TW201615644A - 作為人類免疫缺乏病毒複製之抑制劑的吡唑并嘧啶巨環化合物 - Google Patents

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Abstract

本發明大體上係關於式I化合物，包括用於治療人類免疫缺乏病毒(HIV)感染之組合物及方法。本發明提供HIV之新穎抑制劑，含有此化合物之醫藥組合物，以及製備此等化合物及使用此等化合物治療HIV感染之方法。 □

Description

作為人類免疫缺乏病毒複製之抑制劑的吡唑并嘧啶巨環化合物 相關申請案之交叉引用
本申請案主張2014年2月19日提交之臨時專利申請案USSN 61/941,931之優先權，該案以全文引用的方式併入本文中。
本發明一般係關於用於治療人類免疫缺乏病毒(HIV)感染之化合物、組合物及方法。本發明提供HIV之新穎抑制劑、含有此類化合物之醫藥組合物及使用此等化合物治療HIV感染之方法。
人類免疫缺乏病毒(HIV)已識別為造成後天性免疫不全症候群(AIDS)之病原體，AIDS為一種特徵為破壞免疫系統且無能力擊退威脅生命之機會性感染的致命疾病。當前統計表明全世界多達35,300,000人感染該病毒(UNAIDS Report on the Global AIDS Epidemic 2013)。除大量已感染個體以外，該病毒仍在繼續擴散。2012年之估算指出僅在該年即有接近2,300,000新感染。同年，存在約1,600,000例與HIV及AIDS有關之死亡。
當前存在許多抗病毒藥物可用於對抗該感染。此等藥物可基於其所靶向之病毒蛋白或其作用模式而分類。詳言之，沙奎那韋(saquinavir)、茚地那韋(indinavir)、利托那韋(ritonavir)、奈非那韋(nelfinavir)、阿紮那韋(atazanavir)、地瑞那韋(darunavir)、安普那韋(amprenavir)、夫沙那韋(fosamprenavir)、洛匹那韋(lopinavir)及替拉 那韋(tipranavir)為HIV所表現之天冬胺醯基蛋白酶的競爭性抑制劑。齊多夫定(Zidovudine)、地達諾新(didanosine)、司他夫定(stavudine)、拉米夫定(lamivudine)、紮西他濱(zalcitabine)、恩曲他濱(emtricitabine)、替諾福韋(tenofovir)及阿巴卡韋(abacavir)為作為受質模擬物起作用以中斷病毒cDNA合成的核苷(酸)逆轉錄酶抑制劑。非核苷逆轉錄酶抑制劑奈韋拉平(nevirapine)、地拉韋啶(delavirdine)、依法韋侖(efavirenz)及依曲韋林(etravirine)經由非競爭性(或無競爭性)機制抑制病毒cDNA之合成。恩夫韋地(Enfuvirtide)及馬拉維若(maraviroc)抑制病毒進入宿主細胞。HIV整合酶抑制劑雷特格韋(raltegravir，MK-0518，Isentress®)亦已批准用於治療已患病患者，且顯而易見此類抑制劑作為含有不同類別HIV抑制劑之組合療法的一部分極有效。
單獨使用此等藥物有效減少病毒複製：然而，該效應僅為暫時的，因為病毒容易對所有用作單藥療法之已知藥劑產生耐藥性。另一方面，組合療法已證實極有效減少病毒及抑制許多患者中出現耐藥性。在廣泛使用組合療法之美國，HIV相關死亡之數目已大幅下降(Palella,F.J.；Delany,K.M.；Moorman,A.C.；Loveless,M.O.；Furher,J.；Satten,G.A.；Aschman,D.J.；Holmberg,S.D.N.Engl.J.Med.1998,338,853-860)。
不幸的是，並非所有患者均有反應且大量患者的此治療失敗。實際上，初步研究表明約30-50%患者最終因抑制組合中之至少一種藥物而失敗。在多數情況下治療失敗是由病毒耐藥性引起的。病毒耐藥性又由感染過程期間HIV-1之複製速率以及與病毒聚合酶有關的相對高病毒突變速率及HIV感染個體在服用其指定藥物時缺乏順適性引起。顯而易見，需要新穎抗病毒劑，其較佳具有針對已對當前批准藥物具有耐藥性之病毒的活性。其他重要因素包括相較於多種當前批准 藥物改良之安全性及較便利之給藥方案。
已揭示抑制HIV複製之化合物。參看WO2007131350、WO2009062285、WO2009062288、WO2009062289、WO2009062308、WO2010130842、WO2011076765、WO2012003497、WO2012003498、WO2012033735、WO2012065963、WO2012066442、WO2013012649、WO2013043553、WO2013062028、WO2013073875、WO2013134113、WO2013134142、WO2014021867、WO20140028384及WO2014164428。
本發明提供如下技術優點，例如化合物為新穎的且適用於治療HIV。此外，化合物例如關於其作用機制、結合、抑制功效、目標選擇性、溶解度、安全性概況或生物可用性中之一或多者提供醫藥用途之優勢。
本發明涵蓋式I化合物(包括醫藥學上可接受之鹽)、其醫藥組合物、製備該化合物之方法及其抑制HIV整合酶及治療感染HIV或AIDS之患者的用途。
本發明之一個態樣為一種式I化合物
其中：R1為烷基或鹵烷基；R2為氫或烷基；R3為氫、烷基或鹵基；R4為氫、烷基或環烷基；R5為氫、烷基或(Ar4)烷基； Ar1為苯基或萘基，其經0-3個選自以下之取代基取代：氰基、鹵基、烷基、鹵烷基、烷氧基或鹵烷氧基；Ar2為經0-2個烷基取代基取代之吡咯基、吡唑基或三唑基；Ar3為經0-3個選自以下之取代基取代的苯基：氰基、鹵基、烷基、鹵烷基、烷氧基或鹵烷氧基；Ar4為經0-3個選自以下之取代基取代的苯基：氰基、鹵基、烷基、鹵烷基、烷氧基或鹵烷氧基；X1為伸烷基、伸烯基、-CH2O-、-CH2OCH2-、-CH2N(R4)CH2-或-CH2CON(R4)-；X2為-O-、-Ar1-、-Ar2-、-CON(R5)-、-(Ar3)CH-、-((苯甲氧基)CH2)CH-)-、-O(Ar3)CH-、-CH2CON(R5)-或-N(R5)COCON(R5)-；X3不存在，為-O-、烷氧基、環烷氧基、環烷基、Ar3、(Ar3)O-、((Ar3)烷基)O-；X4為伸烷基、伸烯基、伸烷氧基或伸烯氧基；X5不存在或為-O-；及X6為氮雜環丁烷基、吡咯啶基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、高哌啶基、高哌嗪基或高嗎啉基，且經0-3個鹵基或烷基取代基取代；或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣為一種式I化合物其中：R1為烷基或鹵烷基；R2為氫或烷基；R3為氫、烷基或鹵基；R4為氫或烷基；R5為(Ar4)烷基；Ar1為經0-3個選自以下之取代基取代的苯基：氰基、鹵基、烷 基、鹵烷基、烷氧基或鹵烷氧基；Ar2為經0-2個烷基取代基取代之吡咯基、吡唑基或三唑基；Ar3為經0-3個選自以下之取代基取代的苯基：氰基、鹵基、烷基、鹵烷基、烷氧基或鹵烷氧基；Ar4為經0-3個選自以下之取代基取代的苯基：氰基、鹵基、烷基、鹵烷基、烷氧基或鹵烷氧基；X1為伸烷基、伸烯基、-O-、-CH2O-、-CH2OCH2-、-CON(R4)-或-CH2CON(R4)-；X2為Ar1、Ar2或-CON(R5)-；X3不存在，為-O-、烷氧基、環烷氧基、環烷基、Ar3、(Ar3)O-、((Ar3)烷基)O-；X4為伸烷基、伸烯基、伸烷氧基或伸烯氧基；X5不存在或為-O-；及X6為氮雜環丁烷基、吡咯啶基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、高哌啶基、高哌嗪基或高嗎啉基，且經0-3個鹵基或烷基取代基取代；或X6為苯基或色滿基，且經0-3個選自以下之取代基取代：鹵基、烷基、鹵烷基、烷氧基及鹵烷氧基；或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣為式I化合物，其中R1為烷基或鹵烷基；R2為氫或烷基；R3為氫、烷基或鹵基；R4為氫、烷基或環烷基；R5為氫、烷基或(Ar4)烷基；Ar1為經0-3個選自以下之取代基取代的苯基：氰基、鹵基、烷基、鹵烷基、烷氧基或鹵烷氧基；Ar3為經0-3個選自以下之取代基取代的苯基：氰基、鹵基、烷基、鹵烷基、烷氧基或鹵烷氧基；Ar4為經0-3個選自以下之取代基取代的苯基：氰基、鹵基、烷基、鹵烷基、烷氧基或鹵烷氧基；X1為伸烷基、伸烯基、-CH2O-、-CH2OCH2-、-CH2N(R4)CH2-或-CH2CON(R4)-；X2為-O-、-Ar1-、- CON(R5)-、-(Ar3)CH-、-((苯甲氧基)CH2)CH-)-、-O(Ar3)CH-、-CH2CON(R5)-或-N(R5)COCON(R5)-；X3不存在，為-O-、烷氧基、環烷氧基、環烷基、Ar3、(Ar3)O-、((Ar3)烷基)O-；X4為伸烷基、伸烯基、伸烷氧基或伸烯氧基；X5不存在或為-O-；且X6為經0-3個鹵基或烷基取代基取代之哌啶基；或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣為一種式I化合物，其中R1為烷基，R2為烷基且R3為氫。
本發明之另一態樣為一種式I化合物，其中Ar1為經0-3個選自以下之取代基取代的苯基：氰基、鹵基、烷基、鹵烷基、烷氧基或鹵烷氧基。
本發明之另一態樣為一種式I化合物，其中Ar2為經0-2個烷基取代基取代的三唑基。
本發明之另一態樣為一種式I化合物，其中X1為-CON(R4)-，X2為-CON(R5)-且X3不存在。
本發明之另一態樣為一種式I化合物，其中X2為Ar1。
本發明之另一態樣為一種式I化合物，其中X2為Ar1且X3不存在，為-O-或烷氧基。
本發明之另一態樣為一種式I化合物，其中X2為Ar2且X3為烷氧基、環烷氧基、(Ar3)O-或((Ar3)烷基)O-。
本發明之另一態樣為一種式I化合物，其中X3不存在或為-O-；X4為伸烷基或伸烯基；且X5為-O-。
本發明之另一態樣為一種式I化合物，其中X6為經0-3個鹵基或烷基取代基取代之哌啶基。
本發明之另一態樣為一種式II化合物，其中R1為氫或烷基；R2為氫、芳基烷基、烯丙氧基羰基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳基烷氧基羰基、三烷基矽烷基、烷基(芳基)2矽烷基或(烷基)2芳基矽烷基；R3 為烷基或鹵烷基；R4為氫、烷基、芳基烷基、烷氧基羰基、芳氧基羰基或芳基烷氧基羰基：
本發明之另一態樣為一種式II化合物，其中R1為烷基；R2為氫、苯甲基或第三丁基二苯基矽烷基；R3為甲基或碘甲基；R4為氫、第三丁氧基羰基或苯甲氧基羰基。
本發明之另一態樣為一種用於製備式II化合物之方法，其中R1為烷基，R2為氫，R3為甲基且R4為氫；該方法包含氫解式II化合物，其中R1為烷基，R2為苯甲基，R3為碘甲基且R4為苯甲氧基羰基
本發明之另一態樣為一種用於製備式II化合物之方法，該方法進一步包含其中自N-苯甲氧基羰基-4-亞甲基哌啶及5-烷基-5-苯甲氧基戊-1-醇製備其中R1為烷基，R2為苯甲基，R3為碘甲基且R4為苯甲氧基羰基的式II化合物。
本發明之另一態樣為一種用於製備式II化合物之方法，其中R1為烷基，R2為三烷基矽烷基、烷基(芳基)2矽烷基或(烷基)2芳基矽烷基，R3為甲基且R4為氫；該方法包含質子分解其中R1為烷基，R2為三烷基矽烷基、烷基(芳基)2矽烷基或(烷基)2芳基矽烷基，R3為甲基且R4為第三丁氧基羰基之式II化合物。
本發明之另一態樣為一種用於製備式II化合物之方法，其進一步包含其中自R1為烷基，R2為三烷基矽烷基、烷基(芳基)2矽烷基或(烷基)2芳基矽烷基，R3為碘甲基且R4為第三丁氧基羰基之式II化合物氫解R1為烷基，R2為三烷基矽烷基、烷基(芳基)2矽烷基或(烷基)2芳基矽烷基，R3為甲基且R4為第三丁氧基羰基之式II化合物。
本發明之另一態樣為一種用於製備式II化合物之方法，其進一步包含其中自N-苯甲氧基羰基-4-亞甲基哌啶及5-烷基-5-(三烷基矽烷氧基、烷基(芳基)2矽烷氧基或(烷基)2芳基矽烷氧基)戊-1-醇製備R1為烷基，R2為三烷基矽烷基、烷基(芳基)2矽烷基或(烷基)2芳基矽烷基，R3為碘甲基且R4為第三丁氧基羰基的式II化合物。
本發明之另一態樣為一種用於製備式III化合物之方法，其中R1為經0-1個苯甲氧基、三烷基矽烷氧基、烷基(芳基)2矽烷氧基或(烷基)2芳基矽烷氧基取代基取代之烷氧基，R3為甲基且R4為苯甲氧基羰基或烷氧基羰基，該方法包含用經0-1個苯甲氧基、三烷基矽烷氧基、烷基(芳基)2矽烷氧基或(烷基)2芳基矽烷氧基取代基取代之醇碘醚化R3及R4一起為亞甲基的式III化合物，隨後氫解
除非另外規定，否則此等術語具有以下含義。「烷基」意謂由1至6個碳構成之直鏈或分支鏈烷基。「烯基」意謂由2至6個碳構成且具 有至少一個雙鍵之直鏈或分支鏈烷基。「伸烷基」意謂由1至6個碳構成之直鏈或分支鏈二價烷基。「伸烯基」意謂由2至6個碳構成且具有至少一個雙鍵之直鏈或分支鏈二價烯基。「伸炔基」意謂由2至6個碳構成且具有至少一個參鍵之直鏈或分支鏈二價炔基。「環烷基」意謂由3至7個碳構成之單環環系統。「羥基烷基」、「烷氧基」及具有經取代之烷基部分的其他術語包括烷基部分由1至6個碳原子構成的直鏈及分支鏈異構體。「伸烷氧基」意謂由1至6個碳構成之直鏈或分支鏈二價烷氧基，例如-CH2CH2CH2O-。「伸烯氧基」意謂由2至6個碳構成且具有至少一個雙鍵之直鏈或分支鏈二價烯氧基，例如-CH=CHCH2O-。「伸炔氧基」意謂由2至6個碳構成且具有至少一個雙鍵之直鏈或分支鏈二價炔氧基，例如-CC-CH2O-。「鹵基」包括氟、氯、溴及碘。「鹵基」包括在經鹵基限定之取代基中經單鹵取代至經全鹵取代的所有鹵化異構體，例如「鹵烷基」、「鹵烷氧基」、「鹵苯基」及「鹵苯氧基」。「芳基」意謂具有6至12個碳原子之單環或雙環芳族烴基，或一個或兩個環為苯基之雙環稠環系統。雙環稠環系統由苯基與四至六員芳族或非芳族碳環稠合組成。芳基之代表性實例包括(但不限於)茚滿基、茚基、萘基、苯基及四氫萘基。「雜芳基」意謂具有1-5個獨立地選自氮、氧及硫之雜原子的5至7員單環或8至11員雙環芳族環系統。藉由化學繪圖說明的鍵結於多環系統(例如雙環系統)上的可變位置的取代基欲鍵結至繪製的其所附之環。插句或多插句術語欲向熟習此項技術者闡明鍵結關係。舉例而言，諸如((R)烷基)之術語意謂烷基取代基另外經取代基R取代。
本發明包括化合物之全部醫藥學上可接受之鹽形式。醫藥學上可接受之鹽為抗衡離子不顯著促進化合物的生理學活性或毒性且因而用作藥理學等效物的鹽。此等鹽可根據採用市售試劑之常用有機技術製備。一些陰離子鹽形式包括乙酸鹽、醋硬脂酸鹽、苯磺酸鹽、溴化 物、氯化物、檸檬酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、氫碘酸鹽、碘化物、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、甲磺酸鹽、硝酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽及羥萘甲酸鹽。一些陽離子鹽形式包括銨、鋁、苄星青黴素(benzathine)、鉍、鈣、膽鹼、二乙胺、二乙醇胺、鋰、鎂、葡甲胺、4-苯基環已胺、哌嗪、鉀、鈉、緩血酸胺及鋅。
本發明之一些化合物以立體異構形式存在。本發明包括化合物之全部立體異構形式，包括對映異構體及非對映異構體。製備及分離立體異構體之方法為此項技術中已知的。本發明包括化合物之全部互變異構形式。本發明包括滯轉異構體及旋轉異構體。
本發明欲包括存在於本發明化合物中之原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子數但質量數不同之彼等原子。作為一般實例但非限制性地，氫之同位素包括氘及氚。碳同位素包括13C及14C。本發明之同位素標記化合物一般可藉由熟習此項技術者已知之習知技術或藉由類似於本文所述之方法，使用適當同位素標記試劑代替以其他方式使用之非標記試劑來製備。此類化合物可具有多種潛在用途，例如在測定生物活性時用作標準物及試劑。在穩定同位素之情況中，此類化合物可具有有利改良生物學、藥理學或藥物動力學特性之可能性。
生物學方法
HIV複製之抑制：構建重組NL-RLuc原病毒純系，其中一部分來自NL4-3之nef基因置換為海腎螢光素酶基因。此病毒為充分感染性的且可在細胞培養物中經歷多個複製週期。另外，發光報導子提供定量病毒生長程度且因此定量測試化合物之抗病毒活性的簡單且容易之方法。質體pNLRLuc含有選殖至pUC18之PvuII位點中的原病毒NL-Rluc DNA。藉由用質體pNLRLuc轉染293T細胞製備NL-Rluc病毒。使用來自Invitrogen之LipofectAMINE PLUS套組(Carlsbad,CA)根據製造商進 行轉染且在MT-2細胞中滴定所產生之病毒。為進行易感性分析，在化合物存在下使用經滴定之病毒感染MT-2細胞，且在培育5天後，處理細胞且藉由所表現螢光素酶之量定量病毒生長。分析培養基為補充有10%熱不活化胎牛血清(FBS)、100單位/毫升青黴素G/100單位/毫升鏈黴素、10mM HEPES緩衝液(pH 7.55)及2mM L-麩醯胺酸的RPMI 1640。使用來自至少2個實驗的結果來計算EC50值。使用來自Promega(Madison,WI)之雙螢光素酶套組定量螢光素酶。藉由在化合物之連續稀釋液存在下培育測定病毒對化合物之敏感性。藉由使用中效方程式之指數形式計算50%有效濃度(EC50)，其中(Fa)=1/[1+(ED50/藥物濃度)m](Johnson VA,Byington RT.Infectivity Assay.Techniques in HIV Research.Aldovini A,Walker BD.編71-76.New York：Stockton Press.1990)。結果顯示於表1中。
醫藥組合物及使用方法
本發明化合物抑制HIV複製。因此，本發明之另一態樣為一種用於治療人類患者之HIV感染之方法，其包含投與治療有效量之式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽以及醫藥學上可接受之載劑。
本發明之另一態樣為式I化合物用於製造用以治療AIDS或HIV感染之藥物的用途。
本發明之另一態樣為一種用於治療人類患者之HIV感染的方法，其包含投與治療有效量之式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽以及治療有效量之至少一種用於治療AIDS或HIV感染的選自由以下組成之群的其他試劑：核苷HIV逆轉錄酶抑制劑、非核苷HIV逆轉錄酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、HIV融合抑制劑、HIV連接抑制劑、CCR5抑制劑、CXCR4抑制劑、HIV出芽或成熟抑制劑及HIV整合酶抑制劑。
本發明之另一態樣為一種方法，其中試劑為核苷HIV逆轉錄酶抑制劑。
本發明之另一態樣為一種方法，其中核苷HIV逆轉錄酶抑制劑係選自由以下組成之群：阿巴卡韋、地達諾新、恩曲他濱、拉米夫定、司他夫定、替諾福韋、紮西他濱及齊多夫定，或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣為一種方法，其中試劑為非核苷HIV逆轉錄酶 抑制劑。
本發明之另一態樣為一種方法，其中非核苷HIV逆轉錄酶抑制劑係選自由以下組成之群：地拉韋啶、依法韋侖及奈韋拉平，或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣為一種方法，其中試劑為HIV蛋白酶抑制劑。
本發明之另一態樣為一種方法，其中HIV蛋白酶抑制劑係選自由以下組成之群：安普那韋、阿紮那韋、茚地那韋、洛匹那韋、奈非那韋、利托那韋、沙奎那韋及夫沙那韋，或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣為一種方法，其中試劑為HIV融合抑制劑。
本發明之另一態樣為一種方法，其中HIV融合抑制劑為恩夫韋地或T-1249，或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣為一種方法，其中試劑為HIV連接抑制劑。
本發明之另一態樣為一種方法，其中試劑為CCR5抑制劑。
本發明之另一態樣為一種方法，其中CCR5抑制劑係選自由以下組成之群：Sch-C、Sch-D、TAK-220、PRO-140及UK-427,857，或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣為一種方法，其中試劑為CXCR4抑制劑。
本發明之另一態樣為一種方法，其中CXCR4抑制劑為AMD-3100或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣為一種方法，其中試劑為HIV出芽或成熟抑制劑。
本發明之另一態樣為一種方法，其中該出芽或成熟抑制劑為PA-457或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣為一種方法，其中試劑為HIV整合酶抑制劑。
本發明之另一態樣為一種醫藥組合物，其包含治療有效量之式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽，以及用於治療AIDS或HIV感染的選 自由以下組成之群的至少一種其他試劑：核苷HIV逆轉錄酶抑制劑、非核苷HIV逆轉錄酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、HIV融合抑制劑、HIV連接抑制劑、CCR5抑制劑、CXCR4抑制劑、HIV出芽或成熟抑制劑及HIV整合酶抑制劑，及醫藥學上可接受之載劑。
本發明之另一態樣為組合物，其中試劑為核苷HIV逆轉錄酶抑制劑。
本發明之另一態樣為組合物，其中核苷HIV逆轉錄酶抑制劑係選自由以下組成之群：阿巴卡韋、地達諾新、恩曲他濱、拉米夫定、司他夫定、替諾福韋、紮西他濱及齊多夫定，或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣為組合物，其中試劑為非核苷HIV逆轉錄酶抑制劑。
本發明之另一態樣為組合物，其中非核苷HIV逆轉錄酶抑制劑係選自由以下組成之群：地拉韋啶、依法韋侖及奈韋拉平，或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣為組合物，其中試劑為HIV蛋白酶抑制劑。
本發明之另一態樣為組合物，其中HIV蛋白酶抑制劑係選自由以下組成之群：安普那韋、阿紮那韋、茚地那韋、洛匹那韋、奈非那韋、利托那韋、沙奎那韋及夫沙那韋，或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣為組合物，其中試劑為HIV融合抑制劑。
本發明之另一態樣為組合物方法，其中HIV融合抑制劑為恩夫韋地或T-1249，或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣為組合物，其中試劑為HIV連接抑制劑。
本發明之另一態樣為組合物，其中試劑為CCR5抑制劑。
本發明之另一態樣為組合物，其中CCR5抑制劑係選自由以下組成之群：Sch-C、Sch-D、TAK-220、PRO-140及UK-427,857，或其醫 藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣為一種方法，其中試劑為CXCR4抑制劑。
本發明之另一態樣為一種方法，其中CXCR4抑制劑為AMD-3100或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣為組合物，其中試劑為HIV出芽或成熟抑制劑。
本發明之另一態樣為組合物，其中該出芽或成熟抑制劑為PA-457或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一態樣為組合物，其中試劑為HIV整合酶抑制劑。
如AIDS及HIV感染領域中的從業者所理解，涉及投與式I化合物與至少一種抗HIV藥劑之「組合」、「共同投與」、「同時發生」及類似術語意謂該等組分為組合抗逆轉錄病毒療法或高度活性抗逆轉錄病毒療法(HAART)之部分。
如AIDS及HIV感染領域中的從業者所理解，「治療有效」意謂提供有意義患者益處所需之藥劑之量。一般而言，治療目標為抑制病毒負荷、恢復及保存免疫功能、改良生活品質及降低HIV相關發病率及死亡率。
如AIDS及HIV感染領域中的從業者所理解，「患者」意謂受HIV病毒感染及適於治療之個人。
如AIDS及HIV感染領域中的從業者所理解使用「治療」、「療法」、「方案」、「HIV感染」、「ARC」、「AIDS」及相關術語。
本發明之化合物一般作為醫藥組合物給藥，該醫藥組合物包含治療有效量之式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之載劑且可含有習知賦形劑。治療有效量為提供有意義患者益處所需要之量。醫藥學上可接受之載劑為具有可接受安全性概況的彼等常規已知載劑。組合物涵蓋全部常見固體及液體形式，包括膠囊、錠劑、 口含錠及散劑以及液體懸浮液、糖漿、酏劑及溶液。使用常見調配技術製備組合物，且組合物一般使用習知賦形劑(諸如結合劑及濕潤劑)以及媒劑(諸如水及醇)。參看例如Remington's Pharmaceutical Sciences，第17版，Mack Publishing Company,Easton,PA(1985)。
固體組合物通常調配呈劑量單位且每劑量提供約1至1000mg活性成分的組合物較佳。一些劑量實例為1mg、10mg、100mg、250mg、500mg及1000mg。一般而言，其他抗逆轉錄病毒劑將以與臨床上使用之類別的試劑類似的單位範圍存在。通常，此為0.25-1000mg/單位。
液體組合物一般在劑量單位範圍內。一般而言，液體組合物將在1-100mg/mL單位劑量範圍內。一些劑量實例為1mg/mL、10mg/mL、25mg/mL、50mg/mL及100mg/mL。一般而言，其他抗逆轉錄病毒劑將以與臨床上使用之類別的試劑類似的單位範圍存在。通常，此為1-100mg/mL。
本發明涵蓋全部習知投與模式；經口及非經腸方法較佳。一般而言，給藥方案將與臨床上使用之其他抗逆轉錄病毒劑類似。通常，日劑量將為每天1-100毫克/公斤體重。一般而言，較多化合物需要經口投與且較少化合物需要非經腸投與。然而，特定給藥療法將由醫師使用合理醫學判斷決定。
本發明亦涵蓋化合物以組合療法給予之方法。亦即，化合物可與適用於治療AIDS及HIV感染的其他試劑結合但以各別方式使用。此等試劑中之一些包括HIV連接抑制劑、CCR5抑制劑、CXCR4抑制劑、HIV細胞融合抑制劑、HIV整合酶抑制劑、HIV核苷逆轉錄酶抑制劑、HIV非核苷逆轉錄酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、出芽及成熟抑制劑、免疫調節劑及抗感染劑。在此等組合方法中，式I化合物一般將以每天1-100毫克/公斤體重之日劑量於其他試劑結合給予。其他 試劑一般將以治療使用之量給予。然而，特定給藥療法將由醫師使用合理醫學判斷決定。
合成方法
本發明化合物可藉由此項技術中已知之多種方法製備，包括以下流程及特定實施例部分中之方法。合成流程中所示的結構編號及變數編號與申請專利範圍或說明書其餘部分之結構或變數編號不同，且不應混淆。流程中之變數僅欲說明如何製備本發明之一些化合物。本發明不限於前述說明性實例且該等實例應在所有方面考慮為說明性及非限制性的，參考係對所附申請專利範圍而非對前述實例作出，且因此意欲涵蓋在申請專利範圍之等效含義及範圍的範圍內之所有變化。
流程及實例中所用之縮寫一般遵循此項技術中所用之慣例。用於本說明書及實例中之化學縮寫定義如下：「KHMDS」對應於鉀雙(三甲基矽烷基)醯胺；「DMF」對應於N,N-二甲基甲醯胺；「HATU」對應於六氟磷酸O-(第三氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲，「MeOH」對應於甲醇；「Ar」對應於芳基；「TFA」對應於三氟乙酸，「DMSO」對應於二甲亞碸；「h」對應於小時；「rt」對應於室溫或滯留時間(上下文將指示)；「min」對應於分鐘；「EtOAc」對應於乙酸乙酯；「THF」對應於四氫呋喃；「Et2O」對應於乙醚；「DMAP」對應於4-二甲胺基吡啶；「DCE」對應於1,2-二氯乙烷；「ACN」對應於乙腈；「DME」對應於1,2-二甲氧乙烷；「HOBt」對應於1-羥基苯并三唑水合物；且「DIEA」對應於二異丙基乙胺。
如本文所用之縮寫定義如下：「1×」對應於一次，「2×」對應於兩次，「3×」對應於三次，「℃」對應於攝氏度，「eq」對應於當量，「g」對應於公克，「mg」對應於毫克，「L」對應於公升，「mL」對應於毫升，「μL」對應於微升，「N」對應於正常，「M」對應於莫耳，「mmol」對應於毫莫耳，「atm」對應於大氣壓，「psi」對應於磅/ 平方吋，「conc.」對應於濃縮物，「sat」或「sat'd」對應於飽和，「MW」對應於分子量，「mp」對應於熔點，「ee」對應於對映異構體過量，「MS」或「Mass Spec」對應於質譜，「ESI」對應於電噴霧電離質譜，「HR」對應於高解析度，「HRMS」對應於高解析度質譜，「LCMS」對應於液相層析質譜，「HPLC」對應於高壓液相層析，「RP HPLC」對應於逆相HPLC，「TLC」或「tlc」對應於薄層層析，「NMR」對應於核磁共振光譜法，「1H」對應於質子，「δ」對應於德耳塔，「s」對應於單峰，「d」對應於二重峰，「t」對應於三重峰，「q」對應於四重峰，「m」對應於多重峰，「br」對應於寬峰，「Hz」對應於赫茲，且「α」、「β」、「R」、「S」、「E」及「Z」為熟習此項技術者熟悉之立體化學名稱。
一些化合物可根據流程I自適當經取代之雜環I-1合成。化合物I-1及I-2市場有售或藉由此項技術中已知之反應合成。使I-1與I-2在催化性TsOH存在下在回流二甲苯中反應獲得中間物I-3。用POCl3處理I-3獲得中間物I-4，其可藉由戴維斯氧化(Davis oxidation)轉化成中間物I-5。中間物I-5可藉由用戴斯-馬丁試劑(Dess-Martin reagent)處理氧化成酮酯I-6。中間物I-6可在催化性對掌性路易斯酸(Lewis acid)存在下用兒茶酚硼烷還原成對掌性醇I-7。用乙酸第三丁酯及過氯酸cn處理對掌性醇I-7獲得第三丁基醚I-8。胺可與I-8在諸如惠寧氏鹼(Hunig's base)之有機鹼存在下偶合獲得中間物I-9。在乙醇中用氫氧化物處理二酯I-9可獲得單羧酸中間物I-10，其可經混合酸酐轉化成一級醇I-11。一級醇I-11與疊氮磷酸二苯酯反應可獲得疊氮化物中間物I-12。在CuI存在下用適當炔烴處理疊氮化物I-12可獲得三唑中間物I-13，其可藉由閉環複分解反應隨後水解轉化成巨環羧酸I-14。在10% Pd/C存在下氫解I-14可獲得飽和化合物I-15。
此外，中間物I-12可藉由用含三苯膦之THF水溶液處理還原成胺II-1。可使用此項技術中已知之標準醯胺形成條件使胺II-1與適當羧酸偶合獲得中間物II-2。使II-2經受閉環複分解條件，隨後水解所得巨環酯，可獲得羧酸II-3。氫解不飽和羧酸II-3可獲得飽和羧酸II-4。
中間物I-11可藉由如流程III中所述的此項技術中已知之方法轉化成最終化合物III-2及III-3。
中間物I-11可藉由流程IV中所述之此項技術中已知之方法轉化成最終化合物IV-3及IV-4。
中間物I-11可藉由如流程V所述之此項技術中已知之方法轉化成最終化合物V-3及V-3。
中間物I-11可藉由如流程VI中所述的此項技術中已知之方法轉化成最終化合物VI-2及VI-3。
中間物IV-1可藉由如流程VII中所述的此項技術中已知之方法轉化成最終化合物VII-2及VII-3。
本文所述之化合物藉由熟習此項技術者已知之方法藉由矽膠管柱上的正相管柱層析使用適當溶劑系統純化。此實驗部分提及之製備型HPLC純化藉由在使用以下之C18製備型管柱(5μm)上梯度溶離進行：移動相A：9：1 H2O/具有10mM NH4OAc之乙腈以及移動相B：9：1乙腈/具有10mM NH4OAc之H2O，或移動相A：95：5 H2O/具有20mM NH4OAc之MeOH及移動相B：95：5 MeOH/具有20mM NH4OAc之H2O。
6-(2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-羥基-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯. 使用迪恩-斯托克冷凝器(Dean-Stork condenser)使5-胺基-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(35.5g，229mmol，根據WO 2008015271製備)、2-乙醯基丁二酸二乙酯(51.2mL，275mmol)及TsOH˙H2O(0.218g，1.144mmol)於鄰二甲苯(500mL)中之懸浮液回流5小時。(注意：懸浮液變為澄清均質溶液，接著在約15分鐘內開始有黃色固體從溶液沈澱出來)。接著，將反應混合物冷卻，用己烷(250mL)稀釋，過濾，用己烷洗滌且乾燥獲得呈淡黃色固體狀之6-(2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-羥基-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(53g，75%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 12.61(br.s.,1H),6.49(s,1H),4.34(q,J=7.1Hz,2H),4.09(q,J=7.1Hz,2H),3.57(s,2H),2.34(s,3H),1.33(t,J=7.2Hz,3H),1.19(t,J=7.0Hz,3H)。LCMS(M+1)=308.04。
7-氯-6-(2-乙氧基-2-側氧基乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯. 在120℃下加熱6-(2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-羥基-5-甲基吡 唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(25g，81mmol)及N,N-二甲基苯胺(20.6mL，163mmol)於POCl3(100mL)中之混合物3小時。接著使反應物冷卻至室溫且真空濃縮至一半體積。將其倒入大量冰水中且攪拌20分鐘。形成沈澱物且藉由過濾收集。將此固體溶解於乙酸乙酯(1L)中且用水洗滌。水相用乙酸乙酯反萃取且經合併之有機層用鹽水(200mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且真空濃縮。粗產物接著用EtOAc/己烷濕磨獲得呈淡黃色固體狀之7-氯-6-(2-乙氧基-2-側氧基乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(22g，67.5mmol，83%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.21(s,1H),4.52(q,J=7.2Hz,2H),4.24(q,J=7.2Hz,2H),3.94(s,2H),2.66(s,3H),1.48(t,J=7.0Hz,3H),1.30(t,J=7.2Hz,3H)。LCMS(M+1)=326.2。
7-氯-6-(2-乙氧基-1-羥基-2-側氧基乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯：在-78℃下經20分鐘向0.9M KHMDS(40.9mL，36.8mmol)於THF(100mL)中之經攪拌溶液中添加7-氯-6-(2-乙氧基-2-側氧基乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(10g，30.7mmol，合成參看WO2013025584)之THF(50mL)溶液。30分鐘後，向紅色反應混合物中添加3-苯基-2-(苯基磺醯基)-1,2-噁吖丙啶(10.43g，39.9mmol)之THF(15mL)溶液且在-78℃下再繼續攪拌30分鐘。接著，所得橙色反應混合物用NH4Cl飽和水溶液(50mL)淬滅，用EtOAc(200mL)稀釋，用水(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且真空濃縮獲得固體。此固體用少量乙酸乙酯濕磨且濾出固體，用己烷洗滌且在高度真空下乾燥獲得呈淡黃色固體狀之7-氯-6-(2-乙氧基-1-羥基-2-側氧基乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(5g，16.85 mmol，43%產率，90%純)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.21(s,1H),5.76(s,1H),4.58-4.49(m,2H),4.33(dtt,J=10.7,7.1,3.7Hz,2H),2.71-2.64(s,3H),1.48(t,J=7.2Hz,3H),1.29-1.24(m,3H)。LCMS(M+1)=342.16。
6-(2-乙氧基-2-側氧基乙醯基)-7-氯-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯：向7-氯-6-(2-乙氧基-1-羥基-2-側氧基乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸酯(5.9g13.81mmol)於CH2Cl2(100mL)中之混合物中添加戴斯-馬丁(5.86g，13.81mmol)，且所得混合物在室溫下攪拌1小時。反應混合物用乙酸乙酯(100mL)稀釋且用NaHCO3飽和水溶液(30mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且真空濃縮。藉由矽膠層析法(5-70% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈灰白色固體狀之所要7-氯-6-(2-乙氧基-2-側氧基乙醯基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(3.5g，9.27mmol，67.1%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.24(s,1H),4.56-4.43(m,4H),2.63(s,3H),1.50-1.41(m,6H)。LCMS(M+1)=340.13。
(S)-7-氯-6-(2-乙氧基-1-羥基-2-側氧基乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯：向6-(2-乙氧基-2-側氧基乙醯基)-7-氯-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(264mg，0.777mmol)於無水甲苯(5mL)中之經攪拌黃色溶液中添加1.0M(R)-1-甲基-3,3-二苯基六氫吡咯并[1,2-c][1,3,2]噁氮硼雜環戊烯/甲苯(0.311mL，0.311mmol)。使混合物冷卻至-35℃且經10分鐘添加50%兒茶酚硼烷/甲苯溶液(0.272mL，1.088 mmol)。30分鐘後，使反應混合物緩慢升溫至-15℃且再攪拌2小時，接著用EtOAc(30mL)及Na2CO3飽和水溶液(5mL)稀釋。劇烈攪拌混合物30分鐘，且有機相用Na2CO3飽和水溶液(2×5mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾，濃縮。藉由矽膠層析法(5-100% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈灰白色固體狀之所要(S)-7-氯-6-(2-乙氧基-1-羥基-2-側氧基乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(200mg，0.585mmol，75%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.21(s,1H),5.77(d,J=2.7Hz,1H),4.53(d,J=7.1Hz,2H),4.33(dd,J=7.1,5.5Hz,2H),3.61(br.s.,1H),2.68(s,3H),1.50-1.46(t,J=7.09Hz,3H),1.28(t,J=7.09Hz,3H)。LCMS(M+1)=342.13。
(S)-6-(1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-氯-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯：在室溫下向(S)-7-氯-6-(2-乙氧基-1-羥基-2-側氧基乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(200mg，0.585mmol)於CH2Cl2(6mL)及乙酸第三丁酯(4mL)中之經攪拌溶液中添加過氯酸(0.151mL，1.756mmol)。密封反應燒瓶。攪拌3小時後，反應混合物用CH2Cl2(50mL)稀釋，用NaHCO3飽和水溶液(5mL)小心地淬滅。分離有機層且用鹽水(5ml)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且真空濃縮獲得黃色液體。此粗產物藉由矽膠管柱上的急驟管柱層析使用(10-50% EtOAc/己烷作為溶離劑)純化獲得呈黏稠油狀物之所要(S)-6-(1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-氯-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(200mg，0.503mmol，86%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.19(s,1H),5.66(s,1H),4.52(q,J=7.2Hz,2H),4.25-4.19(m,2H),2.72(s,3H),1.51-1.45(m,3H),1.28(s,9H),1.26-1.21(m, 3H)。LCMS(M+1)=398.25。
4-羥基-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯：在N2氛圍下，將溴化甲基鎂於乙醚中之3N溶液(1.67mL，5.02mmol)逐滴添加至4-羥基-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(4g，20.08mmol)於乙醚(20mL)中之經冷卻(-25℃)溶液中。使反應混合物升溫至室溫且將其攪拌2小時。接著將其冷卻至0℃且藉由添加氯化銨飽和水溶液淬滅。另外添加20mL乙醚且將混合物分配於分液漏斗中。有機相擱置一旁且水相用另外20mL乙醚萃取。經合併之醚萃取物用MgSO4乾燥，過濾且蒸發獲得油狀物，其接著藉由biotage純化用0-50% EtOAc/己烷溶離，獲得呈無色油狀物之4-羥基-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(4.30g，18.0mmol，90%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 3.84-3.65(m,2H),3.34-3.18(m,2H),2.59-2.39(m,1H),1.61-1.53(m,4H),1.50-1.45(m,9H),1.32-1.27(m,3H)。
4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯：在0℃下向4-羥基-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(4.30g，20.0mmol)於DMF(50mL)中之混合物中添加NaH(60重量%)(1.60g，39.9mmol)。接著在室溫下攪拌混合物2小時。此時，經5分鐘緩慢添加烯丙基溴(8.64mL，100mmol)。在室溫下攪拌反應混合物3小時。接著冷卻至0℃且用氯化銨飽和水溶液淬滅。用乙醚萃取反應混合物。有機相用MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得無色油狀物，其接著藉由biotage純化用0-25% EtOAc/己 烷溶離，分離出呈無色油狀物之3.1g(61%)4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 6.02-5.90(m,1H),5.32(dd,J=17.2,1.7Hz,1H),5.16(dd,J=10.4,1.4Hz,1H),3.94-3.88(m,2H),3.73(br.s.,2H),3.19(br.s.,2H),1.78(d,J=13.1Hz,2H),1.53-1.42(m,11H),1.21(s,3H)。
4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶鹽酸鹽：在室溫下攪拌4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(3.10g，12.1mmol)與4N HCl/二噁烷(15mL，60.0mmol)之混合物3小時。接著將其真空濃縮獲得2.2g(95%)呈淡褐色固體狀之4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶鹽酸鹽。1H NMR(500MHz,CD3OD)δ 6.02-5.92(m,1H),5.33(dd,J=17.2,1.7Hz,1H),5.15(dd,J=10.6,1.7Hz,1H),3.96(dt,J=5.1,1.6Hz,2H),3.23-3.18(m,4H),2.06(dd,J=15.3,2.5Hz,2H),1.77-1.69(m,2H),1.31-1.28(s,3H)。藉由攪拌胺˙HCl鹽之DCM溶液與Na2CO3水溶液獲得游離胺。
(S)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-第三丁氧基-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯：在60℃(油浴溫度)下攪拌(S)-6-(1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-氯-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(21.4g，53.8mmol)、4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶，HCl(11.34g，59.2mmol)及DIEA(10.33mL，59.2mmol)於DMF(100mL)中之混合物22小時。注意：2小時及22小時的反應混合物之LCMS相同，指示存在的胺可能不足以使反應完全。胺 HCl鹽為自由流動之液體，可能是因為吸收了大量水。此外，添加額外胺HCl(7.85g，41mmol)及DIEA(5mL)且在60℃下繼續攪拌4小時。接著，冷卻，用Et2O(300mL)稀釋，用水(3×50mL)、鹽水(50mL)洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾且濃縮獲得褐色黏稠油狀物。使用4：1己烷/EtOAc之急驟層析獲得呈黃色糊狀物之(S)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(25.9g，50.1mmol，93%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.03(s,1H),6.11-6.01(m,1H),5.86(br.s.,1H),5.45(d,J=17.8Hz,1H),5.22(dd,J=10.4,1.6Hz,1H),4.50-4.43(m,2H),4.29-4.18(m,2H),4.06-4.01(m,2H),3.90-3.25(br.s,4H),2.63(s,3H),2.05-1.90(m,2H),1.80-1.69(m,1H),1.66-1.59(m,1H),1.45(t,J=7.1Hz,3H),1.37(s,3H),1.25-1.21(m,12H)。LCMS(M+H)=517.5。
(S)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-第三丁氧基-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸：在室溫下，經5分鐘向(S)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(25.9g，50.1mmol)於EtOH(150mL)中之經攪拌溶液中緩慢添加1M NaOH(53mL，53.0mmol)。注意：在NaOH添加結束時反應混合物摸起來是溫暖的。43小時後的LCMS顯示存在未水解之二酯。因此，添加額外1M NaOH(10mL)且在室溫下再繼續攪拌26小時。此時LCMS亦顯示存在未反應之二酯。因此，在45℃下加熱6小時。接著，濃縮且呈淺黃 色之混合物用水(100mL)稀釋，用Et2O(2×100mL)萃取以移除未反應之二酯。將合併之乙醚層乾燥(MgSO4)，過濾且濃縮獲得呈淺黃色糊狀的未反應之(S)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(7.7g，30%)。緩慢添加1M HCl(70mL)小心地酸化水層且用Et2O(3×100mL)萃取。將經合併之乙醚層乾燥(MgSO4)，過濾且濃縮獲得呈白色固體狀之(S)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(16.51g，33.8mmol，67.4%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.15(s,1H),6.01-6.10(m,1H),5.89(br.s.,1H),5.46(d,J=17.2Hz,1H),5.25(d,J=10.3Hz,1H),4.16-4.30(m,2H),4.03(dd,J=1.0,5.04Hz,2H),2.66(s,3H),1.94-2.07(m,3H),1.73(t,J=9.7Hz,1H),1.37(s,3H),1.24-1.28(m,12H)。HNMR中缺少哌啶之4H。LCMS(M+H)=489.4。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃下，向(S)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(2.443g，5mmol)及Et3N(0.836mL，6.00mmol)於THF(100mL)中之經攪拌溶液中添加1M氯甲酸異丙酯/甲苯(6.00mL，6.00mmol)。1小時後，一次性添加NaBH4(0.567g，15.00mmol)於冷水(20mL)中之溶液且在0℃攪拌。1小時後之LCMS顯示形成所要產物且存在未反應的混合酸酐中間物。因此，添加額外NaBH4(0.284g，7.5mmol)且繼續攪拌3小時，同時使反應 混合物緩慢升溫至10℃。此時LCMS顯示仍剩餘約10%未反應之材料。因此，添加額外NaBH4(0.189g)且在10℃下攪拌1小時。接著，反應物用AcOH(1mL)淬滅，用Et2O(200mL)稀釋，用水(2×50mL)及鹽水(25mL)洗滌。將有機層乾燥(MgSO4)，過濾且濃縮，獲得呈淺黃色糊狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(2.7g，5.12mmol，102%產率，90%純度)，其未經純化即用於下一步驟。LCMS(M+H)=475.2。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(疊氮基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.70g，1.475mmol)及疊氮磷酸二苯酯(0.381mL，1.770mmol)於甲苯(10mL)中之經攪拌溶液中添加DBU(0.222mL，1.475mmol)。2小時後，移除冷浴槽，在室溫下攪拌22小時。8小時及22小時的LCMS相同且不完全。因此，向渾濁反應混合物中添加THF(10mL)且在55℃下加熱5小時。接著用Et2O(100mL)稀釋，用水(2×10mL)、鹽水(10mL)洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾，濃縮且藉由急驟層析法使用15%及20% EtOAc純化，獲得呈無色黏稠油狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(疊氮基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.5038g，1.008mmol，68.4%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 6.51(s,1H),6.00-6.09(m,1H),5.92(br.s.,1H),5.46(d,J=16.6Hz,1H),5.23(dd,J=1.4,10.4Hz,1H),4.46-4.53(m,2H),4.15-4.29(m,2H),4.00-4.04(m,2H), 2.63(s,3H),1.90-2.04(m,3H),1.67-1.76(m,1H),1.36(s,3H),1.231.27(m,12H)。缺少哌啶之4H。LCMS(M+H)=500.5。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-((烯丙氧基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在室溫下，向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(疊氮基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.049g，0.098mmol)、炔丙醇(0.029mL，0.490mmol)及DIEA(0.086mL，0.490mmol)於THF(2mL)中之經攪拌無色澄清溶液中添加CuI(0.037g，0.196mmol)。攪拌所得渾濁黃色反應混合物22小時且用Et2O(50mL)稀釋，用1% NH4OH水溶液(2×10mL)、鹽水(10mL)洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾且濃縮獲得呈淺黃色糊狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(羥基甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯，其未經純化即用於下一步驟。
在0℃下向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(羥基甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯於DMF(2mL)中之經攪拌無色溶液中一次性添加60% NaH(10mg，0.250mmol)。5分鐘後，向褐色反應混合物中添加烯丙基溴(0.085mL，0.981mmol)且在0℃下攪拌30分鐘且在室溫下攪拌1小時。接著，用EtOH淬滅且藉由製備型HPLC純化獲得呈褐色糊狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-((烯丙氧基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.0334g，0.056mmol，57.2%產率)。1H NMR(500 MHz,CDCl3)δ 7.67(s,1H),6.45(s,1H),5.98-6.08(m,1H),5.83-5.97(m,2H),5.73(s,2H),5.40-5.53(m,1H),5.30(qd,J=1.6,17.2Hz,1H),5.17-5.24(m,2H),4.64(d,J=0.5Hz,2H),4.13-4.28(m,2H),4.06(td,J=1.4,5.7Hz,2H),4.00-4.03(m,2H),2.60(s,3H),1.87-2.03(m,3H),1.64-1.75(m,1H),1.34(s,3H),1.20-1.26(m,12H)。LCMS(M+H)=596.6。
實例1
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,22-二甲基-16,21-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜五環[20.2.2.1 6 , 9 .1 11 , 14 .0 2 , 7 ]二十八碳-2,4,6(28),8,12,14(27),18-七烯-3-基]乙酸：在70℃下向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-((烯丙氧基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.033g，0.055mmol)於1,2-二氯乙烷(15mL)中之經攪拌溶液中添加Hoveyda-Grubbs第2代催化劑(1.736mg，2.77μmol)，且使所得混合物回流2小時。冷卻，濃縮且經使用3：1 EtOAc/己烷及EtOAc之矽膠塞(2×1)過濾移除催化劑。濃縮含有產物之溶離份獲得巨環酯。
使上述巨環酯及1M NaOH(0.166mL，0.166mmol)於MeOH(2mL)中之溶液回流4小時。接著，冷卻且藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之所要巨環羧酸產物(0.0195g，0.036mmol，65.2%產率)，其混雜有其他烯烴異構體(約10%)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 8.24(s,1H),6.62(s,1H),5.98-6.05(m,1H),5.97(br.s.,1H),5.84-5.91(m,1H),5.82(d,J AB =15.5Hz,1H),5.67(d,J AB =15.5Hz,1H),4.74-4.82(m,2H),4.52(dt,J=2.1,12.4Hz,1H),4.11-4.19(m,2H),3.97-4.06(m, 2H),3.75(dt,J=1.9,12.2Hz,1H),3.33(d,J=11.7Hz,1H),2.86(d,J=11.8Hz,1H),2.63(s,3H),1.98-2.04(m,2H),1.63-1.75(m,2H),1.32(s,3H),1.30(s,9H)。LCMS(M+H)=540.5。
獲得三種異構體之混合物形式的額外11mg(36.8%)所要產物。
實例2
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,22-二甲基-16,21-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜五環[20.2.2.1 6 , 9 .1 11 , 14 .0 2 , 7 ]二十八碳-2,4,6(28),8,12,14(27)-六烯-3-基}乙酸：向三種異構體之混合物(0.011g，0.020mmol)於2：1 EtOAc/MeOH(5mL)中之經攪拌溶液中添加10% Pd/C(2.169mg，2.038μmol)，且抽成真空且留在氣球氫氣壓力下4小時。接著，過濾，濃縮且藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之所要產物(0.0061g，0.011mmol，55.2%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 8.10(s,1H),6.60(s,1H),5.90(br.s.,1H),5.79(d,J AB =15.6Hz,1H),5.74(d,J AB =15.6Hz,1H),4.70-4.77(m,2H),4.27(dt,J=2.3,12.41Hz,1H),3.71-3.78(m,1H),3.65(t,J=5.6Hz,2H),3.44-3.50(m,1H),3.35-3.40(m,2H),2.86(d,J=12.0Hz,1H),2.62(s,3H),1.93-2.00(m,2H),1.74-1.80(m,3H),1.64-1.72(m,2H),1.55-1.62(m,1H),1.28(s,9H),1.26(s,3H)。LCMS(M+H)=542.5。
3-(烯丙氧基)-3-甲基丁-1-炔：在0℃下，向2-甲基丁-3-炔-2-醇(7.33mL，75mmol)於DMF(100mL)中之經攪拌溶液中添加60% NaH (3.00g，75mmol)。30分鐘後，移除冷浴槽，在室溫下攪拌1小時。經5分鐘向其中添加烯丙基溴(9.74mL，113mmol)且繼續攪拌16小時。接著，用Et2O(250mL)稀釋，用水(5×50mL)、鹽水(50mL)洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾且濃縮，獲得黃色液體(5.64g)。其HNMR指示其為產物與未反應之醇的2：1混合物。其未經純化即使用。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 5.93-6.02(m,1H),5.32(qd,J=1.7,17.2Hz,1H),5.18(qd,J=1.5,10.4Hz,1H),4.13(td,J=1.4,5.6Hz,2H),2.45(s,1H),1.52(s,6H)。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(2-(烯丙氧基)丙烷-2-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在室溫下，向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(疊氮基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.075g，0.150mmol)、3-(烯丙氧基)-3-甲基丁-1-炔(0.106g，0.854mmol)與2-甲基丁-3-炔-2-醇(0.035g，0.416mmol)之混合物及DIEA(0.131mL，0.751mmol)於THF(3mL)中之經攪拌澄清無色溶液中添加CuI(0.057g，0.300mmol)。所得渾濁的反應混合物在室溫下攪拌5小時且用Et2O(50mL)稀釋，用水(10mL)、鹽水(10mL)洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾，濃縮且藉由製備型HPLC純化獲得兩種化合物。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(2-羥基丙烷-2-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.0256g，0.044mmol，29.2%產率)，黃色糊狀物；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.59(s,1H),6.45(s,1H),5.98-6.08(m, 1H),5.84-5.93(br.s.,1H),5.72(s,2H),5.46(d,J=16.7Hz,1H),5.21(dd,J=1.7,10.4Hz,1H),4.14-4.28(m,2H),4.00-4.04(m,2H),3.00-3.99(br.m.,4H),2.61(s,3H),2.54(br.s.,1H),1.88-2.04(m,2H),1.66-1.83(m,2H),1.63(s,6H),1.35(s,3H),1.22-1.26(m,12H)。LCMS(M+H)=584.5。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(2-(烯丙氧基)丙烷-2-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.0342g，0.055mmol，36.5%產率)，黃色糊狀物；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.58(s,1H),6.43(s,1H),5.98-6.08(m,1H),5.78-5.94(m,2H),5.72(s,2H),5.47(d,J=16.2Hz,1H),5.16-5.24(m,2H),5.06(d,J=10.4Hz,1H),4.13-4.28(m,2H),4.01(d,J=4.4Hz,2H),3.82(d,J=5.4Hz,2H),3.00-4.50(br.m.,4H),2.61(s,3H),1.90-2.02(m,2H),1.66-1.83(m,2H),1.63(s,6H),1.35(s,3H),1.18-1.29(m,12H)。LCMS(M+H)=624.6。
實例3及4
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,15,15,22-四甲基-16,21-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜五環[20.2.2.1 6 , 9 .1 11 , 14 .0 2 , 7 ]二十八碳-2,4,6(28),8,12,14(27),17-七烯-3-基]乙酸：在70℃下向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(2-(烯丙氧基)丙烷-2-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.034g，0.055mmol)於1,2-二氯乙烷(15mL)中之經攪拌溶液中添加Hoveyda-Grubbs第2代催化劑(1.708mg，2.73μmol)且回流2小時。接著，冷卻，濃縮且所得殘餘物未經純化即用於下一步驟。
使上述殘餘物及1M NaOH(0.164mL，0.164mmol)於MeOH(3mL)中之溶液回流數小時。冷卻且藉由製備型HPLC純化獲得兩種產物。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,15,15,22-四甲基-16,21-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜五環[20.2.2.1 6 , 9 .1 11 , 14 .0 2 , 7 ]二十八碳-2,4,6(28),8,12,14(27),19-七烯-3-基]乙酸：白色固體：1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.89(s,1H),6.61(s,1H),6.24(d,J=6.3Hz,1H),5.83(s,1H),5.67-5.79(m,2H),4.46-4.53(m,1H),4.25(dt,J=2.4,12.7Hz,1H),3.51-3.60(m,2H),3.41(t,J=7.7Hz,2H),3.03(d,J=12.1Hz,1H),2.59(s,3H),2.45-2.54(m,1H),2.38(qd,J=7.1,14.1Hz,1H),1.97-2.07(m,3H),1.62-1.69(m,2H),1.65(s,3H),1.61(s,3H),1.35(s,3H),1.27(s,9H)。LCMS(M+H)=568.6。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,15,15,22-四甲基-16,21-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜五環[20.2.2.1 6 , 9 .1 11 , 14 .0 2 , 7 ]二十八碳-2,4,6(28),8,12,14(27),17-七烯-3-基]乙酸：1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 8.24(s,1H),6.61(s,1H),6.35(d,J=6.2Hz,1H),5.94(br.s.,1H),5.65-5.78(m,2H),4.51-4.58(m,1H),4.40(t,J=11.7Hz,1H),3.77(t,J=11.7Hz,1H),3.42-3.48(m,1H),3.35(q,J=7.8Hz,2H),2.85(d,J=11.66Hz,1H),2.60(s,3H),2.53-2.59(m,1H),2.40-2.49(m,1H),2.01(d,J=13.9Hz,3H),1.70(s,3H),1.66(s,3H),1.63(t,J=6.6Hz,2H),1.29(s,3H),1.28(s,9H)。LCMS(M+H)=568.6。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(2-(羥基甲基)苯 基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在室溫下，向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(疊氮基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.0946g，0.189mmol)、(2-乙炔基苯基)甲醇(0.125g，0.947mmol)及DIEA(0.165mL，0.947mmol)於THF(5mL)中之經攪拌澄清溶液中添加CuI(0.072g，0.379mmol)。48小時後，反應混合物用Et2O(50mL)稀釋，用1% NH4OH(2×10mL)、鹽水(10mL)洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾且濃縮，獲得黃色固體，其藉由製備型HPLC純化獲得呈灰白色固體狀之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(2-(羥基甲基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.0521g，0.082mmol，43.6%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 8.02(s,1H),7.51-7.55(m,1H),7.45-7.49(m,1H),7.33-7.38(m,2H),6.54(s,1H),5.96-6.05(m,1H),5.89(br.s.,1H),5.82(s,2H),5.45(d,J=16.87Hz,1H),5.26-5.38(m,1H),5.18(qd,J=1.58,10.40Hz,1H),4.64(s,2H),4.13-4.28(m,2H),4.00(d,J=5.2Hz,2H),2.62(s,3H),1.83-2.04(m,3H),1.65-1.73(m,1H),1.31(s,3H),1.22-1.26(m,12H)。LCMS(M+H)=632.7。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(2-((烯丙氧基)甲基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃下向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(2-(羥基甲基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑 并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.052g，0.082mmol)於DMF(3mL)中之經攪拌溶液中添加60% NaH(8.23mg，0.206mmol)。10分鐘後，一次性添加溴化物溴(0.071mL，0.823mmol)且在0℃攪拌30分鐘且在室溫下攪拌1小時。接著，用EtOH淬滅，用乙醚(50mL)稀釋，用水(3×5mL)、鹽水(5mL)洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾且濃縮，獲得呈黃色糊狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(2-((烯丙氧基)甲基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯，其未經純化即用於下一步驟。LCMS(M+H)=672.7。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,28-二甲基-22,27-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜六環[26.2.2.1 6 , 9 .1 11 , 14 .0 2 , 7 .0 15 , 20 ]三十四碳-2,4,6(34),8,12,14(33),15(20),16,18,24-十烯-3-基]乙酸乙酯：在70℃下，向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(2-((烯丙氧基)甲基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.055g，0.082mmol)於1,2-二氯乙烷(20mL)中之經攪拌溶液中一次性添加Hoveyda-Grubbs第2代催化劑(2.56mg，4.09μmol)且回流5小時。接著，冷卻，濃縮且藉由製備型HPLC純化獲得產物與一種主要異構體之混合物。反式異構體(0.0089g，0.014mmol，16.89%產率)，灰白色固體。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 8.37(s,1H),7.94(dd,J=1.1,7.7Hz,1H),7.39-7.46(m,2H),7.32-7.36(m,1H),6.73(s,1H),6.00-6.13(m,2H),5.98(s,1H),5.89(d,J AB =14.3Hz,1H),5.65(d,J AB =14.3Hz,1H),4.58(dt,J=2.3,12.4Hz,1H),4.49(d,J AB =10.5Hz,1H),4.40(d,J AB =10.5Hz,1H),4.08-4.22(m, 4H),3.95-4.05(m,2H),3.75-3.82(m,1H),3.03(td,J=2.0,11.5Hz,1H),2.73-2.79(m,1H),2.61(s,3H),2.00(dd,J=2.4,13.6Hz,1H),1.90(dd,J=2.1,13.7Hz,1H),1.67-1.74(m,2H),1.31(s,3H),1.24(s,9H),1.18(t,J=7.1Hz,3H)。LCMS(M+H)=644.6。此混雜有少量異構體。
實例5
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,28-二甲基-22,27-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜六環[26.2.2.1 6 , 9 .1 11 , 14 .0 2 , 7 .0 15 , 20 ]三十四碳-2,4,6(34),8,12,14(33),15(20),16,18-九烯-3-基}乙酸：異構體混合物/未反應之sm(0.0285g，0.044mmol)及10% Pd/C(4.71mg，4.43μmol)於1：1 MeOH/EtOAc(10mL)中之混合物留在氣球氫氣壓力下6小時。接著，過濾且濃縮，獲得黃色糊狀物，其未經純化即用於下一步驟中。
使上述材料及1M NaOH(0.2mL)於MeOH(2mL)中之溶液回流2小時。接著，冷卻且藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之羧酸(0.0098g，0.015mmol，34.0%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 8.32(s,1H),7.98(dd,J=1.0,7.8Hz,1H),7.42(dt,J=1.6,7.5Hz,1H),7.37-7.40(m,1H),7.31-7.35(m,1H),6.73(s,1H),5.91(br.s.,1H),5.87(d,J AB =14.3Hz,1H),5.66(d,J AB =14.3Hz,1H),4.54-4.61(m,1H),4.43(d,J AB =10.2Hz,1H),4.36(d,J AB =10.2Hz,1H),3.82(t,J=11.4Hz,1H),3.59-3.71(m,2H),3.49(td,J=5.3,8.7Hz,1H),3.34-3.40(m,1H),3.22(d,J=10.1Hz,1H),2.73(d,J=11.2Hz,1H),2.60(s,3H),1.90-1.99(m,3H),1.73-1.82(m,3H),1.58-1.67(m,2H),1.26(s,12H)。LCMS (M+H)=618.6。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(3-羥基苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在室溫下，向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(疊氮基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.070g，0.140mmol)、3-乙炔基苯酚(0.083g，0.701mmol)及DIEA(0.122mL，0.701mmol)於THF(5mL)中之經攪拌澄清黃色溶液中添加CuI(0.053g，0.280mmol)。28小時後，反應混合物用Et2O(50mL)稀釋，用水(2×10mL)、鹽水(10mL)洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾且濃縮，獲得黃色油狀物，其藉由製備型HPLC純化獲得呈灰白色固體狀之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(3-羥基苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.0528g，0.085mmol，61.0%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.75-7.99(m,2H),7.52(t,J=1.8Hz,1H),7.22-7.30(m,2H),6.84-6.89(m,1H),6.51(s,1H),5.97-6.07(m,1H),5.86(br.s.,1H),5.78(s,2H),5.44(d,J=16.7Hz,1H),5.19(dd,J=1.6,10.4Hz,1H),4.14-4.29(m,2H),4.00(d,J=4.7Hz,2H),2.62(s,3H),1.82-2.03(m,3H),1.65-1.73(m,1H),1.31(s,3H),1.24(t,J=7.1Hz,3H),1.23(s,9H)。LCMS(M+H)=618.6。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(3-(烯丙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在60℃下加熱(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(3-羥基苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.0525g，0.085mmol)、K2CO3(0.047g，0.340mmol)及烯丙基溴(0.074mL，0.850mmol)於DMF(3mL)中之混合物24小時。接著，冷卻且製備型HPLC純化獲得呈無色糊狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(3-(烯丙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.0184g，0.028mmol，32.9%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.90(s,1H),7.46(dd,J=1.5,2.4Hz,1H),7.35-7.38(m,1H),7.29-7.34(m,1H),6.90(ddd,J=1.0,2.6,8.1Hz,1H),6.51(s,1H),5.98-6.14(m,2H),5.88(br.s.,1H),5.79(s,2H),5.45(qd,J=1.6,17.2Hz,2H),5.31(qd,J=1.4,10.4Hz,1H),5.20(qd,J=1.6,10.4Hz,1H),4.62(td,J=1.5,5.3Hz,2H),4.14-4.28(m,2H),4.00(d,J=5.0Hz,2H),2.70-3.90(m,3H),2.61(s,3H),1.85-2.03(m,3H),1.64-1.74(m,2H),1.31(s,3H),1.25(t,J=7.1Hz,3H),1.24(s,9H)。LCMS(M+H)=658.6。
實例6
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,26-二甲基-20,25-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜六環[24.2.2.1 6 , 9 .1 11 , 14 .1 15 , 19 .0 2 , 7 ]三十三碳-2,4,6(33),8,12,14(32),15(31),16,18-九烯-3-基}乙酸：在70℃下向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(3-(烯丙氧基)苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.018g，0.027mmol)於1,2-二氯乙烷(15mL)中之經攪拌溶液中一次性添加Hoveyda-Grubbs第2代催化劑(0.857mg，1.368μmol)，且回流2小時。接著，冷卻，添加10% Pd/C(2.91mg，2.74μmol)且在氣球H2氛圍下攪拌5小時。接著，過濾，濃縮且深色殘餘物與含NaOH(0.137mL，0.137mmol)之MeOH(2mL)一起回流6小時。接著，冷卻且藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之所要產物(0.0064g，10.18μmol，37.2%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 8.44(s,1H),7.77(d,J=7.6Hz,1H),7.38(t,J=8.0Hz,1H),7.16-7.20(m,1H),6.90-6.95(m,1H),6.61(s,1H),5.73-5.87(m,3H),4.24-4.37(m,2H),4.16-4.23(m,1H),3.73(t,J=11.4Hz,1H),3.49-3.59(m,3H),3.03(d,J=11.8Hz,1H),2.59(s,3H),1.88-2.04(m,4H),1.74-1.82(m,2H),1.52-1.72(m,2H),1.26(s,3H),1.25(s,9H)。LCMS(M+H)=604.6。
1-(烯丙氧基)-1-乙炔基環己烷：使1-乙炔基環己醇(2.28g，18.36mmol)於DMF(25ml)中之溶液冷卻(0℃冰浴)且用60% NaH(0.890g， 22.25mmol)處理。攪拌反應物30分鐘，接著升溫至室溫且攪拌1小時。經5分鐘向其中添加烯丙基溴(4.8mL，55.5mmol)且繼續攪拌16小時。反應物用Et2O(75mL)稀釋，用水(4×50mL)、鹽水(50mL)洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾且濃縮，獲得呈淺黃色移動油狀物之產物1-(烯丙氧基)-1-乙炔基環己烷(2.873g，12.24mmol，66.7%產率)。1H NMR與預期產物相符，由約3：1產物/SM組成。未經進一步純化即原樣使用1H NMR(CDCl3)δ：5.94-6.04(m,1H),5.33(dq,J=17.2,1.7Hz,1H),5.17(dq,J=10.3,1.5Hz,1H),4.15(dt,J=5.6,1.5Hz,2H),2.50(s,1H),2.49(s,1H),1.91-1.98(m,3H),1.49-1.77(m,12H),1.24-1.38(m,3H)。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(1-(烯丙氧基)環己基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在室溫下攪拌(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(疊氮基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.06g，0.120mmol)、1-(烯丙氧基)-1-乙炔基環己烷(0.039g，0.240mmol)、Cu(II)SO4˙5H2O(3.00mg，0.012mmol)及(+)-L-抗壞血酸鈉(0.024g，0.120mmol)於MeOH(2mL)中之混合物16小時。接著，藉由製備型HPLC純化獲得呈淺黃色糊狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(1-(烯丙氧基)環己基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.0287g，0.043mmol，36.0%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.56(s,1H),6.41(s,1H),5.99-6.08(m,1H),5.90(br.s.,1H),5.82(tdd, J=5.3,10.5,17.2Hz,1H),5.73(s,2H),5.47(d,J=16.4Hz,1H),5.17-5.23(m,2H),5.01-5.06(m,1H),4.12-4.28(m,2H),4.00-4.03(m,2H),3.74(td,J=1.5,5.4Hz,2H),2.61(s,3H),1.90-2.06(m,6H),1.67-1.75(m,4H),1.54-1.61(m,1H),1.44-1.52(m,2H),1.35(s,3H),1.23-1.25(m,12H)。LCMS(M+H)=664.7。
實例7
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4',22'-二甲基-16',21'-二氧雜-1'5'7',8',11',12',13'-七氮雜螺[環己烷-1,15'-五環[20.2.2.1 6 , 9 .1 11 , 14 .0 2 , 7 ]二十八烷]-2',4',6'(28'),8',12',14'(27'),18'-七烯-3'-基]乙酸：在70℃下，向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((4-(1-(烯丙氧基)環己基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.0285g，0.043mmol)於1,2-二氯乙烷(10mL)中之經攪拌溶液中添加Hoveyda-Grubbs第2代催化劑(1.345mg，2.147μmol)且回流2小時。接著，濃縮且經使用EtOAc之矽膠塞過濾褐色糊狀物且濃縮獲得呈黃色糊狀物之巨環酯，其未經純化即用於下一步驟中。
使上述粗酯及1M NaOH(0.129mL，0.129mmol)於MeOH(2mL)中之溶液回流2小時。接著，冷卻且藉由製備型HPLC純化獲得單一產物(0.0084g，0.013mmol，30.6%產率)及異構體混合物(0.0063g，10.37μmol，24.15%產率)。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4',22'-二甲基-16',21'-二氧雜-1',5',7',8',11',12',13'-七氮雜螺[環己烷-1,15'-五環[20.2.2.1 6 , 9 .1 11 , 14 .0 2 , 7 ]二十八烷]-2',4',6'(28'),8',12',14'(27'),19'-七烯-3'-基]乙酸：單一異構 體：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.80(s,1H),6.60(s,1H),6.20(d,J=6.5Hz,1H),5.80(s,1H),5.72(d,J=2.8Hz,2H),4.47(q,J=7.3Hz,1H),4.14-4.25(m,1H),3.52(d,J=8.0Hz,2H),3.27-3.35(m,2H),3.02(d,J=11.3Hz,1H),2.57(s,3H),2.44-2.54(m,1H),2.29-2.40(m,1H),1.94-2.03(m,6H),1.48-1.79(m,8H),1.33(s,3H),1.25(s,9H)。LCMS(M+H)=608.7。
實例8
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4',22'-二甲基-16',21'-二氧雜-1',5',7',8',11',12'13'-七氮雜螺[環己烷-1,15'-五環[20.2.2.1 6 , 9 .1 11 , 14 .0 2 , 7 ]二十八烷]-2',4',6'(28'),8',12',14'(27')-六烯-3'-基}乙酸：將異構體(0.0063g，10.37μmol)及10% Pd/C(1.103mg，1.037μmol)於EtOAc(5mL)中之混合物抽成真空且在氣球氛圍下保持24小時。接著，經矽藻土栓塞過濾，濃縮且藉由製備型HPLC純化獲得呈固體狀之產物(0.0039g，6.33μmol，61.1%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.86(s,1H),6.64(s,1H),5.97(br.s.,1H),5.72(s,2H),4.50(dt,J=2.2,12.4Hz,1H),3.82(t,J=11.4Hz,1H),3.54(td,J=5.9,8.8Hz,1H),3.31-3.43(m,4H),2.81(d,J=11.7Hz,1H),2.63(s,3H),1.92-2.09(m,4H),1.85-1.91(m,2H),1.48-1.78(m,12H),1.31(s,9H),1.27(s,3H)。LCMS(M+H)=610.7。
3-(烯丙氧基)-4-甲基戊-1-炔：4-甲基戊-1-炔-3-醇(2.00g，20.38 mmol)於DMF(30ml)中之溶液冷卻(0℃冰浴)且用60% NaH(0.992g，24.80mmol)處理。攪拌反應物20分鐘，接著升溫至室溫且攪拌1小時。經5分鐘向其中添加烯丙基溴(5.3mL，61.2mmol)。攪拌反應物過週末。反應物用Et2O(100mL)稀釋，用水(4×25mL)、鹽水(25mL)洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾且濃縮，獲得呈淺黃色移動油狀物之產物3-(烯丙氧基)-4-甲基戊-1-炔(2.401g，13.03mmol，63.9%產率)。1H NMR與預期產物相符；含有約4：1產物/SM。未經進一步純化即原樣使用。1H NMR(CDCl3)δ：5.86-5.99(m,1H),5.32(dq,J=17.2,1.7Hz,1H),5.16-5.25(m,1H),4.28(ddt,J=12.7,5.0,1.6Hz,1H),4.19(td,J=5.7,2.1Hz,1H),3.98(ddt,J=12.7,6.3,1.3Hz,1H),3.87(dd,J=5.8,2.0Hz,1H),2.41(d,J=2.0Hz,1H),1.92-2.03(m,1H),0.98-1.06(m,8H)。
(2S)-2-(2-((4-(1-(烯丙氧基)-2-甲基丙基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在室溫下攪拌(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(疊氮基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.15g，0.300mmol)、3-(烯丙氧基)-4-甲基戊-1-炔(0.083g，0.600mmol)、Cu(II)SO4˙5H2O(7.50mg，0.030mmol)及(+)-L-抗壞血酸鈉(0.059g，0.300mmol)於MeOH(2mL)中之混合物1小時。接著，藉由製備型HPLC純化獲得呈淺黃色糊狀物之(2S)-2-(2-((4-(1-(烯丙氧基)-2-甲基丙基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基) 乙酸乙酯(0.0761g，0.119mmol，39.7%產率)。LCMS(M+H)=638.7。
實例9
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,22-二甲基-15-(丙烷-2-基)-16,21-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜五環[20.2.2.1 6 , 9 .1 11 , 14 .0 2 , 7 ]二十八碳-2,4,6(28),8,12,14(27),18-七烯-3-基]乙酸：在70℃下向(2S)-2-(2-((4-(1-(烯丙氧基)-2-甲基丙基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.076g，0.119mmol)於1,2-二氯乙烷(30mL)中之經攪拌溶液中添加Hoveyda-Grubbs第2代催化劑(3.73mg，5.96μmol)且回流2.5小時。接著，濃縮且經使用EtOAc之矽膠塞過濾褐色糊狀物且濃縮獲得呈黃色糊狀物之巨環酯，其未經純化即用於下一步驟中。
使上述粗產物酯及NaOH(0.477mL，0.477mmol)於MeOH(4mL)中之溶液回流2小時。接著，冷卻且藉由製備型HPLC純化。合併全部前部峰且濃縮獲得異構體混合物(0.0531g，0.091mmol，77%產率)且濃縮最後峰獲得呈白色固體狀之單一產物(0.008g，0.014mmol，11.43%產率)。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,22-二甲基-15-(丙烷-2-基)-16,21-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜五環[20.2.2.1 6 , 9 .1 11 , 14 .0 2 , 7 ]二十八碳-2,4,6(28),8,12,14(27),19-七烯-3-基]乙酸：1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.89(s,1H),6.63(s,1H),6.24(d,J=6.0Hz,1H),5.82(d,J AB =15.5Hz,1H),5.79(br.s.,1H),5.59(d,J AB =15.5Hz,1H),4.50(q,J=7.4Hz,1H),4.33(d,J=5.4Hz,1H),4.26-4.32(m,1H),3.47-3.55(m,2H),3.32- 3.43(m,2H),3.06(d,J=11.8Hz,1H),2.54-2.65(m,1H),2.58(s,3H),2.28-2.37(m,1H),2.11-2.19(m,1H),2.07(d,J=13.4Hz,1H),1.97(d,J=13.6Hz,1H),1.63-1.77(m,2H),1.33(s,3H),1.26(s,9H),0.97(d,J=6.8Hz,3H),0.95(d,J=6.8Hz,3H)。LCMS(M+H)=582.6。
實例10及11
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,22-二甲基-15-(丙烷-2-基)-16,21-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜五環[20.2.2.1 6 , 9 .1 11 , 14 .0 2 , 7 ]二十八碳-2,4,6(28),8,12,14(27)-六烯-3-基]乙酸：將異構體(0.053g，0.091mmol)及10% Pd/C(9.70mg，9.11μmol)於EtOAc/MeOH(9：1，10mL)中之混合物抽成真空且在氣球H2壓力下攪拌18小時。接著，過濾，濃縮且藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之兩種非對映異構體非對映異構體1(0.0135g，0.022mmol，24.62%產率)及非對映異構體2(0.0168g，0.028mmol，30.6%產率)。
非對映異構體1：1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.86(s,1H),6.61(s,1H),5.95(br.s.,1H),5.71-5.80(m,2H),4.29-4.37(m,2H),3.77(t,J=11.9Hz,1H),3.63(t,J=7.0Hz,1H),3.30-3.51(m,4H),2.82(d,J=11.7Hz,1H),2.62(s,3H),1.95-2.05(m,2H),1.87(d,J=13.2Hz,1H),1.50-1.77(m,8H),1.29(s,9H),1.25(s,3H),0.85-0.91(m,6H)。LCMS(M+H)=584.6。
非對映異構體2：1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 8.16(s,1H),6.64(s,1H),5.93(br.s.,1H),5.75-5.80(m,1H),5.63-5.69(m,1H),4.35-4.45(m,2H),3.85(t,J=11.6Hz,1H),3.69(dt,J=5.1,8.6Hz,1H),3.59-3.65(m,1H),3.48(dt,J=3.5,9.0Hz,1H),3.23-3.36(m,2H),2.73 (d,J=11.4Hz,1H),2.63(s,3H),2.02-2.10(m,2H),1.82-1.91(m,2H),1.55-1.76(m,5H),1.28(s,9H),1.27(br.s.,3H),0.93(d,J=6.8Hz,3H),0.83(d,J=6.8Hz,3H)。LCMS(M+H)=584.6。
3-(烯丙氧基)-5-甲基己-1-炔：5-甲基己-1-炔-3-醇(2.11g，18.81mmol)於DMF(30ml)中之溶液冷卻(0℃冰浴)且用60% NaH(0.903g，22.57mmol)處理。攪拌反應物20分鐘，接著升溫至室溫且攪拌1小時。經5分鐘向其中添加烯丙基溴(4.9mL，56.6mmol)。攪拌反應物隔夜。反應物用Et2O(100mL)稀釋，用水(4×25mL)、鹽水(25mL)洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾且濃縮，獲得呈黃色移動油狀物之產物3-(烯丙氧基)-5-甲基己-1-炔(2.83g，13.94mmol，74.1%產率)。1H NMR與預期產物相符，含有約4：1產物/SM。未經進一步純化即原樣使用。1H NMR(CDCl3)δ：5.89-6.00(m,1H),5.34(dq,J=17.2,1.6Hz,1H),5.22(dq,J=10.3,1.4Hz,1H),4.29(ddt,J=12.6,5.1,1.5Hz,1H),4.14(ddd,J=7.6,6.7,2.0Hz,1H),3.99(ddt,J=12.6,6.3,1.3Hz,1H),2.44(d,J=2.0Hz,1H),1.90(dsxt,J=13.5,6.8Hz,1H),1.64-1.80(m,2H),1.56-1.64(m,2H),0.95(d,J=4.6Hz,3H),0.94(d,J=4.6Hz,3H)。
(2S)-2-(2-((4-(1-(烯丙氧基)-3-甲基丁基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在室溫下攪拌(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(疊氮基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第 三丁氧基)乙酸乙酯(0.179g，0.358mmol)、3-(烯丙氧基)-5-甲基己-1-炔(0.109g，0.717mmol)、Cu(II)SO4˙5H2O(8.95mg，0.036mmol)及(+)-L-抗壞血酸鈉(0.071g，0.358mmol)於MeOH(2mL)中之混合物1小時。接著，藉由製備型HPLC純化獲得呈淺黃色糊狀物之(2S)-2-(2-((4-(1-(烯丙氧基)-3-甲基丁基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.0921g，0.141mmol，39.4%產率)。LCMS(M+H)=652.7。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,22-二甲基-15-(2-甲基丙基)-16,21-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜五環[20.2.2.1 6 , 9 .1 11 , 14 .0 2 , 7 ]二十八碳-2,4,6(28),8,12,14(27),18-七烯-3-基]乙酸：在70℃下，向(2S)-2-(2-((4-(1-(烯丙氧基)-3-甲基丁基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.080g，0.123mmol)於1,2-二氯乙烷(30mL)中之經攪拌溶液中添加Hoveyda-Grubbs第2代催化劑(3.85mg，6.14μmol)。在75℃下2小時後，經矽膠塞(用10mL EtOAC洗滌)過濾反應混合物，濃縮且未經純化即用於下一步驟中。
使上述粗酯及NaOH(0.491mL，0.491mmol)於MeOH(4mL)中之溶液回流2小時。接著，冷卻且藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之非對映異構體之混合物(0.087g，0.146mmol，119%產率)。LCMS(M+H)=596.7。
實例12及13
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,22-二甲基-15-(2-甲基丙基)-16,21-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜五環[20.2.2.1 6 , 9 .1 11 , 14 .0 2 , 7 ]二十八碳-2,4,6(28),8,12,14(27)-六烯-3-基]乙酸：將上述非對映異構體(0.073g，0.123mmol)及10% Pd/C(0.013g，0.012mmol)於EtOA/MeOH(10mL，9：1)中之混合物抽成真空且留在氣球H2氛圍下15小時。接著，過濾且藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之非對映異構體1(0.0157g，0.025mmol，20.50%產率)及非對映異構體2(0.028g，0.046mmol，37.3%產率)。
非對映異構體1：1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.83(s,1H),6.60(s,1H),5.93(br.s.,1H),5.79(d,J AB =15.5Hz,1H),5.71(d,J AB =15.5Hz,1H),4.64(dd,J=5.0,8.9Hz,1H),4.31(dt,J=2.1,12.4Hz,1H),3.74(t,J=11.5Hz,1H),3.64(dt,J=3.8,8.4Hz,1H),3.51(q,J=7.8Hz,1H),3.34-3.42(m,3H),2.83(d,J=12.0Hz,1H),2.61(s,3H),1.97-2.02(m,1H),1.88(dd,J=2.2,13.6Hz,1H),1.71-1.83(m,3H),1.53-1.69(m,7H),1.28(s,9H),1.24(s,3H),0.94(t,J=6.2Hz,6H)。LCMS(M+H)=598.7。
非對映異構體2：1H NMR(500MHz,CDCL3)δ 8.06(s,1H),6.63(s,1H),5.91(br.s.,1H),5.70(s,2H),4.61(dd,J=4.9,8.7Hz,1H),4.38(t,J=11.6Hz,1H),3.75(t,J=11.5Hz,1H),3.60-3.66(m,1H),3.47-3.59(m,2H),3.25-3.35(m,2H),2.83(d,J=11.5Hz,1H),2.61(s,3H),1.99-2.05(m,1H),1.88(d,J=12.5Hz,1H),1.76-1.85(m,2H),1.59-1.74(m,7H),1.27(s,9H),1.25(br.s.,3H),0.95(d,J=5.5,Hz,3H),0.94(d,J=5.5,Hz,3H)。LCMS(M+H)=598.7。
(S)-2-(2-((2-烯丙基苯甲醯胺基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在室溫下攪拌(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(疊氮基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.10g，0.200mmol)及Ph3P(0.063g，0.240mmol)於9：1 THF/H2O(5mL)中之溶液1小時且在45℃下攪拌4小時。接著，用Et2O(25mL)稀釋且用0.5M HCl(2×5mL)萃取。經合併之水層用飽和Na2CO3中和且用CH2Cl2(2×20mL)萃取。經合併之CH2Cl2層乾燥(MgSO4)，過濾且濃縮，獲得呈黏稠淺黃色油狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(胺基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯，其未經純化即用於隨後步驟。
在室溫下，向2-烯丙基苯甲酸(0.065g，0.400mmol)於含有催化劑DMF之CH2Cl2(5mL)中之經攪拌溶液中添加2M乙二醯氯/DCM(0.400mL，0.801mmol)。1小時後，濃縮且所得殘餘物再溶解於CH2Cl2(3mL)中且在室溫下添加至(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(胺基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯及DIEA(0.105mL，0.600mmol)於CH2Cl2(2mL)中之溶液中。2小時後，反應物用一滴MeOH淬滅，濃縮且製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之(S)-2-(2-((2-烯丙基苯甲醯胺基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.059g，0.096mmol，47.7%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.50(dd,J=1.2,7.7Hz,1H),7.37-7.41(m,1H),7.24-7.30(m,3H),6.46-6.53(m,1H),6.49(s,1H),5.98-6.06(m,1H),5.83-5.98(m, 2H),5.39(dd,J=1.6,17.2Hz,1H),5.14(d,J=9.8Hz,1H),5.06(qd,J=1.5,10.1Hz,1H),5.01(qd,J=1.7,17.2Hz,1H),4.84(d,J=5.4Hz,2H),4.15-4.28(m,2H),3.97(d,J=4.6Hz,2H),3.64(d,J=6.3Hz,2H),2.61(s,3H),1.98(d,J=13.2Hz,1H),1.84-1.94(m,2H),1.70(d,J=9.3Hz,1H),1.31(s,3H),1.21-1.26(m,12H)。LCMS(M+H)=618.5。
實例14
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,24-二甲基-12-側氧基-23-氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[22.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16,20-八烯-3-基]乙酸：在70℃下，向(S)-2-(2-((2-烯丙基苯甲醯胺基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.058g，0.094mmol)於1,2-二氯乙烷(20mL)中之經攪拌溶液中添加Hoveyda-Grubbs第2代催化劑(2.94mg，4.69μmol)且回流2小時。接著，冷卻，濃縮且藉由使用1：1及1：3己烷/EtOAc之急驟層析法純化所得殘餘物獲得(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20E)-4,24-二甲基-12-側氧基-23-氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[22.2.2.16,9.02,7.013,18]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16,20-八烯-3-基]乙酸乙酯。
使上述酯及1M NaOH(0.282mL，0.282mmol)於MeOH(3mL)中之溶液回流4小時。接著，冷卻反應混合物且藉由製備型HPLC純化獲得所要產物(0.0375g，0.067mmol，71.1%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.53(dd,J=1.3,7.7Hz,1H),7.37-7.41(m,1H),7.27-7.31(m,1H),7.25(dd,J=0.8,7.7Hz,1H),6.83(br.s.,1H),6.49(s,1H),6.25-6.33(m,1H),5.97(br.s.,1H),5.57-5.65(m,1H),5.04(dd,J=4.9,16.9 Hz,1H),4.87(dd,J=3.3,16.9Hz,1H),4.51(t,J=11.2Hz,1H),3.89-3.96(m,3H),3.58(d,J=4.9Hz,2H),2.97-3.11(m,2H),2.71-2.94(m,3H),2.65(s,3H),2.58(d,J=11.4Hz,1H),1.93(dt,J=2.2,16.2Hz,2H),1.58-1.71(m,2H),1.31(s,9H),1.27(s,3H)。LCMS(M+H)=562.5。
實例15
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,24-二甲基-12-側氧基-23-氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[22.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸：向烯烴混合物(0.0053g，9.44μmol)於MeOH/EtOAc(1：1；5mL)中之經攪拌溶液中添加10% Pd/C(5mg，4.70μmol)，抽成真空且留在氣球氫氣壓力下5小時。接著，過濾，濃縮且藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之飽和產物(0.001g，1.774μmol，18.80%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.48(dd,J=1.2,7.5Hz,1H),7.33-7.37(m,1H),7.20-7.28(m,2H),6.66(br.s.,1H),6.50(s,1H),5.99(br.s.；1H),4.90-5.01(m,2H),4.49(t,J=12.0Hz,1H),3.82(t,J=11.2Hz,1H),3.44-3.49(m,1H),3.38-3.43(m,1H),3.09(d,J=10.4Hz,1H),3.00(td,J=6.4,13.3Hz,1H),2.88(ddd,J=6.0,8.3,13.8Hz,1H),2.64(s,3H),2.58(d,J=11.0Hz,1H),1.87-2.12(m,4H),1.56-1.76(m,4H),1.31(s,9H),1.23(s,3H)。LCMS(M+H)=564.5。
在20分鐘期間向2-(2-羥基苯基)乙酸(1g，6.57mmol)及KOH (0.42g)於MeOH(10mL)中之溶液中添加烯丙基溴(1.194mL，13.80mmol)且使混合物在回流下沸騰2小時。向混合物中添加額外含KOH(0.42g)之MeOH(8ml)，接著使其在回流下沸騰1小時，倒入水中，且用Et2O洗滌。用10M HCI酸化且用Et2O萃取獲得呈無色固體狀之(380mg，1.977mmol，30.1%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 7.16-7.25(m,2H),6.95(d,J=7.8Hz,1H),6.88(dt,J=0.9,7.4Hz,1H),6.01(tdd,J=4.6,10.7,17.4Hz,1H),5.41(qd,J=1.9,17.3Hz,1H),5.22(qd,J=1.6,10.6Hz,1H),4.55(td,J=1.7,4.7Hz,2H),3.52(s,2H)。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((2-(2-(烯丙氧基)苯基)乙醯胺基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在55℃下攪拌(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(疊氮基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.072g，0.144mmol)及Ph3P(0.057g，0.216mmol)於1：9(H2O/THF，5mL)中之溶液數小時。接著，在冰-水浴中冷卻且添加DIEA(0.076mL，0.432mmol)，隨後添加新鮮製備之酸氯化物(在室溫下向2-(2-(烯丙氧基)苯基)乙酸(0.055g，0.288mmol)於含有催化量之DMF的CH2Cl2(5mL)中之溶液中添加2M乙二醯氯(0.288mL，0.576mmol)。1小時後，濃縮反應物且將殘餘物溶解於CH2Cl2(5mL)中且添加至胺中)。將反應混合物溶解於Et2O(50mL)中，用水(2×10mL)、鹽水(10mL)洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾，濃縮且藉由製備型HPLC純化所得黃色殘餘物獲得呈灰白色固體狀之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((2-(2-(烯丙氧基)苯基)乙醯胺基)甲基)-5-甲基 吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.0559g，0.086mmol，59.9%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.28-7.30(m,1H),7.23-7.27(m,1H),6.96(dt,J=1.0,7.5Hz,1H),6.89(d,J=8.2Hz,1H),6.29(s,1H),6.25(t,J=5.0Hz,1H),5.92-6.06(m,2H),5.88(br.s.,1H),5.44(d,J=17.0Hz,1H),5.33(qd,J=1.6,17.3Hz,1H),5.17-5.21(m,2H),4.60(dd,J=3.8,5.4Hz,2H),4.56(td,J=1.6,5.2Hz,2H),4.13-4.26(m,2H),4.00(d,J=4.9Hz,2H),3.68(s,2H),2.59(s,3H),1.82-2.01(m,3H),1.64-1.72(m,1H),1.34(s,3H),1.21-1.25(m,12H)。LCMS(M+H)=648.7。
實例16
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,26-二甲基-12-側氧基-20,25-二氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 14 , 19 ]三十一碳-2,4,6(31),8,14(19),15,17,22-八烯-3-基]乙酸：在70℃向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((2-(2-(烯丙氧基)苯基)乙醯胺基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.0555g，0.086mmol)於1,2-二氯乙烷(10mL)中之攪拌溶液中添加Hoveyda-Grubbs第2代催化劑(2.68mg，4.28μmol)且回流4小時。注意：2小時及4小時的反應混合物之LCMS看起來類似。接著，冷卻，濃縮且藉由使用1：1及1：3己烷/EtOAc之急驟層析法純化。合併所有含有產物及未反應之sm的溶離份，濃縮且用於下一步驟。
使上述殘餘物及1M NaOH(0.257mL，0.257mmol)於MeOH(3mL)中之溶液回流6小時。接著，冷卻及藉由製備型HPLC純化。含有巨環化合物之溶離份合併及蒸發，獲得異構體混合物(0.016g，0.027 mmol，31.6%產率)白色固體及一種異構體(0.0059g，9.97μmol，11.64%產率)白色固體。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,26-二甲基-12-側氧基-20,25-二氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 14 , 19 ]三十一碳-2,4,6(31),8,14(19),15,17,23-八烯-3-基]乙酸：單一異構體.1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.30(dd,J=1.3,7.5Hz,1H),7.21-7.26(m,1H),6.90-6.96(m,2H),6.78(br.s.,1H),6.44(s,1H),6.36(d,J=6.2Hz,1H),5.94(br.s.,1H),4.47-4.66(m,4H),4.11-4.17(m,2H),3.79(t,J=11.5Hz,1H),3.68(d,J AB =13.7Hz,1H),3.54(d,J AB =13.7Hz,1H),3.33-3.41(m,1H),2.91(q,J=7.4Hz,2H),2.81(d,J=11.8Hz,1H),2.60(s,3H),1.95-2.09(m,3H),1.69-1.83(m,3H),1.43(s,3H),1.29(s,9H)。LCMS(M+H)=592.6。
實例17
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,26-二甲基-12-側氧基-20,25-二氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 14 , 19 ]三十一碳-2,4,6(31),8,14(19),15,17-七烯-3-基}乙酸：巨環異構體(0.016g，0.027mmol)及10% Pd/C(2.88mg，2.70μmol)於9：1 EtOAc/MeOH(10mL)中之混合物留在氣球氫氣氣氛下24小時。接著，過濾，濃縮且藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之產物(0.0107g，0.018mmol，66.6%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.34(dd,J=1.7,7.5Hz,1H),7.24(dt,J=1.7,7.8Hz,1H),6.95(dt,J=1.0,7.5Hz,1H),6.91(d,J=8.4Hz,1H),6.87(t,J=5.4Hz,1H),6.48(s,1H),6.00(br.s.,1H),4.68(dd,J=6.5,15.1Hz,1H),4.58(t,J=11.5Hz,1H),4.44(dd,J=4.7,15.1Hz, 1H),4.10-4.16(m,2H),3.85(t,J=11.4Hz,1H),3.59(d,J=1.6Hz,2H),3.54-3.58(m,1H),3.48(dt,J=4.0,7.9Hz,1H),3.27(d,J=10.3Hz,1H),2.73(d,J=12.0Hz,1H),2.62(s,3H),2.23-2.32(m,1H),2.08-2.17(m,1H),1.98-2.05(m,2H),1.50-1.93(m,4H),1.31(s,9H),1.29(br.s.,3H)。LCMS(M+H)=594.6。
2-((4-氟-3-甲基苯甲基)胺基)-2-側氧基乙酸甲酯：在-18℃(冰-鹽浴)下，經10分鐘向(4-氟-3-甲基苯基)甲烷胺(6.96g，50mmol)及Et3N(10.45mL，75mmol)之經攪拌溶液中添加甲基乙二醯氯(5.10mL，55.0mmol)。攪拌反應混合物2小時同時升溫至室溫。接著，濃縮及將殘餘物溶解於Et2O(200mL)中，用1M HCl(2×50mL)、鹽水(25mL)洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾且濃縮，獲得黃色殘餘物，其靜置時固化。此固體與5% Et2O/己烷(100mL)一起攪拌且過濾獲得呈白色固體狀之2-((4-氟-3-甲基苯甲基)胺基)-2-側氧基乙酸甲酯(9.22g，40.9mmol，82%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.31-7.39(m,1H),7.13-7.16(m,1H),7.08-7.12(m,1H),6.97-7.02(m,1H),4.48(d,J=6.2Hz,2H),3.94(s,3H),2.29(d,J=1.9Hz,3H)。LCMS(M+H)=226.2。
2-(烯丙基(4-氟-3-甲基苯甲基)胺基)-2-側氧基乙酸：在0℃下向2-((4-氟-3-甲基苯甲基)胺基)-2-側氧基乙酸甲酯(1g，4.44mmol)於DMF(20mL)中之經攪拌溶液中添加60% NaH(0.391g，9.77mmol)。30分鐘後，移除冷浴槽，在室溫下攪拌1小時且向所得渾濁反應混合物中添加烯丙基溴(1.921mL，22.20mmol)。15小時後LCMS顯示存在未反 應之sm。因此，在95℃下加熱48小時。接著，用Et2O(150mL)稀釋，用1M HCl(20mL)、水(3×10mL)、鹽水(10mL)洗滌，乾燥(4)，過濾且濃縮獲得褐色油狀物。
向上述油狀物於MeOH(10mL)之溶液中添加1M NaOH(6mL，6.00mmol)，且所得漿液在室溫下攪拌24小時。接著，用水(50mL)稀釋且用Et2O(2×50mL)萃取。丟棄乙醚層且水層用濃HCl酸化且用CH2Cl2(2×50mL)萃取。將經合併之CH2Cl2層乾燥(MgSO4)，過濾且濃縮獲得褐色殘餘物，其藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之2-(烯丙基(4-氟-3-甲基苯甲基)胺基)-2-側氧基乙酸(0.471g，1.875mmol，42.2%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.04-7.11(m,1H),6.85-6.99(m,2H),5.56-5.82(m,1H),4.99-5.16(m,2H),4.34-4.45(m,2H),3.68-3.85(m,2H),2.20(br.s.,3H)。LCMS(M+H)=252.2。
(S)-2-(2-((2-(烯丙基(4-氟-3-甲基苯甲基)胺基)-2-側氧基乙醯胺基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：使(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(疊氮基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.206g，0.412mmol)及Ph3P(0.162g，0.618mmol)於9：1 THF/H2O)(15mL)中之混合物回流2小時。接著，冷卻，用Et2O(50mL)稀釋且用0.1M HCl(3×10mL)萃取。丟棄有機層且經合併之水層用飽和Na2CO3中和且用CH2Cl2(3×10mL)萃取。將經合併之CH2Cl2層乾燥(MgSO4)，過濾且濃縮獲得呈淺黃色糊狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(胺基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.193g，0.408mmol，99%產率)，其未經純 化即用於下一步驟。
在室溫下向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(胺基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.195g，0.412mmol)、2-(烯丙基(4-氟-3-甲基苯甲基)胺基)-2-側氧基乙酸(0.207g，0.824mmol)及DIEA(0.288mL，1.648mmol)於DMF(5mL)中之經攪拌溶液中添加HATU(0.470g，1.236mmol)。17小時後，將反應混合物溶解於Et2O(100mL)中，用1M HCl(5mL)、水(3×10mL)、鹽水(10mL)洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾，濃縮且藉由製備型HPLC純化獲得呈黃色糊狀物之(S)-2-(2-((2-(烯丙基(4-氟-3-甲基苯甲基)胺基)-2-側氧基乙醯胺基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.1145g，0.162mmol，39.3%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.92(d,J=14.8Hz,1H),7.03-7.16(m,2H),6.91-6.99(m,1H),6.42(s,1H),5.69-6.07(m,3H),5.43(d,J=17.3Hz,1H),5.11-5.26(m,3H),5.00(s,1H),4.68(t,J=5.4Hz,2H),4.54(s,1H),4.38(d,J=5.8Hz,1H),4.12-4.27(m,3H),3.95-4.05(m,3H),3.92(d,J=6.0Hz,1H),2.59(s,3H),2.26(d,J=1.76Hz,3H),1.81-2.03(m,3H),1.72(td,J=2.6,7.0Hz,1H),1.34(s,3H),1.20-1.25(m,12H)。LCMS(M+H)=707.7。
實例18
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[14-[(4-氟-3-甲基苯基)甲基]-4,20-二甲基-12,13-二側氧基-19-氧雜-1,5,7,8,11,14-六氮雜四環[18.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 ]二十五碳-2,4,6(25),8,16-五烯-3-基]乙酸：在70℃下向(S)-2-(2-((2-(烯丙 基(4-氟-3-甲基苯甲基)胺基)-2-側氧基乙醯胺基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.114g，0.161mmol)於1,2-二氯乙烷(40mL)中之經攪拌溶液中一次性添加Hoveyda-Grubbs第2代催化劑(5.05mg，8.06μmol)且回流2小時。接著，冷卻，濃縮且使深色殘餘物通過使用EtOAc之矽膠塞。濃縮濾液且所得殘餘物未經純化即用於下一步驟。
使上述粗酯及NaOH(0.484mL，0.484mmol)於MeOH(5mL)中之溶液回流2小時。接著，冷卻且藉由製備型HPLC純化獲得呈灰白色固體狀之所要產物(0.0671g，0.102mmol，63.3%產率)。1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δ 7.22(dd,J=1.7,7.3Hz,1H),7.14-7.19(m,1H),7.00-7.05(m,1H),6.48(s,1H),6.26(td,J=6.9,15.3Hz,1H),6.07(s,1H),5.88(td,J=3.0,15.5Hz,1H),4.58-4.73(m,3H),4.42-4.56(m,1H),3.94-4.14(m,4H),3.87(t,J=11.5Hz,1H),3.35-3.39(m,1H),3.27-3.31(m,1H),3.14-3.20(m,1H),2.71(d,J=11.5Hz,1H),2.64(s,3H),2.29(d,J=1.7Hz,3H),1.94-2.00(m,2H),1.72-1.93(m,3H),1.33(s,3H),1.29(s,9H)。LCMS(M+H)=651.6。
實例19
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{14-[(4-氟-3-甲基苯基)甲基]-4,20-二甲基-12,13-二側氧基-19-氧雜-1,5,7,8,11,14-六氮雜四環[18.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 ]二十五碳-2,4,6(25),8-四烯-3-基}乙酸：在氣球氫氣氛圍下攪拌烯烴(0.037g，0.057mmol)及10% Pd/C(6.05mg，5.69μmol)於EtOAc(10mL)中之混合物12小時。接著，經矽藻土栓過濾且濃縮獲得呈白色固 體狀之所要產物(0.0295g，0.044mmol，77%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.56(t,J=4.2Hz,0.3H),7.20-7.25(m,1H),7.14-7.18(m,0.3H),7.11(d,J=7.4Hz,0.7H),7.07-7.09(m,0.7H),6.94-6.99(m,1H),6.46(s,0.7H),6.42(s,0.3H),5.98(br.s.,1H),4.87-4.97(m,1H),4.35-4.80(m,3H),3.65-3.96(m,3H),3.32-3.48(m,3H),3.11-3.28(m,1H),2.63(s,2H),2.62(s,1H),2.60-2.66(m,1H),2.28(s,3H),1.88-1.93(m,3H),1.57-1.80(m,5H),1.31(s,9H),1.29(s,3H)。LCMS(M+H)=653.7。藉由HNMR，此化合物為旋轉異構體之7：3混合物。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((2-烯丙基苯氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃下，向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.190g，0.320mmol)、2-烯丙基苯酚(0.084mL，0.641mmol)及Ph3P(0.126g，0.480mmol)於THF(5mL)中之經攪拌溶液中添加DEAD(0.101mL，0.641mmol)。使反應物經3小時緩慢升溫至室溫，且在室溫下1小時後，用Et2O(50mL)稀釋，用水(2×10mL)、鹽水(10mL)洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾，濃縮且藉由使用10%及20% EtOAc/己烷之急驟層析法純化所得黃色殘餘物獲得呈無色糊狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((2-烯丙基苯氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.0374g，0.063mmol，19.77%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.17-7.23(m,2H),7.08(d,J=7.9Hz,1H),6.94(t,J=7.4Hz,1H),6.63(s,1H),6.00-6.10(m,2H),5.88-5.98(m,1H),5.44-5.55(m,1H),5.31(s,2H),5.22(dd,J=1.3,10.4 Hz,1H),4.15-4.27(m,2H),4.00-4.06(m,2H),3.47(d,J=6.5Hz,2H),2.62(s,3H),1.88-2.06(m,3H),1.68-1.77(m,2H),1.37(br.s.,3H),1.21-1.28(m,12H)。LCMS(M+H)=591.6。
實例20、21及22
在70℃下，向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((2-烯丙基苯氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.037g，0.063mmol)於1,2-二氯乙烷(20mL)中之經攪拌溶液中添加Hoveyda-Grubbs第2代催化劑(3.92mg，6.26μmol)且回流2小時。接著，冷卻，濃縮且使含所得殘餘物及1M NaOH(0.188mL，0.188mmol)之MeOH(3mL)回流5小時。冷卻反應混合物且藉由製備型HPLC純化獲得三種巨環羧酸。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(18Z)-4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 12 , 17 ]二十八碳-2,4,6(28),8,12(17),13,15,18-八烯-3-基]乙酸：(0.0045g，8.00μmol，12.77%產率)，白色固體，混雜有其他異構體；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.32(dd,J=1.7,7.7Hz,1H),7.12-7.16(m,1H),7.03(dd,J=0.8,8.2Hz,1H),6.89-6.93(m,3H),6.48(s,1H),5.93-6.05(br.s.,1H),5.44-5.52(m,2H),4.79(t,J=11.4Hz,1H),3.99-4.06(m,1H),3.61-3.66(m,2H),3.00-3.06(m,1H),2.63(s,3H),2.54-2.62(m,3H),1.93-2.00(m,2H),1.65(tt,J=5.1,13.3Hz,3H),1.31(s,9H),1.29(s,3H)。LCMS(M+H)=535.5。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20Z)-4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 12 , 17 ]二十八碳- 2,4,6(28),8,12(17),13,15,20-八烯-3-基]乙酸：(0.0043g，7.64μmol，12.20%產率)，白色固體，混雜有其他異構體；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.19(dd,J=1.7,7.5Hz,1H),7.03-7.07(m,1H),6.90(dt,J=1.0,7.4Hz,1H),6.72(d,J=8.2Hz,1H),6.54(s,1H),6.19(d,J=12.0Hz,1H),5.84-5.96(m,1H),5.48-5.53(m,1H),5.39(d,J AB =12.9Hz,1H),5.26(d,J AB =12.9Hz,1H),4.57-4.64(m,1H),4.21(t,J=11.0Hz,1H),3.10(d,J=8.2Hz,1H),2.93(ddd,J=2.7,10.0,13.0Hz,1H),2.74(ddd,J=2.5,7.7,13.0Hz,1H),2.67(s,3H),2.31-2.37(m,2H),1.82-1.90(m,2H),1.70(dt,J=4.8,13.1Hz,2H),1.57(dt,J=4.6,13.4Hz,2H),1.31(s,9H),1.28(br.s.,3H)。LCMS(M+H)=535.5。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(19Z)-4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 12 , 17 ]二十八碳-2,4,6(28),8,12(17),13,15,19-八烯-3-基]乙酸：(0.0161g，0.029mmol，45.7%產率)，白色固體；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.21(dd,J=1.7,7.3Hz,1H),7.16(dt,J=1.7,7.8Hz,1H),6.91(dt,J=1.0,7.4Hz,1H),6.87(d,J=8.0Hz,1H),6.52(s,1H),6.18(d,J=6.3Hz,1H),5.98(br.s.,1H),5.36(s,2H),4.62(t,J=11.2Hz,1H),4.55(q,J=6.4Hz,1H),3.98(t,J=10.9Hz,1H),3.01-3.09(m,1H),2.81-2.94(m,2H),2.69-2.74(m,1H),2.67(s,3H),2.55-2.63(m,2H),2.07-2.14(m,2H),1.98(dd,J=2.2,13.9Hz,1H),1.93(dd,J=2.3,13.6Hz,1H),1.66-1.75(m,2H),1.38(s,3H),1.32(s,9H)。LCMS(M+H)=535.5。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((2-溴苯甲基)氧基) 甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸甲酯：向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.500g，1.054mmol)及1-溴-2-(溴甲基)苯(0.527g，2.107mmol)於DMF(2mL)中之溶液中添加氫化鈉(0.126g，3.16mmol)且在室溫下攪拌混合物。30分鐘後，反應物用水淬滅且用EtOAc(3×)萃取獲得乙酯產物。將經合併之有機萃取物乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(biotage；0%-50% EtOAc/己烷，20 CV)純化殘餘物獲得乙酯標題化合物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.64-7.48(m,2H),7.33(td,J=7.5,1.1Hz,1H),7.16(td,J=7.7,1.7Hz,1H),6.61(s,1H),6.11-5.83(m,2H),5.46(d,J=16.9Hz,1H),5.20(dd,J=10.5,1.7Hz,1H),4.84(s,2H),4.74(s,2H),4.33-4.10(m,2H),4.02(d,J=4.9Hz,2H),2.69-2.49(m,3H),2.06-1.67(m,4H),1.39-1.20(m,15H)。未見4個哌啶質子。C32H44BrN4O5之LCMS(M+H)計算值：645.24；實驗值：645.0。
水相用濃HCl酸化，且用EtOAc萃取。經合併之EtOAc萃取物乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮，獲得羧酸。羧酸殘餘物溶解於1mL MeOH中且用2M三甲基矽烷基重氮甲烷(0.527mL，1.054mmol)處理。在室溫下攪拌1小時後，濃縮混合物且藉由急驟層析法(biotage；0%-50% EtOAc/己烷，20 CV)純化殘餘物獲得甲酯。組合甲酯與乙酯產物獲得呈無色油狀物之標題化合物(0.36g，0.559mmol，53.1%產率)，甲酯為主要產物。C31H42BrN4O5之LCMS(M+H)計算值：630.22；實驗值：631.3。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十八碳-2,4,6(28),8,13(18),14,16,19-八烯-3-基]乙酸甲酯：在壓力試管中向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((2-溴苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸甲酯(0.025g，0.040mmol)於乙腈(1ml)中之溶液中添加Et3N(0.055mL，0.397mmol)、三苯膦(3.12mg，0.012mmol)及參(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)(3.64mg，3.97μmol)。密封試管且在120℃下攪拌混合物。18小時後，冷卻及濃縮深色混合物。藉由急驟層析法(Biotage；0%-60% EtOAc/己烷；20 CV)純化褐色殘餘物獲得呈淺黃色油狀物之順式及反式異構體混合物形式的標題化合物(16.9mg，0.031mmol，78%產率)。C31H41N4O5之LCMS(M+H)計算值：549.30；實驗值：549.4。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十八碳-2,4,6(28),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸甲酯：向反應物(中間物2)(16.9mg，0.031mmol)於MeOH(1mL)中之溶液中添加鈀/碳(3.28mg，3.08μmol)。混合物用氫氣沖洗，接著在氫氣氣球下攪拌。1.5小時後，經用MeOH沖洗之矽藻土過濾混合物，接著濃縮獲得標題化合物。C31H42N4O5之LCMS(M+H)計算值：551.34；實驗值：551.4。
實例23
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十八碳-2,4,6(28),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸：向反應物(中間物3)(17.07mg，0.031mmol)於二噁烷(1mL)/MeOH(1mL)中之溶液中添加10N氫氧化鈉(0.031mL，0.310mmol)且在70℃下攪拌混合物1小時。將混合物冷卻且濃縮。粗物質經製備型HPLC純化獲得標題化合物(0.9mg，5.14%產率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ 7.46(d,J=7.0Hz,1H),7.33-7.14(m,3H),6.41(s,1H),6.10(s,1H),5.07(s,1H),5.02-4.94(m,1H),4.69(s,2H),4.04(t,J=10.9Hz,1H),3.61(t,J=4.8Hz,2H),3.27-3.03(m,3H),2.75-2.55(m,4H),2.20-1.60(m,7H),1.38-1.25(m,12H)。C30H41N4O5之LCMS(M+H)計算值：537.30；實驗值：537.3。
(S)-2-(2-(((2-烯丙基苯甲基)氧基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.10g，0.211mmol)及1-烯丙基-2-(溴甲基)苯(0.089g，0.421mmol)於DMF(0.5mL)中之溶液中添加氫化鈉(0.025g，0.632mmol)且在室溫下攪拌混合物。30分鐘後，反應物用水淬滅且用EtOAc(3×)萃取獲得乙酯產物。水相用濃HCl酸化且用EtOAc萃取獲得羧酸中間物。分別對兩種有機溶液進行 乾燥(Na2SO4)、過濾及濃縮。藉由急驟層析法(biotage；0%-50% EtOAc/己烷，20 CV)純化乙酯殘餘物獲得乙酯標題化合物。將羧酸殘餘物溶解於1mL MeOH中且用三甲基矽烷基重氮甲烷(0.105mL，0.211mmol)處理。在室溫下攪拌1小時後，濃縮混合物且藉由急驟層析法(biotage；0%-50% EtOAc/己烷，20 CV)純化殘餘物獲得甲酯標題化合物。組合甲酯及乙酯產物獲得甲酯與乙酯混合物形式之標題化合物59.1mg(46.8%產率)，乙酯為主要產物。對於乙酯：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.50-7.36(m,1H),7.32-7.06(m,3H),6.58(s,1H),6.13-5.83(m,3H),5.46(d,J=16.9Hz,1H),5.20(dd,J=10.5,1.7Hz,1H),5.09-4.93(m,2H),4.76(s,2H),4.67(s,2H),4.32-4.11(m,2H),4.02(d,J=4.9Hz,2H),3.48(d,J=6.4Hz,3H),2.62(s,3H),2.04-1.60(m,4H),1.43-1.28(m,4H),1.26-1.18(m,12H)。C35H49N4O5之LCMS(M+H)計算值：605.37；實驗值：605.4。對於甲酯：C35H49N4O5之LCMS(M+H)計算值：605.37；實驗值：605.4。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16,20-八烯-3-基]乙酸乙酯：將(S)-2-(2-(((2-烯丙基苯甲基)氧基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.059g，0.098mmol)及碘化銅(I)(0.019g，0.098mmol)於DCE(70.0ml)中之溶液加熱至70℃。向其中添加Hoveyda-Grubbs第2代催化劑(0.012g，19.6μmol)且在70℃下攪拌混合物兩小時，接著冷卻至室溫隔夜。濃縮混合物且藉由急驟層析法(Biotage；0%-50% EtOAc/己烷；20 CV)純化獲得呈順式/反式異構體混合物形式之標題化合物(0.0429g，0.074mmol，76%產率)。C33H45N4O5之LCMS(M+H)計算值577.33；實驗值577.2。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯：向反應物(中間物5)(19.3mg，0.033mmol)於MeOH(1mL)中之溶液中添加鈀/碳(3.56mg，3.35μmol)。混合物用氫氣沖洗，接著在氫氣氣球下攪拌。1.5小時後，混合物與矽藻土一起攪拌10分鐘，接著經矽藻土過濾且濃縮獲得標題化合物。C33H47N4O5之LCMS(M+H)計算值：579.35；實驗值：579.4。
實例24
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸：向反應物(中間物6)(17.36mg，0.030mmol)於二噁烷(1mL)/MeOH(1mL)中之溶液中添加10N氫氧化鈉(0.030mL，0.300mmol)且在80℃下攪拌混合物1小時。將混合物冷卻且濃縮。粗物質經製備型HPLC純化獲得標題化合物(6.0mg，10.68μmol，35.6%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.37(d,J=7.3Hz,1H),7.26-7.10(m,3H),6.54(s,1H),5.92(s,1H),4.92-4.80(m,2H),4.76(d, J=12.2Hz,1H),4.62(d,J=12.5Hz,1H),4.48(t,J=13.0Hz,1H),3.69(t,J=11.1Hz,1H),2.92(d,J=9.5Hz,2H),2.71-2.60(m,3H),2.55(d,J=10.4Hz,1H),1.91(s,3H),1.88-1.46(m,8H),1.21-1.12(m,12H)。C31H43N4O5之LCMS(M+H)計算值：551.32；實驗值：551.3。
碘化(2-溴苯乙基)三苯基鏻：在壓力試管中向1-溴-2-(2-碘乙基)苯(0.3244g，1.043mmol)於甲苯(1.739ml)中之溶液中添加三苯膦(0.274g，1.043mmol)且密封試管且在100℃下攪拌。將混合物冷卻至室溫。將產物固化且傾析溶劑。將固體溶解於DCM中且濃縮獲得呈白色泡沫狀之標題化合物(0.4526g，0.790mmol，76%產率)。C26H24BrP之LCMS(M+H)計算值：447.07；實驗值：448.0。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-甲醯基-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.2747g，0.579mmol)於濕潤DCM(5mL)中之溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷(0.319g，0.752mmol)，且在室溫下攪拌混合物。3小時後，藉由過濾移除固體。濾液用Na2S2O3水溶液洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-50% EtOAc/己烷；10 CV)純化所得油狀物獲得呈無色油狀物之標題化合物(0.1962g，0.415mmol，71.7%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.17(s,1H),7.02(s,1H),6.19-5.98(m,1H),5.96-5.76(m,1H), 5.57-5.37(m,2H),5.24(dd,J=10.4,1.6Hz,1H),4.24(dd,J=15.9,7.1Hz,2H),4.03(d,J=4.9Hz,2H),2.65(s,3H),2.08-1.93(m,5H),1.81-1.66(m,1H),1.37(s,3H),1.29-1.25(m,12H)。NMR未發現2個哌啶質子。C25H37N4O5之LCMS(M+H)計算值：473.27；實驗值：473.3。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(3-(2-溴苯基)丙-1-烯-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃下向碘化(2-溴苯乙基)三苯基鏻(0.121g，0.212mmol)於THF(1ml)中之懸浮液中添加氫化鈉(8.68mg，0.217mmol)且在室溫下攪拌所得混合物45分鐘。使混合物冷卻至-78℃且逐滴添加溶解於THF(1ml)中的(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-甲醯基-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.050g，0.106mmol)且在-78℃下攪拌混合物1小時，接著升溫至室溫且攪拌2小時。用水淬滅反應物且用EtOAc萃取產物。有機相用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-50% EtOAc/己烷；20 CV)純化殘餘物獲得呈淺黃色油狀物之標題化合物(0.0386g，0.060mmol，57.0%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.65-7.50(m,1H),7.40-7.30(m,1H),7.28-7.20(m,1H),7.17-7.05(m,1H),6.73-6.55(m,1H),6.54-6.44(m,1H),6.11-5.74(m,3H),5.56-4.97(m,2H),4.33-4.11(m,4H),4.07-3.98(m,1H),3.94(d,J=4.4Hz,1H),2.62(s,3H),2.01-1.79(m,3H),1.77-1.64(m,1H),1.29-1.19(m,15H),(4個哌啶質子在NMR中不可見)。C33H43BrN4O4之LCMS(M+H)計算值：640.24；實驗值：641.4。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,23-二甲基-22-氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十八碳-2,4,6(28),8,10,13(18),14,16,19-九烯-3-基]乙酸乙酯：向用N2沖洗之壓力試管添加(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(3-(2-溴苯基)丙-1-烯-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.09g，0.141mmol)、乙腈(4ml)及三乙胺(0.196mL，1.407mmol)。向此溶液中添加三苯膦(0.011g，0.042mmol)及參(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)(0.013g，0.014mmol)。密封試管且在120℃下攪拌。攪拌20小時後，將混合物冷卻，過濾且濃縮獲得黃色殘餘物。藉由急驟層析法(Biotage；0%-100% EtOAc/己烷；20 CV)純化殘餘物獲得呈黏性黃色油狀物之標題化合物(0.0406g，0.073mmol，51.6%產率)。C33H43N4O4之LCMS(M+H)計算值：559.32；實驗值：559.5。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,23-二甲基-22-氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十八碳-2,4,6(28),8,10,13(18),14,16,19-九烯-3-基]乙酸：向(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,23-二甲基-22-氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.16,9.02,7.013,18]二十八碳-2,4,6(28),8,10,13(18),14,16,19-九烯-3-基]乙酸乙酯(0.0366g，0.066mmol))於二噁烷(1mL)/MeOH(1mL)中之溶液中添加10N氫氧化鈉(0.066mL，0.655mmol)，且在70℃下攪拌混合物1小時。將混合物冷卻且濃縮。粗物質經製備型HPLC純 化獲得非對映異構體形式之標題化合物。C31H38N4O4之LCMS(M+H)計算值：531.29；實驗值：531.4。
實例25
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,23-二甲基-22-氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十八碳-2,4,6(28),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸：向(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,23-二甲基-22-氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.16,9.02,7.013,18]二十八碳-2,4,6(28),8,10,13(18),14,16,19-九烯-3-基]乙酸(21mg，0.040mmol)及三乙胺(5.52μl，0.040mmol)於MeOH(2mL)中之溶液中添加鈀/碳(0.42mg，3.96μmol)。混合物用氫氣沖洗，接著在氫氣氣球下攪拌。1小時後，經用MeOH沖洗之矽藻土過濾混合物，接著濃縮。粗物質經製備型HPLC純化獲得標題化合物(9.1mg，0.016mmol，41.3%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.21(d,J=3.4Hz,2H),7.14(d,J=3.7Hz,2H),6.30(s,1H),5.86(s,1H),4.74-4.59(m,1H),3.77(t,J=11.4Hz,1H),3.52(d,J=1.8Hz,3H),3.22-2.94(m,5H),2.90(s,3H),2.72-2.58(m,2H),2.37-2.20(m,1H),2.00-1.54(m,7H),1.38(s,1H),1.17(br.s.,9H)。C31H43N4O4之LCMS(M+H)計算值：535.32；實驗值：535.5。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((2-溴-4-(三氟甲基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙 酸乙酯：向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.200g，0.421mmol)及2-溴-1-(溴甲基)-4-(三氟甲基)苯(0.268g，0.843mmol)於DMF(1mL)中之溶液中添加氫化鈉(0.051g，1.264mmol)。在室溫下攪拌混合物。30分鐘後，反應物用水淬滅且用EtOAc(3×)萃取。合併有機相且用鹽水洗滌，乾燥，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-100% EtOAc/己烷；25 CV)純化殘餘物獲得呈無色油狀物之標題化合物(0.200g，0.281mmol，66.7%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.81(d,J=0.7Hz,1H),7.73(d,J=8.1Hz,1H),7.59(dd,J=8.6,1.0Hz,1H),6.59(s,1H),6.02(ddt,J=17.0,10.4,5.1Hz,1H),5.95-5.85(m,1H),5.53-5.39(m,1H),5.19(dd,J=10.5,1.7Hz,1H),4.87(s,2H),4.77(s,2H),4.30-4.14(m,2H),4.02(d,J=5.1Hz,2H),2.62(s,3H),2.06-1.61(m,3H),1.35(s,3H),1.25(s,12H)5個哌啶質子不可見。C33H43BrF3N4O5之LCMS(M+H)計算值：712.33；實驗值：713.4。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,23-二甲基-16-(三氟甲基)-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十八碳-2,4,6(28),8,13(18),14,16,19-八烯-3-基]乙酸乙酯：向用N2沖洗之壓力試管中添加(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((2-溴-4-(三氟甲基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.200g，0.281mmol)、乙腈(8ml)及三乙胺(0.392mL，2.81mmol)。向此溶液中添加三苯膦(0.022g，0.084mmol)及參(二苯 亞甲基丙酮)二鈀(0)(0.026g，0.028mmol)。密封試管且在120℃下攪拌23小時。冷卻混合物，過濾且濃縮獲得黃色殘餘物，將其藉由急驟層析法(Biotage；0%-100% EtOAc/己烷；20 CV)純化獲得呈黃色泡沫狀之標題化合物(0.1115g，0.177mmol，62.9%產率)。C34H44F3N4O4之LCMS(M+H)計算值：631.31；實驗值：631.3。
實例26
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,23-二甲基-16-(三氟甲基)-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十八碳-2,4,6(28),8,13(18),14,16,19-八烯-3-基]乙酸：向反應物(中間物12)(0.1115g，0.177mmol)於二噁烷(2mL)/MeOH(2mL)中之溶液中添加10N氫氧化鈉(0.177mL，1.77mmol)且在70℃下攪拌混合物45分鐘。將混合物冷卻且濃縮。粗物質經製備型HPLC純化獲得標題化合物(0.010g，0.0165mmol，9.3%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.67-7.61(m,1H),7.61-7.53(m,2H),6.57-6.50(m,1H),6.48(s,1H),5.92(s,1H),4.99(d,J=2.4Hz,1H),4.83-4.57(m,4H),4.00-3.92(m,1H),3.85(d,J=7.6Hz,1H),3.00(d,J=14.0Hz,1H),2.61(d,J=13.4Hz,1H),2.53(s,3H),1.97-1.65(m,4H),1.39(s,3H),1.21-1.18(m,9H)。(兩個哌啶質子在NMR中不可見)。C31H38F3N4O5之LCMS(M+H)計算值：603.27；實驗值：603.4。
5-氟-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲酸酯：向5-氟-2-羥基苯甲酸甲酯 (1.0g，5.88mmol)、(R)-(-)-戊-4-烯-2-醇(1.210mL，11.76mmol)及三苯膦(2.004g，7.64mmol)於THF(14ml)中之溶液中逐滴添加DIAD(1.486mL，7.64mmol)且在室溫下攪拌所得溶液。20小時後，反應物用Et2O稀釋且用1N NaOH、水(3×)及鹽水洗滌。有機相乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-40% EtOAc/己烷；20 CV)純化殘餘物獲得呈黃色油狀物之5-氟-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲酸甲酯(1.1331g，4.76mmol，81%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.49(dd,J=8.7,3.3Hz,1H),7.15(ddd,J=8.9,7.7,3.4Hz,1H),6.96(dd,J=9.0,4.2Hz,1H),6.02-5.79(m,1H),5.20-5.06(m,2H),4.50-4.34(m,1H),3.90(s,3H),2.60-2.32(m,2H),1.34(d,J=6.1Hz,3H)。
(5-氟-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇：經30分鐘向5-氟-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲酸甲酯(1.00g，4.20mmol)於THF(10mL)中的冷卻至0℃之溶液中逐滴添加氫化鋰鋁(5.04mL，5.04mmol)。在室溫下攪拌所得混合物2小時。反應物用2mL THF稀釋且冷卻至0℃，且藉由逐滴添加鹽水淬滅。另外用5mL EtOAc稀釋混合物且有機相傾析，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮，獲得呈無色油狀物之(5-氟-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇(0.80g，3.81mmol，91%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.04(dd,J=8.7,3.1Hz,1H),6.93(td,J=8.5,3.1Hz,1H),6.82(dd,J=8.9,4.3Hz,1H),5.86(ddt,J=17.1,10.1,7.1Hz,1H),5.25-5.06(m,2H),4.75-4.54(m,2H),4.54-4.38(m,1H),2.51(dt,J=13.9,6.7Hz,2H),1.42-1.31(m,3H)。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-(((甲基磺醯基)氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.50g，1.054mmol)於DCM(6ml)中的冷卻至0℃的溶液中添加DMAP(0.013g，0.105mmol)及TEA(0.294mL，2.107mmol)，隨後添加甲烷磺醯氯(0.098mL，1.264mmol)，且在0℃下攪拌所得溶液。45分鐘後，反應物用DCM稀釋且用NaHCO3飽和水溶液淬滅。用水洗滌有機相，乾燥且濃縮獲得呈淺黃色油狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-(((甲基磺醯基)氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.62g，1.122mmol，106%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.63(s,1H),6.15-5.97(m,1H),5.98-5.81(m,1H),5.55-5.38(m,3H),5.29-5.20(m,1H),4.32-4.11(m,2H),4.02(d,J=4.9Hz,2H),3.06(s,3H),2.63(s,3H),1.93(br.s.,4H),1.35(s,3H),1.29-1.19(m,12H)。
S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-(((甲基磺醯基)氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.62g，1.122mmol)於丙酮(6 ml)中之溶液中添加碘化鈉(0.673g，4.49mmol)，且在室溫下攪拌混合物45分鐘。反應物用EtOAc稀釋，且用水洗滌。有機相乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-50% EtOAc/己烷；20 CV)純化粗油狀物獲得呈淺黃色油狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.5519g，0.944mmol，84%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.53(s,1H),6.16-5.99(m,1H),5.99-5.77(m,1H),5.64-5.39(m,1H),5.32-5.14(m,1H),4.56(s,2H),4.35-4.17(m,2H),4.03(d,J=4.9Hz,2H),2.59(s,3H),1.93(br.s.,4H),1.36(s,3H),1.31-1.18(m,12H)。未見4個哌啶質子。C25H38IN4O4之LCMS(M+H)計算值：585.19；實驗值：585.5。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((5-氟-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸：向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.05g，0.086mmol)及(S)-(5-氟-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇(0.022g，0.103mmol)於DMF(1ml)中之溶液中添加氫化鈉(5.13mg，0.128mmol)且在室溫下攪拌所得黃色混合物。5小時後，混合物用EtOAc稀釋且用1N HCl，隨後水及鹽水洗滌。有機相乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-10% MeOH/DCM；10 CV)純化油狀物獲得呈琥珀色油狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((5-氟-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑 并[1，5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸(20mg，0.031mmol，36.6%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.22(dd,J=9.0,2.9Hz,1H),6.89(dd,J=8.1,3.2Hz,1H),6.84-6.75(m,1H),6.60(s,1H),6.10-5.95(m,1H),5.89-5.75(m,1H),5.52-5.38(m,1H),5.23-4.99(m,4H),4.80(s,2H),4.66(s,2H),4.45-4.28(m,1H),4.06-3.93(m,2H),2.71-2.54(m,3H),2.47(d,J=5.9Hz,1H),2.40-2.30(m,1H),2.08-1.56(m,4H),1.49-1.01(m,15H)。C35H48FN4O6之LCMS(M+H)計算值：639.35；實驗值：639.2。
實例27
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15-氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17,22-八烯-3-基]乙酸：向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((5-氟-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸(20mg，0.031mmol)於DCE(75mL)中之溶液中添加氯化(1,3-二均三甲苯基亞咪唑啶-2-基)(2-異丙氧基苯亞甲基)釕(VI)/Hoveyda-Grubbs II(4.90mg，7.83μmol)及碘化銅(I)(5.96mg，0.031mmol)，且在90℃下攪拌混合物。3小時之後，濃縮反應物。粗物質經製備型HPLC純化獲得(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S,22Z)-15-氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17,22-八烯-3-基]乙酸(9.8mg，0.016mmol，50.2%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.19-6.92(m,3H),6.57-6.38 (m,1H),6.11-5.87(m,1H),5.81-5.64(m,1H),5.59-5.46(m,1H),4.94-4.47(m,4H),4.45-4.31(m,1H),4.01-3.78(m,1H),3.74-3.47(m,1H),2.51(br.s.,13H),1.71-1.49(m,1H),1.33-1.06(m,14H)。C33H44FN4O6之LCMS(M+H)計算值：611.32；實驗值：611.5。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((5-氟-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.50g，0.855mmol)及(S)-(5-氟-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇(0.216g，1.027mmol)於DMF(10ml)中之溶液中添加氫化鈉(0.051g，1.283mmol)且在室溫下攪拌所得黃色混合物。3小時後，混合物用EtOAc稀釋且用1N HCl，隨後水，接著鹽水洗滌。有機相乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-100% EtOAc/己烷；10 CV)純化殘餘物獲得呈紅色油狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((5-氟-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.1481g，0.222mmol，26.0%產率)。C37H52FN4O6之LCMS(M+H)計算值：667.38；實驗值：667.6。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15-氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三 氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16,22-八烯-3-基]乙酸乙酯：向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((5-氟-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.1481g，0.222mmol)於DCE(500mL)中之溶液中添加氯化(1,3-二均三甲苯基亞咪唑啶-2-基)(2-異丙氧基苯亞甲基)釕(VI)(0.035g，0.056mmol)及碘化銅(I)(0.042g，0.222mmol)，且在90℃下攪拌所得溶液3小時。將混合物冷卻至室溫且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-100% EtOAc/己烷；20 CV)純化殘餘物獲得呈淺褐色泡沫狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S,22Z)-15-氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16,22-八烯-3-基]乙酸乙酯：(0.0461g，0.072mmol，32.5%產率)。C35H48FN4O6之LCMS(M+H)計算值：639.35；實驗值：639.5。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15-氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸乙酯：向(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15-氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16,22-八烯-3-基]乙酸乙酯(46.1mg，0.072mmol)於乙醇(3mL)中之溶液中添加氯化(1,3-二均三甲苯基亞咪唑啶-2-基)(2-異丙氧基苯亞甲基)釕(VI)(9.04mg，0.014mmol)，接著添加硼氫化鈉(13.65mg，0.361mmol)，且在 室溫下攪拌混合物。10分鐘後，LCMS指示反應完成。反應物用水淬滅且用EtOAc萃取。有機相乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-100% EtOAc/己烷；20 CV)純化粗產物獲得呈無色油狀物之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15-氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸乙酯(36.5mg，0.057mmol，79%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ δ 7.15(dd,J=9.0,3.2Hz,1H),6.89(td,J=8.6,3.2Hz,1H),6.79(dd,J=8.9,4.5Hz,1H),6.56(s,1H),5.97(s,1H),4.93(d,J=12.2Hz,1H),4.75-4.66(m,3H),4.56-4.39(m,2H),4.29-4.15(m,2H),3.97-3.81(m,1H),3.56-3.34(m,2H),3.14(d,J=11.7Hz,1H),2.83(d,J=12.2Hz,1H),2.61(s,3H),2.03-1.53(m,10H),1.34-1.13(m,18H)。C35H50FN4O6之LCMS(M+H)計算值：641.37；實驗值：641.6。
實例28
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15-氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸：向(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15-氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸乙酯(36.5mg，0.057mmol)於甲醇(3mL)中之溶液中添加氫氧化鈉/1N(0.285mL，0.285mmol)，且使所得溶液回流。3小時後，冷卻及濃縮混合物。藉由製備型HPLC純化殘餘物獲得(2S)-2-(第三丁氧基)-2- [(20S)-15-氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸(4.2mg，11.31%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.96(s,1H),7.13(dd,J=9.0,2.8Hz,1H),7.06-6.89(m,2H),6.49(s,1H),5.57(s,1H),4.87(d,J=12.5Hz,1H),4.69-4.45(m,4H),4.32(t,J=11.6Hz,1H),3.70-3.19(m,5H),2.80(br.s.,1H),2.49-2.44(m,3H),1.88(d,J=14.3Hz,2H),1.74-1.46(m,8H),1.22-1.05(m,15H)。
(S)-5-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲酸甲酯：向2-羥基-5-甲基苯甲酸甲酯(1.0g，6.02mmol)於THF(14ml)中之溶液中添加(R)-(-)-戊-4-烯-2-醇(1.037g，12.04mmol)及三苯膦(2.052g，7.82mmol)。逐滴添加DIAD(1.521mL，7.82mmol)(放熱)且在室溫下攪拌混合物。4.5小時後，混合物用Et2O稀釋且用1N NaOH，隨後水(3×)，接著鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-100% EtOAc/己烷；20 CV)純化黃色油狀物獲得呈黃色油狀物之(S)-5-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲酸甲酯(1.2664g，5.41mmol，90%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.58(d,J=2.2Hz,1H),7.23(dd,J=8.3,2.0Hz,1H),6.90(d,J=8.6Hz,1H),6.03-5.77(m,1H),5.21-4.99(m,2H),4.61-4.35(m,1H),3.89(s,3H),2.60-2.46(m,1H),2.46-2.34(m,1H),2.34-2.25(m,3H),1.34(d,J=6.1Hz,3H)。
(S)-(5-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇：向(S)-5-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲酸甲酯(1.2664g，5.41mmol)於THF(15ml)中的 冷卻至0℃的溶液中逐滴添加氫化鋰鋁(3.25mL，6.49mmol)。在室溫下攪拌混合物2小時，接著冷卻至0℃且藉由逐滴添加鹽水淬滅。將混合物分配於EtOAc與水之間。將有機相用鹽水洗滌、乾燥(Na2SO4)、過濾且濃縮獲得呈無色油狀物之(S)-(5-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇(0.8702g，4.22mmol，78%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.14-7.01(m,2H),6.80(d,J=8.1Hz,1H),6.01-5.74(m,1H),5.24-5.04(m,2H),4.76-4.64(m,1H),4.64-4.56(m,1H),4.51(sxt,J=6.0Hz,1H),2.63-2.48(m,2H),2.48-2.41(m,1H),2.30(s,3H),1.37(d,J=6.1Hz,3H)。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-(((5-甲基-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸：向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.20g，0.342mmol)及(S)-(5-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇(0.085g，0.411mmol)於DMF(4ml)中之溶液中添加氫化鈉(0.021g，0.513mmol)且在室溫下攪拌混合物。5小時後，反應物用EtOAc稀釋且用1N HCl，水，接著鹽水洗滌。有機相乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；10% MeOH/DCM；10 CV)純化黃色殘餘物獲得呈淺黃色油狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-(((5-甲基-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸(32.7mg，0.052mmol，15.05%產率)。C36H51N4O6之LCMS(M+H)計算值：635.38；實驗值：635.5。
實例29
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-4,15,20,26-四甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17,22-八烯-3-基]乙酸：向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-(((5-甲基-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸(32.7mg，0.052mmol)於DCE(4mL)中之溶液中添加Hoveyda-Grubbs第2代催化劑(8.07mg，0.013mmol)及碘化銅(I)(9.81mg，0.052mmol)，且在90℃下攪拌混合物。3小時後，將混合物冷卻至室溫且濃縮。粗物質經製備型HPLC純化獲得(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-4,15,20,26-四甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17,22-八烯-3-基]乙酸(2.1mg，5.64%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.10(s,1H),7.03(d,J=6.6Hz,1H),6.88(d,J=8.4Hz,1H),6.52(s,1H),6.08-5.93(m,1H),5.78(s,1H),5.75-5.67(m,1H),4.82(d,J=12.1Hz,1H),4.71-4.56(m,4H),4.56-4.39(m,2H),4.01-3.79(m,2H),3.73(t,J=11.2Hz,1H),3.35(br.s.,1H),3.17(br.s.,1H),2.74-2.59(m,1H),2.45-2.31(m,2H),2.29-2.14(m,5H),1.89(t,J=12.5Hz,2H),1.68(td,J=12.8,4.0Hz,1H),1.56(td,J=13.0,4.4Hz,1H),1.26-1.19(m,6H),1.19-1.01(m,9H)。C14H20FN3O4S之LCMS(M+H)計算值：607.35；實驗值：607.4。
實例30
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-4,15,20,26-四甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸：向(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-4,15,20,26-四甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17,22-八烯-3-基]乙酸(0.020g，0.033mmol)於乙醇(1mL)中之溶液中添加Hoveyda-Grubbs第2代催化劑(4.13mg，6.59μmol)。添加硼氫化鈉(6.24mg，0.165mmol)且在室溫下攪拌混合物。45分鐘後，藉由小心添加水來淬滅反應物。產物用EtOAc萃取，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。粗物質經製備型HPLC純化獲得(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-4,15,20,26-四甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸(2.1mg，9.94%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.14(s,1H),7.04-6.95(m,1H),6.86(d,J=8.4Hz,1H),6.42(s,1H),4.83(d,J=12.5Hz,1H),4.62-4.42(m,3H),4.39-4.26(m,1H),3.47-3.31(m,3H),2.85-2.74(m,1H),2.64(br.s.,1H),2.42-2.33(m,1H),2.23(s,3H),2.02-1.30(m,14H),1.28-0.96(m,15H)。C34H49N4O6之LCMS(M+H)計算值：609.36；實驗值：609.4。
(S)-2,4-二氟-6-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲醛：向2,4-二氟-6-羥基苯甲醛(1.0g，6.33mmol)於THF(14ml)中之溶液中添加(R)-(-)-戊-4-烯- 2-醇(1.090g，12.65mmol)及三苯膦(2.157g，8.22mmol)。向此混合物中逐滴添加DIAD(1.599mL，8.22mmol)(放熱)且在室溫下攪拌。20小時後，混合物用Et2O稀釋且用1N NaOH，隨後水(3×)，接著鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-50% EtOAc/己烷；10 CV)純化粗產物獲得呈淺黃色油狀物之(S)-2,4-二氟-6-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲醛(0.3394g，1.500mmol，23.72%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ：10.33(s,1H),6.67-6.32(m,2H),6.04-5.63(m,1H),5.32-5.00(m,2H),4.66-4.40(m,1H),2.68-2.28(m,2H),1.41(d,J=6.1Hz,3H)。
(S)-(2,4-二氟-6-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇：在0℃下向(S)-2,4-二氟-6-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲醛(0.3394g，1.500mmol)於THF(4ml)中之溶液中逐滴添加氫化鋰鋁(0.900mL，1.800mmol)。在室溫下攪拌所得混合物2小時。將混合物冷卻至0℃且用鹽水逐滴淬滅，接著用EtOAc及水稀釋。有機相用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-50% EtOAc/己烷；10 CV)純化油狀物獲得呈無色油狀物之(S)-(2,4-二氟-6-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇(0.1344g，0.589mmol，39.2%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ：6.59-6.28(m,2H),6.07-5.71(m,1H),5.30-5.02(m,2H),4.69(d,J=5.6Hz,2H),4.49(sxt,J=6.0Hz,1H),2.61-2.39(m,2H),2.32(t,J=6.8Hz,1H),1.40(d,J=6.1Hz,3H)。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((2,4-二氟-6-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸：向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.2g，0.342mmol)及(S)-(2,4-二氟-6-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇(0.094g，0.411mmol)於DMF(1mL)中之溶液中添加氫化鈉(0.021g，0.513mmol)且在室溫下攪拌混合物。4小時後，混合物用EtOAc稀釋且用水及鹽水洗滌。將有機相乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮，且藉由製備型HPLC純化獲得呈無色油狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((2,4-二氟-6-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸(0.030g，0.046mmol，13.35%產率)。C35H47F2N4O6之LCMS(M+H)計算值：657.34；實驗值：657.5。
實例31
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-14,16-二氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17,22-八烯-3-基]乙酸：向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((2,4-二氟-6-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸(0.030g，0.046mmol)於DCE(4mL)中之溶液中添加Hoveyda-Grubbs第2代催化劑(7.16mg，0.011mmol)及碘化銅(I)(8.70mg，0.046mmol)且在90℃下攪拌混合物。1.5小時後，將混合物冷卻至室溫且過濾及濃縮。粗物質經製備型HPLC純化獲得(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-14,16-二氟- 4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17,22-八烯-3-基]乙酸(2.4mg，5.67%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ：6.91(d,J=11.7Hz,1H),6.77(t,J=9.5Hz,1H),6.51(s,1H),6.09-5.95(m,1H),5.87(d,J=8.1Hz,1H),5.81-5.62(m,1H),4.81-4.61(m,4H),4.57-4.39(m,2H),3.96-3.70(m,3H),2.61-2.39(m,7H),1.96-1.79(m,2H),1.75-1.61(m,1H),1.61-1.46(m,1H),1.29(s,1H),1.24-1.19(m,3H),1.18-1.12(m,9H)。C33H43F2N4O6之LCMS(M+H)計算值：629.31；實驗值：629.3。
實例32
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-14,16-二氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸：向(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-14,16-二氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17,22-八烯-3-基]乙酸(0.020g，0.032mmol)於乙醇(0.5mL)中之溶液中添加Hoveyda-Grubbs第2代催化劑(3.99mg，6.36μmol)及硼氫化鈉(6.02mg，0.159mmol)，且在室溫下攪拌混合物。30分鐘後，用水淬滅混合物且用EtOAc萃取產物。有機相乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。粗物質經製備型HPLC純化獲得(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-14,16-二氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸(3.9mg，12.83%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ：6.92(d,J=11.7Hz,1H),6.77(t,J=9.0Hz,1H),6.42(s,1H),4.83-4.54(m,4H),4.49-4.24(m,2H),3.61(dd,J=10.5,4.6Hz,2H),3.37(br.s.,2H),2.59(d,J=9.9Hz,1H),2.33-1.97(m,4H),1.93(br.s.,1H),1.88-1.41(m,9H),1.31-1.06(m,15H)。C33H45F2N4O6之LCMS(M+H)計算值：631.33；實驗值：631.4。
(S)-4,5-二氟-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲醛：向4,5-二氟-2-羥基苯甲醛(1.0g，6.33mmol)於THF(14ml)中之溶液中添加(R)-(-)-戊-4-烯-2-醇(1.090g，12.65mmol)及三苯膦(2.157g，8.22mmol)。逐滴添加DIAD(1.599mL，8.22mmol)(放熱)且在室溫下攪拌混合物。1.5小時後，混合物用Et2O稀釋且用1N NaOH，隨後水(3×)，接著鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-100% EtOAc/己烷；20 CV)純化黃色油狀物獲得呈黃色油狀物之(S)-4,5-二氟-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲醛(0.1295g，0.572mmol，9.05%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.36(d,J=3.2Hz,1H),7.76-7.55(m,1H),6.83(dd,J=11.9,6.0Hz,1H),6.04-5.67(m,1H),5.23-5.06(m,2H),4.48(sxt,J=6.0Hz,1H),2.71-2.35(m,2H),1.41(d,J=6.1Hz,3H)。
(S)-(4,5-二氟-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇：在0℃下，經30分鐘向(S)-4,5-二氟-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲醛(0.1295g，0.572mmol) 於THF(2ml)中之溶液中逐滴添加氫化鋰鋁(0.343mL，0.687mmol)。在室溫下攪拌混合物2小時，接著冷卻至0℃且藉由逐滴添加鹽水淬滅。將混合物分配於EtOAc與水之間。將有機相用鹽水洗滌、乾燥(Na2SO4)、過濾且濃縮獲得呈黃色油狀物之(S)-(4,5-二氟-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇(0.1088g，0.477mmol，83%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.15(dd,J=10.4,9.2Hz,1H),6.72(dd,J=12.0,6.6Hz,1H),5.99-5.70(m,1H),5.24-5.07(m,2H),4.75-4.49(m,2H),4.41(sxt,J=6.0Hz,1H),2.60-2.35(m,2H),2.26(t,J=6.5Hz,1H),1.36(d,J=6.1Hz,3H)。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S,22Z)-15,16-二氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16,22-八烯-3-基]乙酸乙酯：向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.10g，0.171mmol)及(S)-(4,5-二氟-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇(0.047g，0.205mmol)於DMF(2mL)中之溶液中添加氫化鈉(10.26mg，0.257mmol)且在室溫下攪拌混合物。攪拌4小時後，混合物用EtOAc稀釋且用1N HCl，隨後水及鹽水洗滌。有機相乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；10% MeOH/DCM；10 CV)純化琥珀色油狀物。將所得不純琥珀色油狀物(11.4mg，0.017mmol)溶解於DCE(4mL)中。添加Hoveyda-Grubbs第2代催化劑(2.72mg，4.34μmol)，接著碘化銅(I)(3.31mg，0.017mmol)，且在90℃下攪拌混合物。3小時後，將混合物冷卻至室溫且 過濾及濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC純化獲得(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S,22Z)-15,16-二氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16,22-八烯-3-基]乙酸乙酯(3.0mg，4.57μmol，27%產率)。C35H47F2N4O6之LCMS(M+H)計算值：657.34；實驗值：657.5。
實例33
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15,16-二氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17,22-八烯-3-基]乙酸：向中間物18(3.0mg，4.57μmol)於二噁烷(0.25mL)及MeOH(0.250mL)中之溶液中添加氫氧化鈉(4.57μl,0.046mmol)，且在70℃下攪拌混合物。45分鐘後，將混合物冷卻至室溫。粗物質經製備型HPLC純化獲得(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15,16-二氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17,22-八烯-3-基]乙酸(2.9mg，4.57μmol，100%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.33(d,J=8.4Hz,1H),7.07(s,1H),6.95(d,J=8.4Hz,1H),6.46(s,1H),5.51(br.s.,1H),4.84(d,J=12.5Hz,1H),4.71-4.61(m,1H),4.61-4.52(m,3H),4.39-4.23(m,1H),3.58(d,J=11.4Hz,4H),2.49s,3H),1.77-1.42(m,8H),1.21-1.15(m,6H),1.13(s,9H)。C33H42F2N4O6之LCMS(M+H)計算值：629.31；實驗值：629.3。
4-氯-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲酸戊-4-烯-2-基酯：向4-氯-2-羥基苯甲酸(1.0g，5.79mmol)於THF(14ml)中之溶液中添加(R)-(-)-戊-4-烯-2-醇(1.497g，17.38mmol)及三苯膦(3.95g，15.07mmol)。在冷卻至0℃之後，逐滴添加DIAD(2.93mL，15.07mmol)(放熱)且在室溫下攪拌混合物。20小時後，混合物用Et2O稀釋且用1N NaOH，隨後水(3×)，接著鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-50% EtOAc/己烷；10 CV)純化粗產物獲得呈黃色油狀物之4-氯-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲酸戊-4-烯-2-基酯(1.3681g，4.43mmol，76%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.69(d,J=8.6Hz,1H),7.02-6.87(m,2H),6.01-5.76(m,2H),5.37-5.04(m,5H),4.49(sxt,J=6.0Hz,1H),2.71-2.28(m,4H),1.42-1.32(m,6H)。
(S)-(4-氯-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇：經30分鐘向4-氯-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲酸戊-4-烯-2-基酯(1.36g，4.40mmol)於THF(15ml)中的冷卻至0℃的溶液中逐滴添加氫化鋰鋁(2.64mL，5.28mmol)且在室溫下攪拌所得混合物。3小時後，將混合物冷卻至0℃且藉由逐滴添加鹽水淬滅。用EtOAc稀釋混合物且有機相用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-50% EtOAc/己烷；10 CV)純化油狀物獲得呈無色油狀物之(S)-(4-氯-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇(0.9554g，4.21mmol，96%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.21(d,J=7.8Hz,1H),6.98-6.88(m,1H),6.88(d,J=1.7Hz,1H),5.86(ddt,J=17.1,10.1,7.1Hz,1H),5.25-5.06(m,2H),4.75-4.62(m,1H),4.62-4.43(m,2H),2.61-2.40(m,2H),2.34(t, J=6.5Hz,1H),1.38(d,J=6.1Hz,3H)。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((4-氯-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸：向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.200g，0.342mmol)及(S)-(4-氯-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇(0.093g，0.411mmol)於DMF(1mL)中之溶液中添加氫化鈉(0.021g，0.513mmol)且在室溫下攪拌混合物。2小時後，混合物用EtOAc稀釋且用水及鹽水洗滌。有機相濃縮且藉由製備型HPLC純化獲得呈琥珀色玻璃狀之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((4-氯-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸(41.4mg，0.063mmol，18.47%產率)。C35H48ClN4O6之LCMS(M+H)計算值：655.32；實驗值：655.5。
實例34
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-16-氯-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17,22-八烯-3-基]乙酸：向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((4-氯-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸(41.4mg，0.063 mmol)於DCE(2mL)中之溶液中添加Hoveyda-Grubbs第2代催化劑(9.90mg，0.016mmol)及碘化銅(I)(12.03mg，0.063mmol)且在90℃下攪拌混合物。1.5小時後，將混合物冷卻至室溫且過濾及濃縮。粗物質經製備型HPLC純化獲得(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-16-氯-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17,22-八烯-3-基]乙酸(2.9mg，4.62μmol，7.32%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.31(d,J=8.1Hz,1H),7.10(s,1H),6.94(d,J=7.0Hz,1H),6.48(s,1H),6.34(d,J=5.9Hz,1H),5.65(br.s.,1H),4.75(d,J=11.7Hz,1H),4.67-4.47(m,5H),4.34-4.22(m,1H),3.64(d,J=12.8Hz,1H),3.39-3.27(m,6H),2.49(s,3H),2.41(d,J=3.3Hz,1H),2.27-2.15(m,1H),1.82(d,J=5.5Hz,3H),1.68-1.55(m,1H),1.32(s,3H),1.20(s,12H)。C33H44ClN4O6之LCMS(M+H)計算值：627.29；實驗值：627.5。
實例35
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-16-氯-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸：向(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-16-氯-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17,22-八烯-3-基]乙酸(0.020g，0.032mmol)於乙醇(1mL)中之溶液中添加Hoveyda-Grubbs第2代催化劑(4.00mg，6.38μmol)。添加硼氫化鈉(6.03mg，0.159mmol)且在室溫下攪拌混合物。30分鐘後，藉由小心添加水來 淬滅反應物。產物用EtOAc萃取，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。粗物質經製備型HPLC純化獲得(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-16-氯-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸(6.1mg，9.70μmol，30.4%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.32(d,J=8.1Hz,1H),7.06(s,1H),6.94(d,J=8.1Hz,1H),6.48(s,1H),5.63(br.S.,1H),4.84(d,J=12.5Hz,1H),4.69-4.48(m,4H),4.32(t,J=11.9Hz,1H),3.65(br.S.,1H),3.35-3.22(m,4H),2.74(s,3H),2.02-1.40(m,10H),1.26-0.95(m,15H)。C33H46ClN4O6之LCMS(M+H)計算值：629.31；實驗值：629.4。
(S)-4-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲酸甲酯. 將2-羥基-4-甲基苯甲酸甲酯(5.0g，30.1mmol)溶解於100mL甲苯中。向其中添加三苯膦(23.68g，90mmol)及(R)-戊-4-烯-2-醇(6.19mL，60.2mmol)。冷卻至0℃後，逐滴添加偶氮二甲酸二異丙酯(17.77mL，90mmol)且攪拌反應物隔夜。真空移除溶劑且藉由使用Biotage設備之矽膠層析法(300gm SiO2，溶離劑95：5-90：10己烷/乙酸乙酯)純化產物，獲得1.17g呈油狀物之標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO)δ 1.23(3 H,d),2.33(3 H,s)2.39(2 H,m),3.75(3 H,s),4.57(1 H,m),5.12(2 H,m).5.82(1 H,m)6.61(1 H,d),6.99(1 H,s),7.54(1 H,d)。
(S)-(4-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇. 將(S)-4-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲酸甲酯(1g，4.27mmol)溶解於THF中且冷卻至0℃。 向其中添加氫化鋰鋁(0.162g，4.27mmol)，且在室溫下攪拌反應物5小時。將混合物冷卻至0℃且添加乙酸乙酯，其後攪拌15分鐘。添加飽和NH4Cl且移除冰浴。繼續攪拌0.5小時，接著將混合物轉移至分液漏斗中。用乙酸乙酯萃取溶液，接著經Na2SO4乾燥。過濾後真空移除溶劑。藉由使用Biotage設備之矽膠層析法純化粗產物獲得915mg呈油狀物之標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO)δ 1.22(3 H,d),2.28(3 H,s),2.37(2 H,m),4.44(2 H,d),4.50(1 H,m),5.09(2 H,m),5.86(1 H,m),6.72(1 H,d0,6.77(1 H,s),7.24(1 H,d)。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-(((5-甲基-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：將(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(0.45g，0.770mmol)溶解於1mL DMF中，向其中添加1mL DMF中之溶液形式的(S)-(5-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇(0.191g，0.924mmol)。添加NaH-油中60重量%(47mg，1.16mmol)且攪拌反應混合物5小時。反應物用1N HCl淬滅，接著轉移至分液漏斗中，在其中用乙酸乙酯萃取產物。經Na2SO4乾燥有機溶液。過濾後，真空移除溶劑且藉由使用Biotage設備之矽膠層析法純化產物，分離出呈油狀物之標題化合物(114mg)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.21-1.24(15 H，重疊s與m),1.32(3 H,d),1.65-1.8(4 H,br m),2.35(3 H,s),2.50(2 H,m),2.61(3 H,s),3.0-3.5(4 H，極寬m),3.75(2 H,s),4.21(2 H,m), 4.45(1 H,m),4.66(2 H,br s),4.77(2 H,s),5.06-5.22(4 H，重疊m),5.32(1 H,s),5.85-6.2(2 H，重疊m),6.59(1 H,s),6.71(1 H,s),6.77(1 H,d),7.34(1 H,d)。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S,23E/Z)-4,16,20,27-四甲基-11,19,26-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[25.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十二碳-2,4,6(32),8,13(18),14,16,23-八烯-3-基]乙酸乙酯：向溶解於ClCH2CH2Cl(10mL)中的(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-(((4-甲基-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(51mg，0.077mmol)中添加氯化(1,3二均三甲苯基亞咪唑啶-2-基)(2-異丙氧基苯亞甲基)釕(IV)(12.05mg，0.019mmol)，隨後添加碘化銅(I)(14.65mg，0.077mmol)。將反應物加熱至90-100℃(油浴溫度)且攪拌2.5小時。將混合物冷卻至室溫，且真空移除溶劑。藉由使用Biotage設備之矽膠層析法(12gm SiO2，溶離劑70：30己烷/乙酸乙酯)純化粗產物，獲得56mg呈油狀物之標題產物。C36H50N4O6之LCMS MW計算值，634.4；觀測值mw(m+1)，635.2。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-4,16,20,26-四甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸乙酯：將(2S)-2-(第三丁氧基)- 2-[(20S,23E/Z)-4,16,20,27-四甲基-11,19,26-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[25.2.2.16,9.02,7.013,18]三十二碳-2,4,6(32),8,13(18),14,16,23-八烯-3-基]乙酸乙酯(17mg，0.027mmol)溶解於MeOH中，向其中添加氯化(1,3-二均三甲苯基亞咪唑啶-2-基)(2-異丙氧基苯亞甲基)釕(VI)(3.36mg，5.36μmol)，隨後添加硼氫化鈉(5.07mg，0.134mmol)。攪拌反應物，接著用水淬滅。將混合物轉移至分液漏斗且用乙酸乙酯萃取。有機溶液經Na2SO4乾燥。過濾後，真空移除溶劑獲得呈油狀物之粗產物。使用26mg(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S,23E/Z)-4,16,20,27-四甲基-11,19,26-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[25.2.2.16,9.02,7.013,18]三十二碳-2,4,6(32),8,13(18),14,16,23-八烯-3-基]乙酸乙酯、5.13mg氯化(1,3-二均三甲苯基亞咪唑啶-2-基)(2-異丙氧基苯亞甲基)釕(VI)及7.75mg硼氫化鈉重複反應。合併粗反應產物且藉由使用Biotage設備之矽膠層析法(12gm SiO2，溶離劑70：30己烷/乙酸乙酯)純化獲得22mg呈油狀物之標題化合物。C36H52N4O6之LCMS MW計算值，636.4；觀測值mw(m+1)，637.2。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.17-1.27(15 H，重疊s與m),1.31(3 H,d),1.56-1.99(10 H，重疊m),2.35(3 H,s),2.62(3 H,s),2.75(1 H,m),3.09(1 H,m),3.46(2 H,m),4.14(2 H,m),4.21(2 H,m),4.5-4.8(5 H，重疊m),6.03(1 H,s)6.56(1 H,s),6.72,(1 H,s),6.75(1 H,d),7.26(1 H,d)。
實例36及37
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S,22Z)-4,16,20,26-四甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16,22-八烯-3-基]乙酸及(2S)-2-(第三丁氧基)-2- [(20S,22E)-4,16,20,26-四甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16,22-八烯-3-基]乙酸：將(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S,23E/Z)-4,16,20,27-四甲基-11,19,26-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[25.2.2.16,9.02,7.013,18]三十二碳-2,4,6(32),8,13(18),14,16,23-八烯-3-基]乙酸乙酯(56mg，0.00mmol)溶解於2mL MeOH中。添加1N NaOH(0.35mL，0.35mmol)且將混合物加熱至60℃(油浴溫度)。3小時後，使反應物回到室溫，接著用1N HCl淬滅。添加乙酸乙酯且將混合物轉移至分液漏斗。分離有機層且經Na2SO4乾燥。過濾後，真空移除溶劑獲得41mg呈固體狀之粗產物。粗物質純化兩次，獲得化合物。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S,22Z)-4,16,20,26-四甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16,22-八烯-3-基]乙酸： 1H NMR(500MHz,DMSO)δ 1.16(9 H,s),1.21(3 H,s),1.24(3 H,d),1.57(1 H,m),1.66(1 H,m),1.88(2 H,m),2.29(3 H,s),2.40(1 H,m),2.65(1 H,m),2.74(3 H,s),3.18-3.40(2 H，重疊m),3.71-3.91(2 H，重疊m),4.44-4.62(6 H，重疊m),5.72(1 H,m),5.76(1 H,s),6.01(1 H,m),6.50(1 H,s),6.70(1 H,d),5.62(1 H,s),7.15(1 H,d),7.96(1 H,s)。LCMS(M+H)=607.4。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S,22E)-4,16,20,26-四甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16,22-八烯-3-基]乙酸：1H NMR(500MHz,DMSO)δ 1.10(3 H,m),1.16(12 H，重疊m與s),1.29(2 H,m),1.39(2 H,m),2.27(5 H，重疊m與s),2.39(3 H,s),3.26-3.57(4 H，重疊m),4.21(1 H,d),4.36(3 H，重疊m),4.53(1 H,d),4.74(1 H,d),5.33(2 H,m),5.81(1 H,s),6.10(1 H,s),6.73(1 H,d),6.76(1 H,s0,7.24(1 H,d)。
實例38
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-4,16,20,26-四甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸：將(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-4,16,20,26-四甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸酯(22mg，0.035mmol)溶解於MeOH(1mL)中。向其中添加1N氫氧化鈉(0.138mL，0.138mmol)，且將混合物加熱至60℃(油浴溫度)。攪拌3小時後，將混合物轉移至分液漏斗且用1N HCl酸化。接著用乙酸乙酯萃取溶液且經Na2SO4乾燥有機層。過濾後，真空移除溶劑獲得24mg呈粉末狀之標題化合物。LCMS(M+H)=609.2。
4-(3-羥基丙氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯：在室溫下向4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(8.4g，32.9mmol)於THF(200mL)中之溶液中添加0.5M 9-BBN溶液(132mL，65.8mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物16小時。接著在冰浴中冷卻混合物，且添加1N NaOH(164mL，164mmol)，隨後30% H2O2(30.2mL，296mmol)，且攪拌混合物1小時。接著混合物用乙酸乙酯(250mL)萃取，用水(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由Biotage(5-80% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈無色油狀物之4- (3-羥基丙氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(6.4g，23.41mmol，71.2%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 3.84-3.79(m,2H),3.74(dt,J=13.4,3.7Hz,2H),3.57(t,J=5.6Hz,2H),3.19-3.06(m,2H),1.85(quin,J=5.6Hz,2H),1.75(d,J=13.1Hz,2H),1.48(s,9H),1.47-1.41(m,2H),1.21(s,3H)。LCMS(M+Na)=296.7。
4-甲基-4-(3-側氧基丙氧基)哌啶-1-甲酸第三丁酯：向4-(3-羥基丙氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(6.4g，23.41mmol)於CH2Cl2(300mL)中之溶液中添加戴斯馬丁高碘烷(10.43g，24.58mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物3小時。接著添加飽和NaHCO3溶液且混合物用二氯甲烷萃取，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由Biotage(5-50% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈無色油狀物之4-甲基-4-(3-側氧基丙氧基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(1.3g，4.79mmol，82%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 9.82(s,1H),3.84-3.57(m,4H),3.13-3.02(m,2H),2.66(td,J=6.0,1.8Hz,2H),1.74(d,J=12.8Hz,3H),1.47(s,9H),1.46-1.38(m,2H),1.20(s,3H)。
(E)-4-甲基-4-((5-側氧基hex-3-烯-1-基)氧基)哌啶-1-甲酸第三丁酯：向4-甲基-4-(3-側氧基丙氧基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(5.7g，21.01mmol)於CH2Cl2(150mL)中之溶液中添加1-(三苯基亞磷烷)丙烷-2-酮(8.69g，27.3mmol)且在室溫下攪拌所得混合物16小時。接著添加水且混合物用二氯甲烷萃取，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由 Biotage(5-40% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈無色油狀物之(E)-4-甲基-4-((5-側氧基己-3-烯-1-基)氧基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(5.25g，16.86mmol，80%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 6.85(dt,J=16.1,6.9Hz,1H),6.15(dt,J=16.0,1.4Hz,1H),3.79-3.66(m,2H),3.47(t,J=6.4Hz,2H),3.12(t,J=11.6Hz,2H),2.49(qd,J=6.5,1.5Hz,2H),2.29-2.26(m,3H),1.73(d,J=13.2Hz,2H),1.47(s,9H),1.46-1.39(m,2H),1.18(s,3H)。LCMS(M+Na)=334.3。
4-甲基-4-((5-側氧基己基)氧基)哌啶-1-甲酸第三丁酯：向(E)-4-甲基-4-((5-側氧基己-3-烯-1-基)氧基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(6.2g，19.91mmol)於MeOH(100mL)中之溶液中添加10% Pd/C(2.119g，1.991mmol)且將燒瓶抽真空三次，且釋放至H2，接著留在氣球H2氛圍下5小時。接著，過濾且濃縮獲得呈無色油狀物之4-甲基-4-((5-側氧基己基)氧基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(5.8g，18.50mmol，93%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 3.77-3.70(m,2H),3.32(t,J=6.3Hz,2H),3.13(t,J=11.2Hz,2H),2.48(t,J=7.3Hz,2H),2.16(s,3H),1.77-1.62(m,4H),1.59-1.53(m,2H),1.48(s,9H),1.45-1.37(m,2H),1.16(s,3H)。LCMS(M+Na)=336.4。
(R)-4-((5-羥基己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯：向4-甲基-4-((5-側氧基己基)氧基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(5.8g，18.50mmol)於無水甲苯(100mL)中之經攪拌黃色溶液中添加(S)-1-甲基-3,3-二苯 基六氫吡咯并[1,2-c][1,3,2]噁氮硼雜環戊烯(2.052g，7.40mmol)。將混合物冷卻至-35℃且經5分鐘添加含50%兒茶酚硼烷(6.35mL，25.9mmol)之甲苯。30分鐘後，反應混合物緩慢升溫至-15℃且再攪拌2小時。此時，LCMS指示反應完成。混合物接著用EtOAc(200mL)及飽和Na2CO3(100mL)稀釋。劇烈攪拌混合物30分鐘，且有機相用飽和Na2CO3(2×50mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾，濃縮且藉由矽膠層析法(5-70% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈無色油狀物之所要(R)-4-((5-羥基己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(4.6g，14.58mmol，79%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 3.90-3.80(m,1H),3.78-3.64(m,2H),3.33(t,J=6.4Hz,2H),3.14(t,J=11.4Hz,2H),1.74(d,J=13.2Hz,2H),1.66-1.54(m,3H),1.53-1.46(m,12H),1.46-1.38(m,3H),1.22(d,J=6.3Hz,3H),1.17(s,3H)。LCMS(M+Na)=338.4。
(R)-4-((5-(苯甲氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯：在0℃下，向(R)-4-((5-羥基己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(4.5g，14.27mmol)於DMF(50mL)中之溶液中添加60% NaH(0.685g，17.12mmol)且在室溫下攪拌所得混合物1小時。接著添加苯甲溴(2.55mL，21.40mmol)且攪拌混合物16小時。接著添加水(20mL)且混合物用乙醚(100mL)萃取，用鹽水(25mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由Biotage(0-20% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈淡黃色油狀物之(R)-4-((5-(苯甲氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(3.5g，8.63mmol，60.5%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.38-7.35(m,4H),7.31-7.25(m,1H),4.60(d,J=11.8Hz,1H),4.48(d, J=11.8Hz,1H),3.86-3.62(m,3H),3.58-3.50(m,1H),3.31(t,J=6.3Hz,2H),3.14(br.s.,2H),1.74(d,J=12.9Hz,2H),1.59-1.51(m,3H),1.47(s,9H),1.46-1.37(m,4H),1.22(d,J=6.1Hz,3H),1.17(s,3H)。LCMS(M+H)=406.3。
(R)-4-((5-(苯甲氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶,HCl：在室溫下攪拌(R)-4-((5-(苯甲氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(3.3g，8.14mmol)及4M含HCl之二噁烷(8.14mL，32.5mmol)中之溶液1小時。此時，LCMS指示反應完成。混合物接著濃縮及在高度真空下乾燥獲得呈黏稠油狀物之(R)-4-((5-(苯甲氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶，HCl(2.7g，7.90mmol，97%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 9.27(br.s.,1H),7.40-7.30(m,5H),4.60(d,J=11.8Hz,1H),4.47(d,J=11.8Hz,1H),3.50(q,J=7.1Hz,1H),3.33-3.11(m,5H),1.93(br.s.,1H),1.88(d,J=4.3Hz,1H),1.72(br.s.,4H),1.58-1.39(m,5H),1.24-1.20(m,6H)。LCMS(M+H)=306.4。
7-(4-(((R)-5-(苯甲氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-((S)-1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯：用(R)-4-((5-(苯甲氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶，HCl(2.65g，7.74mmol)及惠寧鹼(2.90mL，16.59mmol)處理(S)-6-(1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-氯-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(2.2g，5.53mmol)於DMF(40ml)中之混合物，且加熱混合物(60℃ 油浴)16小時。此時，LCMS指示反應完成。接著冷卻混合物，用Et2O稀釋且用水(3×50mL)及鹽水(50mL)洗滌，接著乾燥(Na2SO4)，過濾且減壓濃縮。接著藉由Biotage(5-50% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈黏稠油狀物之7-(4-(((R)-5-(苯甲氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-((S)-1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(1.6g，2.399mmol，43.4%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.39-7.32(m,4H),7.29-7.26(m,1H),7.02-7.01(m,1H),5.85(br.s.,1H),4.63-4.54(m,1H),4.51-4.39(m,3H),4.29-4.16(m,2H),3.61-3.53(m,1H),3.47-3.38(m,2H),2.63(s,3H),2.01-1.85(m,3H),1.75-1.64(m,6H),1.59-1.49(m,3H),1.44(t,J=7.1Hz,3H),1.33(s,3H),1.26-1.24(m,2H),1.24(s,9H),1.22(d,J=2.0Hz,3H)。4個缺失之哌啶氫。LCMS(M+H)=667.6。
6-((S)-1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-(4-(((R)-5-羥基己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯：向7-(4-(((R)-5-(苯甲氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-((S)-1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(1.7g，2.55mmol)於EtOH(25mL)中之溶液中添加10% Pd/C(0.271g，0.255mmol)且在氣球氫氣氛圍下攪拌所得混合物5小時。接著過濾及濃縮混合物獲得呈黏稠油狀物之6-((S)-1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-(4-(((R)-5-羥基己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(1.2g，2.081mmol，82%產率)。LCMS(M+H)=577.3。未經進一步純化即原樣用於下一步驟中。
6-((S)-1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯：在0℃下，向6-((S)-1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-(4-(((R)-5-羥基己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(800mg，1.387mmol)於DMF(10mL)中之溶液中添加咪唑(142mg，2.081mmol)，隨後添加第三丁基氯二苯基矽烷(0.533mL，2.081mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物16小時。接著添加水(20mL)且用乙醚(2×25mL)萃取混合物。乙醚層接著用鹽水(25mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。經Biotage(0-10% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈黏稠液體狀之6-((S)-1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(1g，1.227mmol，88%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.69(dd,J=8.0,1.5Hz,4H),7.47-7.28(m,6H),7.01(s,1H),5.82(br.s.,1H),4.50-4.38(m,2H),4.31-4.07(m,2H),3.94-3.77(m,1H),3.41-3.24(m,3H),2.61(s,3H),1.88(br.s.,2H),1.67(br.s.,1H),1.54(br.s.,1H),1.51-1.39(m,5H),1.30(s,3H),1.26-1.23(m,6H),1.22(s,9H),1.08(s,3H),1.06(s,9H)。4個缺失哌啶氫。LCMS(M+H)=816.4。
6-((S)-1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-(4-(((R)-5-((第 三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2甲酸：向6-((S)-1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(1,1.227mmol)於乙醇(12mL)中之溶液中添加1N NaOH(1.227mL，1.227mmol)且在室溫下攪拌所得混合物4小時。接著濃縮混合物且將殘餘物用水(10mL)稀釋且用乙醚(50mL)萃取。水層接著用1N HCl酸化且用乙醚(50mL)萃取，用鹽水(10mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮獲得呈白色固體狀之6-((S)-1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(920mg，1.169mmol，95%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.73-7.68(m,4H),7.47-7.35(m,6H),7.13(s,1H),5.85(br.s,1H),4.30-4.16(m,2H),3.94-3.84(m,1H),3.35(q,J=6.3Hz,2H),2.65(s,3H),1.92(d,J=10.7Hz,2H),1.67-1.39(m,12H),1.30(s,3H),1.28-1.25(m,3H),1.24(s,9H),1.11-1.08(m,3H),1.07(s,9H)。LCMS(M+H)=787.4。
(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯：在0℃下，向6-((S)-1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(900mg，1.143mmol)及Et3N(0.207mL，1.487mmol)於THF(20mL)中之經攪拌溶液 中添加1M氯甲酸異丙酯/甲苯(1.487mL，1.487mmol)。1小時後，一次性添加NaBH4(216mg，5.72mmol)於冷水(20mL)中之溶液且在0℃再攪拌1小時。接著，反應物用MeOH(1mL)淬滅，用Et2O(100mL)稀釋，用水(2×50mL)及鹽水(25mL)洗滌。有機層乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由Biotage(5-30% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈黏稠油狀物之(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(580mg，0.750mmol，65.6%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.74-7.70(m,4H),7.46-7.35(m,6H),6.48(s,1H),5.90(br.s.,1H),4.91-4.83(m,2H),4.29-4.11(m,2H),3.94-3.84(m,1H),3.41-3.29(m,3H),2.61(s,3H),2.17(q,J=5.8Hz,1H),1.94-1.87(m,2H),1.87(br.s.,1H),1.66(br.s.,1H),1.59(s,3H),1.58-1.40(m,5H),1.33-1.26(m,3H),1.26-1.21(m,12H),1.09(d,J=6.1Hz,3H),1.07(s,9H)。LCMS(M+H)=773.4。
(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-甲醯基-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯：向(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(540mg，0.698mmol)於CH2Cl2(10mL)中之溶液中添加戴斯馬丁高碘烷(356mg，0.838mmol)且在室溫下攪拌所得混合物3小時。接著添加飽和NaHCO3溶液且混合物用二氯甲烷(50mL)萃取，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由Biotage(5- 30% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈黏稠油狀物之(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-甲醯基-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(490mg，0.635mmol，91%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 10.15(d,J=5.4Hz,1H),7.74-7.66(m,4H),7.47-7.34(m,6H),7.02(s,1H),5.88(br.s.,1H),4.30-4.18(m,2H),3.94-3.81(m,1H),3.40-3.28(m,3H),2.64(s,3H),2.02-1.85(m,3H),1.68(br.s.,1H),1.57-1.52(m,2H),1.50-1.39(m,3H),1.31(s,3H),1.28-1.25(m,3H),1.25(s,9H),1.09(d,J=6.1Hz,3H),1.07(s,9H)。4個缺失之哌啶氫。LCMS(M+H)=772.3。
2-(2-溴-4-氟苯基)乙醇：在0℃下，向2-(2-溴-4-氟苯基)乙酸(2.3g，9.87mmol)於THF(20mL)中之溶液中添加含1M BH3˙THF複合物(14.80mL，14.80mmol)之THF，且在室溫下攪拌所得混合物3小時。接著添加1N HCl(50mL)且混合物用乙酸乙酯(200mL)萃取，用鹽水(50mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮獲得呈無色油狀物之2-(2-溴-4-氟苯基)乙醇(2.0g，9.13mmol，93%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.33(dd,J=8.4,2.7Hz,1H),7.30-7.24(m,1H),7.01(td,J=8.2,2.6Hz,1H),3.89(q,J=6.6Hz,2H),3.02(t,J=6.6Hz,2H),1.43(t,J=5.8Hz,1H)。
2-溴-4-氟-1-(2-碘乙基)苯：將Ph3P(2.57g，9.81mmol)及咪唑(0.668g，9.81mmol)於DCM(50mL)中之溶液冷卻至0℃。向其中添加碘(2.489g，9.81mmol)且在0℃攪拌所得混合物30分鐘。經若干分 鐘分部分添加2-(2-溴-4-氟苯基)乙醇(1.79g，8.17mmol)且在室溫下攪拌所得混合物。16小時後，過濾混合物，用DCM洗滌固體。用Na2S2O3水溶液洗滌濾液且有機相乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-100% EtOAc/己烷；20 CV)純化殘餘物獲得呈無色油狀物之2-溴-4-氟-1-(2-碘乙基)苯(2.4g，7.30mmol，89%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.33(dd,J=8.2,2.7Hz,1H),7.25(dd,J=8.5,5.8Hz,1H),7.02(td,J=8.2,2.6Hz,1H),3.41-3.35(m,2H),3.32-3.26(m,2H)。
(2-溴-4-氟苯乙基)三苯基鏻，碘鹽：向2-溴-4-氟-1-(2-碘乙基)苯(2.23g，6.78mmol)於甲苯(15ml)中之溶液中添加Ph3P(1.778g，6.78mmol)且在100℃下加熱混合物16小時。將混合物冷卻至室溫，過濾固體且用甲苯及乙醚洗滌，在高度真空下乾燥獲得呈白色固體狀之(2-溴-4-氟苯乙基)三苯基鏻，碘鹽(3g，5.07mmol，74.8%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 8.01-7.87(m,9H),7.85-7.77(m,6H),7.66-7.51(m,1H),7.35-7.24(m,1H),7.20-7.07(m,1H),3.93-3.80(m,2H),3.07-2.86(m,2H)。
(S)-2-(2-(3-(2-溴-4-氟苯基)丙-1-烯-1-基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃下，向(2-溴-4-氟苯乙基)三苯基鏻，碘鹽(705mg，1.193mmol)於THF(8ml)中之懸浮液中 添加NaH(48.9mg，1.223mmol)且在室溫下攪拌所得混合物45分鐘。將混合物冷卻至-78℃且逐滴添加溶解於THF(8ml)中之(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-甲醯基-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(460mg，0.597mmol)，且在-78℃下攪拌混合物1小時，接著升溫至室溫且攪拌1小時。用水淬滅反應物且用EtOAc萃取產物。有機相用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-30% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得E與Z異構體之不可分混合物形式的(S)-2-(2-(3-(2-溴-4-氟苯基)丙-1-烯-1-基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(500mg，0.523mmol，88%產率)。LCMS(M+2H)=957.2。
(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(3-(4-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯基)丙-1-烯-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯：向(S)-2-(2-(3-(2-溴-4-氟苯基)丙-1-烯-1-基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(500mg，0.523mmol)於無水1,4-二噁烷(10mL)中之溶液中添加雙(頻哪醇根基)二硼烷(159mg，0.628mmol)及乙酸鉀(154mg，1.569mmol)，且將混合物脫氣15分鐘。向經脫氣溶液中添加PdCl2(dppf)-CH2Cl2加和物(42.7mg，0.052mmol)且再繼續除氣5分鐘，其後在90℃下加熱反應物16小時。此 時，LCMS指示反應完成及所要產物之外觀。在冷卻至室溫之後，添加水(5ml)且混合物用乙醚(25mL)萃取，用鹽水(10mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由Biotage使用0-20% EtOAc/己烷純化粗產物獲得呈濃稠糊狀物形式之E及Z異構體之不可分混合物(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(3-(4-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯基)丙-1-烯-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(450mg，0.449mmol，86%產率)。產物為異構體之混合物。其未經進一步純化即用於下一步驟中。LCMS(M+H)=1003.30。
(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(3-(4-氟-2-羥基苯基)丙-1-烯-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯：向(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(3-(4-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯基)丙-1-烯-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(450mg，0.449mmol)於丙酮(6mL)中之溶液中添加過硫酸氫鉀(276mg，0.449mmol)於水(6mL)中之溶液，且在室溫下攪拌所得混合物1小時。接著添加飽和硫代硫酸鈉且混合物用乙酸乙酯萃取，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮獲得呈黏稠油狀物之(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(3-(4-氟-2-羥基苯基)丙-1-烯-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(370mg，0.414mmol，92%產率)。產物為異構體之混合物LCMS(M+H)=893.4。未 經進一步純化即原樣用於下一反應中。
(S)-2-(第三丁氧基)-2-(2-(3-(4-氟-2-羥基苯基)丙-1-烯-1-基)-7-(4-(((R)-5-羥基己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯：向(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(3-(4-氟-2-羥基苯基)丙-1-烯-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(380mg，0.425mmol)於THF(5mL)中之溶液中添加含TBAF 1M之THF(0.851mL，0.851mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物16小時。此時，LCMS指示約70%轉化，因此添加另一份1當量TBAF且再攪拌混合物5小時。此時，LCMS指示反應完成。接著濃縮混合物且藉由biotage(5-30% EtOAc/己烷)純化獲得約2：1異構體混合物形式之(S)-2-(第三丁氧基)-2-(2-(3-(4-氟-2-羥基苯基)丙-1-烯-1-基)-7-(4-(((R)-5-羥基己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(240mg，0.367mmol，86%產率)。LCMS(M+H)=655.3。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-16-氟-4,20,26-三甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,10,13(18),14,16-八烯-3-基]乙酸：在0℃下，向(S)-2-(第三丁氧基)-2-(2-(3-(4-氟-2-羥基苯基)丙-1-烯-1-基)-7-(4-(((R)-5-羥基己 基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(240mg，0.367mmol)於THF(50mL)中之溶液中添加Ph3P(144mg，0.550mmol)，隨後DEAD(0.087mL，0.550mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物3小時。此時，LCMS指示反應完成且所要產物為四種異構體之混合物。接著添加水(25mL)且混合物用乙醚(50mL)萃取，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由Biotage(0-30% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得兩種異構體之不可分混合物形式的所要酯(165mg，0.259mmol，70.7%產率)，其未經進一步純化即用於下一步驟。LCMS(M+H)=637.3
在80℃下加熱上述粗產物酯與(0.754mL，0.754mmol)於EtOH(4mL)中之之混合物3小時。接著冷卻混合物且藉由製備型HPLC純化，獲得兩種異構體
第一溶離主要異構體：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.13(t,J=7.7Hz,1H),6.65-6.54(m,2H),6.50(d,J=11.8Hz,1H),6.45(s,1H),5.96-5.76(m,2H),4.51-4.36(m,2H),4.29(d,J=17.8Hz,1H),4.12-3.96(m,1H),3.73(t,J=12.3Hz,1H),3.61-3.51(m,1H),3.33(d,J=11.0Hz,2H),3.01(d,J=12.0Hz,1H),2.58(s,3H),2.06-1.96(m,1H),1.87-1.78(m,5H),1.66-1.50(m,4H),1.38(d,J=6.0Hz,3H),1.27(s,9H),1.22(s,3H)。LCMS(M+H)=609.4。
第二溶離次要產物：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.17-7.07(m,1H),6.99-6.86(m,1H),6.66-6.49(m,3H),6.37(s,1H),5.97(br.s.,1H),4.58-4.45(m,2H),3.87(t,J=11.5Hz,1H),3.74(dd,J=13.4,4.1Hz,1H),3.53-3.38(m,2H),3.31-3.17(m,2H),2.69(br.s.,1H),2.59(s,3H),2.05-1.87(m,5H),1.80-1.51(m,5H),1.30-1.27(m,12H),1.25(s,3H)。LCMS(M+H)=609.4。
實例39及40
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-16-氟-4,20,26-三甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸：向(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(10E,20S)-16-氟-4,20,26-三甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,10,13(18),14,16-八烯-3-基]乙酸(30mg，0.049mmol)於乙酸乙酯(1.5mL)中之混合物中添加10% Pd/C(5.24mg，4.93μmol)且在氫氣氣球氛圍下攪拌所得混合物16小時。此時，LCMS指示反應完成。接著過濾及濃縮混合物獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-16-氟-4,20,26-三甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸(23mg，0.036mmol，72.6%產率)。1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ 7.14(t,J=7.5Hz,1H),6.88(d,J=11.4Hz,1H),6.61(t,J=7.7Hz,1H),6.23(s,1H),5.62(br.s.,1H),4.60(br.s.,1H),4.31(t,J=12.1Hz,1H),2.79-2.73(m,1H),2.70(t,J=8.1Hz,2H),2.56(d,J=11.4Hz,1H),2.46(s,3H),2.20(br.s.,1H),1.91(s,1H),1.84-1.75(m,3H),1.70-1.62(m,5H),1.56-1.44(m,3H),1.18(d,J=5.5Hz,3H),1.16(s,3H),1.13(s,9H)。4個哌啶氫缺失。LCMS(M+H)=611.4。
第二溶離非對映異構體(實例40),(7mg，0.011mmol，29.3%產率)：1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ 7.12(t,J=7.7Hz,1H),6.84(d,J=11.7Hz,1H),6.68-6.54(m,1H),6.28(s,1H),5.86(br.s.,1H),4.55(d,J=8.8Hz,1H),4.31(t,J=11.7Hz,1H),3.63(t,J=11.0Hz,1H),2.88 -2.81(m,1H),2.77(dd,J=14.7,5.5Hz,1H),2.70-2.63(m,1H),2.62-2.57(m,1H),2.48(s,3H),2.44-2.35(m,1H),2.02(dd,J=11.7,5.5Hz,1H),1.95-1.87(m,1H),1.87-1.69(m,4H),1.68-1.61(m,2H),1.57-1.44(m,3H),1.24(d,J=5.5Hz,3H),1.18(br.s.,3H),1.17(s,9H)。4個哌啶氫缺失。LCMS(M+H)=611.4。
在0-5℃下，向5-苯甲氧基己-1-醇(2.00g，9.03mmol)及4-亞甲基哌啶-1-甲酸苯甲酯(1.30g，5.40mmol，0.60當量)於二氯甲烷(7.0mL)中之溶液中裝入三氟甲烷磺酸三甲基矽烷酯(0.133mL，0.720mmol，0.08當量)。緩慢添加N-碘代丁二醯亞胺(1.24g，5.40mmol，0.60當量)，將溫度維持於0-5℃。在0℃攪拌混合物3小時。在0-5℃下，添加4-亞甲基哌啶-1-甲酸苯甲酯(1.30g，5.40mmol，0.60當量)，隨後添加N-碘代丁二醯亞胺(1.24g，5.40mmol，0.60當量)。3小時後，重複相同途徑且在0-5℃下添加4-亞甲基哌啶-1-甲酸苯甲酯(0.65g，2.70mmol，0.30當量)及N-碘代丁二醯亞胺(0.62g，2.70mmol，0.3當量)。接著在0-5℃下攪拌混合物至少12小時。接著在0-5℃下向反應混合物中添加三乙胺(1.40mL，9.94mmol，1.1當量)。10分鐘後，將反應混合物升溫至室溫，且攪拌約1.5小時。添加MTBE(60mL)及水(40mL)。使各相分離且有機層用10% KH2PO4水溶液(30mL)洗滌，及濃縮。藉由急驟層析法(含0-50% EtOAc之庚烷)純化殘餘物，獲得呈淺黃色油狀物之產物(4.20g)，78.6%校正產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)7.41-7.25(m,10H),5.13(s,2H),4.58(d,J=11.7Hz,1H),4.46(d,J=11.7Hz,1H),3.96-3.91(m,2H),3.57-3.49(m,1H),3.31-3.20(m,4H),3.15-3.02(m,2H),1.90-1.78(m,2H),1.68- 1.57(m,4H),1.55-1.38(m,4H),1.21(d,J=6.1Hz,3H)。
向碘甲基化合物(1.35g，2.34mmol，1當量)於MeOH(15mL)中之溶液中添加三乙胺(0.65mL，4.7mmol，2當量)。接著裝入Pd/C(10重量%，100mg)。接著使混合物經受氫解條件(45psi，40℃)。反應物完成時，反應混合物經矽藻土過濾且減壓濃縮至乾燥。向殘餘物中添加MTBE(35mL)，且所得溶液依序用1N NaOH(15mL×2)，接著20% NaCl(20mL)洗滌。有機層經MgSO4乾燥，且濃縮獲得0.51g淡黃色油狀物(AP 95)，70%原樣產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)7.39-7.31(m,5H),4.58(d,J=11.6Hz,1H),4.46(d,J=11.6Hz,1H),3.56-3.47(m,1H),3.34-3.22(m,2H),2.92(t,J=11.0Hz,2H),2.81-1.69(m,2H),1.85(s,br,1H),1.73-1.59(m,4H),1.57-1.51(m,2H),1.49-1.36(m,4H),1.21(d,J=4.1Hz,3H),1.14(s,3H)。
(R)-乙基5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己酸乙酯：在0℃下向(R)-5-羥基己酸乙酯(5g，31.2mmol)於DMF(100mL)中之溶液中添加咪唑(3.19g，46.8mmol)，隨後第三丁基氯二苯基矽烷(12.00mL，46.8mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物16小時。接著添加水(30mL)且用乙醚(2×100mL)萃取混合物。乙醚層接著用鹽水(50mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。經Biotage(0-10% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈澄清黏稠液體狀之(R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己酸乙酯(10g，25.09mmol，80%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.73-7.68(m,4H),7.48-7.36(m,6H),4.13(q,J=7.2Hz,2H),3.96-3.76(m,1H),2.31-2.16(m,2H),1.72-1.62(m,2H),1.58-1.40(m,2H),1.27(t,J=7.1Hz,3H),1.12-1.05(m,12H)。
(R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己-1-醇：在0℃下向(R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己酸乙酯(10g，25.09mmol)於THF(150mL)中之溶液中逐滴添加含1M LAH之THF(31.4mL，31.4mmol)，且所得混合物在0℃下攪拌30分鐘，接著在室溫下攪拌2小時。依序用1mL水(攪拌10分鐘)、1mL 15% NaOH/水(攪拌10分鐘)，接著2mL水淬滅反應物。攪拌1小時後，經矽藻土過濾混合物。真空濃縮濾液。在高度真空下乾燥殘餘物16小時，獲得呈澄清黏稠油狀物之(R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己-1-醇(8.9g，24.96mmol，99%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.72-7.67(m,4H),7.50-7.36(m,6H),3.92-3.84(m,1H),3.61-3.50(m,2H),1.55-1.41(m,4H),1.37-1.31(m,2H),1.21-1.15(m,1H),1.11-1.09(m,3H),1.08(s,9H)。
(R)-4-((5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-(碘甲基)哌啶-1-甲酸第三丁酯：向(R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己-1-醇(8.23g，23.08mmol)及4-亞甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(6.83g，34.6 mmol)於CH2Cl2(40mL)中之溶液中添加TMS-OTf(0.334mL，1.846mmol)，隨後添加CuSO4(1.842g，11.54mmol)，且使漿料冷卻至0-5℃。接著一次性添加N-碘代丁二醯亞胺(7.79g，34.6mmol)且在0-5℃下再攪拌漿液16小時，接著經2-3小時升溫至室溫。添加乙醚(200mL)，隨後添加Na2S2O3水溶液(5% 100mL)，且分離各層。有機層接著用水(100mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由管柱層析法(EtOAc/己烷，5-20%)純化殘餘物獲得呈黃色油狀物之(R)-4-((5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-(碘甲基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(13g，15.30mmol，66.3%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.70(dt,J=7.1,1.7Hz,4H),7.47-7.36(m,6H),3.93(s,1H),3.91-3.69(m,2H),3.25(br.s.,2H),3.20(t,J=6.4Hz,2H),3.00(br.s.,2H),1.87(d,J=13.1Hz,2H),1.57-1.50(m,4H),1.48(s,9H),1.45-1.35(m,4H),1.15-1.02(m,12H)。LCMS(M-BOc)=580.6。
(R)-4-((5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯：向(R)-4-((5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-(碘甲基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(13g，19.12mmol)於MeOH(100mL)中之溶液中添加TEA(5.33mL，38.2mmol)，隨後添加10%Pd-C(1.018g，0.956mmol)且在PAR下在50PSI下對所得混合物進行氫解。16小時後，混合物經矽藻土墊過濾且濃縮濾液。接著藉由Biotage(0-15% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈淡黃色油狀物之(R)-4-((5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸第三 丁酯(8.2g，14.81mmol，77%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.73-7.67(m,4H),7.48-7.35(m,6H),3.86(sxt,J=5.8Hz,1H),3.72(br.s.,2H),3.24(t,J=6.3Hz,2H),3.10(br.s.,2H),1.78-1.66(m,3H),1.59-1.51(m,1H),1.50-1.47(m,6H),1.47(s,9H),1.14(s,3H),1.10-1.03(m,12H)。LCMS(M+Na)=576.7。
(R)-4-((5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶：在室溫下攪拌(R)-4-((5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(8.2g，14.81mmol)及4M HCl(22.21mL，89mmol)於含二噁烷之1,4-二噁烷(5mL)中之混合物2小時。接著濃縮混合物，用乙酸乙酯(100mL)稀釋，用1N NaOH洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮獲得呈黏稠油狀物之(R)-4-((5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶(6.35g，14.00mmol，95%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.72-7.65(m,4H),7.47-7.34(m,6H),3.87(sxt,J=5.9Hz,1H),3.24(t,J=6.4Hz,2H),2.94-2.86(m,2H),2.77-2.69(m,2H),1.74-1.68(m,4H),1.48-1.32(m,6H),1.14(s,3H),1.10-1.05(m,12H)。LCMS(M+H)=454.2。
6-((S)-1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑 并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯：用(R)-4-((5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶(6.33g，13.95mmol)及惠寧鹼(5.62mL，32.2mmol)處理(S)-6-(1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-碘-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(5.25g，10.73mmol)於NMP(80mL)中之混合物，且加熱(70℃油浴)混合物16小時。此時，LCMS指示反應完成。混合物接著冷卻，用Et2O(200mL)稀釋且用水(100mL)及鹽水(50mL)洗滌，接著乾燥(Na2SO4)，過濾，且減壓濃縮。接著藉由Biotage(5-15%)EtOAc己烷純化殘餘物獲得呈黏稠油狀物之6-((S)-1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(7,8.59mmol，80%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.69(dd,J=8.0,1.5Hz,4H),7.47-7.28(m,6H),7.01(s,1H),5.82(br.s.,1H),4.50-4.38(m,2H),4.31-4.07(m,2H),3.94-3.77(m,1H),3.41-3.24(m,3H),2.61(s,3H),1.88(br.s.,2H),1.67(br.s.,1H),1.54(br.s.,1H),1.51-1.39(m,5H),1.30(s,3H),1.26-1.23(m,6H),1.22(s,9H),1.08(s,3H),1.06(s,9H)。4個缺失之哌啶氫。LCMS(M+H)=816.4。
6-((S)-1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸：向6-((S)-1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(6.8g，8.34mmol)於乙 醇(70mL)中之溶液中添加1N NaOH(9.18mL，9.18mmol)且在室溫下攪拌所得混合物5小時。接著濃縮混合物且將殘餘物用水(50mL)稀釋，用1N HCl酸化且用乙醚(200mL)萃取，用鹽水(50mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮獲得呈白色固體狀之6-((S)-1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(6.4g，8.13mmol，97%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.73-7.68(m,4H),7.47-7.35(m,6H),7.13(s,1H),5.85(br.s,1H),4.30-4.16(m,2H),3.94-3.84(m,1H),3.35(q,J=6.3Hz,2H),2.65(s,3H),1.92(d,J=10.7Hz,2H),1.67-1.39(m,12H),1.30(s,3H),1.28-1.25(m,3H),1.24(s,9H),1.11-1.08(m,3H),1.07(s,9H)。LCMS(M+H)=787.4。
(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯：在0℃下，向6-((S)-1-(第三丁氧基)-2-乙氧基-2-側氧基乙基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(6.4g，8.13mmol)及Et3N(1.473mL，10.57mmol)於THF(80mL)中之經攪拌溶液中添加氯甲酸乙酯(1.011mL，10.57mmol)。1小時後，一次性添加NaBH4(1.538g，40.7mmol)於冷水(80mL)中之溶液且在0℃下再攪拌1小時。接著，反應物用MeOH(5mL)淬滅，用Et2O(100mL)稀釋，用水(2×50mL)及鹽水(25mL)洗滌。有機層乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由Biotage(5-30% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈黏稠油狀物 之(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(4.5g，5.82mmol，71.6%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.74-7.70(m,4H),7.46-7.35(m,6H),6.48(s,1H),5.90(br.s.,1H),4.91-4.83(m,2H),4.29-4.11(m,2H),3.94-3.84(m,1H),3.41-3.29(m,3H),2.61(s,3H),2.17(q,J=5.8Hz,1H),1.94-1.87(m,2H),1.87(br.s.,1H),1.66(br.s.,1H),1.59(s,3H),1.58-1.40(m,5H),1.33-1.26(m,3H),1.26-1.21(m,12H),1.09(d,J=6.1Hz,3H),1.07(s,9H)。LCMS(M+H)=773.4。
(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-甲醯基-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯：向(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(羥基甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(2g，2.59mmol)於CH2Cl2(30mL)中之溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷(1.317g，3.10mmol)且在室溫下攪拌所得混合物3小時。接著添加飽和NaHCO3溶液且混合物用二氯甲烷(50mL)萃取，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由Biotage(5-30% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈黏稠油狀物之(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-甲醯基-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(1.9g，2.464mmol，95%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 10.15(d,J=5.4Hz,1H),7.74-7.66(m,4H),7.47-7.34(m,6H),7.02(s,1H),5.88(br.s., 1H),4.30-4.18(m,2H),3.94-3.81(m,1H),3.40-3.28(m,3H),2.64(s,3H),2.02-1.85(m,3H),1.68(br.s.,1H),1.57-1.52(m,2H),1.50-1.39(m,3H),1.31(s,3H),1.28-1.25(m,3H),1.25(s,9H),1.09(d,J=6.1Hz,3H),1.07(s,9H)。4個缺失之哌啶氫。LCMS(M+H)=772.3。
2-(3,5-二氟-2-甲氧基苯基)乙醇：在0℃下向2-(3,5-二氟-2-甲氧基苯基)乙酸(1g，4.95mmol)於THF(20mL)中之溶液中添加1M含LAH(9.89mL，9.89mmol)之THF且在60℃下加熱所得混合物3小時。接著冷卻混合物且逐滴添加水(0.5mL)、1N NaOH(0.5mL)，接著1mL H2O萃取。攪拌15分鐘後，經矽藻土過濾混合物。真空濃縮濾液。在高度真空下乾燥殘餘物獲得呈澄清黏稠油狀物之2-(3,5-二氟-2-甲氧基苯基)乙醇(700mg，3.72mmol，75%產率)。其未經進一步純化即用於下一步驟中。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 6.83-6.72(m,2H),3.90(s,3H),3.87(q,J=5.7Hz,2H),2.92(t,J=6.5Hz,2H),1.73-1.64(m,1H)。
2,4-二氟-6-(2-羥基乙基)苯酚：在0℃下，向2-(3,5-二氟-2-甲氧基苯基)乙醇(850mg，4.52mmol)於DCM(30mL)中之溶液中添加1M BBr3(13.55mL，13.55mmol)溶液。使所得混合物緩慢升溫至室溫且攪拌3小時。接著添加水(逐滴)且在停止鼓泡後，混合物用DCM稀釋且用水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由Biotage(5-50%，EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈澄清黏稠油狀物之2,4-二氟-6- (2-羥基乙基)苯酚(450mg，2.58mmol，57.2%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.14(br.s.,1H),6.80-6.73(m,1H),6.66(dt,J=8.8,2.4Hz,1H),4.01-3.95(m,2H),2.93(t,J=5.5Hz,2H),2.32(br.s.,1H)。
2-(2-(苯甲氧基)-3,5-二氟苯基)乙醇：向2,4-二氟-6-(2-羥基乙基)苯酚(450mg，2.58mmol)於丙酮(10mL)中之溶液中添加K2CO3(714mg，5.17mmol)，隨後添加(溴甲基)苯(0.461mL，3.88mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物16小時。接著添加水且混合物用乙酸乙酯萃取，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由Biotage(5-30% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈黏稠油狀物之2-(2-(苯甲氧基)-3,5-二氟苯基)乙醇(540mg，2.043mmol，79%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.48-7.36(m,5H),6.84-6.72(m,2H),5.07(s,2H),3.78(q,J=6.3Hz,2H),2.84(t,J=6.4Hz,2H),1.53(t,J=5.5Hz,1H)。
2-(苯甲氧基)-1,5-二氟-3-(2-碘乙基)苯：將Ph3P(750mg，2.86mmol)及咪唑(195mg，2.86mmol)於DCM(15mL)中之溶液冷卻至0℃。向其中添加碘(726mg，2.86mmol)且在0℃下攪拌所得混合物30分鐘。接著，經若干分鐘分部分添加2-(2-(苯甲氧基)-3,5-二氟苯基)乙醇(630mg，2.384mmol)且在室溫下攪拌所得混合物。5小時後，過濾混合物，用DCM洗滌固體。用Na2S2O3水溶液洗滌濾液且有機相乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(5%-30% EtOAc/己烷)純化 殘餘物獲得呈淡黃色黏稠油狀物之2-(苯甲氧基)-1,5-二氟-3-(2-碘乙基)苯(630mg，1.684mmol，70.6%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.46-7.34(m,5H),6.83(ddd,J=11.3,8.2,3.0Hz,1H),6.69(dt,J=8.6,2.3Hz,1H),5.10(s,2H),3.21(d,J=7.7Hz,2H),3.13-3.00(m,2H)。
(2-(苯甲氧基)-3,5-二氟苯乙基)三苯基鏻，碘鹽：向2-(苯甲氧基)-1,5-二氟-3-(2-碘乙基)苯(630mg，1.684mmol)於甲苯(8ml)中之溶液中添加Ph3P(442mg，1.684mmol)且在100℃下加熱混合物16小時。接著使混合物冷卻至室溫且經移液管傾析甲苯，且剩餘殘餘物用乙醚及乙酸乙酯洗滌，在高度真空下乾燥獲得呈白色固體狀之(2-(苯甲氧基)-3,5-二氟苯乙基)三苯基鏻，碘鹽(600mg，0.943mmol，56.0%產率)。其不經進一步純化即原樣用於下一步驟。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.81-7.71(m,9H),7.62(td,J=7.8,3.5Hz,5H),7.39-7.33(m,2H),7.31(d,J=7.6Hz,1H),7.25(d,J=7.3Hz,2H),7.22-7.14(m,2H),6.75(ddd,J=11.2,8.2,2.8Hz,1H),5.01(s,2H),3.92(dt,J=12.4,7.9Hz,2H),3.02-2.94(m,2H)。
(S)-2-(2-(3-(2-(苯甲氧基)-3,5-二氟苯基)丙-1-烯-1-基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基 吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃向(2-(苯甲氧基)-3,5-二氟苯乙基)三苯基鏻，碘鹽(330mg，0.519mmol)於THF(4ml)中之懸浮液中添加NaH(21.27mg，0.532mmol)且在室溫攪拌所得混合物45分鐘。使混合物冷卻至0℃且逐滴添加溶解於THF(4ml)中之(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-甲醯基-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(200mg，0.259mmol)，且在0℃攪拌混合物1小時，接著升溫至室溫且攪拌2小時。用水淬滅反應物且用EtOAc萃取產物。有機相用鹽水洗，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-30% EtOAc/己烷)純化殘餘物，獲得(S)-2-(2-(3-(2-(苯甲氧基)-3,5-二氟苯基)丙-1-烯-1-基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(190mg，0.190mmol，73%產率)呈E與Z異構體之混合物。LCMS(M+H)=1002.0。
(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(3-(3,5-二氟-2-羥基苯基)丙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯：向(S)-2-(2-(3-(2-(苯甲氧基)-3,5-二氟苯基)丙-1-烯-1-基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(190mg，0.190mmol)於乙醇(4mL)中之溶液中添加10% Pd-C(40.4mg，0.038mmol)，且在氣球氫氣氛圍下攪拌所得混合物16小時。此時，LCMS指示反應完成。接著混合物經矽藻土墊 過濾，濃縮且在高真空下乾燥，獲得呈濃稠糊狀物之(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(3-(3,5-二氟-2-羥基苯基)丙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(140mg，0.153mmol，81%產率)。其未經進一步純化即用於下一步驟中。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.70(d,J=7.3Hz,4H),7.45-7.34(m,6H),6.75-6.63(m,2H),6.34(s,1H),5.90(br.s.,1H),4.33-4.10(m,3H),3.95-3.79(m,1H),3.35(br.s.,2H),2.92-2.76(m,3H),2.73(br.s.,1H),2.61(s,3H),2.16-2.04(m,3H),1.92(br.s.,1H),1.87(br.s.,1H),1.53-1.46(m,3H),1.45-1.26(m,9H),1.24(s,9H),1.07(s,9H)。LCMS(M+H)=913.9。
(S)-2-(第三丁氧基)-2-(2-(3-(3,5-二氟-2-羥基苯基)丙基)-7-(4-(((R)-5-羥基己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯：向(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(3-(3,5-二氟-2-羥基苯基)丙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(130mg，0.142mmol)於THF(3mL)中之溶液中添加1M TBAF溶液(0.712mL，0.712mmol)且在室溫下攪拌所得混合物16小時。接著濃縮混合物且藉由Biotage(5-50% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈白色固體狀之(S)-2-(第三丁氧基)-2-(2-(3-(3,5-二氟-2-羥基苯基)丙基)-7-(4-(((R)-5-羥基己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(70mg，0.104mmol，72.9%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 6.79-6.61(m,2H),6.34(s,1H),5.94(br.s.,1H),4.29-4.09(m,2H),3.87(d,J=5.4Hz,1H),3.49-3.36(m,2H),2.92-2.79(m,3H),2.76(br.s., 1H),2.62(s,3H),2.16-2.07(m,2H),1.98(d,J=13.2Hz,2H),1.64(d,J=4.3Hz,3H),1.56-1.41(m,4H),1.33(br.s.,2H),1.27-1.20(m,15H)。LCMS(M+H)=675.8。
實例41
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15,17-二氟-4,20,26-三甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸：向(S)-2-(第三丁氧基)-2-(2-(3-(3,5-二氟-2-羥基苯基)丙基)-7-(4-(((R)-5-羥基己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(65mg，0.096mmol)於THF(15mL)中之溶液中添加Ph3P(37.9mg，0.144mmol)，隨後添加DEAD(0.023mL，0.144mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物3小時。此時LCMS指示反應完成。接著添加水(25mL)且混合物用乙醚(50mL)萃取，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由Biotage(0-30% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得所要酯。LCMS(M+H)=657.7。接著在80℃下用1N含NaOH(0.482mL，0.482mmol)之EtOH(2mL)處理酯5小時。接著冷卻混合物，濃縮且藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15,17-二氟-4,20,26-三甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸(24mg，0.036mmol，37.6%產率)。1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δ 6.86-6.72(m,2H),6.26(s,1H),5.93(s,1H),4.58(t,J=11.3Hz,1H),4.53-4.45(m,1H),3.85(t,J=10.9Hz,1H),3.52(t,J=5.0Hz,2H),2.95-2.78(m,3H),2.74(d,J=11.2Hz,1H),2.72-2.64(m,1H),2.62-2.52(m,3H),2.30-2.16(m, 1H),2.08-2.00(m,2H),1.96-1.88(m,2H),1.86-1.62(m,8H),1.28(s,3H),1.26(s,9H),1.20(d,J=6.0Hz,3H)。LCMS(M+H)=629.6。
2-(2,3-二氟-6-甲氧基苯基)乙醇：在0℃下，向2-(2,3-二氟-6-甲氧基苯基)乙酸(1g，4.95mmol)於THF(20mL)中之溶液添加含1M LAH(9.89mL，9.89mmol)之THF且在60℃下加熱所得混合物3小時。接著冷卻混合物且逐滴添加水(0.5mL)、1N NaOH(0.5mL)，接著1mL H2O萃取。攪拌15分鐘後，經矽藻土過濾混合物。真空濃縮濾液。在高度真空下乾燥殘餘物獲得呈澄清黏稠油狀物之2-(2,3-二氟-6-甲氧基苯基)乙醇(810mg，4.30mmol，87%產率)。其未經進一步純化即用於下一步驟中。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.01(q,J=9.2Hz,1H),6.62-6.53(m,1H),3.92-3.75(m,5H),3.00(td,J=6.6,1.9Hz,2H),1.65(t,J=5.7Hz,1H)。
3,4-二氟-2-(2-羥基乙基)苯酚：在0℃下向2-(2,3-二氟-6-甲氧基苯基)乙醇(800mg，4.25mmol)於DCM(25mL)中之溶液中添加1M BBR3(17.01mL，17.01mmol)溶液且使所得混合物升溫至室溫且攪拌4小時。接著添加水(逐滴)且在停止鼓泡後，混合物用DCM稀釋，且用水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由Biotage(5-50%,EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈澄清黏稠油狀物之3,4-二氟-2-(2-羥基乙基)苯酚(500mg，2.87mmol，67.5%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.85(br.s.,1H),7.04-6.93(m,1H),6.71-6.60(m,1H),4.07-4.01(m,2H),3.04-2.95(m,2H),2.38(br.s.,1H)。
2-(6-(苯甲氧基)-2,3-二氟苯基)乙醇：向3,4-二氟-2-(2-羥基乙基)苯酚(460mg，2.64mmol)於丙酮(10mL)中之溶液中添加K2CO3(730mg，5.28mmol)，隨後添加(溴甲基)苯(0.471mL，3.96mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物16小時。接著添加水且混合物用乙酸乙酯萃取，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由Biotage(5-30% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈黏稠油狀物之2-(6-(苯甲氧基)-2,3-二氟苯基)乙醇(580mg，2.195mmol，83%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.46-7.34(m,5H),6.99(q,J=9.1Hz,1H),6.67-6.59(m,1H),5.09(s,2H),3.86(q,J=6.4Hz,2H),3.05(td,J=6.5,1.7Hz,2H)。
1-(苯甲氧基)-3,4-二氟-2-(2-碘乙基)苯：使Ph3P(697mg，2.66mmol)及咪唑(181mg，2.66mmol)於DCM(15mL)中之溶液冷卻至0℃。向其中添加碘(674mg，2.66mmol)且在0℃下攪拌所得混合物30分鐘。經若干分鐘分部分添加2-(6-(苯甲氧基)-2,3-二氟苯基)乙醇(585mg，2.214mmol)且在室溫下攪拌所得混合物。5小時後，過濾混合物，用DCM洗滌固體。用Na2S2O3水溶液洗滌濾液且有機相乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-100% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈無色油狀物之1-(苯甲氧基)-3,4-二氟-2-(2-碘乙基)苯(720mg，1.924mmol，87%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.52-7.35(m,5H),7.03(q,J=9.3Hz,1H),6.69-6.52(m,1H),5.10(s,2H),3.37-3.29(m,4H)。
(6-(苯甲氧基)-2,3-二氟苯乙基)三苯基鏻，碘鹽：向1-(苯甲氧基)-3,4-二氟-2-(2-碘乙基)苯(720mg，1.924mmol)於二甲苯(10mL)中之溶液中添加Ph3P(1514mg，5.77mmol)，且在140℃下加熱混合物16小時。使混合物冷卻至室溫(產物固化)。接著濾出固體且且用甲苯及乙醚洗滌，在高度真空下乾燥獲得呈白色固體狀之(6-(苯甲氧基)-2,3-二氟苯乙基)三苯基鏻，碘鹽(600mg，0.943mmol，49.0%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.87-7.77(m,3H),7.77-7.59(m,12H),7.53-7.44(m,2H),7.40-7.33(m,3H),7.02(q,J=9.3Hz,1H),6.70(d,J=9.1Hz,1H),5.15(s,2H),3.81-3.69(m,2H),3.10-2.98(m,2H)。LCMS(M+H)=510.2。
(S)-2-(2-(3-(6-(苯甲氧基)-2,3-二氟苯基)丙-1-烯-1-基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃下向(6-(苯甲氧基)-2,3-二氟苯乙基)三苯基鏻，碘鹽(217mg，0.340mmol)於THF(5ml)中之懸浮液中添加n-Buli(0.213mL，0.340mmol)，且在60℃下加熱所得混合物1小時。接著使混合物冷卻至室溫且逐滴添加溶解於THF(5ml)中之(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-甲醯基-5-甲基吡唑并 [1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(175mg，0.227mmol)且在室溫下攪拌混合物5小時。用水淬滅反應物且用EtOAc萃取產物。有機相用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-30% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈E及Z異構體之混合物形式的(S)-2-(2-(3-(6-(苯甲氧基)-2,3-二氟苯基)丙-1-烯-1-基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(114mg，0.114mmol，50%產率)。LCMS(M+H)=1001.8。
(S)-2-(第三丁氧基)-2-(2-(3-(2,3-二氟-6-羥基苯基)丙基)-7-(4-(((R)-5-羥基己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯：向(S)-2-(2-(3-(6-(苯甲氧基)-2,3-二氟苯基)丙-1-烯-1-基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(114mg，0.114mmol)於乙醇(4mL)中之溶液中添加10% Pd-C(24mg，0.022mmol)且在氣球氫氣氛圍下攪拌所得混合物16小時。此時，LCMS指示反應完成。接著經矽藻土墊過濾混合物，濃縮且在高度真空下乾燥。接著用1M含TBAF(0.849mL，0.849mmol)之THF(4mL)處理殘餘物16小時。接著濃縮混合物且藉由Biotage(5-70% EtOAc/己烷)純化獲得呈濃稠糊狀物形式之(S)-2-(第三丁氧基)-2-(2-(3-(2,3-二氟-6-羥基苯基)丙基)-7-(4-(((R)-5-羥基己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(35mg，0.052mmol，30%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.90(q,J=9.0Hz,1H),6.59(d, J=10.0Hz,1H),6.36(s,1H),5.91(br.s.,1H),4.32-4.15(m,2H),3.85(d,J=6.3Hz,2H),3.44(br.s.,3H),2.94(br.s.,1H),2.89-2.71(m,4H),2.63(s,3H),2.15-2.04(m,2H),2.04-1.94(m,2H),1.90(d,J=6.8Hz,2H),1.75(d,J=7.3Hz,1H),1.57-1.44(m,6H),1.38-1.27(m,12H),0.94-0.87(m,6H)。LCMS(M+H)=675.4。
實例42
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-14,15-二氟-4,20,26-三甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸：向(S)-2-(第三丁氧基)-2-(2-(3-(2,3-二氟-6-羥基苯基)丙基)-7-(4-(((R)-5-羥基己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(35mg，0.052mmol)於THF(10mL)中之溶液中添加Ph3P(40.8mg，0.156mmol)，隨後添加DEAD(0.025mL，0.156mmol)且在室溫下攪拌所得混合物3小時。此時，LCMS指示反應完成。接著添加水(25mL)且混合物用乙醚(50mL)萃取，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由Biotage(0-30% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得所要酯。LCMS(M+H)=657.7。接著在80℃下用1N含NaOH(0.259mL，0.259mmol)之EtOH(2mL)處理酯5小時。接著冷卻混合物，濃縮且藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-14,15-二氟-4,20,26-三甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸(7.7mg，0.012mmol，23.61%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.18(q,J=9.7Hz,1H),6.82(d, J=8.1Hz,1H),6.28(s,1H),5.70(s,1H),4.58(br.s.,1H),4.30(t,J=11.4Hz,1H),3.65-3.56(m,1H),3.35(d,J=16.9Hz,2H),2.80-2.62(m,4H),2.55(br.s.,1H),2.47(s,3H),2.19(br.s.,1H),1.87(d,J=12.1Hz,2H),1.83-1.74(m,2H),1.73-1.57(m,6H),1.56-1.44(m,2H),1.20-1.15(m,6H),1.14(s,9H)。LCMS(M+H)=629.5。
2-(4,5-二氟-2-甲氧基苯基)乙醇：在0℃下，向2-(4,5-二氟-2-甲氧基苯基)乙酸(1g,4.95mmol)於THF(20mL)中之溶液中添加1M含LAH(9.89mL，9.89mmol)之THF，且在60℃下加熱所得混合物3小時。接著冷卻混合物且逐滴添加水(0.5mL)、1N NaOH(0.5mL)，接著1mL H2O萃取。攪拌15分鐘後，經矽藻土過濾混合物。真空濃縮濾液。在高度真空下乾燥殘餘物獲得呈澄清黏稠油狀物之2-(4,5-二氟-2-甲氧基苯基)乙醇(800mg，4.25mmol，86%產率)。其未經進一步純化即用於下一步驟中。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.02(t,J=9.8Hz,1H),6.71(dd,J=12.1,6.7Hz,1H),3.87-3.82(m,2H),3.81(s,3H),2.85(t,J=6.5Hz,2H),1.56(br.s.,1H)。
4,5-二氟-2-(2-羥基乙基)苯酚：在0℃下，向2-(4,5-二氟-2-甲氧基苯基)乙醇(800mg，4.25mmol)於DCM(25mL)中之溶液中添加1M BBr3(17.01mL，17.01mmol)溶液且所得混合物升溫至室溫且攪拌4小時。接著添加水(逐滴)且在停止鼓泡後，混合物用DCM稀釋，且用水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由Biotage(5-70% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈澄清黏稠油狀物之4,5-二氟-2-(2-羥基乙基)苯酚(450mg，2.58mmol，60.8%產率)。1H NMR(500MHz, CDCl3)δ 6.93-6.84(m,1H),6.75(dd,J=11.5,7.1Hz,1H),4.03-3.96(m,2H),2.85(t,J=5.2Hz,2H)。
2-(2-(苯甲氧基)-4,5-二氟苯基)乙醇：向4,5-二氟-2-(2-羥基乙基)苯酚(450mg，2.58mmol)於丙酮(10mL)中之溶液中添加K2CO3(714mg，5.17mmol)，隨後添加(溴甲基)苯(0.461mL，3.88mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物16小時。接著添加水且混合物用乙酸乙酯萃取，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由Biotage(5-30% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈黏稠油狀物之2-(2-(苯甲氧基)-4,5-二氟苯基)乙醇(580mg，2.195mmol，85%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.48-7.33(m,5H),7.10-7.01(m,1H),6.78(dd,J=12.1,6.7Hz,1H),5.05(s,2H),3.85(q,J=6.0Hz,2H),2.90(t,J=6.4Hz,2H),1.52(t,J=5.5Hz,1H)。
1-(苯甲氧基)-4,5-二氟-2-(2-碘乙基)苯：使Ph3P(691mg，2.63mmol)及咪唑(179mg，2.63mmol)in DCM(15mL)中之溶液冷卻至0℃。向其中添加碘(668mg，2.63mmol)且在0℃攪拌所得混合物30分鐘。經若干分鐘分部分添加2-(2-(苯甲氧基)-4,5-二氟苯基)乙醇(580mg，2.195mmol)且在室溫下攪拌所得混合物。5小時後，過濾混合物且用DCM洗滌固體。用Na2S2O3水溶液洗滌濾液且有機相乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-20% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈無色黏稠油狀物之1-(苯甲氧基)-4,5-二氟-2-(2-碘乙基)苯(630mg，1.684mmol，77%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.50- 7.34(m,6H),7.00(dd,J=10.3,9.2Hz,1H),6.77(dd,J=12.0,6.6Hz,1H),5.06(s,2H),3.37(t,J=7.5Hz,2H),3.21-3.15(m,2H)。
(2-(苯甲氧基)-4,5-二氟苯乙基)三苯基鏻，碘鹽：向1-(苯甲氧基)-4,5-二氟-2-(2-碘乙基)苯(630mg，1.684mmol)於二甲苯(10mL)中之溶液中添加Ph3P(883mg，3.37mmol)且在140℃下加熱混合物16小時。使混合物冷卻至室溫(產物固化)。接著濾出固體且用乙醚及己烷洗滌，在高度真空下乾燥獲得呈白色固體狀之(2-(苯甲氧基)-4,5-二氟苯乙基)三苯基鏻碘鹽(850mg，1.336mmol，79%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.87-7.61(m,15H),7.44-7.33(m,6H),6.74(dd,J=11.6,6.4Hz,1H),5.00(s,2H),3.94-3.83(m,2H),3.06-2.91(m,2H)。LCMS(M+H)=510.4。
(S)-2-(2-(3-(2-(苯甲氧基)-4,5-二氟苯基)丙-1-烯-1-基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃下向(2-(苯甲氧基)-4,5-二氟苯乙基)三苯基鏻碘鹽(289mg，0.454mmol)於THF(4ml)中之懸浮液中添加NaH(18.61mg，0.465mmol)且在室溫下攪拌所得混合物45分鐘。將混合物冷卻至0℃且逐滴添加溶解於THF(4ml)中之(S)-2-(第三丁氧基)-2-(7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-甲醯基-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶 -6-基)乙酸乙酯(175mg，0.227mmol)且在0℃下攪拌混合物1小時，接著升溫至室溫且攪拌2小時。用水淬滅反應物且用EtOAc萃取產物。有機相用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。藉由急驟層析法(Biotage；0%-30% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得呈E及Z異構體混合物形式之(S)-2-(2-(3-(2-(苯甲氧基)-4,5-二氟苯基)丙-1-烯-1-基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(190mg，0.190mmol，84%產率)。LCMS(M+H)=1002.0。
(S)-2-(第三丁氧基)-2-(2-(3-(4,5-二氟-2-羥基苯基)丙基)-7-(4-(((R)-5-羥基己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯：向(S)-2-(2-(3-(2-(苯甲氧基)-4,5-二氟苯基)丙-1-烯-1-基)-7-(4-(((R)-5-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(190mg，0.190mmol)於乙醇(4mL)中之溶液中添加10% Pd-C(60.6mg，0.057mmol)，且在氣球氫氣氛圍下攪拌所得混合物16小時。此時，LCMS指示反應完成。混合物接著經矽藻土墊過濾，濃縮且在高度真空下乾燥。接著用1M含TBAF(0.949mL，0.949mmol)之THF(4mL)處理殘餘物16小時。接著濃縮混合物且藉由Biotage(5-70% EtOAc/己烷)純化獲得呈濃稠糊狀物之(S)-2-(第三丁氧基)-2-(2-(3-(4,5-二氟-2-羥基苯基)丙基)-7-(4-(((R)-5-羥基己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(85mg，0.126mmol，66.4%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 6.96-6.89(m,1H),6.68(dd,J=11.7,7.1Hz,1H),6.34(s,1H),5.90(br.s.,1H),4.31-4.09(m,2H),3.93-3.81 (m,1H),3.44(br.s.,2H),2.88-2.70(m,4H),2.63(s,4H),2.12-1.94(m,4H),1.90(br.s.,2H),1.57-1.42(m,6H),1.41-1.31(m,3H),1.27-1.18(m,18H)。LCMS(M+H)=675.6。
實例43
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15,16-二氟-4,20,26-三甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸：向(S)-2-(第三丁氧基)-2-(2-(3-(4,5-二氟-2-羥基苯基)丙基)-7-(4-(((R)-5-羥基己基)氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(85mg，0.126mmol)於THF(12mL)中之溶液中添加Ph3P(49.6mg，0.189mmol)，隨後添加DEAD(0.030mL，0.189mmol)，且在室溫下攪拌所得混合物3小時。此時LCMS指示反應完成。接著添加水(25mL)且混合物用乙醚(50mL)萃取，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。接著藉由Biotage(0-30% EtOAc/己烷)純化殘餘物獲得所要酯。LCMS(M+H)=657.7。接著在80℃下用1N含NaOH(0.630mL，0.630mmol)之EtOH(2mL)處理酯5小時。接著冷卻混合物，濃縮且藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15,16-二氟-4,20,26-三甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸(16mg，0.024mmol，19.19%產率)。1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δ 7.05(br.s.,1H),6.90(br.s.,1H),6.23(s.,1H),5.86(s.,1H),4.56-4.45(m,2H),3.77(br.s.,1H),3.55-3.46(m,4H),2.87-2.81(m,2H),2.73(br.s.,1H),2.60(br.s.,3H),2.53(br.s.,1H),2.33(br.s.,1H),1.91-1.66(m,11H),1.32-1.12(m, 15H)。LCMS(M+H)=629.5。
以下實例44-53使用適當試劑且使用與實例38相同之方法合成。
實例44
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,16,26-三甲基-20-丙基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸：經製備型HPLC純化粗物質得到6.1mg產物且其純度藉由LCMS分析估算為100%。1H NMR(500MHz,DMSO)δ 0.82(t,3H).1.15(s,9H),1.18(s,3H),1.54-1.86(重疊m,14H).2.29(s,3H),2.50(s,3H),2.67(m,1H),3.31(m,2H),3.65(t,1H),3.80(m,1H)4.33(m,1H)4.46(m,1H),4.57(重疊m,2H),4.82(d,1H),5.67(s,1H),6.49(s,1H),6.70(d,1H),6.81(s,1H),7.18(d,1H)。LCMS(M+H)=637.6。
實例45
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,16,26-三甲基-20-丙基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸：藉由製備型HPLC純化粗產物得到8.0mg產物且其純度藉由LCMS分析估算為97%。1H NMR(500MHz,DMSO)δ 0.88(t,3H).1.16(s,9H),1.18(s,3H),1.36-1.76(重疊 m,14 H),2.26(s,3H),2.50(s3H)2.67(m,1H),3.20(m,1H)3.39(重疊m 2H),3.62(m,1H),4.38(m,1H),4.45(重疊m,2H),4.56(d,1H),4.71(dd,2H)5.77(s,1H),6.51(s,1H),6.64(d,1H),6.79(d,1H),7.06(d,1H)。LCMS(M+H)=636.6。
實例46
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,18-二甲基-12-(4-甲基苯基)-11,17-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜四環[16.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 ]二十三碳-2,4,6(23),8-四烯-3-基]乙酸： 1H NMR(500MHz,DMSO)δ 1.21(重疊s,12H),1.91-1.48(重疊m,10 H),2.30(s,3H),2.51(s,3H),3.34-3.44(重疊m,4H),3.79(m,1H)4.40(m,1H),4.43(d,1H),4.83(重疊，2H),5.91(s,1H),6.25(s,1H),7.16(d,2H),7.22(d,2H)。LCMS(M+H)=565.4。
實例47
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,18-二甲基-12-(4-甲基苯基)-11,17-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜四環[16.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 ]二十三碳-2,4,6(23),8-四烯-3-基]乙酸：1H NMR(500MHz,DMSO)δ 1.20(s,9 H),1.21(s,3H)1.85-1.45(重疊m,10 H),2.31(s,3H),2.51(s,3H),3.33-3.60(重疊m,4H),3.99(m,1H)4.46(m,1H),4.50(重疊，1H),4.52(m,1H)4.78(重疊，1H),5.96(s,1H),6.26(s,1H),7.17(d,2H),7.26(d,2H)。LCMS(M+H)=565.4。
實例48
(2S)-2-[(12S)-12-[(苯甲氧基)甲基]-4,18-二甲基-11,17-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜四環[16.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 ]二十三碳-2,4,6(23),8-四烯-3-基]-2-(第三丁氧基)乙酸： 1H NMR(500MHz,DMSO)δ 1.19(s,12H),1.45-1.57(重疊m,9H),1.71(m,1H),2.51(s,3H)3.23-3.53(重疊m,6H),3.73(m,1H),3.91(m,1H),4.54(s,2H).4.62(m,1H),4.67(d,1H),5.01(d,1H),5.97(s,1H),6.35(s,1H),7.30(m,1H),7.37(重疊m,4H)。LCMS(M+H)=595.3。
實例49
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{15-氟-4,26-二甲基-20-丙基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸： 1H NMR(500MHz,DMSO)δ 0.81(m,3H)1.14(s,9H),1.18(s,3H)1.45-1.90(重疊m,14H),2.51(s,3H),3.33-3.80(重疊m,5H),4.29(m,1H)4.42(m,1H),4.57(重疊，2H),4.6(d,1H)4.87(d,1H),5.59(s,1H),6.49(s,1H),6.97(m,1H),7.02(m,1H)7.12(d,1H)。LCMS(M+H)=641.4。
實例50
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{15-氟-4,26-二甲基-20-丙基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸： 1H NMR(500MHz,DMSO)δ 0.85(m,3H)1.15(s,9H),1.18(s,3H)1.34-1.90(重疊m,14H),2.51(s,3H),2.72(m,1H),3.11(m,1H),3.31-3.80(重疊m,3H),4.55(重疊m,2H)4.61(重疊m,3H),4.60(d,1H)5.73(s,1H),6.54(s,1H),7.00(重疊m,3H)。LCMS(M+H)=641.4。
實例51
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{15-氟-4,26-二甲基-20-苯基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸： 1H NMR(500MHz,DMSO)δ 1.15(s,9H),1.16(s,3H),1.48-1.91(重疊m,10 H),2.52(s,3H),2.81(m,1H),3.32-3.59(重疊m,5H),4.38(m,1H),4.70(重疊m,2H),4.80(d,1H),4.94(d,1H),5.41(m,1H),5.48(s,1H),6.53(s,1H),6.67(m,1H),6.86(m,1H),7.10(dd,1H),7.18(重疊m,2H),7.29(d,2H)。LCMS(M+H)=675.2。
實例52
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{15-氟-4,26-二甲基-20-苯基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸： 1H NMR(500MHz,DMSO)δ 1.13(s,9H),1.18(s,3H),1.56(重疊m,5H),1.83-1.97(重疊m,5H),2.51(s,3H),2.81(m,1H),3.32-3.54(重疊m,5H),4.40(m,1H),4.70(d.1H),4.79(m,2H),4.93(d,1H),5.29(m,1H),5.47(s,1H),6.52(s,1H),6.57(m,1H),6.78(m,1H),7.00(d,1H),7.24(m,1H),7.35(重疊m,3H)。LCMS(M+H)=675.2。
實例53
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(24S)-4,24,30-三甲基-11,23,29-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜六環[28.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 22 .0 15 , 20 ]三十五碳-2,4,6(35),8,13,15,17,19,21-九烯-3-基]乙酸： 1H NMR(500MHz,DMSO)δ 1.13(s,9H),1.18(s,3H),1.27(d,3H),1.53-1.88(重疊m 10H)2.51(s,3H),3.39-3.62(重疊m,5H),4.33(m,1H),4.74(重疊m,4H),4.96(d,1H),5.54(s,1H),6.51(s,1H),7.31(重疊m,2H),7.41(m,1H),7.79(dd,2H),7.84(s,1H)。LCMS(M+H)=645.5。
4-氟-2-[(1,1,1-三氟戊-4-烯-2-基)氧基]苯甲酸甲酯：將2,4-二氟甲酸甲酯(1.72g，9.99mmol)溶解於二噁烷中。向其中添加1,1,1-三氟 戊-4-烯-2-醇(1.40g，9.99mmol)，隨後添加60%(礦物油)NaH(0.40g，9.99mmol)。將所得混合物加熱至90℃，且攪拌隔夜。在冷卻室溫至之後，添加1N HCl且將混合物轉移至分液漏斗。用乙酸乙酯萃取混合物，其後用1N NaOH(2次)及飽和NaCl洗滌有機溶液。溶液經Na2SO4乾燥，過濾且移除溶劑獲得呈油狀物之標題化合物，其未經進一步純化即用於下一步驟。
{4-氟-2-[(1,1,1-三氟戊-4-烯-2-基)氧基]苯基}甲醇：將4-氟-2-[(1,1,1-三氟戊-4-烯-2-基)氧基]苯甲酸甲酯(2.92g，10mmol)溶解於20mL THF中且冷卻至0℃。添加1M(THF)LiAlH4(10mL，10mmol)且攪拌混合物3小時。添加乙酸乙酯(10mL)且攪拌混合物5分鐘，其後添加飽和NaHCO3且繼續攪拌15分鐘。將混合物轉移至分液漏斗且用乙酸乙酯萃取。將有機層合併且經Na2SO4乾燥，過濾且真空移除溶劑。藉由使用己烷/乙酸乙酯作為溶離劑的Biotage儀器上之管柱層析法純化粗產物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 2.70(m,2H),4.64(重疊m,3H),5.23(d,1H),5.27(d,1H),5.84(m,1H),6.68(dd,1H),6.77(td,1H),7.35(m,1H)。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{2-[({4-氟-2-[(1,1,1-三氟戊-4-烯-2-基)氧基]苯基}甲氧基)甲基]-5-甲基-7-[4-甲基-4-(丙-2-烯-1-基氧基)哌啶-1-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基}乙酸乙酯：在0℃下，將(4-氟-2-((1,1,1-三氟戊-4-烯-2-基)氧基)苯基)甲醇(66mg，0.25mmol)及(S)-2-(7-(4-(烯 丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(145mg，0.25mmol)溶解於1mL DMF中且添加60%(礦物油)NaH(10mg，0.25mmol)。在0℃下攪拌所得混合物3小時，接著用1N HCl淬滅。用乙酸乙酯萃取混合物。合併有機溶離份且經Na2SO4乾燥，過濾且移除溶劑獲得粗產物，其未經進一步純化即用於下一反應中。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(21E)-16-氟-4,26-二甲基-20-(三氟甲基)-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17,21-八烯-3-基]乙酸乙酯：將(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{2-[({4-氟-2-[(1,1,1-三氟戊-4-烯-2-基)氧基]苯基}甲氧基)甲基]-5-甲基-7-[4-甲基-4-(丙-2-烯-1-基氧基)哌啶-1-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基}乙酸乙酯(90mg，0.125mmol)溶解於70mL CH2Cl2中。向其中添加[1,3-雙-(2,4,6-三甲基苯基)-2-亞咪唑啶基]二氯(苯基亞甲基)(三環己基膦)釕(21mg，0.025mmol)且在回流下攪拌所得混合物4小時。真空移除溶劑且將殘餘物溶解於中1mL甲醇中。添加[1,3-雙-(2,4,6-三甲基苯基)-2-亞咪唑啶基]二氯(苯基亞甲基)(三環己基膦)釕(21mg，0.025mmol)，隨後添加NaBH4(26mg，0.624mmol)。攪拌15分鐘後，真空移除溶劑且藉由使用己烷/乙酸乙酯溶離的Biotage儀器上之層析法純化粗產物，獲得61mg產物。LCMS(M+H)=695.5。
實例54
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[16-氟-4,26-二甲基-20-(三氟甲基)-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸： 1H NMR(500MHz,DMSO)δ 1.13(s,9H),1.17(s,3H),1.52-1.85(重疊m,10H),2.51(s,3H),3.34-3.9(重疊m,5H),4.26(m,1H),4.57(m,2H),4.90(d,1H),4.78(d,1H),5.38(br s,1H),5.54(s,1H),6.45(s,1H),6.85(m,1H),7.29(d,1H),7.40(t,1H)。LCMS(M+H)=667.5。
(S)-5-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲醛：在室溫下攪拌(S)-(4-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇(100mg，0.485mmol)、戴斯-馬丁高碘烷(247mg，0.582mmol)於DCM(5mL)中之混合物1小時。接著將其用EtOAc稀釋，且用飽和NaHCO3及水洗滌。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用10% EtOAc/己烷溶離純化，分離出呈油狀物之(S)-5-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲醛(90mg，91%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.44(s,1H),7.75(d,J=8.1Hz,1H),6.87-6.78(m,2H),5.88(ddt,J=17.1,10.1,7.1Hz,1H),5.21-5.10(m,2H),4.59(sxt,J=6.1Hz,1H),2.63-2.51(m,1H),2.51-2.42(m,1H),2.40(s,3H),1.40(d,J=6.1Hz,3H)。
1-(4-甲基-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯基)乙醇：向(S)-4-甲基-2- (戊-4-烯-2-基氧基)苯甲醛(50mg，0.245mmol)於乙醚(2mL)中之混合物中添加碘化甲基鎂(0.245mL，0.734mmol)，且在室溫下攪拌混合物1小時。接著將其用水稀釋，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由biotage用25% EtOAc/己烷溶離純化殘餘物獲得呈油狀物之1-(4-甲基-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯基)乙醇(50mg，93%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.19(dd,J=7.7,3.8Hz,1H),6.76(d,J=7.8Hz,1H),6.71(s,1H),5.88(ddtd,J=17.2,10.3,7.0,3.5Hz,1H),5.22-5.10(m,2H),5.10-4.96(m,1H),4.62-4.47(m,1H),2.94(dd,J=18.8,5.4Hz,1H),2.64-2.38(m,2H),2.34(s,3H),1.51(d,J=6.6Hz,3H),1.37(dd,J=6.0,4.0Hz,3H)。
(2S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-((1-(5-甲基-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯基)乙氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃下，向1-(4-甲基-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯基)乙醇(41.5mg，0.188mmol)及(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(100mg，0.171mmol)於DMF(5mL)中之混合物中添加氫化鈉(7.53mg，0.188mmol)。其接著在0℃攪拌4小時，接著用NH4Cl淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。接著藉由biotage用25% EtOAc/己烷溶離純化殘餘物，分離出呈油狀物之(2S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-((1-(4-甲基-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯基)乙氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(20mg，0.030mmol，17.27%產率)。LCMS (M+1)=677.5。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-4,12,16,20,26-五甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸乙酯：使(2S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-((1-(4-甲基-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯基)乙氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(20mg，0.030mmol)及氯化(1,3-二均三甲苯基亞咪唑啶基-2-基)(2-異丙氧基苯亞甲基)釕(VI)(1.851mg，2.95μmol)於ClCH2CH2Cl(25mL)中之混合物回流2小時。接著將其濃縮且在MeOH(2mL)中稀釋殘餘物。添加硼氫化鈉(1.118mg，0.030mmol)且在室溫下攪拌反應物0.5小時。其接著用水淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得20mg油狀物，其接著藉由biotage用20% EtOac/己烷溶離純化，分離出呈油狀物之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-4,12,16,20,26-五甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸乙酯(10mg，52%)。LCMS(M+1)=651.4，HPLC上兩個峰。
實例55
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(12S,20S)-4,12,16,20,26五甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳- 2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸：使(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-4,12,16,20,26-五甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸乙酯(10mg，0.015mmol)及氫氧化鈉(0.077mL，0.077mmol)於EtOH(2mL)中之混合物回流2小時。其接著冷卻至室溫且藉由製備型HPLC純化分離出呈白色固體狀之第一溶離異構體(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(12S,20S)-4,12,16,20,26五甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸(4.0mg，41.8%)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.24(d,J=7.7Hz,1H),6.82(s,1H),6.74(d,J=7.7Hz,1H),6.31(s,1H),5.56-5.43(m,2H),4.63-4.39(m,4H),3.66-3.51(m,4H),2.85(d,J=11.0Hz,1H),2.48(s,3H),2.28(s,3H),1.94-1.86(m,2H),1.75-1.48(m,8H),1.28(d,J=6.2Hz,3H),1.19(d,J=8.4Hz,6H),1.14(s,9H)。LCMS(M+1)=623.3。
實例56
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(12R,20S)-4,12,16,20,26-五甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸：來自上述反應之第二溶離異構體。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.28(d,J=7.3Hz,1H),6.82(s,1H),6.75(d,J=7.3Hz,1H),6.46(s,1H),5.44(br.s.,1H),4.88(d,J=6.6Hz,1H),4.64(d,J=12.8Hz,1H),4.56(br.s.,1H),4.25(t,J=12.5Hz,1H),4.14(d,J=12.8Hz,1H),3.81-3.37(m,4H),2.85(m,1H), 2.48(s,3H),2.29(s,3H),1.85-1.43(m,10H),1.19-1.07(m,18H)。LCMS(M+1)=623.3。
2-(丁-3-烯-1-基)苯甲醛：在-78℃下，向1-溴-2-(丁-3-烯-1-基)苯(1g，4.74mmol)於THF(10mL)中之混合物逐滴添加BuLi(2.274mL，5.68mmol)。接著將其在此溫度下攪拌1小時，接著添加N,N-二甲基甲醯胺(0.416g，5.68mmol)。在78℃下攪拌反應物30分鐘，接著升溫至室溫且在室溫下攪拌1小時。其接著用NH4Cl淬滅，用乙醚萃取。有機層接著經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由biotage用10%EtOAc/己烷溶離純化殘餘物獲得呈油狀物之2-(丁-3-烯-1-基)苯甲醛(0.7g，92%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.35-10.26(m,1H),7.86(dd,J=7.6,1.5Hz,1H),7.54(td,J=7.5,1.6Hz,1H),7.44-7.38(m,1H),7.30(d,J=8.1Hz,1H),5.95-5.83(m,1H),5.09-5.00(m,2H),),3.20-3.12(m,2H),2.44-2.36(m,2H)。
(2-(丁-3-烯-1-基)苯基)甲醇：向2-(丁-3-烯-1-基)苯甲醛(500mg，3.12mmol)於MeOH(10mL)中之混合物添加NaBH4(118mg，3.12mmol)且在室溫下攪拌混合物1小時。接著向其添加水，用EtOAc萃取。有機物經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用10% EtOAc/己烷溶離純化，分離出呈澄清油狀物之(2-(丁-3-烯-1-基)苯基)甲醇(320mg，1.973mmol，63.2%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.44-7.37(m,1H),7.33-7.21(m,3H),5.91(ddt,J=16.9,10.2,6.6Hz,1H),5.13-4.99(m,2H),4.76(d,J=5.9Hz,2H), 2.86-2.77(m,2H),2.44-2.35(m,2H)。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((2-(丁-3-烯-1-基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃下向(2-(丁-3-烯-1-基)苯基)甲醇(35.1mg，0.216mmol)於DMF(3mL)中之混合物添加(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(115mg，0.197mmol)及NaH(7.87mg，0.197mmol)。其接著在0℃下攪拌4小時，接著用水淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由biotage用20% EtOAc/己烷溶離純化殘餘物獲得呈油狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((2-(丁-3-烯-1-基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(55mg，0.089mmol，45.2%產率)。LCMS(M+1)=619.4。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,25-二甲基-11,24-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[23.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯：使含(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((2-(丁-3-烯-1-基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(55mg，0.089mmol)及氯化(1,3-二均三甲苯基亞咪唑啶-2-基)(2-異丙氧基苯亞甲基)釕(VI)(5.57mg，8.89μmol)之ClCH2CH2Cl(60mL)回流2小時。接著將其濃縮且將殘餘物溶解於 MeOH(5mL)中。添加硼氫化鈉(3.36mg，0.089mmol)且在室溫下攪拌反應物1小時。接著將其用水淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage純化獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,25-二甲基-11,24-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[23.2.2.16,9.02,7.013,18]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(37mg，70.2%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.38-7.15(m,4H),6.57(s,1H),6.07(s,1H),4.82-4.69(m,4H),4.59(t,J=11.2Hz,1H),4.28-4.12(m,2H),3.91(t,J=10.9Hz,1H),3.44(d,J=7.3Hz,2H),3.05(d,J=11.3Hz,1H),2.89(dd,J=14.2,6.4Hz,1H),2.78(dd,J=13.8,8.3Hz,2H),2.63(s,3H),2.03-1.89(m,2H),1.88-1.64(m,8H),1.28(s,3H),1.25(s,9H),1.24-1.19(m,3H)。LCMS(M+1)=593.4。
實例57
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,25-二甲基-11,24-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[23.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸：使(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,25-二甲基-11,24-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[23.2.2.16,9.02,7.013,18]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(37mg，0.062mmol)及NaOH(0.312mL，0.312mmol)於EtOH(2mL)中之混合物回流2小時。其接著過濾及藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,25-二甲基-11,24-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[23.2.2.16,9.02,7.013,18]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸(21mg，0.037mmol，59.6% 產率)。1H NMR(500MHz,DMSO)δ 7.29(d,J=7.7Hz,1H),7.26-7.19(m,2H),7.17-7.11(m,1H),6.53(s,1H),5.71(s,1H),4.74-4.58(m,4H),4.50-4.42(m,1H),3.68-3.20(m,4H),2.82-2.75(m,1H),2.66(d,J=8.4Hz,2H),2.51(s,3H),1.90-1.81(m,2H),1.71-1.51(m,8H),1.19(s,3H),1.15(s,9H)。LCMS(M+1)=565.3。
2-(丁-3-烯-1-基)苯甲醛：在-78℃下，向1-溴-2-(丁-3-烯-1-基)苯(1g，4.74mmol)於THF(15mL)中之混合物中逐滴添加BuLi(2.274mL，5.68mmol)。其在此溫度下攪拌1小時，接著添加N,N-二甲基甲醯胺(0.416g，5.68mmol)且在-78℃下攪拌30分鐘。接著升溫至室溫且在室溫下攪拌1小時。其接著用NH4Cl淬滅，用乙醚萃取。有機層接著用MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得呈油狀物之2-(丁-3-烯-1-基)苯甲醛(0.7g，92%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.35-10.26(m,1H),7.86(dd,J=7.6,1.5Hz,1H),7.54(td,J=7.5,1.6Hz,1H),7.44-7.38(m,1H),7.30(d,J=8.1Hz,1H),5.95-5.83(m,1H),5.09-5.00(m,2H),),3.20-3.12(m,2H),2.44-2.36(m,2H)。
(2-(丁-3-烯-1-基)苯基)甲醇：向2-(丁-3-烯-1-基)苯甲醛(500mg，3.12mmol)於MeOH(10mL)中之混合物添加NaBH4(118mg，3.12mmol)且在室溫下攪拌混合物1小時。接著向其添加水，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用10% EtOAc/己烷溶離純化，獲得呈油狀物之(2-(丁-3-烯-1-基)苯基)甲醇(320mg，1.973mmol，63.2%產率)。1H NMR(400MHz, CDCl3)δ 7.44-7.37(m,1H),7.33-7.21(m,3H),5.91(ddt,J=16.9,10.2,6.6Hz,1H),5.13-4.99(m,2H),4.76(d,J=5.9Hz,2H),2.86-2.77(m,2H),2.44-2.35(m,2H)。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((2-(丁-3-烯-1-基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃下向(2-(丁-3-烯-1-基)苯基)甲醇(35.1mg，0.216mmol)於DMF(3mL)中之混合物中添加(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(115mg，0.197mmol)及NaH(7.87mg，0.197mmol)。其接著在0℃下攪拌4小時。反應混合物用水淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由biotage用20% EtOAc/己烷溶離純化殘餘物獲得呈油狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((2-(丁-3-烯-1-基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(55mg，0.089mmol，45.2%產率)。LCMS(M+1)=619.4。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,25-二甲基-11,24-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[23.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯：使(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((2-(丁-3-烯-1-基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧 基)乙酸乙酯(55mg，0.089mmol)及氯化(1,3-二均三甲苯基亞咪唑啶-2-基)(2-異丙氧基苯亞甲基)釕(VI)(5.57mg，8.89μmol)於ClCH2CH2Cl(60mL)中之混合物回流2小時。接著將其濃縮且將殘餘物溶解於MeOH(5mL)中。添加氫化鈉(3.36mg，0.089mmol)且在室溫下攪拌反應物1小時。其接著用水淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用20% EtOAc/己烷溶離純化，獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,25-二甲基-11,24-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[23.2.2.16,9.02,7.013,18]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(37mg，70%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.38-7.15(m,4H),6.57(s,1H),6.07(s,1H),4.82-4.69(m,4H),4.59(t,J=11.2Hz,1H),4.28-4.12(m,2H),3.91(t,J=10.9Hz,1H),3.44(d,J=7.3Hz,2H),3.05(d,J=11.3Hz,1H),2.89(dd,J=14.2,6.4Hz,1H),2.78(dd,J=13.8,8.3Hz,2H),2.63(s,3H),2.03-1.89(m,2H),1.88-1.64(m,8H),1.28(s,3H),1.25(s,9H),1.24-1.19(m,3H)。LCMS(M+1)=593.4。
實例58
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,26-二甲基-11,25-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸：使(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,25-二甲基-11,24-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[23.2.2.16,9.02,7.013,18]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(37mg，0.062mmol)及NaOH(0.312mL，0.312mmol)於EtOH(2mL)中之混合物回流2小 時。其接著過濾及藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,26-二甲基-11,25-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸(21mg，0.037mmol，59.6%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.29(d,J=7.7Hz,1H),7.26-7.19(m,2H),7.17-7.11(m,1H),6.53(s,1H),5.71(s,1H),4.74-4.58(m,4H),4.50-4.42(m,1H),3.68-3.20(m,4H),2.82-2.75(m,1H),2.66(d,J=8.4Hz,2H),2.51(s,3H),1.90-1.81(m,2H),1.71-1.51(m,8H),1.19(s,3H),1.15(s,9H)。LCMS(M+1)=565.3。
1-溴-3-(丁-3-烯-1-基)苯：向1-溴-3-(溴甲基)苯(1g，4.00mmol)於THF(15mL)中之混合物添加溴化烯丙基鎂(4.80mL，4.80mmol)且在室溫下攪拌1小時，接著回流2小時。其接著用NH4Cl淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物。其接著藉由5% EtOAc/己烷純化分離出呈油狀物之1-溴-3-(丁-3-烯-1-基)苯(0.7g，3.32mmol，83%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.41-7.31(m,2H),7.21-7.12(m,2H),5.85(ddt,J=17.1,10.3,6.6Hz,1H),5.14-4.94(m,2H),2.75-2.64(m,2H),2.45-2.31(m,2H)。
3-(丁-3-烯-1-基)苯甲醛：在-78℃下，向1-溴-3-(丁-3-烯-1-基)苯(0.5g，2.369mmol)於四氫呋喃(10mL)中之溶液中逐滴添加BuLi(1.137mL，2.84mmol)。其接著在此溫度下攪拌1小時，接著添加N,N-二甲基甲醯胺(0.208g，2.84mmol)。反應混合物在-78℃下攪拌30分鐘，接著在室溫下攪拌3小時。其接著用NH4Cl淬滅，用乙醚萃 取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得呈油狀物之3-(丁-3-烯-1-基)苯甲醛(0.3g，79%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.03(s,1H),7.77-7.72(m,2H),7.51-7.46(m,2H),5.86(ddt,J=17.1,10.3,6.6Hz,1H),5.10-5.00(m,2H),2.86-2.79(m,2H),2.48-2.39(m,2H)。
(3-(丁-3-烯-1-基)苯基)甲醇：向3-(丁-3-烯-1-基)苯甲醛(300mg，1.873mmol)於MeOH(5mL)中之混合物添加硼氫化鈉(142mg，3.75mmol)且在室溫下攪拌混合物1小時。接著向其添加水，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其藉由用10%EtOAc/己烷溶離之biotage純化獲得呈油狀物之(3-(丁-3-烯-1-基)苯基)甲醇(167mg，1.029mmol，55.0%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.45-7.10(m,4H),5.88(ddt,J=17.0,10.4,6.5Hz,1H),5.15-4.94(m,2H),4.70(br.s.,2H),2.84-2.71(m,2H),2.48-2.34(m,2H)。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((3-(丁-3-烯-1-基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃下，向(3-(丁-3-烯-1-基)苯基)甲醇(40.2mg，0.248mmol)於DMF(3mL)中之混合物中添加(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(145mg，0.248mmol)及NaH(9.92mg，0.248mmol)。在0℃下攪拌混合物3小時。其接著用NH4Cl淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由biotage用20% EtOAc/己烷溶離純化殘 餘物獲得呈油狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((3-(丁-3-烯-1-基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(50mg，0.081mmol，32.6%產率)。LCMS(M+1)=619.5。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.1 6 , 9 .1 13 , 17 .0 2 , 7 ]三十碳-2,4,6(30),8,13(29),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯：使(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((3-(丁-3-烯-1-基)苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(50mg，0.081mmol)及Grubbs II催化劑(6.86mg，8.08μmol)於DCM(50mL)中之混合物回流2小時。接著將其濃縮且將殘餘物溶解於MeOH(3mL)中。添加NaBH4(15.28mg，0.404mmol)且在室溫下攪拌反應混合物1小時。其接著用水淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。接著藉由biotage用25% EtOAc/己烷溶離純化殘餘物，分離出呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.16,9.113,17.02,7]三十碳-2,4,6(30),8,13(29),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(20mg，0.034mmol，41.8%產率)。LCMS(M+1)=593.4。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.36-7.32(m,2H),7.23-7.16(m,2H),6.61(s,1H),5.93(s,1H),4.66(s,2H),4.61-4.52(m,2H),4.34(td,J=12.3,2.2Hz,1H),4.27-4.16(m,2H),3.85(td,J=12.0,2.2Hz,1H),3.42-3.36(m,2H),3.17(d,J=11.7Hz,1H),2.81(dt,J=13.1,6.3Hz,2H),2.65-2.60(m,4H),2.00(dd,J=13.7,2.2Hz,1H),1.89(dd,J=13.6,2.1Hz,1H),1.85-1.70(m, 4H),1.61-1.43(m,4H),1.26-1.21(m,15H)。
實例59
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.1 6 , 9 .1 13 , 17 .0 2 , 7 ]三十碳-2,4,6(30),8,13(29),14,16-七烯-3-基}乙酸：使(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.16,9.113,17.02,7]三十碳-2,4,6(30),8,13(29),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(20mg，0.034mmol)及NaOH(0.169mL，0.169mmol)於EtOH(2mL)中之混合物回流2小時。其接著過濾及藉由製備型HPLC純化分離出呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.16,9.113,17.02,7]三十碳-2,4,6(30),8,13(29),14,16-七烯-3-基}乙酸(10mg，0.017mmol，51.4%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.34-7.27(m,1H),7.22(s,1H),7.16(d,J=7.3Hz,2H),6.50(s,1H),5.62(s,1H),4.62-4.40(m,4H),4.17(t,J=12.5Hz,1H),3.65-3.56(m,1H),3.38-3.23(m,2H),2.77(d,J=11.4Hz,1H),2.74-2.66(m,1H),2.59-2.53(m,1H),2.50(br.s.,4H),1.91(d,J=12.5Hz,1H),1.84-1.75(m,1H),1.75-1.62(m,3H),1.58-1.44(m,3H),1.43-1.33(m,2H),1.17(s,3H),1.14(s,9H)。LCMS(M+1)=565.3。
1-溴-2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苯：在0℃下，向2-溴-5-氟苯甲基溴化物(1g，3.73mmol)於THF(15mL)中之溶液中添加溴化烯丙基鎂(5.60 mL，5.60mmol)。使其升溫至室溫，接著回流5小時。反應混合物用NH4Cl淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物。其接著藉由5% EtOac/己烷純化分離出呈油狀物之1-溴-2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苯(0.7g，3.06mmol，82%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.53-7.45(m,1H),6.99-6.94(m,1H),6.82(td,J=8.3,2.9Hz,1H),5.89(ddt,J=16.9,10.2,6.6Hz,1H),5.14-4.98(m,2H),2.89-2.76(m,2H),2.45-2.33(m,2H)。
2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苯甲醛：在-78℃下，向1-溴-2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苯(0.5g，2.183mmol)於四氫呋喃(10mL)中之混合物逐滴添加BuLi(1.048mL，2.62mmol)。其接著在此溫度下攪拌1小時，接著添加N,N-二甲基甲醯胺(0.204mL，2.62mmol)。反應混合物在-78℃下攪拌30分鐘，接著升溫至室溫且在室溫下攪拌1小時。其接著用NH4Cl淬滅，用乙醚萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由biotage用10% EtOAc/己烷溶離純化殘餘物獲得呈油狀物之2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苯甲醛(0.35g，90%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.22(s,1H),7.88(dd,J=8.6,6.1Hz,1H),7.08(td,J=8.3,2.6Hz,1H),7.05-6.96(m,1H),6.00-5.73(m,1H),5.12-4.99(m,2H),3.22-3.09(m,2H),2.49-2.34(m,2H)。
(2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苯基)甲醇：向3-(丁-3-烯-1-基)苯甲醛(300mg，1.873mmol)於MeOH(10mL)中之混合物添加硼氫化鈉(142 mg，3.75mmol)，且在室溫下攪拌混合物1小時。接著向其添加水，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用10% EtOAc/己烷溶離純化，獲得呈油狀物之(2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苯基)甲醇(160mg，0.888mmol，79%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.35(dd,J=8.2,6.0Hz,1H),7.01-6.87(m,2H),5.88(ddt,J=17.1,10.3,6.6Hz,1H),5.16-4.95(m,2H),4.71(d,J=4.9Hz,2H),2.86-2.72(m,2H),2.39(td,J=7.8,6.6Hz,2H),1.54(t,J=5.5Hz,1H)。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃下，向(2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苯基)甲醇(43.8mg，0.243mmol)及(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(142mg，0.243mmol)於DMF(5mL)中之混合物添加NaH(9.72mg，0.243mmol)，且在0℃下攪拌反應物3小時。其接著用水淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用20% EtOAc/己烷溶離純化，分離出呈油狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(50mg，0.079mmol，32.3%產率)。LCMS(M+1)=637.3。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{16-氟-4,25-二甲基-11,24-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[23.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯：使(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(50mg，0.079mmol)及Grubb's II催化劑(66.7mg，0.079mmol)於DCM(50mL)中之混合物回流2小時。接著將其濃縮且將殘餘物溶解於MeOH(2mL)中。添加NaBH4(2.97mg，0.079mmol)且在室溫下攪拌反應混合物1小時。其接著用水稀釋，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用20% EtOAc/己烷溶離純化，獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{16-氟-4,25-二甲基-11,24-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[23.2.2.16,9.02,7.013,18]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(36mg，0.059mmol，75%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.33-7.27(m,1H),6.95(dd,J=10.3,2.7Hz,1H),6.85(td,J=8.3,2.7Hz,1H),6.56(s,1H),6.07(s,1H),4.78-4.64(m,4H),4.58(t,J=11.2Hz,1H),4.18-4.11(m,2H),3.90(t,J=11.0Hz,1H),3.44(d,J=5.1Hz,2H),3.05(d,J=11.5Hz,1H),2.95-2.85(m,1H),2.83-2.72(m,2H),2.63(s,3H),2.03-1.88(m,2H),1.84-1.62(m,8H),1.31-1.24(m,15H)。LCMS(M+1)=611.4。
實例60
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{16-氟-4,25-二甲基-11,24-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[23.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸：使(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{16-氟-4,25-二甲基-11,24-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[23.2.2.16,9.02,7.013,18]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(36mg，0.059mmol)及NaOH(0.295mL，0.295mmol)於EtOH(2mL)中之混合物回流2小時。其接著過濾及藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{16-氟-4,25-二甲基-11,24-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[23.2.2.16,9.02,7.013,18]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸(23.3mg，0.040mmol，67.8%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.37-7.29(m,1H),7.04(d,J=9.9Hz,1H),6.95(t,J=8.3Hz,1H),6.49(s,1H),5.59(s,1H),4.72-4.66(m,1H),4.65-4.57(m,3H),4.45(t,J=11.7Hz,1H),3.58-3.30(m,4H),2.84-2.75(m,1H),2.66(d,J=12.8Hz,2H),2.50(br.s.,3H),1.93-1.88(m,1H),1.83(d,J=13.9Hz,1H),1.70-1.49(m,8H),1.19(s,3H),1.14(s,9H)。LCMS(M+1)=583.7。
(S)-1-(戊-4-烯-2-基氧基)-2-萘甲酸甲酯：在室溫下攪拌1-羥基-2-萘甲酸甲酯(500mg，2.473mmol)、(R)-戊-4-烯-2-醇(0.382mL，3.71mmol)、三苯膦(1297mg，4.95mmol)及(Z)-二氮烯-1,2-二甲酸二乙酯(0.836mL，4.95mmol)於THF(20mL)中之混合物3小時。接著將其濃 縮且藉由用10% EtOAc/己烷溶離的biotage純化殘餘物分離出呈油狀物之(S)-1-(戊-4-烯-2-基氧基)-2-萘甲酸甲酯(500mg，74.8%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.41-8.27(m,1H),7.96-7.81(m,2H),7.69-7.45(m,3H),5.89(ddt,J=17.2,10.1,7.1Hz,1H),5.22-5.04(m,2H),4.49-4.29(m,1H),3.99(s,3H),2.66-2.57(m,1H),2.55-2.46(m,1H),1.28(d,J=6.4Hz,3H)。
(S)-(1-(戊-4-烯-2-基氧基)萘-2-基)甲醇：向(S)-1-(戊-4-烯-2-基氧基)-2-萘甲酸甲酯(300mg，1.110mmol)於THF(10mL)中之混合物中添加1N LAH(2.220mL，2.220mmol)且在室溫下攪拌反應物1小時。其接著用NH4Cl淬滅，且用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用10% EtOAc/己烷溶離純化，分離出呈油狀物之(S)-(1-(戊-4-烯-2-基氧基)萘-2-基)甲醇(200mg，0.825mmol，74.4%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.19-8.08(m,1H),7.90-7.80(m,1H),7.65(d,J=8.3Hz,1H),7.58-7.45(m,3H),5.96(ddt,J=17.1,10.1,7.2Hz,1H),5.25-5.11(m,2H),4.93(qd,J=12.6,5.9Hz,2H),4.54-4.34(m,1H),2.65(qd,J=6.8,5.5Hz,1H),2.59-2.48(m,1H),2.18(t,J=6.0Hz,1H),1.31(d,J=6.4Hz,3H)。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-(((1-((S)-戊-4- 烯-2-基氧基)萘-2-基)甲氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃下，向(S)-(1-(戊-4-烯-2-基氧基)萘-2-基)甲醇(60.9mg，0.252mmol)於DMF(3mL)中之混合物中添加(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(147mg，0.252mmol)及NaH(10.06mg，0.252mmol)。在0℃下攪拌反應物3小時。其接著用水淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用20% EtOAc/己烷溶離純化，分離出呈油狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-(((1-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)萘-2-基)甲氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(62mg，0.089mmol，35.3%產率)。LCMS(M+1)=699.5。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(24S)-4,24,30-三甲基-11,23,29-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜六環[28.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 22 .0 16 , 21 ]三十五碳-2,4,6(35),8,13(22),14,16(21),17,19-九烯-3-基]乙酸乙酯：使(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-(((1-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)萘-2-基)甲氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(100mg，0.114mmol)及Grubb's II催化劑(9.72mg，0.011mmol)於DCM(80mL)中之混合物回流2小時。接著將其濃縮且將殘餘物溶解於MeOH(3mL)中。添加NaBH4(8.66mg，0.229mmol)且在室溫下攪拌反應物1小時。其接著用NH4Cl淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用25% EtOAc/己烷溶離純化，獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(24S)-4,24,30-三甲基-11,23,29-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜六環[28.2.2.16,9.02,7.013,22.016,21]三十五碳-2,4,6(35),8,13(22),14,16(21),17,19-九烯-3-基]乙酸乙酯(47mg，61%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.25-8.18(m,1H),7.82-7.78(m,1H),7.61-7.58(m,1H),7.54-7.50(m,1H),7.49-7.45(m,2H),6.64(s,1H),6.14(s,1H),4.92-4.87(m,2H),4.86-4.80(m,1H),4.63-4.49(m,3H),4.24-4.10(m,2H),4.01(t,J=10.8Hz,1H),3.54-3.46(m,1H),2.95(d,J=11.0Hz,1H),2.70(d,J=11.2Hz,1H),2.66-2.59(m,4H),2.12(dd,J=9.5,5.1Hz,1H),2.05-1.61(m,9H),1.30-1.17(m,18H)。LCMS(M+1)=673.6。
實例61
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(24S)-4,24,30-三甲基-11,23,29-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜六環[28.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 22 .0 16 , 21 ]三十五碳-2,4,6(35),8,13(22),14,16(21),17,19-九烯-3-基]乙酸：使(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(24S)-4,24,30-三甲基-11,23,29-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜六環[28.2.2.16,9.02,7.013,22.016,21]三十五碳-2,4,6(35),8,13(22),14,16(21),17,19-九烯-3-基]乙酸乙酯(47mg，0.070mmol)及NaOH(0.070mL，0.070mmol)於EtOH(2mL)中之混合物回流2小時。其接著冷卻至室溫且藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(24S)-4,24,30-三甲基-11,23,29-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜六環[28.2.2.16,9.02,7.013,22.016,21]三十五碳- 2,4,6(35),8,13(22),14,16(21),17,19-九烯-3-基]乙酸(31.3mg，0.046mmol，66.0%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 8.12(d,J=8.4Hz,1H),7.87(d,J=8.8Hz,1H),7.63(d,J=8.4Hz,1H),7.53-7.43(m,3H),6.58(s,1H),5.82(s,1H),4.83-4.75(m,2H),4.75-4.67(m,1H),4.58(d,J=10.6Hz,1H),4.49-4.35(m,2H),3.74(t,J=10.8Hz,1H),3.37-3.53(m,2H),3.06(d,J=9.2Hz,1H),2.64(d,J=11.7Hz,1H),2.50(s,3H),1.95(d,J=13.2Hz,2H),1.88-1.45(m,8H),1.20(s,3H),1.16(s,9H),1.07(d,J=5.9Hz,3H)。LCMS(M+1)=645.3。
N-(2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苯甲基)環丙胺：在室溫下攪拌2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苯甲醛(50mg，0.281mmol)及環丙胺(16.02mg，0.281mmol)於MeOH(2mL)中之混合物30分鐘。添加硼氫化鈉(5.31mg，0.140mmol)且在室溫下攪拌1小時。其接著用NH4Cl淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由biotage用25% EtOAc/己烷溶離純化殘餘物，分離出呈油狀物之N-(2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苯甲基)環丙胺(20mg，0.091mmol，32.5%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.26(dd,J=8.3,6.1Hz,1H),6.93-6.82(m,2H),5.95-5.84(m,1H),5.13-5.00(m,2H),3.83(s,2H),2.81-2.75(m,2H),2.41-2.33(m,2H),2.18(tt,J=6.6,3.5Hz,1H),0.51-0.44(m,2H),0.43-0.35(m,2H)。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苯甲基)(環丙基)胺基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃下，向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(53.3mg，0.091mmol)於乙腈(2mL)中之混合物中添加惠寧鹼(0.016mL，0.091mmol)及N-(2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苯甲基)環丙胺(20mg,0.091mmol)。其接著在0℃攪拌2小時，接著用水淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由biotage用20% EtOAc/己烷溶離純化殘餘物獲得呈油狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苯甲基)(環丙基)胺基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(45mg,0.067mmol，73.0%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.36(dd,J=8.3,6.1Hz,1H),6.89-6.78(m,2H),6.41(s,1H),6.06-5.95(m,2H),5.80(ddt,J=17.1,10.3,6.6Hz,1H),5.41(d,J=17.1Hz,1H),5.17(d,J=11.0Hz,1H),5.03-4.92(m,2H),4.30-4.13(m,2H),4.01(d,J=4.9Hz,2H),3.88(s,2H),3.80(s,2H),2.76-2.69(m,2H),2.63(s,3H),2.33-2.22(m,2H),2.10-1.87(m,4H),1.72(br.s.,1H),1.36(br.s.,3H),1.27-1.21(m,12H),0.48-0.31(m,4H)，哌啶之4個質子缺失。LCMS(M+1)=676.5。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{11-環丙基-16-氟-4,25-二甲基-24-氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[23.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯：使(S)-2-(7-(4-(烯丙氧 基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苯甲基)(環丙基)胺基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(45mg，0.067mmol)及Grubb's II催化劑(5.65mg，6.66μmol)於DCM(45mL)中之混合物回流2小時。接著將其濃縮且將殘餘物溶解於MeOH(2mL)中。添加NaBH4(2.52mg，0.067mmol)且在室溫下攪拌反應混合物1小時。其接著用水稀釋，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物。其接著藉由biotage用25% EtOac/己烷溶離純化，獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{11-環丙基-16-氟-4,25-二甲基-24-氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[23.2.2.16,9.02,7.013,18]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(35mg，0.054mmol，81%產率)。。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.14(dd,J=8.4,6.1Hz,1H),6.90(dd,J=10.3,2.8Hz,1H),6.77(td,J=8.4,2.8Hz,1H),6.48(s,1H),6.10(s,1H),4.58-4.48(m,1H),4.28-4.21(m,1H),4.18-4.12(m,1H),4.04(d,J=1.0Hz,2H),3.96-3.83(m,2H),3.62(d,J=13.8Hz,1H),3.44-3.33(m,2H),3.06-2.98(m,1H),2.90-2.72(m,3H),2.68-2.60(m,3H),2.03-1.85(m,3H),1.79-1.62(m,8H),1.30-1.21(m,19H)。LCMS(M+1)=650.3。
實例62
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{11-環丙基-16-氟-4,25-二甲基-24-氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[23.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸：使(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{11-環丙基-16-氟-4,25-二甲基-24-氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環 [23.2.2.16,9.02,7.013,18]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(35mg，0.054mmol)及NaOH(2.154mg，0.054mmol)於EtOH(3mL)中之混合物回流2小時。其接著冷卻至室溫且藉由製備型HPLC純化，分離出呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{11-環丙基-16-氟-4,25-二甲基-24-氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[23.2.2.16,9.02,7.013,18]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸(25.2mg，0.040mmol，73.7%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.18(t,J=7.2Hz,1H),6.98(d,J=9.9Hz,1H),6.85(t,J=7.7Hz,1H),6.43(s,1H),5.75(s,1H),4.39(t,J=11.9Hz,1H),3.89(d,J=9.9Hz,1H),3.65-3.54(m,2H),3.30(d,J=15.0Hz,2H),3.17(s,2H),2.87-2.77(m,1H),2.73-2.63(m,2H),2.51-2.45(m,4H),1.89-1.42(m,11H),1.16(br.s.,12H),0.33(br.s.,1H),0.24(br.s.,1H),0.13(br.s.,1H),-0.06(br.s.,1H)。LCMS(M+1)=622.3。
(S)-2-(2-(((3-烯丙基苯甲基)氧基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃下，向(3-烯丙基苯基)甲醇(33.0mg，0.222mmol)於DMF(3mL)中之混合物中添加(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(130mg，0.222mmol)及NaH(8.90mg，0.222mmol)。在0℃下攪拌反應混合物2小時。其接著用水稀釋，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用25% EtOAc/己烷溶離純化，獲得呈油狀物之(S)-2-(2-(((3-烯丙基苯甲基)氧基)甲基)-7- (4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(50mg，0.083mmol，37.2%產率)。LCMS(M+1)=605.4。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.1 6 , 9 .1 13 , 17 .0 2 , 7 ]二十九碳-2,4,6(29),8,13(28),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯：使(S)-2-(2-(((3-烯丙基苯甲基)氧基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(50mg，0.083mmol)及Grubb's II催化劑(70.2mg，0.083mmol)於DCM(50mL)中之混合物回流2小時。接著將其濃縮。將殘餘物溶解於MeOH(2mL)中。添加硼氫化鈉(3.13mg，0.083mmol)且在室溫下攪拌反應物2小時。其接著用NH4Cl稀釋，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用20% EtOAc/己烷溶離純化，分離出呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.16,9.113,17.02,7]二十九碳-2,4,6(29),8,13(28),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(20mg，0.035mmol，41.8%產率)。LCMS(M+1)=579.7。
實例63
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.1 6 , 9 .1 13 , 17 .0 2 , 7 ]二十九碳-2,4,6(29),8,13(28),14,16-七烯-3- 基}乙酸：使(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.16,9.113,17.02,7]二十九碳-2,4,6(29),8,13(28),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(20mg，0.035mmol)及NaOH(0.035mL，0.035mmol)於EtOH(2mL)中之混合物回流2小時。其接著冷卻至室溫，過濾且藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.16,9.113,17.02,7]二十九碳-2,4,6(29),8,13(28),14,16-七烯-3-基}乙酸(17mg,0.031mmol，89%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.41(s,1H),7.33-7.24(m,1H),7.16(d,J=7.0Hz,2H),6.51(s,1H),5.64(s,1H),4.50-4.29(m,5H),3.65-3.58(m,1H),3.57-3.38(m,3H),2.76(d,J=11.4Hz,1H),2.51(s,3H),2.66(t,J=8.1Hz,2H),1.97(d,J=13.6Hz,1H),1.89-1.51(m,7H),1.22(s,3H),1.15(s,9H)。LCMS(M+1)=551.6。
(S)-4-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲醛：在室溫下攪拌(S)-(4-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯基)甲醇(260mg，1.260mmol)、戴斯-馬丁高碘烷(642mg，1.513mmol)於DCM(10mL)中之混合物1小時。接著將其用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO3及水洗滌。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用10% EtOAc/己烷溶離純化，分離出呈油狀物之(S)-4-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲醛(90mg，35%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.44(s,1H),7.75(d,J=8.1Hz,1H),6.87-6.78(m,2H),5.88(ddt,J=17.1,10.1,7.1Hz,1H),5.21-5.10(m,2H),4.59(sxt,J=6.1Hz,1H),2.63-2.51(m,1H),2.51-2.42(m,1H),2.40(s,3H),1.40(d,J=6.1Hz,3H)。
(S)-N-(4-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)環丙胺：在室溫下攪拌環丙胺(40.0mg，0.700mmol)、(S)-4-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲醛(130mg，0.636mmol)於MeOH(5mL)中之混合物0.5小時。接著添加硼氫化鈉(12.04mg，0.318mmol)且在室溫下攪拌反應物2小時。其接著用水淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由biotage用20% EtOAc/己烷溶離純化殘餘物，分離出呈油狀物之(S)-N-(4-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)環丙胺(20mg，0.082mmol，12.81%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.12(d,J=7.8Hz,1H),6.77-6.67(m,2H),5.90(ddt,J=17.2,10.2,7.1Hz,1H),5.20-5.07(m,2H),4.51(sxt,J=6.0Hz,1H),3.86-3.69(m,2H),2.60-2.39(m,2H),2.34(s,3H),2.12-2.02(m,1H),1.36(d,J=6.1Hz,3H),0.48-0.32(m,4H)。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((環丙基(4-甲基-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)胺基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃下，向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(95mg，0.163mmol)於乙腈(3mL)中之混合物添加(S)-N-(4-甲基-2-(戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)環丙胺(40mg，0.163mmol)及惠寧鹼(0.028mL，0.163mmol)。其接著在0℃攪拌2小時，接著用水 淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。接著藉由20% EtOAc/己烷純化殘餘物獲得呈油狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((環丙基(4-甲基-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)胺基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(90mg，0.128mmol，79%產率)。LCMS(M+1)=702.5。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-11-環丙基-4,16,20,26-四甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸乙酯：使(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((環丙基(4-甲基-2-((S)-戊-4-烯-2-基氧基)苯甲基)胺基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(90mg，0.128mmol)及Grubb's II催化劑(10.89mg，0.013mmol)於DCM(80mL)中之混合物回流2小時。接著將其濃縮且將殘餘物溶解於MeOH(2mL)中。添加NaBH4(4.85mg，0.128mmol)且在室溫下攪拌反應物1小時。其接著用水稀釋，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用25% EtOac/己烷溶離純化，獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-11-環丙基-4,16,20,26-四甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸乙酯(90mg，0.107mmol，83%產率)。LCMS(M+1)=676.4。
實例64
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-11-環丙基-4,16,20,26-四甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸：使(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-11-環丙基-4,16,20,26-四甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸乙酯(70mg，0.104mmol)及NaOH(0.311mL，0.311mmol)於EtOH(2mL)中之混合物回流2小時。其接著冷卻至室溫，藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-11-環丙基-4,16,20,26-四甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸(42mg，0.065mmol，62.6%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.12(d,J=7.3Hz,1H),6.76(s,1H),6.64(d,J=7.7Hz,1H),6.37(s,1H),5.61(s,1H),4.52(br.s.,1H),4.34(t,J=12.3Hz,1H),4.04(d,J=14.3Hz,1H),3.92(d,J=15.0Hz,1H),3.81(d,J=14.3Hz,1H),3.72(d,J=15.0Hz,1H),3.68-3.59(m,1H),3.50-3.29(m,3H),2.79-2.71(m,1H),2.48(s,3H),2.27(s,3H),1.97(br.s.,1H),1.91(s,1H),1.83(d,J=12.8Hz,1H),1.78-1.43(m,8H),1.20(d,J=5.9Hz,3H),1.17(s,3H),1.14(s,9H),0.45(d,J=5.5Hz,1H),0.35(d,J=4.8Hz,2H),0.27(br.s.,1H)。LCMS(M+1)=648.5。
2-烯丙基-4-甲基苯甲酸甲酯：向2-溴-4-甲基苯甲酸甲酯(500 mg，2.183mmol)、烯丙基三丁基錫烷(0.744mL，2.401mmol)、氯化鋰(185mg，4.37mmol)於DMF(1mL)、乙腈(10mL)中之混合物添加二氯雙(三苯膦)鈀(ii)(77mg，0.109mmol)。其接著脫氣2分鐘，接著用N2填充。在90℃下加熱16小時後，其用NH4Cl淬滅，用EtOAc萃取。有機層用KF溶液洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用10% EtOAc/己烷溶離純化，分離出呈油狀物之2-烯丙基-4-甲基苯甲酸甲酯(330mg，1.735mmol，79%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.95-7.77(m,1H),7.21-6.99(m,2H),6.19-5.85(m,1H),5.22-4.91(m,2H),3.89(s,3H),3.76(d,J=6.6Hz,2H),2.39(s,3H)。
(2-烯丙基-4-甲基苯基)甲醇：向2-烯丙基-4-甲基苯甲酸甲酯(220mg，1.156mmol)於THF(2mL)中之混合物中添加LAH(2.313mL，2.313mmol)，且反應混合物在室溫下攪拌1小時。接著向其添加NH4Cl，且用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用10% EtOAc/己烷溶離純化，分離出呈油狀物之(2-烯丙基-4-甲基苯基)甲醇(150mg，0.925mmol，80%產率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ 7.31-7.25(m,1H),7.10-7.03(m,2H),6.03(ddt,J=16.9,10.4,6.3Hz,1H),5.13-5.00(m,2H),4.69(d,J=5.2Hz,2H),3.48(d,J=6.3Hz,2H),2.36(s,3H),1.53(t,J=5.7Hz,1H)。
(S)-2-(2-(((2-烯丙基-4-甲基苯甲基)氧基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)- 4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃下，向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(144mg，0.247mmol)及(2-烯丙基-4-甲基苯基)甲醇(40mg，0.247mmol)於DMF(5mL)中之混合物中添加NaH(9.86mg，0.247mmol)。在0℃下攪拌反應混合物2小時。其接著用水淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由biotage用20% EtOAc/己烷溶離純化殘餘物獲得呈油狀物之(S)-2-(2-(((2-烯丙基-4-甲基苯甲基)氧基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(50mg，0.081mmol，32.8%產率)。LCMS(M+1)=619.4。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,16,24-三甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯：使(S)-2-(2-(((2-烯丙基-4-甲基苯甲基)氧基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(50mg，0.081mmol)及Grubbs II催化劑(68.6mg，0.081mmol)於DCM(50mL)中之混合物回流2小時。接著將其濃縮且將殘餘物溶解於MeOH(2mL)中。接著添加NaBH4(3.06mg，0.081mmol)且在室溫下攪拌反應物1小時。接著將其用水稀釋，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由biotage用20% EtOAc/己烷溶離純化殘餘物，分離出呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,16,24-三甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環 [22.2.2.16,9.02,7.013,18]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(30mg，0.051mmol，62.6%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.36-7.25(m,1H),7.08-6.97(m,2H),6.50(s,1H),6.16(s,1H),4.88(s,2H),4.76-4.59(m,3H),4.24-4.08(m,2H),3.96(t,J=11.0Hz,1H),3.57-3.40(m,2H),2.92(d,J=11.0Hz,1H),2.80-2.72(m,2H),2.69-2.59(m,4H),2.34(s,3H),2.11-2.01(m,1H),1.98-1.86(m,3H),1.86-1.74(m,2H),1.76-1.60(m,2H),1.29-1.22(m,12H),1.19(t,J=7.2Hz,3H)。LCMS(M+1)=593.5。
實例65
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,16,24-三甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸：使(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,16,24-三甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.16,9.02,7.013,18]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(30mg，0.051mmol)及NaOH(0.152mL，0.152mmol)於EtOH(2mL)中之混合物回流2小時。其接著冷卻至室溫且藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,16,24-三甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.16,9.02,7.013,18]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸(24mg，0.042mmol，84%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.25(d,J=7.3Hz,1H),7.03-6.96(m,2H),6.49(s,1H),5.76(br.s.,1H),4.87-4.76(m,2H),4.72(d,J=12.1Hz,1H),4.58(d,J=12.1Hz,1H),4.54-4.46(m,1H),3.66-3.58(m,2H),3.39(m,1H),3.12(br.s.,1H),2.69-2.60(m,2H),2.55(br.s.,4H),2.27(s,3H),1.92- 1.50(m,8H),1.18(s,3H),1.15(s,9H)。LCMS(M+1)=565.4。
2-烯丙基-4-氟苯甲酸甲酯：向2-溴-4-氟苯甲酸甲酯(1g，4.29mmol)、烯丙基三丁基錫烷(1.464mL，4.72mmol)、氯化鋰(0.364g，8.58mmol)於DMF(1mL)、乙腈(10mL)中之混合物添加二氯化雙(三苯膦)鈀(ii)(0.151g，0.215mmol)。其接著脫氣2分鐘，接著用N2填充。在90℃下加熱16小時後，其用NH4Cl淬滅，用EtOAc萃取。有機層用KF溶液洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由biotage用10% EtOAc/己烷溶離純化殘餘物，分離出呈白色固體狀之2-烯丙基-4-氟苯甲酸甲酯(330mg，1.699mmol，39.6%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.96(dd,J=8.6,6.1Hz,1H),7.09-6.87(m,2H),6.01(ddt,J=16.9,10.3,6.6Hz,1H),5.19-4.96(m,2H),3.90(s,3H),3.80(d,J=6.6Hz,2H)。
(2-烯丙基-4-氟苯基)甲醇：向2-烯丙基-4-氟苯甲酸甲酯(400mg，2.060mmol)於THF(5mL)中之混合物中添加LAH(4.12mL，4.12mmol)且在室溫下攪拌反應物1小時。接著向其添加NH4Cl，且用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用10% EtOAc/己烷溶離純化，分離出呈油狀物之(2-烯丙基-4-氟苯基)甲醇(300mg，1.805mmol，88%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.37(dd,J=8.9,6.0Hz,1H),7.06-6.84(m,2H),6.08-5.88(m,1H),5.24-5.03(m,2H),4.76-4.68(m,2H),3.58-3.39(m,2H)。
(S)-2-(2-(((2-烯丙基-4-氟苯甲基)氧基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃下，向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(150mg，0.257mmol)及(2-烯丙基-4-氟苯基)甲醇(42.7mg，0.257mmol)於DMF(5mL)中之混合物添加NaH(10.26mg，0.257mmol)。在0℃下攪拌反應物2小時。其接著用水淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其藉由biotage用20% EtOAc/己烷溶離純化，獲得呈油狀物之(S)-2-(2-(((2-烯丙基-4-氟苯甲基)氧基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(70mg，0.112mmol，43.8%產率)。LCMS(M+1)=623.3。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{16-氟-4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯：使(S)-2-(2-(((2-烯丙基-4-氟苯甲基)氧基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(70mg，0.112mmol)及Grubbs II催化劑(95mg，0.112mmol)於DCM(70mL)中之混合物回流2小時。接著將其濃縮且將殘餘物溶解於MeOH(2mL)中。添加硼氫化鈉(4.25mg，0.112mmol)且在室溫下攪拌反應混合物1小時。其接著用EtOAc萃取，用水 洗滌。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由biotage用20% EtOac/己烷溶離純化殘餘物，分離出呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{16-氟-4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.16,9.02,7.013,18]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(30mg，0.050mmol，44.7%產率)。LCMS(M+1)=597.3。
實例66
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{16-氟-4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸：使(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{16-氟-4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.16,9.02,7.013,18]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(28mg，0.047mmol)及NaOH(1.877mg，0.047mmol)於EtOH(2mL)中之混合物回流2小時。其接著冷卻至室溫且藉由製備型HPLC純化獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{16-氟-4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.16,9.02,7.013,18]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸(20mg，0.035mmol，75.0%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.46-7.32(m,1H),7.08-6.91(m,2H),6.50(s,1H),5.79(s,1H),4.83(q,J=12.1Hz,2H),4.75(d,J=12.5Hz,1H),4.61(d,J=12.5Hz,1H),4.49(t,J=11.7Hz,1H),3.69-3.32(m,3H),3.07(br.s.,1H),2.69(br.s.,2H),2.56(d,J=9.5Hz,1H),2.51(br.s.,3H),1.87-1.50(m,8H),1.18(s,3H),1.16(s,9H)。LCMS(M+1)=569.2。
1-溴-4-氟-2-乙烯基苯：在0℃下向碘化甲基三苯基鏻(1.195g，2.96mmol)於四氫呋喃(25mL)中之混合物添加BuLi(1.182mL，2.96mmol)且在0℃下攪拌0.5小時。接著向其添加2-溴-5-氟苯甲醛(0.5g，2.463mmol)且在室溫下攪拌16小時。接著用水稀釋反應物，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用5% EtOAc/己烷溶離純化，獲得呈油狀物之1-溴-4-氟-2-乙烯基苯(320mg，1.592mmol，64.6%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.56-7.48(m,1H),7.33-7.23(m,1H),7.09-6.96(m,1H),6.89(td,J=8.3,3.1Hz,1H),5.73(d,J=17.4Hz,1H),5.45(d,J=11.0Hz,1H)。
(4-氟-2-乙烯基苯基)甲醇：在-78℃下，向1-溴-4-氟-2-乙烯基苯(0.32g，1.592mmol)於四氫呋喃(5mL)中之混合物逐滴添加BuLi(0.764mL，1.910mmol)。接著將其在此溫度下攪拌1小時，接著添加N,N-二甲基甲醯胺(0.185mL，2.388mmol)。在-78℃下攪拌反應混合物30分鐘，接著升溫至室溫且在室溫下攪拌3小時。其接著用NH4Cl淬滅，用乙醚萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得呈油狀物之4-氟-2-乙烯基苯甲醛(0.2g)，其未經純化即用於下一步驟中。在室溫下攪拌4-氟-2-乙烯基苯甲醛(200mg，1.332mmol)及NaBH4(50.4mg，1.332mmol)於MeOH(2mL)中之混合物1小時。接著將其用水稀釋，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由biotage用20% EtOac/己烷溶離純化殘餘物獲得呈油狀物之(4-氟-2-乙烯基苯基)甲醇(150mg，0.986mmol，74.0%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.35(dd,J=8.3,5.9Hz,1H),7.25(dd,J=10.0,2.7Hz,1H),7.09-7.02(m,1H),7.02-6.95(m,1H),5.73(d,J=17.4Hz,1H),5.44 (d,J=11.0Hz,1H),4.75(d,J=4.9Hz,2H)。
(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((4-氟-2-乙烯基苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯：在0℃下，向(4-氟-2-乙烯基苯基)甲醇(39.1mg，0.257mmol)於DMF(3mL)中之混合物中添加(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(150mg，0.257mmol)及NaH(10.26mg，0.257mmol)。其接著用飽和NH4Cl淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用25% EtOAc/己烷溶離純化，分離出呈油狀物之(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((4-氟-2-乙烯基苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(70mg，0.115mmol，44.8%產率)。LCMS(M+1)=609.3。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(19E/Z)-16-氟-4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十八碳-2,4,6(28),8,13(18),14,16,19-八烯-3-基]乙酸乙酯：使(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(((4-氟-2-乙烯基苯甲基)氧基)甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(70mg，0.115mmol)、氯化(1,3-二均三甲苯基亞咪唑啶-2-基)(2-異丙氧基苯亞甲基)釕(VI)(7.21mg，0.011mmol)及TsOH˙H2O(23.92mg，0.115mmol)於ClCH2CH2Cl(70mL)中之混合物回流6小時。接著使其冷卻至室溫， 用NaHCO3及水洗滌。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由biotage用20% EtOAc/己烷溶離純化殘餘物，分離出呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(19E/Z)-16-氟-4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.16,9.02,7.013,18]二十八碳-2,4,6(28),8,13(18),14,16,19-八烯-3-基]乙酸乙酯(40mg，0.069mmol，59.9%產率)。LCMS(M+1)=581.4。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{16-氟-4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十八碳-2,4,6(28),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯：在室溫下攪拌(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(19E/Z)-16-氟-4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.16,9.02,7.013,18]二十八碳-2,4,6(28),8,13(18),14,16,19-八烯-3-基]乙酸乙酯(40mg，0.069mmol)及硼氫化鈉(7.82mg，0.207mmol)於MeOH(2mL)中之混合物1小時。接著將其用水稀釋，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用20% EtOAc/己烷溶離純化，獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{16-氟-4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.16,9.02,7.013,18]二十八碳-2,4,6(28),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(32mg，0.055mmol，80%產率)。LCMS(M+1)=583.3。
實例67
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{16-氟-4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8 四氮雜五環[21.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十八碳-2,4,6(28),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸：(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{16-氟-4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.16,9.02,7.013,18]二十八碳-2,4,6(28),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(32mg，0.055mmol)及NaOH(2.196mg，0.055mmol)於EtOH(2mL)中之混合物回流2小時。其接著冷卻至室溫且藉由製備型HPLC純化，分離出呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{16-氟-4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8四氮雜五環[21.2.2.16,9.02,7.013,18]二十八碳-2,4,6(28),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸(13.9mg，0.025mmol，44.7%產率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.49-7.41(m,1H),7.11-7.00(m,2H),6.47(s,1H),5.91(s,1H),4.92(d,J=11.7Hz,1H),4.75(d,J=12.1Hz,1H),4.71-4.55(m,3H),3.84(t,J=10.6Hz,1H),3.50(m,2H),3.16-3.01(m,3H),2.59(d,J=11.7Hz,1H),2.53(s,3H),1.99-1.79(m,4H),1.77-1.54(m,2H),1.24(s,3H),1.19(s,9H)。LCMS(M+1)=555.2。
2-溴-4,5-二氟苯甲酸甲酯：向2-溴-4,5-二氟苯甲酸(1g，4.22mmol)於二氯甲烷(10mL)及MeOH(1mL)中之混合物中添加三甲基矽烷基)重氮甲烷(2.110mL，4.22mmol)且在室溫下攪拌反應物1小時。接著將其濃縮獲得呈油狀物之2-溴-4,5-二氟苯甲酸甲酯(1g，3.98mmol，94%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.76(dd,J=10.5,8.3Hz,1H),7.57-7.49(m,1H),3.96(s,3H)。
2-烯丙基-4,5-二氟苯甲酸甲酯：向2-溴-4,5-二氟苯甲酸甲酯(0.5 g，1.992mmol)、烯丙基三丁基錫烷(0.679mL，2.191mmol)、氯化鋰(0.169g，3.98mmol)於DMF(1mL)、乙腈(10mL)中之混合物添加二氯化雙(三苯膦)鈀(ii)(0.070g，0.100mmol)。其接著脫氣2分鐘，接著用N2填充。在90℃下加熱16小時後，其用NH4Cl淬滅，用EtOAc萃取。有機層用KF溶液洗滌5次，接著經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用10% EtOAc/己烷溶離純化，分離出呈油狀物之2-烯丙基-4,5-二氟苯甲酸甲酯(330mg，1.555mmol，78%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.78(dd,J=11.1,8.2Hz,1H),7.11(dd,J=11.1,7.7Hz,1H),5.98(ddt,J=16.9,10.2,6.5Hz,1H),5.16-5.02(m,2H),3.91(s,3H),3.76(d,J=6.6Hz,2H)。
(2-烯丙基-4,5-二氟苯基)甲醇：向2-烯丙基-4,5-二氟苯甲酸甲酯(360mg，1.697mmol)於THF(4mL)中之混合物中添加LAH(3.39mL，3.39mmol)，且在室溫下攪拌反應物1小時。其接著用NH4Cl淬滅，且用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用10% EtOAc/己烷溶離純化，分離出呈油狀物之(2-烯丙基-4,5-二氟苯基)甲醇(150mg，0.814mmol，48.0%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.34-7.24(m,1H),7.08-6.97(m,1H),5.96(ddt,J=16.8,10.4,6.2Hz,1H),5.14(d,J=10.0Hz,1H),5.03(d,J=17.1Hz,1H),4.67(d,J=5.1Hz,2H),3.40(d,J=6.1Hz,2H)。
(S)-2-(2-(((2-烯丙基-4,5-二氟苯甲基)氧基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基) 乙酸乙酯：在0℃下，向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(碘甲基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(200mg，0.342mmol)及(2-烯丙基-4,5-二氟苯基)甲醇(63.0mg，0.342mmol)於DMF(2mL)中之混合物中添加NaH(13.69mg，0.342mmol)。其接著在0℃下攪拌2小時，接著用水淬滅，用EtOAc萃取。有機層經MgSO4乾燥，過濾且濃縮獲得油狀物，其接著藉由biotage用25% EtOac/己烷溶離純化，獲得呈油狀物之(S)-2-(2-(((2-烯丙基-4,5-二氟苯甲基)氧基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(100mg,43.6%)。LCMS(M+1)=641.5。
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{15,16-二氟-4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯：(S)-2-(2-(((2-烯丙基-4,5-二氟苯甲基)氧基)甲基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(第三丁氧基)乙酸乙酯(100mg，0.156mmol)及Grubbs II催化劑(13.25mg，0.016mmol)於DCM(100mL)中之混合物回流2小時。接著將其濃縮且將殘餘物溶解於MeOH(2mL)中。添加硼氫化鈉(5.90mg，0.156mmol)且在室溫下攪拌1小時。其接著用NH4Cl淬滅，用EtOAc萃取。有機層用水洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。藉由biotage用20% EtOAc/己烷溶離純化殘餘物，分離出呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{15,16-二氟-4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.16,9.02,7.013,18]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(60mg，0.098mmol， 62.5%產率)。LCMS(M+1)=615.3。
實例68
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{15,16-二氟-4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸：使(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{15,16-二氟-4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.16,9.02,7.013,18]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸乙酯(60mg，0.098mmol)及NaOH(3.90mg，0.098mmol)於EtOH(2mL)中之混合物回流2小時。其接著冷卻至室溫且藉由製備型HPLC純化，分離出呈白色固體狀之(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{15,16-二氟-4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.16,9.02,7.013,18]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸(32.5mg，55.6%)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.44-7.31(m,1H),7.27(dd,J=11.6,8.6Hz,1H),6.51(s,1H),5.71(s,1H),4.97-4.76(m,3H),4.62(d,J=12.5Hz,1H),4.49(t,J=11.2Hz,1H),3.63-3.53(m,2H),3.21-3.19(m,2H),2.68-2.56(m,3H),2.50(br.s.,3H),1.83(d,J=12.8Hz,3H),1.71-1.50(m,5H),1.18(s,3H),1.15(s,9H)。LCMS(M+1)=587.3。
實例69及70藉由使用與實例35類似之方法合成。
實例69
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15-氯-4,16,20,26-四甲基-11,19,25- 三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸：1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.28(s,1H),7.00(s,1H),6.41(s,1H),5.35(s,1H),4.84(d,J=12.5Hz,1H),4.62-4.49(m,4H),4.31(t,J=11.7Hz,1H),3.66-3.43(m,3H),3.38(br.s.,2H),2.91-2.72(m,3H),2.30(s,3H),1.74-1.40(m,10H),1.18(s,6H),1.14-1.05(m,9H)。LCMS(M+H)=643.3。
實例70
(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15-氯-4,16,20,27-四甲基-11,19,26-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[25.2.2.1 6 , 9 .0 2 , 7 .0 13 , 18 ]三十二碳-2,4,6(32),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸：1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ 7.29(s,1H),7.06(s,1H),6.44(br.s.,1H),5.72(s,1H),4.75-4.41(m,6H),4.29(d,J=4.4Hz,1H),3.83-3.45(m,4H),2.5(s,3H),2.35-2.18(m,3H),1.95-1.37(m,10H),1.33-0.94(m,17H)。LCMS(M+H)=657.5。
熟習此項技術者顯而易知本發明不限於前述說明性實例，且其可以其他不悖離本發明基本屬性之形式實施。因此，需要從各方面將實例視為說明性而非限制性的，參考隨附申請專利範圍而非前述實例，且所有在申請專利範圍等效意義或範圍內的變化打算涵蓋在內。

Claims (18)

  1. 一種式I化合物， 其中：R1為烷基或鹵烷基；R2為氫或烷基；R3為氫、鹵基或烷基；R4為氫、烷基或環烷基；R5為氫、烷基或(Ar4)烷基；Ar1為苯基或萘基且經0-3個選自以下之取代基取代：氰基、鹵基、烷基、鹵烷基、烷氧基及鹵烷氧基；Ar2為經0-2個烷基取代基取代之吡咯基、吡唑基或三唑基；Ar3為經0-3個選自以下之取代基取代的苯基：氰基、鹵基、烷基、鹵烷基、烷氧基及鹵烷氧基；Ar4為經0-3個選自以下之取代基取代的苯基：氰基、鹵基、烷基、鹵烷基、烷氧基及鹵烷氧基；X1為伸烷基、伸烯基、-CH2O-、-CH2OCH2-、-CH2N(R4)CH2-或-CH2CON(R4)-；X2為-O-、-Ar1-、-Ar2-、-CON(R5)-、-(Ar3)CH-、-((苯甲氧基)CH2)CH-)-、-O(Ar3)CH-、-CH2CON(R5)-或-N(R5)COCON(R5)-；X3為不存在，-O-、烷氧基、環烷氧基、環烷基、Ar3、(Ar3)O-或((Ar3)烷基)O-； X4為伸烷基、伸烯基、伸烷氧基或伸烯氧基；X5不存在或為-O-；及X6為氮雜環丁烷基、吡咯啶基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、高哌啶基、高哌嗪基或高嗎啉基，且經0-3個鹵基或烷基取代基取代；或其醫藥學上可接受之鹽。
  2. 如請求項1之化合物，其中R1為烷基或鹵烷基；R2為氫或烷基；R3為氫、鹵基或烷基；R4為氫、烷基或環烷基；R5為氫、烷基或(Ar4)烷基；Ar1為經0-3個選自以下之取代基取代的苯基：氰基、鹵基、烷基、鹵烷基、烷氧基及鹵烷氧基；Ar3為經0-3個選自以下之取代基取代的苯基：氰基、鹵基、烷基、鹵烷基、烷氧基及鹵烷氧基；Ar4為經0-3個選自以下之取代基取代的苯基：氰基、鹵基、烷基、鹵烷基、烷氧基及鹵烷氧基；X1為伸烷基、伸烯基、-CH2O-、-CH2OCH2-、-CH2N(R4)CH2-或-CH2CON(R4)-；X2為-O-、-Ar1-、-CON(R5)-、-(Ar3)CH-、-((苯甲氧基)CH2)CH-)-、-O(Ar3)CH-、-CH2CON(R5)-或-N(R5)COCON(R5)-；X3為不存在、-O-、烷氧基、環烷氧基、環烷基、Ar3、(Ar3)O-或((Ar3)烷基)O-；X4為伸烷基、伸烯基、伸烷氧基或伸烯氧基；X5不存在或為-O-；且X6為經0-3個鹵基或烷基取代基取代的哌啶基；或其醫藥學上可接受之鹽。
  3. 如請求項1之化合物，其中X2為Ar1。
  4. 如請求項1之化合物，其中X3不存在或為-O-；X4為伸烷基或伸烯基；且X5為-O-。
  5. 如請求項1之化合物，其中R1為烷基，R2為烷基且R3為氫。
  6. 如請求項1之化合物，其中Ar1為經0-3個選自以下之取代基取代的苯基：氰基、鹵基、烷基、鹵烷基、烷氧基及鹵烷氧基。
  7. 如請求項1之化合物，其中X6為經0-3個鹵基或烷基取代基取代之哌啶基。
  8. 如請求項1之化合物，其選自由以下組成之群：(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,22-二甲基-16,21-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜五環[20.2.2.16,9.111,14.02,7]二十八碳-2,4,6(28),8,12,14(27),18-七烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,22-二甲基-16,21-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜五環[20.2.2.16,9.111,14.02,7]二十八碳-2,4,6(28),8,12,14(27)-六烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,15,15,22-四甲基-16,21-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜五環[20.2.2.16,9.111,14.02,7]二十八碳-2,4,6(28),8,12,14(27),19-七烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,15,15,22-四甲基-16,21-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜五環[20.2.2.16,9.111,14.02,7]二十八碳-2,4,6(28),8,12,14(27),17-七烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,28-二甲基-22,27-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜六環[26.2.2.16,9.111,14.02,7.015,20]三十四碳-2,4,6(34),8,12,14(33),15(20),16,18-九烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,26-二甲基-20,25-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜六環[24.2.2.16,9.111,14.115,19.02,7]三十三碳-2,4,6(33),8,12,14(32),15(31),16,18-九烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4',22'-二甲基-16',21'-二氧雜-1',5',7',8',11',12',13'-七氮雜螺[環己烷-1,15'-五環[20.2.2.16,9.111,14.02,7]二十八烷]-2',4',6'(28'),8',12',14'(27'),19'-七烯-3'-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4',22'-二甲基-16',21'-二氧雜-1',5',7',8',11',12',13'-七氮雜螺[環己烷-1,15'-五環[20.2.2.16,9.111,14.02,7]二十八烷]- 2',4',6'(28'),8',12',14'(27')-六烯-3'-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,22-二甲基-15-(丙烷-2-基)-16,21-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜五環[20.2.2.16,9.111,14.02,7]二十八碳-2,4,6(28),8,12,14(27),19-七烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,22-二甲基-15-(丙烷-2-基)-16,21-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜五環[20.2.2.16,9.111,14.02,7]二十八碳-2,4,6(28),8,12,14(27)-六烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,22-二甲基-15-(2-甲基丙基)-16,21-二氧雜-1,5,7,8,11,12,13-七氮雜五環[20.2.2.16,9.111,14.02,7]二十八碳-2,4,6(28),8,12,14(27)-六烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,24-二甲基-12-側氧基(oxo)-23-氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[22.2.2.16,9.02,7.013,18]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16,20-八烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,24-二甲基-12-側氧基-23-氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[22.2.2.16,9.02,7.013,18]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,26-二甲基-12-側氧基-20,25-二氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.014,19]三十一碳-2,4,6(31),8,14(19),15,17,23-八烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,26-二甲基-12-側氧基-20,25-二氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.014,19]三十一碳-2,4,6(31),8,14(19),15,17-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[14-[(4-氟-3-甲基苯基)甲基]-4,20-二甲基-12,13-二側氧基-19-氧雜-1,5,7,8,11,14-六氮雜四環[18.2.2.16,9.02,7]二十五碳-2,4,6(25),8,16-五烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{14-[(4-氟-3-甲基苯基)甲基]-4,20-二甲 基-12,13-二側氧基-19-氧雜-1,5,7,8,11,14-六氮雜四環[18.2.2.16,9.02,7]二十五碳-2,4,6(25),8-四烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(18Z)-4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.16,9.02,7.012,17]二十八碳-2,4,6(28),8,12(17),13,15,18-八烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20Z)-4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.16,9.02,7.012,17]二十八碳-2,4,6(28),8,12(17),13,15,20-八烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(19Z)-4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.16,9.02,7.012,17]二十八碳-2,4,6(28),8,12(17),13,15,19-八烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.16,9.02,7.013,18]二十八碳-2,4,6(28),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.16,9.02,7.013,18]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,23-二甲基-22-氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.16,9.02,7.013,18]二十八碳-2,4,6(28),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,23-二甲基-16-(三氟甲基)-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.16,9.02,7.013,18]二十八碳-2,4,6(28),8,13(18),14,16,19-八烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15-氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17,22-八烯-3-基]乙酸； (2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15-氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-4,15,20,26-四甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17,22-八烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-4,15,20,26-四甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-14,16-二氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17,22-八烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-14,16-二氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15,16-二氟-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17,22-八烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-16-氯-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17,22-八烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-16-氯-4,20,26-三甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S,22Z)-4,16,20,26-四甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6 (31),8,13(18),14,16,22-八烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S,22E)-4,16,20,26-四甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16,22-八烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-4,16,20,26-四甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-16-氟-4,20,26-三甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20R)-16-氟-4,20,26-三甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15,17-二氟-4,20,26-三甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-14,15-二氟-4,20,26-三甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15,16-二氟-4,20,26-三甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,16,26-三甲基-20-丙基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,16,26-三甲基-20-丙基-11,19,25-三氧 雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,18-二甲基-12-(4-甲基苯基)-11,17-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜四環[16.2.2.16,9.02,7]二十三碳-2,4,6(23),8-四烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[4,18-二甲基-12-(4-甲基苯基)-11,17-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜四環[16.2.2.16,9.02,7]二十三碳-2,4,6(23),8-四烯-3-基]乙酸；(2S)-2-[(12S)-12-[(苯甲氧基)甲基]-4,18-二甲基-11,17-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜四環[16.2.2.16,9.02,7]二十三碳-2,4,6(23),8-四烯-3-基]-2-(第三丁氧基)乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{15-氟-4,26-二甲基-20-丙基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{15-氟-4,26-二甲基-20-丙基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{15-氟-4,26-二甲基-20-苯基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{15-氟-4,26-二甲基-20-苯基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(24S)-4,24,30-三甲基-11,23,29-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜六環[28.2.2.16,9.02,7.013,22.015,20]三十五碳-2,4,6(35),8,13,15,17,19,21-九烯-3-基]乙酸； (2S)-2-(第三丁氧基)-2-[16-氟-4,26-二甲基-20-(三氟甲基)-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(12S,20S)-4,12,16,20,26-五甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(12R,20S)-4,12,16,20,26-五甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,25-二甲基-11,24-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[23.2.2.16,9.02,7.013,18]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,26-二甲基-11,25-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.16,9.113,17.02,7]三十碳-2,4,6(30),8,13(29),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{16-氟-4,25-二甲基-11,24-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[23.2.2.16,9.02,7.013,18]三十碳-2,4,6(30),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(24S)-4,24,30-三甲基-11,23,29-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜六環[28.2.2.16,9.02,7.013,22.016,21]三十五碳-2,4,6(35),8,13(22),14,16(21),17,19-九烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{11-環丙基-16-氟-4,25-二甲基-24-氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[23.2.2.16,9.02,7.013,18]三十碳-2,4,6(30),8, 13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[21.2.2.16,9.113,17.02,7]二十九碳-2,4,6(29),8,13(28),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-11-環丙基-4,16,20,26-四甲基-19,25-二氧雜-1,5,7,8,11-五氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13(18),14,16-七烯-3-基]乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{4,16,24-三甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.16,9.02,7.013,18]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{16-氟-4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.16,9.02,7.013,18]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{16-氟-4,23-二甲基-11,22-二氧雜-1,5,7,8四氮雜五環[21.2.2.16,9.02,7.013,18]二十八碳-2,4,6(28),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-{15,16-二氟-4,24-二甲基-11,23-二氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[22.2.2.16,9.02,7.013,18]二十九碳-2,4,6(29),8,13(18),14,16-七烯-3-基}乙酸；(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15-氯-4,16,20,26-四甲基-11,19,25-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[24.2.2.16,9.02,7.013,18]三十一碳-2,4,6(31),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸；及(2S)-2-(第三丁氧基)-2-[(20S)-15-氯-4,16,20,27-四甲基-11,19,26-三氧雜-1,5,7,8-四氮雜五環[25.2.2.16,9.02,7.013,18]三十二碳-2,4,6(32),8,13,15,17-七烯-3-基]乙酸；或其醫藥學上可接受之鹽。
  9. 一種式II化合物，其中R1為氫或烷基；R2為氫、芳基烷基、烯丙氧基羰基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳基烷氧基羰基、三烷基矽烷基、烷基(芳基)2矽烷基或(烷基)2芳基矽烷基；R3為烷基或鹵烷基；R4為氫、烷基、芳基烷基、烷氧基羰基、芳氧基羰基或芳基烷氧基羰基：
  10. 如請求項9之化合物，其中R1為烷基；R2為氫、苯甲基或第三丁基二苯基矽烷基；R3為甲基或碘甲基；R4為氫、第三丁氧基羰基或苯甲氧基羰基。
  11. 一種製備式II中R1為烷基、R2為氫、R3為甲基且R4為氫之化合物之方法，其包含氫解式II中R1為烷基、R2為苯甲基、R3為碘甲基且R4為苯甲氧基羰基之化合物
  12. 如請求項11之方法，其另外包含自N-苯甲氧基羰基-4-亞甲基哌啶及5-烷基-5-苯甲氧基戊-1-醇製備R1為烷基、R2為苯甲基、R3為碘甲基且R4為苯甲氧基羰基的式II化合物。
  13. 一種製備式II中R1為烷基、R2為三烷基矽烷基、烷基(芳基)2矽烷基或(烷基)2芳基矽烷基、R3為甲基且R4為氫之化合物之方法，其包含質子分解式II中R1為烷基、R2為三烷基矽烷基、烷基(芳基)2矽烷基或(烷基)2芳基矽烷基、R3為甲基且R4為第三丁氧基羰 基之化合物
  14. 如請求項13之方法，其進一步包含自R1為烷基、R2為三烷基矽烷基、烷基(芳基)2矽烷基或(烷基)2芳基矽烷基、R3為碘甲基且R4為第三丁氧基羰基的式II化合物氫解成R1為烷基、R2為三烷基矽烷基、烷基(芳基)2矽烷基或(烷基)2芳基矽烷基、R3為甲基且R4為第三丁氧基羰基的式II化合物。
  15. 如請求項14之方法，其進一步包含自N-苯甲氧基羰基-4-亞甲基哌啶及5-烷基-5-(三烷基矽烷氧基、烷基(芳基)2矽烷氧基或(烷基)2芳基矽烷氧基)戊-1-醇製備R1為烷基、R2為三烷基矽烷基、烷基(芳基)2矽烷基或(烷基)2芳基矽烷基、R3為碘甲基且R4為第三丁氧基羰基之式II化合物。
  16. 一種製備式III中R1為經0-1個苯甲氧基、三烷基矽烷氧基、烷基(芳基)2矽烷氧基或(烷基)2芳基矽烷氧基取代基取代之烷氧基、R3為甲基且R4為苯甲氧基羰基或烷氧基羰基之化合物之方法，其包含用經0-1個苯甲氧基、三烷基矽烷氧基、烷基(芳基)2矽烷氧基或(烷基)2芳基矽烷氧基取代基取代之醇碘醚化R3及R4一起為亞甲基的式III化合物，隨後氫解
  17. 一種適用於治療HIV感染之組合物，其包含治療量之如請求項1 之化合物及醫藥學上可接受之載劑。
  18. 一種如請求項1至8中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其用於製造用以治療HIV感染之藥劑。
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