TW202016128A - 胜肽、組成物以及治療、預防或改善情緒障礙之方法 - Google Patents
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Abstract
本發明之課題為提供一種能夠治療、預防或改善情緒障礙之新穎胜肽。本發明提供一種胜肽,包含序列編號1所記載之胺基酸序列,且為6以上、20以下之胺基酸長度。
Description
本發明係有關於胜肽、組成物及治療、預防或改善情緒障礙之方法。
反應現代的高壓力社會,情緒低落、憂鬱症等代表性的情緒障礙的增加已經成為問題。情緒障礙的病因之一的不安全感本來是生物體中為了迴避危險、作為警告所必需之物,然而過剩的不安全感關連到情緒障礙的發病、症狀的進展,因此期待開發緩和不安全感的食品、醫藥品等。
例如,專利文獻1記載,既定的胜肽適用於抗焦慮藥等。
[先前技術文獻]
[專利文獻]
[專利文獻1]國際公開第2013/129220號刊物
[發明所欲解決的問題]
然而,對於能夠治療、預防或改善情緒障礙的功能性素材有進一步的需求。
本發明係鑑於上述情況而完成者,其目的在於提供能夠治療、預防或改善情緒障礙的新穎胜肽。
[用於解決問題之手段]
本發明者們,發現藉由特定的胺基酸序列所構成之胜肽能夠解決上述問題,而完成本發明。具體而言,本發明提供以下之物。
(1)一種胜肽,其包括序列編號1所記載之胺基酸序列,且為6以上、20以下之胺基酸長度。
(2)如(1)所記載之胜肽,前述胜肽由序列編號1所記載之胺基酸序列所形成。
(3)如(1)所記載之胜肽,前述胜肽包括序列編號2所記載之胺基酸序列,或與序列編號2所記載之胺基酸序列具有90%以上的一致性之胺基酸序列。
(4)一種用於情緒障礙的治療、預防或改善之組成物,包括如(1)至(3)中任一項所記載之胜肽,或含有前述胜肽作為胺基酸序列的一部分的蛋白質。
(5)如(4)所記載之組成物,前述情緒障礙選自由情緒低落(loss of motivation)、憂鬱、及憂鬱的情緒障礙、以及基於上述之症狀所組成之群組之1種以上。
(6)如(4)或(5)所記載之組成物,其為醫藥品。
(7)如(4)或(5)所記載之組成物,其為飲食品。
(8)一種治療、預防或改善情緒障礙之方法,包括投予如(4)至(7)中任一項所記載之組成物。
[發明效果]
依據本發明,提供能夠治療、預防或改善情緒障礙之新穎胜肽。
以下,對於本發明之實施形態進行詳細說明。惟,本發明不受限於以下之實施形態。
<本發明之胜肽>
本發明之胜肽具有序列編號1所記載之胺基酸序列(QSQSQK),且為6以上、20以下之胺基酸長度。且,以下的胺基酸序列是將N末端置於左端、由N末端至C末端記載。
本發明者們,基於各種胜肽混合物的同步分析資訊、及於影響情緒行為之已知胜肽的結構-活性相關資訊,進行研究的結果,發現了顯示對於情緒障礙的治療等有效果之新穎胜肽,亦即,上述胜肽。
本發明者們進一步研究的結果,發現本發明之胜肽是藉由使多巴胺D1(dopamine D1)受體活性化,而具有情緒提升之效果,達到情緒障礙的治療、預防之效果。
本發明之胜肽可為序列編號1所記載之胺基酸序列所構成者,亦可為在序列編號1所記載之胺基酸序列的N末端側及/或C末端側、添加任意的胺基酸者。再者,序列編號1所記載之胺基酸序列中,N末端的胺基酸為Q(麩醯胺酸),C末端的胺基酸為K(離胺酸)。
本發明之胺基酸長度的上限較佳為20以下之胺基酸長度、更佳為13以下之胺基酸長度、最佳為6以下之胺基酸長度(也就是說,由序列編號1所記載之胺基酸序列所構成。)。本發明之胜肽具有胺基酸長度越短,越容易達到本發明之效果的傾向。
作為在序列編號1所記載之胺基酸序列的N末端側及/或C末端側添加胺基酸的胜肽,並無特殊限定,但能夠列舉包含序列編號2所記載之胺基酸序列(QQFLPEGQSQSQK),或與序列編號2所記載之胺基酸序列具有90%以上的一致性之胺基酸序列者。再者,序列編號2所記載之胺基酸序列是在序列編號1所記載之胺基酸序列的N末端側添加7個胺基酸(QQFLPEG)者。
本發明之胜肽,例如亦可為序列編號2所記載之胺基酸序列中的1個胺基酸被任意的胺基酸取代者。在序列編號1所記載之胺基酸序列的N末端側及/或C末端側附加胺基酸的胜肽,亦可為由序列編號2所記載之胺基酸序列(QQFLPEGQSQSQK),或與序列編號2所記載之胺基酸序列具有90%以上的一致性之胺基酸序列所構成者。
本發明之胜肽可經由化學合成、天然的蛋白質或聚胜肽的加水分解而獲得。
作為化學合成的方法,能夠列舉周知的胜肽合成法。具體而言,能夠列舉通常用於胜肽合成方法之液相法或固相法。更具體而言,能夠列舉Fmoc法、Boc法。合成胜肽亦可進行純化。作為純化方法,例如可列舉使用離子交換層析、逆液相層析、親和性層析等方法。
作為加水分解的方法,可列舉使用加水分解酵素的方法,使用強酸或強鹼的方法。
使用加水分解酵素的方法中,能夠使用源自動物、植物或微生物之加水分解酵素(胰蛋白、胰凝乳蛋白酶、木瓜酶、胃蛋白酶、羧肽酶、嗜熱菌蛋白酶等)。作為加水分解酵素,亦可使用能夠作為食品使用的微生物(例如,麵包酵母、啤酒酵母等食用酵母)等。
使用加水分解酵素的加水分解條件,雖無特殊限定,亦可依照所使用的酵素調整pH為適當的值,在30~40℃程度的溫度下使其反應約30分鐘~48小時。亦可從所獲得的反應液中純化本發明之胜肽。加水分解的對象為食品素材的情況時,能夠直接、或添加其他食品素材作為食品而提供。
使用強酸的方法中,能夠使用例如鹽酸、硝酸、硫酸等。使用強鹼的方法中,例如能夠使用鹼金屬氫氧化物(氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋰等)、鹼金屬碳酸鹽(碳酸鈉、碳酸鉀等)、鹼金屬碳酸氫鹽(碳酸氫鈉、碳酸氫鉀等)。
使用強酸或強鹼的加水分解條件,雖無特殊限定,可在強酸或強鹼的存在下,在水中、1~100℃的溫度下使其反應約30分鐘~48小時。加水分解的反應生成物在調整pH後可直接使用,亦可藉由純化而分離本發明之胜肽而使用。
由各種方法所得到的胜肽的胺基酸序列,能夠藉由艾德曼降解技術(Edman degradation technique)、從C末端讀取胺基酸序列的蛋白質測序儀、GC-MS等進行分析。
<本發明之組成物>
本發明之組成物至少包含本發明之胜肽,亦可為由本發明之胜肽所構成者,亦可含有其他成分。組成物中所包含的胜肽亦可為含有將本發明之胜肽作為胺基酸序列的一部分的蛋白質。
組成物所包含的胜肽,其序列的一部分包含本發明之胜肽以外的胺基酸序列的情況時,具有其序列的長度越短、越容易達成本發明之效果的傾向。
藉由攝取本發明之胜肽,能夠治療、預防或改善情緒障礙。因此,本發明之組成物適合使用於用於情緒障礙的治療、預防或改善。
在本發明中,「情緒障礙」是指具有關於情緒(情感)障礙之精神疾病。具體而言,能夠列舉情緒低落、憂鬱、及憂鬱的情緒障礙、以及基於此等之症狀中的1種以上。依據本發明,能夠治療、預防或改善情緒障礙,特別是情緒低落。
在本發明中,「治療」是意指,例如情緒障礙的進展的延遲,以及症狀的治癒等。「預防」是意指,例如情緒障礙的發病的抑制或延遲等。「改善」是意指,例如情緒障礙的症狀的緩和、減輕等。
本發明之組成物能夠調配成任意的形態,亦可調配作為醫藥品、飲食品。
本發明之組成物調配作為醫藥品時,能夠調配作為經口投予劑或非經口投予劑。本發明之組成物,例如能夠以本發明之胜肽單獨、或與擔體、稀釋劑或賦形劑一起調製作為以下之製劑;錠(素錠、糖衣錠、發泡錠、膜衣錠、咀嚼錠等)、膠囊、口含錠(troche)、粉末、細粒劑、顆粒劑、液劑、懸濁液、乳濁液、糊、乳劑、注射劑(包含調配於胺基酸輸液、電解質輸液等的輸液的情況)、腸溶性的錠劑、膠囊劑、緩釋性製劑等。
作為擔體、稀釋劑或賦形劑,能夠使用製劑領域常用、且不與本發明之胜肽反應之物質。例如,能夠列舉以下之物;乳糖、葡萄糖、甘露糖醇、糊精、環糊精、澱粉、蔗糖、偏矽酸鋁酸鎂(Magnesium Aluminometasilicate)、合成矽酸鋁、羧甲基纖維素鈉、羥丙基澱粉、羧甲基纖維素鈣、離子交換樹脂、甲基纖維素、明膠、阿拉伯膠、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚乙烯吡咯啶酮、聚乙烯醇、輕質無水矽酸、硬脂酸鎂、滑石、西黃蓍膠、膨潤土、矽酸鎂鋁(veegum)、氧化鈦、山梨糖醇酐脂肪酸酯、月桂基硫酸鈉、甘油、脂肪酸甘油酯、精製羊毛脂、甘油基明膠、聚山梨醇酯、聚乙烯二醇(macrogol)、植物油、蠟、液態石蠟、白軟石蠟、氟碳、非離子性界面活性劑、丙二醇、水等。
將本發明之組成物調製作為飲食品的情況時,能夠調製為任意的型態,例如能夠列舉以下之物;飲料類(咖啡、可可、果汁、清涼飲料、電解質飲料、茶飲料、綠茶、紅茶、烏龍茶、乳飲料、乳酸菌飲料、優酪乳、碳酸飲料等)、口香糖、軟糖、果凍、糖果、軟餅乾(cookie)、脆餅乾、硬餅乾(biscuit)、冰品(冰淇淋、冰棒、雪酪、剉冰等)、即食食品、果凍狀食品(果凍、寒天、果凍狀飲料等)等。
本發明之飲食品亦可調配作為所謂的健康食品、機能性食品、營養補助食品、補充劑、特殊保健用食品、機能性表示食品、患者用食品・患者用組合食品(日本厚生勞動省、特別用途食品之一種)或高齡者用食品(日本厚生勞動省、特別用途食品之一種)。
本發明之組成物中,本發明之胜肽的量能夠依照所欲得到的效果適當設定。例如,相對於組成物,將本發明之胜肽以較佳0.01質量%以上、更佳1.00質量%以上調配。再者,相對於組成物,將本發明之胜肽以較佳100質量%以下、更佳90質量%以下調配。又,在本發明之組成物中包含本發明之胜肽以外的胜肽的情況時,上述的值為本發明之胜肽的量換算之值。
本發明之組成物中,本發明之胜肽以外的成分的量能夠依照該成分的種類、組成物的形態、所欲得到的效果等適當設定。
本發明之組成物的投予方法無特殊限定,經口投予、或非經口投予(注射等)的任一皆可。從容易發揮本發明之效果的觀點而言,本發明之組成物以經口投予為佳。
本發明之組成物的投予量,依照投予方法、投予對象的狀態、年齡等而不同,例如換算為本發明之胜肽的量,成人每1日較佳為0.01mg/kg~500mg/kg、更佳為0.05mg/kg~100mg/kg、進而較佳為0.1~30mg/kg。在上述範圍內,具有投予量越多,越容易達到本發明之效果的傾向。
作為本發明之組成物的製造方法,能夠依照所欲獲得的形態、採用周知的方法。
<治療、預防或改善情緒障礙的方法>
藉由將本發明之組成物投予至對象,能夠治療、預防或改善情緒障礙。
投予方法能夠依照組成物的形態適當選擇。
投予次數、投予間隔、投予量,能夠依照投予對象的狀態(症狀、年齡、體重等)適當選擇。
投予對象無特殊限定,能夠列舉人類、人類以外的哺乳類(狗、貓、家畜(牛、豬、綿羊、山羊等)等)等。
[實施例]
以下,顯示實施例具體說明本發明,惟,本發明不受限於此等實施例。
<本發明之胜肽的製作>
將以下2種之本發明之胜肽以Fmoc法合成、接著以逆相HPLC純化而製作。
(1)以序列編號1表示之胺基酸序列(QSQSQK)所形成之胜肽
(2)以序列編號2表示之胺基酸序列(QQFLPEGQSQSQK)所構成之胜肽
再者,將以序列編號2表示之胺基酸序列之中,N末端側那一半的7個殘基所構成的胜肽(以序列編號3表示的胺基酸序列(QQFLPEG)所構成之胜肽)以與上述同樣的方法製作。
將製作的各胜肽投予至以下之各試驗中的小鼠(ddy小鼠(5週齢的雄鼠、體重24~28g)),藉由懸尾實驗評價情緒提升的效果。
<情緒提升效果的評價:懸尾實驗(Tail suspension test)>
從投予胜肽的30分鐘後,將各小鼠在距離地面30cm的位置、吊下尾巴使其懸垂。接著,歷經從試驗開始(0分鐘)至6分鐘間,測定開始逃避行動後、所確認到的不動狀態的時間(不動時間(Immobility time))。已知不動狀態為「絕望狀態」,不動時間越短,則能夠評價為改善絕望狀態、提升情緒。因此,在此試驗中具有情緒提升效果的物質,對於情緒障礙的治療、預防、或改善為有效的。
<試驗1>
將序列編號2所表示的胺基酸序列溶解於生理食鹽水,以每單位體重為0.03、0.1、或0.3mg/kg的量經口投予至小鼠(n=5~6)。作為對照、準備僅經口投予生理食鹽水的小鼠(n=6)。將各小鼠提供於懸尾實驗,評價因本發明之胜肽而情緒提升的效果。將其結果顯示於圖1。
如同圖1所示,投予本發明之胜肽的小鼠,相較於對照,不動時間縮短。此傾向確認為本發明之胜肽之濃度依賴性。因此,本發明之胜肽顯示達到情緒提升的效果,對於情緒障礙的治療、預防等為有用。
<試驗2>
將序列編號1~3所表示的胺基酸序列分別溶解於生理食鹽水,以每單位體重為0.1mg/kg的量經口投予至小鼠(n=5~6)。作為對照、準備僅經口投予生理食鹽水的小鼠(n=6)。將各小鼠提供於懸尾實驗,評價因本發明之胜肽而情緒提升的效果。將其結果顯示於圖2。
如圖2所示,投予序列編號3所表示的胺基酸序列的小鼠、相較於對照組,不能夠確認到不動時間的減少。另一方面,投予序列編號1或2所表示的胺基酸序列的小鼠、相較於對照組,不動時間縮短。由此結果可知,在序列中包含序列編號1所表示的胺基酸序列的胺基酸序列的胜肽,具有顯著的情緒提升的效果。
<試驗3>
準備將序列編號2所表示的胺基酸序列以0.3mg/kg與各種受體的拮抗物併用,經口投予的小鼠(n=5~6)。將各小鼠提供於懸尾實驗,評價因本發明之胜肽而情緒提升的效果。將其結果顯示於圖3。
作為拮抗物,使用以下之物。
(1)SCH23390:多巴胺D1受體的拮抗物,使用量設為30μg/kg
(2)WAY100135:血清素5-HT1A受體的拮抗物,使用量設為10mg/kg
(3)Bicuculline:GABA-A受體的拮抗物,使用量設為30mg/kg。
在圖3中,不動時間越長,則意味著因拮抗物而受到阻礙的受體關係到因序列編號2所表示的胺基酸序列而情緒提升的效果。藉由將序列編號2所表示的胺基酸序列與WAY100135、或Bicuculline併用,相對地不動時間減少。此為血清素5-HT1A受體、GABA-A受體等與因序列編號2所表示的胺基酸序列而情緒提升的效果幾乎無關。相對於此,藉由將序列編號2所表示的胺基酸序列與SCH23390併用,不動時間有意義地增長。此結果表示,多巴胺D1受體的活性化與因序列編號2所表示的胺基酸序列而情緒提升的效果相關的可能性。
無。
[圖1]使用經口投予本發明之胜肽的小鼠之懸尾實驗的結果。
[圖2]使用經口投予本發明之胜肽的小鼠之懸尾實驗的結果。
[圖3]使用經口投予本發明之胜肽的小鼠之懸尾實驗的結果。
Claims (8)
- 一種胜肽,其包含序列編號1所記載之胺基酸序列,且為6以上、20以下之胺基酸長度。
- 如申請專利範圍第1項所述之胜肽,該胜肽由序列編號1所記載之胺基酸序列所形成。
- 如申請專利範圍第1項所述之胜肽,該胜肽包括序列編號2所記載之胺基酸序列,或與序列編號2所記載之胺基酸序列具有90%以上的一致性之胺基酸序列。
- 一種用於情緒障礙的治療、預防或改善之組成物,其包含如申請專利範圍第1至3項中任一項所述之胜肽,或含有該胜肽作為胺基酸序列的一部分之蛋白質。
- 如申請專利範圍第4項所述之組成物,該情緒障礙選自由情緒低落、憂鬱、及憂鬱的情緒障礙、以及基於上述之症狀所組成之群組的1種以上。
- 如申請專利範圍第4或5項所述之組成物,其為醫藥品。
- 如申請專利範圍第4或5項所述之組成物,其為飲食品。
- 預防或改善情緒障礙之方法,其包括投予如申請專利範圍第4至7項中任一項所述之組成物。
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