TW202228759A

TW202228759A - 育毛劑

Info

Publication number: TW202228759A
Application number: TW110135956A
Authority: TW
Inventors: 中村荘太; 高橋秀樹; 中池佑紀美; 辻孝; 小川美帆
Original assignee: 日商日本安佳榜化妝股份有限公司; 國立研究開發法人理化學研究所
Priority date: 2020-09-24
Filing date: 2021-09-24
Publication date: 2022-08-01
Also published as: CN116867504A; JP2023025132A; WO2022065415A1; KR20230149286A; JP2023022204A; US20230390356A1; JPWO2022065415A1

Abstract

為了提供具促進頭髪、鬚毛、眉毛及/或睫毛中之毛幹成長，增強有助於真皮乳頭細胞中之育毛的基因表現，毛髮生長、毛幹伸長速度之提升、毛幹最大長度之提升、及毛幹徑之增大的效果之屬於外用劑之育毛劑、頭皮護理劑及增強有助於真皮乳頭細胞中之育毛的基因表現之劑，而含有棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸者作為此等劑之有效成分。

Description

育毛劑

本發明係關於育毛劑。更詳細而言，係關於屬於包含棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸之外用劑的育毛劑。

在包括人類在內的哺乳動物中，對改善育毛效果及毛種與毛質的育毛劑等之外用劑的需要逐漸增加。為了改善育毛效果及毛種與毛質，提案了有助於調整屬於毛髮的生命週期之毛髮週期的有效成分，並作為育毛劑而在市場上銷售。

例如，提案了利用米諾地爾作為育毛劑的有效成分(參照專利文獻1至3等)，並經過人體臨床試驗，以米諾地爾作為有效成分的育毛劑在市場上銷售。然而，其醫藥用途在日本僅限於男性中年脫髮症等，無法充分地滿足廣大消費者對育毛效果及毛種與毛質改善效果的需求。

此外，提案了利用手性肌醇作為育毛劑的有效成分(參照專利文獻4)。然而，專利文獻4所述之屬於包含手性肌醇之外用劑的育毛劑僅在不具有胰島素抵抗性的對象中得到育毛效果的支持，以致投與對象者受限。因此，無法充分地滿足廣大消費者對育毛效果及毛種與毛質改善效果的需求。

已知棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸係作為化妝品原材料的成分(參照專利文獻5)。然而，並未有關於棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸之育毛效果的報導。

[先前技術文獻]

[專利文獻]

[專利文獻1]美國專利第4139619號說明書

[專利文獻2]日本特開昭63-150211號公報

[專利文獻3]日本特開昭63-145217號公報

[專利文獻4]國際公開第2017/188393號

[專利文獻5]日本特許第5028474號公報

本發明之目的係提供一種具有優異育毛作用的育毛劑。

本發明者等為了解決上述課題進行重複研究之結果發現，藉由將棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸作為有效成分，則可使育毛活性發揮、發揮頭皮護理效果及使真皮乳頭細胞之FGF-7產生促進效果發揮，從而完成本發明。

用於解決上述課題之本發明之第1之手段係，一種育毛劑，其係包含棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸的外用劑。

用於解決上述課題之本發明之第2之手段係，如本發明之第1之手段所述之育毛劑，其中，棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸之含量，相對於整體，係0.001至20重量%。

用於解決上述課題之本發明之第3之手段係，如本發明之第1之手段或第2之手段所述之育毛劑，其中，棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸之含量，相對於整體，係0.005至10重量%。

用於解決上述課題之本發明之第4之手段係，如本發明之第1至第3之手段中任一項之手段所述之育毛劑，其係用於促進毛幹生長或毛髮生長。

用於解決上述課題之本發明之第5之手段係，如本發明之第1至第4之手段中任一項之手段所述之育毛劑，其係使用於使毛幹伸長速度提升。

用於解決上述課題之本發明之第6之手段係，如本發明之第1至第4之手段中任一項之手段所述之育毛劑，其係使用於使毛幹最大長度提升。

用於解決上述課題之本發明之第7之手段係，如本發明之第1至第4之手段中任一項之手段所述之育毛劑，其係使用於使毛幹徑增大。

用於解決上述課題之本發明之第8之手段係，如本發明之第1至第4之手段中任一項之手段所述之育毛劑，其係使用於使毛髮數量增加。

用於解決上述課題之本發明之第9之手段係，如本發明之第1至第8之手段中任一項之手段所述之育毛劑，其係溶液。

用於解決上述課題之本發明之第10之手段係，如本發明之第1至第9之手段中任一項之手段所述之育毛劑，其係用於頭髪、鬚毛、眉毛及/或睫毛。

用於解決上述課題之本發明之第11之手段係，一種育毛方法，係包含將本發明之第1至第10之手段中任一項之手段所述之育毛劑投與至對象。

用於解決上述課題之本發明之其他之手段係，一種頭皮護理劑，其係包含棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸的外用劑。

用於解決上述課題之本發明之其他之手段係，一種頭皮症狀改善方法，其係包含將屬於包含棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸之外用劑的頭皮護理劑投與至對象。

用於解決上述課題之本發明之其他之手段係，一種真皮乳頭細胞之FGF-7產生促進劑，其係包含棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸。

依據本發明之手段，可提供一種育毛劑、頭皮護理劑及真皮乳頭細胞之FGF-7產生促進劑，此等係藉由將棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸作為屬於外用劑之育毛劑的有效成分，而在頭髪、鬚毛、眉毛及/或睫毛中，促進毛幹生長、毛幹伸長速度的提升、毛幹最大長度的提升、毛幹徑的增大之效果以及頭皮護理效果優異。

圖1係確認在棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸0.05%溶液之塗佈後，小鼠之藥劑塗佈部位中之毛髮生長之狀態的照片、及顯示小鼠之藥劑塗佈部位中之毛幹長度之變化的圖。圖之縱軸表示毛幹長度(mm)。又，安慰劑塗佈意指顯示不含藥劑之60%乙醇水溶液塗佈在第一毛髮週期的標準數據。

圖2係顯示藥劑塗佈後之毛幹徑的測定結果。

圖3係顯示人真皮乳頭細胞中之因棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸的刺激引起真皮乳頭細胞之增殖促進效果。

圖4係顯示人真皮乳頭細胞中之因棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸的刺激引起FGF-7基因表現量之變化。

以下說明用於實施本發明之型態。又，本發明並非限定於此等例示，當然，在不脫離本發明之主旨的範圍內可進行各種變更。

本發明之屬於外用劑的育毛劑及頭皮護理劑之有效成分係由棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸(Palmitoyl Dipeptide-5 Diaminobutyloyl Hydroxythreonine(Palm-Lys-Val-Dab-Thr-OH))所構成。

本發明之育毛劑及頭皮護理劑中之屬於有效成分的棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸的濃度，相對於育毛劑及頭皮護理劑之整體，係0.001至20重量%。更具體而言，係0.005至10重量%。

本發明之育毛劑及頭皮護理劑可使用作為包含醫藥品、準藥品、頭髪、鬚毛、眉毛及/或睫毛用之化妝品及頭皮用化妝品的化妝品等，並且可使用作為軟膏、糊劑、搽劑、洗劑、外用液劑、噴霧劑、霜劑、凝膠劑、乳液、養髮劑、髮膠、微針等各種態樣的製劑，惟並非限定於此等者。

此外，在不妨礙本發明之育毛效果及頭皮護理效果之程度中，亦可進一步調配通常含有在包含醫藥品、準藥品、頭髪、鬚毛、眉毛及/或睫毛用化妝品及頭皮用化妝品之化妝品等中允許的添加物等成分者。作為該添加物等成分，係列舉例如賦形劑、穩定劑、矯味劑、基劑、分散劑、稀釋劑、陰離子性界面活性劑、兩性界面活性劑、非離子性界面活性劑、陽離子性界面活性劑、陰離子性聚合物、非離子性聚合物、環氧乙烷/環氧丙烷嵌段共聚物、醇類、乳化劑、經皮吸收促進劑、pH調整劑、保存劑、著色劑、油脂、礦物油等油分、保濕劑、增黏劑、聚合物、皮膜形成劑、紫外線吸收劑、細胞賦活劑、保濕劑、無機鹽、機能性珠粒與膠囊類、聚矽氧類、金屬螯合物劑、抗氧化劑、防腐劑、清涼劑、除臭劑、顏料、染料、香料、糖類、胺基酸類、維他命類、有機酸、有機胺、植物萃取物、黏土礦物及各種聚合物等黏度調整劑等，惟並非限定於此等者。

本發明之育毛劑及頭皮護理劑可含有具有毛髮生長、育毛、養毛等效果的習知成分者。

可調整每次投與本發明之手段中之育毛劑及頭皮護理劑的有效成分之投與量，從而表現出本發明之育毛劑及頭皮護理劑的效果。然後，其投與量，例如可為0.005至200mg，具體而言，可為0.05至100mg，更具體而言，可為0.5至10mg。

本發明之育毛劑及頭皮護理劑的投與次數可為1次或複數次，以表現出本發明之育毛劑及頭皮護理劑的效果。然後，本發明之育毛劑及頭皮護理劑的投與次數，例如可為每天1至6次。然後，具體而言，可為每天1至3次，更具體而言，可為每天1至2次。

本發明之育毛劑及頭皮護理劑係關於促進毛幹生長、毛髮生長及防脫毛者，較佳係關於促進毛幹生長及毛髮生長者。

本說明書中，「促進毛幹生長」之用語，係意指使毛幹伸長速度提升、使毛幹最大長度提升、及/或使毛幹徑增大。

本說明書中，「毛髮生長」之用語，係意指促進從毛髮不生長(毛幹不從表皮長出)或毛髮數量少之部位中毛髮生長已停止、或毛髮生長能力降低的毛孔長出新的毛髮，並使毛髮數量增加，詳細而言，縮短毛髮週期中之休止期、及/或恢復已停止的毛髮週期。

本說明書中，「具有促進毛幹生長效果」係意指，有利於促進毛幹生長之作用，將顯示促進毛幹生長效果之特質稱為「促進毛幹生長活性」。此外，「具有毛髮生長效果」係意指，有利於毛髮生長之作用，將顯示毛髮生長效果之特質稱為「毛髮生長促進活性」。

本說明書中，「脫毛」之用語，係意指毛幹從毛孔脫落的現象，詳細而言，係意指阻害細胞增殖之抑制性細胞介素等之增加及、此等之細胞死亡。將顯示防脫毛效果之特質稱為「防脫毛活性」。此外，「具有防脫毛效果」係意指，經介抑制細胞介素之阻害或者減少、及細胞死亡之抑制，減少毛幹從毛孔的脫落數，並與顯示促進毛幹生長、毛髮生長效果之特質相異的生理現象。

本說明書中，「頭皮症狀」係意指，頭皮屑、頭皮粗糙、頭皮乾燥、紅斑、瘙癢、丘疹等症狀。然後，本說明書中，「頭皮症狀改善」係意指，頭皮屑、頭皮粗糙、頭皮乾燥、紅斑、瘙癢、丘疹等之抑制或改善。

本發明之育毛劑可使用於使毛幹伸長速度或毛幹最大長度提升。然後，針對毛幹伸長速度，與毛髮週期之標準數據中之毛幹伸長速度比較，例如可提升最大110%左右，具體而言，可提升25至110%左右，更具體而言，可提升33至110%左右。此外，針對毛幹最大長度，與毛髮週期之標準數據中之毛幹最大長度比較，例如可提升最大49%左右，具體而言，可提升1至49%左右，更具體而言，可提升2至49%左右。

本發明之育毛劑，可使用於使毛幹徑增大。

本發明之育毛劑可使用於促進從毛髮不生長(毛幹不從表皮長出)或毛髮數量少之部位中毛髮生長已停止、或毛髮生長能力降低的毛孔長出新的毛髮，並使毛髮數量增加，詳細而言，可使用於縮短毛髮週期中之休止期、及/或恢復已停止的毛髮週期。

本發明之育毛劑及頭皮護理劑，除了人類以外，亦可使用於家畜及寵物等動物用(非人動物用)。在本發明之一個方面中，提供一種育毛方法及頭皮症狀改善方法，係包括提供將包含棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸之外用劑投與至包含人類及家畜與寵物等動物之對象。

[實施例]

<試驗例1：因棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸引起的育毛活性評估>

1.材料與方法

(1)實驗動物

從日本SLC股份有限公司(日本)購入C57BL/6N小鼠(雄)及Balb/c nu/nu小鼠(雌)，飼養後進以下實驗。又，動物之飼養及試驗係遵守相關法規、部級法令、及指南，並經理化學研究所實驗倫理審査會之認可而實施者。

(2)試劑

各別準備以下試劑。

安慰劑：60%乙醇水溶液

實施例1：棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸0.05%溶液

(3)源自小鼠背部體毛皮膚之皮膚試驗片的製作

為了採集脫毛後12至14天之成長期VI皮膚作為背部體毛皮膚，將7至8週齡之C57BL/6N小鼠的背部體毛皮膚採集擬定部位脫毛，飼養12至14天。其後，在藉由頸椎脫臼使已脫毛的C57BL/6N小鼠安樂死後，從背部體毛皮膚採集擬定部位適量採集背部體毛皮膚。

將採集的皮膚浸入包含10mM HEPES、10%胎牛血清、及1%青黴素/鏈黴素溶液之DMEM培養基(以下，稱為「DMEM10」)。將採集的背部體毛皮膚以彎鑷夾住，在滅菌用溶液中浸泡10秒進行處理。以優碘7%溶液處理2次、PBS(-)處理3次、DMEM10處理2次之順序，各別使用新鮮的溶液進行滅菌處理。滅菌處理後，浸漬在乾淨的DMEM10中。

將滅菌處理後之背部體毛皮膚裁切並封堵化。使用弧形剪刀切除附著在皮膚之皮筋層的透明結合組織，沿著毛流將毛群裁切成長方形條狀。此時，毛囊係以成為短軸5排的方式而調整，長軸之毛囊係以成為6排之方式而裁切並封堵化。

(4)皮膚試驗片移植至Balb/c nu/nu小鼠

將上述所製作的源自背部體毛皮膚之皮膚試驗片移植至4至6週齡的Balb/c nu/nu小鼠。

具體而言，依據常規方法藉由異氟醚對小鼠進行氣體麻醉。其次，使用優碘7%溶液將小鼠背部消毒後，使其置於自然橫臥位。然後，使用MANI Ophthalmic Knife.(MANI股份有限公司、日本)刺穿小鼠背部，形成從皮膚表皮層延伸至真皮層下層部的移植傷口。將源自背部體毛皮膚之皮膚試驗片以使毛群面向移植傷口的體表側的方式插入到形成的移植傷口。皮膚試驗片之移植深度係以毛群之上端部露出在移植傷口上端部之狀態的方式而調整。其次，將移植有源自背部體毛皮膚之皮膚試驗片的移植傷口使用Nurseban(註冊商標)(股份有限公司Sun Planet、日本)及手術膠帶(3M Japan股份有限公司、日本)作為保護帶覆蓋，以保護移植傷口。移植後5至7天去除保護膠帶，將經移植源自背部體毛皮膚之皮膚試驗片的情況以目視或數位顯微鏡(股份有限公司Keyence、日本)判斷後，進行後續追蹤。

(5)對移植皮膚試驗片之藥劑塗佈

在毛髮週期之第1週，塗佈作為安慰劑的60%乙醇水溶液。對移植了上述皮膚試驗片的Balb/c nu/nu小鼠，使用微量吸移管將25μL之60%乙醇分別塗佈在移植的皮膚試驗片的左右背部。其後，使用烘乾機吹冷風使乙醇快速乾燥。此作業在小鼠左右背部各重複4次。

從毛髮週期之第2週期以後，依據上述方法，在經毛群移植的Balb/c nu/nu小鼠，使用棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸溶液取代60%乙醇水溶液而塗佈。

(6)毛髮生長後續追蹤及組織學的分析

從Balb/c nu/nu小鼠之皮膚試驗片的移植部位各別選擇3個區域，從此等區域各別選擇5根毛，確認並記錄毛髮生長之狀態。藉由目視及數位顯微鏡(股份有限公司Keyence、日本)進行觀察與記錄。

2.結果

對於每種藥劑，每1至3天測量一次毛幹長度，將隨時間變化之各時間點的毛幹長度的平均值繪製為1個點繪製在圖上，並對5隻重複相同的繪製。將結果表示於表1及圖1。

[表1]

在將含有0.05%棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸之溶液塗佈於小鼠之皮膚試驗片的移植部位之情況下，與標準數據進行比較，其毛幹成長速度及毛幹最大長度提升(參照表1及圖1)。從此等結果，確認出含有0.05%棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸的溶液具育毛活性。

<試驗例2：因棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸引起的毛增粗化活性評估>

1.材料與方法

(1)毛增粗化之測量方法

使用上述試驗例1中第2週期結束後的毛幹進行毛增粗化的測量。在採集的毛幹中，使用3根Zigzag毛進行毛增粗化的測量。將其中心部分增粗之範圍以1邊100μm之正方形選擇3處。針對各選擇的範圍進一步選擇5個相異處，並測量那裡Zigzag毛之毛幹徑以評估毛增粗化的程度。

2.結果

將測量了毛幹徑之結果表示於圖2及表2。於此，圖2及表2中之**顯示在p<0.01係顯著者。

[表2]

塗佈屬於本發明之手段之有效成分的棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸時，與成為對照之塗佈60%乙醇水溶液之情況的第2週期結束的毛幹徑相比，確認出明顯產生毛增粗化。

<試驗例3：因棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸引起的毛增粗化活性評估>

1.材料與方法

(1)針對人真皮乳頭細胞及培養基

購入人真皮乳頭細胞(目錄編號：CA602t05a、白人種、源自29歲男性、東洋紡股份有限公司(日本))，依據規程所記載的方式維持與培養細胞並進行試驗評估。

(2)藥劑

調製由包含以下各濃度(最終濃度)之棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸的人真皮乳頭細胞用培養基所構成的藥劑溶液，並使用此作為試驗用藥劑。

實施例1：10.268375μM

實施例2：20.53675μM

實施例3：41.0735μM

實施例4：82.147μM

實施例5：164.294μM

實施例6：328.588μM

(3)試驗方法

將人真皮乳頭細胞以成為1×10³個/孔之方式播種於96孔盤。在CO₂培養器(5%CO₂、37℃)內培養1天後，將人真皮乳頭細胞之培養基取代由包含上述各濃度之棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸的人真皮乳頭細胞用培養基所構成的藥劑溶液。其後，將細胞盤放回CO₂培養器，進一步培養24小時、48小時、及72小時。培養後，除去培養上清液，以磷酸鹽緩衝液(簡稱：PBS)洗滌細胞。以PBS洗滌後，每孔添加100μL包含活細胞數測定試劑SF(Nacalai Tesque股份有限公司(日本))10%的培養基。添加後，測定培養上清液之吸光度(測定波長450nm、參照波長620nm)。以此值為基礎，各別算出將無添加對照群之細胞增殖率作為100%之際，各孔的細胞增殖率。

2.結果

測定在人真皮乳頭細胞使棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸作用後隨時間變化的活細胞率之變化，將其結果表示於圖3。

如圖3所示，確認出相對於人真皮乳頭細胞，使棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸(實施例1至實施例6)作用，則與無添加對照群相比，細胞增殖率增加。更且，確認出在本次檢測的濃度區域內，依據棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸之濃度，細胞增殖率上升。

<試驗例4：因棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸引起的人真皮乳頭細胞中之FGF-7基因表現的評估>

1.材料與方法

(1)針對人真皮乳頭細胞及培養基

與上述試驗例3同樣地維持與培養人真皮乳頭細胞並進行試驗評估。

(2)藥劑

調製以下各濃度(最終濃度)的藥劑溶液並使用作為試驗用藥劑。

比較例1：腺苷100μM

實施例1：棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸1μM

實施例2：棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸10μM

實施例3：棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸300μM

(3)試驗方法

將人真皮乳頭細胞以成為6×10³個/孔的方式播種於24孔盤。在CO₂培養器(5%CO₂、37℃)內培養1天後，取代為包含各試驗用藥劑的培養基。其後，將細胞盤放回CO₂培養器，進一步培養24小時。

培養後，從各孔抽取並回收總RNA，將此反向轉錄為cDNA。使用所調製的cDNA，以即時PCR法測定FGF-7基因的表現。使用GAPDH基因作為內標準，算出FGF-7基因表現量作為與陰性對照群之相對值。

從細胞之總RNA的回收中使用FastGene RNA Basic Kit(目錄編號：FG-80250、日本Genetics股份有限公司(日本))。每孔添加300μL之溶解緩衝劑RL，以移液溶解細胞。在細胞溶解液添加300μL之70%乙醇，以移液混合。將試樣溶液添加於FastGene RNA結合管柱，在室溫以10000g離心1分鐘。通過管柱的濾液從收集試管廢棄，將FastGene RNA結合管柱放回原收集試管後，將600μL之洗滌緩衝劑RW1加入FastGene RNA結合管柱，在室溫以10000g離心1分鐘。將FastGene RNA結合管柱轉移到新的收集試管並設置，將700μL之洗滌緩衝劑RW2加入FastGene RNA結合管柱，在室溫以10000g離心1分鐘。將FastGene RNA結合管柱轉移到新的收集試管並設置，在室溫以15000rpm離心1分鐘。將FastGene RNA結合管柱轉移到新的收集試管並設置，將50μL之溶出緩衝劑RE添加於FastGene RNA結合管柱之膜中央，在室溫以10000g離心1分鐘，並回收純化的RNA。以NanoDrop Lite(目錄編號： ND-LITE、賽默飛世爾科技股份有限公司)測定回收的RNA之濃度，保存在-80℃直至後續的cDNA化作業為止。

cDNA之合成中使用FastGene scriptaseII cDNAsynthesis 5×Ready Mix(目錄編號：NE-LS64、日本Genetics股份有限公司(日本))。將新試管所產生的總RNA之濃度成為20ng/mL的方式，以RNase Free Water稀釋，在該試樣溶液16μL中添加FastGene scriptaseII cDNAsynthesis 5×Ready Mix 4μL，以渦漩攪拌。使用MiniAmp熱循環儀(賽默飛世爾科技股份有限公司)，在25℃培養10分鐘、在42℃培養60分鐘、在85℃培養5分鐘，並合成cDNA。

將以上述方法所合成的cDNA使用於即時PCR。在96孔盤之指定孔中，添加各cDNA模板稀釋液，添加THUNDERBIRD SYBR qPCR Mix(目錄編號：QPS-201、東洋紡股份有限公司(日本))與引子並混合，以QuantStudio 7 Flex Real-Time PCR System(目錄編號：4485693、賽默飛世爾科技股份有限公司)分析基因表現。作為PCR反應，進行95℃ 5秒鐘、60℃ 30秒鐘的40個循環。

試驗中所使用的FGF-7基因特異引子及作為內標準的GAPDH基因特異引子係如下所示。

FGF-7基因表現檢測用引子

順方向：gagagaaaatccttctgcctgttg(序列編號1)

逆方向：cctggtgcaacttgagcctt(序列編號2)

GAPDH基因表現檢測用引子

順方向：catccctgcctctactggcgctgcc(序列編號3)

逆方向：ccaggatgcccttgagggggccctc(序列編號4)

如下所示般算出各基因之相對表現量。

從各基因之增幅曲線與閾值線之交點算出Ct值(PCR循環次數)。相對表現量係從目的基因之Ct值除以內標準GAPDH基因之Ct值而得的值。

2.結果

在人真皮乳頭細胞使棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸作用24小時後，測定FGF-7基因之表現量的變化，並將其結果表示於圖4。於此，圖4中之**顯示在p<0.01係顯著者。

如圖4所示，確認出相對於人真皮乳頭細胞，使棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸(實施例1、2)作用24小時，則與無添加對照群相比，FGF-7基因表現量上升。然後，確認出增加棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸之添加量，則FGF-7基因表現量較大於使腺苷(比較例1)作用之情況。

[產業利用性]

依據本發明之手段，能夠提供一種新穎的育毛劑及頭皮護理劑，其係藉由使用棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸作為屬於外用劑之育毛劑的有效成分，而具有頭髪、鬚毛、眉毛及/或睫毛等毛中之毛幹之成長促進效果、毛幹伸長速度之提升效果及毛幹最大長度之提升效果、頭皮護理效果及真皮乳頭細胞之FGF-7產生促進劑。

Claims

一種育毛劑，係包含棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸的外用劑。
如請求項1所述之育毛劑，其中，棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸之含量，相對於整體，係0.001至20重量%。
如請求項1或2所述之育毛劑，其中，棕櫚醯二肽-5二胺基丁醯羥基蘇胺酸之含量，相對於整體，係0.005至10重量%。
如請求項1至3中任一項所述之育毛劑，其係用於促進毛幹生長或毛髮生長。
如請求項1至4中任一項所述之育毛劑，其係使用於使毛幹伸長速度提升。
如請求項1至4中任一項所述之育毛劑，其係使用於使毛幹最大長度提升。
如請求項1至4中任一項所述之育毛劑，其係使用於使毛幹徑增大。
如請求項1至4中任一項所述之育毛劑，其係使用於使毛髮數量增加。
如請求項1至8中任一項所述之育毛劑，其係溶液。
如請求項1至9中任一項所述之育毛劑，其係用於頭髪、鬚毛、眉毛及/或睫毛。
一種育毛方法，係包含將請求項1至10中任一項所述之育毛劑投與至對象。