TW202038911A - 環孢素類似物之藥學調合物 - Google Patents

Abstract

本揭露關於包含CRV431或其藥學上可接受的鹽之藥學組成物。該組成物展現高溶解性和穩定性。

Description

環孢素類似物之藥學調合物

相關申請案的交叉申請

本案請求2018年11月26日申請的美國專利申請案第62/771,453號的優先權權益，其內容藉由於本文引用而以其整體併入本文中。

本揭露針對環孢素A類似物(例如CRV431，環孢素A的非免疫抑制性類似物)的藥學組成物(例如，自微乳化藥物遞送系統“SMEDDS”)。在一些實施方案中，SMEDDS為穩定、可以容易地增溶CRV431、和可以使得能夠有CRV431的高身體暴露量。

CRV431是於臨床開發用於治療包括肝纖維化和肝細胞癌的肝疾病的小分子親環蛋白(cyclophilin)抑制劑。在臨床前研究中，CRV431已顯示出對多種病毒(包括B型肝炎、C型肝炎、和HIV)的抗病毒活性，以及在許多體內(in vivo )模型中顯示出肝中抗纖維化活性。CRV431(如圖1B所示)是環孢素A (CsA)(如圖1A所示)的衍生物，是由11個胺基酸所組成的中性環狀肽，其中第1和第3個胺基酸已被化學修飾，如圖1B所示。

本揭露提供了一種CRV431的穩定SMEDDS調合物，其使得環孢素A的衍生物(例如，CRV431)能夠有良好的溶解性，並且在健康對象中單一口服劑量後使得能夠有顯著的血液暴露量。

在一方面，本揭露提供了一種自微乳化藥物遞送系統(SMEDDS)，其包含環孢素A的衍生物或類似物(諸如CRV431)，或其藥學上可接受的鹽，

。

在一些實施方案中，系統進一步包含聚氧乙烯蓖麻油(polyoxyl castor oil)(也稱為聚氧乙烯40氫化蓖麻油(polyoxyl 40 hydrogenated castor oil)、聚乙二醇甘油羥基硬脂酸酯(macrogolglycerol hydroxystearate)、和PEG-40氫化蓖麻油，例如Cremophor® RH40和Kolliphor® RH40)。在一些實施方案中，系統進一步包含乙醇。在一些實施方案中，系統進一步包含二乙二醇單乙醚(也稱為2-(2-乙氧基乙氧基)乙醇，諸如Transcutol®)。在一些實施方案中，系統進一步包含丙二醇(PG)。在一些實施方案中，系統進一步包含單亞油酸甘油酯，例如Maisine® CC。在一些實施方案中，系統進一步包含維他命E。

在一些實施方案中，系統包含重量比在1/1/ 5/5/2.4/4或1/1.5/2.5/5/2.4/5之維他命E、Maisine® CC、丙二醇、Transcutol®、乙醇、和Cremophor® RH40。在一些實施方案中，系統包含濃度在約10 mg/mL至約90 mg/mL的CRV431。在一些實施方案中，系統包含濃度在約90 mg/mL的CRV431。

本揭露亦提供了一種藥學組成物，其包含： (a)濃度在90 mg/mL的環孢素A衍生物，諸如CRV431，

； (b)維他命E； (c)Maisine® CC； (d)丙二醇； (e)Transcutol®； (f)乙醇；和 (g)Cremophor® RH40，其中維他命E、Maisine® CC、丙二醇、Transcutol®、乙醇、和Cremophor® RH40分別在重量比為約(0.75-1.5)/(0.5-2)/(2-5)/(2-5)/(2-2.4)/(4-8)。

在另一方面，本揭露提供了一種在有此需要的對象中治療疾病的方法，該方法包括向對象投予本文所揭示之治療有效量的自微乳化藥物遞送系統或治療有效量的藥學組成物。

在另一方面，本揭露提供了一種在有此需要的對象中預防疾病的方法，該方法包括向對象投予本文所揭示之治療有效量的自微乳化藥物遞送系統或治療有效量的藥學組成物。

在一些實施方案中，疾病是嚴重肝疾病。在一些實施方案中，疾病是B型肝炎(HBV)、肝纖維化、或肝細胞癌。在一些實施方案中，疾病是B型肝炎(HBV)。在一些實施方案中，疾病是肝細胞癌。

在另一方面，本揭露提供了一種自微乳化藥物遞送系統，其係用於治療或預防對象的疾病。

在另一方面，本揭露提供了一種本文所揭示之治療有效量的自微乳化藥物遞送系統或治療有效量的藥學組成物用於治療或預防對象的疾病之用途。

在另一方面，本揭露提供了一種使用本文所揭示之治療有效量的自微乳化藥物遞送系統或治療有效量的藥學組成物來製造治療或預防對象的疾病的藥物之用途。

在一些實施方案中，疾病是諸如嚴重肝疾病之疾病。在一些實施方案中，疾病是B型肝炎(HBV)、肝纖維化、或肝細胞癌。在一些實施方案中，疾病是B型肝炎(HBV)。在一些實施方案中，疾病是肝細胞癌。

在一些實施方案中，對象之血液中CRV431濃度隨時間變化圖的曲線下面積(AUC)為約5000 ng.hr/ml至約150000 ng.hr/ml。在一些實施方案中，對象之血液中CRV431最大濃度(C_max )為約1500 ng/ml至約2500 ng/ml。在一些實施方案中，達到該對象之血液中CRV431最大濃度的時間(T_max )為約0.5小時至約8小時。在一些實施方案中，對象之血液中CRV431的消除半衰期(T_1/2 )為約10小時至約200小時。在一些實施方案中，對象之肝中CRV431的濃度相對於對象之血液中CRV431的濃度為約1至約20。

在一些實施方案中，治療有效量的SMEDDS為約0.5 mg/kg至約5 mg/kg。

在一些實施方案中，藉此減緩對象的疾病的症狀和/或降低對象的疾病的嚴重性。在一些實施方案中，藉此該對象的肝功能被改善。在一些實施方案中，藉此引起該疾病的病毒的載量降低。

在一些實施方案中，藥學組成物或SMEDDS在室溫下穩定。在一些實施方案中，藥學組成物或SMEDDS穩定至少約25天至至少約200天。在一些實施方案中，由藥學組成物或SMEDDS分散在水溶液中所形成的粒子為約15 nm至約40 nm。

現在將關於本文提供的描述和方法更詳細地描述本揭露的前述和其他方面。應當理解，本發明可以以不同的形式具體實施，並且不應被解釋為限於在此闡述的實施方案。而是，提供這些實施方案以使得本揭露將全面和完整，並將向本技術領域具有通常知識者充分傳達本發明的範圍。

一般定義

在本揭露中使用的術語僅出於描述特定實施方案的目的，並且不意圖作為對本發明的限制。如在本發明的實施方案的描述和所附申請專利範圍中所使用者，單數形式“一(a)”、“一(an)”和“該(the)”也意圖包括複數形式，除非上下文有另行指明。另外，如本文所用，“和/或”是指並且涵蓋一個或多個相關聯的所列項目之任一和所有的可能組合。此外，在提及可測量值(諸如化合物的量、劑量、時間、溫度等)時本文所用術語“約”，意在涵蓋指定量的20%、10%、5%、1%、0.5%，甚至0.1%的變化量。

將進一步理解，在本說明書中使用術語“包含(comprises)”和/或“包含(comprising)”時，指明所稱特徵、整數、步驟、操作、元件和/或組件的存在，但不排除一個或多個其他特徵、整數、步驟、操作、元件和/或組件和/或其組的存在或添加。除非另行定義，否則所有術語，包括說明書中使用的技術和科學術語，具有相同於本發明所屬技術領域中具有通常知識者普遍所理解的含義。

當應用於本揭露的組成物時，術語“基本上由...所組成”(和語法變體)是指該組成物可以含有額外的組分，只要額外的組分不會實質性地改變組成物。應用於組成物的術語“實質性地改變”是指與由所述組分所組成之組成物的有效性相比，組成物的治療有效性增加或降低了至少約20%或更多。

如本文所用，本文所用的“B型肝炎病毒”(或“HBV”)意圖包括所有亞型(adw、adr、ayw、和ayr)和/或其基因型(A、B、C、D、E、F、G、和H)。本文揭示的SMEDDS可用於治療HBV。

如本文所用，“治療有效量”是指將在對象中提供至少一種臨床症狀(symptom)的一些減緩(alleviation)、緩和(mitigation)和/或降低的量。本技術領域具有通常知識者將認知，只要會向對象提供一些益處，治療效果不必須是完全的或治癒的。

“治療(treating)”包括導致病症(condition)、疾病、疾患等改善的任何效果，例如減輕(lessening)、減少、調幅、或消除效果。疾病的“治療(treating)”或“治療(treatment)”包括：(1)抑制疾病狀態，即阻止疾病狀態或其臨床症狀的發展；(2)緩解(relieving)疾病狀態，即引起疾病狀態或其臨床症狀的暫時或永久消退；或(3)減少或減輕疾病狀態的症狀。

在一些實施方案中，可以在發展出一種或多種症狀後投予治療。在其他實施方案中，可以在沒有症狀下投予治療。也可以在症狀解除(resolved)後繼續治療。

如本文所用，術語“預防(prevention)”、“預防(prevent)”、和“預防(prevent)”是指使疾病狀態的臨床症狀不在對象(其可能暴露於或易患疾病狀態但尚未經驗或顯示疾病狀態的症狀)中發展。在一些實施方案中，可以在沒有症狀下投予預防。例如，可以在症狀發作之前對易感個體投予預防(例如，鑒於症狀病史和/或鑒於遺傳或其他易感性因素)。也可以在症狀解除後繼續投予預防，例如以延遲其複發。

“SMEDDS” 是指自自微乳化藥物遞送系統。 CRV431溶解性

本揭露提供了一種自微乳化藥物遞送系統(SMEDDS)調合物，用於口服遞送環孢素A(CsA)衍生物，諸如CRV431(環孢黴素A的非免疫抑制類似物)。在一些實施方案中，相對於環孢黴素A，CRV431在脂質溶劑中的溶解性可能不良，因此呈現出開發具有足夠口服生物利用度(bioavailability)之臨床用調合物的挑戰。因此，本揭露提供了一種用於將CRV431遞送至患者(例如，人類)的SMEDDS系統。

如本文所述，在一系列常用的表面活性劑、油和共溶劑中測定CRV431(環孢素A衍生物)的溶解性。從最易溶的賦形劑和原型調合物構建了偽三元相圖，並開發了系列1和系列2。在健康的人類自願者中，使用液相色譜法-電噴霧電離質譜法(LC-ESI-MS)研究單次口服劑量1和3 mg/kg CRV431 SMEDDS後的藥物動力學。

系列1調合物的最大藥物載量小於40 mg/ml。調整賦形劑的比允許開發出系列2調合物，其與系列1相比，對CRV431具有更高的藥物載量能力和穩定性。進一步的調整允許開發出含有高達90 mg/ml CRV431的SMEDDS調合物，當其分散到水性介質中時，產生了25 nm的微乳液平均粒徑。本文揭示之CRV431 SMEDDS的藥物動力學在人類顯示出優異的全身暴露量和與劑量成正比的效果，而在大鼠肝中顯示出高藥物水平。

在一些實施方案中，本文揭示之SMEDDS調合物可以用於CRV431的有效臨床開發。例如，本文揭示之調合物可以靶向治療包括B型肝炎(HBV)、肝纖維化、和肝細胞癌的肝疾病。

發現CRV431的水性溶解性為CsA的約4倍高(115 vs 30 µg/ml)，這也反映在計算出的極性表面面積(308 vs 273埃)上。不希望受到理論的束縛，雖然可以預期水中溶解性的增加會導致血漿蛋白結合降低(較高的游離部份)，但CRV431仍被視為微溶於水，因此不希望受到理論束縛，如果調合成固體片劑，則不預期CRV431具有任何可觀的臨床有用性。CRV431計算得出的Log P (3.98)仍然很高，因此，其在脂質中的溶解性預期與環孢素A相似。但是，CRV431在各種脂質表面活性劑和油中的實際溶解性遠小於環孢素A所具者(表3)。不希望受到理論的束縛，CRV431在任何給定的SMEDDS調合物中的固有溶解性預計將顯著低於CsA所具者，這導致較低的載量能力。不希望受到理論的束縛，關於形成SMEDDS調合物的微乳液，至少必須包含油/表面活性劑混合物。可以向該混合物中添加各種共溶劑以增強藥物溶解性。

在一些實施方案中，對於CRV431具有最高溶解性的表面活性劑包括Cremophor® RH40、Lauroglycol^TM 90和Capryol^TM 90。Lauroglycol^TM 90和Capryol^TM 90二者都是水不溶性表面活性劑，並且不受理論的束縛，不預期有用於水包油微乳液的形成。觀察到Lauroglycol^TM 90或Capryol^TM 90與油和共溶劑賦形劑的混合物在水中形成油滴，而非混溶的分散液(數據未顯示)。因此，由於CRV431在Cremophor® RH40中的溶解性，選擇Cremophor® RH40作為表面活性劑。基於CRV431在所測試的油和共溶劑中的溶解性，選擇下列賦形劑及Cremophor® RH40用於SMEDDS原型的開發：維他命E；Maisine®CC；乙醇；Transcutol®；丙二醇。藉由不存在藥物下繪製Maisine® CC (油) vs Cremophor® RH40(表面活性劑) vs共溶劑混合物的調合百分比來繪製偽三元相圖(圖2)。這些研究表明，Cremophor® RH40/Maisine® CC的組合比小於3不會形成微乳液(藉由目視檢查為白色不透明)。明確劃定了微乳液形成(水分散液中澄清)的相界，且表現約佔相圖總面積的40%。

基於偽三元相圖，製備了原型SMEDDS調合物(表4：調合物#1)，其含有比9/3/3/2/1的Cremophor® RH40/Maisine® CC/PG/乙醇/維他命E，以及含有50 mg/ml的CRV431。SMEDDS調合物保持澄清數天，之後透明晶體變得明顯並黏附在玻璃容器的底部。開發了一系列SMEDDS (系列1，表5)，其中增加了Transcutol®共溶劑的比，以試圖促進進一步的溶解性和減少的晶體形成。當分散在水中時，所有系列1調合物都形成微乳液，然而它們也在室溫下不穩定。通常，不希望受到理論的束縛，隨著Transcutol®水平的增加，調合物的不穩定性也隨之增加。這可能與Transcutol®的增加較無關，而是與CRV431也可適度溶解於其中的其他共溶劑的減少較有關。基於系列1的結果，製作了系列2調合物，以探索穩定性更高的調合物。

不希望被理論所束縛，由於偽三元圖(圖2)表明在較低的表面活性劑與油之比下也存在微乳液區，因此開發系列2 CRV431 SMEDDS調合物的基本原理是增加CRV431最易溶解於其中的賦形劑共溶劑(維他命E、丙二醇、Transcutol®和乙醇)，並最小化CRV431最不易溶解於其中之表面活性劑和油組分，同時保持在水分散液中形成澄清微乳液的能力。

相對於原始原型調合物(9/3/3/2/1)，所有系列2 SMEDDS都具有更延長的穩定性(圖4)。幾種SMEDDS在室溫下儲存77天後沒有觀察到藥物流失，因此被認為是穩定的。不受理論的束縛，增加的穩定性是合理的，這是由於下列所致：CRV431在這些SMEDDS中的溶解性增加，而使得CRV431並不像系列1 SMEDDS那樣處於其溶解性極限。確實，SMEDDS 1/1/5/5/2/4和1/1.5/2.5/5/2.4/5 (維他命E/Maisine® CC/丙二醇/Transcutol®/乙醇/ Cremophor® RH40 (w/w/w/w/w/w)也很容易以75 mg/ml的劑量製備。由於調合物的開發目的是增加CRV431的藥物載量，因此乙醇的重量比從2增加到2.4。在一些實施方案中，臨床SMEDDS調合物將以軟膠囊的形式製造和遞送至患者，因此未考慮進一步增強乙醇的含量，這是因為該含量的乙醇將接近軟膠囊的相容性極限。

發現CRV431 SMEDDS (1/1/5/5/2.4/4)具有90-100 mg/ml的溶解性極限並且被認為是穩定的。當1/1/5/5/2.4/4和1/1.5/2.5/5/2.4/5(維他命E/Maisine® CC/丙二醇/Transcutol®/乙醇/Cremophor® RH40 (w/w/w/w/w/w)) CRV431 SMEDDS分散在水性介質中，測得的粒徑約為25 nm，這與Neoral® SMEDDS的報導粒徑(30 nm)一致。

在人類健康對象中，以1和3 mg/kg的劑量研究CRV431 SMEDDS (1/1/5/5/2.4/4)的藥物動力學。觀察到優異的暴露量和劑量成正比性(dose proportionality)。相對於在健康人類對象中的環孢素A(2.5 mg/kg)報導暴露量，CRV431 Cmax略高於Neoral®，總暴露量(AUC)約為Neoral®的14倍，後者是環孢素A的口服調合物，其在水性環境中立即形成微乳液，並包括Cremophor®RH40作為非活性組成分。不希望受到理論的束縛，這似乎主要是由於CRV431相對於環孢素A於半衰期有很大差異所致，CRV431的半衰期大約100小時，而據報導環孢素A的半衰期從健康對象中的6.3小時到在嚴重的肝疾病中的20.4小時。

在大鼠重複劑量研究中，肝中的CRV431水平(10 μg/g組織)為全血的至少6.5倍。 本揭露之SMEDDS

本揭露SMEDDS中之不同組分的相對重量比可以有變化。在一些實施方案中，本揭露之SMEDDS可以包含，相對於SMEDDS中非CRV4​​31組分，介於約0.75與約1.5(例如，約0.75、約1、約1.25、約1.5)重量比的維他命E。例如，SEMDDS可以包含，相對於SMEDDS中Maisine® CC、丙二醇、Transcutol®、乙醇、和Cremophor® RH40中的一或多者，介於約0.75與約1.5(例如，約0.75、約1、約1.25、約1.5)重量比的維他命E。在一些實施方案中，SMEDDS可以包含，相對於SMEDDS中其他非CRV4​​31組分(包括但不限於Maisine® CC、丙二醇、Transcutol®、乙醇、和Cremophor® RH40)中的一或多者，為、約、至少、或最多0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、1.00、1.05、1.10、1.15、1.20、1.25、1.30、1.35、1.40、1.45、1.50、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍之重量比的維他命E。

在一些實施方案中，本揭露之SMEDDS可以包含，相對於SMEDDS中非CRV4​​31組分，介於約0.5與約2(例如，約0.5、約0.75、約1、約1.25、約1.5、約1.75、約2)重量比的Maisine® CC。例如，SEMDDS可以包含，相對於SMEDDS中維他命E、丙二醇、Transcutol®、乙醇、和Cremophor® RH40中的一或多者，介於約0.75與約1.5(例如，約0.75、約1、約1.25、約1.5)重量比的Maisine® CC。在一些實施方案中，SMEDDS可以包含，相對於SMEDDS中其他非CRV4​​31組分(包括但不限於維他命E、丙二醇、Transcutol®、乙醇、和Cremophor® RH40)中的一或多者，為、約、至少、或最多0.75、0.8、0.85、0.9、0.95、1、1.05、1.1、1.15、1.2、1.25、1.3、1.35、1.4、1.45、1.5、1.55、1.6、1.65、1.7、1.75、1.8、1.85、1.9、1.95、2、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍之重量比的Maisine® CC。

在一些實施方案中，本揭露之SMEDDS可以包含，相對於SMEDDS中非CRV4​​31組分，介於約2與約5(例如，約2、約2.25、約2.5、約2.75、約3、約3.25、約3.5、約3.75、約4、約4.25、約4.5、約4.75、約5)重量比的丙二醇。例如，SEMDDS可以包含，相對於SMEDDS中維他命E、Maisine® CC、Transcutol®、乙醇、和Cremophor® RH40中的一或多者，介於約0.75與約1.5(例如，約0.75、約1、約1.25、約1.5)重量比的丙二醇。在一些實施方案中，SMEDDS可以包含，相對於SMEDDS中其他非CRV4​​31組分(包括但不限於維他命E、Maisine® CC、Transcutol®、乙醇、和Cremophor® RH40)中的一或多者，為、約、至少、或最多2、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍之重量比的丙二醇。

在一些實施方案中，本揭露之SMEDDS可以包含，相對於SMEDDS中非CRV4​​31組分，介於約2與約5(例如，約2、約2.25、約2.5、約2.75、約3、約3.25、約3.5、約3.75、約4、約4.25、約4.5、約4.75、約5)重量比的Transcutol®。例如，SEMDDS可以包含，相對於SMEDDS中維他命E、Maisine® CC、丙二醇、乙醇、和Cremophor® RH40中的一或多者，介於約0.75與約1.5(例如，約0.75、約1、約1.25、約1.5)重量比的Transcutol®。在一些實施方案中，SMEDDS可以包含，相對於SMEDDS中其他非CRV4​​31組分(包括但不限於維他命E、Maisine® CC、丙二醇、乙醇、和Cremophor® RH40)中的一或多者，為、約、至少、或最多2、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍之重量比的Transcutol®。

在一些實施方案中，本揭露之SMEDDS可以包含，相對於SMEDDS中非CRV4​​31組分，介於約2與約2.4(例如，約2、約2.25、約2.4)重量比的乙醇。例如，SEMDDS可以包含，相對於SMEDDS中維他命E、Maisine® CC、丙二醇、Transcutol®、和Cremophor® RH40中的一或多者，介於約0.75與約1.5(例如，約0.75、約1、約1.25、約1.5)重量比的乙醇。在一些實施方案中，SMEDDS可以包含，相對於SMEDDS中其他非CRV4​​31組分(包括但不限於維他命E、Maisine® CC、丙二醇、Transcutol®、和Cremophor® RH40)中的一或多者，為、約、至少、或最多2.1、2.11、2.12、2.13、2.14、2.15、2.16、2.17、2.18、2.19、2.2、2.21、2.22、2.23、2.24、2.25、2.26、2.27、2.28、2.29、2.3、2.31、2.32、2.33、2.34、2.35、2.36、2.37、2.38、2.39、2.4、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍之重量比的乙醇。

在一些實施方案中，本揭露之SMEDDS可以包含，相對於SMEDDS中非CRV4​​31組分，介於約4與約8(例如，約4、約4.25、約4.5、約4.75、約5、約5.25、約5.5、約5.75、約6、約6.25、約6.5、約6.75、約7、約7.25、約7.5、約7.75、約8)重量比的Cremophor® RH40。例如，SEMDDS可以包含，相對於SMEDDS中維他命E、Maisine® CC、丙二醇、Transcutol®、和乙醇中的一或多者，介於約0.75與約1.5(例如，約0.75、約1、約1.25、約1.5)重量比的Cremophor® RH40。在較佳實施方案中，本揭露之SMEDDS可以包含，介於約4與約6重量比的Cremophor® RH40。在一些實施方案中，SMEDDS可以包含，相對於SMEDDS中其他非CRV4​​31組分(包括但不限於維他命E、Maisine® CC、丙二醇、Transcutol®、和Cremophor® RH40)中的一或多者，為、約、至少、或最多4、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍之重量比的Cremophor® RH40。在一些實施方案中，SMEDDS包含，重量比約(0.75-1.5)/(0.5-2)/(2-5)/(2-5)/(2-2.4)/(4-8)的維他命E、Maisine® CC、丙二醇、Transcutol®、和乙醇、和Cremophor® RH40。

在一些實施方案中，本揭露之SMEDDS可以包含濃度介於約1 mg/mL與約100 mg/mL(例如，約5 mg/mL、約10 mg/mL、約15 mg/mL、約20 mg/mL、約25 mg/mL、約30 mg/mL、約35 mg/mL、約40 mg/mL、約45 mg/mL、約50 mg/mL、約55 mg/mL、約60 mg/mL、約65 mg/mL、約70 mg/mL、約75 mg/mL、約80 mg/mL、約85 mg/mL、約90 mg/mL、約95 mg/mL、約100 mg/mL)的CRV4​​31。在較佳實施方案中，本揭露之SMEDDS可包含濃度於約10 mg/mL至約90 mg/mL的CRV4​​31。在一些實施方案中，SMEDDS可以包含濃度為、約、至少、或最多1 mg/mL、2 mg/mL、3 mg/mL、4 mg/mL、5 mg/mL、6 mg/mL、7 mg/mL、8 mg/mL、9 mg/mL、10 mg/mL、11 mg/mL、12 mg/mL、13 mg/mL、14 mg/mL、15 mg/mL、16 mg/mL、17 mg/mL、18 mg/mL、19 mg/mL、20 mg/mL、21 mg/mL、22 mg/mL、23 mg/mL、24 mg/mL、25 mg/mL、26 mg/mL、27 mg/mL、28 mg/mL、29 mg/mL、30 mg/mL、31 mg/mL、32 mg/mL、33 mg/mL、34 mg/mL、35 mg/mL、36 mg/mL、37 mg/mL、38 mg/mL、39 mg/mL、40 mg/mL、41 mg/mL、42 mg/mL、43 mg/mL、44 mg/mL、45 mg/mL、46 mg/mL、47 mg/mL、48 mg/mL、49 mg/mL、50 mg/mL、51 mg/mL、52 mg/mL、53 mg/mL、54 mg/mL、55 mg/mL、56 mg/mL、57 mg/mL、58 mg/mL、59 mg/mL、60 mg/mL、61 mg/mL、62 mg/mL、63 mg/mL、64 mg/mL、65 mg/mL、66 mg/mL、67 mg/mL、68 mg/mL、69 mg/mL、70 mg/mL、71 mg/mL、72 mg/mL、73 mg/mL、74 mg/mL、75 mg/mL、76 mg/mL、77 mg/mL、78 mg/mL、79 mg/mL、80 mg/mL、81 mg/mL、82 mg/mL、83 mg/mL、84 mg/mL、85 mg/mL、86 mg/mL、87 mg/mL、88 mg/mL、89 mg/mL、90 mg/mL、91 mg/mL、92 mg/mL、93 mg/mL、94 mg/mL、95 mg/mL、96 mg/mL、97 mg/mL、98 mg/mL、99 mg/mL、100 mg/mL、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍之環孢素A(CsA)衍生物，諸如 CRV431。

在一些實施方案中，SMEDDS中除CRV4​​31以外的組分的重量比係相對於SMEDDS中除CRV4​​31以外的其他組分計。在一些實施方案中，本揭露之SMEDDS是藉由在將CRV431與混合物組合(例如，將CRV431溶解到混合物中，或將混合物添加到CRV431中)以獲得具有本文所揭示之任何濃度(例如，90 mg/mL)的CRV431的SMEDDS之前，以本文所揭示之重量比，將SMEDDS中除CRV4​​31以外的組分(例如，維他命E、Maisine® CC、丙二醇、Transcutol®、乙醇、和Cremophor® RH40)組合(例如，混合)成混合物所製備。在一些實施方案中，本揭露之SMEDDS是藉由一次組合(例如，混合)SMEDDS的組分所製備。

在一些實施方案中，SMEDDS在室溫下穩定。在一些實施方案中，SMEDDS在4℃、5℃、6℃、7℃、8℃、9℃、10℃、11℃、12℃、13℃、14℃、15℃、16℃、17℃、18℃、19℃、20℃、21℃、22℃、23℃、24℃、25℃、26℃、27℃、28℃、29℃、30℃¸ 31℃、32℃、33℃、34℃、35℃、36℃、37℃、38℃、39℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍下穩定。

本文所揭示的SMEDDS在儲存中是穩定的。例如，SMEDDS可以穩定達幾個小時、幾天、幾個月、或幾年。在一些實施方案中，SMEDDS穩定達約一個月到約三年。在一些實施方案中，SMEDDS穩定達至少為約25天至至少約一年。SMEDDS可以穩定達、達約、或達至少、或達最多25天、26天、27天、28天、29天、30天、31天、32天、33天、34天、35天、36天、37天、38天、39天、40天、41天、42天、43天、44天、45天、46天、47天、48天、49天、50天、51天、52天、53天、54天、55天、56天、57天、58天、59天、60天、61天、62天、63天、64天、65天、66天、67天、68天、69天、70天、71天、72天、73天、74天、75天、76天、77天、78天、79天、80天、81天、82天、83天、84天、85天、86天、87天、88天、89天、90天、91天、92天、93天、94天、95天、96天、97天、98天、99天、100天、111天、112天、113天、114天、115天、116天、117天、118天、119天、120天、121天、122天、123天、124天、125天、126天、127天、128天、129天、130天、131天、132天、133天、134天、135天、136天、137天、138天、139天、140天、141天、142天、143天、144天、145天、146天、147天、148天、149天、150天、51天、152天、153天、154天、155天、156天、157天、158天、159天、160天、161天、162天、163天、164天、165天、166天、167天、168天、169天、170天、171天、172天、173天、174天、175天、176天、177天、178天、179天、180天、181天、182天、183天、184天、185天、186天、187天、188天、189天、190天、191天、192天、193天、194天、195天、196天、197天、198天、199天、200天、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍。SMEDDS可以穩定達、達約、或達至少、或達最多1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月、12個月、13個月、14個月、15個月、16個月、17個月、18個月、19個月、20個月、21個月、22個月、23個月、24個月、2.5年、3年、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍。SMEDDS可以被認為是穩定的，例如，如果CRV431實質上沒有結晶或沉澱和/或沒有結晶或沉澱至視覺上可觀察到的程度。

SMEDDS可以被認為是穩定的，例如，如果SMEDDS 中CRV431沒有結晶或沉澱至在SMEDDS中所增溶之CRV431濃度的降低會超過0.1%、0.2%、0.3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍的程度。SMEDDS可以被認為是穩定的，例如，如果SMEDDS中CRV431沒有結晶或沉澱至在SMEDDS中所增溶解之CRV431濃度的降低會超過0.1 mg/ml、0.2 mg/ml、0.3 mg/ml、4 mg/ml、5 mg/ml、6 mg/ml、7 mg/ml、8 mg/ml、9 mg/ml、1 mg/ml、2 mg/ml、3 mg/ml、4 mg/ml、5 mg/ml、6 mg/ml、7 mg/ml、8 mg/ml、9 mg/ml、10 mg/ml、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍的程度。

在一些實施方案中，由SMEDDS分散在水性溶液中所形成之粒子的直徑為約15 nm至約40 nm。在一些實施方案中，由SMEDDS分散在水性溶液中所形成之粒子的直徑為、約、至少、或最多15 nm、16 nm、17 nm、18 nm、19 nm、20 nm、21 nm、22 nm、23 nm、24 nm、25 nm、26 nm、27 nm、28 nm、29 nm、30 nm、31 nm、32 nm、33 nm、34 nm、35 nm、36 nm、37 nm、38 nm、39 nm、40 nm、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍。 本揭露之藥學組成物的用途

本揭露之活性化合物(例如，作為SMEDDS組成物的一部分)可以視需要地與本文所述之一或多種有用於治療病毒感染的其他活性化合物和/或劑組合(或聯合)投予。二或更多種化合物的“組合(in combination)”或“聯合(in conjunction)”投予是指二或更多種化合物在時間上足夠接近地投予，以產生組合的效果，例如相加性和/或協同性效果。二或更多種化合物可以同時(並行)或順序投予，或者在彼此之前或之後的短時間內可能發生二或更多次事件。同時投予可以藉由在投予之前混合化合物來進行，或者藉由在相同的時間點但在不同的解剖部位或使用不同的投予途徑來投予。在一些實施方案中，其他的一或多種抗病毒劑可視需要地並行投予。

例如，在一些實施方案中，本揭露的藥物組成物(例如，SMEDDS組成物)可以與另一種活性劑(例如，另一種抗病毒劑或加強劑(booster agent))在時間上相近地投予。在一些實施方案中，“時間上相近”是指一種治療劑(例如，本揭露的藥物組成物)的投予發生在另一種治療劑(例如，額外的抗病毒劑)的投予之前或之後的一段時間內，而使得該種治療劑的治療效果會與該另一種治療劑的治療效果重疊。在一些實施方案中，該種治療劑的治療效果與該另一種治療劑的治療效果完全重疊。在一些實施方案中，“時間上相近”是指一種治療劑的投予發生在另一種治療劑的投予之前或之後的一段時間內，而使得該種治療劑與該另一種治療劑的間有協同性效果。“時間上相近”可以根據各種因素而變化，包括但不限於要投予治療劑之對象的年齡、性別、體重、遺傳背景、醫學狀況、疾病史和治療史；要治療或改善(ameliorated)的疾病或病症；要達到的治療結果；治療劑的劑量、給藥頻率、和給藥持續時間；治療劑的藥物動力學和藥效動力學(pharmacodynamic)；以及經其投予治療劑的一或多種途徑。在一些實施方案中，“時間上相近”是指在15分鐘內、30分鐘內、1小時內、2小時內、4小時內、6小時內、8小時內、12小時內、18小時內、24小時內、36小時內、2天內、3天內、4天內、5天內、6天內、1週內、2週內、3週內、4週內、6週內、或8週內。在一些實施方案中，一種治療劑的多次投予可以與另一種活性劑的單次投予在時間上相近地發生。在一些實施方案中，在治療週期期間或在給藥方案內，時間上相近是可以有變化的。

在一些實施方案中，本揭露之SMEDDS可以用於治療疾病，例如肝疾病，諸如嚴重肝病、B型肝炎(HBV)、肝纖維化或肝細胞癌。肝疾病的非限制性實例包括肝內膽汁淤積(阿拉吉歐氏症候群(alagille syndrome)、膽汁性肝硬化)、脂肪肝(酒精性脂肪肝、雷氏症候群(reye syndrome))、肝靜脈栓塞、肝豆狀核變性(hepatolentricular degeneration)、肝腫大、肝膿腫(阿米巴性肝膿腫)、肝硬化(酒精性、膽道性、實驗性)、酒精性肝疾病(脂肪肝、肝炎、肝硬化)、寄生蟲病(肝棘球蟲病、片蟲症、阿米巴性肝膿腫)、黃疸(溶血性、肝細胞性和膽汁淤積性)、膽汁淤積、肝門靜脈高壓、肝肥大、腹水、肝炎(酒精性肝炎、動物肝炎、慢性肝炎(自體免疫、B型肝炎、C型肝炎、D型肝炎、藥物引起)、中毒性肝炎、病毒性人類肝炎(A型肝炎、B型肝炎、C型肝炎、D型肝炎、E型肝炎)、威爾遜氏病、肉芽腫性肝炎、繼發性膽汁性肝硬化、肝性腦病變(hepatic encephalopathy)、靜脈曲張、原發性膽汁性肝硬化、原發性硬化性膽管炎、肝細胞腺瘤、血管瘤、膽結石、肝衰竭(肝性腦病變、急性肝衰竭)、和肝贅瘤(血管平滑肌脂肪瘤(angiomyolipoma)、鈣化肝轉移、囊性肝轉移、上皮性腫瘤、纖維板層肝癌(fibrolamellar hepatocarcinoma)、肝侷限性結節狀增生(focal nodular hyperplasia)、肝腺瘤、肝膽囊性囊腺瘤(hepatobiliary cystadenoma)、肝母細胞瘤、肝細胞癌、肝瘤、肝癌、肝血管內皮瘤、間葉錯構瘤(mesenchymal hamartoma)、肝間頁腫瘤、肝結節狀再生性增生(nodular regenerative hyperplasia)、良性肝腫瘤(肝胞囊(hepatic cyst)[簡單胞囊、多囊性肝疾病、肝膽囊性囊腺瘤、膽總管胞囊]、間頁腫瘤[間葉錯構瘤、嬰兒型血管內皮瘤(Infantile hemangioendothelioma)、血管瘤、肝紫質症(peliosis hepatis)、脂肪瘤、發炎性假瘤(Inflammatory pseudotumor)、雜項]、上皮性腫瘤[膽管上皮(膽管錯構瘤、膽管腺瘤)、肝細胞(腺瘤、肝侷限性結節狀增生、肝結節狀再生性增生)]、惡性肝腫瘤[肝細胞腫瘤、肝母細胞瘤、肝細胞癌、膽管細胞腫瘤、膽管癌、囊腺癌(cystadenocarcinoma)、血管腫瘤、血管肉瘤、卡爾波西氏肉瘤、血管內皮瘤、胚胎性癌(embryonal sarcoma)、肝纖維肉瘤、平滑肌肉肉瘤、橫紋肌肉瘤、癌肉瘤、畸胎瘤、類癌、鱗狀上皮癌、原發性淋巴瘤)]、肝紫質症、肝性紅血球紫質症(erythrohepatic porphyria)、肝性紫質症(hepatic porphyria)(急性間歇性紫質症、緩發性皮膚病變紫質症(porphyria cutanea tarda)、柴爾維格氏症症候群(Zellweger syndrome))。在一些實施方案中，肝疾病是肝炎、肝硬化、膽汁淤積或肝衰竭。

在一些實施方案中，在治療期間或之後，對象的疾病症狀減緩和/或對象的疾病嚴重性降低。症狀的非限制性實例包括：皮膚和眼睛發黃(黃疸)、腹痛和腫脹、腿和腳踝腫脹、皮膚發癢、尿色深、大便色淡、或大便呈血色或焦油色、慢性疲勞、噁心或嘔吐、食慾不振、容易瘀傷的趨勢。疾病的嚴重性可能增加(或減少)1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、30、40、50、60、70、80、90、100個、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍的疾病嚴重性評分單位(例如，終末期肝疾病模型(MELD評分)單位。在一些實施方案中，在治療期間或之後，對象的肝臟功能得到改善。例如，對象的肝臟功能改善了5%、10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、70%、80% 90%、100%、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍。在一些實施方案中，在治療期間或之後，引起疾病的病毒載量減少。例如，引起疾病的病毒載量可以減少了、減少約、減少至少、或減少最多5%、10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、70%、80% 90%、95%、96%、97%、98%、99%、100%、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍。

關於疾病或疾患的治療，"有效量"是參考SMEDDS的推薦劑量決定的。所選劑量將取決所選化合物的活性、投予途徑、所治療病症的嚴重性、以及所治療患者的狀況和先前醫學病史而變化。但是，以低於達成所欲治療效果所需的劑量開始化合物的劑量並逐漸增加劑量直至達成所欲效果是落在本技術領域的通常知識內。如為所欲，可以將有效每日劑量分為多次劑量以進行投予，例如分為每天二次至四次的劑量。但是，應當理解，任何特定患者的具體劑量水平將取決於多種因素，包括體重、總體健康狀況、飲食、時間、投予途徑以及與其他藥物組合使用、以及所治療疾病的嚴重性。

在一些實施方案中，本揭露之SMEDDS以例如約1 mg/kg至約13 mg/kg的劑量，例如約1 mg/kg至約10 mg/kg的劑量投予。例如，該化合物向個體投予之劑量可以為、約、至少、或最多1 mg/kg、1.1 mg/kg、1.2 mg/kg、1.3 mg/kg、1.4 mg/kg、1.5 mg/kg、1.6 mg/kg、1.7 mg/kg、1.8 mg/kg、1.9 mg/kg、2 mg/kg、2.1 mg/kg、2.2 mg/kg、2.3 mg/kg、2.4 mg/kg、2.5 mg/kg、2.6 mg/kg、2.7 mg/kg、2.8 mg/kg、2.9 mg/kg、3 mg/kg、3.1 mg/kg、3.2 mg/kg、3.3 mg/kg、3.4 mg/kg、3.5 mg/kg、3.6 mg/kg、3.7 mg/kg、3.8 mg/kg、3.9 mg/kg、4 mg/kg、4.1 mg/kg、4.2 mg/kg、4.3 mg/kg、4.4 mg/kg、4.5 mg/kg、4.6 mg/kg、4.7 mg/kg、4.8 mg/kg、4.9 mg/kg、5 mg/kg、6 mg/kg、7 mg/kg、8 mg/kg、9 mg/kg、10 mg/kg、11 mg/kg、12 mg/kg、13 mg/kg、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍。替代地，或另外地，該化合物向個體投予之量為、約、至少、或最多25 mg、50 mg、75 mg、100 mg、125 mg、150 mg、175 mg、200 mg、250 mg、300 mg、350 mg、400 mg、450 mg、500 mg、600 mg、700 mg、800 mg、900 mg、1000 mg、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍。本揭露之SMEDDS可以，例如以單劑量，每天或每週投予。在本文所揭示的任何實施方案中，可以口服投予SMEDDS。

每個療程的劑量數目可能不同。在一些實施方案中，每個療程的劑量數目可以為、約、至少、或最多1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍。一劑量可以在最近前次劑量後數天、數週、或數個月內投予，諸如 1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月、12個月、一年、兩年、三年、四年、五年或更久、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍。

對象接受的療程數目可以不同。在一些實施方案中，療程的數目可以為、約、至少、或最多1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍。一療程可以在最近前次療程後數天、數週、或數個月內投予，諸如 1天、2天、3天、4天、5天、6天、1週、2週、3週、4週、1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月、12個月、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍。

在一些實施方案中，本文所述的SMEDDS可以例如，以單劑量，每週、或每隔一週、或每隔三週、或每月投予。本揭露之SMEDDS可以每天一次投予，1、2、3、4、5、6、7、8、9、或10天或更久。例如，可以每天投予包含5 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每天投予包含10 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每天投予包含15 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每天投予包含20 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每天投予包含25 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每天投予包含50 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每天投予包含100 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每天投予包含150 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每天投予包含200 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每天投予包含300 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每天投予包含350 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每天投予包含400 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每天投予包含450 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每天投予包含500 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每天投予包含750 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每天投予包含1000 mg CRV431的SMEDDS。本揭露之SMEDDS可以每天一次投予，1、2、3、4、5、6、7天、或更久。本揭露之SMEDDS可以每天一次投予，1、2、3、4、5、6、7、8、9、或10週或更久。例如，可以每週投予包含5 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每週投予包含10 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每週投予包含15 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每週投予包含20 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每週投予包含25 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每週投予包含50 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每週投予包含100 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每週投予包含150 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每週投予包含200 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每週投予包含300 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每週投予包含350 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每週投予包含400 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每週投予包含450 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每週投予包含500 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每週投予包含750 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每週投予包含1000 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每週投予包含1250 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每週投予包含1500 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每週投予包含1750 mg CRV431的SMEDDS。例如，可以每週投予包含2000 mg CRV431的SMEDDS。

在一些實施方案中，在投予劑量後，對象之血液中CRV431濃度隨時間變化圖的曲線下面積(AUC)為約5000 ng.hr/ml至約150000 ng.hr/ml。對象之血液中CRV431濃度隨時間變化圖的AUC可以為、約、至少、或最多5000 ng.hr/ml、10000 ng.hr/ml、11000 ng.hr/ml、12000 ng.hr/ml、13000 ng.hr/ml、14000 ng.hr/ml、15000 ng.hr/ml、16000 ng.hr/ml、17000 ng.hr/ml、18000 ng.hr/ml、19000 ng.hr/ml、20000 ng.hr/ml、30000 ng.hr/ml、40000 ng.hr/ml、50000 ng.hr/ml、60000 ng.hr/ml、70000 ng.hr/ml、80000 ng.hr/ml、90000 ng.hr/ml、100000 ng.hr/ml、110000 ng.hr/ml、120000 ng.hr/ml、130000 ng.hr/ml、140000 ng.hr/ml、150000 ng.hr/ml、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍。

在一些實施方案中，在投予單劑量(例如，本文所揭示的單劑量，包括1 mg/kg或3 mg/kg，或介於1 mg/kg或3 mg/kg間的數字或範圍之單劑量的CRV431)後，對象之血液中CRV431最大濃度(C_max )為約1500 ng/ml至約2500 ng/ml。例如，C_max 可以為、約、至少、或最多1500 ng/ml、1550 ng/ml、1600 ng/ml、1650 ng/ml、1700 ng/ml、1750 ng/ml、1800 ng/ml、1850 ng/ml、1900 ng/ml、1950 ng/ml、2000 ng/ml、2050 ng/ml、2100 ng/ml、2150 ng/ml、2200 ng/ml、2250 ng/ml、2300 ng/ml、2350 ng/ml、2400 ng/ml、2450 ng/ml、2500 ng/ml、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍。在一些實施方案中，在多次劑量的本揭露SMEDDS後，測量對象之血液中CRV431的 C_max 。例如，在多次劑量後，C_max 可以為、約、至少、或最多1500 ng/ml、1550 ng/ml、1600 ng/ml、1650 ng/ml、1700 ng/ml、1750 ng/ml、1800 ng/ml、1850 ng/ml、1900 ng/ml、1950 ng/ml、2000 ng/ml、2050 ng/ml、2100 ng/ml、2150 ng/ml、2200 ng/ml、2250 ng/ml、2300 ng/ml、2350 ng/ml、2400 ng/ml、2450 ng/ml、2500 ng/ml、3000 ng/ml、3500 ng/ml、4000 ng/ml、4500 ng/ml、5000 ng/ml、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍。

在一些實施方案中，在投予劑量後，達到該對象之血液中CRV431最大濃度的時間(T_max )為約0.5小時至約8小時。T_max 可以為、約、至少、或最多0.5 hr、1 hr、1.5 hr、2 hr、2.5 hr、3 hr、3.5 hr、4 hr、4.5 hr、5 hr、5.5 hr、6 hr、6.5 hr、7 hr、7.5 hr、8 hr、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍。

在一些實施方案中，對象之血液中CRV431的消除半衰期(T_1/2 )為約10小時至約200小時。T_1/2 可以為、約、至少、或最多10 hr、11 hr、12 hr、13 hr、14 hr、15 hr、16 hr、17 hr、18 hr、19 hr、20 hr、25 hr、30 hr、35 hr、40 hr、45 hr、50 hr、60 hr、70 hr、80 hr、90 hr、100 hr、110 hr、120 hr、130 hr、140 hr、150 hr、160 hr、170 hr、180 hr、190 hr、200 hr、或介於這些值中的任何兩個值間的數字或範圍。

在一些實施方案中，對象之肝中CRV431的濃度相對於對象之血液中CRV431的濃度為約1至約20。實施例

本揭露進一步藉由以下實施例說明，這些實施例不應被解釋為在範圍或精神上將本揭露限制於本文所述的具體程序。而應理解的是，提供這些實施例示為了例示說明某些實施方案，並且不意圖使本揭露的範圍受限於此。應當進一步理解的是，在不脫離本揭露的精神和/或所附請求項的範圍的情況下，可以採取本技術領域具有通常的知識者可向它們自己建議的各種其他實施方案、修改及其等同形式。實施例 1 - 自微乳化藥物遞送系統的開發 藥物和試劑

藉由修飾CsA合成純度達97.3%的CRV431，並儲存在5℃。CsA是從IVAX (Opava, Czech Republic)獲得的。Lauroglycol^TM 90、Labrasol®、Labrafil® M 2125、Labrafil® 1944、Peceol^TM 、Labrafac^TM WL 1349、Capryol^TM 90、Maisine® CC、和Transcutol®購自Gattefosse (Montreal, Canada)。丙二醇、過濾水、乙腈、甲醇、閃爍瓶和12x75 ml硼矽酸鹽試管購自Fischer Scientific (Pittsburgh, USA)。無水乙醇購自Commercial Alcohols (Toronto, Canada)。維他命E、Tween® 80、Tween® 40、Tween® 20、蓖麻油、二甲亞、Chremophor® EL和Chremophor RH 40購自Sigma-Aldrich (St. Louis, USA)。Span®80購自EMD Millipore Corporation (Burlington, USA)。聚乙二醇400(PEG 400)購自BDH Incorporated (Mississauga, Canada)。理化性質

為了測定CRV431和CsA的水性溶解性，將溶在二甲基亞碸(DMSO)中且濃度20 mM的藥物原液稀釋30倍，以達到在磷酸鹽緩衝鹽水(PBS, pH 7.4)中666 µM的最終濃度，在振盪器上過夜，並以3,300 rpm離心5分鐘以沉澱不溶藥物。收集上清液，用甲醇1：1稀釋，並藉由HPLC(Agilent 1100系列，UV檢測)相對於標準曲線測量藥物濃度。極性表面積和log P使用Molinspiration Cheminformatics (V2018.10, USA)計算。藉由平衡透析試驗測定血漿蛋白結合。藉由將2.5 mM DMSO-藥物原液稀釋500倍來製備藥物血漿樣品，以達到5 µM的人類血漿中最終濃度。將血漿溶液(300 µl)和pH 7.4的PBS (500 µl)添加到快速平衡透析單元(Thermo Scientific ; 8K MWCO)的相鄰腔室中。用塑料膜密封盤，並在37℃以225 rpm在定軌振盪器上振盪4.5 hr。收集血漿和PBS樣品，並用硫酸鋅/甲醇沉澱法提取藥物。在3,300 rpm離心10分鐘後，藉由液相色譜法(LC)電噴霧電離(ESI)質譜法(LC-ESI-MS) (Agilent 1100系列，Santa Clara, USA)對甲醇上清液中的可溶性藥物進行分析，並相對於標準曲線定量。賦形劑中溶解性

在數群用於製備SMEDDS調合物(適用於水分散體和軟膠囊者)的表面活性劑、油、和共溶劑中測量CRV431的溶解性。將CRV431(50 mg)添加到75x125 mm玻璃試管的底部，並用賦形劑補足至1 ml標記。將樣品放在搖桿上，在過夜混合後目視評價溶解性。如果未達到溶解性，則以0.5 ml的增量添加賦形劑，並隨後過夜混合，直至達到澄清溶液。使用目視檢查來評劑賦形劑之間、以及相對於CsA的溶解性差異。偽三元相圖的構造

為了構建擬三元相圖，評估了含有不同組成的Cremophor® RH40 (表面活性劑)、Maisine® CC(油)和共溶劑(維他命E、丙二醇、Transcutol®和乙醇)之混合物，以評價針對各種賦形劑比之微乳液形成(目測澄清)和非微乳液形成(目測模糊)之間的相界。CRV431 SMEDDS 的開發

將CRV431(50-100 mg)添加至75×125mm玻璃試管的底部。另外組合賦形劑(例如維他命E、Maisine® CC、丙二醇、Transcutol®、乙醇、和Cremophor® RH40)並充分混合之，然後將其添加到CRV431中且至體積1 ml標記處。製備了幾個系列的SMEDDS調合物，並評價在水性介質中的藥物溶解性、穩定性(藉由LC-ESI-MS)、以及微乳液的形成和穩定性(目視檢查)。SMEDDS 調合物中 CRV431 的 LC-ESI-MS 定量

對於所有SMEDDS調合物分析，取出10 µl，並添加到閃爍瓶中的10 ml甲醇中。將樣品渦旋振盪10秒以混合，然後將1 ml此溶液添加到另一個閃爍瓶中的9 ml的甲醇中(共稀釋10,000倍)。也製備5 µg/ml的CRV431甲醇溶液標準品。將樣品(1 ml)轉移到注射瓶中，並在Agilent HP 1100 LC-MS上藉由液相色譜法-電噴霧電離質譜法(LC-ESI-MS)分析。將樣品置於保持在5℃的自動進樣器中。將樣品和CRV431標準品(1 μl)注入到保持在75℃的Zorbax SB-C18反相HPLC柱(1.8 µm快速解析HT匣，4.6 x 30 mm)上，該柱使用含有0.02%冰醋酸和20 µM乙酸鈉的乙腈-水梯度系統(表1)。

在正離子模式下使用電噴霧電離(ESI)藉由質譜法(MS)分析CRV431的鈉加成物(1326 m/z)。ESI-MS在N₂ 氣體溫度設定為350℃且乾燥氣體為12 L/min下進行。碎片器電壓和毛細管電壓分別設置為260和4000伏特。霧化器壓力設定為40 psig。通常在6.0分鐘觀察到CRV431洗脫時間。藉由與單點標準品(5 µg/ml)的峰面積比較，而計算調合物的濃度。分散體研究

將大約5 mL的選定介質(水、0.1 N HCl、或磷酸鹽緩衝液(pH 6.8)放在小瓶中，然後滴加四(4)滴(約40 mg)的1/1/5/5/2.4/4(維他命E/Maisine® CC/丙二醇/Transcutol®/乙醇/Cremophor® RH40(w/w/w/w/w/w)) SMEDDS。於添加1/1/5/5/2.4/4(維他命E/Maisine® CC/丙二醇/Transcutol®/乙醇/Cremophor® RH40 (w/w/w/w/w/w)) SMEDDS的初始、在反轉混合後、和在添加一小時後觀察混合物。在1/1.5/2.5/5/2.4/5 SMEDDS上也執行了相同的程序。粒徑

1/1/5/5/2.4/4和1/1.5/2.5/5/2.4/5(維他命E/Maisine® CC/丙二醇/Transcutol®/乙醇/Cremophor® RH40(w/w/w/w/w/w))SMEDDS 二者的平均粒徑都是在25℃藉由動態光散射(Zetasizer Nano, Malvern Instruments, Malvern, UK)，在173°角測量。每個樣品三重覆測量。值表示成平均值±標準偏差。平均值大約為25 nm。人類中 1/1.5/2.5/5/2.4/5(維他命E/Maisine® CC/丙二醇/Transcutol®/乙醇/Cremophor® RH40(w/w/w/w/w/w))CRV431 SMEDDS 之藥物動力學

CRV431 SMEDDS以1或3 mg/kg (75 mg或225 mg)的單劑量口服投予6名健康的禁食人類自願者。這項研究是在研究性藥物的臨床研究機構(Celerion, Arizona, USA)作為臨床1期單一劑量遞增(SAD)研究的一部分，並遵循所有FDA道德準則下進行。根據I期SAD研究的標準納入/排除標準選擇患者。將18-55歲且沒有證據表明：疾病正在進行(由研究人員判定)、或使用尼古丁(篩查前30天)、或濫用藥物(在過去2年內)、或使用慢性處方藥(30天之內)、或使用急性處方藥(14天之內)、或使用包括維生素和草藥/天然補品在內的全身性非處方藥(研究劑量前7天之內)的健康自願者參加本研究。將SMEDDS分注(約3 ml)到100 ml Gibco澄清瓶中，並添加15倍過量的過濾水(HPLC級)。將該混合物輕輕渦旋1-2分鐘直至完全分散。將SMEDDS(水中)劑量放在冰箱中，並在2小時內口服。在0.5、1、2、4、6、8、12、24、48和72小時藉由靜脈穿刺將全血樣品(0.5 ml)抽取到K2-EDTA採血管中。立即冷凍樣品，並在5天內藉由LC-ESI-MS分析。簡言之，將全血樣品解凍並使用硫酸鋅/甲醇沉澱法提取。藉由經驗證LC-ESI-MS方法對7點全血標準曲線進行定量分析。進行非隔室分析，以使用商業軟體(WinNonlin專業版，版本7.0，Pharsight軟體)計算藥物動力學參數(C_max 、AUC、t_1/2 、和T_max )。大鼠中 CRV431 SMEDDS 之藥物動力學

藉由口服管飼法，以30 mg/kg/天，向Sprague Dawley大鼠(n = 6)投予系列1之1/3/3/2/9(維他命E/Maisine® CC/丙二醇/乙醇/Cremophor® RH40(w/w/w/w/ w))CRV431 SMEDDS (50 mg/ml)，7天。在第7天的給藥後12小時，處死動物，提取全血和肝並冷凍。使用LC-ESI-MS在全血中定量CRV431(如用於人類藥物動力學研究中者)。為了定量肝中的CRV431，將1克肝組織樣品添加到9 ml用來均質的溶液(1%甲酸，於水中)中，並使用TissueLyser (Qiagen)在30 Hz下均質10分鐘。 如上所述，取出分裝試樣並藉由LC-ESI-MS分析。CRV431 的理化性質

表2中所例示說明之CRV431和CsA的理化性質表明，相對於CsA，CRV431具有更高的水性溶解性，這反映在更高的血漿游離分率和更高的極性表面積(PSA)。兩種藥物的Log P值都很高。不希望受到理論的束縛，CsA和CRV431均不適合口服開發為乾片劑。

賦形劑中溶解性

在數群用於製備SMEDDS調合物(適用於水分散體和軟膠囊者)的表面活性劑、油、和共溶劑中測量CRV431的溶解性。選擇用於 SMEDDS 開發的賦形劑

基於CRV431在Cremophor®RH40中的溶解性，選擇Cremophor®RH40作為表面活性劑。對於油相，發現CRV431在維他命E中的溶解性最高，其次是Maisine®CC。對於共溶劑，CRV431在乙醇中的溶解性最高，其次是Transcutol®，和丙二醇。因此，選擇所有上述賦形劑用於初步調合物原型的開發。

在所測試的表面活性劑中，CRV431的溶解性(如表3所示)係介於10-30 mg/ml，這與CsA不同，CsA的溶解性為至少50 mg/ml，並且在大多數情況下，＞100 mg/ml。鑑於CRV431的高親脂性，該相對較低的溶解性是一個令人驚訝的發現。CRV431在Cremophor® RH40、Lauroglycol^TM 90和Capryol^TM 90中的溶解性最高。除了在維他命E (25 mg/ml)以外，在所測試的油中，CRV431的溶解性(通常為10 mg/ml)比CsA(＞ 100 mg/ml)小。發現CRV431的溶解性在各種共溶劑中(10-50 mg/ml)比在所測試的表面活性劑和油更高，儘管CsA的溶解性通常也較大。CRV431 SMEDDS 的開發

初步調合物研究涉及在沒有藥物下評價各種賦形劑比對SMEDDS的混溶性和微乳液形成的影響。研究結果(表4)表明，Cremophor® RH40/Maisine組合比小於3時，當分散在水中時不會形成微乳液。藉由目視檢查評價微乳液的形成，並且必須目測為澄清才視為可繼續開發。Cremophor® RH40/Maisine比小於3的水分散體都是渾濁的。數據以偽三元相圖(圖2)圖示，其中明確劃定了微乳液形成的相界。

CRV431 SMEDDS 調合物的開發和穩定性：系列 1 和 2

系列1

基於初步SMEDDS微乳液研究，製備原型SMEDDS調合物(表5：調合物#1)，並評價CRV431的溶解性和穩定性。目的是生產一種可混溶且穩定的SMEDDS調合物，其將CRV431增溶至至少50 mg/ml，並在水性介質中形成澄清微乳液。盡管調合物#1最初將CRV431增溶至50 mg/ml並產生澄清微乳液，但隨後儲存時，幾天之內就明顯形成了黏附在玻璃容器上的CRV431晶體，並且與通過LCMS定量的CRV431的損失相吻合(圖3)。調合物#1落在圖2相圖的左上方圓圈內。

開發了另外的SMEDDS(系列1，表5)，其中增加了Transcutol®共溶劑的比例，以試圖促進進一步的溶解性和減少晶體形成。當分散在水中時，所有系列1調合物都能夠發展成微乳液(顯示在圖2相圖的中間圓圈內)。然而，穩定性結果(圖3)表明，所有系列1 SMEDDS都是不穩定的，並且在室溫下除存時會形成大量CRV431晶體。

系列2 SMEDDS

所有系列2 SMEDDS都形成澄清SMEDDS溶液(表6)。這些調合物顯示為落在偽三元相圖的微乳液相內(圖2的右下方的圓圈內)。

CRV431 SMEDDS

為了進一步增強CRV431的溶解性，增加了乙醇含量。表7和8表明，當乙醇的重量比增加到2.4時，CRV431的藥物載量可以增加到至少90 mg/ml，並且被認為是穩定的。製備100 mg/ml的樣品，但其中CRV431沒有完全溶解，因此省略不再進行進一步測試。在室溫下儲存54天後進行測量時，所有樣品製劑均穩定。因此將含有1/1/5/5/2.4/4和1/1.5/2.5/5/2.4/5重量比的維他命E/ Maisine® CC/丙二醇/Transcutol®/乙醇/Cremophor® RH40之CRV431 SMEDDS調合物視為具有高溶解性和穩定性的CRV431 SMEDDS。

如圖2所示，在左上方圓圈區域內的SMEDDS代表具有高表面活性劑的原型調合物。在中間圓圈區域中的SMEDDS代表含有高共溶劑量的系列1調合物。在右下區域內的SMEDDS代表具有低表面活性劑量且高共溶劑量的系列2調合物。如表6所示，除另行說明者外，所有調合物均含有50 mg/ml的CRV431。在指定的時間取出SMEDDS調合物分裝物，並藉由LCMS分析。相對於原始的系列1 SMEDDS原型(1/3/3/9/2)，顯示所有來自系列2的SMEDDS具有延長的穩定性(圖4)。系列2 SMEDDS在室溫下儲存77天後，沒有可觀察到的藥物損失。CRV431 SMEDDS 調合物 (1/1/5/5/2.4/4 和 1/1.5/2.5/5/2.4/5( 維他命 E/Maisine® CC/ 丙二醇 /Transcutol®/ 乙醇 / Cremophor® RH40 (w/w/w/w/w/w)) 的特徵化 CRV431 SMEDDS 的微乳液形成和穩定性

當CRV431 SMEDDS(1/1/5/5/2.4/4和1/1.5/ 2.5/5/2.4/5(維他命E/Maisine® CC/丙二醇/Transcutol®/乙醇/Cremophor® RH40 (w/w/w/w/w/w))分散在水性介質中，在不到一分鐘的輕輕旋渦和/或反轉混合就形成了目視澄清溶液。在37℃下，微乳液的水中、0.1 N HCl中、和磷酸鹽緩衝液中溶液保持澄清長達1小時(表9)。

粒徑

當分散在水中時，1/1.5/2.5/5/2.4/5 CRV431 SMEDDS調合物的平均粒徑經測得為24.6 ± 5.7 nm (平均值±標準偏差)(圖5)。該大小與與Neoral®水性分散體的報導粒徑一致。另外，1/1/5/5/2.4/4 SMEDDS調合物具有大約相同的粒徑(圖6)。CRV431 SMEDDS 之藥物動力學

人類中1/1.5/2.5/5/2.4/5 CRV431 SMEDDS的藥物動力學表現出優異的暴露量和近似劑量成正比性(圖7A-7C和表10)。患者(n = 6)被給予單劑量的CRV431，並在指定的時點藉由LC-ESI-MS分析全血分裝試樣。誤差棒代表平均值±標準偏差。(圖7A：線性尺規。圖7B：75 mg劑量的對數尺規。圖7C：225 mg劑量的對數尺規。)相對健康人類對象(23)中所報導的環孢素A (2.5 mg/kg)暴露量，CRV431的C_max 略大於Neoral®，且總暴露量(AUC)為大約14倍的Neoral®。

另一項大鼠研究測量了相對於血液，分佈在肝中的CRV431水平(參見圖8)。在這項研究中，藉由口服管飼，以1/3/3/2/9 (維他命E/Maisine® CC/丙二醇/乙醇/Cremophor® RH40 (w/w/w/w/w)) CRV431 SMEDDS (50 mg/ml)，對Sprague Dawley大鼠(n = 6)給藥(30 mg/kg)7天，在最終劑量後12小時，藉由LC-ESI-MS分析全血分裝試樣和肝均質漿。發現分佈在肝中的CRV431水平(10 μg/g組織)為在全血部份中的6.5倍。誤差棒代表平均值±標準偏差。

[圖1A]顯示了環孢素A的化學結構。

[圖1B]顯示了CRV431的化學結構。

[圖2]是擬三相圖(pseudo-ternary phase diagram)，其顯示針對Cremophor® RH40、Maisine® CC、和共溶劑的比的油/水微乳液區域。

[圖3]是藉由LC-ESI-MS測得之CRV431系列1 SMEDDS的穩定性的圖。

[圖4]是與系列1相比之系列2 SMEDDS的穩定性的圖。

[圖5]和[圖6]是CRV431 SMEDDS水性分散體粒子直徑測得值的圖。

[圖7A]是於線性尺度上CRV431在人類的藥物動力學的圖。

[圖7B]是針對75 mg劑量於對數尺度上CRV431在人類的藥物動力學的圖。

[圖7C]是針對225 mg劑量於對數尺度上CRV431在人類的藥物動力學的圖。

[圖8]是CRV431在史-道二氏(Sprague Dawley)大鼠的全血和肝中水平的圖。

Claims (32)

1. 一種自微乳化藥物遞送系統(SMEDDS)，其包含CRV431，或其藥學上可接受的鹽，

   

   。
2. 如請求項1之自微乳化藥物遞送系統，其中該系統包含Cremophor® RH40。
3. 如上述請求項中任一項之自微乳化藥物遞送系統，其中該系統包含乙醇。
4. 如上述請求項中任一項之自微乳化藥物遞送系統，其中該系統包含Transcutol®。
5. 如上述請求項中任一項之自微乳化藥物遞送系統，其中該系統包含丙二醇。
6. 如上述請求項中任一項之自微乳化藥物遞送系統，其中該系統包含Maisine® CC。
7. 如上述請求項中任一項之自微乳化藥物遞送系統，其中該系統包含維他命E。
8. 如上述請求項中任一項之自微乳化藥物遞送系統，其中該系統包含重量比在1/1/5/5/2.4/4或1/1.5/2.5/5/2.4/5之維他命E、Maisine® CC、丙二醇、Transcutol®、乙醇、和Cremophor® RH40。
9. 如上述請求項中任一項之自微乳化藥物遞送系統，其中該系統包含濃度在約10 mg/mL至約90 mg/mL的CRV431。
10. 如上述請求項中任一項之自微乳化藥物遞送系統，其中該系統包含濃度在約90 mg/mL的CRV431。
11. 一種藥學組成物，其包含： (a)濃度在約10 mg/mL至約90 mg/mL的CRV431：

    

    ； (b)維他命E； (c)Maisine® CC； (d)丙二醇； (e)Transcutol®； (f)乙醇；和 (g)Cremophor® RH40，其中維他命E、Maisine® CC、丙二醇、Transcutol®、乙醇、和Cremophor® RH40分別在重量比為約(0.75-1.5)/(0.5-2)/(2-5)/(2-5)/(2-2.4)/(4-8)。
12. 一種在有此需要的對象中治療疾病的方法，該方法包括向該對象投予治療有效量的如請求項1-10中任一項之自微乳化藥物遞送系統(SMEDDS)或治療有效量的如請求項11之藥學組成物。
13. 一種在有此需要的對象中預防疾病的方法，該方法包括向該對象投予治療有效量的如請求項1-10中任一項之自微乳化藥物遞送系統(SMEDDS)或治療有效量的如請求項11之藥學組成物。
14. 如請求項1-10中任一項之自微乳化藥物遞送系統(SMEDDS)、或如請求項11之藥學組成物，其係用於治療或預防對象的疾病。
15. 一種使用治療有效量的如請求項1-10中任一項之自微乳化藥物遞送系統(SMEDDS)或治療有效量的如請求項11之藥學組成物來製造治療或預防對象的疾病的藥物之用途。
16. 如請求項12-13中任一項之方法、請求項14之SMEDDS或藥學組成物、或請求項15之用途，其中該疾病是嚴重肝疾病。
17. 如請求項12-13中任一項之方法、請求項14之SMEDDS或藥學組成物、或請求項15之用途，其中該疾病是B型肝炎(HBV)、肝纖維化、或肝細胞癌。
18. 如請求項12-13中任一項之方法、請求項14之SMEDDS或藥學組成物、或請求項15之用途，其中該疾病是B型肝炎(HBV)。
19. 如請求項12-13中任一項之方法、請求項14之SMEDDS或藥學組成物、或請求項15之用途，其中該疾病是肝纖維化。
20. 如請求項12-13中任一項之方法、請求項14之SMEDDS或藥學組成物、或請求項15之用途，其中該疾病是肝細胞癌。
21. 如請求項12-20中任一項之方法、SMEDDS、藥學組成物、或用途，其中該對象之血液中CRV431濃度隨時間變化圖的曲線下面積(AUC)為約5000 ng.hr/ml至約150000 ng.hr/ml。
22. 如請求項12-21中任一項之方法、SMEDDS、藥學組成物、或用途，其中該對象之血液中CRV431最大濃度(C_max )為約1500 ng/ml至約2500 ng/ml。
23. 如請求項12-22中任一項之方法、SMEDDS、藥學組成物、或用途，其中達到該對象之血液中CRV431最大濃度的時間(T_max )為約0.5小時至約8小時。
24. 如請求項12-23中任一項之方法、SMEDDS、藥學組成物、或用途，其中該對象之血液中CRV431的消除半衰期(T_1/2 )為約10小時至約200小時。
25. 如請求項12-24中任一項之方法、SMEDDS、藥學組成物、或用途，其中該對象之肝中CRV431的濃度相對於該對象之血液中CRV431的濃度為約1至約20。
26. 如請求項12-25中任一項之方法、SMEDDS、藥學組成物、或用途，其中該治療有效量的SMEDDS為約0.5 mg/kg至約5 mg/kg。
27. 如請求項12-26中任一項之方法、SMEDDS、藥學組成物、或用途，藉此減緩該對象的該疾病的症狀和/或降低該對象的該疾病的嚴重性。
28. 如請求項12-27中任一項之方法、SMEDDS、藥學組成物、或用途，藉此該對象的肝功能被改善。
29. 如請求項12-28中任一項之方法、SMEDDS、藥學組成物、或用途，藉此引起該疾病的病毒的載量降低。
30. 如前述請求項中任一項之SMEDDS、藥學組成物、方法、或用途，其中該藥學組成物或該SMEDDS在室溫下是穩定的。
31. 如前述請求項中任一項之SMEDDS、藥學組成物、方法、或用途，其中該藥學組成物或該SMEDDS穩定至少約25天至至少約200天。
32. 如前述請求項中任一項之SMEDDS、藥學組成物、方法、或用途，其中由該藥學組成物或該SMEDDS分散在水溶液中所形成的粒子的直徑為約15 nm至約40 nm。

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