JP4599518B2 - 毛髪手入れ用製剤 - Google Patents
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- Cosmetics (AREA)
Description
脱毛により頭髪が薄くなると、一般的に、外見上実際の年齢よりも上の年齢であるかのような印象を人に与え易く、また、自分自身も急に年老いたかの如く思い込み易い。このため、頭髪が濃い状態を可能な限り持続したいと、又は、薄くなった頭髪を濃い状態に戻したいと切に願う人は多く、それ故、発毛剤、育毛剤又は脱毛防止剤に関する世間一般の関心が高い。
しかしながら、従来の毛髪手入れ用製剤は、必ずしも脱毛防止や発毛及び育毛促進の効果を充分発揮するまでには至っていない。これは、脱毛、発毛及び育毛の原因が複雑であり、種々の原因の組み合わせにより脱毛、発毛及び育毛という現象として現れると考えられるからである。それ故、脱毛防止、発毛及び育毛の効果が高い新規な毛髪手入れ用製剤の開発が望まれていた。
低分子化することも提案されている(特許文献1)。
デオキシリボ核酸(DNA)、リボ核酸(RNA)又は核タンパク質は老化防止効果を有することは知られているが、発毛剤、育毛剤又は脱毛防止剤などの毛髪手入れ用製剤に適用する試みは充分に成されていない。
ノヌクレオチドを含むものである。
前記デオキシオリゴヌクレオチド等は、分子量が比較的小さいので経皮的に吸収され易く、またそれらは経皮的に吸収されたとき細胞賦活作用及び血行促進作用を有する。したがって、本発明の発毛剤を頭皮に適用した場合、優れた発毛促進効果を奏する。
本発明の育毛剤は、本発明の発毛剤と同様の有効成分を有するので、同様の理由により、優れた育毛効果を奏する。
本発明の脱毛防止剤は、本発明の発毛剤と同様の有効成分を有するので、同様の理由により、優れた脱毛防止効果を奏する。
本発明の毛髪手入れ用製剤は、哺乳動物、特にヒトにおけるヘア−ケア用の医薬品、医薬部外品又は化粧品として、或いはこれらに添加する製剤として有用である。
本発明の発毛剤、育毛剤又は脱毛防止剤の製造原料であるDNAは種々の態様のものでよく、例えば、二本鎖、一本鎖又は環状のDNAであってよい。DNAの供給源は、動物、植物、微生物等の様々な生物である。水産加工上の廃棄物である、魚類特に鮭、鱒、鰊及び鱈の精巣(白子)は、とりわけDNAを多く含むが、従来、資源として有効に利用されず、多くが廃棄されていた。それ故、廃棄物の資源化という観点からも、これらの精巣由来のDNAを利用することは望ましい。また、哺乳動物や鳥類、例えばウシ、ブタ、ニワトリ等の胸腺から得られるDNAを使用することができる。更に、合成DNAもまた使用することができる。
具体的には、まず魚類白子を粗砕し、粗砕した魚類白子にDNAが分解しない条件下でタンパク質分解酵素(プロテアーゼ)処理を行い、酵素処理した溶液を濾過する。そして分画分子量が2,000〜1,000,000である中空糸膜を用いて濾液に透析処理を行い、分解したタンパク質およびイオン類を除去すると共に二本鎖DNAを濃縮する。さらに、透析処理を行った溶液から二本鎖DNA塩として沈殿させるかあるいは溶液を濃縮し、これら沈殿物あるいは濃縮物を回収する。
上記方法により得られたDNA塩を乾燥させた粉末状DNA塩を、本発明の毛髪手入れ用製剤組成物の製造原料として用いることができる。
なおオリゴペプチドは、魚類の白子などに含まれるヌクレオプロテイン(核タンパク質)をプロテアーゼ及びヌクレアーゼで加水分解して得られる。
このようにして得られたDNAを処理する酵素は、例えば、ヌクレアーゼであり、とりわけ、アオカビ由来のヌクレアーゼが好ましい。
ーゼの性質について特に制限はないが、ある程度の熱安定性を備えることが好ましい。このようなヌクレアーゼは、例えば天野エンザイム株式会社(旧天野製薬株式会社)、シグマ社等から市販品として入手可能である。
以上の処理により得られたDNA分解生成物には、低分子化されたデオキシオリゴヌクレオチド及びデオキシモノヌクレオチドが主要な部分もしくは大部分として含まれ、そして低分子化が不十分なデオキシヌクレオチド等がごく少量の部分として含有されている。
従って、これら分解生成物に含まれるヌクレオチド類(デオキシオリゴヌクレオチド、デオキシモノヌクレオチド)は、そのほぼ全て乃至その大部分が、本来らせん鎖を取らないモノ体、完全な一本鎖のオリゴ体、並びに、二重らせん構造を一部にしか有しないオリゴ体で構成される。言い換えると、上述の低分子化が十分に進行しなかったような場合を想定したとしても、上記の分解生成物に含まれるヌクレオチド類の二重らせん率が20%を超えることはない。
また、発毛剤、育毛剤又は脱毛防止剤の有効成分として、DNA分解生成物から慣用の分離手段及び/又は精製手段を用いて分離・精製された以下の化合物:デオキシオリゴヌクレオチド及びデオキシモノヌクレオチドを使用することができる。
このとき、DNAの分解生成物に含まれるか、又は、該分解生成物から慣用の分離手段及び/又は精製手段を用いて分離・精製されたデオキシオリゴヌクレオチドの鎖長は2乃至12のものであることが好ましい。
このとき、前記分解生成物及び前記化合物として、鎖長が2乃至12の前記デオキシオリゴヌクレオチド又は前記オリゴヌクレオチドのうち少なくとも何れか一方を含み、並びに鎖長が2乃至12の前記デオキシオリゴヌクレオチド及び前記オリゴヌクレオチドの含
有量の合計が、前記分解生成物および前記化合物の全合計量に対して20%以上であることが特に好ましい。
また、前記分解生成物を更に、発毛剤、育毛剤又は脱毛防止剤の慣用の添加成分と所定比率で組み合わせて使用してもよい。
以下の実施例、参考例及び比較例における配合量は、全体量に対する質量%である。又、実施例で用いた試作品1及び試作品2(ヌクレオプロテイン及び/又はDNA、あるいは、RNAを、酵素分解処理又は加水分解処理して得られた分解生成物をそれぞれ含有するもの)の量は固形分量として示す。
鮭白子由来のDNAに対して、食品添加物として認可されているヌクレアーゼ[例えば、酵素製剤ヌクレアーゼ「アマノ」(天野エンザイム(旧天野製薬)社製)]を用いて限定分解を行った。産生したデオキシモノヌクレオチドとデオキシオリゴヌクレオチドを電気泳動装置で分析して最適条件を決定した。
具体的には、65℃前後に調整した温水に原料として粉末状DNA−Na塩を投入し、
撹拌後、更に70℃に加温し、原料に対してヌクレアーゼ0.25%を加えて3時間反応させた。次に、85℃で10分間加熱してヌクレアーゼを失活させた後、遠心分離し、上澄み液にスプレードライ法を適用して、デオキシオリゴヌクレオチドを含む乾燥粉末(分解生成物)を得た。
65℃前後に調整した温水に原料として鮭白子由来の粉末状DNA−Na塩を投入し、撹拌後、更に70℃に加温し、原料に対して酵素製剤ヌクレアーゼ「アマノ」(天野エンザイム(旧天野製薬)社製)を0.05%加えて3時間反応させて分解生成物を得た。次に、85℃で10分間加熱してヌクレアーゼを失活させた後、分解生成物をHPLCで分析した。
図1に、HPLC(高速液体クロマトグラフィー)による、分解生成物のデオキシオリゴヌクレオチドの分析例を示す。図1において、5'−デオキシモノヌクレオチド及び3'−デオキシモノヌクレオチドはピーク20までに溶出しており、以降の比較的大きなピーク、すなわちピーク26以後をデオキシオリゴヌクレオチドの吸収とみなすことができる。また、ピーク41以後は分子量が3000を超える分解生成物の吸収とみなすことができる。このため、ピーク26乃至41のピーク強度から算出した結果、本例では分解生成物全体に対して、31%のデオキシオリゴヌクレオチド(分子量1000〜3000)の分画が含まれていることがわかった。
前記製造方法にて得たデオキシオリゴヌクレオチドを含む乾燥粉末(分解生成物)を試作品1とし、この試作品1を用いて、本発明の毛髪手入れ用製剤(発毛剤、育毛剤又は脱毛防止剤)を以下のように製造した。また対照として、試作品1を含有しない毛髪手入れ用製剤を製造した。これらの組成を下記表1にまとめて示す。
[実施例1]
95%エタノールに精製水を加え、これに硬化ヒマシ油エチレンオキシド(40モル)付加物、ステアリルジメチルアミンオキシドを加えて攪拌後、試作品1を加えて攪拌溶解し、透明液状の実施例1の製剤を得た。
[比較例1]
試作品1の代わりに同量のグリセリンを用い、実施例1と同様の製法で比較例1の製剤を得た。
実施例1の製剤と比較例1の製剤をそれぞれ、ヒト上腕に10μL塗布し、塗布1時間後に、レーザードップラー計で血流量を測定した。試験結果の判定は、下記判定基準により行った。
++:比較例に比べて血流量が極めて増加した(著効)
+ :比較例に比べて血流量が増加した(有効)
± :比較例に比べて血流量がやや増加した(やや有効)
− :比較例に比べて血流量が同等以下であった(無効)
結果を下記表1にまとめて示す。
発毛及び脱毛周期の休止期に当たるマウスを実験動物として用い、それぞれ1群10匹として以下のように試験を行った。マウスの背部を剃刀で剃毛し、実施例1〜3の製剤及び比較例の製剤を、毎朝1回、0.1mL、剃毛部位の所定面積に塗布し、3週間後の発毛(再生)面積を測定し、製剤を塗布した面積に対する発毛面積の比率を%で求めた。
結果を下記表1にまとめて示す。
毛根休止期率(%)を基準として、育毛促進効果を調べた。実施例1〜3の製剤及び比較例の製剤を、ヒト被験者男性、各群10名に、1日2回各4mLを3カ月間頭皮に塗布した。試験開始直前と3カ月経過後に無作為で頭頂部から毛を抜き、顕微鏡で観察し、毛根の状態から休止期の割合を求め、3カ月経過後の毛根休止期率から開始直前の毛根休止期率を引いた差に基づいて、以下の基準で判定した。
++:比較例に比べて毛根休止期率が30%以上減少
+ :比較例に比べて毛根休止期率が10%以上30%未満の範囲で減少
± :比較例に比べて毛根休止期率が0%以上10%未満の範囲で減少
− :比較例に比べて毛根休止期率が0%未満減少(増加)
結果を下記表1にまとめて示す。
試料使用前後の洗髪による脱毛本数の変化により、脱毛防止効果を調べた。試験群はヒト被験者男性、各群10名とし、試験期間は6カ月間、前記2カ月は試料無塗布期間、後期4カ月間を試料塗布期間とした。試料塗布期間には、実施例1〜3の製剤及び比較例の製剤を、一日2回各4mLを4カ月間頭皮に塗布した。試験期間中は1日おきに洗髪して
抜け毛を回収し、1週間分をまとめて抜毛本数を数えた。この本数から、洗髪1回あたりの抜毛本数(平均値)を算出し、前記最終週平均値と後期最終週平均値を比較し、以下の基準で判定した。
++:抜毛本数が70本以上減少しており、著しい脱毛防止効果が認められた。
+ :抜毛本数が40本以上減少しており、かなりの脱毛防止効果が認められた。
± :抜毛本数が10本以上減少しており、やや脱毛防止効果が認められた。
− :抜毛本数が10本未満の減少又は抜毛本数の増加となり、脱毛防止効果は認められなかった。
結果を下記表1にまとめて示す。
有効成分として、DNA、ヌクレオプロテイン、及び、DNA及びヌクレオプロテインを酵素分解処理又は加水分解処理して得られた分解生成物を含有するものをそれぞれ試作品2(デオキシオリゴヌクレオチド及びデオキシモノヌクレオチドを含有するもの)、試作品3(デオキシオリゴヌクレオチド、デオキシモノヌクレオチド及びオリゴペプチドを含有するもの)、及び、試作品4(デオキシオリゴヌクレオチド、デオキシモノヌクレオチド及びオリゴペプチドを含有するもの)とし、また、有効成分として、RNAを酵素分解処理又は加水分解処理して得られた分解生成物を含有するものを試作品5(オリゴヌクレオチド及びモノヌクレオチドを含有するもの)とした。
得られた試作品2乃至5を用いて、実施例及び参考例の毛髪手入れ用製剤(発毛剤、育毛剤又は脱毛防止剤)を以下のように製造した。また、対照として、試作品2乃至5を含有しない比較例2の毛髪手入れ用製剤を製造した。これらの製剤の組成を下記表2にまとめて示す。
[実施例2〜4及び参考例1及び2]
試作品2、試作品3、試作品4、試作品5、及び、試作品2と試作品5の当量混合物(試作品6)の各々に、下記表2に記載の防腐剤、界面活性剤、分散安定剤、増粘剤及びpH調整剤を適量添加し、撹拌しながら、これらを精製水に溶解し、乳液状の実施例2乃至実施例4、参考例1及び参考例2の製剤を得た。
[比較例2]
試作品2乃至試作品6の代わりに同量のグリセリンを用いて、実施例2乃至実施例4、参考例1及び参考例2と同様の方法で比較例2の製剤を得た。
実施例2乃至実施例4、参考例1、参考例2及び比較例2の製剤について、それぞれ前記の血流量測定試験、発毛試験、育毛促進試験、脱毛防止試験を実施例1及び比較例1と同条件で行った。
結果を表2にまとめて示す。
(1)実施例1、実施例2乃至実施例4、参考例1又は参考例2の製剤における血流量測定試験の評価は++[比較例1又は比較例2に比べて血流量が極めて増加した(著効)]であり、実施例1乃至実施例4、参考例1及び参考例2の製剤の有効成分がヒトの皮膚から浸透して血流量を著しく増加させることは明らかである。
(2)実施例1、実施例2乃至実施例4、参考例1又は参考例2の製剤の発毛試験では、製剤を塗布した面積に対して95%乃至98%の面積で発毛が起こったのに対して、比較例1又は比較例2の製剤の発毛試験では、製剤を塗布した面積に対して僅か5%のみでしか発毛が起こらず、実施例1乃至実施例4、参考例1及び参考例2の製剤の発毛効果は、比較例の製剤の発毛効果よりも遥かに優れている。
(3)実施例1、実施例2乃至実施例4、参考例1又は参考例2の製剤における育毛促進試験の評価は各々++(比較例1又は比較例2に比べて毛根休止期率が30%以上減少)であり、実施例1乃至実施例4、参考例1及び参考例2の製剤は優れた育毛促進効果を奏する。
(4)実施例1、実施例2乃至実施例4、参考例1又は参考例2の製剤における脱毛防止試験の評価は、比較例1又は比較例2の結果が−(脱毛防止効果認められず)であるのに対して、各々++(脱毛本数が70本以上減少)であり、実施例1乃至実施例4、参考例1及び参考例2の製剤は優れた脱毛防止効果を奏する。
なお、実施例1、実施例2乃至実施例4、参考例1、参考例2では、有効成分として試作品1(DNA塩分解生成物)、試作品2(DNA分解生成物)、試作品3(ヌクレオプロテイン分解生成物)、試作品4(DNA及びヌクレオプロテイン分解生成物)、試作品5(RNA分解生成物)、及び試作品6(試作品2と試作品5の混合物)を使用したが、試作品1乃至試作品6の代わりに、それらから分離・精製されたデオキシオリゴヌクレオチド及びデオキシモノヌクレオチド、オリゴペプチド、オリゴヌクレオチド又はモノヌクレオチドを単独で又は組み合わせて使用しても、試作品1乃至試作品6を使用した場合と同様に効果が認められた。
いずれの実施例においても血流量の増加、発毛効果、育毛促進効果及び脱毛防止効果を有することが認められた。
95%エタノールに試作品(類)、ニコチン酸アミド、セファランチン、ジプロピレングリコール、L−メントール、香料を溶解させた。
次に精製水にリン酸ニナトリウム、リン酸一カリウムを溶解させたものを添加し、攪拌溶解して、液状ローション製剤を調製した。
95%エタノールに試作品(類)、ニコチン酸ベンジル、酢酸α−DL−トコフェロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール200、香料を加えて溶解した。
次に精製水に色素を溶解させたものを添加し、攪拌溶解して、液状トニック製剤を調製した。
(A)相及び(B)相をそれぞれ70℃で加熱溶解し、混合してホモミキサー処理を行い、ゲルを調整した。このゲルに(D)相を徐々に添加してホモミキサーで分散させた。
次に、このゲル分散物に予め溶解させた(C)相を添加し、さらに予め溶解させたE相を添加してホモミキサーで乳化し、乳液状製剤を調製した。
Claims (6)
- DNAを酵素分解処理又は加水分解処理により低分子化して得られた分子量1000乃至3000の画分を20乃至50%含有する分解生成物を含有する発毛剤。
- 前記分解生成物はデオキシオリゴヌクレオチド及びデオキシモノヌクレオチドを含み、該デオキシオリゴヌクレオチド及び該デオキシモノヌクレオチドは、その二重らせん率が20%を超えないことを特徴とする、請求項1に記載の発毛剤。
- DNAを酵素分解処理又は加水分解処理により低分子化して得られた分子量1000乃至3000の画分を20乃至50%含有する分解生成物を含有する育毛剤。
- 前記分解生成物はデオキシオリゴヌクレオチド及びデオキシモノヌクレオチドを含み、該デオキシオリゴヌクレオチド及び該デオキシモノヌクレオチドは、その二重らせん率が20%を超えないことを特徴とする、請求項3に記載の育毛剤。
- DNAを酵素分解処理又は加水分解処理により低分子化して得られた分子量1000乃至3000の画分を20乃至50%含有する分解生成物を含有する脱毛防止剤。
- 前記分解生成物はデオキシオリゴヌクレオチド及びデオキシモノヌクレオチドを含み、該デオキシオリゴヌクレオチド及び該デオキシモノヌクレオチドは、その二重らせん率が20%を超えないことを特徴とする、請求項5に記載の脱毛防止剤。
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