TW202330519A - 作為ｔａｍ抑制劑的吡唑并吡啶化合物 - Google Patents

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Abstract

本發明係關於可用作TAM激酶之抑制劑，尤其用作AXL及MER激酶之抑制劑的吡唑并吡啶化合物，以及包含此等化合物之藥物組合物及藉由投與此等化合物或藥物組合物來進行治療之方法。

Description

作為TAM抑制劑的吡唑并吡啶化合物
本發明大體上係關於可用作TAM激酶之抑制劑，尤其用作AXL及MER激酶之抑制劑的吡唑并吡啶化合物，以及包含此等化合物之藥物組合物及藉由投與此等化合物或藥物組合物來進行治療之方法。
受體酪胺酸激酶(RTK)係細胞表面跨膜受體，該細胞表面跨膜受體在其細胞質結構域內含有調節之激酶活性，並且在正常及惡性細胞之信號轉導中起重要作用。已在多種人類癌症中偵測到TAM受體之過度表現或異位表現。
AXL及MER係受體酪胺酸激酶TAM (TYRO3-AXL-MER)家族之兩個成員，當其被激活時，可以調節腫瘤細胞存活、增殖、遷移及侵襲、血管生成以及腫瘤-宿主相互作用。愈來愈多的證據有力地表明，此等受體在對靶向療法及常規細胞毒性藥劑之抵抗中起主要作用。另外，已表明AXL及MER皆為先天免疫、吞噬作用及免疫抑制活性之關鍵調節劑。因此，靶向AXL及MER激酶不僅可以直接影響贅生性細胞之生長、存活及惡性進展，而且具有恢復及增強宿主對癌症之免疫力的潛力。
因此，需要用於抑制TAM激酶，尤其AXL及MER激酶之化合物。
本發明提供能夠抑制TAM激酶，尤其AXL及MER激酶之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。亦提供使用此類化合物來治療諸如癌症等各種疾病或病狀之方法。
在一個態樣中，本發明提供一種化合物，其具有式(I)： (I) 或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環A係包含1個或2個氮原子之5員雜芳基； 環B係苯基或包含1個或2個氮原子之6員雜芳基，其中之每一者視情況經一個或兩個R 2取代； 環C係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R a取代； R 1係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R b取代； R 2係鹵素、羥基、氰基、胺基、烷基或鹵烷基； 各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、側氧基、烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基及-C(=O)R c；或者 兩個相鄰之R a與其連接之原子一起形成環烷基或雜環基； 各R b獨立地選自側氧基、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基或-C(O)NH-R c，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代；並且 R c係烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代。
在另一態樣中，本發明提供一種化合物，其具有式(Ia)： (Ia)， 或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供一種選自由以下組成之群的化合物： ， 或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供一種化合物，其具有式(II)： (II) 或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環A係苯基或包含1個或2個氮原子之6員雜芳基； 環B係苯基或包含1個或2個氮原子之6員雜芳基，其中之每一者視情況經一個或兩個R 2取代； 環C係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R a取代； W係CH、N、O或S； R 1係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R b取代； R 2係鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基； R 3係不存在、氫、側氧基、烷基或鹵烷基； R 4係NH 2或鹵烷基； 各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基及-C(=O)R c；或者 兩個相鄰之R a與其連接之原子一起形成環烷基或雜環基； 各R b獨立地選自側氧基、羥基、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基或-C(O)NH-R c，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代；並且 R c係烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代。
在另一態樣中，本發明提供一種選自由以下組成之群的化合物： 或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供一種化合物，其具有式(III)： (III) 或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環A係包含1個或2個氮原子之5員雜芳基； 環B係苯基或包含1個或2個氮原子之6員雜芳基，其中之每一者視情況經一個或兩個R 2取代； 環C係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R a取代； R 1係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R b取代； R 2係鹵素、羥基、氰基、胺基、烷基或鹵烷基； 各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、側氧基、烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基及-C(=O)R c；或者 兩個相鄰之R a與其連接之原子一起形成環烷基或雜環基； 各R b獨立地選自側氧基、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基或-C(O)NH-R c，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代；並且 R c係烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代。
在另一態樣中，本發明提供了一種化合物，其選自： ， 或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一個態樣中，本發明提供了一種化合物，其具有式(IV)： (IV) 或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環A係6員雜環基或6員雜芳基，其中之每一者包含1個或2個氮原子並且視情況經一或多個各自獨立地選自羥基、鹵素、氰基、側氧基、胺基或烷基之基團取代； 環B係苯基或包含1個或2個氮原子之6員雜芳基，其中之每一者視情況經一個或兩個R 2取代； 環C係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R a取代； R 1係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R b取代； R 2係鹵素、羥基、氰基、胺基、烷基或鹵烷基； 各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、側氧基、烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基及-C(=O)R c；或者 兩個相鄰之R a與其連接之原子一起形成環烷基或雜環基； 各R b獨立地選自側氧基、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基或-C(O)NH-R c，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代；並且 R c係烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代。
在另一態樣中，本發明提供了一種化合物，其選自： ， 或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供了一種藥物組合物，其包含本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽以及藥學上可接受之賦形劑。
在另一態樣中，本發明提供一種用於抑制TAM激酶之方法，其包括使該TAM激酶與本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或本發明之藥物組合物接觸。
在另一態樣中，本發明提供一種用於抑制AXL及MER激酶之方法，其包括使該AXL及MER激酶與本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或本發明之藥物組合物接觸。
在另一態樣中，本發明提供一種用於治療有需要之個體之由TAM介導之疾病或病症的方法，其包括向該個體投與有效量之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或本發明之藥物組合物。
現將詳細參考本發明之某些實施例，在附圖及式中說明了該等實施例之實例。雖然將結合所列舉之實施例描述本發明，但應理解，其不希望在將本發明限於彼等實施例。相反，本發明旨在涵蓋所有替代方案、修改及等效物，該等替代方案、修改及等效物可以包括在如申請專利範圍所定義之本發明範圍內。熟習此項技術者將認識到與本文所描述之方法及材料類似或等效的可以在實施本發明時使用之許多方法及材料。本發明絕不限於所描述之方法及材料。在所併入之一或多個參考文獻及類似材料(包括但不限於所定義之術語、術語用法、所描述之技術等)與本申請不同或相矛盾之情況下，以本發明為準。本發明中所引用之所有參考文獻、專利、專利申請案均以全文引用的方式併入本文中。
應理解，為清楚起見而在單獨實施例之上下文中描述之本發明之某些特徵亦可在單個實施例中組合提供。相反，為簡潔起見而在單個實施例之上下文中描述之本發明之各種特徵亦可單獨提供或以任何合適之子組合提供。必須指出，除非上下文另外明確指示，否則如在說明書及所附申請專利範圍中所用，單數形式「一種(a或an)」及「該(the)」包括其複數形式。因此，例如，對「一種化合物」之提及包括多種化合物。 定義
下文更詳細地描述了具體官能基及化學術語之定義。出於本發明之目的，化學元素係根據元素週期表(Periodic Table of the Elements), CAS版, 《物理及化學手冊(Handbook of Chemistry and Physics)》, 第75版, 內封面來標識，並且具體官能基總體上係如本文所描述定義。另外，有機化學之一般原理以及特定功能部分及反應性描述於以下文獻中：《有機化學(Organic Chemistry)》, Thomas Sorrell, 第2版, 索薩利托科學書籍出版社(University Science Books, Sausalito), 2006；Smith及March, 《馬奇高等有機化學(March's Advanced Organic Chemistry)》, 第6版, 紐約約翰威利父子出版公司(John Wiley & Sons, Inc., New York), 2007；Larock, 《複雜有機轉化(Comprehensive Organic Transformations)》, 第3版, 紐約VCH出版社有限公司(VCH Publishers, Inc., New York), 2018；Carruthers, 《一些現代有機合成方法(Some Modern Methods of Organic Synthesis)》, 第4版, 劍橋之劍橋大學出版社(Cambridge University Press, Cambridge), 2004；該等每個文獻之全部內容以引用方式併入本文。
在本發明之各處，描述了連接取代基。尤其希望的是，每個連接取代基皆包括連接取代基之正向形式及反向形式兩者。例如，-NR(CR'R'')-包括-NR(CR'R'')-及-(CR'R'')NR-兩者。在結構明確需要連接基團之情況下，針對該基團所列之馬庫什變數(Markush variable)被理解為連接基團。例如，若結構需要連接基團且該變數之馬庫什組定義列出「烷基」，則應理解「烷基」表示連接伸烷基。
在顯示與取代基連接之鍵與連接環中兩個原子之鍵交叉時，此類取代基可以與環中之任何原子鍵合。在列出取代基，但未指定此類取代基藉由哪個原子與給定式之化合物之剩餘部分鍵合時，此取代基可以藉由此式中之任何原子鍵合。取代基及/或變數之組合係允許的，但僅在此類組合產生穩定化合物時才允許。
在任何變數(例如，R i)在化合物之任何成分或式中出現多於一次時，其在每次出現時之定義獨立於其在其他每次出現時之定義。因此，例如，若顯示基團被0至2個R i部分取代，則該基團可以視情況經最多兩個R i部分取代，並且R i在每次出現時各自獨立地選自R i之定義。而且，取代基及/或變數之組合係允許的，但僅在此類組合產生穩定化合物時才允許。
如本文所用，術語「C i-j」指示碳原子數目之範圍，其中i及j係整數，並且碳原子數目之範圍包括端點(亦即，i及j)及其間之每個整數點，並且其中j大於i。例如，C 1-6指示一至六個碳原子之範圍，包括一個碳原子、兩個碳原子、三個碳原子、四個碳原子、五個碳原子及六個碳原子。在一些實施例中，術語「C 1-12」指示1至12個碳原子，尤其係1至10個碳原子，尤其係1至8個碳原子，尤其係1至6個碳原子，尤其係1至5個碳原子，尤其係1至4個碳原子，尤其係1至3個碳原子或尤其係1至2個碳原子。
如本文所用，術語「烷基」，不論作為另一個術語之一部分或獨立地使用，係指可以視情況獨立地被一或多個下文所描述之取代基取代之飽和直鏈或支鏈烴基。術語「C i-j烷基」係指具有i至j個碳原子之烷基。在一些實施例中，烷基含有1至10個碳原子。在一些實施例中，烷基含有1至9個碳原子。在一些實施例中，烷基含有1至8個碳原子、1至7個碳原子、1至6個碳原子、1至5個碳原子、1至4個碳原子、1至3個碳原子或1至2個碳原子。「C 1-10烷基」之實例包括但不限於甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基及癸基。「C 1-6烷基」之實例為甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基、正戊基、2-戊基、3-戊基、2-甲基-2-丁基、3-甲基-2-丁基、3-甲基-1-丁基、2-甲基-1-丁基、1-己基、2-己基、3-己基、2-甲基-2-戊基、3-甲基-2-戊基、4-甲基-2-戊基、3-甲基-3-戊基、2-甲基-3-戊基、2,3-二甲基-2-丁基、3,3-二甲基-2-丁基等。
如本文所用，術語「烷氧基」，不論作為另一個術語之一部分或獨立地使用，係指藉由氧原子與母體分子連接之如先前所定義之烷基。術語「C i-j烷氧基」意謂烷氧基之烷基部分具有i至j個碳原子。在一些實施例中，烷氧基含有1至10個碳原子。在一些實施例中，烷氧基含有1至9個碳原子。在一些實施例中，烷氧基含有1至8個碳原子、1至7個碳原子、1至6個碳原子、1至5個碳原子、1至4個碳原子、1至3個碳原子或1至2個碳原子。「C 1-6烷氧基」之實例包括但不限於甲氧基、乙氧基、丙氧基(例如，正丙氧基及異丙氧基)、第三丁氧基、新戊氧基、正己氧基等。
如本文所用，術語「胺基」係指-NH 2基團。胺基亦可以被一或多個如烷基、芳基、羰基或其他胺基等基團取代。
如本文所用，術語「芳基」，不論作為另一術語之一部分或獨立地使用，係指具有總共5至20個環成員之單環及多環系統，其中系統中之至少一個環係芳族，並且其中系統中之每個環含有3至12個環成員。「芳基」之實例包括但不限於可以帶有一或多個取代基之苯基、聯苯、萘基、蒽基等。如本文所用，術語「芳基」之範圍亦包括芳環與一或多個其他環稠合之基團。在多環系統之情況下，僅需要一個環係芳族(例如，2,3-二氫吲哚)，但所有環皆可為芳族(例如，喹啉)。第二環亦可為稠合或橋連的。多環芳基之實例包括但不限於苯并呋喃基、茚基、鄰苯二甲醯亞胺基、萘二甲醯亞胺基、啡啶基或四氫萘基等。芳基可以在一或多個環位置處被如上文所描述之取代基取代。
如本文所用，術語「環烷基」，不論作為另一個術語之一部分或獨立地使用，係指單價非芳族飽和或部分不飽和單環及多環系統，其中所有環原子均為碳，並且該系統含有至少三個成環碳原子。在一些實施例中，環烷基可以含有3至12個成環碳原子、3至10個成環碳原子、3至9個成環碳原子、3至8個成環碳原子、3至7個成環碳原子、3至6個成環碳原子、3至5個成環碳原子、4至12個成環碳原子、4至10個成環碳原子、4至9個成環碳原子、4至8個成環碳原子、4至7個成環碳原子、4至6個成環碳原子、4至5個成環碳原子。環烷基可為飽和或部分不飽和的。環烷基可為被取代的。在一些實施例中，該環烷基可為飽和環狀烷基。在一些實施例中，該環烷基可為在其環系統中含有至少一個雙鍵或三鍵之部分不飽和環狀烷基。在一些實施例中，該環烷基可為單環或多環。單環環烷基之實例包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基、1-環戊-1-烯基、1-環戊-2-烯基、1-環戊-3-烯基、環己基、1-環己-1-烯基、1-環己-2-烯基、1-環己-3-烯基、環己二烯基、環庚基、環辛基、環壬基、環癸基、環十一烷基及環十二烷基。多環環烷基之實例包括但不限於金剛烷基、降冰片烷基、茀基、螺-戊二烯基、螺[3.6]-癸烷基、雙環[1,1,1]戊烯基、雙環[2,2,1]庚烯基等。
如本文所用，術語「氰基」係指-CN。
如本文所用，術語「鹵素」係指選自氟(fluorine或fluoro)、氯(chlorine或chloro)、溴(bromine或bromo)及碘(iodine或iodo)原子。
如本文所用，術語「鹵烷基」係指被一或多個鹵素原子取代之如本文定義之烷基。
如本文所用，術語「鹵烷氧基」係指被一或多個鹵素原子取代之如本文所定義之烷氧基。
如本文所用，術語「雜原子」係指氮、氧或硫，並且包括氮或硫之任何氧化形式以及鹼性氮(包括N-氧化物)之任何四級銨化形式。
如本文所用，術語「雜芳基」，不論作為另一個術語之一部分或獨立地使用，係指除碳原子之外亦具有一或多個雜原子之芳基。該雜芳基可為單環。單環雜芳基之實例包括但不限於噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、㗁唑基、異㗁唑基、㗁二唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、吡啶基、嗒𠯤基、嘧啶基、吡𠯤基、吲哚𠯤基、嘌呤基、㖠啶基、苯并呋喃基及喋啶基。該雜芳基亦包括雜芳環與一或多個芳基、脂環族或雜環基環稠合之多環基團，其中連接基團或連接點位於雜芳環上。多環雜芳基之實例包括但不限於吲哚基、異吲哚基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、苯并[1,3]二氧雜環戊烯基、二苯并呋喃基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹啉基、異喹啉基、二氫喹啉基、二氫異喹啉基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基、㖕啉基、酞𠯤基、喹唑啉基、喹㗁啉基、4H-喹𠯤基、咔唑基、吖啶基、吩𠯤基、吩噻𠯤基、吩㗁 𠯤基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基等。
如本文所用，術語「雜環基」係指飽和或部分不飽和碳環基，其中一或多個環原子為各自獨立地選自氧、硫、氮、磷等之雜原子，剩餘環原子為碳，其中一或多個環原子可以視情況獨立地被一或多個取代基取代。在一些實施例中，該雜環基為飽和雜環基。在一些實施例中，該雜環基為在其環系統中具有一或多個雙鍵之部分不飽和雜環基。在一些實施例中，雜環基可以含有碳、氮或硫之任何氧化形式以及鹼性氮之任何四級銨化形式。「雜環基」亦包括雜環基與飽和、部分不飽和或完全不飽和(亦即，芳族)碳環或雜環稠合之基團。在可能之情況下，該雜環基可為碳連接或氮連接的。在一些實施例中，該雜環為碳連接的。在一些實施例中，該雜環為氮連接的。例如，衍生自吡咯之基團可為吡咯-1-基(氮連接的)或吡咯-3-基(碳連接的)。此外，衍生自咪唑之基團可為咪唑-1-基(氮連接的)或咪唑-3-基(碳連接的)。
在一些實施例中，術語「3員至12員雜環基」係指具有1至3個各自獨立地選自氮、氧或硫之雜原子的3員至12員飽和或部分不飽和單環或多環雜環系統。稠合、螺連及橋連環系亦包括在本定義之範圍內。單環雜環基之實例包括但不限於氧雜環丁烷基、1,1-二側氧基硫雜環丁烷基吡咯啶基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、三唑基、㗁唑基、噻唑基、哌啶基、哌𠯤基、哌啶基、𠰌啉基、吡啶基、吡𠯤基、嘧啶基、嗒𠯤基、三𠯤基、吡啶酮基、嘧啶酮基、吡𠯤酮基、嘧啶酮基、嗒𠯤酮基、吡咯啶基、三𠯤酮基等。稠合雜環基之實例包括但不限於苯并環或吡啶并環，如喹啉基、異喹啉基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基、喹㗁啉基、喹𠯤基、喹唑啉基、氮雜吲哚𠯤基、喋啶基、𠳭烯基、異𠳭烯基、吲哚基、異吲哚基、吲哚𠯤基、吲唑基、嘌呤基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、咔唑基、吩𠯤基、吩噻𠯤基、啡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶基、[1,2,3]三唑并[4,3-a]吡啶基等。螺雜環基之實例包括但不限於螺哌喃基、螺㗁 𠯤基等。橋連雜環基之實例包括但不限於𠰌啡烷基、六亞甲基四胺基、3-氮雜-雙環[3.1.0]己烷、8-氮雜-雙環[3.2.1]辛烷、1-氮雜-雙環[2.2.2]辛烷、1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷(DABCO)等。
如本文所用，術語「羥基(hydroxyl或hydroxy)」係指-OH。
如本文所用，術語「側氧基」係指=O取代基。
如本文所用，術語「部分不飽和的」係指包括至少一個雙鍵或參鍵之基團。術語「部分不飽和的」旨在涵蓋具有多個不飽和位點之環，但不旨在包括芳族(亦即，完全不飽和的)部分。
如本文所用，術語「取代的」，無論前面是否有術語「視情況」，皆意謂指定部分之一或多個氫被合適之取代基替代。應當理解，「取代」或「被…取代」包括隱含前提條件，即此類取代與被取代原子之允許化合價一致，並且取代產生穩定之或化學上可行之化合物，例如，不會自發地經歷如重排、環化、消除等轉化之化合物。除非另有說明，否則「視情況取代的」基團可以在基團之每個可取代位置處具有適當之取代基，並且在任何給定結構中之多於一個位置可以被多於一個選自指定組之取代基取代時，在每個位置處，取代基可以相同或不同。熟習此項技術者應理解，若合適，則取代基本身可以被取代。除非特別陳述為「未取代」，否則對本文中之化學部分的提及應理解為包括取代之變體。例如，對「芳基」基團或部分之提及隱含地包括取代之變體及未取代之變體兩者。 化合物
本發明提供了式(I)之新穎化合物以及其醫藥學上可接受之鹽、用於製備該化合物之合成方法、藥物組合物以及所揭示之化合物之各種用途。
在一個態樣中，本發明提供了一種化合物，其具有式(I)： (I) 或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環A係包含1個或2個氮原子之5員雜芳基； 環B係苯基或包含1個或2個氮原子之6員雜芳基，其中之每一者視情況經一個或兩個R 2取代； 環C係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R a取代； R 1係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R b取代； R 2係鹵素、羥基、氰基、胺基、烷基或鹵烷基； 各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、側氧基、烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基及-C(=O)R c；或者 兩個相鄰之R a與其連接之原子一起形成環烷基或雜環基； 各R b獨立地選自側氧基、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基或-C(O)NH-R c，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代；並且 R c係烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代。
在一些實施例中，環A係包含1個氮原子之5員雜芳基。
在某些實施例中， 選自由以下組成之群： 。
在一些實施例中，環A係包括2個氮原子之5員雜芳基。
在某些實施例中， 選自由以下組成之群： 。
在一些實施例中，環B係視情況經一個或兩個R 2取代之苯基。
在一些實施例中，環B係視情況經一個或兩個R 2取代之包含1個或2個氮原子之6員雜芳基。在某些實施例中，環B係吡啶基。
在一些實施例中，R 1係視情況經一或多個R b取代之環烷基。在某些實施例中，R 1係C 3-8環烷基、C 3-7環烷基、C 3-6環烷基或C 3-5環烷基，其各自視情況經一或多個R b取代。在某些實施例中，R 1係視情況經一或多個R b取代之環丙基。
在一些實施例中，R 1係視情況經一或多個R b取代之雜環基。在某些實施例中，R 1係C 3-8雜環基、C 3-7雜環基、C 3-6雜環基或C 3-5雜環基，其各自視情況經一或多個R b取代。
在一些實施例中，各R b獨立地選自側氧基、烷基、烷氧基、芳基、雜芳基或-C(O)NH-R c，其中該芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基或氰基之基團取代。
在一些實施例中，R 1係視情況經一或多個R b取代之環烷基，R b係-C(O)NH-R c，並且R c係芳基或雜芳基，其中該芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代。
在一些實施例中，R 1係視情況經一或多個R b取代之雜環基，各R b獨立地選自側氧基、烷基、烷氧基、芳基或雜芳基，其中該芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代。
在一些實施例中，R 1選自由以下組成之群： 。
在一些實施例中，R 2係鹵素。在某些實施例中，R 2係氟或氯。在某些實施例中，R 2係氟。
在一些實施例中，R 2係烷基。在某些實施例中，R 2係甲基。
在一些實施例中，R 2係鹵烷基。在某些實施例中，R 2係三氟甲基。
在一些實施例中，環C係雜環基或芳基，其中之每一者視情況經一或多個R a取代。
在一些實施例中，環C係視情況經一或多個R a取代之6員至10員雜環基。
在某些實施例中，環C係視情況經一或多個R a取代之哌啶基或八氫吲𠯤基。在某些實施例中，環C係視情況經一或多個R a取代之4-哌啶基或7-八氫吲𠯤基。
在某些實施例中，各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、側氧基、烷基及-C(=O)R c。在某些實施例中，R c係烷基、C 3-8環烷基、3員至8員雜環基或5員至6員雜芳基。
在一些實施例中，環C係視情況經一或多個R a取代之5員至6員芳基。
在某些實施例中，環C係視情況經一或多個R a取代之苯基。
在某些實施例中，各R a獨立地選自由以下組成之群：鹵素、氰基、烷基、C 3-8環烷基及5員至6員雜芳基。
在某些實施例中，兩個相鄰之R a與其連接之原子一起形成C 5-8環烷基或5員至8員雜環基。
在另一個態樣中，本發明提供一種化合物，其具有式(Ia)： (Ia)， 或其醫藥學上可接受之鹽。
在一個態樣中，本發明提供一種選自由以下組成之群的化合物： ， 或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供一種化合物，其具有式(II)： (II) 或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環A係苯基或包含1個或2個氮原子之6員雜芳基； 環B係苯基或包含1個或2個氮原子之6員雜芳基，其中之每一者視情況經一個或兩個R 2取代； 環C係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R a取代； W係CH、N、O或S； R 1係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R b取代； R 2係鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基； R 3係不存在、氫、側氧基、烷基或鹵烷基； R 4係NH 2或鹵烷基； 各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基及-C(=O)R c；或者 兩個相鄰之R a與其連接之原子一起形成環烷基或雜環基； 各R b獨立地選自側氧基、羥基、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基或-C(O)NH-R c，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代；並且 R c係烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代。
在一些實施例中，環A係苯基。
在一些實施例中，環A係包含1個氮原子之6員雜芳基。
在某些實施例中， 選自由以下組成之群： 。
在一些實施例中，W係N。
在一些實施例中，W係O或S。
在一些實施例中，W係CH。
在一些實施例中，環B係苯基。
在一些實施例中，環B係包含1個或2個氮原子之6員雜芳基。在某些實施例中，環B係吡啶基。
在一些實施例中，R 1係視情況經一或多個R b取代之環烷基。在某些實施例中，R 1係C 3-8環烷基、C 3-7環烷基、C 3-6環烷基或C 3-5環烷基，其各自視情況經一或多個R b取代。在某些實施例中，R 1係視情況經一或多個R b取代之環丙基。
在一些實施例中，R 1係視情況經一或多個R b取代之雜環基。在某些實施例中，R 1係C 3-8雜環基、C 3-7雜環基、C 3-6雜環基或C 3-5雜環基，其各自視情況經一或多個R b取代。
在一些實施例中，各R b獨立地選自側氧基、羥基、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、芳基、雜芳基或-C(O)NH-R c，其中該芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基或氰基之基團取代。
在一些實施例中，R 1係視情況經一或多個R b取代之環烷基，R b係-C(O)NH-R c，並且R c係芳基或雜芳基，其中該芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代。
在一些實施例中，R 1係視情況經一或多個R b取代之雜環基，各R b獨立地選自側氧基、烷基、烷氧基、芳基或雜芳基，其中該芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代。
在一些實施例中，R 1選自由以下組成之群： 。
在一些實施例中，R 2係鹵素。在某些實施例中，R 2係氟或氯。在某些實施例中，R 2係氟。
在一些實施例中，R 2係烷基。在某些實施例中，R 2係甲基。
在一些實施例中，R 2係鹵烷基。在某些實施例中，R 2係三氟甲基。
在一些實施例中，環C係雜環基或芳基，其中之每一者視情況經一或多個R a取代。
在一些實施例中，環C係視情況經一或多個R a取代之6員雜環基。
在某些實施例中，環C係視情況經一或多個R a取代之哌啶基。在某些實施例中，環C係視情況經一或多個R a取代之4-哌啶基。
在某些實施例中，各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、烷基及-C(=O)R c。在某些實施例中，R c係烷基、C 3-8環烷基、3員至8員雜環基或5員至6員雜芳基。
在一些實施例中，環C係視情況經一或多個R a取代之5員至6元芳基。
在某些實施例中，環C係視情況經一或多個R a取代之苯基。
在某些實施例中，各R a獨立地選自由以下組成之群：鹵素、氰基、烷基、C 3-8環烷基及5員至6員雜芳基。
在某些實施例中，兩個相鄰之R a與其連接之原子一起形成C 5-8環烷基或5員至8員雜環基。
在一些實施例中，R 3係不存在。
在一些實施例中，R 3係氫。
在一些實施例中，R 3係側氧基。
在一些實施例中，R 3係烷基。在某些實施例中，R 3係C 1-6烷基、C 1-5烷基、C 1-4烷基或C 1-3烷基。在某些實施例中，R 3係甲基或乙基。
在一些實施例中，R 3係鹵烷基。在某些實施例中，R 3係C 1-6鹵烷基、C 1-5鹵烷基、C 1-4鹵烷基或C 1-3鹵烷基。在某些實施例中，R 3係二氟甲基、三氟乙基或二氟乙基。
在一些實施例中，R 4係NH 2。
在一些實施例中，R 4係鹵烷基。在某些實施例中，R 4係二氟甲基。
在一個態樣中，本發明提供一種選自由以下組成之群的化合物： ， 或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供一種化合物，其具有式(III)： (III) 或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環A係包含1個或2個氮原子之5員雜芳基； 環B係苯基或包含1個或2個氮原子之6員雜芳基，其中之每一者視情況經一個或兩個R 2取代； 環C係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R a取代； R 1係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R b取代； R 2係鹵素、羥基、氰基、胺基、烷基或鹵烷基； 各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、側氧基、烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基及-C(=O)R c；或者 兩個相鄰之R a與其連接之原子一起形成環烷基或雜環基； 各R b獨立地選自側氧基、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基或-C(O)NH-R c，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代；並且 R c係烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代。
在一些實施例中，環A係包含1個氮原子之5員雜芳基。
在某些實施例中， 選自由以下組成之群： 。
在一些實施例中，環A係包括2個氮原子之5員雜芳基。
在某些實施例中， 選自由以下組成之群： 。
在一些實施例中，環B係視情況經一個或兩個R 2取代之苯基。在某些實施例中，環B係苯基。
在一些實施例中，環B係視情況經一個或兩個R 2取代之包含1個或2個氮原子之6員雜芳基。在某些實施例中，環B係吡啶基。
在一些實施例中，R 1係視情況經一或多個R b取代之雜環基。
在某些實施例中，R 1係視情況經一或多個R b取代之雜環基，並且各R b獨立地選自側氧基、烷基、烷氧基、芳基、雜芳基或-C(O)NH-R c，其中該芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基或氰基之基團取代。
在某些實施例中，R 1係視情況經一或多個R b取代之雜環基，並且各R b獨立地選自側氧基、芳基或雜芳基，其中該芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基或氰基之基團取代。
在某些實施例中，R 1選自： 。
在一些實施例中，R 2係鹵素。在某些實施例中，R 2係氟。
在一些實施例中，環C係雜環基或芳基，其中之每一者視情況經一或多個R a取代。
在某些實施例中，環C係視情況經一或多個R a取代之6員至10員雜環基。在某些實施例中，環C係視情況經一或多個R a取代之哌啶基。在某些實施例中，環C係視情況經一或多個R a取代之4-哌啶基。
在某些實施例中，環C係視情況經一或多個R a取代之4-哌啶基，並且各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、側氧基、烷基及-C(=O)R c。在某些實施例中，R c係烷基、C 3-8環烷基、3員至8員雜環基或5員至6員雜芳基。
在另一個態樣中，本發明提供一種化合物，該化合物選自： ， 或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供一種化合物，其具有式(IV)： (IV) 或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 環A係6員雜環基或6員雜芳基，其中之每一者包含1個或2個氮原子並且視情況經一或多個各自獨立地選自羥基、鹵素、氰基、側氧基、胺基或烷基之基團取代； 環B係苯基或包含1個或2個氮原子之6員雜芳基，其中之每一者視情況經一個或兩個R 2取代； 環C係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R a取代； R 1係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R b取代； R 2係鹵素、羥基、氰基、胺基、烷基或鹵烷基； 各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、側氧基、烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基及-C(=O)R c；或者 兩個相鄰之R a與其連接之原子一起形成環烷基或雜環基； 各R b獨立地選自側氧基、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基或-C(O)NH-R c，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代；並且 R c係烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代。
在一些實施例中，環A係包括2個氮原子並且視情況經一或多個各自獨立地選自羥基、鹵素、氰基、側氧基、胺基或烷基之基團取代之6員雜芳基。
在一些實施例中，環A係6員雜環基，其包括2個氮原子並且視情況經一或多個各自獨立地選自羥基、鹵素、氰基、側氧基、胺基或烷基之基團取代。
在一些實施例中， 選自 。
在一些實施例中，環B係視情況經一個或兩個R 2取代之苯基。
在一些實施例中，環B係視情況經一個或兩個R 2取代之包含1個或2個氮原子之6員雜芳基。在某些實施例中，環B係吡啶基。
在一些實施例中，R 1係視情況經一或多個R b取代之雜環基。在某些實施例中，各R b獨立地選自側氧基、烷基、烷氧基、芳基或雜芳基，其中該芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基或氰基之基團取代。
在某些實施例中，R 1係 。
在某些實施例中，環C係視情況經一或多個R a取代之6員至10員雜環基。在某些實施例中，環C係視情況經一或多個R a取代之哌啶基。在某些實施例中，環C係視情況經一或多個R a取代之4-哌啶基。
在某些實施例中，環C係視情況經一或多個R a取代之4-哌啶基，並且各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、側氧基、烷基及-C(=O)R c。在某些實施例中，R c係烷基、C 3-8環烷基、3員至8員雜環基或5員至6員雜芳基。
在另一個態樣中，本發明提供一種化合物，其選自： ， 或其醫藥學上可接受之鹽。
下表1闡述本發明之示例性化合物。 表1
本發明之化合物可以多種不同之形式或衍生物存在，包括但不限於前藥、軟藥、活性代謝衍生物(活性代謝物)及其醫藥學上可接受之鹽，所有此等皆在本發明之範圍內。
如本文所用，術語「前藥」係指在生理條件下代謝或藉由溶劑分解轉化時產生所需活性化合物之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。前藥包括但不限於活性化合物之酯、醯胺、胺基甲酸酯、碳酸酯、醯脲、溶劑化物或水合物。典型地，前藥無活性或活性低於活性化合物，但可以提供一或多種有利之處置、投與及/或代謝性質。例如，一些前藥係活性化合物之酯；在代謝期間中，酯基被裂解以產生活性藥物。此外，一些前藥被酶促激活以產生活性化合物或在進一步化學反應後產生活性化合物之化合物。前藥可以在單個步驟中由前藥形式發展為活性形式，或者可以具有一或多種本身可以具有活性或可以無活性之中間物形式。在以下參考文獻中討論了前藥之製備及用途：T. Higuchi及V. Stella, 「作為新穎遞送系統之前藥(Pro-drugs as Novel Delivery Systems)」, A.C.S.研討會系列(A.C.S. Symposium Series)之第14卷, 《藥物設計中之生物可逆載體(Bioreversible Carriers in Drug Design)》, 編輯Edward B. Roche, 美國製藥協會(American Pharmaceutical Association)及培格曼出版社(Pergamon Press), 1987；《前藥：挑戰與回報(Prodrugs: Challenges and Rewards)》, 編輯V. Stella, R. Borchardt, M. Hageman, R. Oliyai, H. Maag, J. Tilley, 紐約施普林格出版社(Springer Verlag New York), 2007，該等參考文獻皆以全文引用的方式併入本文中。
如本文所用，術語「軟藥」係指發揮藥理作用但分解為無活性代謝物降解物使得活性時間有限之化合物。參見例如「軟藥：安全藥物設計之原則及方法(Soft drugs: Principles and methods for the design of safe drugs)」, Nicholas Bodor, 《藥物研究評述(Medicinal Research Reviews)》, 第4卷, 第4期, 449-469, 1984，該等參考文獻以全文引用的方式併入本文中。
如本文所用，術語「代謝物」，例如活性代謝物，與如上文所描述之前藥重疊。因此，此類代謝物係藥理學活性化合物或進一步代謝為藥理學活性化合物之化合物，該等藥理學活性化合物係由個體體內之代謝過程產生之衍生物。例如，此類代謝物可以由所投與之化合物或鹽或前藥之氧化、還原、水解、醯胺化、脫醯胺化、酯化、脫酯化、酶促裂解等產生。其中，活性代謝物係此類藥理學活性衍生化合物。對於前藥，前藥化合物通常無活性或活性低於代謝產物。對於活性代謝物，母體化合物可為活性化合物或者可為無活性前藥。
可以使用此項技術中已知之常規技術來鑑定前藥及活性代謝物。參見例如，Bertolini等人, 1997, 《藥物化學雜誌(J Med Chem)》 40:2011-2016；Shan等人, 《藥物科學雜誌(J Pharm Sci)》 86:756-757；Bagshawe, 1995, 《藥物開發研究(DrugDev Res)》 34:220-230；Wermuth, 同上。
如本文所用，術語「藥學上可接受的」表明物質或組合物在化學及/或毒理學上與構成製劑之其他成分及/或被治療之個體相容。
如本文所用，除非另外指示，否則術語「藥學上可接受之鹽」包括保留指定化合物之游離酸及鹼之生物有效性並且在生物學上或其他方面並非不可取之鹽。所考慮之藥學上可接受之鹽形式包括但不限於單鹽、雙鹽、三鹽、四鹽等。藥學上可接受之鹽在其投與之量及濃度下係無毒的。此類鹽之製備可以藉由改變化合物之物理特性而不妨礙其發揮其生理作用來促進藥理學使用。物理性質之有用改變包括降低熔點以促進經黏膜投與以及增加溶解度以促進投與更高濃度之藥物。
藥學上可接受之鹽包括酸加成鹽，諸如含有以下之酸加成鹽：硫酸鹽、氯化物、鹽酸鹽、反丁烯二酸鹽、順丁烯二酸鹽、磷酸鹽、胺基磺酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、環己基胺基磺酸鹽及奎尼酸鹽。藥學上可接受之鹽可由以下酸獲得：鹽酸、順丁烯二酸、硫酸、磷酸、胺基磺酸、乙酸、檸檬酸、乳酸、酒石酸、丙二酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、環己基胺基磺酸、反丁烯二酸及奎寧酸。
當存在如羧酸或苯酚等酸性官能基時，藥學上可接受之鹽亦包括鹼加成鹽，如含有以下之鹼加成鹽：N,N'-二苯甲基乙二胺(benzathine)、氯普魯卡因(chloroprocaine)、膽鹼、二乙醇胺、乙醇胺、第三丁胺、乙二胺、葡甲胺、普魯卡因、鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉、銨、烷基胺及鋅。例如，參見《雷明頓氏藥物科學(Remington's Pharmaceutical Sciences)》, 第19版, 賓夕法尼亞州伊斯頓之馬克出版公司(Mack Publishing Co., Easton, PA), 第2卷, 第1457頁, 1995；《藥用鹽手冊：性質、選擇及用途(Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use)》, Stahl及Wermuth, 德國魏因海姆之Wiley-VCH出版社(Wiley-VCH, Weinheim, Germany), 2002。此類鹽可以使用適當之對應鹼來製備。
藥學上可接受之鹽可以藉由標準技術製備。例如，化合物之游離鹼形式可以溶解在合適之溶劑(如含有合適之酸之水溶液或水-醇溶液)中，並且接著藉由蒸發溶液來分離。因此，若特定化合物係鹼，則所需之醫藥學上可接受之鹽可以藉由此項技術中可用之任何合適之方法來製備，例如，用以下酸處理游離鹼：諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等無機酸；或諸如乙酸、順丁烯二酸、丁二酸、杏仁酸、反丁烯二酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水楊酸等有機酸；諸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸等哌喃糖基酸；諸如檸檬酸或酒石酸等α-羥基酸；諸如天冬胺酸或麩胺酸等胺基酸；諸如苯甲酸或肉桂酸等芳族酸；諸如對甲苯磺酸或乙磺酸等磺酸；等等。
類似地，若特定化合物為酸，則所需之藥學上可接受之鹽可以藉由任何合適之方法來製備，例如，用如胺(一級、二級或三級)等無機或有機鹼、鹼金屬氫氧化物或鹼土金屬氫氧化物等處理游離酸。合適之鹽之說明性實例包括衍生自如L-甘胺酸、L-賴胺酸及L-精胺酸等胺基酸、氨、一級胺、二級胺及三級胺，以及如羥乙基吡咯啶、哌啶、𠰌啉或哌𠯤等環胺之有機鹽；以及衍生自鈉、鈣、鉀、鎂、錳、鐵、銅、鋅、鋁及鋰之無機鹽。
亦應理解，本發明之化合物可以非溶劑化形式、溶劑化形式(例如，水合形式)及固體形式(例如，晶體形式或多晶形式)存在，並且本發明旨在涵蓋所有此類形式。
如本文所用，術語「溶劑化物」或「溶劑化形式」係指含有化學計量或非化學計量之溶劑之溶劑加成形式。一些化合物具有在結晶固態中捕獲固定莫耳比之溶劑分子，從而形成溶劑化物之傾向。若溶劑係水，則所形成之溶劑化物係水合物，並且若溶劑係醇，則所形成之溶劑化物係醇化物(alcoholate)。水合物係藉由將一或多個水分子與一個物質分子組合來形成，其中水保持其作為H 2O之分子狀態。形成溶劑化物之溶劑之實例包括但不限於水、異丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸及乙醇胺。
如本文所用，術語「晶體形式」、「結晶形式」、「多晶形式」及「多晶型」可以互換使用，並且係指化合物(或其鹽或溶劑化物)可以不同之晶體堆積排列而結晶之晶體結構，所有此等晶體結構具有相同之元素組成。不同之晶體形式通常具有不同之X射線繞射圖、紅外光譜、熔點、密度、硬度、晶體形狀、光學及電學性質、穩定性及溶解性。重結晶溶劑、結晶速率、儲存溫度及其他因素可能使一種晶體形式占主導地位。化合物之晶體多晶型可以藉由在不同條件下結晶來製備。
本發明之化合物亦可以不同之互變異構形式存在，並且所有此類形式皆涵蓋在本發明之範圍內。術語「互變異構體」或「互變異構形式」係指可藉由低能壘相互轉化之不同能量之結構異構體。例如，質子互變異構體(亦稱為質子轉移互變異構體)包括藉由質子遷移進行之相互轉化，如酮-烯醇、醯胺-亞胺酸、內醯胺-內醯亞胺、亞胺-烯胺異構化，以及質子可以佔據雜環系統之兩個或更多個位置之環狀形式(例如，1H-及3H-咪唑，1H-、2H-及4H-1,2,4-三唑、1H-及2H-異吲哚，以及1H-及2H-吡唑)。價互變異構體包括藉由一些成鍵電子之重組而進行之相互轉化。互變異構體可以處於平衡狀態或藉由適當之取代而空間鎖定成一種形式。除非另外說明，否則本發明之藉由名稱或結構標識為一種特定互變異構形式之化合物旨在包括其他互變異構形式。
本發明亦旨在包括化合物中之原子之所有同位素。原子之同位素包括具有相同原子序數但具有不同質量數之原子。例如，除非另外說明，否則本發明之化合物中之氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、溴或碘意在亦包括其同位素，諸如但不限於 1H、 2H、 3H、 11C、 12C、 13C、 14C、 14N、 15N、 16O、 17O、 18O、 31P、 32P、 32S、 33S、 34S、 36S、 17F、 18F、 19F、 35Cl、 37Cl、 79Br、 81Br、 124I、 127I及 131I。在一些實施例中，氫包括氕、氘及氚。在一些實施例中，碳包括 12C及 13C。
如本文所用，術語「化合物」意指包括所描繪結構之所有形式或衍生物。除非另外規定，否則本文中藉由名稱或結構標識為一種特定互變異構形式之化合物希望包括其他互變異構形式。 化合物之合成
本文所提供之化合物，包括其醫藥學上可接受之鹽之合成，在實例之合成流程中進行說明。本文所提供之化合物可以使用任何已知之有機合成技術來製備並且可以根據多種可能之合成途徑中之任一者來合成，因此此等流程僅具說明性，不希望限制可用於製備本文所提供之化合物之其他可能方法。另外，流程中之步驟係為了更好地說明，並且可以酌情更改。實例中化合物之實施例係出於研究目的及可能提交給監管機構之目的而合成的。
可以在熟習有機合成技術者可容易選擇之合適溶劑中進行用於製備本發明之化合物之反應。合適之溶劑可以在進行反應之溫度(例如，溫度範圍可為從溶劑之凍結溫度至溶劑之沸騰溫度)下與起始材料(反應物)、中間物或產物基本上無反應性。給定反應可以在一種溶劑或超過一種溶劑之混合物中進行。視特定反應步驟而定，適用於特定反應步驟之溶劑可以由熟習此項技術者選擇。
本發明化合物之製備可涉及各種化學基團之保護及脫除保護基。對保護及脫除保護基之需求及對適當之保護基團之選擇可以容易由熟習此項技術者確定。保護基團之化學性質可見於例如：T. W. Greene及P. G. M. Wuts, 《有機合成中之保護基團(Protective Groups in Organic Synthesis)》, 第3版, 紐約約翰威利父子出版公司, (1999)；P. Kocienski, 《保護基團(Protecting Groups)》, 喬治泰米出版社(Georg Thieme Verlag), 2003；及Peter G.M. Wuts, 《格林氏有機合成中之保護基團(Greene's Protective Groups in Organic Synthesis)》, 第5版, Wiley出版社(Wiley), 2014，該等參考文獻皆以全文引用的方式併入本文中。
可以根據此項技術中已知之任何適合方法監測反應。例如，可以藉由諸如核磁共振波譜法(例如， 1H或 13C)、紅外光譜法、分光光度法(例如，UV-可見光)、質譜法等光譜學手段或藉由諸如高效液相層析法(HPLC)、液相層析-質譜法(LCMS)或薄層層析法(TLC)等層析方法來監測產物形成。熟習此項技術者可以藉由各種方法對化合物進行純化，該等方法包括高效液相層析法(HPLC)(「製備型LC-MS純化：改良之化合物特定方法優化(Preparative LC-MS Purification: Improved Compound Specific Method Optimization)」 Karl F. Blom, Brian Glass, Richard Sparks, Andrew P. Combs 《組合化學雜誌(J. Combi. Chem.)》2004, 6(6), 874-883，該等參考文獻以全文引用的方式併入本文中)及正相矽膠層析法。
本發明之已知起始材料可以藉由使用或根據此項技術中已知之方法合成，或者可以自商業供應商處購買。除非另有說明，否則分析級溶劑及可購得之試劑均在未經進一步純化之情況下使用。
除非另有說明，否則本發明之反應均在氮氣或氬氣之正壓下或在無水溶劑中使用乾燥管進行，並且反應燒瓶通常裝配有橡膠隔墊以便藉由注射器引入受質及試劑。玻璃器皿經烘箱乾燥及/或加熱乾燥。
出於說明性目的，下面之實例部分顯示用於製備本發明之化合物以及關鍵中間物之合成途徑。熟習此項技術者將理解，可以使用其他合成途徑來合成本發明之化合物。儘管描繪了特定之起始材料及試劑，但亦可輕鬆用其他起始材料及試劑取代，以提供多種衍生物及/或反應條件。另外，根據本發明，可以使用熟習此項技術者熟知之習知化學方法進一步修飾藉由下述方法製備之許多化合物。 藥物組合物
在另一態樣中，提供藥物組合物，其包含本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一個態樣中，提供藥物組合物，其包含本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及至少一種藥學上可接受之賦形劑。
如本文所用，術語「藥物組合物」係指呈適於投與個體之形式之含有本發明分子或化合物之製劑。
如本文所用，術語「藥學上可接受之賦形劑」意指可用於製備通常安全、無毒並且在生物學上及其他方面均無不良反應之藥物組合物之賦形劑，並且包括對於獸醫用途以及人類藥物用途而言可接受之賦形劑。如本文所用，「藥學上可接受之賦形劑」包括一種及多於一種此類賦形劑。術語「藥學上可接受之賦形劑」亦涵蓋「藥學上可接受之載體」及「藥學上可接受之稀釋劑」。
所使用之特定賦形劑將取決於應用本發明之化合物之手段及目的。溶劑通常係基於要向包括人在內之哺乳動物投與之熟習此項技術者認為安全之溶劑來選擇。通常，安全溶劑為無毒水性溶劑，諸如水及可溶於或可混溶於水中之其他無毒溶劑。合適之水性溶劑包括水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(例如，PEG 400、PEG 300)等及其混合物。
在一些實施例中，合適之賦形劑可以包括緩衝劑，諸如磷酸鹽、檸檬酸鹽及其他有機酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸及甲硫胺酸；防腐劑(諸如氯化十八烷基二甲基苯甲基銨；氯化六甲銨；苯紮氯銨；苄索氯銨；苯酚、丁醇或苯甲醇；對羥苯甲酸烷基酯，諸如對羥苯甲酸甲酯或丙酯；鄰苯二酚；間苯二酚；環己醇；3-戊醇；以及間甲酚)；低分子量(少於約10個殘基)多肽；蛋白質，諸如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水性聚合物，諸如聚乙烯吡咯啶酮；胺基酸，諸如甘胺酸、麩醯胺酸、天冬醯胺、組胺酸、精胺酸或賴胺酸；單糖、二糖及其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或葡聚糖；螯合劑，諸如EDTA；糖，諸如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨糖醇；成鹽反離子，諸如鈉；金屬錯合物(例如，Zn蛋白質錯合物)；及/或非離子型界面活性劑，諸如TWEEN™、PLURONICS™或聚乙二醇(PEG)。
在一些實施例中，合適之賦形劑可以包括一或多種穩定劑、界面活性劑、濕潤劑、潤滑劑、乳化劑、懸浮劑、防腐劑、抗氧化劑、遮光劑、助流劑、加工助劑、著色劑、甜味劑、芳香劑、調味劑及其他已知添加劑以提供藥物(亦即，本發明之化合物或其藥物組合物)之最佳呈現形式或幫助製造藥學產品(亦即，藥物)。該等活性藥物成分亦可以包埋在例如藉由凝聚技術或藉由界面聚合製備之微膠囊中，該等微膠囊例如分別在膠體藥物遞送系統(例如，脂質體、白蛋白微球、微乳液、奈米顆粒以及奈米膠囊)或在粗乳液中之羥甲基纖維素或明膠微膠囊以及聚-(甲基丙烯酸甲酯)微膠囊。此類技術公開於《雷明頓氏藥物科學》 第16版, Osol, A.編輯(1980)中。「脂質體」為可用於將藥物(如本文中所揭示之化合物及視情況存在之化療劑)遞送至包括人在內之哺乳動物之包含各種類型之脂質、磷脂及/或界面活性劑之小囊泡。脂質體之組分通常以雙層形式排列，類似於生物膜之脂質排列。
本文所提供之藥物組合物可以呈允許向個體(包括但不限於人類)投與組合物並且允許將組合物調配成與預期投與途徑相容之任何形式。
針對本文所提供之藥物組合物考慮了多種途徑，並且因此本文所提供之藥物組合物可以取決於預期投與途徑而以散裝或單位劑型供應。例如，對於口服、經頰及舌下投與，散劑、懸浮液、顆粒、錠劑、丸劑、膠囊、軟膠囊及膠囊型錠劑作為固體劑型可為可接受的，並且乳液、糖漿、酏劑、懸浮液及溶液作為液體劑型可為可接受的。對於注射投與，乳液及懸浮液作為液體劑型可為可接受的，並且適於用合適溶液復原之散劑作為固體劑型可為可接受的。對於吸入投與，溶液、噴霧劑、乾粉及氣溶膠可為可接受之劑型。對於外用(包括經頰及舌下)或經皮投與，散劑、噴霧劑、軟膏、糊劑、乳膏、洗劑、凝膠、溶液及貼片可為可接受之劑型。對於陰道投與，陰道栓劑、棉塞、乳膏、凝膠、糊劑、泡沫及噴霧劑可為可接受之劑型。
組合物之單位劑型中之活性成分之量為治療有效量，並根據所涉及之特定療法而變化。如本文所用，術語「治療有效量」係指治療、改善或預防鑑別出之疾病或病狀或顯示可偵測之治療或抑制作用之分子、化合物或包含該等分子或化合物之組合物之量。可以藉由此項技術中已知之任何測定方法來偵測所述作用。個體之精確有效量將取決於個體之體重、體型及健康狀況；病狀之性質及程度；投與速率；選擇用於投與之療法或療法組合；以及處方醫師之判斷。對於給定情況之治療有效量可以藉由在臨床醫生之技能及判斷內之常規實驗來確定。
在一些實施例中，本發明之藥物組合物可以呈口服投與之調配物形式。
在某些實施例中，本發明之藥物組合物可以呈錠劑調配物形式。適用於錠劑調配物之藥學上可接受之賦形劑包括例如惰性稀釋劑，諸如乳糖、碳酸鈉、磷酸鈣或碳酸鈣；造粒劑及崩解劑，諸如玉米澱粉或海藻酸；黏合劑，諸如澱粉；潤滑劑，諸如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石；防腐劑，諸如對羥基苯甲酸乙酯或對羥基苯甲酸丙酯；以及抗氧化劑，諸如抗壞血酸。錠劑調配物可為未包衣的或包衣的，以調節其崩解及後續活性成分在胃腸道內之吸收，或改良其穩定性及/或外觀，在任一種情況下，均使用此項技術中熟知之習知包衣劑及程序。
在某些實施例中，本發明之藥物組合物可以呈硬明膠膠囊形式，其中活性成分與惰性固體稀釋劑，例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混合；或呈軟明膠膠囊形式，其中活性成分與水或油，諸如花生油、液體石蠟或橄欖油混合。
在某些實施例中，本發明之藥物組合物可以呈水性懸浮液形式，該水性懸浮液通常含有細粉形式之活性成分以及一或多種懸浮劑，諸如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、褐藻酸鈉、聚乙烯吡咯啶酮、黃蓍膠及阿拉伯樹膠；分散劑或濕潤劑，諸如卵磷脂或環氧烷與脂肪酸之縮合產物(例如，聚氧乙烯硬脂酸酯)；或環氧乙烷與長鏈脂肪醇之縮合產物，例如十七伸乙基氧基鯨蠟醇；或環氧乙烷與衍生自脂肪酸及己糖醇之偏酯之縮合產物，如聚氧乙烯山梨醇單油酸酯；或環氧乙烷與衍生自脂肪酸及己糖醇酸酐之偏酯之縮合產物，例如聚乙烯脫水山梨醇單油酸酯。水性懸浮液亦可以含有一或多種防腐劑(諸如對羥基苯甲酸乙酯或對羥基苯甲酸丙酯)、抗氧化劑(諸如抗壞血酸)、著色劑、調味劑及/或甜味劑(諸如蔗糖、糖精或阿斯巴甜)。
在某些實施例中，本發明之藥物組合物可以呈油性懸浮液形式，該油性懸浮液通常含有懸浮於植物油(諸如花生油、蓖麻油、橄欖油、芝麻油或椰子油)中或礦物油(諸如液體石蠟)中之活性成分。油性懸浮液亦可以含有增稠劑，諸如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。可以添加甜味劑，如上文陳述之甜味劑，及調味劑以提供可口之口服調配物。此等組合物可以藉由添加抗氧化劑(諸如抗壞血酸)來保存。
在某些實施例中，本發明之藥物組合物可以呈水包油乳液形式。油相可為植物油，諸如橄欖油或花生油；或礦物油，諸如液體石蠟；或任何此等油之混合物。合適之乳化劑可為例如天然存在之膠，諸如阿拉伯膠或黃蓍膠；天然存在之磷脂，諸如大豆、卵磷脂、衍生自脂肪酸及己糖醇酸酐之酯或偏酯(例如，脫水山梨醇單油酸酯)及該偏酯與環氧乙烷之縮合產物，諸如聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯。乳液亦可以含有甜味劑、調味劑及防腐劑。
在某些實施例中，本文所提供之藥物組合物可以呈糖漿及酏劑形式，該糖漿及酏劑可以含有甜味劑，諸如甘油、丙二醇、山梨醇、阿斯巴甜或蔗糖；緩和劑；防腐劑；調味劑及/或著色劑。
在一些實施例中，本發明之藥物組合物可以呈注射投與之調配物形式。
在某些實施例中，本發明之藥物組合物可以呈無菌可注射調配物形式，諸如無菌可注射水性或油性懸浮液。此懸浮液可以根據已知技術使用上文提到之彼等合適分散劑或濕潤劑及懸浮劑來調配。無菌可注射調配物亦可為在無毒非經腸可接受之稀釋劑或溶劑中之無菌可注射溶液或懸浮液，如在1,3-丁二醇中之溶液或製備為凍乾散劑。可以採用之可接受之媒劑及溶劑中包括水、林格氏溶液(Ringer's solution)及等張氯化鈉溶液。另外，無菌不揮發性油習知地可用作溶劑或懸浮介質。出於此目的，可以採用任何溫和的不揮發性油，包括合成之甘油單酯或甘油二酯。另外，諸如油酸等脂肪酸同樣可以用於製備可注射劑。
在一些實施例中，本發明之藥物組合物可以呈吸入投與之調配物形式。
在某些實施例中，本發明之藥物組合物可以呈水性及非水性(例如，於碳氟化合物推進劑中)氣溶膠形式，該水性及非水性氣溶膠含有任何合適之溶劑及視情況存在的其他化合物，諸如但不限於穩定劑、抗微生物劑、抗氧化劑、pH調節劑、界面活性劑、生物可用性調節劑及其組合。該載體及穩定劑隨具體化合物之要求而變化，但通常包括非離子型界面活性劑(吐溫(Tween)、普朗尼克(Pluronic)或聚乙二醇)、無害蛋白質類血清白蛋白、脫水山梨醇酯、油酸、卵磷脂、諸如甘胺酸等胺基酸、緩衝劑、鹽、糖或糖醇。
在一些實施例中，本發明之藥物組合物可以呈外用或經皮投與之調配物形式。
在某些實施例中，本文所提供之藥物組合物可以呈乳膏、軟膏、凝膠及水性或油性溶液或懸浮液形式，該乳膏、軟膏、凝膠及水性或油性溶液或懸浮液通常可以藉由將活性成分與習知之外用可接受之賦形劑，諸如動物脂肪及植物脂肪、油、蠟、石蠟、澱粉、黃蓍膠、纖維素衍生物、聚乙二醇、矽酮、膨潤土、矽酸、滑石及氧化鋅或其混合物，一起調配而獲得。
在某些實施例中，本文所提供之藥物組合物可以調配成一般技術者所熟知之經皮皮膚貼片形式。
除上文所描述之彼等代表性劑型以外，藥學上可接受之賦形劑及載體對於熟習此項技術者而言通常係已知的並且因此包括在本發明中。在例如以下參考文獻中描述了此類賦形劑及載體：《雷明頓氏藥物科學》, 新澤西州之馬克出版公司(Mack Pub. Co., New Jersey) (1991)；《雷明頓：藥學科學與實施(Remington: The Science and Practice of Pharmacy)》, 編輯費城科學大學(University of the Sciences in Philadelphia), 第21版, LWW (2005)，該等參考文獻以引用方式併入本文。
在一些實施例中，本發明之藥物組合物可以被調配成單一劑型。本文所提供之化合物在單一劑型中之量將根據所治療之個體及具體之投與模式而變化。
在一些實施例中，本發明之藥物組合物可以調配成使得可以投與0.001 mg/kg體重/天至1000 mg/kg體重/天，例如0.01 mg/kg體重/天至800 mg/kg體重/天、0.01 mg/kg體重/天至700 mg/kg體重/天、0.01 mg/kg體重/天至600 mg/kg體重/天、0.01 mg/kg體重/天至500 mg/kg體重/天、0.01 mg/kg體重/天至400 mg/kg體重/天、0.01 mg/kg體重/天至300 mg/kg體重/天、0.1 mg/kg體重/天至200 mg/kg體重/天、0.1 mg/kg體重/天至150 mg/kg體重/天、0.1 mg/kg體重/天至100 mg/kg體重/天、0.5 mg/kg體重/天至100 mg/kg體重/天、0.5 mg/kg體重/天至80 mg/kg體重/天、0.5 mg/kg體重/天至60 mg/kg體重/天、0.5 mg/kg體重/天至50 mg/kg體重/天、1 mg/kg體重/天至50 mg/kg體重/天、1 mg/kg體重/天至45 mg/kg體重/天、1 mg/kg體重/天至40 mg/kg體重/天、1 mg/kg體重/天至35 mg/kg體重/天、1 mg/kg體重/天至30 mg/kg體重/天、1 mg/kg體重/天至25 mg/kg體重/天之劑量之本文所提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一些情況下，低於前述範圍之下限之劑量水平可能綽綽有餘，而在其他情況下，可以採用較大劑量而不會引起任何有害副作用，條件係該等較大劑量首先分成若干小劑量以供全天投與。有關投與途徑及劑量方案之更多資訊，參見《綜合藥物化學(Comprehensive Medicinal Chemistry)》第5卷第25.3章(Corwin Hansch；編輯委員會主席), 培格曼出版社(Pergamon Press) 1990，該等參考文獻以引用方式特別併入本文。
在一些實施例中，本發明之藥物組合物可以被調配成短效、快速釋放、長效及持續釋放形式。因此，本發明之藥物調配物亦可被調配成用於控制釋放或緩慢釋放。
在另一態樣中，亦提供了獸用組合物，其包含一或多種本發明之分子或化合物或其醫藥學上可接受之鹽及獸用載體。獸用載體係可用於投與組合物之目的之物質，並且可為原本呈惰性或在獸醫學領域中可接受之固體、液體或氣態物質，並且與活性成分相容。此等獸用組合物可以非經腸、經口或藉由任何其他所需之途徑來投與。
藥物組合物或獸用組合物可以取決於用於投與藥物之方法而以各種方式包裝。例如，用於分配之製品可以包括存放有適當形式之組合物之容器。合適之容器為熟習此項技術者所熟知，並且包括諸如瓶子(塑膠及玻璃)、藥囊、安瓿、塑膠袋、金屬筒等材料。容器亦可以包括防拆組合件以防止輕易獲取包裝之內容物。另外，容器上置放有描述容器內容物之標籤。標籤亦可以包括適當之警告。組合物亦可以包裝於單位劑量或多劑量容器中，例如密封之安瓿瓶及小瓶中，並且可以在冷凍乾燥(凍乾)條件下儲存，在即將使用前，僅需添加無菌液體載體，例如注射用水。臨時注射溶液及懸浮液由先前所描述之種類之無菌散末、顆粒及錠劑製備。 使用方法
式(I)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽能夠抑制TAM激酶之活性。例如，藉由向需要抑制激酶之細胞或個體投與抑制量之本發明化合物，本發明之化合物可用於抑制該細胞或該個體中TAM激酶之活性。該化合物之抑制特性可以使用本文所述之測試程序來證明。
如本文所用，術語「細胞」係指活體外、離體或活體內細胞。在一些實施例中，離體細胞可為自諸如哺乳動物等有機體切除之組織樣品之一部分。在一些實施例中，活體外細胞可為細胞培養物中之細胞。在一些實施例中，活體內細胞可為生活在諸如哺乳動物等有機體中之細胞。
如本文所用，「個體」係指人類及非人類動物。非人類動物之實例包括所有脊椎動物，例如哺乳動物，諸如非人類靈長類動物(尤其是高等靈長類動物)、狗、嚙齒動物(例如，小鼠或大鼠)、豚鼠、貓；以及非哺乳動物，諸如鳥、兩棲動物、爬行動物等。在較佳實施例中，個體係人類。在另一個實施例中，該個體係實驗動物或適合作為疾病模型之動物。
在一些實施例中，本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽對TAM激酶之選擇性超過一或多種其他激酶。在一些實施例中，選擇性係2倍或更多、3倍或更多、5倍或更多、10倍或更多、25倍或更多、50倍或更多、或100倍或更多。
在一些實施例中，本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可以抑制AXL、MER及TYRO3中之一或多者。在一些實施例中，本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽對一種TAM激酶之選擇性超過對另一者之選擇性。
如本文所用，術語「選擇性」意指與參考酶(諸如另一種TAM激酶或除TAM激酶之外之激酶)相比，化合物以更高親和力或效力結合或抑制TAM激酶。
例如，本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽對AXL之選擇性可以超過對MER及TYRO3之選擇性，對MER之選擇性超過對AXL及TYRO3之選擇性，或對AXL及MER之選擇性超過對TYRO3之選擇性。在一些實施例中，本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽抑制所有TAM家族成員(例如，AXL、MER及TYRO3)。在一些實施例中，本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽對AXL及MER之選擇性超過對TYRO3及其他激酶之選擇性。
因此，在一個態樣中，本發明提供了一種抑制TAM激酶之方法，該方法包括使TAM激酶與本文所提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽接觸。
在另一態樣中，本發明提供了一種用於抑制AXL及MER激酶之方法，該方法包括使AXL及MER激酶與本文所提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽接觸。
如本文所用，術語「接觸」係指使指示部分在活體外系統或活體內系統中在一起。例如，使TAM激酶與本文所提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽「接觸」包括向具有TAM激酶之個體投與本文所提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，以及例如，將本文所提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽引入含有細胞或純化製劑之樣品中，該細胞或純化製劑含有TAM激酶。
由於本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽具有針對TAM激酶之抑制活性，所以其可用於治療(治療或預防)與TAM激酶相關之病狀或疾病。
如本文所用，術語「療法」或「治療」旨在具有其正常含義，亦即，處理疾病，以便完全或部分地緩解其症狀中之一種、一些或所有症狀，或糾正或補償潛在病理，由此實現有益之或所需之臨床結果。出於本發明之目的，有益之或所需之臨床結果包括但不限於症狀之緩解、疾病程度之減輕、疾病狀態之穩定(亦即，不惡化)、疾病進展之延緩或減慢、疾病狀態之改善或緩和以及緩解(無論部分或全部)，無論可偵測或不可偵測的。「療法」亦可意指與未接受療法之情況下之預期存活期相比，存活期延長。需要治療者包括已患病狀或病症者以及易患病狀或病症者或欲預防病狀或病症者。
如本文所用，術語「預防」(「prophylaxis」或「prophylactic」)旨在具有其正常含義並且包括用於預防疾病發展之一級預防及疾病已發展並且暫時地或永久地保護患者以防疾病加劇或惡化或罹患與疾病相關之新症狀的二級預防。
在一些實施例中，與TAM激酶相關之病狀或疾病包括增殖性病症，諸如癌症、腎病、免疫系統疾病、循環系統疾病及病毒性疾病。
在一些實施例中，本文所提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可用於治療癌症，例如但不限於白血病(例如，急性髓性白血病、慢性髓性白血病、急性淋巴性白血病)、黑色素瘤、神經膠質瘤、淋巴瘤(例如，慢性淋巴球性淋巴瘤、B細胞淋巴瘤、皮膚T細胞淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)或非霍奇金氏淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma)、毛細胞淋巴瘤、慢性骨髓性淋巴瘤、急性淋巴母細胞性淋巴瘤、AIDS相關淋巴瘤及伯基特氏淋巴瘤(Burkitt's lymphoma))、膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、大腸直腸癌、小腸癌、大腸癌、大腸癌、直腸癌、肛門癌、子宮內膜癌、胃癌、頭頸癌(例如，喉癌、下咽癌、鼻咽癌、口咽癌、唇癌及口腔癌)、腎癌、肝癌(例如，肝細胞癌、膽管細胞癌)、肺癌(例如，腺癌、小細胞肺癌及非小細胞肺癌、細小細胞癌及非細小細胞癌、支氣管癌、支氣管腺瘤、胸膜肺母細胞瘤)、卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、子宮癌、食道癌、膽囊癌、胰臟癌(例如，外分泌胰臟癌)、胃癌、甲狀腺癌、甲狀旁腺癌、皮膚癌(例如，鱗狀細胞癌、卡波西肉瘤(Kaposi sarcoma)、默克爾細胞皮膚癌(Merkel cell skin cancer))及腦癌(例如，星形細胞瘤、髓母細胞瘤、室管膜瘤、神經外胚層腫瘤、松果體腫瘤)。
在一些實施例中，本文所提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可用於治療腎病，例如但不限於腎小球腎炎、慢性腎炎、IgA腎炎、繼發性(sequential或secondary)腎炎、腎病性腎炎、急性腎功能衰竭、慢性腎功能衰竭、糖尿病腎病、痛風性腎病、間質性腎炎及腎盂炎。
在一些實施例中，本文所提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可用於治療免疫系統疾病，例如但不限於牛皮癬及類風濕性關節炎。
在一些實施例中，本文所提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可用於治療循環系統疾病，例如但不限於動脈粥樣硬化及血栓形成。
在一些實施例中，本文所提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可用於治療病毒性疾病，諸如病毒感染。引起感染之病毒之實例包括但不限於人類免疫缺陷病毒、乳頭瘤病毒、流感病毒、A型、B型、C型或D型肝炎病毒、腺病毒、痘病毒、疱疹病毒(例如，N7N、HSV-1、HAV-6、HSVII及CMV、艾普斯登-巴爾病毒(Epstein Barr virus))、人類巨細胞病毒、嚴重急性呼吸症候群病毒、呼吸道合胞病毒、埃博拉病毒(ebola virus)、馬爾堡病毒(Marburg virus)、麻疹病毒、黃病毒(例如，西尼羅河(West Nile)、登革熱、蜱家腦炎、黃熱病、寨卡病毒(Zika))、艾柯病毒(echovirus)、鼻病毒、柯薩奇病毒(coxsackie virus)、豇豆花葉病毒、腮腺炎病毒、輪狀病毒、風疹病毒、細小病毒、牛痘病毒、HTLV病毒、登革熱病毒、軟疣病毒、脊髓灰質炎病毒、狂犬病病毒、JC病毒及蟲媒病毒性腦炎病毒。
本文所提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可以用作癌細胞之轉移抑制調配物。 組合使用
本文所提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可以與一或多種其他藥劑或療法組合使用以補充及/或增強化合物之預防及/或治療效果，以改善動力學，改善吸收，並且減少化合物之劑量；及/或消除化合物之副作用。
本文所提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可與另一種藥劑或療法同時(作為單一製劑或各別製劑)或依序投與。在依序投與時，本文所提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可在另一種藥劑或療法之前投與。可替代地，可以在本文所提供之化合物或藥學上可接受之鹽之前投與另一種藥劑或療法。此等藥劑或療法之投與方法可以彼此相同或不同。
可以與本文所提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽組合用於治療癌症之藥劑或療法之實例包括但不限於化療劑、靶向癌症療法、免疫療法或放射療法，例如烷基化藥劑(例如，氮芥N-氧化物鹽酸鹽、環磷醯胺、異環磷醯胺、美法侖(melphalan)、噻替派(thiotepa)、卡波醌(carboquone)、白消安(busulfan)、鹽酸尼莫司汀(nimustine hydrochloride)、達卡巴嗪(dacarbazine)、雷莫司汀(ranimustine)、卡莫司汀(carmustine)、苯丁酸氮芥、苯達莫司汀(bendamustine)及甲氯乙胺)、抗代謝藥(例如，葉酸拮抗劑、嘧啶類似物、嘌呤類似物及腺苷脫氨酶抑制劑)、抗癌抗生素(例如，放線菌素D(actinomycin D)、絲裂黴素C(mitomycin C)、鹽酸柔紅黴素(daunorubicin hydrochloride)、鹽酸阿黴素(doxorubicin hydrochloride)、鹽酸阿柔比星(aclarubicin hydrochloride)、新制癌菌素(neocarzinostatin)、鹽酸吡柔比星(pirarubicin hydrochloride)、表柔比星(epirubicin)(鹽酸鹽)、鹽酸艾達黴素(idarubicin hydrochloride)、色黴素A3 (chromomycin A3)、博來黴素(bleomycin)(鹽酸鹽)、硫酸培洛黴素(peplomycin sulfate)、四氫哌喃阿黴素(therarubicin)、淨司他丁斯酯(zinostatin stimalamer)、吉妥單抗(gemtuzumab ozogamicin))、植物生物鹼、激素、鉑化合物、抗CD20抗體(例如，利妥昔單抗(rituximab)、替伊莫單抗(ibritumomab)、替伊莫單抗(ibritumomab tiuxetan)及奧妥珠單抗(ocreli-zumab))、抗CD52抗體(例如，阿侖單抗(alemtuzumab))、抗PD-1抗體(例如，納武單抗(nivolumab)、派姆單抗(pembrolizumab))、過繼性細胞轉移、血管生成抑制劑、卡介苗芽孢桿菌療法(Bacillus Calmette-Guerin therapy)、生物化學療法、癌症疫苗、嵌合抗原受體(CAR) T細胞療法、細胞因子療法、基因療法、免疫檢查點調節劑、免疫結合物、放射性結合物、溶瘤病毒療法、靶向藥物療法、G-CSF調配物(例如，培非格司亭(pegfilgrastim)、非格司亭(filgrastim)、來諾司亭(lenograstim)及那托司亭(nartograstim))、急性早幼粒細胞白血病分化誘導劑、拓樸異構酶抑制劑(例如，拓朴替康(topotecan)、替尼泊苷(teniposide)、伊立替康(irinotecan)及索布佐生(sobuzoxane))、芳香酶抑制劑(例如，依西美坦(exemestane))、激酶抑制劑或抗體(例如，針對EGFR、Her2、VEGFR、c-Met、PI3、JAK、Ret、IGFR1、PDGFR、FGFR1、FGFR2、FGFR3、FGFR4、TrkA、TrkB、TrkC、ROS、c-Kit、Fit-3、CSF1R、Bcr-Abl或EML4-Alk)及其他抗癌劑(例如，BET抑制劑、HDAC抑制劑、Bcl2抑制劑、β連環蛋白通路抑制劑、notch通路抑制劑、hedgehog通路抑制劑)。
可以與本文提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽組合用於治療腎病之藥劑或療法之實例包括但不限於類固醇、免疫抑制劑(例如，硫唑嘌呤(azathioprine)、子囊黴素(ascomycin)、依維莫司(everolimus)、柳氮磺胺吡啶(salazosulfapyridine)、環孢菌素(cyclosporine)、環磷醯胺、西羅莫司(sirolimus)、他克莫司(tacrolimus)、布西拉明(bucillamine)、甲氨蝶呤(methotrexate)及來氟米特(leflunomide))、血管緊張素II拮抗藥(例如，氯沙坦(losartan)、坎地沙坦(candesartan)、纈沙坦(valsartan)、厄貝沙坦(irbesartan)、奧美沙坦(olm-esartan)、替米沙坦(telmisartan))、血管緊張素轉換酶抑制劑(例如，阿拉普利(alacepril)、鹽酸咪達普利(imidapril hydrochloride)、鹽酸喹那普利(quinapril hydrochloride)、鹽酸替莫普利(temocapril hydrochloride)、鹽酸地拉普利(delapril hydrochloride)、鹽酸苯那普利(benazepril hydrochloride)、卡托普利(captopril)、群多普利(trandolapril)、培哚普利(perindopril erbumine)、順丁烯二酸依那普利(enalapril maleate)、賴諾普利(lisinopril))、抗血小板藥物(例如，雙嘧達莫(dipyridamole)及鹽酸地拉齊普水合物(dilazep hydrochloride hydrate))及抗凝血藥(例如，雙嘧達莫、鹽酸地拉齊普水合物、阿哌沙班(apixaban)、達比加群(dabigatran)、依度沙班(edoxaban)、磺達肝素(fondaparinex)、肝素、利伐沙班(rivaroxaban)及華法林(warfarin))。
可以與本文所提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽組合用於治療免疫系統疾病之藥劑或療法之實例包括但不限於免疫抑制劑、類固醇、緩解疾病之抗風濕藥、前列腺素、前列腺素合酶抑制劑、磷酸二酯酶抑制劑、金屬蛋白酶抑制劑、諸如抗TNF-α調配物、抗IL-1調配物及抗IL-6調配物等抗細胞因子蛋白調配物、細胞因子抑制劑及非固醇消炎劑。
可以與本文所提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽組合用於治療循環系統疾病之藥劑或療法之實例包括但不限於抗血小板藥、血管緊張素II拮抗藥、血管緊張素轉化酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑及噻唑啶衍生物。
在一些實施例中，本文所提供之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與放射療法或外科手術組合使用。放射線通常自採用光子(x射線或γ射線)或粒子放射線之機器內部(在癌症部位附近植入放射性物質)或外部遞送。當組合療法進一步包括放射療法時，可在任何合適之時間進行放射治療，只要自治療劑與放射療法之組合之共同作用中實現有益作用即可。 標記之化合物與測定方法
在另一個態樣中，本發明係關於本文所提供之標記之化合物(放射性標記、螢光標記等)，該標記之化合物不僅可用於成像技術，而且可在活體外及活體內測定中用於定位及定量組織樣品(包括人類)中之TAM激酶，並且藉由抑制標記之化合物之結合來鑑定TAM激酶配位體。因此，本發明包括含有此類標記之化合物之TAM激酶測定。
本發明進一步包括本文所提供之同位素標記之化合物。「同位素標記的」或「放射性標記的」化合物係本文所提供之如下化合物，其中一或多個原子被原子質量或質量數不同於典型地在自然界中發現(亦即，天然存在)之原子質量或質量數之原子替換或取代。併入本發明放射性標記之化合物中之放射性核素將取決於該放射性標記之化合物之具體應用。例如，對於活體外TAM激酶標記及競爭測定，併入有 3H、 14C、 82Br、 125I、 131I或 35S之化合物通常係最有用的。對於放射成像應用， 11C、 18F、 125I、 123I、 124I、 131I、 75Br、 76Br或 77Br通常將最有用的。用於將放射性同位素併入有機化合物中之合成方法適用於本文所提供之化合物並且在此項技術中已熟知。
本文所提供之放射性標記之化合物可以用於篩選測定以鑑定/評估化合物。一般而言，可以評估新合成或鑑定之化合物(亦即，測試化合物)減少本申請案之放射性標記之化合物與TAM激酶結合之能力。因此，測試化合物與放射性標記之化合物競爭結合TAM激酶之能力與其結合親和力直接相關。 實例
出於說明之目的，包括了以下實例。然而，應理解，此等實例並不限制本發明，並且僅意在表明實施本發明之方法。熟習此項技術者將認識到，可以容易地使所描述之化學反應適於製備本發明之多種其他化合物，並且用於製備本發明之化合物之可替代方法被視作處於本發明之範圍內。例如，藉由對熟習此項技術者而言顯而易見之修飾，例如藉由適當地保護干擾基團、藉由利用此項技術中已知之除所描述之試劑及構建塊之外之其他合適試劑及構建塊及/或藉由對反應條件進行常規修飾，可以成功地合成根據本發明之非示例性化合物。可替代地，本文所揭示或此項技術中已知之其他反應將被認為適用於製備本發明之其他化合物。 實例 1 N-(4-{4- 胺基 -1-[1-(2- 甲基丙醯基 ) 哌啶 -4- 基 ]-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 基 } 苯基 )-2,4- 二側氧基 -1-( 丙 -2- 基 )-3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 1) 步驟 1. 3- 溴 -4- 氯 -1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶
向4-氯-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(5 g，32.558 mmol)於CH 3CN (50 mL)中之溶液中添加NBS (6.4 g，35.8 mmol)。在60℃下攪拌反應物隔夜。LC-MS顯示反應完成。反應混合物用乙酸乙酯萃取，用H 2O及鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在真空中濃縮，得到呈白色固體狀之目標產物3-溴-4-氯-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(7 g，30.1 mmol，92.5%)。LC/MS (ESI): m/z 232(M+H) +。 步驟 2. 3- 溴 -N-[(2,4- 二甲氧基苯基 ) 甲基 ]-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -4- 胺
向3-溴-4-氯-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(7 g，30.1 mmol)於CH 3CN (80 mL)中之溶液中添加2,4-二甲氧基苯甲胺(23 mL，150 mmol)及DIPEA (19.5 g，150 mmol)。在80℃下攪拌反應物隔夜。LC-MS顯示反應完成。反應物用EA及水稀釋，接著用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由急驟管柱層析法(矽膠，0%至100%乙酸乙酯/石油醚)進行純化，得到呈白色固體狀之3-溴-N-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺(5.2 g，14.3 mmol，47.6%)。LC/MS (ESI): m/z 363(M+H) +。 步驟 3. 1-[4-(3- 溴 -4-{[(2,4- 二甲氧基苯基 ) 甲基 ] 胺基 }-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -1- 基 ) 哌啶 -1- 基 ]-2- 甲基丙 -1- 酮
向3-溴-N-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4-胺(200 mg，0.551 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液中添加甲磺酸1-(2-甲基丙醯基)哌啶-4-基酯(206 mg，0.826 mmol)及Cs 2CO 3(359 mg，1.10 mmol)。在100℃下攪拌物隔夜。LC-MS顯示反應完成。反應物用EA及水稀釋，接著用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由急驟管柱層析法(矽膠，0%至100%乙酸乙酯/石油醚)進行純化，得到呈白色油狀之1-[4-(3-溴-4-{[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基}-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)哌啶-1-基]-2-甲基丙-1-酮(185 mg，0.358 mmol，65.1%)。LC/MS (ESI): m/z 516 (M+H) +。 步驟 4. 1-{4-[3-(4- 胺基苯基 )-4-{[(2,4- 二甲氧基苯基 ) 甲基 ] 胺基 }-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -1- 基 ] 哌啶 -1- 基 }-2- 甲基丙 -1- 酮
向1-[4-(3-溴-4-{[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基}-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)哌啶-1-基]-2-甲基丙-1-酮(160 mg，0.310 mmol)於二㗁烷(10 mL)中之溶液中添加4-(四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)苯胺(135.75 mg，0.620 mmol)、Pd(dppf)Cl 2(45.34 mg，0.062 mmol)及K 2CO 3(86 mg，0.620 mmol)。在100℃下在氮氣氛圍下攪拌物隔夜。LC-MS顯示反應完成。反應物用EA及水稀釋，接著用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由急驟管柱層析法(矽膠，0%至100%乙酸乙酯/石油醚)進行純化，得到呈橙色固體狀之目標產物1-{4-[3-(4-胺基苯基)-4-{[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基}-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]哌啶-1-基}-2-甲基丙-1-酮(140 mg，0.265 mmol，85.5%)。LC/MS (ESI): m/z 529(M+H) +。 步驟 5. N-[4-(4-{[(2,4- 二甲氧基苯基 ) 甲基 ] 胺基 }-1-[1-(2- 甲基丙醯基 ) 哌啶 -4- 基 ]-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 基 ) 苯基 ]-2,4- 二側氧基 -1-( 丙 -2- 基 )-3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺
向1-{4-[3-(4-胺基苯基)-4-{[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基}-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]哌啶-1-基}-2-甲基丙-1-酮(140 mg，0.265 mmol)於DMF (8 mL)中之溶液中添加2,4-二側氧基-1-(丙-2-基)-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酸(87.47 mg，0.318 mmol)、HATU (201 mg，0.530 mmol)及DIPEA (170.81 mg，1.324 mmol)，並且在室溫下攪拌反應物隔夜。LC-MS顯示反應完成。反應物用EA及水稀釋，接著用水及鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由急驟管柱層析法(矽膠，0%至10% MeOH/DCM)進行純化，得到呈白色固體狀之N-[4-(4-{[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基}-1-[1-(2-甲基丙醯基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-基)苯基]-2,4-二側氧基-1-(丙-2-基)-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺(200 mg，0.254 mmol，96.1%)。LC/MS (ESI): m/z 786 (M+H) +。 步驟 6. N-(4-{4- 胺基 -1-[1-(2- 甲基丙醯基 ) 哌啶 4- 基 ]-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 基 } 苯基 )-2,4- 二側氧基 -1-( 丙 -2- 基 )-3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺
向N-[4-(4-{[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺基}-1-[1-(2-甲基丙醯基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-基)苯基]-2,4-二側氧基-1-(丙-2-基)-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺(200 mg，0.254 mmol)於TFA (7 mL)中之溶液中添加Et 3SiH (0.123 mL，0.763 mmol)。在室溫下攪拌反應物1小時。LC-MS顯示反應完成。反應物用EA稀釋，接著用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。殘餘物藉由急驟管柱層析法(矽膠，0%至10% MeOH/DCM)進行純化，得到粗產物。接著藉由製備型HPLC (C18，10%至95%，MeCN/含有0.1% HCOOH之H 2O)純化粗產物，得到N-(4-{4-胺基-1-[1-(2-甲基丙醯基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-基}苯基)-2,4-二側氧基-1-(丙-2-基)-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺(60 mg，0.094 mmol，37.1%)。LC/MS (ESI): m/z 636(M+H) +。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.89 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.64 (d, J= 4.6 Hz, 1H), 8.12-8.00 (m, 1H), 7.84 (d, J= 8.5 Hz, 2H), 7.77 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 8.5 Hz, 2H), 7.57 (t, J= 6.7 Hz, 2H), 6.98 (d, J= 6.2 Hz, 1H), 5.88 (s, 2H), 4.94 – 4.64 (m, 2H), 4.56 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 4.11 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 3.28 – 3.03 (m, 1H), 2.94 (dt, J= 13.3, 6.6 Hz, 1H), 2.79 (t, J= 12.3 Hz, 1H), 1.99 (d, J= 23.0 Hz, 3H), 1.89 (s, 1H), 1.45 (d, J= 6.7 Hz, 6H), 1.03 (s, 6H)。
遵循實例1中之程序，亦合成以下化合物：
化合物編號 結構 名稱 m/z [M+1] +
2    N-(4-(4-胺基-1-(1-異丁醯基哌啶-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-基)苯基)-4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-甲醯胺 638.8
3    N-(4-(4-胺基-1-(1-異丁醯基哌啶-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-基)苯基)-N-(4-氟苯基)環丙烷-1,1-二甲醯胺 583.8
4    N-(4-(4-胺基-1-(1-異丁醯基哌啶-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-基)苯基)-3-(4-氟苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺 653.3
5    N-(4-(4-胺基-1-(1-異丁醯基哌啶-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-基)苯基)-5-(4-氟苯基)-1-異丙基-6-甲基-4-側氧基-1,4-二氫吡啶-3-甲醯胺 650.3
化合物 2 ：
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ = 10.43 (s, 1H), 7.84 (dd, J= 4.6, 8.2 Hz, 3H), 7.76 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 7.57 (d, J= 8.6 Hz, 2H), 7.50 - 7.44 (m, 2H), 7.41 - 7.33 (m, 2H), 6.96 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 6.51 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 5.82 (br s, 2H), 4.90 - 4.77 (m, 1H), 4.56 (br d, J= 12.0 Hz, 1H), 4.25 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 4.19 - 4.04 (m, 1H), 3.28 - 3.28 (m, 1H), 2.94 (td, J= 6.7, 13.5 Hz, 1H), 2.85 - 2.73 (m, 1H), 2.10 - 1.81 (m, 4H), 1.30 (t, J= 7.0 Hz, 3H), 1.10 - 0.97 (m, 6H)。
化合物 3 ：
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ = 10.27 (s, 1H), 10.01 (s, 1H), 7.80 (d, J= 8.6 Hz, 2H), 7.76 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 7.67 - 7.61 (m, 2H), 7.57 (d, J= 8.6 Hz, 2H), 7.18 - 7.11 (m, 2H), 6.96 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 5.79 (br s, 2H), 4.89 - 4.77 (m, 1H), 4.56 (br d, J= 12.3 Hz, 1H), 4.11 (br d, J= 11.1 Hz, 1H), 3.28 - 3.27 (m, 1H), 2.93 (td, J= 6.8, 13.5 Hz, 1H), 2.78 (br t, J= 12.4 Hz, 1H), 2.12 - 1.78 (m, 4H), 1.48 (s, 4H), 1.02 (br s, 6H)。
化合物 4 ：
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ = 11.00 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 7.81 (br d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.75 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 7.60 (br d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.46 - 7.39 (m, 2H), 7.38 - 7.32 (m, 2H), 6.95 (d, J= 6.2 Hz, 1H), 5.77 (br s, 2H), 4.90 - 4.70 (m, 2H), 4.53 (br d, J= 11.9 Hz, 1H), 4.09 (br d, J= 13.0 Hz, 1H), 3.32 - 3.20 (m, 1H), 2.98 - 2.87 (m, 1H), 2.84 - 2.72 (m, 1H), 2.06 - 1.91 (m, 3H), 1.91 - 1.79 (m, 1H), 1.47 - 1.35 (m, 6H), 1.07 - 0.95 (m, 6H)。
化合物 5 ：
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.07 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.85 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.77 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.28 (d, J = 7.4 Hz, 4H), 6.96 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 5.81 (s, 2H), 4.80 (dd, J = 13.3, 6.7 Hz, 2H), 4.56 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 4.11 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 2.94 (dt, J = 13.5, 6.7 Hz, 1H), 2.79 (t, J = 11.8 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.06 – 1.78 (m, 4H), 1.52 (d, J = 6.6 Hz, 6H), 1.24 (s, 1H), 1.03 (s, 6H)。 實例 2 N-(4-(4- 胺基 -1-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 基 )-3- 氟苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 6) 步驟 1. 1-(4-(3-(4- 胺基 -2- 氟苯基 )-4-((2,4- 二甲氧基苯甲基 ) 胺基 )-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -1- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
在N2下向1-[4-[3-溴-4-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基胺基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-1-哌啶基]-2-甲基-丙-1-酮(30 mg，58.09 μmol)於二㗁烷(4 mL)及H 2O (1 mL)中之攪拌溶液中添加3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)苯胺(20.66 mg，87.14 μmol)、K 2CO 3(24.09 mg，174.27 μmol)及Pd(dppf)Cl 2(8.50 mg，11.62 μmol)。將混合物加熱至100℃並攪拌16小時。混合物用H 2O (10 mL)淬滅，用EtOAc(10 mL × 3)萃取。將合併之有機相濃縮，得到粗產物，將該粗產物用急驟管柱層析法(DCM/THF = 100%至50%)進行純化，得到呈黃色油狀之1-[4-[3-(4-胺基-2-氟-苯基)-4-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基胺基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-1-哌啶基]-2-甲基-丙-1-酮(30 mg，54.88 μmol，94.47%產率)。LC/MS (ESI): m/z 547.3(M+H) +。 步驟 2. N-(4-(4-((2,4- 二甲氧基苯甲基 ) 胺基 )-1-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 基 )-3- 氟苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺
向1-[4-[3-(4-胺基-2-氟苯基)-4-[(2,4-二甲氧基苯基)甲胺基]吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基]-1-哌啶基]-2-甲基-丙-1-酮(30 mg，54.88 μmol)及2,4-二側氧基-1-(丙-2-基)-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酸(18.13 mg，65.86 μmol)於DMF (3 mL)中之攪拌溶液中添加N-乙基-N-異丙基-丙-2-胺(28.37 mg，219.53 μmol)及HATU (31.30 mg，82.32 μmol)。將反應混合物在40℃下攪拌16小時。混合物用H 2O (20 mL)淬滅，用EtOAc (10 mL × 3)萃取。合併之有機相用Na 2SO 4乾燥並濃縮，得到粗產物，將該粗產物用急驟管柱層析法(DCM/THF = 100%至50%)進行純化，得到呈黃色油狀之N-(4-(4-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-1-(1-異丁醯基哌啶-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-基)-3-氟苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺(25 mg，31.02 μmol，56.53%產率)。LC/MS (ESI): m/z 804.4(M+H) +。 步驟 3. N-(4-(4- 胺基 -1-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 基 )-3- 氟苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺
向N-(4-(4-((2,4-二甲氧基苯甲基)胺基)-1-(1-異丁醯基哌啶-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-基)-3-氟苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺(25 mg，31.02 μmol)於DCM (2 mL)中之攪拌溶液中添加TFA (1 mL)及三乙基矽烷(10.82 mg，93.07 μmol，14.86 μL)。將混合物在20℃下攪拌16小時。將混合物用NaHCO 3飽和水溶液鹼化至pH = 8，用DCM (10 mL × 3)萃取。將合併之有機相濃縮，得到粗產物。將粗產物藉由製備型HPLC (C18，10%至95%，MeCN/含有0.1% HCOOH之H 2O)進行純化，得到N-(4-(4-胺基-1-(1-異丁醯基哌啶-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-基)-3-氟苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺(12 mg，18.34 μmol，59.12%產率，98%純度)。LC/MS (ESI): m/z 654.3(M+H) +。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ = 10.98 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.63 (dd, J= 1.7, 5.1 Hz, 1H), 8.05 (dt, J= 1.8, 7.8 Hz, 1H), 7.95 - 7.88 (m, 1H), 7.74 (d, J= 6.2 Hz, 1H), 7.59 - 7.53 (m, 2H), 7.52 - 7.43 (m, 2H), 6.96 (d, J= 6.2 Hz, 1H), 5.68 (br s, 2H), 4.92 - 4.69 (m, 2H), 4.52 (br d, J= 12.5 Hz, 1H), 4.09 (br d, J= 12.3 Hz, 1H), 3.33 - 3.20 (m, 2H), 2.91 (td, J= 6.7, 13.5 Hz, 1H), 2.78 (br t, J= 12.6 Hz, 1H), 2.03 - 1.91 (m, 3H), 1.89 - 1.75 (m, 1H), 1.42 (d, J= 6.7 Hz, 6H), 1.08 - 0.94 (m, 6H)。
遵循實例2中之程序，亦合成以下化合物：
化合物編號 結構 名稱 m/z [M+1] +
7 N-(4-(4-胺基-1-(1-異丁醯基哌啶-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-基)-3-氟苯基)-4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-甲醯胺 656.3
8    N-(4-(4-胺基-1-(1-異丁醯基哌啶-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-基)-2-氟苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺 654.3
9 N-(4-(4-胺基-1-(1-異丁醯基哌啶-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-基)-2-氟苯基)-4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-甲醯胺 656.3
10 N-(5-(4-胺基-1-(1-異丁醯基哌啶-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-基)吡啶-2-基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺 637.3
11 N-(5-(4-胺基-1-(1-異丁醯基哌啶-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-基)吡啶-2-基)-4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-甲醯胺 639.3
化合物 7 ：
1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ = 10.66 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.83 - 7.81 (m, 1H), 7.74 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 7.52 - 7.48 (m, 1H), 7.47 - 7.43 (m, 3H), 7.38 - 7.33 (m, 2H), 6.96 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 6.51 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 5.66 (br s, 2H), 4.87 - 4.78 (m, 1H), 4.58 - 4.47 (m, 1H), 4.24 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 4.15 - 4.04 (m, 1H), 3.27 (br s, 1H), 2.97 - 2.88 (m, 1H), 2.83 - 2.72 (m, 1H), 2.05 - 1.92 (m, 3H), 1.88 - 1.79 (m, 1H), 1.33 - 1.26 (m, 3H), 1.03 - 0.97 (m, 6H)。
化合物 8 ：
1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ = 11.16 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.65 - 8.61 (m, 1H), 8.54 (t, J= 8.4 Hz, 1H), 8.06 (dt, J= 1.9, 7.7 Hz, 1H), 7.76 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.58 - 7.51 (m, 3H), 7.51 - 7.47 (m, 1H), 6.97 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 5.85 (br s, 2H), 4.86 - 4.79 (m, 1H), 4.79 - 4.73 (m, 1H), 4.56 - 4.49 (m, 1H), 4.14 - 4.05 (m, 1H), 3.28 - 3.23 (m, 1H), 2.96 - 2.89 (m, 1H), 2.83 - 2.74 (m, 1H), 2.04 - 1.92 (m, 3H), 1.91 - 1.83 (m, 1H), 1.46 - 1.39 (m, 6H), 1.05 - 0.97 (m, 6H)。
化合物 9 ：
1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ = 10.97 (s, 1H), 8.40 - 8.33 (m, 1H), 7.92 - 7.85 (m, 1H), 7.80 - 7.72 (m, 1H), 7.52 - 7.43 (m, 4H), 7.40 - 7.33 (m, 2H), 7.00 - 6.93 (m, 1H), 6.57 - 6.51 (m, 1H), 5.88 - 5.79 (m, 2H), 4.88 - 4.76 (m, 1H), 4.58 - 4.49 (m, 1H), 4.31 - 4.22 (m, 2H), 4.15 - 4.05 (m, 1H), 3.31 - 3.25 (m, 1H), 2.96 - 2.89 (m, 1H), 2.83 - 2.73 (m, 1H), 2.06 - 1.93 (m, 3H), 1.91 - 1.82 (m, 1H), 1.38 - 1.30 (m, 3H), 1.05 - 0.96 (m, 6H)。
化合物 10 ：
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ = 11.29 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.63 (d, J= 3.9 Hz, 1H), 8.54 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 8.35 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 8.12 - 8.02 (m, 2H), 7.77 (d, J= 6.1 Hz, 1H), 7.59 - 7.53 (m, 2H), 6.98 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 5.87 (s, 2H), 4.88 - 4.80 (m, 1H), 4.80 - 4.73 (m, 1H), 4.57 - 4.50 (m, 1H), 2.96 - 2.87 (m, 2H), 2.84 - 2.72 (m, 2H), 2.07 - 1.95 (m, 3H), 1.92 - 1.81 (m, 1H), 1.48 - 1.39 (m, 6H), 1.05 - 0.96 (m, 6H)。 實例 3 N-(4-(8- 胺基 -3-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 咪唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -1- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 12) 步驟 1. 3- 溴 -8- 氯咪唑并 [1,5-a] 吡 𠯤
將化合物 12-1(0.900 g，5.86 mmol，1.00當量)於THF (10.0 mL)中之溶液冷卻至-78℃，在-78℃下逐滴添加n-BuLi (2.50 M，4.69 mL，2.00當量)並將混合物在-78℃下攪拌15分鐘。在30分鐘內添加BrCN (620 mg，5.86 mmol，431 uL，1.00當量)於THF (8.00 mL)中之溶液。在添加完成後，將混合物溫熱到25℃，並且另外攪拌30分鐘。LC-MS顯示偵測到一個具有所需質量之主峰。將反應混合物在0℃下藉由添加NH 4Cl飽和水溶液(20.0 mL)淬滅，接著用EtOAc (30.0 mL *2)萃取。合併之有機層用鹽水(50.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱層析法(SiO 2，石油醚:EtOAc = 3:1，石油醚:EtOAc = 1:0至0:1)進行純化。藉由H NMR證實，獲得呈白色固體狀之化合物 12-2(484 mg，2.08 mmol，35.53%產率)。
H NMR(400 MHz, DMSO- d 6) δ8.18 (dd, J 1= 4.0 Hz, J 2= 2.0 Hz, 1H), 7.89 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.54 (d, J= 4.0 Hz, 1H)。 步驟 2. 3- 溴 -8- 氯 -1- 碘咪唑并 [1,5-a] 吡 𠯤
在0℃下向化合物 12-2(484 mg，2.08 mmol，1.00當量)於DMF (5.00 mL)中之溶液中添加NIS (702 mg，3.12 mmol，1.50當量)。在60℃下攪拌混合物8小時。LC-MS顯示化合物 12-2被完全消耗並且偵測到一個具有所需質量之主峰。將反應混合物在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱層析法(SiO 2，石油醚:EtOAc = 1:1，石油醚:EtOAc = 1:0至0:1)進行純化。藉由H NMR證實，獲得呈淺黃色固體狀之化合物 12-3(370 mg，1.03 mmol，49.59%產率)。
H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ7.80 (d, J= 4.0 Hz, 1H), 7.46 (d, J= 4.0 Hz, 1H)。 步驟 3. 3- 溴 -1- 碘咪唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -8- 胺
將化合物 12-3(370 mg，1.03 mmol，1.00當量)及NH 3(26.3 mg，1.55 mmol，1.50當量)吸收到於i-PrOH (5.00 mL)中之微波管中。將密封管在微波下在100℃下加熱2小時。LC-MS顯示化合物 12-3被完全消耗並且偵測到一個具有所需質量之主峰。將反應混合物在減壓下濃縮，得到殘餘物。將粗產物與EtOAc (5.00 mL)在25℃下研磨30分鐘。藉由H NMR證實，獲得呈黃色固體狀之化合物 12-4(320 mg，粗產物)。
H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ7.50 (d, J= 4.0 Hz, 1H), 7.35 - 7.03 (m, 3H)。 步驟 4. 1-(4- 胺基苯基 )-3- 溴咪唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -8- 胺
將化合物 12-4(120 mg，354 μmol，1.00當量)、化合物 12-5(77.5 mg，354 μmol，1.00當量)、Pd(PPh 3) 4(40.9 mg，35.4 μmol，0.1.00當量)、K 2CO 3(102 mg，743 μmol，2.10當量)及H 2O (0.300 mL)於二㗁烷(1.20 mL)中之混合物脫氣並用N 2吹掃3次，接著在N 2氛圍下將混合物在90℃下攪拌4小時。LC-MS顯示化合物 12-4被完全消耗並且偵測到一個具有所需質量之主峰。將反應混合物過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，DCM:MeOH =10:1)進行純化。藉由LC-MS證實，獲得呈黃色固體狀之化合物 12-6(90.0 mg，287 μmol，81.1%產率，97.1%純度)。
LC-MS: (M+H) +: 305.9。 步驟 5. 1-(4-(8- 胺基 -1-(4- 胺基苯基 ) 咪唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -3- 基 )-3,6- 二氫吡啶 -1(2H)- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
將化合物 12-6(100 mg，328 μmol，1.00當量)、化合物 12-7(183 mg，657 μmol，2.00當量)、Pd(PPh 3) 4(37.9 mg，32.8 μmol，0.100當量)、K 2CO 3(136 mg，986 μmol，3.00當量)及H 2O (0.200 mL)於二㗁烷(1.00 mL)中之混合物脫氣並用N 2吹掃3次，接著在N 2氛圍下將混合物在90℃下攪拌8小時。LC-MS顯示化合物 12-6被完全消耗並且偵測到一個具有所需質量之主峰。將反應混合物在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，DCM:MeOH =10:1)進行純化。獲得呈黃色固體狀之化合物 12-8(60.0 mg，159 μmol，48.48%產率)。 步驟 6. 1-(4-(8- 胺基 -1-(4- 胺基苯基 ) 咪唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -3- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
在N 2氛圍下向化合物 12-8(60.0 mg，159 μmol，1.00 當量)於MeOH (1.00 mL)中之溶液中添加Pd/C (10.0%，60.0 mg)。將懸浮液脫氣並用H 2吹掃3次。在H 2(15 Psi)下，在25℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示化合物 12-8被完全消耗。將反應混合物過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之化合物 12-9(40.0 mg，粗產物)。 步驟 7. N-(4-(8- 胺基 -3-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 咪唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -1- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺
向化合物 12-8(35.0 mg，92.4 μmol，1.00當量)於Py (1.00 mL)中之溶液中添加EDCI (35.4 mg，184 μmol，2.00當量)。在25℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示化合物 12-8被完全消耗，並且偵測到所需質量。將反應混合物用DCM (15.0 mL)稀釋並用水(10.0 mL * 2)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。將粗產物與以5.00 mg規模運行之類似反應合併以進一步純化。將混合物藉由製備型TLC (SiO 2，DCM:MeOH = 10:1)進行純化並且藉由製備型HPLC (鹼性條件，管柱：Waters Xbridge C18 150 * 50 mm * 10 um；流動相：[水(NH 4HCO 3)- ACN]；B%：29%至59%，8分鐘)進行純化。如藉由H NMR、LC-MS、HPLC證實，獲得 化合物 12(5.49 mg，8.09 μmol，8.75%產率，93.7%純度)。
H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ10.9 (s, 1H), 8.79 - 8.66 (m, 2H), 7.99 (td, J 1= 8.0 Hz, J 2= 2.0 Hz, 1H), 7.79 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.59 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.54 - 7.49 (m, 1H), 7.39 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.26 - 7.24 (m, 1H), 7.00 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 5.06 - 4.92 (m, 1H), 4.72 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 4.14 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 3.32 - 3.17 (m, 2H), 2.89 - 2.80 (m, 2H), 2.19 - 2.01 (m, 3H), 1.97 - 1.82 (m, 1H), 1.50 (d, J= 8.0 Hz, 6H), 1.14 (d, J= 4.0 Hz, 6H)。
LC-MS (M+H) +: 636.2。
HPLC：純度：93.7%(254 nm)。 實例 4 N-(4-(1- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -8- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 15) 步驟 1. 6- 溴 -1- 氯吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤
向化合物 15-1(1.00 g，6.55 mmol，1.00當量)於MeCN (15.0 mL)中之溶液中添加NBS (1.28 g，7.21 mmol，1.10當量)，在90℃下攪拌混合物3小時。TLC顯示化合物 15-1被消耗並形成了新斑點。LC-MS顯示偵測到所需質量。在減壓下濃縮混合物，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱(SiO 2，PE:EtOAc = 1:0至50:1)進行純化。獲得呈白色固體狀之化合物 15-2(1.00 g，4.32 mmol，65.9%產率)。
H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ7.83 - 7.81 (m, 1H),7.46 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 6.99 - 6.92 (m, 2H)。 步驟 2. 6- 溴 -1- 氯 -8- 碘吡咯 [1,2-a] 吡 𠯤
向化合物 15-2(950 mg，4.10 mmol，1.00當量)於MeCN (10.0 mL)中之溶液中添加NIS (923 mg，4.10 mmol，1.00當量)，在80℃下攪拌混合物5小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。在減壓下濃縮混合物，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱(SiO 2，PE:EtOAc = 1:0至50:1)進行純化，得到呈白色固體狀之所需之產物化合物 15-3(1.30 g，3.64 mmol，88.6%產率)。
H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ8.25 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.49 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H)。 步驟 3. 6- 溴 -8- 碘 -N-(4- 甲氧基苯甲基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -1- 胺
將化合物 15-3(1.30 g，3.64 mmol，1.00當量)、PMBNH 2(1.50 g，10.9 mmol，1.41 mL，3.00當量)及DIEA (940 mg，7.28 mmol，1.27 mL，2.00當量)溶解於微波管中之NMP (13.0 mL)中。在微波下在100℃下加熱密封管8小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將反應混合物用水(50.0 mL)稀釋，用EtOAc (20.0 mL * 3)萃取，將合併之有機層用鹽水(40.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱(SiO 2，PE:EtOAc = 1:0至20:1)進行純化，得到呈白色固體狀之所需之產物化合物 15-4(1.15 g，2.51 mmol，69.0%產率，-純度)。
H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ7.41 - 7.35 (m, 3H), 7.24 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 6.91 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 6.76 (s, 1H), 6.46 (br s, 1H), 4.70 (d, J= 4.8 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H)。 步驟 4. 8-(4- 胺基苯基 )-6- 溴 -N-(4- 甲氧基苯甲基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -1- 胺
在N 2氛圍下向化合物 15-4(1.15 g，2.51 mmol，1.00當量)、化合物 15-5(495 mg，2.26 mmol，0.900當量)於二㗁烷(20.0 mL)、H 2O (2.00 mL)中之溶液中添加K 2CO 3(694 mg，5.02 mmol，2.00當量)、Pd(PPh 3) 4(290 mg，251 μmol，0.100當量)，在100℃下攪拌混合物10小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將混合物過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱(SiO 2，PE:EtOAc = 1:0至4:1)進行純化，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 15-6(550 mg，1.30 mmol，51.7%產率)。
H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ7.42 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.17 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.12 - 7.06 (m, 4H), 6.85 - 6.83 (m, 2H), 6.72 (s, 1H), 6.60 - 6.58 (m, 2H), 5.46(t, J= 5.6 Hz, 1H), 5.26 (s, 2H), 4.48 (d, J= 5.6 Hz, 2H), 3.72 (s, 3H)。 步驟 5. 1-(4-(8-(4- 胺基苯基 )-1-((4- 甲氧基苯甲基 ) 胺基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -6- 基 )-3,6- 二氫吡啶 -1(2H)- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
在N 2氛圍下向化合物 15-6(500 mg，1.18 mmol，1.00當量)、化合物 15-7(363 mg，1.30 mmol，1.10當量)於二㗁烷(10.0 mL)、H 2O (1.00 mL)中之溶液中添加K 2CO 3(327 mg，2.36 mmol，2.00當量)、Pd(PPh 3) 4(137 mg，118 μmol，0.100當量)，在90℃下攪拌12混合物小時。LC-MS顯示化合物 15-6被消耗，並且偵測到所需質量。將混合物過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (管柱：Phenomenex luna C18 150 * 40 mm * 15 um；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：17%至47%，10分鐘)進行純化，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 15-8(300 mg，605 μmol，51.2%產率，-純度)。
H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ7.69 (brs, 1H), 7.22 - 6.99 (m, 6H), 6.92 - 6.84 (m, 2H), 6.69 - 6.57 (m, 3H), 6.09 (brs, 1H), 5.64 (brs, 1H), 4.48 (d, J= 5.2 Hz, 2H), 4.28 (brs, 1H), 4.20 - 4.16 (m, 1H), 3.72 (s, 5H), 3.33 (brs, 2H), 2.96 - 2.88 (m, 2H), 1.04 - 1.02 (m, 6H)。 步驟 6. 1-(4-(8-(4- 胺基苯基 )-1-((4- 甲氧基苯甲基 ) 胺基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -6- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
向化合物 15-8(250 mg，504 μmol，1.00當量)於MeOH (5.00 mL)中之溶液中添加Pd/C (50.0 mg，10%純度)，接著脫氣並用H 2吹掃三次，將混合物在25℃下攪拌2小時(15 psi)。LC-MS顯示化合物 15-8被消耗，並且偵測到所需質量。將混合物過濾並在減壓下濃縮，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 15-9(250 mg，502 μmol，99.5%產率)。 步驟 7. 1-(4-(1- 胺基 -8-(4- 胺基苯基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -6- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
在0℃下向化合物 15-9(150 mg，301 μmol，1.00當量)於DCM (2.00 mL)中之溶液中添加TFA (3.08 g，27.0 mmol，2.00 mL，89.6當量)，將混合物在50℃下攪拌24小時。LC-MS顯示化合物 15-9被完全消耗，並且偵測到所需質量。將反應混合物用NaHCO 3飽和水溶液(20.0 mL)及水(10.0 mL)稀釋，用DCM (30.0 mL * 3)萃取，將合併之有機層用鹽水(50.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 15-10(100 mg，264 μmol，87.8%產率)。 步驟 8. N-(4-(1- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -8- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺
向化合物 15-11(65.6 mg，238 μmol，1.00當量)於DMF (1.00 mL)中之溶液中添加DIEA (154 mg，1.19 mmol，207 uL，5.00當量)、HATU (181 mg，477 μmol，2.00當量)並攪拌0.5小時，接著添加化合物 15-10(90.0 mg，238 μmol，1.00當量)，在25℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾混合物。藉由製備型HPLC (管柱：Phenomenex C18 75 * 30 mm * 3 um；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：18%至48%，7分鐘)純化濾液。殘餘物藉由製備型HPLC (管柱：Welch Ultimate XB-SiOH 250 * 50 * 10 um；流動相：[己烷-EtOH]；B%：30%至70%，15分鐘)進行純化，得到所需產物 化合物 15(7.46 mg，10.7 μmol，4.51%產率，91.4%純度)。
H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ10.82 (s, 1H), 8.77 (d, J= 3.6 Hz, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.12 - 8.10 (m, 1H), 7.79 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.64 - 7.61 (m, 1H), 7.50 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.38 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.31 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 6.88 - 6.87 (m, 1H), 6.62 (s, 1H), 5.00 - 4.85 (m, 2H), 4.12 (s, 1H), 3.26 - 3.07 (m, 2H), 2.87 - 2.71 (m, 2H), 2.11 - 2.05 (m, 2H), 1.72 - 1.67 (m, 2H), 1.52 (d, J= 6.8 Hz, 6H), 1.16 (d, J= 6.4 Hz, 6H)。
LC-MS (M+H) +: 635.5
HPLC：91.5%純度(215 nm) 實例 5 N-(4-(1- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -8- 基 ) 苯基 )-4- 乙氧基 -1-(4- 氟苯基 )-2- 側氧基 -1,2- 二氫吡啶 -3- 甲醯胺 ( 化合物 16) 步驟 1. 4- 乙氧基 -1-(4- 氟苯基 )-N-(4-(6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1-((4- 甲氧基苯甲基 ) 胺基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -8- 基 ) 苯基 )-2- 側氧基 -1,2- 二氫吡啶 -3- 甲醯胺
向化合物 16-2(55.1 mg，198 μmol，1.10當量)於DMF (1.00 mL)中之溶液中添加HATU (103 mg，271 μmol，1.50當量)、DIEA (117 mg，904 μmol，157 μL，5.00當量)，將混合物在25℃下攪拌0.5小時，接著添加化合物 16-1(90.0 mg，180 μmol，1.00當量)並在25℃下攪拌5小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將反應混合物用NaHCO 3飽和水溶液(5.00 mL)及水(5.00 mL)稀釋，用EtOAc (5.00 mL * 3)萃取，將合併之有機層用鹽水(10.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC進行純化，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 16-3(100 mg，132 μmol，73.0%產率)。 步驟 2. N-(4-(1- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -8- 基 ) 苯基 )-4- 乙氧基 -1-(4- 氟苯基 )-2- 側氧基 -1,2- 二氫吡啶 -3- 甲醯胺
向化合物 16-3(100 mg，132 μmol，1.00當量)於DCM (1.00 mL)中之溶液中添加TFA (1.54 g，13.5 mmol，1.00 mL，102當量)，將混合物在50℃下攪拌12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將反應混合物用NaHCO 3飽和水溶液(10.0 mL)及水(3.00 mL)稀釋，用DCM (5.00 mL * 3)萃取，將合併之有機層用鹽水(10.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (管柱：Phenomenex luna C18 150 * 25 mm * 10 um；流動相：[水(FA)- ACN]；B%：65%至95%，2分鐘)進行純化，得到所需產物 化合物 16(23.87 mg，36.9 μmol，27.98%產率，98.6%純度)。
H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ11.37 (s, 1H), 7.76 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.50 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.40 - 7.36 (m, 4H), 7.24 - 7.22 (m, 2H), 7.07 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 6.45 (s, 1H), 6.36 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 5.06 (brs, 1H), 4.82 (d, J= 13.2 Hz, 1H), 4.39 - 4.33 (m, 2H), 4.10 (d, J= 13.2 Hz, 1H), 3.23 (t, J= 12.8 Hz, 1H), 3.10 - 3.05 (m, 1H), 2.89 - 2.82 (m, 1H), 2.78 - 2.71 (m, 1H), 2.15 - 2.09 (m, 2H), 1.70 - 1.65 (m, 2H), 1.59 (t, J= 6.4 Hz, 6H), 1.16 (d, J= 6.0 Hz, 6H)。
LC-MS (M+H) +: 637.7。
HPLC：98.6%純度(220 nm)。 實例 6 N-(4-(3- 胺基 -7-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [4,3-a] 吡啶 -5- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 17) 步驟 1. 4- 溴 -2- 氯 -6- 肼基吡啶
向化合物 17-1(12.8 g，56.5 mmol，1.00當量)於二㗁烷(130 mL)中之溶液中添加N 2H 4·H 2O (57.7 g，979 mmol，56.0 mL，85.0%純度，17.4當量)。將混合物在50℃下攪拌12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。TLC指示有新斑點。向混合物中添加水(60.0 mL)。將混合物用EtOAc (150 mL * 3)萃取。合併之有機層用鹽水(100 mL * 2)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (鹼性條件；管柱：Welch Ultimate XB - CN 250 * 70 * 10 um；流動相：[己烷 - EtOH(0.1% NH 3·H 2O)]；B%：1%至40%，15分鐘)進行純化。獲得呈粉色固體狀之 化合物 17-2(7.00 g，28.9 mmol，51.2%產率，91.9%純度)。H NMR (400 MHz, DMSO -d6): δ8.21 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.77 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 4.33 (s, 2H). LC-MS (M+H) +: 223.9。 步驟 2. (7- 溴 -5- 氯 -[1,2,4] 三唑并 [4,3-a] 吡啶 -3- 基 ) 胺基甲酸乙酯
向化合物 17-2(2.00 g，8.26 mmol，91.9%純度，1.00當量)於2-甲基四氫呋喃(30.0 mL)中之溶液中添加化合物 17-3(1.30 g，9.92 mmol，1.17 mL，1.20當量)，接著將混合物在20℃下攪拌1分鐘。TLC顯示起始材料被完全消耗。將混合物在減壓下濃縮。接著將混合物溶解於DCM (20.0 mL)中。並且向混合物中添加化合物 17-4(1.84 g，7.19 mmol，0.87當量)及TEA (919 mg，9.09 mmol，1.27 mL，1.10當量)，接著在20℃下攪拌1分鐘。TLC指示有新斑點。將混合物在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(SiO 2，PE:EtOAc = 1:0至100:51)進行純化。獲得呈黃色固體狀之 化合物 17-5(1.27 g，3.96 mmol，47.9%產率，99.5%純度)。
H NMR (400 MHz, CDCl 3): δ7.87 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.00 (d, J= 0.8 Hz, 1H), 4.28 - 4.23 (m, 2H), 1.30 - 1.27 (m, 3H). LC-MS (M+H) +: 320.9。 步驟 3. 1-(4-(3- 胺基 -5- 氯 -[1,2,4] 三唑并 [4,3-a] 吡啶 -7- 基 )-3,6- 二氫吡啶 -1(2H)- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
向化合物 17-5(900 mg，2.81 mmol，99.5%純度，1.00當量)、化合物 17-6(744 mg，2.66 mmol，0.95當量)於二㗁烷(7.50 mL)中之溶液中添加含Na 2CO 3(297 mg，2.81 mmol，1.00當量)之H 2O (1.50 mL)及Pd(PPh 3) 2Cl 2(196 mg，280 μmol，0.10當量)。將混合物溶解於微波管中。在微波下在120℃下加熱密封管4小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。TLC顯示有新斑點。過濾反應混合物並在減壓下濃縮過濾物，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC進行純化。獲得呈黃色固體狀之 化合物 17-7(410 mg，1.04 mmol，37.1%產率，81.3%純度)。
H NMR (400 MHz, CDCl 3): δ7.31 - 7.26 (m, 1H), 6.78 - 6.72 (m, 1H), 6.29 - 6.20 (m, 1H), 5.14 (s, 2H), 4.30 - 4.25 (m, 2H), 3.84 - 3.74 (m, 2H), 2.90 - 2.81 (m, 1H), 2.56 - 2.50 (m, 2H), 1.19 - 1.15 (m, 6H)。
LC-MS (M+H) +: 320.1。 步驟 4. 1-(4-(3- 胺基 -5-(4- 胺基苯基 )-[1,2,4] 三唑并 [4,3-a] 吡啶 -7- 基 )-3,6- 二氫吡啶 -1(2H)- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
向化合物 17-7(310 mg，788 μmol，81.3%純度，1.00當量)及化合物 17-8(345 mg，1.58 mmol，2.00當量)於二㗁烷(5.00 mL)中之溶液中添加含K 3PO 4(501 mg，2.36 mmol，3.00當量)之H 2O (1.00 mL)及XPHOS-PD-G2 (93.0 mg，118 μmol，0.15當量)。將混合物脫氣並用N 2吹掃3次，接著在100℃下攪拌12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。TLC指示有新斑點。過濾溶液並在減壓下濃縮過濾物，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱層析法(SiO 2，DCM:MeOH = 100:0至100: 3)進行純化。獲得呈黃色固體狀之 化合物 17-9(193 mg，500 μmol，63.4%產率，97.6%純度)。
H NMR (400 MHz, CDCl 3): δ7.50 - 7.48 (m, 1H), 7.39 - 7.27 (m, 2H), 6.82 - 6.77 (m, 2H), 6.61 - 6.58 (m, 1H), 6.32 - 6.23 (m, 1H), 4.42 - 4.40 (m, 2H), 4.31 - 4.25 (m, 2H), 3.88 - 3.87 (m, 1H), 3.79 - 3.76 (m, 1H), 2.94 - 2.91 (m, 1H), 2.64 - 2.57 (m, 2H), 1.22 - 1.17 (m, 6H)。
LC-MS (M+H) +: 377.1。 步驟 5. 1-(4-(3- 胺基 -5-(4- 胺基苯基 ) 咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -7- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
向化合物 17-9(193 mg，500 μmol，97.6%純度，1.00當量)於MeOH (3.00 mL)中之溶液中添加Pd/C (20.0 mg，10.0%純度)，脫氣並用H 2(15 psi)吹掃3次，接著在20℃下攪拌4小時。LC-MS顯示偵測到所需質量並且起始材料被消耗(約95.0%)。TLC指示有新斑點。TLC指示起始材料被完全消耗(KMnO 4)。過濾混合物且在減壓下濃縮過濾物，得到殘餘物。獲得呈淡黃色固體狀之化合物 17-10(120 mg，317 μmol，63.3%產率)。
H NMR (400 MHz, CDCl 3): δ7.28 (s, 1H), 7.26 - 7.24 (m, 2H), 6.80 - 6.78 (m, 2H), 6.32 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 4.85 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 4.26 (s, 2H), 4.11 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 3.19 - 3.13 (m, 1H), 2.89 - 2.82 (m, 1H), 2.78 - 2.71 (m, 1H), 2.67 - 2.61 (m, 1H), 2.02 - 1.95 (m, 2H), 1.65 - 1.59 (m, 2H), 1.18 - 1.15 (m, 6H)。 步驟 6. N-(4-(3- 胺基 -7-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [4,3-a] 吡啶 -5- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺
向化合物 17-10(50.0 mg，132 μmol，1.00當量)及化合物 17-11(36.3 mg，132 μmol，1.00當量)於吡啶(3.00 mL)中之溶液中添加EDCI (101 mg，528 μmol，4.00當量)。接著將混合物在20℃下攪拌1小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。在減壓下濃縮混合物，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC進行純化。如藉由H NMR及LC-MS證實，獲得 化合物 17(25.0 mg，38.2 μmol，28.9%產率，97.2%純度)。
H NMR (400 MHz, CDCl 3): δ10.98 (s, 1H), 8.75 - 8.71 (m, 2H), 8.02 - 7.97 (m, 1H), 7.82 - 7.80 (m, 2H), 7.53 - 7.50 (m, 1H), 7.45 - 7.38 (m, 3H), 7.28 - 7.27 (m, 1H), 6.36 (s, 1H), 5.01 - 4.97 (m, 1H), 4.85 - 4.82 (m, 1H), 4.09 (s, 3H), 3.18 - 3.12 (m, 1H), 2.87 - 2.81 (m, 1H), 2.78 - 2.72 (m, 1H), 2.66 - 2.60 (m, 1H), 2.01 - 1.95 (m, 2H), 1.64 - 1.58 (m, 2H), 1.52 - 1.51 (m, 6H), 1.14 - 1.13 (m, 6H)。
LC-MS (M+H) +: 636.4。
HPLC：純度：97.2%(220 nm)。 實例 7 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1- 甲基 -1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 18) 步驟 1. 2- 胺基 -4- 溴 -6- 氟苯甲腈
兩個反應平行進行。向化合物 18-1(12.5 g，57.3 mmol，1.00當量)於 i-PrOH (20.0 mL)中之溶液中添加NH 3·H 2O (43.1 g，344 mmol，47.3 mL，28.0%純度，6.00當量)。在80℃下攪拌混合物36小時。LC-MS顯示未偵測到所需質量。TLC指示起始材料被完全消耗並且有新斑點。合併兩次反應以進行後處理。將反應混合物倒入水(200 mL)中。過濾白色固體並用水洗滌。用EtOAc (200 mL)溶解固體。有機層經Na 2SO 4乾燥，接著在減壓下將溶劑蒸發。獲得呈白色固體狀之化合物 18-2(24.2 g，112 mmol，98.1%產率)。
H NMR (400 MHz, CDCl 3): δ6.73 (s, 1H), 6.68 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 4.62 (s, 2H)。 步驟 2. 4- 溴 -2- 氟 -6- 碘苯甲腈
在0℃下向化合物 18-2(4.00 g，18.6 mmol，1.00當量)於H 2O (40.0 mL)及HCl (12.0 M，40.0 mL，25.8當量)中之溶液添加含NaNO 2(1.93 g，27.9 mmol，1.50當量)之H 2O (10.0 mL)。接著向混合物中添加MeCN (30.0 mL)，在0℃下攪拌10分鐘。並且在0℃下向混合物中添加含KI (7.72 g，46.5 mmol，2.50當量)之H 2O (10.0 mL)。在20℃下攪拌混合物6小時。LC-MS顯示未偵測到所需質量。TLC顯示起始材料被完全消耗。TLC指示有新斑點。將反應混合物用EtOAc (100 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱層析法(SiO 2，PE:EtOAc = 100:0至100:3)進行純化。獲得呈白色固體狀之化合物 18-3(3.50 g，10.7 mmol，57.7%產率)。
H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ7.92 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.46 - 7.42 (m, 1H)。 步驟 3. 6- 溴 -4- 碘 -1H- 吲唑 -3- 胺
向化合物 18-3(3.00 g，9.21 mmol，1.00當量)於丁-1-醇(30.0 mL)中之溶液中添加N 2H 4·H 2O (1.04 g，20.34 mmol，1.00 mL，98.0%純度，2.21當量)。接著在110℃下攪拌混合物6小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將混合物過濾。並且將固體用MeOH (20.0 mL * 3)洗滌並在減壓下乾燥，得到殘餘物。獲得呈白色固體狀之化合物 18-4(2.60 g，7.42 mmol，80.6%產率，96.4%純度)。F NMR顯示在所需質量之結構中沒有F。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d6) δ11.91 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 5.12 (s, 2H). LC-M (M+H) +: 337.9。 步驟 4. 2-(6- 溴 -4- 碘 -1H- 吲唑 -3- 基 ) 異二氫吲哚 -1,3- 二酮
向化合物 18-4(2.00 g，5.71 mmol，96.4%純度，1.00當量)於DMF (20.0 mL)中之溶液中添加化合物 18-5(1.27 g，8.56 mmol，1.50當量)。接著將混合物在140℃下攪拌4小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。混合物可以直接純化。將混合物藉由製備型HPLC進行純化。獲得呈灰白色固體狀之化合物 18-6(1.62 g，3.16 mmol，55.2%產率，91.1%純度)。
H NMR (400 MHz, DMSO -d6) δ13.97 (s, 1H), 8.11 - 8.10 (m, 2H), 8.00 - 7.99 (m, 2H), 7.97 - 7.96 (m, 1H), 7.80 (s, 1H)。
LC-MS: (M+H) +: 467.9。
HPLC：純度：97.0%(220 nm)。 步驟 5. 2-(6- 溴 -4- 碘 -1- 甲基 -1H- 吲唑 -3- 基 ) 異二氫吲哚 -1,3- 二酮
在0℃下向化合物 18-6(500 mg，974 μmol，91.1%純度，1.00當量)於DMF (5.00 mL)中之溶液中添加K 2CO 3(134 mg，974 μmol，1.00當量)及MeI (138 mg，976 μmol，60.7 uL，1.00當量)。接著在N 2氛圍下在20℃下攪拌混合物3小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將混合物倒入水(20.0 mL)中並過濾。接著用水(10.0 mL * 3)洗滌固體。獲得呈白色固體狀之化合物 18-7(600 mg，粗產物)。 步驟 6. 6- 溴 -4- 碘 -1- 甲基 -1H- 吲唑 -3- 胺
向化合物 18-7(600 mg，1.24 mmol，1.00當量)於MeOH(5.00 mL)及DCM(5.00 mL)中之溶液中添加N 2H 4·H 2O (1.50 g，29.3 mmol，1.46 mL，98.0%純度，23.5當量)。在20℃下攪拌混合物2小時。TLC指示起始材料被完全消耗。LC-MS顯示偵測到所需質量。混合物用水(10.0 mL)洗滌，用EtOAc (5.00 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱層析法(SiO 2，PE:EtOAc = 100:20至100:40)進行純化。獲得呈白色固體狀之化合物 18-8(300 mg，841 μmol，67.6%產率，98.7%純度)。
H NMR (400 MHz, CDCl 3): δ7.59 - 7.58 (m, 1H), 7.42 (s, 1H), 4.56 (s, 2H), 3.86 (s, 3H). LC-MS (M+H) +: 351.9。 步驟 7. 4-(4- 胺基苯基 )-6- 溴 -1- 甲基 -1H- 吲唑 -3- 胺
向化合物 18-8(185 mg，519 μmol，98.7%純度，1.00當量)及化合物 18-9(102 mg，467 μmol，0.90當量)於THF (6.00 mL)中之溶液中添加含K 2CO 3(150 mg，1.09 mmol，2.10當量)之H 2O (1.50 mL)及Pd(PPh 3) 4(59.9 mg，51.9 μmol，0.10當量)。將混合物脫氣並用N 2吹掃3次，接著在80℃下攪拌8小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。TLC指示有新斑點。將混合物用EtOAc (10.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC進行純化。獲得呈灰白色固體狀之化合物 18-10(110 mg，326 μmol，62.9%產率，94.1%純度)。
H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ7.32 - 7.31 (m, 2H), 7.28 - 7.27 (m, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.80 - 6.78 (m, 2H), 3.82 (s, 3H)。
LC-MS (M+H) +: 318.9。 步驟 8. 1-(4-(3- 胺基 -4-(4- 胺基苯基 )-1- 甲基 -1H- 吲唑 -6- 基 )-3,6- 二氫吡啶 -1(2H)- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
在N 2氛圍下向化合物 18-10(110 mg，326 μmol，94.1%純度，1.00當量)及化合物 18-11(182 mg，652 μmol，2.00當量)於二㗁烷(12.0 mL)中之溶液中添加含K 2CO 3(90.2 mg，652 μmol，2.00當量)之H 2O (3.00 mL)及Pd(PPh 3) 4(37.7 mg，32.6 μmol，0.10當量)。接著將混合物在90℃下攪拌12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。TLC指示有新斑點。將混合物倒入水(10.0 mL)中並用EtOAc (10.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC進行純化。獲得呈黃色固體狀之化合物 18-12(141 mg，粗產物)。
H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ7.33 - 7.31 (m, 2H), 7.06 (s, 1H), 6.93 - 6.92 (m, 1H), 6.81 - 6.79 (m, 2H), 6.22 - 6.15 (m, 1H), 4.27 - 4.23 (m, 2H), 3.87 - 3.85 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.79 - 3.74 (m, 1H), 2.92 - 2.87 (m, 1H), 2.69 - 2.64 (m, 2H), 1.16 - 1.13 (m, 6H)。 步驟 9. 1-(4-(3- 胺基 -4-(4- 胺基苯基 )-1- 甲基 -1H- 吲唑 -6- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
向化合物 18-12(141 mg，362 μmol，1.00當量)於MeOH (3.00 mL)中之溶液中添加Pd/C (14.0 mg，10%純度)，脫氣並用H 2(15 psi)吹掃3次，接著在20℃下攪拌2小時。接著在20℃下攪拌混合物4小時。LC-MS指示起始材料被完全消耗並且偵測到所需質量。過濾混合物且在減壓下濃縮過濾物，得到殘餘物。獲得呈白色固體狀之化合物 18-13(65.0 mg，162 μmol，44.9%產率，98.0%純度)。
H NMR (400 MHz, CDCl 3): δ7.33 - 7.31 (m, 2H), 6.93 (s, 1H), 6.81 - 6.78 (m, 2H), 6.72 (s, 1H), 4.88 - 4.85 (m, 1H), 4.11 - 4.08 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.20 - 3.17 (m, 1H), 2.90 - 2.85 (m, 2H), 2.66 - 2.64 (m, 1H), 2.03 - 2.00 (m, 2H), 1.73 - 1.71 (m, 2H), 1.17 - 1.12 (m, 6H)。
LC-MS (M+H) +: 392.3 步驟 10. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1- 甲基 -1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺
向化合物 18-13(25.5 mg，63.8 μmol，98.0%純度，1.00當量)及化合物 18-14(16.7 mg，60.6 μmol，0.95當量)於吡啶(2.00 mL)中之溶液中添加EDCI (48.9 mg，255 μmol，4.00當量)。接著在20℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。在減壓下濃縮混合物，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC進行純化。如藉由H NMR及LC-MS證實，獲得 化合物 18(8.00 mg，12.0 μmol，18.8%產率，97.6%純度)。
H NMR: (400 MHz, CDCl 3) δ10.83 (s, 1H), 8.76 - 8.75 (m, 1H), 8.72 (s, 1H), 7.99 - 7.98 (m, 1H), 7.77 - 7.75 (m, 2H), 7.52 - 7.48 (m, 3H), 7.41 - 7.39 (m, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 5.02 - 4.95 (m, 1H), 4.88 - 4.85 (m, 1H), 4.12 - 4.09 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.78 (s, 2H), 3.20 - 3.17 (m, 1H), 2.89 - 2.83 (m, 2H), 2.66 - 2.64 (m, 1H), 2.05 - 2.01 (m, 2H), 1.73 - 1.70 (m, 2H), 1.52 - 1.50 (m, 6H), 1.19 - 1.17 (m, 6H)。
LC-MS (M+H) +: 649.4。
HPLC：純度：97.6% (220 nm)。 實例 8 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-[1,2,3] 三唑并 [1,5-a] 吡啶 -4- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 23) 步驟 1. 2-(5- 溴 -3- 氯吡啶 -2- 基 ) 丙二酸二乙酯
向化合物 23-1(10.0 g，47.5 mmol，1.00當量)、化合物 23-2(15.2 g，95.0 mmol，14.3 mL，2.00當量)於DMSO (100 mL)中之溶液中添加Cs 2CO 3(30.9 g，95.0 mmol，2.00當量)，將混合物在100℃下攪拌2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將混合物過濾並用水(300 mL)稀釋，用EtOAc (100 mL * 3)萃取，將合併之有機層用鹽水(200 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀之所需產物化合物 23-3(16.0 g，45.6 mmol，96.0%產率)。
H NMR: (400 MHz, CDCl 3) δ8.55 (d, J= 2.0 Hz, 1H),7.89 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 5.14 (s, 1H), 4.31 - 4.26 (m, 4H), 1.28 (t, J= 7.2 Hz, 6H)。 步驟 2. 2-(5- 溴 -3- 氯吡啶 -2- 基 ) 乙酸乙酯
向化合物 23-3(8.00 g，22.8 mmol，1.00當量)於DMSO (160 mL)中之溶液中添加LiCl (1.93 g，45.6 mmol，2.00當量)、H 2O (411 mg，22.8 mmol，411 μL，1.00當量)，在100℃下攪拌混合物4小時。將混合物加熱至120℃，保持10小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(500 mL)稀釋，用EtOAc (150 mL * 3)萃取，合併之有機層用鹽水(300 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到呈黃色油狀之所需產物乙基化合物 23- 4(6.00 g，21.5 mmol，94.4%產率)。
H NMR: (400 MHz, CDCl 3) δ8.52 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.87 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 4.21 - 4.19 (m, 2H), 3.96 (s, 2H), 1.28 - 1.26 (m, 3H)。 步驟 3. 6- 溴 -4- 氯 -[1,2,3] 三唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲酸乙酯
在0℃下在N 2氛圍下向化合物 23-4(5.00 g，17.9 mmol，1.00當量)於ACN (50.0 mL)中之溶液中添加DBU (9.57 g，62.8 mmol，9.47 mL，3.50當量)，接著在0℃下分批添加化合物 23- 5(6.47 g，26.9 mmol，1.50當量)，將混合物在0℃下攪拌4小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將反應混合物用水(50.0 mL)稀釋，用EtOAc (30.0 mL * 3)萃取，合併之有機層用鹽水(70.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱(SiO 2，PE:EtOAc = 1:0至10:1，板1，PE:EtOAc = 5:1，R f= 0.3)進行純化，得到呈淡黃色固體狀之所需產物化合物 23- 6(1.30 g，4.27 mmol，23.7%產率)。 步驟 4. 4- 氯 -6-(1- 異丁醯基 -1,2,3,6- 四氫吡啶 -4- 基 )-[1,2,3] 三唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲酸乙酯
在N 2氛圍下向化合物 23- 6(700 mg，2.30 mmol，1.00當量)、化合物 23- 7(674 mg，2.41 mmol，1.05當量)於二㗁烷(10.0 mL)、H 2O (2.00 mL)中之溶液中添加Pd(PPh 3) 4(265 mg，229 μmol，0.100當量)、Na 2CO 3(487 mg，4.60 mmol，2.00當量)，在90℃下加熱混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將殘餘物過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱(SiO 2，PE:EtOAc = 100:1至1:1，板1，PE:EtOAc = 1:1)進行純化，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 23- 8(750 mg，1.99 mmol，86.5%產率)。
H NMR: (400 MHz, CDCl 3) δ8.69 - 8.66 (m, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.39 - 6.30 (m, 1H), 4.54 - 4.49 (m, 2H), 4.33 - 4.28 (m, 2H), 3.89 - 3.79 (m, 2H), 2.90 - 2.80 (m, 1H), 2.61 - 2.55 (m, 2H), 1.48 (t, J= 7.2 Hz, 3H), 1.19 - 1.16 (m, 6H)。 步驟 5. 6-(1- 異丁醯基 -1,2,3,6- 四氫吡啶 -4- 基 )-4-(4- 硝基苯基 )-[1,2,3] 三唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲酸乙酯
在N 2氛圍下向化合物 23- 8(740 mg，1.96 mmol，1.00當量)、化合物 23- 9(393 mg，2.36 mmol，1.20當量)於二㗁烷(10.0 mL)、H 2O (2.00 mL)中之溶液中添加Na 2CO 3(624 mg，5.89 mmol，3.00當量)、Pd(PPh 3) 4(227 mg，196 μmol，0.100當量)，在80℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將混合物過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱(SiO 2，PE:EtOAc = 10:1至0:1，板1，PE:EtOAc = 0:1，R f= 0.4)進行純化，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 23- 10(650 mg，1.40 mmol，71.4%產率)。
H NMR: (400 MHz, CDCl 3) δ8.85 - 8.82 (m, 1H), 8.34 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 7.58 - 7.55 (m, 3H), 6.43 - 6.34 (m, 1H), 4.34 - 4.29 (m, 2H), 4.20 - 4.15 (m, 2H), 3.91 - 3.82 (m, 2H), 2.92 - 2.82 (m, 1H), 2.68 - 2.62 (m, 2H), 1.28 - 1.16 (m, 9H)。 步驟 6. 4-(4- 胺基苯基 )-6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-[1,2,3] 三唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲酸乙酯
向化合物 23-10(190 mg，410 μmol，1.00當量)於DCM (2.00 mL)、THF (2.00 mL)中之溶液中添加Pd/C (100 mg，10%純度)，接著脫氣並用H 2吹掃三次，在20℃下攪拌混合物5小時(15 psi)。LC-MS顯示偵測到所需質量。將混合物過濾並濃縮，得到呈白色固體狀之所需產物化合物 23-11(150 mg，344 μmol，84.0%產率)。 步驟 7. 6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-4-(4-(1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺基 ) 苯基 )-[1,2,3] 三唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲酸乙酯
向化合物 23-11(150 mg，344 μmol，1.00當量)、化合物 23-12(114 mg，413 μmol，1.20當量)於DMF (2.00 mL)中之溶液中添加DIEA (222 mg，1.72 mmol，299 uL，5.00當量)、HATU (262 mg，688 μmol，2.00當量)，在20℃下攪拌混合物5小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用NaHCO 3飽和水溶液(3.00 mL)及水(3.00 mL)稀釋，用DCM(10.0 mL * 3)萃取，合併之有機層用水(20.0 mL * 2)、鹽水(20.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (板1，DCM:MeOH = 10:1，R f= 0.6)進行純化，得到呈白色固體狀之所需產物化合物 23-13(170 mg，245 μmol，71.2%產率)。
H NMR: (400 MHz, CDCl 3) δ10.88 (s, 1H), 8.76 - 8.74 (m, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.63 (brs, 1H), 8.01 - 7.87 (m, 1H), 7.76 - 7.74 (m, 2H), 7.53 - 7.49 (m, 1H), 7.43 - 7.32 (m, 4H), 5.02 - 4.95 (m, 1H), 4.93 - 4.87 (m, 1H), 4.17 - 4.12 (m, 1H), 4.10 - 4.05 (m, 2H), 3.20 (t, J= 12.4 Hz, 1H), 2.67 (t, J= 12.4 Hz, 1H), 2.10 - 2.03 (m, 2H), 1.74 - 1.67 (m, 2H), 1.51 (d, J= 6.8 Hz, 6H), 1.18 - 1.14 (m, 6H), 1.06 (t, J= 7.2 Hz, 3H)。 步驟 8. 6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-4-(4-(1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺基 ) 苯基 )-[1,2,3] 三唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲酸
向化合物 23-13(70.0 mg，101 μmol，1.00當量)於甲苯(2.50 mL)中之溶液中添加(Bu 3Sn) 2O (120 mg，202 μmol，103 μL，2.00當量)，在110℃下攪拌混合物24小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用KF飽和水溶液(3.00 mL)及水(3.00 mL)稀釋，用DCM (5.00 mL * 3)萃取，合併之有機層用鹽水(10.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，板1，DCM:MeOH = 10:1，R f= 0.3)進行純化，得到呈白色固體狀之所需產物化合物 23-14(60.0 mg，90.2 μmol，89.3%產率)。 步驟 9. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-[1,2,3] 三唑并 [1,5-a] 吡啶 -4- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺
向化合物 23-14(40.0 mg，60.1 μmol，1.00當量)於甲苯(1.00 mL)中之溶液中添加DPPA (24.8 mg，90.2 μmol，19.5 μL，1.50當量)、TEA (18.2 mg，180 μmol，25.1 μL，3.00當量)，在20℃下攪拌混合物12小時，接著加熱至35℃，保持6小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。濃縮混合物以移除溶劑。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，板1，DCM:MeOH = 10:1，R f= 0.65)進行純化。殘餘物藉由製備型HPLC (管柱：Waters Xbridge 150 * 25 mm * 5 um；流動相：[水(NH 4HCO 3)- ACN]；B%：32%至62%，9分鐘)進行純化，得到所需產物化合物 23(2.10 mg，3.10 μmol，5.15%產率，93.8%純度)，如藉由H NMR，LC-MS及HPLC證實。
H NMR: (400 MHz, CDCl 3) δ10.90 (s, 1H), 8.76 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.01 - 7.97 (m, 1H), 7.81 - 7.79 (m, 2H), 7.53 - 7.49 (m, 1H), 7.48 - 7.45 (m, 2H), 7.41 - 7.38 (m, 1H), 6.73 (s, 1H), 5.02 - 4.95 (m, 1H), 4.88 - 4.84 (m, 1H), 4.12 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 3.70 (s, 2H), 3.17 (t, J=13.6 Hz, 1H), 2.88 - 2.77 (m, 2H), 2.68 - 2.62 (m, 1H), 2.07 - 1.99 (m, 2H), 1.70 - 1.65 (m, 2H), 1.51 (d, J= 6.8 Hz, 6H), 1.16 (brs, 6H)。
LC-MS (M+H) +: 636.5
HPLC：93.8%純度(220 nm) 實例 9 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -4- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 24) 步驟 1. 2- 肼基 -4- 碘菸腈
向化合物 24-1(25.0 g，94.5 mmol，1.00當量)於MeOH (100 mL)中之溶液中添加N 2H 4·H 2O (48.1 g，817 mmol，46.7 mL，85.0%純度，8.65當量)。將混合物在20℃下攪拌0.5小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將反應混合物過濾。濾餅用MeOH (100 mL)洗滌，接著濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之化合物 24-2及化合物 24-2A(混合物，15.0 g，粗產物)。 步驟 2. 4- 碘 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -3- 胺
向化合物 24-2及化合物 24-2A(混合物，15.0 g，粗產物)於DCM (100 mL)及茴香醚(10.0 mL)中之溶液中添加TFA (15.0 g，131 mmol，9.74 mL，3.17當量)。在25℃下攪拌混合物0.5小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。濃縮反應混合物，得到殘餘物。藉由NH 3·H 2O將殘餘物之pH調節至8，接著過濾。將濾餅在減壓下濃縮，得到殘餘物。
殘餘物藉由製備型HPLC (FA條件；管柱：Phenomenex luna C18 (250 * 70 mm，10 um)；流動相：[水(FA)- ACN]；B%：0%至30%，21分鐘)進行純化。獲得呈黃色固體狀之化合物 24-3(4.80 g，18.4 mmol，44.4%產率)。藉由H NMR證實結構。獲得呈黃色固體狀之化合物 24-3A(7.00 g，41.5 mmol，100%產率)。藉由H NMR證實結構。
化合物24-3之H NMR：(400 MHz, DMSO- d6) δ12.39 (brs, 1H), 7.92 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.43 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 5.16 (s, 2H)
化合物24-3A之H NMR：(400 MHz, DMSO- d6) δ12.31 (brs, 1H), 7.91 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.22 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 5.52 (brs, 2H)。 步驟 3. 2-(4- 碘 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -3- 基 ) 異二氫吲哚 -1,3- 二酮
將化合物 24-3(2.00 g，7.69 mmol，1.00當量)及化合物 24-4(1.71 g，11.5 mmol，1.50當量)於HOAc (20.0 mL)中之混合物在120℃下攪拌12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾反應混合物。濾餅用H 2O 40.0 mL洗滌，接著濃縮，得到粗產物。獲得呈白色固體狀之化合物 24-5(1.90 g，4.87 mmol，63.3%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR: (400 MHz, DMSO- d6) δ14.46 (s, 1H), 8.25 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 8.13 - 8.11 (m, 2H), 8.02 - 7.99 (m, 2H), 7.79 (d, J= 4.8 Hz, 1H)。 步驟 4. 3-(1,3- 二氧雜吲哚 -2- 基 )-4- 碘 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 7- 氧化物
在0℃下向化合物 24-5(3.30 g，8.46 mmol，1.00當量)於HOAc (30.0 mL)中之溶液中添加CPBA (6.87 g，33.8 mmol，85.0%純度，4當量)。在85℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將反應混合物濃縮，得到殘餘物。用NaHCO 3飽和水溶液將殘餘物之pH調節至9並用DCM 200 mL (100 mL * 2)萃取。合併之有機層用NaHCO 3飽和水溶液200 mL (100 mL * 2)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱層析法(SiO 2，石油醚:EtOAc = 100:1至0:1)進行純化。(板1：DCM：MeOH = 10:1)。獲得呈黃色固體狀之化合物 24-6(2.00 g，4.92 mmol，58.2%產率)。 步驟 5. 2-(6- 氯 -4- 碘 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -3- 基 ) 異二氫吲哚 -1,3- 二酮
在0℃下向化合物 24-6(2.00 g，3.67 mmol，74.6%純度，1.00當量)於ACN (10.0 mL)中之溶液中添加POCl 3(3.30 g，21.5 mmol，2.00 mL，5.86當量)。在25℃下攪拌混合物1小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將反應混合物過濾，接著濃縮，得到粗產物。獲得呈白色固體狀之化合物 24-7(1.00 g，2.36 mmol，64.1%產率)。 步驟 6. 6- 氯 -4- 碘 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -3- 胺
在15℃下向化合物 24-7(1.00 g，2.36 mmol，1.00當量)於MeOH (10.0 mL)中之溶液中添加NH 2NH 2 . H 2O (4.86 g，82.5 mmol，4.72 mL，85.0%純度，35.0當量)。在15℃下攪拌混合物1小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾反應混合物。濃縮濾液，得到殘餘物。接著用H 2O 50.0 mL稀釋並用DCM 200 mL (100 mL * 2)萃取。合併之有機層用鹽水200 mL洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之化合物 24-8(0.270 g，916 μmol，38.9%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR: (400 MHz, DMSO- d6) δ7.51 (s, 1H), 5.27 (s, 2H)。 步驟 7. 6- 氯 -4-(-4- 硝基苯基 )-1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -3- 胺
向化合物 24-8(120 mg，407 μmol，1.00當量)及化合物 24-9(71.4 mg，427 μmol，1.05當量)於二㗁烷(2.00 mL)及H 2O (1.00 mL)中之溶液中添加Pd(PPh 3) 4(47.0 mg，40.7 μmol，0.100當量)及K 2CO 3(168 mg，1.22 mmol，3.00當量)。在90℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用H 2O 10.0 mL稀釋並用EtOAc 40.0 mL (20.0 mL * 2)萃取。合併之有機層用鹽水60.0 mL (20.0 mL * 3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，石油醚:EtOAc = 1: 2)進行純化。(板1：石油醚:EtOAc = 1: 2)。獲得呈黃色固體狀之化合物 24-10(60.0 mg，207 μmol，50.8%產率)。 步驟 8. 1-(4-(3- 胺基 -4-(4- 硝基苯基 )-1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -6- 基 )-3,6- 二氫吡啶 -1(2H)- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
向化合物 24-10(60.0 mg，207 μmol，1.00當量)及化合物 24-11(86.7 mg，310 μmol，1.50當量)於二㗁烷(2.00 mL)及H 2O (1.00 mL)中之溶液中添加Xphos Pd G4 (17.8 mg，20.7 μmol，0.100當量)及K 3PO 4(87.9 mg，414 μmol，2.00當量)。在90℃下攪拌混合物3小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用H 2O 30.0 mL稀釋並用EtOAc 100 mL (50.0 mL * 2)萃取。合併之有機層用鹽水100 mL(50.0 mL * 2)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，DCM:MeOH = 10:1)進行純化。(板1：DCM：MeOH = 10:1)。獲得呈黃色固體狀之化合物 24-12(60.0 mg，147 μmol，71.2%產率)。 步驟 9. 1-(4-(3- 胺基 -4-(4- 胺基苯基 )-1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -6- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
在N 2下向化合物 24-12(60.0 mg，147 μmol，1.00當量)於THF (6.00 mL)中之溶液中添加Pd/C (30.0 mg，10.0%純度)。將懸浮液在真空下脫氣，並用H 2吹掃若干次。在H 2(15 psi)下在15℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾反應混合物並濾餅用100 mL DCM洗滌，接著在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，DCM:MeOH = 10:1)進行純化。(板1：DCM：MeOH = 10:1)。獲得呈白色固體狀之化合物 24-13(40.0 mg，105 μmol，71.5%產率)。 步驟 10. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -4- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺
向化合物 24-13(30.0 mg，79.2 μmol，1.00當量)及化合物 24-14(21.8 mg，79.2 μmol，1.00當量)於Py (2.00 mL)中之溶液中添加EDCI (30.3 mg，158 μmol，2.00當量)。在15℃下攪拌混合物1小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。向反應混合物中添加30.0 mL H 2O並用EtOAc 100 mL (50.0 mL * 2)萃取。合併之有機層用NaHCO 3飽和水溶液60.0 mL洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，DCM:MeOH = 10:1)進行純化。(板1：DCM：MeOH = 10:1)。粗產物藉由製備型HPLC(FA條件；管柱：Phenomenex C18 75 * 30 mm * 3 um；流動相：[水(FA)- ACN]；B%：32%至62%，7分鐘)進行純化。如藉由H NMR、LC-MS及HPLC證實，獲得 化合物 24(5.37 mg，8.08 μmol，10.1%產率，95.6%純度)。
H NMR (400 MHz, CDCl 3): δ10.92 (s, 1H), 8.77 - 8.72 (m, 2H), 8.02 - 7.98 (m, 1H), 7.83 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.57 - 7.50 (m, 4H), 7.40 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.03 - 4.96 (m, 1H), 4.85 - 4.82 (m, 1H), 4.15 - 4.08 (m, 1H), 4.03 - 3.95 (m, 2H), 3.21 - 3.02 (m, 2H), 2.89 - 2.66 (m, 2H), 2.11 - 2.01 (m, 2H), 1.92 - 1.80 (m, 2H), 1.51 (d, J= 6.8 Hz, 6H), 1.18 - 1.14 (m, 6H)。
LC-MS (M+H) +: 636.5
HPLC：純度：95.6%(220 nm) 實例 10 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -4- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 25) 步驟 1. 4-(4,4- 二氰基 -3,3- 雙 ( 甲硫基 ) 丁醯基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁酯
向化合物 25-1(10.0 g，58.7 mmol，1.00 當量)及化合物 25-2(26.7 g，117 mmol，2.00當量)於DMSO (100 mL)中之溶液中添加KOH (9.89 g，176 mmol，3.00當量)。在25℃下攪拌混合物8小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將反應混合物倒入100 mL水中，用1 M HCl酸化至pH 6，並且用EtOAc 400 mL (100 mL * 3)萃取。合併之有機層用鹽水600 mL (200 mL * 3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱層析法(SiO 2，石油醚:EtOAc = 100:1至0:1)進行純化。(板1：石油醚:EtOAc = 1:1)。獲得呈黃色固體狀之化合物 25-3(5.88 g，14.7 mmol，25.1%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR: (400 MHz, DMSO- d6) δ7.52 - 7.29 (m, 2H), 5.76 - 5.74 (m, 1H), 4.05 - 3.97 (m, 3H), 3.30 (s, 3H), 2.70 - 2.67 (m, 2H), 2.34 - 2.19 (m, 7H), 1.64 - 1.50 (m, 2H), 1.39 (s, 9H)。 步驟 2. 4-(5- 氰基 -4-( 甲硫基 )-6- 側氧基 -1,6- 二氫吡啶 -2- 基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁酯
向化合物 25-3(5.88 g，14.7 mmol，1.00當量)於DMSO (50.0 mL)中之溶液中添加KOH (2.49 g，44.3 mmol，3.00當量)。在25℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將反應混合物倒入100 mL水中，用1 M HCl酸化至pH 6，並且用EtOAc 150 mL (75.0 mL * 2)萃取。合併之有機層用鹽水300 mL (60.0 mL * 5)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (FA條件；管柱：Phenomenex luna C18 (250 * 70 mm，10 um)；流動相：[水(FA)- ACN]；B%：35%至65%，20分鐘)進行純化。獲得呈白色固體狀之化合物 25-4(1.00 g，2.86 mmol，19.3%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d6) δ6.21 (s, 1H), 4.14 - 4.06 (m, 2H), 2.72 - 2.61 (m, 6H), 1.78 - 1.75 (m, 2H), 1.65 - 1.59 (m, 2H), 1.38 (s, 9H)。 步驟 3. 4-( 甲硫基 )-2- 側氧基 -6-( 哌啶 -4- 基 )-1,2- 二氫吡啶 -3- 甲腈
向化合物 25-4(1.00 g，2.86 mmol，1.00當量)於DCM (1.00 mL)中之溶液中添加HCl/二㗁烷(4 M，25.0 mL，34.9當量)。在15℃下攪拌混合物0.5小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將反應混合物濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之化合物 25-5(0.700 g，2.45 mmol，85.5%產率，HCl)。 步驟 4. 6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-4-( 甲硫基 )-2- 側氧基 -1,2- 二氫吡啶 -3- 甲腈
向化合物 25-5(0.700 g，2.45 mmol，1.00當量，HCl)及TEA (743 mg，7.35 mmol，1.02 mL，3.00當量)於THF (10.0 mL)中之溶液中添加化合物 25-6(260 mg，2.45 mmol，255 μL，1.00當量)。在15℃下攪拌混合物0.5小時。將含LiOH . H 2O (1.00 g)之2.00 mL H 2O添加至反應混合物中並在15℃下攪拌0.5小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。向反應混合物添加10.0 mL H 2O並用DCM 40.0 mL(20.0 mL * 2)萃取。合併之有機層用NaHCO 3飽和水溶液40.0 mL洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，DCM:MeOH = 10:1)進行純化。(板1：DCM：MeOH = 10:1)。獲得呈白色固體狀之化合物 25-7(550 mg，1.72 mmol，70.3%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR: (400 MHz, DMSO- d6) δ12.21 (s, 1H), 6.22 (s, 1H), 4.58 - 4.55 (m, 1H), 4.09 - 4.05 (m, 1H), 3.04 - 2.67 (m, 4H), 2.61 (s, 3H), 1.82 - 1.68 (m, 4H), 1.03 - 0.98 (m, 6H)。 步驟 5. 3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1,5- 二氫 -4H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -4- 酮
將化合物 25-7(550 mg，1.72 mmol，1.00當量)及N 2H 4 . H 2O (2.69 g，52.6 mmol，2.61 mL，98.0%純度，30.5當量)溶解於微波管中之 i-PrOH (4.00 mL)中。在微波下在120℃下加熱密封管60分鐘。TLC指示化合物 25-7被完全消耗並且形成一個新斑點。根據TLC，反應係純淨的。(板1：DCM：MeOH = 10:1)。將反應混合物濃縮，得到殘餘物。獲得呈白色固體狀之化合物 25-8(400 mg，1.32 mmol，76.5%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR: (400 MHz, DMSO- d6) δ5.95 (s, 1H), 5.19 (s, 2H), 4.53 (d, J =11.6 Hz, 1H), 4.04 (d, J =13.2 Hz, 1H), 3.05 - 3.02 (m, 1H), 2.99 - 2.84 (m, 1H), 2.67 - 2.61 (m, 2H), 1.89 - 1.81 (m, 2H), 1.55 - 1.38 (m, 2H), 1.02 - 0.97 (m, 6H)。 步驟 6. 1-(4-(3- 胺基 -4- 溴 -1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -6- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
將POBr 3(2.84 g，9.89 mmol，1.01 mL，10.0當量)在60℃下熔融。將化合物 25-8(300 mg，988 μmol，1.00當量)添加至反應混合物中並在75℃下攪拌1小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。向反應混合物中倒入100 mL冰冷NaHCO 3飽和水溶液，接著用EtOAc 200 mL (50.0 mL * 4)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，DCM:MeOH = 7:1)進行純化。(板1：DCM：MeOH = 7:1)。獲得呈白色固體狀之化合物 25-9(80.0 mg，218 μmol，22.0%產率)。 步驟 7. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -4- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺
將化合物 25-9(30.0 mg，81.9 μmol，1.00當量)、化合物 25-10(117 mg，245 μmol，3.00當量)及DIEA (31.7 mg，245 μmol，42.8 μL，3.00當量)、Pd(t-Bu 3P) 2(4.19 mg，8.19 μmol，0.100當量)溶解於微波管中之H 2O (0.150 mL)、二㗁烷(1.50 mL)中。在微波下在130℃下加熱密封管60分鐘。LC-MS顯示偵測到所需質量。濃縮反應混合物，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC(SiO 2，DCM:MeOH = 10:1)進行純化。(板1：DCM：MeOH = 10:1)。如藉由H NMR、LC-MS及HPLC證實，獲得 化合物 25。
H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ10.92 (s, 1H), 8.74 (d, J =4.0 Hz, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.01 - 7.97 (m, 1H), 7.81 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.21 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.53 - 7.40 (m, 3H), 7.04 (s, 1H), 5.01 - 4.98 (m, 1H), 4.80 - 4.77 (m, 1H), 4.21 - 4.09 (m, 3H), 3.24 - 3.17 (m, 1H), 2.93 - 2.82 (m, 1H), 2.23 - 2.09 (m, 2H), 1.72 - 1.65 (m, 2H), 1.54 - 1.45 (m, 8H), 1.14 (t, J =6.8 Hz, 6H)。 實例 11 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 苯并 [d] 異㗁唑 -4- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 27) 步驟 1. 4'- 胺基 -5- 溴 -3- 氟 -[1,1'- 聯苯基 ]-2- 甲腈
向化合物 27- 1(1.00 g，3.07 mmol，1.00當量)、化合物 27- 2(470 mg，2.15 mmol，0.700當量)於THF (12.0 mL)中之溶液中添加含Na 2CO 3(975 mg，9.21 mmol，3.00當量)之H 2O (3.00 mL)及Pd(dppf)Cl 2(449 mg，613 μmol，0.200當量)。將混合物脫氣並用N 2吹掃3次，接著在60℃下攪拌3小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(20.0 mL)淬滅，接著用EtOAc (30.0 mL)萃取。有機層用水(10.0 mL * 3)及鹽水(10.0 mL * 3)洗滌，並且合併之水層用EtOAc (30.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物(PE:EtOAc = 3:1，R f(P1)= 0.500)藉由管柱層析法(SiO 2，PE:EtOAc = 100: 0至100: 30)進行純化。接著將殘餘物用EtOAc: MeOH = 10:1(100 mL)在25℃下研磨30分鐘。過濾混合物並在減壓下濃縮，得到殘餘物。如藉由LC-MS證實，獲得呈棕色固體狀之化合物 27- 3(330 mg，742 μmol，24.2%產率)。
LC-MS: (M+H) +: 291.0 步驟 2. 4'- 胺基 -3- 氟 -5-(1- 異丁醯基 -1,2,3,6- 四氫吡啶 -4- 基 )-[1,1'- 聯苯 ]-2- 甲腈
向化合物 27- 3(320 mg，720 μmol，65.5%純度，1.00當量)及化合物 27- 4(301 mg，1.08 mmol，1.50當量)於THF (12.0 mL)中之溶液中添加含K 2CO 3(298 mg，2.16 mmol，3.00當量)之H 2O (3.00 mL)及Pd(PPh 3) 4(166 mg，144 μmol，0.200當量)。在N 2氛圍下在75℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(20.0 mL)淬滅，接著用EtOAc (30.0 mL)萃取。有機層用水(10.0 mL * 3)及鹽水(10.0 mL * 3)洗滌，並且合併之水層用EtOAc (30.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.600)進行純化。獲得呈棕色固體狀之粗產物 27- 5(550 mg)。 步驟 3. 4'- 胺基 -3- 氟 -5-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-[1,1'- 聯苯 ]-2- 甲腈
向化合物 27- 5(550 mg，1.51 mmol，1.00當量)於THF (80.0 mL)中之溶液中添加Pd/C (8.00 g，10.0%純度)，脫氣並用H 2(15 Psi)吹掃3次，接著在20℃下攪拌2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾混合物，並且在減壓下濃縮濾液，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (EtOAc: MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.800)進行純化並進一步藉由製備型HPLC(中性條件；管柱：Welch Ultimate XB-SiOH 250 * 70.0 * 10.0 um；流動相：[己烷-EtOH]；B%：15.0%至55.0%，15分鐘)進行純化。藉由H NMR、F NMR及LC-MS證實，獲得呈黃色固體狀之化合物 27- 6(120 mg，322 μmol，21.2%產率)。
H NMR: (400 MHz, CDCl 3) δ7.40 - 7.38 (m, 2H), 7.10 (s, 1H), 6.97 - 6.95 (m, 1H), 6.81 - 6.79 (m, 2H), 4.86 (d, J= 14.8 Hz, 1H), 4.10 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 3.19 - 3.12 (m, 1H), 2.88 - 2.81 (m, 2H), 2.66 - 2.60 (m, 1H), 1.98 - 1.92 (m, 2H), 1.67 - 1.61 (m, 2H), 1.20 - 1.11 (m, 6H)。
LC-MS: (M+H) +: 366.3 步驟 4. 4'- 胺基 -5-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-3-(( 丙 -2- 亞基胺基 ) 氧基 )-[1,1'- 聯苯 ]-2- 甲腈
向化合物 27- 7(23.5 mg，322 μmol，26.1 μL，2.00當量)於DMF (2.00 mL)中之溶液中添加 t-BuOK (36.1 mg，322 μmol，2.00當量)。將混合物在20℃下攪拌1小時。接著將化合物 27-6(60.0 mg，161 μmol，98.1%純度，1.00當量)添加至混合物中。並且在20℃下攪拌混合物6小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(10.0 mL)淬滅，接著用EtOAc (10.0 mL * 5)萃取。合併之有機層用水(10.0 mL * 4)及鹽水(10.0 mL * 4)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈棕色固體狀之粗產物 27- 8(80.0 mg)。 步驟 5. 1-(4-(3- 胺基 -4-(4- 胺基苯基 ) 苯并 [d] 異㗁唑 -6- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
向化合物 27- 8(80.0 mg，191 μmol，1.00當量)於MeOH (4.00 mL)及DCM (2.00 mL)中之溶液中添加HCl (6.00 M，4.00 mL，125當量)。接著在50℃下攪拌混合物10小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將反應混合物濃縮，得到殘餘物。藉由飽和NaHCO 3將殘餘物之pH調節至7。接著用EtOAc(30.0 mL * 3)萃取混合物。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC(DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.600)進行純化。如藉由LC-MS證實，獲得呈灰白色固體狀之化合物 27- 9(40.0 mg，104 μmol，54.9%產率)。
LC-MS: (M+H) +: 379.4 步驟 6. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 苯并 [d] 異㗁唑 -4- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 27)
向化合物 27- 9(30.0 mg，78.7 μmol，99.3%純度，1.00當量)及化合物 27- 10(21.6 mg，78.7 μmol，1.00當量)於吡啶(3.00 mL)中之溶液中添加EDCI (60.3 mg，314 μmol，4.00當量)。在20℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(10.0 mL)淬滅，接著用DCM (30.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.500)進行純化。如藉由H NMR、2D NMR及LC-MS證實，獲得 化合物 27(34.5 mg，53.0 μmol，67.2%產率，97.6%純度)。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ10.88 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.64 - 8.63 (m, 1H), 8.08 - 8.05 (m, 1H), 7.83 - 7.81 (m, 2H), 7.58 - 7.55 (m, 2H), 7.51 - 7.49 (m, 2H), 7.37 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 5.19 - 5.17 (m, 2H), 4.79 - 4.75 (m, 1H), 4.59 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 4.07 (d, J= 13.6 Hz, 1H), 3.15 - 3.09 (m, 1H), 2.99 - 2.86 (m, 2H), 2.61 - 2.55 (m, 1H), 1.92 - 1.84 (m, 2H), 1.69 - 1.51 (m, 2H), 1.45 - 1.43 (m, 6H), 1.03 - 0.99 (m, 6H)。
LC-MS: (M+H) +: 636.4
HPLC純度：97.6%(220 nm) 實例 12 N-(4-(3- 胺基 -1- 乙基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1 H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 30) 步驟 1. 2-(6- 溴 -1- 乙基 -4- 碘 -1 H- 吲唑 -3- 基 ) 異二氫吲哚 -1,3- 二酮
在0℃下向化合物 30- 1(500 mg，974 μmol，91.2%純度，1.00當量)於DMF (5.00 mL)中之溶液中添加Cs 2CO 3(317 mg，974 μmol，1.00當量)及EtI (197 mg，1.27 mmol，101 μL，1.30當量)。接著將混合物在20℃下攪拌0.5小時。接著將EtI (30.4 mg，195 μmol，15.6 μL，0.200當量)添加至混合物中。並且在20℃下攪拌混合物0.5小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將混合物倒入水(10.0 mL)中並用DCM:MeOH = 10:1(10.0 mL * 3)萃取。並且合併之有機層用鹽水(10.0 mL * 3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈白色固體狀之化合物 30- 2(513 mg，粗產物)。
LC-MS: (M+H) +: 497.9 步驟 2. 6- 溴 -1- 乙基 -4- 碘 -1 H- 吲唑 -3- 胺
向化合物 30- 2(513 mg，1.03 mmol，1.00當量)於MeOH (5.00 mL)及DCM (5.00 mL)中之溶液中添加N 2H 4·H 2O (920 mg，18.0 mmol，893 μL，98.0%純度，17.4當量)。在20℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。TLC (石油醚:EtOAc = 1:1，R f(P1)= 0.20)指示起始材料被完全消耗。混合物用水(10.0 mL)洗滌，用DCM:MeOH = 10:1 (5.00 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物(石油醚:EtOAc = 1:1，R f(P1)= 0.20)藉由管柱層析法(SiO 2，PE:EtOAc = 100: 20至100: 40)進行純化。藉由H NMR、2D NMR及LC-MS證實，獲得呈白色固體狀之化合物 30-3(276 mg，720 μmol，69.6%產率，95.5%純度)。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ7.79 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 5.21 (s, 2H), 4.16 - 4.10 (m, 2H), 1.25 (t, J= 7.2 Hz, 3H)。
LC-MS: (M+H) +: 367.9 步驟 3. 4-(4- 胺基苯基 )-6- 溴 -1- 乙基 -1H- 吲唑 -3- 胺
將化合物 30- 3(0.250 g，683 μmol，1.00當量)、化合物 30- 4(149 mg，683 μmol，1.00當量)、Pd(PPh 3) 4(78.9 mg，68.3 μmol，0.100當量)、Na 2CO 3(361 mg，3.42 mmol，5.00當量)、EtOH (2.00 mL)及H 2O (2.00 mL)於甲苯(2.00 mL)中之混合物脫氣並用N 2吹掃3次，接著在N 2氛圍下在90℃下攪拌混合物3小時。LC-MS顯示偵測到約31.1%之所需質量。在減壓下濃縮反應混合物，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC(SiO 2，DCM:MeOH = 10:1)進行純化。獲得呈黃色固體狀之化合物 30- 5(175 mg，528 μmol，77.35%產率)。
LC-MS: (M+H) +: 331.0 步驟 4. 1-(4-(3- 胺基 -4-(4- 胺基苯基 )-1- 乙基 -1H- 吲唑 -6- 基 )-3,6- 二氫吡啶 -1(2H)- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
將化合物 30- 5(163 mg，492 μmol，1.00當量)、化合物 30- 6(206 mg，738 μmol，1.50當量)、Pd(PPh 3) 4(56.8 mg，49.2 μmol，0.100當量)、K 2CO 3(204 mg，1.48 mmol，3.00當量)及H 2O (0.750 mL)於二㗁烷(3.00 mL)中之混合物脫氣並用N 2吹掃3次，接著在N 2氛圍下將混合物在90℃下攪拌4小時。LC-MS顯示偵測到約51.5%之所需質量。將反應混合物在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，DCM:MeOH = 10:1)進行純化。藉由LC-MS證實，獲得呈黃色固體狀之化合物 30- 7(166 mg，408 μmol，82.92%產率，99.2%純度)。
LC-MS: (M+H) +: 404.2 步驟 5. 1-(4-(3- 胺基 -4-(4- 胺基苯基 )-1- 乙基 -1H- 吲唑 -6- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
在N 2氛圍下向化合物 30- 7(156 mg，386 μmol，1.00當量)於MeOH (3.00 mL)中之溶液中添加Pd/C (10%，150 mg)。將懸浮液脫氣並用H 2吹掃3次。將混合物在H 2(15 Psi)下在25℃下攪拌2小時。LC-MS顯示化合物 30- 7被完全消耗並且偵測到一個具有所需質量之主峰。將反應混合物過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之化合物 30- 8(140 mg，粗產物)。
LC-MS: (M+H) +: 406.2 步驟 6. N-(4-(3- 胺基 -1- 乙基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1 H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 30)
將化合物 30- 8(70.0 mg，172 μmol，1.00當量)、化合物 30- 9(52.2 mg，189 μmol, 1.10當量)、EDCI (99.2 mg，517 μmol，3.00當量)於Py(2.00 mL)中之混合物脫氣並用N 2吹掃3次，接著在N 2氛圍下在25℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到約54.9%之所需質量。在減壓下濃縮反應混合物，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (中性條件；管柱：Waters Xbridge 150 * 25 mm * 5 um；流動相：[水(NH 4HCO 3)- ACN]；B%：42%至72%，8分鐘)進行純化。如藉由H NMR、LC-MS及HPLC證實，獲得 化合物 30(46.5 mg，67.6 μmol，39.21%產率，96.3%純度)。
H NMR: (400 MHz, CDCl 3) δ10.8 (s, 1H), 8.77 - 8.66 (m, 2H), 7.96 (td, J 1= 8.0 Hz, J 2= 2.0 Hz, 1H), 7.74 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.51 - 7.43 (m, 3H), 7.38 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.73 (s, 1H), 5.02 - 4.91 (m, 1H), 4.84 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 4.19 (q, J= 8.0 Hz, 2H), 4.08 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 3.79 (s, 2H), 3.15 (t, J= 12.0 Hz, 1H), 2.95 - 2.76 (m, 2H), 2.63 (t, J= 12.0 Hz, 1H), 2.07 - 1.91 (m, 2H), 1.80 - 1.59 (m, 2H), 1.48 (d, J= 8.0 Hz, 6H), 1.41 (d, J= 8.0 Hz, 3H), 1.14 (q, J= 8.0 Hz, 6H)。
LC-MS:(M+H) +: 663.4
HPLC純度：96.3% (220 nm)。 實例 13 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-1-(4- 氟苯基 )-4,5- 二甲基 -2- 側氧基 -1,2- 二氫吡啶 -3- 甲醯胺 ( 化合物 35) 步驟 1. 5- 溴 -4- 甲基 -2- 側氧基 -1,2- 二氫吡啶 -3- 甲腈
在0℃下在N 2下向化合物 35-1(6.00 g，44.7 mmol，1.00當量)於DMF (50.0 mL)中之溶液中添加NBS (8.76 g，49.2 mmol，1.10當量)。在40℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將反應混合物倒入100 mL冰水中，並且有固體沈澱。接著過濾並用PE 100 mL洗滌濾餅，濃縮，得到粗產物。獲得呈黃色固體狀之化合物 35-2(6.00 g，28.1 mmol，62.9%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR:(400 MHz, DMSO- d6) δ12.75 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 2.42 (s, 3H)。 步驟 2. 5- 溴 -4- 甲基 -2- 側氧基 -1,2- 二氫吡啶 -3- 甲酸
將化合物 35-2(2.00 g，9.39 mmol，1.00當量)於20.0 mL H 2SO 4(50.0%純度)中之混合物在120℃下攪拌4小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。向反應混合物中添加20.0 mL H 2O並過濾。在減壓下濃縮濾餅，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之化合物 35-3(0.800 g，3.45 mmol，36.7%產率)。 步驟 3. 5- 溴 -4- 甲基 -2- 側氧基 -1,2- 二氫吡啶 -3- 甲酸甲酯
將化合物 35-3(0.800 g，3.45 mmol，1.00當量)及H 2SO 4(1.84 g，18.7 mmol，1.00 mL，5.44當量)於MeOH (10.0 mL)中之混合物在80℃下攪拌12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。用H 2O 20.0 mL稀釋反應混合物，並且添加Na 2CO 3飽和水溶液以將pH調節至8。用DCM 100 mL (50.0 mL * 2)萃取混合物。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之化合物 35-4(0.650 g，2.64 mmol，76.6%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR: (400 MHz, DMSO- d6) δ12.19 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 3.78 (s, 3H), 2.14 (s, 3H)。 步驟 4. 5- 溴 -1-(4- 氟苯基 )-4- 甲基 -2- 側氧基 -1,2- 二氫吡啶 -3- 甲酸甲酯
向化合物 35-4(0.650 g，2.64 mmol，1.00當量)及化合物 35-5(997 mg，7.13 mmol，2.70當量)於DCM (10.0 mL)中之溶液中添加Cu(OAc) 2(959 mg，5.28 mmol，2.00當量)及Py (835 mg，10.5 mmol，852 μL，4.00當量)。在25℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾反應混合物，並且濃縮濾液，得到粗產物。殘餘物藉由管柱層析法(SiO 2，石油醚:EtOAc = 100:1至1:1)進行純化。(石油醚:EtOAc = 2:1)。獲得呈白色固體狀之化合物 35-6(0.800 g，2.35 mmol，89.0%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR: (400 MHz, CDCl 3) δ7.56 (s, 1H), 7.37 - 7.34 (m, 2H), 7.19 - 7.15 (m, 2H), 3.93 (s, 3H), 2.33 (s, 3H)。 步驟 5. 1-(4- 氟苯基 )-4,5- 二甲基 -2- 側氧基 -1,2- 二氫吡啶 -3- 甲酸甲酯
向化合物 35-6(0.100 g，293 μmol，1.00當量)及化合物 35-7(175 mg，2.94 mmol，10.0當量)於H 2O (0.500 mL)及二㗁烷(1.50 mL)中之溶液中添加K 2CO 3(121 mg，881 μmol，3.00當量)及Pd(dppf)Cl 2 . CH 2Cl 2(24.0 mg，29.4 μmol，0.100當量)。在120℃下攪拌混合物1小時。TLC指示化合物 35-6被完全消耗並且形成許多新斑點。根據TLC，反應係混雜的。(石油醚:EtOAc = 1:1)。反應混合物用H 2O 10.0 mL稀釋並用EtOAc 40.0 mL (20.0 mL * 2)萃取。合併之有機層用鹽水60.0 mL (20.0 mL * 3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，石油醚: 乙酸乙酯= 1:1)進行純化。獲得呈白色固體狀之化合物 35-8(85.0 mg，213 μmol，72.4%產率，69%純度)。藉由LC-MS證實結構。 步驟 6. 1-(4- 氟苯基 )-4,5- 二甲基 -2- 側氧基 -1,2- 二氫吡啶 -3- 甲酸
向化合物 35-8(85.0 mg，213 μmol，69%純度，1.00當量)於EtOH (4.00 mL)中之溶液中添加NaOH (2.00 M，3.00 mL，28.1當量)。在90℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用H 2O 10.0 mL稀釋，並且添加1 M HCl以將pH調節至2。用EtOAc 100 mL (50.0 mL * 2)萃取混合物。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (FA條件；管柱：Phenomenex C18 75.0 * 30.0 mm * 3.00 um；流動相：[水(FA)- ACN]；B%：22.0%至52.0%，7分鐘)進行純化。獲得呈白色固體狀之 35-9(50.0 mg，191 μmol，89.8%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR: (400 MHz, CDCl 3) δ15.22 (s, 1H), 7.39 - 7.36 (m, 3H), 7.26 - 7.22 (m, 2H), 2.83 (s, 3H), 2.21 (s, 3H)。 步驟 7. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-1-(4- 氟苯基 )-4,5- 二甲基 -2- 側氧基 -1,2- 二氫吡啶 -3- 甲醯胺
向化合物 35-10(50.0 mg，122 μmol，92.7%純度，1.00當量)及化合物 35-9(28.8 mg，110 μmol，0.900當量)於吡啶(3.00 mL)中之溶液中添加EDCI (94.1 mg，491 μmol，4.00當量)。在20℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(5.00 mL)淬滅，接著用DCM:MeOH = 10:1 (10.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (HCl條件；管柱：3_Phenomenex Luna C18 75 * 30.0 mm * 3.00 um；流動相：[水(HCl)-ACN]；B%：26.0%至46.0%，8分鐘)進行純化。如藉由H NMR及LC-MS證實，獲得 化合物 35(8.00 mg，12.7 μmol，10.3%產率，98.8%純度)。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ11.60 (s, 1H), 10.54 (s, 1H), 7.82 - 7.81 (m, 2H), 7.59 (s, 1H), 7.49 - 7.45 (m, 4H), 7.43 - 7.37 (m, 2H), 7.06 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 4.59 (d, J= 14.4 Hz, 1H), 4.27 (d, J= 10.0 Hz, 2H), 4.08 (d, J= 14.8 Hz, 1H), 3.17 - 3.08 (m, 1H), 2.94 - 2.86 (m, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 1.93 - 1.85 (m, 2H), 1.62 - 1.47 (m, 2H), 1.04 - 0.99 (m, 6H)。
LC-MS: (M+H) +: 621.4
HPLC：純度：98.8% (220 nm) 實例 14 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-4- 羥基菸鹼醯胺 ( 化合物 36) 步驟 1. 5-(4- 氟苯基 )-4- 羥基菸酸
在20℃下向化合物 36-1(1.00 g，4.59 mmol，1.00當量)於二㗁烷(10.0 mL)及H 2O (2.00 mL)中之溶液中添加Pd(PPh 3) 4(530 mg，458 μmol，0.100當量)及Na 2CO 3(972 mg，9.17 mmol，2.00當量)以及化合物 36-2(963 mg，6.88 mmol，1.50當量)。在90℃下攪拌反應混合物12小時。LC-MS顯示化合物 36-1被完全消耗。LC-MS上顯示了若干個新峰，並且偵測到所需m/z (MS=234.0 RT=0.688)。用1.00 M HCl淬滅反應混合物直至pH約為2，接著用EtOAc 300 mL (100 mL * 3)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，接著過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (FA條件，管柱：Phenomenex luna C18 150 * 25.0 mm * 10.0 um；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：12.0%至42.0%，10分鐘)進行進一步純化。如藉由LC-MS及H NMR證實，獲得化合物 36-3(0.150 g，643 μmol，14.0%產率，100%純度)。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ8.61 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.74 - 7.71 (m, 2H), 7.30 - 7.26 (m, 2H)。
LC-MS: (M+H) +: 234.2 步驟 2. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-4- 羥基菸鹼醯胺
向化合物 36-4(80.0 mg，188 μmol，88.9%純度，1.00當量)、化合物 36-3(43.9 mg，188 μmol，100%純度，1.00當量)及HATU (107 mg，282 μmol，1.50當量)於DMF (5.00 mL)中之溶液中添加DIEA (73.1 mg，565 μmol，98.5 μL，3.00當量)。在20℃下攪拌混合物3小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(10.0 mL)淬滅，接著用EtOAc(10.0 mL * 3)萃取。合併之有機層用水(5.00 * 3 mL)洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.200)進行純化並進一步藉由製備型HPLC (HCl條件，管柱：3_Phenomenex Luna C18 75.0 * 30.0 mm * 3.00 um；流動相：[水(HCl)-ACN]；B%：28.0%至48.0%，8分鐘)進行純化。如藉由H NMR、LC-MS及HPLC證實，獲得 化合物 36(20.0 mg，33.2 μmol，17.6%產率，98.4%純度)。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ13.15 (s, 1H), 11.61 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.84 - 7.82 (m, 2H), 7.74 - 7.70 (m, 2H), 7.48 - 7.45 (m, 2H), 7.29 - 7.27 (m, 2H), 7.07 (s, 1H), 6.73 (s, 1H), 4.58 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 4.30 (s, 2H), 4.07 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 3.16 - 3.13 (m, 1H), 2.92 - 2.87 (m, 2H), 2.57 - 2.50 (m, 1H), 1.89 - 1.85 (m, 2H), 1.62 - 1.47 (m, 2H), 1.04 - 0.99 (m, 6H)。
LC-MS: (M+H) +: 593.3
HPLC：純度：98.9%(220 nm) 實例 15 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-4- 羥基 -6- 甲基菸鹼醯胺 ( 化合物 37) 步驟 1. 5- 溴 -6- 甲基 -4- 側氧基 -1,4- 二氫吡啶 -3- 甲酸
在20℃下向化合物 37-1(5.00 g，32.6 mmol，1.00當量)於AcOH (50.0 mL)及H 2O (10.0 mL)中之溶液中逐滴添加Br 2(6.26 g，39.1 mmol，2.02 mL，1.20當量)。在60℃下攪拌反應混合物5小時。LC-MS顯示起始材料被完全消耗。在減壓下濃縮反應混合物以移除AcOH，接著用MeOH (30.0 mL)稀釋，接著過濾並用MeOH (10.0 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾餅，得到殘餘物。藉由H NMR證實，獲得呈白色固體狀之化合物 37-2(5.12 g，22.0 mmol，67.5%產率)。
H NMR:(400 MHz, DMSO -d 6) δ15.77 (s, 1H), 13.43 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 2.53 (s, 3H)。 步驟 2. 5-(4- 氟苯基 )-4- 羥基 -6- 甲基菸酸
在20℃下向化合物 37-2(2.00 g，8.62 mmol，1.00當量)於二㗁烷(20.0 mL)及H 2O (4.00 mL)中之溶液中添加Na 2CO 3(1.83 g，17.2 mmol，2.00當量)及Pd(PPh 3) 4(996 mg，861 μmol，0.100當量)以及化合物 37-3(2.41 g，17.2 mmol，2.00當量)。在90℃下攪拌反應混合物12小時。LC-MS顯示剩餘約5%之起始材料。LC-MS上顯示了若干個新峰，並且偵測到所需m/z (MS=248.1 RT=0.700)。反應混合物用1 M HCl淬滅直至pH約為2，接著過濾並將濾餅溶解於MeOH (10.0 mL)及DCM (90.0 mL)中，接著經無水Na 2SO 4乾燥，接著過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。如藉由H NMR及LC-MS證實，獲得化合物 37-4(0.700 g，2.69 mmol，31.2%產率，95.0%純度)。
H NMR:(400 MHz, DMSO -d 6) δ13.11 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 7.35 - 7.25 (m, 4H), 2.22 (s, 3H)。
LC-MS:(M+H) +: 248.1 步驟 3. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-4- 羥基 -6- 甲基菸鹼醯胺
向化合物 37-5(78.0 mg，200 μmol，97.0%純度，1.00當量)及化合物 37-4(46.9 mg，180 μmol，95.0%純度，0.900當量)於吡啶(5.00 mL)中之溶液中添加EDCI (153 mg，801 μmol，4.00當量)。在40℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將反應混合物用水(5.00 mL)淬滅，接著用DCM:MeOH = 10:1 (10.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.200)進行純化並進一步藉由製備型HPLC (HCl條件；管柱：3_Phenomenex Luna C18 75.0 * 30.0 mm * 3.00 um；流動相：[水(HCl)-ACN]；B%：28.0%至48.0%，8分鐘)進行純化。如藉由H NMR及LC-MS證實，獲得 化合物 37(18.0 mg，29.5 μmol，14.7%產率，99.5%純度)。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ13.16 (s, 1H), 11.60 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 7.80 - 7.78 (m, 2H), 7.45 - 7.43 (m, 2H), 7.33 - 7.06 (m, 4H), 7.06 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 4.58 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 4.27 (d, J= 10.0 Hz, 1H), 4.07 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 3.28 - 3.25 (m, 1H), 3.16 - 3.09 (m, 1H), 2.94 - 2.86 (m, 2H), 2.70 - 2.62 (m, 1H), 2.17 (s, 3H), 1.89 - 1.85 (m, 2H), 1.64 - 1.47 (m, 2H), 1.03 - 0.99 (m, 6H)。
LC-MS: (M+H) +: 607.4
HPLC：純度：99.5% (220 nm) 實例 16 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-4- 羥基 -2,6- 二甲基菸鹼醯胺 ( 化合物 38) 步驟 1. 4- 羥基 -2,6- 二甲基菸酸乙酯
將化合物 38-1(19.8 g，139 mmol，18.3 mL，1.80當量)及化合物 38-2(10.0 g，77.4 mmol，1.00當量)之混合物在130℃下攪拌5小時。TLC指示化合物 38-2被完全消耗並且形成許多新斑點。根據TLC (石油醚: 乙酸乙酯= 3:1)，反應係混雜的。過濾反應混合物並在減壓下濃縮，得到殘餘物。在25℃下用MTBE (50.0 mL)研磨粗產物20分鐘。獲得呈白色固體狀之化合物 38-3(4.80 g，24.5 mmol，31.7%產率，100%純度)。藉由LC-MS及H NMR證實結構。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ11.29 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.20 - 4.14 (m, 2H), 2.16 (s, 6H), 1.22 (t, J= 6.80 Hz, 3H)。
LC-MS: (M-H) -: 194.1 步驟 2. 5- 溴 -4- 羥基 -2,6- 二甲基菸酸乙酯
向化合物 38-3(2.00 g，10.2 mmol，100%純度，1.00當量)於CCl 4(20.0 mL)中之溶液中添加NBS (3.65 g，20.4 mmol，2.00當量)。在70℃下攪拌混合物5小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾反應混合物並用DCM (100 mL)洗滌濾餅。濃縮濾液，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱層析法(SiO 2，石油醚: 乙酸乙酯= 100:1至0:1)進行純化。(DCM:MeOH = 10:1)。獲得呈白色固體狀之化合物 38-4(2.50 g，9.12 mmol，89.0%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ11.80 (s, 1H), 4.22 - 4.20 (m, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 1.24 (t, J= 7.20 Hz, 3H)。 步驟 3. 5-(4- 氟苯基 )-4- 羥基 -2,6- 二甲基菸酸
向化合物 38-4(1.00 g，3.65 mmol，1.00當量)及化合物 38-5(612 mg，4.38 mmol，1.20當量)於二㗁烷(10.0 mL)及H 2O (2.00 mL)中之溶液中添加Pd(PPh 3) 4(421 mg，364 μmol，0.100當量)及K 2CO 3(1.01 g，7.30 mmol，2.00當量)。在100℃下攪拌混合物12小時。TLC指示起始材料被完全消耗並形成許多新斑點。根據TLC (DCM:MeOH = 10:1)，反應係混雜的。反應混合物用H 2O (80.0 mL)稀釋並用EtOAc (100 mL * 3)萃取。合併之有機層用鹽水(200 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。用MeOH:MTBE = 1:10 (20.0 mL)在15℃下研磨粗產物60分鐘。獲得呈灰色固體狀之化合物 38-6(0.550 g，2.02 mmol，55.4%產率，96.1%純度)。藉由H NMR及LC-MS證實結構。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ12.73 (s, 1H), 7.32 - 7.26 (m, 4H), 2.79 (s, 3H), 2.21 (s, 3H)。
LC-MS: (M+H) +: 261.9 步驟 4. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-4- 羥基 -2,6- 二甲基菸鹼醯胺
向化合物 38-7(60.0 mg，138 μmol，87.3%純度，1.00當量)、化合物 38-6(37.7 mg，138 μmol，96.1%純度，1.00當量)及HATU (79.2 mg，208 μmol，1.50當量)於DMF (3.00 mL)中之溶液中添加DIEA (53.8 mg，416 μmol，72.5 μL，3.00當量)。在20℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物藉由添加水(30.0 mL)淬滅，接著用EtOAc (30.0 mL * 5)萃取。合併之有機層用水(60.0 mL * 5)及鹽水(60.0 mL * 3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (板1，DCM:MeOH = 8:1，R f(P1)= 0.40)進行純化並進一步藉由製備型HPLC (管柱：3_Phenomenex Luna C18 75 * 30 mm * 3 um；流動相：[水(HCl)-ACN]；B%：28%至48%，8分鐘)進行純化。如藉由H NMR及LC-MS證實，獲得 化合物 38(15.0 mg，23.3 μmol，16.8%產率，96.5%純度)。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ14.23 (s, 1H), 11.59 (s, 1H), 7.77 - 7.75 (m, 2H), 7.39 - 7.37 (m, 2H), 7.26 - 7.04 (m, 4H), 6.87 (s, 1H), 6.70 (s, 1H), 4.58 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 4.30 (s, 2H), 4.06 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 3.16 - 3.09 (m, 2H), 2.95 - 2.85 (m, 2H), 2.71 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 1.92 - 1.85 (m, 2H), 1.64 - 1.45 (m, 2H), 1.07 - 0.99 (m, 6H)。
LC-MS: (M+H) +: 621.4
HPLC：純度：98.0% (220 nm) 實例 17 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-1- 乙基 -4-(2,2,2- 三氟乙氧基 )-1H- 吡唑 -3- 甲醯胺 ( 化合物 39) 步驟 1. (Z)-4- 氯 -2-(2-(4- 甲氧基苯基 ) 亞肼基 )-3- 側氧基丁酸乙酯
在10℃下向HCl (3.00 M，45.0 mL，3.33當量)之溶液中緩慢添加化合物 39-2(5.00 g，40.6 mmol，1.00當量)。接著將化合物冷卻至0℃，並且添加NaNO 2(2.94 g，42.6 mmol，1.05當量)於H 2O (10.0 mL)中之溶液，混合物變為黃色溶液(溶液A)。在0℃至5℃下向化合物 39-1(7.35 g，44.6 mmol，1.10當量)及NaOAc (16.6 g，203 mmol，5.00當量)於EtOH (10.0 mL)及H 2O (10.0 mL)中之混合物中添加溶液A。接著在15℃下攪拌混合物1小時。TLC指示化合物 39-2被完全消耗並且形成一個新斑點。根據TLC，反應係純淨的。(石油醚:乙酸乙酯= 1:1，R f(P1)= 0.300)。過濾混合物，並且將濾餅用水(200 mL)洗滌並經高真空乾燥，得到呈黃色固體狀之產物。獲得呈黃色固體狀之化合物 39-3(10.0 g，33.4 mmol，82.4%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ12.34 (s, 1H), 7.52 - 7.50 (m, 2H), 7.00 - 6.98 (m, 2H), 4.93 (s, 2H), 4.33 - 4.28 (m, 2H), 3.76 (s, 3H), 1.30 (t, J= 2.80 Hz, 3H)。 步驟 2. 4- 羥基 -1-(4- 甲氧基苯基 )-1H- 吡唑 -3- 甲酸乙酯
向化合物 39-3(5.00 g，16.7 mmol，1.00當量)於EtOH (50.0 mL)中之溶液中添加KOAc (3.29 g，33.4 mmol，2.00當量)。在78℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。在減壓下濃縮反應混合物以移除EtOH。殘餘物用H 2O (100 mL)稀釋，並且用EtOAc (100 mL * 2)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之化合物 39-4(4.00 g，15.2 mmol，91.1%產率)。 步驟 3. 1-(4- 甲氧基苯基 )-4-(2,2,2- 三氟乙氧基 )-1H- 吡唑 -3- 甲酸乙酯
向化合物 39-4(4.00 g，15.2 mmol，1.00當量)於DMF (20.0 mL)中之溶液中添加Cs 2CO 3(9.94 g，30.5 mmol，2.00當量)及化合物 39-5(4.25 g，18.3 mmol，1.20當量)。在20℃下攪拌混合物10小時。LC-MS顯示起始材料被消耗並發現了所需質量。混合物用水(40.0 mL)稀釋，用METB(20.0 mL * 3)萃取。合併之有機層用鹽水(25.0 mL)洗滌並經Na 2SO 4乾燥，過濾並在真空中濃縮。藉由H NMR證實，獲得呈棕色固體狀之化合物 39-6(4.90 g，14.2 mmol，93.3%產率)。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ8.56 (s, 1H), 7.74 - 7.72 (m, 2H), 7.11 - 7.09 (m, 2H), 4.77 - 4.70 (m, 2H), 4.34 - 4.27 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 1.30 (t, J= 7.20 Hz, 3H)。 步驟 4. 4-(2,2,2- 三氟乙氧基 )-1H- 吡唑 -3- 甲酸乙酯
在0℃下向化合物 39-6(4.90 g，14.2 mmol，1.00當量)於IPA (30.0 mL)中之溶液中添加CAN (27.3 g，49.8 mmol，24.8 mL，3.50當量)於H 2O (30.0 mL)中之溶液。在20℃下攪拌混合物10小時。LC-MS顯示發現了所需質量。反應混合物用EtOAc (30.0 mL * 2)萃取。合併之有機層用NaHCO 3飽和水溶液(30.0 mL * 2)、鹽水(50.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在真空中濃縮濾液。粗產物藉由反相HPLC (0.100% HCl條件)進行純化。獲得呈黃色固體狀之化合物 39-7(1.30 g，5.46 mmol，38.3%產率)。 步驟 5. 1- 乙基 -4-(2,2,2- 三氟乙氧基 )-1H- 吡唑 -3- 甲酸乙酯
向化合物 39-7(1.30 g，5.46 mmol，1.00當量)於二㗁烷(20.0 mL)中之溶液中添加Cs 2CO 3(3.56 g，10.9 mmol，2.00當量)及化合物 39-8(1.28 g，8.19 mmol，654 μL，1.50當量)。在20℃下攪拌混合物10小時。LC-MS顯示起始材料被消耗並發現所需質量。過濾混合物並在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之化合物 39-9(1.55 g，粗產物)。 步驟 6. 1- 乙基 -4-(2,2,2- 三氟乙氧基 )-1H- 吡唑 -3- 甲酸
在0℃下向化合物 39-9(700 mg，2.63 mmol，1.00當量)於MeOH (6.00 mL)中之溶液中添加含NaOH (210 mg，5.26 mmol，2.00當量)之H 2O (6.00 mL)。在20℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。TLC (PE:EtOAc = 1:1，R f(R1)= 0.300)指示起始材料被完全消耗。在0℃下用HCl (1 M)將混合物調節至pH = 3，並且用DCM (50.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，並且在減壓下將溶劑蒸發。藉由H NMR證實，獲得呈白色固體狀之化合物 39-10(550 mg，2.31 mmol，87.8%產率)。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ12.57 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 4.64 - 4.57 (m, 2H), 4.12 - 4.07 (m, 2H), 1.36 (t, J= 7.20 Hz, 3H)。 步驟 7. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-1- 乙基 -4-(2,2,2- 三氟乙氧基 )-1H- 吡唑 -3- 甲醯胺
向化合物 39-11(50.0 mg，122 μmol，92.7%純度，1.00當量)及化合物 39-10(26.3 mg，110 μmol，0.900當量)於吡啶(3.00 mL)中之溶液中添加EDCI (94.1 mg，491 μmol，4.00當量)。在20℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用DCM(60.0 mL)稀釋並用水(20.0 mL * 3)洗滌。有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (管柱：3_Phenomenex Luna C18 75.0 * 30.0 mm * 3.00 um；流動相：[水(HCl)-ACN]；B%：28.0%至48.0%，8分鐘)進行純化。如藉由H NMR及LC-MS證實，獲得 化合物 39(15.0 mg，24.9 μmol，20.2%產率，99.3%純度)。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ11.61 (s, 1H), 9.97 (s, 1H), 7.93 - 7.90 (m, 3H), 7.45 - 7.43 (m, 2H), 7.07 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 4.75 - 4.68 (m, 2H), 4.59 (d, J= 13.6 Hz, 1H), 4.30 (s, 2H), 4.21 - 4.15 (m, 2H), 4.07 (d, J= 13.2 Hz, 1H), 3.16 - 3.10 (m, 1H), 2.94 - 2.87 (m, 2H), 2.63 - 2.60 (m, 1H), 1.93 - 1.85 (m, 2H), 1.62 - 1.50 (m, 2H), 1.45 - 1.41 (m, 3H), 1.04 - 0.99 (m, 6H)。
LC-MS: (M+H) +: 598.4
HPLC：純度：99.3% (220 nm) 實例 18 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-1-(4- 氟苯基 )-4-(2,2,2- 三氟乙氧基 )-1H- 吡唑 -3- 甲醯胺 ( 化合物 40) 步驟 1. (Z)-4- 氯 -2-(2-(4- 氟苯基 ) 亞肼基 )-3- 側氧基丁酸乙酯
在0℃下向HCl (3.00 M，45.0 mL，3.00當量)中添加化合物 40-2(5.00 g，45.0 mmol，4.31 mL，1.00當量)，接著在0℃下向反應混合物添加含NaNO 2(3.26 g，47.2 mmol，1.05當量)之H 2O (10.0 mL)。在0℃下攪拌反應混合物1小時。在第一次監測後，在0℃下向含化合物 40-1(8.15 g，49.5 mmol，1.10當量)及NaOAc (18.4 g，224 mmol，5.00當量)之EtOH (50.0 mL)及H 2O (50.0 mL)中逐滴添加先前之反應混合物。在20℃下攪拌反應混合物5小時。LC-MS顯示化合物 40-2被完全消耗。LC-MS上顯示一個具有所需m/z (MS=287，RT=0.891)之主峰。過濾反應混合物並將濾餅用H 2O (50.0 mL * 2)洗滌，接著在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈紅色固體狀之化合物 40-3(12.0 g，粗產物)。 步驟 2. 1-(4- 氟苯基 )-4- 羥基 -1H- 吡唑 -3- 甲酸乙酯
在20℃下向化合物 40-3(12.0 g，41.8 mmol，1.00當量)於EtOH (100 mL)中之溶液中添加KOAc (8.22 g，83.7 mmol，2.00當量)。在80℃下攪拌反應混合物2小時。LC-MS顯示化合物 40-3被完全消耗。LC-MS上顯示一個具有所需m/z (MS=251，RT=0.788)之主峰。在減壓下濃縮反應混合物以移除EtOH，接著用H 2O (100 mL)稀釋，並且接著用EtOAc (100 mL * 3)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，接著過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈紅色固體狀之化合物 40-4(10.4 g，粗產物)。 步驟 3. 1-(4- 氟苯基 )-4-(2,2,2- 三氟乙氧基 )-1H- 吡唑 -3- 甲酸乙酯
在20℃下向化合物 40-4(2.00 g，7.99 mmol，1.00當量)於DMF (20.0 mL)中之溶液中添加NaH (639 mg，15.9 mmol，60.0%純度，2.00當量)。在20℃下攪拌反應混合物30分鐘。在20℃下向反應混合物中添加化合物 40-5(3.71 g，15.9 mmol，2.00當量)。在60℃下攪拌反應混合物1小時。LC-MS顯示化合物 40-4被完全消耗。LC-MS上顯示一個具有所需m/z (MS=333，RT=0.895)之主峰。反應混合物用H 2O (60.0 mL)稀釋，接著用EtOAc(60 mL * 3)萃取。合併之有機層用H 2O(60.0 mL)及鹽水(60.0 mL)洗滌，接著經無水Na 2SO 4乾燥，接著過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈棕色固體狀之化合物 40-6(4.00 g，粗產物)。 步驟 4. 1-(4- 氟苯基 )-4-(2,2,2- 三氟乙氧基 )-1H- 吡唑 -3- 甲酸
在20℃下向化合物 40-6(3.50 g，10.5 mmol，1.00當量)於MeOH (20.0 mL)中之溶液中添加含NaOH (842 mg，21.0 mmol，2.00當量)之H 2O (20.0 mL)。在20℃下攪拌反應混合物12小時。LC-MS顯示化合物 40-6被完全消耗。LC-MS上顯示一個具有所需m/z (MS=305 RT=0.810)之主峰。HPLC顯示對應之峰以指導純化。反應混合物用1 M HCl淬滅直至pH約為2，接著在減壓下濃縮以移除MeOH。水相用EtOAc(100 mL * 3)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，接著過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (FA條件，管柱：Phenomenex luna C18 (250 * 70 mm，10 um)；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：30%至60%，21分鐘)進行純化。如藉由H NMR及LC-MS證實，獲得呈白色固體狀之化合物 40-7(1.50 g，4.93 mmol，46.8%產率，100%純度)。
HPLC：純度：87.6% (220 nm)
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ13.00 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 7.87 - 7.83 (m, 2H), 7.43 - 7.38 (m, 2H), 4.76 - 4.70 (m, 2H)。
LC-MS: (M+H) +: 305.0 步驟 5. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-1-(4- 氟苯基 )-4-(2,2,2- 三氟乙氧基 )-1H- 吡唑 -3- 甲醯胺
向化合物 40-8(50.0 mg，128 μmol，97.0%純度，1.00當量)於DMF (3.00 mL)中之溶液中添加化合物 40-7(37.1 mg，122 μmol，100%純度，0.950當量)、HATU (73.2 mg，192 μmol，1.50當量)及DIEA (49.8 mg，385 μmol，67.1 μL，3.00當量)。在20℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物藉由添加水(30.0 mL)淬滅，接著用EtOAc (30.0 mL * 5)萃取。合併之有機層用水(60.0 mL * 5)及鹽水(60.0 mL * 3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.40)進行純化並進一步藉由製備型HPLC (管柱：3_Phenomenex Luna C18 75 * 30 mm * 3 um；流動相：[水(HCl)-ACN]；B%：36%至56%，8分鐘)進行純化。如藉由H NMR及LC-MS證實，獲得 化合物 40(11.0 mg，15.7 μmol，12.2%產率，94.8%純度)。
H NMR: (400 MHz, MeOD) δ8.34 (s, 1H), 7.93 - 7.85 (m, 4H), 7.52 - 7.49 (m, 2H), 7.29 - 7.25 (m, 2H), 7.16 (s, 1H), 6.81 (s, 1H), 4.74 - 4.68 (m, 3H), 4.20 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 3.27 - 3.24 (m, 1H), 3.02 - 2.96 (m, 2H), 2.73 - 2.72 (m, 1H), 2.04 - 1.96 (m, 2H), 1.69 - 1.64 (m, 2H), 1.15 - 1.10 (m, 6H)。
LC-MS: (M+H) +: 664.4
HPLC：純度：94.8% (220 nm) 實例 19 2-((4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 ) 胺基甲醯基 )-6-(4- 氟苯基 ) 吡啶 1- 氧化物 ( 化合物 42) 步驟 1. 6-(4- 氟苯基 ) 吡啶甲酸
在20℃下向化合物 42-1(1.00 g，4.95 mmol，1.20當量)及化合物 42-2(577 mg，4.13 mmol，1.00當量)於EtOH (10.0 mL)及甲苯(10.0 mL)中之溶液中添加Cs 2CO 3(2.69 g，8.25 mmol，2.00當量)及Pd(PPh 3) 4(95.3 mg，82.5 μmol，0.0200當量)。在90℃下攪拌反應混合物12小時。LC-MS顯示化合物 42-2被完全消耗。反應混合物用1.00 M HCl淬滅直至pH約為3，接著過濾並在減壓下濃縮以移除EtOH及甲苯。過濾殘餘物並在減壓下濃縮濾餅，得到殘餘物。藉由H NMR證實，獲得呈紅色固體狀之化合物 42-3(1.04 g，粗產物)。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ13.23 (m, 1H), 8.27 - 8.25 (m, 2H), 8.24 - 8.23 (m, 1H), 8.06 - 8.05 (m, 1H), 8.00 - 7.98 (m, 1H), 7.37 - 7.32 (m, 2H)。 步驟 2. 6-(4- 氟苯基 ) 吡啶甲酸甲酯
在20℃下向化合物 42-3(850 mg，3.91 mmol，1.00當量)於MeOH (10.0 mL)中之溶液中添加SOCl 2(931 mg，7.83 mmol，567 μL，2.00當量)。在60℃下攪拌反應混合物3小時。LC-MS顯示起始材料被完全消耗。反應混合物用NaHCO 3飽和水溶液淬滅直至pH約為8，接著用EtOAc 30.0 mL (10.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，接著過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈淡黃色油狀之化合物 42-4(1.00 g，粗產物)。 步驟 3. 2-(4- 氟苯基 )-6-( 甲氧羰基 ) 吡啶 1- 氧化物
在0℃下向化合物 42-4(300 mg，1.30 mmol，1.00當量)於DCM (10.0 mL)中之溶液中添加m-CPBA (1.12 g，5.19 mmol，80.0%純度，4.00當量)。將混合物加熱至40℃，保持12小時。LC-MS顯示偵測到約30.0%之所需質量。反應混合物用NaHCO 3飽和水溶液(20.0 mL)及水(20.0 mL)稀釋，用DCM (30.0 mL * 3)萃取，合併之有機層用鹽水(50.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (PE:EtOAc = 1:1，R f(P1)= 0.1)進行純化。獲得呈白色固體狀之化合物 42-5(80.0 mg，323 μmol，24.9%產率，100%純度)。
LC-MS: (M+H) +: 248.1 步驟 4. 2- 羧基 -6-(4- 氟苯基 ) 吡啶 1- 氧化物
在0℃下向化合物 42-5(160 mg，647 μmol，1.00當量)於MeOH (3.00 mL)中之溶液中添加NaOH (1.00 M，1.50 mL，2.32當量)，在20℃下攪拌混合物3小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。濃縮殘餘物以移除溶劑，接著溶解於水(10.0 mL)中，在0℃下用1.00 M HCl調節至pH = 3，用DCM (10.0 mL * 3)萃取，合併之有機層用鹽水(20.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮，得到殘餘物。獲得呈淡黃色固體狀之 42-6(130 mg，557 μmol，86.1%產率)。
H NMR: (400 MHz, CDCl 3) δ8.35 - 8.33 (m, 1H), 8.04 - 8.03 (m, 1H), 7.95 - 7.90 (m, 1H), 7.89 - 7.87 (m, 2H), 7.43 - 7.39 (m, 2H)。 步驟 5. 2-((4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 ) 胺基甲醯基 )-6-(4- 氟苯基 ) 吡啶 1- 氧化物
向化合物 42-7(50.0 mg，122 μmol，92.7%純度，1.00當量)、 42-6(25.7 mg，110 μmol，0.900當量)及HATU (70.0 mg，184 μmol，1.50當量)於DMF (4.00 mL)中之溶液中添加DIEA (47.6 mg，368 μmol，64.1 μL，3.00當量)。在20℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物藉由添加水(30.0 mL)淬滅，接著用EtOAc (10.0 mL * 5)萃取。合併之有機層用水(10.0 mL * 5)及鹽水(10.0 mL * 3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.400)進行純化並進一步藉由製備型HPLC (FA條件；管柱：Phenomenex Synergi C18 150.0 * 25.0 mm * 10.0 um；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：41.0%至71.0%，10分鐘)進行純化。如藉由H NMR、LC-MS及HPLC證實，獲得 化合物 42(23.0 mg，38.2 μmol，31.1%產率，98.5%純度)。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ13.51 (s, 1H), 11.68 (s, 1H), 8.35 - 8.33 (m, 1H), 7.91 - 7.87 (m, 5H), 7.76 - 7.71 (m, 1H), 7.52 - 7.50 (m, 2H), 7.41 - 7.36 (m, 2H), 7.09 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 4.58 (d, J= 13.6 Hz, 1H), 4.29 (s, 2H), 4.07 (d, J= 13.2 Hz, 1H), 3.17 - 3.10 (m, 1H), 2.94 - 2.86 (m, 2H), 2.83 - 2.60 (m, 1H), 1.93 - 1.85 (m, 2H), 1.62 - 1.45 (m, 2H), 1.07 - 0.99 (m, 6H)。
LC-MS: (M+H) +: 593.3
HPLC：純度：98.5% (220 nm) 實例 20 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -4- 側氧基 -1,4- 二氫嗒 𠯤 -3- 甲醯胺 ( 化合物 43) 步驟 1. 2-(4- 氟苯基 ) 乙醯氯
向化合物 43-1(10.0 g，64.8 mmol，1.00當量)於DCM (100 mL)中之溶液中添加SOCl 2(9.26 g，77.8 mmol，5.65 mL，1.20當量)。在20℃下攪拌混合物10小時。TLC (PE:EtOAc = 3:1)顯示起始材料被消耗並形成了主要之新斑點。在真空中濃縮混合物。獲得呈黃色油狀之粗產物 43-2(11.0 g，粗產物)。 步驟 2. 2- 重氮基 -4-(4- 氟苯基 )-3- 側氧基丁酸乙酯
在0℃下向化合物 43-2(11.0 g，63.7 mmol，1.00當量)於EtOAc (100 mL)中之溶液中添加化合物 43-3(14.5 g，127 mmol，13.3 mL，2.00當量)。在20℃下攪拌混合物10小時。LC-MS顯示發現所需質量。用飽和K 2CO 3(10.0 mL)稀釋混合物，並且攪拌20分鐘。將混合物分離並用EtOAc (10.0 mL * 3)萃取水相。合併之有機層用鹽水(10.0 mL * 2)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(SiO 2，PE:EtOAc = 100: 0至100:1)(PE:EtOAc = 5:1，R f(P1)= 0.400)進行純化。藉由H NMR證實，獲得呈黃色固體狀之化合物 43-4(4.70 g，18.7 mmol，29.4%產率)。
H NMR: (400 MHz, CDCl 3) δ7.31 - 7.27 (m, 2H), 7.05 - 7.01 (m, 2H), 4.38 - 4.32 (m, 2H), 4.16 (s, 2H), 1.39 - 1.35 (m, 3H)。 步驟 3. (E)-4-(4- 氟苯基 )-2- 亞肼基 -3- 側氧基丁酸乙酯
在0℃下向化合物 43-4(3.00 g，11.9 mmol，1.00當量)於MTBE (15.0 mL)中之溶液中添加 n-Bu 3P (2.91 g，14.3 mmol，3.55 mL，1.20當量)。在20℃下攪拌混合物10小時。LC-MS顯示發現了所需質量。H NMR顯示有所需產物。添加EtOAc (10.0 mL)及水(20.0 mL)，並且將層分離。有機相用飽和鹽水(20.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在真空中濃縮。獲得呈黃色油狀之化合物 43-5(3.00 g，11.8 mmol，99.2%產率)。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ7.23 - 7.19 (m, 2H), 7.11 - 7.07 (m, 2H), 4.09 - 4.04 (m, 2H), 3.92 (s, 2H), 3.32 (s, 2H), 1.17 - 1.15 (m, 3H)。 步驟 4. (E)-2-(1- 乙氧基 -4-(4- 氟苯基 )-1,3- 二氧丁烷 -2- 亞基 ) 肼 -1- 甲酸第三丁酯
向化合物 43-5(1.00 g，3.96 mmol，1.00當量)於THF (10.0 mL)中之溶液中添加DMAP (145 mg，1.19 mmol，0.300當量)、TEA (882 mg，8.72 mmol，1.21 mL，2.20當量)及Boc 2O(1.73 g，7.93 mmol，1.82 mL，2.00當量)。將混合物在20℃下攪拌4小時。LC-MS顯示起始材料被完全消耗並發現了所需質量。將混合物用EtOAc (15.0 mL)及水(10.0 mL)稀釋，接著分離。將有機層用鹽水(10.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在真空中濃縮。獲得呈黃色油狀之化合物 43-6(1.10 g，3.12 mmol，78.7%產率)。 步驟 5. 5-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -4- 側氧基 -1,4- 二氫嗒 𠯤 -3- 甲酸乙酯
向化合物 43-6(1.00 g，2.84 mmol，1.00當量)於甲苯(10.0 mL)中之溶液中添加DMF-DMA (675 mg，5.66 mmol，752 μL，2.00當量)。將混合物在60℃下攪拌10小時。LC-MS顯示起始材料被完全消耗。在真空中濃縮混合物。殘餘物藉由管柱層析法(SiO 2，PE:EtOAc = 100: 0至100: 30)(PE:EtOAc = 1:1，R f(P1)= 0.400)進行純化。藉由2D NMR證實，獲得呈黃色固體狀之化合物 43-7(0.500 g，1.81 mmol，63.7%產率)。 步驟 6. 5-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -4- 側氧基 -1,4- 二氫嗒 𠯤 -3- 甲酸
在0℃下向化合物 43-7(100 mg，361 μmol，1.00當量)於MeOH (1.00 mL)中之溶液中添加含NaOH (28.9 mg，723 μmol，2.00當量)之H 2O (1.00 mL)。在20℃下攪拌混合物6小時。TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(R1)= 0.800)顯示起始材料被完全消耗。在0℃下將混合物用HCl (1 M)調節至PH = 3，並且用DCM (50.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，並且在減壓下將溶劑蒸發。殘餘物藉由製備型HPLC (FA條件；管柱：Unisil 3-100 C18 Ultra 150 * 50.0 mm * 3.00 um；流動相：[水(FA)- ACN]；B%：12.0%至42.0%，7分鐘)進行純化。藉由H NMR及LC-MS證實，獲得呈白色固體狀之化合物 43-8(50.0 mg，201 μmol，55.6%產率，100%純度)。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ9.05 (s, 1H), 7.95 - 7.91 (m, 2H), 7.38 - 7.34 (m, 2H), 4.14 (s, 3H)。
LC-MS: (M+H) +: 249.1 步驟 7. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -4- 側氧基 -1,4- 二氫嗒 𠯤 -3- 甲醯胺
向化合物 43-9(50.0 mg，122 μmol，92.7%純度，1.00當量)及 43-8(27.4 mg，110 μmol，100%純度，0.900當量)於吡啶(3.00 mL)中之溶液中添加EDCI (94.1 mg，491 μmol，4.00當量)。將混合物在20℃下攪拌2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物藉由添加水(10.0 mL)淬滅，接著用DCM (20.0 mL)萃取。用鹽水(10.0 mL * 3)洗滌有機層。接著將合併之水相用DCM (10.0 mL * 3)萃取。接著將合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (FA條件；管柱：Phenomenex Synergi C18 150 * 25.0 mm * 10.0 um；流動相：[水(FA)- ACN]；B%：35.0%至65.0%，8分鐘)進行純化。如藉由H NMR及LC-MS證實，獲得 化合物 43(20.0 mg，32.1 μmol，26.1%產率，97.7%純度)。
H NMR:(400 MHz, DMSO -d 6) δ12.41 (s, 1H), 11.62 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 7.96 - 7.92 (m, 2H), 7.86 - 7.83 (m, 2H), 7.51 - 7.49 (m, 2H), 7.37 - 7.32 (m, 2H), 7.08 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 4.59 (d, J= 13.6 Hz, 1H), 4.30 - 4.27 (m, 2H), 4.12 (s, 3H), 4.08 (d, J= 14.8 Hz, 1H), 3.16 - 3.13 (m, 1H), 2.94 - 2.88 (m, 2H), 2.63 - 2.57 (m, 1H), 1.94 - 1.86 (m, 2H), 1.63 - 1.48 (m, 2H), 1.04 - 1.00 (m, 6H)。
LC-MS:(M+H) +: 608.4
HPLC ：純度：97.7% (220 nm) 實例 21 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1- 甲基 -1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-4- 羥基菸鹼醯胺 ( 化合物 44)
向化合物 44-1(30.0 mg，75.1 μmol，98.0%純度，1.00當量)、化合物 44-2(17.5 mg，75.1 μmol，100%純度，1.00當量)及HATU (42.8 mg，112 μmol，1.50當量)於DMF (3.00 mL)中之溶液中添加DIEA (29.1 mg，225 μmol，39.2 μL，3.00當量)。在20℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將反應混合物用水(50.0 mL)淬滅，接著用EtOAc(10.0 mL * 5)萃取。合併之有機層用水(10.0 mL * 4)及鹽水(10.0 mL * 4)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC(DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.400)進行純化。如藉由H NMR及LC-MS證實，獲得 化合物 44(20.0 mg，32.6 μmol，43.4%產率，99.0%純度)。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6) δ13.09 (s, 1H), 12.64 (s, 1H), 8.63 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 8.09 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.84 - 7.82 (m, 2H), 7.74 - 7.70 (m, 2H), 7.47 - 7.45 (m, 2H), 7.29 - 7.25 (m, 2H), 7.22 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 4.60 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 4.35 (s, 2H), 4.08 (d, J= 10.4 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.17 - 3.10 (m, 1H), 2.94 - 2.88 (m, 2H), 2.63 - 2.60 (m, 1H), 1.93 - 1.86 (m, 2H), 1.67 - 1.55 (m, 2H), 1.05 - 1.00 (m, 6H)。
LC-MS: (M+H) +: 607.4
HPLC：純度：99.0% (220 nm) 實例 22 N-(4-(4- 胺基 -1-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-4- 羥基菸鹼醯胺 ( 化合物 45) 步驟 1. 1-(4-(3-(4- 胺基苯基 )-4-((3,4- 二甲基苯甲基 ) 胺基 )-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -1- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
向化合物 45-1(50.0 mg，96.5 μmol，99.6%純度，1.00當量)及化合物 45-2(42.2 mg，193 μmol，2.00當量)於THF (4.00 mL)中之溶液中添加含K 2CO 3(40.0 mg，289 μmol，3.00當量)之H 2O (1.00 mL)及Pd(PPh 3) 4(11.1 mg，9.65 μmol，0.100當量)。在N 2氛圍下在80℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(20.0 mL)淬滅，接著用EtOAc (30.0 mL)萃取。有機層用水(10.0 mL * 3)及鹽水(10.0 mL * 3)洗滌，並且合併之水層用EtOAc(30.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.300)進行純化。藉由H NMR證實，獲得呈黃色固體狀之化合物 45-3(68.0 mg，粗產物)。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ7.92 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.72 - 7.68 (m, 1H), 7.40 - 7.38 (m, 2H), 7.21 - 7.19 (m, 1H), 6.74 - 6.72 (m, 2H), 6.60 - 6.59 (m, 1H), 6.41 - 6.39 (m, 2H), 4.81 (d, J= 12.4 Hz, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.55 - 4.47 (m, 1H), 4.14 (d, J= 13.6 Hz, 1H), 3.84 - 3.81 (m, 2H), 3.79 (s, 3H), 3.61 (s, 3H), 3.29 - 3.22 (m, 1H), 2.88 - 2.77 (m, 2H), 2.33 - 2.21 (m, 2H), 2.11 - 2.01 (m, 2H), 1.20 - 1.12 (m, 6H)。 步驟 2. N-(4-(4-((3,4- 二甲基苯甲基 ) 胺基 )-1-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-4- 羥基菸鹼醯胺
向化合物 45-3(60.0 mg，113 μmol，1.00當量)及化合物 45-4(31.7 mg，136 μmol，1.20當量)於DMF (3.00 mL)中之溶液中添加HATU (64.7 mg，170 μmol，1.50當量)及DIEA (44.0 mg，340 μmol，59.3 μL，3.00當量)。接著在20℃下攪拌混合物6小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(50.0 mL)淬滅，接著用EtOAc(10.0 mL * 3)萃取。合併之有機層用水(10.0 mL * 4)及鹽水(10.0 mL * 4)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。藉由H NMR證實，獲得呈黃色固體狀之化合物 45-5(100 mg，粗產物)。
H NMR:(400 MHz, DMSO -d 6) δ13.15 (s, 1H), 8.64 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.10 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.87 - 7.82 (m, 3H), 7.74 - 7.71 (m, 2H), 7.64 - 7.61 (m, 1H), 7.57 - 7.54 (m, 2H), 7.30 - 7.25 (m, 2H), 7.12 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 6.94 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 6.48 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.42 - 6.39 (m, 1H), 5.61 - 5.60 (m, 1H), 4.82 - 4.81 (m, 1H), 4.59 - 4.53 (m, 1H), 4.50 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 4.13 - 4.09 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.61 (s, 3H), 2.96 - 2.91 (m, 2H), 2.03 - 1.87 (m, 4H), 1.03 - 1.01 (m, 6H)。 步驟 3. N-(4-(4- 胺基 -1-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-4- 羥基菸鹼醯胺
在0℃下向化合物 45-5(50.0 mg，67.2 μmol，1.00當量)於DCM (2.00 mL)中之溶液中添加TFA (3.08 g，27.0 mmol，2.00 mL，401當量)。將混合物在20℃下攪拌3小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用飽和NaHCO 3(10.0 mL)淬滅，接著用DCM (10.0 mL * 5)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (鹼性條件；管柱：Waters Xbridge 150 * 25.0 mm * 5.00 um；流動相：[水(氫氧化氨v/v)-ACN]；B%：23.0%至53.0%，9分鐘)進行純化。如藉由H NMR及LC-MS證實，獲得 化合物 45(16.0 mg，26.6 μmol，39.6%產率，98.9%純度)。
H NMR:(400 MHz, MeOD) δ8.76 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.91 - 7.89 (m, 2H), 7.73 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.66 - 7.61 (m, 4H), 7.18 - 7.14 (m, 2H), 6.95 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 4.84 - 4.79 (m, 1H), 4.72 (d, J= 13.2 Hz, 1H), 4.26 (d, J= 13.6 Hz, 1H), 3.41 - 3.35 (m, 1H), 3.06 - 3.00 (m, 1H), 2.94 - 2.89 (m, 1H), 2.27 - 2.23 (m, 1H), 2.14 - 2.08 (m, 3H), 1.17 - 1.11 (m, 6H)。
LC-MS:(M+H) +: 594.3
HPLC ：純度：98.9% (215 nm) 實例 23 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -4- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 46) 步驟 1. 1-(4-(3- 胺基 -4- 溴 -1- 甲基 -1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -6- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
向化合物 46-1(35.0 mg，95.5 μmol，1.00當量)及K 2CO 3(26.4 mg，191 μmol，2.00當量)於DMF (2.00 mL)中之溶液中添加CH 3I (13.5 mg，95.5 μmol，5.95 μL，1.00當量)。在45℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用H 2O 10.0 mL稀釋並用EtOAc 40.0 mL (20.0 mL * 2)萃取。合併之有機層用鹽水60.0 mL (20.0 mL * 3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，DCM:MeOH = 10:1)進行純化。(板1：DCM：MeOH = 10:1)。獲得呈白色固體狀之化合物 46-2(10.0 mg，26.3 μmol，27.5%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR: (400 MHz, DMSO- d6) δ7.27 (s, 1H), 5.52 (s, 2H), 4.58 - 4.54 (m, 1H), 4.07 - 4.04 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.16 - 3.10 (m, 2H), 2.92 - 2.88 (m, 2H), 1.95 - 1.86 (m, 2H), 1.62 - 1.49 (m, 2H), 1.03 - 0.98 (m, 6H)。 步驟 2. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -4- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺
將化合物 46-2(5.00 mg，13.5 μmol，1.00當量)、化合物 46-3(18.7 mg，39.4 μmol，3.00當量)及DIEA (5.10 mg，39.4 μmol，6.87 μL，3.00當量)、Pd(t-Bu 3P) 2(671 ug，1.31 μmol，0.100當量)溶解於微波管中之二㗁烷(1.50 mL)、H 2O(0.100 mL)中。在微波下在130℃下加熱密封管60分鐘。LC-MS顯示偵測到所需質量。濃縮反應混合物，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，DCM:MeOH = 10:1)進行純化。(板1：DCM：MeOH = 10:1)。殘餘物藉由製備型HPLC (鹼性條件，管柱：Waters Xbridge 150 * 25 mm * 5 um；流動相：[水(氫氧化氨v/v)-ACN]；B%：30%至60%，9分鐘)進行純化。如藉由H NMR、LC-MS及HPLC證實，獲得 化合物 46(1.71 mg，2.39 μmol，18.2%產率，91.0%純度)。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ10.87 (s, 1H), 8.76 - 8.72 (m, 2H), 8.01 - 7.97 (m, 1H), 7.82 - 7.80 (m, 2H), 7.72 - 7.70 (m, 2H), 7.53 - 7.49 (m, 1H), 7.41 - 7.40 (m, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.03 - 4.96 (m, 1H), 4.87 - 4.84 (m, 1H), 4.08 - 4.03 (m, 3H), 3.84 (s, 3H), 3.20 - 3.08 (m, 2H), 2.93 - 2.80 (m, 1H), 2.72 - 2.67 (m, 1H), 2.21 - 2.09 (m, 2H), 1.80 - 1.74 (m, 2H), 1.51 (d, J =6.8 Hz, 6H), 1.16 (t, J =6.8 Hz, 7.6H)。
LC-MS:M+H: 650.4
HPLC ：91.0%純度 實例 24 N-(4-(5- 胺基 -1-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 咪唑并 [1,5-c] 嘧啶 -3- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 47) 步驟 1. 2-( 雙 (4- 甲氧基苯甲基 ) 胺基 ) 嘧啶 -4- 甲腈
向化合物 47-1(5.00 g，35.8 mmol，1.00當量)、(PMB) 2NH (9.36 g，35.8 mmol，1.00當量)於MeCN (50.0 mL)中之溶液中添加K 2CO 3(5.94 g，43.0 mmol，1.20當量)，在80℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾混合物並濃縮以移除溶劑。粗產物用(PE/EA = 10:1，V/V，50.0 mL)在20℃下研磨2小時，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 47-2(11.0 g，30.5 mmol，85.1%產率)。
H NMR: (400 MHz, CDCl 3) δ8.50 (d, J= 4.8 Hz, 1H),7.18 (d, J= 8.0 Hz, 4H), 6.88 - 6.85 (m, 4H), 6.81 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 4.76 (s, 4H), 3.81 (s, 6H)。 步驟 2. ((2-( 雙 (4- 甲氧基苯甲基 ) 胺基 ) 嘧啶 -4- 基 ) 甲基 ) 胺基甲酸第三丁酯
向化合物 47-2(21.0 g，58.3 mmol，1.00當量)於DCM (84.0 mL)、MeOH (336 mL)中之溶液中添加Boc 2O (24.2 g，111 mmol，25.4 mL，1.90當量)、Pd/C (2.10 g，10%純度)及HOAc (22.1 g，367 mmol，21.0 mL，6.30當量)，接著脫氣並用H 2吹掃三次，在25℃下攪拌混合物5小時(50 psi)。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾混合物並濃縮以移除溶劑。殘餘物藉由管柱(SiO 2，PE:EtOAc = 50:1至3:1，板1，PE:EtOAc = 3:1，R f= 0.3)進行純化，得到呈無色油狀之所需產物化合物 47- 3(22.0 g，47.3 mmol，81.2%產率)。
H NMR: (400 MHz, CDCl 3) δ8.28 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 7.19 - 7.17 (m, 4H), 6.86 - 6.83 (m, 4H), 6.47 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 5.37 (br s, 1H), 4.79 (s, 4H), 4.26 (d, J= 4.8 Hz, 2H), 3.80 (s, 6H), 1.46 (s, 9H)。 步驟 3. 4-( 胺基甲基 )-N,N- 雙 (4- 甲氧基苯甲基 ) 嘧啶 -2- 胺
將化合物 47- 3(22.0 g，47.4 mmol，1.00當量)於HCl/MeOH (4 M，200 mL，16.9當量)中之溶液在20℃下攪拌4小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。濃縮混合物以移除溶劑，得到呈白色固體狀之所需產物化合物 47-4(18.9 g，47.1 mmol，99.5%產率，HCl)。 步驟 4. N-((2-( 雙 (4- 甲氧基苯甲基 ) 胺基 ) 嘧啶 -4- 基 ) 甲基 )-4- 硝基苯甲醯胺
在0℃下向化合物 47- 4(9.00 g，22.5 mmol，1.00當量，HCl)於DCM (100 mL)中之溶液中添加TEA (9.09 g，89.8 mmol，12.5 mL，4.00當量)，接著逐滴添加含化合物 47-5(4.17 g，22.5 mmol，1.00當量)之DCM (100 mL)，在0℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用NaHCO 3飽和水溶液(50.0 mL)及水(50.0 mL)稀釋，用DCM (100 mL * 3)萃取，合併之有機層用鹽水(200 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。粗產物用(PE/EA = 3:1，V/V，80 mL)研磨2小時，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 47- 6(7.80 g，15.1 mmol，67.6%產率)。
化合物 47-6之H NMR：(400 MHz, CDCl 3) δ8.38 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 8.11 - 8.09 (m, 2H), 7.62 - 7.60 (m, 2H), 7.53 (br s, 1H), 7.17 - 7.16 (m, 4H), 6.87 - 6.84 (m, 4H), 6.57 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 4.83 (br s, 4H), 4.57 - 4.56 (m, 2H), 3.80 (s, 6H)。 步驟 5. N-(4- 甲氧基苯甲基 )-3-(4- 硝基苯基 ) 咪唑并 [1,5-c] 嘧啶 -5- 胺及 N,N- 雙 (4- 甲氧基苯甲基 )-3-(4- 硝基苯基 ) 咪唑并 [1,5-c] 嘧啶 -5- 胺
向化合物 47- 6(5.80 g，11.3 mmol，1.00當量)於DCM (24.0 mL)中之溶液中逐滴添加2-MeOPyr (1.36 g，12.4 mmol，1.29 mL，1.10當量)、Tf 2O (3.82 g，13.6 mmol，2.24 mL，1.20當量)，將混合物加熱至25℃，保持5小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將反應混合物用NaHCO 3飽和水溶液(30.0 mL)及水(30.0 mL)稀釋，用DCM (50.0 mL * 3)萃取，將合併之有機層用鹽水(100 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (管柱：Welch Ultimate XB - CN 250 * 70 * 10 um；流動相：[己烷- EtOH (0.1% NH 3·H 2O)]；B%：10%至50%，15分鐘)進行純化，得到呈紅色固體狀之所需產物化合物 47-7 及 47-7A(3.80 g，10.1 mmol，89.6%產率)。 步驟 6. 3-(4- 硝基苯基 ) 咪唑并 [1,5-c] 嘧啶 -5- 胺
將化合物 47-7 及 47-7A(3.80 g，10.1 mmol，1.00當量)溶解於微波管中之TFA (46.2 g，405 mmol，30.0 mL，40.0當量)。在微波下在100℃下加熱密封管2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。混合物用DCM (100 mL)及水(100 mL)稀釋，在0℃下用NaOH水溶液調節至pH = 9，接著用DCM (300 mL * 3)萃取，合併之有機層用水(500 mL)、鹽水(500 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮，得到殘餘物。粗產物藉由製備型HPLC (管柱：Welch Ultimate XB - NH 2250 * 50 * 10 um；流動相：[己烷- EtOH(0.1% NH 3·H 2O)]；B%：5%至45%，15分鐘)進行純化。粗產物藉由管柱(SiO 2，PE:EtOAc = 1:1至0:1，板1，PE:EtOAc = 0:1，R f= 0.15)進行純化，得到呈紅色固體狀之所需產物化合物 47-8(400 mg，1.57 mmol，15.4%產率)。 H NMR: (400 MHz, DMSO) δ8.34 - 8.32 (m, 2H), 7.84 - 7.82 (m, 2H), 7.50 (s, 1H), 7.28 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 6.96 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 6.56 (brs, 2H)。 步驟 7. 1- 溴 -3-(4- 硝基苯基 ) 咪唑并 [1,5-c] 嘧啶 -5- 胺
在-10℃下向化合物 47-8(350 mg，1.37 mmol，1.00當量)於DCM (6.00 mL)、ACN (6.00 mL)中之溶液中分批添加NBS (220 mg，1.23 mmol，0.900當量)，在-10℃下攪拌混合物0.5小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(20.0 mL)稀釋，用DCM (100 mL * 3)萃取，合併之有機層用鹽水(150 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱(SiO 2，PE:EtOAc = 3:1至1:1，板1，PE:EtOAc = 1:1，R f= 0.6)進行純化，得到呈紅色固體狀之所需產物化合物 47-9(90.0 mg，269.3 μmol，19.6%產率)。
H NMR: (400 MHz, CDCl 3) δ8.33 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 7.86 - 7.83 (m, 2H), 7.39 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 6.80 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 6.74 (brs, 2H)。 步驟 8. 1-(4-(5- 胺基 -3-(4- 硝基苯基 ) 咪唑并 [1,5-c] 嘧啶 -1- 基 )-3,6- 二氫吡啶 -1(2H)- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
向化合物 47-9(90.0 mg，269 μmol，1.00當量)、化合物 47-10(90.2 mg，323 μmol，1.20當量)於二㗁烷(2.00 mL)、H 2O (0.400 mL)中之溶液中添加Na 2CO 3(57.1 mg，538 μmol，2.00當量)、Pd(PPh 3) 4(31.1 mg，26.9 μmol，0.100當量)，在90℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示化合物 47-9被消耗，並且偵測到所需質量。過濾混合物並濃縮以移除溶劑。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，板1，PE:EtOAc = 0:1，R f= 0.15)進行純化，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 47-11(60.0 mg，147.6 μmol，54.8%產率)。 步驟 9. 1-(4-(5- 胺基 -3-(4- 胺基苯基 ) 咪唑并 [1,5-c] 嘧啶 -1- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
向化合物 47-11(55.0 mg，135 μmol，1.00當量)於THF (1.00 mL)、MeOH (1.00 mL)中之溶液中添加Pd/C (10.0 mg，10%純度)，接著脫氣並用H 2吹掃三次，在20℃下攪拌混合物1小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾混合物並濃縮以移除溶劑，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 47-12(30.0 mg，79.2 μmol，58.5%產率)。 步驟 10. N-(4-(5- 胺基 -1-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 咪唑并 [1,5-c] 嘧啶 -3- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 47)
向化合物 47-12(25.0 mg，66.1 μmol，1.00當量)、化合物 47-13(18.2 mg，66.1 μmol，1.00當量)於Py (1.00 mL)中之溶液中添加EDCI (50.6 mg，264 μmol，4.00當量)，在20℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用NaHCO 3飽和水溶液(3.00 mL)及水(3.00 mL)稀釋，用DCM (3.00 mL * 3)萃取，合併之有機層用鹽水(5.00 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，板1，DCM:MeOH = 10:1，R f= 0.5)進行純化。殘餘物藉由製備型HPLC (管柱：Phenomenex luna C18 150 * 25 mm * 10 μm；流動相：[水(FA)- ACN]；B%：14%至44%，10分鐘)進行純化，得到所需產物 化合物 47(5.54 mg，8.54 μmol，12.9%產率，98.0%純度)，如藉由H NMR，LC-MS及HPLC證實。
H NMR: (400 MHz, CDCl 3) δ10.92 (s, 1H), 8.75 - 8.73 (m,1H), 8.70 (s, 1H), 8.01 - 7.96 (m, 1H), 7.78 - 7.76 (m, 2H), 7.57 - 7.55 (m, 2H), 7.52 - 7.49 (m, 1H), 7.38 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.08 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 6.80 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 5.01 - 4.95 (m, 1H), 4.78 (d, J= 13.2 Hz, 1H), 4.61 - 4.56 (m, 2H), 4.08 (d, J= 13.2 Hz, 1H), 3.18 - 3.11 (m, 2H), 2.87 - 2.80 (m, 1H), 2.70 (brs, 1H), 2.02 - 1.88 (m, 4H), 1.50 (d, J= 6.0 Hz, 6H), 1.14(t, J= 6.0 Hz, 6H)。
LC-MS:(M+H) +: 636.4
HPLC: 98.0%純度(220 nm) 實例 25 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 )-3- 氟苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-4- 羥基菸鹼醯胺 ( 化合物 48)
向化合物 48-1(50.0 mg，107 umol，85.0%純度，1.00當量)及化合物 48-2(25.0 mg，107 μmol，1.00當量)於DMF (3.00 mL)中之溶液中添加HATU (122 mg，322 μmol，3.00當量)及DIEA (41.7 mg，322 umol，56.2 uL，3.00當量)。在20℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。用水(50.0 mL)淬滅反應混合物，接著用EtOAc (10.0 mL * 5)萃取。合併之有機層用水(10.0 mL * 4)及鹽水(10.0 mL * 4)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。粗產物藉由製備型TLC (板1，DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.400)進行純化並進一步藉由製備型HPLC (HCl條件；管柱：3_Phenomenex Luna C18.0 75.0 * 30.0 mm * 3.00 um；流動相：[水(HCl)-ACN]；B%：28.0%至48.0%，8分鐘)進行純化。在減壓下濃縮混合物以移除MeCN並用飽和NaHCO 3調節直至pH約為8。用DCM:MeOH = 10:1 (20.0 mL * 3)萃取水部分。將合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，接著過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。如藉由H NMR及LC-MS證實，獲得 化合物 48(9.31 mg，14.8 umol，13.8%產率，97.4%純度)。
H NMR: (400 MHz, DMSO -d 6): δ13.67 (s, 1H), 11.61 (s, 1H), 8,63 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 8.07 (d, J= 0.8 Hz, 1H), 7.96 - 7.92 (m, 1H), 7.73 - 7.70 (m, 2H), 7.44 - 7.42 (m, 1H), 7.38 - 7.33 (m, 1H), 7.26 - 7.22 (m, 2H), 7.10 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 4.58 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 4.20 (s, 2H), 4.07 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 3.16 - 3.09 (m, 1H), 2.94 - 2.85 (m, 2H), 2.62 - 2.59 (m, 1H), 1.93 - 1.85 (m, 2H), 1.61 - 1.45 (m, 2H), 1.03 - 0.99 (m, 6H)。
LC-MS: (M+H) +: 611.3
HPLC：純度：97.4% (215 nm) 實例 26 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-1- 異丙基 -6- 甲基 -4- 側氧基 -1,4- 二氫吡啶 -3- 甲醯胺 ( 化合物 49)
向化合物 49-2(50.0 mg，122 μmol，92.7%純度，1.00當量)及化合物 49-1(32.3 mg，110 μmol，98.9%純度，0.900當量)於DMF (2.00 mL)中之溶液中添加HATU (70.0 mg，184 μmol，1.50當量)及DIEA (47.6 mg，368 μmol，64.1 μL，3.00當量)。在20℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(50.0 mL)淬滅，接著用EtOAc (10.0 mL * 5)萃取。合併之有機層用水(10.0 mL * 4)及鹽水(10.0 mL * 4)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。粗產物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.400)進行純化並進一步藉由製備型HPLC (FA條件；管柱：Phenomenex luna C18.0 150 * 25.0 mm * 10.0 um；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：41.0%至71.0%，10分鐘)進行純化。在減壓下濃縮混合物以移除MeCN並用飽和NaHCO 3調節直至pH約為8。水部分用DCM (20.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，接著過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。如藉由H NMR及LC-MS證實，獲得 化合物 49(18.9 mg，28.7 μmol，23.4%產率，99.2%純度)。
H NMR:(400 MHz, DMSO -d 6) δ13.01 (s, 1H), 11.60 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 7.81 - 7.90 (m, 2H), 7.48 - 7.44 (m, 2H), 7.29 - 7.27 (m, 4H), 7.06 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 4.81 - 4.75 (m, 1H), 4.59 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 4.29 (s, 2H), 4.07 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 3.16 - 3.09 (m, 1H), 2.94 - 2.85 (m, 2H), 2.62 - 2.59 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 1.93 - 1.85 (m, 2H), 1.62 - 1.47 (m, 8H), 1.04 - 0.99 (m, 6H)。
LC-MS:(M+H) +: 649.5
HPLC:純度：99.2%(215 nm) 實例 27 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -4- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 50) 步驟 1. 2-(4- 碘 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -3- 基 ) 異二氫吲哚 -1,3- 二酮
將化合物 50-1(9.00 g，34.6 mmol，1.00當量)及化合物 50-2(7.69 g，51.9 mmol，1.50當量)於HOAc (90.0 mL)中之混合物在120℃下攪拌12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾反應混合物並用100 mL MTBE洗滌濾餅，接著在減壓下濃縮，得到殘餘物。藉由H NMR證實，獲得呈灰白色固體狀之化合物 50-3(11.3 g，28.9 mmol，83.6%產率)。
H NMR:(400 MHz, DMSO -d 6) δ14.47 (s, 1H), 8.27 - 8.25 (m, 1H), 8.13 - 8.10 (m, 2H), 8.02 - 7.99 (m, 2H), 7.80 - 7.79 (m, 1H)。 步驟 2. 3-(1,3- 二氧雜吲哚 -2- 基 )-4- 碘 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 7- 氧化物
在0℃下向化合物 50-3(4.00 g，10.2 mmol，1.00當量)於HOAc (50.0 mL)中之溶液中添加 m-CPBA (7.08 g，34.8 mmol，85.0%純度，3.40當量)。在70℃下攪拌混合物10小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。濃縮反應混合物，得到殘餘物。藉由NaHCO 3飽和水溶液將殘餘物之pH調節至7。接著用DCM (30.0 mL * 3)萃取混合物。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。將粗產物藉由反相HPLC (0.100% FA條件)進行純化。藉由H NMR證實，獲得呈黃色固體狀之化合物 50-4(1.50 g，3.69 mmol，36.0%產率)。
H NMR ：(400 MHz, DMSO -d 6) δ13.39 (s, 1H), 7.90 - 7.89 (m, 3H), 7.70 - 7.69 (m, 2H), 7.57 - 7.53 (m, 1H)。 步驟 3. 2-(6- 氯 -4- 碘 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -3- 基 ) 異二氫吲哚 -1,3- 二酮
向化合物 50-4(1.50 g，3.69 mmol，1.00當量)於MeCN (20.0 mL)中之溶液中添加POCl 3(2.26 g，14.8 mmol，1.37 mL，4.00當量)。在20℃下攪拌混合物3小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾混合物並在減壓下濃縮濾餅，得到殘餘物。並且在減壓下濃縮濾液以移除。用NaHCO 3飽和水溶液將殘餘物之pH調節至9並用DCM 150 mL (50.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之化合物 50-5(1.00 g，2.36 mmol，63.7%產率)。 步驟 4. 6- 氯 -4- 碘 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -3- 胺
向化合物 50-5(1.00 g，2.36 mmol，1.00當量)於MeOH (30.0 mL)中之溶液中添加N 2H 4·H 2O (2.09 g，40.8 mmol，2.03 mL，98.0%純度，17.3當量)。接著在20℃下攪拌混合物1小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾混合物並在減壓下濃縮濾餅，得到殘餘物。並且濾液用水(20.0 mL)淬滅，接著用DCM (30.0 mL * 3)萃取。用水(20.0 mL * 3)及鹽水(20.0 mL * 3)洗滌有機層。有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之化合物 50-6(250 mg，0.849 mmol，36.0%產率)。 步驟 5. 6- 氯 -4- 碘 -1- 甲基 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -3- 胺
在0℃下向化合物 50-6(140 mg，475 μmol，1.00當量)於DMF (3.00 mL)中之溶液中添加K 2CO 3(131 mg，950 μmol，2.00當量)及MeI (85.9 mg，605 μmol，37.7 uL，1.27當量)。接著在N 2氛圍下在20℃下攪拌混合物3小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(10.0 mL)淬滅，接著用EtOAc (10.0 mL * 3)萃取。合併之有機層用水(10.0 mL * 4)及鹽水(10.0 mL * 4)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.600)進行純化。藉由LC-MS證實，獲得呈黃色固體狀之化合物 50-7(80.0 mg，214 μmol，45.0%產率，82.5%純度)。
LC-MS:(M+H) +: 309.0 步驟 6. 6- 氯 -1- 甲基 -4-(-4- 硝基苯基 )-1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -3- 胺
四個批次係平行的。向化合物 7(20.0 mg，53.5 μmol，82.5%純度，1.00當量)及化合物 50-8(7.15 mg，42.8 μmol，0.800當量)於二㗁烷(1.50 mL)及H 2O (0.100 mL)中之溶液中添加DIEA (20.7 mg，160 μmol，27.9 μL，3.00當量)及Pd(t-Bu 3P) 2(2.74 mg，5.35 μmol，0.100當量)。在N 2氛圍下在微波下在130℃下攪拌混合物1小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。混合物藉由製備型TLC (PE:THF = 1:1，R f(P1)= 0.600)進行純化。獲得呈黃色固體狀之化合物 50-9(44.0 mg，144 μmol，67.6%產率)。 步驟 7. 1-(4-(3- 胺基 -1- 甲基 -4-(4- 硝基苯基 )-1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -6- 基 )-3,6- 二氫吡啶 -1(2H)- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
兩個反應平行進行。向化合物 50-9(22.0 mg，72.4 μmol，1.00當量)及化合物 50-10(87.0 mg，289 umol，92.9%純度，4.00當量)於二㗁烷(1.50 mL)及H 2O (0.100 mL)中之溶液中添加DIEA (28.0 mg，217 μmol，37.8 μL，3.00當量)及Pd(t-Bu 3P) 2(3.70 mg，7.24 μmol，0.100當量)。在N 2氛圍下在微波下在120℃下攪拌混合物1小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。藉由製備型TLC(DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.600)純化混合物。獲得呈黃色固體狀之粗產物 50-11(70.0 mg)。 步驟 8. 1-(4-(3- 胺基 -4-(4- 胺基苯基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -6- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
向化合物 50-11(70.0 mg，166 μmol，1.00當量)於THF (8.00 mL)中之溶液中添加Pd/C (700 mg，10.0%純度)，脫氣並用H 2(15 Psi)吹掃3次，接著在20℃下攪拌2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將混合物過濾，並且將濾液在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.400)進行純化。獲得呈黃色固體狀之化合物 50-12(16.0 mg，40.7 μmol，24.4%產率)。 步驟 9. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -4- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺
向化合物 50-12(13.0 mg，33.1 umol，1.00當量)及化合物 50-13(8.21 mg，29.8 μmol，0.900當量)於吡啶(5.00 mL)中之溶液中添加EDCI (25.4 mg，132 μmol，4.00當量)。接著在20℃下攪拌混合物1小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(20.0 mL)淬滅，接著用DCM(10.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.400)及製備型HPLC (氫氧化氨條件；管柱：Waters Xbridge 150 * 25.0 mm * 5.00 um；流動相：[水(氫氧化氨v/v)-ACN]；B%：33.0%至63.0%，9分鐘)進行純化。如藉由H NMR及LC-MS證實，獲得 化合物 50(4.00 mg，5.92 μmol，17.8%產率，96.1%純度)。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ10.89 (s, 1H), 8.76 - 8.75 (m, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.02 - 7.97 (m, 1H), 7.81 - 7.79 (m, 2H), 7.56 - 7.50 (m, 3H), 7.41 - 7.39 (m, 1H), 6.75 (s, 1H), 5.02 - 4.96 (m, 1H), 4.81 (d, J= 13.6 Hz, 1H), 4.10 (d, J= 10.0 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.88 (s, 2H), 3.24 - 3.18 (m, 1H), 3.08 - 3.02 (m, 1H), 2.90 - 2.84 (m, 1H), 2.75 - 2.69 (m, 1H), 2.09 - 2.02 (m, 2H), 1.90 - 1.84 (m, 2H), 1.52 - 1.50 (m, 6H), 1.19 - 1.15 (m, 6H)。
LC-MS:(M+H) +: 650.2
HPLC:純度：96.1%(215 nm) 實例 28 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -4- 側氧基 -1,4- 二氫吡啶 -3- 甲醯胺 ( 化合物 51) 步驟 1. 5-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -4- 側氧基 -1,4- 二氫吡啶 -3- 甲酸
向化合物 51-1(100 mg，406 μmol，1.00當量)及化合物 51-2(113 mg，812 μmol，2.00當量)於二㗁烷(1.00 mL)中之溶液中添加Na 2CO 3(2.00 M，609 uL，3.00當量)及Pd(PPh 3) 4(46.9 mg，40.6 μmol，0.100當量)。在N 2氛圍下在90℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用H 2O 20.0 mL稀釋並用檸檬酸飽和水溶液調節pH至3。接著用DCM: IPA (3:1，40.0 mL * 2)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.400)進行純化。獲得呈黃色固體狀之化合物 51-3(60.0 mg，242 umol，59.7%產率)。 步驟 2. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -4- 側氧基 -1,4- 二氫吡啶 -3- 甲醯胺
向化合物 51-4(50.0 mg，122 μmol，92.7%純度，1.00當量)及化合物 51-3(27.3 mg，110 μmol，0.900當量)於DMF (2.00 mL)中之溶液中添加HATU (70.0 mg，184 μmol，1.50當量)及DIEA (47.6 mg，368 μmol，64.1 μL，3.00當量)。接著在20℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(50.0 mL)淬滅，接著用EtOAc (10.0 mL * 5)萃取。合併之有機層用水(10.0 mL * 4)及鹽水(10.0 mL * 4)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。粗產物藉由製備型TLC(DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.400)進行純化。如藉由H NMR及LC-MS證實，獲得 化合物 51(12.7 mg，20.1 μmol，15.8%產率，95.9%純度)。
H NMR:(400 MHz, DMSO -d 6) δ13.10 (s, 1H), 11.61 (s, 1H), 8.70 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.16 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.84 - 7.82 (m, 2H), 7.76 - 7.72 (m, 2H), 7.48 - 7.46 (m, 2H), 7.31 - 7.27 (m, 2H), 7.07 (s, 1H), 6.73 (s, 1H), 4.59 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 4.30 (s, 2H), 4.07 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.16 - 3.10 (m, 1H), 2.94 - 2.86 (m, 2H), 2.63 - 2.58 (m, 1H), 1.93 - 1.85 (m, 2H), 1.62 - 1.45 (m, 2H), 1.04 - 0.99 (m, 6H)。
LC-MS:(M+H) +: 607.1
HPLC:純度：95.9%(215 nm) 實例 29 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-1- 異丙基 -4- 側氧基 -1,4- 二氫吡啶 -3- 甲醯胺 ( 化合物 52) 步驟 1. 5- 溴 -4- 羥基菸酸甲酯
向化合物 52-1(0.500 g，2.29 mmol，1.00當量)於MeOH (5.00 mL)中之溶液中添加H 2SO 4(1.84 g，18.7 mmol，1.00 mL，8.18當量)。在80℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用H 2O 30.0 mL稀釋並DCM 100 mL (50.0 mL * 2)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈白色固體狀之化合物 52-2(0.400 g，1.72 mmol，75.1%產率)。 步驟 2. 5- 溴 -1- 異丙基 -4- 側氧基 -1,4- 二氫吡啶 -3- 甲酸甲酯
向化合物 52-2(200 mg，861 μmol，1.00當量)於DMF (2.00 mL)中之溶液中添加Cs 2CO 3(337 mg，1.03 mmol，1.20當量)。在75℃下攪拌混合物30分鐘。將反應混合物冷卻至25℃，將化合物 52-3(219 mg，1.29 mmol，129 μL，1.50當量)添加至混合物中。接著在55℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾反應混合物。濾液直接用於進一步純化。殘餘物藉由製備型HPLC (鹼性條件，管柱：Waters Xbridge 150 * 25.0 mm * 5.00 um；流動相：[水(氫氧化氨v/v)-ACN]；B%：7.00%至37.0%，9分鐘)進行純化。獲得呈白色固體狀之化合物 52-4(70.0 mg，255 μmol，29.6%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR:(400 MHz, DMSO -d 6) δ8.47 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.40 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 4.51 - 4.39 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 1.41 - 1.39 (m, 6H)。 步驟 3. 5-(4- 氟苯基 )-1- 異丙基 -4- 側氧基 -1,4- 二氫吡啶 -3- 甲酸
向化合物 52-4(70.0 mg，255 μmol，1.00當量)及化合物 52-5(71.4 mg，510 μmol，2.00當量)於二㗁烷(1.00 mL)中之溶液中添加Pd(PPh 3) 4(29.5 mg，25.5 μmol，0.100當量)及Na 2CO 3(2.00 M，383 μL，3.00當量)。在N 2氛圍下在90℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。濃縮反應混合物，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.300)進行純化。獲得呈黃色固體狀之化合物 52-6(40.0 mg，145 μmol，56.9%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ8.61 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.68 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.62 - 7.58 (m, 2H), 7.19 - 7.15 (m, 2H), 4.39 - 4.33 (m, 1H), 1.63 - 1.62 (m, 6H)。 步驟 4. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-1- 異丙基 -4- 側氧基 -1,4- 二氫吡啶 -3- 甲醯胺
向化合物 52-7(46.0 mg，113 μmol，92.7%純度，1.00當量)及化合物 52-6(28.0 mg，101 μmol，0.900當量)於DMF (3.00 mL)中之溶液中添加HATU (64.4 mg，169 μmol，1.50當量)及DIEA (43.8 mg，339 umol，59.0 uL，3.00當量)。接著在20℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(50.0 mL)淬滅，接著用EtOAc(10.0 mL * 5)萃取。合併之有機層用水(10.0 mL * 4)及鹽水(10.0 mL * 4)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。粗產物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.400)進行純化並進一步藉由製備型HPLC (HCl條件；管柱：3_Phenomenex Luna C18.0 75.0 * 30.0 mm * 3.00 um；流動相：[水(HCl)-ACN]；B%：38.0%至58.0%，8分鐘)進行純化。在減壓下濃縮混合物以移除MeCN並用飽和NaHCO 3調節直至pH約為8。將水部分用DCM (20.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，接著過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。如藉由H NMR及LC-MS證實，獲得 化合物 52(8.59 mg，13.4 μmol，11.7%產率，98.7%純度)。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ12.86 (s, 1H), 8.73 (s, 1H), 7.91 - 7.89 (m, 2H), 7.59 - 7.55 (m, 3H), 7.52 - 7.49 (m, 2H), 7.20 - 7.16 (m, 2H), 7.09 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 4.86 (d, J= 10.0 Hz, 1H), 4.36 - 4.33 (m, 1H), 4.10 (d, J= 10.0 Hz, 1H), 3.91 (s, 2H), 3.20 - 3.14 (m, 1H), 2.91 - 2.86 (m, 2H), 2.68 - 2.62 (m, 1H), 2.04 - 1.97 (m, 2H), 1.76 - 1.71 (m, 2H), 1.63 - 1.62 (m, 6H) , 1.17 - 1.15 (m, 6H)。
LC-MS:(M+H) +: 635.1
HPLC:純度：98.7%(215 nm) 實例 30 N-(4-(1- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -8- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-4- 羥基菸鹼醯胺 ( 化合物 53) 步驟 1. 6- 溴 -1- 氯吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤
向化合物 53-1(10.0 g，65.5 mmol，1.00當量)於ACN (100 mL)中之溶液中添加NBS (11.6 g，65.5 mmol，1.00當量)，在90℃下攪拌混合物3小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將混合物過濾並濃縮以移除溶劑。粗產物藉由管柱(SiO 2，PE:EtOAc = 100:1至10:1，板1，PE:EtOAc = 5:1，R f= 0.55)進行純化，得到呈白色固體狀之所需產物化合物 53-2(9.10 g，39.3 mmol，59.9%產率，100%純度)。
LC-MS:(M+H) +: 232.9 步驟 2. 6- 溴 -1- 氯 -8- 碘吡咯 [1,2-a] 吡 𠯤
向化合物 53-2(9.10 g，39.3 mmol，1.00當量)於ACN (100 mL)中之溶液中分批添加NIS (9.73 g，43.2 mmol，1.10當量)，在80℃下攪拌混合物5小時。LC-MS顯示化合物 53-2被完全消耗並且偵測到所需質量。將混合物過濾並濃縮以移除溶劑。殘餘物藉由管柱(SiO 2，PE:EtOAc = 100:1至20:1，板1，PE:EtOAc = 5:1，R f= 0.5)進行純化，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 53-3(12.0 g，33.5 mmol，85.4%產率)。
H NMR: (400 MHz, CDCl 3) δ7.91 - 7.90 (m, 1H), 7.46 - 7.45 (m, 1H), 7.11 (s, 1H)。 步驟 3. 6- 溴 -8- 碘 -N-(4- 甲氧基苯甲基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -1- 胺
將化合物 53-3(12.0 g，33.6 mmol，1.00當量)、PMBNH 2(13.8 g，101 mmol，13.0 mL，3.00當量)及DIEA (8.68 g，67.7 mmol，11.7 mL，2.00當量)溶解於微波管中之NMP (100 mL)中。在微波下在100℃下加熱密封管8小時。LC-MS顯示剩餘約3%化合物 53-3，偵測到約90%之所需質量。反應混合物用水(300 mL)稀釋，用EtOAc (100 mL * 3)萃取，合併之有機層用鹽水(200 mL * 3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱(SiO 2，PE:EtOAc = 100:1至20:1，板1，PE:EtOAc = 5:1，R f= 0.5)進行純化，得到呈淡黃色固體狀之所需產物化合物 53-4(10.0 g，21.8 mmol，65.0%產率)。 H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ7.41 - 7.40 (m,1H), 7.38 - 7.35 (m, 2H), 7.25 - 7.23 (m, 1H), 6.93 - 6.89 (m, 2H), 6.76 (s, 1H), 6.46 (brs, 1H), 4.69 (d, J= 4.8 Hz, 2H)。 步驟 4. 8-(4- 胺基苯基 )-6- 溴 -N-(4- 甲氧基苯甲基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -1- 胺
在N 2氛圍下向化合物 53-4(5.00 g，10.9 mmol，1.00當量)、化合物 53-5(2.15 g，9.82 mmol，0.900當量)於二㗁烷(20.0 mL)、H 2O (2.00 mL)中之溶液中添加K 2CO 3(3.02 g，21.83 mmol，2.00當量)、Pd(PPh 3) 4(1.26 g，1.09 mmol，0.100當量)，在90℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將混合物過濾並濃縮以移除溶劑。粗產物藉由管柱(SiO 2，PE:EtOAc = 50:1至2:1，板1，PE:EtOAc = 1:1，R f= 0.5)進行純化，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 53-6(2.00 g，4.72 mmol，43.2%產率，100%純度)。
LC-MS:(M+H) +: 425.0 步驟 5. 1-(4-(8-(4- 胺基苯基 )-1-((4- 甲氧基苯甲基 ) 胺基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -6- 基 )-3,6- 二氫吡啶 -1(2H)- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
向化合物 53-6(2.00 g，4.72 mmol，1.00當量)、化合物 53-7(1.58 g，5.67 mmol，1.20當量)於二㗁烷(20.0 mL)、H 2O (2.00 mL)中之溶液中添加K 2CO 3(1.31 g，9.45 mmol，2.00當量)、Pd(PPh 3) 4(546 mg，472 umol，0.100當量)，在90℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將混合物過濾並濃縮以移除溶劑。粗產物藉由製備型HPLC (管柱：Phenomenex luna C18 (250 * 70 mm，10 um)；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：20%至50%，25分鐘)進行純化，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 53-8(1.20 g，2.42 mmol，51.2%產率)。 步驟 6. 1-(4-(8-(4- 胺基苯基 )-1-((4- 甲氧基苯甲基 ) 胺基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -6- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
向化合物 53-8(1.20 g，2.42 mmol，1.00當量)於MeOH (20.0 mL)中之溶液中添加Pd/C (500 mg，10%純度)，接著脫氣並用H 2吹掃三次，在25℃下攪拌混合物4小時(15 psi)。LC-MS顯示化合物 53-8被消耗並且偵測到所需質量。將混合物過濾並濃縮以移除溶劑，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 53-9(1.10 g，2.21 mmol，91.3%產率)。 步驟 7. 5-(4- 氟苯基 )-4- 羥基 -N-(4-(6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1-((4- 甲氧基苯甲基 ) 胺基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -8- 基 ) 苯基 ) 菸鹼醯胺
向化合物 53-9(90.0 mg，181 μmol，1.00當量)、化合物 53-10(46.4 mg，199 μmol，1.10當量)於DCM (1.00 mL)中之溶液中添加DIEA (23.4 mg，181 μmol，31.5 μL，1.00當量)、HATU (103 mg，271 umol，1.50當量)，將混合物在25℃下攪拌2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將反應混合物用NaHCO 3飽和水溶液(3.00 mL)及水(3.00 mL)稀釋，用DCM (3.00 mL * 3)萃取，將合併之有機層用鹽水(5.00 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，DCM:MeOH = 10:1，板1，DCM:MeOH = 10:1，R f= 0.45)進行純化，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 53-11(57.0 mg，79.9 μmol，44.2%產率)。 步驟 8. N-(4-(1- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -8- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-4- 羥基菸鹼醯胺
向化合物 53-11(57.0 mg，80.0 μmol，1.00當量)於DCM (1.00 mL)中之溶液中添加TFA (1.54 g，13.5 mmol，1.00 mL，169當量)，在50℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用NaHCO 3飽和水溶液(20.0 mL)淬滅並用水(10.0 mL)稀釋，用DCM (10.0 mL * 3)萃取，合併之有機層用鹽水(20.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，DCM:MeOH = 10:1，板1，DCM:MeOH = 10:1，R f= 0.5)進行純化，得到所需產物 化合物 53(21.5 mg，34.8 μmol，43.6%產率，96.0%純度)，如藉由H NMR、LC-MS及HPLC證實。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ12.81 (s, 1H), 8.69 (s,1H), 8.81 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.62 (s, 1H), 7.56 - 7.53 (m, 2H), 7.42 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.27 - 7.25 (m, 1H), 7.12 (t, J= 8.8 Hz, 2H), 7.05 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 6.50 (s, 1H), 4.83 - 4.80 (m, 1H), 4.12 - 4.09 (m, 1H), 3.25 (brs, 1H), 3.11 - 3.10 (m, 1H), 2.89 - 2.86 (m, 1H), 2.76 - 2.73 (m, 1H), 2.17 - 2.08 (m, 2H), 1.74 - 1.65 (m, 2H), 1.17 - 1.16 (m, 6H)。
LC-MS:(M+H) +: 593.2
HPLC ：96.0%純度(220 nm) 實例 31 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -4- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-4- 羥基菸鹼醯胺 ( 化合物 54) 步驟 1. 2- 氟 -4- 碘菸腈
在-60℃下向化合物 54-1(25.0 g，204 mmol，1.00當量)於THF (300 mL)中之溶液中添加TMPMgCl . LiCl (1.00 M，307 mL，1.50當量)。在-60℃下攪拌混合物1小時。在-60℃下將含I 2(57.1 g，225 mmol，45.3 mL，1.10當量)之THF (100 mL)添加至反應混合物中，並且在25℃下攪拌12小時。TLC指示化合物 54-1被完全消耗並形成了兩個新斑點。根據TLC (石油醚: 乙酸乙酯 = 3:1)，反應係純淨的。藉由在0℃下添加NH 4Cl 250 mL飽和水溶液將反應混合物淬滅，接著用H 2O 200 mL稀釋並用EtOAc 400 mL (200 mL * 2)萃取。合併之有機層用鹽水400 mL (200 mL * 2)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由管柱層析法(SiO 2，石油醚: 乙酸乙酯= 100:1至0:1)進行純化。獲得呈黃色固體狀之化合物 54-2(10.0 g，40.3 mmol，19.6%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ8.09 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.80 (d, J= 5.6 Hz, 1H)。 步驟 2. 2- 肼基 -4- 碘菸腈
向化合物 54-2(9.20 g，37.1 mmol，1.00當量)於MeOH (100 mL)中之溶液中添加N 2H 4·H 2O (15.1 g，296 mmol，14.2 mL，98.0%純度，8.00當量)。在15℃下攪拌0.5混合物小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾反應混合物。濾餅用100 mL EtOH洗滌，接著在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之化合物 54-3(9.00 g，34.6 mmol，93.3%產率)。 步驟 3. 4- 碘 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -3- 胺
向化合物 54-3(9.00 g，34.6 mmol，1.00當量)於DCM (50.0 mL)中之溶液中添加含TFA (81.0 g，710 mmol，52.6 mL，20.5當量)之茴香醚(5.00 mL)。在20℃下攪拌混合物0.5小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。濃縮反應混合物，得到殘餘物。藉由NH 3•H 2O將殘餘物之pH調節至9，接著過濾。濾餅用20.0 mL MTBE洗滌，接著濃縮以獲得產物。獲得呈黃色固體狀之化合物 54-4(8.50 g，32.6 mmol，94.4%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR:(400 MHz, DMSO- d6) δ12.34 (brs, 1H), 7.92 (d, J= 4.4 Hz, 1H), 7.43 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 5.16 (s, 2H) 步驟 4. 2-(4- 碘 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -3- 基 ) 異二氫吲哚 -1,3- 二酮
化合物 54-4(8.50 g，32.6 mmol，1.00當量)及化合物 54-5(7.26 g，49.0 mmol，1.50當量)於HOAc (80.0 mL)中之混合物在120℃下攪拌12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾反應混合物並將濾餅用100 mL MTBE洗滌，接著在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之化合物 54-6(11.0 g，28.2 mmol，86.2%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR:(400 MHz, DMSO- d6) δ14.47 (s, 1H), 8.25 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 8.13 - 8.11 (m, 2H), 8.02 - 7.99 (m, 2H), 7.79 (d, J= 4.8 Hz, 1H)。 步驟 5. 3-(1,3- 二氧雜吲哚 -2- 基 )-4- 碘 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 7- 氧化物
在0℃下向化合物 54-6(8.00 g，20.5 mmol，1.00當量)於HOAc (100 mL)中之溶液中添加m-CPBA (16.6 g，82.0 mmol，85.0%純度，4.00當量)。在60℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾反應混合物。濃縮濾液以移除HOAc，接著用100 mL H 2O稀釋，並且用NaHCO 3飽和水溶液將pH調節至9，接著用EtOAc 300 mL (100 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。在25℃下用MTBE 50.0 mL研磨粗產物20分鐘。藉由管柱層析法(SiO 2，石油醚:EtOAc = 100:1至0:1)進行純化濾液。(板1：DCM：MeOH = 10:1)。獲得呈黃色固體狀之化合物 54-7(4.00 g，9.85 mmol，48.0%產率)。 步驟 6. 2-(6- 氯 -4- 碘 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -3- 基 ) 異二氫吲哚 -1,3- 二酮
在0℃下向化合物 54-8(4.00 g，9.85 mmol，1.00當量)於MeCN (40.0 mL)中之溶液中添加POCl 3(15.1 g，98.4 mmol，9.15 mL，10.0當量)。在25℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾反應混合物並用100 mL MeOH洗滌濾餅，接著在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之化合物 54-9(2.00 g，4.71 mmol，47.8%產率)。 步驟 7. 6- 氯 -4- 碘 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -3- 胺
向化合物 54-8(2.00 g，4.71 mmol，1.00當量)於MeOH (4.00 mL)中之溶液中添加N 2H 4·H 2O (7.22 g，141 mmol，7.01 mL，98%純度，30.0當量)。在25℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。向反應混合物中添加50.0 mL H 2O並用EtOAc 150 mL (50 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之化合物 54-9(1.30 g，4.41 mmol，93.7%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR:(400 MHz, DMSO- d6) δ7.51 (s, 1H), 5.27 (s, 2H)。 步驟 8. 6- 氯 -4-(-4- 硝基苯基 )-1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -3- 胺
向化合物 54-9(200 mg，679 μmol，1.00當量)及化合物 54-10(119 mg，713 μmol，1.05當量)於二㗁烷(8.00 mL)中之溶液中添加含K 2CO 3(281 mg，2.04 mmol，3.00當量)之H 2O (2.00 mL)及Pd(PPh 3) 4(78.4 mg，67.9 μmol，0.100當量)。在N 2氛圍下在90℃下攪拌混合物3小時。TLC (PE: THF = 2:1，R f(P1)= 0.400)顯示起始材料被完全消耗並且有新斑點。反應混合物用水(20.0 mL)淬滅，接著用EtOAc(30.0 mL)萃取。有機層用水(10.0 mL * 3)及鹽水(10.0 mL * 3)洗滌，並且合併之水層用EtOAc (30.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (PE: THF = 1:1，R f(P1)= 0.500)進行純化。藉由LC-MS證實，獲得呈黃色固體狀之化合物 54-11(195 mg，394 μmol，58.0%產率，58.5%純度)。
LC-MS:(M+H) +: 290.2
步驟 9. 1-(4-(3- 胺基 -4-(4- 硝基苯基 )-1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -6- 基 )-3,6- 二氫吡啶 -1(2H)- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
向化合物 54-11(175 mg，353 μmol，58.5%純度，1.00當量)及化合物 54-12(493 mg，1.77 mmol，5.00當量)於二㗁烷(12.0 mL)中之溶液中添加含K 3PO 4(225 mg，1.06 mmol，3.00當量)之H 2O (3.00 mL)及Xphos-Pd-G 2(55.6 mg，70.7 μmol，0.200當量)。在N 2氛圍下在100℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(20.0 mL)淬滅，接著用EtOAc (30.0 mL)萃取。有機層用水(10.0 mL * 3)及鹽水(10.0 mL * 3)洗滌，並且合併之水層用EtOAc (30.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.400)進行純化。藉由LC-MS證實，獲得呈黃色固體狀之化合物 54-13(85.0 mg，173 μmol，48.9%產率，82.8%純度)。
LC-MS:(M+H) +: 407.2 步驟 10. 1-(4-(3- 胺基 -4-(4- 胺基苯基 )-1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -6- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
向化合物 54-13(80.0 mg，163 μmol，82.8%純度，1.00當量)於THF (30.0 mL)中之溶液中添加Pd/C (800 mg，10.0%純度)，脫氣並用H 2(15 Psi)吹掃3次，接著在20℃下攪拌2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾混合物且在減壓下濃縮過濾物，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.400)進行純化。藉由LC-MS證實，獲得呈黃色固體狀之化合物 54-14(35.0 mg，91.4 μmol，56.0%產率，98.8%純度)。
LC-MS:(M+H) +: 379.4 步驟 11. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -4- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-4- 羥基菸鹼醯胺
向化合物 54-14(30.0 mg，78.3 μmol，98.8%純度，1.00當量)及化合物 54-15(16.4 mg，70.5 μmol，0.900當量)於DMF (5.00 mL)中之溶液中添加HATU (44.6 mg，117 μmol，1.50當量)及DIEA (30.3 mg，235 μmol，40.9 μL，3.00當量)。接著在20℃下攪拌混合物1小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用飽和NaHCO 3(15.0 mL)淬滅，接著用EtOAc (10.0 mL * 5)萃取。合併之有機層用水(10.0 mL * 4)及鹽水(10.0 mL * 4)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。粗產物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.400)進行純化並進一步藉由製備型HPLC (NH 3•H 2O條件；管柱：Waters Xbridge 150 * 25.0 mm * 5.00 um；流動相：[水(氫氧化氨v/v)-ACN]；B%：20.0%至50.0%，32分鐘)進行純化。接著在減壓下濃縮反應混合物以移除MeCN並冷凍乾燥，得到殘餘物。如藉由H NMR、LC-MS及HPLC證實，獲得 化合物 54(7.06 mg，11.6 μmol，14.9%產率，98.2%純度)。
H NMR:(400 MHz, MeOD) δ8.71 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.97 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.91 - 7.89 (m, 2H), 7.67 - 7.60 (m, 4H), 7.20 - 7.16 (m, 2H), 6.93 (s, 1H), 4.71 (d, J= 14.4 Hz, 1H), 4.21 (d, J= 14.0 Hz, 1H), 3.27 - 3.24 (m, 1H), 3.16 - 3.10 (m, 1H), 3.05 - 2.98 (m, 1H), 2.82 - 2.75 (m, 1H), 2.08 - 2.00 (m, 2H), 1.92 - 1.78 (m, 2H), 1.16 - 1.11 (m, 6H)。
LC-MS:(M+H) +: 594.4
HPLC ：純度：98.2%(215 nm) 實例 32 N-(4-(4- 胺基 -1-(3- 側氧基八氫吲哚 𠯤 -7- 基 )-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 55) 步驟 1. 7- 羥基六氫吲哚 𠯤 -3(2H)- 酮
在0℃下向化合物 55-1(900 mg，5.88 mmol，1.00當量)於MeOH (10.0 mL)中之溶液中添加NaBH 4(445 mg，11.7 mmol，2.00當量)，在25℃下攪拌混合物1小時。TLC (板1，DCM:MeOH = 10:1)顯示化合物 55-1被消耗並形成了新斑點。混合物用NH 4Cl飽和水溶液(20.0 mL)淬滅，用EtOAc/MeOH (V/V，10/1，20.0 mL * 3)萃取，合併之有機層用鹽水(40.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮以移除溶劑，得到呈無色油狀之所需產物化合物 55-2(300 mg，1.93 mmol，32.9%產率)。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ4.10 - 4.05 (m, 1H), 3.74 - 3.69 (m, 1H), 3.48 - 3.42 (m, 1H), 2.63 - 2.56 (m, 1H), 2.34 - 2.28 (m, 2H), 2.20 - 2.09 (m, 2H), 1.93 - 1.88 (m, 1H), 1.63 - 1.53 (m, 1H), 1.33 - 1.26 (m, 1H), 1.15 - 1.07 (m, 1H)。 步驟 2. 7-(3- 溴 -4-((2,4- 二甲氧基苯甲基 ) 胺基 )-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -1- 基 ) 六氫吲哚 𠯤 -3(2H)- 酮
在0℃下向化合物 55-3(100 mg，275 μmol，1.00當量)、化合物 55-2(55.5 mg，357 μmol，1.30當量)於THF (2.00 mL)中之溶液中添加pph 3(361 mg，1.38 mmol，5.00當量)、DIAD (167 mg，825 μmol，160 μL，3.00當量)，在N 2下在25℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示化合物 55-2被消耗並且偵測到所需質量。反應混合物用水(10.0 mL)稀釋，用DCM(10.0 mL * 3)萃取，合併之有機層用鹽水(20.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。將粗產物藉由管柱(SiO 2，DCM:MeOH = 1: 0至50:1，板1，DCM:MeOH = 10:1，R f= 0.5)進行純化，得到呈無色油狀之所需產物化合物 55-4(70.0 mg，139 μmol，50.8%產率)。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ7.90 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.29 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 6.52 - 6.48 (m, 3H), 6.45 - 6.42 (m, 1H), 4.76 (brs, 1H), 4.73 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 4.23 - 4.19 (m, 1H), 4.07 - 4.02 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.36 - 3.29 (m, 1H), 2.43 - 2.39 (m, 2H), 2.34 - 2.29 (m, 1H), 2.28 - 2.23 (m, 1H), 2.13 - 2.10 (m, 1H), 2.00 - 1.96 (m, 1H), 1.78 - 1.70 (m, 1H), 1.58 - 1.53 (m, 1H)。 步驟 3. 7-(3-(4- 胺基苯基 )-4-((2,4- 二甲氧基苯甲基 ) 胺基 )-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -1- 基 ) 六氫吲哚 𠯤 -3(2H)- 酮
向化合物 55-4(60.0 mg，119 μmol，1.00當量)、化合物 55-5(39.4 mg，179 μmol，1.50當量)於THF (2.00 mL)、H 2O(0.200 mL)中之溶液中添加K 2CO 3(33.1 mg，239 μmol，2.00當量)、Pd(PPh 3) 4(13.8 mg，11.9 μmol，0.100當量)，在N 2下在70℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示化合物 4被消耗並且偵測到所需質量。將混合物過濾並濃縮以移除溶劑。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，DCM:MeOH = 10:1，板1，DCM:MeOH = 10:1，R f= 0.55)進行純化，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 55-6(30.0 mg，58.5 μmol，48.8%產率，-純度)。 步驟 4. N-(4-(4-((2,4- 二甲氧基苯甲基 ) 胺基 )-1-(3- 側氧基八氫吲哚 𠯤 -7- 基 )-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺
向化合物 55-6(20.0 mg，39.0 μmol，1.00當量)、化合物 55-7(10.7 mg，39.0 μmol，1.00當量)於DCM (1.00 mL)中之溶液中添加DIEA (25.2 mg，195 μmol，33.9 μL，5.00當量)、HATU (22.2 mg，58.5 μmol，1.50當量)，在25℃下攪拌混合物1小時。LC-MS顯示化合物 55-6被消耗並偵測到所需質量。反應混合物用NaHCO 3飽和水溶液(3.00 mL)及水(3.00 mL)稀釋，用DCM (3.00 mL * 3)萃取，合併之有機層用鹽水(5.00 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 55-8(30.0 mg，38.9 μmol，66.5%產率)。 步驟 5. N-(4-(4- 胺基 -1-(3- 側氧基八氫吲哚 𠯤 -7- 基 )-1H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺
向化合物 55-8(25.0 mg，32.4 μmol，1.00當量)於DCM (1.00 mL)中之溶液中添加TFA (1.54 g，13.5 mmol，1.00 mL，415當量)，在50℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用NaHCO 3飽和水溶液(10.0 mL)及水(5.00 mL)稀釋，用DCM (10.0 mL * 3)萃取，合併之有機層用鹽水(20.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，DCM:MeOH = 10:1，板1，DCM:MeOH = 10:1，R f= 0.4)進行純化，得到所需產物 化合物 55(22.5 mg，35.0 μmol，90.0%產率，96.6%純度)。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ10.87 (s, 1H), 8.75 - 8.73 (m, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.00 - 7.96 (m, 1H), 7.86 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.81 - 7.79 (m, 2H), 7.67 - 7.65 (m, 2H), 7.52 - 7.48 (m, 1H), 7.39 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.68 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 5.15 (brs, 2H), 5.01 - 4.95 (m, 1H), 4.89 (brs, 1H), 4.34 - 4.30 (m, 1H), 4.10 - 4.06 (m, 1H), 3.48 - 3.42 (m, 1H), 2.43 - 2.39 (m, 3H), 2.29 - 2.20 (m, 2H), 2.07 - 2.02 (m, 1H), 1.84 - 1.76 (m, 1H), 1.60 - 1.55 (m, 1H), 1.50 (d, J= 6.8 Hz, 6H)。
LC-MS:(M+H) +: 620.3
HPLC ：純度：96.6%(215 nm) 實例 33 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -4- 基 ) 苯基 )-N-(4- 氟苯基 ) 環丙烷 -1,1- 二甲醯胺 ( 化合物 56) 步驟 1. 3-(1,3- 二氧雜吲哚 -2- 基 )-4- 碘 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 7- 氧化物
在0℃下向化合物 56-1(5.86 g，15.0 mmol，1.00當量)於DCM (60.0 mL)中之溶液中添加UHP (5.09 g，54.0 mmol，3.60當量)，接著在0℃下逐滴添加TFAA (9.46 g，45.0 mmol，6.27 mL，3.00當量)。在N 2氛圍下在25℃下攪拌反應混合物4小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。向混合物添加MeCN (300 mL)，在20℃下攪拌10分鐘。接著過濾混合物。濾餅用MeCN (50.0 mL * 3)洗滌並在減壓下濃縮，得到殘餘物。藉由H NMR證實，獲得呈灰白色固體狀之化合物 56-2(5.45 g，13.4 mmol，89.3%產率)。
H NMR:(400 MHz, DMSO -d 6) δ15.42 (s, 1H), 8.23 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 8.14 - 8.11 (m, 2H), 8.03 - 8.00 (m, 2H), 7.67 (d, J= 6.4 Hz, 1H)。 步驟 2. 2-(6- 氯 -4- 碘 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -3- 基 ) 異二氫吲哚 -1,3- 二酮
在0℃下向化合物 56-2(5.45 g，13.4 mmol，1.00當量)於MeCN (60.0 mL)中之溶液中添加POCl 3(45.2 g，295 mmol，27.4 mL，22.0當量)。在20℃下攪拌混合物3小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。向混合物中添加MTBE (100 mL)並過濾。並且將濾餅用MTBE (20.0 mL * 3)洗滌，在減壓下濃縮，得到殘餘物。藉由H NMR證實，獲得呈白色固體狀之化合物 56-3(5.23 g，12.3 mmol，91.7%產率)。
H NMR:(400 MHz, DMSO -d 6) δ14.65 (s, 1H), 8.13 - 8.11 (m, 2H), 8.02 - 8.00 (m, 2H), 7.93 (s, 1H)。 步驟 3. 6- 氯 -4- 碘 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -3- 胺
向化合物 56-3(5.65 g，13.3 mmol，1.00當量)於MeOH (60.0 mL)中之溶液中添加N 2H 4žH 2O (11.5 g，226 mmol，11.2 mL，17.0當量)。接著在20℃下攪拌混合物1小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾混合物並在減壓下濃縮濾餅，得到殘餘物。並且過濾物用水(60.0 mL)淬滅，接著用DCM (60.0 mL * 3)及DCM:MeOH = 10:1 (60 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之化合物 56-4(2.50 g，8.49 mmol，63.8%產率)。 步驟 4. 6- 氯 -4- 碘 -1- 甲基 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -3- 胺
在0℃下向化合物 56-4(1.00 g，3.40 mmol，1.00當量)於DMF (20.0 mL)中之溶液中添加K 2CO 3(938 mg，6.79 mmol，2.00當量)及MeI (1.37 g，9.64 mmol，0.600 mL，2.84當量)。接著在N 2氛圍下在20℃下攪拌混合物10小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(60.0 mL)淬滅，接著用EtOAc (50.0 mL * 5)萃取。合併之有機層用水(100 mL * 4)及鹽水(100 mL * 4)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物(DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.800)藉由管柱層析法(SiO 2，DCM:MeOH = 100: 0至100:1)進行純化。藉由H NMR證實，獲得呈黃色固體狀之化合物 56-5(450 mg，1.46 mmol，42.9%產率)。
H NMR:(400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.51 (s, 1H), 5.37 (s, 2H), 3.72 (s, 3H)。 步驟 5. 6- 氯 -1- 甲基 -4-(-4- 硝基苯基 )-1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -3- 胺
四個批次係平行的。向化合物 56-5(100 mg，324 μmol，1.00當量)及化合物 56-6(40.5 mg，243 μmol，0.750當量)於二㗁烷(1.50 mL)及H 2O (0.100 mL)中之溶液中添加DIEA (125 mg，972 μmol，169 uL，3.00當量)及Pd( t-Bu 3P) 2(16.5 mg，32.4 μmol，0.100當量)。在N 2氛圍下在微波下在125℃下攪拌混合物30分鐘。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(20.0 mL)淬滅，接著用EtOAc (30.0 mL)萃取。有機層用水(10.0 mL * 3)及鹽水(10.0 mL * 3)洗滌，並且合併之水層用EtOAc (30.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。將粗產物藉由製備型TLC (石油醚: THF = 1:1，R f(P1)= 0.500)進行純化。獲得呈黃色固體狀之化合物 56-7(124 mg，408 μmol，31.4%產率)。 步驟 6. 1-(4-(3- 胺基 -1- 甲基 -4-(4- 硝基苯基 )-1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -6- 基 )-3,6- 二氫吡啶 -1(2H)- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
兩個批次係平行的。向化合物 56-7(62.0 mg，204 μmol，1.00當量)及化合物 56-8(214 mg，714 μmol，92.9%純度，3.50當量)於二㗁烷(1.50 mL)及H 2O (0.100 mL)中之溶液中添加DIEA (79.1 mg，612 umol，106 uL，3.00當量)及Pd( t-Bu 3P) 2(10.4 mg，20.4 μmol，0.100當量)。在N 2氛圍下在微波下將混合物在120℃下攪拌1小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(20.0 mL)淬滅，接著用EtOAc(30.0 mL)萃取。有機層用水(10.0 mL * 3)及鹽水(10.0 mL * 3)洗滌，並且合併之水層用EtOAc (30.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。將粗產物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.500)進行純化。獲得呈黃色固體狀之化合物 56-9(100 mg，237 μmol，29.1%產率)。 步驟 7. 1-(4-(3- 胺基 -4-(4- 胺基苯基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -6- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮
向化合物 56-9(100 mg，237 μmol，1.00當量)於THF (10.0 mL)中之溶液中添加Pd/C (10.0 mg，10.0%純度)，脫氣並用H 2(15 Psi)吹掃3次，接著在20℃下攪拌2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾混合物且在減壓下濃縮過濾物，得到殘餘物。獲得呈棕色固體狀之化合物 56-10(90.0 mg，229 μmol，96.4%產率)。 步驟 8. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1- 甲基 -1H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -4- 基 ) 苯基 )-N-(4- 氟苯基 ) 環丙烷 -1,1- 二甲醯胺
向化合物 56-10(50.0 mg，127 μmol，1.00當量)於吡啶(1.00 mL)中之溶液中添加化合物 56-11(28.4 mg，127 μmol，1.00當量)、EDCI (97.6 mg，509 μmol，4.00當量)。接著在20℃下攪拌混合物1小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(10.0 mL)淬滅，接著用DCM(30.0 mL)萃取。有機層用水(10.0 mL * 3)及鹽水(10.0 mL * 3)洗滌，並且合併之水層用DCM (10.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。粗產物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.400)進行純化並進一步藉由製備型HPLC (氫氧化氨條件；管柱：Waters Xbridge 150 * 25.0 mm * 5.00 um；流動相：[水(氫氧化氨v/v)-ACN]；B%：40.0%至70.0%，9分鐘)進行純化。接著在減壓下濃縮混合物以移除MeCN。並且將混合物冷凍乾燥，得到產物。如藉由H NMR及LC-MS證實，獲得 化合物 56(9.50 mg，14.9 μmol，11.7%產率，94.1%純度)。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ9.64 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 7.73 – 7.71 (m, 2H), 7.57 – 7.55 (m, 2H), 7.49 – 7.46 (m, 2H), 7.09 – 7.04 (m, 2H), 6.75 (s, 1H), 4.81 (d, J= 15.2 Hz, 1H), 4.11 (d, J= 13.2 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.24 – 3.18 (m, 1H), 3.09 – 3.03 (m, 1H), 2.89 – 2.84 (m, 1H), 2.75 – 2.69 (m, 1H), 2.10 – 2.02 (m, 2H), 1.91 – 1,89 (m, 2H), 1.77 – 1.72 (m, 4H), 1.19 – 1.15 (m, 6H)。
LC-MS:(M+H) +: 598.3
HPLC ：純度：94.1%(215 nm) 實例 34 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1- 甲基 -1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-4- 乙氧基 -1-(4- 氟苯基 )-2- 側氧基 -1,2- 二氫吡啶 -3- 甲醯胺 ( 化合物 57)
向化合物 57-1(30 mg，76.63 μmol，1當量)及化合物 57-2(22 mg，79.35 μmol，1.04當量)於Py (2 mL)中之溶液中添加EDCI (30.00 mg，156.49 μmol，2.04當量)。在25℃下攪拌混合物2小時。自反應混合物中取出等分試樣並添加至MeOH中，LCMS顯示化合物 57-1被消耗並偵測到所需之MS。反應混合物用H 2O (10 mL)稀釋並用EtOAc (15 mL * 2)萃取。合併之有機層用H 2O (40 mL * 3)，接著用NH 4Cl (飽和，50 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (管柱：Waters Xbridge 150 * 25 mm * 5 um；流動相：[水(氫氧化氨v/v)-ACN]；B%：34%至64%，9分鐘)進行純化，接著濃縮以移除MeCN並冷凍乾燥，得到 化合物 57(25 mg，37.11 μmol，41.39%產率，96.6%純度)，如藉由H NMR證實。
H NMR:(400 MHz, DMSO- d6) δ10.38 (s, 1H), 7.88 - 7.74 (m, 3H), 7.55 - 7.30 (m, 6H), 7.22 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.50 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 4.60 (d, J= 12.4 Hz, 1H), 4.34 (brs, 1H), 4.30 - 4.15 (m, 2H), 4.08 (d, J= 12.4 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.20 - 3.05 (m, 1H), 2.95 - 2.80 (m, 2H), 2.65 - 2.55 (m, 1H), 2.05 - 1.80 (m, 2H), 1.80 - 1.45 (m, 2H), 1.30 (t, J= 7.2 Hz, 3H), 1.10 - 0.85 (m, 6H)。 實例 35 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1- 甲基 -1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-2,5- 二側氧基 -1- 苯基 -1,2,5,6,7,8- 六氫喹啉 -3- 甲醯胺 ( 化合物 58)
向化合物 58-1(30 mg，76.63 μmol，1當量)於Py (2 mL)中之溶液中添加化合物 58-2(24.00 mg，84.72 μmol，1.11當量)及EDCI (30 mg，156.49 μmol，2.04當量)。在25℃下攪拌混合物2小時。自反應混合物中取出等分試樣並添加至MeOH中，LCMS顯示化合物 58-1被消耗並偵測到所需之MS。反應混合物用H 2O(5 mL)稀釋並用EtOAc(5 mL * 2)萃取。合併之有機層用H 2O(15 mL * 3)，接著用NH 4Cl(飽和，30 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (管柱：Phenomenex luna C18 150 * 25 mm* 10 um；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：53%至73%，9分鐘)進行純化，接著濃縮以移除MeCN，並且用NaHCO 3(飽和)調節至pH = 8，接著用EtOAc (20 ml * 2)萃取，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到所需之 化合物 58(25 mg，37.95 μmol，49.53%產率，99.7%純度)，如藉由H NMR證實。
H NMR:(400 MHz, DMSO- d 6 ) δ11.57 (s, 1H), 8.96 (s, 1H),7.98 - 7.80 (m, 2H), 7.75 - 7.55 (m, 3H), 7.53 - 7.38 (m, 4H), 7.22 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 4.70 - 4.53 (m, 2H), 4.40 - 4.25 (m, 2H), 4.15 - 4.00 (m, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.23 - 3.05 (m, 1H), 2.98 - 2.80 (m, 2H), 2.63 - 2.54 (m, 3H), 2.10 - 1.80 (m, 4H), 1.75 - 1.48 (m, 2H), 1.10 - 0.95 (m, 6H)。 實例 36 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1- 甲基 -1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-5-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -4- 側氧基 -1,4- 二氫吡啶 -3- 甲醯胺 ( 化合物 59)
向化合物 59-2(30 mg，76.63 μmol，1當量)於DMF (3 mL)中之溶液中添加HATU (43.70 mg，114.94 umol，1.5當量)、DIEA (19.81 mg，153.25 μmol，26.69 μL，2當量)及化合物 59-1(19 mg，76.85 μmol，1當量)，接著在25℃下攪拌混合物2小時。自反應混合物中取出等分試樣並添加至MeOH中，LCMS顯示化合物 59-2被消耗並偵測到所需MS。將反應混合物用H 2O (10 mL)稀釋並用EtOAc (5 mL * 2)將其萃取。合併之有機層用H 2O (10 mL * 3)，接著係鹽水(20 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (管柱：Waters Xbridge 150 * 25 mm * 5 um；流動相：[水(氫氧化氨v/v)-ACN]；B%：38%至68%，9分鐘)進行純化，並且濃縮以移除MeCN並冷凍乾燥，得到 化合物 59(18 mg，28.71 umol，37.47%產率，99%純度)，如藉由H NMR證實。
H NMR:(400 MHz, DMSO- d 6 ) δ13.10 (s, 1H), 8.70 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 8.15 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.83 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 7.79 - 7.68 (m, 2H), 7.46 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.33- 7.20 (m, 3H), 6.73 (s, 1H), 4.60 (d, 1H, J= 12.8 Hz), 4.36 (brs, 2H), 4.17 - 4.00 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 3.21 - 3.05 (m, 1H), 2.99 - 2.84 (m, 2H), 2.63 - 2.57 (m, 1H), 1.97 - 1.81 (m, 2H), 1.69 - 1.60 (m, 1H), 1.60 - 1.52 (m, 1H), 1.07- 0.97 (m, 6H)。 實例 37 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1- 甲基 -1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-1-(4- 氟苯基 )-2- 側氧基 -1,2- 二氫吡啶 -3- 甲醯胺 ( 化合物 60)
向化合物 60-1(30 mg，76.63 μmol，1當量)於Py (2 mL)中之溶液中添加化合物 60-2(20 mg，85.77 μmol，1.12當量)及EDCI (30 mg，156.49 μmol，2.04當量)，接著在25℃下攪拌混合物2小時。自反應混合物中取出等分試樣並添加至MeOH中，LCMS顯示化合物 60-1被消耗並偵測到所需MS。反應混合物用H 2O (5 mL)稀釋並用EtOAc (10 mL * 2)萃取。合併之有機層用H 2O (20 mL * 3)，接著用NH 4Cl (飽和，50 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型HPLC (管柱：Phenomenex luna C18 150 * 25 mm * 10 um；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：48%至78%，10分鐘)進行純化，接著濃縮以移除MeCN，並且用NaHCO 3(飽和)調節至pH = 8，接著用EtOAc (20 ml * 2)萃取，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到所需之 化合物 60(20 mg，32.87 μmol，42.89%產率，99.7%純度)，如藉由H NMR證實。
H NMR:(400 MHz, DMSO- d6) δ12.04 (s, 1H), 8.88 - 8.53 (m, 1H), 8.20 - 8.05 (m, 1H), 7.93 - 7.77 (m, 2H), 7.73 - 7.57 (m, 2H), 7.55 - 7.38 (m, 4H), 7.23 (s, 1H), 6.77 - 6.68 (m, 2H), 4.68 - 4.57 (m, 1H), 4.40 - 4.26 (m, 2H), 4.17 - 4.05 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.22 - 3.05 (m, 1H), 2.97 - 2.80 (m, 2H), 2.65- 2.57 (m, 1H), 1.97 - 1.81 (m, 2H), 1.74 - 1.48 (m, 2H), 1.08 - 0.86 (m, 6H)。 實例 38 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1- 甲基 -1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-2- 側氧基 -2H-[1,2'- 聯吡啶 ]-3- 甲醯胺 ( 化合物 61) 步驟 1. 2- 側氧基 -2H-[1,2'- 聯吡啶 ]-3- 甲酸甲酯
向化合物 61-1(500 mg，3.24 mmol，1.00當量)於THF (4.00 mL)及DMF (1.00 mL)中之溶液中添加化合物 61-2(305 mg，3.24 mmol，1.00當量)。並且在20℃下攪拌混合物2小時。接著將EDCI (746 mg，3.89 mmol，1.20當量)及DMAP (198 mg，1.62 mmol，0.500當量)添加至混合物中，並且在20℃下攪拌混合物14小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。在20℃下將混合物用4.00 M HCl (10.0 mL)淬滅並攪拌30分鐘。接著將混合物用Na 2CO 3調節直至pH約為9。水部分用EtOAc (100 mL * 8)萃取。合併之有機層經無水Na 2SO 4乾燥，接著過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物(DCM:MeOH = 10:1，Rf(P1)= 0.400)藉由管柱層析法(SiO 2，DCM:MeOH = 100: 0至100:1)進行純化。藉由H NMR證實，獲得呈黃色固體狀之化合物 61-3(500 mg，2.17 mmol，66.9%產率)。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ8.58 - 8.57 (m, 1H), 8.25 - 8.23 (m, 1H), 8.13 - 8.11 (m, 1H), 7.98 - 7.96 (m, 1H), 7.87 - 7.83 (m, 1H), 7.37 - 7.27 (m, 1H), 6.41 - 6.37 (m, 1H), 3.92 (s, 3H)。 步驟 2. 2- 側氧基 -2H-[1,2'- 聯吡啶 ]-3- 甲酸
在0℃下向化合物 61-3(500 mg，2.17 mmol，1.00當量)於MeOH (3.00 mL)中之溶液中添加NaOH (2.00 M，2.88 mL，2.65當量)。在20℃下攪拌混合物10分鐘。LC-MS顯示偵測到所需質量。在減壓下濃縮混合物以移除MeOH。接著將混合物溶解於水(50.0 mL)中並用2.00 M HCl調節直至pH約為2。接著過濾混合物，得到殘餘物。將混合物溶解於MeOH (50 mL)中並在減壓下濃縮，得到產物。獲得呈黃色固體狀之化合物 61-4(320 mg，1.48 mmol，68.1%產率)。 步驟 3. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1- 甲基 -1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-2- 側氧基 -2H-[1,2'- 聯吡啶 ]-3- 甲醯胺
向化合物 61-5(25.0 mg，63.8 μmol，1.00當量)及化合物 61-4(12.4 mg，57.4 μmol，0.900當量)於DCM (2.00 mL)中之溶液中添加HATU (36.4 mg，95.7 μmol，1.50當量)及DIEA (41.2 mg，319 μmol，55.6 μL，5.00當量)。接著在20℃下攪拌混合物1小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用NaHCO 3飽和水溶液(20.0 mL)淬滅，接著用DCM (30.0 mL * 3)萃取。有機層用NaHCO 3飽和水溶液(40.0 mL * 2)洗滌。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。粗產物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，Rf(P1)= 0.500)進行純化。如藉由H NMR、LC-MS及HPLC證實，獲得 化合物 61(27.5 mg，45.3 μmol，70.9%產率，97.0%純度)。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ11.94 (s, 1H), 8.80 - 8.77 (m, 1H), 8.68 - 8.67 (m, 1H), 8.06 - 8.04 (m, 1H), 7.99 - 7.95 (m, 1H), 7.88 - 7.86 (m, 3H), 7.51 - 7.46 (m, 3H), 6.97 (s, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.69 - 6.65 (m, 1H), 4.87 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 4.11 (d, J= 12.4 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.21 - 3.14 (m, 1H), 2.93 - 2.83 (m, 2H), 2.69 - 2.63 (m, 1H), 2.05 - 1.98 (m, 2H), 1.78 - 1.72 (m, 2H), 1.19 - 1.15 (m, 6H)。
LC-MS:(M+H) +: 590.3
HPLC ：純度：97.0%(215 nm) 實例 39 8-((4-(1- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -8- 基 ) 苯基 ) 胺基 )-2-(4- 氟苯基 )-2,7- 㖠啶 -1(2H)- 酮 ( 化合物 62) 步驟 1. 1-(4- 氟苯基 )-4- 甲基 -2- 側氧基 -1,2- 二氫吡啶 -3- 甲腈
向化合物 62-1(5.00 g，37.2 mmol，1.00當量)及化合物 62-2(10.4 g，74.5 mmol，2.00當量)於DCM (50.0 mL)中之溶液中添加Cu(OAc) 2(13.5 g，74.5 mmol，2.00當量)及吡啶(11.7 g，149 mmol，12.0 mL，4.00當量)。在25℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾反應混合物，濃縮濾液，得到殘餘物。殘餘物(DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.400)藉由管柱層析法(SiO 2，DCM:MeOH = 100:1至100:10)進行純化。獲得呈黃色固體狀之化合物 62-3(5.50 g，24.1 mmol，64.6%產率)。藉由H NMR證實結構。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ7.46 - 7.44 (m, 1H), 7.37 - 7.33 (m, 2H), 7.21 - 7.19 (m, 2H), 6.26 - 6.25 (m, 1H), 2.52 (s, 3H)。 步驟 2. (E)-4-(2-( 二甲基胺基 ) 乙烯基 )-1-(4- 氟苯基 )-2- 側氧基 -1,2- 二氫吡啶 -3- 甲腈
向化合物 62-3(2.00 g，8.76 mmol，1.00當量)於DMF (20.0 mL)中之溶液中添加DMF-DMA (1.08 g，9.06 mmol，1.20 mL，1.03當量)。接著在N 2氛圍下在90℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(100 mL)淬滅，接著用EtOAc (30.0 mL * 5)萃取。合併之有機層用水(30.0 mL * 4)及鹽水(30.0 mL * 4)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。粗產物用DCM: MTBE = 1:10(110 mL)在20℃下研磨30分鐘。過濾混合物並在減壓下濃縮濾餅，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之化合物 62-4(2.10 g，7.41 mmol，84.5%產率)。 步驟 3. 2-(4- 氟苯基 )-2,7- 㖠啶 -1,8(2H,7H)- 二酮
在N 2氛圍下將化合物 62-4(1.60 g，5.65 mmol，1.00當量)於H 2SO 4(64.4 g，643 mmol，35.0 mL，98.0%純度，113當量)中之混合物在110℃下攪拌2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將混合物倒入冰水(100 mL)中並用DCM (50.0 mL * 3)萃取。接著用飽和NaHCO 3將水相之pH調節至7，並且用DCM (100 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。藉由H NMR證實，獲得呈黃色固體狀之化合物 62-5(1.10 g，4.29 mmol，76.0%產率)。
H NMR:(400 MHz, DMSO -d 6) δ11.39 (s, 1H), 7.70 - 7.69 (m, 1H), 7.47 - 7.44 (m, 3H), 7.37 - 7.32 (m, 2H), 6.39 - 6.29 (m, 2H)。 步驟 4. 8- 氯 -2-(4- 氟苯基 )-2,7- 㖠啶 -1(2H)- 酮
將化合物 62-5(500 mg，1.95 mmol，1.00當量)於POCl 3(41.2 g，269 mmol，25.0 mL，137當量)中之混合物在110℃下攪拌1小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾混合物並在減壓下濃縮濾餅，得到殘餘物。並且將過濾物在減壓下濃縮，得到殘餘物。用NaHCO 3飽和水溶液將殘餘物之pH調節至9並用DCM 150 mL (50.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之化合物 62-6(520 mg，1.89 mmol，97.0%產率)。 步驟 5. 2-(4- 氟苯基 )-8-((4-(6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1-((4- 甲氧基苯甲基 ) 胺基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -8- 基 ) 苯基 ) 胺基 )-2,7- 㖠啶 -1(2H)- 酮
向化合物 62-6(66.2 mg，241 μmol，1.20當量)及化合物 62-7(100 mg，200 μmol，1.00當量)於二㗁烷(6.00 mL)中之溶液中添加 t-BuONa (23.1 mg，241 μmol，1.20當量)、DPPP (16.5 mg，40.1 umol，0.200當量)及Pd 2(dba) 3(18.4 mg，20.1 μmol，0.100當量)。在N 2氛圍下在100℃下攪拌混合物4小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。殘餘物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.400)進行純化。獲得呈黃色固體狀之化合物 62-8(70.0 mg，95.1 μmol，47.3%產率)。 步驟 6. 8-((4-(1- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -8- 基 ) 苯基 ) 胺基 )-2-(4- 氟苯基 )-2,7- 㖠啶 -1(2H)- 酮
向化合物 62-8(70.0 mg，95.1 μmol，1.00當量)於DCM (5.00 mL)中之溶液中添加TFA (7.70 g，67.5 mmol，5.00 mL，709當量)。接著在50℃下攪拌混合物10小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。用NaHCO 3飽和水溶液將反應混合物之pH調節至9並用DCM 150 mL (50.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 15:1，R f(P1)= 0.400)進行純化。如藉由H NMR、LC-MS及HPLC證實，獲得 化合物 62(24.5 mg，38.8 umol，40.8%產率，97.6%純度)。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ11.76 (s, 1H), 8.33 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.91 - 7.89 (m, 2H), 7.44 - 7.41 (m, 4H), 7.26 - 7.24 (m, 4H), 7.09 - 7.08 (m, 1H), 6.74 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 6.49 - 6.47 (m, 2H), 5.09 (s, 2H), 4.83 (d, J= 13.2 Hz, 1H), 4.10 (d, J= 14.4 Hz, 1H), 3.28 - 3.21 (m, 1H), 3.12 - 3.06 (m, 1H), 2.89 - 2.83 (m, 1H), 2.78 - 2.72 (m, 1H), 2.16 - 2.10 (m, 2H), 1.74 - 1.65 (m, 2H), 1.17 - 1.16 (m, 6H)。
LC-MS:(M+H) +: 616.2
HPLC ：純度：97.6%(220 nm) 實例 40 8-((4-(1- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -8- 基 ) 苯基 ) 胺基 )-2-( 吡啶 -2- 基 )-2,7- 㖠啶 -1(2H)- 酮 ( 化合物 63) 步驟 1. 4- 甲基 -2- 側氧基 -2H-[1,2'- 聯吡啶 ]-3- 甲腈
向化合物 63-1(4.00 g，29.8 mmol，1.00當量)及化合物 63-2(9.42 g，59.6 mmol，5.68 mL，2.00當量)於甲苯(130 mL)中之溶液中添加K 3PO 4(12.6 g，59.6 mmol，2.00當量)、CuI (5.68 g，29.8 mmol，1.00當量)及DMAEA (1.05 g，11.9 mmol，1.30 mL，0.400當量)。在N 2氛圍下在120℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。過濾混合物。接著將混合物用水(200 mL)淬滅，接著用EtOAc (200 mL * 2)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物(石油醚: 乙酸乙酯= 0:1，R f(P1)= 0.500)藉由管柱層析法(SiO 2，石油醚: 乙酸乙酯= 0:1至0:1)進行純化。藉由H NMR證實，獲得呈黃色固體狀之化合物 63-3(0.600 g，2.84 mmol，9.53%產率)。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ8.57 - 8.56 (m, 1H), 8.13 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 8.03 - 8.01 (m, 1H), 7.90 - 7.85 (m, 1H), 7.39 - 7.36 (m, 1H), 6.31 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 2.52 (s, 3H)。 步驟 2. (E)-4-(2-( 二甲胺基 ) 乙烯基 )-2- 側氧基 -2H-[1,2'- 聯吡啶 ]-3- 甲腈
向化合物 63-3(540 mg，2.56 mmol，1.00當量)於DMF (10.0 mL)中之溶液中添加DMF-DMA (335 mg，2.81 mmol，373 μL，1.10當量)。接著在N 2氛圍下在90℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。在減壓下濃縮混合物，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之粗產物 63-4(700 mg)。 步驟 3. 2-( 吡啶 -2- 基 )-2,7- 㖠啶 -1,8(2H,7H)- 二酮
在N 2氛圍下將化合物 63-4(700 mg，2.63 mmol，1.00當量)於H 2SO 4(18.4 g，183 mmol，10.0 mL，98.0%純度，69.9當量)中之混合物在110℃下攪拌2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將混合物倒入冰水(100 mL)中並用DCM (50.0 mL * 3)萃取。接著用飽和NaHCO 3將水相之pH調節至7，並且用DCM (100 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。接著將水相在減壓下濃縮，得到殘餘物。並且將殘餘物用DCM:MeOH = 3:1 (400 mL)在20℃下研磨30分鐘。接著過濾混合物且在減壓下濃縮過濾物，得到殘餘物。獲得呈黃色固體狀之化合物 63-5(500 mg，2.09 mmol，79.5%產率)。 步驟 4. 8- 氯 -2-( 吡啶 -2- 基 )-2,7- 㖠啶 -1(2H)- 酮
將化合物 63-5(200 mg，836 μmol，1.00當量)於POCl 3(16.5 g，107 mmol，10.0 mL，128當量)中之混合物在110℃下攪拌1小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。在減壓下濃縮反應混合物，得到殘餘物。用NaHCO 3飽和水溶液將殘餘物之pH調節至9並用DCM 150 mL (50.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。藉由H NMR證實，獲得呈黃色固體狀之化合物 63-6(210 mg，814 μmol，97.4%產率)。
H NMR:(400 MHz, DMSO -d 6) δ8.64 - 8.62 (m, 1H), 8.51 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 8.05 - 7.99 (m, 2H), 7.80 - 7.78 (m, 1H), 7.68 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.54 - 7.51 (m, 1H), 6.78 (d, J= 7.6 Hz, 1H)。 步驟 5. 8-((4-(6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1-((4- 甲氧基苯甲基 ) 胺基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -8- 基 ) 苯基 ) 胺基 )-2-( 吡啶 -2- 基 )-2,7- 㖠啶 -1(2H)- 酮
向化合物 63-6(77.6 mg，301 μmol，1.50當量)及化合物 63-7(100 mg，200 μmol，1.00當量)於二㗁烷(3.00 mL)中之溶液中添加 t-BuONa (23.1 mg，241 μmol，1.20當量)、DPPP (33.1 mg，80.3 μmol，0.400當量)及Pd 2(dba) 3(36.8 mg，40.1 μmol，0.200當量)。在N 2氛圍下在100℃下攪拌混合物10小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(20.0 mL)淬滅，接著用EtOAc (30.0 mL)萃取。將有機層用水(10.0 mL * 3)及鹽水(10.0 mL * 3)洗滌，並且合併之水層用EtOAc (30.0 mL * 3)萃取。合併之有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.400)進行純化。獲得呈黃色固體狀之化合物 63-8(80.0 mg，111 μmol，55.3%產率)。 步驟 6. 8-((4-(1- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 吡咯并 [1,2-a] 吡 𠯤 -8- 基 ) 苯基 ) 胺基 )-2-( 吡啶 -2- 基 )-2,7- 㖠啶 -1(2H)- 酮
向化合物 63-8(40.0 mg，55.6 μmol，1.00當量)於DCM (1.50 mL)中之溶液中添加TFA (2.31 g，20.2 mmol，1.50 mL，364當量)。接著在50℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。在減壓下濃縮反應混合物，得到殘餘物。接著用NaHCO 3飽和水溶液將殘餘物之pH調節至9並用EtOAc 150 mL(50.0 mL * 3)萃取。合併之有機層用NaHCO 3飽和水溶液(50.0 mL * 2)及水(50.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (DCM:MeOH = 10:1，R f(P1)= 0.400)進行純化。如藉由H NMR、LC-MS及HPLC證實，獲得 化合物 63(18.6 mg，30.2 μmol，54.4%產率，98.1%純度)。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ11.77 (s, 1H), 8.65 - 8.64 (m, 1H), 8.34 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.95 - 7.88 (m, 4H), 7.80 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.45 - 7.38 (m, 3H), 7.25 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.07 (d, J= 4.8 Hz, 1H), 6.75 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 6.53 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 5.35 (s, 2H), 4.83 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 4.11 (d, J= 10.4 Hz, 1H), 3.28 - 3.25 (m, 1H), 3.10 - 3.08 (m, 1H), 2.88 - 2.85 (m, 1H), 2.79 - 2.72 (m, 1H), 2.16 - 2.01 (m, 2H), 1.75 - 1.66 (m, 2H), 1.17 - 1.16 (m, 6H)。
LC-MS:(M+H) +: 599.2
HPLC ：純度：98.1%(215 nm) 實例 41 N-(4-(4- 胺基 -7-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1- 側氧基 -1,2- 二氫酞 𠯤 -5- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 64) 步驟 1. 3- 溴 -2- 氰基 -5-(1- 異丁醯基 -1,2,3,6- 四氫吡啶 -4- 基 ) 苯甲酸
向化合物 64-1(500 mg，1.37 mmol，1.00當量)、化合物 64-2(362 mg，1.30 mmol，0.950 當量)於二㗁烷(10.0 mL)、H 2O (1.00 mL)中之溶液中添加Na 2CO 3(2 M，1.37 mL，2.00當量)、Pd(PPh 3) 4(158 mg，136 μmol，0.100當量)，在90℃下攪拌混合物3小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用水(10.0 mL)稀釋，用EtOAc (10.0 mL * 3)萃取，在0℃下用1 M HCl將水相調節至pH = 2，用DCM (10.0 mL * 3)萃取，合併之有機層用鹽水(20.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮以移除溶劑，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 64-3(500 mg，1.33 mmol，97.0%產率)。 步驟 2. 2- 氰基 -5-(1- 異丁醯基 -1,2,3,6- 四氫吡啶 -4- 基 )-4'- 硝基 -[1,1'- 聯苯 ]-3- 甲酸
向化合物 64-3(500 mg，1.33 mmol，1.00當量)、化合物 64-4(265 mg，1.59 mmol，1.20當量)於二㗁烷(10.0 mL)中之溶液中添加K 3PO 4(2 M，1.99 mL，3.00當量)、XPHOS-PD-G2 (104 mg，132 μmol，0.100當量)，在N2氛圍下在90℃下攪拌混合物12小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。混合物用水(20.0 mL)稀釋，用EtOAc(20.0 mL * 2)萃取，棄去有機層並在0℃下用1 M HCl將水相調節至pH = 2，用DCM (20.0 mL * 3)萃取，合併之有機層用鹽水(40.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 64-5(350 mg，834 μmol，62.9%產率)。 步驟 3. 2- 氰基 -5-(1- 異丁醯基 -1,2,3,6- 四氫吡啶 -4- 基 )-4'- 硝基 -[1,1'- 聯苯 ]-3- 甲酸甲酯
向化合物 64-5(350 mg，834 μmol，1.00當量)於DMF (5.00 mL)中之溶液中添加Ag 2O (386 mg，1.67 mmol，2.00當量)、MeI (177 mg，1.25 mmol，77.9 μL，1.50當量)，在25℃下攪拌混合物3小時。LC-MS顯示化合物 64-5被消耗，並且偵測到所需質量。將混合物過濾並用水(20.0 mL)稀釋，用EtOAc (20.0 mL * 3)萃取，合併之有機層用水(30.0 mL * 2)、鹽水(30.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮以移除溶劑，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 64-6(340 mg，784 μmol，94.0%產率)。 步驟 4. 4'- 胺基 -2- 氰基 -5-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-[1,1'- 聯苯 ]-3- 甲酸甲酯
向化合物 64-6(340 mg，784 umol，1.00當量)於THF (5.00 mL)中之溶液中添加Pd/C (100 mg，10%純度)，接著脫氣並用H 2吹掃三次，在25℃下攪拌混合物1小時(15 psi)。LCMS顯示偵測到所需質量。將混合物過濾並濃縮以移除溶劑。混合物藉由製備型TLC(SiO 2，DCM:MeOH = 10:1，板1，DCM:MeOH = 10:1，R f= 0.6)進行純化，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 64-7(180 mg，443.91 μmol，56.59%產率)。 步驟 5. 4- 胺基 -5-(4- 胺基苯基 )-7-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 酞 𠯤 -1(2H)- 酮
向化合物 64-7(100 mg，246 μmol，1.00當量)於MeOH (2.00 mL)中之溶液中添加N 2H 4 . H 2O (412 mg，8.07 mmol，400 μL，98.0%純度，32.7當量)，在50℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。將混合物濃縮以移除溶劑。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，DCM:MeOH = 10:1，板1，DCM:MeOH = 10:1，R f= 0.25)進行純化，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 64-8(50.0 mg，123 μmol，50.0%產率)。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ10.87 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.43 - 7.42 (m, 1H), 7.17 - 7.14 (m, 2H), 6.79 - 6.73 (m, 2H), 4.91 - 4.82 (m, 3H), 4.08 (brs, 1H), 3.91 (brs, 2H), 3.15 (t, J= 13.2 Hz, 1H), 2.96 - 2.90 (d, 1H), 2.86 - 2.81 (m, 1H), 2.66 - 2.60 (m, 1H), 2.00 - 1.94 (m, 2H), 1.73 - 1.66 (m, 2H), 1.17 - 1.13 (m, 6H)。 步驟 6. N-(4-(4- 胺基 -7-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1- 側氧基 -1,2- 二氫酞 𠯤 -5- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺
向化合物 64-8(50.0 mg，123 μmol，1.00當量)、化合物 64-9(30.5 mg，111 μmol，0.900當量)於Py (2.00 mL)中之溶液中添加EDCI (47.3 mg，247 μmol，2.00當量)，在25℃下攪拌混合物2小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用NaHCO 3飽和水溶液(10.0 mL)及水(10.0 mL)稀釋，用DCM (20.0 mL * 3)萃取，合併之有機層用鹽水(40.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，DCM:MeOH = 10:1，板1，DCM:MeOH = 10:1，R f= 0.55)進行純化，得到所需產物 化合物 64(12.36 mg，17.3 μmol，14.0%產率，93.0%純度)，如藉由H NMR，LC-MS及HPLC證實。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ10.91 (s, 1H), 9.81 (s, 1H), 8.75 - 8.71 (m, 2H), 8.36 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.01 - 7.97 (m, 1H), 7.76 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.52 - 7.49 (m, 1H), 7.44 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.41 - 7.34 (m, 3H), 5.02 - 4.95 (m, 1H), 4.86 - 4.82 (m, 1H), 4.23 (s, 2H), 4.12 - 4.08 (m, 1H), 3.18 - 3.12 (m, 1H), 2.98 - 2.91 (m, 1H), 2.87 - 2.80 (m, 1H), 2.66 - 2.60 (m, 1H), 2.02 - 1.95 (m, 2H), 1.73 - 1.70 (m, 2H), 1.51 (d, J= 6.8 Hz, 6H), 1.17 - 1.13 (m, 6H)。
LC-MS:(M+H) +: 663.4
HPLC ：純度：93.7%(220 nm) 實例 42 N-(4-(4- 胺基 -7-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 喹唑啉 -5- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 ( 化合物 65) 步驟 1 ： 4-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧雜環戊硼烷 -2- 基 )-1,2,3,6- 四氫吡啶 2,2,2- 三氟乙酸鹽
向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-3,6-二氫吡啶–1(2 H)-甲酸第三丁酯(1.00 g，3.23 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(3 mL)。在N 2氛圍下在25℃下將所得混合物攪拌2小時。藉由LC-MS監測反應。在反應完成後，將反應混合物在真空中濃縮，得到呈黃色固體狀之4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1,2,3,6-四氫吡啶2,2,2-三氟乙酸鹽(1.04 g，100%產率，粗產物)。
LC-MS: (ESI) [M+H] += 210.1，t R= 0.78分鐘 步驟 2 ： 2- 甲基 -1-(4-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧雜環戊硼烷 -2- 基 )-3,6- 二氫吡啶 -1(2H)- 基 ) 丙 -1- 酮
在0℃下向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1,2,3,6-四氫吡啶2,2,2-三氟乙酸鹽(1.04 g，3.23 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液中逐滴添加三乙胺(979 mg，9.69 mmol)及異丁醯氯(342 mg，3.23 mmol)。在N 2氛圍下在25℃下將所得混合物攪拌12小時。藉由LC-MS監測反應。在反應完成後，將反應混合物在真空中濃縮並藉由矽膠管柱層析法(PE: EA=1:1)進行純化以獲得呈黃色油狀之2-甲基-1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-3,6-二氫吡啶-1(2 H)-基)丙-1-酮(200 mg，0.71 mmol，22%產率)。
LC-MS: (ESI) [M+H] += 280.2，t R= 1.24分鐘 步驟 3 ： 2- 胺基 -4- 溴 -6- 氟苯甲腈
在室溫下向4-溴-2,6-二氟苯甲腈(500 mg，2.29 mmol)於異丙醇(5 mL)中之溶液中添加NH 3žH 2O (5 mL)。在N 2氛圍下在85℃下將所得混合物攪拌12小時。藉由TLC監測反應。在反應完成後，將反應溶液倒入水(10 mL)中，並且用乙酸乙酯(10 mL × 3)萃取。合併之有機層用鹽水飽和水溶液(10 mL × 3)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱層析法(PE: EA = 2:1)進行純化以獲得呈黃色固體狀之2-胺基-4-溴-6-氟苯甲腈(400 mg，1.86 mmol，81%產率)。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 6.84 (s, 1H), 6.81-6.70 (m, 3H)。 步驟 4 ： 4- 溴 -2- 氟 -6- 碘苯甲腈
在0℃下向2-胺基-4-溴-6-氟苯甲腈(10.0 g，46.5 mmol)於乙腈(100 mL)中之溶液中添加KI (15.4 g，93.0 mmol)、CuI (884 mg，4.65 mmol)及亞硝酸第三丁酯(9.5 g，93.0 mmol)。將混合物加熱至70℃並在70℃下攪拌1小時。藉由TLC監測反應。在反應完成後，在真空中濃縮反應混合物，接著藉由矽膠管柱層析法(PE: EA = 4:1)進行純化以獲得呈黃色固體狀之4-溴-2-氟-6-碘苯甲腈(6.00 g，18.4 mmol，40%產率)。 步驟 5 ： 7- 溴 -5- 碘喹唑啉 -4- 胺
向乙酸甲脒(7.67 g，73.6 mmol)於DMF (50 mL)中之溶液中緩慢添加氫化鈉(5.88 g，147 mmol，60%含量分散在礦物油中)及4-溴-2-氟-6-碘苯甲腈(6.00 g，18.4 mmol)。在N 2氛圍下在120℃下將所得混合物攪拌1小時。藉由LC-MS監測反應。在反應完成後，將混合物倒入水(100 mL)中並過濾以獲得呈黃色固體狀之7-溴-5-碘喹唑啉-4-胺(1.00 g，2.85 mmol，15%產率)。
LC-MS: (ESI) [M+H] += 351.9，t R= 0.83分鐘 步驟 6 ： (4-(4- 胺基 -7- 溴喹唑啉 -5- 基 ) 苯基 ) 胺基甲酸第三丁酯
向7-溴-5-碘喹唑啉-4-胺(1.00 g，2.85 mmol)、(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)苯基)胺基甲酸第三丁酯(1.09 g，3,42 mmol)於甲苯(5 mL)及水(1 mL)中之混合物中添加BrettPhos (153 mg，0.285 mmol)、BrettPhos Pd G3 (258 mg，0.285 mmol)及K 2CO 3(1.18 g，8.55 mmol)。在微波中在120℃下攪拌混合物2小時。藉由LC-MS監測反應。在反應完成後，在真空中濃縮反應物，並且殘餘物藉由矽膠管柱層析法(PE: EA = 4:1)進行純化以獲得呈黃色固體狀之(4-(4-胺基-7-溴喹唑啉-5-基)苯基)胺基甲酸第三丁酯(40.0 mg，0.097 mmol，3.3%產率)。
LC-MS: (ESI) [M+H] += 415.1，t R= 1.11分鐘 步驟 7 ： (4-(4- 胺基 -7-(1- 異丁醯基 -1,2,3,6- 四氫吡啶 -4- 基 ) 喹唑啉 -5- 基 ) 苯基 ) 胺基甲酸第三丁酯
在N 2氛圍下向(4-(4-胺基-7-溴喹唑啉-5-基)苯基)胺基甲酸第三丁酯(40.0 mg，0.097 mmol)於1,4-二㗁烷(3 mL)及水(0.5 mL)中之混合物中添加2-甲基-1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-3,6-二氫吡啶-1(2 H)-基)丙-1-酮(54.1 mg，0.194 mmol)、cataCXium A-Pd-G2 (6.68 mg，0.010 mmol)、K 3PO 4(61.7 mg，0.291 mmol)。將所得混合物在90℃下攪拌12小時。在反應完成後，將混合物過濾，接著在真空中濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱層析法(DCM:MeOH = 20:1)進行純化以獲得呈黃色固體狀之(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基-1,2,3,6-四氫吡啶-4-基)喹唑啉-5-基)苯基)胺基甲酸第三丁酯(40.0 mg，0.082 mmol，85%產率)。
LC-MS: (ESI) [M+H]+ = 488.2，tR = 1.12分鐘 步驟 8 ： (4-(4- 胺基 -7-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 喹唑啉 -5- 基 ) 苯基 ) 胺基甲酸第三丁酯
向(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基-1,2,3,6-四氫吡啶-4-基)喹唑啉-5-基)苯基)胺基甲酸第三丁酯(40.0 mg，0.082 mmol)於四氫呋喃(2 mL)中之溶液中添加Pd/C (5.00 mg，鈀含量10%)。混合物用H 2脫氣三次，接著在H 2氛圍下在25℃下攪拌1小時。藉由LC-MS監測反應。在反應完成後，過濾混合物並在真空中濃縮，得到呈黃色固體狀之(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)-喹唑啉-5-基)苯基)胺基甲酸第三丁酯(40.2 mg，0.082 mmol，粗產物)。
LC-MS: (ESI) [M+H] += 490.3，t R= 1.11分鐘。 步驟 9 ： 1-(4-(4- 胺基 -5-(4- 胺基苯基 ) 喹唑啉 -7- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 酮 2,2,2- 三氟乙酸鹽
向(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)喹唑啉-5-基)苯基)胺基甲酸第三丁酯(40.2 mg，0.082 mmol)於二氯甲烷(2 mL)中之溶液中逐滴添加三氟乙酸(1 mL)。在N 2氛圍下在25℃下攪拌混合物2小時。藉由LC-MS監測反應。在反應完成後，將混合物直接在真空中濃縮，得到呈黃色固體狀之1-(4-(4-胺基-5-(4-胺基苯基)喹唑啉-7-基)哌啶-1-基)-2-甲基丙-1-酮2,2,2-三氟乙酸鹽(41.2 mg，0.082 mmol，粗產物)。
LC-MS: (ESI) [M+H] += 390.2，t R= 0.90分鐘 步驟 10 ： N-(4-(4- 胺基 -7-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 ) 喹唑啉 -5- 基 ) 苯基 )-1- 異丙基 -2,4- 二側氧基 -3-( 吡啶 -2- 基 )-1,2,3,4- 四氫嘧啶 -5- 甲醯胺 2,2,2- 三氟乙酸鹽
向1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酸(33.8 mg，0.123 mmol)於DCM (2 mL)中之溶液中添加HATU (46.7 mg，0.123 mmol)及DIEA (47.6 mg，0.369 mmol)。在N 2氛圍下在25℃下攪拌混合物0.5小時。接著將1-(4-(4-胺基-5-(4-胺基苯基)喹唑啉-7-基)哌啶-1-基)-2-甲基丙-1-酮2,2,2-三氟乙酸鹽(41.2 mg，0.082 mmol)添加至上述混合物中。在N 2氛圍下在25℃下繼續攪拌混合物2小時。藉由LC-MS監測反應。在反應完成後，將反應溶液在真空中濃縮，並且殘餘物藉由反相製備型HPLC (用CH 3CN及含0.1% TFA之H 2O溶離)以獲得N-(4-(4-胺基-7-(1-異丁醯基哌啶-4-基)喹唑啉-5-基)苯基)-1-異丙基-2,4-二側氧基-3-(吡啶-2-基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲醯胺-2,2,2-三氟乙酸鹽。(1.20 mg，1.5 μmol，1.7%產率)。
LC-MS: [ESI] [M+H] += 647.3，t R= 0.98分鐘。
1H-NMR (400 MHz,CD 3OD): δ 8.78 (s, 1H), 8.71-8.56 (m, 2H), 8.11 (td, J = 7.6, 2.0 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.69-7.59 (m, 2H), 7.56 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.79-4.68 (m, 2H), 4.31-4.11 (m, 1H), 3.73-3.51 (m, 1H), 3.01 (td, J = 13.2, 6.4 Hz, 1H), 2.87-2.63 (m, 1H), 2.30-2.17 (m, 1H), 2.07-1.94 (m, 2H), 1.84-1.61 (m, 2H), 1.51 (d, J = 6.8 Hz, 6H), 1.14-1.08 (m, 6H)。 實例 43 N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1- 甲基 -1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-5'- 氟 -2- 側氧基 -2H-[1,2'- 聯吡啶 ]-3- 甲醯胺 ( 化合物 66) 步驟 1. 5'- 氟 -2- 側氧基 -2H-[1,2'- 聯吡啶 ]-3- 甲酸甲酯
向化合物 66-1(1.00 g，6.49 mmol，1.00當量)於THF (10.0 mL)及DMF (2.50 mL)中之溶液中添加化合物 66-2(727 mg，6.49 mmol，1.00當量)，在25℃下攪拌混合物2小時，接著添加EDCI (1.87 g，9.73 mmol，1.50當量)、DMAP (396 mg，3.24 mmol，0.500當量)，在25℃下攪拌混合物10小時。LC-MS顯示化合物 66-1被消耗，並且偵測到所需質量。將混合物用4 M HCl (10.0 mL)稀釋並在25℃下攪拌0.5小時，將混合物過濾，並且濾餅係呈黃色固體狀之所需產物化合物 66-3(660 mg，2.66 mmol，40.9%產率)。 步驟 2. 5'- 氟 -2- 側氧基 -2H-[1,2'- 聯吡啶 ]-3- 甲酸
在0℃下向化合物 66-3(660 mg，2.66 mmol，1.00當量)於THF (10.0 mL)、MeOH (4.00 mL)之溶液中添加LiOH . H 2O (334 mg，7.98 mmol，3.00當量)於H 2O (2.00 mL)中之溶液，在25℃下攪拌混合物3小時。LC-MS顯示化合物 66-3被消耗，並且偵測到所需質量。濃縮混合物以移除溶劑並用水(20.0 mL)稀釋，用EtOAc (20.0 mL * 2)萃取，棄去有機層並在0℃下用1 M HCl將水相調節至pH = 2，用DCM(30.0 mL * 3)萃取，合併之有機層用鹽水(50.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮以移除溶劑，得到呈黃色固體狀之所需產物化合物 66-4(500 mg，2.14 mmol，80.3%產率)。 步驟 3. N-(4-(3- 胺基 -6-(1- 異丁醯基哌啶 -4- 基 )-1- 甲基 -1H- 吲唑 -4- 基 ) 苯基 )-5'- 氟 -2- 側氧基 -2H-[1,2'- 聯吡啶 ]-3- 甲醯胺
向化合物 66-5(25.0 mg，63.8 μmol，1.00當量)、化合物 66-5(13.4 mg，57.4 μmol，0.900當量)於DCM (2.00 mL)中之溶液中添加DIEA (41.2 mg，319 μmol，55.6 μL，5.00當量)、HATU (36.4 mg，95.8 μmol，1.50當量)，在25℃下攪拌混合物1小時。LC-MS顯示偵測到所需質量。反應混合物用NaHCO 3飽和水溶液(3.00 mL)及水(3.00 mL)稀釋，用DCM (5.00 mL * 3)萃取，合併之有機層用鹽水(10.0 mL)洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物藉由製備型TLC (SiO 2，DCM:MeOH = 10:1，板1，DCM:MeOH = 10:1，R f= 0.55)進行純化，得到所需產物 化合物 66(22.73 mg，35.16 μmol，55.06%產率，94%純度)，如藉由H NMR，LC-MS及HPLC證實。
H NMR:(400 MHz, CDCl 3) δ11.86 (s, 1H), 8.79 – 8.76 (m, 1H), 8.49 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 8.03 – 8.00 (m, 1H), 7.92 – 7.89 (m, 1H), 7.87 – 7.85 (m, 2H), 7.69 – 7.65 (m, 1H), 7.51 – 7.49 (m, 2H), 6.97 (s, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.67 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 4.86 (d, J= 13.6 Hz, 1H), 4.10 (d, J= 12.4 Hz, 1H), 3.87 – 3.79 (m, 5H), 3.17 (t, J= 12.8 Hz, 1H), 2.93 – 2.83 (m, 2H), 2.65 (t, J= 12.0 Hz, 1H), 2.04 – 1.98 (m, 2H), 1.76 – 1.70 (m, 2H), 1.19 – 1.14 (m, 6H)。
LC-MS:(M+H) +: 608.4
HPLC ：純度：94.0%(220 nm) 實例 44 生物化學測定
活體外激酶測定
首先將所有化合物在DMSO中稀釋到其最終濃度之50倍。將50 µL之化合物稀釋液轉移到384孔Echo盤(Labcyte PP-0200)中之各孔中。將所有化合物轉移到384孔Echo盤中之一個孔中，並藉由在下一個孔中將100% DMSO稀釋4倍來連續稀釋該化合物，依此類推，總共精確獲得10種濃度。將50 μl之100% DMSO添加至同一384孔Echo盤之兩個空孔中，用作無化合物對照及無酶對照。將該盤標記為源盤。將來自384孔Echo盤之各孔中之400 nL雙重複轉移至384孔測定盤(Corning 3573)。向各孔中添加含有AXL、MER或TYRO3 (最終濃度分別為6 nM、1 nM或1.5 nM) 於1 × 激酶緩衝液(50 mM HEPES pH 7.5、10 mM MgCl2、2 mM DTT及0.01% Brij-35)中之10 µL酶溶液，並且將混合物在室溫下溫育10分鐘。為了起始各反應，將含有FAM標記之肽(AXL、MER及TYRO3之最終濃度為3000 nM FAM-P8)及ATP (AXL、MER或TYRO3之最終濃度分別為81 µM、32 µM或33 µM)於1 × 激酶緩衝液中之10 µL肽溶液添加至各孔中。所有反應物均在28℃下溫育1小時，接著藉由添加25 µL終止緩衝液(100 mM HEPES pH 7.5、50 mM EDTA、0.2%塗覆試劑#3及0.015% Brij-35)終止反應。
接著使用Caliper EZ讀取器Ⅱ (下游電壓：-500 V，上游電壓：-2250 V，基礎壓力-0.5 PSI，螢幕壓力-1.2 PSI)讀取轉換值以對所有樣品進行分析。使用下式將轉換值轉換為激酶活性抑制%：抑制% = [(MA – X)/(MA – MI)] × 100%，其中MA = 僅DMSO對照之轉換值，MI =無酶對照之轉換值，並且X =在任何給定化合物劑量下之轉換值。接著藉由繪製劑量反應曲線並且接著使用Excel軟體中之Xlfit應用程式來計算IC50值。
發現本文所提供之化合物係AXL、MER及TYRO3中之一或多者之抑制劑。特定而言，本文所提供之化合物對AXL及MER之選擇性超過對TYRO3之選擇性。下表2中提供本發明之示例性化合物之IC 50資料。 表2
化合物編號 AXL IC 50(nM) MER IC 50(nM) TYRO3 IC 50(nM)
1 3.5 22 87
2 1.4 2.4 23.3
3 10.9 8.5 233.7
4 3.4 19 35
5 2.9 18 26
6 2.4 15 63
7 0.87 1.2 11.1
8 3.29 14.0 51.6
9 0.6 1.2 5.1
10 4.3 28 170
11 1 2.3 48.5
12 25 32 798
13 29 157 1103
14 123 456 1370
15 4 24 67
16 0.6 1.2 21
17 114 878 9420
18 4 21 48
19 5 27 56
20 0.6 1.0 13.2
22 1.2 0.77 15
23 42 183 3920
24 3 14 366
25 167.6 270.5 2290
27 7 6.5 203
30 6.8 161 939
35 7 9 513
36 1 2 180
37 1 2 51
38 0.6 2.2 6.5
39 14 15 677
40 15 275 ＞2500
42 2.4 3.6 17
43 1 3 8
44 1 4 206
45 1 2 68
46 68.2 198.7 977
47 67 355 ＞2500
48 3 3 29
49 3 11 12
50 2 7 24
51 2 1 22
52 3 7 25
53 3 2 268
54 7 4 478
55 4.3 28 58
56 22 5.5 338
57 0.4 1.8 10
58 1.6 16 43
59 0.7 5 26
60 1.2 6 22
61 7 9 244
62 32 4 203
63 51 37 ＞2500
64 114 105 695
65 56 47 143
66 3.5 4 82
前述說明被認為僅係對本發明之原理之說明。另外，由於許多潤飾及變化對於熟習此項技術者而言顯而易見，所以不希望將本發明限於如上文所描述之所示確切構造及製程。因此，所有合適之潤飾及等效物可以被視為落入由所附申請專利範圍限定之本發明範疇內。

Claims (109)

  1. 一種化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其具有式(I)： (I) 其中 環A係包含1個或2個氮原子之5員雜芳基； 環B係苯基或包含1個或2個氮原子之6員雜芳基，其中之每一者視情況經一個或兩個R 2取代； 環C係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R a取代； R 1係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R b取代； R 2係鹵素、羥基、氰基、胺基、烷基或鹵烷基； 各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、側氧基、烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基及-C(=O)R c；或者 兩個相鄰之R a與其連接之原子一起形成環烷基或雜環基； 各R b獨立地選自側氧基、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基或-C(O)NH-R c，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代；並且 R c係烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代。
  2. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環A係包含1個氮原子之5員雜芳基。
  3. 如請求項2之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中 選自由以下組成之群： 。
  4. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環A係包含2個氮原子之5員雜芳基。
  5. 如請求項4之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中 選自由以下組成之群： 。
  6. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環B係視情況經一個或兩個R 2取代之苯基。
  7. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環B係視情況經一個或兩個R 2取代之包含1個或2個氮原子的6員雜芳基。
  8. 如請求項7之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環B係吡啶基。
  9. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1係視情況經一或多個R b取代之環烷基。
  10. 如請求項9之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1係視情況經一或多個R b取代之環丙基。
  11. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1係視情況經一或多個R b取代之雜環基。
  12. 如請求項9至11中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各R b獨立地選自側氧基、烷基、烷氧基、芳基、雜芳基或-C(O)NH-R c，其中該芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基或氰基之基團取代。
  13. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1選自由以下組成之群： 。
  14. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 2係鹵素。
  15. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 2係氟。
  16. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係雜環基或芳基，其中之每一者視情況經一或多個R a取代。
  17. 如請求項16之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係視情況經一或多個R a取代之6員至10員雜環基。
  18. 如請求項17之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係視情況經一或多個R a取代之哌啶基或八氫吲𠯤基。
  19. 如請求項18之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係視情況經一或多個R a取代之4-哌啶基或7-八氫吲𠯤基。
  20. 如請求項16至19中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、側氧基、烷基及-C(=O)R c。
  21. 如請求項20之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R c係烷基、C 3-8環烷基、3員至8員雜環基或5員至6員雜芳基。
  22. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係視情況經一或多個R a取代之芳基。
  23. 如請求項22之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係視情況經一或多個R a取代之苯基。
  24. 如請求項22或23之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各R a獨立地選自由以下組成之群：鹵素、氰基、烷基、C 3-8環烷基及5員至6員雜芳基。
  25. 如請求項22或23之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中兩個相鄰之R a與其連接之原子一起形成C 5-8環烷基或5員至8員雜環基。
  26. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其具有式(Ia)： (Ia)。
  27. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其選自由以下組成之群： 。
  28. 一種化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其具有式(II)： (II) 其中 環A係苯基或包含1個或2個氮原子之6員雜芳基； 環B係苯基或包含1個或2個氮原子之6員雜芳基，其中之每一者視情況經一個或兩個R 2取代； 環C係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R a取代； W係CH、N、O或S； R 1係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R b取代； R 2係鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基； R 3係不存在、氫、側氧基、烷基或鹵烷基； R 4係NH 2或鹵烷基； 各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基及-C(=O)R c；或者 兩個相鄰之R a與其連接之原子一起形成環烷基或雜環基； 各R b獨立地選自側氧基、羥基、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基或-C(O)NH-R c，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代；並且 R c係烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代。
  29. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環A係視情況經一個或兩個R 2取代之苯基。
  30. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環A係包含1個氮原子之6員雜芳基。
  31. 如請求項30之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中 選自由以下組成之群： 。
  32. 如請求項28至31中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中W係N。
  33. 如請求項28至31中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中W係O或S。
  34. 如請求項28至31中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中W係CH。
  35. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環B係苯基。
  36. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環B係包含1個或2個氮原子之6員雜芳基。
  37. 如請求項36之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環B係吡啶基。
  38. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1係視情況經一或多個R b取代之環烷基。
  39. 如請求項38之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1係視情況經一或多個R b取代之環丙基。
  40. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1係視情況經一或多個R b取代之雜環基。
  41. 如請求項38至40中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各R b獨立地選自側氧基、羥基、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、芳基、雜芳基或-C(O)NH-R c，其中該芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基或氰基之基團取代。
  42. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1選自由以下組成之群： 。
  43. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 2係鹵素。
  44. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 2係氟。
  45. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係雜環基或芳基，其中之每一者視情況經一或多個R a取代。
  46. 如請求項45之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係視情況經一或多個R a取代之6員雜環基。
  47. 如請求項46之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係視情況經一或多個R a取代之哌啶基。
  48. 如請求項47之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係視情況經一或多個R a取代之4-哌啶基。
  49. 如請求項45至48中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、烷基及-C(=O)R c。
  50. 如請求項49之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R c係烷基、C 3-8環烷基、3員至8員雜環基或5員至6員雜芳基。
  51. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係視情況經一或多個R a取代之芳基。
  52. 如請求項51之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係視情況經一或多個R a取代之苯基。
  53. 如請求項51或52之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各R a獨立地選自由以下組成之群：鹵素、氰基、烷基、C 3-8環烷基及5員至6員雜芳基。
  54. 如請求項51或52之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中兩個相鄰之R a與其連接之原子一起形成C 5-8環烷基或5員至8員雜環基。
  55. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 3係不存在。
  56. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 3係氫。
  57. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 3係側氧基。
  58. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 3係烷基。
  59. 如請求項56之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 3係甲基或乙基。
  60. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 3係鹵烷基。
  61. 如請求項60之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 3係二氟甲基、三氟乙基或二氟乙基。
  62. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 4係NH 2。
  63. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 4係鹵烷基。
  64. 如請求項63之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 4係二氟甲基。
  65. 如請求項28之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其選自： 。
  66. 一種化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其具有式(III)： (III) 其中 環A係包含1個或2個氮原子之5員雜芳基； 環B係苯基或包含1個或2個氮原子之6員雜芳基，其中之每一者視情況經一個或兩個R 2取代； 環C係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R a取代； R 1係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R b取代； R 2係鹵素、羥基、氰基、胺基、烷基或鹵烷基； 各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、側氧基、烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基及-C(=O)R c；或者 兩個相鄰之R a與其連接之原子一起形成環烷基或雜環基； 各R b獨立地選自側氧基、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基或-C(O)NH-R c，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代；並且 R c係烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代。
  67. 如請求項66之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環A係包含1個氮原子之5員雜芳基。
  68. 如請求項67之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中 選自由以下組成之群： 。
  69. 如請求項66之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環A係包含2個氮原子之5員雜芳基。
  70. 如請求項69之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中 選自由以下組成之群： 。
  71. 如請求項66之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環B係視情況經一個或兩個R 2取代之苯基。
  72. 如請求項66之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環B係視情況經一個或兩個R 2取代之包含1個或2個氮原子之6員雜芳基。
  73. 如請求項72之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環B係吡啶基。
  74. 如請求項66之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1係視情況經一或多個R b取代之雜環基。
  75. 如請求項74之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各R b獨立地選自側氧基、烷基、烷氧基、芳基、雜芳基或-C(O)NH-R c，其中該芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基或氰基之基團取代。
  76. 如請求項66之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1選自： 。
  77. 如請求項66之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 2係鹵素。
  78. 如請求項77之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 2係氟。
  79. 如請求項66之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係雜環基或芳基，其中之每一者視情況經一或多個R a取代。
  80. 如請求項79之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係視情況經一或多個R a取代之6員至10員雜環基。
  81. 如請求項80之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係視情況經一或多個R a取代之哌啶基。
  82. 如請求項81之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係視情況經一或多個R a取代之4-哌啶基。
  83. 如請求項79至82中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、側氧基、烷基及-C(=O)R c。
  84. 如請求項83之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R c係烷基、C 3-8環烷基、3員至8員雜環基或5員至6員雜芳基。
  85. 如請求項66之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其選自： 。
  86. 一種化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其具有式(IV)： (IV) 其中 環A係6員雜環基或6員雜芳基，其中之每一者包含1個或2個氮原子並且視情況經一或多個各自獨立地選自羥基、鹵素、氰基、側氧基、胺基或烷基之基團取代； 環B係苯基或包含1個或2個氮原子之6員雜芳基，其中之每一者視情況經一個或兩個R 2取代； 環C係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R a取代； R 1係環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中之每一者視情況經一或多個R b取代； R 2係鹵素、羥基、氰基、胺基、烷基或鹵烷基； 各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、側氧基、烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基及-C(=O)R c；或者 兩個相鄰之R a與其連接之原子一起形成環烷基或雜環基； 各R b獨立地選自側氧基、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基或-C(O)NH-R c，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代；並且 R c係烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基、氰基、胺基或烷基之基團取代。
  87. 如請求項85之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環A係6員雜芳基，其包含2個氮原子並且視情況經一或多個各自獨立地選自羥基、鹵素、氰基、側氧基、胺基或烷基之基團取代。
  88. 如請求項85之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環A係6員雜環基，其包含2個氮原子並且視情況經一或多個各自獨立地選自羥基、鹵素、氰基、側氧基、胺基或烷基之基團取代。
  89. 如請求項85之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中 選自 。
  90. 如請求項85之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環B係視情況經一個或兩個R 2取代之苯基。
  91. 如請求項85之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環B係視情況經一個或兩個R 2取代之包含1個或2個氮原子之6員雜芳基。
  92. 如請求項91之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環B係吡啶基。
  93. 如請求項85之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1係視情況經一或多個R b取代之雜環基。
  94. 如請求項93之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各R b獨立地選自側氧基、烷基、烷氧基、芳基或雜芳基，其中該芳基及雜芳基視情況經一或多個各自獨立地選自鹵素、羥基或氰基之基團取代。
  95. 如請求項85之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R 1係 。
  96. 如請求項85之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係視情況經一或多個R a取代之雜環基。
  97. 如請求項96之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係視情況經一或多個R a取代之6員至10員雜環基。
  98. 如請求項97之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係視情況經一或多個R a取代之哌啶基。
  99. 如請求項98之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中環C係視情況經一或多個R a取代之4-哌啶基。
  100. 如請求項96至99中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各R a獨立地選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、氰基、胺基、側氧基、烷基及-C(=O)R c。
  101. 如請求項100之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R c係烷基、C 3-8環烷基、3員至8員雜環基或5員至6員雜芳基。
  102. 如請求項85之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其選自： 。
  103. 一種藥物組合物，其包含如請求項1至102中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽以及藥學上可接受之賦形劑。
  104. 一種用於抑制TAM激酶之方法，其包括使該TAM激酶與如請求項1至102中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如請求項103之藥物組合物接觸。
  105. 一種用於抑制AXL及MER激酶之方法，其包括使該AXL及MER激酶與如請求項1至102中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如請求項103之藥物組合物接觸。
  106. 一種用於治療有需要之個體之由TAM介導之疾病或病症之方法，其包括向該個體投與有效量之如請求項1至102中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如請求項103之藥物組合物。
  107. 如請求項106之方法，其中該由TAM介導之疾病或病症係癌症。
  108. 如請求項107之方法，其中該癌症選自肝細胞癌、膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、大腸直腸癌、子宮內膜癌、胃癌、頭頸癌、腎癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌、食道癌、膽囊癌、胰臟癌、甲狀腺癌、皮膚癌、白血病、多發性骨髓瘤、慢性淋巴球性淋巴瘤、成人T細胞白血病、B細胞淋巴瘤、急性髓性白血病、霍奇金氏淋巴瘤或非霍奇金氏淋巴瘤、華氏巨球蛋白血症、毛細胞淋巴瘤、伯奇氏淋巴瘤、膠質母細胞瘤、黑色素瘤及橫紋肌肉瘤。
  109. 如請求項108之方法，其中該癌症係肺癌、前列腺癌、大腸癌、乳癌、黑色素瘤、腎細胞癌、多發性骨髓瘤、胃癌或橫紋肌肉瘤。
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