TW201629088A - 免疫調節劑 - Google Patents

免疫調節劑 Download PDF

Info

Publication number
TW201629088A
TW201629088A TW104133278A TW104133278A TW201629088A TW 201629088 A TW201629088 A TW 201629088A TW 104133278 A TW104133278 A TW 104133278A TW 104133278 A TW104133278 A TW 104133278A TW 201629088 A TW201629088 A TW 201629088A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
instance
group
minutes
cancer
methyl
Prior art date
Application number
TW104133278A
Other languages
English (en)
Inventor
力強 孫
趙倩
艾瑞克 莫
艾瑞克Ｐ 吉利斯
保羅 麥可 史格拉
Original Assignee
必治妥美雅史谷比公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=54330101&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=TW201629088(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by 必治妥美雅史谷比公司 filed Critical 必治妥美雅史谷比公司
Publication of TW201629088A publication Critical patent/TW201629088A/zh

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/12—Cyclic peptides, e.g. bacitracins; Polymyxins; Gramicidins S, C; Tyrocidins A, B or C
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/50—Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link
    • C07K7/54—Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link with at least one abnormal peptide link in the ring
    • C07K7/56—Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link with at least one abnormal peptide link in the ring the cyclisation not occurring through 2,4-diamino-butanoic acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/64—Cyclic peptides containing only normal peptide links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/10—Peptides having 12 to 20 amino acids
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/70503—Immunoglobulin superfamily, e.g. VCAMs, PECAM, LFA-3
    • G01N2333/70532—B7 molecules, e.g. CD80, CD86
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
    • G01N2500/02—Screening involving studying the effect of compounds C on the interaction between interacting molecules A and B (e.g. A = enzyme and B = substrate for A, or A = receptor and B = ligand for the receptor)
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/26—Infectious diseases, e.g. generalised sepsis
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

本發明提供新穎巨環肽，其抑制PD-1/PD-L1及PD-L1/CD80蛋白質/蛋白質相互作用且因此適用於改善各種疾病，包括癌症及感染性疾病。

Description

免疫調節劑
本發明提供新穎巨環肽，其抑制PD-1/PD-L1及CD80/PD-L1蛋白質/蛋白質相互作用且因此適用於改善各種疾病，包括癌症及感染性疾病。
蛋白質漸進式死亡1(PD-1)為受體CD28家族之抑制成員，亦包括CD28、CTLA-4、ICOS及BTLA。PD-1表現於活化B細胞、T細胞及骨髓細胞上(Agata等人，見上文；Okazaki等人，Curr.Opin.Immunol.,14：779-782(2002)；Bennett等人，J.Immunol.,170：711-718(2003))。
PD-1蛋白質為作為Ig基因超家族之一部分的55kDa I型跨膜蛋白(Agata等人，Int.Immunol.,8：765-772(1996))。PD-1含有膜近端免疫受體酪胺酸抑制基元(ITIM)及膜遠端基於酪胺酸之切換基元(ITSM)(Thomas,M.L.,J.Exp.Med.,181：1953-1956(1995)；Vivier,E.等人，Immunol.Today,18：286-291(1997))。雖然結構上與CTLA-4類似，但PD-1缺乏對CD80 CD86(B7-2)結合至關重要的MYPPY基元。已鑑別PD-1之兩種配位體，PD-L1(B7-H1)及PD-L2(b7-DC)。已展示在與表現PD-L1或PD-L2之細胞相互作用後，表現PD-1之T細胞的活化下調(Freeman等人，J.Exp.Med.,192：1027-1034(2000)；Latchman等人，Nat.Immunol.,2：261-268(2001)；Carter等人，Eur.J.Immunol.,32：634-643(2002))。PD-L1及PD-L2皆為B7蛋白質家族成員，其結合至PD-1，但不結合至其他CD28家族成員。PD-L1配位體在多種人類 癌症中為充足的(Dong等人，Nat.Med.,8：787-789(2002))。PD-1與PD-L1之間的相互作用導致腫瘤浸潤性淋巴球減少、T細胞受體介導之增生減少及癌細胞免疫逃避(Dong等人，J.Mol.Med.,81：281-287(2003)；Blank等人，Cancer Immunol.Immunother.,54：307-314(2005)；Konishi等人，Clin.Cancer Res.,10：5094-5100(2004))。免疫抑制可藉由抑制PD-1與PD-L1之局部相互作用而逆轉，且當PD-1與PD-L2之相互作用亦阻斷時，效應相加(Iwai等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,99：12293-12297(2002)；Brown等人，J.Immunol.,170：1257-1266(2003))。
亦已展示PD-L1與CD80相互作用(Butte MJ等人，Immunity；27：111-122(2007))。已展示PD-L1/CD80對表現免疫細胞之相互作用為抑制相互作用。已展示阻斷此相互作用即消除此抑制相互作用(Paterson AM等人，J Immunol.,187：1097-1105(2011)；Yang J等人，J Immunol.Aug 1；187(3)：1113-9(2011))。
當表現PD-1之T細胞接觸表現其配位體之細胞時，響應於抗原性刺激之功能活性(包括增生、細胞激素分泌及細胞毒性)減少。PD-1/PD-L1或PD-L2相互作用在感染或腫瘤溶解期間或在自身耐受性出現期間下調免疫反應(Keir,M.E.等人，Annu.Rev.Immunol.,26：Epub(2008))。慢性抗原刺激，諸如在腫瘤疾病或慢性感染期間出現之慢性抗原刺激，導致T細胞表現升高含量之PD-1且在針對慢性抗原之活性方面功能異常(評述於Kim等人，Curr.Opin.Imm.(2010)中)。此稱為「T細胞耗竭」。B細胞亦呈現PD-1/PD-配位體抑制及「耗竭」。
已展示使用針對PD-L1之抗體阻斷PD-1/PD-L1接合恢復且強化許多系統中之T細胞活化。患有晚期癌症之患者受益於使用針對PD-L1之單株抗體的療法(Brahmer等人，New Engl.J.Med.(2012))。腫瘤及慢性感染之臨床前動物模型已展示藉由單株抗體阻斷PD-1/PD-L1路徑 可增強免疫反應且引起腫瘤排斥反應或控制感染。經由PD-1/PD-L1阻斷之抗腫瘤免疫療法可強化針對許多組織學相異腫瘤之治療性免疫反應(Dong,H.等人，「B7-H1 pathway and its role in the evasion of tumor immunity」,J.Mol.Med.,81(5)：281-287(2003)；Dong,H.等人，「Tumor-associated B7-H1 promotes T-cell apoptosis：a potential mechanism of immune evasion」,Nat.Med.,8(8)：793-800(2002))。
干擾PD-1/PD-L1相互作用使得具有慢性感染之系統中的T細胞活性增強。阻斷PD-L1使得具有慢性淋巴球性脈絡叢腦膜炎病毒感染之小鼠改良病毒清除且恢復免疫力(Barber,D.L.等人，「Restoring function in exhausted CD8 T cells during chronic viral infection」,Nature,439(7077)：682-687(2006))。感染HIV-1之人類化小鼠展示CD4+ T細胞針對病毒血症之保護及病毒消耗增強(Palmer等人，J.Immunol.(2013))。經由針對PD-L1之單株抗體阻斷PD-1/PD-L1可恢復HIV患者(Day,Nature(2006)；Petrovas,J.Exp.Med.(2006)；Trautman,Nature Med.(2006)；D'Souza,J.Immunol.(2007)；Zhang,Blood(2007)；Kaufmann,Nature Imm.(2007)；Kasu,J.Immunol.(2010)；Porichis,Blood(2011)),HCV patients(Golden-Mason,J.Virol.(2007)；Jeung,J.Leuk.Biol.(2007)；Urbani,J.Hepatol.(2008)；Nakamoto,PLoS Path.(2009)；Nakamoto,Gastroenterology(2008))及HBV患者(Boni,J.Virol.(2007)；Fisicaro,Gastro.(2010)；Fisicaro等人，Gastroenterology(2012)；Boni等人，Gastro.(2012)；Penna等人，J.Hep.(2012)；Raziorrough,Hepatology(2009)；Liang,World J.Gastro.(2010)；Zhang,Gastro.(2008))之T細胞的活體外抗原特異性功能。
亦已展示阻斷PD-L1/CD80相互作用刺激免疫力(Yang J.等人，J Immunol.Aug 1；187(3)：1113-9(2011))。已展示由PD-L1/CD80相互作用之阻斷產生的免疫刺激經由與另外PD-1/PD-L1或PD-1/PD-L2相互 作用之阻斷組合而增強。
假設免疫細胞表型改變為敗血性休克之重要因素(Hotchkiss等人，Nat Rev Immunol(2013))。此等改變包括PD-1及PD-L1之含量增加(Guignant等人，Crit.Care(2011))，PD-1及PD-L1之含量增加的敗血性休克患者的細胞展現T細胞細胞凋亡水準增加。針對PD-L1之抗體可降低免疫細胞凋亡之水準(Zhang等人，Crit.Care(2011))。此外，缺少PD-1表現之小鼠與野生型小鼠相比對敗血性休克症狀更具抗性。YangJ.等人，J Immunol.Aug 1；187(3)：1113-9(2011))。研究已揭示使用抗體阻斷PD-L1相互作用可抑制不當免疫反應且改善病徵。
除增強對慢性抗原之免疫反應以外，亦已展示阻斷PD-1/PD-L1路徑增強對疫苗接種(包括在慢性感染之情形下的治療性疫苗接種)之反應(Ha,S.J.等人，「Enhancing therapeutic vaccination by blocking PD-1-mediated inhibitory signals during chronic infection」,J.Exp.Med.,205(3)：543-555(2008)；Finnefrock,A.C.等人，「PD-1 blockade in rhesus macaques：impact on chronic infection and prophylactic vaccination」,J.Immunol.,182(2)：980-987(2009)；Song,M.-Y.等人，「Enhancement of vaccine-induced primary and memory CD8+ t-cell responses by soluble PD-1」,J.Immunother.,34(3)：297-306(2011))。
本文所述之分子在生物化學及基於細胞之實驗系統中證明阻斷PD-L1與PD-1之相互作用的能力。此等結果與治療性投與增強癌症或慢性感染之免疫力的潛能(包括治療性疫苗)相符。
本文所述之巨環肽能夠抑制PD-L1與PD-1及與CD80之相互作用。此等化合物已證明高度有效結合至PD-L1、阻斷PD-L1與PD-1或CD80之相互作用且能夠促進增強T細胞功能活性，因此使其成為非經腸、經口、經肺、經鼻、經頰及持續釋放調配物之候選物。
在一個態樣中，本發明提供一種式(I)化合物 或其醫藥學上可接受之鹽，其中：A係選自-CH2CH2-； 其中： 表示羰基之連接點且表示氮原子之連接點； n為0、1或2；m為1或2；m'為0或1；z為1或2；當z為1時，w為2； 當z為2時，w為1或2；p為0、1或2；R14及R15獨立地選自氫及甲基；Rx係選自氫、胺基、羥基及甲基；及Rz 係選自氫及-C(O)NHR16；其中R16係選自氫、-CHR17C(O)NH2、-CHR17C(O)NHCHR18C(O)NH2及-CHR17C(O)NHCHR18C(O)NHCH2C(O)NH2；其中R17係選自氫及-CH2OH且其中R18係選自氫及甲基；Rv為氫、甲基或天然胺基酸側鏈；Rc、Rf、Rh、Ri及Rm為氫；Rn為氫或甲基，或Rv及Rn形成吡咯啶環；Ra、Re、Rj及Rk各自獨立地選自氫及甲基；R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12及R13獨立地選自天然胺基酸側鏈及非天然胺基酸側鏈或如下所述與相應鄰近R基團一起形成環；Re及Rk可各與相應鄰近R基團及其所連接之原子一起形成選自氮雜環丁烷、吡咯啶、嗎啉、哌啶、哌嗪及四氫噻唑之環；其中各環視情況經一至四個獨立地選自胺基、氰基、甲基、鹵基及羥基之基團取代；Rb為甲基，或Rb及R2與其所連接之原子一起形成選自氮雜環丁烷、吡咯啶、嗎啉、哌啶、哌嗪及四氫噻唑之環；其中各環視情況經一至四個獨立地選自胺基、氰基、甲基、鹵基及羥基之基團取代；Rd為氫或甲基，或Rd及R4與其所連接之原子一起可形成選自氮雜環丁烷、吡咯啶、嗎啉、哌啶、哌嗪及四氫噻唑之環；其中各環視情況經一至四個獨立地選自胺基、氰基、甲基、鹵基、羥基及苯基之基團取代； Rg為氫或甲基，或Rg及R7與其所連接之原子一起可形成選自氮雜環丁烷、吡咯啶、嗎啉、哌啶、哌嗪及四氫噻唑之環；其中各環視情況經一至四個獨立地選自以下之基團取代：胺基、視情況經鹵基取代之苯甲基、苯甲氧基、氰基、環己基、甲基、鹵基、羥基、視情況經甲氧基取代之異喹啉基氧基、視情況經鹵基取代之喹啉基氧基及四唑基；且其中該吡咯啶及該哌啶環視情況與環己基、苯基或吲哚基稠合；及RL為甲基，或RL及R12與其所連接之原子一起形成選自氮雜環丁烷及吡咯啶之環，其中各環視情況經一至四個獨立地選自胺基、氰基、甲基、鹵基及羥基之基團取代。
在第一態樣之第一實施例中，本發明提供一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中：Rd及R4與其所連接之原子一起形成吡咯啶環；Rg及R7與其所連接之原子一起形成吡咯啶環，其中該環視情況經一個羥基取代；及Rk為甲基。
在第一態樣之第二實施例中，本發明提供一種式(I)化合物或其治療學上可接受之鹽，其中：Rd及R4與其所連接之原子一起形成吡咯啶環；Rg及R7與其所連接之原子一起形成吡咯啶環，其中該環視情況經一個羥基取代；Rk為甲基Ra、Re及Rj為氫；Rb及R2各為甲基，或Rb及R2與其所連接之原子一起形成哌啶環；RL為甲基；Rn為氫、甲基，或Rn及Rv形成吡咯啶環； R1為苯基甲基，其中該苯基經一個選自鹵基、羥基、甲氧基或甲基之基團取代；R3係選自-CH2C(O)NH2及-CH2CO2H；R5係選自氫、-CH2NH2、-CH2(咪唑基)及-CH2C(O)NH2；R6 係選自-CH2CH(CH3)2、-(CH2)4NH2、-(CH2)2CO2H及(CH2)2C(O)NH2；R8及R10為-CH2(吲哚基)，其中該吲哚基視情況經-CH2CO2H取代；R9 係選自氫、-(CH2)2NH2、-(CH2)4NH2、-CH2OH及-CH2C(O)NH2；R11及R12為-(CH2)3CH3；及R13係選自甲基、-CH2OH、-CH2CH(CH3)2及-(CH2)2CO2H。
在第一態樣之第三實施例中，本發明提供一種式(I)化合物或其治療學上可接受之鹽，其中：Rd及R4與其所連接之原子一起形成吡咯啶環；Rg及R7與其所連接之原子一起形成吡咯啶環，其中該環視情況經一個羥基取代；Rk為甲基Ra、Re及Rj為氫；Rb及R2各為甲基，或Rb及R2與其所連接之原子一起形成哌啶環；RL為甲基；Rn為氫、甲基，或Rn及Rv形成吡咯啶環；R1為苯基甲基，其中該苯基經一個選自鹵基、羥基、甲氧基或甲基之基團取代；R3係選自-CH2C(O)NH2及-CH2CO2H；R5係選自氫、-CH2NH2、-CH2(咪唑基)及-CH2C(O)NH2； R6 係選自-CH2CH(CH3)2、-(CH2)4NH2、-(CH2)2CO2H及(CH2)2C(O)NH2；R8及R10為-CH2(吲哚基)，其中該吲哚基視情況經-CH2CO2H取代；R9 係選自氫、-(CH2)2NH2、-(CH2)4NH2、-CH2OH及-CH2C(O)NH2；R11及R12為-(CH2)3CH3；及R13係選自甲基、-CH2OH、-CH2CH(CH3)2及-(CH2)2CO2H；及A為-CH2CH2。
在第一態樣之第四實施例中，本發明提供一種式(I)化合物或其治療學上可接受之鹽，其中：Rd及R4與其所連接之原子一起形成吡咯啶環；Rg及R7與其所連接之原子一起形成吡咯啶環，其中該環視情況經一個羥基取代；Rk為甲基Ra、Re及Rj為氫；Rb及R2各為甲基，或Rb及R2與其所連接之原子一起形成哌啶環；RL為甲基；Rn為氫、甲基，或Rn及Rv形成吡咯啶環；R1為苯基甲基，其中該苯基經一個選自鹵基、羥基、甲氧基或甲基之基團取代；R3係選自-CH2C(O)NH2及-CH2CO2H；R5係選自氫、-CH2NH2、-CH2(咪唑基)及-CH2C(O)NH2；R6 係選自-CH2CH(CH3)2、-(CH2)4NH2、-(CH2)2CO2H及(CH2)2C(O)NH2；R8及R10為-CH2(吲哚基)，其中該吲哚基視情況經-CH2CO2H取 代；R9 係選自氫、-(CH2)2NH2、-(CH2)4NH2、-CH2OH及-CH2C(O)NH2；R11及R12為-(CH2)3CH3；及R13係選自甲基、-CH2OH、-CH2CH(CH3)2及-(CH2)2CO2H；及 A為。
在第一態樣之第五實施例中，本發明提供一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中：Rd及R4與其所連接之原子一起形成吡咯啶環；Rg及R7與其所連接之原子一起形成吡咯啶環，其中該環視情況經一個羥基取代；Rk為甲基；Ra、Re及Rj為氫；Rb及R2各為甲基，或Rb及R2與其所連接之原子一起形成哌啶環；RL為甲基；Rn為氫、甲基，或Rn及Rv形成吡咯啶環；R1為苯基甲基，其中該苯基經一個選自鹵基、羥基、甲氧基或甲基之基團取代；R3係選自-CH2C(O)NH2及-CH2CO2H；R5係選自氫、-CH2NH2、-CH2(咪唑基)及-CH2C(O)NH2；R6 係選自-CH2CH(CH3)2、-(CH2)4NH2、-(CH2)2CO2H及(CH2)2C(O)NH2；R8及R10為-CH2(吲哚基)，其中該吲哚基視情況經-CH2CO2H取代； R9 係選自氫、-(CH2)2NH2、-(CH2)4NH2、-CH2OH及-CH2C(O)NH2；R11及R12為-(CH2)3CH3；及R13係選自甲基、-CH2OH、-CH2CH(CH3)2及-(CH2)2CO2H；及 A為。
在第一態樣之第六實施例中，本發明提供一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中：Rd及R4與其所連接之原子一起形成吡咯啶環；Rg及R7與其所連接之原子一起形成吡咯啶環，其中該環視情況經一個羥基取代；Rk為甲基Ra、Re及Rj為氫；Rb及R2各為甲基，或Rb及R2與其所連接之原子一起形成哌啶環；RL為甲基；Rn為氫、甲基，或Rn及Rv形成吡咯啶環；R1為苯基甲基，其中該苯基經一個選自鹵基、羥基、甲氧基或甲基之基團取代；R3係選自-CH2C(O)NH2及-CH2CO2H；R5係選自氫、-CH2NH2、-CH2(咪唑基)及-CH2C(O)NH2；R6 係選自-CH2CH(CH3)2、-(CH2)4NH2、-(CH2)2CO2H及(CH2)2C(O)NH2；R8及R10為-CH2(吲哚基)，其中該吲哚基視情況經-CH2CO2H取代；R9 係選自氫、-(CH2)2NH2、-(CH2)4NH2、-CH2OH及- CH2C(O)NH2；R11及R12為-(CH2)3CH3；及R13係選自甲基、-CH2OH、-CH2CH(CH3)2及-(CH2)2CO2H；及 A為。
在第一態樣之第七實施例中，本發明提供一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中：Rd及R4與其所連接之原子一起形成吡咯啶環；Rg及R7與其所連接之原子一起形成吡咯啶環，其中該環視情況經一個羥基取代；Rk為甲基Ra、Re及Rj為氫；Rb及R2各為甲基，或Rb及R2與其所連接之原子一起形成哌啶環；RL為甲基；Rn為氫、甲基，或Rn及Rv形成吡咯啶環；R1為苯基甲基，其中該苯基經一個選自鹵基、羥基、甲氧基或甲基之基團取代；R3係選自-CH2C(O)NH2及-CH2CO2H；R5係選自氫、-CH2NH2、-CH2(咪唑基)及-CH2C(O)NH2；R6 係選自-CH2CH(CH3)2、-(CH2)4NH2、-(CH2)2CO2H及(CH2)2C(O)NH2；R8及R10為-CH2(吲哚基)，其中該吲哚基視情況經-CH2CO2H取代；R9 係選自氫、-(CH2)2NH2、-(CH2)4NH2、-CH2OH及-CH2C(O)NH2； R11及R12為-(CH2)3CH3；及R13係選自甲基、-CH2OH、-CH2CH(CH3)2及-(CH2)2CO2H；及 A為。
在第二態樣中，本發明提供一種式(II)化合物， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中：A係選自-CH2CH2-； 其中： 表示羰基之連接點且表示氮原子之連接點； n為0或1；m為1或2； z為1或2；當z為1時，w為2；當z為2時，w為1或2；p為0、1或2；R14及R15獨立地選自氫及甲基；及Rz 係選自氫及-C(O)NHR16；其中R16係選自氫、-CHR17C(O)NH2、-CHR17C(O)NHCHR18C(O)NH2及-CHR17C(O)NHCHR18C(O)NHCH2C(O)NH2；其中R17係選自氫及-CH2OH且其中R18係選自氫及甲基；Rv為氫或天然胺基酸側鏈；Rc、Rf、Rh、Ri及Rm為氫；Rn為氫或甲基，或Rv及Rn形成吡咯啶環；Ra、Re、Rj及Rk各自獨立地選自氫及甲基；R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12及R13獨立地選自天然胺基酸側鏈及非天然胺基酸側鏈或如下所述與相應鄰近R基團一起形成環；Re及Rk可各與相應鄰近R基團及其所連接之原子一起形成選自氮雜環丁烷、吡咯啶、嗎啉、哌啶、哌嗪及四氫噻唑之環；其中各環視情況經一至四個獨立地選自胺基、氰基、甲基、鹵基及羥基之基團取代；Rb為甲基，或Rb及R2與其所連接之原子一起形成選自氮雜環丁烷、吡咯啶、嗎啉、哌啶、哌嗪及四氫噻唑之環；其中各環視情況經一至四個獨立地選自胺基、氰基、甲基、鹵基及羥基之基團取代；Rd為氫或甲基，或Rd及R4與其所連接之原子一起可形成選自氮雜環丁烷、吡咯啶、嗎啉、哌啶、哌嗪及四氫噻唑之環；其中各環視情況經一至四個獨立地選自胺基、氰基、甲基、鹵基、羥基及苯基之基 團取代；Rg為氫或甲基，或Rg及R7與其所連接之原子一起可形成選自氮雜環丁烷、吡咯啶、嗎啉、哌啶、哌嗪及四氫噻唑之環；其中各環視情況經一至四個獨立地選自以下之基團取代：胺基、視情況經鹵基取代之苯甲基、苯甲氧基、氰基、環己基、甲基、鹵基、羥基、視情況經甲氧基取代之異喹啉基氧基、視情況經鹵基取代之喹啉基氧基及四唑基；且其中該吡咯啶及該哌啶環視情況與環己基、苯基或吲哚基稠合；及RL為甲基，或RL及R12與其所連接之原子一起形成選自氮雜環丁烷及吡咯啶之環，其中各環視情況經一至四個獨立地選自胺基、氰基、甲基、鹵基及羥基之基團取代。
在第三態樣中，本發明提供一種增強、刺激及/或增加有需要之個體的免疫反應的方法，該方法包含向該個體投與治療有效量之式(I)化合物或其治療學上可接受之鹽。在第一實施例中，該方法另外包含在式(I)化合物或其治療學上可接受之鹽之前、之後或同時投與額外藥劑。在第二實施例中，該額外藥劑為抗微生物劑、抗病毒劑、細胞毒性劑及/或免疫反應調節劑。在第三實施例中，該額外藥劑為HDAC抑制劑。在第四實施例中，該額外藥劑為TLR7及/或TLR8促效劑。
在第四態樣中，本發明提供一種抑制有需要之個體之癌細胞生長、增生或癌轉移的方法，該方法包含向該個體投與治療有效量之式(I)化合物或其治療學上可接受之鹽。應理解，該抑制可為直接或間接的。在第一實施例中，該癌症係選自黑素瘤、腎細胞癌、鱗狀非小細胞肺癌(NSCLC)、非鱗狀NSCLC、結腸直腸癌、去勢療法無效之前列腺癌、卵巢癌、胃癌、肝細胞癌、胰臟癌、頭頸部鱗狀細胞癌、食道癌、胃腸道癌及乳癌、及血液科惡性病。
在第五態樣中，本發明提供一種治療有需要之個體之感染性疾 病的方法，該方法包含向該個體投與治療有效量之式(I)化合物或其治療學上可接受之鹽。在第一實施例中，該感染性疾病由病毒引起。在第二實施例中，該病毒係選自HIV、A型肝炎、B型肝炎、C型肝炎、疱疹病毒及流感。
在第六態樣中，本發明提供一種治療有需要之個體之敗血性休克的方法，該方法包含向該個體投與治療有效量之本文所述之一或多種巨環肽。
在第七態樣中，本發明提供一種阻斷個體之PD-L1與PD-1及/或CD80之相互作用的方法，該方法包含向該個體投與治療有效量之本文所述之至少一種巨環肽。
在R側鏈為經甲基取代之環之一部分的式(I)及(II)化合物中，應理解該甲基可在環中任何可取代之碳原子上，包括作為巨環母結構之一部分的碳。
在式(I)化合物中，較佳R1側鏈為：苯丙胺酸、酪胺酸、3-噻吩-2-基、4-甲基苯丙胺酸、4-氯苯丙胺酸、3-甲氧基苯丙胺酸、異色胺酸、3-甲基苯丙胺酸、1-萘基丙胺酸、3,4-二氟苯丙胺酸、4-氟苯丙胺酸、3,4-二甲氧基苯丙胺酸、3,4-二氯苯丙胺酸、4-二氟甲基苯丙胺酸、2-甲基苯丙胺酸、2-萘基丙胺酸、色胺酸、4-吡啶基、4-溴苯丙胺酸、3-吡啶基、4-三氟甲基苯丙胺酸、4-羧基苯丙胺酸、4-甲氧基苯丙胺酸、聯苯丙胺酸及3-氯苯丙胺酸；及2,4-二胺基丁烷。
在R2並非環之一部分的式(I)化合物中，較佳R2側鏈為：丙胺酸、絲胺酸及甘胺酸。
在式(I)化合物中，較佳R3側鏈為：天冬醯胺、天冬胺酸、麩胺酸、麩醯胺酸、絲胺酸、鳥胺酸、離胺酸、組胺酸、蘇胺酸、白胺酸、丙胺酸、2,3-二胺基丙烷及2,4-二胺基丁烷。
在R4並非環之一部分的式(I)化合物中，較佳R4側鏈為：纈胺 酸、丙胺酸、異白胺酸及甘胺酸。
在式(I)化合物中，較佳R5側鏈為：組胺酸、天冬醯胺、2,3-二胺基丙烷、絲胺酸、甘胺酸、2,4-二胺基丁烷、蘇胺酸、丙胺酸、離胺酸、天冬胺酸、丙胺酸及3-噻唑基丙胺酸。
在式(I)化合物中，較佳R6側鏈為：白胺酸、天冬胺酸、天冬醯胺、麩胺酸、麩醯胺酸、絲胺酸、離胺酸、3-環己烷、蘇胺酸、鳥胺酸、2,4-二胺基丁烷、丙胺酸、精胺酸及鳥胺酸(COCH3)。
在R7並非環之一部分的式(I)化合物中，較佳R7側鏈為：甘胺酸、2,4-二胺基丁烷、絲胺酸、離胺酸、精胺酸、鳥胺酸、組胺酸、天冬醯胺、麩醯胺酸、丙胺酸及2,4-二胺基丁烷(C(O)環丁烷)。
在式(I)化合物中，較佳R8側鏈為色胺酸及1,2-苯并異噻唑啉基丙胺酸。
在式(I)化合物中，較佳R9側鏈為：絲胺酸、組胺酸、離胺酸、鳥胺酸、2,4-二丁胺、蘇胺酸、離胺酸、甘胺酸、麩胺酸、纈胺酸、2,3-二胺基丙烷、精胺酸、天冬胺酸及酪胺酸。
在式(I)化合物中，較佳R10側鏈為：視情況經取代之色胺酸、苯并異噻唑基丙胺酸、1-萘基丙胺酸及甲硫胺酸。
在式(I)化合物中，較佳R11側鏈為：正白胺酸、白胺酸、天冬醯胺、苯丙胺酸、甲硫胺酸、乙氧基甲烷、丙胺酸、色胺酸、異白胺酸、苯基丙烷、麩胺酸、己烷及庚烷。
在R12並非環之一部分的式(I)化合物中，較佳R12側鏈為：正白胺酸、丙胺酸、乙氧基甲烷、甲硫胺酸、絲胺酸、苯丙胺酸、甲氧基乙烷、白胺酸、色胺酸、異白胺酸、麩胺酸、己烷、庚烷及甘胺酸。
在式(I)化合物中，較佳R13側鏈：精胺酸、鳥胺酸、丙胺酸、2,4-二胺基丁烷、2,3-二胺基丙烷、白胺酸、天冬胺酸、麩胺酸、絲胺酸、離胺酸、蘇胺酸、環丙基甲烷、甘胺酸、纈胺酸、異白胺酸、 組胺酸及2-胺基丁烷。
根據本發明，吾等已發現肽特異性結合至PD-L1且能夠抑制PD-L1與PD-1及CD80之相互作用。此等巨環肽展現活體外免疫調節功效，因此使其成為用於治療包括癌症及感染性疾病之各種疾病的治療性候選物。
術語「特異性結合(specific binding或specifically bind)」係指蛋白質與結合分子(諸如化合物或配位體)之間的相互作用。相互作用取決於由結合分子識別之蛋白質的特別結構(亦即酶結合位點、抗原決定子或抗原決定基)的存在。舉例而言，若化合物特異性結合蛋白質結合位點「A」，則在含有包括結合位點A之蛋白質及特異性結合至蛋白質結合位點A之經標記肽的反應物中存在該化合物將減小結合至該蛋白質之經標記肽的量。相比之下，化合物對蛋白質之非特異性結合並不導致經標記肽自蛋白質之濃度依賴性置換。
本發明意欲包括存在於本發明化合物中之原子的所有同位素。同位素包括原子數相同、但質量數不同之彼等原子。作為一般實例但非限制性地，氫之同位素包括氘及氚。碳之同位素包括13C及14C。本發明之同位素標記化合物一般可藉由熟習此項技術者已知之習知技術或藉由類似於本文所述之方法，使用適當同位素標記試劑代替原來使用之未標記試劑來製備。此類化合物可具有多種潛在用途，例如在測定生物活性時用作標準物及試劑。在穩定同位素之情況下，此類化合物可具有有利地調節生物學、藥理學或藥物動力學特性之潛能。
本文所述之標的物的另一態樣為所揭示之肽作為放射性標記配位體用於配位體結合分析之顯影或用於監測活體內吸附、代謝、分佈、受體結合或佔有率或化合物處置之用途。舉例而言，本文所述之巨環肽可使用放射性同位素125I製備，且所得放射性標記肽可用於顯影結合分析或用於代謝研究。作為替代方案且出於相同目的，本文所 述之巨環肽可藉由使用熟習此項技術者已知之方法的催化性氚化轉化成放射性標記形式。
本發明之巨環肽亦可藉由使用熟習此項技術者已知之方法添加放射性示蹤劑而用作PET成像劑。
較佳肽包括本文所提供之巨環肽中之至少一者且此等肽可包括於醫藥組合物及組合中。
除非在特定情形中另外限制，否則本文所提供之定義非限制性地適用於本說明書通篇所用的術語。
一般熟習胺基酸及肽化學之技術者瞭解胺基酸包括由以下通式結構表示之化合物：
其中R及R'如本文中所論述。
除非另外指明，否則如本文中單獨或作為另一基團之一部分使用之術語「胺基酸」包括(但不限於)連接至稱為「α」碳之同一碳的胺基及羧基，其中R及/或R'可為天然或非天然側鏈，包括氫。在「α」碳處之絕對「S」組態通常稱為「L」或「天然」組態。在「R」及「R'」(主要)取代基等於氫之情況下，胺基酸為甘胺酸且並非對掌性。
如本文所用，術語「天然胺基酸側鏈」及「天然存在之胺基酸側鏈」係指通常呈S-組態之任何天然存在之胺基酸(亦即L-胺基酸)(亦即丙胺酸、精胺酸、天冬醯胺、天冬胺酸、半胱胺酸、麩醯胺酸、麩胺酸、甘胺酸、-組胺酸、異白胺酸、白胺酸、離胺酸、甲硫胺酸、苯丙胺酸、脯胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、色胺酸、酪胺酸及纈胺酸)側鏈。
如本文所用，術語「非天然胺基酸側鏈」及「非天然存在之胺基酸側鏈」係指通常呈R-組態之任何天然存在之胺基酸(亦即D-胺基酸)側鏈或除呈R-或S-組態之天然存在之胺基酸側鏈(亦即分別D-或L-胺基酸)以外之選自以下之基團：C2-C7烯基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C6烷氧基羰基C1-C3烷基、C1-C7烷基、C1-C3烷基硫基C1-C3烷基、C1-C3烷基磺醯基C1-C3烷基、醯胺基C1-C3烷基、胺基C1-C3烷基、氮雜吲哚基C1-C3烷基、苯并噻唑基C1-C3烷基、苯并噻吩基C1-C3烷基、苯甲氧基C1-C3烷基、羧基C1-C3烷基、氰基C1-C3烷基、C3-C6環烷基C1-C3烷基、二苯甲基、呋喃基C1-C3烷基、鹵基C1-C3烷基、羥基C1-C3烷基、咪唑基C1-C3烷基、萘基C1-C3烷基、哌喃基C1-C3烷基、吡啶基C1-C3烷基、四氫呋喃基C1-C3烷基、噻唑基C1-C3烷基、噻吩基C1-C3烷基；聯苯C1-C3烷基，其中該聯苯視情況經選自C1-C3烷基、胺基、氰基、鹵基、羥基及硝基之基團取代；吲哚基C1-C3烷基，其中該吲哚基部分視情況經一個選自C1-C3烷基、羧基C1-C3烷基、氰基、鹵基、羥基、硝基及苯基之基團取代，其中該苯基另外視情況經一個、兩個或三個獨立地選自C1-C3烷氧基、C1-C3烷基及鹵基之基團取代；NRaRb(C1-C7烷基)，其中Ra及Rb獨立地選自氫、C2-C4烯氧基羰基、C1-C3烷氧基羰基、C1-C3烷基、C1-C3烷基羰基、C3-C6環烷基羰基、呋喃基羰基、苯基C1-C3烷基、苯基羰基、哌喃基羰基、四氫呋喃基羰基及噻吩基羰基。當烷基連接基團含有一個以上碳時，另一NRaRb基團可在鏈上。
NRcRd羰基C1-C3烷基，其中Rc及Rd獨立地選自氫、C3-C4烯基、C1-C3烷基、苯基C1-C3烷基及三苯甲基；苯基C1-C3烷基，其中該苯基部分視情況經一個、兩個、三個、 四個或五個獨立地選自以下之基團取代：C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、C1-C3烷基磺醯基胺基、醯胺基、胺基、胺基C1-C3烷基、胺基磺醯基、羧基、氰基、鹵基、鹵基C1-C3烷基、羥基、-NC(NH2)2、硝基及-OP(O)(OH)2；及苯氧基C1-C3烷基，其中該苯基視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之基團取代：C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、C1-C3烷基磺醯基胺基、醯胺基、胺基、胺基C1-C3烷基、胺基磺醯基、羧基、氰基、鹵基、鹵基C1-C3烷基、羥基及硝基。
如本文所用，術語「C2-C4烯基」係指具有二至四個碳原子、含有至少一個碳-碳雙鍵之直鏈或分支鏈基團。
如本文所用，術語「C3-C4烯基」係指具有三或四個碳原子、含有至少一個碳-碳雙鍵之直鏈或分支鏈基團。
如本文所用，術語「C2-C7烯基」係指具有二至七個碳原子、含有至少一個碳-碳雙鍵之直鏈或分支鏈基團。
如本文所用，術語「C2-C4烯氧基」係指經由氧原子連接至母分子部分之C2-C4烯基。
如本文所用，術語「C1-C3烷氧基」係指經由氧原子連接至母分子部分之C1-C3烷基。
如本文所用，術語「C1-C4烷氧基」係指經由氧原子連接至母分子部分之C1-C4烷基。
如本文所用，術語「C1-C6烷氧基」係指經由氧原子連接至母分子部分之C1-C6烷基。
如本文所用，術語「C1-C3烷氧基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之C1-C3烷氧基。
如本文所用，術語「C1-C3烷氧基羰基」係指經由羰基連接至母分子部分之C1-C3烷氧基。
如本文所用，術語「C1-C6烷氧基羰基」係指經由羰基連接至母分子部分之C1-C6烷氧基。
如本文所用，術語「C1-C6烷氧基羰基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之C1-C6烷氧基羰基。
如本文所用，術語「C1-C3烷基」係指衍生自含有一至三個碳原子之直鏈或分支鏈飽和烴之基團。
如本文所用，術語「C1-C4烷基」係指衍生自含有一至四個碳原子之直鏈或分支鏈飽和烴之基團。
如本文所用，術語「C1-C6烷基」係指衍生自含有一至六個碳原子之直鏈或分支鏈飽和烴之基團。
如本文所用，術語「C1-C3烷基羰基」係指經由羰基連接至母分子部分之C1-C3烷基。
如本文所用，術語「C1-C3烷基硫基」係指經由硫原子連接至母分子部分之C1-C3烷基。
如本文所用，術語「C1-C3烷基硫基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之C1-C3烷基硫基。
如本文所用，術語「C1-C3烷基磺醯基」係指經由磺醯基連接至母分子部分之C1-C3烷基。
如本文所用，術語「C1-C3烷基磺醯基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之C1-C3烷基磺醯基。
如本文所用，術語「C1-C3烷基磺醯基胺基」係指經由胺基連接至母分子部分之C1-C3烷基磺醯基。
如本文所用，術語「醯胺基」係指-C(O)NH2。
如本文所用，術語「醯胺基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之醯胺基。
如本文所用，術語「胺基」係指-NH2。
如本文所用，術語「胺基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之胺基。
如本文所用，術語「胺基磺醯基」係指經由磺醯基連接至母分子部分之胺基。
如本文所用，術語「氮雜吲哚基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子之氮雜吲哚基。氮雜吲哚基可經由基團中之任何可取代原子連接至烷基部分。
如本文所用，術語「苯并噻唑基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子之苯并噻唑基。苯并噻唑基可經由基團中之任何可取代原子連接至烷基部分。
如本文所用，術語「苯并噻吩基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子之苯并噻吩基。苯并噻吩基可經由基團中之任何可取代原子連接至烷基部分。
如本文所用，術語「苯甲氧基」係指經由氧原子連接至母分子部分之苯甲基。
如本文所用，術語「苯甲氧基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之苯甲氧基。
如本文所用，術語「聯苯C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之聯苯基。聯苯基可經由基團中之任何可取代原子連接至烷基部分。
如本文所用，術語「羰基」係指-C(O)-。
如本文所用，術語「羧基」係指-CO2H。
如本文所用，術語「羧基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之羧基。
如本文所用，術語「氰基」係指-CN。
如本文所用，術語「氰基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至 母分子部分之氰基。
如本文所用，術語「C3-C6環烷基」係指具有三至六個碳原子及零個雜原子之飽和單環烴環系統。
如本文所用，術語「C3-C6環烷基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之C3-C6環烷基。
如本文所用，術語「C3-C6環烷基羰基」係指經由羰基連接至母分子部分之C3-C6環烷基。
如本文所用，術語「呋喃基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之呋喃基。呋喃基可經由基團中之任何可取代原子連接至烷基部分。
如本文所用，術語「呋喃基羰基」係指經由羰基連接至母分子部分之呋喃基。
如本文所用，術語「鹵基」及「鹵素」係指F、Cl、Br或I。
如本文所用，術語「鹵基C1-C3烷基」係指經一個、兩個或三個鹵素原子取代之C1-C3烷基。
如本文所用，術語「鹵甲基」係指經一個、兩個或三個鹵素原子取代之甲基。
如本文所用，術語「羥基」係指-OH。
如本文所用，術語「羥基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之羥基。
如本文所用，術語「咪唑基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之咪唑基。咪唑基可經由基團中之任何可取代原子連接至烷基部分。
如本文所用，術語「吲哚基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之吲哚基。吲哚基可經由基團中之任何可取代原子連接至烷基部分。
如本文所用，術語「萘基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之萘基。萘基可經由基團中之任何可取代原子連接至烷基部分。
如本文所用，術語「硝基」係指-NO2。
如本文所用，術語「NRaRb」係指經由氮原子連接至母分子部分之兩個基團Ra及Rb。Ra及Rb獨立地選自氫、C2-C4烯氧基羰基、C1-C3烷基羰基、C3-C6環烷基羰基、呋喃基羰基及苯基羰基。
如本文所用，術語「NRaRb(C1-C3)烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之NRaRb基團。
如本文所用，術語「NRcRd」係指經由氮原子連接至母分子部分之兩個基團Rc及Rd。Rc及Rd獨立地選自氫、C1-C3烷基及三苯甲基。
如本文所用，術語「NRcRd羰基」係指經由羰基連接至母分子部分之NRcRd基團。
如本文所用，術語「NRcRd羰基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之NRcRd羰基。
如本文所用，術語「苯氧基」係指經由氧原子連接至母分子部分之苯基。
如本文所用，術語「苯氧基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之苯氧基。
如本文所用，術語「苯基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之苯基。
如本文所用，術語「苯基羰基」係指經由羰基連接至母分子部分之苯基。
如本文所用，術語「哌喃基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之哌喃基。哌喃基可經由基團中之任何可取代原子連接至烷基部分。
如本文所用，術語「哌喃基羰基」係指經由羰基連接至母分子部分之哌喃基。
如本文所用，術語「吡啶基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之吡啶基。吡啶基可經由基團中之任何可取代原子連接至烷基部分。
如本文所用，術語「硫基」係指-S-。
如本文所用，術語「磺醯基」係指-SO2-。
如本文所用，術語「四氫呋喃基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之四氫呋喃基。四氫呋喃基可經由基團中之任何可取代原子連接至烷基部分。
如本文所用，術語「四氫呋喃基羰基」係指經由羰基連接至母分子部分之四氫呋喃基。
如本文所用，術語「噻唑基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之噻唑基。噻唑基可經由基團中之任何可取代原子連接至烷基部分。
如本文所用，術語「噻吩基C1-C3烷基」係指經由C1-C3烷基連接至母分子部分之噻吩基。噻吩基可經由基團中之任何可取代原子連接至烷基部分。
如本文所用，術語「噻吩基羰基」係指經由羰基連接至母分子部分之噻吩基。
術語「治療」係指：(i)預防可能易患疾病、病症及/或病狀、但尚未診斷出患病的患者出現該疾病、病症或病狀；(ii)抑制該疾病、病症或病狀，亦即遏制其發展；及(iii)緩解該疾病、病症或病狀，亦即使得該疾病病症及/或病狀及/或與該疾病、病症及/或病狀相關聯之症狀消退。
巨環肽與PD-L1之結合可例如藉由諸如均相時差式螢光(HTRF)、 表面電漿子共振(SPR)、等溫滴定量熱法(ITC)、核磁共振光譜(NMR)及其類似物之方法量測。另外，巨環肽與表現於細胞表面上之PD-L1的結合可如本文所述在細胞結合分析中量測。
投與本文所述之治療劑包括(但不限於)投與治療有效量之治療劑。如本文所用，術語「治療有效量」係指(但不限於)治療或預防藉由投與本文所述之PD-1/PD-L1結合抑制劑之組合物可治療之病狀的治療劑的量。該量為足以展現可偵測之治療性或預防性或改善性效應之量。效應可包括例如(但不限於)本文中所列舉之病狀的治療或預防。個體之精確有效量將取決於個體之體型及健康狀況、欲治療之病狀的性質及程度、治療醫師之建議及選擇用於投與之治療劑或治療劑組合。因此，事先規定精確有效量為不適用的。
在另一個態樣中，本發明係關於使用本發明之巨環肽抑制個體腫瘤細胞生長之方法。如本文所證實，本發明之巨環肽能夠結合至PD-L1、妨礙PD-L1與PD-1之間的相互作用、與PD-L1與已知阻斷與PD-1之相互作用的抗PD-1單株抗體之結合競爭、增強CMV特異性T細胞IFNγ分泌及增強HIV特異性T細胞IFNg分泌。因此，本發明之巨環肽適用於調節免疫反應、治療諸如癌症或感染性疾病之疾病、刺激保護性自體免疫反應或刺激抗原特異性免疫反應(例如藉由共投與PD-L1阻斷肽與所關注之抗原)。
為了使本發明可更易於理解，首先定義某些術語。在整個實施方式中，闡述其他定義。
術語「漸進式死亡配位體1」、「漸進式細胞死亡配位體1」、「蛋白質PD-L1」、「PD-L1」、「PDL1」、「PDCDL1」、「hPD-L1」、「hPD-LI」、「CD274」及「B7-H1」可互換使用且包括人類PD-L1之變體、同功異型物、物種同源物及具有至少一個與PD-L1共同之抗原決定基的類似物。完整PD-L1序列可見於GENBANK®寄存編號NP_054862。
術語「漸進式死亡1」、「漸進式細胞死亡1」、「蛋白質PD-1」、「PD-1」、「PD1」、「PDCD1」、「hPD-1」及「hPD-I」可互換使用且包括人類PD-1之變體、同功異型物、物種同源物及具有至少一個與PD-1共同之抗原決定基的類似物。完整PD-1序列可見於GENBANK®寄存編號U64863。
術語「細胞毒性T淋巴球相關抗原-4」、「CTLA-4」、「CTLA4」、「CTLA-4抗原」及「CD152」(參見例如Murata,Am.J.Pathol.,155：453-460(1999))可互換使用且包括人類CTLA-4之變體、同功異型物、物種同源物及具有至少一個與CTLA-4共同之抗原決定基的類似物(參見例如Balzano,Int.J.Cancer Suppl.,7：28-32(1992))。完整CTLA-4核酸序列可見於GENBANK®寄存編號L15006。
術語「免疫反應」係指例如淋巴球、抗原呈現細胞、吞噬細胞、粒細胞及由以上細胞或肝臟產生之可溶性大分子(包括巨環肽、細胞激素及補體)產生對侵入病原體、感染有病原體之細胞或組織、癌細胞或在自體免疫或病理性炎症之情況下正常人類細胞或組織之選擇性損壞、破壞或自人體消除之作用。
如本文所用，「不良事件」(AE)為與醫藥治療之使用相關聯之任何不利且一般不希望、甚至不當跡象(包括異常實驗室研究結果)、症狀或疾病。舉例而言，不良事件可與響應於治療之免疫系統活化或免疫系統細胞(例如T細胞)擴增相關聯。醫藥治療可具有一或多個相關AE且各AE可具有相同或不同的嚴重程度。提及能夠「改變不良事件」之方法意指降低與不同治療方案之使用相關聯之一或多個AE的發生率及/或嚴重程度的治療方案。
如本文所用，「過度增生性疾病」係指細胞生長增加超過正常水準之病狀。舉例而言，過度增生性疾病或病症包括惡性疾病(例如食道癌、結腸癌、膽道癌)及非惡性疾病(例如動脈粥樣硬化、良性增生 及良性前列腺肥大)。
如本文所用，「約」或「基本上包含」意指在如由一般熟習此項技術者所測定之特定值的可接受的誤差範圍內，其將部分取決於如何量測或測定該值，亦即量測系統之侷限性。舉例而言，「約」或「基本上包含」可意指根據此項技術中之實踐在一個或一個以上標準差內。或者，「約」或「基本上包含」可意指至多20%之範圍。此外，尤其在生物系統或方法方面，該等術語可意指值之至多一個數量級或至多5倍。當在本申請案及申請專利範圍中提供特定值時，除非另外陳述，否則「約」或「基本上包含」之含義應假定為在該特定值之可接受的誤差範圍內。
如本文所述，除非另外指明，否則任何濃度範圍、百分比範圍、比率範圍或整數範圍應理解為包括在所列舉範圍內之任何整數值及(在適當時)其分數(諸如整數之十分之一及百分之一)。
競爭分析
本發明亦關於能夠與參考抗PD-L1抗體(MDX-1105)競爭結合達至少約20%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%及至少約100%之巨環肽。此類巨環肽可與一或多種本文所揭示之巨環肽共有結構同源性，包括突變體、保守取代形式、功能取代形式及缺失形式，其限制條件為其特異性結合至PD-L1。舉例而言，若巨環肽與參考抗PD-L1抗體實質上結合至相同PD-L1區，則巨環肽應結合至與抗PD-L1單株抗體所結合之PD-L1抗原決定基至少重疊之PD-L1抗原決定基。重疊區可在一個胺基酸殘基至數百個胺基酸殘基之範圍內變化。巨環肽應接著在競爭分析中與抗PD-L1單株抗體與PD-L1之結合競爭及/或阻斷該結合，且從而減少抗PD-L1單株抗體與PD-L1之結合，較佳達至少約50%。
出於競爭分析目的可用作參考抗體之抗PD-L1抗體為此項技術中 已知的。舉例而言，可使用以下代表性抗PD-L1抗體：MDX-1105(BMS)；L01X-C(Serono)、L1X3(Serono)、MSB-0010718C(Serono)及PD-L1 Probody(CytomX)及共同擁有的WO 2007/005874中所揭示之PD-L1抗體。
出於競爭分析目的可用作參考抗體之抗PD-1抗體為此項技術中已知的。舉例而言，可使用以下代表性抗PD-1抗體：尼沃單抗(nivolumab，BMS)；共同擁有的美國專利第8,008,449號中所分別揭示之17D8、2D3、4H1、4A11、7D3及5F4(BMS)、MK-3475(Merck，美國專利第8,168,757號中所揭示)及美國專利第7,488,802號中所揭示之抗體。
醫藥組合物
在另一個態樣中，本發明提供一種組合物(例如醫藥組合物)，含有與醫藥學上可接受之載劑一起調配之一種本發明之巨環肽或本發明之巨環肽組合。此類組合物可包括一種本發明之巨環肽或免疫結合物或雙特異性分子或(例如兩種或兩種以上不同的)本發明之巨環肽或免疫結合物或雙特異性分子之組合。舉例而言，本發明之醫藥組合物可包含結合至靶抗原上之不同抗原決定基或具有互補活性的巨環肽(或免疫結合物或雙特異性物)之組合。
本發明之醫藥組合物亦可在組合療法中(亦即與其他藥劑組合)投與。舉例而言，組合療法可包括巨環肽與至少一種其他消炎劑或免疫抑制劑之組合。可用於組合療法之治療劑的實例更詳細地描述於下文關於本發明之巨環肽之用途的部分中。
如本文所用，「醫藥學上可接受之載劑」包括生理學上相容之任何及全部溶劑、分散介質、包衣、抗細菌劑及抗真菌劑、等張劑及吸收延遲劑及其類似物。較佳地，載劑適用於靜脈內、肌肉內、皮下、非經腸、脊椎或表皮投與(例如藉由注射或輸注)。視投藥途徑而定， 活性化合物(亦即巨環肽、免疫結合物或雙特異性分子)可包覆在材料中以保護該化合物免受酸作用及可使該化合物不活化之其他天然條件。
本發明之醫藥化合物可包括一或多種醫藥學上可接受之鹽。「醫藥學上可接受之鹽」或「治療學上可接受之鹽」係指保留母化合物之所需生物活性且未賦予任何不合需要的毒理學效應之鹽(參見例如Berge,S.M.等人，J.Pharm.Sci.,66：1-19(1977))。此類鹽之實例包括酸加成鹽及鹼加成鹽。酸加成鹽包括衍生自無毒無機酸(諸如鹽酸、硝酸、磷酸、硫酸、氫溴酸、氫碘酸、亞磷酸及其類似物)以及衍生自無毒有機酸(諸如脂族單羧酸及二羧酸、經苯基取代之烷酸、羥基烷酸、芳族酸、脂族及芳族磺酸及其類似物)之鹽。鹼加成鹽包括衍生自鹼土金屬(諸如鈉、鉀、鎂、鈣及其類似物)以及衍生自無毒有機胺(諸如N,N'-二苯甲基乙二胺、N-甲基葡糖胺、氯普魯卡因(chloroprocaine)、膽鹼、二乙醇胺、乙二胺、普魯卡因(procaine)及其類似物)之鹽。
本發明之醫藥組合物亦可包括醫藥學上可接受之抗氧化劑。醫藥學上可接受之抗氧化劑之實例包括：(1)水溶性抗氧化劑，諸如抗壞血酸、半胱胺酸鹽酸鹽、硫酸氫鈉、偏亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉及其類似物；(2)油溶性抗氧化劑，諸如抗壞血酸棕櫚酸酯、丁基化羥基大茴香醚(BHA)、丁基化羥基甲苯(BHT)、卵磷脂、沒食子酸丙酯、α-生育酚及其類似物；及(3)金屬螯合劑，諸如檸檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨醇、酒石酸、磷酸及其類似物。
可用於本發明醫藥組合物中之適合水性及非水性載劑的實例包括水、乙醇、多元醇(諸如丙三醇、丙二醇、聚乙二醇及其類似物)及其適合混合物、植物油(諸如橄欖油)及可注射有機酯(諸如油酸乙酯)。可例如藉由使用包衣材料(諸如卵磷脂)、在分散液之情況下藉由 維持所需粒度及藉由使用界面活性劑來維持適當流動性。
此等組合物亦可含有佐劑，諸如防腐劑、濕潤劑、乳化劑及分散劑。可藉由滅菌程序(見上文)及藉由包括各種抗細菌劑及抗真菌劑(例如對羥基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚山梨酸及其類似物)而確保防止微生物存在。亦可能需要在組合物中包括等張劑，諸如糖、氯化鈉及其類似物。另外，可注射醫藥形式之延長吸收可藉由包括延遲吸收劑(諸如單硬脂酸鋁及明膠)來達成。
醫藥學上可接受之載劑包括無菌水溶液或分散液及用於臨時製備無菌可注射溶液或分散液之無菌散劑。此類介質及藥劑用於醫藥活性物質之用途為此項技術中已知的。除非任何習知介質或藥劑與活性化合物不相容，否則考慮將其用於本發明之醫藥組合物中。組合物中亦可併入補充性活性化合物。
治療組合物通常必須在製造及儲存條件下無菌且穩定。組合物可調配為溶液、微乳液、脂質體或適合於高藥物濃度之其他有序結構。載劑可為含有例如水、乙醇、多元醇(例如，丙三醇、丙二醇及液體聚乙二醇及其類似物)及其適合混合物之溶劑或分散介質。可例如藉由使用包衣(諸如卵磷脂)、在分散液之情況下藉由維持所需粒度及藉由使用界面活性劑來維持適當流動性。在許多情況下，組合物中將較佳包括等張劑，例如糖、多元醇(諸如甘露醇、山梨醇)或氯化鈉。可注射組合物之延長吸收可藉由在組合物中包括延遲吸收劑(例如單硬脂酸鹽及明膠)來達成。
無菌可注射溶液可藉由將所需量之活性化合物與一種上列成分或成分組合一起併入適當溶劑中，並視需要接著滅菌微過濾來製備。一般而言，分散液藉由將活性化合物併入含有鹼性分散介質及所需上列其他成分的無菌媒劑中來製備。在無菌粉末用於製備無菌可注射溶液之情況下，較佳製備方法為真空乾燥及冷凍乾燥(凍乾)，該等方法 自其預先無菌過濾溶液產生活性成分粉末加任何額外所需成分。
可與載劑物質組合以產生單一劑型的活性成分之量將視所治療之個體、特定投藥模式而變化。可與載劑物質組合以產生單一劑型的活性成分之量一般為產生治療性效應之組合物的量。一般而言，在100%中，此量將介於約0.01%至約99%之活性成分、較佳約0.1%至約70%、最佳約1%至約30%之活性成分與醫藥學上可接受之載劑組合。
調節劑量方案以得到最佳所需反應(例如治療反應)。舉例而言，可投與單一藥團，可隨時間投與若干分次劑量，或可如治療情形之緊急程度所指示而按比例減少或增加劑量。就投藥簡便性及劑量均一性而言，將非經腸組合物調配成單位劑型尤其有利。如本文所用之單位劑型係指適合作為單一劑量用於待治療之個體的實體上離散單位；各單位含有與所需醫藥載劑結合之經計算以產生所需治療性效應之預定量活性化合物。本發明之單位劑型之規格藉由以下情況指定且直接取決於以下情況：(a)活性化合物之獨特特徵及欲達成之特定治療性效應，及(b)混配用於治療個體敏感性之此類活性化合物之技術中的固有限制。
關於巨環肽之投與，劑量範圍介於宿主體重之約0.0001至100mg/kg且更通常0.01至5mg/kg。舉例而言，劑量可為0.3mg/kg體重、1mg/kg體重、3mg/kg體重、5mg/kg體重或10mg/kg體重或在1-10mg/kg範圍內。例示性治療方案需要每天一次、每天兩次、兩週一次、三週一次、一週一次、每兩週一次、每三週一次、每四週一次、一月一次、每3個月一次或每3至6個月一次投與。本發明之巨環肽的較佳劑量方案包括經由靜脈內投與1mg/kg體重或3mg/kg體重，同時使用以下給藥時程中之一者給與巨環：(i)每四週六次劑量，接著每三個月；(ii)每三週；(iii)3mg/kg體重一次，接著每三週1mg/kg體重。
在一些方法中，同時投與具有不同結合特異性之兩種或兩種以 上巨環肽，在此情況下，所投與之各化合物之劑量屬於所指示的範圍內。化合物通常在多個時刻投與。單次劑量之間的間隔可為例如每週、每月、每三個月或每年。間隔亦可為不規律的，藉由量測患者中針對靶抗原之巨環肽的血液含量所指示。在一些方法中，調節劑量以達到約1-1000μg/ml之血漿濃度，且在一些方法中達到約25-300μg/ml。
或者，巨環肽可以持續釋放調配物形式投與，在此情況下不需要頻繁投與。投與之劑量及頻率可視治療為預防性或治療性而變化。在預防性應用中，在長時期內，以相對不頻繁之間隔投與相對較低之劑量。一些患者在其餘生中繼續接受治療。在治療性應用中，有時需要以相對較短之間隔投與相對較高之劑量，直至疾病之進展降低或終止，且較佳直至患者展示疾病之症狀之部分或完全改善。此後，可向患者投與預防性方案。
可改變本發明之醫藥組合物中之活性成分的實際劑量，以便獲得在對患者無毒性之情況下有效達成特定患者、組合物及投藥模式之所需治療反應的量的活性成分。所選劑量將視多種藥物動力學因素而定，包括本發明所用特定組合物或其酯、鹽或醯胺之活性；投藥途徑；投藥時間；所用特定化合物之排泄率；治療持續時間；與所用特定組合物組合使用之其他藥物、化合物及/或物質；所治療患者之年齡、性別、體重、病狀、一般健康狀況及先前病史；及醫藥技術中熟知之類似因素。
「治療有效劑量」之本發明之巨環肽較佳使得疾病症狀之嚴重程度降低、無疾病症狀期之頻率或持續時間增加或預防疾病病痛所致之損傷或失能。舉例而言，關於腫瘤治療，「治療有效劑量」較佳相對於未經治療之個體抑制細胞生長或腫瘤生長達至少約20%、更佳至少約40%、甚至更佳至少約60%且再更佳至少約80%。化合物抑制腫瘤 生長及/或HIV之能力可在預測對人類腫瘤之功效或病毒功效之動物模型系統中評估。或者，組合物之此特性可藉由利用熟習此項技術者已知之分析檢查化合物之抑制能力(諸如活體外抑制)來評估。治療有效量之治療性化合物可在個體體內減小腫瘤尺寸、減少病毒負荷或以其他方式改善症狀。一般熟習此項技術者將能夠基於諸如個體體型、個體症狀之嚴重程度及所選特定組合物或投藥途徑之因素來確定該等量。
在另一個態樣中，本發明提供一種分裝部分之醫藥套組，其如本文所述包含巨環肽及另一種免疫調節劑。該套組亦可另外包含治療過度增生性疾病(諸如，如本文所述之癌症)及/或抗病毒疾病之使用說明書。
本發明之組合物可經由一或多種投藥途徑、使用此項技術中已知之多種方法中之一或多者來投與。如熟習此項技術者應瞭解，投藥途徑及/或模式將視所需結果而變化。本發明之巨環肽的較佳投藥途徑包括靜脈內、肌肉內、皮內、腹膜內、皮下、脊椎或其他非經腸投藥途徑，例如藉由注射或輸注。如本文所用，片語「非經腸投與」意指除腸內及局部投與以外通常藉由注射進行之投藥模式，且包括(但不限於)靜脈內、肌肉內、動脈內、鞘內、囊內、眶內、心內、皮內、腹膜內、經氣管、皮下、表皮下、關節內、囊下、蛛網膜下、脊柱內、硬膜外及胸骨內注射及輸注。
或者，本發明之巨環肽可經由非非經腸途徑投與，諸如局部、表皮或黏膜投藥途徑，例如鼻內、經口、經陰道、經直腸、舌下或局部。
活性化合物可與將保護化合物免於快速釋放之載劑一起製備，諸如控制釋放調配物，包括植入物、經皮貼劑及微膠囊化遞送系統。可使用可生物降解的生物相容性聚合物，諸如乙烯乙酸乙烯酯、聚酸 酐、聚乙醇酸、膠原蛋白、聚原酸酯及聚乳酸。用於製備此類調配物之許多方法已獲得專利或一般為熟習此項技術者已知。參見例如Robinson,J.R.編，Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems,Marcel Dekker,Inc.,New York(1978)。
治療性組合物可用此項技術中已知之醫療裝置投與。舉例而言，在一個較佳實施例中，本發明之治療性組合物可用無針皮下注射裝置投與，諸如美國專利第5,399,163號、第5,383,851號、第5,312,335號、第5,064,413號、第4,941,880號、第4,790,824號或第4,596,556號中所揭示之裝置。適用於本發明之熟知插入物及模組之實例包括：美國專利第4,487,603號，其揭示一種以受控速率施配藥物之可植入微輸注泵；美國專利第4,486,194號，其揭示一種經由皮膚投與藥物之治療性裝置；美國專利第4,447,233號，其揭示一種以精確輸注速率遞送藥物之藥物輸注泵；美國專利第4,447,224號，其揭示一種用於連續藥物遞送之可變流動可植入輸注裝置；美國專利第4,439,196號，其揭示一種具有多腔隔室之滲透藥物遞送系統；及美國專利第4,475,196號，其揭示一種滲透藥物遞送系統。此等專利以引用的方式併入本文中。許多其他此類插入物、遞送系統及模組為熟習此項技術者已知的。
在某些實施例中，本發明之巨環肽可經調配以確保恰當活體內分佈。舉例而言，血腦障壁(BBB)排除多種高度親水性化合物。為確保本發明之治療性化合物穿過BBB(必要時)，其可調配成例如脂質體。關於製造脂質體之方法，參見例如美國專利第4,522,811號、第5,374,548號及第5,399,331號。脂質體可包含選擇性輸送至特定細胞或器官中之一或多個部分，由此增強靶向藥物遞送(參見例如Ranade,V.V.,J.Clin.Pharmacol.,29：685(1989))。例示性靶向部分包括葉酸或生物素(參見例如Low等人之美國專利第5,416,016號)；甘露糖 (Umezawa等人，Biochem.Biophys.Res.Commun.,153：1038(1988))；巨環肽(Bloeman,P.G.等人，FEBS Lett.,357：140(1995)；Owais,M.等人，Antimicrob.Agents Chemother.,39：180(1995))；界面活性劑蛋白質A受體(Briscoe等人，Am.J.Physiol.,1233：134(1995))；p120(Schreier等人，J.Biol.Chem.,269：9090(1994))；亦參見Keinanen,K.等人，FEBS Lett.,346：123(1994)；Killion,J.J.等人，Immunomethods 4：273(1994)。
本發明之用途及方法
本發明之巨環肽、組合物及方法具有許多活體外及活體內效用，涉及例如偵測PD-L1或藉由阻斷PD-L1增強免疫反應。舉例而言，此等分子可投與培養物中、活體外或離體之細胞或投與人類個體(例如活體內)以在多種情形中增強免疫力。因此，在一個態樣中，本發明提供一種調節個體之免疫反應的方法，其包含向該個體投與本發明之巨環肽以便調節該個體之免疫反應。較佳地，增強、刺激或上調反應。在其他方面中，巨環肽可具有抗獼猴、抗小鼠及/或抗土撥鼠結合及治療活性。
如本文所用，術語「個體」意欲包括人類及非人類動物。非人類動物包括所有脊椎動物，例如哺乳動物及非哺乳動物，諸如非人類靈長類動物、羊、犬、貓、牛、馬、雞、土撥鼠、兩棲動物及爬行動物，但哺乳動物為較佳，諸如非人類靈長類動物、羊、犬、貓、牛及馬。較佳個體包括需要增強免疫反應之人類患者。該等方法尤其適用於治療患有可藉由強化T細胞介導之免疫反應治療之病症的人類患者。在一個特定實施例中，該等方法尤其適用於活體內處理癌細胞。為實現抗原特異性免疫力增強，巨環肽可連同所關注之抗原一起投與。當針對PD-L1之巨環肽連同另一藥劑一起投與時，兩者可以任一次序或同時投與。
本發明另外提供用於偵測樣品中人類、土撥鼠、獼猴及/或小鼠PD-L1抗原之存在或量測人類、土撥鼠、獼猴及/或小鼠PD-L1抗原之量的方法，其包含使該樣品及對照樣品與特異性結合至人類、土撥鼠、獼猴及/或小鼠PD-L1之參考巨環肽在允許在該巨環與人類、土撥鼠、獼猴及/或小鼠PD-L1之間形成複合物的條件下接觸。接著偵測複合物之形成，其中樣品與對照樣品相比之差異複合物形成指示樣品中存在人類、土撥鼠、獼猴及/或小鼠PD-L1抗原。
鑒於本發明之巨環肽對於PD-L1與CD28、ICOS及CTLA-4相比之特異性結合，本發明之巨環肽可用於特異性偵測細胞表面上之PD-L1表現，且此外，可用於經由免疫親和力純化來純化PD-L1。
癌症
藉由巨環肽阻斷PD-1可增強患者針對癌細胞之免疫反應。PD-1之配位體PD-L1並不表現在正常人類細胞中，但大量存在於多種人類癌症中(Dong等人，Nat.Med.,8：787-789(2002))。PD-1與PD-L1之間的相互作用導致腫瘤浸潤性淋巴球減少、T細胞受體介導之增生減少及癌細胞免疫逃避(Dong等人，J.Mol.Med.,81：281-287(2003)；Blank等人，Cancer Immunol.Immunother.,54：307-314(2005)；Konishi等人，Clin.Cancer Res.,10：5094-5100(2004))。免疫抑制可藉由抑制PD-1與PD-L1之局部相互作用而逆轉，且當PD-1與PD-L2之相互作用亦阻斷時，效應相加(Iwai等人，Proc.Natl.Acad.Sci.,99：12293-12297(2002)；Brown等人，J.Immunol.,170：1257-1266(2003))。雖然先前研究已展示T細胞增生可藉由抑制PD-1與PD-L1之相互作用而恢復，但尚未報導藉由阻斷PD-1/PD-L1相互作用對活體內癌症腫瘤生長之直接效應。在一個態樣中，本發明係關於使用巨環肽活體內治療個體，使得癌性腫瘤生長受到抑制。巨環肽可單獨用於抑制癌性腫瘤生長。或者，巨環肽可如下所述與其他免疫原性劑、標準癌症治療或其他巨環 肽結合使用。
因此，在一個實施例中，本發明提供一種抑制個體之腫瘤細胞生長的方法，其包含向該個體投與治療有效量之巨環肽。
可使用本發明之巨環肽抑制生長之較佳癌症包括通常響應於免疫療法之癌症。治療之較佳癌症之非限制性實例包括黑素瘤(例如轉移性惡性黑素瘤)、腎細胞癌(例如透明細胞癌)、前列腺癌(例如激素難治性前列腺癌及去勢療法無效之前列腺癌)、乳癌、結腸直腸癌及肺癌(例如鱗狀及非鱗狀非小細胞肺癌)。另外，本發明包括可使用本發明之巨環肽抑制生長之難治性或復發性惡性病。
可使用本發明之方法治療之其他癌症的實例包括骨癌；胰臟癌；皮膚癌；頭頸癌；皮膚或眼內惡性黑素瘤；子宮癌；卵巢癌；結腸癌；直腸癌；肛門區癌；胃癌；睾丸癌；子宮癌；輸卵管癌；子宮內膜癌；子宮頸癌；陰道癌；外陰癌；霍奇金氏病(Hodgkin's Disease)；非霍奇金氏淋巴瘤；食道癌；小腸癌；內分泌系統癌；甲狀腺癌；副甲狀腺癌；腎上腺癌；軟組織肉瘤；尿道癌；陰莖癌；慢性或急性白血病，包括急性骨髓白血病、慢性骨髓白血病、急性淋巴母細胞白血病、慢性淋巴球性白血病；兒童實體腫瘤；淋巴球性淋巴瘤；膀胱癌；腎癌或輸尿管癌；腎盂癌；中樞神經系統(CNS)贅瘤；原發性CNS淋巴瘤；腫瘤血管生成；脊軸腫瘤；腦幹神經膠質瘤；垂體腺瘤；卡堡氏肉瘤(Kaposi's sarcoma)；表皮樣癌；鱗狀細胞癌；T細胞淋巴瘤；環境誘發癌，包括由石棉誘發之癌症；及該等癌症之組合。本發明亦適用於治療轉移性癌症，尤其表現PD-L1之轉移性癌症(Iwai等人，Int.Immunol.,17：133-144(2005))。
視情況，針對PD-L1之巨環肽可與以下免疫原性劑組合，諸如癌細胞、經純化之腫瘤抗原(包括重組蛋白質、肽及碳水化合物分子)、細胞及轉染有編碼免疫刺激細胞激素之基因的細胞(He等人，J. Immunol.,173：4919-4928(2004))。可使用之腫瘤疫苗的非限制性實例包括黑素瘤抗原之肽，諸如gp100、MAGE抗原、Trp-2、MART1及/或酪胺酸酶之肽，或經轉染以表現細胞激素GM-CSF之腫瘤細胞(下文進一步論述)。
在人類中，已展示一些腫瘤具有免疫原性，諸如黑素瘤。預期藉由利用PD-L1阻斷升高T細胞活化之臨限值，吾等可預計活化宿主中之腫瘤反應。
當與疫苗接種方案組合時，PD-L1阻斷可能最有效。已設計出針對腫瘤之許多實驗性疫苗接種策略(參見Rosenberg,S.,Development of Cancer Vaccines,ASCO Educational Book Spring：60-62(2000)；Logothetis,C.,ASCO Educational Book Spring：300-302(2000)；Khayat,D.,ASCO Educational Book Spring：414-428(2000)；Foon,K.,ASCO Educational Book Spring：730-738(2000)；亦參見Restifo,N.等人，Cancer Vaccines，第61章，第3023-3043頁，DeVita,V.等人編，Cancer：Principles and Practice of Oncology，第五版(1997))。在此等策略中之一者中，使用自體或同種異體腫瘤細胞製備疫苗。已顯示此等細胞疫苗在腫瘤細胞經轉導以表現GM-CSF時最有效。已顯示GM-CSF為用於腫瘤疫苗接種之抗原呈現之強活化劑(Dranoff等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,90：3539-3543(1993))。
各種腫瘤中基因表現及大規模基因表現模式之研究已產生所謂腫瘤特異性抗原之定義(Rosenberg,S.A.,Immunity,10：281-287(1999))。在許多情況下，此等腫瘤特異性抗原為腫瘤中及出現腫瘤之細胞中表現的分化抗原，例如黑素細胞抗原gp100、MAGE抗原及Trp-2。更重要的是，許多此等抗原可展示為宿主中發現之腫瘤特異性T細胞的靶標。PD-L1阻斷可與表現於腫瘤中之重組蛋白質及/或肽之集合結合使用以產生針對此等蛋白質之免疫反應。此等蛋白質通常被免疫 系統視為自體抗原且因此對其具耐受性。腫瘤抗原亦可包括蛋白質端粒酶，其為合成染色體之端粒所必需的且表現於超過85%之人類癌症中且僅表現於有限數目之體細胞組織中(Kim,N等人，Science,266：2011-2013(1994))。(可藉由各種方法保護此等體細胞組織免受免疫攻擊)。腫瘤抗原亦可為由於改變蛋白質序列或在兩個無關序列之間形成融合蛋白(亦即費城染色體(Philadelphia chromosome)中之bcr-abl)之體細胞突變而在癌細胞中表現之「新抗原」或B細胞腫瘤之個體基因型。
其他腫瘤疫苗可包括人類癌症中所牽涉之病毒的蛋白質，該等病毒諸如人類乳頭狀瘤病毒(HPV)、肝炎病毒(HBV及HCV)及卡堡氏疱疹肉瘤病毒(KHSV)。可與PD-L1阻斷結合使用之腫瘤特異性抗原的另一形式為自腫瘤組織自身分離之經純化熱休克蛋白質(HSP)。此等熱休克蛋白質含有腫瘤細胞蛋白質之片段且此等HSP高效遞送至抗原呈現細胞以引發腫瘤免疫力(Suot,R.等人，Science,269：1585-1588(1995)；Tamura,Y.等人，Science,278：117-120(1997))。
樹突狀細胞(DC)為可用於引發抗原特異性反應之強抗原呈現細胞。DC可離體產生且負載有各種蛋白質及肽抗原以及腫瘤細胞提取物(Nestle,F.等人，Nat.Med.,4：328-332(1998))。DC亦可藉由基因方法轉導以亦表現此等腫瘤抗原。DC亦已出於免疫目的而直接與腫瘤細胞融合(Kugler,A.等人，Nat.Med.,6：332-336(2000))。作為疫苗接種之方法，DC免疫作用可與PD-L1阻斷有效組合以活化更強抗腫瘤反應。
PD-L1阻斷亦可與標準癌症治療組合。PD-L1阻斷可與化學治療方案有效組合。在此等情形中，有可能減小所投與之化學治療劑的劑量(Mokyr,M.等人，Cancer Res.,58：5301-5304(1998))。此類組合之一個實例為巨環肽與達卡巴嗪(decarbazine)組合用於治療黑素瘤。此類 組合之另一個實例為巨環肽與介白素-2(IL-2)組合用於治療黑素瘤。支持PD-L1阻斷與化學療法組合使用之科學基本原理在於作為大部分化學治療化合物之細胞毒性作用結果的細胞死亡應使得抗原呈現路徑中腫瘤抗原之含量增加。可經由細胞死亡而與PD-L1阻斷產生協同作用的其他組合療法為輻射、手術及激素去除。此等方案中之每一者產生宿主中之腫瘤抗原之來源。血管生成抑制劑亦可與PD-L1阻斷組合。抑制血管生成導致腫瘤細胞死亡，其可將腫瘤抗原饋至宿主抗原呈現路徑中。
PD-L1阻斷巨環肽亦可與使表現Fcα或Fcγ受體之效應細胞靶向腫瘤細胞之雙特異性巨環肽組合使用(參見例如美國專利第5,922,845號及第5,837,243號)。雙特異性巨環肽可用於靶向兩個單獨抗原。舉例而言，抗Fc受體/抗腫瘤抗原(例如Her-2/neu)雙特異性巨環肽已用於使巨噬細胞靶向腫瘤位點。此靶向可更有效地活化腫瘤特異性反應。此等反應之T細胞臂藉由使用PD-L1阻斷來強化。或者，可藉由使用結合至腫瘤抗原及樹突狀細胞特異性細胞表面標記之雙特異性巨環肽將抗原直接遞送至DC。
腫瘤藉由多種機制逃避宿主免疫監視。許多此等機制可藉由使腫瘤所表現且具免疫抑制性之蛋白質不活化來克服。此等蛋白質尤其包括TGF-β(Kehrl,J.等人，J.Exp.Med.,163：1037-1050(1986))、IL-10(Howard,M.等人，Immunology Today,13：198-200(1992))及Fas配位體(Hahne,M.等人，Science,274：1363-1365(1996))。針對此等實體中之每一者的巨環肽可與抗PD-L1組合使用，以抵消免疫抑制劑之效應且促進宿主的腫瘤免疫反應。
可用於活化宿主免疫反應之其他巨環肽可與抗PD-L1組合使用。此等巨環肽包括樹突狀細胞表面上之活化DC功能及抗原呈現的分子。抗CD40巨環肽能夠有效替代輔助T細胞活性(Ridge,J.等人， Nature,393：474-478(1998))且可與PD-1抗體結合使用(Ito,N.等人，Immunobiology,201(5)：527-540(2000))。活化針對以下T細胞協同刺激分子之巨環肽亦可使得T細胞活化水準增加，諸如CTLA-4(例如美國專利第5,811,097號)、OX-40(Weinberg,A.等人，Immunol.,164：2160-2169(2000))、4-1BB(Melero,I.等人，Nat.Med.,3：682-685(1997)及ICOS(Hutloff,A.等人，Nature,397：262-266(1999))。
骨髓移植目前用於治療多種造血來源之腫瘤。雖然移植物抗宿主病為此治療之後果，但可自移植物抗腫瘤反應獲得治療效益。PD-L1阻斷可用於增加供體移植之腫瘤特異性T細胞的有效性。
亦存在涉及抗原特異性T細胞之離體活化及擴增及將此等細胞授受性轉移至受體中以便抗原特異性T細胞抗腫瘤之數個實驗性治療方案(Greenberg,R.等人，Science,285：546-551(1999))。此等方法亦可用於活化針對諸如CMV之感染物的T細胞反應。在巨環肽存在下之離體活化可預期增加授受性轉移T細胞之頻率及活性。
感染性疾病
本發明之其他方法用於治療已暴露於特定毒素或病原體之患者。因此，本發明之另一個態樣提供一種治療個體之感染性疾病的方法，其包含向該個體投與本發明之巨環肽，以便治療該個體之感染性疾病。
與其如上文所論述之針對腫瘤之應用類似，PD-L1阻斷可單獨使用或作為佐劑與疫苗組合使用以刺激針對病原體、毒素及自體抗原之免疫反應。此治療方法可特別適用之病原體之實例包括當前無有效疫苗之病原體或習知疫苗不完全有效之病原體。此等病原體包括(但不限於)HIV、肝炎(A、B及C)、流感、疱疹、梨形鞭毛蟲屬(Giardia)、瘧疾(Butler,N.S.等人，Nature Immunology 13,188-195(2012)；Hafalla,J.C.R.等人，PLOS Pathogens；February 2,2012))、利什曼原蟲 屬(Leishmania)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、綠膿桿菌(Pseudomonas Aeruginosa)。PD-L1阻斷特別適用於抵抗由經感染過程呈現改變抗原之感染物(諸如HIV)所確立之感染。此等新穎抗原決定基在投與抗人類PD-L1時識別為外來的，因此經由PD-L1引起藉由陰性信號未抑制之強T細胞反應。
引起可藉由本發明方法治療之感染之病原性病毒的一些實例包括HIV、肝炎(A、B或C)、疱疹病毒(例如VZV、HSV-1、HAV-6、HSV-II及CMV、埃-巴二氏病毒(Epstein Barr virus))、腺病毒、流感病毒、黃病毒、埃可病毒(echovirus)、鼻病毒、科沙奇病毒(coxsackie virus)、冠狀病毒、呼吸道融合病毒、腮腺炎病毒、輪狀病毒、麻疹病毒、風疹病毒、小病毒、牛痘病毒、HTLV病毒、登革熱病毒、乳頭狀瘤病毒、軟疣病毒(molluscum virus)、脊髓灰質炎病毒、狂犬病病毒、JC病毒及蟲媒病毒性腦炎病毒。
引起可藉由本發明方法治療之感染之病原菌的一些實例包括衣原體(chlamydia)、立克次體細菌(rickettsial bacteria)、分枝桿菌(mycobacteria)、葡萄球菌(staphylococci)、鏈球菌(streptococci)、肺炎球菌(pneumonococci)、腦膜炎球菌(meningococci)及淋球菌(conococci)、克雷伯氏菌(klebsiella)、變形桿菌(proteus)、沙雷氏菌(serratia)、假單胞菌(pseudomonas)、軍團菌(legionella)、白喉(diphtheria)、沙門氏菌(salmonella)、桿菌(bacilli)、霍亂(cholera)、破傷風(tetanus)、肉毒中毒(botulism)、炭疽病(anthrax)、瘟疫(plague)、鉤端螺旋體病(leptospirosis)及萊姆病(Lymes disease)細菌。
引起可藉由本發明方法治療之感染之病原性真菌的一些實例包括念珠菌屬(Candida)(白色念珠菌(albicans)、克魯斯氏念珠菌(krusei)、光滑念珠菌(glabrata)、熱帶念珠菌(tropicalis)等)、新型隱球菌(Cryptococcus neoformans)、麴菌屬(Aspergillus)(煙麯黴 (fumigatus)、黑麴菌(niger)等)、毛黴目(Mucorales)屬(毛黴菌屬(mucor)、犁頭黴屬(absidia)、根黴屬(rhizophus))、申克氏胞絲菌(Sporothrix schenkii)、皮炎芽生菌(Blastomyces dermatitidis)、巴西副球孢子菌(Paracoccidioides brasiliensis)、粗球孢子菌(Coccidioides immitis)及莢膜組織胞漿菌(Histoplasma capsulatum)。
引起可藉由本發明方法治療之感染之病原性寄生蟲的一些實例包括溶組織內阿米巴(Entamoeba histolytica)、大腸纖毛蟲(Balantidium coli)、福氏耐格里阿米巴原蟲(Naegleriafowleri)、棘阿米巴蟲屬(Acanthamoeba sp.)、蘭比亞梨形鞭毛蟲(Giardia lambia)、隱胞子蟲屬(Cryptosporidium sp.)、肺炎肺囊蟲(Pneumocystis carinii)、間日瘧原蟲、微小巴倍蟲、布氏錐蟲(Trypanosoma brucei)、克氏錐蟲(Trypanosoma cruzi)、杜氏利什曼原蟲(Leishmania donovani)、剛地弓形蟲(Toxoplasma gondi)及巴西日圓線蟲(Nippostrongylus brasiliensis)。
在所有以上方法中，PD-L1阻斷可與以下其他形式之免疫療法組合，從而提供增強的腫瘤抗原呈現，諸如細胞激素治療(例如干擾素、靶向VEGF活性或VEGF受體之藥劑、GM-CSF、G-CSF、IL-2)或雙特異性抗體療法(參見例如Holliger,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,90：6444-6448(1993)；Poljak,Structure,2：1121-1123(1994))。
自體免疫反應
巨環肽可引起且放大自體免疫反應。實際上，使用腫瘤細胞及肽疫苗誘發抗腫瘤反應揭示許多抗腫瘤反應涉及抗自體反應性(在抗CTLA-4+GM-CSF調節之B 16黑素瘤中觀測到去色素(van Elsas等人，見上文)；Trp-2疫苗接種小鼠中之去色素(Overwijk,W.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,96：2982-2987(1999))；由TRAMP腫瘤細胞疫苗引起之自體免疫前列腺炎(Hurwitz,A.，見上文(2000))、在人類臨床試 驗中觀測到黑素瘤肽抗原疫苗接種及白斑病(Rosenberg,S.A.等人，J.Immunother.Emphasis Tumor Immunol.,19(1)：81-84(1996))。
因此，可能考慮抗PD-L1阻斷與各種自身蛋白質結合使用以便設計高效產生針對此等自身蛋白質之免疫反應用於疾病治療的疫苗接種方案。舉例而言，阿茲海默氏病涉及類澱粉沈積物之β肽在腦中之不當積聚；針對類澱粉之抗體反應能夠清除此等類澱粉沈積物(Schenk等人，Nature,400：173-177(1999))。
其他自身蛋白質亦可用作靶標，諸如用於過敏症及哮喘治療之IgE及用於類風濕性關節炎治療之TNFα。最後，針對各種激素之抗體反應可藉由使用本文所揭示之巨環化合物誘發。針對生殖激素之中和抗體反應可用於避孕。針對特定腫瘤生長所需之激素及其他可溶性因子的中和抗體反應亦可視為可能的疫苗接種靶標。
如上所述使用抗PD-L1巨環化合物之類似方法可用於誘發治療性自體免疫反應以治療具有其他自身抗原(諸如類澱粉沈積物，包括阿茲海默氏病中之β；細胞激素，諸如TNFα及IgE)不當積聚之患者。
疫苗
巨環肽可藉由抗PD-1巨環與所關注之抗原(例如疫苗)之共投與而用於刺激抗原特異性免疫反應。因此，在另一個態樣中，本發明提供一種增強個體體內針對抗原之免疫反應的方法，其包含向該個體投與：(i)該抗原；及(ii)抗PD-1巨環，使得個體體內針對該抗原之免疫反應得以增強。抗原可為例如腫瘤抗原、病毒抗原、細菌抗原或來自病原體之抗原。此類抗原之非限制性實例包括以上部分中所論述之抗原，諸如上文所論述之腫瘤抗原(或腫瘤疫苗)、或來自上文所述之病毒、細菌或其他病原體的抗原。
活體內及活體外投與本發明組合物(例如巨環肽、多特異性及雙特異性分子及免疫結合物)之適合途徑為此項技術中所熟知，且可由 一般技術者選擇。舉例而言，組合物可藉由注射(例如靜脈內或皮下)投與。所用分子之適合劑量將視個體之年齡及體重以及組合物之濃度及/或調配物而定。
如先前所述，本發明之巨環肽可與一或多種其他治療劑(例如細胞毒性劑、放射毒性劑或免疫抑制劑)共投與。肽可連接至藥劑(以免疫複合物形式)或可與藥劑分開投與。在後一情況(分開投與)中，肽可在藥劑之前、之後或同時投與或可與其他已知療法(例如抗癌療法，例如輻射)共投與。此類治療劑尤其包括抗贅生性劑，諸如小紅莓(doxorubicin)(阿德力黴素(adriamycin))、順鉑博萊黴素硫酸鹽(cisplatin bleomycin sulfate)、卡莫司汀(carmustine)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、達卡巴嗪及環磷醯胺羥基脲(cyclophosphamide hydroxyurea)，其本身僅在對患者具毒性或亞毒性之含量下有效。順鉑每四週以100mg/劑量靜脈內投與一次，且阿德力黴素每21天以60-75mg/ml劑量靜脈內投與一次。本發明之巨環肽與化學治療劑之共投與提供兩種經由不同機制操作之抗癌劑，其產生針對人類腫瘤細胞之細胞毒性效應。此類共投與可解決因耐藥性出現或腫瘤細胞之抗原性改變而將使其不與肽起反應所致的問題。
包含本發明組合物(例如巨環肽、雙特異性或多特異性分子或免疫結合物)及使用說明書之套組亦在本發明之範疇內。套組可另外含有至少一種額外試劑或一或多種本發明之額外巨環肽(例如具有結合至PD-L1抗原中與巨環不同之抗原決定基的互補活性的人類抗體)。套組通常包括指示套組內含物之預期用途的標籤。術語標籤包括在套組上或與套組一起供應或以其他方式伴隨套組之任何書寫或記錄材料。
組合療法
本發明之巨環肽與另一PD-L1拮抗劑及/或其他免疫調節劑之組合適用於增強針對過度增生性疾病之免疫反應。舉例而言，此等分子 可投與培養物中、活體外或離體之細胞或投與人類個體(例如活體內)以在多種情形中增強免疫力。因此，在一個態樣中，本發明提供一種調節個體之免疫反應的方法，其包含向該個體投與本發明之巨環肽以便調節該個體之免疫反應。較佳地，增強、刺激或上調反應。在另一個實施例中，本發明提供一種改變與用免疫刺激性治療劑治療過度增生性疾病相關聯之不良事件的方法，其包含向個體投與本發明之巨環肽及低於治療劑量之另一種免疫調節劑。
藉由巨環肽阻斷PD-L1可增強患者針對癌細胞之免疫反應。可使用本發明之巨環肽抑制生長之癌症包括通常響應於免疫療法之癌症。用本發明之組合療法治療之癌症的代表性實例包括黑素瘤(例如轉移性惡性黑素瘤)、腎癌、前列腺癌、乳癌、結腸癌及肺癌。可使用本發明之方法治療之其他癌症的實例包括骨癌；胰臟癌；皮膚癌；頭頸癌；皮膚或眼內惡性黑素瘤；子宮癌；卵巢癌；直腸癌；肛門區癌；胃癌；睾丸癌；子宮癌；輸卵管癌；子宮內膜癌；子宮頸癌；陰道癌；外陰癌；霍奇金氏病；非霍奇金氏淋巴瘤；食道癌；小腸癌；內分泌系統癌；甲狀腺癌；副甲狀腺癌；腎上腺癌；軟組織肉瘤；尿道癌；陰莖癌；慢性或急性白血病，包括急性骨髓白血病、慢性骨髓白血病、急性淋巴母細胞白血病、慢性淋巴球性白血病；兒童實體腫瘤；淋巴球性淋巴瘤；膀胱癌；腎癌或輸尿管癌；腎盂癌；中樞神經系統(CNS)贅瘤；原發性CNS淋巴瘤；腫瘤血管生成；脊軸腫瘤；腦幹神經膠質瘤；垂體腺瘤；卡堡氏肉瘤；表皮樣癌；鱗狀細胞癌；T細胞淋巴瘤；環境誘發癌，包括由石棉誘發之癌症；及該等癌症之組合。本發明亦適用於治療轉移性癌症。
在某些實施例中，含有至少一種本文中論述之巨環肽的治療劑組合可以在醫藥學上可接受之載劑中之單一組合物形式同時投與，或以各藥劑可依次投與之分開組合物形式同時投與。舉例而言，第二免 疫調節劑及本發明之巨環肽可依次投與，諸如首先投與第二免疫調節劑且其次投與巨環肽，或首先投與巨環肽且其次投與第二免疫調節劑。此外，若依次投與一次以上劑量之組合療法，則依次投與之次序在每一投與時間點可顛倒或保持相同次序，依次投與可與同時投與組合或其任何組合。舉例而言，第二免疫調節劑及巨環肽之第一次投與可同時，第二次投與可依次，其中首先投與第二免疫調節劑且其次投與巨環肽，且第三次投與可依次，其中首先投與巨環肽且其次投與第二免疫調節劑等。另一代表性給藥方案可涉及首先依次投與，其中首先投與巨環肽且其次投與第二免疫調節劑，且後續投與可同時。
視情況，巨環肽及第二免疫調節劑之組合可另外與免以下疫原性劑組合，諸如癌細胞、經純化之腫瘤抗原(包括重組蛋白質、肽及碳水化合物分子)、細胞及轉染有編碼免疫刺激細胞激素之基因的細胞(He等人，J.Immunol.,173：4919-4928(2004))。可使用之腫瘤疫苗的非限制性實例包括黑素瘤抗原之肽，諸如gp100、MAGE抗原、Trp-2、MART1及/或酪胺酸酶之肽，或經轉染以表現細胞激素GM-CSF之腫瘤細胞(下文進一步論述)。
經組合之PD-L1巨環肽及第二免疫調節劑可另外與疫苗接種方案組合。已設計出針對腫瘤之許多實驗性疫苗接種策略(參見Rosenberg,S.,Development of Cancer Vaccines,ASCO Educational Book Spring：60-62(2000)；Logothetis,C.,ASCO Educational Book Spring：300-302(2000)；Khayat,D.,ASCO Educational Book Spring：414-428(2000)；Foon,K.,ASCO Educational Book Spring：730-738(2000)；亦參見Restifo等人，Cancer Vaccines，第61章，第3023-3043頁，DeVita等人編，Cancer：Principles and Practice of Oncology，第五版(1997))。在此等策略中之一者中，使用自體或同種異體腫瘤細胞製備疫苗。已顯示此等細胞疫苗在腫瘤細胞經轉導以表現GM-CSF時最有效。已顯示GM- CSF為用於腫瘤疫苗接種之抗原呈現之強活化劑(Dranoff等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,90：3539-3543(1993))。
各種腫瘤中基因表現及大規模基因表現模式之研究已產生所謂腫瘤特異性抗原之定義(Rosenberg,Immunity,10：281-287(1999))。在許多情況下，此等腫瘤特異性抗原為腫瘤中及出現腫瘤之細胞中表現的分化抗原，例如黑素細胞抗原gp100、MAGE抗原及Trp-2。更重要的是，許多此等抗原可展示為宿主中發現之腫瘤特異性T細胞的靶標。在某些實施例中，經組合之PD-L1巨環肽及第二免疫調節劑可與表現於腫瘤中之重組蛋白質及/或肽之集合結合使用以產生針對此等蛋白質之免疫反應。此等蛋白質通常被免疫系統視為自體抗原且因此對其具耐受性。腫瘤抗原亦可包括蛋白質端粒酶，其為合成染色體之端粒所必需的且表現於超過85%之人類癌症中且僅表現於有限數目之體細胞組織中(Kim等人，Science,266：2011-2013(1994))。(可藉由各種方法保護此等體細胞組織免受免疫攻擊)。腫瘤抗原亦可為由於改變蛋白質序列或在兩個無關序列之間形成融合蛋白(亦即費城染色體中之bcr-abl)之體細胞突變而在癌細胞中表現之「新抗原」或B細胞腫瘤之個體基因型。
其他腫瘤疫苗可包括人類癌症中所牽涉之病毒的蛋白質，該等病毒諸如人類乳頭狀瘤病毒(HPV)、肝炎病毒(HBV及HCV)及卡堡氏疱疹肉瘤病毒(KHSV)。可與PD-L1巨環肽阻斷結合使用之腫瘤特異性抗原的另一形式為自腫瘤組織自身分離之經純化熱休克蛋白質(HSP)。此等熱休克蛋白質含有腫瘤細胞蛋白質之片段且此等HSP高效遞送至抗原呈現細胞以引發腫瘤免疫力(Suot等人，Science,269：1585-1588(1995)；Tamura等人，Science,278：117-120(1997))。
樹突狀細胞(DC)為可用於引發抗原特異性反應之強抗原呈現細胞。DC可離體產生且負載有各種蛋白質及肽抗原以及腫瘤細胞提取 物(Nestle等人，Nat.Med.,4：328-332(1998))。DC亦可藉由基因方法轉導以亦表現此等腫瘤抗原。DC亦已出於免疫目的而直接與腫瘤細胞融合(Kugler等人，Nat.Med.,6：332-336(2000))。作為疫苗接種之方法，DC免疫作用可與經組合之抗PD-L1巨環肽及第二免疫調節劑進一步有效組合以活化更強抗腫瘤反應。
經組合之抗PD-L1巨環肽及額外免疫調節劑亦可與標準癌症治療進一步組合。舉例而言，巨環肽與第二免疫調節劑之組合可與化學治療方案有效組合。在此等情形中，如在巨環肽與第二免疫調節劑之組合下所觀測，有可能減小與本發明之組合一起投與之其他化學治療劑的劑量(Mokyr等人，Cancer Res.,58：5301-5304(1998))。此類組合之一個實例為巨環肽與第二免疫調節劑之組合與達卡巴嗪進一步組合用於治療黑素瘤。另一個實例為巨環肽與第二免疫調節劑之組合與介白素-2(IL-2)進一步組合用於治療黑素瘤。支持PD-L1巨環肽及另一種免疫調節劑與化學療法組合使用之科學基本原理在於作為大部分化學治療化合物之細胞毒性作用結果的細胞死亡應使得抗原呈現路徑中腫瘤抗原之含量增加。可經由細胞死亡而與經組合之抗PD-L1巨環肽及額外免疫調節劑產生協同作用的其他組合療法包括輻射、手術及激素去除。此等方案中之每一者產生宿主中之腫瘤抗原之來源。血管生成抑制劑亦可與經組合之PD-L1及第二免疫調節劑組合。抑制血管生成導致腫瘤細胞死亡，其亦可為饋至宿主抗原呈現路徑中之腫瘤抗原之來源。
PD-L1與另一種免疫調節劑之組合亦可與使表現Fcα或Fcγ受體之效應細胞靶向腫瘤細胞之雙特異性巨環肽組合使用(參見例如美國專利第5,922,845號及第5,837,243號)。雙特異性巨環肽可用於靶向兩個單獨抗原。舉例而言，抗Fc受體/抗腫瘤抗原(例如Her-2/neu)雙特異性巨環肽已用於使巨噬細胞靶向腫瘤位點。此靶向可更有效地活化腫瘤 特異性反應。此等反應之T細胞臂藉由使用經組合之PD-L1及第二免疫調節劑來強化。或者，可藉由使用結合至腫瘤抗原及樹突狀細胞特異性細胞表面標記之雙特異性巨環肽將抗原直接遞送至DC。
在另一個實例中，巨環肽與第二免疫調節劑之組合可與以下抗贅生性巨環劑結合使用，諸如RITUXAN®(利妥昔單抗(rituximab))、HERCEPTIN®(曲妥珠單抗(trastuzumab))、BEXXAR®(托西莫單抗(tositumomab))、ZEVALIN®(布突默單抗(ibritumomab))、CAMPATH®(阿侖單抗(alemtuzumab))、Lymphocide(依帕珠單抗(eprtuzumab))、AVASTIN®(貝伐單抗(bevacizumab))及TARCEVA®(埃羅替尼(erlotinib))及其類似物。舉例而言且不希望受理論束縛，用抗癌抗體或與毒素結合之抗癌抗體治療可導致癌細胞死亡(例如腫瘤細胞)，其將強化藉由第二免疫調節劑靶標或PD-L1介導之免疫反應。在一個示例性實施例中，過度增生性疾病(例如癌症腫瘤)之治療可包括抗癌抗體與同時或依次或其任何組合投與之巨環肽及第二免疫調節劑之組合，其可強化宿主之抗腫瘤免疫反應。
腫瘤藉由多種機制逃避宿主免疫監視。許多此等機制可藉由使腫瘤所表現且具免疫抑制性之蛋白質不活化來克服。此等蛋白質尤其包括TGF-β(Kehrl,J.等人，J.Exp.Med.,163：1037-1050(1986))、IL-10(Howard,M.等人，Immunology Today,13：198-200(1992))及Fas配位體(Hahne,M.等人，Science,274：1363-1365(1996))。在另一個實例中，針對此等實體中之每一者的抗體可與巨環肽及另一種免疫調節劑進一步組合，以抵消免疫抑制劑之效應且促進宿主的腫瘤免疫反應。
可用於活化宿主免疫反應性之其他藥劑可與本發明之巨環肽進一步組合使用。此等藥劑包括樹突狀細胞表面上之活化DC功能及抗原呈現的分子。抗CD40巨環肽能夠有效替代輔助T細胞活性(Ridge,J.等人，Nature,393：474-478(1998))且可與單獨或與抗CTLA-4組合組合 之本發明之巨環肽結合使用(Ito,N.等人，Immunobiology,201(5)：527-540(2000))。活化針對以下T細胞協同刺激分子之巨環肽亦可使得T細胞活化水準增加，諸如OX-40(Weinberg,A.等人，Immunol.,164：2160-2169(2000))、4-1BB(Melero,I.等人，Nat.Med.,3：682-685(1997)及ICOS(Hutloff,A.等人，Nature,397：262-266(1999))。
骨髓移植目前用於治療多種造血來源之腫瘤。雖然移植物抗宿主病為此治療之後果，但可自移植物抗腫瘤反應獲得治療效益。單獨或與另一種免疫調節劑組合之本發明之巨環肽可用於增加供體移植之腫瘤特異性T細胞的有效性。
亦存在涉及抗原特異性T細胞之離體活化及擴增及將此等細胞授受性轉移至受體中以便抗原特異性T細胞抗腫瘤之數個實驗性治療方案(Greenberg,R.等人，Science,285：546-551(1999))。此等方法亦可用於活化針對諸如CMV之感染物的T細胞反應。在單獨或與另一種免疫調節劑組合之本發明之巨環肽存在下之離體活化可預期增加授受性轉移T細胞之頻率及活性。
在某些實施例中，本發明提供一種改變與用免疫刺激劑治療過度增生性疾病相關聯之不良事件的方法，其包含向個體投與本發明之巨環肽與低於治療劑量之另一種免疫調節劑之組合。舉例而言，本發明之方法提供一種藉由向患者投與不可吸收類固醇而降低免疫刺激性治療抗體誘發之結腸炎或腹瀉之發病率的方法。由於任何將接受免疫刺激性治療抗體之患者處於罹患由此類治療誘發之結腸炎或腹瀉的風險下，故此整個患者群體適合於根據本發明方法之療法。雖然已投與類固醇以治療發炎性腸病(IBD)及預防IBD惡化，但其尚未用於尚未診斷患有IBD之患者預防(降低發病率)IBD。與類固醇(甚至不可吸收類固醇)相關聯之顯著副作用已阻礙預防性使用。
在其他實施例中，單獨或與另一種免疫調節劑組合之本發明之 巨環肽可與任何不可吸收類固醇之使用進一步組合。如本文所用，「不可吸收類固醇」為展現深入首次代謝的糖皮質激素，使得在肝臟中代謝後，類固醇之生物利用率低，亦即小於約20%。在本發明之一個實施例中，不可吸收類固醇為布地奈德(budesonide)。布地奈德為局部起效的糖皮類固醇，其在經口投與後主要藉由肝臟深入代謝。ENTOCORT® EC(Astra-Zeneca)為經研發以使藥物遞送至迴腸及貫穿結腸最佳化之布地奈德的pH及時間依賴性經口調配物。ENTOCORT® EC在美國核准用於治療涉及迴腸及/或升結腸之輕度至中度克羅恩氏病(Crohn's disease)。用於治療克羅恩氏病之ENTOCORT® EC的常用口服劑量為6至9毫克/天。ENTOCORT® EC在腸中釋放，隨後吸收且保留在腸道黏膜中。一次其通過腸道黏膜目標組織，ENTOCORT® EC在肝臟中藉由細胞色素P450系統深入代謝成具有可忽略的糖皮質激素活性的代謝物。因此，生物利用率較低(約10%)。布地奈德之低生物利用率使得與具有較不深入之首次代謝的其他糖皮質激素相比的治療比率得以改善。布地奈德與全身起效的皮質類固醇相比產生較少不良作用，包括下丘腦-垂體抑制作用較小。然而，長期投與ENTOCORT® EC可導致全身性糖皮質激素效應，諸如腎上腺皮質機能亢進症及腎上腺抑制。參見Physicians' Desk Reference Supplement，第58版，608-610(2004)。
在其他實施例中，PD-L1及另一種免疫調節劑與不可吸收類固醇結合之組合可與水楊酸進一步組合。水楊酸包括5-ASA劑，諸如：柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine)(AZULFIDINE®,Pharmacia & Upjohn)；奧沙拉嗪(olsalazine)(DIPENTUM®,Pharmacia & UpJohn)；巴柳氮(balsalazide)(COLAZAL®,Salix Pharmaceuticals,Inc.)；及美沙拉嗪(mesalamine)(ASACOL®,Procter & Gamble Pharmaceuticals；PENTASA®,Shire US；CANASA®,Axcan Scandipharm,Inc.； ROWASA®,Solvay)。
劑量及調配物
式I之適合肽或更特定言之本文所述之巨環肽可作為單獨化合物及或與可接受之載劑混合以醫藥調配物形式投與患者以治療糖尿病及其他相關疾病。熟習治療糖尿病之技術者可易於確定向需要此類治療之哺乳動物(包括人類)投與化合物之劑量及途徑。投藥途徑可包括(但不限於)經口、口內、經直腸、經皮、經頰、鼻內、經肺、皮下、肌肉內、皮內、舌下、結腸內、眼內、靜脈內或腸道投與。根據投藥途徑，基於可接受之藥學實踐調配化合物(Fingl等人，The Pharmacological Basis of Therapeutics，第1章，第1頁(1975)；Remington's Pharmaceutical Sciences，第18版，Mack Publishing Co.,Easton,PA(1990))。
本文所述之醫藥學上可接受之肽組合物可以多種劑型投與，諸如錠劑、膠囊(其各包括持續釋放或定時釋放調配物)、丸劑、散劑、顆粒、酏劑、原位凝膠、微球體、晶體複合物、脂質體、微乳液、酊劑、懸浮液、糖漿、氣溶膠噴霧劑及乳液。本文所述之組合物亦可以經口、靜脈內(快速注射或輸注)、腹膜內、皮下、經皮或肌肉內形式投與，全部使用一般熟習醫藥技術者熟知的劑型。組合物可單獨投與，但一般將與基於所選投藥途徑及標準醫藥實踐選擇的醫藥載劑一起投與。
本文所述之組合物的給藥方案將當然視已知因素而變化，諸如特定藥劑之藥力學特徵及其投藥模式及途徑；接受者之物種、年齡、性別、健康狀況、醫學病狀及體重；症狀之性質及程度；同時發生的治療的種類；治療頻率；投藥途徑、患者之腎功能及肝功能以及所需效應。醫師或獸醫可確定預防、對抗或遏止疾病狀態之進程所需之有效量之藥物且開具該有效量之藥物的處方。
根據一般指導，活性成分在用於指定效應時之口服日劑量將介於每公斤體重約0.001至約1000mg範圍內，較佳每天每公斤體重約0.01至約100mg，且最佳每天每公斤約0.6至約20mg。活性成分在用於指定效應時之靜脈內日劑量將在恆定速率輸注期間介於每公斤體重每分鐘0.001ng至100.0ng範圍內。此類恆定靜脈內輸注可較佳以每公斤體重每分鐘0.01ng至50ng且最佳每公斤體重每分鐘0.01ng至10.0mg之速率投與。本文所述之組合物可以單次日劑量投與，或每日總劑量可分成每日兩次、三次或四次分次給藥投與。本文所述之組合物亦可視需要藉由將允許經數天/週/月之時段持續釋放藥物之儲槽式調配物投與。
本文所述之組合物可經由局部使用適合之鼻內媒劑以鼻內形成或使用經皮皮膚貼片經由經皮途徑投與。當以經皮遞送系統形式投與時，劑量投與將當然在整個給藥方案中為連續而非間斷的。
組合物通常與根據預定投藥形式(亦即口服錠劑、膠囊、酏劑、在推進劑存在或不存在下生成之氣溶膠噴霧劑及糖漿)適當選擇且與習知醫藥實踐相符之適合醫藥稀釋劑、賦形劑或載劑(在本文中統稱為醫藥載劑)混合投與。
舉例而言，對於以錠劑或膠囊形式經口投與，活性藥物組分可與以下經口、無毒、醫藥學上可接受之惰性載劑組合，諸如(但不限於)乳糖、澱粉、蔗糖、葡萄糖、甲基纖維素、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、硫酸鈣、甘露醇及山梨醇；對於以液體形式經口投與，經口藥物組分可與以下任何經口、無毒、醫藥學上可接受之惰性載劑組合，諸如(但不限於)乙醇、丙三醇及水。此外，當需要或必要時，亦可將適合之黏合劑、潤滑劑、崩解劑及著色劑併入混合物中。適合之黏合劑包括(但不限於)澱粉；明膠；天然糖，諸如(但不限於)葡萄糖或β-乳糖；玉米甜味劑；天然及合成膠，諸如阿拉伯膠、黃蓍膠或海藻酸 鈉；羧基甲基纖維素；聚乙二醇及蠟。用於此等劑型之潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉及氯化鈉。崩解劑包括(但不限於)澱粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土及三仙膠。
本文所述之組合物亦可以混合微胞或脂質體遞送系統形式投與，諸如單層小微脂粒、單層大微脂粒及多層微脂粒。脂質體可由多種磷脂形成，諸如膽固醇、硬脂胺或磷脂醯膽鹼。可添加滲透增強劑以增強藥物吸收。
由於已知前藥增強許多所需醫藥品質(亦即溶解性、生物可用性、製造等)，故本文所述化合物可以前藥形式遞送。因此，本文所述之標的物意欲涵蓋本發明所主張之化合物的前藥、遞送其之方法及含有其之組合物。
本文所述之組合物亦可與作為靶向藥物載劑之可溶性聚合物偶合。此類聚合物可包括聚乙烯-吡咯啶酮、哌喃共聚物、聚羥丙基-甲基丙烯醯胺-苯酚、聚羥乙基天冬醯胺苯酚或經軟脂醯基殘基取代之聚氧化乙烯-聚離胺酸。此外，本文所述之組合物可與以下適用於實現藥物控制釋放之一類可生物降解聚合物組合，例如聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳酸與聚乙醇酸之共聚物、聚ε己內酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二氫哌喃、聚氰基丙烯酸酯及水凝膠之交聯或兩性嵌段共聚物。
適於投與之劑型(醫藥組合物)可含有每劑量單位約0.01毫克至約500毫克活性成分。在此等醫藥組合物中，活性成分將通常以按該組合物之總重量計約0.5-95重量%之量存在。
明膠膠囊可含有活性成分及粉末狀載劑，諸如乳糖、澱粉、纖維素衍生物、硬脂酸鎂及硬脂酸。類似稀釋劑可用於製造壓製錠劑。錠劑及膠囊可製造為持續釋放產物以提供藥物經數小時時段之連續釋放。壓製錠劑可經糖包覆或經膜包覆以掩蓋任何令人不愉快的味道且 保護錠劑不受大氣影響，或經腸溶包衣包覆以便在胃腸道中選擇性崩解。
用於經口投與之液體劑型可含有著色劑及調味劑以增加患者接受性。
一般而言，水、適合之油、生理鹽水、右旋糖(葡萄糖)及相關糖水溶液及二醇(諸如丙二醇或聚乙二醇)為適用於非經腸溶液之載劑。用於非經腸投與之溶液較佳含有活性成分之水溶性鹽、適合之穩定劑及(若需要)緩衝物質。單獨或合併之抗氧化劑，諸如亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉或抗壞血酸為適合之穩定劑。亦使用檸檬酸及其鹽及EDTA鈉。另外，非經腸溶液可含有防腐劑，諸如氯化苯甲烴銨、對羥基苯甲酸甲酯或丙酯及氯丁醇。
適合之醫藥載劑描述於本領域之標準參考本文Remington：The Science and Practice of Pharmacy，第十九版，Mack Publishing Company(1995)中。
適用於本文所述化合物投與之代表性醫藥劑型可說明如下：
膠囊
大多數單位膠囊可藉由用100毫克粉末狀活性成分、150毫克乳糖、50毫克纖維素及6毫克硬脂酸鎂填充標準分半硬明膠膠囊來製備。
軟明膠膠囊
可製備活性成分於可消化油(諸如大豆油、棉籽油或橄欖油)中之混合物且藉助於正排量泵注入明膠中以形成含有100毫克活性成分之軟明膠膠囊。膠囊應洗滌且乾燥。
錠劑
錠劑可藉由習知程序製備以使得劑量單位例如為100毫克活性成分、0.2毫克膠態二氧化矽、5毫克硬脂酸鎂、275毫克微晶纖維素、 11毫克澱粉及98.8毫克乳糖。可施用適當包衣以增加可口性或延遲吸收。
可注射劑
本文所述之肽組合物的可注射調配物可或可不需要使用賦形劑，諸如已經監管機構核准之賦形劑。此等賦形劑包括(但不限於)溶劑及共溶劑、增溶劑、乳化劑或增稠劑、螯合劑、抗氧化劑及還原劑、抗微生物防腐劑、緩衝劑及pH調節劑、增積劑、保護劑及張力調節劑及專門添加劑。可注射調配物必須無菌、無熱原質且在溶液情況下，不含微粒物質。
適於藉由注射投與之非經腸組合物可藉由將例如1.5重量%活性成分攪拌於可或可不含有共溶劑或其他賦形劑之醫藥學上可接受之緩衝液中來製備。溶液應用氯化鈉等張且滅菌。
懸浮液
可製備用於經口及/或非經腸投與之水性懸浮液，以使得例如各5mL含有100mg細粉狀活性成分、20mg羧甲基纖維素鈉、5mg苯甲酸鈉、1.0g山梨醇溶液U.S.P.及0.025mL香草精或其他可口調味劑。
可生物降解微粒
適於藉由注射投與之持續釋放非經腸組合物可例如藉由將適合之可生物降解聚合物溶解於溶劑中，將欲併入之活性劑添加至聚合物溶液且自基質移除溶劑，由此形成活性劑分佈於整個基質中之聚合物基質來製備
肽合成
本發明之巨環肽的化學合成可使用多種此項技術公認之方法進行，包括逐步固相合成、經由構形輔助之肽片段再接合的半合成、選殖或合成肽區段之酶促接合及化學接合。合成本文所述之巨環肽及其類似物之較佳方法為使用各種固相技術之化學合成，諸如描述於 Chan,W.C.等人編，Fmoc Solid Phase Synthesis,Oxford University Press,Oxford(2000)；Barany,G.等人，The Peptides：Analysis,Synthesis,Biology，第2卷：「Special Methods in Peptide Synthesis,Part A」，第3-284頁，Gross,E.等人編，Academic Press,New York(1980)；及Stewart,J.M.等人，Solid-Phase Peptide Synthesis，第2版，Pierce Chemical Co.,Rockford,IL(1984)中之固相技術。較佳策略係基於用於臨時保護α-胺基之Fmoc(9-茀基甲基甲基-氧基羰基)基團與用於臨時保護胺基酸側鏈之第三丁基組合(參見例如Atherton,E.等人，「The Fluorenylmethoxycarbonyl Amino Protecting Group」,The Peptides：Analysis,Synthesis,Biology，第9卷：「Special Methods in Peptide Synthesis,Part C」，第1-38頁，Undenfriend,S.等人編，Academic Press,San Diego(1987)。
肽可以逐步方式在不溶性聚合物負載物(亦稱為「樹脂」)上自肽之C端開始合成。藉由將肽之C端胺基酸經由形成醯胺或酯鍵附接至樹脂開始合成。此使得所得肽最終分別以C端醯胺或羧酸形式釋放。
用於合成之C端胺基酸及所有其他胺基酸需要使其α-胺基及側鏈官能基(若存在)有差異地受保護，使得α-胺基保護基可在合成期間選擇性移除。胺基酸之偶合藉由將其羧基活化為活性酯且使其與附接至樹脂之N端胺基酸未封端之α-胺基反應來進行。重複α-胺基脫除保護基及偶合之順序，直至組裝整個肽序列為止。肽接著自樹脂釋放，同時伴隨側鏈官能基脫除保護基，通常在適當清除劑存在下進行以限制副反應。所得肽最終藉由逆相HPLC純化。
作為最終肽之前驅物所需之肽基-樹脂的合成利用市售交聯聚苯乙烯聚合物樹脂(Novabiochem,San Diego,CA；Applied Biosystems,Foster City,CA)。C端甲醯胺之較佳固體負載物為：4-(2',4'-二甲氧基苯基-Fmoc-胺基甲基)-苯氧基乙醯基-對甲基二苯甲胺樹脂(Rink醯胺 MBHA樹脂)；9-Fmoc-胺基-二苯并哌喃-3-基氧基-Merrifield樹脂(Sieber醯胺樹脂)；4-(9-Fmoc)胺基甲基-3,5-二甲氧基苯氧基)戊醯基-胺基甲基-Merrifield樹脂(PAL樹脂)。第一及後續胺基酸之偶合可使用HOBt、6-Cl-HOBt或分別由DIC/HOBt、HBTU/HOBt、BOP、PyBOP生產或由DIC/6-Cl-HOBt、HCTU、DIC/HOAt或HATU生產之HOAt活性酯實現。受保護之肽片段的較佳固體負載物為：2-氯三苯甲基氯樹脂及9-Fmoc-胺基-二苯并哌喃-3-基氧基-Merrifield樹脂(Sieber醯胺樹脂)。第一胺基酸裝載於2-氯三苯甲基氯樹脂上最佳藉由使受Fmoc保護之胺基酸與樹脂在二氯甲烷及DIEA中反應來實現。若需要，可添加少量DMF以促進胺基酸溶解。
本文所述之肽類似物的合成可藉由使用單通道或多通道肽合成器來進行，諸如CEM Liberty Microwave合成器或Protein Technologies,Inc.Prelude(6通道)或Symphony(12通道)合成器。
相應肽之肽基-樹脂前驅物可使用任何標準程序裂解且脫除保護基(參見例如King,D.S.等人，Int.J.Peptide Protein Res.,36：255-266(1990))。所需方法為在水及作為清除劑之TIS存在下使用TFA。通常，肽基-樹脂在室溫下於TFA/水/TIS(94：3：3，v：v：v；1mL/100mg肽基樹脂)中攪拌2-6小時。接著濾出已用樹脂且濃縮TFA溶液或在減壓下乾燥。所得粗物質肽沈澱且用Et2O洗滌或直接再溶解於DMSO或50%乙酸水溶液中以便藉由製備型HPLC純化。
具有所需純度之肽可藉由例如在Waters型號4000或Shimadzu型號LC-8A液體層析儀上使用製備型HPLC純化來獲得。將粗物質肽溶液注入YMC S5 ODS(20×100mm)管柱中且用MeCN/水(均用0.1% TFA緩衝)之線性梯度使用14-20mL/min之流動速率溶離，同時藉由在220nm下之UV吸光度監測流出物。經純化肽之結構可藉由電噴霧MS分析確認。
分析資料：
質譜分析：「ESI-MS(+)」表示在陽離子模式中進行之電噴霧電離質譜分析；「ESI-MS(-)」表示在陰離子模式中進行之電噴霧電離質譜分析；「ESI-HRMS(+)」表示在陽離子模式中進行之高解析度電噴霧電離質譜分析；「ESI-HRMS(-)」表示在陰離子模式中進行之高解析度電噴霧電離質譜分析。所偵測之質量在「m/z」單位名稱後報導。精確質量大於1000之化合物常常偵測為雙電荷或三電荷離子。
分析資料：
質譜分析：「ESI-MS(+)」表示在陽離子模式中進行之電噴霧電離質譜分析；「ESI-MS(-)」表示在陰離子模式中進行之電噴霧電離質譜分析；「ESI-HRMS(+)」表示在陽離子模式中進行之高解析度電噴霧電離質譜分析；「ESI-HRMS(-)」表示在陰離子模式中進行之高解析度電噴霧電離質譜分析。所偵測之質量在「m/z」單位名稱後報導。精確質量大於1000之化合物常常偵測為雙電荷或三電荷離子。
分析條件A：
管柱：Waters BEH C18,2.0×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B，經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.5分鐘；流速：1mL/min；偵測：UV，220nm。
分析條件B：
管柱：Waters BEH C18,2.0×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：0% B，經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.5分鐘；流速：0.5mL/min；偵測：UV，220nm。
分析條件C：
管柱：Waters Aquity BEH C18 2.1×50mm 1.7μm粒子；移動相 A：水+0.05% TFA；移動相B：乙腈+0.05% TFA；溫度：40℃；梯度：0% B，經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.5分鐘；流速：0.8mL/min；偵測：UV，220nm。
分析條件D：
管柱：Waters Aquity BEH C18 2.1×50mm 1.7μm粒子；移動相A：水+0.05% TFA；移動相B：甲醇+0.05% TFA；溫度：40℃；梯度：0% B，經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.5分鐘；流速：0.8mL/min；偵測：UV，220nm。
通用程序： Prelude方法A：
所有操作在Prelude肽合成器(Protein Technologies)上自動進行。除非另外指出，否則所有程序在裝配有底部玻璃料之10mL聚丙烯管中進行；若反應物之標度超過0.100mmol，則使用裝配有底部玻璃料之40mL聚丙烯管。該管經由該管之底部及頂部連接至Prelude肽合成器。DMF及DCM可經由管頂部添加，其向下同等洗滌管側。其餘試劑經由管底部添加且向上穿過玻璃料以接觸樹脂。所有溶液經由管底部移除。「週期性攪動」描述經由底部玻璃料之簡單N2氣脈衝；脈衝持續約5秒且每隔30秒出現。一般不使用製備超過三週之胺基酸溶液。HATU溶液在製備5天內使用。DMF=二甲基甲醯胺；HATU=六氟磷酸1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物；DIPEA=二異丙基乙胺；TIPS=三異丙基矽烷；DTT=DL-二硫蘇糖醇。所用樹脂為2-氯三苯甲基氯樹脂(1.42mmol/g裝載量)。常用胺基酸列於以下，其中側鏈保護基在括弧內指出：Fmoc-Ala-OH；Fmoc-Arg(Pbf)-OH；Fmoc-Asn(Trt)-OH；Fmoc-Asp(OtBu)-OH；Fmoc-Bzt-OH；Fmoc-Cys(Trt)-OH；Fmoc-Dab(Boc)-OH；Fmoc-Dap(Boc)-OH；Fmoc-Gln(Trt)-OH；Fmoc-Gly-OH；Fmoc-His(Trt)- OH；Fmoc-Hyp(tBu)-OH；Fmoc-Ile-OH；Fmoc-Leu-OH；Fmoc-Lys(Boc)-OH；Fmoc-Nle-OH；Fmoc-Met-OH；Fmoc-[N-Me]Ala-OH；Fmoc-[N-Me]Nle-OH；Fmoc-Phe-OH；Fmoc-Pro-OH；Fmoc-Sar-OH；Fmoc-Ser(tBu)-OH；Fmoc-Thr(tBu)-OH；Fmoc-Trp(Boc)-OH；Fmoc-Tyr(tBu)-OH；Fmoc-Val-OH。
「Prelude方法A」之程序描述在0.100mmol標度下進行之實驗，其中該標度藉由下文描述之「樹脂裝載程序」中所用之胺基酸的量來確定。在0.100mmol標度下使用約100mg 2-氯三苯甲基氯樹脂。所有該程序可藉由該規模之倍量來調整所述體積，以便按比例放大超過0.100mmol之規模。
在胺基酸偶合之前，所有肽合成序列藉由將第一胺基酸裝載於樹脂上開始，下文描述為「樹脂裝載程序」。將胺基酸偶合至一級胺N端使用下文所述之「單偶合程序」。將胺基酸偶合至二級胺N端使用下文所述之「雙重偶合程序」。
樹脂裝載程序：
向10mL聚丙烯固相反應容器中添加2-氯三苯甲基氯樹脂(100mg，1.42mmol/g裝載量)。將反應容器置於Prelude肽合成器上。手動向反應容器中添加受Fmoc保護之C端胺基酸(0.10mmol)及二異丙基乙胺(0.65mmol)於DCM(2.5mL)中之溶液。在自動化下，藉由週期性氮氣鼓泡攪動混合物60分鐘。向反應容器中添加甲醇(0.20mL)。混合物藉由週期性氮氣鼓泡攪動15分鐘，接著經由玻璃料排出反應容器。樹脂如下連續洗滌三次：對於每次洗滌，將DCM(2.0mL)添加至容器頂部且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌三次：對於每次洗滌，將DMF(2.0mL)添加至容器頂部且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌兩次：對於每次洗滌，將DCM(2.0mL)添加至容器頂部且週 期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌三次：對於每次洗滌，將DMF(2.0mL)添加至容器頂部且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。
單偶合程序：
向先前步驟之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物3分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物3分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌六次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物30秒，隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加胺基酸(0.2M於DMF中，1.0mL，2eq)，接著添加HATU(0.2M於DMF中，1.0mL，2eq)且最後添加DIPEA(0.8M於DMF中，0.5mL，4eq)。週期性攪動混合物15分鐘，隨後經由玻璃料排出反應溶液。樹脂如下連續洗滌四次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物30秒，隨後經由玻璃料排出溶液。封端步驟進行如下：向反應容器中添加DMF(0.65mL)，接著添加DIPEA(0.8M於DMF中，0.45mL)，接著添加乙酸酐(1.0M於DMF中，1.45mL)。週期性攪動混合物10分鐘，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌四次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。所得樹脂直接用於下一步驟。
雙重偶合程序：
向先前步驟之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物3分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物3分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌六次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物30秒， 隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加胺基酸(0.2M於DMF中，1.0mL，2eq)，接著添加HATU(0.2M於DMF中，1.0mL，2eq)且最後添加DIPEA(0.8M於DMF中，0.5mL，4eq)。週期性攪動混合物15分鐘，隨後經由玻璃料排出反應溶液。樹脂如下洗滌兩次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物30秒，隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加胺基酸(0.2M於DMF中，1.0mL，2eq)，接著添加HATU(0.2M於DMF中，1.0mL，2eq)且最後添加DIPEA(0.8M於DMF中，0.5mL，4eq)。週期性攪動混合物15分鐘，隨後經由玻璃料排出反應溶液。樹脂如下洗滌兩次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物30秒，隨後經由玻璃料排出溶液。封端步驟進行如下：向反應容器中添加DMF(0.65mL)，接著添加DIPEA(0.8M於DMF中，0.45mL)，接著添加乙酸酐(1.0M於DMF中，1.45mL)。週期性攪動混合物10分鐘，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌四次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。所得樹脂直接用於下一步驟。
Symphony方法A：
除如所指出之外，此採集程序與「Prelude方法A」相同。對於所有程序，使用Symphony X肽合成器(Protein Technologies)代替Prelude肽合成器且所有試劑經由反應容器頂部添加。
樹脂裝載程序：
與肽偶合步驟中所用的肽合成器無關，樹脂裝載步驟始終按照「Prelude方法A：樹脂裝載程序」在Prelude合成器上進行。
單偶合程序：
除DIPEA溶液之濃度為0.4M且將1.0mL此溶液遞送至反應物以外，此程序與「Prelude方法A：單偶合程序」相同。另外，封端步驟 中所用之試劑為添加至懸浮於DIPEA(0.4M，1.0mL)中之樹脂的純乙酸酐(1.0mL)。
雙重偶合程序：
除DIPEA溶液之濃度為0.4M且將1.0mL此溶液遞送至反應物以外，此程序與「Prelude方法A：雙重偶合程序」相同。另外，封端步驟中所用之試劑為添加至懸浮於DIPEA(0.4M,1.0mL)中之樹脂的純乙酸酐(1.0mL)。
通用合成順序A：
「通用合成順序A」描述用於得到本文所述之環狀肽之程序的通用順序。出於此通用程序的目的，「Symphony方法A」之程序與「Prelude方法A」之程序可互換。該程序可藉由該規模之倍量來調整所述體積，以便按比例放大超過0.100mmol之規模。使用0.100mmol胺基酸進行「Prelude方法A：樹脂裝載程序」。接著，按照「Prelude方法A：單偶合程序」(若樹脂結合肽之N端為一級胺)或「Prelude方法A：雙重偶合程序」(若樹脂結合肽之N端為二級胺)在Prelude上依次進行一系列胺基酸偶合。
製備實例5001
製備中間物5001A：
按照「通用合成順序A」。向自動化順序之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DCM(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。接著立刻使用DCM(8mL)將樹脂轉移至15mL小瓶中。向溶液中添加六氟異丙醇(2mL)。樹脂立刻變成深紅色；溶液保持無色。簡單手動攪動混合物，接著使其靜置在室溫下15分鐘，接著過濾。將濾液轉移至15mL小瓶中且在N2流下濃縮，得到固體殘餘物，即中間物5001A。
製備中間物5001B：
向裝有以上製備之全部中間物5001A的15mL小瓶中添加DMF(0.50mL)，接著添加HATU(45.6mg，0.120mmol)，接著添加DIPEA(0.114mL，0.650mmol)。攪拌黃色溶液30分鐘。在以下條件下直接對溶液進行HPLC純化：管柱：Luna C18,30×100mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1% TFA；移動相B：95：5乙腈：水+0.1% TFA；梯度：經10分鐘60-100% B，接著在100% B保持10分鐘；流速：42mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥，得到白色固體，即中間物5001B。
製備實例5001：
「脫除保護基溶液」係藉由將三氟乙酸(22mL)、苯酚(1.325g)、水(1.25mL)、TIPS(0.5mL)及DTT(0.25g)合併於40mL玻璃瓶中來製備。向裝有以上製備之全部中間物5001B的1打蘭小瓶中添加「脫除保護基溶液」(1.0mL)。使溶液在500rpm下運行的震盪器中混合1.5小時，接著倒入25mL裝有Et2O(20mL)之試管中。沈澱少量白色固體。離心混合物；傾析液體。將固體懸浮於Et2O(10mL)中。離心混合物，傾析液體。將所得殘餘物溶解於MeOH中且在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘15-55% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為0.5mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.49min；ESI-MS(+)m/z 864.2(M+2H)
分析條件B：滯留時間=2.73min；ESI-MS(+)m/z 863.8(M+2H)
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：863.4774實驗值：863.4768。
製備實例5002
製備中間物5002A：
按照「通用合成順序A」。向自動化順序之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DCM(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。接著立刻使用DCM(8mL)將樹脂轉移至15mL小瓶中。向溶液中添加六氟異丙醇(2mL)。樹脂立刻變成深紅色；溶液保持無色。簡單手動攪動混合物，接著使其靜置在室溫下15分鐘，接著過濾。將濾液轉移至15mL小瓶 中且在N2流下濃縮，得到固體殘餘物，即中間物5002A。
製備中間物5002B：
向裝有以上製備之全部中間物5002A的15mL小瓶中添加DMF(0.50mL)，接著添加HATU(45.6mg，0.120mmol)，接著添加DIPEA(0.114mL，0.650mmol)。攪拌黃色溶液30分鐘。在以下條件下直接對溶液進行HPLC純化：管柱：Luna C18,30×100mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1% TFA；移動相B：95：5乙腈：水+0.1% TFA；梯度：經10分鐘60-100% B，接著在100% B保持10分鐘；流速：42mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥，得到白色固體，即中間物5002B。
製備實例5002：
「脫除保護基溶液」係藉由將三氟乙酸(22mL)、苯酚(1.325g)、水(1.25mL)、TIPS(0.5mL)及DTT(0.25g)合併於40mL玻璃瓶中來製備。向裝有以上製備之全部中間物5002B的1打蘭小瓶中添加「脫除保護基溶液」(1.0mL)。使溶液在500rpm下運行的震盪器中混合1.0小時，接著倒入25mL裝有Et2O(15mL)之試管中。沈澱少量白色固體。離心混合物；傾析液體。將固體懸浮於Et2O(15mL)中。離心混合物，傾析液體。將所得殘餘物溶解於MeOH中，且向溶液中添加DIPEA(0.050mL)。在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘45-85% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為1.7mg且其藉由LCMS分析估計之純度為95%。
分析條件A：滯留時間=1.69min；ESI-MS(-)m/z 891.3(M-2H)
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：892.4801實驗值：892.4796。
製備實例5003
製備中間物5003A：
使用45mL反應容器(RV)在0.200mmol標度上遵循「通用合成順序A」。向自動化順序之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，4.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，4.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(4.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DCM(4.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加DCM(16mL)，接著添加六氟異丙醇(4mL)。簡單手動攪動混合物，接著使其靜置在室溫下15分鐘，接著經由反應容器底部玻璃料過濾。將濾液轉移至25mL試管且經由離心蒸發濃縮，得到中間物5003A。
製備中間物5003B：
向裝有以上製備之全部中間物5003A的25mL試管中添加DMF(2.0mL)，接著添加HATU(84mg，0.220mmol)，接著添加DIPEA(0.350mL，2.00mmol)。將試管置於在500rpm下運行之震盪器中30分鐘。溶液接著用PhMe稀釋至20mL體積且接著經由離心蒸發濃縮溶液，得到固體殘餘物，即粗中間物5003B。
製備實例5003：
「脫除保護基溶液」係藉由將三氟乙酸(22mL)、苯酚(1.325g)、水(1.25mL)、TIPS(0.5mL)及DTT(0.25g)合併於40mL玻璃瓶中來製備。向裝有以上製備之全部粗中間物5003B的25mL試管中添加「脫除保護基溶液」(2.0mL)。使溶液在500rpm下運行的震盪器中混合1.0小時，接著經由添加Et2O(15mL)稀釋。隨著混合物澈底混合，形成白色沈澱物。離心混合物；傾析液體。將固體懸浮於Et2O(15mL)中。離心混合物，傾析液體。將所得殘餘物溶解於水：MeOH：MeCN(1mL：1mL：1mL)中，且向溶液中添加碳酸氫銨(約25mg)。在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘50-90% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘20-60% B，接著在100% B保持3分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為1.0mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。分析條件A：滯留時間=1.93min；ESI-MS(+)m/z 846.7(M+2H)；ESI-HRMS(+)m/z：計算值：845.9588 實驗值：845.9576。
製備實例5004
製備中間物5004A：
使用45mL反應容器(RV)在0.200mmol標度上遵循「通用合成順序A」。向自動化順序之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，4.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，4.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(4.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DCM(4.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加DCM(16mL)，接著添加六氟異丙醇(4mL)。簡單手動攪動混合物，接著使其靜置在室溫下15分鐘，接著經由反應容器底部玻璃料過濾。將濾液轉移至25mL試管且經由離心蒸發濃縮，得到中間物5004A。
製備中間物5004B：
向裝有以上製備之全部中間物5004A的25mL試管中添加DMF(2.0mL)，接著添加DIPEA(0.350mL，2.00mmol)，接著添加HATU(84mg，0.220mmol)於DMF(0.5mL)中之溶液。將試管置於在500rpm下運行之震盪器中2小時。溶液接著用PhMe稀釋至20mL體積且接著經由離心蒸發濃縮溶液，得到固體殘餘物，即粗中間物5004B。
製備實例5004：
「脫除保護基溶液」係藉由將三氟乙酸(22mL)、苯酚(1.325g)、水(1.25mL)、TIPS(0.5mL)及DTT(0.25g)合併於40mL玻璃瓶中來製備。向裝有以上製備之全部粗中間物5004B的25mL試管中添加「脫除保護基溶液」(2.0mL)。使溶液在500rpm下運行的震盪器中混合1.0小時，接著經由添加Et2O(15mL)稀釋。隨著混合物澈底混合，形成白色沈澱物。離心混合物；傾析液體。將固體懸浮於Et2O(15mL)中。離心混合物，傾析液體。將所得殘餘物溶解於水：MeOH：MeCN(1mL：1mL：1mL)中，且向溶液中添加碳酸氫銨(約100mg)。在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘15-55% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為5.5mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。分析條件A：滯留時間=1.84min；ESI-MS(+)m/z 874.4(M+2H)
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：874.4696實驗值：874.4679。
製備實例5005
製備中間物5005A：
使用45mL反應容器(RV)在0.200mmol標度上遵循「通用合成順序A」。向自動化順序之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，4.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，4.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(4.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DCM(4.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加DCM(16mL)，接著添加六氟異丙醇(4mL)。簡單手動攪動混合物，接著使其靜置在室溫下15分鐘，接著經由反應容器底部玻璃料過濾。將濾液轉移至25mL試管且經由離心蒸發濃縮，得到中間物5005A。
製備中間物5005B：
向裝有以上製備之全部中間物5005A的25mL試管中添加DMF(2.0mL)，接著添加DIPEA(0.350mL，2.00mmol)，接著添加HATU(84mg，0.220mmol)於DMF(0.5mL)中之溶液。將試管置於在500rpm下運行之震盪器中2小時。溶液接著用PhMe稀釋至20mL體積且接著經由離心蒸發濃縮溶液，得到固體殘餘物，即粗中間物5005B。
製備實例5005：
「脫除保護基溶液」係藉由將三氟乙酸(22mL)、苯酚(1.325g)、水(1.25mL)、TIPS(0.5mL)及DTT(0.25g)合併於40mL玻璃瓶中來製備。向裝有以上製備之全部粗中間物5005B的25mL試管中添加「脫除保護基溶液」(2.0mL)。使溶液在500rpm下運行的震盪器中混合1.0小時，接著經由添加Et2O(15mL)稀釋。隨著混合物澈底混合，形成白色沈澱物。離心混合物；傾析液體。將固體懸浮於Et2O(15mL)中。離心混合物，傾析液體。將所得殘餘物溶解於水：MeOH：MeCN(1mL：1mL：1mL)中，且向溶液中添加碳酸氫銨(約100mg)。在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘50-90% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為4.5mg且其藉由LCMS分析估計之純度為95%。分析條件A：滯留時間=1.84min；ESI-MS(+)m/z 881.5(M+2H)；ESI-HRMS(+)m/z：計算值：881.4774 實驗值：881.4761。
製備實例5006
製備中間物5006A：
使用45mL反應容器(RV)在0.200mmol標度上遵循「通用合成順序A」。向自動化順序之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，4.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，4.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(4.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DCM(4.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加DCM(16mL)，接著添加六氟異丙醇(4mL)。簡單手動攪動混合物，接著使其靜置在室溫下15分鐘，接著經由反應容器底部玻璃料過濾。保留濾液。向含有樹脂之反應容器中添加DCM(16mL)，接著添加六氟異丙醇(4mL)。 簡單手動攪動混合物，接著使其靜置在室溫下15分鐘，接著經由反應容器底部玻璃料過濾。合併濾液，經由離心蒸發濃縮，得到中間物5006A。
製備中間物5006B：
向具有以上製備之全部中間物5006A的7mL小瓶中添加DMF(2.0mL)，接著添加DIPEA(0.350mL，2.00mmol)，接著添加HATU(84mg，0.220mmol)。將試管置於在500rpm下運行之震盪器中1小時。溶液在N2流下濃縮，接著進一步高真空濃縮，得到琥珀色固體，即粗中間物5006B。
製備實例5006：
「脫除保護基溶液」係藉由將三氟乙酸(22mL)、苯酚(1.325g)、水(1.25mL)、TIPS(0.5mL)及DTT(0.25g)合併於40mL玻璃瓶中來製備。向裝有以上製備之全部粗中間物5006B的小瓶中添加「脫除保護基溶液」(2.0mL)。使溶液在500rpm下運行的震盪器中混合1.0小時，接著經由添加Et2O(15mL)稀釋。隨著混合物澈底混合，形成白色沈澱物。離心混合物；傾析液體。將固體懸浮於Et2O(15mL)中。離心混合物，傾析液體。將所得殘餘物溶解於水：MeOH：MeCN(1mL：1mL：1mL)中，且向溶液中添加碳酸氫銨(約25mg)。在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘45-85% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有 所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為6.4mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。分析條件A：滯留時間=1.77min；ESI-MS(+)m/z 870.1(M+2H)；分析條件C：滯留時間=1.44min；ESI-MS(+)m/z 871.2(M+2H)。
製備實例5007
製備中間物5007A：
使用45mL反應容器(RV)在0.200mmol標度上遵循「通用合成順序A」。向自動化順序之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，4.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，4.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(4.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DCM(4.0mL)且週期性攪動所得混合物90 秒，隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加DCM(16mL)，接著添加六氟異丙醇(4mL)。簡單手動攪動混合物，接著使其靜置在室溫下15分鐘，接著經由反應容器底部玻璃料過濾。保留濾液。向含有樹脂之反應容器中添加DCM(16mL)，接著添加六氟異丙醇(4mL)。簡單手動攪動混合物，接著使其靜置在室溫下15分鐘，接著經由反應容器底部玻璃料過濾。合併濾液，經由離心蒸發濃縮，得到中間物5007A。
製備中間物5007B：
向具有以上製備之全部中間物5007A的7mL小瓶中添加DMF(2.0mL)，接著添加DIPEA(0.350mL，2.00mmol)，接著添加HATU(84mg，0.220mmol)。將試管置於在500rpm下運行之震盪器中1小時。溶液在N2流下濃縮，接著進一步高真空濃縮，得到琥珀色固體，即粗中間物5007B。
製備實例5007：
「脫除保護基溶液」係藉由將三氟乙酸(22mL)、苯酚(1.325g)、水(1.25mL)、TIPS(0.5mL)及DTT(0.25g)合併於40mL玻璃瓶中來製備。向裝有以上製備之全部粗中間物5007B的小瓶中添加「脫除保護基溶液」(2.0mL)。使溶液在500rpm下運行的震盪器中混合1.0小時，接著經由添加Et2O(15mL)稀釋。隨著混合物澈底混合，形成白色沈澱物。離心混合物；傾析液體。將固體懸浮於Et2O(15mL)中。離心混合物，傾析液體。將所得殘餘物溶解於水：MeOH：MeCN(1mL：1mL：1mL)中，且向溶液中添加碳酸氫銨(約25mg)。在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘15-55% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸 發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為6.5mg且其藉由LCMS分析估計之純度為97%。分析條件A：滯留時間=1.70min；ESI-MS(+)m/z 871.0(M+2H)。
製備實例5008
製備中間物5008A：
使用45mL反應容器(RV)在0.200mmol標度上遵循「通用合成順序A」。向自動化順序之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，4.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，4.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於 每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(4.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DCM(4.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加DCM(16mL)，接著添加六氟異丙醇(4mL)。簡單手動攪動混合物，接著使其靜置在室溫下15分鐘，接著經由反應容器底部玻璃料過濾。保留濾液。向含有樹脂之反應容器中添加DCM(16mL)，接著添加六氟異丙醇(4mL)。簡單手動攪動混合物，接著使其靜置在室溫下15分鐘，接著經由反應容器底部玻璃料過濾。合併濾液，經由離心蒸發濃縮，得到中間物5008A。
製備中間物5008B：
向具有以上製備之全部中間物5008A的7mL小瓶中添加DMF(2.0mL)，接著添加DIPEA(0.350mL，2.00mmol)，接著添加HATU(84mg，0.220mmol)。將試管置於在500rpm下運行之震盪器中1小時。溶液在N2流下濃縮，接著進一步高真空濃縮，得到琥珀色固體，即粗中間物5008B。
製備實例5008：
「脫除保護基溶液」係藉由將三氟乙酸(22mL)、苯酚(1.325g)、水(1.25mL)、TIPS(0.5mL)及DTT(0.25g)合併於40mL玻璃瓶中來製備。向裝有以上製備之全部粗中間物5008B的小瓶中添加「脫除保護基溶液」(2.0mL)。使溶液在500rpm下運行的震盪器中混合1.0小時，接著經由添加Et2O(15mL)稀釋。隨著混合物澈底混合，形成白色沈澱物。離心混合物；傾析液體。將固體懸浮於Et2O(15mL)中。離心混合物，傾析液體。將所得殘餘物溶解於水：MeOH：MeCN(1mL：1mL：1mL)中，且向溶液中添加碳酸氫銨(約25mg)。在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5 μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經30分鐘15-55% B，接著在100% B保持4分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘45-85% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為5.1mg且其藉由LCMS分析估計之純度為98%。分析條件A：滯留時間=1.75min；ESI-MS(+)m/z 883.7(M+2H)；分析條件B：滯留時間=2.73min；ESI-MS(+)m/z 884.3(M+2H)。
製備實例5009
製備中間物5009A：
使用45mL反應容器(RV)在0.200mmol標度上遵循「通用合成順 序A」。向自動化順序之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，4.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，4.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(4.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DCM(4.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加DCM(16mL)，接著添加六氟異丙醇(4mL)。簡單手動攪動混合物，接著使其靜置在室溫下15分鐘，接著經由反應容器底部玻璃料過濾。保留濾液。向含有樹脂之反應容器中添加DCM(16mL)，接著添加六氟異丙醇(4mL)。簡單手動攪動混合物，接著使其靜置在室溫下15分鐘，接著經由反應容器底部玻璃料過濾。合併濾液，經由離心蒸發濃縮，得到中間物5009A。
製備中間物5009B：
向具有以上製備之全部中間物5009A的7mL小瓶中添加DMF(2.0mL)，接著添加DIPEA(0.350mL，2.00mmol)，接著添加HATU(84mg，0.220mmol)。將試管置於在500rpm下運行之震盪器中1小時。溶液在N2流下濃縮，接著進一步高真空濃縮，得到琥珀色固體，即粗中間物5009B。
製備實例5009：
「脫除保護基溶液」係藉由將三氟乙酸(22mL)、苯酚(1.325g)、水(1.25mL)、TIPS(0.5mL)及DTT(0.25g)合併於40mL玻璃瓶中來製備。向裝有以上製備之全部粗中間物5009B的小瓶中添加「脫除保護基溶液」(2.0mL)。使溶液在500rpm下運行的震盪器中混合1.0小時，接著經由添加Et2O(15mL)稀釋。隨著混合物澈底混合，形成白 色沈澱物。離心混合物；傾析液體。將固體懸浮於Et2O(15mL)中。離心混合物，傾析液體。將所得殘餘物溶解於水：MeOH：MeCN(1mL：1mL：1mL)中，且向溶液中添加碳酸氫銨(約25mg)。在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘45-85% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為6.2mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。分析條件A：滯留時間=1.72min；ESI-MS(+)m/z 869.1(M+2H)；分析條件C：滯留時間=1.47min；ESI-MS(+)m/z 1852.5(M+TFA)。
Symphony X方法E/F/G之通用程序 通用偶合程序：
所有操作在Symphony X肽合成器(Protein Technologies)上自動進行。除非另外指出，否則所有程序在裝配有底部玻璃料之10mL聚丙烯管中進行；若反應物之標度超過0.100mmol，則使用裝配有底部玻璃料之40mL聚丙烯管。該管經由該管之底部及頂部連接至Symphony X肽合成器。DMF及DCM可經由管頂部添加，其向下同等洗滌管側。其餘試劑經由管頂部添加且向上穿過玻璃料以接觸樹脂。所有溶液經由管底部移除。「週期性攪動」描述經由底部玻璃料之簡單N2氣脈衝；脈衝持續約5秒且每隔30秒出現。氯乙醯氯於DMF中之溶液在製備24小時內使用。一般不使用製備超過三週之胺基酸溶液。HATU溶 液在製備5天內使用。DMF=二甲基甲醯胺；HATU=六氟磷酸1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物；DIPEA=二異丙基乙胺；Rink樹脂：4-((2,4-二甲氧基苯基)(Fmoc胺基)甲基)苯氧基甲基聚苯乙烯。
樹脂膨脹程序：
向10mL聚丙烯固相反應容器中添加樹脂(0.100mmol)。樹脂如下洗滌(膨脹)三次：向反應容器中添加DMF(2.0mL)，接著週期性攪動混合物10分鐘，隨後經由玻璃料排出溶劑。
單偶合程序：
向先前步驟之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物3分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物3分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌六次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物30秒，隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加胺基酸(0.2M於DMF中，1.0mL，2eq)，接著添加HATU(0.2M於DMF中，1.0mL，2eq)且最後添加DIPEA(0.4M於DMF中，1.0mL，4eq)。週期性攪動混合物15分鐘，隨後經由玻璃料排出反應溶液。樹脂如下連續洗滌四次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物30秒，隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加乙酸酐(2.0mL)。週期性攪動混合物10分鐘，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌四次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。所得樹脂直接用於下一步驟。
單偶合1小時程序：
向先前步驟之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v， 2.0mL)。週期性攪動混合物3分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物3分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌六次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物30秒，隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加胺基酸(0.2M於DMF中，1.0mL，2eq)，接著添加HATU(0.2M於DMF中，1.0mL，2eq)且最後添加DIPEA(0.4M於DMF中，1.0mL，4eq)。週期性攪動混合物60分鐘，隨後經由玻璃料排出反應溶液。樹脂如下連續洗滌四次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物30秒，隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加乙酸酐(2.0mL)。週期性攪動混合物10分鐘，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌四次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。所得樹脂直接用於下一步驟。
雙重偶合程序：
向先前步驟之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物3分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物3分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌六次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物30秒，隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加胺基酸(0.2M於DMF中，1.0mL，2eq)，接著添加HATU(0.2M於DMF中，1.0mL，2eq)且最後添加DIPEA(0.4M於DMF中，1.0mL，4eq)。週期性攪動混合物15分鐘，隨後經由玻璃料排出反應溶液。樹脂如下洗滌兩次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物30秒，隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加胺基酸(0.2M於 DMF中，1.0mL，2eq)，接著添加HATU(0.2M於DMF中，1.0mL，2eq)且最後添加DIPEA(0.4M於DMF中，1.0mL，4eq)。週期性攪動混合物15分鐘，隨後經由玻璃料排出反應溶液。樹脂如下洗滌兩次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物30秒，隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加乙酸酐(2.0mL)。週期性攪動混合物10分鐘，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌四次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。所得樹脂直接用於下一步驟。
氯乙醯氯偶合程序：
向先前步驟之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物3分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物3分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌六次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物30秒，隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加DIPEA(0.8M於DMF中，3.0mL，24eq)，接著添加氯乙醯氯(0.8M於DMF中，1.65mL，13.2eq)。週期性攪動混合物30分鐘，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌三次：對於每次洗滌，將DMF(2.0mL)添加至容器頂部且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌四次：對於每次洗滌，將CH2Cl2(2.0mL)添加至容器頂部且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。將所得樹脂置於N2下15分鐘。
脫除保護基方法：
除非另外指出，否則所有操作均手動進行。「脫除保護基方法」之程序描述依0.100mmol規模進行之實驗。該程序可藉由該規模之倍 量來調整所述體積，以便按比例放大超過0.100mmol之規模。「脫除保護基溶液」係由三氟乙酸(38mL)、DTT(1g)及三異丙基矽烷(1mL)於40mL玻璃瓶中合併而製成。自反應容器移出樹脂且轉移至4mL玻璃瓶。向小瓶中添加「脫除保護基溶液」(2.0mL)。使混合物在震盪器中(1000RPM持續30-90分鐘)劇烈混合。經由0.2微米針筒過濾器過濾混合物且用「脫除保護基溶液」(1.0mL)萃取固體。向裝有合併濾液之24mL試管中添加Et2O(15mL)。使混合物劇烈混合，此時出現大量白色固體沈澱。使混合物離心3分鐘，接著傾析溶液與固體分離且棄去。將固體懸浮於Et2O(20mL)中；接著使混合物離心3分鐘；且傾析溶液與固體分離並棄去。對於最後一次，將固體懸浮於Et2O(20mL)中；使混合物離心3分鐘；且傾析溶液與固體分離並棄去，得到呈白色至灰白色固體狀之粗物質肽。
環化方法E：
除非另外指出，否則所有操作均手動進行。「環化方法E」之程序描述依0.100mmol規模進行之實驗。該程序可藉由該規模之倍量來調整所述體積，以便按比例放大超過0.100mmol之規模。將粗物質肽固體溶解於20mL DMF中，且向溶液中添加0.5mL DIEA，接著添加50mg KI。將溶液加熱至65℃隔夜。濃縮反應溶液且對殘餘物進行逆相HPLC純化，得到所需環狀肽。
Symphony X方法E之通用程序：
「Symphony X方法E之通用程序」描述用於得到本文所述之環狀肽之程序的通用順序。向10mL聚丙烯固相反應容器中添加Rink樹脂，且將反應容器置於Symphony X肽合成器上。「通用偶合程序E」如下：樹脂膨脹程序。接著，按照「單偶合程序」(若樹脂結合肽之N端為一級胺)或「雙重偶合程序」(若樹脂結合肽之N端為二級胺)在Symphony X肽合成器上依次進行一系列胺基酸偶合。使用「單偶合1 小時」程序，將胺基酸(S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-(1-(2-(第三丁氧基)-2-側氧基乙基)-1H-吲哚-3-基)丙酸偶合至樹脂上。隨後進行氯乙醯氯偶合程序；隨後進行脫除保護基方法；隨後進行環化方法E。
環化方法F：
除非另外指出，否則所有操作均手動進行。「環化方法F」之程序描述依0.100mmol規模進行之實驗。該程序可藉由該規模之倍量來調整所述體積，以便按比例放大超過0.100mmol之規模。將粗物質肽固體溶解於20mL DMF中，且向溶液中添加0.2mL DIEA。攪拌反應混合物5分鐘，隨後冷卻至0℃。將0.5mL含0.2M CDI之DMF溶液逐滴添加至反應混合物中。在室溫下攪拌溶液隔夜。濃縮反應溶液且對殘餘物進行逆相HPLC純化，得到所需環狀肽。
Symphony X方法F之通用程序：
「Symphony X方法F之通用程序」描述用於得到本文所述之環狀肽之程序的通用順序。向10mL聚丙烯固相反應容器中添加Rink樹脂，且將反應容器置於Symphony X肽合成器上。隨後進行「通用偶合程序」：樹脂膨脹程序。接著，按照「單偶合程序」(若樹脂結合肽之N端為一級胺)或「雙重偶合程序」(若樹脂結合肽之N端為二級胺)在Symphony X肽合成器上依次進行一系列胺基酸偶合。使用「單偶合1小時」程序，將胺基酸(S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-(1-(2-(第三丁氧基)-2-側氧基乙基)-1H-吲哚-3-基)丙酸偶合至樹脂上。在最後一個胺基酸偶合至肽上後，向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。使混合物在震盪器上震盪30分鐘。經由玻璃料排出溶液。依次用DMF、隨後DCM洗滌樹脂。隨後進行脫除保護基方法；隨後進行環化方法F。
環化方法G：
除非另外指出，否則所有操作均手動進行。「環化方法G」之程序描述依0.100mmol規模進行之實驗。該程序可藉由該規模之倍量來調整所述體積，以便按比例放大超過0.100mmol之規模。將粗物質肽固體溶解於20mL THF中，且向溶液中添加0.2mL DIEA。攪拌反應混合物5分鐘，隨後冷卻至0℃。將0.5mL含0.2M乙二醯二氯之THF溶液逐滴添加至反應混合物中。在室溫下攪拌溶液隔夜。濃縮反應溶液且對殘餘物進行逆相HPLC純化，得到所需環狀肽。
Symphony X方法G之通用程序：
「Symphony X方法G之通用程序」描述用於得到本文所述之環狀肽之程序的通用順序。向10mL聚丙烯固相反應容器中添加Rink樹脂，且將反應容器置於Symphony X肽合成器上。隨後進行「通用偶合程序」：樹脂膨脹程序。接著，按照「單偶合程序」(若樹脂結合肽之N端為一級胺)或「雙重偶合程序」(若樹脂結合肽之N端為二級胺)在Symphony X肽合成器上依次進行一系列胺基酸偶合。使用「單偶合1小時」程序，將胺基酸(S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-(1-(2-(第三丁氧基)-2-側氧基乙基)-1H-吲哚-3-基)丙酸偶合至樹脂上。在最後一個胺基酸偶合至肽上後，向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。使混合物在震盪器上震盪30分鐘。經由玻璃料排出溶液。依次用DMF、隨後DCM洗滌樹脂。隨後進行脫除保護基方法；隨後進行環化方法G。
實例10001-10028藉由按照「Symphony X方法E之通用程序」製備。
製備實例10001
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10001之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為20.9mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.64min；ESI-MS(+)m/z 927.55(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=3.14min；ESI-MS(+)m/z 927.75(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：927.4885(M+2H)；實驗值：927.4877(M+2H)。
製備實例10002
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10002之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為14.9mg且其藉由LCMS分析估計之純度為96%。
分析條件A：滯留時間=1.70min；ESI-MS(+)m/z 919.75(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=3.19min；ESI-MS(+)m/z 919.75(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：919.4910(M+2H)；實驗值：919.4897(M+2H)。
製備實例10003
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10003之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為14.2mg且其藉由LCMS分析估計之純度為98%。
分析條件A：滯留時間=1.71min；ESI-MS(+)m/z 931.30(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=3.21min；ESI-MS(+)m/z 931.30(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：930.9990(M+2H)；實驗值：930.9985(M+2H)。
製備實例10004
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10004之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為2.7mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.64min；ESI-MS(+)m/z 933.20(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=3.14min；ESI-MS(+)m/z 933.25(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：932.9783(M+2H)；實驗值：932.9775(M+2H)。
製備實例10005
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10005之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為20.3mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=2.46min；ESI-MS(+)m/z 910.50(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=3.29min；ESI-MS(+)m/z 910.50(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：910.0553(M+2H)；實驗值：910.0541(M+2H)。
製備實例10006
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10006之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為8.4mg且其藉由LCMS分析估計之純度為98%。
分析條件A：滯留時間=1.44min；ESI-MS(+)m/z 947.40(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=2.56min；ESI-MS(+)m/z 946.80(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：946.4963(M+2H)；實驗值：946.4941(M+2H)。
製備實例10007
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10007之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為1.5mg且其藉由LCMS分析估計之純度為97%。
分析條件A：滯留時間=1.38min；ESI-MS(+)m/z 954.70(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=2.52min；ESI-MS(+)m/z 954.40(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：954.4938(M+2H)；實驗值：954.4915(M+2H)。
製備實例10008
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10008之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為5.6mg且其藉由LCMS分析估計之純度為97%。
分析條件A：滯留時間=1.40min；ESI-MS(+)m/z 962.30(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=2.92min；ESI-MS(+)m/z 962.25(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：961.9810(M+2H)；實驗值：961.9804(M+2H)。
製備實例10009
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10009之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為35.8mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=2.38min；ESI-MS(+)m/z 917.50(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：917.0631(M+2H)；實驗值：917.0618(M+2H)。
製備實例10010
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10010之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為24.5mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=2.36min；ESI-MS(+)m/z 924.55(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：924.0709(M+2H)；實驗值：924.0700(M+2H)。
製備實例10011
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10011之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為2.4mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.33min；ESI-MS(+)m/z 912.90(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=2.78min；ESI-MS(+)m/z 912.85(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：912.4468(M+2H)；實驗值：912.4468(M+2H)。
製備實例10012
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10012之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為11.7mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.50min；ESI-MS(+)m/z 919.90(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=2.97min；ESI-MS(+)m/z 919.90(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：919.4547(M+2H)；實驗值：919.4549(M+2H)。
製備實例10013
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10013之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為6.4mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.38min；ESI-MS(+)m/z 927.00(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=2.73min；ESI-MS(+)m/z 926.95(M+2H)。
製備實例10014
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10014之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為1.1mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.28min；ESI-MS(+)m/z 941.90(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=2.71min； ESI-MS(+)m/z 941.90(M+2H)。
製備實例10015
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10015之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為4.3mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.32min；ESI-MS(+)m/z 948.90(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=2.80min；ESI-MS(+)m/z 948.80(M+2H)。
製備實例10016
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10016之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為5.3mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.31min；ESI-MS(+)m/z 955.90(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=2.82min；ESI-MS(+)m/z 955.90(M+2H)。
製備實例10017
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10017之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為28.9mg且其藉由LCMS分析估計之純度為98%。
分析條件A：滯留時間=1.64min；ESI-MS(+)m/z 918.40(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=3.16min；ESI-MS(+)m/z 918.40(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：917.9730(M+2H)；實驗值：917.9720(M+2H)。
製備實例10018
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10018之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為31.3mg且其藉由LCMS分析估計之純度為98%。
分析條件A：滯留時間=1.61min； ESI-MS(+)m/z 924.45(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=3.15min；ESI-MS(+)m/z 925.40(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：924.9808(M+2H)；實驗值：924.9808(M+2H)。
製備實例10019
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10019之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為15.0mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.61min；ESI-MS(+)m/z 932.45(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=3.15min；ESI-MS(+)m/z 932.40(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：931.9887(M+2H)；實驗值：931.9878(M+2H)。
製備實例10020
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10020之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為11.1mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.42min；ESI-MS(+)m/z 947.40(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=2.95min；ESI-MS(+)m/z 947.40(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：946.9758(M+2H)；實驗值：946.9756(M+2H)。
製備實例10021
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10021之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為11.1mg且其藉由LCMS分析估計之純度為99%。
分析條件A：滯留時間=1.44min；ESI-MS(+)m/z 954.40(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=2.99min；ESI-MS(+)m/z 954.35(M+2H)。
製備實例10022
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10022之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為5.0mg且其藉由LCMS分析估計之純度為95%。
分析條件A：滯留時間=1.46min；ESI-MS(+)m/z 961.45(M+2H)。
製備實例10023
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10023之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為3.5mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.52min；ESI-MS(+)m/z 949.00(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=2.80min；ESI-MS(+)m/z 948.85(M+2H)。
製備實例10024
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10024之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為5.0mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.56min；ESI-MS(+)m/z 920.30(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=3.05min；ESI-MS(+)m/z 920.30(M+2H)。
製備實例10025
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10025之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為4.1mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.43min；ESI-MS(+)m/z 934.60(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=2.97min；ESI-MS(+)m/z 934.35(M+2H)。
製備實例10026
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10026之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為19.7mg且其藉由LCMS分析估計之純度為97%。
分析條件A：滯留時間=1.69min；ESI-MS(+)m/z 910.85(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=3.18min；ESI-MS(+)m/z 910.85(M+2H)。
製備實例10027
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10027之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為21.0mg且其藉由LCMS分析估計之純度為99%。
分析條件A：滯留時間=1.66min；ESI-MS(+)m/z 917.85(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=3.18min；ESI-MS(+)m/z 917.90(M+2H)。
製備實例10028
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10028之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為20.1mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.65min；ESI-MS(+)m/z 924.90(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=3.17min；ESI-MS(+)m/z 924.90(M+2H)。
製備實例10500
製備中間物10500：
按照「通用合成順序A」。將2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)乙氧基)乙酸用於「樹脂裝載程序」。向自動化順序之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DCM(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。接著立刻使用DCM(8mL)將樹脂轉移至15mL小瓶中。向溶液中添加六氟異丙醇(2mL)。樹脂立刻變成深紅色；溶液保持無色。簡單手動攪動混合物，接著使其靜置在室溫下15分鐘，接著過濾。將濾液轉移至15mL小瓶中且在N2流下濃縮，得到固體殘餘物，即中間物10500。
製備實例10500：
「脫除保護基溶液」係藉由將三氟乙酸(23.75mL)、1,4-二硫基-DL-蘇糖醇(625mg)、三異丙基矽烷(0.625mL)合併於40mL玻璃瓶中來製備。向裝有以上製備之全部中間物10500的1打蘭小瓶中添加「脫 除保護基溶液」(1.0mL)。使溶液在500rpm下運行的震盪器中混合1.5小時，接著倒入25mL裝有Et2O(20mL)之試管中。沈澱少量白色固體。離心混合物；傾析液體。將固體懸浮於Et2O(10mL)中。離心混合物，傾析液體。在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經20分鐘40-80% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為7.3mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=2.57min；ESI-MS(+)m/z 764.9(M+2H)。
分析條件E：滯留時間=2.57min；ESI-MS(+)m/z 765.4(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：765.4602實驗值：765.4581。
製備實例10501
製備中間物10501A：
按照「通用合成順序A」。將2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)乙氧基)乙酸用於「樹脂裝載程序」。向自動化順序之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DCM(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。接著立刻使用DCM(8mL)將樹脂轉移至15mL小瓶中。向溶液中添加六氟異丙醇(2mL)。樹脂立刻變成深紅色；溶液保持無色。簡單手動攪動混合物，接著使其靜置在室溫下15分鐘，接著過濾。將濾液 轉移至15mL小瓶中且在N2流下濃縮，得到固體殘餘物，即中間物10501A。
製備中間物10501B：
向裝有以上製備之全部中間物10501A的15mL小瓶中添加DCM(2mL)，接著添加HATU(38mg，0.10mmol)，接著添加DIPEA(0.114mL，0.650mmol)。攪拌溶液2小時。在真空下乾燥溶液，得到中間物10501B。
製備實例10501：
「脫除保護基溶液」係藉由將三氟乙酸(23.75mL)、1,4-二硫基-DL-蘇糖醇(625mg)、三異丙基矽烷(0.625mL)合併於40mL玻璃瓶中來製備。向裝有以上製備之全部中間物10501A的1打蘭小瓶中添加「脫除保護基溶液」(1.0mL)。使溶液在500rpm下運行的震盪器中混合1.0小時，接著倒入25mL裝有Et2O(15mL)之試管中。沈澱少量白色固體。離心混合物；傾析液體。將固體懸浮於Et2O(15mL)中。離心混合物，傾析液體。將所得殘餘物溶解於MeOH中，且向溶液中添加DIPEA(0.050mL)。在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘15-55% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘40-80% B，接著在100% B保持4分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為1.0mg且其藉由LCMS分析估計之純度為95%。
分析條件A：滯留時間=1.65min；ESI-MS(-)m/z 856.8 (M+2H)。
分析條件B：滯留時間=2.72min；ESI-MS(-)m/z 857.2(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：856.9798實驗值：856.9790。
製備實例10502
製備中間物10502A：
按照「通用合成順序A」。將2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)乙氧基)乙酸用於「樹脂裝載程序」。向自動化順序之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶 液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DCM(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。接著立刻使用DCM(8mL)將樹脂轉移至15mL小瓶中。向溶液中添加六氟異丙醇(2mL)。樹脂立刻變成深紅色；溶液保持無色。簡單手動攪動混合物，接著使其靜置在室溫下15分鐘，接著過濾。將濾液轉移至15mL小瓶中且在N2流下濃縮，得到固體殘餘物，即中間物10502A。
製備中間物10502B：
向裝有以上製備之全部中間物10501A的15mL小瓶中添加DCM(2mL)，接著添加HATU(38mg，0.10mmol)，接著添加DIPEA(0.114mL，0.650mmol)。攪拌溶液2小時。在真空下乾燥溶液得到一物，將之再溶解於MeOH中，接著在以下條件下進行HPLC純化：管柱：Waters XBridge C18,30×100mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘55-100% B，接著在100% B保持15分鐘；流速：30mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥，得到白色固體，即中間物10502B。
製備實例10502：
「脫除保護基溶液」係藉由將三氟乙酸(23.75mL)、1,4-二硫基-DL-蘇糖醇(625mg)、三異丙基矽烷(0.625mL)合併於40mL玻璃瓶中來製備。向裝有以上製備之全部中間物10501A的1打蘭小瓶中添加「脫除保護基溶液」(1.0mL)。使溶液在500rpm下運行的震盪器中混合1.0小時，接著倒入25mL裝有Et2O(15mL)之試管中。沈澱少量白色固體。離心混合物；傾析液體。將固體懸浮於Et2O(15mL)中。離心混合物，傾析液體。將所得殘餘物溶解於MeOH中，且向溶液中添加DIPEA(0.050mL)。在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質： 管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘50-100% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為0.1mg且其藉由LCMS分析估計之純度為83%。
分析條件A：滯留時間=1.79min；ESI-MS(-)m/z 886.1(M+2H)。
製備實例10503
製備中間物10503A：
按照「通用合成順序A」。將2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)乙氧基)乙酸用於「樹脂裝載程序」。向自動化順序之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF (20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DCM(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。接著立刻使用DCM(8mL)將樹脂轉移至15mL小瓶中。向溶液中添加六氟異丙醇(2mL)。樹脂立刻變成深紅色；溶液保持無色。簡單手動攪動混合物，接著使其靜置在室溫下15分鐘，接著過濾。將濾液轉移至15mL小瓶中且在N2流下濃縮，得到固體殘餘物，即中間物10503A。
製備中間物10503B：
向裝有以上製備之全部中間物10501A的15mL小瓶中添加DCM(2mL)，接著添加HATU(38mg，0.10mmol)，接著添加DIPEA(0.114mL，0.650mmol)。攪拌溶液2小時。在真空下乾燥溶液，得到中間物10503B。
製備實例10503：
「脫除保護基溶液」係藉由將三氟乙酸(23.75mL)、1,4-二硫基-DL-蘇糖醇(625mg)、三異丙基矽烷(0.625mL)合併於40mL玻璃瓶中來製備。向裝有以上製備之全部中間物10501A的1打蘭小瓶中添加「脫除保護基溶液」(1.0mL)。使溶液在500rpm下運行的震盪器中混合1.0小時，接著倒入25mL裝有Et2O(15mL)之試管中。沈澱少量白色固體。離心混合物；傾析液體。將固體懸浮於Et2O(15mL)中。離心混合物，傾析液體。將所得殘餘物溶解於MeOH中，且向溶液中添加DIPEA(0.050mL)。在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經30 分鐘40-90% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：waters CSH c-18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為0.8mg且其藉由LCMS分析估計之純度為99%。
分析條件A：滯留時間=1.81min；ESI-MS(-)m/z 879.3(M+2H)。
分析條件E：滯留時間=1.81min；ESI-MS(-)m/z 1758.1(M-H)。
製備實例9005
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘40-80% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之 溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持3分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為4.5mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。ESI-MS(+)m/z 964.1(M+2H)。
製備實例9006
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘5-40% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為8.7mg且其藉由LCMS分析估計之純度為97%。ESI-MS(+)m/z 964.5(M+2H)。
製備實例9007
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘30-70% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘5-40% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為2.7mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。ESI-MS(+)m/z 971.5(M+2H)。
製備實例9008
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘40-80% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘15-55% B，接著在100% B保持3分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為5.7mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。ESI-MS(+)m/z 971.1(M+2H)。
製備實例9009
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘15-55% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘15-55% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為9.5mg且其藉由LCMS分析估計之純度為97%。ESI-MS(+)m/z 964.9(M+2H)。
製備實例9010
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘15-55% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘15-55% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為10.7mg且其藉由LCMS分析估計之純度為97%。ESI-MS(+)m/z 966.1(M+2H)。
製備實例9011
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經30分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為15.6mg且其藉由LCMS分析估計之純度為82%。ESI-MS(+)m/z 973.2(M+2H)。
製備實例9012
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘5-45% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘5-45% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為7.3mg且其藉由LCMS分析估計之純度為96%。ESI-MS(+)m/z 964.0(M+2H)。
製備實例9013
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘30-70% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之 溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘5-45% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為10.7mg且其藉由LCMS分析估計之純度為97%。ESI-MS(+)m/z 965.1(M+2H)。
製備實例9014
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘5-45% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘5-45% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20 mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為2.4mg且其藉由LCMS分析估計之純度為97%。ESI-MS(+)m/z 972.1(M+2H)。
製備實例9015
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為8.6mg且其藉由LCMS分析估計之純度為96%。ESI-MS(+)m/z 966.2(M+2H)。
製備實例9016
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為2.1mg且其藉由LCMS分析估計之純度為95%。ESI-MS(+)m/z 973.2(M+2H)。
製備實例9017
實例9017
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為3.2mg且其藉由LCMS分析估計之純度為92%。ESI-MS(+)m/z 973.1(M+2H)。
製備實例9018
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘5-45% B，接 著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為4.5mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。ESI-MS(+)m/z 972.1(M+2H)。
製備實例9019
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經30分鐘15-55% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為6.6mg且其藉由LCMS分析估計之純度為95%。ESI-MS(+)m/z 972.4(M+2H)。
製備實例9020
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘5-45% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為4.5mg且其藉由LCMS分析估計之純度為94%。ESI-MS(+)m/z 980.2(M+2H)。
製備實例9021
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經50分鐘0-45% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為4.7mg且其藉由LCMS分析估計之純度為97%。ESI-MS(+)m/z 979.1(M+2H)。
製備實例9022
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經33分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為2.1mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。ESI-MS(+)m/z 972.2(M+2H)。
製備實例9023
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經30分鐘15-85% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為9.5mg且其藉由LCMS分析估計之純度為95%。ESI-MS(+)m/z 974.0(M+2H)。
製備實例9024
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘5-45% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘5-45% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產 量為3.4mg且其藉由LCMS分析估計之純度為99%。ESI-MS(+)m/z 980.6(M+2H)。
製備實例9025
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘5-45% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘5-45% B，接著在100% B保持0分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘5-45% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份 且經由離心蒸發乾燥。產物產量為7.4mg且其藉由LCMS分析估計之純度為95%。ESI-MS(+)m/z 980.0(M+2H)。
製備實例9026
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：waters xbridge c-18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為4.0mg且其藉由LCMS分析估計之純度為97%。ESI-MS(+)m/z 948.2(M+2H)。
製備實例9027
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：waters CSH c-18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘5-45% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為3.7mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。ESI-MS(+)m/z 949.3(M+2H)。
製備實例9028
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：waters xbridge c-18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為3.9mg且其藉由LCMS分析估計之純度為90%。ESI-MS(+)m/z 956.1(M+2H)。
製備實例9029
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：waters xbridge c-18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為4.3mg且其藉由LCMS分析估計之純度為99%。ESI-MS(+)m/z 956.2(M+2H)。
製備實例9030
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為5.8mg且其藉由LCMS分析估計之純度為98%。ESI-MS(+)m/z 949.2(M+2H)。
製備實例9031
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經30分鐘15-55% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘20-30% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為2.5mg且其藉由LCMS分析估計之純度為97%。ESI-MS(+)m/z 950.1(M+2H)。
製備實例9032
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘15-55% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為5.9mg且其藉由LCMS分析估計之純度為82%。ESI-MS(+)m/z 957.1(M+2H)。
製備實例9033
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘15-55% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為7.0mg且其藉由LCMS分析估計之純度為99%。ESI-MS(+)m/z 956.2(M+2H)。
製備實例9034
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經30分鐘15-55% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘15-55% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為3.3mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。ESI-MS(+)m/z 948.4(M+2H)。
製備實例9035
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經30分鐘15-55% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘5-45% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為2.1mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。ESI-MS(+)m/z 950.2(M+2H)。
製備實例9036
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘5-45% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為0.7mg且其藉由LCMS分析估計之純度為96%。ESI-MS(+)m/z 956.3(M+2H)。
製備實例9037
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經30分鐘15-55% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘5-45% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為0.9mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。ESI-MS(+)m/z 956.2(M+2H)。
製備實例9038
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經30分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘5-45% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為0.5mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。ESI-MS(+)m/z 949.2(M+2H)。
製備實例9039
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經20分鐘20-100% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為4.7mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。ESI-MS(+)m/z 951.1(M+2H)。
製備實例9040
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為3.3mg且其藉由LCMS分析估計之純度為98%。ESI-MS(+)m/z 957.4(M+2H)。
製備實例9041
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘25-65% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為1.7mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。ESI-MS(+)m/z 957.1(M+2H)。
製備實例9042
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為4.5mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。ESI-MS(+)m/z 956.2(M+2H)。
製備實例9043
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘35-75% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為3.3mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。ESI-MS(+)m/z 957.1(M+2H)。
製備實例9044
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為6.3mg且其藉由LCMS分析估計之純度為99%。ESI-MS(+)m/z 964.1(M+2H)。
製備實例9045
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘35-75% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為5.5mg且其藉由LCMS分析估計之純度為99%。ESI-MS(+)m/z 963.4(M+2H)。
製備實例9046
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘35-75% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為5.2mg且其藉由LCMS分析估計之純度為98%。ESI-MS(+)m/z 957.2(M+2H)。
製備實例9047
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘35-75% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為4.9mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。ESI-MS(+)m/z 965.1(M+2H)。
製備實例9048
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘35-75% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為6.1mg且其藉由LCMS分析估計之純度為96%。ESI-MS(+)m/z 965.1(M+2H)。
製備實例9049
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經20分鐘10-100% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經20分鐘18-58% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為4.4mg且其藉由LCMS分析估計之純度為90%。ESI-MS(+)m/z 932.1(M+2H)。
製備實例9050
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經20分鐘10-100% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經20分鐘18-58% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為3.9mg且其藉由LCMS分析估計之純度為94%。ESI-MS(+)m/z 938.7(M+2H)。
製備實例9051
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經20分鐘10-100% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經20分鐘18-58% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為3.9mg且其藉由LCMS分析估計之純度為97%。ESI-MS(+)m/z 938.5(M+2H)。
製備實例9052
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘10-100% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經20分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為5.9mg且其藉由LCMS分析估計之純度為86%。ESI-MS(+)m/z 940.1(M+2H)。
製備實例9053
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘10-100% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經20分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為8.0mg且其藉由LCMS分析估計之純度為96%。ESI-MS(+)m/z 940.4(M+2H)。
製備實例9054
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘10-100% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經20分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為3.8mg且其藉由LCMS分析估計之純度為98%。ESI-MS(+)m/z 940.2(M+2H)。
製備實例9055
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘10-100% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為3.6mg且其藉由LCMS分析估計之純度為84%。ESI-MS(+)m/z 947.2(M+2H)。
製備實例9056
實例9056
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘10-100% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為4.0mg且其藉由LCMS分析估計之純度為90%。ESI-MS(+)m/z 946.2(M+2H)。
製備實例9057
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經20分鐘30-100% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經20分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20 mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為4.1mg且其藉由LCMS分析估計之純度為92%。ESI-MS(+)m/z 941.4(M+2H)。
製備實例9058
在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經20分鐘30-100% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經20分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為4.2mg且其藉由LCMS分析估計之純度為98%。ESI-MS(+)m/z 947.6(M+2H)。
製備實例9059
移動相A：5：95甲醇：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5甲醇：水+10mM乙酸銨；梯度：經20分鐘30-100% B，接著在100%B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；梯度：經20分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為3.5mg且其藉由LCMS分析估計之純度為98%。ESI-MS(+)m/z 947.2(M+2H)。
製備實例10029
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10029之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為8.4mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.24min；ESI-MS(+)m/z 907.2(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=1.67min；ESI-MS(+)m/z 906.9(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：906.5014(M+2H)；實驗值：906.4994(M+2H)。
製備實例10030
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10030之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為8.4mg且其藉由LCMS分析估計之純度為97%。
分析條件A：滯留時間=1.65min；ESI-MS(+)m/z 935.75(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=1.70min；ESI-MS(+)m/z 935.80(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：935.5041(M+2H)；實驗值：935.5024(M+2H)。
製備實例10031
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10031之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為3.0mg且其藉由LCMS分析估計之純度為95%。
分析條件A：滯留時間=1.14min；ESI-MS(+)m/z 944.20(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=1.59min；ESI-MS(+)m/z 94350(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：943.4834(M+2H)；實驗值：943.4808(M+2H)。
製備實例10032
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10032之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為3.9mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.15min；ESI-MS(+)m/z 950.2(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=1.47min；ESI-MS(+)m/z 950.3(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：949.5198(M+2H)；實驗值：949.5158(M+2H)。
製備實例10033
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10033之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為1.8mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.17min；ESI-MS(+)m/z 921.2(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=1.48min；ESI-MS(+)m/z 920.9(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：計算值：921.0091(M+2H)；實驗值：921.0053(M+2H)。
製備實例10034
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10034之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為0.6mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.17min；ESI-MS(+)m/z 906.9(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=1.56min；ESI-MS(+)m/z 907.1(M+2H)。
製備實例10035
實例10035
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10035之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為0.3mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.15min；ESI-MS(+)m/z 915.0(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=1.48min；ESI-MS(+)m/z 915.2(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：914.9724(M+2H)。
製備實例10036
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10036之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有 所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為3.5mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.16min；ESI-MS(+)m/z 943.0(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=1.51min；ESI-MS(+)m/z 942.6(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：942.5112(M+2H)。
製備實例10037
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10037之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為20.8mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.17min；ESI-MS(+)m/z 949.1(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=1.57min；ESI-MS(+)m/z 949.1(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：948.5098(M+2H)。
製備實例10038
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10038之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為2.4mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.20min；ESI-MS(+)m/z 920.1(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=1.60min；ESI-MS(+)m/z 921.0(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：919.9986(M+2H)。
製備實例10039
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10039之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為8.4mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.24min；ESI-MS(+)m/z 943.1(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=1.73min；ESI-MS(+)m/z 943.1(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：942.5096(M+2H)。
製備實例10040
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10040之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為8.6mg且其藉由LCMS分析估計之純度為100%。
分析條件A：滯留時間=1.28min；ESI-MS(+)m/z 956.1(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=1.80min；ESI-MS(+)m/z 956.1(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：955.5169(M+2H)。
製備實例10041
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10041之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為2.6mg且其藉由LCMS分析估計之純度為97%。
分析條件A：滯留時間=1.23min；ESI-MS(+)m/z 950.4(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=1.64min；ESI-MS(+)m/z 950.4(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：950.4883(M+2H)。
製備實例10042
在以下條件下經由製備型LC/MS純化實例10042之粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經15分鐘20-60% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為14.5mg且其藉由LCMS分析估計之純度為95%。
分析條件A：滯留時間=1.47min；ESI-MS(+)m/z 926.9(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=1.83min；ESI-MS(+)m/z 926.2(M+2H)。
ESI-HRMS(+)m/z：927.0048(M+2H)。
製備(S)-2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-((2-胺基-2-側氧基乙基)胺基)-3-側氧基丙氧基)乙酸
流程：
步驟1：
將(S)-氮丙啶-1,2-二甲酸1-苯甲酯2-甲酯(5.105g，21.70mmol)及2-羥基乙酸苯甲酯(6.16ml，43.4mmol)溶解於DCM(43.4ml)中且冷卻至0℃，接著添加BF3.OEt2(0.275ml，2.170mmol)。攪拌反應物2小時。TLC顯示氮丙啶起始物質耗盡。再攪拌反應物14小時。向反應物中添加飽和碳酸氫鈉溶液且劇烈攪拌兩相混合物20分鐘。反應物用DCM稀釋且與水相分離。有機層用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥且真空濃縮。藉由使用10-40% EtOAc/己烷之急驟層析純化粗物質。收集產物溶離份且真空移除溶劑，得到O-(2-(苯甲氧基)-2-側氧基乙基)-N-((苯甲氧基)羰基)-L-絲胺酸甲酯3.0(34%)。ESI-MS(+)m/z 402.1(M+1)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)d 7.43-7.30(m,10H),5.95(d,J=8.0Hz,1H),5.18(s,2H),5.15(s,2H),4.50(dt,J=8.4,3.1Hz,1H),4.12(d,J=2.8Hz,2H),4.10-4.04(m,1H),3.81(dd,J=9.4,3.1Hz,1H),3.77(s,3H)。
步驟2：
將(S)-3-(2-(苯甲氧基)-2-側氧基乙氧基)-2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)丙酸甲酯(3g，7.47mmol)溶解於MeOH(37.4ml)中且置於N2氛圍下。在劇烈攪拌下，將Pd-C(0.398g，0.374mmol)添加至溶液中。將反應物置於H2氛圍下且攪拌16小時。反應物經由矽藻土過濾且真空濃 縮，得到(S)-2-(2-胺基-3-甲氧基-3-側氧基丙氧基)乙酸1.32g(100%)，其未經進一步純化即用於步驟3。ESI-MS(+)m/z 178.1(M+1)。
步驟3：
將(S)-2-(2-胺基-3-甲氧基-3-側氧基丙氧基)乙酸(1.323g，7.47mmol)溶解於THF(29.9ml)中，接著添加水(29.9ml)。接著添加碳酸氫鈉(1.255g，14.94mmol)，隨後添加(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基)碳酸(9H-茀-9-基)甲酯(2.52g，7.47mmol)。攪拌反應物2小時。真空移除大部分THF，接著添加Et2O。棄去有機層且再用Et2O洗滌水層。收集水相，用1N HCl酸化且用EtOAc萃取。收集有機層，經硫酸鈉乾燥且真空濃縮，得到(S)-2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲氧基-3-側氧基丙氧基)乙酸2.76g(93%)，其未經進一步純化。ESI-MS(+)m/z 400.1(M+1)。
步驟4：
向(S)-2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲氧基-3-側氧基丙氧基)乙酸(3.78g，9.46mmol)於乙酸乙酯(40.6ml)及己烷(15.05ml)中之溶液中逐滴添加2,2,2-三氯乙醯亞胺第三丁酯(1.692ml，9.46mmol)。在15分鐘後，添加BF3.OEt2(0.060ml，0.473mmol)且攪拌反應物1小時。再添加2,2,2-三氯乙醯亞胺第三丁酯(1.692ml，9.46mmol)，接著添加BF3.OEt2(0.060ml，0.473mmol)且攪拌1小時。該過程再重複一次，添加2,2,2-三氯乙醯亞胺第三丁酯(1.692ml，9.46mmol)，接著添加BF3.OEt2(0.060ml，0.473mmol)且攪拌1小時。向反應物中添加飽和碳酸氫鹽且使其攪拌15分鐘。收集有機相，用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥且真空濃縮，得到粗產物，其藉由使用20-30% EtOAc/己烷作為溶離劑之急驟層析進一步純化。收集產物溶離份且真空移除溶劑，得到N-(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)-O-(2-(第三丁氧基)- 2-側氧基乙基)-L-絲胺酸甲酯3.9g(90%)。ESI-MS(+)m/z 478.1(M+Na)。
步驟5：
將(S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-(2-(第三丁氧基)-2-側氧基乙氧基)丙酸甲酯(3.9g，8.56mmol)溶解於DCE(42.8ml)中，接著添加三甲基錫醇(3.10g，17.12mmol)。將反應物加熱至80℃持續5小時。真空移除溶劑且將殘餘物再溶解於EtOAc中，並用1N HCl洗滌3次，接著用鹽水洗滌。收集有機層，經硫酸鈉乾燥且真空濃縮，得到所需產物。NMR顯示一些剩餘錫。將物質再溶解於EtOAc中且用0.1M KHSO4洗滌3次，接著用鹽水洗滌。收集有機層，經硫酸鈉乾燥且真空濃縮，得到N-(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)-O-(2-(第三丁氧基)-2-側氧基乙基)-L-絲胺酸3.36g(89%)。ESI-MS(+)m/z 464.0(M+Na)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)d 7.78(d,J=7.5Hz,2H),7.66(t,J=7.4Hz,2H),7.45-7.38(m,2H),7.36-7.29(m,2H),6.44(d,J=7.0Hz,1H),4.55-4.33(m,3H),4.26(t,J=7.3Hz,1H),4.12-4.01(m,3H),3.82(dd,J=9.7,4.4Hz,1H),1.52(s,9H)。
步驟6：
將(S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-(第三丁氧基)-6-側氧基己酸(850mg，1.934mmol)、2-胺基乙醯胺，HCl(278mg，2.51mmol)懸浮於DCM(9670μl)中，接著添加胡尼鹼(Hunig's Base)(1013μl，5.80mmol)，隨後添加HATU(809mg，2.127mmol)。攪拌反應物2小時。反應物用DCM稀釋且用1N HCl、隨後鹽水洗滌。收集有機層，經硫酸鈉乾燥且真空濃縮。藉由使用20-60%丙酮/DCM之急驟層析純化粗物質。收集產物溶離份且真空移除溶劑，得到所需產物789mg(82%)。ESI-MS(+)m/z 498.1(M+H)。
步驟7：
將(S)-2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-((2-胺基-2-側氧基乙基)胺基)-3-側氧基丙氧基)乙酸第三丁酯(1.25g，2.51mmol)溶解於HCl(4N於二噁烷中)(15ml，60.0mmol)中。攪拌反應物4小時。真空移除溶劑，得到(S)-2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-((2-胺基-2-側氧基乙基)胺基)-3-側氧基丙氧基)乙酸1.11g(100%)。ESI-MS(+)m/z 442.0(M+H)。
製備(S)-2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-胺基-3-側氧基丙氧基)乙酸
步驟1：
將(S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-(2-(第三丁氧基)-2-側氧基乙氧基)丙酸(1.875g，4.25mmol)(合成描述在別處)、氯化銨(0.568g，10.62mmol)懸浮於DMF(21.24ml)中，接著添加胡尼鹼(2.225ml，12.74mmol)，隨後添加HATU(1.776g，4.67mmol)。攪拌反應物2小時。反應物用DCM稀釋且用1N HCl、隨後鹽水洗滌。收集有機層，經硫酸鈉乾燥且真空濃縮。藉由使用20-40%丙酮/DCM之急驟層析純化粗物質。收集產物溶離份且真空移除溶劑，得到(S)-2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-胺基-3-側氧基丙氧基)乙酸第三丁酯1.43g(76%)。ESI-MS(+)m/z 441.0(M+1)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)d 7.78(d,J=7.5Hz,2H),7.65(d,J=7.5Hz,2H),7.46-7.38(m,2H),7.36-7.30(m,2H),6.99(d,J=17.3Hz,1H),6.44(br.s.,1H),5.46(br.s.,1H),4.43(d,J=6.3Hz,2H),4.31(br.s.,1H),4.27-4.21(m,1H),4.16-3.95(m,3H),3.73-3.64(m,1H),1.51(s,9H)。
步驟2：
將(S)-2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-胺基-3-側氧基丙氧基)乙酸第三丁酯(1.432g，3.25mmol)溶解於HCl(4N於二噁烷中)(15ml，60.0mmol)中。攪拌反應物4小時。真空移除溶劑，得到(S)-2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-胺基-3-側氧基丙氧基)乙酸1.25g(100%)。ESI-MS(+)m/z 385.0(M+1)。
製備(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-((2-胺基-2-側氧基乙基)胺基)-6-側氧基己酸
步驟1：
將(S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-(第三丁氧基)-6-側氧基己酸(850mg，1.934mmol)、2-胺基乙醯胺，HCl(278mg，2.51mmol)懸浮於DCM(9670μl)中，接著添加胡尼鹼(1013μl，5.80mmol)，隨後添加HATU(809mg，2.127mmol)。攪拌反應物2小時。反應物用DCM稀釋且用1N HCl、隨後鹽水洗滌。收集有機層，經硫酸鈉乾燥且真空濃縮。藉由使用20-60%丙酮/DCM之急驟層析純化粗物質。收集產物溶離份且真空移除溶劑，得到(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-((2-胺基-2-側氧基乙基)胺基)-6-側氧基己酸第三丁酯789mg(82%)。ESI-MS(+)m/z 496.1(M+1)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)d 7.78(d,J=7.5Hz,2H),7.60(d,J=7.5Hz,2H),7.45-7.39(m,2H),7.35-7.30(m,2H),6.78(br.s.,1H),6.42(br.s.,1H),5.71(d,J=6.0Hz,1H),5.45(br.s.,1H),4.44(d,J=6.8Hz,2H),4.25-4.19(m,1H),4.10(d,J=6.0Hz,1H),3.97(d,J=5.5Hz,2H),2.36-2.24(m,2H), 1.90(br.s.,1H),1.76-1.55(m,3H),1.46(s,9H)
步驟2：
將(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-((2-胺基-2-側氧基乙基)胺基)-6-側氧基己酸第三丁酯(0.789g，1.593mmol)溶解於HCl(4N於二噁烷中)(15ml，60.0mmol)中。攪拌反應物6小時。真空移除溶劑，得到(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-((2-胺基-2-側氧基乙基)胺基)-6-側氧基己酸700mg(100%)。ESI-MS(+)m/z 440.0(M+1)。
製備(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸
步驟1：
將(S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-(第三丁氧基)-6-側氧基己酸(2.5g，5.69mmol)、氯化銨(0.761g，14.22mmol)懸浮於DMF(28.4ml)中，接著添加胡尼鹼(2.98ml，17.06mmol)，隨後添加HATU(2.379g，6.26mmol)。攪拌反應物2小時。反應物用Et2O稀釋且用1N HCl、隨後鹽水洗滌。收集有機層，經硫酸鈉乾燥且真空濃縮。藉由使用0-20%丙酮/DCM之急驟層析純化粗物質。收集產物溶離份且真空移除溶劑，得到(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸第三丁酯1.89g(76%)。ESI-MS(+)m/z 439.0(M+1)。
步驟2：
將(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸第三丁酯(1.89g，4.31mmol)溶解於HCl(4N於二噁烷中)(15ml，60.0mmol)中。攪拌反應物4小時。真空移除溶劑，得到(S)-5-((((9H- 茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸1.65g(100%)。ESI-MS(+)m/z 385.0(M+1)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)d 7.80(d,J=7.5Hz,2H),7.71-7.65(m,2H),7.43-7.36(m,2H),7.35-7.29(m,2H),4.47-4.35(m,2H),4.26-4.21(m,1H),4.09(d,J=7.8Hz,1H),2.32(t,J=6.4Hz,2H),1.88-1.57(m,4H)。
製備(R)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸
步驟1：
將(R)-5-胺基-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸(4.77g，20.54mmol)溶解於THF(82ml)中，接著添加水(82ml)。接著添加碳酸氫鈉(3.45g，41.1mmol)，隨後添加(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基)碳酸(9H-茀-9-基)甲酯(6.93g，20.54mmol)。攪拌反應物2小時。真空移除大部分THF，接著添加Et2O。棄去有機層且再用Et2O洗滌水層。收集水相，用1N HCl酸化且用EtOAc萃取。收集有機層，經硫酸鈉乾燥且真空濃縮，得到(R)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸8.76g(94%)。ESI-MS(+)m/z 454.9(M+1)。
製備實例10504
製備中間物10504A：
按照「通用合成順序A」。將(S)-2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-((2-胺基-2-側氧基乙基)胺基)-3-側氧基丙氧基)乙酸用於「樹脂裝載程序」。向自動化順序之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DCM(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。接著立刻使用DCM(8mL)將樹脂轉移至15mL小瓶中。向溶液中添加六氟異丙醇(2mL)。樹脂立刻變成深紅色；溶液保持無色。簡單手動攪動混合物，接著使 其靜置在室溫下15分鐘，接著過濾。將濾液轉移至15mL小瓶中且在N2流下濃縮，得到固體殘餘物，即中間物10501A。
製備中間物10504B：
向裝有以上製備之全部中間物10504A的40mL小瓶中添加DCM(20mL)，接著添加HATU(38mg，0.10mmol)，接著添加DIPEA(0.114mL，0.650mmol)。攪拌溶液2小時。在真空下乾燥溶液，得到中間物10504B。
製備實例10504：
「脫除保護基溶液」係藉由將三氟乙酸(23.75mL)、1,4-二硫基-DL-蘇糖醇(625mg)、三異丙基矽烷(0.625mL)合併於40mL玻璃瓶中來製備。向裝有以上製備之全部中間物10504A的5打蘭小瓶中添加「脫除保護基溶液」(2.0mL)。使溶液在500rpm下運行的震盪器中混合20分鐘，接著倒入25mL裝有Et2O(15mL)之試管中。沈澱少量白色固體。離心混合物；傾析液體。將固體懸浮於Et2O(15mL)中。離心混合物，傾析液體。在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘0-40% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為7.3mg且其藉由LCMS分析估計之純度為93%。
分析條件A：滯留時間=1.58min；ESI-MS(+)m/z 936.1(M+2H)。
分析條件B：滯留時間=2.70min；ESI-MS(+)m/z 935.9(M+2H)。
製備實例10505
製備中間物10505A：
除了由於使用預裝載之Fmoc-L-Pro-2-氯三苯甲基樹脂而無需裝載步驟之外，按照「通用合成順序A」。在第4醯胺鍵形成步驟中使用5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)戊酸。向自動化順序之含有樹脂的反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。向反應容器中添加哌啶：DMF(20：80 v/v，2.0mL)。週期性攪動混合物4分鐘且隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加DMF(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。樹脂如下連續洗滌五次：對於每次洗滌，經由容器頂部添加 DCM(2.0mL)且週期性攪動所得混合物90秒，隨後經由玻璃料排出溶液。接著立刻使用DCM(8mL)將樹脂轉移至15mL小瓶中。向溶液中添加六氟異丙醇(2mL)。樹脂立刻變成深紅色；溶液保持無色。簡單手動攪動混合物，接著使其靜置在室溫下15分鐘，且接著過濾。將濾液轉移至15mL小瓶中且在N2流下濃縮，得到固體殘餘物，即中間物10501A。
製備中間物10505B：
向裝有以上製備之全部中間物10504A的40mL小瓶中添加DCM(20mL)，接著添加HATU(76mg，0.20mmol)，接著添加DIPEA(0.052mL，0.30mmol)。攪拌溶液2小時。在真空下乾燥溶液，得到中間物10504B。
製備實例10505：
「脫除保護基溶液」係藉由將三氟乙酸(23.75mL)、1,4-二硫基-DL-蘇糖醇(625mg)、三異丙基矽烷(0.625mL)合併於40mL玻璃瓶中來製備。向裝有以上製備之全部中間物10504A的5打蘭小瓶中添加「脫除保護基溶液」(2.0mL)。使溶液在500rpm下運行的震盪器中混合20分鐘，接著倒入25mL裝有Et2O(15mL)之試管中。沈澱少量白色固體。離心混合物；傾析液體。將固體懸浮於Et2O(15mL)中。離心混合物，傾析液體。在以下條件下經由製備型LC/MS純化粗物質：管柱：XBridge C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘10-50% B，接著在100% B保持5分鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。在以下條件下經由製備型LC/MS進一步純化物質：管柱：Waters CSH C18,19×200mm,5μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；梯度：經30分鐘0-40% B，接著在100% B保持5分 鐘；流速：20mL/min。合併含有所需產物之溶離份且經由離心蒸發乾燥。產物產量為7.0mg且其藉由LCMS分析估計之純度為95%。
分析條件A：滯留時間=1.56min；ESI-MS(+)m/z 927.0(M+2H)。分析條件C：滯留時間=1.49min；ESI-MS(+)m/z 927.1(M+2H)。10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.52分鐘，對應ESI偵測值為922.9 m/z。10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.52分鐘，對應ESI偵測值為922.9 m/z。10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.52分鐘，對應ESI偵測值為922.9 m/z。
製備實例10506
按照用於製備實例10505之程序製備實例10506，得到9.3mg產物(98.6%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.05%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.05%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.43分鐘，對應ESI偵測值為1785.1 m/z。
製備實例10507
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-((2-胺基-2-側氧基乙基)胺基)-6-側氧基己酸)製備實例10507，得到2.3mg產物(95.5%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.05%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.05%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.36分鐘，對應ESI偵測值為1885.9 m/z。
製備實例10508
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-((2-胺基-2-側氧基乙基)胺基)-6-側氧基己酸)製備實例10508，得到5.2mg產物(97.5%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.05%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.05%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.38分鐘，對應ESI偵測值為956.2 m/z。
製備實例10509
按照用於製備實例10505之程序製備實例10509，得到5.3mg產物(98.2%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.05%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.05%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.31分鐘，對應ESI偵測值為622 m/z。
製備實例10510
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-((2-胺基-2-側氧基乙基)胺基)-6-側氧基己酸)製備實例10510，得到7mg產物(100%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.75分鐘；流速：1.0mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.75分鐘；流速：1.0mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.65分鐘，對應ESI偵測值為946 m/z。
製備實例10511
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10511，得到2.9mg產物(95.1%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.05%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.05%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.73分鐘，對應ESI偵測值為1795 m/z。
製備實例10512
按照用於製備實例10505之程序製備實例10512，得到8.6mg產物(100%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.75分鐘；流速：1.0mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.75分鐘；流速：1.0mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.68分鐘，對應ESI偵測值為898.2 m/z。
製備實例10513
按照用於製備實例10505之程序製備實例10513，得到7.4mg產物(100%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.75分鐘；流速：1.0mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.75分鐘；流速：1.0mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.6分鐘，對應ESI偵測值為906.2 m/z。
製備實例10514
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-((2-胺基-2-側氧基乙基)胺基)-6-側氧基己酸)製備實例10514，得到1.8mg產物(100%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.75分鐘；流速：1.0mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.75分鐘；流速：1.0mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.61分鐘，對應ESI偵測值為935.2 m/z。
製備實例10515
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-((2-胺基-2-側氧基乙基)胺基)-6-側氧基己酸)製備實例10515，得到0.3mg產物(96.7%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.75分鐘；流速：1.0mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.75分鐘；流速：1.0mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.65分鐘，對應ESI偵測值為948.3 m/z。
製備實例10516
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-((2-胺基-2-側氧基乙基)胺基)-6-側氧基己酸)製備實例10516，得到1.5mg產物(100%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.05%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.05%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.27分鐘，對應ESI偵測值為983 m/z。
製備實例10517
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10517，得到15.3mg產物(97%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.39分鐘，對應ESI偵測值為1809.7 m/z。
製備實例10518
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10518，得到10.9mg產物(97.5%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.79分鐘，對應ESI偵測值為1822.1 m/z。
製備實例10519
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10519，得到8.5mg產物(94.5%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.89分鐘，對應ESI偵測值為1807.1 m/z。
製備實例10520
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸)製備實例10520，得到7mg產物(95.4%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.55分鐘，對應ESI偵測值為1853.1 m/z。
製備實例10521
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸)製備實例10521，得到5.6mg產物(100%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.85分鐘，對應ESI偵測值為1853.3 m/z。
製備實例10522
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸)製備實例10522，得到5.9mg產物(94.1%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.74分鐘，對應ESI偵測值為1867.1 m/z。
製備實例10525
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸)製備實例10525，得到2.8mg產物(99.1%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.72分鐘，對應ESI偵測值為926.8 m/z。
製備實例10526
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸)製備實例10526，得到4.5mg產物(99.2%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.72分鐘，對應ESI偵測值為920.9 m/z。
製備實例10527
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-胺基-3-側氧基丙氧基)乙酸)製備實例10527，得到2.8mg產物(97.4%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.97分鐘，對應ESI偵測值為1835.8 m/z。
製備實例10528
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-胺基-3-側氧基丙氧基)乙酸)製備實例10528，得到3.4mg產物(99%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.74分鐘，對應ESI偵測值為927.1 m/z。
製備實例10529
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-胺基-3-側氧基丙氧基)乙酸)製備實例10529，得到2.8mg產物(98.9%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.89分鐘，對應ESI偵測值為1841.2 m/z。
製備實例10530
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-胺基-3-側氧基丙氧基)乙酸)製備實例10530，得到4.5mg產物(97.3%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.77分鐘，對應ESI偵測值為935.4 m/z。
製備實例10531
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-胺基-3-側氧基丙氧基)乙酸)製備實例10531，得到5.8mg產物(97.5%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.81分鐘，對應ESI偵測值為1859 m/z。
製備實例10532
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸)製備實例10532，得到3.7mg產物(95.4%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.67分鐘，對應ESI偵測值為1854 m/z。
製備實例10533
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-胺基-3-側氧基丙氧基)乙酸)製備實例10533，得到3.5mg產物(92.7%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.62分鐘，對應ESI偵測值為1839.9 m/z。
製備實例10534
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸)製備實例10534，得到3.8mg產物(100%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.75分鐘；流速：1.0mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.75分鐘；流速：1.0mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=2分鐘，對應ESI偵測值為929.2 m/z。
製備實例10535
按照用於製備實例10505之程序製備實例10535，得到9.3mg產物(95.8%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.78分鐘，對應ESI偵測值為904.7 m/z。
製備實例10536
按照用於製備實例10505之程序製備實例10536，得到11.6mg產物(100%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.75分鐘；流速：1.0mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.75分鐘；流速：1.0mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.9分鐘，對應ESI偵測值為899.1 m/z。
製備實例10537
按照用於製備實例10505之程序製備實例10537，得到5.9mg產物(100%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：50℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.75分鐘；流速：1.0mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters Acquity UPLC BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：50℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持0.75分鐘；流速：1.0mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.94分鐘，對應ESI偵測值為605.1 m/z。
製備實例10538
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-2-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-胺基-3-側氧基丙氧基)乙酸)製備實例10538，得到1.1mg產物(99%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.78分鐘，對應ESI偵測值為1852.7 m/z。
製備實例10539
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸)製備實例10539，得到2.8mg產物(97.8%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.64分鐘，對應ESI偵測值為923.0 m/z。
製備實例10540
按照用於製備實例10505之程序製備實例10540，得到5.5mg產物(95.7%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.96分鐘，對應ESI偵測值為1793.2 m/z。
製備實例10541
按照用於製備實例10505之程序製備實例10541，得到9.2mg產物(96.7%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.86分鐘，對應ESI偵測值為1810 m/z。
製備實例10542
按照用於製備實例10505之程序製備實例10542，得到10.6mg產物(94.5%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.76分鐘，對應ESI偵測值為1824.8 m/z。
製備實例10543
按照用於製備實例10505之程序製備實例10543，得到6.4mg產物(95.4%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.79分鐘，對應ESI偵測值為1811.9 m/z。
製備實例10544
按照用於製備實例10505之程序製備實例10544，得到6.6mg產物(98.6%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.86分鐘，對應ESI偵測值為1829.9 m/z。
製備實例10545
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10545，得到3mg產物(94.6%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.91分鐘，對應ESI偵測值為1826.2 m/z。
製備實例10546
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10546，得到6.4mg產物(100%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.64分鐘，對應ESI偵測值為[ERROR]m/z。
製備實例10547
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10547，得到5.5mg產物(97.6%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.89分鐘，對應ESI偵測值為1822.1 m/z。
製備實例10548
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10548，得到5.2mg產物(97.7%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.8分鐘，對應ESI偵測值為1828.7 m/z。
製備實例10549
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10549，得到1.9mg產物(98%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.39分鐘，對應ESI偵測值為1824.8 m/z。
製備實例10550
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10550，得到1.8mg產物(98.3%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.83分鐘，對應ESI偵測值為1810.6 m/z。
製備實例10551
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10551，得到3.8mg產物(95.5%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.79分鐘，對應ESI偵測值為1840.9 m/z。
製備實例10552
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸)製備實例10552，得到4.9mg產物(100%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.5分鐘，對應ESI偵測值為1837 m/z。
製備實例10553
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸)製備實例10553，得到4.2mg產物(94.3%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.74分鐘，對應ESI偵測值為1834.9 m/z。
製備實例10554
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸)製備實例10554，得到5.1mg產物(100%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.79分鐘，對應ESI偵測值為1851.7 m/z。
製備實例10555
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸)製備實例10555，得到8.6mg產物(98.8%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.82分鐘，對應ESI偵測值為1841 m/z。
製備實例10556
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸)製備實例10556，得到4.3mg產物(98.5%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.9分鐘，對應ESI偵測值為1855.6 m/z。
製備實例10557
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸)製備實例10557，得到2.2mg產物(100%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.69分鐘，對應ESI偵測值為1870.1 m/z。
製備實例10558
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(R)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10558，得到1.4mg產物(100%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.37分鐘，對應ESI偵測值為905.7 m/z。
製備實例10559
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(R)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10559，得到1.9mg產物(100%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.91分鐘，對應ESI偵測值為1826.8 m/z。
製備實例10560
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(R)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10560，得到3.4mg產物(95.9%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.47分鐘，對應ESI偵測值為1823.1 m/z。
製備實例10561
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸)製備實例10561，得到3.1mg產物(96.6%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.37分鐘，對應ESI偵測值為1852.8 m/z。
製備實例10562
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸)製備實例10562，得到3.6mg產物(96.9%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.69分鐘，對應ESI偵測值為1851.3 m/z。
製備實例10563
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸)製備實例10563，得到1.6mg產物(97%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.6分鐘，對應ESI偵測值為1867.1 m/z。
製備實例10564
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(S)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-6-胺基-6-側氧基己酸)製備實例10564，得到3.2mg產物(97.1%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.62分鐘，對應ESI偵測值為1854 m/z。
製備實例10566
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(R)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10566，得到5.9mg產物(96.6%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.47分鐘，對應ESI偵測值為1811.2 m/z。
製備實例10567
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(R)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10567，得到4.3mg產物(93.9%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.52分鐘，對應ESI偵測值為1807.4 m/z。
製備實例10568
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(R)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10568，得到4.5mg產物(97.6%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.6分鐘，對應ESI偵測值為1826.1 m/z。
製備實例10569
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(R)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10569，得到6.1mg產物(100%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.78分鐘，對應ESI偵測值為1838.1 m/z。
製備實例10570
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(R)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10570，得到1.8mg產物(97%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.47分鐘，對應ESI偵測值為1827.2 m/z。
製備實例10571
按照用於製備實例10505之程序(在第4醯胺偶合步驟中使用(R)-5-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)戊酸)製備實例10571，得到0.7mg產物(91.3%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.52分鐘，對應ESI偵測值為922.9 m/z。
製備實例10572
按照用於製備實例10505之程序製備實例10572，得到21.7mg產物(94.8%純度)。使用兩次分析型LC/MS注射測定最終純度。注射1條件：管柱：Waters BEH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+10mM乙酸銨；移動相B：95：5乙腈：水+10mM乙酸銨；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。注射2條件：管柱：Waters CSH C18,2.1×50mm,1.7μm粒子；移動相A：5：95乙腈：水+0.1%三氟乙酸；移動相B：95：5乙腈：水+0.1%三氟乙酸；溫度：70℃；梯度：經3分鐘0-100% B，接著在100% B保持2.0分鐘；流速：0.75mL/min；偵測：UV，220nm。分析結果：滯留時間=1.59分鐘，對應ESI偵測值為1810.8 m/z。
使用均相時差式螢光(HTRF)結合分析測試巨環肽與PD-1與PD-L1之結合競爭之能力的方法
使用PD-1/PD-L1均相時差式螢光(HTRF)結合分析研究本發明之巨環肽結合至PD-L1之能力。
方法
可溶性PD-1與可溶性PD-L1結合之均相時差式螢光(HTRF)分析。 可溶性PD-1及可溶性PD-L1係指移除跨膜區且融合至異源序列(特定言之，人類免疫球蛋白G序列(Ig)之Fc部分或六聚組胺酸抗原決定基標籤(His))之羧基端截短的蛋白質。所有結合研究均在由dPBS組成的補充有0.1%(w/v)牛血清白蛋白及0.05%(v/v)Tween-20之HTRF分析緩衝液中進行。對於PD-1-Ig/PD-L1-His結合分析，抑制劑與PD-L1-His(10nM最終)一起在4μl分析緩衝液中預培育15分鐘，接著添加含PD-1-Ig(20nM最終)之1μl分析緩衝液並另外培育15分鐘。使用來自人類、短尾獼猴、小鼠或其他物種之PD-L1融合蛋白。使用經銪穴狀配位體標記之抗Ig單株抗體(1nM最終)及經別藻藍蛋白(APC)標記之抗His單株抗體(20nM最終)實現HTRF偵測。將抗體稀釋於HTRF偵測緩衝液中且將5μl施配在結合反應頂部。使反應平衡30分鐘且使用EnVision螢光計獲得信號(665nm/620nm比率)。建立PD-1-Ig/PD-L2-His(分別為20及5nM)、CD80-His/PD-L1-Ig(分別為100及10nM)及CD80-His/CTLA4-Ig(分別為10及5nM)之間的額外結合分析。在生物素標記之第71號化合物與人類PD-L1-His之間的結合/競爭研究進行如下。巨環肽抑制劑與PD-L1-His(10nM最終)一起在4μl分析緩衝液中預培育60分鐘，接著添加含生物素標記之第71號化合物(0.5nM最終)之1μl分析緩衝液。使結合平衡30分鐘，接著添加含經銪穴狀配位體標記之抗生蛋白鏈菌素(2.5pM最終)及經APC標記之抗His(20nM最終)之5μl HTRF緩衝液。使反應平衡30分鐘且使用EnVision螢光計獲得信號(665nm/620nm比率)。
重組蛋白質。在HEK293T細胞中表現具有C端人類Ig抗原決定基標籤[hPD-1(25-167)-3S-IG]之羧基截短之人類PD-1(胺基酸25-167)及具有C端His抗原決定基標籤[hPD-L1(19-239)-菸草葉脈斑點病毒蛋白酶裂解位點(TVMV)-His]之人類PD-L1(胺基酸18-239)，且依次藉由重組蛋白質A親和層析及尺寸排阻層析純化。人類PD-L2-His(Sino Biologicals)、CD80-His(Sino Biologicals)、CTLA4-Ig(RnD Systems)均經由市售來源獲得。
重組人類PD-1-Ig之序列
hPD1(25-167)-3S-IG
(SEQ ID NO：1)
重組人類PD-L1-TVMV-His(PD-L1-His)之序列
hPDL1(19-239)-TVMV-His
(SEQ ID NO：2)
結果顯示於表1中。如所示，本發明之巨環肽證實有效抑制PD-1-Ig對PD-L1-TVMV-His(PD-L1-His)之結合活性。範圍如下：A=0.10-10μM；B=0.01-0.099μM；C=0.001-0.0099μM
熟習此項技術者應顯而易知本發明不限於前述說明性實例，且其可以其他不悖離本發明基本屬性之形式實施。因此，需要在所有方面將實例視為說明性而非限制性的，參考隨附申請專利範圍而非前述實例，且因此所有在申請專利範圍等效意義或範圍內的變化均意欲涵蓋於其中。
<110> 美商必治妥美雅史谷比公司
<120> 免疫調節劑
<130> 12410-US-NP
<150> US 62/062,240
<151> 2014-10-10
<160> 2
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 384
<212> PRT
<213> 智人
<400> 1
<210> 2
<211> 237
<212> PRT
<213> 智人
<400> 2

Claims (20)

  1. 一種式(I)化合物 或其醫藥學上可接受之鹽，其中：A係選自-CH2CH2-； 其中： 表示羰基之連接點且表示氮原子之連接點； n為0、1或2；m為1或2； m'為0或1；z為1或2；當z為1時，w為2；當z為2時，w為1或2；p為0、1或2；R14及R15獨立地選自氫及甲基；Rx係選自氫、胺基、羥基及甲基；及Rz係選自氫及-C(O)NHR16；其中R16係選自氫、-CHR17C(O)NH2、-CHR17C(O)NHCHR18C(O)NH2及-CHR17C(O)NHCHR18C(O)NHCH2C(O)NH2；其中R17係選自氫及-CH2OH且其中R18係選自氫及甲基；Rv為氫、甲基或天然胺基酸側鏈；Rc、Rf、Rh、Ri及Rm為氫；Rn為氫或甲基，或Rv及Rn形成吡咯啶環；Ra、Re、Rj及Rk各自獨立地選自氫及甲基；R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12及R13獨立地選自天然胺基酸側鏈及非天然胺基酸側鏈或如下所述與相應鄰近R基團一起形成環；Re及Rk可各與相應鄰近R基團及其所連接之原子一起形成選自氮雜環丁烷、吡咯啶、嗎啉、哌啶、哌嗪及四氫噻唑之環；其中各環視情況經一至四個獨立地選自胺基、氰基、甲基、鹵基及羥基之基團取代；Rb為甲基，或Rb及R2與其所連接之原子一起形成選自氮雜環丁烷、吡咯啶、嗎啉、哌啶、哌嗪及四氫噻唑之環；其中各環視情況經一至四個獨立地選自胺基、氰基、甲基、鹵基及羥基之基團取代； Rd為氫或甲基，或Rd及R4與其所連接之原子一起可形成選自氮雜環丁烷、吡咯啶、嗎啉、哌啶、哌嗪及四氫噻唑之環；其中各環視情況經一至四個獨立地選自胺基、氰基、甲基、鹵基、羥基及苯基之基團取代；Rg為氫或甲基，或Rg及R7與其所連接之原子一起可形成選自氮雜環丁烷、吡咯啶、嗎啉、哌啶、哌嗪及四氫噻唑之環；其中各環視情況經一至四個獨立地選自以下之基團取代：胺基、視情況經鹵基取代之苯甲基、苯甲氧基、氰基、環己基、甲基、鹵基、羥基、視情況經甲氧基取代之異喹啉基氧基、視情況經鹵基取代之喹啉基氧基及四唑基；且其中該吡咯啶及該哌啶環視情況與環己基、苯基或吲哚基稠合；及RL為甲基，或RL及R12與其所連接之原子一起形成選自氮雜環丁烷及吡咯啶之環，其中各環視情況經一至四個獨立地選自胺基、氰基、甲基、鹵基及羥基之基團取代。
  2. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中Rd及R4與其所連接之原子一起形成吡咯啶環；Rg及R7與其所連接之原子一起形成吡咯啶環，其中該環視情況經一個羥基取代；及Rk為甲基。
  3. 如請求項2之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中：Ra、Re及Rj為氫；Rb及R2各為甲基，或Rb及R2與其所連接之原子一起形成哌啶環；RL為甲基；Rn為氫、甲基，或Rn及Rv形成吡咯啶環； R1為苯基甲基，其中該苯基經一個選自鹵基、羥基、甲氧基或甲基之基團取代；R3係選自-CH2C(O)NH2及-CH2CO2H；R5係選自氫、-CH2NH2、-CH2(咪唑基)及-CH2C(O)NH2；R6係選自-CH2CH(CH3)2、-(CH2)4NH2、-(CH2)2CO2H及(CH2)2C(O)NH2；R8及R10為-CH2(吲哚基)，其中該吲哚基視情況經-CH2CO2H取代；R9係選自氫、-(CH2)2NH2、-(CH2)4NH2、-CH2OH及-CH2C(O)NH2；R11及R12為-(CH2)3CH3；及R13係選自甲基、-CH2OH、-CH2CH(CH3)2及-(CH2)2CO2H。
  4. 如請求項3之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中 A為。
  5. 如請求項3之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中A為
  6. 如請求項3之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中A為
  7. 如請求項3之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中A為
  8. 一種化合物，其選自 實例5001、實例5002、實例5003、實例5004、實例5005、實例5006、實例5007、實例5008、實例5009、實例10001、實例10002、實例10003、實例10004、實例10005、實例10006、實例10007、實例10008、實例10009、實例10010、實例10011、實例10012、實例10013、實例10014、實例10015、實例10016、實例10017、實例10018、實例10019、實例10020、實例10021、實例10022、實例10023、實例10024、實例10025、實例10026、實例10027、實例10028、實例10500、實例10501、實例10502、實例10503、實例9005、實例9006、實例9007、實例9008、實例9009、實例9010、實例9011、實例9012、實例9013、實例9014、實例9015、實例9016、實例9017、實例9018、實例9019、實例9020、實例9021、實例9022、實例9023、實例9024、實例9025、實例9026、實例9027、實例9028、實例9029、實例9030、實例9031、實例9032、實例9033、實例9034、實例9035、實例9036、實例9037、實例9038、實例9039、實例9040、實例9041、實例9042、實例9043、實例9044、實例9045、實例9046、實例9047、實例9048、實例9049、實例9050、實例9051、實例9052、實例9053、實例9054、實例9055、實例9056、實例9057、實例9058、實例9059、實例10029、實例10030、實例10031、實例10032、實例10033、實例10034、實例10035、實例10036、實例10037、實例10038、實例10039、實例10040、實例10041、實例10042、實例10504、實例10505、實例10506、實例10507、實例10508、實例10509、實例10510、實例10511、實例10512、實例10513、實例10514、實例10515、實例10516、實例10517、實例10518、實例10519、實例10520、實例10521、實例10522、實例10525、實例10526、實例 10527、實例10528、實例10529、10530、實例10531、實例10532、實例10533、實例10534、實例10535、實例10536、實例10537、實例10538、實例10539、實例10540、實例10541、實例10542、實例10543、實例10544、實例10545、實例10546、實例10547、實例10548、實例10549、實例10550、實例10551、實例10552、實例10553、實例10554、實例10555、實例10556、實例10557、實例10558、實例10559、實例10560、實例10561、實例10562、實例10563、實例10564、實例10566、實例10567、實例10568、實例10569、實例10570、實例10571及實例10572或其醫藥學上可接受之鹽。
  9. 一種如請求項1至8中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其用於製造用於增強、刺激及/或提高有需要之個體之免疫反應的藥劑。
  10. 如請求項9之用途，其中該藥劑另外包含額外藥劑或在該額外藥劑之前、之後或同時投與。
  11. 如請求項10之用途，其中該額外藥劑為抗微生物劑、抗病毒劑、細胞毒性劑及/或免疫反應調節劑。
  12. 如請求項10之用途，其中該額外藥劑為HDAC抑制劑。
  13. 如請求項10之用途，其中該額外藥劑為TLR7及/或TLR8促效劑。
  14. 一種如請求項1至8中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其用於製造用於抑制有需要之個體之癌細胞生長、增生或癌轉移的藥劑。
  15. 如請求項14之用途，其中該癌症係選自黑素瘤、腎細胞癌、鱗狀非小細胞肺癌(NSCLC)、非鱗狀NSCLC、結腸直腸癌、去勢療法無效之前列腺癌、卵巢癌、胃癌、肝細胞癌、胰臟癌、頭頸部鱗狀細胞癌、食道癌、胃腸道癌及乳癌、及血液科惡性病。
  16. 一種如請求項1至8中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其用於製造用於治療有需要之個體之感染性疾病的藥劑。
  17. 如請求項16之用途，其中該感染性疾病由病毒引起。
  18. 如請求項17之用途，其中該病毒係選自HIV、A型肝炎、B型肝炎、C型肝炎、疱疹病毒及流感。
  19. 一種如請求項1至8中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其用於製造用於治療有需要之個體之敗血性休克的藥劑。
  20. 一種如請求項1至8中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其用於製造用於阻斷個體之PD-L1與PD-1及/或CD80之相互作用的藥劑。
TW104133278A 2014-10-10 2015-10-08 免疫調節劑 TW201629088A (zh)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462062240P 2014-10-10 2014-10-10

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW201629088A true TW201629088A (zh) 2016-08-16

Family

ID=54330101

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW104133278A TW201629088A (zh) 2014-10-10 2015-10-08 免疫調節劑

Country Status (20)

Country Link
US (1) US9732119B2 (zh)
EP (1) EP3204403B1 (zh)
JP (1) JP6718439B2 (zh)
KR (1) KR102538436B1 (zh)
CN (1) CN107001424B (zh)
AR (1) AR102350A1 (zh)
AU (1) AU2015328136A1 (zh)
BR (1) BR112017006980A2 (zh)
CA (1) CA2963930A1 (zh)
CL (1) CL2017000855A1 (zh)
CO (1) CO2017004535A2 (zh)
EA (1) EA201790695A1 (zh)
ES (1) ES2793018T3 (zh)
IL (1) IL251589A0 (zh)
MX (1) MX2017004542A (zh)
PE (1) PE20170701A1 (zh)
SG (1) SG11201702792SA (zh)
TW (1) TW201629088A (zh)
WO (1) WO2016057624A1 (zh)
ZA (1) ZA201702484B (zh)

Families Citing this family (76)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SG11201504410PA (en) 2012-12-07 2015-07-30 Chemocentryx Inc Diazole lactams
MA40132B1 (fr) 2014-09-11 2019-04-30 Bristol Myers Squibb Co Inhibiteurs macrocycliques des interactions protéine/protéine pd-1/pd-l1 et cd80(b7-1)/pd-li
US9856292B2 (en) 2014-11-14 2018-01-02 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
US9861680B2 (en) 2014-12-18 2018-01-09 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
US9944678B2 (en) 2014-12-19 2018-04-17 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
CA2974237C (en) 2015-01-09 2021-07-20 Etubics Corporation Methods and compositions for combination immunotherapy
US20160222060A1 (en) 2015-02-04 2016-08-04 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
US9809625B2 (en) 2015-03-18 2017-11-07 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
EP3286213B1 (en) * 2015-04-20 2021-08-04 Etubics Corporation Methods and compositions for combination immunotherapy
US10143746B2 (en) 2016-03-04 2018-12-04 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
US10358463B2 (en) * 2016-04-05 2019-07-23 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
BR112018070361A2 (pt) 2016-04-07 2019-01-29 Chemocentryx Inc redução da carga tumoral através da administração de antagonistas do ccr1 em combinação com inibidores de pd-1 ou inibidores de pd-l1
TWI808055B (zh) 2016-05-11 2023-07-11 美商滬亞生物國際有限公司 Hdac 抑制劑與 pd-1 抑制劑之組合治療
TWI794171B (zh) 2016-05-11 2023-03-01 美商滬亞生物國際有限公司 Ｈｄａｃ抑制劑與ｐｄ-ｌ１抑制劑之組合治療
RS61742B1 (sr) 2016-05-19 2021-05-31 Bristol Myers Squibb Co Imunomodulatori za pet-snimanje
SG10201914029RA (en) 2016-10-14 2020-03-30 Precision Biosciences Inc Engineered meganucleases specific for recognition sequences in the hepatitis b virus genome
CN110267971B (zh) * 2016-11-07 2023-12-19 百时美施贵宝公司 免疫调节剂
CN106963948A (zh) * 2017-05-12 2017-07-21 顾艳宏 阿帕替尼与Anti‑PD‑1抗体联用在制备结肠癌药物中的应用
CN110997698B (zh) * 2017-06-23 2023-12-26 百时美施贵宝公司 充当pd-1拮抗剂的免疫调节剂
AU2018335486B2 (en) 2017-09-25 2024-07-04 Chemocentryx, Inc. Combination therapy using a Chemokine Receptor 2 (CCR2) antagonist and a PD-1/PD-L1 inhibitor
EP3692053A1 (en) 2017-10-03 2020-08-12 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
CN111566120B (zh) 2017-12-20 2023-09-29 捷克共和国有机化学与生物化学研究所 活化sting转接蛋白的具有膦酸酯键的3’3’环状二核苷酸
AU2018392212B9 (en) 2017-12-20 2021-03-18 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2'3' cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the STING adaptor protein
MA50423A (fr) 2018-01-08 2020-08-26 Chemocentryx Inc Procédés de traitement de tumeurs solides au moyen d'antagonistes du ccr2
US20190269664A1 (en) 2018-01-08 2019-09-05 Chemocentryx, Inc. Methods of treating solid tumors with ccr2 antagonists
US10836769B2 (en) 2018-02-26 2020-11-17 Gilead Sciences, Inc. Substituted pyrrolizine compounds and uses thereof
US10870691B2 (en) 2018-04-05 2020-12-22 Gilead Sciences, Inc. Antibodies and fragments thereof that bind hepatitis B virus protein X
TWI833744B (zh) 2018-04-06 2024-03-01 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 3'3'-環二核苷酸
TWI818007B (zh) 2018-04-06 2023-10-11 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 2'3'-環二核苷酸
TW202005654A (zh) 2018-04-06 2020-02-01 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 ２，２，─環二核苷酸
TW201945388A (zh) 2018-04-12 2019-12-01 美商精密生物科學公司 對b型肝炎病毒基因體中之識別序列具有特異性之最佳化之經工程化巨核酸酶
TW202014193A (zh) 2018-05-03 2020-04-16 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 包含碳環核苷酸之2’3’－環二核苷酸
SG11202011651SA (en) 2018-05-31 2020-12-30 Ono Pharmaceutical Co Biomarkers for determining the effectiveness of immune checkpoint inhibitors
WO2020028097A1 (en) 2018-08-01 2020-02-06 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of (r)-11-(methoxymethyl)-12-(3-methoxypropoxy)-3,3-dimethyl-8-0x0-2,3,8,13b-tetrahydro-1h-pyrido[2,1-a]pyrrolo[1,2-c] phthalazine-7-c arboxylic acid
TW202028212A (zh) 2018-10-11 2020-08-01 日商小野藥品工業股份有限公司 Ｓｔｉｎｇ促效化合物
WO2020092528A1 (en) 2018-10-31 2020-05-07 Gilead Sciences, Inc. Substituted 6-azabenzimidazole compounds having hpk1 inhibitory activity
CN113227089B (zh) 2018-10-31 2024-07-05 吉利德科学公司 作为hpk1抑制剂的取代的6-氮杂苯并咪唑化合物
US20220143061A1 (en) 2019-03-07 2022-05-12 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3'3'-cyclic dinucleotides and prodrugs thereof
WO2020178769A1 (en) 2019-03-07 2020-09-10 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2'3'-cyclic dinucleotides and prodrugs thereof
WO2020178768A1 (en) 2019-03-07 2020-09-10 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3'3'-cyclic dinucleotide analogue comprising a cyclopentanyl modified nucleotide as sting modulator
US20220041733A1 (en) 2019-03-28 2022-02-10 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
EP3946628A1 (en) 2019-03-28 2022-02-09 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
TWI751517B (zh) 2019-04-17 2022-01-01 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
TWI751516B (zh) 2019-04-17 2022-01-01 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
CN111909240B (zh) * 2019-05-10 2023-10-24 中国药科大学 一种pd-1/pd-l1多肽类抑制剂及其医药用途
US20220251141A1 (en) * 2019-05-21 2022-08-11 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
TWI826690B (zh) 2019-05-23 2023-12-21 美商基利科學股份有限公司 經取代之烯吲哚酮化物及其用途
WO2020243570A1 (en) 2019-05-30 2020-12-03 Bristol-Myers Squibb Company Cell localization signature and combination therapy
WO2020243563A1 (en) 2019-05-30 2020-12-03 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures for suitability to immuno-oncology therapy
JP2022534982A (ja) 2019-05-30 2022-08-04 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 細胞局在化シグネチャーおよびその使用
WO2021025031A1 (ja) 2019-08-05 2021-02-11 小野薬品工業株式会社 免疫チェックポイント阻害薬の有効性判定バイオマーカー
EP4017476A1 (en) 2019-08-19 2022-06-29 Gilead Sciences, Inc. Pharmaceutical formulations of tenofovir alafenamide
KR20220066334A (ko) 2019-09-22 2022-05-24 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Lag-3 길항제 요법에 대한 정량적 공간 프로파일링
AR120096A1 (es) 2019-09-30 2022-02-02 Gilead Sciences Inc Vacunas para vhb y métodos de tratamiento de vhb
US20220411499A1 (en) 2019-11-08 2022-12-29 Bristol-Myers Squibb Company LAG-3 Antagonist Therapy for Melanoma
CN116057068A (zh) 2019-12-06 2023-05-02 精密生物科学公司 对乙型肝炎病毒基因组中的识别序列具有特异性的优化的工程化大范围核酸酶
WO2021188959A1 (en) 2020-03-20 2021-09-23 Gilead Sciences, Inc. Prodrugs of 4'-c-substituted-2-halo-2'-deoxyadenosine nucleosides and methods of making and using the same
US20230151024A1 (en) 2020-04-10 2023-05-18 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Sting agonistic compound
KR20220167275A (ko) 2020-04-10 2022-12-20 오노 야꾸힝 고교 가부시키가이샤 암 치료 방법
WO2022047189A1 (en) 2020-08-28 2022-03-03 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for hepatocellular carcinoma
MX2023002326A (es) 2020-08-31 2023-03-21 Bristol Myers Squibb Co Firma de localizacion celular e inmunoterapia.
WO2022066635A1 (en) 2020-09-22 2022-03-31 Avidea Technologies, Inc. Compositions and methods of manufacturing amphiphilic block copolymers that form nanoparticles in situ
AU2021364837A1 (en) 2020-10-23 2023-05-25 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for lung cancer
WO2022120179A1 (en) 2020-12-03 2022-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures and uses thereof
BR112023019847A2 (pt) 2021-03-29 2023-11-07 Juno Therapeutics Inc Métodos para dosagem e tratamento com uma combinação de uma terapia com inibidor de ponto de verificação e uma terapia com célula t car
TW202348237A (zh) 2021-05-13 2023-12-16 美商基利科學股份有限公司 TLR8調節化合物及抗HBV siRNA療法之組合
CA3222269A1 (en) 2021-06-11 2022-12-15 Gilead Sciences, Inc. Combination mcl-1 inhibitors with anti-cancer agents
AU2022290855A1 (en) 2021-06-11 2023-12-07 Gilead Sciences, Inc. Combination mcl-1 inhibitors with anti-body drug conjugates
WO2022271684A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
AU2022297367A1 (en) 2021-06-23 2023-12-07 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
CA3222439A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
WO2022271677A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
CN118176214A (zh) 2021-10-29 2024-06-11 百时美施贵宝公司 血液癌症的lag-3拮抗剂疗法
WO2023147371A1 (en) 2022-01-26 2023-08-03 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for hepatocellular carcinoma
US20230326022A1 (en) 2022-04-08 2023-10-12 Bristol-Myers Squibb Company Machine Learning Identification, Classification, and Quantification of Tertiary Lymphoid Structures
WO2024137776A1 (en) 2022-12-21 2024-06-27 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for lung cancer

Family Cites Families (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4475196A (en) 1981-03-06 1984-10-02 Zor Clair G Instrument for locating faults in aircraft passenger reading light and attendant call control system
US4447233A (en) 1981-04-10 1984-05-08 Parker-Hannifin Corporation Medication infusion pump
US4439196A (en) 1982-03-18 1984-03-27 Merck & Co., Inc. Osmotic drug delivery system
US4522811A (en) 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
US4447224A (en) 1982-09-20 1984-05-08 Infusaid Corporation Variable flow implantable infusion apparatus
US4487603A (en) 1982-11-26 1984-12-11 Cordis Corporation Implantable microinfusion pump system
US4486194A (en) 1983-06-08 1984-12-04 James Ferrara Therapeutic device for administering medicaments through the skin
US4596556A (en) 1985-03-25 1986-06-24 Bioject, Inc. Hypodermic injection apparatus
US5374548A (en) 1986-05-02 1994-12-20 Genentech, Inc. Methods and compositions for the attachment of proteins to liposomes using a glycophospholipid anchor
MX9203291A (es) 1985-06-26 1992-08-01 Liposome Co Inc Metodo para acoplamiento de liposomas.
US4790824A (en) 1987-06-19 1988-12-13 Bioject, Inc. Non-invasive hypodermic injection device
US4941880A (en) 1987-06-19 1990-07-17 Bioject, Inc. Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly
US5108921A (en) 1989-04-03 1992-04-28 Purdue Research Foundation Method for enhanced transmembrane transport of exogenous molecules
US5064413A (en) 1989-11-09 1991-11-12 Bioject, Inc. Needleless hypodermic injection device
US5312335A (en) 1989-11-09 1994-05-17 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US5383851A (en) 1992-07-24 1995-01-24 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US5869451A (en) 1995-06-07 1999-02-09 Glaxo Group Limited Peptides and compounds that bind to a receptor
US6410690B1 (en) 1995-06-07 2002-06-25 Medarex, Inc. Therapeutic compounds comprised of anti-Fc receptor antibodies
US5811097A (en) 1995-07-25 1998-09-22 The Regents Of The University Of California Blockade of T lymphocyte down-regulation associated with CTLA-4 signaling
US5922845A (en) 1996-07-11 1999-07-13 Medarex, Inc. Therapeutic multispecific compounds comprised of anti-Fcα receptor antibodies
US6277818B1 (en) 1998-10-29 2001-08-21 Angstrom Pharmaceuticals, Inc. Cyclic peptide ligands that target urokinase plasminogen activator receptor
JP4511943B2 (ja) 2002-12-23 2010-07-28 ワイス エルエルシー Ｐｄ−１に対する抗体およびその使用
PL2439273T3 (pl) 2005-05-09 2019-08-30 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Ludzkie przeciwciała monoklonalne przeciwko białku programowanej śmierci komórki 1(pd-1) oraz metody leczenia nowotworów z wykorzystaniem przeciwciał anty-pd-1 samodzielnie lub w połączeniu z innymi immunoterapeutykami
CN104356236B (zh) 2005-07-01 2020-07-03 E.R.施贵宝&圣斯有限责任公司 抗程序性死亡配体1(pd-l1)的人单克隆抗体
US9090668B2 (en) 2007-03-26 2015-07-28 The University Of Tokyo Process for synthesizing cyclic peptide compound
WO2009114335A2 (en) 2008-03-12 2009-09-17 Merck & Co., Inc. Pd-1 binding proteins
EP2324055A2 (en) 2008-08-25 2011-05-25 Amplimmune, Inc. Pd-1 antagonists and methods of use thereof
US8907053B2 (en) 2010-06-25 2014-12-09 Aurigene Discovery Technologies Limited Immunosuppression modulating compounds
JP5818237B2 (ja) 2010-09-09 2015-11-18 国立大学法人 東京大学 Ｎ−メチルアミノ酸およびその他の特殊アミノ酸を含む特殊ペプチド化合物ライブラリーの翻訳構築と活性種探索法
JP6206943B2 (ja) 2010-12-03 2017-10-04 国立大学法人 東京大学 ペプチドライブラリーの製造方法、ペプチドライブラリー、及びスクリーニング方法
WO2012168944A1 (en) 2011-06-08 2012-12-13 Aurigene Discovery Technologies Limited Therapeutic compounds for immunomodulation
WO2013144704A1 (en) 2012-03-29 2013-10-03 Aurigene Discovery Technologies Limited Immunomodulating cyclic compounds from the bc loop of human pd1
JP2013253842A (ja) 2012-06-06 2013-12-19 Univ Of Tokyo ｐＨ依存的に標的分子に結合するペプチドのスクリーニング方法
WO2013182660A1 (en) 2012-06-06 2013-12-12 Bionor Immuno As Hiv vaccine
JP6047231B2 (ja) 2012-06-06 2016-12-21 ポリフォー・アクチェンゲゼルシャフトＰｏｌｙｐｈｏｒ Ａｇ β−ヘアピンペプチド模倣薬
CN110079599B (zh) 2013-03-15 2024-06-04 豪夫迈·罗氏有限公司 治疗pd-1和pd-l1相关疾患的生物标志物和方法
US9308236B2 (en) * 2013-03-15 2016-04-12 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic inhibitors of the PD-1/PD-L1 and CD80(B7-1)/PD-L1 protein/protein interactions
PL3041468T3 (pl) 2013-09-06 2018-12-31 Aurigene Discovery Technologies Limited Pierścieniowe związki peptydomimetyczne jako immunomodulatory
WO2015044900A1 (en) 2013-09-27 2015-04-02 Aurigene Discovery Technologies Limited Therapeutic immunomodulating compounds
CN103724290B (zh) * 2013-11-15 2015-04-29 浙江大学 一种环肽化合物clavatustide A及其产生菌、制备方法和应用
MA40132B1 (fr) 2014-09-11 2019-04-30 Bristol Myers Squibb Co Inhibiteurs macrocycliques des interactions protéine/protéine pd-1/pd-l1 et cd80(b7-1)/pd-li
US9856292B2 (en) 2014-11-14 2018-01-02 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
US9861680B2 (en) 2014-12-18 2018-01-09 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
US9944678B2 (en) 2014-12-19 2018-04-17 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
US20160222060A1 (en) 2015-02-04 2016-08-04 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators
US9809625B2 (en) 2015-03-18 2017-11-07 Bristol-Myers Squibb Company Immunomodulators

Also Published As

Publication number Publication date
CA2963930A1 (en) 2016-04-14
US20160102122A1 (en) 2016-04-14
AU2015328136A1 (en) 2017-05-25
IL251589A0 (en) 2017-06-29
ZA201702484B (en) 2019-06-26
MX2017004542A (es) 2017-06-23
SG11201702792SA (en) 2017-05-30
BR112017006980A2 (pt) 2017-12-12
EP3204403B1 (en) 2020-04-08
ES2793018T3 (es) 2020-11-12
EA201790695A1 (ru) 2017-08-31
CN107001424B (zh) 2021-03-05
US9732119B2 (en) 2017-08-15
JP2017536344A (ja) 2017-12-07
CN107001424A (zh) 2017-08-01
AR102350A1 (es) 2017-02-22
WO2016057624A1 (en) 2016-04-14
JP6718439B2 (ja) 2020-07-08
CL2017000855A1 (es) 2017-12-11
PE20170701A1 (es) 2017-06-05
KR102538436B1 (ko) 2023-05-30
KR20170064548A (ko) 2017-06-09
CO2017004535A2 (es) 2017-08-31
EP3204403A1 (en) 2017-08-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110267971B (zh) 免疫调节剂
JP6976263B2 (ja) 免疫調節剤
CN110997698B (zh) 充当pd-1拮抗剂的免疫调节剂
TW201629088A (zh) 免疫調節劑
JP6797130B2 (ja) 免疫修飾因子
US9861680B2 (en) Immunomodulators
KR102590776B1 (ko) 면역조정제
KR20200058506A (ko) 면역조정제
TW201632541A (zh) 免疫調節劑
US20160222060A1 (en) Immunomodulators