TW202233598A - PPARγ調節劑及使用方法 - Google Patents

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Abstract

本文揭露了具有式 (I) 的新穎的化合物及其藥學上可接受的鹽，含有其的藥物組成物及其使用方法。

Description

PPARγ調節劑及使用方法
本文揭露了新穎的化合物和含有此類化合物之藥物組成物。該等化合物可用於治療癌症，特別是已知靶向RXRα和/或PPAR γ途徑的試劑係有用之癌症。
肌層浸潤性膀胱癌（MIBC）係一種侵襲性、潛在致命的疾病，治療選擇有限。儘管化學療法和免疫療法被批准用於治療局部晚期或轉移性膀胱癌，但大多數患者要麼沒有反應，要麼僅出現短時間的反應（Seiler等人, 2017 Eur Urology[歐洲泌尿學]；Robertson等人, 2017 Cell[細胞]）。這表明需要額外的努力來確定可以使那些目前對現有標準護理（SoC）療法沒有反應的患者受益之新穎療法。
最近的研究表明，並非所有晚期膀胱癌皆為平等產生的。深度基因表現和基因組分析揭示了MIBC的不同分子亞型，包括基底亞型和管腔亞型（Choi等人, 2014 Cancer Cell[癌細胞]；Kardo等人, 2016 JCI Insight；Kamoun等人, 2020 Eur Urology[歐洲泌尿學]），具有獨特的腫瘤內在和微環境特徵。與管腔乳癌和前列腺癌非常相似，管腔膀胱癌往往生長較慢，免疫浸潤較少，並且對化學療法和免疫療法的反應較差（Robertson等人, 2017 Cell[細胞]）。由於目前只有次優療法可用於管腔疾病，因此需要共同努力來識別和開發新穎的管腔譜系特異性治療節點。
大部分管腔膀胱癌中RXRα/PPARγ途徑的基因組改變，包括RXRα在絲胺酸427（S427F/Y）的頻發突變、PPARγ在蘇胺酸475（T475M）的熱點突變和PPARγ的擴增/超表現（Guo等人, 2013 Nature Genetics[自然遺傳學]；Van Allen等人, 2014 Cancer Discovery[癌症發現]）係顯而易見的。該等基因組改變增強了MIBC中PPARγ/RXRα依賴性轉錄程式（Halstead等人, 2017 e 生命；Korpal等人, 2017 Nat Communications[自然通訊] ；Goldstein等人, 2017 Cancer Research[癌症發現]）。此外，只有PPARγ 活性管腔膀胱癌細胞系在PPARγ的遺傳/藥理學抑制後顯示出增殖減少（Halstead等人, 2017 eLife ；Goldstein等人, 2017 Cancer Research[癌症發現]）。因此，該途徑激活與生長對RXRα/PPARγ的依賴有關。隨後對PPARγ在管腔細胞中的功能作用的分析揭示了藉由增強葡萄糖和脂質代謝在促進能量產生中的關鍵作用（Liu等人, 2019 Nat Communications[自然通訊]），這可能有助於觀察到在基因組改變的管腔細胞中對PPARγ的依賴性。
除了PPARγ在PPARγ改變的管腔膀胱癌中發揮的這種腫瘤內在作用外，最近的研究表明，活化的PPARγ/RXRα抑制炎性細胞介素表現和免疫細胞浸潤（Korpal等人, 2017 Nat Communications[自然通訊] ；Kardos等人, 2016 JCI Insight）。幾個臨床數據集和體內腫瘤模型表明PPARγ 高/RXRα S427F/Y會損害CD8 +T細胞浸潤並賦予對免疫檢查點抑制劑的部分抗性。PPARγ或RXRα的敲低和PPARγ的藥理學抑制顯著增加細胞介素的表現，並可能提出恢復免疫監視和對免疫療法敏感性的治療方法（Korpal等人, 2017 Nat Communications[自然通訊]）。總的來說，該等研究表明PPARγ作為腫瘤細胞固有的「免疫癌基因」，藉由促進腫瘤細胞生長、增強能量產生和藉由免疫抑制增加腫瘤細胞存活來發揮作用。
因此，本文揭露了可以靶向RXRα和/或PPAR γ途徑的化合物。
本文揭露了具有式 (I) 的化合物：
Figure 02_image006
及其藥學上可接受的鹽， 其中： Ar 1選自
Figure 02_image008
其中 Y 1選自N和C-X 1，其中X 1選自氫、羥基、鹵素、和C 1-C 4烷基； R 3選自氫、視需要取代的烷基，視需要取代的胺、鹵素、氰基、和視需要取代的烷氧基；並且 R 4選自氫和視需要取代的烷基， Y 2選自C-X 2和N並且Y 3係NH，或 Y 2係NH並且Y 3係C-X 2， 其中X 2選自氫和鹵素； 環A選自飽和的6至9員環，其視需要被至少一個選自鹵素、羥基和視需要取代的烷基的取代基取代； R 1選自-(CHR 5) k-(CR 6R 7) n-(O) m-環B， 其中 k係0或1， n係0或1， m係0或1， R 5選自氫和視需要取代的烷基， R 6選自氫和鹵素， R 7選自氫和鹵素，並且 環B選自 視需要取代的芳基， 視需要取代的雜芳基， 視需要取代的環烷基， 視需要取代的雜環烷基， 視需要取代的環烯基，和 視需要取代的雜環烯基；並且 R 2選自氫和視需要取代的烷基。
在一些實施方式中，R 3選自氫、視需要取代的烷基、視需要取代的胺、氯、氟、氰基、和視需要取代的烷氧基。
在一些實施方式中，R 1選自-(CHR 5) k-(CR 6R 7) n-環B，其中k、n、R 5、R 6、R 7、和環B如式 (I) 中所定義。在一些實施方式中，R 1選自-(CHR 5) k-(CR 6R 7) n-環B，其中k、n、R 5、和環B如式 (I) 中所定義並且R 6和R 7係氟。
在一些實施方式中，R 2選自氫和C 1-C 3烷基。
在一些實施方式中，具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽具有小於1000 nM的TR-FRET反向促效劑AC 50值。在一些實施方式中，具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽具有小於500 nM的TR-FRET反向促效劑AC 50值。在一些實施方式中，具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽具有小於250 nM的TR-FRET反向促效劑AC 50值。在一些實施方式中，具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽具有範圍從0.1 nM至1000 nM的TR-FRET反向促效劑AC 50值。在一些實施方式中，具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽具有範圍從0.1 nM至500 nM的TR-FRET反向促效劑AC 50值。在一些實施方式中，具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽具有範圍從0.1 nM至250 nM的TR-FRET反向促效劑AC 50值。
如本文所用，「TR-FRET反向促效劑AC 50值」係指使用TR-FRET測定來測量對本文揭露的PPARγ的Co-R肽募集而獲得的AC 50值。
本文還揭露了藥物組成物，其包含至少一種選自具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽的實體。在一些實施方式中，藥物組成物進一步包含至少一種藥學上可接受的載體。
本文還揭露了治療患有癌症的受試者之方法，該方法包括向受試者投與治療可接受量的至少一種選自具有式 (I) 的化合物和/或其藥學上可接受的鹽的實體。在一些實施方式中，癌症選自晚期膀胱癌、管腔乳癌、前列腺癌、管腔膀胱癌、基底膀胱癌和/或具有改變的RXRα和/或PPARγ途徑的癌症。在一些實施方式中，癌症係化學療法抗性和/或免疫療法抗性的。
本文還揭露了至少一種選自具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽的實體在治療性治療（例如癌症治療）之方法中的用途。本文還揭露了至少一種選自具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽的化合物用於製備藥物。
如本文所用，除非另外指出，否則以下定義將適用。
如本文所述，化合物可以被一個或多個取代基取代，如本文一般性說明的那些，或如本揭露之特定類別、亞類和物種所舉例說明的。通常，術語「取代的」係指用特定的取代基的自由基替換給定結構中的氫自由基。除非另有說明，否則取代的基團可以在該基團的每個可取代的位置處具有取代基，並且當任何給定結構中的一個以上位置可被選自指定基團的一個以上取代基取代時，該取代基在每個位置處可以是相同或不同的。本揭露所設想的取代基的組合係導致形成穩定的或化學上可行的化合物的那些。術語「取代的」包括，例如，至少一個氫原子被至少一個非氫原子取代的情況，例如像鹵素原子如F、Cl、Br和I（包括全鹵化）；氘；基團例如像烷基和氰基中的碳原子；基團如羥基、烷氧基、和酯基中的氧原子；基團如硫醇基、硫代烷基、氰基、碸基、磺醯基、和亞碸基中的硫原子；基團如胺、醯胺、烷基胺、二烷基胺、芳基胺、烷基芳基胺、二芳基胺、N-氧化物、醯亞胺和烯胺中的氮原子；基團如三烷基矽基、二烷基芳基矽基、烷基二芳基矽基、和三芳基矽基中的矽原子；以及各種其他基團中的其他雜原子。「取代的」還包括，例如，在任何上述基團中，至少一個氫原子被與雜原子的更高級鍵（例如，雙鍵或三鍵）替代的情況，該雜原子係例如側氧基、羰基、羧基和酯基團中的氧；以及基團如亞胺、肟、腙和腈中的氮。
「異構物」係指具有相同數量和種類的原子、並因此具有相同的分子量，但在原子的排列或組態方面不同的化合物。「立體異構物」係指具有相同原子連線性但其原子在空間中的排列不同的化合物。「非鏡像異構物」或「非鏡像異構物」係指不是鏡像異構物的立體異構物。「鏡像異構物」係指彼此為不能重疊的鏡像的立體異構物。「幾何異構物」係指相對於雙鍵或環或中心原子而言具有不同基團位置的順式-反式異構物。
本文所教示的鏡像異構物可包括「鏡像異構性純」異構物，其在一個或多個特定不對稱中心處實質上包含單個鏡像異構物，例如大於或等於90%、92%、95%、98%或99%或等於100%的單個鏡像異構物。「不對稱中心」或「手性中心」係指包含四個不同取代基的四面體碳原子。
如本文所用的「立體異構物純的」意指包含化合物的一種立體異構物並且實質上不含該化合物的其他立體異構物的化合物或其組成物。例如，具有一個手性中心的化合物的立體異構物純的組成物將實質上不含該化合物的相反鏡像異構物。在一些實施方式中，具有兩個手性中心的化合物的立體異構物純的組成物將實質上不含該化合物的非鏡像異構物，且實質上不含相反鏡像異構物。在一些實施方式中，立體異構物純的化合物包含按重量計大於約80%的該化合物的一種立體異構物和按重量計小於約20%的該化合物的其他立體異構物，如按重量計大於約90%的該化合物的一種立體異構物和按重量計小於約10%的該化合物的其他立體異構物，進一步如按重量計大於約95%的該化合物的一種立體異構物和按重量計小於約5%的該化合物的其他立體異構物，並且進一步如按重量計大於約97%的該化合物的一種立體異構物和按重量計小於約3%的該化合物的其他立體異構物。作為描述異構物的術語的「R」和「S」係在不對稱取代的碳原子上的立體化學組態的描述符。將不對稱取代的碳原子指定為「R」或「S」係藉由應用Cahn-Ingold-Prelog優先規則完成的，如熟悉該項技術者所熟知的，並描述於有機化學命名法.E部分，立體化學的國際純粹與應用化學聯合會（IUPAC）規則中。
「Ar」或「芳基」係指具有一個或多個閉環的芳族碳環部分。非限制性實例包括苯基、萘基、蒽基、菲基、聯苯基和芘基。在一些實施方式中，芳基基團含有6個碳原子（「C 6芳基」）。
如本文所用，「烷基」或「烷基基團」包括完全飽和的直鏈、支鏈和環烴鏈。在一些實施方式中，烷基基團含有1-8個碳原子（「C 1-C 8烷基」）。在一些實施方式中，烷基基團含有1-6個碳原子（「C 1-C 6烷基」）。在一些實施方式中，烷基基團含有1-3個碳原子。在一些實施方式中，烷基基團含有2-3個碳原子，並且在一些實施方式中，烷基基團含有1-2個碳原子。在一些實施方式中，術語「烷基」或「烷基基團」係指環烷基基團。在一些實施方式中，環烷基基團含有3-8個碳原子（「C 3-C 8環烷基」）。在一些實施方式中，環烷基基團含有3-6個碳原子（「C 3-C 6環烷基」）。示例性烷基基團的非限制性實例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、環丙基和環己基。
如本文所用，「烯基」或「烯基基團」包括含有至少一個雙鍵（不飽和鍵）的直鏈、支鏈和環烴鏈。
如本文所用，「烷氧基」係指經由氧（「烷氧基」）原子連接至主碳鏈的如先前所定義的烷基基團。
如本文所用，「環狀環」或「環」係指具有一個或多個閉合環的環狀部分並且包括例如單環、雙環、三環部分，並且包括橋接部分和螺部分。「環狀環」或「環」中的成員數係指形成環狀部分的一個或多個閉合環的原子總數。例如，8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷係8員環並且3-氧雜-9-氮雜雙環[3.3.1]壬烷係9員環。
如本文所用的「環烷基」係指完全飽和並包括在「烷基」基團類中的環烴鏈。
如本文所用的「環烯基」係指包含至少一個雙鍵（不飽和鍵）並包含在「烯基」基團類中的環烴鏈。
如本文可互換使用的「鹵素」和「鹵素原子」係指氟、氯、溴和碘。
「鹵代烷基」係指被一個或多個鹵素原子（F、Cl、Br、I）取代的烷基基團。例如，「氟甲基」係指被一個或多個氟原子取代的甲基基團（例如，單氟甲基、二氟甲基、或三氟甲基）。
「雜原子」係指O、S、N或P。
如本文所用的「雜烷基」包括完全飽和並且在鏈中包含至少一個雜原子（氧、氮、硫或磷）的直鏈、支鏈和環烴鏈。
如本文所用的「雜環烷基」係指完全飽和並在鏈中包含至少一個雜原子（氧、氮、硫或磷）的環烴鏈。
如本文所用的「雜環烯基」係指含有至少一個雙鍵（不飽和鍵）並在鏈中包含至少一個雜原子（氧、氮、硫或磷）的環烴鏈。
「雜芳基」係指具有一個或多個閉合環且在該等環中的至少一個中具有一個或多個雜原子（氧、氮、硫或磷）的環狀部分，其中該等環中的至少一個為芳族環，且其中該一個或多個環可獨立地是稠合和/或橋連的。非限制性實例包括苯硫基、三唑基、吡啶基、嘧啶基、嗒𠯤基和吡𠯤基。
如本文所用，「雜環基」或「雜環的」意指在環中含有至少一個雜原子的單環雜環、雙環雜環、或三環雜環。雜環可以是飽和的、不飽和的、芳族的（例如雜芳基）或非芳族的。在一些實施方式中，雜環基團含有2-10個碳原子、3-10個碳原子、2-8個碳原子、3-8個碳原子、2-6個碳原子、3-6個碳原子、2-4個碳原子、3-4個碳原子、或3個碳原子。在某些實施方式中，雜環可以是3-10員環、3-8員環、3-6員環、3-4員環、或3員環。
單環雜環係含有至少一個獨立地選自O、N、P和S的雜原子的3員、4員、5員、6員、7員或8員環。在一些實施方式中，雜環係含有一個選自O、N、P和S的雜原子的3員或4員環。在一些實施方式中，雜環係含有零個或一個雙鍵以及一個、兩個或三個選自O、N、P和S的雜原子的5員環。在一些實施方式中，雜環係含有零個、一個或兩個雙鍵以及一個、兩個或三個選自O、N、P和S的雜原子的6員、7員或8員環。單環雜環的代表性實例包括但不限於氮雜環丁烷基、氮雜環庚烷基、吖環丙烷基、二氮雜環庚烷基、1,3-二㗁𠮿基、1,3-二氧戊環基、二氫哌喃基（包括3,4-二氫-2H-哌喃-6-基）、1,3-二硫雜環戊烷基、1,3-二噻𠮿基、咪唑啉基、咪唑啶基、異噻唑啉基、異四氫噻唑基、異㗁唑啉基、異㗁唑烷基、𠰌啉基、㗁二唑啉基、㗁二唑烷基、㗁唑啉基、㗁唑烷基、哌𠯤基、哌啶基、哌喃基、吡唑啉基、吡唑啶基、吡咯啉基、吡咯啶基、四氫呋喃基、四氫哌喃基（包括四氫-2H-哌喃-4-基）、四氫噻吩基、噻二唑啉基、噻二唑啶基、噻唑啉基、四氫噻唑基、硫代𠰌啉基、1,1-二氧化硫代𠰌啉基（硫代𠰌啉碸）、硫代哌喃基、以及三噻𠮿基。
本揭露之雙環雜環藉由與芳基基團稠合的單環雜環，或與單環環烷基稠合的單環雜環，或與單環環烯基稠合的單環雜環，或與單環雜環稠合的單環雜環來例示。雙環雜環的代表性實例包括但不限於3,4-二氫-2H-哌喃基、1,3-苯并間二氧雜環戊烯基、1,3-苯并二硫雜環戊烯基、2,3-二氫-1,4-苯并二㗁𠯤基、2,3-二氫-1-苯并呋喃基、2,3-二氫-1-苯并噻吩基、2,3-二氫-1H-吲哚基、以及1,2,3,4-四氫喹啉基。
在一些實施方式中，雙環雜環係螺雜環。如本領域已知的，「螺」雜環係環僅藉由一個原子連接的雙環部分。連接原子也稱為螺原子且最常見的是季原子，如碳或氮。螺環化合物可以用中綴螺，後接不包括螺原子本身的含有較小環中的原子數以及較大環中的原子數的方括號來命名；數字由點分隔。此類化合物的實例包括但不限於2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷。
三環雜環係與芳基基團稠合的雙環雜環，或與單環環烷基稠合的雙環雜環，或與單環環烯基稠合的雙環雜環，或與單環雜環稠合的雙環雜環。三環雜環的代表性實例包括但不限於2,3,4,4a,9,9a-六氫-1H-咔唑基、5a,6,7,8,9,9a-六氫二苯并[b,d]呋喃基和5a,6,7,8,9,9a-六氫二苯并[b,d]噻吩基。
本揭露之雜環基團藉由基團內含有的任何可取代的碳原子或任何可取代的氮、氧或硫原子與母體分子部分連接，並且可含有一個或兩個具有1、2、3或4個碳原子的伸烷基橋，每個連接基團的兩個不相鄰的碳原子。此類「橋連的」雜環基團的實例包括但不限於氧雜三環[3.3.1.1 3,7]癸基（包括2-氧雜三環[3.3.1.1 3,7]癸基）、2,4-二氧雜雙環[4.2.1]壬基、氧雜雙環[2.2.1]庚基（包括2-氧雜雙環[2.2.1]庚基）和2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷。
在上述雜芳基和雜環中，氮或硫原子可視需要被氧化成各種氧化態。在具體實例中，基團S(O) 0-2分別是指-S-（硫化物）、-S(O)-（亞碸）和-SO 2-（碸）。為方便起見，氮，尤其但非排他地，定義為環狀芳族氮的那些，意指包括那些相應的N-氧化物形式。因此，對於具有例如吡啶基環的本揭露化合物；相應的吡啶基-N-氧化物意指作為本揭露之另一種化合物包括在內。
「治療（treatment/treat/treating）」癌症係指逆轉、減輕和/或延緩本文所述之癌症的進展。
如本文所用，「受試者」意指動物受試者，如哺乳動物受試者，並且特別是人類。
如本文所用的「藥學上可接受的載體」係指不破壞與其一起配製的化合物的藥理學活性的無毒載體、佐劑或媒介物。可以在本揭露之組成物中使用的藥學上可接受的載體、佐劑或媒介物包括但不限於離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、血清蛋白（如人血清白蛋白）、緩衝物質（如磷酸鹽）、甘胺酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、鹽或電解質（如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽）、膠體二氧化矽、三矽酸鎂、聚乙烯吡咯啶酮、基於纖維素的物質、聚乙二醇、環糊精、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、蠟、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、聚乙二醇以及羊毛脂。
「藥學上可接受的鹽」為保持母體化合物的所需生物活性且不賦予非所需毒理學作用的鹽。這類鹽的實例為：(a) 與無機酸（例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、硝酸等）形成的酸加成鹽；以及與有機酸（例如，乙酸、草酸、酒石酸、琥珀酸、馬來酸、富馬酸、葡萄糖酸、檸檬酸、蘋果酸、抗壞血酸、苯甲酸、鞣酸、棕櫚酸、海藻酸、聚麩胺酸、萘磺酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、萘二磺酸、聚半乳糖醛酸等）形成的鹽；和 (b) 由元素陰離子（如氯、溴和碘）形成的鹽。參見，例如，Haynes等人, 「Commentary: Occurrence of Pharmaceutically Acceptable Anions and Cations in the Cambridge Structural Database [評論：劍橋結構數據庫中藥學上可接受的陰離子和陽離子的存在],」 J. Pharmaceutical Sciences[藥物科學雜誌], 第94卷, 第10期 (2005)，和Berge等人, 「Pharmaceutical Salts [藥用鹽]」, J . Pharmaceutical Sciences[藥物科學雜誌], 第66卷, 第1期 (1977)，將其藉由引用併入本文。
除非另有說明，否則如本文所用的用於描述化學基團或部分的命名法遵循以下慣例：從左至右讀取名稱，與分子其餘部分的連接點在名稱的右側。例如，基團「(C 1-3烷氧基)C 1-3烷基」在烷基端連接至分子的其餘部分。進一步的實例包括其中連接點在乙基端的甲氧基乙基和其中連接點在胺端的甲胺基。
除非另有說明，否則當化學基團由其具有由「-」表示的末端鍵部分的化學式或結構描述時，應理解「-」表示連接點。
本文揭露了具有式 (I) 的化合物：
Figure 02_image010
及其藥學上可接受的鹽， 其中： Ar 1選自
Figure 02_image012
其中 Y 1選自N和C-X 1，其中X 1選自氫、羥基、鹵素、和C 1-C 4烷基； R 3選自氫、視需要取代的烷基，視需要取代的胺、鹵素、氰基、和視需要取代的烷氧基；並且 R 4選自氫和視需要取代的烷基； Y 2選自C-X 2和N並且Y 3係NH，或 Y 2係NH並且Y 3係C-X 2， 其中X 2選自氫和鹵素； 環A選自飽和的6至9員環，其視需要被至少一個選自鹵素、羥基和視需要取代的烷基的取代基取代； R 1選自-(CHR 5) k-(CR 6R 7) n-(O) m-環B， 其中 k係0或1， n係0或1， m係0或1， R 5選自氫和視需要取代的烷基， R 6選自氫和鹵素， R 7選自氫和鹵素，並且 環B選自 視需要取代的芳基， 視需要取代的雜芳基， 視需要取代的環烷基， 視需要取代的雜環烷基， 視需要取代的環烯基，和 視需要取代的雜環烯基；並且 R 2選自氫和視需要取代的烷基。
在一些實施方式中，R 3選自氫、視需要取代的烷基、視需要取代的胺、氯、氟、氰基、和視需要取代的烷氧基。
在一些實施方式中，R 1選自-(CHR 5) k-(CR 6R 7) n-環B。在一些實施方式中，R 1選自-(CHR 5) k-(CR 6R 7) n-環B，其中R 6和R 7係氟。
在一些實施方式中，R 2選自氫和C 1-C 3烷基。
在一些實施方式中，環A選自哌啶基和飽和7至9員雙環，並且環A視需要被至少一個選自鹵素、羥基、和視需要取代的烷基的取代基取代。
在一些實施方式中，環A係哌啶基，其視需要被至少一個選自鹵素、羥基、和視需要取代的烷基的取代基取代。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個鹵素取代的哌啶基。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個羥基取代的哌啶基。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個視需要取代的烷基取代的哌啶基。
在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個選自鹵素、羥基、和視需要取代的烷基的取代基取代的飽和7至9員雙環。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個鹵素取代的飽和7至9員雙環。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個羥基取代的飽和7至9員雙環。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個視需要取代的烷基取代的飽和7至9員雙環。
在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個選自鹵素、羥基、和視需要取代的烷基的取代基取代的飽和7員雙環。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個選自鹵素、羥基、和視需要取代的烷基的取代基取代的飽和8員雙環。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個選自鹵素、羥基、和視需要取代的烷基的取代基取代的飽和9員雙環。
在一些實施方式中，環A選自哌啶基、氮雜螺辛烷、氮雜螺壬烷、氮雜雙環辛烷、和氧雜-氮雜雙環壬烷，並且環A視需要被至少一個選自鹵素、羥基、和視需要取代的烷基的取代基取代。
在一些實施方式中，環A選自哌啶基，其視需要被至少一個選自鹵素、羥基、和視需要取代的烷基的取代基取代。在一些實施方式中，環A選自氮雜螺辛烷，其視需要被至少一個選自鹵素、羥基、和視需要取代的烷基的取代基取代。在一些實施方式中，環A選自氮雜螺壬烷，其視需要被至少一個選自鹵素、羥基、和視需要取代的烷基的取代基取代。在一些實施方式中，環A選自氮雜雙環辛烷，其視需要被至少一個選自鹵素、羥基、和視需要取代的烷基的取代基取代。在一些實施方式中，環A選自氧雜-氮雜雙環壬烷，其視需要被至少一個選自鹵素、羥基、和視需要取代的烷基的取代基取代。
在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個鹵素取代的哌啶基。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個羥基取代的哌啶基。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個視需要取代的烷基取代的哌啶基。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個鹵素取代的氮雜螺辛烷。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個羥基取代的氮雜螺辛烷。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個視需要取代的烷基取代的氮雜螺辛烷。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個鹵素取代的氮雜螺壬烷。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個羥基取代的氮雜螺壬烷。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個視需要取代的烷基取代的氮雜螺壬烷。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個鹵素取代的氮雜雙環辛烷。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個羥基取代的氮雜雙環辛烷。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個視需要取代的烷基取代的氮雜雙環辛烷。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個鹵素取代的氧雜-氮雜雙環壬烷。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個羥基取代的氧雜-氮雜雙環壬烷。在一些實施方式中，環A選自視需要被至少一個視需要取代的烷基取代的氧雜-氮雜雙環壬烷。
在一些實施方式中，環B選自視需要取代的5至10員芳基、視需要取代的5至10員雜芳基、視需要取代的3至10員環烷基、視需要取代的4至10員雜環烷基、視需要取代的6至10員環烯基、和視需要取代的6至10員雜環烯基。在一些實施方式中，環B選自視需要取代的5至10員雜芳基。在一些實施方式中，環B選自視需要取代的3至10員環烷基。在一些實施方式中，環B選自視需要取代的4至10員雜環烷基。在一些實施方式中，環B選自視需要取代的6至10員環烯基。在一些實施方式中，環B選自視需要取代的6至10員雜環烯基。
在一些實施方式中，環B選自視需要取代的5至6員單環芳基、視需要取代的10員二環芳基、視需要取代的5至6員單環雜芳基、視需要取代的9至10員二環雜芳基、視需要取代的3至10員單環烷基、視需要取代的7至10員橋連二環烷基、視需要取代的7至10員螺環二環烷基、視需要取代的4至10員單環雜環烷基、視需要取代的7至10員橋連二環雜環烷基、視需要取代的7至10員螺環二環雜環烷基、視需要取代的5至6員單環環烯基、視需要取代的8至10員二環環烯基、視需要取代的5至6員單環雜環烯基、和視需要取代的8至10員二環雜環烯基。
在一些實施方式中，環B選自視需要取代的5至6員單環芳基。在一些實施方式中，環B選自視需要取代的10員二環芳基。在一些實施方式中，環B選自視需要取代的5至6員單環雜芳基。在一些實施方式中，環B選自視需要取代的9至10員二環雜芳基。在一些實施方式中，環B選自視需要取代的3至10員單環烷基。在一些實施方式中，環B選自視需要取代的7至10員橋連二環烷基。在一些實施方式中，環B選自視需要取代的7至10員螺環二環烷基。在一些實施方式中，環B選自視需要取代的4至10員單環雜環烷基。在一些實施方式中，環B選自視需要取代的7至10員橋連二環雜環烷基。在一些實施方式中，環B選自視需要取代的7至10員螺環二環雜環烷基。在一些實施方式中，環B選自視需要取代的5至6員單環環烯基。在一些實施方式中，環B選自視需要取代的8至10員二環環烯基。在一些實施方式中，環B選自視需要取代的5至6員單環雜環烯基。在一些實施方式中，環B選自視需要取代的8至10員二環雜環烯基。
在一些實施方式中，環B選自視需要取代的5至6員單環芳基、視需要取代的10員二環芳基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的5至6員單環雜芳基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的9至10員二環雜芳基、視需要取代的3至10員單環烷基、視需要取代的7至10員橋連二環烷基、視需要取代的7至10員螺環二環烷基、具有1至3個選自氧、矽、和氮的環雜原子的視需要取代的4至10員單環雜環烷基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的7至10員橋連二環雜環烷基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的7至10員螺環二環雜環烷基、視需要取代的5至6員單環環烯基、視需要取代的8至10員二環環烯基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的5至6員單環雜環烯基、和具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的8至10員二環雜環烯基。
在一些實施方式中，環B選自視需要取代的5至6員單環芳基。
在一些實施方式中，環B選自視需要取代的10員二環芳基。
在一些實施方式中，環B選自具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的5至6員單環雜芳基。
在一些實施方式中，環B選自具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的9至10員二環雜芳基。
在一些實施方式中，環B選自視需要取代的3至10員單環烷基。
在一些實施方式中，環B選自視需要取代的7至10員橋連二環烷基。
在一些實施方式中，環B選自視需要取代的7至10員螺環二環烷基。
在一些實施方式中，環B選自具有1至3個選自氧、矽、和氮的環雜原子的視需要取代的4至10員單環雜環烷基。
在一些實施方式中，環B選自具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的7至10員橋連二環雜環烷基。
在一些實施方式中，環B選自具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的7至10員螺環二環雜環烷基。
在一些實施方式中，環B選自視需要取代的5至6員單環環烯基。
在一些實施方式中，環B選自視需要取代的8至10員二環環烯基。
在一些實施方式中，環B選自具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的5至6員單環雜環烯基。
在一些實施方式中，環B選自具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的8至10員二環雜環烯基。
在一些實施方式，環A選自
Figure 02_image014
其中q係0或1，並且R 8和R 9各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、視需要取代的烷氧基、和視需要取代的烷基。
在一些實施方式中，R 8和R 9中的至少一個係螺連接的氧雜環丁烷，使得環A選自
Figure 02_image016
。
在一些實施方式中，本文揭露的是具有式 (II) - (V) 的化合物：
Figure 02_image018
其中 Y 1選自N和C-X 1，其中X 1選自氫、羥基、鹵素、和C 1-C 4烷基； Y 2選自C-X 2和N並且Y 3係NH，或Y 2係NH並且Y 3係C-X 2，其中X 2選自氫和鹵素； q係0或1； R 1選自-(CHR 5) k-(CR 6R 7) n-(O) m-環B，其中k係0或1，n係0或1，m係0或1； R 5選自氫和視需要取代的烷基； R 6選自氫和鹵素； R 7選自氫和鹵素；並且 環B選自視需要取代的5至6員單環芳基、視需要取代的10員二環芳基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的5至6員單環雜芳基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的9至10員二環雜芳基、視需要取代的3至10員單環烷基、視需要取代的7至10員橋連二環烷基、視需要取代的7至10員螺環二環烷基、具有1至3個選自氧、矽、和氮的環雜原子的視需要取代的4至10員單環雜環烷基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的7至10員橋連二環雜環烷基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的7至10員螺環二環雜環烷基、視需要取代的5至6員單環環烯基、視需要取代的8至10員二環環烯基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的5至6員單環雜環烯基、和具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的8至10員二環雜環烯基； R 2選自氫和視需要取代的烷基； R 3選自氫、視需要取代的烷基、視需要取代的胺、鹵素、氰基、和視需要取代的烷氧基； R 4選自氫和烷基；並且 R 8和R 9各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、視需要取代的烷氧基、和視需要取代的烷基。
在一些實施方式中，具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽具有小於1000 nM的TR-FRET反向促效劑AC 50值。在一些實施方式中，具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽具有小於500 nM的TR-FRET反向促效劑AC 50值。在一些實施方式中，具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽具有小於250 nM的TR-FRET反向促效劑AC 50值。在一些實施方式中，具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽具有範圍從0.1 nM至1000 nM的TR-FRET反向促效劑AC 50值。在一些實施方式中，具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽具有範圍從0.1 nM至500 nM的TR-FRET反向促效劑AC 50值。在一些實施方式中，具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽具有範圍從0.1 nM至250 nM的TR-FRET反向促效劑AC 50值。
在一些實施方式中，R 8和R 9中的至少一個係螺連接的氧雜環丁烷。
在一些實施方式中，R 3選自氫、視需要取代的烷基、視需要取代的胺、氯、氟、氰基、和視需要取代的烷氧基。
在一些實施方式中，R 1選自-(CHR 5) k-(CR 6R 7) n-環B。在一些實施方式中，R 1選自-(CHR 5) k-(CR 6R 7) n-環B，其中R 6和R 7係氟。
在一些實施方式中，R 2選自氫和C 1-C 3烷基。
在一些實施方式中，環B選自
Figure 02_image020
其中 w係0或1； Y 4和Y 5各自獨立地選自視需要取代的-(CH 2)-、視需要取代的-(NH)-、和-O-； Y 6選自視需要取代的-(CH 2)-、視需要取代的-(NH)-、四烷基矽烷、和-O-； R 10選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、和羰基；並且 R 11、R 12、和R 13各自獨立地選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
在一些實施方式中，環B選自
Figure 02_image022
其中 R 11和R 12各自獨立地選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基； R 14選自氫和視需要取代的烷基； R選自氫、視需要取代的烷基、和芳基；並且 R’選自氫、視需要取代的烷基、和鹵素。
在一些實施方式中，環B選自
Figure 02_image024
其中R 11、R 12、和R 13各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、視需要取代的烷基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
在一些實施方式中，環B選自
Figure 02_image026
其中 w係0或1； Y 4選自SO 2、視需要取代的磺醯胺、視需要取代的醯胺、視需要取代的-(CH 2)-、視需要取代的-(NH)-、和-O-； R 11和R 12各自獨立地選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基；並且 環C選自5員芳環、包含1或2個環氮原子的5員雜芳環、6員芳環和包含1或2個環氮原子的6員雜芳環。
在一些實施方式中，環B選自
Figure 02_image028
其中 Y 4、Y 5、和Y 6各自獨立地選自視需要取代的-(CH)-、視需要取代的-(NH)-、和-O-； R 11選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基；並且 環C選自5員芳環、包含1或2個環氮原子的5員雜芳環、6員芳環和包含1或2個環氮原子的6員雜芳環。
在一些實施方式中，環B選自
Figure 02_image030
其中 當R 11鍵合至氮時，R 11選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、和羥基，並且R 11另外選自氫和視需要取代的烷基； 當R 12鍵合至氮時，R 12選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、和羥基，並且R 12另外選自氫和視需要取代的烷基； 當R 13鍵合至氮時，R 13選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、和羥基，並且R 13另外選自氫和視需要取代的烷基；並且 R 14選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
在一些實施方式中，環B選自
Figure 02_image032
其中 Y 4和Y 5各自獨立地選自視需要取代的-(CH 2)-、視需要取代的-(NH)-、和-O-；並且 R 11和R 12獨立地選自氫、氰基、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、芳基、雜芳基、和視需要取代的烷氧基。
在一些實施方式中，環B選自
Figure 02_image034
其中R 11 和R 12獨立地選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
在一些實施方式中，環B選自
Figure 02_image036
其中R 11、R 12、和R 13獨立地選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
在一些實施方式中，環B選自
Figure 02_image038
其中Y 6選自視需要取代的-(CH)-和視需要取代的-(NH)-；並且 R 11選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
在一些實施方式中，環B選自
Figure 02_image040
其中 Y 4選自視需要取代的-(CH 2)-、視需要取代的-(NH)-、和-O-； Y 5選自視需要取代的-(CH)-和N；並且 R 11和R 12選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
在一些實施方式中，環B選自
Figure 02_image042
其中R 11和R 12選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
在一些實施方式中，環B選自
Figure 02_image044
其中R 11、R 12、和R 13獨立地選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
在一些實施方式，R 1選自-(CHR 5) k-(CR 6R 7) n-(O) m-環B，其中k係0或1，n係0或1，m係0或1，R 5選自氫和甲基，R 6選自氫和鹵素，R 7選自氫和鹵素；並且R 2選自氫和甲基。
在本文揭露的一些實施方式中是具有下式的化合物：
Figure 02_image046
其中 Y 1選自N和C-X 1，其中X 1選自氫、羥基、鹵素、和C 1-C 4烷基； R 3選自氫、視需要取代的C 1-C 3烷基、鹵素、氰基、和視需要取代的C 1-C 3烷氧基；並且 R 4選自氫和烷基； Y 4選自CH 2、O、和N-R 11； X 3選自氫和鹵素； R’選自氫和視需要被至少一個鹵素取代的C 1-C 3烷基； R 11選自氫和C 1-C 3烷基； R 12選自氫、鹵素、和C 1-C 3烷基；並且 R 13選自氫、鹵素、C 2-C 4烷氧基、和C 1-C 3烷基。
在本文揭露的一些實施方式中是具有下式的化合物：
Figure 02_image048
其中 X 1選自氫、羥基、鹵素、和C 1-C 4烷基； X 3選自氫和鹵素；並且 R 11和R 12獨立地選自氫和C 1-C 3烷基。
在一些實施方式中，取代的烷基選自鹵代烷基。
在一些實施方式中，鹵代烷基係三氟甲基。
在本文揭露的一些實施方式中是具有式 (IIB) 和式 (IIIB) 的化合物：
Figure 02_image050
式 (IIB)，和
Figure 02_image052
式 (IIIB)；其中 q係0或1；並且 R 8和R 9各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、視需要取代的烷氧基、和視需要取代的烷基。
在一些實施方式中，本文提供了具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽，其具有小於40000 nM，例如小於20000 nM、小於10000 nM、小於1000 nM、小於100 nM、小於50 nM、小於20 nM、小於10 nM或小於5 nM的活性，如使用本文揭露的TR-FRET測定所測量的。
本文揭露了藥物組成物，其包含至少一種選自具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽的實體。
在一些實施方式中，藥物組成物進一步包含至少一種藥學上可接受的載體。
本文揭露了用於治療和/或預防癌症之方法，該方法包括向有需要的受試者投與有效量的至少一種選自具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽的實體，和包含至少一種選自具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽的實體的藥物組成物。在一些實施方式中，癌症選自膀胱癌、乳癌、前列腺癌和/或具有改變的RXRα和/或PPARγ途徑的癌症。在一些實施方式中，癌症係膀胱癌。在一些實施方式中，該膀胱癌係晚期膀胱癌、管腔膀胱癌和/或基底膀胱癌。在一些實施方式中，該癌症係化學療法抗性和/或免疫療法抗性的癌症。
本文揭露了至少一種選自具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽的實體，和包含至少一種選自具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽的實體的藥物組成物在治療和/或預防癌症中的用途。在一些實施方式中，該癌症選自膀胱癌、乳癌、前列腺癌和具有改變的RXRα和/或PPARγ途徑的癌症。在一些實施方式中，癌症係膀胱癌。在一些實施方式中，該膀胱癌選自晚期膀胱癌、管腔膀胱癌和基底膀胱癌。在一些實施方式中，該癌症係化學療法抗性和/或免疫療法抗性的癌症。
本文揭露了以下具有式 (I) 的化合物： 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4s)-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(4-氟-5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； (S)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(3-氟苯基)乙基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1s,4s)-4-(二氟甲基)環己基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1r,4r)-4-(二氟甲基)環己基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； N-(4-甲基環己基)-1-[5-(2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4s)-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1s,4s)-4-乙基環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1r,4r)-4-乙基環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(3-氯吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-[4-氯-5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[4-氯-5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]哌啶-4-甲醯胺； N-((1s,4s)-4-(二氟甲基)環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1r,4r)-4-(二氟甲基)環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4s)-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； (R)-1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[1-(3-氯苯基)乙基]哌啶-4-甲醯胺； (S)-1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[1-(3-氯苯基)乙基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(1-苯基吡咯啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氯吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(2-甲基-1,3-二㗁𠮿-5-基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲哚-5-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2,3,6-三氟苄基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-氯-5-氟苄基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氟吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-氰基環丁基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-甲基吡啶-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(異口克唍-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,2S)-2-苯基環丙基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-羥基環己基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4,4-二甲基氧雜環丁烷-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-甲基㗁唑-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氯嘧啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-氯吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1,5-二甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(4-氯苯氧基)丙-2-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3,3-二氟環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-甲氧基環丁基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-氟吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-(二氟甲基)苯基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3,3-二氟環丁基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2,2-二氟-2-苯基乙基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3,3,5-三甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-(二氟甲氧基)苄基)哌啶-4-甲醯胺； N-(苯并[d]㗁唑-6-基甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； (R)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(3-氟苯基)乙基)哌啶-4-甲醯胺； N-(5-氯-2-氟苄基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2,3-二氟苄基)哌啶-4-甲醯胺； N-(3-氯-2-氟苄基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氟苄基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3,4-二氫-2H-哌喃-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-(3-氯苄基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(3-氯苄基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3r,5S)-N-(3-氯苄基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； N-(3-氯苄基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-甲基哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(三氟甲基)環戊基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1,4-二甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-(三氟甲氧基)苄基)哌啶-4-甲醯胺； N-(雙環[3.2.1]辛烷-8-基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-[(3-氯苯基)甲基]-1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-1,2,4-三唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-側氧基吲哚啉-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-4-羥基哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-3-甲基哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-4-氟哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3,3-二氟環戊基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-甲基吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-3-氟哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6-(三氟-l5-甲基)吡啶-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氯吡啶-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲唑-6-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲哚-3-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(異喹啉-6-基甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5-側氧基-1-苯基吡咯啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(口克唍-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2,2-二甲基-1,3-二氧戊環-4-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-甲基-1,2,3,4-四氫喹啉-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-1H-吲哚-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲哚-6-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-甲基呋喃-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲哚-4-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5,6,7,8-四氫異喹啉-5-基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲唑-4-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲哚-7-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-氟口克唍-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-苯基哌啶-4-基)哌啶-4-甲醯胺； N-((2H-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-羥基-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺； N-((3-氟-1H-吲唑-5-基)甲基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲唑-3-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-甲基-1H-吲唑-5-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-側氧基-1-苯基吡咯啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； N-(5-氯-2,3-二氫苯并呋喃-3-基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-5-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5,5-二甲基四氫呋喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((8-氟咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-甲基-1,3-二㗁𠮿-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-1H-吲唑-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6-氯咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4,4-二氟四氫呋喃-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-(三氟甲基)㗁唑-4-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(2-氟苯基)吡咯啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-5-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-(二氟甲基)異㗁唑-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-甲基-2-側氧基-2,3-二氫苯并[d]㗁唑-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-1H-吲唑-6-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((2-氧雜雙環[3.1.1]庚烷-1-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-甲基-2,2-二氧-3,4-二氫-1H-苯并[c][1,2]噻𠯤-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； (S)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-氰基口克唍-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-甲基-2-側氧基-1,2,5,6,7,8-六氫喹啉-5-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-2-側氧基吲哚啉-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3,4-二氫-2H-哌喃并[2,3-b]吡啶-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1,1-二氧-2,3-二氫苯并[b]噻吩-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-甲基-3-側氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6,7-二氫-5H-環戊[d]嘧啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3,3-二甲基-2-側氧基吲哚啉-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氟-1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-側氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉-4-基)哌啶-4-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氟-3-甲基環丁基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5-甲基四氫呋喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲哚-2-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-甲基吡啶-2-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-甲氧基口克唍-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(4-氟苯基)吡咯啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； (S)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,2-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (R)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,2-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (S)-5-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺； (R)-5-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-N-[(3-氟-1H-吲唑-5-基)甲基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5,6-二甲基吡𠯤-2-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1H-吲哚-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-羥基-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4s)-4-羥基-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； (2S,5R)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,5S)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,5R)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2S,5S)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； N-[(3-氯苯基)甲基]-1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺； (1R,3S,5S)-N-[(3-氯苯基)甲基]-8-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； N-[(3-氟-1H-吲唑-5-基)甲基]-1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-乙基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(1H-吲哚-5-基甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-[(2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基]-1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺； (2R,4R)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,6-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； 1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)哌啶-4-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((3-氟-1-甲基-1H-吲唑-5-基)甲基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； N-((3,3-二甲基吲哚啉-5-基)甲基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； 1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(3-甲基-1H-吲唑-5-基)乙基)哌啶-4-甲醯胺； 9-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-3-氧雜-9-氮雜雙環[3.3.1]壬烷-7-甲醯胺； (1R,3R,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((3-氟-1H-吲唑-5-基)甲基)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3R,5S)-N-[(2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氟-1H-吲唑-5-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-氟-1H-吲唑-5-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(3-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-5-基)乙基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(3-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-5-基)乙基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(1,1-二甲基矽烷-4-基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3R,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3R,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5R,8r)-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5S,8s)-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； 4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(R)-1-(2-氟苯基)吡咯啶-3-基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3S,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[1-氧雜螺[3.5]壬-7-基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (2R,4S,5S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2S,4S,5S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,4R,5S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,4S,5R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2S,4S,5R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2S,4R,5S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,4R,5R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2S,4R,5R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (1R,3S,5S)-N-[(3S,6S)-1-乙基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-N-[(3S,6R)-1-乙基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-N-[(3R,6S)-1-乙基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-N-[(3S,6R)-1-乙基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (R)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-羥基-4-(全氟乙基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3R,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-(二氟甲基)-4-甲氧基環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3R,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-(二氟甲基)-4-甲氧基環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((1r,4R)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((1s,4S)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-(2-甲氧基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-(2-甲氧基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-1,2,4-三唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(3,3-二氟-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1s,4R)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1r,4R)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1s,4S)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1s,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1r,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1s,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； 4-(4-(5-羥基-2-甲基吡啶-4-基)-1H-咪唑-2-羰基)-N-((1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (R)-N-((1r,4S)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4R)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-羥基雙環[2.2.2]辛烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-羥基雙環[2.2.2]辛烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(2,3-二甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(6-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(2-乙基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(2-(羥基甲基)吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-(三氟甲基)-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(3,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1r,4R)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4S,7r)-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4R,7s)-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-1-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-1-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-1-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-1-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5R,8r)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5S,8s)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5S,8r)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5R,8s)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5R,8r)-1-乙基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5S,8s)-1-乙基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5S,8r)-1-乙基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5R,8s)-1-乙基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-(2-(二甲基胺基)乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-(2-羥基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-(2-羥基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-羥基雙環[2.2.1]庚烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-羥基雙環[2.2.1]庚烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-羥基雙環[2.1.1]己烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； 4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-羥基雙環[2.1.1]己烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-羥基雙環[1.1.1]戊-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1S,4S)-4-((S)-2-甲氧基丙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,4S)-4-((R)-2-甲氧基丙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(((R)-4,5,6,7-四氫-2H-吲唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(((S)-4,5,6,7-四氫-2H-吲唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(((R)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,5-a]吡啶-7-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(((S)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,5-a]吡啶-7-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((R)-1-(2-羥基-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((R)-1-(2-羥基-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((S)-1-(2-羥基-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((S)-1-(2-羥基-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(((R)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-7-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(((S)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-7-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1r,4R)-N-((R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-甲醯胺； (1s,4S)-N-((R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-甲醯胺； (1r,4S)-N-((S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-甲醯胺； (1s,4R)-N-((S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(氧雜環丁烷-3-基)-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-(2-胺基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(1-(2,2-二氟丙基)-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,4S)-4-((S)-2-胺基丙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1S,4S)-4-((S)-2-羥基丙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-(8-氧雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,3R)-3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2-二甲基環丁基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,3S)-3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2-二甲基環丁基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((S)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((R)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((S)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-8H-[1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]㗁𠯤-6-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((R)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-8H-[1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]㗁𠯤-6-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-甲基吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(3-氯吡啶-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(3-氯吡啶-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氟-3-甲基吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氟-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-(三氟甲基)-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-3,4-二氫-2H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-3,4-二氫-2H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (2S,4R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺； (2S,4S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺； (2R,4R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺； (2R,4S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺； (R)-N-((1r,4R)-4-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1s,4S)-4-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5S,8s)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5R,8r)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5,6-二氫-8H-咪唑并[2,1-c][1,4]㗁𠯤-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((1R,3S)-1-亞胺基-2,2-二甲基-1-氧四氫-1H-1l6-噻吩-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((1S,3S)-1-亞胺基-2,2-二甲基-1-氧四氫-1H-1l6-噻吩-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((1S,3R)-1-亞胺基-2,2-二甲基-1-氧四氫-1H-1l6-噻吩-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((1R,3R)-1-亞胺基-2,2-二甲基-1-氧四氫-1H-1l6-噻吩-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(全氟乙基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4R)-4-羥基-4-(全氟乙基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((4S,7r)-3,3-二氟-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((4R,7s)-3,3-二氟-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1s,4R)-4-(1,1-二氟乙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-(1,1-二氟乙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6R,8aR)-八氫吲口巾-6-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6R,8aS)-八氫吲口巾-6-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6S,8aR)-八氫吲口巾-6-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6S,8aS)-八氫吲口巾-6-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(3-氯-5-氟吡啶-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(3-氯-5-氟吡啶-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1s,3R)-3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2,4,4-四甲基環丁基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,3S)-3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2,4,4-四甲基環丁基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-4,4-二氟-1-(2-氟-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-4,4-二氟-1-(2-氟-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-6-甲基-3,4-二氫-2H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-6-甲基-3,4-二氫-2H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((S)-3-甲基-4,5,6,7-四氫-1H-吲唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((R)-3-甲基-4,5,6,7-四氫-1H-吲唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-7-氟-3,4-二氫-2H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-7-氟-3,4-二氫-2H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-甲基吡𠯤-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-氯-2-甲基嘧啶-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯吡𠯤-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氟-3-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氰基吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-(氧雜環丁烷-3-基)吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-(3-氰基氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-甲基-5-(三氟甲基)㗁唑-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(5-環丙基-1,3,4-㗁二唑-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(5-環丙基-1,3,4-㗁二唑-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(氧雜環丁烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(氧雜環丁烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-甲基吡𠯤-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-(1,1-二氟-3-甲氧基丙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1s,4R)-4-(1,1-二氟-3-甲氧基丙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1s,4R)-4-胺基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-胺基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3,5-二氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (2S,4S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,4S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,4R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺； (2S,4R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (2R,4S)-2-乙基-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺； (2S,4R)-2-乙基-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺； (2S,4S)-2-乙基-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺； (2R,4R)-2-乙基-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氟-3-(4-甲基哌𠯤-1-基)吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5R,8r)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5S,8s)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5S,8r)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5R,8s)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-((1-氟環丙基)甲基)氮雜環丁烷-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,2-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,2-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4R)-4-(羥基甲基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-(羥基甲基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-(1-(三級丁基亞磺醯基)-3,3-二氟-1-氮雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((4S,7r)-3,3-二氟-1-氮雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((4R,7s)-3,3-二氟-1-氮雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(4-羥基雙環[2.2.2]辛烷-1-基)乙基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(4-羥基雙環[2.2.2]辛烷-1-基)乙基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((4,6-二甲基吡𠯤-3-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5-氯嘧啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,4R)-4-𠰌啉代四氫呋喃-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,4S)-4-𠰌啉代四氫呋喃-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(5,6-二氫-8H-咪唑并[2,1-c][1,4]㗁𠯤-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(5,6-二氫-8H-咪唑并[2,1-c][1,4]㗁𠯤-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(氧雜環丁烷-3-基)哌啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-𠰌啉代環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4R)-4-𠰌啉代環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,5S,7r)-9-甲基-3-氧雜-9-氮雜雙環[3.3.1]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,5S,7s)-9-甲基-3-氧雜-9-氮雜雙環[3.3.1]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(氧雜環丁烷-3-基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(氧雜環丁烷-3-基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3R,4S)-4-氟-1-甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3S,4S)-4-氟-1-甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3R,4R)-4-氟-1-甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3S,4R)-4-氟-1-甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3S,6S)-1,6-二甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3R,6R)-1,6-二甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3S,6R)-1,6-二甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3R,6S)-1,6-二甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1,6,6-三甲基哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1,6,6-三甲基哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(2-氟乙基)-2,2-二甲基哌啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(2-氟乙基)-2,2-二甲基哌啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3R,4R)-4-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3S,4S)-4-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3S,4R)-4-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-(氧雜環丁烷-3-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(2-甲基嘧啶-4-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(2-甲基嘧啶-4-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-((S)-四氫呋喃-3-基)氮雜環丁烷-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-((R)-四氫呋喃-3-基)氮雜環丁烷-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-((3-氯-5-(3,5-二甲基哌𠯤-1-基)吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-4,4-二氟-1-((1-(三氟甲基)環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-4,4-二氟-1-((1-(三氟甲基)環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(4-(1,1-二氟-2-羥基乙基)-4-羥基環己基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-((1-(三氟甲基)環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(4-氰基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (S)-N-((1s,4R)-4-(氰基甲基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-(氰基甲基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-(2-氟-2-甲基丙基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(4-胺基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-(2-氟-2-甲基丙基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-(三氟甲基)-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； 5-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-氧雜-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5-((R)-1-羥基乙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5-((S)-1-羥基乙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-(氧雜環丁烷-3-基氧基)吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-((5-(3,5-二甲基哌𠯤-1-基)嘧啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(1-氰基環丙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(2-甲氧基-5-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1,6,6-三甲基哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1,6,6-三甲基哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-6-甲基吡𠯤-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(6-甲基吡𠯤-4-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(6-甲基吡𠯤-4-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(2-甲基嘧啶-5-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(2-甲基嘧啶-5-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-((3-羥基氧雜環丁烷-3-基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-((3-羥基氧雜環丁烷-3-基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-甲氧基嘧啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-氰基嘧啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(1-(3,5-二氯吡啶-2-基)環丙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(2,2-二氟-3-羥基丙基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(2,2-二氟-3-羥基丙基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,4S)-4-((3S,5R)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,4R)-4-((3S,5R)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-((R)-1-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-((S)-1-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-((R)-1-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-((S)-1-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-((1R,4R)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)-3-氯吡啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-((1S,4S)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)-3-氯吡啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((3-羥基氧雜環丁烷-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-((R)-1-氧雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-((S)-1-氧雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-((R)-1-氧雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-((S)-1-氧雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1,4,5-三甲基-1H-咪唑-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(5-((1S,2S)-2-氰基環丙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(5-((1R,2R)-2-氰基環丙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-((1R,4R)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)嘧啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-((1S,4S)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)嘧啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-氟吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-氟吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-((1S,6R)-2,5-二氮雜雙環[4.1.0]庚烷-2-基)嘧啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-((1R,6S)-2,5-二氮雜雙環[4.1.0]庚烷-2-基)嘧啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-4,4-二氟-1-((1-羥基環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-4,4-二氟-1-((1-羥基環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(5-氰基嘧啶-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(5-氰基嘧啶-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-異丙基-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,3R,4S)-3,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,3S,4R)-3,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,3R,4S)-3,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,3S,4R)-3,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(5-甲基-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-基)乙基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(5-甲基-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-基)乙基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((5-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； 4-(5-(2-乙醯基-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-((S)-1-羥基乙基)吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-((S)-1-羥基乙基)吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-((R)-1-羥基乙基)吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-((R)-1-羥基乙基)吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(2-環丙基-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(2-環丙基-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-((1S,2S)-2-(羥基甲基)環丙基)吡𠯤-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-((1R,2R)-2-(羥基甲基)環丙基)吡𠯤-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((2-((3S,5R)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)-5-(三氟甲基)㗁唑-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(2-乙基-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(2-乙基-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-氯-5-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-(三氟甲基)-2-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌𠯤-1-基)㗁唑-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-5-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺； (R)-5-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺； (S)-N-(5-氰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-(1-(6-氰基吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(5-氰基吡啶-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(5-氰基吡啶-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-4,4-二氟-1-(5-甲基吡𠯤-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-4,4-二氟-1-(5-甲基吡𠯤-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-異丙氧基吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(6-乙醯基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-((S)-1-羥基乙基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-((R)-1-羥基乙基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-(7',8'-二氫-6'H-螺[氧雜環丁烷-3,5'-喹啉]-8'-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-(5-乙基-2-氧雜-5-氮雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(5,5-二甲基-6,7-二氫-5H-吡唑并[5,1-b][1,3]㗁𠯤-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1-(胺基甲基)-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,3R,4S)-3-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1S,3S,4R)-3-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-2-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-2-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((4-(三氟甲基)-1H-咪唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,2R,4S)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,2S,4S)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,2R,4S)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,2S,4S)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,2R,4R)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,2S,4R)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,2R,4R)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,2S,4R)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((3-(三氟甲基)異㗁唑-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-環丙基吡啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-環丙基吡啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((1-甲基-4-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((3-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(((S)-3,3-二氟哌啶-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(((R)-3,3-二氟哌啶-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((5-氟嘧啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-5-羥基-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-5-羥基-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((3-(三氟甲基)雙環[1.1.1]戊-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((2-甲基-4-(三氟甲基)噻唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(羥基甲基)-3-甲基-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(羥基甲基)-3-甲基-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((1-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(羥基甲基)-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-(4-甲基哌𠯤-1-基)吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((1-羥基-3,3-二甲基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼雜環戊烯-6-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼雜環戊烯-5-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,3S)-3-羥基-3-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1S,3S)-3-羥基-3-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,3R)-3-羥基-3-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1S,3R)-3-羥基-3-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((3-(三氟甲基)吡啶-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-氯-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-甲氧基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(6-氰基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(6-氰基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(2-氯-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(2-氯-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-甲氧基-3-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； 及其藥學上可接受的鹽。
具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽的合成可如本文（包括實例）所述，使用熟悉該項技術者熟悉的技術進行。用於製備本文所述之示例性化合物的合成方法在實例中描述。該方法可用於合成具有式 (I) 的化合物，藉由使用合適的反應物，使用本文所述並在本領域常規實施的技術和方法製備特定化合物。作為進一步的實例，方案1-5提供了本文所述之示例性化合物的合成方案的示意圖。
通常，具有式 (I) 的化合物可根據以下一般反應方案製備： 方案 1
Figure 02_image054
在上述 方案 1中，R 1、R 3、R 4、Y 1、和環A如本文所述。
如以上方案1中所述，具有式 1-a的吡唑-3-甲酸和具有式 1-b的化合物在合適的溶劑（例如像DMF）中偶合在一起。在合適的鹼（例如像DIPEA或TEA）的存在下，合適的偶合劑（例如像EDCI/HOBt）促進反應。反應可以在室溫或升高的溫度下進行。
藉由使用標準條件（例如像在水、MeOH和THF的混合物中的LiOH）來水解酯基，將具有式 1-c的烷基酯轉化為具有式 1-d的酸。
作為鏡像異構物混合物的具有式 1-f的化合物藉由具有式 1-d的酸與具有式 1-e的一級胺的試劑藉由偶合反應進行反應來製備。在合適的鹼和溶劑的存在下使用偶合劑，例如像EDCI/HOBt。
在一些實施方式中，作為鏡像異構物混合物的具有式 1-f的化合物藉由在合適的鹼（例如像K 2CO 3）的存在下，在合適的溶劑（例如像DMF）中，將來自與SEM-Cl的偶合反應的吡唑產物烷基化來製備。在一些實施方式中，具有式 1-f的受保護的化合物藉由在THF中的 p-TsOH的存在下用DHP處理形成。
在一些實施方式中，具有式 1-f的吡唑溴化物與芳基硼酸 1-g在熟悉該項技術者已知的標準鈴木（Suzuki）偶合條件下反應以形成具有式 1-i的化合物作為鏡像異構物混合物。
在一些實施方式中，具有式 1-f’的吡唑溴化物首先藉由在鈀試劑（例如像Pd(dppf)Cl 2）的存在下，使在1,4-二㗁𠮿中的B 2Pin 2和KOAc在升高的溫度下反應幾個小時轉化為具有式 1-f’的吡唑硼酸。
在一些實施方式中，具有式 1-f的吡唑在與使用Dtbpy、[Ir(COD)OMe] 2、在MTBE中的B 2Pin 2、THF的Ir催化的硼基化方法反應時，經歷C-H硼基化過程以合成具有式 1-f’的化合物。
具有式 1-f'的化合物隨後可以在標準條件下與具有式 1-g' 的芳基溴進行鈴木偶合反應以產生具有式 1-h的化合物。
作為鏡像異構物混合物的具有式 1-i的化合物可以藉由使用合適的酸（例如像在DCM中的TFA）裂解保護基團（例如像SEM或THP）來製備。
具有式 1-i的化合物的鏡像異構物可以使用手性純化柱（例如像CHIRALPAK IF柱）分離。 方案 2
Figure 02_image056
在上述 方案 2中，R 1、Y 1、Y 2、環A如本文所述。
具有式 2-b的化合物可以藉由使用熟悉該項技術者已知的條件水解游離NH或具有式 2-a的 N-保護的吡唑酸來製備。可以使用標準條件，例如像在MeOH、水和THF的混合物中的LiOH或NaOH。
具有式 2-d的化合物係藉由使用標準的偶合劑（例如像HATU），在合適的鹼（例如像在DMF中的DIPEA）的存在下，使具有式 2-b的酸與具有式 2-c的胺偶合來製備。
在一些實施方式中，藉由使DHP與合適的酸（例如像在THF中的 p-TsOH）反應，將具有游離吡唑NH的具有式 2-d的化合物進一步用THP保護基團保護。
具有受保護的吡唑的具有式 2-f的化合物，在一些實施方式中作為鏡像異構物的混合物，可以在標準的鈴木偶合條件下藉由使用熟悉該項技術者已知的條件，使具有式 2-e的芳基硼酸與具有式 2-d的芳基溴反應來製備。標準鈴木條件，例如像Pd(dppf)Cl 2在鹼（例如像K 2CO 3）的存在下，在合適的溶劑（例如像1,4-二㗁𠮿和水的混合物）中。
具有式 2-g的化合物，在一些實施方式中作為鏡像異構物的混合物，可以藉由裂解保護基團來製備。在一些實施方式中，在甲酸銨的存在下使用催化量的鈀除去苄基保護基團。在一些實施方式中，藉由使用合適的酸（例如像在MeOH中的HCl或在DCM中的TFA）來除去THP保護基團。 方案 3
Figure 02_image058
在上述 方案 3中，R 1、R 2、R 3、和Y 1如本文所述。
具有式 3-c的化合物可以使用標準的偶合條件，用試劑（例如像HATU或EDCI/HOBt），在合適的鹼（例如像在DMF中的DIPEA）的存在下，藉由可商購的具有式 3-a的酸和具有式 3-b的烷基酯哌啶的偶合反應來製備。在一些實施方式中，將具有式 3-c的化合物在熟悉該項技術者已知的合適條件下，用THP或SEM保護基團保護以產生具有式 3-d的芳基溴。使用鈴木偶合反應使具有式 3-d的化合物與具有式 3-e的芳基硼酸進一步反應以產生具有式 3-f的聯芳基化合物。
在一些實施方式中，在 p-TsOH的存在下使用DHP，將具有式 3-c的化合物用THP保護基團保護。產物可以使用Ir催化的硼基化方法（使用Dtbpy、[Ir(COD)OMe] 2、在MTBE中的B 2Pin 2和THF）進一步反應以合成具有式 3-d’的化合物。可以使具有式 3-d’的化合物與具有式 3-e’的芳基硼酸以鈴木偶合反應進行反應以產生具有式 3-f的化合物。
在一些實施方式中，具有式 3-f的化合物首先在DCM或其他合適的條件下用TFA處理以使THP基團去保護。
在一些實施方式中，具有式 3-g的化合物藉由使用標準水解條件水解化合物 3-f中的酯或去保護的 3-f來製備 。合適的水解條件包括例如在DCM中的TFA以水解三級丁酯，以及在THF、MeOH和水的混合物中的LiOH以水解甲酯。
使用條件（如T3P®、HATU或EDCI/HOBt），在合適的鹼（例如像TEA或DIPEA）的存在下，在溶劑（例如像DMF）中，具有式 3-g的酸可以與具有式 3-h的胺偶合。在一些實施方式中，使用試劑（例如像在DMF和DCM中的草醯氯），然後添加具有式 3-h的胺與DIPEA和DMAP，將具有式 3-g的酸轉化為其相應的醯氯。該偶合反應產物中的THP保護基團可以使用例如在DCM中的TFA裂解，以產生式具有式 3-i的化合物。在一些實施方式中，使用手性分離進一步分離化合物 3-i的非鏡像異構物。 方案 4
Figure 02_image060
在上述 方案 4中，R 1、R 3、Y 1、Y 2，Y 3、和環A如本文所述。
如以上 方案 4中所述，具有式 4-c的化合物可以藉由使用偶合條件（如但不限於在DMF中的HATU或EDCI/HOBt、DIPEA）將具有式 4-a的酸與具有式 4-b的胺偶合來製備。
具有式 4-d的化合物可以使用合適的條件（例如像在DCM中的TFA或在1,4-二㗁𠮿中的HCl），藉由 t-Boc保護基團的去保護來製備 。
具有式 4-f的化合物可以藉由使用熟悉該項技術者已知的標準條件，例如像SEM-Cl，在K 2CO 3或在DMF或DHP中的NaH的存在下，在THF中的 p-TsOH的存在下，在具有式 4-e的化合物上添加保護基團（如SEM或THP）來製備。
在一些實施方式中，使用標準的鈴木偶合條件使具有式 4-f的化合物與有具式 4-g的硼酸反應，以產生具有式 4-h的化合物。鈴木條件可以使用試劑（例如像Pd(dppf)Cl 2），與鹼（例如像K 2CO 3或K 3PO 4）在合適的溶劑（例如像1,4-二㗁𠮿或水）中。在一些實施方式中，鈴木偶合的產物可以經歷SEM或THP去保護以形成具有式 4-h的產物。
可替代地，在一些實施方式中，使用硼基化條件（例如像Dtbpy、[Ir(Cod)OMe] 2或在MTBE中的B 2pin 2）將具有式 4-f的化合物轉化為硼酸 4-f’。隨後，可以使用標準的鈴木偶合條件，在具有式 4-f’和 4-g’的化合物之間製備具有式 4-h的化合物。
具有式 4-h的化合物可以使用標準條件水解，例如像在水、THF和MeOH的混合物中的LiOH，以提供具有式 4-i的酸。在一些實施方式中，藉由水解形成的產物經歷SEM或THP基團的去保護以產生未保護的化合物 4-i。
具有式 4-j的化合物可以使用條件（例如像EDCI/HOBt或HATU與在DMF中的DIPEA），藉由在具有式 4-i和 4-d的化合物之間的醯胺偶合反應來製備。在一些實施方式中，具有式 4-j的化合物藉由使具有式 4-h的酯，藉由試劑（例如像AlMe 3）促進直接與具有式 4-d的胺反應來製備。
在一些實施方式中，保護基團（例如像SEM）從具有式 4-j的化合物裂解以產生具有式 4-k的化合物。在一些實施方式中，使用手性分離技術分離具有式 4-k的化合物的非鏡像異構混合物。 方案 5
Figure 02_image062
在上述 方案 5中，R 1、Ar 1、和環A如本文所述。
如以上 方案 5中所述，具有式 5-a的化合物可以用合適的保護基團（例如像SEM或THP）保護。在一些實施方式中，具有式 5-b的化合物在標準鈴木偶合條件下與具有式 5-c的芳基硼酸反應。標準鈴木反應條件包括例如催化鈀源，例如像Pd(dppf)Cl 2，在合適的鹼（例如像K 2CO 3）的存在下，在溶劑（例如像水或1,4-二㗁𠮿）中。反應可以在環境溫度或升高的溫度下進行。
在一些實施方式中，具有式 5-b的化合物在MTBE中使用Dtbpy、[Ir(Cod)OMe] 2和B 2Pin 2進行C-H硼基化反應以形成具有式 5-b'的硼酸。隨後，具有式 5-b'的化合物可以使用標準的鈴木反應條件與具有式 5-c'的芳基鹵反應。
在一些實施方式中，具有式 5-d的化合物使用合適的條件（例如像在DCM中的TFA）進行去保護反應。
具有式 5-e的烷基酯可以使用標準條件水解，例如像在THF、MeOH和水的混合物中的LiOH。
具有式 5-f的酸和具有式 5-g的烷基胺可以在促進反應的合適的鹼（例如像DIPEA）的存在下，使用合適的偶合劑（例如像HATU或HOBt/EDCI）偶合在一起。可以使用合適的溶劑，例如像DMF。
在一些實施方式中，藉由手性柱純化分離具有式 5-h的烷基酯的鏡像異構物混合物。在一些實施方式中，混合物在沒有預先分離的情況下用於隨後的步驟。具有式 5-h的化合物可以使用在THF、MeOH和水的混合物中的LiOH，或者在三級丁酯的情況下使用在1,4-二㗁𠮿中的HCl，水解成具有式 5-i的酸。
具有式 5-i的酸可以與具有式 5-j的胺使用標準的醯胺偶合條件（例如像HATU或HOBt/EDCI、在DMF中的DIPEA）偶合。在一些實施方式中，具有式 5-j的化合物可以被去保護以產生具有式 5-k的化合物。在一些實施方式中，當具有式 5-k的化合物作為非鏡像異構物混合物存在時，非鏡像異構物藉由手性柱純化而分離。
應當理解，可能需要進一步的合成操作以獲得某些具有式 (I) 的化合物。對上述一般反應方案I的修改，例如改變起始材料或修改任何反應產物係可能的。對上述示例性方案進行該等和其他修改之方法在本領域中是眾所周知的並且在實例中進行了更詳細的描述。
熟悉該項技術者還將理解，在本文所述之方法中，中間體化合物的官能基可能需要用合適的保護基團保護，即使沒有具體描述。此類官能基包括羥基、胺基、巰基和羧酸。羥基的合適保護基團包括三烷基矽基或二芳基烷基矽基（例如，三級丁基二甲基矽基、三級丁基二苯基矽基或三甲基矽基）、四氫哌喃基、苄基等。胺基、脒基和胍基的合適保護基團包括三級丁氧基羰基、苄氧基羰基等。巰基的合適保護基團包括C(O) R」（其中R」係烷基、芳基或芳烷基）、對甲氧基苄基、三苯甲基等。用於羧酸的合適的保護基團包括烷基、芳基或芳烷基酯。可以根據熟悉該項技術者已知的和如本文所述之標準技術添加或去除保護基團。Green, T.W. 和P.G.M. Wutz, Protective Groups in Organic Synthesis [有機合成中的保護基團] (1999), 第3版, Wiley [威利出版社] 中詳細描述了保護基團的使用。如熟悉該項技術者將理解的，保護基團還可以是聚合物樹脂，如Wang樹脂、Rink樹脂或2-氯三苯甲基-氯樹脂。
與上述反應物類似的反應物可以藉由美國化學學會化學文摘社編製的已知化學品的索引來識別，該等索引可在大多數公共和大學圖書館中找到，也可以藉由線上數據庫（如需更多詳細資訊，可聯繫美國化學學會，華盛頓特區）。在目錄中已知但無法商購的化學品可以由定製化學合成公司製備，其中許多標準化學品供應公司（例如，上面列出的那些）提供定製合成服務。本揭露之藥用鹽的製備和選擇的參考文獻係P. H. Stahl & C. G. Wermuth 「Handbook of Pharmaceutical Salts [藥用鹽手冊]」, 瑞士化學學報, 蘇黎世, 2002。
一般而言，本文所述反應中使用的化合物可以根據一般反應方案1-5和/或熟悉該項技術者已知的有機合成技術，從可商購的化學品和/或從化學文獻中所述之化合物開始製備。「可商購的化學品」可以從標準商業來源獲得，包括Acros有機物公司（賓夕法尼亞州匹茲堡市）、奧爾德里奇化學公司（威斯康辛州密爾沃基市，包括西格瑪化學公司和Fluka）、Apin化學有限公司（英國彌爾頓公園）、Avocado研究公司（英國蘭開夏郡）、BDH公司（加拿大多倫多）、Bionet公司（英國康沃爾）、Chemservice公司（賓夕法尼亞州威徹斯特市）、Crescent化學公司（紐約州霍波格）、伊士曼有機化學公司、伊士曼-柯達公司（紐約州羅切斯特）、飛世爾科技有限公司（賓夕法尼亞州匹茲堡市）、Fisons化學公司（英國萊斯特郡）、Frontier科技公司（猶他州洛根市）、ICN生物醫學公司（加利福尼亞州科斯塔梅薩山市）、Key有機物公司（英國康沃爾郡）、Lancaster合成公司（新罕布什爾州溫厄姆市）、Maybridge化學有限公司（英國康沃爾郡）、Parish化學公司（猶他州奧瑞姆市）、Pfaltz & Bauer公司（康涅狄格州沃特伯裡市）、Polyorganix公司（德克薩斯州休斯頓市）、Pierce化學公司（伊利諾州羅克福德市）、Riedel de Haen公司（德國漢諾威市）、Spectrum品質產品公司（新澤西州新布倫瑞克）、TCI美國公司（俄勒岡州波特蘭市）、環球化工有限公司（馬里蘭州羅克維爾市）、和美國Wako化學公司（維吉尼亞州里士滿市）。
可以藉由各種參考書、文獻和數據庫來識別熟悉該項技術者已知之方法。詳述可用於製備本發明化合物的反應物的合成，或提供描述製備的文獻的參考文獻的合適的參考書和論文包括例如「Synthetic Organic Chemistry [合成有機化學],」 John Wiley & Sons, Inc. [約翰·威利父子公司], 紐約；S. R. Sandler等人, 「Organic Functional Group Preparations [有機官能基製劑]」, 第二版, Academic Press [學術出版社], 紐約, 1983；H. O. House, 「Modern Synthetic Reactions [現代合成反應]」, 第二版, W. A. Benjamin, Inc. Menlo Park [門洛派克公司], 加利福尼亞州 1972；T. L. Gilchrist, 「Heterocyclic Chemistry [雜環化學]」, 第二版, John Wiley & Sons [約翰·威利父子公司], 紐約, 1992；J. March, 「Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms and Structure [高等有機化學：反應、機理和結構]」, 第四版, Wiley Interscience [威利跨學科], 紐約, 1992。詳述可用於製備本揭露化合物的反應物的合成，或提供描述製備的文獻的參考文獻的另外合適的參考書和論文包括例如，Fuhrhop, J. 和Penzlin G. 「Organic Synthesis: Concepts, Methods, Starting Materials [有機合成：概念、方法、起始材料]」, 第二修訂和增補版 (1994) John Wiley & Sons [約翰·威利父子出版社] ISBN: 3 527-29074-5；Hoffman, R.V. 「Organic Chemistry, An Intermediate Text [有機化學，中間文本]」 (1996) Oxford University Press [牛津大學出版社], ISBN 0-19-509618-5；Larock, R. C. 「Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations [綜合有機轉化：官能基製備指南]」 第二版 (1999) Wiley-VCH [威利-VCH出版社], ISBN: 0-471-19031-4；March, J. 「Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure [高等有機化學：反應、機理和結構]」 第四版 (1992) John Wiley & Sons [約翰·威利父子出版社], ISBN: 0-471-60180-2；Otera, J. (編輯) 「Modern Carbonyl Chemistry [現代羰基化學]」 (2000) Wiley-VCH [威利-VCH出版社], ISBN: 3-527-29871-1；Patai, S. 「Patai’s 1992 Guide to the Chemistry of Functional Groups [Patai1992年官能基化學指南]」 (1992) Interscience [跨學科] ISBN: 0-471-93022-9；Quin, L.D. 等人 「A Guide to Organophosphorus Chemistry [有機磷化學指南]」 (2000) Wiley-Interscience [威利跨學科], ISBN: 0-471-31824-8；Solomons, T. W. G. 「Organic Chemistry [有機化學]」 第七版 (2000) John Wiley & Sons [約翰·威利父子出版社], ISBN: 0-471-19095-0；Stowell, J.C., 「Intermediate Organic Chemistry [中間有機化學]」 第二版 (1993) Wiley-Interscience [威利跨學科], ISBN: 0-471-57456-2；「Industrial Organic Chemicals: Starting Materials and Intermediates: An Ullmann’s Encyclopedia [工業有機化學品：起始材料和中間體：烏爾曼百科全書]」 (1999) John Wiley & Sons [約翰·威利父子出版社], ISBN: 3-527-29645-X, 共8卷；「Organic Reactions [有機反應]」 (1942-2000) John Wiley & Sons [約翰·威利父子出版社], 共55卷；以及「Chemistry of Functional Groups [官能基化學]」 John Wiley & Sons [約翰·威利父子出版社], 共73卷。
本文公開了組成物，其包含至少一種選自具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽的實體和視需要至少一種藥學上可接受的載體。該至少一種藥學上可接受的載體可以根據組成物所預期的特定投與途徑進行選擇。
本揭露之藥物組成物可以被配製用於腸胃外、經口、吸入噴霧、局部、經直腸、經鼻、頰內、經陰道和/或植入式儲藥器投與等。如本文所用的術語「腸胃外」包括皮下、靜脈內、肌內、關節內、滑膜內、胸骨內、鞘內、肝內、病灶內和顱內注射或輸注技術。在一些實施方式中，組成物藉由靜脈內、經口、皮下或藉由肌內投與來投與。本揭露之組成物的無菌可注射形式可以是水性或油性懸浮液。可以根據本領域已知的技術，使用合適的分散劑或濕潤劑和懸浮劑來配製該等懸浮液。無菌可注射製劑還可以是在無毒腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液或懸浮液，例如，作為在1,3-丁二醇中的溶液。可接受的媒介物和溶劑中可使用的是水、林格氏液和等滲氯化鈉溶液。另外，常規地使用無菌不揮發性油作為溶劑或懸浮介質。
可以使用任何溫和的不揮發性油，包括合成的單甘油酯或二甘油酯。脂肪酸如油酸及其甘油酯衍生物可用於製備可注射劑，天然的藥學上可接受的油如橄欖油或蓖麻油、尤其是它們的聚氧乙烯化的形式也是如此。該等油溶液或懸浮液還可以含有長鏈醇稀釋劑或分散劑，如羧甲基纖維素或通常用於配製藥學上可接受的劑型（包括乳劑和懸浮液）的類似分散劑。出於配製的目的，也可以使用其他常用的表面活性劑，如Tweens、Spans和其他乳化劑或生體可用率增強劑，它們通常用於製造藥學上可接受的固體、液體或其他劑型。
對於口服投與，可以以可接受的口服劑型（包括但不限於膠囊劑、片劑、水性懸浮液或溶液）提供化合物（例如，具有式 (I) 的化合物或其藥學上可接受的鹽）。在用於口服使用的片劑的情況下，通常使用的載體包括乳糖和玉米澱粉。還可以添加潤滑劑，如硬脂酸鎂。對於膠囊劑形式的口服投與，有用的稀釋劑包括乳糖和乾燥的玉米澱粉。當需要口服使用水性懸浮液時，活性成分與乳化劑和/或懸浮劑組合。如果需要，也可以添加某些甜味劑、調味劑或著色劑。
本揭露之化合物和組成物可用於治療和/或預防各種類型的癌症，包括對靶向RXRα和/或PPARγ途徑的試劑有反應的癌症。因此，本文揭露了用於治療和/或預防癌症之方法，該方法包括向有需要的受試者投與有效量的至少一種選自具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽的實體。在一些實施方式中，癌症選自晚期膀胱癌、管腔乳癌、前列腺癌、管腔膀胱癌、基底膀胱癌、化學療法抗性的癌症、和免疫療法抗性的癌症。
通常，適當的劑量和治療方案以足以提供治療和/或預防性益處的量提供至少一種本揭露之化合物。對於治療性治療和預防性（prophylactic/preventative）措施，治療性和/或預防性益處包括例如改善的臨床結果，其中目的是預防或減緩或延遲（減輕）不希望的生理變化或障礙，或預防或減緩或延遲（減輕）這種障礙的擴大或嚴重性。如本文所討論的，由治療受試者產生的有益或期望的臨床結果包括但不限於減少、減輕、緩和由待治療的疾病、病症或障礙引起的或與之相關的症狀；減少症狀的發生；提高生活品質；更長的無病狀態（即，降低受試者出現症狀的可能性或傾向，在此基礎上做出疾病診斷）；減少疾病的程度；疾病狀態穩定（即不惡化）；延緩或減緩疾病進展；疾病狀態的改善或緩解；和緩解（無論是部分還是全部），無論是可檢測的還是不可檢測的；和/或總生存期。「治療」可以包括與受試者未接受治療時的預期生存期相比延長生存期。需要治療的受試者包括：(i) 已經患有例如對靶向RXRα和/或PPARγ途徑的試劑有反應的癌症的受試者；(ii) 易患或有患此類癌症風險的受試者；以及 (iii) 預防此類癌症的受試者（即降低疾病、障礙或病症發生的可能性）。
在本文所述方法的一些實施方式中，受試者係人。在本文所述方法的一些實施方式中，受試者係非人類動物。需要如本文所述之治療的受試者可能表現出此類癌症的至少一種症狀或後遺症，或者可能處於發展此類癌症的風險中。可以被治療的非人類動物包括哺乳動物，例如非人類靈長類動物（例如猴子、黑猩猩、大猩猩等），齧齒動物（例如大鼠、小鼠、沙鼠、倉鼠、雪貂、兔子），兔類動物，豬（例如豬、小型豬），馬，犬，貓，牛和其他家養、農場和動物園動物。
本揭露之化合物在治療和/或預防對靶向RXRα和/或PPARγ途徑的藥劑有反應的癌症中的有效性可由醫學和臨床領域的普通技術人員容易地確定。醫學和臨床領域的普通技術人員也可以容易地確定和調整合適的給藥方案（例如 ，調整每劑量化合物的量和/或給藥的劑量和頻率）。診斷方法的一種或任意組合，包括身體檢查、臨床症狀的評估和監測，以及本文所述之分析測試和方法的執行，可用於監測受試者的健康狀況。
本揭露之至少一種實體或包含至少一種此類實體的藥物組成物的投與可以與一種或多種其他療法結合，例如至少一種額外的抗癌劑或至少一種用於降低療法毒性的試劑。例如，可以投與至少一種緩和劑來抵消（至少部分地）療法的副作用。促進恢復或抵消投與抗生素或皮質類固醇的副作用的試劑（化學或生物）係此類緩和試劑的實例。
其他實施方式包括：
1. 一種具有式 (I) 的化合物
Figure 02_image064
或其藥學上可接受的鹽， 其中： Ar 1選自
Figure 02_image066
其中 Y 1選自N和C-X 1，其中X 1選自氫、羥基、鹵素、和C 1-C 4烷基； R 3選自氫、視需要取代的烷基，視需要取代的胺、鹵素、氰基、和視需要取代的烷氧基；並且 R 4選自氫和烷基； Y 2選自C-X 2和N並且Y 3係NH，或Y 2係NH並且Y 3係C-X 2， 其中X 2選自氫和鹵素； 環A選自飽和的6至9員環，其視需要被至少一個選自鹵素、羥基和視需要取代的烷基的取代基取代； R 1選自-(CHR 5) k-(CR 6R 7) n-(O) m-環B，其中 k係0或1， n係0或1， m係0或1， R 5選自氫和視需要取代的烷基， R 6選自氫和鹵素， R 7選自氫和鹵素，並且 環B選自 視需要取代的芳基， 視需要取代的雜芳基， 視需要取代的環烷基， 視需要取代的雜環烷基， 視需要取代的環烯基，和 視需要取代的雜環烯基；並且 R 2選自氫和視需要取代的烷基。
2. 根據實施方式1所述之化合物或藥學上可接受的鹽，環A選自哌啶基和飽和7至9員雙環，並且環A視需要被至少一個選自鹵素、羥基、和視需要取代的烷基的取代基取代。
3. 根據實施方式1至2中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，環A選自哌啶基、氮雜螺辛烷、氮雜螺壬烷、氮雜雙環辛烷、和氧雜-氮雜雙環壬烷，並且環A視需要被至少一個選自鹵素、羥基、和視需要取代的烷基的取代基取代。
4. 根據實施方式1至3中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，環B選自 視需要取代的5至10員芳基， 視需要取代的5至10員雜芳基， 視需要取代的3至10員環烷基， 視需要取代的4至10員雜環烷基， 視需要取代的6至10員環烯基，和 視需要取代的6至10員雜環烯基。
5. 根據實施方式1至4中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，環B選自視需要取代的5至6員單環芳基、視需要取代的10員二環芳基、視需要取代的5至6員單環雜芳基、視需要取代的9至10員二環雜芳基、視需要取代的3至10員單環烷基、視需要取代的7至10員橋連二環烷基、視需要取代的7至10員螺環二環烷基、視需要取代的4至10員單環雜環烷基、視需要取代的7至10員橋連二環雜環烷基、視需要取代的7至10員螺環二環雜環烷基、視需要取代的5至6員單環環烯基、視需要取代的8至10員雙環烯基、視需要取代的5至6員單環雜環烯基、和視需要取代的8至10員二環雜環烯基。
6. 根據實施方式1至5中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽1，其中，環B選自視需要取代的5至6員單環芳基、視需要取代的10員二環芳基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的5至6員單環雜芳基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的9至10員二環雜芳基、視需要取代的3至10員單環烷基、視需要取代的7至10員橋連二環烷基、視需要取代的7至10員螺環二環烷基、具有1至3個選自氧、矽、和氮的環雜原子的視需要取代的4至10員單環雜環烷基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的7至10員橋連二環雜環烷基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的7至10員螺環二環雜環烷基、視需要取代的5至6員單環環烯基、視需要取代的8至10員二環環烯基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的5至6員單環雜環烯基、和具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的8至10員二環雜環烯基。
7. 根據實施方式1至6中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，環A選自
Figure 02_image068
其中q係0或1，並且 R 8和R 9各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、視需要取代的烷氧基、和視需要取代的烷基。
8. 根據實施方式1所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其選自具有式 (II) - (V) 的化合物：
Figure 02_image070
其中 Y 1選自N和C-X 1，其中X 1選自氫、羥基、鹵素、和C 1-C 4烷基； R 2選自氫和視需要取代的烷基； R 3選自氫、視需要取代的烷基、視需要取代的胺、鹵素、氰基、和視需要取代的烷氧基； R 4選自氫和烷基； Y 2選自C-X 2和N並且Y 3係NH，或 Y 2係NH並且Y 3係C-X 2， 其中X 2選自氫和鹵素； 其中q係0或1； R 1選自-(CHR 5) k-(CR 6R 7) n-(O) m-環B， 其中 k係0或1， n係0或1， m係0或1， R 5選自氫和視需要取代的烷基， R 6選自氫和鹵素， R 7選自氫和鹵素，並且 環B選自視需要取代的5至6員單環芳基、視需要取代的10員二環芳基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的5至6員單環雜芳基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的9至10員二環雜芳基、視需要取代的3至10員單環烷基、視需要取代的7至10員橋連二環烷基、視需要取代的7至10員螺環二環烷基、具有1至3個選自氧、矽、和氮的環雜原子的視需要取代的4至10員單環雜環烷基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的7至10員橋連二環雜環烷基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的7至10員螺環二環雜環烷基、視需要取代的5至6員單環環烯基、視需要取代的8至10員二環環烯基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的5至6員單環雜環烯基、和具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的8至10員二環雜環烯基；並且 R 8和R 9各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、視需要取代的烷氧基、和視需要取代的烷基。
9. 根據實施方式1至8中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
Figure 02_image072
其中： w係0或1； Y 4和Y 5各自獨立地選自視需要取代的-(CH 2)-、視需要取代的-(NH)-、和-O-； Y 6選自視需要取代的-(CH 2)-、視需要取代的-(NH)-、四烷基矽烷、和-O-； R 10選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、和羰基；並且 R 11、R 12、和R 13各自獨立地選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
10. 根據實施方式1至9中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
Figure 02_image074
其中 R 11和R 12各自獨立地選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基； R 14選自氫和視需要取代的烷基； R選自氫、視需要取代的烷基、和芳基；並且 R’選自氫、視需要取代的烷基、和鹵素。
11. 根據實施方式1至9中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
Figure 02_image076
其中R 11、R 12、和R 13各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、視需要取代的烷基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
12. 根據實施方式1至8中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
Figure 02_image078
其中 w係0或1， Y 4選自SO 2、視需要取代的磺醯胺、視需要取代的醯胺、視需要取代的-(CH 2)-、視需要取代的-(NH)-、和-O-； R 11和R 12各自獨立地選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基；並且 環C選自5員芳環、包含1或2個環氮原子的5員雜芳環、6員芳環和包含1或2個環氮原子的6員雜芳環。
13. 根據實施方式1至8中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
Figure 02_image080
其中 Y 4、Y 5、和Y 6各自獨立地選自視需要取代的-(CH)-、視需要取代的-(NH)-、和-O-； R 11選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基；並且 環C選自5員芳環、包含1或2個環氮原子的5員雜芳環、6員芳環和包含1或2個環氮原子的6員雜芳環。
14. 根據實施方式1至8和13中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
Figure 02_image082
其中 當R 11鍵合至氮時，R 11選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、和羥基，並且R 11另外選自氫和視需要取代的烷基； 當R 12鍵合至氮時，R 12選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、和羥基，並且R 12另外選自氫和視需要取代的烷基； 當R 13鍵合至氮時，R 13選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、和羥基，並且R 13另外選自氫和視需要取代的烷基；並且 R 14選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
15. 根據實施方式1至8中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
Figure 02_image084
其中 Y 4和Y 5各自獨立地選自視需要取代的-(CH 2)-、視需要取代的-(NH)-、和-O-；並且 R 11和R 12獨立地選自氫、氰基、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、芳基、雜芳基、和視需要取代的烷氧基。 16. 根據實施方式1至8和16中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
Figure 02_image086
其中 R 11 和R 12獨立地選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
17. 根據實施方式1至8中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
Figure 02_image088
其中 R 11 、R 12、和R 13獨立地選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
18. 根據實施方式1至8和15中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
Figure 02_image090
其中 Y 6選自視需要取代的-(CH)-和視需要取代的-(NH)-；並且 R 11選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
19. 根據實施方式1至8中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，環B選自
Figure 02_image092
其中 Y 4選自視需要取代的-(CH 2)-、視需要取代的-(NH)-、和-O-； Y 5選自視需要取代的-(CH)-和N；並且 R 11和R 12選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
20. 根據實施方式1至8中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，環B選自
Figure 02_image094
其中 R 11和R 12選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
21. 根據實施方式1至8和12中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，環B選自
Figure 02_image096
其中 R 11、R 12、和R 13獨立地選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
22. 根據實施方式1至21中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， R 1選自-(CHR 5) k-(CR 6R 7) n-(O) m-環B，其中 k係0或1， n係0或1， m係0或1， R 5選自氫和甲基， R 6選自氫和鹵素， R 7選自氫和鹵素；並且 R 2選自氫和甲基。
23. 一種化合物，該化合物選自：
Figure 02_image098
或其藥學上可接受的鹽，其中 Y 1選自N和C-X 1，其中X 1選自氫、羥基、鹵素、和C 1-C 4烷基； R 3選自氫、視需要取代的C 1-C 3烷基、鹵素、氰基、和視需要取代的C 1-C 3烷氧基；並且 R 4選自氫和烷基； Y 4選自CH 2、O、和N-R 11； X 3選自氫和鹵素； R’選自氫和視需要被至少一個鹵素取代的C 1-C 3烷基； R 11選自氫和C 1-C 3烷基； R 12選自氫、鹵素、和C 1-C 3烷基；並且 R 13選自氫、鹵素、C 2-C 4烷氧基、和C 1-C 3烷基。
24. 根據實施方式23所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其選自：
Figure 02_image100
其中 X 1選自氫、羥基、鹵素、和C 1-C 4烷基； X 3選自氫和鹵素；並且 R 11和R 12獨立地選自氫和C 1-C 3烷基。
25. 根據實施方式1至24中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，該視需要取代的烷基選自鹵代烷基。
26. 根據實施方式25所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，該鹵代烷基係三氟甲基。
27. 至少一種選自以下的化合物： 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4s)-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(4-氟-5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； (S)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(3-氟苯基)乙基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1s,4s)-4-(二氟甲基)環己基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1r,4r)-4-(二氟甲基)環己基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； N-(4-甲基環己基)-1-[5-(2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4s)-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1s,4s)-4-乙基環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1r,4r)-4-乙基環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(3-氯吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-[4-氯-5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[4-氯-5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]哌啶-4-甲醯胺； N-((1s,4s)-4-(二氟甲基)環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1r,4r)-4-(二氟甲基)環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4s)-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； (R)-1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[1-(3-氯苯基)乙基]哌啶-4-甲醯胺； (S)-1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[1-(3-氯苯基)乙基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(1-苯基吡咯啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氯吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(2-甲基-1,3-二㗁𠮿-5-基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲哚-5-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2,3,6-三氟苄基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-氯-5-氟苄基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氟吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-氰基環丁基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-甲基吡啶-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(異口克唍-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,2S)-2-苯基環丙基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-羥基環己基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4,4-二甲基氧雜環丁烷-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-甲基㗁唑-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氯嘧啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-氯吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1,5-二甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(4-氯苯氧基)丙-2-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3,3-二氟環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-甲氧基環丁基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-氟吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-(二氟甲基)苯基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3,3-二氟環丁基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2,2-二氟-2-苯基乙基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3,3,5-三甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-(二氟甲氧基)苄基)哌啶-4-甲醯胺； N-(苯并[d]㗁唑-6-基甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； (R)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(3-氟苯基)乙基)哌啶-4-甲醯胺； N-(5-氯-2-氟苄基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2,3-二氟苄基)哌啶-4-甲醯胺； N-(3-氯-2-氟苄基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氟苄基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3,4-二氫-2H-哌喃-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-(3-氯苄基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(3-氯苄基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3r,5S)-N-(3-氯苄基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； N-(3-氯苄基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-甲基哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(三氟甲基)環戊基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1,4-二甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-(三氟甲氧基)苄基)哌啶-4-甲醯胺； N-(雙環[3.2.1]辛烷-8-基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-[(3-氯苯基)甲基]-1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-1,2,4-三唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-側氧基吲哚啉-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-4-羥基哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-3-甲基哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-4-氟哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3,3-二氟環戊基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-甲基吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-3-氟哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6-(三氟-l5-甲基)吡啶-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氯吡啶-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲唑-6-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲哚-3-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(異喹啉-6-基甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5-側氧基-1-苯基吡咯啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(口克唍-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2,2-二甲基-1,3-二氧戊環-4-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-甲基-1,2,3,4-四氫喹啉-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-1H-吲哚-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲哚-6-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-甲基呋喃-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲哚-4-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5,6,7,8-四氫異喹啉-5-基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲唑-4-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲哚-7-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-氟口克唍-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-苯基哌啶-4-基)哌啶-4-甲醯胺； N-((2H-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-羥基-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺； N-((3-氟-1H-吲唑-5-基)甲基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲唑-3-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-甲基-1H-吲唑-5-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-側氧基-1-苯基吡咯啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； N-(5-氯-2,3-二氫苯并呋喃-3-基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-5-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5,5-二甲基四氫呋喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((8-氟咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-甲基-1,3-二㗁𠮿-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-1H-吲唑-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6-氯咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4,4-二氟四氫呋喃-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-(三氟甲基)㗁唑-4-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(2-氟苯基)吡咯啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-5-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-(二氟甲基)異㗁唑-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-甲基-2-側氧基-2,3-二氫苯并[d]㗁唑-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-1H-吲唑-6-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((2-氧雜雙環[3.1.1]庚烷-1-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-甲基-2,2-二氧-3,4-二氫-1H-苯并[c][1,2]噻𠯤-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； (S)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-氰基口克唍-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-甲基-2-側氧基-1,2,5,6,7,8-六氫喹啉-5-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-2-側氧基吲哚啉-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3,4-二氫-2H-哌喃并[2,3-b]吡啶-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1,1-二氧-2,3-二氫苯并[b]噻吩-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-甲基-3-側氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6,7-二氫-5H-環戊[d]嘧啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3,3-二甲基-2-側氧基吲哚啉-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氟-1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-側氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉-4-基)哌啶-4-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氟-3-甲基環丁基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5-甲基四氫呋喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲哚-2-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-甲基吡啶-2-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-甲氧基口克唍-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(4-氟苯基)吡咯啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； (S)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,2-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (R)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,2-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (S)-5-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺； (R)-5-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-N-[(3-氟-1H-吲唑-5-基)甲基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5,6-二甲基吡𠯤-2-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1H-吲哚-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-羥基-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4s)-4-羥基-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； (2S,5R)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,5S)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,5R)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2S,5S)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； N-[(3-氯苯基)甲基]-1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺； (1R,3S,5S)-N-[(3-氯苯基)甲基]-8-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； N-[(3-氟-1H-吲唑-5-基)甲基]-1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-乙基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(1H-吲哚-5-基甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-[(2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基]-1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺； (2R,4R)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,6-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； 1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)哌啶-4-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((3-氟-1-甲基-1H-吲唑-5-基)甲基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； N-((3,3-二甲基吲哚啉-5-基)甲基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； 1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(3-甲基-1H-吲唑-5-基)乙基)哌啶-4-甲醯胺； 9-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-3-氧雜-9-氮雜雙環[3.3.1]壬烷-7-甲醯胺； (1R,3R,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((3-氟-1H-吲唑-5-基)甲基)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3R,5S)-N-[(2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氟-1H-吲唑-5-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-氟-1H-吲唑-5-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(3-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-5-基)乙基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(3-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-5-基)乙基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(1,1-二甲基矽烷-4-基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3R,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3R,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5R,8r)-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5S,8s)-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； 4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(R)-1-(2-氟苯基)吡咯啶-3-基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3S,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[1-氧雜螺[3.5]壬-7-基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (2R,4S,5S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2S,4S,5S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,4R,5S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,4S,5R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2S,4S,5R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2S,4R,5S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,4R,5R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2S,4R,5R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (1R,3S,5S)-N-[(3S,6S)-1-乙基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-N-[(3S,6R)-1-乙基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-N-[(3R,6S)-1-乙基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-N-[(3S,6R)-1-乙基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (R)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-羥基-4-(全氟乙基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3R,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-(二氟甲基)-4-甲氧基環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3R,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-(二氟甲基)-4-甲氧基環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((1r,4R)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((1s,4S)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-(2-甲氧基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-(2-甲氧基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-1,2,4-三唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(3,3-二氟-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1s,4R)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1r,4R)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1s,4S)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1s,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1r,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1s,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； 4-(4-(5-羥基-2-甲基吡啶-4-基)-1H-咪唑-2-羰基)-N-((1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (R)-N-((1r,4S)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4R)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-羥基雙環[2.2.2]辛烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-羥基雙環[2.2.2]辛烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(2,3-二甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(6-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(2-乙基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(2-(羥基甲基)吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-(三氟甲基)-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(3,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1r,4R)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4S,7r)-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4R,7s)-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-1-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-1-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-1-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-1-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5R,8r)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5S,8s)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5S,8r)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5R,8s)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5R,8r)-1-乙基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5S,8s)-1-乙基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5S,8r)-1-乙基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5R,8s)-1-乙基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-(2-(二甲基胺基)乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-(2-羥基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-(2-羥基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-羥基雙環[2.2.1]庚烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-羥基雙環[2.2.1]庚烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-羥基雙環[2.1.1]己烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； 4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-羥基雙環[2.1.1]己烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-羥基雙環[1.1.1]戊-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1S,4S)-4-((S)-2-甲氧基丙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,4S)-4-((R)-2-甲氧基丙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(((R)-4,5,6,7-四氫-2H-吲唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(((S)-4,5,6,7-四氫-2H-吲唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(((R)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,5-a]吡啶-7-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(((S)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,5-a]吡啶-7-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((R)-1-(2-羥基-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((R)-1-(2-羥基-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((S)-1-(2-羥基-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((S)-1-(2-羥基-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(((R)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-7-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(((S)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-7-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1r,4R)-N-((R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-甲醯胺； (1s,4S)-N-((R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-甲醯胺； (1r,4S)-N-((S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-甲醯胺； (1s,4R)-N-((S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(氧雜環丁烷-3-基)-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-(2-胺基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(1-(2,2-二氟丙基)-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,4S)-4-((S)-2-胺基丙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1S,4S)-4-((S)-2-羥基丙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-(8-氧雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,3R)-3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2-二甲基環丁基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,3S)-3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2-二甲基環丁基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((S)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((R)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((S)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-8H-[1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]㗁𠯤-6-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((R)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-8H-[1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]㗁𠯤-6-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-甲基吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(3-氯吡啶-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(3-氯吡啶-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氟-3-甲基吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氟-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-(三氟甲基)-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-3,4-二氫-2H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-3,4-二氫-2H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (2S,4R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺； (2S,4S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺； (2R,4R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺； (2R,4S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺； (R)-N-((1r,4R)-4-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1s,4S)-4-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5S,8s)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5R,8r)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5,6-二氫-8H-咪唑并[2,1-c][1,4]㗁𠯤-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((1R,3S)-1-亞胺基-2,2-二甲基-1-氧四氫-1H-1l6-噻吩-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((1S,3S)-1-亞胺基-2,2-二甲基-1-氧四氫-1H-1l6-噻吩-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((1S,3R)-1-亞胺基-2,2-二甲基-1-氧四氫-1H-1l6-噻吩-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((1R,3R)-1-亞胺基-2,2-二甲基-1-氧四氫-1H-1l6-噻吩-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(全氟乙基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4R)-4-羥基-4-(全氟乙基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((4S,7r)-3,3-二氟-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((4R,7s)-3,3-二氟-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1s,4R)-4-(1,1-二氟乙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-(1,1-二氟乙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6R,8aR)-八氫吲口巾-6-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6R,8aS)-八氫吲口巾-6-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6S,8aR)-八氫吲口巾-6-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6S,8aS)-八氫吲口巾-6-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(3-氯-5-氟吡啶-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(3-氯-5-氟吡啶-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1s,3R)-3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2,4,4-四甲基環丁基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,3S)-3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2,4,4-四甲基環丁基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-4,4-二氟-1-(2-氟-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-4,4-二氟-1-(2-氟-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-6-甲基-3,4-二氫-2H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-6-甲基-3,4-二氫-2H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((S)-3-甲基-4,5,6,7-四氫-1H-吲唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((R)-3-甲基-4,5,6,7-四氫-1H-吲唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-7-氟-3,4-二氫-2H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-7-氟-3,4-二氫-2H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-甲基吡𠯤-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-氯-2-甲基嘧啶-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯吡𠯤-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氟-3-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氰基吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-(氧雜環丁烷-3-基)吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-(3-氰基氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-甲基-5-(三氟甲基)㗁唑-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(5-環丙基-1,3,4-㗁二唑-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(5-環丙基-1,3,4-㗁二唑-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(氧雜環丁烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(氧雜環丁烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-甲基吡𠯤-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-(1,1-二氟-3-甲氧基丙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1s,4R)-4-(1,1-二氟-3-甲氧基丙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1s,4R)-4-胺基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-胺基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3,5-二氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (2S,4S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,4S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,4R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺； (2S,4R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (2R,4S)-2-乙基-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺； (2S,4R)-2-乙基-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺； (2S,4S)-2-乙基-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺； (2R,4R)-2-乙基-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氟-3-(4-甲基哌𠯤-1-基)吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5R,8r)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5S,8s)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5S,8r)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5R,8s)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-((1-氟環丙基)甲基)氮雜環丁烷-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,2-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,2-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4R)-4-(羥基甲基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-(羥基甲基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-(1-(三級丁基亞磺醯基)-3,3-二氟-1-氮雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((4S,7r)-3,3-二氟-1-氮雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((4R,7s)-3,3-二氟-1-氮雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(4-羥基雙環[2.2.2]辛烷-1-基)乙基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(4-羥基雙環[2.2.2]辛烷-1-基)乙基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((4,6-二甲基吡𠯤-3-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5-氯嘧啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,4R)-4-𠰌啉代四氫呋喃-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,4S)-4-𠰌啉代四氫呋喃-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(5,6-二氫-8H-咪唑并[2,1-c][1,4]㗁𠯤-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(5,6-二氫-8H-咪唑并[2,1-c][1,4]㗁𠯤-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(氧雜環丁烷-3-基)哌啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-𠰌啉代環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4R)-4-𠰌啉代環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,5S,7r)-9-甲基-3-氧雜-9-氮雜雙環[3.3.1]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,5S,7s)-9-甲基-3-氧雜-9-氮雜雙環[3.3.1]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(氧雜環丁烷-3-基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(氧雜環丁烷-3-基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3R,4S)-4-氟-1-甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3S,4S)-4-氟-1-甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3R,4R)-4-氟-1-甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3S,4R)-4-氟-1-甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3S,6S)-1,6-二甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3R,6R)-1,6-二甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3S,6R)-1,6-二甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3R,6S)-1,6-二甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1,6,6-三甲基哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1,6,6-三甲基哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(2-氟乙基)-2,2-二甲基哌啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(2-氟乙基)-2,2-二甲基哌啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3R,4R)-4-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3S,4S)-4-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3S,4R)-4-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-(氧雜環丁烷-3-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(2-甲基嘧啶-4-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(2-甲基嘧啶-4-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-((S)-四氫呋喃-3-基)氮雜環丁烷-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-((R)-四氫呋喃-3-基)氮雜環丁烷-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-((3-氯-5-(3,5-二甲基哌𠯤-1-基)吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-4,4-二氟-1-((1-(三氟甲基)環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-4,4-二氟-1-((1-(三氟甲基)環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(4-(1,1-二氟-2-羥基乙基)-4-羥基環己基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-((1-(三氟甲基)環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(4-氰基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (S)-N-((1s,4R)-4-(氰基甲基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-(氰基甲基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-(2-氟-2-甲基丙基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(4-胺基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-(2-氟-2-甲基丙基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-(三氟甲基)-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； 5-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-氧雜-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5-((R)-1-羥基乙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5-((S)-1-羥基乙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-(氧雜環丁烷-3-基氧基)吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-((5-(3,5-二甲基哌𠯤-1-基)嘧啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(1-氰基環丙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(2-甲氧基-5-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1,6,6-三甲基哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1,6,6-三甲基哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-6-甲基吡𠯤-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(6-甲基吡𠯤-4-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(6-甲基吡𠯤-4-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(2-甲基嘧啶-5-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(2-甲基嘧啶-5-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-((3-羥基氧雜環丁烷-3-基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-((3-羥基氧雜環丁烷-3-基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-甲氧基嘧啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-氰基嘧啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(1-(3,5-二氯吡啶-2-基)環丙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(2,2-二氟-3-羥基丙基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(2,2-二氟-3-羥基丙基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,4S)-4-((3S,5R)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,4R)-4-((3S,5R)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-((R)-1-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-((S)-1-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-((R)-1-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-((S)-1-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-((1R,4R)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)-3-氯吡啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-((1S,4S)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)-3-氯吡啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((3-羥基氧雜環丁烷-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-((R)-1-氧雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-((S)-1-氧雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-((R)-1-氧雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-((S)-1-氧雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1,4,5-三甲基-1H-咪唑-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(5-((1S,2S)-2-氰基環丙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(5-((1R,2R)-2-氰基環丙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-((1R,4R)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)嘧啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-((1S,4S)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)嘧啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-氟吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-氟吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-((1S,6R)-2,5-二氮雜雙環[4.1.0]庚烷-2-基)嘧啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-((1R,6S)-2,5-二氮雜雙環[4.1.0]庚烷-2-基)嘧啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-4,4-二氟-1-((1-羥基環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-4,4-二氟-1-((1-羥基環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(5-氰基嘧啶-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(5-氰基嘧啶-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-異丙基-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,3R,4S)-3,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,3S,4R)-3,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,3R,4S)-3,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,3S,4R)-3,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(5-甲基-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-基)乙基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(5-甲基-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-基)乙基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((5-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； 4-(5-(2-乙醯基-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-((S)-1-羥基乙基)吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-((S)-1-羥基乙基)吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-((R)-1-羥基乙基)吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-((R)-1-羥基乙基)吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(2-環丙基-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(2-環丙基-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-((1S,2S)-2-(羥基甲基)環丙基)吡𠯤-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-((1R,2R)-2-(羥基甲基)環丙基)吡𠯤-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((2-((3S,5R)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)-5-(三氟甲基)㗁唑-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(2-乙基-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(2-乙基-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-氯-5-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-(三氟甲基)-2-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌𠯤-1-基)㗁唑-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-5-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺； (R)-5-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺； (S)-N-(5-氰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-(1-(6-氰基吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(5-氰基吡啶-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(5-氰基吡啶-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-4,4-二氟-1-(5-甲基吡𠯤-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-4,4-二氟-1-(5-甲基吡𠯤-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-異丙氧基吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(6-乙醯基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-((S)-1-羥基乙基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-((R)-1-羥基乙基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-(7',8'-二氫-6'H-螺[氧雜環丁烷-3,5'-喹啉]-8'-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-(5-乙基-2-氧雜-5-氮雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(5,5-二甲基-6,7-二氫-5H-吡唑并[5,1-b][1,3]㗁𠯤-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1-(胺基甲基)-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,3R,4S)-3-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1S,3S,4R)-3-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-2-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-2-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((4-(三氟甲基)-1H-咪唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,2R,4S)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,2S,4S)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,2R,4S)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,2S,4S)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,2R,4R)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,2S,4R)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,2R,4R)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,2S,4R)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((3-(三氟甲基)異㗁唑-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-環丙基吡啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-環丙基吡啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((1-甲基-4-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((3-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(((S)-3,3-二氟哌啶-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(((R)-3,3-二氟哌啶-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((5-氟嘧啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-5-羥基-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-5-羥基-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((3-(三氟甲基)雙環[1.1.1]戊-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((2-甲基-4-(三氟甲基)噻唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(羥基甲基)-3-甲基-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(羥基甲基)-3-甲基-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((1-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(羥基甲基)-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-(4-甲基哌𠯤-1-基)吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((1-羥基-3,3-二甲基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼雜環戊烯-6-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼雜環戊烯-5-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,3S)-3-羥基-3-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1S,3S)-3-羥基-3-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,3R)-3-羥基-3-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1S,3R)-3-羥基-3-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((3-(三氟甲基)吡啶-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-氯-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-甲氧基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(6-氰基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(6-氰基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(2-氯-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(2-氯-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-甲氧基-3-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； 及其藥學上可接受的鹽。
28. 一種藥物組成物，其包含至少一種選自根據實施方式1至27中任一項所述之化合物及其藥學上可接受的鹽的實體。
29. 根據實施方式28所述之藥物組成物，其進一步包含至少一種藥學上可接受的載體。
30. 一種用於治療和/或預防癌症之方法，該方法包括向有需要的受試者投與有效量的至少一種選自根據實施方式1至27中任一項所述之具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽和根據實施方式28或29中任一項所述之藥物組成物的實體。
31. 根據實施方式30所述之方法，其中，該癌症選自膀胱癌、乳癌、前列腺癌和/或具有改變的RXRα和/或PPARγ途徑的癌症。
32. 根據實施方式30和31中任一項所述之方法，其中，該癌症係膀胱癌。
33. 根據實施方式30至32中任一項所述之方法，其中，該膀胱癌係晚期膀胱癌、管腔膀胱癌和/或基底膀胱癌。
34. 根據實施方式30至33中任一項所述之方法，其中，該癌症係化學療法抗性和/或免疫療法抗性的癌症。
35. 至少一種選自根據實施方式1至27中任一項所述之具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽和根據實施方式28或29中任一項所述之藥物組成物的實體在治療和/或預防癌症中的用途。
36. 根據實施方式35所述之用途，其中，該癌症選自膀胱癌、乳癌、前列腺癌和/或具有改變的RXRα和/或PPARγ途徑的癌症。
37. 根據實施方式35和36中任一項所述之用途，其中，該癌症係膀胱癌。
38. 根據實施方式35至37中任一項所述之用途，其中，該膀胱癌係晚期膀胱癌、管腔膀胱癌和/或基底膀胱癌。
39. 根據實施方式35至38中任一項所述之用途，其中，該癌症係化學療法抗性和/或免疫療法抗性的癌症。
40. 根據實施方式1至27中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，該化合物或藥學上可接受的鹽具有小於1000 nM、小於500 nM或小於250 nM的TR-FRET反向促效劑AC 50值。
41. 根據實施方式1至27中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，R 1的m係0。
42. 根據實施方式8所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中R 8或R 9係螺連接的氧雜環丁烷。
43. 根據實施方式1至27和40至42中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中該化合物選自具有式 (IIB) 和 式 (IIIB) 的化合物：
Figure 02_image050
式 (IIB)，和
Figure 02_image052
式 (IIIB)；其中 q係0或1；並且 R 8和R 9各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、視需要取代的烷氧基、和視需要取代的烷基。
為了能夠更充分地理解本文所述之揭露內容，闡述了以下實例。下文闡述的反應方案和測定可用於合成和測試本揭露之其他實施方式。應理解的是該等實例僅出於說明性目的而不應解釋為以任何方式限制本揭露。 實例
在以下說明性實例中，除非另有說明， (i)       溫度以攝氏度給出（ºC）； (ii)      有機溶液經無水硫酸鈉或硫酸鎂乾燥，除非另有說明；使用旋轉蒸發器在減壓（5 - 1000毫巴）下在高達60ºC的浴溫下進行有機溶劑的蒸發； (iii)     柱層析法意指在矽膠或預填充矽膠柱（12、24、40 g等）上的快速層析法；在矽膠板上進行薄層層析（TLC）； (iv)     使用Teledyne ISCO CombiFlash ®系統或Biotage ®快速柱進行正相和反相快速柱層析法，根據製造商的說明使用，並且分別從4700 Superior Street, Lincoln NE 68504, 美國或Biotage AB Box 8 751 03, 瑞典烏普薩拉大學獲得； (v)      製備型TLC意指用於純化的製備型TLC板； (vi)     通常，藉由TLC或液相層析/質譜（LC/MS）跟蹤反應過程，並且給出反應時間僅用於說明； (vii)    最終產物具有令人滿意的質子核磁共振（NMR）譜和/或質譜數據； (viii)   如果需要更多材料，則重複製備過程； (ix)     當給出時，NMR數據為主要診斷性質子的δ值形式，以相對於作為內標的四甲基矽烷（TMS，δ 0 ppm）的百萬分之一（ppm）給出； (x)      化學符號具有其通常的含義； (xi)     如果指定給給定化合物的命名法與本文描述的化合物結構不一致，則以該結構為准； (xii)    製備型HPLC意指製備型高效液相層析，係指使用下列反相HPLC柱進行純化（除非另有說明），並根據製造商的說明使用； Sunfire製備型C18 OBD柱，19 x 150 mm，5 µm，在MeCN/H 2O中10 nm，以0.1%甲酸或0.05% TFA作為流動相，從沃特世公司（Waters），上海市浦東新區金海路1000號金領之都13號樓獲得 XBridge製備型OBD C18柱，19 x 250 mm或30 x 150 mm或30 x 50 mm，在MeCN/H 2O中5 µm，以10 mM NH 4HCO 3作為流動相，從沃特世公司，上海市浦東新區金海路1000號金領之都13號樓獲得 YMC-Actus Triart C18柱，20 x 250 mm或30 x 250 mm，5 µm，在MeCN/H 2O中12 nm，0.1%或1 mM甲酸或10 mM NH 4HCO 3作為流動相，從YMC有限公司，中國上海市仙霞路319號遠東國際廣場A2404，200051獲得 Gemini-NX C18 AXAI填充，21.2 x 150 mm，在MeCN/H 2O中5 µm，以0.1%甲酸作為流動相，從Phenomenex公司，天津經濟技術開發區南大街西179號，300462獲得 XBridge Shield RP18 OBD柱，30 x 150 mm，在MeCN/H 2O中5 μm，以10 mM NH 4HCO 3作為流動相，從沃特世公司，上海市浦東新區金海路1000號金領之都13號樓獲得 Atlantis HILIC OBD柱，19 x 150 mm，5 μm，在MeCN/H 2O中10 nm，以0.1%甲酸作為流動相，從沃特世公司，上海市浦東新區金海路1000號金領之都13號樓獲得 XBridge BEH130 Prep C18 OBD柱，130 Å，19 x 150 mm，5 µm，在MeCN/H 2O中13 nm，以20 mM NH 4HCO 3或10 mM NH 4HCO 3和0.1% NH 3H 2O作為流動相，從沃特世公司，上海市浦東新區金海路1000號金領之都13號樓獲得 XSelect CSH製備型C18 OBD柱，19 x 150 mm或30 x 50 mm，30 x 150 mm，在MeCN/H 2O中5 µm，以0.1%或0.05%甲酸或10 mM NH 4HCO 3作為流動相，從沃特世公司，上海市浦東新區金海路1000號金領之都13號樓獲得 Xselect CSH F-苯基OBD柱，19 x 250 mm，在MeCN/H 2O中5 µm，以10 mM NH 4HCO 3作為流動相，從沃特世公司，上海市浦東新區金海路1000號金領之都13號樓獲得 Ascentis Express C18 OBD柱，在MeCN/H 2O中50 x 2.1 mm，以0.1% NH 4HCO 3作為流動相，從西格瑪奧德里奇公司，中國上海市浦東新區東嶼路227弄3號前灘世貿中心（二期）C座15F-18F獲得 Xbridge C18柱，100 x 19 mm，在MeCN/H 2O中5μm，以0.1%NH 4OH作為流動相，從沃特世公司，34楓樹街，米爾福德市，MA 01757，美國獲得 CSH C18柱，100 x 19 mm，在MeCN/H 2O中5μm，以0.1%甲酸作為流動相，從沃特世公司，34楓樹街，米爾福德市，MA 01757，美國獲得 (xiii)    手性製備型HPLC意指手性製備型高效液相層析，係指使用下列手性HPLC柱進行純化（除非另有說明），並根據製造商的說明使用； Viridis BEH製備型OBD柱，1.9 x 15 cm，在己烷/IPA中5 µm，作為流動相，從沃特世公司，上海市浦東新區金海路1000號金領之都13號樓獲得 手性ART纖維素-SB柱，2 x 25 cm或3 x 25 cm，在MTBE/MeOH中5 µm，以在MeOH中的2 mM NH 3，己烷/EtOH與在MeOH中的10 mM NH 3，己烷/IPA與在MeOH中的10 mM NH 3，MTBE/IPA與在MeOH中的0.5% 2 M NH 3，MTBE/MeOH與在MeOH中的0.5% 2 M NH 3，或己烷/EtOH與在MeOH中的8 mM NH 3作為流動相，從YMC有限公司，中國上海市仙霞路319號遠東國際廣場A2404，200051獲得 Gemini-NX C18 AXAI填充柱，21.2 x 150 mm，在MeCN/H 2O中5 µm，以0.1%甲酸作為流動相，從Phenomenex公司，中國天津經濟技術開發區西區南大街149號獲得 (xiv)    根據製造商的指示使用Chiralpak ®柱（例如IA、IC、ID、IE、IF、IG和/或AD-H型）並從DAICEL手性科技（中國）有限公司，中國上海市外高橋保稅區香河路32號，200131獲得 (xv)     製備型SFC係指製備型超臨界流體層析，根據製造商的說明，與N-Lux 3u i-纖維素-5柱一起使用，0.46 x 10 cm，在二氧化碳/MeOH中3 µm，以20 mM NH 3作為流動相，從Phenomenex公司，中國天津經濟技術開發區西區南大街149號獲得； (xvi)    除非另有說明，否則每個單獨鏡像異構物（e.e.）的鏡像異構物過量係使用在220 nm或254 nm處的面積百分比計算的； (xvii)   除非另有說明，否則每個單獨非鏡像異構物（d.e.）的非鏡像異構物過量係使用在220 nm或254 nm處的面積百分比計算的； (xviii)  當樣本使用反相液相層析法（LC）分離，並藉由電灑電離（ESI）質譜（MS）或薄層層析（TLC）檢測，並藉由大氣壓化學電離（APCI）質譜（MS）檢測時，獲取質譜（MS）正負離子；給出了m/z的值；通常，只報告表明母體質量的離子；並且除非另有說明，否則所引用的質量離子為[M+H] +或[M+Na] +；以及 (xix)    使用了以下縮寫： AcOH：乙酸 B 2Pin 2：雙(皮那醇(pinacolato))二硼 Boc：三級丁氧基羰基 Boc 2O：脫碳酸二三級丁酯 Cs 2CO 3：碳酸銫 DAST：(二乙基胺基)三氟化硫 DCE：1,2-二氯乙烷 DCM：二氯甲烷 DEAD：偶氮二甲酸二乙酯 DHP：二氫哌喃 DIAD：偶氮二甲酸二異丙酯 DIPEA： N,N-二異丙基乙胺，Hunig鹼 DIBAL-H：二異丁基氫化鋁 DMF：二甲基甲醯胺 DMSO：二甲亞碸 DPPA：疊氮化磷酸二苯酯 Dppf：1,1′-二茂鐵二基-雙(二苯基膦) Dtbpy：4,4’-二三級丁基-2,2’-二吡啶基 EDCI∙HCl：N-(3-二甲基胺丙基)-N-乙基碳二亞胺鹽酸鹽 EDCI： N-(3-二甲基胺基丙基)- N-乙基碳二亞胺 EtOH：乙醇 EtOAc：乙酸乙酯 FA：甲酸 h：小時 HATU：1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1 H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓 3-氧化物六氟磷酸鹽 HCl：鹽酸 HMPA：六甲基磷醯胺 HOBt：羥基苯并三唑 HPLC：高效液相層析法 H 2SO 4：硫酸 IPA：異丙醇 [Ir(COD)OMe] 2：雙(1,5-環辛二烯)二-μ-甲氧基二銥(I) K 2CO 3：碳酸鉀 K 3PO 4：磷酸三鉀 勞氏試劑：2,4-雙(4-甲氧基苯基)-2,4-二硫側氧基-1,3,2,4-二噻二磷雜環丁烷 LCMS：液相層析質譜法 MeCN：乙腈 MeOH：甲醇 2-MeTHF：2-甲基四氫呋喃 min：分鐘 MTBE：甲基三級丁基醚 nBuLi：正丁基鋰 NCS： n-氯代琥珀醯亞胺 NH 4Cl：氯化銨 NMO：N-甲基𠰌啉 N-氧化物 NMR：核磁共振 Pd/C：碳鈀(0) Pd 2(dba) 3：三(二亞苄基丙酮)二鈀(0) Pd(dppf)Cl 2：[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II) PTSA：對甲苯磺酸 T3P ®：丙基膦酸酐溶液 TBAF：四丁基氟化銨 TEA：三乙胺 TEMPO：(2,2,6,6-四甲基哌啶-1-基)氧基 TFA：三氟乙酸 THF：四氫呋喃 TLC：薄層層析法 TsOH：甲苯磺酸 XPhos：2-二環己基膦基-2′,4′,6′-三異丙基聯苯基
中間體
中間體 501. 1-(5- 溴 -1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲酸甲酯
Figure 02_image104
將EDCI（3.00 g，15.71 mmol），HOBt（2.10 g，15.71 mmol），和哌啶-4-甲酸甲酯（2.20 g，15.71 mmol）添加到5-溴-1 H-吡唑-3-甲酸（2.00 g，10.47 mmol）和DIPEA（7.28 mL，41.89 mmol）在DMF（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。然後將混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌，並將有機層在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，1/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（2.60 g）。LCMS (ESI): 316.0 [M+H] +。
中間體 502. N-(4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
步驟 -1. 4-[(4- 甲基環己基 ) 胺基甲醯基 ] 哌啶 -1- 甲酸苄酯
Figure 02_image106
將HATU（866.5 mg，2.28 mmol）和4-甲基環己烷-1-胺（258.0 mg，2.28 mmol）添加到1-[(苄基氧基)羰基]哌啶-4-甲酸（500.0 mg，1.90 mmol）和DIPEA（736.3 mg，5.70 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌，並將有機物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，30/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物的非鏡像異構物混合物（300.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 359.2。
步驟 -2. N -(4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺（中間體 502 ）
Figure 02_image108
將Pd/C（90.0 mg）添加到4-[(4-甲基環己基)胺基甲醯基]哌啶-1-甲酸苄酯（步驟-1，300.0 mg，0.84 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在H 2氣氛下攪拌2 h，濾出固體，然後將所得混合物在減壓下濃縮，以得到標題化合物（154.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): [M+H] +: 225.2。
中間體 503. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸
步驟 -1. 1-(5- 溴 -1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image110
將HATU（14.33 g，37.70 mmol）和哌啶-4-甲酸三級丁酯（8.73 g，47.12 mmol）添加到5-溴-1 H-吡唑-3-甲酸（6.00 g，31.42 mmol）和DIPEA（12.18 g，94.24 mmol）在DMF（100.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。然後將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（8.00 g）。LCMS (ESI): 358.1 [M+H] +。
步驟 -2. 1-[5- 溴 -1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image112
將DHP（3.76 g，44.70 mmol）和TsOH（769.1 mg，4.47 mmol）添加到1-(5-溴-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲酸三級丁酯（步驟-1，8.00 g，22.33 mmol）在THF（100.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。用飽和NaHCO 3溶液將溶液的pH值調節至pH 8。將溶液用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠層析法（EtOAc/石油醚，1/4 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（9.00 g）。LCMS (ESI): [M+H] +: 442.1。
步驟 -3. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image114
在25ºC下將Pd(dppf)Cl 2（1.65 g，2.26 mmol）和K 2CO 3（9.37 g，67.8 mmol）添加到1-[5-溴-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸三級丁酯（步驟-2，10.00 g，22.61 mmol）和5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基硼酸（6.35 g，33.91 mmol）在1,4-二㗁𠮿（60.00 mL）和水（12.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得溶液在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌2 h。然後將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠層析法（EtOAc/石油醚，1/2 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（6.00 g）。LCMS (ESI): [M+H] +: 505.2。
步驟 -4. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸（中間體 503 ）
Figure 02_image116
將TFA（20.00 mL）添加到1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸三級丁酯（步驟-3，6.00 g，11.88 mmol）在DCM（20.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物濃縮，並將所得殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：IntelFlash-1 C18柱；流動相：MeCN/水，1/1 v/v），以獲得呈固體的標題化合物（2.73 g）。LCMS (ESI): 365.1 [M+H] +。
中間體 504. 1-[5- 溴 -1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸酯
Figure 02_image118
在25ºC下將DHP（1.40 g，16.45 mmol）和TFA（0.63 mL，8.22 mmol）添加到1-(5-溴-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲酸甲酯（中間體501，2.60 g，8.22 mmol）在THF（10.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在60ºC下攪拌14 h。然後將溶液在減壓下濃縮，並藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，1/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（1.10 g）。LCMS (ESI): 400.1 [M+H] +。
中間體 505. 1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-( 四氫 -2 H- 哌喃 -2- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲酸
步驟 -1. 1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-( 四氫 -2 H- 哌喃 -2- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲酸甲酯
Figure 02_image120
將5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基硼酸（514.0 mg，3.00 mmol），Pd(dppf)Cl 2（361.0 mg，0.51 mmol）和K 3PO 4（1594.0 mg，7.52 mmol）添加到1-[5-溴-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸甲酯（1.00 g，2.51 mmol）在1,4-二㗁𠮿（10.00 mL）和H 2O（2.50 mL）中的溶液中。將所得溶液在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌2 h。將所得混合物在真空下濃縮，並將所得殘餘物藉由矽膠柱（DCM/甲醇，10/1 v/v）純化，以得到1.06 g呈油狀物的標題化合物。LCMS (ESI): [M+H] +: 447.2。
步驟 -2. 1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-( 四氫 -2 H- 哌喃 -2- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲酸（中間體 505 ）
Figure 02_image122
將LiOH（342.0 mg，14.26 mmol）添加到1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸甲酯（步驟-1，1.06 g，2.38 mmol）在THF（4.00 mL）/MeOH（4.00 mL）/H 2O（4.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌1 h。將所得溶液在真空下濃縮並將所得殘餘物用二氯甲烷稀釋。用AcOH將溶液的pH值調節至pH 6。將所得混合物在真空下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（940.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 433.2。
中間體 506. 5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸和
中間體 507. 5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸
步驟 -1. 5- 溴 -1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image124
在0ºC下將SEM-Cl（2.85 mL，16.10 mmol）逐滴添加到5-溴-1 H-吡唑-3-甲酸甲酯（3.00 g，14.63 mmol）和K 2CO 3（2.23 g，16.10 mmol）在DMF（40.00 mL）中的攪拌溶液中。然後將反應混合物在25ºC下攪拌2 h。將溶液用EtOAc和水稀釋，然後用EtOAc萃取。將有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/己烷，0/100至10/90 v/v）純化，以獲呈油狀物的標題化合物（3.49 g）。LCMS (ESI): 337.0 [M+H] +。
步驟 -2. 5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image126
將Pd(dppf)Cl 2（0.44 g，0.60 mmol）和K 2CO 3（1.24 g，8.95 mmol）添加到5-溴-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-甲酸甲酯（步驟-1，1.0 g，2.98 mmol）和(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)硼酸（0.61 g，3.58 mmol）在水（2.00 mL）和1,4-二㗁𠮿（8.00 mL）中的攪拌溶液中。將反應混合物在100ºC下在氮氣氣氛下攪拌15 h。然後將反應混合物冷卻至25ºC並用EtOAc和水稀釋。將有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/己烷，5/95至25/75 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（765.0 mg）。LCMS (ESI): 382.2 [M+H] +。
步驟 -3a. 5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸（中間體 506 ）
Figure 02_image128
將1 M氫氧化鋰水溶液（2.21 mL，2.21 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-甲酸甲酯（步驟-2，281.0 mg，0.74 mmol）在水（2.00 mL）和THF（8.00 mL）中的攪拌溶液中。將反應混合物在25ºC下攪拌7 h。然後藉由添加HCl水溶液（1 M）將混合物的pH調節至1。將溶液濃縮，並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/己烷，30/70至50/50 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（264.0 mg）。LCMS (ESI): 369.4 [M+H] +。
步驟 -3b. 5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image130
將TFA（10.00 mL）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-甲酸甲酯（步驟-2，10.00 g，26.21 mmol）在DCM（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌4 h，然後將溶液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，12/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（7.00 g）。LCMS (ESI): 252.1 [M+H] +。
步驟 -4. 5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸（中間體 507 ）
Figure 02_image132
將LiOH .H 2O（1.67 g，39.80 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸甲酯（步驟-3b，5.00 g，19.90 mmol）在THF（8.00 mL），MeOH（8.00 mL）和H 2O（8.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在60ºC下攪拌14 h，然後將溶液在減壓下濃縮。藉由添加HCl水溶液（1 M）將溶液的pH調節至3。藉由過濾收集沈澱的固體並用水洗滌，然後在壓力下乾燥以獲得呈固體的標題化合物（4.50g）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.37 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 3.87 (s, 3H)。LCMS (ESI): 238.0 [M+H] +。
中間體 506 的替代合成方法。 5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸 步驟 -1. 5- 溴 -1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 甲酸甲酯和 3- 溴 -1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -5- 甲酸甲酯
Figure 02_image134
兩批平行進行。在0ºC下將二氯甲烷（2.50 L）添加到配備有頂置式攪拌器、加料漏斗和溫度計、N 2氣球的5.00 L夾套燒瓶中。3. 在0ºC下將5-溴-1H-吡唑-3-甲酸甲酯（500.00 g，2.44 mol）添加到燒瓶中。在0ºC下將DIPEA（630.00 g，4.88 mol）和SEM-Cl （610.00 kg，3.66 mol）添加到燒瓶中。將所得混合物用N 2吹掃3次並在N 2下在0至20ºC下攪拌12 h。將兩批合併，並將反應混合物倒入H 2O（8.00 L）中，用二氯甲烷萃取（4.00 L x 2）。將合併的有機層用鹽水（5.00 L）洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並將濾液在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/乙酸乙酯（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.03 kg）。 1 H NMR(400 MHz, CDCl 3) δ6.92 (s, 1H), 5.83 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.64 (t, 2H), 0.91 - 0.95 (m, 2H), 2.70 - 1.75 (t, 1H), 1.73 - 1.74 (m, 4H), 1.48 - 1.55 (m, 6H), 1.43 (s, 9H), 1.18 - 1.19 (m, 1H), 0.00 (s, 9H)。LCMS：279 [M+H] +。 步驟 -2. 5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image136
兩批平行進行。在25ºC下將甲醇（2.50 L）添加到配備有頂置式攪拌器、加料漏斗和溫度計、N 2氣球的5.00 L夾套燒瓶中。在25ºC下將5-溴-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-甲酸甲酯和3-溴-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-5-甲酸甲酯（步驟-1，517.00 g，1.54 mol）添加到燒瓶中。在0ºC下將DIPEA（399.00 g，3.08 mol）添加到燒瓶中，並且在25ºC下將(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)硼酸（277.00 g，1.62 mol）添加到燒瓶中。在25ºC下將P(tBu) 3PdG 2（39.50 g，77.10 mmol）添加到燒瓶中並將所得混合物用N 2吹掃3次。將反應混合物在65ºC下在N 2下攪拌2 h。將兩批合併，並將反應混合物倒入H 2O（3.00 L）中，用乙酸乙酯萃取（3.00 L x 2）。將合併的有機層用鹽水（4.00 L）洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並將濾液在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/乙酸乙酯（30/1至5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.15 kg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ8.09 (d, 1H), 7.40 (t, 2H), 5.92 (s, 2H), 3.95 (d, 6H), 3.66 (t, 2H), 0.92 (t, 2H), 0.03 (s, 9H)。LCMS：382.4 [M+H] +。 步驟 -3. 5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸（中間體 506 ）
Figure 02_image138
兩批平行進行。在25ºC下將THF（1.80 L）和H 2O（1.80 L）添加到配備有頂置式攪拌器、加料漏斗和溫度計、N 2氣球等的5.00 L夾套燒瓶中。在25ºC下將5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯（步驟-2，576.00 g，1.51 mol）和LiOH.H 2O（127.00 g，3.02 mol）添加到燒瓶中。將反應混合物在25ºC下在N 2下攪拌2 h。將兩批合併，並將反應混合物調節至pH=4，用乙酸乙酯（500 mL x 2）萃取。將合併的有機層用鹽水（500 mL）洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並將濾液在真空中濃縮。在25ºC下將殘餘物用石油醚/乙酸乙酯（10/1 v/v，100 mL）研磨0.5 h並濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（1.01 kg）。 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ8.07 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.23 (d, 1H), 6.00 (s, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.67 (t, 2H), 0.88 (t, 2H), 0.04 (s, 9H)。LCMS：368.1 [M+H] +。
中間體 508. (1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸
步驟 -1. (1 R,3 S,5 S)-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3,8- 二甲酸 3- 苄基 8- 三級丁酯
Figure 02_image140
將(1 R,3 S,5 S)-8-(三級丁氧基羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（1.00 g，3.92 mmol），苯甲醇（0.47 g，4.00 mmol），PPh 3（1.54 g，6.00 mmol）在THF（30.00 mL）中的混合物冷卻至0ºC。在0ºC下在氮氣氣氛下將DIAD（1.19 g，6.00 mmol）逐滴添加到該混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h，然後將混合物在減壓下濃縮。將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，3/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（1.30 g）。LCMS (ESI): 346.2 [M+H] +
步驟 -2. (1 R,3 S,5 S)-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸苄酯
Figure 02_image142
在0ºC下將TFA（15.00 mL）添加到(1 R,3 S,5 S)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3,8-二甲酸 3-苄基 8-三級丁酯（步驟-1，6.00 g，17.37 mmol）在DCM（15.00 mL）中的混合物中，並在0ºC下攪拌30 min。將所得混合物在減壓下濃縮。所得殘餘物無需進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): [M+H] +: 246.1。
步驟 -3. (1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸苄酯
Figure 02_image144
將5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體507，4.25 g，17.92 mmol），HOBt（3.30 g，24.46 mmol）和EDCI（4.69 g，24.46 mmol）在DMF（50.00 mL）中的溶液在25ºC下攪拌30 min。將(1 R,3 S,5 S)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸苄酯（步驟-3，4.00 g，16.31 mmol）和DIPEA（10.54 g，81.53 mmol）添加到上述混合物中並在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌，然後將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，19/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（3.25 g）。LCMS (ESI): [M+H] +: 465.2。
步驟 -4. (1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸（中間體 508 ）
Figure 02_image146
將LiOH .H 2O（0.59 g，14.06 mmol）添加到(1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸苄酯（步驟3，3.25 g，7.00 mmol）在H 2O（10.00 mL）、THF（10.00 mL）、和MeOH（10.00 mL）中的溶液中並在25ºC下攪拌30 min。將所得混合物在減壓下濃縮以盡可能多地除去THF和MeOH。用HCl的水溶液（1 M）將混合物酸化至pH 3。藉由過濾收集沈澱物，用水洗滌，然後在減壓下乾燥，得到呈固體的標題化合物（2.10 g）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 12.25 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.14 (s, 1H), 5.32 - 5.09 (m, 1H), 4.79 - 4.54 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.02 - 2.80 (m, 1H), 2.13 - 1.65 (m, 8H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 375.1。
中間體 509. 1-[5- 溴 -1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸
Figure 02_image148
將LiOH.H 2O（0.69 g，16.49 mmol）添加到1-[5-溴-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸甲酯（中間體504，1.10 g，2.75 mmol）在THF（2.00 mL）/H 2O（2.00 mL）/MeOH（2.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。用HCl（1 M）將所得混合物的pH值調節至pH 4。將所得溶液用EtOAc萃取，將有機層合併，並在真空下濃縮，得到630.0 mg呈油狀物的標題化合物。LCMS (ESI): [M+H] +: 386.1。 中間體 510. 5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸
Figure 02_image150
使用與對於中間體507的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基硼酸作為步驟-2的起始材料，隨後是步驟-3b和步驟-4中的條件。藉由過濾收集沈澱的固體，以獲得呈白色固體的標題化合物。LCMS (ESI): 254.0 [M+H] +。
中間體 511. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸
步驟 -1. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸乙酯
Figure 02_image152
將5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸（1.0 g，4.22 mmol），EDCI（1.21 g，6.32 mmol）和HOBt（854.53 mg，6.32 mmol）在DMF（5.00 mL）中的溶液在25ºC下攪拌30 min。將DIPEA（1.63 g，12.65 mmol），哌啶-4-甲酸乙酯（729.1 mg，4.64 mmol）添加到混合物中並在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌，然後將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，1/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（700.0 mg）。LCMS (ESI): 377.2 [M+H] +。
步驟 -2. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸（中間體 511 ）
Figure 02_image154
將LiOH（147.3 mg，3.50 mmol）添加到1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸乙酯（步驟-1，660.0 mg，1.75 mmol）在THF（3.00 mL），MeOH（3.00 mL）和H 2O（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min。用HCl的水溶液（1 N）將混合物酸化至pH 3。將水層用EtOAc萃取並將所得混合物在減壓下濃縮，以得到標題化合物（550.0 mg），將其不經進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 349.1 [M+H] +。
中間體 512. (1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸
步驟 -1. (1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image156
將HATU（8.10 g，21.29 mmol）和DIPEA（6.88 g，53.23 mmol）添加到(1 R,3 S,5 S)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸甲酯（中間體513，3.60 g，21.29 mmol）和5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體510，4.00 g，17.72 mmol）在DMF（15.00 mL）中的溶液中。然後將溶液在25ºC下攪拌14 h。然後將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/1 v/v）純化，以得到呈固體的標題化合物（6.20 g）。LCMS (ESI): 405.1 [M+H] +。
步驟 -2. (1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸（中間體 512 ）
Figure 02_image158
將LiOH.H 2O（1.54 g，64.46 mmol），MeOH（5.00 mL）和H 2O（5.00 mL）依次添加到(1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸苄酯（步驟-1，6.20 g，12.89 mmol）在THF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在60ºC下攪拌1 h。然後將溶液在減壓下濃縮以盡可能多地除去MeOH，然後用HCl水溶液（1 N）酸化至pH 6。藉由過濾收集沈澱物，用水洗滌，然後在烘箱中在減壓下乾燥，以得到呈固體的標題化合物（5.00 g）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.06 - 13.93 (m, 1H), 12.22 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.31 - 7.23 (m, 2H), 5.25 -5.17 (m, 1H), 4.70 - 4.50 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 2.95 - 2.86 (m, 1H), 2.01 - 1.80 (m, 8H)。LCMS (ESI): 391.1 [M+H] +。
中間體 513. (1 R,3 s,5 S)-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸甲酯
步驟 -1. 8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3,8- 二甲酸 8- 三級丁基 3- 甲酯
Figure 02_image160
將甲基碘（3.34 g，23.50 mmol）和K 2CO 3（4.06 g，29.38 mmol）添加到8-(三級丁氧基羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（5.00 g，19.58 mmol）在DMF（15.00 mL）中的溶液中。然後將溶液在25ºC下攪拌14 h。然後將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/1 v/v）純化，以得到呈固體的標題化合物（5.00 g）。LCMS (ESI): 270.2 [M+H] +。
步驟 -2. (1 R,3 s,5 S)-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸甲酯 （中間體 513 ）
Figure 02_image162
將TFA（3.00 mL）添加到8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3,8-二甲酸 8-三級丁基 3-甲酯（步驟-1，5.00 g，18.56 mmol）在DCM（20.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌2 h。然後將溶液在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，9 : 1 v/v）純化，以得到呈固體的標題化合物（4.50 g）純化，其無需進一步純化而使用。LCMS (ESI): 170.1 [M+H] +。
中間體 514. 1-(3- 氟 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲胺
步驟 -1. 3- 氟 -1 H- 吲唑 -5- 甲酸甲酯
Figure 02_image164
將1 H-吲唑-5-甲酸酯（1.00 g，5.68 mmol）添加到Selectfluor®（3.02 g，8.52 mmol）在MeCN（25.00 mL）和AcOH（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在70ºC下攪拌14 h，然後用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠層析法（EtOAc/石油醚，1/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（480.0 mg）。LCMS (ESI): 195.1 [M+H] +。
步驟 -2. (3- 氟 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲醇
Figure 02_image166
在0ºC下將LiAlH 4（7.00 mL，在THF中1 M，6.95 mmol）添加到3-氟-1 H-吲唑-5-甲酸甲酯（步驟-1，900.0 mg，4.60 mmol）在THF（15.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌1 h，然後用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠層析法（EtOAc/石油醚，1/2 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（300.0 mg）。LCMS (ESI): 167.1 [M+H] +。
步驟 -3. 2-[(3- 氟 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 ] 異吲哚 -1,3- 二酮
Figure 02_image168
將PPh 3（710.4 mg，2.70 mmol）和DIAD（547.6 mg，2.70 mmol）添加到(3-氟-1 H-吲唑-5-基)甲醇（步驟-2，300.0 mg，1.80 mmol）和鄰苯二甲醯亞胺（398.5 mg，2.70 mmol）在THF（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌2 h，然後用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠層析法（EtOAc/石油醚，1/2 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（180.0 mg）。LCMS (ESI): 296.1 [M+H] +。
步驟 -4. 1-(3- 氟 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲胺（中間體 514 ）
Figure 02_image170
將NH 2NH 2·H 2O（0.50 mL）添加到2-[(3-氟-1 H-吲唑-5-基)甲基]異吲哚-1,3-二酮（步驟-3，180.0 mg，0.60 mmol）在EtOH（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在60ºC下攪拌30 min，然後將溶液濃縮以獲得呈固體的標題化合物（90.0 mg），將其不經進一步純化而用於下一步驟。LCMS (ESI): 166.1 [M+H] +。
中間體 515. 1-(3- 甲基 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲胺
步驟 -1. 3- 甲基 -1 H- 吲唑 -5- 甲腈
Figure 02_image172
將Pd(PPh 3) 4（1.09 g，0.95 mmol）和Zn(CN) 2（662.0 mg，5.64 mmol）添加到5-溴-3-甲基-1 H-吲唑（1.00 g，4.74 mmol）在DMF（15.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在100ºC下在氮氣下攪拌1 h。然後濾出固體，並將溶液用水稀釋，用二氯甲烷萃取，並將有機層在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（EtOAc/石油醚，1/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（700.0 mg）。LCMS (ESI): 158.1 [M+H] +。
步驟 -2. 1-(3- 甲基 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲胺（中間體 515 ）
Figure 02_image174
將LiAlH 4（762.0 mg，20.10 mmol）添加到3-甲基-1 H-吲唑-5-甲腈（步驟-1，700.0 mg，4.50 mmol）在THF（14.00 mL）中的溶液中。將溶液在0ºC下攪拌30 min，然後在70ºC下攪拌2 h。將溶液濃縮，然後重新溶解在MeOH中。將溶液在真空下濃縮，並將殘餘物使用矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（175.0 mg）。LCMS (ESI): 162.1 [M+H] +。
中間體 516. 4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 胺 a. 步驟 -1. 三甲基 ([[8-( 三氟甲基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 ] 氧基 ]) 矽烷
Figure 02_image176
在25ºC下將三氟甲基三甲基矽烷（6.83 g，48.02 mmol）和Cs 2CO 3（31.29 g，96.04 mmol）添加到1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-酮（5.00 g，32.01 mmol）在1,2-二甲氧基乙烷（100.00 mL）中的溶液中。將溶液攪拌14 h並且然後用水稀釋並且用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發，以獲得呈固體的標題化合物（6.00 g）。
步驟 -2. 8-( 三氟甲基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 醇
Figure 02_image178
將在THF中的TBAF（20.00 mL，1 M，20.00 mmol）添加到三甲基([[8-(三氟甲基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基]氧基])矽烷（步驟-1，6.00 g，20.11 mmol）在THF（50 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h並且然後用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠層析法（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（4.00 g）。
步驟 -3. 8- 甲氧基 -8-( 三氟甲基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷
Figure 02_image180
在0ºC下將NaH（424.4 mg，17.68 mmol，在礦物油中的60%分散體）添加到8-(三氟甲基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-醇（步驟-2，2.00 g，8.84 mmol）在THF（10 mL）中的溶液中。將溶液在0ºC下攪拌30 min，然後添加甲基碘（0.72 mL，11.49 mmol）。將溶液在25ºC下攪拌14 h並且然後用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠層析法（EtOAc/石油醚，1/2 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物。
步驟 -4. 4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 酮
Figure 02_image182
將P-TsOH（186.4 mg，1.08 mmol）添加到8-甲氧基-8-(三氟甲基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷（步驟-3，1.30 g，5.41 mmol）在丙酮（5.00 mL）和H 2O（1.00 mL）中的溶液中。將溶液在70ºC下攪拌14 h並且然後用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠層析法（EtOAc/石油醚，1/2 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（800.0 mg）。
步驟 -5. 4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 胺（中間體 516 ）
Figure 02_image184
將NH 4OAc（943.1 mg，12.20 mmol）添加到4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己烷-1-酮（步驟-4，400.0 mg，2.03 mmol）在EtOH（10.00 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌30 min，然後添加NaBH 3CN（512.6 mg，8.16 mmol）並將溶液在25ºC下攪拌28 h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，6/1 v/v）純化，以獲得標題化合物（500.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI) 198.2 [M+H] +。
中間體 517. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸
步驟 -1. 1-(1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲酸甲酯
Figure 02_image186
將1 H-吡唑-3-甲酸（5.00 g，44.61 mmol）、EDCI（10.26 g，53.53 mmol）、和HOBt（7.23 g，53.53 mmol）溶解在DMF（30 mL）中，然後將反應在25ºC下攪拌20 min。哌啶-4-甲酸甲酯（6.39 g，44.63 mmol）和DIPEA（17.30 g，133.82 mmol）。然後將溶液在25ºC下攪拌3 h。然後將混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/ MeOH，13/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（8.9 g）。LCMS (ESI): 238.1 [M+H] +。
步驟 -2. 1-(1-( 四氫 -2 H- 哌喃 -2- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲酸甲酯
Figure 02_image188
將DHP（1.69 g，20.09 mmol）和TFA（0.77 mL，10.03 mmol）添加到1-(1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲酸甲酯（步驟-1，2.38 g，10.03 mmol）在THF（10 mL）中的溶液中。將所得混合物在60ºC下攪拌4 h，在減壓下濃縮，並且然後將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，19/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（3.14 g）。LCMS (ESI): 322.1 [M+H] +。
步驟 -3. (3-(4-( 甲氧基羰基 ) 哌啶 -1- 羰基 )-1-( 四氫 -2 H- 哌喃 -2- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 基 ) 硼酸
Figure 02_image190
將Dtbpy（194.3 mg，0.72 mmol），[Ir(COD)OMe]2（319.9 mg，0.48 mmol），和B 2Pin2（1348.4 mg，5.31 mmol）添加到1-(1-(四氫-2 H-哌喃-2-基)-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲酸甲酯（步驟-3，517.0 mg，1.61 mmol）在MTBE（4.00 mL）和THF（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將溶液在70ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h，然後用MeOH淬滅。將溶液在減壓下濃縮，然後將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（550.0 mg）。LCMS (ESI): 366.2 [M+H] +。
步驟 -4. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1-( 四氫 -2 H- 哌喃 -2- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲酸甲酯
Figure 02_image192
將4-溴-5-氯-2-甲基吡啶（84.0 mg，0.41 mmol），K 3PO 4（116.0 mg，0.55 mmol），和Pd(dppf)Cl 2（39.0 mg，0.05 mmol）添加到(3-(4-(甲氧基羰基)哌啶-1-羰基)-1-(四氫-2 H-哌喃-2-基)-1 H-吡唑-5-基)硼酸（步驟-3，100.0 mg，0.27 mmol）在1,4-二㗁𠮿（2.00 mL）和H 2O（0.20 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在70ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h，然後在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（104.0 mg）。LCMS (ESI): 447.2 [M+H] +。 步驟 -5. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸甲酯
Figure 02_image194
將TFA（2.00 mL）添加到1-(5-(5-氯-2-甲基吡啶-4-基)-1-(四氫-2 H-哌喃-2-基)-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲酸甲酯（步驟-4，104.0 mg，0.23 mmol）在DCM（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌2 h，然後在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（86.0 mg）。LCMS (ESI): 363.1 [M+H] +。 步驟 -6. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸（中間體 517 ）
Figure 02_image196
將LiOH .H 2O（30.0 mg，0.72 mmol）添加到1-[5-(5-氯-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸甲酯（步驟-5，86.0 mg，0.24 mmol）在THF（1.00 mL），MeOH（1.00 mL），和H 2O（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後用HCl（1 M）將pH值調節至5。將溶液用乙酸乙酯萃取並將有機層在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（60.0 mg）。LCMS (ESI): 349.1 [M+H] +。
中間體 518. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸
Figure 02_image198
使用與對於中間體517的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用哌啶-4-甲酸乙酯作為步驟-1中的起始材料，和使用4-溴-5-氟-2-甲基吡啶作為步驟-4中的起始材料。分離出呈固體的標題化合物（115.0 mg）。LCMS (ESI): 333.1 [M+H] +。
中間體 519. (1 R,3 s, 5S) -N-(3- 氯苄基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
步驟 -1. (1 R,3 s,5 S)-3-[[(3- 氯苯基 ) 甲基 ] 胺基甲醯基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -8- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image200
將HATU（178.7 mg，0.50 mmol），1-(3-氯苯基)甲胺（66.6 mg，0.50 mmol），和DIPEA（151.9 mg，1.20 mmol）添加到(1 R,3 s,5 S)-8-(三級丁氧基羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（100.0 mg，0.40 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌2 h，然後用EtOAc稀釋，用水洗滌，並將有機層濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚 /EtOAc，5/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（80.0 mg）。LCMS (ESI): 379.9 [M+H] +。
步驟 -2. (1 R,3 s, 5S) -N-(3- 氯苄基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺（中間體 519 ）
Figure 02_image202
在0ºC下將TFA（2.00 mL）添加到(1 R,3 s,5 S)-3-[[(3-氯苯基)甲基]胺基甲醯基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸三級丁酯（步驟-1，80.0 mg，0.20 mmol）在DCM（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌2 h，然後在減壓下濃縮以獲得標題化合物（90.0 mg），將其不經進一步純化而用於下一步驟。LCMS (ESI): 279.3 [M+H] +。
中間體 520. 5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸
步驟 -1. 1-( 四氫 -2 H- 哌喃 -2- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image204
將DHP（2.67 g，31.72 mmol）和TsOH（0.68 g，3.97 mmol）添加到1 H-吡唑-3-甲酸甲酯（2.00 g，15.86 mmol）在THF（6.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，1/3 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（2.30 g）。LCMS (ESI): 211.2 [M+H] +。
步驟 -2. (3-( 甲氧基羰基 )-1-( 四氫 -2 H- 哌喃 -2- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 基 ) 硼酸
Figure 02_image206
將Dtbpy（255.3 mg，0.95 mmol），[Ir(Cod)OMe]2（630.6 mg，0.95 mmol）和B 2Pin 2（1811.8 mg，7.14 mmol）添加到1-(四氫-2 H-哌喃-2-基)-1 H-吡唑-3-甲酸甲酯（步驟-1，1.00 g，4.76 mmol）在MTBE（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在50ºC下攪拌3 h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，1/3 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.20 g）。LCMS (ESI): 255.0 [M+H] +。
步驟 -3. 5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1-( 四氫 -2 H- 哌喃 -2- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image208
將4-溴-5-氟-2-甲基吡啶（1.34 g，7.09 mmol），Pd(dppf)Cl 2（0.69 g，0.95 mmol）和K 2CO 3（1.30 g，9.45 mmol）添加到(3-(甲氧基羰基)-1-(四氫-2 H-哌喃-2-基)-1 H-吡唑-5-基)硼酸（步驟-2，1.20 g，4.72 mmol）在1,4-二㗁𠮿（8.00 mL）和H 2O（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在80ºC下攪拌14 h，然後將溶液過濾，用水稀釋，並用EA萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，1/3 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（255.0 mg）。LCMS (ESI): 320.3 [M+H] +。 步驟 -4. 5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image210
將TFA（3.00 mL）添加到5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1-(四氫-2 H-哌喃-2-基)-1 H-吡唑-3-甲酸甲酯（步驟-3，300.0 mg，0.80 mmol）在DCM（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌1 h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，1/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（170.0 mg）。LCMS (ESI): 236.2 [M+H] +。
步驟 -5. 5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸（中間體 520 ）
Figure 02_image212
將LiOH（86.6 mg，3.60 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸甲酯（170.0 mg，0.70 mmol）在THF（2.00 mL），MeOH（2.00 mL），和H 2O（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌1 h，然後用HCl（6 M）酸化至pH 7。將沈澱的固體過濾，用水洗滌，並且然後乾燥以獲得呈固體的標題化合物（0.80 g）。LCMS (ESI): 222.1 [M+H] +。
中間體 521. 1-[5-(5- 氯 -2- 乙基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸
Figure 02_image214
使用與對於中間體517的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用哌啶-4-甲酸乙酯作為步驟-1中的起始材料，和使用4-溴-5-氯-2-乙基吡啶作為步驟-4中的起始材料。分離出呈固體的標題化合物（4.0 mg）。LCMS (ESI): 363.1[M+H] +。
中間體 522. 1-(2,3- 二甲基 -1 H- 吲哚 -5- 基 ) 甲胺
Figure 02_image216
使用與對於中間體515的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5-溴-2,3-二甲基-1 H-吲哚作為步驟-1中的起始材料，以獲得呈固體的標題化合物（90.0 mg）。LCMS (ESI): 175.2 [M+H] +。
中間體 523. 1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 胺
步驟 -1. 4-[ 雙 [(4- 甲氧基苯基 ) 甲基 ] 胺基 ] 環己烷 -1- 酮
Figure 02_image218
在25ºC下將PMBCl（8.30 g，53.00 mmol）和K 2CO 3（12.21 g，88.37 mmol）添加到4-胺基環己烷-1-酮（2.00 g，17.67 mmol）在DMF（15.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在60ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，2/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（2.00 g）。LCMS (ESI): 354.2 [M+H] +
步驟 -2. N , N- 雙 [(4- 甲氧基苯基 ) 甲基 ]-1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 胺
Figure 02_image220
將 t-BuOK（6.00 g，53.45 mmol）和碘化三甲氧化鋶（11.81 g，53.19 mmol）添加到 t-BuOH（25.00 mL）中。將所得溶液在50ºC下攪拌30 min，然後添加4-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]環己烷-1-酮（步驟-1，4.70 g，13.30 mmol）。將所得混合物在50ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，2/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物的非鏡像異構物混合物（600.0 mg）。LCMS (ESI): 382.2 [M+H] +
步驟 -3. 1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 胺（中間體 523 ）
Figure 02_image222
將Pd/C（299.6 mg，10% Pd）添加到 N, N-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]-1-氧雜螺[3.5]壬-7-胺（600.0 mg，1.57 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下在H2下攪拌2天。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以得到標題化合物（200.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 142.1 [M+H] +
中間體 524. (1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸 步驟 -1. (1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸苄酯
Figure 02_image224
將EDCI（923.0 mg，4.80 mmol）和HOBt（650.6 mg，4.80 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體520，710.0 mg，3.20 mmol）在DMF（20.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌30 min，然後添加(1 R,3 R,5 S)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸苄酯（1023.7 mg，4.20 mmol）和DIPEA（1.68 mL，9.6 mmol）。將溶液在25ºC下攪拌2 h，然後用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，並在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，1/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（750.0 mg）。LCMS (ESI): 449.2 [M+H] +。 步驟 -2. (1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸（中間體 524 ）
Figure 02_image226
將LiOH.H 2O（140.4 mg，3.30 mmol）添加到(1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸苄酯（步驟-1，750.0 mg，1.70 mmol）在MeOH（2.00 mL），H 2O（2.00 mL），THF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後在減壓下濃縮，以盡可能多地除去MeOH和THF。用HCl（1 M）將殘餘物酸化至pH 4，然後藉由過濾收集沈澱的固體並用水洗滌，以獲得呈白色固體的標題化合物（530.0 mg）。LCMS (ESI): 359.1 [M+H] +。
中間體 525. 中間體 525-A 和中間體 525-B 的鏡像異構物混合物
中間體 525-A. ( S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯
中間體 525-B. ( R)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯
Figure 02_image228
將EDCI（591.5 mg，3.10 mmol）和HOBt（416.9 mg，3.10 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體520，455.0 mg，2.10 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌30 min，然後添加4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯鹽酸鹽（550.0 mg，2.70 mmol，CAS#：2253630-26-9，烯胺有限公司）和DIPEA（1.07 mL，6.20 mmol）。將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層在真空下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得( S)-4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯和( R)-4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯的混合物（500.0 mg），其為鏡像異構物的混合物（中間體525）。LCMS (ESI): 373.2 [M+H] +。
標題化合物的兩種鏡像異構物藉由手性製備型HPLC分離。
柱：CHIRALPAK IG
柱尺寸：2 x 25 cm，5 μm
梯度：Hex：DCM=3 : 1（10 mM NH 3·MEOH）/IPA，80/20 v/v
流速：
檢測（nm）：220/254 nm
中間體 525-A.獲得呈固體的第一洗脫化合物（220.0 mg）。
第一洗脫化合物的保留時間為8.41 min。
LCMS (ESI): 373.2 [M+H] +。
中間體 525-B.獲得呈固體的第二洗脫化合物（220.0 mg）。
第二洗脫化合物的保留時間為13.45 min。
LCMS (ESI): 373.2 [M+H] +。
中間體 526. 中間體 526-A 和中間體 526-B 的鏡像異構物混合物
中間體 526-A. ( S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸
中間體 526-B. ( R)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸
Figure 02_image230
將LiOH.H 2O（68.0 mg，1.62 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯和( R)-4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯的鏡像異構物混合物（中間體525，300.0 mg）在THF（6.00 mL），MeOH（6.00 mL），H 2O（6.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌2 h，然後在減壓下濃縮，以盡可能多地除去MeOH和THF，並用HCl（1 M）酸化至pH 5。藉由過濾收集沈澱的固體並用水洗滌，以獲得( S)-4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸和( R)-4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸，其為鏡像異構物的固體混合物（中間體526，230.0 mg）。LCMS (ESI): 359.1 [M+H] +。
另外，將( S)-4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（中間體525-A）轉化為呈固體的( S)-4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體526-A）。LCMS (ESI): 359.1 [M+H] +。
另外，還將( R)-4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（中間體525-B）轉化為呈固體的( R)-4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體526-B，164.0 mg）。LCMS (ESI): 359.1 [M+H] +。
中間體 527. 中間體 527-A 和中間體 527-B 的鏡像異構物混合物。
步驟 -1. 4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯
Figure 02_image232
將HOBt（341.8 mg，2.53 mmol），EDCI（484.9 mg，2.53 mmol），和4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯鹽酸鹽（433.6 mg，2.11 mmol，CAS#：2253630-26-9，Enamine公司）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體507，500.0 mg，2.11 mmol）和DIPEA（817.3 mg，6.32 mmol）在DMF（6.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌，並濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（25/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（530.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 389.2。
步驟 -2. 4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸（中間體 527 ）
Figure 02_image234
將LiOH .H 2O（108.1 mg，2.58 mmol）添加到4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（步驟-1，500.0 mg，1.29 mmol）在THF（2.00 mL），MeOH（2.00 mL），和H 2O（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將混合物在減壓下濃縮，用水稀釋，並藉由添加HCl水溶液將pH調節至5。將水層用EtOAc萃取。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物作為鏡像異構物的混合物不經進一步純化而用於下一步驟。LCMS (ESI): [M+H] +: 375.1。
中間體 527-A. ( S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸
中間體 527-B. ( R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸
Figure 02_image236
步驟 -1. 4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯
Figure 02_image238
將4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯鹽酸鹽（6.77 g，32.9 mmol，CAS#：2253630-26-9，Enamine公司），HATU（13.66 g，35.9 mmol）和DIPEA（11.61 g，89.8 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體506，11.0 g，29.9 mmol）在DMF（30.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層在減壓下濃縮以得到殘餘物，將其藉由矽膠層析法（EtOAc/石油醚，1/3 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（14 g）。LCMS (ESI): 519.2 [M+H] +
步驟 -2. 4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯
Figure 02_image240
將TFA（60.00 mL）添加到4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（步驟-1，13.00 g，25.1 mmol）在DCM（30.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將溶液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（EtOAc/石油醚，3/1 v/v）純化，以獲得呈白色固體的標題化合物（9.65 g）。LCMS (ESI): 389.2 [M+H] +
步驟 -3. ( S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯和 ( R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯
Figure 02_image242
將4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（步驟-3，5.54 g）藉由製備型SFC使用以下條件純化： 柱：CHIRALPAK IG柱 柱尺寸：30x250 mm，5 μm 流動相A：CO 2；流動相B：IPA 流速：23 mL/min 梯度：50% B 檢測：220 nm； 注射體積：4.8 mL；
( S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯。獲得呈固體的第二洗脫鏡像異構物（2.29 g）。 第二洗脫鏡像異構物的保留時間為14.29 min。 LCMS (ESI): 389.1 [M+H] +。 ( R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯。獲得呈固體的第一洗脫鏡像異構物（2.42 g）。 第一洗脫鏡像異構物的保留時間為8.25 min。 LCMS (ESI): 389.1 [M+H] +。
步驟 -4a.( S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸（中間體 527-A ）
Figure 02_image244
在0ºC下將LiOH.H 2O（0.56 g，13.4 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（來自步驟-3的第二洗脫鏡像異構物，2.6 g，6.69 mmol，1.00當量）在THF（10.00 mL），MeOH（10.00 mL），和水（10.00 mL）的混合物中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將溶液在減壓下濃縮以盡可能多地除去MeOH和THF，然後用HCl（1 M）酸化至pH 3，然後將溶液用EtOAc萃取。將有機層合併並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（2.50 g）。LCMS (ESI): 375.2 [M+H] +
步驟 -4b. ( R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸（中間體 527-B ）
Figure 02_image246
將LiOH.H 2O（497.0 mg，11.84 mmol）添加到( R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（2.30 g，5.92 mmol）在THF（5.00 mL），MeOH（5.00 mL），水（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮以除去MeOH和THF。用HCl（1 M）將混合物酸化至pH 3。將水層用EtOAc萃取。將有機層合併並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（2.20 g）。LCMS (ESI): 375.1 [M+H] +。
中間體 528-A. 1- 乙基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 胺
Figure 02_image248
步驟 -1. N-[6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image250
將Boc 2O（10.10 g，46.26 mmol）添加到6-(三氟甲基)吡啶-3-胺（5.00 g，30.84 mmol）和TEA（12.89 mL，92.53 mmol）在DCM（15.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌2 h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/2 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（7.10 g）。LCMS (ESI): 263.2 [M+H] +。
步驟 -2. N-[6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image252
將HOAc（0.92 g，15.32 mmol）和Ru/Al 2O 3（0.31 g，1.53 mmol）添加到 N-[6-(三氟甲基)吡啶-3-基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-1，4.00 g，15.25 mmol）在MeOH（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在50ºC下在氫氣（50 atm）下攪拌14 h，然後將溶液過濾，並將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（3.40 g）。LCMS (ESI): 269.3 [M+H] +。
步驟 -3. N-[1- 乙基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image254
將乙醛（246.3 mg，5.60 mmol）和AcOH（0.50 ml）添加到 N-[6-(三氟甲基)哌啶-3-基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-2，500.0 mg，1.90 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌30 min，然後添加NaBH 3CN（351.4 mg，5.60 mmol）。將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（410.0 mg）。LCMS (ESI): 297.3 [M+H] +。
步驟 -4. 1- 乙基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 胺（中間體 528-A ）
Figure 02_image256
將TFA（0.32 mL，4.15 mmol）添加到 N-[1-乙基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-3，410.0 mg，1.38 mmol）在DCM（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌1 h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（250.0 mg）。LCMS (ESI): 197.2 [M+H] +。
中間體 528-B. 1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 胺
Figure 02_image258
使用與對於中間體528-A的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用甲醛作為步驟-3中的起始材料。收集呈固體的標題化合物（290.0 mg）。LCMS (ESI): 391.1[M+H] +。
中間體 529. (1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸
Figure 02_image260
使用與對於中間體508的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體506）作為步驟-3中的起始材料。將所得固體在烘箱中在減壓下乾燥，以獲得呈固體的標題化合物（450.0 mg）。LCMS (ESI): 505.1 [M+H] +。
中間體 530. 4-( 二氟甲基 )-4- 甲氧基環己烷 -1- 胺
步驟 -1. 4-( 二苄基胺基 ) 環己烷 -1- 酮
Figure 02_image262
將苄基溴（1.50 g，8.84 mmol）和DIPEA（1.50 mL，8.84 mmol）添加到4-胺基環己烷-1-酮（0.50 g，4.42 mmol）在MeCN（8.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，5/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（600.0 mg）。LCMS (ESI): 294.2 [M+H] +。
步驟 -2. 4-( 二苄基胺基 )-1-( 二氟甲基 ) 環己烷 -1- 醇
Figure 02_image264
將HMPA（4.58 g，25.56 mmol），CsF（0.23 g，1.53 mmol），和TMSCF 2H（1.27 g，10.23 mmol）添加到4-(二苄基胺基)環己烷-1-酮（步驟-1，1.50 g，5.11 mmol）在THF（10.00 mL）中的溶液中。將溶液在70ºC下攪拌14 h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，5/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（550.0 mg）。LCMS (ESI): 346.2 [M+H] +。
步驟 -3. N , N- 二苄基 -4-( 二氟甲基 )-4- 甲氧基環己烷 -1- 胺
Figure 02_image266
在0ºC下將NaH（61.1 mg，2.50 mmol）添加到4-(二苄基胺基)-1-(二氟甲基)環己烷-1-醇（步驟-2，440.0 mg，1.30 mmol,）在THF（5.00 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌1 h，然後添加MeI（0.40 mL，6.40 mmol）。將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後將反應用MeOH淬滅。將溶液在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，1/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（350.0 mg）。LCMS (ESI): 360.2 [M+H] +。
步驟 -4. 4-( 二氟甲基 )-4- 甲氧基環己烷 -1- 胺（中間體 530 ）
Figure 02_image268
將Pd/C（104.7 mg）添加到 N, N-二苄基-4-(二氟甲基)-4-甲氧基環己烷-1-胺（步驟-3，350.0 mg，0.97 mmol）在MeOH（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌14 h，然後過濾並將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（130.0 mg）。LCMS (ESI): 180.1 [M+H] +。
中間體 531. 4-(2- 甲氧基乙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 胺
步驟 -1. 8-(2- 甲氧基乙氧基 )-8-( 三氟甲基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷
Figure 02_image270
在0ºC下將NaH（170.0 mg，7.10 mmol，在礦物油中的60%分散體）添加到8-(三氟甲基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-醇（中間體516，步驟-2，800.0 mg，3.50 mmol）在THF（10.00 mL）中的攪拌混合物中。將溶液在25ºC下攪拌1 h，然後添加2-溴乙基甲基醚（2.46 g，17.69 mmol）。將溶液在80ºC下攪拌14 h，然後藉由添加MeOH淬滅。將溶液濃縮，然後將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/3 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（300.0 mg）。LCMS (ESI): 285.1 [M+H] +。
步驟 -2. 4-(2- 甲氧基乙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 酮
Figure 02_image272
將對甲苯磺酸（36.0 mg，0.20 mmol）添加到8-(2-甲氧基乙氧基)-8-(三氟甲基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷（步驟-1，300.0 mg，1.10 mmol）在丙酮（4.00 mL）和H 2O（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在80ºC下攪拌14 h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（120.0 mg）。LCMS (ESI): 241.1 [M+H] +。
步驟 -3. N- 苄基 -4-(2- 甲氧基乙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 胺
Figure 02_image274
將苄基胺（107.0 mg，1.00 mmol）添加到4-(2-甲氧基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己烷-1-酮（步驟-2，120.0 mg，0.50 mmol）在MeOH（3.00 mL）和AcOH（0.20 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌30 min，然後添加三乙醯氧基硼氫化鈉（317.0 mg，1.50 mmol）。將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（100.0 mg）。LCMS (ESI): 332.2 [M+H] +。
步驟 -4. 4-(2- 甲氧基乙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 胺（中間體 531 ）
Figure 02_image276
將Pd/C（30.0 mg）添加到 N-苄基-4-(2-甲氧基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（步驟-3，100.0 mg，0.30 mmol）在MeOH（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌14 h，並且然後過濾。將濾液在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（55.0 mg）。LCMS (ESI): 242.1 [M+H] +。
中間體 532. 6-( 三氟甲基 ) 㗁 𠮿 -3- 胺
步驟 -1. 2-( 羥甲基 ) 丙 -2- 烯酸苄酯
Figure 02_image278
將HCHO（9.26 g，308.40 mmol）和1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷（34.57 g，308.19 mmol）添加到丙-2-烯酸苄酯（50.00 g，308.28 mmol）在1,4-二㗁𠮿（100.00 mL）和H 2O（100.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後在真空下濃縮。將殘餘物用乙酸乙酯稀釋並用水洗滌。將有機層在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/3 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（10.17 g）。
步驟 -2. 2-( 溴甲基 ) 丙 -2- 烯酸苄酯
Figure 02_image280
在0ºC下將三溴化磷（15.62 g，57.71 mmol）分批添加到2-(羥基甲基)丙-2-烯酸苄酯（步驟-1，10.10 g，52.55 mmol）在乙醚（150.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在0ºC下攪拌30 min，然後在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/10 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（9.63 g）。
步驟 -3. 2-[[(1,1,1- 三氟戊 -4- 烯 -2- 基 ) 氧基 ] 甲基 ] 丙 -2- 烯酸苄酯
Figure 02_image282
在0ºC下將NaH（661.2 mg，27.60 mmol，在礦物油中的60%分散體）添加到1,1,1-三氟戊-4-烯-2-醇（1.93 g，13.78 mmol）在DMF（15.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在0ºC下攪拌30 min，然後添加2-(溴甲基)丙-2-烯酸苄酯（步驟-2，3.87 g，15.15 mmol）。將溶液緩慢升溫至25ºC並攪拌2 h，然後用乙酸乙酯稀釋並用水洗滌。將有機層在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/10 v/v）純化，以獲得呈液體的標題化合物（2.51 g）。
步驟 -4. 6-( 三氟甲基 )-5,6- 二氫 -2 H- 哌喃 -3- 甲酸苄酯
Figure 02_image284
將格魯布斯催化劑（第2代，676.0 mg，0.80 mmol）添加到2-[[(1,1,1-三氟戊-4-烯-2-基)氧基]甲基]丙-2-烯酸苄酯（步驟-3，2.51 g，7.95 mmol）在DCM（1250.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌30 min，然後用水稀釋。將有機層在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/10 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（1.98 g）。
步驟 -5. 6-( 三氟甲基 ) 㗁 𠮿 -3- 甲酸
Figure 02_image286
將Pd(OH) 2/C（990.8 mg）添加到6-(三氟甲基)-5,6-二氫-2 H-哌喃-3-甲酸苄酯（步驟-4，1.98 g，6.90 mmol）在THF（50.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下在H 2氣氛下攪拌20 h。濾出固體並將濾液在真空下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（1.25 g）。
步驟 -6. N-[6-( 三氟甲基 ) 㗁 𠮿 -3- 基 ] 胺基甲酸苄酯
Figure 02_image288
將苯甲醇（982.0 mg，9.10 mmol），DPPA（2.50 g，9.10 mmol）和DIPEA（4.2 mL，24.22 mmol）添加到6-(三氟甲基)㗁𠮿-3-甲酸（步驟-5，1.20 g，6.06 mmol）在甲苯（20.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在110ºC下攪拌13 h，然後在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/4 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（1.60 g）。LCMS (ESI): 304.1 [M+H] +。
步驟 -7. 6-( 三氟甲基 ) 㗁 𠮿 -3- 胺（中間體 532 ）
Figure 02_image290
將Pd/C（300.0 mg）添加到 N-[6-(三氟甲基)㗁𠮿-3-基]胺基甲酸苄酯（步驟-6，600.0 mg，1.90 mmol）在MeOH（10.00 mL）和EtOAc（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下在H 2氣氛下攪拌1 h。濾出固體並將濾液在真空下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（340.0 mg）。LCMS (ESI): 170.1 [M+H] +。
中間體 533. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲酸
步驟 -1. 2,5- 二甲基吡啶 -4- 甲酸甲酯
Figure 02_image292
將Pd(dppf)Cl 2（393.3 mg，0.54 mmol）和TEA（2.25 mL，16.13 mmol）添加到4-溴-2,5-二甲基吡啶（1.00 g，5.38 mmol）在MeOH（20.00 mL）中的溶液中。將溶液在70ºC下在CO氣氛下攪拌14 h。然後將溶液用水稀釋並用EA萃取。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/4 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（600.0 mg）。LCMS (ESI): 166.1 [M+H] +。
步驟 -2. 2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲酸甲酯
Figure 02_image294
將Rh/Al 2O 3（20%，120.0 mg）添加到2,5-二甲基吡啶-4-甲酸甲酯（步驟-1，600.0 mg，3.60 mmol）在MeOH（10.00 mL）中的溶液中。將溶液在50ºC下在H 2氣氛（50 atm）下攪拌14 h。濾出固體，並將所得溶液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（500.0 mg）。LCMS (ESI): 172.1 [M+H] +。
步驟 -3. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲酸酯
Figure 02_image296
將2,5-二甲基哌啶-4-甲酸甲酯（步驟-2，50.0 mg，0.30 mmol）和5-(5-氯-2-甲基-氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體510，74.1 mg，0.30 mmol）添加到HOBt（51.3 mg，0.40 mmol），EDCI（72.8 mg，0.40 mmol）和DIPEA（0.15 mL，0.90 mmol）在DMF（3.00 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後用水稀釋並用EA萃取。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（100.0 mg）。LCMS (ESI): 407.2 [M+H] +。
步驟 -4. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲酸（中間體 533 ）
Figure 02_image298
將LiOH（29.3 mg，1.20 mmol）添加到1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-2,5-二甲基-哌啶-4-甲酸甲酯（步驟-3，100.0 mg，0.20 mmol）在THF（1.00 mL），MeOH（1.00 mL），和H 2O（1.00 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌1 h，然後藉由HCl（6 M）將pH調節至5。然後將溶液用水稀釋並用EA萃取。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發，以獲得呈固體的標題化合物（70.0 mg）。LCMS (ESI): 393.1 [M+H] +。
中間體 534. 4-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸
Figure 02_image300
使用與對於中間體527的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體510）作為步驟-1中的起始材料。收集呈固體的標題化合物（290.0 mg）。LCMS (ESI): 391.1[M+H] +。
中間體 535-A. 4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 胺
步驟 -1. 4-( 二苄基胺基 ) 環己烷 -1- 酮
Figure 02_image302
將苄基溴（17.50 g，100.25 mmol）和碳酸鉀（13.80 g，100.25 mmol）添加到4-胺基環己烷-1-酮鹽酸鹽（5.00 g，33.42 mmol）在MeCN（30.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌5 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（8.30 g）。LCMS (ESI): [M+H] +: 294.2。
步驟 -2. N, N- 二苄基 -4-( 三氟甲基 )-4-[( 三甲基矽基 ) 氧基 ] 環己烷 -1- 胺
Figure 02_image304
在25ºC下將CsF（621.0 mg，4.10 mmol），TMSCF 3（3.80 g，27.27 mmol）和HMPA（12.00 g，68.16 mmol）添加到4-(二苄基胺基)環己烷-1-酮（步驟-1，4.00 g，13.63 mmol）在THF（20.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在70ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（4.50 g）。LCMS (ESI): [M+H] +: 436.2。
步驟 -3. 4-( 二苄基胺基 )-1-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 醇
Figure 02_image306
將氟化四丁基銨三水合物（3.20 g，10.33 mmol）添加到 N, N-二苄基-4-(三氟甲基)-4-[(三甲基矽基)氧基]環己烷-1-胺（步驟-2，4.50 g，10.33 mmol）在THF（30.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌3 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（3.70 g）。LCMS (ESI): [M+H] +: 364.2。
步驟 -4. N, N- 二苄基 -4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 胺
Figure 02_image308
將NaH（220.0 mg，5.50 mmol，在礦物油中的60%分散體）添加到4-(二苄基胺基)-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（步驟-3，1.00 g，2.75 mmol）在DMF（10.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將碘乙烷（2.10 g，13.76 mmol）添加到反應混合物中。將所得混合物在60ºC下攪拌4 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將該有機層在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（920.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 392.2。
步驟 -5. 4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 胺（中間體 535-A ）
Figure 02_image310
將Pd/C（450.0 mg，4.20 mmol）添加到 N, N-二苄基-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（步驟-4，920.0 mg，2.45 mmol）在MeOH（5.00 mL）/THF（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物過濾。將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（475.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 212.1。
中間體 535-B. (1 r,4 r)-4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 胺
Figure 02_image312
使用與對於中間體535-A的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 r,4 r)-4-(二苄基胺基)-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇作為步驟-3中的起始材料。收集呈油狀物的標題化合物（70 mg）。LCMS (ESI): 212.1 [M+H] +。
中間體 536. (1 R,3 S,5 S)- N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
步驟 -1. (1 R,3 S,5 S)-3-[[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ] 胺基甲醯基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -8- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image314
將(1 r,4 r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（100.0 mg，0.50 mmol，CAS#：1408075-09-1，Enamine公司），HATU（228.3 mg，0.60 mmol），和DIPEA（0.29 mL，1.60 mmol）添加到(1 R,3 S,5 S)-8-(三級丁氧基羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（139.4 mg，0.50 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（220.0 mg）。LCMS (ESI): 421.2 [M+H] +。
步驟 -2. (1 R,3 S,5 S)- N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺（中間體 536 ）
Figure 02_image316
將TFA（2.00 mL）添加到(1 R,3 S,5 S)-3-[[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]胺基甲醯基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸三級丁酯（步驟-1，100.0 mg，0.20 mmol）在DCM（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌30 min，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（53.0 mg）。LCMS (ESI): 321.2 [M+H] +。
中間體 537. 3,3- 二氟 -1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 胺 2,2,2- 三氟乙酸酯
步驟 -1. 2,2- 二氟 -2-(8- 羥基 -1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 ) 乙酸乙酯
Figure 02_image318
在22ºC下將TMSCl（0.15 mL，1.15 mmol）添加到鋅（1.00 g，15.40 mmol）在THF（20.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在65ºC下攪拌20 min，然後添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯（0.49 mL，3.84 mmol）並繼續攪拌30 min。然後添加1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-酮（500.0 mg，3.20 mmol），作為在THF（10.00 mL）中的溶液並將所得混合物攪拌2 h。然後將溶液冷卻至22ºC，用AcOH（2.34 mL）淬滅，用水稀釋並用EtOAc萃取，將有機層合併,用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發，以獲得呈油狀物的標題化合物（605.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.36 (q, 2H), 3.98 - 3.92 (m, 4H), 1.96 - 1.91 (m, 3H), 1.83 - 1.76 (m, 2H), 1.70 - 1.64 (m, 2H), 1.36 (t, 3H)。
步驟 -2. 8-(1,1- 二氟 -2- 羥基乙基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 醇
Figure 02_image320
在0ºC下將NaBH 4（245.0 mg，6.48 mmol）添加到2,2-二氟-2-(8-羥基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)乙酸乙酯（步驟-1，605.0 mg，2.16 mmol）在MeOH（13.10 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物攪拌2 h，然後添加額外的NaBH 4（245 mg，6.48 mmol）並將所得混合物在22ºC下攪拌16 h。將溶液用水淬滅並在減壓下濃縮。將殘餘物溶解在EtOAc中，用鹽水洗滌，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用環己烷/EtOAc（1/1 v/v至1/4 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（160.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.04 - 3.90 (m, 6H), 2.19 (t, 1H), 2.01 - 1.87 (m, 5H), 1.83 - 1.77 (m, 2H), 1.70 - 1.63 (m, 2H)。
步驟 -3. 2,2- 二氟 -2-(8- 羥基 -1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 ) 乙基 4- 甲基苯磺酸酯
Figure 02_image322
將TEA（0.19 mL，1.34 mmol）和TsCl（154.0 mg，0.81 mmol）添加到8-(1,1-二氟-2-羥基乙基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-醇（步驟-2，160.0 mg，0.67 mmol）在DCM（5.60 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌16 h。然後將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，用水和鹽水洗滌，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發，以獲得呈油狀物的標題化合物（217.0 mg）。TLC-MS (APCI): [M+H] +: 392.7。
步驟 -4. 3,3- 二氟 -1,8,11- 三氧雜二螺 [3.2.47.24] 十三烷
Figure 02_image324
在0ºC下將NaH（30.0 mg，0.76 mmol，在礦物油中的60%分散體）添加到2,2-二氟-2-(8-羥基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)乙基4-甲基苯磺酸酯（步驟-3，198.0 mg，0.51 mmol）在THF（50.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物升溫至22ºC並攪拌6 h。然後將溶液用水稀釋並用Et 2O萃取。將有機層合併，用鹽水洗滌，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法純化（用環己烷/EtOAc（95/5 v/v至1/1.5 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（101.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.64 (t, 2H), 3.99 - 3.90 (m, 4H), 2.02 (t, 4H), 1.87 - 1.77 (m, 2H), 1.76 - 1.67 (m, 2H)。
步驟 -5. 3,3- 二氟 -1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 酮
Figure 02_image326
將TFA（1.90 mL，0.23 mmol）添加到3,3-二氟-1,8,11-三氧雜二螺[3.2.47.24]十三烷（步驟-4，50.0 mg，0.23 mmol）在DCM（0.50 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌16 h。將溶液在減壓下濃縮並將所得殘餘物溶解在DCM中，用NaHCO 3的飽和水溶液和鹽水洗滌，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發，以得到呈油狀物的標題化合物（20.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.76 (t, 2H), 2.60 (ddd, 2H), 2.42 (dt, 2H), 2.37 - 2.25 (m, 2H), 2.23 - 2.12 (m, 2H)。
步驟 -6. 3,3- 二氟 -1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 酮肟
Figure 02_image328
在22ºC下將3,3-二氟-1-氧雜螺[3.5]壬-7-酮（步驟-5，380.0 mg，1.90 mmol）在MeOH（1.00 mL）中的溶液添加到鹽酸羥胺（0.15 g，2.10 mmol）和乙酸鈉（0.19 g，2.30 mmol）在MeOH（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在60ºC下攪拌16 h。然後將溶液用EtOAc稀釋，並將有機層用水和鹽水洗滌。將有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠層析法（用環己烷/EtOAc（4/1 v/v至1.5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（310.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 6.94 (s, 1H), 4.69 (t, 2H), 2.81 (dt, 1H), 2.55 (ddd, 1H), 2.45 (ddd, 1H), 2.34 (dt, 1H), 2.13 - 1.93 (m, 4H)。
步驟 -7. (3,3- 二氟 -1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image330
在-78ºC下將NaBH 4（79.0 mg，2.10 mmol）添加到3,3-二氟-1-氧雜螺[3.5]壬-7-酮肟（步驟-6，50.0 mg，0.26 mmol）和六水合氯化鎳(II)（81.0 mg，0.34 mmol）在MeOH（5.20 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物升溫至0ºC持續4.5 h。添加Boc 2O（86.0 mg，0.39 mmol）並將反應混合物在22ºC下攪拌16 h。將溶液冷卻至0ºC，用鹽水淬滅，並且然後在減壓下濃縮。將水層用Et 2O萃取。將有機層合併，用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用環己烷/EtOAc（4/1 v/v至2/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（47.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.62 (td, 2H), 4.41 (s, 1H), 3.49 (s, 1H), 2.23 (d, 2H), 2.07 (d, 2H), 1.91 (d, 2H), 1.73 - 1.60 (m, 2H), 1.54 (s, 9H)。
步驟 -8. 3,3- 二氟 -1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 胺 2,2,2- 三氟乙酸酯（中間體 537 ）
Figure 02_image332
在0ºC下將TFA（0.13 mL，1.60 mmol）添加到(3,3-二氟-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-7，45.0 mg，0.16 mmol）在DCM（0.30 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在22º下攪拌4.5 h。然後將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈油狀物的標題化合物（47.0 mg）。TLC-MS (APCI): [M+H] +: 178.2。
中間體 538. 5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸
步驟 -1. 1-( 四氫 -2 H- 哌喃 -2- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸乙酯
Figure 02_image334
將DHP（11.90 g，141.47 mmol）和TFA（8.10 g，112.34 mmol）添加到1 H-吡唑-3-甲酸乙酯（10.00 g，71.36 mmol）在THF（100.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在60ºC下攪拌14 h。然後將溶液在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（15.00 g）。LCMS (ESI): [M+H] +: 225.1。
步驟 -2. (3-( 乙氧基羰基 )-1-( 四氫 -2 H- 哌喃 -2- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 基 ) 硼酸
Figure 02_image336
將B 2pin 2（8.20 g，32.28 mmol），4,4′-二三級丁基-2,2′-二吡啶基（1.80 g，6.76 mmol）和[Ir(COD)OMe] 2（2.20 g，3.32 mmol）添加到1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-甲酸乙酯（步驟-1，5.00 g，22.30 mmol）在MTBE（100.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。然後將溶液在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（5.50 g）。LCMS (ESI): [M+H] +: 269.1。
步驟 -3. 5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 甲酸乙酯
Figure 02_image338
將4-氯-6-甲基嘧啶（172.0 mg，1.34 mmol），K 3PO 4（474.0 mg，2.23 mmol）和Pd(dppf)Cl 2（163.0 mg，0.22 mmol）添加到(3-(乙氧基羰基)-1-(四氫-2 H-哌喃-2-基)-1 H-吡唑-5-基)硼酸（步驟-2，300.0 mg，1.12 mmol）在1,4-二㗁𠮿（10.00 mL）和H 2O（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在70ºC下攪拌14 h。將所得溶液用EtOAc稀釋，用水洗滌。將有機層在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（260.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 317.2。
步驟 -4. 5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸乙酯
Figure 02_image340
將TFA（4.00 mL）添加到5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-甲酸乙酯（步驟-3，260.0 mg，0.82 mmol）在DCM（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在真空下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（170.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 233.1。 步驟 -5. 5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸（中間體 538 ）
Figure 02_image342
將LiOH .H 2O（124.0 mg，2.96 mmol）添加到5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸乙酯（步驟-4，170.0 mg，0.73 mmol）在THF（4.00 mL），MeOH（4.00 mL），和H 2O（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在60ºC下攪拌14 h。用HCl（1 M）將溶液的pH值調節至5。將所得混合物用EtOAc萃取。將有機層在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（135.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 205.1。
中間體 539. 1-(3- 氯苯基 ) 乙胺
步驟 -1. ( E)- N-(3- 氯苯亞甲基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image344
將三級丁烷亞磺醯胺（1.00 g，8.25 mmol），MgSO 4（3.00 g，24.76 mmol），和PTSA（1.00 g，5.81 mmol）添加到間氯苯甲醛（1.00 g，8.20 mmol）在DCM（2.0 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h。然後將硫酸鎂濾出並將濾液在真空下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（1.9 g）。LCMS (ESI): 244.1 [M+H] +。
步驟 -2. N -[1-(3- 氯苯基 ) 乙基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image346
在0ºC下將溴(甲基)鎂（23.4 mL，1 M，23.4 mmol）逐滴添加到( E)- N-(3-氯苯亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-2，2.00 g，7.79 mmol）在THF（8 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得溶液用水淬滅，然後用HCl（1 M）將溶液的pH調節至pH 6。然後將溶液用EtOAc萃取，將有機層合併，並且然後在真空下濃縮以獲得呈固體的標題化合物（1.57 g）。LCMS (ESI): 260.1 [M+H] +。
步驟 -3. 1-(3- 氯苯基 ) 乙胺（中間體 539 ）
Figure 02_image348
將 N-[1-(3-氯苯基)乙基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-2，1.57 g，6.04 mmol）在HCl在1,4-二㗁𠮿（1 M，10 mL）中的混合物在25ºC下攪拌2 h。將溶液在真空下濃縮，然後將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，2/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（700 mg）。LCMS (ESI): 156.1 [M+H] +。
中間體 540. (4,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯
步驟 -1. 8-( 環氧乙烷 -2- 基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 醇
Figure 02_image350
在0ºC下將mCPBA（75 wt%，7.07 g，30.7 mmol）添加到8-乙烯基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-醇（其根據WO 2017044877製備，但是在一個步驟中，並且其也是可商購的）（4.72 g，25.6 mmol）在DCM（51.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在22º下攪拌16 h。然後將溶液用DCM稀釋並用亞硫酸氫鈉溶液（40%水溶液）淬滅。將水層用DCM萃取，並將合併的有機層用飽和NaHCO 3水溶液、水、和鹽水洗滌。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發以獲得標題化合物（3.69 g），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.02 - 3.90 (m, 4H), 2.93 (dd, 1H), 2.84 (dd, 1H), 2.72 (dd, 1H), 2.01 - 1.91 (m, 2H), 1.83 (td, 1H), 1.76 (ddd, 2H), 1.71 - 1.60 (m, 3H), 1.44 (d, 1H)。
步驟 -2. 1,4,9- 三氧雜二螺 [4.2.48.25] 十四烷 -12- 醇
Figure 02_image352
在-78ºC下將 nBuLi（1.6 M，34.6 mL，55.3 mmol）添加到碘化三甲氧化鋶（12.2 g，55.3 mmol）在THF（500.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物攪拌並升溫至0ºC持續30 min，然後冷卻至-78ºC並在10 min內添加8-(環氧乙烷-2-基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-醇（步驟-1，3.69 g，18.4 mmol）在THF（50.00 mL）中的溶液。將反應混合物升溫至22ºC並且然後回流4.5 h。將所得混合物冷卻至22ºC並用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用環己烷/EtOAc（2/3 v/v至1/4 v/v）洗脫）純化，以獲得標題化合物（1.34 g），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.04 - 3.91 (m, 6H), 3.82 (td, 1H), 2.31 (dddd, 1H), 1.98 - 1.61 (m, 8H), 1.59 (s, 1H), 1.54 (d, 1H)。
步驟 -3. 1,4,9- 三氧雜二螺 [4.2.48.25] 十四烷 -12- 酮
Figure 02_image354
在-78ºC下將DMSO（0.89 mL，12.50 mmol）添加到草醯氯（0.82 mL，9.38 mmol）在DCM（6.50 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在-78ºC下攪拌45 min。然後逐滴添加1,4,9-三氧雜二螺[4.2.48.25]十四烷-12-醇（步驟-2，1.34 g，6.25 mmol）在DCM（12.50 mL）中的溶液並將所得混合物攪拌45 min。添加TEA（4.30 mL，31.3 mmol），並將反應混合物在-78ºC下攪拌30 min並在45 min內升溫至22ºC。將反應混合物用水淬滅並用DCM萃取。將有機層合併，用水、鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠層析法（用環己烷/EtOAc（3/2 v/v至2/3 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.13 g）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.14 (t, 2H), 4.00 - 3.90 (m, 4H), 2.55 (t, 2H), 1.89 - 1.63 (m, 8H)。
步驟 -4. 12,12- 二氟 -1,4,9- 三氧雜二螺 [4.2.48.25] 十四烷
Figure 02_image356
將DAST（1.87 mL，14.10 mmol）添加到1,4,9-三氧雜二螺[4.2.48.25]十四烷-12-酮（步驟-3，300.0 mg，1.41 mmol）在DCM（7.07 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在22º下攪拌4天。然後將反應混合物逐滴添加到攪拌的飽和NaHCO 3水溶液中。將水層進一步用DCM萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用環己烷/EtOAc（9/1 v/v至4/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（93.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.01-3.88 (m, 6H), 2.42 (tt, 2H), 1.89 - 1.66 (m, 8H)。
步驟 -5. 4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 酮的合成
Figure 02_image358
將TFA（0.44 g，0.30 mL，3.80 mmol）添加到12,12-二氟-1,4,9-三氧雜二螺[4.2.48.25]十四烷（步驟-4，90.0 mg，0.38 mmol）在DCM（3.80 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌16 h。將反應混合物在減壓下濃縮並將所得殘餘物溶解在DCM中，用NaHCO 3的飽和水溶液和鹽水洗滌，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發，以獲得呈油狀物的標題化合物（58.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.05 (t, 2H), 2.64 (td, 2H), 2.51 (m, 2H), 2.42 - 2.30 (m, 2H), 2.10 - 2.01 (m, 2H), 1.94 (td, 2H)。
步驟 -6. 4,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 酮肟
Figure 02_image360
在22ºC下將4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-酮（步驟-5，58.0 mg，0.30 mmol）在MeOH（0.40 mL）中的溶液添加到鹽酸羥胺（23.0 mg，0.34 mmol）和乙酸鈉（30.0 mg，0.37 mmol）在MeOH（0.40 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在60ºC下攪拌16 h。然後將溶液用EtOAc稀釋，並將有機層用水和鹽水洗滌。將有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠層析法（用環己烷/EtOAc（3/1 v/v至3/2 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（30.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 6.73 (s, 1H), 4.00 (t, 2H), 3.18 (dt, 1H), 2.62 - 2.29 (m, 4H), 2.21 - 2.11 (m, 1H), 1.95 - 1.80 (m, 2H), 1.77 - 1.63 (m, 2H)。
步驟 -7. (4,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯（中間體 540 ）
Figure 02_image362
在-78ºC下將NaBH 4（44.0 mg，1.20 mmol）添加到4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-酮肟（步驟-6，30.0 mg，0.15 mmol）和六水合氯化鎳(II)（45.0 mg，0.19 mmol）在MeOH（2.90 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物升溫至0ºC持續4.5 h。添加Boc 2O（48.0 mg，0.22 mmol）並將所得混合物在22ºC下攪拌16 h。將溶液冷卻至0ºC，用鹽水淬滅，並且然後在減壓下濃縮。將水層用Et 2O萃取。將有機層合併，用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發以獲得標題化合物（30.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.56 - 4.37 (m, 1H), 3.93 (td, 2H), 3.68 - 3.47 (m, 1H), 2.49 - 2.33 (m, 2H), 1.97 - 1.85 (m, 2H), 1.85 - 1.70 (m, 2H), 1.61 - 1.54 (m, 4H), 1.44 (s, 9H)。
中間體 541. 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸
步驟 -1. 5- 溴 -1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image364
在0ºC下將SEMCl（24.40 g，146.33 mmol）逐滴添加到5-溴-1 H-吡唑-3-甲酸甲酯（20.00 g，97.56 mmol）和K 2CO 3（26.97 g，195.11 mmol）在DMF（70.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（29.57 g）。LCMS (ESI): 335.0 [M+H] +。
步驟 -2. 5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image366
將5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基硼酸（15.77 g，92.28 mmol），K 3PO 4（30.14 g，141.97 mmol）和Pd(dppf)Cl 2（10.39 g，14.20 mmol）添加到5-溴-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-甲酸甲酯（步驟-1，23.80 g，70.99 mmol）在1,4-二㗁𠮿（150.00 mL）/H 2O（15.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在90ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（3/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（26.00 g）。LCMS (ESI): 382.1 [M+H] +。
步驟 -3. 5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 甲酸
Figure 02_image368
將LiOH.H 2O（8.94 g，213.12 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-甲酸甲酯（步驟-2，27.1 g，71.04 mmol）在THF（30.00 mL）/MeOH（30.00 mL）/H 2O（30.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在70ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。然後用HCl（1 M）將混合物酸化至pH 3。將水層用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（23.50 g）。LCMS (ESI): 368.1 [M+H] +。
步驟 -4. 4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯
Figure 02_image370
將4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（10.82 g，63.95 mmol）和HATU（26.75 g，70.359 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-甲酸（步驟-3，23.5 g，63.954 mmol，1.00當量）和DIPEA（24.80 g，191.86 mmol）在DMF（50.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（2/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（25.85 g）。LCMS (ESI): 519.4 [M+H] +。
步驟 -5. 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸
Figure 02_image372
將LiOH.H 2O（56.63 mg，1.35 mmol）添加到4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（步驟-4，350.0 mg，0.68 mmol）在MeOH（2.00 mL）/H 2O（2.00 mL）/THF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。用HCl（1 M）將混合物酸化至pH 3。將水層用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（300.0 mg）。LCMS (ESI): 505.2 [M+H] +。 實例
實例 101. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 s,4 s)-4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺和 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 r)-4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image374
步驟 -1. 1-(5- 溴 -1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲酸乙酯
Figure 02_image376
將EDCI（6.13 g，31.99 mmol），HOBt（4.32 g，31.99 mmol），和哌啶-4-甲酸乙酯（4.24 g，27.07 mmol）添加到5-溴-1 H-吡唑-3-甲酸（4.7 g，24.61 mmol）和DIPEA（12.9 mL，73.83 mmol）在DMF（40 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h，然後用EtOAc稀釋並用水洗滌。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，1/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（7.7 g）。LCMS (ESI): 330.1 [M+H] +。
步驟 -2. 1-(5- 溴 -1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲酸
Figure 02_image378
將LiOH（160.0 mg，6.66 mmol）添加到1-(5-溴-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲酸乙酯（步驟-1，1.1 g，3.33 mmol）在THF（4.00 mL），MeOH（4.00 mL），和H 2O（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。用HCl的水溶液（1 M）將混合物酸化至pH 4。將水層用EtOAc萃取並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（950 mg）。LCMS (ESI): 302.1 [M+H] +。
步驟 -3. 1-(5- 溴 -1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image380
將EDCI（3.56 g，22.93 mmol），HOBt（2.52 g，18.65 mmol），4-甲基環己烷-1-胺（2.11 g，18.64 mmol）添加到1-(5-溴-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲酸（步驟-2，3.75 g，12.46 mmol）和DIPEA（8.41 mL，48.28 mmol）在DMF（40 mL）中的攪拌溶液中。然後將溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌，然後將有機層在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，95/5 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（2.02 g）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.75 (s, 1H), 7.66 - 7.58 (m, 1H), 6.72 - 6.65 (m, 1H), 4.43 - 4.25 (m, 1H), 4.12 - 3.85 (m, 1H), 3.75 - 3.34 (m, 1H), 3.25 - 2.96 (m, 1H), 2.91 - 2.65 (m, 1H), 2.44 - 2.20 (m, 1H), 1.75 - 1.65 (m, 4H), 1.53 - 1.35 (m, 6H), 1.33 - 1.16 (m, 2H), 1.16 - 1.03 (m, 1H), 1.01 - 0.79 (m, 3H)。LCMS (ESI): 397.1 [M+H] +。
步驟 -4. 1-(5- 溴 -1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 )- N-(4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image382
在0ºC下將SEM-Cl（251.8 mg，1.5 mmol）添加到1-(5-溴-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺（步驟-3，200.0 mg，0.50 mmol）和K 2CO 3（208.7 mg，1.50 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌，並將有機層在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（200.0 mg）。LCMS (ESI): 527.3 [M+H] +。
步驟 -5. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image384
在25ºC下將Pd(dppf)Cl 2（61.0 mg，0.10 mmol）和K 3PO 4（17.1 mg，0.80 mmol）添加到1-(5-溴-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基)- N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺（步驟-4，200.00 mg，0.40 mmol）和5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基硼酸（233.0 mg，1.20 mmol）在1,4-二㗁𠮿（3.00 mL）和水（0.60 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。完成後，將溶液在真空下濃縮，然後將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（210.0 mg）。LCMS (ESI): 590.3 [M+H] +。
步驟 -6. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 s,4 s)-4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺和 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 r)-4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image386
將TFA（1.5 mL）添加到1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺（步驟-5，210 mg，0.4 mmol）在DCM（1.5 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h，然後將溶液在真空下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（柱：XBridge製備型OBD C18柱，30×150 mm，5 μm；流動相：水（10 mM NH 4HCO 3）/MeCN（68/32至38/62 v/v）；流速：60 mL/min；檢測（nm）：254 nm），並得到1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 s,4 s)-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺和1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 r)-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺（13.9 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 101）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD-d4) δ 8.24 (s, 1H), 7.14 (dHz, 1H), 4.63 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.83 (s, 1H), 3.55 (m, 1H), 3.45 - 3.26 (m, 1H), 2.93 (s, 1H), 2.72 - 2.36 (m, 1H), 1.87 - 1.55 (m, 9H), 1.37 - 1.34 (m, 3H), 1.11 - 0.91 (m, 4H)。LCMS (ESI): 460.2 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物。
柱：CHIRALPAK IF
柱尺寸：2*25 cm，5 μm
流動相：MTBE（0.1% FA）：EtOH（80/20 v/v）
流速：14 mL/min
檢測（nm）：220/254 nm
實例 101-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（4.9 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為14.07 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.96 (m, 1H), 8.38 - 8.32 (m, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.25 - 7.21 (m, 1H), 7.13 (s, 1H), 4.64 - 4.08 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.51 - 3.37 (m, 1H), 3.19 - 3.14 (m, 1H), 2.90 - 2.73 (m, 1H), 2.51 - 2.49 (m, 1H), 1.76 - 1.72 (s, 2H), 1.51 - 1.25 (m, 9H), 1.15 (s, 2H), 0.89 (d, 3H)。LCMS (ESI): 460.2 [M+H] +。
實例 101-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（14.5 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為22.53 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.96 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 4.63 - 4.10 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.51 - 3.37 (m, 1H), 3.14 - 3.05 (m, 1H), 2.82 - 2.71 (m, 1H), 2.42 - 2.35 (m, 1H), 1.77 - 1.48 (m, 7H), 1.42 - 1.06 (m, 4H), 0.96 - 0.85 (m, 5H)。LCMS (ESI): 460.2 [M+H] +。
實例 102. 1-(4- 氟 -5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image388
步驟 -1. 1- 苄基 -5- 溴 -1 H- 吡唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image390
在0ºC下將NaH（210.7 mg，8.8 mmol，在礦物油中的60%分散體）添加到5-溴-1 H-吡唑-3-甲酸甲酯（600.0 mg，2.9 mmol）在THF（10.0 mL）中的攪拌溶液中。然後將苄基溴（1501.7 mg，8.8 mmol）添加到混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。然後將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/3 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（460.0 mg）。LCMS (ESI): 295.1 [M+H] +。
步驟 -2. 1- 苄基 -5- 溴 -4- 氟 -1 H- 吡唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image392
在25ºC下將Selectfluor®（1.65 g，4.68 mmol）添加到1-苄基-5-溴吡唑-3-甲酸甲酯（步驟-1，60.0 mg，1.56 mmol）在MeCN（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在80ºC下攪拌14 h。將混合物濃縮並藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/3 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（130.0 mg）。LCMS (ESI): 313.1 [M+H] +。
步驟 -3. 1- 苄基 -5- 溴 -4- 氟 -1 H- 吡唑 -3- 甲酸
Figure 02_image394
在25ºC下將LiOH∙H 2O（174.2 mg，4.15 mmol）添加到1-苄基-5-溴-4-氟-1 H-吡唑-3-甲酸甲酯（步驟-2，30.0 mg，0.42 mmol）在MeOH（1.0 mL）和水（1.0 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在40ºC下攪拌14 h。使用HCl水溶液（6 M）將溶液的pH調節至5，然後將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由反相柱層析法（MeCN/水，5/95至95/5 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（80.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 279.1。
步驟 -4. 1-(1- 苄基 -5- 溴 -4- 氟 -1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image396
將HATU（61.0 mg，0.16 mmol）和 N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺（中間體502，36.0 mg，0.16 mmol）添加到1-苄基-5-溴-4-氟-1 H-吡唑-3-甲酸（步驟-3，40.0 mg，0.13 mmol）和DIPEA（70 μL， 0.40 mmol）在DMF（5.0 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。然後將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/1 v/v）純化，以獲得標題化合物（60.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): [M+H] +: 505.2。
步驟 -5. 1-(1- 苄基 -4- 氟 -5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image398
在25ºC下將Pd(dppf)Cl 2（11.6 mg，0.02 mmol）和K 2CO 3（65.6 mg，0.48 mmol）添加到1-(1-苄基-5-溴-4-氟-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺 （步驟-4，80.0 mg，0.16 mmol）和2-甲氧基吡啶-4-基硼酸（24.2 mg，0.16 mmol）在1,4-二㗁𠮿（2.5 mL）和水（0.5 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌2 h。然後將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並且然後將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/1 v/v）純化，以獲得標題化合物（50.0 mg），其為非鏡像異構物的混合物。LCMS (ESI): [M+H] +: 534.3。
步驟 -6. 1-(4- 氟 -5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image400
在25ºC下將NH 4HCO 2（586.1 mg，7.39 mmol）和Pd(OH) 2（10.5 mg，0.08 mmol）添加到1-(1-苄基-4-氟-5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺（步驟-5，40.0 mg，0.08 mmol）在HCO 2H（10.0 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在70ºC下攪拌14 h。將混合物濃縮並藉由反相柱層析法（MeCN/水，5/95至95/5 v/v）純化，以獲得標題化合物（4.6 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.22 (s, 1H), 7.84 - 7.50 (m, 1H), 7.37 - 7.05 (m, 2H), 4.70 - 4.60 (m, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.88 - 3.60 (m, 1H), 3.25 - 3.20 (m, 1H), 3.00 - 2.85 (m, 1H), 2.70 - 2.45 (m, 1H), 1.98 - 1.50 (m, 9H), 1.35 - 1.12 (m, 3H), 1.10 - 0.85 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 444.2。
實例 103. ( S)-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1-(3- 氟苯基 ) 乙基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image402
將T3P ®（在DMF中50%，64 uL，0.11 mmol）和(S)-1-(3-氟苯基)乙烷-1-胺（10.4 uL，0.08 mmol）添加到1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（中間體503，20.0 mg，0.06 mmol）和TEA（23 uL，0.16 mmol）在DMF（0.55 mL，0.06 mmol）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌4 h。將反應混合物在Genevac（HT12系統）中乾燥，然後純化（使用以下條件：柱：沃特世CSH C18，100 x19 mm，5 μm；流動相：A: 0.1%在水中的甲酸；流動相：B：0.1%在MeCN中的甲酸；流速：30 mL/min；梯度：20% B至95% B，8.5 min內），以獲得呈固體的標題化合物（3.4 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 468.18.
實例 104. N-((1 s,4 s)-4-( 二氟甲基 ) 環己基 )-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺和 N -((1 r,4 r)-4-( 二氟甲基 ) 環己基 )-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image404
步驟 -1. N-[4-( 二氟甲基 ) 環己基 ]-1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image406
將HATU（221.57 mg，0.58 mmol）和4-(二氟甲基)環己烷-1-胺（86.93 mg，0.58 mmol）添加到1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-(四氫-2 H-哌喃-2-基)-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲酸（中間體505，210 mg，0.49 mmol）和DIPEA（0.25 mL，1.46 mmol）在DMF（2 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。然後將溶液用EtOAc稀釋，用水洗滌，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，15/1 v/v）純化，以獲得標題化合物（140 mg），其為非鏡像異構物的混合物。LCMS (ESI): [M+H] +: 564.3。
步驟 -2. N-((1 s,4 s)-4-( 二氟甲基 ) 環己基 )-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺和 N -((1 r,4 r)-4-( 二氟甲基 ) 環己基 )-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image404
將TFA（1.0 mL）添加到N-[4-(二氟甲基)環己基]-1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺（步驟-3，140 mg，0.25 mmol）在DCM（1 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min。然後將溶液在減壓下濃縮並藉由反相柱層析法（水（0.1% NH 4HCO 3）/MeCN，65/35至40/60 v/v）純化，以獲得 N-((1 s,4 s)-4-(二氟甲基)環己基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺和 N-((1 r,4 r)-4-(二氟甲基)環己基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺（60 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 104）。
使用手性HPLC分離該非鏡像異構物的固體混合物。
柱：CHIRALPAK IF
柱尺寸：2x25 cm，5 μm
流動相：Hex：DCM（1 : 1，10 mM NH 3·MeOH）: MeOH=50 : 50
流速：15 mL/min
檢測（nm）：220/254 nm
實例 104-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（10.4 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.67 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.08 - 13.91 (m, 1H), 8.28 (d, 1H), 7.75 (d, 1H), 7.36 - 7.29 (m, 1H), 7.04 (d, 1H), 6.12 - 5.52 (m, 1H), 4.50 - 4.43 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.60 - 3.29 (m, 2H), 3.25 - 3.02 (m, 1H), 2.82 - 2.76 (m, 1H), 2.38 (d, 1H), 1.85 - 1.40 (m, 9H), 1.27 - 1.09 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 480.2。
實例 104-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（10.6 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為15.25 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.51 - 13.41 (m, 1H), 8.28 (d, 1H), 7.94 - 7.59 (m, 1H), 7.43 - 7.20 (m, 1H), 7.14 - 6.94 (m, 1H), 6.19 - 5.59 (m, 1H), 4.78 - 4.38 (m, 1H), 4.24 - 4.01 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.85 - 3.78 (m, 1H), 3.45 - 3.01 (m, 1H), 2.94 - 2.67 (m, 1H), 2.63 - 2.45 (m, 2H), 1.91 - 1.58 (m, 6H), 1.58 - 1.32 (m, 6H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 480.2。
實例 105. 1-(5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image409
將1-(5-溴-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺（實例101，步驟-3，180.0 mg，0.45 mmol），Pd(dppf)Cl 2（66.3 mg，0.09 mmol），K 3PO 4（192.3 mg，0.91 mmol）和2-甲氧基吡啶-4-基硼酸（83.2 mg，0.54 mmol）在H 2O（0.30 mL）和1,4-二㗁𠮿（3.00 mL）中的混合物在100ºC下在N 2氣氛下攪拌3 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌，並將有機層在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XBridge Shield RP18 OBD，30x150 mm，5 μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：28% B至58% B，7 min內；檢測：220 nm），以獲得標題化合物（8 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.20 - 8.19 (s, 1H), 7.34 (bs, 1H), 7.20 - 7.18 (bs, 1H), 7.10 (s, 1H), 4.67 (bs, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.85 - 3.84 (m, 1H), 3.29 - 3.24 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 2.63 - 2.61 (m, 1H), 1.86 - 1.56 (m, 10H), 1.38 - 1.30 (m, 3H), 0.98 - 0.91 (m, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 426.2。
實例 106. N-(4- 甲基環己基 )-1-[5-(2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image411
使用與對於實例105的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用2-甲基吡啶-4-基硼酸作為起始材料。將所得產物純化（使用以下條件：柱：XBridge製備型C18 OBD，19x150 mm，5 μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeCN；流速：25 mL/min；梯度：22% B至44% B，7 min內；檢測：210/254 nm），以獲得標題化合物（28.7 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.47 (d, 1H), 7.76 - 7.70 (m, 1H), 7.67 - 7.61 (m, 1H), 7.18 - 7.11 (m, 1H), 4.70 - 4.64 (m, 2H), 3.89 - 3.47 (m, 1H), 3.41 - 3.17 (m, 1H), 2.98 - 2.92 (m, 1H), 2.61 (s, 3H), 2.55 - 2.49 (m, 1H), 1.99 - 1.72 (m, 6H), 1.70 - 1.50 (m, 3H), 1.47 - 1.16 (m, 3H), 1.14 - 0.89 (m, 4H)。LCMS (ESI): 410.3 [M+H] +。
實例 107. 1-(5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 s,4 s)-4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image413
步驟 -1. 1-(5- 溴 -1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-[(1 s,4 s)-4- 甲基環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image415
將(1 s,4 s)-4-甲基環己烷-1-胺（374 mg，3.31 mmol），HOBT（670 mg，4.97 mmol），EDCI（951.8 mg，4.97 mmol），和DIPEA（1.6 mL，9.90 mmol）添加到1-(5-溴-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲酸（1.00 g，3.31 mmol，實例101- 步驟-2）在DMF（5 ml）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。然後將反應用水淬滅，將水層用EtOAc萃取，並將有機層濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.1 g）。LCMS (ESI): 397.3 [M+H] +。
步驟 -2. 1-[5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 s,4 s)-4- 甲基環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image417
將2-甲氧基吡啶-4-基硼酸（76 mg，0.5 mmol），K 3PO 4（160 mg，0.75 mmol），和Pd(dppf)Cl 2（36 mg，0.05 mmol）添加到1-(5-溴-1 H-吡唑-3-羰基)- N-[(1 s,4 s)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺（步驟-1，100 mg，0.25 mmol）在1,4-二㗁𠮿（2 mL）和H 2O（0.2 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在110ºC下攪拌14 h，然後濃縮。將殘餘物用製備型TLC（DCM/MeOH，15/1 v/v）純化，然後用製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30*150 mm，5 μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：25% B至41% B，7 min內；檢測：254/220 nm），以獲得呈固體的標題化合物（18 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.20 - 8.18 (d, 1H), 7.36 - 7.34 (m, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.68 - 4.61 (m, 2H), 3.99 - 3.94 (s, 3H), 3.86 - 3.85 (m, 1H), 2.94 (m, 1H), 2.67 - 2.57 (m, 1H), 1.98 - 1.71 (m, 5H), 1.69 - 1.51 (m, 6H), 1.40 - 1.29 (m, 2H), 0.98 (d, 3H)。LCMS (ESI): 426.2 [M+H] +。
實例 108. 實例 108-A 和 108-B 的非鏡像異構物混合物。
實例 108-A. N-((1 s,4 s)-4- 乙基環己基 )-1-(5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺和
Figure 02_image419
實例 108-B. N-((1 r,4 r)-4- 乙基環己基 )-1-(5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image421
使用與對於實例107的合成所描述的程序類似的程序製備 N-(4-乙基環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺，不同的是使用4-乙基環己烷-1-胺作為起始材料。將所得產物藉由矽膠層析法純化（12 : 1 DCM: MeOH），並得到 N-((1 s,4 s)-4-乙基環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺和 N-((1 r,4 r)-4-乙基環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺（90 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 108）。 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.88 - 13.72 (m, 1H), 8.21 - 8.15 (m, 1H), 7.65 - 7.59 (m, 1H), 7.47 - 7.35 (m, 1H), 7.27 - 7.17 (m, 2H), 4.52 - 4.02 (m, 2H), 3.77 - 3.71 (m, 1H), 3.46 - 3.40 (m, 1H), 3.29 (s, 3H), 3.14 - 3.08 (m, 1H), 2.81 - 2.75 (m, 1H), 1.81 - 1.61 (m, 4H), 1.60 - 1.35 (m, 5H), 1.33 - 0.97 (m, 5H), 0.96 - 0.76 (m, 4H)。LCMS (ESI): 440.2 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IC
柱尺寸：2 x 25 cm，5 μm
流動相：Hex：DCM（1 : 1，10 mM NH 3·MeOH）: MeOH=50 : 50
流速：18 mL/min
檢測（nm）：220/254 nm
實例 108-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物， N-((1 s,4 s)-4-乙基環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺（17.0 mg），並且保留時間為10.8 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.89 - 13.67 (m, 1H), 8.19 (dd, 1H), 7.67 - 7.56 (m, 1H), 7.41 (dd, 1H), 7.27 - 7.16 (m, 2H), 4.54 - 4.43 (m, 2H), 4.19 - 4.13 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.74 (s, 1H), 3.12 (d, 1H), 2.78 (d, 1H), 1.73 (d, 3H), 1.59 - 1.40 (m, 7H), 1.35 - 1.16 (m, 5H), 0.84 (t, 3H)。LCMS (ESI): 440.2 [M+H] +。
實例 108-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物， N-((1 r,4 r)-4-乙基環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺 （40.0 mg），並且保留時間為14.7 min。
實例 108-B也按照以下程序合成（如下所示的步驟-1至-3），然後將樣本的保留時間與 N-(4-乙基環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺的外消旋樣本對比（使用以下條件：柱：CHIRALPAK IC-3，4.6x50 mm，3 μm；流動相：（Hex : DCM=1 : 1）（0.1% DEA）/MeOH，1/1 v/v；流速：1 mL/min），以確定化合物的手性。實例108-A的保留時間為1.47 min並且實例108-B的保留時間為2.01 min。
步驟 -1. 1-[5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸甲酯
Figure 02_image423
將2-甲氧基吡啶-4-基硼酸（1.45 g，9.5 mmol），K 3PO 4（2.66 g，12.5 mmol），和Pd(dppf)Cl 2（918.0 mg，1.2 mmol）添加到1-(5-溴-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲酸甲酯（中間體501，2 g，6.3 mmol）在1,4-二㗁𠮿（20.0 mL）和H 2O（2.0 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在110ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h，然後在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，97/3 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.4 g）。LCMS (ESI): 345.1 [M+H] +。
步驟 -2. 1-[5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸
Figure 02_image425
將LiOH（293.0 mg，12.2 mmol）添加到1-[5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸甲酯（步驟-2，1.40 g，4.1 mmol）在THF（3.0 mL），MeOH（3.0 mL）和H 2O（3.0 mL）中的攪拌混合物中。將溶液在25ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h，然後用EtOAc萃取。將合併的有機層用水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並將溶劑在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（1.0 g）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 8.20 (d, 1H), 7.42 (m, 1H), 7.25 - 7.21 (m, 2H), 4.29 (s, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.27 (s, 1H), 2.96 (s, 1H), 2.58 (m, 1H), 1.89 - 1.86 (m, 2H), 1.54 (s, 2H)。LCMS (ESI): 331.1 [M+H] +。
步驟 -3. N-((1 r,4 r)-4- 乙基環己基 )-1-(5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺（實例 108-B ）
Figure 02_image427
將EDCI（86.2 mg，0.5 mmol），HOBt（60.7 mg，0.5 mmol），和(1 r,4 r)-4-乙基環己烷-1-胺鹽酸鹽（58.9 mg，0.4 mmol）添加到1-[5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（步驟-3，99.0 mg，0.3 mmol）和DIPEA（0.16 mL，0.9 mmol）在DMF（1.50 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h。藉由過濾收集沈澱物，用EtOAc洗滌，並在減壓下乾燥，以獲得呈固體的標題化合物（40 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.84 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.65 (d, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.28 - 7.18 (m, 2H), 4.51 - 4.06 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.49 - 3.38 (m, 1H), 3.23 - 2.99 (m, 1H), 2.90 - 2.70 (m, 1H), 2.42 - 2.32 (m, 1H), 1.86 - 1.65 (m, 6H), 1.62 - 1.38 (m, 2H), 1.29 - 1.00 (m, 5H), 0.99 - 0.77 (m, 5H)。LCMS (ESI): 440.2 [M+H] +。
實例 109. 1-(5-(3- 氯吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image429
使用與對於實例101的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的使用係3-氯吡啶-4-基硼酸作為步驟-5中的起始材料。將所得殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XBridge Shield RP18 OBD，30x150 mm，5 μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：27% B至57% B，7 min內；檢測：254 nm），以獲得標題化合物（10.2 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.93 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.58 (d, 1H), 7.84 (d, 1H), 7.73 - 7.50 (m, 1H), 7.17 (d, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.89 - 3.36 (m, 1H), 3.30 (s, 1H), 2.96 - 2.61 (m, 1H), 2.61 - 2.29 (m, 1H), 1.83 - 1.60 (m, 4H), 1.61 - 1.38 (m, 6H), 1.34 - 1.06 (m, 4H), 1.02 - 0.80 (m, 4H)。LCMS (ESI): 429.2 [M+H] +。
實例 110. 1-[4- 氯 -5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 s,4 s)-4- 甲基環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺和 1-[4- 氯 -5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-N-[(1 r,4 r)-4- 甲基環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image431
步驟 -1. 5- 溴 -4- 氯 -1 H- 吡唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image433
將NCS（195.4 mg，1.46 mmol）添加到5-溴-1 H-吡唑-3-甲酸甲酯（250.0 mg，1.22 mmol）在MeCN（5.0 mL）中的溶液中。將所得混合物在70ºC下攪拌14 h，然後將混合物濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（270 mg）。LCMS (ESI): 239.0 [M+H] +。
步驟 -2. 5- 溴 -4- 氯 -1 H- 吡唑 -3- 甲酸
Figure 02_image435
將NaOH（225.5 mg，5.64 mmol）添加到5-溴-4-氯-1 H-吡唑-3-甲酸甲酯（步驟-2，270.0 mg，1.13 mmol）在THF（1.0 mL），MeOH（1.0 mL）和H 2O（1.0 mL）中的溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h，然後用HCl（6 M）將溶液的pH調節至pH 3。藉由過濾收集固體，以獲得呈固體的標題化合物（200 mg）。LCMS (ESI): 225.0 [M+H] +。
步驟 -3. 1-(5- 溴 -4- 氯 -1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺：
Figure 02_image437
將HATU（506.0 mg，1.33 mmol）， N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺（中間體502，238.9 mg，1.07 mmol）和DIPEA（343.9 mg，2.66 mmol）添加到5-溴-4-氯-1 H-吡唑-3-甲酸（步驟-2，200.0 mg，0.89 mmol）在DMF（5.0 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌1 h，然後用水（5 mL）淬滅。然後將溶液用EtOAc萃取,並且然後將有機層濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/1 v/v）純化，以獲得標題化合物（200 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 431.1 [M+H] +。
步驟 -4. 1-[5- 溴 -4- 氯 -1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ]- N-(4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image439
將DHP（116.9 mg，1.39 mmol）和TsOH（15.9 mg，0.09 mmol）添加到1-(5-溴-4-氯-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺（步驟-3，400.0 mg，0.93 mmol）在THF（10.0 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h，然後將溶液濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/1 v/v）純化，以獲得標題化合物（380 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 426.2 [M+H] +。
步驟 -5. 1-[4- 氯 -5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ]- N-(4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image441
將2-甲氧基吡啶-4-基硼酸（36.6 mg，0.24 mmol），Pd(dppf)Cl 2（7.3 mg，0.01 mmol）和K 2CO 3（82.6 mg，0.6 mmol）添加到1-[5-溴-4-氯-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]- N-環己基哌啶-4-甲醯胺（步驟-4，100.0 mg，0.2 mmol）在1,4-二㗁𠮿（2.0 mL）和H 2O（0.4 mL）中的溶液中。將所得混合物在80ºC下攪拌2 h，然後將溶液濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/1 v/v）純化，以獲得標題化合物（80 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 544.3 [M+H] +。
步驟 -6. 1-[4- 氯 -5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 s,4 s)-4- 甲基環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺，和 1-[4- 氯 -5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-N-[(1 r,4 r)-4- 甲基環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image443
將HCl（6 M，1.0 mL）添加到1-[4-氯-5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]- N-環己基哌啶-4-甲醯胺（步驟-5，80.0 mg，0.15 mmol）在MeOH（1 mL）中的溶液中。將所得混合物在50ºC下攪拌1 h，然後將溶液濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（水（10 mM NH 4CO 3）: MeCN，80/20至40/60 v/v），以獲得1-[4-氯-5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-[(1 s,4 s)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺，和1-[4-氯-5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-N-[(1 r,4 r)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺（3.2 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（實例110）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 - 8.26 (m, 1H), 7.45 - 7.40 (m, 1H), 7.28 - 7.26 (m, 1H), 4.72 - 4.60 (m, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.97 - 3.80 (m, 1H), 3.62 - 3.51 (m, 1H), 3.28 - 3.16 (m, 1H), 3.05 - 2.90 (m, 1H), 2.70 - 2.45 (m, 1H), 2.01 - 1.83 (m, 2H), 1.83 - 1.70 (m, 4H), 1.69 - 1.50 (m, 4H), 1.45 - 1.17 (m, 2H), 1.15 - 1.01 (m, 1H), 1.01 - 0.84 (m, 3H)。LCMS (ESI:) 460.31 [M+H] +。
使用非手性製備型HPLC分離標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：XBridge製備型OBD C18柱
柱尺寸：19x250 mm，5 μm
流動相：水（10 mM NH 4HCO 3）:MeCN
梯度：37% MeCN至45% MeCN
流速：25 mL/min
檢測（nm）：220/254 nm
實例 110-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（6.2 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.5 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 - 8.26 (m, 1H), 7.45 - 7.40 (m, 1H), 7.28 - 7.26 (m, 1H), 4.70 - 4.60 (m, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.97 - 3.80 (m, 1H), 3.61 - 3.52 (m, 1H), 3.28 - 3.15 (m, 1H), 3.05 - 2.90 (m, 1H), 2.50 - 2.42 (m, 1H), 1.99 - 1.84 (m, 2H), 1.83 - 1.68 (m, 4H), 1.66 - 1.49 (m, 1H), 1.46 - 1.17 (m, 4H), 1.16 - 0.98 (m, 2H), 0.93 (d, 3H)。LCMS (ESI:) 460.31 [M+H] +。
實例 110-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（6.3 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.8 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 - 8.26 (m, 1H), 7.45 - 7.40 (m, 1H), 7.28 - 7.26 (m, 1H), 4.74 - 4.65 (m, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.98 - 3.80 (m, 2H), 3.28 - 3.15 (m, 1H), 3.05 - 2.90 (m, 1H), 2.50 - 2.42 (m, 1H), 1.99 - 1.86 (m, 1H), 1.84 - 1.72 (m, 3H), 1.72 - 1.50 (m, 6H), 1.44 - 1.22 (m, 3H), 0.98 (d, 3H)。LCMS (ESI:) 460.31 [M+H] +。
實例 111. 1-[5-(6- 甲氧基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4- 甲基環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺和 1-[5-(6- 甲氧基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 s,4 s)-4- 甲基環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image445
步驟 -1 ： 1-(1-( 四氫 -2H- 哌喃 -2- 基 )-1H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲酸
Figure 02_image447
在0ºC下將LiOH（821.70 mg，19.56 mmol）分批添加到1-(1-(四氫-2 H-哌喃-2-基)-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲酸甲酯（中間體517，步驟-2，3.14 g，9.77 mmol）和H 2O（10.00 mL）在THF（10 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在24ºC下攪拌1 h。用HCl（6 M）將混合物酸化至pH 6。將水層用EtOAc萃取。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈油狀物的標題化合物（2.6 g）。LCMS (ESI): [M+H] +: 308.1。
步驟 -2. N-(4- 甲基環己基 )-1-[1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image449
將HATU（3.86 g，10.15 mmol），4-甲基環己烷-1-胺（1.15 g，10.16 mmol），和DIPEA（3.28 g，25.38 mmol）添加到1-(1-(四氫-2H-哌喃-2-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲酸（步驟-1，2.60 g，8.46 mmol）在DMF（20 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌1 h，然後用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層在減壓下濃縮並將殘餘物藉由反相柱層析法（MeCN/H 2O（0.5% NH 4HCO 3），10/90至60/40 v/v）純化，以獲得標題化合物（2.1 g），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 403.3 [M+H] +。
步驟 -3. 5-[4-[(4- 甲基環己基 ) 胺基甲醯基 ] 哌啶 -1- 羰基 ]-2-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 基硼酸
Figure 02_image451
將Dtbpy（53.6 mg，0.2 mmol），[Ir(COD)OMe] 2（66.2 mg，0.1 mmol），和B 2Pin 2（253.7 mg，0.1 mmol）添加到 N-(4-甲基環己基)-1-[1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺（步驟-2，402.0 mg，0.99 mmol）在MTBE（8 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在70ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h，然後在減壓下濃縮，以獲得標題化合物，其為非鏡像異構物混合物，將其不經進一步純化而用於下一步驟。LCMS (ESI): 447.3 [M+H] +。
步驟 -4. 1-[5-(6- 甲氧基嘧啶 -4- 基 )-1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ]- N-(4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image453
將4-氯-6-甲氧基嘧啶（34 mg，0.24 mmol），Pd(dppf)Cl 2（28 mg，0.04 mmol），和K 3PO 4（126 mg，0.59 mmol）添加到5-[4-[(4-甲基環己基)胺基甲醯基]哌啶-1-羰基]-2-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-基硼酸（直接從步驟-3中使用）在1,4-二㗁𠮿（2 mL）和H 2O（0.2 mL）中的混合物中。將溶液在70ºC下在氮氣氣氛下攪拌3 h，然後用乙酸乙酯稀釋並用水洗滌。將有機層在減壓下濃縮並將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，15/1 v/v）純化，以獲得標題化合物（90 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 511.3 [M+H] +。
步驟 -5. 1-[5-(6- 甲氧基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4- 甲基環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺和 1-[5-(6- 甲氧基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 s,4 s)-4- 甲基環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image445
將TFA（2 mL）添加到1-[5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]- N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺（步驟-4，90 mg，0.18 mmol）在DCM（2 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h，然後將溶液在減壓下濃縮，以獲得1-[5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-[(1 r,4 r)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺和1-[5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-[(1 s,4 s)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺，其為非鏡像異構物的混合物（ 實例 111）。
使用手性製備型HPLC分離標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IC
柱尺寸：2x25 cm，5 μm
流動相：MTBE（0.1% FA）/MeOH，1/1 v/v
流速：20 mL/min
檢測（nm）：220/254 nm
實例 111-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（9.3 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為11.36 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.83 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.66 - 7.58 (m, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 4.44 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.53 - 3.37 (m, 1H), 3.23 - 3.15 (m, 1H), 2.80 (s, 1H), 2.43 - 2.28 (m, 1H), 1.77 - 1.69 (m, 3H), 1.66 - 1.63 (m, 2H), 1.53 (s, 2H), 1.25 - 1.23 (m, 2H), 1.17 - 1.07 (m, 2H), 1.00 - 0.90 (m, 2H), 0.85 (d, 3H)。LCMS (ESI): 427.4 [M+H] +。
實例 111-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（11.4 mg）。第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為16.17 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.83 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.46 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.74 (s, 1H), 3.02 - 3.15 (m, 1H), 2.92 - 2.73 (m, 1H), 2.42 - 2.33 (m, 1H), 1.72 (s, 2H), 1.51 (s, 4H), 1.47 - 1.40 (m, 4H), 1.25 - 1.23 (m, 3H), 0.89 (d, 3H)。LCMS (ESI): 427.4 [M+H] +。
實例 112. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(3- 氯苯基 ) 甲基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image456
步驟 -1. 1-[5- 溴 -1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸
Figure 02_image458
將氫氧化鋰（1.00 g，41.75 mmol）添加到1-[5-溴-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸甲酯（中間體504，1.60 g，4.0 mmol）在THF（5.0 mL），MeOH（5.0 mL），和H 2O（5.0 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌1 h，然後將溶液在真空下濃縮。使用HCl（1 M）將溶液的pH調節至5，然後將溶液用乙酸乙酯萃取。將有機層在真空下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（1.3 g）。LCMS (ESI): 386.1 [M+H] +。
步驟 -2. 1-[5- 溴 -1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(3- 氯苯基 ) 甲基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image460
將1-(3-氯苯基)甲胺（88.0 mg，0.6 mmol），HATU（237.0 mg，0.6 mmol），和DIPEA（0.27 mL，1.6 mmol）添加到1-[5-溴-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（步驟-1，200.0 mg，0.52 mmol）在DMF（4.0 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌1 h，然後用水稀釋並用二氯甲烷萃取。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥，並在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（200 mg）。LCMS (ESI): 509.1 [M+H] +。
步驟 -3. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(3- 氯苯基 ) 甲基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺：
Figure 02_image462
將5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基硼酸（213.0 mg，1.16 mmol），Pd(dppf)Cl 2（85 mg，0.12 mmol）和K 3PO 4（369.0 mg，1.27 mmol）添加到1-[5-溴-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]- N-[(3-氯苯基)甲基]哌啶-4-甲醯胺（步驟-3，295.0 mg，0.58 mmol）在1,4-二㗁𠮿（4.0 mL）和H 2O（1.0 mL）中的溶液中。將所得溶液在80ºC下在氮氣下攪拌4 h，然後在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（150 mg）。LCMS (ESI): 572.2 [M+H] +。
步驟 -4. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(3- 氯苯基 ) 甲基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image456
將TFA（2.0 mL）添加到1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]- N-[(3-氯苯基)甲基]哌啶-4-甲醯胺（步驟-3，150.0 mg，0.26 mmol）在DCM（2.0 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌1 h，然後用飽和NaHCO 3水溶液將溶液的pH值調節至8。然後將溶液用DCM萃取並將有機層在真空下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：Atlantis HILIC OBD，19x150 mm，5 μm，10 nm；流動相A：水（0.1% FA）；流動相B：MeCN；梯度：31% B至60% B，8 min內；檢測器：UV 220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（54.9 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.90 (s, 1H), 8.47 - 8.39 (m, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.39 - 7.29 (m, 3H), 7.29 - 7.20 (m, 2H), 7.16 (s, 1H), 4.45 (bs, 2H), 4.27 (d, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.22 (s, 1H), 2.91 - 2.86 (m, 1H), 2.55 (d, 1H), 1.90 - 1.81 (m, 2H), 1.70 - 1.58 (m, 2H)。LCMS (ESI): 488.1 [M+H] +。
實例 113. N-((1 s,4 s)-4-( 二氟甲基 ) 環己基 )-1-(5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺和 N -((1 r,4 r)-4-( 二氟甲基 ) 環己基 )-1-(5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image464
步驟 -1. 1-[5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸甲酯
Figure 02_image466
將2-甲氧基吡啶-4-基硼酸（1.45 g，9.5 mmol），K 3PO 4（2.66 g，12.53 mmol）和Pd(dppf)Cl 2（918 mg，1.2 mmol）添加到1-(5-溴-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲酸甲酯（中間體501，2.00 g，6.3 mmol）在1,4-二㗁𠮿（20 mL）和H 2O（2 mL）中的攪拌混合物中。將所得溶液在110ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h，然後將溶液在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM /MeOH，97/3 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.4 g）。LCMS (ESI): 345.1 [M+H] +。
步驟 -2. 1-[5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸
Figure 02_image468
將LiOH（293 mg，12.2 mmol）添加到1-[5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸甲酯（1.40 g，4.07 mmol）在THF（3 mL），MeOH（3 mL），和H 2O（3 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。然後將溶液用EtOAc萃取，然後將合併的有機層用水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（1.0 g）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 8.20 (d, 1H), 7.42 (m, 1H), 7.25 - 7.21 (m, 2H), 4.29 (s, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.27 (s, 1H), 2.96 (s, 1H), 2.58 (m, 1H), 1.89 - 1.86 (m, 2H), 1.54 (s, 2H)。LCMS (ESI): 331.1 [M+H] +。
步驟 -3. N-((1 s,4 s)-4-( 二氟甲基 ) 環己基 )-1-(5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺和 N -((1 r,4 r)-4-( 二氟甲基 ) 環己基 )-1-(5-(2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image470
將4-(二氟甲基)環己烷-1-胺鹽酸鹽（14.6 mg，0.08 mmol）添加到1-[5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（20.0 mg，0.06 mmol）和三乙基胺（25 μL，0.18 mmol）在THF（0.6 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下在氮氣氣氛下攪拌15 min，然後添加T3P ®（在DMF中50%，53 μL，0.1 mmol）。將溶液攪拌額外的2 h，然後用水和EtOAc稀釋。將有機層分離，用水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並且然後在減壓下濃縮。將殘餘物先藉由矽膠柱層析法（EtOAc/Hex，0/100至100/0 v/v）純化，以獲得 N-((1 s,4 s)-4-(二氟甲基)環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺和 N-((1 r,4 r)-4-(二氟甲基)環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺的非鏡像異構物混合物（ 實例 113）。
使用製備型HPLC分離標題化合物的混合物。
柱：沃特世CSH C18
柱尺寸：150x19 mm，5 μm
梯度：水（0.1% FA）/MeCN（0.1% FA），75/25至5/95 v/v
流速：30 mL/min
檢測（nm）：254 nm
實例 113-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（1.7 mg）。
在以下QC條件下，第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為1.45 min。
LCMS (ESI): 462.7 [M+H] +。
實例 113-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（2.0 mg）。
在以下QC條件下，第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為1.47 min。
1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.23 (d, 1H), 7.29 (br s, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 5.87 - 5.50 (m, 2H), 4.73 - 4.46 (m, 2H), 4.12 (br s, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.43 - 3.13 (m, 1H), 3.13 - 2.88 (m, 1H), 2.44 (br s, 1H), 2.06 - 1.92 (m, 2H), 1.91 - 1.69 (m, 9H), 1.67 - 1.59 (m, 2H), 1.50 - 1.37 (m, 3H)。LCMS (ESI): 462.7 [M+H] +。
QC條件：
柱：沃特世Acquity UPLC CSH C18
柱尺寸：50 x 2.1 mm，1.8 μm
梯度：MeCN（0.1% FA）/水（0.1% FA），5/95至100/0
流速：0.8 mL/min
實例 114. 實例 114-A 和 114-B. 1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 s,4 s)-4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺和 1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 r)-4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image472
步驟 -1. 1-[5- 溴 -1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ]- N-(4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image474
將DHP（158.8 mg，1.89 mmol）和TsOH（10.8 mg，0.06 mmol）添加到1-(5-溴-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺（250.0 mg，0.63 mmol，實例101，步驟1-3）在THF（10.0 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌2 h，然後將溶液濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/1 v/v）純化，以獲得標題化合物（230.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 481.2 [M+H] +。
步驟 -2. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ]- N-(4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image476
將5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基硼酸（142.0 mg，0.83 mmol），Pd(dppf)Cl 2（60.8 mg，0.08 mmol）和K 3PO 4（176.4 mg，0.83 mmol）添加到1-[5-溴-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]- N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺（步驟-1，200.0 mg，0.42 mmol）在1,4-二㗁𠮿（5.0 mL）和H 2O（0.5 mL）中的溶液中。將溶液在70ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h，然後用乙酸乙酯稀釋並用水洗滌。然後將有機層在減壓下濃縮，並將殘餘物藉由製備型TLC（CH 2Cl 2/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得標題化合物（212 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 528.3 [M+H] +。 步驟 -3. 1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 s,4 s)-4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺和 1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 r)-4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image472
將TFA（2.0 mL）添加到1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]- N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺（步驟-2，236.0 mg，0.45 mmol）在DCM（2.0 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌30 min，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：30 mL/min；梯度：30% B至60% B，30 min內；檢測器，UV 220/254 nm），以獲得1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 s,4 s)-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺和1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 r)-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺 （72.0 mg），其為非鏡像異構物的混合物（ 實例 114）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.12 (d, 1H), 7.24 (d, 1H), 7.07 (d, 1H), 4.71 - 4.42 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.87 - 3.46 (m, 1H), 3.32 - 3.20 (m, 1H), 2.96 - 2.90 (m, 1H), 2.69 - 2.38 (m, 1H), 1.86 - 1.44 (m, 10H), 1.41 - 1.10 (m, 3H), 1.08 - 0.86 (m, 3H)。LCMS (ESI): 444.4 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IF
柱尺寸：2x25 cm，5 μm
流動相：（Hex/DCM，1/1 v/v，10 mM NH 3·MeOH）/EtOH（1/1 v/v）
流速：20 mL/min
檢測（nm）：220/254 nm
實例 114-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（4.4 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為14.3 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.94 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 4.61 - 4.14 (m, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.54 - 3.34 (m, 1H), 3.25 - 3.06 (m, 1H), 2.94 - 2.64 (m, 1H), 2.46 - 2.29 (m, 1H), 1.83 - 1.41 (m, 8H), 1.39 - 0.96 (m, 5H), 0.91 - 0.84 (m, 3H)。LCMS (ESI): 444.2 [M+H] +。
實例 114-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（42.6 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為24.8 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.97 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.63 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 4.59 - 4.29 (m, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.78 - 3.71 (m, 1H), 3.25 - 3.06 (m, 1H), 2.92 - 2.69 (m, 1H), 2.69 - 2.38 (m, 1H), 1.75 - 1.69 (m, 2H), 1.63 - 1.15 (m, 11H), 0.94 - 0.85 (m, 3H)。LCMS (ESI): 444.2 [M+H] +。
實例 115. ( R)-1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[1-(3- 氯苯基 ) 乙基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺和 ( S)-1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[1-(3- 氯苯基 ) 乙基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺的鏡像異構物混合物
Figure 02_image479
步驟 -1. 1-[5- 溴 -1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[1-(3- 氯苯基 ) 乙基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺：
Figure 02_image481
將1-(3-氯苯基)乙烷-1-胺（中間體539，112 mg，0.72 mmol），DIPEA（187 mg，1.45 mmol），和HATU（220 mg，0.58 mmol）添加到1-[5-溴-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（中間體509，186 mg，0.48 mmol）在DMF（2 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌1 h。將所得溶液用水稀釋，然後將有機物用DCM萃取。將有機層在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（240 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 523.1。
步驟 -2. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[1-(3- 氯苯基 ) 乙基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺：
Figure 02_image483
將Pd(dppf)Cl 2（78 mg，0.11 mmol），K 3PO 4（340 mg，1.60 mmol）和5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基硼酸（200 mg，1.07 mmol）添加到1-[5-溴-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]- N-[1-(3-氯苯基)乙基]哌啶-4-甲醯胺（步驟-1，280 mg，0.53 mmol）在二㗁𠮿（4.00 mL），H 2O（1 mL）中的溶液中。將所得溶液在80ºC下在N 2氣氛下攪拌12 h。將所得溶液用水稀釋並將有機物用DCM萃取。將有機層在真空下濃縮並將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAC，1/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（120 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 586.2。
步驟 -3. ( R)-1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[1-(3- 氯苯基 ) 乙基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺和 ( S)-1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[1-(3- 氯苯基 ) 乙基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺：
Figure 02_image479
將TFA（2 mL）添加到1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]- N-[1-(3-氯苯基)乙基]哌啶-4-甲醯胺（步驟-2，120 mg，0.21 mmol，1.00 當量）在DCM（2 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌3 h。添加DIPEA，將混合物的pH調節至pH 8。將所得溶液在真空下濃縮。將所得殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：Atlantis HILIC OBD，19x150 mm，5 μm，10 nm；流動相A：水（0.1% FA）；流動相B：MeCN；梯度：42% B至57% B，7 min內；檢測器：UV 220/254 nm），以獲得( R)-1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-[1-(3-氯苯基)乙基]哌啶-4-甲醯胺和( S)-1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-[1-(3-氯苯基)乙基]哌啶-4-甲醯胺（27.2 mg），其為鏡像異構物的固體混合物（ 實例 115）。 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.92 (s, 1H), 8.31 (d, ,2H), 7.38 - 7.17 (m, 5H), 7.11 (s, 1H), 4.96 - 4.80 (m, 1H), 4.44 (s, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.18 (s, 1H), 2.82 (s, 1H), 2.52 (s, 1H), 1.77 (s, 2H), 1.53 (s, 2H), 1.32 (d, 3H)。LCMS (ESI): 502.1 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該鏡像異構物的固體混合物。
柱：CHIRALPAK IC
柱尺寸：3x25 cm，5 μm
流動相：MTBE（10 mM NH 3·MeOH）/MeOH，4/1 v/v
流速：50 mL/min
檢測器（nm）：220/254 nm
實例 115-A.獲得呈固體的第一洗脫鏡像異構物（7.1 mg）。
第一洗脫鏡像異構物的保留時間為7.3 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14.14 - 13.72 (m, 1H), 8.47 - 8.16 (m, 2H), 7.38 - 7.30 (m, 2H), 7.30 -7.17 (m, 3H), 7.16 - 7.07 (m, 1H), 4.97 - 4.71 (m, 1H), 4.70 - 3.99 (m, 2H), 3.89 (d, 3H), 3.28 - 3.07 (m, 1H), 2.73 (s, 1H), 2.50 (s, 1H), 1.77 (s, 2H), 1.53 (s, 2H), 1.33 (d, 3H)。LCMS (ESI): 502.1 [M+H] +。
實例 115-B.獲得呈固體的第二洗脫鏡像異構物（8.2 mg）。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14.14 - 13.61 (m, 1H), 8.35 (d,2H), 7.40 - 7.29 (m, 2H), 7.30 - 7.16 (m, 3H), 7.13 (s, 1H), 4.99 - 4.71 (m, 1H), 4.73 - 3.96 (m, 2H), 3.89 (d, 3H), 3.19 (s, 1H), 2.76 (s, 1H), 2.50 (s, 1H), 1.78 (s, 2H), 1.53 (s, 2H), 1.33 (d, 3H)。LCMS (ESI): 502.1 [M+H] +。
實例 117. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-(1- 苯基吡咯啶 -3- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image485
步驟 -1. 3-[1-[5- 溴 -1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 醯胺基 ] 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image487
將EDCI（469 mg，2.45 mmol）和HOBT（330 mg，2.45 mmol）添加到1-[5-溴-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（中間體509，630 mg，1.63 mmol）在DMF（5 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌30 min，然後添加3-胺基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（364 mg，1.96 mmol）和DIPEA（843 mg，6.52 mmol）。將溶液在25ºC下攪拌3 h，然後用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層在減壓下濃縮，然後將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物的鏡像異構物混合物（600 mg）。LCMS (ESI): 554.2 [M+H] +。
步驟 -2. 3-(1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-( 㗁 𠮿 -2- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 羧醯胺 ) 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image489
將5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基硼酸（步驟-1，392 mg，2.1 mmol），Pd(dppf)Cl 2（153 mg，0.2 mmol）和K 3PO 4（666 mg，3.1 mmol）添加到3-[1-[5-溴-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]哌啶-4-醯胺基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（580 mg，1.0 mmol）在1,4-二㗁𠮿（10 mL）和H 2O（2.5 mL）中的溶液中。將溶液在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌2 h，然後用乙酸乙酯稀釋並用水洗滌。將有機層在減壓下濃縮，並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得標題化合物（430 mg），其為鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 617.3 [M+H] +。 步驟 -3. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-( 吡咯啶 -3- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image491
將TFA（2.00 mL）添加到3-[1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]哌啶-4-醯胺基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（步驟-2，430.0 mg，0.70 mmol）在DCM（2.00 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌1 h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18反相柱層析法（MeCN/H 2O，1/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物的鏡像異構物混合物（200.0 mg）。LCMS (ESI): 433.2 [M+H] + 步驟 -4. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-(1- 苯基吡咯啶 -3- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image493
將溴苯（81 mg，0.5 mmol），Pd 2(dba) 3（31 mg，0.03 mmol），XPhos（33 mg，0.07 mmol）和K 3PO 4（220 mg，1.04 mmol）添加到1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-(吡咯啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺（步驟-3，150 mg，0.35 mmol）在DMSO（3.0 mL）中的混合物中。將溶液在120ºC下在氮氣氣氛下攪拌3 h，然後用乙酸乙酯稀釋並用水洗滌。將有機層在減壓下濃縮，然後將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XBridge Shield RP18 OBD，30x150 mm，5 μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeCN；梯度：38% B至55% B，8 min內；檢測：220/254 nm），以獲得標題化合物（15.7 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ 13.80 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.15 (d, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.20 - 7.10 (m, 3H), 6.63 - 6.55 (m, 1H), 6.54 - 6.48 (m, 2H), 4.53 - 4.30 (m, 3H), 3.90 (s, 3H), 3.53 - 3.41 (m, 1H), 3.36 (s, 1H), 3.30 - 3.18 (m, 2H), 3.08 - 2.96 (m, 1H), 2.77 (s, 1H), 2.45 (s, 1H), 2.27 - 2.07 (m, 1H), 1.95 - 1.82 (m, 1H), 1.75 (s, 2H), 1.56 (s, 2H)。LCMS (ESI): 509.3 [M+H] +。
實例 118. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 s,4 s)-4-( 三氟甲基 ) 環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺和 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4-( 三氟甲基 ) 環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image495
步驟 -1. 1-[5- 溴 -1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[4-( 三氟甲基 ) 環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image497
將4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（103.9 mg，0.6 mmol）和DIPEA（200.8 mg，1.6 mmol）添加到1-[5-溴-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（中間體509，200.0 mg，0.5 mmol）和HATU（236.3 mg，0.6 mmol）在DMF（3.0 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌2 h，然後用乙酸乙酯稀釋並用水洗滌。將有機層在減壓下濃縮，然後將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，2/1 v/v）純化，以獲得標題化合物（290 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 535.2 [M+H] +。 步驟 -2. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[4-( 三氟甲基 ) 環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image499
將5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基硼酸（98.7 mg，0.50 mmol），Pd(dppf)Cl 2（64.2 mg，0.10 mmol）和K 3PO 4（186.3 mg，0.90 mmol）添加到1-[5-溴-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]- N-[4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺（步驟-1，235.0 mg，0.40 mmol）在H 2O（0.40 mL）中的攪拌溶液中，並添加1,4-二㗁𠮿（4.00 mL）。將溶液在70ºC下在N 2氣氛下攪拌14 h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（100% EtOAc）純化，以獲得標題化合物（180 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 598.2 [M+H] +。
步驟 -3. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 s,4 s)-4-( 三氟甲基 ) 環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺和 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4-( 三氟甲基 ) 環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image495
將TFA（3.0 mL）添加到1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]- N-[4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺（步驟-2，198.0 mg，0.3 mmol）在DCM（3.0 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌1 h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XBridge Shield RP18 OBD，30x150 mm，5 μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：36% B至54% B，7 min內；檢測：220/254 nm），以獲得1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-[(1 s,4 s)-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺和1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-[(1 r,4 r)-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺（51.6 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 118）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 8.33 (s, 1H), 7.83 - 7.71 (m, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.15 - 7.08 (m, 1H), 4.47 - 4.41 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.86 - 3.81 (m, 1H), 3.19 - 3.13 (m, 1H), 2.84 - 2.78 (m, 1H), 2.37 - 2.09 (m, 1H), 1.90 - 1.79 (m, 1H), 1.78 - 1.64 (m, 4H), 1.64 - 1.42 (m, 7H)。LCMS (ESI): 514.2 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該非鏡像異構物的固體混合物。
柱：手性ART纖維素-SB
柱尺寸：2x25 cm，5 μm
流動相：MTBE（2 mM NH 3·MEOH）/MeOH，9/1 v/v
流速：20 mL/min
檢測（nm）：220/254 nm
實例 118-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（22.6 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.14 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.68 - 4.62 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.40 - 3.15 (m, 1H), 2.96 - 2.90 (m, 2H), 2.73 - 2.60 (m, 1H), 2.23 - 2.17 (m, 1H), 1.95 - 1.71 (m, 7H), 1.69 - 1.55 (m, 5H)。LCMS (ESI): 514.2 [M+H] +。
實例 118-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（5.1 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.65 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) 8.25 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.77 - 4.50 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.64 - 3.58 (m, 1H), 3.40 - 2.80 (m, 2H), 2.53 - 2.47 (m, 1H), 2.20 - 2.05 (m, 2H), 2.04 - 1.92 (m, 2H), 1.88 - 1.61 (m, 5H), 1.51 - 1.13 (m, 4H)。LCMS (ESI): 514.2 [M+H] +。
實例 119. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( 咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -2- 基甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image502
將HATU（25.0 mg，0.07 mmol）和咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基甲胺（9.7 mg，0.07 mmol）添加到1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（中間體503，20.0 mg，0.06 mmol）和DIPEA（21.0 mg，0.17 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得殘餘物過濾。將濾液藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XBridge BEH130製備型C18 OBD柱，130Å，19 x 150 mm 5 µm 13 nm；流動相A：水（20 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；檢測器，UV 254/210 nm），以獲得呈固體的標題化合物（19.8 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.41 - 8.19 (m, 2H), 7.71 (s, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.32 - 7.23 (m, 2H), 7.15 (s, 2H), 6.92 - 6.87 (m, 1H), 4.55 (m, 3H), 3.94 (m, 4H), 2.61 (m, 1H), 2.00 - 1.73 (m, 4H), 1.29 (s, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 494.3。
實例 120. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5- 氯吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image504
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(5-氯吡啶-2-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（21.7 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.94 (m, 1H), 8.59 - 8.46 (m, 2H), 8.36 (m, 1H), 7.95 - 7.84 (m, 1H), 7.36 - 7.20 (m, 2H), 7.18 - 7.11 (m, 1H), 4.76 - 4.42 (m, 1H), 4.36 (m, 2H), 4.14 (s, 1H), 3.99 - 3.80 (m, 3H), 3.28 - 3.10 (m, 1H), 3.02 - 2.78 (m, 1H), 2.78 - 2.56 (m, 1H), 2.00 - 1.69 (m, 2H), 1.69 - 1.42 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 489.35。
實例 121. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-(2- 甲基 -1,3- 二㗁 𠮿 -5- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image506
將EDCI（35.5 mg，0.19 mmol），HOBT（25.0 mg，0.19 mmol），和2-甲基-1,3-二㗁𠮿-5-胺（21.7 mg，0.19 mmol）添加到1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（中間體503，45.0 mg，0.12 mmol）和DIPEA（31.9 mg，0.25 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，並且經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（C18柱；流動相：在水中的MeCN，10%至95%梯度，20 min內；檢測器：UV 254 nm），以獲得標題化合物（20.9 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ 13.92 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.24 (d, 1H), 7.14 (d, 1H), 4.72 (q, 1H), 4.47 (s, 2H), 3.90 - 3.86 (m, 5H), 3.79 - 3.75 (m, 2H), 3.57 (d, 1H), 3.18 - 3.14 (m, 1H), 2.83 - 2.75 (m, 2H), 1.76 - 1.72 (m, 2H), 1.65 - 1.60 (m, 2H), 1.21 (s, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 464.1。
實例 122. N-((1 H- 吲哚 -5- 基 ) 甲基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image508
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 H-吲哚-5-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（17.0 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.47 (d, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.15 (s, 2H), 7.09 - 7.00 (m, 1H), 6.40 (dd, 1H), 4.74 - 4.52 (m, 2H), 4.44 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.39 - 3.18 (m, 1H), 2.97 - 2.91 (m, 1H), 2.66 - 2.53 (m, 1H), 1.98 - 1.63 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 493.3。
實例 123. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(2,3,6- 三氟苄基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image510
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(2,3,6-三氟苯基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（16.2 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.27 (s, 1H), 7.35 - 7.18 (m, 1H), 7.15 (s, 2H), 7.06 - 6.92 (m, 1H), 4.66 - 4.60 (m, 2H), 4.50 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.31 - 3.25 (m, 1H), 2.97 - 2.91 (m, 1H), 2.64 - 2.49 (m, 1H), 1.95 - 1.61 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 508.35。
實例 124. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1,3- 二甲基 -1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image512
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1,3-二甲基-1 H-吡唑-4-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（13.2 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 4.62 (s, 2H), 4.18 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 2.93 (s, 1H), 2.52 (m, 1H), 2.19 (s, 3H), 1.93 - 1.64 (m, 5H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 472.4。
實例 125. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(2- 氯 -5- 氟苄基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image514
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(2-氯-5-氟苯基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（15.9 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.56 - 7.35 (m, 1H), 7.21 - 6.96 (m, 4H), 4.64 (s, 3H), 4.45 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.97 - 2.87 (m, 1H), 2.74 - 2.56 (m, 1H), 1.98 - 1.64 (m, 4H), 1.32 (m, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 506.3。
實例 126. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1-(2,2,2- 三氟乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image516
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(2,2,2-三氟乙基)-1 H-吡唑-4-胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（21.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.59 (m, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 4.94 - 4.88 (m, 2H), 4.86 - 4.81 (m, 1H), 4.68 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.01 - 2.96 (m, 1H), 2.75 - 2.63 (m, 1H), 1.98 - 1.94 (m, 2H), 1.85 - 1.77 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 512.1。
實例 127. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image518
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(5-氟吡啶-2-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（21.3 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.39 (m, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.63 - 7.54 (m, 1H), 7.42 - 7.34 (m, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.64 (s, 2H), 4.47 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.96 (s, 1H), 2.65 (s, 1H), 1.94 (s, 2H), 1.76 (m, 2H), 1.31 (m, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 473.35。
實例 128. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1- 氰基環丁基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image520
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-胺基環丁烷-1-甲腈鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（17.7 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 4.63 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.44 - 2.85 (m, 3H), 2.76 - 1.70 (m, 10H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 443.3。
實例 129. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image522
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（14.6 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 8.02 - 7.94 (m, 1H), 7.71 - 7.62 (m, 1H), 7.56 (m, 1H), 7.14 (m, 2H), 4.55 (s, 1H), 4.45 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 2.99 (s, 1H), 2.74 - 2.48 (m, 1H), 2.08 - 1.67 (m, 4H), 1.30 (m, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 523.3。
實例 130. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image524
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(3-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（8.4 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.82 - 8.73 (m, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.15 - 8.08 (m, 1H), 7.53 - 7.45 (m, 1H), 7.15 (s, 2H), 4.68 (s, 2H), 4.64 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.99 (s, 1H), 2.77 - 2.65 (m, 1H), 1.97 (s, 2H), 1.81 (d, 1H), 1.75 (d, 1H), 1.31 (m, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 523.40。
實例 131. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4- 甲基吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image526
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(4-甲基吡啶-3-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（11.5 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.35 (s, 1H), 8.33 - 8.22 (m, 2H), 7.26 (m, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.64 (s, 1H), 4.57 (s, 1H), 4.43 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.94 (s, 2H), 2.65 - 2.55 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.02 - 1.63 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 469.40。
實例 132. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( 異口克唍 -4- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image528
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用異口克唍-4-胺作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體混合物（18.0 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 (s, 1H), 7.33 - 7.22 (m, 3H), 7.17 (s, 2H), 7.13 - 7.05 (m, 1H), 5.07 - 4.98 (m, 1H), 4.90 - 4.79 (m, 1H), 4.79 - 4.68 (m, 1H), 4.65 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 4.01 - 3.83 (m, 2H), 3.39 - 3.18 (m, 1H), 2.94 (s, 1H), 2.67 - 2.53 (m, 1H), 2.00 - 1.63 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 496.40。
實例 133. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 R,2 S)-2- 苯基環丙基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image530
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 R,2 S)-2-苯基環丙-1-胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（17.3 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 (s, 1H), 7.35 - 7.10 (m, 7H), 4.64 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.29 - 3.07 (m, 1H), 3.14 - 2.77 (m, 2H), 2.61 - 2.46 (m, 1H), 2.10 - 1.98 (m, 1H), 1.97 - 1.66 (m, 4H), 1.34 - 1.12 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 480.3。
實例 134. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1- 羥基環己基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image532
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(胺基甲基)環己烷-1-醇作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（18.9 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.66 - 4.62 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.34 - 3.30 (m, 1H), 3.23 - 3.18 (m, 2H), 2.96 - 2.92 (m, 1H), 2.68 - 2.55 (m, 1H), 2.02 - 1.27 (m, 14H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 476.45。
實例 135. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4,4- 二甲基氧雜環丁烷 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image534
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(4,4-二甲基氧雜環丁烷-2-基)甲胺作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體混合物（19.2 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 4.73 - 4.58 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.51 - 3.33 (m, 2H), 2.95 (s, 1H), 2.67 - 2.52 (m, 1H), 2.47 - 2.34 (m, 1H), 2.26 - 2.14 (m, 1H), 2.03 - 1.64 (m, 6H), 1.46 (s, 3H), 1.40 (s, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 462.4。
實例 136. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((2- 甲基㗁唑 -5- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image536
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(2-甲基㗁唑-5-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（18.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.84 (d, 1H), 4.63 (s, 2H), 4.38 (d, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.00 - 2.87 (m, 1H), 2.62 - 2.51 (m, H), 2.41 (s, 3H), 2.03 - 1.57 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 459.40。
實例 137. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -7- 基甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image538
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（22.6 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.25 (s, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.23 - 7.03 (m, 3H), 6.78 (d, 1H), 6.65 (d, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.66 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.97 (s, 1H), 2.75 - 2.62 (m, 1H), 2.09 - 1.86 (m, 2H), 1.83 - 1.73 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 494.3。
實例 138. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5- 氯嘧啶 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image540
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(5-氯嘧啶-2-基)甲胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（17.4 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD): δ 8.76 (s, 2H), 8.25 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 4.65 (s, 2H), 4.58 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.00 (s, 2H), 2.74 - 2.63 (m, 1H), 1.97 (s, 2H), 1.86 - 1.69 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 490.3。
實例 139. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image542
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（13.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)：δ 8.81 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.11 - 8.07 (m, 1H), 7.52 (m, 1H), 7.15 (s, 2H), 4.68 (s, 2H), 4.57 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.98 (s, 1H), 2.70 (d, 2H), 1.95 (d, 1H), 1.77 (d, 2H), 1.31 (d, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 523.3。
實例 140. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3- 氯吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image544
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(3-氯吡啶-2-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（20.8 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.51 - 8.40 (m, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.90 - 7.76 (m, 1H), 7.43 - 7.27 (m, 2H), 7.15 (s, 1H), 4.61 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.37 - 3.23 (m, 3H), 2.98 (s, 1H), 2.70 (s, 1H), 1.96 (s, 2H), 1.84 - 1.69 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 489.3。
實例 141. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1,5- 二甲基 -1 H- 吡唑 -3- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image546
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1,5-二甲基-1 H-吡唑-3-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（18.1 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 (s, 1H), 7.16 (s, 2H), 5.98 (d, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.28 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.32 (s, 1H), 2.96 (s, 1H), 2.59 (m, 1H), 2.27 (d, 3H), 2.08 - 1.64 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 472.3。
實例 142. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1-(4- 氯苯氧基 ) 丙 -2- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image548
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(4-氯苯氧基)丙-2-胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（22.1 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 (s, 1H), 7.32 - 7.21 (m, 2H), 7.16 (s, 2H), 7.00 - 6.88 (m, 2H), 4.66 - 4.60 (m, 2H), 4.36 - 4.19 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 4.02 - 3.86 (m, 2H), 3.40 - 3.17 (m, 1H), 2.98 - 2.92 (m, 1H), 2.66 - 2.50 (m, 1H), 2.03 - 1.61 (m, 4H), 1.28 (d, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 532.35。
實例 143. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3,3- 二氟環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image550
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用3,3-二氟環己烷-1-胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（19.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.67 - 4.62 (m, 2H), 3.97 - 3.86 (m, 4H), 2.93 (s, 1H), 2.57 - 2.45 (m, 1H), 2.25 (s, 1H), 2.05 - 1.48 (m, 10H), 1.35 - 1.16 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 482.40。
實例 144. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image552
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇鹽酸鹽作為起始材料。獲得標題化合物，其為非鏡像異構物的固體混合物（11.8 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)：δ 8.25 (s, 1H), 7.17 - 7.12 (m, 2H), 4.65 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.70 - 3.60 (m, 1H), 2.92 (s, 1H), 2.75 - 2.42 (m, 1H), 1.98 - 1.57 (m, 12H), 1.41 - 1.20 (m, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 530.4。
實例 145. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3- 甲氧基環丁基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image554
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(3-甲氧基環丁基)甲胺作為起始材料。獲得標題化合物，其為非鏡像異構物的固體混合物（17.2 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 4.64 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.84 - 3.67 (m, 1H), 3.31 - 3.27 (m, 1H) 3.26 (s, 3H), 3.21 (d, 2H), 3.06 - 2.88 (m, 1H), 2.67 - 2.47 (m, 1H), 2.43 - 2.26 (m, 2H), 2.15 - 1.99 (m, 1H), 1.96 - 1.69 (m, 4H), 1.69 - 1.49 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 462.3。
實例 146. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image556
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(3-氟吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（15.0 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.41 - 8.33 (m, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.64 - 7.54 (m, 1H), 7.43 - 7.34 (m, 1H), 7.15 (s, 2H), 4.59 (m, 4H), 3.96 (s, 3H), 3.67 (s, 1H), 3.14 - 2.85 (m, 1H), 2.77 - 2.55 (m, 1H), 1.93 (s, 2H), 1.87 - 1.63 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 473.35。
實例 147. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3-( 二氟甲基 ) 苯基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image558
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用3-(二氟甲基)苯胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（17.6 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.70 - 7.63 (m, 1H), 7.46 - 7.38 (m, 1H), 7.29 - 7.22 (m, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 4.69 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.00 (s, 1H), 2.80 - 2.68 (m, 2H), 1.99 (s, 2H), 1.83 (m, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 490.40。
實例 148. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3,3- 二氟環丁基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image560
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(3,3-二氟環丁基)甲胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（23.3 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.64 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.28 (s, 1H), 2.93 (s, 1H), 2.66 - 2.49 (m, 4H), 2.34 - 2.24 (m, 4H), 2.01 - 1.69 (m, 2H), 1.31 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 468.35。
實例 149. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(2,2- 二氟 -2- 苯基乙基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image562
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用2,2-二氟-2-苯基乙烷-1-胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（20.8 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.57 - 7.38 (m, 5H), 7.12 (s, 2H), 4.59 - 4.54 (m, 2H), 3.96 - 3.82 (m, 5H), 3.26 - 3.22 (m, 1H), 2.94 - 2.89 (m, 1H), 2.60 - 2.48 (m, 1H), 1.85 - 1.54 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 504.3。
實例 150. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3,3,5- 三甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image564
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用3,3,5-三甲基環己烷-1-胺作為起始材料。獲得標題化合物，其為非鏡像異構物的固體混合物（21.7 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 4.66 - 4.60 (m, 2H), 4.04 - 3.92 (m, 4H), 3.43 - 3.17 (m, 1H), 2.96 - 2.90 (m, 1H), 2.62 - 2.56 (m, 1H), 2.10 - 0.60 (m, 20H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 488.4。
實例 151. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(4-( 二氟甲氧基 ) 苄基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image566
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(4-(二氟甲氧基)苯基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（5.8 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.35 - 7.26 (m, 2H), 7.18 - 7.00 (m, 4H), 6.99 - 6.55 (m, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.35 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.35 - 3.20 (m, 1H), 2.94 (s, 1H), 2.65 - 2.53 (m, 1H), 2.00 - 1.71 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 520.4。
實例 152. N-( 苯并 [d] 㗁唑 -6- 基甲基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image568
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用苯并[d]㗁唑-6-基甲胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（8.1 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.45 (s, 1H), 8.30 - 8.24 (m, 1H), 7.71 (m, 1H), 7.65 - 7.57 (m, 1H), 7.41 - 7.33 (m, 1H), 7.15 (s, 2H), 4.69 (s, 2H), 4.53 (s, 2H), 4.29 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 2.96 (s, 1H), 2.75 - 2.52 (m, 1H), 2.05 - 1.63 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 495.40。
實例 153. ( R)-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(1-(3- 氟苯基 ) 乙基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image570
使用與對於實例103的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用( R)-1-(3-氟苯基)乙烷-1-胺作為起始材料。將所得產物純化（使用以下條件：柱：沃特世CSH C18，100x19 mm，5 μm；流動相：A: 0.1%在水中的甲酸；流動相：B：0.1%在MeCN中的甲酸；流速：30 mL/min；梯度：20% B至95% B，8.5 min內），以獲得呈固體的標題化合物（4.6 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.36 - 7.27 (m, 1H), 7.13 (s, 2H), 7.11 (br s, 1H), 7.04 (br d, 1H), 6.98 - 6.92 (m, 1H), 5.01 - 4.93 (m, 1H), 4.71 - 4.47 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.05 - 2.81 (m, 1H), 2.66 - 2.55 (m, 1H), 1.98 - 1.82 (m, 2H), 1.81 - 1.65 (m, 2H), 1.44 (d, 3 H)。LCMS (ESI): 486.18 [M+H] +。
實例 154. N-(5- 氯 -2- 氟苄基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image572
使用與對於實例103的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(5-氯-2-氟苯基)甲胺作為起始材料，以獲得呈固體的標題化合物（4.5 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.34 - 7.25 (m, 2H), 7.18 - 7.06 (m, 3H), 4.70 - 4.54 (m, 2H), 4.39 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.78 (s, 1H), 3.02 - 2.83 (m, 1H), 2.60 (s, 1H), 1.98 - 1.83 (m, 2H), 1.81 - 1.67 (m, 2H)。LCMS (ESI): 506.10 [M+H] +。
實例 155. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(2,3- 二氟苄基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image574
使用與對於實例103的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(2,3-二氟苯基)甲胺作為起始材料，以獲得呈固體的標題化合物（5.4 mg）。LCMS (ESI): 490.14 [M+H] +。
實例 156. N-(3- 氯 -2- 氟苄基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image576
使用與對於實例103的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(3-氯-2-氟苯基)甲胺作為起始材料，以獲得呈固體的標題化合物（6.6 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.39 (t, 1H), 7.28 (t, 1H), 7.18 - 7.10 (m, 3H), 4.65 (br s, 2H), 4.45 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.03 - 2.86 (m, 1H), 2.67 - 2.57 (m, 1H), 1.97 - 1.84 (m, 2H), 1.76 (br d, 2H)。LCMS (ESI): 506.10 [M+H] +。
實例 157. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(3- 氟苄基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image578
使用與對於實例103的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(3-氟苯基)甲胺作為起始材料，以獲得呈固體的標題化合物（6.4 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.35 - 7.28 (m, 1H), 7.14 (s, 2H), 7.09 (d, 1H), 7.03 - 6.94 (m, 2H), 4.75 - 4.53 (m, 2H), 4.37 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.02 - 2.83 (m, 1H), 2.60 (br s, 1H), 1.98 - 1.84 (m, 2H), 1.84 - 1.69 (m, 2H)。LCMS (ESI): 472.19 [M+H] +。
實例 158. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-((3,4- 二氫 -2 H- 哌喃 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image580
使用與對於實例103的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(3,4-二氫-2 H-哌喃-2-基)甲胺作為起始材料，以獲得標題化合物（4.0 mg），其為鏡像異構物的固體。LCMS (ESI): 460.19 [M+H] +。
實例 159. N-(3- 氯苄基 )-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image582
步驟 -1. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸甲酯
Figure 02_image584
將5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基硼酸（514.0 mg，3.0 mmol），Pd(dppf)Cl 2（361.0 mg，0.5 mmol），和K 3PO 4（1.59 g，7.5 mmol）添加到1-[5-溴-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸甲酯（中間體504，1.0 g，2.5 mmol）在1,4-二㗁𠮿（10.0 mL）和H 2O（2.5 mL）中的溶液中。將溶液在80ºC下在N 2氣氛下攪拌2 h。然後將溶液在真空下濃縮，並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（1.06 g）。LCMS (ESI): 447.2 [M+H] +。
步驟 -2. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸
Figure 02_image586
將LiOH（342.0 mg，14.3 mmol）添加到1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸甲酯（步驟-1，1.06 g，2.4 mmol）在THF（4.0 mL），MeOH（4.0 mL），和H 2O（4.0 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌1 h，然後在真空下濃縮。將殘餘物用DCM稀釋，然後用AcOH將溶液的pH調節至pH 6。將所得混合物在真空下濃縮，以得到呈黃色油狀物的標題化合物（940 mg）。LCMS (ESI): [M+H]+: 433.2。
步驟 -3. N-[(3- 氯苯基 ) 甲基 ]-1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image588
將1-(3-氯苯基)甲胺（49.1 mg，0.3 mmol），HATU（131.9 mg，0.3 mmol）和DIPEA（89.7 mg，0.7 mmol）添加到1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（步驟-2，100.0 mg，0.2 mmol）在DMF（1.0 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌4 h，然後用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層在真空下濃縮，並然後將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（55 mg）。LCMS (ESI): 556.2 [M+H] +。
步驟 -4. N-(3- 氯苄基 )-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image582
將TFA（2.0 mL）添加到 N-[(3-氯苯基)甲基]-1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺（步驟-3，55.0 mg，0.1 mmol）在DCM（2.0 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌1 h，然後在真空下濃縮。將殘餘物用DCM稀釋，並且然後用DIPEA將溶液的pH調節至pH 8。然後將溶液在真空下濃縮並將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XBridge Shield RP18 OBD，30x150 mm，5 μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeCN；梯度：33% B至50% B，7 min內；檢測：220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（2.9 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ 14.09 -13.90 (m, 1H), 8.54 -8.37 (m, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.39 - 7.25 (m, 4H), 7.22 - 7.17 (m, 1H), 7.04 (d, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.27 (d, 2H), 3.87 (s, 3H), 2.93 - 2.68 (m, 1H), 2.51 (d, 1H), 1.81 (s, 2H), 1.56 (s, 2H), 1.23 (s, 1H)。LCMS (ESI): 472.2 [M+H] +。
實例 160. (1 R,3 s,5 S) -N-(3- 氯苄基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺和 (1 R,3r,5 S) -N-(3- 氯苄基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image590
Figure 02_image592
步驟 -1. 3-((3- 氯苄基 ) 胺基甲醯基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -8- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image594
將HATU（536.1 mg，1.41 mmol）和8-(三級丁氧基羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（300.0 mg，1.18 mmol）添加到1-(3-氯苯基)甲胺（183.0 mg，1.29 mmol）和DIPEA（455.6 mg，3.53 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/1 v/v）純化，以獲得標題化合物（440.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS：ESI [M+H] +: 379.2。
步驟-2. N-(3-氯苄基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺
Figure 02_image596
將TFA（1.00 mL）添加到3-[[(3-氯苯基)甲基]胺基甲醯基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸三級丁酯（步驟-1，440.0 mg，1.16 mmol）在DCM（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮，以獲得標題化合物（300.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS：ESI [M+H] +: 279.1。
步驟 -3. 8-(5- 溴 -1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(3- 氯苄基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image598
將HATU（491.0 mg，1.29 mmol）和5-溴-1 H-吡唑-3-甲酸（205.5 mg，1.08 mmol）添加到 N-[(3-氯苯基)甲基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺（步驟-2，300.0 mg，1.08 mmol）和DIPEA（417.2 mg，3.23 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/1 v/v）純化，以獲得標題化合物（350.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS：ESI [M+H] +: 451.2
步驟 -4. 8-(5- 溴 -1-( 四氫 -2 H- 哌喃 -2- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(3- 氯苄基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image600
將DHP（130.3 mg，1.55 mmol）添加到8-(5-溴-1 H-吡唑-3-羰基) -N-[(3-氯苯基)甲基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺（步驟-3，350.0 mg，0.78 mmol）在THF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/1 v/v）純化，以獲得標題化合物（240.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS：ESI [M+H] +: 535.3。
步驟 -5. N-(3- 氯苄基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-( 四氫 -2 H- 哌喃 -2- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image602
將K 2CO 3（185.7 mg，1.34 mmol）和Pd(dppf)Cl 2（32.8 mg，0.05 mmol）添加到8-[5-溴-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基] -N-[(3-氯苯基)甲基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺（步驟-4，240.0 mg，0.45 mmol）和5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基硼酸（114.8 mg，0.67 mmol）在1,4-二㗁𠮿（5.00 mL）和H 2O（1.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在90ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/1 v/v）純化，以獲得標題化合物（200.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS：ESI [M+H] +: 582.1。
步驟 -6. (1 R,3 s,5 S) -N-(3- 氯苄基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺和 (1 R,3r,5 S) -N-(3- 氯苄基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image590
Figure 02_image592
將TFA（1.00 mL）添加到 N-[(3-氯苯基)甲基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺（步驟-5，180.0 mg，0.31 mmol）在DCM（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XSelect CSH製備型C18 OBD柱，5 µm，19 x 150 mm；流動相A：水（0.05% FA），流動相B：MeCN；流速：25 mL/min；梯度：37 B至48 B，8 min內；檢測器，UV 254 nm），以獲得標題化合物（48.5 mg），其為兩種非鏡像異構物的固體混合物（實例160）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.44 - 8.36 (m, 1H), 8.29 - 8.27 (m, 1H), 7.39 - 7.25 (m, 4H), 7.22 - 7.16 (m, 2H), 5.01 - 4.92 (m, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.25 (d, 2H), 3.88 (s, 3H), 2.97 - 2.86 (m, 1H), 2.04 - 1.65 (m, 9H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 498.1。
實例 160-A. (1 R,3 s,5 S) -N-(3- 氯苄基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image605
在25ºC下將5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體507，59.8 mg，0.3 mmol），EDCI（48.3 mg，0.3 mmol），和HOBt（34.1 mg，0.3 mmol）在DMF（2.0 mL）中的溶液攪拌40 min，然後(1 R,3 s, 5S) -N-(3-氯苄基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺（中間體519，58.5 mg，0.2 mmol）和DIPEA（0.18 mL，1.1 mmol）。將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後用EtOAc稀釋，用水洗滌，並將有機層濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：Xselect CSH OBD，30x150 mm，5 μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：36% B至55% B，8 min內；檢測：220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（20 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.43 - 7.06 (m, 6H), 5.51 - 4.92 (m, 2H), 4.35 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.08 - 2.94 (m, 1H), 2.24 - 1.99 (m, 4H), 1.97 - 1.75 (m, 4H)。LCMS (ESI): 498.20 [M+H] +。
實例 160-B. (1 R,3r,5 S) -N-(3- 氯苄基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image607
使用與對於實例160-A的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 R,3r,5 S)-8-(三級丁氧基羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸作為步驟-1中的起始材料。獲得呈固體的標題化合物（4.7 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.03 (s, 1H), 8.40 (t, 1H), 8.28 (d, 1H), 7.41 - 7.26 (m, 4H), 7.26 - 7.18 (m, 1H), 7.13 (d, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.30 (d, 2H), 3.87 (s, 3H), 2.61 (s, 1H), 2.25 - 2.04 (m, 4H), 1.83 (s, 2H), 1.75 (s, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 498.3。
實例 161. N-(3- 氯苄基 )-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N- 甲基哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image609
使用與對於實例104的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(3-氯苯基) -N-甲基甲胺作為步驟-3中的起始材料。將所得殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30 x 150 mm，5 µm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：37% B至50% B，7 min內；檢測器，UV 254/220 nm），以獲得呈固體的標題化合物（8.2 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ 14.12 - 13.87 (m, 1H), 8.28 (d, 1H), 7.50 - 7.22 (m, 4H), 7.15 (d, 1H), 7.11 - 6.96 (m, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.51 (s, 3H), 4.11 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.02 (s, 3H), 2.79 (s, 1H), 2.73 (s, 1H), 1.90 - 1.42 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 486.3。
實例 162. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(1-( 三氟甲基 ) 環戊基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image611
將草醯二氯（41 mg，0.33 mmol）和DMF（1滴）添加到1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（中間體503，20.0 mg，0.06 mmol）在DCM（2.0 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在30ºC下攪拌3 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物溶解在氯仿（1.0 mL）中。將1-(三氟甲基)環戊-1-胺鹽酸鹽（21 mg，0.11 mmol），DIPEA（29.0 µL，0.17 mmol）和DMAP（6.7 mg，0.06 mmol）在氯仿（1.0 mL）中的溶液添加到上述反應混合物中。將所得混合物在50ºC下攪拌24 h。將所得混合物在真空下濃縮並將殘餘物溶解在DMF（1.0 mL）中，過濾。藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XBridge BEH130製備型C18 OBD柱，130Å，19 x 150 mm 5 µm 13 nm；流動相A：水（20 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；檢測器，UV 254/210 nm），得到呈固體的標題化合物（1.6 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 500.51.
實例 163. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(1,4- 二甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image613
將HATU（10.4 mg，0.03 mmol）和1,4-二甲基環己烷-1-胺（17.4 mg，0.14 mmol）添加到1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（中間體503，10.0 mg，0.03 mmol）和DIPEA（10.6 mg，0.08 mmol）在DMF（274 µL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌18 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：沃特世CSH C18柱，19 x 100 mm，5 μm；流動相A：水（0.1%甲酸），流動相B：MeCN（0.1%甲酸）；檢測器：沃特世2489雙波長UV檢測器；流速：30 mL/min），以獲得標題化合物（9.6 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.14 (s, 3H), 4.62 - 4.71 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.18 - 3.28 (m, 1H), 2.78 - 3.04 (m, 1H), 2.46 - 2.68 (m, 1H), 2.26 (br d, 2H), 1.64 - 1.96 (m, 5H), 1.51 (br d, 2H), 1.20 - 1.38 (m, 7H), 1.12 (br t, 2H), 0.90 (br d, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 474.3。
實例 164. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(4-( 三氟甲氧基 ) 苄基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image615
使用與對於實例103的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(4-(三氟甲氧基)苯基)甲胺作為起始材料。將溶液用水和EtOAc稀釋，然後將有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（8.4 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.27 (s, 1H), 7.38 (d, 2H), 7.24 (d, 2H), 7.15 (s, 2H), 4.61 - 4.73 (m, 1H), 4.40 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.33 - 3.37 (m, 2H), 2.88 - 3.03 (m, 1H), 2.61 (s, 1H), 1.84 - 2.00 (m, 2H), 1.69 - 1.83 (m, 2H)。LCMS (ESI): 538.15 [M+H] +。
實例 165. N-( 雙環 [3.2.1] 辛烷 -8- 基 )-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image617
使用與對於實例104的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用雙環[3.2.1]辛烷-8-胺作為步驟-3中的起始材料。將所得殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：YMC-Actus Triart C18，20 x 250 mm，5 μm 12 nm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：44% B至74% B，7 min內；檢測器，UV 254/220 nm），以獲得標題化合物（10.3 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.15 (d, 1H), 7.33 - 7.24 (m, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.76 - 4.47 (m, 3H), 3.95 (s, 3H), 3.79 - 3.75 (m, 1H), 2.96 (s, 1H), 2.84 - 2.69 (m, 1H), 2.16 (s, 2H), 1.99 - 1.55 (m, 12H), 1.50 - 1.41 (m, 1H), 1.36 - 1.23 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 456.2。
實例 166. N-[(3- 氯苯基 ) 甲基 ]-1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H-1,2,4- 三唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image619
步驟 -1. 1-(5- 溴 -1 H-1,2,4- 三唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲酸乙酯
Figure 02_image621
將EDCI（460.2 mg，2.4 mmol）和HOBt（324.3 mg，2.4 mmol）添加到5-溴-1 H-1,2,4-三唑-3-甲酸（384.0 mg，2.0 mmol）在DMF（2.0 mL）中的溶液中，然後將溶液在25ºC下攪拌20 min。然後添加哌啶-4-甲酸乙酯（377.4 mg，2.4 mmol）和DIPEA（1.05 mL，6.0 mmol），並將溶液在25ºC下攪拌14 h。將溶液濃縮，然後將殘餘物藉由製備型HPLC（條件??）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（400 mg）。LCMS (ESI): 331.0 [M+H] +。
步驟 -2. 1-(5- 溴 -1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ]-1,2,4- 三唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲酸酯
Figure 02_image623
在0ºC下將SEMCl（184.3 mg，1.1 mmol）和K 2CO 3 （152.7 mg，1.1 mmol）添加到1-(5-溴-1 H-1,2,4-三唑-3-羰基)哌啶-4-甲酸乙酯（步驟-1，305.0 mg，0.9 mmol）在DMF（2.0 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在0ºC下攪拌3 h，然後用EtOAc稀釋，用水洗滌並濃縮，以獲得標題化合物（250 mg），將其不經進一步純化而用於下一步驟。LCMS (ESI): 461.1 [M+H] +。 步驟 -3. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ]-1,2,4- 三唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸酯
Figure 02_image625
將5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基硼酸（170.4 mg，0.99 mmol），Pd(dppf)Cl 2 （72.9 mg，0.1 mmol），和K 3PO 4（211.61 mg，0.997 mmol）添加到1-(5-溴-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]-1,2,4-三唑-3-羰基)哌啶-4-甲酸乙酯（直接從步驟-2中使用）在1,4-二㗁𠮿（5.00 mL）和H 2O（0.50 mL）中的溶液中。將溶液在80ºC下在N 2氣氛下攪拌4 h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，4/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（110 mg）。LCMS (ESI): 508.2 [M+H] +。
步驟 -4. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ]-1,2,4- 三唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸
Figure 02_image627
將LiOH（18.2 mg，0.4 mmol）添加到1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]-1,2,4-三唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸乙酯（步驟-4，110.0 mg，0.2 mmol）在THF（1.5 mL），H 2O（1.5 mL）和MeOH（1.5 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌30 min，然後用HCl（6 M）將pH調節至pH 3。將水層用EtOAc萃取，然後將有機層濃縮以獲得標題化合物（100 mg），將其不經進一步純化而用於下一步驟。LCMS (ESI): 480.2 [M+H] +。
步驟 -5. N -[(3- 氯苯基 ) 甲基 ]-1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ]-1,2,4- 三唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image629
將HATU（95.1 mg，0.3 mmol），1-(3-氯苯基)甲胺（35.4 mg，0.3 mmol）和DIPEA（80.9 mg，0.6 mmol）添加到1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]-1,2,4-三唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（直接從步驟-4使用）在DMF（1.0 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後用EtOAc稀釋，用水洗滌並濃縮，以獲得標題化合物（120 mg），將其不經進一步純化而用於下一步驟。LCMS (ESI): 603.2 [M+H] +。
步驟 -6. N-[(3- 氯苯基 ) 甲基 ]-1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H-1,2,4- 三唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image619
將TFA（1.0 mL）添加到 N-[(3-氯苯基)甲基]-1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]-1,2,4-三唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺（直接從步驟-5使用）在DCM（1.0 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌2 h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XBridge製備型C18 OBD，30x50 mm，5 μm，13 nm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeOH；流速：25 mL/min；梯度：46% B至69% B，7 min內；檢測：254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（32.8 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.23 - 8.16 (m, 1H), 7.41 (d, 1H), 7.37 - 7.27 (m, 2H), 7.33 - 7.18 (m, 2H), 4.95 - 4.85 (m, 1H), 4.70 (d, 1H), 4.37 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.37- 3.25 (m, 1H), 3.00 (t, 1H), 2.76 - 2.51 (m, 1H), 2.05 - 1.66 (m, 4H)。LCMS (ESI): 473.1 [M+H] +。
實例 167. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-((2- 側氧基吲哚啉 -5- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image632
使用與對於實例163的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5-(胺基甲基)吲哚啉-2-酮作為起始材料。將所得殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XBridge BEH130製備型C18 OBD柱，130 Å，19 x 150 mm；5 μm 13 nm；流動相A：水（20 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；檢測器，UV 210/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（8.2 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 (s, 1H), 7.24 - 7.11 (m, 4H), 6.95 - 6.81 (m, 1H), 4.66 - 4.60 (m, 2H), 4.39 - 4.30 (m, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.65 - 3.35 (m, 2H), 3.03 - 2.97 (m, 2H), 2.63 - 2.57 (m, 1H), 1.93 - 1.54 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 509.3。
實例 168. N-((1 H- 吡咯并 [2,3-b] 吡啶 -5- 基 ) 甲基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image634
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（12.1 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.27 (s, 1H), 8.17 (d, 1H), 7.95 (d, 1H), 7.40 (d, 1H), 7.16 (s, 2H), 6.48 (d, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.49 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.24 (s, 1H), 3.00 (s, 1H), 2.68 - 2.52 (m, 1H), 1.98 - 1.78 (m, 4H)。LCMS (ESI): 494.3 [M+H] +。
實例 169. 實例 169-A 和實例 169-B 的非鏡像異構物混合物
實例 169-A. ( R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image636
實例 169-B. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image638
步驟 -1. 7-(((1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 胺基甲醯基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image640
在0ºC下將HATU（447.0 mg，1.18 mmol）和(1 r,4 r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（226.0 mg，1.23 mmol，CAS#：1408075-09-1，Enamine公司）添加到4-(三級丁氧基羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（300.0 mg，1.18 mmol）和DIPEA（0.62 mL，3.53 mmol）在DMF（6.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將反應混合物用EtOAc、水稀釋，然後用EtOAc萃取。將有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用60-100% EtOAc/己烷洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物的非鏡像異構物混合物（494.0 mg），其含有殘餘溶劑。LCMS (ESI): [M+Na] +: 443.4。
步驟 -2. N-((1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image642
將TFA（3.00 mL）添加到7-(((1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)胺基甲醯基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-4-甲酸三級丁酯（步驟-1，494.0 mg，1.18 mmol）在DCM（5.00 mL）中的溶液中。將反應混合物在25ºC下攪拌8 h。將反應混合物在減壓下濃縮並藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，0-20% MeCN/水（0.1%甲酸）），以獲得標題化合物（534.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物，含有殘餘溶劑。LCMS (ESI): [M+H] +: 322.3。
步驟 -3. 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image644
將HATU（103.0 mg，0.27 mmol）和 N-((1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-2，164.0 mg，0.36 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體506，100.0 mg，0.27 mmol）和DIPEA（0.19 mL，1.09 mmol）在DMF（6.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌16 h。將反應混合物用EtOAc和水稀釋，然後用EtOAc萃取。將有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用70-100% EtOAc/己烷洗脫）純化，以獲得標題化合物（153.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): [M+H] +: 670.6。
步驟 -4. ( R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image646
將TFA（3.00 mL）添加到4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-4，89.0 mg，0.13 mmol）在DCM（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將反應混合物濃縮並藉由矽膠柱層析法（用0-10% MeOH/DCM洗脫）純化，以獲得( R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（62.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 169）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.12 (d, 1 H), 7.27 (br d, 1 H), 7.10 (br s, 1 H), 4.89 - 4.95 (m, 1 H), 4.39 - 4.71 (m, 1 H), 3.93 (s, 4 H), 2.91 (br d, 1 H), 2.21 - 2.61 (m, 1 H), 1.56 - 2.01 (m, 10 H), 1.14 - 1.40 (m, 2 H), 0.81 - 1.10 (m, 2 H), 0.73 (br s, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 540.2。
將非鏡像異構物的固體混合物（80.0 mg）使用手性製備型HPLC分離。
柱：CHIRALPAK IA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（8 mM NH 3·MeOH）: EtOH=50 : 50，保持15 min
流速：18 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 169-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（26.3 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為4.59 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.09 - 13.85 (m, 1H), 8.29 - 8.23 (m, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.04 (s, 1H), 5.70 (s, 1H), 4.56 - 4.49 (m, 1H), 3.91 - 3.76 (m, 4H), 2.86 - 2.70 (m, 2H), 2.22 - 2.16 (m, 1H), 1.83 - 1.72 (m, 5H), 1.56 - 1.46 (m, 5H), 1.30 - 0.43 (m, 5H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 540.2。
實例 169-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（28.3 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.06 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.00 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.82 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 5.71 (s, 1H), 4.44 (br s, 1H), 3.91 - 3.80 (m, 4H), 3.38 - 3.33 (m, 1H), 2.90 - 2.76 (m, 1H), 2.21 (s, 1H), 1.83 - 1.71 (m, 5H), 1.56 - 1.46 (m, 5H), 1.29 - 1.00 (m, 1H), 0.99 - 0.80 (m, 2H), 0.78 - 0.61 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 540.2。
實例 169-B. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的替代合成方法
Figure 02_image648
將HOBt（2.44 g，18.03 mmol）和EDCI（3.46 g，18.00 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，4.50 g，12.02 mmol）在DMF（20.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min。然後將(1 r,4 r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇鹽酸鹽（3.17 g，14.42 mmol，CAS#：2137056-98-3，Enamine公司）和DIPEA（7.77 g，60.10 mmol）添加到所得混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層減壓濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18柱；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：5% B至40% B，30 min內；流速：40 mL/min；檢測器，UV 220/254 nm），以獲得標題化合物（4.91 g）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.18 - 13.81 (m, 1H), 8.23 (d, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.02 (br s, 1H), 5.69 (s, 1H), 4.64 - 4.32 (m, 1H), 3.87 - 3.84 (m, 4H), 3.36 - 3.34 (m, 1H), 2.90 - 2.75 (m, 1H), 2.27 - 2.08 (m, 1H), 1.79 - 1.70 (m, 5H), 1.56 - 1.45 (m, 5H), 1.25 - 0。80 (m, 2H), 0.68 - 0.44 (m, 3H)。LCMS (ESI): 540.45 [M+H] +。
實例 169-B. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的替代合成方法
步驟 -1. 4- 苄基 -7-((( 三級丁基二苯基矽基 ) 氧基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷
Figure 02_image650
在N 2保護下在5ºC下，將THF（30.00 L）添加到配備有攪拌器、加料漏斗和溫度計的50.0 L燒瓶中。在5ºC下將(4-苄基-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基)甲醇（3.00 kg，12.90 mol）添加到燒瓶中。在5ºC下將咪唑（2.21 kg，32.40 mol）添加到燒瓶中。在5ºC下將三級丁基-氯-二苯基-矽烷（4.28 kg，15.60 mol）添加到燒瓶中。將反應混合物在5ºC至25ºC下在N 2下攪拌12 h。將反應混合物倒入H 2O（10.00 L）中，用乙酸乙酯（10.00 L x 2）萃取。將合併的有機層用鹽水（10.00 L）洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並將濾液在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/乙酸乙酯（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（5.50 kg）並且將其直接用於下一步驟。
步驟 -2. 7-((( 三級丁基二苯基矽基 ) 氧基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image652
在N 2保護下在20ºC至30ºC下，將MeOH（20.00 L）添加到配備有攪拌器、加料漏斗和溫度計的50.0 L燒瓶中。在20ºC至30ºC下將4-苄基-7-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷（步驟-1，1.00 kg，2.13 mol）一次性添加到燒瓶中，並且在20ºC至30ºC下在N 2下將Pd/C（100.00 g，213.00 mmol，10.0%純度）分幾份添加到燒瓶中。在20ºC至30ºC下在N 2下，將HCOOH（1.02 kg，21.30 mol）添加到燒瓶中。將混合物在50ºC至55ºC下攪拌1 h。將混合物通過矽藻土過濾，並將濾餅用MeOH（5.00 L x 2）洗滌。用NaHCO 3溶液（10.00 L）將混合物調節至pH 7至8並用乙酸乙酯（10.0 L x 2）萃取，將合併的有機層用鹽水（10.0 L x 2）洗滌，並經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以得到1.30 kg的殘餘物。在20ºC至30ºC下將THF（6.50 L）和H 2O（3.90 L）添加到具有頂置式攪拌器、加料漏斗和溫度計、N 2氣球等的50.0 L夾套燒瓶中。在20ºC至30ºC下將殘餘物（1.30 kg）一次性添加到燒瓶中，並在20ºC至30ºC下將NaHCO 3（447.00 g，5.32 mol）添加到燒瓶中。在10至20ºC下將Boc 2O（697.00 g，3.19 mol）逐滴添加到燒瓶中。將混合物在20至30ºC下攪拌1.5 h。將H 2O（10.0 L）添加到反應混合物中並用MTBE（10.0 L x 2）萃取，將合併的有機層用鹽水（10.0 L x 2）洗滌，並經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以得到殘餘物。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/乙酸乙酯（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（810.00 g）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ7.66 (d, 4H), 7.29 - 7.45 (m, 6H), 4.03 (d, 1H), 3.51 (d, 2H), 2.90 (t, 1H), 1.98 - 2.07 (m, 1H), 1.72 - 1.75 (m, 2H), 1.48 (s, 9H), 1.26 - 1.29 (m, 2 H), 1.08 (s, 9H), 1.00 - 1.06 (m, 1H), 0.83 - 0.99 (m, 1H), 0.50 - 0.52 (m, 1H), 0.39 - 0.40 (m, 1H)。LCMS：380.1 [M+H] +。
步驟 -3. 7-( 羥基甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image654
在N 2保護下在20ºC下，將THF（24.00 L）添加到具有攪拌器、加料漏斗和溫度計的50.0 L燒瓶中。在20ºC下將7-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-4-甲酸三級丁酯（步驟-2，3.10 kg，6.46 mol）一次性添加到燒瓶中。在20ºC下將TBAF（1.00 M，6.46 L）添加到燒瓶中並將所得混合物在20ºC下攪拌2 h。將混合物倒入H 2O（10.00 L）中，用乙酸乙酯（10.00 L x 2）萃取。將合併的有機層用鹽水（5.00 L）洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並將濾液在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/乙酸乙酯（3/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（1.45 kg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ4.43 (t, 1H), 3.83 - 3.86 (m, 1H), 3.21-3.24 (m, 2H), 1.75 - 1.99 (m, 1H), 1.65 - 1.70 (m, 1H), 1.39 (t, 1H), 1.18 (s, 9H), 1.00 - 1.06 (m, 1 H), 0.99 - 1.04 (m, 2H), 0.76 - 0.78 (m, 1H), 0.37 - 0.38 (m, 1H), 0.33 - 0.35 (m, 1H)。
步驟 -4. 4-( 三級丁氧基羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸
Figure 02_image656
五批平行進行。在10ºC下將MeCN（1.10 L）和H 2O（1.10 L）添加到具有頂置式攪拌器、加料漏斗和溫度計、N 2氣球的5.00 L夾套燒瓶中。在10ºC下將7-(羥基甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-4-甲酸三級丁酯（步驟-3，284.00 g，1.18 mol）添加到燒瓶中。在10ºC下將TEMPO（74.00 g，470.00 mmol）一次性添加到燒瓶中，並且在10ºC下在N 2下，將PhI(OAc) 2（947.00 g，2.94 mol）分十份緩慢添加到反應中。將混合物在25ºC下在N 2下攪拌12 h。將五批合併，並將反應混合物緩慢添加到飽和Na 2SO 3溶液（8.00 L）中並在20ºC下攪拌0.5 h。然後添加飽和K 2CO 3溶液並調節至pH = 11。將混合物用石油醚（3.00 L x 2）萃取並將1N HCl（約20.0 L）添加到水溶液中並調節至pH = 3。將混合物用DCM（5.00 L x 3）萃取並將合併的有機層在真空中濃縮。將殘餘物從（庚烷，2.00 L，20ºC）中結晶，並將混合物過濾，並將濾餅用庚烷（300 mL x 2）洗滌。收集殘餘物並在真空中濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（1.40 kg，4.47 mol）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ12.2 (brs, 1H), 3.81 (d, 1H), 2.91 (t, 1H), 2.60 (t, 1H), 1.75 - 1.78 (m, 2H), 1.23 - 1.26 (m, 10H), 0.81 - 0.82 (m, 1H), 0.51 - 0.79 (m, 1H), .0.47 - 0.49 (m, 2H)。LCMS：156.6 [M-100] +。
步驟 -5. 7-(((1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 胺基甲醯基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image658
四批平行進行。將DCM（3.20 L）添加到配備有頂置式攪拌器、加料漏斗和溫度計、N 2氣球的5.00 L夾套燒瓶中。在0ºC下將4-(三級丁氧基羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（步驟-4，317.00 g，1.24 mol）添加到燒瓶中。在0ºC下將DIPEA（321.00 g，2.48 mol），EDCI（297.00 g，1.55 mol），和HOBt（209.00 g，1.55 mol）添加到燒瓶中。在0ºC下將(1r,4r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（239.00 g，1.30 mol）添加到燒瓶中，並將所得混合物用N 2吹掃3次。將反應混合物在0ºC至25ºC下在N 2下攪拌2 h。將四批合併，並將反應倒入H 2O（10.00 L）中，用乙酸乙酯（10.0 L x 2）萃取。將合併的有機層用鹽水（10.00 L）洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並將濾液在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/乙酸乙酯（1/2 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.55 kg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ7.74 (d, 1H), 5.77 (s, 1H), 3.80 - 3.88 (m, 2H), 2.78 - 2.88 (m, 1H), 2.70 - 2.70 (m, 1H), 2.70 - 1.75 (t, 1H), 1.73 - 1.74 (m, 4H), 1.48 - 1.55 (m, 6H), 1.43 (s, 9H), 1.18 - 1.19 (m, 1H), 0.80 - 0.81 (m, 1H), 0.79 - 0.81 (m, 1H), 0.46 - 0.48 (m, 2H)。
步驟 -6. N-((1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺鹽酸鹽
Figure 02_image660
在N 2保護下將乙酸乙酯（10.00 L）添加到配備有攪拌器、加料漏斗和溫度計的30.0 L燒瓶中。在0ºC下將7-(((1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)胺基甲醯基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-4-甲酸三級丁酯 （步驟-5，1.50 kg，3.57 mol）添加到燒瓶中。將反應混合物用N 2吹掃3次。在0ºC下將HCl/二㗁𠮿（4.00 M，2.50 L）添加到燒瓶中。將反應在0ºC至20ºC下在N 2下攪拌1 h。將反應混合物在真空下濃縮以獲得呈固體的標題化合物（1.40 kg），並且直接用於下一步驟。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ9.43 (s, 2H), 7.94 (d, 1H), 5.37 (brs, 1H), 3.81 (s, 1H), 3.42 - 3.44 (m, 1H), 2.80 - 2.90 (m, 1H), 2.51 - 2.64 (m, 1H), 2.10 - 2.13 (m, 1H), 1.78 - 1.83 (s, 6H), 1.74 - 1.78 (m, 4H), 1.49 (d, 1H), 1.03 - 1.05 (m, 2H), 0.70 - 0.73 (m, 2H)。
步驟 -7. 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1H- 吡唑 -3- 羰基 )-N-((1r,4r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image662
四批平行進行。在0ºC下將DMF（3.00 L）添加到配備有頂置式攪拌器、加料漏斗和溫度計、N 2氣球的5.00 L夾套燒瓶中。在0ºC下將 N-((1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺鹽酸鹽（步驟-6，317.00 g，863.00 mmol）添加到燒瓶中。在0ºC下將DIPEA（502.00 g，3.88 mol），EDCI（298.00 g，1.55 mol），和HOBt（209.00 g，1.55 mol）添加到燒瓶中。將反應混合物在0ºC下攪拌並用N 2吹掃。在0ºC下將5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體506，370.00 g，1.04 mol）添加到燒瓶中並將所得混合物在0ºC至30ºC下在N 2下攪拌12 h。將四批合併，並將反應混合物倒入H 2O（10.00 L）中，用乙酸乙酯（10.00 L x 2）萃取。將合併的有機層用鹽水（10.00 L）洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並將濾液在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/乙酸乙酯（1/2 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（1.50 kg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ8.31 (d, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.08 (s, 1H), 5.81 - 5.80 (m, 1H), 5.49 (d, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.92 - 3.89 (m, 1H), 3.63 - 3.61 (m, 2H), 2.98 - 2.96 (m, 1H), 2.06 - 2.02 (m, 1H), 1.85 - 1.25 (m, 11H), 1.23 (t, 3H), 1.23 - 0.64 (m, 6H), 0.00 (s, 9H)。LCMS：670.2 [M+1] +。
步驟 -8. 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image664
三批平行進行。在N 2保護下在20ºC下，將DCM（500.00 mL）添加到配備有攪拌器、加料漏斗和溫度計的10 L燒瓶中。在20ºC下在N 2下，將4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-7，500 g，747 mmol，1.00當量）添加到燒瓶中。在20ºC下將TFA（1.28 kg，11.20 mol）添加到燒瓶中。將反應混合物在20ºC至25ºC下在N 2下攪拌2 h。將三批合併，並將反應混合物倒入NaHCO 3（10.00 L）中，用乙酸乙酯（10.0 L x 2）萃取。將合併的有機層在真空下濃縮。將所得1.20 kg殘餘物溶解在甲醇（3.00 L）中，並在5ºC至10ºC下緩慢逐滴添加NH 3.H 2O（1.00 L），並將混合物攪拌1 h。將混合物倒入飽和NaCl（2.00 L）溶液中，用乙酸乙酯（4.00 L x 2）萃取，將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並將濾液在真空下濃縮。將殘餘物從（MTBE，2.00 L，25ºC）中結晶，將混合物過濾並將濾餅用MTBE（300 mL x 2）洗滌。收集濾餅並在真空下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（970.00 g）。 1 H NMR(400 MHz, DMSO- d6) δ14.0 (brs, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.37 - 4.34 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.83 (s, 1H) 2.79 (s,1H), 2.20 - 2.10 (m, 1H), 1.79 - 1.50 (m, 11H), 1.08 - 0.98 (m, 3H), 0.89 - 0.65 (m, 2H)。LCMS：540.1 [M+1] +。
步驟 -9. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺（實例 169-B ）
Figure 02_image666
將4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-8，1.15 kg，2.13 mol）使用製備型SFC分離。
儀器：沃特世SFC製備型350
柱：DAICEL CHIRALPAK IG（250 mm x 50 mm，10 µm）
流動相A：CO 2
流動相B：EtOH
梯度：B 55%
流速：200 mL/min
背壓：100巴
柱溫：35°C
波長：220 nm
循環時間：約12.2 min
樣本製備：將1150 g化合物溶解在4700 ml乙醇中
注射：每次注射15 mL
實例 169-B.獲得呈固體的標題化合物（411.00 g）。它的保留時間為21.69 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ14.0 (brs, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.82 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 5.68 (s, 1H), 4.47 - 4.34 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.83 (s, 1H) 2.79 (s,1H), 2.20 - 2.10 (m, 1H), 1.78 - 1.50 (m, 11H), 1.08 - 0.98 (m, 3H), 0.89 - 0.65 (m, 2H)。LCMS：540.1 [M+1] +。
實例 170-A. (1 R,3 S,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image668
將HOBt（151.6 mg，1.12 mmol），EDCI（215.1 mg，1.12 mmol），和(1 r,4 r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（164.4 mg，0.90 mmol）添加到(1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體508，280.0 mg，0.75 mmol）和DIPEA（483.3 mg，3.74 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：40 mL/min；梯度：25 B至35 B，20 min內；檢測器，UV 220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（242.0 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (s, 1H), 8.28 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.13 (d, 1H), 5.70 (s, 1H), 5.00 - 4.54 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.84 - 3.77 (m, 1H), 3.00 - 2.86 (m, 1H), 2.10 - 1.41 (m, 16H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 540.2。
替代方法：實例 170-A 和實例 170-B.(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-((1 s,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image670
Figure 02_image672
使用與對於實例170-A的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇作為步驟-5中的起始材料。
標題化合物的兩種非鏡像異構物使用製備型HPLC分離。
柱：XBridge製備型OBD C18柱
柱尺寸：30 x 150 mm，5 µm
流動相：水（10 mM NH 4HCO 3）: MeCN=81 : 19至51 : 49，持續7 min
流速：60 mL/min
檢測：254 nm
實例 170-B. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-((1 s,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（10.9 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.15 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.02 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.13 (s, 1H), 5.74 (s, 1H), 5.40 - 5.02 (m, 1H), 4.71 - 4.65 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.57 - 3.34 (m, 1H), 2.83 - 2.71 (m, 1H), 2.12 - 1.37 (m, 16H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 540.3。
實例 170-A. (1 R,3 S,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（11.4 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.73 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (s, 1H), 8.28 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.13 (d, 1H), 5.70 (s, 1H), 5.00 - 4.54 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.84 - 3.77 (m, 1H), 3.00 - 2.86 (m, 1H), 2.14 - 1.97 (m, 2H), 1.95 - 1.72 (m, 8H), 1.71 - 1.58 (m, 2H), 1.58 - 1.35 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 540.3。
實例 171. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(3- 氯苄基 )-4- 羥基哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image674
步驟 -1. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 羥基哌啶 -4- 甲酸甲酯
Figure 02_image676
將HATU（38.0 mg，0.10 mmol）和4-羥基哌啶-4-甲酸甲酯（12.7 mg，0.08 mmol）添加到5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體510，20.0 mg，0.08 mmol）和DIPEA（31.0 mg，0.24 mmol）在DCM（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在真空下濃縮以獲得標題化合物並且不經進一步純化而用於下一步驟。
步驟 -2. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 羥基哌啶 -4- 甲酸
Figure 02_image678
將LiOH（9.6 mg，0.40 mmol）在水（0.50 mL）中的溶液添加到1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-羥基哌啶-4-甲酸甲酯（如來自步驟-1）在MeOH（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在真空下濃縮以獲得標題化合物並且不經進一步純化而用於下一步驟。
步驟 -3. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(3- 氯苄基 )-4- 羥基哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image680
將HATU（38.0 mg，0.10 mmol）和(3-氯苯基)甲胺（15.0 mg，0.10 mmol）添加到1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-羥基哌啶-4-甲酸（如來自步驟-2）和DIPEA（31.0 mg，0.24 mmol）在DMF（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物過濾。然後將濾液藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：Sunfire製備型C18 OBD柱，19 x 150 mm 5 µm 10 nm；流動相A：水（0.1% FA），流動相B：MeCN；檢測器，UV 210/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（21.6 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.27 (s, 1H), 7.34 - 7.00 (m, 6H), 4.58 - 4.53 (m, 2H), 4.38 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.59 - 3.55 (m, 1H), 3.26 - 3.21 (m, 1H), 2.15 - 2.11 (m, 2H), 1.81 - 1.54 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 504.3。
實例 172. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(3- 氯苄基 )-2- 甲基哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image682
使用與對於實例171的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用2-甲基哌啶-4-甲酸甲酯鹽酸鹽作為步驟-1中的起始材料。獲得標題化合物，其為非鏡像異構物的固體混合物（9.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.29 - 8.25 (m, 1H), 7.34 - 7.24 (m, 2H), 7.28 - 7.18 (m, 2H), 7.14 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 4.57 - 4.52 (m, 1H), 4.45 - 4.29 (m, 2H), 4.16 - 4.01 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.41 - 3.37 (m, 1H), 2.59 - 2.52 (m, 1H), 2.04 - 1.74 (m, 4H), 1.29 (d, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 502.4。
實例 173. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(3- 氯苄基 )-3- 甲基哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image684
使用與對於實例171的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用3-甲基哌啶-4-甲酸三級丁酯鹽酸鹽作為步驟-1中的起始材料，並且在1,4-二㗁𠮿中的4 M HCl被替換為步驟-2中的試劑。獲得標題化合物，其為非鏡像異構物的固體混合物（10.9 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.35 - 8.20 (m, 1H), 7.34 - 7.19 (m, 4H), 7.13 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 4.43 - 4.28 (m, 3H), 4.26 - 4.22 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.72 - 3.35 (m, 1H), 2.75 - 2.69 (m, 1H), 2.29 - 2.14 (m, 1H), 2.11 - 1.89 (m, 1H), 1.80 - 1.71 (m, 1H), 0.99 - 0.93 (m, 2H), 0.90 - 0.84 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 502.3。
實例 174. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(3- 氯苄基 )-4- 氟哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image686
步驟 -1. 4-((3- 氯苄基 ) 胺基甲醯基 )-4- 氟哌啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image688
將HATU（64.6 mg，0.17 mmol）和(3-氯苯基)甲胺（20.0 mg，0.14 mmol）添加到1-(三級丁氧基羰基)-4-氟哌啶-4-甲酸鉀（40.0 mg，0.14 mmol）和DIPEA（54.3 mg，0.42 mmol）在DCM（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在真空下濃縮以獲得標題化合物並且不經進一步純化而用於下一步驟。
步驟 -2. N-(3- 氯苄基 )-4- 氟哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image690
將4 M HCl在1,4-二㗁𠮿（1.00 mL）中的溶液添加到來自步驟-1的4-((3-氯苄基)胺基甲醯基)-4-氟哌啶-1-甲酸三級丁酯中並將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在真空下濃縮以獲得標題化合物並且不經進一步純化而用於下一步驟。
步驟 -3. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(3- 氯苄基 )-4- 氟哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image692
將HATU（64.6 mg，0.17 mmol）和 N-(3-氯苄基)-4-氟哌啶-4-甲醯胺（如來自步驟-2）添加到5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體510，30.0 mg，0.11 mmol）和DIPEA（90.5 mg，0.70 mmol）在DMF（1.00 mL）中的溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物過濾。然後將濾液藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：Sunfire製備型C18 OBD柱，19 x 150 mm 5 µm 10 nm；流動相A：水（0.1% FA），流動相B：MeCN；檢測器，UV 210/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（7.3 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 2H), 7.35 - 7.28 (m, 1H), 7.32 - 7.16 (m, 3H), 7.10 (s, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.39 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.53 (s, 1H), 3.20 (s, 1H), 2.27 (s, 1H), 2.17 (s, 1H), 1.99 (s, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 506.3。
實例 175. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(3,3- 二氟環戊基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image694
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用3,3-二氟環戊-1-胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體混合物（24.1 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.27 (s, 1H), 7.25 - 7.14 (s, 2H), 4.81 - 4.18 (m, 3H), 3.95 (s, 3H), 3.14 - 2.83 (m, 1H), 2.62 - 2.40 (m, 2H), 2.39 - 1.48 (m, 10H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 468.3。
實例 176. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-((5- 甲基吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image696
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(5-甲基吡啶-2-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（4.0 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.44 - 8.36 (m, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.82 (d, 1H), 7.40 (d, 1H), 7.17 (s, 2H), 4.80 - 4.57 (m, 2H), 4.51 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.79 - 3.47 (m, 1H), 3.18 - 2.79 (m, 1H), 2.78 - 2.56 (m, 1H), 2.40 (s, 3H), 1.96 (s, 2H), 1.87 - 1.64 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 469.15。
實例 177. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(3- 氯苄基 )-3- 氟哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image698
使用與對於實例171的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用3-氟哌啶-4-甲酸甲酯鹽酸鹽作為步驟-1中的起始材料。獲得標題化合物，其為非鏡像異構物的固體混合物（4.6 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.30 - 8.17 (m, 1H), 7.32 - 7.02 (m, 6H), 5.27 - 4.96 (m, 2H), 4.80 - 4.47 (m, 1H), 4.40 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.65 - 3.44 (m, 1H), 3.21 - 2.74 (m, 2H), 2.24 - 2.04 (m, 1H), 1.94 - 1.86 (m, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 506.3。
實例 178. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-((6-( 三氟 -l5- 甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image700
使用與對於實例163的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(6-(三氟-l5-甲基)吡啶-3-基)甲胺作為起始材料。將所得殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：Sunfire製備型C18 OBD柱，19 x 150 mm 5 µm 10 nm；流動相A：水（0.1% FA），流動相B：MeCN；檢測器，UV 210/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（24.8 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 10.06 (s, 1H), 9.68 (d, 1H), 9.36 (m, 1H), 9.26 - 9.16 (m, 1H), 8.57 (d, 2H), 5.91 (s, 2H), 5.37 (d, 3H), 4.73 (m, 4H), 4.03 (m, 1H), 3.60 - 2.89 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 523.3。
實例 179. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-((5- 氯吡啶 -3- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image702
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(5-氯吡啶-3-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（14.3 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.48 - 8.39 (m, 2H), 8.25 (s, 1H), 7.82 - 7.77 (m, 2H), 7.14 (s, 1H), 4.66 - 4.62 (m, 2H), 4.42 - 4.38 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.97 - 2.92 (m, 1H), 2.66 - 2.54 (m, 2H), 1.93 - 1.89 (m, 2H), 1.78 - 1.70 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 489.3。
實例 180. N-((1 H- 吲唑 -6- 基 ) 甲基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image704
使用與對於實例179的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 H-吲唑-6-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（4.8 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.54 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.76 - 7.69 (m, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.20 - 7.03 (m, 2H), 4.63 - 4.58 (m, 2H), 4.53 - 4.48 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.97 - 2.93 (m, 1H), 2.67 - 2.57 (m, 1H), 2.06 - 1.64 (m, 4H), 1.47 - 0.99 (m, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 494.3。
實例 181. N-((1 H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image706
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 H-吲哚-3-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（17.5 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.58 - 7.51 (m, 1H), 7.37 - 7.30 (m, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.16 - 7.06 (m, 3H), 7.05 - 6.96 (m, 1H), 4.66 - 4.62 (m, 1H), 4.54 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.25 - 3.21 (m, 2H), 2.91 - 2.87 (m, 1H), 2.60 - 2.48 (m, 1H), 1.98 - 1.73 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 493.3。
實例 182. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-( 異喹啉 -6- 基甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image708
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用異喹啉-6-基甲胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（12.9 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 9.21 (s, 1H), 8.44 - 8.42 (m, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.11 - 8.09 (m, 1H), 7.83 - 7.81 (m, 2H), 7.66 - 7.63 (m, 1H), 7.20 - 7.10 (m, 2H), 4.80 - 4.55 (m, 4H), 3.99 (s, 3H), 3.33 - 3.19 (m, 1H), 3.17 - 2.92 (m, 1H), 2.77 - 2.56 (m, 1H), 2.10 - 1.73 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 505.40。
實例 183. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(5- 側氧基 -1- 苯基吡咯啶 -3- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image710
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用4-胺基-1-苯基吡咯啶-2-酮作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（24.3 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.66 - 7.54 (m, 2H), 7.45 - 7.33 (m, 2H), 7.24 - 7.07 (m, 3H), 4.79 - 4.37 (m, 3H), 4.35 - 4.14 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.78 - 3.50 (m, 1H), 3.22 - 2.77 (m, 3H), 2.72 - 2.42 (m, 2H), 2.01 - 1.57 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 523.45。
實例 184. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-( 口 克 唍 -4- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image712
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用口克唍-4-胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體（11.1 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.17 - 7.09 (m, 4H), 6.91 - 6.83 (m, 1H), 6.81 - 6.74 (m, 1H), 5.10 - 5.02 (m, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.28 - 4.13 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.94 (d, 1H), 2.64 - 2.51 (m, 1H), 2.19 - 2.07 (m, 1H), 2.04 - 1.91 (m, 2H), 1.81 (d, 2H), 1.43 - 1.08 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 496.40。
實例 185. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-((2,2- 二甲基 -1,3- 二氧戊環 -4- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image714
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(2,2-二甲基-1,3-二氧戊環-4-基)甲胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體混合物（19.4 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)：δ 8.25 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.64 (s, 2H), 4.22 - 4.11 (m, 1H), 4.06 - 3.98 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.68 - 3.59 (m, 1H), 3.40 - 3.35 (m, 3H), 2.96 (s, 1H), 2.64 - 2.51 (m, 1H), 1.98 - 1.63 (m, 4H), 1.39 (s , 3H), 1.31 (s, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 478.3。
實例 186. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(1- 甲基 -1,2,3,4- 四氫喹啉 -4- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image716
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-甲基-1,2,3,4-四氫喹啉-4-胺作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體混合物（7.4 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 7.16 - 7.06 (m, 1H), 7.06 - 6.98 (m, 1H), 6.72 - 6.57 (m, 2H), 5.04 - 4.94 (m, 1H), 4.76 - 4.44 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.28 - 3.18 (m, 2H), 2.94 - 2.88 (m, 5H), 2.65 - 2.51 (m, 1H), 2.16 - 1.76 (m, 6H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 509.4。
實例 187. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-((1- 甲基 -1 H- 吲哚 -3- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image718
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1-甲基-1 H-吲哚-3-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（14.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)：δ 8.25 (s, 1H), 7.56 (m, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.21 - 7.10 (m, 3H), 7.07 - 7.01 (m, 1H), 4.52 (m, 4H), 3.94 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 3.01 - 2.82 (m, 2H), 2.60 - 2.48 (m, 1H), 1.88 - 1.72 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 507.4。
實例 188. N-((1 H- 吲哚 -6- 基 ) 甲基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image720
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 H-吲哚-6-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（8.4 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 (s, 1H), 7.24 - 7.11 (m, 4H), 6.95 - 6.81 (m, 2H), 4.63 (s, 2H), 4.35 (m, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.00 (s, 2H), 2.60 (s, 1H), 1.90 (s, 2H), 1.77 (m, 2H), 1.31 (s, 1H), 0.92 (s, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 493.3。
實例 189. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-((5- 甲基呋喃 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image722
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(5-甲基呋喃-2-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（13.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)：δ 8.25 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 6.09 (d, 1H), 5.92 - 5.88 (m, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.28 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.96 (d, 1H), 2.62 - 2.49 (m, 1H), 2.23 (d, 3H), 1.95 - 1.65 (m, 5H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 458.3。
實例 190. N-((1 H- 吲哚 -4- 基 ) 甲基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image724
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 H-吲哚-4-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（5.7 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.36 - 7.28 (m, 1H), 7.23 (d, 1H), 7.14 (s, 2H), 7.09 - 7.01 (m, 1H), 6.97 - 6.90 (m, 1H), 6.54 - 6.47 (m, 1H), 4.64 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 3.30 - 3.03 (m, 2H), 3.02 - 2.83 (m, 1H), 2.67 - 2.52 (m, 1H), 2.08 - 1.60 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 493.40。
實例 191. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(5,6,7,8- 四氫異喹啉 -5- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image726
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5,6,7,8-四氫異喹啉-5-胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體混合物（20.5 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.35 - 8.25 (m, 3H), 7.24 (m, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 5.15 - 5.05 (m, 1H), 4.69 (s, 3H), 3.97 (s, 3H), 2.99 (m, 2H), 2.90 - 2.80 (m, 2H), 2.71 - 2.55 (m, 2H), 2.16 - 1.91 (m, 3H), 1.95 - 1.71 (m, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 495.3。
實例 192. N-((1 H- 吲唑 -4- 基 ) 甲基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image728
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 H-吲唑-4-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（14.5 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 8.13 (d, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.39 - 7.28 (m, 1H), 7.14 (s, 2H), 7.08 - 7.01 (m, 1H), 4.71 (s, 2H), 4.65 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.00 - 2.85 (m, 2H), 2.67 - 2.50 (m, 1H), 1.97 - 1.59 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 494.3。
實例 193. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-((3- 氯 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image730
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（13.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.79 (d, 1H), 8.36 - 8.16 (m, 2H), 7.31 - 6.74 (m, 2H), 4.68 (s, 2H), 3.94 (d, 3H), 3.54 - 3.43 (m, 1H), 3.17 - 3.08 (m, 1H), 3.06 - 2.94 (m, 1H), 2.79 - 2.67 (m, 2H), 2.10 - 1.57 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 557.3。
實例 194. N-((1 H- 吲哚 -7- 基 ) 甲基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image732
使用與對於實例179的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 H-吲哚-7-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（7.4 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.29 (s, 1H), 7.55 - 7.46 (m, 1H), 7.26 (d, 1H), 7.24 - 6.95 (m, 4H), 6.48 (d, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.64 (s, 3H), 3.97 (s, 3H), 3.25 (s, 1H), 2.93 (s, 1H), 2.69 - 2.52 (m, 1H), 1.93 - 1.73 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 493.3。
實例 195. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(6- 氟口克唍 -4- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image734
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用6-氟口克唍-4-胺作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體混合物（17.6 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 (s, 1H), 7.17 (s, 2H), 6.98 - 6.86 (m, 2H), 6.84 - 6.73 (m, 1H), 5.14 - 5.05 (m, 1H), 4.68 (s, 2H), 4.28 - 4.14 (m, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.17 - 2.84 (m, 1H), 2.71 - 2.43 (m, 1H), 2.32 - 2.08 (m, 1H), 2.04 - 1.68 (m, 6H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 514.10。
實例 196. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-(1- 苯基哌啶 -4- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image736
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-苯基哌啶-4-胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（15.5 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 (s, 1H), 7.30 - 7.14 (m, 4H), 7.05 - 6.96 (m, 2H), 6.90 - 6.79 (m, 1H), 4.66 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.88 - 3.75 (m, 1H), 3.66 (d, 2H), 2.96 (s, 1H), 2.90 - 2.76 (m, 2H), 2.70 - 2.23 (m, 1H), 2.13 - 1.57 (m, 9H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 523.4。
實例 197. N-((2 H- 苯并 [d][1,2,3] 三唑 -5- 基 ) 甲基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image738
使用與對於實例103的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(2 H-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)甲胺作為起始材料，以獲得呈固體的標題化合物（2.4 mg）。LCMS (ESI): 495.42 [M+H] +。
實例 198. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-((1 r,4 r)-4- 羥基 -4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image740
使用與對於實例103的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 r,4 r)-4-胺基-1-甲基環己烷-1-醇作為起始材料，以獲得呈固體的標題化合物（7.3 mg）。LCMS (ESI): 476.52 [M+H] +。
實例 199. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) -N-((1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image742
使用與對於實例103的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 r,4 r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇作為起始材料，以獲得呈固體的標題化合物（18.1 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.59 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.79 (s, 1H), 2.83 - 2.98 (m, 1H), 2.61 - 2.69 (m, 1H), 1.83 - 1.93 (m, 6H), 1.69 - 1.81 (m, 6H), 1.62 - 1.67 (m, 2H)。LCMS (ESI): 530.95 [M+H] +。
實例 200. N-((3- 氟 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 )-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image744
將1-(3-氟-1 H-吲唑-5-基)甲胺（中間體514，56.0 mg，0.3 mmol）添加到1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（中間體511，118.1 mg，0.3 mmol），HATU（193.4 mg，0.5 mmol）和DIPEA（0.18 mL，1.0 mmol）在DMF（5.0 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌一段時間，然後用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由快速製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XSelect CSH製備型C18 OBD，19x150 mm，5 μm；流動相A：水（0.1% FA）；流動相B：MeCN；流速：25 mL/min；梯度：33% B至33% B，6 min內；檢測：254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（41.5 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.00 (m, 1H), 12.50 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.45 - 7.42 (m, 2H), 7.33 - 7.30 (m, 1H), 7.04 - 7.02 (m, 1H), 4.52 - 4.31 (m, 4H), 3.88 (s, 3H), 3.20 - 3.16 (m, 1H), 2.90 - 2.80 (m, 1H), 2.55 - 2.50 (m, 1H), 1.88 - 1.76 (m, 2H), 1.74 - 1.50 (m, 2H)。LCMS (ESI): 496.2 [M+H] +。
實例 201. N-((1 H- 吲唑 -3- 基 ) 甲基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image746
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 H-吲唑-3-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（23.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.80 - 7.73 (m, 1H), 7.53 - 7.44 (m, 1H), 7.44 - 7.33 (m, 1H), 7.23 - 7.08 (m, 3H), 4.75 (s, 2H), 4.62 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.91 (s, 2H), 2.65 - 2.53 (m, 1H), 1.85 - 1.73 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 494.4。
實例 202. N-((1 H- 吡咯并 [2,3-b] 吡啶 -3- 基 ) 甲基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image748
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)甲胺二鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（21.6 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.94 (s, 1H), 11.44 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.25 - 8.16 (m, 2H), 7.99 - 7.90 (m, 1H), 7.39 - 7.32 (m, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.10 - 7.00 (m, 1H), 4.55 - 4.30 (m, 4H), 3.90 (s, 3H), 3.17 (s, 1H), 2.82 (s, 1H), 2.59 - 2.41 (m, 1H), 1.78 - 1.72 (m, 2H), 1.63 - 1.57 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 494.3。
實例 203. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((2- 甲基 -1 H- 吲哚 -5- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image750
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(2-甲基-1 H-吲哚-5-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（4.8 mg）。LCMS (ESI): 507.53 [M+H] +。
實例 204. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(3- 甲基 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image752
步驟 -1. 1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-( 四氫 -2 H- 哌喃 -2- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3- 甲基 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image754
將HOBt（47.0 mg，0.3 mmol），EDCI（67.0 mg，0.3 mmol），1-(3-甲基-1 H-吲唑-5-基)甲胺（中間體515，56.0 mg，0.3 mmol），和DIPEA（90.0 mg，0.7 mmol）添加到1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-(四氫-2 H-哌喃-2-基)-1 H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲酸（中間體505，100.0 mg，0.2 mmol）在DMF（2.0 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌2 h，然後用水稀釋並用二氯甲烷萃取。將有機層在真空下濃縮，並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（90 mg）。LCMS (ESI): 576.3 [M+H] +。
步驟 -2. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(3- 甲基 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image752
將TFA（2.0 mL）添加到1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-(四氫-2 H-哌喃-2-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3-甲基-1 H-吲唑-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺（步驟-2，90.0 mg，0.16 mmol）在DCM（2.00 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌1 h，然後在真空下濃縮。將殘餘物用DCM稀釋，然後用DIPEA將溶液的pH調節至pH 8。將溶液在真空下濃縮並將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：Xselect CSH OBD，30x150 mm，5 μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeCN；梯度：20% B至40% B，8 min內；檢測：220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（9.4 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.98 (s, 1H), 12.56 (s, 1H), 8.42 - 8.34 (m, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.43 - 7.36 (m, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.25 - 7.18 (m, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.47 (s, 1H), 4.35 (d, 3H), 3.87 (s, 3H), 3.20 (s, 2H), 2.85 (s, 1H), 2.46 (s, 3H), 1.70 (m, 4H)。LCMS (ESI): 492.2 [M+H] +。
實例 205. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1- 異丙基 -1 H- 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image757
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-異丙基-1 H-吡唑-4-胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（12.2 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.27 (s, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.49 (d, 1H), 7.19 - 7.13 (m, 2H), 4.97 - 4.58 (m, 3H), 4.55 - 4.40 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.03 - 2.97 (m, 1H), 2.76 - 2.62 (m, 1H), 2.09 - 1.77 (m, 4H), 1.51 - 1.43 (m, 6H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 472.4。
實例 206. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1- 甲基 -1 H- 吲哚 -5- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image759
將HATU（31.3 mg，0.08 mmol）和(1-甲基-1 H-吲哚-5-基)甲胺（26.4 mg，0.16 mmol）添加到1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（中間體503，30.0 mg，0.08 mmol）和DIPEA（31.9 mg，0.25 mmol）在DMF（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌3 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層經無水Na 2SO 4乾燥。過濾後，將濾液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（100% EtOAc）純化，以獲得呈固體的標題化合物（35.3 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.18 - 7.26 (m, 1H), 7.10 - 7.19 (m, 3H), 6.38 (d, 1H), 4.52 - 4.71 (m, 3H), 4.44 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 3.19 - 3.28 (m, 1H), 2.87 - 3.07 (m, 1H), 2.51 - 2.67 (m, 1H), 1.72 - 1.96 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 507.3。
實例 207. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(2- 側氧基 -1- 苯基吡咯啶 -3- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image761
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用3-胺基-1-苯基吡咯啶-2-酮作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體混合物（12.2 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.66 - 7.60 (m, 2H), 7.43 - 7.35 (m, 2H), 7.23 - 7.07 (m, 3H), 4.75 - 4.48 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.93 - 3.81 (m, 2H), 3.17 - 2.87 (m, 2H), 2.73 - 2.47 (m, 2H), 2.24 - 1.68 (m, 5H), 1.35 - 1.26 (m, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 523.45。
實例 208. N-(5- 氯 -2,3- 二氫苯并呋喃 -3- 基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image763
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5-氯-2,3-二氫苯并呋喃-3-胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（20.1 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 (s, 1H), 7.33 (s, 2H), 7.22 (m, 1H), 7.17 (s, 1H), 6.81 (m, 1H), 5.56 (m, 1H), 4.73 (m, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.33 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 2.95 (s, 2H), 2.56 (m, 1H), 1.98 - 1.70 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 516.3。
實例 209. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image765
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（18.5 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)：δ 9.04 (d, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.73 (d, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.67 (s, 3H), 4.61 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.35 (s, 1H), 3.14 - 2.95 (m, 1H), 2.77 - 2.66 (m, 1H), 2.05 - 1.88 (m, 2H), 1.87 - 1.71 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 524.3。
實例 210. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5- 甲基咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image767
使用與對於實例179的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)甲胺二鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（5.4 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 2H), 7.67 (s, 1H), 7.48 - 7.39 (m, 1H), 7.39 - 7.27 (m, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.83 (d, 1H), 4.76 - 4.53 (m, 4H), 3.96 (s, 3H), 3.13 - 2.86 (m, 3H), 2.67 - 2.61 (m, 3H), 1.98 - 1.67 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 508.4。
實例 211. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image769
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)甲胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（20.3 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 9.10 (d, 2H), 8.28 (s, 1H), 7.17 (s, 2H), 4.71 (s, 3H), 4.65 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.34 (s, 1H), 3.17 - 2.94 (m, 1H), 2.82 - 2.68 (m, 1H), 2.00 (s, 2H), 1.89 - 1.66 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 524.10。
實例 212. N-((1 H- 吡咯并 [2,3-c] 吡啶 -5- 基 ) 甲基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image771
使用與對於實例179的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 H-吡咯并[2,3-c]吡啶-5-基)甲胺二鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（11.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)：δ 8.72 (d, 1H), 8.28 (d, 2H), 7.76 - 7.65 (m, 2H), 7.14 (s, 2H), 6.67 - 6.63 (m, 1H), 4。68 (s, 1H), 4.59 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 2.96 (s, 1H), 2.71 - 2.61 (m, 1H), 1.95 (s, 2H), 1.78 (d, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 494.3。
實例 213. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(5,5- 二甲基四氫呋喃 -3- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image773
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5,5-二甲基四氫呋喃-3-胺作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體混合物（19.3 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.64 (s, 2H), 4.48 - 4.35 (m, 1H), 4.11 - 3.99 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.71 - 3.49 (m, 1H), 3.29 (s, 1H), 3.11 - 2.79 (m, 1H), 2.69 - 2.46 (m, 1H), 2.23 - 2.07 (m, 1H), 1.97 - 1.58 (m, 5H), 1.33 (s, 3H), 1.23 (s, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 462.15。
實例 214. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((8- 氟咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image775
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(8-氟咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（22.8 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.94 (d, 1H), 8.52 - 8.28 (m, 3H), 7.87 (d, 1H), 7.32 - 7.20 (m, 1H), 7.18 - 7.06 (m, 2H), 6.92 - 6.78 (m, 1H), 4.80 - 4.44 (m, 1H), 4.39 (d, 2H), 4.14 (s, 1H), 3.99 - 3.79 (m, 3H), 3.31 (s, 2H), 3.07 - 2.76 (m, 1H), 1.82 (s, 2H), 1.71 - 1.46 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 512.45。
實例 215. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((2- 甲基 -1 H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image777
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(2-甲基-1 H-苯并[d]咪唑-5-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（19.0 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ 13.95 (s, 1H), 12.09 (s, 1H), 8.37 (d, 2H), 7.54 - 7.18 (m, 3H), 7.15 (s, 1H), 7.00 (d, 1H), 4.58 - 4.27 (m, 4H), 3.90 (s, 3H), 3.31 - 3.22 (m, 2H), 2.86 (s, 1H), 2.46 (s, 3H), 1.80 (s, 2H), 1.61 (s, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 508.4。
實例 216. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((2- 甲基 -1,3- 二㗁 𠮿 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image779
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(2-甲基-1,3-二㗁𠮿-2-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（19.5 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.15 (s, 2H), 4.65 (s, 2H), 4.03 - 3.70 (m, 7H), 3.42 (s, 3H), 3.02 (m, 1H), 2.80 -1.66 (m, 6H), 1.59 (m, 1H), 1.36 (s, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 478.4。
實例 217. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((6- 甲基咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image781
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(6-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)甲胺二鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（16.4 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.61 (s, 2H), 7.38 (m, 1H), 7.16 (m, 2H), 4.82 (s, 1H), 4.48 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 2.81 (s, 2H), 2.31 (s, 3H), 1.99 - 1.77 (m, 5H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 508.3。
實例 218. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1- 甲基 -1 H- 吲唑 -3- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image783
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1-甲基-1 H-吲唑-3-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（20.2 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.85 - 7.64 (m, 1H), 7.53 - 7.46 (m, 1H), 7.43 - 7.37 (m, 1H), 7.21 - 7.06 (m, 3H), 4.72 (s, 2H), 4.65 (s, 2H), 4.02 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 3.25 (s, 1H), 2.91 (s, 1H), 2.64 - 2.47 (m, 1H), 2.01 - 1.54 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 508.4。
實例 219. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((6- 氯咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image785
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(6-氯咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（21.9 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.84 - 8.77 (m, 1H), 8.48 - 8.38 (m, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.58 - 7.48 (m, 1H), 7.31 - 7.21 (m, 2H), 7.15 (s, 1H), 4.37 (m, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.22 (s, 2H), 2.94 - 2.53 (m, 2H), 1.71 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 528.4。
實例 220. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4,4- 二氟四氫呋喃 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image787
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(4,4-二氟四氫呋喃-2-基)甲胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體混合物（18.9 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.65 (s, 2H), 4.36 - 4.14 (m, 1H), 4.13 - 3.98 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.90 - 3.74 (m, 1H), 3.73 - 3.60 (m, 1H), 3.54 - 3.37 (m, 2H), 3.14 - 2.84 (m, 1H), 2.74 - 2.51 (m, 1H), 2.50 - 2.33 (m, 1H), 2.23 - 2.01 (m, 1H), 2.01 - 1.63 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 484.40。
實例 221. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5-( 三氟甲基 ) 㗁唑 -4- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image789
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(5-(三氟甲基)㗁唑-4-基)甲胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（9.7 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.36 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.16 (s, 2H), 4.64 (s, 2H), 4.50 - 4.42 (m, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.83 - 3.50 (m, 1H), 3.15 - 2.85 (m, 1H), 2.72 - 2.51 (m, 1H), 1.91 (s, 2H), 1.83 - 1.65 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 513.05。
實例 222. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1-(2- 氟苯基 ) 吡咯啶 -3- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image791
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(2-氟苯基)吡咯啶-3-胺作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體混合物（20.8 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.07 - 6.96 (m, 1H), 7.02 - 6.91 (m, 1H), 6.82 - 6.65 (m, 2H), 4.70 (s, 2H), 4.51 - 4.38 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.69 - 3.49 (m, 2H), 3.45 - 3.33 (m, 1H), 3.33 - 3.23 (m, 1H), 2.94 (s, 1H), 2.66 - 2.51 (m, 1H), 2.37 - 2.19 (m, 1H), 2.03 - 1.76 (m, 6H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 527.4。
實例 223. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1- 甲基 -1 H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image793
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1-甲基-1 H-苯并[d]咪唑-5-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（12.0 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.95 (m, 1H), 8.48 - 8.29 (m, 2H), 8.15 (s, 1H), 7.56 - 7.43 (m, 2H), 7.32 - 7.05 (m, 3H), 4.76 - 4.43 (m, 2H), 4.38 (m, 2H), 4.23 - 3.98 (m, 1H), 3.96 - 3.86 (m, 3H), 3.82 (s, 3H), 3.26 - 3.09 (m, 1H), 2.99 - 2.56 (m, 1H), 1.94 - 1.71 (m, 2H), 1.71 - 1.38 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 508.4。
實例 224. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(2- 甲基 -5,6,7,8- 四氫喹唑啉 -5- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image795
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用2-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-5-胺作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體混合物（12.5 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.45 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.16 (s, 2H), 5.24 - 5.06 (m, 1H), 4.68 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.79 - 3.45 (m, 1H), 3.16 - 2.74 (m, 2H), 2.63 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 1.99 - 1.63 (m, 8H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 510.5。
實例 225. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5-( 二氟甲基 ) 異㗁唑 -3- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image797
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(5-(二氟甲基)異㗁唑-3-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（21.1 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.29 (s, 1H), 7.32 - 7.05 (m, 2H), 6.91 (d, 1H), 6.75 - 6.68 (m, 1H), 4.71 (s, 2H), 4.49 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.32 (s, 1H), 2.97 (s, 1H), 2.71 - 2.55 (m, 1H), 2.03 - 1.61 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 495.3。
實例 226. N-((1 H- 吡咯并 [2,3-b] 吡啶 -6- 基 ) 甲基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image799
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（21.1 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (d, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.10 - 7.01 (m, 2H), 6.45 (d, 1H), 4.77 - 4.65 (m, 1H), 4.55 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.30 (d, 2H), 3.03 - 2.89 (m, 1H), 2.72 - 2.57 (m, 1H), 1.99 - 1.73 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 494.3。
實例 227. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(2- 甲基 -1,2,3,4- 四氫異喹啉 -4- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image801
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-4-胺作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體混合物（21.3 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.41 - 6.94 (m, 6H), 5.27 - 5.19 (m, 2H), 4.76 - 4.48 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.76 - 3.45 (m, 3H), 2.93 - 2.84 (m, 1H), 2.64 - 2.52 (m, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.06 - 1.65 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 509.4。
實例 228. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3- 甲基 -2- 側氧基 -2,3- 二氫苯并 [d] 㗁唑 -5- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image803
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5-(胺基甲基)-3-甲基苯并[d]㗁唑-2(3 H)-酮作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（22.4 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.44 - 8.37 (m, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.29 - 7.18 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.09 (d, 1H), 7.01 - 6.94 (m, 1H), 4.45 (s, 2H), 4.29 (d, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.16 (d, 1H), 2.85 (d, 1H), 2.58 - 2.47 (m, 4H), 1.80 (s, 2H), 1.57 (s, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 525.3。
實例 229. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1- 甲基 -1 H- 吲唑 -6- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image805
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1-甲基-1 H-吲唑-6-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（22.8 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.92 (d, 1H), 4.79 - 4.58 (m, 2H), 4.36 - 4.31 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.54 - 3.49 (m, 1H), 3.20 (s, 3H), 2.96 - 2.91 (m, 1H), 2.63 - 2.52 (m, 1H), 2.01 - 1.84 (m, 2H), 1.78 - 1.74 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 508.4。
實例 230. N-((2- 氧雜雙環 [3.1.1] 庚烷 -1- 基 ) 甲基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image807
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(2-氧雜雙環[3.1.1]庚烷-1-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（19.6 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (d, 1H), 7.38 - 6.75 (m, 2H), 4.78 - 4.58 (m, 2H), 4.25 (s, 1H), 4.15 - 4.03 (m, 2H), 3.94 (d, 3H), 3.27 - 3.21 (m, 3H), 3.19 (s, 2H), 2.98 - 2.88 (m, 1H), 2.66 - 2.55 (m, 1H), 2.53 - 2.45 (m, 1H), 2.10 - 2.02 (m, 2H), 2.01 - 1.93 (m, 2H), 1.82 - 1.67 (m, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 474.3。
實例 231. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1- 甲基 -2,2- 二氧 -3,4- 二氫 -1 H- 苯并 [c][1,2] 噻 𠯤 -4- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image809
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用4-胺基-1-甲基-3,4-二氫-1 H-苯并[c][1,2]噻𠯤 2,2-二氧化物作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體混合物（11.4 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.42 - 7.29 (m, 2H), 7.21 - 7.12 (m, 4H), 5.67 - 5.59 (m, 1H), 4.68 - 4.64 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.76 - 3.66 (m, 1H), 3.54 - 3.42 (m, 1H), 3.32 - 3.29 (m, 3H), 2.97 - 2.93 (m, 1H), 2.81 (s, 1H), 2.69 - 2.57 (m, 1H), 2.06 - 1.68 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 559.3。
實例 232. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1- 甲基 -1 H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -5- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image811
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1-甲基-1 H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（19.6 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.53 (d, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.78 - 4.56 (m, 2H), 4.53 - 4.49 (m, 2H), 4.10 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 3.35 - 3.30 (m, 1H), 3.02 - 2.84 (m, 1H), 2.64 - 2.53 (m, 1H), 1.93 - 1.88 (m, 2H), 1.79 - 1.71 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 509.4。
實例 233. ( S)-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(6- 氰基口克唍 -4- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image813
使用與對於實例179的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用( S)-4-胺基口克唍-6-甲腈作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（15.8 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.30 (s, 1H), 7.60 - 7.48 (m, 2H), 7.18 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 5.17 - 5.07 (m, 2H), 4.77 - 4.71 (m, 2H), 4.38 - 4.32 (m, 2H), 4.00 - 3.94 (m, 4H), 2.72 - 2.51 (m, 1H), 2.20 - 2.14 (m, 1H), 1.89 - 1.83 (m, 5H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 521.4。
實例 234. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1- 甲基 -2- 側氧基 -1,2,5,6,7,8- 六氫喹啉 -5- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image815
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5-胺基-1-甲基-5,6,7,8-四氫喹啉-2(1 H)-酮作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體混合物（19.8 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)：δ 8.26 (s, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.14 (s, 2H), 6.46 (d, 1H), 4.66 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.53 (s, 3H), 2.98 - 2.66 (m, 3H), 2.60 - 2.50 (m, 1H), 2.13 - 1.25 (m, 10H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 525.4。
實例 235. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1- 甲基 -2- 側氧基吲哚啉 -5- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image817
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5-(胺基甲基)-1-甲基吲哚啉-2-酮鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（18.9 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.23 (m, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.92 (m, 1H), 4.79 - 4.58 (m, 2H), 4.36 - 4.31 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.54 - 3.49 (m, 1H), 3.20 (s, 3H), 2.96 - 2.91 (m, 1H), 2.63 - 2.52 (m, 1H), 2.01 - 1.84 (m, 4H), 1.78 - 1.74 (m, 2H), 1.40 - 1.13 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 523.4。
實例 236. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3,4- 二氫 -2 H- 哌喃并 [2,3-b] 吡啶 -4- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image819
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用3,4-二氫-2 H-哌喃并[2,3-b]吡啶-4-胺二鹽酸鹽作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體混合物（13.1 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 (s, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.20 - 7.14 (m, 2H), 7.04 (d, 1H), 5.23 - 5.13 (m, 1H), 4.71 - 4.65 (m, 3H), 4.48 - 4.38 (m, 2H), 3.97 (s, 3H), 2.99 - 2.93 (m, 1H), 2.68 - 2.53 (m, 1H), 2.28 - 1.98 (m, 1H), 1.96 - 1.78 (m, 5H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 497.3。
實例 237. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1,1- 二氧 -2,3- 二氫苯并 [b] 噻吩 -5- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image821
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5-(胺基甲基)-2,3-二氫苯并[b]噻吩 1,1-二氧化物鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（21.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.27 (s, 1H), 7.65 (d, 1H), 7.51 - 7.33 (m, 2H), 7.33 - 7.11 (m, 1H), 7.11 - 6.94 (m, 1H), 4.80 - 4.56 (m, 1H), 4.51 - 4.39 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.73 - 3.33 (m, 4H), 2.01 - 1.68 (m, 4H), 1.56 - 1.22 (m, 3H), 0.94 - 0.85 (m, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 544.3。
實例 238. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4-( 二氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image823
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)甲胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（17.6 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.93 (d, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.14 (d, 2H), 6.89 - 6.51 (m, 1H), 4.64 (s, 5H), 3.94 (s, 3H), 3.02 (s, 1H), 2.81 - 2.61 (m, 1H), 1.98 (s, 2H), 1.88 - 1.62 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 506.3。
實例 239. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((6-( 二氟甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image825
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（24.1 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.97 - 7.88 (m, 1H), 7.56 (d, 1H), 7.45 (dd, 1H), 7.15 (s, 2H), 6.90 - 6.49 (m, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.52 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.32 (s, 1H), 3.18 - 2.89 (m, 1H), 2.76 - 2.58 (m, 1H), 1.96 (s, 2H), 1.86 - 1.67 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 505.3。
實例 240. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(2- 甲基 -3- 側氧基 -1,2,3,4- 四氫異喹啉 -4- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image827
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用4-胺基-2-甲基-1,4-二氫異喹啉-3(2 H)-酮鹽酸鹽作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體混合物（19.2 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (d, 1H), 7.38 - 7.27 (m, 3H), 7.23 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 5.49 (s, 1H), 4.73 (d, 1H), 4.69 (d, 1H), 4.49 (d, 1H), 4.45 (d, 1H), 3.95 (s, 2H), 3.13 (s, 3H), 3.09 - 2.91 (m, 2H), 2.88 - 2.75 (m, 2H), 2.03 (d, 2H), 1.93 - 1.76 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 523.4。
實例 241. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((6,7- 二氫 -5 H- 環戊 [d] 嘧啶 -2- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image829
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(6,7-二氫-5 H-環戊[d]嘧啶-2-基)甲胺二鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（20.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)：δ 8.49 (d, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.63 (d, 2H), 4.54 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.08 - 2.91 (m, 3H), 2.75 - 2.64 (m, 2H), 2.24 - 2.10 (m, 3H), 2.06 - 1.65 (m, 5H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 496.4。
實例 242. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3,3- 二甲基 -2- 側氧基吲哚啉 -5- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image831
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5-(胺基甲基)-3,3-二甲基吲哚啉-2-酮鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（22.1 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.13 (d, 3H), 6.87 (d, 1H), 4.67 - 4.63 (m, 2H), 4.35 - 4.30 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.96 - 2.91 (m, 2H), 2.64 - 2.52 (m, 1H), 1.87 - 1.82 (m, 2H), 1.79 - 1.72 (m, 2H), 1.35 - 1.30 (m, 6H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 537.4。
實例 243. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5- 氟 -1 H- 苯并 [d] 咪唑 -4- 基 ) 甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image833
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(5-氟-1 H-苯并[d]咪唑-4-基)甲胺二鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（9.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.27 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.60 - 7.48 (m, 1H), 7.13 (s, 1H), 7.09 - 7.03 (m, 2H), 4.72 (s, 2H), 4.63 (d, 1H), 3.94 (d, 3H), 3.30 - 3.07 (m, 2H), 2.96 - 2.83 (m, 1H), 2.61 - 2.45 (m, 1H), 1.97 - 1.59 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 512.3。
實例 244. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3- 側氧基 -1,2,3,4- 四氫異喹啉 -4- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image835
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用4-胺基-1,4-二氫異喹啉-3(2 H)-酮二氫溴化物作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體混合物（22.4 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 (s, 1H), 7.44 - 7.22 (m, 5H), 7.19 (s, 1H), 5.56 (s, 1H), 4.70 (s, 2H), 4.58 (d, 1H), 4.41 (d, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.23 - 2.65 (m, 3H), 2.09 (s, 2H), 1.89 (s, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 509.4。
實例 245. 實例 245-A 和實例 245-B 的鏡像異構物混合物
實例 245-A. ( S)-4-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3- 氯苄基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image837
實例 245-B. ( R)-4-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3- 氯苄基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image839
使用與對於實例174的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用4-(三級丁氧基羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸作為步驟-1中的起始材料。獲得( S)-4-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(3-氯苄基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( R)-4-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(3-氯苄基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，其為鏡像異構物的固體混合物（5.5 mg， 實例 245）。LCMS (ESI): 514.4 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離標題化合物的兩種鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IC柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（10 mM NH 3·MeOH）：EtOH=50 : 50，保持15 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 245-A.獲得呈固體的第一洗脫化合物（2.5 mg）。
第一洗脫化合物的保留時間為7.24 min。
LCMS (ESI): 514.4 [M+H] +。
實例 245-B.獲得呈固體的第二洗脫化合物（1.9 mg）。
第二洗脫化合物的保留時間為9.88 min。
LCMS (ESI): 514.4 [M+H] +。
實例 246. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3- 氟 -3- 甲基環丁基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image841
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用3-氟-3-甲基環丁烷-1-胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得標題化合物，其為非鏡像異構物的固體混合物（17.0 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.29 (s, 1H), 7.19 - 7.13 (m, 2H), 4.74 - 4.68 (m, 2H), 4.46 - 4.30 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 2.94 (s, 1H), 2.74 - 2.45 (m, 2H), 2.22 - 2.01 (m, 1H), 1.91 - 1.85 (m, 2H), 1.83 - 1.68 (m, 4H), 1.55 - 1.40 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 450.3。
實例 247. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(5- 甲基四氫呋喃 -3- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image843
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5-甲基四氫呋喃-3-胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得標題化合物，其為非鏡像異構物的固體混合物（16.8 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)：δ 8.25 (m, 1H), 7.10 (m, 2H), 4.76 - 4.64 (m, 1H), 4.40 - 4.32 (m, 1H), 4.18 - 4.06 (m, 1H), 3.98 - 3.89 (m, 4H), 3.86 - 3.79 (m, 1H), 3.68 - 3.46 (m, 1H), 2.97 - 2.85 (m, 1H), 2.60 - 2.49 (m, 1H), 2.46 - 2.36 (m, 1H), 2.00 - 1.62 (m, 5H), 1.42 - 1.20 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 448.3。
實例 248. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 R)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺，和 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,6 R)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺和， 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,6 S)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺，和 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 S)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image845
使用與對於實例179的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-胺二鹽酸鹽作為起始材料。獲得1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,6 R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺和1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 S,6 R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺和1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 S,6 S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺和1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,6 S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺，其為非鏡像異構物的固體混合物（18.4 mg， 實例 248）。LCMS (ESI): [M+H] +: 530.4。
使用手性製備型HPLC分離標題化合物的四種非鏡像異構物，得到兩個部分，每個部分含有兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IC柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（8 mM NH 3·MeOH）: EtOH=50 : 50，保持25 min
流速：18 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 248-A.獲得呈固體的第一洗脫峰（5.2 mg）。
第一洗脫峰的保留時間為17.03 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD)：δ 8.25 (d, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.68 (d, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.92 (s, 1H), 3.08 - 2.98 (m, 1H), 2.72 - 2.66 (m, 2H), 2.61 - 2.48 (m, 4H), 1.90 - 1.64 (m, 9H), 1.37 - 1.26 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 529.4。
實例 248-B.獲得呈固體的第二洗脫峰（5.3 mg）。
第二洗脫峰的保留時間為21.87 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.30 - 7.06 (m, 2H), 4.78 - 4.58 (m, 3H), 3.97 - 3.90 (m, 4H), 3.08 - 2.97 (m, 1H), 2.94 - 2.90 (m, 1H), 2.75 - 2.66 (m, 2H), 2.62 - 2.48 (m, 4H), 1.95 - 1.53 (m, 8H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 529.4。
實例 249. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,6 S)-6-( 三氟甲基 ) 四氫 -2 H- 哌喃 -3- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺，和 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 R)-6-( 三氟甲基 ) 四氫 -2 H- 哌喃 -3- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺，和 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 S)-6-( 三氟甲基 ) 四氫 -2 H- 哌喃 -3- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺和， 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 S)-6-( 三氟甲基 ) 四氫 -2 H- 哌喃 -3- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image847
將6-(三氟甲基)㗁𠮿-3-胺（中間體532，55.0 mg，0.33 mmol），HATU（156.4 mg，0.41 mmol）和DIPEA（106.3 mg，0.82 mmol）添加到1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（中間體503，100.0 mg，0.27 mmol）在DMF（2.00 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌2 h，然後用EtOAc稀釋，用水洗滌，並將有機層濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，12/1 v/v）純化，並進一步藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：YMC-Actus Triart C18，30 x 250 mm，5 µm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN/MeOH；流速：60 mL/min；梯度：50 B至66 B，7 min內；220 nm），以獲得1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 S,6 S)-6-(三氟甲基)四氫-2 H-哌喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺和1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,6 R)-6-(三氟甲基)四氫-2 H-哌喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺和1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,6 S)-6-(三氟甲基)四氫-2 H-哌喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺和1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,6 S)-6-(三氟甲基)四氫-2 H-哌喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺，其為非鏡像異構物的固體混合物（12.0 mg， 實例 249）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.27 (s, 1H), 7.16 (s, 2H), 4.69 - 4.63 (m, 2H), 4.04 -3.60 (m, 8H), 2.99 - 2.92 (m, 1H), 2.78 - 2.62 (m, 1H), 2.03 - 1.51 (m, 8H)。LCMS (ESI): 516.2 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離標題化合物的四種非鏡像異構物，得到兩個部分，每個部分含有兩種非鏡像異構物。
柱：Reg-AD
柱尺寸：3x25 cm，5 μm
流動相：Hex（8 mM NH 3·MeOH）/EtOH，65/35 v/v
流速：45 mL/min
檢測（nm）：220/254 nm
實例 249-A.獲得呈固體的第一洗脫峰（67.5 mg）。
第一洗脫峰的保留時間為12.5 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 (s, 1H), 7.17 (s, 2H), 4.72 (s, 2H), 4.08 - 3.80 (m, 7H), 3.74 (d, 1H), 3.10 (s, 1H), 2.72 (s, 1H), 2.11 - 1.62 (m, 8H)。LCMS (ESI): 516.2 [M+H] +。
實例 249-B.獲得呈固體的第二洗脫峰（66.0 mg）。
第二洗脫峰的保留時間為19.0 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 (s, 1H), 7.17 (s, 2H), 4.85 - 4.47 (m, 2H), 4.12 - 3.54 (m, 8H), 2.96 (s, 1H), 2.80 - 2.48 (m, 1H), 2.16 - 1.42 (m, 8H)。LCMS (ESI): 516.2 [M+H] +。
實例 250. N-((1 H- 吲哚 -2- 基 ) 甲基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image849
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 H-吲哚-2-基)甲胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（20.1 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.33 - 8.18 (m, 1H), 7.48 - 7.43 (m, 1H), 7.34 - 7.29 (m, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.11 - 7.01 (m, 1H), 7.01 - 6.94 (m, 1H), 6.31 (m, 1H), 4.81 - 4.61 (m, 2H), 4.52 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.31 (s, 1H), 3.14 - 2.83 (m, 1H), 2.77 - 2.50 (m, 1H), 2.02 - 1.69 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 493.3。
實例 251. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(6- 甲基吡啶 -2- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image851
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用6-甲基吡啶-2-胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（6.9 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 (s, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.71 - 7.60 (m, 1H), 7.18 (s, 2H), 6.99 (d, 1H), 4.69 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.03 (s, 1H), 2.90 - 2.76 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.02 (s, 2H), 1.94 - 1.78 (m, 2H), 1.33 (d, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 455.3。
實例 252. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3- 甲氧基口克唍 -4- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image853
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用3-甲氧基口克唍-4-胺作為起始材料。獲得標題化合物，其為非鏡像異構物的固體混合物（13.4 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.27 (s, 1H), 7.16 (m, 4H), 6.99 - 6.86 (m, 1H), 6.82 (m, 1H), 5.09 - 4.92 (m, 1H), 4.67 (s, 2H), 4.40 - 4.21 (m, 1H), 4.20 - 4.05 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.70 - 3.55 (m, 1H), 3.58 (s, 1H), 3.49 (s, 3H), 3.09 - 2.79 (m, 1H), 2.68 - 2.42 (m, 1H), 2.10 - 1.65 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 526.4。
實例 253. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1-(4- 氟苯基 ) 吡咯啶 -3- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image855
使用與對於實例179的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(4-氟苯基)吡咯啶-3-胺作為起始材料。獲得標題化合物，其為鏡像異構物的固體混合物（9.3 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 7.01 - 6.78 (m, 2H), 6.63 - 6.41 (m, 2H), 4.77 - 4.34 (m, 4H), 3.94 (s, 3H), 3.62 - 3.35 (m, 2H), 3.17 - 3.04 (m, 1H), 2.91 (s, 1H), 2.67 - 2.46 (m, 1H), 2.36 - 2.24 (m, 1H), 2.08 - 1.57 (m, 6H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 527.5。
實例 254. N-((1 H- 吡咯并 [3,2-c] 吡啶 -4- 基 ) 甲基 )-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image857
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-基)甲胺二鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（18.8 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.42 - 8.35 (m, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.05 (d, 1H), 7.45 - 7.37 (m, 1H), 7.34 - 7.26 (m, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.61 - 6.51 (m, 1H), 4.61 (d, 2H), 4.44 (s, 2H), 3.29 (s, 1H), 3.18 (s, 2H), 3.03 (s, 1H), 2.80 (s, 1H), 1.67 (d, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 494.2。
實例 255. 實例 255-A 和實例 255-B 的鏡像異構物混合物
實例 255-A. ( S)-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3- 氯苄基 )-2,2- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image859
實例 255-B. ( R)-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3- 氯苄基 )-2,2- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image861
使用與對於實例171的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用2,2-二甲基哌啶-4-甲酸甲酯作為步驟-1中的起始材料。獲得( S)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(3-氯苄基)-2,2-二甲基哌啶-4-甲醯胺和( R)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(3-氯苄基)-2,2-二甲基哌啶-4-甲醯胺，其為鏡像異構物的固體混合物（6.5 mg， 實例 255）。LCMS (ESI): [M+H] +: 516.5。
使用手性製備型HPLC分離標題化合物的兩種鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IC柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（10 mM NH 3·MeOH）: IPA=80 : 20，保持18 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 255-A.獲得呈固體的第一洗脫化合物（1.1 mg）。
第一洗脫化合物的保留時間為7.02 min。
LCMS (ESI): [M+H] +: 516.5。
實例 255-B.獲得呈固體的第二洗脫化合物（0.7 mg）。
第二洗脫化合物的保留時間為14.32 min。
LCMS (ESI): 516.4 [M+H] +。
實例 256. 實例 256-A 和實例 256-B 的鏡像異構物混合物
實例 256-A. ( S)-5-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3- 氯苄基 )-5- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -8- 甲醯胺
Figure 02_image863
實例 256-B. ( R)-5-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3- 氯苄基 )-5- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -8- 甲醯胺
Figure 02_image865
使用與對於實例174的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5-(三級丁氧基羰基)-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲酸作為步驟-1中的起始材料。獲得( S)-5-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(3-氯苄基)-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺和( R)-5-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(3-氯苄基)-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺，其為鏡像異構物的固體混合物（4.3 mg， 實例 256）。LCMS (ESI): [M+H] +: 528.5。
使用手性製備型HPLC分離標題化合物的兩種鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（10 mM NH 3·MeOH）: EtOH=80 : 20，保持20 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 256-A.獲得呈固體的第一洗脫化合物（1.5 mg）。
第一洗脫化合物的保留時間為9.52 min。
LCMS (ESI): [M+H] +: 528.5。
實例 256-B.獲得呈固體的第二洗脫化合物（1.6 mg）。
第二洗脫化合物的保留時間為17.13 min。
LCMS (ESI): [M+H] +: 528.4。
實例 257. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 s,4 S)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image867
將(1 R,3 s,5 S)-8-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體512，297.3 mg，0.76 mmol）和4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（150.0 mg，0.76 mmol）添加到HOBt（133.6 mg，0.99 mmol），EDCI（189.6 mg，0.99 mmol）和DIPEA（0.39 mL，2.28 mmol）在DMF（10 mL）中的混合物中。將溶液在25ºC下攪拌14 h，並且然後用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠層析法（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得呈固體的(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 s,4 S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺的非鏡像異構物混合物（300 mg）（ 實例 257）。LCMS (ESI) 570.4 [M+H] +。
兩種非鏡像異構物藉由手性製備型HPLC分離。
柱：手性ART纖維素-SB
柱尺寸：2 x 25 cm，5 μm
梯度：Hex（10 mM NH 3·MeOH）/EtOH，90/10 v/v
流速：20 mL/min
檢測（nm）：220/254 nm
實例 257-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（41.3 mg）。第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.63 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.29 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 5.39 (s, 1H), 4.85 - 4.80 (m, 1H), 3.97 (s, 4H), 3.41 (s, 3H), 3.13 - 3.05 (m, 1H), 2.20 - 1.90 (m, 6H), 1.88 - 1.60 (m, 10H)。LCMS (ESI): 570.4 [M+H] +。
實例 257-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（125.2 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.45 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.30 - 8.26 (m, 1H), 7.30 - 7.20 (m, 1H), 7.10 (s, 1H), 5.39 (s, 1H), 4.85 - 4.80 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.71 - 3.57 (m, 1H), 3.42 (s, 3H), 2.98 - 2.85 (m, 1H), 2.20 - 1.85 (m, 8H), 1.82 - 1.70 (m, 4H), 1.68 - 1.55 (m, 2H), 1.54 - 1.40 (m, 2H)。LCMS (ESI): 570.4 [M+H] +。
實例 258. (1 R,3 S,5 S)- N-[(3- 氟 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 ]-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image869
步驟 -1. (1 R,3 S,5 S)-3-[[(3- 氟 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 ] 胺基甲醯基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -8- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image871
將1-(3-氟-1 H-吲唑-5-基)甲胺（155.0 mg，0.94 mmol）添加到(1 R,3 S,5 S)-8-(三級丁氧基羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（239.0 mg，0.94 mmol），HOBt（139.0 mg，1.03 mmol），EDCI（198.0 mg，1.03 mmol）和DIPEA（0.49 mL，2.8 mmol）在DMF（4.00 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後用H 2O稀釋並用乙酸乙酯萃取。將有機層在真空下濃縮，並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（60 mg）。LCMS (ESI): 403.2 [M+H] +。
步驟 -2. (1 R,3 S,5 S)- N-[(3- 氟 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image873
將TFA（1.00 mL）添加到(1 R,3 S,5 S)-3-[[(3-氟-1 H-吲唑-5-基)甲基]胺基甲醯基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸三級丁酯（步驟-1，60.0 mg，0.15 mmol）在DCM（2.0 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌1 h，然後在真空下濃縮。將殘餘物用DCM稀釋，並且用DIPEA將溶液的pH值調節至8。將溶液在真空下濃縮，並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（40 mg）。LCMS (ESI): 303.2 [M+H] +。
步驟 -3. (1 R,3 S,5 S)- N-[(3- 氟 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 ]-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image875
將5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體507，19.0 mg，0.08 mmol），HATU（18.0 mg，0.05 mmol），和DIPEA（33 μL，0.19 mmol）添加到(1 R,3 S,5 S)- N-[(3-氟-1 H-吲唑-5-基)甲基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺（步驟-2，20.0 mg，0.07 mmol）在DMF（2.0 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌2 h，然後在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，2/1 v/v）純化，然後藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：YMC-Actus Triart C18，20x250 mm，5 μm，12 nm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeCN；梯度：31% B至42% B，8 min內；檢測：220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（1.4 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.44 - 7.36 (m, 2H), 7.28 - 7.18 (m, 2H), 5.15 (s, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.32 (s, 1H), 3.08 - 2.94 (m, 1H), 2.29 - 1.99 (m, 4H), 1.99 - 1.76 (m, 4H)。LCMS (ESI): 522.3 [M+H] +。
實例 259. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 s,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image877
使用與對於實例257-A和257-B的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體512）作為起始材料。殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得呈固體的(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 s,4 S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺的非鏡像異構物混合物（200.0 mg）（ 實例 259）。
兩種非鏡像異構物藉由手性製備型HPLC分離。
柱：CHIRALPAK IE
柱尺寸：2x25 cm，5 μm
梯度：Hex（10 mM NH 3·MeOH）/EtOH，70/30 v/v
流速：20 mL/min
檢測（nm）：225/260 nm
實例 259-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（65.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為17.6 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 5.20 - 5.10 (m, 1H), 4.87 - 4.85 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.69 - 3.60 (m, 1H), 2.94 - 2.90 (m, 1H), 2.20 - 1.90 (m, 4H), 2.24 - 1.97 (m, 4H), 1.98 - 1.83 (m, 4H), 1.82 - 1.71 (m, 4H), 1.70 - 1.54 (m, 4H)。LCMS (ESI): 556.4 [M+H] +。
實例 259-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（60.0 mg）。第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為22.5 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 5.39 (s, 1H), 4.69 (s, 1H), 3.96 (s, 4H), 3.12 - 2.98 (s, 1H), 2.24 - 1.99 (m, 4H), 1.99 - 1.83 (m, 6H), 1.82 - 1.59 (m, 6H)。LCMS (ESI): 556.4 [M+H] +。
實例 260. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(5,6- 二甲基吡 𠯤 -2- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image879
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5,6-二甲基吡𠯤-2-胺作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（6.0 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 9.03 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.16 (s, 2H), 4.66 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.78 - 3.33 (m, 1H), 3.17 - 2.92 (m, 1H), 2.90 - 2.73 (m, 1H), 2.58 - 2.41 (m, 6H), 1.99 (s, 2H), 1.90 - 1.67 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 470.2。
實例 261. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1 H- 吲哚 -4- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image881
使用與對於實例103的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1 H-吲哚-4-胺作為起始材料，以獲得呈固體的標題化合物（4.2 mg）。LCMS (ESI): 479.3 [M+H] +。
實例 262. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(3- 氯苯基 ) 甲基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image883
將1-(3-氯苯基)甲胺（29.0 mg，0.2 mmol），HATU（98.0 mg，0.3 mmol），和DIPEA（89 μL，0.5 mmol）添加到1-[5-(5-氯-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（中間體517，60.0 mg，0.2 mmol）在DMF（2.0 mL中）的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後用乙酸乙酯稀釋並用水洗滌。將有機層在減壓下濃縮，然後將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱，C18；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeCN；梯度：25% B至35% B，15 min內；檢測：220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（5 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.55 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.36 - 7.19 (m, 5H), 4.69 - 4.65 (m, 2H), 4.37 (s, 2H), 2.99 - 2.95 (m, 1H), 2.68 - 2.60 (m, 2H), 2.59 (s, 3H), 2.05 - 1.85 (m, 2H), 1.82 - 1.74 (m, 2H)。LCMS (ESI): 472.1 [M+H] +。
實例 263. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺和 1-[5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 s,4 s)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image885
將HOBt（67 mg，0.5 mmol）和EDCI（95 mg，0.5 mmol）添加到1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（中間體518，110 mg，0.3 mmol）在DMF（3 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌30 min，然後添加4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇鹽酸鹽（87 mg，0.4 mmol）和DIPEA（0.17 mL，0.9 mmol）。將溶液在25ºC下攪拌6 h，然後用乙酸乙酯稀釋並用水洗滌。將有機層在減壓下濃縮，並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得呈固體的1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺和1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-[(1 s,4 s)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺的非鏡像異構物混合物（100 mg）（ 實例 263）。
兩種非鏡像異構物藉由手性製備型HPLC分離。
柱：CHIRALPAK IG
柱尺寸：20x250 mm，5 μm
流動相：Hex：DCM=3 : 1（10 mM NH 3·MeOH）/MeOH 51/49至21/79 v/v
流速：20 mL/min
檢測（nm）：220/254 nm
實例 263-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（9.7 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.04 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.99 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.86 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 5.70 (s, 1H), 4.51 - 4.47 (m, 1H), 4.35 - 4.00 (m, 1H), 3.88 - 3.81 (m, 1H), 3.33 (s, 3H), 3.21 - 3.16 (m, 1H), 2.84 - 2.80 (m, 1H), 2.61 - 2.51 (m, 1H), 1.81 - 1.74 (m, 6H), 1.58 - 1.48 (m, 6H)。LCMS (ESI): 498.3 [M+H] +。
實例 263-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（6.7 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.46 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.03 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.92 - 7.66 (m, 2H), 7.03 (s, 1H), 5.74 (s, 1H), 4.75 - 4.35 (m, 2H), 4.11 (s, 1H), 3.60 - 3.45 (m, 1H), 3.28 - 3.09 (m, 1H), 2.95 - 2.68 (m, 1H), 2.46 - 2.30 (m, 1H), 1.86 - 1.67 (m, 5H), 1.67 - 1.43 (m, 9H)。LCMS (ESI): 498.3 [M+H] +。
實例 264. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 r)-4- 羥基 -4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺和 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 s,4 s)-4- 羥基 -4- 甲基環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image887
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用4-胺基-1-甲基環己烷-1-醇作為起始材料。使用製備型HPLC分離1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 r)-4-羥基-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺和1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 s,4 s)-4-羥基-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺，分離作為非鏡像異構物的混合物（ 實例 264）。
柱：XBridge BEH130製備型C18 OBD柱
柱尺寸：19 x 150 mm，5 µm
流動相：水（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 3H 2O）：MeCN
檢測：210/254 nm
實例 264-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（4.6 mg）。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 4.90 - 4.38 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.76 - 3.65 (m, 1H), 3.33 - 3.19 (m, 1H), 2.92 (s, 1H), 2.59 - 2.47 (m, 1H), 1.88 - 1.32 (m, 12H), 1.23 (s, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 476.5。
實例 264-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（6.9 mg）。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.27 (d, 1H), 7.13 (d, 2H), 4.82 - 4.51 (m, 1H), 4.42 - 4.10 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.70 - 3.45 (m, 1H), 3.32 - 3.09 (m, 1H), 3.07 - 2.77 (m, 1H), 2.62 - 2.35 (m, 1H), 2.03 - 1.33 (m, 13H), 1.21 (s, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 476.4。
實例 265. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(2- 甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -3- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image889
使用與對於實例167的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用2-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-3-胺鹽酸鹽作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（7.0 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 (s, 1H), 7.32 - 7.14 (m, 4H), 6.97 - 6.86 (m, 1H), 6.79 (m, 1H), 5.17 (m, 1H), 4.67 (s, 1H), 4.60 - 4.46 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 2.94 (s, 1H), 2.65 - 2.50 (m, 1H), 1.93 - 1.79 (m, 4H), 1.77 (s, 1H), 1.45 (m, 3H), 1.40 - 1.28 (m, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 496.3。
實例 266. (2 S,5 R)-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3- 氯苄基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 R,5 S)-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3- 氯苄基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 R,5 R)-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3- 氯苄基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 S,5 S)-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3- 氯苄基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image891
將1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-2,5-二甲基哌啶-4-甲酸（中間體533，50.0 mg，0.1 mmol）和1-(3-氯苯基)甲胺（18. mg，0.1 mmol）添加到EDCI（31.9 mg，0.17 mmol）和HOBt（22.4 mg，0.16 mmol）和DIPEA（67 μL，0.4 mmol）在DMF（3 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發，以獲得(2 S,5 R)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(3-氯苄基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺和(2 R,5 S)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(3-氯苄基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺和(2 R,5 R)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(3-氯苄基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺和(2 S,5 S)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(3-氯苄基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺，其為非鏡像異構物混合物（ 實例 266）。
使用手性製備型HPLC分離四種非鏡像異構物，得到兩個部分，每個部分含有兩種非鏡像異構物。
柱：Gemini-NX C18 AXAI填充
柱尺寸：21.2x150 mm，5 μm
梯度：水（0.1%FA）/MeCN，57/43至54/46 v/v
流速：25 mL/min
檢測（nm）：220/254
實例 266-A.獲得呈固體的第一洗脫峰（2.2 mg）。
第一洗脫峰的保留時間為10.5 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.95 (s, 1H), 8.57 (d, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.37 - 7.15 (m, 5H), 7.13 (s, 1H), 4.91 - 4.68 (m, 1H), 4.38 - 4.20 (m, 3H), 3.90 (s, 3H), 2.93 - 2.60 (m, 1H), 2.40 (m, 1H), 1.76 - 1.50 (m, 3H), 1.29 - 1.22 (m, 3H), 0.87 - 0.78 (m, 3H)。LCMS (ESI): 516.3 [M+H] +。
實例 266-B.獲得呈固體的第二洗脫峰（2.1 mg）。
第二洗脫峰的保留時間為11.5 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.95 (s, 1H), 8.57 (d, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.37 - 7.15 (m, 5H), 7.13 (s, 1H), 4.35 - 4.32(m, 1H), 4.25 - 4.20 (m, 3H), 3.90 (s, 3H), 2.93 - 2.60 (m, 1H), 2.40 (m, 1H), 1.90 - 1.80 (m, 1H), 1.70 - 1.58 (m, 1H), 1.23 (d, 3H), 0.81 (d, 3H)。LCMS (ESI): 516.3 [M+H] +。
實例 267. N-[(3- 氯苯基 ) 甲基 ]-1-[5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image893
使用與對於實例262的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（中間體518）作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱，C18；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeCN；梯度：20% B至30% B，12 min內；檢測：220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（2 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.44 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.36 - 7.28 (m, 2H), 7.26 (d, Hz, 1H), 7.23 (m, 1H), 7.16 (s, 1H), 4.70 (s, 2H), 4.37 (s, 2H), 2.97 (s, 1H), 2.58 (s, 5H), 1.94 (s, 2H), 1.77 (m, 2H)。LCMS (ESI): 456.2 [M+H] +。
實例 268. (1 R,3 S,5 S)- N-[(3- 氯苯基 ) 甲基 ]-8-[5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image895
將HATU（128.9 mg，0.3 mmol），DIPEA（0.12 mL，0.7 mmol）和(1 R,3 S,5 S)- N-[(3-氯苯基)甲基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺（中間體519，63.0 mg，0.2 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體520，50.0 mg，0.2 mmol）在DMF（5 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由反相柱層析法（MeCN/水，95/5至5/95 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（19.5 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.64 (d, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.38 - 7.22 (m, 4H), 7.26 - 7.17 (m, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.89 - 4.87 (m, 1H), 4.36 (s, 2H), 3.07 - 2.95 (m, 1H), 2.67 (s, 3H), 2.20 - 2.03 (m, 4H), 1.98 - 1.80 (m, 4H)。LCMS (ESI): 482.1 [M+H] +。
實例 269. N -[(3- 氟 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 ]-1-[5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image897
使用與對於實例262的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（中間體518）和1-(3-氟-1H-吲唑-5-基)甲胺（中間體514）作為起始材料。殘餘物首先藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，然後藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：Xselect CSH OBD，30x150 mm，5 μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeCN；梯度：20% B至35% B，8 min內；檢測：220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（2.6 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.01 (s, 1H), 12.49 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.43 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.47 - 7.41 (m, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.57 - 4.40 (m, 2H), 4.39 - 4.26 (m, 2H), 2.85 (s, 1H), 2.52 - 2.36 (m, 5H), 1.81 (s, 2H), 1.58 (s, 2H)。LCMS (ESI): 480.2 [M+H] +。
實例 270. 1-[5-(5- 氯 -2- 乙基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(3- 氯苯基 ) 甲基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image899
將HOBt（11.6 mg，0.09 mmol）和EDCI（16.5 mg，0.09 mmol）添加到1-[5-(5-氯-2-乙基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（中間體521，24.0 mg，0.07 mmol）在DMF（1.0 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌30 min，然後添加1-(3-氯苯基)甲胺（11.2 mg，0.08 mmol）和DIPEA（35 μL，0.2 mmol）。將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後用EtOAc稀釋，用水洗滌，並將有機層在減壓下濃縮。殘餘物首先藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，然後藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：Xselect CSH OBD，30x50 mm，5 μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeCN；梯度：35% B至52% B，7 min內；檢測：220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（2.1 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.57 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.39 - 7.17 (m, 5H), 4.81 - 4.49 (m, 2H), 4.37 (s, 2H), 3.13 - 2.78 (m, 3H), 2.63 (s, 1H), 2.03 - 1.72 (m, 4H), 1.48 - 1.21 (m, 4H)。LCMS (ESI): 486.1 [M+H] +。
實例 271. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-(1 H- 吲哚 -5- 基甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image901
使用與對於實例267的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(1 H-吲哚-5-基)甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XselectCSH OBD，30x150 mm，5 μm；流動相A：水（0.1% FA）；流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：20% B至33% B，8 min內；檢測：220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（9.6 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.00 (s, 1H), 11.01 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.35 - 8.28 (m, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.42 - 7.37 (m, 1H), 7.36 - 7.28 (m, 2H), 7.03 (s, 1H), 7.01 - 6.94 (m, 1H), 6.40 - 6.34 (m, 1H), 4.51 - 4.46 (m, 1H), 4.32 (d, 2H), 4.15 - 4.11 (m, 1H), 3.31 (s, 3H), 3.28 - 3.11 (m, 1H), 3.18 (s, 1H), 2.86 - 2.81 (m, 1H), 1.83 - 1.78 (m, 2H), 1.62 - 1.57 (m, 2H)。LCMS (ESI): 461.4 [M+H] +；
實例 272. N-[(2,3- 二甲基 -1 H- 吲哚 -5- 基 ) 甲基 ]-1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image903
使用與對於實例270的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（中間體511）和1-(2,3-二甲基-1 H-吲哚-5-基)甲胺（中間體522）作為起始材料。殘餘物首先藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，然後藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：YMC-Actus Triart C18，30x250 mm，5 μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeCN；梯度：34% B至50% B，7 min內；檢測：220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（31.1 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.35 - 7.29 (m, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.23 - 7.14 (m, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.01 - 6.91 (m, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.44 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.18 - 3.03 (m, 1H), 2.95 (s, 1H), 2.67 - 2.52 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.20 (d, 3H), 2.08 - 1.60 (m, 4H)。LCMS (ESI): 505.2 [M+H] +。
實例 273. (2 R,4 R)-1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3- 氯苄基 )-2- 甲基哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image905
使用與對於實例174的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(2 R,4 R)-1-(三級丁氧基羰基)-2-甲基哌啶-4-甲酸作為步驟-1中的起始材料。獲得呈固體的標題化合物（2.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 504.3。
實例 274. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3- 氯苄基 )-2,6- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image907
步驟 -1. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-2,6- 二甲基哌啶 -4- 甲酸甲酯
Figure 02_image909
將SOCl 2（1.00 mL）添加到5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體510，90.0 mg，0.35 mmol）並將所得混合物在70ºC下攪拌5 h。將所得混合物在真空下濃縮並將殘餘物溶解在THF（2.00 mL）中。將2,6-二甲基哌啶-4-甲酸甲酯（60.0 mg，0.35 mmol）和NaH（28.0 mg，0.70 mmol，在礦物油中的60%分散體）在THF（1.00 mL）和DIPEA（274.0 mg，2.13 mmol）中的溶液添加到反應混合物中。將所得混合物在80ºC下攪拌24 h並且完成後在真空下濃縮。殘餘物不經進一步純化而用於下一步驟。
步驟 -2. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-2,6- 二甲基哌啶 -4- 甲酸
Figure 02_image911
將LiOH（44.0 mg，1.05 mmol）在水（0.50 mL）中的溶液添加到1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-2,6-二甲基哌啶-4-甲酸甲酯（步驟-1）在MeOH（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在30ºC下攪拌5 h。將所得混合物在真空下濃縮以獲得標題化合物並且不經進一步純化而用於下一步驟。
步驟 -3. 1-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3- 氯苄基 )-2,6- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image913
將HATU（199.0 mg，0.53 mmol）和(3-氯苯基)甲胺（50.0 mg，0.35 mmol）添加到1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-2,6-二甲基哌啶-4-甲酸（步驟-2）和DIPEA（137.0 mg，1.05 mmol）在DMF（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在30ºC下攪拌14 h。將所得混合物過濾。然後將濾液藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：Sunfire製備型C18 OBD柱，19 x 150 mm 5 µm 10 nm；流動相A：水（0.1% FA），流動相B：MeCN；檢測器，UV 210/254 nm），以獲得標題化合物（3.6 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD)：δ 8.27 (s, 1H), 7.49 - 6.70 (m, 6H), 4.64 (d, 1H), 4.35 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.53 - 2.42 (m, 1H), 2.26 - 2.14 (m, 2H), 1.89 - 1.74 (m, 2H), 1.43 (d, 6H), 1.31 (d, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 518.1。
實例 275. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 s,4 S)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image915
使用與對於實例170-A的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用甲氧基-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺作為步驟-5中的起始材料。藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10 : 1 v/v）洗脫）純化，得到呈固體的(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 s,4 S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺的非鏡像異構物混合物（210.0 mg，實例275）。LCMS (ESI): [M+H] +: 554.4。
使用手性製備型HPLC分離標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（10 mM NH 3·MeOH）：IPA=70 : 30，保持19 min
流速：20 mL/min
檢測：210/260 nm
實例 275-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（35.4 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.10 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.16 - 8.06 (m, 1H), 7.38 - 7.08 (m, 2H), 5.37 (s, 1H), 4.80 - 4.78 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.94 (s, 1H), 3.31 (s, 3H), 3.15 - 3.05 (m, 1H), 2.21 - 1.65 (m, 16H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 554.4。
實例 275-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（128.1 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為12.40 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.20 - 7.90 (m, 1H), 7.38 - 7.08 (m, 2H), 5.37 (s, 1H), 4.80 - 4.78 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.70 - 3.60 (m, 1H), 3.35 (s, 3H), 3.15 - 3.05 (m, 1H), 2.21 - 1.65 (m, 16H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 554.4。
實例 276. 1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image917
將EDCI（165.1 mg，0.86 mmol），HOBt（116.4 mg，0.86 mmol），和1-氧雜螺[3.5]壬-7-胺（中間體523，202.7 mg，1.44 mmol）添加到1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（中間體511，200.0 mg，0.57 mmol）和DIPEA（222.6 mg，1.72 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，流動相A：水（0.1% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：30 mL/min；梯度：20 B至50 B，20 min內；220/254 nm），以獲得標題化合物（162.0 mg），其為非鏡像異構物的呈固體混合物。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.01 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.05 (s, 1H), 4.73 - 4.03 (m, 4H), 3.88 (s, 3H), 3.55 - 3.49 (m, 1H), 3.18 - 3.12 (m, 1H), 2.85 - 2.78 (m, 1H), 2.45 - 2.38 (m, 1H), 2.33 - 2.21 (m, 2H), 2.03 - 1.93 (m, 2H), 1.76 - 1.69 (m, 2H), 1.58 - 1.37 (m, 8H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 472.3。
實例 277. (1 R,3 s,5 S)- N-((3- 氟 -1- 甲基 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image919
步驟 -1. 3- 氟 -1- 甲基吲唑 -5- 甲腈
Figure 02_image921
將Selectfluor®（4.51 g，12.73 mmol）和AcOH（1.00 mL）添加到1-甲基吲唑-5-甲腈（1.00 g，6.36 mmol）在MeCN（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在70ºC下攪拌14 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/5 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（623.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 176.1。
步驟 -2. 1-(3- 氟 -1- 甲基吲唑 -5- 基 ) 甲胺
Figure 02_image923
將Pd/C（300.0 mg，2.82 mmol）添加到3-氟-1-甲基吲唑-5-甲腈（步驟-1，600.0 mg，3.43 mmol）在MeOH（10.00 mL）和AcOH（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌1 h。濾出固體。將濾液在真空下濃縮，並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（648.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 180.1。
步驟 -3. (1 R, 3 S, 5 S)-3-[[(3- 氟 -1- 甲基吲唑 -5- 基 ) 甲基 ] 胺基甲醯基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -8- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image925
將HOBt（135.7 mg，1.00 mmol），EDCI（192.6 mg，1.00 mmol），和1-(3-氟-1-甲基吲唑-5-基)甲胺（150.0 mg，0.84 mmol）添加到(1 R,3 S,5 S)-8-(三級丁氧基羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（256.5 mg，1.00 mmol）和DIPEA（324.5 mg，2.51 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層在真空下濃縮，並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（20/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（249.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 417.2.
步驟 -4. (1 R, 3 S, 5S)- N-[(3- 氟 -1- 甲基吲唑 -5- 基 ) 甲基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image927
將TFA（2.00 mL）添加到(1 R,3 S,5 S)-3-[[(3-氟-1-甲基吲唑-5-基)甲基]胺基甲醯基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸三級丁酯（249.0 mg，0.60 mmol）在DCM（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌30 min。將所得混合物在真空下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（185.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 317.2。
步驟 -5. (1 R, 3 S, 5 S)- N-[(3- 氟 -1- 甲基吲唑 -5- 基 ) 甲基 ]-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image919
將HOBt（44.4 mg，0.33 mmol），EDCI（63.0 mg，0.33 mmol），和(1 R，3 S，5 S)- N-[(3-氟-1-甲基吲唑-5-基)甲基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺（96.0 mg，0.30 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體513，60.0 mg，0.25 mmol）和DIPEA（98.1 mg，0.76 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將該有機層在真空下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：Xselect CSH F-苯基OBD柱，19 x 250 mm，5 µm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeOH；梯度：61% B至71% B，10 min內；檢測器，UV 220 nm），以獲得呈固體的標題化合物（42.1 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.16 (s, 1H), 7.60 - 7.05 (m, 5H), 5.38 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.15 - 3.70 (m, 6H), 3.10 - 2.93 (m, 1H), 2.28 - 1.67 (m, 8H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 536.2。
實例 278. N-((3,3- 二甲基吲哚啉 -5- 基 ) 甲基 )-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image930
步驟 -1. 5- 溴 -3,3- 二甲基吲哚啉
Figure 02_image932
在25ºC下將在THF（1 M，21.00 mL）中的BH 3添加到5-溴-3,3-二甲基-1 H-吲哚-2-酮（1.00 g，4.17 mmol）在THF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在70ºC下攪拌4 h。然後將溶液在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（660.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 226.0。
步驟 -2. 5- 溴 -3,3- 二甲基吲哚啉 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image934
將二碳酸二三級丁酯（2.55 g，11.68 mmol）和DMAP（36.0 mg，0.29 mmol）添加到5-溴-3,3-二甲基吲哚啉（步驟-1，660.0 mg，2.92 mmol）在THF（50.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在80ºC下攪拌3 h。然後將溶液在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（20/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（510.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 326.1。
步驟 -3. 5- 氰基 -3,3- 二甲基吲哚啉 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image936
將Zn(CN) 2（220.0 mg，1.88 mmol）和Pd(PPh 3) 4（3.61 g，3.13 mmol）添加到5-溴-3,3-二甲基-2 H-吲哚-1-甲酸三級丁酯（步驟-2，510.0 mg，1.56 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌3 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。然後將溶液在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（3/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（244.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 273.2。
步驟 -4. 5-( 胺基甲基 )-3,3- 二甲基吲哚啉 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image938
將Pd/C（60.0 mg）和AcOH（2.00 mL）添加到5-氰基-3,3-二甲基-2 H-吲哚-1-甲酸三級丁酯（步驟-3，200.0 mg，0.73 mmol）在MeOH（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌3 h。濾出固體。然後將溶液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（150.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 277.2。
步驟 -5. 5-[([1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 基 ] 甲醯胺基 ) 甲基 ]-3,3- 二甲基 -2 H- 吲哚 -1- 甲酸三級丁酯的合成
Figure 02_image940
將HATU（85.9 mg，0.23 mmol）和5-(胺基甲基)-3,3-二甲基-2 H-吲哚-1-甲酸三級丁酯（步驟-4，52.0 mg，0.19 mmol）添加到1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（78.7 mg，0.23 mmol）和DIPEA（74.3 mg，0.57 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（2/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（110.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 607.3。
步驟 -6. N-((3,3- 二甲基吲哚啉 -5- 基 ) 甲基 )-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image930
將TFA（2.00 mL）添加到5-[([1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-基]甲醯胺基)甲基]-3,3-二甲基-2 H-吲哚-1-甲酸三級丁酯（步驟-5，150.0 mg，0.25 mmol）在DCM（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化。將所得殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：SHIMADZU（HPLC-01）：柱，YMC-Actus Triart C18，30 x 250 mm，5 µm；流動相，水（10 mM NH 4HCO 3）和MeCN（25%至55%，7 min內）；檢測器，UV 220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（33.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.94 (d, 1H), 6.62 (d, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.27 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.24 (s, 3H), 2.95 (s, 1H), 2.63 - 2.53 (m, 1H), 2.00 - 1.64 (m, 4H), 1.29 (s, 6H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 507.2。
實例 279. (1 R,3 s,5 S)- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image943
步驟 -1. (1 R,3 R,5 S)-8-[5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸苄酯的合成
Figure 02_image945
將EDCI（185.0 mg，0.97 mmol），HOBt（130.0 mg，0.96 mmol），和(1 R,3 R,5 S)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸苄酯（190.0 mg，0.77 mmol）添加到5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體538，130.0 mg，0.64 mmol）和DIPEA（490.0 mg，3.79 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得溶液用EtOAc稀釋，用水洗滌。將有機層在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（150.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 432.2。
步驟 -2. (1 R,3 R,5 S)-8-[5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸
Figure 02_image947
將LiOH .H 2O（29.0 mg，0.69 mmol，1.99當量）添加到(1 R,3 R,5 S)-8-[5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸苄酯（步驟-5，150.0 mg，0.35 mmol）在THF（2.00 mL），MeOH（2.00 mL），和H 2O（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。然後將溶液在減壓下濃縮並溶解在水中，並用HCl（1 M）將pH調節至5。將所得混合物用EtOAc萃取。將有機層在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（100.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 342.1。
步驟 -3. (1 R,3 R,5 S)-8-[5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image943
將EDCI（89.0 mg，0.46 mmol），HOBt（62.0 mg，0.46 mmol），和(1 r,4 r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（68.0 mg，0.37 mmol）添加到1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（步驟-7，105.0 mg，0.31 mmol）和DIPEA（119.0 mg，0.92 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得溶液用EtOAc稀釋，用水洗滌。將有機層在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化。將所得殘餘物進一步藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：Ascentis Express C18 OBD柱，50 x 2.1 mm；流動相A：水（0.1% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20% B至50% B，20 min內；檢測器，UV 220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（66.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 14.17 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.75 (d, 1H), 7.43 (s, 1H), 5.68 (s, 1H), 5.23 (s, 1H), 4.69 (d, 1H), 3.80 (s, 1H), 2.92 (s, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.02 (s, 1H), 1.78 (m, 9H), 1.62 (d, 2H), 1.51 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 507.2。 實例 280. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 R)-6-( 三氟甲基 ) 四氫 -2 H- 哌喃 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,6 R)-6-( 三氟甲基 ) 四氫 -2 H- 哌喃 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,6 S)-6-( 三氟甲基 ) 四氫 -2 H- 哌喃 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 S)-6-( 三氟甲基 ) 四氫 -2 H- 哌喃 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image950
使用與對於實例170-A的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用6-(三氟甲基)㗁𠮿-3-胺（中間體532）作為步驟-5中的起始材料。
使用手性製備型HPLC分離(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,6 R)-6-(三氟甲基)四氫-2 H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 S,6 R)-6-(三氟甲基)四氫-2 H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 S,6 S)-6-(三氟甲基)四氫-2 H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,6 S)-6-(三氟甲基)四氫-2 H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺的四種非鏡像異構物的混合物（ 實例 280）。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（8 mM NH 3·MeOH）: EtOH=80 : 20，保持21 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 280-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（4.2 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.81 min。
LCMS (ESI): [M+H] +: 526.2。
實例 280-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（18.8 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為14.25 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.22 (s, 2H), 5.35 (s, 1H), 4.57 (s, 1H), 3.94 (s, 5H), 3.83 (s, 1H), 3.72 (d, 1H), 3.14 (s, 1H), 2.27 - 1.86 (m, 9H), 1.86 - 1.64 (m, 2H), 1.55 (s, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 526.2。
實例 280-C.獲得呈固體的第三洗脫非鏡像異構物（1.6 mg）。
第三洗脫非鏡像異構物的保留時間為16.53 min。
LCMS (ESI): [M+H] +: 526.2。
實例 280-D.獲得呈固體的第四洗脫非鏡像異構物（10.9 mg）。
第四洗脫非鏡像異構物的保留時間為17.57 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.16 (s, 1H), 7.45 - 6.98 (m, 2H), 5.36 (s, 1H), 4.57 (s, 1H), 3.94 (s, 5H), 3.83 (s, 1H), 3.72 (d, 1H), 3.14 (s, 1H), 3.12 (s, 9H), 2.50 - 1.85 (m, 2H), 1.88 - 1.67 (m, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 526.2。
實例 281. 1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1-(3- 甲基 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 乙基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image952
步驟 -1. 5- 溴 -1-(4- 甲氧基苄基 )-3- 甲基 -1 H- 吲唑
Figure 02_image954
將PMBCl（0.96 g，6.16 mmol）和K 2CO 3（1.96 g，14.21 mmol）添加到5-溴-3-甲基-1 H-吲唑（1.00 g，4.74 mmol）在DMF（20.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/2 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.20 g）。LCMS (ESI): [M+H] +: 331.2。
步驟 -2. 1-(1-(4- 甲氧基苄基 )-3- 甲基 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 乙烷 -1- 酮
Figure 02_image956
在25ºC下將Pd(PPh 3) 4（349.0 mg，0.30 mmol）和三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷（1.63 g，4.53 mmol）添加到5-溴-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-甲基吲唑（步驟-1，500.0 mg，1.51 mmol）在DMF（20.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在80ºC下攪拌4 h。將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（200.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 295.1。
步驟 -3. 1-(1-(4- 甲氧基苄基 )-3- 甲基 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 乙烷 -1- 胺
Figure 02_image958
將NH 4OAc（196.0 mg，2.55 mmol）添加到1-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-甲基吲唑-5-基]乙酮（步驟-2，150.0 mg，0.51 mmol）在EtOH（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min。然後將NaBH 3CN（160.0 mg，2.55 mmol）添加到反應混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得標題化合物（90.0 mg），其為鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): [M+H] +: 296.3。
步驟 -4. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-(1-[1-[(4- 甲氧基苯基 ) 甲基 ]-3- 甲基吲唑 -5- 基 ] 乙基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image960
將EDCI（23.1 mg，0.26 mmol），HOBt（35.7 mg，0.26 mmol）和1-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-甲基吲唑-5-基]乙胺（步驟-3，60.0 mg，0.20 mmol）添加到1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（70.8 mg，0.20 mmol）和DIPEA（78.8 mg，0.61 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。然後將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得標題化合物（90.0 mg），其為鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): [M+H] +: 626.1。
步驟 -5. 1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1-(3- 甲基 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 乙基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image962
在25ºC下將TfOH（1.50 mL）添加到1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-(1-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-甲基吲唑-5-基]乙基)哌啶-4-甲醯胺（步驟-4，60.0 mg）在TFA（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在80ºC下攪拌4 h。然後將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將所得混合物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱；流動相，在水中的MeCN，10%至95%梯度，20 min內；檢測器UV254 nm），以獲得標題化合物（17.4 mg），其為鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.00 (s, 1H), 12.55 (s, 1H), 8.35 - 8.25 (m, 2H), 7.57 (s, 1H), 7.40 (d, 1H), 7.36 - 7.25 (m, 2H), 7.04 (s, 1H), 5.07 - 4.97 (m, 1H), 4.47 - 4.25 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.25 - 3.10 (m, 2H), 2.90 - 2.70 (m, 1H), 2.50 - 2.40 (m, 3H), 1.82 - 1.70 (m, 2H), 1.65 - 1.42 (m, 2H), 1.40 (d, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 506.1。
實例 282. 9-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-3- 氧雜 -9- 氮雜雙環 [3.3.1] 壬烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image964
步驟 -1. 9-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-3- 氧雜 -9- 氮雜雙環 [3.3.1] 壬烷 -7- 甲酸甲酯
Figure 02_image966
將HATU（55.1 mg，0.15 mmol）和3-氧雜-9-氮雜雙環[3.3.1]壬烷-7-甲酸甲酯（28.2 mg，0.15 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體506，53.2 mg，0.15 mmol）和DIPEA（76.0 µL，0.43 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在23ºC下攪拌18 h。然後將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用30-50% EtOAc/己烷洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（51.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 535.5。
步驟 -2. 9-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-3- 氧雜 -9- 氮雜雙環 [3.3.1] 壬烷 -7- 甲酸
Figure 02_image968
將1 M LiOH的溶液（292.5 µL，0.30 mmol）添加到9-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-羰基)-3-氧雜-9-氮雜雙環[3.3.1]壬烷-7-甲酸甲酯（步驟-1，52.0 mg，0.10 mmol）在THF（1.00 ml）和水（1.00 ml）中的攪拌溶液中。將所得混合物在23ºC下攪拌18 h。藉由添加乙酸將pH調節至pH 5。將所得混合物濃縮並且不經進一步純化而用於下一步驟。LCMS (ESI): [M+H] +: 521.3。
步驟 -3. 9-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-3- 氧雜 -9- 氮雜雙環 [3.3.1] 壬烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image970
將HATU（40.6 mg，0.11 mmol）和(1 r,4 r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（19.5 mg，0.11 mmol）添加到9-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-羰基)-3-氧雜-9-氮雜雙環[3.3.1]壬烷-7-甲酸（步驟-3，50.5 mg，0.10 mmol）和DIPEA（50.8 µL，0.29 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在23ºC下攪拌22 h。然後將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用70-100% EtOAc/己烷洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（64.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 686.5。
步驟 -4. 9-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-3- 氧雜 -9- 氮雜雙環 [3.3.1] 壬烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image964
將TFA（3.00 mL）添加到9-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-3-氧雜-9-氮雜雙環[3.3.1]壬烷-7-甲醯胺（步驟-3，64.0 mg，0.09 mmol）在DCM（23.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在23ºC下攪拌15 h。然後將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用5-15% MeOH/DCM洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（45.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.95 - 8.31 (m, 2H), 6.93 - 7.39 (m, 2H), 4.93 - 5.13 (m, 1H), 4.53 - 4.73 (m, 1H), 4.18 - 4.33 (m, 1H), 4.01 - 4.12 (m, 1H), 3.75 - 3.99 (m, 8H), 3.35 (s, 1H), 1.82 - 2.22 (m, 8H), 1.59 - 1.77 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 556.3。
實例 283. (1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image973
將HOBt（57.0 mg，0.42 mmol），EDCI（80.0 mg，0.42 mmol），和(1 r,4 r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（74.0 mg，0.40 mmol）添加到(1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體524，100.0 mg，0.28 mmol）和DIPEA（108.0 mg，0.84 mmol）在DMF（20.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併並在真空下濃縮，然後將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得所得殘餘物。然後將所得殘餘物進一步藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：YMC-Actus Triart C18，30 x 250 mm，5 µm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeCN；梯度：26% B至38% B，8 min內；檢測器，UV 220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（56.8 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 8.53 (d, 1H), 7.84 - 7.70 (m, 2H), 7.12 (d, 1H), 5.70 (s, 1H), 4.69 (d, 1H), 3.81 (d, 1H), 3.01 - 2.83 (m, 1H), 2.50 (d, 3H), 2.15 - 1.41 (m, 17H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 524.3。
實例 284. (1 R,3 s,5 S)- N-((3- 氟 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image975
將EDCI（80.2 mg，0.42 mmol），HOBt（56.5 mg，0.42 mmol），和1-(3-氟-1 H-吲唑-5-基)甲胺（中間體514，69.1 mg，0.42 mmol）添加到(1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體524，100.0 mg，0.28 mmol）和DIPEA（108.0 mg，0.84 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將該有機層在真空下濃縮。將殘餘物藉由手性製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：YMC-Actus Triart C18，30 x 250 mm，5 µm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：25% B至37% B，8 min內；檢測器，UV 220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（30.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 14.01 (s, 1H), 12.49 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.41 - 8.29 (m, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.48 - 7.41 (m, 1H), 7.36 - 7.30 (m, 1H), 7.13 (s, 1H), 5.54 - 4.45 (m, 2H), 4.34 (d, 2H), 3.01 - 2.85 (m, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.04 (s, 1H), 1.97 - 1.62 (m, 7H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 506.2。
實例 285. (1 R,3 R,5 S)- N-[(2,3- 二甲基 -1 H- 吲哚 -5- 基 ) 甲基 ]-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image977
使用與對於實例266的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體508）和1-(2,3-二甲基-1 H-吲哚-5-基)甲胺（中間體522）作為起始材料。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：YMC-Actus Triart C18，30x250 mm，5 μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeCN；梯度：38% B至52% B，7 min內；檢測：220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（9.1 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.31 - 7.22 (m, 2H), 7.22 - 7.14 (m, 2H), 6.97 - 6.90 (m, 1H), 5.28 (s, 1H), 4.41 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.06 - 2.92 (m, 1H), 2.36 - 2.31 (m, 3H), 2.19 - 2.02 (m, 8H), 1.97 - 1.85 (m, 2H), 1.81 (d, 2H)。LCMS (ESI): 531.2 [M+H] +。
實例 286-A. ( R)-4-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image979
實例 286-B. ( S)-4-(5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image981
將HOBt（140.0 mg，1.04 mmol），EDCI（198.7 mg，1.04 mmol），和(1 r，4 r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇鹽酸鹽（227.6 mg，1.04 mmol）添加到4-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體534，270.0 mg，0.69 mmol）和DIPEA（267.9 mg，2.07 mmol）在DMF（6.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將該有機層在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，得到( R)-4-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( S)-4-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，其為非鏡像異構物的固體混合物。
使用手性製備型HPLC分離標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（8 mM NH 3·MeOH）: EtOH=70 : 30，保持14 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 286-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（34.7 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.75 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.27 (s, 1H), 7.39 - 7.00 (m, 2H), 4.60 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.05 - 2.73 (m, 1H), 2.53 (s, 1H), 2.01 - 1.80 (m, 5H), 1.81 - 1.60 (m, 5H), 1.31 (s, 2H), 1.17 - 0.91 (m, 2H), 0.76 (s, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 556.3。
實例 286-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（41.8 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.75 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.26 (s, 1H), 7.20 (s, 2H), 4.51 (s, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.83 (s, 1H), 3.07 - 2.68 (m, 1H), 2.42 (s, 1H), 2.15 - 1.36 (m, 11H), 1.36 - 0.50 (m, 6H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 556.1。
實例 287-A. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image983
實例 287-B. ( R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image985
使用與對於實例283的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用( S)-4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸和( R)-4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體526）的混合物作為起始材料。將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的( S)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( R)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺的非鏡像異構物混合物。
使用手性製備型HPLC分離標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（8 mM NH3·MeOH）: EtOH=80 : 20，保持14 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 287-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（41.5 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.35 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.42 (d, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 4.87 - 4.41 (m, 1H), 3.95 (s, 1H), 2.93 (s, 1H), 2.58 (s, 3H), 2.32- 2.51 (m, 1H), 2.04 - 1.77 (m, 5H), 1.80 - 1.59 (m, 5H), 1.52 - 1.42 (m, 1H), 1.28 (m, 1H), 1.04 - 0.83 (m, 2H), 0.75 (s, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 524.3。
實例 287-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（39.4 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.16 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.44 - 8.39 (m, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 3.95 (s, 1H), 2.92 (s, 1H), 2.58 (s, 3H), 2.51 - 2.32 (m, 1H), 2.03 - 1.57 (m, 12H), 1.52 - 1.13 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 524.3。
實例 288-A. ( S)- N-((3- 氟 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image987
實例 288-B. ( R)- N-((3- 氟 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image989
將EDCI（92.2 mg，0.48 mmol），HOBt（65.0 mg，0.48 mmol），和1-(3-氟-1 H-吲唑-5-基)甲胺（中間體514，72.8 mg，0.44 mmol）添加到4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527，150.0 mg，0.40 mmol）和DIPEA（155.4 mg，1.20 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：30 mL/min；梯度：35 B至60 B，20 min內；檢測器，UV 220/254 nm），以獲得呈固體的( S)- N-((3-氟-1 H-吲唑-5-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( R)- N-((3-氟-1 H-吲唑-5-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺的鏡像異構物混合物（50 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 522.2。
使用手性製備型HPLC分離標題化合物的兩種鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（0.5% 2 M NH 3·MeOH）: EtOH=50 : 50，保持30 min
流速：15 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 288-A.獲得呈固體的第一洗脫鏡像異構物（10.6 mg）。
第一洗脫鏡像異構物的保留時間為14.62 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.44 - 7.38 (m, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.48 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.65 - 3.36 (m, 1H), 2.86 (s, 1H), 2.50 - 2.44 (m, 1H), 1.91 (s, 2H), 1.34 - 1.28 (m, 2H), 1.05 - 0.99 (m, 2H), 0.73 (s, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 551.2。
實例 288-B.獲得呈固體的第二洗脫鏡像異構物（10.1 mg）。
第二洗脫鏡像異構物的保留時間為21.53 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.44 - 7.38 (m, 2H), 7.20 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.48 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.56 (s, 1H), 2.87 (s, 1H), 2.44 (s, 1H), 1.91 (s, 2H), 1.31 (s, 2H), 1.04 (s, 2H), 0.74 (s, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 551.2。
實例 289. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 R)-6-( 三氟甲基 ) 四氫 -2 H- 哌喃 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,6 R)-6-( 三氟甲基 ) 四氫 -2 H- 哌喃 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,6 S)-6-( 三氟甲基 ) 四氫 -2 H- 哌喃 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 S)-6-( 三氟甲基 ) 四氫 -2 H- 哌喃 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image991
使用與對於實例283的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用6-(三氟甲基)四氫-2 H-哌喃-3-胺（中間體532）作為起始材料。將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v））純化，以獲得(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,6 R)-6-(三氟甲基)四氫-2 H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 S,6 R)-6-(三氟甲基)四氫-2 H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 S,6 S)-6-(三氟甲基)四氫-2 H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,6 S)-6-(三氟甲基)四氫-2 H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 289）。
使用手性製備型HPLC分離標題化合物的四種非鏡像異構物。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（8 mM NH 3·MeOH）: EtOH=80 : 20，保持2 min
流速：50 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 289-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（1.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.75 min。
LCMS (ESI): [M+H] +: 510.2。
實例 289-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（15.9 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為12.83 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.49 - 8.37 (m, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.04 - 3.79 (m, 3H), 3.79 - 3.65 (m, 1H), 3.22 - 3.05 (m, 1H), 2.59 (d, 3H), 2.26 - 1.66 (m, 13H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 510.2。
實例 289-C.獲得呈固體的第三洗脫非鏡像異構物（16.0 mg）。
第三洗脫非鏡像異構物的保留時間為15.40 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.44 (d, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.04 - 3.78 (m, 3H), 3.78 - 3.67 (m, 1H), 3.22 - 3.06 (m, 1H), 2.59 (d, 3H), 2.23 - 1.63 (m, 13H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 510.2。
實例 289-D.獲得呈固體的第四洗脫非鏡像異構物（3.0 mg）。
第四洗脫非鏡像異構物的保留時間為17.80 min。
LCMS (ESI): [M+H] +: 510.2。
實例 290. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( R)-1-(3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -5- 基 ) 乙基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( S)-1-(3-( 三氟甲基 )-1,2,4- 㗁二唑 -5- 基 ) 乙基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image993
將HATU（112.0 mg，0.29 mmol）和1-[3-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-5-基]乙胺（48.0 mg，0.27 mmol）添加到(1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體508，100.0 mg，0.27 mmol）和DIPEA（104.0 mg，0.80 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：30 mL/min；梯度：20 B至50 B，20 min內；檢測器，UV 220/254 nm），以獲得 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(( R)-1-(3-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-5-基)乙基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(( S)-1-(3-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-5-基)乙基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，其為非鏡像異構物的固體混合物（125.8 mg， 實例 290）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.15 (d, 1H), 7.29 - 7.17 (m, 2H), 5.42 - 5.00 (m, 3H), 3.95 (s, 3H), 3.12 - 2.96 (m, 1H), 2.26 - 1.90 (m, 8H), 1.65 (d, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 538.3。
使用手性製備型HPLC分離標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IG柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（10 mM NH 3·MeOH）: EtOH=90 : 10，保持22 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 290-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（46.4 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為13.43 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.15 (s, 1H), 7.29 - 7.17 (m, 2H), 5.42 - 3.82 (m, 3H), 3.95 (s, 3H), 3.12 - 2.96 (m, 1H), 2.26 - 1.90 (m, 8H), 1.65 (d, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 538.2。
實例 290-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（45.5 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為18.50 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.16 (s, 1H), 7.29 - 7.17 (m, 2H), 5.42 - 3.85 (m, 3H), 3.95 (s, 3H), 3.12 - 2.96 (m, 1H), 2.26 - 1.90 (m, 8H), 1.65 (d, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 538.2。
實例 291. (1 R,3 s,5 S)- N-(1,1- 二甲基矽烷 -4- 基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image995
將HATU（45.6 mg，0.12 mmol）和1,1-二甲基矽烷-4-胺 鹽酸鹽（21.6 mg，0.12 mmol）添加到(1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體508，29.9 mg，0.08 mmol）和DIPEA（31.0 mg，0.24 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在30ºC下攪拌14 h。將所得混合物過濾。然後將濾液藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XBridge BEH130製備型C18 OBD 柱，130 Å，19 x 150 mm 5 µm 13 nm；流動相A：水（20 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；檢測器，UV 210/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（20.4 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (m, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 5.22 - 5.18 (m, 1H), 4.86 - 4.82 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.56 - 3.48 (m, 1H), 3.00 - 2.79 (m, 1H), 2.25 - 1.80 (m, 6H), 1.77 - 1.69 (m, 2H), 1.56 - 1.42 (m, 2H), 1.32 - 1.26 (m, 2H), 0.86 - 0.69 (m, 2H), 0.67 - 0.55 (m, 2H), 0.07 (s, 3H), 0.01 (s, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 500.4。
實例 292. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 s,4 S)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image997
使用與對於實例276的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體524）和4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（中間體516）作為起始材料。殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 s,4 S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺的非鏡像異構物混合物（150 mg， 實例 292）。LCMS (ESI): 538.2 [M+H] +。
兩種非鏡像異構物藉由手性製備型HPLC分離。
柱：CHIRALPAK IA
柱尺寸：2x25 cm，5 μm
梯度：Hex：DCM=3 : 1（10 mM NH 3·MEOH）/EtOH，80/20 v/v
流速：17 mL/min
檢測（nm）：220/254 nm
實例 292-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（69.5 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.64 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14.00 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.90 - 7.65 (m, 2H), 7.11 (s, 1H), 4.67 (s, 2H), 3.69 - 3.38 (m, 1H), 3.31 (s, 3H), 2.85 - 2.67 (m, 1H), 2.50 - 2.47 (m, 3H), 2.11 - 1.42 (m, 14H), 1.44 - 1.06 (m, 2H)。LCMS (ESI): 538.2 [M+H] +。
實例 292-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（15.7 mg）。第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.02 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14.00 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 7.81 (d, 2H), 7.11 (s, 1H), 4.94 (m, 2H), 3.91 - 3.55 (m, 1H), 3.30 (s, 3H), 2.97 - 2.75 (m, 1H), 2.49 - 2.48 (m, 3H), 2.33 - 1.66 (m, 10H), 1.59 (m, 6H)。LCMS (ESI): 538.2 [M+H] +。
實例 293-A. ( R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image999
實例 293-B. ( R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 s,4 S)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1001
實例 293-C. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1003
實例 293-D. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 s,4 R)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1005
將HATU（127.3 mg，0.34 mmol），4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（中間體516，88.0 mg，0.45 mmol）和DIPEA（86.6 mg，0.67 mmol）添加到( R)-4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體526-B，80.0 mg，0.22 mmol）在DMF（3.0 0 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層在真空下濃縮並將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得呈固體的( R)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( R)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 s,4 S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺的混合物（80.0 mg）。LCMS (ESI): 538.2 [M+H] +。
將兩種非鏡像異構物( R)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( R)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 s,4 S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（80.0 mg）藉由手性製備型HPLC純化。
柱：CHIRALPAK IA，
柱尺寸：2x25 cm，5 μm
梯度：Hex：DCM = 3 : 1（10 mM NH 3·MeOH）/EtOH，90/10 v/v
流速：20 mL/min
檢測（nm）：220/254 nm
實例 293-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（6.7 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.88 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.42 (d, 1H), 8.07 - 7.72 (m, 1H), 7.19 - 7.02 (m, 1H), 4.56 (s, 1H), 3.94 (s, 1H), 3.42 - 3.34 (m, 3H), 3.10 - 2.81 (m, 1H), 2.57 (d, 3H), 2.40 (m, 1H), 2.14 - 1.35 (m, 10H), 1.29 (s, 2H), 1.10 - 0.79 (m, 2H), 0.74 (s, 2H)。LCMS (ESI): 538.2 [M+H] +。
實例 293-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（28.3 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為13.05 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.41 (d, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.13 (d, 1H), 4.55 (s, 1H), 3.81 - 3.50 (m, 1H), 3.40 (d, 3H), 2.76 (s, 1H), 2.57 (d, 3H), 2.39 (m), 2.14 - 1.93 (m, 2H), 1.92 - 1.68 (m, 4H), 1.65 - 1.53 (m, 2H), 1.53 - 1.40 (m, 2H), 1.40 - 1.15 (m, 2H), 1.04 (s, 2H), 0.73 (d, 2H)。LCMS (ESI): 538.2 [M+H] +。
另外，在類似的反應中，將( S)-4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸的混合物（中間體526-A）與4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（中間體516）反應，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( S)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 s,4 R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺的混合物（xx mg）。
將兩種非鏡像異構物( S)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( S)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 s,4 R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺藉由手性HPLC純化。
柱：CHIRALPAK IA，
柱尺寸：2x25 cm，5 μm
梯度：Hex：DCM = 3 : 1（10 mM NH 3·MeOH）/EtOH，90/10 v/v
流速：20 mL/min
檢測（nm）：220/254 nm
實例 293-C.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（5.1 mg）。第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為13.03 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.43 (d, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 4.59 (s, 1H), 3.96 (s, 1H), 3.50 - 3.34 (m, 3H), 3.01 - 2.82 (m, 1H), 2.68 - 2.48 (m, 3H), 2.52 - 2.13 (m, 1H), 1.98 - 1.50 (m, 10H), 1.43 - 1.15 (m, 2H), 1.13 - 0.82 (m, 2H), 0.75 (s, 2H)。LCMS (ESI): 538.2 [M+H] +。
實例 293-D.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（28.6 mg）。第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為15.32 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) 8.41 (d, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 3.65 (s, 1H), 3.50 - 3.34 (m, 3H), 2.82-2.70 (m, 1H), 2.60 (s, 3H), 2.40 (s, 1H), 2.17 - 1.97 (m, 2H), 1.95 - 1.73 (m, 4H), 1.72 - 1.57 (m, 2H), 1.55 - 1.39 (m, 2H), 1.38 - 1.14 (m, 2H), 1.13 - 0.83 (m, 2H), 0.82 - 0.61 (m, 2H)。LCMS (ESI): 538.2 [M+H] +。
實例 294. (1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺和 (1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 s,4 s)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1007
使用與對於實例267的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（中間體516）和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體508）作為起始材料。殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，15/1 v/v）純化，以獲得呈固體的(1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-[(1 r,4 r)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺和(1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-[(1 s,4 s)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺的非鏡像異構物混合物（140 mg， 實例 294）。LCMS (ESI): 554.2 [M+H] +。
藉由手性製備型HPLC分離標題化合物的非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IA，
柱尺寸：2x25 cm，5 μm
梯度：Hex：DCM=3 : 1（10 mM NH 3·MeOH）/EtOH，80/20 v/v
流速：17 mL/min
檢測（nm）：220/254 nm
實例 294-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（71.5 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.32 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.23 - 7.18 (m, 2H), 5.37 - 4.90 (m, 2H), 3.98 - 3.91 (m, 4H), 3.43 - 3.39 (m, 3H), 3.15 - 3.01 (m, 1H), 2.24 - 1.98 (m, 4H), 1.99 - 1.90 (m, 2H), 1.89 - 1.81 (m, 5H), 1.81 - 1.62 (m, 5H)。LCMS (ESI): 554.2 [M+H] +。
實例 294-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（3.2 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.56 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.33 - 8.01 (m, 1H), 7.51 - 6.89 (m, 2H), 5.37 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.78 - 3.55 (m, 1H), 3.42 (s, 3H), 2.92 (s, 1H), 2.26 - 1.95 (m, 5H), 1.94 - 1.86 (m, 2H), 1.86 - 1.73 (m, 4H), 1.71 - 1.39 (m, 5H)。LCMS (ESI): 554.2 [M+H] +。
實例 295. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5 R,8 r)-2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5 S,8 s)-2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1009
使用與對於實例301的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用8-胺基-1-氮雜螺[4.5]癸-2-酮鹽酸鹽作為起始材料。
使用製備型HPLC分離(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((5 R,8 r)-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((5 S,8 s)-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺的非鏡像異構物混合物（ 實例 295）。
柱：XBridge BEH130製備型C18 OBD柱
柱尺寸：19 x 150 mm，5 µm
流動相：水（10 mM NH 4HCO 3，0.1% NH 3H 2O）：MeCN
檢測：210/254 nm
實例 295-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（1.9 mg）。
LCMS (ESI): 525.5 [M+H] +。
實例 295-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（10.2 mg）。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD)：δ 8.12 (m, 1H), 7.39 - 7.05 (m, 2H), 5.35 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.76 - 3.45 (m, 1H), 3.22 - 2.75 (m, 1H), 2.42 - 2.32 (m, 2H), 2.20 - 1.52 (m, 17H), 1.47 - 1.31 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 525.4。
實例 296. 4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[( R)-1-(2- 氟苯基 ) 吡咯啶 -3- 基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1011
步驟 -1. ( R)-3-[4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 醯胺基 ] 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1013
將EDCI（217.6 mg，1.1 mmol）和HOBt（153.4 mg，1.1 mmol）添加到4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527，170.0 mg，0.45 mmol）在DMF（6.00 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌30 min，然後添加(3 R)-3-胺基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（101.5 mg，0.54 mmol）和DIPEA（0.40 mL，2.3 mmol）。然後將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後用EtOAc稀釋，用水洗滌，並將有機層濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，15/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（270.0 mg）。LCMS (ESI): 543.3 [M+H] +。
步驟 -2. 4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[( R)- 吡咯啶 -3- 基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1015
將TFA（2.00 mL）添加到(R)-3-[4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-醯胺基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，270.0 mg，0.5 mmol）在DCM（2.00 mL）中的溶液中。然後將溶液在25ºC下攪拌1 h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，5/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（170.0 mg）。LCMS (ESI): 443.3 [M+H] +。
步驟 -3. 4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[( R)-1-(2- 氟苯基 ) 吡咯啶 -3- 基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1011
將1-溴-2-氟苯（94.9 mg，0.5 mmol），RuPhos（37.9 mg，0.08 mmol），RuPhos環鈀配合物G3（68.0 mg，0.08 mmol），和Cs 2CO 3（265.1 mg，0.8 mmol）添加到4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-[( R)-吡咯啶-3-基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-2，120.0 mg，0.3 mmol）在DMF（5 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在110ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h，然後用EtOAc稀釋並用水洗滌。然後將溶液在減壓下濃縮並將殘餘物首先藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，25/1 v/v）純化，然後藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：30 mL/min；梯度：10% B至50% B，30 min內；檢測器，UV 220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（0.5 mg）。LCMS (ESI): 537.2 [M+H] +。
實例 297. (1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1017
使用與對於實例276的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-氧雜螺[3.5]壬-7-胺（中間體523）和(1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體508）作為起始材料。將殘餘物藉由手性製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：手性ART纖維素-SB，2x25 cm，5 μm；流動相A：MTBE（10 mM NH 3·MEOH）；流動相B：EtOH；流速：20 mL/min；梯度：20% B至20% B，11 min內；檢測：220/254 nm），以獲得標題化合物，其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.14 - 13.91 (m, 1H), 8.35 - 8.23 (m, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.18 - 7.12 (m, 1H), 5.24 - 4.51 (m, 2H), 4.33 (t, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.55 - 3.45 (m, 1H), 2.83 - 2.77 (m, 1H), 2.27 (t, 2H), 2.12 - 1.87 (m, 4H), 1.84 - 1.68 (m, 4H), 1.67 - 1.45 (m, 6H), 1.44 - 1.17 (m, 2H)。LCMS (ESI): 498.3 [M+H] +；
實例 298. (2 R,4 S,5 S)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 S,4 S,5 S)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 R,4 R,5 S)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 R,4 S,5 R)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 S,4 S,5 R)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 S,4 R,5 S)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 R,4 R,5 R)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 S,4 R,5 R)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1019
步驟 -1. 1-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲酸甲酯
Figure 02_image1021
將EDCI（671.7 mg，3.50 mmol），HOBt（473.8 mg，3.50 mmol），和2,5-二甲基哌啶-4-甲酸甲酯（200.0 mg，1.17 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體506，448.4 mg，1.17 mmol）和DIPEA（452.9 mg，3.50 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。然後將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（420.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 521.7.
步驟 -2. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲酸
Figure 02_image1023
將LiOH·H 2O（96.6 mg，4.03 mmol）添加到1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]-2,5-二甲基哌啶-4-甲酸甲酯（步驟-1，420.0 mg，0.81 mmol）在MeOH（2.00 mL），H 2O（2.00 mL）和THF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。然後將溶液在減壓下濃縮，用水稀釋，然後藉由添加HCl水溶液將pH調節至6。藉由過濾收集沈澱的固體並且用水洗滌。將所得固體在烘箱中在減壓下乾燥，以獲得呈固體的標題化合物（350.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 521.7.
步驟 -3. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]-2,5- 二甲基 -N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image1025
將HATU（394.0 mg，1.04 mmol）和( 1r,4 r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（151.9 mg，0.83 mmol）添加到1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]-2,5-二甲基哌啶-4-甲酸（步驟-2，350.0 mg，0.69 mmol）和DIPEA（267.9 mg，2.07 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。然後將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（420.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 672.8。
步驟 -4. (2 R,4 S,5 S)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 S,4 S,5 S)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 R,4 R,5 S)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 R,4 S,5 R)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 S,4 S,5 R)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 S,4 R,5 S)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 R,4 R,5 R)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 S,4 R,5 R)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,5- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image1019
將TFA（0.14 mL，1.88 mmol）添加到(1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]-2,5-二甲基- N-[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺（步驟-3，420.0 mg，0.63 mmol）在DCM（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。然後將溶液在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（3/1 v/v）洗脫）純化，以獲得標題化合物（310.0 mg， 實例 298），其為(2 R,4 S,5 S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺，和(2 S,4 S,5 S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺，和(2 R,4 R,5 S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺，和(2 R,4 S,5 R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺，和(2 S,4 S,5 R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺，和(2 S,4 R,5 S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺，和(2 R,4 R,5 R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺，和(2 S,4 R,5 R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺的非鏡像異構物的固體混合物
（380.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 542.5。
使用製備型HPLC分離標題化合物的八種非鏡像異構物，得到兩個部分，每個部分含有四種非鏡像異構物。
柱：Sunfire製備型C18 OBD柱
柱尺寸：19 x 150 mm，5 µm
流動相：水（0.05% TFA）：MeCN
檢測：220/254 nm
第一洗脫峰（15.0 mg）的保留時間為11.13 min。
第二洗脫峰（200.0 mg）的保留時間為12.32 min。
使用手性製備型HPLC分離來自製備型HPLC的含有標題化合物的四種非鏡像異構物的第一部分（15.0 mg），得到兩個部分，每個部分含有兩種非鏡像異構物。
柱：Viridis BEH製備型OBD柱
柱尺寸：1.9 x 15 cm，5 µm
流動相：己烷：IPA=85 : 15，保持19.5 min
流速：15 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 298-A.獲得呈固體的第一洗脫峰（2.8 mg）。
第一洗脫峰的保留時間為11.25 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.44 - 7.03 (m, 2H), 4.56 (s, 1H), 4.48 - 4.24 (m, 1H), 4.05 - 3.90 (m, 4H), 3.70 - 3.45 (m, 1H), 2.25 (m, 2H), 2.18 - 1.80 (m, 6H), 1.80 - 1.58 (m, 5H), 1.37 - 1.28 (m, 3H), 0.98 (d, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 542.5。
實例 298-B.獲得呈固體的第二洗脫峰（2.0 mg）。
第二洗脫峰的保留時間為16.56 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.44 - 7.03 (m, 2H), 4.56 (s, 1H), 4.48 - 4.24 (m, 1H), 4.05 - 3.90 (m, 4H), 3.70 - 3.45 (m, 1H), 2.25 (m, 2H), 2.18 - 1.80 (m, 6H), 1.80 - 1.58 (m, 5H), 1.37 - 1.28 (m, 3H), 0.98 (d, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 542.5。
使用手性製備型HPLC分離來自製備型HPLC的含有標題化合物的四種非鏡像異構物的第二部分（200.0 mg），得到兩個部分，每個部分含有兩種非鏡像異構物。
柱：Chiralpak IC柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（10 mM NH 3·MeOH）：EtOH
檢測：215/260 nm
第一洗脫峰（150.0 mg）的保留時間為10.89 min。
第二洗脫峰（30.0 mg）的保留時間為21.56 min。
使用製備型SFC分離來自手性製備型HPLC的第一部分（150.0 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：N-Lux 3u i-纖維素-5柱
柱尺寸：0.46 x 10 cm，3 µm
流動相：EtOH（10%至50%持續4.0 min，50%，保持2 min）
流速：2 mL/min
檢測：220/254 nm
出口壓力：100巴
實例 298-C.獲得呈固體的第一洗脫化合物（36.5 mg）。
第一洗脫化合物的保留時間為2.40 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (m, 1H), 7.44 - 7.03 (m, 2H), 4.56 (s, 1H), 4.48 - 4.24 (m, 1H), 4.05 - 3.90 (m, 4H), 3.70 - 3.45 (m, 1H), 2.25 (m, 2H), 2.18 - 1.80 (m, 6H), 1.80 - 1.58 (m, 5H), 1.37 - 1.28 (m, 3H), 0.98 (d, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 542.1。
實例 298-D.獲得呈固體的第二洗脫化合物（33.0 mg）。
第二洗脫化合物的保留時間為2.69 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (m, 1H), 7.44 - 7.03 (m, 2H), 4.56 (s, 1H), 4.48 - 4.24 (m, 1H), 4.05 - 3.90 (m, 4H), 3.70 - 3.45 (m, 1H)，2.25 (m, 2H), 2.18 - 1.80 (m, 6H), 1.80 - 1.58 (m, 5H), 1.37 - 1.28 (m, 3H), 0.98 (d, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 542.1。
使用手性製備型HPLC分離來自手性製備型HPLC的第二部分（30.0 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：Chiralpak IC-3柱
柱尺寸：0.46 x 5 cm，3 µm
流動相：己烷（0.1% DEA）：EtOH=70 : 30
檢測：220/254 nm
實例 298-E.獲得呈固體的第一洗脫化合物（7.8 mg）。
第一洗脫化合物的保留時間為2.36 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (m, 1H), 7.44 - 7.03 (m, 2H), 4.56 (s, 1H), 4.48 - 4.24 (m, 1H), 4.05 - 3.90 (m, 4H), 3.70 - 3.45 (m, 1H)，2.25 (m, 2H), 2.18 - 1.80 (m, 6H), 1.80 - 1.58 (m, 5H), 1.37 - 1.28 (m, 3H), 0.98 (d, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 542.3。
實例 298-F. 獲得呈固體的第二洗脫化合物（7.5 mg）。
第二洗脫化合物的保留時間為4.65 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (m, 1H), 7.44 - 7.03 (m, 2H), 4.56 (s, 1H), 4.48 - 4.24 (m, 1H), 4.05 - 3.90 (m, 4H), 3.70 - 3.45 (m, 1H)，2.25 (m, 2H), 2.18 - 1.80 (m, 6H), 1.80 - 1.58 (m, 5H), 1.37 - 1.28 (m, 3H), 0.98 (d, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 542.3。
實例 299. (1 R,3 S,5 S)- N-[(3 S,6 S)-1- 乙基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 ]-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 S,5 S)- N-[(3S,6R)-1- 乙基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 ]-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 S,5 S)- N-[(3 R,6 S)-1- 乙基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 ]-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 S,5 S)- N-[(3 S,6 R)-1- 乙基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 ]-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1028
步驟 -1. (1 R,3 S,5 S)- N-[1- 乙基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 ]-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1030
將1-乙基-6-(三氟甲基)哌啶-3-胺（中間體528-A，139.9 mg，0.7 mmol）添加到(1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體529，300.0 mg，0.6 mmol），EDCI（191.7 mg，1.8 mmol），HOBt（240.9 mg，1.8 mmol）和DIPEA（0.31 mL）的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h，然後用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（220 mg）。LCMS (ESI): 683.3 [M+H] +。
步驟 -2. (1 R,3 S,5 S)- N-[(3 S,6 S)-1- 乙基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 ]-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺和 (1 R,3 S,5 S)- N-[(3S,6R)-1- 乙基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 ]-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺和 (1 R,3 S,5 S)- N-[(3 R,6 S)-1- 乙基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 ]-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺和 (1 R,3 S,5 S)- N-[(3 S,6 R)-1- 乙基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 ]-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1032
將TFA（74 μL，0.97 mmol）添加到(1 R,3 S,5 S)- N-[1-乙基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺（步驟-1，220.0 mg，0.32 mmol）在DCM（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將溶液在25ºC下攪拌1 h，然後在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的(1 R,3 S,5 S)- N-[(3 S,6 S)-1-乙基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，和(1 R,3 S,5 S)- N-[(3S,6R)-1-乙基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，和(1 R,3 S,5 S)- N-[(3 R,6 S)-1-乙基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，和(1 R,3 S,5 S)- N-[(3 S,6 R)-1-乙基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺的非鏡像異構物混合物（130 mg， 實例 299）。
將標題化合物藉由製備型HPLC純化以得到兩個部分，每個部分含有兩種非鏡像異構物。
柱：YMC-Actus Triart C18
柱尺寸：20x250 mm，5 μm
梯度：水（1 mM FA）/MeCN，90/10至35/65 v/v
流速：25 mL/min
檢測（nm）：254 nm
實例 299-A.獲得第一洗脫峰（30 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.20 - 8.09 (m, 1H), 7.51 - 6.82 (m, 2H), 5.36 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.93 - 3.83 (m, 1H), 3.40 - 3.34 (m, 1H), 3.25 - 3.12 (m, 1H), 3.08 - 2.98 (m, 2H), 2.85 - 2.74 (m, 2H), 2.45 - 2.33 (m, 1H), 2.21 - 1.96 (m, 6H), 1.95 - 1.86 (m, 2H), 1.85 - 1.60 (m, 3H), 1.52 - 1.35 (m, 1H), 1.07 (t, 3H)。LCMS (ESI): 553.2 [M+H] +。
實例 299-B.獲得第二洗脫峰（65.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.15 (s, 1H), 7.22 (s, 2H), 5.36 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.86 (dt, 5.5 Hz, 1H), 3.43 - 3.36 (m, 2H)， 3.02 - 2.71 (m, 4H), 2.60 (t, 1H), 2.17 - 1.86 (m, 8H), 1.86 - 1.69 (m, 3H), 1.57 (d, 1H), 1.09 (t,3H)。LCMS (ESI): 553.2 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC進一步純化第一洗脫峰（ 實例 299-A），以分離兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IA
柱尺寸：2x25 cm，5 μm
梯度：Hex（10 mM NH 3·MeOH）/EtOH，80/40 v/v
流速：28 mL/min
檢測（nm）：220/254 nm
實例 299-C.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（6.8 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.08 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.15 (d, 1H), 7.29 - 7.17 (m, 2H), 5.20 - 5.14 (m, 1H), 4.05 - 3.97 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.74 - 3.68 (m, 1H), 3.08 - 2.90 (m, 5H), 2.66 - 2.56 (m, 1H), 2.27 - 2.12 (m, 2H), 2.12 - 1.95 (m, 5H), 1.94 - 1.73 (m, 4H), 1.68 - 1.40 (m, 1H), 1.22 (t, 3H)。LCMS (ESI): 553.1 [M+H] +。
實例 299-D.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（6.9 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為11.17 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.15 (d, 1H), 7.29 - 7.17 (m, 2H), 5.17 (s, 1H), 4.04 - 3.97 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.69 - 3.63 (m, 1H), 3.22 - 2.92 (m, 5H), 2.68 - 2.58 (m, 1H), 2.27 - 2.11 (m, 2H), 2.12 - 1.96 (m, 5H), 1.95 - 1.87 (m, 1H), 1.86 - 1.72 (m, 3H), 1.63 - 1.50 (m, 1H), 1.21 (t, 3H)。LCMS (ESI): 553.1 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC進一步純化第二洗脫峰（ 實例 299-B），以分離兩種非鏡像異構物。
柱：手性ART纖維素-SB
柱尺寸：2x25 cm，5 μm
梯度：Hex（10 mM NH 3·MeOH）/IPA，70/30 v/v
流速：20 mL/min
檢測（nm）：220/254 nm
實例 299-E.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（16.9 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.98 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.17 (s, 1H), 7.28 - 7.16 (m, 2H), 5.36 (s, 1H), 4.86 - 4.62 (m, 1H), 3.98 - 3.92 (m, 3H), 3.86 (dt, 1H), 3.41 - 3.35 (m, 1H), 3.02 - 2.69(m, 4H), 2.60 (t, 1H), 2.22 - 1.86 (m, 8H), 1.86 - 1.67 (m, 3H), 1.67 - 1.48 (m, 1H), 1.09 (t, 3H)。LCMS (ESI): 553.1 [M+H] +。
實例 299-F.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（18.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.11 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.20 - 8.14 (m, 1H), 7.47 - 6.85 (m, 2H), 5.40 - 5.34 (m, 1H), 4.82 - 4.54 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.92 - 3.80 (m, 1H), 3.44 - 3.27 (m, 1H), 3.03 - 2.72 (m, 4H), 2.67 - 2.53 (m, 1H), 2.27 - 1.99 (m, 4H), 1.99 - 1.86 (m, 4H), 1.86 - 1.68 (m, 3H), 1.68 - 1.48 (m, 1H), 1.09 (t, 3H)。LCMS (ESI): 553.1 [M+H] +。
實例 300-A. ( R)-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1034
將HATU（134.0 mg，0.35 mmol）和1-氧雜螺[3.5]壬-7-胺（66.0 mg，0.47 mmol）添加到(7 R)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（實例308，步驟-3b，80.0 mg，0.23 mmol）和DIPEA（91.0 mg，0.70 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌並濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，並進一步藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，流動相A：水（0.1% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：30 mL/min；梯度：15 B至50 B，20 min內；220/254 nm），以獲得標題化合物（5.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.20 (s, 1H), 9.05 (d, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.23 (s, 1H), 4.62 - 4.28 (m, 3H), 3.56 - 3.27 (m, 2H), 2.68 - 2.61 (m, 2H), 2.33 - 2.22 (m, 3H), 2.03 - 1.93 (m, 2H), 1.80 - 0.55 (m, 15H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 465.2。
實例 300-B. ( S)-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1036
使用與對於實例119的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(7 S)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（實例308，步驟-3a）作為起始材料。獲得呈固體的標題化合物（6.0 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.52 (s, 1H), 9.05 (d, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.23 (s, 1H), 4.61 - 4.28 (m, 3H), 3.56 - 3.27 (m, 2H), 2.68 - 2.61 (m, 2H), 2.33 - 2.22 (m, 3H), 2.03 - 1.93 (m, 2H), 1.80 - 0.52 (m, 15H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 465.2。
實例 301. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(4- 羥基 -4-( 全氟乙基 ) 環己基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1038
步驟 -1. (4- 羥基 -4-( 全氟乙基 ) 環己基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1040
在0ºC下將三甲基(全氟乙基)矽烷（1.10 g，5.74 mmol）和TBAF（1.53 g，5.85 mmol）添加到(4-側氧基環己基)胺基甲酸三級丁酯（600.0 mg，2.81 mmol）在THF（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在22º下攪拌16 h。然後將溶液用NH 4Cl的飽和水溶液淬滅。然後將反應在減壓下濃縮，溶解在DCM中，並用水萃取。將水層進一步用DCM萃取並將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用環己烷/EtOAc（4/1 v/v至1.5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物的非鏡像異構物混合物（40.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.42 (s, 1H), 3.44 (s, 1H), 1.95 - 1.73 (m, 8H), 1.69 (s, 1H), 1.57 - 1.51 (m, 2H), 1.45 (s, 9H)。
步驟 -2. 4- 胺基 -1-( 全氟乙基 ) 環己烷 -1- 醇鹽酸鹽
Figure 02_image1042
在22ºC下將HCl（在1,4-二㗁𠮿中4 M，88.0 mg，2.40 mmol）添加到(4-羥基-4-(全氟乙基)環己基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-1，40.0 mg，0.12 mmol）在1,4-二㗁𠮿（0.60 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物攪拌48 h。然後將溶液在減壓下濃縮，以獲得標題化合物（32.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。TLC-MS (APCI): [M+H] +: 234.1。
步驟 -3. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(4- 羥基 -4-( 全氟乙基 ) 環己基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1038
將HOBt（22.0 mg，0.14 mmol），EDCI（28.0 mg，0.14 mmol），和4-胺基-1-(全氟乙基)環己烷-1-醇鹽酸鹽（步驟-2，31.0 mg，0.12 mmol）添加到(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體508，36.0 mg，96.0 µmol）和DIPEA（0.08 mL，0.48 mmol）在DMF（1.60 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在22º下攪拌16 h。將反應混合物 在減壓下濃縮並用EtOAc/水（1/1 v/v）稀釋並用水和鹽水洗滌，並且然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，10%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH)），以獲得標題化合物（32.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d 6 ) δ 14.03 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.13 (d, 1H), 5.84 (s, 1H), 4.68 (s, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.50 (s, 1H), 2.84 - 2.72 (m, 1H), 2.11 - 1.43 (m, 16H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 590.1。
實例 302. (1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4-( 二氟甲基 )-4- 甲氧基環己基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺和 (1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1s,4s)-4-( 二氟甲基 )-4- 甲氧基環己基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1045
將HOBt（81.2 mg，0.60 mmol），EDCI（115.2 mg，0.60 mmol），和4-(二氟甲基)-4-甲氧基環己烷-1-胺（中間體530，79.0 mg，0.44 mmol）添加到(1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體508，150.0 mg，0.40 mmol）和DIPEA（258.9 mg，2.00 mmol）在DMF（5.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc和水稀釋。將有機層在減壓下濃縮並將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，15/1 v/v）純化，以獲得呈固體的(1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-[(1 r,4 r)-4-(二氟甲基)-4-甲氧基環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺和(1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-[(1s,4s)-4-(二氟甲基)-4-甲氧基環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺的非鏡像異構物混合物（150.0 mg， 實例 302）。LCMS (ESI): 536.2 [M+H] +。
藉由手性製備型HPLC分離標題化合物的非鏡像異構物。
柱：手性ART纖維素-SB
柱尺寸：2x25 cm，5 μm
梯度：MTBE（0.5% 2 M NH 3·MeOH）/MeOH，90/10 v/v
流速：20 mL/min
檢測（nm）：220/254 nm
實例 302-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（42.7 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.81 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.04 (m, 1H), 8.29 (d, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.13 (d, 1H), 6.26 - 5.61 (m, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.65 (d, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.79 (s, 1H), 3.25 (s, 3H), 2.94 - 2.88 (m, 1H), 2.14 - 1.73 (m, 7H), 1.70 - 1.55 (m, 7H), 1.54 - 1.40 (m, 2H)。LCMS (ESI): 536.2 [M+H] +。
實例 302-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（43.9 mg）。第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.68 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.02 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.74 (d, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.24 - 5.63 (m, 1H), 5.45 - 5.00 (m, 1H), 4.71 - 4.65 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.50 - 3.44 (m, 1H), 3.27 (s, 3H), 2.91 - 2.65 (m, 1H), 2.12 - 1.96 (m, 1H), 1.95 - 1.70 (m, 6H), 1.70 - 1.54 (m, 4H), 1.47 - 1.15 (m, 5H)。LCMS (ESI): 536.2 [M+H] +。
實例 303. (1 R,3 s,5 S)- N-((1 r,4 R)-4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺和 (1 R,3 s,5 S)- N-((1 s,4 S)-4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1047
將EDCI（10.0 mg，0.06 mmol），HOBt（7.00 mg，0.06 mmol），和4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（中間體535-A，9.0 mg，0.05 mmol）添加到(1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體508，14.0 mg，0.04 mmol）和DIPEA（14.0 mg，0.11 mmol）在DMF（1.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌3 h。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20% B至30% B，12 min內；檢測器，UV 220/254 nm），以獲得標題化合物，其為非鏡像異構物的固體混合物（2.6 mg， 實例 303）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ 13.99 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.67 (s, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.83 - 3.76 (m, 1H), 3.60 - 3.44 (m, 2H), 3.28 (s, 1H), 3.00 - 2.80 (m, 1H), 2.10 - 1.68 (m, 10H), 1.60 (d, 6H), 1.16 - 1.05 (m, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 568.2。
使用手性製備型HPLC分離標題化合物的兩種非鏡像異構物（100.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2 M NH 3·MeOH）: MeOH=90 : 10，保持13 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 303-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（84.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.04 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ 14.02 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.14 (s, 1H), 5.30 - 4.59 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.83 (d, 1H), 3.59 - 3.48 (m, 2H), 3.00 - 2.79 (m, 1H), 2.13 - 1.44 (m, 16H), 1.19 - 1.02 (m, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 568.3。
實例 303-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（2.7 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.74 min。
LCMS (ESI): [M+H] +: 568.3。
實例 304. (1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4-(2- 甲氧基乙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺和 (1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 s,4 s)-4-(2- 甲氧基乙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1049
將EDCI（60.0 mg，0.31 mmol），HOBt（42.0 mg，0.31 mmol），和4-(2-甲氧基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（中間體531，50.0 mg，0.21 mmol）添加到(1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體508，78.00 mg，0.21 mmol）和DIPEA（81.0 mg，0.63 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層在減壓下濃縮，並將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeCN；梯度：30% B至40% B，12 min內；檢測：220/254 nm），以獲得呈固體的 (1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-[(1 r,4 r)-4-(2-甲氧基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺和(1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-[(1 s,4 s)-4-(2-甲氧基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺的非鏡像異構物混合物（62 mg， 實例 304）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.22 (d, 2H), 5.29 (s, 1H), 4.58 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.76 - 3.69 (m, 2H), 3.69 - 3.52 (m, 3H), 3.39 (d, 3H), 2.98 - 2.86 (m, 1H), 2.25 - 1.97 (m, 6H), 1.96 - 1.82 (m, 3H), 1.82 - 1.72 (m, 3H), 1.72 - 1.46 (m, 4H)。LCMS (ESI): 598.2 [M+H] +。
將兩種非鏡像異構物藉由手性製備型HPLC純化。
柱：手性ART纖維素-SB
柱尺寸：2x25 cm，5 μm
梯度：MTBE（0.5% 2 M NH 3·MeOH）/IPA
流速：20 mL/min
檢測（nm）：220/254
實例 304-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（2.4 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.52 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.15 (s, 1H), 7.28 (s, 2H), 5.41 (s, 1H),4.59 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.74 - 3.69 (m, 2H), 3.58 - 3.53 (m, 3H), 3.38 (s, 3H), 3.16 - 2.97 (m, 1H), 2.28 - 2.11 (m, 2H), 2.11 - 1.98 (m, 3H), 1.97 - 1.90 (m, 2H), 1.90 - 1.80 (m, 5H), 1.81 - 1.62 (m, 4H)。LCMS (ESI): 598.3 [M+H] +。
實例 304-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（5.4 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.76 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.16 (s, 1H), 7.40 - 6.93 (m, 2H), 5.36 (s, 1H), 4.68 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.75 - 3.68 (m, 2H), 3.62 - 3.54 (m, 3H), 3.40 (s, 3H), 2.93 (d, 1H), 2.23 - 1.97 (m, 6H), 1.95 - 1.84 (m, 2H), 1.83 - 1.71 (m, 4H), 1.70 - 1.61 (m, 2H), 1.60 - 1.46 (m, 2H)。LCMS (ESI): 598.3 [M+H] +。
實例 305. (1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H-1,2,4- 三唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1051
步驟 -1. 5- 溴 -1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ]-1,2,4- 三唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image1053
在0ºC下將NaH（209.0 mg，5.2 mmol，在礦物油中的60%分散體）添加到5-溴-1 H-1,2,4-三唑-3-甲酸甲酯（900.0 mg，4.4 mmol）在DMF（5.0 mL）中的溶液中。將溶液在0ºC下攪拌1 h，然後添加SEMCl（0.93 mL，5.2 mmol）。將溶液在0ºC下攪拌3 h，然後用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層在真空下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，5/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（830 mg）。LCMS (ESI): 336.0 [M+H] +。
步驟 -2. 5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ]-1,2,4- 三唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image1055
將5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基硼酸（640.0 mg，3.7 mmol），Pd(dppf)Cl 2（365.0 mg，0.5 mmol），和K 3PO 4（1.0 g，5.0 mmol）添加到5-溴-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]-1,2,4-三唑-3-甲酸甲酯（步驟-1，840 mg，2.5 mmol）在1,4-二㗁𠮿（10.00 mL）和H 2O（1.00 mL）中的溶液中。將溶液在70ºC下在氮氣氣氛下攪拌4 h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（450.0 mg）。LCMS (ESI): 383.1 [M+H] +。
步驟 -3. (1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H-1,2,4- 三唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1051
在氮氣氣氛下將AlMe 3（1 M，1.30 mL，1.30 mmol）逐滴添加到(1 R,3 S,5 S)- N-[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺（中間體536，251 mg，0.8 mmol）在甲苯（3 mL）中的混合物中。將溶液在25ºC下在氮氣氣氛下攪拌1 h，然後添加5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]-1,2,4-三唑-3-甲酸甲酯（步驟-2，200 mg，0.5 mmol）。將溶液在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h，然後添加AlMe 3（1 M，2 mL，2.1 mmol）。將溶液在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h，然後添加MeOH並且然後將溶液在減壓下濃縮。將所得溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌，然後將有機層在真空下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3）；流動相B：MeCN；梯度：35% B至47% B，12 min內；檢測：220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（9 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.12 (s, 1H), 7.36 (d, 1H), 5.46 (s, 1H), 4.59 (s, 1H), 3.93 (s, 4H), 3.17 - 3.00 (m, 1H), 2.26 - 2.13 (m, 1H), 2.13 - 1.99 (m, 3H), 1.99 - 1.83 (m, 6H), 1.78 (s, 2H), 1.68 (d, 4H)。LCMS (ESI): 541.3 [M+H] +。
實例 306. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,6 S)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 S)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 R)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,6 R)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1058
將HATU（690.0 mg，1.80 mmol）和1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-胺（中間體528-B，200.0 mg，1.20 mmol）添加到(1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-苯甲酸（中間體508，500.0 mg，1.32 mmol）和DIPEA（1.40 g，10.80 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌並濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（用DCM/MeOH（20/1 v/v）洗脫）純化，以獲得(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 S,6 S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,6 S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,6 R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 S,6 R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺的非鏡像異構物混合物（ 實例 306），其為兩部分，每個部分含有兩種非鏡像異構物。
實例 306-A.獲得呈固體的第一洗脫點（240.0 mg）。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.32 - 7.15 (m, 2H), 5.16 - 4.52 (m, 2H), 4.06 - 3.76 (m, 4H), 3.14 - 2.86 (m, 2H), 2.77 - 2.64 (m, 1H), 2.51 (s, 3H), 2.08 - 1.55 (m, 13H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 539.4。
實例 306-B.獲得呈固體的第一洗脫點（55.0 mg）。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.15 (d, 1H), 7.30 - 7.17 (m, 2H), 5.54 - 4.53 (m, 2H), 4.06 - 3.75 (m, 4H), 3.07 - 2.86 (m, 2H), 2.82 - 2.66 (m, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.20 - 1.23 (m, 13H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 538.9。
使用手性製備型HPLC分離來自製備型TLC的第一洗脫點（240 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IG柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1 己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3·MeOH）: EtOH=50 : 50，保持30 min
流速：17 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 306-C.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（14.3 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.97 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.15 (d, 1H), 7.32 - 7.15 (m, 2H), 5.16 - 4.52 (m, 2H), 4.07 - 3.76 (m, 4H), 3.14 - 2.86 (m, 2H), 2.77 - 2.64 (m, 1H), 2.51 (s, 3H), 2.08 - 1.55 (m, 13H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 539.3。
實例 306-D.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（14.7 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為25.54 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.32 - 7.15 (m, 2H), 5.40 - 4.52 (m, 2H), 4.06 - 3.76 (m, 4H), 3.14 - 2.86 (m, 2H), 2.77 - 2.64 (m, 1H), 2.51 (s, 3H), 2.08 - 1.55 (m, 13H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 539.4。
使用手性製備型HPLC分離來自製備型TLC的第二洗脫點（55 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1 己烷/DCM（0.5% 2M NH 3·MeOH）: EtOH=70 : 30，保持15 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 306-E.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（18.1 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.36 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.27 - 8.05 (m, 1H), 7.52 - 6.98 (m, 2H), 5.28 (s, 1H), 4.82 - 4.62 (m, 1H), 4.11 - 3.62 (m, 4H), 3.13 - 2.84 (m, 2H), 2.84 - 2.64 (m, 1H), 2.53 - 2.26 (m, 3H), 2.19 - 1.85 (m, 9H), 1.83 - 1.48 (m, 3H), 1.45 - 1.27 (m, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 539.3。
實例 306-F.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（16.5 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.74 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.32 - 8.00 (m, 1H), 7.45 - 6.91 (m, 2H), 5.37 (s, 1H), 4.82 - 4.61 (m, 1H), 4.04 - 3.78 (m, 4H), 3.15 - 2.89 (m, 2H), 2.84 - 2.61 (m, 1H), 2.46 - 2.32 (m, 3H), 2.20 - 1.86 (m, 11H), 1.85 - 1.55 (m, 1H), 1.47 - 1.23 (m, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 538.9。
實例 307. (1 R,3 s,5 S)- N-(3,3- 二氟 -1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1060
在22ºC下將HATU（45.0 mg，0.12 mmol）和3,3-二氟-1-氧雜螺[3.5]壬-7-胺 2,2,2-三氟乙酸酯（中間體537，48.0 mg，0.17 mmol）添加到(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體508，40.0 mg，0.11 mmol）和DIPEA（94.0 µL，0.54 mmol）在DMF（0.46 mL）中的攪拌溶液中持續16 h。將反應混合物在減壓下濃縮並用EtOAc/水（1/1 v/v）稀釋並用水和鹽水洗滌，並且然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由反相柱層析法（C18柱，10%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH））純化，以獲得標題化合物（44.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。
實例 308-A. 實例 308-C 和實例 308-D 的非鏡像異構物混合物
實例 308-B. 實例 308-E 和實例 308-F 的非鏡像異構物混合物
實例 308-C. ( S)- N-((1 r,4 S)-4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1062
實例 308-D. ( S)- N-((1 s,4 R)-4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1064
實例 308-E. ( R)- N-((1 r,4 R)-4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1066
實例 308-F. ( R)- N-((1 s,4 S)-4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1068
步驟 -1. 4-[5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯
Figure 02_image1070
將HOBt（496.3 mg，3.67 mmol），EDCI（704.1 mg，3.67 mmol），和4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯鹽酸鹽（554.0 mg，2.69 mmol，CAS#：2253630-26-9，Enamine公司）添加到5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸（中間體538，500.0 mg，2.45 mmol）和DIPEA（1.58 g，12.24 mmol）在DMF（5.00 mL）中的溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc和水稀釋。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱；流動相A：在水中的NH 3HCO 3，流動相B：MeCN；20至30% B梯度，10 min內；檢測器，UV 220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（400.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 356.2。
步驟 -2. (7 S)-4-[5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯和 (7 R)-4-[5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯
Figure 02_image1072
將4-[5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（步驟-1，600.0 mg，1.69 mmol）的兩種鏡像異構物藉由手性製備型HPLC分離（使用以下條件：柱：CHIRALPAK IE，3 x 25 cm，5 µm；流動相A：MTBE（0.5% 2 M NH 3·MeOH），流動相B：EtOH；流速：32 mL/min；梯度：50 B至50 B，30 min內；檢測器，UV 220/254 nm）。獲得呈固體的第一洗脫化合物（(7 S)-4-[5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸）（300.0 mg）且保留時間為12.26 min。獲得呈固體的第二洗脫化合物（(7 R)-4-[5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸）（270.0 mg）且保留時間為23.81 min。LCMS (ESI): [M+H] +: 356.2。
步驟 -3a. (7 S)-4-[5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸
Figure 02_image1074
將LiOH .H 2O（46.1 mg，1.10 mmol）添加到(7 S)-4-[5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（步驟-2，150.0 mg，0.42 mmol）在H 2O（1.00 mL），THF（1.00 mL）和MeOH（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。藉由添加HCl水溶液將pH調節至3。將水層用EtOAc萃取。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈固體的標題化合物（120.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 342.2。
步驟 -3b. (7 R)-4-[5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸
Figure 02_image1076
將LiOH .H 2O（53.1 mg，1.27 mmol）添加到(7 R)-4-[5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（步驟-2，150.0 mg，0.42 mmol）在H 2O（1.00 mL），THF（1.00 mL）和MeOH（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。藉由添加HCl水溶液將pH調節至3。將水層用EtOAc萃取。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈固體的標題化合物（140.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 342.2。
步驟 -4a. ( S)- N-(4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1078
將HOBt（77.2 mg，0.57 mmol），EDCI（109.5 mg，0.57 mmol），和4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（88.5 mg，0.42 mmol）添加到(7 S)-4-[5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（步驟-3a，130.0 mg，0.38 mmol）和DIPEA（246.1 mg，1.90 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc和水稀釋。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（25/1 v/v）洗脫）純化，以獲得標題化合物（110.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 308-A）。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 9.03 (d, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 4.61 (s, 1H), 3.97 (s, 1H), 3.70 - 3.57 (m, 2H), 2.93 (s, 1H), 2.63 - 2.34 (m, 4H), 2.12 - 1.60 (m, 9H), 1.42 - 0.63 (m, 10H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 535.3。
步驟 -4b. ( R)- N-(4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1080
將HOBt（89.1 mg，0.66 mmol），EDCI（126.4 mg，0.66 mmol），和4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（102.1 mg，0.48 mmol）添加到(7 R)-4-[5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（步驟-3b，150.0 mg，0.44 mmol）和DIPEA（284.0 mg，2.20 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc和水稀釋。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（25/1 v/v）洗脫）純化，以獲得標題化合物（120.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 308-B）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 9.03 (s, 1H), 7.92 - 7.86 (m, 1H), 7.34 (s, 1H), 4.75 - 4.45 (m, 1H), 3.97 (s, 1H), 3.70 - 3.57 (m, 2H), 2.93 (s, 1H), 2.63 - 2.24 (m, 4H), 2.01 - 1.53 (m, 10H), 1.44 - 1.14 (m, 5H), 1.14 - 0.93 (m, 1H), 0.78 - 0.72 (m, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 535.2。
步驟 -5a. ( S)- N-((1 r,4 S)-4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( S)- N-((1 s,4 R)-4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1082
來自實例 308-A的兩種非鏡像異構物的混合物（步驟4a，120.0 mg）使用手性製備型HPLC分離。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：3 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3·MeOH）: MeOH=90 : 10，保持42 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 308-C.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（( S)- N-((1 r,4 S)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺）（47.9 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為16.33 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.02 (s, 1H), 8.11 - 7.71 (m, 1H), 7.35 (s, 1H), 4.80 - 4.39 (m, 1H), 3.96 (s, 1H), 3.68 - 3.58 (m, 2H), 2.95 - 2.91 (m, 1H), 2.60 (s, 3H), 2.44 (s, 1H), 2.03 - 1.58 (m, 11H), 1.39 - 0.97 (m, 6H), 0.87 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 535.3。
實例 308-D.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（( S)- N-((1 s,4 R)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺）（0.7 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為20.14 min。
LCMS (ESI): [M+H] +: 535.1。
步驟 -5b. ( R)- N-((1 s,4 S)-4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( R)- N-((1 r,4 R)-4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1084
來自 實例 308-B的兩種非鏡像異構物的混合物（步驟-4b，110.0 mg）使用手性製備型HPLC分離。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：3 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2 M NH 3·MeOH）: MeOH=80 : 20，保持17 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 308-E. 獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（( R)- N-((1 s,4 S)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺）（36.4 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.89 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.02 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 4.64 - 4.60 (m, 1H), 3.96 (s, 1H), 3.68 - 3.58 (m, 2H), 2.95 - 2.91 (m, 1H), 2.60 (s, 3H), 2.44 (s, 1H), 1.99 - 1.59 (m, 10H), 1.42 - 1.14 (m, 5H), 1.14 - 0.88 (m, 2H), 0.77 - 0.73 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 535.3。
實例 308-F.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（( R)- N-((1 r,4 R)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺）（0.6 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為13.44 min。
LCMS (ESI): [M+H] +: 535.1。
實例 309-A. ( S)- N-((1 r,4 S)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1086
實例 309-B. ( S)- N-((1 s,4 R)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1088
實例 309-C. ( R)- N-((1 r,4 R)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1090
實例 309-D. ( R)- N-((1 s,4 S)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1092
步驟 -1a. ( S)- N-(4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1094
將HOBt（48.0 mg，0.35 mmol），EDCI（67.0 mg，0.35 mmol），和4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（139.0 mg，0.70 mmol）添加到(7 S)-4-[5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（實例308，步驟-3a，80.0 mg，0.23 mmol）和DIPEA（151.0 mg，1.17 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌並濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得標題化合物（100.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): [M+H] +: 521.2。
步驟 -1b. ( R)- N-(4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1096
將HOBt（59.0 mg，0.44 mmol），EDCI（84.0 mg，0.44 mmol），和4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（58.0 mg，0.29 mmol）添加到(7 R)-4-[5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（實例308，步驟-3b，100.0 mg，0.29 mmol）的攪拌溶液中和DIPEA（189.0 mg，1.47 mmol）在DMF（5.00 mL）中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌並濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得標題化合物（100.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): [M+H] +: 521.3。
步驟 -2a. ( S)- N-((1 r,4 S)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( S)- N-((1 s,4 R)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1098
使用手性製備型HPLC分離來自步驟-1a的標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2 M NH 3·MeOH）: MeOH=50 : 50，保持10 min
流速：18 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 309-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（( S)- N-((1 r,4 S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺）（18.2 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為3.27 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 9.01 (s, 1H), 8.02 - 7.71 (m, 1H), 7.35 - 7.28 (m, 1H), 4.75 - 4.51 (m, 1H), 3.98 - 3.91 (m, 1H), 3.39 (d, 3H), 2.94 - 2.88 (m, 1H), 2.61 - 2.26 (m, 4H), 1.99 - 1.58 (m, 11H), 1.32 - 0.90 (m, 3H), 0.76 - 0.69 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 521.3。
實例 309-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（( S)- N-((1 s,4 R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺）（27.7 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.65 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 9.04 - 8.98 (m, 1H), 8.09 - 7.69 (m, 1H), 7.35 - 7.29 (m, 1H), 4.64 - 4.57 (m, 1H), 3.68 - 3.61 (m, 1H), 3.40 (s, 3H), 2.79 - 2.72 (m, 1H), 2.61 - 2.25 (m, 4H), 2.03 (m, 2H), 1.90 - 0.50 (m, 14H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 521.3。
步驟 -2b. ( R)- N-((1 r,4 R)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( R)- N-((1 s,4 S)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1100
使用手性製備型HPLC分離來自步驟-1b的標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2 M NH 3·MeOH）: MeOH=80 : 20，保持21 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 309-C.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（( R)- N-((1 r,4 R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺）（9.5 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為14.43 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 9.04 (s, 1H), 8.04 - 7.69 (m, 1H), 7.38 - 7.31 (m, 1H), 4.64 - 4.57 (m, 1H), 3.97 (s, 1H), 3.42 (s, 3H), 2.97 - 2.90 (m, 1H), 2.60 (s, 3H), 2.48 - 2.41 (m, 1H), 1.93 - 0.62 (m, 16H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 521.0。
實例 309-D.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（( R)- N-((1 s,4 S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺）（23.9 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為18.37 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 9.03 (s, 1H), 8.03 - 7.66 (m, 1H), 7.34 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 3.74 - 3.60 (m, 1H), 3.42 (s, 3H), 2.78 (s, 1H), 2.64 - 2.25 (m, 4H), 2.12 - 1.99 (m, 2H), 1.92 - 0.57 (m, 14H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 521.0。
實例 310. 4-(4-(5- 羥基 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 咪唑 -2- 羰基 )- N-((1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1102
步驟 -1. 4- 溴 -1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 咪唑 -2- 甲酸乙酯和 5- 溴 -1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 咪唑 -2- 甲酸乙酯
Figure 02_image1104
在0ºC下SEMCl（0.49 mL，2.74 mmol）將添加到4-溴-1 H-咪唑-2-甲酸乙酯（500.0 mg，2.28 mmol）和K 2CO 3（379.0 mg，2.74 mmol）在DMF（40.00 ml）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌5 h。將反應混合物用EtOAc、水稀釋，用鹽水洗滌。將濃縮的殘餘物藉由矽膠柱層析法（用10-20% EtOAc/己烷洗脫）純化，以獲得呈油狀物的4-溴-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-咪唑-2-甲酸乙酯（416.0 mg）（LCMS (ESI): [M+H] +: 349.5），和呈油狀物的5-溴-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-咪唑-2-甲酸乙酯（169.0 mg）（LCMS (ESI): [M+H] +: 349.5）。
步驟 -2. 4-(5- 羥基 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 咪唑 -2- 甲酸乙酯
Figure 02_image1106
將Pd(dppf)Cl 2（105.0 mg，0.13 mmol），K 2CO 3（119.0 mg，0.86 mmol），和KOAc（63.0 mg，0.64 mmol）添加到4-溴-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-咪唑-2-甲酸乙酯（步驟-1，150.0 mg，0.43 mmol），4-溴-6-甲基吡啶-3-醇（120.0 mg，0.64 mmol），和1，4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧雜環戊硼烷(dioxaborolane))（164.0 mg，0.64 mmol）在1,4-二㗁𠮿（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將氮氣鼓泡通過反應混合物持續5 min。然後，將反應混合物在85ºC下攪拌1 h。將脫氣水（0.4 mL）添加到反應混合物中並將所得混合物在85ºC下攪拌16 h。將反應混合物用EtOAc、水稀釋，用鹽水洗滌。將濃縮的殘餘物藉由矽膠柱層析法（用20-100% EtOAc/己烷洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（49.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 378.5。
步驟 -3. 4-(5- 羥基 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 咪唑 -2- 甲酸
Figure 02_image1108
將LiOH（在水中1 M，46.0 µL，0.05 mmol）添加到4-(5-羥基-2-甲基吡啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-咪唑-2-甲酸乙酯（步驟-2，5.80 mg，0.02 mmol）在MeOH（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將反應混合物在60ºC下攪拌1 h。藉由添加HCl水溶液（1 M）將pH調節至2。將反應混合物濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用20-30% MeOH/DCM洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（2.4 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 350.5。
步驟 -4. 4-(4-(5- 羥基 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 咪唑 -2- 羰基 )- N-((1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1110
將HATU（3.9 mg，10.3 µmol）和 N-((1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（3.3 mg，10.3 µmol）添加到4-(5-羥基-2-甲基吡啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-咪唑-2-甲酸（步驟-3，2.4 mg，6.9 µmol）和DIPEA（3.60 µL，0.02 mmol）在DMF（0.50 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在60ºC下攪拌4 h。將反應混合物用EtOAc和水稀釋。將有機層用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾，並濃縮。將DCM（1.00 mL）和TFA（1.00 mL）添加到濃縮的殘餘物中，並將所得混合物在23ºC下攪拌30 min。將殘餘物藉由反相柱層析法（C18柱）（用0-40%水/MeCN（0.1%甲酸）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（2.3 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.16 - 8.28 (m, 1H), 7.95 - 8.16 (m, 3H), 7.60 - 7.83 (m, 1H), 5.15 - 5.44 (m, 1H), 4.55 - 4.81 (m, 1H), 3.84 - 4.09 (m, 1H), 2.85 - 3.05 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.23 - 2.42 (m, 1H), 1.90 - 1.66 (m, 11H), 1.19 - 1.45 (m, 2H), 0.90 - 1.19 (m, 2H), 0.57 - 0.85 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 522.6。
實例 311. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,6 S)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 S)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 R)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,6 R)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1112
將EDCI（160.5 mg，0.84 mmol），HOBt（113.1 mg，0.84 mmol），1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-胺（中間體528-B，305.0 mg，1.67 mmol）添加到(1 R,3 R,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體524，200.0 mg，0.56 mmol）和DIPEA（432.8 mg，3.35 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將混合物用EtOAc和水稀釋。將有機層合併，並在真空下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH 10/1 v/v）純化，以獲得(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 S,6 S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,6 S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,6 R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 S,6 R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺的非鏡像異構物混合物（ 實例 311），其為兩部分，每個部分含有兩種非鏡像異構物。獲得呈固體的第一部分（263.0 mg）（LCMS (ESI): [M+H] +: 523.2）並且獲得呈固體的第二部分（93.0 mg）（LCMS (ESI): [M+H] +: 523.2）。
使用手性製備型HPLC分離來自製備型TLC的第一部分（263.0 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IG柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3·MeOH）: EtOH=70 : 30，保持33 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 311-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（43.9 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.64 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ14.19 - 13.74 (m, 1H), 8.65 - 8.27 (m, 1H), 7.90 - 7.57 (m, 1H), 7.27 - 6.90 (m, 1H), 5.44 - 4.44 (m, 2H), 3.95 - 3.50 (m, 1H), 3.19 (s, 1H), 2.84 (s, 1H), 2.51 (s, 3H), 2.44 (s, 3H), 2.19 - 1.91 (m, 1H), 1.91 (d, 2H), 1.78 (s, 7H), 1.63 (s, 3H), 1.42 (m, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 523.2。
實例 311-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（44.6 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為15.92 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ14.19 - 13.74 (m, 1H), 8.65 - 8.27 (m, 1H), 7.90 - 7.57 (m, 1H), 7.27 - 6.90 (m, 1H), 5.39 - 4.41 (m, 2H), 3.92 - 3.59 (m, 1H), 3.26 - 3.03 (m, 1H), 2.84 (s, 1H), 2.62 - 2.47 (m, 3H), 2.44 (s, 3H), 2.19 - 1.91 (m, 1H), 1.91 (s, 2H), 1.81 - 1.66 (m, 7H), 1.66 - 1.50 (m, 3H), 1.41 (m, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 523.2。
使用手性製備型HPLC分離來自製備型TLC的第二部分（93.0 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IF柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MBTE（0.5% 2 M NH 3·MeOH）: EtOH=70 : 30，保持38 min
流速：13 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 311-C.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（4.5 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為16.05 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.01 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.78 (s, 2H), 7.12 (s, 1H), 4.95 (m, 2H), 3.64 (s, 1H), 3.50 (s, 1H), 2.77 (m, 3H), 2.30 (m, 4H), 2.25 - 2.11 (m, 1H), 2.10 - 1.93 (m, 2H), 1.77 (s, 7H), 1.65 (s, 2H), 1.23 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 523.2。
實例 311-D.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（3.5 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為29.13 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.00 (s, 1H), 8.65 - 8.27 (m, 1H), 7.90 - 7.57 (m, 2H), 7.27 - 6.90 (m, 1H), 5.38 - 4.47 (m, 2H), 3.72 (s, 1H), 3.28 (s, 1H), 2.77 (m, 1H), 2.49 (d, 3H), 2.42 (s, 3H), 1.89 (s, 2H), 1.88 - 1.65 (m, 10H), 1.43 (m, 1H), 1.20 (m, 1H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 523.2。
實例 312-A. ( R)- N-((1 r,4 S)-4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1114
實例 312-B. ( S)- N-((1 r,4 R)-4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1116
將HATU（270.0 mg，0.71 mmol）和(1 r,4 r)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（中間體535-B，100.0 mg，0.47 mmol）添加到4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527，177.0 mg，0.47 mmol）和DIPEA（184.0 mg，1.42 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的( R- N-((1 r,4 S)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( S)- N-((1 r,4 R)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺的非鏡像異構物混合物（190.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 568.3。
使用手性製備型HPLC分離標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（0.5% 2 M NH 3·MeOH）: EtOH=50 : 50，保持14 min
流速：17 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 312-A.獲得呈固體的第一洗脫化合物（32.9 mg）。
第一洗脫化合物的保留時間為5.71 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.00 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 4.45 (s, 1H), 3.91 - 3.81 (m, 4H), 3.62 - 3.48 (m, 2H), 2.83 - 2.76 (m, 1H), 2.25 - 2.18 (m, 1H), 1.84 - 1.42 (m, 11H), 1.19 - 1.08 (m, 4H), 1.03 - 0.77 (m, 2H), 0.68 - 0.62 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 568.3。
實例 312-B.獲得呈固體的第二洗脫化合物（35.2 mg）。
第二洗脫化合物的保留時間為10.23 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.00 (m, 1H), 8.27 (m, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 4.45 (s, 1H), 3.91 - 3.81 (m, 4H), 3.62 - 3.48 (m, 2H), 2.83 - 2.76 (m, 1H), 2.25 - 2.18 (m, 1H), 1.84 - 1.42 (m, 11H), 1.19 - 1.08 (m, 4H), 1.03 - 0.77 (m, 2H), 0.68 - 0.62 (m, 2H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 568.3。
實例 313-A. ( R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4- 羥基雙環 [2.2.2] 辛烷 -1- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1118
實例 313-B. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4- 羥基雙環 [2.2.2] 辛烷 -1- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1120
使用與對於實例288的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用4-(胺基甲基)雙環[2.2.2]辛烷-1-醇作為起始材料。將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，得到( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((4-羥基雙環[2.2.2]辛烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((4-羥基雙環[2.2.2]辛烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，其為鏡像異構物的固體混合物（120.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 512.3。
使用製備型手性HPLC分離標題化合物的兩種鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（0.5% 2 M NH 3·MeOH）: IPA=70 : 30，保持25 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 313-A.獲得呈固體的第一洗脫化合物（35.2 mg）。
第一洗脫化合物的保留時間為7.12 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.12 - 13.84 (m, 1H), 8.27 - 8.21 (m, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.55 - 4.26 (m, 1H), 4.16 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.80 - 2.74 (m, 3H), 2.32 - 2.04 (m, 1H), 1.76 - 1.71 (m, 1H), 1.57 - 0.76 (m, 15H), 0.69 - 0.47 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 512.3。
實例 313-B.獲得呈固體的第二洗脫化合物（38.6 mg）。
第二洗脫化合物的保留時間為17.65 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.14 - 13.84 (m, 1H), 8.27 - 8.21 (m, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.58 - 4.26 (m, 1H), 4.16 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.80 - 2.75 (m, 3H), 2.32 - 2.04 (m, 1H), 1.76 - 1.71 (m, 1H), 1.57 - 0.76 (m, 15H), 0.69 - 0.47 (m, 4H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 512.2。
實例 314. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(2,3- 二甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1122
步驟 -1. 5- 溴 -1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸
Figure 02_image1124
將LiOH .H 2O（0.63 g，14.91 mmol）添加到5-溴-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-甲酸甲酯（中間體506，步驟-1，2.50 g，7.46 mmol）在THF（12.00 mL），MeOH（12.00 mL），和H 2O（12.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。然後將溶液在減壓下濃縮，然後藉由添加HCl水溶液（1 M）將pH調節至5。藉由過濾收集固體並在真空下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（300.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 321.0。
步驟 -2. (1 R,3 s,5 S)-8-(5- 溴 -1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸苄酯
Figure 02_image1126
將HOBt（1.41 g，10.41 mmol），EDCI（2.00 g，10.41 mmol），和(1 R,3 R,5 S)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸苄酯（1.70 g，6.94 mmol）添加到5-溴-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-甲酸（步驟-1，2.23 g，6.94 mmol）和DIPEA（2.69 g，20.83 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得溶液在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，並在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/4 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（2.00 g）。LCMS (ESI): [M+H] +: 548.2。
步驟 -3. (1 R,3 s,5 S)-8-(5- 溴 -1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸
Figure 02_image1128
將LiOH .H 2O（0.31 g，7.29 mmol）添加到(1 R,3 s,5 S)-8-(5-溴-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸苄酯（步驟-2，2.00 g，3.65 mmol）在THF（5.00 mL），MeOH（5.00 mL），和H 2O（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。然後將溶液在減壓下濃縮，然後藉由添加HCl水溶液（1 M）將pH調節至5。藉由過濾收集固體並在真空下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（1.60 g）。LCMS (ESI): [M+H] +: 458.1。
步驟 -4. (1 R,3 s,5 S)-8-(5- 溴 -1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1130
將HOBt（884.0 mg，6.54 mmol），EDCI（1.25 g，6.54 mmol），和(1 r,4 r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（919.0 mg，5.02 mmol）添加到(1 R,3 R,5 S)-8-(5-溴-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（步驟-3，1.60 g，4.36 mmol）和DIPEA（2.81 g，21.81 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得溶液在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，並在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/4 v/v）洗脫）純化，以獲得呈白色固體的標題化合物（1.60 g）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 7.72 (d, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.67 (s, 1H), 5.49 (s, 2H), 5.04 (d, 1H), 4.63 (s, 1H), 3.78 (s, 1H), 3.68 - 3.52 (m, 2H), 2.98 - 2.80 (m, 1H), 2.16 - 1.54 (m, 10H), 1.64 - 1.42 (m, 6H), 0.93 - 0.78 (m, 2H), 0.07 (s, 9H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 625.2。
步驟 -5. (3-((1 R,3 s,5 S)-3-(((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 胺基甲醯基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -5- 基 ) 硼酸
Figure 02_image1132
在氮氣氣氛下將Pd(dppf)Cl 2（168.0 mg，0.20 mmol）和KOAc（303.0 mg，3.09 mmol）添加到(1 R,3 s,5 S)-8-(5-溴-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺（步驟-4，640.0 mg，1.03 mmol）和B 2Pin 2（523.0 mg，2.06 mmol）在1,4-二㗁𠮿（32.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在100ºC下攪拌5 h。所得殘餘物作為溶液直接用於下一步驟。
步驟 -6. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(2,3- 二甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1122
在氮氣氣氛下將Pd(dppf)Cl 2 （11.0 mg，0.01 mmol）和K 3PO 4（41.0 mg，0.19 mmol）添加到(3-((1 R,3 s,5 S)-3-(((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)胺基甲醯基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-5-基)硼酸（步驟-5，在1,4-二㗁𠮿中1.0 mL，0.06 mmol）和4-溴-2,3-二甲基吡啶（24.2 mg，0.13 mmol）在1,4-二㗁𠮿（1 mL）和H 2O（0.50 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在100ºC下攪拌14 h。將所得混合物過濾。然後將濾液藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：welFlash C18-I，20-40 µm，120 g；流動相A：水（0.1% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：40% B至85% B，15 min內；220/254 nm）。將兩滴濃HCl添加到純化殘餘物在MeOH（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在60ºC下攪拌4 h。將所得混合物過濾。將濾液藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XBridge BEH130製備型C18 OBD柱，130Å，19 x 150 mm 5 µm 13 nm；流動相A：水（20 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；檢測器，UV 210/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（6.5 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.29 (d, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.92 (s, 1H), 5.38 (s, 1H), 3.91 (d, 1H), 3.14 - 3.01 (m, 1H), 2.59 (s, 3H), 2.39 (s, 3H), 2.19 - 1.78 (m, 11H), 1.78 - 1.60 (m, 6H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 520.5。
實例 315. (1 R,3 s,5 S)- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8-(5-(6- 甲基 -1 H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1135
使用與對於實例314的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用4-溴-6-甲基-1 H-吡唑并[3,4-b]吡啶作為步驟-6中的起始材料。獲得呈固體的標題化合物（6.8 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.51 (d, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 3.99 - 3.86 (m, 1H), 3.52 - 3.45 (m, 1H), 3.14 - 3.11 (m, 1H), 3.11 - 3.03 (m, 1H), 2.70 (s, 3H), 2.29 - 1.55 (m, 16H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 546.3。
實例 316. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(2- 乙基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1137
使用與對於實例314的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用4-溴-2-乙基吡啶作為步驟-6中的起始材料。獲得呈固體的標題化合物（9.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.48 (d, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 5.32 - 5.27 (m, 1H), 4.86 - 3.80 (m, 1H), 3.95 - 3.89 (m, 1H), 3.13 - 3.00 (m, 1H), 2.92 - 2.81 (m, 2H), 2.24 - 1.80 (m, 10H), 1.80 - 1.56 (m, 6H), 1.38 - 1.26 (m, 3H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 520.4。
實例 317. (1 R,3 s,5 S)- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8-(5-(2-( 羥基甲基 ) 吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1139
使用與對於實例314的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(4-溴吡啶-2-基)甲醇作為步驟-6中的起始材料。獲得呈固體的標題化合物（9.9 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.52 (d, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 5.15 - 5.10 (m, 2H), 4.79 - 4.66 (m, 2H), 3.94 - 3.89 (m, 1H), 3.12 - 3.02 (m, 1H), 2.27 - 1.43 (m, 16H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 522.4。
實例 318. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3-( 三氟甲基 )-1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1141
步驟 -1. (3- 側氧基 -1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1143
在0ºC下將甲磺酸（98.1 µL，1.51 mmol）添加到(4-乙烯基-4-羥基環己基)胺基甲酸三級丁酯（其根據WO 2004002992製備，並且其也是可商購的）（241.0 mg，1.01 mmol），BrettPhos AuNTf 2（51.0 mg，50.4 µmol）和8-乙基喹啉 1-氧化物（349.0 mg，2.01 mmol）在DCE（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物攪拌15 min，然後升溫至22ºC並攪拌3 h。然後將所得溶液用水稀釋並用DCM萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/環己烷（1/4 v/v至3/7 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物的非鏡像異構物混合物（170.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 5.19 (s, 2H), 4.43 (s, 1H), 3.49 (s, 1H), 2.08 (d, 2H), 1.98 - 1.91 (m, 2H), 1.79 - 1.71 (m, 2H), 1.54 - 1.48 (m, 2H), 1.44 (s, 9H)。
步驟 -2. (3- 羥基 -3-( 三氟甲基 )-1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1145
在0ºC下將三甲基(三氟甲基)矽烷（504.0 µL，3.41 mmol）和CsF（526.0 mg，3.46 mmol）添加到(3-側氧基-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-1，145.0 mg，0.57 mmol）在THF（0.50 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物攪拌16 h。然後將溶液用NH 4Cl的飽和水溶液稀釋，攪拌30 min並用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/環己烷（3/7 v/v至1/3 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物的非鏡像異構物混合物（110.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.59 (d, 1H), 4.42 - 4.32 (m, 2H), 3.45 (s, 1H), 2.63 (s, 1H), 2.46 - 2.19 (m, 4H), 1.99 - 1.92 (m, 1H), 1.91 - 1.83 (m, 1H), 1.49 - 1.39 (m, 11H)。
步驟 -3. (3-((( 甲硫基 ) 碳硫基 ) 氧基 )-3-( 三氟甲基 )-1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1147
在0ºC下將NaH（5.0 mg，0.13 mmol，在礦物油中的60%分散體）添加到(3-羥基-3-(三氟甲基)-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-2，37.0 mg，0.11 mmol）在THF（1.10 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在0ºC下攪拌20 min。將CS 2（0.01 mL，0.17 mmol）添加到反應混合物中。將所得混合物在0ºC下攪拌30 min，然後添加MeI（0.02 mL，0.34 mmol）。將反應混合物在22ºC下攪拌4 h。然後將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，用飽和NaHCO 3水溶液洗滌，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發，以獲得呈油狀物的標題化合物的非鏡像異構物混合物（26.0 mg），其無需進一步純化而使用。TLC-MS (APCI): [M+H] +: 416.1。
步驟 -4. (3-( 三氟甲基 )-1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1149
在22ºC下將1,1,1,3,3,3-六甲基-2-(三甲基矽基)三矽烷（45.0 mg，0.18 mmol）和AIBN（2.0 mg，0.01 mmol）添加到(3-(((甲硫基)碳硫基)氧基)-3-(三氟甲基)-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-3，50.0 mg，0.12 mmol）在甲苯（1.70 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在110ºC下攪拌18 h。將所得混合物濃縮並直接藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/環己烷（1/9 v/v至3/7 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物的非鏡像異構物混合物（13.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.58 - 4.47 (m, 2H), 4.35 (s, 1H), 3.45 (s, 1H), 3.26 - 3.14 (m, 1H), 2.40 - 2.31 (m, 1H), 2.20 - 2.11 (m, 1H), 1.91 - 1.81 (m, 2H), 1.69 - 1.56 (m, 3H), 1.51 - 1.27 (m, 10H)。
步驟 -5. 2,2,2- 三氟 -1-((3-( 三氟甲基 )-1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-l5- 氮烷基 ) 乙烷 -1- 酮
Figure 02_image1151
在0ºC下將TFA（32.0 µL，0.42 mmol）添加到(3-(三氟甲基)-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-4，13.0 mg，0.04 mmol）在DCM（0.11 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌4.5 h。然後將反應混合物濃縮並在高真空下進一步乾燥。所得含有標題化合物的非鏡像異構物混合物的殘餘物（14.0 mg）不經進一步純化而直接用於下一步驟。TLC-MS (APCI): [M+H] +: 210.1。
步驟 -6. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3-( 三氟甲基 )-1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1153
將HATU（12.0 mg，0.03 mmol）和3-(三氟甲基)-1-氧雜螺[3.5]壬-7-胺 2,2,2-三氟乙酸酯（步驟-5，15.0 mg，0.05 mmol）添加到(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體508，11.0 mg，0.03 mmol）和DIPEA（26.0 µL，0.15 mmol）在DMF（0.10 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌16 h。將反應混合物濃縮並用EtOAc和水稀釋。將有機層用水和鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由反相柱層析法（C18柱，10%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH））純化，然後將所得殘餘物溶解在DCM中並進行製備型TLC（用2.5% MeOH/DCM洗脫），並且最終藉由反相柱層析法（C18柱，10%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH））純化，以獲得標題化合物（3.3 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (s, 1H), 7.21 (s, 2H), 5.34 (s, 1H), 4.65 - 4.56 (m, 1H), 4.50 - 4.41 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.65 - 3.54 (m, 1H), 3.49 - 3.38 (m, 1H), 2.95 - 2.84 (m, 1H), 2.36 - 2.26 (m, 1H), 2.26 - 2.19 (m, 1H), 2.15 - 1.24 (m, 15H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 566.2。
實例 319. (1 R,3 s,5 S)- N-(3,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1155
步驟 -1. 11- 氟 -1,4,9- 三氧雜二螺 [4.2.48.25] 十四烷 -12- 酮
Figure 02_image1157
在-78ºC下將1,4,9-三氧雜二螺[4.2.48.25]十四烷-12-酮（370.0 mg，1.74 mmol）在THF（3.00 mL）中的溶液添加到LiHMDS（1 M，1.59 mL，1.59 mmol）在THF（14.30 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物攪拌40 min，然後添加NFSI（500.0 mg，1.59 mmol），作為在THF（3.00 mL）中的溶液。將所得混合物在22ºC下攪拌16 h。將溶液用NH 4Cl的飽和水溶液淬滅並用EtOAc萃取。將合併的有機層用水和鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/EtOAc（0/1 v/v至4/1 v/v）洗脫）純化，以獲得標題化合物（234.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 5.06 (dt, 1H), 4.38 (ddd, 1H), 4.07 - 3.90 (m, 5H), 1.92 - 1.66 (m, 8H)。
步驟 -2. 11- 氟 -1,4,9- 三氧雜二螺 [4.2.48.25] 十四烷 -12- 醇
Figure 02_image1159
在0ºC下將NaBH 4（46.1 mg，1.22 mmol）添加到11-氟-1,4,9-三氧雜二螺[4.2.48.25]十四烷-12-酮（步驟-1，234.0 mg，1.02 mmol）在MeOH（5.08 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在0ºC下攪拌5 h。將反應混合物用NH 4Cl的飽和水溶液淬滅並用EtOAc萃取。將合併的有機層用水和鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/EtOAc（9/1 v/v至4/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物的非鏡像異構物混合物（191.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 5.17 - 4.98 (m, 1H), 4.16 - 3.90 (m, 5H), 3.83 (ddd, 1H), 2.16 (dd, 1H), 1.97 - 1.54 (m, 8H)。
步驟 -3. 11,12- 二氟 -1,4,9- 三氧雜二螺 [4.2.48.25] 十四烷
Figure 02_image1161
將DAST（0.19 mL，1.46 mmol）添加到11-氟-1,4,9-三氧雜二螺[4.2.48.25]十四烷-12-醇（步驟-2，170.0 mg，0.73 mmol）在DCM（7.32 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌16 h。然後將反應混合物逐滴添加到攪拌的飽和NaHCO 3水溶液中。將水層進一步用DCM萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/EtOAc（1/0 v/v至9/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物的非鏡像異構物混合物（23 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 5.29 - 5.10 (m, 1H), 4.92 - 4.74 (m, 1H), 4.22 - 4.07 (m, 1H), 4.06 - 3.87 (m, 5H), 1.96 - 1.62 (m, 8H)。
步驟 -4. 3,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 酮
Figure 02_image1163
在0ºC下將TFA（0.13 mL，15.0 µmol）添加到11,12-二氟-1,4,9-三氧雜二螺[4.2.48.25]十四烷（步驟-3，30.0 mg，0.13 mmol）在DCM（0.26 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌16 h。將反應混合物在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物的非鏡像異構物混合物（24.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 5.37 - 5.17 (m, 1H), 5.00 - 4.81 (m, 1H), 4.32 - 4.17 (m, 1H), 4.17 - 4.05 (m, 1H), 2.68 (qd, 2H), 2.43 - 2.24 (m, 2H), 2.24 - 2.06 (m, 2H), 2.00 - 1.82 (m, 2H)。
步驟 -5. 3,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 酮肟
Figure 02_image1165
在22ºC下將3,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-酮（步驟-4，24.0 mg，0.13 mmol）作為在MeOH（0.20 mL）中的溶液添加到鹽酸羥胺（9.6 mg，0.14 mmol）和乙酸鈉（13.0 mg，0.16 mmol）在MeOH（0.20 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在60ºC下攪拌16 h。將所得溶液用EtOAc稀釋並將有機層用水和鹽水洗滌。將有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用環己烷/EtOAc（3/1 v/v至3/2 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物的非鏡像異構物混合物（7.0 mg）。TLC-MS (APCI): [M+H] +: 206.0。
步驟 -6. (3,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1167
在-78ºC下將NaBH 4（10.3 mg，0.27 mmol）添加到3,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-酮肟（步驟-5，7.0 mg，0.03 mmol）和六水合氯化鎳(II)（10.5 mg，0.04 mmol）在MeOH（0.68 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物升溫至0ºC持續4.5 h。添加Boc 2O（11.2 mg，0.05 mmol）並將反應混合物在22ºC下攪拌16 h。將所得溶液冷卻至0ºC，用鹽水淬滅,並且然後在減壓下濃縮。將水溶液用Et 2O萃取。將有機層合併，用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發以獲得標題化合物（10.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 5.31 - 5.07 (m, 1H), 5.00 - 4.66 (m, 1H), 4.43 (s, 1H), 4.21 - 4.06 (m, 1H), 4.01 - 3.93 (m, 1H), 3.48 (s, 1H), 1.98 - 1.76 (m, 4H), 1.74 - 1.58 (m, 2H), 1.52 - 1.46 (m, 2H), 1.44 (s, 9H)。
步驟 -7. 2,2,2- 三氟乙醛 --(3,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-l4- 氮烷
Figure 02_image1169
在0ºC下將TFA（26.0 µL，0.34 mmol）添加到(3,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-6，10.0 mg，34.3 µmol）在DCM（0.21 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌4.5 h，並且然後在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物的非鏡像異構物混合物（10.5 mg）。TLC-MS (APCI): [M+H] +: 192.1。
步驟 -8. (1 R,3 s,5 S)- N-(3,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1155
將HATU（11.2 mg，29.4 µmol）和2,2,2-三氟乙醛--(3,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-l4-氮烷（步驟-7，10.6 mg，34.73 µmol）添加到(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體508，10.0 mg，26.7 µmol）和DIPEA（23.0 µL，0.13 mmol）在DMF（0.20 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在22ºC下攪拌16 h。將反應混合物濃縮並用EtOAc和水稀釋，用水和鹽水洗滌，並且然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由反相柱層析法（C18柱，10%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH））純化，以獲得標題化合物（6.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 14.00 (s, 1H), 8.28 (d, 1H), 7.76 - 7.63 (m, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.12 (d, 1H), 5.45 - 5.26 (m, 1H), 5.17 - 4.88 (m, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.19 - 3.78 (m, 5H), 3.71 - 3.58 (m, 1H), 3.58 - 3.44 (m, 1H), 2.88 - 2.70 (m, 1H), 2.11 - 0.99 (m, 16H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 548.2。
實例 320. (1 R,3 s,5 S)- N-(4,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1172
步驟 -1. 2,2,2- 三氟乙醛 -4,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 銨鹽
Figure 02_image1174
在0ºC下將TFA（0.08 mL，1.00 mmol）添加到的(4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)胺基甲酸三級丁酯（中間體540，30.0 mg，0.10 mmol）在DCM（0.21 mL）中攪拌溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌4.5 h。將反應混合物在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物的非鏡像異構物混合物（31.0 mg）。TLC-MS (APCI): [M+H] +: 192.1。
步驟 -2. (1 R,3 s,5 S)- N-(4,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1176
將HATU（28.0 mg，0.07 mmol）和4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-胺 2,2,2-三氟乙酸酯（步驟-1，32.0 mg，0.10 mmol）添加到(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體508，25.0 mg，0.07 mmol）和DIPEA（0.06 mL，0.33 mmol）在DMF（0.2 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在22ºC下攪拌16 h。將反應濃縮並用EtOAc和水稀釋，用水和鹽水洗滌，並且然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由反相柱層析法（C18柱，10%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH））純化，以獲得標題化合物（19.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (400 MHz, DMSO -d 6 ) δ 14.01 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.74 (dd, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.13 (s, 1H), 4.68 (s, 1H), 3.99 - 3.77 (m, 5H), 3.78 - 3.73 (m, 0.5H), 3.51 - 3.47 (m, 0.5H), 2.90 - 2.85 (m, 0.5H), 2.80 - 2.75 (m, 0.5H), 2.46 - 2.39 (m, 2H), 2.05 - 1.22 (m, 17H)。LCMS (ESI): [M+H] +: 548.1。
實例321. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,6 S)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 R)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,6 R)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 S)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1178
使用與對於實例311的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A）作為起始材料。將所得殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 S,6 S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,6 R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 S,6 R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,6 S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺的非鏡像異構物混合物（ 實例 321），其為兩部分，每個部分含有兩種非鏡像異構物。獲得呈油狀物的第一部分（90.0 mg）（LCMS (ESI): [M+H] +: 539.2）並且獲得呈油狀物的第二部分（23.0 mg）（LCMS (ESI): [M+H] +: 539.2）。
使用手性製備型HPLC分離來自製備型TLC的第一部分（90.0 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: MeOH=80 : 20，保持27 min
流速：16 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 321-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（28.1 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為14.53 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.75 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.47 - 4.41 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.78 - 3.72 (m, 1H), 3.25 - 3.05 (m, 1H), 2.69 - 2.63 (m, 3H), 2.48 - 2.40 (m, 3H), 2.17 - 2.11 (m, 1H), 1.90 - 1.57 (m, 5H), 1.54 - 1.38 (m, 2H), 1.20 - 1.14 (m, 1H), 0.97 - 0.91 (m, 2H), 0.64 - 0.58 (m, 2H)。LCMS (ESI): 539.3 [M+H] +。
實例 321-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（24.6 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為20.09 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.75 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.47 - 4.41 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.78 - 3.72 (m, 1H), 3.25 - 3.05 (m, 1H), 2.69 - 2.63 (m, 3H), 2.48 - 2.40 (m, 3H), 2.17 - 2.10 (m, 1H), 1.90 - 1.55 (m, 5H), 1.54 - 1.36(m, 2H), 1.20 - 1.14 (m, 1H), 0.97 - 0.91 (m, 2H), 0.64 - 0.58 (m, 2H)。LCMS (ESI): 539.3 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離來自製備型TLC的第二部分（23.0 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2M NH 3.MeOH）: EtOH=70 : 30，保持13 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 321-C.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（3.1 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.40 min。
LCMS (ESI): 539.25 [M+H] +。
實例 321-D.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（4.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為11.30 min。
LCMS (ESI): 539.25 [M+H] +。
實例 322. (R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,6 S)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (R)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 R)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (R)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,6 R)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (R)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 S)-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1180
使用與對於實例311的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用( R)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-B）作為起始材料。將所得殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得( R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 S,6 S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,6 R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 S,6 R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,6 S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺的非鏡像異構物混合物（ 實例 322），其為兩部分，每個部分含有兩種非鏡像異構物。獲得呈油狀物的第一部分（90.0 mg）（LCMS (ESI): 539.2 [M+H] +），並且獲得第二部分（1.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 322-C）。LCMS (ESI): 539.2 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離來自製備型TLC的第一部分（90.0 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: MeOH=95 : 5，保持13 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 322-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（20.1 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.93 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.99 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.75 (d, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.83 - 4.08 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.76 (s, 1H), 3.28 - 2.99 (m, 1H), 2.76 - 2.53 (m, 3H), 2.49 - 2.41 (m, 3H), 2.11 (d, 1H), 2.01 - 1.57 (m, 5H), 1.57 - 1.29 (m, 2H), 1.23 (s, 1H), 1.09 - 0.74 (m, 2H), 0.64 (s, 2H)。LCMS (ESI): 539.3 [M+H] +。
實例 322-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（17.6 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.71 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.94 (s, 1H), 8.26 (d, 1H), 7.74 (d, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 4.42 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.83 - 3.64 (m, 1H), 3.26 - 3.03 (m, 1H), 2.81 - 2.54 (m, 3H), 2.47 - 2.43 (m, 3H), 2.27 - 2.03 (m, 1H), 1.96 - 1.56 (m, 3H), 1.56 - 1.36 (m, 2H), 1.34 - 0.99 (m, 3H), 1.03 - 0.76 (m, 2H), 0.63 (s, 2H)。LCMS (ESI): 539.3 [M+H] +。
實例 323. (R)-N-((1 r,4 R)-4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -((1 r,4 S)-4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1182
步驟 -1. (1 r,4 r)-4-( 二苄基胺基 )-1-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 醇
Figure 02_image1184
將K 2CO 3（6.00 g，43.67 mmol）添加到(1 r,4 r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（2.00 g，10.92 mmol）和苄基溴（4.30 g，25.11 mmol）在MeCN（10.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，3/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（3.60 g）。LCMS (ESI): 364.2 [M+H] +。
步驟 -2. (1 r,4 r)- N, N- 二苄基 -4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 胺
Figure 02_image1186
將NaH（39.6 mg，1.65 mmol）添加到(1 r,4 r)-4-(二苄基胺基)-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（步驟-1，300.0 mg，0.86 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將碘乙烷（643.7 mg，4.13 mmol）添加到所得混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將反應混合物用水和EtOAc稀釋。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/石油醚，1/10 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（130.0 mg）。LCMS (ESI): 392.2 [M+H] +。
步驟 -3. (1 r,4 r)-4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 胺
Figure 02_image1188
將Pd/C（50.0 mg）添加到(1 r,4 r)- N, N-二苄基-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（步驟-2，130.0 mg，0.33 mmol）在MeOH（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在H 2氣氛下攪拌14 h。濾出固體。將有機層在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（70.0 mg）。LCMS (ESI): 212.1 [M+H] +。
步驟 -4. (7 R)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (7 S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4- 乙氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1182
將HOBt（56.4 mg，0.42 mmol），EDCI（80.0 mg，0.42 mmol），和(1 r,4 r)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（步驟-3，76.4 mg，0.362 mmol）添加到4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體526，99.7 mg，0.28 mmol）和DIPEA（143.8 mg，1.11 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物用EtOAc和水稀釋。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得(7 R)-4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-[(1 r,4 r)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和(7 S)-4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-[(1 r,4 r)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（57.0 mg），其為非鏡像異構物的油狀混合物。LCMS (ESI): 552.3 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（57.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH= 90 : 10，保持12 min
流速：17 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 323-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（5.7 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.35 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.01 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 7.82 (s, 2H), 7.25 - 6.89 (m, 1H), 4.49 (s, 1H), 3.85 (s, 1H), 3.67 - 3.47 (m, 2H), 2.97 - 2.65 (m, 2H), 2.05 - 1.32 (m, 12H), 1.31 - 1.07 (m, 5H), 1.06 - 0.74 (m, 2H), 0.67 (s, 3H)。LCMS (ESI): 552.25 [M+H] +。
實例 323-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（10.9 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.91 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.24 - 13.77 (m, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.03 - 7.71 (m, 2H), 7.03 (s, 1H), 4.51 (s, 1H), 3.93 - 3.79 (m, 1H), 3.63 - 3.48 (m, 2H), 3.20 - 2.62 (m, 2H), 2.42 - 2.04 (m, 1H), 2.01 - 1.35 (m, 11H), 1.33 - 0.77 (m, 7H), 0.66 (s, 3H)。LCMS (ESI): 552.25 [M+H] +。
實例 324. (R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 甲氧基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1191
使用與對於實例323的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用碘甲烷作為步驟-2中的起始材料，和4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527）作為步驟-4中的起始材料。將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得 (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，其為非鏡像異構物的固體混合物。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=90 : 10，保持21 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 324-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（51.8 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.80 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 13.95 (d, 1H), 8.25 (d, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.51 (s, 1H), 3.86 - 3.80 (m, 4H), 3.28 (s, 3H), 2.77 (s, 1H), 2.18 (s, 1H), 1.91 - 1.66 (m, 5H), 1.60 (m, 5H), 1.27 - 1.04 (m, 2H), 0.92 - 0.79 (m, 2H), 0.70 - 0.52 (m, 2H)。LCMS (ESI): 554.25 [M+H] +。
實例 324-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（45.3 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為15.55 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 13.95 (d, 1H), 8.26 (d, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.51 (s, 1H), 3.86 - 3.80 (m, 4H), 3.28 (s, 3H), 2.77 (s, 1H), 2.17 (s, 1H), 1.72 (s, 5H), 1.64 - 1.50 (m, 5H), 1.22 (s, 1H), 1.13 (s, 1H), 0.95 (s, 2H), 0.66 (s, 1H), 0.57 (s, 1H)。LCMS (ESI): 554.25 [M+H] +。
實例 325. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4 S,7 r)-1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4 R,7 s)-1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1193
使用與對於實例276的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A）作為起始材料。將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，15/1 v/v）純化，以獲得 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((4 S,7 r)-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((4 R,7 s)-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，其為非鏡像異構物的固體混合物（60.0 mg）。LCMS (ESI): 498.5 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK ART Cellulose-SC柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=50 : 50，保持14 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 325-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（3.7 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.38 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.42 - 7.08 (m, 2H), 4.52 (t, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.69 - 3.57 (m, 1H), 2.82 - 2.76 (m, 1H), 2.47 - 2.35 (m, 3H), 2.25 - 2.06 (m, 3H), 1.97 - 1.41 (m, 8H), 1.34 - 1.20 (m, 2H), 1.08 - 1.02 (m, 2H), 0.73 (s, 2H)。LCMS (ESI): 498.45 [M+H] +。
實例 325-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（0.9 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.95 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.54 - 7.08 (m, 2H), 4.54 (t, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.67 - 3.61 (m, 1H), 2.80 - 2.74 (m, 1H), 2.52 - 2.08 (m, 6H), 1.92 - 1.72 (m, 4H), 1.70 - 1.55 (m, 2H), 1.41 - 1.23 (m, 4H), 1.08 - 0.86 (m, 2H), 0.76 - 0.70 (m, 2H)。LCMS (ESI): 498.50 [M+H] +。
實例 326. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,6 S)-1-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 S)-1-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 R)-1-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,6 R)-1-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1195
步驟 -1.N-[6-(三氟甲基)哌啶-3-基]胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1197
將Rh/Al 2O 3（0.14 g，1.34 mmol）和HOAc（4.00 mL）添加到 N-[6-(三氟甲基)吡啶-3-基]胺基甲酸三級丁酯（3.50 g，13.35 mmol）在MeOH（30.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在50ºC下在50 atm H 2氣氛下攪拌14 h。將溶液過濾並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，1/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（2.50 g）。LCMS (ESI): 269.3[M+H] +。
步驟 -2. N-[1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1199
將2,2-二甲基環氧乙烷（0.60 g，8.39 mmol）和K 2CO 3（2.32 g，16.78 mmol）添加到 N-[(3 S,6 S)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-1，1.50 g，5.59 mmol）在EtOH（8.00 mL）和H 2O（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在110ºC下攪拌14 h。將溶液過濾並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，2/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（750.0 mg）。LCMS (ESI): 341.4 [M+H] +。
步驟 -3. N-[1-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1201
將Et 2NSF 3 （461.2 mg，2.87 mmol）添加到 N-[1-(2-羥基-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-2，750.0 mg，2.20 mmol）在DCM（6.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將溶液用水和DCM稀釋。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚/EtOAc，3/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（700.0 mg）。LCMS (ESI): 343.4 [M+H] +。
步驟 -4. 1-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 胺
Figure 02_image1203
將TFA（3.00 mL）添加到N-[1-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-3，700.0 mg，2.05 mmol）在DCM（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（400.0 mg）。LCMS (ESI): 243.2 [M+H] +。
步驟 -5. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1205
將EDCI（411.5 mg，2.15 mmol），HOBt（290.0 mg，2.15 mmol），和1-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-胺（步驟-4，400.0 mg，1.65 mmol）添加到(1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體529，833.2 mg，1.65 mmol）和DIPEA（640.2 mg，4.95 mmol）在DMF（6.00 ml）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，然後經無水硫酸鈉乾燥，過濾，並將溶劑蒸發。將殘餘物藉由矽膠層析法（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（750.0 mg）。LCMS (ESI): 729.9 [M+H] +。
步驟 -6. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,6 S)-1-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 S)-1-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,6 R)-1-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺，和 (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,6 R)-1-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-6-( 三氟甲基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1207
將TFA（3.00 mL）添加到(1 R,3 S,5 S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]- N-[(3 S,6 S)-1-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺（步驟-5，750.0 mg，1.028 mmol）在DCM（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相快速柱層析法純化（使用以下條件：C18柱；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：5% B至60% B，40 min內；檢測器，220/254 nm），以獲得(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 S,6 S)-1-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,6 S)-1-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,6 R)-1-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺，和(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 S,6 R)-1-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺（500.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 599.4 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該四種非鏡像異構物的混合物（400.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: MeOH=85 : 15，保持23 min
流速：18 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 326-A 和實例 326-B.獲得第一洗脫峰（180.0 mg），其為兩種非鏡像異構物的固體混合物。
第一洗脫峰的保留時間為9.13 min。
實例 326-C.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（111.6 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為11.83 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.44 - 6.98 (m, 2H), 5.34 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.90 - 3.79 (m, 1H), 3.42 - 3.32 (m, 2H), 2.99 - 2.86 (m, 4H), 2.82 - 2.68 (m, 1H), 2.18 - 1.92 (m, 6H), 1.87 - 1.84 (m, 3H), 1.79 - 1.71 (m, 2H), 1.60 - 1.47 (m, 1H), 1.37 - 1.25 (m, 6H)。LCMS (ESI): 599.1 [M+H] +。
實例 326-D.獲得呈固體的第三洗脫非鏡像異構物（16.0 mg）。
第三洗脫非鏡像異構物的保留時間為18.93 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.16 (s, 1H), 7.42 - 7.02 (m, 2H), 5.39 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.92 - 3.85 (m, 1H), 3.43 - 3.33 (m, 2H), 3.18 (d, 1H), 3.06 - 2.93 (m, 1H), 2.89 - 2.72 (m, 3H), 2.20 - 1.99 (m, 5H), 1.95 - 1.72 (m, 6H), 1.67 - 1.58 (m, 1H), 1.41 - 1.24 (m, 6H)。LCMS (ESI): 599.1 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離第一洗脫峰（180.0 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=80 : 20，保持17 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 326-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（76.8 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.37 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (s, 1H), 7.40 - 7.03 (m, 2H), 5.34 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.91 - 3.80 (m, 1H), 3.42 - 3.32 (m, 2H), 2.99 - 2.86 (m, 3H), 2.89 - 2.78 (m, 1H), 2.78 - 2.68 (m, 1H), 2.21 - 1.93 (m, 5H), 1.92 - 1.67 (m, 6H), 1.60 - 1.47 (m, 1H), 1.33 (d, 3H), 1.28 (d, 3H)。LCMS (ESI): 599.1 [M+H] +。
實例 326-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（9.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為14.75 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.24 - 7.19 (m, 2H), 5.36 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.91 - 3.85 (m, 1H), 3.42 - 3.33 (m, 2H), 3.21 - 3.14 (m, 1H), 3.07 - 2.93 (m, 1H), 2.86 (s, 1H), 2.84 - 2.73 (m, 2H), 2.24 - 1.96 (m, 5H), 1.95 - 1.74 (m, 6H), 1.67 - 1.58 (m, 1H), 1.43 - 1.23 (m, 6H)。LCMS (ESI): 599.1 [M+H] +。
實例 327. (R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5 R,8 r)-1- 甲基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (R)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5 S,8 s)-1- 甲基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5 S,8 r)-1- 甲基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5 R,8 s)-1- 甲基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1209
步驟 -1. 8-( 二苄基胺基 )-1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -2- 酮
Figure 02_image1211
將三乙醯氧基硼氫化鈉（2.54 g，11.96 mmol）添加到1-氮雜螺[4.5]癸烷-2,8-二酮（1.00 g，5.98 mmol），二苄基胺（1.30 g，6.59 mmol）在AcOH（0.10 mL）和DCE（6.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用DCM稀釋，用水洗滌。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，19/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.50 g）。LCMS (ESI): 349.2 [M+H] +。
步驟 -2. 8-( 二苄基胺基 )-1- 甲基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -2- 酮
Figure 02_image1213
在0ºC下將NaH（110.2 mg，2.76 mmol，在礦物油中的60%分散體）添加到8-(二苄基胺基)-1-氮雜螺[4.5]癸-2-酮（步驟-1，800.0 mg，2.30 mmol）在DMF（6.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在0ºC下攪拌30 min。在0ºC下將MeI（391.0 mg，2.76 mmol）添加到所得混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，30/1 v/v）純化，以獲得呈液體的標題化合物（810.0 mg）。LCMS (ESI): 363.2 [M+H] +。
步驟 -3. 8- 胺基 -1- 甲基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -2- 酮
Figure 02_image1215
在0ºC下將Pd/C（160.0 mg）添加到8-(二苄基胺基)-1-甲基-1-氮雜螺[4.5]癸-2-酮（步驟-2，800.0 mg，2.21 mmol）在MeOH（6.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在H 2氣氛下攪拌14 h。將所得混合物過濾，用MeOH洗滌。將濾液濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（360.0 mg），將其不經進一步純化而用於下一步驟。LCMS (ESI): 183.1 [M+H] +。
步驟 -4. (R)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5 R,8 r)-1- 甲基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (R)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5 S,8 s)-1- 甲基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5 S,8 r)-1- 甲基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5 R,8 s)-1- 甲基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1209
將EDCI（122.9 mg，0.64 mmol），HOBt（86.6 mg，0.64 mmol），和8-胺基-1-甲基-1-氮雜螺[4.5]癸-2-酮（步驟-3，194.7 mg，1.07 mmol）添加到4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527，200.0 mg，0.53 mmol）和DIPEA（207.1 mg，1.60 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得( R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((5 R,8 r)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺,和 (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((5 S,8 s)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺,和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((5 S,8 r)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺,和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((5 R,8 s)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（300.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 539.3 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該四種非鏡像異構物的混合物（300.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: MeOH=70 : 30，保持15 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 327-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（91.5 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.01 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.04 - 14.00 (m, 1H), 8.25 - 8.20 (m, 1H), 7.83 - 7.77 (m, 1H), 7.32 - 7.26 (m, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.45 - 4.40 (m, 1H), 3.88 - 3.80 (m, 4H), 2.65 - 2.62 (m, 4H), 2.18 (t, 3H), 1.90 - 1.86 (m, 3H), 1.90 - 1.72 (m, 2H), 1.66 - 1.61 (m, 4H), 1.55 - 1.50 (m, 1H), 1.24 - 1.08 (m, 4H), 0.98 - 0.93 (m, 2H), 0.70 - 0.65 (m, 1H), 0.60 - 0.56 (m, 1H)。LCMS (ESI): 539.3 [M+H] +。
實例 327-B 和實例 327-C.獲得第二洗脫峰（140.0 mg），其為兩種非鏡像異構物的固體混合物。
第二洗脫峰的保留時間為6.51 min。
實例 327-D.獲得呈固體的第三洗脫非鏡像異構物（26.8 mg）。
第三洗脫非鏡像異構物的保留時間為11.45 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.99 - 13.95 (m, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.71 - 7.65 (m, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.50 - 4.46 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.52 - 3.29 (m, 1H), 2.59 -2.56 (m, 4H), 2.19 (t, 3H), 1.88 - 1.63 (m, 7H), 1.53 - 1.49 (m, 1H), 1.37 - 1.22 (m, 2H), 1.44 - 1.07 (m, 4H), 0.95 (s, 2H), 0.62 (s, 2H)。LCMS (ESI): 539.4 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離第二洗脫峰（140.0 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/DCM=50 : 50，保持12 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 327-B.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（52.6 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為3.87 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.15 - 13.71 (m, 1H), 8.29 - 8.20 (m, 1H), 7.83 - 7.76 (m, 1H), 7.32 - 7.26 (m, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.54 - 4.45 (m, 1H), 3.88 - 3.80 (m, 4H), 2.84 - 2.79 (m, 1H), 2.65 (s, 3H), 2.18 (t, 3H), 1.93 - 1.74 (m, 5H), 1.66 - 1.46 (m, 6H), 1.17 (d, 3H), 0.98 - 0.94 (m, 2H), 0.70 - 0.66 (m, 1H), 0.61 - 0.56 (m, 1H)。LCMS (ESI): 539.1 [M+H] +。
實例 327-C.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（21.5 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.50 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.19 - 13.62 (m, 1H), 8.29 - 8.21 (m, 1H), 7.72 - 7.65 (m, 1H), 7.32 - 7.28 (m, 1H), 7.04 - 6.99 (m, 1H), 4.52 - 4.48 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.55 - 3.45 (m, 1H), 2.59 - 2.54 (m, 4H), 2.19 (t, 3H), 1.86 - 1.63 (m, 7H), 1.54 - 1.50 (m, 1H), 1.37 - 1.26 (m, 4H), 1.25 - 1.04 (m, 2H), 0.97 - 0.87 (m, 2H), 0.69 - 0.46 (m, 2H)。LCMS (ESI): 539.1 [M+H] +。
實例 328. (R)-N-((5 R,8 r)-1- 乙基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (R)-N -((5 S,8 s)-1- 乙基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N -((5 S,8 r)-1- 乙基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N -((5 R,8 s)-1- 乙基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1218
使用與對於實例327的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用碘乙烷作為步驟-2中的起始材料。將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的( R)-N-((5 R,8 r)-1-乙基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (R)-N-((5 S,8 s)-1-乙基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-((5 S,8 r)-1-乙基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-((5 R,8 s)-1-乙基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺的非鏡像異構物混合物（ 實例 328）（200.0 mg）。LCMS (ESI): 553.3 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離標題化合物的四種非鏡像異構物。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: MeOH=70 : 30，保持18 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 328-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（28.7 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.00 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.27 (d, 1H), 7.84 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 4.44 (s, 1H), 3.90 - 3.82 (m, 4H), 3.21 - 3.12 (m, 2H), 2.85 - 2.81 (m, 1H), 2.56 - 2.52 (m, 3H), 2.22 - 2.14 (m, 2H), 1.92 - 1.73 (m, 5H), 1.66 - 1.41 (m, 5H), 1.27 - 1.19 (m, 3H), 1.10 - 1.02 (m, 3H), 0.93 - 0.88 (m, 1H), 0.69 - 0.65 (m, 2H)。LCMS (ESI): 553.1 [M+H] +。
實例 328-B 和實例 328-C.獲得第二洗脫峰，其為兩種非鏡像異構物的固體混合物。
第二洗脫峰的保留時間為8.29 min。
實例 328-D.獲得呈固體的第三洗脫非鏡像異構物（11.4 mg）。
第三洗脫非鏡像異構物的保留時間為15.44 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.27 (d, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.06 - 7.00 (m, 1H), 4.46 - 4.41 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.63 - 3.48 (m, 1H), 3.14 - 3.05 (m, 2H), 2.67 - 2.62 (m, 4H), 2.24 - 2.16 (m, 2H), 1.88 - 1.79 (m, 2H), 1.78 - 1.66 (m, 5H), 1.56 - 1.51 (m, 1H), 1.45 - 1.36 (m, 2H), 1.35 - 1.11 (m, 3H), 1.05 - 0.82 (m, 4H), 0.65 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 553.1 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離第二洗脫峰，其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IH柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/DCM=80 : 20，保持14 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 328-B.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（10.2 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.62 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.43 - 8.17 (m, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.34 - 7.28 (m, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.56 - 4.48 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.56 - 3.49 (m, 1H), 3.14 - 3.04 (m, 2H), 2.56 - 2.52 (m, 4H), 2.24 - 2.15 (m, 2H), 1.87 - 1.79 (m, 2H), 1.78 - 1.66 (m, 5H), 1.61 - 1.21 (m, 6H), 1.05 - 0.83 (m, 4H), 0.68 - 0.64 (m, 1H), 0.58 - 0.54 (m, 1H)。LCMS (ESI): 553.4 [M+H] +。
實例 328-C.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（32.1 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.94 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.29 - 8.24 (m, 1H), 7.84 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.50 - 4.46 (m, 1H), 3.90 - 3.85 (m, 4H), 3.21 - 3.12 (m, 2H), 2.85 - 2.81 (m, 1H), 2.56 - 2.52 (m, 3H), 2.22 - 2.14 (m, 3H), 1.88 - 1.80 (m, 5H), 1.66 - 1.62 (m, 5H), 1.27 - 1.19 (m, 3H), 1.10 - 0.87 (m, 3H), 0.69 - 0.64 (m, 2H)。LCMS (ESI): 553.1 [M+H] +。
實例 329-A. (S)-N-((1 r,4 S)-4-(2-( 二甲基胺基 ) 乙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1220
使用與對於實例323的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(2-溴乙基)二甲基胺作為步驟-2中的起始材料，和 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A）作為步驟-4中的起始材料。將所得殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18柱；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20% B至40% B，20 min內；檢測器，UV 254/220 nm），以獲得呈固體的標題化合物（49.9 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ 13.96 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 7.84 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 4.41 (s, 1H), 3.86 - 3.82 (m, 4H), 3.60 - 3.42 (m, 2H), 2.87 - 2.64 (m, 1H), 2.32 - 2.11 (m, 8H), 2.01 - 1.32 (m, 11H), 1.32 - 0.99 (m, 2H), 0.87 (d, 2H), 0.63 (s, 2H)。LCMS (ESI): 611.3 [M+H] +。
實例 329-B. (R)-N-((1 r,4 R)-4-(2-( 二甲基胺基 ) 乙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1222
使用與對於實例323的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(2-溴乙基)二甲基胺作為步驟-2中的起始材料，和 (R)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-B）作為步驟-4中的起始材料。將所得殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18柱；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20% B至40% B，20 min內；檢測器，UV 254/220 nm），以獲得呈固體的標題化合物（12.6 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.42 - 8.04 (m, 2H), 7.84 (d, 1H), 7.39 - 7.15 (m, 1H), 7.02 (d, 1H), 4.42 (s, 1H), 3.87 (d, 4H), 3.64 - 3.48 (m, 2H), 2.92 - 2.59 (m, 1H), 2.47 - 2.36 (m, 1H), 2.34 - 1.92 (m, 7H), 1.88 - 1.34 (m, 12H), 1.15 (s, 1H), 0.90 (s, 2H), 0.64 (s, 2H)。LCMS (ESI): 611.4 [M+H] +。
實例 330. (R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4-(2- 羥基乙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4-(2- 羥基乙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1224
步驟 -1. (1 r,4 r)- N, N- 二苄基 -4-(2- 甲氧基乙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 胺
Figure 02_image1226
將NaH（79.2 mg，3.30 mmol）添加到(1 r,4 r)-4-(二苄基胺基)-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（600.0 mg，1.65 mmol）在DMF（5.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌1 h。然後將2-溴乙基甲基醚（1.15 g，8.26 mmol）添加到所得混合物中。將所得溶液在80ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌。將有機層合併，經無水Na2SO4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（394.0 mg）。LCMS (ESI): 422.2 [M+H] +。
步驟 -2. 2-(((1 r,4 r)-4-( 二苄基胺基 )-1-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 氧基 ) 乙烷 -1- 醇
Figure 02_image1228
在0ºC下將在DCM中的BBr 3（1 M，0.69 mL）添加到(1 r,4 r)- N, N-二苄基-4-(2-甲氧基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（步驟-1，145.0 mg，0.34 mmol）在DCM（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。然後藉由添加MeOH將反應混合物淬滅。將溶液在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（90.0 mg）。LCMS (ESI): 408.2 [M+H] +。
步驟 -3. 2-(((1 r,4 r)-4- 胺基 -1-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 氧基 ) 乙烷 -1- 醇
Figure 02_image1230
將Pd/C（18.0 mg）添加到2-(((1r,4r)-4-(二苄基胺基)-1-(三氟甲基)環己基)氧基)乙烷-1-醇（步驟-2，90.0 mg，0.22 mmol）在MeOH（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得溶液在25ºC下在H 2氣氛下攪拌14 h。然後濾出Pd/C。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（40.0 mg）。LCMS (ESI): 228.1[M+H] +。
步驟 -4. (R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4-(2- 羥基乙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4-(2- 羥基乙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1224
將HOBt（29.2 mg，0.22 mmol），EDCI（41.5 mg，0.22 mmol），和2-[[(1r,4r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己基]氧基]乙醇（步驟-3，32.8 mg，0.14 mmol）添加到4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527，54.0 mg，0.14 mmol）和DIPEA（74.6 mg，0.58 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-(2-羥基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-(2-羥基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（45.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 584.2 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（45.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=80 : 20，保持22 min
流速：16 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 330-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（4.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.24 min。
LCMS (ESI): 584.3 [M+H] +。
實例 330-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（3.6 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為17.96 min。
LCMS (ESI): 584.3 [M+H] +。
實例 331. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-(2,2,2- 三氟乙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (R)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-(2,2,2- 三氟乙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1232
步驟 -1. (3 R)-3-( 二苄基胺基 ) 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1234
在0ºC下將K 2CO 3（6.68 g，48.32 mmol）和苄基溴（4.59 g，26.85 mmol）添加到(3 R)-3-胺基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（1.00 g，5.37 mmol）在MeCN（23.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在60ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.70 g）。LCMS (ESI): 367.2 [M+H] +。
步驟 -2. (3 R)- N, N- 二苄基吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image1236
在0ºC下將TFA（5.00 mL）添加到(3 R)-3-(二苄基胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，1.00 g，2.73 mmol）在DCM（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（650.0 mg）。LCMS (ESI): 267.2 [M+H] +。
步驟 -3. 1-[(3 R)-3-( 二苄基胺基 ) 吡咯啶 -1- 基 ]-2,2,2- 三氟乙酮
Figure 02_image1238
將TEA（3.42 g，33.79 mmol）添加到(3 R)- N, N-二苄基吡咯啶-3-胺（步驟-2，3.00 g，11.26 mmol）在DCM（15.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌5 min。然後在0ºC下添加三氟乙酸酐（3.55 g，16.89 mmol）。將所得混合物在0ºC下攪拌30 min並且然後在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（2/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（3.00 g）。LCMS (ESI): 363.2 [M+H] +。
步驟 -4. (3 R)- N, N- 二苄基 -1-(2,2,2- 三氟乙基 ) 吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image1240
在0ºC下將BH 3-THF（13.25 mL，13.25 mmol）添加到1-[(3 R)-3-(二苄基胺基)吡咯啶-1-基]-2,2,2-三氟乙酮（步驟-3，3.00 g，8.28 mmol）在乾THF（15.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌2 h。在25ºC下將反應混合物用MeOH淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.50 g）。LCMS (ESI): 349.2 [M+H] +。
步驟 -5. (3 R)-1-(2,2,2- 三氟乙基 ) 吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image1242
在0ºC下將Pd/C（450.0 mg）添加到(3 R)- N, N-二苄基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡咯啶-3-胺（步驟-4，1.50 g，4.31 mmol）在MeOH（10.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下在H 2氣氛下攪拌14 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（300.0 mg）。所得殘餘物無需進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 169.1 [M+H] +。
步驟 -6. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-(2,2,2- 三氟乙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (R)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-(2,2,2- 三氟乙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1232
將HOBt（216.6 mg，1.60 mmol），EDCI（307.2 mg，1.60 mmol），和(3 R)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡咯啶-3-胺（步驟-5，161.7 mg，0.96 mmol）添加到4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527，300.0 mg，0.80 mmol）和DIPEA（517.8 mg，4.00 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（EtOAc）純化，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (R)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (R)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（200.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 525.2 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（200.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IC柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: MeOH=50 : 50，保持11 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 331-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（49.6 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.43 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.11 (d, 1H), 7.29 - 7.23 (m, 1H), 7.08 (d, 1H), 4.55 (s, 1H), 4.32 - 4.26 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.24 - 3.08 (m, 2H), 3.02 - 2.86 (m, 2H), 2.82 - 2.76 (m, 1H), 2.72 - 2.58 (m, 2H), 2.43 - 2.37 (m, 1H), 2.31 - 2.13 (m, 1H), 1.98 - 1.52 (m, 3H), 1.31 - 1.20 (m, 1H), 1.01 - 0.93 (m, 3H), 0.76 - 0.67 (m, 2H)。LCMS (ESI): 525.2 [M+H] +。
實例 331-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（49.8 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.94 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.11 (d, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.09 (d, 1H), 4.58 - 4.52 (m, 1H), 4.33 - 4.24 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.24 - 3.05 (m, 2H), 3.02 - 2.86 (m, 2H), 2.81 - 2.75 (m, 1H), 2.72 - 2.59 (m, 2H), 2.42 - 2.36 (m, 1H), 2.31 - 2.13 (m, 1H), 1.95 - 1.54 (m, 3H), 1.41 - 0.82 (m, 3H), 0.82 - 0.56 (m, 3H)。LCMS (ESI): 525.3 [M+H] +。
實例 332. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-(2,2,2- 三氟乙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (R)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-(2,2,2- 三氟乙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1245
使用與對於實例331的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(3 S)-3-胺基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯作為步驟-1中的起始材料。將所得殘餘物藉由製備型TLC（EtOAc）純化，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (S)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (S)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（45.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SC柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: MeOH=50 : 50，保持15 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 332-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（7.8 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.07 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.00 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.58 - 4.42 (m, 1H), 4.18 - 4.09 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.33 - 3.14 (m, 3H), 2.93 - 2.75 (m, 3H), 2.68 - 2.57 (m, 2H), 2.16 - 1.98 (m, 2H), 1.76 - 1.70 (m, 1H), 1.67 - 1.52 (m, 2H), 1.35 - 1.06 (m, 2H), 0.99 - 0.93 (m, 1H), 0.67 - 0.61 (m, 2H)。LCMS (ESI): 525.1 [M+H] +。
實例 332-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（11.2 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為11.74 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.13 - 7.08 (m, 1H), 4.61 - 4.56 (m, 1H), 4.35 - 4.28 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.25 - 3.11 (m, 2H), 3.01 - 2.90 (m, 2H), 2.83 - 2.78 (m, 1H), 2.72 - 2.62 (m, 2H), 2.42 - 2.37 (m, 1H), 2.30 - 2.17 (m, 1H), 1.98 - 1.59 (m, 3H), 1.30 - 1.25 (m, 1H), 1.14 - 0.84 (m, 3H), 0.82 - 0.57 (m, 2H)。LCMS (ESI): 525.1 [M+H] +。
實例 333. (R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4- 羥基雙環 [2.2.1] 庚烷 -1- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4- 羥基雙環 [2.2.1] 庚烷 -1- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的鏡像異構物混合物
Figure 02_image1247
步驟 -1. N- 苄基 -4- 羥基雙環 [2.2.1] 庚烷 -1- 甲醯胺
Figure 02_image1249
將EDCI（921.0 mg，4.80 mmol），HOBt（649.0 mg，4.80 mmol），和苄基胺（343.0 mg，3.20 mmol）添加到4-羥基雙環[2.2.1]庚烷-1-甲酸（500.0 mg，3.20 mmol）和DIPEA（2.10 g，16.01 mmol）在DMF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（20/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（630.0 mg）。LCMS (ESI): 246.2 [M+H] +。
步驟 -2. 4-[( 苄基胺基 ) 甲基 ] 雙環 [2.2.1] 庚烷 -1- 醇
Figure 02_image1251
將LiAlH 4（472.0 mg，12.43 mmol）添加到 N-苄基-4-羥基雙環[2.2.1]庚烷-1-甲醯胺（步驟-1，610.0 mg，2.49 mmol）在THF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在70ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（20/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（390.0 mg）。LCMS (ESI): 232.2 [M+H] +。
步驟 -3. 4-( 胺基甲基 ) 雙環 [2.2.1] 庚烷 -1- 醇
Figure 02_image1253
將Pd/C（39.0 mg）添加到4-[(苄基胺基)甲基]雙環[2.2.1]庚烷-1-醇（步驟-2，390.0 mg，1.69 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下在H 2氣氛下攪拌2 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（120.0 mg）。LCMS (ESI): 142.1 [M+H] +。
步驟 -4. 4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸
Figure 02_image1255
將LiOH .H 2O（162.0 mg，3.86 mmol）添加到4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（來自中間體527-A的合成步驟-1，1.00 g，1.93 mmol）在THF（3.00 mL），MeOH（3.00 mL）和H 2O（3.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。用HCl（1 M）將混合物酸化至pH 3。將水層用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（950.0 mg）。LCMS (ESI): 505.4 [M+H] +。
步驟 -5. 4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]- N-([4- 羥基雙環 [2.2.1] 庚烷 -1- 基 ] 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1257
將HOBt（215.0 mg，1.59 mmol），EDCI（305.0 mg，1.59 mmol），和4-(胺基甲基)雙環[2.2.1]庚烷-1-醇（步驟-3，150.0 mg，1.06 mmol）添加到4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（步驟-4，536.0 mg，1.06 mmol）和DIPEA（686.0 mg，5.31 mmol）在DMF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（600.0 mg）。LCMS (ESI): 628.3 [M+H] +。
步驟 -6. (R)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4- 羥基雙環 [2.2.1] 庚烷 -1- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4- 羥基雙環 [2.2.1] 庚烷 -1- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1247
將TFA（3.00 mL）添加到4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]- N-([4-羥基雙環[2.2.1]庚烷-1-基]甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-5，300.0 mg，0.48 mmol）在DCM（3.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((4-羥基雙環[2.2.1]庚烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((4-羥基雙環[2.2.1]庚烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（220.0 mg），其為鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 498.6 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種鏡像異構物的混合物（220.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=50 : 50，保持16 min
流速：16 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 333-A.獲得呈固體的第一洗脫鏡像異構物（60.1 mg）。
第一洗脫鏡像異構物的保留時間為11.81 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.07 - 13.88 (m, 1H), 8.34 - 8.23 (m, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.77 (s, 1H), 4.54 - 4.48 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.32 - 3.29 (m, 1H), 3.12 - 3.04 (m, 2H), 2.22 - 2.16 (m, 1H), 1.74 (s, 1H), 1.64 - 1.39 (m, 7H), 1.30 - 1.19 (m, 6H), 1.01 - 0.95 (m, 2H), 0.70 - 0.50 (m, 2H)。LCMS (ESI): 498.45 [M+H] +。
實例 333-B.獲得呈固體的第二洗脫鏡像異構物（64.0 mg）。
第一洗脫鏡像異構物的保留時間為19.40 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.07 - 13.86 (m, 1H), 8.34 - 8.23 (m, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.77 (s, 1H), 4.55 - 4.49 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.31 - 3.29 (m, 1H), 3.12 - 3.04 (m, 2H), 2.22 - 2.16 (m, 1H), 1.80 - 1.71 (m, 1H), 1.49 (d, 7H), 1.24 (d, 6H), 1.01 - 0.95 (m, 2H), 0.76 - 0.50 (m, 2H)。LCMS (ESI): 498.45 [M+H] +。
實例 334. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4- 羥基雙環 [2.1.1] 己烷 -1- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1259
步驟 -1. N-[4-( 二苄基胺基甲醯基 ) 雙環 [2.1.1] 己烷 -1- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1261
將EDCI（1.59 g，0.01 mol），HOBt（1.12 g，0.01 mmol），和二苄基胺（0.98 g，5.00 mmol）添加到4-[(三級丁氧基羰基)胺基]雙環[2.1.1]己烷-1-甲酸（1.00 g，4.14 mmol）和DIPEA（2.68 g，21.00 mmol）在DMF（15.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（2/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.90 g）。LCMS (ESI): 421.2 [M+H] +。
步驟 -2. 4- 胺基 - N, N- 二苄基雙環 [2.1.1] 己烷 -1- 甲醯胺
Figure 02_image1263
在0ºC下將TFA（8.00 mL）添加到N-[4-(二苄基胺基甲醯基)雙環[2.1.1]己烷-1-基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-1，1.90 g，4.52 mmol）在DCM（8.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌3 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（9/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.50 g）。LCMS (ESI): 321.2 [M+H] +。
步驟 -3. N, N- 二苄基 -4- 羥基雙環 [2.1.1] 己烷 -1- 甲醯胺
Figure 02_image1265
將NaNO 2（516.8 mg，7.49 mmol）添加到4-胺基- N, N-二苄基雙環[2.1.1]己烷-1-甲醯胺（步驟-2，800.0 mg，2.50 mmol）在AcOH（0.50 mL）和H 2O（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在65ºC下攪拌14 h。使混合物冷卻至25ºC。然後將在MeOH（3.00 mL）中的KOH（1.12 g，19.98 mmol）添加到反應混合物中。將所得混合物在65ºC下攪拌3 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，2/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（200.0 mg）。LCMS (ESI): 322.2 [M+H] +。
步驟 -4. 4-[( 二苄基胺基 ) 甲基 ] 雙環 [2.1.1] 己烷 -1- 醇
Figure 02_image1267
將BH 3-THF（3.11 mL，3.11 mmol）添加到N,N-二苄基-4-羥基雙環[2.1.1]己烷-1-甲醯胺（步驟-3，100.0 mg，0.31 mmol）在THF（1.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在60ºC下攪拌14 h。將反應混合物用MeOH淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，1/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（30.0 mg）。LCMS (ESI): 308.2 [M+H] +。
步驟 -5. 4-( 胺基甲基 ) 雙環 [2.1.1] 己烷 -1- 醇
Figure 02_image1269
在0ºC下將Pd/C（24.0 mg）添加到4-[(二苄基胺基)甲基]雙環[2.1.1]己烷-1-醇（步驟-4，30.0 mg，0.10 mmol）在MeOH（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下在H 2氣氛下攪拌14 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（11.0 mg）。LCMS (ESI): 128.1 [M+H] +。
步驟 -6. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4- 羥基雙環 [2.1.1] 己烷 -1- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1259
將HOBt（25.5 mg，0.19 mmol），EDCI（36.2 mg，0.19 mmol），和4-(胺基甲基)雙環[2.1.1]己烷-1-醇（步驟-5，12.0 mg，0.09 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，38.9 mg，0.10 mmol）和DIPEA（61.0 mg，0.47 mmol）在DMF（1.50 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XSelect CSH氟苯基，30 x150 mm，5μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeOH；流速：60 mL/min；梯度：45% B至55% B，7 min內；檢測：254/220 nm），以獲得呈固體的標題化合物（4.3 mg）。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.11 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 5.39 - 5.29 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 2.85 - 2.80 (m, 1H), 2.23 - 2.15 (m, 2H), 2.06 - 2.00 (m, 1H), 1.70 - 1.62 (m, 2H), 1.62 - 1.58 (m, 2H), 1.56 - 1.47 (m, 2H), 1.41 - 1.31 (m, 6H), 0.93 - 0.85 (m, 2H), 0.81 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 484.20 [M+H] +。
實例 335. 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4- 羥基雙環 [2.1.1] 己烷 -1- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1271
步驟 -1. 4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]- N-([4- 羥基雙環 [2.1.1] 己烷 -1- 基 ] 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1273
將HOBt（31.9 mg，0.24 mmol），EDCI（45.2 mg，0.24 mmol），和4-(胺基甲基)雙環[2.1.1]己烷-1-醇（來自實例334的合成步驟-5，15.0 mg，0.12 mmol）添加到4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（來自實例333的合成步驟-4，71.4 mg，0.14 mmol）和DIPEA（76.2 mg，0.59 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（1/5 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（15.0 mg）。LCMS (ESI): 614.3 [M+H] +。
步驟 -2. 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4- 羥基雙環 [2.1.1] 己烷 -1- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1275
將TFA（0.50 mL）添加到4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]- N-([4-羥基雙環[2.1.1]己烷-1-基]甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-1，20.0 mg，0.03 mmol）在DCM（0.50 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（20/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（2.2 mg）。LCMS (ESI): 484.2 [M+H] +。
實例 336. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3- 羥基雙環 [1.1.1] 戊 -1- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1277
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用3-(胺基甲基)雙環[1.1.1]戊-1-醇鹽酸鹽作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱，C18柱；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：20 mL/min；梯度：45% B至55% B，7 min內；檢測：254/220 nm），以獲得呈固體的標題化合物（14.1 mg）。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.01 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.03 (s, 1H), 4.51 - 4.46 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.22 - 3.16 (m, 3H), 2.17 - 2.13 (m, 1H), 1.74 - 1.38 (m, 9H), 1.29 - 0.81 (m, 3H), 0.65 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 470 [M+H] +。
實例 337. (S)-N-((2- 氧雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (R)-N -((2- 氧雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的鏡像異構物混合物
Figure 02_image1279
使用與對於實例288的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲胺氯化氫作為起始材料。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-N-((2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (R)-N-((2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（65.0 mg），其為鏡像異構物的固體混合物。
使用手性製備型HPLC分離該兩種鏡像異構物的混合物。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=90 : 10，保持11 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 337-A.獲得呈固體的第一洗脫鏡像異構物（14.3 mg）。
第一洗脫鏡像異構物的保留時間為6.72 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.06 - 13.85 (m, 1H), 8.34 - 8.22 (m, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.64 - 4.38 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.44 - 3.35 (m, 5H), 2.33 - 2.11 (m, 1H), 1.79 - 1.46 (m, 4H), 1.38 - 1.08 (m, 4H), 1.01 - 0.81 (m, 2H), 0.70 - 0.49 (m, 2H)。LCMS (ESI): 470.4 [M+H] +。
實例 337-B.獲得呈固體的第二洗脫鏡像異構物（11.2 mg）。
第二洗脫鏡像異構物的保留時間為7.83 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.06 - 13.85 (m, 1H), 8.34 - 8.22 (m, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.35 - 7.28 (m, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.65 - 4.38 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.49 - 3.37 (m, 5H), 2.23 - 2.17 (m, 1H), 1.79 - 1.44 (m, 4H), 1.38 - 1.06 (m, 4H), 1.01 - 0.78 (m, 2H), 0.70 - 0.49 (m, 2H)。LCMS (ESI): 470.4 [M+H] +。
實例 338. (S)-N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲氧基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (R)-N -((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲氧基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1281
步驟 -1. 5-(6- 甲氧基嘧啶 -4- 基 )-1-( 四氫 -2 H- 哌喃 -2- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸乙酯
Figure 02_image1283
將4-氯-6-甲氧基嘧啶（388.3 mg，2.69 mmol），K 3PO 4（1425.2 mg，6.71 mmol）和Pd(dppf)Cl 2（327.5 mg，0.448 mmol）添加到5-(乙氧基羰基)-2-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-基硼酸（600.0 mg，2.24 mmol）在1,4-二㗁𠮿（5.00 mL）和H 2O（0.50 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在70ºC下在氮氣氣氛下攪拌3 h。將所得混合物在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（450.0 mg）。LCMS (ESI): 333.2 [M+H] +。
步驟 -2. 5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸乙酯
Figure 02_image1285
將三氟乙酸（6.00 mL）添加到5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-甲酸乙酯（步驟-1，450.0 mg，1.35 mmol）在DCM（6.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌1 h。然後將溶液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（300.0 mg）。LCMS (ESI): 249.1 [M+H] +。
步驟 -3. 5-(6- 甲氧基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 甲酸
Figure 02_image1287
將LiOH .H 2O（152.1 mg，3.62 mmol）添加到5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸乙酯（步驟-2，300.0 mg，1.21 mmol）在THF（2.00 mL），MeOH（2.00 mL），和H 2O（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在60ºC下攪拌14 h。將溶液在減壓下濃縮。用HCl的水溶液（1 M）將混合物酸化至pH 4。藉由過濾收集固體並在真空下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（180.0 mg）。LCMS (ESI): 221.1 [M+H] +。
步驟 -4. 4-(5-(6- 甲氧基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯
Figure 02_image1289
將HOBt（174.9 mg，1.29 mmol），EDCI（248.1 mg，1.29 mmol），和4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（230.0 mg，1.12 mmol）添加到5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸（步驟-3，190.0 mg，0.86 mmol）和DIPEA（446.1 mg，3.45 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（260.0 mg）。LCMS (ESI): 372.2 [M+H] +。
步驟 -5. 4-(5-(6- 甲氧基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸
Figure 02_image1291
將LiOH .H 2O（117.5 mg，2.80 mmol）添加到4-[5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（步驟-4，260.0 mg，0.70 mmol）在THF（1.50 mL），MeOH（1.50 mL），和H 2O（1.50 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在下25ºC攪拌1 h。將溶液在減壓下濃縮。用HCl的水溶液（1 M）將混合物酸化至pH 3。然後將混合物用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（140.0 mg）。LCMS (ESI): 358.1 [M+H] +。
步驟 -6. (S)-N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲氧基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (R)-N -((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲氧基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1281
將HOBt（79.4 mg，0.59 mmol），EDCI（112.7 mg，0.59 mmol），甲基 (1 r,4 r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（106.4 mg，0.51 mmol）添加到4-[5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（步驟-5，140.0 mg，0.39 mmol）和DIPEA（202.5 mg，1.57 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（20/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（150.0 mg）。LCMS (ESI): 523.2 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（50.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=70 : 30，保持15 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 338-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（22.5 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.74 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.99 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.53 - 7.10 (m, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.51 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.81 (s, 1H), 2.76 (s, 1H), 2.39 - 1.92 (m, 1H), 1.83 - 1.37 (m, 11H), 1.22 (s, 2H), 1.11 (d, 1H), 0.96 (s, 1H), 0.90 - 0.76 (m, 1H), 0.60 (s, 2H)。LCMS (ESI): 523.20 [M+H] +。
實例 338-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（20.8 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為12.66 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.99 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.38 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.48 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.80 (d, 1H), 2.76 (s, 1H), 2.34 - 2.04 (m, 1H), 1.83 - 1.65 (m, 5H), 1.65 - 1.39 (m, 6H), 1.22 (s, 1H), 1.19 - 1.10 (m, 1H), 1.03 (d, 1H), 0.91 (d, 1H), 0.85 - 0.72 (m, 1H), 0.60 (s, 2H)。LCMS (ESI): 523.3 [M+H] +。
實例 339. (R)-N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1294
步驟 -1. 4-[5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸
Figure 02_image1296
將LiOH.H 2O（59.0 mg，1.41 mmol）添加到4-[5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（來自實例308的合成步驟-1，250.0 mg，0.70 mmol）在THF（2.00 mL），MeOH（2.00 mL）和H 2O（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將溶液在減壓下濃縮。用HCl的水溶液（1 M）將混合物酸化至pH 4。將所得溶液用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（200.0 mg）。LCMS (ESI): 342.2 [M+H] +。
步驟 -2. (R)-N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(6- 甲基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1294
將HOBt（89.1 mg，0.66 mmol），EDCI（126.4 mg，0.66 mmol），和(1r,4r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇鹽酸鹽（125.5 mg，0.57 mmol）添加到4-[5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（步驟-1，150.0 mg，0.44 mmol）和DIPEA（284.0 mg，2.20 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（18/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( R)-N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-((1 r,4 S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（180.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 507.2 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（180.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=70 : 30，保持20 min
流速：16 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 339-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（34.1 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.47 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.82 (d, 1H), 9.03 (d, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.67 (s, 1H), 4.45 (s, 1H), 3.84 - 3.78 (m, 1H), 3.00 - 2.95 (m, 1H), 2.79 - 2.75 (m, 1H), 2.48 (d, 3H), 2.24 - 2.20 (m, 1H), 1.88 - 1.63 (m, 5H), 1.57 - 1.46 (m, 5H), 1.19 - 1.11 (m, 1H), 1.00 - 0.69 (m, 2H), 0.65 - 0.56 (m, 2H)。LCMS (ESI): 507.1 [M+H] +。
實例 339-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（46.6 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為15.61 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.02 (d, 1H), 9.05 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.69 (s, 1H), 4.56 - 4.50 (m, 1H), 3.87 - 3.81 (m, 1H), 3.30 - 3.01 (m, 1H), 2.82 - 2.76 (m, 1H), 2.51 - 2.48 (m, 3H), 2.24 - 2.18 (m, 1H), 1.83 - 1.72 (m, 5H), 1.57 - 1.47 (m, 5H), 1.01 - 0.95 (m, 3H), 0.67 - 0.61 (m, 2H)。LCMS (ESI): 507.1 [M+H] +。
實例 340. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 S,4 S)-4-( (S)-2- 甲氧基丙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 R,4 S)-4-( (R)-2- 甲氧基丙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1299
步驟 -1. 2- 甲氧基丙基三氟甲磺酸酯
Figure 02_image1301
在0ºC下將Tf 2O（25.04 g，88.75 mmol）和TEA（8.98 g，88.77 mmol）添加到2-甲氧基丙醇（4.00 g，44.38 mmol）在DCM（10.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在下25ºC攪拌5 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（9/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈液體的標題化合物（660.0 mg）。
步驟 -2. (1 r,4 r)- N, N- 二苄基 -4-(2- 甲氧基丙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 胺
Figure 02_image1303
在0ºC下將NaH（61.7 mg，1.54 mmol，在礦物油中的60%分散體）添加到(1 r,4 r)-4-(二苄基胺基)-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（來自實例323的合成步驟-1，280.0 mg，0.77 mmol）在THF（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min。然後將2-甲氧基丙基三氟甲磺酸酯（步驟-1，660.0 mg，1.62 mmol）添加到反應混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將反應混合物用MeOH淬滅並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（9/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（250.0 mg）。LCMS (ESI): 436.2 [M+H] +。
步驟 -3. (1 r,4 r)-4-(2- 甲氧基丙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 胺
Figure 02_image1305
在0ºC下將Pd/C（125.0 mg）添加到(1 r,4 r)- N, N-二苄基-4-(2-甲氧基丙氧基)-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（步驟-3，250.0 mg，0.58 mmol）在MeOH（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下在H 2氣氛下攪拌14 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（100.0 mg）。LCMS (ESI): 256.2 [M+H] +。
步驟 -4. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 S,4 S)-4-( (S)-2- 甲氧基丙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 R,4 S)-4-( (R)-2- 甲氧基丙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1299
將HOBt（84.7 mg，0.63 mmol），EDCI（120.2 mg，0.63 mmol），和(1r,4r)-4-(2-甲氧基丙氧基)-4-(三氟甲基)環己烷-1-胺（步驟-3，80.0 mg，0.31 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，129.1 mg，0.35 mmol）和DIPEA（202.5 mg，1.57 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（用石油醚/EtOAc（1/20 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 S,4 S)-4-( (S)-2-甲氧基丙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 R,4 S)-4-( (R)-2-甲氧基丙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（120.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 612.3 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（80.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=95 : 5，保持29 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 340-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（1.9 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為21.48 min。
LCMS (ESI): 612.0 [M+H] +。
實例 340-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（3.4 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為24.89 min。
LCMS (ESI): 612.0 [M+H] +。
實例 341. (S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-(( (R)-4,5,6,7- 四氫 -2 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-(( (S)-4,5,6,7- 四氫 -2 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1308
步驟 -1. N- 苄基 -4,5,6,7- 四氫 -1 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image1310
將EDCI（865.2 mg，4.51 mmol），HOBt（609.8 mg，4.51 mmol），和苄基胺（386.9 mg，3.61 mmol）添加到4,5,6,7-四氫-1 H-吲唑-5-甲酸（500.0 mg，3.01 mmol）和DIPEA（1944.33 mg，15.044 mmol）在DMF（3.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（300.0 mg）。LCMS (ESI): 256.1 [M+H] +。
步驟 -2. 苄基 (4,5,6,7- 四氫 -1 H- 吲唑 -5- 基甲基 ) 胺
Figure 02_image1312
在0ºC下將BH 3-THF（7.80 mL，7.83 mmol）添加到N-苄基-4,5,6,7-四氫-1 H-吲唑-5-甲醯胺（步驟-1，200.0 mg，0.78 mmol）在THF（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在70ºC下攪拌5 h。將MeOH（6.00 mL）添加到所得混合物中並將所得混合物在70ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（90.0 mg）。LCMS (ESI): 242.2 [M+H] +。
步驟 -3. 1-(4,5,6,7- 四氫 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲胺
Figure 02_image1314
在0ºC下將Pd/C（25.0 mg）添加到苄基(4,5,6,7-四氫-1 H-吲唑-5-基甲基)胺（步驟-2，70.0 mg，0.29 mmol）在MeOH（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下在H 2氣氛下攪拌14 h。過濾固體並用MeOH洗滌。將濾液濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（40.0 mg）。LCMS (ESI): 152.1 [M+H] +。
步驟 -4. (S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-(( (R)-4,5,6,7- 四氫 -2 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-(( (S)-4,5,6,7- 四氫 -2 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1308
將EDCI（76.8 mg，0.40 mmol），HOBt（54.0 mg，0.40 mmol），和1-(4,5,6,7-四氫-1 H-吲唑-5-基)甲胺（步驟-3，40.0 mg，0.27 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，100.0 mg，0.27 mmol）和DIPEA（170.0 mg，1.34 mmol）在DMF（2.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)- N-(( (R)-4,5,6,7-四氫-2 H-吲唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)- N-(( (S)-4,5,6,7-四氫-2 H-吲唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（55.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 341）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.89 (s, 1H), 12.20 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.94 - 7.88 (m, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.47 - 4.42 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.18 - 2.98 (m, 3H), 2.82 - 2.58 (m, 3H), 2.35 - 1.99 (m, 2H), 1.86 - 1.66 (m, 4H), 1.52 (s, 1H), 1.39 - 1.27 (m, 1H), 1.23 - 1.19 (m, 1H), 1.06 - 0.79 (m, 2H), 0.64 - 0.59 (m, 2H)。LCMS (ESI): 508.20 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（50.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=70 : 30，保持13 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 341-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（14.4 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.39 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.11 (s, 1H), 7.45 - 7.16 (m, 2H), 7.10 (s, 1H), 4.75 - 4.48 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.28 - 3.17 (m, 2H), 2.85 - 2.51 (m, 4H), 2.41 - 2.37 (m, 1H), 2.22 - 2.11 (m, 1H), 2.01 - 1.63 (m, 4H), 1.52 - 1.40 (m, 1H), 1.31 - 1.26 (m, 2H), 1.06 - 1.02 (m, 1H), 0.80 - 0.58 (m, 3H)。LCMS (ESI): 508.50 [M+H] +。
實例 341-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（13.9 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.95 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.12 (s, 1H), 7.42 - 7.15 (m, 2H), 7.10 (s, 1H), 4.78 - 4.48 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.24 - 3.17 (m, 2H), 2.85 - 2.52 (m, 4H), 2.42 - 2.38 (m, 1H), 2.22 - 2.12 (m, 1H), 2.03 - 1.73 (m, 4H), 1.48 (s, 1H), 1.31 - 1.25 (m, 2H), 1.06 - 1.01 (m, 1H), 0.75 - 0.71 (m, 3H)。LCMS (ESI): 508.50 [M+H] +。
實例 342. (S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-(( (R)-5,6,7,8- 四氫咪唑并 [1,5-a] 吡啶 -7- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-(( (S)-5,6,7,8- 四氫咪唑并 [1,5-a] 吡啶 -7- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1317
步驟 -1. 咪唑并 [1,5-a] 吡啶 -7- 甲腈
Figure 02_image1319
將氰化鋅（595.9 mg，5.08 mmol）和Pd(PPh 3) 4（586.5 mg，0.51 mmol）添加到7-溴咪唑并[1,5-a]吡啶（1.00 g，5.08 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在100ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（24/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（500.0 mg）。LCMS (ESI): 144.0 [M+H] +。
步驟 -2. 1-[5 H,6 H,7 H,8 H- 咪唑并 [1,5-a] 吡啶 -7- 基 ] 甲胺
Figure 02_image1321
將Pd/C（100.0 mg）添加到咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲腈（步驟-1，250.0 mg，1.75 mmol）在MeOH（6.00 mL）和AcOH（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在60ºC下在H 2氣氛（30 atm）下攪拌14 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（200.0 mg）。LCMS (ESI): 152.1 [M+H] +。
步驟 -3. (S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-(( (R)-5,6,7,8- 四氫咪唑并 [1,5-a] 吡啶 -7- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-(( (S)-5,6,7,8- 四氫咪唑并 [1,5-a] 吡啶 -7- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1323
將HOBt（144.4 mg，1.07 mmol），EDCI（204.8 mg，1.07 mmol），和1-[5H,6H,7H,8 H-咪唑并[1,5-a]吡啶-7-基]甲胺（步驟-2，181.0 mg，1.20 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，200.0 mg，0.53 mmol）和DIPEA（345.2 mg，2.67 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XBridge製備型OBD C18柱，30 x150 mm，5μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：13% B至43% B，10 min內；波長：254 nm），以獲得 (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)- N-(( (R)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,5-a]吡啶-7-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)- N-(( (S)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,5-a]吡啶-7-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（88.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 342）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.10 (d, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.09 (d, 1H), 6.65 (s, 1H), 4.60 - 4.54 (m, 1H), 4.30 - 4.17 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.90 - 3.81 (m, 1H), 3.37 - 3.31 (m, 2H), 3.29 - 3.15 (m, 2H), 3.00 - 2.87 (m, 1H), 2.86 - 2.80 (m, 1H), 2.48 - 2.21 (m, 2H), 2.06 - 2.00 (m, 2H), 1.95 - 1.52 (m, 3H), 1.35 - 1.25 (m, 2H), 1.15 - 0.97 (m, 2H), 0.78 - 0.69 (m, 2H).LCMS (ESI)：508 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（88.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/DCM=60 : 40，保持18 min
流速：16 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 342-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（25.1 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.57 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ14.04 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.64 (s, 1H), 4.53 - 4.47 (m, 1H), 4.23 - 4.10 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.88 - 3.73 (m, 1H), 3.18 - 3.02 (m, 2H), 2.91 - 2.77 (m, 1H), 2.76 - 2.62 (m, 1H), 2.34 - 2.19 (m, 1H), 2.03 - 1.68 (m, 4H), 1.61 - 1.49 (m, 2H), 1.27 - 1.12 (m, 2H), 1.01 - 0.95 (m, 2H), 0.67 - 0.61 (m, 2H)。LCMS (ESI): 508 [M+H] +。
實例 342-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（27.5 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為13.95 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.04 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.68 (s, 1H), 4.55 - 4.49 (m, 1H), 4.22 - 4.11 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.88 - 3.74 (m, 1H), 3.17 - 3.05 (m, 2H), 2.90 - 2.77 (m, 1H), 2.56 - 2.50 (m, 1H), 2.35 - 2.14 (m, 1H), 2.00 - 1.68 (m, 4H), 1.59 - 1.53 (m, 2H), 1.38 - 1.10 (m, 2H), 1.07 - 0.79 (m, 2H), 0.77 - 0.46 (m, 2H)。LCMS (ESI): 508 [M+H] +。
實例 343. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1- 甲基 -2- 氧雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1325
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(1-甲基-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱，C18柱；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：10% B至30% B，20 min內；檢測：254/220 nm），以獲得呈固體的標題化合物（74.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.95 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.47 - 4.43 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.44 - 3.40 (m, 2H), 3.36 - 3.32 (m, 2H), 2.70 - 2.66 (m, 1H), 2.19 - 2.15 (m, 1H), 1.75 - 1.70 (m, 1H), 1.58 - 1.40 (m, 3H), 1.38 - 1.23 (m, 6H), 1.23 - 0.89 (m, 3H), 0.63 - 0.59 (m, 2H)。LCMS (ESI): 484.0 [M+H] +。
實例 344. (R)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-( (R)-1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-( (R)-1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1327
步驟 -1. 1-[(3 R)-3-( 二苄基胺基 ) 吡咯啶 -1- 基 ]-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image1329
將2,2-二甲基環氧乙烷（324.8 mg，4.51 mmol）和K 2CO 3（622.6 mg，4.51 mmol）添加到(3 R)- N, N-二苄基吡咯啶-3-胺（400.0 mg，1.50 mmol）在EtOH（4.00 mL）和水（0.40 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在110ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（19/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（410.0 mg）。LCMS (ESI): 339.2 [M+H] +。
步驟 -2. 1-[(3 R)-3- 胺基吡咯啶 -1- 基 ]-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image1331
在0ºC下將Pd/C（123.0 mg）添加到1-[(3 R)-3-(二苄基胺基)吡咯啶-1-基]-2-甲基丙-2-醇（步驟-1，410.0 mg）在MeOH（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在H 2氣氛下攪拌14 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（177.0 mg）。LCMS (ESI): 159.1 [M+H] +。
步驟 -3a. (R)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-( (R)-1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1333
將HOBt（72.6 mg，0.54 mmol），EDCI（103.0 mg，0.54 mmol），和1-[(3 R)-3-胺基吡咯啶-1-基]-2-甲基丙-2-醇（步驟-2，85.0 mg，0.54 mmol）添加到( R)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-B，100.6 mg，0.27 mmol）和DIPEA（173.6 mg，1.34 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：10 B至30 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（47.2 mg）（ 實例 344-A）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.11 (d, 1H), 7.26 (d, 1H), 7.09 (d, 1H), 4.74 - 4.36 (m, 1H),, 4.32 - 4.21 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 2.99 - 2.70 (m, 3H), 2.67 - 2.55 (m, 2H), 2.52 - 2.33 (m, 2H),, 2.25 - 2.10 (m, 1H), 2.00 - 1.44 (m, 3H), 1.39 - 1.12 (m, 8H), 1.11 - 0.58 (m, 2H), 0.79 - 0.51 (m, 2H)。LCMS (ESI): 515 [M+H] +。
步驟 -3b. (S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-( (R)-1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1335
將HOBt（72.6 mg，0.54 mmol），EDCI（103.0 mg，0.54 mmol），和1-[(3 R)-3-胺基吡咯啶-1-基]-2-甲基丙-2-醇（步驟-2，85.0 mg，0.54 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，100.6 mg，0.27 mmol）和DIPEA（173.6 mg，1.34 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：10 B至30 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（26.8 mg）（ 實例 344-B）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.11 (d, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.09 (d, 1H), 4.67 - 4.46 (m, 1H), 4.37 - 4.20 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.70 - 3.35 (m, 2H), 3.27 - 2.66 (m, 5H), 2.56 - 2.20 (m, 2H), 2.05 - 1.54 (m, 3H), 1.38 - 1.15 (m, 8H), 1.15 - 0.82 (m, 2H), 0.81 - 0.52 (m, 2H)。LCMS (ESI): 515 [M+H] +。
實例 345. (S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-( (S)-1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (R)- 4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-( (S)-1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1337
使用與對於實例345的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，使用(3 S)- N, N-二苄基吡咯啶-3-胺作為步驟-1中的起始材料。獲得呈固體的 (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)- N-( (S)-1-(2-羥基-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（27.0 mg）（ 實例 345-A）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.11 (d, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.09 (d, 1H), 4.60 - 4.56 (m, 1H), 4.31 - 4.22 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 2.95 - 2.73 (m, 3H), 2.64 - 2.53 (m, 2H), 2.52 - 2.32 (m, 3H), 2.29 - 2.12 (m, 1H), 1.99 - 1.49 (m, 3H), 1.35 - 1.11 (m, 8H), 0.95 - 0.91 (m, 2H), 0.75 - 0.69 (m, 2H)。LCMS (ESI): 515.6 [M+H] +。
獲得呈固體的 (R)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)- N-( (S)-1-(2-羥基-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（10.2 mg）（ 實例 345-B）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.11 (d, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.69 - 4.41 (m, 1H), 4.28 - 4.24 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 2.95 - 2.69 (m, 3H), 2.68 - 2.52 (m, 2H), 2.52 - 2.29 (m, 3H), 2.26 - 2.12 (m, 1H), 1.99 - 1.53 (m, 3H), 1.42 - 1.08 (m, 8H), 1.09 - 0.80 (m, 2H), 0.73 - 0.69 (m, 2H)。LCMS (ESI): 515.6 [M+H] +。
實例 346. (S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-(( (R)-3- 甲基 -5,6,7,8- 四氫 -[1,2,4] 三唑并 [4,3-a] 吡啶 -7- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-(( (S)-3- 甲基 -5,6,7,8- 四氫 -[1,2,4] 三唑并 [4,3-a] 吡啶 -7- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1339
步驟 -1. 3- 甲基 -[1,2,4] 三唑并 [4,3-a] 吡啶 -7- 甲腈
Figure 02_image1341
將Zn(CN) 2（789.2 mg，6.72 mmol）和Pd(PPh 3) 4（517.7 mg，0.45 mmol）添加到7-溴-3-甲基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶（950.0 mg，4.48 mmol）在DMF（8.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在100ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將水層合併，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：0 B至20 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（212.0 mg）。LCMS (ESI): 159.1 [M+H] +。
步驟 -2. 1-[3- 甲基 -5 H,6 H,7 H,8 H-[1,2,4] 三唑并 [4,3-a] 吡啶 -7- 基 ] 甲胺
Figure 02_image1343
將PtO 2（180.0 mg）添加到3-甲基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-7-甲腈（步驟-1，180.0 mg，1.14 mmol）在AcOH（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在H 2氣氛下攪拌3 h。濾出固體。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（180.0 mg）。LCMS (ESI): 167.1 [M+H] +。
步驟 -3. (S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-(( (R)-3- 甲基 -5,6,7,8- 四氫 -[1,2,4] 三唑并 [4,3-a] 吡啶 -7- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-(( (S)-3- 甲基 -5,6,7,8- 四氫 -[1,2,4] 三唑并 [4,3-a] 吡啶 -7- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1339
將HOBt（54.1 mg，0.40 mmol），EDCI（76.8 mg，0.40 mmol）和1-[3-甲基-5H,6H,7H,8 H-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-7-基]甲胺（步驟-2，168.7 mg，1.01 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，100.0 mg，0.27 mmol）和DIPEA（207.1 mg，1.60 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：0 B至20 B，30 min內；220/254 nm），以獲得 (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)- N-(( (R)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-7-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)- N-(( (S)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-7-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（2.1 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 346）。NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.22 - 8.06 (m, 1H), 7.47 - 7.22 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.21 - 4.05 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.88 - 3.71 (m, 1H), 3.31 - 3.22 (m, 3H), 3.17 - 2.98 (m, 1H), 2.85 (s, 1H), 2.55 - 2.30 (m, 5H), 2.26 - 2.03 (m, 2H), 1.99 - 1.54 (m, 3H), 1.50 - 0.41 (m, 5H)。LCMS (ESI): 523.2 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（28.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/DCM=50 : 50，保持20 min
流速：16 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 346-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（1.7 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為13.35 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.49 - 7.16 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.31 - 4.06 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.91 - 3.73 (m, 1H), 3.23 - 2.97 (m, 2H), 2.86 (s, 1H), 2.67 - 2.32 (m, 5H), 2.20 - 2.06 (m, 2H), 2.03 - 1.58 (m, 3H), 1.31 (s, 2H), 1.19 - 0.86 (m, 2H), 0.76 (s, 3H)。LCMS (ESI): 523.5 [M+H] +。
實例 346-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（3.7 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為17.07 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.29 - 8.08 (m, 1H), 7.47 - 7.17 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.64 (s, 1H), 4.26 - 4.06 (m, 1H), 3.95 - 3.75(m, 4H), 3.19 - 3.00 (m, 2H), 2.97 - 2.73 (m, 1H), 2.67 - 2.32 (s, 5H), 2.30 - 2.06 (m, 2H), 2.04 - 1.53 (m, 3H), 1.31 (s, 2H), 1.19 - 0.87 (m, 2H), 0.76 (s, 3H)。LCMS (ESI): 523.5 [M+H] +。
實例 347. (1 r,4 R)- N-( (R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 基 )-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 甲醯胺和 (1 s,4 S)- N-( (R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 基 )-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 甲醯胺和 (1 r,4 S)- N-( (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 基 )-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 甲醯胺和 (1 s,4 R)- N-( (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 基 )-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1345
步驟 -1. 7-[4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷醯胺基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1347
將HOBt（254.8 mg，1.89 mmol），EDCI（361.4 mg，1.89 mmol），和7-胺基-4-氮雜螺[2.5]辛烷-4-甲酸三級丁酯（213.3 mg，0.94 mmol）添加到4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-甲酸（200.0 mg，0.94 mmol）和DIPEA（609.2 mg，4.71 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，3/20 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（280.0 mg）。LCMS (ESI): 421.2 [M+H] +。
步驟 -2. N-[4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 基 ]-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 甲醯胺
Figure 02_image1349
在0ºC下將TFA（4.00 mL）添加到7-[4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷醯胺基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-4-甲酸三級丁酯（步驟-1，280.0 mg，0.67 mmol）在DCM（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈固體的標題化合物（300.0 mg）。LCMS (ESI): 321.2 [M+H] +。
步驟 -3. N-[4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 基 ]-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 甲醯胺
Figure 02_image1351
將HATU（476.0 mg，1.25 mmol）和 N-[4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基]-4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-甲醯胺（步驟-2，300.8 mg，0.94 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-甲酸（中間體506，230.0 mg，0.63 mmol）和DIPEA（809.0 mg，6.26 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌5 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（2/3 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（400.0 mg）。LCMS (ESI): 670.3 [M+H] +。
步驟 -4. (1 r,4 R)- N-( (R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 基 )-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 甲醯胺，和 (1 s,4 S)- N-( (R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 基 )-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 甲醯胺，和 (1 r,4 S)- N-( (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 基 )-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 甲醯胺，和 (1 s,4 R)- N-( (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 基 )-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 甲醯胺
Figure 02_image1345
在0ºC下將TFA（4.00 mL）添加到N-[4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基]-4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-甲醯胺（步驟-3，400.0 mg，0.60 mmol）在DCM（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌5 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，1/2 v/v）純化，以獲得(1 r,4 R)- N-( (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-甲醯胺，和(1 s,4 S)- N-( (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-甲醯胺，和(1 r,4 S)- N-( (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-甲醯胺，和(1 s,4 R)- N-( (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-甲醯胺（160.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 347）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.24 (d, 1H), 7.90 - 7.73 (m, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 5.66 (d, 1H), 4.6 - 4.25 (m, 1H), 4.2 - 4.01 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 2.42 - 2.32 (m, 1H), 2.19 - 1.61 (m, 7H), 1.62 - 1.04 (m, 5H), 1.13 - 0.43 (m, 4H)。LCMS (ESI): 540 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該四種非鏡像異構物的混合物（160.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=75 : 25，保持30 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 347-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（19.7 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為14.86 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.02 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 5.63 (s, 1H), 4.47 - 4.41 (m, 1H), 4.07 - 4.01 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.35 - 3.03 (m, 1H), 2.40 - 2.31 (m, 1H), 2.07 - 2.01 (m, 1H), 1.94 - 1.68 (m, 7H), 1.56 - 1.44 (m, 2H), 1.41 - 1.13 (m, 2H), 0.91 - 0.85 (m, 2H), 0.68 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 540 [M+H] +。
實例 347-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（25.2 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為16.29 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.00 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 5.63 (s, 1H), 4.45 - 4.39 (m, 1H), 4.08 - 4.02 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.35 - 3.02 (m, 1H), 2.40 - 2.31 (m, 1H), 2.07 - 2.01 (m, 1H), 1.91 - 1.63 (m, 7H), 1.56 - 1.44 (m, 2H), 1.27 - 1.21 (m, 2H), 0.92 - 0.86 (m, 2H), 0.69 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 540 [M+H] +。
實例 347-C.獲得呈固體的第三洗脫非鏡像異構物（20.3 mg）。
第三洗脫非鏡像異構物的保留時間為18.86 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 8.26 (d, 1H), 7.75 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 5.70 (s, 1H), 4.46 - 4.40 (m, 1H), 4.05 - 3.99 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.35 - 3.13 (m, 1H), 2.07 - 2.01 (m, 2H), 1.93 - 1.62 (m, 5H), 1.61 - 1.50 (m, 2H), 1.50 - 1.36 (m, 2H), 1.35 - 1.15 (m, 2H), 1.02 - 0.73 (m, 2H), 0.69 - 0.57 (m, 2H)。LCMS (ESI): 540 [M+H] +。
實例 347-D.獲得呈固體的第四洗脫非鏡像異構物（24.1 mg）。
第四洗脫非鏡像異構物的保留時間為23.10 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 8.27 (d, 1H), 7.75 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 5.70 (s, 1H), 4.45 - 4.39 (m, 1H), 4.05 - 3.99 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.37 - 2.87 (m, 1H), 2.07 - 2.01 (m, 2H), 1.92 - 1.80 (m, 1H), 1.80 - 1.62 (m, 4H), 1.61 - 1.51 (m, 2H), 1.51 - 1.37 (m, 2H), 1.37 - 1.14 (m, 2H), 0.91 - 0.78 (m, 2H), 0.66 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 540 [M+H] +。
實例 348. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1354
步驟 -1. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1356
將EDCI（56.5 mg，0.30 mmol），HOBt（39.8 mg，0.30 mmol），和8-胺基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-1-甲酸三級丁酯（50.0 mg，0.20 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，81.0 mg，0.22 mmol）和DIPEA（127.0 mg，0.98 mmol）在DMF（2.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DMC/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（100.0 mg）。LCMS (ESI): 611.3 [M+H] +。
步驟 -2. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1358
在0ºC下將TFA（3.00 mL）添加到 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-1，100.0 mg，0.16 mmol）在DCM（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（50.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.11 (d, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.57 - 4.53 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.67 - 3.61 (m, 1H), 2.96 - 2.87 (m, 2H), 2.78 - 2.73 (m, 1H), 2.44 - 2.39 (m, 1H), 1.91 - 1.61 (m, 10H), 1.56 - 1.44 (m, 2H), 1.40 - 1.17 (m, 3H), 0.96 - 0.91 (m, 2H), 0.73 - 0.69 (m, 2H)。LCMS (ESI): 511.5 [M+H] +。
實例 349. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1-( 氧雜環丁烷 -3- 基 )-1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1360
將3-氧雜環丁烷酮（35.3 mg，0.49 mmol）和分子篩（4Å）（50.0 mg）添加到 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（實例348，50.0 mg，0.10 mmol）在MeOH（4.00 mL）和AcOH（0.10 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在80ºC下攪拌1 h。在25ºC下將NaBH 3CN（18.5 mg，0.29 mmol）添加到將反應混合物中。將所得混合物在80ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至50 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（2.2 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.88 - 4.78 (m, 2H), 4.73 - 4.63 (m, 2H), 4.61 - 4.55 (m, 1H), 4.45 - 4.30 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.61 - 3.55 (m, 1H), 3.11 - 3.01 (m, 2H), 2.79 - 2.73 (m, 1H), 2.43 - 2.37 (m, 1H), 2.01 - 1.93 (m, 1H), 1.90 - 1.79 (m, 7H), 1.54 - 1.18 (m, 9H), 1.10 - 0.84 (m, 1H), 0.76 - 0.70 (m, 2H)。LCMS (ESI): 567.25 [M+H] +。
實例 350. (S)-N-((1 r,4 S)-4-(2- 胺基乙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1362
步驟 -1. ( 三級丁氧基羰基 )(2-(((1 r,4 r)-4-( 二苄基胺基 )-1-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 氧基 ) 乙基 ) 胺基磺酸
Figure 02_image1364
在0ºC下將NaH（20.0 mg，0.82 mmol）添加到(1 r,4 r)-4-(二苄基胺基)-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（200.0 mg，0.55 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min。然後將1,2,3-氧雜四氫噻唑-3-甲酸三級丁酯 2,2-二氧化物（184.0 mg，0.82 mmol）添加到反應混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，13/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（250.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 587.2。
步驟 -2. (2-(((1r,4r)-4-( 二苄基胺基 )-1-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 氧基 ) 乙基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1366
在0ºC下將硫酸（0.40 mL）添加到(三級丁氧基羰基)(2-(((1 r,4 r)-4-(二苄基胺基)-1-(三氟甲基)環己基)氧基)乙基)胺基磺酸（步驟-1，250.0 mg，0.42 mmol）在H 2O（2.00 mL）和DCM（2.00 mL）中的溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。用飽和NaHCO 3水溶液將混合物中和至pH 7。將水層用DCM萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（200.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 507.3。
步驟 -3. (2-(((1 r,4 r)-4- 胺基 -1-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 氧基 ) 乙基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1368
將(2-(((1 r,4 r)-4-(二苄基胺基)-1-(三氟甲基)環己基)氧基)乙基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-2，180.0 mg，0.35 mmol）和Pd/C（60.0 mg）在MeOH（3.00 mL）中的溶液在25ºC下在H 2氣氛下攪拌14 h。濾出固體。將所得濾液在真空下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（127.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 327.2。
步驟 -4. (2-(((1 S,4 r)-4-( (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 羧醯胺 )-1-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 氧基 ) 乙基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1370
將EDCI（62.0 mg，0.32 mmol）和HOBt（43.0 mg，0.32 mmol），和(2-(((1 r,4 r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己基)氧基)乙基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-3，70.0 mg，0.21 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，80.0 mg，0.21 mmol）和DIPEA（83.0 mg，0.64 mmol）在DMF（2.00 mL）中的溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，2/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（100.0 mg）。LCMS (ESI): 683.3 [M+H] +。
步驟 -5. (S)-N-((1 r,4 S)-4-(2- 胺基乙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1372
將HCl（1.00 mL，在1,4-二㗁𠮿中4 M）添加到(2-(((1 S,4 r)-4-( (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-羧醯胺)-1-(三氟甲基)環己基)氧基)乙基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-4，100.0 mg，0.14 mmol）在1,4-二㗁𠮿（1.00 mL）中的溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：10 B至40 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（29.3 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.25 (d, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 4.44 - 4.39 (m, 1H), 3.88 - 3.83 (m, 4H), 3.48 - 3.43 (m, 2H), 2.85 - 2.65 (m, 2H), 2.38 - 2.19 (m, 2H), 1.88 - 1.63 (m, 8H), 1.56 - 1.49 (m, 3H), 1.24 - 0.86 (m, 3H), 0.67 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 583 [M+H] +。
實例 351. (S)-N-(1-(2,2- 二氟丙基 )-1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1374
步驟 -1. 8-( 二苄基胺基 )-1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1376
將K 2CO 3（543.3 mg，3.93 mmol）添加到8-胺基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-1-甲酸三級丁酯（500.0 mg，1.97 mmol）和苄基溴（1.01 g，5.90 mmol）在MeCN（6.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（650.0 mg）。LCMS (ESI): 435.3 [M+H] +。
步驟 -2. N, N- 二苄基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 胺
Figure 02_image1378
將TFA（2.00 mL）添加到8-(二苄基胺基)-1-氮雜螺[4.5]癸烷-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，650.0 mg，1.50 mmol）在DCM（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（6/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（420.0 mg）。LCMS (ESI): 335.2 [M+H] +。
步驟 -3. 1-[8-( 二苄基胺基 )-1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -1- 基 ] 丙 -2- 酮
Figure 02_image1380
在0ºC下將Cs 2CO 3（584.4 mg，1.79 mmol）添加到 N, N-二苄基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-胺（步驟-2，400.0 mg，1.20 mmol）和溴丙酮（327.6 mg，2.39 mmol）在MeCN（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（13/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（350.0 mg）。LCMS (ESI): 391.2 [M+H] +。
步驟 -4. N, N- 二苄基 -1-(2,2- 二氟丙基 )-1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 胺
Figure 02_image1382
在0ºC下將DAST（350.8 mg，2.18 mmol）添加到1-[8-(二苄基胺基)-1-氮雜螺[4.5]癸-1-基]丙-2-酮（步驟-3，170.0 mg，0.44 mmol）在DCM（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將反應混合物用飽和的NaHCO 3水溶液淬滅。將水層用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，5/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（28.0 mg）。LCMS (ESI): 413.2 [M+H] +。
步驟 -5. 1-(2,2- 二氟丙基 )-1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 胺
Figure 02_image1384
在0ºC下將Pd/C（9.0 mg）添加到 N, N-二苄基-1-(2,2-二氟丙基)-1-氮雜螺[4.5]癸-8-胺（步驟-4，30.0 mg，0.07 mmol）在MeOH（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下在H 2氣氛下攪拌14 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（15.0 mg）。LCMS (ESI): 233.1 [M+H] +。
步驟 -6. (S)-N-(1-(2,2- 二氟丙基 )-1- 氮雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1386
將EDCI（24.8 mg，0.13 mmol），HOBt（17.5 mg，0.13 mmol），和1-(2,2-二氟丙基)-1-氮雜螺[4.5]癸-8-胺（15.0 mg，0.07 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，29.0 mg，0.08 mmol）和DIPEA（41.7 mg，0.34 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型SFC純化（使用以下條件：柱：YMC-Actus Triart二醇-HILIC，3 x 25 cm，5 μm；流動相A：CO 2，流動相B：IPA（0.5% 2M NH 3-MeOH）；流速：60 mL/min；梯度：等度，30% B；波長：254 nm；RT1（min）：9.12；樣本溶劑：MeOH；注射體積：2 mL；運行次數：4），以獲得呈固體的標題化合物（0.9 mg）。LCMS (ESI): 589.6 [M+H] +。
實例 352. (S)-N-((1 S,4 S)-4-( (S)-2- 胺基丙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1388
使用與對於實例350的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用 (S)-4-甲基-1,2,3-氧雜四氫噻唑-3-甲酸三級丁酯 2,2-二氧化物作為步驟-1中的起始材料。將所得殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至40 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（61.9 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.25 (d, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 4.47 - 4.42 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.86 - 3.80 (m, 1H), 3.26 - 3.20 (m, 2H), 2.95 - 2.68 (m, 2H), 2.53 - 2.49 (m, 1H), 2.23 - 2.19 (m, 1H), 1.86 - 1.61 (m, 7H), 1.57 - 1.41 (m, 3H), 1.28 - 0.74 (m, 7H), 0.66 - 0.58 (m, 2H)。LCMS (ESI): 597.25 [M+H] +。
實例 353. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 S,4 S)-4-( (S)-2- 羥基丙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1390
步驟 -1. [(2 S)-1-[[(1 r,4 r)-4-( 二苄基胺基 )-1-( 三氟甲基 ) 環己基 ] 氧基 ] 丙 -2- 基 ] 氧基磺酸
Figure 02_image1392
在0ºC下將NaH（49.5 mg，1.24 mmol，在礦物油中的60%分散體）添加到( 1r,4 r)-4-(二苄基胺基)-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（300.0 mg，0.83 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min。然後將 (S)-4-甲基-1,3,2-二氧硫雜戊環 2,2-二氧化物（171.1 mg，1.24 mmol）添加到反應混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（500.0 mg）。LCMS (ESI): 502.2 [M+H] +。
步驟 -2. [(2 S)-1-[[(1 r,4 r)-4-( 二苄基胺基 )-1-( 三氟甲基 ) 環己基 ] 氧基 ] 丙 -2- 基 ] 氧基磺酸
Figure 02_image1394
在0ºC下將HCl（4.00 mL，在1,4-二㗁𠮿中4 M）添加到[(2 S)-1-[[(1 r,4 r)-4-(二苄基胺基)-1-(三氟甲基)環己基]氧基]丙-2-基]氧基磺酸（步驟-1，475.0 mg，0.95 mmol）在THF（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。用飽和NaHCO 3水溶液將反應混合物中和至pH 7。將水層用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（4/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（280.0 mg）。LCMS (ESI): 422.2 [M+H] +。
步驟 -3. (2 S)-1-[[(1 r,4 r)-4- 胺基 -1-( 三氟甲基 ) 環己基 ] 氧基 ] 丙 -2- 醇
Figure 02_image1396
在0ºC下將Pd/C（81.1 mg）添加到(2 S)-1-[[(1 r,4 r)-4-(二苄基胺基)-1-(三氟甲基)環己基]氧基]丙-2-醇（步驟-2，270.0 mg，0.64 mmol）在MeOH（6.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下在H 2氣氛下攪拌14 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（180.0 mg）。LCMS (ESI): 242.1 [M+H] +。
步驟 -4. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 S,4 S)-4-( (S)-2- 羥基丙氧基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1390
將HOBt（93.8 mg，0.69 mmol），EDCI（133.1 mg，0.69 mmol），和(2 S)-1-[[(1 r,4 r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己基]氧基]丙-2-醇（108.9 mg，0.45 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，130.0 mg，0.35 mmol）和DIPEA（224.4 mg，1.74 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至40 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（83.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.02 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.68 - 4.37 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.84 - 3.80 (m, 1H), 3.73 - 3.63 (m, 1H), 3.41 - 3.33 (m, 1H), 3.26 - 3.18 (m, 2H), 2.79 - 2.75 (m, 1H), 2.19 - 2.14 (m, 1H), 1.91 - 1.37 (m, 10H), 1.29 - 0.80 (m, 6H), 0.74 - 0.45 (m, 2H)。LCMS (ESI): 598 [M+H] +。
實例 354. (7 S)- N-(8- 氧雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1398
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用8-氧雜雙環[3.2.1]辛烷-3-胺鹽酸鹽作為起始材料。將所得殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至40 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（23.6 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.31 - 8.21 (m, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.04 - 6.98 (m, 1H), 4.49 - 4.44 (m, 1H), 4.19 (s, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.74 - 3.68 (m, 1H), 2.78 - 2.74 (m, 1H), 2.19 - 2.15 (m, 1H), 2.03 - 1.85 (m, 4H), 1.82 - 1.66 (m, 3H), 1.62 - 1.37 (m, 3H), 1.25 - 1.03 (m, 2H), 0.96 - 0.92 (m, 2H), 0.64 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 484 [M+H] +。
實例 355. (S)-N-((1 S,3 R)-3-(3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )-2,2- 二甲基環丁基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -((1 S,3 S)-3-(3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )-2,2- 二甲基環丁基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1400
步驟 -1. N-[3-(3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )-2,2- 二甲基環丁基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1402
將AcOH（0.06 mL）和 N-(2,2-二甲基-3-側氧基環丁基)胺基甲酸三級丁酯（497.7 mg，2.33 mmol）添加到3,3-二氟吡咯啶鹽酸鹽（335.0 mg，2.33 mmol）在DCE（6.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得溶液在25ºC下攪拌1 h，然後將三乙醯氧基硼氫化鈉（989.1 mg，4.67 mmol）添加到反應混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（700.0 mg）。LCMS (ESI): 305.2 [M+H] +。
步驟 -2. 3-(3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )-2,2- 二甲基環丁烷 -1- 胺
Figure 02_image1404
將TFA（2.00 mL）添加到N-[3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2-二甲基環丁基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-1，650.0 mg，2.14 mmol）在DCM（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈油狀物的標題化合物（350.0 mg）。LCMS (ESI): 205.1 [M+H] +。
步驟 -3. (S)-N-((1 S,3 R)-3-(3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )-2,2- 二甲基環丁基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ((1 S,3 S)-3-(3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )-2,2- 二甲基環丁基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1400
將EDCI（153.5 mg，0.80 mmol），HOBt（108.2 mg，0.80 mmol），和3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2-二甲基環丁烷-1-胺（163.6 mg，0.80 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，149.9 mg，0.40 mmol）和DIPEA（517.6 mg，4.01 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（9/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-N-((1 S,3 R)-3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2-二甲基環丁基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-((1 S,3 S)-3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2-二甲基環丁基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（100 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 561.3 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（100.0 mg）。
柱：XSelect CSH製備型C18 OBD柱
柱尺寸：19 x 250 mm，5 µm
流動相：水（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 3.H 2O）：MeCN=56 : 44至40 : 60，持續10 min
流速：25 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 355-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（5.1 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.90 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (d, 1H), 8.37 - 8.14 (m, 1H), 8.04 - 7.58 (m, 1H), 7.34 - 7.26 (m, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.53 - 4.48 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.75 - 3.53 (m, 1H), 2.82 - 2.71 (m, 2H), 2.71 - 2.56 (m, 2H), 2.24 - 2.02 (m, 5H), 1.86 - 1.38 (m, 3H), 1.31 - 0.91 (m, 6H), 0.88 - 0.77 (m, 4H), 0.68 - 0.44 (m, 3H)。LCMS (ESI): 561.55 [M+H] +。
實例 355-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（20.8 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.42 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (d, H), 8.25 (d, 1H), 8.05 - 7.58 (m, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.69 - 4.31 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.76 - 3.53 (m, 1H), 2.88 - 2.52 (m, 5H), 2.27 - 1.94 (m, 4H), 1.93 - 1.34 (m, 4H), 1.34 - 0.74 (m, 9H), 0.74 - 0.38 (m, 3H)。LCMS (ESI): 561.55 [M+H] +。
實例 356. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( (S)-5,6,7,8- 四氫咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -6- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( (R)-5,6,7,8- 四氫咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -6- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1407
步驟 -1. N, N- 二苯基 -5 H,6 H,7 H,8 H- 咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -6- 甲醯胺
Figure 02_image1409
將HATU（1.88 g，4.94 mmol）和二苄基胺（584.1 mg，2.96 mmol）添加到5 H,6 H,7 H,8 H-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲酸鹽酸鹽（500.0 mg，2.47 mmol）和DIPEA（1.28 g，9.87 mmol）在DMF（8.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（1.00 g）。LCMS (ESI): 346.2 [M+H] +。
步驟 -2. 二苄基 ([5 H,6 H,7 H,8 H- 咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -6- 基甲基 ]) 胺
Figure 02_image1411
在0ºC下LiAlH 4（318.6 mg，8.40 mmol）將添加到 N, N-二苄基-5 H,6 H,7 H,8 H-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-甲醯胺（步驟-1，580.0 mg，1.68 mmol）在THF（10.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在80ºC下攪拌30 min。在0ºC下將反應用MeOH淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（24/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（400.0 mg）。LCMS (ESI): 332.2 [M+H] +。
步驟 -3. 1-[5 H,6 H,7 H,8 H- 咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -6- 基 ] 甲胺
Figure 02_image1413
在0ºC下將Pd/C（65.0 mg）添加到二苄基([5 H,6 H,7 H,8 H-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基甲基])胺（步驟-2，250.0 mg，0.75 mmol）在MeOH（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在H 2氣氛下攪拌14 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（120.0 mg）。LCMS (ESI): 152.1 [M+H] +。
步驟 -4. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( (S)-5,6,7,8- 四氫咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -6- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( (R)-5,6,7,8- 四氫咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -6- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1407
將HOBt（108.3 mg，0.80 mmol），EDCI（153.6 mg，0.80 mmol），和1-[5 H,6 H,7 H,8 H-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基]甲胺（步驟-3，90.9 mg，0.60 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，150.0 mg，0.40 mmol）和DIPEA（258.9 mg，2.00 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至40 B，20 min內；220/254 nm），以獲得 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(( (S)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(( (R)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（70 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 356）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.09 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.90 (d, 2H), 4.58 (s, 1H), 4.13 - 4.04 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.67 - 3.57 (m, 1H), 3.40 - 3.25 (m, 2H), 3.00 - 2.63 (m, 3H), 2.46 - 2.42 (m, 1H), 2.24 - 2.15 (m, 1H), 2.09 - 2.00 (m, 1H), 1.97 - 1.53 (m, 3H), 1.46 - 1.15 (m, 2H), 1.15 - 0.78 (m, 2H), 0.78 - 0.42 (m, 2H)。LCMS (ESI): 508 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（70.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH3.MeOH）: EtOH=50 : 50，保持39 min
流速：17 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 356-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（16.3 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為23.19 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.25 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.95 (d, 1H), 6.77 (d, 1H), 4.46 - 4.42 (m, 1H), 4.03 - 3.94 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.57 - 3.46 (m, 1H), 3.22 - 2.99 (m, 2H), 2.86 - 2.54 (m, 3H), 2.38 - 1.97 (m, 2H), 1.95 - 1.84 (m, 1H), 1.78 - 1.74 (m, 1H), 1.58 - 1.44 (m, 2H), 1.24 - 1.18 (m, 2H), 1.06 - 0.69 (m, 2H), 0.65 - 0.57 (m, 2H)。LCMS (ESI): 508.25 [M+H] +。
實例 356-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（12.6 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為32.53 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.24 (d, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 6.94 (s, 1H), 6.76 (s, 1H), 4.7 - 4.43 (m, 1H), 4.03 - 3.94 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.57 - 3.47 (m, 1H), 3.17 - 3.05 (m, 2H), 2.87 - 2.54 (m, 3H), 2.25 - 2.20 (m, 2H), 1.95 - 1.85 (m, 1H), 1.78 - 1.74 (m, 1H), 1.58 - 1.44 (m, 2H), 1.24 - 1.18 (m, 2H), 0.93 - 0.87 (m, 2H), 0.66 - 0.57 (m, 2H)。LCMS (ESI): 508.25 [M+H] +。
實例 357. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( (S)-3-( 三氟甲基 )-5,6- 二氫 -8 H-[1,2,4] 三唑并 [3,4-c][1,4] 㗁 𠯤 -6- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( (R)-3-( 三氟甲基 )-5,6- 二氫 -8 H-[1,2,4] 三唑并 [3,4-c][1,4] 㗁 𠯤 -6- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1416
步驟 -1. 6-(( 二苄基胺基 ) 甲基 ) 𠰌 啉 -3- 酮
Figure 02_image1418
將6-(胺基甲基)𠰌啉-3-酮（1.00 g，7.68 mmol）和苄基溴（2.63 g，15.36 mmol），Cs 2CO 3（6.26 g，19.20 mmol）在MeCN（15.00 mL）中的溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（470.0 mg）。LCMS (ESI): 311.2 [M+H] +。
步驟 -2. 6-(( 二苄基胺基 ) 甲基 ) 𠰌 啉 -3- 硫酮
Figure 02_image1420
將6-[(二苄基胺基)甲基]𠰌啉-3-酮（步驟-1，450.0 mg，1.45 mmol）和勞氏試劑（586.4 mg，1.45 mmol）在甲苯（4.00 mL）中的溶液在110ºC下攪拌5 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（20/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（175.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 327.1。
步驟 -3. N,N- 二苄基 -1-(3-( 三氟甲基 )-5,6- 二氫 -8 H-[1,2,4] 三唑并 [3,4-c][1,4] 㗁 𠯤 -6- 基 ) 甲胺
Figure 02_image1422
將6-((二苄基胺基)甲基)𠰌啉-3-硫酮（步驟-2，75.0 mg，0.23 mmol）和2,2,2-三氟乙酸肼（147.1 mg，1.14 mmol）在二甲苯（1.00 mL）中的溶液在150ºC下攪拌3 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，30/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（50.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 403.2。
步驟 -4. (3-( 三氟甲基 )-5,6- 二氫 -8 H-[1,2,4] 三唑并 [3,4-c][1,4] 㗁 𠯤 -6- 基 ) 甲胺
Figure 02_image1424
將 N,N-二苄基-1-(3-(三氟甲基)-5,6-二氫-8 H-[1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]㗁𠯤-6-基)甲胺（步驟-3，100.0 mg，0.24 mmol）和Pd/C（100.0 mg）在MeOH（3.00 mL）中的溶液在25ºC下在H 2氣氛下攪拌14 h。濾出固體。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（55.0 mg）。LCMS (ESI): 223.1 [M+H] +。
步驟 -5. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( (S)-3-( 三氟甲基 )-5,6- 二氫 -8 H-[1,2,4] 三唑并 [3,4-c][1,4] 㗁 𠯤 -6- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( (R)-3-( 三氟甲基 )-5,6- 二氫 -8 H-[1,2,4] 三唑并 [3,4-c][1,4] 㗁 𠯤 -6- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1416
將EDCI（64.5 mg，0.33 mmol），HOBt（45.5 mg，0.33 mmol），和(3-(三氟甲基)-5,6-二氫-8 H-[1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]㗁𠯤-6-基)甲胺（步驟-4，49.9 mg，0.22 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，84.0 mg，0.22 mmol）和DIPEA（145.0 mg，1.12 mmol）在DMF（1.00 mL）中的溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。
將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至40 B，20 min內；220/254 nm），以獲得 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(( (S)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-8 H-[1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]㗁𠯤-6-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(( (R)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-8 H-[1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]㗁𠯤-6-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（6.2 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 357）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.23 - 13.48 (m, 1H), 8.34 - 8.21 (m, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.35 - 7.27 (m, 1H), 7.04 (s, 1H), 5.25 - 5.13 (m, 1H), 4.94 - 4.83 (m, 1H), 4.55 - 4.49 (m, 1H), 4.30 - 4.20 (m, 1H), 4.04 - 3.90 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.48 - 3.34 (m, 3H), 2.21 - 2.15 (m, 1H), 1.80 - 1.74 (m, 1H), 1.58 - 1.52 (m, 1H), 1.36 - 1.10 (m, 1H), 1.00 - 0.94 (m, 2H), 0.79 - 0.55 (m, 3H)。LCMS (ESI): 579.0 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（240.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/DCM=50 : 50，保持22 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 357-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（84.9 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.78 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.21 - 13.85 (m, 1H), 8.21 (d, 2H), 7.33 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 5.25 - 5.14 (m, 1H), 4.94 - 4.83 (m, 1H), 4.55 - 4.49 (m, 1H), 4.30 - 4.20 (m, 1H), 4.11 - 3.82 (m, 5H), 3.49 - 3.35 (m, 2H), 3.13 (s, 1H), 2.75 (s, 1H), 2.22 - 2.16 (m, 1H), 1.81 - 1.75 (m, 1H), 1.58 - 1.52 (m, 1H), 1.40 - 1.11 (m, 1H), 1.09 - 0.81 (m, 2H), 0.70 - 0.64 (m, 2H)。LCMS (ESI): 579.1 [M+H] +。
實例 357-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（83.8 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為14.26 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.99 (s, 1H), 8.43 - 7.89 (m, 2H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 5.25 - 5.14 (m, 1H), 4.95 - 4.84 (m, 1H), 4.49 - 4.43 (m, 1H), 4.30 - 4.20 (m, 1H), 4.06 - 3.98 (m, 1H), 3.98 - 3.90 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.48 - 3.34 (m, 2H), 3.15 - 3.09 (m, 1H), 2.78 - 2.72 (m, 1H), 2.22 - 2.16 (m, 1H), 1.80 - 1.74 (m, 1H), 1.58 - 1.52 (m, 1H), 1.27 - 1.21 (m, 1H), 1.10 - 0.76 (m, 2H), 0.68 - 0.62 (m, 2H)。LCMS (ESI): 579.1 [M+H] +。
實例 358. (S)-N-((3- 氯吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1426
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(3-氯吡啶-2-基)甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至50 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（69.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.54 - 8.40 (m, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.89 - 7.80 (m, 1H), 7.42 - 7.01 (m, 3H), 4.60 (s, 3H), 3.92 (s, 3H), 3.36 - 3.31 (m, 1H), 3.17 - 2.79 (m, 1H), 2.77 - 2.25 (m, 1H), 2.21 - 1.56 (m, 2H), 1.51 - 1.23 (m, 1H), 1.19 - 0.93 (m, 1H), 0.88 - 0.55 (m, 3H)。LCMS (ESI): 499 [M+H] +。
實例 359. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3- 甲基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1428
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(3-甲基氯吡啶-2-基)甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：10 B至30 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（78.6 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.36 - 8.29 (m, 1H), 8.26 - 8.17 (m, 2H), 7.58 - 7.51 (m, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.23 - 7.15 (m, 1H), 7.01 (d, 1H), 4.53 - 4.21 (m, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.00 - 2.96 (m, 1H), 2.82 - 2.77 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.23 - 2.20 (m, 1H), 1.77 - 1.73 (m, 1H), 1.57 - 1.52 (m, 1H), 1.34 - 1.12 (m, 1H), 1.05 - 0.47 (m, 4H)。LCMS (ESI): 479.4 [M+H] +。
實例 360. (S)-N-( (R)-1-(3- 氯吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ( (S)-1-(3- 氯吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1430
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(3-氯吡啶-2-基)乙胺作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：40 mL/min；梯度：20 B至40 B，20 min內；檢測器，UV 254/220 nm），以獲得 (S)-N-( (R)-1-(3-氯吡啶-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-( (S)-1-(3-氯吡啶-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（157 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 360）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.55 - 8.47 (m, 1H), 8.32 - 8.22 (m, 2H), 7.93 - 7.84 (m, 1H), 7.39 - 7.27 (m, 2H), 7.01 (s, 1H), 5.40 - 5.29 (m, 1H), 4.49 - 4.43 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.82 - 2.76 (m, 2H), 2.15 - 2.09 (m, 1H), 1.77 - 1.71 (m, 1H), 1.54 - 1.48 (m, 1H), 1.36 - 1.27 (m, 3H), 1.26 - 1.20 (m, 1H), 0.97 - 0.91 (m, 2H), 0.66 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 513.3；[M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（157.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IG柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=50 : 50，保持30 min
流速：17 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 360-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（41.7 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為13.32 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.55 - 8.49 (m, 1H), 8.35 - 8.29 (m, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.93 - 7.87 (m, 1H), 7.39 - 7.29 (m, 2H), 7.01 (s, 1H), 5.35 (q, 1H), 4.48 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.28 - 2.78 (m, 2H), 2.27 - 1.94 (m, 1H), 1.93 - 1.66 (m, 1H), 1.56 - 1.52 (m, 1H), 1.36 - 1.30 (m, 3H), 1.20 - 1.15 (m, 1H), 0.97 - 0.92 (m, 2H), 0.66 - 0.62 (m, 2H)。LCMS (ESI): 513.40 [M+H] +。
實例 360-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（54.7 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為21.18 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.55 - 8.49 (m, 1H), 8.35 - 8.29 (m, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.93 - 7.87 (m, 1H), 7.39 - 7.29 (m, 2H), 7.01 (s, 1H), 5.35 (q, 1H), 4.48 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.28 - 2.78 (m, 2H), 2.27 - 1.94 (m, 1H), 1.93 - 1.68 (m, 1H), 1.56 - 1.55 (m, 1H), 1.36 - 1.31 (m, 3H), 1.20 - 1.15 (m, 1H), 0.97 - 0.92 (m, 2H), 0.66 - 0.62 (m, 2H)。LCMS (ESI): 513.35 [M+H] +。
實例 361. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5- 氟 -3- 甲基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1432
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(5-氟-3-甲基吡啶-2-基)甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：30至50 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（66.5 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.99 (d, 1H), 8.45 - 8.05 (m, 3H), 7.57 (dd, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.65 - 4.24 (m, 3H), 3.88 (s, 3H), 2.89 - 2.68 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.26 - 2.11 (m, 1H), 1.90 - 1.68 (m, 1H), 1.68 - 1.37 (m, 1H), 1.37 - 1.09 (m, 2H), 1.08 - 0.78 (m, 2H), 0.78 - 0.38 (m, 2H)。LCMS (ESI): 497.45 [M+H] +。
實例 362. (S)-N-((3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1434
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽作為起始材料。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：40 mL/min；梯度：20 B至50 B，20 min內；檢測器，UV 254/220 nm），以獲得呈固體的標題化合物（44.1 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.57 - 8.51 (m, 1H), 8.40 - 8.20 (m, 2H), 8.12 - 8.04 (m, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.60 - 4.40 (m, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.25 - 2.76 (m, 2H), 2.17 (s, 1H), 1.80 - 1.76 (m, 1H), 1.54 - 1.50 (m, 1H), 1.34 - 1.07 (m, 1H), 0.98 - 0.93 (m, 1H), 0.73 - 0.43 (m, 3H)。LCMS (ESI): 517.35 [M+H] +。
實例 363. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5- 氟 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 - 2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1436
步驟 -1. 5- 氟 - N- 甲氧基 - N- 甲基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲醯胺
Figure 02_image1438
將HATU（109.1 mg，0.29 mmol）和甲氧基(甲基)胺 鹽酸鹽（27.8 mg，0.29 mmol）添加到5-氟-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸（50.0 mg，0.24 mmol）和DIPEA（154.5 mg，1.20 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（3/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（60.0 mg）。LCMS (ESI): 253.06 [M+H] +。
步驟 -2. 5- 氟 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲醛
Figure 02_image1440
在-78ºC下在氮氣氣氛下，將DIBAL-H（0.36 mL，0.36 mmol，1M）添加到5-氟- N-甲氧基- N-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲醯胺（步驟-1，45.0 mg，0.18 mmol）在乾DCM（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在-78ºC下在氮氣氣氛下攪拌1.5 h。在-78ºC下將反應混合物用MeOH淬滅。在減壓下將所得溶液濃縮至約2.00 mL。殘餘物不經進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 194.02 [M+H] +。
步驟 -3. ( E)- N-[[5- 氟 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 基 ] 亞甲基 ] 羥基胺
Figure 02_image1442
將鹽酸羥胺（15.0 mg，0.22 mmol）添加到5-氟-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲醛（步驟-2，35.0 mg，0.18 mmol）在MeOH（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，1/1 v/v）純化。用MeOH收集標題化合物並濃縮至約2 mL。溶液不經進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 209.03 [M+H] +。
步驟 -4. 1-[5- 氟 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 基 ] 甲胺
Figure 02_image1444
將Zn（141.4 mg，2.16 mmol）添加到( E)- N-[[5-氟-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]亞甲基]羥胺在MeOH（步驟-3，2.00 mL）和AcOH（0.20 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，5/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（14.0 mg）。LCMS (ESI): 195.05 [M+H] +。
步驟 -5. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5- 氟 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1436
將HOBt（9.8 mg，0.07 mmol），EDCI（13.9 mg，0.07 mmol），和1-[5-氟-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]甲胺（步驟-4，7.0 mg，0.04 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，15.0 mg，0.04 mmol）和DIPEA（47.0 mg，0.36 mmol）在DMF（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS，30 x 150 mm，5μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：35% B至59% B，8 min內，59% B；波長：254/220 nm；RT1（min）：7.08），以獲得呈固體的標題化合物（3.4 mg）。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.74 - 8.67 (m, 1H), 8.14 (d, 1H),, 8.06 - 7.96 (m, 1H), 7.32 - 7.26 (m, 1H), 7.15 - 7.09 (m, 1H), 4.70 - 4.59 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.99 - 2.93 (m, 1H), 2.63 - 2.23 (m, 1H), 1.96 (s, 1H), 1.85 - 1.70 (m, 1H), 1.65 - 1.18 (m, 3H), 1.11 - 0.97 (m, 1H), 0.99 - 0.88 (m, 1H), 0.81 - 0.67 (m, 2H)。LCMS (ESI): 551.25 [M+H] +。
實例 364. (S)-N-((3- 氯 -5-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1447
步驟 -1. 5- 乙醯基 -3- 氯吡啶 -2- 甲腈
Figure 02_image1449
將Zn(CN) 2 （370.8 mg，3.16 mmol）和Pd(PPh 3) 4（611.1 mg，0.53 mmol）添加到1-(5,6-二氯吡啶-3-基)乙酮（1.00 g，5.29 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在120ºC下在氮氣氣氛下攪拌3 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（4/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（610.0 mg）。LCMS (ESI): 181.6 [M+H] +。
步驟 -2. 3- 氯 -5-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 吡啶 -2- 甲腈
Figure 02_image1451
在-78ºC下在氮氣氣氛下，將MeMgBr（2.50 mL，7.50 mmol，3 M）添加到5-乙醯基-3-氯吡啶-2-甲腈（步驟-1，300.0 mg，1.66 mmol）在THF（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將反應混合物用MeOH淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，2/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（200.0 mg）。LCMS (ESI): 197.6 [M+H] +。
步驟 -3. 2-[6-( 胺基甲基 )-5- 氯吡啶 -3- 基 ] 丙 -2- 醇
Figure 02_image1453
在-78ºC下在氮氣氣氛下，將DIBAL-H（1.90 mL，1.90 mmol）添加到3-氯-5-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-甲腈（步驟-2，110.0 mg，0.56 mmol）在DCM（3.50 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在-78ºC下在氮氣氣氛下攪拌1 h。在-78ºC下藉由添加MeOH將反應混合物淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（25.0 mg）。LCMS (ESI): 201.7 [M+H] +。
步驟 -4. (S)-N-((3- 氯 -5-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1447
將EDCI（28.7 mg，0.15 mmol），HOBt（20.2 mg，0.15 mmol），和2-[6-(胺基甲基)-5-氯吡啶-3-基]丙-2-醇（步驟-3，15.0 mg，0.08 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，30.8 mg，0.08 mmol）和DIPEA（48.3 mg，0.37 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至40 B，20 min內，檢測器，UV 254/220 nm），以獲得呈固體的標題化合物（11.9 mg）。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (s, 1H), 8.55 (d, 1H), 8.31 - 8.21 (m, 2H), 7.87 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (s, 1H), 5.38 - 5.34 (m, 1H), 4.45 - 4.39 (m, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.15 - 2.64 (m, 2H), 2.20 - 2.16 (m, 1H), 1.77 (s, 1H), 1.66 - 1.35 (m, 7H), 1.23 - 1.18 (m, 1H), 0.98 - 0.93 (m, 2H), 0.64 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 557.15 [M+H] +。
實例 365. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4-( 三氟甲基 )-2- 氧雜雙環 [2.1.1] 己烷 -1- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1456
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-[4-(三氟甲基)-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-1-基]甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（1/5 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（90.2 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (s, 1H), 8.24 (d, 1H), 8.05 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 4.62 - 4.24 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.81 - 3.77 (m, 2H), 3.45 - 3.35 (m, 2H), 2.83 - 2.60 (m, 1H), 2.33 - 2.06 (m, 1H), 2.00 - 1.90 (m, 2H), 1.84 - 1.60 (m, 3H), 1.53 - 1.48 (m, 1H), 1.31 - 0.39 (m, 6H)。LCMS (ESI): 538.30 [M+H] +。
實例 366. (S)-N-( (S)-3,4- 二氫 -2 H- 哌喃并 [3,2-b] 吡啶 -4- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ( (R)-3,4- 二氫 -2 H- 哌喃并 [3,2-b] 吡啶 -4- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1458
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用2 H,3 H,4 H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-胺作為起始材料。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-N-( (S)-3,4-二氫-2 H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-( (R)-3,4-二氫-2 H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（100.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 366）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.36 - 8.21 (m, 2H), 8.16 - 8.09 (m, 1H), 7.33 - 7.28 (m, 1H), 7.24 - 7.18 (m, 2H), 7.03 (s, 1H), 4.93 - 4.86 (m, 1H), 4.53 - 4.49 (m, 1H), 4.29 - 4.22 (m, 1H), 4.14 - 4.09 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 2.27 - 2.05 (m, 2H), 1.94 - 1.89 (m, 2H), 1.79 - 1.74 (m, 1H), 1.58 - 1.54 (m, 1H), 1.36 - 1.08 (m, 1H), 1.00 - 0.95 (m, 2H), 0.65 - 0.45 (m, 3H)。LCMS (ESI): 507.45 [M+H] +。
使用手性製備型SFC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（100.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IH柱
柱尺寸：3 x 25 cm，5 µm
流動相A：CO 2；流動相B：MeOH（0.1% 2 M NH 3-MeOH）
流速：80 mL/min
梯度：等度，40% B
檢測：254 nm
實例 366-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（43.1 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為2.87 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 8.35 - 8.24 (m, 2H), 8.19 - 8.11 (m, 1H), 7.37 - 7.19 (m, 3H), 7.04 (s, 1H), 4.96 - 4.89 (m, 1H), 4.62 - 4.40 (m, 1H), 4.33 - 4.23 (m, 1H), 4.20 - 4.07 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.15 - 2.05 (m, 2H), 1.98 - 1.87 (m, 1H), 1.83 - 1.60 (m, 2H), 1.38 - 1.11 (m, 2H), 0.99 - 0.93 (m, 2H), 0.65 - 0.59 (m, 3H)。LCMS (ESI): 507.45 [M+H] +。
實例 366-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（42.2 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為4.32 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.13 - 13.84 (m, 1H), 8.40 - 8.22 (m, 2H), 8.19 - 8.11 (m, 1H), 7.36 - 7.28 (m, 1H), 7.26 - 7.19 (m, 2H), 7.09 - 7.03 (m, 1H), 4.97 - 4.89 (m, 1H), 4.54 - 4.48 (m, 1H), 4.33 - 4.23 (m, 1H), 4.21 - 4.08 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.30 - 2.06 (m, 2H), 2.03 - 1.89 (m, 1H), 1.82 - 1.76 (m, 1H), 1.60 - 1.54 (m, 1H), 1.40 - 1.12 (m, 2H), 1.04 - 0.81 (m, 2H), 0.69 - 0.46 (m, 3H)。LCMS (ESI): 507.45 [M+H] +。
實例 367. (2 S,4 R)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2-( 三氟甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺和 (2 S,4 S)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2-( 三氟甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1460
步驟 -1. (4 S)-5,5,5- 三氟 -2- 亞甲基 -4-[[ (S)-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯基 ] 胺基 ] 戊酸苄酯
Figure 02_image1462
將Zn（0.61 g，9.39 mmol）添加到 (S)-2-甲基- N-[(1 E)-2,2,2-三氟亞乙基]丙烷-2-亞磺醯胺（1.30 g，6.26 mmol）和2-(溴甲基)丙-2-烯酸苄酯（來自中間體532的合成步驟-2，1.60 g，6.26 mmol）在DMF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在0ºC下在氮氣氣氛下攪拌4 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（7/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（2.00 g）。LCMS (ESI): 378 [M+H] +。
步驟 -2. (4 S)-5,5,5- 三氟 -4-(2- 甲基丙烷 -2- 磺醯胺基 ) 戊酸酯
Figure 02_image1464
在0ºC下將mCPBA（1.01 g，5.83 mmol）添加到(4 S)-5,5,5-三氟-2-亞甲基-4-[[ (S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯基]胺基]戊酸苄酯（步驟-1，2.00 g，5.30 mmol）在DCM（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（7/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.60 g）。LCMS (ESI): 394 [M+H] +。
步驟 -3. (4 S)-5,5,5- 三氟 -2- 亞甲基 -4-[ N-( 丙 -2- 烯 -1- 基 )2- 甲基丙烷 -2- 磺醯胺基 ] 戊酸酯
Figure 02_image1466
在0ºC下將Cs 2CO 3（4.10 g，12.71 mmol）添加到(4 S)-5,5,5-三氟-2-亞甲基-4-(2-甲基丙烷-2-磺醯胺基)戊酸苄酯（步驟-2，1.00 g，2.54 mmol）和烯丙基溴（615.0 mg，5.08 mmol）在DMF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（8/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（950.0 mg）。LCMS (ESI): 434 [M+H] +。
步驟 -4. (2 S)-1-(2- 甲基丙烷 -2- 磺醯基 )-2-( 三氟甲基 )-3,6- 二氫 -2 H- 吡啶 -4- 甲酸苄酯
Figure 02_image1468
將格魯布斯催化劑（第2代，98.0 mg，0.12 mmol）添加到(4 S)-5,5,5-三氟-2-亞甲基-4-[ N-(丙-2-烯-1-基)2-甲基丙烷-2-磺醯胺基]戊酸苄酯（步驟-3，500.0 mg，1.15 mmol）在DCM（180.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（7/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（400.0 mg）。LCMS (ESI): 406 [M+H] +。
步驟 -5. (2 S)-1-(2- 甲基丙烷 -2- 磺醯基 )-2-( 三氟甲基 ) 哌啶 -4- 甲酸
Figure 02_image1470
將Pd(OH) 2（200.0 mg，1.42 mmol）添加到(2 S)-1-(2-甲基丙烷-2-磺醯基)-2-(三氟甲基)-3,6-二氫-2 H-吡啶-4-甲酸苄酯（步驟-4，400.0 mg，0.99 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下在H 2氣氛下攪拌2 h。濾出固體並用MeOH洗滌。將所得濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（300.0 mg）。LCMS (ESI): 318 [M+H] +。
步驟 -6. (2 S)-1-(2- 甲基丙烷 -2- 磺醯基 )- N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-2-( 三氟甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image1472
將HOBt（109.0 mg，0.80 mmol），EDCI（154.0 mg，0.80 mmol），和(1r,4r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（98.0 mg，0.54 mmol）添加到(2S)-1-(2-甲基丙烷-2-磺醯基)-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲酸（步驟-5，170.0 mg，0.54 mmol）和DIPEA（346.0 mg，2.68 mmol）在DMF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（20/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（200.0 mg）。LCMS (ESI): 483 [M+H] +。
步驟 -7. (2 S)- N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-2-( 三氟甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image1474
將TFA（187.0 mg，1.24 mmol）添加到(2 S)-1-(2-甲基丙烷-2-磺醯基)- N-[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺（步驟-6，200.0 mg，0.42 mmol）在DCM（3.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（120.0 mg）。LCMS (ESI): 363 [M+H] +。
步驟 -8. (2 S)-1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-2-( 三氟甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image1476
將2-氯-1-甲基吡啶-1-碘化鎓（888.0 mg，3.48 mmol），TEA（88.0 mg，0.87 mmol），和(2 S)- N-[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺（步驟-7，90.0 mg，0.25 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-甲酸（中間體506，91.0 mg，0.25 mmol）在DCM（3.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（120.0 mg）。LCMS (ESI): 712 [M+H] +。
步驟 -9. (2 S,4 R)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2-( 三氟甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺和 (2 S,4 S)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2-( 三氟甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image1460
將TFA（2 mL）添加到(2 S)-1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]- N-[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺（步驟-8，120.0 mg，0.17 mmol）在DCM（2.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得(2 S,4 R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺和(2 S,4 S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺（50.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 367）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 8.29 (d, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.35 (d, 1H), 7.16 (d, 1H), 6.28 - 5.45 (m, 2H), 4.58 (d, 1H), 3.91 - 3.85 (m, 4H), 2.84 - 2.78 (m, 2H), 2.01 - 1.95 (m, 2H), 1.85 - 1.71 (m, 5H), 1.60 - 1.50 (m, 5H)。LCMS (ESI): 582.4 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（110.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=80 : 20，保持12 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 367-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（8.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.70 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.20 - 8.14 (m, 1H), 7.25 - 7.19 (m, 2H), 5.34 - 5.28 (m, 1H), 5.00 - 4.86 (m, 1H), 4.02 - 3.94 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.70 - 3.30 (m, 1H), 2.62 - 2.56 (m, 1H), 2.33 - 2.05 (m, 3H), 2.00 - 1.80 (m, 5H), 1.77 - 1.60 (m, 4H)。LCMS (ESI): 582.05 [M+H] +。
實例 367-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（33.7 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.23 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.16 (s, 1H), 7.27 - 7.14 (m, 2H), 5.63 - 5.51 (m, 1H), 4.79 - 4.68 (m, 1H), 4.01 - 3.92 (m, 4H), 3.51 - 3.45 (m, 1H), 3.11 - 2.89 (m, 1H), 2.30 - 2.03 (m, 3H), 2.02 - 1.80 (m, 5H), 1.79 - 1.57 (m, 4H)。LCMS (ESI): 582.00 [M+H] +。
實例 368. (2 R,4 R)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2-( 三氟甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺和 (2 R,4 S)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2-( 三氟甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1479
使用與對於實例367的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用( R)-2-甲基- N-[(1 E)-2,2,2-三氟亞乙基]丙烷-2-亞磺醯胺作為步驟-1中的起始材料。將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得(2 R,4 R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺和(2 R,4 S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺（45.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 368）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.56 - 13.92 (m, 1H), 8.42 - 8.14 (m, 1H), 8.09 - 7.79 (m, 1H), 7.53 - 6.95 (m, 2H), 5.69 (s, 1H), 5.52 - 5.28 (m, 1H), 4.81 - 4.37 (m, 1H), 3.95 - 3.65 (m, 4H), 2.97 - 2.70 (m, 2H), 2.04 - 1.63 (m, 7H), 1.59 - 1.39 (m, 5H)。LCMS (ESI): 582.4 [M+H] +。
步驟 -1. (2 R)-1- 苄基 - N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-2-( 三氟甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image1481
將苄基溴（123.0 mg，0.72 mmol）添加到(2 R)- N-[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺（來自實例367的合成步驟-7，除了使用 (R)-2-甲基- N-[(1 E)-2,2,2-三氟亞乙基]丙烷-2-亞磺醯胺作為步驟-1中的起始材料，200.0 mg，0.55 mmol）和K 2CO 3（153.0 mg，1.10 mmol）在MeCN（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在60ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（3/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（200.0 mg）。LCMS (ESI): 453 [M+H] +。
步驟 -2. (2 R,4 R)-1- 苄基 - N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-2-( 三氟甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺和 (2 R,4 S)-1- 苄基 - N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-2-( 三氟甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image1483
藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，3/1 v/v）分離(2 R,4 R)-1-苄基- N-[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺和(2 R,4 S)-1-苄基- N-[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺的非鏡像異構物混合物。
獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（50.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的Rf值為0.5。
LCMS (ESI): 453 [M+H] +。
獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（95.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的Rf值為0.4。
LCMS (ESI): 453 [M+H] +。
步驟 -3. (2 R,4 R)- N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-2-( 三氟甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺和 (2 R,4 S)- N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-2-( 三氟甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image1485
步驟 -3a.將Pd/C（25.0 mg，10% Pd）添加到來自步驟-2的單一非鏡像異構物（第一洗脫非鏡像異構物，50.0 mg，0.11 mmol）在MeOH（2.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下在H 2氣氛下攪拌2 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得標題化合物（35.0 mg），其為固體單一非鏡像異構物。LCMS (ESI): 363 [M+H] +。
步驟 -3b.將Pd/C（46.0 mg，10% Pd）添加到來自步驟-2的單一非鏡像異構物（第二洗脫非鏡像異構物，95.0 mg，0.21 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下在H 2氣氛下攪拌2 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得標題化合物（65.0 mg），其為固體單一非鏡像異構物。LCMS (ESI): 363 [M+H] +。
步驟 -4. (2 R,4 R)-1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-2-( 三氟甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺和 (2 R,4 S)-1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-2-( 三氟甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image1487
步驟 -4a.將2-氯-1-甲基吡啶-1-碘化鎓（123.0 mg，0.48 mmol），TEA（34.0 mg，0.34 mmol），和單一非鏡像異構物胺（步驟-3a，35.0 mg，0.10 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-甲酸（中間體506，36.0 mg，0.10 mmol）在DCM（3.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得標題化合物（50.0 mg），其為固體單一非鏡像異構物。LCMS (ESI): 712 [M+H] +。
步驟 -4b.將2-氯-1-甲基吡啶-1-碘化鎓（229.0 mg，0.90 mmol），TEA（64.0 mg，0.63 mmol），和單一非鏡像異構物胺（步驟-3b，65.0 mg，0.18 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-甲酸（中間體506，66.0 mg，0.18 mmol）在DCM（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得標題化合物（90.0 mg），其為固體單一非鏡像異構物。LCMS (ESI): 712 [M+H] +。
步驟 -5. (2 R,4 R)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2-( 三氟甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺和 (2 R,4 S)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2-( 三氟甲基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image1479
將TFA（2.00 mL）添加到單一非鏡像異構物（步驟-4a，50.0 mg，0.07 mmol）在DCM（2.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得標題化合物（27.4 mg），其為固體單一非鏡像異構物（ 實例 368-A）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.17 (s, 1H), 7.25 - 7.19 (m, 2H), 5.34 - 5.28 (m, 1H), 5.07 - 4.87 (m, 1H), 4.01 - 3.92 (m, 4H), 3.71 - 3.46 (m, 1H), 2.61 - 2.55 (m, 1H), 2.19 - 2.13 (m, 3H), 1.99 - 1.83 (m, 5H), 1.76 - 1.60 (m, 4H)。LCMS (ESI): 582.10 [M+H] +。
將TFA（3.00 mL）添加到單一非鏡像異構物（步驟-4b，90.0 mg，0.13 mmol）在DCM（3.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得標題化合物（39.3 mg），其為固體單一非鏡像異構物（ 實例 368-B）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.16 (s, 1H), 7.34 - 7.12 (m, 2H), 5.60 - 5.54 (m, 1H), 4.78 - 4.68 (m, 1H), 4.01 - 3.92 (m, 4H), 3.56 - 3.41 (m, 1H), 3.01 - 2.91 (m, 1H), 2.28 - 2.02 (m, 2H), 2.01 - 1.83 (m, 5H), 1.80 - 1.54 (m, 5H)。LCMS (ESI): 582.10 [M+H] +。
實例 369. (R)-N-((1 r,4 R)-4-(1,1- 二氟 -2- 甲氧基乙基 )-4- 羥基環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (R)-N- ((1 s,4 S)-4-(1,1- 二氟 -2- 甲氧基乙基 )-4- 羥基環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1490
步驟 -1. 2,2- 二氟 -2-(8-((4- 甲氧基苄基 ) 氧基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 ) 乙酸乙酯
Figure 02_image1492
在0ºC下將NaH（522.4 mg，13.06 mmol，在礦物油中的60%分散體）逐滴添加到2,2-二氟-2-(8-羥基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)乙酸乙酯（來自中間體537的合成步驟-1，2.44 g，8.71 mmol）在DMF（21.70 mL）中的溶液中。在0ºC下攪拌5 min，將1-(氯甲基)-4-甲氧基苯（1.64 g，10.45 mmol）緩慢添加到反應混合物中並使其達到22ºC。將反應混合物在22ºC下攪拌16 h。將反應混合物用水稀釋並用Et 2O萃取3次。將合併的有機層用水洗滌兩次，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用0%至35%環己烷/EtOAc洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（2.95 g）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.30 - 7.20 (m, 2H), 6.91 - 6.81 (m, 2H), 4.55 (s, 2H), 4.28 (q, 2H), 3.96 -3.92 (m, 4H), 3.79 (s, 3H), 2.21 - 2.10 (m, 2H), 1.89 (dtd, 4H), 1.73 - 1.62 (m, 2H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -111.01。
步驟 -2. 2,2- 二氟 -2-(8-((4- 甲氧基苄基 ) 氧基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 ) 乙烷 -1- 醇
Figure 02_image1494
在0ºC下將LiAlH 4（3.35 mL，8.03 mmol，在THF中2.4 M）緩慢添加到2,2-二氟-2-(8-((4-甲氧基苄基)氧基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)乙酸乙酯（步驟-1，2.68 g，6.69 mmol）在無水THF（33.40 mL）中的溶液中。將反應在22ºC下攪拌2 h。將所得混合物用Et 2O稀釋並冷卻至0ºC，並且然後緩慢添加水，隨後添加15% NaOH水溶液和水。將所得混合物升溫至22ºC並攪拌15 min。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用0%至60%環己烷/EtOAc洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（2.35 g）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.29 - 7.21 (m, 2H), 6.88 (d, 2H), 4.53 (s, 2H), 4.02 - 3.89 (m, 6H), 3.80 (s, 3H), 2.27 (s, 1H), 2.12 - 2.02 (m, 2H), 2.00 - 1.80 (m, 4H), 1.73 - 1.62 (m, 2H)。
步驟 -3. 8-(1,1- 二氟 -2- 甲氧基乙基 )-8-((4- 甲氧基苄基 ) 氧基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷
Figure 02_image1496
在0ºC下將NaH（50.2 mg，1.26 mmol，在礦物油中60%）添加到2,2-二氟-2-(8-((4-甲氧基苄基)氧基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)乙烷-1-醇（步驟-2，300.0 mg，0.84 mmol）在DMF（2.80 mL）中的溶液中。15 min後，添加MeI（237.6 mg，1.67 mmol）並將所得混合物在22º下攪拌16 h。將反應混合物用水稀釋並用Et 2O萃取。將合併的有機物用水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用0%至30%環己烷/EtOA洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（281.3 mg，0.76 mmol）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.32 - 7.26 (m, 2H), 6.90 (d, 2H), 4.53 (s, 2H), 3.99 - 3.96 (m, 4H), 3.87 - 3.75 (m, 5H), 3.49 (s, 3H), 2.09 (d, 2H), 1.91 (dtd, 4H), 1.69 (d, 2H)。
步驟 -4. 4-(1,1- 二氟 -2- 甲氧基乙基 )-4- 羥基環己烷 -1- 酮
Figure 02_image1498
將TFA（1.08 mL，14.02 mmol）添加到8-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-8-((4-甲氧基苄基)氧基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷（步驟-3，261.0 mg，0.70 mmol）和1,2-二甲氧基苯（96.8 mg，0.70 mmol）在DCM（2.33 mL）中的溶液中。將反應混合物在22ºC下攪拌16 h。將反應混合物用DCM稀釋並倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中。將各層分離，並將水層進一步用DCM萃取。將合併的有機物經硫酸鈉乾燥並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用0%至35%環己烷/EtOAc洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（134.4 mg，0.65 mmol）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 3.84 (t, 2H), 3.49 (s, 3H), 3.02 (s, 1H), 2.75 (td, 2H), 2.32 (ddt, 2H), 2.20 - 1.96 (m, 4H)。
步驟 -5. 4-(1,1- 二氟 -2- 甲氧基乙基 )-4- 羥基環己烷 -1- 酮肟
Figure 02_image1500
將鹽酸羥胺（45.9 mg，0.66 mmol），乙酸鈉（59.1 mg，0.72 mmol）在MeOH（3.00 mL）中的溶液在22ºC下攪拌30 min。然後將4-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-4-羥基環己烷-1-酮（步驟-4，125.0 mg，0.60 mmol）在MeOH（1.00 mL）中的溶液添加反應混到合物中。將反應混合物在60ºC下攪拌16 h。然後將反應混合物冷卻至22ºC並在減壓下除去MeOH。將殘餘物用水和EtOAc稀釋。將水溶液進一步用EtOAc萃取。將合併的有機物經無水硫酸鈉乾燥並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用0%至100% EtOAc/環己烷洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（129.1 mg，0.58 mmol）。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.81 (t, 2H), 3.48 (s, 3H), 3.31 - 3.21 (m, 1H), 2.56 (td, 1H), 2.42 - 2.32 (m, 1H), 2.20 (td, 1H), 1.97 (dtt, 2H), 1.80 (dtd, 2H)。
步驟 -6. (4-(1,1- 二氟 -2- 甲氧基乙基 )-4- 羥基環己基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1502
在-78ºC下將NaBH 4（168.1 mg，4.44 mmol）添加到4-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-4-羥基環己烷-1-酮肟（步驟-5，124.0 mg，0.56 mmol）和六水合氯化鎳(II)（171.6 mg，0.72 mmol）在MeOH（11.10 mL）中的溶液中。使所得混合物升溫至0ºC並攪拌4 h。然後添加Boc 2O（181.9 mg，0.83 mmol）並將反應混合物升溫至22ºC並攪拌16 h。在0ºC下將反應混合物用鹽水淬滅。在減壓下除去揮發物 。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用0%至60% EtOAc/環己烷洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（154.5 mg，0.50 mmol）。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.71 - 4.28 (m, 1H), 3.87 - 3.72 (m, 2H), 3.51 - 3.33 (m, 4H), 1.99 - 1.49 (m, 9H), 1.48 - 1.39 (m, 9H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO) δ -119.65, -119.76。
步驟 -7. 4- 胺基 -1-(1,1- 二氟 -2- 甲氧基乙基 ) 環己烷 -1- 醇
Figure 02_image1504
將TFA（2.00 mL）添加到 N-[4-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-4-羥基環己基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-6，90.0 mg，0.29 mmol）在DCM（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在22º下攪拌30 min。將溶液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（60.0 mg）。LCMS (ESI): 210.1 [M+H] +。
步驟 -8. (R)-N-((1r,4R)-4-(1,1- 二氟 -2- 甲氧基乙基 )-4- 羥基環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (R)-N- ((1s,4S)-4-(1,1- 二氟 -2- 甲氧基乙基 )-4- 羥基環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1490
將HOBt（58.5 mg，0.43 mmol），EDCI（83.0 mg，0.43 mmol），和4-胺基-1-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)環己烷-1-醇（60.4 mg，0.29 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，108.0 mg，0.29 mmol）和DIPEA（223.7 mg，1.73 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( R)-N-((1 r,4 R)-4-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (R)-N-((1 s,4 S)-4-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（108 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 566.3 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（108.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: EtOH=50 : 50，保持13 min
流速：16 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 369-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（16.2 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.86 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.19 - 13.80 (m, 1H), 8.33 - 8.21 (m, 1H), 7.82 - 7.66 (m, 1H), 7.35 - 7.26 (m, 1H), 7.02 (s, 1H), 5.09 (s, 1H), 4.91 - 4.29 (m, 1H), 3.99 - 3.81 (m, 3H), 3.80 - 3.68 (m, 3H), 3.33 (s, 3H), 2.93 - 2.62 (m, 1H), 2.38 - 2.10 (m, 1H), 1.99 - 1.60 (m, 5H), 1.60 - 1.31 (m, 5H), 1.32 - 1.04 (m, 2H), 1.01 - 0.91 (m, 1H), 0.90 - 0.42 (m, 3H)。LCMS (ESI): 566 [M+H] +。
實例 369-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（38.6 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.12 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 7.72 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (s, 1H), 5.13 (s, 1H), 4.67 - 4.08 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.79 - 3.64 (m, 2H), 3.60 - 3.37 (m, 1H), 3.29 (s, 3H), 2.67 - 2.62 (m, 1H), 2.36 - 2.04 (m, 1H), 1.81 - 1.52 (m, 5H), 1.51 - 1.32 (m, 5H), 1.32 - 0.69 (m, 4H), 0.69 - 0.50 (m, 2H)。LCMS (ESI): 566 [M+H] +。
實例 370. (R)-N-((5 S,8 s)-4,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (R)- N-((5 R,8 r)-4,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1506
步驟 -1. 4,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 胺
Figure 02_image1508
TFA（3.00 mL）將添加到 N-[4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基]胺基甲酸三級丁酯（中間體540，180.0 mg，0.62 mmol）在DCM（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min。將溶液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（118.0 mg）。LCMS (ESI): 192.1 [M+H] +。
步驟 -2. (R)-N-((5 S,8 s)-4,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (R)-N -((5 R,8 r)-4,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1506
將HOBt（108.3 mg，0.80 mmol），EDCI（153.6 mg，0.80 mmol），和4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-胺（112.4 mg，0.59 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，200.0 mg，0.53 mmol）和DIPEA（414.3 mg，3.20 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( R)-N-((5 S,8 s)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (R)-N-((5 R,8 r)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（190.0 mg），其為非鏡像異構物的油狀混合物。LCMS (ESI): 548.2 [M+H] +。
使用手性製備型SFC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（190.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：3 x 25 cm，5 µm
流動相A：CO 2；流動相B：MeOH（0.1% 2M NH3-MeOH）
流速：80 mL/min
梯度：等度，50% B
檢測：220 nm
實例 370-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（44.5 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為2.61 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.12 - 13.71 (m, 1H), 8.32 - 8.21 (m, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.34 - 7.27 (m, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.61 - 4.44 (m, 1H), 4.04 - 3.64 (m, 6H), 3.30 (s, 1H), 2.85 - 2.61 (m, 1H), 2.46 - 2.29 (m, 2H), 2.26 - 2.03 (m, 1H), 1.85 - 1.57 (m, 5H), 1.56 - 1.33 (m, 5H), 1.33 - 0.74 (m, 3H), 0.73 - 0.45 (m, 2H)。LCMS (ESI): 548.55 [M+H] +。
實例 370-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（37.7 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為3.17 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.19 - 13.76 (m, 1H), 8.35 - 8.18 (m, 1H), 7.73 (d, 1H), 7.34 - 7.26 (m, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.50 (s, 1H), 3.99 - 3.71 (m, 5H), 3.50 (s, 1H), 3.29 (s, 1H), 2.70 - 2.63 (m, 1H), 2.46 - 2.28 (m, 2H), 2.24 - 2.03 (m, 1H), 1.85 - 1.60 (m, 5H), 1.59 - 1.30 (m, 5H), 1.29 - 0.75 (m, 3H), 0.72 - 0.46 (m, 2H)。LCMS (ESI): 548.55 [M+H] +。
實例 371. (S)-N-((5,6- 二氫 -8 H- 咪唑并 [2,1-c][1,4] 㗁 𠯤 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1510
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-[5H,6H,8 H-咪唑并[2,1-c][1,4]㗁𠯤-2-基]甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：15 B至40 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（10.7 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.00 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.90 (s, 1H), 4.70 - 4.64 (m, 2H), 4.49 - 4.43 (m, 1H), 4.13 - 4.05 (m, 2H), 3.99 - 3.92 (m, 4H), 3.88 (s, 3H), 3.27 - 2.90 (m, 1H), 2.77 - 2.70 (m, 1H), 2.22 - 2.16 (m, 1H), 1.78 - 1.47 (m, 2H), 1.26 - 1.20 (m, 1H), 0.99 - 0.93 (m, 2H), 0.66 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 510.5 [M+H] +。
實例 372. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(((1 R,3 S)-1- 亞胺基 -2,2- 二甲基 -1- 氧四氫 -1 H-1λ 6- 噻吩 -3- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(((1 S,3 S)-1- 亞胺基 -2,2- 二甲基 -1- 氧四氫 -1 H-1λ 6- 噻吩 -3- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(((1 S,3 R)-1- 亞胺基 -2,2- 二甲基 -1- 氧四氫 -1 H-1λ 6- 噻吩 -3- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(((1 R,3 R)-1- 亞胺基 -2,2- 二甲基 -1- 氧四氫 -1 H-1λ6- 噻吩 -3- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1512
步驟 -1. 3-( 胺基甲基 )-1- 亞胺基 -2,2- 二甲基四氫 -1 H-1λ 6- 噻吩 1- 氧化物
Figure 02_image1514
在0ºC下將TFA（1.50 mL）添加到((1-亞胺基-2,2-二甲基-1-氧四氫-1 H-1λ 6-噻吩-3-基)甲基)胺基甲酸三級丁酯（150.0 mg，0.54 mmol，CAS#：2243512-11-8，Enamine公司）在DCM（1.50 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈固體的標題化合物（80.0 mg）。LCMS (ESI): 177.10 [M+H] +。
步驟 -2. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(((1 R,3 S)-1- 亞胺基 -2,2- 二甲基 -1- 氧四氫 -1 H-1λ 6- 噻吩 -3- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(((1 S,3 S)-1- 亞胺基 -2,2- 二甲基 -1- 氧四氫 -1 H-1λ 6- 噻吩 -3- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(((1 S,3 R)-1- 亞胺基 -2,2- 二甲基 -1- 氧四氫 -1 H-1λ 6- 噻吩 -3- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(((1 R,3 R)-1- 亞胺基 -2,2- 二甲基 -1- 氧四氫 -1 H-1λ 6- 噻吩 -3- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1512
將HATU（412.7 mg，1.09 mmol）和3-(胺基甲基)-1-亞胺基-2,2-二甲基四氫-1 H-1λ 6-噻吩 1-氧化物（步驟-1，95.7 mg，0.54 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，203.6 mg，0.54 mmol）和DIPEA（0.70 mL，5.43 mmol）在DMF（6.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（用DCM/MeOH（18/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(((1 R,3 S)-1-亞胺基-2,2-二甲基-1-氧四氫-1 H-1λ 6-噻吩-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺,和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(((1 S,3 S)-1-亞胺基-2,2-二甲基-1-氧四氫-1 H-1λ 6-噻吩-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺,和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(((1 S,3 R)-1-亞胺基-2,2-二甲基-1-氧四氫-1 H-1λ 6-噻吩-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺,和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(((1 R,3 R)-1-亞胺基-2,2-二甲基-1-氧四氫-1 H-1λ 6-噻吩-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，其為兩部分，每個部分含有兩種非鏡像異構物。
實例 372-A.獲得第一洗脫峰（120.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。
第一洗脫峰的Rf值為0.5。
第一洗脫峰進一步藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XBridge製備型OBD C18柱，30 x 150 mm，5μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：19% B至49% B，7 min內；波長：254 nm；RT1（min）：6.5），以獲得標題化合物（100.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.96 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 4.47 - 4.41 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.49 - 3.43 (m, 1H), 3.24 - 2.90 (m, 5H), 2.69 - 2.63 (m, 1H), 2.23 - 1.97 (m, 2H), 1.83 - 1.42 (m, 3H), 1.32 - 1.03 (m, 7H), 0.77 - 0.94 (m, 2H), 0.66 - 0.50 (m, 2H)。LCMS (ESI): 533.4 [M+H] +。
實例 372-B.獲得第二洗脫峰（90.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。
第二洗脫峰的Rf值為0.3。
第二洗脫峰進一步藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS柱，30 x 150 mm，5 μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：16% B至35% B，8 min內，35% B；波長：254/220 nm；RT1（min）：7.8），以獲得標題化合物（70.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 4.47 - 4.41 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.67 - 3.61 (m, 1H), 3.30 - 2.82 (m, 5H), 2.70 - 2.64 (m, 1H), 2.34 - 1.94 (m, 3H), 1.84 - 1.48 (m, 3H), 1.22 - 1.06 (m, 7H), 0.97 - 0.91 (m, 1H), 0.66 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 533.4 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC進一步純化第一洗脫峰（ 實例 372-A，100.0 mg），以分離兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/DCM=30 : 70，保持18 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 372-C.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（31.9 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為11.53 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (d, 1H), 8.26 (d, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.65 - 4.34 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.24 - 2.83 (m, 5H), 2.76 - 2.55 (m, 2H), 2.29 - 1.89 (m, 3H), 1.85 - 1.37 (m, 3H), 1.33 - 1.02 (m, 8H), 0.76 - 0.39 (m, 2H)。LCMS (ESI): 533.5 [M+H] +。
實例 372-D.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（32.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為15.64 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.06 - 14.01 (m, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.53 - 4.48 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.30 - 2.88 (m, 6H), 2.75 - 2.55 (m, 1H), 2.25 - 1.92 (m, 3H), 1.84 - 1.49 (m, 3H), 1.30 - 1.07 (m, 8H), 0.73 - 0.44 (m, 2H)。LCMS (ESI): 533.5 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC進一步純化第二洗脫峰（ 實例 372-B，70.0 mg），以分離兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/DCM=30 : 70，保持23 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 372-E.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（22.5 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.15 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.24 - 13.51 (m, 1H), 8.45 - 8.11 (m, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.66 - 4.35 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.69 - 3.57 (m, 1H), 3.27 - 2.78 (m, 5H), 2.55 - 2.70 (m, 1H), 2.28 - 1.89 (m, 2H), 1.83 - 1.38 (m, 3H), 1.33 - 0.78 (m, 9H), 0.73 - 0.44 (m, 2H)。LCMS (ESI): 533.5 [M+H] +。
實例 372-F.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（23.5 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為12.54 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.99 (s, 1H), 8.45 - 8.09 (m, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.39 - 7.15 (m, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.64 - 4.24 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.73 - 3.57 (m, 1H), 3.28 - 2.79 (m, 5H), 2.75 - 2.54 (m, 1H), 2.39 - 1.92 (m, 3H), 1.88 - 1.36 (m, 2H), 1.34 - 0.78 (m, 9H), 0.76 - 0.24 (m, 2H)。LCMS (ESI): 533.5 [M+H] +。
實例 373. (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 全氟乙基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 s,4 R)-4- 羥基 -4-( 全氟乙基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1517
步驟 -1. 8-( 全氟乙基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 醇
Figure 02_image1519
將1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-酮（1.00 g，6.40 mmol）溶解在THF（23.70 mL）中，然後在0ºC下依次添加三甲基(全氟乙基)矽烷（2.51 g，13.07 mmol）和氟化四丁基銨（13.32 mL，1 M，13.32 mmol），並且然後將所得混合物在22ºC下攪拌。在22ºC下藉由用NH 4Cl（飽和水溶液）攪拌10 min將反應混合物淬滅。然後將反應混合物在真空下濃縮，重新溶解在DCM中，並用水洗滌。將各層分離，並將水層進一步用DCM萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並在真空下濃縮。將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（用25%至45% EtOAc/環己烷洗脫）純化，以獲得標題化合物（1.26 g）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.02 - 3.91 (m, 4H), 2.06 - 1.83 (m, 6H), 1.75 (s, 1H), 1.72 - 1.64 (m, 2H)。
步驟 -2. 4- 羥基 -4-( 全氟乙基 ) 環己烷 -1- 酮
Figure 02_image1521
將TFA（4.60 mL，59.74 mmol）添加到8-(全氟乙基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-醇（步驟-1，1.10 g，3.98 mmol）在DCM（19.91 mL）中的溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌16 h。將反應混合物在真空下濃縮，重新溶解在DCM中，用NaHCO 3（飽和水溶液）、鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾，並在真空下濃縮。所將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（用0%至100% EtOA/DCM洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（240.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 2.74 (td, 2H), 2.44 - 2.35 (m, 2H), 2.29 - 2.19 (m, 2H), 2.13 (td, 2H)。
步驟 -3. 4- 羥基 -4-( 全氟乙基 ) 環己烷 -1- 酮肟
Figure 02_image1523
將鹽酸羥胺（79.0 mg，1.14 mmol），乙酸鈉（102.0 mg，1.24 mmol），和MeOH（1.30 mL）的溶液攪拌30 min。然後添加4-羥基-4-(全氟乙基)環己烷-1-酮（步驟-2，240.0 mg，1.03 mmol），作為在MeOH（1.3 mL）中的溶液。然後將反應混合物在60ºC下回流24 h。然後將反應混合物冷卻並用EtOAc和水稀釋。將有機層用水和鹽水洗滌。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用25%至45% EtOAc/環己烷洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（170.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 3.37 - 3.27 (m, 1H), 2.53 (td, 1H), 2.44 - 2.34 (m, 1H), 2.16 (td, 1H), 2.11 - 2.01 (m, 2H), 1.96 - 1.79 (m, 3H)。
步驟 -4. (4- 羥基 -4-( 全氟乙基 ) 環己基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1525
在-78ºC下在10 min內，將NaBH 4（208.2 mg，5.50 mmol）添加到4-羥基-4-(全氟乙基)環己烷-1-酮肟（步驟-3，170.0 mg，0.69 mmol）和六水合氯化鎳(II)（212.51 mg，0.89 mmol）在MeOH（49.00 mL）中的溶液中。完成添加後，使所得漿料升溫至0ºC並在該溫度下攪拌6.5 h。然後添加Boc 2O（225.0 mg，1.03 mmol）並將反應混合物升溫至22ºC持續16 h。在0ºC下將反應混合物用鹽水淬滅。在真空下除去MeOH並將所得漿料重新溶解在Et 2O中。將有機層分離並將水相用Et 2O萃取。將有機層合併，用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾，並在真空下濃縮以獲得呈固體的標題化合物（209.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3, 非鏡像異構物的混合物) δ 4.64 - 4.34 (m, 1H), 3.87 - 3.38 (m, 1H), 1.94 (d, 3H), 1.83 - 1.68 (m, 3H), 1.65 - 1.33 (m, 11H)；19FNMR (400 MHz, CDCl 3) δ -78.38, -78.50, -126.63, -126.82；TLC-MS (APCI): [M-H] -: 332.1。
步驟 -5. 4- 胺基 -1-(1,1,2,2,2- 五氟乙基 ) 環己烷 -1- 醇
Figure 02_image1527
在0ºC下TFA（2.00 mL）將添加到 N-[4-羥基-4-(1,1,2,2,2-戊氟乙基)環己基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-4，160.0 mg，0.48 mmol）在DCM（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈油狀物的標題化合物（105.0 mg）。LCMS (ESI): 234.1 [M+H] +。
步驟 -6. (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 全氟乙基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 s,4 R)-4- 羥基 -4-( 全氟乙基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1517
將HOBt（129.8 mg，0.96 mmol），EDCI（184.2 mg，0.96 mmol），和4-胺基-1-(1,1,2,2,2-戊氟乙基)環己烷-1-醇（112.00 mg，0.480 mmol，1.00當量）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，197.8 mg，0.53 mmol）和DIPEA（310.4 mg，2.40 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱，C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：35 B至55 B，20 min內；220/254 nm），以獲得 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-羥基-4-(全氟乙基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 s,4 R)-4-羥基-4-(全氟乙基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（130.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 373）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.11 (d, 1H), 7.51 - 6.94 (m, 2H), 4.80 - 4.19 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.64 - 3.60 (m, 1H), 3.16 - 2.53 (m, 2H), 2.51 - 2.19 (m, 1H), 2.06 - 1.50 (m, 10H), 1.43 - 0.88 (m, 2H), 0.86 - 0.46 (m, 3H)。LCMS (ESI): 590.4[M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（130.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IG柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH3.MeOH）: 9/1 DCM/EtOH=70 : 30，保持11 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 373-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（28.7 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為4.79 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ14.19 - 13.49 (m, 1H), 8.29 - 8.20 (m, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 5.78 (s, 1H), 4.52 - 4.48 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.82 - 3.77 (m, 1H), 2.80 - 2.76 (m, 1H), 2.19 - 2.14 (m, 1H), 1.80 - 1.75 (m, 5H), 1.58 - 1.52 (m, 6H), 1.34 - 0.77 (m, 3H), 0.77 - 0.33 (m, 2H)。LCMS (ESI): 590.50 [M+H] +。
實例 373-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（53.7 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.36 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.99 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.79 - 7.73 (m, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (s, 1H), 5.82 (s, 1H), 4.50 - 4.45 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.51 - 3.46 (m, 1H), 2.63 - 2.59 (m, 1H), 2.16 - 2.12 (m, 1H), 1.89 - 1.32 (m, 10H), 1.32 - 0.74 (m, 3H), 0.74 - 0.29 (m, 3H)。LCMS (ESI): 590.45 [M+H] +。
實例 374. (S)-N-((4 S,7 r)-3,3- 二氟 -1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ((4 R,7 s)-3,3- 二氟 -1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1530
步驟 -1. 3,3- 二氟 -1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 胺
Figure 02_image1532
將HCl（4.00 mL，在1,4-二㗁𠮿中4 M）添加到 N-[3,3-二氟-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基]胺基甲酸三級丁酯（來自中間體537的合成步驟-7，86.0 mg，0.31 mmol）中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min。將所得混合物在減壓下濃縮。所得殘餘物無需進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 178.1 [M+H] +。
步驟 -2. (S)-N-((4 S,7 r)-3,3- 二氟 -1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ((4 R,7 s)-3,3- 二氟 -1- 氧雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1530
將HOBt（83.7 mg，0.62 mmol），EDCI（118.8 mg，0.62 mmol），和3,3-二氟-1-氧雜螺[3.5]壬-7-胺（步驟-1，54.9 mg，0.31 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，116.0 mg，0.31 mmol）和DIPEA（200.2 mg，1.55 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（用DCM/MeOH（20/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-N-((4 S,7 r)-3,3-二氟-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-((4 R,7 s)-3,3-二氟-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（130.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 374）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 - 8.08 (m, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.70 - 4.57 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.70 - 3.66 (m, 1H), 2.79 - 2.74 (m, 1H), 2.44 - 2.21 (m, 2H), 2.13 - 2.05 (m, 1H), 1.97 - 1.62 (m, 7H), 1.59 - 1.39 (m, 2H), 1.27 - 1.22 (m, 2H), 1.11 - 0.81 (m, 2H), 0.73 - 0.68 (m, 2H)。LCMS (ESI): 534.20 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（130.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: EtOH=80 : 20，保持7 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 374-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（42.4 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.25 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.25 (s, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.69 - 4.58 (m, 2H), 4.47 - 4.42 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.65 - 3.58 (m, 1H), 2.64 - 2.60 (m, 1H), 2.14 - 2.04 (m, 3H), 1.85 - 1.41 (m, 6H), 1.34 - 1.07 (m, 4H), 1.06 - 0.73 (m, 2H), 0.62 - 0.58 (m, 2H)。LCMS (ESI): 533.20 [M+H] +。
實例 374-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（55.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.41 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.25 (d, 1H), 7.74 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.70 - 4.59 (m, 2H), 4.53 - 4.24 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.59 - 3.54 (m, 1H), 2.64 - 2.60 (m, 1H), 2.18 - 2.14 (m, 1H), 1.98 - 1.90 (m, 2H), 1.71 - 1.59 (m, 5H), 1.56 - 1.31 (m, 3H), 1.25 - 0.73 (m, 4H), 0.62 - 0.58 (m, 2H)。LCMS (ESI): 533.20 [M+H] +。
實例 375. (S)-N- ((1 s,4 R)-4-(1,1- 二氟乙基 )-4- 羥基環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ((1 r,4 S)-4-(1,1- 二氟乙基 )-4- 羥基環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1535
步驟 -1. 4- 胺基 -1-(1,1- 二氟乙基 ) 環己烷 -1- 醇
Figure 02_image1537
將3,3-二氟-1-氧雜螺[3.5]壬-7-酮肟（來自中間體537的合成步驟-6，33.0 mg，0.17 mmol）在三乙基硼氫化鋰（2.07 mL，1 M，2.07 mmol）中在密封管中在氮氣下回流5 h。將反應混合物冷卻至0ºC並藉由添加水來淬滅。在減壓下除去揮發物。將殘餘物溶解在DCM中並在矽膠墊上過濾。將墊用DCM沖洗以除去雜質。最後藉由用在MeOH中的2.5 M氨水沖洗來收集化合物。將濾液濃縮至乾，以獲得標題化合物。所得殘餘物直接用於下一步驟。
步驟 -2. (4-(1,1- 二氟乙基 )-4- 羥基環己基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1539
將Boc 2O（37.8 mg，0.17 mmol）添加到4-胺基-1-(1,1-二氟乙基)環己烷-1-醇（步驟-1，31.0 mg，0.17 mmol）和Et 3N（48.2 µL，0.35 mmol）在DCM（0.35 mL）中的溶液中。將反應混合物在22ºC下攪拌16 h。將水添加到反應混合物中。將各層分離，並將水層進一步用DCM萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱（用0%至50%環己烷/EtOAc洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（8.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.74 - 4.33 (m, 1H), 3.88 - 3.32 (m, 1H), 1.96 - 1.83 (m, 2H), 1.80 - 1.50 (m, 10H), 1.50 - 1.33 (m, 9H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -106.55, -106.87。
步驟 -3. 4- 胺基 -1-(1,1- 二氟乙基 ) 環己烷 -1- 醇
Figure 02_image1541
將TFA（0.50 mL）添加到(4-(1,1-二氟乙基)-4-羥基環己基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-2，7.0 mg，0.025 mmol）在DCM（0.50 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在真空下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（4.0 mg）。所得殘餘物無需進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 180.1 [M+H] +。
步驟 -4. (S)-N- ((1 s,4 R)-4-(1,1- 二氟乙基 )-4- 羥基環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ((1 r,4 S)-4-(1,1- 二氟乙基 )-4- 羥基環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1535
將HOBt（10.8 mg，0.08 mmol），EDCI（15.4 mg，0.08 mmol），和4-胺基-1-(1,1-二氟乙基)環己烷-1-醇（步驟-3，4.3 mg，0.02 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，15.0 mg，0.04 mmol）和DIPEA（25.9 mg，0.20 mmol）在DMF（1.50 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：YMC-Actus Triart C18柱，30 x 250，5 µm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：27% B至49% B，8 min內；檢測器：254/220 nm；RT：7.23 min），以獲得 (S)-N-((1 s,4 R)-4-(1,1-二氟乙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-((1 r,4 S)-4-(1,1-二氟乙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（5.8 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（實例375）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.11 (d, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.12 - 7.07 (m, 1H), 4.73 - 4.26 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.03 - 2.66 (m, 1H), 2.62 - 2.17 (m, 1H), 2.08 - 1.47 (m, 13H), 1.42 - 0.57 (m, 6H)。LCMS (ESI): 536.5 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（30.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: EtOH=75 : 25，保持13 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 375-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（14.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.04 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.20 - 8.10 (m, 1H), 7.52 - 6.94 (m, 2H), 4.77 - 4.26 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.64 - 3.58 (m, 1H), 2.83 - 2.77 (m, 1H), 2.43 - 2.37 (m, 1H), 1.96 - 1.68 (m, 6H), 1.67 - 1.49 (m, 7H), 1.45 - 0.90 (m, 3H), 0.85 - 0.51 (m, 3H)。LCMS (ESI): 536.30 [M+H] +。
實例 375-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（7.7 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.73 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ8.20 - 8.10 (m, 1H), 7.45 - 7.01 (m, 2H), 4.65 - 4.59 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.64 - 3.58 (m, 1H), 2.82 - 2.76 (m, 1H), 2.43 - 2.37 (m, 1H), 1.97 - 1.68 (m, 6H), 1.68 - 1.55 (m, 6H), 1.55 - 1.48 (m, 1H), 1.42 - 1.17 (m, 2H), 1.17 - 0.93 (m, 1H), 0.86 - 0.52 (m, 3H)。LCMS (ESI): 536.30 [M+H] +。
實例 376. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((6 R,8a R)- 八氫吲口巾 -6- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((6 R,8a S)- 八氫吲口巾 -6- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((6 S,8a R)- 八氫吲口巾 -6- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((6 S,8a S)- 八氫吲口巾 -6- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1544
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用八氫吲口巾-6-胺鹽酸鹽作為起始材料。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((6 R,8a R)-八氫吲口巾-6-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((6 R,8a S)-八氫吲口巾-6-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((6 S,8a R)-八氫吲口巾-6-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((6 S,8a S)-八氫吲口巾-6-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，其為兩部分，每個部分含有兩種非鏡像異構物。獲得呈固體的第一部分（90.0 mg，Rf值為0.5），並且獲得呈固體的二部分（106.0 mg，Rf值為0.3）。LCMS (ESI): 497.3 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離來自製備型TLC的第一部分（90.0 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH3.MeOH）: EtOH=70 : 30，保持20 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 376-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（24.8 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為13.46 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.10 (m, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.30 - 3.99 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.64 - 3.41 (m, 1H), 2.80 (s, 1H), 2.70 - 2.46 (m, 3H), 2.41 - 2.26 (m, 1H), 2.24 - 2.11 (m, 1H), 2.10 - 2.01 (m, 1H), 2.00 - 1.91 (m, 2H), 1.80 (d, 2H), 1.65 - 1.58 (m, 1H), 1.58 - 1.50 (m, 2H), 1.49 - 1.38 (m, 4H), 1.10 - 0.82 (m, 2H), 0.68 - 0.79 (m, 2H)。LCMS (ESI): 497.30 [M+H] +。
實例 376-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（21.8 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為16.13 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 4.57 (s, 1H), 4.28 - 3.98 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.64 - 3.39 (m, 1H), 3.27 - 3.02 (m, 1H), 2.79 (s, 1H), 2.61 - 2.41 (m, 2H), 2.34 (s, 1H), 2.24 - 2.10 (m, 1H), 2.08 - 1.95 (m, 3H), 1.95 - 1.65 (m, 4H), 1.61 - 1.36 (m, 3H), 1.36 - 1.18 (m, 2H), 1.16 - 0.82 (m, 2H), 0.81 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 497.30 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離來自製備型TLC的第二部分（106.0 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IG柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH3.MeOH）: IPA=65 : 35，保持22 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 376-C.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（34.1 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為14.13 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.12 (d, 1H), 4.78 - 4.25 (m, 1H), 4.07 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.79 - 3.37 (m, 1H), 3.18 - 2.58 (m, 4H), 2.56 - 2.34 (m, 1H), 2.34 - 2.25 (m, 1H), 2.25 - 2.10 (m, 3H), 1.99 - 1.66 (m, 6H), 1.50 - 1.38 (m, 3H), 1.19 - 0.84 (m, 2H), 0.72 - 0.82 (m, 2H)。LCMS (ESI): 497.30 [M+H] +。
實例 376-D.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（27.3 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為19.00 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.12 (d, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.07 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.61 - 3.36 (m, 1H), 3.12 - 2.66 (m, 4H), 2.46 (s, 1H), 2.33 - 1.54 (m, 11H), 1.49 - 1.27 (m, 2H), 1.19 - 0.85 (m, 2H), 0.82 - 0.65 (m, 2H)。LCMS (ESI): 497.30 [M+H] +。
實例 377. (S)-N-( (R)-1-(3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ( (S)-1-(3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1546
步驟 -1. N-[(1 E)-(3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 亞甲基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image1548
將PTSA（31.0 mg，0.18 mmol）和MgSO 4（1.31 g，10.91 mmol）添加到3-氯-5-氟吡啶-2-甲醛（580.0 mg，3.64 mmol）和三級丁烷亞磺醯胺（441.0 mg，3.64 mmol）在DCM（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物過濾，將濾餅用DCM洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（850.0 mg）。LCMS (ESI): 263[M+H] +。
步驟 -2. N-[1-(3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 乙基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image1550
在0ºC下將溴(甲基)鎂（1.13 g，9.48 mmol）添加到 N-[(1 E)-(3-氯-5-氟吡啶-2-基)亞甲基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-1，830.0 mg，3.16 mmol）在THF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在氮氣氣氛下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（800.0 mg）。LCMS (ESI): 279 [M+H] +。
步驟 -3. 1-(3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 乙胺
Figure 02_image1552
將HCl（3.00 mL，在1,4-二㗁𠮿中4 M）添加到 N-[1-(3-氯-5-氟吡啶-2-基)乙基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-2，150.0 mg，0.54 mmol）在1,4-二㗁𠮿（3.00 mL）中的溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌3 h。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈固體的標題化合物（75.0 mg）。LCMS (ESI): 175 [M+H] +。
步驟 -4. (S)-N- ( (R)-1-(3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ( (S)-1-(3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1546
將HOBt（75.0 mg，0.56 mmol），EDCI（107.0 mg，0.56 mmol），和1-(3-氯-5-氟吡啶-2-基)乙胺（步驟-3，65.0 mg，0.37 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，140.0 mg，0.37 mmol）和DIPEA（241.0 mg，1.86 mmol）在DMF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-N-( (R)-1-(3-氯-5-氟吡啶-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-( (S)-1-(3-氯-5-氟吡啶-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（160.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 377）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.06 - 13.85 (m, 1H), 8.58 (d, 1H), 8.38 - 8.22 (m, 2H), 8.12 - 8.02 (m, 1H), 7.35 - 7.29 (m, 1H), 7.02 (s, 1H), 5.38 - 5.27 (m, 1H), 4.50 (s, 1H), 3.91 - 3.85 (m, 3H), 2.92 - 2.66 (m, 1H), 2.21 - 2.15 (m, 1H), 1.77 - 1.71 (m, 1H), 1.51 - 1.45 (m, 1H), 1.37 - 1.28 (m, 4H), 1.17 (s, 1H), 0.99 - 0.93 (m, 2H), 0.69 - 0.63 (m, 2H)。LCMS (ESI): 531.4 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（160.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH3.MeOH）: EtOH=80 : 20，保持9 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 377-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（62.7 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.94 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.95 (s, 1H), 8.58 (d, 1H), 8.34 (d, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.12 - 8.02 (m, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.00 (d, 1H), 5.39 - 5.24 (m, 1H), 4.44 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.13 - 2.70 (m, 2H), 2.15 - 2.09 (m, 1H), 1.79 - 1.70 (m, 1H), 1.57 - 1.51 (m, 1H), 1.33 (d, 3H), 1.26 - 1.11 (m, 1H), 0.91 - 0.85 (m, 2H), 0.66 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 531.10 [M+H] +。
實例 377-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（59.4 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.05 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.04 - 13.83 (m, 1H), 8.56 (d, 1H), 8.37 - 8.20 (m, 2H), 8.08 - 8.01 (m, 1H), 7.32 - 7.26 (m, 1H), 7.01 (s, 1H), 5.34 - 5.26 (m, 1H), 4.52 - 4.45 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.07 - 2.73 (m, 2H), 2.17 - 2.12 (m, 1H), 1.70 - 1.66 (m, 1H), 1.46 - 1.03 (m, 5H), 0.99 - 0.79 (m, 2H), 0.61 - 0.57 (m, 2H)。LCMS (ESI): 531.10 [M+H] +。
實例 378. (S)-N-((1 s,3 R)-3-(3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )-2,2,4,4- 四甲基環丁基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ((1 r,3 S)-3-(3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )-2,2,4,4- 四甲基環丁基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1554
步驟 -1. N-[3-(3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )-2,2,4,4- 四甲基環丁基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1556
將3,3-二氟吡咯啶（146.5 mg，1.37 mmol）和Ti(Oi-Pr) 4（706.6 mg，2.49 mmol）添加到 N-(2,2,4,4-四甲基-3-側氧基環丁基)胺基甲酸三級丁酯（300.0 mg，1.24 mmol）在EtOH（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。然後將NaBH 3CN（156.2 mg，2.49 mmol）添加到反應混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌5 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（用石油醚/EtOAc（8/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（80.0 mg）。LCMS (ESI): 333.2 [M+H] +。
步驟 -2. 3-(3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )-2,2,4,4- 四甲基環丁烷 -1- 胺
Figure 02_image1558
在0ºC下將TFA（1.00 mL）添加到 N-[3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2,4,4-四甲基環丁基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-2，50.0 mg，0.11 mmol）在DCM（1.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得標題化合物並且不經進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 233.2 [M+H] +。
步驟 -3. (S)-N-((1 s,3 R)-3-(3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )-2,2,4,4- 四甲基環丁基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ((1 r,3 S)-3-(3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )-2,2,4,4- 四甲基環丁基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1554
將HOBt（39.6 mg，0.29 mmol），EDCI（56.0 mg，0.29 mmol），和3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2,4,4-四甲基環丁烷-1-胺（34.0 mg，0.15 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，60.3 mg，0.16 mmol）和DIPEA（189.1 mg，1.47 mmol）在DMF（1.50 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：40 B至60 B，20 min內；220/254 nm），以獲得 (S)-N-((1 s,3 R)-3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2,4,4-四甲基環丁基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-((1 r,3 S)-3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2,4,4-四甲基環丁基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（40.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 378）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.11 (d, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.80 - 4.25 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.75 - 3.71 (m, 1H), 3.04 - 3.00 (m, 1H), 2.84 - 2.71 (m, 2H), 2.69 - 2.61 (m, 2H), 2.28 - 2.13 (m, 2H), 2.08 - 2.03 (m, 1H), 1.85 - 1.80 (m, 2H), 1.31 - 1.26 (m, 4H), 1.15 - 1.08 (m, 11H), 1.01 - 0.95 (m, 1H), 0.95 - 0.82 (m, 1H), 0.78 - 0.74 (m, 2H)。LCMS (ESI): 589.25 [M+H] +。
使用非手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（23.0 mg）。
柱：GreenSep Basic柱
柱尺寸：3 x 15 cm，5 µm
流動相A：CO 2；流動相B：IPA（0.5% 2M NH 3-MeOH）
流速：70 mL/min
梯度：等度，30% B
檢測：254 nm
注射體積：1.5 mL
實例 378-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（7.1 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.38 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.11 (d, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.09 (d, 1H), 4.64 - 4.60 (m, 4H), 3.92 (s, 3H), 2.84 - 2.73 (m, 2H), 2.80 - 2.70 (m, 1H), 2.28 - 2.10 (m, 1H), 2.09 - 2.02 (m, 1H), 1.84 - 1.80 (m, 2H), 1.31 - 1.27 (m, 5H), 1.18 - 1.08 (m, 11H), 0.93 - 0.85 (m, 2H), 0.74 - 0.70 (m, 2H)。LCMS (ESI): 589.20 [M+H] +。
實例 378-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（1.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.70 min。
LCMS (ESI): 589.20 [M+H] +。
實例 379. (S)-N-( (S)-4,4- 二氟 -1-(2- 氟 -2- 甲基丙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ( (R)-4,4- 二氟 -1-(2- 氟 -2- 甲基丙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1561
步驟 -1. 4-( 二苄基胺基 )-3,3- 二氟吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1563
將K 2CO 3（932.8 mg，6.75 mmol）和BnBr（1.15 g，6.75 mmol）添加到4-胺基-3,3-二氟吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（500.0 mg，2.25 mmol）在MeCN（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在60ºC下攪拌14 h。在減壓下濃縮所得溶液。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/10 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（572.0 mg）。LCMS (ESI): 403.2 [M+H] +。
步驟 -2. N, N- 二苄基 -4,4- 二氟吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image1565
將TFA（5.00 mL）添加到4-(二苄基胺基)-3,3-二氟吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，572.0 mg，1.42 mmol）在DCM（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。在減壓下濃縮所得溶液。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（420.0 mg）。LCMS (ESI): 303.2 [M+H] +。 步驟 -3. 1-[4-( 二苄基胺基 )-3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 ]-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image1567
將2,2-二甲基環氧乙烷（581.9 mg，8.07 mmol）和K 2CO 3（1.12 g，8.07 mmol）添加到 N, N-二苄基-4,4-二氟吡咯啶-3-胺（步驟-2，488.0 mg，1.61 mmol）在EtOH（5.00 mL）/H 2O（0.50 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在110ºC下攪拌14 h。在減壓下濃縮所得溶液。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/5 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（384.0 mg）。LCMS (ESI): 375.2 [M+H] +。 步驟 -4. N, N- 二苄基 -4,4- 二氟 -1-(2- 氟 -2- 甲基丙基 ) 吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image1569
在0ºC下將DAST（322.0 mg，2.00 mmol）添加到1-[4-(二苄基胺基)-3,3-二氟吡咯啶-1-基]-2-甲基丙-2-醇（步驟-3，374.0 mg，1.00 mmol）在DCM（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。藉由添加MeOH將反應混合物淬滅。將溶液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/10 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（270.0 mg）。LCMS (ESI): 377.2 [M+H] +。
步驟 -5. 4,4- 二氟 -1-(2- 氟 -2- 甲基丙基 ) 吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image1571
將Pd/C（150.0 mg）添加到 N, N-二苄基-4,4-二氟-1-(2-氟-2-甲基丙基)吡咯啶-3-胺（步驟-4，270.0 mg，0.72 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。然後濾出並將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（80.0 mg）。LCMS (ESI): 197.1 [M+H] +。
步驟 -6. (S)-N-( (S)-4,4- 二氟 -1-(2- 氟 -2- 甲基丙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ( (R)-4,4- 二氟 -1-(2- 氟 -2- 甲基丙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1561
將HOBt（72.3 mg，0.54 mmol），EDCI（102.6 mg，0.54 mmol），和4-二氟-1-(2-氟-2-甲基丙基)吡咯啶-3-胺（70.0 mg，0.36 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，133.6 mg，0.36 mmol）和DIPEA（138.3 mg，1.07 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：40 B至60 B，20 min內；220/254 nm），以獲得 (S)-N-( (S)-4,4-二氟-1-(2-氟-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-( (R)-4,4-二氟-1-(2-氟-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（105.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 379）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.03 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.43 - 7.20 (m, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.67 - 4.32 (m, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.31 - 3.13 (m, 3H), 2.91 - 2.69 (m, 2H), 2.70 - 2.52 (m, 2H), 2.49 - 2.37 (m, 1H), 2.29 - 2.00 (m, 1H), 1.77 (s, 1H), 1.65 - 1.40 (m, 1H), 1.39 - 1.34 (m, 3H), 1.33 - 1.28 (m, 3H), 1.27 - 1.23 (m, 1H), 1.08 - 0.83 (m, 2H), 0.80 - 0.46 (m, 2H)。LCMS (ESI): 553.30 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（105.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/DCM=80 : 20，保持8 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 379-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（34.8 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為4.66 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.03 (s, 1H), 8.39 - 8.00 (m, 2H), 7.38 - 7.20 (m, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.65 - 4.26 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.28 - 3.09 (m, 3H), 2.93 - 2.67 (m, 2H), 2.68 - 2.51 (m, 2H), 2.46 - 2.33 (m, 1H), 2.22 - 1.97 (m, 1H), 1.88 - 1.37 (m, 2H), 1.35 - 1.05 (m, 8H), 1.05 - 0.79 (m, 1H), 0.73 - 0.44 (m, 2H)。LCMS (ESI): 553.30 [M+H] +。
實例 379-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（30.5 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.99 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.15 - 13.83 (m, 1H), 8.45 - 8.01 (m, 2H), 7.47 - 7.22 (m, 1H), 7.12 - 6.90 (m, 1H), 4.63 - 4.29 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.30 - 3.11 (m, 3H), 2.73 (m, 2H), 2.65 - 2.51 (m, 1H), 2.47 - 2.38 (m, 2H), 2.16 (s, 1H), 1.86 - 1.40 (m, 2H), 1.36 - 1.17 (m, 8H), 1.10 - 0.82 (m, 1H), 0.75 - 0.51 (m, 2H)。LCMS (ESI): 553.20 [M+H] +。
實例 380. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-6- 甲基 -3,4- 二氫 -2 H- 哌喃并 [3,2-b] 吡啶 -4- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-6- 甲基 -3,4- 二氫 -2 H- 哌喃并 [3,2-b] 吡啶 -4- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1574
步驟 -1. 2- 溴 -3-( 丁 -3- 烯 -1- 基氧基 )-6- 甲基吡啶
Figure 02_image1576
將3-丁烯-1-醇（1.15 g，15.96 mmol）和PPh 3（4.18 g，15.96 mmol）添加到2-溴-6-甲基吡啶-3-醇（2.00 g，10.64 mmol）在THF（15.00 mL）中的攪拌溶液中。然後在氮氣氣氛下將DEAD（2.78 g，15.96 mmol）逐滴添加到所得混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將溶液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（2.50 g）。LCMS (ESI): 242.0 [M+H] +。 步驟 -2. 6- 甲基 -4- 亞甲基 -2 H,3 H- 哌喃并 [3,2-b] 吡啶
Figure 02_image1578
將PPh 3（487.5 mg，1.86 mmol），Pd(OAc) 2（139.1 mg，0.62 mmol），AcOK（3.04 g，30.98 mmol）和TEA.HCl（1.71 g，12.39 mmol）添加到2-溴-3-(丁-3-烯-1-基氧基)-6-甲基吡啶（步驟-1，1.50 g，6.20 mmol）在DMF（15.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在105ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/10 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（530.0 mg）。LCMS (ESI): 162.1 [M+H] +。
步驟 -3. 4-( 羥基甲基 )-6- 甲基 -2 H,3 H- 哌喃并 [3,2-b] 吡啶 -4- 醇
Figure 02_image1580
將在 t-BuOH（1.07 g）中的NMO（1.85 g，15.82 mmol）和OsO 4（26.8 mg，0.11 mmol）添加到6-甲基-4-亞甲基-2 H,3 H-哌喃并[3,2-b]吡啶（步驟-2，850.0 mg，5.27 mmol）在DCM（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。在減壓下濃縮所得溶液。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（967.0 mg）。LCMS (ESI): 196.1 [M+H] +。 步驟 -4. 6- 甲基 -2 H,3 H- 哌喃并 [3,2-b] 吡啶 -4- 酮
Figure 02_image1582
將過碘酸鈉（3.18 g，14.86 mmol）添加到4-(羥基甲基)-6-甲基-2 H,3 H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-醇（步驟-3，967.0 mg，4.95 mmol）在THF（5.00 mL）/水（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌3 h。將溶液在減壓下濃縮。將溶液用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（329.0 mg）。LCMS (ESI): 164.1 [M+H] +。
步驟 -5. N-[(4 Z)-6- 甲基 -2 H,3 H- 哌喃并 [3,2-b] 吡啶 -4- 亞基 ] 羥基胺
Figure 02_image1584
將鹽酸羥胺（157.9 mg，2.27 mmol）添加到6-甲基-2 H,3 H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-酮（步驟-4，309.0 mg，1.89 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將溶液在減壓下濃縮，然後用NaHCO 3水溶液鹼化至pH 7。將溶液用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（337.0 mg）。LCMS (ESI): 179.1 [M+H] +。 步驟 -6. 6- 甲基 -2 H,3 H,4 H- 哌喃并 [3,2-b] 吡啶 -4- 胺
Figure 02_image1586
將NH 4OAc（160.4 mg，2.08 mmol）添加到 N-[(4 Z)-6-甲基-2 H,3 H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-亞基]羥基胺（步驟-5，337.0 mg，1.89 mmol）在EtOH（1.00 mL）/NH 4OH（5.00 mL）中的攪拌溶液中。然後在0ºC下將Zn（1.24 g，18.91 mmol）添加到所得混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。濾出固體並用MeOH洗滌。將有機層在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（174.0 mg）。LCMS (ESI): 165.1 [M+H] +。 步驟 -7. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-6- 甲基 -3,4- 二氫 -2 H- 哌喃并 [3,2-b] 吡啶 -4- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-6- 甲基 -3,4- 二氫 -2 H- 哌喃并 [3,2-b] 吡啶 -4- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1574
將HOBt（123.4 mg，0.91 mmol），EDCI（175.1 mg，0.91 mmol），和6-甲基-2 H,3 H,4 H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-胺（步驟-6，100.0 mg，0.61 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，228.0 mg，0.61 mmol）和DIPEA（236.1 mg，1.83 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18柱；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至50 B，30 min內；220/254 nm），以獲得 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (R)-6-甲基-3,4-二氫-2 H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (S)-6-甲基-3,4-二氫-2 H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（103.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 380）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.38 - 13.52 (m, 1H), 8.40 - 8.20 (m, 2H), 7.37 - 7.29 (m, 1H), 7.21 - 6.95 (m, 3H), 4.93 - 4.78 (m, 1H), 4.53 (s, 1H), 4.33 - 4.01 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.32 (s, 1H), 2.66 (s, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.27 - 2.00 (m, 2H), 2.00 - 1.43 (m, 3H), 1.40 - 1.10 (m, 1H), 0.98 (s, 2H), 0.77 - 0.45 (m, 2H)。LCMS (ESI): 521.05 [M+H] +。 使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（103.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: MeOH=50 : 50，保持10 min
流速：19 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 380-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（31.3 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.34 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.17 - 13.78 (m, 1H), 8.47 - 8.12 (m, 2H), 7.42 - 7.20 (m, 1H), 7.16 - 6.95 (m, 3H), 4.93 - 4.74 (m, 1H), 4.52 (s, 1H), 4.31 - 4.16 (m, 1H), 4.10 - 4.05 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 2.90 - 2.60 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.26 - 1.97 (m, 2H), 1.96 - 1.83 (m, 1H), 1.82 - 1.48 (m, 2H), 1.43 - 1.06 (m, 2H), 1.05 - 0.76 (m, 2H), 0.68 - 0.43 (m, 2H)。LCMS (ESI): 521.30 [M+H] +。
實例 380-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（32.8 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.68 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.03 (s, 1H), 8.46 - 8.14 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.15 - 6.98 (m, 3H), 4.83 (s, 1H), 4.49 (s, 1H), 4.31 - 4.15 (m, 1H), 4.14 - 3.97 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 2.86 - 2.59 (m, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.14 - 1.95 (m, 1H), 1.95 - 1.83 (m, 1H), 1.82 - 1.66 (m, 1H), 1.64 - 1.39 (m, 1H), 1.21 (s, 2H), 1.05 - 0.72 (m, 2H), 0.69 - 0.43 (m, 2H)。LCMS (ESI): 521.30 [M+H] +。
實例 381. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(5- 甲基吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1589
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-胺鹽酸鹽作為起始材料。將所得殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：50 B至80 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（54.2 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.29 - 13.71 (m, 1H), 10.08 (s, 1H), 8.87 (d, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.89 (d, 1H), 4.82 - 4.29 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.22 - 2.99 (m, 2H), 2.55 (s, 3H), 2.03 - 1.78 (m, 1H), 1.77 - 1.51 (m, 1H), 1.48 - 0.90 (m, 3H), 0.84 - 0.56 (m, 3H)。LCMS (ESI): 505.05 [M+H] +。
實例 382. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( (S)-3- 甲基 -4,5,6,7- 四氫 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( (R)-3- 甲基 -4,5,6,7- 四氫 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1591
步驟 -1. 3- 甲基 -4,5,6,7- 四氫 -1 H- 吲唑 -5- 碳醯氯
Figure 02_image1593
將(COCl) 2（422.6 mg，3.33 mmol）添加到3-甲基-4,5,6,7-四氫-1 H-吲唑-5-甲酸（200.0 mg，1.11 mmol）在DMF（0.05 mL）和DCM（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min。所得溶液不經進一步純化而直接用於下一步驟。
步驟 -2. N, N- 二苄基 -3- 甲基 -4,5,6,7- 四氫 -1 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image1595
在0ºC下將3-甲基-4,5,6,7-四氫-1 H-吲唑-5-碳醯氯（步驟-1，1.11 mmol）的溶液添加到二苄基胺（327.7 mg，1.66 mmol）和DIPEA（429.4 mg，3.31 mmol）在DCM（5.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌2 h。將溶液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（245.0 mg）。LCMS (ESI): 360.2 [M+H] +。
步驟 -3. 二苄基 [(3- 甲基 -4,5,6,7- 四氫 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 ] 胺
Figure 02_image1597
在氮氣氣氛下將在THF中的LiAlH 4（1.03 mL，1.03 mmol，1 M）添加到 N, N-二苄基-3-甲基-4,5,6,7-四氫-1 H-吲唑-5-甲醯胺（步驟-2，185.0 mg，0.52 mmol）在THF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在0ºC下攪拌1 h。然後將所得混合物在60ºC下攪拌14 h。將溶液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18柱；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：5 B至30 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈油狀物的標題化合物（85.0 mg）。LCMS (ESI): 346.2 [M+H] +。
步驟 -4. 二苄基 [(3- 甲基 -4,5,6,7- 四氫 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 ] 胺
Figure 02_image1599
將Pd/C（45.0 mg）添加到二苄基[(3-甲基-4,5,6,7-四氫-1 H-吲唑-5-基)甲基]胺（步驟-3，85.0 mg，0.25 mmol）在MeOH（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在H 2氣氛下攪拌3 h。濾出固體。將溶液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（38.0 mg）。LCMS (ESI): 166.1 [M+H] +。 步驟 -5. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( (S)-3- 甲基 -4,5,6,7- 四氫 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( (R)-3- 甲基 -4,5,6,7- 四氫 -1 H- 吲唑 -5- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1591
將HOBt（40.5 mg，0.30 mmol），EDCI（57.4 mg，0.30 mmol），和1-(3-甲基-4,5,6,7-四氫-1 H-吲唑-5-基)甲胺（步驟-4，33.0 mg，0.20 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，74.8 mg，0.20 mmol）和DIPEA（77.4 mg，0.60 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18柱；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至60 B，30 min內；220/254 nm），以獲得 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(( (S)-3-甲基-4,5,6,7-四氫-1 H-吲唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(( (R)-3-甲基-4,5,6,7-四氫-1 H-吲唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（26.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 382）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.29 - 13.75 (m, 1H), 11.94 (s, 1H), 8.50 - 8.19 (m, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.47 - 7.25 (m, 1H), 7.05 (s, 1H), 4.75 - 4.21 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.25 - 2.90 (m, 3H), 2.80 - 2.54 (m, 2H), 2.47 - 2.34 (m, 2H), 2.31 - 2.11 (m, 1H), 2.07 - 1.89 (m, 4H), 1.89 - 1.66 (m, 3H), 1.66 - 1.43 (m, 1H), 1.44 - 1.09 (m, 2H), 1.06 - 0.43 (m, 4H)。LCMS (ESI): 522.15 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（26.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH3.MeOH）: EtOH=70 : 30，保持15 min
流速：17 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 382-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（4.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.21 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.30 - 13.75 (m, 1H), 11.78 (s, 1H), 8.45 - 8.09 (m, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.51 (s, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.20 - 3.00 (m, 2H), 2.76 - 2.62 (m, 1H), 2.48 - 2.29 (m, 3H), 2.02 (s, 3H), 1.98 - 1.86 (m, 1H), 1.85 - 1.62 (m, 3H), 1.52 (s, 1H), 1.34 - 1.00 (m, 4H), 1.02 - 0.78 (m, 2H), 0.77 - 0.46 (m, 2H)。LCMS (ESI): 522.10 [M+H] +。
實例 382-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（4.2 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為11.60 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.12 - 13.81 (m, 1H), 11.82 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.50 (s, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.22 - 2.91 (m, 2H), 2.82 - 2.61 (m, 1H), 2.46 - 2.30 (m, 3H), 2.02 (s, 3H), 1.95 - 1.86 (m, 1H), 1.86 - 1.67 (m, 3H), 1.64 - 1.41 (m, 1H), 1.41 - 1.07 (m, 4H), 1.04 - 0.75 (m, 2H), 0.77 - 0.44 (m, 2H)。LCMS (ESI): 522.10 [M+H] +。
實例 383. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-7- 氟 -3,4- 二氫 -2 H- 哌喃并 [3,2-b] 吡啶 -4- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-7- 氟 -3,4- 二氫 -2 H- 哌喃并 [3,2-b] 吡啶 -4- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1602
使用與對於實例380的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用2-溴-5-氟吡啶-3-醇作為步驟-1中的起始材料。將所得殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18柱；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：30 B至60 B，30 min內；220/254 nm），以獲得 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (R)-7-氟-3,4-二氫-2 H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (S)-7-氟-3,4-二氫-2 H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（22.8 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 383）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.28 - 8.04 (m, 2H), 7.41 - 7.17 (m, 1H), 7.16 - 7.05 (m, 2H), 5.10 - 5.00 (m, 1H), 4.75 - 4.48 (m, 1H), 4.42 - 4.14 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.88 - 2.82 (m, 1H), 2.47 - 2.41 (m, 1H), 2.33 - 2.20 (m, 1H), 2.16 - 2.10 (m, 1H), 1.92 - 1.68 (m, 2H), 1.34 - 1.28 (m, 2H), 1.17 - 0.87 (m, 2H), 0.77 - 0.71 (m, 2H)。LCMS (ESI): 525.10 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（22.8 mg）。
柱：CHIRALPAK IH柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.1%二乙醇胺）: EtOH=70 : 30，保持10 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 383-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（4.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.22 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.12 (d, 1H), 8.05 (d, 1H), 7.30 - 7.24 (m, 1H), 7.14 - 7.07 (m, 2H), 5.06 - 5.01 (m, 1H), 4.75 - 4.48 (m, 1H), 4.38 - 4.26 (m, 1H), 4.26 - 4.16 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 2.85 - 2.80 (m, 1H), 2.46 - 2.41 (m, 1H), 2.29 - 2.01 (m, 2H), 1.99 - 1.78 (m, 2H), 1.32 - 1.26 (m, 2H), 1.08 - 0.80 (m, 2H), 0.72 - 0.68 (m, 2H)。LCMS (ESI): 525.00 [M+H] +。
實例 383-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（3.5 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.81 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.12 (d, 1H), 8.05 (d, 1H), 7.30 - 7.24 (m, 1H), 7.14 - 7.07 (m, 2H), 5.14 - 5.01 (m, 1H), 4.71 - 4.45 (m, 1H), 4.36 - 4.31 (m, 1H), 4.26 - 4.16 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.85 - 2.80 (m, 1H), 2.51 - 2.46 (m, 1H), 2.29 - 2.15 (m, 1H), 2.13 - 2.05 (m, 1H), 1.89 - 1.69 (m, 2H), 1.32 - 1.26 (m, 2H), 0.99 - 0.95 (m, 2H), 0.73 - 0.67 (m, 2H)。LCMS (ESI): 525.00 [M+H] +。
實例 384. (1 R,3 s,5 S)- N-((3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1604
使用與對於實例170-A的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲胺鹽酸鹽作為起始材料。將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（94.6 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.16 - 13.96 (m, 1H), 8.57 (d, 1H), 8.35 - 8.22 (m, 2H), 8.15 - 8.05 (m, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.20 - 7.08 (m, 1H), 5.33 - 4.55 (m, 2H), 4.48 - 4.40 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.04 - 2.92 (m, 1H), 2.16 - 1.68 (m, 8H)。LCMS (ESI): 517.4 [M+H] +。
實例 385. (R)-N-((3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ((3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的鏡像異構物混合物
Figure 02_image1606
將HATU（154.1 mg，0.41 mmol）和1-(3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲胺 鹽酸鹽（73.2 mg，0.37 mmol）添加到4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體526，121.0 mg，0.34 mmol）和DIPEA（174.6 mg，1.35 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（120.0 mg），其為鏡像異構物的油狀混合物。LCMS (ESI): 501.2 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（120.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/DCM=50 : 50，保持12 min
流速：16 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 385-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（19.2 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.34 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.22 - 13.68 (m, 1H), 8.64 - 8.46 (m, 2H), 8.34 (s, 1H), 8.17 - 8.03 (m, 1H), 7.94 - 7.72 (m, 1H), 7.03 (s, 1H), 5.04 - 4.08 (m, 3H), 3.55 - 3.04 (m, 3H), 2.96 - 2.71 (m, 1H), 2.25 - 1.99 (m, 1H), 1.80 (s, 1H), 1.56 (s, 1H), 1.40 - 1.11 (m, 1H), 1.07 - 0.82 (m, 2H), 0.79 - 0.41 (m, 3H)。LCMS (ESI): 501.10 [M+H] +。
實例 385-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（15.5 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.07 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.17 - 13.73 (m, 1H), 8.67 - 8.44 (m, 2H), 8.35 (s, 1H), 8.20 - 8.03 (m, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.80 - 4.15 (m, 3H), 3.48 - 2.96 (m, 3H), 2.90 - 2.69 (m, 1H), 2.30 - 1.96 (m, 1H), 1.94 - 1.68 (m, 1H), 1.66 - 1.47 (m, 1H), 1.37 - 1.11 (m, 1H), 1.08 - 0.83 (m, 2H), 0.82 - 0.42 (m, 3H)。LCMS (ESI): 501.10 [M+H] +。
實例 386. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4- 甲基吡 𠯤 -3- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1608
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(4-甲基吡𠯤-3-基)甲胺鹽酸鹽作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS柱，30 x150 mm，5μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：17% B至41% B，8 min內，41% B；波長：254/220 nm；RT1（min）：7.43），以獲得呈固體的標題化合物（20.8 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.94 (s, 1H), 8.97 (d, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 4.68 - 4.27 (m, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.06 - 2.73 (m, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.17 - 2.13 (m, 1H), 1.86 - 1.39 (m, 2H), 1.22 (s, 1H), 0.93 - 0.89 (m, 2H), 0.71 - 0.44 (m, 2H)。LCMS(ESI): 480.4 [M+H] +。
實例 387. (S)-N-((5- 氯 -2- 甲基嘧啶 -4- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1610
步驟 -1. N-[(5- 氯 -2- 甲基嘧啶 -4- 基 ) 甲基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1612
在25ºC下將Pd(AMPhos) 2Cl 2（86.9 mg，0.12 mmol）和K 3PO 4（520.9 mg，2.45 mmol）添加到4,5-二氯-2-甲基嘧啶（200.0 mg，1.23 mmol）和(((三級丁氧基羰基)胺基)甲基)三氟硼酸鉀（349.1 mg，1.47 mmol）在1,4-二㗁𠮿（3.00 mL）和水（0.60 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在90ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，4/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（80.0 mg）。LCMS (ESI): 258.1 [M+H] +。
步驟 -2. 1-(5- 氯 -2- 甲基嘧啶 -4- 基 ) 甲胺
Figure 02_image1614
在25ºC下將TFA（3.00 mL）添加到 N-[(5-氯-2-甲基嘧啶-4-基)甲基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-1，70.0 mg，0.27 mmol）在DCM（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈油狀物的標題化合物（30.0 mg）。LCMS (ESI): 158.0 [M+H] +。
步驟 -3. (S)-N-((5- 氯 -2- 甲基嘧啶 -4- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1610
將HOBt（68.6 mg，0.51 mmol），EDCI（97.3 mg，0.51 mmol），和1-(5-氯-2-甲基嘧啶-4-基)甲胺（步驟-2，40.0 mg，0.25 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，95.0 mg，0.25 mmol）和DIPEA（164.0 mg，1.27 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：15 B至35 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（6.7 mg）。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.61 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.65 - 4.55 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.02 - 2.92 (m, 1H), 2.70 - 2.64 (m, 2H), 2.48 - 2.42 (m, 1H), 2.16 - 1.65 (m, 3H), 1.52 - 1.23 (m, 4H), 1.08 - 0.58 (m, 3H)。LCMS (ESI): 514.15 [M+H] +。
實例 388. (S)-N-((3- 氯吡 𠯤 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1617
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(3-氯吡𠯤-2-基)甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由製備型TLC（用EtOAc洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（91.2 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.22 - 13.76 (m, 1H), 8.63 (d, 1H), 8.44 (d, 2H), 8.48 - 8.20 (m, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.55 - 4.47 (m, 3H), 4.07 - 4.01 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.92 - 2.75 (m, 1H), 2.22 - 2.05 (m, 1H), 1.85 - 1.79 (m, 1H), 1.59 - 1.53 (m, 1H), 1.43 - 1.13 (m, 1H), 1.11 - 0.85 (m, 2H), 0.79 - 0.43 (m, 2H)。LCMS (ESI): 500.35 [M+H] +。
實例 389. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5- 氟 -3- 甲氧基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1619
步驟 -1. 5- 氟 -3- 甲氧基吡啶 -2- 甲腈
Figure 02_image1621
將Zn（16.0 mg，0.25 mmol）和Pd(dppf)Cl 2（362.0 mg，0.37 mmol）添加到2-氯-5-氟-3-甲氧基吡啶（400.0 mg，2.48 mmol）和氰化鋅（291.0 mg，2.48 mmol）在DMF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在90ºC下在氮氣氣氛下攪拌4 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（310.0 mg）。LCMS (ESI): 153 [M+H] +。
步驟 -2. 5- 氟 -3- 甲氧基吡啶 -2- 甲腈
Figure 02_image1623
將DIBAL-H（7.62 mL，7.62 mmol，1 M）添加到5-氟-3-甲氧基吡啶-2-甲腈（步驟-1，290.0 mg，1.91 mmol）在DCM（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在-78ºC下在氮氣氣氛下攪拌4 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（130.0 mg）。LCMS (ESI): 157 [M+H] +。
步驟 -3. (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5- 氟 -3- 甲氧基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1619
將EDCI（221.0 mg，1.15 mmol），HOBt（156.0 mg，1.15 mmol），和1-(5-氟-3-甲氧基吡啶-2-基)甲胺（步驟-2，120.0 mg，0.77 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，288.0 mg，0.77 mmol）和DIPEA（497.0 mg，3.84 mmol）在DMF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（31.0 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 10.90 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 8.17 - 8.06 (m, 2H), 7.53 - 7.42 (m, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 4.63 - 4.29 (m, 3H), 3.91 - 3.77 (m, 6H), 3.19 - 2.77 (m, 2H), 2.25 - 2.19 (m, 1H), 1.79 - 1.73 (m, 1H), 1.58 - 1.52 (m, 1H), 1.27 - 1.21 (m, 1H), 0.93 - 0.87 (m, 2H), 0.68 - 0.59 (m, 2H)。LCMS (ESI): 513.15 [M+H] +。
實例 390. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-( 吡啶 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-( 吡啶 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1626
步驟 -1. N, N- 二苄基 -1-( 吡啶 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image1628
將3-溴吡啶（474.5 mg，3.00 mmol），BrettPhos（161.2 mg，0.30 mmol），BrettPhos Pd G3（272.2 mg，0.30 mmol）和Cs 2CO 3（2.45 g，7.51 mmol）添加到 N, N-二苄基吡咯啶-3-胺（800.0 mg，3.00 mmol）在1,4-二㗁𠮿（10.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得溶液在110ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。使混合物冷卻至25ºC。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（3/2 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（422.4 mg）。LCMS (ESI): 344.2 [M+H] +。
步驟 -2. 1-( 吡啶 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image1630
在0ºC下將Pd/C（126.0 mg）添加到 N, N-二苄基-1-(吡啶-3-基)吡咯啶-3-胺（步驟-1，210.0 mg，0.61 mmol）在MeOH（3.00 mL）和THF（1.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（90.0 mg）。LCMS (ESI): 164.1 [M+H] +。
步驟 -3. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-( 吡啶 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-( 吡啶 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1626
將HOBt（132.5 mg，0.98 mmol），EDCI（187.9 mg，0.98 mmol）和1-(吡啶-3-基)吡咯啶-3-胺（80.0 mg，0.49 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，183.5 mg，0.49 mmol）和DIPEA（316.7 mg，2.45 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（用DCM/MeOH（18/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (R)-1-(吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (S)-1-(吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（110 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 390）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.28 - 13.68 (m, 1H), 8.39 - 8.04 (m, 2H), 7.90 (d, 1H), 7.82 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.19 - 7.09 (m, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.91 - 6.81 (m, 1H), 4.66 - 4.22 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.58 - 3.42 (m, 1H), 3.31 - 3.22 (m, 1H), 3.12 - 2.78 (m, 2H), 2.76 - 2.54 (m, 1H), 2.26 - 2.00 (m, 3H), 1.96 - 1.37 (m, 2H), 1.36 - 0.75 (m, 3H), 0.75 - 0.34 (m, 3H)。LCMS(ESI):520.4 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（110.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: MeOH=50 : 50，保持10.5 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 390-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（29.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.81 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.27 - 13.68 (m, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.88 - 7.80 (m, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.21 - 7.10 (m, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.95 - 6.84 (m, 1H), 4.72 - 4.19 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.56 - 3.45 (m, 1H), 3.45 - 3.33 (m, 1H), 3.13 - 2.90 (m, 2H), 2.72 - 2.66 (m, 1H), 2.26 - 2.09 (m, 2H), 1.95 - 1.78 (m, 1H), 1.77 - 1.71 (m, 1H), 1.58 - 1.52 (m, 1H), 1.33 - 1.15 (m, 1H), 1.07 - 0.83 (m, 2H), 0.77 - 0.35 (m, 3H)。LCMS (ESI): 520.4 [M+H] +。
實例 390-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（22.5 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.25 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.16 - 13.78 (m, 1H), 8.21 (d, 2H), 8.00 - 7.76 (m, 2H), 7.32 (d, 1H), 7.21 - 7.11 (m, 1H), 7.07 - 7.01 (m, 1H), 6.94 - 6.84 (m, 1H), 4.62 - 4.34 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.56 - 3.44 (m, 1H), 3.43 - 3.34 (m, 1H), 3.12 - 2.84 (m, 2H), 2.72 - 2.66 (m, 1H), 2.26 - 2.09 (m, 2H), 1.95 - 1.68 (m, 2H), 1.58 - 1.52 (m, 1H), 1.32 - 1.08 (m, 1H), 1.03 - 0.82 (m, 2H), 0.77 - 0.44 (m, 3H)。LCMS (ESI): 520.4 [M+H] +。
實例 391. (S)-N-((3- 氯 -5- 氰基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1633
步驟 -1. 6-( 溴甲基 )-5- 氯吡啶 -3- 甲腈
Figure 02_image1635
將NBS（355.0 mg，1.97 mmol）和AIBN（322.9 mg，1.97 mmol）添加到5-氯-6-甲基吡啶-3-甲腈（300.0 mg，1.97 mmol）在CCl 4（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（120.0 mg）。
步驟 -2. 6-( 疊氮基甲基 )-5- 氯吡啶 -3- 甲腈
Figure 02_image1637
在0ºC下將疊氮基鈉（50.6 mg，0.78 mmol）添加到6-(溴甲基)-5-氯吡啶-3-甲腈（步驟-1，90.0 mg，0.39 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在0ºC下攪拌1 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（12/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（60.0 mg）。LCMS (ESI): 194.0 [M+H] +。
步驟 -3. 6-( 疊氮基甲基 )-5- 氯吡啶 -3- 甲腈
Figure 02_image1639
在0ºC下將Pd/C（5.5 mg）添加到6-(疊氮基甲基)-5-氯吡啶-3-甲腈（步驟-2，50.0 mg，0.26 mmol）在MeOH（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在0ºC下在氫氣氣氛下攪拌30 min。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（40.0 mg）。LCMS (ESI): 168.0 [M+H] +。
步驟 -4. (S)-N-((3- 氯 -5- 氰基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1633
將HOBt（57.8 mg，0.43 mmol）和EDCI（81.9 mg，0.43 mmol），和6-(胺基甲基)-5-氯吡啶-3-甲腈（步驟-3，35.8 mg，0.21 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，80.0 mg，0.21 mmol）和DIPEA（138.1 mg，1.07 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：30 B至60 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（17.8 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.80 - 4.35 (m, 3H), 3.85 (s, 3H), 2.83 - 2.78 (m, 1H), 2.33 - 2.03 (m, 1H), 1.81 - 1.76 (m, 1H), 1.54 - 1.49 (m, 1H), 1.23 - 1.19 (m, 2H), 0.98 - 0.94 (m, 2H), 0.65 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 524.20 [M+H] +。
實例 392. (S)-N-((3- 氯 -5-( 氧雜環丁烷 -3- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1641
步驟 -1. 1-(5- 溴 -3- 氯吡啶 -2- 基 ) 甲胺
Figure 02_image1643
在-78ºC下在氮氣氣氛下，將DIBAL-H（13.00 mL，13.00 mmol，1 M）添加到5-溴-3-氯吡啶-2-甲腈（1.00 g，4.60 mmol）在乾DCM（6.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在-78ºC下在氮氣氣氛下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（680.0 mg）。LCMS (ESI): 220.9 [M+H] +。
步驟 -2. N- [(5- 溴 -3- 氯吡啶 -2- 基 ) 甲基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1645
將TEA（685.3 mg，6.77 mmol）和Boc 2O（710.0 mg，3.25 mmol）添加到1-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)甲胺（步驟-1，600.0 mg，2.71 mmol）在DCM（6.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（430.0 mg）。LCMS (ESI): 320.9 [M+H] +。
步驟 -3. N-[[3- 氯 -5-(3- 氰基氮雜環丁烷 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ] 甲基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1647
將3-碘氧雜環丁烷（94.4 mg，0.51 mmol），NiCl 2（7.5 mg，0.03 mmol），(Ir[dF(CF 3)ppy] 2(dtbpy))PF 6（3.8 mg，0.003 mmol），三(三甲基矽基)矽烷（84.8 mg，0.34 mmol），2,6-二甲基砒啶（73.3 mg，0.68 mmol）和dtbpy（9.2 mg，0.03 mmol）添加到 N-[(5-溴-3-氯吡啶-2-基)甲基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-2，110.0 mg，0.34 mmol）在DME（10.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得反應混合物用集成光反應器Royal Blue（450 nm）LED燈在25ºC下在氮氣氛下照射1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（2/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（18.0 mg）。LCMS (ESI): 299.1 [M+H] +。
步驟 -4. 1-[3- 氯 -5-( 氧雜環丁烷 -3- 基 ) 吡啶 -2- 基 ] 甲胺
Figure 02_image1649
在0ºC下將TFA（1.00 mL）添加到 N-[[3-氯-5-(3-氰基氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基]甲基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-3，10.0 mg，0.03 mmol）在DCM（1.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得標題化合物並且不經進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 199.0 [M+H] +。
步驟 -5. (S)-N-((3- 氯 -5-( 氧雜環丁烷 -3- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1641
將HOBt（6.8 mg，0.05 mmol）和EDCI（9.7 mg，0.05 mmol），和1-[3-氯-5-(氧雜環丁烷-3-基)吡啶-2-基]甲胺（步驟-4，5.0 mg，0.025 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，9.4 mg，0.025 mmol）和DIPEA（16.3 mg，0.13 mmol）在DMF（1.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（2/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（2.3 mg）。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.48 (d, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.12 (d, 1H), 5.17 - 5.06 (m, 2H), 4.78 - 4.68 (m, 2H), 4.65 - 4.59 (m, 3H), 4.42 - 4.26 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 2.99 - 2.93 (m, 1H), 2.50 - 2.44 (m, 1H), 1.99 - 1.93 (m, 1H), 1.83 - 1.77 (m, 1H), 1.45 - 1.27 (m, 2H), 1.13 - 0.84 (m, 2H), 0.81 - 0.73 (m, 2H)。LCMS (ESI): 555.15 [M+H] +。
實例 393. (S)-N-((3- 氯 -5-(3- 氰基氮雜環丁烷 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1652
步驟 -1. N-[[3- 氯 -5-(3- 氰基氮雜環丁烷 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ] 甲基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1654
將氮雜環丁烷-3-甲腈鹽酸鹽（173.9 mg，1.47 mmol），Cs 2CO 3（955.8 mg，2.93 mmol），BrettPhos Pd G3（133.0 mg，0.15 mmol）和BrettPhos（78.7 mg，0.15 mmol）添加到 N-[(5-溴-3-氯吡啶-2-基)甲基]胺基甲酸三級丁酯（來自實例392的合成步驟-2，471.7 mg，1.47 mmol）在1,4-二㗁𠮿（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在110ºC下在N 2氣氛下攪拌14 h。在減壓下濃縮所得溶液。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/2 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（42.0 mg）。LCMS (ESI): 323.1 [M+H] +。
步驟 -2. 1-[6-( 胺基甲基 )-5- 氯吡啶 -3- 基 ] 氮雜環丁烷 -3- 甲腈
Figure 02_image1656
將TFA（5.00 mL）添加到 N-[[3-氯-5-(3-氰基氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基]甲基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-1，40.0 mg，0.12 mmol）在DCM（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min。將所得溶液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（25.0 mg）。LCMS (ESI): 223.1 [M+H] +。
步驟 -3. (S)-N-((3- 氯 -5-(3- 氰基氮雜環丁烷 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1652
將HOBt（22.8 mg，0.17 mmol），EDCI（32.3 mg，0.17 mmol），和1-[6-(胺基甲基)-5-氯吡啶-3-基]氮雜環丁烷-3-甲腈（步驟-2，25.0 mg，0.11 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，42.0 mg，0.11 mmol）和DIPEA（87.1 mg，0.67 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：30 B至50 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（12.0 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.18 - 13.78 (m, 1H), 8.48 - 8.07 (m, 2H), 7.79 (s, 1H), 7.42 - 7.22 (m, 1H), 7.17 - 6.94 (m, 2H), 4.60 - 4.44 (m, 1H), 4.43 - 4.29 (m, 2H), 4.25 - 4.14 (m, 2H), 4.13 - 4.00 (m, 2H), 3.97 - 3.89 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.79 - 2.69 (m, 1H), 2.25 - 2.02 (m, 1H), 1.92 - 1.68 (m, 1H), 1.66 - 1.38 (m, 1H), 1.36 - 1.11 (m, 2H), 1.10 - 0.75 (m, 2H), 0.75 - 0.39 (m, 2H)。LCMS (ESI): 579.30 [M+H] +。
實例 394. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((2- 甲基 -5-( 三氟甲基 ) 㗁唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1658
步驟 -1. N- 甲氧基 - N,2- 二甲基 -5-( 三氟甲基 )-1,3- 㗁唑 -4- 甲醯胺
Figure 02_image1660
將HATU（292.0 mg，0.77 mmol）和 N,O-二甲基羥基胺（31.0 mg，0.51 mmol）添加到2-甲基-5-(三氟甲基)-1,3-㗁唑-4-甲酸（100.0 mg，0.51 mmol）和DIPEA（199.0 mg，1.54 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（105.0 mg）。LCMS (ESI): 239 [M+H] +。
步驟 -2. 2- 甲基 -5-( 三氟甲基 )-1,3- 㗁唑 -4- 甲醛
Figure 02_image1662
在-78ºC下在氮氣氣氛下，將DIBAl-H（0.88 mL，0.88 mmol，1 M）添加到 N-甲氧基- N,2-二甲基-5-(三氟甲基)-1,3-㗁唑-4-甲醯胺（步驟-1，105.0 mg，0.44 mmol）在乾DCM（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在-78ºC下在氮氣氣氛下攪拌2 h。將所得混合物用MeOH淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（75.0 mg）。LCMS (ESI): 180 [M+H] +。
步驟 -3. 2- 甲基 - N-[(1 E)-[2- 甲基 -5-( 三氟甲基 )-1,3- 㗁唑 -4- 基 ] 亞甲基 ] 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image1664
將PTSA（3.0 mg，0.02 mmol）和MgSO 4（121.0 mg，1.00 mmol）添加到2-甲基-5-(三氟甲基)-1,3-㗁唑-4-甲醛（步驟-2，60.0 mg，0.34 mmol）和三級丁烷亞磺醯胺（41.0 mg，0.34 mmol）在DCM（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（2/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（60.0 mg）。LCMS (ESI): 283 [M+H] +。
步驟 -4. 2- 甲基 - N-[[2- 甲基 -5-( 三氟甲基 )-1,3- 㗁唑 -4- 基 ] 甲基 ] 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image1666
在0ºC下將NaBH 4（16.0 mg，0.43 mmol）添加到2-甲基- N-[(1 E)-[2-甲基-5-(三氟甲基)-1,3-㗁唑-4-基]亞甲基]丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-3，60.0 mg，0.21 mmol）在MeOH（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（50.0 mg）。LCMS (ESI): 285 [M+H] +。
步驟 -5. 1-[2- 甲基 -5-( 三氟甲基 )-1,3- 㗁唑 -4- 基 ] 甲胺
Figure 02_image1668
將在1,4-二㗁𠮿（1.00 mL）中的HCl（氣態）添加到2-甲基- N-[[2-甲基-5-(三氟甲基)-1,3-㗁唑-4-基]甲基]丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-4，50.0 mg，0.18 mmol）在1,4-二㗁𠮿（1.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈固體的標題化合物（40.0 mg）。LCMS (ESI): 181 [M+H] +。
步驟 -6. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((2- 甲基 -5-( 三氟甲基 ) 㗁唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1658
將EDCI（56.0 mg，0.29 mmol），HOBt（39.0 mg，0.29 mmol），和1-[2-甲基-5-(三氟甲基)-1,3-㗁唑-4-基]甲胺（步驟-5，35.0 mg，0.19 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，73.0 mg，0.19 mmol）和DIPEA（126.0 mg，0.97 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（20.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.91 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.58 - 4.34 (m, 1H), 4.29 - 4.13 (m, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.34 - 3.31 (m, 1H), 2.81 - 2.68 (m, 1H), 2.58 - 2.49 (m, 3H), 2.27 - 1.96 (m, 1H), 1.86 - 1.64 (m, 1H), 1.63 - 1.36 (m, 1H), 1.35 - 1.11 (m, 1H), 1.05 - 0.77 (m, 2H), 0.76 - 0.42 (m, 2H)。LCMS (ESI): 537.15 [M+H] +。
實例 395. (S)-N-( (S)-1-(5- 環丙基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ) 乙基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ( (R)-1-(5- 環丙基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ) 乙基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1671
步驟 -1. 2-( 環丙基甲醯肼基 )-2- 側氧基乙酸乙酯
Figure 02_image1673
在0ºC下在氮氣氣氛下，將TEA（2.02 g，19.98 mmol）和草醯氯乙酯（1.50 g，10.99 mmol）添加到環丙烷碳醯肼（1.00 g，9.99 mmol）在DCM（15.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（12/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（1.70 g）。LCMS (ESI): 201.1 [M+H] +。
步驟 -2. 5- 環丙基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 甲酸乙酯
Figure 02_image1675
將TsCl（1.73 g，9.07 mmol）和TEA（1.08 g，10.72 mmol）添加到2-(環丙基甲醯肼基)-2-側氧基乙酸乙酯（步驟-1，1.65 g，8.24 mmol）在DCM（10.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（4/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（900.0 mg）。LCMS (ESI): 183.1 [M+H] +。
步驟 -3. (5- 環丙基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ) 甲醇
Figure 02_image1677
在0ºC下將NaBH 4（186.9 mg，4.94 mmol）添加到5-環丙基-1,3,4-㗁二唑-2-甲酸乙酯（步驟-2，900.0 mg，4.94 mmol）在EtOH（8.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1.5 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（11/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（550.0 mg）。LCMS (ESI): 141.1 [M+H] +。
步驟 -4. 5- 環丙基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 甲醛
Figure 02_image1679
將苯基碘(III)二乙酸酯（1.43 g，4.44 mmol）和TEMPO（69.6 mg，0.45 mmol）添加到(5-環丙基-1,3,4-㗁二唑-2-基)甲醇（步驟-3，520.0 mg，3.71 mmol）在DCM（8.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，1/2 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（400.0 mg）。LCMS (ESI): 139.0 [M+H] +。
步驟 -5. N-[(1 E)-(5- 環丙基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ) 亞甲基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image1681
將PTSA（24.9 mg，0.15 mmol）和MgSO 4（1.05 g，8.69 mmol）添加到5-環丙基-1,3,4-㗁二唑-2-甲醛（步驟-4，400.0 mg，2.90 mmol）和三級丁烷亞磺醯胺（351.0 mg，2.90 mmol）在DCM（8.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，2/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（350.0 mg）。LCMS (ESI): 242.1 [M+H] +。
步驟 -6. N-[1-(5- 環丙基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ) 乙基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image1683
在-40ºC下在氮氣氣氛下，將溴(甲基)鎂（0.62 mL，0.62 mmol，1M）添加到 N-[(1 E)-(5-環丙基-1,3,4-㗁二唑-2-基)亞甲基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-5，100.0 mg，0.41 mmol）在THF（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。在-30ºC下將反應混合物用MeOH淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（用EtOAc洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（50.0 mg）。LCMS (ESI): 258.1 [M+H] +。
步驟 -7. 1-(5- 環丙基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ) 乙胺
Figure 02_image1685
將 N-[1-(5-環丙基-1,3,4-㗁二唑-2-基)乙基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-6，50.0 mg，0.19 mmol）添加到在1,4-二㗁𠮿（2.00 mL）中的HCl（氣態）中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈固體的標題化合物（25.0 mg），並且不經進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 154.1 [M+H] +。
步驟 -8. (S)-N-( (S)-1-(5- 環丙基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ) 乙基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ( (R)-1-(5- 環丙基 -1,3,4- 㗁二唑 -2- 基 ) 乙基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1671
將HOBt（52.9 mg，0.39 mmol），EDCI（75.1 mg，0.39 mmol），和1-(5-環丙基-1,3,4-㗁二唑-2-基)乙胺（步驟-7，30.0 mg，0.20 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，73.3 mg，0.20 mmol，1.00 當量）和DIPEA（253.1 mg，1.96 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得( S)-N-( (S)-1-(5-環丙基-1,3,4-㗁二唑-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-( (R)-1-(5-環丙基-1,3,4-㗁二唑-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺 （40.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 395）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.20 - 8.08 (m, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.22 - 7.09 (m, 1H), 5.26 - 5.13 (m, 1H), 4.88 - 4.12 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.03 - 2.74 (m, 1H), 2.41 - 2.35 (m, 1H), 2.28 - 2.13 (m, 1H), 2.10 - 1.67 (m, 2H), 1.63 - 1.52 (m, 3H), 1.44 - 1.26 (m, 2H), 1.25 - 1.13 (m, 2H), 1.13 - 1.00 (m, 3H), 1.00 - 0.64 (m, 3H)。LCMS (ESI): 510.40 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（43.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IH柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: EtOH=70 : 30，保持8.5 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 395-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（17.5 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為4.21 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.21 - 8.09 (m, 1H), 7.41 - 7.09 (m, 2H), 5.25 - 5.15 (m, 1H), 4.82 - 4.36 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 2.90 - 2.86 (m, 1H), 2.80 - 2.26 (m, 1H), 2.26 - 2.15 (m, 1H), 2.10 - 1.72 (m, 2H), 1.60 - 1.54 (m, 3H), 1.34 - 1.29 (m, 2H), 1.26 - 1.14 (m, 2H), 1.17 - 1.03 (m, 3H), 0.79 - 0.75 (m, 3H)。LCMS (ESI): 510.20 [M+H] +。
實例 395-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（19.2 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.55 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.18 - 8.07 (m, 1H), 7.42 - 7.09 (m, 2H), 5.25 - 5.15 (m, 1H), 4.80 - 4.36 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.13 - 2.80 (m, 1H), 2.66 - 2.37 (m, 1H), 2.25 - 2.14 (m, 1H), 2.05 - 1.60 (m, 2H), 1.60 - 1.54 (m, 3H), 1.51 - 1.23 (m, 2H), 1.23 - 1.16 (m, 2H), 1.16 - 1.02 (m, 3H), 1.02 - 0.70 (m, 3H)。LCMS (ESI): 510.15 [M+H] +。
實例 396. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-( 氧雜環丁烷 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-( 氧雜環丁烷 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1688
步驟 -1. N, N- 二苄基 -1-( 氧雜環丁烷 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image1690
將3-氧雜環丁烷酮（350.4 mg，4.87 mmol）和4Å分子篩（720.0 mg）添加到3-(二苄基胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（500.0 mg，1.87 mmol）在AcOH（0.80 mL）和MeOH（8.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在80ºC下攪拌1 h，然後添加NaBH 3CN（185.2 mg，2.94 mmol）。將所得混合物在80ºC下攪拌14 h。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（2/3 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（400.0 mg）。LCMS (ESI): 323.21 [M+H] +。
步驟 -2. 1-( 氧雜環丁烷 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image1692
在0ºC下將Pd/C（47.4 mg）添加到 N,N-二苄基-1-(氧雜環丁烷-3-基)吡咯啶-3-胺（步驟-1，158.0 mg，0.49 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌2 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（61.0 mg）。LCMS (ESI): 143.11 [M+H] +。
步驟 -3. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-( 氧雜環丁烷 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-( 氧雜環丁烷 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1688
將HOBt（76.0 mg，0.56 mmol），EDCI（108.0 mg，0.56 mmol）和1-(氧雜環丁烷-3-基)吡咯啶-3-胺（步驟-2，40.0 mg，0.28 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，105.6 mg，0.28 mmol）和DIPEA（360.0 mg，2.79 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至40 B，25 min內；220/254 nm），以獲得 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (R)-1-(氧雜環丁烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (S)-1-(氧雜環丁烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（60.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 396）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 - 8.08 (m, 1H), 7.26 (d, 1H), 7.09 (d, 1H), 4.76 - 4.67 (m, 2H), 4.62 - 4.54 (m, 3H), 4.36 - 4.25 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.70 - 3.59 (m, 1H), 2.80 - 2.67 (m, 3H), 2.55 - 2.37 (m, 3H), 2.31 - 2.17 (m, 1H), 1.98 - 1.60 (m, 3H), 1.30 - 1.25 (m, 2H), 1.13 - 0.81 (m, 2H), 0.78 - 0.61 (m, 2H)。LCMS (ESI): 499.30 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（44.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/DCM=40 : 60，保持12 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 396-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（11.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.83 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.51 - 7.19 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.80 - 4.69 (m, 2H), 4.67 - 4.53 (m, 3H), 4.42 - 4.24 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.79 - 3.59 (m, 1H), 3.00 - 2.67 (m, 3H), 2.65 - 2.12 (m, 4H), 2.05 - 1.51 (m, 3H), 1.44 - 0.91 (m, 3H), 0.88 - 0.53 (m, 3H)。LCMS (ESI): 499.4 [M+H] +。
實例 396-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（11.7 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.65 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.54 - 6.91 (m, 2H), 4.82 - 4.69 (m, 2H), 4.67 - 4.53 (m, 3H), 4.42 - 4.25 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.77 - 3.59 (m, 1H), 2.93 - 2.67 (m, 3H), 2.62 - 2.40 (m, 3H), 2.39 - 2.10 (m, 1H), 2.02 - 1.56 (m, 3H), 1.47 - 0.90 (m, 3H), 0.88 - 0.53 (m, 3H)。LCMS (ESI): 499.4 [M+H] +。
實例 397. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3- 甲基吡 𠯤 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1695
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(3-甲基吡𠯤-2-基)甲胺鹽酸鹽作為起始材料。將所得殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至50 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（61.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.12 - 13.75 (m, 1H), 8.69 - 7.89 (m, 4H), 7.29 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.75 - 4.09 (m, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.30 - 3.28 (m, 2H), 2.97 - 2.66 (m, 1H), 2.29 - 2.00 (m, 1H), 1.93 - 1.37 (m, 3H), 1.32 - 0.82 (m, 3H), 0.73 - 0.43 (m, 3H)。LCMS (ESI): 480.20[M+H] +。
實例 398. (S)-N-((1 r,4 S)-4-(1,1- 二氟 -3- 甲氧基丙基 )-4- 羥基環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -((1 s,4 R)-4-(1,1- 二氟 -3- 甲氧基丙基 )-4- 羥基環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1697
步驟 -1. 2,2- 二氟 -2-(8-((4- 甲氧基苄基 ) 氧基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 ) 乙醛
Figure 02_image1699
在0ºC下在N 2氣氛下，將戴斯-馬丁氧化劑（426.0 mg，1.00 mmol）緩慢添加到2,2-二氟-2-(8-((4-甲氧基苄基)氧基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)乙烷-1-醇（來自實例369的合成步驟-2，300.0 mg，0.84 mmol）在無水DCM（6.98 mL）中的溶液中。將反應混合物在0ºC下攪拌10 min，然後在22ºC下攪拌2.5 h。將反應混合物用DCM稀釋，然後冷卻至0ºC。藉由添加飽和Na 2S 2O 3水溶液（7.00 mL），隨後添加飽和NaHCO 3水溶液（7.00mL）來小心地淬滅懸浮液。除去冰浴並將雙相混合物在22ºC下劇烈攪拌1 h。分離各層，並將有機層用飽和NaHCO 3水溶液、鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（287.0mg），將其不經進一步純化而用於下一步驟。TLC-MS (APCI): 357.4 [M+H] +。
步驟 -2. ( Z)-8-(1,1- 二氟 -3- 甲氧基烯丙基 )-8-((4- 甲氧基苄基 ) 氧基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷和 ( Z)-3- 氟 -3-(8-((4- 甲氧基苄基 ) 氧基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 ) 丙烯醛的混合物
Figure 02_image1701
將(甲氧基甲基)三苯基氯化鏻（243.4 mg，0.71 mmol）溶解在THF（2.85 mL）中並冷卻至0ºC，然後逐滴添加三級丁醇鉀（144.0 mg，1.28 mmol），並使混合物攪拌45 min。此後，添加2,2-二氟-2-(8-((4-甲氧基苄基)氧基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)乙醛（步驟-1，254.0 mg，0.71 mmol），作為在THF（2.00 mL）中的溶液，並使反應緩慢升溫至22ºC持續16 h。然後將反應混合物濃縮至乾並在EtOAc和H 2O之間分配。將有機層進一步用水、鹽水洗滌，乾燥（Na 2SO 4），過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在DCM中0至100% EtOAc，產物用KMnO 4染色）純化，以獲得8-(1,1-二氟-3-甲氧基烯丙基)-8-((4-甲氧基苄基)氧基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷（108.0 mg）和3,3-二氟-3-(8-((4-甲氧基苄基)氧基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)丙醛作為不可分離的雜質，藉由 1H NMR估算為50 wt%。材料不經進一步純化而用於下一步驟。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3, 具有來自不可分離雜質的重疊信號) δ 7.22 - 7.16 (m, 2H), 6.84 - 6.77 (m, 2H), 6.12 (dt, 1H), 4.94 (dt, 1H), 4.26 (s, 2H), 3.93 - 3.85 (m, 4H), 3.73 (s, 3H), 3.65 (s, 3H), 2.11 - 1.71 (m, 6H), 1.64 - 1.54 (m, 1H)。TLC-MS (APCI): 385.3 [M+H] +。
步驟 -3. 8-(1,1- 二氟 -3- 甲氧基丙基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 醇
Figure 02_image1703
在N 2下將( Z)-8-(1,1-二氟-3-甲氧基烯丙基)-8-((4-甲氧基苄基)氧基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷（步驟-2，110.0 mg，50% Wt，0.14 mmol）溶解在EtOAc中。然後添加Pd/C（30.5 mg，10% Wt，0.03 mmol）並藉由氣球用H 2代替氣氛。將反應混合物在22ºC下攪拌18 h，然後經矽藻土墊過濾。將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中30%至50% EtOAc）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（37.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 3.99 - 3.92 (m, 4H), 3.63 (t, 2H), 3.38 (s, 3H), 2.24 (tt, 6.1 Hz, 2H), 2.01 - 1.83 (m, 4H), 1.77 - 1.69 (m, 2H), 1.69 - 1.61 (m, 2H)。TLC-MS (APCI): 267.1 [M+H] +。
步驟 -4. 4-(1,1- 二氟 -3- 甲氧基丙基 )-4- 羥基環己烷 -1- 酮
Figure 02_image1705
在0ºC下將TFA（0.12 mL，1.46 mmol）添加到8-(1,1-二氟-3-甲氧基丙基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-醇（步驟-3，39.0 mg，0.15 mmol）在DCM（1.47 mL）中的溶液中。將所得混合物升溫至22ºC持續18 h。將反應混合物濃縮並將殘餘物不經進一步純化而直接用於下一步驟。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.68 (t, 2H), 3.45 (s, 3H), 2.76 (td, 2H), 2.39 - 2.24 (m, 4H), 2.16 - 2.00 (m, 4H)。
步驟 -5. 4-(1,1- 二氟 -3- 甲氧基丙基 )-4- 羥基環己烷 -1- 酮肟
Figure 02_image1707
將鹽酸羥胺（11.0 mg，0.16 mmol）添加到乙酸鈉（15.0 mg，0.18 mmol）在MeOH（0.40 mL）中的溶液中。將所得混合物攪拌30 min。然後添加4-(1,1-二氟-3-甲氧基丙基)-4-羥基環己烷-1-酮（步驟-4，33.0 mg，0.15 mmol），作為在MeOH（0.40 mL）中的溶液。用回流冷凝器將反應混合物在60ºC下攪拌5 h。然後將反應混合物冷卻至22ºC並用EtOAc和水稀釋。將有機層用H 2O和鹽水洗滌，並且經Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的50至60% EtOAc）純化，以獲得呈固體的標題化合物（19.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.87 (bs, 1H),3.64 (t, 2H), 3.41 (s, 3H), 3.30 - 3.21 (m, 1H), 2.67 - 2.52 (m, 2H), 2.35 - 2.18 (m, 3H), 2.02 - 1.92 (m, 2H), 1.90 - 1.71 (m, 2H)。TLC-MS (APCI): 238.1 [M+H] +。
步驟 -6. (4-(1,1- 二氟 -3- 甲氧基丙基 )-4- 羥基環己基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1709
在-78ºC下將NaBH 4（24.2 mg，0.64 mmol）添加到4-(1,1-二氟-3-甲氧基丙基)-4-羥基環己烷-1-酮肟（步驟-5，19.0 mg，0.08 mmol）和六水合氯化鎳(II)（24.7 mg，0.10 mmol）在MeOH（1.60 mL）中的溶液中。使所得混合物升溫至0ºC並在該溫度下攪拌7 h。然後添加Boc 2O（26.2 mg，0.12 mmol）並將反應混合物升溫至22ºC持續18 h。在0ºC下將反應混合物用鹽水淬滅。在減壓下除去MeOH並將所得殘餘物用Et 2O萃取。將有機層用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（18.4 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3, 非鏡像異構物混合物) δ 4.67 (s, 1H, 次要異構物), 4.40 (s, 1H, 主要異構物), 3.83 (s, 1H, 次要異構物), 3.67 - 3.56 (m, 2H, 重疊信號), 3.50 - 3.26 (m, 4H, 重疊信號), 3.10 (s, 1H), 2.30 - 2.16 (m, 2H), 1.96 - 1.81 (m, 2H), 1.79 - 1.59 (m, 4H), 1.55 - 1.37 (m, 11H, 重疊信號)。 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -111.27, -111.62。TLC-MS (APCI): 324.1 [M+H] +。
步驟 -7. 4- 胺基 -1-(1,1- 二氟 -3- 甲氧基丙基 ) 環己烷 -1- 醇
Figure 02_image1711
將TFA（1.00 mL）添加到 N-[4-(1,1-二氟-3-甲氧基丙基)-4-羥基環己基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-6，16.8 mg，0.05 mmol）在DCM（1.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈固體的標題化合物（11.0 mg）。LCMS (ESI): 224.1 [M+H] +。
步驟 -8. (S)-N-((1 r,4 S)-4-(1,1- 二氟 -3- 甲氧基丙基 )-4- 羥基環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -((1 s,4 R)-4-(1,1- 二氟 -3- 甲氧基丙基 )-4- 羥基環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1697
將HOBt（13.3 mg，0.10 mmol），EDCI（18.9 mg，0.10 mmol），和4-胺基-1-(1,1-二氟-3-甲氧基丙基)環己烷-1-醇（11.0 mg，0.05 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，20.3 mg，0.05 mmol）和DIPEA（63.7 mg，0.50 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得( S)-N-((1 r,4 S)-4-(1,1-二氟-3-甲氧基丙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-((1 s,4 R)-4-(1,1-二氟-3-甲氧基丙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（15.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 580.3 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（15.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：3 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/DCM=40 : 60，保持25 min
流速：18 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 398-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（1.1 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.49 min。
LCMS (ESI): 580.20 [M+H] +。
實例 398-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（3.5 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為21.41 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.11 (d, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.69 - 3.55 (m, 5H), 2.32 - 2.21 (m, 3H), 2.12 - 1.95 (m, 1H), 1.81 - 1.71 (m, 3H), 1.68 - 1.58 (m, 3H), 1.41 - 1.20 (m, 8H), 1.00 - 0.86 (m, 2H), 0.80 - 0.58 (m, 2H)。LCMS (ESI): 580.25 [M+H] +。
實例 399. (S)-N-((1 s,4 R)-4- 胺基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ((1 r,4 S)-4- 胺基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1714
步驟 -1. 2- 甲基 - N-(1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 亞基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image1716
將1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-酮（1.50 g，9.60 mmol）和2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（1.40 g，11.53 mmol）溶解在THF（19.20 mL）中。添加四乙氧基鈦（2.82 mL，13.45 mmol）並將所得溶液在22ºC下攪拌16 h。將混合物用50 mL NaHCO 3/鹽水的1/1飽和水溶液淬滅。將所得混合物攪拌30分鐘，然後通過矽藻土過濾並用EtOAc洗滌固體。將混合物用EtOAc萃取並將合併的有機層經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/EtOAc（0%至40%）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.10 g）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.00 - 3.87 (m, 4H), 3.10 (ddd, 1H), 2.88 (ddd, 1H), 2.62 (dd, 2H), 2.54 - 2.47 (m, 1H), 2.06 - 1.98 (m, 1H), 1.91 (dt, 2H), 1.23 (s, 9H)。
步驟 -2. 2- 甲基 - N-(8-( 三氟甲基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image1718
在-20ºC下將TBAF（5.78 mL，5.78 mmol，在THF中1 M）添加到2-甲基- N-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-亞基)丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-1，1.00 g，3.86 mmol）在THF（38.50 mL）中的溶液中，隨後在劇烈攪拌下緩慢添加三甲基(三氟甲基)矽烷（1.65 g，11.57 mmol）。使反應混合物達到22ºC並攪拌16 h。藉由添加NaHCO 3的飽和水溶液將混合物淬滅。在減壓下除去THF並將殘餘物用水和EtOAc稀釋。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（環己烷/EtOAc，0%至100%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（163.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 3.98 - 3.91 (m, 4H), 3.30 (s, 1H), 2.14 - 1.96 (m, 5H), 1.81 - 1.63 (m, 3H), 1.25 (s, 9H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -80.42。
步驟 -3. 2- 甲基 - N-(4- 側氧基 -1-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image1720
將TFA（0.38 mL，4.95 mmol）添加到2-甲基- N-(8-(三氟甲基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-2，163.0 mg，0.49 mmol）在DCM（2.50 mL）中的溶液中。將反應混合物在22ºC下攪拌16 h。將反應混合物用DCM稀釋並用NaHCO 3（飽和水溶液）洗滌。將有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（環己烷/乙酸乙酯，0%至100%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（123.3 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 3.57 (s, 1H), 2.92 (td, 1H), 2.64 - 2.37 (m, 4H), 2.30 - 2.16 (m, 3H), 1.29 (s, 9H)。
步驟 -4. N-(4-( 羥基亞胺基 )-1-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image1722
將鹽酸羥胺（33.0 mg，0.48 mmol）添加到乙酸鈉（42.5 mg，0.52 mmol）在MeOH（2.10 mL）中的溶液中。使所得混合物攪拌30 min。然後將2-甲基- N-(4-側氧基-1-(三氟甲基)環己基)丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-3，123.3 mg，0.43 mmol）在MeOH（1.00 mL）中的溶液添加到反應混合物中。將反應混合物在60ºC下攪拌16 h。然後將反應混合物冷卻至22ºC並在減壓下除去MeOH。將殘餘物用水和EtOAc稀釋。將水溶液進一步用EtOAc萃取兩次。將有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/環己烷，0%至100%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（93.6 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 3.42 (s, 1H), 3.25 - 3.14 (m, 1H), 2.63 - 1.72 (m, 7H), 1.19 (d, 9H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -80.78, -80.87。
步驟 -5. (4-(( 三級丁基亞磺醯基 ) 胺基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1724
在-78ºC下將NaBH 4（9.3 mg，0.25 mmol）添加到 N-(4-(羥基亞胺基)-1-(三氟甲基)環己基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-4，74.0 mg，0.25 mmol）和六水合氯化鎳(II)（76.1 mg，0.32 mmol）在MeOH（4.90 mL）中的溶液中。使所得混合物升溫至0ºC並在該溫度下攪拌4 h。然後添加Boc 2O（80.7 mg，0.37 mmol）並將反應混合物升溫至22ºC持續18 h。在0ºC下將反應混合物用鹽水淬滅。在減壓下除去揮發物。將殘餘物用水和EtOAc稀釋。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/環己烷，0%至90%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（96.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 3.44 - 3.33 (m, 1H), 2.28 - 1.65 (m, 8H), 1.47 - 1.42 (m, 9H), 1.32 - 1.26 (m, 9H)。 19F NMR (376 MHz, CD 3OD) δ -81.53, -81.94。
步驟 -6. N-[4- 胺基 -1-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image1726
將TFA（2.00 mL）添加到 N-[4-[(2-甲基丙烷-2-亞磺醯基)胺基]-4-(三氟甲基)環己基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-5，34.0 mg，0.09 mmol）在DCM（2.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈油狀物的標題化合物（40.0 mg）。LCMS (ESI): 287 [M+H] +。
步驟 -7. (7 S)- N-(4-(( 三級丁基亞磺醯基 ) 胺基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1728
將HOBt（25.0 mg，0.18 mmol），EDCI（35.0 mg，0.18 mmol），和 N-[4-胺基-1-(三氟甲基)環己基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-6，35.0 mg，0.12 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，46.0 mg，0.12 mmol）和DIPEA（79.0 mg，0.61 mmol）在DMF（3.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得標題化合物（55.0 mg）。LCMS (ESI): 643 [M+H] +。
步驟 -8. (S)-N-((1 s,4 R)-4- 胺基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ((1 r,4 S)-4- 胺基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1714
將在1,4-二㗁𠮿（3.00 mL，4 M）中的HCl（氣態）添加到(7 S)- N-(4-((三級丁基亞磺醯基)胺基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-7，50.0 mg，0.08 mmol）在1,4-二㗁𠮿（3.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，2/1 v/v）純化，以獲得( S)-N-((1 s,4 R)-4-胺基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-((1 r,4 S)-4-胺基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，其為兩部分。LCMS (ESI): 539 [M+H] +。
實例 399-A.獲得呈固體的第一洗脫峰（12.3 mg）。
第一洗脫峰的Rf值為0.4。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.45 - 7.17 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.79 - 4.52 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.65 - 3.59 (m, 1H), 2.82 - 2.76 (m, 1H), 2.43 - 2.37 (m, 1H), 1.95 - 1.68 (m, 11H), 1.39 - 0.97 (m, 3H), 0.79 - 0.73 (m, 2H)。LCMS (ESI): 539.10 [M+H] +。
實例 399-B.獲得呈固體的第二洗脫峰（1.1 mg）。
第二洗脫峰的Rf值為0.3。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.45 - 7.09 (m, 2H), 4.83 - 4.41 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.92 - 3.87 (m, 1H), 2.94 - 2.88 (m, 1H), 2.44 - 2.38 (m, 1H), 2.06 - 1.64 (m, 9H), 1.58 - 1.46 (m, 2H), 1.39 - 1.20 (m, 2H), 1.08 - 1.02 (m, 1H), 0.78 - 0.72 (m, 2H)。LCMS (ESI): 539.20 [M+H] +。
實例 400. (S)-N-((3,5- 二氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1731
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(3,5-二氟吡啶-2-基)甲胺二鹽酸鹽作為起始材料。將所得殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18柱；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至50 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（72.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.16 - 13.83 (m, 1H), 8.47 (d, 1H), 8.43 - 8.21 (m, 2H), 7.98 - 7.87 (m, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.68 - 4.38 (m, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.33 - 3.29 (m, 1H), 2.78 - 2.74 (m, 1H), 2.20 - 2.16 (m, 1H), 1.80 - 1.75 (m, 1H), 1.55 - 1.51 (m, 1H), 1.20 - 1.15 (m, 1H), 1.06 - 0.39 (m, 4H)。LCMS (ESI): 501.25 [M+H] +。
實例 401. (2 S,4 S)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2- 甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 R,4 S)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2- 甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 R,4 R)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2- 甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 S,4 R)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2- 甲基哌啶 -4- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1733
步驟 -1. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]-2- 甲基哌啶 -4- 甲酸甲酯
Figure 02_image1735
將HATU（706.8 mg，1.86 mmol）和2-甲基哌啶-4-甲酸甲酯鹽酸鹽（300.0 mg，1.55 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-甲酸（中間體506，569.2 mg，1.55 mmol）和DIPEA（600.6 mg，4.65 mmol）在DMF（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（3/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（700.0 mg）。LCMS (ESI): 507.2 [M+H] +。
步驟 -2. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]-2- 甲基哌啶 -4- 甲酸
Figure 02_image1737
將氫氧化鋰（116.0 mg，2.76 mmol）添加到1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]-2-甲基哌啶-4-甲酸甲酯（步驟-1，700.0 mg，1.38 mmol）在THF（2.00 mL），MeOH（2.00 mL）和H 2O（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。用HCl的水溶液（1 M）將混合物酸化至pH 3。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（600.0 mg）。LCMS (ESI): 493.2 [M+H] +。
步驟 -3. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]-2- 甲基 - N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image1739
將HOBt（259.2 mg，1.92 mmol），EDCI（367.7 mg，1.92 mmol）和(1r,4r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇鹽酸鹽（280.9 mg，1.28 mmol）添加到1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]-2-甲基哌啶-4-甲酸（步驟-2，630.0 mg，1.28 mmol）和DIPEA（826.4 mg，6.39 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（800.0 mg）。LCMS (ESI): 658.3 [M+H] +。
步驟 -4. (2 S,4 S)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2- 甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 R,4 S)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2- 甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 R,4 R)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2- 甲基哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 S,4 R)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2- 甲基哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image1733
將TFA（5.00 mL）添加到三級丁基 1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]-2-甲基- N-[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺（步驟-3，780.0 mg，1.19 mmol）在DCM（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得(2 S,4 S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺，和(2 R,4 S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺，和(2 R,4 R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺和(2 S,4 R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺（332.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 8.28 (d, 1H), 7.83 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.04 (d, 1H), 5.72 - 5.66 (m, 1H), 4.42 - 4.36 (m, 1H), 4.20 - 3.84 (m, 6H), 1.88 - 1.60 (m, 8H), 1.55 - 1.45 (m, 4H), 1.25 - 1.17 (m, 3H)。LCMS (ESI): 528.15.[M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該四種非鏡像異構物的混合物（330.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=70 : 30，保持11 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 401-A 和實例 401-B.獲得第一洗脫峰（160.0 mg），其為兩種非鏡像異構物的固體混合物。
第一洗脫峰的保留時間為3.11 min。
實例 401-C.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（7.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.61 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.17 - 13.70 (m, 1H), 8.35 - 8.13 (m, 1H), 7.83 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.14 - 6.81 (m, 1H), 5.78 - 5.51 (m, 1H), 5.02 - 4.28 (m, 1H), 3.97 - 3.64 (m, 4H), 3.31 - 3.26 (m, 3H), 1.89 - 1.66 (m, 6H), 1.62 - 1.38 (m, 5H), 1.35 - 1.08 (m, 4H)。LCMS (ESI): 528.05 [M+H] +。
實例 401-D.獲得呈固體的第三洗脫非鏡像異構物（7.1 mg）。
第三洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.95 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ14.17 - 13.77 (m, 1H), 8.46 - 8.11 (m, 1H), 7.87 - 7.79 (m, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.14 - 6.86 (m, 1H), 5.72 - 5.66 (m, 1H), 5.07 - 4.25 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.85 - 3.80 (m, 1H), 3.31 - 3.28 (m, 3H), 1.82 - 1.67 (m, 6H), 1.56 - 1.50 (m, 5H), 1.31 - 1.12 (m, 4H)。LCMS (ESI): 528.05 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離第一洗脫峰（160.0 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=80 : 20，保持22 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 401-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（68.6 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為14.40 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 8.28 (d, 1H), 7.83 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.04 (d, 1H), 5.71 - 5.65 (m, 1H), 4.42 - 4.36 (m, 1H), 4.13 - 3.84 (m, 4H), 3.71 - 3.35 (m, 3H), 1.99 - 1.62 (m, 8H), 1.55 - 1.45 (m, 4H), 1.26 - 1.17 (m, 3H)。LCMS (ESI): 528.05 [M+H] +。
實例 401-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（58.2 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為16.94 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.18 - 13.66 (m, 1H), 8.41 - 8.10 (m, 1H), 7.82 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.17 - 6.87 (m, 1H), 5.82 - 5.55 (m, 1H), 4.59 - 4.17 (m, 1H), 4.07 - 3.72 (m, 4H), 3.57 - 3.30 (m, 3H), 2.00 - 1.35 (m, 12H), 1.28 - 1.05 (m, 3H)。LCMS (ESI): 528.05 [M+H] +。
實例 402. (S)-N-((3- 氯 -5- 甲氧基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1742
使用與對於實例389的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用2-溴-3-氯-5-甲氧基吡啶作為起始材料。將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（1/2 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（43.4 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.27 - 13.76 (m, 1H), 8.38 - 8.09 (m, 3H), 7.59 (d, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.74 - 4.22 (m, 2H), 4.03 - 3.70 (m, 6H), 1.91 - 1.40 (m, 3H), 1.38 - 1.07 (m, 3H), 1.07 - 0.34 (m, 5H)。LCMS(ESI): 529.10 [M+H] +。
實例 403. (2 R,4 S)-2- 乙基 -1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 S,4 R)-2- 乙基 -1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 S,4 S)-2- 乙基 -1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 R,4 R)-2- 乙基 -1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1744
步驟 -1. 2- 乙烯基吡啶 -4- 甲酸甲酯
Figure 02_image1746
將2-乙烯基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷（1.57 g，10.18 mmol），K 3PO 4（3.93 g，18.52 mmol）和Pd(dppf)Cl 2（1.35 g，1.85 mmol）添加到2-溴吡啶-4-甲酸甲酯（2.00 g，9.26 mmol）在1,4-二㗁𠮿（15.00 mL）/H 2O（1.50 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在70ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。在減壓下濃縮所得溶液。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/3 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（1.30 g）。LCMS (ESI): 164.1 [M+H] +。 步驟 -2. 2- 乙基哌啶 -4- 甲酸甲酯
Figure 02_image1748
將PtO 2（1.30 g）添加到2-乙烯基吡啶-4-甲酸甲酯（步驟-1，1.30 g，7.97 mmol）在AcOH（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌14 h。在減壓下濃縮所得溶液。將殘餘物藉由矽膠柱（DCM/MeOH（5/1 v/v））純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（112.0 mg）。LCMS (ESI): 172.1 [M+H] +。 步驟 -3. 2- 乙基 -1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸甲酯
Figure 02_image1750
將HATU（266.5 mg，0.70 mmol）和2-乙基哌啶-4-甲酸甲酯（步驟-2，100.0 mg，0.58 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-甲酸（中間體506，214.6 mg，0.58 mmol）和DIPEA（377.4 mg，2.92 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/5 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（220.0 mg）。LCMS (ESI): 521.3 [M+H] +。 步驟 -4. 2- 乙基 -1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ] 哌啶 -4- 甲酸
Figure 02_image1752
將氫氧化鋰（51.6 mg，1.23 mmol）添加到2-乙基-1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸甲酯（步驟-3，320.0 mg，0.62 mmol）在MeOH（3.00 mL）/THF（3.00 mL）/H 2O（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將溶液在減壓下濃縮，然後用HCl（1M）酸化至pH 3。將殘餘物用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（295.0 mg）。LCMS (ESI): 507.4 [M+H] +。 步驟 -5. 2- 乙基 -1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image1754
將HOBt（104.0 mg，0.77 mmol），EDCI（147.6 mg，0.77 mmol），和(1r,4r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇鹽酸鹽（112.7 mg，0.51 mmol）添加到2-乙基-1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸（步驟-4，260.0 mg，0.51 mmol）和DIPEA（199.0 mg，1.54 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（297.0 mg）。LCMS (ESI): 672.3 [M+H] +。
步驟 -6. (2 R,4 S)-2- 乙基 -1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 S,4 R)-2- 乙基 -1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 S,4 S)-2- 乙基 -1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺，和 (2 R,4 R)-2- 乙基 -1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image1744
將TFA（3.00 mL）添加到2-乙基-1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]- N-[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺（步驟-5，297.0 mg，0.44 mmol）在DCM（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將溶液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得(2 R,4 S)-2-乙基-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺，和(2 S,4 R)-2-乙基-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺和(2 S,4 S)-2-乙基-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺，和(2 R,4 R)-2-乙基-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺（160.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 403）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.95 (s, 1H), 8.42 - 8.18 (m, 1H), 7.94 - 7.70 (m, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 5.77 - 5.56 (m, 1H), 4.41 - 4.13 (m, 2H), 3.90 - 3.80 (m, 4H), 2.98 - 2.59 (m, 1H), 2.17 - 1.89 (m, 1H), 1.85 - 1.62 (m, 8H), 1.61 - 1.33 (m, 5H), 1.15 - 1.25 (m, 1H), 0.97 - 0.67 (m, 3H)。LCMS (ESI): 542 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該四種非鏡像異構物的混合物（160.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: EtOH=90 : 10，保持14 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 403-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（40.7 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.41 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.96 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.94 - 7.73 (m, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (s, 1H), 5.72 - 5.65 (m, 1H), 4.31 - 4.21 (m, 2H), 3.90 - 3.80 (m, 4H), 2.95 - 2.56 (m, 1H), 2.03 - 1.85 (m, 1H), 1.81 - 1.61 (m, 8H), 1.59 - 1.35 (m, 5H), 1.31 - 1.11 (m, 1H), 0.92 - 0.66 (m, 3H)。LCMS (ESI): 542.30 [M+H] +。
實例 403-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（36.4 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.72 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.96 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.94 - 7.62 (m, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.02 (s, 1H), 5.72 - 5.66 (m, 1H), 4.34 - 4.24 (m, 2H), 3.90 - 3.79 (m, 4H), 3.02 - 2.62 (m, 1H), 2.10 - 1.83 (m, 1H), 1.85 - 1.62 (m, 8H), 1.59 - 1.36 (m, 5H), 1.33 - 1.04 (m, 1H), 0.97 - 0.63 (m, 3H)。LCMS (ESI): 542.30 [M+H] +。
實例 403-C.獲得呈固體的第三洗脫非鏡像異構物（7.3 mg）。
第三洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.69 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.95 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.00 (s, 1H), 5.68 (s, 1H), 4.69 - 4.65 (m, 1H), 4.45 - 4.37 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.83 - 3.77 (m, 1H), 3.18 - 3.13 (m, 1H), 2.75 - 2.71 (m, 1H), 1.84 - 1.41 (m, 13H), 1.30 - 1.11 (m, 1H), 0.89 - 0.65 (m, 3H)。LCMS (ESI): 542.30 [M+H] +。
實例 403-D.獲得呈固體的第四洗脫非鏡像異構物（7.7 mg）。
第四洗脫非鏡像異構物的保留時間為12.92 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.95 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.00 (s, 1H), 5.68 (s, 1H), 4.69 - 4.65 (m, 1H), 4.45 - 4.37 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.83 - 3.77 (m, 1H), 3.18 - 3.13 (m, 1H), 2.75 - 2.71 (m, 1H), 1.84 - 1.41 (m, 13H), 1.30 - 1.11 (m, 1H), 0.89 - 0.65 (m, 3H)。LCMS (ESI): 542.30 [M+H] +。
實例 404. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5- 氟 -3-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1757
步驟 -1. 1-(3- 溴 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲胺
Figure 02_image1759
在-78ºC下在N 2氣氛下，將DIBAL-H（15.00 mL，14.93 mmol）添加到3-溴-5-氟吡啶-2-甲腈（1.00 g，4.98 mmol）在DCM（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得溶液在-78ºC下在N 2氣氛下攪拌1 h。在-78ºC下將所得溶液用MeOH淬滅並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（333.6 mg）。LCMS (ESI): 205.0 [M+H] +。
步驟 -2. N-[(3- 溴 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1761
將(Boc) 2O（400.6 mg，1.84 mmol）和NEt 3（386.9 mg，3.83 mmol）添加到1-(3-溴-5-氟吡啶-2-基)甲胺（步驟-1，313.6 mg，1.53 mmol）在DCM（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h。將溶液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（30/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（305.0 mg）。LCMS (ESI): 305.0 [M+H] +。
步驟 -3. N-[[5- 氟 -3-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ] 甲基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1763
將Pd-PEPPSI-IPentCl 2-甲基吡啶 (鄰甲基吡啶)（110.2 mg，0.13 mmol，CAS#：1612981-29-8），Cs 2CO 3（427.1 mg，1.31 mmol），和1-甲基-哌𠯤（98.5 mg，0.98 mmol）添加到 N-[(3-溴-5-氟吡啶-2-基)甲基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-2，200.0 mg，0.66 mmol）在甲苯（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將溶液在130ºC下在N 2氣氛下攪拌14 h。在減壓下濃縮所得溶液。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（12/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（35.7 mg）。LCMS (ESI): 325.2 [M+H] +。
步驟 -4. 1-[5- 氟 -3-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ] 甲胺
Figure 02_image1765
將TFA（1.00 mL）添加到 N-[[5-氟-3-(4-甲基哌𠯤-1-基)吡啶-2-基]甲基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-3，30.0 mg，0.09 mmol）在DCM（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈油狀物的標題化合物。LCMS (ESI): 225.1 [M+H] +。
步驟 -5. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5- 氟 -3-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1757
將HOBt（18.7 mg，0.14 mmol），EDCI（26.5 mg，0.14 mmol）和1-[5-氟-3-(4-甲基哌𠯤-1-基)吡啶-2-基]甲胺（20.7 mg，0.09 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，34.6 mg，0.09 mmol）和DIEA（35.8 mg，0.28 mmol）在DMF（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：30 B至50 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（3.2 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.21 (d, 1H), 8.14 (d, 1H), 7.54 - 7.39 (m, 1H), 7.35 - 7.21 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.62 - 4.45 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.74 - 3.59 (m, 1H), 3.12 - 3.01 (m, 4H), 3.00 - 2.87 (m, 4H), 2.58 (s, 3H), 2.51 - 2.19 (m, 1H), 2.01 - 1.71 (m, 2H), 1.67 - 1.49 (m, 1H), 1.29 - 1.09 (m, 2H), 1.02 - 0.83 (m, 2H), 0.81 - 0.58 (m, 2H)。LCMS (ESI): 581.10 [M+H] +。
實例 405. (R)-N-((5 R,8 r)-4,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (R)-N- ((5 S,8 s)-4,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N- ((5 S,8 r)-4,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N- ((5 R,8 s)-4,4- 二氟 -1- 氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1768
將HOBt（94.2 mg，0.70 mmol），EDCI（133.3 mg，0.70 mmol），和4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-胺（來自實例370的合成步驟-1，79.0 mg，0.31 mmol）添加到4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體526，120.0 mg，0.28 mmol）和DIPEA（258.9 mg，1.40 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：15 B至50 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的 (R)-N-((5 R,8 r)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (R)-N-((5 S,8 s)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-((5 S,8 r)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-((5 R,8 s)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺的非鏡像異構物混合物（100.0 mg）（ 實例 405）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.49 - 8.29 (m, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.13 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 3.97 - 3.77 (m, 3H), 3.64 - 3.60 (m, 1H), 2.92 - 2.67 (m, 1H), 2.55 - 2.35 (m, 3H), 2.02 - 1.41 (m, 12H), 1.38 - 0.88 (m, 3H), 0.76 - 0.71 (m, 3H)。LCMS (ESI): 532.15 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該四種非鏡像異構物的混合物（100.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/DCM=50 : 50，保持12 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 405-A 和實例 405-B.獲得第一洗脫峰（40.0 mg），其為兩種非鏡像異構物的固體混合物。
第一洗脫峰的保留時間為4.22 min。
實例 405-C.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（8.6 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.68 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.49 - 8.38 (m, 1H), 8.03 - 7.90 (m, 1H), 7.75 - 7.69 (m, 1H), 7.15 (s, 1H), 4.81 - 4.50 (m, 1H), 4.06 - 3.91 (m, 2H), 3.90 - 3.77 (m, 1H), 2.99 - 2.74 (m, 1H), 2.59 (s, 3H), 2.56 - 2.40 (m, 2H), 2.03 - 1.48 (m, 11H), 1.42 - 1.20 (m, 2H), 1.17 - 0.98 (m, 1H), 0.86 - 0.63 (m, 3H)。LCMS (ESI): 532.35 [M+H] +。
實例 405-D.獲得呈固體的第三洗脫非鏡像異構物（7.1 mg）。
第三洗脫非鏡像異構物的保留時間為12.84 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.42 (s, 1H), 7.98 - 7.92 (m, 1H), 7.81 - 7.63 (m, 1H), 7.15 (s, 1H), 4.78 - 4.55 (m, 1H), 4.06 - 3.89 (m, 2H), 3.77 - 3.54 (m, 1H), 2.91 - 2.68 (m, 1H), 2.62 - 2.36 (m, 4H), 1.99 - 1.69 (m, 6H), 1.69 - 1.43 (m, 5H), 1.39 - 1.20 (m, 2H), 1.16 - 0.90 (m, 2H), 0.86 - 0.64 (m, 3H)。LCMS (ESI): 532.35 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離第一洗脫峰（40.0 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK AD-H柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=70 : 30，保持36 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 405-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（4.1 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為21.97 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.40 (s, 1H), 7.89 - 7.84 (m, 1H), 7.13 (s, 1H), 4.67 - 4.15 (m, 1H), 4.01 - 3.75 (m, 3H), 3.16 - 2.78 (m, 1H), 2.61 - 2.52 (m, 2H), 2.54 - 2.38 (m, 2H), 2.25 - 2.01 (m, 1H), 1.99 - 1.71 (m, 5H), 1.69 - 1.47 (m, 4H), 1.39 - 1.14 (m, 4H), 1.10 - 0.95 (m, 1H), 0.94 - 0.83 (m, 1H), 0.80 - 0.62 (m, 2H)。LCMS (ESI): 532.20 [M+H] +。
實例 405-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（10.8 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為28.6 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.41 (s, 1H), 7.86 - 7.82 (m, 1H), 7.13 (s, 1H), 4.71 - 4.18 (m, 1H), 3.98 - 3.88 (m, 2H), 3.74 - 3.40 (m, 1H), 3.10 - 2.65 (m, 1H), 2.56 (s, 3H), 2.50 - 2.34 (m, 3H), 2.16 - 1.62 (m, 6H), 1.60 - 1.43 (m, 4H), 1.37 - 1.17 (m, 2H), 1.10 - 0.87 (m, 2H), 0.80 - 0.58 (m, 2H)。LCMS (ESI): 532.20 [M+H] +。
實例 406. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1-((1- 氟環丙基 ) 甲基 ) 氮雜環丁烷 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1770
步驟 -1. 3-[ 雙 [(4- 甲氧基苯基 ) 甲基 ] 胺基 ] 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1772
將K 2CO 3（2.40 g，17.42 mmol）和1-(溴甲基)-4-甲氧基苯（2.90 g，14.52 mmol）添加到3-胺基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯（1.00 g，5.81 mmol）在MeCN（10.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下在氮氣氣氛下攪拌3 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（2.10 g）。LCMS (ESI): 413 [M+H] +。
步驟 -2. N, N- 雙 [(4- 甲氧基苯基 ) 甲基 ] 氮雜環丁烷 -3- 胺
Figure 02_image1774
將在1,4-二㗁𠮿（5.00 ml，4M）中的HCl（氣態）添加到3-[雙[(4-甲氧基苯基)甲基]胺基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，2.10 g，5.09 mmol）在1,4-二㗁𠮿（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.50 g）。LCMS (ESI): 313 [M+H] +。
步驟 -3. 1-(1- 氟環丙烷羰基 )- N, N- 雙 [(4- 甲氧基苯基 ) 甲基 ] 氮雜環丁烷 -3- 胺
Figure 02_image1776
將HATU（913.0 mg，2.40 mmol）和 N, N-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]氮雜環丁烷-3-胺（步驟-2，500.0 mg，1.60 mmol）添加到1-氟環丙烷-1-甲酸（167.0 mg，1.60 mmol）和DIPEA（621.0 mg，4.80 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（3/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（400.0 mg）。LCMS (ESI): 399 [M+H] +。
步驟 -4. 1-[(1- 氟環丙基 ) 甲基 ]- N, N- 雙 [(4- 甲氧基苯基 ) 甲基 ] 氮雜環丁烷 -3- 胺
Figure 02_image1778
將BH 3-Me 2S（4.50 mL，9.03 mmol）添加到1-(1-氟環丙烷羰基)- N, N-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]氮雜環丁烷-3-胺（步驟-3，360.0 mg，0.90 mmol）在THF（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物用MeOH淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（220.0 mg）。LCMS (ESI): 385 [M+H] +。
步驟 -5. 1-[(1- 氟環丙基 ) 甲基 ] 氮雜環丁烷 -3- 胺
Figure 02_image1780
將硝酸鈰銨（301.0 mg，0.55 mmol）添加到1-[(1-氟環丙基)甲基]- N, N-雙[(4-甲氧基苯基)甲基]氮雜環丁烷-3-胺（步驟-4，100.0 mg，0.26 mmol）在H 2O（0.50 mL）和MeCN（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（35.0 mg）。LCMS (ESI): 145 [M+H] +。
步驟 -6. (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1-((1- 氟環丙基 ) 甲基 ) 氮雜環丁烷 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1770
將EDCI（60.0 mg，0.31 mmol），HOBt（43.0 mg，0.31 mmol），和1-[(1-氟環丙基)甲基]氮雜環丁烷-3-胺（步驟-5，30.0 mg，0.21 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，78.0 mg，0.21 mmol）和DIPEA（134.0 mg，1.04 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（15.5 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.35 - 7.23 (m, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.65 - 4.41 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.84 - 3.72 (m, 2H), 3.21 - 3.08 (m, 2H), 2.96 - 2.70 (m, 3H), 2.62 - 2.09 (m, 1H), 2.03 - 1.65 (m, 2H), 1.49 - 1.08 (m, 2H), 1.07 - 0.92 (m, 4H), 0.79 - 0.61 (m, 4H)。LCMS (ESI): 501.20[M+H] +。
實例 407. (S)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,2- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺和 (R)- 1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,2- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1783
步驟 -1. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]-2,2- 二甲基哌啶 -4- 甲酸甲酯
Figure 02_image1785
將HATU（367.0 mg，0.97 mmol）和2,2-二甲基哌啶-4-甲酸甲酯鹽酸鹽（100.0 mg，0.48 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-甲酸（中間體506，195.0 mg，0.53 mmol）和DIPEA（623.0 mg，4.83 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，3/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（250.0 mg）。LCMS (ESI): 521.26 [M+H] +。
步驟 -2. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]-2,2- 二甲基哌啶 -4- 甲酸
Figure 02_image1787
將LiOH.H 2O（57.7 mg，1.44 mmol）添加到1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]-2,2-二甲基哌啶-4-甲酸甲酯（步驟-1，250.0 mg，0.48 mmol）在THF（1.50 mL），H 2O（1.50 mL）和MeOH（1.50 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。用HCl（水溶液）將混合物酸化至pH 3。將所得混合物用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（2/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（220.0 mg）。LCMS (ESI): 507.24 [M+H] +。
步驟 -3. 1-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ] 哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image1789
將EDCI（169.8 mg，0.89 mmol），HOBt（120.0 mg，0.89 mmol），和(1 r,4 r)-4-(氯胺基)-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（107.1 mg，0.49 mmol）添加到1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]-2,2-二甲基哌啶-4-甲酸（步驟-2，225.0 mg，0.45 mmol）和DIPEA（573.6 mg，4.46 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，2/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（264.0 mg）。LCMS (ESI): 672.32 [M+H] +。
步驟 -4. (S)-1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,2- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺和 (R)- 1-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2,2- 二甲基哌啶 -4- 甲醯胺
Figure 02_image1783
在0ºC下將TFA（3.00 mL）添加到1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]-2,2-二甲基- N-[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺（步驟-3，234.0 mg，0.35 mmol）在DCM（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，1/1 v/v）純化，以獲得( S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,2-二甲基哌啶-4-甲醯胺和 (R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,2-二甲基哌啶-4-甲醯胺（160.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 407）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.19 - 8.07 (m, 1H), 7.45 - 7.13 (m, 1H), 7.08 - 6.87 (m, 1H), 4.02 - 3.94 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.82 - 3.76 (m, 1H), 3.69 - 3.44 (m, 1H), 2.94 - 2.78 (m, 1H), 2.11 - 2.00 (m, 1H), 1.99 - 1.82 (m, 5H), 1.80 - 1.57 (m, 10H), 1.34 - 1.28 (m, 1H), 0.97 - 0.87 (m, 1H)。LCMS (ESI): 542.30 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（150.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: EtOH=95 : 5，保持18 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 407-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（43.2 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.62 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.92 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 6.94 (s, 1H), 5.69 (s, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.86 - 3.79 (m, 1H), 3.73 - 3.62 (m, 1H), 3.53 - 3.35 (m, 1H), 2.75 - 2.64 (m, 1H), 1.97 - 1.36 (m, 17H), 1.19 - 1.13 (m, 1H)。LCMS (ESI): 542.25 [M+H] +。
實例 407-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（37.9 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為14.69 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.94 - 13.90 (m, 1H), 8.26 - 8.21 (m, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 6.96 - 6.91 (m, 1H), 5.71 - 5.67 (m, 1H), 3.89 - 3.79 (m, 4H), 3.86 - 3.79 (m, 1H), 3.73 - 3.62 (m, 1H), 2.75 - 2.64 (m, 1H), 1.96 - 1.49 (m, 17H), 1.26 - 1.08 (m, 1H)。LCMS (ESI): 542.25 [M+H] +。
實例 408. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 s,4 R)-4-( 羥基甲基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4-( 羥基甲基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1792
步驟 -1. 4-( 羥基甲基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 酮
Figure 02_image1794
將(8-(三氟甲基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)甲醇（50.0 mg，0.21 mmol）在AcOH（80%水溶液，0.27 M）中的溶液在65ºC下攪拌18 h。將反應混合物減壓濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的EtOAc，0%至100%）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（7.0 mg）。TLC-MS (APCI): 229.1 [M+MeOH+H] +。
步驟 -2. 4-( 羥基甲基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 酮肟
Figure 02_image1796
將鹽酸羥胺（2.7 mg，0.04 mmol）添加到乙酸鈉（3.5 mg，0.04 mmol）在MeOH（0.10 mL）中的溶液中。將所得混合物攪拌30 min。然後將4-(羥基甲基)-4-(三氟甲基)環己烷-1-酮（步驟-1，7.0 mg，0.04 mmol）在MeOH（0.10 mL）中的溶液添加到反應混合物中。將反應混合物在60ºC下攪拌48 h。然後將反應混合物冷卻至22ºC並用EtOAc和水稀釋。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（7.4 mg）。TLC-MS (APCI): 212.1 [M+H] +。
步驟 -3. (4-( 羥基甲基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1798
在-78ºC下將NaBH 4（10.0 mg，0.27 mmol）添加到4-(羥基甲基)-4-(三氟甲基)環己烷-1-酮肟（步驟-2，7.0 mg，0.03 mmol）和六水合氯化鎳(II)（10.2 mg，0.04 mmol）在MeOH（49.00 mL）中的溶液中。使所得混合物升溫至0ºC並在該溫度下攪拌6.5 h。將Boc 2O（10.8 mg，0.05 mmol）添加到反應混合物中並將反應混合物升溫至22ºC持續18 h。在0ºC下將反應混合物用鹽水淬滅。在減壓下除去MeOH並將所得混合物用Et 2O稀釋。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的EtOAc，20%至50%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（8.1 mg）（約90%純度）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3, 非鏡像異構物的混合物) δ 4.60 - 4.35 (m, 1H), 3.84 - 3.63 (m, 2H), 3.61 - 3.36 (m, 1H), 1.99 - 1.50 (m, 9H), 1.44 (s, 9H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl3, 非鏡像異構物的混合物) δ -71.95, -76.51。
步驟 -4. [4- 胺基 -1-( 三氟甲基 ) 環己基 ] 甲醇
Figure 02_image1800
將TFA（0.50 mL）添加到 N-[4-(羥基甲基)-4-(三氟甲基)環己基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-3，8.1 mg，0.03 mmol）在DCM（0.50 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將溶液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（5.3 mg）。LCMS (ESI): 198.1 [M+H] +。
步驟 -5. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 s,4 R)-4-( 羥基甲基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4-( 羥基甲基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1792
將HOBt（5.5 mg，0.04 mmol），EDCI（7.7 mg，0.04 mmol），和[4-胺基-1-(三氟甲基)環己基]甲醇（5.3 mg，0.03 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，10.1 mg，0.03 mmol）和DIPEA（17.4 mg，0.14 mmol）在DMF（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 s,4 R)-4-(羥基甲基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-(羥基甲基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（8.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 408）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.12 (s, 1H), 7.48 - 6.84 (m, 2H), 4.61 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.81 - 3.41 (m, 3H), 3.03 - 2.21 (m, 2H), 2.02 - 1.48 (m, 9H), 1.38 - 1.17 (m, 3H), 0.81 - 0.49 (m, 4H)。LCMS (ESI): 554.20 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（8.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: EtOH=50 : 50，保持13 min
流速：18 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 408-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（1.8 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為4.93 min。
LCMS (ESI): 554.30 [M+H] +。
實例 408-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（0.3 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.35 min。
LCMS (ESI): 554.35 [M+H] +。
實例 409. (7 S)- N-(1-( 三級丁基亞磺醯基 )-3,3- 二氟 -1- 氮雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1802
步驟 -1. 2-(8-(( 三級丁基亞磺醯基 ) 胺基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-2,2- 二氟乙酸乙酯
Figure 02_image1804
將鋅（2.51 g，38.4 mmol）和氯化亞銅（1.27 g，12.8 mmol）的混合物攪拌並在氮氣氣氛下用熱風槍加熱1 min。冷卻至22ºC後，添加乾THF（30.00 mL）並將反應混合物在70ºC下攪拌30 min。將混合物冷卻至22ºC並在22ºC下逐滴添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯（6.50 g，32.0 mmol）。在22ºC下攪拌10 min後，逐滴添加2-甲基- N-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-亞基)丙烷-2-亞磺醯胺（來自實例399的合成步驟-1，3.32 g，12.8 mmol）在乾THF（13.00 mL）中的溶液，並且然後將反應混合物在60ºC下攪拌18 h。將混合物用NH 4Cl/鹽水（1/1 v/v）的飽和水溶液淬滅並用EtOAc萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在DCM中的EtOAc，0至100%）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（1.44 g，3.76 mmol）。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.34 (q, 2H), 3.98 - 3.89 (m, 4H), 3.68 (s, 1H), 2.25 - 2.04 (m, 3H), 2.04 - 1.92 (m, 3H), 1.83 - 1.74 (m, 1H), 1.71 - 1.62 (m, 3H), 1.36 (t, 3H), 1.25 (s, 9H)。
步驟 -2. N-(8-(1,1- 二氟 -2- 羥基乙基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image1806
在0ºC下將LiAlH 4（6.26 mL，15.0 mmol，2.4 M）逐滴添加到2-(8-((三級丁基亞磺醯基)胺基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)-2,2-二氟乙酸乙酯（步驟-1，1.44 g，3.76 mmol）在THF（47.00 ml）中的溶液中。將反應混合物在0ºC下攪拌1 h。將所得混合物用Et 2O稀釋，冷卻至0ºC，並藉由依次添加水（0.57 mL），NaOH（0.86 mL，15%水溶液），和水（1.71 mL）淬滅。將混合物升溫至22ºC持續15 min，用MgSO 4攪拌15 min，並過濾沈澱物，並將濾餅用EtOAc和Et 2O洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（1.00 g）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.02 (ddd, 1H), 3.95 - 3.93 (m, 4H), 3.92 - 3.77 (m, 2H), 2.35 - 2.26 (m, 1H), 2.18 - 2.02 (m, 2H), 1.81 - 1.60 (m, 5H), 1.28 (s, 9H)。
步驟 -3. 1-( 三級丁基亞磺醯基 )-3,3- 二氟 -8,11- 二氧雜 -1- 氮雜二螺 [3.2.47.24] 十三烷
Figure 02_image1808
將三苯基膦（1.15 g，4.39 mmol）和DIAD（1.18 g，5.86 mmol）添加到 N-(8-(1,1-二氟-2-羥基乙基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-2，1.00 g，2.93 mmol）在乾THF（84.00 mL）中的溶液中。將反應混合物在22ºC下攪拌18 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在DCM中的EtOAc，0%至50%）純化，以獲得標題化合物（708.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.53 (td, 1H), 3.88 - 3.84 (m, 4H), 3.49 (dt, 1H), 2.24 - 2.17 (m, 2H), 2.17 - 2.10 (m, 1H), 1.85 - 1.78 (m, 1H), 1.75 - 1.63 (m, 4H), 1.07 (s, 9H)。
步驟 -4. 1-( 三級丁基亞磺醯基 )-3,3- 二氟 -1- 氮雜螺 [3.5] 壬 -7- 酮
Figure 02_image1810
將1-(三級丁基亞磺醯基)-3,3-二氟-8,11-二氧雜-1-氮雜二螺[3.2.47.24]十三烷（步驟-3，413.0 mg，75.2% Wt，0.96 mmol）在AcOH（80%水溶液，0.27 M）中的溶液在65ºC下攪拌18 h。將反應在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的EtOAc，20%至100%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（180.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.71 (td, 1H), 3.66 (dt, 1H), 2.65 - 2.37 (m, 8H), 1.17 (s, 9H)。
步驟 -5. 1-( 三級丁基亞磺醯基 )-3,3- 二氟 -1- 氮雜螺 [3.5] 壬 -7- 酮肟
Figure 02_image1812
將鹽酸羥胺（95.8 mg，1.38 mmol）添加到乙酸鈉（205.0 mg，1.50 mmol）在MeOH（3.13 mL）中的溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌30 min。將1-(三級丁基亞磺醯基)-3,3-二氟-1-氮雜螺[3.5]壬-7-酮（步驟-4，350.0 mg，1.25 mmol）在MeOH（3.13mL）中的溶液添加到反應混合物中。將反應混合物在60ºC下攪拌48 h。然後將反應混合物冷卻至22ºC並用EtOAc和水稀釋。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（252.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.73 - 4.60 (m, 1H), 3.61 (qd, 1H), 3.33 - 3.14 (m, 1H), 2.80 - 2.09 (m, 7H), 1.14 (s, 9H)。
步驟 -6. (1-( 三級丁基亞磺醯基 )-3,3- 二氟 -1- 氮雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1814
在-78ºC下將NaBH 4（257.0 mg，6.79 mmol）添加到1-(三級丁基亞磺醯基)-3,3-二氟-1-氮雜螺[3.5]壬-7-酮肟（步驟-5，250.0 mg，0.85 mmol）和六水合氯化鎳(II)（262.0 mg，1.10 mmol）在MeOH（49.00 mL）中的溶液中。使所得混合物升溫至0ºC並在該溫度下攪拌6.5 h。添加Boc 2O（278 mg，1.27 mmol）並將反應升溫至22ºC持續18 h。在0ºC下將反應用鹽水淬滅。在減壓下除去MeOH並將所得殘餘物用Et 2O稀釋。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的EtOAc，20%至40%）純化，以獲得固體（111.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 非鏡像異構物的混合物) δ 4.64 - 4.52 (m, 1H), 4.36 (s, 1H), 3.70 - 3.36 (m, 2H), 2.55 - 2.30 (m, 1H), 2.30 - 1.96 (m, 4H), 1.96 - 1.73 (m, 3H), 1.46 - 1.43 (m, 9H), 1.18 - 1.11 (m, 9H)。 19FNMR (400 MHz, CDCl 3, 非鏡像異構物混合物) δ -105.18, -105.70, -107.56, -108.37, -111.24, -111.45, -111.76, -111.97。TLC-MS (APCI): 381.4 [M+H] +。
步驟 -7. 3,3- 二氟 -1-(2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯基 )-1- 氮雜螺 [3.5] 壬 -7- 胺
Figure 02_image1816
將TFA（3.00 mL）添加到 N-[3,3-二氟-1-(2-甲基丙烷-2-亞磺醯基)-1-氮雜螺[3.5]壬-7-基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-6，80.0 mg，0.21 mmol）在DCM（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈油狀物的標題化合物（58.0 mg）。LCMS (ESI): 281.1 [M+H] +。
步驟 -8. (7 S)- N-(1-( 三級丁基亞磺醯基 )-3,3- 二氟 -1- 氮雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1802
將HOBt（42.7 mg，0.32 mmol），EDCI（60.5 mg，0.32 mmol），和3,3-二氟-1-(2-甲基丙烷-2-亞磺醯基)-1-氮雜螺[3.5]壬-7-胺（步驟-7，59.0 mg，0.21 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，78.8 mg，0.21 mmol）和DIPEA（163.2 mg，1.26 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，3/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（35.0 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.33 - 7.24(m, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.67 - 4.44 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.90 - 3.81 (m, 1H), 3.81 - 3.69 (m, 1H), 2.51 - 2.19 (m, 1H), 2.16 - 1.85 (m, 3H), 1.83 - 1.35 (m, 7H), 1.34 - 1.13 (m, 13H), 1.08 - 0.84 (m, 1H), 0.78 - 0.70 (m, 2H)。LCMS (ESI): 637.05 [M+H] +。
實例 410. (S)-N-((4 S,7 r)-3,3- 二氟 -1- 氮雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ((4 R,7 s)-3,3- 二氟 -1- 氮雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1818
將在EtOAc（2.00 mL）中的HCl（氣態）添加到(7 S)- N-(1-(三級丁基亞磺醯基)-3,3-二氟-1-氮雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（實例409，35.0 mg，0.06 mmol）中。將所得溶液在25ºC下攪拌1 h。在減壓下濃縮所得溶液。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-N-((4 S,7 r)-3,3-二氟-1-氮雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-((4 R,7 s)-3,3-二氟-1-氮雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（25.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 533.2 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（25.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: MeOH=50 : 50，保持17 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 410-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（10.1 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.43 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.83 - 7.48 (m, 1H), 7.39 - 7.21 (m, 1H), 7.01 (s, 1H), 5.04 - 4.14 (m, 1H), 3.89 - 3.80 (m, 4H), 3.74 - 3.61 (m, 2H), 3.59 - 3.43 (m, 1H), 2.81 - 2.65 (m, 1H), 2.12 - 1.92 (m, 2H), 1.84 - 1.59 (m, 4H), 1.56 - 1.37 (m, 3H), 1.36 - 1.12 (m, 3H), 1.11 - 0.82 (m, 2H), 0.81 - 0.44 (m, 3H)。LCMS (ESI): 533.10 [M+H] +。
實例 410-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（8.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為14.94 min。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.99 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.80 - 7.65 (m, 1H), 7.37 - 7.23 (m, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.80 - 4.22 (m, 1H), 3.86 - 3.78 (m, 3H), 3.78 - 3.64 (m, 2H), 3.55 - 3.45 (m, 2H), 2.81 - 2.58 (m, 1H), 1.93 - 1.76 (m, 2H), 1.75 - 1.48 (m, 6H), 1.47 - 1.27 (m, 2H), 1.25 - 1.02 (m, 2H), 1.00 - 0.77 (m, 2H), 0.76 - 0.38 (m, 3H)。LCMS (ESI): 533.05 [M+H] +。
實例 411. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-(4- 羥基雙環 [2.2.2] 辛烷 -1- 基 ) 乙基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-(4- 羥基雙環 [2.2.2] 辛烷 -1- 基 ) 乙基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1820
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用4-(1-胺基乙基)雙環[2.2.2]辛烷-1-醇鹽酸鹽作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至40 B，30 min內；220/254 nm），以獲得非鏡像異構物的固體混合物（100.0 mg）（ 實例 411）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.25 (s, 1H), 7.46 - 7.25 (m, 2H), 7.00 (s, 1H), 4.80 - 4.07 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.70 - 3.47 (m, 2H), 2.75 - 2.60 (m, 1H), 2.24 - 2.05 (m, 1H), 1.75 - 1.61 (m, 1H), 1.55 - 1.32 (m, 14H), 1.28 - 1.11 (m, 1H), 1.02 - 0.80 (m, 4H), 0.69 - 0.55 (m, 2H)。LCMS (ESI): 526.10 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（100.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.1%二乙醇胺）: EtOH=90 : 10，保持12 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 411-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（14.4 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.32 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.25 - 13.65 (m, 1H), 8.36 - 8.14 (m, 1H), 7.44 - 7.18 (m, 2H), 7.00 (s, 1H), 4.63 - 4.14 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.61 - 3.47 (m, 2H), 2.77 - 2.67 (m, 1H), 2.66 - 2.52 (m, 1H), 2.38 - 2.07 (m, 1H), 1.88 - 1.62 (m, 1H), 1.52 - 1.33 (m, 12H), 1.27 - 1.04 (m, 1H), 1.02 - 0.70 (m, 5H), 0.70 - 0.45 (m, 2H)。LCMS (ESI): 526.10 [M+H] +。
實例 411-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（12.1 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.60 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.20 - 13.58 (m, 1H), 8.32 - 8.14 (m, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.34 - 7.25 (m, 1H), 7.09 - 6.89 (m, 1H), 4.62 - 4.29 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.63 - 3.49 (m, 2H), 2.82 - 2.59 (m, 1H), 2.58 - 2.53 (m, 1H), 2.27 - 1.94 (m, 1H), 1.78 - 1.58 (m, 1H), 1.50 - 1.35 (m, 12H), 1.33 - 1.08 (m, 2H), 1.06 - 0.91 (m, 1H), 0.90 - 0.80 (m, 3H), 0.72 - 0.56 (m, 2H)。LCMS (ESI): 526.10 [M+H] +。
實例 412. (S)-N-((4,6- 二甲基吡 𠯤 -3- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1822
使用與對於實例389的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是3-氯-4,6-二甲基吡𠯤作為起始材料。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（79.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 13.98 (s, 1H), 8.55 - 8.06 (m, 2H), 7.42 - 7.22 (m, 2H), 7.01 (s, 1H), 4.70 - 4.30 (m, 3H), 3.85 (s, 3H), 2.96 - 2.64 (m, 1H), 2.56 - 2.51 (m, 3H), 2.32 - 2.12 (m, 4H), 1.86 - 1.66 (m, 1H), 1.65 - 1.39 (m, 1H), 1.29 - 1.11 (m, 2H), 0.97 - 0.80 (m, 2H), 0.70 - 0.30 (m, 2H)。LCMS (ESI): 494.30 [M+H] +。
實例 413. (R)-N-((5- 氯嘧啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1824
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(5-氯嘧啶-2-基)甲胺鹽酸鹽作為起始材料。將所得殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：10 B至40 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（86.4 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.14 - 13.80 (m, 1H), 8.87 (s, 2H), 8.47 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.35 - 7.17 (m, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.51 - 4.34 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.59 - 3.31 (m, 3H), 2.91 - 2.66 (m, 1H), 2.34 - 2.01 (m, 1H), 1.90 - 1.63 (m, 1H), 1.61 - 1.41 (m, 1H), 1.38 - 1.10 (m, 1H), 1.07 - 0.76 (m, 1H), 0.70 - 0.56 (m, 2H)。LCMS (ESI): 500.00 [M+H] +。
實例 414. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,4 R)-4- 𠰌 啉代四氫呋喃 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,4 S)-4- 𠰌 啉代四氫呋喃 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1826
步驟 -1. N-[4-( 𠰌 啉 -4- 基 ) 氧雜環戊烷 -3- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1828
將𠰌啉（216.5 mg，2.49 mmol）添加到 N-(4-側氧基氧雜環戊烷-3-基)胺基甲酸三級丁酯（100.0 mg，0.50 mmol）在MeOH（2.50 mL）和AcOH（0.10 mL）中的攪拌混合物中。將所得溶液在25ºC下攪拌1 h。然後將NaBH 3CN（93.7 mg，1.49 mmol）添加到溶液中並在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在真空下濃縮。將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（103.9 mg）。LCMS (ESI): 273.2 [M+H] +。
步驟 -2. 4-( 𠰌 啉 -4- 基 ) 氧雜環戊烷 -3- 胺
Figure 02_image1830
將在1,4-二㗁𠮿（1.50 mL）中的HCl（氣態）添加到 N-[4-(𠰌啉-4-基)氧雜環戊烷-3-基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-1，90.0 mg，0.33 mmol）中。將所得溶液在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈固體的標題化合物並且不經進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 173.2 [M+H] +。
步驟 -3. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 S,4 R)-4- 𠰌 啉代四氫呋喃 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3 R,4 S)-4- 𠰌 啉代四氫呋喃 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1826
將HOBt（44.7 mg，0.33 mmol），EDCI（63.5 mg，0.33 mmol），和4-(𠰌啉-4-基)氧雜環戊烷-3-胺（步驟-2，56.9 mg，0.33 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，82.5 mg，0.22 mmol）和DIPEA（142.2 mg，1.10 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至40 B，20 min內；220/254 nm），以獲得 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 S,4 R)-4-𠰌啉代四氫呋喃-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3 R,4 S)-4-𠰌啉代四氫呋喃-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（71.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 529.3 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（71.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=60 : 40，保持35 min
流速：18 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 414-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（19.7 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為22.26 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.44 - 6.98 (m, 2H), 4.49 - 4.27 (m, 1H), 4.12 - 3.98 (m, 2H), 3.99 - 3.90 (m, 4H), 3.78 - 3.64 (m, 6H), 3.04 - 2.89 (m, 2H), 2.56 - 2.52 (m, 2H), 2.40 - 2.34 (m, 3H), 1.98 - 1.79 (m, 1H), 1.78 - 1.61 (m, 1H), 1.32 - 1.30 (m, 1H), 1.15 - 1.00 (m, 1H), 0.95 - 0.73 (m, 4H)。LCMS (ESI): 529.25 [M+H] +。
實例 414-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（14.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為27.21 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.54 - 6.92 (m, 2H), 4.76 - 4.51 (m, 1H), 4.47 - 4.28 (m, 1H), 4.17 - 3.91 (m, 4H), 3.88 - 3.60 (m, 6H), 3.07 - 2.86 (m, 2H), 2.56 - 2.49 (m, 2H), 2.46 - 2.29 (m, 2H), 2.01 - 1.53 (m, 2H), 1.51 - 1.12 (m, 4H), 1.11 - 0.96 (m, 2H), 0.95 - 0.57 (m, 2H)。LCMS (ESI): 529.15 [M+H] +。
實例 415. (S)-N-( (S)-1-(5,6- 二氫 -8 H- 咪唑并 [2,1-c][1,4] 㗁 𠯤 -2- 基 ) 乙基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ( (R)-1-(5,6- 二氫 -8 H- 咪唑并 [2,1-c][1,4] 㗁 𠯤 -2- 基 ) 乙基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1833
使用與對於實例377的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5H,6H,8 H-咪唑并[2,1-c][1,4]㗁𠯤-2-甲醛作為起始材料。將所得殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，15/1 v/v）純化，以獲得( S)-N-( (S)-1-(5,6-二氫-8 H-咪唑并[2,1-c][1,4]㗁𠯤-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-( (R)-1-(5,6-二氫-8 H-咪唑并[2,1-c][1,4]㗁𠯤-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（88.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 415）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.19 - 8.08 (m, 1H), 7.46 - 6.98 (m, 2H), 6.92 (s, 1H), 5.01 - 4.92 (m, 1H), 4.78 - 4.72 (m, 2H), 4.09 - 3.99 (m, 4H), 3.95 (s, 3H), 2.87 - 2.81 (m, 1H), 2.44 - 2.38 (m, 1H), 2.06 - 1.59 (m, 2H), 1.48 - 1.40 (m, 3H), 1.34 - 1.28 (m, 2H), 1.21 - 0.85 (m, 2H), 0.78 - 0.72 (m, 3H)。LCMS (ESI): 524.20 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（80.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IH柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: EtOH=85 : 15，保持15 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 415-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（38.5 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.26 min。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (s, 1H), 7.44 - 7.05 (m, 2H), 6.92 (s, 1H), 5.02 - 4.92 (m, 1H), 4.78 - 4.72 (m, 2H), 4.63 - 4.55 (m, 1H), 4.09 - 3.98 (m, 4H), 3.94 (s, 3H), 3.11 - 2.74 (m, 1H), 2.73 - 2.19 (m, 1H), 1.96 - 1.54 (m, 2H), 1.52 - 1.39 (m, 3H), 1.39 - 1.19 (m, 2H), 1.22 - 0.95 (m, 1H), 0.81 - 0.67 (m, 3H)。LCMS (ESI): 524.20 [M+H] +。
實例 415-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（30.1 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為11.17 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.92 (s, 1H), 5.02 - 4.92 (m, 1H), 4.77 - 4.73 (m, 2H), 4.70 - 4.46 (m, 1H), 4.09 - 3.99 (m, 4H), 3.94 (s, 3H), 3.25 - 2.86 (m, 1H), 2.83 - 2.34 (m, 1H), 2.09 - 1.63 (m, 2H), 1.47 - 1.41 (m, 3H), 1.33 - 1.29 (m, 2H), 1.28 - 1.23 (m, 1H), 0.75 - 0.71 (m, 3H)。LCMS (ESI): 524.20 [M+H] +。
實例 416. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -7- 基甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1835
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（34.8 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.11 - 13.84 (m, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.34 - 8.17 (m, 1H), 8.07 - 8.02 (m, 1H), 7.68 - 7.61 (m, 1H), 7.35 - 7.27 (m, 1H), 7.25 - 7.17 (m, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.73 - 6.65 (m, 2H), 4.81 - 4.44 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.06 - 2.58 (m, 1H), 2.39 - 2.03 (m, 1H), 2.06 - 0.37 (m, 9H)。LCMS (ESI): 504.15 [M+H] +。
實例 417. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1-( 氧雜環丁烷 -3- 基 ) 哌啶 -4- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1837
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(氧雜環丁烷-3-基)哌啶-4-胺作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：30 B至50 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（39.8 mg）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.18 - 6.99 (m, 1H), 4.82 - 4.63 (m, 3H), 4.63 - 4.41 (m, 3H), 3.94 (s, 3H), 3.77 - 3.57 (m, 1H), 3.56 - 3.40 (m, 1H), 3.32 - 2.97 (m, 1H), 2.89 - 2.62 (m, 3H), 2.60 - 2.27 (m, 1H), 2.19 - 1.67 (m, 5H), 1.64 - 1.40 (m, 2H), 1.39 - 1.13 (m, 1H), 1.08 - 0.81 (m, 2H), 0.79 - 0.59 (m, 2H)。LCMS (ESI): 513.15[M+H] +。
實例 418. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 𠰌 啉代環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 s,4 R)-4- 𠰌 啉代環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1839
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用4-(𠰌啉-4-基)環己烷-1-胺作為起始材料。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（1/3 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-𠰌啉代環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 s,4 R)-4-𠰌啉代環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，其為兩部分。
實例 418-A.獲得呈固體的第一洗脫峰（25.5 mg）。
第一洗脫峰的Rf值為0.33。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.22 - 13.75 (m, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.54 - 4.48 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.75 - 3.69 (m, 1H), 3.61 - 3.55 (m, 4H), 2.84 - 2.60 (m, 1H), 2.46 - 2.39 (m, 4H), 2.23 - 2.05 (m, 2H), 1.89 - 1.32 (m, 10H), 1.18 - 1.12 (m, 2H), 1.02 - 0.96 (m, 2H), 0.69 - 0.63 (m, 2H)。LCMS (ESI): 541.2 [M+H] +。
實例 418-B.獲得呈固體的第一洗脫峰（24.9 mg）。
第一洗脫峰的Rf值為0.15。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.99 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.47 - 4.41 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.59 - 3.50 (m, 5H), 2.65 - 2.59 (m, 1H), 2.49 - 2.40 (m, 4H), 2.19 - 2.10 (m, 2H), 1.84 - 1.64 (m, 5H), 1.55 - 1.49 (m, 1H), 1.31 - 1.03 (m, 6H), 0.97 - 0.79 (m, 2H), 0.65 - 0.59 (m, 2H)。LCMS (ESI): 541.30 [M+H] +。
實例 419. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 R,5 S,7 r)-9- 甲基 -3- 氧雜 -9- 氮雜雙環 [3.3.1] 壬 -7- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 R,5 S,7 s)-9- 甲基 -3- 氧雜 -9- 氮雜雙環 [3.3.1] 壬 -7- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1841
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用9-甲基-3-氧雜-9-氮雜雙環[3.3.1]壬烷-7-胺二鹽酸鹽作為起始材料。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/ MeOH，7/1 v/v）純化，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 R,5 S,7 r)-9-甲基-3-氧雜-9-氮雜雙環[3.3.1]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 R,5 S,7 s)-9-甲基-3-氧雜-9-氮雜雙環[3.3.1]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，其為兩部分。
實例 419-A.獲得呈固體的第一洗脫峰（22.6 mg）。
第一洗脫峰的Rf值為0.6。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.62 - 4.58 (m, 1H), 4.37 - 4.29 (m, 1H), 4.03 - 3.92 (m, 5H), 3.82 - 3.75 (m, 2H), 2.84 - 2.66 (m, 3H), 2.57 - 2.35 (m, 5H), 2.04 - 1.57 (m, 3H), 1.47 - 1.23 (m, 4H), 1.12 - 0.86 (m, 2H), 0.76 - 0.72 (m, 2H)。LCMS (ESI): 513.25 [M+H] +。
實例 419-B.獲得呈固體的第二洗脫峰（23.8 mg）。
第二洗脫峰的Rf值為0.3。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.62 - 4.58 (m, 1H), 3.97 - 3.89 (m, 5H), 3.83 - 3.73 (m, 2H), 3.33 - 3.20 (m, 1H), 2.78 - 2.73 (m, 3H), 2.59 - 2.32 (m, 4H), 2.03 - 1.67 (m, 6H), 1.33 - 1.29 (m, 2H), 1.10 - 0.84 (m, 2H), 0.76 - 0.72 (m, 2H)。LCMS (ESI): 513.30 [M+H] +。
實例 420. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1-( 甲基磺醯基 ) 哌啶 -4- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1843
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(甲基磺醯基)哌啶-4-胺作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至40 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（106.2 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.21 - 13.68 (m, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.73 - 4.29 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.72 - 3.66 (m, 1H), 3.65 - 3.42 (m, 2H), 2.89 - 2.76 (m, 6H), 2.73 - 2.61 (m, 1H), 2.24 - 2.07 (m, 1H), 1.94 - 1.67 (m, 3H), 1.61 - 1.30 (m, 3H), 1.31 - 1.08 (m, 1H), 1.08 - 0.77 (m, 2H), 0.72 - 0.55 (m, 2H)。LCMS (ESI): 535.05 [M+H] +。
實例 421. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-( 氧雜環丁烷 -3- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-( 氧雜環丁烷 -3- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1845
步驟 -1. 3-( 二苄基胺基 ) 哌啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1847
將Cs 2CO 3（4.07 g，12.48 mmol）和BnBr（2.13 g，12.48 mmol）添加到3-胺基哌啶-1-甲酸三級丁酯（1.00 g，4.99 mmol）在MeCN（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將溶液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/10 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（1.15 g）。LCMS (ESI): 381.3 [M+H] +。 步驟 -2. N, N- 二苄基哌啶 -3- 胺
Figure 02_image1849
在0ºC下將TFA（5.00 mL）添加到3-(二苄基胺基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，1.15 g，3.02 mmol）在DCM（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將溶液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（840.0 mg）。LCMS (ESI): 281.2 [M+H] +。 步驟 -3. N, N- 二苄基 -1-( 氧雜環丁烷 -3- 基 ) 哌啶 -3- 胺
Figure 02_image1851
將3-氧雜環丁烷酮（1.05 g，14.62 mmol）和AcOH（40.00 µL）添加到 N, N-二苄基哌啶-3-胺（步驟-2，820.0 mg，2.92 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在80ºC下攪拌1 h。然後將NaBH 3CN（551.3 mg，8.77 mmol）添加到所得混合物中。將所得混合物在80ºC下攪拌5 h。將溶液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/3 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（663.0 mg）。LCMS (ESI): 337.2 [M+H] +。 步驟 -4. 1-( 氧雜環丁烷 -3- 基 ) 哌啶 -3- 胺
Figure 02_image1853
將Pd/C（100.0 mg）添加到 N,N-二苄基-1-(氧雜環丁烷-3-基)哌啶-3-胺（步驟-3，300.0 mg，0.89 mmol）在MeOH（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌14 h。濾出固體。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（139.0 mg）。LCMS (ESI): 157.1 [M+H] +。 步驟 -5. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-( 氧雜環丁烷 -3- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-( 氧雜環丁烷 -3- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1845
將HOBt（167.4 mg，1.24 mmol），EDCI（237.4 mg，1.24 mmol），和1-(氧雜環丁烷-3-基)哌啶-3-胺（步驟-4，129.0 mg，0.83 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，309.1 mg，0.83 mmol）和DIPEA（320.2 mg，2.48 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至40 B，20 min內；220/254 nm），以獲得 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (S)-1-(氧雜環丁烷-3-基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (R)-1-(氧雜環丁烷-3-基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（160.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 421）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.62 - 4.21 (m, 5H), 3.85 (s, 3H), 3.74 - 3.54 (m, 1H), 3.41 - 3.34 (m, 1H), 3.19 - 2.82 (m, 1H), 2.76 - 2.59 (m, 1H), 2.46 - 2.27 (m, 2H), 2.19 - 2.10 (m, 1H), 1.90 - 1.54 (m, 5H), 1.54 - 1.34 (m, 2H), 1.29 - 1.04 (m, 2H), 1.03 - 0.76 (m, 2H), 0.72 - 0.44 (m, 2H)。LCMS (ESI): 513.30 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（165.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：1/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=70 : 30，保持8 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 421-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（66.5 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.54 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.96 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.65 - 4.16 (m, 6H), 3.85 (s, 3H), 3.74 - 3.54 (m, 1H), 3.49 - 3.32 (m, 1H), 3.13 - 2.80 (m, 1H), 2.74 - 2.51 (m, 3H), 2.27 - 1.99 (m, 1H), 1.89 - 1.55 (m, 5H), 1.53 - 1.34 (m, 2H), 1.28 - 1.06 (m, 2H), 1.05 - 0.76 (m, 1H), 0.72 - 0.39 (m, 2H)。LCMS (ESI): 535.30 [M+H] +。
實例 421-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（54.2 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.78 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.95 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.96 - 4.16 (m, 6H), 3.85 (s, 3H), 3.73 - 3.56 (m, 1H), 3.42 - 3.32 (m, 1H), 3.14 - 2.71 (m, 1H), 2.45 - 2.37 (m, 3H), 2.27 - 2.05 (m, 1H), 1.90 - 1.58 (m, 5H), 1.58 - 1.35 (m, 2H), 1.29 - 1.05 (m, 2H), 1.00 - 0.80 (m, 1H), 0.67 - 0.50 (m, 2H)。LCMS (ESI): 535.30 [M+H] +。
實例 422. (S)-N-((3 R,4 S)-4- 氟 -1- 甲基哌啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N- ((3 S,4 S)-4- 氟 -1- 甲基哌啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N- ((3 R,4 R)-4- 氟 -1- 甲基哌啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N- ((3 S,4 R)-4- 氟 -1- 甲基哌啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1856
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用4-氟-1-甲基哌啶-3-胺作為起始材料。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-N-((3 R,4 S)-4-氟-1-甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-((3 S,4 S)-4-氟-1-甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-((3 R,4 R)-4-氟-1-甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-((3 S,4 R)-4-氟-1-甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（300.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 422）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.00 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.97 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.81 - 4.19 (m, 2H), 3.88 (m, 4H), 2.92 - 2.54 (m, 3H), 2.25 - 1.93 (m, 6H), 1.93 - 1.62 (m, 4H), 1.58 - 1.10 (m, 2H), 1.05 - 0.78 (m, 2H), 0.64 (m, 2H)。LCMS (ESI): 489.20 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該四種非鏡像異構物的混合物（300.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ART Amylose-SA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：1/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=95 : 5，保持17 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 422-A 和實例 422-B.獲得第一洗脫峰（145.0 mg），其為兩種非鏡像異構物的固體混合物。
第一洗脫峰的保留時間為7.91 min。
實例 422-C.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（61.8 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為11.66 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.01 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.97 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.84 - 4.03 (m, 2H), 4.00 - 3.96 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.83 - 2.79 (m, 1H), 2.59 - 2.50 (m, 1H), 2.49 - 2.42 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.14 - 2.04 (m, 3H), 1.97 - 1.67 (m, 3H), 1.56 - 1.52 (m, 1H), 1.22 - 1.17 (m, 1H), 0.99 - 0.95 (m, 2H), 0.66 - 0.61 (m, 2H)。LCMS (ESI): 489.20 [M+H] +。
實例 422-D.獲得呈固體的第三洗脫非鏡像異構物（52.5 mg）。
第三洗脫非鏡像異構物的保留時間為13.99 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.01 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.81 - 4.58 (m, 1H), 4.50 - 4.45 (m, 1H), 4.06 - 3.93 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.83 - 2.79 (m, 1H), 2.56 - 2.52 (m, 1H), 2.49 - 2.43 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.11 - 2.01 (m, 3H), 1.96 - 1.65 (m, 3H), 1.59 - 1.30 (m, 1H), 1.29 - 0.91 (m, 2H), 0.90 - 0.80 (m, 1H), 0.66 - 0.62 (m, 2H)。LCMS (ESI): 489.15 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離第一洗脫峰（145.0 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=50 : 50，保持28 min
流速：15 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 422-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（48.5 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為18.31 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.05 - 7.00 (m, 1H), 4.57 - 4.23 (m, 2H), 3.95 - 3.80 (m, 4H), 3.20 - 2.82 (m, 1H), 2.78 - 2.54 (m, 4H), 2.16 (s, 3H), 2.11 - 1.95 (m, 2H), 1.91 - 1.82 (m, 1H), 1.80 - 1.62 (m, 2H), 1.56 - 1.51 (m, 1H), 1.23 - 1.18 (m, 1H), 0.96 - 0.91 (m, 2H), 0.66 - 0.61 (m, 2H)。LCMS (ESI): 489.20[M+H] +。
實例 422-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（46.3 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為23.35 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.31 - 8.21 (s, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 4.54 - 4.24 (m, 2H), 3.95 - 3.78 (m, 4H), 2.90 - 3.22 (m, 1H), 2.79 - 2.54 (m, 4H), 2.16 (s, 3H), 2.11 - 1.94 (m, 2H), 1.93 - 1.84 (m, 1H), 1.79 - 1.62 (m, 2H), 1.56 - 1.52 (m, 1H), 1.38 - 1.08 (m, 1H), 1.06 - 0.53 (m, 4H)。LCMS (ESI): 489.15 [M+H] +。
實例 423. (S)-N-((3 S,6 S)-1,6- 二甲基哌啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N- ((3 R,6 R)-1,6- 二甲基哌啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N- ((3 S,6 R)-1,6- 二甲基哌啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N- ((3 R,6 S)-1,6- 二甲基哌啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1858
步驟 -1. N-( 三級丁氧基羰基 )- N-(6- 甲基吡啶 -3- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1860
將(Boc) 2O（16.14 g，73.98 mmol），DMAP（225.9 mg，1.85 mmol）和NEt 3（5.61 g，55.48 mmol）添加到6-甲基吡啶-3-胺（2.00 g，18.49 mmol）在THF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在60ºC下攪拌4 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.61 g）。LCMS (ESI): 309.2 [M+H] +。
步驟 -2. N-( 三級丁氧基羰基 )- N-(6- 甲基哌啶 -3- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1862
將PtO 2（1.00 g，4.40 mmol）添加到 N-(三級丁氧基羰基)- N-(6-甲基吡啶-3-基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-1，1.00 g，3.24 mmol）在AcOH（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（500.0 mg）。LCMS (ESI): 315.2 [M+H] +。
步驟 -3. N-( 三級丁氧基羰基 )- N-(1,6- 二甲基哌啶 -3- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1864
將甲醛（387.3 mg，4.78 mmol，37%水溶液）添加到 N-(三級丁氧基羰基)- N-(6-甲基哌啶-3-基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-2，500.0 mg，1.59 mmol）在MeOH（5.00 mL）和AcOH（1.00 mL）中的攪拌溶液中，然後添加NaBH 3CN（296.2 mg，4.78 mmol）。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（500.0 mg）。LCMS (ESI): 329.2 [M+H] +。
步驟 -4. 1,6- 二甲基哌啶 -3- 胺
Figure 02_image1866
將TFA（2.00 mL）添加到 N-(三級丁氧基羰基)- N-(1,6-二甲基哌啶-3-基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-3，500.0 mg，1.52 mmol）在DCM（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。得到呈固體的1,6-二甲基哌啶-3-胺（180.0 mg）。LCMS (ESI): 129.1 [M+H] +。
步驟 -5. (S)-N-((3 S,6 S)-1,6- 二甲基哌啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N- ((3 R,6 R)-1,6- 二甲基哌啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N- ((3 S,6 R)-1,6- 二甲基哌啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N- ((3 R,6 S)-1,6- 二甲基哌啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1858
將HOBt（94.9 mg，0.70 mmol），EDCI（134.6 mg，0.70 mmol）和1,6-二甲基哌啶-3-胺（步驟-4，60.0 mg，0.47 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，175.2 mg，0.47 mmol）和DIPEA（362.9 mg，2.81 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（8/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-N-((3 S,6 S)-1,6-二甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-((3 R,6 R)-1,6-二甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-((3 S,6 R)-1,6-二甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-((3 R,6 S)-1,6-二甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（132.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.77 - 7.55 (m, 1H), 7.41 - 7.21 (m, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.72 - 4.13 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.74 - 3.53 (m, 1H), 2.96 - 2.71 (m, 3H), 2.71 - 2.57 (m, 2H), 2.25 - 2.05 (m, 3H), 1.87 - 1.66 (m, 3H), 1.64 - 1.43 (m, 2H), 1.35 - 1.07 (m, 4H), 1.06 - 0.90 (m, 4H), 0.89 - 0.43 (m, 2H)。LCMS (ESI): 485.30 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該四種非鏡像異構物的混合物（130.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：1/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: IPA=70 : 30，保持18 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 423-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（50.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為11.21 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.78 - 7.58 (m, 1H), 7.40 - 7.27 (m, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.83 - 4.01 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.72 - 3.56 (m, 1H), 3.48 - 3.20 (m, 3H), 2.87 - 2.58 (m, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.85 - 1.42 (m, 6H), 1.30 - 1.07 (m, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.70 - 0.53 (m, 2H)。LCMS (ESI): 485.25 [M+H] +。
實例 423-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（1.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為12.99 min。
LCMS (ESI): 485.20 [M+H] +。
實例 423-C.獲得呈固體的第三洗脫非鏡像異構物（50.0 mg）。
第三洗脫非鏡像異構物的保留時間為14.86 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (s, 1H), 8.41 - 8.09 (m, 1H), 7.89 - 7.52 (m, 1H), 7.48 - 7.21 (m, 1H), 7.14 - 6.84 (m, 1H), 4.72 - 4.18 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.73 - 3.54 (m, 1H), 3.53 - 3.19 (m, 3H), 2.85 - 2.64 (m, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.88 - 1.41 (m, 6H), 1.29 - 1.08 (m, 3H), 1.01 - 0.91 (s, 3H), 0.73 - 0.53 (m, 2H)。LCMS (ESI): 485.20 [M+H] +。
實例 424. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1,6,6- 三甲基哌啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1,6,6- 三甲基哌啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1868
步驟 -1. 5-( 二苄基胺基 )-2,2- 二甲基哌啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1870
將K 2CO 3（453.9 mg，3.28 mmol）和苄基溴（562.5 mg，3.29 mmol）添加到5-胺基-2,2-二甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯（250.0 mg，1.10 mmol）在MeCN（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在80ºC下攪拌3 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，8/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（130.0 mg）。LCMS (ESI): 409.28 [M+H] +。
步驟 -2. N, N- 二苄基 -6,6- 二甲基哌啶 -3- 胺
Figure 02_image1872
在0ºC下將TFA（1.50 mL）添加到5-(二苄基胺基)-2,2-二甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，130.0 mg，0.32 mmol）在DCM（1.50 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈固體的標題化合物（98.0 mg）。其不經進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 309.23 [M+H] +。
步驟 -3. N, N- 二苄基 -1,6,6- 三甲基哌啶 -3- 胺
Figure 02_image1874
將NaBH 3CN（60.0 mg，0.96 mmol）和甲醛（77.4 mg，0.95 mmol，37%水溶液）添加到 N, N-二苄基-6,6-二甲基哌啶-3-胺（步驟-2，98.2 mg，0.32 mmol）在MeOH（2.00 mL）和AcOH（0.20 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，18/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（50.0 mg）。LCMS (ESI): 323.24 [M+H] +。
步驟 -4. 1,6,6- 三甲基哌啶 -3- 胺
Figure 02_image1876
在0ºC下將Pd/C（25.0 mg）添加到 N,N-二苄基-1,6,6-三甲基哌啶-3-胺（步驟-3，50.0 mg，0.16 mmol）在MeOH（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（15.4 mg）。其不經進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 143.15 [M+H] +。
步驟 -5. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1,6,6- 三甲基哌啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1,6,6- 三甲基哌啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1868
將HOBt（29.3 mg，0.22 mmol），EDCI（41.4 mg，0.22 mmol），1,6,6-三甲基哌啶-3-胺（步驟-4，15.4 mg，0.11 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，28.4 mg，0.08 mmol）和DIPEA（70.0 mg，0.54 mmol）在DMF（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌4 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，18/1 v/v）純化，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (R)-1,6,6-三甲基哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (S)-1,6,6-三甲基哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（30.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 424）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 7.31 - 7.25 (m, 1H), 7.14 - 7.08 (m, 1H), 4.59 - 4.55 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.93 - 3.89 (m, 1H), 2.92 - 2.71 (m, 2H), 2.48 - 2.35 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 1.93 - 1.71 (m, 3H), 1.68 - 1.48 (m, 3H), 1.36 - 1.26 (m, 2H), 1.17 (s, 3H), 1.12 - 1.05 (m, 4H), 1.00 - 0.85 (m, 1H), 0.80 - 0.59 (m, 2H)。LCMS (ESI): 499.40 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（30.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IG柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：1/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=93 : 7，保持29 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 424-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（6.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為20.02 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.69 - 4.39 (m, 1H), 3.99 - 3.90 (m, 4H), 2.99 - 2.73 (m, 2H), 2.56 - 2.45 (m, 1H), 2.38 (s, 3H), 1.94 - 1.72 (m, 2H), 1.73 - 1.52 (m, 3H), 1.36 - 1.27 (m, 4H), 1.20 (s, 3H), 1.14 (s, 3H), 1.03 - 0.83 (m, 2H), 0.81 - 0.65 (m, 2H)。LCMS (ESI): 499.40 [M+H] +。
實例 424-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（4.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為24.77 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.60 - 4.55 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.95 - 3.89 (m, 1H), 2.95 - 2.69 (m, 2H), 2.53 - 2.43 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 1.87 - 1.73 (m, 2H), 1.71 - 1.53 (m, 3H), 1.38 - 1.26 (m, 4H), 1.20 (s, 3H), 1.11 (s, 3H), 1.05 - 0.84 (m, 2H), 0.81 - 0.64 (m, 2H)。LCMS (ESI): 499.40 [M+H] +。
實例 425. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-(2- 氟乙基 )-2,2- 二甲基哌啶 -4- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-(2- 氟乙基 )-2,2- 二甲基哌啶 -4- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1879
步驟 -1. 4-( 二苄基胺基 )-2,2- 二甲基哌啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1881
將BnBr（936.3 mg，5.47 mmol）和K 2CO 3（605.3 mg，4.38 mmol）添加到4-胺基-2,2-二甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯（500.0 mg，2.19 mmol）在MeCN（6.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（3/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（790.0 mg）。LCMS (ESI): 409.3 [M+H] +。
步驟 -2. N, N- 二苄基 -2,2- 二甲基哌啶 -4- 胺
Figure 02_image1883
將TFA（5.00 mL）添加到4-(二苄基胺基)-2,2-二甲基哌啶-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，730.0 mg，1.79 mmol）在DCM（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（EtOAc）純化，以獲得呈固體的標題化合物（500.0 mg）。LCMS (ESI): 309.2 [M+H] +。
步驟 -3. N, N- 二苄基 -1-(2- 氟乙基 )-2,2- 二甲基哌啶 -4- 胺
Figure 02_image1885
將Cs 2CO 3（316.9 mg，0.97 mmol）和1-溴-2-氟乙烷（246.9 mg，1.95 mmol）添加到 N, N-二苄基-2,2-二甲基哌啶-4-胺（200.0 mg，0.65 mmol）在MeCN（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在80ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（100.0 mg）。LCMS (ESI): 355.3 [M+H] +。
步驟 -4. 1-(2- 氟乙基 )-2,2- 二甲基哌啶 -4- 胺
Figure 02_image1887
在0ºC下將Pd/C（22.0 mg）添加到 N,N-二苄基-1-(2-氟乙基)-2,2-二甲基哌啶-4-胺（110.0 mg，0.31 mmol）在MeOH（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌14 h。藉由過濾濾出固體並用MeOH洗滌。將所得濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（50.0 mg）。LCMS(ESI): 175.1 [M+H] +。
步驟 -5. (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-(2- 氟乙基 )-2,2- 二甲基哌啶 -4- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-(2- 氟乙基 )-2,2- 二甲基哌啶 -4- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1879
將EDCI（109.3 mg，0.57 mmol），HOBt（77.2 mg，0.57 mmol）和1-(2-氟乙基)-2,2-二甲基哌啶-4-胺（步驟-4，50.0 mg，0.29 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，107.0 mg，0.29 mmol）和DIPEA（368.9 mg，2.86 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XBridge製備型OBD C18柱，30 x150 mm，5μm；流動相A：MeCN，流動相B：水（10 mM NH 4HCO 3）；流速：60 mL/min；梯度：30% B至60% B，15 min內，60% B；波長：254/220 nm；RT1（min）：14.00），以獲得 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (S)-1-(2-氟乙基)-2,2-二甲基哌啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (R)-1-(2-氟乙基)-2,2-二甲基哌啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（80.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 425）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.44 - 7.09 (m, 2H), 4.58 - 4.29 (m, 3H), 3.97 - 3.86 (m, 4H), 3.24 - 3.02 (m, 1H), 2.94 - 2.71 (m, 2H), 2.62 - 2.20 (m, 3H), 1.89 - 1.59 (m, 5H), 1.52 - 1.36 (m, 2H), 1.31 - 1.23 (m, 2H), 1.18 - 1.00 (m, 7H), 0.76 - 0.71 (m, 2H)。LCMS (ESI): 531.40 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（80.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SC柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=70 : 30，保持16 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 425-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（34.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為11.48 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.67 - 4.31 (m, 3H), 4.03 - 3.82 (m, 4H), 3.24 - 3.00 (m, 1H), 2.97 - 2.85 (m, 1H), 2.84 - 2.69 (m, 1H), 2.67 - 2.48 (m, 1H), 2.43 - 2.20 (m, 2H), 1.94 - 1.75 (m, 3H), 1.74 - 1.58 (m, 1H), 1.57 - 1.36 (m, 2H), 1.35 - 1.21 (m, 2H), 1.19 - 1.02 (m, 7H), 1.01 - 0.84 (m, 1H), 0.80 - 0.63 (m, 2H)。LCMS (ESI): 531.20 [M+H] +。
實例 425-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（36.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為11.48 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 7.38 - 7.19 (m, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.72 - 4.24 (m, 3H), 4.01 - 3.81 (m, 4H), 3.25 - 2.97 (m, 1H), 2.96 - 2.84 (m, 1H), 2.84 - 2.70 (m, 1H), 2.63 - 2.48 (m, 1H), 2.47 - 2.20 (m, 2H), 1.97 - 1.71 (m, 3H), 1.71 - 1.58 (m, 1H), 1.56 - 1.35 (m, 2H), 1.34 - 1.20 (m, 2H), 1.19 - 1.02 (m, 7H), 1.01 - 0.82 (m, 1H), 0.79 - 0.61 (m, 2H)。LCMS (ESI): 531.25 [M+H] +。
實例 426. (S)-N-((3 R,4 R)-4- 氟 -1-(6- 甲基吡啶 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1890
步驟 -1. (3 R,4 R)-3-( 二苄基胺基 )-4- 氟吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1892
將BnBr（419.0 mg，2.45 mmol）和K 2CO 3（406.0 mg，2.94 mmol）添加到(3R,4R)-3-胺基-4-氟吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（200.0 mg，0.98 mmol）在MeCN（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在60ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（7/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（310.0 mg）。LCMS (ESI): 385 [M+H] +。
步驟 -2. (3 R,4 R)- N, N- 二苄基 -4- 氟吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image1894
在0ºC下將TFA（3.00 mL）添加到(3R,4R)-3-(二苄基胺基)-4-氟吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，310.0 mg，0.81 mmol）在DCM（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（220.0 mg）。LCMS (ESI): 285 [M+H] +。
步驟 -3. (3 R,4 R)- N, N- 二苄基 -4- 氟 -1-(6- 甲基吡啶 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image1896
將[1,3-雙[2,6-雙(丙-2-基)苯基]-2,3-二氫-1 H-咪唑-2-基]二氯(3-氯吡啶-1-鎓-1-基)鈀（48.0 mg，0.07 mmol）和Cs 2CO 3（458.0 mg，1.41 mmol）添加到(3 R,4 R)- N, N-二苄基-4-氟吡咯啶-3-胺（步驟-2，200.0 mg，0.70 mmol）和5-溴-2-甲基吡啶（121.0 mg，0.70 mmol）在1,4-二㗁𠮿（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在90ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（230.0 mg）。LCMS (ESI): 376 [M+H] +。
步驟 -4. (3 R,4 R)-4- 氟 -1-(6- 甲基吡啶 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image1898
將Pd/C（20.0 mg）添加到(3 R,4 R)- N, N-二苄基-4-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)吡咯啶-3-胺（步驟-3，100.0 mg，0.27 mmol）在MeOH（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌14 h。藉由過濾濾出固體並用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（45.0 mg）。LCMS (ESI): 196 [M+H] +。
步驟 -5. (S)-N-((3 R,4 R)-4- 氟 -1-(6- 甲基吡啶 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1890
將EDCI（59.0 mg，0.31 mmol），HOBt（42.0 mg，0.31 mmol）和(3 R,4 R)-4-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)吡咯啶-3-胺（步驟-4，40.0 mg，0.21 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，77.0 mg，0.21 mmol）和DIPEA（132.0 mg，1.02 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（46.9 mg）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 14.12 - 13.86 (m, 1H), 8.31 - 8.19 (m, 2H), 7.86 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.11 - 6.98 (m, 2H), 6.97 - 6.87 (m, 1H), 5.26 - 4.97 (m, 1H), 4.62 - 4.35 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.70 - 3.58 (m, 2H), 3.58 - 3.40 (m, 2H), 3.26 - 3.16 (m, 1H), 2.71 - 2.65 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.20 - 2.14 (m, 1H), 1.79 - 1.73 (m, 1H), 1.58 - 1.52 (m, 1H), 1.23 - 1.17 (m, 1H), 1.05 - 0.45 (m, 4H)。LCMS (ESI): 552.25 [M+H] +。
實例 427. (S)-N-((3 S,4 S)-4- 氟 -1-(6- 甲基吡啶 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1900
使用與對於實例426的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(3 S,4 S)-3-胺基-4-氟吡咯啶-1-甲酸三級丁酯作為步驟-1中的起始材料。將所得殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至50 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（52.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.11 - 13.55 (m, 1H), 8.36 - 8.10 (m, 2H), 7.94 - 7.78 (m, 1H), 7.44 - 7.25 (m, 1H), 7.13 - 6.99 (m, 2H), 6.96 - 6.83 (m, 1H), 5.22 - 4.94 (m, 1H), 4.60 - 4.23 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.86 - 3.59 (m, 2H), 3.59 - 3.40 (m, 2H), 3.26 - 3.15 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.26 - 1.96 (m, 1H), 1.90 - 1.64 (m, 1H), 1.64 - 1.38 (m, 1H), 1.36 - 1.09 (m, 1H), 1.07 - 0.74 (m, 2H), 0.71 - 0.47 (m, 3H)。LCMS (ESI): 552.25 [M+H] +。
實例 428. (S)-N-((3 S,4 R)-4- 氟 -1-(6- 甲基吡啶 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1902
使用與對於實例426的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用(3 S,4 R)-3-胺基-4-氟吡咯啶-1-甲酸三級丁酯作為步驟-1中的起始材料。將所得殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至50 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（52.2 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.93 (s, 1H), 8.36 - 8.24 (m, 2H), 7.81 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.11 - 7.01 (m, 2H), 6.89 - 6.81 (m, 1H), 5.41 - 5.07 (m, 1H), 4.74 - 4.30 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.75 - 3.44 (m, 3H), 3.24 - 3.04 (m, 2H), 2.98 - 2.74 (m, 1H), 2.40 - 1.99 (m, 4H), 1.90 - 1.70 (m, 1H), 1.66 - 1.44 (m, 1H), 1.37 - 1.14 (m, 1H), 1.09 - 0.78 (m, 2H), 0.75 - 0.54 (m, 2H)。LCMS (ESI): 552.25 [M+H] +。
實例 429. (7 S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3-( 氧雜環丁烷 -3- 基 )-3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1904
步驟 -1. 6-[(7 S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 醯胺基 ]-3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1906
將HOBt（144.0 mg，1.07 mmol），EDCI（204.0 mg，1.07 mmol），和6-胺基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸三級丁酯（116.0 mg，0.54 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，200.0 mg，0.54 mmol）和DIPEA（344.0 mg，2.68 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（200.7 mg）。LCMS (ESI): 555.2 [M+H] +。
步驟 -2. (7 S)- N-(3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1908
在0ºC下將TFA（1.50 mL）添加到6-[(7 S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-醯胺基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸三級丁酯（步驟-1，170.0 mg，0.31 mmol）在DCM（1.50 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈油狀物的標題化合物（130.0 mg）。其不經進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 455.2 [M+H] +。
步驟 -3. (7 S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(3-( 氧雜環丁烷 -3- 基 )-3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1904
在25ºC下將NaBH 3CN（54.9 mg，0.86 mmol）和3-氧雜環丁烷酮（103.0 mg，1.43 mmol）添加到(7 S)- N-[3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基]-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-2，130.0 mg，0.29 mmol）在AcOH（0.30 mL）和MeOH（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在80ºC下攪拌3 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（60.4 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.83 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 4.72 - 4.57 (m, 1H), 4.54 - 4.46 (m, 2H), 4.43 - 4.31 (m, 3H), 3.87 (s, 3H), 3.67 - 3.56 (m, 1H), 3.01 - 2.80 (m, 3H), 2.65 - 2.52 (m, 1H), 2.33 - 2.09 (m, 2H), 1.81 - 1.69 (m, 1H), 1.58 - 1.41 (m, 3H), 1.31 - 1.09 (m, 2H), 1.08 - 0.72 (m, 2H), 0.63 - 0.59 (m, 2H)。LCMS (ESI): 511.30 [M+H] +。
實例 430. (S)-N-(5- 氯吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1911
將HATU（60.9 mg，0.16 mmol，1.20當量）和5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-胺（22.5 mg，0.13 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，50.0 mg，0.13 mmol）和DIPEA（51.8 mg，0.40 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化。然後將殘餘物進一步藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XBridge製備型OBD C18柱，30 x 150 mm，5μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：30% B至40% B，9 min內，40% B；波長：254/220 nm；RT1（min）：8.9），以獲得呈固體的標題化合物（30.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.96 (s, 1H), 10.29 (s, 1H), 9.09 (d, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.16 - 6.95 (m, 2H), 4.75 - 4.25 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.23 - 3.00 (m, 2H), 2.35 - 2.12 (m, 1H), 2.04 - 1.78 (m, 1H), 1.77 - 1.52 (m, 1H), 1.48 - 1.26 (m, 1H), 1.17 - 0.88 (m, 2H), 0.84 - 0.56 (m, 2H)。LCMS (ESI): 525.10 [M+H] +。
實例 431. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-(2- 甲基嘧啶 -4- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-(2- 甲基嘧啶 -4- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1913
步驟 -1. 3-[(7 S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 醯胺基 ] 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1915
將HATU（487.5 mg，1.28 mmol）和3-胺基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（199.0 mg，1.07 mmol，1.00當量）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，400.0 mg，1.07 mmol）和DIPEA（414.3 mg，3.20 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（12/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（550.0 mg）。LCMS (ESI): 543.3 [M+H] +。
步驟 -2. (7 S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-( 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1917
將TFA（10.00 mL）添加到3-[(7 S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-醯胺基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，450.0 mg，0.83 mmol）在DCM（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（330.0 mg）。LCMS (ESI): 443.2 [M+H] +。
步驟 -3. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-(2- 甲基嘧啶 -4- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-(2- 甲基嘧啶 -4- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1913
將4-氯-2-甲基嘧啶（52.3 mg，0.41 mmol）和DIPEA（87.6 mg，0.68 mmol）添加到(7 S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-(吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-2，150.0 mg，0.34 mmol）在EtOH（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在80ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (S)-1-(2-甲基嘧啶-4-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (R)-1-(2-甲基嘧啶-4-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（110.0 mg），其為非鏡像異構物的油狀混合物。LCMS (ESI): 535.2 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（100.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：1/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=50 : 50，保持10 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 431-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（22.1 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.51 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.19 - 8.09 (m, 1H), 8.06 - 7.95 (m, 1H), 7.38 - 7.23 (m, 1H), 7.16 - 7.01 (m, 1H), 6.43 - 6.27 (m, 1H), 4.78 - 4.40 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.87 - 3.42 (m, 5H), 2.92 - 2.69 (m, 1H), 2.45 (s, 3H), 2.37 - 2.22 (m, 2H), 2.15 - 1.96 (m, 1H), 1.95 - 1.46 (m, 2H), 1.40 - 1.17 (m, 1H), 1.13 - 0.86 (m, 2H), 0.83 - 0.64 (m, 2H)。LCMS (ESI): 535.25 [M+H] +。
實例 431-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（18.1 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.19 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.22 - 8.07 (m, 1H), 8.06 - 7.90 (m, 1H), 7.46 - 7.20 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.44 - 6.20 (m, 1H), 4.78 - 4.33 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.83 - 3.60 (m, 4H), 3.32 - 3.27 (m, 1H), 2.90 - 2.72 (m, 1H), 2.68 - 2.22 (m, 5H), 2.15 - 1.94 (m, 1H), 1.94 - 1.43 (m, 2H), 1.35 - 1.24 (m, 2H), 1.17 - 0.88 (m, 1H), 0.86 - 0.65 (m, 2H)。LCMS (ESI): 535.25 [M+H] +。
實例 432. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1920
步驟 -1. N-[[3-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ] 甲基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1922
將Pd(AMPhos) 2Cl 2（135.8 mg，0.19 mmol）和K 3PO 4（814.0 mg，3.83 mmol）添加到2-氯-3-(三氟甲基)吡𠯤（350.0 mg，1.92 mmol）和(((三級丁氧基羰基)胺基)甲基)三氟硼酸鉀(I)（545.5 mg，2.30 mmol）在1,4-二㗁𠮿（5.00 mL）和水（1.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在90ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，3/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（90.0 mg）。LCMS (ESI): 278.1 [M+H] +。
步驟 -2. 1-[3-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ] 甲胺
Figure 02_image1924
將TFA（2.00 mL）添加到 N-[[3-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]甲基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-1，80.0 mg，0.29 mmol）在DCM（2.00 mL中）的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈固體的標題化合物（40.0 mg）。LCMS (ESI): 178.1 [M+H] +。
步驟 -3. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1920
將HOBt（61.0 mg，0.45 mmol），EDCI（86.6 mg，0.45 mmol），和1-[3-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]甲胺（步驟-2，40.0 mg，0.23 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，84.5 mg，0.23 mmol）和DIPEA（145.9 mg，1.13 mmol）在DMF（6.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS，30 x150 mm，5 μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：35% B至45% B，8 min內，45% B；波長：254 nm；RT1（min）：6.93），以獲得呈固體的標題化合物（40.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.83 (d, 1H), 8.65 (d, 1H), 8.13 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.80 - 4.68 (m, 2H), 4.66 - 4.39 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.05 - 2.86 (m, 1H), 2.69 - 2.29 (m, 1H), 2.09 - 1.90 (m, 1H), 1.87 - 1.63 (m, 1H), 1.57 - 1.25 (m, 2H), 1.22 - 0.49 (m, 4H)。LCMS (ESI): 534.20 [M+H] +。
實例 433. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1-( (S)- 四氫呋喃 -3- 基 ) 氮雜環丁烷 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1-( (R)- 四氫呋喃 -3- 基 ) 氮雜環丁烷 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1927
步驟 -1. 3-[(7 S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 醯胺基 ] 氮雜環丁烷 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1929
將HATU（121.9 mg，0.32 mmol）和3-胺基氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯（46.0 mg，0.27 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，100.0 mg，0.27 mmol）和DIPEA（103.6 mg，0.80 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（130.0 mg）。LCMS (ESI): 529.3 [M+H] +。
步驟 -2. (7 S)- N-( 氮雜環丁烷 -3- 基 )-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1931
將TFA（2.00 mL）添加到3-[(7 S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-醯胺基]氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，130.0 mg，0.25 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得溶液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（100.0 mg）。LCMS (ESI): 429.2 [M+H] +。
步驟 -3. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1-( (S)- 四氫呋喃 -3- 基 ) 氮雜環丁烷 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1-( (R)- 四氫呋喃 -3- 基 ) 氮雜環丁烷 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1927
將二氫呋喃-3-酮（100.5 mg，1.17 mmol）添加到(7 S)- N-(氮雜環丁烷-3-基)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-2，100.0 mg，0.23 mmol）在MeOH（3.00 mL）和AcOH（0.50 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。然後將NaBH 3CN（44.0 mg，0.70 mmol）添加到反應混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌4 h。將溶液用水稀釋並用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（20/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(1-( (S)-四氫呋喃-3-基)氮雜環丁烷-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(1-( (R)-四氫呋喃-3-基)氮雜環丁烷-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（73.2 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 433）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.27 (s, 2H), 7.61 - 7.16 (m, 1H), 7.12 - 6.82 (m, 1H), 4.56 - 4.30 (m, 1H), 4.28 - 4.00 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.73 - 3.59 (m, 2H), 3.56 - 3.49 (m, 1H), 3.47 - 3.28 (m, 3H), 2.98 - 2.87 (m, 1H), 2.86 - 2.72 (m, 2H), 2.71 - 2.60 (m, 2H), 2.37 - 1.93 (m, 1H), 1.91 - 1.80 (m, 3H), 1.78 - 1.67 (m, 2H), 1.64 - 1.38 (m, 2H), 1.35 - 1.07 (m, 1H), 1.01 - 0.71 (m, 1H), 0.69 - 0.36 (m, 1H)。LCMS (ESI): 499.25 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（71.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Amylose-SA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=50 : 50，保持13 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 433-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（24.5 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.53 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.07 - 7.96 (m, 1H), 7.24 - 7.10 (m, 1H), 7.04 - 6.94 (m, 1H), 4.67 - 4.37 (m, 1H), 4.35 - 4.18 (m, 1H), 3.76 (m, 4H), 3.69 - 3.59 (m, 1H), 3.57 - 3.41 (m, 4H), 3.07 - 2.95 (m, 2H), 2.94 - 2.80 (m, 2H), 2.78 - 2.57 (m, 1H), 2.50 - 2.07 (m, 1H), 1.93 - 1.68 (m, 2H), 1.66 - 1.43 (m, 2H), 1.38 - 1.05 (m, 1H), 1.01 - 0.72 (m, 2H), 0.69 - 0.49 (m, 2H)。LCMS (ESI): 499.20 [M+H] +。
實例 433-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（22.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.07 min。
1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.01 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 4.70 - 4.36 (m, 1H), 4.35 - 4.14 (m, 1H), 3.87 - 3.71 (m, 4H), 3.69 - 3.58 (m, 1H), 3.57 - 3.39 (m, 4H), 3.07 - 2.95 (m, 2H), 2.94 - 2.82 (m, 2H), 2.79 - 2.57 (m, 1H), 2.55 - 2.04 (m, 1H), 1.97 - 1.68 (m, 2H), 1.66 - 1.49 (m, 2H), 1.41 - 1.08 (m, 1H), 1.06 - 0.70 (m, 2H), 0.69 - 0.42 (m, 2H)。LCMS (ESI): 499.20 [M+H] +。
實例 434. (7 S)- N-((3- 氯 -5-(3,5- 二甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1934
步驟 -1. 4-(5- 氯 -6- 氰基吡啶 -3- 基 )-2,6- 二甲基哌 𠯤 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1936
將2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯（1.40 g，6.52 mmol）和DIPEA（1.05 g，8.15 mmol）添加到3-氯-5-氟吡啶-2-甲腈（850.0 mg，5.43 mmol）在DMSO（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在100ºC下攪拌1 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/2 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.83 g）。LCMS (ESI): 351.2 [M+H] +。 步驟 -2. 4-[6-( 胺基甲基 )-5- 氯吡啶 -3- 基 ]-2,6- 二甲基哌 𠯤 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1938
在-78ºC下在氮氣氣氛下，將DIBAL-H（15.39 mL，15.39 mmol）添加到4-(5-氯-6-氰基吡啶-3-基)-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，1.80 g，5.13 mmol）在DCM（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在-78ºC下在氮氣氣氛下攪拌1 h。在-78ºC下將所得混合物用MeOH淬滅。將溶液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（918.0 mg）。LCMS (ESI): 355.2 [M+H] +。 步驟 -3. 4-[5- 氯 -6-([[(7 S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 基 ] 甲醯胺基 ] 甲基 ) 吡啶 -3- 基 ]-2,6- 二甲基哌 𠯤 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image1940
將HOBt（81.2 mg，0.60 mmol），EDCI（115.2 mg，0.60 mmol），和4-[6-(胺基甲基)-5-氯吡啶-3-基]-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯（步驟-2，170.6 mg，0.48 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，150.0 mg，0.40 mmol）和DIPEA（155.4 mg，1.20 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（280.0 mg）。LCMS (ESI): 711.3 [M+H] +。 步驟 -4. (7 S)- N-((3- 氯 -5-(3,5- 二甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1934
在0ºC下將TFA（3.00 mL）添加到4-[5-氯-6-([[(7 S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基]甲醯胺基]甲基)吡啶-3-基]-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯（步驟-3，280.0 mg，0.39 mmol）在DCM（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將溶液在減壓下濃縮，然後用TEA鹼化至pH 8。將溶液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18柱；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：30 B至50 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（97.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.14 (d, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 4.70 - 4.11 (m, 3H), 3.87 (s, 3H), 3.72 - 3.54 (m, 2H), 2.93 - 2.70 (m, 3H), 2.26 - 2.00 (m, 3H), 1.90 - 1.68 (m, 1H), 1.65 - 1.43 (m, 1H), 1.23 (s, 2H), 1.08 - 0.72 (m, 9H), 0.71 - 0.48 (m, 2H)。LCMS (ESI): 611.40 [M+H] +。
實例 435. (S)-N-( (S)-4,4- 二氟 -1-((1-( 三氟甲基 ) 環丙基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ( (R)-4,4- 二氟 -1-((1-( 三氟甲基 ) 環丙基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1943
步驟 -1. 4- 疊氮基 -3,3- 二氟吡咯啶 2,2,2- 三氟乙酸酯
Figure 02_image1945
在0ºC下將TFA（1.70 g，14.95 mmol）添加到4-疊氮基-3,3-二氟吡咯啶-1-甲酸三級丁酯 [1]（371.0 mg，1.49 mmol）在DCM（2.99 mL）中的溶液中。將反應混合物升溫至22ºC持續3 h並在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物，其不經進一步純化而使用。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 3.37 (ddd, 1H), 3.64 - 3.82 (m, 3H), 4.84 - 4.95 (m, 1H), 9.79 (s, 2H)。
步驟 -2. (4- 疊氮基 -3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 )(1-( 三氟甲基 ) 環丙基 ) 甲酮
Figure 02_image1947
將2-(3 H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異脲六氟磷酸鹽(V)（516.0 mg，1.36 mmol）和DIPEA（797.0 mg，6.17 mmol）添加到1-(三氟甲基)環丙烷-1-甲酸（190.0 mg，1.23 mmol）在DMF（3.00 mL）中的溶液中。將混合物在22ºC下攪拌20 min。將4-疊氮基-3,3-二氟吡咯啶 2,2,2-三氟乙酸酯（步驟-1，388.0 mg，1.48 mmol）在DMF（1.93 mL）中的溶液添加到反應混合物中並在22ºC下攪拌4 h。將反應混合物用EtOAc稀釋並用水、鹽水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用在環己烷中的10%至30% EtOAc洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（221.0 mg）。TLC-MS (APCI): 285.1 [M+H] +。
步驟 -3. (4,4- 二氟 -1-((1-( 三氟甲基 ) 環丙基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -3- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1949
在0ºC下在密封管中，將氫化鋁鋰(III)（1.27 mL，1.27 mmol，1 M）逐滴添加到(4-疊氮基-3,3-二氟吡咯啶-1-基)(1-(三氟甲基)環丙基)甲酮（步驟-2，72.0 mg，0.25 mmol）在Et 2O（1.27 mL）中的溶液中。將反應混合物加熱至50ºC持續6 h，將所得混合物用Et 2O稀釋，並藉由在0ºC下依次添加水（0.05 mL）、NaOH（15%水溶液，0.05 mL）、和水（0.15 mL）淬滅。將所得混合物升溫至22ºC持續15 min，經MgSO 4乾燥並經矽藻土過濾。將Boc 2O（82.9 mg，0.38 mmol）添加到濾液中並在22ºC下攪拌18 h。將反應混合物在減壓下濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用在環己烷中的5%至30% EtOAc洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（53.0 mg）。TLC-MS (APCI): 345.3 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 4.33 - 4.17 (m, 1H), 3.30 - 3.19 (m, 2H), 2.78 - 2.64 (m, 2H), 2.58 (d, 1H), 2.35 (t, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.03 - 0.98 (m, 2H), 0.75 - 0.68 (m, 2H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO) δ -68.02, -95.50 (d), -108.07 (d)。
步驟 -4. 4,4- 二氟 -1-[[1-( 三氟甲基 ) 環丙基 ] 甲基 ] 吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image1951
將TFA（1.00 mL）添加到 N-(4,4-二氟-1-[[1-(三氟甲基)環丙基]甲基]吡咯啶-3-基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-4，38.0 mg，0.11 mmol）在DCM（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌1 h。將所得溶液在減壓下濃縮以獲得呈油狀物的標題化合物（25.0 mg）。LCMS (ESI): 245.1 [M+H] +。
步驟 -5. (S)-N-( (S)-4,4- 二氟 -1-((1-( 三氟甲基 ) 環丙基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ( (R)-4,4- 二氟 -1-((1-( 三氟甲基 ) 環丙基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1943
將HOBt（17.4 mg，0.13 mmol），EDCI（24.7 mg，0.13 mmol），和4,4-二氟-1-[[1-(三氟甲基)環丙基]甲基]吡咯啶-3-胺（21.0 mg，0.09 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，32.2 mg，0.09 mmol）和DIPEA（66.7 mg，0.52 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-N-( (S)-4,4-二氟-1-((1-(三氟甲基)環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-( (R)-4,4-二氟-1-((1-(三氟甲基)環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（50.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 601.2 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（50.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IF柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：1/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=70 : 30，保持10 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 435-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（10.7 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.92 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.41 - 7.82 (m, 1H), 7.70 - 6.84 (m, 2H), 4.75 - 4.37 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.28 - 3.17 (m, 2H), 3.00 - 2.77 (m, 2H), 2.76 - 2.57 (m, 2H), 2.55 - 2.42 (m, 1H), 2.39 - 2.13 (m, 1H), 1.99 - 1.54 (m, 2H), 1.49 - 1.18 (m, 3H), 1.17 - 0.96 (m, 3H), 0.96 - 0.82 (m, 1H), 0.83 - 0.59 (m, 4H)。LCMS (ESI): 601.20 [M+H] +。
實例 435-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（10.2 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.08 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.32 - 7.70 (m, 1H), 7.61 - 6.88 (m, 2H), 4.71 - 4.32 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.28 - 3.18 (m, 2H), 3.00 - 2.77 (m, 2H), 2.76 - 2.57 (m, 2H), 2.54 - 2.37 (m, 2H), 2.00 - 1.70 (m, 2H), 1.56 - 1.17 (m, 3H), 1.15 - 0.96 (m, 3H), 0.96 - 0.51 (m, 5H)。LCMS (ESI): 601.20 [M+H] +。
實例 436. (1 R,3 s,5 S)- N-(4-(1,1- 二氟 -2- 羥基乙基 )-4- 羥基環己基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1954
步驟 -1. 8-(1,1- 二氟 -2- 羥基乙基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 醇
Figure 02_image1956
在0ºC下將LiAlH 4（1.08 mL，2.60 mmol，在THF中2.4 M）添加到2,2-二氟-2-(8-羥基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)乙基4-甲基苯磺酸酯（來自中間體537的合成步驟-3，509.5 mg，1.30 mmol）在THF（6.49 mL）中的攪拌溶液中。將反應混合物升溫至22ºC並攪拌2 h。將所得混合物用Et 2O稀釋並冷卻至0ºC，並且然後緩慢添加水，隨後添加15% NaOH水溶液和水。將所得混合物升溫至22ºC並攪拌15 min。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用0%至100% EtOAc/環己烷洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（150.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 3.93 - 3.90 (m, 4H), 3.88 (t, 2H), 1.89 - 1.73 (m, 6H), 1.61 (dd, 2H)。 19F NMR (376 MHz, CD 3OD) δ -124.39。
步驟 -2. 4-(1,1- 二氟 -2- 羥基乙基 )-4- 羥基環己烷 -1- 酮
Figure 02_image1958
將TFA（723.9 mg，6.35 mmol）添加到8-(1,1-二氟-2-羥基乙基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-醇（步驟-1，150.0 mg，0.63 mmol）在DCM（6.70 mL）中的溶液中。將混合物在22ºC下攪拌48 h。在減壓下除去揮發物。將剩餘TFA與甲苯共蒸發兩次。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用0%至100% EtOAc/環己烷洗脫）純化，以獲得標題化合物（122.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 4.00 - 3.80 (m, 3H), 2.69 (td, 1H), 2.29 - 2.20 (m, 1H), 2.19 - 2.09 (m, 1H), 2.07 - 1.97 (m, 1H), 1.93 - 1.59 (m, 4H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -121.54, -122.53。
步驟 -3. 4-(1,1- 二氟 -2- 羥基乙基 )-4- 羥基環己烷 -1- 酮肟
Figure 02_image1960
將鹽酸羥胺（33.6 mg，0.48 mmol）添加到乙酸鈉（43.3 mg，0.53 mmol）在MeOH（2.40 mL）中的溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌30 min。然後將4-(1,1-二氟-2-羥基乙基)-4-羥基環己烷-1-酮（步驟-2，122.0 mg，70.0% Wt，0.44 mmol）在MeOH（1 mL）中的溶液添加到反應混合物中。將所得混合物在60ºC下攪拌16 h。將反應混合物冷卻至22ºC並在減壓下除去MeOH。將殘餘物溶解在EtOAc中並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（0%至100% EtOAc/環己烷）純化，以獲得呈固體的標題化合物（68.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 3.90 (t, 2H), 3.26 - 3.16 (m, 1H), 2.45 (td, 1H), 2.24 (ddt, 1H), 2.07 (td, 1H), 1.96 (dddd, 2H), 1.78 - 1.61 (m, 2H)。 19F NMR (376 MHz, CD 3OD) δ -124.10 (d)。
步驟 -4. (4-(1,1- 二氟 -2- 羥基乙基 )-4- 羥基環己基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1962
在-78ºC下將NaBH 4（98.4 mg，2.60 mmol）添加到4-(1,1-二氟-2-羥基乙基)-4-羥基環己烷-1-酮肟（步驟-3，68.0 mg，0.33 mmol）和六水合氯化鎳(II)（100.4 mg，0.42 mmol）在MeOH（6.50 mL）中的溶液中。將所得混合物升溫至0ºC並在該溫度下攪拌4 h。然後添加Boc 2O（106.4 mg，0.49 mmol）並將反應混合物在22ºC下攪拌18 h。在0ºC下將反應混合物用鹽水淬滅。在減壓下除去揮發物。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（0%至80% EtOAc/環己烷）純化，以獲得呈固體的標題化合物（88.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ 4.74 (d, 0.3H), 4.53 (d, 0.7H), 4.02 - 3.87 (m, 2H), 3.78 (s, 0.3H), 3.39 (s, 0.7H), 1.99 - 1.46 (m, 8H), 1.43 (s, 3H), 1.42 - 1.40 (m, 6H)。 19F NMR (376 MHz, 氯仿-d) δ -121.67, -122.09。
步驟 -5. 4- 胺基 -1-(1,1- 二氟 -2- 羥基乙基 ) 環己烷 -1- 醇鹽酸鹽
Figure 02_image1964
將HCl（612.0 µL，2.45 mmol，在1,4-二㗁𠮿中4.0 M）添加到(4-(1,1-二氟-2-羥基乙基)-4-羥基環己基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-4，72.3 mg，0.24 mmol）中。將溶液在22ºC下攪拌1.5 h。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈固體的標題化合物（52.9 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 3.98 - 3.81 (m, 2H), 3.16 - 3.03 (m, 1H), 1.99 - 1.63 (m, 8H)。 19F NMR (376 MHz, CD 3OD) δ -122.67, -124.22。
步驟 -6. (1 R,3 s,5 S)- N-(4-(1,1- 二氟 -2- 羥基乙基 )-4- 羥基環己基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1954
將HATU（33.5 mg，0.09 mmol）和4-胺基-1-(1,1-二氟-2-羥基乙基)環己烷-1-醇鹽酸鹽（20.6 mg，90% Wt，0.08 mmol）添加到(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體508，30.0 mg，0.08 mmol）和DIPEA（20.7 mg，0.16 mmol）在DMF（0.27 mL）中的溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌18 h。將殘餘物直接藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，10%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH）），以獲得呈固體的標題化合物（35.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.28 (s, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.13 (s, 1H), 5.29 - 5.07 (m, 1.7H), 5.01 (s, 0.7H), 4.98 (s, 0.3H), 4.72 - 4.59 (m, 1.3H), 3.87 (s, 3H), 3.82 - 3.65 (m, 2H), 3.41 (s, 1H), 3.01 - 2.87 (m, 0.3H), 2.84 - 2.71 (m, 0.7H), 2.10 - 1.38 (m, 16H)。
實例 437. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-((1-( 三氟甲基 ) 環丙基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1967
步驟 -1. (1-( 三氟甲基 ) 環丙基 ) 甲醇
Figure 02_image1969
將硼烷-甲基硫化物錯合物（5.11 mL，10.22 mmol，2 M）逐滴添加到1-(三氟甲基)環丙烷-1-甲酸（1.05 g，6.81 mmol）在THF（13.63 mL）中的溶液中。將所得溶液在40ºC下攪拌24 h並冷卻至0ºC，並藉由緩慢添加飽和NH 4Cl水溶液淬滅。將所得混合物通過矽藻土過濾。將殘餘物用EtOAc萃取。將合併的有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮以獲得呈油狀物的標題化合物（615.0 mg），並且將其不經進一步純化而用於下一步驟。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.83 (d, 2H), 0.95 - 0.88 (m, 2H), 0.74 - 0.67 (m, 2H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -69.83。
步驟 -2. (1-( 三氟甲基 ) 環丙基 ) 甲基 4- 甲基苯磺酸酯
Figure 02_image1971
在0ºC下將Et 3N（1.84 mL，13.17 mmol），DMAP（10.7 mg，0.09 mmol）和對甲苯磺醯氯（1.26 g，6.58 mmol）添加到(1-(三氟甲基)環丙基)甲醇（步驟-1，615.0 mg，4.39 mmol）在DCM（7.30 mL）中的攪拌溶液中。將反應混合物在22ºC下攪拌16 h。將反應混合物用DCM稀釋並用飽和NH 4Cl水溶液、鹽水洗滌並經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（環己烷/EtOAc，0%至80%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（73.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.84 - 7.73 (m, 2H), 7.39 - 7.31 (m, 2H), 4.10 (s, 2H), 2.46 (s, 3H), 1.14 - 1.09 (m, 2H), 0.87 - 0.81 (m, 2H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -70.12。
步驟 -3. (R)-(1-((1-( 三氟甲基 ) 環丙基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -3- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image1973
將(1-(三氟甲基)環丙基)甲基 4-甲基苯磺酸酯（步驟-2，73.0 mg，0.25 mmol）和 (R)-吡咯啶-3-基胺基甲酸三級丁酯（60.1 mg，0.32 mmol）在DMF（1.24 mL）中的溶液在60ºC下攪拌16 h。向反應混合物中添加水並用Et 2O萃取。將合併的有機物用水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（環己烷/EtOAc，0%至40%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（39.3 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.84 (s, 1H), 4.15 (s, 1H), 2.98 - 2.85 (m, 1H), 2.76 - 2.63 (m, 2H), 2.53 - 2.40 (m, 2H), 2.32 - 2.16 (m, 2H), 1.63 - 1.52 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.06 - 0.95 (m, 2H), 0.68 - 0.52 (m, 2H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -69.42, -76.49。
步驟 -4. (R)-2,2,2- 三氟 - N-(1-((1-( 三氟甲基 ) 環丙基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -3- 基 ) 乙醯胺
Figure 02_image1975
將TFA（145.3 mg，1.28 mmol）添加到 (R)-(1-((1-(三氟甲基)環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-3，39.3 mg，0.13 mmol）在DCM（637.0 µL）中的溶液中。將反應混合物在22ºC下攪拌2 h。在減壓下除去揮發物。將殘餘物與環己烷共蒸發兩次，以獲得呈固體的標題化合物，並且不經進一步純化而用於下一步驟。TLC-MS (APCI): 305.1 [M+H] +。
步驟 -5. (1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-((1-( 三氟甲基 ) 環丙基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1967
將HATU（33.5 mg，0.09 mmol）和 (R)-2,2,2-三氟- N-(1-((1-(三氟甲基)環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)乙醯胺（步驟-4，24.4 mg，0.08 mmol）添加到(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體508，30.0 mg，0.08 mmol）和DIPEA（0.11 mL，0.64 mmol）在DMF（367.0 µL）中的溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌18 h。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，10%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH）），以獲得含有PF 6鹽的標題化合物。將固體溶解在水中並添加飽和NaHCO 3水溶液。將所得混合物劇烈攪拌2 h。濾出固體並用水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（19.5 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 14.09 (s, 0.4H), 13.97 (s, 0.6H), 8.31 (d, 0.6H), 8.24 (d, 0.4H), 7.92 (t, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.15 (s, 0.6H), 7.09 (s, 0.4H), 5.21 (s, 0.6H), 4.68 (d, 1H), 4.60 (s, 0.4H), 4.11 - 4.01 (m, 1H), 3.87 (d, 3H), 2.88 - 2.74 (m, 1H), 2.70 - 2.57 (m, 3H), 2.44 - 2.25 (m, 2H), 2.14 - 1.42 (m, 10H), 0.98 - 0.88 (m, 2H), 0.76 - 0.67 (m, 2H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO) δ -67.90, -141.89, -142.82。TLC-MS (APCI): [M+H] += 565.3。
實例 438. (1 R,3 s,5 S)- N-(4- 氰基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1978
步驟 -1. 1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 甲腈
Figure 02_image1980
在-10ºC下在2 h的時間段內，將三級丁醇鉀（18.06 g，160.92 mmol）分批添加到1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-酮（10.56 g，67.61 mmol）和TosMIC（17.16 g，87.90 mmol）在DMF（189 mL）和乙醇（7 mL）中的混合物中。溫度保持在-5ºC以下。添加完成後，將混合物升溫至0ºC並在0ºC再攪拌1 h，然後在22ºC再攪拌2.5 h。將反應混合物用二乙醚和水稀釋。將混合物攪拌1 h。分離有機層並用水洗滌，然後用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物蒸餾（110ºC，3毫巴），以獲得呈油狀物的標題化合物（5.43 g）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.00 - 3.84 (m, 4H), 2.64 (tt, 1H), 1.95 (dqt, 4H), 1.83 (ddd, 2H), 1.61 (ddd, 2H)。
步驟 -2. N-( 三級丁基二甲基矽基 )-1-(1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 亞基 ) 甲亞胺
Figure 02_image1982
在火焰乾燥的Schlenk管中，將二異丙胺（2.11 mL，14.95 mmol）溶解在乾THF（6.64 mL）中，並在-78ºC下逐滴添加BuLi（9.34 mL，14.95 mmol，在己烷中1.6M）。在-78ºC下攪拌10 min後，藉由特氟隆套管添加1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-甲腈（步驟-1，2.50 g，14.95 mmol）在乾THF（6.64 mL）中的溶液並將溶液在-78ºC下攪拌5 min。經由特氟隆套管添加三級丁基二甲基氯矽烷（2.45 g，16.45 mmol）在乾THF（5.98 mL）中的溶液，並將反應混合物升溫至22ºC並攪拌1.5 h。在高真空（1⋅10−2 mbar）下除去所有揮發物。將殘餘物溶解在戊烷（10.00 mL）中並在特氟隆墊上過濾。將溶劑在減壓下除去，並將殘留物藉由短程蒸餾（130ºC，1⋅10-2 mbar）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（3.02 g）。由於該等產品對水分敏感，因此將化合物儲存在氮氣氣氛下。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 3.93 - 3.89 (m, 4H), 2.28 - 2.20 (m, 4H), 1.70 - 1.63 (m, 4H), 0.92 (s, 9H), 0.15 - 0.10 (m, 6H)。
步驟 -3. 8-( 三氟甲基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 甲腈
Figure 02_image1984
在0ºC下在火焰乾燥的螺旋蓋小瓶中，將 N-(三級丁基二甲基矽基)-1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-亞基)甲亞胺（2.50 g，7.99 mmol，90% Wt）添加到V(O)salen（222.9 mg，0.40 mmol） [2]和1-(三氟甲基)-1l3-苯并[d][1,2]碘氧雜戊環-3(1H)-酮（步驟-2，4.21 g，7.99 mmol，60% Wt）的混合物中。將反應混合物用DCM（2.00 mL）稀釋並從0ºC至22ºC攪拌24 h。將揮發物在減壓下除去，並將反應混合物直接藉由矽膠柱層析法（環己烷/EtOAc，0%至25%）純化。將殘餘物進一步藉由矽膠柱層析法（用DCM洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.02 g）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.05 - 3.90 (m, 4H), 2.20 - 2.11 (m, 2H), 2.09 - 1.81 (m, 6H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -75.67。
步驟 -4. 4- 側氧基 -1-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 甲腈
Figure 02_image1986
在22ºC下將TFA（412.7 µL，5.36 mmol）添加到8-(三氟甲基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-甲腈（步驟-3，84.0 mg，0.36 mmol）在DCM（0.70 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌48 h。將反應混合物用DCM稀釋並用NaHCO 3（飽和水溶液）洗滌。將各層分離，並將水層進一步用DCM萃取。將合併的有機物經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（50.5 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 2.74 (td, 2H), 2.64 - 2.56 (m, 2H), 2.51 (ddt, 2H), 2.21 - 2.10 (m, 2H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -75.29。
步驟 -5. N-(4- 氰基 -4-( 三氟甲基 ) 環亞己基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image1988
將異丙醇鈦(IV)（107.0 µL，0.35 mmol）添加到4-側氧基-1-(三氟甲基)環己烷-1-甲腈（步驟-4，48.0 mg，0.25 mmol）和2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（36.5 mg，0.30 mmol）在THF（0.50 mL）中的溶液中。將所得溶液在22ºC下攪拌4 h。將混合物用20 mL NaHCO 3（飽和水溶液）/NaCl（飽和水溶液）（1/1 v/v）淬滅。將所得混合物攪拌30 min，然後通過矽藻土過濾並將固體用EtOAc稀釋。將混合物用EtOAc萃取並將合併的有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/EtOAc，0%至30%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（29.4 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 3.92 (d, 1H), 2.81 - 2.55 (m, 3H), 2.47 - 2.36 (m, 2H), 2.10 - 1.96 (m, 2H), 1.25 (s, 9H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -75.47, -75.60。
步驟 -6. N-(4- 氰基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image1990
在-78ºC下將LiAlH 4（42.2 µL，0.08 mmol，在Et 2O中2.0 M）逐滴添加到 N-(4-氰基-4-(三氟甲基)環亞己基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-5，24.9 mg，0.08 mmol）在THF（563.0 µL）中的溶液中。將所得溶液在-78ºC下攪拌30 min。將反應混合物用Et 2O（10.00 mL）稀釋並在0ºC下用水淬滅。添加無水硫酸鈉並將所得混合物在22ºC下攪拌15 min。將固體經特氟隆墊過濾並將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（24.9 mg），並且不經進一步純化而直接用於下一步驟。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -75.89, -75.97。
步驟 -7. 4- 胺基 -1-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 甲腈鹽酸鹽
Figure 02_image1992
將HCl（336.1 µL，0.42 mmol，在MeOH中1.25 M）添加到 N-(4-氰基-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-6，24.9 mg，0.08 mmol）在MeOH（168.0 µL）中的溶液中。將反應混合物在22ºC下攪拌10 min。在減壓下除去揮發物並將殘餘物在Et 2O中研磨。將固體濾出並用Et 2O洗滌，以獲得呈固體的標題化合物（16.5 mg）。TLC-MS (APCI): [M+H] += 229.1。
步驟 -8. (1 R,3 s,5 S)- N-(4- 氰基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image1978
將HATU（31.2 mg，0.08 mmol）和4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-甲腈鹽酸鹽（步驟-7，16.5 mg，0.07 mmol）添加到(1 R,3 s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體508，27.1 mg，0.07 mmol）和DIPEA（25.0 µL，0.14 mmol）在DMF（240.0 µL）中的溶液中。將反應混合物在22ºC下攪拌18 h。將反應混合物直接藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，5%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH）），以獲得呈固體的標題化合物（16.5 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.28 (s, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.13 (s, 1H), 5.38 - 4.55 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.70 - 3.55 (m, 1H), 2.85 - 2.71 (m, 1H), 2.21 - 1.58 (m, 14H), 1.49 - 1.32 (m, 2H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -70.10, -137.16, -137.99
實例 439. (S)-N-((1 s,4 R)-4-( 氰基甲基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ((1 r,4S)-4-( 氰基甲基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image1995
步驟 -1. 8-( 三氟甲基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 甲醛
Figure 02_image1997
在-40ºC下在劇烈攪拌下，將DIBAL-H（1.22 mL，1.22 mmol，在DCM中1 M）逐滴添加到8-(三氟甲基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-甲腈（來自實例438的合成步驟-4，261.0 mg，1.11 mmol）在DCM（5.50 mL）中的溶液中。將反應混合物在-40ºC下攪拌1 h。藉由在-40ºC下添加飽和NH 4Cl水溶液將反應混合物淬滅，並且然後升溫至22ºC。將反應混合物用Et 2O稀釋。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（234.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.65 (s, 1H), 3.96 - 3.92 (m, 4H), 2.29 - 2.13 (m, 2H), 2.05 - 1.93 (m, 2H), 1.78 - 1.69 (m, 2H), 1.54 (td, 2H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -72.59。
步驟 -2. (8-( 三氟甲基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 ) 甲醇
Figure 02_image1999
在0ºC下將NaBH 4（56.9 mg，1.50 mmol）添加到8-(三氟甲基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-甲醛（步驟-1，358.0 mg，1.50 mmol）在MeOH（7.50 mL）中的溶液中。將反應混合物在0ºC下攪拌2 h。藉由添加飽和NH 4Cl水溶液將反應混合物淬滅。在減壓下除去MeOH。將殘餘物用水稀釋並用Et 2O萃取。將合併的有機物經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/環己烷，0%至50%）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（255.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.97 - 3.94 (m, 4H), 3.79 (s, 2H), 1.95 - 1.59 (m, 9H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -74.81。
步驟 -3. (8-( 三氟甲基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 ) 甲基 4- 甲基苯磺酸酯
Figure 02_image2001
在0ºC下將 nBuLi（308.31 µL，0.49 mmol，1.60莫耳）逐滴添加到(8-(三氟甲基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)甲醇（步驟-2，79.0 mg，0.33 mmol）在THF（0.66 mL）中的溶液中。將混合物在0ºC下攪拌10 min。將甲苯磺醯氯（75.2 mg，0.39 mmol）在THF（0.50 mL）中的溶液添加到反應混合物中。在0ºC下攪拌15 min後，將反應混合物升溫至22ºC並攪拌16 h。藉由添加水將反應混合物淬滅並用Et 2O萃取。將合併的有機物經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/環己烷，0%至50%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（87.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.82 - 7.75 (m, 2H), 7.38 - 7.33 (m, 2H), 4.10 (s, 2H), 3.96 - 3.91 (m, 4H), 1.96 - 1.85 (m, 2H), 1.79 - 1.63 (m, 4H), 1.60 - 1.48 (m, 2H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -75.69。
步驟 -4. 2-(8-( 三氟甲基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 ) 乙腈
Figure 02_image2003
在120ºC下將(8-(三氟甲基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)甲基4-甲基苯磺酸酯（步驟-3，120.0 mg，0.30 mmol），碘化鈉（13.7 mg，0.09 mmol）和NaCN（44.7 mg，0.91 mmol）的溶液在密封管中加熱24 h。將反應混合物用水稀釋並將水溶液用Et 2O萃取。將合併的有機物用水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/環己烷，0%至50%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（62.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.00 - 3.90 (m, 4H), 2.67 (s, 2H), 2.10 - 2.01 (m, 2H), 1.90 - 1.74 (m, 4H), 1.67 - 1.57 (m, 2H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -77.06。
步驟 -5. 2-(4- 側氧基 -1-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 乙腈
Figure 02_image2005
將TFA（290.7 µL，3.77 mmol）添加到2-(8-(三氟甲基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)乙腈（步驟-4，62.7 mg，0.25 mmol）在DCM（0.50 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌48 h。將反應混合物用DCM稀釋並用飽和NaHCO 3水溶液洗滌。將合併的有機物經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/環己烷，0%至60%）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（51.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 2.78 (s, 2H), 2.61 - 2.39 (m, 4H), 2.32 - 2.23 (m, 2H), 2.16 - 2.06 (m, 2H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -76.32。
步驟 -6. N-(4-( 氰基甲基 )-4-( 三氟甲基 ) 環亞己基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image2007
將乙醇鈦（103.5 µL，0.50 mmol）添加到2-(4-側氧基-1-(三氟甲基)環己基)乙腈（步驟-5，51.0 mg，0.25 mmol）和2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（36.2 mg，0.30 mmol）在THF（0.50 mL）中的溶液中。將所得溶液在22ºC下攪拌16 h。將混合物用20 mL NaHCO 3（飽和水溶液）/NaCl（飽和水溶液）（1/1 v/v）淬滅。將混合物攪拌30 min，然後通過矽藻土過濾並用EtOAc洗滌固體。將混合物用EtOAc萃取並將合併的有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/環己烷，0%至100%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（35.9 mg），並且將其不經進一步純化而用於下一步驟。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 5.14 - 5.03 (m, 1H), 4.75 (d, 1H), 2.74 (d, 2H), 2.70 - 2.61 (m, 2H), 2.56 - 2.42 (m, 2H), 2.31 - 1.94 (m, 3H), 1.25 (s, 9H)。TLC-MS, (APCI): 309.1 [M+H] +。
步驟 -7. N-((1 s,4 s)-4-( 氰基甲基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺和 N- ((1 r,4 r)-4-( 氰基甲基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image2009
在-78ºC下將LiAlH 4（52.4 µL，0.10 mmol，在Et 2O中2.0M）逐滴添加到 N-(4-(氰基甲基)-4-(三氟甲基)環亞己基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-6，35.9 mg，0.10 mmol，90% Wt）在THF（698.0 µL）中的溶液中。將所得溶液在-78ºC下攪拌2 h。將反應混合物用Et 2O稀釋並用水在-78ºC下淬滅。添加無水硫酸鈉並將混合物在22ºC下攪拌15 min。固體經特氟隆墊過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/環己烷，30%至100%）純化，以獲得 N-((1 s,4 s)-4-(氰基甲基)-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺和 N-((1 r,4r)-4-(氰基甲基)-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺，其為兩部分。
獲得呈固體的第一洗脫部分（16.2 mg）。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.25 (tt, 1H), 3.13 (d, 1H), 2.16 - 2.05 (m, 2H), 1.96 - 1.87 (m, 2H), 1.87 - 1.73 (m, 2H), 1.49 - 1.29 (m, 2H), 1.26 - 1.17 (m, 9H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -78.21。
獲得呈固體的第二洗脫部分（8.9 mg）。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.52 - 3.42 (m, 1H), 3.04 (d, 1H), 2.61 (s, 2H), 2.13 - 2.01 (m, 2H), 1.97 - 1.77 (m, 2H), 1.76 - 1.56 (m, 2H), 1.34 - 1.24 (m, 2H), 1.24 - 1.19 (m, 9H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -75.27。
步驟 -8. 2-((1 s,4 s)-4- 胺基 -1-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 乙腈鹽酸鹽和 2-((1 r,4 r)-4- 胺基 -1-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 乙腈鹽酸鹽
Figure 02_image2011
將HCl（212.6 µL，0.27 mmol，在MeOH中1.25 M）添加到 N-(4-(氰基甲基)-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（來自步驟-7的第一洗脫異構物，16.5 mg，0.05 mmol）在MeOH（265.0 µL）中的溶液中。將反應混合物在22ºC下攪拌15 min。在減壓下除去揮發物並將殘餘物在EtOAc和Et 2O中研磨。濾出固體並用Et 2O洗滌，以獲得呈固體的異構物1（9.0 mg）。
異構物1：
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 3.18 (tt, 1H), 2.93 (s, 2H), 2.10 - 2.02 (m, 2H), 2.01 - 1.93 (m, 2H), 1.92 - 1.80 (m, 2H), 1.63 - 1.47 (m, 2H)。 19F NMR (376 MHz, CD 3OD) δ -79.85。
將HCl（80.29 µL，100.4 µmol，在MeOH中1.25 M）添加到 N-(4-(氰基甲基)-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（來自步驟-7的第二洗脫異構物，8.9 mg，20.07 µmol）在MeOH（100.0 µL）中的溶液中。將反應混合物在22ºC下攪拌10 min。在減壓下除去揮發物並將殘餘物在EtOAc和Et 2O中研磨。濾出固體並用Et 2O洗滌，以獲得呈固體的異構物2（3.8 mg）。
異構物2：
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 3.28 - 3.19 (m, 1H), 2.82 (s, 2H), 2.28 - 2.17 (m, 2H), 2.05 - 1.94 (m, 2H), 1.81 - 1.64 (m, 4H)。 19F NMR (376 MHz, CD 3OD) δ -72.88。
步驟 -9. (S)-N-((1 s,4 R)-4-( 氰基甲基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ((1 r,4 S)-4-( 氰基甲基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image1995
將HATU（14.6 mg，0.04 mmol）和來自步驟-8的異構物1（8.2 mg，0.03 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，12.7 mg，0.03 mmol）和DIPEA（13.2 mg，0.10 mmol）在DMF（0.20 mL）中的溶液中。將所得溶液在22ºC下攪拌18 h。將反應混合物直接藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，10%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH）），以獲得呈固體的標題化合物的單一異構物（10.5 mg）（ 實例 439-A）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.12 (s, 1H), 7.37 - 7.17 (m, 1H), 7.10 (s, 1H), 4.58 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.81 (s, 1H), 2.83 (s, 2H), 2.47 - 2.29 (m, 1H), 2.13 - 2.00 (m, 2H), 2.00 - 1.52 (m, 8H), 1.40 - 0.61 (m, 8H)。TLC-MS, (APCI): 563.4 [M+H] +。
將HATU（6.1 mg，0.02 mmol）和來自步驟-8的異構物2（3.6 mg，0.01 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，5.5 mg，0.01 mmol）和DIPEA（5.7 mg，0.04 mmol）在DMF（0.2 mL）中的溶液中。將所得溶液在22ºC下攪拌18 h。將反應混合物直接藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，10%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH）），以獲得呈固體的不同於實例439-A的標題化合物的單一異構物（2.0 mg）（ 實例 439-B）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.20 - 8.06 (m, 1H), 7.40 - 7.16 (m, 2H), 7.10 (s, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.02 - 3.81 (m, 3H), 3.64 (s, 1H), 2.91 (s, 2H), 2.80 (d, 1H), 2.38 (s, 1H), 1.97 - 1.64 (m, 7H), 1.45 - 0.64 (m, 10H)。TLC-MS, (APCI): 563.4 [M+H] +。
實例 440. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((2-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2014
步驟 -1. 4-(( 甲苯磺醯基氧基 ) 甲基 )-2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2016
在0ºC下在氮氣氣氛下，將甲苯磺醯氯（412.0 mg，2.16 mmol）和三乙胺（548.0 µL，3.93 mmol）添加到4-(羥基甲基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-2-甲酸三級丁酯（419.0 mg，1.96 mmol）在無水DCM（3.45 mL）中的溶液中。將反應混合物在22ºC下攪拌16 h。將反應混合物用水淬滅並將有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/環己烷，0%至40%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（626.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.81 - 7.74 (m, 2H), 7.38 - 7.32 (m, 2H), 4.32 (t, 1H), 4.19 (s, 2H), 3.18 (s, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.81 - 1.74 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.45 - 1.41 (m, 2H)。
步驟 -2. 4-( 疊氮基甲基 )-2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2018
在氮氣下將疊氮化鈉（84.9 mg，1.31 mmol）添加到在密封管中的4-((甲苯磺醯基氧基)甲基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-2-甲酸三級丁酯（步驟-1，300.0 mg，0.82 mmol）在無水DMF（0.81 mL）中的溶液中。將反應混合物在50ºC下攪拌18 h。將混合物用水稀釋。將水溶液用Et 2O萃取。將合併的有機層用水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/環己烷，0%至40%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（195.5 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.36 (t, 1H), 3.53 (s, 2H), 3.25 (s, 2H), 1.86 - 1.79 (m, 2H), 1.51 (dd, 2H), 1.47 (s, 9H)。
步驟 -3. 4-( 疊氮基甲基 )-2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷鹽酸鹽
Figure 02_image2020
在氮氣下將HCl（1.45 mL，5.79 mmol，在1,4-二㗁𠮿中4.0 M）添加到4-(疊氮基甲基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-2-甲酸三級丁酯（步驟-2，137.9 mg，0.58 mmol）在1,4-二㗁𠮿（1.15 mL）中的溶液中。將反應混合物在22ºC下攪拌16 h。在減壓下除去揮發物，以獲得呈固體的標題化合物（101.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 4.20 (t, 1H), 3.73 (s, 2H), 3.26 (s, 2H), 2.14 - 2.04 (m, 2H), 1.68 - 1.58 (m, 2H)。
步驟 -4. 4-( 疊氮基甲基 )-2-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷
Figure 02_image2022
在氮氣下，將DIPEA（202.0 µL，1.16 mmol）和2-氟-2-甲基丙基三氟甲磺酸酯（194.7 mg，0.87 mmol）添加到在密封管中的4-(疊氮基甲基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷鹽酸鹽（步驟-3，101.1 mg，0.58 mmol）在1,4-二㗁𠮿/DMF（98/3 v/v，1.40 mL）中的溶液中。將反應混合物在80ºC下加熱16 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物用水和EtOAc稀釋。將有機層進一步用EtOAc萃取。將合併的有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/MeOH，0%至10%）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（50.6 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 3.51 (s, 2H), 3.47 - 3.43 (m, 1H), 2.76 (d, 2H), 2.72 (s, 2H), 1.68 - 1.57 (m, 4H), 1.40 (s, 3H), 1.35 (s, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CD 3OD) δ -142.39。
步驟 -5. (2-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 基 ) 甲胺
Figure 02_image2024
將4-(疊氮基甲基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷（步驟-4，17.4 mg，0.08 mmol）和氫氧化鈀碳（5.0 mg，0.04 mmol）在MeOH（0.20 mL）中的溶液在氫氣氣氛（1 atm）下在22ºC下攪拌18 h。將反應混合物在特氟隆墊上過濾並在減壓下濃縮，以獲得標題化合物（13.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 3.43 - 3.40 (m, 1H), 2.82 (s, 2H), 2.75 (d, 2H), 2.67 (s, 2H), 1.62 - 1.51 (m, 4H), 1.40 (s, 3H), 1.35 (s, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CD 3OD) δ -142.14。
步驟 -6. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((2-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2014
將HATU（18.4 mg，0.05 mmol）和(2-(2-氟-2-甲基丙基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲胺（12.9 mg，0.06 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，16.0 mg，0.04 mmol）和DIPEA（0.02 mL，0.10 mmol）在DMF（0.2 mL）中的溶液中。將所得溶液在22ºC下攪拌18 h。將反應混合物直接藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，5%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH）），以獲得呈固體的標題化合物（10.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.99 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.47 (s, 0.77H), 3.87 (s, 3H), 3.54 - 3.06 (m, 6.23H), 2.85 - 2.62 (m, 5H), 1.74 (s, 1H), 1.55 - 1.38 (m, 5H), 1.36 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.07 - 0.47 (m, 4H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO) δ -69.48, -71.37, -138.48。
實例 441. (1 R,3 s,5 S)- N-(4- 胺基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image2026
步驟 -1. 2- 甲基 - N-(1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 亞基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image2028
將四乙氧基鈦（2.82 mL，13.45 mmol）添加到1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-酮（1.50 g，9.6 mmol）和2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（1.40 g，11.53 mmol）在THF（19.20 mL）中的混合物中。將所得溶液在22ºC下攪拌16 h。將混合物用50 mL NaHCO 3（飽和水溶液）/NaCl（飽和水溶液）（1/1 v/v）淬滅。將混合物攪拌30 min，並通過矽藻土過濾並用EtOAc洗滌固體。將混合物用EtOAc萃取並將合併的有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/EtOAc，0%至40%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.10 g）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.00 - 3.97 (m, 4H), 3.10 (ddd, 1H), 2.88 (ddd, 1H), 2.62 (dd, 2H), 2.54 - 2.47 (m, 1H), 2.06 - 1.98 (m, 1H), 1.91 (dt, 2H), 1.23 (s, 9H)。
步驟 -2. 2- 甲基 - N-(8-( 三氟甲基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image2030
在-20ºC下將TBAF（5.78 mL，5.78 mmol，在THF中1 M）添加到2-甲基- N-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-亞基)丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-1，1.00 g，3.86 mmol）在THF（38.50 mL）中的溶液中。在劇烈攪拌下將三甲基(三氟甲基)矽烷（1.65 g，11.57 mmol）緩慢添加到反應混合物中。將反應混合物在22ºC下攪拌16 h。藉由添加NaHCO 3（飽和水溶液）將混合物淬滅。在減壓下除去THF並將殘餘物用水和EtOAc稀釋。將水溶液進一步用EtOAc萃取。將合併的有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（環己烷/EtOAc，0%至100%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（163.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 3.98 - 3.91 (m, 4H), 3.30 (s, 1H), 2.14 - 1.96 (m, 5H), 1.81 - 1.63 (m, 3H), 1.25 (s, 9H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -80.42。
步驟 -3. 2- 甲基 - N-(4- 側氧基 -1-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image2032
將TFA（381.2 µL，4.95 mmol）添加到2-甲基- N-(8-(三氟甲基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-2，163.0 mg，0.50 mmol）在DCM（2.50 mL）中的溶液中。將反應混合物在22ºC下攪拌16 h。將反應混合物用DCM稀釋並用NaHCO 3（飽和水溶液）洗滌。將有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（環己烷/EtOAc，0%至100%）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（123.3 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 3.57 (s, 1H), 2.92 (td, 1H), 2.64 - 2.37 (m, 4H), 2.30 - 2.16 (m, 3H), 1.29 (s, 9H)。
步驟 -4. N-(4-( 羥基亞胺基 )-1-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image2034
將鹽酸羥胺（33.0 mg，0.48 mmol）添加到乙酸鈉（42.5 mg，0.52 mmol）和MeOH（2.10 mL）的混合物中。將所得混合物在22ºC下攪拌30 min。然後將2-甲基- N-(4-側氧基-1-(三氟甲基)環己基)丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-3，123.3 mg，0.43 mmol）在MeOH（1.00 mL）中的溶液添加到反應混合物中。將反應混合物在60ºC下攪拌16 h。然後將反應混合物冷卻至22ºC並在減壓下除去MeOH。將殘餘物用水和EtOAc稀釋。將水溶液進一步用EtOAc萃取。將合併的有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/環己烷，0%至100%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（93.6 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 3.42 (s, 1H), 3.25 - 3.14 (m, 1H), 2.63 - 1.72 (m, 7H), 1.19 (d, 9H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -80.78, -80.87。
步驟 -5. (4-(( 三級丁基亞磺醯基 ) 胺基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2036
在-78ºC下將NaBH 4（9.32 mg，0.25 mmol）添加到 N-(4-(羥基亞胺基)-1-(三氟甲基)環己基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-4，74.0 mg，0.25 mmol）和六水合氯化鎳(II)（76.1 mg，0.32 mmol）在MeOH（4.90 mL）中的溶液中。將所得混合物升溫至0ºC並在該溫度下攪拌4 h。然後添加Boc 2o（80.7 mg，0.37 mmol）並將反應混合物在22ºC下攪拌18 h。在0ºC下將反應混合物用鹽水淬滅。在減壓下除去揮發物。將殘餘物用水和EtOAc稀釋。將水溶液進一步用EtOAc萃取。將有機層合併，並且經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（EtOAc/環己烷，0%至90%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（96.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 3.44 - 3.33 (m, 1H), 2.28 - 1.65 (m, 8H), 1.47 - 1.42 (m, 9H), 1.32 - 1.26 (m, 9H)。 19F NMR (376 MHz, CD 3OD) δ -81.53, -81.94。
步驟 -6. N-(4- 胺基 -1-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image2038
在0ºC下將TFA（41.86 µL，0.54 mmol）添加到(4-((三級丁基亞磺醯基)胺基)-4-(三氟甲基)環己基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-5，30.0 mg，0.08 mmol）在DCM（388.0 µL）中的溶液中。將反應混合物升溫至22ºC並攪拌1.5 h。在減壓下除去揮發物。將殘餘物與環己烷共蒸發兩次，以獲得呈油狀物的標題化合物（22.2 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 3.17 - 3.06 (m, 1H), 2.36 - 1.58 (m, 8H), 1.23 - 1.16 (m, 9H)。 19F NMR (376 MHz, CD 3OD) δ -77.36, -82.14。
步驟 -7. (1 R,3 s,5 S)- N-(4-(( 三級丁基亞磺醯基 ) 胺基 )-4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image2040
將HATU（28.2 mg，0.07 mmol）和2-甲基- N-(4-((2,2,2-三氟乙醯基)-l4-氮烷基)-1-(三氟甲基)環己基)丙烷-2-亞磺醯胺（25.1 mg，0.07 mmol）添加到(1 R, 3s,5 S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸（中間體508，24.5 mg，0.07 mmol）和DIPEA（57.0 µL，0.33 mmol）在DMF（218.0 µL）中的溶液中。將反應混合物在22ºC下攪拌18 h。將混合物直接藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，5%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH）），以獲得呈固體的標題化合物（30.6 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.28 (d, 1H), 7.82 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.13 (d, 1H), 5.40 (s, 1H), 5.07 - 4.55 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.81 - 3.72 (m, 0.4H), 3.59 - 3.44 (m, 0.6H), 2.97 - 2.89 (m, 0.4H), 2.87 - 2.76 (m, 0.6H), 2.23 - 1.48 (m, 16H), 1.25 - 1.14 (m, 9H)。
步驟 -8. (1 R,3 s,5 S)- N-(4- 胺基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-8-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-8- 氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲醯胺
Figure 02_image2026
在-78ºC下將HCl（209.5 µL，0.25 mmol，在MeOH中1.2 M）添加到(1 R,3 s,5 S)- N-(4-((三級丁基亞磺醯基)胺基)-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺（步驟-1，20.2 mg，0.03 mmol）在MeOH（314.0 µL）中的溶液中。將所得混合物在-78ºC下攪拌2.5 h。將揮發物在減壓下除去並將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，5%至95%水（0.1% HCOOH）/MeOH）），以獲得呈固體的標題化合物（9.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 13.98 (s, 1H), 8.28 (d, 1H), 7.73 (t, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.13 (d, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.68 (d, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.81 - 3.71 (m, 0.3H), 3.48 - 3.38 (m, 0.7H), 2.98 - 2.87 (m,0.3H), 2.84 - 2.72 (m, 0.7H), 2.18 - 1.16 (m, 18H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO) δ -81.98, -82.66。TLC-MS (APCI): 539.3 [M+H] +。
實例 442. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(2-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2043
步驟 -1. 2-( 三級丁氧基羰基 )-2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 甲酸
Figure 02_image2045
將重鉻酸吡啶鎓（3.53 g，9.38 mmol）添加到4-(羥基甲基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-2-甲酸三級丁酯（400.0 mg，1.88 mmol）在DMF（10.00 mL）中的溶液中。將混合物在22ºC下攪拌18 h。將反應用水（20.0 mL）和EtOAc（20.0 mL）稀釋。將水層用固體NaCl飽和並用EtOAc萃取，用鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（510.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.71 (s, 1H), 4.16 (t, 1H), 3.34 (s, 2H), 2.13 - 2.05 (m, 2H), 1.61 - 1.55 (m, 2H), 1.40 (s, 9H)。
步驟 -2. 4-((( 苄基氧基 ) 羰基 ) 胺基 )-2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2047
將DPPA（702.6 mg，2.553 mmol）添加到2-(三級丁氧基羰基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-4-甲酸（步驟-1，510.0 mg，1.62 mmol）在甲苯（7.69 mL）中的混合物中。將反應混合物回流1 h。將反應混合物冷卻至22ºC並逐滴添加苯甲醇（0.35 mL，3.39 mmol）並將所得混合物回流18 h。將反應混合物冷卻至22ºC並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的EtOAc，0%至50%）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（476.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.39 - 7.33 (m, 10H), 5.24 (s, 1H), 5.10 (s, 2H), 4.27 (t, 1H), 3.38 (s, 2H), 1.86 - 1.74 (m, 2H), 1.63 - 1.59 (m, 2H), 1.46 (s, 9H)。
步驟 -3. (2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 基 ) 胺基甲酸酯 2,2,2- 三氟乙酸苄酯
Figure 02_image2049
將TFA（1.10 g，9.62 mmol）添加到4-(((苄基氧基)羰基)胺基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-2-甲酸三級丁酯（步驟-2，476.0 mg，0.96 mmol）在DCM（4.81 mL）中的溶液中。將反應混合物在22ºC下攪拌18 h 。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得標題化合物並且不經進一步純化而直接用於下一步驟。TLC-MS (APCI): 233.2 [M+H] +。
步驟 -4. (2-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 基 ) 胺基甲酸苄酯
Figure 02_image2051
將DIPEA（621.0 mg，4.81 mmol）和2-氟-2-甲基丙基三氟甲磺酸酯（258.7 mg，1.15 mmol）添加到(2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)胺基甲酸酯 2,2,2-三氟乙酸苄酯（步驟-3，333.0 mg，0.96 mmol）在1,4-二㗁𠮿（4.80 mL）中的溶液中。將反應混合物在80ºC下攪拌18 h。將反應混合物用水稀釋並用DCM萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的EtOAc，35%至55%）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（155.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.40 - 7.30 (m, 5H), 5.20 (s, 1H), 5.09 (s, 2H), 3.04 - 2.61 (m, 4H), 2.04 - 1.80 (m, 4H), 1.47 - 1.33 (m, 6H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -140.98。TLC-MS (APCI): 307.2 [M+H] +。
步驟 -5. 2-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 胺
Figure 02_image2053
將Pd/C（26.9 mg，25.3 µmol，10% Wt）添加到(2-(2-氟-2-甲基丙基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)胺基甲酸苄酯（步驟-5，155.0 mg，0.51 mmol）在MeOH（3.37 mL）中的混合物中。將所得混合物在22ºC下在H2氣氛下攪拌18 h。將所得反應混合物通過矽藻土過濾並用MeOH沖洗，並將濾液濃縮以獲得呈油狀物的標題化合物（74.0 mg）。TLC-MS (APCI): 173.1 [M+H] +。
步驟 -6. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(2-(2- 氟 -2- 甲基丙基 )-2- 氮雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2043
將HATU（55.9 mg，0.15 mmol）和2-(2-氟-2-甲基丙基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-4-胺（步驟-5，29.9 mg，0.17 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，50.0 mg，0.13 mmol）和DIPEA（81.13 mg，0.63 mmol）在DMF（0.40 mL）中的溶液中。將所得溶液在22ºC下攪拌18 h。將反應混合物在減壓下濃縮並用EtOAc/水（1/1 v/v）稀釋。將有機層用水、鹽水洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，10%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH）），以獲得呈固體的標題化合物（30.0 mg）。 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 13.97 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.45 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.23 (s, 2H), 2.71 (s, 2H), 2.68 - 2.59 (m, 3H), 2.30 - 2.10 (m, 1H), 1.87 - 1.78 (m, 2H), 1.80 - 1.66 (m, 3H), 1.60 - 1.41 (m, 1H), 1.32 (s, 3H), 1.28 (s, 3H), 1.26 - 1.05 (m, 2H), 0.96 (s, 1H), 0.62 (s, 2H)。TLC-MS (APCI): 529.3 [M+H] +。
實例 443. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1-( 三氟甲基 )-2- 氧雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2055
步驟 -1. 3- 羥基 -3-( 三氟甲基 ) 環丁烷 -1,1- 二甲酸二異丙酯
Figure 02_image2057
在0ºC下將三甲基(三氟甲基)矽烷（593.0 mg，4.17 mmol）添加到3-側氧基環丁烷-1,1-二甲酸二異丙酯（1.00 g，4.13 mmol）和CsF（在150ºC下新鮮乾燥2 h，251.0 mg，1.65 mmol）在乾THF（24.30 mL）中的溶液中。將反應混合物在22ºC下攪拌18 h。添加NH 4Cl飽和水溶液（12.00 mL）並將所得混合物攪拌15 min，並添加TBAF（12.00 mL，在THF中1 M）。將所得混合物攪拌1 h，然後用EtOAc萃取。將合併的有機層用水、鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾並濃縮，以獲得標題化合物（1.26 g），並且不經進一步純化而用於下一步驟。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.16 - 5.04 (m, 2H), 3.09 - 3.01 (m, 2H), 2.68 - 2.54 (m, 2H), 1.29 - 1.21 (m, 12H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -84.68。
步驟 -2. (3- 羥基 -3-( 三氟甲基 ) 環丁烷 -1,1- 二基 ) 二甲醇
Figure 02_image2059
在0ºC下將LiAlH 4（1.45 mL，2.89 mmol，2 M）逐滴添加到3-羥基-3-(三氟甲基)環丁烷-1,1-二甲酸二異丙酯（步驟-1，527.0 mg，1.31 mmol）在THF（13.1 mL）中的溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌18 h。將反應混合物用Et 2O稀釋並藉由順序添加水（0.14 mL）、NaOH（15%水溶液，0.14 mL）、和水（0.42 mL）淬滅。將有機層經MgSO 4乾燥，過濾，並濃縮。將殘餘物溶解在DCM中並將所得固體過濾，以獲得呈固體的標題化合物（79.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 6.22 (s, 1H), 4.69 - 4.59 (m, 1H), 4.59 - 4.49 (m, 1H), 3.51 (s, 2H), 3.30 (s, 2H), 2.09 (d, 2H), 1.72 (d, 2H)。
步驟 -3. (3- 羥基 -3-( 三氟甲基 ) 環丁烷 -1,1- 二基 ) 雙 ( 亞甲基 ) 雙 (4- 甲基苯磺酸酯 )
Figure 02_image2061
在0ºC下將甲苯磺醯氯（0.12 g，0.65 mmol）添加到(3-羥基-3-(三氟甲基)環丁烷-1,1-二基)二甲醇（步驟-2，59.0 mg，0.29 mmol）在吡啶（0.16 mL）和DCM（0.43 mL）中的溶液中。將反應混合物在22ºC下攪拌18 h。將反應混合物在減壓下濃縮，用DCM稀釋，並冷卻至0ºC。添加HCl（2 M水溶液）並將水層用DCM萃取，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的EtOAc，10%至40%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（98.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.79 - 7.71 (m, 4H), 7.40 - 7.33 (m, 4H), 4.15 (s, 2H), 3.93 (s, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.28 (d, 2H), 1.92 (d, 2H)。
步驟 -4. (1-( 三氟甲基 )-2- 氧雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 基 ) 甲基 4- 甲基苯磺酸酯
Figure 02_image2063
在0ºC下將NaH（6.0 mg，0.15 mmol，60% Wt）分批添加到(3-羥基-3-(三氟甲基)環丁烷-1,1-二基)雙(亞甲基)雙(4-甲基苯磺酸酯)（步驟-3，51.0 mg，0.10 mmol）在THF（10.00 mL）中的溶液中。將反應混合物在0ºC下攪拌1h並且然後回流5 h。將反應混合物冷卻至22ºC並藉由順序添加水和鹽水淬滅。將水層用EtOAc萃取，經Na 2SO 4乾燥，並在減壓下濃縮 。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的EtOAc，0%至20%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（24.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.81 - 7.76 (m, 2H), 7.40 - 7.34 (m, 2H), 4.30 (s, 2H), 3.78 (s, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.00 (dd, 2H), 1.80 (dd, 2H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -77.51。
步驟 -5. 4-( 疊氮基甲基 )-1-( 三氟甲基 )-2- 氧雜雙環 [2.1.1] 己烷
Figure 02_image2065
將NaN 3（6.8 mg，0.10mmol）添加到(1-(三氟甲基)-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基 4-甲基苯磺酸酯（步驟-4，22.0 mg，0.07 mmol）在DMF（0.07 mL）中的溶液中。將所得混合物加熱至40ºC並攪拌18 h。將反應混合物冷卻至22ºC並用EtOAc稀釋，用水、鹽水洗滌。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（7.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 3.83 (s, 2H), 3.66 (s, 2H), 2.04 (dd, 2H), 1.86 (dd, 2H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -77.53。
步驟 -6. 氯 ((1-( 三氟甲基 )-2- 氧雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 基 ) 甲基 )-l5- 氮烷
Figure 02_image2067
將三苯基膦（10.6 mg，0.04 mmol）添加到4-(疊氮基甲基)-1-(三氟甲基)-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷（步驟-5，7.0 mg，0.03 mmol）在EtOAc（0.23 mL）中的溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌18 h。將HCl（0.04 mL，0.17 mmol，4.0 M）和一滴水添加到反應混合物中。將反應混合物攪拌7 h並在減壓下濃縮並在Et 2O中研磨，以獲得標題化合物（10.0 mg），並且將其不經進一步純化而用於下一步驟。TLC-MS (APCI): 182.1 [M+H] +。
步驟 -7. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1-( 三氟甲基 )-2- 氧雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2055
將HATU（11.5 mg，0.03 mmol）和氯((1-(三氟甲基)-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-l5-氮烷（步驟-6，7.6 mg，0.03 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，10.0 mg，0.03 mmol）和DIPEA（16.0 mg，0.13 mmol）在DMF（0.2 mL）中的溶液中。將所得溶液在22ºC下攪拌18 h。將反應混合物直接藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，10%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH）），並且然後藉由反相柱層析法再次純化（使用以下條件：C18柱，10%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH）），以獲得呈固體的標題化合物（3.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 0.66 - 0.81 (m, 2H), 1.23 - 1.34 (m, 4H), 1.61 (t, 1H), 1.73 (dd, 2H), 1.86 (s, 1H), 1.90 - 1.98 (m, 2H), 2.02 (s, 1H), 2.31 - 2.60 (m, 1H), 2.77 - 2.90 (m, 1H), 3.55 (s, 2H), 3.73 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 7.11 (s, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.53 - 7.68 (m, 1H), 8.13 (d, 1H)。 19F NMR (376 MHz, CD 3OD) δ -144.71, -79.14。TLC-MS (APCI): 538.2 [M+H] +。
實例 444. 5-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2- 氧雜 -5- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -8- 甲醯胺
Figure 02_image2070
步驟 -1. 5- 苄基 -2- 氧雜 -5- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -8- 甲腈
Figure 02_image2072
在-10ºC下將三級丁醇鉀（34.6 mg，0.31 mmol）添加到5-苄基-2-氧雜-5-氮雜螺[3.5]壬-8-酮（30.0 mg，0.13 mmol）和甲苯磺醯基甲基異腈（32.9 mg，0.17 mmol）在DMF（0.36 mL）和EtOH（0.01 mL）中的混合物中。將所得混合物升溫至0ºC並在0ºC下攪拌1 h，隨後在22ºC下攪拌2.5 h。將反應混合物用Et 2O和水稀釋。將所得混合物劇烈攪拌1 h。將有機層用水、鹽水洗滌，經MgSO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的EtOAc，0至50%）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（14.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.41 - 7.26 (m, 5H), 4.83 (d, 1H), 4.77 (d, 1H), 4.54 (d, 1H), 4.43 (d, 1H), 4.04 (d, 1H), 3.75 (d, 1H), 2.78 - 2.63 (m, 2H), 2.42 - 2.31 (m, 2H), 2.25 - 2.14 (m, 1H), 1.85 - 1.72 (m, 2H)。
步驟 -2. 5- 苄基 -2- 氧雜 -5- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -8- 甲酸
Figure 02_image2074
將NaOH（0.62 mL，1.20 mmol，2.0 M）添加到在密封小瓶中的5-苄基-2-氧雜-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲腈（步驟-1，30.0 mg，0.12 mmol）在EtOH（0.62 mL）中的溶液中。將反應混合物在78ºC下加熱18 h。將反應混合物冷卻並在減壓下濃縮。將殘餘物溶解在水中並用DCM洗滌。用KHSO 4（2.0 M水溶液）將水層酸化至pH約為6，用EtOAc萃取，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（MeOH/DCM，0至10%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（16.0 mg）。TLC-MS (APCI): 262.0 [M+H] +。
步驟 -3. 5- 苄基 - N-((1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2- 氧雜 -5- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -8- 甲醯胺
Figure 02_image2076
將HATU（75.0 mg，0.20 mmol）和(1 r,4 r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（43.0 mg，0.23 mmol）添加到5-苄基-2-氧雜-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲酸（步驟-2，47.0 mg，0.18 mmol）和DIPEA（58.0 mg，0.45 mmol）在DMF（1.80 mL）中的溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌18 h。將反應混合物用EtOAc稀釋並用水和鹽水洗滌。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（DCM/MeOH，0至20%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（66.0 mg）。TLC-MS (APCI): 426.9 [M+H] +。
步驟 -4. N-((1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2- 氧雜 -5- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -8- 甲醯胺
Figure 02_image2078
在H 2氣氛下，將Pd/C（9.8 mg，9.19 µmol，10% Wt）添加到5-苄基- N-((1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-氧雜-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺（步驟-3，56.0 mg，0.13 mmol）在MeOH（1.31 mL）中的溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌18 h。將所得混合物經矽藻土過濾並將濾液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（MeOH/DCM，0%至20%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（34.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.66 - 4.56 (m, 2H), 4.53 - 4.37 (m, 2H), 4.00 - 3.88 (m, 1H), 3.06 (dt, 1H), 2.70 (td, 1H), 2.47 (tt, 1H), 2.31 - 2.20 (m, 1H), 1.98 - 1.81 (m, 4H), 1.81 - 1.57 (m, 7H)。 19F NMR (376 MHz, CD 3OD) δ -85.21。
步驟 -5. 5-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-2- 氧雜 -5- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -8- 甲醯胺
Figure 02_image2070
將HOBt（18.4 mg，0.12 mmol），EDCI（23.1 mg，0.12 mmol），和 N-((1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-氧雜-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺（27.0 mg，0.08 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-甲酸（步驟-4，20.9 mg，0.09 mmol）和DIPEA（51.9 mg，0.40 mmol）在DMF（0.24 mL）中的溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌18 h。將所得反應混合物直接藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，10%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH）），並且藉由第二次反相柱層析法進一步純化（使用以下條件：C18柱，10%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH））。然後將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（MeOH/DCM，0至20%）和製備型TLC（MeOH/DCM，10%）純化，以獲得呈固體的標題化合物（2.5 mg）。 1H NMR (500 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.15 (d, 1H), 5.39 - 5.30 (m, 1H), 4.98 (s, 1H), 4.74 (d, 1H), 4.56 (d, 1H), 4.46 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.13 - 2.98 (m, 1H), 2.82 (s, 1H), 2.41 - 2.13 (m, 3H), 2.07 - 2.01 (m, 1H), 1.95 - 1.81 (m, 3H), 1.76 - 1.49 (m, 7H)。 19F NMR (471 MHz, CD 3OD) δ -85.24, -144.28。TLC-MS (APCI): 556.3 [M+H] +。
實例 445. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(5-( (R)-1- 羥基乙基 ) 吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(5-( (S)-1- 羥基乙基 ) 吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2081
步驟 -1. (7 S)- N-[5- 氯吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 ]-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2083
將HATU（406.0 mg，1.07 mmol）和5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-胺（150.0 mg，0.89 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，333.1 mg，0.89 mmol）和DIPEA（345.0 mg，2.67 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌1 h。將所得溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（460.0 mg）。LCMS (ESI): 525.2 [M+H] +。 步驟 -2. (7 S)- N-[5-(1- 乙氧基乙烯基 ) 吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 ]-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2085
將三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷（402.5 mg，1.11 mmol）和Pd(PPh 3) 4（99.1 mg，0.09 mmol）添加到(7 S)- N-[5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-1，450.0 mg，0.86 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在100ºC下在氮氣氣氛下攪拌3 h。將所得溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（480.0 mg）。LCMS (ESI): 561.2 [M+H] +。 步驟 -3. (7 S)- N-[5- 乙醯基吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 ]-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2087
在0ºC下將HCl（2.00 mL）添加到(7S)- N-[5-(1-乙氧基乙烯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-2，480.0 mg，0.86 mmol）在MeOH（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將溶液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（170.0 mg）。LCMS (ESI): 533.2 [M+H] +。 步驟 -4. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(5-( (R)-1- 羥基乙基 ) 吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(5-( (S)-1- 羥基乙基 ) 吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2081
在0ºC下將NaBH 4（10.7 mg，0.28 mmol）添加到(7 S)- N-[5-乙醯基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-3，150.0 mg，0.28 mmol）在MeOH（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將溶液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（42.0 mg）（ 實例 445）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.78 (d, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.13 (d, 1H), 7.43 - 7.06 (m, 3H), 4.99 - 4.87 (m, 1H), 4.79 - 4.60 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.26 - 3.06 (m, 1H), 2.61 - 2.39 (m, 1H), 2.26 - 1.76 (m, 2H), 1.66 - 1.40 (m, 4H), 1.36 - 1.23 (m, 2H), 1.20 - 1.01 (m, 1H), 0.94 - 0.60 (m, 3H)。LCMS (ESI): 535.15 [M+H] +。
使用手性製備型SFC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（40.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IH柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相A：CO 2；流動相B：IPA（0.5% 2M NH 3-MeOH）
流速：50 mL/min
梯度：等度，35% B
檢測：220 nm
注射體積：2 mL
實例 445-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（10.6 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.42 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.78 (d, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.14 (d, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.13 (d, 2H), 5.05 - 4.89 (m, 1H), 4.78 - 4.13 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.26 - 3.05 (m, 1H), 2.75 - 2.36 (m, 1H), 2.25 - 1.72 (m, 2H), 1.63 - 1.42 (m, 3H), 1.40 - 1.23 (m, 2H), 1.22 - 0.96 (m, 1H), 0.95 - 0.71 (m, 3H)。LCMS (ESI): 535.20 [M+H] +。
實例 445-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（10.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.70 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.78 (d, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.23 - 8.08 (m, 1H), 7.34 - 7.20 (m, 1H), 7.19 - 7.05 (m, 2H), 5.05 - 4.90 (m, 1H), 4.80 - 4.10 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.24 - 3.08 (m, 1H), 2.82 - 2.40 (m, 1H), 2.26 - 1.76 (m, 2H), 1.65 - 1.43 (m, 3H), 1.38 - 1.23 (m, 2H), 1.18 - 1.01 (m, 1H), 0.98 - 0.64 (m, 3H)。LCMS (ESI): 535.15 [M+H] +。
實例 446. (S)-N-((3- 氯 -5-( 氧雜環丁烷 -3- 基氧基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2090
步驟 -1. 3- 氯 -5-( 氧雜環丁烷 -3- 基氧基 ) 吡啶甲腈
Figure 02_image2092
在0ºC下將NaH（153.6 mg，3.84 mmol，在礦物油中的60%分散體）添加到氧雜環丁烷-3-醇（500.0 mg，3.21 mmol）在DMF（50.00 mL中）的攪拌溶液中。將所得混合物在0ºC下攪拌30 min。在0ºC下將3-氯-5-氟吡啶-2-甲腈（500.0 mg，3.21 mmol）添加到所得混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（2/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（600.0 mg）。LCMS (ESI): 211.0 [M+H] +。
步驟 -2. 3- 氯 -5-( 氧雜環丁烷 -3- 基氧基 ) 吡啶 -2- 甲腈
Figure 02_image2094
在-78ºC下在氮氣氣氛下，將DIBAL-H（3.56 mL，3.56 mmol）添加到3-氯-5-(氧雜環丁烷-3-基氧基)吡啶-2-甲腈（步驟-1，250.0 mg，1.19 mmol）在DCM（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在-78ºC下在氮氣氣氛下攪拌10 min。在-78ºC下在氮氣氣氛下，將反應混合物用MeOH淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（60.0 mg）。LCMS (ESI): 215.0 [M+H] +。
步驟 -3. (S)-N- ((3- 氯 -5-( 氧雜環丁烷 -3- 基氧基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2096
將HOBt（72.0 mg，0.53 mmol），EDCI（102.0 mg，0.53 mmol），和3-氯-5-(氧雜環丁烷-3-基氧基)吡啶-2-甲腈（步驟-2，57.0 mg，0.27 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，100.0 mg，0.27 mmol）和DIPEA（172.0 mg，1.34 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：Xselect CSH C18 OBD柱，30 x150 mm 5μm，流動相A：水（0.1%FA），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：35% B至45% B，8 min內，45% B；波長：220 nm；RT1（min）：4.58），以獲得呈固體的標題化合物（12.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.16 - 8.03 (m, 2H), 7.40 - 7.21 (m, 2H), 7.10 (d, 1H), 5.50 - 5.29 (m, 1H), 5.12 - 4.96 (m, 2H), 4.75 - 4.63 (m, 2H), 4.62 - 4.43 (m, 3H), 3.94 (s, 3H), 3.06 - 2.81 (m, 1H), 2.65 - 2.25 (m, 1H), 2.13 - 1.63 (m, 2H), 1.48 - 1.17 (m, 2H), 1.13 - 0.60 (m, 4H)。LCMS (ESI): 571.10 [M+H] +。
實例 447. (7 S)- N-((5-(3,5- 二甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2098
步驟 -1. 4-(2- 氰基嘧啶 -5- 基 )-2,6- 二甲基哌 𠯤 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2100
將DIPEA（756.0 mg，5.85 mmol）和2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯（501.0 mg，2.34 mmol）添加到5-氟嘧啶-2-甲腈（240.0 mg，1.95 mmol）在MeCN（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在100ºC下在氮氣氣氛下攪拌4 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（500.0 mg）。LCMS (ESI): 318 [M+H] +。
步驟 -2. 4-[2-( 胺基甲基 ) 嘧啶 -5- 基 ]-2,6- 二甲基哌 𠯤 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2102
在0ºC下將LiAlH 4（4.30 mL，4.35 mmol）添加到4-(2-氰基嘧啶-5-基)-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，460.0 mg，1.45 mmol）在THF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在0ºC下在氮氣氣氛下攪拌1 h。將所得混合物用MeOH淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（150.0 mg）。LCMS (ESI): 322 [M+H] +。
步驟 -3 .4-(2-((( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 羧醯胺 ) 甲基 ) 嘧啶 -5- 基 )-2,6- 二甲基哌 𠯤 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2104
將EDCI（116.0 mg，0.61 mmol）和HOBt（82.0 mg，0.61 mmol），和4-[2-(胺基甲基)嘧啶-5-基]-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯（步驟-2，130.0 mg，0.40 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，151.0 mg，0.40 mmol）和DIPEA（261.0 mg，2.02 mmol）在DMF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（120.0 mg）。LCMS (ESI): 678 [M+H] +。
步驟 -4. (7S)- N-((5-(3,5- 二甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2098
將TFA（3.00 mL）添加到4-[2-([[(7S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基]甲醯胺基]甲基)嘧啶-5-基]-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯（步驟-3，120.0 mg，0.177 mmol）在DCM（3.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（70.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.43 (s, 2H), 8.28 (d, 2H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 4.37 - 4.31 (m, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.74 - 3.67 (m, 2H), 2.96 - 2.91 (m, 2H), 2.84 - 2.73 (m, 2H), 2.71 - 2.66 (m, 1H), 2.36 - 2.18 (m, 3H), 1.81 - 1.77 (m, 1H), 1.58 - 1.53 (m, 1H), 1.27 - 1.22 (m, 1H), 1.10 - 1.04 (m, 6H), 0.94 - 0.89 (m, 2H), 0.69 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 578.30 [M+H] +。
實例 448. (S)-N-(1- 氰基環丙基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2107
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-胺基環丙烷-1-甲腈鹽酸鹽作為起始材料。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（60.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.26 - 13.59 (m, 1H), 8.92 - 8.54 (m, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.14 - 6.58 (m, 1H), 4.72 - 4.04 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.94 - 2.57 (m, 1H), 2.36 - 1.99 (m, 2H), 1.93 - 1.55 (m, 1H), 1.54 - 1.38 (m, 3H), 1.38 - 1.18 (m, 1H), 1.17 - 1.03 (m, 2H), 1.03 - 0.80 (m, 2H), 0.79 - 0.44 (m, 2H)。LCMS (ESI): 439.20 [M+H] +。
實例 450. (S)-N-( (S)-1-(1 H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -4- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ( (R)-1-(1 H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -4- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2109
步驟 -1. N, N- 二苄基 -1-[1 H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -4- 基 ] 吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image2111
在25ºC下將Pd-PEPPSI-IPentCl 2-甲基吡啶（鄰甲基吡啶）（157.0 mg，0.19 mmol，CAS#：1612891-29-8），4-溴-1 H-吡唑并[3,4-b]吡啶（260.2 mg，1.31 mmol）和Cs 2CO 3（61.2 mg，3.75 mmol）添加到 N, N-二苄基吡咯啶-3-胺（500.0 mg，1.88 mmol）在1,4-二㗁𠮿（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在90ºC下在氮氣氣氛下攪拌14h。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（227.0 mg）。LCMS (ESI): 384.2 [M+H] +。
步驟 -2. 1-[1 H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -4- 基 ] 吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image2113
將BF 3HF-Et 2O（943.0 mg，5.86 mmol）和Pd/C（134.6 mg）添加到 N, N-二苄基-1-[1 H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基]吡咯啶-3-胺（步驟-1，449.0 mg，1.17 mmol）在THF（6.00 mL）和MeOH（6.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌7天。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（180.0 mg）。LCMS (ESI): 204.1 [M+H] +。
步驟 -3. (S)-N-( (S)-1-(1 H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -4- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N- ( (R)-1-(1 H- 吡唑并 [3,4-b] 吡啶 -4- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2109
將HOBt（148.0 mg，1.10 mmol），EDCI（210.0 mg，1.10 mmol），和1-[1 H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基]吡咯啶-3-胺（步驟-2，90.0 mg，0.44 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，206.0 mg，0.55 mmol）和DIPEA（285.0 mg，2.22 mmol）在DMF（6.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至40 B，20 min內；檢測器，UV 254/220 nm），以獲得 (S)-N-( (S)-1-(1 H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-( (R)-1-(1 H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（150.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 450）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.28 (s, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.10 (d, 1H), 6.17 (d, 1H), 4.63 - 4.56 (m, 2H), 4.17 - 3.75 (m, 6H), 3.64 - 3.60 (m, 1H), 2.86 - 2.82 (m, 1H), 2.47 - 2.34 (m, 2H), 2.21 - 2.12 (m, 1H), 1.89 - 1.85 (m, 2H), 1.33 - 1.26 (m, 2H), 1.00 - 0.95 (m, 2H), 0.76 - 0.65 (m, 2H)。LCMS (ESI): 560.40 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（100.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=70 : 30，保持9.5 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 450-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（20.6 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.25 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.19 - 8.09 (m, 2H), 7.99 (d, 1H), 7.26 (d, 1H), 7.09 (d, 1H), 6.10 (d, 1H), 4.59 - 4.55 (m, 2H), 3.96 - 3.91 (m, 4H), 3.83 - 3.79 (m, 2H), 3.60 - 3.55 (m, 1H), 2.86 - 2.81 (m, 1H), 2.61 - 2.28 (m, 2H), 2.19 - 2.09 (m, 1H), 1.87 - 1.82 (m, 2H), 1.33 - 1.29 (m, 2H), 1.00 - 0.95 (m, 2H), 0.75 - 0.66 (m, 2H)。LCMS (ESI): 560.45 [M+H] +。
實例 450-B.
獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（24.6 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.97 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.18 - 8.09 (m, 2H), 7.99 (d, 1H), 7.26 (d, 1H), 7.09 (d, 1H), 6.10 (d, 1H), 4.62 - 4.53 (m, 2H), 4.08 - 3.67 (m, 6H), 3.59 - 3.55 (m, 1H), 2.86 - 2.82 (m, 1H), 2.54 - 2.31 (m, 2H), 2.18 - 2.09 (m, 1H), 2.00 - 1.63 (m, 2H), 1.34 - 1.25 (m, 2H), 1.16 - 0.80 (m, 2H), 0.73 - 0.64 (m, 2H)。LCMS (ESI): 560.40 [M+H] +。
實例 451. (S)-N-((3- 氯 -6- 甲基吡 𠯤 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2115
步驟 -1. 1-(3- 氯 -6- 甲基吡 𠯤 -2- 基 ) 甲胺
Figure 02_image2117
在-78ºC下在氮氣氣氛下，將DIBAL-H（11.72 mL，11.72 mmol）添加到3-氯-6-甲基吡𠯤-2-甲腈（300.0 mg，1.95 mmol）在DCM（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在-78ºC下在氮氣氣氛下攪拌15 min。在-78ºC下在氮氣氣氛下，藉由添加MeOH將反應混合物淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（70.0 mg）。LCMS (ESI): 158.04 [M+H] +。
步驟 -2. (S)-N-((3- 氯 -6- 甲基吡 𠯤 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2115
將HOBt（68.6 mg，0.36 mmol），EDCI（48.3 mg，0.36 mmol），和1-(3-氯-6-甲基吡𠯤-2-基)甲胺（步驟-1，40.0 mg，0.25 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，66.5 mg，0.18 mmol）和DIPEA（46.3 mg，0.36 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：10 B至30 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（22.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.24 - 8.20 (m, 1H), 8.16 - 8.11 (m, 1H), 7.31 - 7.26 (m, 1H), 7.14 - 7.09 (m, 1H), 4.62 - 4.57 (m, 3H), 3.95 (s, 3H), 3.08 - 2.88 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.49 - 2.39 (m, 1H), 2.08 - 1.67 (m, 2H), 1.60 - 0.95 (m, 3H), 0.94 - 0.55 (m, 3H)。LCMS (ESI): 514.25 [M+H] +。
實例 452. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-(6- 甲基吡 𠯤 -4- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-(6- 甲基吡 𠯤 -4- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2119
步驟 -1. N, N- 二苄基 -1-(6- 甲基吡 𠯤 -4- 基 ) 吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image2121
將DIPEA（582.2 mg，4.51 mmol）添加到 N,N-二苄基吡咯啶-3-胺（400.0 mg，1.50 mmol）和5-氯-3-甲基吡𠯤（193.0 mg，1.50 mmol）在DMSO（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在100ºC下攪拌5 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（13/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（280.0 mg）。LCMS (ESI): 359.2 [M+H] +。
步驟 -2. 1-(6- 甲基吡 𠯤 -4- 基 ) 吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image2123
將Pd/C（240.0 mg）和HCl（6 M）（137.6 mg，2.01 mmol）添加到 N, N-二苄基-1-(6-甲基吡𠯤-4-基)吡咯啶-3-胺（步驟-1，240.0 mg，0.67 mmol）在MeOH（6.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌2天。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（110.0 mg）。LCMS (ESI): 179.1 [M+H] +。
步驟 -3. (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-(6- 甲基吡 𠯤 -4- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-(6- 甲基吡 𠯤 -4- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2119
將HOBt（166.8 mg，1.23 mmol），EDCI（236.6 mg，1.23 mmol），和1-(6-甲基吡𠯤-4-基)吡咯啶-3-胺（步驟-2，110.0 mg，0.62 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，231.0 mg，0.62 mmol）和DIPEA（797.6 mg，6.17 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（5/1 v/v）洗脫）純化，並進一步藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱，C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至30 B，20 min內；檢測器，UV 254/220 nm），以獲得 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (S)-1-(6-甲基吡𠯤-4-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (R)-1-(6-甲基吡𠯤-4-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（140.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 452）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.44 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.66 - 4.49 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.75 - 3.66 (m, 1H), 3.60 - 3.51 (m, 2H), 3.31 - 3.26 (m, 1H), 2.82 (s, 1H), 2.50 (s, 3H), 2.46 - 2.27 (m, 2H), 2.13 - 2.02 (m, 1H), 1.87 - 1.83 (m, 2H), 1.42 - 0.83 (m, 3H), 0.79 - 0.56 (m, 3H)。LCMS (ESI): 535.40 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（130.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: EtOH=50 : 50，保持45 min
流速：14 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 452-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（35.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為34.30 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.44 (d, 1H), 8.13 (d, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.59 (t, 1H), 4.58 - 4.50 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.76 - 3.67 (m, 1H), 3.60 - 3.49 (m, 2H), 3.32 - 3.25 (m, 1H), 2.82 (s, 1H), 2.53 - 2.48 (m, 3H), 2.45 - 2.27 (m, 2H), 2.14 - 2.03 (m, 1H), 1.87 - 1.82 (m, 2H), 1.33 - 1.29 (m, 2H), 1.06 - 1.01 (m, 2H), 0.75 - 0.70 (m, 2H)。LCMS (ESI): 535.45 [M+H] +。
實例 452-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（35.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為43.64 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.43 (q, 1H), 8.13 (d, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.61 - 6.54 (m, 1H), 4.57 - 4.49 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.73 - 3.68 (m, 1H), 3.58 - 3.51 (m, 2H), 3.31 - 3.23 (m, 1H), 2.85 - 2.80 (m, 1H), 2.51 (s, 3H), 2.44 - 2.27 (m, 2H), 2.13 - 2.04 (m, 1H), 1.89 - 1.67 (m, 2H), 1.44 - 1.17 (m, 2H), 1.03 - 0.99 (m, 2H), 0.73 - 0.69 (m, 2H)。LCMS (ESI): 535.45 [M+H] +。
實例 453. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-(2- 甲基嘧啶 -5- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-(2- 甲基嘧啶 -5- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2126
步驟 -1. 3-(1,3- 二側氧基異吲哚 -2- 基 ) 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2128
將 N-乙氧羰基鄰苯二甲醯亞胺（1.18 g，5.37 mmol）和TEA（0.71 g，6.98 mmol）添加到3-胺基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（1.00 g，5.37 mmol）在THF（15.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在80ºC下攪拌3 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（780.0 mg）。LCMS (ESI): 317.1 [M+H] +。
步驟 -2. 2-( 吡咯啶 -3- 基 ) 異吲哚 -1,3- 二酮
Figure 02_image2130
將TFA（6.00 mL）添加到3-(1,3-二側氧基異吲哚-2-基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，700.0 mg，2.21 mmol）在DCM（6.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（9/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（450.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 217.1.
步驟 -3. 2-[1-(2- 甲基嘧啶 -5- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 ] 異吲哚 -1,3- 二酮
Figure 02_image2132
將Cs 2CO 3（1.78 g，5.46 mmol），Pd-PEPPSI-IPentCl 2-甲基吡啶（鄰甲基吡啶）（297.0 mg，0.27 mmol，CAS#：1612891-29-8），和5-溴-2-甲基嘧啶（472.1 mg，2.73 mmol）添加到2-(吡咯啶-3-基)異吲哚-1,3-二酮（步驟-2，590.0 mg，2.73 mmol）在1,4-二㗁𠮿（15.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在90ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（20/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（260.0 mg）。LCMS (ESI): [M+H] +: 309.1.
步驟 -4. 1-(2- 甲基嘧啶 -5- 基 ) 吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image2134
將肼（249.4 mg，7.78 mmol）添加到2-[1-(2-甲基嘧啶-5-基)吡咯啶-3-基]異吲哚-1,3-二酮（步驟-3，240.0 mg，0.78 mmol）在乙醇（6.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在60ºC下攪拌30 min。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（12/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（123.0 mg）。LCMS (ESI): 179.1 [M+H] +。
步驟 -5. (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-(2- 甲基嘧啶 -5- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-(2- 甲基嘧啶 -5- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2126
將HOBt（127.0 mg，0.94 mmol），EDCI（179.0 mg，0.94 mmol），和1-(2-甲基嘧啶-5-基)吡咯啶-3-胺（步驟-4，110.0 mg，0.61 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，176.0 mg，0.47 mmol）和DIPEA（303.0 mg，2.34 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱，C18；流動相，在水中的NH 4HCO 3和MeCN，30%至50%梯度，20 min內；檢測器，UV 254/220 nm），以獲得 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (S)-1-(2-甲基嘧啶-5-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (R)-1-(2-甲基嘧啶-5-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（180.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 453）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.21 - 7.97 (m, 3H), 7.38 - 6.99 (m, 2H), 4.71 - 4.40 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.69 - 3.57 (m, 1H), 3.56 - 3.44 (m, 1H), 3.44 - 3.35 (m, 1H), 3.26 - 3.11 (m, 2H), 2.92 - 2.73 (m, 1H), 2.64 - 2.52 (m, 3H), 2.52 - 2.40 (m, 1H), 2.39 - 2.22 (m, 1H), 2.14 - 1.97 (m, 1H), 1.96 - 1.59 (m, 2H), 1.45 - 1.16 (m, 1H), 1.16 - 0.81 (m, 2H), 0.82 - 0.58 (m, 2H)。LCMS (ESI): 535.40 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（150.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：1/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=80 : 20，保持23 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 453-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（55.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為14.48 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.25 - 7.93 (m, 3H), 7.41 - 7.28 (m, 1H), 7.27 - 6.97 (m, 1H), 4.75 - 4.31 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.67 - 3.56 (m, 1H), 3.54 - 3.45 (m, 1H), 3.44 - 3.36 (m, 1H), 3.28 - 3.12 (m, 1H), 2.96 - 2.72 (m, 1H), 2.55 (s, 3H), 2.47 - 2.22 (m, 2H), 2.13 - 1.95 (m, 1H), 1.93 - 1.59 (m, 2H), 1.52 - 1.18 (m, 2H), 1.18 - 0.83 (m, 2H), 0.82 - 0.49 (m, 2H)。LCMS (ESI): 535.40 [M+H] +。
實例 453-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（60.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為20.18 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.52 - 7.84 (m, 3H), 7.48 - 6.92 (m, 2H), 4.76 - 4.42 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.68 - 3.57 (m, 1H), 3.56 - 3.45 (m, 1H), 3.45 - 3.36 (m, 1H), 3.26 - 3.17 (m, 1H), 2.94 - 2.70 (m, 1H), 2.56 (s, 3H), 2.49 - 2.24 (m, 2H), 2.15 - 1.98 (m, 1H), 1.97 - 1.59 (m, 2H), 1.47 - 1.17 (m, 2H), 1.15 - 0.81 (m, 2H), 0.81 - 0.54 (m, 2H)。LCMS (ESI): 535.40 [M+H] +。
實例 454. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-((3- 羥基氧雜環丁烷 -3- 基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-((3- 羥基氧雜環丁烷 -3- 基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2136
步驟 -1. 3-{[3-( 二苄基胺基 ) 吡咯啶 -1- 基 ] 甲基 } 氧雜環丁烷 -3- 醇
Figure 02_image2138
將TEA（177.0 mg，1.75 mmol）和1,5-二氧雜螺[2.3]己烷（150.0 mg，1.75 mmol）添加到 N, N-二苄基吡咯啶-3-胺（310.0 mg，1.16 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在80ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（340.0 mg）。LCMS (ESI): 353.0 [M+H] +。
步驟 -2. 3-[(3- 胺基吡咯啶 -1- 基 ) 甲基 ] 氧雜環丁烷 -3- 醇
Figure 02_image2140
將Pd/C（120.0 mg）添加到3-{[3-(二苄基胺基)吡咯啶-1-基]甲基}氧雜環丁烷-3-醇（步驟-1，320.0 mg，0.91 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（120.0 mg）。LCMS (ESI): 173 [M+H] +。
步驟 -3. (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-N-( (R)-1-((3- 羥基氧雜環丁烷 -3- 基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-N-( (S)-1-((3- 羥基氧雜環丁烷 -3- 基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2136
將HOBt（129.0 mg，0.96 mmol），EDCI（184.0 mg，0.96 mmol），和3-[(3-胺基吡咯啶-1-基)甲基]氧雜環丁烷-3-醇（步驟-2，110.0 mg，0.64 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，239.0 mg，0.64 mmol）和DIPEA（413.0 mg，3.20 mmol）在DMF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-N-( (R)-1-((3-羥基氧雜環丁烷-3-基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-N-( (S)-1-((3-羥基氧雜環丁烷-3-基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（110.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 454）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.81 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.95 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 5.40 (s, 1H), 4.42 - 4.32 (m, 4H), 4.16 - 4.07 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.39 - 3.27 (m, 4H), 2.79 - 2.61 (m, 4H), 2.40 - 2.33 (m, 1H), 2.23 - 2.16 (m, 1H), 2.10 - 1.97 (m, 1H), 1.74 - 1.69 (m, 1H), 1.54 - 1.42 (m, 2H), 1.20 - 1.16 (m, 1H), 0.93 - 0.88 (m, 2H), 0.67 - 0.58 (m, 2H)。LCMS (ESI): 529.45 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（100.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：1/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=80 : 20，保持25 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 454-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（38.2 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為18.42 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.99 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.95 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 5.40 (s, 1H), 4.68 - 4.30 (m, 5H), 4.15 - 4.08 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.82 - 2.63 (m, 6H), 2.41 - 2.31 (m, 1H), 2.27 - 2.11 (m, 1H), 2.10 - 1.97 (m, 1H), 1.75 - 1.71 (m, 1H), 1.57 - 1.45 (m, 2H), 1.30 - 1.09 (m, 2H), 0.99 - 0.94 (m, 2H), 0.65 - 0.61 (m, 2H)。LCMS (ESI): 529.45 [M+H] +。
實例 454-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（39.2 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為21.78 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.99 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.96 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 5.41 (s, 1H), 4.42 - 4.33 (m, 5H), 4.17 - 4.07 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.80 - 2.60 (m, 6H), 2.41 - 2.33 (m, 1H), 2.20 - 2.16 (m, 1H), 2.10 - 1.97 (m, 2H), 1.76 - 1.69 (m, 1H), 1.58 - 1.42 (m, 2H), 1.21 - 1.16 (m, 1H), 0.95 - 0.91 (m, 2H), 0.67 - 0.58 (m, 2H)。LCMS (ESI): 529.45 [M+H] +。
實例 455. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5- 甲氧基嘧啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2143
步驟 -1. 5- 甲氧基嘧啶 -2- 甲腈
Figure 02_image2145
將甲醇鈉（2.19 g，40.62 mmol）添加到5-氟嘧啶-2-甲腈（1.00 g，8.12 mmol）在DMF（10.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（3/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（570.0 mg）。LCMS (ESI): 136.0 [M+H] +。
步驟 -2. 1-(5- 甲氧基嘧啶 -2- 基 ) 甲胺
Figure 02_image2147
在0ºC下在氮氣氣氛下，將LiAlH 4（2.96 mL，1.04 mmol）添加到5-甲氧基嘧啶-2-甲腈（步驟-1，200.0 mg，1.48 mmol）在THF（10.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在0ºC下在氮氣氣氛下攪拌30 min。在0ºC下將反應混合物用MeOH淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（60.0 mg）。LCMS (ESI): 140.1 [M+H] +。
步驟 -3. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5- 甲氧基嘧啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2143
將EDCI（110.2 mg，0.57 mmol），HOBt（77.7 mg，0.57 mmol），和1-(5-甲氧基嘧啶-2-基)甲胺（步驟-2，40.0 mg，0.29 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，107.6 mg，0.29 mmol）和DIPEA（185.8 mg，1.44 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，並進一步藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS，30 mm x 150 mm，5 µm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：25% B至35% B，8 min內，35% B；波長：254 nm；RT1（min）：7.9），以獲得標題化合物（2.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.46 (s, 2H), 8.13 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.57 - 4.52 (m, 3H), 3.98 - 3.92 (m, 6H), 2.97 - 2.92 (m, 1H), 2.49 - 2.44 (m, 1H), 1.99 - 1.95 (m, 1H), 1.81 - 1.77 (m, 1H), 1.54 - 1.27 (m, 1H), 1.26 - 0.85 (m, 2H), 0.84 - 0.58 (m, 3H)。LCMS (ESI): 496.40 [M+H] +。
實例 456. (S)-N-((5- 氰基嘧啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2149
步驟 -1. N-[(5- 溴嘧啶 -2- 基 ) 甲基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2151
將二碳酸二三級丁酯（145.8 mg，0.67 mmol）和DIPEA（115.1 mg，0.89 mmol）添加到1-(5-溴嘧啶-2-基)甲胺鹽酸鹽（100.0 mg，0.45 mmol）在DCM（3.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。在減壓下濃縮所得溶液。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（120.0 mg）。LCMS (ESI): 288.0 [M+H] +。
步驟 -2. N-[(5- 氰基嘧啶 -2- 基 ) 甲基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2153
將Zn(CN) 2（81.5 mg，0.69 mmol），dppf（38.3 mg，0.07 mmol）和Pd(dba) 2（39.9 mg，0.07 mmol）添加到 N-[(5-溴嘧啶-2-基)甲基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-1，200.0 mg，0.69 mmol）在1,4-二㗁𠮿（5.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在120ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（100.0 mg）。LCMS (ESI): 235.1 [M+H] +。
步驟 -3. 2-( 胺基甲基 ) 嘧啶 -5- 甲腈
Figure 02_image2155
將TFA（1.00 mL）添加到 N-[(5-氰基嘧啶-2-基)甲基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-2，100.0 mg，0.43 mmol）在DMF（1.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌1 h。將溶液在減壓下濃縮以獲得呈固體的標題化合物（55.0 mg），並且不經進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 135.0 [M+H] +。
步驟 -4. (S)-N-((5- 氰基嘧啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2149
將HOBt（75.6 mg，0.56 mmol），EDCI（107.2 mg，0.56 mmol），和2-(胺基甲基)嘧啶-5-甲腈（步驟-3，50.0 mg，0.37 mmol）添加到 (S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，139.5 mg，0.37 mmol）和DIPEA（240.9 mg，1.87 mmol）在DMF（3.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（55.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 9.25 (s, 2H), 8.54 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.79 - 4.17 (m, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.29 - 3.10 (m, 1H), 2.90 - 2.73 (m, 1H), 2.37 - 2.02 (m, 1H), 1.97 - 1.69 (m, 1H), 1.66 - 1.43 (m, 1H), 1.42 - 1.20 (m, 1H), 1.20 - 0.79 (m, 2H), 0.77 - 0.46 (m, 2H)。LCMS (ESI): 491.35 [M+H] +。
實例 457. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2158
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]甲胺鹽酸鹽作為起始材料。將殘餘物藉由反相快速層析法純化（使用以下條件：相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：30 B至40 B，20 min內；檢測器，UV 254/220 nm），以獲得呈固體的標題化合物（75.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.95 (s, 1H), 9.22 (d, 2H), 8.60 - 8.52 (m, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.59 - 4.53 (m, 2H), 4.47 (s, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.20 - 3.15 (m, 1H), 2.85 - 2.80 (m, 1H), 2.24 - 2.20 (m, 1H), 1.85 - 1.81 (m, 1H), 1.58 - 1.53 (m, 1H), 1.32 - 1.27 (m, 1H), 1.14 - 0.75 (m, 2H), 0.68 - 0.64 (m, 2H)。LCMS (ESI): 534.15 [M+H] +。
實例 458. ( S) -N-(1-(3,5- 二氯吡啶 -2- 基 ) 環丙基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2160
步驟 -1. 1,3- 二乙基 2-(3,5- 二氯吡啶 -2- 基 ) 丙二酸酯
Figure 02_image2162
將丙二酸二乙酯（1.85 g，11.57 mmol）和Cs 2CO 3（3.77 g，11.57 mmol）添加到3,5-二氯-2-氟吡啶（960.0 mg，5.78 mmol）在DMSO（10.00 mL）中的攪拌溶液。將所得混合物在110ºC下攪拌3 h。將所得溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（1.50 g）。LCMS (ESI): 306.0 [M+H] +。
步驟 -2. 2-(3,5- 二氯吡啶 -2- 基 ) 乙酸乙酯
Figure 02_image2164
將氯化鋰（519.3 mg，12.25 mmol）和H 2O（88.3 mg，4.90 mmol）添加到1,3-二乙基2-(3,5-二氯吡啶-2-基)丙二酸酯（步驟-1，1.50 g，4.90 mmol）在DMSO（6.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在120ºC下攪拌14 h。將所得溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層減壓濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（887.0 mg）。LCMS (ESI): 234.0 [M+H] +。
步驟 -3. 1-(3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 環丙烷 -1- 甲酸乙酯
Figure 02_image2166
將二苯基(乙烯基)鋶三氟甲磺酸酯（1.31 g，2.18 mmol）添加到2-(3,5-二氯吡啶-2-基)乙酸乙酯（步驟-2，425.0 mg，1.82 mmol）在DMSO（5.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌2 min。然後在0ºC下在氮氣氣氛下，將DBU（829.2 mg，5.45 mmol）添加到所得混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（380.0 mg）。LCMS (ESI): 260.0 [M+H] +。
步驟 -4. 1-(3,5- 二氯吡啶 -2- 基 ) 環丙烷 -1- 甲醯胺
Figure 02_image2168
將氫氧化鋰（123.2 mg，2.93 mmol）添加到1-(3,5-二氯吡啶-2-基)環丙烷-1-甲酸乙酯（步驟-3，380.0 mg，1.47 mmol）在H 2O（1.50 mL）/MeOH（1.50 mL）/THF（1.50 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在70ºC下攪拌3 h。將所得溶液在減壓下濃縮，然後用HCl（1 M）酸化至pH 3。將溶液用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（300.0 mg）。LCMS (ESI): 232.0 [M+H] +。
步驟 -5. 1-(3,5- 二氯吡啶 -2- 基 ) 環丙烷 -1- 甲醯胺
Figure 02_image2170
將HATU（589.9 mg，1.55 mmol）和NH 4Cl（76.1 mg，1.42 mmol）添加到1-(3,5-二氯吡啶-2-基)環丙烷-1-甲酸（步驟-4，300.0 mg，1.29 mmol）和DIPEA（501.2 mg，3.88 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（290.0 mg）。LCMS (ESI): 231.0 [M+H] +。
步驟 -6. (1-(3,5- 二氯吡啶 -2- 基 ) 環丙基 ) 胺基甲酸甲酯
Figure 02_image2172
將KOH（92.3 mg，1.64 mmol）和PhI(OAc) 2（492.1 mg，1.23 mmol）添加到1-(3,5-二氯吡啶-2-基)環丙烷-1-甲醯胺（步驟-5，190.0 mg，0.82 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，20/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（150.0 mg）。LCMS (ESI): 261.0 [M+H] +。
步驟 -7. 1-(3,5- 二氯吡啶 -2- 基 ) 環丙 -1- 胺
Figure 02_image2174
將NaOH（180.0 mg，4.50 mmol）添加到(1-(3,5-二氯吡啶-2-基)環丙基)胺基甲酸甲酯（步驟-6，150.0 mg，0.57 mmol）在EtOH（3.00 mL）和H 2O（1.50 mL）中的攪拌溶液中。使用微波將反應混合物加熱至120ºC持續30 min。將所得溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（80.0 mg）。LCMS (ESI): 203.0 [M+H] +。
步驟 -8. ( S) -N-(1-(3,5- 二氯吡啶 -2- 基 ) 環丙基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2160
將1-(3,5-二氯吡啶-2-基)環丙-1-胺（步驟-7，70.0 mg，0.35 mmol）和HATU（157.3 mg，0.41 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，129.1 mg，0.35 mmol）和DIPEA（133.7 mg，1.04 mmol）在DMF（3.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（100.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.78 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.54 - 8.40 (m, 1H), 8.34 - 8.19 (m, 1H), 8.15 - 8.02 (m, 1H), 7.36 - 7.27 (m, 1H), 7.04 - 6.93 (m, 1H), 4.72 - 4.08 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.95 - 2.60 (m, 2H), 2.37 - 1.99 (m, 1H), 1.81 - 1.59 (m, 1H), 1.57 - 1.28 (m, 3H), 1.27 - 1.12 (m, 1H), 1.11 - 0.96 (m, 2H), 0.96 - 0.74 (m, 2H), 0.73 - 0.34 (m, 2H)。LCMS (ESI): 559.05 [M+H] +。
實例 459. (S)-N-( (S)-1-(2,2- 二氟 -3- 羥基丙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -( (R)-1-(2,2- 二氟 -3- 羥基丙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2177
步驟 -1. 3-[3-( 二苄基胺基 ) 吡咯啶 -1- 基 ]-2,2- 二氟 -3- 側氧基丙酸乙酯
Figure 02_image2179
在25ºC下將2,2-二氟丙二酸 1,3-二乙酯（883.6 mg，4.50 mmol）和AlMe 3（6.77 mL，6.77 mmol）添加到 N, N-二苄基吡咯啶-3-胺（600.0 mg，2.25 mmol）在甲苯（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，30/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（600.9 mg），LCMS (ESI): 417.2 [M+H] +。
步驟 -2. 3-[3-( 二苄基胺基 ) 吡咯啶 -1- 基 ]-2,2- 二氟丙 -1- 醇
Figure 02_image2181
將Zn(OAc) 2（44.1 mg，0.24 mmol）和甲基二甲氧基矽烷（763.6 mg，7.21 mmol）添加到3-[3-(二苄基胺基)吡咯啶-1-基]-2,2-二氟-3-側氧基丙酸乙酯（步驟-1，500.0 mg，1.20 mmol）在THF（6.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在65ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，30/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（250.0 mg）。LCMS (ESI): 361.2 [M+H] +。
步驟 -3. 3-(3- 胺基吡咯啶 -1- 基 )-2,2- 二氟丙 -1- 醇
Figure 02_image2183
將Pd/C（125.0 mg）添加到3-[3-(二苄基胺基)吡咯啶-1-基]-2,2-二氟丙-1-醇（步驟-2，250.0 mg，0.69 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌4 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（100.0 mg）。LCMS (ESI): 181.1 [M+H] +。
步驟 -4. (S)-N-( (S)-1-(2,2- 二氟 -3- 羥基丙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -( (R)-1-(2,2- 二氟 -3- 羥基丙基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2177
將HOBt（74.2 mg，0.55 mmol），EDCI（105.2 mg，0.55 mmol），和3-(3-胺基吡咯啶-1-基)-2,2-二氟丙-1-醇（步驟-3，98.9 mg，0.55 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，137.0 mg，0.37 mmol）和DIPEA（236.5 mg，1.83 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得( S)-N-( (S)-1-(2,2-二氟-3-羥基丙基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-( (R)-1-(2,2-二氟-3-羥基丙基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（150.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 459）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.30 - 8.01 (m, 1H), 7.53 - 7.23 (m, 1H), 7.23 - 7.03 (m, 1H), 4.75 - 4.42 (m, 1H), 4.41 - 4.20 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.84 - 3.61 (m, 2H), 3.02 - 2.85 (m, 3H), 2.85 - 2.71 (m, 1H), 2.69 - 2.56 (m, 2H), 2.51 - 2.31 (m, 1H), 2.30 - 2.14 (m, 1H), 2.00 - 1.49 (m, 3H), 1.43 - 1.16 (m, 3H), 1.16 - 0.96 (m, 2H), 0.95 - 0.84 (m, 1H), 0.83 - 0.59 (m, 2H)。LCMS (ESI): 537.30 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（150.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: IPA=70 : 30，保持17 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 459-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（40.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為12.11 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.96 (d, 1H), 8.39 - 8.14 (m, 1H), 8.05 - 7.85 (m, 1H), 7.46 - 7.23 (m, 1H), 7.04 (s, 1H), 5.52 - 5.22 (m, 1H), 4.70 - 4.22 (m, 1H), 4.20 - 4.04 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.75 - 3.53 (m, 2H), 3.24 - 2.94 (m, 1H), 2.92 - 2.60 (m, 6H), 2.45 - 2.26 (m, 1H), 2.25 - 1.93 (m, 2H), 1.89 - 1.64 (m, 1H), 1.62 - 1.38 (m, 2H), 1.38 - 1.14 (m, 1H), 1.12 - 0.73 (m, 2H), 0.72 - 0.42 (m, 2H)。LCMS (ESI): 537.20 [M+H] +。
實例 459-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（50.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為14.81 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.96 (d, 1H), 8.41 - 8.14 (m, 1H), 8.07 - 7.77 (m, 1H), 7.43 - 7.23 (m, 1H), 7.03 (s, 1H), 5.59 - 5.15 (m, 1H), 4.65 - 4.22 (m, 1H), 4.20 - 4.02 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.77 - 3.51 (m, 2H), 3.25 - 2.95 (m, 1H), 2.92 - 2.61 (m, 6H), 2.47 - 2.31 (m, 1H), 2.29 - 1.98 (m, 2H), 1.85 - 1.64 (m, 1H), 1.63 - 1.38 (m, 2H), 1.37 - 0.79 (m, 3H), 0.77 - 0.49 (m, 2H)。LCMS (ESI): 537.20 [M+H] +。
實例 460. (S)-N-((1 R,4 S)-4-((3 S,5 R)-3,5- 二甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -((1 S,4 R)-4-((3 S,5 R)-3,5- 二甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2186
步驟 -1. (2 R,6 S)-4-[4-( 二苄基胺基 ) 環己基 ]-2,6- 二甲基哌 𠯤 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2188
將4-(二苄基胺基)環己烷-1-酮（1.00 g，3.41 mmol）和NaBH 3CN（642.5 mg，10.23 mmol）添加到(2 R,6 S)-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯（730.4 mg，3.41 mmol）在AcOH（0.06 mL）和MeOH（6.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（7/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（800.0 mg）。LCMS (ESI): 492.3 [M+H] +。
步驟 -2. (2 S,6 R)-4-(4- 胺基環己基 )-2,6- 二甲基哌 𠯤 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2190
在0ºC下將Pd/C（80.0 mg）添加到(2 R,6 S)-4-[4-(二苄基胺基)環己基]-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，400.0 mg，0.81 mmol）在MeOH（6.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮以獲得標題化合物並且不經進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 312.3 [M+H] +。
步驟 -3. (2 S,6 R)-4-(4-(( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 羧醯胺 ) 環己基 )-2,6- 二甲基哌 𠯤 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2192
將HOBt（130.2 mg，0.96 mmol），EDCI（184.6 mg，0.96 mmol），和(2 R,6 S)-4-(4-胺基環己基)-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯（步驟-2，150.0 mg，0.48 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，180.3 mg，0.48 mmol）和DIPEA（311.2 mg，2.41 mmol）在DMF（6.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（250.0 mg）。LCMS (ESI): 668.3 [M+H] +。
步驟 -4. (S)-N -((1 R,4 S)-4-((3 S,5 R)-3,5- 二甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -((1 S,4 R)-4-((3 S,5 R)-3,5- 二甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2186
在0ºC下將三氟乙醛（2.00 mL）添加到(2 S,6 R)-4-(4-(( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-羧醯胺)環己基)-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯（步驟-3，250.0 mg，0.37 mmol）在DCM（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（4/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-N-((1 R,4 S)-4-((3 S,5 R)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-((1 S,4 R)-4-((3 S,5 R)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（160.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 568.3 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（160.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Amylose-SA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=50 : 50，保持6.5 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 460-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（2.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為3.67 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.61 - 4.56 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.93 - 3.88 (m, 1H), 2.96 - 2.83 (m, 6H), 2.66 - 2.25 (m, 3H), 2.12 - 1.46 (m, 12H), 1.48 - 1.21 (m, 1H), 1.20 - 1.04 (m, 6H), 0.94 - 0.89 (m, 1H), 0.84 - 0.61 (m, 2H)。LCMS (ESI): 568.35 [M+H] +。
實例 460-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（2.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.40 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.59 - 4.54 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.61 - 3.56 (m, 1H), 2.99 - 2.79 (m, 5H), 2.78 - 2.65 (m, 1H), 2.46 - 2.41 (m, 1H), 2.36 - 2.26 (m, 2H), 2.00 - 1.85 (m, 7H), 1.47 - 1.34 (m, 2H), 1.33 - 1.20 (m, 4H), 1.12 - 1.06 (m, 6H), 0.99 - 0.94 (m, 1H), 0.77 - 0.70 (m, 2H)。LCMS (ESI): 568.30 [M+H] +。
實例 461. (S)-N-( (R)-1-( (R)-1- 氧雜 -6- 氮雜螺 [3.3] 庚烷 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N -( (R)-1-( (S)-1- 氧雜 -6- 氮雜螺 [3.3] 庚烷 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N -( (S)-1-( (R)-1- 氧雜 -6- 氮雜螺 [3.3] 庚烷 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N -( (S)-1-( (S)-1- 氧雜 -6- 氮雜螺 [3.3] 庚烷 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2195
步驟 -1. 3-[(7 S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 醯胺基 ] 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2197
將HATU（243.8 mg，0.64 mmol）和3-胺基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（99.5 mg，0.53 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，200.0 mg，0.53 mmol）和DIPEA（207.1 mg，1.60 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/EtOAc（13/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（270.0 mg）。LCMS (ESI): 543.3 [M+H] +。
步驟 -2. (7 S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]- N-( 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2199
將TFA（3.00 mL）添加到3-[(7 S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-醯胺基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，270.0 mg，0.50 mmol）在DCM（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（210.0 mg），並且將其不經進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 443.2 [M+H] +。
步驟 -3. 3-[3-[(7 S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 醯胺基 ] 吡咯啶 -1- 基 ]-1- 氧雜 -6- 氮雜螺 [3.3] 庚烷 -6- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2201
將3-側氧基-1-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷-6-甲酸三級丁酯（433.7 mg，2.04 mmol），4A MS（720.0 mg）和AcOH（0.20 mL）添加到(7 S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-(吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-2，180.0 mg，0.41 mmol）在MeOH（8.00 mL中）的攪拌混合物中。將所得混合物在80ºC下攪拌1 h。在25ºC下將NaBH 3CN（76.7 mg，1.22 mmol）逐滴添加到反應混合物中。將所得混合物在80ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（13/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（240.0 mg）。LCMS (ESI): 640.3 [M+H] +。
步驟 -4. (S)-N-( (R)-1-( (R)-1- 氧雜 -6- 氮雜螺 [3.3] 庚烷 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N -( (R)-1-( (S)-1- 氧雜 -6- 氮雜螺 [3.3] 庚烷 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N- ( (S)-1-( (R)-1- 氧雜 -6- 氮雜螺 [3.3] 庚烷 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N- ( (S)-1-( (S)-1- 氧雜 -6- 氮雜螺 [3.3] 庚烷 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2195
在0ºC下將TFA（3.00 mL）添加到3-{3-[(7 S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-醯胺基]吡咯啶-1-基}-1-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷-6-甲酸三級丁酯（步驟-3，240.0 mg，0.38 mmol）在DCM（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至25 B，10 min內；檢測器，UV 254/220 nm），以獲得 (S)-N-( (R)-1-( (R)-1-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-( (R)-1-( (S)-1-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-( (S)-1-( (R)-1-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-( (S)-1-( (S)-1-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（120.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 461）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) 8.16 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.64-4.49 (m, 1H), 4.46-4.29 (m, 3H), 4.17-4.09 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.84-3.77 (m, 1H), 3.75-3.66 (m, 2H), 3.51-3.43 (m, 1H), 2.96-2.7 (m, 3H), 2.66-2.56 (m, 1H), 2.55-2.41 (m, 2H), 2.34-2.2 (m, 1H), 1.93-1.64 (m, 3H), 1.33-1.25 (m, 2H), 1.01-0.95 (m, 2H), 0.78-0.69 (m, 2H)。LCMS (ESI): 540.40 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該四種非鏡像異構物的混合物（100.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Amylose-SA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.3% IPA）：MeOH=90 : 10，保持22 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 461-A 和實例 461-B.獲得第一洗脫峰（55.0 mg），其為兩種非鏡像異構物的固體混合物。
第一洗脫峰的保留時間為12.70 min。
實例 461-C.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（23.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為15.32 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.69 - 4.49 (m, 1H), 4.47 - 4.39 (m, 1H), 4。39 - 4.27 (m, 2H), 4.18 - 4.07 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.84 - 3.77 (m, 1H), 3.74 - 3.6 6 (m, 2H), 3.51 - 3.43 (m, 1H), 2.95 - 2.75 (m, 3H), 2.61 - 2.41 (m, 3H), 2.33 - 2.21 (m, 1H), 1.94 - 1.65 (m, 3H), 1.4 - 1.19 (m, 2H), 0.94 - 0.89 (m, 2H), 0.78 - 0.69 (m, 2H)。LCMS (ESI): 540.45 [M+H] +。
實例 461-D.獲得呈固體的第三洗脫非鏡像異構物（22.0 mg）。
第三洗脫非鏡像異構物的保留時間為19.79 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.6 - 4.55 (m, 1H), 4.46 - 4.29 (m, 3H), 4.15 - 4.06 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.82 - 3.74 (m, 1H), 3.72 - 3.63 (m, 2H), 3.5 - 3.4 (m, 1H), 3 - 2.69 (m, 3H), 2.69 - 2.54 (m, 2H), 2.53 - 2.34 (m, 1H), 2.34 - 2.21 (m, 1H), 1.92 - 1.65 (m, 3H), 1.38 - 1.21 (m, 2H), 0.98 - 0.94 (m, 2H), 0.78 - 0.69 (m, 2H)。LCMS (ESI): 540.45 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離第一洗脫峰（55.0 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: 3/1 MeOH/DCM=40:60，保持19 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 461-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（20.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.23 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.49 - 4.69 (m, 1H), 4.39 - 4.47 (m, 1H), 4.27 - 4.39 (m, 2H), 4.07 - 4.18 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.77 - 3.84 (m, 1H), 3.66 - 3.74 (m, 2H), 3.43 - 3.51 (m, 1H), 2.75 - 2.95 (m, 3H), 2.41 - 2.61 (m, 3H), 2.21 - 2.33 (m, 1H), 1.65 - 1.94 (m, 3H), 1.19 - 1.4 (m, 2H), 0.89 - 0.94 (m, 2H), 0.69 - 0.78 (m, 2H)。LCMS (ESI): 540.45 [M+H] +。
實例 461-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（21.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為13.50 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.49 - 4.69 (m, 1H), 4.39 - 4.47 (m, 1H), 4.27 - 4.39 (m, 2H), 4.07 - 4.18 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.77 - 3.84 (m, 1H), 3.66 - 3.74 (m, 2H), 3.43 - 3.51 (m, 1H), 2.75 - 2.95 (m, 3H), 2.41 - 2.61 (m, 3H), 2.21 - 2.33 (m, 1H), 1.65 - 1.94 (m, 3H), 1.19 - 1.4 (m, 2H), 0.89 - 0.94 (m, 2H), 0.69 - 0.78 (m, 2H)。LCMS (ESI): 540.40 [M+H] +。
實例 462. (S)-N-((5-((1 R,4 R)-2,5- 二氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -2- 基 )-3- 氯吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -((5-((1 S,4 S)-2,5- 二氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -2- 基 )-3- 氯吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2204
步驟 -1. 5-(5- 氯 -6- 氰基吡啶 -3- 基 )-2,5- 二氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2206
將DIPEA（619.2 mg，4.79 mmol）和2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯（759.9 mg，3.83 mmol）添加到3-氯-5-氟吡啶-2-甲腈（500.0 mg，3.19 mmol）在MeCN（6.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在100ºC下在氮氣氣氛下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（954.0 mg）。LCMS (ESI): 335.12 [M+H] +。
步驟 -2. 5-[6-( 胺基甲基 )-5- 氯吡啶 -3- 基 ]-2,5- 二氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2208
在-78ºC下在氮氣氣氛下，將DIBAL-H（3.58 mL，3.59 mmol）添加到5-(5-氯-6-氰基吡啶-3-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯（步驟-1，400.0 mg，1.20 mmol）在DCM（8.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在-78ºC下在氮氣氣氛下攪拌10 min。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（9/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（225.0 mg）。LCMS (ESI): 339.15 [M+H] +。
步驟 -3. 5-[5- 氯 -6-({[(7 S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-2 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 基 ] 甲醯胺基 } 甲基 ) 吡啶 -3- 基 ]-2,5- 二氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2210
將HOBt（95.7 mg，0.71 mmol），EDCI（135.8 mg，0.71 mmol），和5-[6-(胺基甲基)-5-氯吡啶-3-基]-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯（步驟-2，120.0 mg，0.35 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，132.6 mg，0.35 mmol）和DIPEA（228.9 mg，1.77 mmol）在DMF（24.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（140.0 mg）。LCMS (ESI): 695.28 [M+H] +。
步驟 -4. (S)-N-((5-((1 R,4 R)-2,5- 二氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -2- 基 )-3- 氯吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -((5-((1 S,4 S)-2,5- 二氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -2- 基 )-3- 氯吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2204
在0ºC下將TFA（2.00 mL）添加到5-[5-氯-6-({[(7 S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-2 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基]甲醯胺基}甲基)吡啶-3-基]-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯（步驟-3，120.0 mg，0.17 mmol）在DCM（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至50 B，30 min內；220/254 nm），以獲得 (S)-N-((5-((1 R,4 R)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)-3-氯吡啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-((5-((1 S,4 S)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)-3-氯吡啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（100.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 462）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.86 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.13 - 7.08 (m, 2H), 4.60 - 4.43 (m, 4H), 3.95 (s, 3H), 3.91 - 3.80 (m, 1H), 3.66 - 3.55 (m, 1H), 3.14 - 3.07 (m, 1H), 3.04 - 2.96 (m, 2H), 2.95 - 2.84 (m, 1H), 2.66 - 2.17 (m, 1H), 2.04 - 1.79 (m, 4H), 1.42 - 1.26 (m, 2H), 1.05 - 0.84 (m, 2H), 0.78 - 0.70 (m, 2H)。LCMS (ESI): 595.40 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（100.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Amylose-SA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: MeOH=50 : 50，保持16 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 462-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（8.1 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.79 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.14 - 7.07 (m, 2H), 4.56 - 4.43 (m, 4H), 3.95 (s, 3H), 3.88 - 3.83 (m, 1H), 3.64 - 3.57 (m, 1H), 3.16 - 2.80 (m, 4H), 2.64 - 2.34 (m, 1H), 2.04 - 1.95 (m, 2H), 1.93 - 1.82 (m, 2H), 1.45 - 1.21 (m, 2H), 1.03 - 0.88 (m, 2H), 0.81 - 0.68 (m, 2H)。LCMS (ESI): 595.45 [M+H] +。
實例 462-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（22.1 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為12.12 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.14 - 7.07 (m, 2H), 4.55 - 4.43 (m, 4H), 3.95 (s, 3H), 3.89 - 3.82 (m, 1H), 3.64 - 3.57 (m, 1H), 3.12 - 3.07 (m, 1H), 3.07 - 2.92 (m, 3H), 2.62 - 2.40 (m, 1H), 2.05 - 1.72 (m, 4H), 1.42 - 1.21 (m, 2H), 1.18 - 0.93 (m, 2H), 0.81 - 0.68 (m, 2H)。LCMS (ESI): 595.15 [M+H] +。
實例 463. (S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-((3- 羥基氧雜環丁烷 -3- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2213
步驟 -1. 3-[( 二苄基胺基 ) 甲基 ] 氧雜環丁烷 -3- 醇
Figure 02_image2215
在氮氣氣氛下將TEA（220.0 mg，2.18 mmol）和1,5-二氧雜螺[2.3]己烷（149.8 mg，1.74 mmol）添加到二苄基胺（286.0 mg，1.45 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。在減壓下濃縮所得溶液。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（374.0 mg）。LCMS (ESI): 284.2 [M+H] +。
步驟 -2. 3-( 胺基甲基 ) 氧雜環丁烷 -3- 醇
Figure 02_image2217
將Pd/C（170.0 mg，10%）添加到3-[(二苄基胺基)甲基]氧雜環丁烷-3-醇（步驟-1，340.0 mg）在MeOH（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下在H 2氣氛下攪拌14 h。濾出固體並用MeOH洗滌。將所得溶液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（118.0 mg）。LCMS (ESI): 104.1 [M+H] +。
步驟 -3. (S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-((3- 羥基氧雜環丁烷 -3- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2213
將HOBt（54.1 mg，0.40 mmol），EDCI（76.8 mg，0.40 mmol），和3-(胺基甲基)氧雜環丁烷-3-醇（步驟-2，30.3 mg，0.29 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，100.0 mg，0.27 mmol）和DIPEA（172.6 mg，1.34 mmol）在DMF（3.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（60.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.08 - 7.93 (m, 1H), 7.40 - 7.23 (m, 1H), 7.03 (s, 1H), 5.88 - 5.74 (m, 1H), 4.62 - 4.23 (m, 5H), 3.88 (s, 3H), 3.43 - 3.33 (m, 2H), 2.87 - 2.65 (m, 1H), 2.38 - 2.00 (m, 1H), 1.87 - 1.68 (m, 1H), 1.67 - 1.42 (m, 1H), 1.34 - 1.11 (m, 1H), 1.08 - 0.77 (m, 2H), 0.78 - 0.32 (m, 3H)。LCMS (ESI): 460.10 [M+H] +。
實例 464. (S)-N-( (R)-1-( (R)-1- 氧雜螺 [3.3] 庚烷 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N -( (R)-1-( (S)-1- 氧雜螺 [3.3] 庚烷 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S )- N-( (S)-1-( (R)-1- 氧雜螺 [3.3] 庚烷 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N- ( (S)-1-( (S)-1- 氧雜螺 [3.3] 庚烷 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2220
使用與對於實例433的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用3-胺基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯作為步驟-1中的起始材料，和使用1-氧雜螺[3.3]庚烷-3-酮作為步驟-3中的起始材料。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得( S)-N-( (R)-1-( (R)-1-氧雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-( (R)-1-( (S)-1-氧雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-( (S)-1-( (R)-1-氧雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-( (S)-1-( (S)-1-氧雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（270.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 464）。1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 13.92 (s, 1H), 8.34 - 8.19 (m, 1H), 8.06 - 7.92 (m, 1H), 7.38 - 7.25 (m, 1H), 7.09 - 6.96 (m, 1H), 4.70 - 4.32 (m, 1H), 4.31 - 4.23 (m, 1H), 4.22 - 4.01 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.23 - 3.09 (m, 1H), 2.85 - 2.65 (m, 2H), 2.65 - 2.53 (m, 2H), 2.46 - 2.30 (m, 2H), 2.29 - 2.01 (m, 4H), 2.01 - 1.85 (m, 2H), 1.84 - 1.34 (m, 5H), 1.31 - 1.09 (m, 1H), 1.06 - 0.75 (m, 2H), 0.73 - 0.58 (m, 2H)。LCMS (ESI): 539.20 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該四種非鏡像異構物的混合物（270.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IG柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：1/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=85:15，保持17 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 464-A 和實例 464-B.獲得呈油狀物的第一洗脫峰（100.0 mg）。
第一洗脫峰的保留時間為9.73 min。
實例 464-C 和實例 464-D.獲得呈油狀物的第二洗脫峰（100.0 mg）。
第二洗脫峰的保留時間為12.90 min。
使用手性製備型HPLC分離第一洗脫峰（100.0 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: IPA=50 : 50，保持36 min
流速：11 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 464-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（42.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為22.77 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.07 - 7.91 (m, 1H), 7.38 - 7.26 (m, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.61 - 4.32 (m, 1H), 4.31 - 4.23 (m, 1H), 4.22 - 4.09 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.22 - 3.12 (m, 1H), 2.78 - 2.54 (m, 5H), 2.43 - 2.25 (m, 2H), 2.22 - 2.03 (m, 4H), 2.01 - 1.88 (m, 1H), 1.80 - 1.31 (m, 5H), 1.30 - 0.73 (m, 3H), 0.72 - 0.55 (m, 2H)。LCMS (ESI): 539.20 [M+H] +。
實例 464-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（39.0 mg）。
第二非鏡像異構物的保留時間為30.82 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.38 - 13.63 (m, 1H), 8.40 - 8.15 (m, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.63 - 4.38 (m, 1H), 4.37 - 4.23 (m, 1H), 4.23 - 4.04 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.24 - 3.13 (m, 1H), 2.77 - 2.65 (m, 2H), 2.64 - 2.54 (m, 3H), 2.44 - 2.29 (m, 2H), 2.28 - 2.19 (m, 1H), 2.19 - 2.02 (m, 3H), 2.01 - 1.86 (m, 1H), 1.81 - 1.34 (m, 5H), 1.33 - 0.83 (m, 3H), 0.78 - 0.42 (m, 2H)。LCMS (ESI): 539.20 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離第二洗脫峰（100.0 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：1/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: IPA=80 : 20，保持19 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 464-C.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（37.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為12.46 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.35 - 8.21 (m, 1H), 8.07 - 7.91 (m, 1H), 7.38 - 7.27 (m, 1H), 7.11 - 6.96 (m, 1H), 4.63 - 4.33 (m, 1H), 4.32 - 4.23 (m, 1H), 4.23 - 4.04 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.24 - 3.10 (m, 1H), 2.92 - 2.54 (m, 5H), 2.42 - 2.26 (m, 2H), 2.24 - 2.02 (m, 4H), 2.01 - 1.86 (m, 1H), 1.81 - 1.31 (m, 5H), 1.31 - 0.75 (m, 3H), 0.74 - 0.45 (m, 2H)。LCMS (ESI): 539.25 [M+H] +。
實例 464-D.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（36.0 mg）。
第二非鏡像異構物的保留時間為15.30 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.37 - 8.14 (m, 1H), 8.14 - 7.85 (m, 1H), 7.52 - 7.23 (m, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.68 - 4.33 (m, 1H), 4.30 - 4.24 (m, 1H), 4.22 - 4.04 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.25 - 3.12 (m, 1H), 2.82 - 2.54 (m, 4H), 2.43 - 2.30 (m, 2H), 2.29 - 2.02 (m, 5H), 2.01 - 1.87 (m, 1H), 1.83 - 1.35 (m, 5H), 1.32 - 0.74 (m, 3H), 0.71 - 0.49 (m, 2H)。LCMS (ESI): 539.25 [M+H] +。
實例 465. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1,4,5- 三甲基 -1 H- 咪唑 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2222
步驟 -1. 1,4,5- 三甲基咪唑
Figure 02_image2224
將CH 3I（3.25 g，22.89 mmol）添加到4,5-二甲基-1 H-咪唑（2.00 g，20.81 mmol）在DMSO（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下在氮氣氣氛下攪拌1 h。然後將KOH（2.57 g，45.77 mmol）添加到反應混合物中並將所得混合物在65ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，5/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（400.0 mg）。LCMS (ESI): 111.2 [M+H] +。
步驟 -2. 1,4,5- 三甲基咪唑 -2- 甲醛
Figure 02_image2226
在-78ºC下在氮氣氣氛下，將n-BuLi（279.1 mg，4.36 mmol）添加到1,4,5-三甲基咪唑（步驟-1，400.0 mg，3.63 mmol）在THF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將混合物在-78ºC下在氮氣氣氛下攪拌30 min，然後在-78ºC下添加DMF（4.00 mL）並將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將殘餘物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，15/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（300.0 mg）。LCMS (ESI): 139.2 [M+H] +。
步驟 -3. 2- 甲基 - N-[(1 E)-(1,4,5- 三甲基咪唑 -2- 基 ) 亞甲基 ] 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image2228
將PTSA（112.2 mg，0.65 mmol）和MgSO 4（784.0 mg，6.51 mmol）添加到1,4,5-三甲基咪唑-2-甲醛（步驟-2，300.0 mg，2.17 mmol）和三級丁烷亞磺醯胺（657.9 mg，5.43 mmol）在DCM（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在45ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。然後，將混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（150.0 mg）。LCMS (ESI): 242.4 [M+H] +。
步驟 -4. N -[(1,4- 二甲基咪唑 -2- 基 ) 甲基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image2230
將NaBH 4（62.7 mg，1.66 mmol）添加到2-甲基- N-[(1 E)-(1,4,5-三甲基咪唑-2-基)亞甲基]丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-3，200.0 mg，0.83 mmol）在MeOH（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在氮氣氣氛下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（180.0 mg）。LCMS (ESI): 244.4 [M+H] +。
步驟 -5. 1-(1,4,5- 三甲基咪唑 -2- 基 ) 甲胺
Figure 02_image2232
將在1,4-二㗁𠮿（4.00 mL）中的HCl（氣態）添加到2-甲基- N-[(1,4,5-三甲基咪唑-2-基)甲基] 丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-4，200.0 mg，0.82 mmol）在1,4-二㗁𠮿（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌1h。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得標題化合物。殘餘物不經進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 140.1 [M+H] +。
步驟 -5. (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1,4,5- 三甲基 -1 H- 咪唑 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2222
將HOBt（230.6 mg，1.71 mmol），EDCI（327.2 mg，1.71 mmol），和1-(1,4,5-三甲基咪唑-2-基)甲胺（步驟-4，190.1 mg，1.37 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，426.0 mg，1.14 mmol）和DIPEA（735.3 mg，5.69 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。然後將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至30 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（86.4 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.33 - 8.26 (m, 1H), 8.25 - 8.17 (m, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.10 - 6.95 (m, 1H), 4.62 - 4.35 (m, 1H), 4.32 - 4.15 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.31 (s, 3H), 3.24 - 2.84 (m, 1H), 2.83 - 2.60 (m, 1H), 2.30 - 2.10 (m, 1H), 2.09 - 2.00 (m, 6H), 1.90 - 1.68 (m, 1H), 1.65 - 1.41 (m, 1H), 1.34 - 1.06 (m, 1H), 1.01 - 0.72 (m, 2H), 0.71 - 0.49 (m, 2H)。LCMS (ESI): 496.25 [M+H] +。
實例 466. (S)-N-(5-((1 S,2 S)-2- 氰基環丙基 ) 吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -(5-((1 R,2 R)-2- 氰基環丙基 ) 吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2235
步驟 -1. N-[5- 氯吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2237
將DIPEA（767.0 mg，5.93 mmol）添加到5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-胺（500.0 mg，2.97 mmol）和Boc 2O（971.0 mg，4.45 mmol）在DCM（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（620.0 mg）。LCMS (ESI): 269 [M+H] +。
步驟 -2. 2-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧雜環戊硼烷 -2- 基 ) 環丙烷 -1- 甲腈
Figure 02_image2239
將2,9-二甲基-1,10-啡啉（621.0 mg，2.98 mmol）和[Ir(OOD)OMe] 2（1.98 g，2.98 mmol）添加到環丙基氰化物（2.00 g，29.81 mmol）和4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧雜環戊硼烷（6.06 g，23.85 mmol）在THF（10.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在90ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（7/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.80 g）。
步驟 -3. N -[5-(2- 氰基環丙基 ) 吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 ] 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2241
將Pd(PCy 3) 2Cl 2（82.0 mg，0.11 mmol）和K 3PO 4（474.0 mg，2.23 mmol）添加到 N-{5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基}胺基甲酸三級丁酯（步驟-1，300.0 mg，1.12 mmol）和2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)環丙烷-1-甲腈（步驟-2，1.10 g，5.58 mmol）在1,4-二㗁𠮿（5.00 mL）和H 2O（0.50 mL）中的混合物中。將所得混合物在90ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（170.0 mg）。LCMS (ESI): 300 [M+H] +。
步驟 -4. 2-{3- 胺基吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -5- 基 } 環丙烷 -1- 甲腈
Figure 02_image2243
將TFA（3.00 mL）添加到 N-[5-(2-氰基環丙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]胺基甲酸三級丁酯（步驟-3，170.0 mg，0.57 mmol）在DCM（3.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈固體的標題化合物（140.0 mg）。LCMS (ESI): 200 [M+H] +。
步驟 -5. (S)-N -(5-((1 S,2 S)-2- 氰基環丙基 ) 吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -(5-((1 R,2 R)-2- 氰基環丙基 ) 吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2235
將HATU（344.0 mg，0.90 mmol）和2-{3-胺基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基}環丙烷-1-甲腈（步驟-4，120.0 mg，0.60 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，226.0 mg，0.60 mmol）和DIPEA（234.0 mg，1.81 mmol）在DMF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-N-(5-((1 S,2 S)-2-氰基環丙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-(5-((1 R,2 R)-2-氰基環丙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（100.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 466）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.94 (s, 1H), 9.86 (s, 1H), 8.95 (d, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.26 (d, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.12 - 7.03 (m, 2H), 4.84 - 4.25 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.20 - 3.00 (m, 3H), 2.41 - 2.25 (m, 2H), 2.00 - 1.49 (m, 4H), 1.44 - 1.22 (m, 1H), 1.12 - 0.88 (m, 2H), 0.81 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 556.45 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（100.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IG柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：1/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=50 : 50，保持24 min
流速：18 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 466-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（32.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為16.72 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.72 (d, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.18 (d, 1H), 7.06 (d, 1H), 4.71 - 4.24 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.24 - 3.15 (m, 1H), 2.97 - 2.88 (m, 1H), 2.66 - 2.47 (m, 1H), 2.41 - 2.34 (m, 1H), 2.28 - 1.94 (m, 2H), 1.91 - 1.80 (m, 2H), 1.79 - 1.71 (m, 1H), 1.52 - 1.46 (m, 1H), 1.18 - 1.03 (m, 1H), 0.98 - 0.69 (m, 3H)。LCMS (ESI): 556.40 [M+H] +。
實例 466-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（24.4 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為21.46 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.72 (d, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.14 (d, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.06 (d, 1H), 4.73 - 4.44 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.24 - 3.09 (m, 1H), 2.98 - 2.88 (m, 1H), 2.81 - 2.44 (m, 1H), 2.41 - 2.31 (m, 1H), 2.25 - 1.94 (m, 2H), 1.91 - 1.80 (m, 2H), 1.78 - 1.71 (m, 1H), 1.53 - 1.40 (m, 1H), 1.37 - 1.26 (m, 1H), 0.89 - 0.74 (m, 3H)。LCMS (ESI): 556.25 [M+H] +。
實例 467. (S)-N-((5-((1 R,4 R)-2,5- 二氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -2- 基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -((5-((1 S,4 S)-2,5- 二氮雜雙環 [2.2.1] 庚烷 -2- 基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2245
使用與對於實例447的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸三級丁酯作為步驟-1中的起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至30 B，20 min內；檢測器，UV 254 nm），以獲得 (S)-N-((5-((1 R,4 R)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)嘧啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-((5-((1 S,4 S)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)嘧啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（100.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 467）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.16 - 8.10 (m, 3H), 7.28 (d, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.87 - 4.82 (m, 2H), 4.50 - 4.45 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.91 - 3.85 (m, 1H), 3.66 - 3.59 (m, 1H), 3.15 - 3.08 (m, 1H), 3.05 - 2.88 (m, 3H), 2.49 - 2.44 (m, 1H), 2.04 - 1.92 (m, 2H), 1.92 - 1.84 (m, 1H), 1.81 - 1.77 (m, 1H), 1.72 - 1.15 (m, 2H), 1.00 - 0.96 (m, 2H), 0.79 - 0.71 (m, 2H)。LCMS (ESI): 562.45 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（100.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: MeOH=30 : 70，保持25 min
流速：18 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 467-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（40.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為16.98 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 3H), 7.29 (d, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.70 - 4.49 (m, 2H), 4.48 - 4.42 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.90 - 3.85 (m, 1H), 3.67 - 3.59 (m, 1H), 3.15 - 3.08 (m, 1H), 3.06 - 2.78 (m, 3H), 2.49 - 2.44 (m, 1H), 2.13 - 1.89 (m, 2H), 1.88 - 1.82 (m, 1H), 1.81 - 1.70 (m, 1H), 1.51 - 1.19 (m, 2H), 1.08 - 0.86 (m, 2H), 0.79 - 0.71 (m, 2H)。LCMS (ESI): 562.45 [M+H] +。
實例 467-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（20.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為22.34 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 3H), 7.29 (d, 1H), 7.14 - 7.09 (m, 1H), 4.59 - 4.54 (m, 1H), 4.53 - 4.45 (m, 3H), 3.95 (s, 3H), 3.85 - 3.80 (m, 1H), 3.66 - 3.58 (m, 1H), 3.13 - 3.06 (m, 1H), 3.04 - 2.91 (m, 3H), 2.49 - 2.44 (m, 1H), 2.01 - 1.94 (m, 2H), 1.90 - 1.83 (m, 1H), 1.81 - 1.77 (m, 1H), 1.44 - 1.36 (m, 2H), 1.00 - 0.96 (m, 2H), 0.79 - 0.71 (m, 2H)。LCMS (ESI): 562.45 [M+H] +。
實例 468. (R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(6- 氟吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -7- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(6- 氟吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -7- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2247
步驟 -1. 7- 溴 -6- 氟吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image2249
在-78ºC下在氮氣氣氛下，將TMPMgClLiCl（2.39 mL，2.80 mmol，1 M）添加到6-氟吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲酸甲酯（500.0 mg，2.58 mmol）在THF（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在-78ºC下在氮氣氣氛下攪拌30 min。然後在-78ºC下在氮氣氣氛下，將CF 2Br-CF 2Br（995.8 mg，3.86 mmol）添加到反應混合物中。將所得混合物在-78ºC下在氮氣氣氛下攪拌2 h。在-78ºC下在氮氣氣氛下，將所得混合物用MeOH淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，60/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（450.0 mg）。LCMS (ESI): 273.0 [M+H] +。
步驟 -2. 7- 溴 -6- 氟吡唑并 [1,5-a] 吡啶
Figure 02_image2251
在0ºC下將H 2SO 4（4.00 mL）添加到7-溴-6-氟吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲酸甲酯（步驟-1，150.0 mg，0.55 mmol）在H 2O（4.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在0ºC下攪拌30 min並且然後加熱至100ºC持續1 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用Na 2CO 3（水溶液）洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，3/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（90.0 mg）。LCMS (ESI): 215.0 [M+H] +。
步驟 -3. 4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2253
將HATU（339.1 mg，0.89 mmol）和NH 4Cl（63.6 mg，1.19 mmol）添加到4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺 [2.5] 辛烷-7-甲酸（中間體541，300.0 mg，0.59 mmol）和DIPEA（230.5 mg，1.78 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，12/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（250.0 mg）。LCMS (ESI): 504.2 [M+H] +。
步驟 -4. 4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2255
將XantPhos Pd G 2（225.7 mg，0.25 mmol），XantPhos（147.1 mg，0.25 mmol），和Cs 2CO 3（414.0 mg，1.27 mmol）添加到4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-3，320.0 mg，0.64 mmol）和7-溴-6-氟吡唑并[1,5-a]吡啶（步驟-2，273.2 mg，1.27 mmol）在1,4-二㗁𠮿（8.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在110ºC下在氮氣氣氛下攪拌48 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，3/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（340.0 mg）。LCMS (ESI): 638.3 [M+H] +。
步驟 -5. (R)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(6- 氟吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -7- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(6- 氟吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -7- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2247
將TFA（5.00 mL）添加到4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-羰基]- N-{6-氟吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基}-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（340.0 mg，0.53 mmol）在DCM（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至30 B，20 min內；220/254 nm），以獲得 (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(6-氟吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(6-氟吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（260.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 468）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.71 - 7.59 (m, 1H), 7.37 - 7.24 (m, 2H), 7.13 (d, 1H), 6.75 (d, 1H), 4.73 - 4.49 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.27 - 3.20 (m, 1H), 2.72 - 2.30 (m, 1H), 2.24 - 2.04 (m, 1H), 1.99 - 1.74 (m, 1H), 1.72 - 1.52 (m, 1H), 1.27 - 0.96 (m, 2H), 0.90 - 0.80 (m, 2H)。LCMS (ESI): 508.15 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（260.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.1% FA）：EtOH=70 : 30，保持17 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 468-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（42.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為12.42 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.99 (s, 1H), 10.44 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 8.05 (d, 1H), 7.81 - 7.66 (m, 1H), 7.48 - 7.26 (m, 2H), 7.16 - 6.97 (m, 1H), 6.77 (d, 1H), 4.64 - 4.36 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.20 - 3.06 (m, 2H), 2.05 - 1.91 (m, 1H), 1.77 - 1.61 (m, 1H), 1.57 - 1.42 (m, 1H), 1.11 - 0.86 (m, 2H), 0.81 - 0.66 (m, 3H)。LCMS (ESI): 508.25 [M+H] +。
實例 468-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（52.2 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為15.46 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.93 (s, 1H), 10.43 (s, 1H), 8.34 - 8.19 (m, 1H), 8.12 - 8.01 (m, 1H), 7.78 - 7.65 (m, 1H), 7.48 - 7.26 (m, 2H), 7.13 - 7.01 (m, 1H), 6.87 - 6.67 (m, 1H), 4.50 (s, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.27 - 3.01 (m, 2H), 2.09 - 1.87 (m, 1H), 1.80 - 1.57 (m, 1H), 1.57 - 1.39 (m, 1H), 1.14 - 0.83 (m, 2H), 0.81 - 0.45 (m, 3H)。LCMS (ESI): 508.15 [M+H] +。
實例 469. (S)-N-((5-((1 S,6 R)-2,5- 二氮雜雙環 [4.1.0] 庚烷 -2- 基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -((5-((1 R,6 S)-2,5- 二氮雜雙環 [4.1.0] 庚烷 -2- 基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2258
使用與對於實例447的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用2,5-二氮雜雙環[4.1.0]庚烷-2-甲酸三級丁酯作為步驟-1中的起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至50 B，20 min內；220/254 nm），以獲得 (S)-N-((5-((1S,6R)-2,5-二氮雜雙環[4.1.0]庚烷-2-基)嘧啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-((5-((1R,6S)-2,5-二氮雜雙環[4.1.0]庚烷-2-基)嘧啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（60.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 469）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.43 (s, 2H), 8.27 (s, 1H), 8.17 - 8.07 (m, 1H), 7.33 - 7.24 (m, 1H), 7.15 - 7.08 (m, 1H), 4.68 - 4.39 (m, 3H), 3.94 (s, 3H), 3.40 (s, 2H), 3.28 - 3.03 (m, 3H), 2.94 (s, 1H), 2.83 - 2.70 (m, 1H), 2.47 (s, 1H), 2.14 - 1.58 (m, 2H), 1.51 - 1.28 (m, 2H), 1.22-1.10 (m, 1H), 1.00 (s, 2H), 0.84 - 0.59 (m, 3H)。LCMS (ESI): 562.50 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（60.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IF柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：1/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=60 : 40，保持45 min
流速：15 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 469-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（20.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為22.95 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.46 - 8.33 (m, 2H), 8.16 - 8.09 (m, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.16 - 7.07 (m, 1H), 4.64 - 4.42 (m, 2H), 3.99 - 3.88 (m, 2H), 3.69 - 3.36 (m, 1H), 3.26 - 3.12 (m, 2H), 3.06 - 2.99 (m, 2H), 2.98 - 2.79 (m, 3H), 2.63 - 2.31 (m, 2H), 2.11 - 1.90 (m, 1H), 1.87 - 1.67 (m, 1H), 1.53 - 1.18 (m, 2H), 1.17 - 0.85 (m, 3H), 0.82 - 0.59 (m, 2H), 0.46 - 0.29 (m, 1H)。LCMS (ESI): 562.20 [M+H] +。
實例 469-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（20.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為34.46 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.48 - 8.33 (m, 2H), 8.18 - 8.04 (m, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.67 - 4.43 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.61 - 3.37 (m, 1H), 3.26 - 3.11 (m, 2H), 3.07 - 2.97 (m, 2H), 2.97 - 2.83 (m, 2H), 2.66 - 2.22 (m, 2H), 2.08 - 1.88 (m, 1H), 1.88 - 1.68 (m, 1H), 1.58 - 1.22 (m, 2H), 1.19 - 0.89 (m, 3H), 0.85 - 0.57 (m, 2H), 0.48 - 0.32 (m, 1H)。LCMS (ESI): 562.15 [M+H] +。
實例 470. (S)-N-( (R)-4,4- 二氟 -1-((1- 羥基環丙基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -( (S)-4,4- 二氟 -1-((1- 羥基環丙基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2260
步驟 -1. 4-( 二苄基胺基 )-3,3- 二氟吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2262
將K 2CO 3（1.55 g，11.25 mmol）和BnBr（1.92 g，0.01 mmol）添加到4-胺基-3,3-二氟吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（1.00 g，4.50 mmol）在MeCN（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在60ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.23 g）。LCMS (ESI): 403.2 [M+H] +。
步驟 -2. N , N- 二苄基 -4,4- 二氟吡咯啶 -3- 胺
Figure 02_image2264
將TFA（6.00 mL）添加到4-(二苄基胺基)-3,3-二氟吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，1.20 g，2.98 mmol）在DCM（6.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（850.0 mg）。LCMS (ESI): 303.2 [M+H] +。
步驟 -3. 1-[4-( 二苄基胺基 )-3,3- 二氟吡咯啶 -1- 羰基 ] 環丙 -1- 醇
Figure 02_image2266
將HOBt（635.3 mg，4.70 mmol），EDCI（901.3 mg，4.70 mmol），和 N,N-二苄基-4,4-二氟吡咯啶-3-胺（步驟-2，568.7 mg，1.88 mmol）添加到1-羥基環丙烷-1-甲酸（240.0 mg，2.35 mmol）和DIPEA（1.52 g，11.76 mmol）在DMF（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（6/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（400.0 mg）。LCMS (ESI): 387.2 [M+H] +。
步驟 -4. 1-{[4-( 二苄基胺基 )-3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 ] 甲基 } 環丙 -1- 醇
Figure 02_image2268
在0ºC下在氮氣氣氛下，將LiAlH 4-THF（0.28 mL，0.29 mmol）添加到1-[4-(二苄基胺基)-3,3-二氟吡咯啶-1-羰基]環丙-1-醇（步驟-3，110.0 mg，0.29 mmol）在THF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在60ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。在0ºC下將所得混合物用MeOH淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（3/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（65.0 mg）。LCMS (ESI): 373.2 [M+H] +。
步驟 -5. 1-[(4- 胺基 -3,3- 二氟吡咯啶 -1- 基 ) 甲基 ] 環丙 -1- 醇
Figure 02_image2270
在0ºC下將Pd/C（22.0 mg）添加到1-{[4-(二苄基胺基)-3,3-二氟吡咯啶-1-基]甲基}環丙-1-醇（步驟-4，110.0 mg，0.30 mmol）在MeOH（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（50.0 mg）。LCMS (ESI): 193.1 [M+H] +。
步驟 -6. (S)-N-( (R)-4,4- 二氟 -1-((1- 羥基環丙基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -( (S)-4,4- 二氟 -1-((1- 羥基環丙基 ) 甲基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2260
將HOBt（70.3 mg，0.52 mmol），EDCI（99.7 mg，0.52 mmol），和1-[(4-胺基-3,3-二氟吡咯啶-1-基)甲基]環丙-1-醇（步驟-5，50.0 mg，0.26 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，97.4 mg，0.26 mmol）和DIPEA（168.1 mg，1.30 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至50 B，30 min內；220/254 nm），以獲得 (S)-N-( (R)-4,4-二氟-1-((1-羥基環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-( (S)-4,4-二氟-1-((1-羥基環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（80.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 470）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (s, 1H), 7.51 - 7.16 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.75 - 4.42 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.60 - 3.37 (m, 1H), 3.27 - 3.12 (m, 2H), 3.11 - 2.96 (m, 1H), 2.95 - 2.79 (m, 1H), 2.74 - 2.63 (m, 1H), 2.62 - 2.53 (m, 1H), 2.52 - 2.27 (m, 1H), 2.05 - 1.58 (m, 2H), 1.50 - 1.19 (m, 2H), 1.17 - 0.89 (m, 2H), 0.88 - 0.61 (m, 4H), 0.59 - 0.43 (m, 2H)。LCMS (ESI): 549.40 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（80.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Amylose-SA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: EtOH=50 : 50，保持16 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 470-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（25.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.37 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (s, 1H), 7.52 - 6.77 (m, 2H), 4.74 - 4.40 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.26 - 3.13 (m, 2H), 3.10 - 2.96 (m, 1H), 2.96 - 2.76 (m, 1H), 2.75 - 2.51 (m, 3H), 2.51 - 2.25 (m, 1H), 2.08 - 1.55 (m, 2H), 1.44 - 1.19 (m, 2H), 1.16 - 0.88 (m, 2H), 0.86 - 0.61 (m, 4H), 0.57 - 0.42 (m, 2H)。LCMS (ESI): 549.45 [M+H] +。
實例 470-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（30.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為12.26 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (s, 1H), 7.54 - 6.94 (m, 2H), 4.74 - 4.42 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.29 - 3.12 (m, 2H), 3.11 - 2.96 (m, 1H), 2.95 - 2.79 (m, 1H), 2.74 - 2.52 (m, 3H), 2.51 - 2.20 (m, 1H), 2.04 - 1.61 (m, 2H), 1.48 - 1.23 (m, 2H), 1.21 - 0.89 (m, 1H), 0.88 - 0.63 (m, 5H), 0.60 - 0.41 (m, 2H)。LCMS (ESI): 549.25 [M+H] +。
實例 471. (7 S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2273
步驟 -1. 3-[(7 S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 醯胺基 ] 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2275
。
將3-胺基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（249.0 mg，1.34 mmol）和HATU（609.0 mg，1.60 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，500.0 mg，1.34 mmol）和DIPEA（518.0 mg，4.01 mmol）在DMF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（700.0 mg）。LCMS (ESI): 543 [M+H] +。
步驟 -2. (7 S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( 吡咯啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2273
將TFA（3.00 mL）添加到3-[(7 S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-醯胺基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，700.0 mg，1.29 mmol）在DCM（3.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v.v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（520.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.26 (d, 1H), 7.96 (m, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 4.64 - 4.29 (m, 1H), 4.21 - 4.01 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.98 - 2.58 (m, 7H), 2.29 - 2.08 (m, 1H), 2.06 - 1.82 (m, 1H), 1.81 - 1.65 (m, 1H), 1.60 - 1.39 (m, 2H), 1.31 - 1.10 (m, 1H), 1.02 - 0.79 (m, 2H), 0.70 - 0.57 (m, 2H)。LCMS (ESI): 443.35 [M+H] +。
實例 472. (S)-N-( (R)-1-(5- 氰基嘧啶 -2- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -( (S)-1-(5- 氰基嘧啶 -2- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2278
將DIPEA（219.0 mg，1.70 mmol）添加到(7 S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-(吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（實例471，150.0 mg，0.34 mmol）和2-氯嘧啶-5-甲腈（33.0 mg，0.24 mmol）在EtOH（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-N-( (R)-1-(5-氰基嘧啶-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-( (S)-1-(5-氰基嘧啶-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（120.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 472）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.94 (s, 1H), 8.79 - 8.72 (m, 2H), 8.27 (d, 1H), 8.16 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.61 - 4.27 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.78 - 3.68 (m, 1H), 3.68 - 3.60 (m, 2H), 3.48 - 3.39 (m, 1H), 3.30 - 2.81 (m, 1H), 2.74 - 2.52 (m, 1H), 2.23 - 2.10 (m, 2H), 1.95 - 1.83 (m, 1H), 1.78 - 1.73 (m, 1H), 1.66 - 1.41 (m, 1H), 1.33 - 1.11 (m, 1H), 0.97 - 0.93 (m, 2H), 0.64 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 546.25 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（120.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Amylose-SA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：1/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: MeOH=50 : 50，保持12.5 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 472-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（40.2 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.86 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (s, 1H), 8.91 - 8.69 (m, 2H), 8.27 (d, 1H), 8.15 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.16 - 6.91 (m, 1H), 4.72 - 4.24 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.78 - 3.69 (m, 1H), 3.67 - 3.61 (m, 2H), 3.52 - 3.41 (m, 1H), 3.26 - 2.86 (m, 1H), 2.79 - 2.57 (m, 1H), 2.25 - 2.06 (m, 2H), 2.00 - 1.82 (m, 1H), 1.79 - 1.70 (m, 1H), 1.64 - 1.44 (m, 1H), 1.31 - 1.10 (m, 1H), 1.03 - 0.79 (m, 2H), 0.76 - 0.52 (m, 2H)。LCMS (ESI): 546.45 [M+H] +。
實例 472-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（38.2 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.56 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (s, 1H), 8.81 - 8.69 (m, 2H), 8.27 (d, 1H), 8.16 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 4.65 - 4.26 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.80 - 3.71 (m, 1H), 3.69 - 3.60 (m, 2H), 3.52 - 3.38 (m, 1H), 3.28 - 2.83 (m, 1H), 2.82 - 2.61 (m, 1H), 2.30 - 2.06 (m, 2H), 1.98 - 1.86 (m, 1H), 1.83 - 1.69 (m, 1H), 1.63 - 1.45 (m, 1H), 1.30 - 1.12 (m, 1H), 1.04 - 0.79 (m, 2H), 0.74 - 0.53 (m, 2H)。LCMS (ESI): 546.45 [M+H] +。
實例 473. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1- 異丙基 -3- 甲基 -1 H-1,2,4- 三唑 -5- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2280
步驟 -1. 2- 異丙基 -5- 甲基 -1,2,4- 三唑 -3- 甲酸乙酯
Figure 02_image2282
將NaH（309.4 mg，7.73 mmol，在礦物油中的60%分散體）添加到5-甲基-2 H-1,2,4-三唑-3-甲酸乙酯（1.00 g，6.45 mmol）在DMF（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在0ºC下攪拌30 min，然後將2-碘丙烷（1.64 g，9.67 mmol）添加到反應混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（20/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（665.0 mg）。LCMS (ESI): 198.1 [M+H] +。 步驟 -2. (2- 異丙基 -5- 甲基 -1,2,4- 三唑 -3- 基 ) 甲醇
Figure 02_image2284
在0ºC下將LiBH 4（530.1 mg，24.34 mmol）添加到2-異丙基-5-甲基-1,2,4-三唑-3-甲酸乙酯（步驟-1，600.0 mg，3.04 mmol）在THF（5.00 mL）/EtOH（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。在減壓下濃縮所得溶液。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（12/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（250.0 mg）。LCMS (ESI): 156.1 [M+H] +。 步驟 -3. 2- 異丙基 -5- 甲基 -1,2,4- 三唑 -3- 甲醛
Figure 02_image2286
將MnO 2（756.2 mg，8.70 mmol）添加到(2-異丙基-5-甲基-1,2,4-三唑-3-基)甲醇（步驟-2，270.0 mg，1.74 mmol）在DCM（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物過濾，將濾餅用DCM洗滌。將溶液在減壓下濃縮以獲得標題化合物並將殘餘物不經進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 154.1 [M+H] +。 步驟 -4. N-[(1 E)-(2- 異丙基 -5- 甲基 -1,2,4- 三唑 -3- 基 ) 亞甲基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image2288
將三級丁烷亞磺醯胺（213.6 mg，1.76 mmol），PTSA（15.2 mg，0.09 mmol）和MgSO 4（636.5 mg，5.29 mmol）添加到2-異丙基-5-甲基-1,2,4-三唑-3-甲醛的粗產物（步驟-3，266.0 mg，1.76 mmol 1.00當量）在DCM（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。在減壓下濃縮所得溶液。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（180.0 mg）。LCMS (ESI): 257.1 [M+H] +。
步驟 -5. N-[(2- 異丙基 -5- 甲基 -1,2,4- 三唑 -3- 基 ) 甲基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image2290
將NaBH 4（47.2 mg，1.25 mmol）添加到 N-[(1 E)-(2-異丙基-5-甲基-1,2,4-三唑-3-基)亞甲基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-4，160.0 mg，0.62 mmol）在MeOH（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。在減壓下濃縮所得溶液。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（160.0 mg）。LCMS (ESI): 259.2 [M+H] +。 步驟 -6. 1-(2- 異丙基 -5- 甲基 -1,2,4- 三唑 -3- 基 ) 甲胺
Figure 02_image2292
將在1,4-二㗁𠮿（4.00 mL）中的HCl（氣態）添加到 N-[(2-異丙基-5-甲基-1,2,4-三唑-3-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-5，150.0 mg，0.58 mmol）在1,4-二㗁𠮿（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物。LCMS (ESI): 155.1 [M+H] +。 步驟 -7. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1- 異丙基 -3- 甲基 -1 H-1,2,4- 三唑 -5- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2280
將HOBt（98.0 mg，0.73 mmol），EDCI（139.1 mg，0.73 mmol）和1-(2-異丙基-5-甲基-1,2,4-三唑-3-基)甲胺（步驟-6，89.5 mg，0.58 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，181.1 mg，0.48 mmol）和DIPEA（186.9 mg，1.45 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAC稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（85.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.01 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.78 - 4.50 (m, 1H), 4.49 - 4.27 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.27 - 2.87 (m, 1H), 2.84 - 2.69 (m, 1H), 2.28 - 2.10 (m, 4H), 1.90 - 1.69 (m, 1H), 1.60 - 1.42 (m, 1H), 1.37 - 1.27 (m, 6H), 1.27 - 1.12 (m, 1H), 1.08 - 0.81 (m, 2H), 0.76 - 0.40 (m, 3H)。LCMS (ESI): 511.20 [M+H] +。
實例 474. (S)-N-((1 S,3 R,4 S)-3,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N -((1 S,3 S,4 R)-3,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N -((1 R,3 R,4 S)-3,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N -((1 R,3 S,4 R)-3,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2295
步驟 -1. N,N- 二苄基 -4-( 三氟甲基 ) 環己 -3- 烯 -1- 胺
Figure 02_image2297
將SOCl 2（785.7 mg，6.60 mmol）和吡啶（522.4 mg，6.60 mmol）添加到(1 r,4 r)-4-(二苄基胺基)-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（800.0 mg，2.20 mmol）在THF（10.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在50ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（16/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈黃色固體的標題化合物（620.0 mg）。LCMS (ESI): 346.2 [M+H] +。
步驟 -2. (1 S,2 R)-4-( 二苄基胺基 )-1-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1,2- 二醇和 (1 R,2 S)-4-( 二苄基胺基 )-1-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1,2- 二醇
Figure 02_image2299
將OsO 4（8.5 mg，0.03 mmol）和 t-BuOH（348.5 mg，4.70 mmol）添加到 N,N-二苄基-4-(三氟甲基)環己-3-烯-1-胺（步驟-1，580.0 mg，1.68 mmol）和NMO（590.1 mg，5.04 mmol）在DCM（10 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM / MeOH 20 : 1）純化，以獲得標題化合物（160.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 380.2 [M+H] +。
步驟 -3. (1 S,2 R)-4- 胺基 -1-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1,2- 二醇和 (1 R,2 S)-4- 胺基 -1-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1,2- 二醇
Figure 02_image2301
在0ºC下將Pd/C（48.0 mg）添加到(1 S,2 R)-4-(二苄基胺基)-1-(三氟甲基)環己烷-1,2-二醇和(1 R,2 S)-4-(二苄基胺基)-1-(三氟甲基)環己烷-1,2-二醇（步驟-2，160.0 mg，0.42 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌8 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮以獲得標題化合物（70.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物，並將殘餘物不經進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 199.2 [M+H] +。
步驟 -4. (S)-N- ((1 S,3 R,4 S)-3,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -((1 S,3 S,4 R)-3,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物；以及 (S)-N -((1 R,3 R,4 S)-3,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -((1 R,3 S,4 R)-3,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的第二非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2295
將HOBt（20.4 mg，0.15 mmol），EDCI（28.9 mg，0.15 mmol），和(1 S,2 R)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1,2-二醇和(1 R,2 S)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1,2-二醇（步驟-3，15.0 mg，0.08 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，28.2 mg，0.08 mmol）和DIPEA（48.7 mg，0.38 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌4 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，9/1 v/v）純化，以獲得( S)-N-((1 S,3 R,4 S)-3,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-((1 S,3 S,4 R)-3,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-((1 R,3 R,4 S)-3,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-((1 R,3 S,4 R)-3,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（20.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。
使用手性製備型HPLC分離該四種非鏡像異構物的混合物（20.0 mg）。
柱：Xselect CSH C18 OBD柱
柱尺寸：3 x 15 cm，5 µm
流動相：水（10 mM NH 4HCO 3）: MeCN=80:20，保持12 min
流速：60 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 474-A.獲得第一洗脫峰（11.9 mg），其為兩種非鏡像異構物的固體混合物。
第一洗脫峰的保留時間為10.20 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.59 - 4.55 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.93 - 3.85 (m, 1H), 3.80 - 3.62 (m, 1H), 2.81 - 2.76 (m, 1H), 2.46 - 2.42 (m, 1H), 1.99 - 1.89 (m, 2H), 1.80 - 1.60 (m, 3H), 1.58 - 1.50 (m, 2H), 1.46 - 1.15 (m, 3H), 1.11 - 0.79 (m, 2H), 0.77 - 0.69 (m, 2H)。LCMS (ESI): 556.30 [M+H] +。
實例 474-B.獲得第二洗脫峰（3.7 mg），其為兩種非鏡像異構物的固體混合物。
第二洗脫峰的保留時間為11.28 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.14 - 7.09 (m, 1H), 4.61 - 4.56 (m, 1H), 4.14 - 4.00 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.92 - 2.88 (m, 1H), 2.48 - 2.43 (m, 1H), 1.90 - 1.78 (m, 6H), 1.65 - 1.59 (m, 1H), 1.50 - 1.01 (m, 3H), 0.96 - 0.88 (m, 2H), 0.77 - 0.72 (m, 2H)。LCMS (ESI): 556.30 [M+H] +。
步驟 -5. (S)-N-((1 S,3 R,4 S)-3,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N -((1 S,3 S,4 R)-3,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N -((1 R,3 R,4 S)-3,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N -((1 R,3 S,4 R)-3,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2295
使用手性製備型HPLC分離四種非鏡像異構物的混合物（100.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Amylose-SA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=50 : 50，保持26 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 474-C.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（3.8 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.80 min。
LCMS (ESI): 556.25 [M+H] +。
實例 474-D.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（23.9 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為11.24 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.23 - 7.19 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.82 (s, 0H), 4.79 - 4.20 (m, 1H), 4.13 (s, 0H), 3.97 - 3.93 (m, 4H), 3.93 - 3.85 (m, 1H), 2.89 - 2.15 (m, 2H), 1.91 - 1.56 (m, 8H), 1.40 - 1.19 (m, 2H), 1.04 - 0.53 (m, 4H)。LCMS (ESI): 556.15 [M+H] +。
實例 474-E.獲得呈固體的第三洗脫非鏡像異構物（24.9 mg）。
第三洗脫非鏡像異構物的保留時間為16.06 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.57 - 6.84 (m, 2H), 4.80 - 4.21 (m, 1H), 3.97 - 3.85 (m, 4H), 3.74 - 3.69 (m, 1H), 2.81 - 2.76 (m, 1H), 2.65 - 2.30 (m, 1H), 2.10 - 1.50 (m, 8H), 1.43 - 0.56 (m, 6H)。LCMS (ESI): 556.25 [M+H] +。
實例 474-F.獲得呈固體的第四洗脫非鏡像異構物（2.4 mg）。
第四洗脫非鏡像異構物的保留時間為22.31 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.61 - 4.57 (m, 1H), 4.11 - 4.01 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.92 - 2.88 (m, 1H), 2.45 - 2.41 (m, 1H), 1.90 - 1.78 (m, 6H), 1.78 - 1.74 (m, 1H), 1.41 - 1.21 (m, 4H), 1.09 - 0.93 (m, 1H), 0.77 - 0.73 (m, 2H)。LCMS (ESI): 556.10 [M+H] +。
實例 475. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-(5- 甲基 -4,5,6,7- 四氫吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2- 基 ) 乙基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-(5- 甲基 -4,5,6,7- 四氫吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2- 基 ) 乙基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2305
步驟 -1. 5- 甲基 -4 H,6 H,7 H- 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2- 甲酸乙酯
Figure 02_image2307
將AcOH（0.50 mL）和HCHO（283.0 mg，9.43 mmol）添加到4 H,5 H,6 H,7 H-吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-甲酸乙酯（920.0 mg，4.71 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min。然後將NaBH 3CN（888.4 mg，14.14 mmol）添加到反應混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（950.0 mg）。LCMS (ESI): 210.1 [M+H] +。
步驟 -2. {5- 甲基 -4 H,6 H,7 H- 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2- 基 } 甲醇
Figure 02_image2309
在0ºC下在氮氣氣氛下，將在THF（5.00 mL）中的5-甲基-4 H,6 H,7 H-吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-甲酸乙酯（步驟-1，890.0 mg，4.25 mmol）添加到LiAlH 4（8.51 mL，8.51 mmol）的攪拌溶液中。將所得混合物在0ºC下在氮氣氣氛下攪拌30 min。在0ºC下將反應用MeOH淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（530.0 mg）。LCMS (ESI): 168.1 [M+H] +。
步驟 -3. 5- 甲基 -4 H,6 H,7 H- 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2- 甲醛
Figure 02_image2311
在0ºC下將戴斯-馬丁氧化劑（2.69 g，6.34 mmol）分批添加到{5-甲基-4 H,6 H,7 H-吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-基}甲醇（步驟-2，530.0 mg，3.17 mmol）在DCM（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（250.0 mg）。LCMS (ESI): 166.1 [M+H] +。
步驟 -4. (R)-2- 甲基 - N-[(1 E)-{5- 甲基 -4 H,6 H,7 H- 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2- 基 } 亞甲基 ] 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image2313
將PTSA（13.0 mg，0.08 mmol）和MgSO 4（546.5 mg，4.54 mmol）添加到5-甲基-4 H,6 H,7 H-吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-甲醛（步驟-3，250.0 mg，1.51 mmol）和 (R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（183.4 mg，1.51 mmol）在DCM（10.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（18/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（230.0 mg）。LCMS (ESI): 269.1 [M+H] +。
步驟 -5. (R)-2- 甲基 - N-[(1 S)-1-{5- 甲基 -4 H,6 H,7 H- 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2- 基 } 乙基 ] 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image2315
在0ºC下在氮氣氣氛下，將溴(甲基)鎂（0.28 mL，0.84 mmol，3.0 M溶液）添加到 (R)-2-甲基- N-[(1 E)-{5-甲基-4 H,6 H,7 H-吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-基}亞甲基]丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-4，45.0 mg，0.17 mmol）在THF（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在50ºC下在氮氣氣氛下攪拌3.5 h。在0ºC下將反應用MeOH淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（6/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（15.0 mg）。LCMS (ESI): 285.2 [M+H] +。
步驟 -6. (1 S)-1-{5- 甲基 -4 H,6 H,7 H- 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2- 基 } 乙胺
Figure 02_image2317
在25ºC下將在1,4-二㗁𠮿（1.50 mL）中的HCl（氣態）添加到( R)-2-甲基- N-[(1 S)-1-{5-甲基-4 H,6 H,7 H-吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-基}乙基]丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-5，15.0 mg，0.05 mmol）中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈固體的標題化合物（9.0 mg）。LCMS (ESI): 181.1 [M+H] +。
步驟 -7. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-1-(5- 甲基 -4,5,6,7- 四氫吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2- 基 ) 乙基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-1-(5- 甲基 -4,5,6,7- 四氫吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2- 基 ) 乙基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2305
將HOBt（13.5 mg，0.10 mmol），EDCI（19.1 mg，0.10 mmol），和(1 S)-1-{5-甲基-4 H,6 H,7 H-吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-基}乙胺（步驟-6，9.0 mg，0.05 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，18.7 mg，0.05 mmol）和DIPEA（64.5 mg，0.50 mmol）在DMF（1.50 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH（9/1 v/v）純化，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (S)-1-(5-甲基-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-基)乙基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (R)-1-(5-甲基-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-基)乙基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（17.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物。LCMS (ESI): 537.3 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（17.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Amylose-SA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: EtOH=50 : 50，保持10 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 475-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（2.6 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.23 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.44 - 6.99 (m, 2H), 6.01 - 5.96 (m, 1H), 5.05 (d, 1H), 4.70 - 4.39 (m, 1H), 4.17 - 4.10 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.68 - 3.64 (m, 2H), 2.99 - 2.92 (m, 2H), 2.87 - 2.82 (m, 1H), 2.60 - 2.09 (m, 4H), 1.91 - 1.68 (m, 2H), 1.48 - 1.42 (m, 3H), 1.33 - 1.29 (m, 2H), 1.10 - 0.90 (m, 2H), 0.89 - 0.40 (m, 2H)。LCMS (ESI): 537.25 [M+H] +。
實例 475-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（4.5 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.32 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.12 (s, 1H), 7.46 - 6.99 (m, 2H), 6.01 - 5.97 (m, 1H), 5.08 - 5.02 (m, 1H), 4.80 - 4.28 (m, 1H), 4.17 - 4.10 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.68 - 3.63 (m, 2H), 3.07 - 2.74 (m, 3H), 2.71 - 2.40 (m, 4H), 2.05 - 1.56 (m, 2H), 1.48 - 1.42 (m, 3H), 1.39 - 1.30 (m, 2H), 1.30 - 0.82 (m, 2H), 0.81 - 0.63 (m, 2H)。LCMS (ESI): 537.25 [M+H] +。
實例 476. (S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-((5-( 三氟甲基 )-1 H- 咪唑 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2320
步驟 -1. 2-(1 H- 咪唑 -2- 基甲基 ) 異吲哚 -1,3- 二酮
Figure 02_image2322
將Et 3N（677.2 mg，6.69 mmol）和 N-乙氧羰基鄰苯二甲醯亞胺（1.13 g，5.15 mmol）添加到1-(1 H-咪唑-2-基)甲胺（500.0 mg，5.15 mmol）在THF（5.00 mL中）的攪拌溶液中。將所得混合物在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（19/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（630.0 mg）。LCMS (ESI): 228.07 [M+H] +。
步驟 -2. 2-{[4-( 三氟甲基 )-3 H- 咪唑 -2- 基 ] 甲基 } 異吲哚 -1,3- 二酮
Figure 02_image2324
在0ºC下將NaH（63.4 mg，2.64 mmol，在礦物油中的60%分散體）和三氟碘甲烷（1.03 g，5.28 mmol）添加到2-(1 H-咪唑-2-基甲基)異吲哚-1,3-二酮（步驟-1，400.0 mg，1.76 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在60ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（100.0 mg）。LCMS (ESI): 296.06 [M+H] +。
步驟 -3. 1-[4-( 三氟甲基 )-3 H- 咪唑 -2- 基 ] 甲胺
Figure 02_image2326
將肼（32.6 mg，1.02 mmol）添加到2-{[4-(三氟甲基)-3 H-咪唑-2-基]甲基}異吲哚-1,3-二酮（步驟-2，100.0 mg，0.34 mmol）在EtOH（1.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在60ºC下攪拌30 min。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由SiliaBond®丙磺酸（SCX-2）（用在MeOH（7 M）中的NH 3洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（50.0 mg）。LCMS (ESI): 166.05 [M+H] +。
步驟 -4. (S)- 4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-((5-( 三氟甲基 )-1 H- 咪唑 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2320
將HOBt（65.5 mg，0.48 mmol），EDCI（92.9 mg，0.48 mmol），和1-[4-(三氟甲基)-3 H-咪唑-2-基]甲胺（步驟-3，40.0 mg，0.24 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，90.7 mg，0.24 mmol）和DIPEA（156.6 mg，1.21 mmol）在DMF（2.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：30 B至60 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（12.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.16 - 12.25 (m, 1H), 8.59 - 8.34 (m, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.65 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 4.44 (s, 1H), 4.30 (d, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.22 - 2.96 (m, 1H), 2.84 - 2.62 (m, 1H), 2.33 - 2.00 (m, 1H), 1.89 - 1.69 (m, 1H), 1.66 - 1.42 (m, 1H), 1.37 - 1.15 (m, 1H), 1.09 - 0.77 (m, 2H), 0.71 - 0.53 (m, 2H)。LCMS (ESI): 522.10 [M+H] +。
實例 477. 4-(5-(2- 乙醯基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2329
步驟 -1. 5-(2- 氯 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image2331
將PdCl 2(AMPHOS) 2（1.27 g，1.79 mmol）和CsF（2.72 g，17.90 mmol）添加到5-溴-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-甲酸甲酯（3.00 g，8.95 mmol）和2-氯-5-氟吡啶-4-基硼酸（3.14 g，17.90 mmol）在1,4-二㗁𠮿（10.00 mL）和H 2O（1.00 mL）中的溶液中。將所得混合物在95ºC下在氮氣氣氛下攪拌2 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，5/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（1.20 g）。LCMS (ESI): 386.1 [M+H] +。
步驟 -2. 5-(2- 氯 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 甲酸
Figure 02_image2333
將氫氧化鋰（108.7 mg，2.59 mmol）添加到5-(2-氯-5-氟吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-甲酸甲酯（步驟-1，500.0 mg，1.30 mmol）在H 2O（8.00 mL），THF（8.00 mL）和MeOH（8.00 mL）中的溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用HCl（1 M）洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，12/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（480.0 mg）。LCMS (ESI): 372.2 [M+H] +。
步驟 -3. 4-[5-(2- 氯 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯
Figure 02_image2335
將HATU（539.9 mg，1.42 mmol）和4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（220.3 mg，1.30 mmol）添加到5-(2-氯-5-氟吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-甲酸（步驟-2，440.0 mg，1.18 mmol）和DIPEA（458.8 mg，3.55 mmol）在DMF（8.00 mL）中的溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（17/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（600.0 mg）。LCMS (ESI): 523.3 [M+H] +。
步驟 -4. 4-{5-[2-(1- 乙氧基乙烯基 )-5- 氟吡啶 -4- 基 ]-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 羰基 }-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯
Figure 02_image2337
將Pd(PPh 3) 4（132.6 mg，0.12 mmol）添加到4-[5-(2-氯-5-氟吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（步驟-3，600.0 mg，1.15 mmol）和三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷（538.6 mg，1.49 mmol）在DMF（8.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在100ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，2/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（600.0 mg）。LCMS (ESI): 559.3 [M+H] +。
步驟 -5. 4-[5-(2- 乙醯基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯：
Figure 02_image2339
將HCl（10.00 mL）添加到4-{5-[2-(1-乙氧基乙烯基)-5-氟吡啶-4-基]-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-羰基}-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（步驟-4，600.0 mg，1.07 mmol）在MeOH（10.00 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h。將混合物用NaHCO 3（水溶液）洗滌並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（360.0 mg）。LCMS (ESI): 401.2 [M+H] +。
步驟 -6. 4-[5-(2- 乙醯基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸
Figure 02_image2341
將氫氧化鋰（75.5 mg，1.80 mmol）添加到4-[5-(2-乙醯基-5-氟吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（步驟-5，360.0 mg，0.90 mmol）在THF（4.00 mL），H 2O（2.00 mL）和MeOH（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將混合物用EtOAc稀釋並用HCl（1 M，水溶液）洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH 10/1 v/v）純化以獲得呈油狀物的標題化合物（290.0 mg）。LCMS (ESI): 387.1 [M+H] +。
步驟 -7. 4-(5-(2- 乙醯基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2329
將HATU（318.8 mg，0.84 mmol）和1-(3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲胺（112.2 mg，0.70 mmol）添加到4-[5-(2-乙醯基-5-氟吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（步驟-6，270.0 mg，0.70 mmol）和DIPEA（270.9 mg，2.10 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌並濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，15/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（92.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.18 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.65 - 8.50 (m, 2H), 8.35 (s, 1H), 8.17 - 8.02 (m, 1H), 7.10 (s, 1H), 4.58 - 4.41 (m, 2H), 2.90 - 2.73 (m, 1H), 2.72 - 2.62 (m, 3H), 2.50 - 2.50 (m, 3H), 2.31 - 2.09 (m, 1H), 1.92 - 1.70 (m, 1H), 1.36 - 1.13 (m, 1H), 1.07 - 0.86 (m, 1H), 0.77 - 0.53 (m, 3H)。LCMS (ESI): 529.20 [M+H] +。
實例 478. (R)-N-((3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2-( (S)-1- 羥基乙基 ) 吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N -((3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2-( (S)-1- 羥基乙基 ) 吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (R)-N -((3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2-( (R)-1- 羥基乙基 ) 吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 (S)-N -((3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2-( (R)-1- 羥基乙基 ) 吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2344
在0ºC下將NaBH 4（3.2 mg，0.09 mmol）添加到4-(5-(2-乙醯基-5-氟吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（實例477，90.0 mg，0.17 mmol）在MeOH（2.00 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18柱；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：30 B至50 B，30 min內；220/254 nm），以獲得 (R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-( (S)-1-羥基乙基)吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-( (S)-1-羥基乙基)吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-( (R)-1-羥基乙基)吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和 (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-( (R)-1-羥基乙基)吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（70.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 478）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.54 - 8.45 (m, 1H), 8.45 - 8.36 (m, 1H), 8.34 - 7.84 (m, 1H), 7.84 - 7.75 (m, 1H), 7.16 (s, 1H), 4.95 - 4.89 (m, 1H), 4.65 - 4.55 (m, 3H), 3.04 - 2.77 (m, 1H), 2.54 - 2.30 (m, 1H), 2.10 - 1.86 (m, 1H), 1.74 (d, 1H), 1.57 - 1.47 (m, 3H), 1.43 - 1.32 (m, 1H), 1.22 - 0.95 (m, 2H), 0.89 - 0.63 (m, 3H)。LCMS (ESI): 531.20 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該四種非鏡像異構物的混合物。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SC柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: MeOH=50 : 50，保持12 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 478-A 和實例 478-B.獲得第一洗脫峰（70.0 mg），其為兩種非鏡像異構物的固體混合物。
第一洗脫峰的保留時間為6.13 min。
LCMS (ESI): 531.25 [M+H] +。
實例 478-C.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（11.5 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.22 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.48 (s, 1H), 8.45 - 8.40 (m, 1H), 8.14 - 8.09 (m, 1H), 7.85 - 7.78 (m, 1H), 7.16 (s, 1H), 4.96 - 4.88 (m, 1H), 4.67 - 4.53 (m, 3H), 2.98 - 2.93 (m, 1H), 2.47 - 2.43 (m, 1H), 1.98 - 1.94 (m, 1H), 1.82 - 1.77 (m, 1H), 1.55 - 1.49 (m, 3H), 1.45 - 1.27 (m, 2H), 1.07 - 1.03 (m, 2H), 0.79 - 0.74 (m, 2H)。LCMS (ESI): 531.25 [M+H] +。
實例 478-D.獲得呈固體的第三洗脫非鏡像異構物（12.2 mg）。
第三洗脫非鏡像異構物的保留時間為11.21 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.45 (s, 2H), 8.32 -7.94 (m, 1H), 7.88 -7.74 (m, 1H), 7.16 (s, 1H), 4.96 -4.91 (m, 1H), 4.69 - 4.5 (m, 3H), 3.06 - 2.85 (m, 1H), 2.79 - 2.21 (m, 1H), 2.11 - 1.72 (m, 2H), 1.59 - 1.47 (m, 3H), 1.46 - 1.34 (m, 1H), 1.34 - 1.24 (m, 1H), 1.22 - 0.99 (m, 1H), 0.98- 0.85 (m, 1H), 0.83- 0.7 (m, 2H)。LCMS (ESI): 531.20 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離第一洗脫峰（70.0 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: 3/2 MeOH/DCM=50:50，保持33 min
流速：14 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 478-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（8.1 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為19.27 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.63 - 8.36 (m, 2H), 8.22 - 7.95 (m, 1H), 7.86 - 7.69 (m, 1H), 7.16 (s, 1H), 4.95 - 4.87 (m, 1H), 4.62 - 4.57 (m, 3H), 3.06 - 2.87 (m, 1H), 2.68 - 2.25 (m, 1H), 2.07 - 1.89 (m, 1H), 1.86 - 1.67 (m, 1H), 1.55 - 1.46 (m, 3H), 1.43 - 1.35 (m, 2H), 1.23 - 0.63 (m, 4H)。LCMS (ESI): 531.25 [M+H] +。
實例 478-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（10.3 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為26.26 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.48 (s, 1H), 8.45 - 8.39 (m, 1H), 8.36 - 7.88 (m, 1H), 7.84 - 7.74 (m, 1H), 7.16 (s, 1H), 4.97 - 4.88 (m, 1H), 4.64 - 4.57 (m, 2H), 2.99 - 2.85 (m, 1H), 2.80 - 2.11 (m, 2H), 2.07 - 1.88 (m, 1H), 1.87 - 1.67 (m, 1H), 1.53 (s, 1H), 1.52 - 1.50 (m, 2H), 1.47 - 1.33 (m, 1H), 1.24 - 0.82 (m, 2H), 0.82 - 0.68 (m, 3H)。LCMS (ESI): 531.25 [M+H] +。
實例 479. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-5,6,7,8- 四氫咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-5,6,7,8- 四氫咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2346
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-8-胺二鹽酸鹽作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至50 B，20 min內；220/254nm），以獲得 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (R)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (S)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（154.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 479）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (s, 1H), 7.54 - 6.78 (m, 4H), 5.23 - 5.00 (m, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.15 - 3.98 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.83 (s, 1H), 2.43 (s, 1H), 2.30 - 1.57 (m, 6H), 1.52 - 1.21 (m, 2H), 1.04 (s, 1H), 0.73 (s, 3H)。LCMS (ESI): 494.25 [M+H] +。 使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（154.0 mg）。
柱：ART Cellulose-SC柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：1/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=70:30，保持14 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 479-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（52.2 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.22 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.97 (d, 1H), 5.18 - 5.06 (m, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.17 - 4.00 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.25 - 3.04 (m, 1H), 2.84 (s, 1H), 2.41 (s, 1H), 2.27 - 2.07 (m, 2H), 2.06 - 1.93 (m, 2H), 1.93 - 1.64 (m, 2H), 1.54 - 1.23 (m, 1H), 1.03 (s, 2H), 0.73 (s, 2H)。LCMS (ESI): 494.30 [M+H] +。
實例 479-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（52.2 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為11.10 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.97 (d, 1H), 5.18 - 5.03 (m, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.16 - 4.01 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.24 - 2.99 (m, 1H), 2.84 (s, 1H), 2.47 (s, 1H), 2.26 - 2.09 (m, 2H), 2.08 - 1.98 (m, 1H), 1.96 - 1.63 (m, 3H), 1.54 - 1.36 (m, 1H), 1.06 (s, 2H), 0.73 (s, 2H)。LCMS (ESI): 494.30 [M+H] +。
實例 480. (S)-N-((3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(2- 環丙基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (R)-N -((3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(2- 環丙基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的鏡像異構物混合物
Figure 02_image2348
步驟 -1. 5-(2- 環丙基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image2350
將環丙基三氟-λ 4-硼烷鉀（383.5 mg，2.59 mmol），Cs 2CO 3（844.3 mg，2.59 mmol）和Pd(dppf)Cl 2（189.6 mg，0.26 mmol）添加到5-(2-氯-5-氟吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-甲酸甲酯（來自實例477的合成步驟-1，500.0 mg，1.30 mmol）在甲苯（5.00 mL）/H 2O（0.50 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在110ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（236.0 mg）。LCMS (ESI): 392.2 [M+H] +。 步驟 -2. 5-(2- 環丙基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 甲酸
Figure 02_image2352
將水合鋰（50.6 mg，1.21 mmol）添加到5-(2-環丙基-5-氟吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-甲酸甲酯（步驟-1，236.0 mg，0.60 mmol）在THF（2.00 mL）/MeOH（2.00 mL）/H 2O（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。然後用HCl（1 M）將混合物酸化至pH 3。將水層用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（203.0 mg）。LCMS (ESI): 378.2 [M+H] +。 步驟 -3. 4-[5-(2- 環丙基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯
Figure 02_image2354
將4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（90.2 mg，0.53 mmol），HATU（193.5 mg，0.51 mmol）添加到5-(2-環丙基-5-氟吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-甲酸（步驟-2，183.0 mg，0.49 mmol）和DIPEA（188.0 mg，1.46 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（3/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（213.0 mg）。LCMS (ESI): 529.3 [M+H] +。 步驟 -4. 4-[5-(2- 環丙基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸
Figure 02_image2356
將水合鋰（33.8 mg，0.81 mmol）添加到4-[5-(2-環丙基-5-氟吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（步驟-3，213.0 mg，0.40 mmol）在THF（2.00 mL）/MeOH（2.00 mL）/H 2O（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。然後用HCl（1 M）將混合物酸化至pH 3。將水層用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（210.0 mg）。LCMS (ESI): 515.2 [M+H] +。 步驟 -5. 1-(3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲胺
Figure 02_image2358
在-78ºC下在氮氣氣氛下將DIBAL-H（19.16 mL，19.16 mmol）添加到3-氯-5-氟吡啶-2-甲腈（1.00 g，6.39 mmol）在DCM（6.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在-78ºC下在氮氣氣氛下攪拌10 min。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（12/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（395.0 mg）。LCMS (ESI): 161.0 [M+H] +。 步驟 -6. N-[(3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 ]-4-[5-(2- 環丙基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2360
將HATU（168.4 mg，0.44 mmol）和1-(3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲胺（步驟-5，94.9 mg，0.59 mmol）添加到4-[5-(2-環丙基-5-氟吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（步驟-4，190.0 mg，0.37 mmol）和DIPEA（143.1 mg，1.11 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（210.0 mg）。LCMS (ESI): 657.3 [M+H] +。 步驟 -7. (S)-N-((3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(2- 環丙基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (R)-N -((3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(2- 環丙基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2348
將TFA（2.00 mL）添加到 N-[(3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基]-4-[5-(2-環丙基-5-氟吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（210.0 mg，0.32 mmol）在DCM（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：40 B至70 B，20 min內；220/254 nm），以獲得 (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(2-環丙基-5-氟吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(2-環丙基-5-氟吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（80.0 mg），其為鏡像異構物的固體混合物（ 實例 480）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.52 - 8.27 (m, 2H), 7.90 - 7.54 (m, 2H), 7.13 (s, 1H), 4.60 (s, 3H), 2.95 (s, 1H), 2.43 (s, 1H), 2.28 - 2.07 (m, 1H), 2.05 - 1.55 (m, 2H), 1.47 - 1.16 (m, 3H), 1.11 - 0.92 (m, 5H), 0.85 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 527.15 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種鏡像異構物的混合物（80.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: IPA=50 : 50，保持29 min
流速：14 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 480-A.獲得呈固體的第一洗脫鏡像異構物（21.0 mg）。
第一洗脫鏡像異構物的保留時間為19.29 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.51 - 8.28 (m, 2H), 7.94 - 7.52 (m, 2H), 7.14 (s, 1H), 4.60 (s, 3H), 3.07 - 2.84 (m, 1H), 2.43 (s, 1H), 2.28 - 2.10 (m, 1H), 2.04 - 1.89 (m, 1H), 1.86 - 1.67 (m, 1H), 1.57 - 1.21 (m, 2H), 1.18 - 0.92 (m, 6H), 0.77 (s, 2H)。LCMS (ESI): 527.20 [M+H] +。
實例 480-B.獲得呈固體的第二洗脫鏡像異構物（23.0 mg）。
第二洗脫鏡像異構物的保留時間為24.97 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.51 - 8.28 (m, 2H), 7.94 - 7.59 (m, 2H), 7.13 (s, 1H), 4.60 (s, 3H), 2.95 (s, 1H), 2.43 (s, 1H), 2.27 - 2.11 (m, 1H), 2.04 - 1.86 (m, 1H), 1.85 - 1.67 (m, 1H), 1.52 - 1.18 (m, 2H), 1.17 - 0.93 (m, 6H), 0.92 - 0.59 (m, 2H)。LCMS (ESI): 527.20 [M+H] +。
實例 481. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3-((1 S,2 S)-2-( 羥基甲基 ) 環丙基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3-((1 R,2 R)-2-( 羥基甲基 ) 環丙基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2363
步驟 -1. (1 S,2 S)-2-(3- 氰基吡 𠯤 -2- 基 ) 環丙烷 -1- 甲酸乙酯和 (1 R,2 R)-2-(3- 氰基吡 𠯤 -2- 基 ) 環丙烷 -1- 甲酸乙酯
Figure 02_image2365
將Pd(dppf)Cl 2（366.0 mg，0.50 mmol）和Cs 2CO 3（1.63 g，5.00 mmol）添加到3-溴吡𠯤-2-甲腈（460.0 mg，2.50 mmol）和(1 S,2 S)-2-(三氟-λ 4-硼烷基)環丙烷-1-甲酸鉀（825.0 mg，3.75 mmol）在甲苯（10.00 mL）和H 2O（1.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌30 min並加熱至110ºC持續14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（410.0 mg）。LCMS (ESI): 218 [M+H] +。
步驟 -2. (1 S,2 S)-2-(3-( 胺基甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 環丙烷 -1- 甲酸乙酯和 (1 R,2 R)-2-(3-( 胺基甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 環丙烷 -1- 甲酸乙酯
Figure 02_image2367
將Pd/C（54.0 mg）添加到(1 S,2 S)-2-(3-氰基吡𠯤-2-基)環丙烷-1-甲酸乙酯和(1 R,2 R)-2-(3-氰基吡𠯤-2-基)環丙烷-1-甲酸乙酯（步驟-1，270.0 mg，1.24 mmol）和AcOH（0.50 mL）在EtOH（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下在氫氣壓下攪拌14 h。將所得混合物過濾，將濾餅用EtOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（70.0 mg）。LCMS (ESI): 222 [M+H] +。
步驟 -3. (1 S,2 S)-2-(3-((( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 羧醯胺 ) 甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 環丙烷 -1- 甲酸乙酯和 (1 R,2 R)-2-(3-((( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 羧醯胺 ) 甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 環丙烷 -1- 甲酸乙酯
Figure 02_image2369
將EDCI（131.0 mg，0.68 mmol），HOBt（92.0 mg，0.68 mmol），和(1 S,2 S)-2-(3-(胺基甲基)吡𠯤-2-基)環丙烷-1-甲酸乙酯和(1 R,2 R)-2-(3-(胺基甲基)吡𠯤-2-基)環丙烷-1-甲酸乙酯（步驟-2，151.0 mg，0.68 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，170.0 mg，0.45 mmol）和DIPEA（293.4 mg，2.27 mmol）在DMF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（210.0 mg）。LCMS (ESI): 578 [M+H] +。
步驟 -4. (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3-((1 S,2 S)-2-( 羥基甲基 ) 環丙基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((3-((1 R,2 R)-2-( 羥基甲基 ) 環丙基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2363
在0ºC下在氮氣氣氛下，將LiAlH 4（0.33 mL，0.33 mmol）添加到(1 S,2 S)-2-(3-((( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-羧醯胺)甲基)吡𠯤-2-基)環丙烷-1-甲酸乙酯和(1 R,2 R)-2-(3-((( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-羧醯胺)甲基)吡𠯤-2-基)環丙烷-1-甲酸乙酯（步驟-3，190.0 mg，0.33 mmol）在THF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在0ºC下在氮氣氣氛下攪拌2 h。在0ºC下將反應用MeOH淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3-((1 S,2 S)-2-(羥基甲基)環丙基)吡𠯤-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((3-((1 R,2 R)-2-(羥基甲基)環丙基)吡𠯤-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（100.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 481）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.99 (s, 1H), 8.52 - 8.16 (m, 4H), 7.33 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.76 - 4.35 (m, 4H), 3.88 (s, 3H), 3.57 - 3.50 (m, 1H), 3.42 - 3.33 (m, 1H), 3.29 - 3.05 (m, 1H), 2.83 - 2.78 (m, 2H), 2.18 - 2.08 (m, 3H), 1.83 - 1.78 (m, 1H), 1.60 - 1.52 (m, 2H), 1.26 - 1.15 (m, 1H), 1.01 - 0.93 (m, 2H), 0.66 - 0.62 (m, 2H)。LCMS (ESI): 536.45 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（100.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IG柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：1/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=50 : 50，保持21 min
流速：17 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 481-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（14.2 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.63 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.50 - 8.14 (m, 4H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.66 - 4.51 (m, 3H), 4.50 - 4.45 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.59 - 3.51 (m, 1H), 3.32 - 3.27 (m, 1H), 2.83 - 2.78 (m, 2H), 2.16 - 2.11 (m, 1H), 1.82 - 1.77 (m, 1H), 1.59 - 1.54 (m, 2H), 1.32 - 1.22 (m, 2H), 1.22 - 1.12 (m, 1H), 1.08 - 0.79 (m, 3H), 0.66 - 0.62 (m, 2H)。LCMS (ESI): 536.20 [M+H] +。
實例 481-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（12.9 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為16.73 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.99 (s, 1H), 8.50 - 8.16 (m, 4H), 7.33 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.67 - 4.52 (m, 3H), 4.48 - 4.43 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.57 - 3.50 (m, 1H), 3.40 - 3.33 (m, 1H), 2.83 - 2.78 (m, 1H), 2.35 - 2.06 (m, 2H), 1.83 - 1.78 (m, 1H), 1.60 - 1.52 (m, 2H), 1.26 - 1.15 (m, 3H), 1.01 - 0.93 (m, 3H), 0.66 - 0.62 (m, 2H)。LCMS (ESI): 536.20 [M+H] +。
實例 482. (S)-N-((2-((3 S,5 R)-3,5- 二甲基哌 𠯤 -1- 基 )-5-( 三氟甲基 ) 㗁唑 -4- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2371
步驟 -1. 5-( 三氟甲基 )-1,3- 㗁唑 -4- 甲酸乙酯
Figure 02_image2373
在0ºC下將三氟乙酸酐（11.14 g，53.04 mmol）添加到2-異氰乙酸乙酯（5.00 g，44.20 mmol）和DBU（8.08 g，53.04 mmol）在THF（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用DCM稀釋並用HCl（1 M）洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/EtOAc（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（2.44 g）。LCMS (ESI): 210.0 [M+H] +。
步驟 -2. 2- 碘 -5-( 三氟甲基 )-1,3- 㗁唑 -4- 甲酸乙酯
Figure 02_image2375
在-78ºC下在氮氣氣氛下將LiHMDS（7.89 mL，7.89 mmol）添加到5-(三氟甲基)-1,3-㗁唑-4-甲酸乙酯（步驟-1，1.10 g，5.26 mmol）在THF（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在-78ºC下在氮氣氣氛下攪拌30 min。然後在-78ºC下將I 2（1.60 g，6.31 mmol）添加到所得混合物中。將所得混合物在-78ºC下在氮氣氣氛下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（4/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（850.0 mg）。LCMS (ESI): 335.9 [M+H] +。
步驟 -3. (2 R,6 S)-4-[4-( 乙氧基羰基 )-5-( 三氟甲基 )-1,3- 㗁唑 -2- 基 ]-2,6- 二甲基哌 𠯤 -1- 甲酸甲基三級丁酯
Figure 02_image2377
將(2 R,6 S)-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯（543.7 mg，2.54 mmol）和Cs 2CO 3（1.65 g，5.07 mmol）添加到2-碘-5-(三氟甲基)-1,3-㗁唑-4-甲酸乙酯（步驟-2，850.0 mg，2.54 mmol）在1,4-二㗁𠮿（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在90ºC下在氮氣氣氛下攪拌3 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（2/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（648.0 mg）。LCMS (ESI): 408.2 [M+H] +。
步驟 -4. 2-[(3 R,5 S)-4-( 三級丁氧基羰基 )-3,5- 二甲基哌 𠯤 -1- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-1,3- 㗁唑 -4- 甲酸
Figure 02_image2379
將氫氧化鋰（135.4 mg，3.23 mmol）添加到(2 R,6 S)-4-[4-(乙氧基羰基)-5-(三氟甲基)-1,3-㗁唑-2-基]-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯（步驟-3，680.0 mg，1.61 mmol）在THF（2.00 mL）/MeOH（2.00 mL）/H 2O（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。然後用HCl（1.2 M）將混合物酸化至pH 3。將水層用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（622.0 mg）。LCMS (ESI): 394.2 [M+H] +。
步驟 -5. (2 R,6 S)-4-[4-( 羥基甲基 )-5-( 三氟甲基 )-1,3- 㗁唑 -2- 基 ]-2,6- 二甲基哌 𠯤 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2381
在0ºC下將2-氯甲酸甲基丙酯（78.1 mg，0.57 mmol）和 N-甲基𠰌啉（57.9 mg，0.57 mmol）添加到2-[(3 R,5 S)-4-(三級丁氧基羰基)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基]-5-(三氟甲基)-1,3-㗁唑-4-甲酸（步驟-4，150.0 mg，0.38 mmol）在DME（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在0ºC下攪拌30 min。將所得混合物過濾，將濾餅用DME洗滌。然後在0ºC下將NaBH 4（28.9 mg，0.76 mmol）在H 2O（1.00 mL）中的溶液添加到上述所得溶液中。將所得混合物在0ºC下攪拌30 min。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得標題化合物（139.0 mg）：呈淡黃色油狀物的(2 R,6 S)-4-[4-(羥基甲基)-5-(三氟甲基)-1,3-㗁唑-2-基]-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯。LCMS (ESI): 380.2 [M+H] +。
步驟 -6. (2 R,6 S)-4-[4-( 疊氮基甲基 )-5-( 三氟甲基 )-1,3- 㗁唑 -2- 基 ]-2,6- 二甲基哌 𠯤 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2383
在0ºC下將DBU（103.5 mg，0.68 mmol）和DPPA（187.2 mg，0.68 mmol）逐滴添加到(2 R,6 S)-4-[4-(羥基甲基)-5-(三氟甲基)-1,3-㗁唑-2-基]-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁基酯（步驟-5，129.0 mg，0.34 mmol）在THF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在0ºC下攪拌5 min並在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（3/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（135.0 mg）。LCMS (ESI): 405.2 [M+H] +。
步驟 -7. (2 R,6 S)-4-[4-( 胺基甲基 )-5-( 三氟甲基 )-1,3- 㗁唑 -2- 基 ]-2,6- 二甲基哌 𠯤 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2385
將Pd/C（25.0 mg）添加到(2 R,6 S)-4-[4-(疊氮基甲基)-5-(三氟甲基)-1,3-㗁唑-2-基]-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯（步驟-6，121.0 mg，0.30 mmol）在MeOH（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌3 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（83.0 mg）。LCMS (ESI): 379.2 [M+H] +。
步驟 -8. (2 R,6 S)-4-[4-({[(7 S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 基 ] 甲醯胺基 } 甲基 )-5-( 三氟甲基 )-1,3- 㗁唑 -2- 基 ]-2,6- 二甲基哌 𠯤 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2387
將(2 R,6 S)-4-[4-(胺基甲基)-5-(三氟甲基)-1,3-㗁唑-2-基]-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯（步驟-7，63.2 mg，0.17 mmol）和T 3P（132.8 mg，0.21 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，52.1 mg，0.14 mmol）和TEA（84.5 mg，0.83 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（68.0 mg）。LCMS (ESI): 735.3 [M+H] +。
步驟 -9. (7 S)- N-({2-[(3 R,5 S)-3,5- 二甲基哌 𠯤 -1- 基 ]-5-( 三氟甲基 )-1,3- 㗁唑 -4- 基 } 甲基 )-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2389
將TFA（1.00 mL）添加到(2 R,6 S)-4-[4-({[(7 S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基]甲醯胺基}甲基)-5-(三氟甲基)-1,3-㗁唑-2-基]-2,6-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯（步驟-8，60.0 mg，0.08 mmol）在DCM（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：30 B至50 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（28.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.17 - 8.09 (m, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.16 - 7.05 (m, 1H), 4.72 - 4.40 (m, 1H), 4.41 - 4.20 (m, 1H), 4.01 - 3.87 (m, 5H), 3.10 - 2.78 (m, 4H), 2.74 - 2.58 (m, 2H), 2.57 - 2.31 (m, 1H), 1.98 - 1.62 (m, 2H), 1.46 - 1.26 (m, 2H), 1.20 - 1.07 (m, 6H), 1.05 - 0.83 (m, 2H), 0.83 - 0.63 (m, 2H)。LCMS (ESI): 635.25 [M+H] +。
實例 483. (S)- N-((3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(2- 乙基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (R)-N -((3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(2- 乙基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的鏡像異構物混合物
Figure 02_image2391
步驟 -1. 5-(2- 乙烯基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image2393
將2-乙烯基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷（135.7 mg，0.88 mmol），K 3PO 4（187.0 mg，0.88 mmol）和Pd(dppf)Cl 2（64.5 mg，0.09 mmol）添加到5-(2-氯-5-氟吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-甲酸甲酯（來自實例477的合成步驟-1，170.0 mg，0.44 mmol）在1,4-二㗁𠮿（3.00 mL）/H 2O（0.30 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在90ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物過濾，將濾餅用DCM洗滌。將濾液減壓濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（158.0 mg）。LCMS (ESI): 378.2 [M+H] +。 步驟 -2. 5-(2- 乙基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image2395
將Pd/C（55.0 mg，0.52 mmol）添加到5-(2-乙烯基-5-氟吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-甲酸甲酯（158.0 mg，0.42 mmol）在MeOH（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌3 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物。殘餘物不經進一步純化而直接使用。LCMS (ESI): 380.2 [M+H] +。 步驟 -3. 5-(2- 乙基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 甲酸
Figure 02_image2397
將氫氧化鋰（30.1 mg，0.72 mmol）添加到5-(2-乙基-5-氟吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-甲酸甲酯（步驟-2，136.0 mg，0.36 mmol）在MeOH（1.00 mL）/THF（1.00 mL）/H 2O（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。用HCl（1 M）將殘餘物酸化至pH 3。將水層用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（130.0 mg）。LCMS (ESI): 366.2 [M+H] +。 步驟 -4. 4-[5-(2- 乙基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯
Figure 02_image2399
將4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（77.8 mg，0.46 mmol）和HATU（174.8 mg，0.46 mmol，1.20當量）添加到5-(2-乙基-5-氟吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-甲酸（步驟-3，140.0 mg，0.38 mmol）和DIPEA（148.5 mg，1.15 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（137.0 mg）。LCMS (ESI): 517.3 [M+H] +。 步驟 -5. 4-[5-(2- 乙基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸
Figure 02_image2401
將LiOH.H 2O（22.3 mg，0.53 mmol）添加到4-[5-(2-乙基-5-氟吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（步驟-4，137.0 mg，0.27 mmol）在MeOH（1.00 mL）/THF（1.00 mL）/H 2O（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮，然後用HCl（1 M）酸化至pH 3。將水層用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（130.0 mg）。LCMS (ESI): 503.2 [M+H] +。 步驟 -6. N-[(3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 ]-4-[5-(2- 乙基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2403
將1-(3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲胺（57.5 mg，0.36 mmol）和HATU（95.3 mg，0.25 mmol）添加到4-[5-(2-乙基-5-氟吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（步驟-5，120.0 mg，0.24 mmol）和DIPEA（92.6 mg，0.72 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（122.0 mg）。LCMS (ESI): 645.3 [M+H] +。 步驟 -7. (S)-N-((3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(2- 乙基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (R)-N -((3- 氯 -5- 氟吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(2- 乙基 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2391
將TFA（2.00 mL）添加到 N-[(3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基]-4-[5-(2-乙基-5-氟吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-6，112.0 mg，0.17 mmol）在DCM（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至50 B，30 min內；220/254 nm），以獲得 (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(2-乙基-5-氟吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(2-乙基-5-氟吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（44.1 mg），其為鏡像異構物的固體混合物（ 實例 483）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.50 - 8.39 (m, 2H), 7.97 - 7.70 (m, 2H), 7.16 (s, 1H), 4.60 (s, 3H), 3.08 - 2.73 (m, 3H), 2.43 (s, 1H), 2.16 - 1.63 (m, 2H), 1.58 - 1.26 (m, 4H), 1.20 - 0.95 (m, 2H), 0.76 (m, 3H)。LCMS (ESI): 515.15 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（42.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ART Amylose-SA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=50 : 50，保持13 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 483-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（11.4 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.64 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.53 - 8.29 (m, 2H), 8.10 - 7.52 (m, 2H), 7.16 (s, 1H), 4.60 (s, 3H), 3.04 - 2.77 (m, 3H), 2.43 (s, 1H), 2.23 - 1.65 (m, 2H), 1.52 - 1.27 (m, 4H), 1.06 (s, 2H), 0.77 (s, 3H)。LCMS (ESI): 515.20 [M+H] +。
實例 483-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（11.2 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.61 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.56 - 8.35 (m, 2H), 8.04 - 7.62 (m, 2H), 7.16 (s, 1H), 4.60 (s, 3H), 3.02 - 2.76 (m, 3H), 2.43 (s, 1H), 2.05 - 1.64 (m, 2H), 1.48 - 1.23 (m, 4H), 1.22 - 0.95 (m, 2H), 0.76 (s, 3H)。LCMS (ESI): 515.10 [M+H] +。
實例 484. (S)-N-((3- 氯 -5- 甲氧基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (R)-N -((3- 氯 -5- 甲氧基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的鏡像異構物混合物
Figure 02_image2406
步驟 -1. 3- 氯 -5- 甲氧基吡啶 -2- 甲腈
Figure 02_image2408
將甲醇鈉（259.0 mg，4.79 mmol）添加到3-氯-5-氟吡啶-2-甲腈（500.0 mg，3.19 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌4 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（3/1 v/v）洗脫）純化，以獲得固體（420.0 mg）。LCMS (ESI): 169 [M+H] +。
步驟 -2. 1-(3- 氯 -5- 甲氧基吡啶 -2- 基 ) 甲胺
Figure 02_image2410
在-78ºC下將DIBAL-H（8.30 mL，8.30 mmol）添加到3-氯-5-甲氧基吡啶-2-甲腈（步驟-1，200.0 mg，1.19 mmol）在DCM（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在-78ºC下在氮氣氣氛下攪拌1 h。在-78ºC下將反應用MeOH淬滅。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（7/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（170.0 mg）。LCMS (ESI): 173 [M+H] +。
步驟 -3. (S)-N -((3- 氯 -5- 甲氧基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (R)-N -((3- 氯 -5- 甲氧基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2406
將EDCI（120.0 mg，0.63 mmol），HOBt（85.0 mg，0.63 mmol），和1-(3-氯-5-甲氧基吡啶-2-基)甲胺（步驟-2，108.0 mg，0.63 mmol）添加到4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體526，150.0 mg，0.42 mmol）和DIPEA（270.5 mg，2.10 mmol）在DMF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-N-((3-氯-5-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (R)-N-((3-氯-5-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（150.0 mg），其為鏡像異構物的固體混合物（ 實例 484）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.43 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 7.83 (m, 1H), 7.50 (d, 1H), 7.15 (s, 1H), 4.77 - 4.58 (m, 3H), 3.89 (s, 3H), 3.04 - 2.84 (m, 1H), 2.71 - 2.51 (m, 3H), 2.51 - 2.27 (m, 1H), 2.11 - 1.60 (m, 2H), 1.55 - 1.23 (m, 1H), 1.20 - 0.94 (m, 2H), 0.91 - 0.57 (m, 3H)。LCMS (ESI): 513.10[M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（150.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SC柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=70 : 30，保持12 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 484-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（50.6 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為4.01 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.42 (s, 1H), 8.19 (d, 1H), 7.83 (m, 1H), 7.50 (d, 1H), 7.15 (s, 1H), 4.55 (s, 3H), 3.89 (s, 3H), 3.02 - 2.86 (m, 1H), 2.58 (s, 3H), 2.50 - 2.30 (m, 1H), 2.07 - 1.68 (m, 2H), 1.50 - 1.33 (m, 1H), 1.23 - 0.89 (m, 2H), 0.84 - 0.63 (m, 3H)。LCMS (ESI): 513.15[M+H] +。
實例 484-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（52.3 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.31 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.42 (s, 1H), 8.19 (d, 1H), 7.88 (m, 1H), 7.50 (d, 1H), 7.15 (s, 1H), 4.55 (s, 3H), 3.90 (s, 3H), 3.06 - 2.83 (m, 1H), 2.58 (s, 3H), 2.49 - 2.33 (m, 1H), 2.07 - 1.68 (m, 2H), 1.51 - 1.33 (m, 1H), 1.21 - 0.89 (m, 2H), 0.88 - 0.62 (m, 3H)。LCMS (ESI): 513.10 [M+H] +。
實例 485. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5-( 三氟甲基 )-2-((3 S,5 R)-3,4,5- 三甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 㗁唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2413
將HCHO（2.1 mg，0.07 mmol），ZnCl 2（9.7 mg，0.07 mmol）和NaBH 3CN（4.5 mg，0.07 mmol）添加到 (S)-N-((2-((3 S,5 R)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)-5-(三氟甲基)㗁唑-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（實例482，15.0 mg，0.02 mmol）在MeOH（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在60ºC下在氮氣氣氛下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：XBridge製備型苯基OBD柱，19 x 250 mm，5μm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；流速：25 mL/min；梯度：40% B至50% B，8 min內，50% B；波長：220\254 nm；RT1（min）：7），以獲得呈固體的標題化合物（8.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 5.72 - 5.57 (m, 1H), 4.73 - 4.41 (m, 1H), 4.06 - 3.81 (m, 5H), 3.14 - 2.96 (m, 1H), 2.93 - 2.82 (m, 2H), 2.62 - 2.10 (m, 6H), 2.05 - 1.57 (m, 2H), 1.47 - 1.25 (m, 2H), 1.27 - 1.12 (m, 7H), 1.07 - 0.86 (m, 1H), 0.86 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 649.40 [M+H] +。
實例 486. (S)-5-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-5- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -8- 甲醯胺和 (R)- 5-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-5- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -8- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2415
步驟 -1. 5-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 羰基 ]-5- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -8- 甲酸甲酯
Figure 02_image2417
將HATU（497.0 mg，1.31 mmol）和5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲酸甲酯（199.0 mg，1.09 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-甲酸（中間體506，400.0 mg，1.09 mmol）和DIPEA（422.0 mg，3.27 mmol）在DMF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得固體（540.0 mg）。LCMS (ESI): 533 [M+H] +。
步驟 -2. 5-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 羰基 ]-5- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -8- 甲酸
Figure 02_image2419
將LiOH.H 2O（49.0 mg，2.03 mmol）添加到5-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-羰基]-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲酸甲酯（步驟-1，540.0 mg，1.01 mmol）在THF（3.00 mL），MeOH（3.00 mL）和H2O（3.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。用HCl（水溶液）將混合物酸化至pH 3。將水層用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（500.0 mg）。LCMS (ESI): 519 [M+H] +。
步驟 -3. 5-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1r,4r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-5- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -8- 甲醯胺
Figure 02_image2421
將EDCI（288.0 mg，1.50 mmol），HOBt（203.0 mg，1.50 mmol），和(1 r,4 r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇（184.0 mg，1.00 mmol）添加到5-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-羰基]-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲酸（步驟-2，520.0 mg，1.00 mmol）和DIPEA（648.0 mg，5.02 mmol）在DMF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（600.0 mg）。LCMS (ESI): 684 [M+H] +。
步驟 -4. (S)-5-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-5- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -8- 甲醯胺和 (R)- 5-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-5- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -8- 甲醯胺
Figure 02_image2415
將TFA（5.00 mL）添加到5-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1-{[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基}吡唑-3-羰基]- N-[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺（步驟-3，600.0 mg，0.88 mmol）在DCM（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-5-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺和 (R)-5-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺 （400.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 486）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.91 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 5.69 (s, 1H), 4.03 (m, 1H), 3.90 - 3.86 (m, 3H), 3.85 - 3.79 (m, 1H), 3.07 - 3.03 (m, 1H), 2.80 - 2.69 (m, 1H), 2.44 - 2.40 (m, 2H), 2.25 - 2.18 (m, 1H), 2.10 - 2.00 (m, 1H), 1.98 - 1.82 (m, 2H), 1.82 - 1.68 (m, 5H), 1.58 - 1.47 (m, 6H), 1.36 - 1.23 (m, 1H)。LCMS (ESI): 554.20 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（400.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Amylose-SA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=80 : 20，保持10 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 486-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（165.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為4.77 min。
實例 486-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（170.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.47 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.08 - 6.91 (m, 1H), 5.69 (s, 1H), 4.49 - 3.62 (m, 5H), 3.18 - 2.88 (m, 1H), 2.83 - 2.62 (m, 1H), 2.44 - 2.31 (m, 1H), 2.28 - 2.18 (m, 1H), 2.15 - 1.98 (m, 1H), 1.95 - 1.83 (m, 2H), 1.82 - 1.64 (m, 5H), 1.62 - 1.42 (m, 6H), 1.40 - 0.67 (m, 2H)。LCMS (ESI): 554.25 [M+H] +。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.08 - 6.91 (m, 1H), 5.69 (s, 1H), 4.49 - 3.62 (m, 5H), 3.18 - 2.88 (m, 1H), 2.83 - 2.62 (m, 1H), 2.44 - 2.31 (m, 1H), 2.28 - 2.18 (m, 1H), 2.15 - 1.98 (m, 1H), 1.95 - 1.83 (m, 2H), 1.82 - 1.64 (m, 5H), 1.62 - 1.42 (m, 6H), 1.40 - 0.67 (m, 2H)。LCMS (ESI): 554.25 [M+H] +。
實例 487. (S)-N-(5- 氰基吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2424
將Zn(CN) 2（29.1 mg，0.25 mmol）和Pd(PPh 3) 4（22.0 mg，0.02 mmol）添加到(7 S)- N-{5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基}-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（來自實例445的合成步驟-1，100.0 mg，0.19 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在120ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至55 B，30 min內；254/220 nm），以獲得呈固體的標題化合物（54.1 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.20 - 13.67 (m, 1H), 10.66 - 10.40 (m, 1H), 9.32 (d, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.38 - 8.18 (m, 1H), 7.49 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.07 (s, 1H), 4.76 - 4.12 (m, 1H), 4.04 - 3.79 (m, 3H), 3.25 - 3.05 (m, 2H), 2.38 - 2.12 (m, 1H), 1.97 - 1.80 (m, 1H), 1.68 (s, 1H), 1.54 - 1.26 (m, 1H), 1.20 - 0.89 (m, 1H), 0.87 - 0.77 (m, 1H), 0.76 - 0.66 (m, 1H), 0.66 - 0.53 (m, 1H)。LCMS (ESI): 516.20 [M+H] +。
實例 488. (7 S)- N-(1-(6- 氰基吡啶 -3- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2426
將DIPEA（58.4 mg，0.45 mmol）添加到(7 S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-(吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（實例471，100.0 mg，0.23 mmol）和5-氟吡啶-2-甲腈（27.6 mg，0.23 mmol）在MeCN（1.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：15 B至50 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（30.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.11 - 13.87 (m, 1H), 8.33 - 8.23 (m, 1H), 8.20 - 8.16 (m, 1H), 8.07 - 8.03 (m, 1H), 7.73 - 7.67 (m, 1H), 7.40 - 7.28 (m, 1H), 7.07 - 7.00 (m, 1H), 6.99 - 6.93 (m, 1H), 4.65 - 4.28 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.68 - 3.54 (m, 1H), 3.51 - 3.38 (m, 2H), 3.24 - 3.09 (m, 1H), 2.28 - 2.08 (m, 2H), 1.99 - 1.85 (m, 1H), 1.83 - 1.66 (m, 1H), 1.63 - 1.42 (m, 1H), 1.31 - 1.20 (m, 2H), 1.18 - 1.04 (m, 1H), 1.03 - 0.86 (m, 1H), 0.82 - 0.41 (m, 3H)。LCMS (ESI): 545.20 [M+H] +。
實例 489. (S)-N-( (R)-1-(5- 氰基吡啶 -2- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -( (S)-1-(5- 氰基吡啶 -2- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2428
使用與對於實例488的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用6-氟吡啶-3-甲腈作為起始材料。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（95.0 mg）（ 實例 489）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.99 (s, 1H), 8.48 (d, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.88 - 7.73 (m, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.57 (d, 1H), 4.69 - 4.13 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.73 - 3.33 (m, 4H), 2.76 - 2.60 (m, 2H), 2.28 - 2.06 (m, 2H), 2.02 - 1.43 (m, 3H), 1.03 - 0.75 (m, 2H), 0.73 - 0.49 (m, 3H)。LCMS (ESI): 545.25 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（95.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: MeOH=70 : 30，保持16 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 489-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（32.6 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.94 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (s, 1H), 8.48 (d, 1H), 8.31 - 8.19 (m, 1H), 8.15 (d, 1H), 7.89 - 7.72 (m, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.57 (d, 1H), 4.70 - 4.07 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.75 - 3.45 (m, 4H), 2.80 - 2.60 (m, 2H), 2.30 - 2.01 (m, 2H), 1.97 - 1.83 (m, 1H), 1.80 - 1.66 (m, 1H), 1.64 - 1.39 (m, 1H), 0.99 - 0.92 (m, 2H), 0.89 - 0.70 (m, 1H), 0.68 - 0.53 (m, 2H)。LCMS (ESI): 545.25 [M+H] +。
實例 489-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（37.2 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為13.84 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.48 (d, 1H), 8.35 - 8.23 (m, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.89 - 7.72 (m, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.57 (d, 1H), 4.74 - 4.08 (m, 1H), 3.98 - 3.79 (m, 4H), 3.73 - 3.34 (m, 4H), 2.79 - 2.59 (m, 2H), 2.31 - 2.03 (m, 2H), 1.97 - 1.85 (m, 1H), 1.82 - 1.68 (m, 1H), 1.64 - 1.46 (m, 1H), 1.02 - 0.77 (m, 3H), 0.71 - 0.49 (m, 2H)。LCMS (ESI): 545.15 [M+H] +。
實例 490. (S)-N-( (S)-4,4- 二氟 -1-(5- 甲基吡 𠯤 -2- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -( (R)-4,4- 二氟 -1-(5- 甲基吡 𠯤 -2- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2430
步驟 -1. 3,3- 二氟 -4-[(7S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 醯胺基 ] 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2432
將HOBt（108.3 mg，0.80 mmol），EDCI（153.6 mg，0.80 mmol），4-胺基-3,3-二氟吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（118.7 mg，0.53 mmol）添加到(7 S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（200.0 mg，0.53 mmol）和DIPEA（207.1 mg，1.60 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，12/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（300.0 mg）。LCMS (ESI): 579.2 [M+H] +。
步驟 -2. (7 S)- N-(4,4- 二氟吡咯啶 -3- 基 )-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2434
在0ºC下將TFA（3.00 mL）添加到3,3-二氟-4-[(7 S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-醯胺基]吡咯啶-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，300.0 mg，0.52 mmol）在DCM（3.00 mL）中的溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，5/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（220.0 mg）。LCMS (ESI): 479.2 [M+H] +。
步驟 -3. (S)-N-( (S)-4,4- 二氟 -1-(5- 甲基吡 𠯤 -2- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)-N -( (R)-4,4- 二氟 -1-(5- 甲基吡 𠯤 -2- 基 ) 吡咯啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2430
將Pd-PEPPSI-iHeptCl（24.9 mg，0.03 mmol，CAS#：905459-27-0）和Cs 2CO 3（204.3 mg，0.63 mmol）添加到(7 S)- N-(4,4-二氟吡咯啶-3-基)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（150.0 mg，0.31 mmol）和2-氯-5-甲基-吡𠯤（80.6 mg，0.63 mmol）在1,4-二㗁𠮿（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得( S)-N-( (S)-4,4-二氟-1-(5-甲基吡𠯤-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-N-( (R)-4,4-二氟-1-(5-甲基吡𠯤-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（45.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 490）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.94 - 7.86 (m, 1H), 7.31 - 7.27 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 5.01 - 4.90 (m, 2H), 4.09 - 3.97 (m, 1H), 3.97 - 3.87 (m, 5H), 3.54 - 3.39 (m, 2H), 2.96 - 2.92 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 1.92 - 1.88 (m, 2H), 1.39 - 1.22 (m, 2H), 1.09 - 1.04 (m, 1H), 0.78 - 0.73 (m, 3H)。LCMS (ESI): 571.60 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（43.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SC柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：1/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=80 : 20，保持22 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 490-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（4.4 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.83 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.20 - 8.11 (m, 1H), 8.09 - 8.00 (m, 1H), 7.95 - 7.83 (m, 1H), 7.37 - 7.25 (m, 1H), 7.19 - 7.03 (m, 1H), 5.11 - 4.90 (m, 1H), 4.67 - 4.51 (m, 2H), 4.11 - 4.00 (m, 1H), 4.00 - 3.94 (m, 5H), 3.52 - 3.41 (m, 1H), 3.02 - 2.89 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 1.99 - 1.87 (m, 1H), 1.85 - 1.73 (m, 1H), 1.40 - 1.26 (m, 2H), 1.09 - 0.87 (m, 2H), 0.81 - 0.69 (m, 2H)。LCMS (ESI): 571.15 [M+H] +。
實例 490-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（5.8 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為17.48 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.20 - 8.10 (m, 1H), 8.08 - 7.98 (m, 1H), 7.92 - 7.84 (m, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.16 - 7.00 (m, 1H), 5.04 - 4.90 (m, 3H), 4.67 - 4.31 (m, 1H), 4.09 - 3.95 (m, 5H), 3.50 - 3.40 (m, 1H), 2.94 (s, 1H), 2.41 (s, 3H), 1.96 - 1.68 (m, 2H), 1.45 - 1.32 (m, 1H), 1.16 - 0.90 (m, 2H), 0.88 - 0.66 (m, 3H)。LCMS (ESI): 571.25 [M+H] +。
實例 491. (S)-N-((3- 氯 -5- 異丙氧基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2437
使用與對於實例484的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用NaH和異丙醇作為步驟-1中的起始材料。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（310.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.86 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 8.19 (d, 2H), 7.58 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.81 - 4.69 (m, 1H), 4.52 - 4.27 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.30 - 3.28 (m, 1H), 3.23 - 2.90 (m, 1H), 2.85 - 2.65 (m, 1H), 2.31 - 2.05 (m, 1H), 1.87 - 1.70 (m, 1H), 1.65 - 1.48 (m, 1H), 1.36 - 1.16 (m, 6H), 1.09 - 0.79 (m, 2H), 0.77 - 0.52 (m, 3H)。LCMS (ESI): 557.25 [M+H] +。
實例 492. (S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (S)-3- 甲基 -5,6,7,8- 四氫 -[1,2,4] 三唑并 [4,3-a] 吡啶 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-( (R)-3- 甲基 -5,6,7,8- 四氫 -[1,2,4] 三唑并 [4,3-a] 吡啶 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2439
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用3-甲基-5H,6H,7H,8 H-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-8-胺作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：15 B至50 B，30 min內；220/254 nm），以獲得 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (S)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-( (R)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（159.2 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 492）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.45 - 7.27 (m, 1H), 7.16 (d, 1H), 5.31 - 5.06 (m, 1H), 4.78 - 4.46 (m, 1H), 4.05 - 3.97 (m, 1H), 3.97 - 3.85 (m, 4H), 2.86 (s, 1H), 2.56 - 2.29 (m, 4H), 2.26 - 2.12 (m, 2H), 2.12 - 1.97 (m, 2H), 1.97 - 1.58 (m, 3H), 1.49 - 1.22 (m, 1H), 1.16 - 0.97 (m, 1H), 0.84 - 0.61 (m, 3H)。LCMS (ESI): 509.25 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（157.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SC柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=50 : 50，保持7 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 492-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（38.9 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為4.01 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.12 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.27 - 7.04 (m, 1H), 5.24 - 5.13 (m, 1H), 4.76 - 4.33 (m, 1H), 4.05 - 3.97 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.93 - 3.86 (m, 1H), 3.00 - 2.73 (m, 1H), 2.52 - 2.29 (m, 4H), 2.26 - 2.12 (m, 2H), 2.06 (s, 2H), 1.93 - 1.64 (m, 2H), 1.48 - 1.19 (m, 2H), 1.16 - 0.82 (m, 2H), 0.82 - 0.57 (m, 2H)。LCMS (ESI): 509.25 [M+H] +。
實例 492-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（44.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.45 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.27 - 7.04 (m, 1H), 5.25 - 5.13 (m, 1H), 4.78 - 4.38 (m, 1H), 4.06 - 3.84 (m, 5H), 3.15 - 3.00 (m, 1H), 2.94 - 2.77 (m, 1H), 2.55 - 2.29 (m, 3H), 2.26 - 2.13 (m, 2H), 2.13 - 2.00 (m, 1H), 1.97 - 1.64 (m, 3H), 1.59 - 1.36 (m, 1H), 1.40 - 1.21 (m, 2H), 1.20 - 0.87 (m, 1H), 0.85 - 0.54 (m, 2H)。LCMS (ESI): 509.25 [M+H] +。
實例 493. (R)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基 -3- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基 -3- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2441
步驟 -1. (5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 甲醇
Figure 02_image2443
在0ºC下將2-氯甲酸甲基丙酯（1.20 g，8.77 mmol）和 N-甲基𠰌啉（0.89 g，8.77 mmol）添加到5-氟-2-甲氧基吡啶-3-甲酸（1.00 g，5.84 mmol）在DME（20.00 mL）中的溶液中。將所得混合物在0ºC下攪拌30 min。將所得混合物過濾，將濾餅用DME（5.00 mL）洗滌。然後在0ºC下將NaBH 4（0.44 g，11.69 mmol）添加到濾液中。將所得混合物在0ºC下攪拌1 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（914.0 mg）。LCMS (ESI): 158.00 [M+H] +。
步驟 -2. 3-( 氯甲基 )-5- 氟 -2- 甲氧基吡啶
Figure 02_image2445
在0ºC下將SOCl 2（1.38 g，11.63 mmol）添加到(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)甲醇（步驟-1，914.0 mg，5.82 mmol）在DCM（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在0ºC下攪拌14 h。將所得混合物在真空下濃縮以獲得呈固體的標題化合物（900.0 mg）。LCMS (ESI): 176.10 [M+H] +。
步驟 -3. 5- 氟 -2- 甲氧基 -3- 甲基吡啶
Figure 02_image2447
將Zn（1.01 g，15.38 mmol）添加到3-(氯甲基)-5-氟-2-甲氧基吡啶（步驟-2，900.0 mg，5.13 mmol）在AcOH（5.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在120ºC下攪拌3 h。將所得混合物過濾，將濾液用EtOAc稀釋並用NaHCO 3洗滌。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（3/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（380.0 mg）。LCMS (ESI): 142.20 [M+H] +。
步驟 -4. 5- 氟 -4- 碘 -2- 甲氧基 -3- 甲基吡啶
Figure 02_image2449
將LDA（265.6 mg，2.48 mmol）和I 2（755.3 mg，2.98 mmol）添加到5-氟-2-甲氧基-3-甲基吡啶（步驟-3，350.0 mg，2.48 mmol）在THF（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在-78ºC下在氮氣氣氛下攪拌2 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚）純化，以獲得呈固體的標題化合物（160.0 mg）。LCMS (ESI): 268.20 [M+H] +。
步驟 -5. 5-(5- 氟 -2- 甲氧基 -3- 甲基吡啶 -4- 基 )-1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 甲酸乙酯
Figure 02_image2451
將PEPPSI™-IPr催化劑（35.5 mg，0.05 mmol，CAS#：905459-27-0）和K 3PO 4（333.9 mg，1.57 mmol）添加到5-氟-4-碘-2-甲氧基-3-甲基吡啶（步驟-4，140.0 mg，0.52 mmol）和5-(乙氧基羰基)-2-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-基硼酸（步驟-4，140.5 mg，0.52 mmol）在1,4-二㗁𠮿（2.00 mL）和H 2O（0.20 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在70ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，3/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（140.0 mg）。LCMS (ESI): 364.30 [M+H] +。
步驟 -6. 5-(5- 氟 -2- 甲氧基 -3- 甲基吡啶 -4- 基 )-1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 甲酸
Figure 02_image2453
將氫氧化鋰（32.3 mg，0.77 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-甲酸乙酯（步驟-5，140.0 mg，0.39 mmol）在THF（2.00 mL），MeOH（1.00 mL）和H 2O（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用HCl（1 M水溶液）洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，12/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（80.0 mg）。LCMS (ESI): 336.10 [M+H] +。
步驟 -7. 4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基 -3- 甲基吡啶 -4- 基 )-1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2455
將HOBt（42.3 mg，0.31 mmol），EDCI（60.0 mg，0.31 mmol），和 N-[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（66.9 mg，0.21 mmol）添加到5-(5-氟-2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-甲酸（步驟-6，70.0 mg，0.21 mmol）和DIPEA（134.9 mg，1.05 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，15/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（85.0 mg）。LCMS (ESI): 638.30 [M+H] +。
步驟 -8. (R)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基 -3- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 (S)- 4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基 -3- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2441
將TFA（2.00 mL）添加到4-[5-(5-氟-2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]- N-[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-7，77.0 mg，0.12 mmol）在DCM（2.00 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，12/1 v/v）純化，以獲得( R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和 (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（37.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 493）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.06 - 7.90 (m, 1H), 6.93 - 6.65 (m, 1H), 4.75 - 4.55 (m, 1H), 4.08 - 3.89 (m, 4H), 3.00 - 2.81 (m, 1H), 2.68 - 2.29 (m, 1H), 2.21 (s, 3H), 1.94 - 1.88 (m, 4H), 1.82 - 1.59 (m, 4H), 1.44 - 1.21 (m, 3H), 1.16 - 0.99 (m, 1H), 0.96 - 0.85 (m, 1H), 0.82 - 0.69 (m, 3H)。LCMS (ESI): 554.15 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（35.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SC柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：3/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=50 : 50，保持8.5 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 493-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（11.6 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為4.15 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.97 (s, 1H), 6.80 (s, 1H), 4.77 - 4.49 (m, 1H), 3.98 (s, 2H), 3.96 - 3.94 (m, 2H), 3.01 - 2.84 (m, 1H), 2.68 - 2.25 (m, 1H), 2.21 (s, 3H), 1.98 - 1.77 (m, 7H), 1.76 - 1.58 (m, 5H), 1.35 - 1.12 (m, 1H), 1.09 - 0.98 (m, 1H), 0.80 - 0.66 (m, 2H)。LCMS (ESI): 554.25 [M+H] +。
實例 493-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（12.1 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為6.32 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.89 (s, 1H),6.70 (s, 1H),4.50 - 4.40 (m, 1H), 3.90 - 3.84 (m, 4H), 2.70 - 2.90 (m, 1H), 2.55 - 2.18 (m, 1H), 2.10 (s, 3H),1.87 - 1.69 (m, 7H), 1.65 - 1.52 (m, 5H), 1.08 - 1.17 (m, 1H), 0.98 - 0.75 (m, 1H), 0.69 - 0.58 (m, 2H)。LCMS (ESI): 554.25 [M+H] +。
實例 494. (S)-N-(6- 乙醯基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2458
步驟 -1. (7 S)- N-{6- 溴吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 基 }-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2460
將6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-3-胺（300.0 mg，1.42 mmol）和HATU（591.7 mg，1.56 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，529.7 mg，1.42 mmol）和DIPEA（548.5 mg，4.25 mmol）在DMF（8.00 mL）中的溶液中。將溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，3/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（650.0 mg）。LCMS (ESI): 568.1 [M+H] +。
步驟 -2. (7 S)- N-[6-(1- 乙氧基乙烯基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 基 ]-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺。
Figure 02_image2462
將三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷（536.9 mg，1.49 mmol），Pd(PPh 3) 4（132.1 mg，0.11 mmol）添加到(7 S)- N-{6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基}-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-1，650.0 mg，1.14 mmol）在DMF（10.00 mL）中的溶液中。將溶液在100ºC下在N 2下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，3/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（380.0 mg）。LCMS (ESI): 560.2 [M+H] +。
步驟 -3. (S)-N -(6- 乙醯基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2458
在25ºC下將PTSA（116.9 mg，0.68 mmol）添加到(7 S)- N-[6-(1-乙氧基乙烯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基]-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-2，380.0 mg，0.68 mmol）在(CH 3) 2CO（5.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在60ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：30 B至50 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（300.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.26 - 9.18 (m, 1H), 8.47 - 8.35 (m, 1H), 8.20 - 8.09 (m, 1H), 7.75 - 7.60 (m, 2H), 7.45 - 7.18 (m, 1H), 7.14 (s, 1H), 4.74 - 4.54 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.20 - 3.03 (m, 1H), 2.65 (s, 3H), 2.59 - 2.40 (m, 1H), 2.14 - 1.97 (m, 1H), 1.96 - 1.77 (m, 1H), 1.61 - 1.39 (m, 1H), 1.39 - 1.23 (m, 1H), 1.22 - 1.00 (m, 1H), 0.96 - 0.64 (m, 3H)。LCMS (ESI): 532.25 [M+H] +。
實例 495. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(6-(( S)-1- 羥基乙基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(6-(( R)-1- 羥基乙基 ) 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2465
在0ºC下將NaBH 4（21.4 mg，0.56 mmol）添加到(7 S)- N-{6-乙醯基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基}-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（實例494，300.0 mg，0.56 mmol）在MeOH（10.00 mL）中的溶液中。然後將溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(6-(( S)-1-羥基乙基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(6-(( R)-1-羥基乙基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（150.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 495）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.91 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.31 - 8.24 (m, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.72 - 7.63 (m, 1H), 7.37 - 7.30 (m, 1H), 7.23 - 7.15 (m, 1H), 7.10 - 7.02 (m, 1H), 4.85 - 4.69 (m, 1H), 4.68 - 4.34 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.07 - 2.86 (m, 1H), 2.41 - 2.21 (m, 1H), 2.08 - 1.81 (m, 1H), 1.77 - 1.51 (m, 1H), 1.46 - 1.14 (m, 4H), 1.11 - 0.80 (m, 2H), 0.79 - 0.47 (m, 3H)。LCMS (ESI): 534.20 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（150.0 mg）。
柱：ART Amylose-SA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：1/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=85 : 15，保持21 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 495-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（53.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為11.88 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.61 - 8.38 (m, 1H), 8.20 - 8.08 (m, 2H), 7.67 - 7.60 (m, 1H), 7.34 - 7.08 (m, 3H), 4.78 - 4.44 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.24 - 2.78 (m, 2H), 2.76 - 2.29 (m, 1H), 2.23 - 1.97 (m, 1H), 1.97 - 1.76 (m, 1H), 1.61 - 1.39 (m, 4H), 1.39 - 1.20 (m, 1H), 1.20 - 0.94 (m, 2H), 0.93 - 0.65 (m, 2H)。LCMS (ESI): 534.25 [M+H] +。
實例 495-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（55.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為18.01 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.61 - 8.36 (m, 1H), 8.19 - 8.09 (m, 2H), 7.67 - 7.59 (m, 1H), 7.34 - 7.21 (m, 2H), 7.18 - 7.10 (m, 1H), 4.74 - 4.45 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.19 - 2.89 (m, 2H), 2.80 - 2.33 (m, 1H), 2.15 - 1.74 (m, 2H), 1.66 - 1.38 (m, 4H), 1.39 - 1.22 (m, 1H), 1.21 - 0.87 (m, 2H), 0.80 (m, 2H)。LCMS (ESI): 534.30 [M+H] +。
實例 496. (7 S)- N-(7',8'- 二氫 -6' H- 螺 [ 氧雜環丁烷 -3,5'- 喹啉 ]-8'- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2467
步驟 -1. 8- 亞甲基 -7,8- 二氫喹啉 -5,5(6 H)- 二甲酸二甲酯
Figure 02_image2469
在-78ºC下將NaHMDS（72.7 mg，0.40 mL，1 M，396.6 µmol）逐滴添加到8-亞甲基-5,6,7,8-四氫喹啉-5-甲酸甲酯 [3]（62.0 mg，305.1 µmol）在THF（1.52 mL）中的溶液中。將所得混合物在-78ºC下攪拌30 min並且然後添加氯甲酸甲酯（37.5 mg，0.03 mL，396.6 µmol）。將所得混合物在-78ºC下攪拌2.5 h並且然後在-78ºC下用NH 4Cl（飽和水溶液，1.5 mL）淬滅並使其升溫至22ºC。劇烈攪拌30 min後，將各層分離並將水層用EtOAc萃取。將有機層合併，用鹽水洗滌，乾燥（Na 2SO 4），過濾，並在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的10%至40% EtOAc）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（63.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 2.46 - 2.53 (m, 2H), 2.65 - 2.74 (m, 2H), 3.82 - 3.77 (m, 6H), 5.24 (s, 1H), 6.37 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 7.73 (d, 1H), 8.54 - 8.59 (m, 1H)。
步驟 -2. (8- 亞甲基 -5,6,7,8- 四氫喹啉 -5,5- 二基 ) 二甲醇
Figure 02_image2471
在-78ºC下將LiAlH 4（256.0 mg，3.37 mL，6.74 mmol）添加到8-亞甲基-7,8-二氫喹啉-5,5(6 H)-二甲酸二甲酯（步驟-1，734.0 mg，2.81 mmol）在THF（28.1 mL）中的溶液中。將所得混合物在-78ºC下攪拌30 min並升溫至-10ºC持續7 h。將反應混合物用Et 2O稀釋並升溫至0ºC。依次添加水（0.26 mL）、NaOH（15%水溶液，0.26 mL）、和水（0.78 mL）並將混合物升溫至22ºC持續15 min，並添加MgSO 4並將反應混合物攪拌額外的15 min。將所得混合物經矽藻土過濾並在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的0至10% EtOAc）純化，以獲得呈固體的標題化合物（350.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 1.77 - 1.86 (m, 2H), 2.59 (t, 2H), 3.49 (dd, 2H), 3.58 - 3.63 (m, 2H), 4.66 (t, 2H), 5.05 (dt, 1H), 6.09 (dt, 1H), 7.20 (dd, 1H), 7.83 (dd, 1H), 8.38 (dd, 1H)。
步驟 -3. (5-( 羥基甲基 )-8- 亞甲基 -5,6,7,8- 四氫喹啉 -5- 基 ) 甲基 4- 甲基苯磺酸酯
Figure 02_image2473
將(8-亞甲基-5,6,7,8-四氫喹啉-5,5-二基)二甲醇（步驟-2，100.0 mg，0.49 mmol）和吡啶（119.0 mg，0.12 mL，1.51 mmol）在DCM（0.541 mL）中的溶液冷卻至0 oC。在1 h內將Ts-Cl（97.5 mg，0.51 mmol）在DCM（1.00 mL）中的溶液添加到反應混合物並將反應混合物在0ºC下攪拌30 min並且然後在22ºC下攪拌18 h。在真空中濃縮反應混合物。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的20%至40% EtOAc）純化，以獲得呈固體的標題化合物（51.0 mg）。TLC-MS (APCI): [M+H] +: 360.1.
步驟 -4. 8'- 亞甲基 -7',8'- 二氫 -6' H- 螺 [ 氧雜環丁烷 -3,5'- 喹啉 ]
Figure 02_image2475
在0ºC下將NaH（2.2 mg，60% Wt，56.0 µmol）添加到(5-(羥基甲基)-8-亞甲基-5,6,7,8-四氫喹啉-5-基)甲基4-甲基苯磺酸酯（步驟-3，10.0 mg，28 µmol）在THF（2.8 mL）中的溶液中。在該溫度下繼續攪拌5 min後，將反應混合物升溫回流18 h。將反應混合物用鹽水淬滅並用EtOAc萃取。將合併的有機層用水、鹽水洗滌，乾燥（Na 2SO 4），過濾，並在真空中濃縮 。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的20%至40% EtOAc）純化，以獲得呈固體的標題化合物（4.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.53 (dd, 1H), 8.24 (dd, 1H), 7.32 (dd, 1H), 6.30 - 6.24 (m, 1H), 5.22 - 5.17 (m, 1H), 4.77 (d, 2H), 4.71 (d, 2H), 2.61 - 2.55 (m, 2H), 2.30 - 2.23 (m, 2H)。
步驟 -5. 6',7'- 二氫 -8' H- 螺 [ 氧雜環丁烷 -3,5'- 喹啉 ]-8'- 酮
Figure 02_image2477
在0ºC下將二水合鋨酸鉀（1.53 mg，4.17 µmol）和過碘酸鈉（71.3 mg，0.33 mmol）添加到8'-亞甲基-7',8'-二氫-6' H-螺[氧雜環丁烷-3,5'-喹啉]（步驟-4，15.6 mg，83.3 µmol）在1,4-二㗁𠮿（0.41 mL）和水（0.41 mL）中的溶液中。將反應混合物在0ºC下攪拌5 h並且然後添加吡啶（13.2 mg，0.17 mmol）並將反應混合物升溫至22ºC持續18 h。將反應混合物用DCM稀釋並用Na 2S 2O 3（15%水溶液）洗滌，乾燥（Na 2SO 4），過濾並在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在DCM中的0至10% MeOH）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（13.6 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.83 (d, 1H), 8.47 (d, 1H), 7.68 (dd, 1H), 4.82 (d, 2H), 4.77 (d, 2H), 2.82 - 2.74 (m, 2H), 2.59 - 2.52 (m, 2H)。
步驟 -6. (7',8'- 二氫 -6'H- 螺 [ 氧雜環丁烷 -3,5'- 喹啉 ]-8'- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2479
將氰基硼氫化鈉（41.5 mg，0.66 mmol）和乙酸銨（203.7 mg，2.64 mmol）添加到6',7'-二氫-8' H-螺[氧雜環丁烷-3,5'-喹啉]-8'-酮（步驟-5，25.0 mg，0.13 mmol）在EtOH（2.64 mL）中的溶液中。將反應混合物在密封管中加熱至80ºC持續18 h。將反應冷卻至22ºC並添加Boc 2O（0.1 g，0.40 mmol）。將反應混合物在22ºC下攪拌2 h並且然後在真空中濃縮。將殘餘物溶解在DCM中並用NaHCO 3（飽和水溶液）洗滌。將水層用DCM萃取，並將合併的有機層用鹽水洗滌，乾燥（Na 2SO 4），過濾，並在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在DCM中的0至10% MeOH）純化，並進一步藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的20%至100% EtOAc，隨後是在DCM中的0至20% MeOH）純化，以獲得呈固體的標題化合物（4.4 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.52 (dd, 1H), 8.27 (dd, 1H), 7.35 (ddd, 1H), 5.58 (s, 1H), 4.82 (d, 1H), 4.73 (d, 1H), 4.70 (d, 1H), 4.62 (dd, 1H), 4.58 (dt, 1H), 2.47 - 2.37 (m, 1H), 2.37 - 2.18 (m, 1H), 2.17 - 2.07 (m, 1H), 2.01 (q, 1H), 1.47 (s, 9H)。
步驟 -7. 7',8'- 二氫 -6' H- 螺 [ 氧雜環丁烷 -3,5'- 喹啉 ]-8'- 胺 2,2,2- 三氟乙酸酯
Figure 02_image2481
將TFA（18 mg，0.16 mmol）添加到(7',8'-二氫-6' H-螺[氧雜環丁烷-3,5'-喹啉]-8'-基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-6，4.5 mg，15.50 µmol）在DCM（0.16 mL）中的溶液中。將所得混合物在22ºC下攪拌18 h。將反應混合物在減壓下濃縮以獲得呈油狀物的標題化合物，將其不經進一步純化而用於下一步驟。TLC-MS (APCI): [M+H] +: 191.1.
步驟 -8. (7 S)- N-(7',8'- 二氫 -6' H- 螺 [ 氧雜環丁烷 -3,5'- 喹啉 ]-8'- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2467
將HATU（5.6 mg，15.00 µmol）和7',8'-二氫-6' H-螺[氧雜環丁烷-3,5'-喹啉]-8'-胺 2,2,2-三氟乙酸酯（4.9 mg，16.00 µmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，5.0 mg，13.00 µmol）和DIPEA（14.0 mg，0.11 mmol）在DMF（0.2 mL）中的溶液中。將所得溶液在22ºC下攪拌18 h。將殘餘物直接藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，10%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH）），然後藉由矽膠柱層析法（在DCM中的0至10% MeOH）進行第二次純化，以獲得呈固體的標題化合物（3.36 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.50 - 8.36 (m, 2H), 8.12 (s, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.40 - 7.15 (m, 1H), 7.10 (s, 1H), 4.97 (t, 1H), 4.82 - 4.66 (m, 4H), 3.93 (s, 3H), 2.81 (s, 1H), 2.56 - 2.17 (m, 4H), 2.12 - 1.73 (m, 4H), 1.39 - 1.26 (m, 2H), 1.09 - 0.97 (m, 1H), 0.94 - 0.82 (m, 1H), 0.71 (s, 2H)。TLC-MS (APCI): [M+H] +: 547.2.
實例 497. (7 S)- N-(5- 乙基 -2- 氧雜 -5- 氮雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2484
步驟 -1. N-(3- 烯丙基氧雜環丁烷 -3- 基 )- N- 乙基 -2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image2486
將NaH（662.6 mg，16.56 mmol，60% Wt）分批添加到 N-(3-烯丙基氧雜環丁烷-3-基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（1.50 g，6.90 mmol）在無水THF（17.25 mL）和DMF（34.51 mL）中的溶液中。將所得混合物在0ºC下在氮氣下攪拌1.5 h。一次性添加碘乙烷（2.79 mL，34.51 mmol）並將反應混合物在22ºC下攪拌16 h。將反應混合物用水稀釋並用Et 2O萃取。將合併的有機物用水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的0%至70% EtOAc）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（1.18 g）。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.00 (dddd, 1H), 5.42 - 5.19 (m, 2H), 4.89 - 4.75 (m, 2H), 4.40 (ddd, 1H), 4.29 (ddd, 1H), 3.31 (dq, 1H), 2.90 - 2.62 (m, 3H), 1.26 (s, 9H), 1.05 (t, 3H)。
步驟 -2. 3- 烯丙基 - N- 乙基氧雜環丁烷 -3- 胺鹽酸鹽
Figure 02_image2488
在-78ºC下在劇烈攪拌下，將HCl（184.1 mg，5.05 mmol，在1,4-二㗁𠮿中4 M）添加到 N-(3-烯丙基氧雜環丁烷-3-基)- N-乙基-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-1，1.18 g，4.81 mmol）在MeOH（24.04 mL）中的溶液中。5 min後，在0ºC下在減壓下除去揮發物。將殘餘物在Et 2O中研磨並濾出固體，以獲得呈固體的標題化合物（810.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 5.99 (ddt, 1H), 5.42 - 5.21 (m, 2H), 4.73 (d, 2H), 4.44 (d, 2H), 3.02 - 2.92 (m, 2H), 2.67 (dd, 2H), 1.24 (t, 3H)。
步驟 -3. 2-(((3- 烯丙基氧雜環丁烷 -3- 基 )( 乙基 ) 胺基 ) 甲基 ) 丙烯酸甲酯
Figure 02_image2490
在0ºC下在氮氣下，將2-(溴甲基)丙烯酸甲酯（856.9 mg，4.79 mmol）添加到3-烯丙基- N-乙基氧雜環丁烷-3-胺鹽酸鹽（步驟-2，810.0 mg，4.56 mmol）和三乙胺（1.30 mL，9.35 mmol）在DCM（22.8 mL）中的溶液中。使反應混合物達到22ºC並攪拌16 h。添加水並將水溶液用DCM萃取。將合併的有機物經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的0%至25% EtOAc）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（1.05 g）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 6.27 - 6.22 (m, 1H), 6.10 - 6.08 (m, 1H), 6.07 - 5.95 (m, 1H), 5.26 - 5.15 (m, 2H), 4.56 (d, 2H), 4.41 - 4.25 (m, 2H), 3.76 (s, 3H), 3.26 (t, 2H), 2.61 - 2.44 (m, 4H), 0.92 (t, 3H)。
步驟 -4. 5- 乙基 -2- 氧雜 -5- 氮雜螺 [3.5] 壬 -7- 烯 -7- 甲酸甲酯
Figure 02_image2492
在密封管中，向2-(((3-烯丙基氧雜環丁烷-3-基)(乙基)胺基)甲基)丙烯酸甲酯（步驟-3，1.05 g，4.39 mmol）在DCM（169.00 mL）中的溶液中鼓入氮氣15 min。添加Grubbs II（372.0 mg，0.44 mmol）並將反應混合物在45ºC下攪拌18 h。在減壓下除去DCM，並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在MeOH中的0%至15% EtOAc）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（872.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.03 - 6.94 (m, 1H), 4.66 (d, 2H), 4.26 (d, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.51 - 3.40 (m, 2H), 2.69 - 2.56 (m, 2H), 2.36 (q, 2H), 1.13 (t, 3H)。
步驟 -5. 5- 乙基 -2- 氧雜 -5- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 甲酸甲酯
Figure 02_image2494
將Pd/C（15.0 mg，10 wt.%）添加到5-乙基-2-氧雜-5-氮雜螺[3.5]壬-7-烯-7-甲酸甲酯（步驟-4，250.0 mg，1.18 mmol）在MeOH（7.40 mL）中的溶液中並將所得混合物在22ºC下在氫氣氣氛（1 atm）下攪拌16 h。將反應混合物在特氟隆墊上攪拌並將濾液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的0%至100% EtOAc）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（158.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.71 - 4.62 (m, 2H), 4.35 (d, 1H), 4.30 - 4.23 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.10 - 2.99 (m, 1H), 2.98 - 2.86 (m, 1H), 2.65 - 2.51 (m, 1H), 2.46 - 2.30 (m, 2H), 2.12 (dt, 1H), 1.99 - 1.88 (m, 1H), 1.74 (t, 1H), 1.66 - 1.51 (m, 1H), 1.13 (t, 3H)。
步驟 -6. 5- 乙基 -2- 氧雜 -5- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 甲酸
Figure 02_image2496
將LiOH（29.2 mg，1.22 mmol）添加到5-乙基-2-氧雜-5-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸甲酯（步驟-5，153.0 mg，0.72 mmol）在H 2O（1.43 mL）和THF（1.43 mL）中的溶液中。將反應混合物在22ºC下攪拌2 h。將反應混合物濃縮至乾以獲得標題化合物，並且不經進一步純化而用於下一步驟。TLC-MS (APCI): [M+H] += 200.1
步驟 -7. (5- 乙基 -2- 氧雜 -5- 氮雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2498
在密封管中，將三乙胺（392 µL，2.81 mmol）添加到5-乙基-2-氧雜-5-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸（步驟-6，140.0 mg，0.70 mmol）在無水三級丁醇（3.50 mL）中的溶液中，隨後添加疊氮化磷酸二苯酯（181.8 µL，0.84 mmol）。將管密封並將反應混合物在90ºC下攪拌16 h。在減壓下除去溶劑並將殘餘物用水稀釋。將水溶液用EtOAc萃取。將合併的有機物經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的0%至100% EtOAc）純化，以獲得呈固體的標題化合物（75.4 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.80 - 4.63 (m, 2H), 4.36 - 4.25 (m, 2H), 3.69 (s, 1H), 2.97 - 2.16 (m, 4H), 2.04 (s, 2H), 1.81 - 1.68 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.12 (t, 3H)。
步驟 -8. 1-((5- 乙基 -2- 氧雜 -5- 氮雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-λ 4- 氮烷基 )-2,2,2- 三氟乙烷 -1- 酮
Figure 02_image2500
將TFA（54.1 µL，0.70 mmol）添加到(5-乙基-2-氧雜-5-氮雜螺[3.5]壬-7-基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-7，38.0 mg，0.14 mmol）在DCM（0.70 mL）中的溶液中。將反應混合物在22ºC下在氮氣下攪拌2 h。在減壓下除去揮發物，並藉由與甲苯共蒸發除去剩餘的TFA以獲得標題化合物。殘餘物不經進一步純化而用於下一步驟。TLC-MS (APCI)。[M+H] += 171.1。
步驟 -9. (7 S)- N-(5- 乙基 -2- 氧雜 -5- 氮雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2484
將HATU（39.1 mg，0.10 mmol）和5-乙基-2-氧雜-5-氮雜螺[3.5]壬-7-胺（步驟-8，17.5 mg，0.10 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，35.0 mg，0.09 mmol）和DIPEA（82.0 µL，0.47 mmol）在DMF（0.50 mL）中的溶液中。將所得溶液在22ºC下攪拌16 h。將反應混合物直接藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，5%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH）），以獲得呈固體的標題化合物（17.5 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 13.97 (d, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.94 - 4.38 (m, 3H), 4.26 (d, 1H), 4.14 (d, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.75 - 3.60 (m, 1H), 3.26 - 3.01 (m, 1H), 2.92 - 2.80 (m, 1H), 2.79 - 2.70 (m, 1H), 2.70 - 2.57 (m, 1H), 2.41 - 2.24 (m, 1H), 2.21 - 2.09 (m, 1H), 2.05 - 1.87 (m, 2H), 1.79 - 1.39 (m, 4H), 1.34 - 1.17 (m, 1.63H), 1.15 - 0.96 (m, 3.35H), 0.96 - 0.73 (m, 1H), 0.71 - 0.44 (m, 2H)。
實例 498. (S)-N-(5,5- 二甲基 -6,7- 二氫 -5 H- 吡唑并 [5,1-b][1,3] 㗁 𠯤 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2503
步驟 -1. 3- 羥基 -3- 甲基丁基甲磺酸酯
Figure 02_image2505
在0ºC下將TEA（1.46 g，14.4 mmol）添加到3-甲基丁烷-1,3-二醇（1.00 g，9.60 mmol）在DCM（8.00 mL）中的溶液中。添加Ms-Cl（1.21 g，10.6 mmol）在DCM（4.53 mL）中的溶液並將反應混合物在0ºC下攪拌4 h。將反應混合物用NaHCO 3（飽和水溶液）淬滅。將有機層乾燥（Na 2SO 4），過濾並在真空中濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（1.52 g）。殘餘物不經進一步純化而直接用於下一步驟。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.42 (t, 2H), 3.02 (s, 3H), 1.96 (t, 2H), 1.33 -1.29 (m, 6H)。
步驟 -2. 2- 甲基 -4-(4- 硝基 -1 H- 吡唑 -1- 基 ) 丁 -2- 醇
Figure 02_image2507
在5ºC下將4-硝基-1 H-吡唑（0.39 g，3.45 mmol）添加到3-羥基-3-甲基丁基甲磺酸酯（步驟-1，1.57 g，8.62 mmol），K 2CO 3（953.0 mg，6.90 mmol），和KI（1.43 g，8.62 mmol）在MeCN（33.00 mL）中的溶液中。將反應混合物在該溫度下攪拌10 min並緩慢加熱至80ºC持續18 h。將反應混合物用水稀釋，用EtOAc萃取，乾燥（Na 2SO 4），過濾並在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在環己烷中的5%至50% EtOAc）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（632.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.17 (d, 1H), 8.08 - 8.03 (m, 1H), 4.37 - 4.30 (m, 2H), 2.14 - 2.06 (m, 2H), 1.32 - 1.30 (m, 6H)。
步驟 -3. 5,5- 二甲基 -3- 硝基 -6,7- 二氫 -5 H- 吡唑并 [5,1-b][1,3] 㗁 𠯤
Figure 02_image2509
在-78ºC下將LiHMDS（7.61 mL，7.61 mmol，1 M）逐滴添加到2-甲基-4-(4-硝基-1 H-吡唑-1-基)丁烷-2-醇（步驟-2，632.0 mg，3.17 mmol）在THF（9.61 mL）中的溶液中。將所得混合物在該溫度下攪拌2 h。添加全氯乙烷（901.0 mg，3.81 mmol）在THF（1.59 mL）中的溶液並將混合物升溫至22ºC持續18 h。將反應混合物用NH 4Cl（飽和水溶液）淬滅，並用DCM和EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（621.0 mg）。殘餘物不經進一步純化而用於下一步驟。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.96 (s, 1H), 4.17 (t, 2H), 2.18 (t, 2H), 1.63 - 1.58 (m, 6H)。
步驟 -4. 5,5- 二甲基 -6,7- 二氫 -5 H- 吡唑并 [5,1-b][1,3] 㗁 𠯤 -3- 胺
Figure 02_image2511
在配備有冷凝器的圓底燒瓶中，在劇烈攪拌下將鋅（119.4 mg，1.83 mmol）添加到氯化銨（97.7 mg，1.83 mmol）和5,5-二甲基-3-硝基-6,7-二氫-5 H-吡唑并[5,1-b][1,3]㗁𠯤（步驟-3，36.0 mg，0.18 mmol）在DCM（0.3 mL）和MeOH（0.3 mL）中的混合物中。將所得混合物在22ºC下劇烈攪拌2 h。濾出固體並將濾液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（在DCM中的0%至20% MeOH）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（10.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.15 (s, 1H), 4.09 (t, 2H), 2.65 (s, 2H), 2.05 (t, 2H), 1.46 - 1.43 (m, 6H)。
步驟 -5. (S)-N-(5,5- 二甲基 -6,7- 二氫 -5 H- 吡唑并 [5,1-b][1,3] 㗁 𠯤 -3- 基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2503
將HATU（23.5 mg，61.7 µmol）和5,5-二甲基-6,7-二氫-5 H-吡唑并[5,1-b][1,3]㗁𠯤-3-胺（步驟-4，10.3 mg，61.7 µmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，21.0 mg，56.1 µmol）和DIPEA（18.1 mg，0.14 mmol）在DMF（0.40 mL）中的溶液中。將所得溶液在22ºC下攪拌16 h。將反應混合物直接藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，5%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH）），以獲得呈固體的標題化合物（12.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.67 - 4.23 (m, 1H), 4.04 (t, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.33 (s, 2H), 2.90 (s, 1H), 2.37 - 2.13 (m, 1H), 2.07 (t, 2H), 1.79 (s, 1H), 1.69 - 1.47 (m, 1H), 1.42 - 1.38 (m, 6H), 1.34 - 1.17 (m, 1H), 1.13 - 0.46 (m, 3H)。 19F NMR (471 MHz, CD 3OD) δ -143.34。TLC-MS (APCI): [M+H] +: 524.2.
實例 499. (S)-N-((1-( 胺基甲基 )-2- 氧雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2514
步驟 -1. ((4-( 胺基甲基 )-2- 氧雜雙環 [2.1.1] 己烷 -1- 基 ) 甲基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2516
在0ºC下在劇烈攪拌下，將NaBH 4（31.8 mg，0.84 mmol）分批添加到((4-氰基-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-1-基)甲基)胺基甲酸三級丁酯（50.0 mg，0.21 mmol） [4]和六水合氯化鎳(II)（64.8 mg，0.27 mmol）在MeOH（4.20 mL）中的溶液中。完成添加後，使所得混合物升溫至22ºC並在該溫度下攪拌5 h。將反應混合物減壓濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱（在DCM中的0%至20% MeOH（2.5M氨））純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（38.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.88 (s, 1H), 3.54 (s, 2H), 3.40 (d, 2H), 2.00 (br s, 2H), 1.77 - 1.67 (m, 2H), 1.65 - 1.51 (m, 2H), 1.41 (s, 9H)。
步驟 -2. (S)-((4-((4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 羧醯胺 ) 甲基 )-2- 氧雜雙環 [2.1.1] 己烷 -1- 基 ) 甲基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2518
將HATU（39.1 mg，102.8 µmol）和((4-(胺基甲基)-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-1-基)甲基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-1，38.5 mg，158.9 µmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，35.0 mg，93.5 µmol）和DIPEA（49.0 µL，280.5 µmol）在DMF（0.3 mL）中的溶液中。將所得溶液在22ºC下攪拌16 h。將反應混合物直接藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，5%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH）），以獲得呈固體的標題化合物（35.2 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.27 (d, 1H), 8.01 - 7.91 (m, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.85 (t, 1H), 4.62 - 3.98 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.46 (s, 2H), 3.37 - 3.32 (m, 2H), 3.17 (s, 2H), 3.16 (s, 1H), 2.76 - 2.64 (m, 1H), 2.32 - 2.11 (m, 1H), 1.80 - 1.67 (m, 1H), 1.55 - 1.49 (m, 2H), 1.36 (s, 9H), 1.32 - 1.26 (m, 2H), 1.22 - 1.13 (m, 1H), 1.02 - 0.79 (m, 2H), 0.69 - 0.51 (m, 2H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO) δ -142.38。
步驟 -3. (S)-N-((1-( 胺基甲基 )-2- 氧雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2514
在0ºC下將HCl（250.6 µL，1.0 mmol，在1,4-二㗁𠮿中4 M）添加到 (S)-((4-((4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-羧醯胺)甲基)-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-1-基)甲基)胺基甲酸三級丁酯（步驟-2，30.0 mg，50.1 µmol）在MeOH（0.25 mL）中的溶液中。使反應混合物達到22ºC並攪拌2.5 h。在減壓下除去揮發物。將殘餘物溶解在DMF和三乙胺（48.9 µL，350.8 µmol）中。將所得溶液藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：C18柱，5%至95% MeOH/水（0.1% HCOOH）），並進一步藉由矽膠柱層析法（在DCM中的0%至20% MeOH（2.5 M氨））純化，以獲得呈固體的標題化合物（4.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.02 (d, 1H), 7.17 (d, 1H), 7.00 (d, 1H), 4.62 - 4.21 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.51 (s, 2H), 3.41 (s, 2H), 2.80 (s, 2H), 2.78 - 2.67 (m, 1H), 2.43 - 2.25 (m, 1H), 1.84 - 1.58 (m, 2H), 1.52 (dd, 2H), 1.42 (dd, 2H), 1.29 - 1.12 (m, 2H), 0.93 - 0.52 (m, 4H)。 19F NMR (376 MHz, CD 3OD) δ -144.95。
實例 500. ( S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-((2-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2521
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-[2-(三氟甲基)吡啶-3-基]甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（8/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（84.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.58 (d, 1H), 8.14 (d, 1H), 7.97 (d, 1H), 7.73 - 7.59 (m, 1H), 7.43 - 6.98 (m, 2H), 4.73 - 4.52 (m, 3H), 3.95 (s, 3H), 3.05 - 2.81 (m, 1H), 2.72 - 2.29 (m, 1H), 2.05 - 1.70 (m, 2H), 1.58 - 1.19 (m, 2H), 1.06 (s, 2H), 0.87 - 0.59 (m, 2H)。LCMS (ESI): 533.25 [M+H] +。
實例 501. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 R,3 R,4 S)-3- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 S,3 S,4 R)-3- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2523
步驟 -1. 5- 胺基 -2-( 三氟甲基 ) 苯酚
Figure 02_image2525
在0ºC下將BBr 3（28.3 mL，28.24 mmol）添加到3-甲氧基-4-(三氟甲基)苯胺（270.0 mg，1.41 mmol）在DCE（5.00 mL）中的溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（260.0 mg）。LCMS (ESI): 178.00 [M+H] +。
步驟 -2. 5- 胺基 -2-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1- 醇
Figure 02_image2527
將PtO 2（260.0 mg，1.15 mmol）添加到5-胺基-2-(三氟甲基)苯酚（步驟-1，260.0 mg，1.47 mmol）在AcOH（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（50.0 mg）。LCMS (ESI): 184.00 [M+H] +。
步驟 -3. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 R,3 R,4 S)-3- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 S,3 S,4 R)-3- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2523
將HOBt（49.8 mg，0.37 mmol），EDCI（70.6 mg，0.37 mmol），和5-胺基-2-(三氟甲基)環己烷-1-醇（步驟-2，45.0 mg，0.25 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，92.0 mg，0.25 mmol）和DIPEA（158.8 mg，1.23 mmol）在DMF（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：30 B至50 B，30 min內；220/254 nm），以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 R,3 R,4 S)-3-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 S,3 S,4 R)-3-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（40.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 501）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.22 - 8.00 (m, 1H), 7.46 - 7.16 (m, 1H), 7.14 - 7.04 (m, 1H), 4.74 - 4.37 (m, 1H), 4.36 - 4.27 (m, 1H), 4.20 - 4.04 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.91 - 2.65 (m, 1H), 2.46 - 2.21 (m, 2H), 2.15 - 1.73 (m, 5H), 1.71 - 1.51 (m, 3H), 1.48 - 1.24 (m, 2H), 1.19 - 0.85 (m, 2H), 0.84 - 0.62 (m, 2H)。LCMS (ESI): 540.20 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（40.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Amylose-SA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/DCM=70 : 30，保持17 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 501-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（10.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.72 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.46 - 7.18 (m, 1H), 7.11 (m, 1H), 4.73 - 4.50 (m, 1H), 4.43 - 4.25 (m, 1H), 4.19 - 4.03 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.87 - 2.69 (m, 1H), 2.46 - 2.24 (m, 2H), 2.10 - 1.74 (m, 5H), 1.73 - 1.55 (m, 3H), 1.49 - 1.22 (m, 3H), 1.16 - 0.86 (m, 2H), 0.85 - 0.62 (m, 2H)。LCMS (ESI): 540.30 [M+H] +。
實例 501-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（9.2 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為14.43 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.22 - 8.01 (m, 1H), 7.45 - 7.17 (m, 1H), 7.15 - 6.96 (m, 1H), 4.71 - 4.44 (m, 1H), 4.39 - 4.26 (m, 1H), 4.18 - 4.03 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.88 - 2.67 (m, 1H), 2.47 - 2.23 (m, 2H), 2.13 - 1.85 (m, 5H), 1.83 - 1.75 (m, 1H), 1.71 - 1.53 (m, 2H), 1.48 - 1.24 (m, 3H), 1.19 - 0.91 (m, 1H), 0.86 - 0.61 (m, 3H)。LCMS (ESI): 540.30 [M+H] +。
實例 502. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( S)-2-( 三氟甲基 )-5,6,7,8- 四氫咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( R)-2-( 三氟甲基 )-5,6,7,8- 四氫咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2530
步驟 -1. 8- 溴 -2-( 三氟甲基 ) 咪唑并 [1,2-a] 吡啶
Figure 02_image2532
將3-溴-1,1,1-三氟丙-2-酮（331.1 mg，1.73 mmol）添加到3-溴吡啶-2-胺（300.0 mg，1.73 mmol）在EtOH（4.00 mL）中的溶液中。將所得混合物在160ºC下回流1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，1/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（350.0 mg）。LCMS (ESI): 265.00 [M+H] +。
步驟 -2. N,N- 二苄基 -2-( 三氟甲基 ) 咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -8- 胺
Figure 02_image2534
將Pd-PEPPSI-iHeptCl（73.5 mg，0.08 mmol，CAS#：905459-27-0），Cs 2CO 3（491.7 mg，1.51 mmol）和二苄基胺（148.9 mg，0.76 mmol）添加到8-溴-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶（步驟-1，200.0 mg，0.76 mmol）在1,4-二㗁𠮿（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，1/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（250.0 mg）。LCMS (ESI): 382.00 [M+H] +。
步驟 -3. 2-( 三氟甲基 )-5 H,6 H,7 H,8 H- 咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -8- 胺
Figure 02_image2536
在0ºC下將Pd/C（114.9 mg，10%）添加到 N, N-二苄基-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-8-胺（步驟-2，230.0 mg，0.60 mmol）在MeOH（1.50 mL）和AcOH（0.50 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液減壓濃縮。將殘餘物藉由SiliaBond®丙磺酸（SCX-2）（用在MeOH（7 M）中的NH 3洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（120.0 mg）。LCMS (ESI): 206.00 [M+H] +。
步驟 -4. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( S)-2-( 三氟甲基 )-5,6,7,8- 四氫咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( R)-2-( 三氟甲基 )-5,6,7,8- 四氫咪唑并 [1,2-a] 吡啶 -8- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2530
將HOBt（59.3 mg，0.44 mmol），EDCI（84.1 mg，0.44 mmol），和2-(三氟甲基)-5H,6H,7H,8H-咪唑并[1,2-a]吡啶-8-胺（步驟-3，120.0 mg，0.58 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，109.5 mg，0.29 mmol）和DIPEA（189.0 mg，1.46 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至40 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(( S)-2-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(( R)-2-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（40.0 mg）（ 實例 502）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.21 - 8.04 (m, 1H), 7.59 - 7.46 (m, 1H), 7.37 - 7.21 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 5.18 - 5.04 (m, 1H), 4.68 - 4.47 (m, 1H), 4.18 - 4.02 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.92 - 2.76 (m, 1H), 2.71 - 2.29 (m, 1H), 2.28 - 2.09 (m, 3H), 2.09 - 1.94 (m, 1H), 1.93 - 1.83 (m, 1H), 1.83 - 1.67 (m, 1H), 1.59 - 1.15 (m, 2H), 1.14 - 0.85 (m, 2H), 0.84 - 0.64 (m, 2H)。LCMS (ESI): 562.30 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（40.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SC柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/DCM=50 : 50，保持10 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 502-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（10.3 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為7.66 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.42 - 7.20 (m, 1H), 7.14 - 7.00 (m, 1H), 5.18 - 5.02 (m, 1H), 4.74 - 4.22 (m, 1H), 4.19 - 4.01 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.94 - 2.77 (m, 1H), 2.67 - 2.29 (m, 1H), 2.26 - 1.96 (m, 4H), 1.95 - 1.72 (m, 2H), 1.46 - 1.15 (m, 3H), 1.14 - 0.95 (m, 1H), 0.83 - 0.58 (m, 2H)。LCMS (ESI): 562.30 [M+H] +。
實例 502-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（11.1 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.60 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.63 - 7.48 (m, 1H), 7.43 - 7.21 (m, 1H), 7.18 - 7.04 (m, 1H), 5.18 - 5.06 (m, 1H), 4.76 - 4.41 (m, 1H), 4.17 - 4.06 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.96 - 2.79 (m, 1H), 2.60 - 2.32 (m, 1H), 2.28 - 2.10 (m, 2H), 2.09 - 1.97 (m, 1H), 1.95 - 1.82 (m, 2H), 1.83 - 1.64 (m, 1H), 1.63 - 1.38 (m, 1H), 1.36 - 1.24 (m, 2H), 1.22 - 0.97 (m, 1H), 0.84 - 0.60 (m, 2H)。LCMS (ESI): 562.35 [M+H] +。
實例 503. ( S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-((4-( 三氟甲基 )-1 H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2538
步驟 -1. 5-( 三氟甲基 )-3 H- 咪唑 -4- 甲醛
Figure 02_image2540
將戴斯-馬丁氧化劑（1.02 g，2.41 mmol）添加到[5-(三氟甲基)-3 H-咪唑-4-基]甲醇（200.0 mg，1.20 mmol）在DCM（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（197.0 mg）。LCMS (ESI): 165.0 [M+H] +。
步驟 -2. 2- 甲基 - N-[(1 E)-[5-( 三氟甲基 )-3 H- 咪唑 -4- 基 ] 亞甲基 ] 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image2542
將三級丁烷亞磺醯胺（218.3 mg，1.80 mmol），PTSA（20.7 mg，0.12 mmol）和MgSO 4（433.5 mg，3.60 mmol）添加到5-(三氟甲基)-3H-咪唑-4-甲醛（步驟-1，197.0 mg，1.20 mmol）在DCM（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（320.0 mg）。LCMS (ESI): 268.0 [M+H] +。
步驟 -3. 2- 甲基 - N-{[5-( 三氟甲基 )-3 H- 咪唑 -4- 基 ] 甲基 } 丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image2544
將NaBH 4（90.6 mg，2.39 mmol）添加到2-甲基- N-[(1 E)-[5-(三氟甲基)-3 H-咪唑-4-基]亞甲基]丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-2，320.0 mg，1.20 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（154.0 mg）。LCMS (ESI): 270.0 [M+H] +。
步驟 -4. 1-[5-( 三氟甲基 )-3 H- 咪唑 -4- 基 ] 甲胺
Figure 02_image2546
將2-甲基- N-{[5-(三氟甲基)-3 H-咪唑-4-基]甲基}丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-3，154.0 mg，0.57 mmol）在HCl（氣態）/1,4-二㗁𠮿（5.00 mL）中的溶液在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈固體的標題化合物並且不經進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 166.0 [M+H] +。
步驟 -5. ( S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-((4-( 三氟甲基 )-1 H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2538
將HOBt（76.9 mg，0.57 mmol），EDCI（109.1 mg，0.57 mmol），1-[5-(三氟甲基)-3 H-咪唑-4-基]甲胺（步驟-4，93.9 mg，0.57 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，142.0 mg，0.38 mmol）和DIPEA（294.1 mg，2.27 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層減壓濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM /MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（117.2 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.51 - 7.17 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.71 - 4.53 (m, 1H), 4.51 - 4.42 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.97 - 2.75 (m, 1H), 2.56 - 2.20 (m, 1H), 1.99 - 1.58 (m, 2H), 1.39 - 1.18 (m, 2H), 1.13 - 0.87 (m, 2H), 0.81 - 0.61 (m, 2H)。LCMS (ESI): 522.30 [M+H] +。
實例 504. ( S)- N-((1 S,2 R,4 S)-2,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 ( S)- N-((1 S,2 S,4 S)-2,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 ( S)- N-((1 R,2 R,4 S)-2,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 ( S)- N-((1 R,2 S,4 S)-2,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 ( S)- N-((1 S,2 R,4 R)-2,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 ( S)- N-((1 S,2 S,4 R)-2,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 ( S)- N-((1 R,2 R,4 R)-2,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 ( S)- N-((1 R,2 S,4 R)-2,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2548
步驟 -1. 5- 羥基 -2- 側氧基 -5-( 三氟甲基 ) 環己基苯甲酸酯
Figure 02_image2550
將甲基胺基苯甲酸酯（332.0 mg，2.20 mmol）添加到4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-酮（400.0 mg，2.20 mmol）在DMSO（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（2/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（637.0 mg）。LCMS (ESI): 303.0 [M+H] +。
步驟 -2. 2- 胺基 -5- 羥基 -5-( 三氟甲基 ) 環己基苯甲酸酯
Figure 02_image2552
將NaBH 3CN（675.7 mg，10.76 mmol）和NH 4OAc（3.32 g，43.02 mmol）添加到5-羥基-2-側氧基-5-(三氟甲基)環己基苯甲酸酯（步驟-1，630.0 mg，2.15 mmol）在EtOH（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（310.0 mg）。LCMS (ESI): 304.1 [M+H] +。
步驟 -3. 4- 胺基 -1-( 三氟甲基 ) 環己烷 -1,3- 二醇
Figure 02_image2554
將氫氧化鋰（124.5 mg，2.97 mmol）添加到2-胺基-5-羥基-5-(三氟甲基)環己基苯甲酸酯（步驟-2，300.0 mg，0.99 mmol）在THF（2.00 mL）/MeOH（2.00 mL）/H 2O（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在100ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將該殘餘物藉由丙磺酸（SCX-2）（用NH 3-MeOH（7 M）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（190.0 mg）。LCMS (ESI): 200.0 [M+H] +。
步驟 -4. ( S)- N-((1 S,2 R,4 S)-2,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 ( S)- N-((1 S,2 S,4 S)-2,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 ( S)- N-((1 R,2 R,4 S)-2,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 ( S)- N-((1 R,2 S,4 S)-2,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 ( S)- N-((1 S,2 R,4 R)-2,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 ( S)- N-((1 S,2 S,4 R)-2,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 ( S)- N-((1 R,2 R,4 R)-2,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 ( S)- N-((1 R,2 S,4 R)-2,4- 二羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2548
將HOBt（57.0 mg，0.42 mmol，1.5當量），EDCI（80.8 mg，0.42 mmol），和4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1,3-二醇（步驟-3，111.9 mg，0.56 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，105.2 mg，0.28 mmol）和DIPEA（109.0 mg，0.84 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)- N-((1 S,2 R,4 S)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和( S)- N-((1 S,2 S,4 S)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( S)- N-((1 R,2 R,4 S)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和( S)- N-((1 R,2 S,4 S)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和( S)- N-((1 S,2 R,4 R)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( S)- N-((1 S,2 S,4 R)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和( S)- N-((1 R,2 R,4 R)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和( S)- N-((1 R,2 S,4 R)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（150.0 mg），其為(7S)-N-[2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基]-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（呈淡黃色油狀物）的非鏡像異構物的油狀混合物。LCMS (ESI): 556.2 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該八種非鏡像異構物的混合物（150.0 mg）。
柱：XBridge製備型OBD C18柱
柱尺寸：30 x 150 mm，5 µm
流動相：水（10 mM NH 4HCO 3）: MeCN=79:21至69:31，持續8 min
流速：20 mL/min
檢測：254 nm
實例 504-A.獲得第一洗脫峰（37.0 mg），其為四種非鏡像異構物的固體混合物。
第一洗脫峰的保留時間為10.00 min。
LCMS (ESI): 556.2 [M+H] +。
實例 504-B.獲得第二洗脫峰（77.0 mg），其為四種非鏡像異構物的固體混合物。
第二洗脫峰的保留時間為13.00 min。
LCMS (ESI): 556.2 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離第一洗脫峰（33.0 mg），其中含有來自第一次分離的標題化合物的四種非鏡像異構物。
柱：CHIRAL ART Amylose-SA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/EtOH=60:40，保持22 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 504-C.獲得第一洗脫峰（7.9 mg），其為兩種非鏡像異構物的固體混合物。
第一洗脫峰的保留時間為11.52 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (s, 1H), 7.42 - 7.19 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.70 - 4.42 (m, 1H), 4.26 - 4.15 (m, 1H), 4.14 - 4.04 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.15 - 2.93 (m, 1H), 2.55 - 2.24 (m, 1H), 1.99 - 1.77 (m, 5H), 1.78 - 1.65 (m, 2H), 1.64 - 1.54 (m, 1H), 1.42 - 1.24 (m, 2H), 1.14 - 0.97 (m, 1H), 0.83 - 0.68 (m, 3H)。LCMS (ESI): 556.25 [M+H] +。
實例 504-D.獲得第二洗脫峰（8.0 mg），其為兩種非鏡像異構物的固體混合物。
第二洗脫峰的保留時間為16.53 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.44 - 7.19 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.74 - 4.42 (m, 1H), 4.24 - 4.16 (m, 1H), 4.14 - 4.05 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.22 - 2.95 (m, 1H), 2.62 - 2.28 (m, 1H), 2.01 - 1.77 (m, 5H), 1.76 - 1.66 (m, 2H), 1.65 - 1.56 (m, 1H), 1.43 - 1.20 (m, 2H), 1.12 - 0.96 (m, 1H), 0.86 - 0.64 (m, 3H)。LCMS (ESI): 556.25 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離第二洗脫峰（77.0 mg），其中含有來自第一次分離的標題化合物的四種非鏡像異構物。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SB柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/EtOH=80:20，保持31 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 504-E.獲得第一洗脫峰（18.7 mg），其為兩種非鏡像異構物的固體混合物。
第一洗脫峰的保留時間為24.86 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.71 - 4.43 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.83 - 3.70 (m, 1H), 3.69 - 3.54 (m, 1H), 2.94 - 2.74 (m, 1H), 2.59 - 2.30 (m, 1H), 2.28 - 2.09 (m, 1H), 2.02 - 1.74 (m, 3H), 1.74 - 1.62 (m, 3H), 1.62 - 1.52 (m, 1H), 1.42 - 1.22 (m, 2H), 1.13 - 0.86 (m, 2H), 0.83 - 0.65 (m, 2H)。LCMS (ESI): 556.25 [M+H] +。
實例 504-F.獲得第二洗脫峰（13.9 mg），其為兩種非鏡像異構物的固體混合物。
第二洗脫峰的保留時間為29.05 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.71 - 4.36 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.83 - 3.70 (m, 1H), 3.69 - 3.55 (m, 1H), 2.99 - 2.73 (m, 1H), 2.62 - 2.32 (m, 1H), 2.28 - 2.12 (m, 1H), 1.99 - 1.74 (m, 4H), 1.75 - 1.63 (m, 2H), 1.61 - 1.49 (m, 1H), 1.44 - 1.26 (m, 2H), 1.18 - 0.88 (m, 2H), 0.88 - 0.62 (m, 2H)。LCMS (ESI): 556.25 [M+H] +。
實例 505. ( S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-((3-( 三氟甲基 ) 異㗁唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2557
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-[3-(三氟甲基)-1,2-㗁唑-4-基]甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：30 B至50 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（84.9 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.88 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.39 - 7.15 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.70 - 4.42 (m, 1H), 4.41 - 4.23 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.95 - 2.72 (m, 1H), 2.60 - 2.18 (m, 1H), 2.07 - 1.46 (m, 2H), 1.47 - 1.17 (m, 2H), 1.18 - 0.97 (m, 1H), 0.83 - 0.52 (m, 3H)。LCMS (ESI): 523.20 [M+H] +。
實例 506. ( S)- N-((3- 環丙基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(3-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( R)- N-((3- 環丙基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(3-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的鏡像異構物混合物
Figure 02_image2559
步驟 -1. 3- 環丙基吡啶 -2- 甲腈
Figure 02_image2561
將環丙基三氟-λ 4-硼烷鉀（646.9 mg，4.37 mmol），Pd(dppf)Cl 2（319.9 mg，0.44 mmol）和Cs 2CO 3（1424.3 mg，4.37 mmol）添加到3-溴吡啶-2-甲腈（400.0 mg，2.19 mmol）在甲苯（5.00 mL）和H 2O（0.50 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在110ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（20/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（320.0 mg）。LCMS (ESI): 145.00 [M+H] +。
步驟 -2. 1-(3- 環丙基吡啶 -2- 基 ) 甲胺
Figure 02_image2563
在0ºC下，將LiAlH 4（168.5 mg，4.44 mmol）添加到3-環丙基吡啶-2-甲腈（步驟-1，320.0 mg，2.22 mmol）在THF（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在0ºC下在氮氣氣氛下攪拌1 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（300.0 mg）。LCMS (ESI): 149.00 [M+H] +。
步驟 -3. ( S)- N-((3- 環丙基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(3-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( R)- N-((3- 環丙基吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(3-(5- 氟 -2- 甲基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2559
將HOBt（157.3 mg，1.164mmol），EDCI（223.1 mg，1.16 mmol），和1-(3-環丙基吡啶-2-基)甲胺（步驟-2，115.0 mg，0.78 mmol）添加到4-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體526，278.1 mg，0.78 mmol）和DIPEA（501.4 mg，3.88 mmol）在DMF（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至40 B，30 min內；220/254 nm），以獲得( S)- N-((3-環丙基吡啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( R)- N-((3-環丙基吡啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（92.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 506）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.51 - 8.38 (m, 1H), 8.36 - 8.24 (m, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.53 - 7.39 (m, 1H), 7.33 - 7.20 (m, 1H), 7.19 - 7.02 (m, 1H), 4.78 - 4.64 (m, 3H), 4.63 - 4.47 (m, 1H), 3.05 - 2.84 (m, 1H), 2.72 - 2.53 (m, 3H), 2.52 - 2.34 (m, 1H), 2.10 - 1.88 (m, 2H), 1.87 - 1.68 (m, 1H), 1.49 - 1.28 (m, 1H), 1.19 - 0.89 (m, 4H), 0.84 - 0.65 (m, 4H)。LCMS (ESI): 489.25 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（92.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ID柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/DCM=50 : 50，保持14 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 506-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（27.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.66 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.42 (s, 1H), 8.36 - 8.21 (m, 1H), 7.98 - 7.61 (m, 1H), 7.53 - 7.41 (m, 1H), 7.32 - 7.22 (m, 1H), 7.20 - 7.09 (m, 1H), 4.79 - 4.66 (m, 2H), 4.62 - 4.49 (m, 1H), 3.21 - 2.71 (m, 2H), 2.58 (s, 3H), 2.53 - 2.29 (m, 1H), 2.10 - 1.89 (m, 2H), 1.87 - 1.69 (m, 1H), 1.49 - 1.25 (m, 2H), 1.15 - 0.94 (m, 3H), 0.85 - 0.66 (m, 4H)。LCMS (ESI): 489.45 [M+H] +。
實例 506-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（22.0 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為11.58 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.51 - 8.37 (m, 1H), 8.37 - 8.26 (m, 1H), 8.01 - 7.64 (m, 1H), 7.53 - 7.42 (m, 1H), 7.32 - 7.22 (m, 1H), 7.15 (s, 1H), 4.78 - 4.67 (m, 2H), 4.62 - 4.47 (m, 1H), 3.19 - 2.72 (m, 2H), 2.67 - 2.53 (m, 3H), 2.52 - 2.33 (m, 1H), 2.10 - 1.65 (m, 3H), 1.51 - 1.22 (m, 2H), 1.17 - 0.90 (m, 3H), 0.84 - 0.60 (m, 4H)。LCMS (ESI): 489.40 [M+H] +。
實例 507. ( S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-((1- 甲基 -4-( 三氟甲基 )-1 H- 吡唑 -5- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2566
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-[2-甲基-4-(三氟甲基)吡唑-3-基]甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（117.1 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (s, 1H), 8.42 - 8.21 (m, 2H), 7.78 (s, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.49 - 4.31 (m, 3H), 3.95 - 3.76 (m, 6H), 3.25 - 2.95 (m, 1H), 2.84 - 2.65 (m, 1H), 2.27 - 2.02 (m, 1H), 1.93 - 1.65 (m, 1H), 1.54 (s, 1H), 1.33 - 1.11 (m, 1H), 1.08 - 0.81 (m, 2H), 0.73 - 0.39 (m, 2H)。LCMS (ESI): 536.15 [M+H] +。
實例 508. ( S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-((1- 甲基 -5-( 三氟甲基 )-1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2568
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-[1-甲基-5-(三氟甲基)-1,2,3-三唑-4-基]甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至50 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（85.3 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.24 - 13.78 (m, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.42 - 7.22 (m, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.74 - 4.36 (m, 3H), 4.25 - 4.03 (m, 3H), 3.88 (s, 3H), 2.99 - 2.70 (m, 1H), 2.27 - 2.03 (m, 1H), 1.92 - 1.64 (m, 1H), 1.61 - 1.38 (m, 1H), 1.33 - 1.12 (m, 2H), 1.05 - 0.74 (m, 2H), 0.70 - 0.59 (m, 2H)。LCMS (ESI): 537.50 [M+H] +。
實例 509. ( S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-((1- 甲基 -3-( 三氟甲基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2570
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-[1-甲基-3-(三氟甲基)吡唑-4-基]甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（100.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.15 - 6.98 (m, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.30 (s, 2H), 3.93 (d, 6H), 2.82 (s, 1H), 2.40 (s, 1H), 2.08 - 1.55 (m, 2H), 1.16 (d, 3H), 0.72 (s, 3H)。LCMS (ESI): 536.25 [M+H] +。
實例 510. ( S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-((3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2572
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（80.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.84 - 8.72 (m, 1H), 8.22 - 8.04 (m, 2H), 7.56 - 7.45 (m, 1H), 7.43 - 7.16 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.78 - 4.60 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.11 - 2.77 (m, 2H), 2.78 - 2.18 (m, 1H), 2.12 - 1.67 (m, 2H), 1.53 - 1.21 (m, 2H), 1.18 - 0.95 (m, 1H), 0.94 - 0.54 (m, 3H)。LCMS (ESI): 533.20 [M+H] +。
實例 511. ( S)- N-((( S)-3,3- 二氟哌啶 -4- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( S)- N-((( R)-3,3- 二氟哌啶 -4- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2574
步驟 -1. 3,3- 二氟 -4-({[(7 S)-4-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 基 ] 甲醯胺基 } 甲基 ) 哌啶 -1- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2576
將EDCI（77.0 mg，0.40 mmol），HOBt（55.0 mg，0.40 mmol），和4-(胺基甲基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸三級丁酯（67.0 mg，0.27 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，100.0 mg，0.27 mmol）和DIPEA（173.0 mg，1.34 mmol）在DMF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（140 mg）。LCMS (ESI): 607 [M+H] +。
步驟 -2. ( S)- N-((( S)-3,3- 二氟哌啶 -4- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( S)- N-((( R)-3,3- 二氟哌啶 -4- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2574
在0ºC下將TFA（3.00 mL）添加到3,3-二氟-4-({[(7 S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基]甲醯胺基}甲基)哌啶-1-甲酸三級丁酯（步驟-1，130.0 mg，0.21 mmol）在DCM（3.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)- N-((( S)-3,3-二氟哌啶-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( S)- N-((( R)-3,3-二氟哌啶-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（95.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 511）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.94 - 7.84 (m, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 4.68 - 4.22 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.45 - 3.35 (m, 1H), 3.07 - 2.93 (m, 2H), 2.90 - 2.80 (m, 1H), 2.75 - 2.59 (m, 2H), 2.46 - 2.32 (m, 2H), 2.30 - 2.13 (m, 1H), 2.11 - 1.92 (m, 1H), 1.82 - 1.64 (m, 2H), 1.62 - 1.40 (m, 1H), 1.32 - 1.11 (m, 2H), 1.06 - 0.78 (m, 2H), 0.70 - 0.52 (m, 2H)。LCMS (ESI): 507.25 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（50.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Amylose-SA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/DCM=40 : 60，保持22 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 511-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（22.7 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為14.49 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (d, 1H), 7.35 - 7.20 (m, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.75 - 4.36 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.59 - 3.49 (m, 1H), 3.28 - 3.19 (m, 1H), 3.16 - 3.06 (m, 2H), 3.05 - 2.98 (m, 1H), 2.88 - 2.51 (m, 3H), 2.51 - 2.28 (m, 1H), 2.25 - 2.07 (m, 1H), 2.06 - 1.54 (m, 3H), 1.53 - 1.38 (m, 1H), 1.37 - 0.83 (m, 3H), 0.81 - 0.61 (m, 2H)。LCMS (ESI): 507.25 [M+H] +。
實例 511-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（17.5 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為18.59 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (d, 1H), 7.34 - 7.23 (m, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.74 - 4.32 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.60 - 3.47 (m, 1H), 3.29 - 3.19 (m, 1H), 3.17 - 3.06 (m, 2H), 3.06 - 2.97 (m, 1H), 2.89 - 2.68 (m, 2H), 2.63 - 2.52 (m, 1H), 2.51 - 2.31 (m, 1H), 2.26 - 2.07 (m, 1H), 1.98 - 1.57 (m, 3H), 1.52 - 1.39 (m, 1H), 1.36 - 0.86 (m, 3H), 0.82 - 0.65 (m, 2H)。LCMS (ESI): 507.25 [M+H] +。
實例 512. ( S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-((5- 氟嘧啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2579
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-(5-氟嘧啶-2-基)甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（122.2 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.99 (s, 1H), 8.85 (s, 2H), 8.54 - 8.38 (m, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.74 - 4.24 (m, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.24 - 2.93 (m, 1H), 2.90 - 2.73 (m, 1H), 2.38 - 2.08 (m, 1H), 1.95 - 1.72 (m, 1H), 1.67 - 1.44 (m, 1H), 1.39 - 1.15 (m, 1H), 1.11 - 0.78 (m, 2H), 0.75 - 0.42 (m, 2H)。LCMS (ESI): 484.20 [M+H] +。
實例 513. ( S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-((2-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2581
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-[2-(三氟甲基)吡啶-3-基]甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（8/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（84.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.58 (d, 1H), 8.14 (d, 1H), 7.97 (d, 1H), 7.73 - 7.59 (m, 1H), 7.43 - 6.98 (m, 2H), 4.73 - 4.52 (m, 3H), 3.95 (s, 3H), 3.05 - 2.81 (m, 1H), 2.72 - 2.29 (m, 1H), 2.05 - 1.70 (m, 2H), 1.58 - 1.19 (m, 2H), 1.06 (s, 2H), 0.87 - 0.59 (m, 2H)。LCMS (ESI): 533.25 [M+H] +。
實例 514. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( S)-5- 羥基 -4,5,6,7- 四氫吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( R)-5- 羥基 -4,5,6,7- 四氫吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2583
步驟 -1. 5- 甲氧基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 甲酸
Figure 02_image2585
將LiOH.H 2O（267.0 mg，6.36 mmol）添加到5-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲酸乙酯（700.0 mg，3.18 mmol）在THF（3.00 mL），MeOH（3.00 mL），和H 2O（3.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。用HCl（水溶液）將混合物酸化至pH 3。將水層用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（550.0 mg）。LCMS (ESI): 193 [M+H] +。
步驟 -2. N -{5- 甲氧基吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 基 } 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2587
將DPPA（1.97 g，7.16 mmol）， t-BuOH（2.76 g，37.21 mmol）和DIPEA（1.48 g，11.45 mmol）添加到5-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲酸（步驟-1，550.0 mg，2.86 mmol）在甲苯（10.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在110ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（500.0 mg）。LCMS (ESI): 264 [M+H] +。
步驟 -3. N -{5- 甲氧基 -4 H,5 H,6 H,7 H- 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 基 } 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image2589
將Pd/C（30.0 mg，10%）添加到 N-{5-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基}胺基甲酸三級丁酯（步驟-2，120.0 mg，0.38 mmol）在MeOH（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在80ºC下在20 psi的氫氣壓下攪拌14 h。藉由過濾濾出固體並用MeOH洗滌。將所得濾液在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（95.0 mg）。LCMS (ESI): 268 [M+H] +。
步驟 -4. 5- 甲氧基 -4 H,5 H,6 H,7 H- 吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 胺
Figure 02_image2591
將TFA（3.00 mL）添加到 N-{5-甲氧基-4 H,5 H,6 H,7 H-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基}胺基甲酸三級丁酯（步驟-3，90.0 mg，0.34 mmol）在DCM（3.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮以獲得呈油狀物的標題化合物（60.0 mg）。LCMS (ESI): 168 [M+H] +。
步驟 -5. 5-[5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1-{[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 } 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1r,4r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-5- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -8- 甲醯胺
Figure 02_image2593
將EDCI（103.0 mg，0.54 mmol），HOBt（72.7 mg，0.54 mmol），和5-甲氧基-4 H,5 H,6 H,7 H-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-胺（步驟-4，60.0 mg，0.36 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，134.0 mg，0.36 mmol）和DIPEA（232.0 mg，1.80 mmol）在DMF（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（110.0 mg）。LCMS (ESI): 524 [M+H] +。
步驟 -6. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( S)-5- 羥基 -4,5,6,7- 四氫吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( R)-5- 羥基 -4,5,6,7- 四氫吡唑并 [1,5-a] 吡啶 -3- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2583
將BBr 3（526.0 mg，2.10 mmol）添加到(7 S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]- N-{5-甲氧基-4 H,5 H,6 H,7 H-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基}-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-5，110.0 mg，0.21 mmol）在DCE（5.00 mL）中的混合物中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(( S)-5-羥基-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(( R)-5-羥基-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（100.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 514）。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.93 (s, 1H), 9.26 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.09 - 7.00 (m, 1H), 5.06 (d, 1H), 4.70 - 4.28 (m, 1H), 4.15 - 4.04 (m, 2H), 4.04 - 3.96 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.97 - 2.87 (m, 1H), 2.86 - 2.79 (m, 1H), 2.61 - 2.55 (m, 1H), 2.36 - 2.12 (m, 1H), 2.08 - 1.98 (m, 1H), 1.97 - 1.90 (m, 1H), 1.88 - 1.76 (m, 1H), 1.72 - 1.45 (m, 2H), 1.41 - 1.16 (m, 1H), 1.13 - 0.82 (m, 2H), 0.78 - 0.47 (m, 2H)。LCMS (ESI): 510.25 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（1100.0 mg）。
柱：CHIRALPAK IE柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/DCM=50 : 50，保持27 min
流速：18 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 514-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（27.3 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為16.48 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.99 (s, 1H), 9.26 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.05 (s, 1H), 5.05 (d, 1H), 4.68 - 4.30 (m, 1H), 4.15 - 4.04 (m, 2H), 4.04 - 3.95 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.97 - 2.73 (m, 2H), 2.36 - 2.13 (m, 1H), 2.07 - 1.98 (m, 1H), 1.97 - 1.90 (m, 1H), 1.88 - 1.73 (m, 1H), 1.71 - 1.49 (m, 2H), 1.42 - 1.17 (m, 2H), 1.13 - 0.79 (m, 2H), 0.76 - 0.43 (m, 2H)。LCMS (ESI): 510.25 [M+H] +。
實例 514-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（29.5 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為22.15 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 9.26 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.05 (s, 1H), 5.05 (d, 1H), 4.73 - 4.21 (m, 1H), 4.15 - 4.04 (m, 2H), 4.02 - 3.95 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.96 - 2.87 (m, 1H), 2.87 - 2.76 (m, 1H), 2.69 - 2.55 (m, 1H), 2.36 - 2.13 (m, 1H), 2.08 - 1.98 (m, 1H), 1.97 - 1.89 (m, 1H), 1.89 - 1.74 (m, 1H), 1.70 - 1.48 (m, 1H), 1.37 - 1.16 (m, 2H), 1.12 - 0.79 (m, 2H), 0.74 - 0.62 (m, 2H)。LCMS (ESI): 510.25 [M+H] +。
實例 515. ( S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-((3-( 三氟甲基 ) 雙環 [1.1.1] 戊 -1- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2595
使用與對於實例430的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-[3-(三氟甲基)雙環[1.1.1]戊-1-基]甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（80.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.20 - 13.67 (m, 1H), 8.36 - 8.18 (m, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.53 (s, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.26 - 3.14 (m, 2H), 2.84 - 2.61 (m, 1H), 2.36 - 2.07 (m, 1H), 1.95 - 1.68 (m, 7H), 1.66 - 1.42 (m, 1H), 1.38 - 1.07 (m, 2H), 1.06 - 0.77 (m, 2H), 0.75 - 0.48 (m, 2H)。LCMS (ESI): 552.25 [M+H] +。
實例 516. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((4-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2597
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-[4-(三氟甲基)吡啶-3-基]甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（112.2 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (d, 1H), 8.82 - 8.68 (m, 2H), 8.51 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.72 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.68 - 4.24 (m, 3H), 3.88 (s, 3H), 2.92 - 2.73 (m, 1H), 2.36 - 2.11 (m, 1H), 2.00 - 1.75 (m, 1H), 1.68 - 1.46 (m, 1H), 1.41 - 1.19 (m, 2H), 1.09 - 0.82 (m, 2H), 0.76 - 0.49 (m, 2H)。LCMS (ESI): 533.25 [M+H] +。
實例 517. ( S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-((2- 甲基 -4-( 三氟甲基 ) 噻唑 -5- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2599
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-[2-甲基-4-(三氟甲基)-1,3-噻唑-5-基]甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（77.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.50 - 7.01 (m, 2H), 4.64 (s, 3H), 3.95 (s, 3H), 2.92 - 2.76 (m, 1H), 2.76 - 2.57 (m, 3H), 2.55 - 2.27 (m, 1H), 2.10 - 1.58 (m, 2H), 1.45 - 1.20 (m, 2H), 1.18 - 0.96 (m, 1H), 0.96 - 0.58 (m, 3H)。LCMS (ESI): 553.15 [M+H] +。
實例 518. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( R)-1-( 羥基甲基 )-3- 甲基 -2- 氧雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(( S)-1-( 羥基甲基 )-3- 甲基 -2- 氧雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2601
使用與對於實例430的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用{4-胺基-3-甲基-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-1-基}甲醇作為起始材料。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(( R)-1-(羥基甲基)-3-甲基-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-(( S)-1-(羥基甲基)-3-甲基-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（50.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 518）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (d, 1H), 8.36 - 8.22 (m, 2H), 7.32 (d, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.74 - 4.61 (m, 1H), 4.58 - 4.30 (m, 1H), 4.18 (d, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.50 (d, 2H), 2.26 - 2.04 (m, 1H), 1.92 - 1.40 (m, 5H), 1.33 - 1.22 (m, 2H), 1.21 - 1.11 (m, 2H), 1.07 - 0.92 (m, 3H), 0.89 - 0.78 (m, 1H), 0.74 - 0.63 (m, 1H), 0.60 - 0.51 (m, 1H)。LCMS (ESI): 500.25 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（50.0 mg）。
柱：CHIRAL ART Cellulose-SC柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: 1/1 EtOH/DCM=50:50，保持13.5 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 518-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（18.4 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.55 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.97 (d, 1H), 8.36 - 8.21 (m, 2H), 7.32 (d, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.71 - 4.60 (m, 1H), 4.59 - 4.34 (m, 1H), 4.24 - 4.14 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.53 - 3.47 (m, 2H), 2.23 - 2.04 (m, 1H), 1.91 - 1.77 (m, 3H), 1.77 - 1.67 (m, 2H), 1.61 - 1.44 (m, 1H), 1.31 - 1.13 (m, 3H), 1.07 - 0.93 (m, 3H), 0.90 - 0.78 (m, 1H), 0.73 - 0.62 (m, 1H), 0.60 - 0.51 (m, 1H)。LCMS (ESI): 500.25 [M+H] +。
實例 518-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（16.5 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為12.08 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.36 - 8.22 (m, 2H), 7.33 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 4.74 - 4.60 (m, 1H), 4.57 - 4.27 (m, 1H), 4.26 - 4.11 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.50 (d, 2H), 2.29 - 2.03 (m, 1H), 1.89 - 1.79 (m, 3H), 1.77 - 1.68 (m, 2H), 1.61 - 1.42 (m, 1H), 1.30 - 1.10 (m, 2H), 1.08 - 0.92 (m, 4H), 0.88 - 0.78 (m, 1H), 0.71 - 0.52 (m, 2H)。LCMS (ESI): 500.25 [M+H] +。
實例 519. ( S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-((1-( 三氟甲基 )-1 H- 咪唑 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2603
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-[1-(三氟甲基)咪唑-2-基]甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：10 B至50 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（102.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (s, 1H), 7.65 - 7.45 (m, 1H), 7.41 - 7.16 (m, 1H), 7.15 - 7.04 (m, 2H), 4.75 - 4.41 (m, 3H), 4.08 - 3.83 (m, 3H), 2.99 - 2.82 (m, 1H), 2.68 - 2.26 (m, 1H), 2.21 - 1.55 (m, 2H), 1.50 - 1.20 (m, 2H), 1.18 - 0.97 (m, 1H), 0.95 - 0.71 (m, 3H)。LCMS (ESI): 522.20 [M+H] +。
實例 520. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-(1-( 羥基甲基 )-2- 氧雜雙環 [2.1.1] 己烷 -4- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2605
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用{4-胺基-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-1-基}甲醇作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至50 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（88.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.45 - 7.17 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.76 - 4.45 (m, 1H), 4.20 - 3.91 (m, 3H), 3.81 (s, 2H), 3.78 - 3.62 (m, 2H), 2.95 - 2.69 (m, 1H), 2.48 - 2.21 (m, 1H), 2.15 - 2.00 (m, 2H), 1.96 - 1.83 (m, 2H), 1.83 - 1.62 (m, 1H), 1.45 - 1.27 (m, 2H), 1.20 - 1.00 (m, 2H), 0.97 - 0.84 (m, 1H), 0.82 - 0.71 (m, 2H)。LCMS (ESI): 486.15 [M+H] +。
實例 521. ( S)- N-((3- 氯 -5-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2607
步驟 -1. 3- 氯 -5-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 吡啶 -2- 甲腈
Figure 02_image2609
將1-甲基-哌𠯤（128.0 mg，1.28 mmol）和DIPEA（330.3 mg，2.56 mmol）添加到3-氯-5-氟吡啶-2-甲腈（200.0 mg，1.28 mmol）在DMSO（4.00 mL）中的溶液中。將溶液在120ºC下攪拌2 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH 10/1 v/v）純化以獲得呈固體的標題化合物（290.0 mg）。LCMS (ESI): 237.1 [M+H] +。
步驟 -2. 1-[3- 氯 -5-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ] 甲胺。
Figure 02_image2611
將DIBAL-H（721.0 mg，5.07 mmol）添加到3-氯-5-(4-甲基哌𠯤-1-基)吡啶-2-甲腈（步驟-1，150.0 mg，0.63 mmol）在THF（10.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在-78ºC下攪拌1 h，然後將溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，5/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（80.0 mg）。LCMS (ESI): 241.1 [M+H] +。
步驟 -3. ( S)- N-((3- 氯 -5-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2607
將HOBt（54.7 mg，0.41 mmol），EDCI（77.6 mg，0.41 mmol），和1-[3-氯-5-(4-甲基哌𠯤-1-基)吡啶-2-基]甲胺（步驟-2，65.0 mg，0.27 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，101.1 mg，0.27 mmol）和DIPEA（174.5 mg，1.35 mmol）在DMF（2.00 mL）中的溶液中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（DCM/MeOH，10/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（100.0 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.98 (s, 1H), 8.32 - 8.07 (m, 3H), 7.45 - 7.38 (m, 1H), 7.35 - 7.27 (m, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.63 - 4.21 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.27 - 3.15 (m, 4H), 2.89 - 2.66 (m, 1H), 2.46 - 2.37 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 1.89 - 1.68 (m, 1H), 1.65 - 1.43 (m, 1H), 1.34 - 1.11 (m, 3H), 1.05 - 0.89 (m, 2H), 0.89 - 0.75 (m, 1H), 0.73 - 0.53 (m, 2H)。LCMS (ESI): 597.25 [M+H] +。
實例 522. ( S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-((1- 羥基 -3,3- 二甲基 -1,3- 二氫苯并 [c][1,2] 氧雜硼雜環戊烯 -6- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2614
使用與對於實例430的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用6-(胺基甲基)-3,3-二甲基苯并[c][1,2]氧雜硼雜環戊烯-1(3H)-醇作為起始材料。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：Atlantis T3製備型OBD柱，19 x 100 mm 5 μm，流動相A：水（0.1% FA），流動相B：MeCN（0.1% FA）；流速：30 mL/min；梯度：40% B至50% B，8 min內；波長：254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（4.4 mg）。1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ ppm 8.12 (br s, 1 H) 7.49 (br s, 1 H) 7.36 (br s, 1 H) 7.28 (d, 2 H) 7.10 (br s, 1 H) 5.02-4.96 (m, 2 H) 4.38 (s, 2 H) 3.93 (s, 3 H) 3.53-3.48 (m, 1 H) 2.84 (br s, 1 H) 1.92-1.88 (m, 2 H) 1.49 (s, 6 H) 1.33-1.29 (m, 2 H) 0.71 (br s, 2 H)。LCMS (ESI): 548.12 [M+H] +。
實例 523. ( S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-(1- 羥基 -1,3- 二氫苯并 [c][1,2] 氧雜硼雜環戊烯 -5- 基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2616
使用與對於實例430的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用5-胺基苯并[c][1,2]氧雜硼雜環戊烯-1(3H)-醇作為起始材料。將殘餘物藉由製備型HPLC純化（使用以下條件：柱：Atlantis T3製備型OBD柱，19 x 100 mm 5 μm，流動相A：水（0.1% FA），流動相B：MeCN（0.1% FA）；流速：30 mL/min；梯度：35% B至50% B，8 min內；波長：254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（12.1 mg）。1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ ppm 8.12 (br s, 1 H) 7.66 - 7.79 (m, 1 H) 7.58 (br d, 1 H) 7.40 (br d, 1 H) 7.21 -7.35 (m, 1 H) 7.11 (br s, 1 H) 4.90 - 5.16 (m, 2 H) 3.93 (s, 3 H) 3.48 (s, 2 H) 2.91 - 3.06 (m, 1 H) 1.88 - 2.09 (m, 1 H) 1.74 - 1.92 (m, 1 H) 1.38 (d, 2 H) 1.29 (br s, 1 H) 0.89 - 0.78 (m, 3 H)。LCMS (ESI): 506.30 [M+H] +。
實例 524. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 R,3 S)-3- 羥基 -3-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 S,3 S)-3- 羥基 -3-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 R,3 R)-3- 羥基 -3-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺，和 ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 S,3 R)-3- 羥基 -3-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2618
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用3-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至50 B，30 min內；220/254 nm），以獲得( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 R,3 S)-3-羥基-3-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 S,3 S)-3-羥基-3-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 R,3 R)-3-羥基-3-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺，和( S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 S,3 R)-3-羥基-3-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（160.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 524）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.45 - 7.16 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.69 - 4.43 (m, 1H), 4.25 - 3.97 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.91 - 2.67 (m, 1H), 2.52 - 2.22 (m, 1H), 2.10 - 1.85 (m, 3H), 1.85 - 1.65 (m, 5H), 1.65 - 1.54 (m, 1H), 1.54 - 1.38 (m, 1H), 1.37 - 1.13 (m, 2H), 1.13 - 0.93 (m, 1H), 0.88 - 0.55 (m, 3H)。LCMS (ESI): 540.30 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該四種非鏡像異構物的混合物（50.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ART Cellulose-SC柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：MTBE（0.5% 2M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/DCM=80 : 20，保持40 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 524-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（30.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.75 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.48 - 7.17 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.78 - 4.34 (m, 1H), 4.14 - 3.98 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.86 - 2.66 (m, 1H), 2.52 - 2.27 (m, 1H), 2.08 - 1.95 (m, 1H), 1.95 - 1.83 (m, 2H), 1.82 - 1.60 (m, 4H), 1.55 - 1.39 (m, 2H), 1.39 - 1.14 (m, 3H), 1.13 - 0.87 (m, 1H), 0.87 - 0.53 (m, 3H)。LCMS (ESI): 540.30 [M+H] +。
實例 524-B 和 524-C.獲得第二洗脫峰（60.0 mg），其為兩種非鏡像異構物的固體混合物。
第二洗脫峰的保留時間為25.08 min。
實例 524-D.獲得呈固體的第三洗脫非鏡像異構物（29.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為36.51 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.42 - 7.16 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.76 - 4.41 (m, 1H), 4.26 - 4.11 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.92 - 2.66 (m, 1H), 2.52 - 2.19 (m, 1H), 2.13 - 1.65 (m, 9H), 1.66 - 1.49 (m, 2H), 1.47 - 1.23 (m, 1H), 1.15 - 0.86 (m, 1H), 0.86 - 0.57 (m, 3H)。LCMS (ESI): 540.30 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離第二洗脫峰（60.0 mg），其中含有標題化合物的兩種非鏡像異構物。
柱：CHIRALPAK IH柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: 1/1 MeOH/DCM=85 : 15，保持14.5 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 524-B.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（23.0 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為8.87 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.13 (s, 1H), 7.45 - 7.17 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.72 - 4.35 (m, 1H), 4.14 - 4.00 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.87 - 2.64 (m, 1H), 2.52 - 2.26 (m, 1H), 2.04 - 1.96 (m, 1H), 1.96 - 1.84 (m, 2H), 1.83 - 1.62 (m, 4H), 1.55 - 1.38 (m, 2H), 1.39 - 1.13 (m, 3H), 1.13 - 0.87 (m, 1H), 0.86 - 0.58 (m, 3H)。LCMS (ESI): 540.30 [M+H] +。
實例 524-C.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（15.5 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為12.75 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.14 (s, 1H), 7.45 - 7.16 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.75 - 4.42 (m, 1H), 4.26 - 4.15 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.92 - 2.66 (m, 1H), 2.47 - 1.95 (m, 1H), 1.95 - 1.86 (m, 3H), 1.86 - 1.68 (m, 5H), 1.67 - 1.51 (m, 2H), 1.43 - 1.26 (m, 1H), 1.19 - 0.93 (m, 2H), 0.75 (s, 3H)。LCMS (ESI): 540.30 [M+H] +。
實例 525. ( S)-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )- N-((3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -4- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2620
使用與對於實例325的合成所描述的程序類似的程序製備標題化合物，不同的是使用1-[3-(三氟甲基)吡啶-4-基]甲胺作為起始材料。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱，C18；流動相A，水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度30 B至50 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（75.1 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.93 - 8.68 (m, 2H), 8.12 (s, 1H), 7.52 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.17 - 7.02 (m, 1H), 4.65 - 4.55 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.57 - 3.39 (m, 1H), 3.27 - 3.05 (m, 1H), 3.05 - 2.85 (m, 1H), 2.76 - 2.25 (m, 1H), 2.18 - 1.65 (m, 2H), 1.58 - 1.24 (m, 1H), 1.23 - 0.95 (m, 1H), 0.92 - 0.58 (m, 3H)。LCMS (ESI): 533.30 [M+H] +。
實例 526. ( S)- N-((5- 氯 -1- 甲基 -3-( 三氟甲基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 )-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2622
步驟 -1. 5- 氯 -1- 甲基 -3-( 三氟甲基 ) 吡唑 -4- 甲醛
Figure 02_image2624
將戴斯-馬丁氧化劑（790.7 mg，1.86 mmol）添加到[5-氯-1-甲基-3-(三氟甲基)吡唑-4-基]甲醇（200.0 mg，0.93 mmol）在DCM（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在0ºC下攪拌2 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（31 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（190.0 mg）。LCMS (ESI): 213.00 [M+H] +。
步驟 -2. N-[(1 E)-[5- 氯 -1- 甲基 -3-( 三氟甲基 ) 吡唑 -4- 基 ] 亞甲基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image2626
將PTSA（30.7 mg，0.18 mmol），三級丁烷亞磺醯胺（216.7 mg，1.79 mmol）和MgSO 4（322.8 mg，2.68 mmol）添加到5-氯-1-甲基-3-(三氟甲基)吡唑-4-甲醛（步驟-1，190.0 mg，0.89 mmol）在DCM（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（3/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（95.0 mg）。LCMS (ESI): 316.00 [M+H] +。
步驟 -3. N-{[5- 氯 -1- 甲基 -3-( 三氟甲基 ) 吡唑 -4- 基 ] 甲基 }-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
Figure 02_image2628
將NaBH 4（23.3 mg，0.62 mmol）添加到 N-[(1E)-[5-氯-1-甲基-3-(三氟甲基)吡唑-4-基]亞甲基]-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-2，95.0 mg，0.31 mmol）在MeOH（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用PE/EA（3/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（65.0 mg）。LCMS (ESI): 318.00 [M+H] +。
步驟 -4. 1-[5- 氯 -1- 甲基 -3-( 三氟甲基 ) 吡唑 -4- 基 ] 甲胺
Figure 02_image2630
將在1,4-二㗁𠮿（2.00 mL）中的HCl（氣態）添加到 N-{[5-氯-1-甲基-3-(三氟甲基)吡唑-4-基]甲基}-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（步驟-3，65.0 mg，0.21 mmol）在1,4-二㗁𠮿（2.00 mL）中的溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（3/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（43.0 mg）。LCMS (ESI): 214.00 [M+H] +。
步驟 -5. ( S)- N-((5- 氯 -1- 甲基 -3-( 三氟甲基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 )-4-(3-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -5- 羰基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2622
將HOBt（47.5 mg，0.35 mmol），EDCI（67.3 mg，0.35 mmol），和1-[5-氯-1-甲基-3-(三氟甲基)吡唑-4-基]甲胺（步驟-4，50.0 mg，0.23 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，61.4 mg，0.16 mmol）和DIPEA（181.5 mg，1.40 mmol）在DMF（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：30 B至50 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（37.0 mg）。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.21 - 8.03 (m, 1H), 7.35 - 7.20 (m, 1H), 7.17 - 7.00 (m, 1H), 4.67 - 4.51 (m, 1H), 4.34 - 4.23 (m, 2H), 4.00 - 3.81 (m, 6H), 2.90 - 2.68 (m, 1H), 2.54 - 2.28 (m, 1H), 1.92 - 1.61 (m, 2H), 1.39 - 1.14 (m, 2H), 1.03 - 0.91 (m, 2H), 0.77 - 0.69 (m, 2H)。LCMS (ESI): 570.20 [M+H] +。
實例 527. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5- 甲氧基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2633
步驟 -1. 5- 甲氧基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 甲腈
Figure 02_image2635
將NaOMe（78.5 mg，1.45 mmol）添加到5-氯-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲腈（300.0 mg，1.45 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在-78ºC至25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（3/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（65.0 mg）。LCMS (ESI): 203.0 [M+H] +。
步驟 -2. 1-[5- 甲氧基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 基 ] 甲胺
Figure 02_image2637
將Pd/C（10.0 mg，0.09 mmol）添加到5-甲氧基-3-(三氟甲基)吡啶-2-甲腈（步驟-1，45.0 mg，0.22 mmol）在AcOH（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下在氫氣氣氛下攪拌1 h。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮以獲得呈油狀物的標題化合物，並且不經進一步純化而直接用於下一步驟。LCMS (ESI): 207.0 [M+H] +。
步驟 -3. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5- 甲氧基 -3-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2633
將HOBt（29.5 mg，0.22 mmol），EDCI（41.9 mg，0.22 mmol），和1-[5-甲氧基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基]甲胺（步驟-2，45.0 mg，0.22 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，54.5 mg，0.15 mmol），DIPEA（150.5 mg，1.17 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（46.7 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.46 (d, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.63 (d, 1H), 7.45 - 7.17 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.61 (s, 3H), 4.02 - 3.88 (m, 6H), 3.10 - 2.83 (m, 1H), 2.56 - 2.35 (m, 1H), 2.10 - 1.87 (m, 1H), 1.83 - 1.63 (m, 1H), 1.53 - 1.23 (m, 3H), 1.18 - 0.89 (m, 1H), 0.84 - 0.62 (m, 2H)。LCMS (ESI): 563.35 [M+H] +。
實例 528. ( R)-4-(5-(6- 氰基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( S)-4-(5-(6- 氰基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2640
步驟 -1. 5-(6- 氰基嘧啶 -4- 基 )-1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 甲酸乙酯
Figure 02_image2642
將Pd(dppf)Cl 2（524.0 mg，0.72 mmol）和K 3PO 4（1.52 g，7.17 mmol）添加到6-氯嘧啶-4-甲腈（500.0 mg，3.58 mmol）和5-(乙氧基羰基)-2-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-基硼酸（1.25 g，4.66 mmol）在1,4-二㗁𠮿（10.00 mL）/H 2O（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在70ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（720.0 mg）。LCMS (ESI): 328.1 [M+H] +。
步驟 -2. 5-(6- 氰基嘧啶 -4- 基 )-1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 甲酸
Figure 02_image2644
在80ºC下在氮氣氣氛下，將三甲基羥基錫（829.0 mg，4.58 mmol）添加到5-(6-氰基嘧啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-甲酸乙酯（步驟-1，500.0 mg，1.53 mmol）在DCE（5.00 mL）中的攪拌溶液中持續14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（300.0 mg）。LCMS (ESI): 300.1 [M+H] +。
步驟 -3. 7-[[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ] 胺基甲醯基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -4- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image2646
將EDCI（389.4 mg，2.03 mmol），HOBt（275.2 mg，2.04 mmol），和(1 r,4 r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇鹽酸鹽（222.9 mg，1.02 mmol）添加到4-(三級丁氧基羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（260.0 mg，1.02 mmol）和DIPEA（1.32 g，10.18 mmol）在DMF（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層減壓濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（4/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（400.0 mg）。LCMS (ESI): 421.2 [M+H] +。
步驟 -4. N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 羧醯胺
Figure 02_image2648
在0ºC下將TFA（4.00 mL）添加到7-[[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]胺基甲醯基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-4-甲酸三級丁酯（步驟-3，370.0 mg，0.88 mmol）在DCM（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，2/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（200.0 mg）。LCMS (ESI): 321.1 [M+H] +。
步驟 -5. 4-[5-(6- 氰基嘧啶 -4- 基 )-1-( 㗁 𠮿 -2- 基 ) 吡唑 -3- 羰基 ]- N-[(1 r,4 r)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2650
將HATU（427.0 mg，1.12 mmol）和 N-[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-4，300.0 mg，0.94 mmol）添加到5-(6-氰基嘧啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-甲酸（步驟-2，280.0 mg，0.94 mmol）和DIPEA（363.0 mg，2.81 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（1/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（350.0 mg）。LCMS (ESI): 602.2 [M+H]+。
步驟 -6. ( R)-4-(5-(6- 氰基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( S)-4-(5-(6- 氰基嘧啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2640
將TFA（3.00 mL）添加到4-[5-(6-氰基嘧啶-4-基)-1-(㗁𠮿-2-基)吡唑-3-羰基]- N-[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（350.0 mg，0.58 mmol）在DCM（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（10/1）洗脫）純化，以獲得( R)-4-(5-(6-氰基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺和( S)-4-(5-(6-氰基嘧啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基)- N-((1 r,4 S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（130.0 mg），其為非鏡像異構物的固體混合物（ 實例 528）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.28 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.74 - 8.50 (m, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.61 - 7.19 (m, 1H), 5.69 (s, 1H), 4.86 - 4.11 (m, 1H), 3.90 - 3.74 (m, 1H), 2.91 - 2.71 (m, 1H), 2.31 - 2.02 (m, 1H), 1.88 - 1.66 (m, 5H), 1.64 - 1.40 (m, 5H), 1.34 - 0.82 (m, 3H), 0.76 - 0.43 (m, 3H)。LCMS (ESI): 518.25 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（128.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ART Amylose-SA柱，柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm，流動相：1/1己烷/DCM（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: EtOH=85:15，保持12 min，流速：20 mL/min，檢測：220/254 nm。
實例 528-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（51.9 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為5.68 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.31 (s, 1H), 9.39 (d, 1H), 8.60 (s, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.36 (s, 1H), 5.78 - 5.61 (m, 1H), 4.80 - 4.07 (m, 1H), 3.96 - 3.77 (m, 1H), 3.08 - 2.90 (m, 1H), 2.89 - 2.71 (m, 1H), 2.31 - 2.10 (m, 1H), 1.87 - 1.67 (m, 5H), 1.62 - 1.42 (m, 5H), 1.28 - 1.17 (m, 1H), 1.05 - 0.91 (m, 1H), 0.89 - 0.79 (m, 1H), 0.73 - 0.53 (m, 2H)。LCMS (ESI): 518.20 [M+H] +。
實例 528-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（49.1 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為10.19 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.66 - 14.15 (m, 1H), 9.49 - 9.30 (m, 1H), 8.76 - 8.51 (m, 1H), 7.97 - 7.67 (m, 1H), 7.62 - 7.20 (m, 1H), 5.69 (s, 1H), 4.84 - 4.06 (m, 1H), 3.95 - 3.76 (m, 1H), 3.20 - 2.92 (m, 1H), 2.92 - 2.73 (m, 1H), 2.29 - 2.06 (m, 1H), 1.92 - 1.67 (m, 5H), 1.65 - 1.43 (m, 5H), 1.35 - 1.16 (m, 1H), 1.16 - 1.03 (m, 1H), 1.02 - 0.81 (m, 1H), 0.75 - 0.44 (m, 2H)。LCMS (ESI): 518.20 [M+H] +。
實例 529. ( S)-4-(5-(2- 氯 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( R)-4-(5-(2- 氯 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺的非鏡像異構物混合物
Figure 02_image2653
步驟 -1. 5- 溴 -1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image2655
將K 2CO 3（26.97 g，195.11 mmol）添加到5-溴-1 H-吡唑-3-甲酸甲酯（20.00 g，97.56 mmol）在DMF（50.00 mL）中的攪拌溶液中。然後在0ºC下將SEMCl（24.40 g，146.33 mmol）添加到所得混合物中。將所得溶液在25ºC下攪拌14 h。將所得溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層減壓濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/3 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（29.00 g）。LCMS (ESI): 335.1 [M+H] +。 步驟 -2. 5-(2- 氯 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image2657
將2-氯-5-氟吡啶-4-基硼酸（679.9 mg，3.88 mmol），CsF（906.2 mg，5.97 mmol）和Pd(AmPhos) 2Cl 2（422.4 mg，0.60 mmol）添加到5-溴-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-甲酸甲酯（步驟-1，1.00 g，2.98 mmol）在1,4-二㗁𠮿（5.00 mL）/H 2O（0.50 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在95ºC下在氮氣氣氛下攪拌2 h。將溶液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/5 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（350.0 mg）。LCMS (ESI): 386.1 [M+H] +。 步驟 -3. 5-(2- 氯 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 甲酸
Figure 02_image2659
將氫氧化鋰（76.1 mg，1.81 mmol）添加到5-(2-氯-5-氟吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-甲酸甲酯（步驟-2，350.0 mg，0.91 mmol）在MeOH（2.00 mL）/THF（2.00 mL）/H 2O（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌2 h。將溶液在減壓下濃縮，然後用HCl（1 M）酸化至pH 3。將溶液用乙酸乙酯萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（301.0 mg）。LCMS (ESI): 372.1 [M+H] +。 步驟 -4. 4-[5-(2- 氯 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯
Figure 02_image2661
將4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯鹽酸鹽（177.1 mg，0.86 mmol）和HATU（357.1 mg，0.94 mmol）添加到5-(2-氯-5-氟吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-甲酸（步驟-3，291.0 mg，0.78 mmol）和DIPEA（303.4 mg，2.35 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用EtOAc/石油醚（1/3 v/v）洗脫）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（362.0 mg）。LCMS (ESI): 523.2 [M+H] +。 步驟 -5. 4-[5-(2- 氯 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸
Figure 02_image2663
將氫氧化鋰（58.1 mg，1.38 mmol）添加到4-[5-(2-氯-5-氟吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸甲酯（步驟-4，362.0 mg，0.69 mmol）在THF（2.00 mL）/MeOH（2.00 mL）/H 2O（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將溶液在減壓下濃縮，然後用HCl（1 M）酸化至pH 3。將溶液用乙酸乙酯萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈油狀物的標題化合物（339.0 mg）。LCMS (ESI): 509.2 [M+H] +。 步驟 -6. 4-[5-(2- 氯 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1-[[2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ] 甲基 ] 吡唑 -3- 羰基 ]-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲酸甲酯
Figure 02_image2665
將(1 r,4 r)-4-胺基-1-(三氟甲基)環己烷-1-醇鹽酸鹽（137.6 mg，0.63 mmol）和HATU（285.9 mg，0.75 mmol）添加到4-[5-(2-氯-5-氟吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（步驟-5，319.0 mg，0.63 mmol）和DIPEA（243.0 mg，1.88 mmol）在DMF（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將溶液用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用DCM/MeOH（15/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（410.0 mg）。LCMS (ESI): 674.3 [M+H] +。 步驟 -7. ( S)-4-(5-(2- 氯 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 S)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺和 ( R)-4-(5-(2- 氯 -5- 氟吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((1 r,4 R)-4- 羥基 -4-( 三氟甲基 ) 環己基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2653
將TFA（5.00 mL）添加到4-[5-(2-氯-5-氟吡啶-4-基)-1-[[2-(三甲基矽基)乙氧基]甲基]吡唑-3-羰基]- N-[(1 r,4 r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺（步驟-6，410.0 mg，0.61 mmol）在DCM（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將溶液在減壓下濃縮，然後用TEA鹼化至pH 8。然後將溶液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：20 B至50 B，30 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（182.2 mg）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.10 (s, 1H), 8.56 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.04 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.80 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 7.11 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 5.68 (s, 1H), 4.75 - 4.09 (m, 1H), 3.94 - 3.76 (m, 1H), 2.93 - 2.69 (m, 1H), 2.30 - 2.08 (m, 1H), 1.90 - 1.66 (m, 5H), 1.62 - 1.39 (m, 5H), 1.29 - 1.10 (m, 2H), 1.03 - 0.79 (m, 2H), 0.75 - 0.53 (m, 2H)。LCMS (ESI): 544.10 [M+H] +。
使用手性製備型HPLC分離該兩種非鏡像異構物的混合物（200.0 mg）。
柱：CHIRALPAK ART Amylose-SA柱
柱尺寸：2 x 25 cm，5 µm
流動相：己烷（0.5% 2 M NH 3.MeOH）: MeOH=20 : 80，保持13 min
流速：20 mL/min
檢測：220/254 nm
實例 529-A.獲得呈固體的第一洗脫非鏡像異構物（82.2 mg）。
第一洗脫非鏡像異構物的保留時間為4.91 min。
實例 529-B.獲得呈固體的第二洗脫非鏡像異構物（72.1 mg）。
第二洗脫非鏡像異構物的保留時間為9.40 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.13 (s, 1H), 8.57 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.82 (d, 1H), 7.12 (d, 1H), 5.70 (s, 1H), 4.68 - 4.04 (m, 1H), 3.91 - 3.73 (m, 1H), 3.30 - 3.11 (m, 1H), 2.90 - 2.71 (m, 1H), 2.38 - 2.04 (m, 1H), 1.90 - 1.65 (m, 5H), 1.64 - 1.41 (m, 5H), 1.33 - 0.78 (m, 3H), 0.78 - 0.53 (m, 2H)。LCMS (ESI): 544.15 [M+H] +。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 14.12 (s, 1H), 8.57 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.82 (d, 1H), 7.12 (d, 1H), 5.70 (s, 1H), 4.72 - 4.07 (m, 1H), 3.91 - 3.74 (m, 1H), 3.30 - 2.88 (m, 1H), 2.88 - 2.71 (m, 1H), 2.37 - 2.10 (m, 1H), 1.89 - 1.65 (m, 5H), 1.63 - 1.40 (m, 5H), 1.32 - 1.10 (m, 1H), 1.04 - 0.77 (m, 2H), 0.74 - 0.52 (m, 2H)。LCMS (ESI): 544.10 [M+H] +。
實例 530. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5- 甲氧基 -3-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2667
步驟 -1. 3- 氯 -5- 甲氧基吡 𠯤 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2669
將甲醇鈉（0.52 g，9.66 mmol）添加到3,5-二氯吡𠯤-2-甲酸甲酯（1.00 g，4.83 mmol）在MeOH（10.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（5/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（730.0 mg）。LCMS (ESI): 203.00 [M+H] +。
步驟 -2. 5- 甲氧基 -3-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 甲酸甲酯
Figure 02_image2671
將CuI（1.37 g，7.21 mmol）和2,2-二氟-2-磺酸基乙酸甲酯（2.77 g，14.41 mmol）添加到3-氯-5-甲氧基吡𠯤-2-甲酸甲酯（步驟-1，730.0 mg，3.60 mmol）在DMF（5.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在80ºC下在氮氣氣氛下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（用石油醚/EtOAc（4/1 v/v）洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（600.0 mg）。LCMS (ESI): 237.0 [M+H] +。
步驟 -3. 5- 甲氧基 -3-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 甲酸
Figure 02_image2673
將LiOH.H 2O（106.6 mg，2.54 mmol）添加到5-甲氧基-3-(三氟甲基)吡𠯤-2-甲酸甲酯（步驟-2，300.0 mg，1.27 mmol）在THF（4.00 mL）/MeOH（2.00 mL）/H 2O（2.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌1 h。將所得混合物在真空下濃縮。用HCl（1 M）將混合物酸化至pH 3，並用EtOAc萃取。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以獲得呈固體的標題化合物（280.0 mg）。LCMS (ESI): 223.0 [M+H] +。
步驟 -4. [5- 甲氧基 -3-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ] 甲醇
Figure 02_image2675
在0ºC下將2-甲基丙基氯甲酸酯（344.3 mg，2.52 mmol）和N-甲基𠰌啉（191.3 mg，1.89 mmol）添加到5-甲氧基-3-(三氟甲基)吡𠯤-2-甲酸（步驟-3，280.0 mg，1.26 mmol）在DME（7.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在0ºC下攪拌1 h。將所得混合物過濾，將濾餅用DME（3.00 mL）洗滌。然後將NaBH 4（71.5 mg，1.89 mmol）在H 2O（1.00 mL）中的溶液添加到濾液的攪拌混合物中。將所得混合物在0ºC至25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，4/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（130.0 mg）。LCMS (ESI): 209.0 [M+H] +。
步驟 -5. [5- 甲氧基 -3-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ] 甲磺酸甲酯
Figure 02_image2677
在0ºC下將NEt 3（126.4 mg，1.25 mmol）和MsCl（143.1 mg，1.25 mmol）添加到[5-甲氧基-3-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]甲醇（步驟-4，130.0 mg，0.63 mmol）在DCM（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在0ºC至25ºC下攪拌14 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，5/1 v/v）純化，以獲得呈油狀物的標題化合物（120.0 mg）。LCMS (ESI): 287.0 [M+H] +。
步驟 -6. 2-{[5- 甲氧基 -3-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ] 甲基 } 異吲哚 -1,3- 二酮
Figure 02_image2679
將2-鉀代異吲哚-1,3-二酮（129.4 mg，0.70 mmol）添加到[5-甲氧基-3-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]甲磺酸甲酯（步驟-5，100.0 mg，0.35 mmol）在DMF（4.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型TLC（石油醚/EtOAc，4/1 v/v）純化，以獲得呈固體的標題化合物（85.0 mg）。LCMS (ESI): 338.0 [M+H] +。
步驟 -7. 1-[5- 甲氧基 -3-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ] 甲胺
Figure 02_image2681
將肼（16.2 mg，0.50 mmol）添加到2-{[5-甲氧基-3-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]甲基}異吲哚-1,3-二酮（步驟-6，85.0 mg，0.25 mmol）在EtOH（3.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在50ºC下攪拌2 h。將所得混合物在真空下濃縮。將殘餘物藉由SiliaBond®丙磺酸（SCX-2）（用在MeOH（7 M）中的NH 3洗脫）純化，以獲得呈固體的標題化合物（50.0 mg）。LCMS (ESI): 208.0 [M+H] +。
步驟 -8. ( S)-4-(5-(5- 氟 -2- 甲氧基吡啶 -4- 基 )-1 H- 吡唑 -3- 羰基 )- N-((5- 甲氧基 -3-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 甲基 )-4- 氮雜螺 [2.5] 辛烷 -7- 甲醯胺
Figure 02_image2667
將1-[5-甲氧基-3-(三氟甲基)吡𠯤-2-基]甲胺（步驟-7，60.0 mg，0.29 mmol）和HATU（80.8 mg，0.21 mmol）添加到( S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1 H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲酸（中間體527-A，72.3 mg，0.19 mmol）和DIPEA（124.8 mg，0.97 mmol）在DMF（1.00 mL）中的攪拌溶液中。將所得混合物在25ºC下攪拌14 h。將所得混合物用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機層合併，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由反相柱層析法純化（使用以下條件：柱：C18；流動相A：水（0.5% NH 4HCO 3），流動相B：MeCN；梯度：30 B至50 B，20 min內；220/254 nm），以獲得呈固體的標題化合物（43.5 mg）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.44 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.43 - 7.18 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.72 - 4.55 (m, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 3.53 - 3.36 (m, 1H), 3.00 - 2.80 (m, 1H), 2.56 - 2.27 (m, 1H), 2.10 - 1.85 (m, 1H), 1.79 - 1.67 (m, 1H), 1.51 - 1.21 (m, 2H), 1.17 - 0.94 (m, 1H), 0.81 - 0.59 (m, 3H)。LCMS (ESI): 564.25 [M+H] +。
TR-FRET 測定測量 Co-R 肽對 PPARγ 的募集
用於測定的His 6-TEV-PPARγ-(234-505)蛋白根據Korpal, M. 等人, Evasion of immunosurveillance by genomic alterations of PPARgamma/RXRalpha in bladder cancer.[藉由膀胱癌中PPARγ/RXRα的基因組改變規避免疫監視] Nature communications [自然通訊], 2017. 8(1): 第103頁表現和純化。
測定緩衝液由以下組成：50 mM氯化鉀（西格瑪公司（Sigma））、50 mM HEPES pH 7.4（天惠華公司（Teknova））、2 mM DTT（波士頓生物產品公司（Boston Bioproducts））、0.1 mg/mL牛γ球蛋白（西格瑪公司）、和0.001% Pluronic F-127（賽默飛世爾公司（Thermo Fisher））。His 6-PPARγ-(234-505)的2x工作儲備液在測定緩衝液中稀釋至10 nM的最終濃度。2x檢測溶液含有最終濃度分別為5 nM和200 nM的抗-6xHis-鋱抗體（CisBio）和FITC標記的Co-R肽（來自新英格蘭肽公司（New England Peptide）的SMRT-ID2）。
聲學分配器從11點主劑量響應（MDR）源板向384孔測定板（康寧公司（Corning），3820）輸送4 nL化合物或DMSO，最高最終濃度為20 µM。在該等測定板中，第24列中的陽性對照含有500 nM（最終）T0070907，並且第23列中的陰性對照含有相同體積的DMSO。然後將5 µL的2x蛋白質工作原液或對照添加到板中，並在室溫下孵育20分鐘。使用Combi（Thermo）或Mantis（Formulatrix）移液裝置進行試劑添加。孵育後添加5 µL的2x檢測溶液。將板蓋上、離心並再孵育一小時。TR-FRET數據使用Envision板讀取器（珀金埃爾默公司（Perkin Elmer））記錄，使用賽默飛世爾公司推薦的設置。陽性和陰性對照的FITC-Co-R肽募集的TR-FRET信號用於將TR-FRET信號標準化為響應百分比，並確定測定Z素。實驗一式三份地進行，並在GraphPad Prism 7中進行分析。
測定結果報告於表1中。 [ 表 1]. 生物測定結果
實例 # TR-FRET i-Ag ； AC 50(nM) CTGlo 144 h UMUC9.5 ； GI50 (nM)
101 29.4 304.6
101a 40000.0 ＞10000
101b 9.2 84.0
102 321.5 643.3
103 256.7 319.5
104a 40000.0 ＞10000
104b 47.6 98.6
105 536.7 1023.8
106 465.3 2193.9
107 341.7 n.d.
108a 160.1 674.1
108 177.9 830.2
109 372.9 n.d.
110 574.7 1208.6
110a 2161.7 3185.8
110b 217.4 697.2
111b 519.3 639.7
111a 40000.0 n.d.
112 30.3 111.1
113a 14286.4 ＞10000.000
113b 672.1 2400.1
114 78.5 120.0
114b 15.8 26.8
114a 3469.9 4432.7
115 n.d. 427.8
115a 716.6 1317.6
115b 59.5 263.4
117 56.2 292.9
118 n.d. 121.2
118b 963.5 2962.2
118a 15.5 116.4
119 336.7 ＞5000.000
120 226.8 765.5
121 807.1 2223.9
122 11.0 66.1
123 12.8 100.4
124 981.8 5020.0
125 24.6 301.0
126 706.8 2455.0
127 644.0 2925.5
128 863.6 2555.0
129 272.6 1021.3
130 75.9 685.2
131 493.7 2608.5
132 24.6 136.3
133 291.6 1744.8
134 238.3 1093.8
135 482.6 2652.0
136 887.4 6096.5
137 129.7 678.5
138 500.5 1469.5
139 336.4 1793.9
140 85.4 633.5
141 678.6 2602.3
142 903.5 3140.6
143 909.8 3309.5
144 44.7 333.6
145 688.4 4121.0
146 262.2 1411.5
147 267.9 954.6
148 712.2 3172.0
149 49.3 417.7
150 269.2 779.1
151 48.1 538.9
152 853.0 825.0
153 621.4 2090.9
154 77.4 166.1
155 103.4 121.5
156 32.1 105.5
157 129.9 212.5
158 296.1 544.5
159 27.1 62.4
160 11.6 20.6
160-A 11.5 38.2
160-B 14228.5 ＞10000.000
161 940.9 1951.5
162 588.2 908.0
163 447.0 747.3
164 607.9 1005.7
165 178.6 435.4
166 299.7 ＞10000.000
167 112.3 4035.0
168 45.7 486.8
169 4.5 2.1
169-A 79.0 272.8
169-B 2.3 1.4
170-A 4.7 11.8
170-B 1107.9 3556.2
171 209.8 1548.7
172 16.5 162.6
173 673.8 2099.1
174 124.9 407.0
175 349.2 1640.0
176 375.5 1843.5
177 29.8 68.9
178 343.7 1259.1
179 321.2 1534.0
180 143.5 707.0
181 56.2 85.6
182 422.4 1604.4
183 232.8 1646.1
184 215.3 383.8
185 734.7 1551.1
186 201.8 339.2
187 41.7 114.5
188 79.8 211.0
189 118.8 521.4
190 24.0 91.8
191 837.8 2013.0
192 83.3 374.6
193 393.9 1199.2
194 808.2 483.8
195 212.0 348.1
196 609.6 1031.9
197 197.3 3931.9
198 917.5 4158.1
199 32.0 139.7
200 112.2 71.5
201 77.5 171.3
202 136.4 1590.4
203 77.4 96.4
204 20.2 83.3
205 911.6 3114.8
206 13.8 86.6
207 888.9 5670.2
208 34.7 290.3
209 318.7 2369.4
210 259.3 1684.5
211 461.8 3258.6
212 79.2 782.5
213 570.7 1639.9
214 193.7 1586.4
215 264.9 ＞5000.000
216 696.7 3103.1
217 309.4 3633.2
218 13.8 137.8
219 94.5 1611.7
220 286.2 2127.6
221 279.4 1729.0
222 18.5 208.1
223 627.8 ＞10000.000
224 554.3 5177.2
225 327.0 1719.2
226 42.8 426.8
227 947.4 5963.6
228 489.7 ＞10000.000
229 70.6 614.4
230 134.1 696.8
231 998.7 5444.2
232 515.7 2145.4
233 196.2 3426.8
234 927.0 ＞10000.000
235 404.2 2359.4
236 466.0 5355.8
237 722.4 ＞10000.000
238 838.8 5163.5
239 245.6 1397.1
240 707.8 6050.0
241 880.4 3483.2
242 74.2 1657.0
243 25.8 414.3
244 605.3 5563.2
245 9.8 n.d.
245-A 8.3 4.1
245-B 109.0 414.6
246 382.7 1230.0
247 565.1 2231.8
248 66.3 411.4
248-A 340.8 2532.3
248-B 32.2 207.3
249 26.4 244.3
249-A 29.3 189.3
249-B 55.5 384.0
250 24.7 430.3
251 253.6 1377.9
252 182.5 1146.6
253 51.0 387.1
254 58.8 ＞2000.000
255 63.3 151.2
255-A 49.6 140.7
255-B 1758.7 4119.5
256 488.4 184.8
256-A 92.4 72.6
256-B 15908.7 3522.6
257-A 215.0 263.8
257-B 28.0 79.1
258 17.0 20.0
259-A 417.6 1483.5
259-B 6.5 31.3
260 969.6 4034.5
261 78.4 490.1
262 29.2 332.2
263-A 90.0 381.6
263-B 4238.6 6958.5
264-A 657.8 4892.6
264-B 11069.1 ＞10000.000
265 87.7 458.3
266-A 140.3 306.6
266-B 144.4 483.3
267 14.2 103.9
268 7.0 36.5
269 12.0 160.3
270 23.4 306.0
271 6.1 30.3
272 9.0 110.8
273 26.7 212.7
274 20.0 n.d.
275-A 5.5 11.4
275-B 129.9 249.8
276 813.3 ＞4000.000
277 3.3 29.0
278 75.1 477.9
279 24.6 289.7
280-A 895.4 5801.6
280-B 6.5 15.3
280-C 101.3 282.6
280-D 14.9 44.9
281 100.9 631.7
282 59.0 292.9
283 7.5 70.8
284 2.3 12.1
285 7.9 16.3
286-A 304.0 459.9
286-B 2.2 1.5
287-A 2.3 2.4
287-B 117.8 184.3
288-A 4.4 0.9
288-B 39.0 56.8
289-A 3607.8 135.2
289-B 2.8 18.6
289-C 9.1 52.1
289-D 157.6 153.5
290 400.2 832.9
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490-B 9.7 77.8
491 0.3 11.0
492 453.5 ＞10000.000
492-A 1512.5 ＞10000.000
492-B 738.0 ＞10000.000
493 12.6 88.6
493-A 3.2 16.9
493-B 101.4 484.2
494 6.7 80.8
495 15.7 185.6
495-A 23.2 286.6
495-B 13.3 143.6
496 9.6 68.2
497 87.7 644.7
498 2.9 21.9
499 294.5 ＞10000.000
500 7.5 13.3
501 5.4 13.0
501-A 7.8 21.4
501-B 51.1 258.5
502 11.8 50.6
502-A 109.7 750.3
502-B 5.3 66.1
503 8.1 145.6
504-A 2128.6 ＞10000.000
504-B 48.7 1837.0
504-E 687.0 2262.9
504-F 6887.2 ＞10000.000
504-C 15.7 258.4
504-D 2.5 74.7
505 6.9 10.3
506 10.3 20.6
506-A 4123.4 3277.7
506-B 3.6 8.3
507 17.4 14.1
508 5.6 8.5
509 4.2 7.0
510 3.8 1.8
511 10.6 95.2
511-A 17.2 63.5
511-B 18.5 78.4
512 11.2 97.2
513 6.1 15.4
514 33.7 ＞10000.000
514-A 149.1 4198.9
514-B 59.6 4309.9
515 5.0 6.0
516 3.3 10.0
517 7.9 20.3
518 148.9 4054.0
518-A 130.5 3129.8
518-B 995.6 ＞10000.000
519 4.3 19.1
520 783.7 ＞10000.000
521 1.8 19.8
522 1.4 14.3
523 5.3 54.3
524 128.4 341.0
524-A n.d. 110.0
524-B n.d. 430.1
524-C n.d. 367.3
524-D n.d. 890.2
525 7.0 19.0
526 3.7 7.1
527 n.d. 5.0
528 6.0 478.7
528-A 2088.1 ＞10000.000
528-B 14.0 404.9
529 10.6 34.2
529-A 756.1 5558.9
529-B 1.4 9.2
530 n.d. n.d.
     
     
     
可以使用上述測定以相同方式獲得本文揭露的另外的化合物的AC 50值。
在表1中，n.d. 意指未確定。
用於增殖測定的細胞接種
將UM-UC-9工程化細胞在添加了10% FBS、25 mM葡萄糖（高葡萄糖）、4.0 mM L-麩醯胺酸、2.0 mM GlutaMAX™、1.0 mM丙酮酸鹽、1.0%非必需胺基酸（NEAA）的杜氏改良伊格爾培養基（DMEM）中，在37ºC的95%加濕培養箱中（具有5% CO 2）培養。UM-UC-9工程化待測細胞（ARC）的細胞庫係從非常活躍的生長階段製備的。在使用前，將每瓶含有大約5 x 10 6個細胞的ARC小瓶儲存在液氮氣相中冷凍保存。
為了製作測定板，從冷凍保存中回收ARC，在70 µM細胞過濾器中過濾，驗證細胞活力＞90%，並使用細胞計數器（Cellometer Auto 1000，Nexelom公司）計數。使用DMEM培養基將每個細胞系接種到384孔板（50 µl/孔）中，密度在接種後7天（500個細胞/孔）先前確定為對數生長期，使用散裝試劑分配器（Multidrop™ Combi，賽默科技公司（Thermo Scientific））和用70%乙醇預消毒的大口徑塑膠吸頭盒。一板細胞被指定為預處理時間零（T0）對照。將新鮮接種的板在生物安全櫃內蓋上蓋子30分鐘，使細胞在板孔內均勻分佈，並且然後置於37ºC、5% CO 2和95%相對濕度的自動培養箱（STX110，Liconic公司）中。
待測板中測試化合物的製備
在-20ºC下在降低的濕度（-45ºC露點）下將化合物作為10 mM二甲亞碸（DMSO）溶液儲存在低溫樣本檔案中，並避光保存。自動化檔案中的所有樣本都儲存在2D條碼聚丙烯管中，藉由實驗室資訊管理系統（LIMS）進行跟蹤，並在樣本註冊時藉由NMR（化學，H3生物醫學）和LCMS（分析化學，H3生物醫學）驗證身份和純度。藉由冗餘LCMS方法（酸性和鹼性分離方案；分析化學，H3生物醫學）在樣本請求完成時藉由質量匹配和純度再次驗證身份。 從低溫檔案儲存中取出的樣本藉由加熱超音波（Bransonic® Ultrasonic Bath，布蘭森）溶解，轉移（Microlab Starlet，漢米爾頓）並藉由低容量液體處理器連續稀釋（Viaflo Assist，英特格拉），並在LIMS中藉由自動化日誌檔進行跟蹤，以創建1D條碼主劑量-響應板（MDR），作為實驗中使用的所有待測板（ARP）的標準來源。從MDR源藉由聲學轉移（ATS-100，EDC）製備的nL體積的ARP被熱密封（PlateLoc，安捷倫公司（Agilent））並在使用前儲存在-20ºC下（生產後＜7天）。藉由聲學分配器日誌檔跟蹤液體轉移被用來更新所有ARP板圖的LIMS系統。
測量預處理對照細胞和樣本對處理細胞的抗增殖作用
在第0天（預處理細胞）或第7天（處理過的細胞），使用自動化機器人測定平臺（ACell，HighRes Biosolutions公司）進行細胞增殖測定。將細胞ARP從培養中取出，丟棄其板蓋，並使用散裝試劑分配器（Multidrop™ Combi，賽默科技公司，帶有小口徑金屬吸頭盒）將25 μL（1/2體積）的Cell Titer-Glo® 2.0細胞活力測定試劑（Promega）添加到第1-23列的孔中（第24列將用作板背景或陽性對照）。將細胞ARP在室溫下在自動化旅館位置孵育總共1.0分鐘，同時將下一個板輸送至散裝試劑分配器，並且然後將無蓋細胞ARP返回至37ºC孵育2.5小時。將細胞ARP每隔約2分鐘按順序再次處理一次，移動ARP以在室溫下在自動化旅館位置孵育總共1.0分鐘，然後輸送至板讀取器（具有超靈敏發光的EnVision® 2104多模式板讀取器，PerkinElmer）。以每孔0.1秒測量相對發光。使用後，根據現行法規，所有ARP都被丟棄到生物安全廢物容器中，作為BL2級廢物進行處理。
數據分析
數據標準化
使用化合物處理板（TEST）載體/DMSO對照孔作為陰性對照（N TEST）和預處理板（T0）細胞信號作為陽性對照（N T0）來評估細胞增殖。數據被轉換為抑制百分比並落在從0%至100%的生長範圍內，其中0%等於預處理信號且100%等於不受抑制的生長或最大生長。
使用預處理板（T0）細胞信號作為陰性對照（N T0）和化合物處理板（TEST）背景對照孔作為陽性對照（P TEST）來評估細胞活力，這類似於使用細胞毒性化合物對照（如硼替佐米或星孢菌素）產生的數據。數據被轉換為抑制百分比並落在從-100%至0%的範圍內，其中0%等於預處理信號且-100%等於最大細胞死亡。
然後，根據TEST孔信號（信號 TEST）係高於還是低於‘N T0’的值，藉由兩個公式之一計算所有TEST孔的響應%數據，如下所示：
如果‘信號 TEST’大於‘N T0’，則使用計算#1，否則使用計算#2。
計算 #1 ：
響應% = 100 x (信號 TEST- 平均( P TEST) - N T0) / ( 平均( N TEST) - 平均( P TEST) - N T0)
計算 #2 ：
響應% = 100 x (信號 TEST- 平均( P TEST) - N T0) / N T0
其中：
「N T0」值係藉由從T0板上的活性「N」對照孔的平均值中背景減去活性‘P’對照孔的平均值來計算的。
「N T0」= 平均 ( N - 平均 ( P ) )
4 參數邏輯擬合
使用H3生物醫學公司開發的Ecabia數據分析軟體擬合數據。
擬合係藉由使用Apache公共數學庫的單純形優化器最小化四參數邏輯方程的觀察值與計算值之間的均方根誤差來進行的。擬合參數的邊界條件設置為：頂部固定在100%響應，底部在-100%與100%響應之間，希爾斜率在-3與-0.3之間，拐點不受限制。（如果合適，可以為各個曲線更改該等預設參數）。
GI 50
GI 50（與載體處理的細胞相比，細胞生長被抑制50%的測試品濃度）被計算為擬合曲線穿過50%響應水平的濃度。
如果計算值低於最低測試濃度C min，則該值被設置為「＜ C min」。如果計算值高於最高測試濃度
C max或不存在值，因為曲線的底部高於給定的響應水平，該值被設置為「＞ C max」。從實驗的重複計算平均值和標準差。
細胞培養. 除UM-UC9和UM-UC14外，所有人類細胞系均購自ATCC。將親本5637和SW780（均為PPARγ擴增）系保持在含有10%胎牛血清（FBS）的ATCC配製的RPMI-1640培養基中。將親本Cal29（PPARγ活性）細胞系保持在含有10%熱滅活FBS的杜氏改良伊格爾培養基（DMEM）中。將親本HT-1197（RXRα-S427F）和HT-1376（PPARγ高）膀胱癌細胞系保持在含有10% FBS的伊格爾最低必需培養基（EMEM）中。將KMBC2（PPARγ擴增）細胞系保持在含有10% FBS的DMEM/Ham’s F-12 1 : 1中。將RT4細胞系（PPARγ突變體）保持在ATCC配製的含有10% FBS的McCoy’s 5a改良培養基中。將RT112細胞系（PPARγ活性）保持在含有10%熱滅活FBS的ATCC配製的RPMI-1640培養基中。將SW1710（PPARγ低人膀胱癌細胞系）保持在含有15%熱滅活的FBS的DMEM中。UM-UC9（PPARγ擴增）、UM-UC14（PPARγ擴增）和UM-UC3（PPARγ低）人膀胱癌細胞系購自西格瑪奧德里奇公司/ECACC，並保持在含有10% FBS、1% NEAA和2mM L-麩醯胺酸的EMEM中。還平行測試了非膀胱癌細胞系作為對照。將結腸直腸癌細胞系HCT-116（PPARγ低）保持在ATCC配製的含有10% FBS的McCoy’s 5a改良培養基中。將結腸直腸癌細胞系RKO（PPARγ低）保持在ATCC配製的含有10% FBS的EMEM中。將肺癌細胞系A549（PPARγ低）保持在含有10% FBS的F-12K培養基中。將肝癌細胞系Hep3B（PPARγ低）保持在含有10%熱滅活的FBS和2mM L-麩醯胺酸的EMEM中。將大鼠膀胱癌細胞系AY-27（PPARγ低），來自OncoDesign（法國）的禮物保持在含有10% FBS、2mM L-麩醯胺酸、碳酸氫鈉和青黴素/鏈黴素的RPMI 1640培養基中。所有細胞系都經過檢測，並且沒有支原體污染。
短期活力測定：
對於活力測定，在添加化合物前一天，將500個細胞接種在384孔板的每個孔中。劑量響應在11點系列稀釋中測量，最高劑量為10 μM。DMSO的百分比在整個過程中受到控制，並且僅包括DMSO對照。給藥後144小時，添加CellTiter-Glo試劑，孵育，並在EnVision多標籤讀取器（PerkinElmer）上分析。將每種處理的發光值標準化為相應DMSO對照的平均值。在GraphPad Prism中生成劑量響應曲線圖，並由非線性回歸分析計算GI 50。GI 50係在Spotfire中繪製的。
結果在表1中CTGlo 144 h UMUC9.5; GI50 (nM)列中報告。
種群形成測定：
第1天：使用0.25%胰蛋白酶收穫細胞，製成單細胞懸液並計數。每個細胞系和處理條件在6孔板中各自進行三次重複。取決於細胞系，在2 ml培養基中接種密度範圍為125 - 2000個細胞/孔。
第2天：將化合物在RPMI 1640培養基中稀釋以製備100X溶液，其中每孔添加20 μl。DMSO用作載體對照，並且其濃度在整個板中保持在0.1%。
根據DMSO對照中的菌落大小，每3-4天更換培養基並投與新鮮化合物持續多達2-3週。給定細胞系的所有板同時終止。在研究結束時對存活的種群進行染色。吸取培養基後，將0.5%結晶紫添加到孔中約1 h。除去結晶紫溶液並用水小心洗滌孔以除去殘留的染色溶液。在成像前將板風乾過夜。
本文揭露的化合物可以使用上述方法進行測試。活性化合物可以在PPARγ活性/高/突變細胞系的板中表現出顯著的抗增殖活性，而非活性化合物在PPARγ非活性/無效細胞系中表現出無活性。此類測試可用於確認本文揭露的化合物的效力和選擇性。
RT4 異種移植研究
動物實驗係根據H3 Biomedicine IACUC定義的內部動物護理和使用委員會（IACUC）指南進行的。在37º下在5% CO 2加濕培養箱中，將細胞保持在相關培養基中的單層培養物中。在接種當天，藉由胰蛋白酶消化收集細胞，洗滌並重新懸浮在冰冷的磷酸鹽緩衝鹽水（PBS）中。雄性免疫缺陷BALB/C裸鼠（來自Charles River實驗室）用5x10 6個細胞以1 : 1的比例（每個50 µL）在右側腋窩區域附近，用在PBS中的0.1 mL體積的Matrigel™，使用26號針進行皮下接種。當平均腫瘤體積達到大約200 mm 3時，將動物隨機且均勻地分成組並開始治療。持續治療直到腫瘤達到約2000 mm 3或直到注意到顯著的體重減輕（相對於起始體重＞20%的減輕）。使用GraphPad Prism版本5.04（GraphPad Software公司，加拿大拉荷亞）進行統計學分析。
使用化合物X檢查RT4異種移植模型中的抗腫瘤活性。化合物X係根據本文所述之方法製備和測試的根據式 (IIIB) 的化合物。化合物X每天口服給藥，劑量範圍為3至10 mg/kg。在投與之前，由個體小鼠體重計算給藥體積。每天測量體重，同時每週測量腫瘤體積兩次。腫瘤體積（TV）基於以下公式計算：
TV = 長度 × 寬度 2× 0.5
長度：腫瘤的最大直徑（mm）
寬度：垂直於長度的直徑（mm）
腫瘤生長抑制%（TGI）根據下式計算：
腫瘤生長抑制%（TGI） =
Figure 02_image2683
其中第X天係終點測量。
在研究期間每天一次口服給予化合物X。數據代表平均值 ± SEM（腫瘤體積）或平均值 + SEM（體重變化%）（治療組N=8，載體對照N=8）。在最後一天的研究中，相對於載體對照，* p＜0.0001（雙向ANOVA，隨後進行Tukey多重比較測驗）。
結果顯示了在免疫受損小鼠中生長的攜帶T475M PPARγ變體的RT4異種移植模型中化合物X的抗腫瘤和體重作用。與對照相比，化合物X以劑量依賴性方式抑制異種移植生長，其中3 mg/kg QD和10 mg/kg QD顯著抑制生長（對於兩種劑量，TGI分別為53%和77%並且p＜0.0001）。所有劑量和方案均耐受良好，沒有顯著的體重減輕。
在TR-FRET測定中測試了以下化合物以測量對PPARγ的Co-R肽募集，並且發現其AC 50大於1000 nM：
(7R*)-4-(5-{5-[(1S)-1-羥基乙基]-2-甲基吡啶-4-基}-1H-吡唑-3-羰基)-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-{4-羥基雙環[2.2.2]辛烷-1-基}哌啶-4-甲醯胺；
2-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]-7,7-二氟-2-氮雜雙環[4.1.0]庚烷-5-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-{[6-(三氟甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-3-基]甲基}哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(1,4-二甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]-4-(2,2,2-三氟乙氧基)哌啶-4-甲醯胺；
2-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-5-甲醯胺；
rel-(1R,5R)-2-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-5-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]-4-(羥基甲基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(4-側氧基-3,4-二氫酞𠯤-1-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(2-甲基-2,3-二氫-1H-異吲哚-5-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-{[2-(三氟甲基)苯基]甲基}哌啶-4-甲醯胺；
N-[(1H-1,3-苯并二唑-5-基)甲基]-1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(2,6-二氟-3-甲基苯基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(3-羥基環戊基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1H-吲唑-5-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(1-苄基吡咯啶-3-基)-1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-({咪唑并[1,2-a]吡𠯤-6-基}甲基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(6-側氧基-1,6-二氫吡啶-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]-4-(甲氧基甲基)哌啶-4-甲醯胺；
(1S,4R,5R*)-N-[(3-氯苯基)甲基]-2-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-({咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基}甲基)哌啶-4-甲醯胺；
(1R,5S,6r*)-N-(3-氯苄基)-3-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-6-甲醯胺；
(1R,5S,6s*)-N-(3-氯苄基)-3-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-3-氮雜雙環[3.1.1]庚烷-6-甲醯胺；
(1R,5S,8R*)-N-[(3-氯苯基)甲基]-3-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲醯胺；
(3S)-N-[(3-氯苯基)甲基]-1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-3-甲醯胺；
(3R)-N-[(3-氯苯基)甲基]-1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-3-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[3-(三氟甲基)-1,2-㗁唑-5-基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(4-氯吡啶-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(5-氯吡𠯤-4-基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(2,3-二氟苯基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(4-甲氧基-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[1-(氧雜環丁烷-3-基)乙基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,3r,5r,7r)-金剛烷-2-基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(4,5-二甲基-1,3-噻唑-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[4-(甲磺醯基甲基)苯基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(5-甲基吡𠯤-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1-氰基環丙基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(5-甲基-1,2-㗁唑-3-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-乙基氧雜環丁烷-3-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(4-甲基吡啶-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(6-甲基吡啶-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(2-氰基苯基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(吡𠯤-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-{[3-氟-5-(三氟甲基)苯基]甲基}哌啶-4-甲醯胺；
N-(1-三級丁基哌啶-4-基)-1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(1-環丁基哌啶-4-基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1-甲基氮雜環丁烷-3-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(5-苯基-1H-吡唑-3-基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(1-甲基-1H-1,3-苯并二唑-2-基)哌啶-4-甲醯胺；
N-[(3-氯苯基)甲基]-1-[5-(2-甲氧基-5-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲酸；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1-甲基-1H-咪唑-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(2-苯基丙-2-基)哌啶-4-甲醯胺；
N-(4,4-二氟環己基)-1-[5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(4-側氧基環己基)哌啶-4-甲醯胺；
N-(4-甲基環己基)-1-{5-[2-(吡咯啶-1-基)吡啶-4-基]-1H-吡唑-3-羰基}哌啶-4-甲醯胺；
1-{5-[2-(二甲基胺基)吡啶-4-基]-1H-吡唑-3-羰基}-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺；
1-{5-[2-(甲基胺基)吡啶-4-基]-1H-吡唑-3-羰基}-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-4-甲基-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺；
1-{5-[2-(二氟甲氧基)吡啶-4-基]-1H-吡唑-3-羰基}-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4r)-4-乙基環己基]哌啶-4-甲醯胺；
4-(3-{4-[(4-甲基環己基)胺基甲醯基]哌啶-1-羰基}-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-甲酸；
2-(2-氯-5-{1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-醯胺基}苯氧基)乙酸；
N-[(4-甲基-1,3-噻唑-2-基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
rel-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-苯基環己基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(4-乙基-1,3-噻唑-2-基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(6-三級丁基吡啶-3-基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[1-(3-氯苯基)環丙基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4r)-4-乙基環己基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-氰基環己基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-({5H,6H,7H-環戊[b]吡啶-3-基}甲基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(5,6-二甲基吡啶-3-基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(2,6-二甲基吡啶-4-基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(4-苯基環己基)-1-[5-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(3,4-二氯苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(2,5-二氯苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(3S)-1-苄基吡咯啶-3-基]-1-[5-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(3R)-1-苄基吡咯啶-3-基]-1-[5-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(4-氯苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(2-氯苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[3-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-5-羰基]-N-[(1r,4r)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺；
2-{1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-羰基}-1,2,3,4-四氫異喹啉；
N-乙基-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(4-甲氧基吡啶-2-基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(2-氰基乙基)-N-甲基-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(2,6-二甲基苯基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(6-甲基吡𠯤-3-基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-甲基-N-(2-甲基丙基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(5-甲基-1,2,4-㗁二唑-3-基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(4-甲氧基-2-甲基苯基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(5-氟吡啶-2-基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(2,2-二甲基丙基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[3-(𠰌啉-4-基)丙基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-苄基-N-甲基-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
(3R)-1-{1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-羰基}吡咯啶-3-醇；
(3S)-N,N-二甲基-1-{1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-羰基}吡咯啶-3-胺；
4-{1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-羰基}𠰌啉；
(3R)-N,N-二甲基-1-{1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-羰基}吡咯啶-3-胺；
N-(3-甲基吡啶-4-基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(吡𠯤-3-基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(戊-3-基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[2-(二甲基胺基)乙基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(1,3-㗁唑-2-基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(2-乙氧基乙基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-{1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-羰基}-6-氧雜-1-氮雜螺[3.3]庚烷；
N-甲基-N-丙基-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-甲基-4-{1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-羰基}-1,4-二氮雜環庚烷；
1-苯基-4-{1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-羰基}哌𠯤；
N-(環丙基甲基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[2-(吡咯啶-1-基)乙基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(1R)-1-(4-甲基苯基)乙基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(吡啶-4-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-{1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-羰基}-4-(2,2,2-三氟乙基)哌𠯤；
1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺；
N-甲基-N-(1-甲基哌啶-4-基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(2-甲基環己基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(4-三級丁基苯基)甲基]-N-甲基-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(1R)-1-苯基乙基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
[(2S)-1-{1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-羰基}吡咯啶-2-基]甲醇；
N-(1-甲基哌啶-4-基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(4,4-二氟環己基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-甲基-2-(4-{1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-羰基}哌𠯤-1-基)乙醯胺；
1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-羥基環己基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(1-甲磺醯基哌啶-4-基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-甲基-4-{1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-羰基}哌𠯤；
N-[3-(二甲基胺基)丙基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(4-甲氧基環己基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-羥基環己基]哌啶-4-甲醯胺；
1-(2-甲磺醯基乙基)-4-{1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-羰基}哌𠯤；
N-(㗁𠮿-4-基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(4-甲基㗁𠮿-4-基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
4-{3-[4-(4-甲基哌啶-1-羰基)哌啶-1-羰基]-1H-吡唑-5-基}吡啶；
N-(4-氯苯基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-3-甲醯胺；
N-環丙基-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(4-甲基苯基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-環丙基-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-3-甲醯胺；
N-(2,3-二氫-1,4-苯并二㗁𠯤-6-基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-3-甲醯胺；
N-[(3-甲基苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-3-甲醯胺；
N-(2-苯基丙基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-3-甲醯胺；
N-(3-氯-4-甲基苯基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(2H-1,3-苯并二氧雜環戊烯-5-基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-3-甲醯胺；
4-{3-[4-(4-苯基哌啶-1-羰基)哌啶-1-羰基]-1H-吡唑-5-基}吡啶；
N-[(3R)-1-苄基吡咯啶-3-基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(4-氯苯基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
4-{3-[4-(哌啶-1-羰基)哌啶-1-羰基]-1H-吡唑-5-基}吡啶；
N-(4-甲氧基苯基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-環己基-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(㗁𠮿-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
N-苯基-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1-羥基環丙基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
N-環戊基-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(1R)-1-(4-三級丁基苯基)乙基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
(1R,4S,5R*)-N-[(3-氯苯基)甲基]-2-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-2-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-甲醯胺；
N-(3-甲基丁基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(4,5-二甲基-1,3-噻唑-2-基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(2,5-二甲氧基苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(吡𠯤-3-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(5-側氧基吡咯啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(6-側氧基-1,6-二氫嘧啶-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(3-氯苯基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(2,3-二甲氧基苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(4-環丙基-1,3-噻唑-2-基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(6-甲氧基吡啶-3-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
(1S,4R,5R*)-2-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-甲醯胺；
(7R*)-4-[5-(2-乙氧基-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺；
(7R*)-4-[5-(2-乙氧基-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺；
(7R*)-4-{5-[5-氟-2-(丙-2-基氧基)吡啶-4-基]-1H-吡唑-3-羰基}-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺；
(1R,5S,6S)-N-[(3-氯苯基)甲基]-3-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-甲醯胺；
1-[5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺；
(7R*)-4-[5-(2-乙氧基-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺；
(7R*)-4-[5-(2-乙氧基-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(3,3-二氟環丁基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1-甲基-5-側氧基吡咯啶-3-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
(2R,4r,6S)-N-{[(7S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基]甲基}-2,6-二甲基哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-{咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(3,6-二甲基吡𠯤-2-基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-羥基-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(2-環丙氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(6-側氧基-1,6-二氫吡啶-3-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[3-(三氟甲基)苯基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[2-(3-氯苯基)丙-2-基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(2,6-二甲氧基苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1-甲基-1H-咪唑-4-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
(1R,4S,5R*)-2-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-甲醯胺；
N-(1-苯基哌啶-3-基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-({1-甲基-4-側氧基-1H,4H,5H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基}甲基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-{[1-(二甲基胺基)環戊基]甲基}哌啶-4-甲醯胺；
N-{[4-(三級丁氧基)苯基]甲基}-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
(1R,4S)-2-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r*,4r**)-4-羥基-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(嘧啶-4-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(4-甲基噻吩-2-基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-{2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基}哌啶-4-甲醯胺；
N-[4-(2-羥基乙基)環己基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(2S)-2-苯基丙基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(4-甲基環己基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
(7R*)-4-(5-{5-[(1R)-1-羥基乙基]-2-甲基吡啶-4-基}-1H-吡唑-3-羰基)-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺；
N-[(3-甲氧基苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(4-甲基𠰌啉-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
7-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]-3-氧雜-7-氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氟氧雜環丁烷-3-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(4-甲氧基苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
(7S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-{8-甲基-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-2-基}-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(嘧啶-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(2,2-二甲基-1,3-二㗁𠮿-5-基)哌啶-4-甲醯胺；
(7R*)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(4r,7r)-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺；
N-[(3-氯苯基)甲基]-2-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-甲醯胺；
1-[5-(2-氰基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-{1-甲基-2-氧雜雙環[2.2.1]庚烷-4-基}哌啶-4-甲醯胺；
N-[(2-甲氧基-3-甲基苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[2-(2-側氧基-1,2-二氫吡啶-1-基)乙基]哌啶-4-甲醯胺；
(1R,3S,5S)-N-(1,1-二側氧基-1λ⁶-噻𠮿-4-基)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺；
N-[(2H-1,3-苯并二氧雜環戊烯-5-基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(5-甲基吡𠯤-2-基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-{1-甲基-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基}哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-({咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基}甲基)哌啶-4-甲醯胺；
4-{5-[5-氟-2-(氧雜環丁烷-3-基氧基)吡啶-4-基]-1H-吡唑-3-羰基}-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺；
N-[(3-氯苯基)甲基]-3-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-甲基-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[1-(吡𠯤-2-基)乙基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(5s,8r*)-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基]哌啶-4-甲醯胺；
(7S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(1-亞胺基-1-側氧基-1λ⁶-噻𠮿-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]-4-氰基哌啶-4-甲醯胺；
N-[(2-氯苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1,4-二㗁𠮿-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(4-甲基環己基)-1-{5-[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]-1H-吡唑-3-羰基}哌啶-4-甲醯胺；
N-(1-乙醯基吡咯啶-3-基)-1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(3-羥基吡𠯤-2-基)哌啶-4-甲醯胺；
N-[(1S)-1-苯基乙基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
8-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]-3-氰基-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺；
N-(4,4-二甲基環己基)-1-[5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-苄基-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1,3-二氧戊環-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1,3-㗁唑-5-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
(1S,4R,5R*)-2-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-甲醯胺；
(7S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1R,2R*,5R)-8-甲基-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-2-基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]-4-甲氧基哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(2-甲基-1,3-二氧戊環-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(4-三級丁基-1,3-噻唑-2-基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-({3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基}甲基)哌啶-4-甲醯胺；
(1R,3S,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-甲基-N-[(1r*,4s)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺；
N-(3-甲基環己基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(2R)-2-苯基丙基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(4-羥基㗁𠮿-4-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
(1R,5S,6R)-N-[(3-氯苯基)甲基]-3-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-甲醯胺；
N-[(3-氯-2-甲氧基苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[1-(嘧啶-2-基)乙基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(1-苯基環丙基)哌啶-4-甲醯胺；
N-[(2-氟苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
(1R,4S,5R*)-N-[(3-氯苯基)甲基]-2-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-2-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-5-甲醯胺；
N-[(2-甲氧基苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1,2,4-㗁二唑-3-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
(1R,3S,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-甲基-N-[(1r*,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-({[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-6-基}甲基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-{3-氟雙環[1.1.1]戊-1-基}哌啶-4-甲醯胺；
rel-1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(4r)-4-甲氧基-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1,3-㗁唑-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1-羥基環丁基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(4-氰基吡啶-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(1S)-1-(4-甲基苯基)乙基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(6-甲基吡𠯤-2-基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(8R)-5,6,7,8-四氫喹啉-8-基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[2-(三氟甲基)環丙基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(1,1-二側氧基-3,4-二氫-2H-1λ⁶-苯并噻喃-4-基)哌啶-4-甲醯胺；
(7R*)-4-{5-[5-氟-2-(丙-2-基氧基)吡啶-4-基]-1H-吡唑-3-羰基}-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-({[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-3-基}甲基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-環丙基哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1,3-二㗁𠮿-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(2-環丙基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(5-甲基-1,2,4-㗁二唑-3-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-{4-羥基雙環[2.2.1]庚烷-1-基}哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(口辛啉-4-基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(4-甲基㗁𠮿-4-基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(1S)-1-苯基丙基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(2,2-二側氧基-3,4-二氫-1H-2λ⁶-苯并噻喃-4-基)哌啶-4-甲醯胺；
N-(2-苯基乙基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-甲基氧雜環丁烷-3-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
(1R,5S,8R*)-N-[(3-氯苯基)甲基]-3-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲醯胺；
(7R)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3RS,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[1-(3-氯苯基)環丙基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(1-環丁基乙基)-1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(4,4-二氟-5-側氧基吡咯啶-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4s)-4-乙基環己基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(2-苯基丙-2-基)哌啶-4-甲醯胺；
N-[(2-甲氧基-5-甲基苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
(7S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-{[(1s,4s)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-1-基]甲基}-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(4-氟吡啶-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(㗁𠮿-2-基)哌啶-4-甲醯胺；
；
N-[(4-氯苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-({咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基}甲基)哌啶-4-甲醯胺；
7-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(2R,4R)-2-甲基-3,4-二氫-2H-1-苯并哌喃-4-基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(4-氰基環己基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-({[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基}甲基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(6-氟-1,1-二側氧基-3,4-二氫-2H-1λ⁶-苯并噻喃-4-基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺；
(7R*)-N-[(3aR,7aS)-1-甲基-八氫-1H-吲哚-5-基]-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(1,3-二㗁𠮿-5-基)哌啶-4-甲醯胺；
N-(4-苯基環己基)-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[5-(丙-2-基)-1,3-噻唑-2-基]哌啶-4-甲醯胺；
(7S)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1R,2R*,5R)-8-甲基-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-2-基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1,2-㗁唑-3-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
N-[(4,5-二甲基噻吩-2-基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
(7R)-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(1-亞胺基-1-側氧基-1λ⁶-噻𠮿-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺；
N-[(4-三級丁基苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
(1R,3S,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[4-(三氟甲基)雙環[2.2.2]辛烷-1-基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺；
N-[(2,5-二氯苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
(1S,4R,5R*)-N-[(3-氯苯基)甲基]-2-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-5-甲醯胺；
N-[(3-氯苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(6-甲基吡啶-3-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
(7S)-N-[(3R,4S)-4-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)吡咯啶-3-基]-4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(4-乙基-4-羥基環己基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(6-氰基吡啶-3-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(3,3-二氟-1-甲基環丁基)哌啶-4-甲醯胺；
N-[(4-氯-2-甲氧基苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]-3,3-二氟哌啶-4-甲醯胺；
rel-(1R,5R)-2-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-5-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(2-甲基氧雜環戊烷-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1,3-二㗁𠮿-4-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(8S)-5,6,7,8-四氫喹啉-8-基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)乙基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(3-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-({2,3-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基}甲基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3,3-二甲基氧雜環丁烷-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(3-氰基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺；
N-{雙環[1.1.1]戊-1-基}-1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-甲基氧雜環戊烷-3-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
rel-1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(4r)-4-甲氧基-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(5r,8r*)-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-({5,7-二甲基-2-側氧基-1H,2H-吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基}甲基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(2-甲基-1,3-二㗁𠮿-5-基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(4-氟-1,2-苯并㗁唑-3-基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(氧雜環戊烷-2-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
N-(4-甲基環己基)-1-[5-(嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(2-側氧基-1,2,5,6,7,8-六氫喹啉-5-基)哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(2-羥基-2,3-二氫-1H-亞茚-1-基)哌啶-4-甲醯胺；
(1R,3R,5S)-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-8-{5-[3-(三氟甲基)吡啶-4-基]-1H-吡唑-3-羰基}-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺；
N-[(5-氯-2-甲氧基苯基)甲基]-1-[5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺；
3-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]-3-氮雜雙環[4.1.0]庚烷-6-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(㗁𠮿-3-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-{[5-(二氟甲基)嘧啶-2-基]甲基}哌啶-4-甲醯胺；
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺；以及
1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(4R)-5,8-二氟-3,4-二氫-2H-1-苯并哌喃-4-基]哌啶-4-甲醯胺。
在TR-FRET AC 50大於1000 nM的化合物中，沒有確定用星號（「*」）標記的立體中心的手性。
本申請要求於2020年11月9日提交的美國臨時申請案號63/111,354之優先權權益，將其內容藉由引用以其全文併入本文。
無
無
無
Figure 110141725-A0101-11-0002-3

Claims (43)

  1. 一種具有式 (I) 的化合物
    Figure 03_image2685
    或其藥學上可接受的鹽， 其中： Ar 1選自
    Figure 03_image2687
    其中 Y 1選自N和C-X 1，其中X 1選自氫、羥基、鹵素、和C 1-C 4烷基； R 3選自氫、視需要取代的烷基、視需要取代的胺、鹵素、氰基、和視需要取代的烷氧基；並且 R 4選自氫和視需要取代的烷基； Y 2選自C-X 2和N並且Y 3係NH，或Y 2係NH並且Y 3係C-X 2， 其中X 2選自氫和鹵素； 環A選自飽和的6至9員環，其視需要被至少一個選自鹵素、羥基和視需要取代的烷基的取代基取代； R 1選自-(CHR 5) k-(CR 6R 7) n-(O) m-環B，其中 k係0或1， n係0或1， m係0或1， R 5選自氫和視需要取代的烷基， R 6選自氫和鹵素， R 7選自氫和鹵素，並且 環B選自 視需要取代的芳基， 視需要取代的雜芳基， 視需要取代的環烷基， 視需要取代的雜環烷基， 視需要取代的環烯基，和 視需要取代的雜環烯基；並且 R 2選自氫和視需要取代的烷基。
  2. 如請求項1所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，環A選自哌啶基和飽和7至9員雙環，並且環A視需要被至少一個選自鹵素、羥基、和視需要取代的烷基的取代基取代。
  3. 如請求項1至2中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，環A選自哌啶基、氮雜螺辛烷、氮雜螺壬烷、氮雜雙環辛烷、和氧雜-氮雜雙環壬烷，並且環A視需要被至少一個選自鹵素、羥基、和視需要取代的烷基的取代基取代。
  4. 如請求項1至3中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，環B選自 視需要取代的5至10員芳基， 視需要取代的5至10員雜芳基， 視需要取代的3至10員環烷基， 視需要取代的4至10員雜環烷基， 視需要取代的6至10員環烯基，和 視需要取代的6至10員雜環烯基。
  5. 如請求項1至4中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，環B選自視需要取代的5至6員單環芳基、視需要取代的10員二環芳基、視需要取代的5至6員單環雜芳基、視需要取代的9至10員二環雜芳基、視需要取代的3至10員單環烷基、視需要取代的7至10員橋連二環烷基、視需要取代的7至10員螺環二環烷基、視需要取代的4至10員單環雜環烷基、視需要取代的7至10員橋連二環雜環烷基、視需要取代的7至10員螺環二環雜環烷基、視需要取代的5至6員單環環烯基、視需要取代的8至10員二環環烯基、視需要取代的5至6員單環雜環烯基、和視需要取代的8至10員二環雜環烯基。
  6. 如請求項1至5中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，環B選自視需要取代的5至6員單環芳基、視需要取代的10員二環芳基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的5至6員單環雜芳基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的9至10員二環雜芳基、視需要取代的3至10員單環烷基、視需要取代的7至10員橋連二環烷基、視需要取代的7至10員螺環二環烷基、具有1至3個選自氧、矽、和氮的環雜原子的視需要取代的4至10員單環雜環烷基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的7至10員橋連二環雜環烷基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的7至10員螺環二環雜環烷基、視需要取代的5至6員單環環烯基、視需要取代的8至10員二環環烯基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的5至6員單環雜環烯基、和具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的8至10員二環雜環烯基。
  7. 如請求項1至6中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，環A選自
    Figure 03_image2689
    其中 q係0或1，並且 R 8和R 9各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、視需要取代的烷氧基、和視需要取代的烷基。
  8. 如請求項1所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其選自具有式 (II) - (V) 的化合物：
    Figure 03_image2691
    其中 Y 1選自N和C-X 1，其中X 1選自氫、羥基、鹵素、和C 1-C 4烷基； R 3選自氫、視需要取代的烷基，視需要取代的胺、鹵素、氰基、和視需要取代的烷氧基； R 4選自氫和烷基；並且 Y 2選自C-X 2和N並且Y 3係NH，或 Y 2係NH並且Y 3係C-X 2， 其中X 2選自氫和鹵素； q係0或1； R 1選自-(CHR 5) k-(CR 6R 7) n-(O) m-環B， 其中 k係0或1， n係0或1， m係0或1， R 5選自氫和視需要取代的烷基， R 6選自氫和鹵素， R 7選自氫和鹵素，並且 環B選自視需要取代的5至6員單環芳基、視需要取代的10員二環芳基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的5至6員單環雜芳基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的9至10員二環雜芳基、視需要取代的3至10員單環烷基、視需要取代的7至10員橋連二環烷基、視需要取代的7至10員螺環二環烷基、具有1至3個選自氧、矽、和氮的環雜原子的視需要取代的4至10員單環雜環烷基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的7至10員橋連二環雜環烷基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的7至10員螺環二環雜環烷基、視需要取代的5至6員單環環烯基、視需要取代的8至10員二環環烯基、具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的5至6員單環雜環烯基、和具有1至3個選自氧和氮的環雜原子的視需要取代的8至10員二環雜環烯基； R 2選自氫和視需要取代的烷基；並且 R 8和R 9各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、視需要取代的烷氧基、和視需要取代的烷基。
  9. 如請求項1至8中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
    Figure 03_image2693
    其中： w係0或1； Y 4和Y 5各自獨立地選自視需要取代的-(CH 2)-、視需要取代的-(NH)-、和-O-； Y 6選自視需要取代的-(CH 2)-、視需要取代的-(NH)-、四烷基矽烷、和-O-； R 10選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、和羰基；並且 R 11、R 12、和R 13各自獨立地選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
  10. 如請求項1至9中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
    Figure 03_image2695
    其中 R 11和R 12各自獨立地選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基； R 14選自氫和視需要取代的烷基； R選自氫、視需要取代的烷基、和芳基；並且 R’選自氫、視需要取代的烷基、和鹵素。
  11. 如請求項1至9中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
    Figure 03_image2697
    其中R 11、R 12、和R 13各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、視需要取代的烷基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
  12. 如請求項1至8中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
    Figure 03_image2699
    其中 w係0或1， Y 4選自SO 2、視需要取代的磺醯胺、視需要取代的醯胺、視需要取代的-(CH 2)-、視需要取代的-(NH)-、和-O-； R 11和R 12各自獨立地選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基；並且 環C選自5員芳環、包含1或2個環氮原子的5員雜芳環、6員芳環和包含1或2個環氮原子的6員雜芳環。
  13. 如請求項1至8中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
    Figure 03_image2701
    其中 Y 4、Y 5、和Y 6各自獨立地選自視需要取代的-(CH)-、視需要取代的-(NH)-、和-O-； R 11選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基；並且 環C選自5員芳環、包含1或2個環氮原子的5員雜芳環、6員芳環和包含1或2個環氮原子的6員雜芳環。
  14. 如請求項1至8和13中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
    Figure 03_image2703
    其中 當R 11鍵合至氮時，R 11選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、和羥基，並且R 11另外選自氫和視需要取代的烷基； 當R 12鍵合至氮時，R 12選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、和羥基，並且R 12另外選自氫和視需要取代的烷基； 當R 13鍵合至氮時，R 13選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、和羥基，並且R 13另外選自氫和視需要取代的烷基；並且 R 14選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
  15. 如請求項1至8中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
    Figure 03_image2705
    其中 Y 4和Y 5各自獨立地選自視需要取代的-(CH 2)-、視需要取代的-(NH)-、和-O-；並且 R 11和R 12獨立地選自氫、氰基、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、芳基、雜芳基、和視需要取代的烷氧基。
  16. 如請求項1至8和16中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
    Figure 03_image2707
    其中R 11和R 12獨立地選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
  17. 如請求項1至8中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
    Figure 03_image2709
    其中R 11、R 12、和R 13獨立地選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
  18. 如請求項1至8和15中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， 環B選自
    Figure 03_image2711
    其中 Y 6選自視需要取代的-(CH)-和視需要取代的-(NH)-；並且 R 11選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
  19. 如請求項1至8中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，環B選自
    Figure 03_image2713
    其中 Y 4選自視需要取代的-(CH 2)-、視需要取代的-(NH)-、和-O-； Y 5選自視需要取代的-(CH)-和N；並且 R 11和R 12選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
  20. 如請求項1至8中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，環B選自
    Figure 03_image2715
    其中R 11和R 12選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
  21. 如請求項1至8和12中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，環B選自
    Figure 03_image2717
    其中 R 11、R 12、和R 13獨立地選自氫、鹵素、視需要取代的烷基、羥基、視需要取代的胺、和視需要取代的烷氧基。
  22. 如請求項1至21中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中， R 1選自-(CHR 5) k-(CR 6R 7) n-(O) m-環B，其中 k係0或1， n係0或1， m係0或1， R 5選自氫和甲基， R 6選自氫和鹵素， R 7選自氫和鹵素；並且 R 2選自氫和甲基。
  23. 一種化合物，該化合物選自：
    Figure 03_image2719
    或其藥學上可接受的鹽， 其中 Y 1選自N和C-X 1，其中X 1選自氫、羥基、鹵素、和C 1-C 4烷基； R 3選自氫、視需要取代的C 1-C 3烷基、鹵素、氰基、和視需要取代的C 1-C 3烷氧基；並且 R 4選自氫和烷基； Y 4選自CH 2、O、和N-R 11； X 3選自氫和鹵素； R’選自氫和視需要被至少一個鹵素取代的C 1-C 3烷基； R 11選自氫和C 1-C 3烷基； R 12選自氫、鹵素、和C 1-C 3烷基；並且 R 13選自氫、鹵素、C 2-C 4烷氧基、和C 1-C 3烷基。
  24. 如請求項23所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其選自：
    Figure 03_image2721
    其中 X 1選自氫、羥基、鹵素、和C 1-C 4烷基； X 3選自氫和鹵素；並且 R 11和R 12獨立地選自氫和C 1-C 3烷基。
  25. 如請求項1至24中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，該視需要取代的烷基選自鹵代烷基。
  26. 如請求項25所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，該鹵代烷基係三氟甲基。
  27. 至少一種選自以下的化合物： 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4s)-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(4-氟-5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； (S)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(3-氟苯基)乙基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1s,4s)-4-(二氟甲基)環己基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1r,4r)-4-(二氟甲基)環己基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； N-(4-甲基環己基)-1-[5-(2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4s)-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1s,4s)-4-乙基環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1r,4r)-4-乙基環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(3-氯吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-[4-氯-5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[4-氯-5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-甲基環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]哌啶-4-甲醯胺； N-((1s,4s)-4-(二氟甲基)環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1r,4r)-4-(二氟甲基)環己基)-1-(5-(2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4s)-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； (R)-1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[1-(3-氯苯基)乙基]哌啶-4-甲醯胺； (S)-1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[1-(3-氯苯基)乙基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(1-苯基吡咯啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氯吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(2-甲基-1,3-二㗁𠮿-5-基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲哚-5-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2,3,6-三氟苄基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-氯-5-氟苄基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氟吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-氰基環丁基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-甲基吡啶-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(異口克唍-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,2S)-2-苯基環丙基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-羥基環己基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4,4-二甲基氧雜環丁烷-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-甲基㗁唑-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氯嘧啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-氯吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1,5-二甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(4-氯苯氧基)丙-2-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3,3-二氟環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-甲氧基環丁基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-氟吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-(二氟甲基)苯基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3,3-二氟環丁基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2,2-二氟-2-苯基乙基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3,3,5-三甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-(二氟甲氧基)苄基)哌啶-4-甲醯胺； N-(苯并[d]㗁唑-6-基甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； (R)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(3-氟苯基)乙基)哌啶-4-甲醯胺； N-(5-氯-2-氟苄基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2,3-二氟苄基)哌啶-4-甲醯胺； N-(3-氯-2-氟苄基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氟苄基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3,4-二氫-2H-哌喃-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-(3-氯苄基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(3-氯苄基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3r,5S)-N-(3-氯苄基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； N-(3-氯苄基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-甲基哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(三氟甲基)環戊基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1,4-二甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-(三氟甲氧基)苄基)哌啶-4-甲醯胺； N-(雙環[3.2.1]辛烷-8-基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-[(3-氯苯基)甲基]-1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-1,2,4-三唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-側氧基吲哚啉-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-4-羥基哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-3-甲基哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-4-氟哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3,3-二氟環戊基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-甲基吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-3-氟哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6-(三氟-l5-甲基)吡啶-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氯吡啶-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲唑-6-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲哚-3-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(異喹啉-6-基甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5-側氧基-1-苯基吡咯啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(口克唍-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2,2-二甲基-1,3-二氧戊環-4-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-甲基-1,2,3,4-四氫喹啉-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-1H-吲哚-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲哚-6-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-甲基呋喃-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲哚-4-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5,6,7,8-四氫異喹啉-5-基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲唑-4-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲哚-7-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-氟口克唍-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-苯基哌啶-4-基)哌啶-4-甲醯胺； N-((2H-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-羥基-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺； N-((3-氟-1H-吲唑-5-基)甲基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲唑-3-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-甲基-1H-吲唑-5-基)甲基]哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-異丙基-1H-吡唑-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-側氧基-1-苯基吡咯啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； N-(5-氯-2,3-二氫苯并呋喃-3-基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-5-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5,5-二甲基四氫呋喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((8-氟咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-甲基-1,3-二㗁𠮿-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-1H-吲唑-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6-氯咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4,4-二氟四氫呋喃-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-(三氟甲基)㗁唑-4-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(2-氟苯基)吡咯啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-5-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-(二氟甲基)異㗁唑-3-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-甲基-2-側氧基-2,3-二氫苯并[d]㗁唑-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-1H-吲唑-6-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-((2-氧雜雙環[3.1.1]庚烷-1-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-甲基-2,2-二氧-3,4-二氫-1H-苯并[c][1,2]噻𠯤-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； (S)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-氰基口克唍-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-甲基-2-側氧基-1,2,5,6,7,8-六氫喹啉-5-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-2-側氧基吲哚啉-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3,4-二氫-2H-哌喃并[2,3-b]吡啶-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1,1-二氧-2,3-二氫苯并[b]噻吩-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-甲基-3-側氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6,7-二氫-5H-環戊[d]嘧啶-2-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3,3-二甲基-2-側氧基吲哚啉-5-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氟-1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-側氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉-4-基)哌啶-4-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氟-3-甲基環丁基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5-甲基四氫呋喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吲哚-2-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-甲基吡啶-2-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-甲氧基口克唍-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(4-氟苯基)吡咯啶-3-基)哌啶-4-甲醯胺； N-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-基)甲基)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； (S)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,2-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (R)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,2-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (S)-5-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺； (R)-5-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-N-[(3-氟-1H-吲唑-5-基)甲基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5,6-二甲基吡𠯤-2-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1H-吲哚-4-基)哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-羥基-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4s)-4-羥基-4-甲基環己基)哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-3-基)哌啶-4-甲醯胺； (2S,5R)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,5S)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,5R)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2S,5S)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； N-[(3-氯苯基)甲基]-1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺； (1R,3S,5S)-N-[(3-氯苯基)甲基]-8-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； N-[(3-氟-1H-吲唑-5-基)甲基]-1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氯-2-乙基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(3-氯苯基)甲基]哌啶-4-甲醯胺； 1-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-(1H-吲哚-5-基甲基)哌啶-4-甲醯胺； N-[(2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基]-1-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]哌啶-4-甲醯胺； (2R,4R)-1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺； 1-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-氯苄基)-2,6-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； 1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)哌啶-4-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((3-氟-1-甲基-1H-吲唑-5-基)甲基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； N-((3,3-二甲基吲哚啉-5-基)甲基)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)哌啶-4-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； 1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(3-甲基-1H-吲唑-5-基)乙基)哌啶-4-甲醯胺； 9-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-3-氧雜-9-氮雜雙環[3.3.1]壬烷-7-甲醯胺； (1R,3R,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((3-氟-1H-吲唑-5-基)甲基)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3R,5S)-N-[(2,3-二甲基-1H-吲哚-5-基)甲基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氟-1H-吲唑-5-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-氟-1H-吲唑-5-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-6-(三氟甲基)四氫-2H-哌喃-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(3-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-5-基)乙基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(3-(三氟甲基)-1,2,4-㗁二唑-5-基)乙基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(1,1-二甲基矽烷-4-基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3R,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3R,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5R,8r)-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5S,8s)-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； 4-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(R)-1-(2-氟苯基)吡咯啶-3-基]-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3S,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[1-氧雜螺[3.5]壬-7-基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (2R,4S,5S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2S,4S,5S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,4R,5S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,4S,5R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2S,4S,5R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2S,4R,5S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,4R,5R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (2S,4R,5R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,5-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (1R,3S,5S)-N-[(3S,6S)-1-乙基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-N-[(3S,6R)-1-乙基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-N-[(3R,6S)-1-乙基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-N-[(3S,6R)-1-乙基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基]-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (R)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(4-羥基-4-(全氟乙基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3R,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-(二氟甲基)-4-甲氧基環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3R,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-(二氟甲基)-4-甲氧基環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((1r,4R)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((1s,4S)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-(2-甲氧基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基]-N-[(1s,4s)-4-(2-甲氧基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3S,5S)-8-[5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-1,2,4-三唑-3-羰基]-N-[(1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基]-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(3,3-二氟-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1s,4R)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1r,4R)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1s,4S)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1s,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1r,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1s,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； 4-(4-(5-羥基-2-甲基吡啶-4-基)-1H-咪唑-2-羰基)-N-((1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (R)-N-((1r,4S)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4R)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-羥基雙環[2.2.2]辛烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-羥基雙環[2.2.2]辛烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(2,3-二甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(6-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(2-乙基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(2-(羥基甲基)吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-(三氟甲基)-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(3,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-1-甲基-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1r,4R)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-乙氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-甲氧基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4S,7r)-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4R,7s)-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6S)-1-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6S)-1-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,6R)-1-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,6R)-1-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(三氟甲基)哌啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5R,8r)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5S,8s)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5S,8r)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5R,8s)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5R,8r)-1-乙基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5S,8s)-1-乙基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5S,8r)-1-乙基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5R,8s)-1-乙基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-(2-(二甲基胺基)乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-(2-羥基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-(2-羥基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-羥基雙環[2.2.1]庚烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-羥基雙環[2.2.1]庚烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-羥基雙環[2.1.1]己烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； 4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-羥基雙環[2.1.1]己烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-羥基雙環[1.1.1]戊-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(6-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1S,4S)-4-((S)-2-甲氧基丙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,4S)-4-((R)-2-甲氧基丙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(((R)-4,5,6,7-四氫-2H-吲唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(((S)-4,5,6,7-四氫-2H-吲唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(((R)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,5-a]吡啶-7-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(((S)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,5-a]吡啶-7-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-甲基-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((R)-1-(2-羥基-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((R)-1-(2-羥基-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((S)-1-(2-羥基-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((S)-1-(2-羥基-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(((R)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-7-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(((S)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-7-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1r,4R)-N-((R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-甲醯胺； (1s,4S)-N-((R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-甲醯胺； (1r,4S)-N-((S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-甲醯胺； (1s,4R)-N-((S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-基)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己烷-1-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(氧雜環丁烷-3-基)-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-(2-胺基乙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(1-(2,2-二氟丙基)-1-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,4S)-4-((S)-2-胺基丙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1S,4S)-4-((S)-2-羥基丙氧基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-(8-氧雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,3R)-3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2-二甲基環丁基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,3S)-3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2-二甲基環丁基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((S)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((R)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((S)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-8H-[1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]㗁𠯤-6-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((R)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-8H-[1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]㗁𠯤-6-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-甲基吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(3-氯吡啶-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(3-氯吡啶-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氟-3-甲基吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氟-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-(三氟甲基)-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-3,4-二氫-2H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-3,4-二氫-2H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (2S,4R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺； (2S,4S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺； (2R,4R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺； (2R,4S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-(三氟甲基)哌啶-4-甲醯胺； (R)-N-((1r,4R)-4-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((1s,4S)-4-(1,1-二氟-2-甲氧基乙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5S,8s)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5R,8r)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5,6-二氫-8H-咪唑并[2,1-c][1,4]㗁𠯤-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((1R,3S)-1-亞胺基-2,2-二甲基-1-氧四氫-1H-1l6-噻吩-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((1S,3S)-1-亞胺基-2,2-二甲基-1-氧四氫-1H-1l6-噻吩-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((1S,3R)-1-亞胺基-2,2-二甲基-1-氧四氫-1H-1l6-噻吩-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((1R,3R)-1-亞胺基-2,2-二甲基-1-氧四氫-1H-1l6-噻吩-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(全氟乙基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4R)-4-羥基-4-(全氟乙基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((4S,7r)-3,3-二氟-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((4R,7s)-3,3-二氟-1-氧雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1s,4R)-4-(1,1-二氟乙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-(1,1-二氟乙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6R,8aR)-八氫吲口巾-6-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6R,8aS)-八氫吲口巾-6-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6S,8aR)-八氫吲口巾-6-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((6S,8aS)-八氫吲口巾-6-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(3-氯-5-氟吡啶-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(3-氯-5-氟吡啶-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1s,3R)-3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2,4,4-四甲基環丁基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,3S)-3-(3,3-二氟吡咯啶-1-基)-2,2,4,4-四甲基環丁基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-4,4-二氟-1-(2-氟-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-4,4-二氟-1-(2-氟-2-甲基丙基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-6-甲基-3,4-二氫-2H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-6-甲基-3,4-二氫-2H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((S)-3-甲基-4,5,6,7-四氫-1H-吲唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(((R)-3-甲基-4,5,6,7-四氫-1H-吲唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-7-氟-3,4-二氫-2H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-7-氟-3,4-二氫-2H-哌喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-甲基吡𠯤-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-氯-2-甲基嘧啶-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯吡𠯤-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氟-3-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氰基吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-(氧雜環丁烷-3-基)吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-(3-氰基氮雜環丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-甲基-5-(三氟甲基)㗁唑-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(5-環丙基-1,3,4-㗁二唑-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(5-環丙基-1,3,4-㗁二唑-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(氧雜環丁烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(氧雜環丁烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-甲基吡𠯤-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-(1,1-二氟-3-甲氧基丙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1s,4R)-4-(1,1-二氟-3-甲氧基丙基)-4-羥基環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1s,4R)-4-胺基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-胺基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3,5-二氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (2S,4S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,4S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺； (2R,4R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺； (2S,4R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-甲基哌啶-4-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (2R,4S)-2-乙基-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺； (2S,4R)-2-乙基-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺； (2S,4S)-2-乙基-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺； (2R,4R)-2-乙基-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)哌啶-4-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-氟-3-(4-甲基哌𠯤-1-基)吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5R,8r)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5S,8s)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5S,8r)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5R,8s)-4,4-二氟-1-氧雜螺[4.5]癸-8-基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-((1-氟環丙基)甲基)氮雜環丁烷-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,2-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (R)-1-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2,2-二甲基哌啶-4-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4R)-4-(羥基甲基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-(羥基甲基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-(1-(三級丁基亞磺醯基)-3,3-二氟-1-氮雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((4S,7r)-3,3-二氟-1-氮雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((4R,7s)-3,3-二氟-1-氮雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(4-羥基雙環[2.2.2]辛烷-1-基)乙基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(4-羥基雙環[2.2.2]辛烷-1-基)乙基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((4,6-二甲基吡𠯤-3-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((5-氯嘧啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3S,4R)-4-𠰌啉代四氫呋喃-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3R,4S)-4-𠰌啉代四氫呋喃-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(5,6-二氫-8H-咪唑并[2,1-c][1,4]㗁𠯤-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(5,6-二氫-8H-咪唑并[2,1-c][1,4]㗁𠯤-2-基)乙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(氧雜環丁烷-3-基)哌啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-𠰌啉代環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1s,4R)-4-𠰌啉代環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,5S,7r)-9-甲基-3-氧雜-9-氮雜雙環[3.3.1]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,5S,7s)-9-甲基-3-氧雜-9-氮雜雙環[3.3.1]壬-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(甲基磺醯基)哌啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(氧雜環丁烷-3-基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(氧雜環丁烷-3-基)哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3R,4S)-4-氟-1-甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3S,4S)-4-氟-1-甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3R,4R)-4-氟-1-甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3S,4R)-4-氟-1-甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3S,6S)-1,6-二甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3R,6R)-1,6-二甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3S,6R)-1,6-二甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3R,6S)-1,6-二甲基哌啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1,6,6-三甲基哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1,6,6-三甲基哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(2-氟乙基)-2,2-二甲基哌啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(2-氟乙基)-2,2-二甲基哌啶-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3R,4R)-4-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3S,4S)-4-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3S,4R)-4-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(3-(氧雜環丁烷-3-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(2-甲基嘧啶-4-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(2-甲基嘧啶-4-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-((S)-四氫呋喃-3-基)氮雜環丁烷-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-((R)-四氫呋喃-3-基)氮雜環丁烷-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-((3-氯-5-(3,5-二甲基哌𠯤-1-基)吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-4,4-二氟-1-((1-(三氟甲基)環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-4,4-二氟-1-((1-(三氟甲基)環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(4-(1,1-二氟-2-羥基乙基)-4-羥基環己基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-((1-(三氟甲基)環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(4-氰基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (S)-N-((1s,4R)-4-(氰基甲基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1r,4S)-4-(氰基甲基)-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((2-(2-氟-2-甲基丙基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (1R,3s,5S)-N-(4-胺基-4-(三氟甲基)環己基)-8-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(2-(2-氟-2-甲基丙基)-2-氮雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-(三氟甲基)-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； 5-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4r)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-2-氧雜-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5-((R)-1-羥基乙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(5-((S)-1-羥基乙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-(氧雜環丁烷-3-基氧基)吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-((5-(3,5-二甲基哌𠯤-1-基)嘧啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(1-氰基環丙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(2-甲氧基-5-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1,6,6-三甲基哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1,6,6-三甲基哌啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-6-甲基吡𠯤-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(6-甲基吡𠯤-4-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(6-甲基吡𠯤-4-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(2-甲基嘧啶-5-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(2-甲基嘧啶-5-基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-((3-羥基氧雜環丁烷-3-基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-((3-羥基氧雜環丁烷-3-基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-甲氧基嘧啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-氰基嘧啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(1-(3,5-二氯吡啶-2-基)環丙基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(2,2-二氟-3-羥基丙基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(2,2-二氟-3-羥基丙基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,4S)-4-((3S,5R)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,4R)-4-((3S,5R)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-((R)-1-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-((S)-1-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-((R)-1-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-((S)-1-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-((1R,4R)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)-3-氯吡啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-((1S,4S)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)-3-氯吡啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((3-羥基氧雜環丁烷-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-((R)-1-氧雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-((S)-1-氧雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-((R)-1-氧雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-((S)-1-氧雜螺[3.3]庚烷-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1,4,5-三甲基-1H-咪唑-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(5-((1S,2S)-2-氰基環丙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(5-((1R,2R)-2-氰基環丙基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-((1R,4R)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)嘧啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-((1S,4S)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)嘧啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-氟吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-氟吡唑并[1,5-a]吡啶-7-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-((1S,6R)-2,5-二氮雜雙環[4.1.0]庚烷-2-基)嘧啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-((1R,6S)-2,5-二氮雜雙環[4.1.0]庚烷-2-基)嘧啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-4,4-二氟-1-((1-羥基環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-4,4-二氟-1-((1-羥基環丙基)甲基)吡咯啶-3-基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(吡咯啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(5-氰基嘧啶-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(5-氰基嘧啶-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1-異丙基-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,3R,4S)-3,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,3S,4R)-3,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,3R,4S)-3,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,3S,4R)-3,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(5-甲基-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-基)乙基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(5-甲基-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-基)乙基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((5-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； 4-(5-(2-乙醯基-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-((S)-1-羥基乙基)吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-((S)-1-羥基乙基)吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-((R)-1-羥基乙基)吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-((R)-1-羥基乙基)吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(2-環丙基-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(2-環丙基-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-((1S,2S)-2-(羥基甲基)環丙基)吡𠯤-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((3-((1R,2R)-2-(羥基甲基)環丙基)吡𠯤-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((2-((3S,5R)-3,5-二甲基哌𠯤-1-基)-5-(三氟甲基)㗁唑-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(2-乙基-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-氯-5-氟吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(2-乙基-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-氯-5-甲氧基吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-(三氟甲基)-2-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌𠯤-1-基)㗁唑-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-5-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺； (R)-5-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-5-氮雜螺[3.5]壬烷-8-甲醯胺； (S)-N-(5-氰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-(1-(6-氰基吡啶-3-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-1-(5-氰基吡啶-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-1-(5-氰基吡啶-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((S)-4,4-二氟-1-(5-甲基吡𠯤-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((R)-4,4-二氟-1-(5-甲基吡𠯤-2-基)吡咯啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-異丙氧基吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(6-乙醯基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-((S)-1-羥基乙基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(6-((R)-1-羥基乙基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-(7',8'-二氫-6'H-螺[氧雜環丁烷-3,5'-喹啉]-8'-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (7S)-N-(5-乙基-2-氧雜-5-氮雜螺[3.5]壬-7-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(5,5-二甲基-6,7-二氫-5H-吡唑并[5,1-b][1,3]㗁𠯤-3-基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1-(胺基甲基)-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,3R,4S)-3-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1S,3S,4R)-3-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-2-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-2-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氫咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((4-(三氟甲基)-1H-咪唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,2R,4S)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,2S,4S)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,2R,4S)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,2S,4S)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,2R,4R)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1S,2S,4R)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,2R,4R)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((1R,2S,4R)-2,4-二羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((3-(三氟甲基)異㗁唑-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-環丙基吡啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-N-((3-環丙基吡啶-2-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((1-甲基-4-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((3-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(((S)-3,3-二氟哌啶-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-(((R)-3,3-二氟哌啶-4-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((5-氟嘧啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-5-羥基-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-5-羥基-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((3-(三氟甲基)雙環[1.1.1]戊-1-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((4-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((2-甲基-4-(三氟甲基)噻唑-5-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((R)-1-(羥基甲基)-3-甲基-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((S)-1-(羥基甲基)-3-甲基-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((1-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-(1-(羥基甲基)-2-氧雜雙環[2.1.1]己烷-4-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((3-氯-5-(4-甲基哌𠯤-1-基)吡啶-2-基)甲基)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((1-羥基-3,3-二甲基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼雜環戊烯-6-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼雜環戊烯-5-基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,3S)-3-羥基-3-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1S,3S)-3-羥基-3-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1R,3R)-3-羥基-3-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1S,3R)-3-羥基-3-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-N-((3-(三氟甲基)吡啶-4-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-N-((5-氯-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)甲基)-4-(3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-羰基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-甲氧基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(6-氰基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(6-氰基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(2-氯-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4S)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (R)-4-(5-(2-氯-5-氟吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((1r,4R)-4-羥基-4-(三氟甲基)環己基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； (S)-4-(5-(5-氟-2-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-羰基)-N-((5-甲氧基-3-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)甲基)-4-氮雜螺[2.5]辛烷-7-甲醯胺； 及其藥學上可接受的鹽。
  28. 一種藥物組成物，其包含至少一種選自如請求項1至27中任一項所述之具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽的實體。
  29. 如請求項28所述之藥物組成物，其進一步包含至少一種藥學上可接受的載體。
  30. 一種用於治療和/或預防癌症之方法，該方法包括向有需要的受試者投與有效量的至少一種選自如請求項1至27中任一項所述之具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽和如請求項28或29中任一項所述之藥物組成物的實體。
  31. 如請求項30所述之方法，其中，該癌症選自膀胱癌、乳癌、前列腺癌和具有改變的RXRα和/或PPARγ途徑的癌症。
  32. 如請求項30和31中任一項所述之方法，其中，該癌症係膀胱癌。
  33. 如請求項30至32中任一項所述之方法，其中，該膀胱癌選自晚期膀胱癌、管腔膀胱癌和基底膀胱癌。
  34. 如請求項30至33中任一項所述之方法，其中，該癌症係化學療法抗性和/或免疫療法抗性的癌症。
  35. 至少一種選自如請求項1至27中任一項所述之具有式 (I) 的化合物及其藥學上可接受的鹽和如請求項28或29中任一項所述之藥物組成物的實體在治療和/或預防癌症中的用途。
  36. 如請求項35所述之用途，其中，該癌症選自膀胱癌、乳癌、前列腺癌和具有改變的RXRα和/或PPARγ途徑的癌症。
  37. 如請求項35和36中任一項所述之用途，其中，該癌症係膀胱癌。
  38. 如請求項35至37中任一項所述之用途，其中，該膀胱癌係晚期膀胱癌、管腔膀胱癌和/或基底膀胱癌。
  39. 如請求項35至38中任一項所述之用途，其中，該癌症係化學療法抗性和/或免疫療法抗性的癌症。
  40. 如請求項1至27中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，該化合物或藥學上可接受的鹽具有小於1000 nM、小於500 nM或小於250 nM的TR-FRET反向促效劑AC 50值。
  41. 如請求項1至27中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，R 1的m係0。
  42. 如請求項8所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，R 8或R 9係螺連接的氧雜環丁烷。
  43. 如請求項1至27和40至42中任一項所述之化合物或藥學上可接受的鹽，其中，該化合物選自具有式 (IIB) 和式 (IIIB) 的化合物：
    Figure 03_image050
    式 (IIB)，和
    Figure 03_image052
    式 (IIIB)；其中 q係0或1；並且 R 8和R 9各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、視需要取代的烷氧基、和視需要取代的烷基。 [1]根據US 2015141402 A1製備，程序沒有任何偏差。 [2]根據Früh, N.和Togni, A. (2014), Vanadium‐Catalyzed Solvent‐Free Synthesis of Quaternary α‐Trifluoromethyl Nitriles by Electrophilic Trifluoromethylation [藉由親電三氟甲基化的釩催化無溶劑合成季α-三氟甲基腈]. Angew. Chem. Int. Ed. [德國應用化學]，53: 10813-10816製備。 [3]根據WO 2018168818 A1製備，與所報導的程序沒有任何偏差。 [4]根據V. V. Levterov, Y. Panasyuk, V. O. Pivnytska, P. K. Mykhailiuk, Angew. Chem. Int. Ed. [德國應用化學] 2020, 59, 7161製備。
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