CN116670143A - 囊性纤维化跨膜传导调控因子的调节剂 - Google Patents

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CN116670143A CN202180082146.3A CN202180082146A CN116670143A CN 116670143 A CN116670143 A CN 116670143A CN 202180082146 A CN202180082146 A CN 202180082146A CN 116670143 A CN116670143 A CN 116670143A
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Abstract

本公开提供了囊性纤维化跨膜传导调控因子(CFTR)的调节剂，所述调节剂具有核心结构(I)；含有至少一种此类调节剂的药物组合物；使用此类调节剂和药物组合物治疗包含囊性纤维化的CFTR介导的疾病的方法；组合药物组合物和组合疗法；以及用于制备此类调节剂的方法和中间体。

Description

囊性纤维化跨膜传导调控因子的调节剂
本申请要求于2020年10月7日提交的美国临时申请第63/088,799号的优先权的权益，所述美国临时申请的内容通过引用以其整体并入。
本公开涉及囊性纤维化跨膜传导调控因子(CFTR)的调节剂；含有所述调节剂的药物组合物；使用此类调节剂治疗包含囊性纤维化的CFTR介导的疾病的方法；使用此类调节剂的组合疗法和组合药物组合物；以及用于制备此类调节剂的方法和中间体。
囊性纤维化(CF)是一种隐性遗传疾病，在全球范围内有约70,000名儿童及成人受到影响。尽管CF的治疗取得一定进展，但仍无法治愈。
在CF患者中，呼吸道上皮中内源性表达的CFTR突变导致顶端阴离子分泌减少，使得离子和液体转运失衡。由此引起的阴离子转运减少导致肺中粘液累积增加，并且伴随微生物感染，最终导致CF患者死亡。除呼吸系统疾病之外，CF患者通常患有胃肠道问题和胰腺功能不全，如果不治疗，则会导致死亡。另外，大多数患有囊性纤维化的男性不育，并且患有囊性纤维化的女性的生育力降低。
关于CFTR基因的序列分析已揭露出多种引起疾病的突变(Cutting,G.R.等人(1990)Nature 346:366-369；Dean,M.等人(1990)Cell 61:863:870；以及Kerem,B-S.等人(1989)Science 245:1073-1080；Kerem,B-S等人(1990)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87:8447-8451)。迄今为止，已识别出CF基因中超过2000个突变；目前，CFTR2数据库仅包含关于这些已识别突变中的432个的信息，有足够的证据将352个突变定义为致病性的。最普遍的致病突变是CFTR氨基酸序列508位的苯丙氨酸缺失，并且通常称为F508del突变。该突变出现在许多囊性纤维化病例中，并且与严重疾病相关。
CFTR中残基508的缺失阻止新生蛋白质正确地折叠。这导致突变蛋白无法离开内质网(ER)并运输至质膜。因此，存在于膜中的用于阴离子转运的CFTR通道的数目远低于在表达野生型CFTR，即不含突变的CFTR的细胞中观察到的数目。除了运输受损之外，突变导致缺陷性通道门控。膜中通道数目的减少和门控缺陷一起导致阴离子和流体跨上皮转运减少。(Quinton,P.M.(1990),FASEB J.4:2709-2727)。由于F508del突变而存在缺陷的通道仍是功能性的，尽管其功能小于野生型CFTR通道。(Dalemans等人(1991),Nature Lond.354:526-528；Pasyk和Foskett(1995),J.Cell.Biochem.270:12347-50)。除F508del之外，CFTR中导致缺陷性运输、合成和/或通道门控的其他致病突变可以上调或下调以改变阴离子分泌并改变疾病进展和/或严重程度。
CFTR是在包括吸收性和分泌性上皮细胞的各种细胞类型中表达的cAMP/ATP介导的阴离子通道，其中它调控跨膜阴离子通量以及其他离子通道和蛋白质的活性。在上皮细胞中，CFTR的正常功能对于维持电解质在全身(包括呼吸和消化组织)的转运至关重要。CFTR由编码蛋白质的1480个氨基酸构成，所述蛋白质由跨膜结构域的串联重复序列组成，每个跨膜结构域含有六个跨膜螺旋和一个核苷酸结合结构域。两个跨膜结构域通过大的极性调控(R)结构域与多个磷酸化位点连接，从而调控通道活性和细胞运输。
氯离子转运通过存在于顶端膜上的ENaC和CFTR以及细胞基底外侧表面上表达的Na+-K+-ATP酶泵和Cl-通道的协调活性进行。氯离子从内腔侧的次级主动转运导致细胞内氯离子积累，接着其可经由Cl-通道被动地离开细胞，从而导致媒介物转运。Na+/2Cl-/K+共转运蛋白、Na+-K+-ATP酶泵和基底外侧表面上的基底外侧膜K+通道以及在内腔侧上CFTR的布置经由内腔侧上CFTR协调氯离子分泌。由于水自身可能无法主动转运，因此其跨上皮的流动取决于由钠和氯离子大量流动产生的微小跨上皮渗透梯度。
最近已鉴定出多种CFTR调节性化合物。然而，仍然需要能够治疗或减轻囊性纤维化和其它CFTR介导的疾病，并且尤其是这些疾病的更严重形式的化合物。
本公开的一方面提供了新颖化合物，所述新颖化合物包含式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物。
式I涵盖在以下结构范围内的化合物：
并且包括那些化合物的互变异构体、所述化合物和互变异构体中任一者的氘化衍生物，以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中：
环A选自：
■C6-C10芳基，
■C3-C10环烷基，
■3至10元杂环基，以及
■5至10元杂芳基；
环B选自：
■C6-C10芳基，
■C3-C10环烷基，
■3至10元杂环基，以及
■5至10元杂芳基；
V选自O和NH；
W1选自N和CH；
W2选自N和CH；条件是W1和W2中的至少一个是N；
Z选自O、NRZN和C(RZC)2，条件是当L2不存在时，Z是C(RZC)2；
每个L1独立地选自C(RL1)2；
每个L2独立地选自C(RL2)2；
每个R3独立地选自：
■卤素，
■C1-C6烷基，
■C1-C6烷氧基，
■C3-C10环烷基，
■任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，以及
■3至10元杂环基；
R4选自氢和C1-C6烷基；
每个R5独立地选自：
■氢，
■卤素，
■羟基，
■N(RN)2，
■-SO-Me，
■-CH＝C(RLC)2，其中两个RLC一起形成C3-C10环烷基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
○羟基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷氧基和C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
○C3-C10环烷基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的基团取代的-(O)0-1-(C6-C10芳基)，
○3至10元杂环基，以及
○N(RN)2，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷氧基：
○卤素，
○C6-C10芳基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
■C1-C6氟烷基，
■C3-C10环烷基，
■C6-C10芳基，以及
■3至10元杂环基；
RZN选自：
■氢，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
○羟基，
○氧代，
○氰基，
○任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6烷氧基的基团取代的C1-C6烷氧基，
○N(RN)2，
○SO2Me，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C10环烷基：
◆羟基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基、C6-C10芳基和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，
◆C1-C6氟烷基，
◆C1-C6烷氧基，以及
◆COOH，
◆N(RN)2，
◆C6-C10芳基，以及
◆任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
◆卤素，
◆羟基，
◆氰基，
◆SiMe3，
◆SO2Me，
◆SF5，
◆N(RN)2，
◆P(O)Me2，
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基、5至10元杂芳基、SO2Me和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、N(RN)2和C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆C1-C6氟烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
◆-(O)0-1-(C6-C10芳基)，以及
◆任选地被羟基、氧代、N(RN)2、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6氟烷基和C3-C10环烷基取代的-(O)0-1-(5至10杂芳基)，
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
◆羟基，
◆氧代，
◆N(RN)2，
◆C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷氧基的基团取代)，
◆C1-C6烷氧基，
◆C1-C6氟烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的C6-C10芳基，以及
◆5至10元杂芳基，以及
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
◆羟基，
◆氰基，
◆氧代，
◆卤素，
◆B(OH)2，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基(任选地被1-3个-SiMe3取代)和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基、N(RN)2和C3-C10环烷基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆C1-C6氟烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆-(O)0-1-(C6-C10芳基)，
◆任选地被1-4个独立地选自羟基、氧代、卤素、氰基、N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、N(RN)2和C1-C6烷氧基的基团取代)、C1-C6烷氧基、C1-C6氟烷基、3至10元杂环基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代)的基团取代的-(O)0-1-(3至10元杂环基)，以及
◆任选地被1-4个独立地选自C1-C6烷基和C3-C10环烷基的基团取代的5至10元杂芳基，
■C1-C6氟烷基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C10环烷基：
○羟基，
○氧代，
○卤素，
○氰基，
○N(RN)2，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
◆羟基，
◆氧代，
◆N(RN)2，
◆C1-C6烷氧基，以及
◆C6-C10芳基，
○任选地被1-3个独立地选自卤素、氧代、C6-C10芳基和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷氧基，
○卤素，
○C3-C10环烷基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
◆羟基，
◆氰基，
◆氧代，
◆卤素，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、C1-C6烷氧基、N(RN)2和C3-C10环烷基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆C1-C6氟烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆C6-C10芳基，以及
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
■C6-C10芳基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
○氧代，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
◆氧代，
◆羟基，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自卤素和C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，以及
◆-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
○C1-C6氟烷基，
○任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的C3-C10环烷基，以及
○3至10元杂环基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
○卤素，
○任选地被1-3个独立地选自氧代、C1-C6烷氧基和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基(任选地被1-3个选自氧代、C1-C6烷氧基和C6-C10芳基的基团取代)的基团取代的3至10元杂环基，
■RF；
每个RZC独立地选自：
■氢，
■任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)的基团取代的C1-C6烷基，
■任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，以及
■RF；
或者两个RZC一起形成氧代基团；
每个RL1独立地选自：
■氢，
■N(RN)2，条件是两个N(RN)2不与同一碳结合，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
○卤素，
○羟基，
○氧代，
○N(RN)2，
○任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
○任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基和氧代的基团取代)的基团取代的3至10元杂环基，
■C3-C10环烷基，
■任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
○卤素，
○氰基，
○SiMe3，
○POMe2，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C7烷基：
◆羟基，
◆氧代，
◆氰基，
◆SiMe3，
◆N(RN)2，以及
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷氧基：
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，以及
◆C1-C6烷氧基，
○C1-C6氟烷基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基和C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
○C6-C10芳基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
○5至10元杂芳基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
◆氧代，以及
◆C1-C6烷氧基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，以及
■RF；
或者同一碳原子上的两个RL1一起形成氧代基团；
每个RL2独立地选自氢和RF；或者同一碳原子上的两个RL2一起形成氧代基团；前提是至少一个RL1或RL2是RF；
每个RN独立地选自：
■氢，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C8烷基：
○氧代，
○卤素，
○羟基，
○NH2，
○NHMe，
○NMe2，
○任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
○-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
○任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，以及
○任选地被1-4个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的3至14元杂环基，以及
○任选地被1-4个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的5至14元杂芳基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C10环烷基：
○羟基，
○NH2，以及
○NHMe，以及
○任选地被1-3个独立地选自羟基的基团取代的C1-C6烷基，
■C6-C10芳基，以及
■3至10元杂环基；
或者同一氮原子上的两个RN与其所结合的氮一起形成任选地被1-3个选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
■羟基，
■氧代，
■氰基，
■任选地被1-3个独立地选自氧代、羟基、C1-C6烷氧基和N(RN2)2的基团取代的C1-C6烷基，其中每个RN2独立地选自氢和C1-C6烷基，
■C1-C6烷氧基，以及
■C1-C6氟烷基；
或者一个R4和一个RL1一起形成C6-C8亚烷基；
两个RF与其所结合的原子一起形成选自以下的基团：
■任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
○卤素，
○C1-C6烷基，
○N(RN)2，以及
○任选地被1-3个独立地选自羟基的基团取代的3至10元杂环基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至11元杂环基：
○氧代，
○N(RN)2，
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
◆氧代，
◆卤素，
◆羟基，
◆N(RN)2，
◆-SO2-(C1-C6烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自卤素、C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、卤素、氰基、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷氧基的基团取代)、C1-C6烷氧基(任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代)、-(O)0-1-(C1-C6氟烷基)和C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷氧基的基团取代)的基团取代的C6-C10芳基，
◆任选地被1-4个独立地选自羟基、卤素、N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代、羟基和C1-C6烷氧基的基团取代)、C1-C6氟烷基和C6-C10芳基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自氧代、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)的基团取代)、C1-C6烷氧基、C3-C10环烷基和RN的基团取代的3至10元杂环基，
◆任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)和C1-C6烷基的基团取代的-O-(5至12元杂芳基)，以及
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氰基的基团取代)、C1-C6烷氧基、-(O)0-1-(C1-C6氟烷基)、-O-(C6-C10芳基)和C3-C10环烷基的基团取代的5至10元杂芳基，
○任选地被1-4个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C12环烷基，
○C6-C10芳基，
○3至10元杂环基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷氧基、C1-C6氟烷基和N(RN)2的基团取代的5至10元杂芳基，以及
■任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基和C1-C6氟烷基的基团取代的5至12元杂芳基。
在式I的一些情况下，当两个RF一起形成3至11元杂环基时，其中所述3至11元杂环基任选地被5至10元杂芳基取代，并且其中所述5至10元杂芳基任选地被C1-C6烷氧基取代，所述C1-C6烷氧基可以任选地被C6-C10芳基取代。
式I还包含式Ia化合物：
那些化合物的互变异构体、所述化合物和互变异构体中任一者的氘化衍生物，以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中环A、环B、W1、W2、Z、L1、L2、R3、R4、R5和RF如式I所定义。
式I还包含式IIa化合物：
那些化合物的互变异构体、所述化合物和互变异构体中任一者的氘化衍生物，以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中环B、W1、W2、Z、L1、L2、R3、R4、R5和RF如式I所定义。
式I还包含式IIb化合物：
那些化合物的互变异构体、所述化合物和互变异构体中任一者的氘化衍生物，以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中环A、W1、W2、Z、L1、L2、R3、R4、R5和RF如式I所定义。
式I还包含式III化合物：
那些化合物的互变异构体、所述化合物和互变异构体中任一者的氘化衍生物，以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中W1、W2、Z、L1、L2、R4、R5和RF如式I所定义。
式I还包含式IV化合物：
那些化合物的互变异构体、所述化合物和互变异构体中任一者的氘化衍生物，以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中Z、L1、L2、R4、R5和RF如式I所定义。
式I还包含式V化合物：
那些化合物的互变异构体、所述化合物和互变异构体中任一者的氘化衍生物，以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中Z、L1、L2、R4、R5和RF如式I所定义。
式I还包含式Va和式Vb化合物：
/>
那些化合物的互变异构体、所述化合物和互变异构体中任一者的氘化衍生物，以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中Z、L1、L2、R4、R5和RF如式I所定义。
式I还包含式VI化合物：
那些化合物的互变异构体、所述化合物和互变异构体中任一者的氘化衍生物，以及前述任一者的药学上可接受的盐，其中L1、R4、R5和RF如式I所定义。
本公开的另一方面提供了药物组合物，所述药物组合物包括选自本文所公开的新颖化合物的至少一种化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐以及至少一种药学上可接受的载体，所述组合物可以进一步包含至少一种另外的活性药物成分。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分是至少一种其它CFTR调节剂。在一些实施例中，所述至少一种其它CFTR调节剂选自CFTR增效剂。在一些实施例中，所述至少一种其它CFTR调节剂选自CFTR校正剂。在一些实施例中，所述至少一种其它CFTR调节剂包含增效剂和校正剂。在一些实施例中，所述至少一种其它CFTR调节剂选自替扎卡托(tezacaftor)、鲁玛卡托(lumacaftor)、依伐卡托(ivacaftor)、氘替卡托(deutivacaftor)、(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和前述任一者的氘化衍生物和药学上可接受的盐。
因此，本公开的另一方面提供了治疗CFTR介导的疾病囊性纤维化的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用选自本文所公开的新颖化合物的至少一种化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐以及至少一种药学上可接受的载体，任选地作为包括至少一种另外的活性药物成分的药物组合物的一部分。在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分是至少一种其它CFTR调节剂。在一些实施例中，所述至少一种其它CFTR调节剂选自CFTR增效剂。在一些实施例中，所述至少一种其它CFTR调节剂选自CFTR校正剂。在一些实施例中，所述至少一种其它CFTR调节剂包含增效剂和校正剂。在一些实施例中，所述至少一种其它CFTR调节剂选自替扎卡托、鲁玛卡托、依伐卡托、氘替卡托、(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和前述任一者的氘化衍生物和药学上可接受的盐。
在某些实施例中，本公开的药物组合物包括选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种(即，一种或多种)化合物。在一些实施例中，包括选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种(即，一种或多种)化合物的组合物可以任选地进一步包括：(a)选自(R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羟基丙基)-6-氟-2-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-吲哚-5-基)环丙烷甲酰胺(替扎卡托)、3-(6-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)环丙烷甲酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸(鲁玛卡托)和替扎卡托和鲁玛卡托的氘化衍生物以及药学上可接受的盐的至少一种(即，一种或多种)化合物；和/或(b)选自N-[2,4-双(1,1-二甲基乙基)-5-羟基苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺(依伐卡托)、N-(2-(叔丁基)-5-羟基-4-(2-(甲基-d3)丙烷-2-基-1,1,1,3,3,3-d6)苯基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲酰胺(氘替卡托)、(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和前述任一者的氘化衍生物和药学上可接受的盐的至少一种(即，一种或多种)化合物。
本公开的另一方面提供了治疗CFTR介导的疾病、囊性纤维化的方法，所述方法包括向有需要的患者施用选自本文所公开的新颖化合物、其氘化衍生物和前述中任一项的药学上可接受的盐的至少一种化合物，并且任选地进一步施用一种或多种另外的CFTR调节剂。本公开的另外的方面提供了本公开的药物组合物，所述药物组合物包括选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，以及任选地一种或多种CFTR调节剂用于疗法或用于制造药物。在一些实施例中，任选的一种或多种另外的CFTR调节剂选自CFTR增效剂。在一些实施例中，所述一种或多种另外的CFTR调节剂选自CFTR校正剂。在一些实施例中，所述一种或多种另外的CFTR调节剂选自替扎卡托、鲁玛卡托、依伐卡托、氘替卡托、(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和前述任一者的氘化衍生物和药学上可接受的盐。
本公开的另外的方面提供了用于制备本文所公开的化合物和药物组合物的中间体和方法。
定义
如本文所使用的“替扎卡托”是指(R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羟基丙基)-6-氟-2-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-吲哚-5-基)环丙烷甲酰胺，其可用以下结构描绘：
替扎卡托可以呈氘化衍生物或药学上可接受的盐或氘化衍生物的药学上可接受的盐的形式。在WO 2010/053471、WO 2011/119984、WO 2011/133751、WO 2011/133951、WO2015/160787和US 2009/0131492中公开了替扎卡托以及制备和使用替扎卡托的方法，所述文献通过引用并入本文。
如本公开全文中使用的“依伐卡托”是指N-(2,4-二叔丁基-5-羟基苯基)-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺，其由以下结构描绘：
依伐卡托也可以呈氘化衍生物、药学上可接受的盐或氘化衍生物的药学上可接受的盐的形式。在WO 2006/002421、WO 2007/079139、WO 2010/108162和WO 2010/019239中公开了依伐卡托以及制备和使用依伐卡托的方法，所述文献通过引用并入本文。
在一些实施例中，在本文所公开的组合物和方法中使用依伐卡托的特定氘化衍生物(氘替卡托)。氘替卡托的化学名称为N-(2-(叔丁基)-5-羟基-4-(2-(甲基-d3)丙烷-2-基-1,1,1,3,3,3-d6)苯基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲酰胺，如以下结构所描绘：
氘替卡托可以呈另外的氘化衍生物、药学上可接受的盐或另外的氘化衍生物的药学上可接受的盐的形式。在WO 2012/158885、WO 2014/078842和美国专利第8,865,902号中公开了氘替卡托以及制备和使用氘替卡托的方法，所述文献通过引用并入本文。
如本文所使用，“鲁玛卡托”是指3-(6-(1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)环丙烷甲酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸，其化学结构描绘如下：
鲁玛卡托可以呈氘化衍生物、药学上可接受的盐或氘化衍生物的药学上可接受的盐的形式。在WO 2007/056341、WO 2009/073757和WO 2009/076142中公开了鲁玛卡托以及制备和使用鲁玛卡托的方法，所述文献通过引用并入本文。
如本文所使用的，术语“烷基”是指含有碳原子(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个碳原子)的饱和或部分饱和、支链或无支链的脂肪烃，其中相邻碳原子之间的一个或多个键可以是双(烯基)或三(炔基)键。烷基可以是被取代或未被取代的。
如本文所使用的，术语“卤代烷基”是指被一个或多个卤素原子取代的烷基，例如氟烷基，是指被一个或多个氟原子取代的烷基。
如本文所使用的，术语“烷氧基”是指与氧原子共价结合的烷基或环烷基。烷氧基可以是被取代或未被取代的。
如本文所用，术语“卤代烷氧基”是指被一个或多个卤素原子取代的烷氧基。
如本文所使用的，“环烷基”是指具有3至12个碳(例如3-10个碳)的环状、双环、三环或多环非芳香族烃基团并且可以包含一个或多个不饱和键。“环烷基”涵盖单环、双环、三环、桥连环、稠合环和螺环，包括单螺环和二螺环。环烷基的非限制性实例是环丙基、环丁基、环戊基、环己基、金刚烷基、降冰片基和二螺[2.0.2.1]庚烷。环烷基可以是被取代或未被取代的。
如本文所使用的术语“芳基”是源自芳香族环的官能团或取代基并且涵盖单环芳香族环和双环、三环和稠合的环体系，其中所述体系中的至少一个环是芳香族的。芳基的非限制性实例包含苯基、萘基和1,2,3,4-四氢萘基。
如本文所使用的术语“杂芳基环”是指包括至少一个环原子的芳香族环，所述环原子是如O、N或S等杂原子。杂芳基涵盖单环和双环、三环、桥连环、稠合环和螺环体系(包含单螺环和双螺环)，其中所述体系中的至少一个环是芳香族的。杂芳基环的非限制性实例包含吡啶、喹啉、吲哚和二氢吲哚。
如本文所使用的，术语“杂环基环”是指在环中含有3至12个原子(例如3-10个原子)的非芳香族烃，所述环包括至少一个环原子，所述环原子是如O、N或S等杂原子并且可以包含一个或多个不饱和键。“杂环基”环涵盖单环、双环、三环、多环、桥连环、稠合环和螺环，包括单螺环和二螺环。
“被取代的”，无论前面是否带有术语“任选地”，均指示“被取代的”基团中的至少一个氢被取代基置换。除非另外指示，否则“任选地被取代”的基团可在该基团的每个可取代位置处具有合适的取代基，并且当任何给定结构中的多于一个位置可以被选自指定基团的多于一个取代基取代时，在每个位置处的取代基可以相同或不同。
氮保护基的实例包括例如氨基甲酸叔丁酯(Boc)、苄基(Bn)、对甲氧基苄基(PMB)、四氢吡喃基(THP)、氨基甲酸9-芴基甲基酯(Fmoc)、氨基甲酸苄酯(Cbz)、氨基甲酸甲酯、氨基甲酸乙酯、氨基甲酸2,2,2-三氯乙酯(Troc)、氨基甲酸2-三甲基甲硅烷基乙酯(Teoc)、氨基甲酸烯丙酯(Aloc或Alloc)、甲酰胺、乙酰胺、苯甲酰胺、烯丙胺、三氟乙酰胺、三苯甲胺、苄亚基胺和对甲苯磺酰胺。氮保护基的完整列表可见于Wuts,P.G.M.“Greene'sProtective Groups in Organic Synthesis:Fifth Edition,”2014,John Wiley andSons。
如本文所使用，术语“选自(selected from)”和“选自(chosen from)”可互换使用。
如本文所使用，“一种或多种氘化衍生物”是指具有与参考化合物相同的化学结构并且一个或多个氢原子被氘原子置换的化合物。在一些实施例中，被氘替代的所述一个或多个氢是烷基的一部分。在一些实施例中，被氘替代的所述一个或多个氢是甲基的一部分。
如本文所用，“CFTR”是指囊性纤维化跨膜传导调控因子。
术语“CFTR调节剂”和“CFTR调节剂”在本文中可互换使用，是指增加CFTR的活性的化合物。由CFTR调节剂引起的活性增加包括但不限于对CFTR进行校正、增强、稳定化和/或扩增的化合物。
本文中可互换使用的术语“校正剂”或“CFTR校正剂”是指促进CFTR的加工和运输以增加细胞表面的CFTR量的化合物。本文公开的新颖化合物是CFTR校正剂。在与本文所公开的新颖化合物的组合疗法中，可以使用其它校正剂来治疗CFTR介导的疾病，如囊性纤维化。此类其它校正剂包含，例如，替扎卡托、鲁玛卡托和其氘化衍生物和药学上可接受的盐。
本文中可互换使用的术语“增效剂”和“CFTR增效剂”是指增加位于细胞表面的CFTR蛋白的通道活性，从而增强离子转运的化合物。本文所公开的依伐卡托和氘替卡托是CFTR增效剂。增效剂可以与本公开的新颖化合物组合使用，以治疗CFTR介导的疾病，如囊性纤维化。此类增效剂包含例如依伐卡托、氘替卡托、(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和其氘化衍生物以及药学上可接受的盐。
应当理解，当描述选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的化合物的组合并且本文提供了其它特定CFTR调节剂时，组合或治疗方案将通常但不一定包含至少一种增效剂，例如，选自依伐卡托、氘替卡托、(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的增效剂。应当理解，通常但不一定在组合药物组合物或疗法中使用单一增效剂。在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物的组合和其它特定CFTR调节剂都将包含CFTR增效剂，例如依伐卡托、氘替卡托、(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和其氘化衍生物和药学上可接受的盐的增效剂，以及另一种CFTR校正剂，例如选自替扎卡托、鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的校正剂化合物。
如本文所使用的，术语“选自…的至少一种化合物”是指从特定组中选择化合物中的一种或多种。
在本公开中提及“化合物1-426意在表示单独提及化合物1至426中的每一种或者提及化合物组，例如化合物1-371、化合物372-385以及化合物386-426。
如本文所使用的，术语“活性药物成分”或“治疗剂”(“API”)是指生物活性化合物。
术语“患者”和“受试者”可互换使用并且指包括人的动物。
术语“有效剂量”和“有效量”在本文中可互换使用，并且指产生施用化合物所期望的效果(例如，CF或CF的症状改善，或CF或CF症状的严重程度减轻)的化合物的量。有效剂量的确切量将取决于治疗目的，并且将由本领域技术人员使用已知技术确定(参见例如Lloyd(1999)The Art,Science and Technology of Pharmaceutical Compounding)。
如本文所使用，术语“治疗(treatment/treating)”等通常意指改善受试者的CF的一种或多种症状，或减轻CF或CF的一种或多种症状的严重程度。如本文所使用，“治疗”包括但不限于以下：受试者的生长增加、体重增益增加、肺粘液减少、胰腺和/或肝功能改善、胸部感染减轻和/或咳嗽或呼吸急促减轻。根据本领域已知的标准方法和技术，可以容易地评估任何这些症状的改善或严重程度的减轻。应当理解，本文提及的使用本公开的一种或多种化合物任选地与一种或多种另外的CFTR调节剂(例如，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐，任选地与一种或多种另外的CFTR调节剂组合)组合的治疗方法(例如，治疗CFTR介导的疾病的方法或治疗囊性纤维化的方法)也应该被解释为提及：
-一种或多种化合物(例如，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的组合物，任选地与一种或多种另外的CFTR调节剂组合)用于治疗例如囊性纤维化的方法，任选地与一种或多种另外的CFTR调节剂组合；和/或
-一种或多种化合物(例如，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的组合物，任选地与一种或多种另外的CFTR调节剂组合)在制备用于治疗例如囊性纤维化的药物中的用途。
还应当理解，本文所提及的使用本公开的药物组合物(例如，包括选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，并且任选地进一步包括一种或多种另外的CFTR调节剂的药物组合物)的治疗方法(例如，治疗CFTR介导的疾病的方法或治疗囊性纤维化的方法)也应该被解释为提及：
-药物组合物(例如，包括选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，并且任选地进一步包括一种或多种另外的CFTR调节剂的药物组合物)用于治疗例如囊性纤维化的方法；和/或
-药物组合物(例如，包括选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，并且任选地进一步包括一种或多种另外的CFTR调节剂的药物组合物)在制备用于治疗例如囊性纤维化的药物中的用途。
如本文所用，当提及两种或更多种化合物、药剂或另外的活性药物成分时，术语“与……组合”意指在彼此之前、与其同时或在其之后向患者施用两种或更多种化合物、药剂或活性药物成分。
术语“约”和“大约”可以指由本领域技术人员确定的特定值的可接受误差，其部分取决于如何测量或确定所述值。在一些实施例中，术语“约”和“大约”意指给定值或范围的20％、15％、10％、5％、4％、3％、2％、1％或0.5％以内。
如本文所用，术语“溶剂”是指可至少部分溶解产物(产物溶解度>1g/L)的任何液体。
如本文所用，术语“室温”或“环境温度”意指15℃至30℃。
应当理解，本公开的某些化合物可以作为单独的立体异构体或对映异构体和/或这些立体异构体或对映异构体的混合物存在。
本文公开的某些化合物可以互变异构体形式存在，并且两种互变异构形式都是预期的，即使仅描绘单一互变异构结构。例如，对化合物X的描述应被理解为包含其互变异构体化合物Y并且反之亦然，以及其混合物：
如本文所用，“最低功能(MF)突变”是指与最低CFTR功能相关的CFTR基因突变(极低至无功能CFTR蛋白)，并且包括例如与CFTR通道打开和关闭能力的严重缺乏相关的突变，称为缺陷型通道门控或“门控突变”；与CFTR细胞加工及其向细胞表面的递送的严重缺乏相关的突变；与没有(或最少)CFTR合成相关的突变；以及与通道传导的严重缺陷相关的突变。
如本文所使用的，术语“药学上可接受的盐”是指本公开的化合物的盐形式，其中所述盐是无毒的。本公开的化合物的药学上可接受的盐包括衍生自合适的无机和有机酸和碱的那些盐。例如，化合物的“游离碱”形式不含离子键结的盐。
在提及本公开的一种或多种化合物或式时，短语“和氘化衍生物及其药学上可接受的盐”可与“和氘化衍生物以及前述任一者的药学上可接受的盐”互换使用。这些短语旨在涵盖所提及的化合物中任一者的药学上可接受的盐、所提及的化合物中任一者的氘化衍生物和那些氘化衍生物的药学上可接受的盐。
本领域的普通技术人员将认识到，当公开“化合物或其药学上可接受的盐”的量时，化合物的药学上可接受的盐形式的量是等于化合物的游离碱的浓度的量。应注意，本文所公开的化合物或其药学上可接受的盐的量是以其游离碱形式计。
合适的药学上可接受的盐是例如S.M.Berge等人J.Pharmaceutical Sciences,1977,66,1-19中所公开的那些盐。例如，该文章的表1提供以下药学上可接受的盐：
表1：
乙酸盐 碘化物 苄星青霉素(Benzathine)
苯磺酸盐 羟乙基磺酸盐 氯普鲁卡因
苯甲酸盐 乳酸盐 胆碱
碳酸氢盐 乳糖醛酸盐 二乙醇胺
酒石酸氢盐 苹果酸盐 乙二胺
溴化物 马来酸盐 葡甲胺
依地酸钙 扁桃酸盐 普鲁卡因
樟脑磺酸盐 甲磺酸盐 铝
碳酸盐岩 甲基溴 钙
氯化物 甲基硝酸盐 锂
柠檬酸盐 甲基硫酸盐 镁
二盐酸盐 粘液酸盐 钾
依地酸盐 萘磺酸盐 钠
乙二磺酸盐 硝酸盐 锌
依托酸盐(Estolate) 双羟萘酸盐(恩波酸盐(Embonate))
乙磺酸盐 泛酸盐
富马酸盐 磷酸盐/二磷酸盐
葡庚糖酸盐 聚半乳糖醛酸盐
葡糖酸盐 水杨酸盐
谷氨酸盐 硬脂酸盐
对羟乙酰氨基苯砷酸盐 碱式乙酸盐
己基间苯二酚盐 琥珀酸盐
海巴明(Hydrabamine) 硫酸盐
氢溴酸盐 鞣酸盐
盐酸盐 酒石酸盐
羟萘甲酸盐 氯茶碱盐
三乙基碘化物
药学上可接受的酸加成盐的非限制性实例包括：与无机酸形成的盐，所述无机酸诸如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸或高氯酸；与有机酸形成的盐，所述有机酸诸如乙酸、草酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸；以及通过使用本领域中使用的其他方法诸如离子交换形成的盐。药学上可接受的盐的非限制性实例包括己二酸盐、褐藻酸盐、抗坏血酸、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸、乙烷磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙烷磺酸盐、乳糖醛酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲烷磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一烷酸盐和戊酸盐。衍生自适当碱的药学上可接受的盐包括碱金属、碱土金属、铵和N+(C1-4烷基)4盐。本公开还设想本文公开的化合物的任何碱性含氮基团的季铵化。碱金属和碱土金属盐的合适非限制性实例包括钠、锂、钾、钙和镁。药学上可接受的盐的其它非限制性实例包括铵、季铵以及使用抗衡离子诸如卤离子、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低碳数烷基磺酸根和芳基磺酸根形成的胺阳离子。药学上可接受的盐的其它合适的非限制性实例包括苯磺酸盐和葡糖胺盐。
本文还公开了化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐。
治疗方法
本文所公开的任何新颖化合物，例如式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐，可以作为CFTR调节剂，即，调节体内的CFTR活性。编码CFTR的基因中发生突变的个体可以受益于接受CFTR调节剂。CFTR突变可能影响CFTR的数量，即细胞表面处CFTR通道的数量，或者其可以影响CFTR功能，即每个通道打开和转运离子的功能。影响CFTR数量的突变包括导致合成缺陷(I类缺陷)的突变、导致加工和运输缺陷(II类缺陷)的突变、导致CFTR合成减少(V类缺陷)的突变以及降低CFTR的表面稳定性(VI类缺陷)的突变。影响CFTR功能的突变包括导致门控缺陷(III类缺陷)的突变和导致传导缺陷(IV类缺陷)的突变。一些CFTR突变表现出多种类别的特征。CFTR基因中的某些突变导致囊性纤维化。
因此，在一些实施例中，本公开提供了治疗、减轻患者的囊性纤维化的严重程度或症状性治疗患者的囊性纤维化的方法，所述方法包括向患者施用有效量的本文所公开的任何新颖化合物，例如式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐单独或与如一种或多种CFTR调节剂等另一种活性成分组合。在一些实施例中，所述一种(或多种)CFTR调节剂是校正剂。在一些实施例中，所述一种(或多种)CFTR调节剂是增效剂。在一些实施例中，所述CFTR调节剂包含校正剂和增效剂两者。在一些实施例中，所述一种或多种CFTR调节剂选自增效剂：依伐卡托、氘替卡托、(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和前述任一者的氘化衍生物和药学上可接受的盐；以及校正剂：鲁玛卡托、替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐。
在一些实施例中，待治疗患者具有F508del/最小功能(MF)基因型、F508del/F508del基因型(针对F508del突变为同型接合的)、F508del/门控基因型，或F508del/残余功能(RF)基因型。在一些实施例中，患者是异型接合的并且具有一个F508del突变。在一些实施例中，患者针对N1303K突变是同型接合的。
在一些实施例中，5mg至500mg的本文所公开的化合物、其互变异构体、所述化合物和互变异构体的氘化衍生物或前述任一者的药学上可接受的盐每日施用。
在一些实施例中，待治疗患者具有CFTR基因中的至少一个F508del突变。在一些实施例中，基于体外数据，患者具有对本公开的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐作出应答的CFTR基因突变。在一些实施例中，患者是异型接合的，并且在选自表2的一个等位基因上具有F508del突变并且在另一个等位基因上具有突变：
表2：CFTR突变
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a也称为2183delAA→G。
CFTR：囊性纤维化跨膜传导调控因子；
IVA：依伐卡托。
SwCl：汗液氯化物。
TEZ：替扎卡托。
来源：CFTR2.org[互联网]。巴尔的摩(MD)：CFTR的临床和功能翻译。CFTR(CFTR2)的临床和功能翻译，美国囊性纤维化基金会，约翰霍普金斯大学，病童医院。可在http://www.cftr2.org/.中找到。于2018年5月15日访问。
注意：％PI：CFTR2患者登记中胰腺功能不全的F508del-CFTR杂合子患者的百分比；SwCl：CFTR2患者登记中F508del-CFTR杂合子患者的平均汗液氯化物。
在一些实施例中，本公开还涉及使用前述化合物的同位素标记的化合物或其药学上可接受的盐的治疗方法，其中此类化合物和盐的化学式和变量各自独立地如上文或上述任何其他实施例所描述，前提条件是，其中一个或多个原子被原子质量或质量数不同于通常天然存在的原子的原子质量或质量数的原子置换(被同位素标记)。可商购并且适用于本公开的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，分别例如’2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F和36Cl。
同位素标记的化合物和盐可以多种有益的方式使用。它们可适用于药物和/或各种类型的测定，诸如底物组织分布测定。例如，氚(3H)和/或碳-14(14C)标记的化合物因制备相对简单和可侦测性优良而特别适用于各种类型的测定，诸如底物组织分布测定。例如，氘(2H)标记的化合物在治疗上可用并且相较于非2H标记的化合物具有潜在的治疗优点。一般来说，相较于非同位素标记的化合物和盐，氘(2H)标记的化合物和盐可以由于以下所述的动力学同位素效应而具有较高的代谢稳定性。更高的代谢稳定性直接转化为增加的体内半衰期或较低的剂量，这可为所期望的。同位素标记的化合物和盐通常可以通过进行本文的合成方案和相关描述中、实例部分和制备部分中所公开的程序，用容易获得的同位素标记的反应物置换非同位素标记的反应物来制备。
在一些实施例中，同位素标记的化合物和盐是氘(2H)标记的化合物和盐。在一些特定实施例中，同位素标记的化合物和盐被氘(2H)标记，其中一个或多个氢原子已被氘置换。在化学结构中，氘表示为“D”。
并入本公开的同位素标记的化合物和盐中的同位素(例如，氘)的浓度可以由同位素富集因子限定。如本文所用，术语“同位素富集因子”意指指定同位素之同位素丰度与天然丰度之间的比率。在一些实施例中，如果本公开的化合物中的取代基表示为氘，则此类化合物对于每个指定氘原子具有的同位素富集因子为至少3500(在每个指定氘原子处的52.5％氘并入量)、至少4000(60％氘并入量)、至少4500(67.5％氘并入量)、至少5000(75％氘并入量)、至少5500(82.5％氘并入量)、至少6000(90％氘并入量)、至少6333.3(95％氘并入量)、至少6466.7(97％氘并入量)、至少6600(99％氘并入量)或至少6633.3(99.5％氘并入量)。
组合疗法
本文所公开的一方面提供了使用本文所公开的任何新颖化合物，例如式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐与至少一种另外的活性药物成分组合治疗囊性纤维化和其它CFTR介导的疾病的方法。
在一些实施例中，至少一种另外的活性药物成分选自粘液溶解剂、支气管扩张剂、抗生素、抗感染剂和抗炎剂。
在一些实施例中，另外的治疗剂是抗生素。可用于本文中的示例性抗生素包括妥布霉素(tobramycin)，包括妥布霉素吸入粉(TIP)；阿奇霉素(azithromycin)；氨曲南(aztreonam)，包括氨曲南的气雾化形式；阿米卡星(amikacin)，包括其脂质体调配物；环丙沙星(ciprofloxacin)，包括其适用于通过吸入施用的调配物；左氧氟沙星(levoflaxacin)，包括其气雾化调配物；以及两种抗生素的组合，例如磷霉素(fosfomycin)和妥布霉素。
在一些实施例中，另外的药剂是粘液溶解剂。可用于本文的示例性粘液溶解剂包括
在一些实施例中，另外的药剂是支气管扩张剂。示例性支气管扩张剂包括沙丁胺醇(albuterol)、硫酸异丙喘宁(metaprotenerol sulfate)、乙酸吡布特罗(pirbuterolacetate)、沙美特罗(salmeterol)或硫酸特曲布尔(tetrabuline sulfate)。
在一些实施例中，另外的药剂是抗炎剂，即可以减轻肺部炎症的药剂。可用于本文的示例性此类药剂包括布洛芬(ibuprofen)、二十二碳六烯酸(DHA)、西地那非(sildenafil)、吸入型谷胱甘肽、吡格列酮(pioglitazone)、羟氯喹(羟基chloroquine)或辛伐他汀(simvastatin)。
在一些实施例中，另外的药剂是营养剂。示例性营养剂包含胰脂肪酶(胰酶替代物)，包含或/> (先前的/>)、/>或谷胱甘肽吸入。在一个实施例中，另外的营养剂是胰脂肪酶。
在一些实施例中，至少一种另外的活性药物成分选自CFTR调节剂。在一些实施例中，另外的活性药物成分选自CFTR增效剂。在一些实施例中，所述增效剂选自依伐卡托、氘替卡托和(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和前述任一者的氘化衍生物和药学上可接受的盐。在一些实施例中，另外的活性药物成分选自CFTR校正剂。在一些实施例中，校正剂选自鲁玛卡托、替扎卡托、鲁玛卡托和替扎卡托的氘化衍生物和前述任一者的氘化衍生物和药学上可接受的盐。在一些实施例中，另外的活性药物成分包含CFTR增效剂和CFTR校正剂两者。
在一些实施例中，所述至少一种另外的活性药物成分选自：(a)替扎卡托、鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的化合物；和(b)依伐卡托、氘替卡托、(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和前述任一者的氘化衍生物和药学上可接受的盐。因此，在一些实施例中，本文所提供的组合疗法包括：(a)选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的化合物；(b)选自替扎卡托、鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；或(c)选自依伐卡托、氘替卡托、前述任一者的氘化衍生物和药学上可接受的盐的至少一种化合物。在一些实施例中，本文所提供的组合疗法包括：(a)选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自替扎卡托、鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；以及(c)选自依伐卡托、氘替卡托和前述任一者的氘化衍生物和药学上可接受的盐的至少一种化合物。在一些实施例中，本文所提供的组合疗法包括：(a)选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自替扎卡托、鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；和/或(c)选自(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和前述任一者的氘化衍生物和药学上可接受的盐的至少一种化合物。
在一些实施例中，将选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。在一些实施例中，将选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。在一些实施例中，将选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自依伐卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。在一些实施例中，将选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。在一些实施例中，将选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。
在一些实施例中，将选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自依伐卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。在一些实施例中，将选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。在一些实施例中，将选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。
在一些实施例中，将选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自依伐卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。在一些实施例中，将选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。在一些实施例中，将选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物与选自鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物组合施用。
式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐中的每一种可以独立地每天施用一次、每天施用两次或每天施用三次。在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次。在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。
在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次。在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。
在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-371、化合物372-385、化合物386-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次。在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。
在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次。在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。
在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次。在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。
在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次。在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。
在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自鲁玛卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次。在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自鲁玛卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。
在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，选自(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自鲁玛卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次。在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，选自(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物以及选自鲁玛卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。
在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次并且选自依伐卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用一次并且选自依伐卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物每天施用两次。
选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自替扎卡托、鲁玛卡托、依伐卡托、氘替卡托、(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和前述任一者的氘化衍生物和药学上可接受的盐的至少一种化合物可以在单一药物组合物或单独的药物组合物中施用。此类药物组合物可以每天一次或每天多次，如每天两次或每天三次施用。如本文所使用的，短语给定量的API(例如，替扎卡托、鲁玛卡托、依伐卡托、氘替卡托、(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇或氘化衍生物或前述任一者的药学上可接受的盐)每天施用一次或两次或每天施用意味着所述给定量每次给药每天施用一次或两次。
在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物在第一药物组合物中施用；选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第二药物组合物中施用；并且选自依伐卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第三药物组合物中施用。
在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物在第一药物组合物中施用；选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第二药物组合物中施用；选自氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第三药物组合物中施用。
在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物在第一药物组合物中施用；选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第二药物组合物中施用；选自(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第三药物组合物中施用。
在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物在第一药物组合物中施用；选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第二药物组合物中施用；选自鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第三药物组合物中施用。
在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物在第一药物组合物中施用；选自(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第二药物组合物中施用；选自鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第三药物组合物中施用。
在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物在第一药物组合物中施用；并且选自替扎卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第二药物组合物中施用。在一些实施例中，第二药物组合物包括日剂量的一半的依伐卡托或其药学上可接受的盐，并且日剂量的另一半的依伐卡托或其药学上可接受的盐在第三药物组合物中施用。
在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物在第一药物组合物中施用；并且选自替扎卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第二药物组合物中施用。
在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；选自替扎卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第一药物组合物中施用。在一些实施方案中，第一药物组合物每天向患者施用两次。在一些实施例中，第一药物组合物每天施用一次。在一些实施例中，第一药物组合物每天施用一次并且仅包括依伐卡托的第二组合物每天施用一次。
在一些实施例中，选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；选自替扎卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物和选自(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物在第一药物组合物中施用。在一些实施方案中，第一药物组合物每天向患者施用两次。在一些实施例中，第一药物组合物每天施用一次。在一些实施例中，第一药物组合物每天施用一次并且仅包括(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇(或氘化衍生物或其药学上可接受的盐)的第二组合物每天施用一次。
任何合适的药物组合物可以用于式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、替扎卡托、鲁玛卡托、依伐卡托、氘替卡托、(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇及其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物以及前述中任一项的药学上可接受的盐。用于替扎卡托和其药学上可接受的盐的一些示例性药物组合物可见于WO 2011/119984和WO 2014/014841中，所述文献中的每一个通过引用并入本文。用于依伐卡托和其药学上可接受的盐的一些示例性药物组合物可以在WO 2007/134279、WO 2010/019239、WO 2011/019413、WO 2012/027731和WO2013/130669中找到，并且氘替卡托和其药学上可接受的盐的一些示例性药物组合物可以在US 8,865,902、US 9,181,192、US 9,512,079、WO 2017/053455和WO 2018/080591中找到，所有所述文献都通过引用并入本文。用于鲁玛卡托和其药学上可接受的盐的一些示例性药物组合物可见于WO 2010/037066、WO 2011/127421和WO 2014/071122中，所述文献中的每一个通过引用并入本文。
药物组合物
本公开的另一方面提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，以及至少一种药学上可接受的载体。
在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，与至少一种另外的活性药物成分组合。在一些实施例中，至少一种另外的活性药物成分是CFTR调节剂。在一些实施例中，至少一种另外的活性药物成分是CFTR校正剂。在一些实施例中，至少一种另外的活性药物成分是CFTR增效剂。在一些实施例中，药物组合物包括选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物，以及至少两种另外的活性药物成分，其中一种是CFTR校正剂并且其中另一种是CFTR增效剂。
在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：(a)选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；以及(c)至少一种药学上可接受的载体。在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：(a)选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；以及(c)至少一种药学上可接受的载体。
在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：(a)选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；以及(c)至少一种药学上可接受的载体。
在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：(a)选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；以及(c)至少一种药学上可接受的载体。
在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：(a)选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；(c)选自依伐卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；以及(d)至少一种药学上可接受的载体。
在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：(a)选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；(c)选自氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；以及(d)至少一种药学上可接受的载体。
在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：(a)选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自依伐卡托、氘替卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；(c)选自鲁玛卡托和其药学上可接受的盐的至少一种化合物；以及(d)至少一种药学上可接受的载体。
在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：(a)选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自替扎卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；(c)选自(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；以及(d)至少一种药学上可接受的载体。在一些实施例中，本公开提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：(a)选自式I的化合物、式Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、化合物1-426、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐的至少一种化合物；(b)选自鲁玛卡托和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；(c)选自(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和氘化衍生物及其药学上可接受的盐的至少一种化合物；以及(d)至少一种药学上可接受的载体。
本文公开的任何药物组合物可以包含至少一种药学上可接受的载体。在一些实施例中，至少一种药学上可接受的载体选自药学上可接受的媒介物和药学上可接受的佐剂。在一些实施例中，至少一种药学上可接受的载体选自药学上可接受的填充剂、崩解剂、表面活性剂、粘合剂和润滑剂。
本文所述的药物组合物可用于治疗囊性纤维化和其他CFTR介导的疾病。
如上所述，本文公开的药物组合物可以任选地还包含至少一种药学上可接受的载体。至少一种药学上可接受的载体可选自佐剂和媒介物。如本文所使用，至少一种药学上可接受的载体包括适合于所需的特定剂型的任何和所有溶剂、稀释剂、其它液体媒介物、分散助剂、悬浮助剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、防腐剂、固体粘合剂和润滑剂。Remington:The Science and Practice of Pharmacy,第21版,2005,D.B.Troy编辑,Lippincott Williams&Wilkins,Philadelphia和Encyclopedia of PharmaceuticalTechnology,J.Swarbrick和J.C.Boylan编辑,1988-1999,Marcel Dekker,New York公开用于配制药物组合物的各种载体和用于制备其的已知技术。除非任何常规载体与本公开的化合物不相容，诸如通过产生任何不合需要的生物作用或另外以有害方式与药物组合物的任何其他组分相互作用，否则预期其使用在本公开的范围内。合适的药学上可接受的载体的非限制性实例包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白(例如人血清白蛋白)、缓冲物质(例如磷酸盐、甘氨酸、山梨酸和山梨酸钾)、饱和植物脂肪酸偏甘油酯混合物、水盐和电解质(诸如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠和锌盐)、胶体二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酸酯，、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、羊毛脂、糖(诸如乳糖、葡萄糖和蔗糖)、淀粉(诸如玉米淀粉和马铃薯淀粉)、纤维素和其衍生物(诸如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素)、粉状黄蓍胶、麦芽、明胶、滑石、赋形剂(诸如可可脂和栓剂蜡)、油类(诸如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油)、二醇类(诸如丙二醇和聚乙二醇)、酯类(诸如油酸乙酯和月桂酸乙酯)、琼脂、缓冲剂(诸如氢氧化镁和氢氧化铝)、海藻酸、无热原质水、等渗盐水、林格氏溶液(Ringer'ssolution)、乙醇、磷酸盐缓冲液、无毒相容润滑剂(诸如月桂基硫酸钠和硬脂酸镁)、着色剂、脱模剂、包覆剂、甜味剂、调味剂、芳香剂、防腐剂和抗氧化剂。
示例性实施例
下面提供了实施例的非限制性列表：
1.一种式I化合物：
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中：
环A选自：
■C6-C10芳基，
■C3-C10环烷基，
■3至10元杂环基，以及
■5至10元杂芳基；
环B选自：
■C6-C10芳基，
■C3-C10环烷基，
■3至10元杂环基，以及
■5至10元杂芳基；
V选自O和NH；
W1选自N和CH；
W2选自N和CH；条件是W1和W2中的至少一个是N；
Z选自O、NRZN和C(RZC)2，条件是当L2不存在时，Z是C(RZC)2；
每个L1独立地选自C(RL1)2；
每个L2独立地选自C(RL2)2；
每个R3独立地选自：
■卤素，
■C1-C6烷基，
■C1-C6烷氧基，
■C3-C10环烷基，
■任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，以及
■3至10元杂环基；
R4选自氢和C1-C6烷基；
每个R5独立地选自：
■氢，
■卤素，
■羟基，
■N(RN)2，
■-SO-Me，
■-CH＝C(RLC)2，其中两个RLC一起形成C3-C10环烷基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
○羟基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷氧基和C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
○C3-C10环烷基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的基团取代的-(O)0-1-(C6-C10芳基)，
○3至10元杂环基，以及
○N(RN)2，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷氧基：
○卤素，
○C6-C10芳基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
■C1-C6氟烷基，
■C3-C10环烷基，
■C6-C10芳基，以及
■3至10元杂环基；
RZN选自：
■氢，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
○羟基，
○氧代，
○氰基，
○任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6烷氧基的基团取代的C1-C6烷氧基，
○N(RN)2，
○SO2Me，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C10环烷基：
◆羟基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基、C6-C10芳基和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，
◆C1-C6氟烷基，
◆C1-C6烷氧基，以及
◆COOH，
◆N(RN)2，
◆C6-C10芳基，以及
◆任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
◆卤素，
◆羟基，
◆氰基，
◆SiMe3，
◆SO2Me，
◆SF5，
◆N(RN)2，
◆P(O)Me2，
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基、5至10元杂芳基、SO2Me和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、N(RN)2和C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆C1-C6氟烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
◆-(O)0-1-(C6-C10芳基)，以及
◆任选地被羟基、氧代、N(RN)2、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6氟烷基和C3-C10环烷基取代的-(O)0-1-(5至10杂芳基)，
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
◆羟基，
◆氧代，
◆N(RN)2，
◆C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷氧基的基团取代)，
◆C1-C6烷氧基，
◆C1-C6氟烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的C6-C10芳基，以及
◆5至10元杂芳基，以及
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
◆羟基，
◆氰基，
◆氧代，
◆卤素，
◆B(OH)2，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基(任选地被1-3个-SiMe3取代)和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基、N(RN)2和C3-C10环烷基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆C1-C6氟烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆-(O)0-1-(C6-C10芳基)，
◆任选地被1-4个独立地选自羟基、氧代、卤素、氰基、N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、N(RN)2和C1-C6烷氧基的基团取代)、C1-C6烷氧基、C1-C6氟烷基、3至10元杂环基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代)的基团取代的-(O)0-1-(3至10元杂环基)，以及
◆任选地被1-4个独立地选自C1-C6烷基和C3-C10环烷基的基团取代的5至10元杂芳基，
■C1-C6氟烷基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C10环烷基：
○羟基，
○氧代，
○卤素，
○氰基，
○N(RN)2，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
◆羟基，
◆氧代，
◆N(RN)2，
◆C1-C6烷氧基，以及
◆C6-C10芳基，
○任选地被1-3个独立地选自卤素、氧代、C6-C10芳基和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷氧基，
○卤素，
○C3-C10环烷基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
◆羟基，
◆氰基，
◆氧代，
◆卤素，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、C1-C6烷氧基、N(RN)2和C3-C10环烷基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆C1-C6氟烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆C6-C10芳基，以及
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
■C6-C10芳基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
○氧代，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
◆氧代，
◆羟基，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自卤素和C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，以及
◆-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
○C1-C6氟烷基，
○任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的C3-C10环烷基，以及
○3至10元杂环基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
○卤素，
○任选地被1-3个独立地选自氧代、C1-C6烷氧基和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基(任选地被1-3个选自氧代、C1-C6烷氧基和C6-C10芳基的基团取代)的基团取代的3至10元杂环基，以及
■RF；
每个RZC独立地选自：
■氢，
■任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)的基团取代的C1-C6烷基，
■任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，以及
■RF；
或者两个RZC一起形成氧代基团；
每个RL1独立地选自：
■氢，
■N(RN)2，条件是两个N(RN)2不与同一碳结合，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
○卤素，
○羟基，
○氧代，
○N(RN)2，
○任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
○任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基和氧代的基团取代)的基团取代的3至10元杂环基，
■C3-C10环烷基，
■任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
○卤素，
○氰基，
○SiMe3，
○POMe2，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C7烷基：
◆羟基，
◆氧代，
◆氰基，
◆SiMe3，
◆N(RN)2，以及
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷氧基：
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，以及
◆C1-C6烷氧基，
○C1-C6氟烷基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基和C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
○C6-C10芳基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
○5至10元杂芳基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
◆氧代，以及
◆C1-C6烷氧基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，以及
■RF；
或者同一碳原子上的两个RL1一起形成氧代基团；
每个RL2独立地选自氢和RF；或者同一碳原子上的两个RL2一起形成氧代基团；前提是至少一个RL1或RL2是RF；
每个RN独立地选自：
■氢，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C8烷基：
○氧代，
○卤素，
○羟基，
○NH2，
○NHMe，
○NMe2，
○任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
○-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
○任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，
○任选地被1-4个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的3至14元杂环基，以及
○任选地被1-4个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的5至14元杂芳基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C10环烷基：
○羟基，
○NH2，以及
○NHMe，以及
○任选地被1-3个独立地选自羟基的基团取代的C1-C6烷基，
■C6-C10芳基，以及
■3至10元杂环基；
或者同一氮原子上的两个RN与其所结合的氮一起形成任选地被1-3个选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
■羟基，
■氧代，
■氰基，
■任选地被1-3个独立地选自氧代、羟基、C1-C6烷氧基和N(RN2)2的基团取代的C1-C6烷基，其中每个RN2独立地选自氢和C1-C6烷基，
■C1-C6烷氧基，以及
■C1-C6氟烷基；
或者一个R4和一个RL1一起形成C6-C8亚烷基；
两个RF与其所结合的原子一起形成选自以下的基团：
■任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
○卤素，
○C1-C6烷基，
○N(RN)2，以及
○任选地被1-3个独立地选自羟基的基团取代的3至10元杂环基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至11元杂环基：
○氧代，
○N(RN)2，
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
◆氧代，
◆卤素，
◆羟基，
◆N(RN)2，
◆-SO2-(C1-C6烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自卤素、C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、卤素、氰基、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷氧基的基团取代)、C1-C6烷氧基(任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代)、-(O)0-1-(C1-C6氟烷基)和C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷氧基的基团取代)的基团取代的C6-C10芳基，
◆任选地被1-4个独立地选自羟基、卤素、N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代、羟基和C1-C6烷氧基的基团取代)、C1-C6氟烷基和C6-C10芳基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自氧代、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)的基团取代)、C1-C6烷氧基、C3-C10环烷基和RN的基团取代的3至10元杂环基，
◆任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)和C1-C6烷基的基团取代的-O-(5至12元杂芳基)，以及
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氰基的基团取代)、C1-C6烷氧基、-(O)0-1-(C1-C6氟烷基)、-O-(C6-C10芳基)和C3-C10环烷基的基团取代的5至10元杂芳基，
○任选地被1-4个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C12环烷基，
○C6-C10芳基，
○3至10元杂环基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷氧基、C1-C6氟烷基和N(RN)2的基团取代的5至10元杂芳基，以及
■任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基和C1-C6氟烷基的基团取代的5至12元杂芳基。
1A.在实施例1的一些情况下，当两个RF一起形成3至11元杂环基时，其中所述3至11元杂环基任选地被5至10元杂芳基取代，并且其中所述5至10元杂芳基任选地被C1-C6烷氧基取代，所述C1-C6烷氧基可以任选地被C6-C10芳基取代。
2.根据实施例1所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中环A选自C6-C10芳基、3至10元杂环基和5至10元杂芳基。
3.根据实施例1或2所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中环A选自苯基、吡啶基、吡唑基、1H-吡咯基、吲哚啉基和哌啶基。
4.根据实施例1至3中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中环A是苯基。
5.根据实施例1至4中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中环B选自C6-C10芳基。
6.根据实施例1至5中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中环B是苯基。
7.根据实施例1至6中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中V是O。
8.根据实施例1至6中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中V是NH。
9.根据实施例1至8中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中W1是N并且W2是N。
10.根据实施例1至9中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中Z选自NRZN和C(RZC)2。
11.根据实施例1至10中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R3独立地选自C1-C6烷基。
12.根据实施例1至11中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R3是甲基。
13.根据实施例1至10中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R3不存在。
14.根据实施例1至13中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4选自氢和甲基。
15.根据实施例1至14中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4是甲基。
16.根据实施例1至14中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4是氢。
17.根据实施例1至16中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R5独立地选自C1-C6烷基和C1-C6烷氧基。
18.根据实施例1至17中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R5独立地选自甲基、
19.根据实施例1至18中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN选自氢和RF。
20.根据实施例1至19中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN是氢。
21.根据实施例1至19中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN是RF。
22.根据实施例1至21中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZC是氢，或者两个RZC一起形成氧代基团。
23.根据实施例1至22中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RL1独立地选自氢、任选被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C9烷基和RF。
24.根据实施例1至23中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RL2独立地选自氢和RF，或者在同一碳原子上的两个RL2一起形成氧代基团。
25.根据实施例1至24中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RN独立地选自氢和C1-C8烷基(任选被1-3个独立地选自氧代、C1-C6烷氧基、C3-C10环烷基和C6-C10芳基的基团取代)。
26.根据实施例1至25中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中两个RF与其所结合的原子一起形成选自以下的基团：
■C6-C10芳基，以及
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至11元杂环基：
○氧代，
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
◆氧代，
◆卤素，
◆羟基，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氰基和C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，
◆任选地被1-4个独立地选自N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代、羟基和C1-C6烷氧基的基团取代)和C1-C6氟烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
◆任选地被1-3个独立地选自N(RN)2、C1-C6烷基和-O-(C6-C10芳基)的基团取代的5-10元杂芳基，
○任选地被1-4个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代的C3-C12环烷基，
○C6-C10芳基，以及
○3至10元杂环基。
27.一种式Ia化合物：
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中环A、环B、W1、W2、Z、L1、L2、R3、R4、R5和RF如根据实施例1所述的那样定义。
28.根据实施例27所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中环A选自C6-C10芳基、3至10元杂环基和5至10元杂芳基。
29.根据实施例27或28所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中环A选自苯基、吡啶基、吡唑基、1H-吡咯基、吲哚啉基和哌啶基。
30.根据实施例27至29中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中环A是苯基。
31.根据实施例27至30中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中环B选自C6-C10芳基。
32.根据实施例27至31中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中环B是苯基。
33.根据实施例27至32中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中W1是N并且W2是N。
34.根据实施例27至33中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中Z选自NRZN和C(RZC)2。
35.根据实施例27至34中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R3独立地选自C1-C6烷基。
36.根据实施例27至35中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R3是甲基。
37.根据实施例27至34中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R3不存在。
38.根据实施例27至37中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4选自氢和甲基。
39.根据实施例27至38中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4是甲基。
40.根据实施例27至38中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4是氢。
41.根据实施例27至40中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R5独立地选自C1-C6烷基和C1-C6烷氧基。
42.根据实施例27至41中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R5独立地选自甲基、
43.根据实施例27至42中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN选自氢和RF。
44.根据实施例27至43中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN是氢。
45.根据实施例27至44中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN是RF。
46.根据实施例27至45中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZC是氢，或者两个RZC一起形成氧代基团。
47.根据实施例27至46中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RL1独立地选自氢、任选被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C9烷基和RF。
48.根据实施例27至47中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RL2独立地选自氢和RF，或者在同一碳原子上的两个RL2一起形成氧代基团。
49.根据实施例27至48中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RN独立地选自氢和C1-C8烷基(任选被1-3个独立地选自氧代、C1-C6烷氧基、C3-C10环烷基和C6-C10芳基的基团取代)。
50.根据实施例27至49中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中两个RF与其所结合的原子一起形成选自以下的基团：
■C6-C10芳基，以及
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至11元杂环基：
○氧代，
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
◆氧代，
◆卤素，
◆羟基，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氰基和C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，
◆任选地被1-4个独立地选自N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代、羟基和C1-C6烷氧基的基团取代)和C1-C6氟烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
◆任选地被1-3个独立地选自N(RN)2、C1-C6烷基和-O-(C6-C10芳基)的基团取代的5-10元杂芳基，
○任选地被1-4个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代的C3-C12环烷基，
○C6-C10芳基，以及
○3至10元杂环基。
51.一种式IIa化合物：
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中环B、W1、W2、Z、L1、L2、R3、R4、R5和RF如根据实施例1所述的那样定义。
52.根据实施例51所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中环B选自C6-C10芳基。
53.根据实施例51或52所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中环B是苯基。
54.根据实施例51至53中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中W1是N并且W2是N。
55.根据实施例51至54中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中Z选自NRZN和C(RZC)2。
56.根据实施例51至55中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R3独立地选自C1-C6烷基。
57.根据实施例51至56中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R3是甲基。
58.根据实施例51至55中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R3不存在。
59.根据实施例51至58中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4选自氢和甲基。
60.根据实施例51至59中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4是甲基。
61.根据实施例51至59中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4是氢。
62.根据实施例51至61中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R5独立地选自C1-C6烷基和C1-C6烷氧基。
63.根据实施例51至62中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R5独立地选自甲基、
64.根据实施例51至63中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN选自氢和RF。
65.根据实施例51至64中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN是氢。
66.根据实施例51至64中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN是RF。
67.根据实施例51至66中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZC是氢，或者两个RZC一起形成氧代基团。
68.根据实施例51至67中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RL1独立地选自氢、任选被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C9烷基和RF。
69.根据实施例51至68中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RL2独立地选自氢和RF，或者在同一碳原子上的两个RL2一起形成氧代基团。
70.根据实施例51至69中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RN独立地选自氢和C1-C8烷基(任选被1-3个独立地选自氧代、C1-C6烷氧基、C3-C10环烷基和C6-C10芳基的基团取代)。
71.根据实施例51至70中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中两个RF与其所结合的原子一起形成选自以下的基团：
■C6-C10芳基，以及
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至11元杂环基：
○氧代，
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
◆氧代，
◆卤素，
◆羟基，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氰基和C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，
◆任选地被1-4个独立地选自N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代、羟基和C1-C6烷氧基的基团取代)和C1-C6氟烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
◆任选地被1-3个独立地选自N(RN)2、C1-C6烷基和-O-(C6-C10芳基)的基团取代的5-10元杂芳基，
○任选地被1-4个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代的C3-C12环烷基，
○C6-C10芳基，以及
○3至10元杂环基。
72.一种式IIb化合物：
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中环A、W1、W2、Z、L1、L2、R3、R4、R5和RF如根据实施例1所述的那样定义。
73.根据实施例72所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中环A选自C6-C10芳基、3至10元杂环基和5至10元杂芳基。
74.根据实施例72或73所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中环A选自苯基、吡啶基、吡唑基、1H-吡咯基、吲哚啉基和哌啶基。
75.根据实施例72至74中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中环A是苯基。
76.根据实施例72至75中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中W1是N并且W2是N。
77.根据实施例72至76中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中Z选自NRZN和C(RZC)2。
78.根据实施例2至77中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R3独立地选自C1-C6烷基。
79.根据实施例72至78中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R3是甲基。
80.根据实施例72至77中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R3不存在。
81.根据实施例72至80中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4选自氢和甲基。
82.根据实施例72至81中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4是甲基。
83.根据实施例72至81中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4是氢。
84.根据实施例72至83中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R5独立地选自C1-C6烷基和C1-C6烷氧基。
85.根据实施例72至84中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R5独立地选自甲基、
86.根据实施例72至85中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN选自氢和RF。
87.根据实施例72至86中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN是氢。
88.根据实施例72至86中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN是RF。
89.根据实施例72至88中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZC是氢，或者两个RZC一起形成氧代基团。
90.根据实施例72至89中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RL1独立地选自氢、任选被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C9烷基和RF。
91.根据实施例72至90中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RL2独立地选自氢和RF，或者在同一碳原子上的两个RL2一起形成氧代基团。
92.根据实施例72至91中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RN独立地选自氢和C1-C8烷基(任选被1-3个独立地选自氧代、C1-C6烷氧基、C3-C10环烷基和C6-C10芳基的基团取代)。
93.根据实施例72至92中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中两个RF与其所结合的原子一起形成选自以下的基团：
■C6-C10芳基，以及
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至11元杂环基：
○氧代，
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
◆氧代，
◆卤素，
◆羟基，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氰基和C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，
◆任选地被1-4个独立地选自N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代、羟基和C1-C6烷氧基的基团取代)和C1-C6氟烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
◆任选地被1-3个独立地选自N(RN)2、C1-C6烷基和-O-(C6-C10芳基)的基团取代的5-10元杂芳基，
○任选地被1-4个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代的C3-C12环烷基，
○C6-C10芳基，以及
○3至10元杂环基。
94.一种式III化合物：
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中W1、W2、Z、L1、L2、R4、R5和RF如根据实施例1所述的那样定义。
95.根据实施例94所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中W1是N并且W2是N。
96.根据实施例94或95所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中Z选自NRZN和C(RZC)2。
97.根据实施例94至96中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4选自氢和甲基。
98.根据实施例94至97中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4是甲基。
99.根据实施例94至97中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4是氢。
100.根据实施例94至99中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R5独立地选自C1-C6烷基和C1-C6烷氧基。
101.根据实施例94至100中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R5独立地选自甲基、
102.根据实施例94至101中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN选自氢和RF。
103.根据实施例94至102中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN是氢。
104.根据实施例94至102中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN是RF。
105.根据实施例94至104中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZC是氢，或者两个RZC一起形成氧代基团。
106.根据实施例94至105中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RL1独立地选自氢、任选被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C9烷基和RF。
107.根据实施例94至106中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RL2独立地选自氢和RF，或者在同一碳原子上的两个RL2一起形成氧代基团。
108.根据实施例94至107中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RN独立地选自氢和C1-C8烷基(任选被1-3个独立地选自氧代、C1-C6烷氧基、C3-C10环烷基和C6-C10芳基的基团取代)。
109.根据实施例94至108中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中两个RF与其所结合的原子一起形成选自以下的基团：
■C6-C10芳基，以及
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至11元杂环基：
○氧代，
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
◆氧代，
◆卤素，
◆羟基，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氰基和C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，
◆任选地被1-4个独立地选自N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代、羟基和C1-C6烷氧基的基团取代)和C1-C6氟烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
◆任选地被1-3个独立地选自N(RN)2、C1-C6烷基和-O-(C6-C10芳基)的基团取代的5-10元杂芳基，
○任选地被1-4个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代的C3-C12环烷基，
○C6-C10芳基，以及
○3至10元杂环基。
110.一种式IV化合物：
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中Z、L1、L2、R4、R5和RF如根据实施例1所述的那样定义。
111.根据实施例110所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中Z选自NRZN和C(RZC)2。
112.根据实施例110或111所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4选自氢和甲基。
113.根据实施例110至112中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4是甲基。
114.根据实施例110至112中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4是氢。
115.根据实施例110至114中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R5独立地选自C1-C6烷基和C1-C6烷氧基。
116.根据实施例110至115中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R5独立地选自甲基、
117.根据实施例110至116中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN选自氢和RF。
118.根据实施例110至117中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN是氢。
119.根据实施例110至117中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN是RF。
120.根据实施例110至119中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZC是氢，或者两个RZC一起形成氧代基团。
121.根据实施例110至120中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RL1独立地选自氢、任选被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C9烷基和RF。
122.根据实施例110至121中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RL2独立地选自氢和RF，或者在同一碳原子上的两个RL2一起形成氧代基团。
123.根据实施例110至122中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RN独立地选自氢和C1-C8烷基(任选被1-3个独立地选自氧代、C1-C6烷氧基、C3-C10环烷基和C6-C10芳基的基团取代)。
124.根据实施例110至123中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中两个RF与其所结合的原子一起形成选自以下的基团：
■C6-C10芳基，以及
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至11元杂环基：
○氧代，
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
◆氧代，
◆卤素，
◆羟基，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氰基和C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，
◆任选地被1-4个独立地选自N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代、羟基和C1-C6烷氧基的基团取代)和C1-C6氟烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
◆任选地被1-3个独立地选自N(RN)2、C1-C6烷基和-O-(C6-C10芳基)的基团取代的5-10元杂芳基，
○任选地被1-4个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代的C3-C12环烷基，
○C6-C10芳基，以及
○3至10元杂环基。
125.一种式V化合物：
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中Z、L1、L2、R4、R5和RF如根据实施例1所述的那样定义。
126.根据实施例125所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中Z选自NRZN和C(RZC)2。
127.根据实施例125或126所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4选自氢和甲基。
128.根据实施例125至127中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4是甲基。
129.根据实施例125至127中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4是氢。
130.根据实施例125至129中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R5独立地选自C1-C6烷基和C1-C6烷氧基。
131.根据实施例125至131中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R5独立地选自甲基、
132.根据实施例125至131中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN选自氢和RF。
133.根据实施例125至132中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN是氢。
134.根据实施例125至132中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZN是RF。
135.根据实施例125至134中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中RZC是氢，或者两个RZC一起形成氧代基团。
136.根据实施例125至135中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RL1独立地选自氢、任选被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C9烷基和RF。
137.根据实施例125至136中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RL2独立地选自氢和RF，或者在同一碳原子上的两个RL2一起形成氧代基团。
138.根据实施例125至137中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RN独立地选自氢和C1-C8烷基(任选被1-3个独立地选自氧代、C1-C6烷氧基、C3-C10环烷基和C6-C10芳基的基团取代)。
139.根据实施例125至138中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中两个RF与其所结合的原子一起形成选自以下的基团：
■C6-C10芳基，以及
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至11元杂环基：
○氧代，
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
◆氧代，
◆卤素，
◆羟基，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氰基和C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，
◆任选地被1-4个独立地选自N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代、羟基和C1-C6烷氧基的基团取代)和C1-C6氟烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
◆任选地被1-3个独立地选自N(RN)2、C1-C6烷基和-O-(C6-C10芳基)的基团取代的5-10元杂芳基，
○任选地被1-4个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代的C3-C12环烷基，
○C6-C10芳基，以及
○3至10元杂环基。
140.一种式VI化合物：
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中L1、R4、R5和RF如根据实施例1所述的那样定义。
141.根据实施例140所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4选自氢和甲基。
142.根据实施例140或141所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4是甲基。
143.根据实施例140或141所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中R4是氢。
144.根据实施例140至143中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R5独立地选自C1-C6烷基和C1-C6烷氧基。
145.根据实施例140至144中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个R5独立地选自甲基、
146.根据实施例140至145中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RL1独立地选自氢、任选被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C9烷基和RF。
147.根据实施例140至146中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中每个RN独立地选自氢和C1-C8烷基(任选被1-3个独立地选自氧代、C1-C6烷氧基、C3-C10环烷基和C6-C10芳基的基团取代)。
148.根据实施例140至147中任一项所述的化合物、盐或氘化衍生物，其中两个RF与其所结合的原子一起形成选自以下的基团：
■C6-C10芳基，以及
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至11元杂环基：
○氧代，
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
◆氧代，
◆卤素，
◆羟基，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氰基和C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，
◆任选地被1-4个独立地选自N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代、羟基和C1-C6烷氧基的基团取代)和C1-C6氟烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
◆任选地被1-3个独立地选自N(RN)2、C1-C6烷基和-O-(C6-C10芳基)的基团取代的5-10元杂芳基，
○任选地被1-4个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代的C3-C12环烷基，
○C6-C10芳基，以及
○3至10元杂环基。
149.根据实施例1至148中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其选自式I、Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一个的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐。
150.根据实施例1至149中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其选自化合物1-371(表13、14和15)、化合物372-385(表12)、化合物386-426(表24)、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐。
151.一种药物组合物，其包括根据实施例1至150中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。
152.根据实施例151所述的药物组合物，其进一步包括一种或多种另外的治疗剂。
153.根据实施例152所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂选自粘液溶解剂、支气管扩张剂、抗生素、抗感染剂和抗炎剂。
154.根据实施例152所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂是选自妥布霉素的抗生素，包含妥布霉素吸入粉末(TIP)、阿奇霉素、氨曲南，包含雾化形式的氨曲南、阿米卡星，包含其脂质体调配物、环丙沙星，包含其适于吸入施用的调配物、左氧氟沙星，包含其雾化调配物，以及两种抗生素的组合，例如磷霉素和妥布霉素。
155.根据实施例152所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂是CFTR调节剂。
156.根据实施例155所述的药物组合物，其中所述CFTR调节剂是增效剂。
157.根据实施例155所述的药物组合物，其中所述CFTR调节剂是校正剂。
158.根据实施例156所述的药物组合物，其包括CFTR增效剂和CFTR校正剂两者。
159.根据实施例155或实施例158所述的药物组合物，其中所述CFTR增效剂选自依伐卡托、氘替卡托、(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和前述任一者的氘化衍生物和药学上可接受的盐。
160.根据实施例157或实施例158所述的药物组合物，其中所述CFTR校正剂选自替扎卡托和鲁玛卡托。
161.根据实施例152所述的药物组合物，其中所述组合物包括依伐卡托和替扎卡托。
162.根据实施例152所述的药物组合物，其中所述组合物包括氘替卡托和替扎卡托。
163.根据实施例152所述的药物组合物，其中所述组合物包括(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和替扎卡托。
164.根据实施例152所述的药物组合物，其中所述组合物包括依伐卡托和鲁玛卡托。
165.根据实施例152所述的药物组合物，其中所述组合物包括氘替卡托和鲁玛卡托。
166.根据实施例152所述的药物组合物，其中所述组合物包括(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和鲁玛卡托。
167.一种治疗囊性纤维化的方法，所述方法包括向有需要的患者施用根据实施例1至150中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐或根据实施例151至166中任一项所述的药物组合物。
168.根据实施例167所述的方法其进一步包括在施用根据实施例1至150中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐或根据实施例151所述的药物组合物之前、同时或之后向所述患者施用一种或多种另外的治疗剂。
169.根据实施例168所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂选自CFTR调节剂。
170.根据实施例169所述的方法，其中所述CFTR调节剂是增效剂。
171.根据实施例169所述的方法，其中所述CFTR调节剂是校正剂。
172.根据实施例169所述的方法，其包括施用CFTR增效剂和另外的CFTR校正剂两者。
173.根据实施例170或实施例172所述的方法，其中所述CFTR增效剂选自依伐卡托、氘替卡托、(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和前述任一者的氘化衍生物和药学上可接受的盐。
174.根据实施例171或实施例172所述的方法，其中所述CFTR校正剂选自替扎卡托和鲁玛卡托。
175.根据实施例169所述的方法，其包括施用依伐卡托和替扎卡托。
176.根据实施例169所述的方法，其包括施用氘替卡托和替扎卡托。
177.根据实施例169所述的方法，其包括施用(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和替扎卡托。
178.根据实施例169所述的方法，其包括施用依伐卡托和鲁玛卡托。
179.根据实施例169所述的方法，其包括施用氘替卡托和鲁玛卡托。
180.根据实施例169所述的方法，其包括施用(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和鲁玛卡托。
181.根据实施例1至150中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐或根据实施例151至166中任一项所述的药物组合物，其用于治疗囊性纤维化。
182.根据实施例1至150中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐或根据实施例151至166中任一项所述的药物组合物，其用于制造用于治疗囊性纤维化的药物。
183.一种选自化合物1-426的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐。
184.一种选自化合物1-426的化合物的氘化衍生物。
185.一种选自化合物1-426的化合物的药学上可接受的盐。
186.一种选自化合物1-426的化合物。
187.一种药物组合物，其包括选自化合物1-426的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。
188.一种药物组合物，其包括选自化合物1-426的化合物的氘化衍生物和药学上可接受的载体。
189.一种药物组合物，其包括选自化合物1-426的化合物的药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。
190.一种药物组合物，其包括选自化合物1-426的化合物和药学上可接受的载体。
191.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-426的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐；(b)CFTR增效剂；以及(c)药学上可接受的载体。
192.一种药物组合物组合物，其包括：(a)选自化合物1-426的化合物的氘化衍生物；(b)CFTR增效剂；以及(c)药学上可接受的载体。
193.一种药物，其包括：(a)选自化合物1-426的化合物的药学上可接受的盐；(b)CFTR增效剂；以及(c)药学上可接受的载体。
194.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-426的化合物；(b)CFTR增效剂；以及(c)药学上可接受的载体。
195.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-426的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐；(b)另外的CFTR校正剂；以及(c)药学上可接受的载体。
196.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-426的化合物的氘化衍生物；(b)另外的CFTR校正剂；以及(c)药学上可接受的载体。
197.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-426的化合物的药学上可接受的盐；(b)另外的CFTR校正剂；以及(c)药学上可接受的载体。
198.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-426的化合物；(b)另外的CFTR校正剂；以及(c)药学上可接受的载体。
199.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-426的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐；(b)另外的CFTR校正剂；(c)CRTR增效剂；以及(d)药学上可接受的载体。
200.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-426的化合物的氘化衍生物；(b)另外的CFTR校正剂；(c)CRTR增效剂；以及(d)药学上可接受的载体。
201.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-426的化合物的药学上可接受的盐；(b)另外的CFTR校正剂；(c)CRTR增效剂；以及(d)药学上可接受的载体。
202.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-426的化合物；(b)另外的CFTR校正剂；(c)CRTR增效剂；以及(d)药学上可接受的载体。
203.一种选自化合物1-426的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐用于治疗囊性纤维化的方法。
204.一种选自化合物1-426的化合物的氘化衍生物用于治疗囊性纤维化的方法。
205.一种选自化合物1-426的化合物的药学上可接受的盐用于治疗囊性纤维化的方法。
206.一种选自化合物1-426的化合物用于治疗囊性纤维化的方法。
207.一种包括选自化合物1-426的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
208.一种包括选自化合物1-426的化合物的氘化衍生物和药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
209.一种包括选自化合物1-426的化合物的药学上可接受的盐和药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
210.一种包括选自化合物1-426的化合物和药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
211.一种包括：(a)选自化合物1-426的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐；(b)CFTR增效剂；以及(c)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
212.一种包括：(a)选自化合物1-426的化合物的氘化衍生物；(b)CFTR增效剂；以及(c)药学上可接受的载体的药物用于治疗囊性纤维化的方法。
213.一种包括：(a)选自化合物1-426的化合物的药学上可接受的盐；(b)CFTR增效剂；以及(c)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
214.一种药物组合物，其包括：(a)选自化合物1-426的化合物；(b)CFTR增效剂；以及(c)药学上可接受的载体。
215.一种包括：(a)选自化合物1-426的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐；(b)另外的CFTR校正剂；以及(c)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
216.一种包括：(a)选自化合物1-426的化合物的氘化衍生物；(b)另外的CFTR校正剂；以及(c)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
217.一种包括：(a)选自化合物1-426的化合物的药学上可接受的盐；(b)另外的CFTR校正剂；以及(c)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
218.一种包括：(a)选自化合物1-426的化合物；(b)另外的CFTR校正剂；以及(c)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
219.一种包括：(a)选自化合物1-426的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐；(b)另外的CFTR校正剂；(c)CRTR增效剂；以及(d)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
220.一种包括：(a)选自化合物1-426的化合物的氘化衍生物；(b)另外的CFTR校正剂；(c)CRTR增效剂；以及(d)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
221.一种包括：(a)选自化合物1-426的化合物的药学上可接受的盐；(b)另外的CFTR校正剂；(c)CRTR增效剂；以及(d)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
222.一种包括：(a)选自化合物1-426的化合物；(b)另外的CFTR校正剂；(c)CRTR增效剂；以及(d)药学上可接受的载体的药物组合物用于治疗囊性纤维化的方法。
实例
I.缩写列表
ACN：乙腈
Boc酸酐((Boc)2O)：二碳酸二叔丁酯
CDCl3：氯仿-dCDI：碳基二咪唑
CDMT：2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪
CH2Cl2：二氯甲烷
CH3CN：乙腈
COMU：(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代亚乙基氨基氧基)二甲基氨基-吗啉基-碳鎓六氟磷酸盐
Cmpd：化合物
DABCO：1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷
DBU：1,8-二氮杂双环(5.4.0)十一碳-7-烯
DCE：1,2-二氯乙烷
DCM：二氯甲烷
DI：去离子
DIAD：偶氮二甲酸二异丙酯
DEIA：(DIPEA、DiPEA)：N,N-二异丙基乙胺
DMA：N,N-二甲基乙酰胺
DMAP：4-二甲基氨基吡啶
DMF：N,N-二甲基甲酰胺
DMSO：二甲亚砜
DMP：戴斯-马丁过碘烷
EA：乙酸乙酯
EDC：1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺
ELSD：蒸发光散射检测器
ESI-MS：电喷雾电离质谱法
EtOAc：乙酸乙酯
EtOH：乙醇
GC：气相色谱法
Grubbs第1代催化剂：二氯(亚苄基)双(三环己基膦)钌(II)
Grubbs第2代催化剂：[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)咪唑烷-2-亚基]-二氯-[(2-异丙氧基苯基)亚甲基]钌
HATU：1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶3-六氟磷酸氧化物
HPLC：高效液相色谱法
Hoveyda-Grubbs第2代催化剂：(1,3-双-(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基)二氯(邻异丙氧基苯基亚甲基)钌，二氯[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷基亚基](2-异丙氧基苯基亚甲基)钌(II)
IPA：异丙醇
KHSO4：硫酸氢钾
LC：液相色谱法
LCMS：液相色谱法质谱法
LCMS Met.：LCMS方法
LCMS Rt：LCMS保留时间
LDA：二异丙基氨基锂
LiOH：氢氧化锂
MeCN：乙腈
MeOH：甲醇
MgSO4：硫酸镁
MTBE：甲基叔丁基醚
MeTHF或2-MeTHF：2-甲基四氢呋喃
NaHCO3：碳酸氢钠
NaOH：氢氧化钠
NMP：N-甲基-2-吡咯烷酮
NMM：N-甲基吗啉
Pd/C：钯/炭
Pd2(dba)3：三(二亚苄基丙酮)二钯(0)
Pd(dppf)Cl2：[1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)
Pd(OAc)2：乙酸钯(II)
PTFE：聚四氟乙烯
rt、RT：室温
RuPhos：2-二环己基膦基-2′,6′-二异丙氧基联苯
SFC：超临界流体色谱法
TBAI：四丁基碘化铵
TEA：三乙胺
TFA：三氟乙酸
THF：四氢呋喃
TLC：薄层色谱法
TMS：三甲基甲硅烷基
TMSCl：三甲基氯硅烷
T3P：丙烷膦酸酐
UPLC：超高效液相色谱法
XANTPHOS：4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基氧杂蒽
XPhos：2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯
II.一般方法
除非另有说明，否则通过商业来源获得试剂和起始材料，并且在不纯化的情况下使用。
在分别以400MHz和100MHz的1H和13C共振频率操作的Bruker Biospin DRX 400MHzFTNMR光谱仪上或在300MHz NMR光谱仪上获得质子和碳NMR光谱。使用broadband observe(BBFO)探针，在20Hz样品旋转下，分别以0.1834和0.9083Hz/Pt数字分辨率获取一维质子和碳谱。使用标准、先前公布的脉冲序列和常规处理参数，在30℃的温度控制下获取所有质子和碳谱。
NMR(1D和2D)光谱也记录于分别在400MHz和100MHz下操作的配备有5mm多核Iprobe的Bruker AVNEO 400MHz光谱仪上。
还在Varian Mercury NMR仪器上使用45度脉冲角度、4800Hz谱宽和28860个采集点，在300MHz下记录1H NMR光谱。将FID零填充至32k个点，并且在傅立叶变换之前应用0.3Hz谱线增宽。使用30度脉冲角度、100kHz谱宽和59202个采集点在282MHz下记录19F NMR光谱。将FID零填充至64k个点，并且在傅立叶变换之前应用0.5Hz谱线增宽。
还在Bruker Avance III HD NMR仪器上使用30度脉冲角、8000Hz的光谱宽度和128k采集点，在400MHz下记录1H NMR光谱。将FID零填充至256k个点，并且在傅立叶变换之前应用0.3Hz谱线增宽。使用30度脉冲角度、89286Hz谱宽和128k个采集点在377MHz下记录19F NMR光谱。将FID零填充至256k个点，并且在傅立叶变换之前应用0.3Hz谱线增宽。
NMR谱也记录在配备有：5mm QNP(H1/C13/F19/P31)探针(类型：250-SB，s#23055/0020)的Bruker AC 250MHz仪器上或配备有ID PFG，5mm，50-202/500Mhz探针(型号/部件编号99337300)的Varian 500Mhz仪器上。
化合物的最终纯度通过反相UPLC使用Waters制造的Acquity UPLC BEH C18柱(50×2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在3.0分钟内从1-99％流动相B运行的双梯度来测定。流动相A＝H2O(0.05％ CF3CO2H)。流动相B＝CH3CN(0.035％ CF3CO2H)。流速＝1.2mL/min，进样体积＝1.5μL并且柱温＝60℃。通过两个UV迹线(220nm、254nm)的曲线下面积(AUC)求平均值来计算最终纯度。低分辨率质谱报道为使用配备有电喷雾电离(ESI)源的单四极杆质谱仪获得的[M+1]+物质，该ESI源能够在整个检测范围内实现0.1Da的质量准确度和1000的最小分辨率(分辨率无单位)。(2S)-2,4-二甲基-4-硝基-戊酸甲酯的光学纯度是使用手性气体色谱法(GC)分析，在Agilent7890A/MSD 5975C仪器上使用Restek Rt-βDEXcst(30m×0.25mm×0.25μm_df)柱以2.0mL/min流速(H2载气)在220℃进样温度和120℃烘箱温度下进行15分钟来测定的。
III.一般UPLC/HPLC分析方法
LC方法A：使用Waters制造的Acquity UPLC BEH C18柱(50×2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在3.0分钟内从1-99％流动相B运行的双梯度的分析型反相UPLC。流动相A＝H2O(0.05％ CF3CO2H)。流动相B＝CH3CN(0.035％ CF3CO2H)。流速＝1.2mL/min，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
LC方法B：使用Kinetex C18柱(50×3.0mm)和在6分钟内从5-100％流动相B运行的双梯度进行的反相HPLC。流动相A＝H2O(0.1％ CF3CO2H)。流动相B＝CH3CN(0.1％ CF3CO2H)。流速＝1.5mL/min，进样体积＝2μL，并且柱温＝60℃。
LC方法C：Kinetex C184.6x 50mm 2.6μm。温度：45℃，流速：2.0毫升/分钟，运行时间：3分钟。流动相：初始95％水(0.1％甲酸)和5％乙腈(0.1％甲酸)，线性梯度至95％乙腈(0.1％甲酸)持续2.0分钟，然后在95％乙腈(0.1％甲酸)下保持1.0分钟。
LC方法D：由Waters制造的Acquity UPLC BEH C18柱(30×2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002349)和在1.0分钟内从1-99％流动相B运行的双梯度。流动相A＝H2O(0.05％CF3CO2H)。流动相B＝CH3CN(0.035％CF3CO2H)。流速＝1.5mL/min，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
LC方法G：Symmetry，4.6x 75mm 3.5μm。温度：45℃，流速：2.0毫升/分钟，运行时间：8分钟。流动相：初始95％ H2O(0.1％甲酸)和5％ CH3CN(0.1％ FA)，线性梯度至95％CH3CN(0.1％甲酸)持续6.0分钟，然后在95％CH3CN(0.1％甲酸)下保持2.0分钟。
LC方法H：Kinetex C184.6×50mm 2.6um。温度：45℃，流速：2.0毫升/分钟，运行时间：6分钟。流动相：初始95％ H2O(0.1％甲酸)和5％ CH3CN(0.1％ FA)，线性梯度至95％CH3CN(0.1％ FA)持续4.0分钟，然后在95％CH3CN(0.1％ FA)下保持2.0分钟。
LC方法I：由Waters(pn：186002350)制造的Acquity UPLC BEH C18柱(50×2.1mm，1.7μm颗粒)和在5.0分钟内从1％-99％流动相B运行的双梯度。流动相A＝H2O(0.05％CF3CO2H)。流动相B＝CH3CN(0.035％CF3CO2H)。流速＝1.2mL/min，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
LC方法J：使用Waters制造的Acquity UPLC BEH C18柱(50×2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在2.9分钟内从1-99％流动相B运行的双梯度的反相UPLC。流动相A＝H2O(0.05％ NH4HCO2)。流动相B＝CH3CN。流速＝1.2mL/min，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
LC方法K：Kinetex Polar C183.0×50mm 2.6μm，3分钟，5％-95％ACN/H2O(0.1％甲酸)1.2毫升/分钟。
LC方法M：Poroshell 120EC-C183.0×50mm 2.7μM，温度：45℃，流速：2.0毫升/分钟，运行时间：6分钟。流动相条件：初始95％ H2O(0.1％ FA)和5％ CH3CN(0.1％ FA)，线性梯度至95％ CH3CN(0.1％ FA)持续4.0分钟，然后在95％ CH3CN(0.1％ FA)下保持2.0分钟。
LC方法N：Kinetex EVO C184.6×50mm 2.6μm，温度：45℃，流速：2.0毫升/分钟，运行时间：4分钟。流动相：初始95％ H2O(0.1％甲酸)和5％CH3CN(0.1％FA)，线性梯度至95％CH3CN(0.1％FA)持续2.0分钟，然后在95％ CH3CN(0.1％ FA)下保持2.0分钟。
LC方法O：Zorbax C184.6×50mm 3.5μM，2.0毫升/分钟，95％ H2O(0.1％甲酸)+5％CH3CN(0.1％ FA)至95％ CH3CN(0.1％ FA)梯度(2.0分钟)，然后在95％ CH3CN(0.1％ FA)下保持1.0分钟。
LC方法P：Poroshell 120EC-C18 3.0×50mm 2.7μM，温度45℃，流速：1,5毫升/分钟，运行时间：3分钟。流动相条件：初始95％ H2O(0.1％甲酸)和5％ CH3CN(0.1％ FA)，线性梯度至95％ CH3CN(0.1％ FA)持续1.5分钟，然后在95％ CH3CN(0.1％ FA)下保持1.5分钟。
LC方法Q：使用Waters制造的Acquity UPLC BEH C18柱(50×2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在2.9分钟内从30-99％流动相B运行的双梯度的反相UPLC。流动相A＝H2O(0.05％ CF3CO2H)。流动相B＝CH3CN(0.035％ CF3CO2H)。流速＝1.2mL/min，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
LC方法S：Merckmillipore Chromolith SpeedROD C18柱(50x 4.6mm)和在12分钟内从5-100％流动相B运行的双梯度。流动相A＝水(0.1％CF3CO2H)。流动相B＝乙腈(0.1％CF3CO2H)。
LC方法T：Merckmillipore Chromolith SpeedROD C18柱(50x 4.6mm)和在6分钟内从5-100％流动相B运行的双梯度。流动相A＝水(0.1％ CF3CO2H)。流动相B＝乙腈(0.1％CF3CO2H)。
LC方法U：Kinetex Polar C183.0×50mm 2.6μm，6分钟，5％-95％ACN/H2O(0.1％甲酸)1.2毫升/分钟。
LC方法W：水皮质2.7μC18(3.0mm×50mm)，温度：55℃；流速：1.2毫升/分钟；流动相：含0.1％三氟乙酸(TFA)酸的100％水，然后含0.1％TFA酸的100％乙腈，梯度：4分钟内5％至100％ B，在100％ B停留0.5分钟，1.5分钟内平衡到5％ B。
IV.常见中间体的合成
实例A：3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸的制备
步骤1：N-叔丁氧羰基-N-(4,6-二氯嘧啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯
向4,6-二氯嘧啶-2-胺(300g，1.829mol)于DCM(2.1L)中的溶液中添加(BOC)2O(838g，3.840mol)，然后添加DMAP(5.6g，45.84mmol)。将混合物在环境温度下搅拌6小时。添加另外的DMAP(5.6g，45.84mmol)，并且将反应在环境温度下继续搅拌24小时。将混合物用水(2.1L)稀释并将有机相分离。将有机相用水(2.1L)、2.1L的盐水洗涤，经硫酸镁干燥，经硅藻土过滤并在真空中浓缩，得到在浆液中有淤泥的浅橙色油。将混合物用约500mL的庚烷稀释并使用M过滤器过滤。将沉淀(SM)用250mL的庚烷洗涤。将滤液在真空中浓缩，得到稠密的橙色油，将所述稠密的橙色油用先前实验的固体接种并静置结晶，得到浅橙色硬固体。N-叔丁氧羰基-N-(4,6-二氯嘧啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(645g，97％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.07(s,1H),1.44(s,18H).ESI-MS m/z计算值363.07526，实验值364.1(M+1)+；保留时间：2.12分钟(LC方法A)。
步骤2：N-叔丁氧羰基-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯
将所有溶剂在使用之前进行脱气。向N-叔丁氧基羰基-N-(4,6-二氯嘧啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(88g，241.6mmol)的浆液中添加含(2,6-二甲基苯基)硼酸(大约36.24g，241.6mmol)和Cs2CO3(大约196.8g，604.0mmol)的DME(704mL)和水(176mL)。添加Pd(dppf)Cl2(大约8.839g，12.08mmol)并将混合物在氮气下在80℃下(回流)剧烈搅拌1小时(没有SM残留)。将反应冷却至环境温度并用水(704mL)稀释。将水相分离并用EtOAc(704mL)萃取。将有机相用700mL的盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗产物在1500g硅胶柱上进行色谱分析，用0-30％ EtOAc/己烷洗脱。将产物级分(在15％ EtOAc洗脱)合并，并在真空下浓缩，得到呈澄清油的产物，所述产物在静置后结晶。N-叔丁氧羰基-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯(81.3g，78％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.88(s,1H),7.30(dd,J＝8.2,7.0Hz,1H),7.21-7.16(m,2H),2.03(s,6H),1.38(s,18H).ESI-MSm/z计算值433.17682，实验值434.1(M+1)+；保留时间：2.32分钟(LC方法A)。
步骤3：4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺(盐酸盐)
将N-叔丁氧羰基-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨基甲酸叔丁酯(514.8g，915.9mmol)溶解于二氯甲烷(4L)中。添加对二氧六环(1L，4mol)中的氯化氢，并且将混合物在室温下搅拌过夜。将所得沉淀通过真空过滤收集并在真空下干燥，得到呈白色固体的4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺盐酸盐(213.5g，82％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ7.45-6.91(m,3H),6.73(s,1H),2.08(s,6H).ESI-MS m/z计算值233.072，实验值234.1(M+1)+；保留时间：2.1分钟(LC方法C)。
步骤4：4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺
将4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺(盐酸盐)(166g，614.5mmol)和4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺(盐酸盐)(30g，111.0mmol)悬浮于DCM(2.5L)中，用NaOH(1M的725mL，725.0mmol)处理并在室温下搅拌1小时。将混合物转移到分液漏斗中并放置过夜。将DCM相分离并将含有不溶性物质的水相用DCM(2×500mL)萃取两次以上。将合并的棕色DCM相经硫酸镁和木炭搅拌1小时，过滤并将黄色溶液浓缩至约500mL的体积。将溶液用庚烷(750mL)稀释并将DCM在60℃下在减压下去除，得到奶油悬浮液。将所述奶油悬浮液在室温下搅拌1小时，过滤，用冷庚烷洗涤并干燥，得到呈奶油固体的4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺(157g，91％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.28-7.14(m,3H),7.10(d,J＝7.5Hz,2H),6.63(s,1H),2.06(s,6H).ESI-MS m/z计算值233.07198，实验值234.0(M+1)+；保留时间：1.45分钟(LC方法A)。
步骤5：3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
在搅拌和氮气下将4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺(235g，985.5mmol)溶解于MeTHF(2.3L)中并在冰浴中冷却。向冷溶液中一次性添加3-氯磺酰基苯甲酸甲酯(347g，1.479mol)(似乎轻微吸热)，并在1.25小时内向冷的浅黄色溶液中滴加2-甲基-丁烷-2-醇(锂盐)(3.1M的875mL，2.712mol)(于庚烷中)的溶液(放热，内部温度为0至10℃)。将冰浴去除并且将绿色溶液在室温下搅拌4小时。向绿色溶液中添加冷HCl(1.5M的2L，3.000mol)，将相分离并且将有机相用水(1L)洗涤一次并且用盐水(500mL)洗涤一次。将水相用MeTHF(350mL)反萃取一次并将有机相合并。将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸甲酯的该黄色MeTHF溶液(ESI-MS m/z计算值431.07065，实验值432.0(M+1)+；保留时间：1.81分钟)用NaOH(2M的2.3L，4.600mol)处理并在室温下搅拌1小时。将相分离并将NaOH相用MeTHF(2×500mL)洗涤两次并且将合并的有机相用2M NaOH(1×250mL)萃取一次。将合并的NaOH相合并，在冰浴中搅拌并通过添加HCl(36％w/w的416mL，4.929mol)缓慢酸化，同时保持内部温度在10与20℃之间。在添加结束时(pH为约5-6)，通过添加固体柠檬酸将最终pH调节至2-3。将形成的黄色粘性悬浮液在室温下搅拌过夜，得到奶油酥悬浮液。将固体通过过滤收集，用大量水洗涤并吸干3小时。在45-50℃的氮气泄漏条件下，将固体在减压下干燥120小时。分离出呈类白色固体的3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(395g，96％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.44(s,1H),12.46(s,1H),8.48-8.39(m,1H),8.25-8.15(m,1H),8.15-8.08(m,1H),7.68(t,J＝7.8Hz,1H),7.31(s,1H),7.28-7.18(m,1H),7.10(d,J＝7.6Hz,2H),1.84(s,6H).ESI-MS m/z计算值417.055，实验值418.0(M+1)+；保留时间：1.56分钟。(LC方法A)。
实例B：N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-硝基-苯磺酰胺的制备步骤1：N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-硝基-苯磺酰胺
在0℃下向氢化钠(60％在矿物油中)(4.87g，0.122mol)于无水四氢呋喃(30mL)中的悬浮液中逐滴添加4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺(8.13g，0.0348mol)于无水四氢呋喃(40mL)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。在0℃下将3-硝基苯磺酰基氯(11.57g，52.2mmol)于无水四氢呋喃(40mL)中的溶液逐滴添加到反应混合物中。将反应在相同温度下搅拌1小时。将反应用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)淬灭。将反应溶液用二氯甲烷(3x 100mL)萃取。将合并的有机层用水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并且然后在真空下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法使用0至10％氯仿-乙酸乙酯纯化。将粗产物用乙醚和己烷(1:5)的溶剂混合物研磨，以得到呈白色固体的N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-硝基-苯磺酰胺(5.98g，41％)。ESI-MS m/z计算值418.1，实验值419.0(M+1)。保留时间：5.73分钟。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ(ppm):9.01(s,1H)；8.43(t,J＝10.5Hz,2H)；7.682(t,J＝7.8Hz,1H)；7.23(m,1H)；7.12(d,J＝7.5Hz,2H)；6.95(s,1H)；1.99(s,6H).
实例C：N-[4-(2,6-二甲基苯基)-6-甲磺酰基-嘧啶-2-基]-3-硝基-苯磺酰胺的制备
步骤1：N-[4-(2,6-二甲基苯基)-6-甲磺酰基-嘧啶-2-基]-3-硝基-苯磺酰胺
阶段1：向250mL圆底烧瓶中添加N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-硝基-苯磺酰胺(14.14g，33.76mmol)、硫代甲醇钠(5.86g，83.61mmol)和NMP(130mL)。将该溶液在100℃下搅拌3小时。然后将反应混合物冷却至室温，用1N HCl(300mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×300mL)萃取。将合并的有机萃取物用水(300mL)、3％过氧化氢水溶液(300mL)、水(300mL)和饱和氯化钠水溶液(300mL)洗涤，然后经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中蒸发。由此得到橙色泡沫(16.71g，115％粗产物产率)，其用于进行下一步反应。
阶段2：向含有来自阶段1的产物的250mL圆底烧瓶中添加DCM(120mL)，随后添加m-CPBA(77％纯度，27.22g，121.5mmol)。将此溶液在室温下搅拌90分钟。将反应混合物通过转移至含有DCM(400mL)和固体Na2S2O3(41.15g，260.3mmol)的1L爱伦美氏烧瓶(Erlenmeyerflask)中淬灭。将该混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物用DCM(300mL)稀释，然后用水(3×400mL)和饱和氯化钠水溶液(300mL)洗涤。然后将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在真空中蒸发。然后将此固体部分地溶解在DCM(100mL)中，并在布氏漏斗(Büchner funnel)上在真空中过滤以去除间氯苯甲酸废物(重复三次)。然后将剩余的溶液通过硅胶色谱法(330g二氧化硅，0％至60％乙酸乙酯/己烷梯度)纯化，以得到N-[4-(2,6-二甲基苯基)-6-甲基磺酰基-嘧啶-2-基]-3-硝基-苯磺酰胺(5.881g，36％)。ESI-MS m/z计算值462.06677，实验值463.1(M+1)+；保留时间：1.6分钟；LC方法A。
实例D：二螺[2.0.24.13]庚烷-7-甲醛的制备
步骤1：1-环丙基环丙醇
向环丙烷甲酸甲酯(75g，749.1mmol)于乙醚(450mL)中的溶液中添加异丙醇钛(IV)(55.3mL，187.4mmol)。在2小时内向混合物中缓慢添加乙基溴化镁(1M的1.6L，1.60mol)。添加是放热的并且通过监测添加速率和使用冷却浴来控制。在添加期间，将反应温度保持在21℃-26℃之间。在添加之后，将混合物在环境温度下再搅拌2小时。接下来，将混合物使用丙酮/干冰浴冷却至-5℃并用硫酸(10％w/w的970g，990mmol)缓慢淬灭。将反应混合物在干冰/丙酮浴中冷却，以在淬灭期间将反应容器保持在0℃以下。随着淬灭的进行，形成灰色/紫色固体。在完全添加硫酸水溶液之后，将混合物在0℃下搅拌1小时。将沉淀通过硅藻土使用中等玻璃料过滤并将沉淀用乙醚(900mL)洗涤。将滤液转移到分液漏斗中并将有机相用盐水(1L)、饱和碳酸氢钠(1L)和盐水(1L)洗涤。将有机相经硫酸镁干燥，经硅藻土过滤并将溶剂在100托下通过旋转蒸发来蒸发并将水浴设定在20℃。将粗产物在-23℃下储存过夜并无需进一步纯化即可使用。发现产物1-环丙基环丙醇(61g，83％)含有约50％溶剂(四氢呋喃和iPrOH)并原样用于下一步骤。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ1.32(tt,J＝8.2,5.1Hz,1H),0.71-0.61(m,2H),0.51-0.43(m,2H),0.43-0.33(m,2H),0.23-0.14(m,2H).
步骤2：1-溴-1-环丙基-环丙烷
将三苯基膦(56.1g，213.9mmol)于二氯甲烷(200mL)中的溶液冷却至-10℃。添加溴(11.0mL，214mmol)于二氯甲烷(40mL)中的溶液并将反应在-10℃下再搅拌15分钟。然后将反应冷却至-30℃并添加吡啶(3.3mL，41mmol)。滴加1-环丙基环丙醇(20.0g，204mmol)、吡啶(17.3mL，214mmol)和二氯甲烷(100mL)的溶液，同时维持温度在-15℃至-20℃之间。在30分钟之后，添加完成并使反应逐渐温热至室温。然后使反应在40℃下搅拌过夜。然后将反应冷却至室温并用水(100mL)淬灭。然后将反应搅拌10分钟并将层分离。将有机相依次用1M盐酸(102mL)洗涤，然后用饱和碳酸氢钠(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩(30℃/室内真空约300托)以去除大部分二氯甲烷。将粗反应混合物快速蒸馏(40℃/20托)以进一步去除二氯甲烷。将固体残余物(Ph3PO和产物)再加热并蒸馏(50-60℃/20托)，得到呈混浊的无色液体的21.5g(65％产率)的1-溴-1-环丙基-环丙烷。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ1.61(tt,J＝8.2,5.0Hz,1H),1.07-1.02(m,2H),0.78-0.66(m,2H),0.67-0.51(m,2H),0.35-0.21(m,2H).
步骤3：亚环丙基环丙烷
在室温下，在3颈250mL圆底烧瓶中搅拌叔丁醇钾(16.7g，148.8mmol)于二甲亚砜(100mL)中的溶液。滴加1-溴-1-环丙基-环丙烷(20.0g，124.2mmol)并且反应立即变成黑色并且然后变成棕色。反应是温和放热的(使用冰水浴将温度维持在18℃至22℃之间)。在10分钟之后，添加完成。将冰水浴去除并且使反应在室温下搅拌。在90分钟之后，使用球到球蒸馏(bulb-to-bulb distillation)对反应混合物进行真空蒸馏。将蒸馏在40与100托之间从60℃至80℃进行。将蒸馏物在接收器中缓慢收集，得到18.2g(作为42wt％t-BuOH溶液的7.3g的产物)的无色液体。将蒸馏物用水(5×10mL)进一步洗涤。添加二氯甲烷(4g)并将混合物经硫酸镁干燥，过滤(用另外2部分各自3g的二氯甲烷洗涤)，得到呈无色液体的17.30g(作为39.6wt％二氯甲烷溶液的6.9g产物；69％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ1.19(s,8H).1H NMR证实存在二氯甲烷和少量叔丁醇。
步骤4：二螺[2.0.2.1]庚烷-7-羧酸乙酯
在0℃下在氮气气氛下，向亚环丙基环丙烷(49.5g，617.8mmol)于二氯甲烷(110mL)中的溶液中添加乙酸铑(II)(4.2g，9.503mmol)。使用设定为0.02毫升/分钟(1.2毫升/小时)的添加速率的注射泵，在0℃下向混合物中添加2-重氮乙酸乙酯(106.8mL，1.016mol)。将添加继续89小时。将粗反应混合物通过硅胶塞过滤，每次用150mL的二氯甲烷洗涤3次。将挥发性物质在真空中去除，得到粗的暗黄色油，二螺[2.0.2.1]庚烷-7-羧酸乙酯(100g，97％，含有约20％二氯甲烷，作为污染物的(E)-丁-2-二酸二乙酯和(Z)-丁-2-二酸二乙酯)，其直接用于下一步骤。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ4.13(q,J＝7.1Hz,2H),2.23(s,1H),1.24(t,J＝7.1Hz,3H),1.08-0.93(m,4H),0.90-0.82(m,2H),0.77(ddd,J＝8.2,5.0,3.5Hz,2H).
步骤5：二螺[2.0.2.1]庚-7-基甲醇
向用冰水浴冷却的氢化铝锂(7.8g，200.2mmol)于乙醚(300mL)中的浆液中缓慢添加二螺[2.0.2.1]庚烷-7-羧酸乙酯(10.77g，64.79mmol)。在添加期间使混合物温热至温和回流并在环境温度下继续搅拌1小时。将反应用冰水浴冷却并通过添加水(8.0mL，440mmol)，随后添加氢氧化钠(2M的8.0mL，16mmol)并且然后添加水(24.0mL，1.33mol)缓慢淬灭。将浅黄色浆液经硅藻土过滤并用150mL的甲基叔丁基醚洗涤3次。将滤液在真空中浓缩，得到8.87g的澄清油，二螺[2.0.2.1]庚-7-基甲醇(8.87g，定量产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ3.71(dd,J＝6.7,5.5Hz,2H),1.76-1.65(m,1H),1.46(t,J＝5.6Hz,1H),0.87(q,J＝1.9Hz,4H),0.72-0.61(m,2H),0.60-0.50(m,2H).
步骤6：二螺[2.0.24.13]庚烷-7-甲醛
向20mL小瓶中添加{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}甲醇(381mg，3.068mmol)、二氯甲烷(4mL)、碳酸氢钾(620mg，6.193mmol)和氯铬酸吡啶盐(728mg，3.377mmol)(PCC)。使反应在室温下搅拌5小时。将反应经硅藻土过滤并蒸发(300托，在40℃水浴中最低限度加热)。将反应混合物溶解于乙醚中，经硅藻土过滤，并在300托下蒸发(在40℃水浴中最低限度加热)，得到呈淡棕色油的二螺[2.0.24.13]庚烷-7-甲醛(433mg，58％)。纯度估计为约50％。粗产物无需进一步纯化即可用于下一步骤。
实例E：2-二螺[2.0.24.13]庚-7-基乙醛的制备
步骤1：7-(溴甲基)二螺[2.0.2.1]庚烷
使1000mL、3颈圆底烧瓶配备有机械搅拌器、冷却浴、加料漏斗、J-Kem温度探针和氮气入口/出口。在氮气气氛下，向容器中装入三苯基膦(102.7mL，443.2mmol)和二氯甲烷(1L)，得到澄清无色溶液。开始搅拌，并向冷却浴中装入丙酮。将干冰分批添加到冷却浴中，直到获得-15℃的釜温。向加料漏斗中装入溴(22.82mL，443.0mmol)于二氯甲烷(220mL，10mL/g)中的溶液，随后在1小时内逐滴添加该溶液。在添加期间将干冰分批添加到冷却浴中，以将釜温维持在-15℃。在溴添加完成之后，将浅黄色悬浮液在-15℃下继续搅拌15分钟，在该温度下将悬浮液冷却至-30℃。向加料漏斗中装入二螺[2.0.2.1]庚-7-基甲醇(50g，402.6mmol)、吡啶(35.82mL，442.9mmol)和二氯甲烷(250mL，5mL/g)的溶液。然后在1.5小时内滴加澄清浅黄色溶液，将釜温维持在-30℃。使所得澄清浅黄色反应混合物逐渐温热至-5℃的釜温并且然后在-5℃下继续搅拌1小时。然后将反应混合物倒入己烷(2000mL)中，导致沉淀的形成。将悬浮液在室温下搅拌30分钟，并且然后通过具有20mm硅藻土层的玻璃料布氏漏斗过滤。将澄清滤液减压浓缩(水浴温度为20℃)，得到含有一些沉淀的黄色油状物。将油状物用一些己烷稀释，在室温下静置15分钟，然并且后通过具有20mm硅藻土层的玻璃料布氏漏斗过滤。将澄清滤液减压浓缩(水浴温度为20℃)，得到呈澄清黄色油状物的7-(溴甲基)二螺[2.0.2.1]庚烷(70g，93％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ3.49(d,J＝7.5Hz,2H),1.90(t,J＝7.5Hz,1H),1.06-0.84(m,4H),0.71(ddd,J＝9.1,5.1,4.0Hz,2H),0.54(dddd,J＝8.6,4.8,3.8,1.0Hz,2H).
步骤2：2-二螺[2.0.2.1]庚-7-基乙腈
使1000mL、3颈圆底烧瓶配备有机械搅拌器、用作二级防护的冷却浴、J-Kem温度探针和氮气入口/出口。在氮气气氛下，向容器中装入7-(溴甲基)二螺[2.0.2.1]庚烷(35g，187.1mmol)和二甲亚砜(245mL)，得到澄清琥珀色溶液。开始搅拌，并记录釜温为19℃。然后向容器中装入一次性添加的固体氰化钠(11.46g，233.8mmol)，得到深色溶液并在15分钟内逐渐放热达到49℃。几分钟后，釜温开始降低，并且将混合物继续在室温下搅拌过夜(约15小时)。将深色反应混合物用冰冷饱和碳酸钠溶液(500mL)淬灭，并且然后转移到分液漏斗中并用乙醚(500mL)分配。移除有机物，并用乙醚(2X 250mL)萃取残余水。将合并的有机物用水(500mL)洗涤，经硫酸钠(200g)干燥，并且然后通过玻璃料布氏漏斗过滤。将澄清琥珀色滤液减压浓缩(水浴温度20℃)，得到呈澄清琥珀色油状物的2-二螺[2.0.2.1]庚-7-基乙腈(21g，84％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ2.42(d,J＝6.6Hz,2H),1.69(t,J＝6.6Hz,1H),1.02-0.88(m,4H),0.79-0.70(m,2H),0.66-0.55(m,2H).
步骤3：2-二螺[2.0.2.1]庚-7-基乙酸
/>
向2-二螺[2.0.2.1]庚-7-基乙腈(2.1g，14.19mmol)于EtOH(32mL)中的溶液中添加氢氧化钠(5.12g，128.0mmol)，随后添加水(13mL)，并将所得溶液搅拌并加热至70℃过夜。然后将混合物冷却至室温，用水稀释并用乙醚萃取。通过添加6N盐酸(产生浑浊沉淀)将水相调节至pH＝1，并用乙醚(3X)萃取。将有机相干燥(硫酸镁)、过滤并浓缩，得到呈橙色固体状的2-二螺[2.0.2.1]庚-7-基乙酸(2.19g，99％产率，98％纯度)，其不经进一步纯化即用于下一步。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ2.44(d,J＝6.9Hz,2H),1.67(t,J＝6.9Hz,1H),0.91(ddd,J＝9.0,5.2,3.9Hz,2H),0.81(dddd,J＝8.9,5.2,3.9,0.5Hz,2H),0.69(ddd,J＝8.9,5.2,3.9Hz,2H),0.56-0.44(m,2H).
步骤4：2-二螺[2.0.2.1]庚-7-基乙醇
在15分钟内向在冰/水浴中冷却的溶解于四氢呋喃(33.71mL)中的氢化铝锂(827.4mg，902.3μL，21.80mmol)中逐滴添加含2-二螺[2.0.2.1]庚-7-基乙酸(2.552g，16.77mmol)的四氢呋喃(7.470mL)，保持反应温度<20℃。使混合物搅拌总共18小时，逐渐升温到环境温度。将混合物用冰/水浴冷却，并且通过依次缓慢添加水(838.4mg，838.4μL，46.54mmol)，随后添加氢氧化钠(1.006mL，5M，5.031mmol)，然后添加水(2.493g，2.493mL，138.4mmol)淬灭，得到经硅藻土过滤的白色粒状浆液。用乙醚洗涤过滤后的固体。将滤液在约300mbar和30℃水浴下真空浓缩。将残余物用乙醚稀释，干燥(硫酸镁)，过滤并在约300mbar和30℃水浴下真空浓缩，随后真空浓缩约30秒，得到2-二螺[2.0.2.1]庚-7-基乙醇(2.318g，100％)，其不经进一步纯化即直接用于后续步骤。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ3.64(s,2H),1.68(d,J＝6.7Hz,2H),1.39(s,1H),1.31(s,1H),0.82(d,J＝14.0Hz,4H),0.65(s,2H),0.50(d,J＝3.6Hz,2H).
步骤5：2-二螺[2.0.24.13]庚-7-基乙醛
向20mL小瓶中添加2-二螺[2.0.24.13]庚-7-基乙醇(65％w/w的506mg，2.380mmol)、二氯甲烷(3mL)、碳酸氢钾(500mg，4.994mmol)、氯铬酸吡啶盐(640mg，2.969mmol)(PCC)。使反应在室温下搅拌5小时。将反应经硅藻土过滤并蒸发。将反应混合物用乙醚溶解，经硅藻土过滤，并在300托下蒸发(最低限度加热)，得到2-二螺[2.0.24.13]庚-7-基乙醛(492mg，61％)。
实例F：3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇的制备
步骤1：2-[1-(三氟甲基)环丙基]甲基磺酸乙酯
1000mL 3颈圆底烧瓶上装配有机械搅拌器、冷却浴、J-Kem温度探针和加料漏斗和氮气入口/出口。在氮气气氛下，向容器中装入2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙醇(125g，811.0mmol)和2-甲基四氢呋喃(625mL)，得到澄清无色溶液。开始搅拌并记录釜温为19℃。然后向容器中一次性添加纯的三乙胺(124.3mL，891.8mmol)。然后向冷却浴中装入碎冰/水并将釜温降至0℃。向加料漏斗中装入甲磺酰氯(62.77mL，811.0mmol)于2-甲基四氢呋喃(125mL，2mL/g)中的溶液，随后在90分钟内滴加所述溶液，得到白色悬浮液并放热至1℃。使混合物缓慢温热至室温并在室温下继续搅拌1小时，此时将混合物倒入冰冷的水(250mL)中并且然后转移到分液漏斗中。将有机物去除并用20wt％碳酸氢钾溶液(250mL)洗涤，经硫酸钠(200g)干燥并且然后通过玻璃料布氏漏斗过滤。将澄清滤液在减压下浓缩以提供呈澄清淡黄色油的2-[1-(三氟甲基)环丙基]丙酸(185g，98％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ4.36(ddt,J＝7.1,6.4,0.7Hz,2H),3.02(s,3H),2.03(t,J＝7.1Hz,2H),1.11-0.98(m,2H),0.81-0.66(m,2H).
步骤2：3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙腈
1000mL 3颈圆底烧瓶上装配有机械搅拌器、加热罩、J-Kem温度探针/控制器、水冷回流冷凝器和氮气入口/出口。在氮气气氛下，向容器中装入2-[1-(三氟甲基)环丙基]甲基磺酸乙酯(50g，215.3mmol)和二甲亚砜(250mL)，得到澄清的浅黄色溶液。开始搅拌并记录釜温为19℃。向容器中装入氰化钠(13.19g，269.1mmol)，以固体形式一次性添加。将混合物加热至70℃的釜温并维持条件24小时。在加热时，所有的氰化钠溶解并且反应混合物变成浅琥珀色悬浮液。在冷却至室温之后，将反应混合物倒入水(500mL)中并且然后转移至分液漏斗中并用甲基叔丁基醚(500mL)分配。将有机相去除并将残余的水相用甲基叔丁基醚(3×250mL)萃取。将合并的有机层用水(2×250mL)洗涤，经硫酸钠(200g)干燥并且然后通过玻璃料布氏漏斗过滤。将澄清滤液在减压下浓缩以提供呈澄清琥珀色油的3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙腈(30g，85％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ2.55(t,J＝7.6Hz,2H),1.93(t,J＝7.7Hz,2H),1.11-1.04(m,2H),0.78-0.70(m,2H).
步骤3：3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙酸
1000mL 3颈圆底烧瓶上装配有机械搅拌器、加热罩、J-Kem温度探针/控制器、水冷回流冷凝器和氮气入口/出口。在氮气气氛下，随后向容器中装入3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙腈(25g，153.2mmol)和乙醇(375mL)，得到澄清琥珀色溶液。开始搅拌并记录釜温为19℃。然后向容器中装入氢氧化钠(6M的102.1mL，612.6mmol)，一次性添加。将所得澄清琥珀色溶液加热至70℃的釜温并维持条件24小时。在冷却至室温之后，将反应混合物浓缩以去除乙醇。将残余的水溶液用水(150mL)稀释并且然后转移到分液漏斗中并用甲基叔丁基醚(50mL)分配。将水相去除并将pH用6M盐酸溶液调节至pH为约1。将所得水溶液转移到分液漏斗中并用甲基叔丁基醚(250mL)分配。将有机相去除并将残余的水相用甲基叔丁基醚(2×150mL)萃取。将合并的有机物经硫酸钠(150g)干燥并且然后通过玻璃料布氏漏斗过滤。将澄清滤液在减压下浓缩以提供呈澄清琥珀色油的3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙酸(26g，93％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ2.63-2.50(m,2H),1.96-1.84(m,2H),1.03-0.95(m,2H),0.66-0.58(m,J＝1.7Hz,2H).
步骤4：3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇
使1000mL、3颈圆底烧瓶配备有机械搅拌器、冷却浴、加料漏斗、J-Kem温度探针和氮气入口/出口。在氮气气氛下向容器中装入氢化铝锂粒料(6.775g，178.5mmol)。然后在氮气气氛下向容器中装入四氢呋喃(250mL)。开始搅拌并记录釜温为20℃。使混合物在室温下搅拌0.5小时以使粒料溶解。记录所得灰色悬浮液的釜温为24℃。然后向冷却浴中装入碎冰/水并将釜温降至0℃。向加料漏斗中装入3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙酸(25g，137.3mmol)于四氢呋喃(75mL，3mL/g)中的溶液并在1小时内滴加澄清的浅黄色溶液。在添加完成之后，记录所得灰棕色悬浮液的釜温为5℃。使混合物缓慢温热至室温并在室温下继续搅拌24小时。将悬浮液用碎冰/水冷却浴冷却至0℃并且然后通过非常缓慢地滴加水(6.775mL)，随后添加15wt％氢氧化钠溶液(6.775mL)并且最后用水(20.32mL)淬灭。记录所得白色悬浮液的釜温为5℃。将悬浮液在约5℃下持续搅拌30分钟并且然后通过具有20mm硅藻土层的玻璃料布氏漏斗过滤。将滤饼用四氢呋喃(2×150mL)置换洗涤并且然后在真空下干燥15分钟。将滤液用硫酸钠(250g)干燥并且然后通过玻璃料布氏漏斗过滤。将滤液在减压下浓缩，得到澄清的浅琥珀色油，即期望的产物3-[1-(三氟甲基)环丙基]丙烷-1-醇(21.2g，92％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ3.65(t,J＝6.0Hz,2H),1.78-1.59(m,4H),0.99-0.91(m,2H),0.59(dp,J＝4.7,1.7Hz,2H).
实例G：2-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-4-羧酸的制备
步骤1：2-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-4-羧酸甲酯
在氮气下，将2-氯磺酰基吡啶-4-羧酸甲酯(5g，21.218mmol)和4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺(5g，21.395mmol)溶解于无水THF(150mL)中并将溶液冷却至-78℃。滴加LiHMDS的1M THF溶液(1M的43mL，43.000mmol)并使混合物逐渐温热至0℃。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)淬灭并用氯仿(3×50mL)萃取。将有机级分合并，经硫酸钠干燥并蒸发。将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-100％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈白色固体的2-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-4-羧酸甲酯(8.3g，80.6％)。ESI-MS m/z计算值432.06592，实验值432.8(M+1)+；保留时间：5.5分钟；LC方法S。
步骤2：2-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-4-羧酸
将1M NaOH水溶液(95mL，95.000mmol)添加到2-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-4-羧酸甲酯(8.1g，18.712mmol)于THF(95mL)中的溶液中并将混合物在室温下搅拌1小时。添加1M HCl水溶液至pH为约8并且将混合物用2-MeTHF(2×100mL)萃取。将水相分离并用1M HCl水溶液酸化至pH为约2。将形成的沉淀通过过滤收集，得到呈白色固体的2-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-4-羧酸(5.17g，71％)。1H NMR(250MHz,DMSO(d6))δ8.87(d,J＝5.0Hz,1H),8.32(d,J＝1.1Hz,1H),8.04(dt,J＝4.9,1.5Hz,1H),7.32–7.16(m,2H),7.04(d,J＝7.5Hz,2H),1.76(s,6H).ESI-MS m/z计算值418.05026，实验值419.3(M+1)+；保留时间：4.62分钟；LC方法S。
V.新化合物的合成
实例1：化合物1和化合物2的制备
步骤1：N-(2-氨乙基)-2-硝基-苯磺酰胺
在搅拌下并且在氮气气氛下，在0-5℃下，向乙烷-1,2-二胺(600.00mL，8.89mol)于四氢呋喃(500mL)中的溶液中滴加2-硝基苯磺酰氯(205g，897.26mmol)于四氢呋喃(700mL)中的溶液。在添加之后，将反应再搅拌30分钟并且然后温热至室温并在真空下浓缩。将油状残余物溶于DCM(500mL)中并用水(500mL)洗涤。将有机层分离，并将产物从水层(pH＝11，3×300mL)中萃取。将有机层合并，并经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩，得到橙色凝胶(161g，纯度90％)。将水层用6M HCl处理以将pH调节至8-7，然后将其用氯仿:异丙醇(3:1，v:v，4×300mL)的混合物萃取。在蒸发之后，分离出更多物质(57.2g，纯度98％)。N-(2-氨乙基)-2-硝基-苯磺酰胺的总量为218.2g(89％)。ESI-MS m/z计算值245.04703，实验值246.4(M+1)+；保留时间：1.69分钟；LC方法T。
步骤2：N-[2-[[(2R)-3-氯-2-羟丙基]氨基]乙基]-2-硝基-苯磺酰胺
向配备有磁力搅拌棒的250mL烧瓶中装入N-(2-氨乙基)-2-硝基-苯磺酰胺(75g，275.22mmol)、无水甲醇(80mL)和无水硫酸镁(18g，149.54mmol)。通过注射器快速添加纯(2R)-2-(氯甲基)环氧乙烷(12mL，147.35mmol)。将橙色悬浮液在氮气下在室温下搅拌7小时。将固体过滤并将滤液在减压下浓缩。将残余物溶于DCM(500mL)和水(200mL)中并将两个相分离。在经硫酸钠干燥之后，将溶剂蒸发。将残余物通过硅胶快速色谱法(2×330g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(0至10％)纯化。将纯级分合并并将溶剂在真空下去除，得到呈黄色凝胶的N-[2-[[(2R)-3-氯-2-羟丙基]氨基]乙基]-2-硝基-苯磺酰胺(40.2g，78％)。ESI-MS m/z计算值337.04993，实验值338.4(M+1)+；保留时间：1.91分钟；LC方法T。
步骤3：(6R)-1-(2-硝基苯基)磺酰基-1,4-二氮杂环庚-6-醇
将N-[2-[[(2R)-3-氯-2-羟丙基]氨基]乙基]-2-硝基-苯磺酰胺(58.3g，167.42mmol)和碳酸铯(205g，629.19mmol)于无水乙腈(1500mL)中的悬浮液在氮气下在65℃油浴中搅拌2.5小时。在冷却之后，将固体滤出并将溶剂通过蒸发去除。将残余物在DCM(800mL)与水(200mL)之间分配并将两个相倾析。将有机相经硫酸钠干燥并且将溶剂蒸发。将粗残余物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(330g柱)使用0至15％甲醇/二氯甲烷纯化。将纯级分合并并将溶剂蒸发，得到呈橙色凝胶的(6R)-1-(2-硝基苯基)磺酰基-1,4-二氮杂环庚-6-醇(18.1g，34％)。1H NMR(250MHz,DMSO)δ8.06-7.93(m,2H),7.93 -7.77(m,2H),5.01(s,1H),3.85-3.65(m,2H),3.62-3.50(m,2H),3.25-3.09(m,3H),2.96-2.64(m,4H).ESI-MS m/z计算值301.07324，实验值302.1(M+1)+；保留时间：0.88分钟；LC方法W。
步骤4：(6R)-6-羟基-4-(2-硝基苯基)磺酰基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在500mL烧瓶中，在氮气下将(6R)-1-(2-硝基苯基)磺酰基-1,4-二氮杂环庚-6-醇(12.14g，40.29mmol)溶解于无水甲醇(130mL)中。添加三乙胺(8mL，57.40mmol)并将混合物在冰浴中冷却。添加二碳酸二叔丁酯(11mL，47.88mmol)并在5分钟之后将冰浴去除。将反应混合物在室温下搅拌20小时。将反应浓缩，并将残余物溶于DCM(100mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)中。将两个相倾析，并将水相用DCM(25mL)进一步萃取。将合并的萃取物经硫酸钠干燥并将溶剂蒸发，得到通过硅胶快速色谱法(330g柱)使用甲醇(40分钟内0至10％)/二氯甲烷的梯度纯化的残余物。产物洗脱出约2-3％甲醇。将纯级分合并并将溶剂蒸发，得到呈黄色泡沫状固体的(6R)-6-羟基-4-(2-硝基苯基)磺酰基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(13.93g，86％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)可见几个构象异构体δ8.09-7.99(m,1H),7.77-7.62(m,3H),4.33-4.12(m,1H),3.96-3.66(m,4H),3.58-3.42(m,2H),3.36-3.17(m,2H),3.01-2.85(m,1H),1.51-1.42(m,9H).ESI-MS m/z计算值401.12567，实验值402.28(M+1)+；保留时间：1.3分钟；LC方法A。
步骤5：(6S)-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
将(6R)-6-羟基-4-(2-硝基苯基)磺酰基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(52g，116.58mmol)溶解于乙腈(500mL)中。添加碳酸钾(97g，694.83mmol)，然后添加苯硫酚(40.071g，38.5mL，352.79mmol)。然后将混合物在55℃油浴中在氮气下加热4小时。将其冷却至室温并浓缩以去除大部分乙腈。将残余物在DCM(500mL)与HCl(400mL，1N水溶液)之间分配。将层分离，并将水层用DCM(200mL×2)再洗涤两次。将水溶液(含有期望的产物)在冰水中冷却。添加NaOH(3N，水溶液)以达到pH＝12。添加DCM以萃取游离碱产物。将层再次分离并将水相用DCM进一步萃取(200mL×2)。将合并的DCM溶液用盐水(3200mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到(6S)-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(15.6g，59％)ESI-MS m/z计算值216.1474，实验值217.4(M+1)+；保留时间：2.27分钟。ESI-MS m/z计算值216.1474，实验值217.4(M+1)+；保留时间：2.27分钟；LC方法T。
步骤6：(6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(6S)-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.195g，5.525mmol)、无水DMF(35mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.828g，4.375mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(5mL，28.71mmol)和HATU(2.013g，5.294mmol)并将混合物在0℃下搅拌14分钟，然后通过倒入在冰中冷却的柠檬酸(10％w/v的150mL，78.07mmol)(10％水溶液)中淬灭。将所得白色固体过滤并用水洗涤。将湿固体溶解于DCM中并将溶液经硫酸钠干燥。在溶剂的蒸发之后，将残余物(2.76g)通过硅胶快速色谱法(120g柱)使用甲醇(30分钟内0至10％)/二氯甲烷的梯度纯化。产物洗脱出约4％甲醇。溶剂的蒸发得到呈白色泡沫状固体的(6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.672g，62％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)络合物光谱可能是由于旋转异构体的存在，信号的归属不清楚，质子表观过剩。δ12.40(s,1H),8.05-7.84(m,2H),7.72-7.53(m,2H),7.38-7.30(m,1H),7.24(t,J＝7.3Hz,1H),7.16-7.01(m,2H),5.27(d,J＝13.5Hz,0.5H),4.98(s,0.5H),4.13-3.36(m,7H),3.19(宽s,1H),3.13-2.95(m,2H),1.90(d,J＝9.2Hz,6H),1.39(d,J＝17.4Hz,6H),1.11(s,3H).ESI-MS m/z计算值615.19183，实验值616.41(M+1)+；保留时间：1.69分钟；LC方法A。
步骤7：(16S)-12-(2,6-二甲基苯基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-18-羧酸叔丁酯
在氮气下向250mL烧瓶中装入(6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.426g，2.314mmol)和无水DMF(70mL)。将混合物在冰中冷却。分两部分添加NaH(60％w/w的783mg，19.58mmol)(60％矿物油分散体)。将混合物在氮气下在0℃下搅拌3.5小时。在搅拌下，将混合物缓慢倒入冰冷的柠檬酸(10％w/v的300mL，156.1mmol)(10％水溶液)中。将所得固体悬浮液用EtOAc(4×60mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到通过硅胶快速色谱法(120g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至10％)纯化的残余物(3.97g)。产物洗脱出约4-5％甲醇。溶剂的蒸发得到呈类无色树脂的(16S)-12-(2,6-二甲基苯基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-18-羧酸叔丁酯(858mg，64％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)残余DMF可见。两个构象异构体(55:45)观察到δ12.59(两个宽s,1H),8.33(2s,1H),7.95(s,2H与残余DMF信号重叠),7.67(br s,2H),7.26(t,J＝7.6Hz,1H),7.12(d,J＝7.6Hz,2H),6.34(br s,1H),5.42(两个br m,1H),4.61-4.38(m,1H),4.23-3.84(m,2H),3.64-3.36(m,2H),3.32-3.09(m,2H),2.04(br s,6H),1.44(两个s,9H).ESI-MS m/z计算值579.21515，实验值580.45(M+1)+；保留时间：1.51分钟；LC方法A。
步骤8：(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(化合物2)
将于DCM(200mL，在冰水浴中冷却)中的(16S)-12-(2,6-二甲基苯基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-18-羧酸叔丁酯(21.68g，33.661mmol)用HCl(4M的80mL，320.00mmol)处理。将溶液在室温下搅拌2小时。将混合物浓缩至干燥。将残余物用DCM/乙醚/己烷(1/1/2，v:v，40mL)研磨。将上清液倾析。将残余物以这种方式处理三次。将所得固体在高真空下干燥48小时，得到呈白色固体的(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(11.88g,66％).1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ10.36(s,1H),9.42(s,1H),8.76(s,1H),7.99-7.89(m,1H),7.76-7.62(m,2H),7.33-7.21(m,1H),7.16-7.10(m,2H),6.39(d,J＝0.9Hz,1H),5.75(m,1H),4.62 -4.41(m,1H),3.74-3.15(m,7H),2.05(s,6H).ESI-MS m/z计算值479.16272，实验值480.1(M+1)+；保留时间：1.42分钟；LC方法W。
步骤9：(16R)-18-(3,3-二甲基丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(化合物1)
在搅拌下将(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(4.7g，9.108mmol)添加到DCM(47mL)中并且将悬浮液用3,3-二甲基丁醛(4.6mL，36.65mmol)处理，随后用乙酸(3.1mL，54.51mmol)处理，并将所得精细凝胶状悬浮液在室温下搅拌50分钟。将悬浮液在冰浴中冷却并在约30秒内缓慢添加氰基硼氢化钠(3.4g，54.10mmol)，导致放热反应。将悬浮液在冰浴中搅拌15分钟，然后将冰浴去除并将悬浮液再搅拌15分钟。将反应混合物添加到搅拌的氯化铵饱和溶液(250mL)中并用乙酸乙酯(250mL)萃取。将有机相用饱和氯化铵溶液(200mL)洗涤一次并用盐水(100mL)洗涤一次。将水相用乙酸乙酯(200mL)反萃取，并且将合并的有机相干燥，过滤并蒸发。将粗产物通过反相色谱法(435g C18，加载有DMSO和几滴6M HCl的液体)用含有5mM HCl的5％乙腈至100％乙腈/水的线性梯度纯化。将不纯的级分通过相同的方法再纯化。将纯物质合并，得到呈类白色固体的(16R)-18-(3,3-二甲基丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(3.56g，64％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.59(s,1H),8.82(s,1H),7.95(t,J＝4.6Hz,1H),7.69(d,J＝4.7Hz,2H),7.27(t,J＝7.6Hz,1H),7.13(d,J＝7.6Hz,2H),6.40(s,1H),5.82(tt,J＝10.5,4.5Hz,1H),4.51(dt,J＝14.8,5.4Hz,1H),3.95-3.61(m,4H),3.55-3.21(m,5H),2.05(s,6H),1.71(dp,J＝17.3,5.9Hz,2H),0.95(s,9H).ESI-MS m/z计算值563.25665，实验值564.0(M+1)+；保留时间：4.75分钟；LC方法A，13.5分钟内的B相的梯度为1-99％。
实例2：化合物3的制备
步骤1：(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-{螺[3.5]壬烷-2-基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物3)
在20mL小瓶中，按照该顺序向螺[3.5]壬烷-2-酮(600mg，4.341mmol)于无水二氯甲烷(40mL)中的搅拌的溶液中添加(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(2.0g，3.876mmol)、N,N-二异丙基乙胺(1.1mL，6.315mmol)和冰乙酸(450μL，7.913mmol)。将所得浅黄色溶液在环境温度下搅拌25分钟，然后立即添加三乙酰氧基硼氢化钠(1.743g，8.224mmol)并再继续搅拌一小时。然后将饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)添加到反应中并将其搅拌20分钟。将不均匀混合物用二氯甲烷(10mL)稀释，并将层分离。将水层用二氯甲烷(2×10mL)萃取。将合并的有机物用盐水(15mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗通过快速色谱法(80g硅胶，30分钟内0-5％甲醇/二氯甲烷)纯化。获得呈白色固体的期望的产物(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-{螺[3.5]壬烷-2-基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(1.649g，70％)。1H NMR(499MHz,DMSO-d6)δ12.75(s,1H),8.44(s,1H),7.95-7.85(m,1H),7.66(d,J＝5.6Hz,2H),7.25(t,J＝7.6Hz,1H),7.12(d,J＝7.6Hz,2H),6.27(s,1H),5.43(t,J＝9.2Hz,1H),4.14(dt,J＝13.9,6.8Hz,1H),3.56(dd,J＝14.5,4.0Hz,1H),3.27(dd,J＝14.4,10.8Hz,1H),3.21-3.08(m,3H),2.94(dd,J＝13.4,7.0Hz,1H),2.73-2.60(m,2H),2.05(s,6H),1.97(t,J＝9.3Hz,2H),1.52(t,J＝9.6Hz,2H),1.44(d,J＝6.0Hz,2H),1.40(d,J＝5.5Hz,4H),1.32(s,4H).ESI-MS m/z计算值601.2723，实验值602.5(M+1)+；保留时间：1.29分钟；LC方法A。
实例3：化合物4的制备
步骤1：(16R)-18-(4,4-二氟环己基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物4)
向小瓶中添加(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(65mg，0.1260mmol)、4,4-二氟环己酮(102mg，0.7605mmol)、5-乙基-2-甲基吡啶硼烷络合物(75μL，0.5038mmol)和乙酸(250μL，4.396mmol)。将反应在35℃下温和加热4小时。将反应用甲醇淬灭，过滤并通过反相HPLC(1％-60％ ACN:水和0.1％ HCl改性剂)纯化，得到呈固体的(16R)-18-(4,4-二氟环己基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(40.1mg，53％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71(t,J＝1.2Hz,1H),8.01-7.92(m,1H),7.78-7.68(m,2H),7.31(t,J＝7.6Hz,1H),7.16(d,J＝7.6Hz,2H),6.30(s,1H),5.80(d,J＝7.1Hz,1H),4.48(dt,J＝15.0,5.8Hz,1H),3.91-3.77(m,3H),3.65(ddt,J＝19.5,13.7,6.8Hz,3H),3.58-3.43(m,1H),3.30(dd,J＝14.5,10.9Hz,1H),2.31-2.14(m,4H),2.06(d,J＝7.5Hz,6H),1.98-1.79(m,3H).ESI-MS m/z计算值597.2221，实验值598.5(M+1)+；保留时间：1.13分钟(LC方法A)。
实例4：化合物5的制备
步骤1：(16R)-18-(4,4-二甲基环己基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(化合物5)
按照该顺序在环境温度下在氮气下向(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(10mg，0.01938mmol)于无水二氯甲烷(0.50mL)中的溶液中添加4,4-二甲基环己酮(5mg，0.03962mmol)、三乙胺(5μL，0.03587mmol)和冰乙酸(2mg，0.03330mmol)。将浅黄色溶液搅拌20分钟，然后在环境温度下添加固三乙酰氧基硼氢化钠(9mg，0.04246mmol)。在搅拌12小时(过夜)之后，添加碳酸氢钠水溶液(1mL)和二氯甲烷(2mL)。将两个层分离，并将水层用二氯甲烷(2×2mL)萃取。将合并的有机萃取物依次用水(2mL)和盐水(2mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗物质溶于DMSO(0.8mL)中，微过滤并通过制备型反相HPLC纯化，用0-99％乙腈/水洗脱15分钟(HCl作为改性剂)。获得呈白色固体的期望的产物(16R)-18-(4,4-二甲基环己基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(8mg，65％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.27(s,1H),8.78(s,1H),7.94(s,1H),7.69(s,2H),7.27(t,J＝7.6Hz,1H),7.13(d,J＝7.6Hz,2H),6.36(s,1H),5.84(s,1H),4.50-4.32(m,1H),3.99-3.83(m,2H),3.80(dd,J＝14.7,4.1Hz,1H),3.66(d,J＝6.0Hz,2H),3.56-3.43(m,2H),3.30(dd,J＝14.3,10.8Hz,1H),2.05(s,6H),1.89(d,J＝12.7Hz,2H),1.74(两个t,J＝12.2Hz,2H),1.52(d,J＝13.1Hz,2H),1.31(t,J＝13.4Hz,2H),0.96(s,3H),0.93(s,3H).ESI-MS m/z计算值589.2723，实验值590.5(M+1)+；保留时间：1.2分钟；LC方法A。
实例5：化合物6的制备
步骤1：(16R)-18-环戊基-12-(2,6-二甲基苯基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮(化合物6)
向测试管中添加(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(12mg，0.02502mmol)、DCE(0.5mL)和DIEA(大约4.204mg，5.666μL，0.03253mmol)。在5分钟之后，添加环戊酮(大约10.52mg，11.06μL，0.1251mmol)和乙酸(大约7.513mg，7.115μL，0.1251mmol)并使反应搅拌1小时。添加氰基硼氢化钠(大约7.862mg，0.1251mmol)，并且使反应在室温下搅拌4小时。将反应用DMF(0.5mL)稀释，过滤并通过反相HPLC使用CAN/水的1％-70％梯度和HCl改性剂纯化。将(16R)-18-环戊基-12-(2,6-二甲基苯基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮(盐酸盐)分离为固体(5.3mg，36.3％)。ESI-MS m/z计算值547.22534，实验值548.1(M+1)+；保留时间：0.94分钟；LC方法A。
实例6：化合物7的制备
步骤1：(16R)-18-(3-叔丁基环丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物7)
向小瓶中添加(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(100mg，0.1938mmol)、3-叔丁基环丁酮(147mg，1.165mmol)、乙酸(400μL，7.034mmol)和5-乙基-2-甲基吡啶硼烷络合物(115μL，0.7725mmol)。将反应加热至35℃并搅拌过夜。将反应用甲醇稀释，过滤并通过HPLC(1％-60％ ACN:水和0.1％ HCl改性剂)纯化，得到呈白色固体的(16R)-18-(3-叔丁基环丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(90.1mg，74％)。ESI-MS m/z计算值589.2723，实验值590.5(M+1)+；保留时间：1.27分钟，LC方法A。
实例7：化合物8的制备
步骤1：(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-{螺[3.4]辛烷-2-基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物8)
向4mL小瓶中装入(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(55mg，0.1066mmol)、螺[3.4]辛烷-2-酮(73mg，0.5879mmol)、无水DCM(1mL)、DIEA(28μL，0.1608mmol)和乙酸(40μL，0.7034mmol)。将小瓶用氮气短暂吹扫，加盖并在室温下搅拌约10分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(66mg，0.3114mmol)。将小瓶用氮气吹扫，加盖并且将反应在室温下搅拌16小时。添加甲醇(100μL)。将DCM蒸发并且将残余物溶于DMSO(1mL)中。将溶液通过PTFE注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化。蒸发得到溶解于DCM/MeOH中以转移到小瓶中的固体。在溶剂的蒸发之后，DCM/己烷中的研磨和蒸发得到呈类白色固体的(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-{螺[3.4]辛烷-2-基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(44mg，65％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.37(broad s,1H),8.83(broad s,1H),7.95(s,1H),7.69(s,2H),7.27(t,J＝7.6Hz,1H),7.13(d,J＝7.7Hz,2H),6.35(br s,1H),5.99-5.82(m,1H),4.47-4.42(m,1H),3.98(h,J＝8.5Hz,1H),3.79(dd,J＝14.6,4.0Hz,1H),3.71-3.59(m,2H),3.52-3.38(m，可能为3H，与水信号重叠)2.40(dq,J＝26.8,10.1,8.9Hz,2H),2.22(q,J＝8.4Hz,2H),2.05(br s,6H),1.72-1.45(m,10H).ESI-MS m/z计算值587.25665，实验值588.6(M+1)+；保留时间：1.16分钟；LC方法A。
实例8：化合物9和化合物10的制备
步骤1：(16R)-18-(2,2-二甲基环丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体1(化合物9)以及(16R)-18-(2,2-二甲基环丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体2(化合物10)
向测试管中添加(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(20mg，0.03876mmol)、2,2-二甲基环丁酮(23mg，0.2344mmol)、5-乙基-2-甲基吡啶硼烷络合物(18μL，0.1209mmol)和乙酸(45μL，0.7913mmol)。将反应在30℃下搅拌过夜。将反应用甲醇淬灭，过滤并通过制备型HPLC(30分钟内1％-50％ MeCN，HCl改性剂)纯化。洗脱的第一非对映异构体是(16R)-18-(2,2-二甲基环丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(0.8mg，7％)ESI-MS m/z计算值561.24097，实验值562.3(M+1)+；保留时间：1.11分钟(非对映异构体1)。洗脱的第二非对映异构体是(16R)-18-(2,2-二甲基环丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(0.8mg，7％)ESI-MS m/z计算值561.24097，实验值562.5(M+1)+；保留时间：1.14分钟(非对映异构体2)，LC方法A。
实例9：化合物11的制备
步骤1：(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-(1-乙基丙基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2-酮(化合物11)
向测试管中添加(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(12mg，0.02502mmol)、DIEA(大约4.204mg，5.666μL，0.03253mmol)和1,2-二氯乙烷(0.5mL)。在5分钟搅拌之后，添加戊烷-3-酮(大约10.78mg，13.26μL，0.1251mmol)、乙酸(大约7.513mg，7.115μL，0.1251mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(大约26.51mg，0.1251mmol)并使反应搅拌过夜。将反应用甲醇淬灭，过滤并通过反相HPLC纯化，得到(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-(1-乙基丙基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2-酮(盐酸盐)(14.9mg，100％)。ESI-MS m/z计算值549.24097，实验值550.4(M+1)+；保留时间：1.12分钟；LC方法A。
实例10：化合物12-34的表征
下表中的化合物是使用本文所描述的可商购试剂和中间体以类似于上文所描述的方式制备的。
表3：
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表4：
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实例11：化合物35的制备
步骤1：(16R)-18-(环丙基甲基)-12-(2,6-二甲基苯基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮(化合物35)
向含有12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(10.5mg，0.02035mmol)的小瓶中添加二氯乙烷(700μL)、环丙烷甲醛(7.7μL，0.1030mmol)和乙酸(6μL，0.1055mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。添加氰基硼氢化钠(7mg，0.1114mmol)，并且使反应在室温下搅拌1小时。通过LCMS分析，反应是完全的。将反应用甲醇淬灭，过滤并通过制备型HPLC使用1％-99％ ACN:水和0.1％ HCl改性剂纯化。(16R)-18-(环丙基甲基)-12-(2,6-二甲基苯基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮(6.8mg，63％)ESI-MS m/z计算值533.20966，实验值534.4(M+1)+；保留时间：0.93分钟分离为白色固体。ESI-MS m/z计算值533.20966，实验值534.4(M+1)+；保留时间：0.93分钟；LC方法A。
实例12：化合物36和化合物37的制备
步骤1：(16R)-18-(3,3-二甲基环戊基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(非对映异构体的混合物)
向小瓶中添加(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(20mg，0.03876mmol)、3,3-二甲基环戊酮(大约21.74mg，0.1938mmol)、5-乙基-2-甲基吡啶硼烷络合物(大约15.70mg，17.31μL，0.1163mmol)和乙酸(大约46.55mg，44.08μL，0.7752mmol)。将反应加热至30℃并搅拌过夜。将反应用甲醇淬灭，过滤并通过制备型HPLC纯化，得到呈非对映异构体的混合物的(16R)-18-(3,3-二甲基环戊基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(11.0mg，49％)。
步骤2：(16R)-18-(3,3-二甲基环戊基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体1(化合物36)以及(16R)-18-(3,3-二甲基环戊基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体2(化合物37)
对(16R)-18-(3,3-二甲基环戊基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(11mg，0.01911mmol)进行手性SFC分离(手性Cel OD(250×10mm)5μm柱，35℃，流动相：22％ MeOH，78％ CO2(无改性剂)，流速：10毫升/分钟，进样体积：70μL，压力：10bar，波长：210nm)，得到洗脱的第一非对映异构体，(16R)-18-(3,3-二甲基环戊基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(2.9mg，50％)。ESI-MS m/z计算值575.25665，实验值576.3(M+1)+；保留时间：1.19分钟；以及洗脱的第二非对映异构体，(16R)-18-(3,3-二甲基环戊基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(3.4mg，58％)。ESI-MS m/z计算值575.25665，实验值576.5(M+1)+；保留时间：1.2分钟(LC方法A)。
实例13：化合物38、化合物39和化合物40的制备
步骤1：(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-(4-氟环己基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮，2:1非对映异构混合物(化合物40)，(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-(4-氟环己基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体1(化合物38)，以及(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-(4-氟环己基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体2(化合物39)
在4mL小瓶中，按照该顺序向4-氟环己酮(35mg，0.3014mmol)于无水1,2-二氯乙烷(1.5mL)中的搅拌的溶液中添加(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(40mg，0.07752mmol)、三乙胺(20μL，0.1435mmol)和冰乙酸(10μL，0.1758mmol)。将所得浅黄色溶液在环境温度下搅拌30分钟，然后添加氰基硼氢化钠(40mg，0.6365mmol)并继续搅拌13小时。将粗物质用DMSO(0.8mL)稀释，微过滤并通过制备型反相HPLC纯化，用1-99％乙腈/水洗脱15分钟(HCl作为改性剂)。获得呈白色固体的呈非对映异构混合物的期望的产物(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-(4-氟环己基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(33mg，69％)。ESI-MS m/z计算值579.23157，实验值580.5(M+1)+；保留时间：1.01分钟(LC方法A)。
将两个非对映异构体通过制备型SFC(柱：手性Cel OD(250×10mm)，5μm；35C；流动相：30％ MeOH(无改性剂)，70％ CO2；流速：10毫升/分钟；浓度：约MeOH中的23mg/mL(无改性剂)；进样体积70μL；压力：179bar；波长：210nm)分离，得到峰1，非对映异构体1，(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-(4-氟环己基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(17.5mg，39％)。1H NMR(500MHz,甲醇-d4)δ8.63(t,J＝1.7Hz,1H),7.99(dt,J＝7.2,1.8Hz,1H),7.74-7.60(m,2H),7.27(t,J＝7.7Hz,1H),7.14(d,J＝7.7Hz,2H),6.18(s,1H),5.61(tt,J＝9.4,4.7Hz,1H),4.82-4.67(m,1H),4.27(ddd,J＝14.3,8.7,5.9Hz,1H),3.66(dd,J＝14.5,4.0Hz,1H),3.38(dd,J＝13.1,5.2Hz,1H),3.30-3.25(m,2H),3.25-3.18(m,1H),3.00(dd,J＝13.1,9.3Hz,1H),2.95(ddd,J＝13.5,8.7,4.6Hz,1H),2.76(dt,J＝10.9,6.4Hz,1H),2.39-1.93(m,8H),1.83-1.72(m,3H),1.72-1.51(m,3H).ESI-MS m/z计算值579.23157，实验值580.4(M+1)+；保留时间：0.97分钟(LC方法A)；以及峰2，非对映异构体2，(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-(4-氟环己基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(9mg，20％)1H NMR(500MHz,甲醇-d4)δ8.61(d,J＝1.8Hz,1H),7.99(dt,J＝7.0,1.9Hz,1H),7.71-7.62(m,2H),7.27(t,J＝7.7Hz,1H),7.14(d,J＝7.7Hz,2H),6.17(s,1H),5.59(tt,J＝9.6,4.7Hz,1H),4.56-4.37(m,1H),4.31-4.23(m,1H),3.65(dd,J＝14.4,4.0Hz,1H),3.35(dd,J＝13.3,5.3Hz,1H),3.29-3.23(m,2H),3.22-3.16(m,1H),3.01-2.87(m,2H),2.77-2.69(m,1H),2.33-2.00(m,8H),1.99-1.90(m,2H),1.61-1.42(m,4H).ESI-MS m/z计算值579.23157，实验值580.4(M+1)+；保留时间：0.98分钟(LC方法A)。
实例14：化合物41的制备
步骤1：(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-{2-氧杂螺[3.5]壬烷-7-基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(化合物41)
向4mL小瓶中装入(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(15mg，0.02907mmol)、无水DCM(1mL)、N,N-二异丙基乙胺(10μL，0.05741mmol)、2-氧杂螺[3.5]壬烷-7-酮(22mg，0.1569mmol)和冰乙酸(10μL，0.1758mmol)。将小瓶用氮气短暂吹扫，加盖并在室温下搅拌约10分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(25mg，0.1180mmol)。将小瓶用氮气吹扫，加盖并且将反应在室温下搅拌13小时(过夜)。添加甲醇(0.25mL)。将挥发物在减压下蒸发，并将残余物溶于DMSO(1mL)中。将溶液微过滤(0.45uM)并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％，HCl作为改性剂)纯化，得到白色固体。(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-{2-氧杂螺[3.5]壬烷-7-基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(4.4mg，23％)1H NMR(499MHz,甲醇-d4)δ8.91(s,1H),8.06(dt,J＝7.7,1.5Hz,1H),7.76(dt,J＝7.7,1.5Hz,1H),7.71(t,J＝7.7Hz,1H),7.28(t,J＝7.7Hz,1H),7.15(d,J＝7.7Hz,2H),6.29(s,1H),6.14-6.04(m,1H),4.73-4.55(m,1H),4.07-3.98(m,1H),3.93(d,J＝7.7Hz,2H),3.85(dt,J＝13.4,6.6Hz,1H),3.75-3.66(m,1H),3.63(s,2H),3.60-3.48(m,2H),3.41(s,2H),3.38-3.32(m,1H),2.11(s,6H),2.03(d,J＝10.3Hz,2H),1.94-1.73(m,4H),1.37(t,J＝13.3Hz,1H),1.11(t,J＝16.7Hz,1H).ESI-MS m/z计算值603.2515，实验值604.4(M+1)+；保留时间：0.92分钟(LC方法A)。
实例15：化合物42和化合物43的制备
步骤1：1,4-二苄基-1,4-二氮杂环庚-6-醇
向N,N'-二苄基乙烷-1,2-二胺(49.97g，48.990mL，205.83mmol)于甲苯(1.2L)中的溶液中缓慢添加1,3-二溴丙-2-醇(45.3g，21.268mL，197.51mmol)和三乙胺(59.95g，82.576mL，592.45mmol)。将溶液回流2天。将溶剂去除并将残余物溶解于水(400mL)中，用乙酸乙酯(300mL×3)萃取。将合并的有机层用水、盐水洗涤，并且用硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用梯度法乙酸乙酯/己烷0-100％纯化，得到呈黄色油的1,4-二苄基-1,4-二氮杂环庚-6-醇(27g，42％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.40-7.18(m,10H),3.81(p,J＝3.7Hz,1H),3.72-3.64(s,4H),2.90-2.66(m,6H),2.47(tdd,J＝8.1,6.7,5.0Hz,2H).ESI-MS m/z计算值296.18887，实验值297.2(M+1)+；保留时间：1.53分钟；LC方法T。
步骤2：6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
将1,4-二苄基-1,4-二氮杂环庚-6-醇(13.36g，45.07mmol)于甲醇(500mL)中的溶液在氮气下吹扫。添加氢氧化钯(3.03g的20％/炭，50％湿，2.16mmol)，将反应混合物在氢气下吹扫，然后在一个氢气大气压下搅拌24小时。将反应混合物在氮气下再次吹扫，然后经硅藻土过滤并用甲醇(约500mL)洗涤。在减压下浓缩，得到呈黄色油的粗二胺。将粗二胺溶解于甲醇(200mL)中并在冰浴中冷却。添加三乙胺(7.6mL，54.5mmol)，然后添加二碳酸二叔丁酯(9.85g，45.1mmol)并且将反应逐渐温热至室温并搅拌过夜。将反应混合物在减压下浓缩，然后悬浮于二氯甲烷(约150mL)和庚烷(约100mL)中。白色蓬松固体析出。将固体滤出并且将滤液吸附在硅胶上并通过220g柱硅胶色谱法纯化，用0％至10％甲醇/二氯甲烷洗脱，得到呈稠密琥珀色油的6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(3.265g，32％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.47(s,9H),2.69-3.12(m,6H),3.14-3.80(m,4H),3.91-4.05(m,1H).ESI-MS m/z计算值216.1474，实验值217.2(M+1)+；保留时间：0.93分钟(LC方法M)。
步骤3：4-{3-[4-氯-6-(2,6-二甲基-苯基)-嘧啶-2-基氨磺酰基]-苯甲酰基}-6-羟基-[1,4]二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在室温下，向3-[4-氯-6-(2,6-二甲基-苯基)-嘧啶-2-基氨磺酰基]-苯甲酸(9.82g，23.5mmol)于二氯甲烷(150mL)中的溶液中添加N,N'-二异丙基碳二亚胺(3.68mL，23.5mmol)。将反应混合物搅拌10分钟。在室温下，在1小时内滴加6-羟基-[1,4]二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(4.53g，20.95mmol)于二氯甲烷(75mL)中的溶液。将反应再搅拌30分钟，并且然后将其用10％柠檬酸水溶液(75mL)淬灭。分离两层。将水层用二氯甲烷(2×150mL)萃取并且将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-80％己烷-丙酮纯化，得到呈粉色固体的4-{3-[4-氯-6-(2,6-二甲基-苯基)-嘧啶-2-基氨磺酰基]-苯甲酰基}-6-羟基-[1,4]二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(7.62g，59％)。ESI-MS m/z计算值615.19，实验值616.0(M1)。保留时间：5.24分钟。
步骤4：12-(2,6-二甲基苯基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(化合物43)
向4-{3-[4-氯-6-(2,6-二甲基-苯基)-嘧啶-2-基氨磺酰基]-苯甲酰基}-6-羟基-[1,4]二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(7.62g，12.37mmol)于无水二甲基甲酰胺(800mL)中的溶液中分几部分添加于矿物油(4.95g，123.7mmol)中的60％悬浮液氢化钠。将反应混合物在室温下搅拌16小时并且然后用10％柠檬酸水溶液(500mL)淬灭。将产物用乙酸乙酯(3×500mL)萃取并且将合并的有机层用盐水(3×500mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-70％己烷-丙酮纯化，得到呈白色固体的16-(2,6-二甲基苯基)-4-氧代-2-氧杂-6-硫杂-7-氮杂-3(6,1)-二氮杂环庚-1(4,2)-嘧啶-5(1,3)-苯并环庚烷-34-羧酸6,6-二氧化物叔丁酯(4.404g，56％)。1H-NMR(250MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.30(d,J＝15.1Hz,1H),7.92(s,1H),7.67(s,2H),7.27(m,1H),7.14(m,2H),6.35(s,1H),5.50(m,1H),4.48(m,1H),3.99(m,2H),3.56(m,1H),3.24(m,5H),2.05(s,6H),1.42(d,J＝10.5Hz,9H).ESI-MS m/z计算值579.21515，实验值580.2(M+1)+；保留时间：4.66分钟。
步骤5：12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物42)
将TFA(12mL，155.8mmol)添加到于DCM(50mL)中的16-(2,6-二甲基苯基)-2-氧杂-6-硫杂-7-氮杂-3(6,1)-二氮杂环庚-1(4,2)-嘧啶-5(1,3)-苯并环庚烷-4-酮6,6-二氧化物(3g，5.175mmol)中。将混合物在室温下搅拌。将溶剂去除并且将粗重悬于DCM/甲苯中并且将混合物在减压下浓缩至干燥(该步骤重复3次)，得到12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(2.3g，93％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.42(s,1H),9.46(s,1H),8.76(s,1H),7.95(s,1H),7.67(s,2H),7.28(s,1H),7.14(s,2H),6.38(s,1H),5.75(s,1H),4.49(s,1H),3.76(s,2H),3.62(s,1H),3.43(s,3H),3.25(s,1H),2.05(s,6H).ESI-MSm/z计算值479.16272，实验值480.0(M+1)+；保留时间：0.69分钟；LC方法A。
实例16：化合物44的制备
步骤1：12-(2,6-二甲基苯基)-18-异丁基-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮(化合物44)
将2-甲基丙醛(大约22.53mg，0.3125mmol)添加到3ml小瓶中的于乙酸(0.5mL)中的12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(30mg，0.06250mmol)中，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(大约132.5mg，0.6250mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌1小时，然后在60℃下搅拌16小时。然后将所述反应混合物冷却至室温，过滤并通过反相HPLC纯化，得到12-(2,6-二甲基苯基)-18-异丁基-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮(4.3mg，13％)。ESI-MS m/z计算值535.22534，实验值536.0(M+1)+；保留时间：1.0分钟；LC方法A。
实例17：化合物45-63的表征
下表中的化合物是使用本文所描述的可商购试剂和中间体以类似于上文所描述的方式制备的。
表5：
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表6：
实例18：化合物64的制备
步骤1：12-(2,6-二甲基苯基)-18-[(吡啶-2-基)甲基]-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物64)和12-(2,6-二甲基苯基)-18-[(吡啶-4-基)甲基]-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮
在分离的小瓶中运行两次反应：将12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(20mg，0.04166mmol)、2-(溴甲基)吡啶(氢溴酸盐)(15mg，0.05930mmol)、TEA(35μL，0.2511mmol)和DMF(0.5mL)合并并在90℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤并在反相HPLC(Waters，HCl，10-60％ ACN-水)上纯化，得到12-(2,6-二甲基苯基)-18-[(吡啶-2-基)甲基]-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(8.5mg，36％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.77(d,J＝9.7Hz,2H),8.10-8.03(m,1H),7.94(s,1H),7.70(d,J＝11.8Hz,3H),7.63-7.56(m,1H),7.26(t,J＝7.6Hz,1H),7.13(d,J＝7.6Hz,2H),6.37(s,1H),5.89(s,1H),4.72(s,2H),4.40(s,1H),3.95-3.91(m,3H),3.42(s,3H),3.30(s,1H),2.70(s,1H),2.20(s,1H),2.05(s,6H),1.90(s,1H).ESI-MS m/z计算值570.2049，实验值571.0(M+1)+；保留时间：0.96分钟(LC方法A)。
在第二小瓶中，将12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(20mg，0.04166mmol)、4-(溴甲基)吡啶(氢溴酸盐)(15mg，0.05930mmol)、TEA(35μL，0.2511mmol)和DMF(0.5mL)合并并在90℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤并在反相HPLC(Waters，HCl，10-60％ ACN-水)上纯化，得到12-(2,6-二甲基苯基)-18-[(吡啶-4-基)甲基]-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮ESI-MS m/z计算值570.2049，实验值571.0(M+1)+；保留时间：0.99分钟(LC方法A)。
实例19：化合物65的制备
步骤1：18-(4,4-二甲基戊基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物65)
将12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(30mg，0.06250mmol)、1-溴-4,4-二甲基-戊烷(16mg，0.08934mmol)、三乙胺(25mg，0.2471mmol)和DMF(0.5mL)合并并在110℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤并在反相HPLC(Waters，HCl，25-75％ ACN-水)上纯化，得到18-(4,4-二甲基戊基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(2mg，6％)ESI-MS m/z计算值577.2723，实验值578.0(M+1)+；保留时间：1.26分钟(LC方法A)。
实例20：化合物66的制备
步骤1：(36R)-16-(2,6-二甲基苯基)-34-(吡啶-3-基甲基)-2-氧杂-6-硫杂-7-氮杂-3(6,1)-二氮杂环庚-1(4,2)-嘧啶-5(1,3)-苯并环庚烷-4-酮-6,6-二氧化物(化合物66)
将12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(20mg，0.04166mmol)、3-(溴甲基)吡啶(氢溴酸盐)(大约15.81mg，0.06249mmol)、TEA(大约16.86mg，23.22μL，0.1666mmol)和DMF(1mL)合并并在120℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤并在反相HPLC(Waters，HCl，25-75％ ACN-水)上纯化，得到(36R)-16-(2,6-二甲基苯基)-34-(吡啶-3-基甲基)-2-氧杂-6-硫杂-7-氮杂-3(6,1)-二氮杂环庚-1(4,2)-嘧啶-5(1,3)-苯并环庚烷-4-酮-6,6-二氧化物(2.6mg，11％)ESI-MS m/z计算值570.2049，实验值571.0(M+1)+；保留时间：0.97分钟(LC方法A)。
实例21：化合物67和化合物68的制备
步骤1：(16R)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物67)
向4mL小瓶中装入(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(25mg，0.04845mmol)、无水DCM(500μL)、DIEA(15μL，0.08612mmol)(溶解所有固体)、苯甲醛(10μL，0.09838mmol)和乙酸(10μL，0.1758mmol)。将小瓶用氮气短暂吹扫，加盖并在室温下搅拌约20分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(20mg，0.09437mmol)。将小瓶用氮气吹扫，加盖并且将反应在室温下搅拌一小时。添加少量甲醇。将DCM蒸发并且将残余物溶于DMSO(1mL)中。将溶液微过滤并通过反相制备型HPLC使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化，得到呈白色固体的(16R)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(17mg，57％)。ESI-MS m/z计算值569.20966，实验值570.44(M+1)+；保留时间：1.07分钟(LC方法A)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6+10％ D2O(在不存在D2O的情况下的宽信号)δ8.67(s,1H),7.96(d,J＝7.8Hz,1H),7.76-7.65(m,2H),7.67-7.51(m,5H),7.31(t,J＝7.9Hz,1H),7.16(d,J＝7.6Hz,2H),6.28(s,1H),5.75(宽s,1H),4.66-4.35(m,3H),3.86-3.51(m,5H),3.51-3.40(m,1H),3.38-3.24(m,1H),2.06(brs,6H).
步骤2：(16R)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物67)，以及(16S)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(化合物68)
将12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(25mg，0.05208mmol)和苯甲醛(25μL，0.2459mmol)在二氯乙烷(0.5mL)中与乙酸(15μL，0.2638mmol)合并。在45分钟之后，添加三乙酰氧基硼氢化钠(45mg，0.2123mmol)，并且将反应在室温下搅拌2小时。此时，转化似乎已经停止，并添加另外的苯甲醛(25μL，0.2459mmol)和乙酸(15μL，0.2638mmol)。在将反应再搅拌一小时之后，添加氰基硼氢化钠(16mg，0.2546mmol)并将反应在室温下再搅拌16小时。此后，将反应混合物用甲醇稀释，过滤并通过反相HPLC(1-70％ ACN/水，HCl改性剂，15分钟运行)纯化，得到18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(22mg，70％)ESI-MS m/z计算值569.20966，实验值570.4(M+1)+；保留时间：0.48分钟(LC方法D)。
然后对该物质进行手性SFC分离(手性Cel OJ-H(250×10mm，5μm柱，流动相：28％MeCN/MeOH(90:10，20mM NH3，72％ CO2，MeCN/MeOH/DMSO(81:9:10)中的浓度14mg/mL，进样体积70μL，100bar，220nm)，得到呈白色固体的每个对映异构体。首先洗脱的峰1，(16R)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(4mg，13％)ESI-MS m/z计算值569.20966，实验值570.5(M+1)+；保留时间：1.16分钟(LC方法A)。，以及其次洗脱的峰2，(16S)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(4.4mg，15％)。ESI-MS m/z计算值569.20966，实验值570.5(M+1)+；保留时间：1.16分钟(LC方法A)。
实例22：化合物69的制备
步骤1：18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮，对映异构体1，以及18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮，对映异构体2
将12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(660mg，1.375mmol)和苯甲醛(大约689.0mg，660.0μL，6.493mmol)在二氯乙烷(13.20mL)中与乙酸(大约418.2mg，396.0μL，6.964mmol)合并。在45分钟之后，添加氰基硼氢化钠(大约422.4mg，6.722mmol)，并且将反应在室温下在室温下搅拌2小时。此后，将反应混合物用甲醇稀释，过滤并通过制备型HPLC(1-70％ ACN/水，HCl改性剂，15分钟运行)纯化，得到18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(750mg，96％)ESI-MS m/z计算值569.20966，实验值570.5(M+1)+；保留时间：1.14分钟，(LC方法A)。然后对该物质进行手性SFC分离(手性Cel OJ-H(250×21.2mm，5μm柱，流动相：MeCN/MeOH(90:10，20mM NH3，72％ CO2，流速70毫升/分钟，MeCN/MeOH/DMSO(81/9/10)中的24mg/mL，进样体积500μL，100bar，220nm)，得到首先洗脱成峰1的呈白色固体的18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(121mg，31％)，ESI-MS m/z计算值569.20966，实验值570.5(M+1)+；保留时间：1.14分钟；LC方法A。将第二异构体丢弃。
步骤2：12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮
将18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(121mg，0.2124mmol)(来自步骤1分离的峰1)溶解于氮气吹扫的烧瓶中的甲醇(22mL)中，并进行短暂的超声处理以帮助溶解起始材料。添加二羟基钯(45mg，0.06409mmol)，并且然后通过从气球向反应中鼓泡15分钟来将反应混合物用氢气吹扫，然后在氢气下搅拌3小时。然后将反应容器用氮气吹扫，并且将反应混合物通过硅藻土过滤，将所述硅藻土用100mL甲醇洗涤。将滤液浓缩，得到白色固体12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(97mg，95％)ESI-MS m/z计算值479.16272，实验值480.3(M+1)+；保留时间：0.79分钟；LC方法A。
步骤3：12-(2,6-二甲基苯基)-18-{2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物69)
向含有12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(28mg，0.05839mmol)的小瓶中添加二氯乙烷(1mL)、2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙醛(44mg，0.2893mmol)和乙酸(17μL，0.2989mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。添加氰基硼氢化钠(19mg，0.3023mmol)，并且使反应在室温下搅拌1小时。将反应用甲醇淬灭，过滤并通过制备型HPLC(1％-99％ACN:水和0.1％ HCl改性剂)纯化，得到呈白色固体的12-(2,6-二甲基苯基)-18-{2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(17.4mg，48％)。ESI-MS m/z计算值615.2127，实验值616.3(M+1)+；保留时间：1.18分钟；LC方法A。
实例23：化合物70的制备
步骤1：6-苄基硫基吡啶-2-甲酸甲酯
在0℃下，向苯基甲硫醇(28.408g，26.800mL，228.72mmol)于THF(600mL)中的溶液中分几部分添加NaH(11.200g，60％w/w，280.03mmol)。将浆液温热至室温并搅拌30分钟，然后以单一部分添加6-溴吡啶-2-羧酸甲酯(50g，231.45mmol)。在3小时之后，将反应用乙醚(800mL)稀释并用水(400mL)和饱和碳酸氢钠(50mL)淬灭。将层分离，并且将有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并在减压下浓缩，得到呈黄色油的6-苄基硫基吡啶-2-甲酸甲酯(56.35g，89％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ7.84–7.77(m,1H),7.77–7.73(m,1H),7.52(m,1H),7.48(d,J＝7.8Hz,2H),7.28(t,J＝7.2,7.2Hz,2H),7.24–7.18(m,1H),4.44(s,2H),3.90(d,J＝1.2Hz,3H).ESI-MS m/z计算值259.0667，实验值260.1(M+1)+；保留时间：3.2分钟；LC方法T。
步骤2：6-氯磺酰基吡啶-2-羧酸甲酯
在-1-0℃冰浴中冷却6-苄基硫基吡啶-2-甲酸甲酯(121.62g，431.47mmol)于DCM(950mL)和DI水(300mL)中的溶液，并在剧烈搅拌下滴加磺酰氯(228.14g，140mL，1.6396mol)，同时维持温度低于5℃。在添加之后，将有机相分离，用DI水(2×500mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空下浓缩。将残余物溶解于DCM(500mL)中。添加己烷(1000mL)并且将DCM缓慢蒸发掉。将白色沉淀通过真空过滤并且将固体用己烷(2×500mL)洗涤。收集过滤出的固体。将滤液中的残余固体过滤并溶解于DCM(500mL)中。将DCM溶液转移到1L圆底烧瓶中并在真空下浓缩。将残余物溶解于DCM(200mL)中。添加己烷(600mL)并且将DCM缓慢蒸发掉。将白色沉淀通过真空过滤并将固体用己烷(2×500mL)洗涤。在干燥之后，分离出6-氯磺酰基吡啶-2-羧酸甲酯(56.898g，55％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.48(dd,J＝7.8,1.1Hz,1H),8.31(dd,J＝7.9,1.1Hz,1H),8.25(t,J＝7.8Hz,1H),4.08(s,3H).ESI-MS m/z计算值234.97061，实验值236.1(M+1)+；保留时间：1.74分钟；LC方法T。
步骤3：6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸甲酯
将溶解于无水THF(680mL)中的4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺(16.63g，71.161mmol)和6-氯磺酰基吡啶-2-羧酸甲酯(16.8g，71.294mmol)的溶液冷却至-78℃。然后滴加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1M的143mL，143.00mmol)于THF中的溶液。使混合物缓慢温热至0℃并且然后添加1M HCl水溶液(146mL)，随后添加DI水(680mL)。将THF蒸发并且用氯仿(3×250mL)萃取水相。将合并的有机层用饱和NaCl水溶液(300mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空下浓缩。将粗在10％丙酮/己烷(500mL)中重结晶。将白色沉淀过滤并用丙酮(2×100mL)漂洗，得到6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸甲酯(15.79g，50％)。ESI-MS m/z计算值432.06592，实验值433.3(M+1)+；保留时间：5.5分钟；LC方法S。
步骤4：6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸
向6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸甲酯(15.79g，36.477mmol)于THF(180mL)中的溶液中添加氢氧化钠水溶液(1M的182mL，182.00mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将THF蒸发并且将水层用乙醚(2×200mL)洗涤。将水层用1M HCl水溶液(250mL)酸化至pH 2。将沉淀过滤并且将白色固体用DI水(2×250mL)漂洗。将固体在真空下干燥，得到6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸(14.3444g，93％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ8.14-7.99(m,3H),7.21-7.11(m,1H),7.03(d,J＝7.7Hz,2H),6.92(s,1H),1.78(s,6H).ESI-MS m/z计算值418.05026，实验值419.1(M+1)+；保留时间：2.61分钟；LC方法T。
步骤5：1,4-二氮杂环庚-6-醇
将Pd(OH)2/炭(6g，8.5mmol，20wt％)添加到1,4-二苄基-1,4-二氮杂环庚-6-醇(54g，182mmol)于MeOH(1400mL)中的溶液中。将混合物在氢气气氛下氢化16小时。将反应经硅藻土过滤并浓缩，得到呈无色油的1,4-二氮杂环庚-6-醇(20.6g，92％)。ESI-MS m/z计算值116.09496，实验值117.3(M+1)+；保留时间：0.78分钟；LC方法T。
步骤6：6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯
在0C下，向1,4-二氮杂环庚-6-酮(7.17g，58.6mmol)于MeOH(100ML)中的溶液中缓慢添加三氟乙酸乙酯(7.2mL，59.9mmol)。将溶液在室温下搅拌1小时。然后，将反应冷却至0C，缓慢添加TEA(10.0mL，69.6mmol)和氯甲酸苄酯(2.7M的22mL，59.4mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。添加于水(5mL)中的碳酸钾(13g，94.1mmol)。将反应在40℃下搅拌14小时。在过滤之后，将溶剂在减压下去除。将残余物通过硅胶色谱法使用MeOH/乙酸乙酯0-60％的梯度纯化，得到呈无色油的6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯(3.6g，23％)。1H NMR(250MHz,CD3OD)δ7.66-7.08(m,5H),5.14(s,2H),4.14-3.87(m,1H),3.84-3.61(m,2H),3.59-3.36(m,2H),3.16-2.76(m,4H).ESI-MS m/z计算值250.13174，实验值251.3(M+1)+；保留时间：1.81分钟；LC方法T。
步骤7：4-(3,3-二甲基丁基)-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯
将于DCE(5mL)中的6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯(608.5mg，2.431mmol)与3,3-二甲基丁醛(460μL，3.665mmol)、乙酸(500μL，8.792mmol)合并，并在室温下搅拌1小时。然后添加氰基硼氢化钠(760mg，12.09mmol)，并且将反应在室温下搅拌90分钟。将粗过滤并通过反相制备型色谱法使用C18柱和含有5mM盐酸的1至50％乙腈/水的15分钟梯度洗脱剂纯化，得到4-(3,3-二甲基丁基)-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯(547.6mg，67％)。ESI-MS m/z计算值334.22565，实验值335.0(M+1)+；保留时间：0.98分钟；LC方法A。
步骤8：18-(3,3-二甲基丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22,23-六氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(化合物70)
阶段1：将6-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸(170mg，0.4059mmol)和4-(3,3-二甲基丁基)-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯(135mg，0.4036mmol)合并，并溶解于四氢呋喃(1.5mL)中。添加叔丁醇钠(97mg，1.009mmol)。使反应混合物在50℃下搅拌3小时。添加更多叔丁醇钠(97mg，1.009mmol)和四氢呋喃(1.5mL)并将反应在室温下继续18小时。将反应混合物冷却至室温，过滤并通过反相制备型色谱法使用C18柱和含有5mM盐酸的10至60％乙腈/水的15分钟梯度洗脱剂纯化，得到6-[[4-[[1-苄氧羰基-4-(3,3-二甲基丁基)-1,4-二氮杂环庚-6-基]氧]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸(29.8mg，10％)ESI-MS m/z计算值716.2992，实验值716.0(M+1)+；保留时间：1.3分钟(LC方法A)，以及6-[[4-[[1-(3,3-二甲基丁基)-1,4-二氮杂环庚-6-基]氧]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸(45.5mg，18％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.31-8.20(m,2H),8.18-8.11(m,1H),7.29(t,J＝7.6Hz,1H),7.16(d,J＝7.6Hz,2H),6.30(d,J＝20.3Hz,1H),3.85-3.74(m,2H),3.57(ddd,J＝21.9,10.1,6.1Hz,2H),3.46-3.23(m,3H),3.22-2.80(m,4H),2.24-2.08(m,6H),1.73-1.43(m,2H),0.91(d,J＝16.9Hz,9H).ESI-MS m/z计算值582.26245，实验值583.0(M+1)+；保留时间：0.92分钟(LC方法A)。
阶段2：将6-[[4-[[1-(3,3-二甲基丁基)-1,4-二氮杂环庚-6-基]氧]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]吡啶-2-羧酸(45.5mg，18％)、HATU(100mg，0.2630mmol)、DIEA(300μL，1.722mmol)和DMF(1mL)在室温下搅拌30分钟。将粗过滤并通过反相制备型色谱法使用C18柱和含有5mM盐酸的1至50％乙腈/水的15分钟梯度洗脱剂纯化，得到18-(3,3-二甲基丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22,23-六氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(1.8mg，1％)。ESI-MS m/z计算值564.2519，实验值565.0(M+1)+；保留时间：1.03分钟(LC方法A)。
实例24：化合物71的制备
步骤1：2-[(2R)-3-(叔丁氨基)-2-羟基丙基]异吲哚啉-1,3-二酮
向压力容器中装入2-甲基丙烷-2-胺(2.16g，29.534mmol)和2-[[(2S)-环氧烷-2-基]甲基]异吲哚啉-1,3-二酮(5g，24.607mmol)于异丙醇(160mL)中的溶液。将反应混合物在85℃下搅拌过夜。将异丙醇在减压下蒸发。将残余物通过硅胶色谱法(DCM/MeOH＝100/0-90/10)纯化，得到呈白色固体的2-[(2R)-3-(叔丁氨基)-2-羟基丙基]异吲哚啉-1,3-二酮(5.65g，78％)。ESI-MS m/z计算值276.1474，实验值277.2(M+1)+；保留时间：1.78分钟；LC方法T。
步骤2：2-[(2R)-3-(叔丁氨基)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-丙基]异吲哚啉-1,3-二酮
向2-[(2R)-3-(叔丁氨基)-2-羟基丙基]异吲哚啉-1,3-二酮(4.8g，16.328mmol)和咪唑(2.223g，32.654mmol)于DMF(60mL)中的溶液中添加叔丁基-氯-二甲基-硅烷(4.925g，32.676mmol)。将反应混合物在室温下搅拌36小时。将咪唑(0.74g，10.87mmol)和叔丁基-氯-二甲基-硅烷(1.64g，10.87mmol)添加到反应混合物中并将其搅拌60小时。将反应混合物用盐水(150mL)淬灭，并将水层用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×150mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至10％ MeOH/DCM纯化，得到呈浅黄色液体的2-[(2R)-3-(叔丁氨基)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-丙基]异吲哚啉-1,3-二酮(4.47g，68％)。ESI-MS m/z计算值390.23386，实验值391.7(M+1)+；保留时间：3.25分钟；LC方法T。
步骤3：2-[叔丁基-[(2R)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-3-(1,3-二氧异吲哚啉-2-基)丙基]氨基]乙酸乙酯
向2-[(2R)-3-(叔丁氨基)-2-(1-甲基-1-三甲基甲硅烷基-乙氧基)丙基]异吲哚啉-1,3-二酮(4.85g，12.045mmol)于DCM(150mL)中的溶液中添加2-氧代乙酸乙酯(2.459g，50％w/w，12.043mmol)，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(2.553g，12.046mmol)。将反应混合物在室温下搅拌。每隔2小时向反应混合物中添加2-氧代乙酸乙酯(2.459g，50％w/w，12.043mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(2.553g，12.046mmol)，在2天内总共添加10次。将反应混合物用饱和碳酸氢钠(150mL)淬灭并搅拌0.5小时。将两个层分离，并将水层用二氯甲烷(3×120mL)萃取。将合并的二氯甲烷层用盐水(250mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(己烷/EtOAc＝100/0-60/40)纯化，得到呈澄清油的2-[叔丁基-[(2R)-3-(1,3-二氧异吲哚啉-2-基)-2-(1-甲基-1-三甲基甲硅烷基-乙氧基)丙基]氨基]乙酸乙酯(5.22g，91％)。ESI-MS m/z计算值476.27066，实验值477.5(M+1)+；保留时间：3.61分钟；LC方法T。
步骤4：(6S)-4-叔丁基-6-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-1,4-二氮杂环庚-2-酮
向2-[叔丁基-[(2R)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-3-(1,3-二氧异吲哚啉-2-基)丙基]氨基]乙酸乙酯(5.22g，11.283mmol)于乙醇(150mL)中的溶液中添加水合肼(2.8244g，3.76mL，41.186mmol)。将反应混合物在85℃下搅拌18小时。在冷却至室温之后，将溶剂在减压下去除。将残余物用水10％ NaOH(水溶液)(100mL)稀释，并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至40％丙酮/己烷纯化，得到呈浅黄色固体的(6S)-4-叔丁基-6-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-1,4-二氮杂环庚-2-酮(2.6g，77％)。ESI-MS m/z计算值300.2233，实验值301.5(M+1)+；保留时间：2.67分钟；LC方法T。
步骤5：(6R)-4-叔丁基-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
阶段1：在0℃下，向(6S)-4-叔丁基-6-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-1,4-二氮杂环庚-2-酮(2.6g，8.6519mmol)于无水THF(55mL)中的溶液中缓慢添加LAH(1.97g，51.905mmol)。将反应混合物在40℃下搅拌9小时。将反应在冰浴中冷却至0℃，并将其用乙醚(50mL)稀释。将反应用水(2.1mL)、15％ NaOH(2.1mL)和水(6.3mL)淬灭，并将其在室温下搅拌30分钟。将白色沉淀通过硅藻土垫过滤去除，并用THF(3×25mL)洗涤。将合并的滤液真空浓缩。
阶段2：将残余物溶解于THF(20mL)中，并添加NaOH水溶液(17.3g，10％w/w，43.253mmol)，随后添加Boc酸酐(1.98g，9.0723mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。添加水(50mL)和乙酸乙酯(30mL)。将有机层分离，并将水层用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过硅胶色谱法使用0至50％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈白色固体的(6R)-4-叔丁基-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.86g，78％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ4.61(t,J＝5.4Hz,1H),3.80-3.64(m,1H),3.64-3.43(m,2H),3.13-2.60(m,4H),2.47-2.25(m,2H),1.39(s,9H),1.01(s,9H).ESI-MS m/z计算值272.21，实验值273.3(M+1)+；保留时间：1.13分钟；LC方法W。
步骤6：(6S)-1-叔丁基-1,4-二氮杂环庚-6-醇
向100mL圆底烧瓶中装入(6R)-4-叔丁基-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.04g，3.818mmol)和二噁烷(3mL)。在固体的溶解之后，添加HCl(4M的12mL，48.00mmol)(4M二噁烷溶液)并且将混合物在室温下搅拌3小时。在减压下移除挥发物。将固体用DCM/MeOH和己烷处理并将溶剂蒸发。将操作重复3次。在真空中干燥得到呈白色泡沫状固体的(6S)-1-叔丁基-1,4-二氮杂环庚-6-醇(二盐酸盐)(1.018g，100％)。ESI-MS m/z计算值172.15756，实验值173.09(M+1)+；保留时间：0.15分钟；LC方法A。
步骤7：3-[(6R)-4-叔丁基-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(6S)-1-叔丁基-1,4-二氮杂环庚-6-醇(二盐酸盐)(384mg，1.441mmol)、无水DMF(6mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(504mg，1.206mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(1.4mL，8.038mmol)和HATU(580mg，1.525mmol)并将混合物在0℃下搅拌19分钟(在10分钟之后通过LCMS完成)。将反应通过在剧烈搅拌下倒入柠檬酸(10％w/v的50mL，26.02mmol)(10％水溶液)中来淬灭并在冰中冷却。将所得白色固体过滤并用水洗涤。将湿固体溶解于DCM中并将溶液经硫酸钠干燥。在溶剂的蒸发之后，将残余物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(80g柱)使用甲醇(60分钟内0至10％)/二氯甲烷的梯度纯化。产物洗脱出约5-6％甲醇。溶剂的蒸发得到呈白色固体的3-[(6R)-4-叔丁基-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(158mg，23％)。ESI-MS m/z计算值571.202，实验值572.28(M+1)+；保留时间：1.27分钟(LC方法A)。
步骤8：(16R)-18-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物71)
在氮气下向100mL烧瓶中装入3-[(6R)-4-叔丁基-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(155mg，0.2709mmol)和无水DMF(8mL)。将混合物在冰中冷却。一次性添加NaH(60％w/w的93mg，2.325mmol)(60％矿物油分散体)。将混合物在氮气下在0℃下搅拌10分钟。将冰浴去除，并且将反应在氮气下剧烈搅拌4小时。在搅拌下，将反应混合物缓慢倒入冰冷的柠檬酸(10％w/v的40mL，20.82mmol)水溶液中。将所得固体悬浮液用EtOAc(3×40mL)萃取。在水相(pH＝2)中检测到大量产物。将水相使用饱和碳酸钠水溶液中和至pH＝6并将剩余的产物用EtOAc(50mL)萃取。将组合的萃取物经硫酸钠干燥并且将溶剂蒸发。在溶剂的蒸发之后，将残余物溶解于DMSO(4mL)中。将溶液通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化，得到89mg的含有大量杂质的产物。将产物溶解于DMSO(2mL)中并使用21.2×50mm C18柱和乙腈/水的较浅梯度(25分钟内1至50％)(HCl作为改性剂)再次纯化。蒸发和DCM/MeOH/己烷中的研磨在蒸发之后得到呈白色固体的(16R)-18-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(58mg，37％)。1H NMR(499MHz,DMSO-d6+10％ D2O)δ8.69(s,1H),7.97-7.89(m,1H),7.72-7.61(m,2H),7.25(t,J＝7.6Hz,1H),7.11(d,J＝7.7Hz,2H),6.23(s,1H),5.70(宽s,1H),4.41-4.26(m,1H),3.88(d,J＝12.8Hz,1H),3.80(d,J＝13.6Hz,1H),3.76-3.69(m,1H),3.62(t,J＝12.0Hz,1H),3.56-3.42(m,2H),3.28(dd,J＝14.5,10.8Hz,1H),2.02(br s,6H),1.43(s,9H).ESI-MS m/z计算值535.22534，实验值536.6(M+1)+；保留时间：0.9分钟；LC方法A。
实例25：化合物72和化合物73的制备
步骤1：2-[(2R)-2-羟基-3-(1,2,2-三甲基丙氨基)丙基]异吲哚啉-1,3-二酮
向圆底烧瓶中装入3,3-二甲基丁烷-2-胺(6.985g，69.029mmol)和2-[[(2S)-环氧烷-2-基]甲基]异吲哚啉-1,3-二酮(11.689g，57.524mmol)于异丙醇(150mL)中的溶液。将反应混合物回流过夜。将异丙醇在真空下去除。将残余物通过硅胶色谱法使用0至10％甲醇/二氯甲烷(用1％氢氧化铵缓冲)纯化，得到呈黄色油的2-[(2R)-2-羟基-3-(1,2,2-三甲基丙氨基)丙基]异吲哚啉-1,3-二酮(15.588g，89％)，其在静置之后固化。产物是非对映异构体的混合物。ESI-MS m/z计算值304.17868，实验值305.2(M+1)+；保留时间：2.47分钟；LC方法S。
步骤2：2-[(2R)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-3-(1,2,2-三甲基丙氨基)丙基]异吲哚啉-1,3-二酮
向2-[(2R)-2-羟基-3-(1,2,2-三甲基丙氨基)丙基]异吲哚啉-1,3-二酮(15.588g，50.187mmol)和咪唑(6.8329g，100.37mmol)于DMF(155.88mL)中的溶液中添加叔丁基-氯-二甲基-硅烷(15.128g，100.37mmol)。将反应混合物在室温下搅拌4天。将反应混合物用盐水(250mL)淬灭，并将水层用乙酸乙酯(3×250mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×250mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至30％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈浅黄色液体的2-[(2R)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-3-(1,2,2-三甲基丙氨基)丙基]异吲哚啉-1,3-二酮(20.693g，96％)。产物是非对映异构体的混合物。ESI-MS m/z计算值418.26517，实验值419.2(M+1)+；保留时间：4.99分钟；LC方法S。
步骤3：2-[[(2R)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-3-(1,3-二氧异吲哚啉-2-基)丙基]-(1,2,2-三甲基丙基)氨基]乙酸乙酯
向2-[(2R)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-3-(1,2,2-三甲基丙氨基)丙基]异吲哚啉-1,3-二酮(10.83g，25.093mmol)于二氯甲烷(300mL)中的溶液中添加乙酸(7.5341g，7.1346mL，125.46mmol)。将2-氧代乙酸乙酯(30.741g，50％w/w，150.56mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(53.182g，250.93mmol)分几批(在2小时内)交替添加到反应混合物中，并将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用饱和碳酸氢钠(300mL)淬灭并搅拌1小时。将两个层分离，并将水层用二氯甲烷(2×300mL)萃取。将合并的二氯甲烷层用盐水(200mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至20％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈澄清油(非对映异构体的混合物)的2-[[(2R)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-3-(1,3-二氧异吲哚啉-2-基)丙基]-(1,2,2-三甲基丙基)氨基]乙酸乙酯(8.431g，65％)。ESI-MS m/z计算值504.3019，实验值505.3(M+1)+；保留时间：5.87分钟(异构体A)，保留时间：6.44(异构体B)，LC方法S
步骤4：(6S)-6-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-4-(1,2,2-三甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-2-酮
向2-[[(2R)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-3-(1,3-二氧异吲哚啉-2-基)丙基]-(1,2,2-三甲基丙基)氨基]乙酸乙酯(8.431g，16.203mmol)于乙醇(150mL)中的溶液中添加水合肼(5.5557g，81.015mmol)。将反应在80℃下搅拌4天。在冷却至室温之后，将溶剂在减压下去除。将残余物用水10％ NaOH(水溶液)(100mL)稀释，并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至30％丙酮/己烷纯化，得到呈浅黄色油的(6S)-6-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-4-(1,2,2-三甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-2-酮(4.4332g，79％)。产物是非对映异构体的混合物。ESI-MS m/z计算值328.2546，实验值329.1(M+1)+；保留时间：4.19分钟；LC方法S。
步骤5：(6R)-6-羟基-4-(1,2,2-三甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
阶段1：在0℃下，向(6S)-6-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-4-(1,2,2-三甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-2-酮(4.4332g，12.818mmol)于无水THF(50mL)中的溶液中缓慢添加LAH(2.9190g，76.908mmol)。将反应混合物在40℃下搅拌过夜。将反应在冰浴中冷却至0℃，并将其用乙醚(50mL)稀释。将反应用水(3mL)、15％ NaOH(3mL)和水(9mL)淬灭，并将其在室温下搅拌30分钟。将白色沉淀通过硅藻土垫过滤去除并用THF(3×10mL)洗涤。将合并的滤液真空浓缩。
阶段2：将残余物溶解于THF(30mL)中，并添加NaOH水溶液(999.93g，10％w/w的25mL，2.5000mol)，随后添加Boc酸酐(4.1962g，4.4171mL，19.227mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将挥发物在真空下去除。将水溶液残余物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至50％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈澄清油的(6R)-6-羟基-4-(1,2,2-三甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(2.3853g，61％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ4.77-4.61(m,1H),3.90-3.44(m,3H),3.09-2.13(m,8H),1.38(s,9H),0.98-0.88(m,3H),0.85(s,4H),0.83(s,5H).产物是非对映异构体的混合物。ESI-MS m/z计算值300.2413，实验值301.6(M+1)+；保留时间：1.54分钟；LC方法W。
步骤6：(6S)-1-(1,2,2-三甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-6-酮
在环境温度下在氮气下，向(6R)-6-羟基-4-(1,2,2-三甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.10g，3.661mmol)于无水二噁烷(12mL)中的搅拌的溶液中添加于二噁烷中的4M氯化氢(4M的9.2mL，36.80mmol)。将橙色溶液搅拌1小时，然后将挥发物在减压下去除。向残余物中添加甲苯(20mL)，在减压下浓缩。将过程用甲苯重复三次并在真空下干燥4小时。将粗物质不经任何纯化直接进入下一步骤。(6S)-1-(1,2,2-三甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-6-酮(二盐酸盐)(1.00g，100％)。1H NMR(499MHz,DMSO-d6)δ4.65-4.36(m,1H),4.14-4.00(m,1H),3.75-3.62(m,3H),3.53-3.35(m,3H),3.31
-3.15(m,2H),1.36-1.23(m,3H),1.07(s,9H).
步骤7：N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-[(6R)-6-羟基-4-(1,2,2-三甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]苯磺酰胺
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(6S)-1-(1,2,2-三甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-6-酮(二盐酸盐)(500mg，1.830mmol)、无水DMF(15mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(690mg，1.651mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。将N,N-二异丙基乙胺(1.8mL，10.33mmol)和HATU(765mg，2.012mmol)添加到反应中并将混合物在0℃下搅拌10分钟。将反应通过在剧烈搅拌下倒入柠檬酸(10％w/v的50mL，26.02mmol)(10％水溶液)中来淬灭，同时在冰浴中冷却。由于固体形成不良，所得白色固体没有过滤。将产物用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机物用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩成淡黄色固体。将粗固体溶解于DCM(2mL)中并通过快速色谱法(120g硅胶柱)使用0-5％甲醇/二氯甲烷纯化30分钟。产物洗脱出约2-3％甲醇。挥发物的蒸发和在真空中的进一步干燥得到呈类白色泡沫状固体的N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-[(6R)-6-羟基-4-(1,2,2-三甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]苯磺酰胺(盐酸盐)(721mg，69％)。1H NMR(499MHz,DMSO-d6)δ12.36(s,1H),7.98-7.84(m,2H),7.64(q,J＝6.9Hz,1H),7.58(q,J＝8.2Hz,1H),7.30(d,J＝4.8Hz,1H),7.24(td,J＝7.7,2.3Hz,1H),7.10(dd,J＝7.6,5.1Hz,2H),5.75(s,1H),4.89(s,1H),3.82-3.67(m,1H),3.40(dd,J＝14.1,5.1Hz,1H),3.21-2.96(m,2H),2.93-2.79(m,2H),2.66-2.55(m,1H),2.46-2.38(m,1H),2.23-2.11(m,1H),1.93-1.82(m,6H),0.98-0.85(m,7H),0.74(s,5H)。ESI-MS m/z计算值599.2333，实验值600.4(M+1)+；保留时间：1.4分钟；LC方法A。
步骤8：(16R)-18-(3,3-二甲基丁烷-2-基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体1(化合物72)，以及(16R)-18-(3,3-二甲基丁烷-2-基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体2(化合物73)
在氮气下，向250mL烧瓶中装入N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-[(6R)-6-羟基-4-(1,2,2-三甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]苯磺酰胺(盐酸盐)(500mg，0.7854mmol)和无水DMF(25mL)。将混合物在冰浴中冷却。以几乎相等的两部分添加氢化钠(60％w/w的300mg，7.501mmol)(60％矿物油分散体)。将混合物在氮气下在0℃下搅拌7小时。将冰水浴去除并且使反应在30分钟内温热至环境温度并继续再搅拌2.5小时(总共7小时)。在搅拌下，将混合物缓慢倒入冰冷的柠檬酸(10％w/v的100mL，52.05mmol)(10％水溶液)中。将所得乳液用EtOAc(4×50mL)萃取。将合并的有机物依次用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，然后经无水硫酸钠干燥并在过滤。在减压下的挥发物的蒸发得到残余物(450mg)，将所述残余物通过硅胶色谱法(40g柱)使用0至5％甲醇/二氯甲烷纯化25分钟，然后经35分钟梯度再次纯化，得到198mg的固体。通过制备型反相HPLC(C18，1-99％乙腈/水(含有5mM HCl))纯化15分钟得到两个非对映异构体：首先洗脱的非对映异构体1，(16R)-18-(3,3-二甲基丁烷-2-基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(84mg，36％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.86-8.69(m,1H),7.99-7.86(m,1H),7.78-7.58(m,2H),7.26(d,J＝8.1Hz,1H),7.14(d,J＝7.6Hz,2H),6.35(s,1H),6.08-5.92(m,1H),4.45-4.30(m,1H),4.23-4.07(m,1H),3.91-3.74(m,2H),3.73-3.51(m,5H),2.06(s,6H),1.40(d,J＝6.7Hz,2H),1.11(s,7H),0.92(s,3H).(嵌入在tBu峰之一中的Me质子之一)。ESI-MS m/z计算值563.25665，实验值564.3(M+1)+；保留时间：1.39分钟，(LC方法A)；以及其次洗脱的非对映异构体2，(16R)-18-(3,3-二甲基丁烷-2-基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(77mg，33％)。ESI-MS m/z计算值563.25665，实验值564.4(M+1)+；保留时间：1.52分钟(LC方法A)。
实例26：化合物74的制备
步骤1：(6R)-6-羟基-4-(2-硝基苯基)磺酰基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯
在100mL小瓶中，向(6R)-1-(2-硝基苯基)磺酰基-1,4-二氮杂环庚-6-醇(1.92g，6.372mmol)于无水二氯甲烷(30mL)中的溶液中添加三乙胺(1.4mL，10.04mmol)，随后在氮气下在0-5℃(冰水浴)下滴加氯甲酸苄酯(1.1mL，7.705mmol)。使反应逐渐温热至室温并继续搅拌过夜(12小时)。将挥发物在减压下去除并将残余物用二氯甲烷(30mL)和水(20mL)处理。将层分离，并将水层用二氯甲烷(20mL)再次萃取。将合并的有机层(经硫酸钠)干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗物质通过硅胶(40g)柱色谱法纯化，用0-5％甲醇/二氯甲烷洗脱20分钟，得到呈浅橙色胶的期望的(6R)-6-羟基-4-(2-硝基苯基)磺酰基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯(2.43g，88％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.02(ddd,J＝9.2,7.6,1.7Hz,1H),7.84-7.75(m,3H),7.45-7.22(m,5H),5.14(two d,J＝12.2Hz,2x 1H),4.00-3.91(m,2H),3.86(dd,J＝13.5,7.1Hz,1H),3.71(td,J＝12.8,12.3,5.4Hz,2H),3.50-3.38(m,1H),3.38-3.33(m,0.5H),3.29-3.25(m,0.5H),3.24-3.09(m,2H).ESI-MS m/z计算值435.11002，实验值436.3(M+1)+；保留时间：1.36分钟；LC方法A。
步骤2：(6S)-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯
在环境温度下在氮气下，按照该顺序向(6R)-6-羟基-4-(2-硝基苯基)磺酰基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯(2.420g，5.557mmol)于无水DMF(20mL)中的搅拌的溶液中添加碳酸钾(5.0g，36.18mmol)和苯硫酚(2.0mL，19.48mmol)。在该温度下搅拌1小时之后，将固体通过过滤去除并将滤液在减压下浓缩。将粗干燥加载到硅藻土上并用硅胶色谱法[40g硅胶，用0至15％甲醇/二氯甲烷的梯度洗脱(通过ELSD监测)纯化。获得呈玻璃状物质的期望的化合物(6S)-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯(1.0g，72％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.40-7.28(m,5H),5.16(d,J＝12.5Hz,1H),5.13(d,J＝12.5Hz,1H),3.94(dtd,J＝10.2,5.9,5.2,2.4Hz,1H),3.78(ddd,J＝14.3,4.8,2.6Hz,1H),3.68(dtd,J＝14.0,6.8,4.5Hz,1H),3.51-3.42(m,1H),3.42-3.35(m,1H),3.04-2.96(m,1H),2.94(d,J＝3.3Hz,1H),2.88(dddd,J＝12.6,7.0,5.4,2.8Hz,2H).ESI-MS m/z计算值250.13174，实验值251.2(M+1)+；保留时间：0.63分钟(LC方法A)。
步骤3：(6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯
在0-5℃下在氮气下，向3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.01g，2.366mmol)于无水DMF(15mL)中的溶液中添加二异丙基乙胺(2.1mL，12.06mmol)，随后添加HATU(945mg，2.485mmol)。在搅拌2分钟之后，添加(6S)-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯(592mg，2.365mmol)于无水DMF(2mL)中的溶液。将反应混合物搅拌10分钟，然后倒入10％柠檬酸水溶液(75mL)中并用乙酸乙酯(30mL)萃取。将水层用乙酸乙酯(2×25mL)再萃取并且将合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(40g柱)，使用0-10％甲醇(期望的峰出现在5％甲醇附近)，得到呈白色固体的(6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯(1.025g，67％)。ESI-MS m/z计算值649.1762，实验值650.4(M+1)+；保留时间：1.74分钟；LC方法A。
步骤4：(16S)-12-(2,6-二甲基苯基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-18-羧酸苄酯
在5℃(冰水浴)下在氮气下，向(6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯(989mg，1.521mmol)于无水DMF(50mL)中的溶液中一次性添加氢化钠(730mg，18.25mmol)。将反应混合物在该温度下搅拌2小时，然后倒入10％柠檬酸水溶液(60mL)中。将产物用乙酸乙酯(3×40mL)萃取并且将合并的有机层用盐水(3×40mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(80g柱)使用0-5％甲醇/二氯甲烷纯化35分钟，得到呈白色固体的(16S)-12-(2,6-二甲基苯基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-18-羧酸苄酯(411mg，44％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.46(两个宽s,1H),8.05-7.98(m,1H),7.72-7.64(m,2H),7.45(d,J＝7.6Hz,1H),7.39(d,J＝7.1Hz,1H),7.31(td,J＝8.3,7.8,2.7Hz,2H),7.27-7.18(m,2H),7.13(d,J＝7.6Hz,2H),6.23(two s,1H),5.70-5.51(m,1H),5.27(dd,J＝17.7,12.3Hz,1H),5.17(dd,J＝15.9,11.6Hz,1H),4.69-4.54(m,1H),4.34(dd,J＝38.7,14.4,4.4Hz,1H),4.18-4.05(m,1H),3.76(t,J＝13.8Hz,1H),3.69-3.55(m,1H),3.54-3.46(m,1H),3.28-3.15(m,2H),2.10(s,6H).ESI-MS m/z计算值613.1995，实验值614.4(M+1)+；保留时间：1.56分钟；LC方法A。
步骤5：(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-乙基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(化合物74)
将(16S)-12-(2,6-二甲基苯基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-18-羧酸苄酯(389mg，0.6339mmol)于乙醇(20mL)中的不均匀混合物超声处理10分钟，得到乳液(乳白色)。将所述乳液脱气并在氮气下添加钯(68mg，0.06390mmol)。将混合物在环境温度下在氢气气球下搅拌2小时。将烧瓶用氮气吹扫并添加更多钯(68mg，0.06390mmol)并将反应在氢气下继续36小时。将烧瓶用氮气吹扫并将固体催化剂经硅藻土垫滤出。将滤液浓缩并将残余物通过硅胶色谱法[80g硅胶柱，40分钟内0-5％甲醇/二氯甲烷(非常陡的梯度)纯化并且产物含有约4.2％甲醇]，得到呈白色固体的(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(189mg，62％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.71(t,J＝1.7Hz,1H),8.00(dt,J＝7.0,1.8Hz,1H),7.73-7.61(m,2H),7.26(t,J＝7.6Hz,1H),7.13(d,J＝7.6Hz,2H),5.61(tt,J＝9.6,4.5Hz,1H),4.37(dt,J＝13.8,6.6Hz,1H),3.72(dd,J＝14.5,4.0Hz,1H),3.51-3.41(m,1H),3.37-3.32(m,1H),3.29-3.21(m,2H),3.10-2.99(m,2H),2.10(s,6H).ESI-MS m/z计算值479.16272，实验值480.4(M+1)+；保留时间：0.76分钟(LC方法A)。
首先洗脱N-乙基副产物，在二氯甲烷中有约4％甲醇。将级分浓缩以获得约85％纯物质。将所述纯物质通过制备型反相HPLC(30分钟内1-70％乙腈/水，5％ HCl作为改性剂)进一步纯化，得到呈白色固体的(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-乙基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(16mg，5％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.62(s,1H),8.81(s,1H),8.03-7.87(m,1H),7.69(d,J＝4.8Hz,2H),7.27(t,J＝7.6Hz,1H),7.13(d,J＝7.6Hz,2H),6.40(s,1H),5.83(tt,J＝10.2,4.2Hz,1H),4.61-4.39(m,1H),3.89(q,J＝7.2Hz,2H),3.84(d,J＝4.1Hz,1H),3.80(d,J＝4.1Hz,1H),3.66-3.61(m,2H),3.50(dd,J＝11.4,5.8Hz,2H),3.43-3.38(m,1H),3.27(dd,J＝14.4,10.9Hz,1H),2.05(s,6H),1.34(t,J＝7.1Hz,3H).ESI-MS m/z计算值507.19403，实验值508.3(M+1)+；保留时间：0.81分钟(LC方法A)。
实例27：化合物75的制备
步骤1：(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-(丙烷-2-基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(化合物75)
向含有(16S)-12-(2,6-二甲基苯基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-18-羧酸苄酯(1.03g，1.678mmol)的烧瓶中添加THF(50mL)、丙烷-2-醇(12.5mL)、Pd(OH)2(20％w/w的118mg，0.1681mmol)和乙酸(5.0mL，87.92mmol)。将反应用氮气吹扫并且将反应用气球喷射到氢气上并搅拌过夜。添加更多Pd(OH)2(20％w/w的118mg，0.1681mmol)并使用氢气气球喷射反应。添加更多催化剂(20％w/w的118mg，0.1681mmol)并将反应在另外2小时内完成。将反应经硅藻土过滤并将滤饼用异丙醇洗涤。将滤液蒸发至干燥。将残余物溶解于DMSO中并通过反相HPLC 1％-99％ACN:水和HCl改性剂纯化，得到呈白色固体的(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮。分离出副产物：(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-(丙烷-2-基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(6.6mg)。ESI-MS m/z计算值521.20966，实验值522.2(M+1)+；保留时间：0.88分钟；LC方法A。
实例28：化合物76和化合物77的制备
步骤1：N-(环氧乙烷-2-基甲基)氨基甲酸叔丁酯
在0℃下，向N-烯丙基氨基甲酸叔丁酯(10.41g，66.217mmol)于DCM(500mL)中的溶液中分批添加m-CPBA(30.9g，134.30mmol)。使反应混合物温热至室温过夜。将反应用10％亚硫酸氢钠水溶液(250mL)淬灭。将两个层分离，并且将有机层用饱和碳酸氢钠水溶液(150mL)和盐水(100mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到粗无色油的N-(环氧乙烷-2-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(12.61g，93％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ4.73(s,1H),3.64-3.40(m,1H),3.30-3.13(m,1H),3.13-3.01(m,1H),2.78(dd,J＝4.7,4.0Hz,1H),2.59(dd,J＝4.7,2.6Hz,1H),1.44(s,9H).
步骤2：N-[2-羟基-3-[(4-甲氧基苯基)甲氨基]丙基]氨基甲酸叔丁酯
将(4-甲氧基苯基)甲胺(14.164g，103.25mmol)添加到N-(环氧乙烷-2-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(10.52g，51.625mmol)于异丙醇(60mL)中的溶液中并将混合物在50℃下搅拌16小时。将异丙醇蒸发，添加甲苯(100mL)并将溶液蒸发，得到呈黄色油的粗N-[2-羟基-3-[(4-甲氧基苯基)甲氨基]丙基]氨基甲酸叔丁酯(25g，92％)，其在不进行纯化的情况下用于下一步骤。ESI-MS m/z计算值310.18927，实验值311.4(M+1)+；保留时间：3.02分钟；LC方法S。
步骤3：N-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-3-[(4-甲氧基苯基)甲氨基]丙基]氨基甲酸叔丁酯
将TBDMSCl(9.8150g，65.120mmol)添加到N-[2-羟基-3-[(4-甲氧基苯基)甲氨基]丙基]氨基甲酸叔丁酯(24.47g，46.514mmol)和TEA(12.143g，16.726mL，120.00mmol)于1,2-二氯乙烷(120mL)中的溶液中并将混合物在60℃下搅拌24小时。将混合物用氯仿(200mL)稀释并用饱和碳酸钾(100mL)洗涤。将有机相分离，蒸发并将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-30％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈无色油的N-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-3-[(4-甲氧基苯基)甲氨基]丙基]氨基甲酸叔丁酯(16.43g，71％)。ESI-MS m/z计算值424.27573，实验值425.4(M+1)+；保留时间：5.5分钟；LC方法S。
步骤4：N-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-3-[(2-氯乙酰基)-[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]丙基]氨基甲酸叔丁酯
将N-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-3-[(4-甲氧基苯基)甲氨基]丙基]氨基甲酸叔丁酯(16.01g，37.702mmol)和DIPEA(9.7454g，13.134mL，75.404mmol)于DCM(370mL)中的溶液在冰水浴上冷却并滴加氯乙酰氯(5.5357g，3.8984mL，49.013mmol)。将混合物搅拌1小时，用DCM(350mL)稀释并用1M柠檬酸(300mL)洗涤。将有机相分离，经硫酸钠干燥并蒸发，将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-20％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈无色油的N-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-3-[(2-氯乙酰基)-[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]丙基]氨基甲酸叔丁酯(17.208g，87％)。ESI-MS m/z计算值500.2473，实验值501.6(M+1)+；保留时间：7.25分钟；LC方法S。
步骤5：6-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-4-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-氧代-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
将N-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-3-[(2-氯乙酰基)-[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]丙基]氨基甲酸叔丁酯(6.208g，11.769mmol)溶解于DMF(50mL)中并将溶液在氩气下在冰水浴上冷却。分批添加NaH(588.38mg，60％w/w，14.711mmol)，使混合物温热至室温并搅拌过夜。将混合物倒入乙酸乙酯(300mL)和1M柠檬酸(200mL)的混合物中，将有机相分离，经硫酸钠干燥并蒸发，将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-10％氯仿-甲醇纯化，得到呈无色油的6-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-4-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-氧代-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(5.85g，86％)。ESI-MS m/z计算值464.27066，实验值465.2(M+1)+；保留时间：3.86分钟；LC方法T。
步骤6：6-羟基-4-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-氧代-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
将6-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-4-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-氧代-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(5.85g，10.072mmol)和乙酸(703.09mg，0.6658mL，11.708mmol)溶解于MeOH(100mL)中并添加KF(1.7554g，30.216mmol)。将混合物回流24小时，蒸发并将残余物在二氯甲烷(200mL)与饱和碳酸钾(30mL)之间分配。将有机相分离，经硫酸钠干燥并蒸发，将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-3％氯仿-甲醇纯化，得到呈无色油的6-羟基-4-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-氧代-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(3.421g，92％)。ESI-MS m/z计算值350.18417，实验值351.1(M+1)+；保留时间：2.28分钟；LC方法T。
步骤7：3-[[4-[[4-叔丁氧基羰基-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,4-二氮杂环庚-6-基]氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
在0℃下在氮气下，向3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(3.3747g，8.076mmol)和6-羟基-4-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-氧代-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(2.97g，8.4758mmol)于无水DMF(40mL)中的搅拌的溶液中添加氢化钠(3.2301g，矿物油中60％w/w，80.760mmol)。使反应混合物温热至室温并搅拌8小时。将反应用饱和氯化铵水溶液(80mL)淬灭。添加盐水(200mL)并将水层用10％柠檬酸水溶液酸化至pH为约3。将产物用乙酸乙酯(3×120mL)萃取。将合并的有机层用盐水(70mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将产物通过硅胶色谱法使用0-10％DCM-甲醇纯化，得到两个级分：1)3.08g的还原纯度3-[[4-[[4-叔丁氧基羰基-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,4-二氮杂环庚-6-基]氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(约40％纯度)以及2)呈白色固体的纯3-[[4-[[4-叔丁氧基羰基-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,4-二氮杂环庚-6-基]氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(2.04g，33％)。这两个分离的级分分别向前移动。ESI-MS m/z计算值731.2625，实验值732.8(M+1)+；保留时间：4.92分钟；LC方法S。
步骤8：3-[[4-[(1-叔丁氧基羰基-3-氧代-1,4-二氮杂环庚-6-基)氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
在0℃下，向3-[[4-[[4-叔丁氧基羰基-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,4-二氮杂环庚-6-基]氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(3.08g，1.6835mmol)于乙腈(40mL)中的搅拌的悬浮液中添加硝酸铈铵(2.8044g，5.0505mmol)于水(5mL)中的溶液。使反应混合物温热至室温并搅拌4小时。将反应混合物用盐水(100mL)稀释并用10％柠檬酸水溶液酸化至pH为约3。将产物用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-10％氯仿-甲醇纯化，得到3-[[4-[(1-叔丁氧基羰基-3-氧代-1,4-二氮杂环庚-6-基)氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(900mg，57％)ESI-MS m/z计算值611.20496，实验值612.6(M+1)+；保留时间：2.46分钟；LC方法T。
步骤9：6-[6-(2,6-二甲基苯基)-2-[[3-(羟甲基)苯基]磺酰氨基]嘧啶-4-基]氧-3-氧代-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在-10℃下在氮气下，向3-[[4-[(1-叔丁氧基羰基-3-氧代-1,4-二氮杂环庚-6-基)氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.52g，1.6153mmol)和N-甲基吗啉(179.72mg，0.1953mL，1.7768mmol)于无水THF(30mL)中的搅拌的溶液中滴加氯甲酸乙酯(192.83mg，0.1699mL，1.7768mmol)。将反应混合物搅拌1小时，然后温热至0℃并添加硼氢化钠(183.33mg，4.8459mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌4小时。将反应用水(20mL)冷淬灭，添加盐水(50mL)并将挥发物在真空下去除。将水层用10％柠檬酸水溶液酸化至pH为约3并将产物用乙酸乙酯(2×75mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-100％己烷-乙酸乙酯，然后使用0-10％氯仿-甲醇纯化，得到呈白色固体的6-[6-(2,6-二甲基苯基)-2-[[3-(羟甲基)苯基]磺酰氨基]嘧啶-4-基]氧-3-氧代-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(635mg，62％)。ESI-MS m/z计算值597.2257，实验值598.4(M+1)+；保留时间：3.31分钟；LC方法S。
步骤10：6-[2-[[3-(溴甲基)苯基]磺酰氨基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧-3-氧代-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在0℃下在氮气下，向四溴化碳(389.53mg，1.1746mmol)和三苯基膦(308.08mg，1.1746mmol)于无水DCM(25mL)中的搅拌的溶液中添加6-[6-(2,6-二甲基苯基)-2-[[3-(羟甲基)苯基]磺酰氨基]嘧啶-4-基]氧-3-氧代-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(585mg，0.9788mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌2小时并且然后用饱和氯化铵水溶液(20mL)冷淬灭。在温热至室温之后，将两个层分离并将有机层浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-10％氯仿-甲醇纯化，得到呈白色固体的6-[2-[[3-(溴甲基)苯基]磺酰氨基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧-3-氧代-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(311mg，41％)。ESI-MS m/z计算值659.1413，实验值660.7(M+1)+；保留时间：5.7分钟；LC方法S。
步骤11：12-(2,6-二甲基苯基)-8,8,20-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-18-羧酸叔丁酯(化合物77)
在0℃下在氮气下，向6-[2-[[3-(溴甲基)苯基]磺酰氨基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧-3-氧代-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(286mg，0.4330mmol)于无水DMF(22mL)中的搅拌的溶液中分批添加氢化钠(173.18mg，矿物油中60％w/w，4.3300mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌30分钟并且然后通过滴加饱和氯化铵水溶液(30mL)缓慢冷淬灭。将产物用乙酸乙酯(2×75mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-65％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈白色固体的12-(2,6-二甲基苯基)-8,8,20-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-18-羧酸叔丁酯(177mg，68％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ8.10(s,1H),7.63(d,J＝40.0Hz,4H),7.24(t,J＝7.6Hz,1H),7.11(d,J＝7.5Hz,2H),6.36(s,1H),5.53(d,J＝18.5Hz,2H),4.31-4.17(m,2H),4.03(t,J＝15.0Hz,2H),3.76(t,J＝12.4Hz,1H),3.45(s,1H),3.08-2.85(m,1H),2.02(s,6H),1.42(s,9H).ESI-MS m/z计算值579.21515，实验值580.3(M+1)+；保留时间：2.25分钟；LC方法T。
步骤12：12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-8,8,20-三酮(化合物76)
在20mL小瓶中，在环境温度下在氮气下，向12-(2,6-二甲基苯基)-8,8,20-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-18-羧酸叔丁酯(100mg，0.1725mmol)于无水二噁烷(2.0mL)中的搅拌的溶液中添加于二噁烷中的氯化氢(4.0M的1.0mL，4.000mmol)。在搅拌1小时之后，将挥发物在减压下去除并将固体在真空下干燥过夜。获得呈白色固体的期望的12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-8,8,20-三酮(盐酸盐)(89mg，99％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.35(d,J＝1.9Hz,1H),7.89-7.79(m,1H),7.60-7.53(m,2H),7.30-7.20(m,1H),7.12(d,J＝7.4Hz,2H),6.24(s,1H),6.07(tdd,J＝11.0,4.6,2.4Hz,1H),5.76(d,J＝16.2Hz,1H),4.38(d,J＝15.1Hz,1H),4.14-4.01(m,2H),3.88(td,J＝10.2,6.3Hz,2H),3.76-3.66(m,1H),3.65-3.55(m,1H),3.51(dd,J＝12.5,11.2Hz,1H),2.07(s,6H).ESI-MS m/z计算值479.16272，实验值480.4(M+1)+；保留时间：0.8分钟；LC方法A。
实例29：化合物78的制备
步骤1：18-(4,4-二氟环己基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-8,8,20-三酮(化合物78)
在4mL小瓶中，按照该顺序向4,4-二氟环己酮(15mg，0.1118mmol)于无水1,2-二氯乙烷(1.0mL)中的搅拌的溶液中添加12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-8,8,20-三酮(盐酸盐)(12mg，0.02326mmol)、三乙胺(5μL，0.03587mmol)和冰乙酸(5μL，0.08792mmol)。将所得浅黄色溶液在环境温度下搅拌30分钟，然后添加氰基硼氢化钠(14mg，0.2228mmol)并继续搅拌13小时(过夜)。将粗物质用DMSO(0.8mL)稀释，微过滤并通过制备型反相HPLC纯化，用1-99％乙腈/水洗脱15分钟(HCl作为改性剂)。获得呈白色固体的期望的产物18-(4,4-二氟环己基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-8,8,20-三酮(盐酸盐)(3.0mg，20％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.31(s,1H),7.83(dd,J＝6.6,2.4Hz,1H),7.60-7.51(m,2H),7.29-7.22(m,1H),7.12(d,J＝7.7Hz,2H),6.22(s,1H),6.11(t,J＝10.9Hz,1H),5.79(d,J＝16.2Hz,1H),4.45(表观q,J＝14.5Hz,1H),4.13(d,J＝8.3Hz,1H),4.09(d,J＝9.6Hz,1H),3.90(dd,J＝14.8,10.4Hz,2H),3.62(t,J＝11.7Hz,2H),3.24(d,J＝14.7Hz,1H),2.31-2.19(m,4H),2.07(s,6H),2.05-1.83(m,4H).ESI-MS m/z计算值597.2221，实验值598.5(M+1)+；保留时间：1.47分钟；LC方法A。
实例30：化合物79的制备
步骤1：(16R)-18-[2-(金刚烷-1-基)乙酰基]-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(化合物79)
在0-5℃(冰水浴)下在氮气下，向(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(12mg，0.02326mmol)和N,N-二异丙基乙胺(15μL，0.08612mmol)于无水二氯甲烷(0.6mL)中的搅拌的溶液中添加2-(1-金刚烷基)乙酰氯(6mg，0.02821mol)。将反应在环境温度下搅拌3小时，然后在减压下浓缩并且将粗物质溶于DMSO(1.0mL)中，微过滤并通过制备型反相HPLC纯化，用1-99％乙腈/水洗脱15分钟(HCl作为改性剂)。获得呈白色固体的期望的产物(16R)-18-[2-(金刚烷-1-基)乙酰基]-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(12.1mg，79％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.51(t,J＝1.7Hz,1H),8.01(ddt,J＝6.9,4.9,1.8Hz,1H),7.69(tq,J＝7.5,4.0Hz,2H),7.27(td,J＝7.6,4.0Hz,1H),7.13(d,J＝7.7Hz,2H),6.24(d,J＝20.5Hz,1H),5.72(dq,J＝9.9,5.2Hz,0.4H),5.37(tt,J＝10.6,3.9Hz,0.6H),4.81(dd,J＝14.6,6.0Hz,1H),4.68(d,J＝13.3Hz,1H),4.56-4.48(m,0.4H),4.48-4.36(m,0.6H),4.28-4.16(m,0.6H),3.97(dd,J＝14.3,4.4Hz,0.6H),3.71(dd,J＝14.9,3.9Hz,0.4H),3.67-3.54(m,1H),3.53-3.32(m,2H),3.27-3.19(m,0.4H),3.08(dd,J＝14.1,10.9Hz,0.6H),2.53(d,J＝13.5Hz,0.6H),2.46(d,J＝13.7Hz,0.4H),2.27(d,J＝13.7Hz,0.41H),2.12(s,6H),2.03(d,J＝13.5Hz,0.6H),1.98(s,1H),1.90-1.76(m,5H),1.75-1.59(m,9H).ESI-MS m/z计算值655.28284，实验值656.5(M+1)+；保留时间：1.76分钟；LC方法A。
实例31：化合物80的制备
步骤1：(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-(2,2-二甲基丙酰基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(化合物80)
在0-5℃(冰水浴)下在氮气下，向(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(12mg，0.02326mmol)和三乙胺(15μL，0.1076mmol)于无水二氯甲烷(0.6mL)中的搅拌的溶液中添加新戊酰氯(4mg，0.03317mmol)。将反应在环境温度下搅拌3小时，然后在减压下浓缩并且将粗物质溶于DMSO(1.0mL)中，微过滤并通过制备型反相HPLC纯化，用1-99％乙腈/水洗脱15分钟(HCl作为改性剂)。获得呈白色固体的期望的产物(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-(2,2-二甲基丙酰基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(10.9mg，83％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.48-8.36(m,1H),8.01(ddd,J＝5.9,2.8,1.7Hz,1H),7.72-7.63(m,2H),7.26(t,J＝7.6Hz,1H),7.14(d,J＝7.6Hz,2H),6.25(broad s,1H),5.57(broad s,1H),4.69(s,1H),4.53(d,J＝13.8Hz,1H),4.41(dt,J＝14.3,7.4Hz,1H),3.80(d,J＝14.1Hz,1H),3.64-3.49(m,2H),3.38-3.32(m,1H),3.27-3.14(m,1H),2.11(s,6H),1.35(s,9H).ESI-MS m/z计算值563.2202，实验值564.4(M+1)+；保留时间：1.35分钟；LC方法A。
实例32：化合物81的制备
步骤1：(16R)-18-(3,3-二甲基丁酰基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(化合物81)
在0-5℃(冰水浴)下在氮气下，向(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(12mg，0.02326mmol)和N,N-二异丙基乙胺(15μL，0.08612mmol)于无水二氯甲烷(0.6mL)中的搅拌的溶液中添加3,3-二甲基丁酸(4mg，0.03444mmol)，随后添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶3-六氟磷酸氧化物(11mg，0.02893mmol)(HATU)。将反应在环境温度下搅拌3小时，然后在减压下浓缩。将残余物溶于DMSO(1.0mL)中，微过滤并通过制备型反相HPLC纯化，用1-99％乙腈/水洗脱15分钟(HCl作为改性剂)。获得呈白色固体的期望的产物(16R)-18-(3,3-二甲基丁酰基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(8.6mg，64％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.47(dt,J＝16.0,1.5Hz,1H),8.01(ddt,J＝7.6,3.4,1.8Hz,1H),7.74-7.63(m,2H),7.27(td,J＝7.7,3.4Hz,1H),7.22-7.06(m,2H),6.24(d,J＝15.8Hz,1H),5.72(tt,J＝9.6,4.6Hz,0.5H),5.45(td,J＝10.3,5.1Hz,0.5H),4.75(ddd,J＝14.6,6.4,3.5Hz,0.5H),4.63(d,J＝12.8Hz,0.5H),4.56-4.40(m,1H),4.32(dt,J＝14.5,5.1Hz,0.5H),4.17(ddd,J＝13.9,9.7,6.4Hz,0.5H),3.86(dd,J＝14.2,4.3Hz,0.5H),3.76-3.69(m,0.5H),3.69-3.62(m,1H),3.59-3.41(m,1.5H),3.41-3.32(m,0.5H),3.23(dt,J＝13.9,4.5Hz,0.5H),3.12(dd,J＝14.2,10.9Hz,0.5H),2.52(d,J＝14.3Hz,0.5H),2.51(s,1H),2.30(d,J＝14.3Hz,0.5H),2.12(s,6H),1.11(s,4H),1.09(s,5H).(旋转异构体比率为约5:4)ESI-MS m/z计算值577.2359，实验值578.4(M+1)+；保留时间：1.46分钟；LC方法A。
实例33：化合物82的制备
步骤1：O4-苄基O1-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1,4-二羧酸叔丁酯
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向冷却至0℃的6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.87g，8.6463mmol)于无水二氯甲烷(80mL)中的溶液中添加三乙胺(2.0110g，2.77mL，19.874mmol)，然后添加氯甲酸苄酯(1.6252g，1.36mL，9.5268mmol)。将混合物在0℃下搅拌30分钟，然后在室温下过夜。在室温下添加更多氯甲酸苄酯(179.25mg，150μL，1.0507mmol)并将混合物搅拌3小时。添加乙酸乙酯(250mL)，然后将有机相用5％碳酸氢钠水溶液(4×15mL)和盐水(1×50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过加载有DCM的快速色谱法(80g硅胶，DCM/EtOAc 100:0至25:75)纯化，得到呈无色油的O4-苄基O1-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1,4-二羧酸叔丁酯(2.15g，71％)。ESI-MS m/z计算值350.1842，实验值373.2(M+Na)+；保留时间：1.875分钟(LC方法N)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.45-1.47(m,9H),3.02-4.06(m,10H),5.08-5.17(m,2H),7.35-7.36(m,5H).
步骤2：O4-苄基O1-6-氧代-1,4-二氮杂环庚-1,4-二羧酸叔丁酯
向冷却至0℃的O4-苄基O1-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1,4-二羧酸叔丁酯(2.03g，5.7932mmol)于无水二氯甲烷(65mL)中的溶液中添加戴斯-马丁过碘烷(3.669g，8.6504mmol)。将混合物在2小时内从0℃搅拌至室温。将反应混合物用乙酸乙酯(250mL)稀释。将有机相用5％碳酸氢钠(4×100mL)和盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并将溶剂在减压下去除。将残余物通过快速色谱法(加载在DCM中)(80g硅胶)纯化，用0-20％乙酸乙酯/二氯甲烷的混合物洗脱，得到呈黄色油的O4-苄基O1-6-氧代-1,4-二氮杂环庚-1,4-二羧酸叔丁酯(1.668g，83％)。ESI-MS m/z计算值348.1685，实验值371.2(M+Na)+；保留时间：2.062分钟(LC方法N)。
步骤3：O4-苄基O1-6-羟基-6-甲基-1,4-二氮杂环庚-1,4-二羧酸叔丁酯
在-20℃下，向O4-苄基O1-6-氧代-1,4-二氮杂环庚-1,4-二羧酸叔丁酯(647mg，1.8571mmol)于干燥THF(50mL)中的溶液中滴加甲基溴化镁溶液(乙醚中的3M的0.760mL，2.2800mmol)。使反应在2小时内升温至室温，然后用饱和氯化铵溶液(50mL)淬灭，在水(150mL)与EtOAc(200mL)之间分配。将水层用EtOAc(2×100mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(加载有DCM，40g硅胶，DCM/EtOAc 100:0至75:25)纯化，得到呈浅黄色油的O4-苄基O1-6-羟基-6-甲基-1,4-二氮杂环庚-1,4-二羧酸叔丁酯(511mg，75％)。ESI-MS m/z计算值364.1998，实验值387.2(M+Na)+；保留时间：2.8分钟(LC方法H)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ0.96-1.07(m,3H),1.26-1.47(m,9H),2.89-3.28(m,4H),3.50-3.78(m,4H),4.81(d,J＝3.2Hz,1H),4.98-5.20(m,2H),7.20-7.46(m,5H).
步骤4：6-羟基-6-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向O4-苄基O1-6-羟基-6-甲基-1,4-二氮杂环庚-1,4-二羧酸叔丁酯(100mg，0.2744mmol)于甲醇(7mL)中的溶液中添加钯/炭(10mg，10％w/w，0.0094mmol)并将混合物在氢气下在1atm下搅拌过夜。然后将其通过硅藻土过滤并且将滤液蒸发，得到成无色油的粗6-羟基-6-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(59.4mg，89％)。ESI-MS m/z计算值230.16304，实验值231.1(M+1)+；保留时间：1.51分钟；LC方法T。
步骤5：4-苄基-6-羟基-6-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向6-羟基-6-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(62.4mg，0.2709mmol)和苯甲醛(30.276mg，0.029mL，0.2853mmol)于无水DCM(2mL)中的溶液中添加三乙酰氧基硼氢化钠(65.4mg，0.3086mmol)。将所得溶液在环境温度下搅拌2小时，然后添加另外的三乙酰氧基硼氢化钠(33.6mg，0.1585mmol)并再搅拌2小时。将反应溶液在饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)与二氯甲烷(80mL)之间分配。将有机层分离，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(加载在DCM中)(25g硅胶，洗脱0至30％ EtOAc/己烷)纯化，得到呈浅黄色液体的4-苄基-6-羟基-6-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(72.3mg，81％)。ESI-MSm/z计算值320.21，实验值321.2(M+1)+；保留时间：3.04分钟；LC方法S。
步骤6：1-苄基-6-甲基-1,4-二氮杂环庚-6-醇
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向4-苄基-6-羟基-6-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(72.3mg，0.2193mmol)于二噁烷(1.5mL)中的溶液中添加HCl(二噁烷中的4M的0.5mL，2.0000mmol)。将所得溶液在环境温度下搅拌16小时。在减压下移除所有溶剂。将残余物在真空下干燥4小时，得到呈粘性固体的1-苄基-6-甲基-1,4-二氮杂环庚-6-醇(二盐酸盐)(64.3mg，95％)。该产物不经任何纯化直接用于下一步骤。ESI-MS m/z计算值220.15756，实验值221.4(M+1)+；保留时间：1.58分钟；LC方法S。
步骤7：3-(4-苄基-6-羟基-6-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基)-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺
向3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(91.8mg，0.2197mmol)于无水DCM(2mL)中的悬浮液溶液中添加SOCl2(1.6310g，1mL，13.709mmol)。将所得溶液在35℃下加热2天。在减压下移除所有溶剂。在0℃下，向1-苄基-6-甲基-1,4-二氮杂环庚-6-醇(二盐酸盐)(64.3mg，0.2083mmol)于无水DCM(1mL)中的悬浮液中添加以上制备的苯甲酰氯于无水DCM(1mL)中的溶液。将所得溶液在该温度下搅拌30分钟，然后将反应溶液用二氯甲烷(100mL)稀释并添加饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)。将有机层分离，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(加载在DCM中)(40g硅胶，用0至100％丙酮/己烷洗脱)纯化，得到呈白色固体的3-(4-苄基-6-羟基-6-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基)-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(136mg，98％)。ESI-MS m/z计算值619.202，实验值620.3(M+1)+；保留时间：4.63分钟；LC方法S。
步骤8：18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-16-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(化合物82)
向3-(4-苄基-6-羟基-6-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基)-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(67mg，0.1037mmol)于无水THF(10mL)中的溶液中添加NaH(47mg，1.1751mmol)。将所得溶液在环境温度下搅拌8小时并且在50℃下搅拌16小时。将该反应与来自相同规模反应的另一种粗混合物合并，并用碳酸氢钠水溶液(20mL)处理，然后用乙酸乙酯(100mL)处理。将有机层分离，用盐水(2×20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(加载在DCM中)(40g硅胶，洗脱0至70％丙酮/己烷)并通过反相HPLC(35％至65％ B，流动相A＝水(0.1％ CF3CO2H)，流动相B＝乙腈(0.1％CF3CO2H))纯化。将纯级分合并并冻干，得到TFA盐，将其溶于水(5mM HCl)中并再次冻干，获得呈白色固体的18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-16-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(13mg，9％合并产率)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ8.49(s,1H),7.87(s,1H),7.68(d,J＝4.6Hz,2H),7.59-7.30(m,5H),7.30-7.17(m,1H),7.11(d,J＝7.6Hz,2H),6.23(s,1H),4.54(d,J＝15.0Hz,2H),4.0-3.71(m,4H,与水重叠),3.52(d,J＝15.2Hz,2H),3.35-2.92(m,2H),2.22(s,3H),2.04(s,6H).ESI-MS m/z计算值583.22534，实验值584.2(M+1)+；保留时间：1.96分钟；LC方法T。
实例34：化合物83和化合物84的制备
步骤1：(2R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-甲基-戊酸甲酯
在0℃下，向(2R)-2-氨基-4-甲基-戊酸甲酯(盐酸盐)(50g，269.74mmol)于二噁烷(313mL)和碳酸氢钠水溶液(1250mL)的混合物中的溶液中添加Boc酸酐(61.814g，283.23mmol)。将所得溶液搅拌20小时，同时将其温热至环境温度。将反应溶液用乙酸乙酯(3×500mL)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈浅黄色油的(2R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-甲基-戊酸甲酯(64.13g，92％)。1HNMR(250MHz,CDCl3)δ4.88(m,1H),4.32(m,1H),3.79-3.67(m,3H),1.76-1.58(m,2H),1.58-1.40(m,10H),0.95(d,,J＝2.3Hz,3H),0.93(d,,J＝2.3Hz,3H).ESI-MS m/z计算值245.1627，实验值246.1(M+1)+；保留时间：4.97分钟；LC方法S。
步骤2：N-[(1R)-1-(2-氯乙酰基)-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯
在-50℃下，向二异丙胺(52.313g，72.456mL，516.98mmol)于无水THF(350mL)中的溶液中缓慢添加n-BuLi(2.5M的207.03mL，517.57mmol)，然后将反应温热至0℃并再搅拌30分钟，然后将其冷却至-78℃。在-78℃下在35分钟内将所得LDA溶液通过导管滴加到(2R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-甲基-戊酸甲酯(25g，96.814mmol)和氯(碘)甲烷(69.9g，388.37mmol)于无水THF(650mL)中的预冷的溶液中。在添加完成之后，将所得溶液在该温度下进一步搅拌1小时。缓慢添加乙酸(82mL)和THF(82mL)的混合物以淬灭反应。将反应溶液温热至0℃，然后添加水(500mL)并将有机层分离。将水层用乙酸乙酯(2×300mL)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(加载在DCM中)(330g硅胶，用0至15％ EtOAc/己烷洗脱)纯化，得到呈浅黄色固体的N-[(1R)-1-(2-氯乙酰基)-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(19.19g，75％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ5.16-4.75(m,1H),4.64-4.41(m,1H),4.29(d,J＝3.0Hz,2H),1.91-1.48(m,3H),1.44(s,9H),0.97(d,J＝4.2Hz,3H),0.93(d,J＝4.2Hz,3H).
步骤3：2-(苄氨基)乙酸叔丁酯
将2-溴乙酸叔丁酯(30mL，194.98mmol)滴加到苯甲胺(85mL，770.42mmol)于甲苯(150mL)中的溶液中，然后将混合物在72℃下加热1小时。将混合物倒入1N氢氧化钠溶液(200mL)中并用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。将有机相合并，用水(200mL)和盐水(200mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法在330g柱上纯化，用0％至40％的乙酸乙酯/己烷洗脱，得到2-(苄氨基)乙酸叔丁酯(39.9g，90％)。ESI-MS m/z计算值221.14159，实验值222.6(M+1)+；保留时间：1.93分钟；LC方法T。
步骤4：2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基-2-氧代-己基]氨基]乙酸叔丁酯
向2-(苄氨基)乙酸叔丁酯(12.04g，51.687mmol)和N-[(1R)-1-(2-氯乙酰基)-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(15.725g，56.637mmol)于无水DMF(110mL)中的溶液中添加碳酸氢钠(11.6g，138.08mmol)，然后添加碘化钠(5.08g，33.891mmol)。将所得溶液在环境温度下搅拌17小时，然后添加水(400mL)。将溶液用乙醚(2×400mL)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩，得到粗产物。将粗产物通过快速色谱法(加载在DCM中)(330g硅胶，用0至15％ EtOAc/己烷洗脱)纯化，得到呈浅黄色液体的2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基-2-氧代-己基]氨基]乙酸叔丁酯(22.85g，85％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.66-6.79(m,5H),5.12-4.85(m,1H),4.40(s,1H),3.96-3.76(m,2H),3.76 -3.54(m,2H),3.36(d,J＝1.5Hz,2H),1.91-1.52(m,2H),1.52-1.33(m,18H),1.31-1.23(m,1H),0.94(d,J＝6.5Hz,3H),0.88(d,J＝6.5Hz,3H).ESI-MS m/z计算值448.29373，实验值449.2(M+1)+；保留时间：5.04分钟；LC方法S。
步骤5：2-[苄基-[(2S,3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-5-甲基-己基]氨基]乙酸叔丁酯和2-[苄基-[(2R,3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-5-甲基-己基]氨基]乙酸叔丁酯
在0℃下，向2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基-2-氧代-己基]氨基]乙酸叔丁酯(21.93g，48.886mmol)于MeOH(220mL)中的溶液中添加硼氢化钠(3.745g，98.989mmol)(内部温度<24℃)。将反应溶液在0℃下搅拌20分钟。添加水(250mL)。将溶液用乙酸乙酯(2×400mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。添加苯(2×100mL)并在真空中浓缩以去除水。将粗产物通过快速色谱法(加载在DCM中)(330g硅胶，用0至20％ EtOAc/己烷洗脱)纯化，得到呈浅黄色油的2-[苄基-[(2S,3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-5-甲基-己基]氨基]乙酸叔丁酯(15.13g，65％)(更多极性的异构体)。ESI-MS m/z计算值450.3094，实验值451.2(M+1)+；保留时间：4.74分钟(LC方法S)；1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.51-7.06(m,5H),4.63(d,J＝9.2Hz,1H),3.87(d,J＝13.5Hz,1H),3.69(d,J＝13.5Hz,1H),3.64-3.46(m,2H),3.19(d,J＝1.8Hz,2H),2.84(d,J＝13.1Hz,1H),2.54(dd,J＝13.0,9.8Hz,1H),1.78-1.54(m,1H),1.44(s,9H),1.43(s,9H),1.4 2-1.27(m,2H),0.91(d,J＝4.3Hz,3H),0.89(d,J＝4.3Hz,3H)；以及呈浅黄色油的2-[苄基-[(2R,3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-5-甲基-己基]氨基]乙酸叔丁酯(4.36g，19％)(更少极性的异构体)，ESI-MS m/z计算值450.3094，实验值451.2(M+1)+；保留时间：4.73分钟(LC方法S)；1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.48-7.04(m,5H),4.76(d,J＝9.9Hz,1H),3.89(d,J＝13.5Hz,1H),3.77-3.32(m,4H),3.19(d,J＝5.2Hz,2H),2.73(dd,J＝13.1,3.2Hz,1H),2.52(dd,J＝13.1,10.7Hz,1H),1.78-1.49(m,3H),1.44(s,9H),1.40(s,9H),1.07-0.69(m,6H).
步骤6：(6R,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮
向2-[苄基-[(2R,3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-5-甲基-己基]氨基]乙酸叔丁酯(4.36g，9.6758mmol)中添加HCl(二噁烷中的4M的100mL，400.00mmol)。将所得溶液在环境温度下搅拌24小时。然后将溶剂在减压下去除。将残余物溶解于无水EtOH(200mL)中。将所得溶液在50℃下搅拌6小时。然后添加TEA(9.8010g，13.5mL，96.857mmol)并将反应在50℃下持续15小时。将所有溶剂在减压下去除。将残余物溶解于乙酸乙酯(500mL)中并用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)洗涤。将有机层分离，并且将水层用乙酸乙酯(100mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(加载在DCM中)(120g硅胶，用0至100％EtOAc/己烷洗脱)纯化，得到呈白色泡沫固体的(6R,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(2.19g，81％)。ESI-MS m/z计算值276.18378，实验值277.1(M+1)+；保留时间：2.08分钟；LC方法S。
步骤7：(6R,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向(6R,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(2.19g，7.5595mmol)于无水THF(76mL)中的溶液中非常缓慢添加LAH(1.72g，45.318mmol)。将悬浮液溶液在40℃下在氩气下加热16小时。将反应溶液冷却至0℃，然后滴加水(1.7mL)，接着添加15％的NaOH水溶液(1.7mL)和水(5.1mL)。添加THF(80mL)并且将悬浮液在环境温度下搅拌1小时。将悬浮液通过硅藻土过滤并用THF(100mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩，得到溶解于二噁烷(40mL)和碳酸氢钠饱和水溶液(40mL)的混合物中的呈无色液体的粗氨基醇中间体。添加Boc酸酐(2.09g，9.5763mmol)并将所得溶液在环境温度下搅拌16小时。然后添加另外的Boc酸酐(0.43g，1.9702mmol)并将反应再搅拌8小时。添加水(50mL)和乙酸乙酯(100mL)。将有机层分离，并且将水层用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(加载在己烷中)(120g硅胶，用0至15％ EtOAc/己烷洗脱)纯化，得到呈无色液体的(6R,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.9399g，65％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ7.48-7.09(m,5H),4.35(s,1H),4.13-3.74(m,2H),3.65(t,J＝2.6Hz,2H),3.52(d,J＝15.1Hz,1H),3.14-2.75(m,2H),2.68(d,J＝12.3Hz,1H),2.46-2.10(m,2H),1.69-1.44(m,2H),1.43-1.21(m,10H),0.95-0.77(m,6H).ESI-MS m/z计算值362.25696，实验值363.6(M+1)+；保留时间：1.86分钟；LC方法T。
步骤8：(5R,6R)-1-苄基-5-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮
向100mL圆底烧瓶中装入(6R,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(465mg，1.283mmol)、二噁烷(4mL)和HCl(4M的4mL，16.00mmol)(4M二噁烷溶液)。将混合物在室温下搅拌2小时(LCMS的转化率为约30％)。添加更多HCl(4M的4mL，16.00mmol)并且将溶液在室温下搅拌3小时。在减压下移除挥发物。将残余物用乙醚、DCM和己烷处理并将溶剂蒸发。重复操作，直到获得固体为止。在真空中干燥得到呈灰色固体的(5R,6R)-1-苄基-5-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-醇(二盐酸盐)(492mg，100％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6+10％ D2O)δ7.59-7.46(m,5H),4.47-4.29(m,2H),3.75-3.46(m,6H),1.69-1.51(m,2H),1.51-1.34(m,1H),0.97-0.82(m,6H).ESI-MS m/z计算值262.2045，实验值263.26(M+1)+；保留时间：0.48分钟，LC方法A。
步骤9：3-[(6R,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(5R,6S)-1-苄基-5-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(二盐酸盐)(492mg，1.282mmol)、无水DMF(9mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(535mg，1.280mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(1.5mL，8.612mmol)和HATU(590mg，1.552mmol)并将混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入在冰中冷却的柠檬酸(10％w/v的50mL，26.02mmol)(10％水溶液)中。将所得白色固体过滤并用水洗涤。将固体(1.03g)通过硅胶快速色谱法(80g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约2％甲醇，得到呈白色固体的3-[(6R,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(275mg，32％)。ESI-MS m/z计算值661.24896，实验值662.43(M+1)+；保留时间：1.45分钟；LC方法A。
步骤10：(16R,21R)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(化合物84)
在氮气下向100mL烧瓶中装入3-[(6S,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(275mg，0.4153mmol)和无水DMF(25mL)。向溶液中添加NaH(60％w/w的133mg，3.325mmol)并将混合物在氮气下在室温下搅拌3天。将10％柠檬酸水溶液(10％w/v的100mL，52.05mmol)在冰中冷却并在搅拌下将DMF反应混合物倒入冷的柠檬酸溶液中。添加少量盐水，并且将所得固体悬浮液用EtOAc(3×30mL)萃取。首次萃取形成由于存在通过过滤将其去除的非常精细的固体造成的乳液。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物，将所述残余物溶解于含有少量甲醇的DCM中并通过硅胶快速色谱法(24g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(50分钟内0至10％)纯化。产物洗脱约3-5％甲醇作为多个宽峰。将含有产物的所有级分合并并将溶剂蒸发，得到在DCM/己烷中几轮研磨/蒸发之后变成类白色固体的残余物。(16R,21R)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(93mg，35％)。ESI-MS m/z计算值625.2723，实验值626.53(M+1)+；保留时间：1.34分钟；LC方法A。
步骤11：(16R,21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮
向100mL烧瓶中装入(21R)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(85mg，0.1331mmol)和MeOH(20mL)。将溶液用氮气喷射。添加Pd(OH)2(20％w/w的45mg，0.06409mmol)并将溶液在氢气(气球)气氛下搅拌17小时。将溶液用氮气吹扫。将催化剂通过硅藻土过滤去除并将滤液浓缩。将残余物溶解于DCM/MeOH中并将溶液过滤。溶剂的蒸发得到呈类白色固体的(16R,21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(70mg，98％)。ESI-MS m/z计算值535.22534，实验值536.49(M+1)+；保留时间：1.07分钟；LC方法A。
步骤12：(16R,21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-18-{螺[3.4]辛烷-2-基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物83)
向4mL小瓶中装入(21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(15mg，0.02800mmol)、无水DCM(400μL)、螺[3.4]辛烷-2-酮(20mg，0.1611mmol)和乙酸(12μL，0.2110mmol)。将小瓶用氮气短暂吹扫，加盖并在室温下搅拌约10分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(20mg，0.09437mmol)。将小瓶用氮气吹扫，加盖并且将反应在室温下搅拌14小时。添加甲醇(25μL)。将DCM相蒸发并且将残余物溶于DMSO(1mL)中。将溶液微过滤并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化，得到呈白色固体的(16R,21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-18-{螺[3.4]辛烷-2-基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(9.7mg，50％)。ESI-MSm/z计算值643.3192，实验值644.6(M+1)+；保留时间：1.4分钟；LC方法A。
实例35：化合物85和化合物86的制备
步骤1：(6S,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮
向2-[苄基-[(2S,3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-5-甲基-己基]氨基]乙酸叔丁酯(15.13g，33.577mmol)中添加HCl(4M的335mL，1.3400mol)。将所得溶液在环境温度下搅拌24小时。然后将所有溶剂在减压下去除。将残余物溶解于无水EtOH(700mL)中。将所得溶液在50℃下搅拌21小时。然后添加TEA(33.977g，46.800mL，335.77mmol)并将反应在50℃下持续7.5小时。将所有溶剂在减压下去除。将残余物溶解于乙酸乙酯(800mL)中并用饱和碳酸氢钠水溶液(200mL)洗涤。将有机层分离，并且将水层用乙酸乙酯(200mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(加载在DCM中)(220g硅胶，用0至100％EtOAc/己烷洗脱)纯化，得到呈白色固体的(6S,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(7.33g，77％)。ESI-MS m/z计算值276.18378，实验值277.2(M+1)+；保留时间：2.17分钟；LC方法S。
步骤2：(6S,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向(6S,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(7.33g，25.673mmol)于无水THF(260mL)中的溶液中非常缓慢添加LAH(5.86g，154.40mmol)。将悬浮液溶液在40℃下在氩气下加热16小时。将反应溶液冷却至0℃，然后滴加水(5.9mL)，接着添加15％的NaOH水溶液(5.9mL)和水(17.7mL)。添加THF(200mL)并且将悬浮液溶液在环境温度下搅拌1小时。将悬浮液通过硅藻土过滤并用THF(100mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩，得到溶解于二噁烷(130mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(130mL)的混合物中的呈无色液体的粗氨基醇中间体。添加Boc酸酐(5.6g，25.659mmol)。将所得溶液在环境温度下搅拌16小时。添加水(100mL)和乙酸乙酯(200mL)。将有机层分离，并将水层用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(加载在己烷中)(330g硅胶，用0至30％ EtOAc洗脱)纯化，得到呈白色固体的(6S,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(6.5889g，68％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ7.48-7.05(m,5H),5.00(dd,J＝16.2,6.3Hz,1H),3.99-3.35(m,5H),2.91-2.53(m,3H),2.23(dt,J＝12.3,8.4Hz,2H),1.61-1.17(m,12H),1.00-0.71(m,6H).ESI-MS m/z计算值362.25696，实验值363.3(M+1)+；保留时间：1.86分钟；LC方法T。
步骤3：(5R,6S)-1-苄基-5-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮
向100mL圆底烧瓶中装入(6S,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(456mg，1.258mmol)、二噁烷(4mL)和HCl(4M的4mL，16.00mmol)(4M二噁烷溶液)。将混合物在室温下搅拌3小时。添加更多HCl(4M的4mL，16.00mmol)并且将溶液在室温下搅拌3小时。在减压下移除挥发物。将固体用DCM和己烷处理并将溶剂蒸发。将操作重复3次。在真空中干燥得到呈白色固体的(5R,6S)-1-苄基-5-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-醇(二盐酸盐)(425mg，100％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6+10％D2O)δ7.64-7.44(m,5H),4.46(d,J＝13.1Hz,1H),4.32(d,J＝13.1Hz,1H),4.07(dd,J＝6.8,2.7Hz,1H),3.68(d,J＝13.9Hz,1H),3.62-3.35(m,5H),3.29(d,J＝14.1Hz,1H),1.63(p,J＝6.6Hz,1H),1.44(qt,J＝14.2,7.1Hz,2H),0.90(2个重叠的双峰,J＝5.9Hz,6H).ESI-MS m/z计算值262.2045，实验值263.26(M+1)+；保留时间：0.5分钟；LC方法A。
步骤4：3-[(6S,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(5R,6R)-1-苄基-5-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(二盐酸盐)(425mg，1.255mmol)、无水DMF(9mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(527mg，1.261mmol)。将悬浮液在冰浴中冷却。添加DIEA(1.5mL，8.612mmol)(在1-2分钟内溶解所有固体)，然后添加HATU(591mg，1.554mmol)并将混合物在0℃下搅拌20分钟。将反应混合物倒入在冰中冷却的柠檬酸(10％w/v的50mL，26.02mmol)(10％水溶液)中。将所得白色固体过滤并用水洗涤。将湿固体溶解于DCM中，经硫酸钠干燥并将溶剂蒸发。将所得固体(903mg)通过硅胶快速色谱法(80g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约2％甲醇，得到呈白色固体的3-[(6S,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(546mg，65％)。ESI-MS m/z计算值661.24896，实验值662.46(M+1)+；保留时间：1.47分钟；LCMS方法A。
步骤5：(16S,21R)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物86)
在氮气下向100mL烧瓶中装入3-[(6R,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(546mg，0.8245mmol)和无水DMF(50mL)。向溶液中添加一部分NaH(60％w/w的278mg，6.951mmol)(60％油悬浮液)并将混合物在氮气下在室温下搅拌17小时。将10％柠檬酸水溶液(10％w/v的200mL，104.1mmol)在冰中冷却并在搅拌下将DMF反应混合物倒入冷的柠檬酸溶液中。将所得固体过滤(长过滤)。将含有产物和二聚杂质的40:60混合物的滤液用50mL的盐水处理并用EtOAc(3×50mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物，将所述残余物溶解于含有少量甲醇的DCM中并将其通过硅胶快速色谱法(40g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(60分钟内0至10％)纯化。产物洗脱出约3％甲醇。溶剂的蒸发得到呈白色固体的(16S,21R)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(25mg，5％)。ESI-MS m/z计算值625.2723，实验值626.53(M+1)+；保留时间：1.29分钟；LC方法A。
步骤6：(16S,21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮
向100mL烧瓶中装入(21R)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(21mg，0.03255mmol)和MeOH(10mL)。将溶液用氮气喷射。添加Pd(OH)2(20％w/w的30mg，0.04273mmol)并将溶液在氢气(气球)气氛下搅拌17小时。将溶液用氮气吹扫。将催化剂通过硅藻土过滤去除并将滤液浓缩。将残余物溶解于DCM/MeOH中并将溶液通过注射器过滤器过滤。溶剂的蒸发得到呈类白色固体的(16S,21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(18mg，103％)。ESI-MS m/z计算值535.22534，实验值536.45(M+1)+；保留时间：1.07分钟；LC方法A。
步骤7：(16S,21R)-18-(4,4-二氟环己基)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物85)
向4mL小瓶中装入(21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(9mg，0.01680mmol)、无水DCM(200μL)、4,4-二氟环己酮(18mg，0.1342mmol)和乙酸(10μL，0.1758mmol)。将小瓶用氮气短暂吹扫，加盖并在室温下搅拌约15分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(10mg，0.04718mmol)。将小瓶用氮气吹扫，加盖并且将反应在室温下搅拌15小时。添加少量甲醇。将DCM蒸发并且将残余物溶于DMSO(1mL)中。将溶液微过滤并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化，得到呈白色固体的(16S,21R)-18-(4,4-二氟环己基)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(0.6mg，5％)。ESI-MS m/z计算值653.2847，实验值654.51(M+1)+；保留时间：1.27分钟；LC方法A。
实例36：化合物87、化合物84、化合物88和化合物89的制备
步骤1：2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基-2-氧代-己基]氨基]乙酸乙酯
在室温下将N-[(1R)-1-(2-氯乙酰基)-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(4g，15.165mmol)溶解于DMF(25mL)中。添加2-(苄氨基)乙酸乙酯(盐酸盐)(2.93g，12.756mmol)，随后添加碳酸氢钠(3.83g，45.592mmol)和碘化钠(1.13g，0.3082mL，7.5387mmol)。将反应混合物在室温下搅拌5小时。然后将所述反应混合物在EtOAc(约60mL)与水(50mL)之间分配。将水层用EtOAc再萃取一次。将合并的有机物用水、盐水洗涤并经硫酸钠干燥并且然后过滤并浓缩。将残余物使用硅胶柱(0-15％ EtOAc/己烷，用碘显现的化合物)纯化，得到呈浅黄色油的2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基-2-氧代-己基]氨基]乙酸乙酯(5g，74％)。ESI-MS m/z计算值420.26242，实验值421.7(M+1)+；保留时间：3.02分钟；LC方法T。
步骤2：2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基-2-氧代-己基]氨基]乙酸
将2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基-2-氧代-己基]氨基]乙酸乙酯(5g，11.889mmol)溶解于THF(50mL)和MeOH(15mL)中。将混合物在冰水浴中冷却。通过移液管添加于水(25mL)中的LiOH水合物(711.79mg，29.722mmol)。移除冷却浴。将混合物搅拌30分钟。添加水(100mL)，然后添加EtOAc(50mL)。添加3N HCl水溶液以将pH调节至2。分离各层。将乙酸乙酯层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物用甲苯(30mL×2)处理并浓缩两次，得到黄色残余物2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基-2-氧代-己基]氨基]乙酸(5g，107％)。ESI-MS m/z计算值392.2311，实验值393.6(M+1)+；保留时间：2.68分钟；LC方法T。
步骤3：2-[[(3R)-3-氨基-5-甲基-2-氧代-己基]-苄基-氨基]乙酸
将2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基-2-氧代-己基]氨基]乙酸(5g，12.739mmol)悬浮于DCM(10mL)中。添加HCl(二噁烷中的4M溶液的20mL，80.000mmol)。将混合物在室温下搅拌2.5小时。然后将其浓缩以去除大部分挥发物。将残余物置于高真空下2小时，得到2-[[(3R)-3-氨基-5-甲基-2-氧代-己基]-苄基-氨基]乙酸(4.5g，121％)。ESI-MS m/z计算值292.17868，实验值293.4(M+1)+；保留时间：1.52分钟；LC方法T。
步骤4：(7R)-4-苄基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2,6-二酮
在室温下将2-[[(3R)-3-氨基-5-甲基-2-氧代-己基]-苄基-氨基]乙酸(二盐酸盐)(4.5g，12.319mmol)溶解于DMF(300mL)中。添加HOAt(1.98g，14.547mmol)，然后添加HATU(5.62g，14.781mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时。滴加DIEA(4.8230g，6.5mL，37.317mmol)。将反应混合物在氮气下搅拌13小时。添加水(200mL)。将混合物用EtOAc(150mL×3)萃取。将合并的有机物浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用5-90％梯度纯化，得到呈浅黄色固体的(7S)-4-苄基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2,6-二酮(1.6g，42％)。1HNMR(250MHz,氯仿-d)δ7.42–7.16(m,5H),7.01(s,1H),5.05–4.77(m,1H),3.87–3.50(m,3H),3.50–3.07(m,3H),1.82–1.53(m,2H),1.51–1.29(m,1H),0.91(d,J＝6.2Hz,6H).ESI-MS m/z计算值274.16812，实验值275.4(M+1)+；保留时间：2.89分钟；LC方法T。
步骤5：1-苄基-5-(2-甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-6-醇
将(7R)-4-苄基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2,6-二酮(1.45g，5.2851mmol)溶解于THF(35mL)中并将溶液在冰水浴中冷却5分钟。在10分钟内分批添加LAH(501.49mg，0.5469mL，13.213mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟，然后置于50℃油浴中并再搅拌3小时。然后将所述混合物在冰中冷却。缓慢添加饱和罗谢尔溶液(20mL)。将层分离，并将水层使用THF萃取更多次(30mL×2)。将合并的THF溶液浓缩并且将残余物在氯仿(30mL)与盐水(30mL)之间分配。将层分离，并将水层使用CHCl3(约30mL)再次萃取。将合并的有机物浓缩，并且将残余物通过硅胶色谱法使用0-5％MeOH/DCM纯化。分离出呈浅黄色树脂的产物1-苄基-5-(2-甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-6-醇(1.07g，78％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ7.68–6.89(m,5H),3.63(s,2H),3.51–3.41(m,1H),2.94–2.67(m,3H),2.66–2.53(m,3H),1.84–1.60(m,1H),1.37–1.06(m,2H),0.86(dd,J＝6.6,4.7Hz,6H).ESI-MS m/z计算值262.2045，实验值264.3(M+1)+；保留时间：0.83分钟；LC方法W。后续化学产物表明带有手性中心的异丁基的部分外消旋化。
步骤6：3-(4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基)-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺
在氮气下，向100mL烧瓶中装入1-苄基-5-(2-甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-6-醇(566mg，2.157mmol)、3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(760mg，1.819mmol)、碳酸钾(840mg，6.078mmol)(325目)和无水DCM(15mL)。添加DIC(0.34mL，2.171mmol)，并且将不均匀混合物在室温下剧烈搅拌16小时。将反应用DCM(40mL)稀释并将其用10％柠檬酸水溶液和盐水(40mL)的混合物淬灭。分离两层。将水层用二氯甲烷(2×30mL-在pH＝4的水相中没有检测到产物)萃取并且将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物溶解于MeOH中并通过反相色谱法(100g HP C18柱)使用含有5mM HCl的乙腈/水的梯度(25分钟内10至100％)纯化。预期产物洗脱出约45-50％MeCN。将纯级分合并并浓缩。添加盐水并且将产物用DCM(3×30mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，将溶剂蒸发，得到呈无定形黄色固体的3-(4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基)-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(358mg，30％)。ESI-MS m/z计算值661.24896，实验值662.5(M+1)+；保留时间：1.48分钟；LC方法A。
步骤7：18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮，主要非对映异构体1，顺式构型(化合物88)，以及(16R,21R)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(化合物84)，以及(16S,21S)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物87)，以及18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮，次要非对映异构体2，反式构型(化合物89)
在氮气下向100mL烧瓶中装入3-(4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基)-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(358mg，0.5406mmol)和无水DMF(35mL)。向溶液中添加NaH(60％w/w的173mg，4.325mmol)并将混合物在氮气下在室温下搅拌21小时。将10％柠檬酸溶液(25mL)和盐水(75mL)的混合物在冰中冷却并在搅拌下通过移液管将反应混合物转移到该溶液中。将所得白色沉淀过滤并干燥(321mg)。将水相用饱和碳酸钠中和至pH 7-8并将产物用EtOAc(2×40mL)萃取。在经硫酸钠干燥和溶剂的蒸发之后，获得146mg的固体。将过滤的固体溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(24g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至10％)纯化。产物洗脱出约3-4％ MeOH，得到17mg的相对纯的物质。将所述物质与萃取的级分合并，并使用较浅梯度(60分钟内0至10％)再次纯化。分离出两种非对映异构体：
分离出呈白色固体的主要非对映异构体(更少极性)，18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(81mg，22％)。ESI-MS m/z计算值625.2723，实验值626.6(M+1)+；保留时间：1.35分钟(LC方法A)。对该产物进行手性SFC分离(Phenomenex LUX-1(250×21.2mm)，μm柱，流动相：24％ MeOH(20mM NH3)，76％ CO2，流速：70毫升/分钟，MeOH+20mM NH3:DMSO(90:10)中的32mg/mL，进样体积500μL，压力：100bar，波长：210nm)，得到呈峰1的：(16R,21R)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(23mg，13％)。ESI-MS m/z计算值625.2723，实验值626.4(M+1)+；保留时间：1.36分钟(LC方法A)以及呈峰2的(16S,21S)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(23mg，13％)。ESI-MS m/z计算值625.2723，实验值626.6(M+1)+；保留时间：1.35分钟(LC方法A)。
将次要非对映异构体(更多极性)通过制备型HPLC和硅胶快速色谱法(4g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(60分钟内0至5％)进一步纯化。溶剂的蒸发呈白色固体的18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(6mg，2％)。ESI-MS m/z计算值625.2723，实验值626.5(M+1)+；保留时间：1.31分钟，(LC方法A)。
实例37：化合物90、化合物91和化合物92的制备
步骤1：3-(4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基)-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺
在氮气下，向100mL烧瓶中装入1-苄基-5-(2-甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-6-醇(420mg，1.601mmol)、3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(560mg，1.340mmol)、碳酸钾(589mg，4.262mmol)(325目)和无水DCM(10mL)。添加DIC(0.25mL，1.597mmol)，并且将不均匀混合物在室温下剧烈搅拌24小时。将反应用DCM(40mL)稀释并将其用10％柠檬酸水溶液和盐水(40mL)的混合物淬灭。分离两层。将水层用二氯甲烷(2×30mL)萃取并且将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物溶解于MeOH中并通过反相色谱法(100g，C18柱)使用乙腈/水的梯度(25分钟内10至100％)纯化，两种溶剂都含有0.1％的甲酸。预期产物洗脱出约50-60％ MeCN。将纯级分合并并浓缩。添加盐水并且将产物用DCM(3×30mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，将溶剂蒸发，得到呈无定形棕黄色固体的3-(4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基)-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(350mg，39％)。ESI-MS m/z计算值661.24896，实验值662.5(M+1)+；保留时间：1.49分钟；LC方法A。
步骤2：18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体1和非对映异构体2的混合物(87:13)(化合物90)
在氮气下向100mL烧瓶中装入3-(4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基)-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(353mg，0.5330mmol)和无水DMF(35mL)。向溶液中添加NaH(60％w/w的240mg，6.001mmol)并将混合物在氮气下在室温下搅拌24小时。将混合物冷却至0℃并通过添加10％柠檬酸淬灭。将混合物用水和盐水(总共60mL-最终pH＝5-6)稀释。将形成的白色沉淀过滤并干燥(442mg)。将产物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(24g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至10％)纯化。产物洗脱出约3-4％ MeOH，得到75mg的相对纯的物质(以85:15异构混合物的形式出现)。将产物溶解于甲醇中并通过反相色谱法(15.5g C18柱)使用含有5mM的HCl的乙腈/水的梯度(15分钟内10至100％)纯化。产物洗脱出约45-55％ MeCN。将纯级分收集并将有机溶剂通过蒸发去除。添加盐水并且将产物用DCM(3×30mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，将溶剂蒸发，得到60mg(85:15异构体混合物)。将物质溶解于MeOH(2mL)中，微过滤(0.45uM)并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化。将纯级分收集并将有机溶剂通过蒸发去除。添加盐水并且将产物用DCM(3×30mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，将溶剂蒸发，得到呈白色固体的18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(38mg，11％)。>98％纯度。ESI-MS m/z计算值625.2723，实验值626.6(M+1)+；保留时间：1.36分钟。非对映异构体的表观混合物(87:13)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)络合物光谱表明主要和次要异构体的存在。δ13.04(s,1H),8.47(s,1H),7.93(s,1H),7.67(s,2H),7.44-7.34(m,3H),7.31-7.21(m,2H),7.11(d,J＝7.6Hz,2H),6.32(s,1H),5.55(s,1H),4.32-4.16(m,1H),4.00-3.76(m,3H),3.26-3.00(m,3H),2.83-2.69(m,1H),2.22-1.72(m,7H),1.29-1.00(m,3H),0.76-0.61(m,3H),0.18(d,J＝6.2Hz,3H).ESI-MS m/z计算值625.2723，实验值626.6(M+1)+；保留时间：1.36分钟；LC方法A。
步骤3：12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体1和非对映异构体2的混合物(87:13)(化合物91)
向100mL烧瓶中装入18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(31mg，0.04855mmol)(非对映异构体混合物87:13)和MeOH(10mL)。将溶液用氮气喷射。添加Pd(OH)2(20％w/w的15mg，0.02136mmol)并将溶液在氢气(气球)气氛下搅拌15小时。将溶液用氮气吹扫。将催化剂通过硅藻土过滤去除并将滤液浓缩，得到呈纯白色固体的12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(26mg，98％)。ESI-MS m/z计算值535.22534，实验值536.5(M+1)+；保留时间：1.11分钟(LC方法A)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)较小的侧峰表明存在次要非对映异构体.δ8.65-8.37(m,1H),7.86(d,J＝7.8Hz,1H),7.68-7.50(m,2H),7.20(t,J＝7.6Hz,1H),7.08(d,J＝7.5Hz,2H),6.13(s,1H),5.56-5.32(m,1H),4.76-3.95(m,3H),3.27-3.07(m,4H),2.94-2.81(m,1H),1.98(broad s,6H),1.73(ddd,J＝14.0,10.2,3.3Hz,1H),1.21-1.08(m,1H),1.02(ddd,J＝13.5,9.8,3.2Hz,1H),0.68(d,J＝6.6Hz,3H),0.27-0.11(m,3H).
步骤4：18-(3,3-二甲基丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮，主要非对映异构体1(化合物92)
在4mL小瓶中，将(21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(22mg，0.04025mmol)(主要非对映异构体的87:13混合物)与3,3-二甲基丁醛(22μL，0.1753mmol)和乙酸(15μL，0.2638mmol)在二氯甲烷(0.5mL)中合并，并在室温下在氮气下(密闭小瓶)搅拌。在2小时之后，添加氰基硼氢化钠(15mg，0.2387mmol)并在室温下继续搅拌1.5小时。然后将反应混合物倒入氯化铵水溶液中并用DCM萃取3次。将合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并浓缩(27mg)。将所得粗物质溶解于DMSO中，微过滤并通过反相HPLC(1-99％ ACN/水，HCl改性剂，15分钟梯度)纯化。主要非对映异构体得到呈白色固体的18-(3,3-二甲基丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(4.1mg，15％)。ESI-MS m/z计算值619.3192，实验值620.6(M+1)+；保留时间：1.38分钟；LC方法A。
实例38：化合物93和化合物94的制备
步骤1：(2S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-甲基-戊酸甲酯
在0℃下，向(2S)-2-氨基-4-甲基-戊酸甲酯(盐酸盐)(50g，269.74mmol)于二噁烷(313mL)和碳酸氢钠水溶液(1250mL)的混合物中的溶液中添加Boc酸酐(62.4g，285.91mmol)。将所得溶液搅拌20小时，同时使其温热至环境温度。将反应溶液用乙酸乙酯(3×500mL)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈浅黄色油的(2S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-甲基-戊酸甲酯(50g，72％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ5.00-4.70(m,1H),4.44-4.17(m,1H),3.73(s,3H),1.85-1.54(m,2H),1.50-1.12(m,10H),0.95(d,J＝2.3Hz,3H),0.92(d,J＝2.3Hz,3H).ESI-MS m/z计算值245.1627，实验值246.1(M+1)+；保留时间：4.53分钟；LC方法S。
步骤2：N-[(1S)-1-(2-氯乙酰基)-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯
在-50℃下，向二异丙胺(104.4g，144.60mL，1.0317mol)于无水THF(700mL)中的溶液中缓慢添加n-BuLi(2.5M的412.68mL，1.0317mol)，然后将反应温热至0℃并再搅拌30分钟，然后将其冷却至-78℃。在-78℃下在30分钟内将LDA溶液(保持在-78℃)通过导管添加到(2S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-甲基-戊酸甲酯(50g，193.63mmol)和氯(碘)甲烷(139.80g，57.721mL，776.74mmol)于无水THF(1300mL)中的预冷的溶液中。将所得溶液在该温度下搅拌1.5小时。缓慢添加乙酸(164mL)和THF(164mL)的混合物以淬灭反应。将反应溶液温热至约0℃，然后添加水(1000mL)并将有机层分离。将水层用乙酸乙酯(2×600mL)萃取。将合并的有机层用盐水(400mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物(分成两批)通过快速色谱法(加载在DCM中)(330g硅胶，用0至15％ EtOAc/己烷洗脱)纯化，呈棕色固体的N-[(1S)-1-(2-氯乙酰基)-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(42.59g，79％)。1HNMR(250MHz,CDCl3)δ5.06-4.75(m,1H),4.53(q,J＝7.7,5.9Hz,1H),4.29(d,J＝2.9Hz,2H),1.87-1.52(m,3H),1.44(s,9H),0.98(d,J＝4.7Hz,3H),0.95(d,J＝4.7Hz,3H).
步骤3：2-[苄基-[(3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基-2-氧代-己基]氨基]乙酸乙酯
向2-(苄氨基)乙酸乙酯(28.476g，139.99mmol)和N-[(1S)-1-(2-氯乙酰基)-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(42.59g，153.40mmol)于无水DMF(280mL)中的溶液中添加碳酸氢钠(31.541g，375.46mmol)，然后添加碘化钠(13.801g，92.072mmol)。将所得溶液在环境温度下搅拌48小时，然后添加水(1000mL)。将溶液用乙醚(2×1000mL)萃取。将合并的有机层用盐水(500mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩，得到粗产物。将粗产物(分成两批)通过快速色谱法(加载在DCM中)(330g硅胶，用0至15％ EtOAc/己烷洗脱)纯化，得到呈浅黄色液体的2-[苄基-[(3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基-2-氧代-己基]氨基]乙酸乙酯(54.69g，85％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.57-7.05(m,5H),4.97(d,J＝8.6Hz,1H),4.40(td,J＝9.1,4.0Hz,1H),4.16(q,J＝7.1Hz,2H),3.97-3.75(m,2H),3.69(s,2H),3.47(d,J＝2.3Hz,2H),1.85-1.49(m,1H),1.49-1.31(m,10H),1.31-1.22(m,4H),0.93(d,J＝6.6Hz,3H),0.88(d,J＝6.6Hz,3H).ESI-MS m/z计算值420.26242，实验值421.3(M+1)+；保留时间：4.61分钟；LC方法S。
步骤4：2-[苄基-[(3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基-2-氧代-己基]氨基]乙酸
将2-[苄基-[(3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基-2-氧代-己基]氨基]乙酸乙酯(5g，11.889mmol)溶解于THF(50mL)中，添加MeOH(15mL)。将混合物在冰水浴中冷却。通过移液管添加LiOH水合物(1.4967g，35.667mmol)混合物和水(25mL)。移除冷却浴。将混合物再搅拌30分钟。添加水(100mL)，然后添加EtOAc(50mL)。添加3N HCl水溶液以将pH调节至2。分离各层。将乙酸乙酯层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物用甲苯(30mL×2)处理并浓缩，得到呈浅黄色残余物的2-[苄基-[(3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基-2-氧代-己基]氨基]乙酸(5g，107％)。ESI-MS m/z计算值392.2311，实验值393.6(M+1)+；保留时间：2.65分钟。
步骤5：2-[[(3S)-3-氨基-5-甲基-2-氧代-己基]-苄基-氨基]乙酸
将2-[苄基-[(3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基-2-氧代-己基]氨基]乙酸(5g，12.739mmol)悬浮于DCM(10mL)中。添加HCl(二噁烷中的4M溶液的20mL，80.000mmol)。将混合物在室温下搅拌2.5小时。然后将其浓缩以去除大部分挥发物。将残余物置于高真空下2小时，得到呈浅黄色固体的2-[[(3S)-3-氨基-5-甲基-2-氧代-己基]-苄基-氨基]乙酸(二盐酸盐)(5.1g，99％)。ESI-MS m/z计算值292.17868，实验值293.4(M+1)+；保留时间：1.52分钟；LC方法T。
步骤6：(7S)-4-苄基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2,6-二酮
在室温下将2-[[(3S)-3-氨基-5-甲基-2-氧代-己基]-苄基-氨基]乙酸(二盐酸盐)(5.1g，13.961mmol)溶解于DMF(250mL)中。添加HOAt(2.2803g，16.753mmol)，然后添加HATU(6.3700g，16.753mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时。滴加DIEA(5.4131g，7.2953mL，41.883mmol)。使反应混合物在氮气气球下搅拌13小时。添加水(200mL)。将混合物用EtOAc(150mL×3)萃取。将合并的有机物浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用5-90％梯度纯化，得到呈浅黄色固体的(7S)-4-苄基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2,6-二酮(1.6g，42％)。ESI-MS m/z计算值274.16812，实验值275.4(M+1)+；保留时间：2.89分钟；LC方法T。
步骤7：1-苄基-5-(2-甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-6-醇
将(7S)-4-苄基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2,6-二酮(1.2g，4.3738mmol)溶解于THF(30mL)中并将溶液在冰水浴中冷却5分钟。在10分钟内分批添加LAH(415.03mg，0.4526mL，10.935mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟，然后置于50℃油浴中并搅拌3小时。然后将所述混合物在冰中冷却。缓慢添加饱和罗谢尔盐溶液(20mL)。将层分离，并将水层使用THF萃取更多次(30mL×2)。将合并的THF溶液浓缩并且将残余物在氯仿(30mL)与盐水(30mL)之间分配。将层分离并将水层使用CHCl3(约30mL)再次萃取。将合并的有机物浓缩，并且将残余物通过硅胶色谱法使用0-5％MeOH/DCM纯化。分离出呈浅黄色油的产物1-苄基-5-(2-甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-6-醇。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ7.67–6.86(m,5H),3.64(s,2H),3.47(s,1H),2.93–2.80(m,1H),2.74(dd,J＝12.9,4.2Hz,2H),2.68–2.53(m,3H),1.71(dp,J＝13.3,6.4Hz,1H),1.43–1.04(m,2H),0.98–0.68(m,6H).ESI-MS m/z计算值262.2045，实验值263.4(M+1)+；保留时间：0.87分钟；LC方法W。后续工作表明70:30非对映异构混合物是由反应期间带有手性中心的异丁基的部分外消旋化产生的。
步骤8：3-(4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基)-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺
在氮气下，向20mL小瓶中装入1-苄基-5-(2-甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-6-醇(261mg，0.9947mmol)、3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(351mg，0.8400mmol)、碳酸钾(342mg，2.475mmol)和无水DCM(6mL)。添加DIC(155μL，0.9899mmol)，并且将不均匀混合物在室温下剧烈搅拌17小时。将反应用DCM(40mL)稀释并将其用10％柠檬酸水溶液和盐水(40mL)的混合物淬灭。分离两层。将水层用二氯甲烷(3×25mL)萃取并且将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物溶解于MeOH中并通过反相色谱法(30g C18柱)使用乙腈/水的梯度(20分钟内5至100％)纯化。使用相同的洗脱剂和0.1％甲酸作为改性剂将混合的级分合并并再次纯化。预期产物洗脱出约50-60％MeCN。将纯级分合并并浓缩。添加盐水并且将产物用DCM(3×30mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，将溶剂蒸发，得到呈无定形固体的3-(4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基)-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(210mg，38％)。1产物的HNMR表明非对映异构体的混合物的比率为70:30。将物质在不经任何进一步纯化的情况下用于下一步骤。ESI-MS m/z计算值661.24896，实验值662.5(M+1)+；保留时间：1.47分钟；LC方法A。
步骤9：18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体1和非对映异构体2的混合物(92:8)(化合物94)
在氮气下向100mL烧瓶中装入3-(4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基)-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(207mg，0.3126mmol)和无水DMF(20mL)。向溶液中添加NaH(60％w/w的143mg，3.575mmol)并将混合物在氮气下在室温下搅拌23小时。将混合物冷却至0℃并通过添加10％柠檬酸淬灭。将混合物用水和盐水(总共60mL)稀释。将形成的白色沉淀过滤并干燥(241mg粗)。将产物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(24g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至10％)纯化。产物洗脱出约3-4％MeOH，得到52mg的相对纯的物质(以93:7异构混合物的形式出现)。将产物溶解于甲醇中并通过反相色谱法(15.5g C18柱)使用含有5mM的HCl的乙腈/水的梯度(15分钟内10至100％)纯化。产物洗脱出约50-55％ MeCN。将纯级分收集并将有机溶剂通过蒸发去除。添加盐水并且将产物用DCM(3×30mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，将溶剂蒸发，得到呈白色固体的18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(42mg，21％)。2种非对映异构体的混合物(92:8)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)络合物光谱表明主要和次要异构体的存在。δ13.03(宽s,1H),8.48(s,1H),7.93(s,1H),7.68(s,2H),7.45-7.34(m,3H),7.26(q,J＝7.8Hz,2H),7.11(d,J＝7.5Hz,2H),6.33(s,1H),5.55(s,1H),4.34-4.10(m,1H),4.01-3.69(m,3H),3.27-2.95(m,4H),2.87-2.70(m,1H),2.28-1.70(m,7H),1.35-1.00(m,3H),0.73-0.60(m,3H),0.18(d,J＝6.2Hz,3H).ESI-MS m/z计算值625.2723，实验值626.6(M+1)+；保留时间：1.37分钟；LC方法A。
步骤10：12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物93)
向100mL烧瓶中装入18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(12mg，0.01812mmol)(非对映异构混合物80:20)和MeOH(5mL)。将溶液用氮气喷射。添加Pd(OH)2(20％w/w的14mg，0.01994mmol)并将溶液在氢气(气球)气氛下搅拌23小时。将溶液用氮气吹扫。将催化剂通过硅藻土过滤去除并将滤液浓缩，得到9mg的残余物。将产物溶解于DMSO(1mL)中，微过滤并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化。通过genevac蒸发的溶剂的蒸发得到呈白色固体的12-(2,6-二甲基苯基)-21-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(4.8mg，44％)。ESI-MS m/z计算值535.22534，实验值536.6(M+1)+；保留时间：1.1分钟；LC方法A。
实例39：化合物95和化合物96的制备
步骤1：(2S)-2-(苄氨基)-4-甲基-戊酸甲酯
将(2S)-2-氨基-4-甲基-戊酸甲酯(18.537，0.1mol)、三乙胺(10.119g，13.938mL，100.00mmol)和无水硫酸镁(20g，166.16mmol)于甲醇(200mL)中的溶液在室温下搅拌大约10分钟。添加苯甲醛(10.612g，10.204mL，100.00mmol)，并且将反应混合物在室温下搅拌16小时。然后将反应混合物通过硅藻土垫过滤以去除硫酸镁，然后将其在冰浴中冷却。将硼氢化钠(7.5665g，200.00mmol)缓慢添加到反应混合物中。添加期间产生的气体。将反应混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物用饱和氯化铵(100mL)淬灭以将pH调节至7。将挥发物在真空下去除。将水溶液残余物用乙醚(3×200mL)萃取。将合并的乙醚层用水(200mL)和盐水(200mL)洗涤，经无水硫酸镁干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至20％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈澄清油的(2S)-2-(苄氨基)-4-甲基-戊酸甲酯(10.851g，46％)。ESI-MS m/z计算值235.15723，实验值236.2(M+1)+；保留时间：2.87分钟；LC方法S。
步骤2：(3S,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮
向(2S)-2-(苄氨基)-4-甲基-戊酸甲酯(18.83g，80.018mmol)和2-[[(2S)-环氧烷-2-基]甲基]异吲哚啉-1,3-二酮(16.259g，80.018mmol)于ACN(112.98mL)中的溶液中添加高氯酸镁(26.791g，120.03mmol)。将反应在室温下搅拌24小时。将反应用水(500mL)稀释并用二氯甲烷(3×500mL)萃取。将合并的有机层用盐水(500mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物用甲醇(377mL)稀释。将水合肼(10.975g，160.04mmol)添加到反应混合物中。将反应在65℃下搅拌2天。将白色沉淀滤出，并将滤液在真空下浓缩。将残余物用1N NaOH(水溶液)(200mL)淬灭，并将其用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用50至100％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈类白色固体的(3S,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(10.34g，44％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.38-7.27(m,5H),6.02(t,J＝6.8Hz,1H),3.90-3.78(m,2H),3.72(dd,J＝8.6,6.1Hz,1H),3.52(d,J＝13.9Hz,1H),3.36(t,J＝6.6Hz,2H),3.19(dd,J＝14.3,3.7Hz,1H),2.67(dd,J＝14.3,9.5Hz,1H),1.94-1.80(m,1H),1.74-1.66(m,1H),1.62-1.46(m,1H),0.95(dd,J＝6.6,5.6Hz,6H).ESI-MS m/z计算值276.18378，实验值277.0(M+1)+；保留时间：2.25分钟；LC方法S。
步骤3：(3S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮
在0℃下向(3S,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(5.63g，20.371mmol)于DCM(112mL)中的溶液中添加戴斯-马丁过碘烷(12.960g，30.556mmol)。将反应在室温下搅拌2小时。将反应用Na2S2O3和碳酸氢钠的饱和1:1混合物(100mL)的混合物淬灭，并将其用DCM(3×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空中浓缩。将残余物溶解于甲醇(281mL)中。将硼氢化钠(2.3121g，2.4467mL，61.113mmol)在室温下添加到反应混合物中并搅拌1小时。将反应用水(100mL)淬灭。将产物用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用50至100％己烷-乙酸乙酯纯化，得到(3S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(1.793g，32％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.52-6.96(m,5H),6.12(s,1H),3.99-2.51(m,8H),1.94-1.63(m,2H),1.63-1.37(m,1H),1.05-0.68(m,6H).ESI-MS m/z计算值276.18378，实验值276.9(M+1)+；保留时间：2.22分钟；LC方法S。非对映异构体的混合物。
步骤4：(2S)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮
向(3S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(1.793g，6.4227mmol)于无水THF(40mL)中的溶液中添加LAH(1.4626g，1.5950mL，38.536mmol)。将反应混合物在40℃下搅拌2天。随后将反应用水(1.5mL)、15％ NaOH(水溶液)(1.5mL)和水(4.5mL)淬灭。在室温下搅拌1小时之后，将白色沉淀通过硅藻土垫过滤去除。将滤液经无水硫酸镁干燥并在真空中浓缩，得到呈非对映异构体的混合物的(2S)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(1.598g，95％)。ESI-MS m/z计算值262.2045，实验值263.2(M+1)+；保留时间：1.96分钟；LC方法S。
步骤5：(3S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向(2S)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(1.598g，6.0902mmol)于二氯甲烷(20mL)中的溶液中添加Boc酸酐(1.9938g，9.1353mmol)和三乙胺(0.924g，9.1353mmol)。将反应在室温下搅拌2小时。将反应用盐水(50mL)淬灭。将两个层分离，并将水层用二氯甲烷(2×50mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸镁干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至100％己烷-乙醚纯化，得到呈透明凝胶和呈非对映异构体的混合物的(3S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.359g，61％)。ESI-MSm/z计算值362.25696，实验值363.3(M+1)+；保留时间：3.88分钟；LC方法S。
步骤6：(3S)-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向(3S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(647mg，1.7848mmol)于甲醇(50mL)中的溶液中添加10％钯/炭(190mg)和甲酸铵(337.63mg，5.3544mmol)。将反应混合物在65℃下搅拌2小时。在冷却至室温之后，将催化剂通过硅藻土垫过滤去除。将滤液在真空下浓缩。将残余物用二氯甲烷(50mL)稀释，并且用水(20mL)和盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至20％二氯甲烷/甲醇(用0.5％氢氧化铵缓冲)纯化，得到呈澄清油和呈非对映异构体的混合物的(3S)-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(382.4mg，78％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ4.64(m,1H),3.96-3.43(m,3H),3.05-2.61(m,3H),2.35(m,1H),1.98(s,1H),1.79-1.54(m,1H),1.38(s,9H),1.24-0.96(m,2H),0.85(t,J＝6.8Hz,6H).ESI-MS m/z计算值272.21，实验值273.2(M+1)+；保留时间：2.95分钟；LC方法S。
步骤7：(3S,6R)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯和(3S,6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰]-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在氮气下向100mL烧瓶中装入(3S)-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(371mg，1.362mmol)(非对映异构体的1:1混合物)、无水DMF(8mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(474mg，1.134mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(1.3mL，7.463mmol)和HATU(525mg，1.381mmol)并将混合物在0℃下搅拌4小时。通过LCMS检测2个异构体(1:1比率)。将反应通过在剧烈搅拌下倒入柠檬酸(10％w/v的50mL，26.02mmol)(10％水溶液)中来淬灭并在冰中冷却。将所得白色固体过滤并干燥。将固体溶解于DCM中并将其通过硅胶快速色谱法(80g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。分离出两个异构体：首先洗脱的更少极性非对映异构体，(3S,6R)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(240mg，63％)。ESI-MS m/z计算值671.25446，实验值672.36(M+1)+；保留时间：1.98分钟(LC方法A)；以及其次洗脱的更少极性非对映异构体，(3S,6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(294mg，77％)。ESI-MS m/z计算值671.25446，实验值672.36(M+1)+；保留时间：1.94分钟(LC方法A)。
步骤8：(16S,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(化合物96)
在氮气下向100mL烧瓶中装入(3S,6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(294mg，0.4373mmol)和无水DMF(15mL)。将混合物在冰中冷却。一次性添加NaH(60％w/w的155mg，3.875mmol)(60％矿物油分散体)。将混合物在氮气下在0℃下搅拌5分钟。将冰浴去除，并且将反应在氮气下剧烈搅拌5小时。在搅拌下，将反应混合物缓慢倒入冰冷的10％柠檬酸(10％w/v的60mL，31.23mmol)水溶液中。将所得固体悬浮液用EtOAc(3×50mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物，将所述残余物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(40g柱)使用MeOH/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。溶剂的蒸发和DCM/己烷中的研磨/蒸发的几个循环得到呈白色固体的(16S,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(186mg，66％)。ESI-MS m/z计算值635.2778，实验值636.4(M+1)+；保留时间：1.91分钟(LC方法A)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6+10％ D2O)两个比率为1:2的旋转异构体。δ8.32(s,0.35H),8.18(s,0.65H),7.91-7.83(m,1H),7.67(td,J＝7.7,1.5Hz,1H),7.55(d,J＝7.6Hz,1H),7.29(t,J＝7.6Hz,1H),7.14(d,J＝7.7Hz,2H),6.18(s,1H),5.74-5.51(m,1H),5.12-4.94(m,1H),4.25-3.98(m,2H),3.44(q,J＝14.4Hz,1H),3.22-2.97(m,3H),2.05(宽s,6H),1.69-1.53(m,1H),1.46(s,11H),1.04-0.81(m,6H).在不存在D2O的情况下观察到磺胺NH为13.02ppm。
步骤9：(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物95)
在氮气下向含有(20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(170mg，0.2620mmol)的100mL烧瓶中装入DCM(2mL)。添加HCl(4M的1mL，4.000mmol)(4M二噁烷溶液)并将混合物在室温下搅拌2.5小时。添加另外量的HCl(4M的0.5mL，2.000mmol)并将混合物再搅拌2.5小时。将挥发物通过蒸发去除并且将残余物在DCM/己烷中研磨并且将溶剂蒸发。重复操作，直到获得固体为止。在真空下的干燥得到(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(157mg，103％)。ESI-MS m/z计算值535.22534，实验值536.45(M+1)+；保留时间：1.05分钟(LC方法A)。
实例40：化合物97的制备
步骤1：(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-18-{螺[3.4]辛烷-2-基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物97)
向4mL小瓶中装入(20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(20mg，0.03426mmol)、螺[3.4]辛烷-2-酮(34mg，0.2738mmol)、无水DCM(400μL)、DIEA(10μL，0.05741mmol)和乙酸(13μL，0.2286mmol)。将小瓶加盖并在室温下搅拌约10分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(25mg，0.1180mmol)。将小瓶用氮气吹扫，加盖并且将反应在室温下搅拌4.5小时。添加甲醇(100μL)。将DCM蒸发并且将残余物溶于DMSO(1mL)中。将溶液微过滤(0.45μm)并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化，得到呈白色固体的(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-18-{螺[3.4]辛烷-2-基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(15.3mg，64％)。ESI-MS m/z计算值643.3192，实验值644.76(M+1)+；保留时间：1.42分钟(LC方法A)。
实例41：化合物98的制备
步骤1：(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-18-(2,2,2-三氟乙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物98)
向4mL小瓶中装入(20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(21mg，0.03597mmol)、无水DMF(500μL)、DIEA(19μL，0.1091mmol)和2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(7μL，0.04859mmol)。将小瓶用氮气吹扫，加盖并且将反应在室温下搅拌2.5小时。添加第二量的试剂2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(7μL，0.04859mmol)并将混合物搅拌1.5小时。添加甲醇(500μL)。将溶液微过滤并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化。收集含有反应的主峰的级分(Rt＝0.62分钟，使用1分钟LCMS方法)。溶剂的蒸发得到呈白色固体的(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-18-(2,2,2-三氟乙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(8.8mg，37％)。ESI-MS m/z计算值617.22833，实验值618.44(M+1)+；保留时间：1.52分钟；LC方法A。
实例42：化合物99的制备
步骤1：(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-甲基-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物99)
将(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(20mg，0.03426mmol)溶解于甲酸(250μL)(88％水溶液)中并与甲醛水溶液(900μL，32.67mmol)(37％水溶液)合并，并在螺旋盖小瓶中加热至90℃5小时。然后将反应混合物通过吹入氮气部分浓缩，用甲醇稀释。将溶液微过滤并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化，得到呈白色固体的(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-甲基-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(13.7mg，67％)。ESI-MS m/z计算值549.24097，实验值550.43(M+1)+；保留时间：1.13分钟；LC方法A。
实例43：化合物100的制备
步骤1：(2S,6S)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮
向(3S,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(4.713g，17.053mmol)于无水THF(100mL)中的溶液中缓慢添加LAH(3.8835g，102.32mmol)。将反应在40℃下搅拌2天。在0℃下向反应混合物中添加水(3.9mL)、15％ NaOH(水溶液)(3.9mL)和水(11.7mL)。将反应混合物再搅拌30分钟，然后将其通过硅藻土垫过滤。将滤饼用THF(3×20mL)洗涤。将合并的滤液在真空下浓缩，得到呈澄清液体的(2S,6S)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(4.785g，98％)。将粗产物在不经纯化的情况下直接用于下一步骤反应。ESI-MS m/z计算值262.2045，实验值263.3(M+1)+；保留时间：1.95分钟；LC方法S。
步骤2：(3S,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向(2S,6S)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(4.785g，18.236mmol)于二氯甲烷(50mL)中的溶液中添加Boc酸酐(5.9699g，27.354mmol)和三乙胺(2.5465g，3.5076mL，25.166mmol)。将反应在室温下搅拌2小时。将反应用盐水(50mL)淬灭。将两个层分离，并将水层用二氯甲烷(2×50mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸镁干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至60％己烷-乙醚纯化，得到呈透明凝胶的(3S,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(3.692g，56％)ESI-MS m/z计算值362.25696，实验值363.3(M+1)+；保留时间：3.84分钟；LC方法S。
步骤3：(3S,6R)-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向(3S,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.919g，5.2937mmol)于甲醇(100mL)中的溶液中添加10％钯/炭(563mg)。将甲酸铵(1.0014g，15.881mmol)添加到反应中。将反应混合物在65℃下搅拌2小时。将催化剂通过过滤去除，并将溶液在真空下浓缩。将残余物用二氯甲烷(100mL)稀释，并且用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，得到呈澄清油的(3S,6R)-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.432g，94％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ4.62(s,1H),3.56(s,1H),3.42(d,J＝6.0Hz,1H),3.26(dt,J＝13.1,5.6Hz,2H),3.07-2.92(m,1H),2.85-2.58(m,2H),2.30(dt,J＝14.7,7.6Hz,1H),1.88(s,1H),1.69(dq,J＝13.6,6.5Hz,1H),1.40(s,9H),1.10(dq,J＝22.6,6.5,6.1Hz,2H),0.86(t,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS m/z计算值272.21，实验值273.1(M+1)+；保留时间：2.86分钟；LC方法S。
步骤4：(3S,6R)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(3S,6R)-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(680mg，2.496mmol)、无水DMF(15mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(870mg，2.082mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(2.4mL，13.78mmol)和HATU(958mg，2.520mmol)并将混合物在0℃下搅拌2.5小时。将反应通过在剧烈搅拌下倒入柠檬酸(10％w/v的75mL，39.04mmol)(10％水溶液)中来淬灭并在冰中冷却。将所得白色固体过滤。将固体溶解于DCM中并将其通过硅胶快速色谱法(120g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约2-3％甲醇。溶剂的蒸发得到呈白色泡沫状固体的(3S,6R)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.277g，91％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6+10％ D2O)旋转异构体的络合物混合物。δ8.06-7.95(m,1.5H),7.77(s,0.5H),7.68-7.54(m,2H),7.32-7.21(m,2H),7.14(dd,J＝7.6,3.0Hz,2H),4.75(宽s,0.5H),4.47(d,J＝13.5Hz,0.5H),3.95(br d,J＝19.9Hz,1H),3.85-3.56(m,2H),3.30(brs,1H),3.27-2.96(m,3H),1.93(2单线态,6H),1.57(dt,J＝13.3,6.6Hz,1H),1.44-1.35(m,9H),1.31-1.15(m,2H),1.02-0.91(m,3H),0.62-0.18(m,3H).在不存在D2O的情况下，在12.34ppm处可见可交换磺酰胺NH。ESI-MS m/z计算值671.25446，实验值672.44(M+1)+；保留时间：1.98分钟；LC方法A。
步骤5：(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(化合物100)
在氮气下向100mL烧瓶中装入(3S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰]-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.258g，1.871mmol)和无水DMF(60mL)。将混合物在冰中冷却。分两等部分添加NaH(60％w/w的665mg，16.63mmol)(60％矿物油分散体)。将混合物在氮气下在0℃下搅拌5分钟。将冰浴去除，并且将反应在氮气下剧烈搅拌3小时。在搅拌下，将反应混合物缓慢倒入冰冷的柠檬酸(10％w/v的250mL，130.1mmol)水溶液中。将所得固体悬浮液用EtOAc(3×70mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物，将所述残余物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(120g柱)使用MeOH/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约3-4％ MeOH。溶剂的蒸发和DCM/己烷中的研磨/蒸发的几个循环得到呈白色固体的(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(420mg，35％)。ESI-MS m/z计算值635.2778，实验值636.36(M+1)+；保留时间：1.88分钟(LC方法A)。将该物质在不经任何进一步纯化的情况下用于下一步骤。
将少量物质(24mg)溶解于DMSO(1mL)中并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化。将有机溶剂蒸发并将从水中析出的固体用DCM(2×20mL)萃取。在经硫酸钠干燥和蒸发之后，分离出呈白色固体的(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(17mg，69％)1H NMR(400MHz,DMSO-d6+10％ D2O)可见2个构象异构体，1:1比率δ8.19(d,J＝14.2Hz,1H),7.88(t,J＝7.6Hz,1H),7.68(td,J＝7.8,4.0Hz,1H),7.46(t,J＝7.1Hz,1H),7.28(t,J＝7.6Hz,1H),7.14(d,J＝7.7Hz,2H),6.25(s,1H),5.52-5.32(m,1H),4.29(t,J＝12.4Hz,1H),3.95(信号与水信号重叠，可能是1H),3.80-3.56(m,2H),3.33-3.22(m,1H),3.19-2.86(m,2H),2.51-2.39(m,1H),2.04(宽s,6H),1.82-1.66(m,1H),1.48和1.43(两个d,9H),1.36-1.29(m,1H),0.94(dd,J＝18.0,6.6Hz,6H).在不存在D2O的情况下，磺胺NH信号在13.0ppm左右可见。ESI-MS m/z计算值635.2778，实验值636.43(M+1)+；保留时间：1.88分钟；LC方法A。
实例44：化合物101和化合物102的制备
步骤1：(3R,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮
向2-[[(2R)-环氧烷-2-基]甲基]异吲哚啉-1,3-二酮(10.422g，51.291mmol)于ACN(72.420mL)中的溶液中添加(2R)-2-(苄氨基)-4-甲基-戊酸甲酯(12.07g，51.291mmol)和高氯酸镁(17.173g，76.936mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后用水(70mL)稀释并用DCM(3×75mL)萃取。将合并的有机层用盐水(70mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将有机残余物溶解于甲醇(241.40mL)中并将水合肼(7.0345g，6.8362mL，102.58mmol)添加到反应中。将反应在65℃下搅拌24小时。将反应冷却至室温并滤出白色固体。将滤液浓缩并且然后用1N NaOH(200mL)稀释，然后用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，然后通过硅胶色谱法纯化，用0-5％DCM-MeOH洗脱，得到(3R,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(6.81g，45％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.30(s,5H),5.98(s,1H),3.86(d,J＝14.0Hz,2H),3.72(dd,J＝8.6,6.2Hz,1H),3.52(d,J＝14.1Hz,1H),3.45-3.32(m,2H),3.19(dd,J＝14.3,3.8Hz,1H),2.67(dd,J＝14.2,9.4Hz,1H),1.94-1.77(m,1H),1.77-1.62(m,1H),1.62-1.49(m,1H),0.95(dd,J＝6.6,5.5Hz,6H).ESI-MS m/z计算值276.18378，实验值277.1(M+1)+；保留时间：2.73分钟；LC方法S。
步骤2：(2R,6R)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮
向(3R,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(6.81g，24.641mmol)于THF(120mL)中的溶液中添加LAH(5.6115g，147.85mmol)。将反应在40℃下搅拌过夜，然后冷却至室温。随后在0℃下将反应用水(5.6mL)、15％ NaOH(水溶液)(5.6mL)和水(16.8mL)淬灭。将反应混合物再搅拌30分钟，然后将其通过硅藻土垫过滤。将滤饼用THF(3×50mL)洗涤。将合并的滤液在真空下浓缩，得到(2R,6R)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(6.53g，101％)。ESI-MS m/z计算值262.2045，实验值263.3(M+1)+；保留时间：2.38分钟；LC方法S。
步骤3：(3R,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在室温下向(2R,6R)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(6.53g，24.887mmol)于DCM(78.360mL)中的溶液中添加Boc酸酐(8.1474g，37.331mmol)和三乙胺(3.7775g，5.2032mL，37.331mmol)并搅拌过夜。将反应用盐水(100mL)淬灭。将两个层分离，并将水层用DCM(2×100mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸镁干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0-5％ DCM-MeOH纯化，得到(3R,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(7.02g，78％)。ESI-MS m/z计算值362.25696，实验值363.2(M+1)+；保留时间：3.68分钟；LC方法S。
步骤4：(3R,6S)-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向(3R,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(3.51g，9.6826mmol)于甲醇(100mL)中的溶液中添加钯(1.0305g，0.9683mmol)和甲酸铵(1.8316g，29.048mmol)。将反应在65℃下搅拌2小时。将钯通过过滤去除，并将溶液在真空下浓缩。将残余物用二氯甲烷(100mL)稀释，并用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，得到(3R,6S)-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(2.41g，91％)1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ4.61(s,1H),3.63-3.49(m,1H),3.46-3.39(m,1H),3.32-3.20(m,2H),3.07-2.92(m,1H),2.87-2.59(m,2H),2.38-2.22(m,1H),1.77-1.60(m,1H),1.39(s,9H),1.22-0.97(m,2H),0.86(t,J＝6.7Hz,6H).ESI-MS m/z计算值272.21，实验值273.1(M+1)+；保留时间：2.77分钟；LC方法S。
步骤5：(3R,6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
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在氮气下，向100mL烧瓶中装入(3R,6S)-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(998mg，3.664mmol)、无水DMF(20mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.279g，3.061mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(3.6mL，20.67mmol)和HATU(1.43g，3.761mmol)并将混合物在0℃下搅拌3.5小时。将反应通过在剧烈搅拌下倒入柠檬酸(10％w/v的110mL，57.25mmol)(10％水溶液)中来淬灭并在冰中冷却。将所得白色固体过滤。将湿固体溶解于DCM中并将溶液经硫酸钠干燥。在浓缩之后，将所述溶液通过硅胶快速色谱法(120g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约3-4％甲醇。溶剂的蒸发得到呈白色泡沫状固体的(3R,6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.783g，87％)。ESI-MS m/z计算值671.25446，实验值672.33(M+1)+；保留时间：1.92分钟；LC方法A。
步骤6：(16S,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(化合物102)
在氮气下向100mL烧瓶中装入(3R,6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.45g，2.157mmol)和无水DMF(70mL)。将混合物在冰中冷却。分两等部分添加NaH(60％w/w的768mg，19.20mmol)(60％矿物油分散体)，彼此间隔3分钟添加。将混合物在氮气下在0℃下搅拌10分钟。将冰浴去除，并且将反应在氮气下剧烈搅拌4小时。在搅拌下，将反应混合物缓慢倒入冰冷的柠檬酸(10％w/v的300mL，156.1mmol)水溶液中。将所得固体悬浮液用EtOAc(3×75mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物，将所述残余物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(120g柱)使用MeOH/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约3-4％ MeOH。溶剂的蒸发和DCM/己烷中的研磨/蒸发的几个循环得到呈类白色固体的(16S,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(481mg，34％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6+10％ D2O)在(60:40)比率δ8.18和8.15中可见两个旋转异构体(两个s，60:40比率，总共1H),7.85(t,J＝8.6Hz,1H),7.73-7.59(m,1H),7.49-7.39(m,1H),7.25(t,J＝7.7Hz,1H),7.11(d,J＝7.8Hz,2H),6.26(s,1H),5.40(宽s,1H),4.26(t,J＝12.1Hz,1H),3.97-3.84(m,1H),3.70-3.55(m,2H与水信号重叠),3.24(br s,1H),3.16-2.89(m,2H),2.46-2.34(m,1H),2.01(br s,6H),1.76-1.61(m,1H),1.51-1.23(m,10H),0.92(dd,J＝21.8,6.6Hz,6H).ESI-MS m/z计算值635.2778，实验值636.32(M+1)+；保留时间：1.93分钟；LC方法A。
步骤7：(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(化合物101)
在氮气下向含有(16S,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(445mg，0.6859mmol)的100mL烧瓶中装入DCM(15mL)。添加于二噁烷中的4M氯化氢(4.0M的4.3mL，17.20mmol)(4M二噁烷溶液)并将混合物在室温下搅拌2.5小时(94％转化)。添加另外量的并将混合物再搅拌2.5小时。将挥发物在减压下去除并将残余物用二氯甲烷/己烷研磨并将挥发物蒸发。重复操作，直到获得固体为止。在真空下的干燥得到(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(393mg，100％)。ESI-MS m/z计算值535.22534，实验值536.4(M+1)+；保留时间：1.17分钟；LC方法A。
实例45：化合物103的制备
步骤1：(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-甲基-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物103)
将(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(25mg，0.04370mmol)溶解于甲酸(250μL)(88％水溶液)中并与甲醛水溶液(900μL，32.67mmol)(37％水溶液)合并，并在螺旋盖小瓶中加热至90℃4小时。然后将反应混合物通过吹入氮气部分浓缩，用甲醇稀释。将溶液微过滤并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化，得到呈白色固体的(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-甲基-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(15.7mg，60％)。ESI-MS m/z计算值549.24097，实验值550.68(M+1)+；保留时间：1.12分钟；LC方法A。
实例46：化合物104的制备
步骤1：(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-(2,2-二甲基丙基)-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(化合物104)
按照该顺序向4mL小瓶中装入(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(20mg，0.03496mmol)、2,2-二甲基丙醛(30mg，0.3483mmol)、无水二氯甲烷(1mL)、N,N-二异丙基乙胺(10μL，0.05741mmol)和冰乙酸(10μL，0.1758mmol)。将小瓶在氮气下加盖并在室温下搅拌30分钟。然后立即添加三乙酰氧基硼氢化钠(40mg，0.1887mmol)。将小瓶用氮气吹扫，加盖并且将反应混合物在室温下搅拌13小时。添加甲醇(0.2mL)并且将挥发物在减压下去除。将残余物溶于DMSO(1mL)中。将溶液微过滤并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化，得到呈白色固体的(16R,20R)-12-(2,6-二氟环己基)-18-(2,2-二甲基丙基)-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(11mg，49％)。ESI-MS m/z计算值605.3036，实验值606.4(M+1)+；保留时间：1.95分钟；LC方法A。
实例47：化合物105的制备
步骤1：(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-18-(2,2,2-三氟乙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(化合物105)
向2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(7.5mg，0.03231mmol)和(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(14mg，0.02447mmol)于无水DMF(0.6mL)中的搅拌的溶液中添加DIEA(15μL，0.08612mmol)并用氮气吹扫30秒。将澄清反应在环境温度下搅拌2小时。将反应微过滤并通过反相柱色谱法(C18柱)纯化，用1-99％乙腈/水洗脱15分钟(5mM HCl水溶液作为改性剂)。将期望的级分浓缩并干燥，得到呈白色固体的(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-18-(2,2,2-三氟乙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10,12,14(22)-六烯-2,8,8-三酮(8.1mg，53％)。1H NMR(499MHz,DMSO-d6)δ9.81(s,1H),9.03(t,J＝1.7Hz,1H),8.08(d,J＝8.0Hz,1H),7.78(t,J＝7.8Hz,1H),7.69(dt,J＝7.8,1.2Hz,1H),7.22(t,J＝7.6Hz,1H),7.11(d,J＝7.6Hz,2H),6.66(s,1H),5.57-5.43(m,1H),5.20(dq,J＝17.5,8.8Hz,1H),4.99(dq,J＝17.1,8.6Hz,1H),4.01-3.85(m,2H),3.71(d,J＝13.1Hz,1H),3.58-3.45(m,3H),3.22(d,J＝12.7Hz,1H),3.09(dd,J＝14.2,10.8Hz,1H),1.96(s,6H),1.68(dq,J＝13.0,6.4Hz,1H),1.35(ddd,J＝13.7,9.1,4.8Hz,1H),0.96(d,J＝6.6Hz,3H),0.91(d,J＝6.6Hz,3H).ESI-MS m/z计算值617.22833，实验值618.4(M+1)+；保留时间：1.72分钟；LC方法A。
实例48：化合物106的制备
步骤1：(2R)-2-(苄氨基)-4-甲基-戊酸甲酯
在室温下，向(2R)-2-氨基-4-甲基-戊酸甲酯(盐酸盐)(30g，161.84mmol)于甲醇(300.00mL)中的溶液中添加TEA(16.377g，22.558mL，161.84mmol)和硫酸镁(32.368g，268.91mmol)并搅拌10分钟。将苯甲醛(17.175g，16.357mL，161.84mmol)添加到混合物中并在室温下搅拌2天。将溶液通过硅藻土垫过滤并在冰浴中缓慢添加硼氢化钠(12.246g，12.959mL，323.68mmol)。将反应搅拌1小时，然后用氯化铵(150mL)淬灭。将甲醇在真空中去除并将溶液用乙醚(3×300mL)萃取。将有机层用水(300mL)和盐水(300mL)洗涤，然后经硫酸钠干燥并浓缩，然后通过洗脱0-20％己烷-乙酸乙酯的硅胶色谱法纯化，得到呈澄清液体的(2R)-2-(苄氨基)-4-甲基-戊酸甲酯(26.8g，70％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.47-6.90(m,5H),3.81(d,J＝12.9Hz,1H),3.72(s,3H),3.61(d,J＝12.9Hz,1H),3.31(t,J＝7.2Hz,1H),1.83-1.71(m,1H),1.66(s,1H),1.48(dd,J＝7.6,6.3Hz,2H),0.88(dd,J＝16.4,6.6Hz,6H).ESI-MS m/z计算值235.15723，实验值236.3(M+1)+；保留时间：2.66分钟；LC方法S。
步骤2：(3R,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮
在室温下，向2-[[(2R)-环氧烷-2-基]甲基]异吲哚啉-1,3-二酮(10.880g，53.544mmol)和(2R)-2-(苄氨基)-4-甲基-戊酸甲酯(12g，50.994mmol)的乙腈(75mL)中的溶液中分批添加高氯酸镁(17.073g，76.491mmol)。在添加完成之后，将反应混合物搅拌24小时。将反应用水(300mL)淬灭并将产物用DCM(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(80mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。在室温下将获得的残余物溶解于甲醇(250mL)中，并添加水合肼(5.1057g，101.99mmol)。将反应混合物加热至65℃24小时。在冷却至室温之后，将白色沉淀滤出并将滤液在真空下浓缩。将获得的残余物用1M NaOH水溶液(200mL)稀释并且将产物用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-5％ DCM-甲醇纯化，得到呈白色泡沫的(3R,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(8.43g，57％)1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.38-7.14(m,5H),6.08(s,1H),3.96-3.71(m,3H),3.67-3.43(m,2H),3.42-3.23(m,1H),3.21-3.02(m,1H),2.98-2.82(m,1H),1.98-1.66(m,3H),1.62-1.44(m,1H),1.03-0.79(m,6H).ESI-MS m/z计算值276.18378，实验值277.7(M+1)+；保留时间：2.64分钟；LC方法S。
步骤3：(3R,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在0℃下在氮气下向(3R,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(8.43g，30.502mmol)于无水THF(260mL)中的搅拌的溶液中分批添加LAH(6.9460g，183.01mmol)。在添加完成之后，将反应混合物在0℃下搅拌10分钟，并且然后加热至45℃24小时。将反应混合物冷却至0℃并且然后按照Fieser后处理程序淬灭。将盐通过硅藻土垫滤出，将滤饼用THF(2×150mL)洗涤，并将合并的滤液在真空下浓缩。将获得的残余物溶解于DCM(90mL)中并冷却至0℃。添加TEA(4.6297g，6.3770mL，45.753mmol)，然后添加Boc酸酐(9.9855g，45.753mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1小时。将反应用盐水(200mL)冷淬灭并将2个层分离。将水层用DCM(2×150mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-25％己烷-丙酮纯化，得到呈黄色油的(3R,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(11.54g，99％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.39-7.14(m,5H),3.98-3.60(m,3H),3.57-3.19(m,3H),2.97-2.56(m,3H),1.83-1.57(m,1H),1.56-1.18(m,13H),1.01-0.76(m,6H).ESI-MS m/z计算值362.25696，实验值363.7(M+1)+；保留时间：4.19分钟；LC方法S。
步骤4：(3R,6R)-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
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在室温下向(3R,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(5.3g，14.620mmol)于无水甲醇(140mL)中的搅拌的溶液中添加钯/炭(2.3338g，10％w/w，2.1930mmol)，然后添加甲酸铵(3.6875g，58.480mmol)。将反应混合物加热至65℃1小时。在冷却至室温之后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤并将滤饼用甲醇(2×80mL)洗涤。将合并的滤液在真空下浓缩，得到呈无色油的(3R,6R)-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(3.98g，92％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ4.68(s,1H),4.13(s,1H),3.93-3.63(m,3H),2.98-2.53(m,3H),2.45-2.30(m,1H),2.05-1.56(m,1H),1.42-1.32(m,9H),1.27-0.95(m,3H),0.94-0.75(m,6H).ESI-MS m/z计算值272.21，实验值273.3(M+1)+；保留时间：1.61分钟；LC方法T。
步骤5：(3R,6R)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(3R,6R)-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(933mg，3.425mmol)、无水DMF(20mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.19g，2.848mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(3.3mL，18.95mmol)和HATU(1.33g，3.498mmol)并将混合物在0℃下搅拌5小时。将反应通过在剧烈搅拌下倒入柠檬酸(10％w/v的100mL，52.05mmol)(10％水溶液)中来淬灭并在冰中冷却。将所得白色固体过滤并干燥。将固体溶解于DCM中并将其通过硅胶快速色谱法(120g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约3-4％甲醇。溶剂的蒸发得到呈类白色泡沫状固体的(3R,6R)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.183g，62％)。ESI-MS m/z计算值671.25446，实验值672.26(M+1)+；保留时间：1.98分钟；LC方法A。
步骤6：(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(化合物106)
在氮气下向100mL烧瓶中装入(3R,6R)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.158g，1.723mmol)和无水DMF(55mL)。将混合物在冰中冷却。分两等部分添加NaH(60％w/w的604mg，15.10mmol)(60％矿物油分散体)，彼此间隔3分钟添加。将混合物在氮气下在0℃下搅拌10分钟。将冰浴去除，并且将反应在氮气下剧烈搅拌2小时。在搅拌下，将反应混合物缓慢倒入冰冷的柠檬酸(10％w/v的230mL，119.7mmol)水溶液中。将所得固体悬浮液用EtOAc(100mL和2×50mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物，将所述残余物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(120g柱)使用MeOH/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约3-4％ MeOH。溶剂的蒸发和DCM/己烷中的研磨/蒸发的几个循环得到呈白色固体的(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(499mg，45％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6+10％ D2O)2个旋转异构体可见(70:30)δ8.34-8.11(m,1H),7.84(d,J＝7.7Hz,1H),7.64(t,J＝7.8Hz,1H),7.52(d,J＝7.6Hz,1H),7.25(t,J＝7.6Hz,1H),7.11(d,J＝7.7Hz,2H),6.17(s,1H),5.70-5.46(m,1H),5.08-4.90(m,1H),4.22-4.05(m,1H),4.03-3.86(m,1H),3.49-3.31(m,1H),3.20-2.91(m,3H),2.02(broad s,6H),1.62-1.51(m,1H),1.46-1.36(m,11H),0.97-0.85(m,6H).ESI-MS m/z计算值635.2778，实验值636.4(M+1)+；保留时间：1.89分钟(LC方法A)。
实例49：化合物107的制备
步骤1：(3S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮
在0℃下向(3S,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(5.63g，20.371mmol)于DCM(112mL)中的溶液中添加戴斯-马丁过碘烷(12.960g，30.556mmol)。将反应在室温下搅拌2小时。将反应用Na2S2O3和碳酸氢钠的饱和1:1混合物(100mL)的混合物淬灭，并将其用DCM(3×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空中浓缩。将残余物溶解于甲醇(281mL)中。将硼氢化钠(2.3121g，2.4467mL，61.113mmol)在室温下添加到反应混合物中并搅拌1小时。将反应用水(100mL)淬灭。将产物用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用50至100％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈类浅黄色泡沫状固体的(3S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(1.793g，32％)。1HNMR(250MHz,CDCl3)δ7.52-6.96(m,5H),6.12(s,1H),3.99-2.51(m,8H),1.94-1.63(m,2H),1.63-1.37(m,1H),1.05-0.68(m,6H).产物是非对映异构体的混合物。ESI-MS m/z计算值276.18378，实验值276.9(M+1)+；保留时间：2.22分钟；LC方法S。
步骤2：(2S)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮
向(3S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(1.793g，6.4227mmol)于无水THF(40mL)中的溶液中添加LAH(1.4626g，1.5950mL，38.536mmol)。将反应混合物在40℃下搅拌2天。随后将反应用水(1.5mL)、15％ NaOH(水溶液)(1.5mL)和水(4.5mL)淬灭。在室温下搅拌1小时之后，将白色沉淀通过硅藻土垫过滤去除。将滤液经无水硫酸镁干燥并在真空中浓缩，得到呈黄色油的(2S)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(1.598g，95％)。产物是非对映异构体的混合物。ESI-MS m/z计算值262.2045，实验值263.2(M+1)+；保留时间：1.96分钟；LC方法S。
步骤3：(3S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向(2S)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(1.598g，6.0902mmol)于二氯甲烷(20mL)中的溶液中添加Boc酸酐(1.9938g，9.1353mmol)和三乙胺(0.924g，9.1353mmol)。将反应在室温下搅拌2小时。将反应用盐水(50mL)淬灭。将两个层分离，并将水层用二氯甲烷(2×50mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸镁干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至100％己烷-乙醚纯化，得到呈透明凝胶的(3S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.359g，61％)。化合物是非对映异构体的混合物。ESI-MS m/z计算值362.25696，实验值363.3(M+1)+；保留时间：3.88分钟；LC方法S。
步骤4：(2S)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮
向(3S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(680mg，1.8758mmol)于DCM(25mL)中的溶液中添加于二噁烷中的HCl(4M的10mL，40.000mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将溶剂在减压下去除。将残余物溶解于水中并冻干，得到呈白色固体的(2S)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(二盐酸盐)(628.4mg，96％)。1HNMR(250MHz,二甲亚砜-d6)δ11.93-9.24(m,2H),7.99-7.05(m,5H),4.85-3.60(m,7H),3.51-2.80(m,5H),2.04-1.20(m,3H),1.15-0.42(m,6H).产物是非对映异构体的混合物。ESI-MS m/z计算值262.2045，实验值263.1(M+1)+；保留时间：1.27分钟；LC方法W。
步骤5：3-[(3S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(2S)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(盐酸盐)(602mg，2.014mmol)、无水DMF(10mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(767mg，1.836mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(2.1mL，12.06mmol)和HATU(847mg，2.228mmol)并将混合物在0℃下搅拌15分钟。将反应通过在剧烈搅拌下倒入柠檬酸(10％w/v的70mL，36.43mmol)(10％水溶液)中淬灭并在冰中冷却。将所得白色固体过滤并用水洗涤。将湿固体溶解于DCM中并将溶液经硫酸钠干燥。在溶剂的蒸发之后，将残余物通过硅胶快速色谱法(80g柱)使用甲醇(30分钟内0至5％)/二氯甲烷的梯度纯化。产物洗脱出约2-4％甲醇。溶剂的蒸发得到呈玻璃状树脂的3-[(3S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(493mg，41％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.01(宽s,2H),7.93(s,2H),7.81-7.52(m,2H),7.45-7.20(m,5H),7.20-7.03(m,2H),4.33-3.29(m,4H),2.08-1.76(m,6H),1.38-0.90(m,3H),0.87-0.63(m,3H),0.50(d,J＝6.2Hz,1.5H),0.20(d,J＝6.3Hz,1.5H).ESI-MS m/z计算值661.24896，实验值662.35(M+1)+；保留时间：1.49分钟；LC方法A。
步骤6：(19S)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-19-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物107)
在氮气下向100mL烧瓶中装入3-[(3S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(482mg，0.7278mmol)和无水DMF(25mL)。将混合物在冰中冷却。快速添加NaH(60％w/w的260mg，6.501mmol)(60％矿物油分散体)。将混合物在氮气下在0℃下搅拌4小时。在搅拌下，将混合物缓慢倒入冰冷的柠檬酸(10％w/v的100mL，52.05mmol)(10％水溶液)中。将所得固体悬浮液用EtOAc(3×60mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物，将所述残余物溶解于含有少量甲醇(开始仅用DCM析出的固体)的DCM中并通过硅胶快速色谱法(40g柱)使用MeOH/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至10％)纯化。两个产物在不良分离的情况下洗脱出约4-5％。将富含次要环化产物的级分(在主要产物之后作为肩部洗脱)蒸发，得到74mg的混合物。将其溶解于DMSO(2mL)中，微过滤并使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂(2×950μL进样量)进行反相制备型HPLC(C18)。将这两个产物分离并隔离。在蒸发之后分离出呈白色固体的更多极性的环化产物。将产物溶解于DMSO(1mL)中并使用相同的方法再次纯化。蒸发得到(19S)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-19-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(14mg，3％)。ESI-MS m/z计算值625.2723，实验值626.35(M+1)+；保留时间：1.62分钟(LC方法A)。
实例50：化合物108、化合物109和化合物110的制备
步骤1：(2S,6S)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮
向(3S,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.727g，4.7641mmol)于DCM(20mL)中的溶液中添加于二噁烷中的HCl(4M的10mL，40.000mmol)。将反应在室温下搅拌16小时。将溶剂在真空下去除。将残余物溶解于水中并冻干，得到呈类白色固体的(2S,6S)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(盐酸盐)(1.352g，90％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ11.06(m,1H),10.53-9.93(m,1H),9.73(s,1H),7.99 -7.22(m,5H),4.75-4.18(m,3H),3.95-3.60(m,4H),3.35-3.12(m,3H),1.96-1.57(m,3H),0.92(m,6H).ESI-MS m/z计算值262.2045，实验值263.4(M+1)+；保留时间：1.14分钟；LC方法W。
步骤2：(2S,6S)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮
向(3S,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.727g，4.7641mmol)于DCM(20mL)中的溶液中添加于二噁烷中的HCl(4M的10mL，40.000mmol)。将反应在室温下搅拌16小时。将溶剂在真空下去除。将残余物溶解于水中并冻干，得到呈类白色固体的(2S,6S)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(盐酸盐)(1.352g，90％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ11.06(m,1H),10.53-9.93(m,1H),9.73(s,1H),7.99 -7.22(m,5H),4.75-4.18(m,3H),3.95-3.60(m,4H),3.35-3.12(m,3H),1.96-1.57(m,3H),0.92(m,6H).ESI-MS m/z计算值262.2045，实验值263.4(M+1)+；保留时间：1.14分钟；LC方法W。
步骤3：3-[(3S,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(2S)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(盐酸盐)(589mg，1.971mmol)、无水DMF(10mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(683mg，1.634mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(1.9mL，10.91mmol)和HATU(750mg，1.972mmol)并将混合物在0℃下搅拌13分钟(在10分钟之后LCMS显示完全反应)。将反应通过在剧烈搅拌下倒入柠檬酸(10％w/v的60mL，31.23mmol)(10％水溶液)中来淬灭并在冰中冷却。将所得白色固体过滤并用水洗涤。将湿固体溶解于DCM中并将溶液经硫酸钠干燥。在溶剂的蒸发之后，将残余物通过硅胶快速色谱法(80g柱)使用甲醇(30分钟内0至5％)/二氯甲烷的梯度纯化。产物洗脱出约2-4％甲醇。溶剂的蒸发得到呈白色泡沫状固体的3-[(3S,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(698mg，65％)。ESI-MS m/z计算值661.24896，实验值1.49(M+1)+；保留时间：662.46分钟；LC方法A。
步骤4：(16R,19S)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-19-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物109)
在氮气下向100mL烧瓶中装入3-[(3S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(695mg，1.049mmol)和无水DMF(35mL)。将混合物在冰中冷却。快速添加NaH(60％w/w的373mg，9.326mmol)(60％矿物油分散体)。将混合物在氮气下在0℃下搅拌7小时。在搅拌下，将混合物缓慢倒入冰冷的柠檬酸(10％w/v的150mL，78.07mmol)溶液(10％水溶液)中。将所得固体悬浮液用EtOAc(3×60mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物(1.9g)，将所述残余物溶解于含有少量甲醇(开始仅用DCM析出的固体)的DCM中并通过硅胶快速色谱法(40g柱)使用EtOAc/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至10％，然后20分钟内10-100％)纯化。产物洗脱出约10-35％EtOAc以及二聚杂质。将产物使用40g硅柱和MeOH/二氯甲烷的梯度(30分钟内0-10％)再次纯化。产物洗脱出约3-4％ MeOH。溶剂的蒸发和DCM/己烷中的研磨/蒸发的几个循环，得到呈白色固体的(16R,19S)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-19-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(182mg，28％)。ESI-MS m/z计算值625.2723，实验值626.39(M+1)+；保留时间：1.62分钟(LC方法A)。将该物质在不经任何进一步纯化的情况下用于下一步骤。
将18mg的物质溶解于DMSO(1μL)中并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化，得到呈类白色固体的(16R,19S)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-19-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(12mg，65％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6+10％ D2O)δ8.53(s,1H),7.98(ddd,J＝7.3,5.4,3.3Hz,1H),7.79-7.69(m,2H),7.63-7.38(m,5H),7.31(t,J＝7.6Hz,1H),7.15(d,J＝7.7Hz,2H),6.23(s,1H),5.74(宽s,1H),4.60-4.20宽s,2H与水重叠),3.94-3.17(br m,7H),2.03(br s,6H),1.95-1.87(m,1H),1.54(br s,2H),0.94(d,J＝6.5Hz,3H),0.90(d,J＝6.5Hz,3H).在不存在D2O的情况下，在10.10ppm处可见可交换磺酰胺NH单体。ESI-MS m/z计算值625.2723，实验值626.42(M+1)+；保留时间：1.62分钟；LC方法A。
步骤5：(16R,19S)-12-(2,6-二甲基苯基)-19-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物108)
向100mL烧瓶中装入(19S)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-19-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(151mg，0.2413mmol)和MeOH(35mL)。将溶液用氮气喷射10分钟。添加Pd(OH)2(20％w/w的76mg，0.1082mmol)并将溶液在氢气(气球)气氛下搅拌21小时。将溶液用氮气吹扫。将催化剂通过硅藻土过滤去除并将滤液浓缩。将残余物溶解于DCM中并将溶液过滤。溶剂的蒸发和DCM/己烷中的残余物的研磨，然后蒸发得到呈类白色固体的(16R,19S)-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-19-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(137mg，102％)。将物质在不经任何进一步纯化的情况下用于下一步骤。ESI-MSm/z计算值535.22534，实验值536.44(M+1)+；保留时间：0.96分钟；LC方法A。
步骤6：(16R,19S)-18-(4,4-二氟环己基)-12-(2,6-二甲基苯基)-19-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物110)
向4mL小瓶中装入(19S)-12-(2,6-二甲基苯基)-19-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(17mg，0.03059mmol)、无水DCM(400μL)、4,4-二氟环己酮(35mg，0.2610mmol)和乙酸(12μL，0.2110mmol)。将小瓶用氮气短暂吹扫，加盖并在室温下搅拌约10分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(22mg，0.1038mmol)。将小瓶用氮气吹扫，加盖并且将反应在室温下搅拌15小时。添加第二数量的试剂，即4,4-二氟环己酮(115mg，0.8574mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(42mg，0.1982mmol)并将混合物在室温下搅拌6小时(30％转化)。添加另一批相同的试剂，并将混合物在室温下搅拌过夜。在18小时之后，添加甲醇(100μL)并将DCM通过向小瓶中吹入氮气蒸发。将残余物溶于DMSO(1mL)中。将溶液微过滤并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化，得到再次纯化的固体(85％纯度)。溶剂的蒸发得到呈类白色固体的(16R,19S)-18-(4,4-二氟环己基)-12-(2,6-二甲基苯基)-19-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(3.6mg，17％)。ESI-MS m/z计算值653.2847，实验值654.4(M+1)+；保留时间：1.37分钟；LC方法A。
实例51：化合物111的制备
步骤1：(2R,6R)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮
向(3R,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(3.51g，9.6826mmol)于DCM(40mL)中的溶液中添加HCl(4M的19.5mL，78.000mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应在真空中浓缩并且将残余物溶解于水中并冻干，得到(2R,6R)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(2.74g，102％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ11.33-10.88(m,1H),10.48-9.98(m,1H),9.74(s,1H),7.70(s,2H),7.45(s,3H),4.74-4.25(m,3H),4.16-3.96(m,1H),3.85-3.59(m,4H),3.52-3.34(m,3H),3.32-3.15(m,2H),1.98-1.51(m,3H),1.09-0.79(m,6H).ESI-MS m/z计算值262.2045，实验值263.3(M+1)+；保留时间：1.43分钟；LC方法T。
步骤2：3-[(3R,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(2R,6R)-1-苄基-2-异丁基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(二盐酸盐)(1.238g，3.692mmol)、无水DMF(15mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.28g，3.063mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(3.5mL，20.09mmol)和HATU(1.47g，3.866mmol)并将混合物在0℃下搅拌17分钟。将反应通过在剧烈搅拌下倒入柠檬酸(10％w/v的110mL，57.25mmol)(10％水溶液)中淬灭并在冰中冷却。将所得白色固体过滤并用水洗涤。将湿固体溶解于DCM中并将溶液经硫酸钠干燥。在溶剂的蒸发之后，将残余物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(120g柱)使用甲醇(30分钟内0至5％)/二氯甲烷的梯度纯化。产物洗脱出约2-3％甲醇。溶剂的蒸发得到呈白色泡沫状固体的3-[(3R,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(970mg，48％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)存在几个构象异构体，使得注释困难且不确定。还存在残余的DMF。δ8.06-7.97(m,2H),7.83-7.72(m,1H),7.70-7.58(m,1H),7.41-7.17(m,7H),7.16-7.05(m,2H),4.96(宽s,0.4H),4.16-3.92(m,1H),3.89-3.56(m,1H),3.37-3.12(m,6H与水信号重叠),3.00-2.91(m,2H),1.95-1.76(m,6H),1.65-1.41(m,1H),1.29-1.03(m,1H),1.00-0.48(m,6H).ESI-MS m/z计算值661.24896，实验值662.36(M+1)+；保留时间：1.47分钟；LC方法A。
步骤3：(16S,19R)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-19-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物111)
在氮气下向100mL烧瓶中装入3-[(3R,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羰基]-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(947mg，1.430mmol)和无水DMF(50mL)。将混合物在冰中冷却。将NaH(60％w/w的513mg，12.83mmol)(60％矿物油分散体)分2等部分快速添加(添加间隔2分钟)。将混合物在氮气下在0℃下搅拌5-10分钟。将冰浴去除，并且将反应在氮气下剧烈搅拌4.5小时。在搅拌下，将混合物缓慢倒入冰冷的柠檬酸(10％w/v的200mL，104.1mmol)溶液(10％水溶液)中。将所得固体悬浮液用EtOAc(3×70mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物，将所述残余物溶解于含有少量甲醇(开始仅用DCM析出的固体)的DCM中并通过硅胶快速色谱法(80g柱)使用MeOH/二氯甲烷的梯度(30分钟内0-10％)纯化。产物洗脱出约4-5％ MeOH。将溶剂蒸发，得到749mg的80％纯度的物质。将所述物质使用较浅梯度(45分钟内0-10％)再次纯化。溶剂的蒸发和DCM/己烷中的研磨蒸发的几个循环，得到呈白色固体的(16S,19R)-18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-19-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(526mg，57％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)一般宽信号δ12.96(宽s,1H),8.48(s,1H),7.94(s,1H),7.81-7.57(brm,2H),7.51-7.32(m,4H),7.31-7.18(m,2H),7.11(d,J＝7.2Hz,2H),6.18(br s,1H),5.69(br s,1H),4.10-3.94(m,2H),3.70(d,J＝14.5,5.4Hz,1H),3.61-3.44(m,3H),3.25-3.12(m,2H),2.99-2.92(m,1H),1.98(br s,6H),1.65-1.54(m,1H),1.29-1.08(m,2H),1.07-0.88(m,6H).ESI-MS m/z计算值625.2723，实验值626.37(M+1)+；保留时间：1.61分钟；LC方法A。
实例52：化合物112的制备
步骤1：N-[(1R)-3-氯-1-甲基-2-氧代-丙基]氨基甲酸叔丁酯
在-78℃下在氮气下，向二异丙胺(31.068g，43.030mL，307.03mmol)于无水THF(180mL)中的搅拌的溶液中滴加n-BuLi(2.5M的112.58mL，281.45mmol)。在添加完成之后，将反应在该温度下搅拌45分钟。将制备的LDA溶液通过套管添加到(2R)-2-(叔丁氧基羰基氨基)丙酸甲酯(10.4g，51.172mmol)和氯(碘)甲烷(36.104g，204.69mmol)于无水THF(360mL)中的冷(-78℃)溶液中。在LDA添加完成之后，将所得反应混合物在-78℃下搅拌1小时。将反应通过滴加冰乙酸(50mL)于THF(50mL)中的溶液冷淬灭。使反应混合物温热至约0℃并添加水(300mL)。将挥发物在真空下去除并将水层用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(70mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-20％己烷-乙酸乙酯纯化，得到浅黄色固体的N-[(1R)-3-氯-1-甲基-2-氧代-丙基]氨基甲酸叔丁酯(10.84g，86％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ5.09(s,1H),4.62-4.43(m,1H),4.28(s,2H),1.44(s,9H),1.37(d,J＝7.2Hz,3H).
步骤2：2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-氧代-丁基]氨基]乙酸乙酯
在室温下在氮气下，向N-[(1R)-3-氯-1-甲基-2-氧代-丙基]氨基甲酸叔丁酯(10.84g，44.009mmol)和2-(苄氨基)乙酸乙酯(盐酸盐)(10.109g，44.009mmol)于无水DMF(65mL)中的搅拌的溶液中添加碳酸氢钠(14.789g，176.04mmol)，然后添加碘化钠(4.6176g，30.806mmol)。将反应混合物搅拌18小时。添加水(250mL)，并且将产物用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(120mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-25％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈黄色油的2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-氧代-丁基]氨基]乙酸乙酯(13.56g，77％)ESI-MS m/z计算值378.21548，实验值379.6(M+1)+；保留时间：4.42分钟；LC方法S。
步骤3：2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-丁基]氨基]乙酸乙酯，非对映异构体1，以及2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-丁基]氨基]乙酸乙酯，非对映异构体2
在-78℃下在氮气下向2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-氧代-丁基]氨基]乙酸乙酯(9.19g，24.282mmol)于无水甲醇(110mL)中的搅拌的溶液中分批添加硼氢化钠(1.8373g，48.564mmol)。在添加完成之后，将反应混合物在该温度下搅拌2小时。将反应在-78℃下用饱和氯化铵水溶液(250mL)淬灭并且然后温热至室温。添加盐水(100mL)，并且将产物用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗产物通过硅胶色谱法使用0-25％己烷-乙酸乙酯纯化，得到两个级分：1)非对映异构体1，含有杂质的次要异构体(黄色油)，2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-丁基]氨基]乙酸乙酯(1.59g，16％)ESI-MS m/z计算值380.2311，实验值381.6(M+1)+；保留时间：3.96分钟以及2)非对映异构体2，含有非对映异构体1的显著部分的主要异构体(黄色油)，2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-丁基]氨基]乙酸乙酯(8.78g，90％)ESI-MS m/z计算值380.2311，实验值381.6(M+1)+；保留时间：3.78分钟，(LC方法S)。
步骤4：(7R)-4-苄基-6-羟基-7-甲基-1,4-二氮杂环庚-2-酮
在室温下，将2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-丁基]氨基]乙酸乙酯(8.78g，23.076mmol)溶解于HCl(4M的144.22mL，576.90mmol)于1,4-二噁烷中的溶液中并将反应混合物搅拌1小时。将挥发物在真空下去除并将所得残余物溶解于无水乙醇(300mL)中。在室温下添加TEA(23.351g，32.164mL，230.76mmol)并将反应混合物加热至50℃1小时。在冷却至室温之后，将挥发物在真空下去除。添加饱和碳酸氢钠水溶液(250mL)和盐水(100mL)并将产物用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到呈黄色油的(7R)-4-苄基-6-羟基-7-甲基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(5.59g，98％)。ESI-MS m/z计算值234.13683，实验值235.4(M+1)+；保留时间：1.63分钟；LC方法S。
步骤5：(7R)-4-苄基-6-羟基-7-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯，非对映异构体1，以及(7R)-4-苄基-6-羟基-7-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯，非对映异构体2
在0℃下在氮气下向(7R)-4-苄基-6-羟基-7-甲基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(5.59g，23.859mmol)于无水THF(220mL)中的搅拌的溶液中分批添加LAH(5.4332g，143.15mmol)。在添加完成之后，将反应混合物在0℃下搅拌10分钟，然后加热至40℃2小时。将反应混合物冷却至0℃并且按照Fieser后处理程序淬灭。将盐通过硅藻土垫滤出并用THF(2×100mL)洗涤。将合并的滤液真空浓缩。将残余物溶解于1,4-二噁烷(100mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)的混合物中，并添加Boc酸酐(5.7279g，26.245mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。添加盐水(200mL)，并且将产物用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-60％己烷-乙酸乙酯纯化，得到2个不同的级分：1)更少极性化合物A(无色油)，非对映异构体1，(7R)-4-苄基-6-羟基-7-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(840mg，10％)ESI-MS m/z计算值320.21，实验值321.4(M+1)+；保留时间：3.32分钟(LC方法S)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.47-7.17(m,5H),3.96 3.75(m,2H),3.72-3.57(m,2H),3.21-2.92(m,2H),2.89-2.70(m,1H),2.54-2.17(m,2H),1.45(s,9H),1.30-1.09(m,4H)；2)更多极性化合物B(无色油)，非对映异构体2，(7R)-4-苄基-6-羟基-7-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(3.25g，40％)ESI-MS m/z计算值320.21，实验值321.7(M+1)+；保留时间：3.26分钟(LC方法S)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.44-7.14(m,5H),3.70 3.52(m,4H),3.03-2.78(m,2H),2.68-2.52(m,3H),1.45(s,9H),1.27(d,J＝1.9Hz,2H),1.19(d,J＝6.8Hz,3H).
步骤6：(7R)-6-羟基-7-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯，非对映异构体1
在室温下向(7R)-4-苄基-6-羟基-7-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(800mg，2.4967mmol)于压力容器中的无水甲醇(23mL)中的搅拌的溶液中添加钯/炭(398.54mg，10％w/w，0.3745mmol)，然后添加甲酸铵(629.73mg，9.9868mmol)。将反应混合物加热至65℃1小时。在冷却至室温之后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤并将滤饼用甲醇(2×20mL)洗涤。将合并的滤液在真空下浓缩，得到呈无色油的(7R)-6-羟基-7-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(670mg，99％)ESI-MS m/z计算值230.16304，实验值231.5(M+1)+；保留时间：2.39分钟；LC方法S。
步骤7：O1-苄基O4-(5R)-6-羟基-5-甲基-1,4-二氮杂环庚-1,4-二羧酸叔丁酯，非对映异构体1
在0℃下，向(7R)-6-羟基-7-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(670mg，2.6183mmol)于1,4-二噁烷(15mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)的混合物中的搅拌的溶液中滴加氯甲酸苄酯(705.25mg，0.5902mL，3.9274mmol)。在添加完成之后，将反应混合物在0℃下搅拌1小时。将反应用盐水(25mL)冷淬灭并将产物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)和盐水(40mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-40％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈无色油的O1-苄基O4-(5R)-6-羟基-5-甲基-1,4-二氮杂环庚-1,4-二羧酸叔丁酯(354mg，36％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ7.35(d,J＝3.2Hz,5H),5.22-4.80(m,3H),4.36-4.09(m,1H),3.84-3.65(m,2H),3.63-3.46(m,3H),3.21-3.13(m,2H),1.39-1.28(m,9H),1.07(d,J＝6.8Hz,3H).ESI-MS m/z计算值364.19983，实验值365.1(M+1)+；保留时间：2.31分钟；LC方法T。
步骤8：(5R)-6-羟基-5-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯，非对映异构体1
向100mL圆底烧瓶中装入O1-苄基O4-(5R)-6-羟基-5-甲基-1,4-二氮杂环庚-1,4-二羧酸叔丁酯(339mg，0.9302mmol)、DCM(3.5mL)和HCl(4M的3mL，12.00mmol)(4M二噁烷溶液)。将混合物在室温下搅拌2.5小时。在减压下移除挥发物。将固体用DCM和己烷处理并将溶剂蒸发。将操作重复3次。在真空中干燥得到呈白色泡沫状固体的(5R)-6-羟基-5-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯(盐酸盐)(291mg，98％)。ESI-MS m/z计算值264.1474，实验值265.1(M+1)+；保留时间：0.62分钟；LC方法A。
步骤9：(5R)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-5-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯，非对映异构体1
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(5R)-6-羟基-5-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯(盐酸盐)(291mg，0.9385mmol)、无水DMF(6mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(340mg，0.8137mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(0.95mL，5.454mmol)和HATU(390mg，1.026mmol)并将混合物在0℃下搅拌3.5小时。将反应通过在剧烈搅拌下倒入柠檬酸(10％w/v的30mL，15.61mmol)(10％水溶液)中来淬灭并在冰中冷却。将所得白色固体过滤。将湿固体溶解于DCM中并将溶液经硫酸钠干燥。在浓缩之后，将所述溶液通过硅胶快速色谱法(40g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(60分钟内0至10％)纯化。产物洗脱出约2-3％甲醇。溶剂的蒸发得到呈白色泡沫状固体的(5R)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-5-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯(340mg，63％)。ESI-MS m/z计算值663.19183，实验值664.38(M+1)+；保留时间：1.76分钟(LC方法J)。
步骤10：(21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-甲基-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸苄酯，非对映异构体1(化合物112)
在氮气下向100mL烧瓶中装入(5R)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-5-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯(332mg，0.4999mmol)和无水DMF(17mL)。将混合物在冰中冷却。添加NaH(60％w/w的183mg，4.575mmol)(60％矿物油分散体)。将混合物在氮气下在0℃下搅拌1小时15分钟。在搅拌下，将反应混合物缓慢倒入冰冷的柠檬酸(10％w/v的70mL，36.43mmol)水溶液中。将所得固体悬浮液用EtOAc(3×50mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物，将所述残余物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(24g柱)使用MeOH/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约2-3％ MeOH。溶剂的蒸发和DCM/己烷中的研磨/蒸发的几个循环，得到呈白色固体的(21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-甲基-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸苄酯(56mg，17％)。1H NMR(499MHz,DMSO-d6)存在旋转异构体(1:1比率)δ13.08(非常宽的分离s,0.3H),8.34和8.30(两个单线态1:1，总共1H),7.98-7.86(宽m,1H),7.67(br s,2H),7.46-7.38(m,1H),7.35(d,J＝7.0Hz,1H),7.31(t,J＝7.4Hz,1H),7.29-7.18(m,3H),7.12(d,J＝7.6Hz,2H),6.44(br s,1H),5.54-5.06(m,3H),4.46-4.30(m,1H),4.27-4.12(m,1H),4.11-3.87(m,2H),3.87-3.73(m,1H),3.43-3.19(m,2H与水信号重叠),2.05(br s,6H),1.09(d,1.5H),1.08(d,1.5H).ESI-MS m/z计算值627.21515，实验值628.37(M+1)+；保留时间：1.61分钟；LC方法A。
实例53：化合物113的制备
步骤1：(7R)-6-羟基-7-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯，非对映异构体2
在室温下向(7R)-4-苄基-6-羟基-7-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(3.18g，9.9243mmol)于压力容器中的无水甲醇(90mL)中的搅拌的溶液中添加钯/炭(1.5842g，10％w/w，1.4886mmol)，然后添加甲酸铵(2.5031g，39.697mmol)。将反应混合物加热至65℃1小时。在冷却至室温之后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤并将滤饼用甲醇(2×50mL)洗涤。将合并的滤液在真空下浓缩，得到呈无色油的(7R)-6-羟基-7-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(2.201g，82％)。ESI-MS m/z计算值230.16304，实验值231.7(M+1)+；保留时间：2.27分钟；LC方法S。
步骤2：O1-苄基O4-(5R)-6-羟基-5-甲基-1,4-二氮杂环庚-1,4-二羧酸叔丁酯，非对映异构体2
在0℃下，向(7R)-6-羟基-7-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(2.201g，9.5569mmol)于1,4-二噁烷(50mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)的混合物中的搅拌的溶液中滴加氯甲酸苄酯(2.4455g，2.0464mL，14.335mmol)。在添加完成之后，将反应混合物在0℃下搅拌1小时。将反应用盐水(75mL)冷淬灭并将产物用乙酸乙酯(3×120mL)萃取。将合并的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液(80mL)和盐水(40mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-50％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈无色油的O1-苄基O4-(5R)-6-羟基-5-甲基-1,4-二氮杂环庚-1,4-二羧酸叔丁酯，非对映异构体2(2.1304g，59％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ7.44-7.24(m,5H),5.38-5.20(m,1H),5.09(s,2H),3.94-3.72(m,2H),3.68-3.48(m,3H),3.07-2.79(m,3H),1.40(s,9H),1.17-1.04(m,3H).ESI-MS m/z计算值364.19983，实验值365.1(M+1)+；保留时间：2.29分钟；LC方法T。
步骤3：(5R)-6-羟基-5-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯，非对映异构体2
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向100mL圆底烧瓶中装入O1-苄基O4-(5R)-6-羟基-5-甲基-1,4-二氮杂环庚-1,4-二羧酸叔丁酯(926mg，2.541mmol)、DCM(8mL)和HCl(4M的7.5mL，30.00mmol)(4M二噁烷溶液)。将混合物在室温下搅拌2小时。在减压下移除挥发物。将固体用DCM和己烷处理并将溶剂蒸发。将操作重复3次。在真空中干燥得到呈白色粘性树脂的(5R)-6-羟基-5-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯(盐酸盐)(756mg，99％)。ESI-MS m/z计算值264.1474，实验值265.09(M+1)+；保留时间：0.62分钟；(LC方法A)。
步骤4：(5R)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-5-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯，非对映异构体2
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(5R)-6-羟基-5-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯(盐酸盐)(756mg，2.513mmol)、无水DMF(14mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(0.893g，2.137mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(2.5mL，14.35mmol)和HATU(1.027g，2.701mmol)并将混合物在0℃下搅拌30分钟。将反应通过在剧烈搅拌下倒入柠檬酸(10％w/v的75mL，39.04mmol)(10％水溶液)中淬灭并在冰中冷却。将所得白色固体过滤。将湿固体溶解于DCM中并将溶液经硫酸钠干燥。在浓缩之后，将所述溶液通过硅胶快速色谱法(120g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(60分钟内0至10％)纯化。产物洗脱出约4-5％甲醇。溶剂的蒸发得到呈白色泡沫状固体的(5R)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-5-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯(1.02g，72％)。ESI-MS m/z计算值663.19183，实验值664.23(M+1)+；保留时间：1.76分钟(LC方法A)。
步骤5：(21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-甲基-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸苄酯，非对映异构体2(化合物113)
在氮气下向100mL烧瓶中装入(5R)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-5-甲基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸苄酯(1.00g，1.506mmol)和无水DMF(50mL)。将混合物在冰中冷却。分两等部分添加NaH(60％w/w的546mg，13.65mmol)(60％矿物油分散体)，彼此间隔3分钟添加。将混合物在氮气下在0℃下搅拌1.5小时。在搅拌下，将反应混合物缓慢倒入冰冷的柠檬酸(10％w/v的210mL，109.3mmol)水溶液中。将所得固体悬浮液用EtOAc(3×75mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物，将所述残余物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(80g柱)使用MeOH/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约3-4％ MeOH。溶剂的蒸发和DCM/己烷中的研磨/蒸发的几个循环得到123mg的76％纯度的固体。将物质溶解于DMSO(2.5mL)中并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化。将有机相蒸发并将析出的固体用DCM萃取。挥发物的蒸发，DCM/己烷中的研磨和蒸发得到呈白色固体的(21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-甲基-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸苄酯(66mg，7％)。1H NMR(499MHz,DMSO-d6)可见两个构象异构体，比率70:30δ13.06(宽s,0.7H),11.97(br s,0.3H),8.03-7.94(m,1H),7.89(br s,1H),7.67-7.57(m,1H),7.53(s,1H),7.47-7.33(m,5H),7.25(br s,1H),7.12(br s,2H),6.57-6.17(br m,1H),5.44-4.90(br m,2H),4.76(s,0.3H),4.43(s,0.7H),4.03(dd,J＝14.2,5.1Hz,1H),3.77(br s,1H),3.68-3.35(m,3H),3.14-2.79(m,2H),2.24-1.81(m,6H),1.15-0.97(m,3H).ESI-MS m/z计算值627.21515，实验值628.3(M+1)+；保留时间：1.58分钟；LC方法A。
实例54：化合物114的制备
步骤1：2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基-2-氧代-己基]氨基]乙酸叔丁酯
向2-(苄氨基)乙酸叔丁酯(12.04g，51.687mmol)和N-[(1R)-1-(2-氯乙酰基)-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(15.725g，56.637mmol)于无水DMF(110mL)中的溶液中添加碳酸氢钠(11.6g，138.08mmol)，然后添加碘化钠(5.08g，33.891mmol)。将所得溶液在环境温度下搅拌17小时，然后添加水(400mL)。将溶液用乙醚(2×400mL)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩，得到粗产物。将粗产物通过快速色谱法(加载在DCM中)(330g硅胶，用0至15％ EtOAc/己烷洗脱)纯化，得到呈浅黄色液体的2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基-2-氧代-己基]氨基]乙酸叔丁酯(22.85g，85％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.66-6.79(m,5H),5.12-4.85(m,1H),4.40(s,1H),3.96-3.76(m,2H),3.76 -3.54(m,2H),3.36(d,J＝1.5Hz,2H),1.91-1.52(m,2H),1.52-1.33(m,18H),1.31-1.23(m,1H),0.94(d,J＝6.5Hz,3H),0.88(d,J＝6.5Hz,3H).ESI-MS m/z计算值448.29373，实验值449.2(M+1)+；保留时间：5.04分钟；LC方法S。
步骤2：2-[苄基-[(2S,3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-5-甲基-己基]氨基]乙酸叔丁酯和2-[苄基-[(2R,3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-5-甲基-己基]氨基]乙酸叔丁酯
在0℃下，向2-[苄基-[(3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基-2-氧代-己基]氨基]乙酸叔丁酯(21.93g，48.886mmol)于MeOH(220mL)中的溶液中添加硼氢化钠(3.745g，98.989mmol)(内部温度<24℃)。将反应溶液在0℃下放置20分钟。添加水(250mL)。将溶液用乙酸乙酯(2×400mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。添加苯(2×100mL)并在真空中浓缩以去除粗产物中的少量水。将粗产物通过快速色谱法(加载在DCM中)(330g硅胶，用0至20％ EtOAc/己烷洗脱)纯化，得到呈浅黄色油的2-[苄基-[(2S,3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-5-甲基-己基]氨基]乙酸叔丁酯(15.13g，65％)(更多极性)。ESI-MS m/z计算值450.3094，实验值451.2(M+1)+；保留时间：4.74分钟(LC方法S)；1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.51-7.06(m,5H),4.63(d,J＝9.2Hz,1H),3.87(d,J＝13.5Hz,1H),3.69(d,J＝13.5Hz,1H),3.64-3.46(m,2H),3.19(d,J＝1.8Hz,2H),2.84(d,J＝13.1Hz,1H),2.54(dd,J＝13.0,9.8Hz,1H),1.78-1.54(m,1H),1.44(s,9H),1.43(s,9H),1.4 2-1.27(m,2H),0.91(d,J＝4.3Hz,3H),0.89(d,J＝4.3Hz,3H)；以及呈浅黄色油的2-[苄基-[(2R,3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-5-甲基-己基]氨基]乙酸叔丁酯(4.36g，19％)(更少极性)，ESI-MS m/z计算值450.3094，实验值451.2(M+1)+；保留时间：4.73分钟(LC方法S)；1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.48-7.04(m,5H),4.76(d,J＝9.9Hz,1H),3.89(d,J＝13.5Hz,1H),3.77-3.32(m,4H),3.19(d,J＝5.2Hz,2H),2.73(dd,J＝13.1,3.2Hz,1H),2.52(dd,J＝13.1,10.7Hz,1H),1.78-1.49(m,3H),1.44(s,9H),1.40(s,9H),1.07-0.69(m,6H).
步骤3：(6S,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮
向2-[苄基-[(2S,3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-5-甲基-己基]氨基]乙酸叔丁酯(15.13g，33.577mmol)中添加HCl(4M的335mL，1.3400mol)。将所得溶液在环境温度下搅拌24小时。然后将所有溶剂在减压下去除。将残余物溶解于无水EtOH(700mL)中。将所得溶液在50℃下搅拌21小时。然后添加TEA(33.977g，46.800mL，335.77mmol)并在50℃下持续7.5小时。将所有溶剂在减压下去除。将残余物溶解于乙酸乙酯(800mL)中并用饱和碳酸氢钠水溶液(200mL)洗涤。将有机层分离，并且将水层用乙酸乙酯(200mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(加载在DCM中)(220g硅胶，用0至100％ EtOAc/己烷洗脱)纯化，得到呈白色固体的(6S,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(7.33g，77％)。ESI-MS m/z计算值276.18378，实验值277.2(M+1)+；保留时间：2.17分钟；LC方法S。
步骤4：(6S,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向(6S,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(7.33g，25.673mmol)于无水THF(260mL)中的溶液中非常缓慢添加LAH(5.86g，154.40mmol)。将悬浮液溶液在40℃下在氩气下加热16小时。将反应溶液冷却至0℃，然后滴加水(5.9mL)，接着添加15％的NaOH水溶液(5.9mL)和水(17.7mL)。添加THF(200mL)并且将悬浮液溶液在环境温度下搅拌1小时。将悬浮液通过硅藻土过滤并用THF(100mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩，得到溶解于二噁烷(130mL)和碳酸氢钠饱和水溶液(130mL)的混合物中的呈无色液体的粗氨基醇中间体。添加Boc酸酐(5.6g，25.659mmol)并将所得溶液在环境温度下搅拌16小时。添加水(100mL)和乙酸乙酯(200mL)。将有机层分离，并将水层用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(加载在己烷中)(330g硅胶，用0至30％ EtOAc洗脱)纯化，得到呈白色固体的(6S,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(6.5889g，68％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ7.48-7.05(m,5H),5.00(dd,J＝16.2,6.3Hz,1H),3.99-3.35(m,5H),2.91-2.53(m,3H),2.23(dt,J＝12.3,8.4Hz,2H),1.61-1.17(m,12H),1.00-0.71(m,6H).ESI-MS m/z计算值362.25696，实验值363.3(M+1)+；保留时间：1.86分钟；LC方法T。
步骤5：(6S,7R)-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向100mL圆底烧瓶中装入(6S,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.51g，4.165mmol)和MeOH(30mL)。将溶液用氮气喷射10分钟。添加Pd(OH)2(20％w/w的640mg，0.9115mmol)(20％湿)并将反应在室温下在氢气(气球)下搅拌15小时。将溶液用氮气喷射10分钟并通过硅藻土垫过滤两次。在浓缩之后，将溶液通过过滤盘微过滤并将溶剂蒸发，得到呈类白色固体的(6S,7R)-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.111g，98％)。ESI-MS m/z计算值272.21，实验值273.2(M+1)+；保留时间：0.94分钟(LC方法A)。：
步骤6：(6S,7R)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(6S,7R)-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.11g，4.075mmol)、无水DMF(20mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.42g，3.398mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(4mL，22.96mmol)和HATU(1.59g，4.182mmol)并将混合物在0℃下搅拌20分钟。将反应通过在剧烈搅拌下倒入柠檬酸(10％w/v的120mL，62.46mmol)(10％水溶液)中淬灭并在冰中冷却。将所得白色固体过滤。将湿固体溶解于DCM中并将溶液经硫酸钠干燥。在浓缩之后，将所述溶液通过硅胶快速色谱法(120g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约3-4％甲醇。溶剂的蒸发得到呈白色泡沫状固体的(6S,7R)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.853g，81％)。ESI-MS m/z计算值671.25446，实验值672.35(M+1)+；保留时间：2.06分钟(LC方法A)。
步骤7：(16S,17R)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(化合物114)
在氮气下向100mL烧瓶中装入(6S,7R)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.04g，1.547mmol)和无水DMF(50mL)。将混合物在冰中冷却。分两等部分添加NaH(60％w/w的550mg，13.75mmol)(60％矿物油分散体)，彼此间隔3分钟添加。将混合物在氮气下在0℃下搅拌10分钟。将冰浴去除，并且将反应在氮气下剧烈搅拌1.5小时。在搅拌下，将反应混合物缓慢倒入冰冷的柠檬酸(10％w/v的220mL，114.5mmol)水溶液中。将所得固体悬浮液用EtOAc(3×75mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物，将所述残余物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(80g柱)使用MeOH/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约3-4％ MeOH。溶剂的蒸发和DCM/己烷中的研磨/蒸发的几个循环得到呈白色固体的(16S,17R)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(341mg，34％)。1H NMR(499MHz,DMSO-d6)可见几个旋转异构体δ13.36-11.65(br m,1H),8.58-8.30(m,1H),7.88(宽s,1H),7.64(br s,2H),7.25(t,J＝7.7Hz,1H),7.12(d,J＝7.6Hz,2H),6.29(br s,1H),5.94-5.20(m,1H),4.74-4.00(m,2H),3.97-3.36(m,2H),3.24-2.80(m与水重叠,2H),2.03(br s,6H),1.89-1.74(m,1H),1.73-1.19(m,12H),0.97-0.71(m,6H).ESI-MS m/z计算值635.2778，实验值636.37(M+1)+；保留时间：1.9分钟；LC方法A。
实例55：化合物115的制备
步骤1：(6R,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮
向2-[苄基-[(2R,3R)-3-(叔丁氧羰基氨基)-2-羟基-5-甲基-己基]氨基]乙酸叔丁酯(4.36g，9.6758mmol)中添加HCl(二噁烷中的4M的100mL，400.00mmol)。将所得溶液在环境温度下搅拌24小时。然后将所有溶剂在减压下去除。将残余物溶解于无水EtOH(200mL)中。将所得溶液在50℃下搅拌6小时。然后添加TEA(9.8010g，13.5mL，96.857mmol)并将反应在50℃下持续15小时。将所有溶剂在减压下去除。将残余物溶解于乙酸乙酯(500mL)中并用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)洗涤。将有机层分离，并且将水层用乙酸乙酯(100mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(加载在DCM中)(120g硅胶，用0至100％ EtOAc/己烷洗脱)纯化，得到呈白色泡沫固体的(6R,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(2.19g，81％)。ESI-MS m/z计算值276.18378，实验值277.1(M+1)+；保留时间：2.08分钟；LC方法S。
步骤2：(6R,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向(6R,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(2.19g，7.5595mmol)于无水THF(76mL)中的溶液中非常缓慢添加LAH(1.72g，45.318mmol)。将悬浮液溶液在40℃下在氩气下加热16小时。将反应溶液冷却至0℃，然后滴加水(1.7mL)，接着添加15％的NaOH水溶液(1.7mL)和水(5.1mL)。添加THF(80mL)并且将悬浮液溶液在环境温度下搅拌1小时。将悬浮液通过硅藻土过滤并用THF(100mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩，得到溶解于二噁烷(40mL)和碳酸氢钠饱和水溶液(40mL)的混合物中的呈无色液体的粗氨基醇中间体。然后添加Boc酸酐(2.09g，9.5763mmol)并将溶液在环境温度下搅拌16小时。然后添加另外的Boc酸酐(0.43g，1.9702mmol)并将反应再搅拌8小时。添加水(50mL)和乙酸乙酯(100mL)。将有机层分离，并将水层用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(加载在己烷中)(120g硅胶，用0至15％ EtOAc/己烷洗脱)纯化，得到呈无色液体的(6R,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.9399g，65％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ7.48-7.09(m,5H),4.35(s,1H),4.13-3.74(m,2H),3.65(t,J＝2.6Hz,2H),3.52(d,J＝15.1Hz,1H),3.14-2.75(m,2H),2.68(d,J＝12.3Hz,1H),2.46-2.10(m,2H),1.69-1.44(m,2H),1.43-1.21(m,10H),0.95-0.77(m,6H).ESI-MS m/z计算值362.25696，实验值363.6(M+1)+；保留时间：1.86分钟；LC方法T。
步骤3：(6R,7R)-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向100mL圆底烧瓶中装入(6R,7R)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.92g，5.296mmol)和MeOH(35mL)。将溶液用氮气喷射10分钟。添加Pd(OH)2(20％w/w的500mg，0.7121mmol)(20％湿)并将反应在室温下在氢气(气球)下搅拌2天。将溶液用氮气喷射10分钟并通过硅藻土垫过滤两次。在浓缩之后，将溶液微过滤并将溶剂蒸发，得到呈浅棕色树脂的(6R,7R)-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.43g，99％)。ESI-MS m/z计算值272.21，实验值273.2(M+1)+；保留时间：0.98分钟；LC方法A。
步骤4：(6R,7R)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(6R,7R)-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.43g，5.250mmol)、无水DMF(25mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.854g，4.437mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(5.2mL，29.85mmol)和HATU(2.14g，5.628mmol)并将混合物在0℃下搅拌45分钟。将反应通过在剧烈搅拌下倒入柠檬酸(10％w/v的160mL，83.28mmol)(10％水溶液)中淬灭并在冰中冷却。将所得白色固体过滤并干燥。将固体溶解于DCM中。在浓缩之后，将所述溶液通过硅胶快速色谱法(220g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约3-4％甲醇。溶剂的蒸发得到呈白色泡沫状固体的(6R,7R)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.575g，53％)。ESI-MS m/z计算值671.25446，实验值672.33(M+1)+；保留时间：2.0分钟；LC方法A。
步骤5：(16R,17R)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(化合物115)
在氮气下向100mL烧瓶中装入(6R,7R)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.062g，1.580mmol)和无水DMF(50mL)。将混合物在冰中冷却。分两等部分添加NaH(60％w/w的563mg，14.08mmol)(60％矿物油分散体)，彼此间隔3分钟添加。将混合物在氮气下在0℃下搅拌10分钟。将冰浴去除，并且将反应在氮气下剧烈搅拌1.5小时。在搅拌下，将反应混合物缓慢倒入冰冷的柠檬酸(10％w/v的230mL，119.7mmol)水溶液中。将所得固体悬浮液用EtOAc(3×75mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物，将所述残余物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(120g柱)使用MeOH/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约3-4％ MeOH。溶剂的蒸发和DCM/己烷中的研磨/蒸发的几个循环得到呈白色固体的(16R,17R)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(692mg，67％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)旋转异构体的混合物(60:40)δ13.12-11.88(宽m,1H),8.35(s,0.6H),8.28(s,0.4H),7.89(宽s,1H),7.65(br s,2H),7.25(t,J＝7.9Hz,1H),7.12(d,J＝7.6Hz,2H),6.31(bt s,1H),5.70-5.44(m,1H),4.70-4.30(m,2H),4.08-3.84(m,1H),3.44(q,J＝13.2Hz,1H),3.31-3.18(m,2H与水重叠),3.15-3.02(m,1H),2.07-1.89(m,7H),1.57-1.53(m,2H),1.47和1.42(2d,总共9H),1.02-0.77(m,6H).ESI-MS m/z计算值635.2778，实验值636.33(M+1)+；保留时间：1.85分钟；LC方法A。
实例56：化合物116的制备
步骤1：(7S)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮
在-70℃(内部温度)下，向2-[苄基-[(3S)-3-(叔丁氧羰基氨基)-5-甲基-2-氧代-己基]氨基]乙酸乙酯(52.3g，124.36mmol)于MeOH(620mL)中的溶液中分3部分添加硼氢化钠(9g，237.89mmol)，然后该此温度下搅拌1小时，然后将其置于-80℃冰箱中。将反应用饱和氯化铵水溶液(650mL)淬灭，然后温热至环境温度。将反应溶液用乙醚(3×700mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将获得的粗产物溶解于DCM(310mL)和HCl(4M的310.90mL，1.2436mol)于1,4-二噁烷中的混合物中。将所得溶液在环境温度下搅拌50分钟。在减压下移除所有溶剂。将获得的残余物溶解于无水EtOH(2500mL)中，在40℃下加热15小时，然后在70℃下加热24小时。将反应溶液冷却至50℃并添加TEA(126.88g，175mL，1.2539mol)。将反应溶液在该温度下继续搅拌5小时。在减压下移除所有溶剂。将残余物溶解于乙酸乙酯(1200mL)中并用饱和碳酸氢钠水溶液(600mL)洗涤。将有机层分离，并且将水层用乙酸乙酯(600mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(加载在DCM中)(330g硅胶，用0至100％EtOAc/己烷洗脱)纯化，得到呈棕色泡沫固体、顺式/反式异构体的混合物的(7S)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(30.52g，89％)。ESI-MS m/z计算值276.18378，实验值277.2(M+1)+；保留时间：2.08分钟；LC方法S。
步骤2：(6S,7S)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯和(6R,7S)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向(7S)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(30.52g，110.43mmol)于无水THF(1100mL)中的溶液中小心地以小部分添加LAH(25.3g，666.59mmol)。然后将反应在40℃下搅拌22小时，然后将反应冷却至0℃。滴加水(25.3mL)，然后滴加15％ NaOH水溶液(25.3mL)和水(75.9mL)，然后滴加THF(300mL)并将所得溶液在环境温度下搅拌1小时。将溶液通过硅藻土过滤并将垫用THF洗涤。将滤液在减压下浓缩，得到溶解于二噁烷(550mL)和碳酸氢钠水溶液(550mL)的混合物中的呈浅黄色液体的粗氨基醇中间体。添加Boc酸酐(32.4g，144.00mmol)。将所得溶液在环境温度下搅拌19小时。添加水(100mL)和乙酸乙酯(200mL)并将有机层分离。将水层用乙酸乙酯(2×500mL)萃取。将合并的有机层用盐水(150mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(加载在DCM中)(330g硅胶，用0至30％ EtOAc/己烷洗脱)纯化，得到呈浅黄色油的(6S,7S)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(8.212g，19％)(更少极性)。ESI-MS m/z计算值362.2569，实验值363.3(M+1)+，保留时间：1.88分钟(LC方法W)，1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ7.55-7.08(m,5H),4.36(s,1H),4.08-3.73(m,2H),3.66(s,2H),3.52(d,J＝15.0Hz,1H),3.10-2.76(m,2H),2.76-2.59(m,1H),2.45-2.20(m,2H),1.63-1.45(m,2H),1.38(d,J＝6.5Hz,9H),1.31-1.18(m,1H),0.99-0.77(m,6H)；以及呈白色泡沫固体的(6R,7S)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(20.275g，49％)(更多极性)，ESI-MS m/z计算值362.2569，实验值363.3(M+1)+；保留时间：1.88分钟(LC方法W)，1HNMR(250MHz,DMSO-d6)δ7.29(m,J＝5.5Hz,5H),5.00(dd,J＝16.1,6.3Hz,1H),3.89-3.38(m,5H),2.84-2.56(m,3H),2.33-2.14(m,2H),1.39(m,12H),1.01-0.72(m,6H).
步骤3：(6R,7S)-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向100mL圆底烧瓶中装入(6R,7S)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.63g，4.496mmol)和MeOH(30mL)。将溶液用氮气喷射10分钟。添加Pd(OH)2(20％w/w的500mg，0.7121mmol)(20％湿)并将反应在室温下在氢气(气球)下搅拌15小时(70-80％转化)。添加另一批催化剂Pd(OH)2(20％w/w的220mg，0.3133mmol)并安装新的气球。在4天之后，将溶液用氮气喷射10分钟并通过硅藻土垫过滤两次。在浓缩之后，将溶液微过滤并将溶剂蒸发，得到呈棕黄色固体的(6R,7S)-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.227g，99％)。ESI-MS m/z计算值272.21，实验值273.2(M+1)+；保留时间：1.03分钟；LC方法A。
步骤4：(6R,7S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(6R,7S)-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.227g，4.460mmol)、无水DMF(23mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.6g，3.829mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(4.5mL，25.84mmol)和HATU(1.73g，4.550mmol)并将混合物在0℃下搅拌4小时。将反应通过在剧烈搅拌下倒入柠檬酸(10％w/v的140mL，72.87mmol)(10％水溶液)中来淬灭并在冰中冷却。将所得白色固体过滤。将湿固体溶解于DCM中并将溶液经硫酸钠干燥。在浓缩之后，将所述溶液通过硅胶快速色谱法(120g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约3-4％甲醇。溶剂的蒸发得到呈粉色泡沫状固体的(6R,7S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.407g，55％)。ESI-MS m/z计算值671.25446，实验值672.33(M+1)+；保留时间：2.05分钟；LC方法A。
步骤5：(16R,17S)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(化合物116)
在氮气下向100mL烧瓶中装入(6R,7S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.252g，1.862mmol)和无水DMF(60mL)。将混合物在冰中冷却。以小部分添加NaH(60％w/w的679mg，16.98mmol)(60％矿物油分散体)。将混合物在氮气下在0℃下搅拌10分钟。将冰浴去除，并且将反应在氮气下剧烈搅拌5小时。在搅拌下，将反应混合物缓慢倒入冰冷的柠檬酸(10％w/v的260mL，135.3mmol)水溶液中。将所得固体悬浮液用EtOAc(3×75mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物，将所述残余物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(80g柱)使用MeOH/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约3-4％ MeOH。溶剂的蒸发和DCM/己烷中的研磨/蒸发的几个循环得到呈白色固体的(16R,17S)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(442mg，36％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)可见两个构象异构体(70:30)δ13.35-11.65(宽m,1H),8.61-8.28(m,1H),7.92(br s,1H),7.64(br s,2H),7.25(t,J＝8.3Hz,1H),7.12(br d,2H),6.29(br s,1H),5.9-5.31(br m,1H),4.71-3.99(m,2H),3.93-3.36(m,2H),3.24-2.99(m,2H),2.03(br s,6H),1.90-1.73(m,1H),1.73-1.18(m,12H),1.02-0.73(m,6H).ESI-MSm/z计算值635.2778，实验值636.4(M+1)+；保留时间：1.95分钟；LC方法A。
实例57：化合物117的制备
步骤1：(6S,7S)-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向100mL圆底烧瓶中装入(6S,7S)-4-苄基-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(2.43g，6.703mmol)和MeOH(40mL)。将溶液用氮气喷射10分钟。添加Pd(OH)2(20％w/w的684mg，0.9742mmol)(20％湿)并将反应在室温下在氢气(气球)下搅拌1.5天。将溶液用氮气喷射10分钟并通过硅藻土垫过滤两次。在浓缩之后，将溶液通过Whatman0.45uM PTFE注射器过滤盘微过滤并将溶剂蒸发，得到呈浅棕色树脂的(6S,7S)-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.788g，98％)。ESI-MS m/z计算值272.21，实验值273.16(M+1)+；保留时间：1.06分钟；LC方法A。
步骤2：(6S,7S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(6S,7S)-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.788g，6.564mmol)、无水DMF(30mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(2.2g，5.265mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(6.2mL，35.59mmol)和HATU(2.56g，6.733mmol)并将混合物在0℃下搅拌20分钟。将反应通过在剧烈搅拌下倒入柠檬酸(10％w/v的190mL，98.89mmol)(10％水溶液)中淬灭并在冰中冷却。将所得白色固体过滤并吸干。将固体溶解于DCM中。在浓缩之后，将所述溶液通过硅胶快速色谱法(220g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约2-3％甲醇。溶剂的蒸发得到呈白色泡沫状固体的(6S,7S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(2.39g，68％)。ESI-MS m/z计算值671.25446，实验值672.44(M+1)+；保留时间：2.07分钟；LC方法A。
步骤3：(16S,17S)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(化合物117)
在氮气下向100mL烧瓶中装入(6S,7S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-7-异丁基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(2.39g，3.555mmol)和无水DMF(100mL)。将混合物在冰中冷却。分两等部分添加NaH(60％w/w的1.14g，28.50mmol)(60％矿物油分散体)，彼此间隔3分钟添加。将混合物在氮气下在0℃下搅拌10分钟。将冰浴去除，并且将反应在氮气下剧烈搅拌2小时。在搅拌下，将反应混合物缓慢倒入冰冷的柠檬酸(10％w/v的500mL，260.2mmol)水溶液中。将所得固体悬浮液用EtOAc(3×120mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物，将所述残余物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(120g柱)使用MeOH/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约3-4％ MeOH。溶剂的蒸发和DCM/己烷中的研磨/蒸发的几个循环得到呈白色固体的(16S,17S)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(749mg，33％)。ESI-MS m/z计算值635.2778，实验值636.4(M+1)+；保留时间：1.92分钟(LC方法A)。将该物质(91％纯度)在不经任何进一步纯化的情况下用于下一步骤。
将少量的物质(45mg)溶解于DMSO(1mL)中并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化，得到呈白色固体的(16S,17S)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(24mg，52％)。1H NMR(499MHz,DMSO-d6)可见两个旋转异构体比率(60:40).δ13.22-12.00(宽m,1H),8.39-8.21(m,1H),7.89(br s,1H),7.65(br s,2H),7.25(d,J＝8.3Hz,1H),7.12(d,J＝7.6Hz,2H),6.31(br s,1H),5.68-5.45(m,1H),4.71-4.33(m,2H),4.08-3.83(m,1H),3.44(q,J＝13.2Hz,1H),3.30-3.18(m,2H与水信号重叠),3.14-3.02(m,1H),2.15-1.87(m,7H),1.56(d,J＝10.3Hz,2H),1.50-1.37(m,9H),1.02-0.78(m,6H).ESI-MS m/z计算值635.2778，实验值636.4(M+1)+；保留时间：1.94分钟；LC方法A。
实例58：化合物118的制备
步骤1：(16S,17R)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物118)
在氮气下向含有(16S,17R)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(303mg，0.4671mmol)的100mL烧瓶中装入DCM(5mL)。添加HCl(4M的5mL，20.00mmol)(4M二噁烷溶液)并将混合物在室温下搅拌2.5小时。将挥发物通过蒸发去除并且将残余物在DCM/己烷中研磨并且将溶剂蒸发。重复操作，直到获得固体为止。在真空下的干燥得到呈类白色固体的(16S,17R)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(306mg，103％)。ESI-MSm/z计算值535.22534，实验值536.49(M+1)+；保留时间：1.04分钟(LC方法A)。将该物质在不经任何进一步纯化的情况下用于下一步骤。
将少量物质(20mg)通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化，得到呈类白色固体的(16S,17R)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(11mg，54％)。ESI-MS m/z计算值535.22534，实验值536.5(M+1)+；保留时间：1.05分钟；LC方法A。
实例59：化合物119和化合物120的制备
步骤1：(16S,17R)-18-(4,4-二氟环己基)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮、(16S,17R)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-18-{螺[3.4]辛烷-2-基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物119)和(16S,17R)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-18-{螺[3.5]壬烷-2-基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物120)
对于三个反应中的每一个，向4mL小瓶中分别装入(16S,17R)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(20mg，0.03146mmol)、无水DCM(300μL)、DIEA(10μL，0.05741mmol)、乙酸(13μL，0.2286mmol)和对应的酮4,4-二氟环己酮(25mg，0.1864mmol)(反应A)、螺[3.4]辛烷-2-酮(25mg，0.2013mmol))(反应B)和螺[3.5]壬烷-2-酮(25mg，0.1809mmol)(反应C)。将小瓶加盖并在室温下搅拌20分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(25mg，0.1180mmol)。将小瓶加盖并在室温下搅拌16小时(反应B和C)。对于反应A，添加另一量的试剂4,4-二氟环己酮(136mg)和三乙酰氧基硼氢化钠(25mg，0.1180mmol)并将混合物搅拌4小时。添加甲醇(100μL)。将DCM蒸发并且将残余物溶于DMSO(1mL)中。将溶液微过滤(0.45μM)并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化(B和C的每种化合物纯化两次)。使用甲酸铵作为改性剂对来自反应A的化合物进行第三次纯化。蒸发得到呈类白色固体的三种以下产物：
(16S,17R)-18-(4,4-二氟环己基)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(2mg，10％)。ESI-MS m/z计算值653.2847，实验值654.55(M+1)+；保留时间：1.6分钟(LC方法A)。
(16S,17R)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-18-{螺[3.4]辛烷-2-基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(7.5mg，34％)。ESI-MS m/z计算值643.3192，实验值644.43(M+1)+；保留时间：1.55分钟(LC方法A)。
(16S,17R)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-18-{螺[3.5]壬烷-2-基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(5.7mg，26％)。ESI-MS m/z计算值657.3349，实验值658.4(M+1)+；保留时间：1.63分钟(LC方法A)。
实例60：化合物121的制备
步骤1：(16S,17R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-甲基-17-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物121)
将(16S,17R)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(20mg，0.03146mmol)溶解于甲酸(250μL)(88％水溶液)中并与甲醛水溶液(900μL，32.67mmol)(37％水溶液)合并，并在螺旋盖小瓶中加热至90℃2小时。然后将反应混合物通过吹入氮气部分浓缩并用甲醇稀释。将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化，得到呈白色固体的(16S,17R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-甲基-17-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(5.6mg，30％)。ESI-MS m/z计算值549.24097，实验值550.46(M+1)+；保留时间：1.04分钟；LC方法A。
实例61：化合物122的制备
步骤1：(16S,17R)-18-(3,3-二甲基丁酰基)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物122)
向4mL小瓶中装入(16S,17R)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(20mg，0.03146mmol)、3,3-二甲基丁酸(10μL，0.07851mmol)、DMF(200μL)、DIEA(27μL，0.1550mmol)和HATU(30mg，0.07890mmol)。将小瓶加盖并将混合物在室温下搅拌2小时。LCMS显示30％转化。添加另一量的3,3-二甲基丁酸(50μL，0.3926mmol)并将混合物在室温下搅拌过夜。在16小时之后，将混合物用DMSO(800μL)稀释。将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化，得到呈白色固体的(16S,17R)-18-(3,3-二甲基丁酰基)-12-(2,6-二甲基苯基)-17-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(10.5mg，52％)。ESI-MS m/z计算值633.29846，实验值634.42(M+1)+；保留时间：1.89分钟；LC方法A。
实例62：化合物123和化合物124的制备
步骤1：(3R,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-2-酮
向2-[[(2R)-环氧烷-2-基]甲基]异吲哚啉-1,3-二酮(7.3g，35.926mmol)于ACN(50mL)中的溶液中添加(2R)-2-(苄氨基)-3-甲基-丁酸甲酯(7.98g，36.060mmol)和高氯酸镁(12.1g，54.210mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后用水(70mL)稀释并用DCM(3×75mL)萃取。将合并的有机层用盐水(70mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将有机残余物溶解于甲醇(160mL)中并将水合肼(3.6056g，4.8mL，52.578mmol)添加到反应中。将反应在65℃下搅拌24小时。将反应冷却至室温并滤出白色固体。将滤液浓缩并且然后用1N NaOH(200mL)稀释，然后用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，然后通过硅胶色谱法纯化，用0-5％ DCM-MeOH洗脱，得到(3R,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(3.21g，34％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.40-7.15(m,5H),5.75(s,1H),4.13-3.76(m,2H),3.65-3.59(m,1H),3.45-3.30(m,2H),3.28-3.01(m,2H),2.88-2.54(m,1H),2.43-2.12(m,1H),1.19-0.67(m,6H).ESI-MSm/z计算值262.16812，实验值263.2(M+1)+；保留时间：1.94分钟；LC方法T。
步骤2：(2R,6R)-1-苄基-2-异丙基-1,4-二氮杂环庚-6-酮
向(3R,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(3.21g，12.236mmol)于THF(100mL)中的溶液中添加LAH(5.1g，134.37mmol)。将反应在40℃下搅拌3天，然后冷却至室温。随后在0℃下将反应用水(5.1mL)、15％ NaOH(水溶液)(5.1mL)和水(15.3mL)淬灭。将反应混合物再搅拌30分钟，然后将其通过硅藻土垫过滤。将滤饼用THF(3×50mL)洗涤。将合并的滤液在真空下浓缩，得到(2R,6R)-1-苄基-2-异丙基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(3.23g，106％)。ESI-MS m/z计算值248.18886，实验值249.3(M+1)+；保留时间：1.46分钟；LC方法T。
步骤3：(3R,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在室温下向(2R,6R)-1-苄基-2-异丙基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(3.23g，13.005mmol)于DCM(40mL)中的溶液中添加Boc酸酐(4.26g，19.519mmol)和三乙胺(1.9602g，2.7mL，19.371mmol)并搅拌过夜。将反应用盐水(50mL)淬灭。将两个层分离，并将水层用DCM(2×50mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸镁干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0-5％ DCM-MeOH纯化，得到(3R,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(2.61g,58％).1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.29(dd,J＝8.9,6.0Hz,5H),4.07-3.82(m,2H),3.78-3.56(m,2H),3.52(dd,J＝10.9,4.5Hz,2H),3.40-3.14(m,2H),2.95-2.68(m,1H),2.61-2.36(m,1H),1.88(d,J＝6.9Hz,1H),1.50(d,J＝7.5Hz,9H),1.18-0.68(m,6H).ESI-MS m/z计算值348.2413，实验值349.2(M+1)+；保留时间：2.28分钟；LC方法T。
步骤4：(3R,6S)-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向(3R,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(2.61g，7.4897mmol)于甲醇(52mL)中的溶液中添加钯(800mg，0.7517mmol)/炭和甲酸铵(1.4g，22.203mmol)。将反应在65℃下搅拌2小时。将钯通过过滤去除，并将溶液在真空下浓缩。将残余物用DCM(100mL)稀释，并且用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，得到(3R,6S)-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.82g，87％)。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ4.62(dd,J＝12.9,5.1Hz,1H),3.60-3.46(m,1H),3.44-3.35(m,2H),3.34-3.13(m,2H),3.10-2.95(m,2H),2.90(dd,J＝13.7,9.7Hz,1H),2.43-2.33(m,1H),2.27(ddd,J＝16.7,13.3,8.9Hz,1H),1.77(s,1H),1.58-1.49(m,1H),1.38(s,9H),0.90-0.81(m,6H).ESI-MS m/z计算值258.19434，实验值259.2(M+1)+；保留时间：1.36分钟；LC方法T。
步骤5：(3R,6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(3R,6S)-6-羟基-3-(1-甲基乙基)-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.753g，6.785mmol)、无水DMF(35mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(2.39g，5.720mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(6.7mL，38.47mmol)和HATU(2.61g，6.864mmol)并将混合物在0℃下搅拌25分钟，然后在室温下搅拌6小时。将反应通过在剧烈搅拌下倒入柠檬酸(10％w/v的200mL，104.1mmol)(10％水溶液)中来淬灭并在冰中冷却。将所得类白色固体过滤。将湿固体溶解于DCM中并将溶液经硫酸钠干燥。在浓缩之后，将所述溶液通过硅胶快速色谱法(120g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约3-4％甲醇。溶剂的蒸发得到呈类白色泡沫状固体的(3R,6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.607g，43％)。ESI-MSm/z计算值657.2388，实验值658.36(M+1)+；保留时间：1.96分钟；LC方法A。
步骤6：(16S,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-2,8,8-三氧代-20-(丙烷-2-基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(化合物124)
在氮气下向250mL烧瓶中装入(3R,6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.607g，2.441mmol)和无水DMF(80mL)。将混合物在冰中冷却。分两等部分添加NaH(60％w/w的780mg，19.50mmol)(60％矿物油分散体)，彼此间隔3分钟添加。将混合物在氮气下在0℃下搅拌10分钟。将冰浴去除，并且将反应在氮气下剧烈搅拌3小时。在搅拌下，将反应混合物缓慢倒入冰冷的柠檬酸(10％w/v的300mL，156.1mmol)水溶液中。将所得固体悬浮液用EtOAc(3×75mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物，将所述残余物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(120g柱)使用MeOH/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约3-4％ MeOH。溶剂的蒸发和DCM/己烷中的研磨/蒸发的几个循环得到呈白色固体的(16S,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-2,8,8-三氧代-20-(丙烷-2-基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(539mg，35％)。ESI-MS m/z计算值621.2621，实验值622.32(M+1)+；保留时间：1.83分钟；LC方法A。
步骤7：(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(丙烷-2-基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物123)
在氮气下向含有(16S,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-2,8,8-三氧代-20-(丙烷-2-基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(527mg，0.8307mmol)的100mL烧瓶中装入DCM(5mL)。添加HCl(4M的4mL，16.00mmol)(4M二噁烷溶液)并将混合物在室温下搅拌8小时。将挥发物通过蒸发去除并且将残余物在DCM/己烷中研磨并且将溶剂蒸发。重复操作，直到获得固体为止。在真空下的干燥得到呈白色固体的(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(丙烷-2-基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(491mg，102％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6+10％ D2O)δ8.85(s,1H),7.89(d,J＝7.9Hz,1H),7.67(t,J＝7.8Hz,1H),7.51(d,J＝7.6Hz,1H),7.26(t,J＝7.6Hz,1H),7.12(d,J＝7.7Hz,2H),6.30(s,1H),5.67-5.55(m,1H),3.85(t,J＝12.4Hz,1H),3.59-3.40(m,5H),3.01(dd,J＝13.9,10.9Hz,1H),2.92-2.80(m,1H),2.03(宽s,6H),1.04-0.89(m,6H).ESI-MS m/z计算值521.20966，实验值522.41(M+1)+；保留时间：1.06分钟；LC方法A。
实例63：化合物125的制备
步骤8：(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-甲基-20-(丙烷-2-基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物125)
将(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(丙烷-2-基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(28mg，0.04816mmol)溶解于甲酸(250μL)(88％水溶液)中并与甲醛水溶液(900μL，32.67mmol)(37％水溶液)合并，并在螺旋盖小瓶中加热至90℃15小时。然后将反应混合物通过吹入氮气部分浓缩，用甲醇稀释。将溶液通过PTFE注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化，得到呈白色固体的(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-甲基-20-(丙烷-2-基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(18.1mg，64％)。ESI-MS m/z计算值535.22534，实验值536.6(M+1)+；保留时间：1.06分钟；LC方法A。
实例64：化合物126、化合物127和化合物128的制备
步骤8：(16R,20R)-18-(4,4-二氟环己基)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(丙烷-2-基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物126)、和(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(丙烷-2-基)-18-{螺[3.4]辛烷-2-基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物127)和(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(丙烷-2-基)-18-{螺[3.5]壬烷-2-基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物128)
对于三个反应中的每一个，向4mL小瓶中分别装入(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(丙烷-2-基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(20mg，0.03440mmol)、无水DCM(300μL)、DIEA(10μL，0.05741mmol)、乙酸(13μL，0.2286mmol)和对应的酮4,4-二氟环己酮(25mg，0.1864mmol)(反应A)、螺[3.4]辛烷-2-酮(25mg，0.2013mmol))(反应B)和螺[3.5]壬烷-2-酮(25mg，0.1809mmol)(反应C)。将小瓶加盖并在室温下搅拌20分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(25mg，0.1180mmol)。将小瓶加盖并在室温下搅拌17小时。添加甲醇(100μL)。将DCM蒸发并且将残余物溶于DMSO(1mL)中。将溶液微过滤(0.45μM)并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化。Geneva蒸发得到呈白色固体的3种以下产物：
(16R,20R)-18-(4,4-二氟环己基)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(丙烷-2-基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(12.5mg，52％)。ESI-MS m/z计算值639.2691，实验值640.4(M+1)+；保留时间：1.4分钟(LC方法A)。
(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(丙烷-2-基)-18-{螺[3.4]辛烷-2-基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(13.2mg，55％)。ESI-MS m/z计算值629.3036，实验值630.61(M+1)+；保留时间：1.4分钟(LC方法A)。
(16R,20R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(丙烷-2-基)-18-{螺[3.5]壬烷-2-基}-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(16.1mg，66％)。ESI-MS m/z计算值643.3192，实验值644.43(M+1)+；保留时间：1.44分钟(LC方法A)。
实例65：化合物129、化合物130和化合物131的制备
步骤1：(2S)-2-氨基-5-甲基-己酸甲酯
将(2S)-2-氨基-5-甲基-己酸(10.02g，69.009mmol)溶解于MeOH(510mL)中并缓慢添加SOCl2(8.4g，5.1502mL，70.605mmol)。反应变成澄清溶液并加热回流两天。在完成之后，将挥发物去除并将产物在真空中干燥，得到呈白色固体的(2S)-2-氨基-5-甲基-己酸甲酯(盐酸盐)(13.33g，94％)。ESI-MS m/z计算值159.12593，实验值160.4(M+1)+；保留时间：1.11分钟；LC方法T。
步骤2：(2S)-2-(苄氨基)-5-甲基-己酸甲酯
将(2S)-2-氨基-5-甲基-己酸甲酯(盐酸盐)(12.3g，62.856mmol)和苯甲醛(6.3440g，6.1mL，59.780mmol)溶解于DCE(350mL)中并分批添加三乙酰氧基硼氢化钠(26.68g，125.88mmol)。在40分钟之后，将反应通过添加碳酸氢钠(200mL)淬灭。将层分离，并将水层用DCM萃取三次(100mL)。将合并的有机层经硫酸钠干燥并浓缩。将粗残余物干燥加载到硅胶上并通过快速柱色谱法使用0-15％己烷/EtOAc作为洗脱剂纯化，得到呈澄清无色油的(2S)-2-(苄氨基)-5-甲基-己酸甲酯(11.04g，67％)。ESI-MS m/z计算值249.17288，实验值250.2(M+1)+；保留时间：1.73分钟；LC方法T。
步骤3：(3S,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异戊基-1,4-二氮杂环庚-2-酮
将(2S)-2-(苄氨基)-5-甲基-己酸甲酯(11.721g，47.006mmol)溶解于MeCN(134mL)中并添加2-[[(2R)-环氧烷-2-基]甲基]异吲哚啉-1,3-二酮(10.04g，49.411mmol)。接下来，分批添加高氯酸镁(15.65g，70.115mmol)并使反应在室温下搅拌3天。将反应用水(200mL)稀释并用DCM(200mL)萃取三次，将合并的有机层经硫酸钠干燥并蒸发。将粗残余物溶解于MeOH(300mL)中并将水合肼(4.8450g，4.75mL，96.783mmol)添加到溶液中。将反应加热至65℃24小时，然后冷却至室温。将固体滤出并将滤液浓缩。将粗残余物干燥加载到硅胶上并通过快速柱色谱法使用0-30％己烷/EtOAc作为洗脱剂纯化。收集适当的级分，得到呈无色油的(3S,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异戊基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(6.43g，45％)。ESI-MS m/z计算值290.19943，实验值291.3(M+1)+；保留时间：1.51分钟；LC方法T。
步骤4：(3S,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异戊基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
将(3S,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异戊基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(6.43g，22.142mmol)溶解于THF(200mL)中并冷却至0℃。在氮气流下缓慢添加LAH(5.0422g，132.85mmol)。一旦完成，使反应在室温下搅拌20分钟，然后温热至室温1小时，然后加热至65℃过夜。将反应冷却至0℃并且然后缓慢添加5mL的DI水、7mL 2M NaOH，然后添加15mL DI水。添加硫酸钠，并将反应搅拌20分钟，然后将固体滤出并将滤液浓缩。将粗残余物溶解于DCM(100mL)中并添加TEA(2.2405g，3.0861mL，22.142mmol)和Boc酸酐(7.2486g，33.213mmol)。将反应在室温下搅拌1小时，然后用盐水(100mL)淬灭。将水层用DCM(50mL)萃取三次。有机层经硫酸钠干燥并浓缩。将粗残余物干燥加载到硅胶上并通过快速柱色谱法用0-25％己烷:丙酮纯化。收集适当的级分，得到呈无色油的(3S,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异戊基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(7.08g，81％)。ESI-MS m/z计算值376.27258，实验值377.5(M+1)+；保留时间：2.27分钟；LC方法T。
步骤5：(3S,6S)-6-羟基-3-异戊基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
将(3S,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异戊基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(7.08g，18.803mmol)和甲酸铵(4.76g，75.489mmol)溶解于MeOH(200mL)中，并添加钯/炭(3.09g，10％w/w，2.9036mmol)。将混合物加热至65℃1小时，然后添加硅藻土并将固体过滤。将滤液浓缩并溶解于乙酸乙酯(75mL)和氯化铵水溶液(75mL)中。将水层萃取，得到呈白色固体的(3S,6S)-6-羟基-3-异戊基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(2.9g，51％)。ESI-MS m/z计算值286.2256，实验值287.1(M+1)+；保留时间：1.71分钟(LC方法W)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ3.85-3.66(m,3H),2.96-2.82(m,1H),2.81-2.66(m,1H),2.62-2.52(m,1H),2.42(d,J＝9.1Hz,1H),1.54-1.43(m,1H),1.37(s,9H),1.32-1.08(m,4H),0.85(dd,J＝6.6,1.9Hz,6H)
将水层用碳酸氢钠碱化并用EtOAc(40mL)萃取三次，得到呈白色固体的第二批(3S,6S)-6-羟基-3-异戊基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(2.16g，38％)。ESI-MS m/z计算值286.2256，实验值287.1(M+1)+；保留时间：1.71分钟(LC方法W)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ3.85-3.66(m,3H),2.96-2.82(m,1H),2.81-2.66(m,1H),2.62-2.52(m,1H),2.42(d,J＝9.1Hz,1H),1.54-1.43(m,1H),1.37(s,9H),1.32-1.08(m,4H),0.85(dd,J＝6.6,1.9Hz,6H).
步骤6：(3S,6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异戊基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(3S,6S)-6-羟基-3-异戊基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.03g，3.596mmol)、无水DMF(20mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.256g，3.006mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(3.5mL，20.09mmol)和HATU(1.44g，3.787mmol)并将混合物在0℃下搅拌5小时。将反应通过在剧烈搅拌下倒入柠檬酸(10％w/v的110mL，57.25mmol)(10％水溶液)中来淬灭并在冰中冷却。将所得白色固体过滤。将固体溶解于DCM中。在浓缩之后，将所述溶液通过硅胶快速色谱法(120g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约3-4％甲醇。溶剂的蒸发得到呈白色泡沫状固体的(3S,6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异戊基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.433g，69％)。ESI-MS m/z计算值685.2701，实验值686.34(M+1)+；保留时间：2.06分钟；LC方法A。
步骤7：(16S,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(3-甲基丁基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(化合物129)
/>
在氮气下向100mL烧瓶中装入(3S,6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异戊基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.433g，2.088mmol)和无水DMF(70mL)。将混合物在冰中冷却。一次性添加NaH(60％w/w的677mg，16.93mmol)(60％矿物油分散体)。将混合物在氮气下在0℃下搅拌10分钟。将冰浴去除，并且将反应在氮气下剧烈搅拌3.5小时。在搅拌下，将反应混合物缓慢倒入冰冷的10％柠檬酸(10％w/v的300mL，156.1mmol)水溶液中。将所得固体悬浮液用EtOAc(3×75mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物，将所述残余物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(80g柱)使用MeOH/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物约2-3％ MeOH。溶剂的蒸发和DCM/己烷中的研磨/蒸发的几个循环得到呈白色固体的(16S,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(3-甲基丁基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(739mg，53％)。ESI-MS m/z计算值649.2934，实验值650.37(M+1)+；保留时间：2.05分钟；LC方法A。
步骤8：(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(3-甲基丁基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物130)
向含有(16S,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(3-甲基丁基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(723mg，1.090mmol)的100mL烧瓶中装入DCM(7mL)。添加HCl(4M的5mL，20.00mmol)(4M二噁烷溶液)并将混合物在室温下搅拌2小时。将挥发物通过蒸发去除并且将残余物在DCM/己烷中研磨并且将溶剂蒸发。重复操作，直到获得固体为止。在真空下的干燥得到呈白色固体的(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(3-甲基丁基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(655mg，101％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6+10％ D2O)δ8.63(s,1H),7.87(d,J＝7.9Hz,1H),7.66(t,J＝7.7Hz,1H),7.55(d,J＝7.5Hz,1H),7.27(t,J＝7.7Hz,1H),7.12(d,J＝7.7Hz,2H),6.20(s,1H),5.95-5.82(m,1H),4.73-4.59(m,1H),3.82-3.75(m,1H与水重叠),3.61-3.41(m,2H),3.31-3.19(m,2H),3.13(t,J＝11.7Hz,1H),2.02(宽s,6H),1.71-1.48(m,3H),1.27-1.10(m,2H),0.88(d,J＝6.5Hz,6H).ESI-MS m/z计算值549.24097，实验值550.43(M+1)+；保留时间：1.23分钟；LC方法A。
步骤9：(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-甲基-20-(3-甲基丁基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物131)
将(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(3-甲基丁基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(22mg，0.03678mmol)溶解于甲酸(250μL)(88％水溶液)中并与甲醛水溶液(900μL，32.67mmol)(37％水溶液)合并，并在螺旋盖小瓶中加热至90℃4小时。然后将反应混合物通过吹入氮气部分浓缩，用甲醇稀释。将溶液通过Whatman 0.45μM PTFE注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化，得到呈白色固体的(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-18-甲基-20-(3-甲基丁基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(16.8mg，75％)。ESI-MS m/z计算值563.25665，实验值564.69(M+1)+；保留时间：1.2分钟；LC方法A。
实例66：化合物132和化合物133的制备
步骤1：(2S)-2-(苄氨基)-3-甲基-丁酸甲酯
向(2S)-2-氨基-3-甲基丁酸甲酯(盐酸盐)(45g，263.07mmol)、TEA(26.862g，37mL，265.46mmol)、苯甲醛(28.208g，27mL，264.48mmol)于DCE(500mL)中的溶液中添加三乙酰氧基硼氢化钠(112g，528.45mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。之后，添加DCM(300mL)并将有机层用盐水(2×800mL)洗涤。将有机层用1M HCl(800mL)萃取。将水层分离，用2M氢氧化钠溶液碱化，然后用乙酸乙酯(2×800mL)萃取。将有机层用盐水(800mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩，得到呈无色油的(2S)-2-(苄氨基)-3-甲基-丁酸甲酯(38.12g，64％)。ESI-MS m/z计算值221.14159，实验值222.4(M+1)+；保留时间：1.69分钟；LC方法T。
步骤2：(3S,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-2-酮
向2-[[(2R)-环氧烷-2-基]甲基]异吲哚啉-1,3-二酮(22g，107.19mmol)于ACN(140mL)中的溶液中添加(2S)-2-(苄氨基)-3-甲基-丁酸甲酯(24.205g，107.19mmol)和高氯酸镁(40g，164.87mmol)。将反应混合物在室温下搅拌，然后用水(250mL)稀释并将ACN在真空中去除。然后将浑浊混合物用DCM(3×250mL)萃取。将合并的有机层用盐水(500mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将有机残余物(48g)溶解于甲醇(500mL)中。将水合肼(15.023g，20mL，219.07mmol)添加到反应混合物中并且然后将其在65℃下搅拌40小时。将反应冷却至室温并滤出白色固体。将滤液浓缩并且然后用1N NaOH(800mL)稀释，然后用乙酸乙酯(2×600mL)萃取。将合并的有机层用盐水(600mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，然后通过硅胶色谱法纯化，用0-10％ DCM-MeOH洗脱，得到呈白色泡沫的(3S,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(11.44g，40％)。ESI-MS m/z计算值262.16812，实验值263.2(M+1)+；保留时间：1.89分钟；LC方法T。
步骤3：(2S,6R)-1-苄基-2-异丙基-1,4-二氮杂环庚-6-酮
向(3S,6R)-4-苄基-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-2-酮(11.44g，42.734mmol)于THF(300mL)中的溶液中添加LAH(20g，500.60mmol)。将反应在60℃下搅拌20小时，然后冷却至室温。随后在0℃下将反应用水(20mL)、15％ NaOH(水溶液)(20mL)和水(60mL)淬灭。将反应混合物再搅拌30分钟，然后将其通过硅藻土垫过滤。将滤饼用THF(3×150mL)洗涤。将合并的滤液在真空下浓缩，得到(2S,6R)-1-苄基-2-异丙基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(11.6g，104％)。ESI-MS m/z计算值248.18886，实验值249.4(M+1)+；保留时间：1.54分钟；LC方法T。
步骤4：(3S,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在室温下向(2S,6R)-1-苄基-2-异丙基-1,4-二氮杂环庚-6-酮(11.6g，42.736mmol)于DCM(140mL)中的溶液中添加Boc酸酐(15g，66.668mmol)和三乙胺(13.068g，18mL，129.14mmol)并搅拌过夜。将反应用饱和碳酸氢钠(200mL)和盐水(100mL)淬灭。将两个层分离，并将水层用DCM(2×200mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0-60％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈澄清油的(3S,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(12.9g，85％)。ESI-MS m/z计算值348.2413，实验值349.5(M+1)+；保留时间：2.4分钟；LC方法T。
步骤5：(3S,6S)-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向(3S,6S)-4-苄基-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(12.9g，36.278mmol)于HOAc(3.1680g，3mL，52.754mmol)、乙酸乙酯(80mL)和甲醇(20mL)中的溶液中添加10％钯/炭(1.5g)。将混合物在帕尔振荡器中在60psi下保持1.5小时。将反应混合物通过硅藻土垫过滤。将滤液在真空下浓缩。向残余物中添加饱和碳酸氢钠(200mL)和DCM(200mL)。将两个层分离，并将水层用DCM(2×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(500mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，得到呈浅色凝胶的(3S,6S)-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(8.8g，92％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ3.96-3.68(m,3H),2.98-2.86(m,1H),2.81-2.65(m,2H),2.62-2.53(m,1H),2.39–2.27(m,1H),1.59(tt,J＝12.7,6.5Hz,1H),1.38(s,9H),0.88(dt,J＝13.0,6.8Hz,6H).ESI-MS m/z计算值258.19434，实验值259.2(M+1)+；保留时间：1.37分钟；LC方法W。
步骤6：(3S,6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(3S,6S)-6-羟基-3-(1-甲基乙基)-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.765g，6.832mmol)、无水DMF(35mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(2.418g，5.787mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(6.8mL，39.04mmol)和HATU(2.64g，6.943mmol)并将混合物在0℃下搅拌30分钟，然后在室温下搅拌6.5小时。将反应通过在剧烈搅拌下倒入柠檬酸(10％w/v的200mL，104.1mmol)(10％水溶液)中来淬灭并在冰中冷却。将所得类白色固体过滤。将湿固体溶解于DCM中并将溶液经硫酸钠干燥。在浓缩之后，将所述溶液通过硅胶快速色谱法(220g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约3-4％甲醇。溶剂的蒸发得到1.075g的约70％纯度的类白色泡沫状固体。将物质使用120g柱和相同的溶剂梯度再次纯化。溶剂的蒸发得到呈白色泡沫状固体的(3S,6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(773mg，20％)。ESI-MS m/z计算值657.2388，实验值658.29(M+1)+；保留时间：1.92分钟；LC方法A。
步骤7：(16S,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-2,8,8-三氧代-20-(丙烷-2-基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(化合物132)
在氮气下向250mL烧瓶中装入(3S,6S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-3-异丙基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(773mg，1.174mmol)和无水DMF(40mL)。将混合物在冰中冷却。分两等部分添加NaH(60％w/w的375mg，9.376mmol)(60％矿物油分散体)，彼此间隔3分钟添加。将混合物在氮气下在0℃下搅拌10分钟。将冰浴去除，并且将反应在氮气下剧烈搅拌3小时。在搅拌下，将反应混合物缓慢倒入冰冷的柠檬酸(10％w/v的150mL，78.07mmol)水溶液中。将所得固体悬浮液用EtOAc(3×75mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物，将所述残余物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(80g柱)使用MeOH/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。产物洗脱出约3-4％ MeOH。溶剂的蒸发和DCM/己烷中的研磨/蒸发的几个循环得到呈白色固体的(16S,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-2,8,8-三氧代-20-(丙烷-2-基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(344mg，46％)。ESI-MS m/z计算值621.2621，实验值622.29(M+1)+；保留时间：1.8分钟；LC方法A。
步骤8：(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(丙烷-2-基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物133)
在氮气下向含有(16S,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-2,8,8-三氧代-20-(丙烷-2-基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(337mg，0.5312mmol)的100mL烧瓶中装入DCM(3mL)。添加HCl(4M的3mL，12.00mmol)(4M二噁烷溶液)并将混合物在室温下搅拌2小时。将挥发物通过蒸发去除并且将残余物在DCM/己烷中研磨并且将溶剂蒸发。重复操作，直到获得固体为止。在真空下的干燥得到呈白色固体的(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(丙烷-2-基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(341mg，109％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6+10％ D2O)δ8.64(s,1H),7.91-7.78(m,1H),7.65(t,J＝8.4Hz,1H),7.51(d,J＝7.5Hz,1H),7.32-7.21(m,1H),7.12(d,J＝7.6Hz,2H),6.18(s,1H),5.85(s,1H),4.63(s,1H),3.90-3060(m,3H与水重叠),3.49(t,J＝13.3Hz,1H),3.36-3.16(m,3H),2.02(宽s,6H),0.99-0.83(m,6H).ESI-MS m/z计算值521.20966，实验值522.3(M+1)+；保留时间：1.0分钟；LC方法A。
实例67：化合物134、化合物135和化合物136的制备
步骤1：(2S)-2-(苄氨基)-4,4-二甲基-戊酸甲酯
在室温下在氮气下，向(2S)-2-氨基-4,4-二甲基-戊酸甲酯(盐酸盐)(25.65g，124.52mmol)于无水1,2-二氯乙烷(600mL)的搅拌的溶液中添加苯甲醛(13.214g，12.706mL，124.52mmol)。将反应混合物搅拌15分钟并且分批添加三乙酰氧基硼氢化钠(65.977g，311.30mmol)。在添加完成之后，将反应混合物在室温下搅拌45分钟。将反应用饱和碳酸氢钠水溶液(500mL)淬灭并将两个层分离。将水层用DCM(2×150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-5％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈无色油的(2S)-2-(苄氨基)-4,4-二甲基-戊酸甲酯(22.82g，70％)。ESI-MS m/z计算值249.17288，实验值250.2(M+1)+；保留时间：2.31分钟；LC方法S。
步骤2：(3S,6R)-4-苄基-3-(2,2-二甲基丙基)-6-羟基-1,4--二氮杂环庚-2-酮
在室温下向(2S)-2-(苄氨基)-4,4-二甲基-戊酸甲酯(22.82g，91.518mmol)和2-[[(2R)-环氧烷-2-基]甲基]异吲哚啉-1,3-二酮(19.526g，96.094mmol)于乙腈(170mL)中的溶液中添加高氯酸镁(30.642g，137.28mmol)。将反应混合物加热至30℃24小时。将反应用水(500mL)淬灭并将产物用DCM(3×250mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。在室温下将获得的残余物溶解于甲醇(500mL)中并添加水合肼(9.1631g，183.04mmol)。将反应混合物加热至65℃24小时。在冷却至室温之后，将白色沉淀滤出并将滤液在真空下浓缩。将获得的残余物用1M NaOH水溶液(500mL)处理并且将产物用乙酸乙酯(3×250mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-5％ DCM-甲醇纯化，得到呈白色泡沫的(3S,6R)-4-苄基-3-(2,2-二甲基丙基)-6-羟基-1,4--二氮杂环庚-2-酮(21.75g，79％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.41-7.17(m,5H),6.28(s,1H),3.97-3.69(m,3H),3.68-3.44(m,2H),3.43-3.24(m,1H),3.21-3.05(m,1H),2.98-2.79(m,1H),2.24(s,1H),2.07-1.84(m,1H),1.75-1.52(m,1H),0.96(s,9H).ESI-MS m/z计算值290.19943，实验值291.0(M+1)+；保留时间：1.84分钟；LC方法T。
步骤3：(2S,6R)-1-苄基-2-(2,2-二甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-6-酮
在0℃下在氮气下向(3S,6R)-4-苄基-3-(2,2-二甲基丙基)-6-羟基-1,4--二氮杂环庚-2-酮(10.1g，34.779mmol)于无水THF(300mL)中的搅拌的溶液中分批添加LAH(7.9199g，208.67mmol)。在添加完成之后，将反应混合物在0℃下搅拌15分钟，然后加热至45℃24小时。将反应混合物冷却至0℃并且按照Fieser后处理程序淬灭。将盐滤出并用THF(2×100mL)洗涤。将合并的滤液在真空下浓缩，得到呈白色固体的(2S,6R)-1-苄基-2-(2,2-二甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-6-酮(9.86g，94％)。产物不经进一步纯化即用于下一步。ESI-MS m/z计算值276.22015，实验值277.6(M+1)+；保留时间：1.54分钟；LC方法S。
步骤4：(3S,6S)-4-苄基-3-(2,2-二甲基丙基)-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在0℃下向(2S,6R)-1-苄基-2-(2,2-二甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-6-酮(9.86g，33.887mmol)于DCM(120mL)中的搅拌的溶液中添加TEA(5.1436g，7.0848mL，50.831mmol)，随后添加Boc酸酐(11.094g，50.831mmol)。将反应混合物在该温度下搅拌1小时。将反应用盐水(200mL)冷淬灭。在温热至室温之后，将两个层分离。将水层用DCM(2×100mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-25％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈粘状无色油的(3S,6S)-4-苄基-3-(2,2-二甲基丙基)-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(12.52g，93％)。ESI-MS m/z计算值376.27258，实验值377.3(M+1)+；保留时间：3.44分钟；LC方法S。
步骤5：(3S,6S)-3-(2,2-二甲基丙基)-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在室温下在氮气下向(3S,6S)-4-苄基-3-(2,2-二甲基丙基)-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(12.52g，33.251mmol)于无水甲醇(325mL)中的搅拌的溶液中添加钯/炭(5.3078g，10％w/w，4.9876mmol)，然后添加甲酸铵(8.3864g，133.00mmol)。将反应混合物加热至65℃2小时。在冷却至室温之后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤并将固体用甲醇(2×80mL)洗涤。将合并的滤液在真空下浓缩，得到呈白色固体的(3S,6S)-3-(2,2-二甲基丙基)-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(9.74g，97％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ3.90-3.66(m,3H),2.98-2.84(m,1H),2.81-2.53(m,4H),2.48-2.39(m,2H),1.38(s,9H),1.26-1.14(m,1H),1.13-1.04(m,1H),0.89(s,9H).ESI-MS m/z计算值286.22565，实验值287.1(M+1)+；保留时间：1.59分钟；LC方法T。
步骤6：3-[[4-[[(3S,6S)-1-叔丁氧基羰基-3-(2,2-二甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-6-基]氧]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
在氮气下，向20mL烧瓶中装入(3S,6S)-3-(2,2-二甲基丙基)-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(244mg，0.8519mmol)、3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(364mg，0.8711mmol)和无水THF(3mL)。添加叔丁醇钠叔丁醇钠(327mg，3.403mmol)，将小瓶盖上，在室温下搅拌反应2.5小时，然后在50℃下搅拌1.5小时。将混合物用10％柠檬酸水溶液(20mL)稀释并将产物用EtOAc(3×20mL)萃取。将组合的萃取物经硫酸钠干燥并且将溶剂蒸发。将所得固体悬浮于甲醇中并将不溶级分(主要是起始氯代酸)滤出。将滤液浓缩并使用含有5mM HCl的乙腈/水的梯度进行反相(100g C18柱)(15分钟内0至20％，然后20分钟内20至100％)。产物洗脱出约40-50％ MeCN。纯级分的蒸发得到呈类白色固体的3-[[4-[[(3S,6S)-1-叔丁氧基羰基-3-(2,2-二甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-6-基]氧]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(113mg，19％)。ESI-MS m/z计算值667.30396，实验值668.7(M+1)+；保留时间：1.36分钟；LC方法A。
步骤7：(16S,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2,2-二甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(化合物134)
在氮气下，向100mL烧瓶中装入3-[[4-[[(3S,6S)-1-叔丁氧基羰基-3-(2,2-二甲基丙基)-1,4-二氮杂环庚-6-基]氧]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(103mg，0.1462mmol)、无水DMF(5mL)、DIEA(100μL，0.5741mmol)和HATU(104mg，0.2735mmol)。将混合物在室温下搅拌20分钟。将反应混合物与小规模反应(以0.01278mmol运行)合并并将其在搅拌下将其缓慢倒入冰冷的柠檬酸(10％w/v的20mL，10.41mmol)水溶液中。将所得固体悬浮液用EtOAc(3×40mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物，将所述残余物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(12g柱)使用MeOH/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化(两次纯化作为第一次进行，早期用DMF和杂质洗脱)。产物洗脱出约3-4％MeOH。溶剂的蒸发和DCM/己烷中的研磨/蒸发的几个循环得到呈白色固体的(16S,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2,2-二甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(60mg，57％)。ESI-MS m/z计算值649.2934，实验值650.48(M+1)+；保留时间：2.02分钟；LC方法A。
步骤8：(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2,2-二甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物135)
在氮气下向含有(16S,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2,2-二甲基丙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(57mg，0.08772mmol)的100mL烧瓶中装入DCM(1mL)。添加HCl(4M的1mL，4.000mmol)(4M二噁烷溶液)并将混合物在室温下搅拌2小时(94％转化)。添加更多HCl(4M的500μL，2.000mmol)并将混合物再搅拌一小时。将挥发物通过蒸发去除并且将残余物在DCM/己烷中研磨并且将溶剂蒸发。重复操作，直到获得固体为止。在真空下的干燥得到呈白色固体的(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2,2-二甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(58mg，107％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.67(s,1H),7.86(d,J＝7.9Hz,1H),7.65(t,J＝7.8Hz,1H),7.52(d,J＝7.6Hz,1H),7.27(t,J＝7.7Hz,1H),7.12(d,J＝7.7Hz,2H),6.21(s,1H),5.90(宽s,1H),4.83(brs,1H),3.87(dd,J＝14.0,7.3Hz,1H),3.57(t,J＝13.1Hz,1H),3.47(dd,J＝14.2,4.8Hz,1H),3.26-3.08(m,3H),2.03(s,6H),1.61-1.44(m,2H),0.98(s,9H).ESI-MS m/z计算值549.24097，实验值550.43(M+1)+；保留时间：1.18分钟；LC方法A。
步骤9：(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2,2-二甲基丙基)-18-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物136)
将(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2,2-二甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(20mg，0.03242mmol)溶解于甲酸(250μL)(88％水溶液)中并与甲醛水溶液(900μL，32.67mmol)(37％水溶液)合并，并在螺旋盖小瓶中加热至90℃2.5小时。然后将反应混合物通过吹入氮气部分浓缩，用DMSO稀释。将溶液通过注射器过滤盘微过滤并通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化，得到呈类白色固体的(16R,20S)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2,2-二甲基丙基)-18-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(3.7mg，19％)。ESI-MS m/z计算值563.25665，实验值564.69(M+1)+；保留时间：1.16分钟；LC方法A。
实例68：化合物137的制备
步骤1：(3S)-3-氨基四氢呋喃-2-酮
将(2S)-2-氨基-4-羟基-丁酸(23.58g，197.95mmol)溶解于HCl水溶液(2.4M的380mL，912.00mmol)中。将溶液在140℃下回流并搅拌3小时。然后将反应冷却至室温并搅拌过夜。将EtOH(5×400mL)添加到溶液中并浓缩，直到剩下白色固体为止。将固体在冰浴上冷却并过滤。将白色固体用冷乙醇(3×400mL)洗涤并干燥，得到呈白色粉末的(3S)-3-氨基四氢呋喃-2-酮(盐酸盐)(20.71g，75％)。1H NMR(250MHz,氧化氘)δ4.68-4.52(m,1H),4.52-4.34(m,2H),2.95-2.64(m,1H),2.55-2.26(m,1H).
步骤2：(3S)-3-(苄氨基)四氢呋喃-2-酮
向(3S)-3-氨基四氢呋喃-2-酮(盐酸盐)(18.36g，133.46mmol)于DCE(275mL)中的溶液中添加TEA(13.504g，18.6mL，133.45mmol)和苯甲醛(12.792g，12.3mL，120.54mmol)并在室温下搅拌10分钟。在室温下添加三乙酰氧基硼氢化钠(56.6g，267.06mmol)并将反应搅拌1小时，然后用碳酸氢钠水溶液(250mL)淬灭。将溶液用DCM(3×300mL)萃取。将有机层用盐水(300mL)洗涤，然后经硫酸钠干燥并浓缩，然后通过洗脱0-100％己烷-乙醚的硅胶色谱法纯化，得到(3S)-3-(苄氨基)四氢呋喃-2-酮(17.93g，70％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.34(m,5H),4.40(td,J＝8.9,2.1Hz,1H),4.17(ddd,J＝10.5,9.2,6.2Hz,1H),3.91(d,J＝1.5Hz,2H),3.55(dd,J＝10.5,8.1Hz,1H),2.66-2.26(m,1H),2.20-2.08(m,1H),2.04-1.98(m,1H).ESI-MS m/z计算值191.09464，实验值192.2(M+1)+；保留时间：1.89分钟；LC方法T。
步骤3：(3R,6S)-4-苄基-6-羟基-3-(2-羟乙基)-1,4-二氮杂环庚-2-酮
向2-[[(2R)-环氧烷-2-基]甲基]异吲哚啉-1,3-二酮(18g，88.585mmol)于ACN(200mL)中的溶液中添加(3S)-3-(苄氨基)四氢呋喃-2-酮(16.93g，88.534mmol)和高氯酸镁(29.64g，132.79mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时，然后用水(150mL)稀释并用DCM(3×150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(170mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将有机残余物溶解于甲醇(300mL)中并将水合肼(8.8638g，11.8mL，129.26mmol)添加到反应中。将反应在65℃下搅拌24小时。将反应冷却至室温并滤出白色固体。将滤液浓缩并且然后用1N NaOH(40mL)稀释，然后用乙酸乙酯(3×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，然后通过硅胶色谱法纯化，用0-5％ DCM-MeOH洗脱，得到(3R,6S)-4-苄基-6-羟基-3-(2-羟乙基)-1,4-二氮杂环庚-2-酮(17.06g，73％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.48-7.25(m,5H),6.25(s,1H),4.58-3.67(m,5H),3.48(s,2H),3.40(d,J＝6.6Hz,1H),3.17(s,1H),3.03-2.75(m,1H),2.40-1.71(m,2H).ESI-MS m/z计算值264.1474，实验值265.1(M+1)+；保留时间：2.13分钟；LC方法T。
步骤4：(2R,6S)-1-苄基-2-(2-羟乙基)-1,4-二氮杂环庚-6-醇
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向(3R,6S)-4-苄基-6-羟基-3-(2-羟乙基)-1,4-二氮杂环庚-2-酮(17.06g，64.543mmol)于2-甲基四氢呋喃(260mL)中的溶液中添加LAH(25g，658.69mmol)。将反应在45℃下搅拌过夜，然后冷却至室温。随后在0℃下将反应用水(25mL)、15％ NaOH(水溶液)(25mL)和水(75mL)淬灭。将反应混合物再搅拌30分钟，然后将其通过硅藻土垫过滤。将滤饼用THF(3×500mL)洗涤。将合并的滤液在真空下浓缩，得到(2R,6S)-1-苄基-2-(2-羟乙基)-1,4-二氮杂环庚-6-醇(13.85g，86％)。ESI-MS m/z计算值250.16812，实验值251.1(M+1)+；保留时间：2.03分钟；LC方法T。
步骤5：(3R,6R)-4-苄基-6-羟基-3-(2-羟乙基)-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在室温下向(2R,6S)-1-苄基-2-(2-羟乙基)-1,4-二氮杂环庚-6-醇(13.85g，55.325mmol)于DCM(300mL)中的溶液中添加Boc酸酐(18.1g，82.934mmol)和三乙胺(8.4216g，11.6mL，83.226mmol)并搅拌过夜。将反应用盐水(200mL)淬灭。将两个层分离，并将水层用DCM(2×500mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸镁干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0-5％ DCM-MeOH纯化，得到(3R,6R)-4-苄基-6-羟基-3-(2-羟乙基)-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(11.28g，58％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.30(d,J＝7.1Hz,5H),4.13-3.68(m,7H),3.55-3.24(m,3H),3.19-2.75(m,2H),2.14-1.73(m,2H),1.51(s,9H).ESI-MS m/z计算值350.22055，实验值351.2(M+1)+；保留时间：2.37分钟；LC方法T。
步骤6：(3R,6R)-4-苄基-3-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧乙基]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在0℃下，向(3R,6R)-4-苄基-6-羟基-3-(2-羟乙基)-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(4.94g，14.096mmol)于THF(100mL)中的溶液中添加咪唑(1.9g，27.909mmol)。将溶液搅拌10分钟，然后在相同温度下添加TBSCl(2.6g，17.250mmol)。在0℃下将反应搅拌过夜，然后用氯化铵水溶液(50mL)淬灭。将反应用乙酸乙酯(3×100mL)萃取并用盐水(150mL)洗涤，然后经硫酸钠干燥。将有机层在真空中浓缩并使用洗脱10-60％己烷-乙醚的硅胶色谱法纯化，得到(3R,6R)-4-苄基-3-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧乙基]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(5.383g，82％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ7.60-7.31(m,5H),4.97-4.82(m,1H),4.10-4.02(m,1H),4.00-3.70(m,5H),3.67-3.55(m,1H),3.31(ddq,J＝35.4,10.3,5.4,4.7Hz,1H),3.16-2.72(m,3H),1.84-1.69(m,1H),1.64(d,J＝17.8Hz,9H),1.55(dt,J＝13.4,6.7Hz,1H),1.12-0.96(m,9H),0.26-0.21(m,6H).ESI-MS m/z计算值464.30704，实验值465.3(M+1)+；保留时间：3.21分钟；LC方法T。
步骤7：(3S,6S)-3-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧乙基]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
向100mL圆底烧瓶中装入(3S,6S)-4-苄基-3-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧乙基]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.553g，3.342mmol)和MeOH(30mL)。将溶液用氮气喷射10分钟。添加Pd(OH)2(20％w/w的525mg，0.7477mmol)(20％湿)并将反应在室温下在氢气(两个气球)下搅拌4天。将溶液用氮气喷射10分钟并通过硅藻土垫过滤。在浓缩之后，将溶液通过注射器过滤盘微过滤并将溶剂蒸发，得到呈有色树脂的(3S,6S)-3-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧乙基]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.215g，97％)。ESI-MS m/z计算值374.26007，实验值375.75(M+1)+；保留时间：1.49分钟；LC方法A。
步骤8：3-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧乙基]-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯，非对映异构体1，以及3-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧乙基]-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯，非对映异构体2
在氮气下，向100mL烧瓶中装入(3S,6S)-3-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧乙基]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.215g，3.244mmol)、无水DMF(18mL)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.15g，2.752mmol)。在试剂的溶解之后，将混合物在冰浴中冷却。添加DIEA(3.2mL，18.37mmol)和HATU(1.36g，3.577mmol)并将混合物在0℃下搅拌30分钟，然后在室温下搅拌5小时。将反应通过在剧烈搅拌下倒入柠檬酸(10％w/v的100mL，52.05mmol)(10％水溶液)中来淬灭并在冰中冷却。将所得白色固体过滤。将固体溶解于DCM中。在浓缩之后，将所述溶液通过硅胶快速色谱法(220g柱)使用甲醇/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。具有预期质量的两个产物以不同的峰洗脱。
更少极性物质(非对映异构体1)洗脱出约2％ MeOH，3-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧乙基]-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(55mg，3％)。ESI-MS m/z计算值773.3045，实验值774.55(M+1)+；保留时间：2.38分钟(LC方法A)。
更多极性物质(非对映异构体2)洗脱出约3％ MeOH，3-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧乙基]-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(210mg，10％)。ESI-MS m/z计算值773.3045，实验值774.37(M+1)+；保留时间：2.34分钟(LC方法A)。
步骤9：12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-羟乙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(化合物137)
在氮气下向100mL烧瓶中装入3-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧乙基]-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(210mg，0.2712mmol)(主要异构体，非对映异构体2)和无水DMF(11mL)。将混合物在冰中冷却。一次性添加NaH(60％w/w的88mg，2.200mmol)(60％矿物油分散体)。将混合物在氮气下在0℃下搅拌10分钟。将冰浴去除，并且将反应在氮气下剧烈搅拌2小时。在搅拌下，将反应混合物缓慢倒入冰冷的10％柠檬酸(10％w/v的40mL，20.82mmol)水溶液中。将所得固体悬浮液用EtOAc(3×75mL)萃取。在经硫酸钠干燥之后，溶剂的蒸发得到残余物，将所述残余物溶解于DCM中并通过硅胶快速色谱法(24g柱)使用MeOH/二氯甲烷的梯度(30分钟内0至5％)纯化。主要脱保护的产物洗脱出约4％ MeOH。溶剂的蒸发和DCM/己烷中的研磨/蒸发的几个循环，得到呈白色固体的12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-羟乙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(95mg，56％)。ESI-MS m/z计算值623.2414，实验值624.3(M+1)+；保留时间：1.39分钟(LC方法A)。将少量(21mg)通过反相制备型HPLC(C18)使用乙腈/水的梯度(15分钟内1至99％)和HCl作为改性剂纯化，得到呈白色固体的12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-羟乙基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-18-羧酸叔丁酯(15.7mg，41％)。ESI-MS m/z计算值623.2414，实验值624.3(M+1)+；保留时间：1.39分钟(LC方法A)。8个手性SFC柱的筛选始终只显示一个峰，表明产物是未知结构的单一对映异构体。
实例69：化合物138-159的表征
下表中的化合物是使用本文所描述的可商购试剂和中间体以类似于上文所描述的方式制备的。
表7：
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表8：
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实例70：化合物160的制备
步骤1：3-[2-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯
将3-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(大约1.209g，6.005mmol)于NMP(20mL)中的溶液在冰浴中冷却，并添加氢化钠(60％w/w的0.24g，6.001mmol)。在90分钟之后，添加2,4-二氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶(1.52g，6.005mmol)于NMP(10mL)中的溶液。使反应缓慢温热至室温并搅拌三天。将所述反应用饱和氯化铵水溶液淬灭，用水稀释，并用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取物用水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。将残余物通过硅胶柱色谱法用0-30％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈无色固体的3-[2-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.36g，54％)。ESI-MS m/z计算值417.18192，实验值418.2(M+1)+；保留时间：0.86分钟；LC方法D。
步骤2：2-氯-4-(2,6-二甲基苯基)-6-(3-哌啶氧基)嘧啶
将3-[2-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.36g，3.254mmol)于HCl(4M的15mL，60.00mmol)(于二噁烷中)中的溶液搅拌两小时。将溶剂在真空下去除，将残余物悬浮于乙腈中，并将溶剂在真空下再次去除。将所得固体用乙醚研磨并在真空下干燥，得到浅棕黄色固体2-氯-4-(2,6-二甲基苯基)-6-(3-哌啶氧基)嘧啶(盐酸盐)(1.15g，100％)ESI-MS m/z计算值317.1295，实验值318.1(M+1)+；保留时间：0.5分钟；LC方法D。
步骤3：2-[3-[2-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧-1-哌啶基]-N-(3-氨磺酰基苯基)乙酰胺
将2-氯-4-(2,6-二甲基苯基)-6-(3-哌啶氧基)嘧啶(盐酸盐)(0.14g，0.3952mmol)、2-氯-N-(3-氨磺酰基苯基)乙酰胺(0.11g，0.4423mmol)和碳酸氢钠(0.17g，2.024mmol)于NMP(2mL)中的溶液搅拌三天。将反应用水稀释并用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取物用水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。将残余物通过硅胶柱色谱法用0-6％甲醇/二氯甲烷纯化，得到无色固体2-[3-[2-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧-1-哌啶基]-N-(3-氨磺酰基苯基)乙酰胺(0.16g，76％)ESI-MS m/z计算值529.155，实验值530.3(M+1)+；保留时间：0.47分钟；LC方法D。
步骤4：5-(2,6-二甲基苯基)-2-氧杂-9λ6-硫杂-6,8,15,18,24-五氮杂四环[16.3.1.13,7.110,14]二十四碳-3(24),4,6,10,12,14(23)-六烯-9,9,16-三酮(化合物160)
将2-[3-[2-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧-1-哌啶基]-N-(3-氨磺酰基苯基)乙酰胺(0.16g，0.3019mmol)、乙酸钯(II)(14mg，0.06236mmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基氧杂蒽(36mg，0.06222mmol)和碳酸铯(0.20g，0.6138mmol)于二噁烷(15mL)中的混合物用氮气流脱气并在100℃下搅拌16小时。将反应过滤并使用反相HPLC纯化，得到无色固体5-(2,6-二甲基苯基)-2-氧杂-9λ6-硫杂-6,8,15,18,24-五氮杂四环[16.3.1.13,7.110,14]二十四碳-3(24),4,6,10,12,14(23)-六烯-9,9,16-三酮(盐酸盐)(27mg，17％)ESI-MS m/z计算值493.17838，实验值494.3(M+1)+；保留时间：1.16分钟；LC方法A。
实例71：化合物161的制备
步骤1：(3R)-4-苄基-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
将(3R)-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3g，13.87mmol)和苯甲醛(2.5mL，24.59mmol)在无水DCE(40mL)中与乙酸(1.45mL，25.50mmol)合并，并在室温下搅拌30分钟。然后将反应混合物冷却至0℃并添加三乙酰氧基硼氢化钠(6.2g，29.25mmol)。将反应混合物恢复至室温并搅拌16小时。将反应混合物倒入碳酸氢钠水溶液中并用乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，然后浓缩并在高真空下干燥72小时，得到呈白色固体的(3R)-4-苄基-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.15g，98％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ7.31(d,J＝4.3Hz,4H),2.63-2.54(m,1H),7.29-7.20(m,1H),4.61(t,J＝5.2Hz,1H),3.99(d,J＝13.7Hz,1H),3.79-3.66(m,2H),3.48(d,J＝12.7Hz,1H),3.36(dd,J＝5.6,1.4Hz,1H),3.00(td,J＝9.3,4.6Hz,1H),2.32(dt,J＝8.0,3.8Hz,1H),2.13-1.99(m,1H),1.39(s,9H).ESI-MS m/z计算值306.19434，实验值307.3(M+1)+；保留时间：0.36分钟；LC方法D。
步骤2：3-[[4-[[(2R)-1-苄基-4-叔丁氧基羰基-哌嗪-2-基]甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(4.062g，9.721mmol)和(3R)-4-苄基-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.614g，11.80mmol)在无水NMP(50mL)中合并。将反应混合物冷却至0℃，并在氮气流下分批缓慢添加NaH(1.75g，43.75mmol)。然后将反应混合物在室温下搅拌1小时。此后，将反应混合物缓慢添加到烧瓶中，在含有氯化铵水溶液和乙酸乙酯的冰/水浴中冷却。将水溶液和有机层分离并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取4次。将水层用1M HCl进一步酸化至pH＝6并将乙酸乙酯再萃取2次。将合并的有机物用水洗涤3次。发现来自这些洗涤的水层的pH为8，并添加另外的氯化铵水溶液和1M HCl，直到pH达到6为止。然后将酸化的水层用乙酸乙酯萃取3次，并将这些分离的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到3-[[4-[[(2R)-1-苄基-4-叔丁氧基羰基-哌嗪-2-基]甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(4.34g，65％)ESI-MSm/z计算值687.27264，实验值688.4(M+1)+；保留时间：0.54分钟，所述产物在不经进一步纯化的情况下用于下一步骤。将最初的有机层分别用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗物质通过硅胶色谱法纯化，用0-10％甲醇/二氯甲烷洗脱。将含有产物的级分合并并浓缩，得到3-[[4-[[(2R)-1-苄基-4-叔丁氧基羰基-哌嗪-2-基]甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.6g，24％)。ESI-MS m/z计算值687.27264，实验值688.5(M+1)+；保留时间：0.54分钟，LC方法D。
步骤3：(8R)-13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(化合物161)
阶段1：将3-[[4-[[(2R)-1-苄基-4-叔丁氧基羰基-哌嗪-2-基]甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(4.34g，6.310mmol)溶解于甲醇(40mL)中并添加二羟基钯(800mg，0.5697mmol)。将反应容器用氮气吹扫，然后将氢气从气球中鼓入15分钟，之后将反应在室温下搅拌4小时，同时将氢气气球放在适当的位置。然后将反应混合物用氮气吹扫，过滤并浓缩，得到白色固体3-[[4-[[(2R)-4-叔丁氧基羰基哌嗪-2-基]甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(3.56g，94％)ESI-MS m/z计算值597.2257，实验值598.4(M+1)+；保留时间：0.46分钟，LC方法D。
阶段2：将来自阶段1的产物与HATU(3.12g，8.206mmol)在二氯甲烷(500mL)中合并，然后添加DIPEA(5.6mL，32.15mmol)并将反应混合物在室温下搅拌1小时。然后将反应混合物浓缩并溶解于150mL乙酸乙酯中。将有机层用100mL 1M HCl洗涤，并将所得水层用100mL乙酸乙酯再萃取一次。然后将合并的有机物用盐水洗涤并经硫酸钠干燥。将所得粗通过硅胶柱色谱法纯化，用0-10％甲醇/二氯甲烷的溶剂梯度洗脱，得到(中等纯度，但用于下一步骤)的(8R)-13-(2,6-二甲基苯基)-2,17,17-三氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(22),11,13,15(23),18,20-六烯-6-羧酸叔丁酯(2.64g，72％)ESI-MS m/z计算值579.21515，实验值580.3(M+1)+；保留时间：0.61分钟，LC方法D。
阶段3：将来自阶段2的产物溶解于二氯甲烷(20mL)和于二噁烷中的HCl(4M的35mL，140.0mmol)中并在室温下搅拌1小时。然后将反应混合物在真空下浓缩成固体残余物。添加己烷并将反应混合物在真空下再次浓缩，得到白色固体，所述白色固体无需进一步纯化即可用于下一步骤：(8R)-13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(盐酸盐)(2.32g，71％)ESI-MS m/z计算值479.16272，实验值480.4(M+1)+；保留时间：0.3分钟，LC方法D。
将来自阶段3的物质的10mg部分通过制备型HPLC(1-40MeCN/水，HCl改性剂，15分钟运行)进一步纯化，得到(8R)-13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(盐酸盐)(6mg，0％)。ESI-MS m/z计算值479.16272，实验值480.4(M+1)+；保留时间：0.7分钟(LC方法A)。
实例72：化合物162的制备
步骤1：(8R)-13-(2,6-二甲基苯基)-6-甲基-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(化合物162)
在3mL小瓶中，将(8R)-13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(盐酸盐)(14mg，0.02713mmol)溶解于甲酸(400μL)和37％甲醛水溶液(400μL，14.52mmol)中。将该溶液在70℃下搅拌4小时。然后将反应混合物冷却至室温，用甲醇稀释，过滤并通过反相HPLC(1-40％ ACN/水，带有HCl改性剂，15分钟运行)纯化并浓缩，得到呈白色粉末的(8R)-13-(2,6-二甲基苯基)-6-甲基-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(盐酸盐)(5.1mg，35％)ESI-MS m/z计算值493.17838，实验值494.4(M+1)+；保留时间：0.8分钟，LC方法A。
实例73：化合物163的制备
步骤1：(8R)-13-(2,6-二甲基苯基)-6-{2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基}-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(22),11(23),12,14,18,20-六烯-2,17,17-三酮(化合物163)
将2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙醇(225mg，1.460mmol)和戴斯-马丁过碘烷(615mg，1.450mmol)在二氯甲烷(3mL)中合并，并在室温下搅拌1小时，然后将小瓶中的内容物添加到含有溶解于乙酸(3mL)中的(8R)-13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(盐酸盐)(125mg，0.2422mmol)的分离的小瓶中。在室温下搅拌30分钟之后，添加三乙酰氧基硼氢化钠(412mg，1.944mmol)。将反应混合物再搅拌20分钟，然后浓缩，溶解于DMSO和甲醇中，过滤并通过反相HPLC(1-70％ ACN/水，15分钟运行)纯化，得到(8R)-13-(2,6-二甲基苯基)-6-{2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基}-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(22),11(23),12,14,18,20-六烯-2,17,17-三酮(盐酸盐)(60mg，37％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.21(s,1H),8.53(s,1H),7.96(d,J＝7.1Hz,1H),7.71(d,J＝7.8Hz,2H),7.27(t,J＝7.5Hz,1H),7.13(d,J＝7.7Hz,2H),6.30(s,1H),5.27(s,1H),5.14(s,1H),4.63(d,J＝14.7Hz,1H),4.13(s,1H),3.57(d,J＝21.9Hz,2H),3.25(m,3H),3.04(s,2H),2.19-1.96(m,8H),0.98(d,J＝6.9Hz,2H),0.86(d,J＝5.6Hz,2H).ESI-MS m/z计算值615.2127，实验值616.3(M+1)+；保留时间：1.24分钟，LC方法A。
实例74：化合物164的制备
步骤1：(8R)-6-苄基-13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(化合物164)
将(8R)-13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(12.000mg，0.02502mmol)和对应的苯甲醛(大约13.28mg，12.72μL，0.1251mmol)在乙酸中合并。在5分钟之后，添加三乙酰氧基硼氢化钠(大约31.81mg，0.1501mmol)，并且将反应在室温下再搅拌30分钟。然后将反应混合物用甲醇稀释，过滤并通过反相HPLC(1-70％或1-40％ ACN/水，带有HCl改性剂，15分钟运行)纯化，得到对应的(8R)-6-苄基-13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(盐酸盐)(8mg，52％)。ESI-MS m/z计算值569.20966，实验值570.4(M+1)+；保留时间：1.16分钟；LC方法A。
实例75：化合物165的制备
步骤1：(8R)-13-(2,6-二甲基苯基)-6-(丙烷-2-基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(化合物165)
将(8R)-13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(12.000mg，0.02502mmol)和对应的丙酮(大约7.266mg，9.186μL，0.1251mmol)在乙酸中合并。在5分钟之后，添加三乙酰氧基硼氢化钠(大约31.81mg，0.1501mmol)，并且将反应在室温下再搅拌30分钟。然后将反应混合物用甲醇稀释，过滤并通过反相HPLC(1-70％或1-40％ACN/水，带有HCl改性剂，15分钟运行)纯化，得到对应的(8R)-13-(2,6-二甲基苯基)-6-(丙烷-2-基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(盐酸盐)(4.5mg，32％)。ESI-MSm/z计算值521.20966，实验值522.4(M+1)+；保留时间：0.86分钟；LC方法A。
实例76：化合物166的制备
步骤1：(8R)-N-环庚基-13-(2,6-二甲基苯基)-2,17,17-三氧代-10-氧代-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-6-甲酰胺(化合物166)
将(8R)-13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(盐酸盐)(12mg，0.02326mmol)和异氰基环庚烷(大约4.857mg，4.621μL，0.03489mmol)溶解于THF(0.5mL)中，并添加二异丙基乙胺(大约12.02mg，16.20μL，0.09304mmol)。在室温下搅拌1小时之后，将反应混合物用甲醇稀释，过滤并通过反相HPLC(1-70％ ACN/水，HCl改性剂，15分钟)纯化，得到(8R)-N-环庚基-13-(2,6-二甲基苯基)-2,17,17-三氧代-10-氧代-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-6-甲酰胺(8.1mg，56％)。ESI-MS m/z计算值618.26245，实验值619.4(M+1)+；保留时间：1.6分钟；LC方法A。
实例77：化合物167的制备
步骤1：(8R)-13-(2,6-二甲基苯基)-2,17,17-三氧代-N,N-双(丙烷-2-基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-6-甲酰胺(化合物167)
将(8R)-13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(盐酸盐)(大约12.00mg，0.02326mmol)和N,N-二异丙基氨基甲酰氯(大约15.23mg，0.09304mmol)在二氯甲烷(0.3mL)中合并，并添加三乙胺(大约18.83mg，0.1861mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。然后将反应混合物用甲醇稀释，过滤并通过反相HPLC(1-70％ ACN/水，15分钟运行，HCl改性剂)纯化，浓缩后得到(8R)-13-(2,6-二甲基苯基)-2,17,17-三氧代-N,N-双(丙烷-2-基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-6-甲酰胺(6.5mg，46％)。ESI-MS m/z计算值606.26245，实验值607.4(M+1)+；保留时间：1.67分钟；LC方法A。
实例78：化合物168的制备
步骤1：(8R)-6-环己烷羰基-13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(化合物168)
将(8R)-13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(盐酸盐)(12mg，0.02326mmol)、环己烷羧酸(大约3.876mg，0.03024mmol)和HATU(大约11.50mg，0.03024mmol)在DMF(0.5mL)中合并，并添加DIPEA(大约15.03mg，20.26μL，0.1163mmol)。将反应混合物在室温下搅拌一小时，然后过滤并通过反相HPLC(1-70％ ACN/水，带有HCl)纯化并干燥，得到(8R)-6-环己烷羰基-13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(9.7mg，71％)。ESI-MS m/z计算值589.2359，实验值590.4(M+1)+；保留时间：1.59分钟；LC方法A。
实例79：化合物169的制备
步骤1：4-苄基-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
将3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(7g，32.37mmol)和苯甲醛(3.9mL，38.37mmol)在DCE(100mL)中与乙酸(2.5mL，43.96mmol)合并，并在室温下搅拌30分钟。然后将反应混合物冷却至0℃并添加三乙酰氧基硼氢化钠(9g，42.46mmol)。将反应混合物恢复至室温并搅拌16小时。将反应混合物倒入碳酸氢钠水溶液中并用乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗通过硅胶色谱法纯化，用0-100％乙酸乙酯/二氯甲烷的梯度洗脱。4-苄基-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(5.1g，51％)ESI-MS m/z计算值306.19434，实验值307.3(M+1)+；保留时间：0.35分钟，LC方法D。
步骤2：3-[[4-[(1-苄基-4-叔丁氧基羰基-哌嗪-2-基)甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(900mg，2.154mmol)和4-苄基-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(870mg，2.839mmol)在无水NMP(12mL)中合并。将反应混合物冷却至0℃，并在氮气流下分批缓慢添加NaH(430mg，10.75mmol)。然后将反应混合物在室温下搅拌1小时。此后，将反应混合物缓慢添加到含有氯化铵水溶液和乙酸乙酯的烧瓶中。将水溶液和有机层分离并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取4次。将合并的有机物用水、盐水洗涤并经硫酸钠干燥。将所得粗物质通过硅胶色谱法纯化，用0-10％甲醇/二氯甲烷洗脱。将含有产物的级分合并并浓缩，得到3-[[4-[(1-苄基-4-叔丁氧基羰基-哌嗪-2-基)甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.103g，74％)ESI-MS m/z计算值687.27264，实验值688.5(M+1)+；保留时间：0.54分钟，LC方法D。
步骤3：13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮
阶段1：将3-[[4-[(1-苄基-4-叔丁氧基羰基-哌嗪-2-基)甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(500mg，0.7270mmol)溶解于甲醇(10mL)中并添加二羟基钯(225mg，0.3204mmol)。将反应容器用氮气吹扫，然后将氢气从气球中鼓入15分钟，之后将反应在室温下搅拌2小时，同时将氢气气球放在适当的位置。然后将反应混合物用氮气吹扫，过滤并浓缩，得到白色固体3-[[4-[(4-叔丁氧基羰基哌嗪-2-基)甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(411mg，95％)ESI-MS m/z计算值597.2257，实验值598.3(M+1)+；保留时间：0.46分钟(LC方法D)。
阶段2：将来自阶段1的产物与HATU(360mg，0.9468mmol)在DMF(50mL)中合并，然后添加DIPEA(650μL，3.732mmol)并将反应混合物在室温下搅拌2小时。然后将反应混合物用0.3M HCl稀释并用乙酸乙酯萃取3次。然后将合并的有机物用水洗涤2次，然后用盐水洗涤并经硫酸钠干燥。将所得粗通过硅胶柱色谱法纯化，用0-10％甲醇/二氯甲烷的溶剂梯度洗脱，得到13-(2,6-二甲基苯基)-2,17,17-三氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-6-羧酸叔丁酯(340mg，81％)ESI-MS m/z计算值579.21515，实验值580.3(M+1)+；保留时间：0.61分钟，(LC方法D)。
阶段3：将来自阶段2的产物溶解于二氯甲烷(4mL)和HCl(4M的4mL，16.00mmol)中并在室温下搅拌1小时。然后将反应混合物在真空下浓缩成固体残余物。添加己烷并将反应混合物在真空下再次浓缩，得到白色固体，所述白色固体无需进一步纯化即可用于下一步骤：13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(281mg，81％)。ESI-MS m/z计算值479.16272，实验值480.3(M+1)+；保留时间：0.27分钟(LC方法D)。
步骤4：6-苄基-13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(化合物169)
将13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(12mg，0.02502mmol)在乙酸(0.5mL)中与苯甲醛(13mg，0.1225mmol)合并。将反应在室温下搅拌5分钟，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(大约31.81mg，0.1501mmol)并将反应混合物在室温下搅拌20分钟。然后将反应混合物用0.2mL甲醇稀释，过滤并通过反相HPLC(1-40％ACN或1-70％ ACN 15分钟，带有HCl改性剂)纯化，得到6-苄基-13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2,17,17-三酮(盐酸盐)(7mg，46％)。ESI-MS m/z计算值569.20966，实验值570.3(M+1)+；保留时间：1.1分钟；LC方法A。
实例80：化合物170的制备
步骤1：2-(羟甲基)-4-[2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
将2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙醇(大约427.6mg，2.774mmol)溶解于4mL DCE中并添加戴斯-马丁过碘烷(大约1.236g，2.913mmol)并将反应在室温下搅拌一小时。然后将该反应混合物添加到含有2mL DCE中的2-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(300mg，1.387mmol)的小瓶中。然后添加乙酸(500μL，8.792mmol)并将反应混合物在室温下再搅拌两小时。此时，添加三乙酰氧基硼氢化钠(1.3g，6.134mmol)并使反应混合物在室温下再搅拌16小时。然后将反应混合物倒入碳酸氢钠水溶液中并用乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗通过硅胶色谱法纯化，用0-100％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脱(在运行中相当晚才出来，无UV活性，但通过ELSD检测到)，得到呈无色油的2-(羟甲基)-4-[2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(269mg，55％)。ESI-MS m/z计算值352.1974，实验值353.4(M+1)+；保留时间：0.48分钟；LC方法D。
步骤2：13-(2,6-二甲基苯基)-6-{2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基}-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(22),11,13,15(23),18,20-六烯-2,17,17-三酮(化合物170)
阶段1：将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(30mg，0.07179mmol)和2-(羟甲基)-4-[2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(50mg，0.1419mmol)与叔丁醇钠(30mg，0.3122mmol)在无水THF(0.5mL)中合并，并在室温下搅拌。在2小时之后，添加另外的叔丁醇钠(17mg，0.1769mmol)并使反应再搅拌16小时。将反应混合物用乙酸淬灭，用甲醇稀释，过滤并通过反相HPLC(1-70％ ACN，HCl改性剂，15分钟运行)纯化，得到3-[[4-[[1-叔丁氧基羰基-4-[2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基]哌嗪-2-基]甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(8mg，14％)ESI-MSm/z计算值733.2757，实验值734.4(M+1)+；保留时间：0.56分钟(LC方法D)。
阶段2：将boc保护的产物用HCl(4M的500μL，2.000mmol)溶解于二氯甲烷(0.5mL)中并在室温下搅拌90分钟。然后将来自步骤1的反相HPLC的boc去保护的物质溶解于1mL二氯甲烷中，并将反应混合物浓缩，得到3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[4-[2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基]哌嗪-2-基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(10mg，21％)ESI-MS m/z633.22327，实验值634.4(M+1)+；保留时间：0.46分钟(LC方法D)。
阶段3：将来自阶段2的产物与HATU(8mg，0.02104mmol)在DMF(0.8mL)中合并，并添加DIPEA(17μL，0.09760mmol)。在室温下搅拌1小时之后，将反应混合物用0.3mL甲醇稀释，过滤并通过反相HPLC(1-70％ACN，HCl改性剂，15分钟运行)纯化，得到13-(2,6-二甲基苯基)-6-{2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基}-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(22),11,13,15(23),18,20-六烯-2,17,17-三酮(盐酸盐)(6.5mg，14％)ESI-MS m/z计算值615.2127，实验值616.3(M+1)+；保留时间：1.19分钟(LC方法A)。
实例81：化合物171的制备
步骤1：(3S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(化合物171)
在室温下将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(100mg，0.2393mmol)、(3S)-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(大约55mg，0.2543mmol)和EDC(盐酸盐)(66mg，0.2893mmol)在无水二氯甲烷(1.2mL)中合并，并搅拌20分钟。然后将反应混合物添加到20mL乙酸乙酯和20mL0.5M HCl中。将层分离并且将水溶液用20mL乙酸乙酯再次萃取。将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将粗物质通过硅胶色谱法纯化，用0-100％乙酸乙酯/己烷洗脱。将含有产物的级分浓缩，得到中间体(3S)-4-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰基]-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(54mg，37％)。ESI-MS m/z计算值615.19183，实验值616.2(M+1)+；保留时间：0.71分钟；LC方法D。将酰胺产物与氮气吹扫的小瓶中的无水NMP(20mL)中的NaH(30mg，0.7501mmol)合并，并加热至70℃2小时。然后将反应混合物用1M HCl淬灭并倒入50mL 0.5M HCl和50mL乙酸乙酯中。将层分离并且将水溶液用30mL乙酸乙酯萃取2次。将合并的有机物用水、盐水洗涤5次，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗通过硅胶柱色谱法使用0-10％二氯甲烷/甲醇的梯度纯化。将含有产物的级分合并并浓缩，得到(8S)-13-(2,6-二甲基苯基)-2,17,17-三氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,98]二十三碳-1(22),11(23),12,14,18,20-六烯-6-羧酸叔丁酯(26mg，19％)ESI-MS m/z计算值579.21515，实验值580.2(M+1)+；保留时间：1.62分钟(LC方法A)。
实例82：化合物172和化合物173的制备
步骤1：4-苄基-3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯
将1-苄基-4-叔丁氧羰基-哌嗪-2-羧酸(1.0234g，3.194mmol)、N-甲氧基甲胺(盐酸盐)(521.5mg，5.346mmol)、DIPEA(1.7mL，9.760mmol)和EDCI(771.7mg，4.026mmol)和HOBt(473.8mg，3.506mmol)的DMF(10mL)混合物在室温下搅拌4小时并且然后用饱和氯化铵水溶液(10mL)淬灭并用乙酸乙酯(15ml×2)萃取。将有机层用水(10mL)洗涤，然后通过盐水(10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩，得到4-苄基-3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.2667g，109％)ESI-MS m/z计算值363.21582，实验值364.2(M+1)+；保留时间：1.0分钟，LC方法A。
步骤2：4-苄基-3-(1-羟乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
阶段1：将4-苄基-3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(400.6mg，1.102mmol)的THF(5mL)混合物冷却至0℃并用滴加的溴(甲基)镁(3M的750μL，2.250mmol)处理。将反应混合物温热至室温并搅拌16小时。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(10mL)处理并用乙酸乙酯(2×10mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩，得到3-乙酰基-4-苄基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(416.2mg，119％)ESI-MS m/z计算值318.19434，实验值319.3(M+1)+；保留时间：1.42分钟(LC方法A)。
阶段2：将来自上述的产物溶于MeOH(10mL)中，冷却至0℃并用硼氢化钠(80.4mg，2.125mmol)分批处理。将反应温热至室温并搅拌1小时并且然后用饱和氯化铵(10mL)处理。将产物用乙酸乙酯(15ml×2)萃取，用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。经粗残余物通过快速柱色谱法(12g硅)纯化。将化合物用乙酸乙酯/己烷(0-70％)洗脱30分钟，得到4-苄基-3-(1-羟乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(267.3mg，76％)ESI-MS m/z计算值320.21，实验值321.2(M+1)+；保留时间：0.92分钟(LC方法A)。
步骤3：3-[[4-[1-(4-叔丁氧基羰基哌嗪-2-基)乙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
阶段1：将4-苄基-3-(1-羟乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(188.4mg，0.5880mmol)、3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(163.8mg，0.3920mmol)和叔丁醇钠(172.3mg，1.793mmol)的THF(0.5mL)混合物在室温下搅拌16小时。将溶液过滤并将滤液溶解于1.4mL MeOH中，并注射(5×400uL进样量)到反相反相HPLC上，用于使用1-99％MeCN/水(HCl改性剂)的15分钟梯度进行色谱法，得到3-[[4-[1-(1-苄基-4-叔丁氧基羰基-哌嗪-2-基)乙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(101.4mg，35％)ESI-MS m/z计算值701.2883，实验值702.2(M+1)+；保留时间：1.39分钟(LC方法A)。
阶段2：将产物溶于MeOH(3mL)中并用氮气喷射3分钟并且然后用Pd(OH)2(19.7mg，0.02806mmol)处理。将系统抽空并用氮气(3x)吹扫并且然后在氢气气氛下(气球)下在室温下搅拌2小时并且然后经硅藻土垫过滤。将滤液在真空中浓缩，得到3-[[4-[1-(4-叔丁氧基羰基哌嗪-2-基)乙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(90.2mg，36％)。ESI-MS m/z计算值611.2414，实验值612.3(M+1)+；保留时间：1.04分钟(LC方法A)。
步骤4：13-(2,6-二甲基苯基)-9-甲基-2,17,17-三氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(22),11,13,15(23),18,20-六烯-6-羧酸叔丁酯(化合物173)，以及13-(2,6-二甲基苯基)-9-甲基-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(22),11,13,15(23),18,20-六烯-2,17,17-三酮(化合物172)
阶段1：在室温下搅拌3-[[4-[1-(4-叔丁氧基羰基哌嗪-2-基)乙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(35.2mg，0.05431mmol)和HATU(34.2mg，0.08995mmol)的DMF(5mL)混合物并用DIPEA(50μL，0.2871mmol)处理。将混合物搅拌30分钟并且然后用1M HCl(10mL)淬灭并用乙酸乙酯(40mL)稀释。将有机层分离并用水(10mL)洗涤并且然后用盐水(10mL×2)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物用MeOH(1.5mL)稀释并通过反相HPLC使用1-99％ MeCN/水的15分钟梯度(HCl改性剂)纯化，得到13-(2,6-二甲基苯基)-9-甲基-2,17,17-三氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(22),11,13,15(23),18,20-六烯-6-羧酸叔丁酯(6.1mg，19％)ESI-MS m/z计算值593.23083，实验值594.3(M+1)+；保留时间：1.69分钟(LC方法A)。
阶段2：将来自阶段1的一半产物用HCl(4M的800μL，3.200mmol)(在二噁烷中)处理并在室温下搅拌1小时。将混合物在真空中浓缩并且溶解于MeOH(1.5mL)中并通过反相HPLC使用1-99％ MeCN/水(HCl改性剂)的15分钟梯度纯化，得到13-(2,6-二甲基苯基)-9-甲基-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(22),11,13,15(23),18,20-六烯-2,17,17-三酮(盐酸盐)(3.1mg，11％)。ESI-MS m/z计算值493.17838，实验值494.4(M+1)+；保留时间：0.81分钟(LC方法A)。
实例83：化合物174、化合物175和化合物176的制备
步骤1：4-苄基-3-(1-羟基-2-苯基-乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
阶段1：将4-苄基-3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(404.3mg，1.112mmol)的THF(5mL)混合物冷却至0℃并用滴加苄基溴化镁(0.9M的2.5mL，2.250mmol)处理。将反应混合物温热至室温并搅拌16小时。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(10mL)处理并用乙酸乙酯(2×10mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩，得到4-苄基-3-(2-苯乙酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(139.6mg，32％)ESI-MS m/z计算值394.22565，实验值395.3(M+1)+；保留时间：1.49分钟(LC方法A)。
阶段2：将来自上述的产物溶于MeOH(10mL)中，冷却至0℃并用硼氢化钠(64.7mg，1.710mmol)分批处理。将反应温热至室温并搅拌1小时并且然后用饱和氯化铵(10mL)处理。将产物用乙酸乙酯(15ml×2)萃取，用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。经粗残余物通过快速柱色谱法(12g硅)纯化。将化合物用乙酸乙酯/己烷(0-70％)洗脱30分钟，得到4-苄基-3-(1-羟基-2-苯基-乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(127.8mg，29％)ESI-MS m/z计算值396.2413，实验值397.3(M+1)+；保留时间：0.51分钟(LC方法A)。
步骤2：3-[[4-[1-(4-叔丁氧基羰基哌嗪-2-基)-2-苯基-乙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
阶段1：将4-苄基-3-(1-羟基-2-苯基-乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(143.4mg，0.3616mmol)、叔丁醇钠(157.2mg，1.636mmol)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(165.7mg，0.3965mmol)的THF(2mL)混合物在室温下搅拌20小时。将溶液过滤并将滤液用0.5mL MeOH稀释并通过反相HPLC使用1-99％ MeCN/水(HCl改性剂)的15分钟梯度纯化，得到3-[[4-[1-(1-苄基-4-叔丁氧基羰基-哌嗪-2-基)-2-苯基-乙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(192.1mg，65％)ESI-MS m/z计算值777.31964，实验值778.5(M+1)+；保留时间：1.68分钟(LC方法A)。
阶段2：将产物溶于MeOH(5mL)中并用氮气吹扫5分钟并且然后用二羟基钯(99.3mg，0.1414mmol)处理。将系统抽空并用氮气(3x)吹扫并且然后在氢气气氛下(气球)下搅拌4小时。将反应混合物通过硅藻土床过滤并在真空中浓缩，得到3-[[4-[1-(4-叔丁氧基羰基哌嗪-2-基)-2-苯基-乙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(187.3mg，72％)ESI-MS m/z计算值687.27264，实验值688.4(M+1)+；保留时间：0.54分钟(LC方法D)。
步骤3：9-苄基-13-(2,6-二甲基苯基)-2,17,17-三氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(22),11,13,15(23),18,20-六烯-6-羧酸叔丁酯(化合物175)、9-苄基-13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(22),11,13,15(23),18,20-六烯-2,17,17-三酮(化合物176)以及9-苄基-13-(2,6-二甲基苯基)-6-(丙烷-2-基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(22),11,13,15(23),18,20-六烯-2,17,17-三酮(化合物174)
阶段1：在室温下将3-[[4-[1-(4-叔丁氧基羰基哌嗪-2-基)-2-苯基-乙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(86.4mg，0.1193mmol)、HATU(67.3mg，0.1770mmol)和DIPEA(80μL，0.4593mmol)的DMF(11mL)溶液搅拌5分钟并且然后在真空中浓缩。将残余物溶于MeOH(2mL)中并将溶液过滤并将滤液通过反相色谱法使用1-99％ MeCN/水的15分钟梯度(HCl改性剂)纯化，得到9-苄基-13-(2,6-二甲基苯基)-2,17,17-三氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(22),11,13,15(23),18,20-六烯-6-羧酸叔丁酯(盐酸盐)(46.4mg，55％)ESI-MS m/z计算值669.2621，实验值670.4(M+1)+；保留时间：1.96分钟(LC方法A)。
阶段2：将产物溶于HCl(4M的3mL，12.00mmol)(二噁烷中)处理并在室温下搅拌1小时并且然后在真空中浓缩。将溶液过滤并将滤液溶解于1.8mL MeOH中并通过反相HPLC使用1-99％ MeCN/水(HCl改性剂)的15分钟梯度纯化，得到9-苄基-13-(2,6-二甲基苯基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(22),11,13,15(23),18,20-六烯-2,17,17-三酮(盐酸盐)(4.9mg，7％)ESI-MS m/z计算值569.20966，实验值570.4(M+1)+；保留时间：1.14分钟(LC方法A)。
阶段3：将步骤2产物溶于乙酸(1mL，17.58mmol)中并用丙酮(20μL，0.2724mmol)处理，然后用三乙酰氧基硼氢化钠(26.7mg，0.1260mmol)处理。将混合物在室温下搅拌4小时。将溶液过滤并将滤液通过反相HPLC使用1-99％ MeCN/水(HCl改性剂)的15分钟梯度纯化，得到9-苄基-13-(2,6-二甲基苯基)-6-(丙烷-2-基)-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,6,14,16,23-五氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(22),11,13,15(23),18,20-六烯-2,17,17-三酮(盐酸盐)(7.4mg，9％)ESI-MS m/z计算值611.25665，实验值612.4(M+1)+；保留时间：1.3分钟(LC方法A)。
实例84：化合物177和化合物178的制备
步骤1：4-苄基-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
将3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(7g，32.37mmol)和苯甲醛(3.9mL，38.37mmol)在DCE(100mL)中与乙酸(2.5mL，43.96mmol)合并，并在室温下搅拌30分钟。然后将反应混合物冷却至0℃并添加三乙酰氧基硼氢化钠(9g，42.46mmol)。将反应混合物恢复至室温并搅拌16小时。将反应混合物倒入碳酸氢钠水溶液中并用乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将所得粗通过硅胶色谱法纯化，用0-100％乙酸乙酯/二氯甲烷的梯度洗脱，得到4-苄基-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(5.1g，51％)ESI-MS m/z计算值306.19434，实验值307.3(M+1)+；保留时间：0.35分钟，LC方法D。
步骤2：3-[[4-[(1-苄基-4-叔丁氧基羰基-哌嗪-2-基)甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(900mg，2.154mmol)和4-苄基-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(870mg，2.839mmol)在无水NMP(12mL)中合并。将反应混合物冷却至0℃，并在氮气流下分批缓慢添加NaH(430mg，10.75mmol)。然后将反应混合物在室温下搅拌1小时。此后，将反应混合物缓慢添加到含有氯化铵水溶液和乙酸乙酯的烧瓶中。将水溶液和有机层分离并且将水溶液用乙酸乙酯再萃取4次。将合并的有机物用水、盐水洗涤并经硫酸钠干燥。将所得粗物质通过硅胶色谱法纯化，用0-10％甲醇/二氯甲烷洗脱。将含有产物的级分合并并浓缩，得到3-[[4-[(1-苄基-4-叔丁氧基羰基-哌嗪-2-基)甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(1.103g，74％)ESI-MS m/z计算值687.27264，实验值684.5(M+1)+；保留时间：0.54分钟，LC方法D。
步骤3：18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[15.3.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物178)，以及12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[15.3.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮
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阶段1：将3-[[4-[(1-苄基-4-叔丁氧基羰基-哌嗪-2-基)甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(610mg，0.8869mmol)在二氯甲烷(5mL)中与HCl(4M的5mL，20.00mmol，在二噁烷中)合并。将反应混合物在室温下搅拌90分钟，然后在真空下浓缩。添加己烷，并将反应混合物在真空下再次浓缩，得到3-[[4-[(1-苄基哌嗪-2-基)甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(二盐酸盐)(590mg，101％)ESI-MSm/z计算值587.2202，实验值588.4(M+1)+；保留时间：0.46分钟(LC方法D)。
阶段2：将产物在DMF(70mL)中与HATU(440mg，1.157mmol)合并，并且添加DIPEA(927μL,5.322mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时，然后用水和乙酸乙酯稀释，并将层分离。将水相用乙酸乙酯萃取2次，并且将合并的有机物用水洗涤2次，然后用盐水洗涤。然后将有机物经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。形成了大量的二聚副产物和两个硅胶柱(1-10％甲醇/二氯甲烷，然后是0-100％乙酸乙酯/二氯甲烷)，得到18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[15.3.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(185mg，37％)ESI-MS m/z计算值569.20966，实验值570.3(M+1)+；保留时间：1.21分钟(LC方法A)。将该产物的12mg部分通过反相反相HPLC(1-70％ ACN/水，HCl改性剂，15分钟运行)进一步纯化，得到18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[15.3.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(6mg，1％)ESI-MS m/z计算值569.20966，实验值570.3(M+1)+；保留时间：1.21分钟(LC方法A)。
阶段3：将来自阶段2的主要批次的产物溶解于氮气吹扫的小瓶中的甲醇(15mL)中(需要超声处理)。添加二羟基钯(80mg，0.1139mmol)，并将氢气从气球中向反应混合物中鼓入15分钟，然后将反应在室温下搅拌2小时，同时将氢气气球放在适当的位置。然后将反应容器用氮气吹扫，通过硅藻土过滤并浓缩，得到呈白色固体的12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[15.3.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(94mg，22％)ESI-MS m/z计算值479.16272，实验值480.4(M+1)+；保留时间：0.32分钟(LC方法D)。
步骤4：18-(3,3-二甲基丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[15.3.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物177)
将12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[15.3.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(12mg，0.02502mmol)在乙酸(0.5mL)中与3,3-二甲基丁醛(13mg，0.1298mmol)合并。将反应在室温下搅拌5分钟，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(大约31.81mg，0.1501mmol)并将反应混合物在室温下搅拌20分钟。然后将反应混合物用0.2mL甲醇稀释，过滤并通过反相HPLC(1-40％ACN或1-70％ ACN 15分钟，带有HCl改性剂)纯化，得到18-(3,3-二甲基丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[15.3.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(6mg，38％)。ESI-MS m/z计算值563.25665，实验值564.4(M+1)+；保留时间：1.16分钟；LC方法A。
实例85：化合物179、化合物180和化合物181的制备
步骤1：2-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基]乙醛
将氯铬酸吡啶盐(16g，74.227mmol)缓慢添加到活化分子筛(16g)于无水二氯甲烷(150mL)中的悬浮液中。将可商购获得的2-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基]乙醇(3g，20.522mmol)溶解于二氯甲烷(15mL)中并添加到上述混合物中，将所述混合物在室温下搅拌2小时。然后将混合物使用乙醚(150mL)稀释，通过硅胶过滤并在减压下浓缩，得到呈无色油的纯2-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基]乙醛(2.05g，69％)；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ9.84-9.78(m,1H),4.65-4.42(m,1H),4.25-4.10(m,1H),3.64-3.54(m,1H),2.94-2.78(m,1H),2.72-2.58(m,1H),1.42(s,3H),1.37(s,3H).
步骤2：(E)-4-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基]丁-2-烯酸甲酯
在0℃下在氮气下，将2-二甲氧基磷酰乙酸甲酯(3.3750g，3mL，18.533mmol)滴加到氢化钠(830mg，20.752mmol)于四氢呋喃(35mL)中的悬浮液中，并将白色浆液的混合物在0℃下剧烈搅拌30分钟。然后在0℃下滴加2-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基]乙醛(2.3g，15.954mmol)于四氢呋喃(23mL)中的溶液并在室温下搅拌整体2小时。将混合物用水(25mL)稀释并且然后用乙醚(50mL)萃取。将所得有机相用盐水(50mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将粗通过柱色谱法(80g，二氯甲烷/乙醚：3/7)纯化，得到呈无色油的(E)-4-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基]丁-2-烯酸甲酯(2.8g，88％)；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.95(dt,J＝15.7,7.1Hz,1H),6.00-5.84(m,1H),4.32-4.12(m,1H),4.11-4.00(m,1H),3.74(s,3H),3.59(dd,J＝8.2,6.8Hz,1H),2.60-2.37(m,2H),1.43(s,3H),1.36(s,3H).ESI-MS m/zcalc.200.1049,found 201.2(M+1)+；保留时间：1.69分钟，LC方法K。
步骤3：4-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基]丁酸甲酯
将(E)-4-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基]丁-2-烯酸甲酯(3g，14.983mmol)溶解于乙酸乙酯(75mL)中，并且然后添加10％钯/炭(800mg，0.7517mmol)。将所得混合物用氢气鼓泡15分钟并且然后在室温下在氢气气球下搅拌2小时。LCMS显示出起始材料的完全转化。将粗通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯(75mL)洗涤并在减压下浓缩，得到呈无色油的4-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基]丁酸甲酯(2.9g，96％)；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.27-3.87(m,2H),3.68(s,3H),3.53(t,J＝6.9Hz,1H),2.51-2.26(m,2H),1.84-1.52(m,4H),1.41(s,3H),1.36(s,3H).
步骤4：(6R)-6-(羟甲基)四氢吡喃-2-酮
将活化的分子筛(5g)、Amberlyst 15氢树脂(5g)添加到4-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基]丁酸甲酯(3.5g，17.305mmol)于乙腈(339.99mL)中的溶液中。将混合物在室温下剧烈搅拌48小时。通过TLC监测反应。然后将混合物过滤并在减压下蒸发。将残余物在硅胶(40g；用EtOAc洗脱)上进行色谱分析，得到呈无色油的(6R)-6-(羟甲基)四氢吡喃-2-酮(1.15g，51％)；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.49-4.36(m,1H),3.89-3.75(m,1H),3.73-3.62(m,1H),2.71-2.56(m,1H),2.55-2.35(m,1H),2.17-2.06(m,1H),2.05-1.85(m,3H),1.80-1.65(m,1H).
步骤5：[(2R)-6-氧代四氢吡喃-2-基]甲基磺酸甲酯
在室温下，向(6R)-6-(羟甲基)四氢吡喃-2-酮(1.1g，8.4523mmol)于二氯甲烷(33mL)中的溶液中添加三乙胺(1.7424g，2.4mL，17.219mmol)和甲磺酰氯(1.1840g，0.8mL，10.336mmol)并且然后将所得混合物在该温度下搅拌1小时。将所得混合物用二氯甲烷(50mL)稀释并用饱和NaCl水溶液(50mL)淬灭。将水层用二氯甲烷(2×50mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱法(40g，庚烷/乙酸乙酯＝1:3)的纯化得到呈无色油的[(2R)-6-氧代四氢吡喃-2-基]甲基磺酸甲酯(1.5g，85％)；1HNMR(300MHz,CDCl3)δ4.71-4.51(m,1H),4.44-4.26(m,2H),3.11(s,3H),2.74-2.41(m,2H),2.11-1.89(m,3H),1.84-1.66(m,1H).
步骤6：(6R)-6-(叠氮甲基)四氢吡喃-2-酮
在室温下，向[(2R)-6-氧代四氢吡喃-2-基]甲基磺酸甲酯(1.5g，7.2035mmol)于二甲基甲酰胺(30mL)中的搅拌的溶液中添加叠氮钠(700mg，10.768mmol)，并且然后将所得混合物在90℃下搅拌2小时。将反应在0℃下用水(50mL)淬灭。将水层用乙醚(2×50mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱法(40g，庚烷/EtOAc＝1:3)的纯化得到呈无色油的(6R)-6-(叠氮甲基)四氢吡喃-2-酮(800mg，72％)；1HNMR(300MHz,CDCl3)δ4.53-4.38(m,1H),3.59-3.40(m,2H),2.73-2.57(m,1H),2.56-2.35(m,1H),2.08-1.83(m,3H),1.81-1.62(m,1H).
步骤7：(6R)-6-(叠氮甲基)四氢吡喃-2-醇
向(6R)-6-(叠氮甲基)四氢吡喃-2-酮(800mg，5.1561mmol)于四氢呋喃(8mL)中的溶液(-70℃)中缓慢添加氢化二异丁基铝(1M的5.5mL，5.5000mmol)于己烷中的溶液。将混合物在-70℃下搅拌45分钟。添加另外部分氢化二异丁基铝(1M的1.6mL，1.6000mmol)于己烷中的溶液并将混合物在-60℃下搅拌至少6小时。然后在-60℃下在剧烈搅拌下将其通过添加水(15mL)淬灭。使混合物达到室温并添加0.5M HCl(25mL)和二氯甲烷(75mL)。将有机层分离，经硫酸钠干燥，过滤并蒸发。将残余物通过柱色谱法(40g乙酸乙酯)纯化，得到呈澄清油的(6R)-6-(叠氮甲基)四氢吡喃-2-醇(710mg，88％)。
步骤8：(3R)-7-异丁基氮杂-3-醇
在氮气气氛下，将于甲苯中的三甲基膦(1M的9mL，9.0000mmol)添加到(6R)-6-(叠氮甲基)四氢吡喃-2-醇(700mg，4.4538mmol)于甲醇(14mL)中的溶液中。在起始材料的消耗(通过TLC检测，洗脱剂：庚烷/EtOAc＝1/1，v/v)和亚胺中间体的形成(通过TLC检测，洗脱剂：EtOAc/MeOH＝10/1，v/v)之后，将反应混合物在减压下浓缩并将残余物用甲苯(15mL)共蒸发两次。将产物收集在无水四氢呋喃(14mL)和甲苯(14mL)的混合物中并且然后在0℃下在氮气气氛下添加于乙醚中的溴(异丁基)镁(2M的12mL，24.000mmol)。在亚胺中间体的消耗之后，将反应用饱和氯化铵(50mL)淬灭。将水层用乙醚(3×50mL)萃取，将合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗溶解于甲醇HCl(3M的3mL，9.0000mmol)中并且然后搅拌2小时并且然后在真空下浓缩，得到呈褐色固体的(3R)-7-异丁基氮杂-3-醇(盐酸盐)(800mg，86％)；ESI-MS m/z计算值171.1623，实验值172.2(M+1)+；保留时间：1.25分钟，LC方法K。
步骤9：N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-[(6R)-6-羟基-2-异丁基-氮杂环庚烷-1-羰基]苯磺酰胺
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(550mg，1.3162mmol)溶解于二甲基甲酰胺(22mL)中。将混合物用氮气鼓泡15分钟并且然后添加HATU(600mg，1.5780mmol)和三乙胺(435.60mg，0.6mL，4.3048mmol)，然后添加(3R)-7-异丁基氮杂-3-醇(盐酸盐)(300mg，1.4441mmol)。在氮气下将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用乙醚(50mL)稀释，并且用HCl水溶液(1M，2×50mL)和盐水(2×50mL)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈类白色泡沫固体的N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-[(6R)-6-羟基-2-异丁基-氮杂环庚烷-1-羰基]苯磺酰胺(650mg，86％)；ESI-MS m/z计算值570.2068，实验值571.2(M+1)+；保留时间：2.12分钟，LC方法K。
步骤10：(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(化合物181)
将N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-[(6R)-6-羟基-2-异丁基-氮杂环庚烷-1-羰基]苯磺酰胺(950mg，1.6634mmol)溶解于四氢呋喃(95mL)中并且然后添加叔丁醇钠(960mg，9.9892mmol)。在氮气下将所得混合物在室温下搅拌24小时。将反应混合物用EtOAc(50mL)稀释，并且用HCl水溶液(1M，1×25mL)和盐水(2×25mL)洗涤。有机层经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物在40克柱硅胶上进行色谱分析，用EtOAc/己烷(9/1)洗脱，得到110mg的期望的产物(LCMS纯度为87％)并且然后将所得产物通过制备型HPLC纯化，得到呈白色固体的(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(40mg，4％)；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.40(br.s.,1H),7.82(d,J＝6.5Hz,1H),7.60(t,J＝7.5Hz,1H),7.53-7.42(m,1H),7.31-7.19(m,1H),7.16-7.06(m,2H),6.29-6.03(m,1H),5.60-5.32(m,1H),4.65-4.38(m,1H),3.28-3.17(m,1H),3.10-2.95(m,1H),2.33-2.20(m,2H),2.13-1.92(m,6H),1.91-1.70(m,2H),1.67-1.28(m,6H),0.93(d,J＝6.5Hz,6H)。ESI-MS m/z计算值534.2301，实验值535.3(M+1)+；保留时间：3.34分钟，LC方法U。
步骤11：(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体1(化合物180)，以及(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体2(化合物179)
将(31R)-16-(2,6-二甲基苯基)-37-异丁基-2-氧杂-6-硫杂-7-氮杂-3(3,1)-氮杂环庚-1(4,2)-嘧啶-5(1,3)-苯并环庚-4-酮6,6-二氧化物(36.1mg，0.06752mmol)(非对映异构体的混合物)使用正相SFC-MS方法使用由Chiral技术公司(Chiral Technologies)销售的AS-H柱(250×21.2mm，5μm粒径)(pn：20945)和在17.5分钟内从5-40％流动相B运行的双梯度进行分离。流动相A＝CO2。流动相B＝MeOH(20mM NH3)。流速＝5-15％ MeOH[20mMNH3]80毫升/分钟，15-80％ MeOH[20mM NH3]40毫升/分钟。进样体积＝可变，并且柱温＝40℃，得到：首先洗脱的非对映异构体1，(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(17.1mg，95％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.90(s,1H),8.42(s,1H),7.82(s,1H),7.61(s,1H),7.49(s,1H),7.26(s,1H),7.11(s,2H),6.16(s,1H),5.50(s,1H),4.52(s,1H),3.26(s,1H),3.05(d,J＝16.6Hz,1H),2.25(s,2H),2.03(s,6H),1.77(s,1H),1.61(s,2H),1.45(s,2H),1.36(s,2H),1.20(d,J＝44.8Hz,1H),0.94(d,J＝6.3Hz,6H).ESI-MS m/z计算值534.2301，实验值535.0(M+1)+；保留时间：1.95分钟(LC方法A)；以及其次洗脱的非对映异构体2，2，(16R)-12-(2,6-二甲基苯基)-20-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3(23),4,6,10(22),11,13-六烯-2,8,8-三酮(6.5mg，36％)1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.41(s,1H),7.84(s,1H),7.61(s,1H),7.50(s,1H),7.26(s,1H),7.13(s,2H),6.17(s,1H),5.50(s,1H),4.52(s,1H),3.25(s,1H),3.06(s,1H),2.25(s,2H),2.02(s,6H),1.80(s,1H),1.58(s,2H),1.45(s,2H),1.36(s,2H),1.25(s,1H),1.16(s,1H),0.94(s,6H).ESI-MS m/z计算值534.2301，实验值535.0(M+1)+；保留时间：1.97分钟(3分钟运行)(LC方法A)。
实例86：化合物182和化合物183的制备
步骤1：2-[(3-叔丁基苯基)甲氨基]乙酸叔丁酯
将3-叔丁基苯甲醛(3.1742g，19.566mmol)溶解于DCE(100mL)中，添加2-氨基乙酸叔丁酯(盐酸盐)(3.28g，19.566mmol)和TEA(2.1779g，2.9999mL，21.523mmol)并将混合物在室温下搅拌30分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(6.4275g，30.327mmol)，并且将混合物在室温下搅拌24小时。将混合物用饱和碳酸钾(50mL)淬灭并将层分离。将水层用氯仿(2×50mL)洗涤，将有机部分合并，经硫酸钠干燥并蒸发，将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-20％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈黄色油的2-[(3-叔丁基苯基)甲氨基]乙酸叔丁酯(3.753g，62％)。ESI-MS m/z计算值277.2042，实验值278.2(M+1)+；保留时间：2.49分钟，LC方法T。
步骤2：2-[(3-叔丁基苯基)甲基-(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]乙酸叔丁酯
向2-[(3-叔丁基苯基)甲氨基]乙酸叔丁酯(3.753g，13.529mmol)和TEA(2.7380g，3.7713mL，27.058mmol)于DCM(50mL)中的搅拌的溶液中滴加三氟乙酸酐(3.1257g，2.0686mL，14.882mmol)并将混合物在室温下搅拌16小时。添加饱和氯化铵(50mL)，将水相分离并用氯仿(2×20mL)萃取。将有机部分合并，经硫酸钠干燥并蒸发，并将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-10％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈无色油的2-[(3-叔丁基苯基)甲基-(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]乙酸叔丁酯(4.82g，86％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.48-7.12(m,3H),7.03(d,J＝7.1Hz,1H),4.72(d,J＝6.8Hz,2H),4.01-3.71(m,2H),1.46(s,9H),1.32(s,9H).
步骤3：2-[(3-叔丁基苯基)甲基-(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]乙酸
将2-[(3-叔丁基苯基)甲基-(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]乙酸叔丁酯(4.82g，12.908mmol)溶解于TFA(37.000g，25mL，324.50mmol)和DCM(25mL)的混合物中并将混合物在室温下搅拌2小时。然后将所述混合物蒸发，得到呈白色固体的2-[(3-叔丁基苯基)甲基-(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]乙酸(3.83g，85％)。ESI-MS m/z计算值317.1239，实验值318.1(M+1)+；保留时间：3.14分钟，LC方法T。
步骤4：2-[(3-叔丁基苯基)甲基-(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]乙酰氯
在氩气下，将2-[(3-叔丁基苯基)甲基-(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]乙酸(4.3g，13.552mmol)溶解于DCM(80mL)中并添加亚硫酰氯(2.4184g，1.4746mL，20.328mmol)。将混合物回流5小时并在真空中蒸发，得到呈类白色固体的粗2-[(3-叔丁基苯基)甲基-(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]乙酰氯(4.5g，89％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.55-7.10(m,3H),7.10-6.85(m,1H),4.71(s,2H),4.39(s,2H),1.32(s,9H).
步骤5：7-叔丁基-2-(2,2,2-三氟乙酰基)-1,3-二氢异喹啉-4-酮
在氩气下，将2-[(3-叔丁基苯基)甲基-(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]乙酰氯(4.5g，13.403mmol)溶解于DCM(150mL)中，将溶液冷却至-78℃并一次性添加AlCl3(6.2550g，46.910mmol)。使混合物缓慢温热至-10℃，然后冷却至-30℃并滴加HCl(3M的100mL，300.00mmol)。使混合物温热至0℃，将层分离并且将水层用DCM(2×50mL)萃取。将有机部分合并，经硫酸钠干燥并蒸发，得到无需进一步纯化即可使用的粗7-叔丁基-2-(2,2,2-三氟乙酰基)-1,3-二氢异喹啉-4-酮(4g，94％)。ESI-MS m/z计算值299.1133，实验值300.0(M+1)+；保留时间：3.27分钟，LC方法T。
步骤6：7-叔丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇
将7-叔丁基-2-(2,2,2-三氟乙酰基)-1,3-二氢异喹啉-4-酮(4g，13.365mmol)溶解于乙醇(100mL)中并分批添加硼氢化钠(1.5169g，1.6052mL，40.095mmol)。将混合物在室温下搅拌3小时，添加饱和碳酸氢钠(50mL)并将混合物用氯仿(3×50mL)萃取。将有机部分合并，蒸发并将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-10％二氯甲烷-甲醇纯化，得到呈无色油的7-叔丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇(2.513g，87％)。ESI-MS m/z计算值205.1467，实验值206.2(M+1)+；保留时间：1.93分钟，LC方法T。
步骤7：7-叔丁基-4-羟基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯
将7-叔丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇(2.513g，12.241mmol)溶解于DCM(100mL)中，添加NaOH(8.7412g，15％w/w的50mL，32.782mmol)，然后添加叔丁氧羰基叔丁基碳酸酯(2.6716g，2.8122mL，12.241mmol)。将混合物剧烈搅拌2小时，将相分离并且将水层用DCM(2×20mL)萃取。将有机部分合并，经硫酸钠干燥并蒸发，将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-20％己烷-乙酸乙酯纯化，得到7-叔丁基-4-羟基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯(3.045g，78％)。ESI-MS m/z计算值305.1991，实验值306.3(M+1)+；保留时间：2.65分钟。1HNMR(250MHz,DMSO-d6)δ7.35(d,J＝8.1Hz,1H),7.26(d,J＝8.1Hz,1H),7.17(s,1H),5.41(d,J＝5.8Hz,1H),4.52(d,J＝13.9Hz,3H),3.72(dd,J＝12.8,4.4Hz,1H),1.43(s,9H),1.27(s,9H).LC方法T。
步骤8：20-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮
在20mL小瓶中，将7-叔丁基-4-羟基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯(353.8mg，1.111mmol)溶解于二噁烷(3.0mL)中，向其中添加HCl的二噁烷溶液(4.0M的3.0mL，12.00mmol)。将该混合物在室温下搅拌1小时，然后在70℃下搅拌1小时。然后将该混合物冷却至室温，之后在真空中蒸发至干燥，得到黄色固体。该中间体不经进一步纯化即用于下一步骤。在20mL小瓶中，将产物与THF(3.0mL)混合，向其中添加NaOtBu(498.3mg，5.185mmol)。将该混合物在室温下搅拌10分钟，然后将其冷却至0℃。然后，添加3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(550mg，1.316mmol)，并将所得混合物在0℃下搅拌30分钟，并在室温下搅拌30分钟。在分离的20mL小瓶中，制备HATU(845.2mg，2.223mmol)于DMF(6.0mL)中的溶液。将上述制备的底物混合物滴加到该HATU溶液中，并将所得混合物在室温下搅拌15分钟。然后将该混合物用1N HCl溶液(30mL)淬灭并用乙酸乙酯(120mL)稀释。将层分离，并且有机层用1N HCl溶液(40mL)、水(40mL)和饱和氯化钠水溶液(40mL)洗涤，然后经硫酸钠干燥，过滤并在真空中蒸发，得到约600mg的黄色固体。通过硅胶色谱法(24g的硅胶柱)使用1至70％乙酸乙酯/己烷的梯度洗脱剂的纯化得到20-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(90.7mg，14％)ESI-MS m/z计算值568.2144，实验值569.5(M+1)+；保留时间：1.97分钟，LC方法A。
步骤9：20-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮，峰1(化合物182)，以及20-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮，峰2(化合物183)
在3mL小瓶中，将20-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(90.7mg，0.1595mmol)溶解于MeCN(2.5mL)和DMSO(2.5mL)的混合物中，达到约20mg/mL的浓度。对映异构体的分离通过SFC纯化方法实现，使用40℃下的(R,R)-Whelk-O柱(250×10mm，5μm粒径)，流动相为34％ MeCN:MeOH(+20mM NH3)+66％ CO2，流速为70毫升/分钟，进样体积为500μL，并且压力为100bar。收集的批次标有“峰1”(27mg)和“峰2”(18mg)。将这些产物通过反相制备型色谱法使用C18柱和含有5mM盐酸的1至99％乙腈/水的梯度洗脱剂分别再纯化，得到：峰1，20-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(19.6mg，22％)ESI-MS m/z计算值568.2144，实验值569.5(M+1)+；保留时间：1.97分钟(LC方法A)；3.04分钟(手性RR 5分钟方法)；2.08分钟(手性AS-3 5分钟方法)；2.79分钟(手性LUX-4 5分钟方法)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.45-11.78(宽d,1H),8.58(s,1H),8.05-7.92(m,1H),7.87-7.62(m,2H),7.53(d,J＝8.3Hz,1H),7.43(d,J＝1.9Hz,1H),7.39(dd,J＝8.2,2.0Hz,1H),7.27(t,J＝7.6Hz,1H),7.14(d,J＝7.6Hz,2H),6.68-6.32(m,2H),5.28(d,J＝17.3Hz,1H),4.44(d,J＝17.3Hz,1H),4.09(dd,J＝13.0,4.4Hz,1H),3.13(dd,J＝13.0,10.7Hz,1H),2.25-1.99(bs,6H),1.31(s,9H)；以及峰2，20-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(12.4mg，14％)。ESI-MS m/z计算值568.2144，实验值569.5(M+1)+；保留时间：1.97分钟(LC方法A)；3.25分钟(手性RR 5分钟方法)；2.33分钟(手性AS-3 5分钟方法)；3.12分钟(手性LUX-4 5分钟方法)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.71-11.61(宽d,1H),8.58(s,1H),8.05-7.92(m,1H),7.86-7.65(m,2H),7.53(d,J＝8.2Hz,1H),7.43(d,J＝1.9Hz,1H),7.39(dd,J＝8.2,2.0Hz,1H),7.27(t,J＝7.6Hz,1H),7.14(d,J＝7.6Hz,2H),6.65-6.31(m,2H),5.28(d,J＝17.4Hz,1H),4.44(d,J＝17.3Hz,1H),4.09(dd,J＝13.2,4.6Hz,1H),3.13(dd,J＝13.0,10.7Hz,1H),2.25-1.99(bs,6H),1.31(s,9H).
实例87：化合物184和化合物185的制备
步骤1：1-溴-4-叔丁基-2-碘-苯
在室温下，向1-溴-4-叔丁基-苯(100g，469.23mmol)于TFA(1.5000L)中的溶液中分批添加NIS(110.85g，492.69mmol)。使反应搅拌4小时，然后将挥发物在减压下去除。将粗残余物用水(500mL)和EtOAc(500mL)稀释。将水层用EtOAc萃取三次(3x 1L)。将合并的有机层用碳酸氢钠(1L)、水(1L)和盐水(1L)洗涤，然后经硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将该粗残余物溶解于己烷中并通过硅胶垫。将硅胶垫用己烷(3×500mL)洗涤三次，将该残余物浓缩，得到1-溴-4-叔丁基-2-碘-苯(158.86g，98％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.84(s,1H),7.58-7.40(m,1H),7.29-7.08(m,1H),1.28(s,9H).
步骤2：N-[(1R)-1-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯
将(2R)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-4-甲基戊酸(20g，86.472mmol)、EDC(24.866g，129.71mmol)和HOBt(17.527g，129.71mmol)溶解于DCM(200mL)中并冷却至0℃。接下来，添加N-甲氧基甲胺(7.9231g，129.71mmol)和DIPEA(22.351g，30.123mL，172.94mmol)。使反应在室温下搅拌过夜并用水(100mL)淬灭。将层分离，并且将水层用DCM(50mL)萃取三次，并且将合并的有机层经硫酸钠干燥并浓缩。将残余物通过快速柱色谱法使用0-50％己烷:乙醚作为洗脱剂纯化，得到呈无色油的N-[(1R)-1-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(15.62g，63％)。ESI-MS m/z计算值274.1893，实验值275.3(M+1)+；保留时间：3.04分钟，LC方法T。
步骤3：2-溴-5-叔丁基-苯甲醛
在-78℃下，向1-溴-4-叔丁基-2-碘-苯(235.93g，695.94mmol)于干燥THF(2L)中的溶液中滴加i-PrMgBr(1M的1.6L，1.6000mol)。将溶液在该温度下搅拌4.5小时。在-78℃下将DMF(203.48g，215.55mL，2.7838mol)添加到溶液中并将反应在该温度下搅拌2小时，然后使其温热至室温过夜。将溶液用水(1L)淬灭并且将水层分离并用乙醚(3x 1L)萃取。将有机层用盐水(1L)洗涤并经硫酸钠干燥。将有机残余物通过洗脱0-2％己烷-乙醚的硅胶色谱法纯化，得到2-溴-5-叔丁基-苯甲醛(122.09g，73％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ10.36(s,1H),7.94(d,J＝2.5Hz,1H),7.57(d,J＝8.4Hz,1H),7.50(d,J＝2.5Hz,1H),1.33(s,9H).ESI-MS m/z计算值240.01498,保留时间：3.34分钟；LC方法T。
步骤4：N-[(1R)-1-甲酰基-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯
将N-[(1R)-1-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(31.881g，116.20mmol)溶解于THF(750mL)中并冷却至0℃。接下来。缓慢添加LAH(2.6462g，69.720mmol)。将反应在0℃下搅拌2小时，然后用200mL饱和罗谢尔盐溶液淬灭。使反应搅拌过夜，直到混合物变成双相并且水层稍微浑浊为止。将层分离并将水层用二乙醚(200mL)萃取两次。将合并的有机层经硫酸钠干燥并浓缩。将粗残余物干燥加载到硅胶上并通过快速柱色谱法(0-15％己烷:乙醚)纯化。通过TLC(KMnO4染色)对级分的分析揭示了要收集的合适级分，得到呈无色油的N-[(1R)-1-甲酰基-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(15g，48％)。1HNMR(250MHz,CDCl3)d 9.58(s,1H),5.02-4.87(m,1H),4.33-4.12(m,1H),1.92-1.54(m,3H),1.44(s,9H),0.96(dd,J＝6.5,1.5Hz,6H).
步骤5：2-(2-溴-5-叔丁基-苯基)-1,3-二氧戊环
在0℃下，向2-溴-5-叔丁基-苯甲醛(49.29g，204.42mmol)于EtOH(492.90mL)中的溶液中添加硼氢化钠(9.2803g，9.8204mL，245.30mmol)。将反应在该温度下搅拌1小时，然后通过缓慢添加水淬灭。在用DCM(3×300mL)萃取之前，将溶液在真空中浓缩以去除溶剂。将合并的有机层用盐水(500mL)洗涤，然后经硫酸钠干燥并浓缩。将有机残余物通过洗脱0-4％己烷-乙醚的硅胶色谱法纯化，得到呈黄色油的2-(2-溴-5-叔丁基-苯基)-1,3-二氧戊环(26.68g，46％)ESI-MS m/z计算值284.0412，实验值285.0(M+1)+；保留时间：3.32分钟。1HNMR(250MHz,CDCl3)δ7.61(d,J＝2.6Hz,1H),7.48(d,J＝8.4Hz,1H),7.35-7.09(m,1H),6.07(s,1H),4.38-4.13(m,2H),4.13-3.99(m,2H),1.31(s,9H).ESI-MS m/z计算值284.0412，实验值285.0(M+1)+；保留时间：3.32分钟；LC方法T。
步骤6：N-[(1R)-1-[(R)-[4-叔丁基-2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯基]-羟基-甲基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯，以及N-[(1R)-1-[(S)-[4-叔丁基-2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯基]-羟基-甲基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯
将2-(2-溴-5-叔丁基-苯基)-1,3-二氧戊环(26.6g，93.275mmol)溶解于在THF(80mL)中并添加镁(2.7205g，111.93mmol)。将反应回流5小时。然后将反应冷却至室温并搅拌过夜。将深棕色混合物冷却至0℃并用导管插入冷却至0℃的N-[(1R)-1-甲酰基-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(8.0324g，37.31mmol)于THF(80mL)中的溶液中。使反应搅拌2小时并冷却至0℃并用氯化铵(150mL)淬灭。将层分离并将水层用二乙醚(100mL)萃取两次。将合并的有机层用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，经硫酸镁干燥并浓缩。将粗残余物干燥加载到硅胶上并通过快速柱色谱法使用0-50％己烷:乙醚作为洗脱剂纯化，得到两个产物：收集呈黄色泡沫的N-[(1R)-1-[(R)-[4-叔丁基-2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯基]-羟基-甲基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(3.57g，20％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.63-7.33(m,3H),5.96(s,1H),4.99(s,1H),4.78(d,J＝9.5Hz,1H),4.23-3.94(m,4H),1.62-1.44(m,2H),1.30(s,18H),0.97-0.84(m,6H)LCMS保留时间：3.90分钟(LC方法T)以及收集呈黄色油的N-[(1R)-1-[(S)-[4-叔丁基-2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯基]-羟基-甲基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(3.2g，17％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)d 7.60-7.38(m,3H),6.01(s,1H),5.20(s,1H),5.03(d,J＝5.7Hz,1H),4.83(d,J＝9.3Hz,1H),4.26-3.95(m,4H),1.65-1.43(m,2H),1.30(s,18H),1.03-0.78(m,6H),LCMS保留时间：3.90分钟(LC方法T)。
步骤7：(3R,4S)-7-叔丁基-4-羟基-3-异丁基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯
将N-[(1R)-1-[(S)-[4-叔丁基-2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯基]-羟基-甲基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(3.788g，8.9855mmol)溶解于HCl(4M于二噁烷中)(4M的22.5mL，90.000mmol)中并搅拌1小时。将挥发物在真空中去除。将粗残余物溶解于EtOH(70mL)中并冷却至0℃。然后将三乙酰氧基硼氢化钠(3.82g，18.024mmol)分批添加到反应中。在1小时之后，将挥发物去除，并将反应用氯化铵和EtOAc稀释。将水相用EtOAc萃取三次，经硫酸钠干燥并浓缩。将粗残余物溶解于THF(70mL)和3.75M NaOH溶液(70mL)中。添加Boc酸酐(3.95g，18.099mmol)并将反应搅拌1小时。将层分离，并将水层用EtOAc(20mL)萃取三次。将合并的有机层经硫酸钠干燥并浓缩。将粗残余物干燥加载到硅胶上并通过快速柱色谱法使用0-40％己烷:乙醚作为洗脱剂纯化(220nm监测器)。收集适当的级分(通过TLC/KMnO4染色显现)，得到呈浅黄色油的(3R,4S)-7-叔丁基-4-羟基-3-异丁基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯(668mg，20％)。ESI-MS m/z计算值361.2617，实验值362.4(M+1)+；保留时间：3.33分钟，(LC方法W)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ7.41(d,J＝8.0Hz,1H),7.24(d,J＝8.2Hz,1H),7.12(d,J＝9.7Hz,1H),5.63(d,J＝5.4Hz,1H),4.76(dd,J＝24.6,17.5Hz,1H),4.68-4.59(m,1H),4.53-4.33(m,1H),4.05(dd,J＝60.7,17.6Hz,1H),1.42(s,9H),1.39(dd,J＝8.1,4.5Hz,1H),1.25(s,9H),1.09-0.95(m,2H),0.95-0.78(m,6H)
步骤8：(16S,24R)-20-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-24-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(化合物184)，以及(16R,24R)-20-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-24-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(化合物185)
在20mL小瓶中，将(3R,4S)-7-叔丁基-4-羟基-3-异丁基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯(260.7mg，0.7211mmol)溶解于二噁烷(3.0mL)中，向其中添加HCl的二噁烷溶液(4.0M的3.0mL，12.00mmol)。将该混合物在室温下搅拌4.5小时。然后将该混合物在真空中蒸发至干燥，得到224.6mg(>100％产率)的黄色固体。在20mL小瓶中，将产物与THF(3.0mL)混合，向其中添加NaOtBu(512.2mg，5.330mmol)。将该混合物在室温下搅拌10分钟，然后将其冷却至0℃。然后，添加3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(349.1mg，0.8354mmol)，并将该混合物在0℃下搅拌1小时，并在室温下搅拌1小时。在分离的20mL小瓶中，制备HATU(845.2mg，2.223mmol)于DMF(6.0mL)中的溶液。将上述制备的反应混合物滴加到该HATU溶液中，并将所得混合物在室温下搅拌15分钟。然后将该混合物用1NHCl溶液(30mL)淬灭并用乙酸乙酯(120mL)稀释。将层分离，并且有机层用1N HCl溶液(40mL)、水(40mL)和饱和氯化钠水溶液(40mL)洗涤，然后经硫酸钠干燥，过滤并在真空中蒸发，得到黄色固体。通过硅胶色谱法(24g的硅柱)使用1至70％乙酸乙酯/己烷的梯度洗脱剂的纯化得到2批产物(80mg的70％纯度物质和125mg的60％纯度物质)。将这些分别溶解于温热的DMSO(各自2mL)中并通过反相制备型色谱法使用C18柱和含有5mM盐酸的1至99％乙腈/水的梯度洗脱剂纯化，得到：主要产物，(16S,24R)-20-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-24-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(122.5mg，27％)1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.17-11.55(bs,1H),8.44(t,J＝1.8Hz,1H),7.89(d,J＝7.7Hz,1H),7.69(d,J＝7.6Hz,1H),7.64(t,J＝7.6Hz,1H),7.58(d,J＝8.1Hz,1H),7.45(d,J＝2.0Hz,1H),7.44-7.39(m,1H),7.41(s,1H),7.25(t,J＝7.6Hz,1H),7.13(d,J＝7.6Hz,2H),5.53(s,1H),5.48(d,J＝18.1Hz,1H),4.25(d,J＝18.1Hz,1H),3.48-3.30(m,1H,隐藏在水峰下),2.08-1.72(bs,6H),1.44-1.19(m,3H),1.33(s,9H),0.56(d,J＝6.3Hz,3H),0.44(d,J＝6.3Hz,3H)ESI-MS m/z计算值624.27704，实验值625.5(M+1)+；保留时间：2.13分钟(LC方法A)；以及次要产物，(16R,24R)-20-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-24-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(5.9mg，1％)1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.22-11.61(bs,1H),8.45(s,1H),7.89(d,J＝7.7Hz,1H),7.73-7.58(m,3H),7.50(dd,J＝8.2,2.1Hz,1H),7.48(s,1H),7.25(t,J＝7.6Hz,1H),7.13(d,J＝7.6Hz,2H),5.52(s,1H),5.40(d,J＝18.1Hz,1H),4.22(d,J＝18.1Hz,1H),3.48-3.30(m,1H,隐藏在水峰下),2.11-1.81(bs,6H),1.43-1.15(m,3H),1.30(s,9H),0.55(d,J＝6.2Hz,3H),0.44(d,J＝6.3Hz,3H)ESI-MS m/z计算值624.27704，实验值625.5(M+1)+；保留时间：2.1分钟(LC方法A)；以及副产物，(16S,24R)-20-叔丁基-4-(2,6-二甲基苯基)-24-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,5,7,26-四氮杂五环[14.7.1.12,6.19,13.017,22]二十六碳-2(26),3,5,9(25),10,12,17,19,21-壬烯-8,8,14-三酮(16.3mg，4％)ESI-MS m/z计算值624.27704，实验值625.5(M+1)+；保留时间：2.22分钟(LC方法A)。
实例88：化合物186和化合物187的制备
步骤1：2-[2-溴-5-(三氟甲基)苯基]-1,3-二氧戊环
将2-溴-5-(三氟甲基)苯甲醛(25g，93.868mmol)溶解于苯(450mL)中。添加乙二醇(5.8425g，5.3mL，93.190mmol)，然后添加pTSA水合物(893mg，4.6242mmol)。将混合物在配备有迪安-斯塔克装置的圆底烧瓶中加热并在氮气气球下在100℃油浴中搅拌16小时。将反应冷却至室温并用水稀释。将层分离，并将有机层用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至40％ EtOAc/己烷纯化，得到呈无色油的2-[2-溴-5-(三氟甲基)苯基]-1,3-二氧戊环。ESI-MS m/z计算值295.966，实验值295.2(M-1)-；保留时间：4.08分钟，LC方法T。
步骤2：N-[(1R)-1-[2-(1,3-二氧戊环-2-基)-4-(三氟甲基)苯甲酰基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯
将2-[2-溴-5-(三氟甲基)苯基]-1,3-二氧戊环(14.62g，46.753mmol)溶解于甲苯(55mL)中，在氮气气球下在冰水浴中冷却并搅拌15分钟。快速滴加nBuLi(2.5M的19mL，47.500mmol)。混合物变得难以搅拌。沿着反应烧瓶的壁添加更多甲苯(总共30ml)。混合物仍然需要一些手动旋转。将混合物在0℃下保持45分钟。通过注射器添加于甲苯(20ml加上5ml冲洗)中的N-[(1R)-1-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(5.4g，18.698mmol)溶液。使所得混合物搅拌45分钟，同时将冰浴去除。添加氯化铵(20ml饱和水溶液)。将混合物用EtOAc(50ml×2)萃取。将合并的有机物用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0-40％ EtOAc/己烷(室温：0.6(1/3EtOAc/己烷))纯化，得到(5.8g，68％)无色油。ESI-MS m/z计算值431.192，实验值432.7(M+1)+；保留时间：4.29分钟，LC方法T。
步骤3：N-[(1R)-1-[[2-(1,3-二氧戊环-2-基)-4-(三氟甲基)苯基]-羟基-甲基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯
将N-[(1R)-1-[2-(1,3-二氧戊环-2-基)-4-(三氟甲基)苯甲酰基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(4g，8.8076mmol)溶解于EtOH(50mL)中并在冰水浴中冷却。以小部分添加硼氢化钠(740mg，19.169mmol)。将混合物搅拌10分钟，然后添加MeOH(5mL)。将反应持续30分钟。添加氯化铵(20ml饱和水溶液)。将混合物浓缩以去除大部分挥发物并将残余物在水(40mL)与DCM(50mL)之间分配。将层分离并将DCM溶液经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到呈异构体的混合物的N-[(1R)-1-[[2-(1,3-二氧戊环-2-基)-4-(三氟甲基)苯基]-羟基-甲基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(4g，100％)。ESI-MS m/z计算值433.2076，实验值434.7(M+1)+；保留时间：4.1分钟，LC方法T。
步骤4：(3R)-4-羟基-3-异丁基-7-(三氟甲基)-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯
将N-[(1R)-1-[[2-(1,3-二氧戊环-2-基)-4-(三氟甲基)苯基]-羟基-甲基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(4g，9.1357mmol)溶解于HCl(4M的30mL，120.00mmol)中并在室温下搅拌4小时。然后将其浓缩。将粗残余物(亚胺)溶解于EtOH(20mL)中并在冰水浴中冷却。以小部分添加硼氢化钠(520mg，0.5503mL，13.745mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时并且然后添加氯化铵(20ml饱和水溶液)。将混合物在真空下浓缩以去除大部分EtOH。将残余物在水(约30mL)与DCM(40mL)之间分配。将层分离并将水层用DCM(20mL)进一步萃取。将合并的DCM溶液在冰水浴中冷却。添加TEA(1.4520g，2mL，14.349mmol)，然后添加Boc酸酐(3g，3.1579mL，13.746mmol)。然后将混合物在室温下在氮气下搅拌15小时。添加水(40mL)。将分离的DCM层用HCl(20ml，1N水溶液)、饱和碳酸氢钠和盐水进一步洗涤。然后将其经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(80g柱)使用5-40％ EtOAc/己烷纯化90分钟，得到(3R)-4-羟基-3-异丁基-7-(三氟甲基)-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯(1.62g，47％)ESI-MS m/z计算值373.1865，实验值374.4(M+1)+；保留时间：4.22分钟。1HNMR(250MHz,DMSO-d6)δ7.72-7.45(m,3H),5.45(d,J＝5.3Hz,1H),4.93(t,J＝15.6Hz,1H),4.58-4.31(m,2H),4.28-4.01(m,1H),1.44(s,9H),1.16-0.63(m,9H).LC方法W。
步骤5：(16S,24R)-12-(2,6-二甲基苯基)-24-(2-甲基丙基)-20-(三氟甲基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(化合物186)以及(16R,24R)-12-(2,6-二甲基苯基)-24-(2-甲基丙基)-20-(三氟甲基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(化合物187)
在100mL圆底烧瓶中，将(3R,4S)-4-羟基-3-异丁基-7-(三氟甲基)-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯(801.2mg，2.146mmol)溶解于二噁烷(10mL)中，向其中添加HCl的二噁烷溶液(4.0M的10mL，40.00mmol)。将该混合物在室温下搅拌6.5小时。然后将该混合物在真空中蒸发至干燥，得到1.4g(>100％产率)的浅黄色固体。在100mL圆底烧瓶中，将产物1溶解于THF(10mL)中，向其中添加NaOtBu(1.5128g，15.74mmol)。将该混合物在室温下搅拌10分钟，然后将其冷却至0℃。然后，添加3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(965.4mg，2.310mmol)，并将该混合物在0℃下搅拌2小时。在分离的100mL圆底烧瓶中，制备HATU(2.5088g，6.598mmol)于DMF(20mL)中的溶液。将上述制备的反应混合物滴加到该HATU溶液中，并将所得混合物在室温下搅拌15分钟。然后将该混合物用1N HCl溶液(60mL)淬灭并用乙酸乙酯(250mL)稀释。将层分离，并且有机层用1N HCl溶液(100mL)、水(100mL)和饱和氯化钠水溶液(100mL)洗涤，然后经硫酸钠干燥，过滤并在真空中蒸发，得到黄色浆液。通过硅胶色谱法(固体负载10g硅藻土；40g的硅柱)使用1至70％乙酸乙酯/己烷的梯度洗脱剂纯化，得到3批产物(次要非对映异构体批、混合批和大部分纯的主要非对映异构体批)。将这些分别溶解于1:1DMSO:MeOH中并通过反相制备型色谱法使用C18柱和含有5mM盐酸的1至99％乙腈/水的梯度洗脱剂纯化，得到一些混合批以及纯产物：主要产物，(16S,24R)-12-(2,6-二甲基苯基)-24-(2-甲基丙基)-20-(三氟甲基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(70.6mg，5％)1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.40-11.38(bs,1H),8.45(t,J＝1.8Hz,1H),7.96-7.88(m,3H),7.78-7.70(m,2H),7.66(t,J＝7.7Hz,1H),7.49(s,1H),7.25(t,J＝7.6Hz,1H),7.13(d,J＝7.7Hz,2H),5.63(s,1H),5.60(d,J＝18.6Hz,1H),4.35(d,J＝18.6Hz,1H),3.41(t,J＝7.2Hz,1H),2.11-1.79(bs,6H),1.45-1.28(m,2H),1.28-1.17(m,1H),0.56(d,J＝6.2Hz,3H),0.41(d,J＝6.2Hz,3H)ESI-MS m/z计算值636.2018，实验值637.3(M+1)+；保留时间：1.96分钟(LC方法A)；以及次要产物，(16R,24R)-12-(2,6-二甲基苯基)-24-(2-甲基丙基)-20-(三氟甲基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(34.8mg，3％)1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.75-11.52(宽d,1H),8.45(s,1H),8.03-7.91(m,1H),7.84(s,1H),7.81-7.56(m,4H),7.35-7.21(m,2H),7.21-7.08(m,2H),6.59(s,1H),5.70(d,J＝17.2Hz,1H),4.62(d,J＝17.1Hz,1H),3.85(td,J＝10.6,5.8Hz,1H),2.29-1.85(bs,6H),1.42-1.29(m,1H),0.59(d,J＝6.5Hz,3H),0.41(d,J＝6.4Hz,3H),0.41-0.33(m,1H),0.19-0.01(m,1H)ESI-MS m/z计算值636.2018，实验值637.3(M+1)+；保留时间：2.03分钟，LC方法A。
实例89：化合物188和化合物189的制备
步骤1：(2R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4,4-二甲基-戊酸
向(2R)-2-氨基-4,4-二甲基-戊酸(10g，68.871mmol)于水(70mL)中的溶液中添加NaOH(3.0301g，75.758mmol)，然后添加叔丁氧羰基叔丁基碳酸酯(15.8g，16.632mL，72.395mmol)于THF(70mL)中的溶液。将逐渐变澄清并且然后又变浑浊的浑浊混合物在室温下搅拌过夜。将大部分THF蒸发并将残余物用1N HCl(76mL)酸化并用DCM(3×100mL)萃取。将合并的有机相干燥，过滤并蒸发，得到呈白色固体的(2R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4,4-二甲基-戊酸(16.8g，99％)。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ12.40(s,1H),7.07(d,J＝8.5Hz,1H),3.98-3.90(m,1H),1.54(d,J＝6.7Hz,2H),1.37(s,9H),0.88(s,9H).ESI-MS m/z计算值245.1627，实验值268.2(M+Na)+；保留时间：1.89分钟，LC方法K。
步骤2：N-[(1R)-1-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3,3-二甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯
将(2R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4,4-二甲基-戊酸(16.8g，68.483mmol)和N-甲氧基甲胺(盐酸盐)(8g，82.014mmol)于DMF(120mL)中的溶液在冰浴中冷却并用HATU(28.6g，75.218mmol)处理。在约10-15分钟之后，添加DIPEA(19.515g，26.3mL，150.99mmol)，将冰浴去除并将反应在室温下搅拌过夜。将反应用冰水浴冷却。添加水(350mL)。将混合物剧烈搅拌30分钟并过滤。将固体溶解于EtOAc(300mL)中。将溶液用盐水(40mL)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈白色固体的粗N-[(1R)-1-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3,3-二甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(15.8g，80％)，其不经进一步纯化即用于后续步骤。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ5.06-4.94(m,1H),4.84-4.70(m,1H),3.79(s,3H),3.19(s,3H),1.54-1.33(m,11H),0.97(s,9H).(M+Na)+＝311.2，保留时间：1.99分钟，LC方法K。
步骤3：N-[(1R)-1-[4-叔丁基-2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯甲酰基]-3,3-二甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯
在0℃下，将n-BuLi(2.5M的7.2mL，18.00mmol)(于己烷中)添加到2-(2-溴-5-叔丁基-苯基)-1,3-二氧戊环(5.14g，18.02mmol)的甲苯(18mL)溶液中并将其搅拌30分钟。在-10至0℃下，将N-[(1R)-1-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3,3-二甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(2.07g，7.178mmol)于无水甲苯(9mL)中的溶液添加到反应混合物中。将反应在该温度下搅拌1小时，然后将其在0℃下用饱和氯化铵水溶液(50mL)淬灭。将层分离，并将水层用乙醚(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至30％乙醚/己烷(120g柱)纯化，得到N-[(1R)-1-[4-叔丁基-2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯甲酰基]-3,3-二甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(1.32g，42％)ESI-MS m/z计算值433.28284，实验值378.4(M-tBu)-；保留时间：2.34分钟，LC方法A。
步骤4：N-[(1R)-1-[(S)-[4-叔丁基-2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯基]-羟基-甲基]-3,3-二甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯
在室温下将N-[(1R)-1-[4-叔丁基-2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯甲酰基]-3,3-二甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(1.32g，3.044mmol)的EtOH(12mL)溶液用硼氢化钠(117.2mg，3.098mmol)处理并搅拌50分钟。将反应用饱和氯化铵水溶液(注意：气体析出，15mL)小心地淬灭并用乙酸乙酯(30mL)稀释。将有机层分离，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩，得到N-[(1R)-1-[(S)-[4-叔丁基-2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯基]-羟基-甲基]-3,3-二甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(1.27g，96％)ESI-MS m/z计算值435.29846，实验值374.4(M+1)+；保留时间：2.15分钟，LC方法A。
步骤5：(3R,4S)-7-叔丁基-3-(2,2-二甲基丙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇
在室温下将N-[(1R)-1-[[4-叔丁基-2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯基]-羟基-甲基]-3,3-二甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(1.27g，2.916mmol)用氯化氢(4M的10mL，40.00mmol)处理，搅拌50分钟，并且然后在真空中浓缩。将粗残余物溶解于EtOH(15mL)中并冷却至0℃并用硼氢化钠(165.8mg，4.295mmol)分批处理。将反应搅拌2小时并在真空中浓缩。将残余物用乙酸乙酯(50mL)稀释并用饱和氯化铵水溶液(30mL)小心地淬灭。将水层用EtOAc(20mL)萃取并且将合并的有机层经硫酸钠干燥并在真空中浓缩。将粗残余物溶解于THF(15mL)中并用Boc酸酐(994.4mg，4.556mmol)处理，然后用三乙胺(900μL，6.457mmol)处理并将反应混合物搅拌16小时并且然后用饱和氯化铵水溶液(40mL)稀释，然后用乙酸乙酯40mL)稀释。将有机层分离，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物加载到硅胶(80g)上并通过快速柱色谱法使用0-5％ MeOH/DCM作为洗脱剂在35分钟内纯化。收集适当的级分，得到(3R,4S)-7-叔丁基-3-(2,2-二甲基丙基)-4-羟基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯ESI-MS m/z计算值375.27734，实验值302.4(M-OtBu)+；保留时间：0.88分钟(LC方法D)。将来自上述的产物用HCl(4M的16mL，64.00mmol)处理并在室温下搅拌1小时并且然后在真空中浓缩，得到(3R,4S)-7-叔丁基-3-(2,2-二甲基丙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇(盐酸盐)ESI-MS m/z计算值275.2249，实验值276.3(M+1)+；保留时间：0.5分钟(LC方法D)。
步骤6：(16S,24R)-20-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-24-(2,2-二甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3(26),4,6,10(25),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(化合物188)以及(16R,24R)-20-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-24-(2,2-二甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3(26),4,6,10(25),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(化合物189)
在20mL小瓶中，将(3R,4S)-7-叔丁基-3-(2,2-二甲基丙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇(307mg，1.115mmol)与THF(4.0mL)混合，向其中添加叔丁醇钠(746.7mg，7.770mmol)。将该混合物在室温下搅拌10分钟，然后将其冷却至0℃。然后，添加3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(540.4mg，1.293mmol)，并将该混合物在0℃下搅拌1小时，并在室温下搅拌1小时。然后在室温下将反应混合物使用移液管逐滴转移到HATU(1.2713g，3.344mmol)的DMF(9mL)溶液中并将反应搅拌15分钟。然后将该反应混合物用1N HCl溶液(30mL)淬灭并用乙酸乙酯(120mL)稀释。将层分离，并且有机层用1N HCl溶液(40mL)、水(40mL)和饱和氯化钠水溶液(40mL)洗涤，然后经硫酸钠干燥，过滤并在真空中蒸发，得到黄色固体。通过硅胶色谱法(24g的硅柱)使用1至70％乙酸乙酯/己烷的梯度洗脱剂的纯化得到2批半纯产物。将这些分别溶解于热DMSO(各自2mL)中并通过反相制备型色谱法使用C18柱和含有5mM盐酸的1至99％乙腈/水的梯度洗脱剂纯化，得到(16S,24R)-20-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-24-(2,2-二甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3(26),4,6,10(25),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(19.8mg，3％)ESI-MS m/z计算值638.29266，实验值639.5(M+1)+；保留时间：2.29分钟(主要非对映异构体)以及(16R,24R)-20-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-24-(2,2-二甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3(26),4,6,10(25),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(2.5mg，0％)ESI-MSm/z计算值638.29266，实验值639.5(M+1)+；保留时间：2.37分钟(次要非对映异构体)，LC方法A。
实例90：化合物190的制备
步骤1：2-[(3-甲基-1-苯基-丁基)氨基]乙酸叔丁酯
在0℃下，向3-甲基-1-苯基-丁-1-胺(盐酸盐)(5g，25.035mmol)于DMF(100mL)中的溶液中添加碳酸钾(7.3g，52.820mmol)，然后滴加2-溴乙酸叔丁酯(5.03g，25.788mmol)。将混合物在0℃下搅拌4小时并缓慢温热至室温并搅拌过夜。添加冰水(200g)。将混合物用DCM(200mL)萃取并用硫酸钠干燥。快速色谱法(120g硅胶，DCM/MeOH 0-5％)得到呈浅黄色油的2-[(3-甲基-1-苯基-丁基)氨基]乙酸叔丁酯(5.78g，83％)。ESI-MS m/z计算值277.2042，实验值278.3(M+1)+；保留时间：1.64分钟。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.44-7.12(m,5H),3.72-3.56(m,1H),3.20-2.99(m,2H),1.85(br.s.,1H),1.66-1.45(m,3H),1.43(s,9H),0.89(dd,J＝8.5,6.5Hz,6H),LC方法K。
步骤2：2-[(3-甲基-1-苯基-丁基)-(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]乙酸叔丁酯
在0℃下，向2-[(3-甲基-1-苯基-丁基)氨基]乙酸叔丁酯(3.02g，10.887mmol)于DCM(20mL)中的溶液中添加TEA(5.0094g，6.9mL，49.505mmol)，然后滴加TFAA(3.48g，2.3031mL，16.569mmol)于DCM(10mL)中的溶液。将混合物在室温下搅拌1.5小时。HPLC(1)显示反应完全。将混合物用冰水浴冷却。缓慢添加60mL的5％碳酸氢钠水溶液。将混合物用DCM(100mL)萃取并用硫酸钠干燥。快速色谱法(24g硅胶，庚烷/EtOAc0-35％)得到呈浅黄色油的2-[(3-甲基-1-苯基-丁基)-(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]乙酸叔丁酯(3.91g，96％)。ESI-MS m/z计算值373.1865，实验值396.2(M+Na)+；保留时间：2.4分钟。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.44-7.28(m,5H),5.89(t,J＝7.8Hz,0.5H),5.22(dd,J＝10.4,4.6Hz,0.5H),3.83(dd,J＝4.6,1.6Hz,1H),3.76(s,1H),2.13(ddd,J＝13.3,10.1,3.7Hz,1H),1.89-1.57(m,2H),1.32(s,5H),1.29(s,4H),1.00-0.87(m,6H).1919F NMR(282MHz,CDCl3)δ-67.47(s,1.6F),-69.20(s,1.4F).
LC方法K。
步骤3：2-[(3-甲基-1-苯基-丁基)-(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]乙酸
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在0℃下，向2-[(3-甲基-1-苯基-丁基)-(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]乙酸叔丁酯(3.91g，10.471mmol)于DCM(50mL)中的溶液中添加TFA(37.000g，25mL，324.50mmol)。使混合物缓慢地温热至室温并在室温下搅拌过夜。HPLC(1)显示反应完全。将混合物浓缩并与1,2-二氯乙烷共蒸发三次，得到呈浅黄色油的2-[(3-甲基-1-苯基-丁基)-(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]乙酸(3.75g，99％)，其被5％的1,2-二氯乙烷和7％的TFA污染。ESI-MS m/z计算值317.1239，实验值316.1(M-1)-；保留时间：2.03分钟。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.15(br.s.,1H),7.47-7.27(m,5H),5.91(t,J＝7.8Hz,0.3H),5.25(dd,J＝10.4,4.3Hz,0.7H),4.04-3.76(m,2H),2.24-2.04(m,1H),1.90-1.51(m,2H),1.05-0.82(m,6H).1919F NMR(282MHz,CDCl3)δ-67.47(s,2.1F),-69.26(s,0.9F),LC方法K。
步骤4：1-异丁基-2-(2,2,2-三氟乙酰基)-1,3-二氢异喹啉-4-酮
在0℃下，向2-[(3-甲基-1-苯基-丁基)-(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]乙酸(3.55g，9.8454mmol)和DMF(100mg，0.1059mL，1.3681mmol)于DCM(50mL)中的溶液中滴加草酰氯(4.26g，2.9278mL，33.563mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜，浓缩并与1,2-二氯乙烷共蒸发两次。将残余物溶解于1,2-二氯乙烷(50mL)中，冷却至0℃并添加AlCl3(3g，22.499mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟并且在35℃下搅拌1.5小时。LCMS(1)显示反应完全。在0℃下向混合物中缓慢添加2N HCl水溶液(80mL)。将所得混合物用DCM萃取，用盐水洗涤并用硫酸钠干燥。快速色谱法(120g硅胶，庚烷/EtOAc 0-15％)得到呈浅黄色油的1-异丁基-2-(2,2,2-三氟乙酰基)-1,3-二氢异喹啉-4-酮(2.53g，86％)。ESI-MS m/z计算值299.1133，实验值300.1(M+1)+；保留时间：2.14分钟。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.02(d,J＝7.9Hz,1H),7.67-7.56(m,1H),7.52-7.39(m,1H),7.35-7.21(m,1H),5.87(dd,J＝10.7,3.7Hz,0.7H),5.23-5.10(m,0.6H),4.64(dd,J＝18.8,1.2Hz,0.7H),4.27(d,J＝18.8Hz,0.7H),4.05(d,J＝19.7Hz,0.3H),1.97-1.81(m,0.7H),1.79-1.69(m,0.6H),1.66-1.47(m,1.7H),1.10-0.90(m,6H).1919F NMR(282MHz,CDCl3)δ-68.42(br.s.,0.9F),-68.75(s,2.1F),LC方法K。
步骤5：2,2,2-三氟-1-(4-羟基-1-异丁基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-基)乙酮
在0℃下，向1-异丁基-2-(2,2,2-三氟乙酰基)-1,3-二氢异喹啉-4-酮(2.53g，8.4534mmol)于EtOH(50mL)中的溶液中滴加硼氢化钠(307mg，8.1147mmol)于EtOH(15mL)中的溶液。将混合物在0℃下搅拌1小时。将混合物用8.5mL的1N HCl水溶液处理并浓缩。将残余物在水与EtOAc之间分配。将有机相用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到呈浅黄色油的2,2,2-三氟-1-(4-羟基-1-异丁基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-基)乙酮(2.54g，100％)。ESI-MS m/z计算值301.129，实验值302.2(M+1)+；保留时间：2.03分钟，LC方法K。
步骤6：1-异丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇，主要非对映异构体1，以及1-异丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇，次要非对映异构体2
将2,2,2-三氟-1-(4-羟基-1-异丁基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-基)乙酮(2.54g，8.4300mmol)和氨(7M的30mL，210.00mmol)于MeOH中的混合物在50℃下搅拌过夜。将混合物浓缩并将残余物通过快速色谱法(80g硅胶，DCM(1％ NH3)/MeOH 0-8％)纯化，得到呈白色固体的主要非对映异构体1(TLC上更少极性)1-异丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇(1.173g，66％)。ESI-MS m/z计算值205.1467，实验值206.2(M+1)+；保留时间：1.59分钟。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ7.40-7.16(m,4H),4.53(t,J＝2.5Hz,1H),3.97(dd,J＝10.0,3.2Hz,1H),3.26(dd,J＝12.5,3.1Hz,1H),3.02(dd,J＝12.6,2.3Hz,1H),2.24(br.s.,2H),1.98-1.82(m,1H),1.81-1.69(m,1H),1.67-1.54(m,1H),1.02(d,J＝6.5Hz,3H),0.97(d,J＝6.5Hz,3H),以及呈类白色固体的次要非对映异构体2(TLC上更多极性)1-异丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇(204mg，11％)。ESI-MS m/z计算值205.1467，实验值206.2(M+1)+；保留时间：1.72分钟。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.42-7.31(m,1H),7.26-7.17(m,2H),7.10-6.99(m,1H),4.51(t,J＝3.2Hz,1H),3.88(dd,J＝10.9,3.2Hz,1H),3.26(dd,J＝13.1,3.1Hz,1H),2.97(dd,J＝13.1,3.4Hz,1H),2.27(br.s.,2H),1.88-1.67(m,2H),1.30(ddd,J＝14.0,10.3,3.2Hz,1H),1.00(d,J＝6.5Hz,3H),0.96(d,J＝6.5Hz,3H),(LC方法G)。
步骤7：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(1-异丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸，主要非对映异构体1
向3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(104mg，0.2489mmol)和1-异丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇，主要非对映异构体1(60mg，0.2923mmol)于THF(1mL)中的溶液中添加叔丁醇钠(125mg，1.301mmol)并将反应混合物搅拌16小时。将溶剂蒸发，将残余物溶于1:1DMSO:MeOH中，过滤并通过HPLC(1-99％ ACN/水(HCl改性剂))纯化，得到3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(1-异丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸，主要非对映异构体1(盐酸盐)(80mg，52％)。ESI-MS m/z计算值586.225，实验值587.3(M+1)+；保留时间：0.49分钟(LC方法D)。
步骤8：12-(2,6-二甲基苯基)-23-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3(26),4,6,10(25),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮，主要非对映异构体1(化合物190)
向3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(1-异丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸，主要非对映异构体1(盐酸盐)(27mg，0.04602mmol)和HATU(19.25mg，0.05063mmol)于DMF(0.4mL)中的溶液中添加DiPEA(40μL，0.2296mmol)并将反应混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物用MeOH稀释，过滤并通过HPLC(1-99％ ACN/水(HCl改性剂))纯化，得到12-(2,6-二甲基苯基)-23-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3(26),4,6,10(25),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮，主要非对映异构体(13.8mg，53％)。ESI-MS m/z计算值568.2144，实验值569.4(M+1)+；保留时间：2.0分钟，LC方法A。
实例91：化合物191的制备
步骤1：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(1-异丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸，次要非对映异构体2
向3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(104mg，0.2489mmol)和1-异丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇，次要非对映异构体2(60mg，0.2923mmol)于THF(1mL)中的溶液中添加叔丁醇钠(125mg，1.301mmol)并将反应混合物搅拌16小时。将溶剂蒸发，将残余物溶于DMSO:MeOH(1:1，v:v)中，过滤并通过HPLC(1-99％ACN/水(HCl改性剂))纯化，得到3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(1-异丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)，次要非对映异构体2(80mg，52％)。ESI-MS m/z计算值586.225，实验值587.3(M+1)+；保留时间：0.49分钟，LC方法D。
步骤2：12-(2,6-二甲基苯基)-23-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3(26),4,6,10(25),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮，次要非对映异构体2(化合物191)
向3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(1-异丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(15mg，0.02557mmol)和HATU(10.70mg，0.02814mmol)于DMF(0.1mL)中的溶液中添加DiPEA(23μL，0.1320mmol)并将反应混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物用MeOH稀释，过滤并通过HPLC(1-99％ ACN/水(HCl改性剂))纯化，得到12-(2,6-二甲基苯基)-23-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3(26),4,6,10(25),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮，次要非对映异构体(1.1mg，8％)。ESI-MS m/z计算值568.2144，实验值569.3(M+1)+；保留时间：1.94分钟，LC方法A。
实例92：化合物192的制备
步骤1：N-[(1R)-1-[2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯甲酰基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯
向氮气喷射的圆底烧瓶中添加2-(2-溴苯基)-1,3-二氧戊环(10.6g，46.27mmol)和无水甲苯(35mL)。将溶液冷却至0℃，然后滴加n-BuLi溶液(2.5M的18.2mL，45.50mmol)。使反应混合物在0℃下搅拌15分钟，然后添加于甲苯溶液中的N-[(1R)-1-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(4.24g，15.45mmol)。将反应溶液在0℃下搅拌并且然后在室温下搅拌2小时。将反应溶液用氯化铵水溶液淬灭并用EtOAc稀释。将分配的EtOAc级分经硫酸钠干燥，过滤，在真空中浓缩并在硅胶柱上使用100％己烷至50％ EA/己烷的梯度进行色谱分析17分钟，得到N-[(1R)-1-[2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯甲酰基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(4.1g，73％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.63(dd,J＝7.2,1.6Hz,2H),7.52(dtd,J＝18.4,7.3,1.6Hz,2H),7.23(d,J＝8.1Hz,1H),4.71(ddd,J＝11.3,8.2,3.6Hz,1H),4.10-3.99(m,2H),3.99-3.85(m,3H),1.65(tq,J＝10.6,6.6Hz,1H),1.48(ddd,J＝13.8,10.9,4.3Hz,1H),1.34(s,10H),0.83(t,J＝6.9Hz,6H).
步骤2：N-[(1R)-1-[(R)-[2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯基]-羟基-甲基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯，以及N-[(1R)-1-[(S)-[2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯基]-羟基-甲基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯
在0℃下，向N-[(1R)-1-[2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯甲酰基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(7.47g，20.553mmol)于无水EtOH(74mL)中的溶液中分几部分添加硼氢化钠(971.95mg，25.691mmol)。将反应在冰浴中搅拌1小时，然后将其用饱和氯化铵水溶液(70mL)缓慢淬灭。将反应混合物在室温下搅拌15分钟，然后将其在真空中浓缩以去除乙醇。将水溶液残余物用乙酸乙酯(3×70mL)萃取。将合并的有机相用盐水(70mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至30％己烷-乙酸乙酯纯化，得到两个立体异构体：呈白色固体的N-[(1R)-1-[(R)-[2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯基]-羟基-甲基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(4.804g，63％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.70-7.46(m,2H),7.45-7.20(m,2H),6.06(s,1H),5.07(s,1H),4.84(d,J＝9.5Hz,1H),4.27-3.99(m,4H),1.63(s,1H),1.46-1.19(m,11H),0.86(dd,J＝10.3,6.5Hz,6H)，以及呈白色固体的N-[(1R)-1-[(S)-[2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯基]-羟基-甲基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(1.111g，15％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.55(d,J＝7.6Hz,2H),7.46-7.14(m,2H),5.98(s,1H),5.10-4.94(m,1H),4.78(d,J＝9.4Hz,1H),4.20-3.77(m,4H),1.73-1.57(m,1H),1.57-1.47(m,1H),1.32(s,8H),1.12(s,2H),0.90(dd,J＝6.6,3.8Hz,6H).
步骤3：(3R,4R)-4-羟基-3-异丁基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯
将N-[(1R)-1-[(R)-[2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯基]-羟基-甲基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(12.45g，34.066mmol)溶解于HCl于二噁烷中的4M溶液(85.165mL)中。将反应在室温下搅拌1小时。将溶剂在真空下去除。将残余物溶解于EtOH(200mL)中。在0℃下将硼氢化钠(2.5776g，68.132mmol)添加到反应混合物中。将反应混合物在相同温度下搅拌1小时。将溶剂在真空下去除。将残余物溶解于THF(200mL)中。向反应混合物中添加Boc酸酐(14.870g，68.132mmol)。将反应在室温下搅拌2天。将反应用饱和氯化铵(100mL)淬灭。将THF在真空下去除。将水溶液用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至20％己烷-乙酸乙酯纯化。将级分合并并浓缩。将粗物质通过制备型HPLC使用40至90％水-乙腈(用0.1％氢氧化铵缓冲，柱XBridge，C18，10μm，5cm×25cm，流速50毫升/分钟，40分钟内，220nm)进一步纯化，得到呈浅黄色半固体的(3R,4R)-4-羟基-3-异丁基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯(5.35g，50％)。ESI-MS m/z计算值305.1991，实验值306.3(M+1)+；保留时间：2.6分钟。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ7.54-6.89(m,4H),5.22(d,J＝4.9Hz,1H),4.81(t,J＝17.2Hz,1H),4.41(d,J＝30.4Hz,2H),4.09(dd,J＝29.7,17.7Hz,1H),1.44(s,10H),0.89(dd,J＝17.8,6.6Hz,8H),LC方法W。
步骤4：(4-氯-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-基)二氨基甲酸二叔丁酯
将(4,6-二氯嘧啶-2-基)二氨基甲酸二叔丁酯(215g，0.592mol)于1,2-二甲氧基乙烷(1.74L)和水(455mL)的混合物中的溶液脱气10分钟。向溶液中依次添加邻甲苯基硼酸(80.5g，0.592mol)、碳酸铯(482.21g，1.48mol)和Pd(dppf)Cl2(21.7g，0.0296mol)。将反应在65℃下搅拌1小时并用水(1L)稀释。将有机层分离，并且将水层用乙酸乙酯(2×300mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并浓缩，得到呈深棕色粘状油的(4-氯-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-基)二氨基甲酸二叔丁酯(265g，106％)。ESI-MS m/z计算值419.16，实验值420.5(M+1)+.保留时间：4.26分钟。
步骤5：4-氯-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-胺
向(4-氯-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-基)二氨基甲酸二叔丁酯(265g，0.632mol)于二氯甲烷(1.8L)中的溶液中缓慢添加于二噁烷中的4M氯化氢溶液(790mL)并将反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物浓缩并将残余物用二氯甲烷:己烷的1:1混合物研磨。将形成的固体通过过滤收集，用二氯甲烷:己烷的1:1混合物和己烷洗涤，得到呈类白色粉末的4-氯-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-胺(盐酸盐)(96g，63％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ(ppm):7.16-7.51(m,5H)6.82(d,J＝1.10Hz,1H)2.37(s,3H).ESI-MS m/z计算值219.06，实验值220.3(M+1)+，保留时间：2.7分钟。
步骤6：3-(N-(4-氯-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-基)氨磺酰基)苯甲酸甲酯
在0℃下，向氢化钠(60％在矿物油中，3.58g，89.50mmol)于四氢呋喃(90mL)中的混合物中添加先前游离的4-氯-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-胺(7.85g，35.8mmol)于四氢呋喃(30mL)中的溶液。将该混合物在室温下搅拌1小时。在0℃下，将3-(氯磺酰基)苯甲酸甲酯(10.09g，43.01mmol)于四氢呋喃(30mL)中的溶液中缓慢添加到混合物中并将所得反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应用1M盐酸水溶液淬灭至pH＝1。将两个层分离，并将水层用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并还原，得到呈浅棕色固体的3-(N-(4-氯-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-基)氨磺酰基)苯甲酸甲酯(17.95g，119％)。ESI-MS m/z计算值417.06，实验值418.5(M+1)+，保留时间：3.44分钟。
步骤7：3-(N-(4-氯-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-基)氨磺酰基)苯甲酸
将3-(N-(4-氯-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-基)氨磺酰基)苯甲酸甲酯(10.2g，24.46mmol)溶解于四氢呋喃(200mL)和水(200mL)的混合物中。添加氢氧化锂(2.93g，122.5mmol)，并且将反应在45℃下搅拌45分钟。将反应通过添加1M盐酸淬灭，直到pH达到1为止。将两个层分离，并将水层用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并还原。将残余物通过反相柱色谱法使用50-85％水-乙腈(0.1％ TFA)纯化，得到呈白色粉末的3-(N-(4-氯-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-基)氨磺酰基)苯甲酸(5.12g，52％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.51(d,J＝1.43Hz,1H)8.13-8.26(m,2H)7.72(t,J＝7.42Hz,1H)7.35-7.45(m,2H)7.22-7.33(m,3H)2.26(s,3H).ESI-MS m/z计算值403.04，实验值404.2(M+1)+，保留时间：2.99分钟。
步骤8：(16R,24R)-12-(2-甲基苯基)-24-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3(26),4,6,10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(化合物192)
将3-[[4-氯-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(267mg，0.6612mmol)和(3R,4R)-4-羟基-3-异丁基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯(200mg，0.6549mmol)合并并溶解于四氢呋喃(5mL)中。添加叔丁醇钠(248mg，2.581mmol)。使反应混合物在50℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，过滤并通过反相制备型色谱法使用C18柱和含有5mM盐酸的10至60％乙腈/水的15分钟梯度洗脱剂纯化，得到3-[[4-[[(3R,4R)-2-叔丁氧基羰基-3-异丁基-3,4-二氢-1H-异喹啉-4-基]氧基]-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(286mg，64％)ESI-MS m/z计算值672.2618，实验值673.0(M+1)+；保留时间：1.97分钟(LC方法A)。
在室温下将于HCl(4M的1mL，4.000mmol)中的3-[[4-[[(3R,4R)-2-叔丁氧基羰基-3-异丁基-3,4-二氢-1H-异喹啉-4-基]氧基]-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(286mg，64％)搅拌90分钟。将反应混合物浓缩以去除溶剂。将过量的酸与甲苯(3×1mL)共沸，得到3-[[4-[[(3R,4R)-3-异丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基]氧基]-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(243mg，61％)ESI-MS m/z计算值572.20935，实验值573.0(M+1)+；保留时间：0.47分钟(LC方法D)。
在室温下将3-[[4-[[(3R,4R)-3-异丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基]氧基]-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(243mg，61％)、HATU(260mg，0.6838mmol)、DIEA(450μL，2.584mmol)和DMF(1mL)搅拌30分钟。将粗过滤并通过反相制备型色谱法使用C18柱和含有5mM盐酸的25至75％乙腈/水的15分钟梯度洗脱剂纯化，得到(16R,24R)-12-(2-甲基苯基)-24-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3(26),4,6,10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(31.5mg，9％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.82(s,1H),8.45(s,1H),7.90(d,J＝7.8Hz,1H),7.71(d,J＝7.5Hz,2H),7.65(t,J＝7.7Hz,1H),7.55(s,1H),7.45(s,2H),7.39(d,J＝7.0Hz,2H),7.32(d,J＝5.3Hz,3H),5.60(s,1H),5.45(d,J＝18.2Hz,1H),4.28(d,J＝18.1Hz,1H),2.27(s,3H),1.44(dt,J＝13.1,6.7Hz,1H),1.28(s,2H),0.60(d,J＝6.4Hz,3H),0.35(d,J＝6.4Hz,3H).ESI-MS m/z计算值554.1988，实验值555.0(M+1)+；保留时间：1.78分钟(LC方法A)。
实例93：化合物193的制备
步骤1：(3R,4S)-4-羟基-3-异丁基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯
将N-[(1R)-1-[(S)-[2-(1,3-二氧戊环-2-基)苯基]-羟基-甲基]-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(2.1g，5.746mmol)用二噁烷HCl(6M的9.6mL，57.60mmol)处理并在室温下搅拌1小时。在反应完成之后，将混合物在真空中蒸发，得到(3R,4S)-3-异丁基-3,4-二氢异喹啉-4-醇(1,150mg，98％)ESI-MS m/z计算值203.13101，实验值204.12(M+1)+；保留时间：0.29分钟(LC方法D)。在0℃下，向亚胺于EtOH(30mL)中的溶液中添加硼氢化钠(435mg，11.50mmol)并将混合物在室温下搅拌1小时(UPLC对照)。在完成之后，将混合物在真空中蒸发，得到粗(3R,4S)-3-异丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇(800mg，68％)ESI-MS m/z计算值205.14667，实验值206.14(M+1)+；保留时间：0.32分钟，(LC方法A)。将粗胺中间体悬浮于THF(30mL)中并用Boc酸酐(2.5g，11.45mmol)处理。将反应在室温下搅拌过夜，用饱和氯化铵淬灭并用EtOAc萃取。将有机萃取物经硫酸钠干燥，蒸发并通过硅胶色谱法使用40g柱(洗脱剂己烷-EtOAc 100-0％至70-30％)纯化，得到(3R,4S)-4-羟基-3-异丁基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯(825mg，47％)1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.35-7.23(m,3H),7.15(d,J＝7.4Hz,1H),5.00(dd,J＝54.0,17.7Hz,1H),4.81-4.38(m,2H),4.22-4.08(m,1H),1.90(d,J＝8.5Hz,1H),1.51(s,9H),1.26(t,J＝7.1Hz,1H),1.04(dd,J＝9.0,4.8Hz,1H),0.97(d,J＝6.5Hz,3H),0.89(d,J＝6.7Hz,3H).ESI-MS m/z计算值305.1991，实验值232.11(M+1)+；保留时间：0.71分钟，LC方法D。
步骤2：(16S,24R)-12-(2-甲基苯基)-24-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3(26),4,6,10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(化合物193)
将3-[[4-氯-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(265mg，0.6562mmol)和(3R,4S)-4-羟基-3-异丁基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯(200mg，0.6549mmol)合并并溶解于四氢呋喃(5mL)中。添加叔丁醇钠(247mg，2.570mmol)，并且使反应混合物在50℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，过滤并通过反相制备型色谱法使用C18柱和含有5mM盐酸的10至60％乙腈/水的15分钟梯度洗脱剂纯化，得到3-[[4-[[(3R,4S)-2-叔丁氧基羰基-3-异丁基-3,4-二氢-1H-异喹啉-4-基]氧]-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(256.4mg，58％)1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.25(s,1H),8.33(s,1H),8.03(d,J＝7.4Hz,1H),7.92(s,1H),7.32(d,J＝42.7Hz,7H),7.13(s,1H),6.96(s,1H),6.68(s,1H),6.14(s,1H),4.93(d,J＝17.4Hz,1H),4.68(s,1H),4.20(s,1H),2.33(s,3H),1.50(s,10H),1.21(s,2H),0.90-0.79(m,6H).ESI-MS m/z计算值672.2618，实验值673.0(M+1)+；保留时间：2.19分钟(LC方法A)。
在室温下将于HCl(4M的1mL，4.000mmol)中的3-[[4-[[(3R,4S)-2-叔丁氧基羰基-3-异丁基-3,4-二氢-1H-异喹啉-4-基]氧]-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(256.4mg，58％)搅拌30分钟。将反应混合物浓缩并将过量的酸与甲苯(3×1mL)共沸，得到3-[[4-[[(3R,4S)-3-异丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基]氧]-6-(邻甲苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(218.2mg，57％)ESI-MS m/z计算值572.20935，实验值573.0(M+1)+；保留时间：1.07分钟(LC方法A)。
在室温下将产物、HATU(236.3mg，0.6215mmol)、DIEA(450μL，2.584mmol)和DMF(2mL)搅拌30分钟。将粗过滤并通过反相制备型色谱法使用C18柱和含有5mM盐酸的25至75％乙腈/水的15分钟梯度洗脱剂纯化，得到(16S,24R)-12-(2-甲基苯基)-24-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3(26),4,6,10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(64.4mg，18％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.22(s,1H),8.60(s,1H),7.99(d,J＝7.7Hz,1H),7.91–7.70(m,2H),7.60(d,J＝6.6Hz,1H),7.54–7.35(m,5H),7.35–7.25(m,1H),6.72(s,1H),6.57(s,1H),5.35–5.18(m,1H),4.56–4.24(m,3H),2.31(s,3H),1.45–1.14(m,2H),0.97–0.79(m,1H),0.66(d,J＝6.5Hz,3H),0.42–0.07(m,3H).ESI-MS m/z计算值554.1988，实验值555.0(M+1)+；保留时间：1.9分钟，LC方法A。
实例94：化合物194的制备
步骤1：3,4-二氢-1H-2,7-萘啶-2-羧酸叔丁酯
在0℃下，向1,2,3,4-四氢-2,7-萘啶(二盐酸盐)(6g，29.0mmol)和碳酸氢钠(7.3g，86.9mmol)于THF/MeOH(100mL/100mL)中的悬浮液中添加二碳酸二叔丁酯(7g，32.1mmol)。将反应在室温下搅拌过夜，并且然后在真空中浓缩。将残余物溶解于水(100mL)中，并且然后用乙酸乙酯(100mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩，得到呈黄色油的粗3,4-二氢-1H-2,7-萘啶-2-羧酸叔丁酯(6.5g，96％)，其直接用于下一步骤。ESI-MS m/z计算值234.1368，实验值235.2(M+1)+；保留时间：1.13分钟，LC方法C。
步骤2：7-氧代-3,4-二氢-1H-2,7-萘啶-7-鎓-2-羧酸叔丁酯
在0℃下，向3,4-二氢-1H-2,7-萘啶-2-羧酸叔丁酯(6.5g，27.7mmol)于二氯甲烷(100mL)中的溶液中添加3-氯过苯甲酸(7.46g，33.29mmol)。将反应在室温下搅拌2小时，然后用二氯甲烷(100mL)稀释。将混合物用10％ NaS2O3(50mL)、5％碳酸钠水溶液(100mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下蒸发。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化，用0％至10％甲醇/二氯甲烷的混合物洗脱，得到呈浅黄色固体的7-氧代-3,4-二氢-1H-2,7-萘啶-7-鎓-2-羧酸叔丁酯(5.4g，78％)。ESI-MS m/z计算值250.1317，实验值251.2(M+1)+；保留时间：1.38分钟，LC方法C。
步骤3：4-乙酰氧基-3,4-二氢-1H-2,7-萘啶-2-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将7-氧代-3,4-二氢-1H-2,7-萘啶-7-鎓-2-羧酸叔丁酯(5.4g，21.6mmol)于乙酸酐(44mL，466.3mmol)中的溶液在40℃下加热3小时。将反应冷却。将乙酸酐在减压下通过蒸发去除。将残余物用EtOAc(150mL)稀释。将混合物用5％碳酸氢钠溶液洗涤直到碱性为止，然后经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下蒸发。将残余物通过硅胶色谱法纯化，用0％至60％乙酸乙酯/庚烷洗脱，得到呈浅黄色油的4-乙酰氧基-3,4-二氢-1H-2,7-萘啶-2-羧酸叔丁酯(2.0g，32％)。ESI-MS m/z计算值292.1423，实验值293.2(M+1)+；保留时间：1.46分钟，LC方法C。
步骤4：4-羟基-3,4-二氢-1H-2,7-萘啶-2-羧酸叔丁酯
在0℃下向4-乙酰氧基-3,4-二氢-1H--2,7-萘啶-2-羧酸叔丁酯(2g，6.84mmol)于甲醇(30mL)中的溶液中添加于甲醇(10.5mL，48.6mmol)中的25wt.％甲醇钠溶液。将反应混合物在室温下搅拌2小时。将大部分溶剂在35℃下在减压下蒸发。将残余物用水(50mL)和二氯甲烷(50mL)稀释。将混合物在室温下搅拌10分钟。分离两层。将水层用二氯甲烷(20mL)萃取。将合并的有机层用水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下蒸发。将残余物通过硅胶色谱法使用30-100％乙酸乙酯/庚烷纯化，得到呈黄色半固体的4-羟基-3,4-二氢-1H-2,7-萘啶-2-羧酸叔丁酯(1.225g，71％产率)。ESI-MS m/z计算值250.1317，实验值251.2(M+1)+；保留时间：1.16分钟。1H NMR(300MHz,CDCl3)ppm 1.50(s,9H),3.56(dd,J＝13.2,6.8Hz,1H),3.91(dd,J＝12.9,2.6Hz,1H),4.53-4.68(m,2H),4.70-4.81(m,1H),7.44(d,J＝5.0Hz,1H),8.42(s,1H),8.48(d,J＝5.3Hz,1H).LC方法H。
步骤5：12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,20,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3(26),4,6,10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(化合物194)
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(200mg，0.4786mmol)和4-羟基-3,4-二氢-1H-2,7-萘啶-2-羧酸叔丁酯(120mg，0.4794mmol)合并并溶解于四氢呋喃(1.5mL)中。添加叔丁醇钠(162mg，1.686mmol)。使反应混合物在50℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，过滤并通过反相制备型色谱法使用C18柱和含有5mM盐酸的10至60％乙腈/水的15分钟梯度洗脱剂纯化，得到3-[[4-[(2-叔丁氧基羰基-3,4-二氢-1H-2,7-萘啶-4-基)氧]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(12.1mg，4％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.36(s,1H),8.68(s,1H),8.57(d,J＝14.5Hz,1H),8.46(d,J＝3.6Hz,1H),8.13(s,2H),7.56(d,J＝5.2Hz,2H),7.25(td,J＝7.6,4.9Hz,1H),7.12(dd,J＝7.7,3.6Hz,2H),6.38(d,J＝24.8Hz,1H),4.47(d,J＝16.0Hz,1H),4.36(s,1H),3.99(d,J＝13.9Hz,1H),2.03(s,6H),1.41(s,1H),1.13(d,J＝20.3Hz,5H).
在室温下将于HCl(4M的1mL，4.000mmol)中的3-[[4-[(2-叔丁氧基羰基-3,4-二氢-1H-2,7-萘啶-4-基)氧]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(12.1mg，4％)搅拌30分钟。将反应混合物浓缩以去除溶剂。将过量的酸与甲苯(3×1mL)共沸，得到3-(N-(4-(2,6-二甲基苯基)-6-((1,2,3,4-四氢-2,7-萘啶-4-基)氧)嘧啶-2-基)氨磺酰基)苯甲酸。将该产物与HATU(160mg，0.4208mmol)、DIEA(300μL，1.722mmol)和DMF(1mL)合并并将混合物在室温下搅拌30分钟。将粗反应过滤并通过反相制备型色谱法使用C18柱和含有5mM盐酸的1至50％乙腈/水的15分钟梯度洗脱剂纯化，得到12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,20,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3(26),4,6,10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(三氟乙酸盐)(4.2mg，1％)1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.82(s,1H),8.75(s,1H),8.71–8.59(m,1H),7.99(d,J＝7.8Hz,1H),7.85–7.57(m,2H),7.27(t,J＝7.5Hz,1H),7.15(d,J＝7.9Hz,2H),6.51(d,J＝13.9Hz,2H),5.37(d,J＝17.7Hz,1H),4.49(d,J＝17.7Hz,1H),4.13(dd,J＝13.3,5.0Hz,1H),3.22–3.14(m,1H),2.67(s,2H),2.33(s,1H),2.26–1.93(m,5H).ESI-MS m/z计算值513.1471，实验值514.0(M+1)+；保留时间：0.91分钟，LC方法A。
实例95：化合物195和化合物196的制备
步骤1：7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-羧酸叔丁酯
在0℃下，将5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶(二盐酸盐)(10g，48.286mmol)在THF/MeOH(200mL/200mL)中混合。添加碳酸氢钠(12.169g，144.86mmol)，然后添加二碳酸二叔丁酯(11.065g，50.7mmol)。将反应在室温下搅拌过夜并且然后在真空中浓缩。将残余物溶解于水(约200mL)中，并且然后用乙酸乙酯(150mL×3)萃取。将合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩，得到呈无色油的7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-羧酸叔丁酯(1.8g，106％)。ESI-MS m/z计算值234.1368，实验值235.4(M+1)+；保留时间：1.78分钟，LC方法S。
步骤2：1-氧代-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-1-鎓-6-羧酸叔丁酯
将7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-羧酸叔丁酯(12.3g，52.498mmol)溶解于二氯甲烷(200mL)中并在冰水浴中冷却。在1分钟内以小部分添加m-CPBA(14.495g，75％w/w，62.998mmol)。将反应在室温下搅拌5小时，然后用二氯甲烷(250mL)稀释。将混合物用饱和碳酸钠水溶液(100mL×2)洗涤，然后用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩，得到呈白色固体的1-氧代-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-1-鎓-6-羧酸叔丁酯(13.5g，100.68％)。ESI-MS m/z计算值250.1317，实验值251.3(M+1)+；保留时间：1.74分钟。1H NMR(250MHz,CDCl3)ppm 1.48(s,9H),3.05(t,J＝6.0Hz,2H),3.75(t,J＝6.2Hz,2H),4.59(s,2H),6.98-7.09(m,1H),7.10-7.21(m,1H),8.20(d,J＝6.5Hz,1H).LC方法T。
步骤3：8-羟基-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，将1-氧代-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-1-鎓-6-羧酸叔丁酯(13.5g，53.937mmol)和三氟乙酸酐(17.352g，11.6mL，81.790mmol)于DCM(175mL)中的悬浮液在室温下搅拌过夜。然后将反应混合物与氢氧化钠溶液(1N，150mL)一起搅拌30分钟。将所得混合物用DCM(125mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，经无水Na2S04干燥，过滤并浓缩。将残余浅棕色油通过硅胶色谱法，使用30％至95％ EtOAc/己烷纯化，得到呈浅黄色固体的8-羟基-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-羧酸叔丁酯(9.5g，67％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ8.46(d,J＝4.1Hz,1H),7.65(d,J＝8.2Hz,1H),7.31(dd,＝7.7,4.7Hz,1H),5.49(d,J＝4.7Hz,1H),4.78–4.30(m,3H),3.77(dd,J＝13.5,5.5Hz,1H),3.54(d,J＝13.8Hz,1H),1.44(s,9H).ESI-MS m/z计算值250.13174，实验值251.1(M+1)+；保留时间：1.04分钟；LC方法W。
步骤4：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-(5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-8-基氧基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
向玻璃小瓶中添加3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(95mg，0.2273mmol)、叔丁醇钠(103mg，1.072mmol)和8-羟基-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-羧酸叔丁酯(120mg，0.4794mmol)的THF(1mL)溶液。将反应在室温下搅拌2小时。将反应混合物在乙酸乙酯与1M HCl溶液之间分配。将有机物分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发，得到粗3-[[4-[(6-叔丁氧基羰基-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-8-基)氧]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(83mg，58％)ESI-MS m/z计算值631.2101，实验值632.32(M+1)+；保留时间：0.58分钟(LC方法D)。
将产物溶解于4M含HCl的二噁烷(4M的2.1mL，8.400mmol)中并搅拌30分钟。将反应混合物蒸发和粗物质3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-(5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-8-基氧基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(85mg，66％)ESI-MS m/z计算值531.15765，实验值532.32(M+1)+；保留时间：0.38分钟，LC方法D。
步骤5：12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮
向圆底烧瓶中添加于DMF(20mL)中的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-(5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-8-基氧基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(85mg，0.1599mmol)。向反应溶液中添加[二甲基氨基(三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]-二甲基铵(六氟化磷离子)(100mg，0.2630mmol)和DIEA(110μL，0.6315mmol)。使反应在室温下搅拌1小时。将反应溶液过滤并在15分钟内使用1％ MeCN/水至70％ MeCN的梯度直接注射到反相HPLC柱上，得到12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(85mg，76％)的纯化的级分ESI-MS m/z计算值513.1471，实验值514.0(M+1)+；保留时间：0.43分钟，LC方法D。
步骤6：12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮，SFC峰1(化合物196)，以及12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮，SFC峰2(化合物195)
将外消旋12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(84mg，0.1636mmol)溶解于1mL的DMSO中并使用AS柱进行制备型手性SFC，分离出两个对映异构体：SFC峰1，12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(19mg，45％)，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.65(s,1H),8.58(dd,J＝4.7,1.6Hz,1H),7.97(d,J＝7.6Hz,1H),7.87(dd,J＝7.9,1.6Hz,1H),7.78-7.64(m,2H),7.44(dd,J＝7.8,4.7Hz,1H),7.26(t,J＝7.6Hz,1H),7.13(d,J＝7.6Hz,2H),6.62-6.33(m,2H),5.30(d,J＝17.3Hz,1H),4.61-4.35(m,1H),4.23-4.04(m,2H),2.28-1.83(m,6H).ESI-MS m/z计算值513.1471，实验值514.1(M+1)+；保留时间：1.08分钟(LC方法A)；以及峰2，12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(20mg，47％)。ESI-MS m/z计算值513.1471，实验值514.1(M+1)+；保留时间：1.08分钟，LC方法A。
实例96：化合物197的制备
步骤1：4-甲基吡啶-3-羧酸乙酯
将4-甲基吡啶-3-羧酸(30g，218.76mmol)悬浮于乙醇(90mL)中并在室温下滴加浓硫酸(64.400g，35mL，656.61mmol)。将溶液加热回流4小时，然后冷却至室温并倒入冰水中。将溶液用NH3(水溶液)碱化至pH 9，用乙醚(2×100mL)萃取，用硫酸钠干燥并在减压下浓缩，得到4-甲基吡啶-3-羧酸乙酯(25g，69％)；1H NMR(300MHz,CDCl3)ppm 1.40(t,J＝7.0Hz,3H),2.61(s,3H),4.38(q,J＝7.0Hz,2H),7.16(d,J＝4.7Hz,1H),8.53(d,J＝5.3Hz,1H),9.05(s,1H).ESI-MS m/z计算值165.079，实验值166.2(M+1)++；保留时间：1.19分钟，LC方法C。
步骤2：4-甲基-1-氧代-吡啶-1-鎓-3-羧酸乙酯
在搅拌下将3-氯过苯甲酸(95g，423.90mmol)添加到4-甲基吡啶-3-羧酸乙酯(35g，211.88mmol)的冷却的(冰水浴)溶液中并将混合物在室温下搅拌过夜。添加氯仿(150mL)和碳酸钾(118g，853.80mmol)并继续搅拌10分钟。将混合物过滤并将滤液用无水硫酸钠干燥，过滤并将溶剂在真空中去除，得到呈无色油的4-甲基-1-氧代-吡啶-1-鎓-3-羧酸乙酯(31g，81％)；1H NMR(300MHz,CDCl3)ppm 1.38(t,J＝7.2Hz,3H),2.59(s,3H),4.37(q,J＝7.0Hz,2H),7.15(d,J＝6.5Hz,1H),8.17(dd,J＝6.6,1.9Hz,1H),8.72(d,J＝1.8Hz,1H)；ESI-MS m/z计算值181.0739，实验值182.2(M+1)+；保留时间：1.18分钟，LC方法C。
步骤3：4-(氯甲基)吡啶-3-羧酸乙酯
将对甲苯磺酰氯(35g，183.59mmol)添加到4-甲基-1-氧化-吡啶-1-鎓-3-羧酸乙酯(15g，82.786mmol)于二噁烷(150mL)中的溶液中，将混合物在回流下搅拌1.5小时并且然后用盐酸酸化至pH 1。将水层用乙醚(2×75mL)洗涤并将有机萃取物丢弃。将饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)和100g的碳酸氢钠添加到水层中以调节至pH 8。然后将水相用乙醚(3×75mL)萃取并将合并的有机萃取物(硫酸钠)干燥，过滤并将溶剂蒸发。在柱色谱法(120；二氯甲烷/乙酸乙酯＝3:2)之后，得到呈黄色油的4-(氯甲基)吡啶-3-羧酸乙酯(7.7g，47％)；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.42(t,J＝7.0Hz,3H),4.42(d,J＝7.0Hz,2H),5.04(s,2H),7.59(d,J＝5.0Hz,1H),8.74(d,J＝5.0Hz,1H),9.15(s,1H).ESI-MS m/z计算值199.04，实验值200.1(M+1)++；保留时间：1.68分钟，LC方法C。
步骤4：2-(苄氨基)乙酸叔丁酯
将2-溴乙酸叔丁酯(30mL，194.98mmol)滴加到苄胺(85mL，770.42mmol)于甲苯(150mL)中的溶液中，然后将混合物在72℃下加热1小时。将混合物倒入1N氢氧化钠溶液(200mL)中并用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。将有机相合并，用水(200mL)和盐水(200mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法在330g柱上纯化，用0％至40％的乙酸乙酯/己烷洗脱，得到2-(苄氨基)乙酸叔丁酯(39.9g，90％)。ESI-MSm/z计算值221.14，实验值222.6(M+1)+；保留时间：1.93分钟，LC方法T。
步骤5：4-[[苄基-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙基)氨基]甲基]吡啶-3-羧酸乙酯
将2-(苄氨基)乙酸叔丁酯(3g，13.557mmol)、4-(氯甲基)吡啶-3-羧酸乙酯(3g，15.028mmol)、DIEA(5.9360g，8mL,45.929mmol)和乙腈(60mL)在0℃下混合在一起。将所得混合物回流48小时。一旦反应完成，将溶剂在真空下浓缩并将残余物溶解于DCM(100mL)中。将有机相通过饱和碳酸氢钠(100mL)洗涤。将水相通过DCM(100mL×2)萃取。将有机相收集，用硫酸钠干燥并将溶剂在真空下去除，得到残余物，将所述残余物通过快速色谱法(120g，二氯甲烷/乙酸乙酯：0至20％)纯化，得到呈褐色油的纯4-[[苄基-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙基)氨基]甲基]吡啶-3-羧酸乙酯(4g，69％)；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.40(t,J＝7.0Hz,3H),1.46(s,9H),3.19(s,2H),3.78(s,2H),4.21(s,2H),4.37(q,J＝7.1Hz,2H),7.20-7.36(m,5H),7.76(d,J＝5.3Hz,1H),8.65(d,J＝5.0Hz,1H),8.98(s,1H).ESI-MS m/z计算值384.2049，实验值385.3(M+1)++；保留时间：2.23分钟，LC方法C。
步骤6：2-苄基-4-氧代-1,3-二氢-2,6-萘啶-3-羧酸叔丁酯
在-78℃下，在5分钟内将于四氢呋喃(57mL)中的叔丁醇钾(7g，7.7605mL，62.382mmol)滴加到4-[[苄基-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙基)氨基]甲基]吡啶-3-羧酸乙酯(7.8g，20.288mmol)于四氢呋喃(60mL)中的溶液中。将混合物在-78℃下搅拌3小时。添加饱和碳酸氢钠溶液(200mL)并将混合物用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将有机相合并，用盐水(200mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈褐色固体的2-苄基-4-氧代-1,3-二氢-2,6-萘啶-3-羧酸叔丁酯(6.6g，96％)；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.63(s,9H),3.67(s,2H),3.84(s,2H),6.98(d,J＝5.0Hz,1H),7.27-7.42(m,5H),8.59(d,J＝5.0Hz,1H),8.91(s,1H),11.70(s,1H).ESI-MS m/z计算值338.163，实验值339.2(M+1)+；保留时间：2.09分钟，LC方法C。
步骤7：2-苄基-1,3-二氢-2,6-萘啶-4-酮
在0℃下，将三氟乙酸(66mL)缓慢添加到2-苄基-4-氧代-1,3-二氢-2,6-萘啶-3-羧酸叔丁酯(6.6g，19.504mmol)于二氯甲烷(66mL)中的溶液中。将混合物在室温下搅拌4小时，然后倒入饱和碳酸氢钠溶液(300mL)中，并且然后添加碳酸氢钠(100g)。将水混合物用二氯甲烷(2×150mL)萃取。将有机相合并，用无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法在80g柱上纯化，用0％至70％的乙酸乙酯/庚烷洗脱，得到呈黄色固体的2-苄基-1,3-二氢-2,6-萘啶-4-酮(1.95g，42％)；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.43(d,J＝0.9Hz,2H),3.76(s,2H),3.78(s,2H),7.14(d,J＝5.0Hz,1H),7.28-7.41(m,5H),8.66(d,J＝5.3Hz,1H),9.18(s,1H).ESI-MS m/z计算值238.1106，实验值239.2(M+1)++；保留时间：1.42分钟，LC方法C。
步骤8：2-苄基-3,4-二氢-1H-2,6-萘啶-4-醇
在0℃下，将硼氢化钠(930mg，24.582mmol)添加到2-苄基-1,3-二氢-2,6-萘啶-4-酮(1.95g，8.1835mmol)于甲醇(39mL)中的溶液中。将混合物在0℃下搅拌2小时。添加丙酮并将反应在减压下浓缩。将残余物用乙酸乙酯(50mL)和饱和碳酸氢钠溶液(75mL)溶解。将相分离，并将水相用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将有机相合并，用盐水(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈褐色油的2-苄基-3,4-二氢-1H-2,6-萘啶-4-醇(1.8g，92％)；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ2.61-2.73(m,1H),3.06-3.18(m,1H),3.38(d,J＝16.4Hz,1H),3.70-3.87(m,3H),4.69(br.s.,1H),6.93(d,J＝5.0Hz,1H),7.28-7.44(m,5H),8.39(d,J＝5.3Hz,1H),8.64(s,1H).ESI-MS m/z计算值240.1263，实验值241.2(M+1)+；保留时间：0.5分钟，LC方法C。
步骤9：1,2,3,4-四氢-2,6-萘啶-4-醇
将钯/炭(800mg，10％w/w，0.7517mmol)添加到2-苄基-3,4-二氢-1H-2,6-萘啶-4-醇(1.8g，7.4906mmol)和盐酸(10％w/v的16mL，43.883mmol)于乙醇(54mL)中的溶液中。将混合物置于氢气气氛下并搅拌3小时。将氢气去除并将混合物在硅藻土上过滤并将滤液在减压下浓缩，得到呈浅黄色固体的1,2,3,4-四氢-2,6-萘啶-4-醇(盐酸盐)(1.5g，97％)；1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ3.09-3.66(m,2H),4.20-4.82(m,2H),5.14(br.s.,1H),7.93(d,J＝5.3Hz,1H),8.82(d,J＝5.0Hz,1H),9.00(s,1H),9.97(br.s.,1H),10.72(br.s.,1H)..ESI-MS m/z计算值150.0793，实验值151.2(M+1)++；保留时间：0.26分钟，LC方法C。
步骤10：12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,19,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3(26),4,6,10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(化合物197)
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(113mg，0.2704mmol)和1,2,3,4-四氢-2,6-萘啶-4-醇(盐酸盐)(54mg，0.2893mmol)合并，并溶解于四氢呋喃(1mL)中。添加叔丁醇钠(105mg，1.093mmol)。使反应混合物在50℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，过滤并通过反相制备型色谱法使用C18柱和含有5mM盐酸的10至60％乙腈/水的15分钟梯度洗脱剂纯化，得到3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-(1,2,3,4-四氢-2,6-萘啶-4-基氧基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(12.5mg，8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.16(s,1H),10.51(s,1H),9.46(s,1H),8.91(s,1H),8.70(s,1H),8.47(s,1H),8.16(s,2H),7.64(d,J＝31.6Hz,2H),7.27(s,1H),7.11(s,2H),6.28(d,J＝17.2Hz,2H),4.48(t,J＝19.2Hz,2H),4.08(s,1H),2.02(s,6H).ESI-MS m/z计算值531.15765，实验值532.0(M+1)+；保留时间：0.75分钟(LC方法A)。
将3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-(1,2,3,4-四氢-2,6-萘啶-4-基氧基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(12.5mg，8％)、二异丙基乙胺(50μL，0.2871mmol)、HATU(105mg，0.2761mmol)和DMF(1mL)在室温下搅拌30分钟。将粗过滤并通过反相制备型色谱法使用C18柱和含有5mM盐酸的1至50％乙腈/水的15分钟梯度洗脱剂纯化，得到12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,19,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3(26),4,6,10,12,14(25),17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(4.6mg，3％)ESI-MS m/z计算值513.1471，实验值514.0(M+1)+；保留时间：0.92分钟，LC方法A。
实例97：化合物198的制备
步骤1：2-(溴甲基)吡啶-3-羧酸乙酯
在室温下，向2-甲基吡啶-3-羧酸乙酯(25g，151.34mmol)和AIBN(550mg，3.35mmol)于四氯化碳(300mL)和乙酸(8.7mL)中的溶液中添加N-溴代丁二酰亚胺(52g，292.16mmol)。将混合物在油浴中在80℃下搅拌8小时。将溶液冷却并倒入饱和碳酸氢钠(600mL)中并用二氯甲烷(3×400mL)萃取。将有机相用盐水(800mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-50％己烷-乙酸乙酯纯化，得到2-(溴甲基)吡啶-3-羧酸乙酯(40.42g，93％)。ESI-MS m/z计算值243.0，实验值244.3(M+1)+；保留时间：2.43分钟，LC方法T。
步骤2：2-[[苄基-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙基)氨基]甲基]吡啶-3-羧酸乙酯
将2-(苄氨基)乙酸叔丁酯(26.4g，118.82mmol)添加到2-(溴甲基)吡啶-3-羧酸乙酯(28g，108.98mmol)和三乙胺(50mL，358.73mmol)于四氢呋喃(300mL)中的溶液中并将混合物在室温下搅拌过夜。添加水(1500mL)并将其用乙酸乙酯(2×1000mL)萃取。将有机相合并，用盐水(800mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用0％至30％的乙酸乙酯/己烷洗脱，得到呈橙色油的2-[[苄基-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙基)氨基]甲基]吡啶-3-羧酸乙酯(34.55g，70％)。ESI-MS m/z计算值384.20，实验值385.6(M+1)+；保留时间：2.77分钟，LC方法T。
步骤3：7-苄基-5-氧代-6,8-二氢-1,7-萘啶-6-羧酸叔丁酯
在-78℃下，在30分钟内将于四氢呋喃(200mL)中的叔丁醇钾(20g，178.23mmol)滴加到2-[[苄基-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙基)氨基]甲基]吡啶-3-羧酸乙酯(34.55g，76.38mmol)于四氢呋喃(350mL)中的溶液中。将混合物在-78℃下搅拌2小时，并且然后在冰箱中保存过夜。添加饱和碳酸氢钠溶液(900mL)，并且将混合物用乙酸乙酯(3×600mL)萃取。将有机相合并，用盐水(800mL)洗涤，在无水硫酸钠上干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用0％至30％的乙酸乙酯/己烷洗脱，得到7-苄基-5-氧代-6,8-二氢-1,7-萘啶-6-羧酸叔丁酯(19.76g，75％)ESI-MS m/z计算值338.163，实验值339.5(M+1)+；保留时间：2.97分钟，LC方法T。
步骤4：7-苄基-6,8-二氢-1,7-萘啶-5-酮
在0℃下，将三氟乙酸(150mL)缓慢添加到7-苄基-5-氧代-6,8-二氢-1,7-萘啶-6-羧酸叔丁酯(19.26g，55.78mmol)于二氯甲烷(80mL)中的溶液中。将混合物在室温下搅拌3小时。该TFA反应溶液通过2N氢氧化钠碱化至PH为约14。将水相用二氯甲烷(3×200mL)萃取。将有机相用盐水(500mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。7-苄基-6,8-二氢-1,7-萘啶-5-酮的粗产物(14.2g，78％)ESI-MS m/z计算值238.1106，实验值239.3(M+1)+；保留时间：1.87分钟，LC方法S。
步骤5：7-苄基-6,8-二氢-5H-1,7-萘啶-5-醇
在0℃下，将硼氢化钠(3.5g，90.66mmol)添加到7-苄基-6,8-二氢-1,7-萘啶-5-酮(14.2g，43.50mmol)于甲醇(100mL)中的溶液中。将混合物在室温下搅拌30分钟。添加丙酮并减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用0％至50％的7-苄基-6,8-二氢-5H-1,7-萘啶-5-醇(5.78g纯度85％+7.65g纯度95％，99％)洗脱。ESI-MS m/z计算值240.13，实验值241.4(M+1)+；保留时间：1.39分钟，LC方法S。
步骤6：5,6,7,8-四氢-1,7-萘啶-5-醇
向7-苄基-6,8-二氢-5H-1,7-萘啶-5-醇(1.18g，4.52mmol)于甲醇(30mL)和乙酸(1.5mL)中的溶液中添加10％钯/炭(400mg)。将混合物在50psi的氢气气氛下搅拌3小时。将反应混合物通过硅藻土垫过滤。将滤液浓缩，得到5,6,7,8-四氢-1,7-萘啶-5-醇(735mg，103％)ESI-MS m/z计算值150.0793，实验值151.3(M+1)+；保留时间：0.61分钟，LC方法S。
步骤7：5-羟基-6,8-二氢-5H-1,7-萘啶-7-羧酸叔丁酯
在0℃下，向5,6,7,8-四氢-1,7-萘啶-5-醇(700mg，4.44mmol)于四氢呋喃(20mL)和三乙胺(3.5mL，25.11mmol)中的溶液中添加叔丁氧羰基叔丁基碳酸酯(1.5g，6.87mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2.5小时。将反应混合物用乙酸乙酯(2×100mL)和饱和碳酸氢钠(150mL)处理。在处理之后，将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-10％甲醇/二氯甲烷纯化，得到5-羟基-6,8-二氢-5H-1,7-萘啶-7-羧酸叔丁酯(1.12g，92％)ESI-MS m/z计算值250.1317，实验值251.1(M+1)+；保留时间：1.97分钟，LC方法S。
步骤8：3-[[4-[(7-叔丁氧基羰基-6,8-二氢-5H-1,7-萘啶-5-基)氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
向3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(125mg，0.2991mmol)和5-羟基-6,8-二氢-5H-1,7-萘啶-7-羧酸叔丁酯(65mg，0.2597mmol)于NMP(0.75mL)中的溶液中添加NaH(60％w/w的44mg，1.100mmol)并将反应混合物在50℃下搅拌16小时，然后在100℃下搅拌10分钟。将反应混合物冷却，倒入水中，将pH用1N HCl调至6并且然后用EtOAc(2x)萃取。将有机物合并，经硫酸钠干燥并蒸发至干燥。通过柱色谱法(16g硅；0-50％ EtOAc/己烷)的纯化得到呈红色玻璃的3-[[4-[(7-叔丁氧基羰基-6,8-二氢-5H-1,7-萘啶-5-基)氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(60mg，37％)。ESI-MS m/z计算值631.2101，实验值632.4(M+1)+；保留时间：0.57分钟，LC方法D。
步骤9：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-(5,6,7,8-四氢-1,7-萘啶-5-基氧基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
向3-[[4-[(7-叔丁氧基羰基-6,8-二氢-5H-1,7-萘啶-5-基)氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(60mg，0.09498mmol)于MeOH(1mL)中的溶液中添加HCl(二噁烷中的4M)(4M的1mL，4.000mmol)并将反应混合物在室温下搅拌1小时，然后蒸发至干燥，得到呈白色固体的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-(5,6,7,8-四氢-1,7-萘啶-5-基氧基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(34mg，63％)。ESI-MS m/z计算值531.15765，实验值532.3(M+1)+；保留时间：0.38分钟，LC方法D。
步骤10：12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,21,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(化合物198)
向3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-(5,6,7,8-四氢-1,7-萘啶-5-基氧基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(37.6mg，0.06619mmol)于NMP(0.5mL)中的溶液中添加HATU(35mg，0.09205mmol)，然后添加DiPEA(47μL，0.2698mmol)并将反应混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物用MeOH稀释，过滤并通过HPLC(1-99％ ACN/水(HCl改性剂))纯化，得到呈类白色固体的12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,21,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(15mg，44％)。ESI-MS m/z计算值513.1471，实验值514.2(M+1)+；保留时间：1.19分钟，LC方法A。
实例98：化合物199和化合物200的制备
步骤1：8-羟基-1-甲基-2,3,5,7,8,8a-六氢-1,6-萘啶-6-羧酸叔丁酯，以及8-羟基-1-甲基-2,4a,5,7,8,8a-六氢-1,6-萘啶-6-羧酸叔丁酯
将8-羟基-7,8-二氢-5H-1,6-萘啶-6-羧酸叔丁酯(碘甲烷(1))(5.3g，13.512mmol)溶解于MeOH(50mL)中并将混合物冷却至-20℃。在20分钟内以小部分周期性地添加硼氢化钠(1.5336g，1.6229mL，40.536mmol)。将混合物在该温度下搅拌1小时，然后添加饱和碳酸氢钠(20mL)。将混合物在DCM(100mL)与水(60mL)之间分配。分离各层。将水层再萃取一次(50mL DCM)。将合并的有机物用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。分离出呈异构体的混合物的8-羟基-1-甲基-2,3,5,7,8,8a-六氢-1,6-萘啶-6-羧酸叔丁酯(3.5g，96.52％)。ESI-MS m/z计算值268.1787，实验值269.6(M+1)+；保留时间：1.93分钟，LC方法W。
步骤2：8-羟基-1-甲基-2,3,4,4a,5,7,8,8a-八氢-1,6-萘啶-6-羧酸叔丁酯
将8-羟基-1-甲基-2,3,5,7,8,8a-六氢-1,6-萘啶-6-羧酸叔丁酯(3.5g，12.390mmol)溶解于乙酸乙酯和MeOH(40ml/10mL)的溶剂混合物中。将氧化铂水合物(55mg，0.2199mmol)添加到小瓶中并与0.5mL水混合并通过移液管转移到反应烧瓶中。将混合物抽真空并用氮气冲洗(3次)。在放置氢气气球之前，将所述混合物再抽一次真空并将混合物在该压力下搅拌15小时(在反应过程期间，将气球再填充两次)。将混合物抽真空并用氮气冲洗并通过硅藻土垫过滤，用MeOH(3×30mL)洗涤。浓缩滤液。将残余物溶解于乙腈/水(20mL/20mL)中，冻干，得到呈浅棕色固体的8-羟基-1-甲基-2,3,4,4a,5,7,8,8a-八氢-1,6-萘啶-6-羧酸叔丁酯(3.2g，79％)。ESI-MS m/z计算值270.1943，实验值271.5(M+1)+；保留时间：1.27分钟。1H NMR(250MHz,DMSO(d6))δ5.02(s,1H),3.76(s,1H),3.55–3.05(m,6H),2.91(s,1H),2.36(s,3H),2.22(d,J＝12.7Hz,1H),1.66(s,3H),1.39(d,J＝1.1Hz,13H).LC方法W。
步骤3：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(1-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-2H-1,6-萘啶-8-基)氧]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
向玻璃小瓶中添加3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(95mg，0.2273mmol)、叔丁醇钠(103mg，1.072mmol)和8-羟基-1-甲基-2,3,4,4a,5,7,8,8a-八氢-1,6-萘啶-6-羧酸叔丁酯(133mg，0.4919mmol)的THF溶液。将反应在室温下搅拌2小时。将反应混合物在乙酸乙酯与1M HCl溶液之间分配。将有机物分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发，得到3-[[4-[(6-叔丁氧基羰基-1-甲基-2,3,4,4a,5,7,8,8a-八氢-1,6-萘啶-8-基)氧]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(133mg，90％)。ESI-MS m/z计算值651.27264，实验值652.38(M+1)+；保留时间：0.5分钟(LC方法D)。
将产物溶解于4M含HCl的二噁烷(4M的2.1mL，8.400mmol)中并搅拌30分钟。将反应混合物蒸发和粗物质3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(1-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-2H-1,6-萘啶-8-基)氧]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(136mg，102％)ESI-MS m/z计算值551.2202，实验值552.38(M+1)+；保留时间：0.32分钟，LC方法D。
步骤4：12-(2,6-二甲基苯基)-18-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13-六烯-2,8,8-三酮
向圆底烧瓶中添加3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(1-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-2H-1,6-萘啶-8-基)氧]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(二盐酸盐)(136mg，0.2177mmol)。向反应溶液中添加[二甲基氨基(三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]-二甲基铵(六氟化磷离子)(100mg，0.2630mmol)和DIEA(110μL，0.6315mmol)。使反应在室温下搅拌1小时。将反应溶液过滤并在15分钟内使用1％ MeCN/水至70％ MeCN的梯度直接注射到反相反相HPLC柱上，得到12-(2,6-二甲基苯基)-18-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13-六烯-2,8,8-三酮(22mg，19％)的纯化的级分ESI-MS m/z计算值533.20966，实验值534.4(M+1)+；保留时间：2.25分钟(LC方法A)。
步骤5：12-(2,6-二甲基苯基)-18-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13-六烯-2,8,8-三酮，SFC峰1(化合物199)，以及12-(2,6-二甲基苯基)-18-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13-六烯-2,8,8-三酮，SFC峰2(化合物200)
将12-(2,6-二甲基苯基)-18-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13-六烯-2,8,8-三酮(34mg，0.06371mmol)溶解于1mL的DMSO中并通过手性制备型SFC使用AS柱纯化，得到分离的两个对映异构体：SFC峰1，12-(2,6-二甲基苯基)-18-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13-六烯-2,8,8-三酮(11mg，64％)1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.17(s,1H),8.49(s,1H),7.93(d,J＝7.6Hz,1H),7.70(dt,J＝15.1,7.5Hz,2H),7.27(t,J＝7.6Hz,1H),7.14(d,J＝7.6Hz,2H),6.62(s,1H),5.47(dd,J＝9.8,5.7Hz,1H),4.23(dd,J＝13.6,4.5Hz,1H),4.07(d,J＝9.6Hz,1H),3.83-3.67(m,3H),3.20(d,J＝11.3Hz,1H),2.98(d,J＝4.3Hz,3H),2.77-2.63(m,1H),2.54(s,4H),2.07(s,7H),1.83(d,J＝13.1Hz,1H),1.71(d,J＝13.5Hz,2H).ESI-MSm/z计算值533.20966，实验值534.34(M+1)+；保留时间：0.83分钟(LC方法A)；以及SFC峰2，12-(2,6-二甲基苯基)-18-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13-六烯-2,8,8-三酮(13mg，76％)，ESI-MS m/z计算值533.20966，实验值534.37(M+1)+；保留时间：0.83分钟，LC方法A。
实例99：化合物201的制备
步骤1：5-羟基-1-甲基-2,3,4,4a,5,6,8,8a-八氢-1,7-萘啶-7-羧酸叔丁酯，非对映异构体1和2
向5-羟基-6,8-二氢-5H-1,7-萘啶-7-羧酸叔丁酯(3.22g，8.36mmol)于甲醇(35mL)和乙酸乙酯(10mL)中的溶液中添加氧化铂一水合物(70mg，0.31mmol)。将反应在帕尔振荡器中在55psi的氢气下进行2小时，此时将混合物过滤并浓缩。将残余物通过制备型HPLC(柱：Varian C18 10um 5×30cm；流速：60毫升/分钟；流动相A：水+0.1％ TFA；流动相B：乙腈+0.1％TFA；方法：60分钟内0-45％ B)纯化。将合并的级分通过2N氢氧化钠碱化，然后将乙腈去除。将产物用二氯甲烷萃取，将有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到呈黄色凝胶的5-羟基-1-甲基-2,3,4,4a,5,6,8,8a-八氢-1,7-萘啶-7-羧酸叔丁酯的两个异构体：非对映异构体1(再次纯化，502mg)ESI-MS m/z计算值270.19，实验值271.5(M+1)+；保留时间：1.71分钟(LC方法T)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ4.78(d,J＝5.3Hz,1H),4.26-3.84(m,2H),3.74(tt,J＝10.1,5.2Hz,1H),2.72(d,J＝14.5Hz,2H),2.42-2.26(m,1H),2.15(s,3H),1.97(d,J＝18.5Hz,3H),1.76 -1.52(m,1H),1.39(s,10H),1.27-1.09(m,1H)，以及非对映异构体2(1.62g)，ESI-MS m/z计算值270.19，实验值271.5(M+1)+；保留时间：1.74分钟(LC方法T)，1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ5.02(d,J＝6.6Hz,1H),3.53(d,J＝5.5Hz,1H),3.42(s,2H),3.01(s,1H),2.39(s,1H),2.35-2.20(m,4H),2.14(d,J＝5.5Hz,1H),2.00-1.70(m,2H),1.66-1.43(m,2H),1.39(s,11H).
步骤2：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(1-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-2H-1,7-萘啶-5-基)氧]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸，非对映异构体1
向圆底烧瓶中添加3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(110mg，0.2632mmol)、5-羟基-1-甲基-2,3,4,4a,5,6,8,8a-八氢-1,7-萘啶-7-羧酸叔丁酯(三氟乙酸盐)(非对映异构体1，150mg，0.3902mmol)、无水THF(2mL)和叔丁醇钠(100mg，1.041mmol)。使反应溶液在23℃下搅拌1小时。向反应溶液中添加NaH(30％w/w的60mg，0.7501mmol)并使反应溶液在50℃下搅拌过夜。向反应溶液中添加HCl(4M的3mL，12.00mmol)并将溶液在室温下搅拌1小时。将反应溶液过滤并通过反相HPLC在15分钟内使用1％ MeCN/水至70％ MeCN的梯度纯化，得到3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(1-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-2H-1,7-萘啶-5-基)氧]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸，非对映异构体1(45mg，31％)的纯化的级分ESI-MS m/z计算值551.2202，实验值552.38(M+1)+；保留时间：0.3分钟，LC方法D。
步骤3：12-(2,6-二甲基苯基)-21-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,21,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体1(化合物201)
向氮气喷射的圆底烧瓶中添加3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(1-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-2H-1,7-萘啶-5-基)氧]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸，非对映异构体1(34mg，0.06163mmol)、HATU(28mg，0.07364mmol)、DMF(3mL)和DIEA(24mg，0.1857mmol)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将反应混合物在真空中浓缩并将粗残余物通过反相HPLC在15分钟内使用1％ MeCN/水至99％ MeCN的梯度纯化，得到12-(2,6-二甲基苯基)-21-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,21,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体1(18mg，54％)ESI-MS m/z计算值533.20966，实验值534.34(M+1)+；保留时间：0.97分钟，LC方法A。
实例100：化合物202的制备
步骤1：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(1-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-2H-1,7-萘啶-5-基)氧]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸，非对映异构体2
向含有5-羟基-1-甲基-2,3,4,4a,5,6,8,8a-八氢-1,7-萘啶-7-羧酸叔丁酯(三氟乙酸盐)、非对映异构体2(160mg，0.4162mmol)的玻璃小瓶中添加3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(145mg，0.3470mmol)、叔丁醇钠(83mg，0.8637mmol)和无水THF(2mL)。使反应在室温下搅拌1小时。LCMS发现了产物M+H＝552加上SM的1:1混合物，并向反应溶液中添加NaH(28mg的60％w/w，0.7001mmol)，并将混合物在室温下再搅拌1小时，然后在50℃下搅拌1小时。将反应溶液通过添加1mL MeOH淬灭。将反应混合物过滤并通过反相HPLC在15分钟内使用1％ MeCN/水至70％ MeCN的梯度纯化，得到3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(1-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-2H-1,7-萘啶-5-基)氧]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸，非对映异构体2(60mg，31％)ESI-MS m/z计算值551.2202，实验值552.34(M+1)+；保留时间：0.9分钟，LC方法A。
步骤2：12-(2,6-二甲基苯基)-21-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,21,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体2(化合物202)
向氮气喷射的圆底烧瓶中添加3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(1-甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢-2H-1,7-萘啶-5-基)氧]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸，非对映异构体2(60mg，0.1088mmol)、HATU(51mg，0.1341mmol)、DMF(4mL)和DIEA(60μL，0.3445mmol)。将反应溶液在室温下搅拌40分钟。将反应混合物在真空中浓缩并将粗残余物通过反相HPLC在15分钟内使用1％MeCN/水至99％MeCN的梯度纯化，得到12-(2,6-二甲基苯基)-21-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,21,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13-六烯-2,8,8-三酮(6mg，10％)ESI-MS m/z计算值533.20966，实验值534.34(M+1)+；保留时间：0.67分钟，LC方法A。
实例101：化合物203和化合物204的制备
步骤1：12-(2,6-二甲基苯基)-21-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,21,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体3(化合物203)，以及12-(2,6-二甲基苯基)-21-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,21,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体4(化合物204)
将12-(2,6-二甲基苯基)-21-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,21,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体1，(17mg，0.03186mmol)溶解于DMF(1.5mL)中并通过手性制备型SFC使用AS柱纯化，得到两个异构体：12-(2,6-二甲基苯基)-21-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,21,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体3(4.3mg，50％)ESI-MS m/z计算值533.20966，实验值534.37(M+1)+；保留时间：0.98分钟(LC方法A)；以及12-(2,6-二甲基苯基)-21-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,21,25-五氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3,5,7(26),10(25),11,13-六烯-2,8,8-三酮，非对映异构体4(4.7mg，55％)，ESI-MS m/z计算值533.20966，实验值534.37(M+1)+；保留时间：0.98分钟，LC方法A。
实例102：(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-5-{螺[3.5]壬烷-2-基}-8-{2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基}-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-9,15,15-三酮的制备
步骤1：3-[[4-[(3R,4R)-4-氨基-1-叔丁氧基羰基-吡咯烷-3-基]氧-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(10.6g，25.37mmol)、(3R,4R)-3-氨基-4-羟基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(5.2g，25.71mmol)和叔丁醇钠(7.3g，75.96mmol)于THF(0.13L)中的溶液搅拌18小时。将反应用1M柠檬酸酸化，用水稀释，并用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并在真空下蒸发，产生棕黄色油。将油与乙醚一起搅拌，得到无色固体。将固体过滤，用乙醚洗涤并在真空下干燥，得到3-[[4-[(3R,4R)-4-氨基-1-叔丁氧基羰基-吡咯烷-3-基]氧-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(15.2g，103％)ESI-MS m/z计算值583.2101，实验值584.3(M+1)+；保留时间：0.49分钟呈无色固体，LC方法D。
步骤2：3-[[4-[(3R,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-[2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基氨基]吡咯烷-3-基]氧-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
将3-[[4-[(3R,4R)-4-氨基-1-叔丁氧基羰基-吡咯烷-3-基]氧-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(291.8mg，0.5mmol)、2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙醛(大约83.66mg，0.5500mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(大约211.9mg，1.000mmol)于二氯甲烷(2.500mL)中的溶液搅拌18小时。再次添加更多2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙醛(大约83.66mg，0.5500mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(大约211.9mg，1.000mmol)，并将反应搅拌22小时。将溶剂蒸发，并且将残余物用水稀释，用1M柠檬酸酸化并用乙酸乙酯萃取。将残余物通过硅胶柱色谱法用0-8％甲醇/二氯甲烷纯化，得到3-[[4-[(3R,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-[2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基氨基]吡咯烷-3-基]氧-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(0.19g，53％)。ESI-MS m/z计算值719.2601，实验值720.3(M+1)+；保留时间：0.57分钟；LC方法D。
步骤3：(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-9,15,15-三氧代-8-{2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基}-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-5-羧酸叔丁酯
将3-[[4-[(3R,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-[2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基氨基]吡咯烷-3-基]氧-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(0.19g，0.2640mmol)、[[(E)-(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代-亚乙基)氨基]氧-四氢吡喃-4-基-亚甲基]-二甲基-铵(六氟化磷离子)(0.17g，0.3979mmol)和DIEA(0.14mL，0.8038mmol)于DMF(25mL)中的溶液搅拌三天。将反应用1M柠檬酸酸化，用水稀释，并用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并在真空下蒸发。将残余物通过硅胶柱色谱法用0-8％甲醇/二氯甲烷纯化，得到呈橙色固体的(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-9,15,15-三氧代-8-{2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基}-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-5-羧酸叔丁酯(0.17g，92％)。ESI-MSm/z计算值701.2495，实验值702.3(M+1)+；保留时间：0.75分钟，LC方法D。
步骤4：(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-8-{2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基}-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-9,15,15-三酮
将于HCl(4M的4mL，16.00mmol)(于二噁烷中)中的(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-9,15,15-三氧代-8-{2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基}-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-5-羧酸叔丁酯(0.17g，0.2422mmol)搅拌30分钟，并将溶剂在真空下去除。将固体用乙醚研磨并在真空下干燥，得到呈无色固体的(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-8-{2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基}-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-9,15,15-三酮(盐酸盐)(0.14g，91％)。ESI-MS m/z计算值601.1971，实验值602.3(M+1)+；保留时间：0.4分钟，LC方法D。
步骤5：(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-5-{螺[3.5]壬烷-2-基}-8-{2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基}-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-9,15,15-三酮
将(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-8-{2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基}-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-9,15,15-三酮(盐酸盐)(40mg，0.06269mmol)、螺[3.5]壬烷-2-酮(18mg，0.1302mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(41mg，0.1935mmol)于二氯甲烷(0.3mL)中的溶液搅拌四小时。添加更多螺[3.5]壬烷-2-酮(18mg，0.1302mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(41mg，0.1935mmol)，并将反应搅拌四天。将反应与甲醇一起搅拌，并将溶剂在真空下去除。将残余物通过反相HPLC-MS(1％-99％乙腈/水(5mM HCl))纯化，得到呈浅黄色固体的(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-5-{螺[3.5]壬烷-2-基}-8-{2-[1-(三氟甲基)环丙基]乙基}-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-9,15,15-三酮(盐酸盐)(17.8mg，37％)。ESI-MS m/z计算值723.30664，实验值724.5(M+1)+；保留时间：1.61分钟，LC方法A。
实例103：化合物205的制备
步骤1：2-硝基-N-[3-[(2-硝基苯基)磺酰氨基]丙基]苯磺酰胺
将丙烷-1,3-二胺(2mL，23.43mmol)添加到碳酸钾(6.5g，47.0mmol)于水(20mL)的溶液中。在1小时的时间段内将2-硝基-苯磺酰氯(10.7g，46.8mmol)于THF(40mL)中的溶液添加到溶液中。将反应在室温下搅拌2小时。将THF去除并将残余物倒入冰水中，过滤，用冷EtOH洗涤并在真空下干燥，得到呈白色固体的4-甲基-N-[3-(对甲苯磺酰氨基)丙基]苯磺酰胺(9.3g，85％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ8.24-8.09(m,2H),7.94-7.68(m,6H),5.60(t,J＝6.5Hz,2H),3.24(q,J＝6.4Hz,4H),1.79(q,J＝6.2Hz,2H).ESI-MS m/z计算值444.0，实验值445.4(M+1)+；保留时间：2.57分钟(LC方法T)。
步骤2：1,5-双[(2-硝基苯基)磺酰基]-1,5-重氮杂环-3-醇
将NaOMe(27mL，MeOH中30％，125mmol)溶液缓慢添加到2-硝基-N-[3-[(2-硝基苯基)磺酰氨基]丙基]苯磺酰胺(18g，38.5mmol)于无水甲醇(500mL)中的溶液中。将溶液加热回流一小时。将溶剂在减压下去除并将残余物溶解于乙醇(700mL)中。在添加1,3-二溴丙-2-醇(6.8ml，60mmol)之后，将系统加热回流14小时。将系统冷却至室温，过滤，得到呈白色固体的[3-羟基-5-(2-硝基苯基)磺酰基-1,5-重氮杂萘-1-基]-(2-硝基噻喃-1-基)甲二酮(15.9g，83％)。ESI-MS m/z计算值500.1，实验值501.4(M+1)+；保留时间：4.54分钟，LC方法S。
步骤3：3-羟基-5-(2-硝基苯基)磺酰基-1,5-重氮烷-1-羧酸叔丁酯
向1,5-双[(2-硝基苯基)磺酰基]-1,5-重氮杂环-3-醇(17g，32.3mmol)、碳酸钾(7.1g，51.4mmol)于DMF(150mL)中的溶液中添加苯硫酚(4.4mL，43mmol)。将系统在室温下搅拌14小时。将反应混合物倒入水(120mL)中并用EtOAc(3×80mL)洗涤。将水相的水在减压下去除。向溶液中添加Boc酸酐(8.5g，38.9mmol)和TEA(8mL，57.4mmol)。将反应在室温下搅拌2小时。将反应用饱和氯化铵水溶液(50mL)淬灭并用EtOAc(3×70mL)萃取。将合并的有机层用水(3×50mL)、盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到不经进一步纯化的呈白色固体的粗3-羟基-5-(2-硝基苯基)磺酰基-1,5-重氮烷-1-羧酸叔丁酯(10g，67％)。ESI-MS m/z计算值415.1，实验值415.8(M+1)+；保留时间：2.8分钟，LC方法T。
步骤4：3-羟基-1,5-重氮烷-1-羧酸叔丁酯
向3-羟基-5-(2-硝基苯基)磺酰基-1,5-重氮烷-1-羧酸叔丁酯(6g，13mmol)、碳酸钾(3.5g，25.3mmol)于DMF(50mL)中的溶液中添加苯硫酚(2mL，19.6mmol)。将系统在室温下搅拌14小时。将反应混合物倒入水(40mL)中并用EtOAc(3×20mL)洗涤。将水相的溶剂在减压下去除。将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-30％甲醇/DCM纯化，得到呈无色油的3-羟基-1,5-重氮烷-1-羧酸叔丁酯(1.3g，41％)。ESI-MS m/z计算值230.163，实验值231.4(M+1)+；保留时间：1.79分钟，LC方法T。
步骤5：5-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰]-3-羟基-1,5-重氮烷-1-羧酸叔丁酯
在0℃下，向3-[4-氯-6-(2,6-二甲基-苯基)-嘧啶-2-基氨磺酰基]-苯甲酸(1.25g，4.54mmol)和3-羟基-1,5-重氮烷-1-羧酸叔丁酯(1.06g，4.6mmol)于DMF(30mL)和DIEA(8.0mL，45.9mmol)中的溶液中添加HATU(2.33g，6.07mmol)。将反应混合物在冰盐浴下搅拌10分钟。然后将反应用10％柠檬酸水溶液(20mL)淬灭。分离两层。将水层用EtOAc(3×50mL)萃取并且将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-80％己烷-丙酮纯化，得到呈泡沫固体的5-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰]-3-羟基-1,5-重氮烷-1-羧酸叔丁酯(1.25g，46％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.31(s,1H),7.88(s,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,2H),7.24(s,1H),7.10(s,2H),6.27(s,1H),5.74(s,1H),4.45(s,1H),4.06(d,J＝14.0Hz,1H),3.90(d,J＝13.8Hz,1H),3.70-3.41(m,2H),3.17(s,1H),3.03(d,J＝43.8Hz,1H),2.01(s,6H),1.80(q,J＝13.0,12.2Hz,1H),1.71-1.56(m,1H),1.42(d,J＝9.8Hz,9H).ESI-MS m/z计算值593.23083，实验值594.0(M+1)+；保留时间：1.52分钟，LC方法A。
步骤6：12-(2,6-二甲基苯基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,23-五氮杂四环[14.5.1.13,7.110,14]二十四碳-3(24),4,6,10,12,14(23)-六烯-18-羧酸叔丁酯
在0C下向5-[3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰]-3-羟基-1,5-重氮烷-1-羧酸叔丁酯(1.25g，1.88mmol)于无水二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液中分几部分添加于矿物油(700mg，17.5mmol)中的60％悬浮液氢化钠。将反应混合物在室温下搅拌4小时并且然后用10％柠檬酸水溶液(20mL)淬灭。用乙酸乙酯(3×30mL)萃取并且将合并的有机层用盐水(3×50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物通过HPLC纯化，得到呈白色固体的12-(2,6-二甲基苯基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,23-五氮杂四环[14.5.1.13,7.110,14]二十四碳-3(24),4,6,10,12,14(23)-六烯-18-羧酸叔丁酯(760mg，68％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ8.51(s,1H),7.68(s,2H),7.48(s,1H),7.29-7.14(m,1H),7.05(s,2H),6.40(s,1H),6.08(d,J＝10.6Hz,1H),4.76(d,J＝14.0Hz,1H),4.43–4.05(m,2H),3.78(dd,J＝41.7,14.1Hz,1H),3.47-2.68(m,5H),2.41-2.08(m,1H),2.02(s,6H),1.74(dd,J＝27.6,14.7Hz,1H),1.49(s,9H).ESI-MS m/z计算值593.2，实验值594.5(M+1)+；保留时间：2.24分钟，LC方法T。
步骤7：12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,23-五氮杂四环[14.5.1.13,7.110,14]二十四碳-3(24),4,6,10,12,14(23)-六烯-2,8,8-三酮
在0℃下，向12-(2,6-二甲基苯基)-2,8,8-三氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,23-五氮杂四环[14.5.1.13,7.110,14]二十四碳-3(24),4,6,10,12,14(23)-六烯-18-羧酸叔丁酯(8.27g，14.1mmol)于DCM(10mL)中的溶液中添加4M含HCl的二噁烷(30mL)并将反应混合物在室温下搅拌1小时。将溶剂在减压下去除并且然后向白色固体中添加乙醚(15mL)。将其过滤，得到呈白色固体的12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,23-五氮杂四环[14.5.1.13,7.110,14]二十四碳-3(24),4,6,10,12,14(23)-六烯-2,8,8-三酮(盐酸盐)(640mg，99％)。1H NMR(250MHz,DMSO)δ10.33(s,1H),9.28(s,1H),8.80(s,1H),7.91(d,J＝6.8Hz,1H),7.64(d,J＝6.2Hz,2H),7.36-7.22(m,1H),7.13(d,J＝7.5Hz,2H),6.34(s,1H),5.79(d,J＝10.8Hz,1H),4.37(d,J＝12.9Hz,1H),3.91-3.52(m,4H),3.48–3.01(m,4H),2.05(m,8H).ESI-MS m/z计算值493.2，实验值494.5(M+1)+；保留时间：1.31分钟，LC方法T。
步骤8：18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,23-五氮杂四环[14.5.1.13,7.110,14]二十四碳-3,5,7(24),10,12,14(23)-六烯-2,8,8-三酮(化合物205)
将12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8-二酮(100mg，0.2024mmol)(第一非对映异构体)与苯甲醛(42μL，0.4132mmol)、乙酸(60μL，1.055mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(250mg，1.180mmol)在DCE(2mL)中合并，并在室温下搅拌1小时。然后添加并将反应在室温下再搅拌一小时，然后用甲醇稀释，过滤并通过反相HPLC(10-60％ACN/水，带有HCl，15分钟运行)纯化，得到18-苄基-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,23-五氮杂四环[14.5.1.13,7.110,14]二十四碳-3,5,7(24),10,12,14(23)-六烯-2,8,8-三酮(69.3mg，59％)1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.95(s,1H),10.56(s,1H),8.50–8.42(m,1H),7.87(s,1H),7.63(s,4H),7.43(s,2H),7.29(s,1H),7.23–7.17(m,1H),7.10–7.04(m,2H),6.30(s,1H),6.15–5.83(m,1H),5.71(s,1H),5.55(s,1H),4.56(s,2H),4.37(s,1H),4.07(s,1H),2.12–1.86(m,11H).ESI-MS m/z计算值583.22534，实验值584.0(M+1)+；保留时间：1.03分钟(3分钟运行)，LC方法A。
实例104：化合物206的制备
步骤1：18-(3,3-二甲基丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,23-五氮杂四环[14.5.1.13,7.110,14]二十四碳-3,5,7(24),10,12,14(23)-六烯-2,8,8-三酮(化合物206)
将12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8-二酮(盐酸盐)(50mg，0.09424mmol)、3,3-二甲基丁醛(20μL，0.1593mmol)、乙酸(25μL，0.4396mmol)在DCE(1mL)中，并在室温下搅拌1小时。然后添加氰基硼氢化钠(30mg，0.4774mmol)并将反应在室温下再搅拌一小时。重复反应并使用三乙酰氧基硼氢化钠(100mg，0.4718mmol)。然后将反应用甲醇稀释，过滤并通过反相HPLC(10-60％ACN/水，带有HCl，15分钟运行)纯化，得到18-(3,3-二甲基丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,23-五氮杂四环[14.5.1.13,7.110,14]二十四碳-3,5,7(24),10,12,14(23)-六烯-2,8,8-三酮(1.7mg，3％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.07(s,1H),8.60(s,1H),7.94(s,1H),7.69(s,2H),7.27(t,J＝7.7Hz,1H),7.18–7.11(m,2H),6.37(s,1H),5.79(s,1H),4.45–4.36(m,1H),4.07–3.99(m,1H),3.90–3.74(m,3H),3.28–3.15(m,2H),2.20–2.12(m,2H),2.05(s,7H),1.71–1.52(m,3H),0.96(s,8H),0.90(s,2H).ESI-MS m/z计算值577.2723，实验值578.0(M+1)+；保留时间：1.12分钟。LC方法A。
实例105：(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-8-[2-(氧杂-4-基)乙基]-5-{螺[3.4]辛烷-2-基}-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-9,15,15-三酮的制备
步骤1：3-[[4-[(3R,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-(2-四氢吡喃-4-基乙基氨基)吡咯烷-3-基]氧-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
将3-[[4-[(3R,4R)-4-氨基-1-叔丁氧基羰基-吡咯烷-3-基]氧-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(0.12g，0.2056mmol)、2-四氢吡喃-4-基乙醛(52mg，0.4057mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.13g，0.6134mmol)于二氯甲烷(1mL)中的溶液搅拌19小时。将反应用甲醇搅拌，将挥发物在真空下去除，并将残余物通过反相HPLC-MS(1％-99％乙腈/水(5mM HCl))纯化，得到含有产物和去保护产物的混合物。将混合物通过反相HPLC-MS(1％-99％乙腈/水)再纯化，得到呈无色固体的3-[[4-[(3R,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-(2-四氢吡喃-4-基乙基氨基)吡咯烷-3-基]氧-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(16mg，11％)。ESI-MS m/z计算值695.2989，实验值696.4(M+1)+；保留时间：0.52分钟，LC方法D。
步骤2：(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-8-[2-(氧杂-4-基)乙基]-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-9,15,15-三酮
将3-[[4-[(3R,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-(2-四氢吡喃-4-基乙基氨基)吡咯烷-3-基]氧-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(16mg，0.02299mmol)、HATU(14mg，0.03682mmol)和DIEA(13μL，0.07463mmol)于DMF(2mL)中的溶液搅拌17小时。将反应用水稀释，用1M柠檬酸酸化，并用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并在真空下蒸发。将残余物与HCl(4M的3mL，12.00mmol)(于二噁烷中)一起搅拌一小时。将溶剂在真空下蒸发，并且将残余物通过反相HPLC-MS(1％-99％乙腈/水(5mM HCl))纯化，得到呈无色固体的(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-8-[2-(氧杂-4-基)乙基]-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-9,15,15-三酮(盐酸盐)(7mg，50％)。ESI-MS m/z计算值577.2359，实验值578.3(M+1)+；保留时间：0.34分钟，LC方法D。
步骤3：(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-8-[2-(氧杂-4-基)乙基]-5-{螺[3.4]辛烷-2-基}-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-9,15,15-三酮
将(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-8-[2-(氧杂-4-基)乙基]-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-9,15,15-三酮(盐酸盐)(7mg，0.01140mmol)、螺[3.4]辛烷-2-酮(5μL，0.04026mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(10mg，0.04718mmol)于二氯甲烷(0.2mL)中的溶液搅拌两小时。将反应与甲醇一起搅拌，将挥发物在真空下去除，并且将残余物通过反相HPLC-MS(20％-80％乙腈/水(5mM HCl))纯化，得到呈无色固体的(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-8-[2-(氧杂-4-基)乙基]-5-{螺[3.4]辛烷-2-基}-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-9,15,15-三酮(盐酸盐)(7mg，84％)。ESI-MS m/z计算值685.3298，实验值686.5(M+1)+；保留时间：1.33分钟，LC方法A。
实例106：(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-8-乙基-5-{螺[3.4]辛烷-2-基}-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-9,15,15-三酮的制备
步骤1：3-[[4-[(3R,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-(乙氨基)吡咯烷-3-基]氧-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
将3-[[4-[(3R,4R)-4-氨基-1-叔丁氧基羰基-吡咯烷-3-基]氧-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(291.8mg，0.5mmol)、乙醛(大约24.23mg，30.87μL，0.5500mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(大约211.9mg，1.000mmol)于二氯甲烷(2.500mL)中的溶液搅拌18小时。再次添加更多乙醛(大约24.23mg，30.87μL，0.5500mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(大约211.9mg，1.000mmol)，并将反应搅拌22小时。将溶剂蒸发，并且将残余物用水稀释，用1M柠檬酸酸化并用乙酸乙酯萃取。将残余物通过硅胶柱色谱法用0-8％甲醇/二氯甲烷纯化，得到3-[[4-[(3R,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-(乙氨基)吡咯烷-3-基]氧-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(44mg，14％)。ESI-MS m/z计算值611.2414，实验值612.2(M+1)+；保留时间：0.5分钟；LC方法D。
步骤2：(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-8-乙基-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-9,15,15-三酮
将3-[[4-[(3R,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-(乙氨基)吡咯烷-3-基]氧-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(44mg，0.07193mmol)、[[(E)-(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代-亚乙基)氨基]氧-四氢吡喃-4-基-亚甲基]-二甲基-铵(六氟化磷离子)(49mg，0.1147mmol)和DIEA(38μL，0.2182mmol)于DMF(5mL)中的溶液搅拌三天。将反应用1M柠檬酸酸化，用水稀释，并用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并在真空下蒸发。将残余物通过反相HPLC-MS(1％-99％乙腈/水(5mM HCl))纯化，得到含有一些产物的中间体。添加HCl(4M的4mL，16.00mmol)(二噁烷中)，并将反应搅拌三小时。将溶剂在真空下去除，得到呈棕黄色固体的(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-8-乙基-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-9,15,15-三酮(盐酸盐)(13mg，34％)。ESI-MS m/z计算值493.17838，实验值494.2(M+1)+；保留时间：0.3分钟，LC方法D。
步骤3：(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-8-乙基-5-{螺[3.4]辛烷-2-基}-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-9,15,15-三酮
将(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-8-乙基-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-9,15,15-三酮(盐酸盐)(12mg，0.02264mmol)、螺[3.4]辛烷-2-酮(大约8.434mg，0.06792mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(大约19.19mg，0.09056mmol)于二氯甲烷(0.3mL)中的溶液搅拌17小时。将反应与甲醇一起搅拌，并将溶剂蒸发。将残余物通过反相HPLC-MS(1％-99％乙腈/水(5mM HCl))纯化，得到(3R,7R)-19-(2,6-二甲基苯基)-8-乙基-5-{螺[3.4]辛烷-2-基}-2-氧杂-15λ6-硫杂-5,8,16,18,21-五氮杂四环[15.3.1.110,14.03,7]二十二碳-1(20),10(22),11,13,17(21),18-六烯-9,15,15-三酮(盐酸盐)(8.4mg，61％)。ESI-MS m/z计算值601.2723，实验值602.4(M+1)+；保留时间：1.23分钟；LC方法A。
实例108：化合物206的制备
步骤1：18-(3,3-二甲基丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,23-五氮杂四环[14.5.1.13,7.110,14]二十四碳-3,5,7(24),10,12,14(23)-六烯-2,8,8-三酮(化合物206)
将12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8-二酮(盐酸盐)(50mg，0.09424mmol)、3,3-二甲基丁醛(20μL，0.1593mmol)、乙酸(25μL，0.4396mmol)在DCE(1mL)中，并在室温下搅拌1小时。然后添加氰基硼氢化钠(30mg，0.4774mmol)并将反应在室温下再搅拌一小时。重复反应并使用三乙酰氧基硼氢化钠(100mg，0.4718mmol)。然后将反应用甲醇稀释，过滤并通过反相HPLC(10-60％ACN/水，带有HCl，15分钟运行)纯化，得到18-(3,3-二甲基丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,23-五氮杂四环[14.5.1.13,7.110,14]二十四碳-3,5,7(24),10,12,14(23)-六烯-2,8,8-三酮(1.7mg，3％)1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.08(s,1H),8.61(s,1H),7.94(s,1H),7.67(s,2H),7.26(s,1H),7.13(s,2H),6.37(s,1H),5.81(s,1H),4.42(s,1H),4.05(s,1H),3.83(s,2H),3.22(s,1H),2.15(d,J＝6.1Hz,2H),2.05(s,7H),1.68-1.56(m,2H),0.96(s,9H),0.90(s,2H).ESI-MS m/z计算值577.2723，实验值578.0(M+1)+；保留时间：1.12分钟。LC方法A。
实例109：化合物207的制备
步骤1：4-[2-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯
将4-羟基-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯(1.25g，5.014mmol)于DMF(25mL)中的溶液在冰浴中冷却，并添加氢化钠(60％w/w的0.20g，5.000mmol)。在15分钟之后，添加2,4-二氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶(1.26g，4.978mmol)，并使反应缓慢温热至室温并搅拌三天。将反应用水稀释并用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取物用盐水和水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。将残余物通过硅胶柱色谱法用0-20％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈无色固体的4-[2-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯(1.56g，67％)。ESI-MS m/z计算值465.18192，实验值466.3(M+1)+；保留时间：0.86分钟，LC方法D。
步骤2：4-[2-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧-1,2,3,4-四氢异喹啉
将4-[2-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯(2.26g，4.850mmol)于HCl(4M的16mL，64.00mmol)(于二噁烷中)中的溶液搅拌15小时。将溶剂蒸发并将所得固体用乙醚研磨并在真空下干燥，得到呈浅黄色固体的4-[2-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧-1,2,3,4-四氢异喹啉(盐酸盐)(1.76g，90％)。ESI-MS m/z计算值365.1295，实验值366.2(M+1)+；保留时间：0.49分钟，LC方法D。
步骤3：5-[4-[2-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羰基]-1-甲基-吡咯-3-磺酰胺
将1-甲基-4-氨磺酰基-吡咯-2-羧酸(50mg，0.2449mmol)、N,N'-二异丙基碳二亚胺(38μL，0.2427mmol)和碳酸氢钠(大约84.01mg，1.000mmol)于二氯甲烷(1.207mL)中的溶液搅拌两小时，并添加4-[2-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧-1,2,3,4-四氢异喹啉(盐酸盐)(80.46mg，0.2mmol)。将反应搅拌18小时，用水稀释，并用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取物用水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。将残余物通过硅胶柱色谱法用0-4％甲醇/二氯甲烷纯化，得到5-[4-[2-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羰基]-1-甲基-吡咯-3-磺酰胺(87mg，79％)。ESI-MS m/z计算值551.1394，实验值552.3(M+1)+；保留时间：0.73分钟；LC方法D。
步骤4：11-(2,6-二甲基苯基)-4-甲基-14-氧杂-7λ6-硫杂-1,4,8,10,24-五氮杂五环[13.7.1.13,6.19,13.016,21]二十五碳-3(25),5,9(24),10,12,16(21),17,19-辛烷-2,7,7-三酮(化合物207)
将5-[4-[2-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羰基]-1-甲基-吡咯-3-磺酰胺(87mg，0.1576mmol)、乙酸钯(II)(8mg，0.03563mmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基氧杂蒽(19mg，0.03284mmol)和碳酸铯(0.11g，0.3376mmol)于二噁烷(8mL)中的溶液用氮气流脱气并在100℃下搅拌16小时。将反应过滤并使用反相HPLC-MS方法使用由Phenomenex销售的Luna C18(2)柱(75×30mm，5μm粒径)(pn：00C-4252-U0-AX)和15.0分钟内从15-75％流动相B运行的双梯度纯化。流动相A＝H20(5mM HCl)。流动相B＝CH3CN。流速＝50毫升/分钟，并且柱温＝25℃；得到呈无色固体获得的11-(2,6-二甲基苯基)-4-甲基-14-氧杂-7λ6-硫杂-1,4,8,10,24-五氮杂五环[13.7.1.13,6.19,13.016,21]二十五碳-3(25),5,9(24),10,12,16(21),17,19-辛烷-2,7,7-三酮(25mg，30％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.65-7.55(m,2H),7.42-7.28(m,4H),7.28-7.19(m,1H),7.12(d,J＝7.6Hz,2H),6.47(s,1H),6.19(dd,J＝10.6,5.0Hz,1H),5.16(d,J＝17.1Hz,1H),4.39(d,J＝17.1Hz,1H),3.76-3.64(m,4H),3.05(dd,J＝12.8,10.6Hz,1H),2.07(s,7H).ESI-MS m/z计算值515.1627，实验值516.3(M+1)+；保留时间：1.61分钟；(LC方法A)。
实例110：化合物208的制备
步骤1：3-[[4-[2-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-基]甲基]苯磺酰胺
将4-[2-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧-1,2,3,4-四氢异喹啉(盐酸盐)(0.27g，0.6711mmol)、3-(溴甲基)苯磺酰胺(0.17g，0.6797mmol)和碳酸氢钠(0.28g，3.333mmol)于DMF(3mL)中的混合物搅拌19小时。将反应用水稀释并用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取物用盐水和水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。将残余物通过硅胶柱色谱法用0-4％甲醇/二氯甲烷纯化，得到呈无色固体的3-[[4-[2-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-基]甲基]苯磺酰胺(0.29g，81％)。ESI-MS m/z计算值534.14923，实验值535.3(M+1)+；保留时间：0.59分钟，LC方法D。
步骤2：12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3(26),4,6,10,12,14(25),17(22),18,20-壬烯-8,8-二酮(化合物208)
将3-[[4-[2-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-4-基]氧-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-基]甲基]苯磺酰胺(68mg，0.1271mmol)、乙酸钯(II)(6mg，0.02672mmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基氧杂蒽(15mg，0.02592mmol)和碳酸铯(0.12g，0.3683mmol)于二噁烷(7mL)中的溶液用氮气流脱气并在密封的小瓶中在100℃下搅拌15小时。将反应冷却至室温，过滤并浓缩。将残余物使用反相HPLC-MS方法使用由Phenomenex销售的Luna C18(2)柱(75×30mm，5μm粒径)(pn：00C-4252-U0-AX)和15.0分钟内从15-75％流动相B运行的双梯度纯化。流动相A＝H20(5mM HCl)。流动相B＝CH3CN。流速＝50毫升/分钟，并且柱温＝25℃，得到呈无色固体获得的12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,25-四氮杂五环[14.7.1.13,7.110,14.017,22]二十六碳-3(26),4,6,10,12,14(25),17(22),18,20-壬烯-8,8-二酮(盐酸盐)(32mg，47％)。ESI-MS m/z计算值498.17255，实验值499.3(M+1)+；保留时间：1.12分钟，LC方法A。
实例111：化合物209的制备
步骤1：(3R)-3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]吗啉-4-羧酸叔丁酯
向(3R)-4-叔丁氧羰基吗啉-3-羧酸(3.01g，13.02mmol)、N-甲氧基甲胺(盐酸盐)(1.59g，16.30mmol)和1-羟基苯并三唑(2.2g，16.28mmol)于DMF(46mL)中的溶液中添加3-(乙基亚氨基亚甲基氨基)-N,N-二甲基-丙-1-胺(盐酸盐)(3.3g，17.21mmol)，然后添加4-甲基吗啉(5.75mL，52.30mmol)并将反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物倒入水中，将pH用1N HCl调节至4-5并用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机相用0.1N HCl(2x)、饱和碳酸钠水溶液、水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发至干燥。通过柱色谱法(120g硅；0至50％EtOAc/己烷)纯化，得到呈白色固体的(3R)-3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]吗啉-4-羧酸叔丁酯(2.5g，70％)。ESI-MS m/z计算值274.15286，实验值275.0(M+1)+；保留时间：0.45分钟，LC方法D。
步骤2：(3R)-3-(1-羟基-2-苯基-乙基)吗啉-4-羧酸叔丁酯
在0℃下，向(3R)-3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]吗啉-4-羧酸叔丁酯(270mg，0.9843mmol)于THF(3mL)中的溶液中滴加苄基(氯)镁(THF中的2M)(2M的550μL，1.100mmol)，将冷却浴去除并将反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物用冰淬灭，倒入水中，将pH用1M HCl调节至约5并用EtOAc(3x)萃取。将有机物合并，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发至干燥。将残余物溶于MeOH(5mL)中并将溶液冷却至0℃。然后添加硼氢化钠(42mg，1.110mmol)并将反应混合物在室温下搅拌90分钟。将反应混合物倒入水中并用EtOAc(3x)萃取。将有机物合并，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发至干燥。通过柱色谱法(24g硅；0-40％ EtOAc/己烷)纯化，得到呈泡沫的(3R)-3-(1-羟基-2-苯基-乙基)吗啉-4-羧酸叔丁酯(200mg，66％)。ESI-MS m/z计算值307.17834，实验值308.1(M+1)+；保留时间：0.58分钟，LC方法D。
步骤3：1-[(3R)-4-苄基吗啉-3-基]-2-苯基-乙醇
向(3R)-3-(1-羟基-2-苯基-乙基)吗啉-4-羧酸叔丁酯(200mg，0.6507mmol)于DCM(4mL)中的溶液中添加TFA(250μL，3.245mmol)并将反应混合物在室温下搅拌3小时。添加更多TFA(250μL，3.245mmol)并在室温下搅拌1小时。将反应混合物蒸发并与EtOH(3x)共蒸发。将残余物溶于EtOH(2mL)和水(2mL)中。向该溶液中添加碳酸钾(205mg，1.483mmol)，然后添加苄基溴(85μL，0.7147mmol)并将反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物倒入水中并用EtOAc(3x)萃取。将有机物合并，用盐水洗涤并蒸发至干燥。通过快速色谱法(12g 0-40％ EtOAC/己烷)的纯化得到呈澄清油的1-[(3R)-4-苄基吗啉-3-基]-2-苯基-乙醇(75mg，39％)。ESI-MS m/z计算值297.17288，实验值298.2(M+1)+；保留时间：0.37分钟，LC方法D。
步骤4：3-[[4-[1-[(3R)-4-苄基吗啉-3-基]-2-苯基-乙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
在0℃下，向1-[(3R)-4-苄基吗啉-3-基]-2-苯基-乙醇(75mg，0.2522mmol)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(153mg，0.3661mmol)于THF(2mL)中的溶液中添加叔丁醇钠(101mg，1.051mmol)并使反应混合物在16小时内缓慢温热至室温。此时，添加更多叔丁醇钠(50mg，0.5203mmol)并将反应混合物搅拌2小时。将反应用1:1DMSO:MeOH和几滴水稀释，过滤并通过HPLC(1-99％ ACN/水(HCl改性剂))纯化，得到3-[[4-[1-[(3R)-4-苄基吗啉-3-基]-2-苯基-乙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(137mg，17％)。ESI-MS m/z计算值678.2512，实验值679.5(M+1)+；保留时间：0.55分钟，LC方法D。
步骤5：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[1-[(3R)-吗啉-3-基]-2-苯基-乙氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
向3-[[4-[1-[(3R)-4-苄基吗啉-3-基]-2-苯基-乙氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(180mg，0.1183mmol)和钯(10％w/w的42mg，0.03947mmol)中添加MeOH(1mL)和HCl水溶液(37％w/v的58μL，0.5886mmol)并将反应混合物在氢气气球下搅拌1小时。将反应混合物过滤，将溶剂蒸发至干燥，得到呈类白色固体的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[1-[(3R)-吗啉-3-基]-2-苯基-乙氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(110mg，77％)。ESI-MS m/z计算值588.2043，实验值589.4(M+1)+；保留时间：0.48分钟，LC方法D。
步骤6：(8R)-9-苄基-13-(2,6-二甲基苯基)-6,10-二氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(22),11,13,15(23),18,20-六烯-2,17,17-三酮(化合物209)
向3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[1-[(3R)-吗啉-3-基]-2-苯基-乙氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(110mg，0.09150mmol)于DMF(1.5mL)中的溶液中添加HATU(42mg，0.1105mmol)，然后添加DiPEA(80μL，0.4593mmol)并将反应混合物在室温下搅拌90分钟。将反应混合物用1:1DMSO:MeOH和几滴水稀释，过滤并通过HPLC(1-99％ ACN/水(HCl改性剂))纯化，得到呈白色固体的(8R)-9-苄基-13-(2,6-二甲基苯基)-6,10-二氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(22),11,13,15(23),18,20-六烯-2,17,17-三酮(38.8mg，74％)。ESI-MS m/z计算值570.19366，实验值571.3(M+1)+；保留时间：1.63分钟，LC方法A。
实例112：化合物210的制备
步骤1：3,3-二甲氧基吡咯烷-2,5-二酮
在0℃下，将溴(12.409g，4.0mL，77.649mmol)滴加到吡咯-2,5-二酮(5g，51.508mmol)于MeOH(200mL)中的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后在减压下浓缩。将粗物质溶解于MeOH(75mL)中并滴加到金属钠(4.74g，206.18mmol)于MeOH(200mL)中的溶液中。再过20小时之后，将反应混合物在减压下浓缩，然后添加乙酸乙酯(100mL)。将混合物通过缓慢添加6M HCl来中和，然后在水(100mL)与乙酸乙酯(100mL)之间分离。将水层用乙酸乙酯(2×200mL)洗涤，然后将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸镁干燥并在减压下浓缩，得到呈白色固体的3,3-二甲氧基吡咯烷-2,5-二酮(5.49g，67％)。11HNMR(300MHz,METHANOL-d4)δ2.84(s,2H),3.39(s,6H),4.86(s,1H).ESI-MS m/z计算值159.0532，实验值182.1(M+Na)+；保留时间：0.85分钟。
步骤2：3-甲氧基吡咯-2,5-二酮
将甲氧基吡咯烷-2,5-二酮(5.49g，34.498mmol)和对甲苯磺酸水合物(590mg，0.5514mL，3.1017mmol)溶解于甲苯(160mL)中并加热回流6小时。在该过程期间没有安装冷凝器，而是将新鲜的甲苯以维持恒定溶剂体积的速度滴入反应烧瓶中。一旦冷却至室温，将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0％至40％的EtOAc/二氯甲烷纯化，得到起始材料和期望的化合物的混合物(约3:1)。将粗固体溶解于甲苯(100mL)中并添加对甲苯磺酸水合物(260mg，0.2430mL，1.3669mmol)。在没有冷凝器的情况下，将反应混合物加热回流6小时。一旦冷却至室温，将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0％至60％的EtOAc/庚烷纯化，得到呈黄色固体的3-甲氧基吡咯-2,5-二酮(3.43g，78％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.94(s,3H),5.43(s,1H),7.20(br.s.,1H).ESI-MS m/z计算值127.0269，实验值(无电离)；保留时间：0.57分钟，LC方法K。
步骤3：5-苄基-3a-甲氧基-6,6a-二氢-4H-吡咯并[3,4-c]吡咯-1,3-二酮
将N-(甲氧基甲基)-1-苯基-N-(三甲基甲硅烷基甲基)甲胺(10.208g，11mL，42.997mmol)于二氯甲烷(90mL)中的溶液中缓慢添加3-甲氧基吡咯-2,5-二酮(3.43g，26.987mmol)和三氟乙酸(370.00mg，0.25mL，3.2450mmol)于二氯甲烷(210mL)中的冷溶液中，保持内部反应温度低于2℃。使反应混合物温热至室温并搅拌过夜。将反应混合物冷却至0℃并滴加N-(甲氧基甲基)-1-苯基-N-(三甲基甲硅烷基甲基)甲胺(3.2480g，3.5mL，13.681mmol)于二氯甲烷(5mL)中的溶液。在添加之后，将反应混合物温热至室温并搅拌3小时。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)洗涤。将有机层经硫酸镁干燥并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0％至30％的EtOAc/庚烷纯化，得到5-苄基-3a-甲氧基-6,6a-二氢-4H-吡咯并[3,4-c]吡咯-1,3-二酮(7.24g，含有杂质)。将化合物在不经任何进一步纯化的情况下用于下一步骤。ESI-MS m/z计算值260.1161，实验值261.2(M+1)++；保留时间：1.2分钟(LC方法C)。
步骤4：5-苄基-3a-羟基-6,6a-二氢-4H-吡咯并[3,4-c]吡咯-1,3-二酮
将三溴化硼(1M的3.8mL，3.8000mmol)缓慢添加到5-苄基-3a-甲氧基-6,6a-二氢-4H-吡咯并[3,4-c]吡咯-1,3-二酮(200mg，0.7684mmol)于二氯甲烷(10mL)中的-78℃溶液中。在-78℃下搅拌1小时之后，将冷却浴再温热至0℃一小时并将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物冷却回0℃并添加甲醇，直到气体析出完成为止。将反应混合物在减压下浓缩并与甲醇共蒸发两次，得到呈浅橙色油的粗5-苄基-3a-羟基-6,6a-二氢-4H-吡咯并[3,4-c]吡咯-1,3-二酮(220mg)。ESI-MS m/z计算值246.1004，实验值247.2(M+1)++；保留时间：0.75分钟，LC方法K。
步骤5：5-苄基-1,2,3,4,6,6a-六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-3a-醇
在氮气下，将氢化铝锂(四氢呋喃中的1M的3.9mL，3.9000mmol)添加到5-苄基-3a-羟基-6,6a-二氢-4H-吡咯并[3,4-c]吡咯-1,3-二酮(190mg，0.7715mmol)于四氢呋喃(4mL)中的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物冷却至0℃并用水(0.15mL)、2N氢氧化钠水溶液(0.15mL)和水(0.45mL)淬灭。在温热至室温之后，添加一些硫酸镁并将混合物搅拌30分钟，经硅藻土过滤并用乙酸乙酯洗涤。将滤液在减压下浓缩，得到呈澄清油的粗5-苄基-1,2,3,4,6,6a-六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-3a-醇(116mg，69％)。将粗物质在不经任何进一步纯化的情况下用于下一步骤。
步骤6：3-(2-苄基-3a-羟基-3,4,6,6a-四氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡咯-5-羰基)-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺
向3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(29.543mg，0.0707mmol)于DMF(1mL)中的溶液中添加5-苄基-1,2,3,4,6,6a-六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-3a-醇(盐酸盐)(15mg，0.0589mmol)和TEA(17.880mg，0.0246mL，0.1767mmol)。在0℃下将HATU(33.574mg，0.0883mmol)添加到反应混合物中。将反应在0℃下搅拌30分钟，并且然后将其用10％柠檬酸(10mL)淬灭。将反应混合物用DCM(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至10％二氯甲烷-甲醇纯化，得到呈白色固体的3-(2-苄基-3a-羟基-3,4,6,6a-四氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡咯-5-羰基)-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(30mg，47％)。ESI-MS m/z计算值617.1864，实验值618.2(M+1)+；保留时间：4.5分钟，LC方法S。
步骤7：20-苄基-5-(2,6-二甲基苯基)-2-氧杂-9λ6-硫杂-6,8,16,20,24-五氮杂五环[14.5.1.13,7.110,14.01,18]二十四碳-3(24),4,6,10,12,14(23)-六烯-9,9,15-三酮(化合物210)
在0℃下，向3-(2-苄基-3a-羟基-3,4,6,6a-四氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡咯-5-羰基)-N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]苯磺酰胺(104mg，0.1656mmol)于无水二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液中添加氢化钠(66.234mg，60％w/w，1.6560mmol)。将反应混合物在室温下搅拌24小时。将反应用饱和氯化铵(10mL)淬灭，并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×15mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至5％二氯甲烷-甲醇纯化，得到呈类白色固体的20-苄基-5-(2,6-二甲基苯基)-2-氧杂-9λ6-硫杂-6,8,16,20,24-五氮杂五环[14.5.1.13,7.110,14.01,18]二十四碳-3(24),4,6,10,12,14(23)-六烯-9,9,15-三酮(26mg，26％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ8.74(s,1H),7.95(d,J＝6.7Hz,1H),7.70(d,J＝6.1Hz,2H),7.35-7.16(m,6H),7.11(d,J＝8.1Hz,2H),6.73(s,1H),4.51(t,J＝9.9Hz,1H),3.72(d,J＝14.4Hz,1H),3.61(s,2H),3.08-2.68(m,7H),1.93(s,6H).ESI-MS m/z计算值581.2097，实验值582.4(M+1)+；保留时间：1.77分钟，LC方法W。
实例113：化合物211的制备
步骤1：N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-[(3R)-3-(羟甲基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-羰基]苯-1-磺酰胺
向DIC(大约20.02mg，24.84μL，0.1586mmol)中添加溶解于二氯甲烷(0.5mL)中的3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(51mg，0.1220mmol)，然后添加固体碳酸氢钠(大约51.24mg，0.6100mmol)。使悬浮液在室温下搅拌15分钟。之后添加[(3R)-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-基]甲醇(大约21.90mg，0.1342mmol)。将最终反应混合物在室温下搅拌2小时。然后将所述最终反应混合物用DMSO稀释并通过反相HPLC方法使用由Phenomenex销售的Luna C18(2)柱(50×21.2mm，5μm粒径)(pn：00B-4252-P0-AX)和15.0分钟内从10-99％流动相B运行的双梯度纯化。流动相A＝水(5mM HCl酸性改性剂)。流动相B＝乙腈。流速＝35毫升/分钟，进样体积＝950μL，并且柱温＝25℃。254nm处的UV迹线用于收集级分。获得N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-[(3R)-3-(羟甲基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-羰基]苯-1-磺酰胺(18.7mg，27％)。
步骤2：(12R)-17-(2,6-二甲基苯基)-14-氧杂-21λ6-硫杂-3,18,20,27-四氮杂五环[20.3.1.115,19.03,12.05,10]十七碳-1(26),5(10),6,8,15(27),16,18,22,24-壬烯-2,21,21-三酮(化合物211)
将N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-[(3R)-3-(羟甲基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-羰基]苯-1-磺酰胺(17.6mg，0.03126mmol)于1-甲基-吡咯烷-2-酮(5mL)中的溶液添加到氢化钠(大约12.50mg，13.89μL，0.3126mmol)(60wt％分散在矿物油中)中。将反应混合物密封并在70℃下搅拌2小时。将样品通过反相HPLC方法使用由Phenomenex销售的Luna C18(2)柱(50×21.2mm，5μm粒径)(pn：00B-4252-P0-AX)和15.0分钟内从10-99％流动相B运行的双梯度纯化。流动相A＝水(5mM酸性改性剂)。流动相B＝乙腈。流速＝35毫升/分钟，进样体积＝950μL，并且柱温＝25℃。254nm处的UV迹线用于收集级分。获得(12R)-17-(2,6-二甲基苯基)-14-氧杂-21λ6-硫杂-3,18,20,27-四氮杂五环[20.3.1.115,19.03,12.05,10]十七碳-1(26),5(10),6,8,15(27),16,18,22,24-壬烯-2,21,21-三酮(6.8mg，41％)。ESI-MS m/z计算值526.1675，实验值527.3(M+1)+；保留时间：1.73分钟；LC方法A。
实例114：化合物212的制备
步骤1：N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-[(3S)-3-(羟甲基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-羰基]苯-1-磺酰胺
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(60mg，0.1436mmol)溶解于二氯甲烷中，并添加到N,N'-二异丙基碳二亚胺中。使混合物在室温下搅拌30分钟。然后将获得的悬浮液添加到[(3S)-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-基]甲醇(大约25.79mg，0.1580mmol)中。最后添加固体碳酸氢钠。使反应混合物在室温下搅拌。将产物使用反相HPLC方法使用由Phenomenex销售的Luna C18(2)柱(50×21.2mm，5μm粒径)(pn：00B-4252-P0-AX)和15.0分钟内从10-99％流动相B运行的双梯度纯化。流动相A＝水(5mM酸性改性剂)。流动相B＝乙腈。流速＝35毫升/分钟，进样体积＝950μL，并且柱温＝25℃。254nm处的UV迹线用于收集级分。获得N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-[(3S)-3-(羟甲基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-羰基]苯-1-磺酰胺(26.2mg，32％)。ESI-MS m/z计算值562.14417，实验值563.3(M+1)+；保留时间：1.75分钟；LC方法A。
步骤2：(12S)-17-(2,6-二甲基苯基)-14-氧杂-21λ6-硫杂-3,18,20,27-四氮杂五环[20.3.1.115,19.03,12.05,10]十七碳-1(26),5(10),6,8,15(27),16,18,22,24-壬烯-2,21,21-三酮(化合物212)
将N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-[(3S)-3-(羟甲基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-羰基]苯-1-磺酰胺(26.2mg，0.04653mmol)于1-甲基-吡咯烷-2-酮(5mL)中的溶液添加到氢化钠(大约18.61mg，20.68μL，0.4653mmol)(60wt％分散在矿物油中)中。将反应混合物密封并在70℃下搅拌2小时。将产物通过反相HPLC使用由Phenomenex销售的LunaC18(2)柱(50×21.2mm，5μm粒径)(pn：00B-4252-P0-AX)和15.0分钟内从10-99％流动相B运行的双梯度纯化。流动相A＝水(5mM酸性改性剂)。流动相B＝乙腈。流速＝35毫升/分钟，进样体积＝950μL，并且柱温＝25℃。254nm处的UV迹线用于收集级分。获得(12S)-17-(2,6-二甲基苯基)-14-氧杂-21λ6-硫杂-3,18,20,27-四氮杂五环[20.3.1.115,19.03,12.05,10]十七碳-1(26),5(10),6,8,15(27),16,18,22,24-壬烯-2,21,21-三酮(8mg，33％)。ESI-MSm/z计算值526.1675，实验值527.3(M+1)+；保留时间：1.73分钟；LC方法A。
实例115：化合物213的制备
步骤1：3-{[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(3S)-吡咯烷-3-基氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基}苯甲酸
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(50mg，0.1197mmol)、(3S)-3-羟基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(大约44.82mg，0.2394mmol)和叔丁醇钠(大约46.01mg，0.4788mmol)在THF(1mL)中合并，并在室温下搅拌16小时。将反应混合物在乙酸乙酯与1M HCl溶液之间分配。将有机物分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。将粗物质溶解于4M含HCl的二噁烷(4M的2mL，8.000mmol)中并搅拌30分钟。将反应蒸发并将所得物质通过LC/MS利用1-99％乙腈/5mM HCl水溶液的梯度纯化，得到3-{[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(3S)-吡咯烷-3-基氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基}苯甲酸(盐酸盐)(34.5mg，57％)。ESI-MS m/z计算值468.14673，实验值469.3(M+1)+；保留时间：0.36分钟；(LC方法D)。
步骤2：(3S)-17-(2,6-二甲基苯基)-2-氧杂-13λ6-硫杂-6,14,16,19-四氮杂四环[13.3.1.13,6.18,12]二十碳-1(19),8(20),9,11,15,17-六烯-7,13,13-三酮(化合物213)
将3-{[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(3S)-吡咯烷-3-基氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基}苯甲酸(盐酸盐)(27.1mg，0.05366mmol)、HATU(大约20.40mg，0.05366mmol)和三乙胺(大约16.29mg，22.44μL，0.1610mmol)在DMF(1mL)中合并，并在室温下搅拌1小时。将反应混合物过滤并通过LC/MS利用5mM HCl水溶液中的1-99％乙腈的梯度纯化，得到(3S)-17-(2,6-二甲基苯基)-2-氧杂-13λ6-硫杂-6,14,16,19-四氮杂四环[13.3.1.13,6.18,12]二十碳-1(19),8(20),9,11,15,17-六烯-7,13,13-三酮(4.8mg，20％)。ESI-MS m/z计算值450.13617，实验值451.2(M+1)+；保留时间：1.26分钟；(LC方法A)。
实例116：化合物214的制备
步骤1：3-{[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(3R)-吡咯烷-3-基氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基}苯甲酸
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(50mg，0.1197mmol)、(3R)-3-羟基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(大约44.82mg，0.2394mmol)和叔丁醇钠(大约46.01mg，0.4788mmol)在THF(1mL)中合并，并在室温下搅拌16小时。将反应混合物在乙酸乙酯与1M HCl溶液之间分配。将有机物分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。将粗物质溶解于4M含HCl的二噁烷(4M的2mL，8.000mmol)中并搅拌30分钟。将反应蒸发并将所得物质通过LC/MS利用1-99％乙腈/5mM HCl水溶液的梯度纯化，得到3-{[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(3R)-吡咯烷-3-基氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基}苯甲酸(盐酸盐)(35.5mg，59％)。ESI-MS m/z计算值468.14673，实验值469.3(M+1)+；保留时间：0.36分钟；(LC方法D)。
步骤2：(3R)-17-(2,6-二甲基苯基)-2-氧杂-13λ6-硫杂-6,14,16,19-四氮杂四环[13.3.1.13,6.18,12]二十碳-1(19),8(20),9,11,15,17-六烯-7,13,13-三酮(化合物214)
将3-{[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(3R)-吡咯烷-3-基氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基}苯甲酸(盐酸盐)(28.7mg，0.05683mmol)、HATU(大约21.61mg，0.05683mmol)和三乙胺(大约17.25mg，23.76μL，0.1705mmol)在DMF(1mL)中合并，并在室温下搅拌1小时。将反应混合物过滤并通过LC/MS利用5mM HCl水溶液中的1-99％乙腈的梯度纯化，得到(3R)-17-(2,6-二甲基苯基)-2-氧杂-13λ6-硫杂-6,14,16,19-四氮杂四环[13.3.1.13,6.18,12]二十碳-1(19),8(20),9,11,15,17-六烯-7,13,13-三酮(4.5mg，17％)。ESI-MS m/z计算值450.13617，实验值451.3(M+1)+；保留时间：1.26分钟；LC方法A。
实例117：化合物215、化合物216和化合物217的制备
步骤1：2-烯丙基-苯甲酸甲酯
将2-溴-苯甲酸甲酯(23.0g,0.107mol)、烯丙基-三丁基-锡烷(42.5g，0.128mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(2.47g，2.14mmol)溶解于密封管中的无水苯(40mL)中。将反应溶液用氩气吹扫5分钟，然后在100℃下加热20小时。将反应溶液通过硅胶垫过滤并用己烷洗涤。将滤液浓缩，并将残余物在减压(85至87℃/3mmHg)下蒸馏，得到被14％的锡烷杂质污染的无色液体。将不纯的产物通过硅胶柱色谱法使用0-50％己烷--二氯甲烷进一步纯化，得到呈无色液体的2-烯丙基-苯甲酸甲酯(12.3g，65％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ(ppm):7.90(m,1H),7.43(m,1H),7.26(m,2H),6.00(m,1H),5.06-4.98(m,2H),3.89(s,3H),3.76(d,J＝6.3Hz,2H).ESI-MS m/z计算值176.08，实验值177.8(M+1)+.保留时间：5.13分钟。
步骤2：3-碘甲基-异色满-1-酮
向2-烯丙基-苯甲酸甲酯(11.9g，67.3mmol)于乙腈(70mL)中的溶液中添加碘(34.2g，0.135mol)并将反应溶液在环境温度下搅拌1小时。将混合物用乙酸乙酯(900mL)稀释。将有机溶液用饱和亚硫酸氢钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥并浓缩。将获得的残余物通过硅胶色谱法使用0-30％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈浅黄色液体的3-碘甲基-异色满-1-酮(17.5g，87％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ(ppm):8.10(d,J＝7.5Hz,1H),7.58(t,J＝7.5Hz,1H),7.42(t,J＝7.5Hz,1H),7.29(d,J＝7.5Hz,1H),4.56(m,1H),3.45(m,2H),3.19(m,2H).ESI-MS m/z计算值287.98，实验值289.0(M+1)+.保留时间：4.32分钟。
步骤3：4-羟基-2,3,4,5-四氢-苯并[c]氮杂-1-酮
在0℃下，向7N氨于甲醇(1170mL)中的溶液中滴加3-碘甲基-异色满-1-酮(16.9g，58.7mmol)于无水甲醇(120mL)中的溶液。将所得溶液在环境温度下搅拌67小时。将所有溶剂在减压下去除。将获得的残余物溶解于甲醇(10mL)中的7N氨中并添加硅胶。将溶剂去除，并将硅胶用0-13％二氯甲烷-甲醇(1％氨)进行柱色谱法，得到呈白色固体的4-羟基-2,3,4,5-四氢-苯并[c]氮杂-1-酮(5.72g，55％)。1H NMR(250MHz,DMSO)δ(ppm):8.09(t,J＝5.5Hz,1H),7.52(dd,J＝1.5,7.5Hz,1H),7.38(m,2H),7.24(d,J＝7.5Hz,1H),5.06(d,J＝4.0Hz,1H),4.11(m,1H),2.96(m,2H),2.62(m,2H)。ESI-MS m/z计算值177.08，实验值178.1(M+1)+.保留时间：1.50分钟。
步骤4：2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂-4-醇
将4-羟基-2,3,4,5-四氢-苯并[c]氮杂-1-酮(5.72g，32.3mmol)溶解于1N硼烷-四氢呋喃溶液(200mL)中。将所得溶液在60℃下加热63小时，然后冷却至0℃。滴加6N氯化氢水溶液，直到不再观察到鼓泡(pH＝2)为止。将溶剂在减压下去除并将水溶液用乙醚(2×100mL)洗涤，然后用6N氢氧化钠水溶液碱化至pH＝10。将水层用2-甲基四氢呋喃(5×150mL)萃取并将合并的有机层经硫酸钠干燥并浓缩，得到呈白色固体的2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂-4-醇(5.20g，99％)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。ESI-MS m/z计算值163.10，实验值163.7(M+1)+.保留时间：1.17分钟。
步骤5：4-羟基-1,3,4,5-四氢-苯并[c]氮杂-2-羧酸叔丁酯
向2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂-4-醇(5.20g，31.88mmol)于无水二氯甲烷(320mL)中的溶液(混浊溶液)中添加三乙胺(3.87g，38.26mmol)，然后添加二碳酸二叔丁酯(6.61g，30.29mmol)。将所得溶液在环境温度下搅拌30分钟并且然后用二氯甲烷(500mL)稀释。将有机溶液用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-60％己烷--乙酸乙酯纯化，得到呈白色固体的4-羟基-1,3,4,5-四氢-苯并[c]氮杂-2-羧酸叔丁酯(6.93g，83％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ(ppm):4.45(d,J＝15.0Hz,1H),4.34(d,J＝15.0Hz,1H),3.98(m,1H),3.75(m,2H),3.11(d,J＝5.8Hz,1H),1.40(s,9H).ESI-MS m/z计算值263.17，实验值264.2(M+1)+.保留时间：2.09分钟。
步骤6：12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[14.8.1.13,7.110,14.018,23]十七碳-3(27),4,6,10,12,14(26),18,20,22-壬烯-2,8,8-三酮，外消旋混合物(化合物215)，12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[14.8.1.13,7.110,14.018,23]十七碳-3(27),4,6,10,12,14(26),18,20,22-壬烯-2,8,8-三酮，对映异构体1(化合物216)，以及12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[14.8.1.13,7.110,14.018,23]十七碳-3(27),4,6,10,12,14(26),18,20,22-壬烯-2,8,8-三酮，对映异构体2(化合物217)
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(125mg，0.2991mmol)、4-羟基-1,3,4,5-四氢-2-苯并氮杂-2-羧酸叔丁酯(103mg，0.3911mmol)和NaH(70mg，1.750mmol)在无水NMP(1mL)中合并，并在室温下搅拌1小时。然后将反应混合物用0.2mL乙酸淬灭，用甲醇稀释，过滤并通过反相HPLC(1-70％ ACN，HCl改性剂，15分钟运行)纯化，得到3-[[4-[(2-叔丁氧基羰基-1,3,4,5-四氢-2-苯并氮杂-4-基)氧]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(95mg，49％)ESI-MS m/z计算值644.23047，实验值645.4(M+1)+；保留时间：0.71分钟(LC方法D)。
将产物溶解于二氯甲烷(2mL)中并添加于二噁烷中的HCl(4M的2mL，8.000mmol)。在室温下搅拌1小时之后，将反应混合物在真空下浓缩，得到3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-(2,3,4,5-四氢-1H--2-苯并氮杂-4-基氧基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(88mg，51％)ESI-MS m/z计算值544.17804，实验值545.4(M+1)+；保留时间：0.42分钟(LC方法D)。
将产物与HATU(75mg，0.1972mmol)在二氯甲烷(10mL)中合并，并添加DIPEA(160μL，0.9186mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时，然后通过旋转蒸发浓缩。将所得粗物质溶解于1:1DMSO/甲醇中，过滤并通过反相HPLC(1-70％ ACN/水，具有HCl15分钟运行)纯化，得到外消旋的12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[14.8.1.13,7.110,14.018,23]十七碳-3(27),4,6,10,12,14(26),18,20,22-壬烯-2,8,8-三酮(45mg，29％)ESI-MS m/z计算值526.1675，实验值527.3(M+1)+；保留时间：1.65分钟(LC方法A)。使用手性Cel OJ-H(250×10mm，5μm)柱，由18％ MeOH(无改性剂)和82％ CO2组成的流动相，流速为10毫升/分钟，MeOH:DMSO(88:12)浓度为16mg/mL(无改性剂)，并且进样体积为70μL，压力为100bar并且利用220nm波长对该物质进行手性SFC，得到两个对映异构体：对映异构体1，峰1 12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[14.8.1.13,7.110,14.018,23]十七碳-3(27),4,6,10,12,14(26),18,20,22-壬烯-2,8,8-三酮(5.1mg，3％)ESI-MS m/z计算值526.1675，实验值527.4(M+1)+；保留时间：1.64分钟(LC方法A)；以及对映异构体2，峰2 12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[14.8.1.13,7.110,14.018,23]十七碳-3(27),4,6,10,12,14(26),18,20,22-壬烯-2,8,8-三酮(4.4mg，3％)ESI-MS m/z计算值526.1675，实验值527.4(M+1)+；保留时间：1.64分钟(LC方法A)。
实例118：化合物218和化合物219的制备
步骤1：(3-叔丁基苯基)甲胺
向3-叔丁基苄腈(4.58g，28.764mmol)于MeOH(135mL)中的溶液中添加阮内镍2400(7.2g，36.801mmol)和水。将容器抽空并充入氢气(三个循环)。通过注射器添加水中的NH3(28％w/v的13mL，213.73mmol)。将混合物在室温下在氢气(气球)下搅拌18小时。将混合物倾析并通过硅藻土过滤并用MeOH洗涤。浓缩滤液。将残余物用DCM萃取并用硫酸钠干燥。在快速色谱法(120g硅胶，DCM(1％ NH3)/MeOH 0-8％)上进行快速色谱法，得到呈浅黄色油的(3-叔丁基苯基)甲胺(4.51g，96％)。ESI-MS m/z计算值163.1361，实验值164.2(M+1)+；保留时间：1.45分钟。ESI-MS m/z计算值163.1361，实验值164.2(M+1)+；保留时间：1.45分钟；LC方法K。
步骤2：7-叔丁基-3-甲基-异喹啉-4-羧酸乙酯
向带有冷凝器的1L烧瓶中装入(3-叔丁基苯基)甲胺(4.75g，29.095mmol)、2-重氮-3-氧代丁酸乙酯(6.21g，35.795mmol)、2,2,2-三氟乙醇(250mL)、五甲基环戊二烯基铑(III)氯化物二聚物(452mg，0.7313mmol)和乙酸银(974mg，5.8354mmol)。将暴露于空气中的混合物在72℃下搅拌过夜。将混合物用EtOAc稀释，通过硅藻土过滤并用EtOAc洗涤。将滤液在硅胶(40g)上浓缩并通过快速色谱法(120g硅胶，庚烷/EtOAc 0-20％)纯化，得到呈浅黄色油的7-叔丁基-3-甲基-异喹啉-4-羧酸乙酯(5.55g，70％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ9.18(s,1H),7.93-7.74(m,3H),4.54(q,J＝7.0Hz,2H),2.73(s,3H),1.47(t,J＝7.2Hz,3H),1.41(s,9H).ESI-MS m/z计算值271.15723，实验值272.2(M+1)+；保留时间：2.06分钟；LC方法K。
步骤3：7-叔丁基-3-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-羧酸乙酯
向7-叔丁基-3-甲基-异喹啉-4-羧酸乙酯(5.19g，19.126mmol)于MeOH(90mL)中的溶液中添加氯化镍(II)六水合物(9.1g，38.285mmol)。将混合物在室温下搅拌10分钟并用冰水冷却浴冷却。在1小时内分批添加硼氢化钠(14.5g，383.27mmol)，保持内部温度在28-33℃。将混合物在25℃下搅拌10分钟。将混合物浓缩以去除MeOH。在0℃下将残余物用3NHCl水溶液(180mL)处理。pH＝1。将混合物在室温下搅拌30分钟并在0℃下用28％ NH3水溶液(200mL)中和。将混合物用DCM萃取，经硫酸钠干燥。将混合物浓缩并将残余物通过快速色谱法(120g硅，DCM/MeOH 0-8％)纯化，得到呈浅黄色油的7-叔丁基-3-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-羧酸乙酯(2.49g，47％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.22-7.04(m,3H),4.28-4.11(m,2H),4.08(s,2H),3.57(d,J＝4.1Hz,1H),3.12(qd,J＝6.8,4.1Hz,1H),2.36-2.00(m,1H),1.29(s,15H).ESI-MS m/z计算值275.18854，实验值276.2(M+1)+；保留时间：1.62分钟；LC方法K。
步骤4：(7-叔丁基-3-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)甲醇，非对映异构体1和2
在0℃下，向LAH(1.48g，38.994mmol)于THF(50mL)中的悬浮液中添加7-叔丁基-3-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-羧酸乙酯(2.68g，9.7318mmol)于THF(50mL)中的溶液。将混合物在室温下搅拌2小时。将混合物冷却至0℃，用THF(100mL)稀释，分别用1.5mL的THF中的水(20mL)、1.5g的25％ NaOH水溶液和4.5g的水的溶液处理。将混合物在室温下搅拌30分钟，通过硅藻土过滤并用THF洗涤。将滤液用硫酸钠干燥并通过快速色谱法(80g硅胶，DCM(1％ NH3)/MeOH 0-10％)纯化，得到呈浅黄色油的更少极性产物，非对映异构体1(7-叔丁基-3-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)甲醇(1.98g，87％)。ESI-MS m/z计算值233.178，实验值234.2(M+1)+；保留时间：1.87分钟(LC方法U)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.29-7.23(m,1H),7.18-7.12(m,1H),7.07(d,J＝1.5Hz,1H),4.35(dd,J＝10.4,2.5Hz,1H),4.22-4.03(m,2H),3.85-3.74(m,1H),3.32-3.19(m,1H),2.54(d,J＝2.3Hz,1H),1.41(d,J＝6.5Hz,3H),1.30(s,9H)；以及呈浅黄色油的更多极性产物，非对映异构体2(7-叔丁基-3-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)甲醇(0.29g，13％)。ESI-MS m/z计算值233.178，实验值234.2(M+1)+；保留时间：1.87分钟(LC方法U)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.26-7.20(m,1H),7.19-7.11(m,1H),7.04(d,J＝1.5Hz,1H),4.13-4.00(m,2H),3.98-3.86(m,2H),3.71-3.64(m,1H),2.56(q,J＝2.9Hz,1H),1.68(dt,J＝6.0,2.9Hz,1H),1.29(s,9H),1.19(d,J＝6.5Hz,3H).TLC(DCM-MeOH 10:1，两滴28％ NH3水溶液)：主要产物(Rf＝0.5)的极性远少于次要产物(Rf＝0.25)。
步骤5：(7-叔丁基-3-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)甲醇，非对映异构体2，盐形成
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在0℃下，向(7-叔丁基-3-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)甲醇，非对映异构体2(0.3g，1.2856mmol)于DCM(6mL)中的溶液中添加于1,4-二噁烷中的HCl(4M的0.4mL，1.6000mmol)。将混合物在室温下搅拌10分钟。缓慢添加庚烷(50mL)。将混合物浓缩并冷冻干燥，得到呈粘性油的(7-叔丁基-3-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)甲醇(盐酸盐)，非对映异构体2(326mg，87％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.49(br.s.,1H),9.38(br.s.,1H),7.51-7.02(m,3H),6.74(br.s.,1H),4.32-4.00(m,2H),3.83-3.60(m,2H),3.48-3.32(m,1H),2.82(q,J＝5.0Hz,1H),1.49-1.34(m,3H),1.26(s,9H).ESI-MS m/z计算值233.17796，实验值234.2(M+1)+；保留时间：1.9分钟；LC方法U。
步骤6：21-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-25-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[15.7.1.13,7.110,14.018,23]十七碳-3,5,7(27),10,12,14(26),18,20,22-壬烯-2,8,8-三酮，对映异构体1(化合物218)，以及21-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-25-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[15.7.1.13,7.110,14.018,23]十七碳-3,5,7(27),10,12,14(26),18,20,22-壬烯-2,8,8-三酮，对映异构体2(化合物219)
向3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(大约633.9mg，1.517mmol)和(7-叔丁基-3-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)甲醇(盐酸盐)非对映异构体2(315mg，1.167mmol)(来自先前反应的次要非对映异构产物)于THF(11.67mL)中的溶液中添加叔丁醇钾(大约654.8mg，725.9μL，5.835mmol)。将反应搅拌2小时并通过添加盐酸(大约12M的534.9μL，6.419mmol)淬灭。将样品通过反相HPLC(Waters Sunfire C18柱(100×50mm，10μm粒径)，梯度：15.0内1-99％乙腈/水(5mM HCl)纯化，这得到3-[[4-[(7-叔丁基-3-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(175mg，23％)ESI-MS m/z计算值614.2563，保留时间：0.56分钟(LC方法D)。向产物于DMF(6mL)中的溶液中添加HATU(大约576.8mg，1.517mmol)。将反应加热至50℃10分钟。添加三乙胺(大约354.3mg，488.0μL，3.501mmol)并将反应在该温度下进一步搅拌20分钟。将样品通过反相HPLC(Waters Sunfire C18柱(100×50mm，10μm粒径)，梯度：15.0分钟内1-99％乙腈/水(5mM HCl))纯化。将冻干的级分通过半制备型手性SFC(1至99％甲醇/二氧化碳，柱：Daicel手性pak RR，250×20mm，5μM)进一步分离，这得到对映异构体1，21-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-25-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[15.7.1.13,7.110,14.018,23]十七碳-3,5,7(27),10,12,14(26),18,20,22-壬烯-2,8,8-三酮(5.7mg，2％)ESI-MS m/z计算值596.2457，实验值597.51(M+1)+；保留时间：0.82分钟(LC方法D)；以及对映异构体2，21-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-25-甲基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[15.7.1.13,7.110,14.018,23]十七碳-3,5,7(27),10,12,14(26),18,20,22-壬烯-2,8,8-三酮(4.8mg，1％)ESI-MS m/z计算值596.2457，实验值597.51(M+1)+；保留时间：0.82分钟(LC方法D)。
实例119：化合物220的制备
步骤1：2-(三氟甲基磺酰氨基)乙酸甲酯
在室温下，将三乙胺(22.6mL，163.2mmol)添加到2-氨基乙酸甲酯盐酸盐(10.0g，79.6mmol)于二氯甲烷(468mL)中的溶液中并将溶液在室温下搅拌15分钟并且然后冷却至-78℃。缓慢添加三氟甲磺酸酐(14mL，83.6mmol)并使溶液缓慢温热至室温。将反应搅拌三天。将有机层分离并用4M盐酸(2×200mL)、饱和氯化钠水溶液(200mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到呈白色粉末的2-(三氟甲基磺酰氨基)乙酸甲酯(10.6g，47.8mmol)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ5.67(bs,1H),4.07(s,2H),3.83(s,3H).
步骤2：2-[2-苯乙基(三氟甲基磺酰基)氨基]乙酸甲酯
在0℃下，向2-(三氟甲基磺酰氨基)乙酸甲酯(1.0g，4.52mmol)和2-苯基乙醇(0.54mL，4.52mmol)于四氢呋喃(18.8mL)中的溶液中添加三苯基膦(1.42g，5.42mmol)并搅拌15分钟。在0℃下，滴加偶氮二甲酸二异丙酯(1.07mL，5.42mmol)并将反应混合物在室温下搅拌18小时。将挥发物在真空下去除并将粗残余物通过硅胶柱色谱法使用0-70％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈黄色油的2-(1,1,1-三氟-N-苯乙基甲基磺酰胺基)乙酸甲酯(1.06g，81％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ6.96-7.63(m,5H)4.01(br.s.,2H)3.67-3.87(m,5H)2.95(t,J＝7.75Hz,2H).ESI-MS m/z计算值325.05957，实验值326.3(M+1)+；保留时间：3.56分钟。
步骤3：2-[2-苯乙基(三氟甲基磺酰基)氨基]乙酸
制备2-(1,1,1-三氟-N-苯乙基甲基磺酰胺基)乙酸甲酯(假定76mmol)于四氢呋喃(266mL)和水(114mL)的混合物中的溶液。添加氢氧化锂(14.5g，604mmol)，并且使反应在室温下搅拌16小时。将反应用2M盐酸水溶液淬灭并且将层分离。将水层用二氯甲烷(3×100mL)萃取三次。将合并的有机层经硫酸钠干燥并浓缩，得到呈白色固体的2-(1,1,1-三氟-N-苯乙基甲基磺酰胺基)乙酸(12g，51％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.02-7.46(m,5H)5.08(br.s.,1H)4.06(br.s.,2H)3.73(br.s.,2H)2.96(t,J＝7.8Hz,2H).ESI-MS m/z计算值311.0439，实验值312.2(M+1)+；保留时间：3.4分钟。
步骤4：3-(三氟甲基磺酰基)-2,4-二氢-1H-3-苯并氮杂-5-酮
将2-(1,1,1-三氟-N-苯乙基甲基磺酰胺基)乙酸(12g，38.6mmol)于1,2-二氯乙烷(386mL)中的溶液在冰浴中冷却至0℃。添加五氧化二磷(54.8g，193mmol)，并且使反应混合物温热至室温并搅拌18小时。将反应通过添加2M氢氧化钠水溶液淬灭。将两个层分离，并将水层用二氯甲烷(3×80mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并浓缩。将粗残余物通过硅胶柱色谱法使用0-30％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈白色固体的3-((三氟甲基)磺酰基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂-1-酮(6g，50％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.79(d,J＝8.2Hz,1H)7.58(m,J＝7.5Hz,1H)7.40-7.51(m,1H)7.23-7.31(m,1H)4.34(s,2H)3.84(br.s.,2H)3.13(t,J＝6.7Hz,2H)。ESI-MS m/z计算值293.03336，实验值294.4(M+1)+；保留时间：2.92分钟；LC方法B。
步骤5：2,3,4,5-四氢-1H-3-苯并氮杂-5-醇
将3-((三氟甲基)磺酰基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂-1-酮(5.8g，30.05mmol)于甲苯(100mL)和四氢呋喃(50mL)的混合物中的溶液冷却至0℃并缓慢添加氢化铝锂粉末(5.7g，150.24mmol)。将反应混合物在70℃下搅拌17小时。将反应冷却至0℃并在1小时内添加饱和硫酸钠水溶液(150mL)。将形成的固体滤出并用一些氯仿和甲醇洗涤。将滤液浓缩，得到呈白色固体的2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂-1-醇(2.74g，85％)。1HNMR(250MHz,CDCl3)δ7.02-7.36(m,4H)4.62(d,J＝6.3Hz,1H)3.14-3.40(m,3H)2.62-2.98(m,3H)。ESI-MS m/z计算值163.09972，实验值164.6(M+1)+；保留时间：1.19分钟；LC方法B。
步骤6：5-羟基-1,2,4,5-四氢-3-苯并氮杂-3-羧酸叔丁酯
向2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂-1-醇(2.25g，13.8mmol)于四氢呋喃(34.5mL)和1M氢氧化钠水溶液(34.5mL)的混合物中的混合物中添加二碳酸二叔丁酯(3.32g，15.2mmol)并将反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应用水(200mL)和乙酸乙酯(200mL)稀释。将两个层分离，并将水层用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并浓缩。将粗残余物通过硅胶柱色谱法使用0-35％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈白色固体的1-羟基-4,5-二氢-1H-苯并[d]氮杂-3(2H)-羧酸叔丁酯(3.14g，71％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.30-7.41(m,1H)7.16-7.26(m,2H)7.07-7.16(m,1H)4.85(br.s.,1H)3.95-4.20(m,1H)3.85(dd,J＝11.8,7.0Hz,2H),3.39-3.64(m,1H),3.11-3.63(m,2H)2.68-2.86(m,1H)1.47(s,9H).ESI-MS m/z计算值263.15213，实验值264.4(M+1)+；保留时间：2.71分钟；LC方法B。
步骤7：12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[14.8.1.13,7.110,14.017,22]十七碳-3(27),4,6,10(26),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(化合物220)
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(125mg，0.2991mmol)、5-羟基-1,2,4,5-四氢-3-苯并氮杂-3-羧酸叔丁酯(103.4mg)和NaH(70mg，1.750mmol)在无水NMP(2mL)中合并，并在室温下搅拌1小时。然后将反应混合物用0.2mL乙酸淬灭，用甲醇稀释，过滤并通过反相HPLC(1-70％ ACN，HCl改性剂，15分钟运行)纯化，得到3-[[4-[(3-叔丁氧基羰基-1,2,4,5-四氢-3-苯并氮杂-5-基)氧]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(113mg，59％)ESI-MS m/z计算值644.23047，实验值645.4(M+1)+；保留时间：0.71分钟(LC方法D)。将产物溶解于二氯甲烷(2mL)中并添加于二噁烷中的HCl(4M的2mL，8.000mmol)。在室温下搅拌1小时之后，将反应混合物在真空下浓缩，得到3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-(2,3,4,5-四氢-1H--3-苯并氮杂-5-基氧基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(104mg，60％)。将该产物与HATU(90mg，0.2367mmol)在DMF(12mL)中合并，并添加DIPEA(156μL，0.8956mmol)。在室温下搅拌一小时之后，将反应混合物用乙酸乙酯和0.5M HCl稀释，并将层分离。将水层用乙酸乙酯再萃取一次，然后将合并的乙酸乙酯层用水、盐水洗涤并经硫酸钠干燥，然后浓缩。然后将该粗物质通过硅胶色谱法0-10％甲醇，二氯甲烷纯化，得到白色固体12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[14.8.1.13,7.110,14.017,22]十七碳-3(27),4,6,10(26),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(75mg，48％)ESI-MS m/z计算值526.1675，实验值527.3(M+1)+；保留时间：1.63分钟。将10mg的该物质通过反相HPLC(1-70％ ACN/水，HCl改性剂15分钟运行)进一步纯化，得到12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[14.8.1.13,7.110,14.017,22]十七碳-3(27),4,6,10(26),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(8.6mg，5％)ESI-MS m/z计算值526.1675，实验值527.4(M+1)+；保留时间：1.63分钟(LC方法A)。
实例120：化合物221和化合物222的制备
步骤1：12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[14.8.1.13,7.110,14.017,22]十七碳-3(27),4,6,10(26),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮，对映异构体1(化合物222)，以及12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[14.8.1.13,7.110,14.017,22]十七碳-3(27),4,6,10(26),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮，对映异构体2(化合物221)
将3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-(2,3,4,5-四氢-1H--3-苯并氮杂-5-基氧基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(105mg，0.1807mmol)和HATU(103mg，0.2709mmol)于DMF(4.5mL)中的溶液在冰浴中冷却。添加DIPEA(100μL，0.5741mmol)并将混合物在室温下搅拌1小时，过滤并通过制备型反相HPLC(C18)：1-99％ ACN/水/HCl改性剂(15分钟)纯化，得到12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[14.8.1.13,7.110,14.017,22]十七碳-3(27),4,6,10(26),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(56.2mg，59％)ESI-MS m/z计算值526.1675，实验值527.3(M+1)+；保留时间：1.64分钟(LC方法A)。将混合物使用手性AD柱进行SFC，得到对映异构体1，峰1，12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[14.8.1.13,7.110,14.017,22]十七碳-3(27),4,6,10(26),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(5.9mg，6％)ESI-MS m/z计算值526.1675，实验值527.3(M+1)+；保留时间：1.64分钟(LC方法A)；以及对映异构体2，峰2，12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[14.8.1.13,7.110,14.017,22]十七碳-3(27),4,6,10(26),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(7.1mg，7％)ESI-MS m/z计算值526.1675，实验值527.41(M+1)+；保留时间：1.64分钟(LC方法A)。
实例121：化合物223和化合物224的制备
步骤1：3-氧代-5-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯
将3-氧代-2,6-二氢吡啶-1-羧酸叔丁酯(1.58g，8.0109mmol)、苯基硼酸(1.96g，16.075mmol)和2-(4,4-二甲基-4,5-二氢-2-唑基)吡啶(174mg，0.9874mmol)于二氯乙烷(35mL)中的溶液用氮气吹扫5分钟。添加三氟乙酸钯(II)(269mg，0.8091mmol)，将管密封并将反应混合物在60℃下加热过夜。一旦冷却至室温，将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0％至50％ EtOAc/庚烷纯化，得到呈白色固体的3-氧代-5-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.35g，61％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.43(br.s.,9H),2.56-2.91(m,2H),3.17-3.61(m,2H),3.79-4.42(m,3H),7.04-7.49(m,5H).ESI-MS m/z计算值275.1521，实验值220.1(M-C4H8+1)+；保留时间：2.2分钟(LC方法O)。
步骤2：3-羟基-5-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯
在0℃下，将硼氢化钠(270mg，7.1367mmol)添加到3-氧代-5-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.94g，7.0458mmol)于甲醇(20mL)中的溶液中并将反应混合物在相同温度下搅拌1小时。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(100mL)淬灭，并且将水层使用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将有机层合并，经硫酸钠干燥并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0％至30％的EtOAc/庚烷纯化，得到呈白色固体的3-羟基-5-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.4g，69％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.47(s,9H),1.55-1.72(m,2H),2.23-2.37(m,1H),2.45-2.86(m,3H),3.70-3.88(m,1H),4.04-4.46(m,2H),7.18-7.41(m,5H).ESI-MS m/z计算值277.1678，实验值300.2(M+Na)+；保留时间：4.18分钟(LC方法G)。
步骤3：3-(4-硝基苯甲酰基)氧-5-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯
将偶氮二甲酸二异丙酯(92.430mg，0.09mL，0.4571mmol)于四氢呋喃(1mL)中的溶液缓慢添加到3-羟基-5-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(100mg，0.3605mmol)、三苯基膦(114mg，0.1007mL，0.4346mmol)和4-硝基苯甲酸(73mg，0.4368mmol)于四氢呋喃(5mL)中的溶液中并将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用水(2mL)稀释并在减压下浓缩。将残余物用水(10mL)稀释并且使用乙醚(3×10mL)萃取。将有机层合并，用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0％至15％的EtOAc/庚烷纯化，得到呈白色固体的3-(4-硝基苯甲酰基)氧-5-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(106mg，69％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.12-1.34(m,10H),1.94-2.14(m,1H),2.38(d,J＝14.1Hz,1H),2.99-3.36(m,2H),4.19-4.69(m,2H),5.22-5.42(m,1H),7.20-7.42(m,5H),8.15-8.39(m,4H).ESI-MS m/z计算值426.1791，实验值371.1(M-C4H8+1)++；保留时间：2.51分钟(LC方法C)。
步骤4：3-羟基-5-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯
将氢氧化锂(1M的0.5mL，0.5000mmol)添加到3-(4-硝基苯甲酰基)氧-5-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(106mg，0.2486mmol)于四氢呋喃(3mL)中的溶液中并将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用水(20mL)稀释并且使用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将有机层合并，经硫酸钠干燥并在减压下浓缩，得到呈白色固体的3-羟基-5-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(59mg，86％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.42(s,9H),1.82-1.90(m,2H),2.87-2.99(m,1H),3.05(dd,J＝13.3,2.1Hz,1H),3.07-3.21(m,1H),3.78-3.84(m,1H),3.87(dq,J＝6.1,3.1Hz,1H),3.93(dd,J＝13.0,3.7Hz,1H),4.33-4.45(m,1H),7.16-7.40(m,5H).ESI-MS m/z计算值277.1678，实验值222.2(M-C4H8+1)++；保留时间：1.97分钟(LC方法C)。
步骤5：18-(2,6-二甲基苯基)-5-苯基-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(19),9(21),10,12,16(20),17-六烯-8,14,14-三酮，非对映异构体1(化合物223)，以及18-(2,6-二甲基苯基)-5-苯基-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(19),9(21),10,12,16(20),17-六烯-8,14,14-三酮，非对映异构体2(化合物224)
在3mL小瓶中，将3-羟基-5-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(60.1mg，0.2080mmol)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(80mg，0.1914mmol)溶解于NMP(1.0mL)中，向其中添加NaH(60％w/w的35mg，0.8751mmol)。将该混合物在室温下搅拌1.5小时，之后将其用1N HCl(1.0mL)滴加淬灭并用乙酸乙酯(3×2mL)萃取。将合并的有机萃取物用水(4mL)和饱和氯化钠水溶液(4mL)洗涤，然后经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中蒸发。粗产物3-[[4-[(1-叔丁氧基羰基-5-苯基-3-哌啶基)氧]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(约200mg)不经进一步纯化就进入下一步骤。在3mL小瓶中，将来自上述的粗产物溶解于二噁烷(0.75mL)中并用HCl的二噁烷溶液(4.0M的0.25mL，1.000mmol)处理。将该混合物在室温下搅拌15分钟，然后在50℃下搅拌1.5小时。然后将所述混合物冷却至室温，用1:1MeOH:DMSO(1mL)稀释，过滤并通过反相HPLC(1-50％乙腈/水，使用HCl作为改性剂)纯化，得到两个可分离的非对映异构体：非对映异构体1，3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(5-苯基-3-哌啶基)氧]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(4.5mg，4％)ESI-MS m/z计算值558.19366，实验值559.4(M+1)+；保留时间：1.14分钟(LC方法A)；以及非对映异构体2，3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(5-苯基-3-哌啶基)氧]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(73.7mg，65％)ESI-MS m/z计算值558.19366，实验值559.4(M+1)+；保留时间：1.25分钟(LC方法A)。对每个非对映异构体分别进行大环化。
在3mL小瓶中，将非对映异构体1溶解于DMF(200μL)中，并用DIPEA(25μL，0.14mmol)和HATU(7.5mg，0.020mmol)处理。将该混合物在室温下搅拌5分钟，然后将其用MeOH(200μL)稀释，过滤并通过反相HPLC(1-70％乙腈/水，使用HCl作为改性剂)纯化，得到“非对映异构体1”，18-(2,6-二甲基苯基)-5-苯基-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(19),9(21),10,12,16(20),17-六烯-8,14,14-三酮(0.9mg，1％)ESI-MS m/z计算值540.1831，实验值541.4(M+1)+；保留时间：1.64分钟(LC方法A)。
在3mL小瓶中，将非对映异构体2溶解于DMF(2.0mL)中，并用DIPEA(0.25mL，1.435mmol)和HATU(75mg，0.1972mmol)处理。将该混合物在室温下搅拌5分钟，然后将其用MeOH(0.3mL)稀释，过滤并通过反相HPLC(1-70％乙腈/水，使用HCl作为改性剂)纯化，得到“非对映异构体2”，18-(2,6-二甲基苯基)-5-苯基-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(19),9(21),10,12,16(20),17-六烯-8,14,14-三酮(32.5mg，31％)1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ13.46-11.55(bs,1H),8.59(s,1H),8.03-7.88(m,1H),7.81-7.62(m,2H),7.48-7.42(m,2H),7.41-7.36(m,2H),7.33-7.28(m,1H),7.26(t,J＝7.7Hz,1H),7.13(d,J＝7.7Hz,2H),6.38(s,1H),5.45-5.32(m,1H),4.51(dd,J＝12.6,4.3Hz,1H),3.95(d,J＝12.6Hz,1H),3.33-3.24(m,1H),3.03-2.87(m,2H),2.47-2.38(m,1H),2.22(q,J＝11.9Hz,1H),2.15-1.99(bs,6H)ESI-MS m/z计算值540.1831，实验值541.1(M+1)+；保留时间：1.76分钟(LC方法A)。
实例122：化合物225的制备
步骤1：(E)-N-烯丙基-1-苯基-甲亚胺
向苯甲醛(10g，94.231mmol)于二氯甲烷(140mL)中的溶液中添加丙-2-烯-1-胺(6.4685g，8.5mL，113.29mmol)和无水硫酸镁(9.4g，78.094mmol)。将所得悬浮液在室温下搅拌过夜。将反应混合物在硅藻土上过滤，用甲基叔丁基醚洗涤几次。将滤液在减压下浓缩，得到呈黄色油的粗(E)-N-烯丙基-1-苯基-甲亚胺(12.93g，95％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.28(dq,J＝5.8,1.5Hz,2H),5.08-5.34(m,2H),6.09(ddt,J＝17.2,10.2,5.7Hz,1H),7.36-7.50(m,3H),7.70-7.83(m,2H),8.24-8.37(m,1H).
步骤2：N-烯丙基-1-苯基-丁-3-烯-1-胺
向(E)-N-烯丙基-1-苯基-甲亚胺(12.93g，89.049mmol)于二氯甲烷(140mL)中的溶液中滴加烯丙基(溴)镁于乙醚(1M的178mL，178.00mmol)中的溶液并将反应混合物在室温下搅拌2天。缓慢添加饱和氯化铵水溶液(50mL)，剧烈搅拌并添加水(150mL)以溶解固体。将有机层倾析，并且将水层用甲基叔丁基醚(2×300mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并在减压下浓缩，得到呈棕色油的粗N烯丙基-1-苯基-丁-3-烯-1-胺(18.15g，109％)。ESI-MS m/z计算值187.1361，实验值188.2(M+1)+；保留时间：1.3分钟；LC方法P。
步骤3：N-烯丙基-N-(1-苯基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯
向N-烯丙基-1-苯基-丁-3-烯-1-胺(16.677g，89.049mmol)于二氯甲烷(500mL)中的溶液中添加三乙胺(11.979g，16.5mL，118.38mmol)，然后添加Boc酸酐(31.54g，33.200mL，144.52mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。添加饱和氯化铵水溶液(150mL)并且将相倾析。将水层用甲基叔丁基醚(150mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并在减压下浓缩。将粗在硅胶垫上预纯化，用100％庚烷，然后用5％乙酸乙酯洗脱。将级分之一在硅胶色谱法上纯化，用0％至5％乙酸乙酯/庚烷洗脱，得到呈浅黄色油的不纯的N-烯丙基-N-(1-苯基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯(6.167g，24％)。ESI-MS m/z计算值287.1885，实验值232.2(M-C4H8+1)+；保留时间：2.35分钟(LC方法P)。
步骤4：2-苯基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯
在带有隔膜的密封管中，将N-烯丙基-N-(1-苯基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯(404mg，1.4057mmol)于甲苯(12mL)中的溶液用氮气鼓泡10分钟。然后添加Grubbs第2代催化剂(32.1mg，0.0378mmol)并将反应混合物在80℃下加热2小时。然后，将磨碎的氢氧化钠(86mg，2.1502mmol)添加到反应混合物中，将密封管密封并加热至110℃过夜。一旦冷却至室温，添加水(50mL)并将相分离。将水层用甲基叔丁基醚(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物在硅胶色谱法上纯化，通过0％至5％乙酸乙酯/庚烷洗脱，得到呈白色固体的2-苯基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(94mg，26％)。ESI-MS m/z计算值259.1572，实验值204.2(M-C4H8+1)+；保留时间：2.34分钟(LC方法C)并且2-苯基-3,6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(151mg，41％)也获得为黄棕色油。ESI-MS m/z计算值259.1572，实验值204.2.0(M-C4H8+1)++；保留时间：2.25分钟(LC方法C)。
步骤5：5-羟基-2-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯，非对映异构体1和2
在-78℃下，向2-苯基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(94mg，0.3625mmol)于四氢呋喃(3mL)中的溶液中添加硼烷二甲基硫醚(40.050mg，0.05mL，0.5272mmol)。将反应混合物在-78℃下搅拌1小时，然后在室温下搅拌过夜。将反应混合物冷却至0℃，连续添加氢氧化钠水溶液(2M的0.8mL，1.6000mmol)和过氧化氢(30％w/v的0.5mL，4.4099mmol)并在室温下搅拌1小时。添加水(25mL)并用乙酸乙酯(2×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物在硅胶色谱法上纯化，通过0％至30％乙酸乙酯/庚烷洗脱，得到呈无色粘状油(非对映异构体1)的5-羟基-2-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(24mg，24％)，1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.48(s,9H),1.58-1.80(m,3H),2.13(dd,J＝14.4,2.9Hz,1H),2.23-2.43(m,1H),2.91(d,J＝14.1Hz,1H),3.87(br.s.,1H),4.09(d,J＝13.8Hz,1H),5.44(br.s.,1H),7.16-7.44(m,5H).ESI-MS m/z计算值277.1678，实验值300.2(M+Na)+；保留时间：1.91分钟(LC方法C)；以及呈无色粘状油(非对映异构体2)的5-羟基-2-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(43mg，43％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.49(s,9H),1.57-1.86(m,3H),2.14(dq,J＝14.3,3.3Hz,1H),2.24-2.44(m,1H),2.92(dd,J＝14.4,1.8Hz,1H),3.88(br.s.,1H),4.04-4.18(m,1H),5.46(br.s.,1H),7.20-7.44(m,5H).ESI-MS m/z计算值277.1678，实验值300.2(M+Na)++；保留时间：1.90分钟(LC方法C)。
步骤6：18-(2,6-二甲基苯基)-6-苯基-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(19),9(21),10,12,16(20),17-六烯-8,14,14-三酮，非对映异构体1(化合物225)
在3mL小瓶中，将5-羟基-2-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(非对映异构体1)(50mg，0.1687mmol)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(70mg，0.1675mmol)溶解于NMP(1.0mL)中，向其中添加NaH(60％w/w的35mg，0.8751mmol)。将该混合物在室温下搅拌2.5小时，之后将其用1N HCl(1.0mL)滴加淬灭并用乙酸乙酯(3×2mL)萃取。将合并的有机萃取物用水(4mL)和饱和氯化钠水溶液(4mL)洗涤，然后经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中蒸发。粗产物3-[[4-[(1-叔丁氧基羰基-6-苯基-3-哌啶基)氧]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(约150mg)不经进一步纯化就进入下一步骤。在3mL小瓶中，将来自上述的粗产物溶解于二噁烷(0.75mL)中并用HCl的二噁烷溶液(4.0M的0.25mL，1.000mmol)处理。将该混合物在室温下搅拌15分钟，然后在50℃下搅拌1小时。然后将所述混合物冷却至室温，用1:1MeOH:DMSO(1mL)稀释，过滤并通过反相HPLC(1-50％乙腈/水，使用HCl作为改性剂)纯化，得到3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(6-苯基-3-哌啶基)氧]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(43.2mg，43％)ESI-MS m/z计算值558.19366，实验值559.4(M+1)+；保留时间：1.17分钟(LC方法A)。
在3mL小瓶中，将来自上述的产物溶解于DMF(0.6mL)中，并用DIPEA(50μL，0.2871mmol)和Ph2P(O)-OC6F5(58.2mg，0.1515mmol)处理。将该混合物在室温下搅拌10分钟，然后将其用MeOH(0.3mL)稀释，过滤并通过反相HPLC(1-70％乙腈/水，使用HCl作为改性剂)纯化，得到3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(6-苯基-3-哌啶基)氧]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(2,3,4,5,6-五氟苯基)酯(26.3mg，22％)ESI-MS m/z计算值724.17786，实验值725.4(M+1)+；保留时间：1.7分钟(LC方法A)。
在3mL小瓶中，将来自上述的产物溶解于NMP(1.0mL)中，并在90℃下加热30分钟，然后在130℃下加热30分钟。然后将该混合物冷却至室温，过滤并通过反相HPLC(1-70％乙腈/水，使用HCl作为改性剂)纯化，得到18-(2,6-二甲基苯基)-6-苯基-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(19),9(21),10,12,16(20),17-六烯-8,14,14-三酮(6mg，7％)ESI-MS m/z计算值540.1831，实验值541.4(M+1)+；保留时间：1.72分钟(LC方法A)。
实例123：化合物226的制备
步骤1：5-羟基-2-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯，非对映异构体1和2
在-78℃下，向2-苯基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(1.17g，4.5114mmol)于四氢呋喃(35mL)中的溶液中添加硼烷二甲基硫醚(480.60mg，0.6mL，6.3263mmol)。将反应混合物在-78℃下搅拌1小时，然后在室温下搅拌过夜。将反应混合物冷却至0℃，缓慢连续添加氢氧化钠水溶液(2M的10mL，20.000mmol)和过氧化氢(30％w/v的6.5mL，57.328mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌5分钟，然后在室温下搅拌1小时。添加水(80mL)并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物在硅胶色谱法上纯化，通过0％至30％乙酸乙酯/庚烷洗脱，得到呈粘状无色油(非对映异构体1)的5-羟基-2-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(314mg，25％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.49(s,9H),1.57-1.86(m,3H),2.14(dq,J＝14.3,3.3Hz,1H),2.24-2.44(m,1H),2.92(dd,J＝14.4,1.8Hz,1H),3.88(br.s.,1H),4.04-4.18(m,1H),5.46(br.s.,1H),7.20-7.44(m,5H).ESI-MS m/z计算值277.1678，实验值300.2(M+Na)++；保留时间：4.11分钟(LC方法C)；并且5-羟基-2-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(119mg，9％)也获得为无色粘状油(非对映异构体2)，1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.31-1.44(m,2H),1.49(s,9H),1.85-2.02(m,2H),2.35-2.47(m,1H),2.52(dd,J＝12.8,10.7Hz,1H),3.73(td,J＝10.4,5.3Hz,1H),4.22(dd,J＝12.9,5.0Hz,1H),5.40(br.s.,1H),7.15-7.42(m,5H).ESI-MS m/z计算值277.1678，实验值300.2(M+Na)++；保留时间：4.11分钟(LC方法G)。
步骤2：18-(2,6-二甲基苯基)-6-苯基-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(19),9(21),10,12,16(20),17-六烯-8,14,14-三酮，非对映异构体2(化合物226)
在3mL小瓶中，将5-羟基-2-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(50mg，0.1713mmol)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(70mg，0.1675mmol)溶解于NMP(1.0mL)中，向其中添加NaH(60％w/w的35mg，0.8751mmol)。将该混合物在室温下搅拌2.5小时，之后将其用1N HCl(1.0mL)滴加淬灭并用乙酸乙酯(3×2mL)萃取。将合并的有机萃取物用水(4mL)和饱和氯化钠水溶液(4mL)洗涤，然后经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中蒸发。粗产物3-[[4-[(1-叔丁氧基羰基-6-苯基-3-哌啶基)氧]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(约150mg)不经进一步纯化就进入下一步骤。在3mL小瓶中，将粗产物溶解于二噁烷(0.75mL)中并用HCl的二噁烷溶液(4.0M的0.25mL，1.000mmol)处理。将该混合物在室温下搅拌15分钟，然后在50℃下搅拌1小时。然后将所述混合物冷却至室温，用1:1MeOH:DMSO(1mL)稀释，过滤并通过反相HPLC(1-50％乙腈/水，使用HCl作为改性剂)纯化，得到3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(6-苯基-3-哌啶基)氧]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(55.7mg，56％)ESI-MS m/z计算值558.19366，实验值559.4(M+1)+；保留时间：1.14分钟(LC方法A)。
在3mL小瓶中，将来自上述的产物溶解于DMF(0.6mL)中，并用DIPEA(50μL，0.2871mmol)和HATU(50mg，0.1315mmol)处理。将该混合物在室温下搅拌5分钟，然后将其用MeOH(0.3mL)稀释，过滤并通过反相HPLC(1-99％乙腈/水，使用HCl作为改性剂)纯化，得到18-(2,6-二甲基苯基)-6-苯基-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(19),9(21),10,12,16(20),17-六烯-8,14,14-三酮(33.1mg，37％)1HNMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ13.37-11.56(bs,1H),8.63(s,1H),8.02-7.91(m,1H),7.90-7.77(m,1H),7.76-7.64(m,1H),7.46-7.36(m,4H),7.33-7.28(m,1H),7.24(t,J＝7.5Hz,1H),7.10(d,J＝7.6Hz,2H),6.24(s,1H),5.81(d,J＝5.2Hz,1H),5.40-5.28(m,1H),3.80(d,J＝13.3Hz,1H),2.71(d,J＝14.5Hz,1H),2.55(dd,J＝14.5,10.8Hz,1H),2.41-2.29(m,1H),2.27-2.20(m,1H),2.16-1.87(bs,6H),1.81-1.69(m,1H)ESI-MS m/z计算值540.1831，实验值541.4(M+1)+；保留时间：1.8分钟(LC方法A)。
实例124：化合物227的制备
步骤1：3-[苄基-(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]丙酸
向3-(苄氨基)丙酸乙酯(25g，120.8mmol)于乙醇(200mL)中的溶液中添加氢氧化钾(8.1g，144.6mmol)并将混合物在室温下搅拌5小时。将反应混合物用三氟乙酸中和并浓缩。向残余物中添加三氟乙酸酐(100mL，708mmol)并且将混合物在室温下搅拌16小时。将混合物浓缩，并且将残余物在氯仿(200mL)与水(200mL)之间分配。将有机层分离，并且将水层用氯仿(2×50mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并浓缩，得到呈无色油的粗3-(N-苄基-2,2,2-三氟乙酰胺基)丙酸(30.9g，93％)。ESI-MS m/z计算值275.07693，实验值276.2(M+1)+；保留时间：2.52分钟；LC方法B。
步骤2：2-(2,2,2-三氟乙酰基)-3,4-二氢-1H-2-苯并氮杂-5-酮
将3-(N-苄基-2,2,2-三氟乙酰胺基)丙酸(30.9g，112.4mmol)和亚硫酰氯(150mL，2.06mol)的混合物在室温下搅拌16小时并浓缩。将残余物溶解于1,2-二氯乙烷(350mL)中并添加无水氯化铝(31g，233mmol)。将混合物在60℃下搅拌1小时并且然后倒入冰水(500mL)中。将有机层分离，并且将水层用氯仿(2×100mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，浓缩并将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-20％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈无色油的2-(2,2,2-三氟乙酰基)-1,2,3,4-四氢苯并[c]氮杂-5-酮(10.83g，37％)。ESI-MS m/z计算值257.06638，实验值258.3(M+1)+；保留时间：2.51分钟；LC方法B。
步骤3：5-羟基-1,3,4,5-四氢-2-苯并氮杂-2-羧酸叔丁酯
向2-(2,2,2-三氟乙酰基)-1,2,3,4-四氢苯并[c]氮杂-5-酮(10.83g，42.1mmol)于乙醇(200mL)中的溶液中分批添加硼氢化钠(3.12g，82.1mmol)并将混合物在室温下搅拌1小时。添加3M碳酸钾水溶液(200mL)和氯仿(200mL)，然后添加二碳酸二叔丁酯(10g，45.87mmol)。将混合物在室温下搅拌3小时。将有机层分离，并且将水层用氯仿(2×100mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-20％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈白色固体的5-羟基-4,5-二氢-1H-苯并[c]氮杂-2(3H)-羧酸叔丁酯(10.57g，95％)。1H NMR(250MHz,DMSO)δ7.41(d,J＝7Hz,1H),7.26-7.16(m,3H),5.42(d,J＝4Hz,1H),4.87(br.s,1H),4.51(d,J＝14.75Hz,1H),4.24(d,J＝14.75Hz,1H),3.89-3.73(m,1H),3.65-3.43(m,1H),1.90-1.59(m,2H),1.29(s,9H).ESI-MS m/z计算值263.15213，实验值264.0(M+1)+；保留时间：2.03分钟；LC方法B。
步骤4：12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[14.7.2.13,7.110,14.017,22]十七碳-3(27),4,6,10(26),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(化合物227)
在3mL小瓶中，将5-羟基-1,3,4,5-四氢-2-苯并氮杂-2-羧酸叔丁酯(60mg，0.2228mmol)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(80mg，0.1914mmol)溶解于NMP(1.0mL)中，向其中添加NaH(60％w/w的35mg，0.8751mmol)。将该混合物在室温下搅拌1.5小时，之后将其用1N HCl(1.0mL)滴加淬灭并用乙酸乙酯(3×2mL)萃取。将合并的有机萃取物用水(4mL)和饱和氯化钠水溶液(4mL)洗涤，然后经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中蒸发。将粗产物(约160mg)在不进行进一步纯化的情况下用于下一步骤。在3mL小瓶中，将粗产物溶解于二噁烷(1.5mL)中并用HCl的二噁烷溶液(4.0M的0.5mL，2.000mmol)处理。将该混合物在室温下搅拌15分钟，然后在50℃下搅拌1.5小时。然后将所述混合物冷却至室温，用1:1MeOH:DMSO(1mL)稀释，过滤并通过反相HPLC(1-50％乙腈/水，使用HCl作为改性剂)纯化，得到3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-(2,3,4,5-四氢-1H-2-苯并氮杂-5-基氧基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(49.2mg，41％)ESI-MS m/z计算值544.17804，实验值545.4(M+1)+；保留时间：1.08分钟(LC方法A)。
在20mL小瓶中，将来自上述的产物(49.2mg，93％纯度，0.0787mmol)溶解于DMF(6.0mL)中，并用DIPEA(0.3mL，1.722mmol)和HATU(75mg，0.1972mmol)处理。将该混合物在室温下搅拌5分钟，然后将其用MeOH(1.0mL)稀释，过滤并通过反相HPLC(1-70％乙腈/水，使用HCl作为改性剂)纯化，得到12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[14.7.2.13,7.110,14.017,22]十七碳-3(27),4,6,10(26),11,13,17,19,21-壬烯-2,8,8-三酮(12.2mg，12％)1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ13.42-11.57(bs,1H),8.25-8.03(bs,1H),7.96-7.85(m,1H),7.82-7.64(m,2H),7.62-7.52(m,1H),7.47-7.41(m,1H),7.39-7.32(m,2H),7.28(t,J＝7.5Hz,1H),7.15(d,J＝7.6Hz,2H),6.77(d,J＝10.7Hz,1H),6.73-6.47(bs,1H),5.49(d,J＝16.4Hz,1H),4.47(d,J＝16.3Hz,1H),3.41-3.29(m,2H,隐藏在水峰下),2.30-1.91(m,8H)ESI-MS m/z计算值526.1675，实验值527.4(M+1)+；保留时间：1.65分钟(LC方法A)。
实例125：化合物228的制备
步骤1：3-(4-甲氧基苯氧基)-4,5-二氢-1H-苯并[b]氮杂-2(3H)-酮
将3-溴-4,5-二氢-1H-苯并[b]氮杂-2(3H)酮(20.0g，83.7mmol)和4-甲氧基苯酚(25.95g，209.2mmol)于丙酮(349mL)中的混合物冷却至0℃。一次性加入碳酸铯(68.16g，209.2mmol)并将反应在0℃下搅拌五小时，然后温热至室温并搅拌16小时。将无机固体过滤出并将滤饼用丙酮冲洗。将固体溶解于水(50mL)中并用乙酸乙酯(3×75mL)萃取。将合并的有机层浓缩并溶解于乙酸乙酯(150mL)中。将溶液用水(50mL)、1M氢氧化钠水溶液(50mL)和盐水(50mL)洗涤，然后经硫酸钠干燥并浓缩，得到呈白色固体的3-(4-甲氧基苯氧基)-4,5-二氢-1H-苯并[b]氮杂-2(3H)-酮(21.1g，90％)。ESI-MS m/z计算值283.12，实验值284.5(M+1)+.保留时间：2.74分钟。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.60(s,1H)7.10-7.33(m,3H)6.93-7.03(m,1H)6.66-6.83(m,4H)4.63(t,J＝8.46Hz,1H)3.72(s,3H)2.91-3.08(m,1H)2.62-2.88(m,2H)2.42-2.59(m,1H).
步骤2：3-(4-甲氧基苯氧基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[b]氮杂
向3-(4-甲氧基苯氧基)-4,5-二氢-1H-苯并[b]氮杂-2(3H)-酮(24.03g，83.7mmol)于四氢呋喃(175mL)中的溶液中小心添加于四氢呋喃中的2M硼烷二甲基硫醚络合物(87.88mL，175.76mmol)。一旦鼓泡停止，将反应加热回流3.5小时。将反应冷却至0℃并用水(100mL)小心地淬灭。将挥发物在真空下去除并将水层用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并浓缩。将残余物用乙醇研磨并将形成的固体通过过滤收集，得到呈白色结晶粉末的3-(4-甲氧基苯氧基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[b]氮杂(两个步骤内15.55g，69％)。ESI-MS m/z计算值269.14，实验值270.3(M+1)+.保留时间：2.18分钟。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.02-7.15(m,2H)6.80-6.96(m,5H)6.74(d,J＝7.80Hz,1H)4.40(tt,J＝7.95,3.80Hz,1H)3.79(s,3H)3.37-3.55(m,1H)2.89-3.19(m,2H)2.70(dd,J＝14.23,11.26Hz,2H)2.08-2.31(m,1H)1.71-1.94(m,1H).
步骤3：3-(4-甲氧基苯氧基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[b]氮杂-1-羧酸苄酯
向3-(4-甲氧基苯氧基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[b]氮杂(11.17g，41.5mmol)于四氢呋喃(170mL)和饱和碳酸钠水溶液(170mL)中的混合物中缓慢添加于甲苯(250mL，81.74mmol)中的33％氯甲酸苄酯溶液并将双相混合物在室温下搅拌一小时。将两个层分离，并将水层用乙酸乙酯(3×75mL)萃取。将合并的有机层用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并还原，得到呈黄色油的3-(4-甲氧基苯氧基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[b]氮杂-1-羧酸苄酯，其无需进一步纯化即可使用。ESI-MS m/z计算值403.18，实验值404.5(M+1)+.保留时间：3.95分钟。
步骤4：3-羟基-2,3,4,5-四氢o-1H-苯并[b]氮杂-1-羧酸苄酯
将3-(4-甲氧基苯氧基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[b]氮杂-1-羧酸苄酯(16.73g，41.5mmol)于乙腈(140mL)和水(35mL)的4:1混合物中的溶液冷却至0℃。分批添加硝酸铈铵(63.7g，116.2mmol)并且将反应混合物在0℃下搅拌10分钟。将混合物浓缩，并且将残余物溶解于水(75mL)和乙酸乙酯(75mL)中。将两个层分离，并将水层用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将粗残余物通过硅胶柱色谱法使用0-30％二氯甲烷-乙酸乙酯纯化，得到呈橙色固体的3-羟基-2,3,4,5-四氢o-1H-苯并[b]氮杂-1-羧酸苄酯(6.4g，52％)。1H NMR(250MHz,DMSO)δ7.84-6.59(m,9H),5.11(dd,J＝24.0,11.6Hz,3H),4.32(d,J＝13.3Hz,1H),3.72(s,1H),2.86-2.52(m,2H),2.36(d,J＝12.4Hz,1H),2.09(s,1H),1.48-0.89(m,1H).ESI-MS m/z计算值297.14，实验值298.6(M+1)+.保留时间：2.84分钟。
步骤5：2,3,4,5-四氢-1H-1-苯并氮杂-3-醇
在室温下，向3-羟基-2,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂-1-羧酸苄酯(940mg，3.1613mmol)于乙醇(35mL)中的搅拌的溶液中添加钯/炭(220mg，10％w/w，0.2067mmol)并将反应混合物在氢气(1atm)气氛下搅拌16小时。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并在真空下浓缩，得到呈红色油的2,3,4,5-四氢-1H-1-苯并氮杂-3-醇(535mg，99％)。产物不经进一步纯化即用于下一步。ESI-MS m/z计算值163.09972，实验值164.6(M+1)+；保留时间：1.48分钟；LC方法S。
步骤6：N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-(3-羟基-2,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂-1-羰基)苯磺酰胺
在室温下，向2,3,4,5-四氢-1H-1-苯并氮杂-3-醇(515mg，2.9976mmol)和TEA(1.8150g，2.5mL，17.937mmol)于DCM(20mL)中的搅拌的溶液中滴加3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰氯(1.1g，2.1430mmol)于DCM(20mL)中的溶液。在添加完成之后，将反应混合物搅拌1小时。在完成之后，将反应用1M盐酸水溶液(10mL)淬灭。将两个层分离，并将水层用DCM(2×25mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将产物通过硅胶色谱法使用0-65％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈白色固体的N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-(3-羟基-2,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂-1-羰基)苯磺酰胺(440mg，27％)。ESI-MS m/z计算值562.14417，实验值563.4(M+1)+；保留时间：5.51分钟(LC方法S)。
步骤7：5-(2,6-二甲基苯基)-2-氧杂-9λ6-硫杂-6,8,16,27-四氮杂五环[14.8.1.13,7.110,14.017,22]十七碳-3(27),4,6,10,12,14(26),17(22),18,20-壬烯-9,9,15-三酮(化合物228)
在室温下在氮气下，向N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-(3-羟基-2,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂-1-羰基)苯磺酰胺(370mg，0.6571mmol)于无水DMF(30mL)中的搅拌的溶液中添加氢化钠(320mg，60％w/w，8.0008mmol)并将反应混合物搅拌48小时。在完成之后，将反应混合物冷却至0℃并用10％柠檬酸水溶液(25mL)和水(50mL)淬灭。将产物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×40mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将产物通过硅胶色谱法使用0-65％己烷-乙酸乙酯，然后通过反相HPLC使用水(5mM HCl缓冲液)-乙腈梯度方法(C18Higgins分析柱，35-70％乙腈，25毫升/分钟)纯化，得到呈白色固体的5-(2,6-二甲基苯基)-2-氧杂-9λ6-硫杂-6,8,16,27-四氮杂五环[14.8.1.13,7.110,14.017,22]十七碳-3(27),4,6,10,12,14(26),17(22),18,20-壬烯-9,9,15-三酮(52mg，15％)。ESI-MS m/z计算值526.1675，实验值527.2(M+1)+；保留时间：2.34分钟；LC方法T。1HNMR(250MHz,DMSO-d6)δ8.68(s,1H),7.95(d,J＝7.6Hz,1H),7.87-7.63(m,2H),7.54-7.19(m,6H),7.12(d,J＝7.6Hz,2H),6.26(s,1H),5.89-5.55(m,1H),3.83(d,J＝13.4Hz,1H),3.12(t,J＝13.5Hz,2H),2.87(t,J＝12.6Hz,2H),2.23-1.88(m,6H),1.59(q,J＝12.3Hz,1H).
实例126：化合物229的制备
步骤1：N-[(1-烯丙基环戊基)甲基]-4-硝基-苯磺酰胺
将(1-烯丙基环戊基)甲胺(0.20g，1.436mmol)、三乙胺(0.40mL，2.870mmol)和4-硝基苯磺酰氯(0.32g，1.444mmol)于二氯甲烷(8mL)中的溶液搅拌18小时。将反应用二氯甲烷稀释并依次用水、1M HCl和水洗涤。将有机溶液经硫酸钠干燥并蒸发。将残余物通过硅胶柱色谱法用0-30％乙酸乙酯/己烷纯化，得到N-[(1-烯丙基环戊基)甲基]-4-硝基-苯磺酰胺(0.45g，97％)。ESI-MS m/z计算值324.11438，实验值325.1(M+1)+；保留时间：0.69分钟；LC方法D。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.37(d,J＝8.9Hz,2H),8.04(d,J＝8.9Hz,2H),5.82-5.62(m,1H),5.09-5.03(m,1H),5.02-4.99(m,1H),4.77(t,J＝6.5Hz,1H),2.83(d,J＝6.5Hz,2H),2.09(d,J＝7.4Hz,2H),1.69-1.52(m,4H),1.50-1.32(m,4H).
步骤2：[7-(4-硝基苯基)磺酰基-7-氮杂螺[4.5]癸烷-9-基]2,2,2-三氟乙酸酯
将N-[(1-烯丙基环戊基)甲基]-4-硝基-苯磺酰胺(0.13g，0.4007mmol)、(乙酰氧基)(苯基)-λ3-碘烷基乙酸酯(0.16g，0.4967mmol)和TFA(0.37mL，4.803mmol)于二氯甲烷(4mL)中的溶液搅拌18小时。将反应用二氯甲烷稀释并用饱和碳酸氢钠水溶液使其呈碱性。将有机物分离，并且将水层用二氯甲烷进一步萃取。将合并的萃取物用水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。将残余物通过硅胶柱色谱法用0-30％乙酸乙酯/己烷纯化，主要得到[7-(4-硝基苯基)磺酰基-7-氮杂螺[4.5]癸烷-9-基]2,2,2-三氟乙酸酯(0.13g，74％)，其中已经存在一些水解产物。将所述水解产物与碳酸钾(0.11g，0.7959mmol)一起在甲醇(4mL)中搅拌一小时，并将溶液通过硅胶塞，用乙酸乙酯洗脱。将溶液在真空下蒸发，得到7-(4-硝基苯基)磺酰基-7-氮杂螺[4.5]癸烷-9-醇(0.10g，73％)ESI-MS m/z计算值340.10928，实验值341.1(M+1)+；保留时间：0.57分钟呈无色固体(LC方法A)。
步骤3：7-氮杂螺[4.5]癸烷-9-醇
将7-(4-硝基苯基)磺酰基-7-氮杂螺[4.5]癸烷-9-醇(0.16g，0.4700mmol)、巯基乙酸(82μL，1.179mmol)和碳酸钾(0.33g，2.388mmol)于甲醇(5mL)中的溶液搅拌17小时。将反应用水稀释并用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取物经硫酸钠干燥并蒸发。向残余物中添加二氯甲烷(5mL)、叔丁氧羰基叔丁基碳酸酯(0.13g，0.5957mmol)和三乙胺(0.13mL，0.9327mmol)，并将反应搅拌19小时。将反应用水洗涤，经硫酸钠干燥，并在真空下蒸发。将残余物使用反相HPLC-MS方法使用由Phenomenex销售的Luna C18(2)柱(75×30mm，5μm粒径)(pn：00C-4252-U0-AX)和15.0分钟内从1-99％流动相B运行的双梯度纯化。流动相A＝H20(5mM HCl)。流动相B＝CH3CN。流速＝50毫升/分钟，并且柱温＝25℃，得到9-羟基-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(21mg，18％)ESI-MS m/z计算值255.18344，实验值256.2(M+1)+；保留时间：0.6分钟，获得呈无色油(LC方法D)。
步骤4：3-[[4-(7-氮杂螺[4.5]癸烷-9-基氧基)-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(35mg，0.08376mmol)、9-羟基-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(21mg，0.08224mmol)和叔丁醇钠(33mg，0.3434mmol)于THF(1mL)中的溶液搅拌21小时。将反应用1M柠檬酸淬灭，用水稀释，并用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。将残余物使用反相HPLC-MS方法使用由Phenomenex销售的Luna C18(2)柱(75×30mm，5μm粒径)(pn：00C-4252-U0-AX)和15.0分钟内从1-99％流动相B运行的双梯度纯化。流动相A＝H20(5mM HCl)。流动相B＝CH3CN。流速＝50毫升/分钟，并且柱温＝25℃。将所得无色固体与HCl(4M的2mL，8.000mmol)(于二噁烷中)一起搅拌一小时，并将蒸发溶剂，得到呈无色固体的3-[[4-(7-氮杂螺[4.5]癸烷-9-基氧基)-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(28mg，59％)ESI-MS m/z计算值536.20935，实验值537.3(M+1)+；保留时间：0.45分钟(LC方法D)。
步骤5：18'-(2,6-二甲基苯基)-2'-氧杂-14'λ6-硫杂-7',15',17',20'-四氮杂螺[环戊烷-1,5'-四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二烷]-1'(20'),9',11',13'(21'),16',18'-六烯-8',14',14'-三酮(化合物229)
将3-[[4-(7-氮杂螺[4.5]癸烷-9-基氧基)-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(28mg，0.04886mmol)、HATU(23mg，0.06049mmol)和三乙胺(28μL，0.2009mmol)于DMF(3mL)中的溶液搅拌17小时。将反应用水稀释，用1M柠檬酸酸化，并用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并在真空下蒸发。将残余物使用反相HPLC-MS方法使用由Phenomenex销售的Luna C18(2)柱(75×30mm，5μm粒径)(pn：00C-4252-U0-AX)和15.0分钟内从1-99％流动相B运行的双梯度纯化。流动相A＝H20(5mM HCl)。流动相B＝CH3CN。流速＝50毫升/分钟，并且柱温＝25℃，得到呈浅黄色固体获得的18'-(2,6-二甲基苯基)-2'-氧杂-14'λ6-硫杂-7',15',17',20'-四氮杂螺[环戊烷-1,5'-四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二烷]-1'(20'),9',11',13'(21'),16',18'-六烯-8',14',14'-三酮(13mg，47％)。ESI-MS m/z计算值518.1988，实验值519.3(M+1)+；保留时间：1.69分钟；LC方法A。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.39(s,1H),7.93(s,1H),7.68(s,2H),7.32-7.21(m,1H),7.18-7.07(m,2H),6.36(s,1H),5.22(s,1H),4.25(d,J＝12.6Hz,1H),3.93-3.80(m,1H),2.81(dd,J＝13.0,10.7Hz,1H),2.65(d,J＝12.6Hz,1H),2.16-1.99(m,7H),1.93(t,J＝11.9Hz,1H),1.76-1.47(m,8H),
实例127：化合物230的制备
步骤1：7-甲基辛-4-烯酸(E/Z混合物)
在氮气下，将溴化(3-羧丙基)三苯基磷鎓(47.222g，110.00mmol)于无水THF(10mL)中的悬浮液冷却至-10℃并滴加LiHMDS(1M的220.00mL，220.00mmol)。将反应混合物搅拌30分钟并且然后冷却至-78℃。滴加3-甲基丁醛(8.6132g，100mmol)并使反应混合物缓慢温热至室温过夜。将反应用水(500mL)淬灭并将挥发物在真空下去除。将残余水层用乙醚(2×250mL)洗涤，用盐酸水溶液(1M)酸化至pH为约2，并且将产物用乙酸乙酯(3×250mL)萃取。将合并的有机层用盐水(150mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到呈琥珀色油的7-甲基辛-4-烯酸的Z和E异构体的混合物(13.93g，89％)。产物不经进一步纯化即可进入下一步骤。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ5.58-5.28(m,2H),2.50-2.21(m,4H),1.90(dt,J＝18.1,6.4Hz,2H),1.59(dq,J＝13.5,7.0Hz,1H),0.87(dd,J＝8.2,6.6Hz,6H).
步骤2：5-(1-羟基-3-甲基-丁基)四氢呋喃-2-酮，非对映异构体1和2
在室温下，向三氧化甲基铼(VII)(1.3068g，5.2431mmol)于氯仿(100mL)中的搅拌的悬浮液中添加过氧化氢水溶液(8.2071g，50％w/w，120.64mmol)，随后添加(Z/E)-7-甲基辛-4-烯酸(13.93g，89.168mmol)于乙腈(100mL)中的溶液。将获得的反应混合物搅拌18小时。在完成之后，将反应用1M碳酸钠水溶液(30mL)和水(30mL)淬灭。将挥发物在真空下去除并将产物用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗产物通过硅胶色谱法使用0-30％己烷-乙酸乙酯纯化，得到2种异构体：呈白色固体的非对映异构体1(7.29g，47.5％)和呈黄色油的非对映异构体2(4.02g，26.2％)。非对映异构体：1H NMR(250MHz,CDCl3)δ4.38(td,J＝7.4,4.5Hz,1H),3.65(dt,J＝10.0,4.1Hz,1H),2.68-2.43(m,2H),2.33-2.01(m,2H),1.98-1.76(m,2H),1.53(ddd,J＝14.5,10.0,4.9Hz,1H),1.23(ddd,J＝13.4,7.2,3.4Hz,1H),0.94(td,J＝6.5,2.0Hz,6H).非对映异构体2:1H NMR(250MHz,CDCl3)δ4.41(td,J＝7.3,3.0Hz,1H),4.03(dt,J＝9.8,3.3Hz,1H),2.69–2.40(m,2H),2.38–1.98(m,3H),1.82(dddd,J＝13.3,11.6,9.0,6.6Hz,1H),1.38(ddd,J＝14.6,9.8,5.0Hz,1H),1.14(ddd,J＝13.8,9.1,3.6Hz,1H),0.94(dt,J＝9.1,5.5Hz,6H).
步骤3：[3-甲基-1-(5-氧代四氢呋喃-2-基)丁基]甲磺酸盐，非对映异构体2
在0℃下在氮气下，向5-(1-羟基-3-甲基-丁基)四氢呋喃-2-酮，非对映异构体2(4.02g，23.342mmol)和三乙胺(3.5430g，35.013mmol)于无水DCM(25mL)中的搅拌的溶液中滴加甲磺酰氯(3.2086g，28.010mmol)并将反应混合物搅拌1小时。在完成之后，将反应用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)冷淬灭。将两个层分离，并将水层用DCM(2×25mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到呈黄色油的[3-甲基-1-(5-氧代四氢呋喃-2-基)丁基]甲磺酸盐，非对映异构体2(5.98g，96％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ5.06-4.91(m,1H),4.60(td,J＝7.5,2.9Hz,1H),3.05(s,3H),2.68-2.48(m,2H),2.36-2.17(m,2H),1.90-1.54(m,2H),1.45-1.25(m,1H),1.06-0.87(m,6H).
步骤4：5-(1-叠氮基-3-甲基-丁基)四氢呋喃-2-酮，非对映异构体2
在氮气下，向[3-甲基-1-(5-氧代四氢呋喃-2-基)丁基]甲磺酸盐，非对映异构体2(5.98g，23.890mmol)于无水DMF(25mL)中的搅拌的溶液中一次性添加叠氮化钠(1.8637g，28.668mmol)并将反应混合物加热至80℃8小时。在完成之后，将反应混合物冷却至室温并用水(400mL)稀释。将产物用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。将合并的有机层用水(200mL)、盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到呈黄色油的5-(1-叠氮基-3-甲基-丁基)四氢呋喃-2-酮，非对映异构体2(4.33g，87％)。产物不经进一步纯化即用于下一步。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ4.50(m,1H),3.46-3.29(m,1H),2.75-2.43(m,2H),2.41-2.21(m,1H),2.20-2.00(m,1H),1.96 1.74(m,1H),1.73-1.55(m,1H),1.48-1.28(m,1H),1.08-0.84(m,6H).
步骤5：5-羟基-6-异丁基-哌啶-2-酮，非对映异构体2
向5-(1-叠氮基-3-甲基-丁基)四氢呋喃-2-酮，非对映异构体2(4.33g，21.954mmol)于无水甲醇(80mL)中的搅拌的溶液中添加氢氧化钯(1g，20％w/w，1.4241mmol)。将反应混合物在氢气下(1atm)在室温下搅拌48小时。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并在真空下浓缩，得到呈黄色油的5-羟基-6-异丁基-哌啶-2-酮，非对映异构体2(3.9g，93％)。产物无需进一步纯化即可用于下一步骤。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ5.83(s,1H),4.11-3.84(m,1H),3.55-3.31(m,1H),3.01-2.40(m,2H),2.40-2.18(m,1H),2.18-1.97(m,1H),1.97 1.59(m,2H),1.59-1.26(m,2H),1.04-0.73(m,6H).ESI-MS m/z计算值171.12593，实验值172.6(M+1)+；保留时间：1.89分钟；LC方法S。
步骤6：2-异丁基哌啶-3-醇，非对映异构体2
在室温下在氮气下，向5-羟基-6-异丁基-哌啶-2-酮，非对映异构体2(3.9g，22.775mmol)于无水THF(150mL)中的搅拌的溶液中滴加二甲基硫化硼(2M的34.163mL，68.325mmol)。在添加完成之后，将反应混合物加热至70℃2小时。将反应混合物冷却至0℃并用水(75mL)缓慢淬灭。将挥发物在真空下去除并将水层用1M氢氧化钠水溶液碱化至pH为约11。将产物用氯仿(3×120mL)萃取，将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到呈白色蜡的2-异丁基哌啶-3-醇，非对映异构体2(3.52g，88％)。产物不经进一步纯化即用于下一步。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ3.87-3.44(m,1H),2.87-2.36(m,2H),2.27-1.06(m,10H),1.05-0.71(m,6H).ESI-MS m/z计算值157.14667，实验值158.4(M+1)+；保留时间：1.24分钟；LC方法S。
步骤7：3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰氯
在室温下向3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(420mg，1.0051mmol)于亚硫酰氯(8.1550g，5mL，68.546mmol)中的搅拌的悬浮液中添加DMF(9.4400mg，10μL，0.1291mmol)并将所得混合物在45℃下加热18小时。在完成之后，将挥发物在真空下去除，得到呈黄色固体的粗3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰氯(478mg，32％)，其不经进一步纯化即可进入下一步骤。ESI-MS m/z计算值435.02112，实验值436.4(M+1)+；保留时间：6.56分钟；(LC方法S)。
步骤8：N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-(3-羟基-2-异丁基-哌啶-1-羰基)苯磺酰胺，非对映异构体2
向0℃下粗3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰氯(478mg，0.3177mmol)和TEA(726.00mg，1mL，7.1746mmol)于DCM(5mL)中的搅拌的溶液中滴加2-异丁基哌啶-3-醇，非对映异构体2(110mg，0.6995mmol)于DCM(5mL)中的溶液。在添加完成之后，使反应混合物温热至室温并搅拌1小时。在完成之后，将反应用1M盐酸水溶液(10mL)淬灭。将两个层分离，并将水层用DCM(2×25mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将产物通过硅胶色谱法使用0-65％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈白色固体的N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-(3-羟基-2-异丁基-哌啶-1-羰基)苯磺酰胺，非对映异构体2(120mg，58％)。ESI-MS m/z计算值556.1911，实验值557.6(M+1)+；保留时间：5.71分钟；LC方法S。
步骤9：18-(2,6-二甲基苯基)-22-(2-甲基丙基)-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(20),9(21),10,12,16,18-六烯-8,14,14-三酮(化合物230)
在室温下在氮气下，向N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-(3-羟基-2-异丁基-哌啶-1-羰基)苯磺酰胺，非对映异构体2(120mg，0.1831mmol)于无水DMF(10mL)中的搅拌的溶液中添加氢化钠(100mg，60％w/w，2.5002mmol)并将反应混合物搅拌24小时。在完成之后，将反应混合物冷却至0℃并用10％柠檬酸水溶液(10mL)和水(50mL)淬灭。将产物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×40mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将产物通过反相HPLC使用水(5mM HCl缓冲液)-乙腈梯度方法(C18Higgins分析柱，20-80％乙腈，40毫升/分钟)纯化，得到呈白色固体的18-(2,6-二甲基苯基)-22-(2-甲基丙基)-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(20),9(21),10,12,16,18-六烯-8,14,14-三酮(23mg，24％)。1H NMR(250MHz,DMSO(d6))δ8.46(s,1H),7.93(s,1H),7.67(s,2H),7.27(t,J＝7.5Hz,1H),7.13(d,J＝7.6Hz,2H),6.41(s,1H),5.32(s,1H),4.32(d,J＝13.5Hz,1H),4.16(s,1H),2.90(d,J＝10.8Hz,1H),2.23-1.64(m,11H),1.12(s,1H),0.97-0.78(m,1H),0.69(d,J＝6.5Hz,3H),0.02(d,J＝6.3Hz,3H).ESI-MS m/z计算值520.2144，实验值521.5(M+1)+；保留时间：2.44分钟；LC方法T。
实例128：化合物231的制备
步骤1：18-(2,6-二甲基苯基)-22-(2-甲基丙基)-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(20),9(21),10,12,16,18-六烯-8,14,14-三酮(化合物231)
在室温下在氮气下，向N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-(3-羟基-2-异丁基-哌啶-1-羰基)苯磺酰胺(非对映异构体1，以类似于上文对非对映异构体2所描述的方式制备，480mg，0.8616mmol)于无水DMF(50mL)中的搅拌的溶液中分几部分添加氢化钠(344.61mg，60％w/w，8.6160mmol)并将反应混合物搅拌40小时。在完成之后，将反应混合物冷却至0℃并用10％柠檬酸水溶液(40mL)和水(100mL)淬灭。将产物用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×75mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-65％己烷-乙酸乙酯，然后通过反相HPLC使用水(5mM HCl缓冲液)-乙腈梯度方法(C18Higgins分析柱，30-60％乙腈，25毫升/分钟)纯化，得到呈白色固体的18-(2,6-二甲基苯基)-22-(2-甲基丙基)-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(20),9(21),10,12,16,18-六烯-8,14,14-三酮(76mg，17％)。1H NMR(250MHz,DMSO(d6))δ8.46(s,1H),7.94-7.75(m,1H),7.59(d,J＝5.5Hz,2H),7.29-7.16(m,1H),7.10(d,J＝7.6Hz,2H),6.99(s,1H),4.61(s,1H),4.48(d,J＝13.2Hz,1H),3.05(dd,J＝9.3,4.4Hz,1H),2.97-2.78(m,1H),2.06(d,J＝6.2Hz,2H),1.91(s,7H),1.65(dd,J＝17.5,9.0Hz,2H),1.43-1.08(m,2H),0.62(d,J＝5.6Hz,3H),0.30(d,J＝5.5Hz,3H)。ESI-MSm/z计算值520.2144，实验值521.5(M+1)+；保留时间：2.41分钟；LC方法T。
实例129：化合物232的制备
步骤1：4-羟基-2,2-二甲基-丁酸
向3,3-二甲基四氢呋喃-2-酮(7.87g，68.949mmol)于MeOH(34mL)和水(34mL)的混合物中的溶液中添加NaOH(3.17g，79.256mmol)。将所得溶液在45℃下加热16小时。在减压下移除所有溶剂。将获得的固体用甲苯(50mL)处理并将甲苯在减压下去除。然后，将获得的固体溶解于水(60mL)中并冷却至0℃。缓慢添加盐酸水溶液(6N)，直到pH值达到4为止。将水溶液用2-甲基THF(6×80mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤并经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩成呈浅黄色油的4-羟基-2,2-二甲基-丁酸(6.11g，63％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ3.74(t,J＝6.6Hz,1H),1.86(t,J＝6.6Hz,1H),1.25(s,6H).
步骤2：5-羟基-3,3-二甲基-四氢呋喃-2-酮
在环境温度下向4-羟基-2,2-二甲基-丁酸(6.11g，43.459mmol)于无水DCM(435mL)中的溶液中添加戴斯-马丁过碘烷(20.001g，45.741mmol)。将所得溶液在环境温度下搅拌100分钟，过滤并用DCM(100mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩。将获得的残余物通过快速色谱法(加载在DCM中)(220g硅胶，用0至40％ EtOAc/己烷洗脱)纯化，将产物级分合并并在真空中浓缩，得到呈白色固体的5-羟基-3,3-二甲基-四氢呋喃-2-酮(3.318g，59％)。1HNMR(250MHz,CDCl3)δ5.87(t,J＝4.6Hz,1H),4.44(s,1H),2.38–2.23(m,1H),2.12–1.98(m,1H),1.38(s,3H),1.27(s,3H).
步骤3：(E)-2,2,7-三甲基辛-4-烯酸
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在-78℃下在氮气下，向异戊基三苯基溴化磷(42.060g，101.76mmol)于无水THF(120mL)中的搅拌的悬浮液中滴加n-BuLi(己烷中的2.5M的40.704mL，101.76mmol)。在添加完成之后，将反应混合物温热至0℃并搅拌1小时。在冷却至-78℃之后，滴加5-羟基-3,3-二甲基-四氢呋喃-2-酮(3.311g，25.441mmol)于无水THF(60mL)中的溶液。在添加完成之后，使反应混合物温热至室温并搅拌48小时。将反应用水(80mL)和1M盐酸水溶液(20mL)淬灭。将挥发物在真空下去除并将水层用乙酸乙酯(3×120mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-25％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈浅黄色油的(E)-2,2,7-三甲基辛-4-烯酸(3.94g，80％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ5.63-5.27(m,2H),2.38-2.18(m,2H),2.00-1.82(m,2H),1.72-1.48(m,1H),1.19(s,6H),0.87(d,J＝6.5Hz,6H).
步骤4：5-(1-羟基-3-甲基-丁基)-3,3-二甲基-四氢呋喃-2-酮，非对映异构体1和2
在室温下，向三氧化甲基铼(VII)(303.75mg，1.2187mmol)于氯仿(25mL)中的搅拌的悬浮液中添加过氧化氢(1.9346g，50％w/w的1.7429mL，28.437mmol)，随后添加(E)-2,2,7-三甲基辛-4-烯酸(3.94g，20.312mmol)于乙腈(25mL)中的溶液。将反应混合物搅拌18小时。将反应用1M Na2CO3水溶液(20mL)和水(40mL)淬灭。将挥发物在真空下去除并将产物用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将产物通过硅胶色谱法使用0-30％己烷-乙醚纯化，得到呈无色油的5-(1-羟基-3-甲基-丁基)-3,3-二甲基-四氢呋喃-2-酮(非对映异构体1，3.05g，72％)和呈无色油的5-(1-羟基-3-甲基-丁基)-3,3-二甲基-四氢呋喃-2-酮(非对映异构体2，760mg，18％)。非对映异构体1：1H NMR(250MHz,CDCl3)δ4.37-4.18(m,1H),3.70-3.50(m,1H),2.09-1.80(m,4H),1.59-1.43(m,1H),1.28(d,J＝3.0Hz,6H),1.23-1.10(m,1H),0.94(dd,6H).非对映异构体2:1HNMR(250MHz,CDCl3)δ4.43-4.26(m,1H),4.15-3.97(m,1H),2.24-2.08(m,1H),2.01-1.72(m,3H),1.45 1.34(m,1H),1.28(d,6H),1.22-1.05(m,1H),0.95(dd,6H).
步骤5：[1-(4,4-二甲基-5-氧代-四氢呋喃-2-基)-3-甲基-丁基]甲磺酸盐，非对映异构体1
在0℃下在氮气下，向5-(1-羟基-3-甲基-丁基)-3,3-二甲基-四氢呋喃-2-酮，非对映异构体1(3.05g，15.229mmol)和TEA(2.3115g，3.1839mL，22.843mmol)于无水DCM(20mL)中的搅拌的溶液中滴加甲磺酰氯(2.0934g，1.4145mL，18.275mmol)。在添加完成之后，将反应混合物搅拌1小时。将反应用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)淬灭并将两个层分离。将水层用DCM(2×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到呈黄色油的[1-(4,4-二甲基-5-氧代-四氢呋喃-2-基)-3-甲基-丁基]甲磺酸盐，非对映异构体1(4.196g，93％)。产物不经进一步纯化即用于下一步。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ4.79-4.65(m,1H),4.55-4.38(m,1H),3.15(s,3H),2.19-2.04(m,1H),1.97-1.76(m,2H),1.75-1.56(m,2H),1.28(d,6H),0.97(dd,J＝6.6,3.5Hz,6H).
步骤6：5-(1-叠氮基-3-甲基-丁基)-3,3-二甲基-四氢呋喃-2-酮，非对映异构体1
在氮气下，向[1-(4,4-二甲基-5-氧代-四氢呋喃-2-基)-3-甲基-丁基]甲磺酸盐，非对映异构体1(4.19g，15.052mmol)于无水DMF(20mL)中的搅拌的溶液中添加叠氮化钠(1.1742g，3.5336mL，18.062mmol)并将反应混合物加热至80℃16小时。在冷却至室温之后，将反应混合物用水(50mL)和盐水(30mL)稀释并且将产物用乙酸乙酯(3×120mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×60mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到呈琥珀色油的5-(1-叠氮基-3-甲基-丁基)-3,3-二甲基-四氢呋喃-2-酮，非对映异构体1(3.05g，85％)。产物不经进一步纯化即用于下一步。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ4.49-4.24(m,1H),3.82-3.62(m,1H),2.14-1.93(m,2H),1.92-1.70(m,1H),1.46-1.17(m,8H),1.06 0.84(m,6H).
步骤7：5-羟基-6-异丁基-3,3-二甲基-哌啶-2-酮，非对映异构体1
向5-(1-叠氮基-3-甲基-丁基)-3,3-二甲基-四氢呋喃-2-酮，非对映异构体1(3.05g，13.538mmol)于无水甲醇(50mL)中的搅拌的溶液中添加氢氧化钯(570.38mg，20％w/w，0.8123mmol)并将反应混合物在氢气(1atm)下在室温下保持24小时。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-40％己烷-乙酸乙酯纯化，得到呈浅黄色油的5-羟基-6-异丁基-3,3-二甲基-哌啶-2-酮，非对映异构体1(2.21g，73％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ4.59-4.18(m,1H),3.31-3.06(m,1H),2.20-1.54(m,5H),1.47 1.09(m,8H),1.06-0.75(m,6H).ESI-MS m/z计算值199.15723，实验值200.7(M+1)+；保留时间：2.41分钟；LC方法S。
步骤8：2-异丁基-5,5-二甲基-哌啶-3-醇，非对映异构体1
在室温下在氮气下，向5-羟基-6-异丁基-3,3-二甲基-哌啶-2-酮，非对映异构体1(325mg，1.6308mmol)于无水THF(10mL)中的搅拌的溶液中滴加二甲基硫化硼(2M的2.4462mL，4.8924mmol)。在添加完成之后，将反应混合物加热至70℃2小时。在冷却至0℃之后，将反应用水(10mL)淬灭。将挥发物在真空下去除并将水层1M氢氧化钠水溶液碱化至pH11。将产物用氯仿(3×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过反相HPLC使用水(0.1％ TFA缓冲液)-乙腈(0.1％TFA缓冲液)梯度方法(C18Varian柱，5-55％乙腈，40毫升/分钟)纯化，得到呈白色固体的2-异丁基-5,5-二甲基-哌啶-3-醇，非对映异构体1(18mg，6％)。ESI-MS m/z计算值185.17796，实验值186.4(M+1)+；保留时间：0.86分钟；LC方法T。
步骤9：N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-(3-羟基-2-异丁基-5,5-二甲基-哌啶-1-羰基)苯磺酰胺，非对映异构体1
在0℃下，向2-异丁基-5,5-二甲基-哌啶-3-醇，非对映异构体1(18mg，0.0971mmol)和TEA(145.20mg，200μL，1.4349mmol)于DCM(2mL)中的搅拌的溶液中滴加3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酰氯(55mg，0.1008mmol)于DCM(2mL)中的溶液。在添加完成之后，将反应混合物搅拌1小时。将反应用1M盐酸水溶液(2mL)和水(10mL)淬灭。添加5mL的DCM并将两个层分离。将水层用DCM(2×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-40％己烷-丙酮纯化，得到呈白色固体的N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-(3-羟基-2-异丁基-5,5-二甲基-哌啶-1-羰基)苯磺酰胺(48mg，80％)。ESI-MS m/z计算值584.2224，实验值585.6(M+1)+；保留时间：6.3分钟；LC方法S。
步骤10：18-(2,6-二甲基苯基)-5,5-二甲基-22-(2-甲基丙基)-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(20),9(21),10,12,16,18-六烯-8,14,14-三酮(化合物232)
在室温下在氮气下，向N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-(3-羟基-2-异丁基-5,5-二甲基-哌啶-1-羰基)苯磺酰胺，非对映异构体1(48mg，0.0820mmol)于无水DMF(5mL)中的搅拌的溶液中一次性添加氢化钠(32.797mg，60％w/w，0.8200mmol)。将反应混合物搅拌16小时。在冷却至0℃之后，将反应用10％柠檬酸水溶液(5mL)淬灭。添加水(60mL)并且将产物用乙酸乙酯(3×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-40％己烷-丙酮纯化，得到呈白色固体的18-(2,6-二甲基苯基)-5,5-二甲基-22-(2-甲基丙基)-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(20),9(21),10,12,16,18-六烯-8,14,14-三酮(11mg，23％)。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ8.45(s,1H),7.85(s,1H),7.60(s,2H),7.28-7.16(m,1H),7.15-7.04(m,2H),6.96(s,1H),4.63(s,1H),4.22(d,J＝13.1Hz,1H),3.13-2.97(m,1H),2.69(d,J＝13.3Hz,1H),2.01-1.77(m,7H),1.53-1.49(m,1H),1.29-1.18(m,6H),1.03(s,3H),0.58(d,J＝5.2Hz,3H),0.26(d,J＝5.2Hz,3H)。ESI-MS m/z计算值548.2457，实验值549.4(M+1)+；保留时间：2.68分钟；LC方法S。
实例130：化合物233的制备
步骤1：18-(2,6-二甲基苯基)-5,5-二甲基-22-(2-甲基丙基)-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(20),9(21),10,12,16,18-六烯-8,14,14-三酮(化合物233)
在室温下在氮气下，向以类似于上文对非对映异构体1所描述的方式制备的N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-(3-羟基-2-异丁基-5,5-二甲基-哌啶-1-羰基)苯磺酰胺，非对映异构体2(104mg，0.1777mmol)于无水DMF(10mL)中的搅拌的溶液中一次性添加氢化钠(71.073mg，60％w/w，1.7770mmol)。将反应混合物搅拌8小时。在冷却至0℃之后，将反应用10％柠檬酸水溶液(20mL)淬灭。添加水(50mL)并且将产物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×25mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗通过硅胶色谱法使用0-35％己烷-丙酮纯化，得到呈白色固体的18-(2,6-二甲基苯基)-5,5-二甲基-22-(2-甲基丙基)-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(20),9(21),10,12,16,18-六烯-8,14,14-三酮(72mg，72％)。ESI-MS m/z计算值548.2457，实验值549.4(M+1)+；保留时间：2.76分钟；LC方法T。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ8.38(s,1H),8.00-7.90(m,1H),7.75-7.63(m,2H),7.32-7.19(m,1H),7.18-7.07(m,2H),6.40(s,1H),5.53-5.37(m,1H),4.22-4.08(m,1H),4.07-3.97(m,1H),2.77(d,J＝13.6Hz,1H),2.14-1.66(m,9H),1.12(m,7H),0.92-0.78(m,1H),0.68(d,J＝6.5Hz,3H),0.04(d,J＝6.5Hz,3H).
实例131：化合物234的制备
步骤1：[(2R)-5-氧代四氢呋喃-2-基]甲基磺酸甲酯
在室温下，向(5R)-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-酮(3g，25.836mmol)于二氯甲烷(75mL)中的溶液中添加三乙胺(5.2272g，7.2mL，51.657mmol)和甲磺酰氯(3.8480g，2.6mL，33.592mmol)并且然后将所得混合物在该温度下搅拌1小时。将所得混合物用二氯甲烷(25mL)稀释并用饱和NaCl水溶液(50mL)淬灭。将水层用二氯甲烷(2×50mL)萃取两次。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱法(40g，庚烷/乙酸乙酯＝1:3)的纯化得到呈无色油的[(2R)-5-氧代四氢呋喃-2-基]甲基磺酸甲酯(3.6g，72％)；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.85-4.70(m,1H),4.50-4.38(m,1H),4.35-4.27(m,1H),3.08(s,3H),2.72-2.51(m,2H),2.48-2.32(m,1H),2.23-2.07(m,1H).
步骤2：(5R)-5-(叠氮甲基)四氢呋喃-2-酮
在室温下，向[(2R)-5-氧代四氢呋喃-2-基]甲基磺酸甲酯(3.6g，13.888mmol)于二甲基甲酰胺(69mL)中的搅拌的溶液中添加叠氮化钠(1.4g，21.535mmol)，并且然后将所得混合物在90℃下搅拌2小时。将反应在0℃下用水(50mL)淬灭。将水层用乙醚(2×50mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱法(40g，庚烷/EtOAc＝1:3)的纯化得到呈澄清油的(5R)-5-(叠氮甲基)四氢呋喃-2-酮(1.35g，69％)；1HNMR(300MHz,CDCl3)δ4.74-4.55(m,1H),3.66-3.56(m,1H),3.51-3.42(m,1H),2.74-2.45(m,2H),2.40-2.22(m,1H),2.17-1.97(m,1H).
步骤3：(5R)-5-(叠氮甲基)四氢呋喃-2-醇
向(5R)-5-(叠氮甲基)四氢呋喃-2-酮(1.8g，12.754mmol)于四氢呋喃(5.4mL)中的溶液(-70℃)中缓慢添加氢化二异丁基铝(1M的13mL，13.000mmol)于己烷中的溶液。将混合物在-70℃下搅拌45分钟。添加另外部分氢化二异丁基铝(1M的3.9mL，3.9000mmol)于己烷中的溶液并将混合物在-60℃下搅拌至少6小时。然后在-60℃下在剧烈搅拌下将其通过添加水(5mL)淬灭。使混合物达到室温并添加0.5M HCl(75mL)和二氯甲烷(200mL)。将有机层分离，经硫酸钠干燥，过滤并蒸发。将残余物通过柱色谱法(40g乙酸乙酯)纯化，得到呈澄清油的(5R)-5-(叠氮甲基)四氢呋喃-2-醇(1.02g，56％)。
步骤4：(3R)-6-异丁基哌啶-3-醇
在氮气气氛下，将于甲苯中的三甲基膦(1M的19mL，19.000mmol)添加到(5R)-5-(叠氮甲基)四氢呋喃-2-醇(1.3g，9.0818mmol)于甲醇(26mL)中的溶液中。在起始材料的消耗(通过TLC检测，洗脱剂：庚烷/EtOAc＝1/1，v/v)和亚胺中间体的形成(通过TLC检测，洗脱剂：EtOAc/MeOH＝10/1，v/v)之后，将反应混合物在减压下浓缩并将残余物用甲苯(10mL)共蒸发两次。将产物收集在无水四氢呋喃(26mL)和甲苯(26mL)的混合物中并且然后在0℃下在氮气气氛下添加于乙醚中的异丁基溴化镁(2M的23mL，46.000mmol)。在亚胺中间体的消耗之后，将反应用饱和NH4Cl(75mL)淬灭。将水层用乙酸乙酯(3×50mL)萃取，将合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗溶解于甲醇HCl(3M的5mL，15.000mmol)中并且然后搅拌2小时并且然后在真空下浓缩，接着通过反相色谱法(100g，初始100％ H2O(0.1％甲酸)至50％ CH3CN(0.1％ FA))纯化，得到呈褐色固体的(3R)-6-异丁基哌啶-3-醇(盐酸盐)(160mg，9％)；ESI-MS m/z计算值157.14667，实验值158.2(M+1)+；保留时间：0.74分钟；LC方法U。
步骤5：(3R)-6-异丁基哌啶-3-醇
将两批合并的(3R)-6-异丁基哌啶-3-醇(盐酸盐)(212mg，1.0944mmol)溶解于甲醇(5mL)中。将溶剂去除并在减压下浓缩。将所得褐色油在高真空下干燥过夜，得到呈褐色油的(3R)-6-异丁基哌啶-3-醇(盐酸盐)(190mg，87％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.34(br.s.,1H),3.86(br.s.,1H),3.01-2.83(m,3H),1.84-1.51(m,5H),1.49-1.17(m,3H),0.87(d,J＝6.8Hz,3H),0.84(d,J＝6.5Hz,3H).ESI-MS m/z计算值157.14667，实验值158.2(M+1)+；保留时间：0.75分钟；LC方法U。
步骤6：N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-[(5R)-5-羟基-2-异丁基-哌啶-1-羰基]苯磺酰胺
向3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(378mg，0.9046mmol)于无水DCM(2mL)中的溶液中添加亚硫酰氯(6.5240g，4mL，54.837mmol)。将反应在45℃下搅拌40小时。LCMS指示起始材料的完全转化。将挥发物在真空下去除。将残余物溶解于无水DCM(5mL)中，在0℃下将其滴加到(3R)-6-异丁基哌啶-3-醇(盐酸盐)(190mg，0.9024mmol)和三乙胺(290.40mg，0.4mL，2.8698mmol)于无水DCM(5mL)中的溶液中。将反应在室温下搅拌2小时。将反应用10％柠檬酸(15mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至50％丙酮/己烷纯化，得到呈澄清油的N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-[(5R)-5-羟基-2-异丁基-哌啶-1-羰基]苯磺酰胺(359mg，26％)。ESI-MS m/z计算值556.1911，实验值557.2(M+1)+；保留时间：6.0分钟(LC方法S)。
步骤7：(3R)-18-(2,6-二甲基苯基)-6-(2-甲基丙基)-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(20),9(21),10,12,16,18-六烯-8,14,14-三酮(化合物234)
向N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-[(5R)-5-羟基-2-异丁基-哌啶-1-羰基]苯磺酰胺(359mg，0.2320mmol)于无水DMF(20mL)中的溶液中添加NaH(198mg，60％w/w，4.9505mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应用10％柠檬酸(30mL)淬灭。将水溶液用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至50％丙酮/己烷纯化，得到呈白色粉末的(3R)-18-(2,6-二甲基苯基)-6-(2-甲基丙基)-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(20),9(21),10,12,16,18-六烯-8,14,14-三酮(47.4mg，38％)。ESI-MS m/z计算值520.2144，实验值521.2(M+1)+；保留时间：2.68分钟；LC方法W。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.48(s,1H),7.91(s,1H),7.64(s,2H),7.26(t,J＝7.7Hz,1H),7.13(d,J＝7.6Hz,2H),6.33(s,1H),5.17(s,1H),4.80–4.65(m,1H),3.68(d,J＝12.2Hz,1H),2.95–2.86(m,1H),2.16–1.96(m,9H),1.80(ddd,J＝14.0,9.6,5.2Hz,2H),1.50(dq,J＝13.1,6.6Hz,1H),1.43–1.32(m,1H),1.02(d,J＝6.5Hz,3H),0.94(d,J＝6.6Hz,3H).
实例132：化合物235和化合物236的制备
步骤1：6-溴异喹啉-1-羧酸甲酯
向6-溴异喹啉-1-羧酸(10g，39.672mmol)、氯化氢(3M的33mL，99.000mmol)和MeOH(134.47g，170mL，4.1967mol)的混合物中添加硫酸(18M的3.3mL，59.400mmol)并将反应回流过夜。将反应混合物在真空中浓缩。将乙酸乙酯(275mL)添加到残余物中并将混合物用饱和碳酸氢钠洗涤两次(50mL)，然后用盐水(50mL)洗涤。将有机相经硫酸钠干燥，过滤然后浓缩，得到呈白色固体的6-溴异喹啉-1-羧酸甲酯(8.54g，81％)。ESI-MS m/z计算值264.97385，实验值266.0(M+1)+；保留时间：1.87分钟；LC方法K。
步骤2：(6-溴-1-异喹啉基)甲醇
在0℃下在氮气下，将硼氢化钠(940mg，24.846mmol)分批添加到6-溴异喹啉-1-羧酸甲酯(3g，11.274mmol)于甲醇(75mL)中的溶液中并将反应在室温下搅拌过夜。在过夜之后反应没有完成。在0℃下添加更多硼氢化钠(430mg，11.366mmol)，然后在室温下搅拌2.5小时。将反应通过添加丙酮(15mL)淬灭并且将反应搅拌15分钟。将溶剂蒸发，并且将残余物在水(75mL)与乙酸乙酯(200mL)之间分配。将水层用乙酸乙酯(100ml)萃取并且将合并的有机物用盐水(75mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并将溶剂蒸发。将粗物质通过硅胶快速色谱法纯化，40g，用EtOAc-庚烷40％至80％洗脱，得到呈澄清油的(6-溴-1-异喹啉基)甲醇(1.49g，56％)。ESI-MS m/z计算值236.97893，实验值238.0(M+1)+；保留时间：1.2分钟；LC方法K。
步骤3：(6-溴-1-异喹啉基)甲氧基-叔丁基-二甲基-硅烷
将(6-溴-1-异喹啉基)甲醇(4.55g，19.111mmol)于DMF(150mL)中的溶液用咪唑(1.6g，23.503mmol)和叔丁基二甲基甲硅烷基氯(3.17g，21.032mmol)处理。将反应在25℃下搅拌过夜。添加水(300mL)和乙酸乙酯(200mL)。将有机相分离，并且将水相用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。将合并的有机相用盐水(150mL)洗涤并用硫酸钠干燥。在过滤之后，将溶剂蒸发并与庚烷共蒸发以去除痕量的DMF。将粗物质通过80g硅胶色谱法纯化，用EtOAc-庚烷10％至30％洗脱，得到呈澄清油的(6-溴-1-异喹啉基)甲氧基-叔丁基-二甲基-硅烷(6.73g，100％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.44(d,J＝5.9Hz,1H),8.36(d,J＝9.1Hz,1H),8.00(d,J＝2.1Hz,1H),7.69(dd,J＝9.1,2.1Hz,1H),7.51(d,J＝5.6Hz,1H),5.23(s,2H),0.87(s,9H),0.06(s,6H).ESI-MS m/z计算值351.0654，实验值352.1(M+1)+；保留时间：2.25分钟；LC方法K。
步骤4：叔丁基-[(6-叔丁基-1-异喹啉基)甲氧基]-二甲基-硅烷
将氯化镍二水合物(132mg，0.7970mmol)、1,3-二环己基咪唑四氟硼酸盐(200mg，0.6247mmol)和(6-溴-1-异喹啉基)甲氧基-叔丁基-二甲基-硅烷(1.4g，3.9734mmol)于四氢呋喃(20mL)中的溶液用氮气吹扫。将溶液冷却至0℃并滴加于THF中的叔丁基(氯)镁(1M的12mL，12.000mmol)。将溶液在冷却浴中搅拌1小时以上。将溶液倒入EtOAc(120mL)和饱和NH4Cl水溶液(40mL)和水(20mL)的搅拌的混合物中并将所得混合物搅拌5分钟。将有机相分离，并且将水相用EtOAc(120mL)萃取。将合并的有机相用盐水(60mL)洗涤并经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。得到1.8g的呈棕色油的粗物质。将粗通过硅胶色谱法纯化，80g，用EtOAc-庚烷10％至30％洗脱，得到呈澄清油的叔丁基-[(6-叔丁基-1-异喹啉基)甲氧基]-二甲基-硅烷(275mg，21％)。ESI-MS m/z计算值329.2175，实验值330.3(M+1)+；保留时间：2.09分钟；LC方法K。
步骤5：叔丁基-[(6-叔丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)甲氧基]-二甲基-硅烷
在氮气气氛下，向叔丁基-[(6-叔丁基-1-异喹啉基)甲氧基]-二甲基-硅烷(750mg，2.2758mmol)于乙醇(40mL)中的溶液中分批添加氧化铂(330mg，1.4532mmol)。将溶液用氢气吹扫，然后将反应在室温下搅拌过夜。将反应用氮气吹扫，然后经硅藻土过滤并浓缩。将粗物质通过40g硅胶色谱法纯化，用EtOAc-庚烷30％至100％洗脱，得到呈澄清油的叔丁基-[(6-叔丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)甲氧基]-二甲基-硅烷(520mg，68％)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ7.22-7.14(m,1H),7.14-7.09(m,1H),7.04(d,J＝7.9Hz,1H),4.13(q,J＝7.2Hz,1H),4.04(dd,J＝9.0,3.7Hz,1H),3.93-3.81(m,1H),3.81-3.68(m,1H),3.27-3.13(m,1H),3.04-2.92(m,1H),2.91-2.72(m,2H),2.06(s,1H),1.30(s,9H),0.91(s,9H),0.08(d,J＝8.5Hz,6H).ESI-MS m/z计算值333.24878，实验值334.3(M+1)+；保留时间：1.94分钟；LC方法K。
步骤6：(6-叔丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)甲醇
向叔丁基-[(6-叔丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)甲氧基]-二甲基-硅烷(720mg，2.1584mmol)于THF(60mL)中的溶液中添加TBAF(1M的3.2mL，3.2000mmol)于THF中的溶液。将溶液在室温下搅拌过夜。将反应浓缩，然后在EtOAc(120mL)中稀释。添加水(60mL)。将有机相分离，然后将水相用EtOAc(15mL)萃取两次。将有机相合并并经硫酸钠干燥。将溶液过滤并浓缩，得到呈浅棕色油的590mg的粗(6-叔丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)甲醇。ESI-MS m/z计算值219.16231，实验值220.2(M+1)+；保留时间：1.56分钟；LC方法K。
步骤7：6-叔丁基-1-(羟甲基)-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯
向粗(6-叔丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)甲醇(200mg，0.9119mmol)于二氯甲烷(10mL)中的溶液中添加三乙胺(217.80mg，0.3mL，2.1524mmol)并将溶液在冰浴中冷却。添加二碳酸二叔丁酯(310mg，1.4204mmol)并将混合物在室温下搅拌过夜。将反应用5％碳酸氢钠水溶液(50mL)稀释并将水层用二氯甲烷(2×50mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗通过40g硅胶色谱法纯化，用EtOAc-庚烷10％至50％洗脱，得到呈米色固体的6-叔丁基-1-(羟甲基)-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯(77mg，26％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.23(d,J＝1.8Hz,1H),7.19-7.08(m,2H),5.26(br.s.,1H),3.86(br.s.,3H),3.44(br.s.,1H),3.00-2.67(m,3H),1.49(s,9H),1.30(s,9H).ESI-MS m/z计算值319.21475，实验值264.2(M-56+1)+；保留时间：2.17分钟；LC方法K。
步骤8：3-[[4-[(2-叔丁氧基羰基-6-叔丁基-3,4-二氢-1H-异喹啉-1-基)甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
将6-叔丁基-1-(羟甲基)-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯(77mg，0.2410mmol)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(110mg，0.2632mmol)溶解于THF(2mL)中。添加叔丁醇钠(70mg，0.7284mmol)并将反应在室温下搅拌过夜。添加饱和氯化铵溶液(25mL)并用EtOAc(2×30mL)萃取。将有机相合并，并用水(25mL)和盐水(15mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将残余物过滤并浓缩，然后通过12g硅胶色谱法纯化，用EtOAc-庚烷20％至50％至100％洗脱，随后通过另一12g色谱法纯化，用EtOAc-庚烷40％至100％洗脱，得到呈类白色固体的3-[[4-[(2-叔丁氧基羰基-6-叔丁基-3,4-二氢-1H-异喹啉-1-基)甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(23mg，14％)。ESI-MS m/z计算值700.2931，实验值701.3(M+1)+；保留时间：2.33分钟；LC方法K。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.85-8.59(m,2H),8.20(br.s.,1H),8.09(br.s.,1H),7.40-7.28(m,2H),7.24-7.14(m,2H),7.09(t,J＝8.4Hz,3H),6.13(d,J＝6.2Hz,1H),5.55(d,J＝15.9Hz,1H),4.61(br.s.,1H),4.42-4.21(m,1H),4.00(d,J＝13.2Hz,1H),3.51-3.30(m,1H),3.28-3.10(m,1H),3.02-2.85(m,1H),2.82-2.70(m,1H),2.15-2.02(m,6H),1.50-1.35(m,9H),1.32(s,9H).
步骤9：3-[[4-[(6-叔丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
将3-[[4-[(2-叔丁氧基羰基-6-叔丁基-3,4-二氢-1H-异喹啉-1-基)甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(23mg，0.0328mmol)溶解于二噁烷(2mL)中。将溶液用氯化氢(4M的0.2mL，0.8000mmol)处理并将反应在室温下搅拌过夜。未完成。添加氯化氢(4M的0.5mL，2.0000mmol)并在室温下搅拌2小时。反应进展。再次搅拌2小时。无进展。添加氯化氢(4M的0.5mL，2.0000mmol)。在室温下搅拌30分钟。将反应浓缩，得到呈白色固体的粗3-[[4-[(6-叔丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(20.9mg，100％)。ESI-MS m/z计算值600.2406，实验值601.3(M+1)+；保留时间：1.82分钟。LC方法K。
步骤10：8-叔丁基-17-(2,6-二甲基苯基)-14-氧杂-21λ6-硫杂-3,18,20,27-四氮杂五环[20.3.1.115,19.03,12.06,11]十七碳-1(26),6(11),7,9,15(27),16,18,22,24-壬烯-2,21,21-三酮
将粗3-[[4-[(6-叔丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-基)甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(21mg，0.0330mmol)溶解于DMF(2mL)中。添加三乙胺(36.300mg，50μL，0.3587mmol)和HATU(14mg，0.0368mmol)。在室温下搅拌过夜。将反应用水(25mL)和EtOAc(30mL)稀释。将有机相分离，并且将水相用EtOAc(25mL)萃取。将有机相合并，并用水(20mL)和盐水(15mL)洗涤。将有机相经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物通过4g硅胶色谱法纯化，用EtOAc-庚烷30％至70％洗脱，得到呈类白色固体的外消旋8-叔丁基-17-(2,6-二甲基苯基)-14-氧杂-21λ6-硫杂-3,18,20,27-四氮杂五环[20.3.1.115,19.03,12.06,11]十七碳-1(26),6(11),7,9,15(27),16,18,22,24-壬烯-2,21,21-三酮(7.24mg，34％)。ESI-MS m/z计算值582.2301，实验值583.2(M+1)+；保留时间：3.41分钟；LC方法U。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.77(s,1H),7.86(d,J＝7.6Hz,1H),7.74(d,J＝7.6Hz,1H),7.56(t,J＝7.8Hz,1H),7.25-7.18(m,2H),7.11(d,J＝7.6Hz,2H),7.03(d,J＝8.5Hz,1H),6.48(d,J＝8.2Hz,1H),6.35(s,1H),5.62(dd,J＝10.7,4.0Hz,1H),4.81-4.73(m,1H),4.69(dd,J＝12.2,4.6Hz,1H),4.37(t,J＝10.9Hz,1H),3.83-3.66(m,1H),3.44-3.31(m,1H),3.29-3.15(m,1H),2.91(d,J＝16.1Hz,1H),2.14(s,6H),1.30-1.23(s,9H).
步骤11：8-叔丁基-17-(2,6-二甲基苯基)-14-氧杂-21λ6-硫杂-3,18,20,27-四氮杂五环[20.3.1.115,19.03,12.06,11]十七碳-1(26),6(11),7,9,15(27),16,18,22,24-壬烯-2,21,21-三酮，对映异构体1(化合物236)，以及8-叔丁基-17-(2,6-二甲基苯基)-14-氧杂-21λ6-硫杂-3,18,20,27-四氮杂五环[20.3.1.115,19.03,12.06,11]十七碳-1(26),6(11),7,9,15(27),16,18,22,24-壬烯-2,21,21-三酮，对映异构体2(化合物235)
将外消旋8-叔丁基-17-(2,6-二甲基苯基)-14-氧杂-21λ6-硫杂-3,18,20,27-四氮杂五环[20.3.1.115,19.03,12.06,11]十七碳-1(26),6(11),7,9,15(27),16,18,22,24-壬烯-2,21,21-三酮(7.2mg，0.01236mmol)使用正相SFC-MS方法使用由Chiral技术公司销售的AS-H柱(250×21.2mm，5μm粒径)(pn：20945)和在17.5分钟内从5-40％流动相B运行的双梯度纯化。流动相A＝CO2。流动相B＝MeOH(20mM NH3)。流速＝5-15％MeOH[20mM NH3]80毫升/分钟，15-80％ MeOH[20mM NH3]40毫升/分钟。进样体积＝可变，并且柱温＝40℃，得到对映异构体1，8-叔丁基-17-(2,6-二甲基苯基)-14-氧杂-21λ6-硫杂-3,18,20,27-四氮杂五环[20.3.1.115,19.03,12.06,11]十七碳-1(26),6(11),7,9,15(27),16,18,22,24-壬烯-2,21,21-三酮(2.7mg，75％)ESI-MS m/z计算值582.2301，实验值583.0(M+1)+；保留时间：2.79分钟；LCMS LC方法I；以及对映异构体2，8-叔丁基-17-(2,6-二甲基苯基)-14-氧杂-21λ6-硫杂-3,18,20,27-四氮杂五环[20.3.1.115,19.03,12.06,11]十七碳-1(26),6(11),7,9,15(27),16,18,22,24-壬烯-2,21,21-三酮(2.8mg，77％)ESI-MS m/z计算值582.2301，实验值583.0(M+1)+；保留时间：2.79分钟；LC方法I。
实例133：化合物237的制备
步骤1：(2R)-4-甲基-2-(对甲苯磺酰氨基)戊酸
将(2R)-2-氨基-4-甲基-戊酸(18g，137.22mmol)溶解于水(280mL)中并添加NaOH(16.6g，415.03mmol)。一旦所有固体溶解，则添加4-甲基苯磺酰氯(31.5g，165.23mmol)并将反应温热至60℃3天。反应变成澄清溶液。在三天之后，将反应冷却至0℃并添加浓HCl，直到达到pH 1为止。使反应在0℃下搅拌30分钟并将沉淀过滤，得到呈白色固体的(2R)-4-甲基-2-(对甲苯磺酰氨基)戊酸(21g，51％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)d 7.74(d,J＝7.9Hz,2H),7.28(d,J＝7.9Hz,2H),5.18-5.01(m,1H),4.00-3.80(m,1H),2.41(s,3H),1.83-1.66(m,1H),1.59-1.43(m,2H),0.85(dd,J＝18.6,6.5Hz,6H).
步骤2：(2R)-N-甲氧基-N,4-二甲基-2-(对甲苯磺酰氨基)戊酰胺
将(2R)-4-甲基-2-(对甲苯磺酰氨基)戊酸(21g，73.592mmol)、N-甲氧基甲胺(盐酸盐)(10.9g，111.74mmol)和DIPEA(38.1g，51.348mL，294.79mmol)溶解于DMF(370mL)中并添加HATU(56.01g，147.31mmol)。将其搅拌15分钟，然后添加水(800mL)。将有机层用EtOAc(350mL)萃取，然后将合并的有机层用盐水(5×100mL)洗涤并经硫酸钠干燥，然后浓缩。将粗残余物干燥加载到硅胶上并通过快速柱色谱法使用0-40％己烷:EtOAc作为洗脱剂纯化。收集适当的级分，得到呈白色固体的(2R)-N-甲氧基-N,4-二甲基-2-(对甲苯磺酰氨基)戊酰胺(18.6g，73％)。ESI-MS m/z计算值328.1457，实验值329.5(M+1)+；保留时间：2.96分钟；LC方法T。
步骤3：N-[(1R)-1-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3甲基-丁基]-N-(对甲苯磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
向(2R)-N-甲氧基-N,4-二甲基-2-(对甲苯磺酰氨基)戊酰胺(5.07g，15.437mmol)于ACN(50mL)中的溶液中添加叔丁氧羰基叔丁基碳酸酯(5.2g，23.826mmol)和DMAP(220mg，1.8008mmol)。将反应在室温下搅拌1小时，然后将其在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至50％乙酸乙酯/己烷(120g柱)纯化，得到呈澄清油的N-[(1R)-1-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3-甲基-丁基]-N-(对甲苯磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(6.75g，100％)。ESI-MSm/z计算值428.19812，实验值429.2(M+1)+；保留时间：5.83分钟；LC方法S。
步骤4：N-[(1R)-1-甲酰基-3-甲基-丁基]-N-(对甲苯磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在-78℃下，向N-[(1R)-1-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3-甲基-丁基]-N-(对甲苯磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(8.98g，20.955mmol)于无水DCM(100mL)中的溶液中添加于甲苯中的DIBAL-H(1M的42mL，42.000mmol)。将反应在相同温度下搅拌1分钟，然后将其用甲醇(10mL)淬灭。将反应温热至室温。添加饱和酒石酸钾钠(100mL)。将反应混合物搅拌1小时，直到两个层变得澄清为止。分离两层。将水层用DCM(2×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩得到呈白色固体的N-[(1R)-1-甲酰基-3-甲基-丁基]-N-(对甲苯磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(8.94g，88％)。ESI-MS m/z计算值369.16098，实验值370.2(M+1)+；保留时间：5.44分钟；LC方法S。
步骤5：1-溴-4-叔丁基-2-碘-苯
在室温下，向1-溴-4-叔丁基-苯(150g，703.85mmol)于TFA(1.5000L)中的溶液中分批添加NIS(166.27g，739.04mmol)。使反应搅拌6小时，然后将挥发物通过蒸发去除。将粗残余物用水(800mL)和EtOAc(800mL)稀释。将水层用EtOAc(3×1L)萃取三次。将合并的有机层用碳酸氢钠(1L)、水(1L)和盐水(1L)洗涤，然后经硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将该粗残余物溶解于己烷中并通过硅胶垫。将硅胶垫用己烷(3×800mL)洗涤三次，将该残余物浓缩，得到1-溴-4-叔丁基-2-碘-苯(235.93g，99％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.84(d,J＝2.2Hz,1H),7.68-7.44(m,1H),7.23-7.07(m,1H),1.27(s,9H).ESI-MS m/z计算值337.91672，未观察到电离，保留时间：3.92分钟；LC方法T。
步骤6：1-溴-4-叔丁基-2-乙烯基-苯
将1-溴-4-叔丁基-2-碘苯(53.7g，158.40mmol)和乙烯基硼酸频哪醇酯(29.36g，190.63mmol)溶解于DMF(735mL)中并添加碳酸钾(65.87g，476.61mmol)。将溶液脱气10分钟，然后添加Pd(dppf)Cl2(5.85g，7.9950mmol)并将反应温热至60℃过夜。将反应用水(150mL)淬灭，然后浓缩至约300mL的体积。添加更多水(700mL)并将水层用EtOAc(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(5×100mL)洗涤，然后经硫酸钠干燥并浓缩。将粗残余物通过硅胶塞纯化，用5％己烷:EtOAc洗脱，得到呈黄色油的1-溴-4-叔丁基-2-乙烯基-苯(30.63g，77％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)d 7.57(s,1H),7.47(d,J＝8.5Hz,1H),7.17(d,J＝8.5Hz,1H),7.06(dd,J＝17.5,11.0Hz,1H),5.71(d,J＝17.5Hz,1H),5.36(d,J＝11.0Hz,1H),1.33(s,9H).
步骤7：2-(2-溴-5-叔丁基-苯基)乙醇
将1-溴-4-叔丁基-2-乙烯基-苯(30.63g，96.058mmol)溶解于THF(100mL)中并冷却至0℃。缓慢添加硼烷二甲基硫醚络合物(2M的48.000mL，96.000mmol)并使反应搅拌过夜。将反应冷却至0℃，然后缓慢添加水(75mL)。然后添加NaOH(2M的58mL，116.00mmol)和过氧化氢(110g，30％w/w，970.17mmol)并将反应温热至室温并搅拌1小时45分钟。将层分离，并将水层用DCM(50mL)萃取三次。将有机层经硫酸钠干燥并浓缩。将粗残余物干燥加载到硅胶上并通过快速柱色谱法使用0-30％己烷:EtOAc作为洗脱剂纯化，得到呈无色油的2-(2-溴-5-叔丁基-苯基)乙醇(16.31g，63％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.47(d,J＝8.4Hz,1H),7.32–7.23(m,1H),7.19–7.07(m,1H),3.89(t,J＝6.9Hz,2H),3.03(t,J＝6.9Hz,2H),1.30(s,9H).
步骤8：2-(2-溴-5-叔丁基-苯基)乙氧基-叔丁基-二甲基-硅烷
将2-(2-溴-5-叔丁基苯基)乙醇(16.31g，63.422mmol)溶解于DMF(250mL)中，然后添加咪唑(8.69g，127.65mmol)和TBSCl(19.07g，126.52mmol)并将反应在室温下搅拌过夜。将反应浓缩至约50mL的溶剂，然后用500mL的水稀释。将有机层用EtOAc(125mL)萃取三次，然后将有机层用盐水(50mL)洗涤三次。将有机层经硫酸钠干燥并浓缩。将粗残余物干燥加载到硅胶上并通过快速柱色谱法使用0-20％己烷:EtOAc作为洗脱剂纯化，得到呈无色油的2-(2-溴-5-叔丁基-苯基)乙氧基-叔丁基-二甲基-硅烷(18.45g，74％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)d 7.43(d,J＝8.4Hz,1H),7.27(s,1H),7.10(dd,J＝8.4,2.5Hz,1H),3.84(t,J＝7.0Hz,1H),2.96(t,J＝7.0Hz,1H),1.29(s,9H),0.87(s,9H),-0.02(s,6H).
步骤9：N-[(1R)-1-[[4-叔丁基-2-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧乙基]苯基]-羟基-甲基]-3-甲基-丁基]-N-(对甲苯磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在-78℃下，向2-(2-溴-5-叔丁基-苯基)乙氧基-叔丁基-二甲基-硅烷(8.24g，22.185mmol)于无水THF(100mL)中的溶液中滴加于己烷中的nBuLi(2.5M的9mL，22.500mmol)。将反应在相同温度下搅拌1小时。在-78℃下，将N-[(1R)-1-甲酰基-3-甲基-丁基]-N-(对甲苯磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(8.94g，18.389mmol)于无水THF(50mL)中的溶液滴加到反应混合物中。将反应混合物在相同温度下搅拌0.5小时。在-78℃下，将反应用饱和氯化铵(150mL)淬灭。在温热至室温之后，添加饱和氯化铵(150mL)。将两个层分离，并将水层用乙酸乙酯(2×150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(150mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至30％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈白色泡沫状固体的N-[(1R)-1-[[4-叔丁基-2-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧乙基]苯基]-羟基-甲基]-3-甲基-丁基]-N-(对甲苯磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(10.34g，79％)。ESI-MS m/z计算值661.38324，实验值662.4(M+1)+；保留时间：8.71分钟；LC方法S。
步骤10：[(2R)-2-[叔丁氧羰基(对甲苯磺酰基)氨基]-1-[4-叔丁基-2-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧乙基]苯基]-4-甲基-戊基]乙酸酯
向N-[(1R)-1-[[4-叔丁基-2-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧乙基]苯基]-羟基-甲基]-3-甲基-丁基]-N-(对甲苯磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(9.75g，14.728mmol)于无水DMF(100mL)中的溶液中添加乙酰氯(3.5328g，3.2mL，45.005mmol)。在0℃下将NaH(5.9g，60％w/w，147.51mmol)添加到反应混合物中。将反应在室温下搅拌2小时。将反应用饱和氯化铵(200mL)淬灭并用乙醚(200mL)稀释。将两个层分离，并将水层用乙醚(2×200mL)萃取。将合并的乙醚层用盐水(3×100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至50％乙醚/己烷纯化，得到呈透明凝胶的[(2R)-2-[叔丁氧羰基(对甲苯磺酰基)氨基]-1-[4-叔丁基-2-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧乙基]苯基]-4-甲基-戊基]乙酸酯(1.97g，19％)。ESI-MS m/z计算值703.3938，实验值721.5(M+18)+；保留时间：8.99分钟(非对映异构体的混合物)(LC方法S)。回收大量的起始材料N-[(1R)-1-[[4-叔丁基-2-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧乙基]苯基]-羟基-甲基]-3-甲基-丁基]-N-(对甲苯磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(7.21g，74％)。
步骤11：[(2R)-1-[4-叔丁基-2-(2-羟乙基)苯基]-4-甲基-2-(对甲苯磺酰基氨基)戊基]乙酸酯，非对映异构体1和非对映异构体2
在0℃下，将[(2R)-2-[叔丁氧羰基(对甲苯磺酰基)氨基]-1-[4-叔丁基-2-[2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧乙基]苯基]-4-甲基-戊基]乙酸酯(1.97g，2.7981mmol)溶解于HCl(4M的20mL，80.000mmol)于二噁烷中的溶液中。将反应在室温下搅拌1.5小时。将反应用饱和碳酸氢钠(100mL)淬灭并用乙醚(3×100mL)萃取。将合并的乙醚层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用50至100％乙醚/己烷(40g柱)纯化，得到呈澄清油的异构体A(更少极性)，非对映异构体1[(2R)-1-[4-叔丁基-2-(2-羟乙基)苯基]-4-甲基-2-(对甲苯磺酰基氨基)戊基]乙酸酯(0.13g，9％)，以及呈白色固体的异构体B(更多极性)，非对映异构体2[(2R)-1-[4-叔丁基-2-(2-羟乙基)苯基]-4-甲基-2-(对甲苯磺酰基氨基)戊基]乙酸酯(0.71g，52％)。异构体A，非对映异构体1：ESI-MSm/z计算值489.2549，实验值507.2(M+18)+；保留时间：6.05分钟(LC方法S)，1H NMR(250MHz,氯仿-d)δ7.79-7.66(m,2H),7.34-7.21(m,2H),7.19-7.08(m,2H),7.05(d,J＝8.8Hz,1H),5.99(d,J＝3.7Hz,1H),5.27(d,J＝8.7Hz,1H),3.94-3.79(m,1H),3.79-3.73(m,1H),3.72-3.58(m,1H),2.86(h,J＝7.3Hz,2H),2.42(s,3H),2.02(s,3H),1.59-1.47(m,1H),1.39-1.30(m,2H),1.27(s,9H),0.81(d,J＝6.6Hz,3H),0.53(d,J＝6.5Hz,3H)；以及异构体B，非对映异构体2：ESI-MS m/z计算值489.2549，实验值507.6(M+18)+；保留时间：5.98分钟(LC方法S)，1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.61(d,J＝8.3Hz,2H),7.24-7.12(m,5H),6.01(d,J＝5.5Hz,1H),4.61(d,J＝9.3Hz,1H),3.83(m,3H),3.04-2.66(m,2H),2.39(s,3H),1.96(s,3H),1.54-1.44(m,1H),1.30(s,9H),1.25(dd,J＝7.0,1.8Hz,2H),0.81(d,J＝6.6Hz,3H),0.71(d,J＝6.4Hz,3H).
步骤12：[(2R)-7-叔丁基-2-异丁基-3-(对甲苯磺酰基)-1,2,4,5-四氢-3-苯并氮杂-1-基]乙酸酯，非对映异构体2
在0℃下，向[(2R)-1-[4-叔丁基-2-(2-羟乙基)苯基]-4-甲基-2-(对甲苯磺酰基氨基)戊基]乙酸酯，非对映异构体2(1.472g，3.0061mmol)和三苯基膦(1.59g，6.0621mmol)于无水THF(15mL)中的溶液中滴加DIAD(908.28mg，0.87mL，4.4918mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将溶剂在真空下去除。将残余物通过硅胶色谱法使用0至20％乙酸乙酯/己烷(40g硅胶柱)纯化，得到呈白色固体的[(2R)-7-叔丁基-2-异丁基-3-(对甲苯磺酰基)-1,2,4,5-四氢-3-苯并氮杂-1-基]乙酸酯，非对映异构体2(1.323g，93％)。ESI-MS m/z计算值471.24432，实验值472.3(M+1)+；保留时间：7.15分钟；LC方法S。
步骤13：(2R)-7-叔丁基-2-异丁基-3-(对甲苯磺酰基)-1,2,4,5-四氢-3-苯并氮杂-1-醇，非对映异构体2
向[(2R)-7-叔丁基-2-异丁基-3-(对甲苯磺酰基)-1,2,4,5-四氢-3-苯并氮杂-1-基]乙酸酯，非对映异构体2(1.323g，2.8050mmol)于甲醇(50mL)中的溶液中添加碳酸钾(577mg，4.1749mmol)。将反应在室温下搅拌一小时。将反应在真空下浓缩，并且然后将其用乙醚(100mL)和1N HCl(水溶液)(100mL)稀释。分离两层。将水层用乙醚(50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸镁干燥并在真空下浓缩，得到呈白色固体的(2R)-7-叔丁基-2-异丁基-3-(对甲苯磺酰基)-1,2,4,5-四氢-3-苯并氮杂-1-醇，非对映异构体2(1.086g，90％)，其不经纯化用于下一步骤反应。ESI-MS m/z计算值429.23376，实验值430.5(M+1)+；保留时间：6.62分钟；LC方法S。
步骤14：(2R)-7-叔丁基-2-异丁基-2,3,4,5-四氢-1H-3-苯并氮杂-1-醇，非对映异构体2
向(2R)-7-叔丁基-2-异丁基-3-(对甲苯磺酰基)-1,2,4,5-四氢-3-苯并氮杂-1-醇，非对映异构体2(1.086g，2.5278mmol)于无水甲醇(50mL)中的溶液中添加Mg(1.54g，63.361mmol)粉末(50目)。将反应混合物超声处理30分钟。将未反应的Mg通过硅藻土垫滤出并用甲醇(10mL)洗涤。将饱和氯化铵水溶液(50mL)添加到滤液中，并将其用二氯甲烷(3×50mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至10％甲醇/DCM(用0.2％氢氧化铵缓冲)纯化，得到呈白色固体的(2R)-7-叔丁基-2-异丁基-2,3,4,5-四氢-1H-3-苯并氮杂-1-醇，非对映异构体2(502mg，70％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ7.18(dd,J＝7.8,1.8Hz,1H),7.14–7.09(m,2H),4.39(s,1H),3.41–3.30(m,2H),2.91(t,J＝6.9Hz,1H),2.87(t,J＝12.1Hz,1H),2.70(dd,J＝15.2,5.4Hz,1H),1.73(dq,J＝13.4,6.7Hz,1H),1.57(dt,J＝14.0,7.0Hz,1H),1.43(dt,J＝13.9,7.1Hz,1H),1.32(s,9H),0.94(dd,J＝6.5,4.6Hz,6H).ESI-MS m/z计算值275.2249，实验值276.3(M+1)+；保留时间：1.81分钟；LC方法W。
步骤14：(25R)-20-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-25-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[14.8.1.13,7.110,14.017,22]十七碳-3(27),4,6,10(26),11,13,17(22),18,20-壬烯-2,8,8-三酮(化合物237)
在3mL小瓶中，将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(42.0mg，0.09579mmol)、(2R)-7-叔丁基-2-异丁基-2,3,4,5-四氢-1H-3-苯并氮杂-1-醇，非对映异构体2(28.0mg，0.09841mmol)和NaOtBu(60mg，0.6243mmol)溶解于THF(1.0mL)中。将所得混合物在室温下搅拌1小时。在分离的20mL小瓶中，制备HATU(90mg，0.2367mmol)于DMF(4.0mL)中的溶液并冷却至0℃。然后，将3mL小瓶中的反应混合物滴加(2分钟内)到该20mL小瓶中。将所得溶液在0℃下搅拌5分钟，之后将其通过添加1N HCl溶液(5mL)淬灭。将混合物用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机萃取物用水(10mL)和饱和氯化钠水溶液(10mL)洗涤，然后经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中蒸发，得到130mg的黄色油。通过硅胶色谱法(4g的硅)使用1至80％乙酸乙酯/己烷的梯度洗脱剂的纯化得到35mg的不完全纯的白色固体。通过反相制备型色谱法使用C18柱和含有5mM盐酸的1至99％乙腈/水的梯度洗脱剂的进一步纯化得到白色固体(25R)-20-叔丁基-12-(2,6-二甲基苯基)-25-(2-甲基丙基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[14.8.1.13,7.110,14.017,22]十七碳-3(27),4,6,10(26),11,13,17(22),18,20-壬烯-2,8,8-三酮(11.1mg，18％)1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.59-12.02(宽d,1H),8.61(s,1H),7.90(s,1H),7.68(s,2H),7.66(s,1H),7.38-7.26(m,3H),7.15(d,J＝7.7Hz,2H),6.63(s,1H),6.50(d,J＝3.4Hz,1H),4.81(dd,J＝13.8,5.7Hz,1H),4.07(d,J＝9.7Hz,1H),3.15(t,J＝13.1Hz,1H),3.07(dd,J＝15.2,5.9Hz,1H),2.79(dd,J＝13.5,11.8Hz,1H),2.27-1.89(m,6H),1.37-1.22(m,2H),1.31(s,9H),1.03-0.93(m,1H),0.69(d,J＝6.6Hz,3H),0.28(d,J＝6.3Hz,3H).ESI-MS m/z计算值638.29266，实验值639.5(M+1)+；保留时间：2.31分钟；LC方法A。
实例134：化合物238的制备
步骤1：4-异喹啉甲醇
在0℃下，向异喹啉-4-甲醛(5g，31.813mmol)于乙醇(150mL)中的溶液中添加硼氢化钠(1.35g，35.684mmol)。将混合物在0℃下搅拌1.5小时并在室温下搅拌1.0小时。将反应用25％乙酸铵水溶液(200mL)淬灭。将乙醇在减压下去除并将所得混合物用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗用MeOH(50mL)蒸发3次以去除残余的乙酸乙酯并在高真空下干燥，得到呈棕色油的4-异喹啉基甲醇(4.81g，95％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ9.19(s,1H),8.48(s,1H),8.17(d,J＝8.2Hz,1H),8.00(d,J＝8.2Hz,1H),7.78(ddd,J＝8.2,7.0,1.2Hz,1H),7.70-7.58(m,1H),5.19-5.05(m,2H),2.97(br.s.,1H).ESI-MS m/z计算值159.06842，实验值160.1(M+1)+；保留时间：0.42分钟；LC方法K。
步骤2：1,2,3,4-四氢异喹啉-4-甲醇
在氮气气氛下，将4-异喹啉基甲醇(4.81g，30.216mmol)与于甲醇(500mL)中的溶液中的二氧化铂(700mg，3.0826mmol)和盐酸(1M的32mL，32.000mmol)混合。在帕尔装置中，在50psi的氢气气氛下，将溶液在室温下振荡4小时。将反应混合物过滤，并将滤液通过旋转蒸发浓缩至干燥，然后高真空过夜。将粗混合物(5.7g)稀释于水(16mL)中并分成四部分。将每个部分通过反相色谱法纯化。将级分合并并通过旋转蒸发浓缩。将残余物冻干，得到呈白色固体的1,2,3,4-四氢异喹啉-4-甲醇(盐酸盐)(855mg，14％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.74(br.s.,1H),9.07(br.s.,1H),7.43-7.17(m,4H),4.22(t,J＝4.3Hz,2H),3.79(dd,J＝11.7,5.0Hz,1H),3.67(dd,J＝10.7,7.8Hz,1H),3.44-3.35(m,2H),3.20-3.07(m,1H).ESI-MS m/z计算值163.09972，实验值164.2(M+1)+；保留时间：0.42分钟；LC方法U。
步骤3：12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[15.7.1.13,7.110,14.018,23]十七碳-3,5,7(27),10(26),11,13,18,20,22-壬烯-2,8,8-三酮(化合物238)
向3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(114mg，0.2728mmol)和1,2,3,4-四氢异喹啉-4-甲醇(盐酸盐)(63mg，0.3155mmol)于THF(1mL)中的溶液中添加叔丁醇钠(135mg，1.405mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌2小时。然后向反应混合物中滴加HATU(215mg，0.5654mmol)于DMF(1mL)中的溶液。向该溶液中添加DiPEA(143μL，0.8210mmol)并在室温下搅拌16小时。将溶剂蒸发，然后溶于1:1DMSO MeOH中，过滤并通过HPLC(1-99％ ACN/水(HCl改性剂))纯化，得到12-(2,6-二甲基苯基)-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,26-四氮杂五环[15.7.1.13,7.110,14.018,23]十七碳-3,5,7(27),10(26),11,13,18,20,22-壬烯-2,8,8-三酮(7.9mg，5％)。ESI-MS m/z计算值526.1675，实验值527.3(M+1)+；保留时间：1.58分钟；LC方法A。
实例135：化合物239和化合物240的制备
步骤1：3-[(3-甲氧羰基苯基)二磺酰基]苯甲酸甲酯
和硫酸(2.6mL，47mmol)中的悬浮液回流17小时。一旦冷却，将粗混合物(现在是溶液)在减压下浓缩以去除大部分甲醇。然后将残余物转移到装有5％碳酸氢钠水溶液(250mL)的1.0L分液漏斗中并将水层用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈琥珀色油的粗3-[(3-甲氧羰基苯基)二磺酰基]苯甲酸甲酯(4.915g，97.0％纯度，97％产率)。ESI-MS m/z计算值334.03336，实验值335.1(M+1)+；保留时间：2.38分钟；LC方法C。
步骤2：3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨基]磺胺基苯甲酸甲酯
将3-[(3-甲氧羰基苯基)二磺酰基]苯甲酸甲酯(3.983g，11.91mmol)于含有九滴吡啶的二氯甲烷(25mL)中的溶液用磺酰氯(0.96mL，11.8mmol)处理并在室温下搅拌10分钟(出现橙色)。在分离的烧瓶中，将4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-胺盐酸盐(4.60g，17.0mmol)悬浮于二氯甲烷(95mL)中并添加三乙胺(9.7mL，70mmol)(产生溶液)。将该溶液在冰浴中冷却并在约10分钟内滴加含有磺酰氯的溶液。将烧瓶放置在冰浴中并使其逐渐温热至室温5小时。然后将粗混合物转移到装有5％碳酸氢钠(250mL)和盐水(25mL)的500mL分液漏斗中并将水层用二氯甲烷(2×100mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过220g柱硅胶色谱法纯化，通过0％至30％乙酸乙酯/庚烷洗脱。将纯级分放在一旁，并将混合的级分通过220g柱硅胶色谱法再次纯化，通过0％至30％乙酸乙酯/庚烷洗脱。将两组纯级分合并在一起，得到呈白色固体的3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨基]磺胺基苯甲酸甲酯(3.591g，98.1％纯度，52％)。ESI-MS m/z计算值399.0808，实验值400.1(M+1)+；保留时间：2.37分钟；LC方法C。
步骤3：3-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]亚磺酰胺基苯甲酸甲酯
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨基]磺胺基苯甲酸甲酯(4.293g，10.74mmol)于二氯甲烷(100mL)中的溶液在冰浴中冷却并用m-CPBA(2.57g，77％纯度，11.5mmol)处理并使反应在冰浴中搅拌1小时。然后将反应用10％硫代硫酸钠(30mL)淬灭并将粗混合物转移到装有5％碳酸氢钠水溶液(200mL)的500mL分液漏斗中并用二氯甲烷(2×100mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法在220-g柱上纯化，从0％至40％的乙酸乙酯/庚烷洗脱，得到呈白色固体的3-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]亚磺酰胺基苯甲酸甲酯(2.49g，99.2％纯度，55％)。ESI-MSm/z计算值415.0757，实验值416.1(M+1)+；保留时间：2.22分钟(LC方法C)。将含有产物的另外的级分在减压下浓缩并研磨，在乙酸乙酯(约20mL)中研磨，过滤并在减压下浓缩，得到呈白色固体的第二批3-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]亚磺酰胺基苯甲酸甲酯(0.962g，99.3％纯度，21％)。ESI-MS m/z计算值415.0757，实验值416.2(M+1)+；保留时间：2.20分钟(LC方法C)。
步骤4：3-[[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨基]磺酰亚胺基]苯甲酸甲酯
在室温下将3-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]亚磺酰胺基苯甲酸甲酯(2.29g，5.51mmol)于二氯甲烷(85mL)中的溶液用1-氯吡咯烷-2,5-二酮(1.03g，7.71mmol)处理并将溶液在室温下搅拌7小时。然后将溶液在冰浴中冷却并用氨水溶液(二噁烷中的0.5M的100mL，50mmol)使用加料漏斗在10-15分钟的时间段内处理。在添加之后，将反应从冰浴中去除并在室温下搅拌16小时。然后将粗混合物转移到装有5％碳酸氢钠水溶液(600mL)和盐水(100mL)的1.0L分液漏斗中并将水层用二氯甲烷(200mL+2×150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(150mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法在120-g柱上纯化，从0％至50％的乙酸乙酯/庚烷洗脱，得到呈白色固体的3-[[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨基]磺酰亚胺基]苯甲酸甲酯(2.21g，93％)。ESI-MS m/z计算值430.08664，实验值431.1(M+1)+；保留时间：2.01分钟；LC方法C。
步骤5：3-[[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨基]磺酰亚胺基]苯甲酸
将3-[[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨基]磺酰亚胺基]苯甲酸甲酯(2.57g，5.96mmol)于THF(65mL)和水(65mL)中的混合物用氢氧化锂一水合物(500mg，11.9mmol)处理并将反应在室温下剧烈搅拌4.5小时。添加另一部分氢氧化锂一水合物(250mg，5.96mmol)并再继续搅拌2小时。将大部分THF在减压下去除，并且将水层用固体柠檬酸酸化至pH为约4。将反应混合物转移到500mL分液漏斗中，并将水层用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈类白色固体的3-[[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨基]磺酰亚胺基]苯甲酸(2.493g，95.4％纯度，96％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ1.75(br.s.,6H),6.91(s,1H),7.03(d,J＝7.6Hz,2H),7.12-7.22(m,1H),7.64(t,J＝7.9Hz,1H),7.84(s,2H),8.06(d,J＝7.9Hz,1H),8.11(d,J＝7.6Hz,1H),8.39(t,J＝1.6Hz,1H),13.35(br.s.,1H).ESI-MS m/z计算值416.07098，实验值417.1(M+1)+；保留时间：2.59分钟(LC方法B)。
步骤6：4-[3-[[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨基]磺酰亚胺基]苯甲酰基]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯
在0℃下，向3-[[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨基]磺酰亚胺基]苯甲酸(2.13g，4.87mmol)和6-羟基-[1,4]二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(1.32g，5.80mmol)于二甲基甲酰胺(40mL)和DIEA(10mL，57.41mmol)中的溶液中添加HATU(1.94g，5.10mmol)。将反应混合物在冰盐浴中搅拌10分钟。然后将反应用10％柠檬酸水溶液(100mL)淬灭。将该水相用乙酸乙酯(3×100mL)萃取并且将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-80％己烷-丙酮纯化，得到4-[3-[[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨基]磺酰亚胺基]苯甲酰基]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(2.4g，78％)。ESI-MS m/z计算值614.2078，实验值615.5(M+1)+；保留时间：3.02分钟；(LC方法T)。
步骤7：12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-2,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-18-羧酸叔丁酯，非对映异构对1和2
分两部分向4-[3-[[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨基]磺酰亚胺基]苯甲酰基]-6-羟基-1,4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯(2.4g，3.82mmol)于无水二甲基甲酰胺(250mL)中的溶液中添加于矿物油(1.4g，35.0mmol)中的60％悬浮液氢化钠。将反应混合物在0℃下搅拌1.5小时并且然后用10％柠檬酸水溶液(200mL)淬灭。将反应混合物用乙酸乙酯(3×200mL)萃取并且将合并的有机层用盐水(3×500mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法使用0-70％己烷-丙酮纯化，得到16-(2,6-二甲基苯基)-4-氧代-2-氧杂-6-磺酰亚胺基-7-氮杂-3(6,1)-二氮杂环庚-1(4,2)-嘧啶-5(1,3)-苯并环庚烷-34-羧酸叔丁酯的两种部分分离的异构体：非对映异构对1，12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-2,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-18-羧酸叔丁酯(532mg，23％)，ESI-MS m/z计算值578.23，实验值579.4(M+1)+；保留时间：1.86分钟，(LC方法W)；1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ8.47(s,1H),8.05(d,J＝25.0Hz,3H),7.69(s,2H),7.11(d,J＝20.3Hz,3H),6.15(s,1H),5.45(s,1H),4.44(s,1H),4.30-3.71(m,2H),3.56(s,2H),3.22(s,3H),1.97(s,6H),1.59-1.12(m,10H)；以及非对映异构对2：12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-2,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-18-羧酸叔丁酯(727mg，31％)ESI-MS m/z计算值578.23，实验值579.4(M+1)+；保留时间：1.92分钟(LC方法W)，1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ8.30(d,J＝16.0Hz,1H),8.08(d,J＝8.1Hz,3H),7.79-7.57(m,2H),7.13(d,J＝23.0Hz,3H),5.63-5.23(m,1H),4.71-4.31(m,1H),4.23-3.76(m,3H),3.28–3.00(m,5H),1.98(s,8H),1.45(d,J＝10.6Hz,10H).
步骤8：12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-2,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-18-羧酸叔丁酯(非对映异构对1)(化合物239)，以及12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-2,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-18-羧酸叔丁酯(非对映异构对2)(化合物240)
将部分分离的12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-2,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-18-羧酸叔丁酯(532mg，0.9193mmol)(非对映异构体1)和12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-2,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-18-羧酸叔丁酯(727mg，1.256mmol)(非对映异构体2)通过反相制备型色谱法使用C18柱和含有5mM盐酸的10至40％乙腈/水的15分钟梯度洗脱剂纯化，得到：第一非对映异构对(之前在HPLC上出现)-非对映异构对，12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-2,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-18-羧酸叔丁酯(383mg，72％)，1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.83(s,1H),8.48(d,J＝26.7Hz,1H),8.06(s,1H),7.76(s,2H),7.19(d,J＝49.5Hz,3H),6.57(s,1H),5.43(s,1H),4.46(s,1H),4.12(dd,J＝49.4,15.5Hz,1H),3.89(d,J＝25.7Hz,1H),3.66(s,1H),3.20(s,2H),2.04(s,6H),1.43(s,9H).ESI-MSm/z计算值578.23114，实验值579.0(M+1)+；保留时间：1.18分钟(LC方法A)；以及第二非对映异构对(稍后在HPLC上出现)-非对映异构对2，12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-2,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-18-羧酸叔丁酯(90mg，17％)1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.23(d,J＝25.1Hz,1H),8.06(s,1H),7.67(d,J＝26.8Hz,2H),7.11(d,J＝48.3Hz,3H),6.27(s,1H),5.42(s,1H),4.41(s,1H),3.99(d,J＝48.4Hz,3H),3.07(s,2H),1.94(s,6H),1.37(d,J＝17.6Hz,9H).ESI-MS m/z计算值578.23114，实验值579.0(M+1)+；保留时间：1.27分钟(LC方法A)。
实例136：化合物241的制备
步骤1：12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8-二酮，非对映异构对1(化合物241)
将于HCl(4M的5mL，20.00mmol)中的12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-2,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-18-羧酸叔丁酯(383mg，0.6585mmol)(非对映异构对1)搅拌1小时。将挥发物去除并将粗与甲苯共沸三次。将少量通过反相制备型色谱法使用C18柱和含有5mM盐酸的1至50％乙腈/水的15分钟梯度洗脱剂纯化，得到12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8-二酮，非对映异构对1(盐酸盐)(354mg，104％)1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.35(s,1H),10.12(s,1H),8.92(s,3H),8.09(d,J＝10.8Hz,1H),7.85-7.73(m,2H),7.32(t,J＝7.6Hz,1H),7.17(d,J＝7.5Hz,2H),6.66(s,1H),6.01(s,1H),4.54(s,1H),3.80(d,J＝17.7Hz,1H),3.72(d,J＝8.1Hz,1H),3.62(d,J＝14.7Hz,1H),3.47(d,J＝9.2Hz,4H),3.27(d,J＝14.3Hz,2H),2.54(s,2H),2.09(s,6H).ESI-MS m/z计算值478.1787，实验值478.0(M+1)+；保留时间：0.65分钟(LC方法A)。
实例137：化合物242的制备
步骤1：12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8-二酮(化合物242)
将于HCl(4M的500μL，2.000mmol)中的12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-2,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-18-羧酸叔丁酯(10mg，0.01719mmol)(非对映异构对2)搅拌1小时。将溶剂去除并且将粗过滤并通过反相制备型色谱法使用C18柱和含有5mM盐酸的1至50％乙腈/水的15分钟梯度洗脱剂纯化，得到12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8-二酮，非对映异构对2(盐酸盐)(1.8mg，20％)ESI-MS m/z计算值478.1787，实验值479.0(M+1)+；保留时间：0.62分钟；LC方法A。
实例138：化合物243的制备
步骤1：18-(3,3-二甲基丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8-二酮(化合物243)
将12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8-二酮(盐酸盐)(54.5mg，0.1058mmol)(非对映异构对1)与3,3-二甲基丁醛(20μL，0.1593mmol)、乙酸(30μL，0.5275mmol)在DCE(2mL)中合并，并在室温下搅拌1小时。然后添加氰基硼氢化钠(32mg，0.5092mmol)并将反应在室温下再搅拌一小时，然后用甲醇稀释，过滤并通过制备型HPLC(1-50％ ACN/水，带有HCl，15分钟运行)纯化，得到18-(3,3-二甲基丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8-二酮(26.1mg，44％)1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.04(s,1H),9.17(s,1H),8.88(s,1H),8.08(d,J＝7.2Hz,1H),7.80(s,2H),7.33(t,J＝7.6Hz,1H),7.19(s,2H),6.69(s,1H),6.37(s,1H),4.55(d,J＝19.1Hz,1H),4.04(s,1H),3.87(d,J＝17.2Hz,1H),3.76(d,J＝13.6Hz,1H),3.31(s,3H),2.12(s,6H),1.81(s,2H),0.94(s,9H).ESI-MS m/z计算值562.2726，实验值563.0(M+1)+；保留时间：0.95分钟(LC方法A)。
实例139：化合物244和化合物245的制备
步骤1：18-(3,3-二甲基丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8-二酮(非对映异构体1a)(化合物244)，以及18-(3,3-二甲基丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8-二酮(非对映异构体1b)(化合物245)
将18-(3,3-二甲基丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8-二酮，非对映异构对1(25mg，0.04438mmol)在制备型LUX-3手性SFC柱上使用50-80％甲醇(NH3)的梯度纯化，得到非对映异构体1a(LUX-3手性柱上较早洗脱的SFC峰)，18-(3,3-二甲基丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8-二酮(5.6mg，45％)，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.45(s,1H),7.94(s,1H),7.64(s,2H),7.25-7.13(m,1H),7.05(d,J＝7.6Hz,2H),6.05(s,1H),5.56(s,1H),4.16(s,1H),3.21(s,2H),3.09(s,2H),2.82(s,3H),2.67(s,3H),1.96(s,6H),1.43(s,2H),1.24(s,2H),0.91(s,9H).ESI-MS m/z计算值562.2726，实验值563.0(M+1)+；保留时间：1.29分钟(LC方法I)；以及非对映异构体1b(稍后在LUX-3手性柱上洗脱SFC峰)，18-(3,3-二甲基丁基)-12-(2,6-二甲基苯基)-8-亚氨基-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,18,22-五氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10,12,14(22)-六烯-2,8-二酮(5.7mg，46％)1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.45(s,1H),7.94(s,1H),7.65(s,2H),7.13(s,1H),7.05(d,J＝7.6Hz,2H),6.05(s,1H),3.46(d,J＝13.3Hz,1H),3.19(s,2H),3.09(s,2H),2.85(s,2H),2.66(s,2H),1.96(s,6H),1.47-1.39(m,2H),1.23(s,2H),0.91(s,9H).ESI-MS m/z计算值562.2726，实验值563.0(M+1)+；保留时间：1.29分钟(LC方法I)。
实例140：化合物246-248的表征
下表中的化合物是使用本文所描述的可商购试剂和中间体以类似于上文所描述的方式制备的。
表9：
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实例141：化合物249-371的表征
表10：
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表11：
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实例142：化合物372至385
以下表中所描绘的化合物372至385可以按照上文所描述的化合物1-371的程序制备并且CFTR调节活性可以使用下面概述的测定的一种或多种来评估。
表12：
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VI.化合物的生物活性
A.3t3测定
1.用于测定化合物的F508del调节性质的膜电位光学方法
测定利用荧光电压感应染料以使用荧光读板器(例如，FLIPR III，分子装置公司(Molecular Devices,Inc.))测量膜电位的变化，作为NIH 3T3细胞中功能性F508del增加的读数。响应的驱动力是在细胞已经预先用化合物处理并随后加载电压感应染料之后，通过单一液体添加步骤产生氯离子梯度以及通道激活。
2.校正剂化合物的鉴定
为了鉴定F508del的校正剂，开发了单次添加HTS测定形式。该HTS测定利用荧光电压感应染料以测量FLIPR III上膜电位的变化，作为F508del NIH 3T3细胞中F508del门控(电导)增加的测量。将F508del NIH 3T3细胞培养物与一定浓度范围的校正剂化合物在37℃下温育18-24小时，并且随后加载有再分布染料。响应的驱动力是Cl-离子梯度以及在使用如FLIPR III等荧光板读板器的单一液体添加步骤中用毛喉素进行的通道激活。将推定的F508del校正剂与已知校正剂鲁玛卡托的功效和效力与急性添加的300nM依伐卡托的组合进行比较。
3.溶液
浴溶液#1：(以mM为单位)NaCl 160、KCl 4.5、CaCl2 2、MgCl2 1、HEPES 10、pH 7.4和NaOH。
无氯化物浴溶液：用葡萄糖酸盐代替浴溶液#1(上文)中的氯化物盐。
4.细胞培养
稳定表达F508del的NIH3T3小鼠成纤维细胞用于膜电位的光学测量。在175cm2培养烧瓶中,将细胞在含有2mM谷氨酰胺、10％胎牛血清、1X NEAA、b-ME、1X pen/strep和25mMHEPES的杜尔贝科改良伊格尔培养基(Dulbecco's modified Eagle's medium)中于5％CO2和90％湿度中维持在37℃下。对于所有光学测定，将细胞以约20,000/孔接种在384孔基质胶包被的板中。对于校正测定，将细胞在37℃下培养16-24小时，含或不含化合物。
B.肠状测定
1.溶液
基础培养基(ADF+++)由高级DMEM/Ham's F12、2mM Glutamax、10mM HEPES、1μg/mL青霉素/链霉素组成。
肠类肠道维持培养基(IEMM)由ADF+++、1x B27补充剂、1x N2补充剂、1.25mM N-乙酰半胱氨酸、10mM烟酰胺、50ng/mL hEGF、10nM胃泌素、1μg/mL hR-脊椎蛋白-1,、100ng/mLhNoggin、TGF-b 1型抑制剂A-83-01、100μg/mL Primocin、10μM P38MAPK抑制剂SB202190组成。
浸浴1缓冲液由1mM MgCl2、160mM NaCl、4.5mM KCl、10mM HEPES、10mM葡萄糖、2mMCaCl2组成。
无氯缓冲液由1mM葡萄糖酸镁、2mM葡萄糖酸钙、4.5mM葡萄糖酸钾、160mM葡萄糖酸钠、10mM HEPES、10mM葡萄糖组成。
浸浴1染料溶液由浸浴1缓冲液、0.04％ Pluronic F127、20μM Methyl Oxonol、30μM CaCCinh-A01、30μM Chicago Sky Blue组成。
无氯染料溶液由无氯缓冲液、0.04％ Pluronic F127、20μM Methyl Oxonol、30μMCaCCinh-A01、30μM Chicago Sky Blue组成。
无氯染料刺激溶液由无氯染料溶液、10μM毛喉素、100μM IBMX和300nM化合物III组成。
2.细胞培养
人肠上皮肠样细胞自荷兰乌得勒支的霍波特发育生物学与干细胞研究所(Hubrecht Institute for Developmental Biology and Stem Cell Research,Utrecht,The Netherlands)获得，并如先前所述在T型烧瓶中扩增(Dekkers JF,Wiegerinck CL,deJonge HR,Bronsveld I,Janssens HM,de Winter-de Groot KM,Brandsma AM,de JongNWM,Bijvelds MJC,Scholte BJ,Nieuwenhuis EES,van den Brink S,Clevers H,van derEnt CK,Middendorp S和M Beekman JM.使用原发性囊性纤维化肠道类器官的功能性CFTR测定(A functional CFTR assay using primary cystic fibrosis intestinalorganoids.)《自然医学(Nat Med.)》2013年7月；19(7):939-45.)。
3.肠样细胞收集和接种
将细胞回收于细胞回收溶液中，通过在4℃下以650rpm离心5分钟收集，再悬浮于TryPLE中并且在37℃下温育5分钟。然后通过在4℃下以650rpm离心5分钟来收集细胞，并且将其再悬浮于含有10μM ROCK抑制剂(RI)的IEMM中。使细胞悬浮液穿过40μm细胞过滤器，并且以1x106个细胞/mL再悬浮于含有10μM RI的IEMM中。将细胞以5000个细胞/孔接种于多孔板中，并在测定之前在37℃、95％湿度和5％ CO2下温育过夜。
4.膜电位染料，肠状测定A
在37℃、95％湿度和5％ CO2下，将肠样细胞与测试化合物一起在IEMM中温育18-24小时。在化合物温育之后，采用膜电位染料测定，使用FLIPR Tetra直接测量在急剧添加10μM毛喉素和300nM N-[2,4-双(1,1-二甲基乙基)-5-羟苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺之后该测试化合物对CFTR介导的氯离子转运的效力和功效。简言之，将细胞在浸浴1缓冲液中洗涤5次。添加浸浴1染料溶液，并且将细胞在室温下温育25分钟。在染料温育之后，将细胞在无氯染料溶液中洗涤3次。通过添加无氯染料刺激溶液起始氯离子转运，并读取荧光信号15分钟。根据针对急剧毛喉素和300nM N-[2,4-双(1,1-二甲基乙基)-5-羟苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺刺激的荧光反应的AUC测定在每种条件下CFTR介导的氯离子转运。然后将氯离子转运表示为用3μM N-[(6氨基-2-吡啶基)磺酰基]-6-(3-氟-5-异丁氧基-苯基)-2-[(4S)-2,2,4-三甲基吡咯烷-1-基]吡啶-3-甲酰胺、3μM(R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧环戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羟丙基)-6-氟-2-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-吲哚-5-基)环丙烷甲酰胺和300nM急剧N-[2,4-双(1,1-二甲基乙基)-5-羟苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺三重组合控制处理之后氯离子转运的百分比(活性％)。
5.膜电位染料，肠状测定B
在37℃、95％湿度和5％ CO2下，将肠样细胞与测试化合物一起在IEMM中温育18-24小时。在化合物温育之后，采用膜电位染料测定，使用FLIPR Tetra直接测量在急剧添加10μM毛喉素和300nM N-[2,4-双(1,1-二甲基乙基)-5-羟苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺之后该测试化合物对CFTR介导的氯离子转运的效力和功效。简言之，将细胞在浸浴1缓冲液中洗涤5次。添加浸浴1染料溶液，并且将细胞在室温下温育25分钟。在染料温育之后，将细胞在无氯染料溶液中洗涤3次。通过添加无氯染料刺激溶液起始氯离子转运，并读取荧光信号15分钟。根据针对急剧毛喉素和300nM N-[2,4-双(1,1-二甲基乙基)-5-羟苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺刺激的荧光反应的AUC测定在每种条件下CFTR介导的氯离子转运。然后将氯离子转运表示为用1μM(14S)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1H-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ6-硫杂-3,9,11,18,23-五氮杂四环[17.3.1.111,14.05,10]二十四碳-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮、3μM(R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧环戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羟丙基)-6-氟-2-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-吲哚-5-基)环丙烷甲酰胺和300nM急剧N-[2,4-双(1,1-二甲基乙基)-5-羟苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺三重组合控制处理之后氯离子转运的百分比(活性％)。
C.HBE测定
1.CFTR介导的短路电流的尤斯室测定
使用衍生自CF受试者的FF508del和最小功能CFTR突变(F508del/MF-HBE)杂合的人支气管上皮(HBE)细胞进行尤斯室实验，并且如先前所述(Neuberger T,Burton B,ClarkH,Van Goor F Methods Mol Biol2011:741:39-54)进行培养。在四天之后，移除顶端培养基，并且在使用前在空气液体界面生长细胞>14天。这导致产生有纤毛的完全分化的柱状细胞的单层，该细胞的特征是人支气管气道上皮的特征。
为了分离CFTR介导的短路(ISC)电流，将SnapwellTM细胞培养插入物上生长的F508del/MF-HBE安装在尤斯室中，并且在电压钳记录条件(V保持＝0mV)下在37℃下测量跨上皮ISC。基底外侧溶液含有(以mM计)145NaCl、0.83K2HPO4、3.3KH2PO4、1.2MgCl2、1.2CaCl2、10葡萄糖、10HEPES(pH用NaOH调节至7.4)，并且顶端溶液含有(以mM计)145葡糖酸钠、1.2MgCl2、1.2CaCl2、10葡萄糖、10HEPES(pH用NaOH调节至7.4)和30μM阿米洛利以阻断上皮钠通道。将毛喉素(20μM)添加到顶端表面以活化CFTR，随后顶端添加由BPO、GlyH-101和CFTR抑制剂172(各自在20μM最终测定浓度下)组成的CFTR抑制剂混合物以特异性分离CFTR电流。根据抑制后对稳态电流的佛司可林峰响应确定每种条件下的CFTR介导的ISC(μA/cm2)。
2.校正剂化合物的鉴定
如上文所描述的，CFTR校正剂化合物对CFTR介导的ISC的活性在尤斯室研究中确定。将F508del/MF-HBE细胞培养物与一定浓度范围的校正剂化合物和1μM依伐卡托组合温育，或者与单一固定浓度的10μM校正剂化合物和1μM依伐卡托在37℃和20％人血清存在的情况下组合温育18-24小时。在18-24小时温育期间，具有1μM依伐卡托的校正剂化合物的浓度在CFTR介导的ISC的整个尤斯室测量中保持恒定，以确保化合物在整个实验中存在。将推定的F508del校正剂的功效和效力与已知的Vertex校正剂(14S)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1H-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ6-硫杂-3,9,11,18,23-五氮杂四环[17.3.1.111,14.05,10]二十四碳-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮与18μM替扎卡托和1μM依伐卡托组合进行比较。
D.生物活性数据表
以下表表示使用本文所公开的测定中的一种或多种产生的本公开的代表性化合物的CFTR调节活性(EC50：+++为<1μM；++为1-<3μM；+为3-<30μM；并且ND为“在该测定中未检测到。”活性％：+++为>60％；++为30-60％；+为<30％)。
表13：
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以下表表示使用本文所公开的测定中的一种或多种产生的本公开的代表性化合物的CFTR调节活性(EC50：+++为<1μM；++为1-<3μM；+为3-<30μM；并且ND为“在该测定中未检测到。”活性％：+++为>60％；++为30-60％；+为<30％)。
表14：
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以下表表示使用本文所公开的测定中的一种或多种产生的本公开的代表性化合物的CFTR调节活性(EC50：+++为<1μM；++为1-<3μM；+为3-<30μM；并且ND为“在该测定中未检测到。”活性％：+++为>60％；++为30-60％；+为<30％)。
表15：
VII.化合物386-426的合成
一般UPLC/HPLC分析方法
LC方法X：Luna C18(2)50×3mm，3μm。运行：2.5分钟。流动相：初始95％H2O 0.1％FA/5％MeCN 0.1％FA，1.3分钟内线性梯度至95％MeCN 0.1％FA，保持1.2分钟95％CH3CN0.1％FA，T：45℃，流速：1.5毫升/分钟。
LC方法Y：Luna C18(2)50×3mm，3μm。温度：45℃，流速：1.5毫升/分钟，运行时间：3.5分钟。流动相条件：初始95％H2O 0.1％FA/5％MeCN0.1％FA，1.3分钟内线性梯度至95％MeCN 0.1％FA，然后在95％CH3CN0.1％ FA下保持2.2分钟。MSD：ESI阳性。
LCMS方法Z：SunFire C18 4.6×75mm 5μM，6分钟运行，50-95％ ACN/水(0.1％ FA改性剂)，1.5分钟平衡，3分钟内梯度，保持3分钟。1.5毫升/分钟。
LCMS方法1A：C18SunFire 4.6×75mm 5μm，10分钟运行，50-95％ACN/水(0.1％ FA改性剂)，1.5分钟平衡，3分钟内梯度，保持7分钟。1.5毫升/分钟。
LC方法1B：XBridge C18 4.6×75mm 5μm，初始梯度为95％NH4HCO3/5％ MeCN，6分钟运行，1分钟平衡梯度0至3分钟，95％ MeCN，并保持3分钟。流速1.5毫升/分钟。
实例143：化合物386的制备
步骤1：3,3-二甲基哌啶-2-羧酸
在圆底烧瓶中，引入3,3-二甲基哌啶-2-腈(8.51g，49.443mmol)和HCl(在水中)(12M的83mL，996.00mmol)。然后将混合物回流3天。将粗蒸发至干燥。将残余物溶解于MeOH(150mL)中，然后添加MP-62游离碱，直到pH＝8为止。然后将混合物过滤并将滤液在减压下蒸发。将残余物在CH2Cl2中研磨，得到呈类白色固体的沉淀的期望的3,3-二甲基哌啶-2-羧酸(7.895g，101％)。1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ3.37-3.21(m,2H,与溶剂重叠),3.02-2.80(m,1H),1.91-1.47(m,4H),1.27-1.17(m,3H),1.07-0.99(m,3H),(2H缺失，不稳定质子).ESI-MS m/z计算值157.1103，实验值156.2(M-1)-；保留时间：0.41分钟。LC方法X。
步骤2：1-叔丁氧羰基-3,3-二甲基-哌啶-2-羧酸
将3,3-二甲基哌啶-2-羧酸(11.16g，64.599mmol)与碳酸钠(30g，283.05mmol)一起溶解于水(100mL)中，然后滴加溶解于二噁烷(150mL)中的叔丁氧羰基叔丁基碳酸酯(19.000g，20mL，87.057mmol)并将反应混合物在室温下搅拌过夜。添加更多叔丁氧羰基叔丁基碳酸酯(19.000g，20mL，87.057mmol)和碳酸钠(17g，160.40mmol)并将反应在25-30℃下搅拌3天。将反应混合物用水稀释，直到所有固体溶解为止并将混合物在室温下搅拌1小时。将所得溶液用庚烷(200mL)洗涤，以去除未充分反应的过量BOC2O。将乙酸乙酯(100mL)添加到水相中，将所述水相在0℃下用6N HCl水溶液酸化，直到pH＝3-4为止。将水相分离并用乙酸乙酯(2×200mL)洗涤。将有机相合并，经无水硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈澄清黄色油的粗1-叔丁氧羰基-3,3-二甲基-哌啶-2-羧酸(14.7g，78％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.52-4.24(m,1H),4.10-3.88(m,1H),3.26(br.s.,1H),1.76-1.64(m,2H),1.50-1.43(m,10H),1.34-1.28(m,1H),1.07(s,6H),(缺少可交换质子COOH)。ESI-MSm/z计算值257.1627，实验值202.2(M-55)+；保留时间：1.76分钟；LC方法X。
步骤3：2-(羟甲基)-3,3-二甲基-哌啶-1-羧酸叔丁酯
将1-叔丁氧羰基-3,3-二甲基-哌啶-2-羧酸(7.83g，22.426mmol)溶解于THF(80mL)中并冷却至0℃。然后在0℃下滴加硼烷-THF络合物(1M的42.7mL，42.700mmol)并将所得溶液搅拌1小时。然后将反应混合物温热至25℃并搅拌过夜。在完成之后，将反应内容物冷却至0℃，缓慢添加饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)以淬灭过量的试剂，并添加水(10mL)以溶解沉淀的盐。然后将粗反应内容物用CH2Cl2(4×10mL)萃取，并将合并的有机萃取物用饱和碳酸氢钠水溶液(3×20mL)和水(3×20mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩，得到呈无色油的2-(羟甲基)-3,3-二甲基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(7g，128％)。ESI-MS m/z计算值243.18344，实验值无效(M+)+；188.2(M-55)+；保留时间：1.74分钟；LC方法X。
步骤4：2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3,3-二甲基-哌啶-1-羧酸叔丁酯
在0℃下将粗2-(羟甲基)-3,3-二甲基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(7g，28.766mmol)溶解于干燥DCM(147mL)中并用咪唑(4.12g，60.519mmol)、叔丁基-氯-二苯基-硅烷(11.891g，11.25mL，43.262mmol)和4-二甲基氨基吡啶(175mg，1.4325mmol)处理。将混合物在0℃下搅拌20分钟，然后在室温下过夜，用DCM稀释，用水洗涤，经Na2SO4干燥，并将溶剂在减压下蒸发。将所得棕色油通过硅胶垫(己烷/EtOAc 8:2)过滤。将滤液蒸发并通过80g C18金筒反相色谱法使用酸性水(甲酸＝0.1％w/w)中的MeCN的梯度(对于3.5CV为65％，然后在10CV上为100％，然后对于15CV为100％)纯化，得到呈无色粘性油的纯2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3,3-二甲基-哌啶-1-羧酸叔丁酯。ESI-MS m/z计算值481.3012，实验值382.2(M-99)+；保留时间：2.79分钟；LC方法Y。
步骤5：2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3,3-二甲基-6-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯
在配备有机械搅拌器和内部温度传感器的2L烧瓶中，引入高碘酸钠(56g，261.81mmol)和水(565mL)，然后引入氧化钌(IV)水合物(1.2g，7.9426mmol)。将混合物搅拌10分钟。然后将2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3,3-二甲基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(25.4g，48.982mmol)于EtOAc(255mL)中的溶液添加到混合物中并剧烈搅拌。在1小时反应时间之后，将相分离，将水相用EtOAc(3×300mL)洗涤。向合并的有机相中添加iPr-OH(10mL)并将混合物搅拌45分钟，然后经硅藻土垫过滤。将滤液经硫酸钠干燥，过滤然后蒸发。然后将粗通过硅胶干柱真空色谱法使用5、10和15％ EtOAc/庚烷纯化，得到呈澄清黄色油的2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3,3-二甲基-6-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(13.9g，57％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.71-7.61(m,4H),7.45-7.36(m,6H),3.90-3.84(m,1H),3.77(dd,J＝11.0,2.0Hz,1H),3.75-3.71(m,1H),2.67-2.51(m,2H),2.37(td,J＝12.0,7.6Hz,1H),1.49(s,10H),1.13(s,3H),1.05(s,3H),1.03(s,9H).ESI-MS m/z计算值495.2805，实验值396.3(M-99)+；保留时间：4.49分钟；LC方法Z。
步骤6：2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3,3-二甲基-6-(三氟甲基磺酰氧基)-2,4-二氢吡啶-1-羧酸叔丁酯
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在-78℃下在氮气下，将2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3,3-二甲基-6-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.0g，3.9820mmol)于无水THF(44mL)中的溶液冷却。在-78℃(干冰/丙酮)下，在10分钟内滴加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(在THF中)(1M的7mL，7.0000mmol)。将反应在相同温度下搅拌0.5小时。在10分钟内将N-(5-氯-2-吡啶基)-1,1,1-三氟-N-(三氟甲基磺酰基)甲磺酰胺(2.22g，5.6534mmol)于无水THF(4.4mL)中的溶液滴加到反应混合物中。然后将反应在-78℃下搅拌1小时。然后将反应混合物温热至-40℃(干冰+MeOH/H2O(1:1))并搅拌15分钟。将反应在-40℃下用饱和碳酸氢钠(15mL)淬灭并且然后缓慢升至室温。向混合物中添加水(100mL)并且将水相用MTBE(3×150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×50mL)mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。将粗产物通过15.5g C18金筒反相色谱法使用酸性水(甲酸＝0.1％w/w)中的MeCN的梯度(对于3.5CV为75％，然后在10CV上为100％，然后对于10CV为100％)纯化。将收集的含有产物的级分合并，在减压下蒸发至干燥并通过硅胶垫(40g，n-Hex/EtOAc 95:5)过滤，得到呈白色固体的纯2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3,3-二甲基-6-(三氟甲基磺酰氧基)-2,4-二氢吡啶-1-羧酸叔丁酯(2.47g，99％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.76-7.66(m,4H),7.46-7.35(m,6H),5.12(t,J＝3.8Hz,1H),4.25-4.12(m,1H),3.75-3.66(m,1H),3.64-3.58(m,1H),1.87(d,J＝3.7Hz,2H),1.53(s,9H),1.04(s,9H),0.92(s,3H),0.82(s,3H).19F NMR(377MHz,CDCl3)δ-74.28(s,3F).ESI-MS m/z计算值627.2298，实验值650.2(M+23)+；保留时间：5.3分钟；LC方法Z。
步骤7：2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3,3-二甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-2,4-二氢吡啶-1-羧酸叔丁酯
在氮气气氛下，向100mL Schlenk管中装入2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3,3-二甲基-6-(三氟甲基磺酰氧基)-2,4-二氢吡啶-1-羧酸叔丁酯(3g，4.7739mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧硼杂环戊烷(1.94g，7.6396mmol)、精细研磨的碳酸钾(1.72g，12.445mmol)、三苯基膦(252mg，0.9608mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(336mg，0.4787mmol)。将预脱气和干燥的1,4-二噁烷(48mL)添加到反应烧瓶中。将混合物超声处理20秒，然后在85℃下加热过夜。将反应冷却到室温并将粗经硅藻土垫过滤。然后将滤液蒸发。随后将残余物通过硅胶垫(n-Hex/EtOAc95:5)，得到呈无色粘性油的纯2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3,3-二甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-2,4-二氢吡啶-1-羧酸叔丁酯(2.8g，94％)。ESI-MS m/z计算值605.3708，实验值506.3(M-99)+；保留时间：6.38分钟；LC方法1A。
步骤8：2-溴-5-异丙氧基-嘧啶
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将2-溴嘧啶-5-醇(3.56g，20.34mmol)和碳酸钾(5.6g，40.52mmol)在烧瓶中合并，随后添加DMF(35mL)并且然后添加2-碘丙烷(3mL，30.05mmol)。在氮气气氛下将反应混合物在50℃下加热1小时。将反应混合物冷却至室温并过滤。将滤液用乙酸乙酯稀释并添加饱和氯化钠水溶液。将层分离，并将有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤四次。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩成黄色油。将粗物质通过硅胶柱色谱法使用0-20％乙酸乙酯/己烷的梯度纯化，得到呈白色固体的2-溴-5-异丙氧基-嘧啶(4.14g，94％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.48(s,2H),4.79(p,J＝6.0Hz,1H),1.30(d,J＝6.0Hz,6H).ESI-MS m/z计算值215.98982，实验值216.97(M+1)+；保留时间：0.47分钟；LC方法D。
步骤9：2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2,4-二氢吡啶-1-羧酸叔丁酯
向20mL管中装入2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3,3-二甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-2,4-二氢吡啶-1-羧酸叔丁酯(500mg，0.8247mmol)、2-溴-5-异丙氧基-嘧啶(269mg，1.2393mmol)和氢氧化铯水合物(277mg，1.6495mmol)，然后装入干燥甲苯(5.5000mL)和干燥1,4-二噁烷(5.5000mL)。在搅拌下将混合物用N2鼓泡15分钟。然后添加四(三苯基膦)钯(95.6mg，0.0827mmol)并将混合物鼓泡5分钟。将管密封，并将混合物在110℃下加热过夜。将反应冷却至室温，用EtOAc稀释并经硅藻土和硅胶垫(EtOAc)过滤。将滤液蒸发并且随后将残余物通过40g C18金筒快速色谱法使用EtOAc/正己烷的梯度(对于3.5CV为5％，然后在20CV上为25％)纯化，得到呈无色粘性油的纯2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2,4-二氢吡啶-1-羧酸叔丁酯(406mg，80％)。ESI-MS m/z计算值615.3492，实验值616.3(M+1)+；保留时间：5.28分钟；LC方法1A。
步骤10：叔丁基-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2,4-二氢-1H-吡啶-2-基]甲氧基]-二苯基-硅烷
在25mL烧瓶中引入2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2,4-二氢吡啶-1-羧酸叔丁酯(838mg，1.3593mmol)和DCM(8.4mL)。然后在室温下滴加三氟乙酸(4.6620g，3.15mL，40.886mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将粗蒸发至干燥，得到呈黄色粘性油的叔丁基-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2,4-二氢-1H-吡啶-2-基]甲氧基]-二苯基-硅烷(三氟乙酸盐)(1.1g，99％)。ESI-MS m/z计算值515.2968，实验值516.3(M+1)+；保留时间：1.84分钟。LC方法X。
步骤11：叔丁基-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]-二苯基-硅烷
在25mL圆底烧瓶中，将叔丁基-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2,4-二氢-1H-吡啶-2-基]甲氧基]-二苯基-硅烷(三氟乙酸盐)(415mg，0.6590mmol)溶解于THF(10.5mL)中，然后将三乙胺(163.35mg，0.225mL，1.6143mmol)添加到混合物中。在5分钟搅拌之后，在室温下将三乙酰氧基硼氢化钠(682mg，3.2179mmol)添加到混合物中并将混合物搅拌过夜。将反应通过添加H2O(7.5mL)和AcOH(2mL)淬灭。然后将粗混合物用EtOAC(3×10mL)洗涤。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗通过30g C18金筒反相色谱法使用碱性水(NH4OH冲液，pH＝10)中的MeCN的梯度(对于3.5CV为40％，然后在13CV上为100％，然后对于15CV为100％)纯化，得到纯叔丁基-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]-二苯基-硅烷(211mg，59％)。ESI-MS m/z计算值517.31244，实验值518.3(M+1)+；保留时间：5.24分钟；LC方法1B。
步骤12：叔丁基-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]-二苯基-硅烷，非对映异构体1以及叔丁基-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]-二苯基-硅烷，非对映异构体2
将两个不同批次的纯化的叔丁基-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]-二苯基-硅烷(70mg，0.1313mmol)、叔丁基-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]-二苯基-硅烷(100mg，0.1738mmol)和叔丁基-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]-二苯基-硅烷(211mg，0.3900mmol)溶于MeCN中并合并。在减压下蒸发之后，将新批次通过30g C18金筒反相色谱法使用碱性水(NH4OH冲液，pH＝10)中的MeCN的梯度(对于3.5CV为40％，然后在13CV上为100％，然后对于15CV为100％)纯化，得到呈黄色粘性油的纯叔丁基-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]-二苯基-硅烷(150mg，80％)。随后将残余物通过SFC(柱Lux 5μm，纤维素4，250×21.2mm，39.1mg/进样量，浓度48.9mg/mL，柱T＝40℃，流速75毫升/分钟，25％ MeOH)纯化，得到呈玻璃状粘性油的叔丁基-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]-二苯基-硅烷(150mg，80％)(非对映异构体1)(ESI-MS m/z计算值517.3125，实验值518.3(M+1)+；保留时间：5.26分钟)以及呈玻璃状粘性油的叔丁基-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]-二苯基-硅烷(153mg，85％)(非对映异构体2)(ESI-MS m/z计算值517.3125，实验值518.3(M+1)+；保留时间：5.26分钟；LC方法1B。
步骤13：[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲醇，非对映异构体1
在50mL烧瓶中引入叔丁基-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]-二苯基-硅烷，非对映异构体1(150mg，0.2784mmol)(SFC峰1)和THF(2.25mL)。将混合物搅拌10分钟，然后在室温下添加TBAF(1M的1.11mL，1.1100mmol)。在添加之后，将混合物温热至40℃并在该温度下搅拌过夜。将反应冷却至室温并将挥发物在减压下通过蒸发去除。将粗通过C18反相色谱法(柱：30g HP金C18；梯度：含有0.1％的甲酸的30％至100％乙腈/水，15CV)纯化，得到呈浅黄色油的[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲醇，非对映异构体1(甲酸盐)(90mg，99％)。ESI-MS m/z计算值279.19467，实验值280.2(M+1)+；保留时间：1.19分钟；LC方法X。
步骤14：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸，非对映异构体1
将[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲醇，非对映异构体1(90mg，0.3218mmol)于无水N,N-二甲基甲酰胺(0.45mL)中的溶液添加到3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(150mg，0.3590mmol)于2-甲基四氢呋喃(2.25mL)中的溶液中。将混合物冷却至10-15℃并且然后添加叔丁醇钠(200mg，2.0811mmol)。将反应在10-15℃下搅拌2小时，然后在室温下搅拌过夜。将混合物温热至40℃1小时。将反应恢复至室温并将叔丁醇钠(78mg，0.8116mmol)添加到混合物中并搅拌1小时，然后添加另一叔丁醇钠(77.315mg，0.8045mmol)并将混合物再搅拌1小时。然后将混合物冷却至0℃并通过添加1N HCl水溶液(5mL)淬灭。将双相混合物搅拌30分钟。然后将层分离，并将水层用2-甲基四氢呋喃(3×15mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗混合物通过50g C18金筒反相色谱法纯化，用20至100％的MeOH/酸性水(水中的0.1％的盐酸)的梯度洗脱，在蒸发之后得到呈白色固体的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(120mg，53％)。ESI-MS m/z计算值660.273，实验值661.2(M+1)+；保留时间：1.44分钟；LC方法X。
步骤15：13-(2,6-二甲基苯基)-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-7,7-二甲基-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮(化合物386)
在0℃下向N-甲基吗啉(97.520mg，106μL，0.9641mmol)于二甲基甲酰胺(DMF)(19L)中的搅拌的溶液中添加2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(48mg，0.2734mmol)，然后添加于二甲基甲酰胺(DMF)(2mL)中的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(90mg，0.1291mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌5分钟。然后将反应温热至室温并在室温下搅拌24小时。将反应混合物保存并与单独制备的其它反应混合物合并。
将13-(2,6-二甲基苯基)-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-7,7-二甲基-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮(92.9mg，0.1445mmol)和13-(2,6-二甲基苯基)-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-7,7-二甲基-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮(13.8mg，0.0215mmol)的粗混合物合并，在减压下蒸发。将残余物通过40g C18金筒反相色谱法使用酸性水(甲酸＝0.1％w/w)中的MeCN的梯度(对于3.5CV为5％，然后在21CV上为100％)纯化。将含有产物的级分合并并蒸发至干燥。将白色固体溶解于CH3CN/水中并冻干，得到呈白色固体的纯13-(2,6-二甲基苯基)-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-7,7-二甲基-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮(40.9mg，37％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.19-12.73(m,1H),8.63(s,2H),8.44(br.s.,1H),7.89(br.s.,1H),7.69(br.s.,2H),7.29-7.19(m,1H),7.10(d,J＝7.1Hz,2H),6.13(d,J＝4.6Hz,2H),4.85(五重峰,J＝6.0Hz,1H),4.69(d,J＝9.3Hz,1H),3.48-3.35(m,2H),2.71-2.63(m,1H,与DMSO-D6卫星重叠),2.14-1.92(m,8H),1.33(m,7H),0.84(s,3H),0.79(s,3H).ESI-MS m/z计算值642.26245，实验值643.3(M+1)+；保留时间：3.38分钟；LC方法1B。
实例144：化合物387的制备
步骤1：[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲醇，非对映异构体2
在50mL烧瓶中引入叔丁基-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]-二苯基-硅烷，非对映异构体2(210mg，0.3853mmol)和THF(3.1500mL)。将混合物搅拌10分钟，然后在室温下添加TBAF(THF中)(1M的1.16mL，1.1600mmol)。在添加之后，将混合物温热至40℃并在该温度下搅拌过夜。将反应冷却至室温并将挥发物在减压下通过蒸发去除。将粗通过C18反相色谱法(柱：30g HP金C18；梯度：含有0.1％的甲酸的30％至100％乙腈/水，15CV)纯化，得到呈浅黄色油的[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲醇(30mg，28％)。ESI-MS m/z计算值279.19467，实验值280.2(M+1)+；保留时间：1.2分钟；LC方法X。
步骤2：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸，非对映异构体2
将[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲醇(25mg，0.0895mmol)于无水N,N-二甲基甲酰胺(125μL)中的溶液添加到3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(41mg，0.0981mmol)于2-甲基四氢呋喃(0.625mL)中的溶液中。将混合物冷却至10-15℃并且然后添加叔丁醇钠(56mg，0.5827mmol)。将反应在10-15℃下搅拌2小时并将叔丁醇钠(56mg，0.5827mmol)添加到混合物中并搅拌1小时。然后将混合物冷却至0℃并通过添加1N HCl水溶液(0.5mL)淬灭。将双相混合物搅拌30分钟。然后将层分离，并将水层用2-甲基四氢呋喃(3×15mL)萃取。然后将层分离并将水层用2-甲基四氢呋喃(3×15mL)萃取。将合并的有机层与另一个用于纯化的粗批反应合并。
将粗3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(62.4mg，0.0895mmol)和粗3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(12.48mg，0.0179mmol)合并以通过1.5g C18金筒反向快速色谱法使用酸性水(HCl＝0.1％w/w)中的MeCN的梯度(对于3.5CV为20％，然后在10CV上为100％，然后对于10CV为100％)纯化，得到纯3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸，非对映异构体2(盐酸盐)(32mg，40％)。ESI-MS m/z计算值660.273，实验值661.2(M+1)+；保留时间：1.44分钟；LC方法X。
步骤3：13-(2,6-二甲基苯基)-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-7,7-二甲基-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮(化合物387)
在0℃下向N-甲基吗啉(34.960mg，38μL，0.3456mmol)于二甲基甲酰胺(DMF)(6.4mL)中的搅拌的溶液中添加2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(17mg，0.0968mmol)，然后添加于二甲基甲酰胺(DMF)(0.64mL)中的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-2-哌啶基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸，非对映异构体2(盐酸盐)(32mg，0.0459mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌5分钟。然后将反应温热至室温并在室温下搅拌24小时。将挥发物在减压下去除，并且随后将残余物通过15.5g C18金筒反向快速色谱法使用酸性水(甲酸＝0.1％w/w)中的MeCN的梯度(对于3.5CV为10％，然后在20CV上为100％，然后对于3.5CV为100％)纯化，得到呈白色固体的纯13-(2,6-二甲基苯基)-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-7,7-二甲基-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮，非对映异构体2(5.6mg，18％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.95(br.s,1H),8.63(s,2H),8.44(s,1H),7.89(br.s,1H),7.69(br.s,2H),7.28-7.20(m,1H),7.10(d,J＝7.3Hz,2H),6.13(d,J＝4.4Hz,2H),4.85(spt,J＝6.0Hz,1H),4.69(d,J＝9.0Hz,1H),3.47-3.35(m,2H),2.71-2.64(m,1H),2.17-1.86(m,8H),1.40-1.29(m,7H),0.84(s,3H),0.79(s,3H).ESI-MS m/z计算值642.26245，实验值643.2(M+1)+；保留时间：4.61分钟；LC方法Z。
实例145：化合物388和化合物389的制备
步骤1：O1-O6-甲基3,4-二氢-2H-吡啶-1,6-二羧酸叔丁酯
在-78℃下，向O1-O2-甲基哌啶-1,2-二羧酸叔丁酯(65g，259.15mmol)于无水THF(500mL)中的溶液中添加于THF中的1.0M LiHMDS(1M的400mL，400.00mmol)。将反应混合物在相同温度下搅拌30分钟。在-78℃下，通过套管向苯硒酰氯(150g，783.22mmol)于无水THF(1000mL)中的溶液中添加上文制备的烯醇锂溶液。将反应缓慢升温至室温并搅拌过夜。将溶剂在真空下去除。将残余物用饱和氯化铵(500mL)和DCM(500mL)稀释。在相分离之后，将水层用DCM(2×400mL)萃取。将合并的有机层用盐水(300mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱使用0至15％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈黄色油的O1-O6-甲基3,4-二氢-2H-吡啶-1,6-二羧酸叔丁酯(39.2g，60％)，其在静置之后固化。ESI-MSm/z计算值241.13141，实验值242.0(M+1)+；保留时间：2.83分钟；LC方法T。
步骤2：O1-O2-甲基3-异丙基哌啶-1,2-二羧酸叔丁酯
在氩气下，向装有温度计(以监控内部温度)的烘箱干燥的3颈烧瓶中装入CuI(32g，168.02mmol)。将无水THF(95.2mL)添加到其中并将所得悬浮液冷却至-78℃(干冰丙酮浴)。在-78℃(干冰丙酮浴)下，在45分钟内将于THF中的THF(2M的167.00mL，334.00mmol)中的氯(异丙基)镁添加到反应混合物中。在10分钟之后，将反应混合物转移到-35℃浴中(控制量的干冰中的丙酮并使用温度计监测)并搅拌30分钟。将温度降至-78℃浴并搅拌10分钟。在1小时10分钟内(在-78℃下)将O1-O6-甲基3,4-二氢-2H-吡啶-1,6-二羧酸叔丁酯(8g，31.498mmol)于无水THF(95.2mL)中的溶液滴加到反应混合物中。然后将反应在-78℃下搅拌1小时并且然后将温度逐渐升至-10℃并再搅拌30分钟。此时SM被LCMS完全消耗，在LCMS和TLC中观察到对应于产物质量的峰(只有TIC，没有UV)(5:1己烷:EtOAc并用茚三酮染色，产物显示为深蓝色(其它杂质/副产物显示紫色和黄色))。在-10℃下将反应用饱和氯化铵(300mL)淬灭并用EtOAc(300ml)稀释。将不溶物质通过硅藻土垫滤出，用EtOAc彻底洗涤。将水层用乙酸乙酯(2×300mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×250ml)洗涤。将粗产物通过快速色谱法(Combiflash，加载到330g筒中的干燥硅上，使用60分钟内0-15％乙醚/己烷作为洗脱剂)纯化，得到呈浅黄色油的O1-O2-甲基3-异丙基哌啶-1,2-二羧酸叔丁酯(5.9g，62％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ5.01–4.79(m,1H),4.12–3.79(m,1H),3.73(s,3H),3.14–2.75(m,1H),1.86–1.62(m,3H),1.63–1.52(m,1H),1.45(s,9H),1.39–1.28(m,2H),1.03(d,J＝5.8Hz,3H),0.92(d,J＝6.1Hz,3H).ESI-MS m/z计算值285.194，实验值286.5(M+1)+；保留时间：6.16分钟；LC方法S。
步骤3：2-(羟甲基)-3-异丙基-哌啶-1-羧酸叔丁酯
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在0℃下在氮气下，在15分钟内向O1-O2-甲基3-异丙基哌啶-1,2-二羧酸叔丁酯(5.84g，19.441mmol)于无水甲苯(117mL)中的溶液中滴加于甲苯中的1.0M DIBAL-H(1M的52mL，52.000mmol)。将反应在相同温度下再搅拌45分钟。此时起始材料被LCMS完全消耗。在0℃下将反应用饱和酒石酸钾钠(水溶液)(250mL)淬灭并用乙酸乙酯(200mL)稀释。然后将反应混合物恢复至室温并搅拌30分钟。将固体残余物用一小块硅藻土过滤，用EtOAc彻底洗涤。将水层用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(250mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，得到呈澄清液体的粗2-(羟甲基)-3-异丙基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.9g，88％)，其不经进一步纯化而用于下一步骤。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ4.45–4.17(m,1H),3.91–3.79(m,1H),3.59(dd,J＝11.5,5.1Hz,1H),3.02–2.72(m,1H),1.82–1.69(m,2H),1.69–1.53(m,3H),1.46(s,9H),1.44-1.33(m,1H),1.18–1.10(m,1H),1.00(dd,J＝6.5,1.2Hz,3H),0.89(dd,J＝6.7,1.1Hz,3H).ESI-MS m/z计算值257.1991，实验值258.3(M+1)+；保留时间：4.78分钟；LC方法S。
步骤4：2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丙基-哌啶-1-羧酸叔丁酯
在氮气下，将2-(羟甲基)-3-异丙基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.5g，12.511mmol)于无水DCM(80mL)中的溶液冷却至0℃。将咪唑(2.2g，32.316mmol)添加到溶液中。在5分钟之后，在0℃下将2-(羟甲基)-3-异丙基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.5g，12.511mmol)滴加到反应混合物中。将反应在0℃下搅拌30分钟，然后在室温下搅拌1小时。将反应用DCM(150mL)和盐水(150mL)稀释。然后将水层用DCM(2×150ml)萃取。将合并的有机溶液经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(Combiflash，加载到120g筒中的干燥硅上，使用0-15％乙醚/己烷作为洗脱剂)纯化并将溶剂去除，得到呈无色凝胶的2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丙基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(5.3g，81％)。ESI-MS m/z计算值495.31686，实验值496.6(M+1)+；保留时间：9.74分钟；LC方法S。
步骤5：2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丙基-6-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯
在0℃下，向2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丙基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.6g，5.2444mmol)于CCl4(14.5mL)、ACN(14.5mL)和水(19.3mL)的溶剂混合物中的溶液中添加NaIO4(12g，56.103mmol)和氯化钌(III)水合物(120mg，0.5785mmol)。将反应在0℃搅拌30分钟，然后升至室温并搅拌2小时。然后将反应用乙酸乙酯(50mL)稀释。将固体通过硅藻土垫过滤，用EtOAc彻底洗涤。将滤液在减压下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(Combiflash，加载到80g筒中的干燥硅上，使用40分钟内0-15％EtOAc/己烷作为洗脱剂)纯化并将溶剂去除，得到呈无色凝胶的2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丙基-6-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.2g，44％)。ESI-MS m/z计算值509.29614，实验值510.5(M+1)+；保留时间：8.8分钟；LC方法S。
步骤6：2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丙基-6-(三氟甲基磺酰氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯
在-78℃下在氮气下，将2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丙基-6-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.7g，6.8955mmol)于无水THF(74mL)中的溶液冷却。在-78℃下，在25分钟内滴加于THF中的1.0M LiHMDS(1.0M的8.5mL，8.5000mmol)。将反应在相同温度下搅拌0.5小时。在15分钟内将N-(5-氯-2-吡啶基)-1,1,1-三氟-N-(三氟甲基磺酰基)甲磺酰胺(3.3g，8.4037mmol)于无水THF(8.2mL)中的溶液滴加到反应混合物中。然后将反应在-78℃下搅拌1小时。然后将反应混合物温热至-40℃并搅拌15分钟。将反应在-40℃下用饱和碳酸氢钠(15mL)淬灭并且然后缓慢升至室温。将水溶液用乙醚(3×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并在真空下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(Combiflash，加载到4g筒中的干燥硅上，使用0-10％ EtOAc/己烷作为洗脱剂)纯化，得到呈无色凝胶的2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丙基-6-(三氟甲基磺酰氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(223mg，79％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ7.74–7.49(m,4H),7.46–7.33(m,6H),5.09(t,J＝4.3Hz,1H),4.72–4.46(m,1H),3.77(dd,J＝10.4,6.9Hz,1H),3.50(dd,J＝10.3,7.6Hz,1H),2.18–2.03(m,1H),2.00(dd,J＝7.1,4.6Hz,1H),1.66–1.58(m,1H),1.48(s,9H),1.33-1.23(m,1H),1.04(s,9H),0.92(dd,J＝6.6,1.3Hz,3H),0.90(d,J＝6.6Hz,3H)ESI-MS m/z计算值641.2454，实验值642.7(M+1)+；保留时间：9.64分钟；LC方法S。
步骤7：2-氯-5-异丙氧基-嘧啶
将2-氯嘧啶-5-醇(40g，306.44mmol)、2-碘丙烷(80g，470.61mmol)和碳酸钾(100g，723.56mmol)于DMF(400.00mL)中的搅拌的混合物在80℃下加热2小时。使反应混合物冷却至室温并且然后添加水(1L)。将固体过滤，用水洗涤并溶解于EtOAc(1L)中。将乙酸乙酯层经硫酸钠干燥，过滤并在真空下浓缩，得到呈白色固体的2-氯-5-异丙氧基-嘧啶(42g，75％)。ESI-MS m/z计算值172.04034，实验值173.3(M+1)+；保留时间：3.35分钟；LC方法S。
步骤7：2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丙基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯
在氩气气氛下，向250ml烧瓶中装入4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧硼杂环戊烷(2.3g，9.0573mmol)、2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丙基-6-(三氟甲基磺酰氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(3.9g，5.7727mmol)、碳酸钾(2.1g，15.195mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(406mg，0.5784mmol)、三苯基膦(303mg，1.1552mmol)。将预脱气的1,4-二噁烷(62.5mL)(搅拌下鼓泡氩气2小时)添加到反应烧瓶中。将反应混合物用氩气进一步脱气35分钟。然后将反应在90℃下加热5小时20分钟。通过LCMS观察到起始材料的完全消耗。将反应冷却至室温。将反应用乙酸乙酯(150mL)稀释并通过硅藻土垫过滤，用EtOAc彻底洗涤。将盐水(150ml)添加到滤液中。将两个层分离，并将水层用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(Combiflash，加载有120g筒中的最少量的苯，使用0-15％ EtOAc/己烷作为洗脱剂)纯化并将溶剂去除，得到呈白色泡沫的2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丙基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(2.79g，74％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ7.70–7.50(m,4H),7.45–7.32(m,6H),5.00(t,J＝3.8Hz,1H),4.27–4.17(m,1H),3.62(dd,J＝9.8,5.6Hz,1H),3.56(t,J＝9.6Hz,1H),2.15–1.90(m,2H),1.82–1.71(m,1H),1.57-1.53(m,1H),1.41(s,9H),1.24(d,J＝3.9Hz,12H),1.04(s,9H),0.91(d,J＝3.1Hz,3H),0.90(d,J＝3.2Hz,3H).ESI-MS m/z计算值619.3864，实验值620.8(M+1)+；保留时间：4.55分钟；LC方法W。
步骤8：2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3-异丙基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯
向小瓶中添加2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丙基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(365mg，0.5890mmol)、2-氯-5-异丙氧基-嘧啶(161mg，0.8861mmol)、二乙酰氧基钯(26.5mg，0.1180mmol)、三苯基氧膦(61.8mg，0.2356mmol)和磷酸盐(钾离子(3))(375mg，1.767mmol)。将二噁烷(7.3mL)和水(730μL)添加到反应混合物中并将溶液用氮气喷射10分钟。将小瓶用氩气冲洗，用螺旋盖密封并在100℃下加热5小时。将反应混合物冷却至室温并在乙酸乙酯与水之间分配。将层分离，并且将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过硅胶柱色谱法使用0-20％乙酸乙酯/己烷的梯度纯化，得到呈白色固体的2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3-异丙基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(180mg，49％)。ESI-MS m/z计算值629.36487，实验值630.9(M+1)+；保留时间：0.86分钟；LC方法D(50-99％梯度)。
步骤9：叔丁基-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3-异丙基-2-哌啶基]甲氧基]-二苯基-硅烷
将2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3-异丙基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(145mg，0.2302mmol)溶解于DCM(2mL)中并在冰水浴中冷却。将TFA(850μL，11.03mmol)添加到反应中，在5分钟之后将冷却浴去除并将反应温热至室温并在该温度下继续搅拌1小时。然后将反应在减压下浓缩，得到中间体叔丁基-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3-异丙基-1,2,3,4-四氢吡啶-2-基]甲氧基]-二苯基-硅烷(三氟乙酸盐)。ESI-MS m/z计算值529.31244，实验值530.8(M+1)+；保留时间：0.75分钟。然后将所得中间体溶解于THF(4mL)中，然后添加三乙胺(65μL，0.4664mmol)并且然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(195mg，0.9201mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用HCl水溶液(6M的384μL，2.304mmol)淬灭并且然后通过反相HPLC使用(10-99％ ACN/水(5mMHCl))纯化。将期望的级分合并并在减压下浓缩，得到叔丁基-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3-异丙基-2-哌啶基]甲氧基]-二苯基-硅烷(盐酸盐)(95.7mg，73％)。ESI-MS m/z计算值531.3281，实验值532.9(M+1)+；保留时间：0.72分钟；LC方法E。
步骤10：[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3-异丙基-2-哌啶基]甲醇
将叔丁基-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3-异丙基-2-哌啶基]甲氧基]-二苯基-硅烷(盐酸盐)(90mg，0.1584mmol)溶解于二噁烷(1.5mL)中，随后添加HCl水溶液(12.1M的655μL，7.926mmol)。将反应混合物在100℃下加热1小时。将反应混合物冷却至室温并通过反相HPLC使用(1-99％ACN/水(5mM HCl))纯化，得到[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3-异丙基-2-哌啶基]甲醇(盐酸盐)(39mg，75％)。ESI-MS m/z计算值293.21033，实验值294.3(M+1)+；保留时间：0.4分钟；LC方法D。
步骤11：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3-异丙基-2-哌啶基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(49mg，0.1173mmol)溶解于THF(2mL)中，然后添加[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3-异丙基-2-哌啶基]甲醇(盐酸盐)(38.7mg，0.1173mmol)并且然后添加叔丁醇钠(78.9mg，0.8210mmol)。将反应在室温下搅拌2小时。将反应混合物在冰水浴中冷却并用HCl(6M的196μL，1.176mmol)淬灭。将反应混合物温热至室温，用DMSO(1mL)稀释，注射器过滤并通过反相HPLC使用(1-70％ ACN/水(5mM HCl))纯化，得到呈白色固体的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3-异丙基-2-哌啶基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(53.3mg，64％)。ESI-MS m/z计算值674.28864，实验值675.6(M+1)+；保留时间：0.54分钟；LC方法D。
步骤12：13-(2,6-二甲基苯基)-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-7-异丙基-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮
将3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3-异丙基-2-哌啶基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(48.3mg，0.06791mmol)溶解于DMF(4.5mL)中，然后添加2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(15.5mg，0.08828mmol)和4-甲基吗啉(52.3μL，0.4757mmol)。将反应在室温下搅拌12小时。将反应混合物用注射器过滤并通过反相HPLC使用(10-99％ACN/水(5mM HCl))纯化，得到呈白色固体的13-(2,6-二甲基苯基)-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-7-异丙基-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮(33.7mg，74％)。ESI-MS m/z计算值656.2781，实验值657.5(M+1)+；保留时间：1.97分钟；LC方法A。
步骤13：13-(2,6-二甲基苯基)-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-7-异丙基-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮，异构体1(化合物388)以及13-(2,6-二甲基苯基)-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-7-异丙基-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮，异构体2(化合物389)
对13-(2,6-二甲基苯基)-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-7-异丙基-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮(30mg，0.04522mmol)进行异构体的SFC分离。在50℃下将对映异构体通过手性SFC使用手性Pak IG柱(250×10mm；5um)分离。流动相为梯度36至44％MeOH(w/20mM NH3)，64至56％ CO2流速为10毫升/分钟。样品在甲醇(无改性剂)中的浓度为20.0mg/mL，进样体积为70μL，出口压力为173至191bar，检测波长为210nm，得到异构体1，峰1：13-(2,6-二甲基苯基)-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-7-异丙基-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮(6mg，40％)，ESI-MS m/z计算值656.2781，实验值657.5(M+1)+；保留时间：1.97分钟，以及异构体2，峰2：13-(2,6-二甲基苯基)-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-7-异丙基-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮(5mg，33％)，ESI-MS m/z计算值656.2781，实验值657.5(M+1)+；保留时间：1.97分钟；LC方法A。
实例146：化合物390和化合物391的制备
步骤1：6-溴-N-甲基-N-螺[2.3]己-5-基-吡啶-2-胺
向小瓶中添加2-溴-6-氟-吡啶(984.6mg，5.595mmol)、N-甲基螺[2.3]己-5-胺(盐酸盐)(991.3mg，6.714mmol)、碳酸钾(3.1g，22.43mmol)，随后添加NMP(2mL)。将小瓶用螺旋盖密封并将反应混合物在95℃下搅拌6小时。将反应混合物冷却至室温并通过反相HPLC使用(30-100％ ACN/水(5mM HCl))纯化。将期望的级分汇集并在乙酸乙酯与饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。将层分离并将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，得到呈澄清油的6-溴-N-甲基-N-螺[2.3]己-5-基-吡啶-2-胺(1.35g，90％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.25(dd,J＝8.4,7.4Hz,1H),6.70(d,J＝7.4Hz,1H),6.43(d,J＝8.4Hz,1H),4.97(p,J＝8.1Hz,1H),3.04(s,3H),2.47(ddd,J＝10.0,8.2,2.7Hz,2H),2.23(ddd,J＝10.1,8.1,2.8Hz,2H),0.58-0.49(m,2H),0.47-0.38(m,2H).ESI-MS m/z计算值266.04187，实验值267.09(M+1)+；保留时间：0.8分钟；LC方法D。
步骤2：2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丙基-6-[6-[甲基(螺[2.3]己-5-基)氨基]-2-吡啶基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯
向厚壁压力容器中添加2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丙基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(1.62g，2.614mmol)、6-溴-N-甲基-N-螺[2.3]己-5-基-吡啶-2-胺(838mg，3.137mmol)、氢氧化铯水合物(878mg，5.228mmol)、三(4-氟苯基)磷烷(149mg，0.4711mmol)和乙酸钯(II)(53mg，0.2361mmol)。将小瓶用隔膜密封并放置在氮气气氛下。将甲苯(16mL)添加到反应混合物中并将混合物通过鼓泡氮气通过溶液10分钟来脱气。将隔膜去除，将反应器用氩气冲洗并用Teflon螺旋盖密封。将反应混合物在100℃下加热2小时。将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土垫过滤。将滤液在减压下浓缩成油并且然后通过硅胶柱色谱法使用0-8％ EtOAc/己烷的梯度纯化，得到呈粘性白色泡沫的2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丙基-6-[6-[甲基(螺[2.3]己-5-基)氨基]-2-吡啶基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(1.64g，92％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.73-7.54(m,4H),7.51-7.27(m,7H),6.68(d,J＝7.4Hz,1H),6.47(d,J＝8.4Hz,1H),5.87(d,J＝107.9Hz,1H),4.93(p,J＝8.1Hz,1H),4.49(s,1H),3.70(s,1H),3.45(s,1H),2.90(s,3H),2.33(dt,J＝20.0,10.2Hz,2H),2.10(dd,J＝22.7,10.2Hz,3H),1.88(d,J＝17.4Hz,1H),1.55(d,J＝7.8Hz,3H),1.43-1.09(m,3H),1.02(d,J＝3.3Hz,15H),0.90-0.81(m,6H),0.46-0.37(m,3H).ESI-MS m/z计算值679.41693，实验值680.6(M+1)+；保留时间：0.52分钟；LC方法D(50-99％梯度)。
步骤3：6-[6-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-5-异丙基-2-哌啶基]-N-甲基-N-螺[2.3]己-5-基-吡啶-2-胺
将2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丙基-6-[6-[甲基(螺[2.3]己-5-基)氨基]-2-吡啶基]-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(800mg，1.176mmol)溶解于DCM(11.2mL)中并在冰水浴中冷却。将TFA(3.6mL，46.73mmol)添加到反应中，在5分钟之后将冷却浴去除并将反应温热至室温并在该温度下继续搅拌1小时。然后将反应在减压下浓缩，得到中间体6-[2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丙基-1,2,3,4-四氢吡啶-6-基]-N-甲基-N-螺[2.3]己-5-基-吡啶-2-胺(三氟乙酸盐)，然后将其溶解于THF(21.6mL)中，然后添加三乙胺(328μL，2.353mmol)并且然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(997mg，4.704mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用HCl水溶液(6M的2mL，12.00mmol)淬灭并在乙酸乙酯与饱和氯化钠水溶液之间分配。将层分离，并将水层用乙酸乙酯再次萃取。将合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗物质通过反相HPLC使用(10-99％ACN/水(5mM HCl))纯化。将期望的级分合并并在乙酸乙酯与饱和氯化钠水溶液之间分配。将层分离，并将水层用乙酸乙酯再次萃取。将合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，得到6-[6-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-5-异丙基-2-哌啶基]-N-甲基-N-螺[2.3]己-5-基-吡啶-2-胺(盐酸盐)(670mg，92％)。ESI-MS m/z计算值581.3801，实验值582.9(M+1)+；保留时间：0.83分钟；LC方法D。
步骤4：[3-异丙基-6-[6-[甲基(螺[2.3]己-5-基)氨基]-2-吡啶基]-2-哌啶基]甲醇
在氮气气氛下，将6-[6-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-5-异丙基-2-哌啶基]-N-甲基-N-螺[2.3]己-5-基-吡啶-2-胺(盐酸盐)(530mg，0.8571mmol)溶解于无水THF(5.3mL)中。将反应混合物在冰水浴中冷却并且然后添加作为THF中的溶液的四丁基氟化铵(1M的2.2mL，2.200mmol)。将冷却浴去除，使反应混合物温热至室温并在该温度下继续搅拌20小时。将溶剂在减压下去除并将粗物质通过硅胶柱色谱法使用0-8％ MeOH/DCM的梯度纯化，得到[3-异丙基-6-[6-[甲基(螺[2.3]己-5-基)氨基]-2-吡啶基]-2-哌啶基]甲醇(288mg，98％)。ESI-MS m/z计算值343.26236，实验值344.6(M+1)+；保留时间：0.53分钟；LC方法D。
步骤5：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[3-异丙基-6-[6-[甲基(螺[2.3]己-5-基)氨基]-2-吡啶基]-2-哌啶基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(195mg，0.4667mmol)和[3-异丙基-6-[6-[甲基(螺[2.3]己-5-基)氨基]-2-吡啶基]-2-哌啶基]甲醇(160.3mg，0.4667mmol)在烧瓶中合并并溶解于THF(7.8mL)中，然后添加叔丁醇钠(269mg，2.799mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。将反应混合物在DCM、1M HCl水溶液与饱和氯化钠水溶液之间分配。将层分离，并且将有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩成固体。将粗物质通过反相HPLC使用(1-60％ ACN/水(5mM HCl))纯化。将期望的级分合并并用乙酸乙酯和饱和氯化钠水溶液稀释。将层分离，并将水层用乙酸乙酯再次萃取。将合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩并在高真空下进一步干燥，得到呈白色固体的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[3-异丙基-6-[6-[甲基(螺[2.3]己-5-基)氨基]-2-吡啶基]-2-哌啶基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(220mg，62％)。ESI-MSm/z计算值724.3407，实验值725.7(M+1)+；保留时间：0.64分钟；LC方法D。
步骤6：13-(2,6-二甲基苯基)-7-异丙基-4-[6-[甲基(螺[2.3]己-5-基)氨基]-2-吡啶基]-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮，异构体1(化合物390)以及13-(2,6-二甲基苯基)-7-异丙基-4-[6-[甲基(螺[2.3]己-5-基)氨基]-2-吡啶基]-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮，异构体2(化合物391)
将3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[3-异丙基-6-[6-[甲基(螺[2.3]己-5-基)氨基]-2-吡啶基]-2-哌啶基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(220mg，0.2890mmol)溶解于DMF(25mL)中并且然后在冰水浴中冷却。将2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(66mg，0.3759mmol)添加到反应混合物中，随后添加4-甲基吗啉(205mg，2.027mmol)。在五分钟之后，将冷却浴去除，使反应温热至室温并在该温度下继续搅拌12小时。将反应混合物在EtOAc与1M HCl水溶液之间分配。将层分离，并将有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤两次。有机层经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将粗物质通过反相HPLC使用(10-99％ ACN/水(5mM HCl))纯化，得到呈外消旋混合物的13-(2,6-二甲基苯基)-7-异丙基-4-[6-[甲基(螺[2.3]己-5-基)氨基]-2-吡啶基]-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮(200mg，97％)。ESI-MS m/z计算值706.33014，实验值707.8(M+1)+；保留时间：1.85分钟。在50℃下将对映异构体通过手性SFC使用Phenomenex LUX-1柱(手性Cel OD Equiv.250×21.2mm；5μm)分离。流动相为24％ MeOH(w/20mM NH3)，76％ CO2流速为70毫升/分钟。样品在甲醇(无改性剂)中的浓度为约20.5mg/mL，进样体积为500μL并且出口压力为154bar，检测波长为210nm，得到异构体1，峰1，13-(2,6-二甲基苯基)-7-异丙基-4-[6-[甲基(螺[2.3]己-5-基)氨基]-2-吡啶基]-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮(57.7mg，56％)ESI-MS m/z计算值706.33014，实验值707.4(M+1)+；保留时间：1.84分钟；以及异构体2，峰2，13-(2,6-二甲基苯基)-7-异丙基-4-[6-[甲基(螺[2.3]己-5-基)氨基]-2-吡啶基]-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮(69mg，67％)ESI-MS m/z计算值706.33014，实验值707.4(M+1)+；保留时间：1.84分钟；LC方法A。
实例147：化合物392和化合物393的制备
步骤1：O1-O2-甲基3-异丁基哌啶-1,2-二羧酸叔丁酯
在-78℃下，将异丁基溴化镁(于THF中)(1M的380mL，380.00mmol)添加到于THF(140mL)中的碘化铜(I)(36g，189.03mmol)中并且然后温热至-35℃45分钟，然后冷却至-78℃并添加溶解于THF(140mL)中的O1-O6-甲基3,4-二氢-2H-吡啶-1,6-二羧酸叔丁酯(9.3g，38.544mmol)。然后使反应混合物温热至-10℃并在该温度下搅拌30分钟。将反应混合物用浓氯化铵(200mL)淬灭。使所述反应混合物温热，在室温下搅拌30分钟。将水相分离，然后用MeTHF(2×200mL)萃取。将合并的有机相用硫酸钠干燥，在减压下浓缩并将所得残余物在硅胶上用0％然后用5％乙酸乙酯/庚烷纯化，得到呈澄清油的O1-O2-甲基3-异丁基哌啶-1,2-二羧酸叔丁酯(7.2g，61％)1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.82-4.48(m,1H),4.18-3.86(m,1H),3.74(s,3H),3.09-2.79(m,1H),2.34(br.s.,1H),1.69-1.57(m,2H),1.50-1.34(m,13H),1.26-1.19(m,1H),0.93(d,J＝3.9Hz,3H),0.91(d,J＝3.4Hz,3H).ESI-MS m/z计算值299.2097，实验值200.2(M-99)+；保留时间：2.71分钟；LC方法X。
步骤2：2-(羟甲基)-3-异丁基-哌啶-1-羧酸叔丁酯
将DIBAL(甲苯中的1M溶液)(1M的35mL，35.000mmol)滴加到维持在0℃下的O1-O2-甲基3-异丁基哌啶-1,2-二羧酸叔丁酯(4.5g，15.030mmol)于甲苯(90mL)中的溶液中。将反应在该温度下保持45分钟，然后在0℃下用饱和罗谢尔盐水溶液(100mL)淬灭并添加乙酸乙酯(100mL)并在室温下搅拌60分钟，直到可以将相分离为止。将水相用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥，在减压下浓缩并在硅胶上纯化，得到呈澄清油的2-(羟甲基)-3-异丁基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.9g，90％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.16-4.07(m,1H),4.06-3.93(m,1H),3.91-3.83(m,1H),3.71-3.57(m,1H),2.92-2.74(m,1H),1.75-1.54(m,5H),1.50-1.30(m,12H),1.24-1.14(m,1H),0.89(d,J＝6.6Hz,6H).ESI-MS m/z计算值271.2147，实验值294.2(M+23)+；保留时间：1.89分钟；LC方法X。
步骤3：2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-哌啶-1-羧酸叔丁酯
在0℃下，将叔丁基-氯-二苯基-硅烷(1.2g，4.3658mmol)添加到2-(羟甲基)-3-异丁基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(800mg，2.9477mmol)和咪唑(500mg，7.3446mmol)于DCM(8mL)中的溶液中。使反应混合物温热并在室温下搅拌1小时。将反应用DCM(20mL)和盐水(10mL)稀释。然后将水层用DCM(2×20ml)萃取。将合并的有机溶液经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空下浓缩，得到呈黄色油的粗2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.4g，65％)。该物质无需进一步纯化即可用于下一步骤。将分析样品通过30gC18RediSep Rf金柱反相色谱法使用酸性水(0.1％甲酸含量)中的乙腈的5然后60至100％梯度纯化100mg粗样品来制备，得到呈澄清油的2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(71mg，5％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.76-7.63(m,4H),7.49-7.36(m,6H),4.34-4.11(m,1H),4.09-3.80(m,1H),3.78-3.68(m,2H),2.72-2.52(m,1H),1.97-1.85(m,1H),1.76-1.64(m,1H),1.62-1.53(m,2H),1.45(s,9H),1.44-1.26(m,3H),1.17-1.08(m,1H),1.06(s,9H),0.97-0.85(m,6H).ESI-MS m/z计算值509.3325，实验值410.4(M-99)+；保留时间：3.09分钟；LC方法X。
步骤4：2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-6-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯
将高碘酸钠(6.5g，30.389mmol)和氯化钌(III)水合物(100mg，0.4436mmol)添加到2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.4g，1.9223mmol)于CCl4(9mL)和乙腈(9mL)和水(11mL)中的溶液中，在0℃下维持15分钟，然后温热至室温并搅拌2小时。将乙酸乙酯(50mL)添加到反应混合物中，然后将所述反应混合物在硅胶上过滤。将滤液在注射器过滤器上通过，在减压下浓缩并将所得残余物通过C18柱反相色谱法使用酸性水(0.1％甲酸含量)中乙腈的5然后70至100％梯度纯化，得到呈澄清油的2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-6-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(537mg，53％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.69-7.60(m,4H),7.48-7.34(m,6H),4.04(dt,J＝6.5,3.5Hz,1H),3.75-3.68(m,1H),3.67-3.61(m,1H),2.59-2.47(m,1H),2.45-2.34(m,1H),2.29-2.21(m,1H),2.00-1.90(m,1H),1.72-1.61(m,1H),1.51-1.40(m,10H),1.35-1.27(m,2H),1.07-1.01(m,9H),0.96-0.90(m,6H).ESI-MS m/z计算值523.3118，实验值424.4(M-99)+；保留时间：2.55分钟；LC方法X。
步骤5：2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-6-(三氟甲基磺酰氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯
在配备有磁力搅拌器和内部温度传感器的3颈烧瓶中，在-78℃下在氮气气氛下，将2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-6-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(500mg，0.9536mmol)于无水THF(10mL)中的溶液冷却。在-78℃下滴加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1M在THF中)(1M的1.7mL，1.7000mmol)。将反应在相同温度下搅拌30分钟。将N-(5-氯-2-吡啶基)-1,1,1-三氟-N-(三氟甲基磺酰基)甲磺酰胺(530mg，1.3497mmol)于无水THF(1mL)中的溶液滴加到反应混合物中。然后将反应在-78℃下搅拌1小时。将所述反应温热至-40℃并搅拌150分钟。将反应在-40℃下用饱和碳酸氢钠(15mL)淬灭并将温度升至室温。向混合物中添加水(300mL)并且将水相用MTBE(3×150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。将所得残余物使用0至20％乙酸乙酯/庚烷在硅胶上纯化，得到呈澄清油的2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-6-(三氟甲基磺酰氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(550mg，87％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.71-7.60(m,4H),7.50-7.33(m,6H),5.04(t,J＝3.9Hz,1H),4.52-4.41(m,1H),3.81(dd,J＝10.3,6.6Hz,1H),3.52(dd,J＝10.3,8.3Hz,1H),2.20-2.11(m,1H),2.10-2.02(m,1H),1.83(dd,J＝18.6,4.2Hz,1H),1.74-1.60(m,1H),1.49(s,9H),1.16(ddd,J＝14.0,7.6,6.7Hz,1H),1.08-0.97(m,10H),0.88(d,J＝6.6Hz,6H).19F NMR(377MHz,CDCl3)δ-74.17(s,3F).ESI-MS m/z计算值655.2611，无实验值；保留时间：3.02分钟；LC方法Y。
步骤6：2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯
在氩气气氛下，向10mL烧瓶中装入4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧硼杂环戊烷(1g，3.9380mmol)、2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-6-(三氟甲基磺酰氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(1.7g，2.4625mmol)、碳酸钾(920mg，6.6567mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(189mg，0.2693mmol)、三苯基膦(141mg，0.5376mmol)。将预脱气的1,4-二噁烷(30mL)(搅拌下鼓泡氩气2小时)添加到反应烧瓶中。将反应混合物用氩气进一步脱气50分钟。然后将反应在90℃下加热1小时30分钟。将反应冷却至室温。将反应用乙酸乙酯(50mL)稀释并通过硅藻土垫过滤，用EtOAc彻底洗涤。将盐水(50ml)添加到滤液中。将两个层分离，并将水层用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将粗产物通过快速色谱法(Combiflash，加载有40g筒中的最少量的苯，使用0-15％乙醚/己烷作为洗脱剂)纯化并将溶剂去除，得到呈无色凝胶的2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(1.1g，67％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ7.66–7.58(m,4H),7.42–7.33(m,6H),5.00(d,J＝5.5Hz,1H),3.92(t,J＝7.6Hz,1H),3.61(dd,J＝9.7,5.3Hz,1H),3.52(t,J＝9.8Hz,1H),2.37(d,J＝7.1Hz,1H),2.21–2.03(m,1H),1.73(dd,J＝18.2,5.8Hz,1H),1.66–1.57(m,1H),1.41(s,9H),1.24(d,J＝4.4Hz,12H),1.18-1.12(m,2H),1.04(s,9H),0.97–0.82(m,6H).ESI-MS m/z计算值633.4021，实验值634.6(M+1)+；保留时间：4.54分钟；LC方法W。
步骤7：2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯
向厚壁压力容器中添加2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(1g，1.578mmol)、2-溴-5-异丙氧基-嘧啶(411.1mg，1.894mmol)、氢氧化铯水合物(530mg，3.156mmol)、三(4-氟苯基)磷烷(99.81mg，0.3156mmol)和二乙酰氧基钯(35.4mg，0.1577mmol)。将小瓶用隔膜密封并放置在氮气气氛下。将甲苯(10mL)添加到反应混合物中并将混合物通过鼓泡氮气通过溶液10分钟来脱气。将隔膜去除，将反应器用氩气冲洗并用Teflon螺旋盖密封。将反应混合物在100℃下加热2小时。反应混合物的UPLC/MS分析显示大约20％期望的产物形成和起始材料剩余。向反应中装入另外的三(4-氟苯基)磷烷(99.81mg，0.3156mmol)和二乙酰氧基钯(35.4mg，0.1577mmol)并在100℃下继续再搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土垫过滤。将滤液在减压下浓缩成油并且然后通过硅胶柱色谱法使用0-20％ EtOAc/己烷的梯度纯化，得到呈白色固体的2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(505mg，50％)。ESI-MS m/z计算值643.38055，实验值644.71(M+1)+；保留时间：0.87分钟；LC方法d(50-99％梯度)。
步骤8：叔丁基-[[3-异丁基-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-2-哌啶基]甲氧基]-二苯基-硅烷
将2-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(505mg，0.7842mmol)溶解于DCM(7mL)中并在冰水浴中冷却。将TFA(2.4mL，31.15mmol)添加到反应中，在5分钟之后将冷却浴去除并将反应温热至室温并在该温度下继续搅拌2小时。然后将反应在减压下浓缩，得到中间体叔丁基-[[3-异丁基-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-1,2,3,4-四氢吡啶-2-基]甲氧基]-二苯基-硅烷(三氟乙酸盐)，然后将其溶解于THF(14mL)中，然后添加三乙胺(220μL，1.578mmol)并且然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(665mg，3.138mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用HCl水溶液(6M的1.3mL，7.800mmol)淬灭并在乙酸乙酯与饱和氯化钠水溶液之间分配。将层分离，并将水层用乙酸乙酯再次萃取。将合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗物质通过反相HPLC使用(1-60％ ACN/水(5mM HCl))纯化。将期望的级分合并并在乙酸乙酯与饱和氯化钠水溶液之间分配。将层分离，并将水层用乙酸乙酯再次萃取。将合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，得到叔丁基-[[3-异丁基-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-2-哌啶基]甲氧基]-二苯基-硅烷(盐酸盐)(300mg，66％)。ESI-MS m/z计算值545.34375，实验值546.88(M+1)+；保留时间：0.75分钟；LC方法D。
步骤9：[3-异丁基-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-2-哌啶基]甲醇
将叔丁基-[[3-异丁基-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-2-哌啶基]甲氧基]-二苯基-硅烷(盐酸盐)(307.4mg，0.5279mmol)溶解于二噁烷(5mL)中，随后添加HCl水溶液(12M的2.2mL，26.40mmol)。将反应混合物在100℃下加热1小时。将反应混合物冷却至室温并将二噁烷在减压下去除。将粗产物溶解于1mL的甲醇和1mL的DMSO中并通过反相HPLC使用(1-40％ACN/水(5mM HCl))的梯度纯化。将期望的级分合并并在减压下浓缩并在高真空下进一步干燥，得到[3-异丁基-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-2-哌啶基]甲醇(盐酸盐)(140mg，77％)。ESI-MS m/z计算值307.22598，实验值308.6(M+1)+；保留时间：1.34分钟；LC方法I。
步骤10：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[3-异丁基-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-2-哌啶基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸
在氮气气氛下，将3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(170mg，0.4068mmol)和[3-异丁基-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-2-哌啶基]甲醇(盐酸盐)(139.9mg，0.4068mmol)在烧瓶中合并并溶解于THF(6.8mL)中。将叔丁醇钠(274mg，2.851mmol)添加到反应混合物中并继续搅拌1小时20分钟。将反应混合物在冰水浴中冷却并用HCl水溶液(6M的700μL，4.200mmol)淬灭。将反应混合物在乙酸乙酯与饱和氯化钠水溶液之间分配。将层分离，并将水相用乙酸乙酯再次萃取。将合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩至干燥。将粗物质通过反相HPLC使用(1-60％ ACN/水(5mM HCl))的梯度纯化。将期望的级分合并并将乙腈在减压下去除。将所得水溶液在乙酸乙酯与饱和氯化钠水溶液之间分配。将层分离，并将水相用乙酸乙酯再次萃取。将合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩至干燥并在高真空下进一步干燥，得到呈半固体的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[3-异丁基-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-2-哌啶基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(155mg，53％)。ESI-MS m/z计算值688.3043，实验值689.8(M+1)+；保留时间：0.57分钟；LC方法D。
步骤11：13-(2,6-二甲基苯基)-7-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮，异构体1(化合物393)，以及13-(2,6-二甲基苯基)-7-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮，异构体2(化合物392)
将3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[3-异丁基-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-2-哌啶基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(155mg，0.2137mmol)溶解于DMF(20mL)中并且然后在冰水浴中冷却。将2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(48.8mg，0.2779mmol)添加到反应混合物中，随后添加4-甲基吗啉(165μL，1.501mmol)。在五分钟之后，将冷却浴去除，使反应温热至室温并在该温度下继续搅拌12小时。将反应混合物在EtOAc与1M HCl水溶液之间分配。将层分离，并将有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤两次。有机层经硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将粗物质通过反相HPLC使用(10-99％ACN/水(5mM HCl))的梯度纯化。将期望的级分合并，并在减压下浓缩。将产物用DCM/己烷沉淀，得到呈白色固体的13-(2,6-二甲基苯基)-7-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮(118mg，81％)。ESI-MS m/z计算值670.29376，实验值671.3(M+1)+；保留时间：2.06分钟。将非对映异构体通过手性SFC使用手性Pak IG柱(250×21.2mm；5μM)在50℃下分离。流动相为26％ MeOH(20mM NH3)，74％CO2流速为70毫升/分钟。样品在甲醇(无改性剂)中的浓度为32.0mg/mL，进样体积为500μL并且出口压力为151bar，检测波长为210nm，得到异构体1，SFC峰1，13-(2,6-二甲基苯基)-7-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮(28.5mg，39％)，1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.70(s,1H),8.42(s,2H),7.71(d,J＝106.9Hz,2H),7.07(s,1H),6.91(s,2H),6.16(s,1H),5.90(s,1H),5.14(d,J＝10.7Hz,1H),4.65(p,J＝6.0Hz,1H),3.68(d,J＝11.4Hz,1H),3.50-3.30(m,1H),2.54(d,J＝11.6Hz,1H),1.99(d,J＝126.4Hz,11H),1.40(t,J＝5.8Hz,7H),1.03(t,J＝7.0Hz,1H),0.93-0.82(m,1H),0.67(d,J＝6.4Hz,3H),0.57(d,J＝6.3Hz,3H).ESI-MS m/z计算值670.29376，实验值671.3(M+1)+；保留时间：2.05分钟；以及异构体2，SFC峰2：13-(2,6-二甲基苯基)-7-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-17,17-二氧代-10-氧杂-17λ6-硫杂-3,14,16,23-四氮杂四环[16.3.1.111,15.03,8]二十三碳-1(21),11,13,15(23),18(22),19-六烯-2-酮(29.7mg，41％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.70(s,1H),8.43(s,2H),7.68(d,J＝98.5Hz,2H),7.07(s,1H),6.91(s,2H),6.15(d,J＝5.9Hz,1H),5.89(s,1H),5.14(d,J＝10.6Hz,1H),4.66(h,J＝6.0Hz,1H),3.68(d,J＝11.3Hz,1H),3.40(d,J＝6.5Hz,1H),2.54(d,J＝11.4Hz,1H),2.26-1.72(m,11H),1.50-1.32(m,7H),1.03(dt,J＝13.4,6.6Hz,1H),0.94-0.83(m,1H),0.69(d,J＝6.3Hz,3H),0.58(d,J＝6.3Hz,3H).ESI-MSm/z计算值670.29376，实验值671.3(M+1)+；保留时间：2.06分钟；LC方法A。
实例148：化合物394和化合物395的制备
步骤1：6-氧代环己烯-1-羧酸乙酯
将苯硒酰氯(15g，78.322mmol)溶解于DCM(400mL)中。将其冷却至0℃并用吡啶(7.2372g，7.4mL，91.494mmol)处理15分钟。引入2-氧代环己烷羧酸乙酯(13g，76.378mmol)于DCM(40mL)中的溶液。将反应在0℃下搅拌1.5小时并在45分钟内温热至室温。将溶液用10％ HCl(300mL)、饱和碳酸氢钠(300mL)洗涤，并经无水硫酸钠干燥。溶剂的蒸发得到橙色油。向圆底烧瓶中装入中间体和DCM(200mL)。将溶液室温下搅拌并添加几滴过氧化氢以引发反应。将溶液冷却至0℃，并剧烈搅拌，同时在20分钟内滴加过氧化氢(5.3280g，30％w/w的16mL，46.991mmol)。在添加之后，将反应在室温下搅拌15分钟并且在0℃下搅拌15分钟。将固体滤出并用DCM(50mL)洗涤。将合并的滤液用7％碳酸氢钠(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，得到呈橙色液体的6-氧代环己烯-1-羧酸乙酯(12.7g，94％)。将粗物质在不进行纯化的情况下用于下一步骤。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ7.65(s,1H),4.26(d,J＝7.1Hz,2H),2.65–2.40(m,4H),2.15–1.92(m,2H),1.31(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤2：2-异丁基-6-氧代-环己烷羧酸乙酯
在-78℃下，向CuI(38g，199.53mmol)于无水THF(67.000mL)中的悬浮液中添加氯(异丁基)镁(THF中的2M)(2M的200mL，400.00mmol)。将反应在-35℃下搅拌1小时。将反应冷却至-78℃。将6-氧代环己烯-1-羧酸乙酯(6.7g，39.836mmol)于无水THF(67.000mL)中的溶液滴加到反应混合物中。将反应在相同温度下搅拌30分钟，然后将其缓慢温热至0℃。将反应用饱和氯化铵(50mL)淬灭并用乙酸乙酯(300mL)稀释。在分配两个层之前，将固体通过硅藻土垫滤出。将水层用乙酸乙酯(2×300mL)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至40％乙醚/己烷纯化，得到呈浅黄色液体的2-异丁基-6-氧代-环己烷羧酸乙酯(6.1g，66％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ12.74–12.35(m,0.7H),4.42(ddtt,J＝17.9,10.8,7.1,3.4Hz,2H),3.26(dd,J＝10.4,2.8Hz,0.3H),2.84–2.72(m,1H),2.46-2.27(m,3H),2.01–1.76(m,3H),1.64(d,J＝2.6Hz,1H),1.50(ddt,J＝10.5,7.3,3.0Hz,5H),1.30–0.96(m,6H).
步骤3：3-异丁基-7-氧代-氮杂环庚烷-2-羧酸乙酯
将2-异丁基-6-氧代-环己烷羧酸乙酯(11g，48.605mmol)溶解于氯仿(275mL)中并冷却至0℃。添加甲磺酸(47.392g，32mL，493.12mmol)，然后添加叠氮化钠(16g，246.12mmol)。将反应在室温下搅拌30分钟。将所述反应加热回流3小时。将冰添加到反应混合物中并搅拌10分钟；随后添加氢氧化铵，直到反应变成碱性为止。将反应用DCM(3×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(300mL)和2N Na2CO3(300mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至35％丙酮/己烷纯化，得到呈黄色固体的3-异丁基-7-氧代-氮杂环庚烷-2-羧酸乙酯(11g，93％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ6.35–5.80(m,1H),4.28(dq,J＝29.1,7.1Hz,2H),4.21–3.71(m,1H),2.51–1.91(m,4H),1.89–1.49(m,5H),1.45–1.18(m,5H),1.11–0.55(m,6H).ESI-MS m/z计算值241.1678，实验值242.3(M+1)+；保留时间：2.53分钟；LC方法T。
步骤4：7-(羟甲基)-6-异丁基-氮杂环庚烷-2-酮
在0℃下，向3-异丁基-7-氧代-氮杂环庚烷-2-羧酸乙酯(2.21g，9.1577mmol)于无水DCM(25M)中的溶液中滴加于THF中的2M LiBH4(2M的5.1mL，10.200mmol)。将反应在室温下搅拌16小时。在0℃下将反应用1N HCl(20mL)淬灭。将水层用乙酸乙酯(5×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸镁干燥并在真空下浓缩，得到呈透明凝胶的7-(羟甲基)-6-异丁基-氮杂环庚烷-2-酮(1.76g，96％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ7.02–6.65(m,1H),3.57–3.09(m,3H),3.08–2.84(m,1H),2.44–2.03(m,2H),1.87–1.66(m,2H),1.66–1.30(m,4H),1.30–1.05(m,2H),1.00–0.67(m,6H).ESI-MS m/z计算值199.15723，实验值200.2(M+1)+；保留时间：1.85分钟；LC方法T。
步骤5：7-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-6-异丁基-氮杂环庚烷-2-酮
在室温下，向7-(羟甲基)-6-异丁基-氮杂环庚烷-2-酮(5.1g，25.591mmol)和叔丁基-氯-二甲基-硅烷(11.6g，76.963mmol)于无水DMF(80mL)中的溶液中添加咪唑(8.8g，129.26mmol)。将反应搅拌3小时。将反应用乙酸乙酯(300mL)稀释并用盐水(3×50mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱使用0至30％丙酮/己烷纯化，得到呈澄清液体的7-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-6-异丁基-氮杂环庚烷-2-酮(6.19g，73％)，其在静置之后固化。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ6.96–6.78(m,1H),3.81–3.41(m,2H),3.04–2.90(m,1H),2.36–2.01(m,2H),1.95–1.64(m,2H),1.65–1.36(m,4H),1.29–1.06(m,2H),0.97–0.75(m,15H),0.04(t,J＝4.2Hz,6H).ESI-MS m/z计算值313.2437，实验值314.0(M+1)+；保留时间：4.14分钟；LC方法T。
步骤6：2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-7-氧代-氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯，异构体A，以及2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-7-氧代-氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯，异构体B
向7-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-6-异丁基-氮杂环庚烷-2-酮(2.266g，7.2269mmol)和Boc2O(7.97g，8.3895mL，36.518mmol)于无水甲苯(70mL)中的溶液中添加DIEA(4.6746g，6.3mL，36.169mmol)和DMAP(1.32g，10.805mmol)。将反应在110℃下搅拌2小时。将挥发物在真空下去除。将残余物通过硅胶色谱法(120g柱，梯度：0至10％乙酸乙酯/己烷，20毫升/分钟)纯化，得到呈透明凝胶的异构体A(更少极性)2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-7-氧代-氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(1.323g，44％)。ESI-MS m/z计算值413.2961，实验值414.4(M+1)+；保留时间：8.86分钟以及呈透明凝胶的异构体B(更多极性)2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-7-氧代-氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(0.875g，29％)。ESI-MS m/z计算值413.2961，实验值414.2(M+1)+；保留时间：8.75分钟；LC方法S。
步骤7：2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-7-二苯基磷酰氧基-3-异丁基-2,3,4,5-四氢氮杂-1-羧酸叔丁酯，异构体A
向干燥的烧瓶中装入于无水THF(30mL)中的2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-7-氧代-氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯，异构体A(1.323g，3.1982mmol)。在-78℃下，将于THF中的1.0M NaHMDS(1M的4mL，4.0000mmol)滴加到反应混合物中。将反应混合物在相同温度下搅拌1小时。在-78℃下将[氯(苯基)磷酰基]苯(1.0788g，0.87mL，4.5589mmol)滴加到反应混合物中。将反应混合物在相同温度下再搅拌2小时。将反应温热至室温并用水(30mL)淬灭，并用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至40％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈透明凝胶的2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-7-二苯基磷酰氧基-3-异丁基-2,3,4,5-四氢氮杂-1-羧酸叔丁酯，异构体A(1.801g，87％)。ESI-MS m/z计算值613.33527，实验值614.3(M+1)+；保留时间：9.41分钟；LC方法S。
步骤8：三丁基-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)锡烷
向圆底烧瓶中装入2-氯-5-异丙氧基-嘧啶(7g，40.553mmol)和Pd(PPh3)4(4.7g，4.0673mmol)。将脱气的二甲苯(210mL)添加到反应混合物中，随后添加三丁基(三丁基甲锡烷基)甲锡烷(97.580g，85mL，168.21mmol)。将反应在135℃下搅拌16小时。在冷却至室温之后，添加1N KF(水溶液)(500mL)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液通过硅藻土垫过滤，并将滤饼用乙酸乙酯(200mL)洗涤。将滤液的两个层分离。将有机层用盐水(200mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法在10％乙酸乙酯/己烷中纯化，得到呈澄清液体的三丁基-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)锡烷(5.12g，29％)，1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.45(s,2H),4.89–4.55(m,1H),1.73–1.36(m,6H),1.32–1.17(m,12H),1.11–0.88(m,6H),0.89–0.57(m,9H).ESI-MS m/z计算值428.18497，实验值429.2(M+1)+；保留时间：4.11分钟；LC方法T。
步骤9：2-(羟甲基)-3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-2,3,4,5-四氢氮杂-1-羧酸叔丁酯，异构体A
向可微波加热小瓶中装入于无水二噁烷(15mL)中的2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-7-二苯基磷酰氧基-3-异丁基-2,3,4,5-四氢氮杂-1-羧酸叔丁酯，异构体A(0.88g，1.4336mmol)、三丁基-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)锡烷(1.1g，2.5748mmol)和无水LiCl(197mg，4.6469mmol)。将反应混合物用氩气吹扫1小时。将CuI(54mg，0.2835mmol)和Pd(dppf)Cl2(124mg，0.1518mmol)添加到反应混合物中。将反应用氩气再吹扫10分钟，然后将小瓶密封并在微波反应器中在125℃下加热8小时。在冷却至室温之后，将反应用1N KF(水溶液)(15mL)稀释并搅拌1小时。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并用乙酸乙酯(15mL)洗涤。将滤液的两个层分离，并将水层用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将粗物质溶解于甲醇(30mL)中。将1N HCl(1M的1mL，1.0000mmol)添加到反应混合物中。将反应在室温下搅拌1小时。将反应混合物用饱和碳酸氢钠(50mL)和乙酸乙酯(50mL)稀释。将两个层分离，并将水层用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(梯度：0至15％丙酮/己烷)纯化，得到呈黄色凝胶的2-(羟甲基)-3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-2,3,4,5-四氢氮杂-1-羧酸叔丁酯，异构体A(215mg，36％)。ESI-MS m/z计算值419.2784，实验值420.3(M+1)+；保留时间：6.74分钟；LC方法S。
步骤10：[3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-2-基]甲醇，异构体A
在0℃下，向2-(羟甲基)-3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-2,3,4,5-四氢氮杂-1-羧酸叔丁酯，异构体A(192mg，0.4576mmol)于DCM(3mL)中的溶液中滴加TFA(2.2200g，1.5mL，19.470mmol)。将反应在该温度下搅拌10分钟并在室温下搅拌1小时。在真空中除去溶剂。将残余物溶解于无水THF(3mL)中。将TEA(94.380mg，0.13mL，0.9327mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(398mg，1.8779mmol)添加到反应混合物中。将反应在室温下搅拌1.5小时。将反应用2N碳酸钠(10mL)淬灭并用乙酸乙酯(5×10mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将粗物质通过硅胶色谱法使用0至10％甲醇/DCM(用0.3％氢氧化铵缓冲)纯化，得到呈黄色凝胶的[3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-2-基]甲醇，异构体A(52mg，35％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.31(s,2H),5.79(s,1H),4.72–4.42(m,1H),4.08(dd,J＝10.3,4.2Hz,1H),3.79(dd,J＝11.1,4.1Hz,1H),3.48(t,J＝10.4Hz,1H),2.89–2.68(m,1H),2.46–2.23(m,1H),2.02–1.79(m,3H),1.78–1.68(m,2H),1.67–1.48(m,3H),1.42–1.29(m,6H),1.29–1.19(m,1H),1.14–0.99(m,1H),0.89(d,J＝6.5Hz,3H),0.84(d,J＝6.5Hz,3H).ESI-MS m/z计算值321.24164，实验值322.3(M+1)+；保留时间：3.52分钟；LC方法S。
步骤11：14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮，异构体A
在0℃下向[3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-2-基]甲醇，异构体A(52mg，0.1618mmol)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(80mg，0.1825mmol)于无水THF(1mL)中的溶液中添加叔丁醇钠(80mg，0.8324mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。在0℃下将反应用1N HCl(水溶液)(15mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，得到呈黄色凝胶的粗3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-2-基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸。ESI-MS m/z计算值702.32，实验值703.3(M+1)+；保留时间：2.76分钟。将粗酸溶解于无水DMF(10mL)中。以该顺序将NMM(92.000mg，0.1mL，0.9096mmol)和CDMT(60mg，0.3417mmol)添加到反应混合物中。将反应在室温下搅拌40小时。将反应用10％柠檬酸水溶液(15mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至50％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈白色固体的14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮，异构体A(42mg，35％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ10.47(s,1H),8.84(s,1H),8.34(s,2H),8.11(d,J＝8.0Hz,1H),7.74(d,J＝7.8Hz,1H),7.57(t,J＝7.7Hz,1H),7.19(t,J＝7.7Hz,1H),7.00(d,J＝7.6Hz,2H),6.14(s,1H),5.84(dd,J＝11.8,5.2Hz,1H),5.72(dd,J＝13.2,4.4Hz,1H),4.64(t,J＝11.9Hz,1H),4.60–4.51(m,1H),4.34–4.20(m,1H),2.53(dt,J＝15.3,5.1Hz,1H),2.02–1.83(m,8H),1.83–1.70(m,2H),1.70–1.61(m,1H),1.35(d,J＝6.0Hz,6H),1.32–1.15(m,3H),0.84–0.74(m,1H),0.74–0.62(m,6H).ESI-MS m/z计算值684.3094，实验值685.9(M+1)+；保留时间：3.25分钟；LC方法W。
步骤12：14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮，异构体A，SFC峰1(化合物394)，以及14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮，异构体A，SFC峰2(化合物395)
将14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(42mg，0.06133mmol)(单一非对映异构体、外消旋混合物，来自异构体A)在50℃下使用手性Cel OD柱(250×10mm；5um)进行手性SFC。流动相为22％ MeOH(20mM NH3)，78％CO2流速为20毫升/分钟。样品在甲醇(无改性剂)中的浓度为约21mg/mL，进样体积为100μL，出口压力为214bar，检测波长为210nm。对于每个所得对映异构体，将溶剂蒸发并且将残余物通过硅胶快速色谱法(12g柱)使用甲醇(15分钟内0至15％)/二氯甲烷的梯度纯化。将产物在DCM/己烷中研磨并将溶剂蒸发，得到呈白色固体的：SFC峰1，14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(12mg，57％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.86(app t,J＝1.8Hz,1H),8.34(s,2H),8.15(d,J＝7.9Hz,1H),7.76(app d,J＝7.7Hz,1H),7.63(t,J＝7.8Hz,1H),7.19(t,J＝7.6Hz,1H),7.01(d,J＝7.6Hz,2H),6.17(s,1H),5.84(dd,J＝11.8,5.2Hz,1H),5.73(dd,J＝13.2,4.5Hz,1H),4.65(t,J＝11.9Hz,1H),4.57(七重峰,J＝6.0Hz,1H),4.30(dt,J＝12.1,4.8Hz,1H),2.59-2.50(m,1H),1.97(s,6H),1.95-1.60(m,6H),1.36(d,J＝6.0Hz,6H),1.34-1.19(m,2H),0.93-0.73(m,1H),0.73-0.66(m,6H).ESI-MS m/z计算值684.3094，实验值685.64(M+1)+；保留时间：2.19分钟，以及SFC峰2，14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(11.7mg，55％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.87(t,J＝1.9Hz,1H),8.34(s,2H),8.13(d,J＝8.0Hz,1H),7.77(dt,J＝7.7,1.4Hz,1H),7.62(t,J＝7.8Hz,1H),7.19(t,J＝7.6Hz,1H),7.02(d,J＝7.6Hz,2H),6.19(s,1H),5.83(dd,J＝11.7,5.3Hz,1H),5.73(dd,J＝13.2,4.5Hz,1H),4.69-4.61(m,1H),4.60-4.53(m,1H),4.35-4.22(m,1H),2.60-2.48(m,1H),2.03-1.84(m,9H),1.78(t,J＝9.2Hz,2H),1.68-1.63(m,1H),1.36(d,J＝6.1,1.1Hz,6H),1.25-1.17(m,2H),0.82-0.73(m,1H),0.73-0.58(m,6H)。ESI-MS m/z计算值684.3094，实验值685.81(M+1)+；保留时间：2.19分钟；LC方法A。
实例149：化合物396和化合物397的制备
步骤1：[3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-2,3,4,5-四氢-1H-氮杂-2-基]甲醇，异构体C
在室温下向2-(羟甲基)-3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-2,3,4,5-四氢氮杂-1-羧酸叔丁酯，异构体A(176mg，0.4195mmol)于无水DCM(2.5mL)中的溶液中添加于乙醚(2M的5mL，10.000mmol)中的2N HCl。将反应混合物在室温下搅拌24小时。LCMS指示反应不完全。添加另一部分于乙醚中的2N HCl(2M的5mL，10.000mmol)。将反应再搅拌24小时。将挥发物在真空下去除，得到呈黄色固体的粗[3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-2,3,4,5-四氢-1H-氮杂-2-基]甲醇(盐酸盐)。ESI-MS m/z计算值319.226，实验值320.1(M+1)+；保留时间：2.28分钟。将粗物质溶解于乙醇(5mL)中。将10％ Pd/C(100mg，10％w/w，0.0940mmol)添加到反应混合物中。将反应在氢气气球下搅拌24小时。将催化剂通过硅藻土垫过滤去除并用乙醇(10mL)洗涤。将合并的滤液真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至10％甲醇/DCM(用0.3％氢氧化铵缓冲)纯化，得到呈黄色凝胶的[3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-2-基]甲醇，异构体C(46mg，34％)，其在静置之后固化。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.31(s,2H),4.73–4.50(m,1H),4.11–3.93(m,1H),3.88–3.49(m,3H),3.38–3.10(m,1H),2.68–2.49(m,1H),2.33–2.08(m,1H),1.90–1.79(m,1H),1.78–1.69(m,1H),1.67–1.59(m,2H),1.56–1.44(m,2H),1.36(d,J＝5.6Hz,6H),1.28–1.25(m,1H),1.03(m,1H),0.97–0.66(m,6H).ESI-MS m/z计算值321.24164，实验值322.3(M+1)+；保留时间：2.21分钟；LC方法T。
步骤2：14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮，异构体C
/>
在0℃下向3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(63mg，0.1508mmol)和[3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-2-基]甲醇，异构体C(46mg，0.1431mmol)于无水THF(1mL)中的溶液中添加叔丁醇钠(75mg，0.7804mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。在0℃下将反应用1N HCl(水溶液)(15mL)淬灭，并且然后将其用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，得到呈类白色固体的粗3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-2-基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)。ESI-MSm/z计算值702.32，实验值703.5(M+1)+；保留时间：2.69分钟。将粗酸溶解于无水DMF(10mL)中。将NMM(73.600mg，0.08mL，0.7277mmol)和CDMT(60mg，0.3417mmol)添加到反应混合物中。将反应在室温下搅拌2天。将反应用10％柠檬酸(水溶液)(30mL)稀释并用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×30mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用25至75％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈白色固体的14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(40.9mg，41％)(异构体C)。ESI-MS m/z计算值684.3094，实验值685.6(M+1)+；保留时间：3.37分钟；LC方法W。
步骤3：14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮，异构体C，SFC峰1(化合物396)以及14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮，异构体C，SFC峰2(化合物397)
将14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(40.8mg，0.05958mmol)(单一非对映异构体、外消旋混合物，来自异构体C)在50℃下使用手性Pak IC柱(250×21.2mm；5μM)进行手性SFC。流动相为38％ MeOH(20mM NH3)，等度模式下的62％ CO2流速为70毫升/分钟。样品在甲醇中的浓度为12.7mg/mL，进样体积为800μL，出口压力为202bar，检测波长为210nm。对于每个所得对映异构体，将溶剂蒸发，得到呈白色固体的两个产物：异构体C，SFC峰1，14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(15.8mg，77％)，1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.82(s,1H),8.34(s,2H),8.13(d,J＝8.0Hz,1H),7.71(d,J＝7.6Hz,1H),7.53(宽s,1H),7.14(t,J＝7.6Hz,1H),6.96(d,J＝7.6Hz,2H),6.09(s,1H),5.85(dd,J＝11.7,5.2Hz,1H),5.71(dd,J＝13.1,4.4Hz,1H),4.73-4.50(m,2H),4.29(dt,J＝12.1,4.9Hz,1H),2.52(dt,J＝14.3,4.0Hz,1H),2.02-1.84(m,9H),1.81-1.71(m,2H),1.70-1.59(m,1H),1.36(d,J＝6.0Hz,6H),1.30-1.18(m,2H),0.82-0.75(m,1H),0.74-0.65(m,6H).ESI-MS m/z计算值684.3094，实验值685.77(M+1)+；保留时间：2.17分钟，以及异构体C，SFC峰2，14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(15.5mg，76％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.84(s,1H),8.33(s,2H),8.19(d,J＝7.9Hz,1H),7.74(d,J＝8.0Hz,1H),7.62(t,J＝7.7Hz,1H),7.17(t,J＝7.6Hz,1H),6.98(d,J＝7.7Hz,2H),6.12(s,1H),5.85(dd,J＝11.7,5.2Hz,1H),5.71(dd,J＝13.2,4.5Hz,1H),4.64(t,J＝11.9Hz,1H),4.57(h,J＝6.0Hz,1H),4.29(dt,J＝12.1,4.9Hz,1H),2.53(dt,J＝15.2,5.2Hz,1H),2.07-1.83(m,9H),1.80-1.71(m,2H),1.67(dd,J＝11.7,5.6Hz,1H),1.36(d,J＝6.0Hz,6H),1.28(dt,J＝14.5,5.2Hz,2H),0.85-0.76(m,1H),0.75-0.67(m,6H).ESI-MS m/z计算值684.3094，实验值685.83(M+1)+；保留时间：2.17分钟；LC方法A。
实例150：化合物398和化合物399的制备
步骤1：2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-7-二苯基磷酰氧基-3-异丁基-2,3,4,5-四氢氮杂-1-羧酸叔丁酯，异构体B
向干燥的反应烧瓶中装入于无水THF(30mL)中的2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-3-异丁基-7-氧代-氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯，异构体B(1.261g，3.0483mmol)。在-78℃下将于THF(1M的3.8mL，3.8000mmol)中的1.0M NaHMDS添加到反应混合物中。将反应在相同温度下搅拌1小时。将[氯(苯基)磷酰基]苯(1.0292g，0.83mL，4.3493mmol)滴加到反应混合物中。将反应在相同温度下再搅拌2小时。将反应温热至室温并用水(30mL)淬灭，并用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至40％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈透明凝胶的2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-7-二苯基磷酰氧基-3-异丁基-2,3,4,5-四氢氮杂-1-羧酸叔丁酯，异构体B(1.736g，93％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.04–7.80(m,4H),7.64–7.33(m,6H),5.38–5.15(m,1H),4.51–4.22(m,1H),3.96–3.79(m,1H),3.76–3.57(m,1H),2.05–1.85(m,2H),1.82–1.64(m,2H),1.56–1.28(m,10H),1.24–1.11(m,1H),1.10–1.00(m,1H),0.91(m,6H),0.89–0.75(m,9H),0.78–0.64(m,1H),0.21–0.00(m,6H).ESI-MSm/z计算值613.33527，实验值614.1(M+1)+；保留时间：9.45分钟；LC方法S。
步骤2：2-(羟甲基)-3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-2,3,4,5-四氢氮杂-1-羧酸叔丁酯，异构体B
向可微波加热小瓶中装入于无水二噁烷(15mL)中的2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-7-二苯基磷酰氧基-3-异丁基-2,3,4,5-四氢氮杂-1-羧酸叔丁酯(868mg，1.4140mmol)、三丁基-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)锡烷(1.195g，2.7972mmol)和无水LiCl(164mg，3.8685mmol)。将反应混合物用氮气吹扫1小时。将CuI(54mg，0.2835mmol)和Pd(dppf)Cl2(119mg，0.1457mmol)添加到反应混合物中。将反应用氩气再吹扫10分钟，然后将小瓶密封并在微波反应器中在125℃下加热8小时。在冷却至室温之后，将反应用1N KF(水溶液)(15mL)稀释并搅拌1小时。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并用乙酸乙酯(15mL)洗涤。将滤液的两个层分离，并将水层用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将粗物质溶解于甲醇(15mL)中。将1N HCl(1M的1mL，1.0000mmol)添加到反应混合物中。将反应在室温下搅拌1小时。将反应混合物用饱和碳酸氢钠(50mL)和乙酸乙酯(50mL)稀释。将两个层分离并将水层用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(梯度：0至20％丙酮/己烷)纯化，得到呈黄色凝胶的2-(羟甲基)-3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-2,3,4,5-四氢氮杂-1-羧酸叔丁酯，异构体B(202mg，27％)。ESI-MS m/z计算值419.2784，实验值420.3(M+1)+；保留时间：3.81分钟
步骤3：[3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-2-基]甲醇，异构体B
在0℃下，向2-(羟甲基)-3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-2,3,4,5-四氢氮杂-1-羧酸叔丁酯，异构体B(202mg，0.3852mmol)于无水DCM(3mL)中的溶液中滴加TFA(2.2200g，1.5mL，19.470mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。在真空中除去溶剂。向残余物中添加于乙醚中的2N HCl(2M的1.5mL，3.0000mmol)。将挥发物在真空下过夜去除，得到呈黄色油的粗[3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-2,3,4,5-四氢-1H-氮杂-2-基]甲醇(盐酸盐)。将粗物质溶解于无水THF(3mL)中。将TEA(79.860mg，0.11mL，0.7892mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(408mg，1.9251mmol)添加到反应混合物中。将反应在室温下搅拌1.5小时。将反应用2N碳酸钠(10mL)淬灭并用乙酸乙酯(5×10mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将粗物质通过硅胶色谱法使用0至10％甲醇/DCM(用0.3％氢氧化铵缓冲)纯化，得到呈黄色凝胶的[3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-2-基]甲醇，异构体B(24mg，19％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.32(s,2H),4.67–4.50(m,1H),4.31–4.16(m,1H),3.57–3.46(m,2H),3.45(s,2H),3.19–3.03(m,1H),2.26–2.12(m,1H),1.99–1.89(m,1H),1.89–1.81(m,1H),1.68–1.54(m,4H),1.54–1.44(m,1H),1.43–1.29(m,6H),1.28–1.17(m,1H),1.05(ddd,J＝13.2,9.6,3.5Hz,1H),0.93(dd,J＝9.3,6.6Hz,3H),0.84(dd,J＝9.2,6.5Hz,3H).ESI-MS m/z计算值321.24164，实验值322.4(M+1)+；保留时间：2.25分钟；LC方法T。
步骤4：14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮，异构体B
在0℃下向3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(65mg，0.1482mmol)和[3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-2-基]甲醇，异构体B(44mg，0.1369mmol)于无水THF(1mL)中的溶液中添加叔丁醇钠(68mg，0.7076mmol)。将反应在室温下搅拌1.5小时。在0℃下将反应用1N HCl(水溶液)(15mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，得到呈黄色凝胶的粗3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[[3-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-2-基]甲氧基]嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)。ESI-MS m/z计算值702.32，实验值703.5(M+1)+；保留时间：2.76分钟。将粗物质溶解于无水DMF(10mL)中。将NMM(69.000mg，0.075mL，0.6822mmol)添加到反应混合物中，然后添加CDMT(48mg，0.2734mmol)。将反应在室温下搅拌2天。将反应用10％柠檬酸(20mL)和乙酸乙酯(20mL)稀释。将两个层分离，并将水层用(2×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至80％乙酸乙酯/己烷纯化。将含有期望的产物的级分合并并在真空下浓缩。将残余物通过反相HPLC使用0至100％乙腈/水(用0.1％TFA缓冲)进一步纯化，得到呈白色粉末的14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(11.6mg，12％)(异构体B)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),8.44(s,2H),7.87(s,1H),7.61(s,2H),7.25(t,J＝7.4,7.4Hz,1H),7.12(d,J＝7.9Hz,2H),6.33(s,1H),5.64(dd,J＝12.0,4.8Hz,1H),5.46(dd,J＝13.0,4.6Hz,1H),4.86–4.72(m,2H),4.31(dd,J＝12.1,5.1Hz,1H),2.35–2.28(m,1H),2.13–1.96(m,8H),1.71–1.52(m,4H),1.28(dd,J＝6.0,1.6Hz,6H),0.94(dt,J＝13.4,5.7,5.7Hz,1H),0.79–0.64(m,2H),0.52(d,J＝6.3Hz,3H),0.42(d,J＝6.3Hz,3H).ESI-MS m/z计算值684.3094，实验值685.6(M+1)+；保留时间：3.31分钟；LC方法W。
步骤5：14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮，异构体B，SFC峰1(化合物398)，以及14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮，异构体B，SFC峰2(化合物399)
将14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(10.4mg，0.01519mmol)(单一非对映异构体、外消旋混合物，来自异构体B)在50℃下使用手性Cel OD柱(250×10mm；5μm)进行手性SFC。流动相为22％ MeOH(20mM NH3)，流速为20毫升/分钟。样品在甲醇中的浓度为14.9mg/mL，进样体积为100μL，压力为181bar，检测波长为210nm。对于每个所得对映异构体，将溶剂蒸发，得到呈无色玻璃的：异构体B，SFC峰1，14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(3.2mg，62％)。ESI-MS m/z计算值684.3094，实验值685.88(M+1)+；保留时间：2.15分钟，以及异构体B，SFC峰2，14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-4-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(4mg，77％)。ESI-MS m/z计算值684.3094，实验值685.99(M+1)+；保留时间：2.15分钟；LC方法A。
实例151：化合物400和化合物401的制备
步骤1：6-溴-N-环丁基-N-甲基-吡嗪-2-胺
向2,6-二溴吡嗪(136mg，0.5717mmol)于无水DMSO(1mL)中的溶液中添加N-甲基环丁胺(盐酸盐)(91mg，0.7483mmol)和DIPEA(185.50mg，0.25mL，1.4353mmol)。将反应在室温下搅拌16小时。将反应用乙酸乙酯(30mL)稀释并用水(2×10mL)和盐水(10mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至20％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈澄清液体的6-溴-N-环丁基-N-甲基-吡嗪-2-胺(75mg，54％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ7.98–7.64(m,2H),4.76–4.45(m,1H),3.02(s,3H),2.33–2.22(m,2H),2.22–2.09(m,2H),1.79–1.64(m,2H).ESI-MS m/z计算值241.02145，实验值242.2(M+1)+；保留时间：3.26分钟；LC方法T。
步骤2：N-环丁基-N-甲基-6-三丁基锡基-吡嗪-2-胺
向密封管中装入6-溴-N-环丁基-N-甲基-吡嗪-2-胺(2.12g，8.7561mmol)、三丁基(三丁基锡烷基)锡烷(25.256g，22mL，43.537mmol)、无水LiCl(1.26g，29.721mmol)和Pd(PPh3)4(206mg，0.1783mmol)。将脱气的二噁烷(20mL)添加到反应混合物中。将管密封并在120℃下加热1小时。在冷却至室温之后，将1N KF(水溶液)(1M的25mL，25.000mmol)添加到反应混合物中。将反应在室温下搅拌1小时。将沉淀通过硅藻土垫过滤出并用乙酸乙酯(50mL)洗涤。将合并的滤液用盐水(2×20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(0至15％[10％7N氨/甲醇/乙酸乙酯]/己烷)纯化，得到呈黄色液体的N-环丁基-N-甲基-6-三丁基锡基-吡嗪-2-胺(2.692g，68％)。ESI-MS m/z计算值453.21658，实验值454.2(M+1)+；保留时间：4.15分钟；LC方法T。
步骤3：2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-7-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-3-异丁基-2,3,4,5-四氢氮杂-1-羧酸叔丁酯，异构体A/异构体C混合物
向20mL可微波加热小瓶中装入2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-7-二苯基磷酰氧基-3-异丁基-2,3,4,5-四氢氮杂-1-羧酸叔丁酯，异构体A(0.941g，1.4563mmol)、N-环丁基-N-甲基-6-三丁基锡基-吡嗪-2-胺(987mg，2.1824mmol)、CuI(107mg，0.5618mmol)、LiCl(219mg，5.1658mmol)、Pd(dppf)Cl2(130mg，0.1592mmol)和脱气的二噁烷(15mL)。将小瓶密封并在微波反应器中在150℃下辐射4小时。LCMS指示剩余的起始材料。添加另一部分N-环丁基-N-甲基-6-三丁基锡基-吡嗪-2-胺(330mg，0.7297mmol)。将反应用氩气吹扫30分钟。添加CuI(58mg，0.3045mmol)和Pd(dppf)Cl2(126mg，0.1543mmol)。将反应在微波中在150℃下再加热3小时。将反应冷却至室温并用1N KF(水溶液)(1M的15mL，15.000mmol)和乙酸乙酯(15mL)稀释。将反应混合物在室温下搅拌1小时。将沉淀通过硅藻土垫过滤去除并用乙酸乙酯(50mL)洗涤。将合并的滤液用盐水(2×15mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至30％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈黄色液体的2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-7-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-3-异丁基-2,3,4,5-四氢氮杂-1-羧酸叔丁酯(异构体A和C的混合物)(89mg，10％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.08–7.90(m,1H),7.87–7.69(m,1H),6.66–6.22(m,1H),4.73–4.57(m,1H),4.56–4.18(m,1H),3.90–3.70(m,1H),3.70–3.48(m,1H),3.11–2.87(m,3H),2.63–2.35(m,1H),2.29–2.20(m,2H),2.20–2.11(m,2H),1.98–1.87(m,1H),1.76–1.69(m,2H),1.66–1.61(m,1H),1.60–1.55(m,1H),1.42(s,2H),1.42–1.32(m,2H),1.31–1.24(m,2H),1.12(s,7H),0.97–0.73(m,15H),0.13–-0.08(m,6H).ESI-MS m/z计算值558.39655，实验值559.4(M+1)+；保留时间：4.84分钟；LC方法T。
步骤4：[7-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-3-异丁基-氮杂环庚烷-2-基]甲醇，异构体A/异构体C混合物
向反应烧瓶中装入2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]-7-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-3-异丁基-2,3,4,5-四氢氮杂-1-羧酸叔丁酯(异构体A和C混合物)(89mg，0.1513mmol)和于二噁烷中的4N HCl(4M的3mL，12.000mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将挥发物在真空下去除，得到呈深棕色固体的[7-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-3-异丁基-2,3,4,5-四氢-1H-氮杂-2-基]甲醇。ESI-MS m/z计算值344.2576，实验值345.2(M+1)+；保留时间：2.32分钟。将粗物质溶解于无水THF(3mL)中。将三乙胺(30.492mg，0.042mL，0.3013mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(140mg，0.6606mmol)添加到反应混合物中。将反应在室温下搅拌2小时。将反应用2N碳酸钠水溶液(10mL)淬灭并用乙酸乙酯(5×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至10％甲醇/DCM(用0.3％氢氧化铵缓冲)纯化，得到呈棕色凝胶的[7-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-3-异丁基-氮杂环庚烷-2-基]甲醇(异构体A和C混合物)(40mg，76％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ7.88–7.81(m,1H),7.80–7.72(m,1H),4.69–4.51(m,1H),3.84–3.65(m,2H),3.41–3.14(m,1H),3.08–2.96(m,3H),2.81–2.51(m,1H),2.29–2.21(m,2H),2.21–2.08(m,3H),1.86–1.68(m,4H),1.66–1.44(m,3H),1.39–0.98(m,4H),0.95–0.70(m,6H).ESI-MS m/z计算值346.27325，实验值347.3(M+1)+；保留时间：2.26分钟；LC方法T。
步骤5：4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮，异构体A/异构体C混合物
向反应小瓶中装入于无水THF(0.5mL)中的[7-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-3-异丁基-氮杂环庚烷-2-基]甲醇，异构体A(40mg，0.1154mmol)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(异构体A和C混合物)(56mg，0.1340mmol)。在室温下将叔丁醇钠(78mg，0.8116mmol)添加到反应混合物中。将反应在室温下搅拌1小时。将反应用乙酸乙酯(15mL)和1N HCl(水溶液)(15mL)稀释。将两个层分离，并将水层用乙酸乙酯(5×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，得到呈黄色固体的粗3-[[4-[[7-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-3-异丁基-氮杂环庚烷-2-基]甲氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)。ESI-MS m/z计算值727.3516，实验值728.5(M+1)+；保留时间：2.66分钟。将粗物质溶解于无水DMF(7.5mL)中。将CDMT(45mg，0.2563mmol)和NMM(57.960mg，0.063mL，0.5730mmol)添加到反应混合物中。将反应在室温下搅拌2小时。将另一部分CDMT(33mg，0.1880mmol)和NMM(34.960mg，0.038mL，0.3456mmol)添加到反应混合物中。将反应在室温下搅拌2天，然后将其用10％柠檬酸(20mL)淬灭。将反应用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将粗物质与来自另一个实验的粗物质合并，所述实验使用101mg的起始反应物运行，用于异构体A和C的进一步分离。4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(异构体A和C)ESI-MS m/z计算值709.341，实验值710.6(M+1)+；保留时间：5.99分钟和5.73分钟；LC方法T。
步骤6：4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮，异构体A以及4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(异构体A和C的1:1混合物)
将两种粗物质4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(使用40mg的起始反应物制备)和4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(使用101mg的起始反应物制备)合并并通过硅胶色谱法使用0至80％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈黄色固体(纯异构体A)的4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(28mg)和呈橙色凝胶(异构体A和C的1:1混合物)的4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(58mg)。异构体A：ESI-MS m/z计算值709.341，实验值710.8(M+1)+；保留时间：2.91分钟。异构体C ESI-MS m/z计算值709.341，实验值710.5(M+1)+；保留时间：2.8分钟，2.91分钟；LC方法W。
步骤7：4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮，异构体A，SFC峰1(化合物400)，以及4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮，异构体A，SFC峰2(化合物401)
将4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(27mg，0.03803mmol)(单一非对映异构体A、外消旋混合物)在50℃下使用手性Pak AS柱(250×21.2mm；5um)进行手性SFC。流动相为44％ MeOH(20mM NH3)，流速为70毫升/分钟。样品在甲醇(无改性剂)中的浓度为约18mg/mL，进样体积为500μL，出口压力为181bar，检测波长为210nm。对于每个所得对映异构体，将溶剂蒸发并将残余物通过反相HPLC(15分钟内1-99％乙腈/5mM HCl水溶液)纯化，得到呈黄色固体的：非对映异构体A，SFC峰1，4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(7.1mg，53％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.68-8.63(m,1H),7.92(d,J＝7.9Hz,1H),7.87(s,1H),7.84(s,1H),7.80(dt,J＝7.7,1.4Hz,1H),7.59(t,J＝7.8Hz,1H),7.22(t,J＝7.6Hz,1H),7.08(d,J＝7.6Hz,2H),6.27(s,1H),5.71(dd,J＝11.7,5.4Hz,1H),5.58-5.46(m,1H),4.89(t,J＝11.8Hz,1H),4.49(p,J＝8.4Hz,1H),4.40(dt,J＝11.2,5.0Hz,1H),3.22(s,3H),2.39-2.28(m,2H),2.28-2.19(m,2H),2.16-2.08(m,2H),2.05(s,6H),1.97-1.88(m,2H),1.87-1.79(m,1H),1.80-1.69(m,3H),1.68-1.60(m,1H),1.27-1.10(m,2H),0.83-0.71(m,1H),0.68-0.60(m,6H).ESI-MS m/z计算值709.341，实验值710.81(M+1)+；保留时间：2.08分钟；以及非对映异构体B，SFC峰2，4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(8.5mg，63％)，1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.66(s,1H),7.93(d,J＝7.9Hz,1H),7.87(s,1H),7.83(s,1H),7.80(d,J＝7.3Hz,1H),7.59(t,J＝7.8Hz,1H),7.22(t,J＝7.6Hz,1H),7.08(d,J＝7.6Hz,2H),6.28(s,1H),5.71(dd,J＝11.6,5.4Hz,1H),5.57-5.46(m,1H),4.89(t,J＝11.8Hz,1H),4.49(p,J＝8.4Hz,1H),4.44-4.32(m,1H),3.22(s,3H),2.38-2.29(m,2H),2.28-2.19(m,2H),2.17-2.08(m,2H),2.05(s,6H),1.97-1.88(m,2H),1.88-1.81(m,1H),1.80-1.69(m,3H),1.68-1.58(m,1H),1.25-1.12(m,2H),0.84-0.72(m,1H),0.70-0.57(m,6H).ESI-MS m/z计算值709.341，实验值710.75(M+1)+；保留时间：2.08分钟；LC方法A。
实例152：化合物402和化合物403的制备
步骤1：4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮，异构体C，SFC峰1(化合物402)，以及4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮，异构体C，SFC峰2(化合物403)
将4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(57mg，0.08029mmol)(非对映异构体A和C的1:1混合物)溶解于DMSO(1mL)中并进行反相HPLC(15分钟内1-99％乙腈/5mM HCl水溶液，混合级分再次纯化)，得到两个外消旋的非对映异构体：首先洗脱的更多极性非对映异构体C 4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(12.3mg，43％)，ESI-MS m/z计算值709.341，实验值710.75(M+1)+；保留时间：1.96分钟以及其次洗脱的更少极性非对映异构体A 4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(14.7mg，52％)，ESI-MS m/z计算值709.341，实验值710.81(M+1)+；保留时间：2.03分钟。在40℃下将更多极性非对映异构体C使用手性Pak AS柱(250×21.2mm；5um)进行手性SFC。流动相为44％ MeOH(20mM NH3)，流速为70毫升/分钟。样品在甲醇(无改性剂)中的浓度为18mg/mL，进样体积为200μL，出口压力为235bar，检测波长为210nm。对于每个所得对映异构体，将溶剂蒸发并将残余物通过反相HPLC(15分钟内1-99％乙腈/5mM HCl水溶液)纯化，得到非对映异构体C，SFC峰1，4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(0.5mg，3％)。ESI-MS m/z计算值709.341，实验值710.81(M+1)+；保留时间：1.98分钟以及非对映异构体C，SFC峰2，4-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-14-(2,6-二甲基苯基)-8-异丁基-18,18-二氧代-11-氧杂-18λ6-硫杂-3,15,17,24-四氮杂四环[17.3.1.112,16.03,9]二十四碳-1(22),12,14,16(24),19(23),20-六烯-2-酮(0.2mg，1％)。ESI-MS m/z计算值709.341，实验值710.59(M+1)+；保留时间：1.98分钟；LC方法A。
实例153：化合物404和化合物405的制备
步骤1：N-[(1R)-6-苄氧基-2-羟基-1-异丁基-己基]氨基甲酸叔丁酯
将镁(4.5g，185.15mmol)置于氩气气球下的干燥烧瓶中。添加微小的碘晶体。将烧瓶用加热枪短暂加热，直到紫色碘蒸汽的释放可见为止。将内容物冷却到室温。添加无水THF(100mL)，然后添加几滴4-溴丁氧基甲基苯(12.750g，10mL，52.439mmol)于无水THF(100mL)中的溶液。然后添加1,2-二溴乙烷(868.00mg，0.4mL，4.6204mmol)。将混合物定期温和加热搅拌，直到观察到澄清的混合物为止。滴加剩余的溴化物。在添加完成之后，将混合物置于50℃油浴中并在氩气下搅拌1小时。然后将反应冷却至0℃并在20分钟内添加于无水THF(100mL)中的N-[(1R)-1-甲酰基-3-甲基-丁基]氨基甲酸叔丁酯(10g，41.804mmol)。将反应在0℃下搅拌1小时。然后将反应用饱和氯化铵(150ml)淬灭，将水溶液用乙酸乙酯(3×200ml)萃取。然后将合并的有机溶液用盐水(150ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过硅胶色谱法(加载有330g筒中的DCM，使用0-40％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂)纯化，得到呈浅黄色油的N-[(1R)-6-苄氧基-2-羟基-1-异丁基-己基]氨基甲酸叔丁酯(4.6g，28％)。ESI-MS m/z计算值379.27225，实验值380.3(M+1)+；保留时间：6.0分钟；LC方法S。
步骤2：N-[(1R)-6-苄氧基-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-1-异丁基-己基]氨基甲酸叔丁酯
在氩气下，将(1-甲基-1-甲硅烷基-乙基)N-[(1R)-6-苄氧基-2-羟基-1-异丁基-己基]氨基甲酸酯(11g，26.415mmol)溶解于无水DCM(50mL)中并将溶液冷却至0℃。将咪唑(6.8g，99.886mmol)添加到反应中并搅拌5分钟。然后添加TBSCl(10.9g，72.319mmol)并且然后添加DMAP(1.1g，9.0040mmol)。在5分钟之后，然后将反应温热至室温。然后将反应混合物在53℃下加热2小时。然后将反应冷却至室温，用DCM(100mL)稀释，用饱和氯化铵溶液(150mL)淬灭。将水层用DCM(3×100mL)萃取，用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并将溶剂在减压下去除。将粗产物通过硅胶色谱法(加载有330g筒中的DCM，使用0-30％乙醚/己烷作为洗脱剂)纯化，得到呈浅黄色油的N-[(1R)-6-苄氧基-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-1-异丁基-己基]氨基甲酸叔丁酯(7.9g，59％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ7.40–7.31(m,4H),7.29–7.27(m,1H),4.59–4.54(m,1H),4.54–4.47(m,2H),3.73–3.65(m,1H),3.62–3.56(m,1H),3.51–3.43(m,2H),1.67–1.58(m,4H),1.44(s,9H),1.32–1.23(m,2H),0.99–0.82(m,18H),0.11–0.01(m,6H).ESI-MS m/z计算值493.35873，实验值494.5(M+1)+；保留时间：9.5分钟；LC方法S。
步骤3：N-[(1R)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-6-羟基-1-异丁基-己基]氨基甲酸叔丁酯
将N-[(1R)-6-苄氧基-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-1-异丁基-己基]氨基甲酸叔丁酯(7.9g，15.999mmol)于乙醇(160mL)中的溶液冷却至0℃并在N2气体下添加钯/炭(1.709g，10％w/w，1.6059mmol)。将充有H2气体的气球在0℃下鼓泡通过混合物3小时。将反应用氮气吹扫，温热至室温，通过硅藻土垫过滤并用甲醇(3×100L)洗涤。将溶剂在真空中去除并将残余的EtOH在高真空下在45℃下去除，得到呈无色油呈非对映异构体的N-[(1R)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-6-羟基-1-异丁基-己基]氨基甲酸叔丁酯(5.30g，81％)ESI-MS m/z计算值403.3118，实验值404.5(M+1)+；保留时间：8.0分钟；LC方法S。
步骤4：N-[(1R)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-1-羟基-6-氧代-己基]氨基甲酸叔丁酯
在室温下，将N-[(1R)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-6-羟基-1-异丁基-己基]氨基甲酸叔丁酯(3.8g，8.9429mmol)溶解于无水DMSO(35mL)中。将IBX(4.3g，14.896mmol)添加到反应混合物中。然后将反应在室温下搅拌2小时。将反应用水(50ml)和EtOAc(100ml)稀释。将白色固体(IBX副产物)通过烧结漏斗过滤，用乙酸乙酯彻底洗涤。将水溶液用EtOAc(3×100ml)萃取。将合并的有机溶液用盐水(100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并将溶剂在减压下去除。将粗产物通过快速色谱法(Combiflash，加载有40g筒中的DCM，使用0-30％乙醚/己烷(1％ Et3N作为改性剂)作为洗脱剂)纯化，得到呈无色油的N-[(1R)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-1-羟基-6-氧代-己基]氨基甲酸叔丁酯(2.4g，66％)。ESI-MSm/z计算值401.29614，实验值402.2(M+1)+；保留时间：4.59分钟；LC方法T。
步骤5：N-[(1R)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-6-羟基-1-异丁基-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)己基]氨基甲酸叔丁酯
在-90℃至-95℃下，在26分钟内向n-BuLi于己烷(2.5M的2.4mL，6.00mmol)中的溶液中滴加于THF(26.6mL)中的三丁基-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)锡烷(2.32g，2mL，5.4306mmol)并将反应在-90℃至-95℃下搅拌45分钟。在-95℃下，在5分钟内向嘧啶基锂溶液中添加N-[(1R)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-1-羟基-6-氧代-己基]氨基甲酸叔丁酯(2g，4.9794mmol)于THF(6.6mL)中的溶液，然后将反应在-95℃下搅拌15分钟并在2小时内加热至-20℃，用饱和NH4Cl水溶液(20mL)淬灭，用水(10mL)稀释，用EtOAc(3×35mL)萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速色谱法(Combiflash，用苯加载到80g SiO2筒上，并用0-40％ EtOAc/己烷在35分钟梯度内洗脱)纯化，得到呈黄色油，呈非对映异构体的N-[(1R)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-6-羟基-1-异丁基-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)己基]氨基甲酸叔丁酯(1.22g，45％)ESI-MS m/z计算值539.3754，实验值540.7(M+1)+；保留时间：8.08分钟；LC方法S。
步骤6：[(6R)-6-(叔丁氧羰基氨基)-5-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-1-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8-甲基-壬基]甲磺酸酯
将N-[(1R)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-6-羟基-1-异丁基-6-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)己基]氨基甲酸叔丁酯(670mg，1.2399mmol)于DCM(4.25mL)中的溶液冷却至0℃，然后添加Et3N(254.10mg，0.350mL，2.5111mmol)，随后添加MsCl(148.00mg，0.10mL，1.2920mmol)。将反应温热至室温并搅拌30分钟，然后用DCM(30mL)稀释，用饱和NH4Cl水溶液(20mL)洗涤，然后将水溶液用DCM(2×30mL)萃取。将合并的有机物用水(20mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到呈浅黄色油呈非对映异构体的[(6R)-6-(叔丁氧羰基氨基)-5-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-1-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8-甲基-壬基]甲磺酸酯(766mg，95％)ESI-MS m/z计算值617.353，实验值618.7(M+1)+；保留时间：8.83分钟，8.94分钟。LC方法S。
步骤7：叔丁基-[(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-基]氧-二甲基-硅烷
在0℃下，向含有[(6R)-6-(叔丁氧羰基氨基)-5-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-1-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8-甲基-壬基]甲磺酸酯(766.15mg，1.2387mmol)的小瓶中添加TFA(5.0320g，3.4mL，44.131mmol)并将混合物搅拌5分钟，然后温热至室温并搅拌10分钟。将反应在真空中浓缩，得到呈浅黄色油呈非对映异构体的[(6R)-6-氨基-5-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-1-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8-甲基-壬基]甲磺酸酯(三氟乙酸盐)(782mg，100％)ESI-MS m/z计算值517.3006，实验值518.7(M+1)+；保留时间：5.1分钟和5.25分钟。将油残余物与无水DMF(11.2mL)和Cs2CO3(2.3g，7.0592mmol)混合并在60℃下加热14小时。将反应冷却至室温并用饱和NH4Cl(30mL)淬灭，然后用EtOAc(3×30mL)萃取。将合并的有机层用1M NaOH(30mL)和盐水(60mL)的混合物洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩(436mg粗)。将残余物通过快速色谱法纯化(用苯加载到12g SiO2筒上，并用含有0.17M NH3的0-5％ MeOH在DCM中在30CV梯度内洗脱)，得到呈黄色油呈非对映异构体的叔丁基-[(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-基]氧-二甲基-硅烷(330mg，51％)ESI-MS m/z计算值421.3125，实验值422.6(M+1)+；保留时间：6.26分钟和6.54分钟。LC方法S。
步骤8：(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-醇
向叔丁基-[(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-基]氧-二甲基-硅烷(330mg，0.7826mmol)于MeOH(11.8mL)中的溶液中添加HCl(3M的9.4mL，28.200mmol)并在65℃油浴中加热18小时。将反应在真空(50℃)中浓缩成浅橙色泡沫并将残余物用EtOAc(20mL)稀释并添加2M NaOH(10mL)和固体NaCl，直到水溶液饱和为止。将水溶液用EtOAc(5×20mL)萃取，将有机物经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到呈非对映异构体的混合物的粗(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-醇(255mg，90％)ESI-MS m/z计算值307.226，实验值308.6(M+1)+；保留时间：3.51分钟，3.18分钟，2.99分钟，2.66分钟。LC方法S。
步骤9：(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-醇，异构体1，以及(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-醇，异构体2，以及(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-醇，异构体3
将(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-醇(507mg)的异构混合物通过快速色谱法(用DCM加载到24g SiO2筒上，并用0-5％MeOH/DCM在60分钟梯度内洗脱)纯化，分别得到呈无色油的(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-醇，异构体1(107mg，25％)，ESI-MS m/z计算值307.226，实验值308.4(M+1)+；保留时间：3.07分钟，1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.34(s,2H),4.64–4.52(m,1H),4.25(t,J＝5.7Hz,1H),3.70–3.65(m,1H),2.94(dd,J＝8.4,5.8Hz,1H),2.19–2.12(m,1H),2.12–2.04(m,1H),1.88(ddt,J＝13.3,6.5,3.3,3.3Hz,1H),1.82–1.67(m,2H),1.62–1.54(m,1H),1.53–1.41(m,3H),1.39–1.34(m,3H),0.98–0.80(m,6H)；呈无色油的(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-醇，异构体2(30mg，7％)，ESI-MS m/z计算值307.226，实验值308.4(M+1)+；保留时间：3.19分钟，1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.32(s,2H),4.59(p,J＝6.1Hz,1H),4.19(dd,J＝7.8,5.7Hz,1H),3.60(td,J＝6.5,6.5,3.1Hz,1H),3.04(ddd,J＝10.0,6.2,4.2Hz,1H),2.93(s,2H),2.17–2.08(m,1H),2.08–1.99(m,1H),1.93–1.78(m,3H),1.65–1.55(m,2H),1.54–1.47(m,1H),1.38–1.35(m,6H),1.36–1.32(m,1H),0.89(d,J＝6.6Hz,3H),0.77(d,J＝6.5Hz,3H)；呈无色油的(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-醇，异构体3(7mg，2％)，ESI-MS m/z计算值307.226，实验值308.4(M+1)+；保留时间：3.57分钟；1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.32(s,1H),4.61(七重峰,J＝6.1Hz,1H),4.14(dd,J＝11.5,6.7Hz,1H),3.56(t,J＝3.1,3.1Hz,1H),3.12(dd,J＝7.9,6.1Hz,1H),2.86–2.43(m,2H),2.34–2.22(m,1H),2.00–1.89(m,1H),1.88–1.79(m,1H),1.73–1.63(m,1H),1.40–1.35(m,6H),1.35–1.33(m,1H),1.34–1.26(m,2H),0.98–0.84(m,1H),0.79(d,J＝6.5Hz,3H),0.67(d,J＝6.5Hz,3H)；以及呈无色油的(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-醇(异构体1和3的混合物，70mg，16％)，ESI-MS m/z计算值307.226，实验值308.2(M+1)+；保留时间：3.02分钟和3.53分钟；LC方法S。
步骤10：(21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮，异构体1
在0℃下，向(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-醇，异构体1(79mg，0.2570mmol)于THF(1.58mL)中的溶液中添加叔丁醇钠(124mg，1.2903mmol)。将反应温热至室温并搅拌10分钟，直到溶液形成为止。然后将反应冷却至0℃，搅拌5分钟，并且添加3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(128mg，0.3063mmol)。将反应搅拌15分钟，然后温热至室温并搅拌4小时。将反应用1M HCl水溶液(2mL)淬灭，用EtOAc(3×4mL)萃取，用盐水(4mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到呈类白色固体的粗3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-基]氧-嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)(186mg，100％)ESI-MS m/z688.3043，实验值689.7(M+1)+；保留时间：4.38分钟。将残余物稀释于DMF(15.8mL)中并在室温下向溶液中添加NMM(147.20mg，0.160mL，1.4553mmol)，然后添加CDMT(95mg，0.5411mmol)并将混合物搅拌24小时。将反应用10％柠檬酸(40mL)淬灭并用EtOAc(3×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×60mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速色谱法(用苯加载到12g SiO2筒上，并用20-70％ EtOAc/己烷在40分钟梯度内洗脱)纯化，得到呈白色固体的(21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮，异构体1(41mg，23％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.80(s,1H),8.63(s,1H),8.31(s,2H),8.04–7.95(m,1H),7.65(dt,J＝7.6,1.4,1.4Hz,1H),7.57(t,J＝7.8Hz,1H),7.20(t,J＝7.6Hz,1H),7.05(d,J＝7.7Hz,2H),6.08(s,1H),5.67(dd,J＝13.1,6.3Hz,1H),5.48(dt,J＝10.7,4.9,4.9Hz,1H),4.60(p,J＝6.1Hz,1H),4.15–4.08(m,1H),2.87–2.78(m,1H),2.25–2.16(m,1H),2.12–2.04(m,1H),2.01–1.89(m,7H),1.87–1.74(m,2H),1.73–1.62(m,2H),1.41–1.35(m,6H),1.30–1.22(m,1H),0.63(d,J＝6.6Hz,3H),0.06(d,J＝6.6Hz,3H).ESI-MS m/z计算值670.29376，实验值671.8(M+1)+；保留时间：3.13分钟；LC方法W。
步骤11：12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮，异构体1，SFC峰1(化合物405)，以及12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮，异构体1，SFC峰2(化合物404)
将(21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮(41mg，0.06112mmol)(异构体1，外消旋)在50℃下使用Phenomenex Lux-4柱(250×21.2mm；5μM)进行手性SFC分离。流动相为44％ MeOH(20mMNH3)，等度模式下的流速为70毫升/分钟。样品在甲醇和DMSO(76:24，v:v)的混合物中的浓度为27.3mg/mL，进样体积为700μL，出口压力为175bar，检测波长为210nm，得到两个异构体。对于每个异构体，将溶剂蒸发并将残余物通过反相HPLC(15分钟内1-99％乙腈/5mM HCl水溶液)纯化，得到呈类白色固体的：异构体1，SFC峰1，12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮(10.8mg，53％)，1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ9.04(宽s,1H),8.66-8.58(m,1H),8.31(s,2H),8.06(dt,J＝7.8,1.5Hz,1H),7.68-7.62(m,1H),7.58(t,J＝7.7Hz,1H),7.19(t,J＝7.6Hz,1H),7.04(d,J＝7.6Hz,2H),6.07(s,1H),5.68(dd,J＝13.1,6.3Hz,1H),5.53-5.39(m,1H),4.60(七重峰,J＝5.9Hz,1H),4.12(dd,J＝8.6,4.8Hz,1H),2.90-2.76(m,1H),2.27-2.17(m,1H),2.14-2.02(m,1H),2.02-1.91(m,7H),1.89-1.77(m,2H),1.74-1.63(m,2H),1.44-1.35(m,6H),1.25(dd,J＝14.0,10.5Hz,1H),0.63(d,J＝6.6Hz,3H),0.06(d,J＝6.5Hz,3H).ESI-MS m/z计算值670.29376，实验值671.74(M+1)+；保留时间：2.13分钟，以及异构体1，SFC峰2，12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮(10.4mg，51％)，1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ9.04(宽s,1H),8.68-8.56(m,1H),8.31(s,2H),8.06(dt,J＝7.9,1.6Hz,1H),7.66(dt,J＝7.7,1.5Hz,1H),7.58(t,J＝7.7Hz,1H),7.19(t,J＝7.6Hz,1H),7.04(d,J＝7.6Hz,2H),6.07(s,1H),5.68(dd,J＝13.1,6.4Hz,1H),5.48(dt,J＝10.9,5.1Hz,1H),4.60(七重峰,J＝6.6Hz,1H),4.12(dd,J＝8.7,4.7Hz,1H),2.83(dt,J＝14.8,7.3Hz,1H),2.30-2.16(m,1H),2.14-2.02(m,1H),2.00-1.88(m,7H),1.88-1.75(m,2H),1.71-1.60(m,2H),1.42-1.33(m,6H),1.25(dd,J＝13.9,10.6Hz,1H),0.63(d,J＝6.6Hz,3H),0.06(d,J＝6.5Hz,3H).ESI-MS m/z计算值670.29376，实验值671.68(M+1)+；保留时间：2.13分钟ESI-MS m/z计算值670.29376，实验值671.68(M+1)+；保留时间：2.13分钟；LC方法A。
实例154：化合物406和化合物407的制备
步骤1：(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-醇，异构体1和呈非对映异构混合物的(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-醇
向叔丁基-[(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-基]氧-二甲基-硅烷(368mg，0.8727mmol)于MeOH(13.25mL)中的溶液中添加HCl(3M的10.5mL，31.500mmol)和HCl(12M的0.785mL，9.4200mmol)，在室温下搅拌12小时，然后在65℃油浴中加热18小时。在50℃下将反应在真空中浓缩成浅橙色泡沫并将残余物用EtOAc(20mL)稀释并添加2M NaOH(10mL)和固体NaCl，直到水溶液饱和为止。将水溶液用EtOAc(5×20mL)萃取并将有机物经Na2SO4干燥，过滤并浓缩(270mg粗)。将残余物通过快速色谱法(Combiflash，用苯加载到12g SiO2筒上，并用0-5％ MeOH/DCM在30分钟梯度内洗脱)纯化，得到呈无色油呈单一对映异构体的(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-醇，异构体1(28.3mg，11％)ESI-MS m/z计算值307.226，实验值308.3(M+1)+；保留时间：2.94分钟，1HNMR(500MHz,氯仿-d)δ8.33(s,2H),4.59(七重峰,J＝6.0Hz,1H),4.24(t,J＝5.7,1H),3.67(t,J＝4.0Hz,1H),2.94(dd,J＝8.4,5.8Hz,1H),2.20–2.02(m,2H),1.92–1.83(m,1H),1.82–1.65(m,2H),1.63–1.38(m,4H),1.39–1.34(m,6H),0.97–0.90(m,6H)以及呈无色油的含有异构体2(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-醇(95mg，35％)的非对映异构体的混合物。ESI-MS m/z计算值307.226，实验值308.4(M+1)+；保留时间：3.31分钟，3.03分钟，2.73分钟。LC方法S。
步骤2：3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-基]氧-嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸，非对映异构混合物
在0℃下，向来自(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-醇(95mg，0.3090mmol)的先前步骤的非对映异构体于THF(1.9mL)中的溶液中添加叔丁醇钠(150mg，1.5608mmol)。将反应温热至室温并搅拌10分钟，直到溶液形成为止。然后将反应冷却至0℃，搅拌5分钟，然后添加3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(155.3mg，0.3717mmol)，搅拌15分钟，然后温热至室温并搅拌4小时。将反应用1M HCl水溶液(3mL)淬灭，用EtOAc(3×20mL)萃取，用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物在EtOAc(20mL)中研磨30分钟并通过过滤收集，得到呈白色固体和呈非对映异构体的混合物的3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-基]氧-嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(65mg，30％)ESI-MS m/z计算值688.3043，实验值689.7(M+1)+；保留时间：4.21分钟和4.50分钟。LC方法S。
步骤3：(21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮，异构体2
在室温下，向3-[[4-(2,6-二甲基苯基)-6-[(2R)-2-异丁基-7-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)氮杂环庚烷-3-基]氧-嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(来自先前步骤的非对映异构混合物，65mg，0.0944mmol)于DMF(13mL)中的溶液中添加NMM(57.960mg，0.063mL，0.5730mmol)，然后添加CDMT(33mg，0.1880mmol)并将混合物搅拌60小时。将反应用10％柠檬酸(10mL)淬灭，用EtOAc(3×20mL)萃取，用盐水(3×30mL)洗涤，经Na2SO4，干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过快速色谱法(用苯加载到12g SiO2筒上，并用0-70％ EtOAc/己烷在60分钟梯度内洗脱)纯化，得到呈白色固体的(21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮，异构体2(17.1mg，27％)。ESI-MS m/z计算值670.2937，实验值671.5(M+1)+；保留时间：3.18分钟。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.98(s,1H),8.32(s,1H),8.03(d,J＝7.9Hz,2H),7.76–7.67(m,1H),7.55(t,J＝7.8,7.8Hz,1H),7.20(t,J＝7.6,7.6Hz,1H),7.06(d,J＝7.6Hz,2H),6.15(s,1H),5.80(dt,J＝11.9,4.6Hz,1H),5.31(t,J＝4.9Hz,1H),4.56(p,J＝6.0Hz,1H),4.36–4.28(m,1H),2.51(dd,J＝15.2,4.5Hz,1H),2.47–2.37(m,1H),2.15–2.07(m,1H),2.01(s,6H),1.98–1.84(m,2H),1.76–1.69(m,2H),1.54(m,1H),1.50–1.43(m,1H),1.38–1.33(m,6H),0.81(d,J＝6.5Hz,3H),0.29(d,J＝6.4Hz,3H)；LC方法W。
也将由含有异构体4的非对映异构混合物组成的第二化合物洗脱，得到呈白色固体的(21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮(9mg，14％)。ESI-MS m/z计算值670.2937，实验值671.7(M+1)+；保留时间：6.56分钟和6.15分钟。LC方法S。
步骤4：12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮，异构体2，SFC峰1(化合物406)，以及12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮，异构体2，SFC峰2(化合物407)
将(21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮(15.6mg，0.02326mmol)(异构体2，外消旋)在50℃下使用手性Cel OD柱(250×10mm；5μM)进行手性SFC分离。流动相为MeOH(20mM NH3)，等度模式下的流速为20毫升/分钟。样品在甲醇、乙腈和DMSO(60:26:14)的混合物中的浓度为5.6mg/mL，进样体积为400μL，压力为181bar，检测波长为210nm。对于每个异构体，将溶剂蒸发，得到异构体2，SFC峰1，12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮(6.3mg，81％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.95(s,1H),8.31(s,2H),8.05(d,J＝7.4Hz,1H),7.67(宽s,1H),7.49(br s,1H),7.17(t,J＝7.6Hz,1H),7.01(d,J＝7.6Hz,2H),6.06(s,1H),5.81(dt,J＝11.6,4.5Hz,1H),5.29(t,J＝5.0Hz,1H),4.56(p,J＝6.1Hz,1H),4.39-4.24(m,1H),2.54-2.31(m,2H),2.15-2.05(m,1H),1.97(s,6H),1.94-1.82(m,2H),1.77-1.65(m,2H),1.61-1.51(m,1H),1.51-1.38(m,1H),1.39-1.31(m,6H),0.81(d,J＝6.5Hz,3H),0.32(d,J＝6.3Hz,3H).ESI-MS m/z计算值670.29376，实验值671.85(M+1)+；保留时间：2.03分钟，以及异构体2，SFC峰2，12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮(6mg，73％)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ8.94(s,1H),8.31(s,2H),8.03(宽s,1H),7.64(br s,1H),7.46(brs,1H),7.15(s,1H),7.00(s,2H),6.05(s,1H),5.86-5.71(m,1H),5.34-5.19(m,1H),4.56(七重峰,J＝6.1Hz,1H),4.39-4.25(m,1H),2.56-2.34(m,2H),2.14-2.02(m,1H),2.14-2.02(m,1H),2.01-1.82(m,7H),1.82-1.65(m,2H),1.58-1.52(m,1H),1.52-1.41(m,1H),1.39-1.32(m,6H),0.81(d,J＝6.4Hz,3H),0.32(d,J＝6.2Hz,3H).ESI-MS m/z计算值670.29376，实验值671.63(M+1)+；保留时间：2.04分钟；LC方法A。
实例155：化合物408和化合物409的制备
步骤1：12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮，异构体4，SFC峰1(化合物408)，以及12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮，异构体4，SFC峰2(化合物409)
将含有来自几个实验的(21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮(25.8mg，0.0385mmol)的混合异构体的批次溶解于CH3CN(7mL)中并在真空中浓缩，得到呈白色固体呈含有异构体4的异构体的70:30混合物的(21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮(24.3mg，94％)。ESI-MS m/z计算值670.2937，实验值671.5(M+1)+；保留时间：6.59分钟和6.18分钟。LC方法S。
将(21R)-12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮(24.3mg，0.03622mmol)(异构体4，与约30％的另一种未知立体异构体混合的外消旋体)溶解于DMSO(2mL)中并通过反相HPLC(15分钟内1-99％乙腈/5mM HCl水溶液)纯化，得到10.5mg的白色固体。将该物质在50℃下使用Phenomenex Lux-4柱(250×10mm，5μM)进行手性SFC分离。流动相为44％ MeOH(20mM NH3)，等度模式下的流速为20毫升/分钟。样品在MeOH和DMSO(76:24，v:v)的混合物中的浓度为4.2mg/mL。进样体积为200μL，出口压力为174bar并且检测波长为210nm。对于每个异构体，将溶剂蒸发。将产物溶解于DMSO(1mL)中并通过反相HPLC(15分钟内1-99％乙腈/5mM HCl水溶液)纯化，得到呈无色树脂的：异构体4，SFC峰1，12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮(2.1mg，17％)，1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.65-8.61(m,1H),8.31(s,2H),8.05(dt,J＝7.8,1.5Hz,1H),7.66(dt,J＝7.6,1.4Hz,1H),7.58(t,J＝7.7Hz,1H),7.20(t,J＝7.6Hz,1H),7.04(d,J＝7.6Hz,2H),6.08(s,1H),5.68(dd,J＝13.1,6.4Hz,1H),5.48(dt,J＝11.5,5.0Hz,1H),4.60(七重峰,J＝6.1Hz,1H),4.12(dd,J＝8.6,4.8Hz,1H),2.83(dt,J＝14.7,7.3Hz,1H),2.27-2.16(m,1H),2.15-2.03(m,1H),2.02-1.88(m,7H),1.88-1.77(m,2H),1.75-1.63(m,2H),1.45-1.34(m,6H),1.32-1.19(m,1H),0.63(d,J＝6.6Hz,3H),0.06(d,J＝6.5Hz,3H).ESI-MS m/z计算值670.29376，实验值671.74(M+1)+；保留时间：2.11分钟，以及异构体4，SFC峰2，12-(2,6-二甲基苯基)-21-异丁基-20-(5-异丙氧基嘧啶-2-基)-8,8-二氧代-15-氧杂-8λ6-硫杂-1,9,11,22-四氮杂四环[14.4.1.13,7.110,14]二十三碳-3,5,7(23),10(22),11,13-六烯-2-酮(3mg，25％)，1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ8.63(s,1H),8.32(s,2H),8.06(d,J＝7.8Hz,1H),7.67(d,J＝7.7Hz,1H),7.59(t,J＝7.7Hz,1H),7.20(t,J＝7.6Hz,1H),7.05(d,J＝7.6Hz,2H),6.11(s,1H),5.68(dd,J＝13.1,6.3Hz,1H),5.49(dt,J＝11.7,5.0Hz,1H),4.60(七重峰,J＝6.0Hz,1H),4.13(dd,J＝8.7,4.8Hz,1H),2.83(dt,J＝14.7,7.2Hz,1H),2.29-2.17(m,1H),2.14-2.04(m,1H),2.02-1.91(m,7H),1.86-1.60(m,4H),1.42-1.34(m,6H),1.26(dd,J＝13.8,10.6Hz,1H),0.64(d,J＝6.6Hz,3H),0.06(s,3H).ESI-MS m/z计算值670.29376，实验值671.68(M+1)+；保留时间：2.12分钟；LC方法A。
实例156：化合物410的制备
步骤1：(NE)-2-甲基-N-(3-甲基丁叉基)丙烷-2-亚磺酰胺
在环境温度下，向(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(10g，82.51mmol)于无水二氯甲烷(200mL)中的搅拌的溶液中添加3-甲基丁醛(18mL，166.3mmol)，然后添加硫酸铜(II)(40g，250.6mmol)。将淡蓝色混合物在该温度下在氮气下搅拌24小时。最后，混合物变成浅蓝色。将固体经短硅胶床过滤并用二氯甲烷洗涤。将滤液在减压下浓缩。在真空下进一步干燥后，得到呈浅黄色油的期望的(NE)-2-甲基-N-(3-甲基丁叉基)丙烷-2-亚磺酰胺(11.64g，74％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ7.93(t,J＝5.0Hz,1H),2.48-2.34(m,2H),2.10-1.97(m,1H),1.12(s,9H),0.94(d,J＝4.2Hz,3H),0.93(d,J＝4.2Hz,3H).ESI-MS m/z计算值189.11873，实验值190.1(M+1)+；保留时间：1.42分钟；LC方法A。
步骤2：叔丁基-(2-呋喃氧基)-二甲基-硅烷
在0-4℃(冰浴)下在氮气下，向2H-呋喃-5-酮(8g，95.15mmol)于无水二氯甲烷(125mL)中的搅拌的溶液中添加三乙胺(33mL，236.8mmol)。然后在10分钟内缓慢添加[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]三氟甲磺酸酯(30mL，130.6mmol)。在5分钟之后，将水浴去除，并使反应温热至环境温度并将茶色溶液继续剧烈搅拌14小时(过夜)。将反应混合物用水(60mL)淬灭。将相分离，并且将有机相经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过短硅胶塞以去除基线物质，得到呈橙色油的叔丁基-(2-呋喃氧基)-二甲基-硅烷(17.12g，91％)。1HNMR(400MHz,DMSO)δ6.79(dd,J＝2.2,1.1Hz,1H),6.06(dd,J＝3.2,2.2Hz,1H),5.00(dd,J＝3.2,1.1Hz,1H),0.71(s,9H),0.00(s,6H).ESI-MS m/z计算值198.1076，实验值199.1(M+1)+；保留时间：0.29分钟；LC方法A。
步骤3：(S)-2-甲基-N-[(1R)-3-甲基-1-[(2S)-5-氧代-2H-呋喃-2-基]丁基]丙烷-2-亚磺酰胺
在-78℃下在氮气下，在30分钟内向叔丁基-(2-呋喃氧基)-二甲基-硅烷(17.50g，88.23mmol)和(NE)-2-甲基-N-(3-甲基丁叉基)丙烷-2-亚磺酰胺(11.0g，58.10mmol)于无水二氯甲烷(150mL)中的溶液中滴加三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(11mL，60.88mmol)。在该温度下搅拌2小时之后，将反应通过添加饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)淬灭并使其缓慢温热至约5℃。将混合物用二氯甲烷(3×50mL)萃取。将合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，得到油状残余物，将所述油状残余物通过硅胶快速色谱法(3×330g硅胶柱，30分钟内40-60％乙酸乙酯/己烷，峰出现在50％乙酸乙酯附近)纯化，得到纯级分和另一不纯级分。将峰的前端(级分A)丢弃。保持这两种级分是分离的。不纯级分具有不期望的顺式非对映异构体，尽管数量很少。不纯级分(B)(两种非对映异构体的混合物)：(S)-2-甲基-N-[(1R)-3-甲基-1-[(2S)-5-氧代-2H-呋喃-2-基]丁基]丙烷-2-亚磺酰胺(5.61g，35％)，白色固体。ESI-MS m/z计算值273.13986，实验值274.2(M+1)+；保留时间：1.48分钟。相当纯的级分(C)：(S)-2甲基-N-[(1R)-3-甲基-1-[(2S)-5-氧代-2H--呋喃-2-基]丁基]丙烷-2-亚磺酰胺(5.07g，32％)，白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO)δ7.70(dd,J＝5.8,1.5Hz,1H),6.28(dd,J＝5.8,2.0Hz,1H),5.09(dt,J＝3.9,1.9Hz,1H),4.90(d,J＝8.2Hz,1H),3.46(ddt,J＝12.3,8.0,4.0Hz,1H),1.96-1.84(m,1H),1.59(ddd,J＝14.4,10.5,4.3Hz,1H),1.29(ddd,J＝13.7,9.8,3.8Hz,1H),1.06(s,9H),0.91(d,J＝6.7Hz,3H),0.87(d,J＝6.5Hz,3H).ESI-MS m/z计算值273.13986，实验值274.2(M+1)+；保留时间：1.48分钟；LC方法A(1-50％梯度)。
步骤4：(S)-2甲基-N-[(1R)-3-甲基-1-[(2S)-5-氧代四氢呋喃-2-基]丁基]丙烷-2-亚磺酰胺
反应1(来自不纯级分B)：向(S)-2-甲基-N-[(1R)-3-甲基-1-[(2S)-5-氧代-2H-呋喃-2-基]丁基]丙烷-2-亚磺酰胺(5.02g，18.36mmol)于乙酸乙酯(100mL)中的搅拌的溶液中喷射氮气5分钟。然后添加钯(3.00g，2.819mmol)并继续再喷射5分钟。使所得深色悬浮液在氢气(两个气球)下搅拌40小时。然后将气球去除，并将烧瓶用氮气喷射10分钟。将催化剂经硅藻土垫去除，并将滤饼用乙酸乙酯洗涤。将滤液在减压下浓缩并通过硅胶快速色谱法(20分钟内等度35％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到不纯内酯(S)-2-甲基-N-[(1R)-3-甲基-1-[(2S)-5-氧代四氢呋喃-2-基]丁基]丙烷-2-亚磺酰胺(1.55g，31％)(白色固体，ESI-MS m/z计算值275.15552，实验值276.2(M+1)+；保留时间：1.53分钟)以及呈白色固体的纯(S)-2-甲基-N-[(1R)-3-甲基-1-[(2S)-5-氧代四氢呋喃-2-基]丁基]丙烷-2-亚磺酰胺(3.12g，62％)。ESI-MS m/z计算值275.15552，实验值276.2(M+1)+；保留时间：1.51分钟。
反应2(来自纯级分C)：向(S)-2-甲基-N-[(1R)-3-甲基-1-[(2S)-5-氧代-2H-呋喃-2-基]丁基]丙烷-2-亚磺酰胺(5.02g，18.36mmol)于乙酸乙酯(100mL)中的搅拌的溶液中喷射氮气5分钟。然后添加钯(3.00g，2.819mmol)并继续再喷射5分钟。使所得深色悬浮液在氢气(两个气球)下搅拌40小时。然后将气球去除，并将烧瓶用氮气喷射10分钟。将催化剂经硅藻土垫去除，并将滤饼用乙酸乙酯洗涤。将滤液在减压下浓缩并通过硅胶快速色谱法(20分钟内等度35％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到呈白色固体的内酯(S)-2-甲基-N-[(1R)-3-甲基-1-[(2S)-5-氧代四氢呋喃-2-基]丁基]丙烷-2-亚磺酰胺(4.72g，93％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ4.98(d,J＝8.0Hz,1H),4.39(td,J＝7.5,4.7Hz,1H),3.37-3.30(m,1H),2.49-2.45(m,1H),2.38(ddd,J＝17.7,9.7,4.8Hz,1H),2.16-2.00(m,2H),1.94-1.80(m,1H),1.47(ddd,J＝14.3,10.1,4.4Hz,1H),1.20(ddd,J＝13.8,9.7,4.0Hz,1H),1.10(s,9H),0.90(d,J＝6.7Hz,3H),0.87(d,J＝6.5Hz,3H).ESI-MS m/z计算值275.15552，实验值276.2(M+1)+；保留时间：1.53分钟；LC方法A(1-50％梯度)。
步骤5：(5S,6R)-5-羟基-6-异丁基-哌啶-2-酮
在环境温度下在氮气下，向(S)-2-甲基-N-[(1R)-3-甲基-1-[(2S)-5-氧代四氢呋喃-2-基]丁基]丙烷-2-亚磺酰胺(7.89g，28.65mmol)于无水甲醇(300mL)(mmol HCl与MeOH＝1:1)中的搅拌的溶液中添加氯化氢(4M于二噁烷中)(4M的72mL，288.0mmol)。使浅黄色溶液在该温度下搅拌1.5小时。将挥发物在减压下去除，得到呈褐色胶的粗(5S)-5-[(1R)-1-氨基-3-甲基-丁基]四氢呋喃-2-酮(盐酸盐)(5.990g，101％)；ESI-MS m/z计算值171.12593，实验值172.1(M+1)+；保留时间：0.46分钟)。将上述胶溶于无水甲醇(150mL)中并在0-4℃(冰水浴)下添加三乙胺(40mL，287.0mmol)。将浴去除并且使反应温热至室温。在该温度下搅拌15小时(过夜)之后，将挥发物在减压下去除。将残余物溶于二氯甲烷(25mL)中并经硅藻土垫过滤(去除三乙胺-HCl盐)。将滤液浓缩并通过快速色谱法(2×330g硅胶柱，35分钟内0-15％甲醇/二氯甲烷，期望的峰(通过ELSD监测)出现在8％甲醇附近)纯化，得到呈白色固体的(5S,6R)-5-羟基-6-异丁基-哌啶-2-酮(3.45g，70％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ7.26(s,1H),4.92(d,J＝4.0Hz,1H),3.56-3.46(m,1H),3.11(dtd,J＝7.7,4.8,2.5Hz,1H),2.22(ddd,J＝17.5,8.5,6.6Hz,1H),2.05(dt,J＝17.5,6.3Hz,1H),1.86-1.71(m,2H),1.64(dq,J＝13.1,6.5Hz,1H),1.31(ddd,J＝13.6,8.5,5.1Hz,1H),1.22(ddd,J＝13.7,8.2,5.8Hz,1H),0.87(d,J＝6.6Hz,3H),0.84(d,J＝6.6Hz,3H).ESI-MS m/z计算值171.12593，实验值172.2(M+1)+；保留时间：0.84分钟；LC方法A(1-50％梯度)。
步骤6：(5S,6R)-5-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-6-异丁基-哌啶-2-酮
按照该顺序在环境温度下，向(5S,6R)-5-羟基-6-异丁基-哌啶-2-酮(4g，23.36mmol)于无水N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的搅拌的溶液中添加叔丁基-氯-二甲基-硅烷(4.27g，28.33mmol)和咪唑(4.79g，70.36mmol)。将所得澄清溶液在该温度下搅拌15小时(过夜)。向澄清反应中添加水和盐水(1:1，40mL)并用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机物用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。对透明树胶进行快速色谱法(220g，硅胶柱，30分钟运行)，得到呈澄清油的期望的(5S,6R)-5-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-6-异丁基-哌啶-2-酮(5.39g，81％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.65(s,1H),3.58(ddd,J＝7.8,5.1,3.0Hz,1H),3.23-3.12(m,1H),2.47(ddd,J＝17.8,7.6,6.3Hz,1H),2.32-2.14(m,1H),1.89-1.79(m,1H),1.77-1.66(m,1H),1.65-1.50(m,1H),1.36(ddd,J＝13.5,9.5,4.0Hz,1H),1.20(ddd,J＝14.0,9.6,5.0Hz,1H),0.87(d,J＝6.5Hz,3H),0.83(d,J＝6.5Hz,3H),0.81(s,9H),0.00(s,6H).ESI-MS m/z计算值285.2124，实验值286.3(M+1)+；保留时间：1.91分钟；LC方法A。
步骤7：(2R,3S)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-2-异丁基-6-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯
在0-4℃(冰水)下在氮气下，向(5S,6R)-5-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-6-异丁基-哌啶-2-酮(2.32g，8.126mmol)于无水四氢呋喃(40mL)中的搅拌的溶液中添加叔丁氧羰基叔丁基碳酸酯(3.50g，16.04mmol)，随后添加DMAP(1.00g，8.185mmol)。将浴去除并使反应温热至环境温度并搅拌过夜(16小时)。将混合物在减压下浓缩并将粗通过快速色谱法(120g硅胶柱，40分钟内10-65％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到呈无色凝胶的(2R,3S)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-2-异丁基-6-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.42g，77％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.21-4.14(m,1H),3.91(q,J＝3.1Hz,1H),2.63(ddd,J＝17.7,10.6,8.2Hz,1H),2.31(ddd,J＝17.5,7.7,2.3Hz,1H),1.97-1.86(m,1H),1.71-1.63(m,1H),1.55(ddd,J＝13.0,8.4,6.0Hz,1H),1.42(s,9H),1.35(ddd,J＝14.2,8.4,6.0Hz,1H),1.19(ddd,J＝14.1,8.6,5.9Hz,1H),0.87(d,J＝6.7Hz,3H),0.84(d,J＝6.6Hz,3H),0.78(s,9H),0.00(s,3H),-0.01(s,3H).ESI-MS m/z计算值385.26483，实验值286.4(M+1)+；保留时间：2.28分钟；LC方法A。
步骤8：(2R,3S)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-2-异丁基-6-(三氟甲基磺酰氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯
在-78℃下，向(2R,3S)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-2-异丁基-6-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.6g，6.7425mmol)于无水THF(50mL)中的溶液中滴加于THF中的1.0MLiHMDS(1M的8.5mL，8.5000mmol)。将反应在相同温度下搅拌0.5小时。将N-(5-氯-2-吡啶基)-1,1,1-三氟-N-(三氟甲基磺酰基)甲磺酰胺(3.312g，8.4343mmol)于无水THF(10mL)中的溶液滴加到反应混合物中。然后将反应在-40℃下搅拌1小时。将反应用饱和氯化铵(50mL)淬灭并且然后升温至室温。将水溶液用乙醚(3×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至15％乙醚/己烷纯化，得到呈澄清液体的(2R,3S)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-2-异丁基-6-(三氟甲基磺酰氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(3.19g，91％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ5.12–5.06(m,1H),4.46–4.34(m,1H),3.82–3.77(m,1H),2.31(dt,J＝18.9,4.0,4.0Hz,1H),2.14(dd,J＝19.1,4.2Hz,1H),1.76–1.66(m,1H),1.49(s,9H),1.46–1.40(m,1H),0.98(d,J＝6.3Hz,3H),0.91(d,J＝6.7Hz,3H),0.87(s,9H),0.85–0.79(m,1H),0.16–0.03(m,6H).ESI-MS m/z计算值517.2141，实验值无效(M+)+；462.0(M-55)+；保留时间：9.26分钟；LC方法S。
步骤9：(2R,3S)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-2-异丁基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯
向密封管中装入于无水二噁烷(50mL)中的(2R,3S)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-2-异丁基-6-(三氟甲基磺酰氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(3.19g，6.1622mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧硼杂环戊烷(2.35g，9.2542mmol)和碳酸钾(2.567g，18.574mmol)。将反应混合物用氩气吹扫1小时。将Pd(PPh3)2Cl2(433mg，0.6169mmol)和三苯基膦(328mg，1.2505mmol)添加到反应混合物中。将小瓶密封并在90℃下加热过夜。将反应冷却至室温。将固体通过硅藻土垫过滤去除并用乙醚(50mL)洗涤。将合并的滤液经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至15％乙醚/己烷纯化，得到呈白色固体的(2R,3S)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-2-异丁基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(1.69g，55％)。ESI-MS m/z计算值495.35513，实验值496.5(M+1)+；保留时间：5.02分钟；LC方法T。
步骤10：(2R,3S)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-2-异丁基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯
向密封管中装入(2R,3S)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-2-异丁基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(1.69g，3.4102mmol)、6-溴-N-环丁基-N-甲基-吡嗪-2-胺(1.25g，5.1628mmol)、氢氧化铯水合物(1.16g，6.9077mmol)。将反应用氩气吹扫30分钟。添加Pd(OAc)2(44mg，0.1960mmol)和三(4-氟苯基)膦(113mg，0.3573mmol)。将管密封。将反应在100℃下加热2小时。在冷却至室温之后，将反应用水(30mL)稀释。将两个层分离，并将水层用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至20％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈黄色凝胶的(2R,3S)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-2-异丁基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(1.55g，83％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ7.87(s,1H),7.82(s,1H),5.63–5.44(m,1H),4.93–4.70(m,1H),4.48(d,J＝8.5Hz,1H),4.01–3.83(m,1H),3.03(s,3H),2.45–2.33(m,1H),2.29–2.10(m,5H),2.10–1.97(m,1H),1.82–1.64(m,2H),1.50–1.35(m,2H),1.30–0.71(m,24H),0.23–0.05(m,6H).ESI-MS m/z计算值530.36523，实验值531.8(M+1)+；保留时间：4.69分钟；LC方法T。
步骤11：(2R,3S)-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-2-异丁基-哌啶-3-醇，异构体1
向反应烧瓶中装入(2R,3S)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-2-异丁基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(401mg，0.7313mmol)和于二噁烷中的4N HCl(4M的8mL，32.000mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。将所有挥发物在真空下去除，得到呈橙色凝胶的粗(2R,3S)-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-2-异丁基-1,2,3,4-四氢吡啶-3-醇(盐酸盐)。ESI-MS m/z计算值316.2263，实验值317.3(M+1)+；保留时间：2.06分钟。将粗物质溶解于无水THF(10mL)中。在室温下将三乙胺(159.72mg，0.22mL，1.5784mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(640mg，3.0197mmol)添加到反应混合物中。将反应在室温下搅拌1.5小时。将反应用2N碳酸钠(20mL)和乙酸乙酯(20mL)稀释。将两个层分离，并将水层用乙酸乙酯(4×20mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至6％甲醇/DCM(用0.3％氢氧化铵缓冲)纯化，得到呈黄色凝胶的(2R,3S)-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-2-异丁基-哌啶-3-醇，异构体1(212mg，91％)。ESI-MS m/z计算值318.242，实验值319.3(M+1)+；保留时间：1.69分钟。ESI-MS m/z计算值316.22632，实验值317.3(M+1)+；保留时间：2.06分钟；LC方法T。
步骤12：N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-[(2R,3S)-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-3-羟基-2-异丁基-哌啶-1-羰基]苯磺酰胺，异构体1
向3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(270mg，0.6461mmol)于无水DCM(4mL)中的溶液中添加亚硫酰氯(6.5240g，4mL，54.837mmol)。将反应在45℃下搅拌2天。将挥发物在真空下去除，得到呈类白色泡沫的酸氯化物。将粗酸氯化物溶解于无水DCM(4mL)中。在0℃下将所述粗酸氯化物滴加到(2R,3S)-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-2-异丁基-哌啶-3-醇，异构体1(162mg，0.5087mmol)和三乙胺(159.72mg，0.22mL，1.5784mmol)于无水DCM(4mL)中的溶液中。将反应在室温下搅拌2小时。将反应用10％柠檬酸(30mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至50％丙酮/己烷纯化，得到呈黄色凝胶的N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-[(2R,3S)-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-3-羟基-2-异丁基-哌啶-1-羰基]苯磺酰胺，异构体1(133mg，33％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.52–8.35(m,1H),8.21(d,J＝7.8Hz,1H),8.17–8.06(m,1H),7.99–7.85(m,1H),7.80(d,J＝8.4Hz,1H),7.53–7.34(m,1H),7.23–7.14(m,1H),7.10–7.00(m,2H),6.87–6.76(m,1H),6.08(s,1H),5.00–4.75(m,1H),4.70–4.52(m,1H),3.99–3.81(m,1H),3.72(s,1H),3.10–2.84(m,3H),2.49–2.39(m,1H),2.16(s,6H),1.98–1.90(m,2H),1.83–1.62(m,4H),1.22–1.12(m,1H),1.00–0.82(m,2H),0.72(s,1H),0.67–0.56(m,1H),0.56–0.45(m,1H),0.40–0.03(m,6H).ESI-MS m/z计算值717.2864，实验值718.4(M+1)+；保留时间：3.5分钟；LC方法T。
步骤13：(3S,22R)-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-18-(2,6-二甲基苯基)-22-异丁基-14,14-二氧代-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(19),9,11,13(21),16(20),17-六烯-8-酮，异构体1(化合物410)
在0℃下向N-[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]-3-[(2R,3S)-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-3-羟基-2-异丁基-哌啶-1-羰基]苯磺酰胺(133mg，0.1852mmol)于无水DMF(8.6mL)中的溶液中添加NaH(76mg，60％w/w，1.9002mmol)。将反应在室温下搅拌24小时。将反应用10％柠檬酸(水溶液)(10mL)稀释并用乙酸乙酯(5×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至100％乙酸乙酯/己烷纯化。将正确的级分合并并在真空下浓缩。将残余物用反相制备型HPLC使用0至100％乙腈-水(用0.1％ TFA缓冲)再次纯化，得到呈黄色固体的(3S,22R)-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-18-(2,6-二甲基苯基)-22-异丁基-14,14-二氧代-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(19),9,11,13(21),16(20),17-六烯-8-酮(5.9mg，4％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.95(t,J＝1.8Hz,1H),8.13(s,1H),7.93(s,1H),7.76(d,J＝7.9Hz,1H),7.60(d,J＝7.6Hz,1H),7.50(t,J＝7.8Hz,1H),7.22(t,J＝7.6,7.6Hz,1H),7.06(d,J＝7.8Hz,2H),6.45(s,1H),6.08–5.95(m,1H),4.63(p,J＝8.8,8.8,7.9,7.9Hz,1H),4.15(s,1H),3.56(dd,J＝9.1,5.9Hz,1H),3.08(s,3H),2.71–2.55(m,1H),2.51–2.37(m,2H),2.35–2.26(m,2H),2.26–2.14(m,3H),1.95(s,5H),1.85–1.71(m,2H),1.02–0.91(m,1H),0.91–0.80(m,2H),0.40(d,J＝6.5Hz,3H),-0.08(d,J＝6.5Hz,3H).ESI-MS m/z计算值681.30975，实验值682.6(M+1)+；保留时间：2.77分钟；LC方法W。
实例157：化合物411的制备
步骤1：(2R,3S)-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-2-异丁基-哌啶-3-醇，异构体1和异构体2
在0℃下，向(2R,3S)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-2-异丁基-3,4-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(651mg，1.1872mmol)于无水DCM(10mL)中的溶液中添加TFA(8.8800g，6mL，77.879mmol)。将反应温度缓慢升至室温并搅拌90分钟。将挥发物在真空下去除，得到呈红色凝胶的6-[(2R,3S)-3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧-2-异丁基-1,2,3,4-四氢吡啶-6-基]-N-环丁基-N-甲基-吡嗪-2-胺(三氟乙酸盐)ESI-MS m/z计算值430.3128，实验值431.5(M+1)+；保留时间：3.48分钟和(2R,3S)-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-2-异丁基-1,2,3,4-四氢吡啶-3-醇(三氟乙酸盐)ESI-MS m/z计算值316.2263，实验值317.3(M+1)+；保留时间：2.09分钟的混合物。将粗物质溶解于甲醇(10mL)中。在0℃下将硼氢化钠(269mg，7.1103mmol)添加到反应混合物中。将反应在相同温度下搅拌10分钟。在0℃下将反应用浓HCl(12M的0.1mL，1.2000mmol)淬灭。将反应在室温下搅拌过夜。将另一部分浓缩的HCl(12M的1mL，12.000mmol)添加到反应混合物中。将反应在室温下再搅拌24小时。将反应用2N碳酸钠水溶液(20mL)稀释。将挥发物在真空下去除。将水溶液用乙酸乙酯(5×20mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用0至8％甲醇/DCM(用0.3％氢氧化铵缓冲)纯化，得到都呈黄色凝胶的以下两个非对映异构体：异构体1：(2R,3S)-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-2-异丁基-哌啶-3-醇(146mg，37％)ESI-MS m/z计算值318.242，实验值319.1(M+1)+；保留时间：1.78分钟；以及异构体2：(2R,3S)-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-2-异丁基-哌啶-3-醇(121mg，32％)，ESI-MS m/z计算值318.242，实验值319.1(M+1)+；保留时间：1.88分钟，1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ7.86(s,1H),7.84(s,1H),4.73–4.45(m,1H),4.00–3.83(m,1H),3.67–3.44(m,1H),3.03(s,3H),2.95–2.85(m,1H),2.78(s,2H),2.32–2.21(m,2H),2.21–2.13(m,2H),2.13–2.02(m,1H),1.96–1.80(m,2H),1.80–1.65(m,4H),1.64–1.51(m,1H),1.43–1.30(m,1H),0.96(d,J＝6.7Hz,3H),0.87(d,J＝6.8Hz,3H).LC方法T。
步骤2：(3S,22R)-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-18-(2,6-二甲基苯基)-22-异丁基-14,14-二氧代-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(19),9,11,13(21),16(20),17-六烯-8-酮，异构体2(化合物411)
向反应小瓶中装入于无水THF(2.5mL)中的(2R,3S)-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-2-异丁基-哌啶-3-醇，异构体2(107mg，0.3326mmol)和3-[[4-氯-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(157mg，0.3757mmol)。在室温下将叔丁醇钠(224mg，2.3308mmol)添加到反应混合物中。将反应在室温下搅拌1小时。将反应用1N HCl(10mL)淬灭并用乙酸乙酯(5×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，得到呈黄色固体的3-[[4-[[(2R,3S)-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-2-异丁基-3-哌啶基]氧基]-6-(2,6-二甲基苯基)嘧啶-2-基]氨磺酰基]苯甲酸(盐酸盐)。ESI-MS m/z计算值699.3203，实验值700.6(M+1)+；保留时间：2.55分钟。将粗物质溶解于无水DMF(20mL)中。将CDMT(177mg，1.0081mmol)和NMM(202.40mg，0.22mL，2.0010mmol)添加到反应混合物中。将反应在室温下搅拌2天。将反应用10％柠檬酸(水溶液)(30mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×30mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法使用30至80％乙酸乙酯/己烷纯化。将正确的级分合并并在真空下浓缩。将残余物通过反相HPLC使用0至100％乙腈/水(用0.1％ TFA缓冲)进一步纯化，得到呈黄色固体的(3S,22R)-6-[6-[环丁基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]-18-(2,6-二甲基苯基)-22-异丁基-14,14-二氧代-2-氧杂-14λ6-硫杂-7,15,17,20-四氮杂四环[14.3.1.13,7.19,13]二十二碳-1(19),9,11,13(21),16(20),17-六烯-8-酮(71.6mg，31％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.52(s,1H),8.04(s,1H),7.94–7.88(m,2H),7.71(d,J＝6.7Hz,1H),7.66(t,J＝7.6Hz,1H),7.23(t,J＝7.6Hz,1H),7.10(d,J＝8.1Hz,2H),6.33(s,1H),6.00–5.90(m,2H),4.70(m,1H),3.22–3.17(m,1H),3.02(s,3H),2.73–2.66(m,1H),2.36–2.22(m,3H),2.24–2.11(m,6H),1.95(s,6H),1.73–1.60(m,2H),1.08–0.97(m,1H),0.15(d,J＝6.7Hz,3H),0.01(d,J＝6.5Hz,3H).ESI-MS m/z计算值681.30975，实验值682.6(M+1)+；保留时间：2.89分钟；LC方法W。
VIII.化合物386-426的表征
表22和表23中的化合物通过本文所公开的程序制备，或者通过与本文所公开的程序类似的程序制备，并且分析数据与报道的结构一致。
表22：新化合物的LCMS数据
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表23：新化合物的NMR数据
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IX.化合物386-426的生物活性数据
A.HBE测定
1.CFTR介导的短路电流的尤斯室测定
使用衍生自CF受试者的FF508del和最小功能CFTR突变(F508del/MF-HBE)杂合的人支气管上皮(HBE)细胞进行尤斯室实验，并且如先前所述(Neuberger T,Burton B,ClarkH,Van Goor F Methods Mol Biol2011:741:39-54)进行培养。在四天之后，移除顶端培养基，并且在使用前在空气液体界面生长细胞>14天。这导致产生有纤毛的完全分化的柱状细胞的单层，该细胞的特征是人支气管气道上皮的特征。
为了分离CFTR介导的短路(ISC)电流，将SnapwellTM细胞培养插入物上生长的F508del/MF-HBE安装在尤斯室中，并且在电压钳记录条件(V保持＝0mV)下在37℃下测量跨上皮ISC。基底外侧溶液含有(以mM计)145NaCl、0.83K2HPO4、3.3KH2PO4、1.2MgCl2、1.2CaCl2、10葡萄糖、10HEPES(pH用NaOH调节至7.4)，并且顶端溶液含有(以mM计)145葡糖酸钠、1.2MgCl2、1.2CaCl2、10葡萄糖、10HEPES(pH用NaOH调节至7.4)和30μM阿米洛利以阻断上皮钠通道。将毛喉素(20μM)添加到顶端表面以活化CFTR，随后顶端添加由BPO、GlyH-101和CFTR抑制剂172(各自在20μM最终测定浓度下)组成的CFTR抑制剂混合物以特异性分离CFTR电流。根据抑制后对稳态电流的佛司可林峰响应确定每种条件下的CFTR介导的ISC(μA/cm2)。
2.校正剂化合物的鉴定
如上文所描述的，CFTR校正剂化合物对CFTR介导的ISC的活性在尤斯室研究中确定。将F508del/MF-HBE细胞培养物与一定浓度范围的校正剂化合物和1μM依伐卡托组合温育，或者与单一固定浓度的10μM校正剂化合物和1μM依伐卡托在37℃和20％人血清存在的情况下组合温育18-24小时。在18-24小时温育期间，具有1μM依伐卡托的校正剂化合物的浓度在CFTR介导的ISC的整个尤斯室测量中保持恒定，以确保化合物在整个实验中存在。将推定的F508del校正剂的功效和效力与已知的Vertex校正剂(14S)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1H-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ6-硫杂-3,9,11,18,23-五氮杂四环[17.3.1.111,14.05,10]二十四碳-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮与18μM替扎卡托和1μM依伐卡托组合进行比较。
B.HBE2测定
1.CFTR介导的短路电流的尤斯室测定
使用衍生自CF受试者的FF508del和最小功能CFTR突变(F508del/MF-HBE)杂合的人支气管上皮(HBE)细胞进行尤斯室实验，并且如先前所述(Neuberger T,Burton B,ClarkH,Van Goor F Methods Mol Biol2011:741:39-54)进行培养。在四天之后，移除顶端培养基，并且在使用前在空气液体界面生长细胞>14天。这导致产生有纤毛的完全分化的柱状细胞的单层，该细胞的特征是人支气管气道上皮的特征。
为了分离CFTR介导的短路(ISC)电流，将SnapwellTM细胞培养插入物上生长的F508del/MF-HBE安装在尤斯室中，并且在电压钳记录条件(V保持＝0mV)下在37℃下测量跨上皮ISC。基底外侧溶液含有(以mM计)145NaCl、0.83K2HPO4、3.3KH2PO4、1.2MgCl2、1.2CaCl2、10葡萄糖、10HEPES(pH用NaOH调节至7.4)，并且顶端溶液含有(以mM计)145葡糖酸钠、1.2MgCl2、1.2CaCl2、10葡萄糖、10HEPES(pH用NaOH调节至7.4)和30μM阿米洛利以阻断上皮钠通道。将毛喉素(20μM)添加到顶端表面以活化CFTR，随后顶端添加由BPO、GlyH-101和CFTR抑制剂172(各自在20μM最终测定浓度下)组成的CFTR抑制剂混合物以特异性分离CFTR电流。根据抑制后对稳态电流的佛司可林峰响应确定每种条件下的CFTR介导的ISC(μA/cm2)。
2.校正剂化合物的鉴定
如上文所描述的，CFTR校正剂化合物对CFTR介导的ISC的活性在尤斯室研究中确定。将F508del/MF-HBE细胞培养物与一定浓度范围的校正剂化合物和44nM(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇组合温育，或者与单一固定浓度的1或3μM校正剂化合物和44nM(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇在37℃和20％人血清存在的情况下组合温育18-24小时。在18-24小时温育期间，具有44nM(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇的校正剂化合物的浓度在CFTR介导的ISC的整个尤斯室测量中保持恒定，以确保化合物在整个实验中存在。将推定的F508del校正剂的功效和效力与已知的Vertex校正剂(14S)-8-[3-(2-{二螺[2.0.2.1]庚-7-基}乙氧基)-1H-吡唑-1-基]-12,12-二甲基-2λ6-硫杂-3,9,11,18,23-五氮杂四环[17.3.1.111,14.05,10]二十四碳-1(22),5,7,9,19(23),20-六烯-2,2,4-三酮与18μM替扎卡托和1μM依伐卡托组合进行比较。
C.生物活性数据表
表24表示使用本文所公开的测定中的一种或多种产生的本发明的代表性化合物的CFTR调节活性(EC50：+++为<1μM；++为1-<3μM；+为3-<30μM；并且ND为“在该测定中未检测到。”活性％：+++为>60％；++为30-60％；+为<30％)。
表24.化合物386-426的生物活性数据
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VIII.(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇的合成
A.一般方法
除非另有说明，否则通过商业来源获得试剂和起始材料，并且在不纯化的情况下使用。
在分别以400MHz和100MHz的1H和13C共振频率操作的Bruker Biospin DRX 400MHzFTNMR光谱仪上或在300MHz NMR光谱仪上获得质子和碳NMR光谱。使用broadband observe(BBFO)探针，在20Hz样品旋转下，分别以0.1834和0.9083Hz/Pt数字分辨率获取一维质子和碳谱。使用标准、先前公布的脉冲序列和常规处理参数，在30℃的温度控制下获取所有质子和碳谱。
NMR(1D和2D)光谱也记录于分别在400MHz和100MHz下操作的配备有5mm多核Iprobe的Bruker AVNEO 400MHz光谱仪上。
还在Varian Mercury NMR仪器上使用45度脉冲角度、4800Hz谱宽和28860个采集点，在300MHz下记录1H NMR光谱。将FID零填充至32k个点，并且在傅立叶变换之前应用0.3Hz谱线增宽。使用30度脉冲角度、100kHz谱宽和59202个采集点在282MHz下记录19F NMR光谱。将FID零填充至64k个点，并且在傅立叶变换之前应用0.5Hz谱线增宽。
还在Bruker Avance III HD NMR仪器上使用30度脉冲角、8000Hz的光谱宽度和128k采集点，在400MHz下记录1H NMR光谱。将FID零填充至256k个点，并且在傅立叶变换之前应用0.3Hz谱线增宽。使用30度脉冲角度、89286Hz谱宽和128k个采集点在377MHz下记录19F NMR光谱。将FID零填充至256k个点，并且在傅立叶变换之前应用0.3Hz谱线增宽。
NMR谱也记录在配备有：5mm QNP(H1/C13/F19/P31)探针(类型：250-SB，s#23055/0020)的Bruker AC 250MHz仪器上或配备有ID PFG，5mm，50-202/500Mhz探针(型号/部件编号99337300)的Varian 500Mhz仪器上。
除非以下实例有相反指示，否则化合物的最终纯度通过反相UPLC使用Waters制造的Acquity UPLC BEH C18柱(50×2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在3.0分钟内从1％-99％流动相B运行的双梯度来确定。流动相A＝H2O(0.05％ CF3CO2H)。流动相B＝CH3CN(0.035％ CF3CO2H)。流速＝1.2mL/min，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。通过平均两个UV迹线(220nm、254nm)的曲线下面积(AUC)来计算最终纯度。低分辨率质谱报道为使用配备有电喷雾电离(ESI)源的单四极杆质谱仪获得的[M+1]+物质，该ESI源能够在整个检测范围内实现0.1Da的质量准确度和1000的最小分辨率(分辨率无单位)。
在配备有Bruker-Biospin 4mm HFX探针的Bruker-Biospin 400MHz宽孔光谱仪上记录固态NMR(SSNMR)谱。将样品装填至4mm ZrO2转子中并在魔角旋转(MAS)条件下以通常设定为12.5kHz的旋转速度旋转。使用1H MAS T1饱和恢复弛豫实验测量质子弛豫时间以设定13C交叉极化(CP)MAS实验的适当循环延迟。使用19F MAS T1饱和恢复弛豫实验测量氟弛豫时间以设定19F MAS实验的适当循环延迟。将碳CPMAS实验的CP接触时间设定为2ms。采用具有线性斜坡(50％至100％)的CP质子脉冲。在外部参照样品(甘氨酸)上使碳Hartmann-Hahn匹配优化。使用TPPM15去耦序列在大约100kHz的场强下利用质子去耦记录碳和氟谱两者。
B.中间体的合成的程序
中间体1：3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯的制备
步骤1：3-(二苯甲基亚基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
将3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(47.3g,197.43mmol)、二苯甲酮亚胺(47g,259.33mmol)、Xantphos(9.07g,15.675mmol)和碳酸铯(131g,402.06mmol)在二噁烷(800mL)中的混合物用鼓泡氮气脱气30分钟。添加Pd(OAc)2(3.52g,15.679mmol)并且用氮气吹扫系统三次。将反应混合物在100℃下加热18小时。将反应冷却到室温，并在垫上过滤。用EtOAc洗涤滤饼，并将溶剂减压蒸发，得到呈黄色固体的3-(二苯甲基亚基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(90g,84％)。ESI-MS m/z计算值384.10855，实验值385.1(M+1)+；保留时间：2.24分钟。LCMS方法：Kinetex C18 4.6×50mm 2.6μM，2.0毫升/分钟，95％ H2O(0.1％甲酸)+5％乙腈(0.1％甲酸)至95％乙腈(0.1％甲酸)梯度(2.0分钟)，然后在95％乙腈(0.1％甲酸)下保持1.0分钟。
步骤2：3-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
向3-(二苯甲基亚基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(65g,124.30mmol)在甲醇(200mL)中的悬浮液中添加HCl(3M，于甲醇中)(146mL,3M,438.00mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1.5小时，然后在减压下除去溶剂。将残余物溶于乙酸乙酯(2L)和二氯甲烷(500mL)中。将有机相用5％碳酸氢钠水溶液(3×500mL)和盐水(2×500mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并将溶剂在减压下去除。将残余物用庚烷(2×50mL)研磨，并丢弃母液。将获得的固体用二氯甲烷和庚烷(1:1，40mL)的混合物研磨并过滤，得到呈黄色固体的3-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(25.25g,91％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.24(s,1H),7.28(s,1H),5.98(br.s,2H),4.00(s,3H)ppm.19F NMR(282MHz,CDCl3)δ-63.23(s,3F)ppm.ESI-MS m/z计算值220.046，实验值221.1(M+1)+；保留时间：1.62分钟。LCMS方法：KinetexPolar C18 3.0X 50mm 2.6μm,3min,5％-95％乙腈/H2O(0.1％甲酸)1.2mL/min。
步骤3：3-氨基-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯
在0℃下向3-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(18.75g,80.91mmol)在乙腈(300mL)中的溶液中按份添加N-溴代琥珀酰亚胺(18.7g,105.3mmol)。将混合物在25℃下搅拌过夜。添加乙酸乙酯(1000mL)。将有机层用10％硫代硫酸钠溶液(3×200mL)洗涤，用乙酸乙酯(2×200mL)反萃取。将合并的有机提取物用饱和碳酸氢钠溶液(3×200mL)、盐水(200mL)洗涤，经硫酸钠干燥并在真空下浓缩，得到3-氨基-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(25.46g，98％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.93-4.03(m,3H),6.01(br.s.,2H),7.37(s,1H)ppm.19F NMR(282MHz,CDCl3)ppm-64.2(s,3F).ESI-MS m/z计算值297.9565，实验值299.0(M+1)+；保留时间：2.55分钟。LCMS方法：Kinetex C18 4.6×50mm 2.6μM。温度：45℃，流速：2.0毫升/分钟，运行时间：6分钟。流动相：初始95％ H2O(0.1％甲酸)和5％乙腈(0.1％甲酸)，线性梯度至95％乙腈(0.1％甲酸)持续4.0分钟，然后在95％乙腈(0.1％甲酸)下保持2.0分钟。
步骤4：3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-羧酸甲酯
将3-氨基-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(5g,15.549mmol)、(Boc)2O(11g,11.579mL,50.402mmol)、DMAP(310mg,2.5375mmol)和CH2Cl2(150mL)的混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物减压浓缩，并通过硅胶色谱法(0-15％乙酸乙酯/庚烷)纯化，得到呈浅黄色固体的3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(6.73g，87％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.42(s,18H),3.96(s,3H),7.85(s,1H)ppm.19F NMR(282MHz,CDCl3)δ-63.9(s,3F)ppm.ESI-MS m/z计算值498.06134，保留时间：2.34分钟。LCMS方法：Kinetex C18 4.6×50mm 2.6μM。温度：45℃，流速：2.0毫升/分钟，运行时间：3分钟。流动相：初始95％ H2O(0.1％甲酸)和5％乙腈(0.1％甲酸)，线性梯度至95％乙腈(0.1％甲酸)持续2.0分钟，然后在95％乙腈(0.1％甲酸)下保持1.0分钟。
中间体2：6-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸的制备步骤1：6-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸
向3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-6-溴-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸甲酯(247g,494.7mmol)在THF(1.0L)中的混合物中添加LiOH(47.2g,1.971mol)在水(500mL)中的溶液。将混合物在环境温度下搅拌18小时，得到黄色浆液。将混合物用冰浴冷却，并且用HCl(1000mL,2M,2.000mol)缓慢酸化，保持反应温度<15℃。将混合物用庚烷(1.5L)稀释，混合并分离有机相。将水相用庚烷(500mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗油溶解于庚烷(600mL)中，接种并在环境温度下搅拌18小时，得到稠密浆液。将浆液用冷庚烷(500mL)稀释，并且使用中等玻璃料收集沉淀。将滤饼用冷庚烷洗涤并空气干燥1小时，然后在45℃下真空洗涤48小时，得到6-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(158.3g，83％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.38(s,1H),9.01(s,1H),1.50(s,9H)ppm.ESI-MS m/z计算值383.99326，实验值384.9(M+1)+；保留时间：2.55分钟。LCMS方法详情：最终纯度通过反相UPLC使用Waters制造的Acquity UPLC BEH C18柱(50×2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相B运行的双梯度来确定。流动相A＝H2O(0.05％CF3CO2H)。流动相B＝乙腈(0.035％ CF3CO2H)。流速＝1.2mL/min，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
中间体3：2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸的制备
步骤1：2-羟基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯
在-78℃下历经1.5小时时段向3,3,3-三氟-2-氧代-丙酸乙酯(25.15g，147.87mmol)在Et2O(270mL)中的溶液中滴加在THF(190mL，0.817M，155.23mmol)中的溴(丁-3-烯基)镁(内温-72℃至-76℃)。将混合物在-78℃下搅拌20分钟。将干冰-丙酮浴去除。在1小时内将混合物缓慢温热至5℃，添加到1N HCl水溶液(170mL)和碎冰(150g)的混合物(pH＝4)中。分离两层。将有机层浓缩，并将残余物与水相合并并用EtOAc(2x 150mL)萃取。将合并的有机相用5％ NaHCO3水溶液(50mL)和盐水(20mL)洗涤并用Na2SO4干燥。将混合物过滤并浓缩，并与THF(2×40mL)共蒸发，得到呈无色油的2-羟基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯(37.44g，96％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ5.77(ddt,J＝17.0,10.4,6.4Hz,1H),5.15-4.93(m,2H),4.49-4.28(m,2H),3.88(s,1H),2.35-2.19(m,1H),2.17-1.89(m,3H),1.34(t,J＝7.0Hz,3H)ppm.19F NMR(282MHz,CDCl3)δ-78.74(s,3F)ppm.
步骤2：2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯
在0℃下向2-羟基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯(24.29g,87.6％纯度，94.070mmol)在DMF(120mL)中的溶液中按份添加NaH(在矿物油中为60％，5.64g,141.01mmol)。将混合物在0℃下搅拌10分钟。添加苄基溴(24.13g，141.08mmol)和TBAI(8.68g，23.500mmol)。混合物于室温搅拌过夜。添加NH4Cl(3g,0.6eq)。将混合物搅拌10分钟。添加30mL的EtOAc，然后添加冰水(400g)。混合物用CH2Cl2萃取，并将合并的有机层浓缩。通过硅胶色谱法(0-20％ CH2Cl2/庚烷)纯化，得到呈粉色油状物的2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯(26.05g,88％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.34(t,J＝7.2Hz,3H),2.00-2.19(m,3H),2.22-2.38(m,1H),4.33(q,J＝7.2Hz,2H),4.64(d,J＝10.6Hz,1H),4.84(d,J＝10.9Hz,1H),4.91-5.11(m,2H),5.62-5.90(m,1H),7.36(s,5H)ppm.19F NMR(282MHz,CDCl3)δ-70.5(s,3F)ppm.ESI-MS m/z计算值316.12863，实验值317.1(M+1)+；保留时间：2.47分钟。LCMS方法：Kinetex C18 4.6x 50mm 2.6μM。温度：45℃，流速：2.0毫升/分钟，运行时间：3分钟。流动相：初始95％ H2O(0.1％甲酸)和5％乙腈(0.1％甲酸)，线性梯度至95％乙腈(0.1％甲酸)持续2.0分钟，然后在95％乙腈(0.1％甲酸)下保持1.0分钟。
步骤3：2-苄氧基-2(三氟甲基)己-5-烯酸
将氢氧化钠(7.86g,196.51mmol)在水(60mL)中的溶液添加到2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸乙酯(24.86g,78.593mmol)在甲醇(210mL)中的溶液中。将反应在50℃下加热过夜。将反应浓缩以去除甲醇，用水(150mL)稀释，并将羧酸钠盐用庚烷(1×100mL)洗涤。用HCl的3N水溶液将水溶液酸化至pH＝2。将羧酸用二氯甲烷(3×100mL)萃取并经硫酸钠干燥。将溶液过滤并浓缩，得到呈淡黄色油状物的2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸(22.57g,97％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ14.31(br.s.,1H),7.55-7.20(m,5H),5.93-5.70(m,1H),5.17-4.91(m,2H),4.85-4.68(m,1H),4.67-4.55(m,1H),2.32-1.94(m,4H)ppm.19FNMR(282MHz,DMSO-d6)δ-70.29(s,3F)ppm.ESI-MS m/z计算值288.09732，实验值287.1(M-1)；保留时间：3.1分钟。LCMS方法：Kinetex Polar C18 3.0X 50mm 2.6μm,6min,5％-95％乙腈/H2O(0.1％甲酸)1.2mL/min。
中间体4：(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸的制备
步骤1：(2R)-2苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸；(R)-4-喹啉基-[(2S,4S)-5-乙烯基奎宁环-2-基]甲醇
向设置为20℃的N2经吹扫的带夹套反应器中添加乙酸异丙酯(IPAC,100L,0.173M,20Vols)，随后添加先前熔化的用少量反应溶剂制成浆液的2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸(5.00kg,17.345mol)和辛可尼丁(2.553kg,8.67mol)。将反应器设定为在1小时内将内部温度升温到80℃，其中固体在加热到设定温度后进入溶液中，然后将溶液保持在该温度至少10分钟，然后冷却至70℃，保持，并且用手性盐(50g,1.0重量％)进行接种。将混合物搅拌10分钟，然后在4小时内降温到20℃内部温度，然后在20℃下保持过夜。将混合物过滤，滤饼用乙酸异丙酯(10.0L,2.0vols)洗涤，并在真空下干燥。然后将滤饼在真空(50℃，真空)中干燥，得到4.7kg的盐。通过用一部分乙酸异丙酯(94L,20vol，基于当前盐重量计)制成浆液，将所得固体盐返回到反应器中，并泵送到反应器中并搅拌。然后将混合物加热到内部80℃，将热浆料搅拌至少10分钟，然后在4-6小时内降温至20℃，然后在20℃下搅拌过夜。然后将物质过滤并用乙酸异丙酯(9.4L，2.0vol)洗涤滤饼，拉干，将滤饼舀出并在真空(50℃，真空)中干燥，得到3.1kg的固体。将固体(3.1kg)和乙酸异丙酯(62L,20vol，基于盐固体重量计)浆化并添加到反应器中，在N2吹扫下搅拌并加热到80℃，并保持在该温度至少10分钟，然后在4-6小时内降温至20℃，然后搅拌过夜。将混合物过滤，滤饼用乙酸异丙酯(6.2L，2vol)洗涤，干，舀出并在真空(50℃，真空)中干燥，得到2.25kg的固体盐。将固体(2.25kg)和乙酸异丙酯(45L，20vol，基于盐固体重量计)浆化并添加到反应器中，在N2吹扫下搅拌并加热到80℃，保持在该温度至少10分钟，然后在4-6小时内降温至20℃，然后搅拌过夜。将混合物过滤，滤饼用乙酸异丙酯(4.5L，2vol)洗涤，干燥，拉干并在真空(50℃)中干燥，得到呈类白色至棕黄色固体的(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸；(R)-4-喹啉基-[(2S,4S)-5-乙烯基奎宁环-2-基]甲醇(1.886kg，>98.0％ee)。手性纯度通过Agilent1200HPLC仪器使用Phenomenex Lux i-Amylose-3柱(3μm，150×4.6mm)和在20.0分钟内以30％至70％的流动相B运行的双等度梯度来确定。流动相A＝H2O(0.1％ CF3CO2H)。流动相B＝MeOH(0.1％CF3CO2H)。流速＝1.0mL/min，进样量＝2μL,柱温＝30℃,样品浓度：1mg/mL,于60％乙腈/40％水中。
步骤2：(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸
将(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸；(R)-4-喹啉基-[(2S,4S)-5-乙烯基奎宁环-2-基]甲醇(50g,87.931mmol)在乙酸乙酯(500.00mL)中的悬浮液用盐酸水溶液(200mL,1M,200.00mmol)处理。在室温下搅拌15分钟后，将两个相分离。将水相用乙酸乙酯(200mL)萃取两次。将合并的有机层用1N HCl(100mL)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将物质在高真空下干燥过夜，得到呈淡棕色油的(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸(26.18g，96％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.46–7.31(m,5H),5.88–5.73(m,1H),5.15–4.99(m,2H),4.88(d,J＝10.3Hz,1H),4.70(d,J＝10.3Hz,1H),2.37–2.12(m,4H)ppm.19FNMR(377MHz,CDCl3)δ-71.63(br s,3F)ppm.ESI-MS m/z计算值288.0973，实验值287.0(M-1)-；保留时间：2.15分钟。LCMS方法：Kinetex Polar C18 3.0×50mm 2.6μm，3分钟，5％-95％乙腈/H2O(0.1％甲酸)1.2毫升/分钟。
中间体5：(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼的制备
步骤1：N-[[(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酸叔丁酯
向(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酸(365g，1.266mol)于DMF(2L)中的溶液中添加HATU(612g，1.610mol)和DIEA(450mL，2.584mol)并将混合物在环境温度下搅拌10分钟。向混合物中添加N-氨基氨基甲酸叔丁酯(200g，1.513mol)(添加时有轻微放热)并将混合物在环境温度下搅拌16小时。将反应倒入冰水(5L)中。通过过滤收集所得的沉淀并用水洗涤。将固体溶解在EtOAc(2L)中，并且用盐水洗涤。将有机相经MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将油用EtOAc(500mL)稀释，随后用庚烷(3L)稀释，并在环境温度下搅拌数小时，得到稠密浆液。将浆液用另外的庚烷稀释并过滤以收集绒毛状白色固体(343g)。将滤液浓缩并通过硅胶色谱法(0-40％EtOAc/己烷)纯化，得到N-[[(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酸叔丁酯(464g,91％,与来自结晶的产物合并)。ESI-MS m/z计算值402.17664，实验值303.0(M+1-Boc)+；保留时间：2.68分钟。最终纯度通过反相UPLC使用Waters制造的Acquity UPLC BEH C18柱(50×2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相B运行的双梯度来确定。流动相A＝H2O(0.05％ CF3CO2H)。流动相B＝CH3CN(0.035％CF3CO2H)。流速＝1.2mL/min，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
步骤2：(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼
向N-[[(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酸叔丁酯(464g，1.153mol)于DCM(1.25L)中的溶液中添加HCl(925mL，4M，3.700mol)并且在环境温度下搅拌混合物20小时。将混合物在真空中浓缩，将大多数DCM去除。将混合物用乙酸异丙酯(1L)稀释，并用在1L冰水中的NaOH(140g,50％w/w,1.750mol)碱化至pH＝6。分离有机相并用1L盐水洗涤，并将合并的水相用乙酸异丙酯(1L)萃取。将合并的有机相经MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到暗黄色油的(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼(358g，当量)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.02(s,1H),7.44-7.29(m,5H),5.81(ddt,J＝16.8,10.1,6.4Hz,1H),5.13-4.93(m,2H),4.75(dd,J＝10.5,1.5Hz,1H),4.61(d,J＝10.5Hz,1H),3.78(s,2H),2.43(ddd,J＝14.3,11.0,5.9Hz,1H),2.26-1.95(m,3H)ppm.ESI-MS m/z计算值302.1242，实验值303.0(M+1)+；保留时间：2.0分钟。最终纯度通过反相UPLC使用Waters制造的Acquity UPLC BEH C18柱(50×2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相B运行的双梯度来确定。流动相A＝H2O(0.05％ CF3CO2H)。流动相B＝CH3CN(0.035％ CF3CO2H)。流速＝1.2mL/min，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
中间体6：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯的制备
步骤1：N-[2-[[[(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在环境温度下，向6-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(304g,789.3mmol)和(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰肼(270g,893.2mmol)在EtOAc(2.25L)中的混合物中添加DIEA(425mL,2.440mol)。使用冰水浴向混合物中缓慢添加T3P(50％w/w的622g，977.4mmol)，以保持温度<35℃(温度升高至34℃),并将反应混合物在环境温度下搅拌18小时。添加另外的DIEA(100mL，574.1mmol)和T3P(95g，298.6mmol)并且在环境温度下搅拌2天。仍然观察到起始材料，并且添加另外的T3P(252g，792mmol)并搅拌5天。将反应通过缓慢添加水(2.5L)淬灭并且将混合物搅拌30分钟。将有机相分离，并且将水相用EtOAc(2L)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗产物溶解在MTBE(300mL)中，并且用庚烷(3L)稀释，将混合物在环境温度下搅拌12小时，得到浅黄色浆液。将浆料过滤，并将所得固体空气干燥2小时，然后在40℃下真空干燥48小时。将滤液在真空中浓缩并且通过硅胶色谱法(0-20％ EtOAc/己烷)纯化并与结晶得到的物质合并，得到N-[2-[[[(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(433g，82％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.07(s,1H),10.91(s,1H),10.32(s,1H),9.15(s,1H),7.53-7.45(m,2H),7.45-7.28(m,3H),5.87(ddt,J＝17.0,10.2,5.1Hz,1H),5.09(dq,J＝17.1,1.3Hz,1H),5.02(dd,J＝10.3,1.9Hz,1H),4.84(q,J＝11.3Hz,2H),2.37-2.13(m,4H),1.49(s,9H)ppm.ESI-MS m/z计算值668.1069，实验值669.0(M+1)+；保留时间：3.55分钟。最终纯度通过反相UPLC使用Waters制造的Acquity UPLC BEH C18柱(50×2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相B运行的双梯度来确定。流动相A＝H2O(0.05％CF3CO2H)。流动相B＝CH3CN(0.035％ CF3CO2H)。流速＝1.2mL/min，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
步骤2：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯
在氮气下向N-[2-[[[(2R)-2-苄氧基-2-(三氟甲基)己-5-烯酰基]氨基]氨基甲酰基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(240g,358.5mmol)在无水乙腈(1.5L)中的溶液中添加DIEA(230mL,1.320mol)并且将橙色溶液加热至70℃。在1小时内向混合物中添加3等份的对甲苯磺酰氯(80.5g，422.2mmol)。将混合物在70℃下搅拌9小时，然后添加另外的对甲苯磺酰氯(6.5g，34.09mmol)。将混合物搅拌总共24小时，然后允许其冷却到环境温度。将乙腈在真空中去除，得到深橙色油，将其用EtOAc(1.5L)和水(1.5L)稀释。将有机相分离并用500mL的1M HCl、500mL盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。通过硅胶色谱法(0-20％ EtOAc/己烷)纯化，得到N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(200g,86％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.11(s,1H),9.10(s,1H),7.55-7.48(m,2H),7.47-7.28(m,3H),5.87(ddt,J＝16.7,10.2,6.4Hz,1H),5.11(dt,J＝17.2,1.7Hz,1H),5.01(dt,J＝10.2,1.5Hz,1H),4.74(d,J＝10.6Hz,1H),4.65(d,J＝10.6Hz,1H),2.55-2.42(m,2H),2.30(qd,J＝11.3,10.3,6.9Hz,2H),1.52(s,9H)ppm.ESI-MS m/z计算值650.0963，实验值650.0(M+1)+；保留时间：3.78分钟。最终纯度通过反相UPLC使用Waters制造的Acquity UPLC BEHC18柱(50×2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相B运行的双梯度来确定。流动相A＝H2O(0.05％ CF3CO2H)。流动相B＝CH3CN(0.035％CF3CO2H)。流速＝1.2mL/min，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
中间体7：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-N-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯的制备
步骤1：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-N-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯
向N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁酯(222g,340.8mmol)在MTBE(1.333L)中的溶液中添加DIPEA(65.3mL,374.9mmol)，随后添加DMAP(2.09g,17.11mmol)。在大约8分钟内添加二碳酸二叔丁酯(111.6g，511.3mmol)于MTBE(250mL)中的溶液，并将所得混合物再搅拌30分钟。添加1L的水并将层分离。用KHSO4(886mL,0.5M,443.0mmol)、300mL盐水洗涤有机层，用MgSO4干燥，并且通过在45℃下旋转蒸发来蒸发大部分(>95％)的MTBE，留下稠密的油状物。添加1.125L的庚烷，在45℃旋转蒸发浴中旋转直至溶解，然后通过旋转蒸发来蒸发出325mL的溶剂。使旋转蒸发浴温度降至室温，并且在蒸发期间产物开始结晶。然后将烧瓶放入-20℃的冰箱中过夜。将所得固体过滤并用冷庚烷洗涤，并在室温下干燥3天，得到N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-N--叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(240.8g,94％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.95(s,1H),7.52-7.45(m,2H),7.44-7.36(m,2H),7.36-7.29(m,1H),5.83-5.67(m,1H),5.08-5.00(m,1H),5.00-4.94(m,1H),4.79(d,J＝10.4Hz,1H),4.64(d,J＝10.4Hz,1H),2.57-2.26(m,3H),2.26-2.12(m,1H),1.41(s,18H)ppm.ESI-MS m/z计算值750.14874，实验值751.1(M+1)+；保留时间：3.76分钟。最终纯度通过反相UPLC使用Waters制造的Acquity UPLC BEH C18柱(50×2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相B运行的双梯度来确定。流动相A＝H2O(0.05％ CF3CO2H)。流动相B＝CH3CN(0.035％ CF3CO2H)。流速＝1.2mL/min，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
中间体8：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-羟基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-N-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯的制备
步骤1：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-羟基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-N-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯
将N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-溴-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-N-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(280g,372.6mmol)溶解在DMSO(1.82L)(黄色溶液)中，并在室温搅拌下用乙酸铯(215g,1.120mol)处理。将黄色悬浮液在80℃下加热5小时。将反应混合物冷却至室温，并且添加至搅拌的1kg氯化铵溶解在其中的冷水乳液(5.5L)中，并且添加MTBE和庚烷(2L)(在20L中)的1:1混合物。将相分离并将有机相用水(3×3L)和盐水(1×2.5L)洗涤。将有机相用MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将所得黄色溶液用庚烷(约1L)稀释并用N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-羟基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-N-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯接种并在100mbar压力下在室温下在旋转蒸发器上搅拌1.5小时。将固体物质在室温下机械搅拌2小时，过滤所得的稠密细悬浮液，用干冰冷却的庚烷洗涤，并且在45℃下在真空下用氮气排放干燥16小时，得到呈类白色固体的N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-羟基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-N-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(220g，85％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.28(s,1H),8.43(s,1H),7.58-7.26(m,5H),5.85(ddt,J＝16.8,10.3,6.5Hz,1H),5.10(dq,J＝17.2,1.6Hz,1H),5.01(dq,J＝10.2,1.3Hz,1H),4.76(d,J＝11.0Hz,1H),4.65(d,J＝11.0Hz,1H),2.55(dd,J＝9.6,5.2Hz,2H),2.23(td,J＝13.2,10.0,5.7Hz,2H),1.27(d,J＝3.8Hz,18H)ppm.ESI-MSm/z计算值688.23315，实验值689.0(M+1)+；保留时间：3.32分钟。最终纯度通过反相UPLC使用Waters制造的Acquity UPLC BEH C18柱(50×2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相B运行的双梯度来确定。流动相A＝H2O(0.05％ CF3CO2H)。流动相B＝CH3CN(0.035％ CF3CO2H)。流速＝1.2mL/min，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
C.(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇的制备
步骤1：N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[(1R)-1-甲基丁-3-烯氧基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-N-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯
将N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-羟基-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-N-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(159.3g,231.3mmol)和三苯基膦(72.9g,277.9mmol)溶解在甲苯(1L)中，然后添加(2S)-戊-4-烯-2-醇(28.7mL,278.9mmol)。将该混合物加热至45℃，然后在40分钟内缓慢添加DIAD(58.3mL，296.1mmol)(放热)。在接下来的大约2小时内，将混合物冷却至室温。在此冷却期间，在前10分钟之后，添加三苯基膦(6.07g,23.14mmol)。在另外1小时后，添加另外的三苯基膦(3.04g，11.59mmol)。在另外23分钟后，添加DIAD(2.24mL，11.57mmol)。在约2小时时间段冷却到室温之后，将混合物冷却至15℃，并且添加DIAD-三苯基膦氧化物络合物的晶种，这引起沉淀，然后添加1000mL庚烷。将混合物在-20℃下贮存3天。滤出并丢弃沉淀并浓缩滤液，得到红色残余物/油状物。将残余物在45℃下溶解在613mL庚烷中，然后冷却至0℃，用DIAD-三苯基膦氧化物络合物接种，在0℃下搅拌30分钟，然后过滤溶液。将滤液浓缩至较小体积，然后加载到1.5kg硅胶柱上(柱体积＝2400mL,流速＝600mL/min)。在32分钟(8柱体积)内运行1％至6％的EtOAc/己烷梯度，然后保持在6％的EtOAc/己烷，直到产物洗脱完成，得到N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[(1R)-1-甲基丁-3-烯氧基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-N-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(163.5g,93％)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ7.82(s,1H),7.43-7.27(m,5H),5.88-5.69(m,2H),5.35(h,J＝6.2Hz,1H),5.16-4.94(m,4H),4.81(d,J＝10.7Hz,1H),4.63(d,J＝10.7Hz,1H),2.58-2.15(m,6H),1.42(s,18H),1.36(d,J＝6.2Hz,3H)ppm.ESI-MS m/z计算值756.2958，实验值757.3(M+1)+；保留时间：4.0分钟。最终纯度通过反相UPLC使用Waters制造的Acquity UPLCBEH C18柱(50×2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相B运行的双梯度来确定。流动相A＝水(0.05％ CF3CO2H)。流动相B＝乙腈(0.035％ CF3CO2H)。流速＝1.2mL/min，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
步骤2：N-[(6R,12R)-6-苄氧基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]-N-丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)
运行以下反应，在平行运行的两个12L反应烧瓶之间等分。使用机械搅拌，并使用粗孔隙率气体分散管对反应进行恒定的氮气吹扫。向每个烧瓶中添加溶解在DCE(每个烧瓶中8L)中的N-[2-[5-[(1R)-1-苄氧基-1-(三氟甲基)戊-4-烯基]-1,3,4-噁二唑-2-基]-6-[(1R)-1-甲基丁-3-烯氧基]-5-(三氟甲基)-3-吡啶基]-N-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(每个烧瓶中54g,71.36mmol)，并在室温下用氮气强烈吹扫两个烧瓶。将两个烧瓶加热到62℃,并且将Grubbs第1代催化剂(9g,每个烧瓶中的10.94mmol)添加到每个反应中，并且在400rpm下搅拌，同时将内部温度控制设定成75℃,用强氮气吹扫(两个反应在大约20分钟后均达到约75℃)。在5小时15分钟之后，将内部温度控制设定为45℃。在大约2小时之后，将2-硫烷基吡啶-3-甲酸(每个烧瓶中的11g，70.89mmol)添加到每个烧瓶中，随后添加三乙胺(每个烧瓶中的10mL，71.75mmol)。在完成添加后，关闭氮气吹扫，并将两个反应烧瓶在45℃下露天搅拌过夜。然后将反应从加热中移除，并将130g硅胶添加到每个反应中，并且将每个反应在室温下搅拌。在大约2小时后，将绿色混合物组合并在硅藻土上过滤，然后在43℃下通过旋转蒸发浓缩。将获得的残余物溶解于二氯甲烷/庚烷1:1(400mL)中，并且通过过滤去除形成的橙色固体。将绿色母液蒸发，得到115.5g绿色泡沫。将该物质溶解在500mL 1:1二氯甲烷/己烷中，然后加载到3kg硅胶柱上(柱体积＝4800mL,流速＝900mL/min)。在43分钟(8柱体积)内运行2％至9％的EtOAc/己烷梯度，然后在9％EtOAc下运行，直到产物完成洗脱，得到77.8g的不纯产物。将该物质与甲醇(约500mL)共蒸发，然后用甲醇(200mL)稀释，得到234.5g甲醇溶液，分成两半，并且每一半通过反相色谱法(3.8kg，C18柱，柱体积＝3300mL,流速＝375mL/min，以甲醇溶液形式加载)纯化。将柱在55％乙腈下运行约5分钟(0.5柱容积)，然后在约170分钟(19-20柱容积)内以55％至100％乙腈/水梯度运行，然后保持在100％乙腈下，直至产物和杂质洗脱完成。将来自两个柱的清洁产物级分合并并通过旋转蒸发浓缩，然后用乙醇转移到5L烧瓶中，蒸发并仔细干燥(成为泡沫),得到烯烃异构体的混合物N-[(6R,12R)-6-苄氧基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]-N-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(55.5g,53％)。ESI-MS m/z计算值728.26447，实验值729.0(M+1)+；保留时间：3.82分钟。最终纯度通过反相UPLC使用Waters制造的Acquity UPLC BEH C18柱(50×2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相B运行的双梯度来确定。流动相A＝水(0.05％CF3CO2H)。流动相B＝乙腈(0.035％ CF3CO2H)。流速＝1.2mL/min，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
步骤3：N-[(6R,12R)-6-苄氧基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]-N-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯
将N-[(6R,12R)-6-苄氧基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,9,14,16-六烯-17-基]-N-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(E/Z混合物)(11.7g,16.06mmol)溶于搅拌的乙醇(230mL)中并使烧瓶在真空/氮气中循环3次，并用10％ Pd/C(50％水湿润,2.2g,5％w/w,1.034mmol)处理。使混合物在真空/氮气之间循环3次并且在真空/氢气之间循环3次。然后将混合物在氢气(气球)下强烈搅拌7.5小时。通过过滤去除催化剂，替换为新鲜的10％ Pd/C(50％水湿润,2.2g 5％w/w,1.034mmol)并且在氢气(气球)下剧烈搅拌过夜。然后，将催化剂通过过滤再次去除，将滤液蒸发，并且将残余物(11.3g，1g留用)溶解于乙醇(230mL)中，装入新鲜的10％ Pd/C(50％水湿润，2.2g，5％w/w，1.034mmol)，并在氢气(气球)下剧烈搅拌6小时，再次重新装入新鲜的10％ Pd/C(50％水湿润，2.2g，5％w/w，1.034mmol)并在氢气(气球)下剧烈搅拌过夜。通过过滤去除催化剂，并且蒸发滤液(获得10g残余物)。该粗物质(10g+1g上述留用)通过硅胶色谱法(330g柱，液体加载在二氯甲烷中)，用0％至15％乙酸乙酯/己烷的线性梯度纯化，直到产物洗脱，随后用15％至100％乙酸乙酯/己烷纯化，得到呈无色泡沫的N-[(6R,12R)-6-苄氧基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]-N-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(9.1g,78％)。ESI-MS m/z计算值730.2801，实验值731.0(M+1)+；保留时间：3.89分钟。最终纯度通过反相UPLC使用Waters制造的Acquity UPLC BEH C18柱(50×2.1mm，1.7μm颗粒)(pn：186002350)和在4.5分钟内从1％-99％流动相B运行的双梯度来确定。流动相A＝水(0.05％ CF3CO2H)。流动相B＝乙腈(0.035％ CF3CO2H)。流速＝1.2mL/min，进样体积＝1.5μL，并且柱温＝60℃。
步骤4：(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇
将N-[(6R,12R)-6-苄氧基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]-N-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(8.6g,11.77mmol)溶解在乙醇(172mL)中，然后使烧瓶在真空/氮气之间循环3次。用10％ Pd/C(50％水湿润，1.8g，5％w/w，0.8457mmol)处理混合物，然后在真空/氮气之间循环3次，并在真空/氢气之间循环3次，然后在氢气(气球)下在室温下剧烈搅拌18小时。将混合物在真空/氮气之间循环3次，在硅藻土上过滤，用乙醇洗涤，然后蒸发滤液，得到7.3g呈类白色固体的N-叔丁氧基羰基-N-[(6R,12R)-6-羟基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-17-基]氨基甲酸叔丁酯。1H NMR和MS确认了预期产物。使用针对CFTR增效剂活性的标准尤斯室测定来确认CFTR调节活性。
其它实施例
前述论述仅公开并描述了本公开的示例性实施例。所属领域的技术人员将从此类论述以及从附图和权利要求书中容易地认识到，在不脱离如以下权利要求书中限定的本公开的精神和范围的情况下，可在其中进行各种改变、修改和变化。

Claims (21)

1.一种式I化合物：
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中：
环A选自：
■C6-C10芳基，
■C3-C10环烷基，
■3至10元杂环基，以及
■5至10元杂芳基；
环B选自：
■C6-C10芳基，
■C3-C10环烷基，
■3至10元杂环基，以及
■5至10元杂芳基；
V选自O和NH；
W1选自N和CH；
W2选自N和CH；条件是W1和W2中的至少一个是N；
Z选自O、NRZN和C(RZC)2，条件是当L2不存在时，Z是C(RZC)2；
每个L1独立地选自C(RL1)2；
每个L2独立地选自C(RL2)2；
每个R3独立地选自：
■卤素，
■C1-C6烷基，
■C1-C6烷氧基，
■C3-C10环烷基，
■任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，以及
■3至10元杂环基；
R4选自氢和C1-C6烷基；
每个R5独立地选自：
■氢，
■卤素，
■羟基，
■N(RN)2，
■-SO-Me，
■-CH＝C(RLC)2，其中两个RLC一起形成C3-C10环烷基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
○羟基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷氧基和C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
○C3-C10环烷基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的基团取代的-(O)0-1-(C6-C10芳基)，
○3至10元杂环基，以及
○N(RN)2，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷氧基：
○卤素，
○C6-C10芳基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
■C1-C6氟烷基，
■C3-C10环烷基，
■C6-C10芳基，以及
■3至10元杂环基；
RZN选自：
■氢，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
○羟基，
○氧代，
○氰基，
○任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6烷氧基的基团取代的C1-C6烷氧基，
○N(RN)2，
○SO2Me，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C10环烷基：
◆羟基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基、C6-C10芳基和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，
◆C1-C6氟烷基，
◆C1-C6烷氧基，以及
◆COOH，
◆N(RN)2，
◆C6-C10芳基，以及
◆任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
◆卤素，
◆羟基，
◆氰基，
◆SiMe3，
◆SO2Me，
◆SF5，
◆N(RN)2，
◆P(O)Me2，
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基、5至10元杂芳基、SO2Me和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、N(RN)2和C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆C1-C6氟烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
◆-(O)0-1-(C6-C10芳基)，以及
◆任选地被羟基、氧代、N(RN)2、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6氟烷基和C3-C10环烷基取代的-(O)0-1-(5至10杂芳基)，
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
◆羟基，
◆氧代，
◆N(RN)2，
◆C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷氧基的基团取代)，
◆C1-C6烷氧基，
◆C1-C6氟烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的C6-C10芳基，以及
◆5至10元杂芳基，以及
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
◆羟基，
◆氰基，
◆氧代，
◆卤素，
◆B(OH)2，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基(任选地被1-3个-SiMe3取代)和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基、
N(RN)2和C3-C10环烷基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆C1-C6氟烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆-(O)0-1-(C6-C10芳基)，
◆任选地被1-4个独立地选自羟基、氧代、卤素、氰基、N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、N(RN)2和C1-C6烷氧基的基团取代)、C1-C6烷氧基、C1-C6氟烷基、3至10元杂环基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代)的基团取代的-(O)0-1-(3至10元杂环基)，以及
◆任选地被1-4个独立地选自C1-C6烷基和C3-C10环烷基的基团取代的5至10元杂芳基，
■C1-C6氟烷基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C10环烷基：
○羟基，
○氧代，
○卤素，
○氰基，
○N(RN)2，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
◆羟基，
◆氧代，
◆N(RN)2，
◆C1-C6烷氧基，以及
◆C6-C10芳基，
○任选地被1-3个独立地选自卤素、氧代、C6-C10芳基和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷氧基，
○卤素，
○C3-C10环烷基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
◆羟基，
◆氰基，
◆氧代，
◆卤素，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、C1-C6烷氧基、N(RN)2和C3-C10环烷基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆C1-C6氟烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆C6-C10芳基，以及
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
■C6-C10芳基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
○氧代，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
◆氧代，
◆羟基，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自卤素和C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，以及
◆-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
○C1-C6氟烷基，
○任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的C3-C10环烷基，以及
○3至10元杂环基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
○卤素，
○任选地被1-3个独立地选自氧代、C1-C6烷氧基和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基(任选地被1-3个选自氧代、C1-C6烷氧基和C6-C10芳基的基团取代)的基团取代的3至10元杂环基，以及
■RF；
每个RZC独立地选自：
■氢，
■任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)的基团取代的C1-C6烷基，
■任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，以及
■RF；
或者两个RZC一起形成氧代基团；
每个RL1独立地选自：
■氢，
■N(RN)2，条件是两个N(RN)2不与同一碳结合，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
○卤素，
○羟基，
○氧代，
○N(RN)2，
○任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
○任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基和氧代的基团取代)的基团取代的3至10元杂环基，
■C3-C10环烷基，
■任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
○卤素，
○氰基，
○SiMe3，
○POMe2，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C7烷基：
◆羟基，
◆氧代，
◆氰基，
◆SiMe3，
◆N(RN)2，以及
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷氧基：
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，以及
◆C1-C6烷氧基，
○C1-C6氟烷基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基和C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
○C6-C10芳基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
○5至10元杂芳基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
◆氧代，以及
◆C1-C6烷氧基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，以及
■RF；
或者同一碳原子上的两个RL1一起形成氧代基团；
每个RL2独立地选自氢和RF；或者同一碳原子上的两个RL2一起形成氧代基团；前提是至少一个RL1或RL2是RF；
每个RN独立地选自：
■氢，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C8烷基：
○氧代，
○卤素，
○羟基，
○NH2，
○NHMe，
○NMe2，
○任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
○-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
○任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，
○任选地被1-4个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的3至14元杂环基，以及
○任选地被1-4个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的5至14元杂芳基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C10环烷基：
○羟基，
○NH2，以及
○NHMe，以及
○任选地被1-3个独立地选自羟基的基团取代的C1-C6烷基，
■C6-C10芳基，以及
■3至10元杂环基；
或者同一氮原子上的两个RN与其所结合的氮一起形成任选地被1-3个选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
■羟基，
■氧代，
■氰基，
■任选地被1-3个独立地选自氧代、羟基、C1-C6烷氧基和N(RN2)2的基团取代的C1-C6烷基，其中每个RN2独立地选自氢和C1-C6烷基，
■C1-C6烷氧基，以及
■C1-C6氟烷基；
或者一个R4和一个RL1一起形成C6-C8亚烷基；
两个RF与其所结合的原子一起形成选自以下的基团：
■任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
○卤素，
○C1-C6烷基，
○N(RN)2，以及
○任选地被1-3个独立地选自羟基的基团取代的3至10元杂环基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至11元杂环基：
○氧代，
○N(RN)2，
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
◆氧代，
◆卤素，
◆羟基，
◆N(RN)2，
◆-SO2-(C1-C6烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自卤素、C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、卤素、氰基、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷氧基的基团取代)、C1-C6烷氧基(任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代)、-(O)0-1-(C1-C6氟烷基)和C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷氧基的基团取代)的基团取代的C6-C10芳基，
◆任选地被1-4个独立地选自羟基、卤素、N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代、羟基和C1-C6烷氧基的基团取代)、C1-C6氟烷基和C6-C10芳基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自氧代、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)的基团取代)、C1-C6烷氧基、C3-C10环烷基和RN的基团取代的3至10元杂环基，
◆任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)和C1-C6烷基的基团取代的-O-(5至12元杂芳基)，以及
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氰基的基团取代)、C1-C6烷氧基、-(O)0-1-(C1-C6氟烷基)、-O-(C6-C10芳基)和C3-C10环烷基的基团取代的5至10元杂芳基，
○任选地被1-4个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C12环烷基，
○C6-C10芳基，
○3至10元杂环基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷氧基、C1-C6氟烷基和N(RN)2的基团取代的5至10元杂芳基，以及
■任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基(任选地被C6-C10芳基取代)和C1-C6氟烷基的基团取代的5至12元杂芳基。
2.一种式Ia化合物：
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中环A、环B、W1、W2、Z、L1、L2、R3、R4、R5和RF如根据权利要求1所述的那样定义。
3.一种式IIa化合物：
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中环B、W1、W2、Z、L1、L2、R3、R4、R5和RF如根据权利要求1所述的那样定义。
4.一种式IIb化合物：
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中环A、W1、W2、Z、L1、L2、R3、R4、R5和RF如根据权利要求1所述的那样定义。
5.一种式III化合物：
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中W1、W2、Z、L1、L2、R4、R5和RF如根据权利要求1所述的那样定义。
6.一种式IV化合物：
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中Z、L1、L2、R4、R5和RF如根据权利要求1所述的那样定义。
7.一种式V化合物：
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中Z、L1、L2、R4、R5和RF如根据权利要求1所述的那样定义。
8.一种式VI化合物：
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中L1、R4、R5和RF如根据权利要求1所述的那样定义。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其选自式I、Ia、IIa、IIb、III、IV、V、Va、Vb和VI中的任一者的化合物、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐，其选自化合物1-371(表13、14和15)、化合物372-385(表12)、化合物386-426(表24)、其互变异构体、这些化合物和互变异构体的氘化衍生物和前述任一者的药学上可接受的盐。
11.一种药物组合物，其包括根据权利要求1至10中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。
12.根据权利要求11所述的药物组合物，其进一步包括一种或多种另外的治疗剂。
13.根据权利要求12所述的药物组合物，其中所述一种或多种另外的治疗剂选自CFTR调节剂。
14.根据权利要求13所述的药物组合物，其中所述CFTR调节剂选自替扎卡托(tezacaftor)、鲁玛卡托(lumacaftor)、依伐卡托(ivacaftor)、氘替卡托(deutivacaftor)、(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和前述任一者的氘化衍生物和药学上可接受的盐。
15.一种治疗囊性纤维化的方法，所述方法包括向有需要的患者施用根据权利要求1至10中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐或根据权利要求11至14中任一项所述的药物组合物。
16.根据权利要求15所述的方法，其进一步包括在施用根据权利要求1至10中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐或根据权利要求11所述的药物组合物之前、同时或之后向所述患者施用一种或多种另外的治疗剂。
17.根据权利要求16所述的方法，其中所述一种或多种另外的治疗剂选自CFTR调节剂。
18.根据权利要求17所述的方法，其中所述一种或多种另外的CFTR调节剂选自替扎卡托、依伐卡托、氘替卡托、鲁玛卡托、(6R,12R)-17-氨基-12-甲基-6,15-双(三氟甲基)-13,19-二氧杂-3,4,18-三氮杂三环[12.3.1.12,5]十九碳-1(18),2,4,14,16-五烯-6-醇和前述任一者的氘化衍生物和药学上可接受的盐。
19.根据权利要求1至10中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐或根据权利要求11至14中任一项所述的药物组合物，其用于治疗囊性纤维化。
20.根据权利要求1至10中任一项所述的化合物、互变异构体、氘化衍生物或药学上可接受的盐或根据权利要求11至14中任一项所述的药物组合物，其用于制造用于治疗囊性纤维化的药物。
21.一种式I化合物：
其互变异构体、所述化合物或所述互变异构体的氘化衍生物、或前述任一者的药学上可接受的盐，其中：
环A选自：
■C6-C10芳基，
■C3-C10环烷基，
■3至10元杂环基，以及
■5至10元杂芳基；
环B选自：
■C6-C10芳基，
■C3-C10环烷基，
■3至10元杂环基，以及
■5至10元杂芳基；
V选自O和NH；
W1选自N和CH；
W2选自N和CH；条件是W1和W2中的至少一个是N；
Z选自O、NRZN和C(RZC)2，条件是当L2不存在时，Z是C(RZC)2；
每个L1独立地选自C(RL1)2；
每个L2独立地选自C(RL2)2；
每个R3独立地选自：
■卤素，
■C1-C6烷基，
■C1-C6烷氧基，
■C3-C10环烷基，
■任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，以及
■3至10元杂环基；
R4选自氢和C1-C6烷基；
每个R5独立地选自：
■氢，
■卤素，
■羟基，
■N(RN)2，
■-SO-Me，
■-CH＝C(RLC)2，其中两个RLC一起形成C3-C10环烷基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
○羟基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷氧基和C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
○C3-C10环烷基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的基团取代的-(O)0-1-(C6-C10芳基)，
○3至10元杂环基，以及
○N(RN)2，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷氧基：
○卤素，
○C6-C10芳基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
■C1-C6氟烷基，
■C3-C10环烷基，
■C6-C10芳基，以及
■3至10元杂环基；
RZN选自：
■氢，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
○羟基，
○氧代，
○氰基，
○任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6烷氧基的基团取代的C1-C6烷氧基，
○N(RN)2，
○SO2Me，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C10环烷基：
◆羟基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基、C6-C10芳基和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，
◆C1-C6氟烷基，
◆C1-C6烷氧基，以及
◆COOH，
◆N(RN)2，
◆C6-C10芳基，以及
◆任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
◆卤素，
◆羟基，
◆氰基，
◆SiMe3，
◆SO2Me，
◆SF5，
◆N(RN)2，
◆P(O)Me2，
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基、5至10元杂芳基、SO2Me和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、N(RN)2和C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆C1-C6氟烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
◆-(O)0-1-(C6-C10芳基)，以及
◆任选地被羟基、氧代、N(RN)2、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6氟烷基和C3-C10环烷基取代的-(O)0-1-(5至10杂芳基)，
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
◆羟基，
◆氧代，
◆N(RN)2，
◆C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷氧基的基团取代)，
◆C1-C6烷氧基，
◆C1-C6氟烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的C6-C10芳基，以及
◆5至10元杂芳基，以及
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
◆羟基，
◆氰基，
◆氧代，
◆卤素，
◆B(OH)2，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基(任选地被1-3个-SiMe3取代)和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基、
N(RN)2和C3-C10环烷基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆C1-C6氟烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆-(O)0-1-(C6-C10芳基)，
◆任选地被1-4个独立地选自羟基、氧代、卤素、氰基、N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、N(RN)2和C1-C6烷氧基的基团取代)、C1-C6烷氧基、C1-C6氟烷基、3至10元杂环基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代)的基团取代的-(O)0-1-(3至10元杂环基)，以及
◆任选地被1-4个独立地选自C1-C6烷基和C3-C10环烷基的基团取代的5至10元杂芳基，
■C1-C6氟烷基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C10环烷基：
○羟基，
○氧代，
○卤素，
○氰基，
○N(RN)2，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
◆羟基，
◆氧代，
◆N(RN)2，
◆C1-C6烷氧基，以及
◆C6-C10芳基，
○任选地被1-3个独立地选自卤素、氧代、C6-C10芳基和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷氧基，
○卤素，
○C3-C10环烷基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
◆羟基，
◆氰基，
◆氧代，
◆卤素，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、C1-C6烷氧基和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、C1-C6烷氧基、N(RN)2和C3-C10环烷基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆C1-C6氟烷基，
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆C6-C10芳基，以及
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，
■C6-C10芳基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
○氧代，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
◆氧代，
◆羟基，
◆N(RN)2，
◆任选地被1-3个独立地选自卤素和C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，以及
◆-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
○C1-C6氟烷基，
○任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代的C3-C10环烷基，以及
○3至10元杂环基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
○卤素，
○任选地被1-3个独立地选自氧代、C1-C6烷氧基和N(RN)2的基团取代的C1-C6烷基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基(任选地被1-3个选自氧代、C1-C6烷氧基和C6-C10芳基的基团取代)的基团取代的3至10元杂环基，以及
■RF；
每个RZC独立地选自：
■氢，
■任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代)的基团取代的C1-C6烷基，
■任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，以及
■RF；
或者两个RZC一起形成氧代基团；
每个RL1独立地选自：
■氢，
■N(RN)2，条件是两个N(RN)2不与同一碳结合，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
○卤素，
○羟基，
○氧代，
○N(RN)2，
○任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
○任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自羟基和氧代的基团取代)的基团取代的3至10元杂环基，
■C3-C10环烷基，
■任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
○卤素，
○氰基，
○SiMe3，
○POMe2，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C7烷基：
◆羟基，
◆氧代，
◆氰基，
◆SiMe3，
◆N(RN)2，以及
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷氧基：
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，以及
◆C1-C6烷氧基，
○C1-C6氟烷基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基和C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
○C6-C10芳基，
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的3至10元杂环基，以及
○5至10元杂芳基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
◆氧代，以及
◆C1-C6烷氧基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的5至10元杂芳基：
○任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C6烷基：
◆任选地被1-3个独立地选自C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C10环烷基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，以及
■RF；
或者同一碳原子上的两个RL1一起形成氧代基团；
每个RL2独立地选自氢和RF；或者同一碳原子上的两个RL2一起形成氧代基团；前提是至少一个RL1或RL2是RF；
每个RN独立地选自：
■氢，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C1-C8烷基：
○氧代，
○卤素，
○羟基，
○NH2，
○NHMe，
○NMe2，
○任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
○-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
○任选地被1-3个独立地选自卤素和C1-C6烷基的基团取代的C6-C10芳基，
○任选地被1-4个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的3至14元杂环基，以及
○任选地被1-4个独立地选自氧代和C1-C6烷基的基团取代的5至14元杂芳基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C3-C10环烷基：
○羟基，
○NH2，以及
○NHMe，以及
○任选地被1-3个独立地选自羟基的基团取代的C1-C6烷基，
■C6-C10芳基，以及
■3至10元杂环基；
或者同一氮原子上的两个RN与其所结合的氮一起形成任选地被1-3个选自以下的基团取代的3至10元杂环基：
■羟基，
■氧代，
■氰基，
■任选地被1-3个独立地选自氧代、羟基、C1-C6烷氧基和N(RN2)2的基团取代的C1-C6烷基，其中每个RN2独立地选自氢和C1-C6烷基，
■C1-C6烷氧基，以及
■C1-C6氟烷基；
或者一个R4和一个RL1一起形成C6-C8亚烷基；
两个RF与其所结合的原子一起形成选自以下的基团：
■任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基的基团取代的C3-C10环烷基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的C6-C10芳基：
○卤素，
○C1-C6烷基，
○N(RN)2，以及
○任选地被1-3个独立地选自羟基的基团取代的3至10元杂环基，
■任选地被1-3个独立地选自以下的基团取代的3至11元杂环基：
○氧代，
○N(RN)2，
○任选地被1-4个独立地选自以下的基团取代的C1-C9烷基：
◆氧代，
◆卤素，
◆羟基，
◆N(RN)2，
◆-SO2-(C1-C6烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自卤素、C6-C10芳基的基团取代的C1-C6烷氧基，
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、卤素、氰基、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代和C1-C6烷氧基的基团取代)、C1-C6烷氧基(任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基的基团取代)、-(O)0-1-(C1-C6氟烷基)和C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷氧基的基团取代)的基团取代的C6-C10芳基，
◆任选地被1-4个独立地选自羟基、卤素、N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氧代、羟基和C1-C6烷氧基的基团取代)、C1-C6氟烷基和C6-C10芳基的基团取代的-(O)0-1-(C3-C10环烷基)，
◆任选地被1-3个独立地选自氧代、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)的基团取代)、C1-C6烷氧基、C3-C10环烷基和RN的基团取代的3至10元杂环基，
◆任选地被1-3个独立地选自C6-C10芳基(任选地被1-3个独立地选自卤素的基团取代)和C1-C6烷基的基团取代的-O-(5至12元杂芳基)，以及
◆任选地被1-3个独立地选自羟基、氧代、N(RN)2、C1-C6烷基(任选地被1-3个独立地选自氰基的基团取代)、C1-C6烷氧基、-(O)0-1-(C1-C6氟烷基)、-O-(C6-C10芳基)和C3-C10环烷基的基团取代的5至10元杂芳基，
○任选地被1-4个独立地选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6氟烷基的基团取代的C3-C12环烷基，
○C6-C10芳基，
○3至10元杂环基，以及
○任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷氧基(任选地被C6-C10芳基取代)、C1-C6氟烷基和N(RN)2的基团取代的5至10元杂芳基，以及
■任选地被1-3个独立地选自C1-C6烷基(任选地被C6-C10芳基取代)和C1-C6氟烷基的基团取代的5至12元杂芳基。
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