TW201740966A - 真菌萃取物於製備輔助治療癌症的醫藥組合物之用途 - Google Patents
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Abstract
本發明係提供一種用於輔助治療癌症的醫藥組合物。不同於習知技術係以抗癌藥或放射線物質來達成致死癌細胞的效果，本發明係以牛樟芝酒萃物、靈芝酒萃物、或靈樟芝酒萃物作為新穎的醫藥組合物，以達成致死肺癌細胞A549、肝癌細胞Huh7、乳癌細胞MDA-MB 231、以及大腸癌細胞HT 29的醫療功效。此外，相較於習用的抗癌藥或放射線物質多具有導致患者噁心、嘔吐、食欲不振等副作用，本發明之牛樟芝酒萃物、靈芝酒萃物、或靈樟芝酒萃物除了可以達到致死癌細胞的功效外，同時還具有清熱解毒、增強免疫力作用、增加食慾之功效。
Description
本發明係關於醫用組合物之技術領域，尤指萃取自靈芝及/或牛樟芝的一種用於輔助治療癌症的醫藥組合物。
衛生福利部國民健康署(Health Promotion Administration, Ministry of Health and Welfare)指出，相較於2012年，2013年台灣罹癌人數係增加了2499人。值得注意的是，罹患大腸癌、肺癌、肝癌、或乳癌的病人的總數係佔所有罹癌人數的5成。
目前，肺癌以手術為主要的治療方式。然而，由於肺癌難以早期診斷，因此70%的肺癌患者在確診的時候通常就已經是處於局部晚期狀態。因此，在手術切除病灶之後，主治醫生通常會對局部嚴重晚期腫瘤(Locally Advanced Cancer)給予放射治療。然而，肺癌放射治療具有的急性副作用，例如：疲倦、嗜睡、食慾不振、脫皮現象、放射性肺炎等。故，如何提供一種可取代放射治療的局部嚴重晚期腫瘤之治療藥物或療法，便成為相當重要的課題。
肝細胞癌是常見的肝臟惡性腫瘤。臨床上肝癌的治療方法包括：手術及非手術治療；其中，非手術治療又可分為：肝動脈血管栓塞、酒精注射、電射頻熱治療、及化學治療等。對於小型肝臟惡性腫瘤而言，可以動脈血管栓塞的方式致死肝細胞癌；並且，於執行動脈血管栓塞的過程中也可再加入抗癌藥或放射線物質來增加致死肝細胞癌的效果。然而，臨床上的病例顯示，放射線治療對肝癌的療效並不好，此外，廣泛照射放射線亦容易加重肝臟纖維化程度以及導致衍生其它副作用。因此，如何提升動脈血管栓塞於致死肝細胞癌的效果便成為重要的研究目標。
乳癌的治療方法包括外科手術切除、放射治療、化學治療和激素治療等。其中，化療是利用抗癌藥物來破壞癌細胞的生成以達到殺死癌細胞的目的；通常，在乳癌患者接受手術或放射治療之後，醫生可能使用此療法作為輔助治療，以減低癌症復發的機會。臨床上的病例顯示，化療可能引起的副作用包括：噁心、嘔吐、食欲不振、腹瀉、頭髮脫落、口腔潰瘍、造血功能下降、及血球數目減少等。是以，如何提供一種可取代乳癌抗癌藥物的之治療藥物或療法，便成為相當重要的課題。
大腸直腸癌細胞(Colorectal cancer)常經淋巴腺或血液轉移至肝、肺、骨頭，因此大腸直腸癌經過手術切除後，仍可能有(外科醫生)肉眼無法辨識的顯微轉移。是以，在大腸直腸癌患者接受手術治療之後，醫生可能使用輔助性化學治療來預防這些可能存在的顯微轉移所導致的腫瘤局部復發。然而，直腸癌的化學治療最常見的急性副作用為腹瀉及會陰部皮膚發炎。另外，直腸癌的化學治療的慢性副作用包括:小腸阻塞、出血、穿孔、甚至壞死。
由上述說明可以輕易得知，就肺癌、肝癌、乳癌與大腸癌的治療而言，通常必須併用手術治療及化學藥物治療(或放射線治療)，然而化療藥物與放射性藥物(或放射線)皆會對病人產生多種副作用。有鑑於此，本案之發明人係極力加以研究發明，而終於研發完成本發明之一種用於輔助治療癌症的醫藥組合物，其中，該醫藥組合物可以取代化學藥物或放射性藥，用於癌症病人的手術後的輔助性治療。
本發明之主要目的，在於提供一種用於輔助治療癌症的醫藥組合物。不同於習知技術係以抗癌藥或放射線物質來達成致死癌細胞的效果，本發明係以牛樟芝酒萃物、靈芝酒萃物、或靈樟芝酒萃物作為新穎的醫藥組合物，以達成致死肺癌細胞A549、肝癌細胞Huh7、乳癌細胞MDA-MB 231、以及大腸癌細胞HT 29的醫療功效。此外，相較於習用的抗癌藥或放射線物質多具有導致患者噁心、嘔吐、食欲不振等副作用，本發明之牛樟芝酒萃物、靈芝酒萃物、或靈樟芝酒萃物除了可以達到致死癌細胞的功效外，同時還具有清熱解毒、增強免疫力作用、增加食慾之功效。
為了達成上述本發明之主要目的，本案之發明人係提供一種用於輔助治療癌症的醫藥組合物的一第一實施例，係為一牛樟芝(Antrodia camphorata
)的一萃取物；其中，一特定劑量介於50 µg/mL至250 µg/mL之間的該萃取物係具有治療一特定癌症之功效。
於前述用於輔助治療癌症的醫藥組合物的該第一實施例中，其中，所述特定癌症係選自於以下群組之中的任一者：肺癌、肝癌、乳癌、與大腸癌。
於前述用於輔助治療癌症的醫藥組合物的該第一實施例中，其中，所述萃取物可為下列任一者：牛樟芝水萃物或牛樟芝酒萃物；並且，該萃取物可致使肺癌細胞A549、肝癌細胞Huh7、乳癌細胞MDA-MB 231、以及大腸癌細胞HT 29的細胞存活率(cell viability)下降至少50%。
並且，為了達成上述本發明之主要目的，本案之發明人係提供一種用於輔助治療癌症的醫藥組合物的一第二實施例，係為一靈芝(Ganoderma lucidum
)的一萃取物；其中，一特定劑量介於50 µg/mL至250 µg/mL之間的該萃取物係具有治療一特定癌症之功效。
於前述用於輔助治療癌症的醫藥組合物的該第二實施例中，其中，該特定癌症係選自於以下群組之中的任一者：肺癌、肝癌、乳癌、與大腸癌。
於前述用於輔助治療癌症的醫藥組合物的該第二實施例中，其中，所述萃取物可為下列任一者：靈芝水萃物或靈芝酒萃物；並且，該萃取物可致使肺癌細胞A549、肝癌細胞Huh7、乳癌細胞MDA-MB 231、以及大腸癌細胞HT 29的細胞存活率(cell viability)下降至少50%。
再者，為了達成上述本發明之主要目的，本案之發明人係提供一種用於輔助治療癌症的醫藥組合物的一第三實施例，係為一牛樟芝萃取物與一靈芝萃取物的一靈樟芝萃取物；其中，一特定劑量介於50 µg/mL至200 µg/mL之間的該靈樟芝萃取物係具有治療一特定癌症之功效。
於前述用於輔助治療癌症的醫藥組合物的該第三實施例中，其中，該特定癌症係選自於以下群組之中的任一者：肺癌、肝癌、乳癌、與大腸癌。
於前述用於輔助治療癌症的醫藥組合物的該第三實施例中，其中，所述靈芝萃取物可為一靈芝水萃物或一靈芝酒萃物；並且，所述牛樟芝萃取物可為一牛樟芝水萃物或一牛樟芝酒萃物。
於前述用於輔助治療癌症的醫藥組合物的該第三實施例中，其中，所述牛樟芝萃取物與所述靈芝萃取物之間係具有一特定混合比例，且該特定混合比例係介於1:1至10:1之間。
於前述用於輔助治療癌症的醫藥組合物的該第三實施例中，其中，所述靈樟芝萃取物可致使肺癌細胞A549、肝癌細胞Huh7、乳癌細胞MDA-MB 231、以及大腸癌細胞HT 29的細胞存活率(cell viability)下降至少50%。
於前述用於輔助治療癌症的醫藥組合物的該第三實施例中，其中，所述特定癌症係選自於以下群組之中的任一者：肺癌、肝癌、乳癌、與大腸癌。
為了能夠更清楚地描述本發明所提出之一種用於輔助治療癌症的醫藥組合物，以下將配合圖式，詳盡說明本發明之較佳實施例。
牛樟芝(Antrodia cinnamomea
)是非常珍貴的一種藥用真菌，主產地為台灣，亦被稱為Taiwanofungus camphoratus
。目前，牛樟芝的人工培植方式係分為:液體發酵法、固體培養法與椴木栽培法。研究資料顯示，藉由椴木栽培法所生產的樟芝子實體係具有良好的抗氧化及抗癌的特性。
第一實施例
本發明所提出的一種用於輔助治療癌症的醫藥組合物的第一實施例即為牛樟芝(Antrodia camphorata
)的萃取物，且該萃取物可以是一牛樟芝水萃物(water extract ofTaiwanofungus camphoratus
, TCWE)或一牛樟芝酒萃物(ethanol extract ofTaiwanofungus camphoratus
, TCEE)。
於本發明中，係以牛樟芝酒萃物作為示範性的實施例，並藉由細胞實驗證實所述牛樟芝酒萃物具備輔助治療癌症之功效。其中，該牛樟芝酒萃物係透過一萃取製程而製得，且該萃取製程係包括以下製程步驟： 步驟(S1)：備好10克之乾燥牛樟芝子實體粉末並以400毫升的乙醇作為提取液，接著於45-60℃下對該乾燥牛樟芝子實體粉末進行萃取，歷時24小時； 步驟(S2)：收集前述步驟(S1)之一第一萃取液並過濾之，進而得到一第一過濾萃取液以及經過一次萃取之該乾燥牛樟芝子實體粉末； 步驟(S3)：以400毫升的乙醇為提取液，然後於45-60℃之下對經過一次萃取之該乾燥牛樟芝子實體粉末進行再次萃取，歷時24小時； 步驟(S4)：收集前述步驟(S3)之一第二萃取液並過濾之，進而得到一第二過濾萃取液； 步驟(S5)：混合該第一過濾萃取液與該第二過濾萃取液，得到一混合萃取液，並將該混合萃取液以氮氣吹乾方式濃縮至濃稠狀； 步驟(S6)：加入1-2mL的二甲基亞碸(Dimethyl sulfoxide, DMSO)於該混合萃取液之中，以獲得一樣品溶液； 步驟(S7)：將上述步驟(S6)所獲得的樣品溶液以0.22-0.45um孔洞的膜過濾，去除樣品溶液中之微生物，然後取適當劑量(0-250 µg/mL)進行細胞實驗。
另一方面，廣義上的靈芝指的是靈芝科，而狹義上的靈芝則指被廣泛栽培的特定種類。靈芝被發現具有良好的保健功效，並依色澤不同可以分為：赤芝、黃芝、白芝、青芝、黑芝、紫芝六種。於本發明中，係以赤芝(Ganoderma lucidum
)的一萃取物作為用於輔助治療癌症的醫藥組合物的第二實施例。於本發明中，所述靈芝的萃取物可以是一靈芝水萃物或一靈芝酒萃物，其中該靈芝酒萃物係可透過上述步驟(S1)至步驟(S6)而製得。
獲得牛樟芝酒萃物與靈芝酒萃物(即，第一實施例與第二實施例)之後，接著本案發明人完成第一實驗以確定所述牛樟芝酒萃物與所述靈芝酒萃物的正常使用劑量範圍。於第一實驗中，係以牛樟芝酒萃物與靈芝酒萃物處理人類表皮細胞HUVEC，歷時48小時。請參閱圖1，係顯示細胞存活率相對萃取物濃度的資料曲線圖。由圖1，吾人可以發現的是，高濃度的牛樟芝酒萃物(285.2 µg/mL)與靈芝酒萃物(377.4 µg/mL)與對於人類表皮細胞HUVEC產生抑制效果。
繼續地，為了證實本發明所提出的醫藥組合物之輔助治療癌症效果，本案發明人又完成第二實驗。於第二實驗中，係以劑量介於0 µg/mL至250 µg/mL之間的牛樟芝酒萃物分別處理肺癌細胞A549、肝癌細胞Huh7、乳癌細胞MDA-MB 231、以及大腸癌細胞HT 29。請參閱圖2，係顯示細胞存活率相對牛樟芝酒萃物濃度的資料曲線圖。同時，牛樟芝酒萃物對於肺癌細胞A549、肝癌細胞Huh7、乳癌細胞MDA-MB 231、以及大腸癌細胞HT 29之細胞存活率的半抑制濃度(half maximal inhibitory concentration)係整理於下列表(一)之中。如此，第二實驗的實驗數據係證實所述牛樟芝酒萃物(即，第一實施例)的確能夠致使肺癌細胞A549、肝癌細胞Huh7、乳癌細胞MDA-MB 231、以及大腸癌細胞HT 29的細胞存活率(cell viability)下降至少50%；亦即，所述牛樟芝酒萃物具有治療肺癌、肝癌、乳癌、與大腸癌之醫藥功效。 表(一)
進一步地，本案發明人又完成第三實驗。於第三實驗中，係以劑量介於0 µg/mL至250 µg/mL之間的靈芝酒萃物分別處理肺癌細胞A549、肝癌細胞Huh7、乳癌細胞MDA-MB 231、以及大腸癌細胞HT 29。請參閱圖3，係顯示細胞存活率相對靈芝酒萃物濃度的資料曲線圖。同時，靈芝酒萃物對於肺癌細胞A549、肝癌細胞Huh7、乳癌細胞MDA-MB 231、以及大腸癌細胞HT 29之細胞存活率的半抑制濃度係整理於下列表(二)之中。如此，第三實驗的實驗數據係證實所述靈芝酒萃物(即，第三實施例)的確能夠致使肺癌細胞A549、肝癌細胞Huh7、乳癌細胞MDA-MB 231、以及大腸癌細胞HT 29的細胞存活率(cell viability)下降至少50%；亦即，所述靈芝酒萃物具有治療肺癌、肝癌、乳癌、與大腸癌之醫藥功效。 表(二)
除了以牛樟芝酒萃物及靈芝酒萃物分別作為本發明之醫藥組合物的第一實施例與第二實施例以外，本案發明人又將所述牛樟芝酒萃物與所述靈芝酒萃物依一特定混合比例混成一靈樟芝酒萃物，藉以作為本發明之醫藥組合物的一第三實施例。其中，該特定混合比例係介於1:1至10:1之間。
為了證實所述醫藥組合物之第三實施例的輔助治療癌症效果，本案發明人又完成第四實驗。於第四實驗中，係首先依3.56:1的混合比例將一牛樟芝酒萃物與一靈芝酒萃物混成一靈樟芝酒萃物；接著，再以劑量介於0 µg/mL至250 µg/mL之間的靈樟芝酒萃物分別處理肺癌細胞A549、肝癌細胞Huh7、乳癌細胞MDA-MB 231、以及大腸癌細胞HT 29。請參閱圖4，係顯示細胞存活率相對靈樟芝酒萃物濃度的資料曲線圖。同時，靈樟芝酒萃物對於肺癌細胞A549、肝癌細胞Huh7、乳癌細胞MDA-MB 231、以及大腸癌細胞HT 29之細胞存活率的半抑制濃度(half maximal inhibitory concentration)係整理於下列表(三)之中。如此，第四實驗的實驗數據係證實所述靈樟芝酒萃物(即，第三實施例)的確能夠致使肺癌細胞A549、肝癌細胞Huh7、乳癌細胞MDA-MB 231、以及大腸癌細胞HT 29的細胞存活率(cell viability)下降至少50%；亦即，所述靈樟芝酒萃物具有治療肺癌、肝癌、乳癌、與大腸癌之醫藥功效。 表(三)
值得說明的是，熟悉醫藥組合物的生技工程師可以透過表(一)、表(二)與表(三)發現，在相同的劑量下，靈樟芝酒萃物(第三實施例)對於癌細胞的抑制功效係高於牛樟芝酒萃物(第一實施例)，並且，牛樟芝酒萃物(第一實施例)對於癌細胞的抑制功效又高於靈芝酒萃物(第二實施例)。簡單的說，由牛樟芝酒萃物與靈芝酒萃物混合而成的靈樟芝酒萃物能夠以更低的劑量致使肺癌細胞A549、肝癌細胞Huh7、乳癌細胞MDA-MB 231、以及大腸癌細胞HT 29的細胞存活率(cell viability)下降至少50%。由此可知，可見靈芝酒萃物可以輔助提升牛樟芝酒萃物的細胞毒殺功效。
如此，上述係已完整且清楚地說明本發明之用於輔助治療癌症的醫藥組合物，經由上述，可以得知本發明係具有下列之優點：
(1)不同於習知技術係以抗癌藥或放射線物質來達成致死癌細胞的效果，本發明係以牛樟芝酒萃物、靈芝酒萃物、或靈樟芝酒萃物作為新穎的醫藥組合物，以達成致死肺癌細胞A549、肝癌細胞Huh7、乳癌細胞MDA-MB 231、以及大腸癌細胞HT 29的醫療功效。
(2)此外，相較於習用的抗癌藥或放射線物質多具有導致患者噁心、嘔吐、食欲不振等副作用，本發明之牛樟芝酒萃物、靈芝酒萃物、或靈樟芝酒萃物除了可以達到致死癌細胞的功效外，同時還具有清熱解毒、增強免疫力作用、增加食慾之功效。
必須加以強調的是，上述之詳細說明係針對本發明可行實施例之具體說明，惟該實施例並非用以限制本發明之專利範圍，凡未脫離本發明技藝精神所為之等效實施或變更，均應包含於本案之專利範圍中。
＜本發明＞
無
無
＜習知＞
無
無
圖1係顯示顯示細胞存活率相對萃取物濃度的資料曲線圖； 圖2係顯示細胞存活率相對牛樟芝酒萃物濃度的資料曲線圖； 圖3係顯示細胞存活率相對靈芝酒萃物濃度的資料曲線圖； 圖4係顯示細胞存活率相對靈樟芝酒萃物濃度的資料曲線圖。
Claims (13)
- 一種用於輔助治療癌症的醫藥組合物，係為一牛樟芝(Antrodia camphorata )的一萃取物；其中，一特定劑量介於50 µg/mL至250 µg/mL之間的該萃取物係具有治療一特定癌症之功效。
- 如申請專利範圍第1項所述之用於輔助治療癌症的醫藥組合物，其中，該萃取物可為下列任一者：牛樟芝水萃物或牛樟芝酒萃物。
- 如申請專利範圍第1項所述之用於輔助治療癌症的醫藥組合物，其中，該特定癌症係選自於以下群組之中的任一者：肺癌、肝癌、乳癌、與大腸癌。
- 如申請專利範圍第3項所述之用於輔助治療癌症的醫藥組合物，其中，該萃取物可致使肺癌細胞A549、肝癌細胞Huh7、乳癌細胞MDA-MB 231、以及大腸癌細胞HT 29的細胞存活率(cell viability)下降至少50%。
- 一種用於輔助治療癌症的醫藥組合物，係一靈芝(Ganoderma lucidum )的一萃取物；其中，一特定劑量介於50 µg/mL至250 µg/mL之間的該萃取物係具有治療一特定癌症之功效。
- 如申請專利範圍第5項所述之用於輔助治療癌症的醫藥組合物，其中，該萃取物可為下列任一者：靈芝水萃物或靈芝酒萃物。
- 如申請專利範圍第5項所述之用於輔助治療癌症的醫藥組合物，其中，該特定癌症係選自於以下群組之中的任一者：肺癌、肝癌、乳癌、與大腸癌。
- 如申請專利範圍第7項所述之用於輔助治療癌症的醫藥組合物，其中，該萃取物可致使肺癌細胞A549、肝癌細胞Huh7、乳癌細胞MDA-MB 231、大腸癌細胞HT 29的細胞存活率(cell viability)下降至少50%。
- 一種用於輔助治療癌症的醫藥組合物，係為一牛樟芝萃取物與一靈芝萃取物的一靈樟芝萃取物；其中，一特定劑量介於50 µg/mL至200 µg/mL之間的該靈樟芝萃取物係具有治療一特定癌症之功效。
- 如申請專利範圍第9項所述之用於輔助治療癌症的醫藥組合物，其中，該靈芝萃取物可為一靈芝水萃物或一靈芝酒萃物；並且，該牛樟芝萃取物可為一牛樟芝水萃物或一牛樟芝酒萃物。
- 如申請專利範圍第9項所述之用於輔助治療癌症的醫藥組合物，其中，該牛樟芝萃取物與該靈芝萃取物之間係具有一特定混合比例，且該特定混合比例係介於1:1至10:1之間。
- 如申請專利範圍第9項所述之用於輔助治療癌症的醫藥組合物，其中，該特定癌症係選自於以下群組之中的任一者：肺癌、肝癌、乳癌、與大腸癌。
- 如申請專利範圍第12項所述之用於輔助治療癌症的醫藥組合物，其中，該靈樟芝萃取物可致使肺癌細胞A549、肝癌細胞Huh7、乳癌細胞MDA-MB 231、以及大腸癌細胞HT 29的細胞存活率(cell viability)下降至少50%。
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