TW201936182A - Ｅｚｈ２抑制劑組合治療 - Google Patents
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Abstract
本發明關於包含EZH2抑制劑及化學治療劑之組合治療，以及相關的醫藥組成物、治療方法及醫藥用途。
Description
本發明關於有用於治療癌症之組合治療。本發明特別關於包含zeste增強子同源物2 (EZH2)抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與化學治療劑或其醫藥上可接受之鹽之組合治療。本發明亦關於相關的治療方法、醫藥組成物及醫藥用途。
表觀基因變更在細胞過程(包括細胞增生、細胞分化和細胞存活)之調節中扮演重要的角色。腫瘤抑制基因之表觀基因靜默及致癌基因之激活可通過DNA甲基化樣式變更、組蛋白修飾及DNA結合染色質重塑複合體失調而發生。多梳基因為一組表觀基因效應子。EZH2 (zeste增強子同源物2)為多梳抑制因子複合體2 (PRC2)之催化組分，該複合體為藉由令組蛋白H3上的離胺酸27 (H3K27)甲基化以抑制基因轉錄之保守性多亞單元複合體。EZH2在調節基因表現樣式中扮演關鍵角色，該基因表現樣式調節細胞命運決定，諸如分化和自我更新。EZH2在特定的癌細胞中過度表現，在此情況已與細胞增生、細胞侵入、化學抗性及轉移連結。
高的EZH2表現已與許多癌類型的不良預後、嚴重程度及高病期互相關聯，該癌類型包括乳癌、結腸直腸癌、子宮內膜癌、胃癌、肝癌、腎癌、肺癌、黑色素癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌和膀胱癌。參見Crea等人之Crit. Rev. Oncol. Hematol. 2012, 83:184-193及其中引用的文獻；亦參見Kleer等人之Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2003, 100:11606-11；Mimori等人之Eur. J. Surg. Oncol. 2005, 31：376-80；Bachmann等人之J. Clin. Oncol . 2006, 24:268-273；Matsukawa等人之Cancer Sci. 2006, 97:484-491；Sasaki等人之Lab. Invest. 2008, 88:873-882；Sudo等人之Br. J. Cancer 2005, 92(9):1754-1758；Breuer等人之Neoplasia 2004, 6:736-43；Lu等人之Cancer Res. 2007, 67:1757-1768；Ougolkov等人之Clin. Cancer Res. 2008, 14:6790-6796；Varambally等人之Nature 2002, 419:624-629；Wagener等人之Int. J. Cancer 2008, 123:1545-1550；及Weikert等人之Int. J. Mol. Med. 2005, 16:349-353；Jones P. A.等人之Nat Rev Genet , 2002, 3(6):415-428；及Ezponda T.等人之Clin Cancer Res , 2014, 20(19):5001-5008。
已於瀰漫性大型B細胞淋巴瘤(DLBCL)及濾泡性淋巴瘤(FL)鑑定出在EZH2中的復發性體細胞突變。據報導已在至多22%之生發中心B細胞DLBCL及7%之FL中觀察到改變EZH2酪胺酸641 (例如Y641C、Y641F、Y641N、Y641S和Y641H)之突變。Morin等人之Nat. Genetics 2010, 42 (2):181-185。亦曾報導丙胺酸677 (A677)及丙胺酸687 (A687)之突變。McCabe等人之Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2012, 109:2989-2994；Majer等人之FEBS Letters 2012, 586:3448-3451。曾提出EZH2激活之突變改變受質特異性，導致三甲基化H3K27 (H3K27Me3)含量升高(Sneeringer等人之Proc Natl Acad Sci USA 2010, 107(49):20980-5)。
亦稱為燕麥細胞癌(oat call cancer)的小細胞肺癌(SCLC)佔所有肺癌的約10至15%。肺的小細胞癌通常存在於中央氣道中且滲入黏膜下層，導致支氣管氣道變窄。超過70％的小細胞肺癌患者有轉移型疾病的存在；常見的部位包括肝、腎上腺、骨和大腦。SCLC是一種不良分化的贅瘤，其可藉由其神經內分泌(NE)特性來區分(Sabari J. K.等人之Nat Rev Clini Oncol, 2017, 14(9): 549-561)。在診斷後，SCLC係取決於遠端轉移的存在或不存在而最常被分類成有限狀態疾病(limited state disease)(LD)或擴散型疾病(ED)。所有SCLC患者中約三分之二被診斷為ED。儘管於後期檢測出SCLC，但是觀察到大多數患者對化學治療及放射治療良好的初步反應。可是不幸的是在此初步反應後，幾乎所有的患者皆在6至12個月內以抗性疾病復發(Semenova E. A.等人之Genes Dev , 2015, 29(14):1447-1462)。小細胞肺癌係以幾乎一致的腫瘤抑制因子TP53(腫瘤蛋白質p53)及RB1 (視網膜胚細胞瘤)功能喪失為特徵。與其他的肺癌亞型及正常組織相比，在所有的SCLC患者中觀察到EZH2的過度表現。在SCLC中的RB1喪失係與增加的EZH2表現密切相關。EZH2可因此具有介導SCLC進展的角色(Poirier J. T.等人之Oncogene , 2015, 34(48): 5869-5878；Gardner E. E.等人之Cancer Cell , 2017, 31(2): 286-299)。
仍對改進癌症治療之治療方法有需求。咸信本發明之組合具有一或多個優點，諸如比單獨的治療劑治療更大功效、降低藥物與藥物相互作用的可能性、能夠改進給藥時程的可能性、減少副作用的可能性、克服抗性機制的可能性及類似者。本發明之該等及其他優點係自以下的發明內容而明白。
高的EZH2表現已與許多癌類型的不良預後、嚴重程度及高病期互相關聯，該癌類型包括乳癌、結腸直腸癌、子宮內膜癌、胃癌、肝癌、腎癌、肺癌、黑色素癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌和膀胱癌。參見Crea等人之Crit. Rev. Oncol. Hematol. 2012, 83:184-193及其中引用的文獻；亦參見Kleer等人之Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2003, 100:11606-11；Mimori等人之Eur. J. Surg. Oncol. 2005, 31：376-80；Bachmann等人之J. Clin. Oncol . 2006, 24:268-273；Matsukawa等人之Cancer Sci. 2006, 97:484-491；Sasaki等人之Lab. Invest. 2008, 88:873-882；Sudo等人之Br. J. Cancer 2005, 92(9):1754-1758；Breuer等人之Neoplasia 2004, 6:736-43；Lu等人之Cancer Res. 2007, 67:1757-1768；Ougolkov等人之Clin. Cancer Res. 2008, 14:6790-6796；Varambally等人之Nature 2002, 419:624-629；Wagener等人之Int. J. Cancer 2008, 123:1545-1550；及Weikert等人之Int. J. Mol. Med. 2005, 16:349-353；Jones P. A.等人之Nat Rev Genet , 2002, 3(6):415-428；及Ezponda T.等人之Clin Cancer Res , 2014, 20(19):5001-5008。
已於瀰漫性大型B細胞淋巴瘤(DLBCL)及濾泡性淋巴瘤(FL)鑑定出在EZH2中的復發性體細胞突變。據報導已在至多22%之生發中心B細胞DLBCL及7%之FL中觀察到改變EZH2酪胺酸641 (例如Y641C、Y641F、Y641N、Y641S和Y641H)之突變。Morin等人之Nat. Genetics 2010, 42 (2):181-185。亦曾報導丙胺酸677 (A677)及丙胺酸687 (A687)之突變。McCabe等人之Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2012, 109:2989-2994；Majer等人之FEBS Letters 2012, 586:3448-3451。曾提出EZH2激活之突變改變受質特異性，導致三甲基化H3K27 (H3K27Me3)含量升高(Sneeringer等人之Proc Natl Acad Sci USA 2010, 107(49):20980-5)。
亦稱為燕麥細胞癌(oat call cancer)的小細胞肺癌(SCLC)佔所有肺癌的約10至15%。肺的小細胞癌通常存在於中央氣道中且滲入黏膜下層，導致支氣管氣道變窄。超過70％的小細胞肺癌患者有轉移型疾病的存在；常見的部位包括肝、腎上腺、骨和大腦。SCLC是一種不良分化的贅瘤，其可藉由其神經內分泌(NE)特性來區分(Sabari J. K.等人之Nat Rev Clini Oncol, 2017, 14(9): 549-561)。在診斷後，SCLC係取決於遠端轉移的存在或不存在而最常被分類成有限狀態疾病(limited state disease)(LD)或擴散型疾病(ED)。所有SCLC患者中約三分之二被診斷為ED。儘管於後期檢測出SCLC，但是觀察到大多數患者對化學治療及放射治療良好的初步反應。可是不幸的是在此初步反應後，幾乎所有的患者皆在6至12個月內以抗性疾病復發(Semenova E. A.等人之Genes Dev , 2015, 29(14):1447-1462)。小細胞肺癌係以幾乎一致的腫瘤抑制因子TP53(腫瘤蛋白質p53)及RB1 (視網膜胚細胞瘤)功能喪失為特徵。與其他的肺癌亞型及正常組織相比，在所有的SCLC患者中觀察到EZH2的過度表現。在SCLC中的RB1喪失係與增加的EZH2表現密切相關。EZH2可因此具有介導SCLC進展的角色(Poirier J. T.等人之Oncogene , 2015, 34(48): 5869-5878；Gardner E. E.等人之Cancer Cell , 2017, 31(2): 286-299)。
仍對改進癌症治療之治療方法有需求。咸信本發明之組合具有一或多個優點，諸如比單獨的治療劑治療更大功效、降低藥物與藥物相互作用的可能性、能夠改進給藥時程的可能性、減少副作用的可能性、克服抗性機制的可能性及類似者。本發明之該等及其他優點係自以下的發明內容而明白。
本發明關於治療癌症之治療方案。
本發明關於個體之癌症治療方法，其包含對個體投予組合治療，該組合包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽及鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽。
本發明亦關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合。
本發明亦關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合，其係用於癌症治療。
本發明亦關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之協同性組合。
本發明亦關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之協同性組合，其係用於癌症治療。
本發明亦關於醫藥組成物，其包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽，及醫藥上可接受之載劑。
本發明亦關於套組，其包含第一容器、第二容器及仿單，其中第一容器包含至少一個劑量的EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽，第二容器包含至少一個劑量的鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽，且仿單包含使用該等藥劑以治療個體的癌症之指示說明。
在本發明之一個實施態樣中，個體為人類。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為頑抗型小細胞肺癌。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為復發型小細胞肺癌。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌被分類成擴散期疾病。
在本發明之一個實施態樣中，個體未經治療。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為復發型小細胞肺癌且個體未經治療。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為頑抗型小細胞肺癌且個體未經治療。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為擴散期疾病小細胞肺癌且個體未經治療。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為頑抗型擴散期疾病小細胞肺癌且個體未經治療。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為復發型擴散期疾病小細胞肺癌且個體未經治療。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑係選自由下列者所組成之群組：
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(S )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5-溴-8-氯-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-7-(1,4-二甲基-1H -1,2,3-三唑-5-基)-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-7-(3,5-二甲基-1,2-噁唑-4-基)-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-5-[乙基(四氫-2H-吡喃-4-基)胺基]-4-甲基-4’-(嗎啉-4-基甲基)聯苯基-3-甲醯胺；
N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-5-[乙基(四氫-2H-吡喃-4-基)胺基]-4-甲基-4’-(嗎啉-4-基甲基)聯苯基-3-甲醯胺；
N-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-1-[(1R)-1-[1-(2,2,2-三氟乙基)哌啶-4-基]乙基]-1H-吲哚-3-甲醯胺；
N-(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基甲基)-1-異丙基-3-甲基-6-[6-(4-甲基哌-1-基)吡啶-3-基]-1H-吲哚-4-甲醯胺；
N-[(6-甲基-2-側氧基-4-丙基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-6-[2-(4-甲基哌-1-基)吡啶-4-基]-1-(丙-2-基)-1H-吲唑-4-甲醯胺；
或其醫藥上可接受之鹽。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑為5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮或其醫藥上可接受之鹽。
在本發明之一個實施態樣中，鉑為底質之抗贅瘤劑係選自由下列者所組成之群組：順鉑(cisplatin)和卡鉑(carboplatin)。
在本發明之一個實施態樣中，鉑為底質之抗贅瘤劑為順鉑。
在本發明之一個實施態樣中，鉑為底質之抗贅瘤劑為卡鉑。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑為5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮或其醫藥上可接受之鹽，且鉑為底質之抗贅瘤劑為順鉑。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑為5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮或其醫藥上可接受之鹽，且鉑為底質之抗贅瘤劑為卡鉑。
在本發明之一個實施態樣中，另外投予依托泊苷(etoposide)。
下文所述之本發明的每一實施態樣可與本文所述之本發明的一或多個其他的實施態樣組合，該其他的實施態樣與其組合之實施態樣並不矛盾。另外，下文說明本發明的每一實施態樣係設想本發明化合物的其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物、水合物及複合物，以及其鹽的溶劑合物、水合物及複合物(包括其多形物、立體異構物及經同位素標記之型式)在本發明之範圍內。因此，短語「或其醫藥上可接受之鹽」係隱含在本文所述之所有化合物的說明中。
本發明關於個體之癌症治療方法，其包含對個體投予組合治療，該組合包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽及鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽。
本發明亦關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合。
本發明亦關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合，其係用於癌症治療。
本發明亦關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之協同性組合。
本發明亦關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之協同性組合，其係用於癌症治療。
本發明亦關於醫藥組成物，其包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽，及醫藥上可接受之載劑。
本發明亦關於套組，其包含第一容器、第二容器及仿單，其中第一容器包含至少一個劑量的EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽，第二容器包含至少一個劑量的鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽，且仿單包含使用該等藥劑以治療個體的癌症之指示說明。
在本發明之一個實施態樣中，個體為人類。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為頑抗型小細胞肺癌。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為復發型小細胞肺癌。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌被分類成擴散期疾病。
在本發明之一個實施態樣中，個體未經治療。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為復發型小細胞肺癌且個體未經治療。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為頑抗型小細胞肺癌且個體未經治療。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為擴散期疾病小細胞肺癌且個體未經治療。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為頑抗型擴散期疾病小細胞肺癌且個體未經治療。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為復發型擴散期疾病小細胞肺癌且個體未經治療。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑係選自由下列者所組成之群組：
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(S )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5-溴-8-氯-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-7-(1,4-二甲基-1H -1,2,3-三唑-5-基)-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-7-(3,5-二甲基-1,2-噁唑-4-基)-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-5-[乙基(四氫-2H-吡喃-4-基)胺基]-4-甲基-4’-(嗎啉-4-基甲基)聯苯基-3-甲醯胺；
N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-5-[乙基(四氫-2H-吡喃-4-基)胺基]-4-甲基-4’-(嗎啉-4-基甲基)聯苯基-3-甲醯胺；
N-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-1-[(1R)-1-[1-(2,2,2-三氟乙基)哌啶-4-基]乙基]-1H-吲哚-3-甲醯胺；
N-(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基甲基)-1-異丙基-3-甲基-6-[6-(4-甲基哌-1-基)吡啶-3-基]-1H-吲哚-4-甲醯胺；
N-[(6-甲基-2-側氧基-4-丙基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-6-[2-(4-甲基哌-1-基)吡啶-4-基]-1-(丙-2-基)-1H-吲唑-4-甲醯胺；
或其醫藥上可接受之鹽。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑為5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮或其醫藥上可接受之鹽。
在本發明之一個實施態樣中，鉑為底質之抗贅瘤劑係選自由下列者所組成之群組：順鉑(cisplatin)和卡鉑(carboplatin)。
在本發明之一個實施態樣中，鉑為底質之抗贅瘤劑為順鉑。
在本發明之一個實施態樣中，鉑為底質之抗贅瘤劑為卡鉑。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑為5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮或其醫藥上可接受之鹽，且鉑為底質之抗贅瘤劑為順鉑。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑為5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮或其醫藥上可接受之鹽，且鉑為底質之抗贅瘤劑為卡鉑。
在本發明之一個實施態樣中，另外投予依托泊苷(etoposide)。
下文所述之本發明的每一實施態樣可與本文所述之本發明的一或多個其他的實施態樣組合，該其他的實施態樣與其組合之實施態樣並不矛盾。另外，下文說明本發明的每一實施態樣係設想本發明化合物的其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物、水合物及複合物，以及其鹽的溶劑合物、水合物及複合物(包括其多形物、立體異構物及經同位素標記之型式)在本發明之範圍內。因此，短語「或其醫藥上可接受之鹽」係隱含在本文所述之所有化合物的說明中。
詳細說明
本發明可參考下列本發明較佳的實施態樣及其中包括的實施例之詳細說明而更輕易地理解。應理解本文所使用之術語僅以說明特定的實施態樣為目的而已，且不意欲為限制。應進一步理解本文所使用之術語係以相關技術中已知的其傳統意義給出，除非經本文特定的定義。
如本文所使用之單數形式「一(a)」、「一(an)」及「該(the)」包括複數個參考物，除非另有其他指示。例如，「一(a)」取代基包括一或多個取代基。
當術語「約」用於修飾經數值定義之參數時(例如EZH2抑制劑的劑量、鉑為底質之抗贅瘤劑(諸如順鉑)的劑量、化學治療劑(諸如依托泊苷)的劑量及類似者)，則其意指參數可以高於或低於該參數所陳述之數值的至多10%之變化。例如，應理解約5 mg/kg之劑量意指劑量可在4.5 mg/kg與5.5 mg/kg之間變化。
術語「異常細胞生長」及「過度增生性疾患」於本申請案中可交換使用。
如本文所使用之「異常細胞生長」係指不受正常的調節機制支配(例如喪失接觸抑制作用)的細胞生長，除非另有其他指示。異常細胞生長可為良性(非癌)或惡性(癌)。
術語「癌」、「癌的」、「惡性的」係指或說明哺乳動物中的生理狀況，其通常係以失調的細胞生長為特徵。如本文所使用之「癌」係指由異常細胞生長所引起的任何惡性及/或侵入性生長或腫瘤。如本文所用的「癌」係指以形成腫瘤的細胞類型命名之固態腫瘤、血液癌、骨髓癌或淋巴系統癌。固態腫瘤的實例包括但不限於肉瘤及癌(carcinoma)。血液癌實例包括但不限於白血病、淋巴瘤和骨髓癌。術語「癌」包括但不限於起源於身體的特定部位之原發癌、自開始的位置擴散至身體的其他部位之轉移癌、在緩解後自原來的原發癌復發及第二原發癌，其為類型上不同於先前的癌病史之人體內的新原發癌。癌的實例包括但不限於癌(carcinoma)、淋巴瘤、白血病、胚細胞瘤和肉瘤。此等癌的更特別實例包括鱗狀細胞癌、骨髓瘤、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、神經膠瘤、何杰金氏(hodgkin’s)淋巴瘤、非何杰金氏淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤(FL)、瀰漫性大型B細胞淋巴瘤(DLCBCL)、急性骨髓性白血病(AML)、多發性骨髓瘤、胃腸(道)癌、腎癌(renal cancer)、卵巢癌、肝癌、腎臟癌(kidney cancer)、前列腺癌、去勢抗性前列腺癌(CRPC)、甲狀腺癌、黑色素瘤、軟骨肉瘤、神經胚細胞瘤、胰腺癌、多形性膠質母細胞瘤、子宮頸癌、腦癌、胃癌、膀胱癌、肝細胞瘤、乳癌、結腸癌和頭與頸癌。
術語「患者」或「個體」係指任何需要治療或參與臨床試驗、流行病學研究或用作為對照的單一個體，包括人類及哺乳動物獸醫患者，諸如牛、馬、狗和貓。在特定較佳的實施態樣中，個體為人類。
如本文所使用之術語「治療(treat)」或「治療(treating)」癌症意指對患有癌症或被診斷患有癌症的個體投予根據本發明之組合治療以達成至少一種積極的治療效應，諸如減少癌細胞數量、減少腫瘤大小、降低癌細胞浸潤至外周組織的速度或降低腫瘤轉移或腫瘤生長的速度，逆轉、緩和、抑制此術語適用的疾患或病況或該等疾患或病況的一或多種症狀之進展、或預防該等疾患或病況或該等疾患或病況的一或多種症狀。如本文所使用之術語「治療(treatment)」係指剛如上文定義之「治療(treating)」的治療行為，除非另有其他指示。術語「治療(treating)」亦包括個體的輔助性及新輔助性治療。出於本發明的目的，有益或期望的臨床結果包括但不限於下列中之一或多者：減少(或破壞)贅瘤或癌細胞的增生、抑制轉移或贅瘤細胞、縮小或減小腫瘤的大小、緩解癌症、減少源於癌的症狀、提高患有癌症的患者之生活質量、減少治療癌症所需之其他藥的劑量、延遲癌症的進展、治癒癌症、克服一或多種癌症的抵抗機制及/或延長癌症患者的存活期。積極的癌症治療效應可以許多方式測量(參見例如W. A. Weber,J. Nucl. Med . 50:1S-10S (200))。在一些實施態樣中，以本發明之組合達成的治療為下列中任一者：部分反應(PR)、完全反應(CR)、總反應(OR)、無進展存活期(PFS)、無疾病存活期(DFS)及總存活率(OS)。亦稱為「至腫瘤進展的時間」之PFS表示在治療期間及之後癌未生長的時間，且包括患者經歷CR或PR之時間量，及患者經歷穩定的疾病(SD)之時間量。DFS係指在治療期間及之後患者維持無疾病的時間長度。OS係指與原態或未經治療的個體或患者相比而預期壽命的延長。在一些實施態樣中，對本發明之組合的反應為PR、CR＜ PFS、DFS、OR或OS中任一者，該反應係使用固態腫瘤之反應評估準則(Response Evaluation Criteria in Solid Tumors)(RECIST) 1.1反應準則評定。有效治療癌症患者的本發明之組合的治療方案可根據以下因素改變：諸如患者的疾病狀態、年齡和體重及在個體中引發抗癌反應的治療能力。雖然本發明之態樣中任一者的實施態樣可能無法有效地在每一個體中達成積極的治療效應，但是應在統計學上顯著數量的個體中達成，如藉由本技術中已知的任何統計學試驗所確定，諸如司徒登氏t-試驗(Student’s t-test)、chi2-試驗、根據曼(Mann)與惠特尼(Whitney)之U-試驗、克拉斯卡-瓦立斯(Kruskal-Wallis)試驗(H-test)、瓊克希爾-特普斯推特(Jonckheere-Terpstrat)-試驗及威爾康試驗(Wilcon on-test)。術語治療「治療(treatment)」亦包含例如細胞以試劑、診斷化合物、結合化合物或另一細胞的試管內或細胞外治療。
術語「治療方案(regimen)」、「給藥程序(protocol)」及「給藥方案」可交換使用，其係指投予本發明之組合中的每一治療劑的劑量及時序。
「改善」意指與未投予本發明之方法或方案的治療劑相比而減輕或改進一或多種症狀。「改善」亦包括縮短或減少症狀的持續期間。
如本文所使用之藥物、化合物或醫藥組成物的「有效劑量」或「有效量」為足以影響疾病、其併發症及在疾病發展期間呈現之中間病理表型的任何一或多種有益或期望(包括)的生化學、組織學及/或行為學症狀之量。就治療用途而言，「治療有效量」係指減輕欲治療之疾患的症狀中之一或多者至某種程度的欲投予之化合物量。關於癌症的治療，治療有效量係指具有以下效應的量：(1)減少腫瘤大小，(2)抑制(亦即減慢至某種程度，較佳為停止)腫瘤轉移，(3)抑制腫瘤生長或腫瘤侵入至某種程度(亦即減慢至某種程度，較佳為停止)，(4)減輕與癌症相關的一或多種徵兆或症狀至某種程度(或較佳為消除)，(5)減少治療疾病所需之其他藥的劑量，及/或(6)提高另一藥的效應，及/或延遲患者的疾病進展。有效劑量可以一或多次投予。出於本發明的目的，藥物、化合物或醫藥組成物的有效劑量為足以直接或間接完成預防性或治療性治療的量。如臨床背景所理解，藥物、化合物或醫藥組成物的有效劑量可與或可不與另一藥物、化合物或藥物組合物一起達成。
「腫瘤」在應用於經診斷患有或懷疑患有癌症之個體時，其係指任何大小之惡性或潛在惡性贅瘤或組織塊狀物，且包括原發性腫瘤及繼發性贅瘤。固態腫瘤為通常不含囊腫或液體區域之組織的異常生長或塊狀物。固態腫瘤的實例為為肉瘤、癌和淋巴瘤。白血病(血液癌)通常不構成固態腫瘤(國家癌症學會之癌症術語詞典(National Cancer Institute, Dictionary of Cancer Terms))。
亦稱為「腫瘤負荷(tumor load)」之「腫瘤負荷(tumor burden)」係指分布於全身的腫瘤物質之總量。腫瘤負荷係指全身(包括淋巴結及骨髓)的癌細胞總數量或整體腫瘤大小。腫瘤負荷可以此項技術中已知的多種方法測定，諸如使用測徑器，或在體內時使用造影技術，例如超聲波、骨掃描、電腦斷層攝影術(CT)或磁共振造影(MRI)掃描。
術語「腫瘤大小」係指可以腫瘤的長度及寬度量測之整體腫瘤大小。腫瘤大小可以此項技術中已知的多種方法測定，諸如在自個體移出時例如使用測徑器測量腫瘤的尺寸，或在體內時使用造影技術，例如骨掃描、超聲波、CT或MRI掃描。
術語「加成性」被用於意指兩種化合物、組分或靶定之藥劑之組合結果不大於獨立的各化合物、組分或靶定之藥劑的總和。
術語「協同性」或「協同」被用於意指兩種化合物、組分或靶定之藥劑之組合結果大於獨立的各化合物、組分或靶定之藥劑的總和。欲治療之疾病、病況或疾患的此改進為「協同」效應。「協同量」為導致協同效應的兩種化合物、組分或靶定之藥劑之組合量，如本文定義之「協同」。
測定在一或兩種組分之間之協同相互作用時，就效應而言之最優範圍及就效應而言之各組分的絕對劑量範圍可藉由對需要治療之患者投予不同的劑量範圍及/或劑量比率之組分而明確地測量。然而，試管內模式或活體內模式之協同性觀察可預測在人及其他物種中的效應，且有如本文所述之試管內模式或活體內模式的存在以測量協同效應。亦可使用此等研究的結果預測在人類及其他物種中所需之有效劑量和血漿濃度比率範圍，及絕對劑量和血漿濃度，諸如藉由藥物動力學/藥效學方法的應用。
如本文所使用之「非標準的臨床給藥方案」係指投予物質、藥劑、化合物或組成物的方案不同於典型地用於臨床設定之物質、藥劑、化合物或組成物的量、劑量或時程。「非標準的臨床給藥方案」包括「非標準的臨床劑量」或「非標準的臨床給藥時程」。
如本文所使用之「低劑量方案」係指其中在方案中的物質、藥劑、化合物或組成物中之一或多者係以低於該藥劑典型地用於臨床設定中的量或劑量給藥之給藥方案，例如當該藥劑係作為單例(singleton)治療給藥時。
Zeste 增強子同源物2
本發明之實施態樣包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽。
如本文所使用之術語「zeste增強子同源物2 (EZH2)抑制劑」及「EZH2抑制劑」可交換使用，且應意指EZH2的野生型及/或突變體抑制劑。EZH2抑制劑可以那些熟習此項技術領域者已知的方法測定，例如生物學活性可以EZH2酵素檢定法測定，諸如以Kung, P. P.等人之J Med Chem , 2016, 59, 8306-8325所揭示。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之實例包括那些在國際專利申請案PCT/IB2015/054272中所揭示者，該申請案係於2015年12月23日以WO 2015/193765發表，藉由參照於本文納入其內容。用作為本發明之EZH2抑制劑的本文所揭示之特定的EZH2抑制劑之實例包括但不限於選自由下列者所組成之群組的EZH2抑制劑：
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(S )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
或其醫藥上可接受之鹽。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/IB2013/060682中所揭示者，該申請案係於2014年6月26日以WO 2014/097041發表，藉由參照於本文納入其內容。用作為本發明之EZH2抑制劑的本文所揭示之特定的EZH2抑制劑之實例包括但不限於選自由下列者所組成之群組的EZH2調節劑：
5-溴-8-氯-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-7-(1,4-二甲基-1H -1,2,3-三唑-5-基)-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-7-(3,5-二甲基-1,2-噁唑-4-基)-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
或其醫藥上可接受之鹽。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/IB2013/058580中所揭示者，該申請案係於2014年4月3日以WO 2014/049488發表，藉由參照於本文納入其內容。用作為本發明之EZH2抑制劑的本文所揭示之特定的EZH2抑制劑之實例包括但不限於選自由下列者所組成之群組的EZH2抑制劑：
5-[2-(二甲基胺基)嘧啶-5-基]-N -[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H -吡唑-5-基)苯甲醯胺；
N -[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-5-[2-(甲基胺基)嘧啶-5-基]-3-(1-甲基-1H -吡唑-5-基)苯甲醯胺；
N -[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3-(1,4-二甲基-1H -吡唑-5-基)-2-甲基-5-[2-(甲基胺基)嘧啶-5-基]苯甲醯胺；
5-(6-胺基吡啶-3-基)-N -[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H -吡唑-5-基)苯甲醯胺；
N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3-(1,4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-甲基-5-(2-嗎啉-4-基嘧啶-5-基)苯甲醯胺；
N -[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3-(1,4-二甲基-1H -吡唑-5-基)-2-甲基-5-{2-[(1S ,4S )-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚-5-基]嘧啶-5-基}苯甲醯胺；
N -[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3-(1,4-二甲基-1H -吡唑-5-基)-2-甲基-5-{2-[3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基]嘧啶-5-基}苯甲醯胺；
N -[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3-(1,4-二甲基-1H -吡唑-5-基)-5-[2-(3-氟吖呾-1-基)嘧啶-5-基]-2-甲基苯甲醯胺；及
N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-5-[6-(4-甲基哌-1-基)吡啶-3-基]-3-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)苯甲醯胺；
或其醫藥上可接受之鹽。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2011/035336中所揭示者，該申請案係於2011年11月10日以WO 2011/140324發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2011/035340中所揭示者，該申請案係於2011年11月10日以WO 2011/140325發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2011/035344中所揭示者，該申請案係於2012年1月12日以WO 2012/005805發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2012/058188中所揭示者，該申請案係於2013年4月4日以WO 2013/049770發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2013/041115中所揭示者，該申請案係於2013年11月21日以WO 2013/173441發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2011/051258中所揭示者，該申請案係於2012年3月15日以WO 2012/034132發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2012/026953中所揭示者，該申請案係於2012年9月7日以WO 2012/118812發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2012/033648中所揭示者，該申請案係於2012年10月18日以WO 2012/142504發表，藉由參照於本文納入其內容。用作為本發明之EZH2抑制劑的本文所揭示之特定的EZH2抑制劑之實例包括：
N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-5-[乙基(四氫-2H-吡喃-4-基)胺基]-4-甲基-4’-(嗎啉-4-基甲基)聯苯基-3-甲醯胺；
或其醫藥上可接受之鹽。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2012/033662中所揭示者，該申請案係於2012年10月18日以WO 2012/142513發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2011/061740中所揭示者，該申請案係於2012年5月24日以WO 2012/068589發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2013/025639中所揭示者，該申請案係於2013年8月15日以WO 2013/120104發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2014/015706中所揭示者，該申請案係於2014年8月14日以WO 2014/124418，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2013/065112中所揭示者，該申請案係於2014年8月24日以WO 2014/062720發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/IB2015/054272，該申請案係於2015年12月23日以WO 2015/193765發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/IB2015/054272，該申請案係於2015年12月23日以WO 2015/193765發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(S )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/IB2015/054272，該申請案係於2015年12月23日以WO 2015/193765發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
5-溴-8-氯-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-7-(1,4-二甲基-1H -1,2,3-三唑-5-基)-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/IB2013/060682，該申請案係於2014年6月26日以WO 2014/097041發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
5,8-二氯-7-(3,5-二甲基-1,2-噁唑-4-基)-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/IB2013/060682，該申請案係於2014年6月26日以WO 2014/097041發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-5-[乙基(四氫-2H-吡喃-4-基)胺基]-4-甲基-4’-(嗎啉-4-基甲基)聯苯基-3-甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，亦稱為塔澤司他(tazemetostat)、EPZ-5687或EPZ-6438，且其係揭示於國際專利申請案PCT/US2012/033648，該申請案係於2012年10月18日以WO 2012/142504發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
N-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-1-[(1R)-1-[1-(2,2,2-三氟乙基)哌啶-4-基]乙基]-1H-吲哚-3-甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，亦稱為CPI-1205，且其係揭示於國際專利申請案PCT/US2013/025639，該申請案係於2013年8月15日以WO 2013/120104發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
N-(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基甲基)-1-異丙基-3-甲基-6-[6-(4-甲基哌-1-基)吡啶-3-基]-1H-吲哚-4-甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，亦稱為GSK-503，且其係揭示於國際專利申請案PCT/US2011/035336，該申請案係於2011年11月10日以WO 2011/140324發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
N-[(6-甲基-2-側氧基-4-丙基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-6-[2-(4-甲基哌-1-基)吡啶-4-基]-1-(丙-2-基)-1H-吲唑-4-甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，亦稱為GSK-126，且其係揭示於國際專利申請案PCT/US2011/035340，該申請案係於2011年11月10日以WO 2011/140325發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
1-異丙基-N-(6-甲基-2-側氧基-4-丙基-1,2-二氫吡啶-3-基甲基)-6-[6-(4-甲基哌-1-基)吡啶-3-基]-1H-吲唑-4-甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/US2011/035340，該申請案係於2011年11月10日以WO 2011/140325發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
3-氯-4-[2-氰基-3-(嗒-4-基)苯氧基]-N-(2,2,6,6-四甲基哌啶-4-基)苯甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/US2011/061740，該申請案係於2012年5月24日以WO 2012/068589發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
5-氯-N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3-[乙基(四氫-2H-吡喃-4-基)胺基]-2-甲基苯甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/US2012/033662，該申請案係於2012年10月18日以WO 2012/142513發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
1-[(1R)-1-[1-(乙基磺醯基)哌啶-4-基]乙基]-N-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-1H-吲哚-3-甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/US2013/025639，該申請案係於2013年8月15日以WO 2013/120104發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
N-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-1-(1-甲氧基丙-2-基)-2-甲基-1H-吲哚-3-甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/US2013/025639，該申請案係於2013年8月15日以WO 2013/120104發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3-(乙基[反式-4-[(2-甲氧基乙基)(甲基)胺基]環己基]胺基)-2-甲基-5-[3-(嗎啉-4-基)丙-1-炔-1-基]苯甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，隨意地為酒石酸鹽，該化合物係揭示於國際專利申請案PCT/US2013/065112，該申請案係於2014年4月24日以WO 2014/062720發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
1-[(1R)-1-[1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基]乙基]-N-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-1H-吲哚-3-甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/US2014/015706，該申請案係於2014年8月14日以WO 2014/124418發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
5-[環戊基(甲基)胺基]-N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-4-甲基-4’-[(嗎啉-4-基)甲基][1,1’-聯苯基]-3-甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/US2012/033648，該申請案係於2012年10月18日以WO 2012/142504發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
5-溴-3-[環戊基(甲基)胺基]-N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基苯甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/US2012/033662，該申請案係於2012年10月18日以WO 2012/142513發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
5-溴-N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-3-[甲基(氧雜環己烷-4-基)胺基]苯甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/US2012/033662，該申請案係於2012年10月18日以WO 2012/142513發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之較佳的EZH2抑制劑係選自由下列者所組成之群組：
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(S )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5-溴-8-氯-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-7-(1,4-二甲基-1H -1,2,3-三唑-5-基)-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-7-(3,5-二甲基-1,2-噁唑-4-基)-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-5-[乙基(四氫-2H-吡喃-4-基)胺基]-4-甲基-4’-(嗎啉-4-基甲基)聯苯基-3-甲醯胺；
N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-5-[乙基(四氫-2H-吡喃-4-基)胺基]-4-甲基-4’-(嗎啉-4-基甲基)聯苯基-3-甲醯胺；
N-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-1-[(1R)-1-[1-(2,2,2-三氟乙基)哌啶-4-基]乙基]-1H-吲哚-3-甲醯胺；
N-(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基甲基)-1-異丙基-3-甲基-6-[6-(4-甲基哌-1-基)吡啶-3-基]-1H-吲哚-4-甲醯胺；
N-[(6-甲基-2-側氧基-4-丙基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-6-[2-(4-甲基哌-1-基)吡啶-4-基]-1-(丙-2-基)-1H-吲唑-4-甲醯胺；
或其醫藥上可接受之鹽。
可用於本發明之更佳的EZH2抑制劑係選自由下列者所組成之群組：
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(S )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；及
5-溴-8-氯-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-7-(1,4-二甲基-1H -1,2,3-三唑-5-基)-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
或其醫藥上可接受之鹽。
除非另有其他指示，否則本文所有述及之EZH2抑制劑包括述及之其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物、水合物及複合物，以及其鹽之溶劑合物、水合物及複合物，包括其多形物、立體異構物及經同位素標記之型式。
化學治療劑
本發明之實施態樣關於化學治療劑或其醫藥上可接受之鹽。
在一個實施態樣中，化學治療劑為鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽。
在本發明之一個實施態樣中，化學治療劑為順鉑。
在本發明之一個實施態樣中，化學治療劑為卡鉑。
在本發明之一個實施態樣中，化學治療劑為依托泊苷。
在本發明之一個實施態樣中，化學治療劑為順鉑和依托泊苷。
在本發明之一個實施態樣中，化學治療劑為卡鉑和依托泊苷。
治療方法及用途
本發明之方法及組合治療有用於治療癌症。在一些實施態樣中，所提供之方法得到下列效應中之一或多者：(1)抑制癌細胞增生；(2)抑制癌細胞侵入；(3)誘發癌細胞凋亡；(4)抑制癌細胞轉移；(5)抑制血管生成；或(6)克服一或多種與癌症治療有關的抵抗機制。
在一個實施態樣中，本發明關於個體之癌症治療方法，其包含對個體投予包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合治療。
在一個實施態樣中，本發明關於個體之癌症治療方法，其包含對個體投予由EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽所組成之組合治療。
在一個實施態樣中，本發明關於個體之癌症治療方法，其包含對個體投予基本上由EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽所組成之組合治療。
在另一態樣中，本發明關於用於治療個體的癌症之EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽，其中EZH2抑制劑係與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽組合使用。
在另一態樣中，本發明關於用於治療個體的癌症之鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽，其中抗贅瘤劑係與EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽組合使用。
在另一態樣中，本發明關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合。
在另一態樣中，本發明關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合，其係用作為藥劑。
在另一態樣中，本發明關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合，其係用於治療個體的癌症。
在另一態樣中，本發明關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽、鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之協同性組合。
在另一態樣中，本發明關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之協同性組合，其係用作為藥劑。
在另一態樣中，本發明關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之協同性組合，其係用於治療個體的癌症。
在另一態樣中，本發明關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽及鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽的用途，其係製造用於治療個體的癌症之藥劑。
在另一態樣中，本發明關於包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之載劑的醫藥組成物，其係用於治療個體的癌症，其中包含EZH2抑制劑的醫藥組成物係與包含鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之載劑的醫藥組成物組合使用。
在另一態樣中，本發明關於包含鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之載劑的醫藥組成物，其係用於治療個體的癌症，其中包含鉑為底質之抗贅瘤劑的醫藥組成物係與包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之載劑的醫藥組成物組合使用。
在另一態樣中，本發明關於包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之載劑的醫藥組成物，其係用於治療個體的癌症。
在本發明之一個實施態樣中，個體為哺乳動物。
在本發明之一個實施態樣中，個體為人類。
在一些實施態樣中，本發明之方法及組合可用於治療癌症，其包括但不限於下列癌症：
循環系統，例如心(肉瘤[血管肉瘤、纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤、脂肪肉瘤]、黏液瘤、橫紋肌瘤、纖維瘤、脂肪瘤和畸胎瘤)、縱膈與肋膜及其他的胸腔內器官、血管腫瘤和腫瘤相關之血管組織；
呼吸道，例如鼻腔和中耳、鼻副竇、喉頭、氣管、支氣管和肺，諸如小細胞肺癌(SCLC)、非小細胞肺癌(NSCLC)、支氣管癌(鱗狀細胞癌、未分化小細胞癌、未分化大細胞癌、腺癌)、肺泡(小支氣管)癌、支氣管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、軟骨瘤型錯構瘤、中皮瘤；
胃腸系統，例如食道(鱗狀細胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)、胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)、胃、胰腺(導管腺癌、胰島素瘤、升糖素瘤、胃泌素瘤、類癌瘤、VIP瘤)、小腸(腺癌、淋巴瘤、類癌瘤、卡波西氏(Karposi’s)肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、神經纖維瘤、纖維瘤)、大腸(腺癌、管狀腺瘤、絨毛狀腺瘤、錯構瘤、平滑肌瘤)；
生殖泌尿道，例如腎(腺癌、威爾姆氏(Wilm’s)腫瘤[腎胚細胞瘤]、淋巴癌、白血病)、膀胱及與/或尿道(鱗狀細胞癌、移行細胞癌、腺癌)、前列腺(腺癌、肉瘤)，睪丸(精原細胞瘤、畸胎瘤、胚胎性癌、畸胎上皮癌、絨毛膜癌、肉瘤、間質細胞癌、纖維瘤、纖維腺瘤、腺瘤樣腫瘤、脂肪瘤)；
肝，例如肝腫瘤(肝細胞癌)、膽管癌、肝胚細胞瘤、血管肉瘤、肝細胞腺瘤、血管瘤、胰腺內分泌瘤(諸如嗜鉻細胞瘤、胰島素瘤、血管活性腸肽瘤、胰島細胞瘤和升糖素瘤)；
骨，例如骨原性肉瘤(骨肉瘤)、纖維肉瘤、惡性纖維性組織細胞瘤、軟骨肉瘤、伊文氏(Ewing’s)肉瘤、惡性淋巴瘤(網狀細胞肉瘤)、多發性骨髓瘤、惡性巨細胞瘤脊索瘤、骨軟骨瘤(骨軟骨性外生骨疣)、良性軟骨瘤、軟骨胚細胞瘤、軟骨黏液纖維瘤、骨樣骨瘤和巨細胞瘤；
神經系統，例如中樞神經系統(CNS)贅瘤、原發性CNS淋巴瘤、頭顱癌(骨瘤、血管瘤、肉芽腫、黃瘤、畸形性骨炎)、腦膜(腦脊髓膜癌、腦脊髓膜肉癌、神經膠瘤病)、腦癌(星形細胞瘤、神經管胚細胞瘤、神經膠瘤、室管膜瘤、胚細胞瘤[松果體瘤]、多形神經膠母細胞瘤、寡樹突神經膠瘤、神經鞘瘤、視網膜胚細胞瘤、先天瘤)、脊髓神經纖維瘤、腦脊髓膜瘤、神經膠瘤、肉瘤)；
生殖系統，例如婦科、子宮(子宮內膜癌)、子宮頸(子宮頸癌、癌前子宮頸發育不良)、卵巢(卵巢癌[漿液性囊腺癌、黏液性囊腺癌、未分類癌]、粒層細胞-鞘細胞瘤、史脫力-雷迪格細胞瘤(Sertoli-Leydig cell tumor)、無性胚胎瘤、惡性畸胎瘤)、陰唇(鱗狀細胞癌、上皮內癌、腺癌、纖維肉瘤、黑色素瘤)、陰道(透明細胞癌、鱗狀細胞癌、葡萄形肉瘤(胚胎性橫紋肌肉瘤))、輸卵管(輸卵管癌)及與女性生殖器相關的其他部位；胎盤、陰莖、前列腺、睪丸及與男性生殖器相關的其他部位；
血液系統，例如血液(骨髓白血病[急性和慢性]、急性淋巴母細胞白血病、慢性淋巴球性白血病、骨髓增生性疾病、多發性骨髓瘤、骨髓發育不良症候群)，何杰金氏病，非何杰金氏淋巴瘤[惡性淋巴瘤]；
口腔，例如唇、舌、齒齦、口底、顎和嘴的其他部分、腮腺及唾液腺的其他部分、扁桃腺、口咽、鼻咽、梨狀竇、下咽及在唇、口腔、咽喉內的其他部位；
皮膚，例如惡性黑色素瘤、皮膚黑色素瘤、基底細胞癌、鱗狀細胞癌、卡波西氏肉瘤、發育不良的痣、脂肪瘤、血管瘤、皮膚纖維瘤及瘢痕瘤；
腎上腺：神經胚細胞瘤；及
其他組織，包括結締組織和軟組織、腹膜後腔和腹膜、眼、眼球內黑色素瘤、及附屬器官、乳房、頭或/及頸、肛門部、甲狀腺、副甲狀腺、腎上腺和其他的內分泌腺及相關結構、淋巴結繼發性和不明性惡性贅瘤、呼吸和消化系統繼發性惡性贅瘤及其他部位繼發性惡性贅瘤。
又更特定言之，當連同本發明一起使用時，則「癌」的實例包括選自下列之癌：肺癌(NSCLC和SCLC)、乳癌(包括三陰性乳癌、激素陽性乳癌和HER2陽性乳癌)、卵巢癌、結腸癌、直腸癌、肛門部癌、前列腺癌(包括激素敏感型前列腺癌和激素頑抗型前列腺癌，亦稱為去勢抗性前列腺癌)、肝細胞癌、瀰漫性大型B細胞淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤、黑色素瘤或前述癌中之一或多者之組合。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為固態腫瘤。
在一個實施態樣中，癌症為前列腺癌。
在一個實施態樣中，癌症為激素敏感型前列腺癌。
在一個實施態樣中，癌症為去勢抗性前列腺癌，亦稱為激素頑抗型前列腺癌或雄性素非依賴型前列腺癌。
在一個實施態樣中，癌症為非轉移型去勢抗性前列腺癌。
在一個實施態樣中，癌症為轉移型去勢抗性前列腺癌。
在一個實施態樣中，癌症為乳癌。
在一個實施態樣中，癌症為三陰性乳癌。
在一個實施態樣中，癌症為激素陽性乳癌，包括雌性素陽性及/或助孕酮陽性乳癌。
在一個實施態樣中，癌症為HER2陽性乳癌。
在一個實施態樣中，癌症為肝細胞癌。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌。
在一個實施態樣中，癌症為頑抗型小細胞肺癌。
在一個實施態樣中，癌症為復發型小細胞肺癌。
在一個實施態樣中，癌症為頑抗型小細胞肺癌，且個體未經治療。
在一個實施態樣中，癌症為復發型小細胞肺癌，且個體未經治療。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌被分類為有限狀態疾病。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌被分類為擴散期疾病。
在一個實施態樣中，癌症為擴散期疾病小細胞肺癌，且個體未經治療。
在一個實施態樣中，癌症為頑抗型擴散期疾病小細胞肺癌，且個體未經治療。
在一個實施態樣中，癌症為復發型擴散期疾病小細胞肺癌，且個體未經治療。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌係以腫瘤抑制基因TP53的功能喪失為特徵。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌係以腫瘤抑制基因RB1的功能喪失為特徵。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌係以腫瘤抑制基因TP53的功能喪失及腫瘤抑制基因RB1的功能喪失為特徵。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌被分類為有限狀態疾病，且小細胞肺癌係以腫瘤抑制基因TP53的功能喪失為特徵。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌被分類為有限狀態疾病，且小細胞肺癌係以腫瘤抑制基因RB1的功能喪失為特徵。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌被分類為有限狀態疾病，且小細胞肺癌係以腫瘤抑制基因TP53的功能喪失及腫瘤抑制基因RB1的功能喪失為特徵。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌被分類為擴散期疾病，且小細胞肺癌係以腫瘤抑制基因TP53的功能喪失為特徵。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌被分類為擴散期疾病，且小細胞肺癌係以腫瘤抑制基因RB1的功能喪失為特徵。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌被分類為擴散期疾病，且小細胞肺癌係以腫瘤抑制基因TP53的功能喪失及腫瘤抑制基因RB1的功能喪失為特徵。
在一個實施態樣中，癌症為瀰漫性大型B細胞淋巴瘤。
在一個實施態樣中，癌症為濾泡性淋巴瘤。
在一個實施態樣中，癌症為黑色素瘤。
在一個實施態樣中，癌症為局部晚期型。
在一個實施態樣中，癌症為非轉移型。
在一個實施態樣中，癌症為轉移型。
在一個實施態樣中，癌症為頑抗型。
在一個實施態樣中，癌症為復發型。
在一個實施態樣中，癌症無法耐受標準的治療。
在另一態樣中，本發明提供抑制個體的癌細胞增生之方法，其包含對個體投予包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合治療，其量有效抑制細胞增生。
在另一態樣中，本發明提供抑制個體的癌細胞侵入之方法，其包含對個體投予包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合治療，其量有效抑制細胞侵入。
在另一態樣中，本發明提供抑制個體的癌細胞轉移之方法，其包含對個體投予包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合治療，其量有效抑制細胞轉移。
在另一態樣中，本發明提供誘發個體的癌細胞凋亡之方法，其包含對個體投予包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合治療，其量有效誘發凋亡。
在進一步的態樣中，本發明提供誘發個體的細胞凋亡之方法，其包含對個體投予包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合治療。
「接觸」係指使本發明所使用之化合物或醫藥上可接受之鹽與細胞(例如一種表現EZH2之細胞)以化合物可直接或間接發揮其效應(例如影響EZH2活性)的此方式在一起。接觸可於試管內(亦即在人為環境中，諸如而不限於試驗管或培養基中)或於活體內(亦即在活的生物體內，諸如而不限於小鼠、大鼠或兔子)完成。
在一些實施態樣中，細胞係於細胞系中，諸如癌細胞系。在其他的實施態樣中，細胞係在組織或腫瘤中，且組織或腫瘤可於個體中，包括人類。
劑型及方案
本發明之方法及組合治療的各治療劑可根據醫藥實施而單獨或在包含治療劑及一或多種醫藥上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑的藥劑(在本文亦稱為醫藥組成物)中投予。
如本文所使用之術語「組合治療」係指本發明之組合治療的各治療劑單獨或於藥劑中依序、並行或同時投予。
如本文所使用之術語「依序的」或「依序地」係指本發明之組合治療的各治療劑單獨或於藥劑中一個接一個投予，其中各治療劑可以任何順序投予。當組合治療中的治療劑係呈不同的劑型時，例如一個藥劑為錠劑及另一藥劑為無菌液體，及/或當根據不同的給藥時程投予時，例如一個藥劑係每天投予及第二藥劑較不常投予，諸如每週，則以依序投予特別有用。
如本文所使用之術語「並行」係指在本發明之組合治療中的各治療劑係單獨或於不同的藥劑中投予，其中第二治療劑係在第一治療劑後立即投予，但是治療劑可以任何順序投予。在較佳的實施態樣中，治療劑係並行投予。
如本文所使用之術語「同時」係指本發明之組合治療的各治療劑在相同的藥劑中投予。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽係在投予鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽前投予。
在本發明之一個實施態樣中，鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽係在投予EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽前投予。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽係與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽並行投予。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽係與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽同時投予。
如那些熟習此項技術領域者所理解，組合治療可在個體治療的不同階段期間有用地投予個體。
在本發明之一個實施態樣中，組合治療係投予事先未治療過的個體，亦即初次治療。
在本發明之一個實施態樣中，組合治療係投予在先前以生物治療劑或化學治療劑治療後無法達成持續反應的個體，亦即經歷過治療。
組合治療可在手術移除腫瘤前或後投予，及/或可在輻射治療前、期間或後使用，及/或可在化學治療前、期間或後使用。
投予本發明之化合物可以能夠遞送化合物至作用部位之任何方法實現。該等方法包括經口途徑、十二指腸內途徑、非經腸注射(包括靜脈內、皮下、肌肉內、血管內或輸注)、局部及直腸投予。
可調整劑量方案以提供最優的所欲反應。例如，本發明之組合治療的治療劑可作為單次推注、作為隨時間投予的數個分次劑量投予，或劑量可依治療情況的急迫程度之指示而按比例減少或增加。可能特別有利的是調配呈容易投予及劑量均勻的單位劑型之治療劑。如本文所使用之單位劑型係指適合作為用於欲治療之哺乳動物個體的單位劑量之物理離散單位；各單位含有經計算與所需之醫藥載劑一起產生所欲治療效應的預定量之活性化合物。本發明之單位劑型的規格聽令於及直接取決於(a)化學治療劑之獨特特徵及欲達成之特定的治療性或預防性效應，及(b)在化合技術中用於處理個體敏感性的此種活性化合物之固有限制。
因此，熟習此項技術領域者係基於本文所提供之揭示內容而領會劑量及給藥方案係依照治療技術中熟知的方法調整。亦即可輕易地確立最大耐受劑量，且亦可測定提供個體可檢測的治療效益之有效量，同樣可測定投予各藥劑以提供個體可檢測的治療效益之時間要求。據此，儘管本文例示特定的劑量及投予方案，但是該等實例不以任何方式限制在實施本發明時可提供個體的劑量及投予方案。
應注意的是劑量值可隨欲緩解之病況的類型及嚴重性而改變，且可包括單一或多次劑量。應進一步理解用於任何特定個體之特定的劑量方案應根據個體需求及執行或監督組成物投予的人之專業判斷而隨時間調整，該調整係考慮以下因素：諸如疾患或病況的嚴重性、投予速率、化合物的處置及處方醫師的斟酌。本文提出之劑量範圍僅為例示且不意欲限制所主張之組成物的範疇或實施。例如，劑量可基於藥物動力學或藥效學參數而調整，該等參數可包括臨床效應，諸如毒性效應及/或實驗室值。因此，本發明包含如熟習此項技術領域者所測定之患者內劑量遞增。測定用於投予化學治療劑之適當的劑量及方案為相關技術中所熟知，且一旦提供本文所揭示之指導，則熟習此項技術領域者將理解所包含之該測定。
在一些實施態樣中，在組合治療中的治療劑之至少一者係使用與作為單一療法用於治療相同的癌症時通常所使用之劑量方案相同的劑量方案(治療的劑量、頻率及持續期間)投予。在其他的實施態樣中，個體接受在組合治療中的治療劑之至少一者的總量低於使用相同的藥劑作為單一療法時的總量，例如較低的治療劑劑量、減少的給藥頻率及/或較短的給藥持續期間。
EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽的有效劑量係在每天以每公斤體重計約0.001至約100 mg之範圍內的單次或分次劑量，較佳為約1至約35 mg/kg/天。用於70 kg的人類之此劑量將達到約0.01至約7 g/天，較佳為約0.02至約2.5 g/天。在一些事例中，低於前述範圍下限的劑量水平可能綽綽有餘，而在其他例子中，可使用還更大的劑量而不引起任何有害的副作用，只要將此等較大的劑量先分成數個小劑量供全天投予。
在一個實施態樣中，EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽係以每天約10 mg至約7000 mg，較佳為每天約20 mg至約2500 mg，及更佳為每天約50 mg至約1000 mg之日劑量投予。在一個實施態樣中，EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽係以每天約500 mg之日劑量投予。
在較佳的實施態樣中，EZH2抑制劑為5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮或其醫藥上可接受之鹽，其係以每天約50 mg至約2000 mg、每天約50 mg、每天約100 mg、每天約150 mg、每天約200 mg、每天約250 mg、每天約300 mg、每天約350 mg、每天約400 mg、每天約450 mg、每天約500 mg、每天約550 mg、每天約600 mg、每天約650 mg、每天約700 mg、每天約750 mg、每天約800 mg、每天約850 mg、每天約900 mg、每天約950 mg、每天約1000 mg、每天約1100 mg、每天約1200 mg、每天約1300 mg、每天約1400 mg或每天約1500 mg之日劑量投予。此劑量可隨意地再分成小劑量，例如每天150 mg之劑量可能以每天兩次的75 mg劑量給藥。
在一個實施態樣中，化學治療劑為依托泊苷，該依托泊苷係依照批准的標籤經靜脈內投予，例如在第1至5天以每天一次50至100 mg/m2 之劑量；或在第1、3及5天以每天一次50至100 mg/m2 之劑量。在一個實例中，依托泊苷可在每21天週期的第1、2及3天以80至120 mg/m2 之劑量投予，經1、2、3、4、5或6個週期。在一個實施態樣中，化學治療劑(例如依托泊苷)係與鉑為底質之抗贅瘤劑(例如順鉑(cisplatin)或卡鉑)組合使用。
在一個實施態樣中，鉑為底質之抗贅瘤劑為順鉑，該順鉑係依照批准的標籤經靜脈內投予。在一個實例中，順鉑可在每21天週期的第1天以60至80 mg/m2 之劑量投予，經1、2、3、4、5或6個週期。
在一個實施態樣中，鉑為底質之抗贅瘤劑為卡鉑，該卡鉑係依照批准的標籤經靜脈內投予。在一個實例中，卡鉑可在每21天週期的第1天投予以達成5至6 mg/mL/min之初始目標AUC，經1、2、3、4、5或6個週期。在一個實例中，卡鉑可在每21天週期的第1天以400 mg/m2 之劑量投予，經1、2、3、4、5或6個週期。
可依需要進行重複的投予或給藥方案，或調整投予或給藥方案以達成所欲治療。如本文所使用之「連續給藥時程」為無需劑量中斷的投予或給藥方案，例如沒有治療休息日。在治療週期之間無需劑量中斷而重複21或28天的治療週期為連續給藥時程的實例。在實施態樣中，本發明之組合的化合物可以連續的給藥時程投予。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽係一起以有效治療癌症的量給藥。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽係一起以具有協同性的量給藥。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽係以非標準的給藥方案給藥。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽係以低劑量方案給藥。
醫藥組成物及投予途徑
「醫藥組成物」係指作為活性成分的本文所述之治療劑中之一或多者或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物、水合物或前藥與至少一種醫藥上可接受之載劑或賦形劑的混合物。在一些實施態樣中，醫藥組成物包含二或更多醫藥上可接受之載劑及/或賦形劑。
如本文所使用之「醫藥上可接受之載劑」係指不對生物體造成顯著的刺激且不消除活性化合物或治療劑的生物活性及特性之載劑或稀釋劑。
在一個實施態樣中，本發明關於包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽，及醫藥上可接受之載劑的醫藥組成物。
醫藥上可接受之載劑可包含任何習知的醫藥載劑或賦形劑。載劑及/或賦形劑的選擇很大的程度取決於下列因素：諸如特定的投予模式、賦形劑對溶解度和穩定度的效應及劑型的本性。
適合的醫藥載劑包括惰性稀釋劑或填充劑、水及各種有機溶劑(諸如水合物和溶劑合物)。若要求時，醫藥組成物可含有額外的成分，諸如調味劑、結合劑、賦形劑及類似者。因此，可使用含有各種賦形劑(諸如檸檬酸)連同各種崩解劑(諸如澱粉、海藻酸和特定的複合矽酸鹽)及結合劑(諸如蔗糖、明膠和阿拉伯膠)錠劑用於經口投予。賦形劑的非限制性實例包括碳酸鈣、磷酸鈣、各種糖和澱粉型式、纖維素衍生物、明膠、植物油及聚乙二醇。另外，常使用以製錠為目的潤滑劑，諸如硬脂酸鎂、月桂基硫酸鈉和滑石。類似型式的固體組成物亦可用於軟及硬填充式明膠膠囊中。材料的非限制性實例因此包括乳糖(lactose或milk sugar)和高分子量聚乙二醇。當要求以水性懸浮液或酏劑用於經口投予時，則其中的活性化合物可與下列者組合：各種甜味劑或調味劑、著色物質或染料及(若要求時)乳化劑或懸浮劑，連同稀釋劑(諸如水、乙醇、丙二醇、甘油)或彼之組合。
醫藥組成物可例如呈適合於經口投予的形式，如錠劑、膠囊、藥丸、粉末、持續釋放型調配物、溶液或懸浮液，適合於非經腸注射的形式，如無菌溶液、懸浮液或乳液，適合於局部投予的形式，如軟膏或乳膏，或適合於直腸投予的形式，如栓劑。
例示性非經腸投予形式包括活性化合物於無菌水性溶液(例如水性丙二醇或右旋糖溶液)中的溶液或懸浮液。若要求時，可將此等劑型適當地緩衝。
醫藥組成物可呈適合於單一投予精確劑量的單位劑型。
適合於遞送本發明化合物之組合治療的治療劑之醫藥組成物及彼之製備方法將為那些熟習此項技術領域者可輕易地明白。此等組成物及彼之製備方法可見於例如第19版’Remington’s Pharmaceutical Sciences’ (Mack Publishing Company, 1995)中，將其揭示內容以其全文併入本文以供參考。
本發明之組合治療的治療劑可經口投予。經口投予可包含吞嚥，使得治療劑進入胃腸道中，或可使用頰內或舌下投予，藉此使治療劑自嘴巴直接進入血流中。
適合於經口投予的調配物包括固體調配物，諸如錠劑，含有微粒、液體或粉末的膠囊、菱形錠劑(包括以液體填充)、咀嚼劑、多和奈米微粒、凝膠、固溶體、脂質體、薄膜(包括黏膜片)、珠粒劑、噴霧劑及液體調配物。
液體調配物包括懸浮液、溶液、糖漿和酏劑。此等調配物可用作為軟或硬膠囊中的填充劑且通常包括載劑(例如水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甲基纖維素或適合的油)及一或多種乳化劑及/或懸浮劑。液體調配物亦可藉由重組例如來自小藥囊的固體而製得。
本發明之組合治療的治療劑亦可用於快速溶解、快速崩解劑型中，諸如那些在Liang和Chen (2001)之Expert Opinion in Therapeutic Patents,11 (6), 981-986中所述者，將其揭示內容以其全文併入本文以供參考。
用於錠劑劑型的治療劑可構成劑型的1 wt%至80 wt%，更典型為劑型的5 wt%至60 wt%。除了活性劑以外，錠劑通常含有崩解劑。崩解劑的實例包括澱粉乙醇酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈣、交聯羧甲基纖維素鈉(croscarmellose sodium)、交聯聚維酮(crospovidone)、聚乙烯基吡咯啶酮、甲基纖維素、微晶纖維素、經低碳烷基取代之羥丙基纖維素、澱粉、預糊化澱粉和海藻酸鈉。崩解劑通常可構成劑型的1 wt%至25 wt%，較佳為5 wt%至20 wt%。
通常使用結合劑賦予錠劑調配物之內聚特性。適合的結合劑包括微晶纖維素、明膠、糖、聚乙二醇、天然膠和合成膠、聚乙烯基吡咯啶酮、預糊化澱粉、羥丙基纖維素和羥丙基甲基纖維素。錠劑亦可含有稀釋劑，諸如乳糖(單一水合物、經噴霧乾燥之單一水合物、無水物及類似者)、甘露醇、木糖醇、右旋糖、蔗糖、山梨醇、微晶纖維素、澱粉和磷酸氫鈣二水合物。
錠劑亦可隨意地包括表面活性劑(諸如月桂基硫酸鈉和聚山梨醇酯80)及助滑劑(諸如二氧化矽和滑石)。當存在時，表面活性劑的量通常為錠劑的0.2 wt%至5 wt%，且滑動劑的量通常為錠劑的0.2 wt%至1 wt%。
錠劑通常亦含有潤滑劑，諸如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅、硬脂基富馬酸鈉和硬脂酸鎂與月桂基硫酸鈉之混合物。潤滑劑通常係以錠劑的0.25 wt%至10 wt%的量存在，較佳為0.5 wt%至3 wt%。
其他習知的成分包括抗氧化劑、著色劑、調味劑、保存劑及味覺掩蔽劑。
例示性錠劑可含有至多約80 wt%之活性劑、約10 wt%至約90 wt%之結合劑、約0 wt%至約85 wt%之稀釋劑、約2 wt%至約10 wt%之崩解劑及約0.25 wt%至約10 wt%之潤滑劑。
可將錠劑摻合物直接或以滾筒壓縮以形成錠劑。另一選擇地，錠劑摻合物或摻合物的一部分可在製錠前經濕式-、乾式-或熔融造粒、熔融凍凝或擠壓。最後的調配物可包括一或多層且可經包膜或未經包膜；或膠囊化。
錠劑調配物詳細地討論於H. Lieberman和L. Lachman之“Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol. 1”, Marcel Dekker, N. Y., N. Y., 1980 (ISBN 0-8247-6918-X)中，將其揭示內容以其全文併入本文以供參考。
用於經口投予之固體調配物可調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾釋放型調配物包括延遲釋放、持續釋放、脈衝釋放、控制釋放、靶定釋放及程控化釋放。
適合的修飾釋放型調配物說明於美國專利第6,106,864號中。其他適合的釋放技術之細節(諸如高能量分散、及滲透、及包膜粒子)可見於Verma等人之Pharmaceutical Technology On-line , 25(2), 1-14 (2001)中。利用咀嚼膠達成控制釋放說明於WO 00/35298中。將該等參考內容以彼之全文併入本文以供參考。
非經腸投予
本發明之組合治療的治療劑亦可直接投予血液、肌肉或內部器官中。適合於非經腸投予的方式包括靜脈內、動脈內、腹膜內、椎管內、室內、尿道內、胸骨內、顱內、肌肉內和皮下。適合於非經腸投予之器材包括針(包括微型針)注射器、無針注射器和輸注技術。
非經腸調配物通常為水性溶液，其可含有賦形劑，諸如鹽、碳氫化合物和緩衝劑(較佳為3至9之pH)，但對一些應用而言，該調配物可更適合地調配成無菌非水性溶液或與適合的媒劑(諸如無菌的無熱源水)結合使用的乾燥形式。
在無菌條件下製備非經腸調配物(例如藉由冷凍乾燥)可使用那些熟習此項技術領域者熟知的標準醫藥技術輕易地完成。
在製備非經腸溶液所使用之治療劑的溶解度可藉由使用適當的調配技術而增加，諸如併入溶解增強劑。
用於非經腸投予之調配物可調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾釋放型調配物包括延遲釋放、持續釋放、脈衝釋放、控制釋放、靶定釋放及程控化釋放。因此，本發明之組合治療的治療劑可能地調配成以植入式儲積物投予之固體、半固體或觸變性液體，以提供修飾釋放之活性化合物。此等調配物的實例包括塗藥支架和PGLA微球。
本發明之組合治療的治療劑亦可能地經局部投予皮膚或黏膜，亦即經皮膚或透皮投予。出於此目的之典型的調配物包括凝膠、水凝膠、洗劑、溶液、乳膏、軟膏、撒布劑、敷料、發泡體、薄膜、皮膚貼片、薄片、植入物、海綿、纖維、繃帶和微乳液。亦可使用脂質體。典型的載劑包括醇、水、礦物油、液態礦脂、白凡士林、甘油、聚乙二醇和丙二醇。可併入穿透增強劑；參見例如Finnin和Morgan之J Pharm Sci,88 (10), 955-958 (1999年10月)。其他的局部投予方式包括以電穿孔、電離子透入、超聲波透入、超聲波導入和微型針或無針注射(例如Powderject™、Bioject™等)遞送。將該等參考內容以彼之全文併入本文供參考。
用於局部投予之調配物可調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾釋放型調配物包括延遲釋放、持續釋放、脈衝釋放、控制釋放、靶定釋放及程控化釋放。
本發明之組合治療的治療劑亦可能地經鼻內或吸入投予，通常呈來自乾粉吸入器的乾粉形式(單獨、成為混合物，例如與乳糖的乾摻合物，或成為混合型組分粒子，例如與磷脂(諸如磷脂醯膽鹼)混合)，或呈來自加壓容器、泵、噴霧器、霧化器(較佳為使用電流體動力學產生細霧的霧化器)或氣霧器的煙霧噴霧形式，其使用或未使用適合的推噴劑，諸如1,1,1,2-四氟乙烷或1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷。用於鼻內的粉末可包括生物黏著劑，例如聚葡萄胺糖或環糊精。
加壓容器、泵、噴霧器、霧化器或氣霧器可含有本發明化合物的溶液或懸浮液，其包含例如乙醇、水性乙醇或適合於活性物分散、溶解或延長釋放之替代劑、作為溶劑的推進劑及隨意的界面活性劑，諸如去水山梨糖醇三油酸酯、油酸或寡乳酸。
在以乾粉或懸浮液調配物使用前，先將化合物微粉化至適合於吸入遞送的大小(通常小於5微米)。這可藉由形成奈米粒子之任何適當的粉碎方法(諸如螺旋噴射研磨、流化床噴射研磨、超臨界流體處理)、高壓均質化或噴霧乾燥而達成。
在吸入器或吹藥器中使用的膠囊(例如自明膠或HPMC製成)、泡殼及藥筒可經調配以含有治療劑、適合的粉末基底(諸如乳糖或澱粉)與性能修飾劑(諸如l-白胺酸、甘露醇或硬脂酸鎂)之粉末混合物。乳糖可為無水物或呈單一水合物形式，以後者較佳。其他適合的賦形劑包括右旋糖、葡萄糖、麥芽糖、山梨醇、木糖醇、果糖、蔗糖和繭糖。
適合於使用電流體動力學以產生細霧的霧化器中使用的溶液調配物可以每一致動含有1 μg至20 mg治療劑且致動體積可為1 μL至100 μL不等。典型的調配物包括治療劑、丙二醇、無菌水、乙醇及氯化鈉。可用於代替丙二醇的可替代溶劑包括甘油和聚乙二醇。
可將適合的調味劑(諸如薄荷醇和左旋薄荷醇)或甜味劑(諸如糖精或糖精鈉)添加至意欲用於吸入/鼻內投予的那些調配物中。
用於吸入/鼻內投予之調配物可使用例如聚(DL-乳酸-共乙醇酸)(PGLA)調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾釋放型調配物包括延遲釋放、持續釋放、脈衝釋放、控制釋放、靶定釋放及程控化釋放。
在乾粉吸入器及煙霧劑的例子中，劑量單位係藉助於遞送計量之閥測定。通常安排依照本發明的單位以投予含有所欲量的治療劑之計量或〝噴氣〞。每日總劑量可以單一劑量或更常以分次劑量供全天投予。
本發明之組合治療的治療劑可經直腸或陰道投予，例如呈栓劑、子宮托或灌腸劑形式。可可脂為傳統的栓劑基底，但可在適當時使用各種替代物。
用於直腸/陰道投予之調配物可調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾型調配物包括延遲釋放、持續釋放、脈衝釋放、控制釋放、靶定釋放及程控化釋放。
本發明之組合治療的治療劑亦可能地直接投予眼或耳，通常呈經pH調整之等張性無菌食鹽水中的微粉化懸浮液或溶液的滴劑形式。適合於眼及耳投予之其他調配物可包括軟膏、生物可降解性(例如可吸收性凝膠海綿、膠原)和生物不可降解性(例如聚矽氧)植入物、薄片、鏡片及微粒狀或多孔狀系統，諸如類脂囊泡(noisome)或脂質體。可將下列的聚合物與保存劑(諸如氯化烷基二甲基苯甲銨(benzalkonium chloride))合併在一起，諸如經交聯之聚丙烯酸、聚乙烯醇、玻尿酸、纖維素聚合物(例如羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素或甲基纖維素)或雜多糖聚合物(例如結蘭膠(gelan gum))。此等調配物亦可以電離子透入法遞送。
在一個實施態樣中，可用於本發明之組合治療的醫藥組成物僅包含單一治療劑，例如僅一種選自下列的單一劑：(a) EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽；(b)鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽；及(c)化學治療劑或其醫藥上可接受之鹽。
在一個實施態樣中，可用於本發明之組合治療的醫藥組成物包含二或三種治療劑，例如二或三種選自下列的藥劑：(a) EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽；(b)鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽；及(c)化學治療劑或其醫藥上可接受之鹽。
在一個實施態樣中，可用於本發明之組合治療的醫藥組成物包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與化學治療劑或其醫藥上可接受之鹽二者。
在一個實施態樣中，可用於本發明之組合治療的醫藥組成物包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽二者。
套組
本發明之組合治療的治療劑可合宜地組合成適合於共同投予組成物之套組形式。
在一個態樣中，本發明關於包含第一容器、第二容器及仿單的套組，其中第一容器包含至少一個劑量的EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽，第二容器包含至少一個劑量的鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽，且仿單包含使用該等藥劑以治療個體的癌症之指示說明。
在一個態樣中，本發明關於包含第一容器、第二容器、第三容器及仿單的套組，其中第一容器包含至少一個劑量的EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽；第二容器包含至少一個劑量的鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽；第三容器包含至少一個劑量的化學治療劑或其醫藥上可接受之鹽；且仿單包含使用該等藥劑以治療個體的癌症之指示說明。在一個實施態樣中，本發明之套組可包含呈醫藥組成物形式的活性劑中之一或多者，該醫藥組成物包含活性劑或其醫藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之載劑。套組可含有單獨保留該組成物之裝置，諸如容器、分次瓶或分次箔包。此種套組的實例為用於包裝錠劑、膠囊及類似者之常見的泡殼包裝。
套組可特別適合於投予不同的劑型(例如經口和非經腸)、在不同的劑量間隔投予單獨的組成物或相互滴定單獨的組成物。為了協助遵守醫囑，套組通常包括投予指示且可具備有記憶輔助工具。套組可進一步包含可用於投予藥劑的其他材料，諸如稀釋劑、過濾器、IV袋和管線、針和注射器及類似者。
其他的治療劑
在進一步的態樣中，本發明之方法及組合治療可另外包含投予其他的抗癌劑，諸如抗腫瘤劑、抗血管生成劑、信號轉導抑制劑和抗增生劑劑，該等量一起有效治療該癌症。在一些此等實施態樣中，抗腫瘤劑係選自由下列者所組成之群組：有絲分裂抑制劑、烷化劑、抗代謝物、嵌入抗生素、生長因子抑制劑、輻射、細胞週期抑制劑、酵素、拓樸異構酶抑制劑、生物反應修飾劑、抗體、胞毒劑、抗激素劑、雄性素剝奪療法和抗雄性素。在一些實施態樣中，抗腫瘤劑係選自抗體，例如抗PD-1抗體[例如MDX-1106 (納武單抗(nivolumab))、MK-3475 (派立珠單抗(pembrolizumab))、CT-011 (皮立珠單抗(pidilizumab))、REGN2810 (舍米匹單抗(cemiplimab))、BGB-A317 (緹勒珠單抗(tislelizumab)或BGB-A317)、mAb7 (RN888或PF-06801591)、mAb15、AMP-224 (B7-DCIg)、AGEN-2034w (aka AGEN-2034)和司帕塔利單抗(spartalizumab)]、抗PD-L1抗體[例如YW243.55.S70、MDX-1105 (BMS-936559)、MPDL3280A (阿替珠單抗(atezolizumab))、MEDI4736 (德瓦魯單抗(durvalumab))和MSB0010718C (阿維魯單抗(avelumab))]及抗CTLA-4抗體[例如伊匹單抗(ipilimumab)、曲美目單抗(tremelimumab)和AGEN-1884]。
納武單抗係揭示於例如2006年11月16日發表之PCT發表案第WO2006/121168號(在2006年5月02日申請之國際專利申請案第PCT/JP2006/309606號)。派立珠單抗係揭示於例如2009年9月17日發表之PCT發表案第WO2009114335號(在2009年3月03日申請之國際專利申請案第PCT/US2009/035825號)。皮立珠單抗係揭示於例如2009年8月20日發表之PCT發表案第WO2009/101611號(在2009年2月11日申請之國際專利申請案第PCT/IL2009/000153號)。舍米匹單抗係揭示於例如2011年6月03日發表之PCT發表案第WO2011066389號(在2010年11月24日申請之國際專利申請案第PCT/US2010/058007號)。BGB-A317係揭示於例如2015年3月19日發表之PCT發表案第WO2015035606號(在2013年9月13日申請之國際專利申請案第PCT/CN2013/083467號)。mAb7 (RN888或PF-06801591)係揭示於例如2016年6月16日發表之PCT發表案第WO2016/092419號(在2015年12月02日申請之國際專利申請案第PCT/IB2015/059268號)。mAb15係揭示於例如在2016年6月16日發表之PCT發表案第WO2016/092419號(在2015年12月02日申請之國際專利申請案第PCT/IB2015/059268號)。AMP-224 (B7-DCIg)係揭示於例如2010年3月11日發表之PCT發表案第WO2010/027827號(在2009年8月25日申請之國際專利申請案第PCT/US2009/054969號)和2011年月6日03發表之PCT發表案第WO2011066342號(在2010年11月24日申請之國際專利申請案第PCT/US2010/057940號)。AGEN-2034w (aka AGEN-2034)係揭示於例如2017年3月09日發表之PCT發表案第WO2017040790號(國際專利申請案第PCT/US2016/049913號)。司帕塔利單抗係揭示於例如2015年7月30日發表之PCT發表案第WO/2015112900號(在2015年1月23日申請之國際專利申請案第PCT/US2015/012754號)。
YW243.55.S70係揭示於例如2010年7月08日發表之PCT發表案第WO2010077634號(在2009年12月08日申請之國際專利申請案第PCT/US2009/067104號)。MDX-1105 (BMS-936559)係揭示於例如2018年6月14日發表之PCT發表案第WO2018106529號(在2017年12月01日申請之國際專利申請案第PCT/US2017/064207號)和2007年1月11日發表之PCT發表案第WO2007005874號(在2006年6月30日申請之國際專利申請案第PCT/US2006/026046號)。MPDL3280A (阿替珠單抗)係揭示於例如2018年6月14日發表之PCT發表案第WO2018106529號(在2017年12月01日申請之國際專利申請案第PCT/US2017/064207號)。MEDI4736 (德瓦魯單抗)係揭示於例如2011年6月30日發表之PCT發表案第WO2011066389號(在2010年11月24日申請之國際專利申請案第PCT/US2010/058007號)和2018年6月14日發表之PCT發表案第WO2018106529號(在2017年12月01日申請之國際專利申請案第PCT/US2017/064207號)。MSB0010718C (阿維魯單抗)係揭示於例如2013年6月06日發表之PCT發表案第WO13079174號(在2012年11月21日申請之國際專利申請案第PCT/EP2012/004822號)。伊匹單抗係作為抗體10D1揭示於例如2001年3月01日發表之PCT發表案第WO01/14424號(在2000年8月24日申請之國際專利申請案第PCT/US00/23356號)以及2015年10月08日發表之美國專利申請發表案第20150283234號(在2015年4月20日申請之美國專利申請案第14/437,029號)。曲美目單抗係作為抗體11.2.1揭示於例如2004年1月27日准予之美國專利第6,682,736號(在1999年12月23日申請之美國專利申請案第09/472,087號)。AGEN-1884係揭示於例如2016年12月08日發表之PCT發表案第WO2016196237號的實施例1 (在2016年5月27日申請之國際專利申請案第PCT/US2016/034508號)。
在本發明之方法及組合治療的一個實施態樣中，方案亦包括其他的活性劑，其中其他的活性劑為依托泊苷。
本發明的該等及其他態樣(包括下文列示之例示性特定的實施態樣)係自內含於本文的教導而明白。
實施例
化合物1為國際專利申請案PCT/IB2015/054272中所揭示的5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮，該申請案係於2015年12月23日以WO 2015/193765發表。
化合物2為專利申請案PCT/IB2013/060682中所揭示的5,8-二氯-7-(3,5-二甲基-1,2-噁唑-4-基)-2-[4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮，該申請案係於2014年6月26日以WO 2014/097041發表。
除非另有其他指定，否則化合物1和化合物2係於DMSO中製備成儲備溶液，若必要時進一步稀釋。
在本文使用下列的縮寫：
ANCOVA-共變異數分析
BID-每天兩次
BW-體重
BWL-體重減輕
CR-完全反應
DMSO-二甲基亞碸
IP-腹膜內，
N或n-個體數量
NOD/SCID-非肥胖性糖尿病/重症聯合免疫缺陷
NS-不顯著
NSG-NOD SCID γ
PCR-聚合酶鏈反應
PO-經嘴
QD-每天一次
qRT-定量即時
RT-反轉錄
SD-標準偏差
SEM-平均值的標準誤差
TGI-腫瘤生長抑制
WT-野生型。
實施例1至9之方法及程序
細胞培養：SCLC細胞系DMS114係自美國菌種中心(American Type Culture Collection)(美國菌種中心，ATCC CRL-2066)獲得且在加入10%之胎牛血清(FBS)(Gibco/Life Technologies，目錄號10082-147)及1%之Pen/Strep的威冒斯氏(Waymouth’s)培養基MB 752/1 (Gibco/Life Technologies，目錄號11220-035)中培養。COR-L88 (92031917)細胞係購自ECACC。H841 (CRL-5845)、H446 (HTB-171)、NCI-H889 (CRL-5817)、DMS79 (CRL2049)及H69 (HTB-119)係購自美國菌種中心且在建議之培養基(H841：以5%之FBS補充之HITES培養基；H446、COR-L88、NCI-H889、DMS79及H69：RPMI-1640培養基+10%之FBS)中培養。RPMI1640係購自Invitrogen (目錄號11875-093；批號1694256)。HITES培養基係根據美國菌種中心的說明以下列組分的混合物補充之DMEM:F12培養基(Invitrogen，目錄號11320-033；批號1677218)的基本培養基製備：0.005 mg/ml之胰島素和0.01 mg/ml之運鐵蛋白、30nM亞硒酸鈉(ITS-X，Invitrogen，目錄號51500-056，批號1582940)、10 nM氫皮質酮(Sigma，目錄號H0888-1G，批號061M1142V)、10 nM β-雌二醇(Sigma，目錄號E2257-1mg，批號107K8630)、用於4.5 mM之最終濃度的額外2mM L-麩醯胺酸(Invitrogen，目錄號25030-081，批號1552995)、5%之胎牛血清(Invitrogen，目錄號10099-141，批號1565565)。所有的細胞皆維持在37℃與5%之二氧化碳(CO2 )的加濕培育器中。
細胞內西方墨點程序：令細胞以每一槽孔1,500個細胞平鋪在黑色、平坦、透明底部的96槽孔盤(Falcon，BD-353219)中。在隔天，令化合物以3倍稀釋添加至槽孔中，具有3 mM至0.1 nM之最終濃度範圍，留下一些空的槽孔用於對照物：「僅DMSO (第1和第2抗體)」及「僅DMSO (僅第2抗體)」。在72小時後，移出培養基且添加在磷酸鹽緩衝之食鹽水(PBS，Gibco Life Technologies，目錄號10010-023)中的3.7%之甲醛，在通風櫥中經20分鐘固著。接著移出甲醛且添加150 ul冰冷之甲醇(MeOH)，使細胞滲透。包裹盤且冷凍隔夜。在隔天，移出MeOH，添加Odyssey阻斷緩衝液(150 ml)，且令盤保持在旋轉振盪器(VWR)上2小時。移出阻斷緩衝液且添加事先在50 ul Odyssey緩衝液(LiCor #927‑40000)中以1：800稀釋之H3K27Me3抗體(Cell Signaling 9733)。接著令盤放置在冷卻室中的旋轉振盪器(VWR)上且在4℃下培育隔夜。在隔天，移出一級抗體，令細胞以1x PBS+0.1%之Tween 20 (PBST)共清洗5次，每次5分鐘。令二級抗體(Cell Signaling 5151抗兔子)在Odyssey緩衝液(50 μl)中以1：800稀釋且與用於歸一化之於Odyssey緩衝液中以1：10,000 (5 mM)稀釋之DRAQ5試劑(Cell Signalling #4084)一起添加至各槽孔中。在2小時後，移出二級抗體，令盤再以PBST清洗5次，每次5分鐘，且在Odyssey LiCoR儀器(焦距3 mm；使用800 nm (用於二級)連同700 nm過濾器(用於DRAQ5))上檢測螢光信號。IC50 值係使用四參數擬合與7.02版GraphPad Prism計算，且計算所有生物學複製物的算術平均值。
用於DMS114 SCLC細胞之細胞生長抑制檢定法：令DMS114 SCLC細胞以10,000個細胞/槽孔之密度平鋪在透明、平坦底部的12槽孔聚苯乙烯組織培養盤(Falcon，目錄號353225)中的上述之完全細胞培養基(1 mL/槽孔)中。令盤在37℃及5%之CO2 下經隔夜培育16小時。接著令細胞以3 μM之最高濃度開始的10點、3倍連續稀釋之化合物1治療3天。在3天後，令來自每一個別劑量治療之細胞以胰蛋白酶-EDTA (0.25%)(Gibco/Life Technologies，目錄號25200-056)分離，再懸浮於新鮮培養基中且使用Vi-Cell細胞計數器及細胞生存率分析儀(Beckman Coulter，目錄號383556)計數。接著令來自每一個別劑量治療之細胞以500個細胞/槽孔之密度再平鋪於96槽孔超低吸附(ULA)盤(Corning Inc，目錄號7007)中的如上述之完全細胞培養基(100 mL/槽孔)中。令細胞在37℃及5%之CO2 下再經隔夜培育16小時。在隔天，添加如上文提出之各自劑量的化合物1，使用以3 μM之最高濃度開始的10點、3倍連續稀釋之化合物1。接著令盤在37℃及5%之CO2 下再培育14至18天，每3天根據上文所述之給藥時程補給新鮮培養基及藥物。令細胞以化合物共治療17至21天。在培育期結束時，令19 mL AlamarBlue (ThermoFisher，目錄號DAL102)添加至各槽孔中且令盤在37℃下培育16小時。接著在使用540 nm至570 nm螢光激發波長(激發峰為570 nm)及在580 nm至610nm發射(發射峰為585 nm)之Infinite M200 Pro微量盤讀取機(Tecan，目錄號396235)中讀取盤。IC50 值係使用7.02版GraphPad Prism中的非線性迴歸劑量反應曲線擬合來計算。
H841、H446及H69 SCLC細胞之細胞生長抑制檢定法：令H841、H446及H69細胞以每一槽孔100,000個細胞之密度平鋪在一式三份用於各細胞系之12槽孔盤中的上述之彼等建議的完全培養基(1 mL/槽孔)中。令盤在37℃及5%之CO2 下培育隔夜。在DMSO中製備50 mM化合物1儲備液且分配成數個一次性使用的等分試樣及貯存在-20℃。令用於製備化合物盤的化合物1在DMSO中稀釋成3 mM且接著在DMSO進行3倍連續稀釋(總共10個劑量)。在細胞平鋪後24小時，令1 µl藥物稀釋液與DMSO對照物一起添加至含有在1 ml培養基中的細胞(1000×稀釋)之12槽孔盤的適當槽孔中。在各槽孔中的所有稀釋後，藥物的最終濃度為3、1、0.333、0.111、0.037、0.012、0.004、0.001、0.0005、0.0002 µM。令DMSO添加至3個複製的對照槽孔中。以手搖動盤而令藥物適當地混合。接著令細胞維持在37℃之培育器中。在3或4天後，細胞係取決於細胞生長速率而以1：2或1：3分割。關於懸浮型細胞，令細胞使用1 ml吸管徹底混合且接著移出500 µl (1：2分割)或667 µl (1：3分割)細胞。關於附著型細胞，令細胞胰蛋白酶化且以1：2或1：3分割。令相同體積的新鮮培養基添加至各槽孔中，使體積達到1 ml。若細胞為半附著，則一起收集上清液中的懸浮型細胞與胰蛋白酶化之附著型細胞。令新鮮藥物添加至如早先說明之各槽孔中。分割細胞且每3至4天同樣地重複培養基/藥物補給，直到第21天。在第21天，在顯微鏡下觀察細胞形態且記錄在化合物治療時的任何形態改變。關於懸浮型細胞，接著令細胞以移液重複地混合，自一式三份槽孔吸出且轉移至15 mL試管中。關於附著型細胞，移出上清液且令500 µl胰蛋白酶添加至各槽孔中。在細胞自底部分離後，令1 ml完全培養基添加至各槽孔中。細胞破碎成單細胞懸浮液，轉移至15 mL試管中且以1000 rpm離心5分鐘。移出上清液且基於沉澱物大小而令來自一式三份槽孔的細胞再懸浮於1000至3000 µl培養基中。令50至100 µl體積自細胞+培養基槽孔轉移至底部平坦的黑色96槽孔CTG盤(Corning，目錄號CLS3904)中且添加等體積的CTG試劑(來自Promega，目錄號G7571，批號0000089186)。調整細胞懸浮液的體積以確保信號在CTG檢定的線性範圍內(細胞不太多且也不太少)。接著令細胞在暗處搖動5分鐘。細胞生存率係使用根據製造商的說明測量。
為了評定組合EZH2抑制劑與照護標準的化學治療劑(順鉑和依托泊苷，其可作為化學治療的照護標準而單獨或組合使用)之協同性抗增生效應，令上文所述之每一細胞系以限定劑量的化合物1在培養燒瓶中預治療9天，繼而在96槽孔盤中與順鉑或依托泊苷共同治療4天。對細胞增生的效應係使用依照本文所述之方法的CellTiter-Glo細胞增生檢定法評定，且使用Chalice Bioinfomatics軟體(Horizon Discovery，1.6版)分析結果及計算協同性分數。數據係相對於未治療之DMSO/DMSO樣品歸一化且以未治療之樣品的%表示。數據係使用Loewe加成性組合模式分析且使用過度屬性(excess attribute)評估所觀察的數據之量值，其超過以Loewe模式預測的各劑量之加成效應。
SLFN11西方墨點程序：令SCLC細胞系以DMSO中的500 nM化合物1治療7天且接著使用西方墨點評定SLFN11蛋白質含量的變化。在藥物治療後，令細胞胰蛋白酶化(附著型細胞)，藉由在室溫下以2000 rpm離心而收穫，以PBS清洗，繼而以離心收集細胞沉澱物。令細胞沉澱物再懸浮於適當體積的RIPA緩衝液(Sigma；目錄號R0278；每5至10x105細胞100 ul)中，在冰上培育10至15分鐘，以12,000 g及4℃離心10分鐘且接著收集上清液。令15 ug總蛋白質溶解物在4至12%之NuPAGE™ Bis-Tris蛋白質凝膠(NP0336Box)上以1xNuPAGE™ MOPS SDS電泳緩衝液(NP0001)運作。令凝膠在冰上於80V下20分鐘及接著於150V下操作60分鐘。根據製造商的說明以iBlot2乾式墨點系統(目錄號：IB21001)與iBlot2常規硝化纖維素轉移積層(Regular Nitrocellulose Transfer Stack)(目錄號：IB23001)一起用於蛋白質轉移。組裝iBlot2常規硝化纖維素轉移積層且放入iBlot2乾式墨點系統中。轉移係使用根據製造商說明的模板方法P3在20 V之恆電壓下運作7分鐘。在完成轉移後，在RT下於5%之脫脂乳中以搖動1小時阻斷硝化纖維素薄膜。一級抗體溶液係以在5%之脫脂乳阻斷緩衝液中以1：100稀釋之SLFN11抗體(E-4)(目錄號：sc374339)製得。令薄膜在4℃下以搖動培育隔夜。在隔天，令薄膜在搖動器上以室內製備之1x Tris緩衝之食鹽水、0.1%之Tween-20 (TBS-T)清洗三次，每次10分鐘。令薄膜在5%之脫脂乳阻斷緩衝液中以1：2,000稀釋之二級抗小鼠IgG HRP連結Ab (目錄號：CST7076S)中培育1小時且接著在搖動器上以1x TBST經10分鐘清洗三次。使用ECL系統(Thermo-34078及-34096)檢測信號且在ImageQuant LAS400影像器上造影。
COMET檢定法：令懸浮型或附著型SCLC細胞系以50000個細胞/mL之密度接種在T75燒瓶中且在37℃及5%之CO2 下在含有於DMSO中的0.3 µM最終濃度之化合物1或DMSO對照物(0.01%)的完全細胞培養基中培養7天。每3至4天補給新鮮生長培養基及藥物。在治療7天後，令細胞以0.3 µM化合物1或DMSO對照物與不同劑量的順鉑(Sigma-Alderich，目錄號P4394)組合治療3天。以離心收穫細胞，且令細胞沉澱物再懸浮於冰冷1xPBS (不含Ca++ 和Mg++ )中的1×105 細胞/毫升之單細胞懸浮液中及貯存在室溫下備用。令LM瓊脂糖(Trevigen 4250-050-02)經5分鐘熔融於燒杯的沸水中且接著令瓊脂糖瓶放入37℃培育器中冷卻。令與LM瓊脂糖以1：10 (v/v)之比組合的1x105 個細胞/mL (在37℃下)立即移液(50 µl)至CometSlideTM (TREVIGEN 4250-050-03)上，確保完全覆蓋樣品區域。令載玻片平放在4℃的暗處10至20分鐘，且浸入冷的溶解溶液(Trevigen 4250-050-01)中及在4℃下培育隔夜。在溶解溶液中培育後，令載玻片瀝乾且在4℃下於暗處浸入新製備的鹼性解螺旋溶液(Alkaline Unwinding Solution)(20mM NaOH、1mM EDTA pH＞13)中1小時。令載玻片在TREVIGEN CometAssay ES系統(Trevigen 4250-050-ES)中於21 V下接受以新鮮製備的鹼性電泳溶液(20mM NaOH、1mM EDTA pH＞13) 30分鐘電泳。在電泳後，令載玻片瀝乾過量電泳溶液且輕輕浸入H2 O中兩次，每次5分鐘，繼而浸入70%之乙醇中5分鐘。令載玻片於暗處經隔夜空氣乾燥且貯存在室溫下。令乾燥之載玻片以100 µl稀釋之SYBR Gold (Invitrogen，目錄號S11494，以1：10000於TE緩衝液中)於暗處經幾分鐘染色。令染色之載玻片以Nikon螢光顯微鏡造影(在496 nm/522 nm下最大激發/發射)。
γ-H2AX染色：令無菌SLIP-RITE蓋玻片(ThermoScience 22x22# 1.5，目錄號152222)放在6槽孔盤上。令6×104 個細胞接種在各蓋玻片上且在37℃及5%之CO2 下在含有於DMSO中的0.3 µM化合物1或DMSO對照物(0.01%)的2 ml完全細胞培養基中培養7天，每3至4天補給新鮮生長培養基及藥物。在治療7天後，令細胞以DMSO中的0.3µM化合物1或DMSO對照物與不同劑量的順鉑(Sigma-Alderich，目錄號P4394)之組合治療隔夜(16 hr)。在組合治療結束時，令細胞以1x磷酸鹽緩衝之食鹽水(PBS) (不含Ca++ 和Mg++ )清洗3次，在1 ml 4%之三聚甲醛(Electron Microscopy Sciences，目錄號15710)中固著且在4℃下貯存隔夜。在固著後，令細胞在1x PBS中清洗3次且藉由在室溫下在含有0.25%之Triton X-100 (Sigma，目錄號T8787)的1 ml PBS中培育10分鐘而滲透。在滲透後，令細胞以1xPBS清洗3次且在室溫下以10%之驢血清(Sigma-Aldrich，目錄號D9663，在PBS中以1：10稀釋)培育1小時以阻斷抗體的非特異性結合。在阻斷後，令細胞在4℃下以抗磷酸-組蛋白H2A.X (Ser139)抗體(Millipore，目錄號05-636，在1%之BSA中以1：1000稀釋)培育隔夜。在隔天，令細胞在1xPBS中清洗3次且在室溫下以Alexa FluorTM 488驢抗小鼠IgG抗體(Invitrogen，目錄號A21202，在1%之BSA中以1：2000稀釋)中培育1小時。接著令細胞以1x PBS清洗3次，然後計數。令具有細胞的蓋玻片以具有DAPI之Fluoromount-GTM (Invitrogen，目錄號004959-52)放置及架設在COLORFROST PLUS顯微鏡載玻片(ThermoSciences，目錄號9991004)上。令架設之載玻片在Nikon A1R共聚焦顯微鏡上造影。
EZH2-WT DMS114 SCLC活體內異種移植研究：
(i)化合物調配：令用於經口管餵投予之化合物1調配成濕式研磨之奈米懸浮液(在2.5% w/v之聚乙烯基吡咯啶酮(PVP)、0.5% w/v之水性聚乙二醇15羥基硬脂酸酯(Macrogol 15 Hydroxystearate)(Kolliphor HS15)中研磨24小時，具有＜1 mm粒徑分布(PSD；~650 nm中位直徑(d50))。
(ii)細胞植入、化合物給藥及組織收集：在非肥胖性糖尿病的情況下具有嚴重複合型免疫缺陷(SCID)突變的免疫缺陷雌性小鼠(NOD SCID；6至8週齡；來自Charles River Laboratories的NOD.CB17-Prkdcscid/NCrCrl)接受以7.5×106 個DMS114細胞(以1：1於基質膠(Trevigen, Cultrex BME Path Clear®，目錄號：30625F14)中，總體積200ml)經皮下(SC)植入至右側腹中。每週測量兩次腫瘤體積及體重。在植入後第20天，64隻小鼠係基於幾何平均值約160 mm3 之腫瘤大小而隨機分成相應於劑量的6組(表1)。令化合物以10 ml/kg分別經口管餵(化合物1；BID (7/17小時間隔))或經腹膜內注射(順鉑)投予。順鉑給藥時程為每週一次歷經3週(Q7Dx3)且在以化合物1隨機及開始治療後7天開始。
在第55天終止研究組1、2、3和4 (表1)。在最後一次劑量後4小時收集用於藥效學(PD)分析之腫瘤(急速冷凍)樣品。保持兩個順鉑治療組(5和6)的研究，直至隨機化後第81天，以監測腫瘤消退及再生長。在取決於可用的腫瘤大小的最後一次劑量後3小時收集來自第5和6組的腫瘤樣品。
對該等動物進行的所有手續均依照法規及建立的指南，且由輝瑞公司的機構動物護理及使用委員會(Pfizer’s Institutional Animal Care and Use Committee)審查和批准。
(iii)數據解釋：各實驗分別以Microsoft Excel及7.02版GraphPad Prism進行計算及圖形創建。腫瘤體積係以0.5×長度×寬度2 計算。腫瘤生長抑制(TGI)係由以下公式測定：%TGI=[1-(Vtx -Vt0 /Vcx -Vc0 )]×100，其中Vc、Vt為對照組及治療組之幾何平均值。X=研究的第X天及0=第一天給藥。
ELISA檢定法：
(i) 組蛋白提取：組蛋白提取係使用EpiQuick組蛋白提取套組(Epigentek OP0006)進行。令冷凍之腫瘤樣品使用冷研缽及研杵在乾冰上切割且均質化。令均質化混合物轉移至1.5 mL毫升試管內的含有苯基甲基磺醯氟(PMSF)之1X預溶解緩衝液(200 mg/ml)中。令樣品溫和地混合，在冰上培育15分鐘且在4℃下以3,000 rpm旋轉5分鐘。令組織沉澱物再懸浮於來自組蛋白提取套組之3倍體積(每100 mg組織約200 mL)的溶解緩衝液中，在冰上培育30分鐘且在4℃下以12,000 rpm旋轉5分鐘。平衡-DTT緩衝液係藉由令DTT溶液以1：500之比添加至平衡緩衝液而製得。令上清液(含有酸可溶性蛋白質)轉移至新的1.5 mL試管中且令來自組蛋白提取套組之0.3倍體積的平衡-二硫蘇糖醇(DTT)緩衝液立即添加至各樣品中。令腫瘤溶解物使用Bioruptor Plus (Diagenode #B01020001)以高強度短暫地聲波處理4次循環(開啟30秒及關閉30秒)。令提取物等分且儲存在-20℃(短期)或-80℃(長期)。蛋白質濃度係使用Coomassie Plus (Bradford)檢定套組(Thermo #23236)定量。
(ii) H3K27Me3及Me2之ELISA檢定法：令組蛋白提取物在含有0.05%之胎牛血清白蛋白(BSA)的100 mL被覆緩衝液(coating buffer)(磷酸鹽緩衝之食鹽水(PBS))中稀釋至400 ng (或800 ng)最終濃度。在96槽孔檢定微量盤(Corning Costar)中以一式兩份於每一槽孔添加四百(400) ng (或800 ng)各樣品，緊緊密封且在4℃下經隔夜培育。在隔天，令各盤中的槽孔以300 ml清洗緩衝液(PBS、0.05%之Tween 20)清洗3次且接著在室溫下以300 mL阻斷緩衝液(PBS、0.05%之Tween 20、2%之BSA)經2小時阻斷。在另一輪以清洗緩衝液(PBS、0.05%之Tween 20)清洗後，令100 mL檢測抗體(在阻斷緩衝液中以1：2000稀釋之Cell Signaling #9733 H3K27Me3；在阻斷緩衝液中以1：2000稀釋之Cell Signaling #9728 H3K27Me2；在阻斷緩衝液中以1：5000稀釋之Cell ABCAM ab1791總組蛋白H3)添加至各個盤的各槽孔中且在室溫下培育1.5小時。在另一輪以清洗緩衝液(PBS、0.05%之Tween 20)清洗後，令以1：2000稀釋(H3K27Me3及Me2)或以1：10,000稀釋(總H3)之100 mL二級抗體(抗Rb-IgG-HRP，Cell Signaling 7074)添加至各槽孔中且令盤在室溫下培育1.5小時。在另一輪以清洗緩衝液(PBS、0.05%之Tween 20)清洗後，進行檢測：令100 mL TMB受質(Thermo Scientific，N301)添加至各槽孔中，令盤培育10分鐘，令100 mL停止溶液(0.16M硫酸，新鮮製備或自Thermo Scientific N600購得)添加至各槽孔中，輕輕地振盪，且在450 nm讀取吸收值。使用7.02版GraphPad Prism分析數據。P值係使用單因子ANOVA (杜凱氏(Tukey’s)多重比較試驗)測定。
實施例1-化合物1在DMS114 SCLC細胞中的抗增生效應
化合物1對抗EZH2的活性係在含有野生型EZH2之DMS114 SCLC細胞中評估。EZH2抑制劑活性係於細胞中藉由測量細胞H3K27Me3含量的相對量來測定。令DMS114細胞以指定濃度的化合物1治療3天且使用上文所述之細胞內西方檢定法測量H3K27Me3含量。結果顯示於表2和圖1中。圖1為5個獨立的生物學複製實驗之代表。在以3 mM至0.1 nM之濃度範圍治療3天後，化合物1展示劑量依賴性H3K27Me3抑制作用，具有9.48 nM之細胞平均IC50 。
化合物1抑制EZH2‑WT DMS114 SCLC細胞之細胞增生的活性亦使用上文所述用於DMS114 SCLC細胞之細胞增生檢定法評定。令DMS114細胞使用具有3 mM至0.1 nM的10點劑量曲線(1：3稀釋)之不同濃度的化合物1治療17至21天，且接著評定細胞生存率。結果顯示於表2和圖2中。圖2為6個獨立的生物學複製實驗之代表。結果表明化合物1在DMS114細胞中展示強力的劑量依賴性細胞增生抑制作用，具有18.8 nM之平均IC50 。
實施例2-用於化合物1+SCLC照護標準的藥劑順鉑或依托泊苷之組合的抗增生協同性評估
鑑於以化合物1所觀察對抑制SCLC DMS114細胞系生長的強功效，因而研究化合物1與目前照護標準的化學治療劑之組合。實驗係使用依照上文所述之方法對DMS114 SCLC細胞進行細胞生長抑制檢定法，且結果顯示於圖3和4。圖3顯示單獨給藥及與順鉑組合給藥之化合物1的IC50 曲線。圖4顯示單獨給藥及與依托泊苷組合給藥之化合物1的IC50 曲線。該等實驗顯示先以化合物1治療強力地增加順鉑或依托泊苷二者在DMS114細胞中的抗增生效應。圖3和4亦顯示使用如上文所述之Loewe加成性(ADD)模式之組合數據進一步分析的結果。此分析顯示若兩種化合物具有加成效應，則以兩種化合物大於IC50 之劑量所達成的生長抑制水平比能夠預期的水平更強。
實施例3-在DMS114 SCLC異種移植模式中，單一劑化合物1於活體內抑制腫瘤生長
化合物1之抗腫瘤功效係在DMS114 SCLC異種移植模式中使用上文所述之活體內異種移植研究程序於活體內測試。研究分組、給藥方案和投予途徑之定義總結於表1中。結果顯示於圖5中。化合物1顯示以每天兩次(BID) 300 mg/kg具有69%至79%之最大腫瘤生長抑制(TGI)的劑量依賴性功效反應。在腫瘤細胞植入後第20天，小鼠係基於腫瘤大小而隨機分成治療組。在各組中隨機化之腫瘤大小的幾何平均值為約160 mm3 。自圖5所示之結果可看出相對於以媒劑給藥之對照組，以100 mg/kg BID及300 mg/kg BID給藥之化合物1二者顯示顯著的抗腫瘤效益。相對於30 mg/kg BID及100 mg/kg BID治療，以最高300 mg/kg BID劑量有顯著的TGI效益(第55天；2-尾t試驗)，展示劑量依賴性功效。以化合物1單一治療分組未觀察到完全的腫瘤消退。化合物1係以有限的體重減輕而具有良好的耐受性。
實施例4-單一劑化合物1在DMS114 SCLC異種移植模式中顯示於活體內對H3K27Me3及Me2之劑量依賴性生物標誌物抑制作用
在DMS114 SCLC異種移植模式中，化合物1對抗EZH2之活體內活性係藉由使用來自以上實施例3所述之研究於第55天收穫的腫瘤組織樣品以ELISA測量細胞的H3K27Me3及Me2含量之相對量來測定。結果顯示於圖6中。化合物1展現對腫瘤樣品中的H3K27Me3及Me2之劑量依賴性抑制作用，以300 mg/kg BID對H3K27Me3及Me2分別具有96%及82%之最大抑制。
實施例5-化合物1在DMS114 SCLC異種移植模式中顯示與順鉑之組合抗腫瘤活性效益
化合物1與順鉑組合之抗腫瘤功效係於EZH2-WT DMS114 SCLC異種移植模式中使用上文所述之異種移植研究程序於活體內測試。研究分組、給藥方案和投予途徑之定義總結於表1中。結果顯示於圖7中。在順鉑及化合物1單一治療組中，所有腫瘤在第55天進展且大於在治療開始時，儘管在順鉑投予後觀察到間歇性腫瘤縮小。相對之下，在組合組中，與開始的腫瘤負荷相比，12個腫瘤中有6個消退。組合治療係以第55天得到95%之TGI且明顯比以順鉑(51%之TGI；P=0.019相對於順鉑)或以化合物1 (50%之TGI；P=0.016相對於100 mg/kg之化合物1)之單一治療更高的功效。順鉑治療係在單一劑及組合分組二者的第三個劑量後停止，因為其引起小鼠的體重減輕(圖7)。化合物1單一劑治療具有良好的耐受性(圖7)，而化合物1+順鉑組合顯示明顯比順鉑單一治療組更顯著的體重減輕(在第27天及之後的所有測量之P＜0.05；2-尾t試驗)。
為了評定對反應持久性的EZH2抑制效應，在第55天後保持順鉑單一治療組及組合治療組的研究。在兩種該等治療分組中，皆於第42天給予最後一次順鉑治療。在組合分組中，僅以單一治療化合物1作為維持治療再繼續給藥3週(沒有順鉑給藥)。結果顯示於圖7中。在組合分組中，化合物1之維持劑量係於順鉑中止後再持續34天的腫瘤消退，但是在不接受進一步治療的順鉑單一治療分組中的所有腫瘤皆進展了。在組合分組中及在順鉑治療停止後，體重在以化合物1維持給藥期間完全恢復，表明自化合物1維持劑量引起的毒性最小(圖7)。
再者，自圖8和9所示之數據可看出相對於媒劑或化合物1或順鉑單一治療，以順鉑與化合物1之組合提供顯著的存活期效益。用於存活期讀取的最大腫瘤負荷設定在500 mm3 。相對於媒劑對照組，100 mg/kg BID化合物1組及順鉑單一治療組以對數秩(Mantel-Cox)試驗未達到P＜0.05之顯著性水平。在組合組中的中位存活期增加至74.5天，其係相對於媒劑組中的34天，在100 mg/kg BID化合物1中的39天及在順鉑組中的37.5天。
總之，化合物1在DMS114 SCLC異種移植模式中展示於活體內對腫瘤生長的劑量依賴性抑制作用。劑量依賴性抑制作用亦與H3K27Me3及Me2生物標誌物之高效力抑制作用互相關聯。基於所觀察的最小體重變化而結論出以化合物1給藥在小鼠中具有耐受性。當與得到顯著的存活期效益之順鉑單一治療相比時，以化合物1與第一線照護標準的順鉑之組合給藥顯著地增加抗腫瘤功效及抗腫瘤反應持久性二者。再者，在此DMS114 SCLC異種移植模式中，本文所述之非臨床研究展示作為單一劑及順鉑組合二者之化合物1於活體內抑制EZH2催化活性，如以H3K27Me3及Me2抑制作用所測量，誘發強力的腫瘤生長抑制作用。
實施例6-化合物1於另外的SCLC細胞系中的抗增生效應
基於以化合物1在DMS114細胞中觀察到的強大活性(參見上文實施例1)，亦使用上文所述之細胞增生檢定法測試化合物1於3種另外的SCLC細胞系(亦即H841、H446和H69)中的抗增生活性。令各細胞系使用具有3 mM至0.1 nM的10點劑量曲線(在DMSO中以1：3稀釋)之不同濃度的化合物1治療21天，且接著評定細胞生存率。結果顯示於圖10 (H841)、圖11 (H446)和圖12 (H69)中。在治療21天後，化合物1展示強力的劑量依賴性細胞增生抑制作用，在H841細胞系中具有73.15 nM之平均IC50 ；在H446細胞系具有108.6 nM之平均IC50 ；及在H69細胞系中具有224.1 nM之平均IC50 。
實施例7-化合物1+SCLC照護標準的藥劑順鉑或依托泊苷之組合在H841、H446和H69細胞系中的抗增生協同性之評估
鑑於以化合物1所觀察抑制SCLC H841、H446和H69細胞系生長的強功效，因而研究化合物1與目前照護標準的化學治療劑順鉑或依托泊苷之組合。實驗係使用依照上文所述之方法對H841、H446或H69 SCLC細胞進行細胞生長抑制檢定法，且結果顯示於圖13和14 (H841細胞系)、圖15和16 (H446細胞系)及圖17和18 (H69細胞系)中。圖13、15和17顯示單獨給藥及與順鉑組合給藥之化合物1的IC50 曲線。圖14、16和18顯示單獨給藥及與依托泊苷組合給藥之化合物1的IC50 曲線。如同DMS114，該等實驗顯示先以化合物1治療強力地增加順鉑或依托泊苷二者在H841、H446和H69細胞系中的抗增生效應。
圖13至18亦顯示使用如上文所述之Loewe加成性(ADD)模式之組合數據進一步分析的結果。此分析顯示若兩種化合物具有加成效應，則以兩種化合物大於IC50 之劑量所達成的生長抑制水平比能夠預期的水平至少一樣強或更強。
實施例8-化合物1誘發SCLC細胞系中的SLFN11表現
為了瞭解以化學治療劑觀察到的EZH2i協同作用之原因的潛在機制，吾等評定化合物1治療對SLFN11表現(對DNA損傷劑之致敏物)的效應。令許多SCLC細胞系以500 nM化合物1治療7天且使用根據上文所述之方法的西方墨點法評定SLFN11蛋白質含量的變化。結果顯示於圖19中。該等結果表明在以化合物1治療時於許多SCLC細胞系中觀察到強力誘發的SLFN11表現。
實施例9-化合物1+SCLC照護標準的藥劑順鉑之組合誘發SCLC細胞系中增加的DNA損傷
化合物1與化學治療劑順鉑之組合對DNA損傷的效應係使用根據上文所述之方法的DNA損傷標誌物γ-H2AX染色或以COMET檢定法評定DNA損傷來評定。令SCLC細胞系H841或H69以化合物1預治療7天，繼而與順鉑共同治療16小時(γ-H2AX)或3天(COMET檢定法)。結果顯示於圖20至22中。在圖20中，來自H841細胞系的結果表明當與任一單一治療的那些細胞相比時，在以組合治療之細胞中觀察到強力增加的γ-H2AX細胞簇形成。在圖21中，來自H841細胞系的結果表明當與任一單一治療的那些細胞相比時，在以組合治療之細胞中觀察到強力增加的DNA損傷(COMET檢定法)。在H69細胞系COMET檢定法中達成類似的結果(參見圖22)。
在本說明書中所引用的所有發表案及專利/專利申請案係藉由參照彼之全文而併入本文。儘管前述發明已以例證及實例方式於一些細節上說明，但是那些一般熟習此項技術領域者按照本發明的教導將輕易地明白可以不脫離所附申請專利範圍之精神或範圍而對本發明進行特定的改變及修飾。
本發明可參考下列本發明較佳的實施態樣及其中包括的實施例之詳細說明而更輕易地理解。應理解本文所使用之術語僅以說明特定的實施態樣為目的而已，且不意欲為限制。應進一步理解本文所使用之術語係以相關技術中已知的其傳統意義給出，除非經本文特定的定義。
如本文所使用之單數形式「一(a)」、「一(an)」及「該(the)」包括複數個參考物，除非另有其他指示。例如，「一(a)」取代基包括一或多個取代基。
當術語「約」用於修飾經數值定義之參數時(例如EZH2抑制劑的劑量、鉑為底質之抗贅瘤劑(諸如順鉑)的劑量、化學治療劑(諸如依托泊苷)的劑量及類似者)，則其意指參數可以高於或低於該參數所陳述之數值的至多10%之變化。例如，應理解約5 mg/kg之劑量意指劑量可在4.5 mg/kg與5.5 mg/kg之間變化。
術語「異常細胞生長」及「過度增生性疾患」於本申請案中可交換使用。
如本文所使用之「異常細胞生長」係指不受正常的調節機制支配(例如喪失接觸抑制作用)的細胞生長，除非另有其他指示。異常細胞生長可為良性(非癌)或惡性(癌)。
術語「癌」、「癌的」、「惡性的」係指或說明哺乳動物中的生理狀況，其通常係以失調的細胞生長為特徵。如本文所使用之「癌」係指由異常細胞生長所引起的任何惡性及/或侵入性生長或腫瘤。如本文所用的「癌」係指以形成腫瘤的細胞類型命名之固態腫瘤、血液癌、骨髓癌或淋巴系統癌。固態腫瘤的實例包括但不限於肉瘤及癌(carcinoma)。血液癌實例包括但不限於白血病、淋巴瘤和骨髓癌。術語「癌」包括但不限於起源於身體的特定部位之原發癌、自開始的位置擴散至身體的其他部位之轉移癌、在緩解後自原來的原發癌復發及第二原發癌，其為類型上不同於先前的癌病史之人體內的新原發癌。癌的實例包括但不限於癌(carcinoma)、淋巴瘤、白血病、胚細胞瘤和肉瘤。此等癌的更特別實例包括鱗狀細胞癌、骨髓瘤、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、神經膠瘤、何杰金氏(hodgkin’s)淋巴瘤、非何杰金氏淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤(FL)、瀰漫性大型B細胞淋巴瘤(DLCBCL)、急性骨髓性白血病(AML)、多發性骨髓瘤、胃腸(道)癌、腎癌(renal cancer)、卵巢癌、肝癌、腎臟癌(kidney cancer)、前列腺癌、去勢抗性前列腺癌(CRPC)、甲狀腺癌、黑色素瘤、軟骨肉瘤、神經胚細胞瘤、胰腺癌、多形性膠質母細胞瘤、子宮頸癌、腦癌、胃癌、膀胱癌、肝細胞瘤、乳癌、結腸癌和頭與頸癌。
術語「患者」或「個體」係指任何需要治療或參與臨床試驗、流行病學研究或用作為對照的單一個體，包括人類及哺乳動物獸醫患者，諸如牛、馬、狗和貓。在特定較佳的實施態樣中，個體為人類。
如本文所使用之術語「治療(treat)」或「治療(treating)」癌症意指對患有癌症或被診斷患有癌症的個體投予根據本發明之組合治療以達成至少一種積極的治療效應，諸如減少癌細胞數量、減少腫瘤大小、降低癌細胞浸潤至外周組織的速度或降低腫瘤轉移或腫瘤生長的速度，逆轉、緩和、抑制此術語適用的疾患或病況或該等疾患或病況的一或多種症狀之進展、或預防該等疾患或病況或該等疾患或病況的一或多種症狀。如本文所使用之術語「治療(treatment)」係指剛如上文定義之「治療(treating)」的治療行為，除非另有其他指示。術語「治療(treating)」亦包括個體的輔助性及新輔助性治療。出於本發明的目的，有益或期望的臨床結果包括但不限於下列中之一或多者：減少(或破壞)贅瘤或癌細胞的增生、抑制轉移或贅瘤細胞、縮小或減小腫瘤的大小、緩解癌症、減少源於癌的症狀、提高患有癌症的患者之生活質量、減少治療癌症所需之其他藥的劑量、延遲癌症的進展、治癒癌症、克服一或多種癌症的抵抗機制及/或延長癌症患者的存活期。積極的癌症治療效應可以許多方式測量(參見例如W. A. Weber,J. Nucl. Med . 50:1S-10S (200))。在一些實施態樣中，以本發明之組合達成的治療為下列中任一者：部分反應(PR)、完全反應(CR)、總反應(OR)、無進展存活期(PFS)、無疾病存活期(DFS)及總存活率(OS)。亦稱為「至腫瘤進展的時間」之PFS表示在治療期間及之後癌未生長的時間，且包括患者經歷CR或PR之時間量，及患者經歷穩定的疾病(SD)之時間量。DFS係指在治療期間及之後患者維持無疾病的時間長度。OS係指與原態或未經治療的個體或患者相比而預期壽命的延長。在一些實施態樣中，對本發明之組合的反應為PR、CR＜ PFS、DFS、OR或OS中任一者，該反應係使用固態腫瘤之反應評估準則(Response Evaluation Criteria in Solid Tumors)(RECIST) 1.1反應準則評定。有效治療癌症患者的本發明之組合的治療方案可根據以下因素改變：諸如患者的疾病狀態、年齡和體重及在個體中引發抗癌反應的治療能力。雖然本發明之態樣中任一者的實施態樣可能無法有效地在每一個體中達成積極的治療效應，但是應在統計學上顯著數量的個體中達成，如藉由本技術中已知的任何統計學試驗所確定，諸如司徒登氏t-試驗(Student’s t-test)、chi2-試驗、根據曼(Mann)與惠特尼(Whitney)之U-試驗、克拉斯卡-瓦立斯(Kruskal-Wallis)試驗(H-test)、瓊克希爾-特普斯推特(Jonckheere-Terpstrat)-試驗及威爾康試驗(Wilcon on-test)。術語治療「治療(treatment)」亦包含例如細胞以試劑、診斷化合物、結合化合物或另一細胞的試管內或細胞外治療。
術語「治療方案(regimen)」、「給藥程序(protocol)」及「給藥方案」可交換使用，其係指投予本發明之組合中的每一治療劑的劑量及時序。
「改善」意指與未投予本發明之方法或方案的治療劑相比而減輕或改進一或多種症狀。「改善」亦包括縮短或減少症狀的持續期間。
如本文所使用之藥物、化合物或醫藥組成物的「有效劑量」或「有效量」為足以影響疾病、其併發症及在疾病發展期間呈現之中間病理表型的任何一或多種有益或期望(包括)的生化學、組織學及/或行為學症狀之量。就治療用途而言，「治療有效量」係指減輕欲治療之疾患的症狀中之一或多者至某種程度的欲投予之化合物量。關於癌症的治療，治療有效量係指具有以下效應的量：(1)減少腫瘤大小，(2)抑制(亦即減慢至某種程度，較佳為停止)腫瘤轉移，(3)抑制腫瘤生長或腫瘤侵入至某種程度(亦即減慢至某種程度，較佳為停止)，(4)減輕與癌症相關的一或多種徵兆或症狀至某種程度(或較佳為消除)，(5)減少治療疾病所需之其他藥的劑量，及/或(6)提高另一藥的效應，及/或延遲患者的疾病進展。有效劑量可以一或多次投予。出於本發明的目的，藥物、化合物或醫藥組成物的有效劑量為足以直接或間接完成預防性或治療性治療的量。如臨床背景所理解，藥物、化合物或醫藥組成物的有效劑量可與或可不與另一藥物、化合物或藥物組合物一起達成。
「腫瘤」在應用於經診斷患有或懷疑患有癌症之個體時，其係指任何大小之惡性或潛在惡性贅瘤或組織塊狀物，且包括原發性腫瘤及繼發性贅瘤。固態腫瘤為通常不含囊腫或液體區域之組織的異常生長或塊狀物。固態腫瘤的實例為為肉瘤、癌和淋巴瘤。白血病(血液癌)通常不構成固態腫瘤(國家癌症學會之癌症術語詞典(National Cancer Institute, Dictionary of Cancer Terms))。
亦稱為「腫瘤負荷(tumor load)」之「腫瘤負荷(tumor burden)」係指分布於全身的腫瘤物質之總量。腫瘤負荷係指全身(包括淋巴結及骨髓)的癌細胞總數量或整體腫瘤大小。腫瘤負荷可以此項技術中已知的多種方法測定，諸如使用測徑器，或在體內時使用造影技術，例如超聲波、骨掃描、電腦斷層攝影術(CT)或磁共振造影(MRI)掃描。
術語「腫瘤大小」係指可以腫瘤的長度及寬度量測之整體腫瘤大小。腫瘤大小可以此項技術中已知的多種方法測定，諸如在自個體移出時例如使用測徑器測量腫瘤的尺寸，或在體內時使用造影技術，例如骨掃描、超聲波、CT或MRI掃描。
術語「加成性」被用於意指兩種化合物、組分或靶定之藥劑之組合結果不大於獨立的各化合物、組分或靶定之藥劑的總和。
術語「協同性」或「協同」被用於意指兩種化合物、組分或靶定之藥劑之組合結果大於獨立的各化合物、組分或靶定之藥劑的總和。欲治療之疾病、病況或疾患的此改進為「協同」效應。「協同量」為導致協同效應的兩種化合物、組分或靶定之藥劑之組合量，如本文定義之「協同」。
測定在一或兩種組分之間之協同相互作用時，就效應而言之最優範圍及就效應而言之各組分的絕對劑量範圍可藉由對需要治療之患者投予不同的劑量範圍及/或劑量比率之組分而明確地測量。然而，試管內模式或活體內模式之協同性觀察可預測在人及其他物種中的效應，且有如本文所述之試管內模式或活體內模式的存在以測量協同效應。亦可使用此等研究的結果預測在人類及其他物種中所需之有效劑量和血漿濃度比率範圍，及絕對劑量和血漿濃度，諸如藉由藥物動力學/藥效學方法的應用。
如本文所使用之「非標準的臨床給藥方案」係指投予物質、藥劑、化合物或組成物的方案不同於典型地用於臨床設定之物質、藥劑、化合物或組成物的量、劑量或時程。「非標準的臨床給藥方案」包括「非標準的臨床劑量」或「非標準的臨床給藥時程」。
如本文所使用之「低劑量方案」係指其中在方案中的物質、藥劑、化合物或組成物中之一或多者係以低於該藥劑典型地用於臨床設定中的量或劑量給藥之給藥方案，例如當該藥劑係作為單例(singleton)治療給藥時。
Zeste 增強子同源物2
本發明之實施態樣包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽。
如本文所使用之術語「zeste增強子同源物2 (EZH2)抑制劑」及「EZH2抑制劑」可交換使用，且應意指EZH2的野生型及/或突變體抑制劑。EZH2抑制劑可以那些熟習此項技術領域者已知的方法測定，例如生物學活性可以EZH2酵素檢定法測定，諸如以Kung, P. P.等人之J Med Chem , 2016, 59, 8306-8325所揭示。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之實例包括那些在國際專利申請案PCT/IB2015/054272中所揭示者，該申請案係於2015年12月23日以WO 2015/193765發表，藉由參照於本文納入其內容。用作為本發明之EZH2抑制劑的本文所揭示之特定的EZH2抑制劑之實例包括但不限於選自由下列者所組成之群組的EZH2抑制劑：
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(S )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
或其醫藥上可接受之鹽。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/IB2013/060682中所揭示者，該申請案係於2014年6月26日以WO 2014/097041發表，藉由參照於本文納入其內容。用作為本發明之EZH2抑制劑的本文所揭示之特定的EZH2抑制劑之實例包括但不限於選自由下列者所組成之群組的EZH2調節劑：
5-溴-8-氯-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-7-(1,4-二甲基-1H -1,2,3-三唑-5-基)-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-7-(3,5-二甲基-1,2-噁唑-4-基)-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
或其醫藥上可接受之鹽。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/IB2013/058580中所揭示者，該申請案係於2014年4月3日以WO 2014/049488發表，藉由參照於本文納入其內容。用作為本發明之EZH2抑制劑的本文所揭示之特定的EZH2抑制劑之實例包括但不限於選自由下列者所組成之群組的EZH2抑制劑：
5-[2-(二甲基胺基)嘧啶-5-基]-N -[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H -吡唑-5-基)苯甲醯胺；
N -[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-5-[2-(甲基胺基)嘧啶-5-基]-3-(1-甲基-1H -吡唑-5-基)苯甲醯胺；
N -[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3-(1,4-二甲基-1H -吡唑-5-基)-2-甲基-5-[2-(甲基胺基)嘧啶-5-基]苯甲醯胺；
5-(6-胺基吡啶-3-基)-N -[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H -吡唑-5-基)苯甲醯胺；
N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3-(1,4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-甲基-5-(2-嗎啉-4-基嘧啶-5-基)苯甲醯胺；
N -[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3-(1,4-二甲基-1H -吡唑-5-基)-2-甲基-5-{2-[(1S ,4S )-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚-5-基]嘧啶-5-基}苯甲醯胺；
N -[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3-(1,4-二甲基-1H -吡唑-5-基)-2-甲基-5-{2-[3-氧雜-8-氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基]嘧啶-5-基}苯甲醯胺；
N -[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3-(1,4-二甲基-1H -吡唑-5-基)-5-[2-(3-氟吖呾-1-基)嘧啶-5-基]-2-甲基苯甲醯胺；及
N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-5-[6-(4-甲基哌-1-基)吡啶-3-基]-3-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)苯甲醯胺；
或其醫藥上可接受之鹽。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2011/035336中所揭示者，該申請案係於2011年11月10日以WO 2011/140324發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2011/035340中所揭示者，該申請案係於2011年11月10日以WO 2011/140325發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2011/035344中所揭示者，該申請案係於2012年1月12日以WO 2012/005805發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2012/058188中所揭示者，該申請案係於2013年4月4日以WO 2013/049770發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2013/041115中所揭示者，該申請案係於2013年11月21日以WO 2013/173441發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2011/051258中所揭示者，該申請案係於2012年3月15日以WO 2012/034132發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2012/026953中所揭示者，該申請案係於2012年9月7日以WO 2012/118812發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2012/033648中所揭示者，該申請案係於2012年10月18日以WO 2012/142504發表，藉由參照於本文納入其內容。用作為本發明之EZH2抑制劑的本文所揭示之特定的EZH2抑制劑之實例包括：
N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-5-[乙基(四氫-2H-吡喃-4-基)胺基]-4-甲基-4’-(嗎啉-4-基甲基)聯苯基-3-甲醯胺；
或其醫藥上可接受之鹽。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2012/033662中所揭示者，該申請案係於2012年10月18日以WO 2012/142513發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2011/061740中所揭示者，該申請案係於2012年5月24日以WO 2012/068589發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2013/025639中所揭示者，該申請案係於2013年8月15日以WO 2013/120104發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2014/015706中所揭示者，該申請案係於2014年8月14日以WO 2014/124418，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之特定的EZH2抑制劑之其他實例包括那些在國際專利申請案PCT/US2013/065112中所揭示者，該申請案係於2014年8月24日以WO 2014/062720發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/IB2015/054272，該申請案係於2015年12月23日以WO 2015/193765發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/IB2015/054272，該申請案係於2015年12月23日以WO 2015/193765發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(S )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/IB2015/054272，該申請案係於2015年12月23日以WO 2015/193765發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
5-溴-8-氯-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-7-(1,4-二甲基-1H -1,2,3-三唑-5-基)-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/IB2013/060682，該申請案係於2014年6月26日以WO 2014/097041發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
5,8-二氯-7-(3,5-二甲基-1,2-噁唑-4-基)-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/IB2013/060682，該申請案係於2014年6月26日以WO 2014/097041發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-5-[乙基(四氫-2H-吡喃-4-基)胺基]-4-甲基-4’-(嗎啉-4-基甲基)聯苯基-3-甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，亦稱為塔澤司他(tazemetostat)、EPZ-5687或EPZ-6438，且其係揭示於國際專利申請案PCT/US2012/033648，該申請案係於2012年10月18日以WO 2012/142504發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
N-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-1-[(1R)-1-[1-(2,2,2-三氟乙基)哌啶-4-基]乙基]-1H-吲哚-3-甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，亦稱為CPI-1205，且其係揭示於國際專利申請案PCT/US2013/025639，該申請案係於2013年8月15日以WO 2013/120104發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
N-(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基甲基)-1-異丙基-3-甲基-6-[6-(4-甲基哌-1-基)吡啶-3-基]-1H-吲哚-4-甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，亦稱為GSK-503，且其係揭示於國際專利申請案PCT/US2011/035336，該申請案係於2011年11月10日以WO 2011/140324發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
N-[(6-甲基-2-側氧基-4-丙基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-6-[2-(4-甲基哌-1-基)吡啶-4-基]-1-(丙-2-基)-1H-吲唑-4-甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，亦稱為GSK-126，且其係揭示於國際專利申請案PCT/US2011/035340，該申請案係於2011年11月10日以WO 2011/140325發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
1-異丙基-N-(6-甲基-2-側氧基-4-丙基-1,2-二氫吡啶-3-基甲基)-6-[6-(4-甲基哌-1-基)吡啶-3-基]-1H-吲唑-4-甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/US2011/035340，該申請案係於2011年11月10日以WO 2011/140325發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
3-氯-4-[2-氰基-3-(嗒-4-基)苯氧基]-N-(2,2,6,6-四甲基哌啶-4-基)苯甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/US2011/061740，該申請案係於2012年5月24日以WO 2012/068589發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
5-氯-N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3-[乙基(四氫-2H-吡喃-4-基)胺基]-2-甲基苯甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/US2012/033662，該申請案係於2012年10月18日以WO 2012/142513發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
1-[(1R)-1-[1-(乙基磺醯基)哌啶-4-基]乙基]-N-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-1H-吲哚-3-甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/US2013/025639，該申請案係於2013年8月15日以WO 2013/120104發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
N-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-1-(1-甲氧基丙-2-基)-2-甲基-1H-吲哚-3-甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/US2013/025639，該申請案係於2013年8月15日以WO 2013/120104發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3-(乙基[反式-4-[(2-甲氧基乙基)(甲基)胺基]環己基]胺基)-2-甲基-5-[3-(嗎啉-4-基)丙-1-炔-1-基]苯甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，隨意地為酒石酸鹽，該化合物係揭示於國際專利申請案PCT/US2013/065112，該申請案係於2014年4月24日以WO 2014/062720發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
1-[(1R)-1-[1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基]乙基]-N-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-1H-吲哚-3-甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/US2014/015706，該申請案係於2014年8月14日以WO 2014/124418發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
5-[環戊基(甲基)胺基]-N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-4-甲基-4’-[(嗎啉-4-基)甲基][1,1’-聯苯基]-3-甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/US2012/033648，該申請案係於2012年10月18日以WO 2012/142504發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
5-溴-3-[環戊基(甲基)胺基]-N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基苯甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/US2012/033662，該申請案係於2012年10月18日以WO 2012/142513發表，藉由參照於本文納入其內容。
在一個實施態樣中，可用於本發明之EZH2抑制劑為：
5-溴-N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-3-[甲基(氧雜環己烷-4-基)胺基]苯甲醯胺
或其醫藥上可接受之鹽，其係揭示於國際專利申請案PCT/US2012/033662，該申請案係於2012年10月18日以WO 2012/142513發表，藉由參照於本文納入其內容。
可用於本發明之較佳的EZH2抑制劑係選自由下列者所組成之群組：
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(S )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5-溴-8-氯-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-7-(1,4-二甲基-1H -1,2,3-三唑-5-基)-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-7-(3,5-二甲基-1,2-噁唑-4-基)-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-5-[乙基(四氫-2H-吡喃-4-基)胺基]-4-甲基-4’-(嗎啉-4-基甲基)聯苯基-3-甲醯胺；
N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-5-[乙基(四氫-2H-吡喃-4-基)胺基]-4-甲基-4’-(嗎啉-4-基甲基)聯苯基-3-甲醯胺；
N-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-1-[(1R)-1-[1-(2,2,2-三氟乙基)哌啶-4-基]乙基]-1H-吲哚-3-甲醯胺；
N-(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基甲基)-1-異丙基-3-甲基-6-[6-(4-甲基哌-1-基)吡啶-3-基]-1H-吲哚-4-甲醯胺；
N-[(6-甲基-2-側氧基-4-丙基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-6-[2-(4-甲基哌-1-基)吡啶-4-基]-1-(丙-2-基)-1H-吲唑-4-甲醯胺；
或其醫藥上可接受之鹽。
可用於本發明之更佳的EZH2抑制劑係選自由下列者所組成之群組：
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(S )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；及
5-溴-8-氯-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-7-(1,4-二甲基-1H -1,2,3-三唑-5-基)-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮；
或其醫藥上可接受之鹽。
除非另有其他指示，否則本文所有述及之EZH2抑制劑包括述及之其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物、水合物及複合物，以及其鹽之溶劑合物、水合物及複合物，包括其多形物、立體異構物及經同位素標記之型式。
化學治療劑
本發明之實施態樣關於化學治療劑或其醫藥上可接受之鹽。
在一個實施態樣中，化學治療劑為鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽。
在本發明之一個實施態樣中，化學治療劑為順鉑。
在本發明之一個實施態樣中，化學治療劑為卡鉑。
在本發明之一個實施態樣中，化學治療劑為依托泊苷。
在本發明之一個實施態樣中，化學治療劑為順鉑和依托泊苷。
在本發明之一個實施態樣中，化學治療劑為卡鉑和依托泊苷。
治療方法及用途
本發明之方法及組合治療有用於治療癌症。在一些實施態樣中，所提供之方法得到下列效應中之一或多者：(1)抑制癌細胞增生；(2)抑制癌細胞侵入；(3)誘發癌細胞凋亡；(4)抑制癌細胞轉移；(5)抑制血管生成；或(6)克服一或多種與癌症治療有關的抵抗機制。
在一個實施態樣中，本發明關於個體之癌症治療方法，其包含對個體投予包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合治療。
在一個實施態樣中，本發明關於個體之癌症治療方法，其包含對個體投予由EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽所組成之組合治療。
在一個實施態樣中，本發明關於個體之癌症治療方法，其包含對個體投予基本上由EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽所組成之組合治療。
在另一態樣中，本發明關於用於治療個體的癌症之EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽，其中EZH2抑制劑係與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽組合使用。
在另一態樣中，本發明關於用於治療個體的癌症之鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽，其中抗贅瘤劑係與EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽組合使用。
在另一態樣中，本發明關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合。
在另一態樣中，本發明關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合，其係用作為藥劑。
在另一態樣中，本發明關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合，其係用於治療個體的癌症。
在另一態樣中，本發明關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽、鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之協同性組合。
在另一態樣中，本發明關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之協同性組合，其係用作為藥劑。
在另一態樣中，本發明關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之協同性組合，其係用於治療個體的癌症。
在另一態樣中，本發明關於EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽及鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽的用途，其係製造用於治療個體的癌症之藥劑。
在另一態樣中，本發明關於包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之載劑的醫藥組成物，其係用於治療個體的癌症，其中包含EZH2抑制劑的醫藥組成物係與包含鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之載劑的醫藥組成物組合使用。
在另一態樣中，本發明關於包含鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之載劑的醫藥組成物，其係用於治療個體的癌症，其中包含鉑為底質之抗贅瘤劑的醫藥組成物係與包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之載劑的醫藥組成物組合使用。
在另一態樣中，本發明關於包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之載劑的醫藥組成物，其係用於治療個體的癌症。
在本發明之一個實施態樣中，個體為哺乳動物。
在本發明之一個實施態樣中，個體為人類。
在一些實施態樣中，本發明之方法及組合可用於治療癌症，其包括但不限於下列癌症：
循環系統，例如心(肉瘤[血管肉瘤、纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤、脂肪肉瘤]、黏液瘤、橫紋肌瘤、纖維瘤、脂肪瘤和畸胎瘤)、縱膈與肋膜及其他的胸腔內器官、血管腫瘤和腫瘤相關之血管組織；
呼吸道，例如鼻腔和中耳、鼻副竇、喉頭、氣管、支氣管和肺，諸如小細胞肺癌(SCLC)、非小細胞肺癌(NSCLC)、支氣管癌(鱗狀細胞癌、未分化小細胞癌、未分化大細胞癌、腺癌)、肺泡(小支氣管)癌、支氣管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、軟骨瘤型錯構瘤、中皮瘤；
胃腸系統，例如食道(鱗狀細胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)、胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)、胃、胰腺(導管腺癌、胰島素瘤、升糖素瘤、胃泌素瘤、類癌瘤、VIP瘤)、小腸(腺癌、淋巴瘤、類癌瘤、卡波西氏(Karposi’s)肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、神經纖維瘤、纖維瘤)、大腸(腺癌、管狀腺瘤、絨毛狀腺瘤、錯構瘤、平滑肌瘤)；
生殖泌尿道，例如腎(腺癌、威爾姆氏(Wilm’s)腫瘤[腎胚細胞瘤]、淋巴癌、白血病)、膀胱及與/或尿道(鱗狀細胞癌、移行細胞癌、腺癌)、前列腺(腺癌、肉瘤)，睪丸(精原細胞瘤、畸胎瘤、胚胎性癌、畸胎上皮癌、絨毛膜癌、肉瘤、間質細胞癌、纖維瘤、纖維腺瘤、腺瘤樣腫瘤、脂肪瘤)；
肝，例如肝腫瘤(肝細胞癌)、膽管癌、肝胚細胞瘤、血管肉瘤、肝細胞腺瘤、血管瘤、胰腺內分泌瘤(諸如嗜鉻細胞瘤、胰島素瘤、血管活性腸肽瘤、胰島細胞瘤和升糖素瘤)；
骨，例如骨原性肉瘤(骨肉瘤)、纖維肉瘤、惡性纖維性組織細胞瘤、軟骨肉瘤、伊文氏(Ewing’s)肉瘤、惡性淋巴瘤(網狀細胞肉瘤)、多發性骨髓瘤、惡性巨細胞瘤脊索瘤、骨軟骨瘤(骨軟骨性外生骨疣)、良性軟骨瘤、軟骨胚細胞瘤、軟骨黏液纖維瘤、骨樣骨瘤和巨細胞瘤；
神經系統，例如中樞神經系統(CNS)贅瘤、原發性CNS淋巴瘤、頭顱癌(骨瘤、血管瘤、肉芽腫、黃瘤、畸形性骨炎)、腦膜(腦脊髓膜癌、腦脊髓膜肉癌、神經膠瘤病)、腦癌(星形細胞瘤、神經管胚細胞瘤、神經膠瘤、室管膜瘤、胚細胞瘤[松果體瘤]、多形神經膠母細胞瘤、寡樹突神經膠瘤、神經鞘瘤、視網膜胚細胞瘤、先天瘤)、脊髓神經纖維瘤、腦脊髓膜瘤、神經膠瘤、肉瘤)；
生殖系統，例如婦科、子宮(子宮內膜癌)、子宮頸(子宮頸癌、癌前子宮頸發育不良)、卵巢(卵巢癌[漿液性囊腺癌、黏液性囊腺癌、未分類癌]、粒層細胞-鞘細胞瘤、史脫力-雷迪格細胞瘤(Sertoli-Leydig cell tumor)、無性胚胎瘤、惡性畸胎瘤)、陰唇(鱗狀細胞癌、上皮內癌、腺癌、纖維肉瘤、黑色素瘤)、陰道(透明細胞癌、鱗狀細胞癌、葡萄形肉瘤(胚胎性橫紋肌肉瘤))、輸卵管(輸卵管癌)及與女性生殖器相關的其他部位；胎盤、陰莖、前列腺、睪丸及與男性生殖器相關的其他部位；
血液系統，例如血液(骨髓白血病[急性和慢性]、急性淋巴母細胞白血病、慢性淋巴球性白血病、骨髓增生性疾病、多發性骨髓瘤、骨髓發育不良症候群)，何杰金氏病，非何杰金氏淋巴瘤[惡性淋巴瘤]；
口腔，例如唇、舌、齒齦、口底、顎和嘴的其他部分、腮腺及唾液腺的其他部分、扁桃腺、口咽、鼻咽、梨狀竇、下咽及在唇、口腔、咽喉內的其他部位；
皮膚，例如惡性黑色素瘤、皮膚黑色素瘤、基底細胞癌、鱗狀細胞癌、卡波西氏肉瘤、發育不良的痣、脂肪瘤、血管瘤、皮膚纖維瘤及瘢痕瘤；
腎上腺：神經胚細胞瘤；及
其他組織，包括結締組織和軟組織、腹膜後腔和腹膜、眼、眼球內黑色素瘤、及附屬器官、乳房、頭或/及頸、肛門部、甲狀腺、副甲狀腺、腎上腺和其他的內分泌腺及相關結構、淋巴結繼發性和不明性惡性贅瘤、呼吸和消化系統繼發性惡性贅瘤及其他部位繼發性惡性贅瘤。
又更特定言之，當連同本發明一起使用時，則「癌」的實例包括選自下列之癌：肺癌(NSCLC和SCLC)、乳癌(包括三陰性乳癌、激素陽性乳癌和HER2陽性乳癌)、卵巢癌、結腸癌、直腸癌、肛門部癌、前列腺癌(包括激素敏感型前列腺癌和激素頑抗型前列腺癌，亦稱為去勢抗性前列腺癌)、肝細胞癌、瀰漫性大型B細胞淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤、黑色素瘤或前述癌中之一或多者之組合。
在本發明之一個實施態樣中，癌症為固態腫瘤。
在一個實施態樣中，癌症為前列腺癌。
在一個實施態樣中，癌症為激素敏感型前列腺癌。
在一個實施態樣中，癌症為去勢抗性前列腺癌，亦稱為激素頑抗型前列腺癌或雄性素非依賴型前列腺癌。
在一個實施態樣中，癌症為非轉移型去勢抗性前列腺癌。
在一個實施態樣中，癌症為轉移型去勢抗性前列腺癌。
在一個實施態樣中，癌症為乳癌。
在一個實施態樣中，癌症為三陰性乳癌。
在一個實施態樣中，癌症為激素陽性乳癌，包括雌性素陽性及/或助孕酮陽性乳癌。
在一個實施態樣中，癌症為HER2陽性乳癌。
在一個實施態樣中，癌症為肝細胞癌。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌。
在一個實施態樣中，癌症為頑抗型小細胞肺癌。
在一個實施態樣中，癌症為復發型小細胞肺癌。
在一個實施態樣中，癌症為頑抗型小細胞肺癌，且個體未經治療。
在一個實施態樣中，癌症為復發型小細胞肺癌，且個體未經治療。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌被分類為有限狀態疾病。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌被分類為擴散期疾病。
在一個實施態樣中，癌症為擴散期疾病小細胞肺癌，且個體未經治療。
在一個實施態樣中，癌症為頑抗型擴散期疾病小細胞肺癌，且個體未經治療。
在一個實施態樣中，癌症為復發型擴散期疾病小細胞肺癌，且個體未經治療。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌係以腫瘤抑制基因TP53的功能喪失為特徵。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌係以腫瘤抑制基因RB1的功能喪失為特徵。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌係以腫瘤抑制基因TP53的功能喪失及腫瘤抑制基因RB1的功能喪失為特徵。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌被分類為有限狀態疾病，且小細胞肺癌係以腫瘤抑制基因TP53的功能喪失為特徵。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌被分類為有限狀態疾病，且小細胞肺癌係以腫瘤抑制基因RB1的功能喪失為特徵。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌被分類為有限狀態疾病，且小細胞肺癌係以腫瘤抑制基因TP53的功能喪失及腫瘤抑制基因RB1的功能喪失為特徵。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌被分類為擴散期疾病，且小細胞肺癌係以腫瘤抑制基因TP53的功能喪失為特徵。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌被分類為擴散期疾病，且小細胞肺癌係以腫瘤抑制基因RB1的功能喪失為特徵。
在一個實施態樣中，癌症為小細胞肺癌，該小細胞肺癌被分類為擴散期疾病，且小細胞肺癌係以腫瘤抑制基因TP53的功能喪失及腫瘤抑制基因RB1的功能喪失為特徵。
在一個實施態樣中，癌症為瀰漫性大型B細胞淋巴瘤。
在一個實施態樣中，癌症為濾泡性淋巴瘤。
在一個實施態樣中，癌症為黑色素瘤。
在一個實施態樣中，癌症為局部晚期型。
在一個實施態樣中，癌症為非轉移型。
在一個實施態樣中，癌症為轉移型。
在一個實施態樣中，癌症為頑抗型。
在一個實施態樣中，癌症為復發型。
在一個實施態樣中，癌症無法耐受標準的治療。
在另一態樣中，本發明提供抑制個體的癌細胞增生之方法，其包含對個體投予包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合治療，其量有效抑制細胞增生。
在另一態樣中，本發明提供抑制個體的癌細胞侵入之方法，其包含對個體投予包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合治療，其量有效抑制細胞侵入。
在另一態樣中，本發明提供抑制個體的癌細胞轉移之方法，其包含對個體投予包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合治療，其量有效抑制細胞轉移。
在另一態樣中，本發明提供誘發個體的癌細胞凋亡之方法，其包含對個體投予包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合治療，其量有效誘發凋亡。
在進一步的態樣中，本發明提供誘發個體的細胞凋亡之方法，其包含對個體投予包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合治療。
「接觸」係指使本發明所使用之化合物或醫藥上可接受之鹽與細胞(例如一種表現EZH2之細胞)以化合物可直接或間接發揮其效應(例如影響EZH2活性)的此方式在一起。接觸可於試管內(亦即在人為環境中，諸如而不限於試驗管或培養基中)或於活體內(亦即在活的生物體內，諸如而不限於小鼠、大鼠或兔子)完成。
在一些實施態樣中，細胞係於細胞系中，諸如癌細胞系。在其他的實施態樣中，細胞係在組織或腫瘤中，且組織或腫瘤可於個體中，包括人類。
劑型及方案
本發明之方法及組合治療的各治療劑可根據醫藥實施而單獨或在包含治療劑及一或多種醫藥上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑的藥劑(在本文亦稱為醫藥組成物)中投予。
如本文所使用之術語「組合治療」係指本發明之組合治療的各治療劑單獨或於藥劑中依序、並行或同時投予。
如本文所使用之術語「依序的」或「依序地」係指本發明之組合治療的各治療劑單獨或於藥劑中一個接一個投予，其中各治療劑可以任何順序投予。當組合治療中的治療劑係呈不同的劑型時，例如一個藥劑為錠劑及另一藥劑為無菌液體，及/或當根據不同的給藥時程投予時，例如一個藥劑係每天投予及第二藥劑較不常投予，諸如每週，則以依序投予特別有用。
如本文所使用之術語「並行」係指在本發明之組合治療中的各治療劑係單獨或於不同的藥劑中投予，其中第二治療劑係在第一治療劑後立即投予，但是治療劑可以任何順序投予。在較佳的實施態樣中，治療劑係並行投予。
如本文所使用之術語「同時」係指本發明之組合治療的各治療劑在相同的藥劑中投予。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽係在投予鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽前投予。
在本發明之一個實施態樣中，鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽係在投予EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽前投予。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽係與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽並行投予。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽係與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽同時投予。
如那些熟習此項技術領域者所理解，組合治療可在個體治療的不同階段期間有用地投予個體。
在本發明之一個實施態樣中，組合治療係投予事先未治療過的個體，亦即初次治療。
在本發明之一個實施態樣中，組合治療係投予在先前以生物治療劑或化學治療劑治療後無法達成持續反應的個體，亦即經歷過治療。
組合治療可在手術移除腫瘤前或後投予，及/或可在輻射治療前、期間或後使用，及/或可在化學治療前、期間或後使用。
投予本發明之化合物可以能夠遞送化合物至作用部位之任何方法實現。該等方法包括經口途徑、十二指腸內途徑、非經腸注射(包括靜脈內、皮下、肌肉內、血管內或輸注)、局部及直腸投予。
可調整劑量方案以提供最優的所欲反應。例如，本發明之組合治療的治療劑可作為單次推注、作為隨時間投予的數個分次劑量投予，或劑量可依治療情況的急迫程度之指示而按比例減少或增加。可能特別有利的是調配呈容易投予及劑量均勻的單位劑型之治療劑。如本文所使用之單位劑型係指適合作為用於欲治療之哺乳動物個體的單位劑量之物理離散單位；各單位含有經計算與所需之醫藥載劑一起產生所欲治療效應的預定量之活性化合物。本發明之單位劑型的規格聽令於及直接取決於(a)化學治療劑之獨特特徵及欲達成之特定的治療性或預防性效應，及(b)在化合技術中用於處理個體敏感性的此種活性化合物之固有限制。
因此，熟習此項技術領域者係基於本文所提供之揭示內容而領會劑量及給藥方案係依照治療技術中熟知的方法調整。亦即可輕易地確立最大耐受劑量，且亦可測定提供個體可檢測的治療效益之有效量，同樣可測定投予各藥劑以提供個體可檢測的治療效益之時間要求。據此，儘管本文例示特定的劑量及投予方案，但是該等實例不以任何方式限制在實施本發明時可提供個體的劑量及投予方案。
應注意的是劑量值可隨欲緩解之病況的類型及嚴重性而改變，且可包括單一或多次劑量。應進一步理解用於任何特定個體之特定的劑量方案應根據個體需求及執行或監督組成物投予的人之專業判斷而隨時間調整，該調整係考慮以下因素：諸如疾患或病況的嚴重性、投予速率、化合物的處置及處方醫師的斟酌。本文提出之劑量範圍僅為例示且不意欲限制所主張之組成物的範疇或實施。例如，劑量可基於藥物動力學或藥效學參數而調整，該等參數可包括臨床效應，諸如毒性效應及/或實驗室值。因此，本發明包含如熟習此項技術領域者所測定之患者內劑量遞增。測定用於投予化學治療劑之適當的劑量及方案為相關技術中所熟知，且一旦提供本文所揭示之指導，則熟習此項技術領域者將理解所包含之該測定。
在一些實施態樣中，在組合治療中的治療劑之至少一者係使用與作為單一療法用於治療相同的癌症時通常所使用之劑量方案相同的劑量方案(治療的劑量、頻率及持續期間)投予。在其他的實施態樣中，個體接受在組合治療中的治療劑之至少一者的總量低於使用相同的藥劑作為單一療法時的總量，例如較低的治療劑劑量、減少的給藥頻率及/或較短的給藥持續期間。
EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽的有效劑量係在每天以每公斤體重計約0.001至約100 mg之範圍內的單次或分次劑量，較佳為約1至約35 mg/kg/天。用於70 kg的人類之此劑量將達到約0.01至約7 g/天，較佳為約0.02至約2.5 g/天。在一些事例中，低於前述範圍下限的劑量水平可能綽綽有餘，而在其他例子中，可使用還更大的劑量而不引起任何有害的副作用，只要將此等較大的劑量先分成數個小劑量供全天投予。
在一個實施態樣中，EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽係以每天約10 mg至約7000 mg，較佳為每天約20 mg至約2500 mg，及更佳為每天約50 mg至約1000 mg之日劑量投予。在一個實施態樣中，EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽係以每天約500 mg之日劑量投予。
在較佳的實施態樣中，EZH2抑制劑為5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮或其醫藥上可接受之鹽，其係以每天約50 mg至約2000 mg、每天約50 mg、每天約100 mg、每天約150 mg、每天約200 mg、每天約250 mg、每天約300 mg、每天約350 mg、每天約400 mg、每天約450 mg、每天約500 mg、每天約550 mg、每天約600 mg、每天約650 mg、每天約700 mg、每天約750 mg、每天約800 mg、每天約850 mg、每天約900 mg、每天約950 mg、每天約1000 mg、每天約1100 mg、每天約1200 mg、每天約1300 mg、每天約1400 mg或每天約1500 mg之日劑量投予。此劑量可隨意地再分成小劑量，例如每天150 mg之劑量可能以每天兩次的75 mg劑量給藥。
在一個實施態樣中，化學治療劑為依托泊苷，該依托泊苷係依照批准的標籤經靜脈內投予，例如在第1至5天以每天一次50至100 mg/m2 之劑量；或在第1、3及5天以每天一次50至100 mg/m2 之劑量。在一個實例中，依托泊苷可在每21天週期的第1、2及3天以80至120 mg/m2 之劑量投予，經1、2、3、4、5或6個週期。在一個實施態樣中，化學治療劑(例如依托泊苷)係與鉑為底質之抗贅瘤劑(例如順鉑(cisplatin)或卡鉑)組合使用。
在一個實施態樣中，鉑為底質之抗贅瘤劑為順鉑，該順鉑係依照批准的標籤經靜脈內投予。在一個實例中，順鉑可在每21天週期的第1天以60至80 mg/m2 之劑量投予，經1、2、3、4、5或6個週期。
在一個實施態樣中，鉑為底質之抗贅瘤劑為卡鉑，該卡鉑係依照批准的標籤經靜脈內投予。在一個實例中，卡鉑可在每21天週期的第1天投予以達成5至6 mg/mL/min之初始目標AUC，經1、2、3、4、5或6個週期。在一個實例中，卡鉑可在每21天週期的第1天以400 mg/m2 之劑量投予，經1、2、3、4、5或6個週期。
可依需要進行重複的投予或給藥方案，或調整投予或給藥方案以達成所欲治療。如本文所使用之「連續給藥時程」為無需劑量中斷的投予或給藥方案，例如沒有治療休息日。在治療週期之間無需劑量中斷而重複21或28天的治療週期為連續給藥時程的實例。在實施態樣中，本發明之組合的化合物可以連續的給藥時程投予。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽係一起以有效治療癌症的量給藥。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽係一起以具有協同性的量給藥。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽係以非標準的給藥方案給藥。
在本發明之一個實施態樣中，EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽係以低劑量方案給藥。
醫藥組成物及投予途徑
「醫藥組成物」係指作為活性成分的本文所述之治療劑中之一或多者或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物、水合物或前藥與至少一種醫藥上可接受之載劑或賦形劑的混合物。在一些實施態樣中，醫藥組成物包含二或更多醫藥上可接受之載劑及/或賦形劑。
如本文所使用之「醫藥上可接受之載劑」係指不對生物體造成顯著的刺激且不消除活性化合物或治療劑的生物活性及特性之載劑或稀釋劑。
在一個實施態樣中，本發明關於包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽，及醫藥上可接受之載劑的醫藥組成物。
醫藥上可接受之載劑可包含任何習知的醫藥載劑或賦形劑。載劑及/或賦形劑的選擇很大的程度取決於下列因素：諸如特定的投予模式、賦形劑對溶解度和穩定度的效應及劑型的本性。
適合的醫藥載劑包括惰性稀釋劑或填充劑、水及各種有機溶劑(諸如水合物和溶劑合物)。若要求時，醫藥組成物可含有額外的成分，諸如調味劑、結合劑、賦形劑及類似者。因此，可使用含有各種賦形劑(諸如檸檬酸)連同各種崩解劑(諸如澱粉、海藻酸和特定的複合矽酸鹽)及結合劑(諸如蔗糖、明膠和阿拉伯膠)錠劑用於經口投予。賦形劑的非限制性實例包括碳酸鈣、磷酸鈣、各種糖和澱粉型式、纖維素衍生物、明膠、植物油及聚乙二醇。另外，常使用以製錠為目的潤滑劑，諸如硬脂酸鎂、月桂基硫酸鈉和滑石。類似型式的固體組成物亦可用於軟及硬填充式明膠膠囊中。材料的非限制性實例因此包括乳糖(lactose或milk sugar)和高分子量聚乙二醇。當要求以水性懸浮液或酏劑用於經口投予時，則其中的活性化合物可與下列者組合：各種甜味劑或調味劑、著色物質或染料及(若要求時)乳化劑或懸浮劑，連同稀釋劑(諸如水、乙醇、丙二醇、甘油)或彼之組合。
醫藥組成物可例如呈適合於經口投予的形式，如錠劑、膠囊、藥丸、粉末、持續釋放型調配物、溶液或懸浮液，適合於非經腸注射的形式，如無菌溶液、懸浮液或乳液，適合於局部投予的形式，如軟膏或乳膏，或適合於直腸投予的形式，如栓劑。
例示性非經腸投予形式包括活性化合物於無菌水性溶液(例如水性丙二醇或右旋糖溶液)中的溶液或懸浮液。若要求時，可將此等劑型適當地緩衝。
醫藥組成物可呈適合於單一投予精確劑量的單位劑型。
適合於遞送本發明化合物之組合治療的治療劑之醫藥組成物及彼之製備方法將為那些熟習此項技術領域者可輕易地明白。此等組成物及彼之製備方法可見於例如第19版’Remington’s Pharmaceutical Sciences’ (Mack Publishing Company, 1995)中，將其揭示內容以其全文併入本文以供參考。
本發明之組合治療的治療劑可經口投予。經口投予可包含吞嚥，使得治療劑進入胃腸道中，或可使用頰內或舌下投予，藉此使治療劑自嘴巴直接進入血流中。
適合於經口投予的調配物包括固體調配物，諸如錠劑，含有微粒、液體或粉末的膠囊、菱形錠劑(包括以液體填充)、咀嚼劑、多和奈米微粒、凝膠、固溶體、脂質體、薄膜(包括黏膜片)、珠粒劑、噴霧劑及液體調配物。
液體調配物包括懸浮液、溶液、糖漿和酏劑。此等調配物可用作為軟或硬膠囊中的填充劑且通常包括載劑(例如水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甲基纖維素或適合的油)及一或多種乳化劑及/或懸浮劑。液體調配物亦可藉由重組例如來自小藥囊的固體而製得。
本發明之組合治療的治療劑亦可用於快速溶解、快速崩解劑型中，諸如那些在Liang和Chen (2001)之Expert Opinion in Therapeutic Patents,11 (6), 981-986中所述者，將其揭示內容以其全文併入本文以供參考。
用於錠劑劑型的治療劑可構成劑型的1 wt%至80 wt%，更典型為劑型的5 wt%至60 wt%。除了活性劑以外，錠劑通常含有崩解劑。崩解劑的實例包括澱粉乙醇酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈣、交聯羧甲基纖維素鈉(croscarmellose sodium)、交聯聚維酮(crospovidone)、聚乙烯基吡咯啶酮、甲基纖維素、微晶纖維素、經低碳烷基取代之羥丙基纖維素、澱粉、預糊化澱粉和海藻酸鈉。崩解劑通常可構成劑型的1 wt%至25 wt%，較佳為5 wt%至20 wt%。
通常使用結合劑賦予錠劑調配物之內聚特性。適合的結合劑包括微晶纖維素、明膠、糖、聚乙二醇、天然膠和合成膠、聚乙烯基吡咯啶酮、預糊化澱粉、羥丙基纖維素和羥丙基甲基纖維素。錠劑亦可含有稀釋劑，諸如乳糖(單一水合物、經噴霧乾燥之單一水合物、無水物及類似者)、甘露醇、木糖醇、右旋糖、蔗糖、山梨醇、微晶纖維素、澱粉和磷酸氫鈣二水合物。
錠劑亦可隨意地包括表面活性劑(諸如月桂基硫酸鈉和聚山梨醇酯80)及助滑劑(諸如二氧化矽和滑石)。當存在時，表面活性劑的量通常為錠劑的0.2 wt%至5 wt%，且滑動劑的量通常為錠劑的0.2 wt%至1 wt%。
錠劑通常亦含有潤滑劑，諸如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅、硬脂基富馬酸鈉和硬脂酸鎂與月桂基硫酸鈉之混合物。潤滑劑通常係以錠劑的0.25 wt%至10 wt%的量存在，較佳為0.5 wt%至3 wt%。
其他習知的成分包括抗氧化劑、著色劑、調味劑、保存劑及味覺掩蔽劑。
例示性錠劑可含有至多約80 wt%之活性劑、約10 wt%至約90 wt%之結合劑、約0 wt%至約85 wt%之稀釋劑、約2 wt%至約10 wt%之崩解劑及約0.25 wt%至約10 wt%之潤滑劑。
可將錠劑摻合物直接或以滾筒壓縮以形成錠劑。另一選擇地，錠劑摻合物或摻合物的一部分可在製錠前經濕式-、乾式-或熔融造粒、熔融凍凝或擠壓。最後的調配物可包括一或多層且可經包膜或未經包膜；或膠囊化。
錠劑調配物詳細地討論於H. Lieberman和L. Lachman之“Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol. 1”, Marcel Dekker, N. Y., N. Y., 1980 (ISBN 0-8247-6918-X)中，將其揭示內容以其全文併入本文以供參考。
用於經口投予之固體調配物可調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾釋放型調配物包括延遲釋放、持續釋放、脈衝釋放、控制釋放、靶定釋放及程控化釋放。
適合的修飾釋放型調配物說明於美國專利第6,106,864號中。其他適合的釋放技術之細節(諸如高能量分散、及滲透、及包膜粒子)可見於Verma等人之Pharmaceutical Technology On-line , 25(2), 1-14 (2001)中。利用咀嚼膠達成控制釋放說明於WO 00/35298中。將該等參考內容以彼之全文併入本文以供參考。
非經腸投予
本發明之組合治療的治療劑亦可直接投予血液、肌肉或內部器官中。適合於非經腸投予的方式包括靜脈內、動脈內、腹膜內、椎管內、室內、尿道內、胸骨內、顱內、肌肉內和皮下。適合於非經腸投予之器材包括針(包括微型針)注射器、無針注射器和輸注技術。
非經腸調配物通常為水性溶液，其可含有賦形劑，諸如鹽、碳氫化合物和緩衝劑(較佳為3至9之pH)，但對一些應用而言，該調配物可更適合地調配成無菌非水性溶液或與適合的媒劑(諸如無菌的無熱源水)結合使用的乾燥形式。
在無菌條件下製備非經腸調配物(例如藉由冷凍乾燥)可使用那些熟習此項技術領域者熟知的標準醫藥技術輕易地完成。
在製備非經腸溶液所使用之治療劑的溶解度可藉由使用適當的調配技術而增加，諸如併入溶解增強劑。
用於非經腸投予之調配物可調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾釋放型調配物包括延遲釋放、持續釋放、脈衝釋放、控制釋放、靶定釋放及程控化釋放。因此，本發明之組合治療的治療劑可能地調配成以植入式儲積物投予之固體、半固體或觸變性液體，以提供修飾釋放之活性化合物。此等調配物的實例包括塗藥支架和PGLA微球。
本發明之組合治療的治療劑亦可能地經局部投予皮膚或黏膜，亦即經皮膚或透皮投予。出於此目的之典型的調配物包括凝膠、水凝膠、洗劑、溶液、乳膏、軟膏、撒布劑、敷料、發泡體、薄膜、皮膚貼片、薄片、植入物、海綿、纖維、繃帶和微乳液。亦可使用脂質體。典型的載劑包括醇、水、礦物油、液態礦脂、白凡士林、甘油、聚乙二醇和丙二醇。可併入穿透增強劑；參見例如Finnin和Morgan之J Pharm Sci,88 (10), 955-958 (1999年10月)。其他的局部投予方式包括以電穿孔、電離子透入、超聲波透入、超聲波導入和微型針或無針注射(例如Powderject™、Bioject™等)遞送。將該等參考內容以彼之全文併入本文供參考。
用於局部投予之調配物可調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾釋放型調配物包括延遲釋放、持續釋放、脈衝釋放、控制釋放、靶定釋放及程控化釋放。
本發明之組合治療的治療劑亦可能地經鼻內或吸入投予，通常呈來自乾粉吸入器的乾粉形式(單獨、成為混合物，例如與乳糖的乾摻合物，或成為混合型組分粒子，例如與磷脂(諸如磷脂醯膽鹼)混合)，或呈來自加壓容器、泵、噴霧器、霧化器(較佳為使用電流體動力學產生細霧的霧化器)或氣霧器的煙霧噴霧形式，其使用或未使用適合的推噴劑，諸如1,1,1,2-四氟乙烷或1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷。用於鼻內的粉末可包括生物黏著劑，例如聚葡萄胺糖或環糊精。
加壓容器、泵、噴霧器、霧化器或氣霧器可含有本發明化合物的溶液或懸浮液，其包含例如乙醇、水性乙醇或適合於活性物分散、溶解或延長釋放之替代劑、作為溶劑的推進劑及隨意的界面活性劑，諸如去水山梨糖醇三油酸酯、油酸或寡乳酸。
在以乾粉或懸浮液調配物使用前，先將化合物微粉化至適合於吸入遞送的大小(通常小於5微米)。這可藉由形成奈米粒子之任何適當的粉碎方法(諸如螺旋噴射研磨、流化床噴射研磨、超臨界流體處理)、高壓均質化或噴霧乾燥而達成。
在吸入器或吹藥器中使用的膠囊(例如自明膠或HPMC製成)、泡殼及藥筒可經調配以含有治療劑、適合的粉末基底(諸如乳糖或澱粉)與性能修飾劑(諸如l-白胺酸、甘露醇或硬脂酸鎂)之粉末混合物。乳糖可為無水物或呈單一水合物形式，以後者較佳。其他適合的賦形劑包括右旋糖、葡萄糖、麥芽糖、山梨醇、木糖醇、果糖、蔗糖和繭糖。
適合於使用電流體動力學以產生細霧的霧化器中使用的溶液調配物可以每一致動含有1 μg至20 mg治療劑且致動體積可為1 μL至100 μL不等。典型的調配物包括治療劑、丙二醇、無菌水、乙醇及氯化鈉。可用於代替丙二醇的可替代溶劑包括甘油和聚乙二醇。
可將適合的調味劑(諸如薄荷醇和左旋薄荷醇)或甜味劑(諸如糖精或糖精鈉)添加至意欲用於吸入/鼻內投予的那些調配物中。
用於吸入/鼻內投予之調配物可使用例如聚(DL-乳酸-共乙醇酸)(PGLA)調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾釋放型調配物包括延遲釋放、持續釋放、脈衝釋放、控制釋放、靶定釋放及程控化釋放。
在乾粉吸入器及煙霧劑的例子中，劑量單位係藉助於遞送計量之閥測定。通常安排依照本發明的單位以投予含有所欲量的治療劑之計量或〝噴氣〞。每日總劑量可以單一劑量或更常以分次劑量供全天投予。
本發明之組合治療的治療劑可經直腸或陰道投予，例如呈栓劑、子宮托或灌腸劑形式。可可脂為傳統的栓劑基底，但可在適當時使用各種替代物。
用於直腸/陰道投予之調配物可調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾型調配物包括延遲釋放、持續釋放、脈衝釋放、控制釋放、靶定釋放及程控化釋放。
本發明之組合治療的治療劑亦可能地直接投予眼或耳，通常呈經pH調整之等張性無菌食鹽水中的微粉化懸浮液或溶液的滴劑形式。適合於眼及耳投予之其他調配物可包括軟膏、生物可降解性(例如可吸收性凝膠海綿、膠原)和生物不可降解性(例如聚矽氧)植入物、薄片、鏡片及微粒狀或多孔狀系統，諸如類脂囊泡(noisome)或脂質體。可將下列的聚合物與保存劑(諸如氯化烷基二甲基苯甲銨(benzalkonium chloride))合併在一起，諸如經交聯之聚丙烯酸、聚乙烯醇、玻尿酸、纖維素聚合物(例如羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素或甲基纖維素)或雜多糖聚合物(例如結蘭膠(gelan gum))。此等調配物亦可以電離子透入法遞送。
在一個實施態樣中，可用於本發明之組合治療的醫藥組成物僅包含單一治療劑，例如僅一種選自下列的單一劑：(a) EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽；(b)鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽；及(c)化學治療劑或其醫藥上可接受之鹽。
在一個實施態樣中，可用於本發明之組合治療的醫藥組成物包含二或三種治療劑，例如二或三種選自下列的藥劑：(a) EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽；(b)鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽；及(c)化學治療劑或其醫藥上可接受之鹽。
在一個實施態樣中，可用於本發明之組合治療的醫藥組成物包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與化學治療劑或其醫藥上可接受之鹽二者。
在一個實施態樣中，可用於本發明之組合治療的醫藥組成物包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽二者。
套組
本發明之組合治療的治療劑可合宜地組合成適合於共同投予組成物之套組形式。
在一個態樣中，本發明關於包含第一容器、第二容器及仿單的套組，其中第一容器包含至少一個劑量的EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽，第二容器包含至少一個劑量的鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽，且仿單包含使用該等藥劑以治療個體的癌症之指示說明。
在一個態樣中，本發明關於包含第一容器、第二容器、第三容器及仿單的套組，其中第一容器包含至少一個劑量的EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽；第二容器包含至少一個劑量的鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽；第三容器包含至少一個劑量的化學治療劑或其醫藥上可接受之鹽；且仿單包含使用該等藥劑以治療個體的癌症之指示說明。在一個實施態樣中，本發明之套組可包含呈醫藥組成物形式的活性劑中之一或多者，該醫藥組成物包含活性劑或其醫藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之載劑。套組可含有單獨保留該組成物之裝置，諸如容器、分次瓶或分次箔包。此種套組的實例為用於包裝錠劑、膠囊及類似者之常見的泡殼包裝。
套組可特別適合於投予不同的劑型(例如經口和非經腸)、在不同的劑量間隔投予單獨的組成物或相互滴定單獨的組成物。為了協助遵守醫囑，套組通常包括投予指示且可具備有記憶輔助工具。套組可進一步包含可用於投予藥劑的其他材料，諸如稀釋劑、過濾器、IV袋和管線、針和注射器及類似者。
其他的治療劑
在進一步的態樣中，本發明之方法及組合治療可另外包含投予其他的抗癌劑，諸如抗腫瘤劑、抗血管生成劑、信號轉導抑制劑和抗增生劑劑，該等量一起有效治療該癌症。在一些此等實施態樣中，抗腫瘤劑係選自由下列者所組成之群組：有絲分裂抑制劑、烷化劑、抗代謝物、嵌入抗生素、生長因子抑制劑、輻射、細胞週期抑制劑、酵素、拓樸異構酶抑制劑、生物反應修飾劑、抗體、胞毒劑、抗激素劑、雄性素剝奪療法和抗雄性素。在一些實施態樣中，抗腫瘤劑係選自抗體，例如抗PD-1抗體[例如MDX-1106 (納武單抗(nivolumab))、MK-3475 (派立珠單抗(pembrolizumab))、CT-011 (皮立珠單抗(pidilizumab))、REGN2810 (舍米匹單抗(cemiplimab))、BGB-A317 (緹勒珠單抗(tislelizumab)或BGB-A317)、mAb7 (RN888或PF-06801591)、mAb15、AMP-224 (B7-DCIg)、AGEN-2034w (aka AGEN-2034)和司帕塔利單抗(spartalizumab)]、抗PD-L1抗體[例如YW243.55.S70、MDX-1105 (BMS-936559)、MPDL3280A (阿替珠單抗(atezolizumab))、MEDI4736 (德瓦魯單抗(durvalumab))和MSB0010718C (阿維魯單抗(avelumab))]及抗CTLA-4抗體[例如伊匹單抗(ipilimumab)、曲美目單抗(tremelimumab)和AGEN-1884]。
納武單抗係揭示於例如2006年11月16日發表之PCT發表案第WO2006/121168號(在2006年5月02日申請之國際專利申請案第PCT/JP2006/309606號)。派立珠單抗係揭示於例如2009年9月17日發表之PCT發表案第WO2009114335號(在2009年3月03日申請之國際專利申請案第PCT/US2009/035825號)。皮立珠單抗係揭示於例如2009年8月20日發表之PCT發表案第WO2009/101611號(在2009年2月11日申請之國際專利申請案第PCT/IL2009/000153號)。舍米匹單抗係揭示於例如2011年6月03日發表之PCT發表案第WO2011066389號(在2010年11月24日申請之國際專利申請案第PCT/US2010/058007號)。BGB-A317係揭示於例如2015年3月19日發表之PCT發表案第WO2015035606號(在2013年9月13日申請之國際專利申請案第PCT/CN2013/083467號)。mAb7 (RN888或PF-06801591)係揭示於例如2016年6月16日發表之PCT發表案第WO2016/092419號(在2015年12月02日申請之國際專利申請案第PCT/IB2015/059268號)。mAb15係揭示於例如在2016年6月16日發表之PCT發表案第WO2016/092419號(在2015年12月02日申請之國際專利申請案第PCT/IB2015/059268號)。AMP-224 (B7-DCIg)係揭示於例如2010年3月11日發表之PCT發表案第WO2010/027827號(在2009年8月25日申請之國際專利申請案第PCT/US2009/054969號)和2011年月6日03發表之PCT發表案第WO2011066342號(在2010年11月24日申請之國際專利申請案第PCT/US2010/057940號)。AGEN-2034w (aka AGEN-2034)係揭示於例如2017年3月09日發表之PCT發表案第WO2017040790號(國際專利申請案第PCT/US2016/049913號)。司帕塔利單抗係揭示於例如2015年7月30日發表之PCT發表案第WO/2015112900號(在2015年1月23日申請之國際專利申請案第PCT/US2015/012754號)。
YW243.55.S70係揭示於例如2010年7月08日發表之PCT發表案第WO2010077634號(在2009年12月08日申請之國際專利申請案第PCT/US2009/067104號)。MDX-1105 (BMS-936559)係揭示於例如2018年6月14日發表之PCT發表案第WO2018106529號(在2017年12月01日申請之國際專利申請案第PCT/US2017/064207號)和2007年1月11日發表之PCT發表案第WO2007005874號(在2006年6月30日申請之國際專利申請案第PCT/US2006/026046號)。MPDL3280A (阿替珠單抗)係揭示於例如2018年6月14日發表之PCT發表案第WO2018106529號(在2017年12月01日申請之國際專利申請案第PCT/US2017/064207號)。MEDI4736 (德瓦魯單抗)係揭示於例如2011年6月30日發表之PCT發表案第WO2011066389號(在2010年11月24日申請之國際專利申請案第PCT/US2010/058007號)和2018年6月14日發表之PCT發表案第WO2018106529號(在2017年12月01日申請之國際專利申請案第PCT/US2017/064207號)。MSB0010718C (阿維魯單抗)係揭示於例如2013年6月06日發表之PCT發表案第WO13079174號(在2012年11月21日申請之國際專利申請案第PCT/EP2012/004822號)。伊匹單抗係作為抗體10D1揭示於例如2001年3月01日發表之PCT發表案第WO01/14424號(在2000年8月24日申請之國際專利申請案第PCT/US00/23356號)以及2015年10月08日發表之美國專利申請發表案第20150283234號(在2015年4月20日申請之美國專利申請案第14/437,029號)。曲美目單抗係作為抗體11.2.1揭示於例如2004年1月27日准予之美國專利第6,682,736號(在1999年12月23日申請之美國專利申請案第09/472,087號)。AGEN-1884係揭示於例如2016年12月08日發表之PCT發表案第WO2016196237號的實施例1 (在2016年5月27日申請之國際專利申請案第PCT/US2016/034508號)。
在本發明之方法及組合治療的一個實施態樣中，方案亦包括其他的活性劑，其中其他的活性劑為依托泊苷。
本發明的該等及其他態樣(包括下文列示之例示性特定的實施態樣)係自內含於本文的教導而明白。
實施例
化合物1為國際專利申請案PCT/IB2015/054272中所揭示的5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮，該申請案係於2015年12月23日以WO 2015/193765發表。
化合物2為專利申請案PCT/IB2013/060682中所揭示的5,8-二氯-7-(3,5-二甲基-1,2-噁唑-4-基)-2-[4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮，該申請案係於2014年6月26日以WO 2014/097041發表。
除非另有其他指定，否則化合物1和化合物2係於DMSO中製備成儲備溶液，若必要時進一步稀釋。
在本文使用下列的縮寫：
ANCOVA-共變異數分析
BID-每天兩次
BW-體重
BWL-體重減輕
CR-完全反應
DMSO-二甲基亞碸
IP-腹膜內，
N或n-個體數量
NOD/SCID-非肥胖性糖尿病/重症聯合免疫缺陷
NS-不顯著
NSG-NOD SCID γ
PCR-聚合酶鏈反應
PO-經嘴
QD-每天一次
qRT-定量即時
RT-反轉錄
SD-標準偏差
SEM-平均值的標準誤差
TGI-腫瘤生長抑制
WT-野生型。
實施例1至9之方法及程序
細胞培養：SCLC細胞系DMS114係自美國菌種中心(American Type Culture Collection)(美國菌種中心，ATCC CRL-2066)獲得且在加入10%之胎牛血清(FBS)(Gibco/Life Technologies，目錄號10082-147)及1%之Pen/Strep的威冒斯氏(Waymouth’s)培養基MB 752/1 (Gibco/Life Technologies，目錄號11220-035)中培養。COR-L88 (92031917)細胞係購自ECACC。H841 (CRL-5845)、H446 (HTB-171)、NCI-H889 (CRL-5817)、DMS79 (CRL2049)及H69 (HTB-119)係購自美國菌種中心且在建議之培養基(H841：以5%之FBS補充之HITES培養基；H446、COR-L88、NCI-H889、DMS79及H69：RPMI-1640培養基+10%之FBS)中培養。RPMI1640係購自Invitrogen (目錄號11875-093；批號1694256)。HITES培養基係根據美國菌種中心的說明以下列組分的混合物補充之DMEM:F12培養基(Invitrogen，目錄號11320-033；批號1677218)的基本培養基製備：0.005 mg/ml之胰島素和0.01 mg/ml之運鐵蛋白、30nM亞硒酸鈉(ITS-X，Invitrogen，目錄號51500-056，批號1582940)、10 nM氫皮質酮(Sigma，目錄號H0888-1G，批號061M1142V)、10 nM β-雌二醇(Sigma，目錄號E2257-1mg，批號107K8630)、用於4.5 mM之最終濃度的額外2mM L-麩醯胺酸(Invitrogen，目錄號25030-081，批號1552995)、5%之胎牛血清(Invitrogen，目錄號10099-141，批號1565565)。所有的細胞皆維持在37℃與5%之二氧化碳(CO2 )的加濕培育器中。
細胞內西方墨點程序：令細胞以每一槽孔1,500個細胞平鋪在黑色、平坦、透明底部的96槽孔盤(Falcon，BD-353219)中。在隔天，令化合物以3倍稀釋添加至槽孔中，具有3 mM至0.1 nM之最終濃度範圍，留下一些空的槽孔用於對照物：「僅DMSO (第1和第2抗體)」及「僅DMSO (僅第2抗體)」。在72小時後，移出培養基且添加在磷酸鹽緩衝之食鹽水(PBS，Gibco Life Technologies，目錄號10010-023)中的3.7%之甲醛，在通風櫥中經20分鐘固著。接著移出甲醛且添加150 ul冰冷之甲醇(MeOH)，使細胞滲透。包裹盤且冷凍隔夜。在隔天，移出MeOH，添加Odyssey阻斷緩衝液(150 ml)，且令盤保持在旋轉振盪器(VWR)上2小時。移出阻斷緩衝液且添加事先在50 ul Odyssey緩衝液(LiCor #927‑40000)中以1：800稀釋之H3K27Me3抗體(Cell Signaling 9733)。接著令盤放置在冷卻室中的旋轉振盪器(VWR)上且在4℃下培育隔夜。在隔天，移出一級抗體，令細胞以1x PBS+0.1%之Tween 20 (PBST)共清洗5次，每次5分鐘。令二級抗體(Cell Signaling 5151抗兔子)在Odyssey緩衝液(50 μl)中以1：800稀釋且與用於歸一化之於Odyssey緩衝液中以1：10,000 (5 mM)稀釋之DRAQ5試劑(Cell Signalling #4084)一起添加至各槽孔中。在2小時後，移出二級抗體，令盤再以PBST清洗5次，每次5分鐘，且在Odyssey LiCoR儀器(焦距3 mm；使用800 nm (用於二級)連同700 nm過濾器(用於DRAQ5))上檢測螢光信號。IC50 值係使用四參數擬合與7.02版GraphPad Prism計算，且計算所有生物學複製物的算術平均值。
用於DMS114 SCLC細胞之細胞生長抑制檢定法：令DMS114 SCLC細胞以10,000個細胞/槽孔之密度平鋪在透明、平坦底部的12槽孔聚苯乙烯組織培養盤(Falcon，目錄號353225)中的上述之完全細胞培養基(1 mL/槽孔)中。令盤在37℃及5%之CO2 下經隔夜培育16小時。接著令細胞以3 μM之最高濃度開始的10點、3倍連續稀釋之化合物1治療3天。在3天後，令來自每一個別劑量治療之細胞以胰蛋白酶-EDTA (0.25%)(Gibco/Life Technologies，目錄號25200-056)分離，再懸浮於新鮮培養基中且使用Vi-Cell細胞計數器及細胞生存率分析儀(Beckman Coulter，目錄號383556)計數。接著令來自每一個別劑量治療之細胞以500個細胞/槽孔之密度再平鋪於96槽孔超低吸附(ULA)盤(Corning Inc，目錄號7007)中的如上述之完全細胞培養基(100 mL/槽孔)中。令細胞在37℃及5%之CO2 下再經隔夜培育16小時。在隔天，添加如上文提出之各自劑量的化合物1，使用以3 μM之最高濃度開始的10點、3倍連續稀釋之化合物1。接著令盤在37℃及5%之CO2 下再培育14至18天，每3天根據上文所述之給藥時程補給新鮮培養基及藥物。令細胞以化合物共治療17至21天。在培育期結束時，令19 mL AlamarBlue (ThermoFisher，目錄號DAL102)添加至各槽孔中且令盤在37℃下培育16小時。接著在使用540 nm至570 nm螢光激發波長(激發峰為570 nm)及在580 nm至610nm發射(發射峰為585 nm)之Infinite M200 Pro微量盤讀取機(Tecan，目錄號396235)中讀取盤。IC50 值係使用7.02版GraphPad Prism中的非線性迴歸劑量反應曲線擬合來計算。
H841、H446及H69 SCLC細胞之細胞生長抑制檢定法：令H841、H446及H69細胞以每一槽孔100,000個細胞之密度平鋪在一式三份用於各細胞系之12槽孔盤中的上述之彼等建議的完全培養基(1 mL/槽孔)中。令盤在37℃及5%之CO2 下培育隔夜。在DMSO中製備50 mM化合物1儲備液且分配成數個一次性使用的等分試樣及貯存在-20℃。令用於製備化合物盤的化合物1在DMSO中稀釋成3 mM且接著在DMSO進行3倍連續稀釋(總共10個劑量)。在細胞平鋪後24小時，令1 µl藥物稀釋液與DMSO對照物一起添加至含有在1 ml培養基中的細胞(1000×稀釋)之12槽孔盤的適當槽孔中。在各槽孔中的所有稀釋後，藥物的最終濃度為3、1、0.333、0.111、0.037、0.012、0.004、0.001、0.0005、0.0002 µM。令DMSO添加至3個複製的對照槽孔中。以手搖動盤而令藥物適當地混合。接著令細胞維持在37℃之培育器中。在3或4天後，細胞係取決於細胞生長速率而以1：2或1：3分割。關於懸浮型細胞，令細胞使用1 ml吸管徹底混合且接著移出500 µl (1：2分割)或667 µl (1：3分割)細胞。關於附著型細胞，令細胞胰蛋白酶化且以1：2或1：3分割。令相同體積的新鮮培養基添加至各槽孔中，使體積達到1 ml。若細胞為半附著，則一起收集上清液中的懸浮型細胞與胰蛋白酶化之附著型細胞。令新鮮藥物添加至如早先說明之各槽孔中。分割細胞且每3至4天同樣地重複培養基/藥物補給，直到第21天。在第21天，在顯微鏡下觀察細胞形態且記錄在化合物治療時的任何形態改變。關於懸浮型細胞，接著令細胞以移液重複地混合，自一式三份槽孔吸出且轉移至15 mL試管中。關於附著型細胞，移出上清液且令500 µl胰蛋白酶添加至各槽孔中。在細胞自底部分離後，令1 ml完全培養基添加至各槽孔中。細胞破碎成單細胞懸浮液，轉移至15 mL試管中且以1000 rpm離心5分鐘。移出上清液且基於沉澱物大小而令來自一式三份槽孔的細胞再懸浮於1000至3000 µl培養基中。令50至100 µl體積自細胞+培養基槽孔轉移至底部平坦的黑色96槽孔CTG盤(Corning，目錄號CLS3904)中且添加等體積的CTG試劑(來自Promega，目錄號G7571，批號0000089186)。調整細胞懸浮液的體積以確保信號在CTG檢定的線性範圍內(細胞不太多且也不太少)。接著令細胞在暗處搖動5分鐘。細胞生存率係使用根據製造商的說明測量。
為了評定組合EZH2抑制劑與照護標準的化學治療劑(順鉑和依托泊苷，其可作為化學治療的照護標準而單獨或組合使用)之協同性抗增生效應，令上文所述之每一細胞系以限定劑量的化合物1在培養燒瓶中預治療9天，繼而在96槽孔盤中與順鉑或依托泊苷共同治療4天。對細胞增生的效應係使用依照本文所述之方法的CellTiter-Glo細胞增生檢定法評定，且使用Chalice Bioinfomatics軟體(Horizon Discovery，1.6版)分析結果及計算協同性分數。數據係相對於未治療之DMSO/DMSO樣品歸一化且以未治療之樣品的%表示。數據係使用Loewe加成性組合模式分析且使用過度屬性(excess attribute)評估所觀察的數據之量值，其超過以Loewe模式預測的各劑量之加成效應。
SLFN11西方墨點程序：令SCLC細胞系以DMSO中的500 nM化合物1治療7天且接著使用西方墨點評定SLFN11蛋白質含量的變化。在藥物治療後，令細胞胰蛋白酶化(附著型細胞)，藉由在室溫下以2000 rpm離心而收穫，以PBS清洗，繼而以離心收集細胞沉澱物。令細胞沉澱物再懸浮於適當體積的RIPA緩衝液(Sigma；目錄號R0278；每5至10x105細胞100 ul)中，在冰上培育10至15分鐘，以12,000 g及4℃離心10分鐘且接著收集上清液。令15 ug總蛋白質溶解物在4至12%之NuPAGE™ Bis-Tris蛋白質凝膠(NP0336Box)上以1xNuPAGE™ MOPS SDS電泳緩衝液(NP0001)運作。令凝膠在冰上於80V下20分鐘及接著於150V下操作60分鐘。根據製造商的說明以iBlot2乾式墨點系統(目錄號：IB21001)與iBlot2常規硝化纖維素轉移積層(Regular Nitrocellulose Transfer Stack)(目錄號：IB23001)一起用於蛋白質轉移。組裝iBlot2常規硝化纖維素轉移積層且放入iBlot2乾式墨點系統中。轉移係使用根據製造商說明的模板方法P3在20 V之恆電壓下運作7分鐘。在完成轉移後，在RT下於5%之脫脂乳中以搖動1小時阻斷硝化纖維素薄膜。一級抗體溶液係以在5%之脫脂乳阻斷緩衝液中以1：100稀釋之SLFN11抗體(E-4)(目錄號：sc374339)製得。令薄膜在4℃下以搖動培育隔夜。在隔天，令薄膜在搖動器上以室內製備之1x Tris緩衝之食鹽水、0.1%之Tween-20 (TBS-T)清洗三次，每次10分鐘。令薄膜在5%之脫脂乳阻斷緩衝液中以1：2,000稀釋之二級抗小鼠IgG HRP連結Ab (目錄號：CST7076S)中培育1小時且接著在搖動器上以1x TBST經10分鐘清洗三次。使用ECL系統(Thermo-34078及-34096)檢測信號且在ImageQuant LAS400影像器上造影。
COMET檢定法：令懸浮型或附著型SCLC細胞系以50000個細胞/mL之密度接種在T75燒瓶中且在37℃及5%之CO2 下在含有於DMSO中的0.3 µM最終濃度之化合物1或DMSO對照物(0.01%)的完全細胞培養基中培養7天。每3至4天補給新鮮生長培養基及藥物。在治療7天後，令細胞以0.3 µM化合物1或DMSO對照物與不同劑量的順鉑(Sigma-Alderich，目錄號P4394)組合治療3天。以離心收穫細胞，且令細胞沉澱物再懸浮於冰冷1xPBS (不含Ca++ 和Mg++ )中的1×105 細胞/毫升之單細胞懸浮液中及貯存在室溫下備用。令LM瓊脂糖(Trevigen 4250-050-02)經5分鐘熔融於燒杯的沸水中且接著令瓊脂糖瓶放入37℃培育器中冷卻。令與LM瓊脂糖以1：10 (v/v)之比組合的1x105 個細胞/mL (在37℃下)立即移液(50 µl)至CometSlideTM (TREVIGEN 4250-050-03)上，確保完全覆蓋樣品區域。令載玻片平放在4℃的暗處10至20分鐘，且浸入冷的溶解溶液(Trevigen 4250-050-01)中及在4℃下培育隔夜。在溶解溶液中培育後，令載玻片瀝乾且在4℃下於暗處浸入新製備的鹼性解螺旋溶液(Alkaline Unwinding Solution)(20mM NaOH、1mM EDTA pH＞13)中1小時。令載玻片在TREVIGEN CometAssay ES系統(Trevigen 4250-050-ES)中於21 V下接受以新鮮製備的鹼性電泳溶液(20mM NaOH、1mM EDTA pH＞13) 30分鐘電泳。在電泳後，令載玻片瀝乾過量電泳溶液且輕輕浸入H2 O中兩次，每次5分鐘，繼而浸入70%之乙醇中5分鐘。令載玻片於暗處經隔夜空氣乾燥且貯存在室溫下。令乾燥之載玻片以100 µl稀釋之SYBR Gold (Invitrogen，目錄號S11494，以1：10000於TE緩衝液中)於暗處經幾分鐘染色。令染色之載玻片以Nikon螢光顯微鏡造影(在496 nm/522 nm下最大激發/發射)。
γ-H2AX染色：令無菌SLIP-RITE蓋玻片(ThermoScience 22x22# 1.5，目錄號152222)放在6槽孔盤上。令6×104 個細胞接種在各蓋玻片上且在37℃及5%之CO2 下在含有於DMSO中的0.3 µM化合物1或DMSO對照物(0.01%)的2 ml完全細胞培養基中培養7天，每3至4天補給新鮮生長培養基及藥物。在治療7天後，令細胞以DMSO中的0.3µM化合物1或DMSO對照物與不同劑量的順鉑(Sigma-Alderich，目錄號P4394)之組合治療隔夜(16 hr)。在組合治療結束時，令細胞以1x磷酸鹽緩衝之食鹽水(PBS) (不含Ca++ 和Mg++ )清洗3次，在1 ml 4%之三聚甲醛(Electron Microscopy Sciences，目錄號15710)中固著且在4℃下貯存隔夜。在固著後，令細胞在1x PBS中清洗3次且藉由在室溫下在含有0.25%之Triton X-100 (Sigma，目錄號T8787)的1 ml PBS中培育10分鐘而滲透。在滲透後，令細胞以1xPBS清洗3次且在室溫下以10%之驢血清(Sigma-Aldrich，目錄號D9663，在PBS中以1：10稀釋)培育1小時以阻斷抗體的非特異性結合。在阻斷後，令細胞在4℃下以抗磷酸-組蛋白H2A.X (Ser139)抗體(Millipore，目錄號05-636，在1%之BSA中以1：1000稀釋)培育隔夜。在隔天，令細胞在1xPBS中清洗3次且在室溫下以Alexa FluorTM 488驢抗小鼠IgG抗體(Invitrogen，目錄號A21202，在1%之BSA中以1：2000稀釋)中培育1小時。接著令細胞以1x PBS清洗3次，然後計數。令具有細胞的蓋玻片以具有DAPI之Fluoromount-GTM (Invitrogen，目錄號004959-52)放置及架設在COLORFROST PLUS顯微鏡載玻片(ThermoSciences，目錄號9991004)上。令架設之載玻片在Nikon A1R共聚焦顯微鏡上造影。
EZH2-WT DMS114 SCLC活體內異種移植研究：
(i)化合物調配：令用於經口管餵投予之化合物1調配成濕式研磨之奈米懸浮液(在2.5% w/v之聚乙烯基吡咯啶酮(PVP)、0.5% w/v之水性聚乙二醇15羥基硬脂酸酯(Macrogol 15 Hydroxystearate)(Kolliphor HS15)中研磨24小時，具有＜1 mm粒徑分布(PSD；~650 nm中位直徑(d50))。
(ii)細胞植入、化合物給藥及組織收集：在非肥胖性糖尿病的情況下具有嚴重複合型免疫缺陷(SCID)突變的免疫缺陷雌性小鼠(NOD SCID；6至8週齡；來自Charles River Laboratories的NOD.CB17-Prkdcscid/NCrCrl)接受以7.5×106 個DMS114細胞(以1：1於基質膠(Trevigen, Cultrex BME Path Clear®，目錄號：30625F14)中，總體積200ml)經皮下(SC)植入至右側腹中。每週測量兩次腫瘤體積及體重。在植入後第20天，64隻小鼠係基於幾何平均值約160 mm3 之腫瘤大小而隨機分成相應於劑量的6組(表1)。令化合物以10 ml/kg分別經口管餵(化合物1；BID (7/17小時間隔))或經腹膜內注射(順鉑)投予。順鉑給藥時程為每週一次歷經3週(Q7Dx3)且在以化合物1隨機及開始治療後7天開始。
在第55天終止研究組1、2、3和4 (表1)。在最後一次劑量後4小時收集用於藥效學(PD)分析之腫瘤(急速冷凍)樣品。保持兩個順鉑治療組(5和6)的研究，直至隨機化後第81天，以監測腫瘤消退及再生長。在取決於可用的腫瘤大小的最後一次劑量後3小時收集來自第5和6組的腫瘤樣品。
對該等動物進行的所有手續均依照法規及建立的指南，且由輝瑞公司的機構動物護理及使用委員會(Pfizer’s Institutional Animal Care and Use Committee)審查和批准。
(iii)數據解釋：各實驗分別以Microsoft Excel及7.02版GraphPad Prism進行計算及圖形創建。腫瘤體積係以0.5×長度×寬度2 計算。腫瘤生長抑制(TGI)係由以下公式測定：%TGI=[1-(Vtx -Vt0 /Vcx -Vc0 )]×100，其中Vc、Vt為對照組及治療組之幾何平均值。X=研究的第X天及0=第一天給藥。
ELISA檢定法：
(i) 組蛋白提取：組蛋白提取係使用EpiQuick組蛋白提取套組(Epigentek OP0006)進行。令冷凍之腫瘤樣品使用冷研缽及研杵在乾冰上切割且均質化。令均質化混合物轉移至1.5 mL毫升試管內的含有苯基甲基磺醯氟(PMSF)之1X預溶解緩衝液(200 mg/ml)中。令樣品溫和地混合，在冰上培育15分鐘且在4℃下以3,000 rpm旋轉5分鐘。令組織沉澱物再懸浮於來自組蛋白提取套組之3倍體積(每100 mg組織約200 mL)的溶解緩衝液中，在冰上培育30分鐘且在4℃下以12,000 rpm旋轉5分鐘。平衡-DTT緩衝液係藉由令DTT溶液以1：500之比添加至平衡緩衝液而製得。令上清液(含有酸可溶性蛋白質)轉移至新的1.5 mL試管中且令來自組蛋白提取套組之0.3倍體積的平衡-二硫蘇糖醇(DTT)緩衝液立即添加至各樣品中。令腫瘤溶解物使用Bioruptor Plus (Diagenode #B01020001)以高強度短暫地聲波處理4次循環(開啟30秒及關閉30秒)。令提取物等分且儲存在-20℃(短期)或-80℃(長期)。蛋白質濃度係使用Coomassie Plus (Bradford)檢定套組(Thermo #23236)定量。
(ii) H3K27Me3及Me2之ELISA檢定法：令組蛋白提取物在含有0.05%之胎牛血清白蛋白(BSA)的100 mL被覆緩衝液(coating buffer)(磷酸鹽緩衝之食鹽水(PBS))中稀釋至400 ng (或800 ng)最終濃度。在96槽孔檢定微量盤(Corning Costar)中以一式兩份於每一槽孔添加四百(400) ng (或800 ng)各樣品，緊緊密封且在4℃下經隔夜培育。在隔天，令各盤中的槽孔以300 ml清洗緩衝液(PBS、0.05%之Tween 20)清洗3次且接著在室溫下以300 mL阻斷緩衝液(PBS、0.05%之Tween 20、2%之BSA)經2小時阻斷。在另一輪以清洗緩衝液(PBS、0.05%之Tween 20)清洗後，令100 mL檢測抗體(在阻斷緩衝液中以1：2000稀釋之Cell Signaling #9733 H3K27Me3；在阻斷緩衝液中以1：2000稀釋之Cell Signaling #9728 H3K27Me2；在阻斷緩衝液中以1：5000稀釋之Cell ABCAM ab1791總組蛋白H3)添加至各個盤的各槽孔中且在室溫下培育1.5小時。在另一輪以清洗緩衝液(PBS、0.05%之Tween 20)清洗後，令以1：2000稀釋(H3K27Me3及Me2)或以1：10,000稀釋(總H3)之100 mL二級抗體(抗Rb-IgG-HRP，Cell Signaling 7074)添加至各槽孔中且令盤在室溫下培育1.5小時。在另一輪以清洗緩衝液(PBS、0.05%之Tween 20)清洗後，進行檢測：令100 mL TMB受質(Thermo Scientific，N301)添加至各槽孔中，令盤培育10分鐘，令100 mL停止溶液(0.16M硫酸，新鮮製備或自Thermo Scientific N600購得)添加至各槽孔中，輕輕地振盪，且在450 nm讀取吸收值。使用7.02版GraphPad Prism分析數據。P值係使用單因子ANOVA (杜凱氏(Tukey’s)多重比較試驗)測定。
實施例1-化合物1在DMS114 SCLC細胞中的抗增生效應
化合物1對抗EZH2的活性係在含有野生型EZH2之DMS114 SCLC細胞中評估。EZH2抑制劑活性係於細胞中藉由測量細胞H3K27Me3含量的相對量來測定。令DMS114細胞以指定濃度的化合物1治療3天且使用上文所述之細胞內西方檢定法測量H3K27Me3含量。結果顯示於表2和圖1中。圖1為5個獨立的生物學複製實驗之代表。在以3 mM至0.1 nM之濃度範圍治療3天後，化合物1展示劑量依賴性H3K27Me3抑制作用，具有9.48 nM之細胞平均IC50 。
化合物1抑制EZH2‑WT DMS114 SCLC細胞之細胞增生的活性亦使用上文所述用於DMS114 SCLC細胞之細胞增生檢定法評定。令DMS114細胞使用具有3 mM至0.1 nM的10點劑量曲線(1：3稀釋)之不同濃度的化合物1治療17至21天，且接著評定細胞生存率。結果顯示於表2和圖2中。圖2為6個獨立的生物學複製實驗之代表。結果表明化合物1在DMS114細胞中展示強力的劑量依賴性細胞增生抑制作用，具有18.8 nM之平均IC50 。
實施例2-用於化合物1+SCLC照護標準的藥劑順鉑或依托泊苷之組合的抗增生協同性評估
鑑於以化合物1所觀察對抑制SCLC DMS114細胞系生長的強功效，因而研究化合物1與目前照護標準的化學治療劑之組合。實驗係使用依照上文所述之方法對DMS114 SCLC細胞進行細胞生長抑制檢定法，且結果顯示於圖3和4。圖3顯示單獨給藥及與順鉑組合給藥之化合物1的IC50 曲線。圖4顯示單獨給藥及與依托泊苷組合給藥之化合物1的IC50 曲線。該等實驗顯示先以化合物1治療強力地增加順鉑或依托泊苷二者在DMS114細胞中的抗增生效應。圖3和4亦顯示使用如上文所述之Loewe加成性(ADD)模式之組合數據進一步分析的結果。此分析顯示若兩種化合物具有加成效應，則以兩種化合物大於IC50 之劑量所達成的生長抑制水平比能夠預期的水平更強。
實施例3-在DMS114 SCLC異種移植模式中，單一劑化合物1於活體內抑制腫瘤生長
化合物1之抗腫瘤功效係在DMS114 SCLC異種移植模式中使用上文所述之活體內異種移植研究程序於活體內測試。研究分組、給藥方案和投予途徑之定義總結於表1中。結果顯示於圖5中。化合物1顯示以每天兩次(BID) 300 mg/kg具有69%至79%之最大腫瘤生長抑制(TGI)的劑量依賴性功效反應。在腫瘤細胞植入後第20天，小鼠係基於腫瘤大小而隨機分成治療組。在各組中隨機化之腫瘤大小的幾何平均值為約160 mm3 。自圖5所示之結果可看出相對於以媒劑給藥之對照組，以100 mg/kg BID及300 mg/kg BID給藥之化合物1二者顯示顯著的抗腫瘤效益。相對於30 mg/kg BID及100 mg/kg BID治療，以最高300 mg/kg BID劑量有顯著的TGI效益(第55天；2-尾t試驗)，展示劑量依賴性功效。以化合物1單一治療分組未觀察到完全的腫瘤消退。化合物1係以有限的體重減輕而具有良好的耐受性。
實施例4-單一劑化合物1在DMS114 SCLC異種移植模式中顯示於活體內對H3K27Me3及Me2之劑量依賴性生物標誌物抑制作用
在DMS114 SCLC異種移植模式中，化合物1對抗EZH2之活體內活性係藉由使用來自以上實施例3所述之研究於第55天收穫的腫瘤組織樣品以ELISA測量細胞的H3K27Me3及Me2含量之相對量來測定。結果顯示於圖6中。化合物1展現對腫瘤樣品中的H3K27Me3及Me2之劑量依賴性抑制作用，以300 mg/kg BID對H3K27Me3及Me2分別具有96%及82%之最大抑制。
實施例5-化合物1在DMS114 SCLC異種移植模式中顯示與順鉑之組合抗腫瘤活性效益
化合物1與順鉑組合之抗腫瘤功效係於EZH2-WT DMS114 SCLC異種移植模式中使用上文所述之異種移植研究程序於活體內測試。研究分組、給藥方案和投予途徑之定義總結於表1中。結果顯示於圖7中。在順鉑及化合物1單一治療組中，所有腫瘤在第55天進展且大於在治療開始時，儘管在順鉑投予後觀察到間歇性腫瘤縮小。相對之下，在組合組中，與開始的腫瘤負荷相比，12個腫瘤中有6個消退。組合治療係以第55天得到95%之TGI且明顯比以順鉑(51%之TGI；P=0.019相對於順鉑)或以化合物1 (50%之TGI；P=0.016相對於100 mg/kg之化合物1)之單一治療更高的功效。順鉑治療係在單一劑及組合分組二者的第三個劑量後停止，因為其引起小鼠的體重減輕(圖7)。化合物1單一劑治療具有良好的耐受性(圖7)，而化合物1+順鉑組合顯示明顯比順鉑單一治療組更顯著的體重減輕(在第27天及之後的所有測量之P＜0.05；2-尾t試驗)。
為了評定對反應持久性的EZH2抑制效應，在第55天後保持順鉑單一治療組及組合治療組的研究。在兩種該等治療分組中，皆於第42天給予最後一次順鉑治療。在組合分組中，僅以單一治療化合物1作為維持治療再繼續給藥3週(沒有順鉑給藥)。結果顯示於圖7中。在組合分組中，化合物1之維持劑量係於順鉑中止後再持續34天的腫瘤消退，但是在不接受進一步治療的順鉑單一治療分組中的所有腫瘤皆進展了。在組合分組中及在順鉑治療停止後，體重在以化合物1維持給藥期間完全恢復，表明自化合物1維持劑量引起的毒性最小(圖7)。
再者，自圖8和9所示之數據可看出相對於媒劑或化合物1或順鉑單一治療，以順鉑與化合物1之組合提供顯著的存活期效益。用於存活期讀取的最大腫瘤負荷設定在500 mm3 。相對於媒劑對照組，100 mg/kg BID化合物1組及順鉑單一治療組以對數秩(Mantel-Cox)試驗未達到P＜0.05之顯著性水平。在組合組中的中位存活期增加至74.5天，其係相對於媒劑組中的34天，在100 mg/kg BID化合物1中的39天及在順鉑組中的37.5天。
總之，化合物1在DMS114 SCLC異種移植模式中展示於活體內對腫瘤生長的劑量依賴性抑制作用。劑量依賴性抑制作用亦與H3K27Me3及Me2生物標誌物之高效力抑制作用互相關聯。基於所觀察的最小體重變化而結論出以化合物1給藥在小鼠中具有耐受性。當與得到顯著的存活期效益之順鉑單一治療相比時，以化合物1與第一線照護標準的順鉑之組合給藥顯著地增加抗腫瘤功效及抗腫瘤反應持久性二者。再者，在此DMS114 SCLC異種移植模式中，本文所述之非臨床研究展示作為單一劑及順鉑組合二者之化合物1於活體內抑制EZH2催化活性，如以H3K27Me3及Me2抑制作用所測量，誘發強力的腫瘤生長抑制作用。
實施例6-化合物1於另外的SCLC細胞系中的抗增生效應
基於以化合物1在DMS114細胞中觀察到的強大活性(參見上文實施例1)，亦使用上文所述之細胞增生檢定法測試化合物1於3種另外的SCLC細胞系(亦即H841、H446和H69)中的抗增生活性。令各細胞系使用具有3 mM至0.1 nM的10點劑量曲線(在DMSO中以1：3稀釋)之不同濃度的化合物1治療21天，且接著評定細胞生存率。結果顯示於圖10 (H841)、圖11 (H446)和圖12 (H69)中。在治療21天後，化合物1展示強力的劑量依賴性細胞增生抑制作用，在H841細胞系中具有73.15 nM之平均IC50 ；在H446細胞系具有108.6 nM之平均IC50 ；及在H69細胞系中具有224.1 nM之平均IC50 。
實施例7-化合物1+SCLC照護標準的藥劑順鉑或依托泊苷之組合在H841、H446和H69細胞系中的抗增生協同性之評估
鑑於以化合物1所觀察抑制SCLC H841、H446和H69細胞系生長的強功效，因而研究化合物1與目前照護標準的化學治療劑順鉑或依托泊苷之組合。實驗係使用依照上文所述之方法對H841、H446或H69 SCLC細胞進行細胞生長抑制檢定法，且結果顯示於圖13和14 (H841細胞系)、圖15和16 (H446細胞系)及圖17和18 (H69細胞系)中。圖13、15和17顯示單獨給藥及與順鉑組合給藥之化合物1的IC50 曲線。圖14、16和18顯示單獨給藥及與依托泊苷組合給藥之化合物1的IC50 曲線。如同DMS114，該等實驗顯示先以化合物1治療強力地增加順鉑或依托泊苷二者在H841、H446和H69細胞系中的抗增生效應。
圖13至18亦顯示使用如上文所述之Loewe加成性(ADD)模式之組合數據進一步分析的結果。此分析顯示若兩種化合物具有加成效應，則以兩種化合物大於IC50 之劑量所達成的生長抑制水平比能夠預期的水平至少一樣強或更強。
實施例8-化合物1誘發SCLC細胞系中的SLFN11表現
為了瞭解以化學治療劑觀察到的EZH2i協同作用之原因的潛在機制，吾等評定化合物1治療對SLFN11表現(對DNA損傷劑之致敏物)的效應。令許多SCLC細胞系以500 nM化合物1治療7天且使用根據上文所述之方法的西方墨點法評定SLFN11蛋白質含量的變化。結果顯示於圖19中。該等結果表明在以化合物1治療時於許多SCLC細胞系中觀察到強力誘發的SLFN11表現。
實施例9-化合物1+SCLC照護標準的藥劑順鉑之組合誘發SCLC細胞系中增加的DNA損傷
化合物1與化學治療劑順鉑之組合對DNA損傷的效應係使用根據上文所述之方法的DNA損傷標誌物γ-H2AX染色或以COMET檢定法評定DNA損傷來評定。令SCLC細胞系H841或H69以化合物1預治療7天，繼而與順鉑共同治療16小時(γ-H2AX)或3天(COMET檢定法)。結果顯示於圖20至22中。在圖20中，來自H841細胞系的結果表明當與任一單一治療的那些細胞相比時，在以組合治療之細胞中觀察到強力增加的γ-H2AX細胞簇形成。在圖21中，來自H841細胞系的結果表明當與任一單一治療的那些細胞相比時，在以組合治療之細胞中觀察到強力增加的DNA損傷(COMET檢定法)。在H69細胞系COMET檢定法中達成類似的結果(參見圖22)。
在本說明書中所引用的所有發表案及專利/專利申請案係藉由參照彼之全文而併入本文。儘管前述發明已以例證及實例方式於一些細節上說明，但是那些一般熟習此項技術領域者按照本發明的教導將輕易地明白可以不脫離所附申請專利範圍之精神或範圍而對本發明進行特定的改變及修飾。
圖1：以化合物1在DMS114 SCLC細胞中對H3K27Me3之抑制作用。令DMS114 SCLC細胞以不同濃度的化合物1治療3天且使用西方墨點分析評定H3K27Me3含量。各數據點表示在給出之化合物濃度下相對於DMSO歸一化之% H3K27Me3含量(平均值±SD；n=2個技術複製物)。圖為5個獨立的生物學複製實驗之代表。
圖2：以化合物1對DMS114 SCLC細胞之增生抑制作用。令DMS114 SCLC細胞以不同濃度的化合物1治療19天。各數據點表示在給出之化合物濃度下相對於DMSO歸一化之%活細胞(平均值±SD；n=6)。圖為6個獨立的生物學複製實驗之代表。
圖3：化合物1與順鉑之組合在DMS114 SCLC細胞中展現協同效應。令細胞以化合物1預治療9天，繼而與順鉑共同治療4天。數據係相對於未治療之DMSO/DMSO樣品歸一化且以未治療之樣品的%表示。數據係使用Loewe加成性組合模式(additivity combination model)分析。
圖4：化合物1與依托泊苷之組合在DMS114 SCLC細胞中展現協同效應。令細胞以化合物1預治療9天，繼而與依托泊苷共同治療4天。數據係相對於未治療之DMSO/DMSO樣品歸一化且以未治療之樣品的%表示。數據係使用Loewe加成性組合模式分析。
圖5：單一劑化合物1在DMS114 SCLC異種移植模式中的抗腫瘤功效。化合物1治療分組之DMS114腫瘤生長曲線及TGI值(幾何值±SEM)。隨機及治療係在植入雌性NOD/SCID小鼠後第20天開始。P值：2-尾t試驗。以30和100 mg/kg BID治療組顯示出明顯比300 mg/kg BID組更少的TGI。顯示相對於第20天開始治療的體重變化百分比(平均值±SEM)。
圖6：以化合物1在DMS114 SCLC異種移植模式中對H3K27Me3及Me2之劑量依賴性抑制作用。以不同劑量的化合物1治療之DMS114腫瘤中的(A) H3K27Me3及(B) H3K27Me2之調節作用。組蛋白係自第55天收穫的急速冷凍之腫瘤提取且甲基化水平係使用ELISA檢定法評定(平均值±SEM；*ns P＞ 0.05；*P≤ 0.05；**P≤ 0.01；***P≤ 0.001；****P≤ 0.0001)。
圖7：順鉑與化合物1在DMS114 SCLC異種移植模式中之組合之抗腫瘤效益。A.化合物1及順鉑治療分組之DMS114腫瘤生長曲線及TGI值(幾何平均值±SEM)。隨機及治療係在植入雌性NOD/SCID小鼠後第20天開始。P值：2-尾t試驗。100 mg/kg BID之化合物1及順鉑單一治療組顯示出明顯比組合治療組更少的TGI。B.顯示相對於第20天開始治療的體重變化百分比(平均值±SEM)。C.組合治療組之個別腫瘤生長曲線。可在以組合治療之小鼠中的50%觀察到相對於治療開始的腫瘤大小之腫瘤體積消退(以灰色線/空心圓顯示)。
圖8：在EZH2-wt DMS114皮下SCLC異種移植模式中以順鉑與化合物1之組合治療之小鼠的延長存活期。卡本麥爾(Kaplan Meier)存活曲線係基於500 mm3
之腫瘤負荷的存活截止點。在植入雌性NOD/SCID小鼠後第20天隨機。P值係基於對數秩(Log-rank)試驗(Mantel-Cox；Graphpad-Prism軟體)。在第3次順鉑治療後及在第55天後，在兩個順鉑治療組中的體重恢復。
圖9：在DMS114 SCLC異種移植模式中個別的腫瘤生長曲線。在植入(107個細胞於具有50%之基質膠(matrigel)的0.1 mL PBS中)雌性NOD/SCID小鼠後第20天隨機。
圖10：以化合物1對H841 SCLC細胞之增生抑制作用。令H841 SCLC細胞以不同濃度的化合物1治療21天。各數據點表示在給出之化合物濃度下相對於DMSO歸一化之%活細胞(平均值±SEM；n=3個技術複製物)。圖為2個獨立的生物學複製實驗之代表。
圖11：以化合物1對H446 SCLC細胞之增生抑制作用。令H446 SCLC細胞以不同濃度的化合物1治療21天。各數據點表示在給出之化合物濃度下相對於DMSO歸一化之%活細胞(平均值±SEM；n=3個技術複製物)。
圖12：以化合物1對H69 SCLC細胞之增生抑制作用。令H69 SCLC細胞以不同濃度的化合物1治療21天。各數據點表示在給出之化合物濃度下相對於DMSO歸一化之%活細胞(平均值±SEM；n=3個技術複製物)。
圖13：化合物1與順鉑之組合在H841 SCLC細胞中展現協同/加成效應。令H841細胞以化合物1預治療9天，繼而與順鉑共同治療4天。數據係相對於未治療之DMSO/DMSO樣品歸一化且以未治療之樣品的%表示。數據係使用Loewe加成性組合模式分析。
圖14：化合物1與依托泊苷之組合在H841 SCLC細胞中展現協同/加成效應。令H841細胞以化合物1預治療9天，繼而與依托泊苷共同治療4天。數據係相對於未治療之DMSO/DMSO樣品歸一化且以未治療之樣品的%表示。數據係使用Loewe加成性組合模式分析。
圖15：化合物1與順鉑之組合在H446 SCLC細胞中展現協同效應。令H446細胞以化合物1預治療9天，繼而與順鉑共同治療4天。數據係相對於未治療之DMSO/DMSO樣品歸一化且以未治療之樣品的%表示。數據係使用Loewe加成性組合模式分析。
圖16：化合物1與依托泊苷之組合在H446 SCLC細胞中展現協同效應。令H446細胞以化合物1預治療9天，繼而與依托泊苷共同治療4天。數據係相對於未治療之DMSO/DMSO樣品歸一化且以未治療之樣品的%表示。數據係使用Loewe加成性組合模式分析。
圖17：化合物1與順鉑之組合在H69 SCLC細胞細胞中展現協同效應。令H69細胞以化合物1預治療9天，繼而與順鉑共同治療4天。數據係相對於未治療之DMSO/DMSO樣品歸一化且以未治療之樣品的%表示。數據係使用Loewe加成性組合模式分析。
圖18：化合物1與依托泊苷之組合在H69 SCLC細胞細胞中展現協同效應。令H69細胞以化合物1預治療9天，繼而與依托泊苷共同治療4天。數據係相對於未治療之DMSO/DMSO樣品歸一化且以未治療之樣品的%表示。數據係使用Loewe加成性組合模式分析。
圖19：化合物1在SCLC細胞系中誘發SLFN11表現。令SCLC細胞系以500 nM化合物1治療7天且SLFN11表現係使用西方墨點法檢測。
圖20：化合物1與順鉑之組合在H841 SCLC細胞系中誘發增加的γ-H2AX細胞簇(foci)。令H841細胞以化合物1預治療7天，繼而與順鉑共同治療16小時。接著染色細胞的γ-H2AX。
圖21：化合物1與順鉑之組合在H841 SCLC細胞系中誘發增加的DNA損傷，如以COMET檢定法所表明。令H841細胞以化合物1預治療7天，繼而與順鉑共同治療3天。接著使用COMET檢定法分析細胞的DNA損傷。
圖22：化合物1與順鉑之組合在H69 SCLC細胞系中誘發增加的DNA損傷，如以COMET檢定法所表明。令H69細胞以化合物1預治療7天，繼而與順鉑共同治療3天。接著使用COMET檢定法分析細胞的DNA損傷。
Claims (31)
- 一種個體之癌症治療方法，其包含對該個體投予組合治療，該組合治療包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽。
- 根據申請專利範圍第1項之癌症治療方法，其中該個體為人類。
- 根據申請專利範圍第1和2中任一項之癌症治療方法，其中該癌症為小細胞肺癌。
- 根據申請專利範圍第3項之癌症治療方法，其中該小細胞肺癌被分類為擴散期疾病。
- 根據申請專利範圍第1至4中任一項之癌症治療方法，其中該個體未經治療。
- 根據申請專利範圍第1至5項中任一項之癌症治療方法，其中該EZH2抑制劑係選自由下列者所組成之群組： 5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮； 5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮； 5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(S )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮； 5-溴-8-氯-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-7-(1,4-二甲基-1H -1,2,3-三唑-5-基)-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮； 5,8-二氯-7-(3,5-二甲基-1,2-噁唑-4-基)-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮； N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-5-[乙基(四氫-2H-吡喃-4-基)胺基]-4-甲基-4’-(嗎啉-4-基甲基)聯苯基-3-甲醯胺； N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-5-[乙基(四氫-2H-吡喃-4-基)胺基]-4-甲基-4’-(嗎啉-4-基甲基)聯苯基-3-甲醯胺； N-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-1-[(1R)-1-[1-(2,2,2-三氟乙基)哌啶-4-基]乙基]-1H-吲哚-3-甲醯胺； N-(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基甲基)-1-異丙基-3-甲基-6-[6-(4-甲基哌-1-基)吡啶-3-基]-1H-吲哚-4-甲醯胺；及 N-[(6-甲基-2-側氧基-4-丙基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-6-[2-(4-甲基哌-1-基)吡啶-4-基]-1-(丙-2-基)-1H-吲唑-4-甲醯胺； 或其醫藥上可接受之鹽。
- 根據申請專利範圍第6項之癌症治療方法，其中EZH2抑制劑為5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮或其醫藥上可接受之鹽。
- 根據申請專利範圍第1至7項中任一項之癌症治療方法，其中該鉑為底質之抗贅瘤劑係選自由下列者所組成之群組：順鉑(cisplatin)和卡鉑(carboplatin)。
- 根據申請專利範圍第8項之癌症治療方法，其中該鉑為底質之抗贅瘤劑為順鉑。
- 根據申請專利範圍第8項之癌症治療方法，其中該鉑為底質之抗贅瘤劑為卡鉑。
- 根據申請專利範圍第1至5項中任一項之癌症治療方法，其中該EZH2抑制劑為5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮或其醫藥上可接受之鹽，且該鉑為底質之抗贅瘤劑為順鉑。
- 根據申請專利範圍第1至5項中任一項之癌症治療方法，其中該EZH2抑制劑為5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮或其醫藥上可接受之鹽，且該鉑為底質之抗贅瘤劑為卡鉑。
- 根據申請專利範圍第1至12項中任一項之癌症治療方法，該方法包含另外投予依托泊苷(etoposide)。
- 根據申請專利範圍第1至13項中任一項之癌症治療方法，該方法另外包含投予選自下列之額外抗癌劑：抗腫瘤劑、抗血管生成劑、信號轉導抑制劑和抗增生劑。
- 根據申請專利範圍第14項之癌症治療方法，其中該抗癌劑為選自由下列者所組成之群組的抗腫瘤劑：有絲分裂抑制劑、烷基化劑、抗代謝物、嵌入抗生素、生長因子抑制劑、輻射、細胞週期抑制劑、酵素、拓樸異構酶抑制劑、生物反應修飾劑、抗體、胞毒劑、抗激素劑、雄性素剝奪治療及抗雄性素。
- 根據申請專利範圍第14項之癌症治療方法，其中該抗癌劑為選自由下列者所組成之群組的抗腫瘤劑：抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體和抗CTLA-4抗體。
- 根據申請專利範圍第14項之癌症治療方法，其中該抗癌劑為選自由下列者所組成之群組的抗腫瘤劑：納武單抗(nivolumab)、派立珠單抗(pembrolizumab)、皮立珠單抗(pidilizumab)、舍米匹單抗(cemiplimab)、緹勒珠單抗(tislelizumab)、mAb7、mAb15、AMP-224、AGEN-2034、司帕塔利單抗(spartalizumab)、YW243.55.S70、BMS-936559、阿替珠單抗(atezolizumab)、德瓦魯單抗(durvalumab)、阿維魯單抗(avelumab)、伊匹單抗(ipilimumab)、曲美目單抗(tremelimumab)和AGEN-1884。
- 一種EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合。
- 一種EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之組合，其係用於治療癌症。
- 一種EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之協同性組合。
- 一種EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽之協同性組合，其係用於治療癌症。
- 一種醫藥組成物，其包含EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽與鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽，及醫藥上可接受之載劑。
- 一種套組，其包含第一容器、第二容器及仿單，其中該第一容器包含至少一個劑量的EZH2抑制劑或其醫藥上可接受之鹽，該第二容器包含至少一個劑量的鉑為底質之抗贅瘤劑或其醫藥上可接受之鹽，且該仿單包含使用該等藥劑以治療個體的癌症之指示說明。
- 根據申請專利範圍第18或19項之組合、根據申請專利範圍第20或21項之協同性組合、根據申請專利範圍第22項之醫藥組成物或根據申請專利範圍第23項之套組，其另外包含選自下列之額外抗癌劑：抗腫瘤劑、抗血管生成劑、信號轉導抑制劑和抗增生劑。
- 根據申請專利範圍第24項之組合、協同性組合、醫藥組成物或套組，其中該額外抗癌劑為選自由下列者所組成之群組的抗腫瘤劑：有絲分裂抑制劑、烷基化劑、抗代謝物、嵌入抗生素、生長因子抑制劑、輻射、細胞週期抑制劑、酵素、拓樸異構酶抑制劑、生物反應修飾劑、抗體、胞毒劑、抗激素劑、雄性素剝奪治療和抗雄性素。
- 根據申請專利範圍第24項之組合、協同性組合、醫藥組成物或套組，其中該額外抗癌劑為選自由下列者所組成之群組的抗腫瘤劑：抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體和抗CTLA-4抗體。
- 根據申請專利範圍第24項之組合、協同性組合、醫藥組成物或套組，其中該額外抗癌劑為選自由下列者所組成之群組的抗腫瘤劑：納武單抗、派立珠單抗、皮立珠單抗、舍米匹單抗、緹勒珠單抗、mAb7、mAb15、AMP-224、AGEN-2034、司帕塔利單抗、YW243.55.S70、BMS-936559、阿替珠單抗、德瓦魯單抗、阿維魯單抗、伊匹單抗、曲美目單抗和AGEN-1884。
- 根據申請專利範圍第18、19及24至27項中任一項之組合、根據申請專利範圍第20、21及24至27項中任一項之協同性組合、根據申請專利範圍第22及24至27項中任一項之醫藥組成物或根據申請專利範圍第23至27項中任一項之套組，其中該EZH2抑制劑係選自由下列者所組成之群組： 5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮； 5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮； 5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(S )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮； 5-溴-8-氯-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-7-(1,4-二甲基-1H -1,2,3-三唑-5-基)-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮； 5,8-二氯-7-(3,5-二甲基-1,2-噁唑-4-基)-2-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮； N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-5-[乙基(四氫-2H-吡喃-4-基)胺基]-4-甲基-4’-(嗎啉-4-基甲基)聯苯基-3-甲醯胺； N-[(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-5-[乙基(四氫-2H-吡喃-4-基)胺基]-4-甲基-4’-(嗎啉-4-基甲基)聯苯基-3-甲醯胺； N-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-2-甲基-1-[(1R)-1-[1-(2,2,2-三氟乙基)哌啶-4-基]乙基]-1H-吲哚-3-甲醯胺； N-(4,6-二甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-基甲基)-1-異丙基-3-甲基-6-[6-(4-甲基哌-1-基)吡啶-3-基]-1H-吲哚-4-甲醯胺；及 N-[(6-甲基-2-側氧基-4-丙基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基]-6-[2-(4-甲基哌-1-基)吡啶-4-基]-1-(丙-2-基)-1H-吲唑-4-甲醯胺； 或其醫藥上可接受之鹽；且 其中該鉑為底質之抗贅瘤劑係選自由下列者所組成之群組：順鉑和卡鉑。
- 根據申請專利範圍第18、19及24至27項中任一項之組合、根據申請專利範圍第20、21及24至27項中任一項之協同性組合、根據申請專利範圍第22及24至27項中任一項之醫藥組成物或根據申請專利範圍第23至27項中任一項之套組，其中該EZH2抑制劑為5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮或其醫藥上可接受之鹽；且該鉑為底質之抗贅瘤劑為順鉑。
- 根據申請專利範圍第18、19及24至27項中任一項之組合、根據申請專利範圍第20、21及24至27項中任一項之協同性組合、根據申請專利範圍第22及24至27項中任一項之醫藥組成物或根據申請專利範圍第23至27項中任一項之套組，其中該EZH2抑制劑為5,8-二氯-2-[(4-甲氧基-6-甲基-2-側氧基-1,2-二氫-吡啶-3-基)甲基]-7-[(R )-甲氧基(氧呾-3-基)甲基]-3,4-二氫異喹啉-1(2H )-酮，或其醫藥上可接受之鹽；且該鉑為底質之抗贅瘤劑為卡鉑。
- 根據申請專利範圍第30項之組合、協同性組合、醫藥組成物或套組，其另外包含依托泊苷。
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