性檢測：使用DMSO將化合物粉末溶解成10 mM的儲存液；在微孔板中對化合物進行梯度稀釋，並使其最終濃度為0-10 μM之間。然後依次在微孔板中加入微管蛋白、化合物、ATP、以及KIF18A蛋白各2.5 μL，並在室溫反應120分鐘。酶反應終濃度為微管60 μg/mL、ATP 25 μM、KIF18A蛋白2.5 nM。酶反應結束後，每孔加入10 μl ADP-GLO反應試劑，常溫孵育30分鐘。之後，每孔再加入20 μl 檢測試劑，常溫避光孵育30分鐘。最後使用珀金埃爾默Envision進行化學發光檢測。
表1：本發明化合物的酶學活性生物資料
實施例 酶活性(nM) 實施例 酶活性(nM) 實施例 酶活性(nM)
1 ＞3000 37 253 73 271
2 ＞3000 38 452 74 807
3 852 39 414 75 ＞3000
4 38 40 ＞3000 76 75
5 1051 41 44 77 64
6 1089 42 19 78 ＞3000
7 102 43 44 79 24
8 775 44 22 80 475
9 312 45 88 81 710
10 251 46 151 82 283
11 252 47 64 83 117
12 ＞3000 48 22 84 125
13 1276 49 61 85 188
14 158 50 1050 86 162
15 60 51 131 87 NT
16 243 52 25 88 118
17 46 53 296 89 61
18 52 54 277 90 16
19 630 55 40 91 278
20 61 56 110 92 232
21 67 57 72 93 315
22 46 58 779 94 227
23 153 59 437 95 73
24 51 60 433 96 117
25 46 61 377 97 234
26 287 62 272 98 154
27 124 63 437 99 214
28 293 64 177 100 187
29 48 65 383 101 320
30 255 66 62 102 60
31 161 67 12 103 73
32 113 68 112 104 83
33 61 69 ＞3000 105 62
34 56 70 1229 106 210
35 42 71 165
36 50 72 190
NT表示沒有測試
效果實施例2：細胞増殖活性檢測實驗
材料與細胞： OVCAR3細胞購於南京科佰生物科技有限公司。RPMI-1640培養基、胎牛血清、CyQUANT Direct Cell Proliferation Assay試劑盒購於美國賽默飛公司； 96孔細胞培養板購於美國康寧公司。
細胞培養：用含10%胎牛血清的RPMI-1640培養液對OVCAR3細胞進行培養，並放置在 37°C、5% CO 2的培養箱中。處於對數生長期細胞方可用於實驗。
細胞増殖活性檢測：
將OVCAR3細胞接種於96孔細胞培養板，每孔90 μl，置於37°C、5%CO 2的培養箱中培養過夜。使用DMSO將化合物粉末溶解成10 mM的儲存液；在微孔板中對化合物進行梯度稀釋，並使其最終濃度為0-10 μM之間。每孔加入10 μL含化合物的細胞培養液，使最終的DMSO含量為0.2%。細胞板置於37°C、5% CO 2的培養箱中培養3天。每孔加入100 μl的CyQUANT檢測試劑，37°C反應60分鐘，並使用珀金埃爾默公司的Envision進行螢光檢測。
表2：本發明化合物的OVCAR-3 細胞活性生物資料
實施例 OVCAR-3 細胞活性_IC50_nM 實施例 OVCAR-3 細胞活性_IC50_nM 實施例 OVCAR-3 細胞活性_IC50_nM
1 474 37 87 73 34
2 766 38 424 74 119
3 181 39 1333 75 300
4 62 40 411 76 12
5 389 41 15 77 13
6 257 42 12 78 ＞3000
7 1185 43 16 79 11
8 496 44 14 80 21
9 107 45 22 81 20
10 46 46 14 82 15
11 164 47 37 83 13
12 464 48 17 84 21
13 472 49 54 85 25
14 145 50 222 86 22
15 61 51 24 87 NT
16 717 52 110 88 29
17 74 53 35 89 36
18 30 54 84 90 44
19 1401 55 3 91 87
20 139 56 9 92 93
21 1615 57 8 93 85
22 34 58 224 94 92
23 115 59 26 95 7
24 16 60 29
25 91 61 22
26 767 62 59
27 875 63 108
28 118 64 27
29 37 65 116
30 55 66 52.7
31 16 67 25
32 187 68 159
33 34 69 1505
34 12 70 582
35 23 71 94
36 30 72 20
NT表示沒有測試
效果實施例3：CyQuant細胞増殖活性檢測實驗
材料與細胞： HT29細胞購於南京科佰生物；RPMI-1640培養基購於ThermoFisher公司（美國）；胎牛血清購於ThermoFisher公司（美國）； Trypsin-EDTA (0.25%)購於ThermoFisher公司（美國）；DMSO購於SIGMA公司（美國）；96孔板購於ThermoFisher公司（美國）；CyQuant試劑購於ThermoFisher公司（美國）。
細胞培養： HT29細胞用含10%胎牛血清的RPMI-1640培養基於37°C、5% CO 2條件下培養。處於對數生長期細胞方可用於實驗。
細胞増殖活性檢測：利用CyQuant試劑檢測化合物對HT29細胞的增殖抑制活性。調整細胞密度，每孔100 μl接種96孔板（HT29為2000/孔），置於37 °C、5% CO 2條件下培養過夜。加入各目的濃度化合物（起始濃度3000 nΜ，3倍稀釋，9個濃度梯度），DMSO含量為0.2%。細胞板置於37 °C、5% CO 2條件下孵育3天。加入CyQuant試劑孵育1小時，Envision讀板，利用XLFIT計算IC 50。
表3：本發明化合物的HT-29細胞活性生物資料
實施例 HT-29細胞活性_IC50_nM 實施例 HT-29細胞活性_IC50_nM 實施例 HT-29細胞活性_IC50_nM
1 629 37 161 73 63
2 811 38 NT 74 127
3 210 39 1571 75 NT
4 77 40 NT 76 16
5 NT 41 14 77 12
6 NT 42 15 78 ＞3000
7 ＞3000 43 18 79 7
8 250 44 12 80 26
9 165 45 13 81 30
10 56 46 39 82 23
11 319 47 NT 83 16
12 568 48 14 84 25
13 444 49 31 85 34
14 88 50 245 86 21
15 60 51 22 87 NT
16 1523 52 299 88 52
17 337 53 47 89 40
18 26 54 73 90 62
19 ＞3000 55 3 91 126
20 55 56 8 92 50
21 ＞3000 57 4.5 93 83
22 23 58 286 94 57
23 118 59 34
24 20 60 41
25 122 61 34
26 1272 62 60
27 24587 63 153
28 192 64 27
29 45 65 127
30 61 66 54
31 11 67 19
32 251 68 250
33 65 69 ＞3000
34 15 70 700
35 21 71 131
36 39 72 25
NT表示沒有測試
效果實施例4：人源代肝細胞的細胞毒性實驗測試。
材料：一個供體將用於細胞毒性測試，人源代肝細胞的資訊見下表。
供體 種族 來源
1 高加索人 BioIVT
註：可能使用其他人種的肝細胞，具體資訊將在試驗報告中體現。 1)  CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay System 發光細胞活力測定系統購自Promega (Madison, WI)。
儀器：
儀器 供應商 Cat# or Model
96孔板 Corning 354407
離心機 Eppendorf 5804R&5810R
二氧化碳培養箱 Thermo Scientific 371
細胞計數儀 Nexcelom Bioscience LLC Cellmeter K2
振盪器 IKA MS3 BASIC
酶標儀 TECAN INFINITE 200 PRO
實驗設計：
將以下介質在水浴中加熱至37°C: 根據下表配製肝細胞復蘇培養基、接種培養基和孵育培養基。 復蘇培養基
試劑 初始濃度 終濃度 體積
Williams’ Medium E - - 31.2 mL
Isotonic Percoll - 30% 13.5 mL
DPBS（10×） - - 1.5 mL
GlutaMAX™-1（100×） 200 mM/100× 2 mM 500 μL
HEPES 1 M 15 mM 750 μL
FBS - 5% 2.5 mL
人重組胰島素 4 mg/mL 4 μg/mL 50 μL
地塞米松 10 mM 1 μM 5 μL
接種培養基
試劑 初始濃度 終濃度 體積
Williams’ Medium E - - 45.7 mL
FBS - 5% 2.5 mL
地塞米松 10 mM 1 μM 5 μL
青鏈黴素混合溶液 青黴素：10000 u/mL 鏈黴素：10000 μg/mL 青黴素：100 u/mL 鏈黴素：100 μg/mL 500 μL
人重組胰島素 4 mg/mL 4 μg/mL 50 μL
GlutaMAX™-1（100×） 200 mM/100× 2 mM 500 μL
HEPES 1 M 15 mM 750 μL
孵育培養基
試劑 初始濃度 終濃度 體積
Williams’ Medium E - - 48 mL
地塞米松 10mM 0.1 μM 0.5 μL
ITS（100×） - - 500 μL
青鏈黴素混合溶液 青黴素：10000 u/mL 鏈黴素：10000 μg/mL 青黴素：50 u/mL 鏈黴素：50 μg/mL 250 μL
GlutaMAX™-1（100×） 200 mM/100× 2 mM 500 μL
HEPES 1 M 15 mM 750 μL
1)  取一管超低溫保存的肝細胞，確保肝細胞在復蘇之前仍處於低溫冰凍狀態。將肝細胞迅速置於37°C水浴中並輕搖直至所有冰晶全部分散，噴灑75%乙醇後轉移至生物安全櫃中。 2)  將肝細胞小管的內容物（1 mL，約5 × 10 6個細胞）傾入盛有50 mL復蘇培養基的50 mL離心管中，將其於100 g離心10分鐘。離心後，吸出復蘇培養基並加入足量接種培養基得到細胞密度約1.0 × 10 6cells/mL的細胞混懸液。用Cellometer®細胞計數儀對肝細胞進行計數及確定活細胞密度，肝細胞成活率必須大於80%，用接種培養基將細胞密度調整為0.2 × 10 6cells/mL，接種於collagen I包被的96孔板中，每孔100 µL。將培養板置於5%的CO 2培養箱中，95%相對濕度，37°C培養4–6小時。 3)  在DMSO中配製200X的試驗化合物原液(可根據溶解度降低試驗化合物的原液濃度)。DMSO終濃度為0.5%。 4)  將2.5 μL待測化合物原液加入497.5 μL的肝細胞培養培養基中，在無菌的96孔板上配製工作液。 5)  將肝細胞培養液從細胞板上取下，在相應的孔中加入125 μL的工作液，每孔重複三次。在37°C、 5% CO 2下孵育板72小時。每處理24小時後，用肝細胞培養基新稀釋的試驗化合物和陽性對照化合物更換細胞板中的培養基。將細胞板放回培養箱 直接向96孔板中每個孔加入50 µL的CellTiter-Glo試劑。在室溫下用搖板器搖10分鐘。10分鐘後，取100 µL以上孵育液至新的白色平底不透明96孔板上，記錄螢光。
數據分析：
所有計算均使用Microsoft Excel進行。
測試化合物的存活率可以用下式計算：
將% Vehicle與被試化合物的濃度進行擬合，然後使用GraphPad Prism5.0將資料擬合為變斜率的s型劑量-回應曲線。根據曲線計算該化合物的IC 50，公式如下：Y=Bottom + (Top-Bottom)/(1+10 ^((LogIC50-X)*HillSlope))。
效果實施例5：人源代肝細胞微球模型實驗測試
細胞：供體信息：男性，高加索人，36歲（Lot No. NFX, BioIVT）
儀器：
儀器 品牌 貨號/型號
96孔超低吸附培養板 Corning 4515
離心機 Eppendorf 5804R
細胞培養箱 Thermo Scientific 371
細胞計數儀 Invitrogen Countess II
震盪器 IKA MS 3
酶標儀 Tecan Infinite M200
細胞接種和培養： 1)  取一管超低溫保存的肝細胞，確保肝細胞在復蘇之前處於低溫冰凍狀態。將肝細胞迅速置於37°C水浴中並輕搖直至所有的冰晶全部散開，噴灑70%乙醇後轉移至生物安全櫃中。 2)  將肝細胞小管的內容物傾入盛有50mL復蘇培養基的50mL離心管中，將其於100g離心3分鐘。離心後，吸出復蘇培養基並加入足量孵育培養基得到細胞密度約為1.0 x10 6cells/mL細胞混懸液。 3)  用Cellometer Vision 對肝細胞進行計數及確定活細胞密度，肝細胞成活率必須大於80%，用接種培養基將細胞密度調整為4000個/孔，每孔接種100µL。 4)  放入細胞培養箱中，恆溫37 °C孵育7-9天直至微球形成。
化合物的準備及給藥： 1)  使用細胞培養基對化合物，按照三倍稀釋法進行稀釋，稀釋梯度如下表。對照化合物的最大濃度是200 μM，測試化合物最大濃度（依據客戶要求）為5 μM，DMSO的最終濃度為0.1%。 2)  在微球形成後，進行給藥。每次給藥前需將細胞培養板孔中的培養基吸乾，並加入100μL的化合物工作液。每三天給藥一次，直至成球後的第十四天。
試驗指標檢測： 1)  培養14天後，從培養箱中取出細胞培養板，取80μL上清檢測白蛋白和乳酸脫氫酶的含量。 2)  CellTiter-Fluor™ Cell Viability試劑盒室溫下解凍，將10μL GF-AFC底物加入到10mL2×工作液中，並補充等體積的PBS稀釋成1×工作液。 3)  細胞培養板每孔中加入100μL工作液，並在37 °C孵育30 分鐘後，吸取上清80μL至96孔黑板中，於激發波長400 nm和發射波長505 nm處檢測吸光度。
數據分析： 1)  細胞存活百分比（% Vehicle）使用以下公式進行計算： 2)  使用GraphPad Prism 8.0.2計算IC 50，軟體運算公式如下： Y=Bottom + (Top-Bottom)/(1+10 ^((LogIC50-X)*HillSlope))
無
無。

Claims (24)

  1. 一種具有式(I)結構的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物： 式(I) 其中，W 1表示CR W1或N； 其中，W 2表示CR W2或N； 其中，Z表示-CR TR T'或-NR SR S'； 其中，R T和R T'與與之共同相連的C原子一起形成具有選自以下結構的環： ； 其中，R S和R S'與與之共同相連的N原子一起形成具有選自以下結構的環： ； 其中，Y 1、Y 2、Y 3各自獨立地表示-(CR aR b) o-(NR a) p-(CR a'R b') q-； 其中，A、B各自獨立地表示-(CR aR b) m-； 其中，L 1表示5-6元雜芳基、 、 、 、 、 、 ； 其中，L 2表示不存在、-C 1-C 6亞烷基-、-NR a-、-NR a(C 1-C 6亞烷基)-、-C(O)NR a(C 1-C 6亞烷基)-、-O-、-O-( C 1-C 6亞烷基)、-S-、-S(O)-、-S(O) 2-、-S(O) 2NR a-或者-S(O)(NR a)-； 其中，R 1表示L 3-R 3或者 ； 其中，R 2表示氫、鹵素、氰基、硝基、羥基C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、鹵代C 1-C 6烷基、-OR a、-SO 3R a、-SR a、-SF 5、-S(O)R a、-O-鹵代C 1-C 6烷基或-NR aR b； 其中，L 3表示不存在、C 1-C 6亞烷基、-NR a-、-NR aSO 2-、-SO 2NR a-、-S(=O)(NR a)-、-P(O)(OR a) 2、-NR aP(O)(OR a) 2或-NR aP(O)(R a) 2； 其中，R 3表示不存在、氫或者被0-3個選自鹵素、-OR a、-NR aR b、氰基、-O-鹵代C 1-C 6烷基取代的C 1-C 6烷基或C 3-C 6環烷基； 其中，R W1和R W2各自獨立地表示氫、鹵素、氰基、硝基、羥基C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、鹵代C 1-C 6烷基、-OR a、-SO 3R a、-S(O)R a、-O-鹵代C 1-C 6烷基、-SR a、-SF 5或-NR aR b； 其中，Cy 1表示具有6-12元芳基或者5-12元雜芳基；並且所述的Cy 1還可以任意地被0-3個選自以下取代基的基團所取代：鹵素、C 1-C 6烷基、鹵代C 1-C 6烷基、羥基C 1-C 6烷基、OR a、-O-鹵代C 1-C 6烷基、5-6元雜芳基、苯基、-SR a、-SF 5、氰基、硝基、-NR aR b、-NH-(C 0-C 6烷基)-R M、-NR aC(O)R b、-C(O)NR aR b、-OC(O)R a、-C(O)R a、-P(O)R aR b、-C(O)OR a、-S(O)R a、-S(O) 2R a和-S(O) 2NR aR b； 其中，Cy 2表示3-12元飽和或不飽和的單環或者雙環，該環中可以任意地含有0-3個選自O、N和S的雜原子，並且所述的Cy 2還可以任意地被0-3個選自以下取代基的基團所取代：鹵素、C 1-C 6烷基、鹵代C 1-C 6烷基、羥基C 1-C 6烷基、-OR a、-O-鹵代C 1-C 6烷基、-SR a、-SF 5、氰基、硝基、-NR aR b、-NR aC(O)R b、-C(O)NR aR b、-OC(O)R a、-C(O)OR a、-S(O)R a、-S(O) 2R a和-S(O) 2NR aR b； 其中，R M表示-OR a、-NR aR b、5-6元雜環基、5-10元雜芳基、6-10元芳基； 其中，R a、R b、R a'、R b'各自獨立地表示氫、鹵素、C 1-C 6烷基、C 3-C 6環烷基、鹵代C 1-C 6烷基或羥基C 1-C 6烷基；或者R a、R b一起與與之相連的原子形成3-6元飽和或不飽和環，該環中可以任意地含有0-2個選自O、S和N的雜原子; 或者R a'、R b'一起與與之相連的原子形成3-6元飽和或不飽和環，該環中可以任意地含有0-2個選自O、S和N的雜原子； 其中，虛線表示單鍵或雙鍵； 其中，m、o、p、q表示0-3的整數。
  2. 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，W 1表示CH或N。
  3. 如請求項1或2所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，W 2表示CH或N。
  4. 如請求項1-3任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，L 3表示-NR aSO 2-、-SO 2NR a-或-S(=O)(NR a)-。
  5. 如請求項1-4任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中， L 3表示-NR aSO 2-。
  6. 如請求項1-5任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，R 3表示氫或者被0-3個選自鹵素、-OR a、-NR aR b、氰基、-O-鹵代C 1-C 6烷基之基團取代的C 1-C 6烷基或C 3-C 6環烷基。
  7. 如請求項1-6任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，R 3表示被0-3個選自鹵素、-OR a、-NR aR b、氰基和-O-鹵代C 1-C 6烷基之基團取代的C 1-C 6烷基。
  8. 如請求項1-7任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，Z表示-NR SR S'。
  9. 如請求項1-8任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，Z表示： ； 其中，R a、R b各自獨立地表示氫、C 1-C 6烷基、C 3-C 6環烷基、鹵代C 1-C 6烷基或羥基C 1-C 6烷基；或者R a、R b一起與與之相連的原子形成3-6元飽和或不飽和環，該環中可以任意地含有0-2個選自O、S和N的雜原子。
  10. 如請求項1-9任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，Z表示： ，其中，R a、R b各自獨立地表示氫、C 1-C 6烷基、C 3-C 6環烷基、鹵代C 1-C 6烷基或羥基C 1-C 6烷基；或者R a、R b一起與與之相連的原子形成3-6元飽和或不飽和環，該環中可以任意地含有0-2個選自O、S和N的雜原子。
  11. 如請求項1-10任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，Z表示： 。
  12. 如請求項1-11任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，L 1表示5-6元雜芳基、 、 、 、 、 、 。
  13. 如請求項12任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，Cy 1表示被0-3個選自以下取代基：鹵素、C 1-C 6烷基、鹵代C 1-C 6烷基、羥基C 1-C 6烷基、OR a、-O-鹵代C 1-C 6烷基、5-6元雜芳基、苯基、-SR a、-SF 5、氰基、硝基、-NR aR b、-NR aC(O)R b、-C(O)NR aR b、-OC(O)R a、-C(O)R a、-P(O)R aR b、-C(O)OR a、-S(O)R a、-S(O) 2R a和-S(O) 2NR aR b取代的以下任意基團之一： 例如： 。
  14. 如請求項1-13任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，L 1表示：5-6元雜芳基、 、 、 、 、 、 。
  15. 如請求項14所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，L 1表示以下任意基團之一： 。
  16. 如請求項14或15所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，Cy 1表示被0-3個選自以下取代基：鹵素、C 1-C 6烷基、鹵代C 1-C 6烷基、羥基C 1-C 6烷基、OR a、-O-鹵代C 1-C 6烷基、5-6元雜芳基、苯基、-SR a、-SF 5、氰基、硝基、-NR aR b、-NR aC(O)R b、-C(O)NR aR b、-OC(O)R a、-C(O)R a、-P(O)R aR b、-C(O)OR a、-S(O)R a、-S(O) 2R a和-S(O) 2NR aR b取代的以下任意基團之一： 。
  17. 如請求項16所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，Cy 1表示被0-3個選自以下取代基：鹵素、C 1-C 6烷基、鹵代C 1-C 6烷基、羥基C 1-C 6烷基、OR a、-O-鹵代C 1-C 6烷基、5-6元雜芳基、苯基、-SR a、-SF 5、氰基、硝基、-NR aR b、-NR aC(O)R b、-C(O)NR aR b、-OC(O)R a、-C(O)R a、-P(O)R aR b、-C(O)OR a、-S(O)R a、-S(O) 2R a和-S(O) 2NR aR b取代的 。
  18. 如請求項17所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，Cy 1表示被苯基、吡啶基、噻唑基、噁唑基、吡唑基、咪唑基、N-甲基吡唑基取代的 。
  19. 如請求項18所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，Cy 1表示以下基團： 。
  20. 如請求項1-19任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，L 2表示不存在、-C 1-C 6亞烷基-或-NH-。
  21. 如請求項1-20任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，L 2表示不存在。
  22. 如請求項1-21任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，Cy 2表示飽和，部分飽和或不飽和的3-、4-、5-、6-、7-元單環，或3-、4-、5-、6-、7-元并環，且含有0~3個N雜原子和0~2個O或S雜原子，同時單環或并環被0-3個選自以下取代基：鹵素、氰基、硝基、羥基C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、鹵代C 1-C 6烷基、-OR a、-SO 3R a、-S(O)R a、-O鹵代C 1-C 6烷基、-SR a、-SF 5或NR aR b取代的嗎啉基、呱啶基、氮雜環丁烷基、吡咯烷基、環丙基、環丁基、環戊基、環己基、呱嗪基或四氫呋喃基，其中，R a、R b各自獨立地表示氫、鹵素、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、鹵代C 1-C 6烷基或羥基C 1-C 6烷基；或者R a、R b一起與與之相連的原子形成3-6元環，該環中含有0-2個選自O、N和S的雜原子。
  23. 如請求項1-22任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構體、同位素異構體、前藥、水合物或溶劑合物，其中，Cy 2表示： 。
  24. 一種化合物，具有以下結構： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14            15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36            37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87A 87B 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106
    。
TW112117564A 2022-05-13 2023-05-11 驅動蛋白kif18a 抑制劑及其應用 TW202344249A (zh)

Applications Claiming Priority (14)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2022105207440 2022-05-13
CN202210520744 2022-05-13
CN2022108781920 2022-07-25
CN202210878192 2022-07-25
CN2022111830922 2022-09-27
CN202211183092 2022-09-27
CN2022115379922 2022-12-02
CN202211537992 2022-12-02
CN202310071265 2023-01-16
CN202310071265X 2023-01-16
CN2023102888717 2023-03-22
CN202310288871 2023-03-22
CN2023104751808 2023-04-27
CN202310475180 2023-04-27

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW202344249A true TW202344249A (zh) 2023-11-16

Family

ID=88729740

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW112117566A TW202400581A (zh) 2022-05-13 2023-05-11 驅動蛋白kif18a抑制劑及其應用
TW112117564A TW202344249A (zh) 2022-05-13 2023-05-11 驅動蛋白kif18a 抑制劑及其應用
TW112117569A TW202400582A (zh) 2022-05-13 2023-05-11 驅動蛋白kif18a抑制劑及其應用

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW112117566A TW202400581A (zh) 2022-05-13 2023-05-11 驅動蛋白kif18a抑制劑及其應用

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW112117569A TW202400582A (zh) 2022-05-13 2023-05-11 驅動蛋白kif18a抑制劑及其應用

Country Status (2)

Country Link
TW (3) TW202400581A (zh)
WO (3) WO2023217230A1 (zh)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW202415648A (zh) * 2022-09-30 2024-04-16 大陸商長春金賽藥業有限責任公司 稠環類kif18a抑制劑化合物、藥物組合物及其製備方法和用途
WO2024109923A1 (en) * 2022-11-24 2024-05-30 InventisBio Co., Ltd. Heterocyclic compounds, preparation methods and uses thereof
WO2024114787A1 (zh) * 2022-12-02 2024-06-06 深圳众格生物科技有限公司 酰胺或脲类化合物
WO2024125626A1 (en) * 2022-12-16 2024-06-20 Nuphase Therapeutics (Hangzhou) Limited., Co. Nitrogenous compound, pharmaceutical composition and use thereof
WO2024137984A1 (en) * 2022-12-22 2024-06-27 Accent Therapeutics, Inc. Inhibitors of kif18a and uses thereof

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2005119173A (ru) * 2002-12-20 2006-02-27 Фармация Корпорейшн (Us) Ациклические пиразольные соединения
CA2599992A1 (en) * 2005-03-03 2006-09-08 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Acridine and quinoline dervatives as sirtuin modulators
EP2001480A4 (en) * 2006-03-31 2011-06-15 Abbott Lab Indazole CONNECTIONS
EP2280705B1 (en) * 2008-06-05 2014-10-08 Glaxo Group Limited Novel compounds
CA3123044A1 (en) * 2018-12-20 2020-06-25 Amgen Inc. Heteroaryl amides useful as kif18a inhibitors
CN113226473A (zh) * 2018-12-20 2021-08-06 美国安进公司 Kif18a抑制剂
MA54546A (fr) * 2018-12-20 2022-03-30 Amgen Inc Amides d'hétéroaryle utiles en tant qu'inhibiteurs de kif18a
WO2020132651A1 (en) * 2018-12-20 2020-06-25 Amgen Inc. Kif18a inhibitors
CN114401953A (zh) * 2019-08-02 2022-04-26 美国安进公司 Kif18a抑制剂
JP2022542392A (ja) * 2019-08-02 2022-10-03 アムジエン・インコーポレーテツド Ｋｉｆ１８ａ阻害剤としてのピリジン誘導体
AU2020324963A1 (en) * 2019-08-02 2022-02-24 Amgen Inc. KIF18A inhibitors
AU2020326627A1 (en) * 2019-08-02 2022-03-17 Amgen Inc. KIF18A inhibitors
WO2021055728A1 (en) * 2019-09-18 2021-03-25 Merck Sharp & Dohme Corp. Small molecule inhibitors of kras g12c mutant

Also Published As

Publication number Publication date
WO2023217232A1 (zh) 2023-11-16
WO2023217233A1 (zh) 2023-11-16
TW202400582A (zh) 2024-01-01
WO2023217230A1 (zh) 2023-11-16
TW202400581A (zh) 2024-01-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI765908B (zh) 苯並咪唑類化合物激酶抑制劑及其製備方法和應用
US20220002313A1 (en) Hpk1 inhibitors and methods of using same
TW202344249A (zh) 驅動蛋白kif18a 抑制劑及其應用
CN108440515B (zh) 取代的苯并呋喃基和苯并噁唑基化合物及其用途
WO2020239077A1 (zh) 含氮杂环类衍生物调节剂、其制备方法和应用
AU2021200639A1 (en) PD-1/PD-L1 inhibitors
CN107253963B (zh) 吡啶酮和氮杂吡啶酮化合物及使用方法
RU2537945C2 (ru) Триазиновые, пиримидиновые и пиридиновые аналоги и их применение в качестве терапевтических агентов и диагностических проб
JP2021046403A (ja) イミダゾロニルキノリンおよびａｔｍキナーゼ阻害剤としてのその使用
ES2898882T3 (es) Derivados de quinolin-2-ona
US9586956B2 (en) Isoquinoline and naphthyridine derivatives
CN107849053B (zh) 螺环化合物
JP2014521711A (ja) ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリジン化合物と使用方法
EA023935B1 (ru) Производные пурина и их применение для лечения заболевания
CN112409378A (zh) 三环pi3k抑制剂化合物及其使用方法
CN113387962A (zh) 吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮衍生物、其药物组合物及应用
BR112021014466A2 (pt) Derivados de indazolil-isoxazol para o tratamento de doenças, tal como câncer
KR20240035395A (ko) 암 치료에 사용할 수 있는 요소 유도체
JP2023509155A (ja) ビフェニル系誘導体阻害剤、その調製方法及び使用
JP7281834B2 (ja) Ｐｄ－ｌ１拮抗薬化合物
ES2757052T3 (es) Derivados heterocíclicos bicíclicos
CN116554151A (zh) 驱动蛋白kif18a抑制剂及其应用
CN114174293A (zh) 4-(咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)-嘧啶衍生物
JP7284161B2 (ja) ピリミジンＴＢＫ／ＩＫＫεインヒビター化合物およびそれらの使用
CN116940571A (zh) 苯并异噁唑衍生物及其用途