TW201333037A - 抗ｉｌ－３６ｒ抗體 - Google Patents

抗ｉｌ－３６ｒ抗體 Download PDF

Info

Publication number
TW201333037A
TW201333037A TW101142698A TW101142698A TW201333037A TW 201333037 A TW201333037 A TW 201333037A TW 101142698 A TW101142698 A TW 101142698A TW 101142698 A TW101142698 A TW 101142698A TW 201333037 A TW201333037 A TW 201333037A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
amino acid
acid sequence
antibody
seq
sequence seq
Prior art date
Application number
TW101142698A
Other languages
English (en)
Other versions
TWI573804B (zh
Inventor
Su-Ellen Brown
Keith Canada
Lukasz Chlewicki
Michael Howell
Detlev Mennerich
Joseph Robert Woska Jr
Original Assignee
Boehringer Ingelheim Int
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=47215803&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=TW201333037(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Boehringer Ingelheim Int filed Critical Boehringer Ingelheim Int
Publication of TW201333037A publication Critical patent/TW201333037A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI573804B publication Critical patent/TWI573804B/zh

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2866—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for cytokines, lymphokines, interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/244—Interleukins [IL]
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/564—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for pre-existing immune complex or autoimmune disease, i.e. systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, multiple sclerosis, rheumatoid factors or complement components C1-C9
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6863—Cytokines, i.e. immune system proteins modifying a biological response such as cell growth proliferation or differentiation, e.g. TNF, CNF, GM-CSF, lymphotoxin, MIF or their receptors
    • G01N33/6869—Interleukin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/715—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
    • G01N2333/7155—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons for interleukins [IL]
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/20—Dermatological disorders
    • G01N2800/205—Scaling palpular diseases, e.g. psoriasis, pytiriasis

Abstract

本發明係關於抗IL-36R結合化合物，特別是新的抗IL-36R抗體，及使用其之治療及診斷方法及組合物。

Description

抗IL-36R抗體
一般而言，本發明係關於用於診斷及治療用途之抗IL-36R抗體。該等抗體可用於包含該等化合物之醫藥組合物及套組中。該等抗體可用於治療人類中之各種疾病或病症(例如免疫學疾病、發炎性疾病、自體免疫疾病、纖維變性疾病及呼吸疾病)之方法。
序列表
本申請案含有已以ASCII格式經由EFS-Web遞交之序列表且其以引用的方式整體併入本文中。該ASCII拷貝在2012年11月12日創建，命名為09-0583WO.txt且大小為147,390個位元組。
細胞因子之IL-1家族係由11個不同配體組成，即IL-1α(亦稱為IL-1F1)、IL-1β(IL-1F2)、IL-1受體拮抗劑(IL-1Ra或IL-1F3)、IL-18(IL-1F4)、IL-1F5至IL-1F10及IL-1F11(或IL-33)。已知IL-1α及IL-1β誘導與I型IL-1受體(IL-1RI)結合之促發炎活性及常見共受體IL-1受體輔助蛋白(IL-1RAcP)之募集，而IL-1Ra作為與IL-1RI結合之IL-1之競爭性抑制劑起作用，從而發揮抗發炎活性。大量研究報導IL-18係為IFN-γ之誘導物之促發炎細胞因子，而IL-33係闡述為參與(特定而言)Th2反應之控制之免疫調節細胞因子。藉助在DNA數據庫中搜索IL-1之同系物來識別-1家族之新成員(包括IL-1F5、IL-1F6、IL-1F8及IL-1F9)。在人類 及小鼠中，所有編碼該等細胞因子之基因映射至小於300 kb之染色體2q，其中其由IL1A、IL1B及IL1RN基因側接。IL-1F6、IL-1F8及IL-1F9與IL-1及IL-1Ra共享21%至37%胺基酸序列同源性，而IL-1F5與IL-1Ra展示52%胺基酸序列同源性，此表明IL-1F5可代表內源性受體拮抗劑。
IL-1F6、IL-1F8及IL-1F9與IL-1Rrp2(IL-1R家族之受體)結合，且使用IL-1RAcP作為共受體來刺激與彼等由IL-1誘導之信號類似之細胞內信號，而顯示IL-1F5抑制過表現IL-1Rrp2之Jurkat T細胞中IL-1F9誘導之NF-κB活化。如IL-1β一般，所有該等IL-1同系物缺少前導肽且不能藉助習用分泌途徑來釋放，但研究表明IL-1Rrp2激動劑之釋放可藉由與彼等調節IL-1β分泌之機制不同之機制來控制。為認可該等細胞因子之具體生物學效應並確認其全部與同一受體結合，最近已提出修正IL-1同系物之命名法。因此，IL-1Rrp2現稱為IL-36R，且其配體命名為IL-36α(IL-1F6)、IL-36β(IL-1F8)及IL-36γ(IL-1F9)。另外，已顯示發揮受體拮抗劑活性之IL-1F5已重命名為IL-36Ra。
IL-36α、IL-36β及IL-36γ之信使RNA在若干組織中、特定而言在暴露於病原體及皮膚中之內部上皮組織中大量表現。令人感興趣的，IL-36Ra及IL-36α之表現在IL-1β/TNF-α刺激之人類角化細胞中顯著上調，且IL-36Ra及IL-36γ mRNA在牛皮癬損傷皮膚中極大增加。此外，在TNF-α及IFN-γ刺激後，人類角化細胞中之IL-36γ蛋白質產生提高。在慢性腎病中亦報導升高之IL-36α mRNA及蛋白質表現。
在角化細胞中過表現IL-36α之轉基因小鼠呈現與牛皮癬共有一些特徵之發炎性皮膚損傷。當轉基因小鼠與缺乏IL-36Ra之小鼠雜交時，此表現型更嚴重，此支持IL-36Ra在活體內之調節功能。若利用12-O-十四醯基佛波醇13-乙酸酯治療角化細胞特異性IL-36α轉基因小鼠，則該等小鼠中之發炎皮膚病狀與人類牛皮癬甚至更類似，其在組織學上、分子上及在其對治療法之反應上與人類疾病類似。此外，當利用抗IL-36R抗體治療免疫缺陷型小鼠時，移植至該小鼠之人類牛皮癬損傷皮膚正常化，此證明需要IL-36軸來維持人類牛皮癬皮膚中之損傷表現型。該等數據合起來指示IL-36R配體(包括IL-36α、IL-36β及IL-36γ)在活體外及活體內發揮促發炎效應且IL-36Ra作為天然拮抗劑起作用，由此模擬IL-1/IL-1Ra系統。
因此，有證據證明許多疾病病狀中涉及IL-36R配體，且業內需要靶向此途徑、特定而言用於治療發炎性疾病之新治療劑。
本發明藉由提供與IL-36R結合之生物治療藥物、特定而言抗體來解決上文需要。在一態樣中，本發明抗體阻斷IL36配體介導之信號傳導(α、β及/或γ)。在一態樣中，本發明抗體可用於(例如)治療諸如牛皮癬、發炎性腸疾病、硬皮病、COPD及慢性腎病等疾病中上皮介導之發炎/纖維變性。
在一態樣中，本發明提供抗具有一或多種以下性質之 IL-36R抗體。
在一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體具有較高分子/細胞結合效能。在一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體以KD<0.1 nM與人類IL-36R結合。在又一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體、特定而言人類化抗IL-36R抗體以KD<50 pM與人類IL-36R結合。在一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體以EC90<5 nM與IL-36R表現細胞結合。
在另一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體具有較高的基於細胞之功能阻斷效能。在一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體在疾病相關細胞系及原代細胞中以IC90 5 nM阻斷所有三種IL-36R激動配體(α、β、γ)。
在一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體具有上文所述之分子/細胞結合效能及基於細胞之功能阻斷效能。
在又一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體對人類IL-1R1或IL-36R陰性細胞系具有高選擇性、例如大於1000倍之選擇性。在又一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體不與人類IL-1R1或IL-36R陰性細胞系結合。
在實施例一中，本發明提供抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其以等於或<0.1 nM之KD與人類IL-36R結合。
在實施例二中，本發明提供根據實施例一之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段係單株抗體或其抗原結合片段。
在實施例三中，本發明提供根據實施例一或二之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段 係人類化之抗體或其抗原結合片段。
在實施例四中，本發明提供根據實施例三之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其以等於或<50 pM之KD與人類IL-36R結合。
在實施例五中，本發明提供根據實施例一至實施例四中任一者之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其不與人類IL-1R1結合。
在實施例六中，本發明提供根據實施例一之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：35、102、103、104、105、106或140(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62、108、109、110或111(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：72(H-CDR3)。
在實施例七中，本發明提供根據實施例六之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：102(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H- CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62、108、109、110或111(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：72(H-CDR3)。
在實施例八中，本發明提供根據實施例六之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：103(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62、108、109、110或111(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：72(H-CDR3)。
在實施例九中，本發明提供根據實施例六之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：104(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62、108、109、110或111(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：72(H-CDR3)。
在實施例十中，本發明提供根據實施例六之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26(L- CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：105(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62、108、109、110或111(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：72(H-CDR3)。
在實施例十一中，本發明提供根據實施例六之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：106(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62、108、109、110或111(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：72(H-CDR3)。
在實施例十二中，本發明提供根據實施例六之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：140(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62、108、109、110或111(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：72(H-CDR3)。
在實施例十三中，本發明提供根據實施例一之抗IL-36R 抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：包含SEQ ID NO：76、77、78、79、80、81、82或83中之任一者之胺基酸序列之輕鏈可變區；及包含SEQ ID NO：87、88、89、90、91、92、93、94或95中之任一者之胺基酸序列之重鏈可變區。
在實施例十四中，本發明提供根據實施例十三之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：77之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：87之重鏈可變區；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：77之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：88之重鏈可變區；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：77之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：89之重鏈可變區。
在實施例十五中，本發明提供抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：80之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：87之重鏈可變區；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：80之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：88之重鏈可變區；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：80之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：89之重鏈可變區。
在實施例十六中，本發明提供根據實施例一之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含： 輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：27(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：36(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：45(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：107(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：63(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：73(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：27(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：36(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：45(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：107(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：64(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：73(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：27(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：36(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：45(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：54(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：63或64(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：73(H-CDR3)。
在實施例十七中，本發明提供根據實施例一之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：包含SEQ ID NO：84、85或86中之任一者之胺基酸序列之輕鏈可變區；及包含SEQ ID NO：96、97、98、99、100或101中之任一者之胺基酸序列之重鏈可變區。
在實施例十八中，本發明提供根據實施例十七之抗IL- 36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：85之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：100之重鏈可變區；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：85之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：101之重鏈可變區。
在實施例十九中，本發明提供根據實施例十七之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：86之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：100之重鏈可變區；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：86之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：101之重鏈可變區。
在實施例二十中，本發明提供抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含SEQ ID NO：114、115、116、117、118、119、120或121中任一者之胺基酸序列之輕鏈；及包含SEQ ID NO：125、126、127、128、129、130、131、132或133中之任一者之胺基酸序列之重鏈。
在實施例二十一中，本發明提供根據實施例二十之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：115之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：125之重鏈。
在實施例二十二中，本發明提供根據實施例二十之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：115之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：126之重鏈。
在實施例二十三中，本發明提供根據實施例二十之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：115之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：127之重鏈。
在實施例二十四中，本發明提供根據實施例二十之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：118之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：125之重鏈。
在實施例二十五中，本發明提供根據實施例二十之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：118之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：126之重鏈。
在實施例二十六中，本發明提供根據實施例二十之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：118之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：127之重鏈。
在實施例二十七中，本發明提供抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含SEQ ID NO：122、123或124中之任一者之胺基酸序列之輕鏈；及包含SEQ ID NO：134、135、136、137、138或139中之任一者之胺基酸序列之重鏈。
在實施例二十八中，本發明提供根據實施例二十七之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：123之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：138之重鏈。
在實施例二十九中，本發明提供根據實施例二十七之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：123之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：139之重鏈。
在實施例三十中，本發明提供根據二十七之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：124之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：138之重鏈。
在實施例三十一中，本發明提供根據實施例一之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：103(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：72(H-CDR3)。
在實施例三十二中，本發明提供根據實施例一之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：104(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62(H-CDR2)；胺基酸序 列SEQ ID NO：72(H-CDR3)。
在實施例三十三中，本發明提供根據實施例一之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：27(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：36(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：45(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：107(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：63(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：73(H-CDR3)。
在實施例三十四中，本發明提供根據實施例一之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：27(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：36(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：45(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：107(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：64(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：73(H-CDR3)。
在一實施例中，根據實施例一至三十四中之任一者之抗體或其抗原結合片段係單株抗體。在一實施例中，根據實施例一至三十四中之任一者之抗體或其抗原結合片段係人類化之抗體。在一實施例中，根據實施例一至三十四中之任一者之抗體或其抗原結合片段係單株人類化抗體。
在實施例三十五中，本發明提供抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：21(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：30(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：39(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：48(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：57(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：67(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：22(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：31(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：40(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：49(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：58(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：68(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：23(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：32(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：41(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：50(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：59(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：69(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：24(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：33(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：42(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：51(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：60(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：70(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：25(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：34(L-CDR2)；胺基酸序 列SEQ ID NO：43(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：52(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：61(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：71(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：35(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：72(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：27(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：36(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：45(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：54(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：63(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：73(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：27(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：36(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：45(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：54(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：64(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：73(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：28(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：37(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：46(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：55(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：65(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：74(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：29(L- CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：38(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：47(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：56(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：66(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：75(H-CDR3)。
在實施例三十六中，本發明提供抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：1之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：11之重鏈可變區；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：2之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：12之重鏈可變區；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：3之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：13之重鏈可變區；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：4之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：14之重鏈可變區；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：5之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：15；之重鏈可變區或包含胺基酸序列SEQ ID NO：6之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：16之重鏈可變區；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：7之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：17之重鏈可變區；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：8之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：18之重鏈可變區；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：9之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：19之重鏈可變區；或 包含胺基酸序列SEQ ID NO：10之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：20之重鏈可變區。
在又一實施例三十七中，本發明提供醫藥組合物，其包含根據先前實施例中之任一者之抗體或抗原結合片段及醫藥上可接受之載劑。
在又一實施例三十八中，本發明提供根據先前實施例中之任一者之抗體或抗原結合片段或醫藥組合物，其用於醫學中。
在又一實施例三十九中，本發明提供根據實施例1至37中任一者之抗體或抗原結合片段或醫藥組合物，其中該用途係治療發炎性疾病、自體免疫疾病、呼吸疾病、代謝病症、上皮介導之發炎病症、纖維變性或癌症。
在又一實施例四十中，本發明提供根據實施例1至37中任一者之抗體或抗原結合片段或醫藥組合物，其中該用途係用於治療牛皮癬、發炎性腸疾病、牛皮癬性關節炎、多發性硬化症、類風濕性關節炎、COPD、慢性氣喘或關節黏連性脊椎炎。
在又一實施例四十一中，本發明提供根據實施例1至37中任一者之抗體或抗原結合片段或醫藥組合物，其中該用途係用於治療發炎性腸疾病。
在再一實施例四十二中，本發明提供根據實施例41之抗體或抗原結合片段或醫藥組合物，其中該疾病係克隆氏病(Crohns disease)。
在另一實施例四十三中，本發明提供治療疾病之方法， 該方法包含向有需要之患者投與根據實施例1至37中任一者之抗體或抗原結合片段或醫藥組合物，其中該疾病係選自發炎性疾病、自體免疫疾病、呼吸疾病、代謝病症、上皮介導之發炎病症、纖維變性及癌症。
在另一實施例四十四中，本發明提供根據實施例43之方法，其中該疾病係選自牛皮癬、發炎性腸疾病、牛皮癬性關節炎、多發性硬化症、類風濕性關節炎、COPD、慢性氣喘及關節黏連性脊椎炎。
在再一實施例四十五中，本發明提供治療克隆氏病之方法。
本發明之其他實施例涵蓋：- 分離多核苷酸，其包含編碼本發明之抗IL-36R抗體或抗原結合片段之序列，較佳DNA或RNA序列；- 本發明之分離多核苷酸，其編碼藉由SEQ ID NO.1至140中之一或多者定義之序列；- 載體，其包含本發明之多核苷酸，較佳為表現載體，更佳為包含本發明多核苷酸與表現控制序列功能聯結之載體；- 宿主細胞，其包含本發明多核苷酸及/或本發明載體；- 產生本發明之抗IL-36R抗體或抗原結合片段之方法，較佳重組產生方法，其包含使用本發明多核苷酸及/或本發明載體及/或本發明宿主細胞；- 此一方法較佳包含以下步驟：(a)在允許抗IL-36R抗體或抗原結合片段表現之條件下培養宿主細胞及(b)回收抗 IL-36R抗體或抗原結合片段；- 診斷套組或診斷方法，其包含本發明之抗IL-36R抗體或抗原結合片段或其使用；- 本發明之診斷套組或診斷方法，其用於診斷發炎性疾病、自體免疫疾病、呼吸疾病、代謝病症、上皮介導之發炎病症、纖維變性、癌症、牛皮癬、發炎性腸疾病、牛皮癬性關節炎、多發性硬化症、類風濕性關節炎、COPD、慢性氣喘、關節黏連性脊椎炎或克隆氏病。
本發明係關於抗IL-36R抗體。在一態樣中，本發明抗體在(例如)人類中係用於診斷及治療用途。
本發明提供與IL-36R、特定而言人類IL-36R結合之抗體。本發明亦係關於結合IL-36R之人類化抗體。在具體實施例中，已基於某些主要小鼠抗體之序列確定該等人類化抗體之序列。
不希望受此理論限制，認為抗IL-36R抗體或其抗原結合片段與人類IL-36R結合且從而干擾IL-36激動劑之結合，且這樣做時至少部分地阻斷自IL-36R至發炎媒介物之信號傳導級聯。此藉由圖1來圖解說明。
在一態樣中，本發明抗體係用於人類疾病模型。IL-36R亦稱為IL-1RL2及IL-1Rrp2。已報導，IL-36激動配體(α、β或γ)藉由接合IL-36受體、然後與IL-1受體輔助蛋白(IL-1RAcP)形成異源二聚體來起始信號傳導級聯。IL-36拮抗配體(IL-36RA/IL1F5、IL-38/ILF10)抑制信號傳導級聯(參 見圖1)。
在一態樣中，本發明提供抗具有一或多種以下性質之IL-36R抗體。
在一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體具有較高分子/細胞結合效能。在一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體以KD<0.1 nM與人類IL-36R結合。在又一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體、特定而言人類化抗IL-36R抗體以KD<50 pM與人類IL-36R結合。在一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體以EC90<5 nM與IL-36R表現細胞結合。
在另一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體具有較高的基於細胞之功能阻斷效能。在一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體在疾病相關細胞系及原代細胞中以IC90 5 nM阻斷所有三種IL-36R激動配體(α、β、γ)。
在一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體具有上文所述之分子/細胞結合效能及基於細胞之功能阻斷效能。
在一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體係人類化抗體。在一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體係單株抗體。在一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體係全長抗體。在一態樣中，本發明之抗IL-36R抗體係人類化單株抗體，例如全長人類化單株抗體。
本發明之抗體或其抗原結合片段識別特異性「IL-36R抗原表位」或「IL-36R表位」。如本文所用，該等術語係指能夠與抗IL-36R抗體產生免疫反應性之分子(例如，肽)或分子片段。
最常見表位係蛋白質、短寡肽、寡肽模擬物(即，模擬IL-36R抗原之抗體結合性質之有機化合物)或其組合。認為抗體之肽或多肽表位之最小尺寸係約4個至5個胺基酸。肽或多肽表位含有(例如)至少7個胺基酸或(例如)至少9個胺基酸或(例如)介於約15個至約20個之間之胺基酸。由於抗體可識別呈三級形式之抗原肽或多肽，故包含表位之胺基酸不需為鄰接的，且在一些情形下，可甚至不在同一肽鏈上。表位可藉由業內已知之各種技術來測定，例如X射線結晶學、氫/氘交換質譜法(HXMS)、定點誘變、丙胺酸掃描誘變及肽篩選法。
抗體或免疫球蛋白之一般化結構為熟習此項技術者所熟知。該等分子係通常為約150,000道耳頓(dalton)之異源四聚體糖蛋白，其由兩個相同輕(L)鏈及兩個相同重(H)鏈組成且通常稱為全長抗體。每一輕鏈係藉由一個二硫鍵與重鏈共價連接而形成異源二聚體，且異源四聚體分子係藉助異源二聚體中兩個相同重鏈之間之共價二硫鍵來形成。儘管輕鏈及重鏈係藉由一個二硫鍵連接在一起，但兩個重鏈之間之二硫鍵數可隨免疫球蛋白同型而變。每一重鏈及輕鏈亦具有規則間隔之鏈內二硫鍵。每一重鏈在胺基末端具有可變結構域(VH)，之後係三個或四個恆定結構域(CH1、CH2、CH3及CH4)，以及CH1與CH2之間之鉸鏈區。每一輕鏈具有兩個結構域，即胺基末端可變結構域(VL)及羧基末端恆定結構域(CL)。VL結構域與VH結構域非共價結合，而CL結構域通常經由二硫鍵與CH1結構域共價連接。據信，特 定胺基酸殘基在輕鏈可變結構域與重鏈可變結構域之間形成介面(Chothia等人，1985,J.Mol.Biol.186：651-663)。可變結構域在本文中亦稱為可變區。
在不同抗體之間，可變結構域內之某些結構域廣泛不同，即具有「超變性」。該等超變結構域含有直接參與每一特定抗體與其特異性抗原決定簇之結合及特異性之殘基。輕鏈可變結構域與重鏈可變結構域二者中之超變性均集中於三個稱為互補決定區(CDR)或超變環(HVL)之區段中。CDR係藉由以下文獻中之序列比較來定義：Kabat等人，1991，Sequences of Proteins of Immunological Interest，第5版，Public Health Service,National Institutes of Health,Bethesda,MD.，而HVL(在本文中亦稱為CDR)係根據可變結構域之三維結構在結構上定義，如Chothia及Lesk,1987,J.Mol.Biol.196：901-917中所述。其中該兩種方法識別之CDR略有不同。如由Kabat所定義，在輕鏈可變結構域中，CDR-L1大致位於殘基24-34處，CDR-L2大致位於殘基50-56處，且CDR-L3大致位於殘基89-97處；在重鏈可變結構域中，CDR-H1大致位於殘基31-35處，CDR-H2大致位於殘基50-65處，且CDR-H3大致位於殘基95-102處。涵蓋特定CDR之確切殘基數將視CDR之序列及尺寸而變。給定抗體之可變區胺基酸序列，熟習此項技術者可以常規方式確定哪些殘基包含特定CDR。重鏈及輕鏈之CDR1、CDR2、CDR3由此界定對於給定抗體具有特異性之獨特功能性質。
每一重鏈及輕鏈內之三個CDR係由框架區(FR)來間隔，框架區含有可變性往往較低之序列。自重鏈及輕鏈可變結構域之胺基末端至羧基末端，FR及CDR係以以下順序排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3及FR4。FR之較大β-摺疊構型使每一鏈內之CDR彼此緊鄰且與另一鏈中之CDR緊鄰。所得構象有助於抗原結合位點(參見Kabat等人，1991,NIH Publ.第91-3242號，第I卷，第647頁-第669頁)，但並非所有CDR殘基均必須直接參與抗原結合。
FR殘基及Ig恆定結構域並不直接參與抗原結合，但有助於抗原結合及/或介導抗體效應子功能。人們認為，一些FR殘基以至少三種方式對抗原結合產生顯著效應：直接與表位非共價結合，與一或多個CDR殘基相互作用，及影響重鏈與輕鏈之間之介面。恆定結構域並不直接參與抗原結合，但介導各種Ig效應子功能，例如介導抗體參與抗體依賴性細胞毒性(ADCC)、補體依賴性細胞毒性(CDC)及抗體依賴性細胞吞噬作用(ADCP)。
可基於恆定結構域之胺基酸序列將脊椎動物免疫球蛋白之輕鏈分配至兩個顯著不同之類別(卡帕(κ)及蘭布達(λ))中之一類中。藉由比較，根據恆定結構域之序列將哺乳動物免疫球蛋白之重鏈分配至五個主要類別中之一類中：IgA、IgD、IgE、IgG及IgM。將IgG及IgA進一步分為亞類(同型)，例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1及IgA2。與免疫球蛋白之不同類別相對應之重鏈恆定結構域分別稱為α、β、ε、γ及μ。各天然免疫球蛋白類別之亞單元結構及 三維構型為人所熟知。
術語「抗體」、「抗IL-36R抗體」、「人類化抗IL-36R抗體」、「人類化抗IL-36R表位抗體」及「變體人類化抗IL-36R表位抗體」具體涵蓋單株抗體(包括全長單株抗體)、多株抗體、多特異性抗體(例如，雙特異性抗體)及抗體片段，例如抗體中呈現期望生物學活性(例如，IL-36R結合)之可變結構域及其他部分。術語「單株抗體」(mAb)係指具有高度特異性且針對單一抗原決定簇(「表位」)之抗體。因此，修飾詞「單株」指示針對相同表位之抗體，且不應理解為需要藉由任何特定方法來產生該抗體。應理解，單株抗體可藉由業內已知之任何技術或方法來製備；包括(例如)融合瘤方法(Kohler等人，1975,Nature 256：495)，或業內已知之重組DNA方法(例如，參見美國專利第4,816,567號)，或使用噬菌體抗體文庫並使用以下文獻中所述技術分離以重組方式產生之單株抗體之方法：Clackson等人，1991,Nature 352：624-628；及Marks等人，1991,J.Mol.Biol.222：581-597。
術語「單體」係指抗體之均質形式。例如，對於全長抗體而言，單體意指具有兩個相同重鏈及兩個相同輕鏈之單體抗體。
嵌合抗體係由來自一物種(例如，非人類哺乳動物，例如小鼠)之抗體之重鏈及輕鏈可變區及另一物種(例如，人類)抗體之重鏈及輕鏈恆定區組成，且可藉由以下方式來獲得：連接來自第一物種(例如，小鼠)之編碼抗體可變區 之DNA序列與來自第二物種(例如人類)之編碼抗體恆定區之DNA序列，並用含有該等經連接序列之表現載體轉化宿主，從而使其產生嵌合抗體。或者，嵌合抗體亦可係其中重鏈及/或輕鏈中之一或多個區域或結構域與來自另一免疫球蛋白類別或同型之單株抗體中之對應序列相同、同源或係其變體，或來自共有序列或種系序列者。嵌合抗體可包括該等抗體之片段，限制條件係抗體片段呈現其親代抗體之期望生物學活性，例如與相同表位結合(例如，參見美國專利第4,816,567號；及Morrison等人，1984,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 81：6851-6855)。
術語「抗體片段」、「抗IL-36R抗體片段」、「抗IL-36R表位抗體片段」、「人類化抗IL-36R抗體片段」、「人類化抗IL-36R表位抗體片段」、「變體人類化抗IL-36R表位抗體片段」係指全長抗IL-36R抗體之一部分，其中保留可變區或功能能力，例如，特異性IL-36R表位結合。抗體片段之實例包括(但不限於)Fab、Fab'、F(ab')2、Fd、Fv、scFv及scFv-Fc片段、雙鏈抗體、線性抗體、單鏈抗體、微小抗體、自抗體片段形成之雙鏈抗體及自抗體片段形成之多特異性抗體。
可用諸如木瓜酶或胃蛋白酶等酶處理全長抗體以生成可用抗體片段。使用木瓜酶消化來產生兩個相同的稱作「Fab」片段之抗原結合抗體片段(各自具有單一抗原結合位點)及殘留「Fc」片段。Fab片段亦含有輕鏈之恆定結構域及重鏈之CH1結構域。胃蛋白酶處理產生F(ab')2片段， 其具有兩個抗原結合位點且仍能交聯抗原。
Fab'片段與Fab片段之不同之處在於在CH1結構域之C末端存在額外殘基，包括一或多個來自抗體鉸鏈區之半胱胺酸。F(ab')2抗體片段係藉由鉸鏈區中之半胱胺酸殘基連接之Fab'片段對。亦已知抗體片段之其他化學偶合。
「Fv」片段含有完整抗原識別及結合位點，該位點係由一個重鏈可變結構域與一個輕鏈可變結構域呈緊密非共價連接之二聚體組成。在此構型中，每一可變結構域之三個CDR相互作用，從而在該VH-VL二聚體之表面上界定抗原結合位點。該六個CDR共同賦予該抗體抗原結合特異性。
「單鏈Fv」或「scFv」抗體片段係包含抗體之VH及VL結構域之單鏈Fv變體，其中該等結構域存於單一多肽鏈中。單鏈Fv能識別並結合抗原。scFv多肽視情況亦可含有位於VH結構域與VL結構域之間之多肽連接體，以促進scFv形成用於抗原結合之期望三維結構(例如，參見Pluckthun,1994,In The Pharmacology of monoclonal Antibodies，第113卷，Rosenburg及Moore編輯，Springer-Verlag,New York，第269頁-第315頁)。
「雙鏈抗體」係指具有兩個抗原結合位點之小抗體片段，該等片段包含在同一多肽鏈(VH-VL或VL-VH)中連接至輕鏈可變結構域(VL)之重鏈可變結構域(VH)。雙鏈抗體係更充分地闡述於(例如)Holliger等人(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90：6444-6448中。
其他已識別抗體片段包括彼等包含串聯Fd區段(VH-CH1- VH-CH1)對以形成抗原結合區對者。該等「線性抗體」可具有雙特異性或單特異性，如於(例如)Zapata等人，1995,Protein Eng.8(10)：1057-1062中所闡述。
「人類化抗體」或「人類化抗體片段」係特定類型之嵌合抗體，其包括免疫球蛋白胺基酸序列變體或其片段，其能與預定抗原結合，且其包含一或多個實質上具有人類免疫球蛋白胺基酸序列之FR及一或多個實質上具有非人類免疫球蛋白胺基酸序列之CDR。此常稱作「導入」序列之非人類胺基酸序列通常取自「導入」抗體結構域，特定而言可變結構域。通常，人類化抗體至少包括非人類抗體之CDR或HVL，其插入人類重鏈或輕鏈可變結構域之FR之間。本發明闡述具體人類化抗IL-36R抗體，其含有源自小鼠單株抗體之CDR或人類化CDR，該等CDR插入人類種系序列重鏈及輕鏈可變結構域之FR之間。應理解，某些小鼠FR殘基可對人類化抗體之功能具有重要意義，且因此修飾某些人類種系序列重鏈及輕鏈可變結構域殘基以使其與對應小鼠序列中之彼等相同。
在另一態樣中，人類化抗IL-36R抗體包含實質上所有之至少一個(且通常兩個)可變結構域(例如含於(例如)Fab、Fab'、F(ab')2、Fabc及Fv片段中者)，其中所有或實質上所有CDR均與非人類免疫球蛋白中之彼等相對應，且在本文中具體而言，所有CDR均係下文中所詳述之小鼠或人類化序列，且所有或實質上所有FR均係人類免疫球蛋白共有序列或種系序列中之彼等。在另一態樣中，人類化抗IL-36R 抗體亦包括免疫球蛋白Fc區之至少一部分，通常係人類免疫球蛋白中者。通常，抗體可含有輕鏈以及至少重鏈之可變結構域二者。若適宜，抗體亦可包括重鏈之CH1、鉸鏈、CH2、CH3及/或CH4區中之一或多者。
人類化抗IL-36r抗體可選自任一免疫球蛋白類別(包括IgM、IgG、IgD、IgA及IgE)及任一同型(包括IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1及IgA2)。例如，恆定結構域可係補體固定之恆定結構域，其中期望人類化抗體呈現細胞毒性活性，且同型通常係IgG1。若不期望該細胞毒性活性，則恆定結構域可為另一同型，例如IgG2。替代性人類化抗IL-36R抗體可包含來自不止一個免疫球蛋白類別或同型之序列，且熟習此項技術者可選擇特定恆定結構域來優化期望效應子功能。在具體實施例中，本發明所提供抗體係IgG1抗體，且更特定而言係剔除效應子功能之IgG1抗體。
人類化抗IL-36R抗體之FR及CDR或HVL不需要與親代序列精確對應。例如，可藉由取代、插入或缺失來改變(例如，誘變處理)導入CDR或HVL或共有或種系FR序列中之一或多個殘基，從而使得所得胺基酸殘基不再與任一親代序列中對應位置之原始殘基相同，但抗體仍保留與IL-36R結合之功能。該改變通常可並非廣泛改變且可係保守改變。通常，至少75%之人類化抗體殘基可與親代共有或種系FR及導入CDR序列中之彼等殘基相對應，更通常有至少90%、且最通常有超過95%或超過98%或超過99%之殘基相對應。
影響重鏈與輕鏈可變區之間之介面(「VL-VH介面」)之免疫球蛋白殘基係彼等影響兩條鏈相對於彼此之接近或定向者。某些可能參與鏈間相互作用之殘基包括VL殘基34、36、38、44、46、87、89、91、96及98以及VH殘基35、37、39、45、47、91、93、95、100及103(採用Kabat等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest(National Institutes of Health,Bethesda,Md.,1987)中所述之編號系統)。美國專利第6,407,213號亦論述，諸如VL殘基43及85以及VH殘基43及60等殘基亦可能參與此相互作用。儘管僅針對人類IgG闡述該等殘基，但其亦適用於其他物種。選擇合理地預期參與鏈間相互作用之重要抗體殘基用於共有序列中之取代。
術語「共有序列」及「共有抗體」係指在任一特定類別、同型或亞單元結構之所有免疫球蛋白(例如人類免疫球蛋白可變結構域)中之每一位置處包含最常出現之胺基酸殘基的胺基酸序列。共有序列可係基於特定物種或多個物種之免疫球蛋白。「共有」序列、結構或抗體可理解為涵蓋某些實施例中所述之共有人類序列，且係指在任一特定類別、同型或亞單元結構之所有人類免疫球蛋白中之每一位置處包含最常出現之胺基酸殘基之胺基酸序列。因此，共有序列含有在每一位置處具有存於一或多種已知免疫球蛋白中之胺基酸之胺基酸序列，但其可能並不完全複製任一單一免疫球蛋白之整個胺基酸序列。可變區共有序列並非自任一天然產生之抗體或免疫球蛋白獲得。Kabat 等人，1991,Sequences of Proteins of Immunological Interest，第5版，Public Health Service,National Institutes of Health,Bethesda,Md.及其變化形式。
人類種系序列天然存於人類種群中。該等種系基因之組合產生抗體多樣性。抗體輕鏈之種系抗體序列來自保守人類種系κ或λ v-基因及j-基因。類似地，重鏈序列來自種系v-、d-及j-基因(LeFranc,M-P及LeFranc,G，「The Immunoglobulin Facts Book」Academic Press,2001)。
如本文所用，「變體」、「抗IL-36R變體」、「人類化抗IL-36R變體」或「變體人類化抗IL-36R」各自係指至少具有輕鏈可變鼠類CDR之人類化抗IL-36R抗體。變體包括彼等在輕鏈或重鏈可變結構域之一或兩者中具有一或多處胺基酸變化者，限制條件係該等胺基酸變化不會實質上損害抗體與IL-36R之結合。
「經分離」抗體係已經識別且已自其天然環境之組份中分離及/或回收之抗體。抗體天然環境中之污染物組份係彼等可干擾抗體之診斷或治療用途之材料，且可係酶、激素或其他蛋白質性或非蛋白質性溶質。在一態樣中，可將抗體純化至以抗體重量計至少大於95%之分離度。
由於抗體天然環境中之至少一種組份不會存在，故分離抗體包括產生其之重組細胞內之原位抗體。然而，分離抗體通常可藉由至少一個純化步驟來製備，其中移除重組細胞材料。
術語「抗體性能」係指有助於抗體識別抗原或抗體之活 體內效力之因素。抗體之胺基酸序列之變化可影響諸如摺疊等抗體性質，且可影響諸如以下等物理因素：抗體與抗原結合之初始速率(ka)、抗體與抗原之解離常數(kd)、抗體對抗原之親和常數(Kd)、抗體構象、蛋白質穩定性及抗體半衰期。
本文所用術語「經表位標記」係指抗IL-36R抗體與「表位標籤」融合。「表位標籤」係具有足量胺基酸以為抗體產生提供表位之多肽，且其經設計以使得其不干擾人類化抗IL-36R抗體之期望活性。表位標籤通常具有充分獨特性以使得針對該表位標籤產生之抗體實質上不會與其他表位發生交叉反應。適宜標籤多肽通常含有至少6個胺基酸殘基且通常含有約8個至50個胺基酸殘基或約9個至30個殘基。表位標籤及結合表位之抗體之實例包括流感HA標籤多肽及其抗體12CA5(Field等人，1988 Mol.Cell.Biol.8：2159-2165)；c-myc標籤及其8F9、3C7、6E10、G4、B7及9E10抗體(Evan等人，1985,Mol.Cell.Biol.5(12)：3610-3616)；及皰疹單純型病毒糖蛋白D(gD)標籤及其抗體(Paborsky等人，1990,Protein Engineering 3(6)：547-553)。在某些實施例中，表位標籤係「補救受體結合表位」。本文所用術語「補救受體結合表位」係指IgG分子(例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4)之Fc區中之表位，其負責延長IgG分子之活體內血清半衰期。
在一些實施例中，本發明抗體可與細胞毒性劑偶聯。此係抑制或防止細胞功能及/或引起細胞破壞之任何物質。 該術語意欲包括放射性同位素(例如I131、I125、Y90及Re186)、化學治療劑及毒素(例如細菌、真菌、植物或動物源之酶促活性毒素)及其片段。該等細胞毒性劑可使用標準程序與本發明之人類化抗體偶合，且可用於(例如)治療適用抗體療法之患者。
「化學治療劑」係可用於治療癌症之化學化合物。化學治療劑有多種實例可與本發明之治療性抗體偶聯。該等化學治療劑之實例包括烷基化劑，例如噻替哌(thiotepa)及環磷醯胺；磺酸烷基酯，例如白消安(busulfan)、英丙舒凡(improsulfan)及哌泊舒凡(piposulfan)；氮雜環丙烷，例如苯并多巴(benzodopa)、卡波醌(carboquone)、美妥替哌(meturedepa)及烏瑞替哌(uredepa)；伸乙亞胺及甲基密胺，包括六甲密胺(altretamine)、三伸乙基密胺、三伸乙基磷醯胺、三伸乙基硫代磷醯胺及三羥甲基密胺；番荔枝內酯(acetogenin)(尤其係布拉它辛(bullatacin)及布拉它辛酮(bullatacinone))；喜樹鹼(camptothecin)(包括合成類似物托泊替康(topotecan))；苔蘚蟲素(bryostatin)；卡利抑制素(callystatin)；CC-1065(包括其合成類似物阿多來新(adozelesin)、卡澤來新(carzelesin)及比澤來新(bizelesin))；克利特非辛(cryptophycin)(尤其係克利特非辛1及克利特非辛8)；尾海兔素(dolastatin)；奧裏斯他汀(auristatin)(包括類似物單甲基-奧裏斯他汀E及單甲基-奧裏斯他汀F)；多卡米星(duocarmycin)(包括合成類似物KW-2189及CBI-TMI)；艾榴塞洛素(eleutherobin)；水鬼蕉鹼(pancratistatin)； 匍枝珊瑚醇(sarcodictyin)；海綿抑制素(spongistatin)；氮芥(nitrogen mustard)，例如苯丁酸氮芥(chlorambucil)、萘氮芥(chlomaphazine)、氯磷醯胺(cholophosphamide)、雌莫司汀(estramustine)、異環磷醯胺(ifosfamide)、二氯甲二乙胺(mechlorethamine)、鹽酸甲氧氮芥(mechlorethamine oxide hydrochloride)、黴法蘭(melphalan)、新氮芥(novembichin)、苯乙酸氮芥膽甾醇酯(phenesterine)、潑尼莫司汀(prednimustine)；曲磷胺(trofosfamide)、尿嘧啶氮芥；硝基脲，例如卡莫司汀(carmustine)、氯脲菌素(chlorozotocin)、福莫司汀(fotemustine)、洛莫司汀(lomustine)、尼莫司汀(nimustine)及雷莫司汀(ranimnustine)；抗生素，例如烯二炔抗生素(例如，卡奇黴素(calicheamicin)，尤其係卡奇黴素γ1I及卡奇黴素φI1(例如，參見Agnew,Chem.Intl.Ed.Engl.,33：183-186)；達內黴素(dynemicin)，包括達內黴素A；雙膦酸鹽，例如氯屈膦酸鹽(clodronate)；埃斯培拉黴素(esperamicin)；以及新製癌菌素發色團(neocarzinostatin chromophore)及相關色蛋白烯二炔抗生素發色團)、阿克拉黴素(aclacinomycin)、放線菌素(actinomycin)、安麯黴素(authramycin)、偶氮絲胺酸、博萊黴素(bleomycin)、放線菌素C(cactinomycin)、卡拉黴素(carabicin)、洋紅黴素(carminomycin)、嗜癌黴素(carzinophilin)、色黴素(chromomycin)、放線菌素D(dactinomycin)、柔紅黴素(daunorubicin)、地托比星(detorubicin)、6-重氮基-5-側氧基-L-正白胺酸、多柔比星 (doxorubicin)(AdriamycinTM)(包括嗎啉基-多柔比星、氰基嗎啉基-多柔比星、2-吡咯啉基-多柔比星及去氧多柔比星)、表柔比星(epirubicin)、依索比星(esorubicin)、伊達比星(idarubicin)、麻西羅黴素(marcellomycin)、絲裂黴素(mitomycin)(例如絲裂黴素C)、黴酚酸(mycophenolic acid)、諾拉黴素(nogalamycin)、橄欖黴素(olivomycin)、培洛黴素(peplomycin)、泊非黴素(porfiromycin)、嘌呤黴素(puromycin)、三鐵阿黴素(quelamycin)、羅多比星(rodorubicin)、鏈黑黴素(streptonigrin)、鏈脲黴素(streptozocin)、殺結核菌素(tubercidin)、烏苯美司(ubenimex)、淨司他汀(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；抗代謝物，例如甲胺蝶呤及5-氟尿嘧啶(5-FU)；葉酸類似物，例如二甲葉酸(denopterin)、甲胺蝶呤、蝶羅呤(pteropterin)、曲美沙特(trimetrexate)；嘌呤類似物，例如氟達拉濱(fludarabine)、6-巰基嘌呤、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鳥嘌呤；嘧啶類似物，例如安西他濱(ancitabine)、阿紮胞苷(azacitidine)、6-氮雜尿苷(6-azauridine)、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)、二去氧尿苷、去氧氟尿苷(doxifluridine)、依諾他濱(enocitabine)、氟尿苷(floxuridine)；雄激素，例如卡普睪酮(calusterone)、丙酸屈他雄酮(dromostanolone propionate)、環硫雄醇(epitiostanol)、美雄烷(mepitiostane)、睪內酯(testolactone)；抗腎上腺素，例如胺魯米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)、曲洛司坦(trilostane)；葉酸補充劑，例如亞葉酸；乙醯葡醛酸內 酯(aceglatone)；醛磷醯胺糖苷(aldophosphamide glycoside)；胺基乙醯丙酸(aminolevulinic acid)；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶(amsacrine)；百思布希(bestrabucil)；比生群(bisantrene)；依達曲沙(edatrexate)；地磷醯胺(defosfamine)；秋水仙胺(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；依氟鳥胺酸(eflomithine)；依利醋銨(elliptinium acetate)；埃博黴素(epothilone)；依託格魯(etoglucid)；硝酸鎵；羥基脲；香菇多糖(lentinan)；氯尼達明(lonidamine)；類美坦辛(maytansinoid)，例如美坦辛(maytansine)及安絲菌素(ansamitocin)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；莫哌達醇(mopidamol)；二胺硝吖啶(nitracrine)；噴托他汀(pentostatin)；蛋胺氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；洛索蒽醌(losoxantrone)；鬼臼酸；2-乙基醯肼；丙卡巴肼(procarbazine)；PSK®；雷佐生(razoxane)；根黴素(rhizoxin)；西佐喃(sizofiran)；鍺螺胺(spirogermanium)；細格孢氮雜酸(tenuazonic acid)；三亞胺醌(triaziquone)；2,2',2"-三氯三乙胺；新月毒素(尤其係T-2毒素、疣皰菌素A(verracurin A)、桿孢菌素(roridin A)及蛇形菌素(anguidine))；烏拉坦(urethan)；長春地辛(vindesine)；達卡巴嗪(dacarbazine)；甘露莫司汀(mannomustine)；二溴甘露醇(mitabronitol)；二溴衛矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；噶薩托辛(gacytosine)；阿拉伯糖苷(arabinoside)(「Ara-C」)；環磷醯胺；噻替哌；紫杉烷(taxoid)，例如紫杉醇(paclitaxel)(TAXOL®， Bristol-Myers Squibb Oncology,Princeton,N.J.)及多西紫杉醇(doxetaxel)(TAXOTERE®，Rhone-Poulenc Rorer,Antony,France)；苯丁酸氮芥；吉西他濱(gemcitabine)(GemzarTM)；6-硫鳥嘌呤；巰基嘌呤；甲胺蝶呤；鉑類似物，例如順鉑(cisplatin)及卡鉑(carboplatin)；長春花鹼(vinblastine)；鉑；依託泊苷(etoposide)(VP-16)；異環磷醯胺；米托蒽醌；長春新鹼(vincristine)；長春瑞濱(vinorelbine)(NavelbineTM)；諾安托(novantrone)；替尼泊苷(teniposide)；依達曲沙(edatrexate)；道諾黴素(daunomycin)；胺基蝶呤(aminopterin)；希羅達(xeloda)；伊班膦酸鹽(ibandronate)；CPT-11；拓撲異構酶抑制劑RFS 2000；二氟甲基鳥胺酸(DMFO)；類視色素，例如視黃酸；卡培他濱(capecitabine)；及上述藥劑中任一者之醫藥上可接受之鹽、酸或衍生物。此定義中亦包括用於調節或抑制激素對腫瘤之作用之抗激素劑，例如抗雌激素及選擇性雌激素受體調節劑(SERM)，包括(例如)他莫昔芬(tamoxifen)(包括NolvadexTM)、雷洛昔芬(raloxifene)、屈洛昔芬(droloxifene)、4-羥基他莫昔芬、曲沃昔芬(trioxifene)、鹽酸雷洛昔芬(keoxifene)、LY117018、奧那司酮(onapristone)及托瑞米芬(toremifene)(FarestonTM)；抑制酶芳香酶之芳香酶抑制劑，其調節腎上腺中之雌激素產生，例如4(5)-咪唑、胺魯米特、乙酸甲地孕酮(megestrol acetate)(MegaceTM)、依西美坦(exemestane)、福美司坦(formestane)、法屈唑(fadrozole)、伏羅唑(vorozole)(RivisorTM)、來曲唑(letrozole) (FemaraTM)及阿那曲唑(anastrozole)(ArimidexTM)；及抗雄激素，例如氟他胺(flutamide)、尼魯米特(nilutamide)、比卡魯胺(bicalutamide)、亮丙瑞林(leuprolide)及戈舍瑞林(goserelin)；及上述藥劑中任一者之醫藥上可接受之鹽、酸或衍生物。該等藥劑中之任何一或多者可與本發明人類化抗體偶聯以提供用於治療各種病症之有用治療劑。
亦可使抗體與前藥偶聯。「前藥」係醫藥活性物質之前體或衍生物形式，其對腫瘤細胞之細胞毒性與母體藥物相比較小，且能酶促活化或轉化為活性更強之形式。例如，參見Wilman,1986,「Prodrugs in Cancer Chemotherapy」，Biochemical Society Transactions,14，第375頁-第382頁，615th Meeting Belfast；及Stella等人，1985，「Prodrugs：A Chemical Approach to Targeted Drug Delivery」，Directed Drug Delivery,Borchardt等人(編輯)，第247頁-第267頁，Humana Press。有用前藥包括(但不限於)含有磷酸根之前藥、含有硫代磷酸根之前藥、含有硫酸根之前藥、含有肽之前藥、經D-胺基酸修飾之前藥、糖基化前藥、含有β-內醯胺之前藥、含有視情況經取代之苯氧基乙醯胺之前藥及含有視情況經取代之苯基乙醯胺之前藥、5-氟胞嘧啶前藥及其他5-氟尿苷前藥，其可轉化成具有更高活性之無細胞毒性藥物。可衍生為前藥形式之細胞毒性藥物之實例包括(但不限於)彼等上文所述之化學治療劑。
出於診斷性以及治療性監測目的，亦可使本發明抗體與標記(單獨之標記或標記及額外第二藥劑(前藥、化學治療 劑及諸如此類))偶聯。標記與其他第二藥劑不同，其係指可檢測化合物或組合物藥劑，且其可與本發明人類化抗體直接或間接偶聯。標記可係自身可檢測(例如，放射性同位素標記或螢光標記)，或在酶標記情形下，標記可催化受質化合物或組合物發生可檢測之化學變化。可製備經標記人類化抗IL-36R抗體並用於各種應用中，包括活體外及活體內診斷學。
可將本發明抗體調配為脂質體製劑之一部分以影響其活體內遞送。「脂質體」係由各種類別之脂質、磷脂及/或表面活性劑組成之小囊泡。脂質體可用於向哺乳動物遞送化合物或調配物，例如本文所揭示之人類化抗IL-36R抗體，該抗體視情況與一或多種醫藥活性劑及/或標記偶合或組合。脂質體之組份通常以雙層結構排列，此與生物膜之脂質排列類似。
本發明某些態樣係關於分離核酸，其編碼本發明人類化抗體之一或多個結構域。「經分離」核酸分子係自至少一種污染物核酸分子識別並分離之核酸分子，其在抗體核酸之天然來源中通常與該污染物核酸分子相結合。分離核酸分子與存於天然細胞中之核酸分子不同。
在本發明之各種態樣中，可重組表現人類化抗體之一或多個結構域。該重組表現可採用一或多種控制序列，即在特定宿主生物體中表現可操作連接之編碼序列所需之多核苷酸序列。適用於原核細胞中之控制序列包括(例如)啟動子、操縱子及核糖體結合位點序列。真核控制序列包括 (但不限於)啟動子、聚腺苷酸化信號及增強子。該等控制序列可用於在原核及真核宿主細胞中表現及產生人類化抗IL-36R抗體。
在使核酸序列與另一核酸序列具有功能性聯繫時，該核酸序列經「可操作地連接」。例如，若核酸前序列或分泌前導序列表現為參與多肽分泌之前蛋白，則該核酸前序列或分泌前導序列與編碼該多肽之核酸可操作地連接；若啟動子或增強子影響編碼序列之轉錄，則該啟動子或增強子與該序列可操作地連接；或若核糖體結合位點經定位以促進轉譯，則該核糖體結合位點與編碼序列可操作地連接。通常，「可操作連接」意指所連接之DNA序列係鄰接序列，且在分泌前導序列情形下係鄰接序列且位於讀碼框內。然而，增強子視情況鄰接。可藉由在便捷之限制位點處接合來完成連接。若不存在該等位點，則可使用合成寡核苷酸銜接子或連接體。
本文所用表達「細胞」、「細胞系」及「細胞培養物」可互換使用，且所有該等名稱均包括其子代。因此，「轉化體」及「轉化細胞」包括原代個體細胞及源自其之培養物而不考慮轉移次數。
用於治療目的之術語「哺乳動物」係指任何歸類為哺乳動物之動物，包括人類、家畜及農場動物，以及動物園動物、運動用動物或寵物，例如狗、馬、貓、牛及諸如此類。較佳地，哺乳動物係人類。
本文所用「病症」係可受益於利用本文所述人類化抗 IL-36R抗體治療之任何病狀。該術語包括慢性及急性病症或疾病，包括彼等使哺乳動物易患所述病症之病理學病狀。本文欲治療之非限制性實例或病症包括發炎性病症、血管生成病症、自體免疫病症及免疫性病症、呼吸病症、癌症、血液惡性腫瘤、良性腫瘤及惡性腫瘤、白血病及淋巴惡性腫瘤。
術語「癌症」及「癌性」係指或描述哺乳動物中特徵通常在於細胞生長失調之生理學病狀。癌症之實例包括(但不限於)癌瘤、淋巴瘤、母細胞瘤、肉瘤及白血病。
IL-36R相關病症亦包括免疫系統疾病及病症，例如自體免疫病症及發炎性病症。該等病狀包括(但不限於)類風濕性關節炎(RA)、系統性紅斑狼瘡(SLE)、硬皮症、休格倫氏症候群(Sjogren's syndrome)、多發性硬化症、牛皮癬、牛皮癬性關節炎、發炎性腸疾病(例如，潰瘍性結腸炎及克隆氏病(Crohn's disease))、肺炎、氣喘及特發性血小板減少性紫癜(ITP)、上皮性發炎病症、纖維變性及關節黏連性脊椎炎。
術語「靜脈內輸注」係指藥劑引入動物或人類患者之靜脈中經大於約15分鐘、通常介於約30分鐘至90分鐘之間之時間。
術語「靜脈內快速濃注(bolus)」或「靜脈內推注」係指藥物投與動物或人類之靜脈中以使身體在約15分鐘或更短、通常5分鐘或更短時間內接受藥物。
術語「皮下投與」係指藥物引入動物或人類患者之皮膚 下、較佳在皮膚與基底組織之間之囊內，由藥物貯器相當緩慢持續遞送。將皮膚向上捏離或拉離基底組織可產生囊。
術語「皮下輸注」係指藥物引入動物或人類患者之皮膚下、較佳在皮膚與基底組織之間之囊內，由藥物貯器相當緩慢持續遞送一段時間，包括(但不限於)30分鐘或更短、或90分鐘或更短。視情況，可由皮下植入藥物遞送幫浦植入動物或人類患者之皮膚下來實施輸注，其中該幫浦遞送預定量之藥物經預定時間，例如30分鐘、90分鐘或跨越整個治療方案之時間。
術語「皮下快速濃注」係指藥物投與動物或人類患者之皮膚下，其中快速濃注藥物遞送短於約15分鐘；在另一態樣中，短於5分鐘；且在又一態樣中，短於60秒。在再一態樣中，投與皮膚與基底組織之間之囊內，其中該囊可由將皮膚向上捏離或拉離基底組織來產生。
所用術語「治療有效量」係指活性劑緩解或改善所治療病症之一或多種症狀之量。在另一態樣中，治療有效量係指已顯示可有效例如減慢疾病進展之目標血清濃度。可以習用方式測量功效，視欲治療病狀而定。
本文所用「治療」及「療法」及諸如此類意欲包括針對疾病或病症之治療性以及預防性或抑制性措施，其產生任何臨床上期望或有益之效應，包括(但不限於)減輕或緩解疾病或病症之一或多個症狀、使疾病或病症消退、減慢或停止疾病或病症之進展。因此，例如，術語治療包括在疾 病或病症之症狀發作之前或之後投與藥劑，由此預防或消除疾病或病症之一或多個體徵。作為另一實例，該術語包括在疾病之臨床表現後投與藥劑，從而抵抗該疾病之症狀。此外，在發作後及在已出現臨床症狀後投與藥劑包含本文所用「治療」或「療法」，其中不論該治療是否引起疾病改善，投與均影響疾病或病症之臨床參數，例如組織損傷度或轉移之量或程度。此外，只要單獨或與另一治療劑組合之本發明組合物與未使用人類化IL-36R抗體組合物時相比減輕或改善所治療病症之至少一個症狀，不論是否減輕該病症之所有症狀，該結果即應視為可有效治療潛在病症。
所用術語「包裝插頁」係指通常包括於治療產品之商業包裝內之說明書，其含有關於適應症、用法、投與、禁忌及/或關於使用該等治療產品之警告的資訊。
抗體
在一態樣中，本文闡述並揭示抗IL-36R抗體、特定而言人類化抗IL-36R抗體，及包含本發明之一或多種抗IL-36R抗體、特定而言一或多種人類化抗IL-36R抗體之組合物及製品。亦闡述包括抗IL-36抗體、特定而言人類化抗IL-36R抗體之抗原結合片段之結合劑。
本發明之代表性抗體之可變區及CDR係揭示於下文中：
抗IL-36R小鼠抗體序列
本發明之代表性小鼠前導抗體之可變區及CDR(小鼠前導序列)係顯示於下文中：
輕鏈可變區(VK)胺基酸序列
重鏈可變區(VH)胺基酸序列
輕鏈CDR-1(L-CDR1)胺基酸序列
>33D10G1 L-CDR1 TASSSVSSSYLH(SEQ ID NO：21)
>172C8B12 L-CDR1 LASQTIGTWLA(SEQ ID NO：22)
>67E7E8 L-CDR1 LASQTIGTWLG(SEQ ID NO：23)
>78C8D1 L-CDR1 RSSQNIVHSNGNTYLQ(SEQ ID NO：24)
>81A1D1 L-CDR1 RASQDIYKYLN(SEQ ID NO：25)
>81B4E11 L-CDR1 TASSSVSSSYFH(SEQ ID NO：26)
>73C5C10 L-CDR1 KASQDVGTNVL(SEQ ID NO：27)
>73F6F8 L-CDR1 KASQDVGTNVL(SEQ ID NO：27)
>76E10E8 L-CDR1 KASQNVGRAVA(SEQ ID NO：28)
>89A12B8 L-CDR1 LASQTIGTWLG(SEQ ID NO：29)
輕鏈CDR-2(L-CDR2)胺基酸序列
>33D10B12 L-CDR2 STSNLAS(SEQ ID NO：30)
>172C8B12 L-CDR2 AATSLAD(SEQ ID NO：31)
>67E7E8 L-CDR2 RSTTLAD(SEQ ID NO：32)
>78C8D1 L-CDR2 KVSNRFS(SEQ ID NO：33)
>81A1D1 L-CDR2 YTSGLHS(SEQ ID NO：34)
>81B4E11 L-CDR2 RTSNLAS(SEQ ID NO：35)
>73C5C10 L-CDR2 SASYRHS(SEQ ID NO：36)
>73F6F8 L-CDR2 SASYRHS(SEQ ID NO：36)
>76E10E8 L-CDR2 SASNRYT(SEQ ID NO：37)
>89A12B8 L-CDR2 RATSLAD(SEQ ID NO：38)
輕鏈CDR-3(L-CDR3)胺基酸序列
>33D10B12 L-CDR3 HQHHRSPVT(SEQ ID NO：39)
>172C8B12 L-CDR3 QQVYTTPLT(SEQ ID NO：40)
>67E7E8 L-CDR3 QQLYSAPYT(SEQ ID NO：41)
>78C8D1 L-CDR3 FQGSHVPFT(SEQ ID NO：42)
>81A1D1 L-CDR3 QQDSKFPWT(SEQ ID NO：43)
>81B4E11 L-CDR3 HQFHRSPLT(SEQ ID NO：44)
>73C5C10 L-CDR3 QQYSRYPLT(SEQ ID NO：45)
>73F6F8 L-CDR3 QQYSRYPLT(SEQ ID NO：45)
>76E10E8 L-CDR3 QQYSSYPLT(SEQ ID NO：46)
>89A12B8 L-CDR3 QQLYSGPYT(SEQ ID NO：47)
重鏈CDR-1(H-CDR1)胺基酸序列
>33D10B12 H-CDR1 GNTVTSYWMH(SEQ ID NO：48)
>172C8B12 H-CDR1 GYTFTDNYMN(SEQ ID NO：49)
>67E7E8 H-CDR1 GFNIKDDYIH(SEQ ID NO：50)
>78C8D1 H-CDR1 GFSLTKFGVH(SEQ ID NO：51)
>81A1D1 H-CDR1 GFSLSSYEIN(SEQ ID NO：52)
>81B4E11 H-CDR1 GYSFTSSWIH(SEQ ID NO：53)
>73C5C10 H-CDR1 GFSLTNYAVH(SEQ ID NO：54)
>73F6F8 H-CDR1 GFSLTNYAVH(SEQ ID NO：54)
>76E10E8 H-CDR1 GFSLTNYGVH(SEQ ID NO：55)
>89A12B8 H-CDR1 GFNIKDDYIH(SEQ ID NO：56)
重鏈CDR-2(H-CDR2)胺基酸序列
>33D10B12 H-CDR2 EILPSTGRTNYNENFKG(SEQ ID NO：57)
>172C8B12 H-CDR2 RVNPSNGDTKYNQNFKG(SEQ ID NO：58)
>67E7E8 H-CDR2 RIDPANGNTKYAPKFQD(SEQ ID NO：59)
>78C8D1 H-CDR2 VIWAGGPTNYNSALMS(SEQ ID NO：60)
>81A1D1 H-CDR2 VIWTGITTNYNSALIS(SEQ ID NO：61)
>81B4E11 H-CDR2 EINPGNVRTNYNENF(SEQ ID NO：62)
>73C5C10 H-CDR2 VIWSDGSTDFNAPFKS(SEQ ID NO：63)
>73F6F8 H-CDR2 VIWSDGSTDYNAPFKS(SEQ ID NO：64)
>76E10E8 H-CDR2 VIWPVGSTNYNSALMS(SEQ ID NO：65)
>89A12B8 H-CDR2 RIDPANGNTKYDPRFQD(SEQ ID NO：66)
重鏈CDR-3(H-CDR3)胺基酸序列
>33D10B12 H-CDR3 VYFGNPWFAY(SEQ ID NO：67)
>172C8B12 H-CDR3 TKNFYSSYSYDDAMDY(SEQ ID NO：68)
>67E7E8 H-CDR3 SFPNNYYSYDDAFAY(SEQ ID NO：69)
>78C8D1 H-CDR3 QIYYSTLVDY(SEQ ID NO：70)
>81A1D1 H-CDR3 GTGTGFYYAMDY(SEQ ID NO：71)
>81B4E11 H-CDR3 VFYGEPYFPY(SEQ ID NO：72)
>73C5C10 H-CDR3 KGGYSGSWFAY(SEQ ID NO：73)
>73F6F8 H-CDR3 KGGYSGSWFAY(SEQ ID NO：73)
>76E10E8 H-CDR3 MDWDDFFDY(SEQ ID NO：74)
>89A12B8 H-CDR3 SFPDNYYSYDDAFAY(SEQ ID NO：75)
抗IL-36R小鼠CDR序列 主要小鼠抗體之CDR序列之概述係顯示於下文中：
抗IL-36R人類化抗體序列
基於框架同源性、CDR結構、保守標準殘基、保守介面封裝殘基及其他參數來選擇小鼠前導序列之人類框架序列以產生人類化可變區(參見實例5)。
源自抗體81B4及73C5之代表性人類化可變區係顯示於下文中。
輕鏈可變區(VK)胺基酸序列
重鏈可變區(VH)胺基酸序列
上文所示源自抗體81B4及73C5之人類化可變區之CDR序列係描述於下文中。
L-CDR1胺基酸序列
>81B4vK32_3 L-CDR1 TASSSVSSSYFH(SEQ ID NO：26)
>81B4vK32_105 L-CDR1 TASSSVSSSYFH(SEQ ID NO：26)
>81B4vK32_116 L-CDR1 TASSSVSSSYFH(SEQ ID NO：26)
>81B4vK32_127 L-CDR1 TASSSVSSSYFH(SEQ ID NO：26)
>81B4vK32_138 L-CDR1 TASSSVSSSYFH(SEQ ID NO：26)
>81B4vK32_140 L-CDR1 TASSSVSSSYFH(SEQ ID NO：26)
>81B4vK32_141 L-CDR1 TASSSVSSSYFH(SEQ ID NO：26)
>81B4vK32_147 L-CDR1 TASSSVSSSYFH(SEQ ID NO：26)
>73C5vK39_2 L-CDR1 KASQDVGTNVL(SEQ ID NO：27)
>73C5vK39_7 L-CDR1 KASQDVGINVL(SEQ ID NO：27)
>73C5vK39_15 L-CDR1 KASQDVGTNVL(SEQ ID NO：27)
L-CDR2胺基酸序列
>81B4vK32_3 L-CDR2(SEQ ID 102)RTSTLAS
>81B4vK32_105 L-CDR2(SEQ ID 103)RTSILAS
>81B4vK32_116 L-CDR2(SEQ ID 104)RTSRLAS
>81B4vK32_127 L-CDR2(SEQ ID 104)RTSRLAS
>81B4vK32_138 L-CDR2(SEQ ID 104)RTSRLAS
>81B4vK32_140 L-CDR2(SEQ ID 105)RTSQLAS
>81B4vK32_141 L-CDR2(SEQ ID 106)RTSKLAS
>81B4vK32_147 L-CDR2(SEQ ID 140)RTSHLAS
>73C5vK39_2 L-CDR2 SASYRHS(SEQ ID NO：36)
>73C5vK39_7 L-CDR2 SASYRHS(SEQ ID NO：36)
>73C5vK39_15 L-CDR2 SASYRHS(SEQ ID NO：36)
L-CDR3胺基酸序列
>81B4vK32_3 L-CDR3 HQFHRSPLT(SEQ ID NO：44)
>81B4vK32_105 L-CDR3 HQFHRSPLT(SEQ ID NO：44)
>81B4vK32_116 L-CDR3 HQFHRSPLT(SEQ ID NO：44)
>81B4vK32_127 L-CDR3 HQFHRSPLT(SEQ ID NO：44)
>81B4vK32_138 L-CDR3 HQFHRSPLT(SEQ ID NO：44)
>81B4vK32_140 L-CDR3 HQFHRSPLT(SEQ ID NO：44)
>81B4vK32_141 L-CDR3 HQFHRSPLT(SEQ ID NO：44)
>81B4vK32_147 L-CDR3 HQFHRSPLT(SEQ ID NO：44)
>73C5vK39_2 L-CDR3 QQYSRYPLT(SEQ ID NO：45)
>73C5vK39_7 L-CDR3 QQYSRYPLT(SEQ ID NO：45)
>73C5vK39_15 L-CDR3 QQYSRYPLT(SEQ ID NO：45)
H-CDR1胺基酸序列
>81B4vH33_49 H-CDR1 GYSFTSSWIH(SEQ ID NO：53)
>81B4vH33_85T H-CDR1 GYSFTSSWIH(SEQ ID NO：53)
>81B4vH33_90 H-CDR1 GYSFTSSWIH(SEQ ID NO：53)
>81B4vH33_93 H-CDR1 GYSFTSSWIH(SEQ ID NO：53)
>81B4vH50_22 H-CDR1 GYSFTSSWIH(SEQ ID NO：53)
>81B4vH50_30 H-CDR1 GYSFTSSWIH(SEQ ID NO：53)
>81B4vH51_13 H-CDR1 GYSFTSSWIH(SEQ ID NO：53)
>81B4vH51_15 H-CDR1 GYSFTSSWIH(SEQ ID NO：53)
>81B4vH52_83 H-CDR1 GYSFTSSWIH(SEQ ID NO：53)
>73C5vH46_4 H-CDR1 GFSLTDYAVH(SEQ ID NO：107)
>73C5vH46_19 H-CDR1 GFSLTDYAVH(SEQ ID NO：107)
>73C5vH46_40 H-CDR1 GFSLTDYAVH(SEQ ID NO：107)
>73C5vH47_65 H-CDR1 GFSLTDYAVH(SEQ ID NO：107)
>73C5vH47_77 H-CDR1 GFSLTDYAVH(SEQ ID NO：107)
>73C5vH58_91 H-CDR1 GFSLTDYAVH(SEQ ID NO：107)
H-CDR2胺基酸序列
>81B4vH33_49 H-CDR2 EINPGNVRTNYNENF(SEQ ID NO：62)
>81B4vH33_85T H-CDR2 EINPGNVRTNYNENF(SEQ ID NO：62)
>81B4vH33_90 H-CDR2 EINPGNVRTNYNENF(SEQ ID NO：62)
>81B4vH33_93 H-CDR2 EINPGNVRTNYNENF(SEQ ID NO：62)
>81B4vH50_22 H-CDR2 EILPGVVRTNYNENF(SEQ ID NO：108)
>81B4vH50_30 H-CDR2 EINPGAVRTNYNENF(SEQ ID NO：109)
>81B4vH51_13 H-CDR2 EINPGLVRTNYNENF(SEQ ID NO：110)
>81B4vH51_15 H-CDR2 EINPGAVRTNYNENF(SEQ ID NO：109)
>81B4vH52_83 H-CDR2 EINPGSVRTNYNENF(SEQ ID NO：111)
>73C5vH46_4 H-CDR2 VIWSDGSTDYNAPFKS(SEQ ID NO：64)
>73C5vH46_19 H-CDR2 VIWSDGSTDYNAPFKS(SEQ ID NO：64)
>73C5vH46_40 H-CDR2 VIWSDGSTDYNAPFKS(SEQ ID NO：64)
>73C5vH47_65 H-CDR2 VIWSDGSTDYNAPFKS(SEQ ID NO：64)
>73C5vH47_77 H-CDR2 VIWSDGSTDFNAPFKS(SEQ ID NO：63)
>73C5vH58_91 H-CDR2 VIWSDGSTDYNAPFKS(SEQ ID NO：64)
H-CDR3胺基酸序列
>81B4vH33_49 H-CDR3 VFYGEPYFPY(SEQ ID NO：72)
>81B4vH33_85T H-CDR3 VFYGEPYFPY(SEQ ID NO：72)
>81B4vH33_90 H-CDR3 VFYGEPYFPY(SEQ ID NO：72)
>81B4vH33_93 H-CDR3 VFYGEPYFPY(SEQ ID NO：72)
>81B4vH50_22 H-CDR3 VFYGEPYFPY(SEQ ID NO：72)
>81B4vH50_30 H-CDR3 VFYGEPYFPY(SEQ ID NO：72)
>81B4vH51_13 H-CDR3 VFYGEPYFPY(SEQ ID NO：72)
>81B4vH51_15 H-CDR3 VFYGEPYFPY(SEQ ID NO：72)
>81B4vH52_83 H-CDR3 VFYGEPYFPY(SEQ ID NO：72)
>73C5vH46_4 H-CDR3 KGGYSGSWFAY(SEQ ID NO：73)
>73C5vH46_19 H-CDR3 KGGYSGSWFAY(SEQ ID NO：73)
>73C5vH46_40 H-CDR3 KGGYSGSWFAY(SEQ ID NO：73)
>73C5vH47_65 H-CDR3 KGGYSGSWFAY(SEQ ID NO：73)
>73C5vH47_77 H-CDR3 KGGYSGSWFAY(SEQ ID NO：73)
>73C5vH58_91 H-CDR3 KGGYSGSWFAY(SEQ ID NO：73)
在一態樣中，本發明之可變區與恆定區連接。例如，本發明之可變區與下文所示恆定區連接，從而形成抗體之重鏈或輕鏈。
本發明之代表性輕鏈及重鏈序列係顯示於下文中(源自抗體81B4及73C5之人類化可變區與恆定區連接)。
輕鏈胺基酸序列
重鏈胺基酸序列
上文所列示之CDR係使用Chothia編號系統(Al-Lazikani等人，(1997)JMB 273,927-948)來界定。
在一態樣中，本發明抗體包含3個輕鏈CDR及3個重鏈CDR，例如上文所述。
在一態樣中，本發明抗體包含上文所述之輕鏈及重鏈可變區。在一態樣中，本發明之輕鏈可變區與輕鏈恆定區(例如κ或λ恆定區)融合。在一態樣中，本發明之重鏈可變區與重鏈恆定區(例如IgA、IgD、IgE、IgG或IgM、特定而言IgG1、IgG2、IgG3或IgG4)融合。
本發明提供包含以下之抗IL-36R抗體(抗體B1)：包含胺基酸序列SEQ ID NO：115之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：125之重鏈。
本發明提供包含以下之抗IL-36R抗體(抗體B2)：包含胺基酸序列SEQ ID NO：115之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：126之重鏈。
本發明提供包含以下之抗IL-36R抗體(抗體B3)：包含胺基酸序列SEQ ID NO：115之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：127之重鏈。
本發明提供包含以下之抗IL-36R抗體(抗體B4)：包含胺 基酸序列SEQ ID NO：118之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：125之重鏈。
本發明提供包含以下之抗IL-36R抗體(抗體B5)：包含胺基酸序列SEQ ID NO：118之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：126之重鏈。
本發明提供包含以下之抗IL-36R抗體(抗體B6)：包含胺基酸序列SEQ ID NO：118之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：127之重鏈。
本發明提供包含以下之抗IL-36R抗體(抗體C3)：包含胺基酸序列SEQ ID NO：123之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：138之重鏈。
本發明提供包含以下之抗IL-36R抗體(抗體C2)：包含胺基酸序列SEQ ID NO：123之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：139之重鏈。
本發明提供包含以下之抗IL-36R抗體(抗體C1)：包含胺基酸序列SEQ ID NO：124之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：138之重鏈。
本發明之代表性抗體係顯示於下文中。
本發明抗體可用於治療人類中之各種疾病或病症(例如免疫學疾病、發炎性疾病、自體免疫疾病及呼吸疾病)之方法。例如，本發明抗體可用於治療牛皮癬、類風濕性關節炎、發炎性腸疾病或牛皮癬性關節炎之方法。例如，本發明抗體可用於治療慢性阻塞性肺病(COPD)或氣喘之方法。例如，本發明抗體可用於治療硬皮病、掌蹠膿皰病、泛發性膿皰型牛皮癬、糖尿病腎病、狼瘡腎炎、硬皮病、關節黏連性脊椎炎、IL-36受體拮抗劑缺陷自體免疫疾病(DITRA)、IL-1受體拮抗劑缺陷自體免疫疾病(DIRA)或cryopyrin相關週期性症候群(CAPS)之方法。
在一些態樣中，人類化抗體展示阻斷活性，藉此其使IL-36配體與IL-36受體之結合降低至少45%、至少50%、至少55%、至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%或至少95%。抗體阻斷IL-36配體與IL-36受體結合之能力可使用業內已知的競爭性結合分析來量測。或者，抗體之阻斷活性可藉由評價IL-36之生物學效應(例如IL-8、IL-6及GM-CSF之產生)以確定由IL-36受體介導之信號傳導是否受到抑制來量測。
在又一態樣中，本發明提供具有有利生物物理性質之人類化抗IL-36R抗體。在一態樣中，本發明之人類化抗IL- 36R抗體以至少90%單體形式或以至少92%單體形式或以至少95%單體形式存於緩衝液中。在又一態樣中，本發明之人類化抗IL-36R抗體以至少90%單體形式或以至少92%單體形式或以至少95%單體形式於緩衝液中保留1個月或4個月。
在一態樣中，本發明之人類化抗體係抗體B1、抗體B2、抗體B3、抗體B4、抗體B5、抗體B6、抗體C1、抗體C2或抗體C3。因此，在一實施例中，本發明之人類化抗體包含輕鏈序列SEQ ID NO：115及重鏈序列SEQ ID NO：125(抗體B1)。在另一實施例中，本發明之人類化抗體包含輕鏈序列SEQ ID NO：115及重鏈序列SEQ ID NO：126(抗體B2)。在另一實施例中，本發明之人類化抗體包含輕鏈序列SEQ ID NO：115及重鏈序列SEQ ID NO：127(抗體B3)。在另一實施例中，本發明之人類化抗體包含輕鏈序列SEQ ID NO：118及重鏈序列SEQ ID NO：125(抗體B4)。在另一實施例中，本發明之人類化抗體包含輕鏈序列SEQ ID NO：118及重鏈序列SEQ ID NO：126(抗體B5)。在另一實施例中，本發明之人類化抗體包含輕鏈序列SEQ ID NO：118及重鏈序列SEQ ID NO：127(抗體B6)。在另一實施例中，本發明之人類化抗體包含輕鏈序列SEQ ID NO：124及重鏈序列SEQ ID NO：138(抗體C1)。在另一實施例中，本發明之人類化抗體包含輕鏈序列SEQ ID NO：123及重鏈序列SEQ ID NO：139(抗體C2)。在另一實施例中，本發明之人類化抗 體包含輕鏈序列SEQ ID NO：123及重鏈序列SEQ ID NO：138(抗體C3)。
在又一實施例中，本發明之人類化抗體係由輕鏈序列SEQ ID NO：115及重鏈序列SEQ ID NO：125組成(抗體B1)。在另一實施例中，本發明之人類化抗體係由輕鏈序列SEQ ID NO：115及重鏈序列SEQ ID NO：126組成(抗體B2)。在另一實施例中，本發明之人類化抗體係由輕鏈序列SEQ ID NO：115及重鏈序列SEQ ID NO：127組成(抗體B3)。在另一實施例中，本發明之人類化抗體係由輕鏈序列SEQ ID NO：118及重鏈序列SEQ ID NO：125組成(抗體B4)。在另一實施例中，本發明之人類化抗體係由輕鏈序列SEQ ID NO：118及重鏈序列SEQ ID NO：126組成(抗體B5)。在另一實施例中，本發明之人類化抗體係由輕鏈序列SEQ ID NO：118及重鏈序列SEQ ID NO：127組成(抗體B6)。在另一實施例中，本發明之人類化抗體係由輕鏈序列SEQ ID NO：124及重鏈序列SEQ ID NO：138組成(抗體C1)。在另一實施例中，本發明之人類化抗體係由輕鏈序列SEQ ID NO：123及重鏈序列SEQ ID NO：139組成(抗體C2)。在另一實施例中，本發明之人類化抗體係由輕鏈序列SEQ ID NO：123及重鏈序列SEQ ID NO：138組成(抗體C3)。
在一些實施例中，包括其抗原結合片段(重鏈及輕鏈可變區)之人類化抗IL-36R抗體包含源自抗體B1、抗體B2、抗體B3、抗體B4、抗體B5、抗體B6、抗體C1、抗體C2或抗體C3之殘基之胺基酸序列。
在又一實施例中，本發明提供與本發明抗體(例如，本文所述之抗體B1、抗體B2、抗體B3、抗體B4、抗體B5、抗體B6、抗體C1、抗體C2或抗體C3)競爭性結合人類IL-36R之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段。抗體或抗原結合片段與IL-36R競爭性結合之能力可使用業內已知的競爭性結合分析來量測。
人類化抗IL-36R抗體視情況在共有或種系框架區中包括特異性胺基酸取代。在該等框架位置處之特異性胺基酸殘基取代可相對於藉由將CDR或HVL「直接交換」至人類種系框架區中所形成之人類化抗體中所示者改良各方面抗體性能，包括結合親和性及/或穩定性。
在一些實施例中，本發明闡述輕鏈可變區具有SEQ ID NO：1-10中之任一者中所述胺基酸序列之其他單株抗體。在一些實施例中，本發明闡述重鏈可變區具有SEQ ID NO：11-20中之任一者中所述胺基酸序列之其他單株抗體。將CDR置於人類共有重鏈及輕鏈可變結構域之FR中可產生有用之本發明人類化抗體。
特定而言，本發明提供具有SEQ ID NO：1/11、2/12、3/13、4/14、5/15、6/16、7/17、8/18、9/19、10/20之輕鏈可變區及重鏈可變區之組合之單株抗體。該等可變區可與人類恆定區組合。
在一些實施例中，本發明闡述輕鏈可變區序列具有SEQ ID NO：76-86中之任一者中所述胺基酸序列之其他人類化抗體。在一些實施例中，本發明闡述可變區序列具有SEQ ID NO：87-101中之任一者中所述胺基酸序列之其他人類化抗體重鏈。特定而言，本發明提供具有SEQ ID NO：77/89、80/88、80/89、77/87、77/88、80/87、86/100、85/101、85/100之輕鏈可變區及重鏈可變區之組合之單株抗體。該等可變區可與人類恆定區組合。
在又一實施例中，本發明係關於包含人類化輕鏈可變結構域及人類化重鏈可變結構域之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，該人類化輕鏈可變結構域包含SEQ ID NO：77之CDR及胺基酸序列與SEQ ID NO：77之可變結構域輕鏈胺基酸序列之框架區之胺基酸序列具有至少90%一致性、至少93%一致性或至少95%一致性之框架區，該人類化重鏈可變結構域包含SEQ ID NO：89之CDR及胺基酸序列與SEQ ID NO：89之可變結構域重鏈胺基酸序列之框架區之胺基酸序列具有至少90%一致性、至少93%一致性或至少95%一致性之框架區。在一實施例中，該抗IL-36R抗體係人類化單株抗體。
在又一實施例中，本發明係關於抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其包含人類化輕鏈可變結構域，該域包含SEQ ID NO：80之CDRs及胺基酸序列與SEQ ID NO：80之可變結構域輕鏈胺基酸序列之框架區之胺基酸序列具有至少90%一致性、至少93%一致性或至少95%一致性之框架區，及人類化重鏈可變結構域，該域包含SEQ ID NO：88之CDRs及胺基酸序列與SEQ ID NO：88之可變結構域重鏈胺基酸序列之框架區之胺基酸序列具有至少90%一致性、至少93% 一致性或至少95%一致性之框架區。在一個實施例中，該抗IL-36R抗體係人類化單株抗體。
在又一實施例中，本發明係關於包含抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其包含人類化輕鏈可變結構域，該域包含SEQ ID NO：80之CDRs及胺基酸序列與SEQ ID NO：80之可變結構域輕鏈胺基酸序列之框架區之胺基酸序列具有至少90%一致性、至少93%一致性或至少95%一致性之框架區，及人類化重鏈可變結構域，該域包含SEQ ID NO：89之CDRs及胺基酸序列與SEQ ID NO：89之可變結構域重鏈胺基酸序列之框架區之胺基酸序列具有至少90%一致性、至少93%一致性或至少95%一致性之框架區。在一個實施例中，該抗IL-36R抗體係人類化單株抗體。
在又一實施例中，本發明係關於抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其包含該人類化輕鏈可變結構域，該域包含SEQ ID NO：77之CDRs及胺基酸序列與SEQ ID NO：77之可變結構域輕鏈胺基酸序列之框架區之胺基酸序列具有至少90%一致性、至少93%一致性或至少95%一致性之框架區，及人類化重鏈可變結構域，該域包含SEQ ID NO：87之CDRs及胺基酸序列與SEQ ID NO：87之可變結構域重鏈胺基酸序列之框架區之胺基酸序列具有至少90%一致性、至少93%一致性或至少95%一致性之框架區。在一個實施例中，該抗IL-36R抗體係人類化單株抗體。
在又一實施例中，本發明係關於包含人類化輕鏈可變結構域及人類化重鏈可變結構域之抗IL-36R抗體或其抗原結 合片段，該人類化輕鏈可變結構域包含SEQ ID NO：77之CDR及胺基酸序列與SEQ ID NO：77之可變結構域輕鏈胺基酸序列之框架區之胺基酸序列具有至少90%一致性、至少93%一致性或至少95%一致性之框架區，該人類化重鏈可變結構域包含SEQ ID NO：88之CDR及胺基酸序列與SEQ ID NO：88之可變結構域重鏈胺基酸序列之框架區之胺基酸序列具有至少90%一致性、至少93%一致性或至少95%一致性之框架區。在一實施例中，該抗IL-36R抗體係人類化單株抗體。
在又一實施例中，本發明係關於包含人類化輕鏈可變結構域及人類化重鏈可變結構域之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，該人類化輕鏈可變結構域包含SEQ ID NO：80之CDR及胺基酸序列與SEQ ID NO：80之可變結構域輕鏈胺基酸序列之框架區之胺基酸序列具有至少90%一致性、至少93%一致性或至少95%一致性之框架區，該人類化重鏈可變結構域包含SEQ ID NO：87之CDR及胺基酸序列與SEQ ID NO：87之可變結構域重鏈胺基酸序列之框架區之胺基酸序列具有至少90%一致性、至少93%一致性或至少95%一致性之框架區。在一實施例中，該抗IL-36R抗體係人類化單株抗體。
在又一實施例中，本發明係關於包含人類化輕鏈可變結構域及人類化重鏈可變結構域之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，該人類化輕鏈可變結構域包含SEQ ID NO：86之CDR及胺基酸序列與SEQ ID NO：86之可變結構域輕鏈胺基 酸序列之框架區之胺基酸序列具有至少90%一致性、至少93%一致性或至少95%一致性之框架區，該人類化重鏈可變結構域包含SEQ ID NO：100之CDR及胺基酸序列與SEQ ID NO：100之可變結構域重鏈胺基酸序列之框架區之胺基酸序列具有至少90%一致性、至少93%一致性或至少95%一致性之框架區。在一實施例中，該抗IL-36R抗體係人類化單株抗體。
在又一實施例中，本發明係關於包含人類化輕鏈可變結構域及人類化重鏈可變結構域之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，該人類化輕鏈可變結構域包含SEQ ID NO：85之CDR及胺基酸序列與SEQ ID NO：85之可變結構域輕鏈胺基酸序列之框架區之胺基酸序列具有至少90%一致性、至少93%一致性或至少95%一致性之框架區，該人類化重鏈可變結構域包含SEQ ID NO：101之CDR及胺基酸序列與SEQ ID NO：101之可變結構域重鏈胺基酸序列之框架區之胺基酸序列具有至少90%一致性、至少93%一致性或至少95%一致性之框架區。在一實施例中，該抗IL-36R抗體係人類化單株抗體。
在又一實施例中，本發明係關於包含人類化輕鏈可變結構域及人類化重鏈可變結構域之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，該人類化輕鏈可變結構域包含SEQ ID NO：85之CDR及胺基酸序列與SEQ ID NO：85之可變結構域輕鏈胺基酸序列之框架區之胺基酸序列具有至少90%一致性、至少93%一致性或至少95%一致性之框架區，該人類化重鏈可 變結構域包含SEQ ID NO：100之CDR及胺基酸序列與SEQ ID NO：100之可變結構域重鏈胺基酸序列之框架區之胺基酸序列具有至少90%一致性、至少93%一致性或至少95%一致性之框架區。在一實施例中，該抗IL-36R抗體係人類化單株抗體。
在某些具體實施例中，本文所揭示之人類化抗IL-36R抗體至少包含具有上文所揭示鼠類單株抗體或人類化抗體之CDR或HVL之重鏈或輕鏈可變結構域及人類種系重鏈及輕鏈可變結構域之FR。
在又一態樣中，本發明提供抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其包含SEQ ID NO：21-29中之任一者之輕鏈CDR1(L-CDR1)序列；SEQ ID NO：30-38中之任一者之輕鏈CDR2(L-CDR2)序列；SEQ ID NO：39-47中之任一者之輕鏈CDR3(L-CDR3)序列；SEQ ID NO：48-56中之任一者之重鏈CDR1(H-CDR1)序列；SEQ ID NO：57-66中之任一者之重鏈CDR2(H-CDR2)序列；及SEQ ID NO：67-75中之任一者之重鏈CDR3(H-CDR3)序列。在一態樣中，該抗IL-36R抗體或其抗原結合片段包含輕鏈可變區及重鏈可變區，該輕鏈可變區包含上文所列示L-CDR1、上文所列示L-CDR2及上文所列示L-CDR3，該重鏈可變區包含上文所列示H-CDR1、上文所列示H-CDR2及上文所列示H-CDR3。
在又一態樣中，本發明提供抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其包含：a)分別SEQ ID NO：21、30、39、48、57及67之L- CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或b)分別SEQ ID NO：22、31、40、49、58及68之L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或c)分別SEQ ID NO：23、32、41、50、59及69之L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或d)分別SEQ ID NO：24、33、42、51、60及70之L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或e)分別SEQ ID NO：25、34、43、52、61及71之L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或f)分別SEQ ID NO：26、35、44、53、62及72之L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或g)分別SEQ ID NO：27、36、45、54、63及73之L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或h)分別SEQ ID NO：27、36、45、54、64及74之L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或i)分別SEQ ID NO：27、36、45、54、64及73之L- CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或j)分別SEQ ID NO：28、37、46、55、65及74之L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或k)分別SEQ ID NO：29、38、47、56、66及75之L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列。
在又一態樣中，本發明提供抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其包含：a)分別SEQ ID NO：26、103、44、53、62及72之L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或b)分別SEQ ID NO：26、104、44、53、62及72之L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或c)分別SEQ ID NO：27、36、45、107、63及73之L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或d)分別SEQ ID NO：27、36、45、107、64或73之L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列。
在一態樣中，該抗IL-36R抗體或其抗原結合片段包含輕鏈可變區及重鏈可變區，該輕鏈可變區包含上文所列示之 L-CDR1、L-CDR2及L-CDR3組合，該重鏈可變區包含上文所列示之H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3組合。
在具體實施例中，預期具有該等實例性免疫球蛋白之間之經交換CDR區(即(例如)將小鼠抗體或源自其之人類化抗體中之一者之一或兩個CDR與來自另一小鼠抗體或源自其之人類化抗體之類似CDR交換)之嵌合抗體可產生有用抗體。
在某些實施例中，人類化抗IL-36R抗體係抗體片段。上文已概述各種抗體片段且已研發出多種技術來產生抗體片段。可經由蛋白水解消化完整抗體來獲得片段(例如，參見Morimoto等人，1992,Journal of Biochemical and Biophysical Methods 24：107-117；及Brennan等人，1985,Science 229：81)。或者，可在重組宿主細胞中直接產生片段。例如，可直接自大腸桿菌(E.coli)回收Fab'-SH片段，並實施化學偶合以形成F(ab')2片段(例如，參見Carter等人，1992,Bio/Technology 10：163-167)。藉由另一方法，可直接自重組宿主細胞培養物中分離F(ab')2片段。熟習此項技術者可瞭解產生抗體片段之其他技術。因此，在一態樣中，本發明提供包含本文所述CDR、特定而言本文所述L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3之組合中之一者之抗體片段。在又一態樣中，本發明提供包含本文所述可變區、例如本文所述輕鏈可變區及重鏈可變區之組合中之一者之抗體片段。
某些實施例包括人類化抗IL-36R抗體之F(ab')2片段，該 F(ab')2片段包含SEQ ID NO：115或118中之任一者之輕鏈序列與SEQ ID NO：125、126或127中之任一者之重鏈序列之組合。該等實施例可包括包含此一F(ab')2之完整抗體。
某些實施例包括人類化抗IL-36R抗體之F(ab')2片段，該F(ab')2片段包含SEQ ID NO：123或124中之任一者之輕鏈序列與SEQ ID NO：138或139中之任一者之重鏈序列之組合。該等實施例可包括包含此一F(ab')2之完整抗體。
在一些實施例中，抗體或抗體片段包括介導效應子功能之恆定區。恆定區可提供針對表現IL-36R之標靶細胞之抗體依賴性細胞毒性(ADCC)、抗體依賴性細胞吞噬作用(ADCP)及/或補體依賴性細胞毒性(CDC)反應。效應子結構域可為(例如)Ig分子之Fc區。
抗體之效應子結構域可來自任何適宜脊椎動物物種及同型。來自不同動物物種之同型介導效應子功能之能力不同。例如，人類免疫球蛋白介導CDC及ADCC/ADCP之能力通常分別具有以下次序：IgMIgG1 IgG3>IgG2>IgG4及IgG1 IgG3>IgG2/IgM/IgG4。鼠類免疫球蛋白通常分別以以下次序來介導CDC及ADCC/ADCP：鼠類IgMIgG3>>IgG2b>IgG2a>>IgG1及IgG2b>IgG2a>IgG1>>IgG3。在另一實例中，鼠類IgG2a介導ADCC，而鼠類IgG2a及IgM二者介導CDC。
抗體修飾
人類化抗IL-36R抗體及藥劑可包括對人類化抗IL-36R抗體或其抗原結合片段之修飾。例如，可期望在效應子功能方面修飾抗體，以增強抗體在治療癌症中之效力。一該修 飾係將半胱胺酸殘基引入Fc區中，由此使得在此區域中可形成鏈間二硫鍵。由此生成之同二聚抗體可具有經改良之內化能力及/或增強之補體介導細胞殺傷及/或抗體依賴性細胞毒性(ADCC)。例如，參見Caron等人，1992,J.Exp Med.176：1191-1195；及Shopes,1992,J.Immunol.148：2918-2922。亦可使用異雙功能性交聯劑來製備具有增強之抗腫瘤活性之同二聚抗體，如Wolff等人，1993,Cancer Research 53：2560-2565中所述。或者，抗體可經改造以含有雙重Fc區，從而增強抗體之補體溶解及ADCC能力。參見Stevenson等人，1989,Anti-Cancer Drug Design 3：219-230。
已藉由修改抗體Fc區之糖基化模式來生成支持ADCC之能力經改良之抗體。此係可能的，此乃因抗體在CH2結構域中天冬醯胺殘基N297處之糖基化參與ADCC必需之IgG與Fcγ受體之間之相互作用。宿主細胞系已經改造以表現具有經改變糖基化(例如增加二等分型N-乙醯基葡糖胺或減少岩藻糖)之抗體。減少岩藻糖比增加二等分型N-乙醯基葡糖胺之存在更大程度地增強ADCC活性。此外，低岩藻糖抗體之ADCC增強與FcγRIIIa V/F多態性無關。
修飾抗體Fc區中之胺基酸序列係增強ADCC之糖基化改造之替代方案。已藉由廣泛突變分析來確定Fcγ受體在人類IgG1上之結合位點。此導致生成具有Fc突變之人類化IgG1抗體，該等突變提高對FcγRIIIa之結合親和性並增強活體外ADCC。另外，已獲得結合特性具有多種不同變更 之Fc變體，例如與特異性FcγR受體之結合增強且與其他FcγR受體之結合不變或減小。
另一態樣包括免疫偶聯物，其包含與細胞毒性劑偶聯之人類化抗體或其片段，該細胞毒性劑係(例如)化學治療劑、毒素(例如，細菌、真菌、植物或動物源之酶促活性毒素或其片段)或放射性同位素(即，放射性偶聯物)。
上文已闡述可用於產生該等免疫偶聯物之化學治療劑。可用於形成有用免疫偶聯物之酶促活性毒素及其片段包括白喉A鏈、白喉毒素之非結合活性片段、外毒素A鏈(來自綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa))、蓖麻毒素(ricin)A鏈、相思豆毒素(abrin)A鏈、蒴蓮根毒素(modeccin)A鏈、α-八疊球素(alpha-sarcin)、光桐(Aleurites fordii)蛋白、石柱素(dianthin)蛋白、美洲商陸(Phytolaca americana)蛋白(PAPI、PAPII及PAP-S)、苦瓜(Momordica charantia)抑制劑、麻風樹毒素(curcin)、巴豆毒素(crotin)、皂質草(Saponaria officinalis)抑制劑、白樹毒素(gelonin)、米托潔林(mitogellin)、侷限麴菌素、酚黴素、依諾黴素(enomycin)、單端孢黴烯族毒素(tricothecene)及諸如此類。多種放射性核素可用於產生放射性偶聯之人類化抗IL-36R抗體。實例包括212Bi、131I、131In、90Y及186Re。
人類化抗IL-36R抗體與細胞毒性劑或化學治療劑之偶聯物可藉由已知方法使用多種雙功能蛋白質偶合劑製得，例如3-(2-吡啶基二巰基)丙酸N-琥珀醯亞胺酯(SPDP)、亞胺基硫(IT)、亞胺酸酯之雙功能衍生物(例如己二酸二甲酯 HCL)、活性酯(例如辛二酸二琥珀醯亞胺酯)、醛(例如戊二醛)、雙疊氮基化合物(例如雙(對-疊氮基苯甲醯基)已二胺)、雙重氮衍生物(例如雙(對重氮苯甲醯基)-乙二胺)、二異氰酸酯(例如甲苯2,6-二異氰酸酯)及雙活性氟化合物(例如1,5-二氟-2,4-二硝基苯)。例如，蓖麻毒素免疫毒素可如Vitetta等人，1987,Science 238：1098中所述來製備。經碳-14標記之1-異硫氰基苄基-3-甲基二伸乙基三胺基五乙酸(MX-DTPA)係偶聯放射性核苷酸與抗體之實例性螯合劑。偶聯物亦可使用可裂解連接體來形成。
亦可將本文所揭示之人類化抗IL-36R抗體調配為免疫脂質體。含有抗體之脂質體系藉由業內已知之方法來製備，例如以下文獻中所闡述：Epstein等人，1985,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 82：3688；Hwang等人，1980,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 77：4030；及美國專利第4,485,045號及第4,544,545號。循環時間延長之脂質體係揭示於(例如)美國專利第5,013,556號中。
尤其有用之脂質體可使用包含磷脂醯膽鹼、膽固醇及PEG衍生之磷脂醯乙醇胺(PEG-PE)之脂質組合物藉由逆相蒸發法來生成。經由具有指定孔徑之濾膜擠出脂質體以獲得具有期望直徑之脂質體。可經由二硫化物互換反應使本文所揭示抗體之Fab'片段與脂質體偶聯，如Martin等人，1982,J.Biol.Chem.257：286-288中所述。化學治療劑(例如多柔比星)視情況含於脂質體內。例如，參見Gabizon等人，1989,J.National Cancer Inst.81(19)：1484。
本文所闡述並揭示之抗體亦可藉由使抗體與活化前藥之酶偶聯來用於ADEPT(抗體導向酶前藥療法)程序，該酶將前藥(例如，肽基化學治療劑)轉化為活性抗癌藥物。例如，參見WO 81/01145、WO 88/07378及美國專利第4,975,278號。可用於ADEPT之免疫偶聯物中之酶組份係能作用於前藥而將其轉化為活性更強之細胞毒性形式之酶。可用於ADEPT之具體酶包括(但不限於)鹼性磷酸酶，其用於將含磷酸酯前藥轉化為游離藥物；芳基硫酸酯酶，其用於將含硫酸酯前藥轉化為游離藥物；胞嘧啶去胺酶，其用於將非毒性5-氟胞嘧啶轉化為抗癌藥物5-氟尿嘧啶；蛋白酶，例如沙雷氏菌(Serratia)蛋白酶、嗜熱菌蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶、羧肽酶及組織蛋白酶(例如組織蛋白酶B及L)，其用於將含肽前藥轉化為游離藥物；D-內胺醯羧肽酶，其用於轉化含有D-胺基酸取代基之前藥；碳水化合物裂解酶，例如β-半乳糖苷酶及神經胺酸酶，其用於將糖基化前藥轉化為游離藥物；β-內醯胺酶，其用於將經β-內醯胺衍生之藥物轉化為游離藥物；及青黴素醯胺酶，例如青黴素V醯胺酶或青黴素G醯胺酶，其用於將胺氮處分別經苯氧基乙醯基或苯基乙醯基衍生之藥物轉化為游離藥物。或者，可使用具有酶促活性之抗體(「抗體酶」)來將前藥轉化為游離活性藥物(例如，參見Massey,1987,Nature 328：457-458)。可藉由已知方法來製備抗體-抗體酶偶聯物以供將抗體酶遞送至腫瘤細胞群，例如，藉由使酶與上文所述人類化抗IL-36R抗體/異雙功能性交聯試劑共價結合 來製備。或者，可使用重組DNA技術構造融合蛋白，其包含本文所揭示抗體之至少抗原結合區及與之相連之上文所述酶的至少功能活性部分(例如，參見Neuberger等人，1984,Nature 312：604-608)。
在某些實施例中，可期望使用人類化抗IL-36R抗體片段而非完整抗體以(例如)促進腫瘤滲透。可期望修飾抗體片段以延長其血清半衰期。此可藉由(例如)將補救受體結合表位納入抗體片段中來達成。在一方法中，可改變(例如，突變)抗體片段中之適宜區域，或可藉由(例如)DNA或肽合成將表位納入肽標籤中，然後使該標籤在任一末端或在中部與抗體片段融合。例如，參見WO 96/32478。
在其他實施例中，亦包括人類化抗IL-36R抗體之共價修飾。共價修飾包括對以下基團之修飾：半胱胺醯基殘基、組胺醯基殘基、離胺醯基及胺基末端殘基、精胺醯基殘基、酪胺醯基殘基、羧基側基團(天冬胺醯基或麩胺醯基)、麩醯胺醯基及天冬醯胺醯基殘基或絲胺醯基或蘇胺醯基殘基。另一共價修飾類型涉及使糖苷與抗體化學或酶促偶合。若適用，該等修飾可藉由化學合成或藉由抗體之酶促或化學裂解來製備。可藉由使抗體之靶向胺基酸殘基與能與選定側鏈或胺基-或羧基-末端殘基反應之有機衍生劑反應來將抗體之其他共價修飾類型引入分子中。
抗體上存在之任何碳水化合物部分之移除可以化學或酶促方式來完成。化學去糖基化係闡述於以下文獻中：Hakimuddin等人，1987,Arch.Biochem.Biophys.259：52及 Edge等人，1981,Anal.Biochem.,118：131。抗體上碳水化合物部分之酶促裂解可藉由使用多種內切糖苷酶及外切糖苷酶來達成，如Thotakura等人，1987,Meth.Enzymol 138：350中所述。
可用共價修飾之另一類型包含使抗體與多種非蛋白質性聚合物(例如聚乙二醇、聚丙二醇或聚氧化烯)中之一者以以下文獻中之一或多者中所述之方式連接：美國專利第4,640,835號、美國專利第4,496,689號、美國專利第4,301,144號、美國專利第4,670,417號、美國專利第4,791,192號及美國專利第4,179,337號。
人類化及胺基酸序列變體
抗IL-36R抗體之胺基酸序列變體可藉由將適宜核苷酸變化引入抗IL-36R抗體DNA中或藉由肽合成來製備。該等變體包括(例如)本文實例中抗IL-36R抗體胺基酸序列內殘基之缺失及/或插入及/或取代。實施缺失、插入及取代之任一組合以獲得最終構造物，限制條件係最終構造物具有期望特徵。胺基酸變化亦可改變人類化或變體抗IL-36R抗體之轉譯後過程，例如改變糖基化位點之數目或位置。
可用於識別抗IL-36R抗體中係較佳誘變位置之某些殘基或區域之方法係稱作「丙胺酸掃描誘變」，如Cunningham及Wells(Science,244：1081-1085(1989))中所述。此處，殘基或標靶殘基群(例如帶電荷殘基，例如arg、asp、his、lys及glu)已確定且經中性或帶負電荷胺基酸(通常係丙胺酸)替代以影響胺基酸與IL-36R抗原之相互作用。然 後藉由在取代位點或針對取代位點引入另外或其他變體來改良彼等顯示對取代具有功能敏感性之胺基酸位置。因此，在預先確定引入胺基酸序列變異之位點時，無需預先確定突變本身之性質。例如，為分析給定位點處突變之性能，在標靶密碼子或區域處實施丙胺酸掃描誘變或隨機誘變並針對期望活性篩選所表現之抗IL-36R抗體變體。
胺基酸序列插入包括胺基-及/或羧基末端融合(長度在一個殘基至含有上百或更多殘基之多肽的範圍內)以及單一或多個胺基酸殘基之序列內插入。末端插入之實例包括與表位標籤融合之抗IL-36R抗體。抗IL-36R抗體分子之其他插入性變體包括可提高抗體血清半衰期之酶或多肽與抗IL-36R抗體N-或C-末端之融合。
另一變體類型係胺基酸取代變體。該等變體在抗IL-36R抗體分子中移除至少一個胺基酸殘基並在該位置處插入不同殘基。用於取代誘變之最受關注的位點包括超變區，但亦涵蓋FR改變。保守取代係顯示於表5之「較佳取代」標題下。若該等取代引起生物活性改變，則可引入更重要之改變(命名為「實例性取代」，或如下文參照胺基酸類別所進一步闡述)，並篩選產物。
在蛋白質化學中，通常公認抗體之生物學特性可藉由選擇維持以下特性之效應顯著不同之取代來達成：(a)取代 區域中多肽骨架之結構，例如呈摺疊或螺旋構象，(b)分子在標靶位點處之電荷或疏水性，或(c)側鏈體積。基於常見側鏈性質將天然存在之殘基分為以下各類：(1)疏水性：正白胺酸、met、ala、val、leu、ile；(2)中性親水性：cys、ser、thr；(3)酸性：asp、glu；(4)鹼性：asn、gin、his、lys、arg；(5)影響鏈定向之殘基：gly、pro；及(6)芳香族：trp、tyr、phe。
非保守性取代可使得需要將該等類別中一者之成員交換為另一類別。
亦可取代(通常用絲胺酸)維持人類化或變體抗IL-36R抗體之適當構象時未涉及之任何半胱胺酸殘基，從而提高分子之氧化穩定性，防止異常交聯，或提供與細胞毒性或細胞抑制化合物之已確認偶聯點。相反，可將半胱胺酸鍵添加至抗體以提高其穩定性(尤其在抗體係諸如Fv片段等抗體片段時)。
一類取代型變體涉及取代親代抗體(例如人類化或人類抗體)中之一或多個超變區殘基。通常，所選用於進一步研發之所得變體可相對於產生該等變體之親代抗體具有經改良之生物性質。產生該等取代型變體之便捷方法係使用噬菌體展示實施之親和性成熟。簡言之，使若干超變區位點(例如6個至7個位點)突變以在每一位點產生所有可能的胺基酸取代。由此產生之抗體變體以單價方式以與每一顆 粒內所封裝之M13基因III產物之融合形式自絲狀噬菌體顆粒展示出來。然後針對生物學活性(例如結合親和性)來篩選噬菌體展示之變體。為確定修飾之候選超變區位點，可實施丙胺酸掃描誘變以確定顯著促進抗原結合之超變區殘基。或者或另外，有利的是分析抗原-抗體複合物之晶體結構以確定抗體與人類IL-36R之間之接觸點。該等接觸殘基及附近殘基係根據本文所述技術之候選取代殘基。在產生該等變體後，立即如本文所述對變體組進行篩選，且可選擇在一或多個相關分析中具有優越性質之抗體以供進一步研發。
抗體之另一類胺基酸變體改變抗體之初始糖基化模式。「改變」意指缺失一或多個存於抗體中之碳水化合物部分及/或添加一或多個抗體中不存在之糖基化位點。
在一些實施例中，可期望修飾本發明抗體以添加糖基化位點。抗體之糖基化通常係N-連接或O-連接。N-連接係指碳水化合物部分附接至天冬醯胺殘基側鏈。三肽序列天冬醯胺-X-絲胺酸及天冬醯胺-X-蘇胺酸(其中X係除脯胺酸外之任何胺基酸)係碳水化合物部分與天冬醯胺側鏈酶促附接之識別序列。因此，多肽中存在該等三肽序列中之任一者均可產生潛在糖基化位點。O-連接糖基化係指糖N-乙醯半乳糖胺、半乳糖或木糖中之一者附接至羥基胺基酸，最常見為絲胺酸或蘇胺酸，但亦可使用5-羥基脯胺酸或5-羥基離胺酸。因此，為使給定蛋白(例如抗體)糖基化，改造蛋白質之胺基酸序列以使其含有上述三肽序列中之一或多 者(對於N-連接糖基化位點)。亦可藉由在初始抗體序列中添加一或多個絲胺酸或蘇胺酸殘基或經一或多個絲胺酸或蘇胺酸殘基取代來達成改變(對於O-連接糖基化位點)。
編碼抗IL-36R抗體胺基酸序列變體之核酸分子係藉由業內已知之多種方法來製備。該等方法包括(但不限於)自天然來源分離(在天然存在之胺基酸序列變體情形下)或藉由對抗IL-36R抗體之預先製備之變體或非變體形式實施寡核苷酸介導(或定點)誘變、PCR誘變及盒式誘變來製備。
多核苷酸、載體、宿主細胞及重組方法
其他實施例涵蓋包含編碼人類化抗IL-36R抗體之序列之分離多核苷酸、包含該多核苷酸之載體及宿主細胞，以及產生人類化抗體之重組技術。分離多核苷酸可編碼抗IL-36R抗體之任何期望形式，包括(例如)全長單株抗體、Fab、Fab'、F(ab')2及Fv片段、雙鏈抗體、線性抗體、單鏈抗體分子及自抗體片段形成之多特異性抗體。
一些實施例包括分離多核苷酸，其包含編碼抗體或抗體片段中具有SEQ ID NO：1-10中任一者之胺基酸序列之輕鏈可變區的序列。一些實施例包括分離多核苷酸，其包含編碼抗體或抗體片段中具有SEQ ID NO：11-20之胺基酸序列之重鏈可變區的序列。
一些實施例包括分離多核苷酸，其包含編碼抗體或抗體片段中具有SEQ ID NO：76-86中任一者之胺基酸序列之輕鏈可變區的序列。一些實施例包括分離多核苷酸，其包含編碼抗體或抗體片段中具有SEQ ID NO：87-101之胺基酸序 列之重鏈可變區的序列。
一些實施例包括分離多核苷酸，其包含編碼抗體中具有SEQ ID NO：114-124中任一者之胺基酸序列之輕鏈的序列。一些實施例包括分離多核苷酸，其包含編碼抗體中具有SEQ ID NO：125-139之胺基酸序列之重鏈的序列。
在一態樣中，分離多核苷酸序列編碼具有包含以下之胺基酸序列之輕鏈及重鏈可變區之抗體或抗體片段：分別SEQ ID NO：115及SEQ ID NO：127；分別SEQ ID NO：118及SEQ ID NO：126；分別SEQ ID NO：118及SEQ ID NO：127；分別SEQ ID NO：115及SEQ ID NO：125；分別SEQ ID NO：115及SEQ ID NO：126；分別SEQ ID NO：118及SEQ ID NO：125；分別SEQ ID NO：124及SEQ ID NO：138；分別SEQ ID NO：123及SEQ ID NO：139；分別SEQ ID NO：123及SEQ ID NO：138。
包含編碼人類化抗IL-36R抗體或其片段或鏈之序列之多核苷酸可與一或多個業內已知之調節或控制序列融合，且可含於業內已知之適宜表現載體或宿主細胞中。編碼重鏈或輕鏈可變結構域之每一多核苷酸分子均可獨立地與編碼恆定結構域(例如人類恆定結構域)之多核苷酸序列融合，從而使得能產生完整抗體。或者，可使多核苷酸或其部分融合在一起，從而提供產生單鏈抗體之模板。
對於重組產生，將編碼抗體之多核苷酸插入可複製載體中以供選殖(擴增DNA)或表現。可使用多種適合表現重組抗體之載體。載體組份通常包括(但不限於)以下中之一或 多者：信號序列、複製起點、一或多個標記基因、增強子元件、啟動子及轉錄終止序列。
人類化抗IL-36R抗體亦可以融合多肽形式產生，其中抗體與異源多肽融合，例如信號序列或在成熟蛋白質或多肽之胺基末端具有特異性裂解位點之其他多肽。所選異源信號序列通常係宿主細胞可識別及加工(即，藉由信號肽酶裂解)者。對於不能識別並加工人類化抗IL-36R抗體信號序列之原核宿主細胞而言，信號序列可經原核信號序列取代。信號序列可為(例如)鹼性磷酸酶、青黴素酶、脂蛋白、耐熱腸毒素II前導序列及諸如此類。對於酵母菌分泌，可用(例如)以下信號來取代天然信號序列：得自酵母菌轉化酶α-因子(包括酵母菌屬(Saccharomyces)及克魯維酵母菌屬(Kluyveromyces)α-因子前導序列)之前導序列、酸性磷酸酶、人白色念珠菌(C.albicans)葡糖澱粉酶或WO 90/13646中所述之信號。在哺乳動物細胞中，可使用哺乳動物信號序列以及病毒分泌前導序列(例如單純皰疹病毒gD信號)。該前體區之DNA在讀碼框中與編碼人類化抗IL-36R抗體之DNA接合。
表現及選殖載體含有使載體能在一或多個選定宿主細胞中複製之核酸序列。通常，在選殖載體中，此序列係使載體能獨立於宿主染色體DNA而複製者，且其包括複製起點或自主複製序列。用於多種細菌、酵母菌及病毒之該等序列為業內所熟知。來自質體pBR322之複製起點適用於大多數革蘭氏(Gram)陰性細菌，2-υ質體起點適用於酵母 菌，且多種病毒起點(SV40、多瘤病毒、腺病毒、VSV及BPV)可用於在哺乳動物細胞中選殖載體。通常，哺乳動物表現載體不需要複製起點組份(通常可僅使用SV40起點，此乃因其含有早期啟動子)。
表現及選殖載體可含有編碼可選擇標記物之基因以有助於對表現之識別。典型可選擇標記基因編碼如下蛋白質：賦予對抗生素或其他毒素(例如，胺苄青黴素(ampicillin)、新黴素、甲胺蝶呤或四環素)之抗性；或者，係營養缺陷之補體；或在其他替代方案中供應複合培養基中不存在之特殊營養素，例如編碼桿菌(Bacilli)之D-丙胺酸消旋酶之基因。
選擇方案之一個實例利用藥物來阻止宿主細胞之生長。彼等經異源基因成功轉化之細胞產生賦予抗藥性之蛋白質，且因此可在該選擇方案中存活。該顯性選擇之實例使用藥物新黴素、黴酚酸及潮黴素。哺乳動物細胞之常用可選擇標記物係彼等使得能識別可吸收編碼人類化抗IL-36R抗體之核酸之勝任細胞者，例如DHFR(二氫葉酸還原酶)、胸苷激酶、金屬硫蛋白-I及-II(例如靈長類動物金屬硫蛋白基因)、腺苷去胺酶、鳥胺酸去羧酶及諸如此類。首先藉由在含有甲胺蝶呤(Mtx)(DHFR之競爭性拮抗劑)之培養基中培養所有轉化體來鑒定經DHFR選擇基因轉化之細胞。在採用野生型DHFR時，適宜宿主細胞係DHFR活性缺陷之中國倉鼠卵巢(CHO)細胞系(例如DG44)。
或者，經編碼抗IL-36R抗體、野生型DHFR蛋白及另一 可選擇標記物(例如胺基糖苷3'-磷酸轉移酶(APH))之DNA序列轉化或共轉化之宿主細胞(尤其含有內源性DHFR之野生型宿主)可藉由在含有針對該等可選擇標記物之選擇劑(例如胺基糖苷抗生素，例如康黴素(kanamycin)、新黴素或G418)之培養基中使細胞生長來進行選擇。例如，參見美國專利第4,965,199號。
若使用酵母菌細胞作為宿主細胞來實施重組產生，則可使用存於酵母菌質體YRp7中之TRP1基因(Stinchcomb等人，1979,Nature 282：39)作為可選擇標記物。TRP1基因為缺少在色胺酸中生長之能力之酵母菌突變體菌株(例如，ATCC第44076號或PEP4-1)提供選擇標記物(Jones,1977,Genetics 85：12)。則酵母菌宿主細胞基因組中trp1損傷之存在可提供有效環境以藉由在不存在色胺酸時生長來檢測轉化。類似地，Leu2p缺陷型酵母菌株(例如ATCC 20,622或38,626)係藉由具有LEU2基因之已知質體來補足。
另外，可使用源自1.6 μm環形質體pKD1之載體來轉化克魯維酵母菌。或者，已報導用於大規模產生重組牛凝乳酶之表現系統可用於乳酸克魯維酵母菌(K.lactis.)(Van den Berg,1990,Bio/Technology 8：135)。亦已揭示藉由克魯維酵母菌屬之工業菌株分泌成熟重組人類血清白蛋白之穩定多拷貝表現載體(Fleer等人，1991,Bio/Technology 9：968-975)。
表現及選殖載體通常含有宿主生物體可識別且與編碼抗 IL-36R抗體或其多肽鏈之核酸分子可操作連接之啟動子。適用於原核宿主之啟動子包括phoA啟動子、β-內醯胺酶及乳糖啟動子系統、鹼性磷酸酶、色胺酸(trp)啟動子系統及雜合啟動子(例如tac啟動子)。其他已知細菌啟動子亦適宜。用於細菌系統之啟動子亦可含有與編碼人類化抗IL-36R抗體之DNA可操作連接之Shine-Dalgarno(S.D.)序列。
已知多種真核啟動子序列。事實上，所有真核基因均具有富AT區，其位於轉錄起始位點上游約25個至30個鹼基處。在許多基因之轉錄起始點上游70個至80個鹼基處發現之另一序列係CNCAAT區，其中N可為任一核苷酸。在大多數真核基因之3'端處為AATAAA序列，其可能係向編碼序列之3'端添加聚A尾之信號。所有該等序列均以適宜方式插入真核表現載體中。
適用於酵母菌宿主之啟動序列之實例包括以下酶之啟動子：3-磷酸甘油酸酯激酶或其他糖解酶，例如烯醇酶、甘油醛-3-磷酸去氫酶、己糖激酶、丙酮酸去羧酶、磷酸果糖激酶、葡萄糖-6-磷酸異構酶、3-磷酸甘油酸變位酶、丙酮酸激酶、磷酸丙糖異構酶、磷酸葡萄糖異構酶及葡糖激酶。
誘導型啟動子之另一優點係藉由生長條件來控制轉錄。該等啟動子包括以下酶之酵母菌啟動子區：醇去氫酶2、異細胞色素C、酸性磷酸酶、與氮代謝相關之衍生物酶、金屬硫蛋白、甘油醛-3-磷酸去氫酶及負責麥芽糖及半乳糖利用之酶。用於酵母菌表現之適宜載體及啟動子進一步闡 述於EP 73,657中。酵母菌增強子亦可有利地與酵母菌啟動子一起使用。
在哺乳動物宿主細胞中自載體轉錄人類化抗IL-36R抗體受(例如)自以下獲得之啟動子控制：病毒基因組，例如多瘤病毒、禽痘病毒、腺病毒(例如腺病毒2)、牛乳頭狀瘤病毒、禽肉瘤病毒、細胞巨大病毒、反轉錄病毒、肝炎B病毒及猿猴病毒40(SV40)；異源性哺乳動物啟動子，例如肌動蛋白啟動子或免疫球蛋白啟動子；或熱休克啟動子，限制條件係該等啟動子與宿主細胞系統相容。
SV40病毒之早期及晚期啟動子係便捷地以SV40限制性片段形式獲得，其亦含有SV40病毒複製起點。人類細胞巨大病毒之立即早期啟動子係便捷地以HindIII E限制性片段形式獲得。使用牛乳頭狀瘤病毒作為載體在哺乳動物宿主中表現DNA之系統係揭示於美國專利第4,419,446號中。此系統之修改形式係闡述於美國專利第4,601,978號中。亦可參見Reyes等人，1982,Nature 297：598-601，其揭示在來自單純皰疹病毒之胸苷激酶啟動子控制下在小鼠細胞中表現人類p-干擾素cDNA。或者，可使用勞斯肉瘤病毒(rous sarcoma virus)長末端重複序列作為啟動子。
可用於重組表現載體之另一有用元件係增強子序列，其用於提高高等真核生物中編碼人類化抗IL-36R抗體之DNA之轉錄。現已知多種增強子序列來自哺乳動物基因(例如球蛋白、彈性蛋白酶、白蛋白、α-胎蛋白及胰島素)。然而，通常使用來自真核細胞病毒之增強子。實例包括位於 複製起點遲側(late side)上之SV40增強子(bp 100-270)、細胞巨大病毒早期啟動子增強子、位於複製起點遲側上之多瘤病毒增強子及腺病毒增強子。關於活化真核啟動子之增強元件之描述亦可參見Yaniv,1982,Nature 297：17-18。可將增強子剪接至載體中人類化抗IL-36R抗體編碼序列之5'或3'位置處，但較佳位於啟動子之5'位點。
用於真核宿主細胞(酵母菌、真菌、昆蟲、植物、動物、人類細胞或來自其他多細胞生物體之有核細胞)中之表現載體亦可含有終止轉錄及穩定mRNA所需之序列。該等序列通常可自真核生物或病毒DNA或cDNA之5'及偶而3'非轉譯區獲得。該等區域含有在編碼抗IL-36R抗體之mRNA之非轉譯部分中轉錄為聚腺苷酸化片段之核苷酸區段。一種有用轉錄終止組份係牛生長激素聚腺苷酸化區。參見WO 94/11026及其中所揭示之表現載體。在一些實施例中，人類化抗IL-36R抗體可使用CHEF系統來表現。(例如，參見美國專利第5,888,809號；其揭示內容以引用的方式併入本文中。)
在本文載體中選殖或表現DNA之適宜宿主細胞係上述原核細胞、酵母菌細胞或高等真核細胞。適用於此目的之原核生物包括真細菌，例如革蘭氏陰性或革蘭氏陽性生物體，例如腸桿菌科(Enterobacteriaceae)，例如艾氏菌屬(Escherichia)(例如大腸桿菌)、腸桿菌屬(Enterobacter)、伊文氏桿菌屬(Erwinia)、克雷白氏菌屬(Klebsiella)、變形桿菌屬(Proteus)、沙門氏菌屬(Salmonella)(例如鼠傷寒沙 門氏菌(Salmonella typhimurium))、沙雷菌屬(例如黏質沙雷氏菌(Serratia marcescans))及志賀桿菌屬(Shigella)，以及桿菌屬(例如枯草桿菌(B.subtilis)及地衣桿菌(B.licheniformis)(例如於1989年4月12日公開之DD 266,710中所揭示之地衣芽孢桿菌41 P))、假單胞菌屬(Pseudomonas)(例如綠膿桿菌)及鏈黴菌屬(Streptomyces)。一較佳大腸桿菌選殖宿主係大腸桿菌294(ATCC 31,446)，但其他菌株(例如大腸桿菌B、大腸桿菌X1776(ATCC 31,537)及大腸桿菌W3110(ATCC 27,325))亦適合。該等實例係例示性而非限制性的。
除原核生物外，諸如絲狀真菌或酵母菌等真核微生物亦係人類化抗IL-36R抗體編碼載體之適宜選殖或表現宿主。釀酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)或常見焙用酵母菌(baker's yeast)係最常用之低等真核宿主微生物。然而，通常可使用多種其他屬、種及菌株且可用於本文中，例如粟酒裂殖酵母菌菌(Schizosaccharomyces pombe)；克魯維酵母菌屬宿主，例如乳酸克魯維酵母菌、鬆脆克魯維酵母菌(K.fragilis)(ATCC 12,424)、保加利亞克魯維酵母菌(K.bulgaricus)(ATCC 16,045)、威克海姆克魯維酵母菌(K.wickeramii)(ATCC 24,178)、瓦爾提克魯維酵母菌(K.waltii)(ATCC 56,500)、果蠅克魯維酵母菌(K.drosophilarum)(ATCC 36,906)、耐熱克魯維酵母菌(K.thermotolerans)及馬克斯克魯維酵母菌(K.marxianus)；子囊菌酵母菌屬(yarrowia)(EP 402,226)；巴斯德畢赤酵母菌菌(Pichia pastoris)(EP 183,070)；假絲酵母菌屬(Candida)；裏氏木黴菌(Trichoderma reesia)(EP 244,234)；粗糙鏈孢黴菌(Neurospora crassa)；許旺酵母菌屬(Schwanniomyces)，例如西方許旺酵母菌(Schwanniomyces occidentalis)；及絲狀真菌，例如鏈孢黴屬(Neurospora)、青黴屬(Penicillium)、彎頸黴屬(Tolypocladium)及曲黴菌屬(Aspergillus)宿主(例如構巢麯黴(A.nidulans)及黑麯黴(A.niger))。
表現糖基化人類化抗IL-36R抗體之適宜宿主細胞係源自多細胞生物體。無脊椎動物細胞之實例包括植物及昆蟲細胞，包括(例如)多種桿狀病毒株及變體及來自諸如以下等宿主之對應許可昆蟲宿主細胞：草地貪夜蛾(Spodoptera frugiperda)(毛蟲)、埃及斑蚊(Aedes aegypti)(蚊子)、白線斑蚊(Aedes albopictus)(蚊子)、黑腹果蠅(Drosophila melanogaster)(果蠅)及家蠶(Bombyx mori)(蠶)。多種轉染用病毒株可公開獲得，例如加州苜蓿夜蛾(Autographa californica)NPV之L-1變體及家蠶NPV之Bm-5株，且該等病毒尤其可用於轉染草地貪夜蛾細胞。
亦可採用棉花、玉米、馬鈴薯、大豆、矮牽牛、番茄及煙草之植物細胞培養物作為宿主。
在另一態樣中，人類化抗IL-36R之表現係在脊椎動物細胞中實施。脊椎動物細胞在培養(組織培養)中之繁殖已成為常規程序且技術隨處可得。有用哺乳動物宿主細胞系之實例係經SV40轉化之猴子腎CV1細胞系(COS-7，ATCC CRL 1651)、人類胚胎腎細胞系(經亞選殖以在懸浮培養中 生長之293或293細胞，Graham等人，1977,J.Gen Virol.36：59)、幼倉鼠腎細胞(BHK，ATCC CCL 10)、中國倉鼠卵巢細胞/-DHFR1(CHO，Urlaub等人，1980,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 77：4216；例如，DG44)、小鼠賽特利氏(sertoli)細胞(TM4，Mather,1980,Biol.Reprod.23：243-251)、猴子腎細胞(CV1 ATCC CCL 70)、非洲綠猴子腎細胞(VERO-76，ATCC CRL-1587)、人類子宮頸癌細胞(HELA，ATCC CCL 2)、犬腎細胞(MDCK，ATCC CCL 34)、水牛大鼠肝細胞(BRL 3A，ATCC CRL 1442)、人類肺細胞(W138，ATCC CCL 75)、人類肝細胞(Hep G2，HB 8065)、小鼠乳房腫瘤(MMT 060562，ATCC CCL51)、TR1細胞(Mather等人，1982,Annals N.Y.Acad.Sci.383：44-68)、MRC 5細胞、FS4細胞及人類肝癌細胞系(Hep G2)。
用上述用於產生人類化抗IL-36R抗體之表現或選殖載體來轉化宿主細胞，並在習用營養培養基中培養，該等營養培養基經修改以適於誘導啟動子、選擇轉化體或擴增編碼期望序列之基因。
可在多種培養基中培養用於產生本文所述人類化抗IL-36R抗體之宿主細胞。市售培養基適用於培養宿主細胞，例如Ham's F10(Sigma-Aldrich公司，St.Louis,Mo.)、最小必需培養基((MEM)，Sigma-Aldrich公司)、RPMI-1640(Sigma-Aldrich公司)及杜貝克氏改良伊氏培養基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)((DMEM)，Sigma-Aldrich公司)。另外，可使用以下文獻中之一或多者中所闡述之任 一培養基來作為宿主細胞之培養基：Ham等人，1979,Meth.Enz.58：44；Barnes等人，1980,Anal.Biochem.102：255；美國專利第4,767,704號、美國專利第4,657,866號、美國專利第4,927,762號、美國專利第4,560,655號、美國專利第5,122,469號、WO 90/103430及WO 87/00195。該等培養基中之任一者可根據需要補加有激素及/或其他生長因子(例如胰島素、轉鐵蛋白或表皮生長因子)、鹽(例如氯化鈉、鈣鹽、鎂鹽及磷酸鹽)、緩衝液(例如HEPES)、核苷酸(例如腺苷及胸苷)、抗生素(例如正大黴素)、痕量元素(定義為通常以微莫耳範圍之最終濃度存在之無機化合物)及葡萄糖或等效能源。亦可以熟習此項技術者已知之適當濃度包括其他補加物。諸如溫度、pH及諸如此類等培養條件係彼等先前用於所選表現用宿主細胞者，且對熟習此項技術者而言係顯而易見的。
在使用重組技術時，抗體可在細胞內、在壁膜間隙中產生，或直接分泌至培養基中。若在細胞內產生抗體，則作為第一步驟可使細胞破裂以釋放蛋白質。可藉由(例如)離心或超濾移除微粒碎片，即宿主細胞或溶解片段。Carter等人，1992,Bio/Technology 10：163-167闡述分離分泌至大腸桿菌壁膜間隙中之抗體之程序。簡言之，在乙酸鈉(pH 3.5)、EDTA及苯甲磺醯氟(PMSF)存在下經約30分鐘使細胞糊劑解凍。可藉由離心移除細胞碎片。若抗體分泌至培養基中，則通常首先使用市售蛋白質濃縮濾器(例如Amicon或Millipore Pellicon超濾單元)濃縮來自該等表現系 統之上清液。在任一前述步驟中可包括諸如PMSF等蛋白酶抑制劑以抑制蛋白質水解，且可包括抗生素以防止外來污染物生長。可使用多種方法自宿主細胞分離抗體。
可使用(例如)羥基磷灰石層析、凝膠電泳、透析及親和層析來純化自細胞製備之抗體組合物，其中親和層析係典型純化技術。蛋白質A作為親和配體之適合性取決於存於抗體中之任一免疫球蛋白Fc結構域之物種及同型。蛋白質A可用於純化基於人類γ1、γ2或γ4重鏈之抗體(例如，參見Lindmark等人，1983J.Immunol.Meth.62：1-13)。推薦蛋白質G用於所有小鼠同型及人類γ3(例如，參見Guss等人，1986 EMBO J.5：1567-1575)。親和配體所附接之基質最經常為瓊脂糖，但亦可使用其他基質。機械上穩定之基質(例如定孔玻璃或聚(苯乙烯二乙烯基)苯)使得可達成較使用瓊脂糖更快之流速及更短之處理時間。若抗體包含CH3結構域，則Bakerbond ABXTM樹脂(J.T.Baker,Phillipsburg,N.J.)可用於純化。視欲回收抗體亦可使用其他蛋白質純化技術，例如在離子交換管柱上分級分離、乙醇沈澱、逆相HPLC、在二氧化矽上層析、在肝素SEPHAROSETM上層析、在陰離子或陽離子交換樹脂(例如聚天冬胺酸管柱)上層析、層析聚焦、SDS-PAGE及硫酸銨沈澱。
在任何初步純化步驟後，可使用pH介於約2.5至4.5之間之溶析緩衝液對包含目標抗體及污染物之混合物實施低pH疏水作用層析，通常係在低鹽濃度(例如，約0 M-0.25 M 鹽)下實施。
亦包括在低、中等及高嚴格度條件下與由編碼本發明抗體或抗體片段之分離多核苷酸序列代表之核苷酸序列之全部或一部分(例如，編碼可變區之部分)雜交的核酸。雜交核酸之雜交部分之長度通常係至少15個(例如，20個、25個、30個或50個)核苷酸。雜交核酸之雜交部分與編碼抗IL-36R多肽(例如，重鏈或輕鏈可變區)或其補體的核酸之一部分或全部之序列至少80%(例如至少90%、至少95%或至少98%)一致。本文所述類型之雜交核酸可用作(例如)選殖探針、引物(例如PCR引物)或診斷探針。
非治療性用途
本文所述抗體可用作親和純化劑。在此方法中，使用業內熟知方法將抗體固定在諸如蛋白質A樹脂等固相上。使經固定抗體與含有欲純化IL-36R蛋白(或其片段)之樣品接觸，且隨後用適宜溶劑洗滌載體，從而可移除樣品中除與經固定抗體結合之IL-36R蛋白以外之實質上所有材料。最後，用另一適宜溶劑洗滌載體，從而可自抗體釋放IL-36R蛋白。
抗IL-36R抗體(例如人類化抗IL-36R抗體)亦可用於檢測及/或量化IL-36R蛋白之診斷分析，例如，檢測在具體細胞、組織或血清中之IL-36R表現。抗IL-36R抗體可以診斷方式用於(例如)監測疾病之發展或進展作為(例如)測定給定治療及/或預防方案之效力之臨床測試程序之一部分。可藉由偶合抗IL-36R抗體來促進檢測。可檢測物質之實例 包括各種酶、輔基、螢光材料、發光材料、生物發光材料、放射性材料、使用各種正電子發射斷層攝影術之正電子發射金屬及非放射性順磁性金屬粒子。例如，參見美國專利第4,741,900號，其係關於根據此發明可與抗體偶聯用作診斷劑之金屬離子。
抗IL-36R抗體可用於診斷IL-36R相關病症(例如，特徵在於IL-36R之異常表現之病症)或確定個體是否具有患IL-36R相關病症之增加之風險之方法。該等方法包括使來自個體之生物樣品與IL-36R抗體接觸及檢測抗體與IL-36R之結合。「生物樣品」意欲指自個體、細胞系、組織培養或可能表現IL-36R之其他細胞源獲得之任何生物樣品。自哺乳動物獲得組織生檢及體液之方法為業內所熟知。
在一些實施例中，該方法可進一步包含將IL-36R在患者樣品中之含量與對照樣品(例如，未患有IL-36R相關病症之個體)相比較以確定患者是否患有IL-36R相關病症或是否具有患IL-36R相關病症之風險。
在一些實施例中，例如處於診斷性目的，可有利地用可檢測部分標記抗體。可使用多種可檢測標記，包括放射性同位素、螢光標記、酶受質標記及諸如此類。可使用多種已知技術使標記與抗體間接偶聯。例如，可使抗體與生物素偶聯，且可使上文所述三大類標記中之任一種與抗生物素蛋白偶聯，或反之亦然。生物素選擇性地與抗生物素蛋白結合，且標記由此可以此間接方式與抗體偶聯。或者，為達成標記與抗體之間接偶聯，可使抗體與較小半抗原 (例如地高辛(digoxin))偶聯且使一種不同類型之上述標記與抗半抗原抗體(例如，抗地高辛抗體)偶聯。由此，可達成標記與抗體之間接偶聯。
實例性放射性同位素標記包括35S、14C、125I、3H及131I。可使用(例如)以下文獻中所述之技術利用放射性同位素標記抗體：Current Protocols in Immunology，第1卷及第2卷，1991,Coligen等人編輯，Wiley-Interscience,New York,N.Y.,Pubs。可藉由(例如)閃爍計數來量測放射性。
實例性螢光標記包括源自以下之標記：稀土螯合物(銪螯合物)或螢光素及其衍生物、玫瑰紅(rhodamine)及其衍生物、丹磺醯(dansyl)、麗絲胺(Lissamine)、藻紅素及德克薩斯紅(Texas Red)。可經由已知技術使螢光標記與抗體偶聯，例如Current Protocols in Immunology中所揭示之彼等。可使用螢光計來量化螢光。
業內已知多種經充分表徵之酶-受質標記(例如，綜述參見美國專利第4,275,149號)。酶通常催化發色受質進行可使用各種技術量測之化學改變。例如，改變可係可以分光光度計法量測之受質顏色變化。或者，酶可改變受質之螢光或化學發光。量化螢光變化之技術如上文所述。化學發光受質可藉由化學反應經電子激發，且然後可發射可使用(例如)化學發光計量測之光或向螢光受體提供能量。
酶標記之實例包括螢光素酶(例如螢火蟲螢光素酶及細菌螢光素酶，美國專利第4,737,456號)、螢光素、2,3-二氫酞嗪二酮、蘋果酸去氫酶、脲酶、過氧化酶(例如山葵過 氧化酶(HRPO))、鹼性磷酸酶、β-半乳糖苷酶、葡萄糖澱粉酶、溶菌酶、糖氧化酶(例如葡萄糖氧化酶、半乳糖氧化酶及葡萄糖-6-磷酸去氫酶)、雜環氧化酶(例如尿酸酶及黃嘌呤氧化酶)、乳過氧化酶、微過氧化酶及諸如此類。酶與抗體偶聯之技術係闡述於(例如)O'Sullivan等人，1981,Methods for the Preparation of Enzyme-Antibody Conjugates for use in Enzyme Immunoassay，在Methods in Enzym.(J.Langone及H.Van Vunakis編輯)，Academic press,N.Y.,73：147-166中。
酶-受質組合之實例包括(例如)：山葵過氧化酶(HRPO)與作為受質之過氧化氫酶，其中過氧化氫酶氧化染料前體(例如鄰苯二胺(OPD)或3,3',5,5'-四甲基聯苯胺鹽酸鹽(TMB))；鹼性磷酸酶(AP)與作為發色受質之磷酸對硝基苯酯；及β-D-半乳糖苷酶(β-D-Gal)與發色受質(例如對硝基苯基-β-D-半乳糖苷酶或螢光受質4-甲基傘形酮-β-D-半乳糖苷酶)。
熟習此項技術者可瞭解多種其他酶-受質組合。該等組合之一般綜述參見美國專利第4,275,149號及美國專利第4,318,980號。
在另一實施例中，使用未經標記之人類化抗IL-36R抗體且用結合該人類化抗IL-36R抗體之經標記抗體來檢測。
本文所述抗體可用於任一已知分析方法中，例如競爭性結合分析、直接及間接夾心式分析及免疫沈澱分析。例如，參見Zola,Monoclonal Antibodies：A Manual of Techniques，第147頁-第158頁(CRC Press有限公司，1987)。
抗IL-36R抗體或其抗原結合片段可用於抑制配體與IL-36受體之結合。該等方法包含向細胞(例如，哺乳動物細胞)或細胞環境投與抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中藉由IL-36受體介導之信號傳導受到抑制。該等方法可在活體外或活體內實施。「細胞環境」意欲指組織、培養基或圍繞細胞之細胞外基質。向細胞之細胞環境投與抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，以使抗體或片段能夠與細胞外部且圍繞細胞之IL-36R分子結合，從而防止IL-36配體與其受體結合。
診斷套組
抗IL-36R抗體可用於診斷套組中，即預定量試劑與實施診斷分析之說明書之經包裝組合。若用酶標記抗體，則套組可包括酶所需受質及輔因子(例如提供可檢測發色團或螢光團之受質前體)。另外，可包括其他添加劑，例如穩定劑、緩衝液(例如封阻緩衝液或溶解緩衝液)及諸如此類。各種試劑之相對量可大幅變化以使該等試劑在溶液中之濃度可顯著優化分析之靈敏度。試劑可以乾粉形式(通常經凍乾)提供，其包括在溶解後可使試劑溶液具有適宜濃度之賦形劑。
治療性用途
在另一實施例中，本文所揭示之人類化抗IL-36R抗體可用於治療如本文所述各種與IL-36R之表現相關之病症。治 療IL-36R相關病症之方法包含向需要其之個體投與治療有效量之人類化抗IL-36R抗體。
人類化抗IL-36R抗體或藥劑係藉由任何適宜方式來投與，包括非經腸、皮下、腹膜內、肺內及鼻內，且若需要局部免疫阻抑治療，則實施病灶內投與(包括灌注或以其他方式使移植物在移植前與抗體接觸)。人類化抗IL-36R抗體或藥劑可以(例如)輸注或快速濃注形式來投與。非經腸輸注包括肌內、靜脈內、動脈內、腹膜內或皮下投與。另外，人類化抗IL-36R抗體係藉由脈衝輸注適當投與，尤其係以抗體之遞減劑量來投與。在一態樣中，藉由注射來實施投藥，最佳藉由靜脈內或皮下注射來投藥，此部分取決於投與係短期還是長期投與。
在預防或治療疾病時，抗體之適宜劑量可取決於多種因素，例如如上文所定義欲治療疾病之類型、疾病之嚴重程度及病程、投與抗體之目的係預防性還是治療性、先前治療、患者臨床史及對抗體之反應，以及主治醫師之決定。抗體係一次性或經一系列治療以適當方式投與患者。
視疾病類型及嚴重程度而定，不論係(例如)藉由一或多次分開投與或藉由連續輸注來投與，向患者投與之抗體初始候選劑量為約1 μg/kg至20 mg/kg(例如0.1 mg/kg-15 mg/kg)。視上文所提及之因素而定，典型日劑量可在約1 μg/kg至100 mg/kg或更高範圍內。對於經數天或更長時間重複投與，視病狀而定，持續治療直至疾病症狀出現期望阻抑為止。然而，可使用其他劑量方案。此療法之進展可 藉由習用技術及分析容易地監測。實例性劑量方案係揭示於WO 94/04188中者。
本文所用術語「阻抑」在與「改善」及「減輕」相同之上下文中意指減少疾病之一或多個特徵。
可以與良好醫療實踐一致之方式對抗體組合物進行調配、投藥及投與。在此上下文中需考慮之因素包括所治療之特定病症、所治療之特定哺乳動物、個體患者之臨床病狀、病因、藥劑之遞送位點、投與方法、投與時間安排及從業醫師所知之其他因素。欲投與抗體之「治療有效量」可由該等因素決定，且係預防、改善或治療與IL-36R表現相關之病症所需之最小量。
抗體不需(但視情況)與一或多種當前用於預防或治療所述病症之藥劑一起調配。該等其他藥劑之有效量取決於人類化抗IL-36R23p19抗體存於調配物中之量、病症或治療之類型及上述其他因素。該等其他藥劑通常以與上文所用相同之劑量及投與途徑來使用或係上文所用劑量之約1%至99%。
醫藥組合物及其投與
可向患有免疫病症、呼吸病症或癌症或具有罹患該等疾病之風險之個體投與包含IL-36R結合劑(例如，抗IL-36R抗體)之組合物。本發明進一步提供IL-36R結合劑(例如，抗IL-36R抗體)用於製造用以預防或治療癌症、呼吸病症或免疫病症之醫藥之用途。本文所用術語「個體」意指可投與IL-36R結合劑之任何哺乳動物患者，包括(例如)人類 及非人類哺乳動物，例如靈長類動物、齧齒類動物及狗。明確意欲使用本文所述方法治療之個體包括人類。在免疫病症、呼吸病症或癌症之預防或治療中，抗體或藥劑可單獨或與其他組合物組合投與。可與抗體或藥劑組合投與之該等組合物包括甲胺蝶呤(MTX)及免疫調節劑，例如抗體或小分子。
用於該等醫藥組合物之抗體之實例係彼等包含具有SEQ ID NO：1-10中任一者之輕鏈可變區胺基酸序列之抗體或抗體片段者。用於該等醫藥組合物之抗體之實例亦係彼等包含具有SEQ ID NO：11-20中任一者之重鏈可變區胺基酸序列之人類化抗體或抗體片段者。
用於該等醫藥組合物之抗體之其他實例亦係彼等包含具有SEQ ID NO：76-86中任一者之輕鏈可變區胺基酸序列之人類化抗體或抗體片段者。用於該等醫藥組合物之較佳抗體亦係彼等包含具有SEQ ID NO：87-101中任一者之重鏈可變區胺基酸序列之人類化抗體或抗體片段者。
用於該等醫藥組合物之抗體之其他實例亦係彼等包含具有以下任一者之輕鏈可變區及重鏈可變區之人類化抗體或抗體片段者：SEQ ID NO：77及89、SEQ ID NO：80及88、SEQ ID NO：80及89、SEQ ID NO：77及87、SEQ ID NO：77及88、SEQ ID NO：80及87、SEQ ID NO：86及100、SEQ ID NO：85及101或SEQ ID NO：85及10。
用於該等醫藥組合物之抗體之其他實例亦係彼等包含具有SEQ ID NO：115、118、123或124中任一者之輕鏈區胺基 酸序列之人類化抗體者。用於該等醫藥組合物之較佳抗體亦係彼等包含具有SEQ ID NO：125、126、127、138或139中任一者之重鏈可變區胺基酸序列之人類化抗體者。
用於該等醫藥組合物之抗體之其他實例亦係彼等包含抗體B1、抗體B2、抗體B3、抗體B4、抗體B5、抗體B6、抗體C1、抗體C2或抗體C3者。
已知且可使用各種遞送系統來投與IL-36R結合劑。引入方法包括(但不限於)真皮內、肌內、腹膜內、靜脈內、皮下、鼻內、硬膜外及經口途徑。IL-36R結合劑可藉由(例如)輸注、快速濃注或注射來投與，且可與諸如化學治療劑等其他生物活性劑一起投與。投與可為全身性或局部投與。在較佳實施例中，藉由皮下注射來投與。可在(例如)預填充唧筒中製備用於該等注射之調配物，其可每隔一週投與一次。
在具體實施例中，IL-36R結合劑組合物係藉由注射、藉助導管、藉助栓劑或藉助植入體來投與，該植入體係有孔、無孔或凝膠狀材料，其包括諸如矽橡膠膜等膜或纖維。通常，在投與組合物時，使用抗IL-36R抗體或藥劑不吸附之材料。
在其他實施例中，抗IL-36R抗體或藥劑係以受控釋放系統來遞送。在一實施例中，可使用幫浦(例如，參見Langer,1990,Science 249：1527-1533；Sefton,1989,CRC Crit.Ref.Biomed.Eng.14：201；Buchwald等人，1980,Surgery 88：507；Saudek等人，1989,N.Engl.J.Med. 321：574)。在另一實施例中，可使用聚合材料。(例如，參見Medical Applications of Controlled Release(Langer及Wise編輯，CRC Press,Boca Raton,Fla.,1974)；Controlled Drug Bioavailability,Drug Product Design and Performance(Smolen及Ball編輯，Wiley,New York,1984)；Ranger及Peppas,1983,Macromol.Sci.Rev.Macromol.Chem.23：61。亦參見Levy等人，1985,Science 228：190；During等人，1989,Ann.Neurol.25：351；Howard等人，1989,J.Neurosurg.71：105。)其他受控釋放系統係論述於(例如)Langer(參見上文)中。
IL-36R結合劑(例如，抗IL-36R抗體)可以包含治療有效量之結合劑及一或多種醫藥相容成份之醫藥組合物形式來投與。
在典型實施例中，按照常規程序將醫藥組合物調配為適於向人類靜脈內或皮下投與之醫藥組合物。通常，注射投與用組合物係存於無菌等滲水性緩衝液中之溶液。若需要，醫藥物亦可包括增溶劑及局部麻醉劑(例如利多卡因(lignocaine))以減輕注射位點之疼痛。通常，各成份係單獨或混合在一起以單位劑型來供應，例如，作為凍乾乾粉或無水濃縮物存於諸如安瓿或藥囊等標明活性劑之量的密封容器中。若醫藥物係藉由輸注來投與，則可將其分配至含有無菌醫藥級水或鹽水之輸注瓶中。若醫藥物係藉由注射來投與，則可提供含有注射用無菌水或鹽水之安瓿以使得可在投與之前混合各成份。
此外，可以醫藥套組形式來提供醫藥組合物，該醫藥套組包含(a)含有呈凍乾形式之IL-36R結合劑(例如，抗IL-36R抗體)之容器及(b)含有醫藥上可接受之注射用稀釋劑(例如，無菌水)之第二容器。醫藥上可接受之稀釋劑可用於重建或稀釋凍乾抗IL-36R抗體或藥劑。視情況，該(等)容器可附帶有監管醫藥物或生物產品之製造、使用或銷售之政府機構所規定形式之公告，該公告顯示政府機構已批准用於人類投與之製造、使用或銷售。
IL-36R結合劑(例如，抗IL-36R抗體)在治療或預防免疫病症或癌症中之有效量可藉由標準臨床技術來確定。另外，可視情況採用活體外分析來幫助確定最佳劑量範圍。調配物中所用之確切劑量亦可取決於投與途徑及免疫病症或癌症之階段，且應根據從業醫師之判斷及每一患者之情況來決定。可根據得自活體外或動物模型測試系統之劑量反應曲線來推斷有效劑量。
通常，向患有免疫病症或表現IL-36R之癌症之患者所投與之抗IL-36R抗體或IL-36R結合劑之劑量通常為約0.1 mg/kg個體體重至約100 mg/kg。向個體所投與之劑量為約0.1 mg/kg個體體重至約50 mg/kg、約1 mg/kg至約30 mg/kg、約1 mg/kg至約20 mg/kg、約1 mg/kg至約15 mg/kg或約1 mg/kg至約10 mg/kg。
實例性劑量包括(但不限於)1 ng/kg至100 mg/kg。在一些實施例中，劑量為約0.5 mg/kg、約1 mg/kg、約2 mg/kg、約3 mg/kg、約4 mg/kg、約5 mg/kg、約6 mg/kg、約7 mg/kg、約8 mg/kg、約9 mg/kg、約10 mg/kg、約11 mg/kg、約12 mg/kg、約13 mg/kg、約14 mg/kg、約15 mg/kg或約16 mg/kg。該劑量可以諸如以下等頻率來投與：每日、每週一次(一週一次)、每週兩次、每週三次、每週四次、每週五次、每週六次、每兩週一次或每月一次、每兩個月一次或每三個月一次。在具體實施例中，劑量為約0.5 mg/kg/週、約1 mg/kg/週、約2 mg/kg/週、約3 mg/kg/週、約4 mg/kg/週、約5 mg/kg/週、約6 mg/kg/週、約7 mg/kg/週、約8 mg/kg/週、約9 mg/kg/週、約10 mg/kg/週、約11 mg/kg/週、約12 mg/kg/週、約13 mg/kg/週、約14 mg/kg/週、約15 mg/kg/週或約16 mg/kg/週。在一些實施例中，劑量係在約1 mg/kg/週至約15 mg/kg/週範圍內。
在一些實施例中，包含IL-36R結合劑之醫藥組合物可進一步包含與該結合劑偶聯或未偶聯之治療劑。抗IL-36R抗體或IL-36R結合劑可與一或多種用於治療或預防免疫病症或癌症之治療劑組合共投與。
該組合療法投與可對疾病參數(例如，症狀嚴重程度、症狀數或復發頻率)產生累加或協同效應。
對於組合投與之治療方案，在一具體實施例中，將抗IL-36R抗體或IL-36R結合劑與治療劑同時投與。在另一具體實施例中，在投與抗IL-36R抗體或IL-36R結合劑之前或之後投與治療劑，即在投與抗IL-36R抗體或IL-36R結合劑之前或之後至少1小時且最長數月、例如至少1小時、5小時、12小時、1天、1週、1個月或3個月投與治療劑。
製品
在另一態樣中，包括含有可用於治療上述病症之材料之製品。該製品包含容器及標籤。適宜容器包括(例如)瓶子、小瓶、唧筒及試管。容器可自諸如玻璃或塑膠等各種材料形成。容器容納可有效治療病狀之組合物且可具有無菌存取埠。例如，容器可為靜脈內溶液袋或具有皮下注射針可刺入塞子之小瓶。組合物中之活性劑係人類化抗IL-36R抗體。容器上或與容器相連之標籤指示，該組合物係用於治療所選病狀。製品可進一步包含第二容器，該第二容器包含醫藥上可接受之緩衝液，例如磷酸鹽緩衝鹽水、林格氏溶液(Ringer's solution)及右旋糖溶液。其可進一步包括自商業及用戶角度考慮所期望之其他材料，包括其他緩衝液、稀釋劑、過濾器、針、唧筒及寫有使用說明之包裝插頁。
本發明進一步闡述於以下實例中，該等實例不欲限制本發明之範圍。
本發明抗體進一步闡述於以下實例中。
實例 實例1：抗人類IL-36R抗體之識別
利用以重組方式產生之人類IL-36R(ECD-細胞外結構域：基因庫登錄號NP_003845之胺基酸20-332)蛋白質對多個小鼠菌株實施免疫，且將彼等產生強力價反應者納入傳統融合瘤產生。亞選殖並重新篩選引發與人類IL-36R(ECD)之強結合而不與人類IL-1R1(最相關之IL-1R家族成 員)結合之融合產物。識別產生結合IL-36R並使自IL-36R之信號傳導無效之單株抗體之多個融合瘤(參見實例2、3及4)。使用標準PCR引物組自融合瘤選殖可變結構域。代表性單株抗體之可變結構域及特異性CDR係如上文所述。將所有小鼠抗體轉化成由於人類恆定結構域(hu IgGlKO/κ)上之小鼠可變結構域組成之嵌合抗體。hu IgG1KO(剔除(knock out))具有兩個替代突變(Leu234Ala及Leu235Ala)，其藉由降低效應子功能(例如FcλR及補體結合)來消除ADCC及CDC活性。小鼠與嵌合抗體之可變結構域係相同的。嵌合抗體經產生來證實抗體功能並確保已獲得正確的可變結構域序列。
實例2：經識別小鼠抗人類IL-36R抗體之分子結合親和力
A)在單一管柱純化後使用Proteon(Bio-Rad,Hercules,CA)並使用自融合瘤產生之材料量測抗IL-36R抗體與重組人類IL-36R結合之動力學及結合親和力。據估計，所有小鼠前導序列與人類IL-36R在單一IL-36R表面層濃度下之結合親和力<100 pM。小鼠抗體與人類IL-36R在7個不同表面密度下進行之結合親和力(整體擬合)係顯示於表1中。嵌合抗IL36R IgG之結合等效於各別小鼠前導序列。
B)對小鼠IL-36R及人類IL-1R1之分子選擇性
亦以100 nM之濃度將小鼠及嵌合抗IL-36R抗體注射於小鼠IL-36R或人類IL-1R1表面上。使用Fortebio Octet(Fortebio,Menlo Park,CA)量測該等抗體與小鼠IL-36R及人類IL-1R1之結合信號為0，此表明該等抗體選擇性地與人類IL-36R結合。亦在50%人類血清存在下分析抗IL-36R抗體與人類IL-36R之結合，且觀測到血清對結合締合速率(on-rate)無顯著效應。
實例3：小鼠及嵌合抗人類IL-36R抗體在人類及石蟹獼猴功能分析中之效能 方案：人類NCI/ADR-RES細胞pNFκB/細胞因子釋放分析 試劑：
R&D Systems：截短rh IL36β
R&D Systems：截短rh IL36γ
R&D Systems：截短rh IL36α：MA6000 Phospho-NFκB(Ser536)全細胞溶解產物套組
Meso Scale Diagnostics,LLC
MSD ELISA定製人類96孔4點滴(spot)分析
Meso Scale Diagnostics,LLC
將NCI/ADR-RES細胞以45000細胞/孔平鋪於96孔板中含有0.25%血清之RPMI培養基上。一板用於分析pNFκB且另一板用於細胞因子釋放。然後於37℃、5% CO2下將該等板培育過夜。將配體(IL36α、β或γ)及抗體以4×期望濃度於血清饑餓(SS)培養基中稀釋。將拮抗劑(抗體)添加至細胞 中，然後添加配體。對於pNFκB：於37℃、5% CO2下，將NCI細胞+/-配體及拮抗劑培育1小時。然後抽吸培養基，並在冰上將細胞於100 μl/孔完全溶解緩衝液中溶解30 min。然後使溶解產物在4℃下以2500 RPM離心20 min，並轉移至MSD ELISA板，並根據製造商之方案分析pNFκB。對於細胞因子釋放：刺激後18小時-24小時，將上清液轉移至MSD ELISA板，並根據製造商之方案分析細胞因子。
方案：BaF/3石蟹獼猴IL-36R細胞之pNFκB(S536)MSD ELISA
將BaF/3石蟹獼猴IL-36R細胞以90,000細胞/孔平鋪於96孔板中之SS培養基上。將100 μl培養基添加至對照孔中。以4×期望濃度稀釋拮抗劑(抗體)，且將50 μl添加至每一孔中。將配體(IL36α、β或γ)以4×期望濃度於SS培養基中稀釋，且將50 μl添加至每一孔中(最終體積為200 μl)。於37℃、5% CO2下將各板培育15 min。對板進行短暫離心，抽吸培養基，並將細胞溶解於100 μl/孔完全溶解緩衝液中(參見MSD pNFκB方案)並在冰上培育30 min。然後使溶解產物在4℃下以2500 RPM離心20 min，並轉移至MSD ELISA板。然後使用如上文所述之MSD套組評估溶解產物之pNFκB活性。
結果：小鼠抗人類IL-36R抗體在人類功能分析(pNFκB及細胞因子釋放)及石蟹獼猴功能分析(pNFkB)中對於人類IL-36配體之IC90結果係顯示於表2中。嵌合抗人類IL-36R抗體在人類功能分析(pNFκB及細胞因子釋放)及石蟹獼猴 功能分析(pNFκB)中對於人類IL-36配體之IC90結果係顯示於表3中。
實例4：小鼠抗人類IL-36R抗體與人類IL-36R表現細胞之結合 藉由流式細胞術之抗體結合方案
使經全長人類IL-36R轉染之HEK293細胞或NCI/ADR-RES細胞傳代24小時，然後染色。藉由用10 ml存於PBS中之5 mM EDTA沖洗來自燒瓶移除細胞，且然後在37℃下利 用另外10 ml之5 mM EDTA及2.5 ml之Accumax培育10 min，以去凝塊(declump)/分散細胞。然後於PBS+2% BSA中將抗體稀釋至指定濃度，並在室溫下將細胞培育20 min。然後藉由添加200 μl之PBS來洗滌過量抗體，且然後離心。然後以50 μl/孔添加第二試劑，且在室溫下將細胞培育15 min，且然後如上進行洗滌。將細胞重新懸浮於200 μl PBS中，並藉由流式細胞術進行分析。小鼠抗人類IL-36R抗體與人類IL-36R HEK轉染子結合之結合EC50係示於表4中。
實例5：人類化IL-36R抗體之產生
為在人類中投與後降低潛在免疫原性，藉助設計及篩選過程使小鼠抗人類IL-36R單株抗體81B4及73C5「人類化」。基於框架同源性、CDR結構、保守標準殘基、保守介面封裝殘基及其他參數來選擇小鼠前導序列之人類框架序列。在該等框架位置處之特異性胺基酸殘基取代可相對於藉由將CDR或HVL「直接交換」至人類種系框架區中所形成之人類化抗體中所示者改良各方面抗體性能，包括 結合親和性及/或穩定性。選擇與嵌合親代Fab相比顯示較好或相等結合及經改良表現之Fab用於進一步表徵。抗體81B4及73C5之代表性人類化可變區係顯示於說明書部分。以此方式，抗體B1至抗體B6係源自小鼠抗體81B4(選殖至人類IgG1 KO(KO=剔除)/κ骨架中)之人類化抗體。抗體B1至B6係顯示於表A中。抗體C1至抗體C3係源自小鼠抗體73C5(選殖至人類IgG1-KO(KO=剔除)/κ骨架中)之人類化抗體。抗體C1至C3係顯示於表C中。
實例6：人類化IL-36R抗體之結合
使用Proteon(Bio-Rad,Hercules,CA)量測人類化抗IL-36R抗體與重組人類IL-36R結合之動力學及結合親和力。以5個不同表面密度使人類IL-36R固定化，且使用整體擬合分析結果(參見顯示三個實驗之結果之表5)。經由流式細胞術使用實例4中所述方案量測人類化抗體與NCI/ADR-RES細胞之結合(EC90值參見表5)。
實例7：人類化抗人類IL-36R抗體在人類功能分析中之效能
如實例3中所述測試來自人類NCI/ADR-RES細胞之人類化IL-36R變體對信號傳導之功能阻斷。人類化抗人類IL- 36R抗體在人類功能分析(pNFκB及細胞因子釋放)中對人類IL-36配體之IC90結果係顯示於表6中。
實例8：抗IL-36R抗體在人類原代角化細胞功能分析中之效能 方案：人類原代表皮角化細胞pNFkB/細胞因子釋放分析
將細胞以30,000細胞/孔平鋪於96孔板中之培養基中，並在37℃、5% CO2下培育過夜。然後如實例3中所述實施分析。
結果：小鼠、嵌合及人類化抗IL-36R抗體在人類原代角化細胞分析(pNFkB及IL-8釋放)中經人類IL-36配體刺激之IC90結果分別顯示於中表7、表8及表9中。
實例9抗IL-36R抗體在人類原代腸上皮細胞功能分析中之效能 方案：人類原代腸上皮細胞pNFkB/細胞因子釋放分析
將細胞以30,000細胞/孔平鋪於96孔板中之培養基中，並在37℃、5% CO2下培育過夜。然後如實例3中所述實施分析。
結果：小鼠抗IL-36R抗體在經人類IL-36配體刺激之人類原代腸上皮細胞分析(pNFkB及IL-8釋放)中之IC90結果係顯示於表10中。
實例10：抗IL-36R抗體在人類原代腸成肌纖維細胞功能分析中之效能 方案：人類原代腸成肌纖維細胞pNFκB/細胞因子釋放分析
將細胞以30,000細胞/孔平鋪於96孔板中之培養基中，並在37℃、5% CO2下培育。然後如實例3中所述實施分析。
結果：抗IL-36R抗體在經人類IL-36配體刺激之人類原 代腸成肌纖維細胞分析(pNFkB及IL-8釋放)中之IC90結果係顯示於表11及表12中。
實例11：抗IL-36R抗體在人類原代真皮成纖維細胞功能分析中之效能 方案：人類原代真皮成纖維細胞pNFκB/細胞因子釋放分析
將細胞以30,000細胞/孔平鋪於96孔板中之培養基中，並 在37℃、5% CO2下培育過夜。然後如實例3中所述實施分析。
結果：抗IL-36R抗體在經人類IL-36配體刺激之人類原代真皮成纖維細胞分析(pNFkB及IL-8釋放)中之IC90結果係顯示於表13及表14中。
實例12：小鼠抗IL-36R抗體在人類原代近端腎小管細胞功 能分析中之效能 方案：人類原代近端腎小管細胞pNFkB/細胞因子釋放分析
將細胞以5,000細胞/孔平鋪於96孔板中之培養基中，並在37℃、5% CO2下培育過夜。如實例3中所述實施分析。
結果：小鼠、嵌合及人類化抗IL-36R抗體在經人類IL-36配體刺激之人類原代近端腎小管細胞分析(IL-8釋放)中之IC90結果係顯示於表15中。
實例13：對自經IL-36γ刺激之經重構人類表皮產生IL-8之抑制 方案：經重構表皮
將抗IL-36R抗體(1.5 μg/ml)與經重構人類表皮一起預培育並利用人類重組IL-36γ(20 ng/ml)進行刺激。使用重組人類IL-1β(20 ng/ml；R & D Systems)作為陽性對照。培養24小時之後，收集細胞上清液並分析IL-8(對IL-8之分析係如實例3中所述)。以一式三份測試樣品，且平均pg/ml±標準誤差係顯示於下表中(表16)。
實例14：對經重構人類表皮中經IL-36配體誘導之S100A7及S100A12基因表現之抑制
用激動性IL-36配體刺激重構人類表皮誘導S100A7及S100A12基因表現。S100A7及S100A12係位於表皮分化複合體內之基因。
方案 ：將經重構人類表皮與抗IL-36R抗體(1.5 μg/ml)一起培育並利用人類重組IL-36γ(20 ng/ml)進行刺激。使用重組人類IL-1β(20 ng/mL；R & D Systems)作為陽性對照。在5% CO2及37℃下培養24小時後，自經重構人類表皮分離RNA並藉由即時逆轉錄酶-聚合酶鏈反應分析基因表現。使用2-△△Ct方法計算相對表現。以一式三份測試樣品，且平均表現±標準誤差係顯示於下表中(表17)。
實例15：抗IL-36R抗體在牛皮癬之異種移植模型中之效力
方案 ：24個由皮膚科醫生臨床診斷之牛皮癬患者獲得血液及非損傷皮膚生檢。將皮膚生檢移植於免疫缺陷型NIH-III小鼠上並使其植入4週至5週之時間。
在生檢時自收集自每一捐獻者之血液分離外週單核細胞(PBMC)，以供真皮內注射至植入皮膚中。在注射之前，利用1 μg/ml葡萄球菌腸毒素B(Toxin Technologies,Florida,USA)及80 U/ml人類重組IL-2(Peprotech有限公司，Oosterhout，The Netherlands)刺激PBMC。將自體PBMC與存於PBS中之7.5×10^5細胞一起經真皮內注射，以使對皮膚發炎及牛皮癬表現型之誘導同時發生。注射細胞後三週，自小鼠取回生檢並藉由組織學進行分析。
對所有群組之冷凍保藏皮膚組織實施組織學染色。如圖4中所述製備覆蓋所有皮膚層之對角線剖面(8 μm)。為評估表皮厚度，自生檢中心隨機選擇兩個非連續切片並利用蘇木精-曙紅染色。隨後，在100倍放大率下評估切片。在生檢之整個長度中，在兩個切片中使用Olympus DP71相機及Cell^D成像軟體(V2.7,Munster,Germany)量測脊長度。
脊長度係定義為：介於顆粒層之上邊緣與脊之底部之間之距離。隨機且在不知情的情況下對生檢評分。
每一治療群組之平均表皮厚度及最大表皮厚度之結果係顯示於表18中。每一治療群組表皮厚度之淨變化之結果係顯示於表19中。
實例16：野生型及介白素-1受體樣2純合剔除小鼠中3週香煙煙霧暴露後之亞慢性肺發炎
方案 ：使野生型或介白素-1受體樣2小鼠暴露於香煙煙霧中3週以誘導肺窘迫。第1週及第2週係由5個連續暴露日組成，而在第3週期間使小鼠連續暴露4天。每天使小鼠暴露於5支香煙中，其中香煙暴露(16分鐘)與新鮮空氣(8分鐘)之間隔為24分鐘。最後一次暴露之後18小時，用2×0.8 ml之漢克氏鹽溶液(Hank's Salt Solution，0.6 mM EDTA)灌洗小鼠。離心10分鐘後，自支氣管肺泡灌洗液收集上清液及細胞沈澱。每一暴露群組之枝氣管肺泡灌洗液中總的巨噬細胞及嗜中性細胞計數係顯示於表20中。
圖1：IL-36拮抗配體(IL-36RA/IL1F5、IL-38/ILF10)抑制信號傳導級聯。
圖2：基因晶片分析表明IL-36R配體在牛皮癬皮膚中上調(IL-36 RA、IL-36 α及IL-36 γ)。
圖3：使用人類皮膚切片之表現剖面。
經福馬林(Formalin)固定，石蠟包埋且使用抗體33D10進行抗體滴定。
圖4：評估人類皮膚切片之表皮厚度之方法。
<110> 德商百靈佳殷格翰國際股份有限公司
<120> 抗IL-36R抗體
<130> 09-0583
<140> 101142698
<141>2012-11-15
<150> 61/713,713
<151> 2012-10-15
<150> 61/644,111
<151> 2012-05-08
<150> 61/560,554
<151> 2011-11-16
<160> 140
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 108
<212> PRT
<213> 小鼠屬(Mus sp.)
<400> 1
<210> 2
<211> 107
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 2
<210> 3
<211> 107
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 3
<210> 4
<211> 112
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 4
<210> 5
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 對人工序列之描述：合成多肽
<400> 5
<210> 6
<211> 108
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 6
<210> 7
<211> 107
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 7
<210> 8
<211> 107
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 8
<210> 9
<211> 107
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 9
<210> 10
<211> 107
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 10
<210> 11
<211> 119
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 11
<210> 12
<211> 125
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 12
<210> 13
<211> 124
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 13
<210> 14
<211> 118
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 14
<210> 15
<211> 120
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 15
<210> 16
<211> 119
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 16
<210> 17
<211> 119
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 17
<210> 18
<211> 119
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 18
<210> 19
<211> 117
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 19
<210> 20
<211> 124
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 20
<210> 21
<211> 12
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 21
<210> 22
<211> 11
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 22
<210> 23
<211> 11
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 23
<210> 24
<211> 16
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 24
<210> 25
<211> 11
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 25
<210> 26
<211> 12
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 26
<210> 27
<211> 11
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 27
<210> 28
<211> 11
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 28
<210> 29
<211> 11
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 29
<210> 30
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 30
<210> 31
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 31
<210> 32
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 32
<210> 33
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 33
<210> 34
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 34
<210> 35
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 35
<210> 36
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 36
<210> 37
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 37
<210> 38
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 38
<210> 39
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 39
<210> 40
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 對人工序列之描述：合成肽
<400> 40
<210> 41
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 41
<210> 42
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 42
<210> 43
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 43
<210> 44
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 44
<210> 45
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 45
<210> 46
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 46
<210> 47
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 47
<210> 48
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 48
<210> 49
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 49
<210> 50
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 50
<210> 51
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 51
<210> 52
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 52
<210> 53
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 53
<210> 54
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 54
<210> 55
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 55
<210> 56
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 56
<210> 57
<211> 17
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 57
<210> 58
<211> 17
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 58
<210> 59
<211> 17
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 59
<210> 60
<211> 16
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 60
<210> 61
<211> 16
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 61
<210> 62
<211> 15
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 62
<210> 63
<211> 16
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 63
<210> 64
<211> 16
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 64
<210> 65
<211> 16
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 65
<210> 66
<211> 17
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 66
<210> 67
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 67
<210> 68
<211> 16
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 68
<210> 69
<211> 15
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 69
<210> 70
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 70
<210> 71
<211> 12
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 71
<210> 72
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 72
<210> 73
<211> 11
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 73
<210> 74
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 74
<210> 75
<211> 15
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 75
<210> 76
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 76
<210> 77
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 77
<210> 78
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 78
<210> 79
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 79
<210> 80
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 80
<210> 81
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 81
<210> 82
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 82
<210> 83
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 83
<210> 84
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 84
<210> 85
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 85
<210> 86
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 86
<210> 87
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 87
<210> 88
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 88
<210> 89
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 89
<210> 90
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 90
<210> 91
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 91
<210> 92
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 92
<210> 93
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 93
<210> 94
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 94
<210> 95
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 95
<210> 96
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 96
<210> 97
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 97
<210> 98
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 98
<210> 99
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 99
<210> 100
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 100
<210> 101
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 101
<210> 102
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 102
<210> 103
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 103
<210> 104
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 104
<210> 105
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 105
<210> 106
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 106
<210> 107
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 107
<210> 108
<211> 15
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 108
<210> 109
<211> 15
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 109
<210> 110
<211> 15
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 110
<210> 111
<211> 15
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 111
<210> 112
<211> 330
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 112
<210> 113
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 113
<210> 114
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 114
<210> 115
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 115
<210> 116
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 116
<210> 117
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 117
<210> 118
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 118
<210> 119
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 119
<210> 120
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 120
<210> 121
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 121
<210> 122
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 122
<210> 123
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 123
<210> 124
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 124
<210> 125
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 125
<210> 126
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 126
<210> 127
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 127
<210> 128
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 128
<210> 129
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 129
<210> 130
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 130
<210> 131
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 131
<210> 132
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 132
<210> 133
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 133
<210> 134
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 134
<210> 135
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 135
<210> 136
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 136
<210> 137
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 137
<210> 138
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 138
<210> 139
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「對人工序列之描述：合成多肽」
<400> 139
<210> 140
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠屬
<400> 140

Claims (60)

  1. 一種抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其以等於或<0.1 nM之KD與人類IL-36R結合。
  2. 如請求項1之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段係單株抗體或其抗原結合片段。
  3. 如請求項1或2之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段係人類化抗體或其抗原結合片段。
  4. 如請求項1或2之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其以等於或<50 pM之KD與人類IL-36R結合。
  5. 如請求項1或2之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其不與人類IL-1R1結合。
  6. 如請求項1或2之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：35、102、103、104、105、106或140(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62、108、109、110或111(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：72(H-CDR3)。
  7. 如請求項6之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26 (L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：102(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62、108、109、110或111(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：72(H-CDR3)。
  8. 如請求項6之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：103(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62、108、109、110或111(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：72(H-CDR3)。
  9. 如請求項6之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：104(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62、108、109、110或111(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：72(H-CDR3)。
  10. 如請求項6之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26 (L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：105(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62、108、109、110或111(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：72(H-CDR3)。
  11. 如請求項6之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：106(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62、108、109、110或111(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：72(H-CDR3)。
  12. 如請求項6之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：140(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62、108、109、110或111(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：72(H-CDR3)。
  13. 如請求項1或2之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：包含SEQ ID NO：76、77、78、79、80、81、82或83中任一者之胺基酸序列之 輕鏈可變區；及包含SEQ ID NO：87、88、89、90、91、92、93、94或95中任一者之胺基酸序列之重鏈可變區。
  14. 如請求項13之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：77之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：87之重鏈可變區；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：77之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：88之重鏈可變區；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：77之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：89之重鏈可變區。
  15. 如請求項13之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：80之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：87之重鏈可變區；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：80之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：88之重鏈可變區；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：80之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：89之重鏈可變區。
  16. 如請求項1或2之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：27(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：36(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：45(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：107(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：63(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：73(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：27(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：36(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：45(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：107(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：64(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：73(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：27(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：36(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：45(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：54(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：63或64(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：73(H-CDR3)。
  17. 如請求項1或2之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：包含SEQ ID NO：84、85或86中任一者之胺基酸序列之輕鏈可變區；及包含SEQ ID NO：96、97、98、99、100或101中任一者之胺基酸序列之重鏈可變區。
  18. 如請求項17之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：包含該胺基酸序列SEQ ID NO：85之輕鏈可變區；及包含該胺基酸序列SEQ ID NO：100之重鏈可變區；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：85之輕鏈可變區；及包 含胺基酸序列SEQ ID NO：101之重鏈可變區。
  19. 如請求項17之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：86之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：100之重鏈可變區；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：86之輕鏈可變區；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：101之重鏈可變區。
  20. 如請求項1或2之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含SEQ ID NO：114、115、116、117、118、119、120或121中任一者之胺基酸序列之輕鏈；及包含SEQ ID NO：125、126、127、128、129、130、131、132或133中任一者之胺基酸序列之重鏈。
  21. 如請求項20之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：115之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：125之重鏈。
  22. 如請求項20之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：115之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：126之重鏈。
  23. 如請求項20之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：115之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：127之重鏈。
  24. 如請求項20之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：118之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：125之重鏈。
  25. 如請求項20之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：118之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：126之重鏈。
  26. 如請求項20之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：118之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：127之重鏈。
  27. 如請求項1或2之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含SEQ ID NO：122、123或124中任一者之胺基酸序列之輕鏈；及包含SEQ ID NO：134、135、136、137、138或139中任一者之胺基酸序列之重鏈。
  28. 如請求項27之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：123之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：138之重鏈。
  29. 如請求項27之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：123之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：139之重鏈。
  30. 如請求項27之抗IL-36R抗體，其中該抗體包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：124之輕鏈；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：138之重鏈。
  31. 如請求項1或2之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：103(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及 b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：72(H-CDR3)。
  32. 如請求項1或2之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：104(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：72(H-CDR3)。
  33. 如請求項1或2之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：27(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：36(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：45(L-CDR3)；及b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：107(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：63(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：73(H-CDR3)。
  34. 如請求項1或2之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：a)輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：27(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：36(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：45(L-CDR3)；及 b)重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：107(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：64(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：73(H-CDR3)。
  35. 如請求項1或2之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：21(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：30(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：39(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：48(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：57(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：67(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：22(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：31(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：40(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：49(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：58(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：68(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：23(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：32(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：41(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：50(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：59(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：69(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：24(L- CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：33(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：42(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：51(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：60(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：70(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：25(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：34(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：43(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：52(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：61(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：71(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：26(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：35(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：44(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：53(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：62(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：72(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：27(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：36(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：45(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：54(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：63(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：73(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：27(L- CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：36(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：45(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：54(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：64(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：73(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：28(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：37(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：46(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：55(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：65(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：74(H-CDR3)；或輕鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：29(L-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：38(L-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：47(L-CDR3)；及重鏈可變區，其包含胺基酸序列SEQ ID NO：56(H-CDR1)；胺基酸序列SEQ ID NO：66(H-CDR2)；胺基酸序列SEQ ID NO：75(H-CDR3)。
  36. 如請求項1或2之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段包含：包含胺基酸序列SEQ ID NO：1之輕鏈蛋白質；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：11之重鏈蛋白質；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：2之輕鏈蛋白質；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：12之重鏈蛋白質；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：3之輕鏈蛋白質；及包含胺 基酸序列SEQ ID NO：13之重鏈蛋白質；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：4之輕鏈蛋白質；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：14之重鏈蛋白質；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：5之輕鏈蛋白質；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：15之重鏈蛋白質；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：6之輕鏈蛋白質；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：16之重鏈蛋白質；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：7之輕鏈蛋白質；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：17之重鏈蛋白質；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：8之輕鏈蛋白質；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：18之重鏈蛋白質；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：9之輕鏈蛋白質；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：19之重鏈蛋白質；或包含胺基酸序列SEQ ID NO：10之輕鏈蛋白質；及包含胺基酸序列SEQ ID NO：20之重鏈蛋白質。
  37. 如請求項1或2之抗體或其抗原結合片段，其用於醫學中。
  38. 如請求項37之抗體或其抗原結合片段，其中該於醫學中之用途係在治療發炎疾病、自體免疫疾病、呼吸疾病、代謝病症、上皮介導之發炎病症、纖維變性或癌症之方法中之用途。
  39. 如請求項37或38之抗體或其抗原結合片段，其中該於醫學中之用途係在治療牛皮癬、發炎性腸疾病、牛皮癬性關節炎、多發性硬化症、類風濕性關節炎、COPD、慢 性氣喘或關節黏連性脊椎炎之方法中之用途。
  40. 如請求項37或38之抗體或其抗原結合片段，其中該於醫學中之用途係在治療發炎性腸疾病之方法中之用途。
  41. 如請求項37或38之抗體或其抗原結合片段，其中該於醫學中之用途係在治療克隆氏病(Crohn's disease)之方法中之用途。
  42. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至36中任一項之抗體或其抗原結合片段及醫藥上可接受之載劑。
  43. 如請求項42之醫藥組合物，其用於醫學中。
  44. 如請求項42或43之醫藥組合物，其中該於醫學中之用途係在治療發炎疾病、自體免疫疾病、呼吸疾病、代謝病症、上皮介導之發炎病症、纖維變性或癌症之方法中之用途。
  45. 如請求項42或43之醫藥組合物，其中該於醫學中之用途係在治療牛皮癬、發炎性腸疾病、牛皮癬性關節炎、多發性硬化症、類風濕性關節炎、COPD、慢性氣喘或關節黏連性脊椎炎之方法中之用途。
  46. 如請求項42或43之醫藥組合物，其中該於醫學中之用途係在治療發炎性腸疾病之方法中之用途。
  47. 如請求項42或43之醫藥組合物，其中該於醫學中之用途係在治療克隆氏病之方法中之用途。
  48. 一種如請求項1至36中任一項之抗體或其抗原結合片段或如請求項42之醫藥組合物之用途，其用於製造用以治療疾病之醫藥，其中該疾病係選自發炎疾病、自體免疫 疾病、呼吸疾病、代謝病症、上皮介導之發炎病症、纖維變性及癌症。
  49. 如請求項48之用途，其中該疾病係選自牛皮癬、發炎性腸疾病、牛皮癬性關節炎、多發性硬化症、類風濕性關節炎、COPD、慢性氣喘及關節黏連性脊椎炎。
  50. 如請求項48或49之用途，其中該疾病係克隆氏病。
  51. 一種分離之多核苷酸，其包含編碼如請求項1至36中任一項之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段之序列，較佳為DNA或RNA序列。
  52. 如請求項51之分離之多核苷酸，其編碼如SEQ ID NO.1至140中之一或多者所定義之序列。
  53. 一種載體，其包含如請求項51或52之多核苷酸，較佳為表現載體，更佳為包含本發明之多核苷酸與表現控制序列功能聯結之載體。
  54. 一種宿主細胞，其包含如請求項51或52之多核苷酸及/或如請求項53之載體。
  55. 一種製造如請求項1至36中任一項或多項之抗IL-36R抗體或其抗原結合片段之方法，較佳為重組製造方法，包含使用如請求項51或52之多核苷酸、及/或如請求項53之載體及/或如請求項54之宿主細胞。
  56. 如請求項55之方法，其包含以下步驟：(a)該宿主細胞在允許表現該抗IL-36R抗體或抗原結合片段之條件下培養，及(b)回收該抗IL-36R抗體或抗原結合片段。
  57. 一種診斷套組，其包含如請求項1至36中任一項之抗IL- 36R抗體或其抗原結合片段。
  58. 如請求項57之診斷套組，其用於診斷發炎疾病、自體免疫疾病、呼吸疾病、代謝病症、上皮介導之發炎病症、纖維變性、癌症、牛皮癬、發炎性腸疾病、牛皮癬性關節炎、多發性硬化症、類風濕性關節炎、COPD、慢性氣喘、關節黏連性脊椎炎或克隆氏病。
  59. 一種診斷方法，其包含使用如請求項1至36中任一項或多項之抗IL-36R抗體或抗原結合片段。
  60. 如請求項59之診斷方法，其用於診斷發炎疾病、自體免疫疾病、呼吸疾病、代謝病症、上皮介導之發炎病症、纖維變性、癌症、牛皮癬、發炎性腸疾病、牛皮癬性關節炎、多發性硬化症、類風濕性關節炎、COPD、慢性氣喘、關節黏連性脊椎炎或克隆氏病。
TW101142698A 2011-11-16 2012-11-15 抗ｉｌ－３６ｒ抗體 TWI573804B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161560554P 2011-11-16 2011-11-16
US201261644111P 2012-05-08 2012-05-08
US201261713713P 2012-10-15 2012-10-15

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW201333037A true TW201333037A (zh) 2013-08-16
TWI573804B TWI573804B (zh) 2017-03-11

Family

ID=47215803

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW101142698A TWI573804B (zh) 2011-11-16 2012-11-15 抗ｉｌ－３６ｒ抗體

Country Status (38)

Country Link
US (3) US9023995B2 (zh)
EP (2) EP3536710A1 (zh)
JP (3) JP6289375B2 (zh)
KR (3) KR102038310B1 (zh)
CN (3) CN104080808B (zh)
AP (1) AP2014007571A0 (zh)
AR (1) AR089178A1 (zh)
AU (1) AU2012339734B2 (zh)
BR (1) BR112014011594B1 (zh)
CA (1) CA2852994C (zh)
CL (1) CL2014001123A1 (zh)
CO (1) CO7020871A2 (zh)
CY (1) CY1122278T1 (zh)
DK (1) DK2780373T3 (zh)
EA (1) EA031948B1 (zh)
EC (1) ECSP14004976A (zh)
ES (1) ES2755732T3 (zh)
FI (1) FIC20230020I1 (zh)
FR (1) FR23C1023I2 (zh)
HR (1) HRP20191835T1 (zh)
HU (2) HUE047437T2 (zh)
IL (2) IL232100B (zh)
LT (2) LT2780373T (zh)
MX (1) MX347164B (zh)
MY (1) MY195289A (zh)
NL (1) NL301233I2 (zh)
PE (1) PE20142041A1 (zh)
PH (1) PH12014501108B1 (zh)
PL (1) PL2780373T3 (zh)
PT (1) PT2780373T (zh)
RS (1) RS59248B1 (zh)
SG (1) SG11201402283PA (zh)
SI (1) SI2780373T1 (zh)
TW (1) TWI573804B (zh)
UA (1) UA115540C2 (zh)
UY (1) UY34456A (zh)
WO (1) WO2013074569A1 (zh)
ZA (1) ZA201402491B (zh)

Families Citing this family (43)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HUE035281T2 (en) 2011-01-14 2018-05-02 Univ California Therapeutic antibodies to ROR-1 protein and methods of their use
EP3536710A1 (en) 2011-11-16 2019-09-11 Boehringer Ingelheim International GmbH Anti il-36r antibodies
BR112014020826A8 (pt) 2012-02-24 2017-09-19 Stem Centrx Inc Anticorpo que se liga especificamente a um epítopo, ácido nucleico, vetor ou célula hospedeira, conjugado de fármaco – anticorpo, composição farmacêutica compreendendo o referido anticorpo, uso do mesmo, kit e método de preparação do conjugado
KR102442436B1 (ko) * 2014-03-14 2022-09-15 노파르티스 아게 Lag-3에 대한 항체 분자 및 그의 용도
RU2582569C2 (ru) * 2014-07-24 2016-04-27 Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов" Федерального медико-биологического агентства Днк, кодирующая полноразмерный антагонист рецептора интерлейкина-36 человека, днк, кодирующая полноразмерный антагонист рецептора интерлейкина-36 человека с с-концевым полигистидиновым тагом, плазмидный экспрессионный вектор (варианты), штамм бактерий escherichia coli bl21 star[de3] (рет-il36raf), - продуцент полноразмерного рецепторного антагониста интерлейкина-36 и штамм бактерий escherichia coli bl21 star[de3] (pet-il36raf-his), - продуцент полноразмерного рецепторного антагониста интерлейкина-36 с с-концевым полигистидиновым тагом
MA41867A (fr) 2015-04-01 2018-02-06 Anaptysbio Inc Anticorps dirigés contre l'immunoglobuline de cellule t et protéine 3 de mucine (tim-3)
MX2017013080A (es) * 2015-04-15 2018-02-09 Anaptysbio Inc Anticuerpos dirigidos contra receptor de interleucina 36 (il-36r).
EP3307772B1 (en) * 2015-06-12 2020-09-09 Ludwig Institute For Cancer Research Limited Tgf-beta 3 specific antibodies and methods and uses thereof
JP6654773B2 (ja) * 2015-12-25 2020-02-26 国立大学法人名古屋大学 インターロイキン３６受容体アンタゴニスト欠損症の治療薬
MA46113A (fr) 2016-11-01 2019-07-10 Anaptysbio Inc Anticorps dirigés contre l'immunoglobuline de lymphocyte t et la protéine 3 de mucine (tim-3)
CN110382000A (zh) 2017-01-09 2019-10-25 泰萨罗公司 用抗tim-3抗体治疗癌症的方法
US20180273627A1 (en) * 2017-03-27 2018-09-27 Boehringer Ingelheim International Gmbh Anti il-36r antibodies combination therapy
CN111867579B (zh) * 2018-01-08 2023-11-24 凯莫森特里克斯股份有限公司 Ccr6或cxcr2拮抗剂治疗泛发性脓疱型银屑病的方法
JP2021517577A (ja) 2018-03-14 2021-07-26 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 炎症性腸疾患の処置のための抗ｉｌ−３６ｒ抗体の使用
MX2020009544A (es) * 2018-03-14 2020-10-05 Boehringer Ingelheim Int Uso de anticuerpos anti-il-36r para el tratamiento de la psoriasis pustulosa generalizada.
EP3823989A2 (en) 2018-07-16 2021-05-26 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-il36r antibodies
WO2020018511A1 (en) * 2018-07-16 2020-01-23 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animal models of ditra disease and uses thereof
JP2022532812A (ja) 2018-08-16 2022-07-20 カンタージア アクチエボラーグ 抗ｉｌ１ｒａｐ抗体組成物
WO2020065594A1 (en) * 2018-09-28 2020-04-02 Kyowa Kirin Co., Ltd. Il-36 antibodies and uses thereof
AU2019405782A1 (en) 2018-12-21 2021-06-17 23Andme, Inc. Anti-IL-36 antibodies and methods of use thereof
CA3124996A1 (en) 2018-12-27 2020-07-02 Boehringer Ingelheim International Gmbh Il-36r antibodies for treatment of palmoplantar pustulosis
WO2020185479A1 (en) * 2019-03-08 2020-09-17 Boehringer Ingelheim International Gmbh Anti-il-36r antibody formulations
US20220162326A1 (en) * 2019-05-13 2022-05-26 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-il36r antibodies
WO2021112196A1 (ja) * 2019-12-05 2021-06-10 学校法人東京薬科大学 筋組織の減少を抑制するための組成物
AR120913A1 (es) * 2019-12-27 2022-03-30 Teijin Pharma Ltd Anticuerpo que inhibe específicamente la señalización de il-36r
CN115666643A (zh) 2020-05-19 2023-01-31 勃林格殷格翰国际有限公司 用于治疗异位性皮肤炎的抗il-36r抗体
CN116745315A (zh) 2020-07-17 2023-09-12 勃林格殷格翰国际有限公司 用于治疗嗜中性皮肤病的抗il-36r抗体
WO2022026829A1 (en) 2020-07-30 2022-02-03 Anaptysbio, Inc. Anti-interleukin 36 receptor (il-36r) therapy for skin toxicity
CN116406295A (zh) 2020-07-30 2023-07-07 安奈普泰斯生物有限公司 针对鱼鳞病的抗白介素36受体（il-36r）疗法
CA3192882A1 (en) 2020-09-30 2022-04-07 Boehringer Ingelheim International Gmbh Anti-il-36r antibodies for treatment of chronic inflammatory pain
CN112094349B (zh) * 2020-11-04 2021-02-09 上海华奥泰生物药业股份有限公司 靶向于白介素36r的抗体及其制备方法和应用
CN116685605A (zh) 2020-12-17 2023-09-01 上海华奥泰生物药业股份有限公司 靶向il-17a和il-36r的双特异性抗体及其应用
WO2022150642A1 (en) 2021-01-08 2022-07-14 Anaptysbio, Inc. Anti-interleukin 36 receptor (il-36r) therapy for hidradenitis suppurativa
WO2022150644A1 (en) 2021-01-08 2022-07-14 Anaptysbio, Inc. Anti-interleukin 36 receptor (il-36r) therapy for acne
CN114907477A (zh) * 2021-02-08 2022-08-16 上海普铭生物科技有限公司 抗人il-36r抗体及其应用
AU2022231135A1 (en) 2021-03-04 2023-07-27 Boehringer Ingelheim International Gmbh Methods for the treatment of gpp
EP4305207A2 (en) 2021-03-12 2024-01-17 Boehringer Ingelheim International GmbH Biomarkers associated with anti-il-36r antibody treatment in generalized pustular psoriasis
BR112023017717A2 (pt) * 2021-05-03 2024-01-09 Boehringer Ingelheim Int Método para produção de espesolimabe
AU2022291974A1 (en) * 2021-06-18 2024-01-25 Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co., Ltd. Anti-il-36r antibody and use thereof
WO2023285362A1 (en) 2021-07-12 2023-01-19 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of il-36 inhibitors for the treatment of netherton syndrome
US20230049147A1 (en) 2021-08-13 2023-02-16 Boehringer Ingelheim International Gmbh Anti-il-36r antibodies for the treatment of a fibrotic condition
WO2023052222A2 (en) 2021-09-28 2023-04-06 Boehringer Ingelheim International Gmbh System and method for assessing severity of neutrophilic dermatoses with visible skin manifestation
US11802149B2 (en) 2021-10-28 2023-10-31 Abbvie Inc. Anti-amyloid beta antibodies and methods of using the same

Family Cites Families (52)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4179337A (en) 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
US4275149A (en) 1978-11-24 1981-06-23 Syva Company Macromolecular environment control in specific receptor assays
US4318980A (en) 1978-04-10 1982-03-09 Miles Laboratories, Inc. Heterogenous specific binding assay employing a cycling reactant as label
JPS6023084B2 (ja) 1979-07-11 1985-06-05 味の素株式会社 代用血液
WO1981001145A1 (en) 1979-10-18 1981-04-30 Univ Illinois Hydrolytic enzyme-activatible pro-drugs
US4419446A (en) 1980-12-31 1983-12-06 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Recombinant DNA process utilizing a papilloma virus DNA as a vector
US4485045A (en) 1981-07-06 1984-11-27 Research Corporation Synthetic phosphatidyl cholines useful in forming liposomes
NZ201705A (en) 1981-08-31 1986-03-14 Genentech Inc Recombinant dna method for production of hepatitis b surface antigen in yeast
US4640835A (en) 1981-10-30 1987-02-03 Nippon Chemiphar Company, Ltd. Plasminogen activator derivatives
US4741900A (en) 1982-11-16 1988-05-03 Cytogen Corporation Antibody-metal ion complexes
US4601978A (en) 1982-11-24 1986-07-22 The Regents Of The University Of California Mammalian metallothionein promoter system
US4560655A (en) 1982-12-16 1985-12-24 Immunex Corporation Serum-free cell culture medium and process for making same
US4657866A (en) 1982-12-21 1987-04-14 Sudhir Kumar Serum-free, synthetic, completely chemically defined tissue culture media
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
DD266710A3 (de) 1983-06-06 1989-04-12 Ve Forschungszentrum Biotechnologie Verfahren zur biotechnischen Herstellung van alkalischer Phosphatase
US4544545A (en) 1983-06-20 1985-10-01 Trustees University Of Massachusetts Liposomes containing modified cholesterol for organ targeting
US4767704A (en) 1983-10-07 1988-08-30 Columbia University In The City Of New York Protein-free culture medium
US4496689A (en) 1983-12-27 1985-01-29 Miles Laboratories, Inc. Covalently attached complex of alpha-1-proteinase inhibitor with a water soluble polymer
US4965199A (en) 1984-04-20 1990-10-23 Genentech, Inc. Preparation of functional human factor VIII in mammalian cells using methotrexate based selection
US4879231A (en) 1984-10-30 1989-11-07 Phillips Petroleum Company Transformation of yeasts of the genus pichia
US4737456A (en) 1985-05-09 1988-04-12 Syntex (U.S.A.) Inc. Reducing interference in ligand-receptor binding assays
DE3675588D1 (de) 1985-06-19 1990-12-20 Ajinomoto Kk Haemoglobin, das an ein poly(alkenylenoxid) gebunden ist.
GB8516415D0 (en) 1985-06-28 1985-07-31 Celltech Ltd Culture of animal cells
US4927762A (en) 1986-04-01 1990-05-22 Cell Enterprises, Inc. Cell culture medium with antioxidant
GB8610600D0 (en) 1986-04-30 1986-06-04 Novo Industri As Transformation of trichoderma
US4791192A (en) 1986-06-26 1988-12-13 Takeda Chemical Industries, Ltd. Chemically modified protein with polyethyleneglycol
GB8705477D0 (en) 1987-03-09 1987-04-15 Carlton Med Prod Drug delivery systems
US4975278A (en) 1988-02-26 1990-12-04 Bristol-Myers Company Antibody-enzyme conjugates in combination with prodrugs for the delivery of cytotoxic agents to tumor cells
EP0435911B1 (en) 1988-09-23 1996-03-13 Cetus Oncology Corporation Cell culture medium for enhanced cell growth, culture longevity and product expression
FR2646437B1 (fr) 1989-04-28 1991-08-30 Transgene Sa Nouvelles sequences d'adn, leur application en tant que sequence codant pour un peptide signal pour la secretion de proteines matures par des levures recombinantes, cassettes d'expression, levures transformees et procede de preparation de proteines correspondant
EP0402226A1 (en) 1989-06-06 1990-12-12 Institut National De La Recherche Agronomique Transformation vectors for yeast yarrowia
US5013556A (en) 1989-10-20 1991-05-07 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
US5122469A (en) 1990-10-03 1992-06-16 Genentech, Inc. Method for culturing Chinese hamster ovary cells to improve production of recombinant proteins
DE122004000008I1 (de) 1991-06-14 2005-06-09 Genentech Inc Humanisierter Heregulin Antikörper.
ATE161192T1 (de) 1992-08-21 1998-01-15 Genentech Inc Verfahren zur behandlung einer durch lfa-1 vermittelten störung
PT752248E (pt) 1992-11-13 2001-01-31 Idec Pharma Corp Aplicacao terapeutica de anticorpos quimericos e marcados radioactivamente contra antigenios de diferenciacao restrita de linfocitos b humanos para o tratamento do linfoma de celulas b
US6096871A (en) 1995-04-14 2000-08-01 Genentech, Inc. Polypeptides altered to contain an epitope from the Fc region of an IgG molecule for increased half-life
US5888809A (en) 1997-05-01 1999-03-30 Icos Corporation Hamster EF-1α transcriptional regulatory DNA
EP1798287A3 (en) 1997-08-01 2007-11-14 Schering Corporation Mammalian cell membrane proteins and related reagents
US6416973B1 (en) 1997-08-01 2002-07-09 Schering Corporation Nucleic acids encoding mammalian cell membrane protein MDL-1
ES2637801T3 (es) * 2000-04-11 2017-10-17 Genentech, Inc. Anticuerpos multivalentes y usos de los mismos
EP1627927A3 (en) * 2001-03-01 2006-06-07 Epigenomics AG Methods, systems and computer program products for determining the biological effect and/or activity of drugs, chemical substances and/or pharmaceutical compositions based on their effect on the methylation status of the DNA
WO2004031362A2 (en) * 2002-10-03 2004-04-15 Large Scale Biology Corporation Multimeric protein engineering
WO2007024715A2 (en) * 2005-08-19 2007-03-01 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobin and uses thereof
US20070041905A1 (en) 2005-08-19 2007-02-22 Hoffman Rebecca S Method of treating depression using a TNF-alpha antibody
US7612181B2 (en) * 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
JP5577543B2 (ja) 2006-09-08 2014-08-27 アムジエン・インコーポレーテツド Ｉｌ−１ファミリーバリアント
MX2009011500A (es) 2007-04-23 2010-01-29 Schering Corp Anticuerpos anti-mdl-1.
JP5171948B2 (ja) 2007-06-29 2013-03-27 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション Ｍｄｌ−１の使用
US20110159011A1 (en) 2008-08-28 2011-06-30 Wyeth Llc Uses of il-22, il-17, and il-1 family cytokines in autoimmune diseases
EP3536710A1 (en) 2011-11-16 2019-09-11 Boehringer Ingelheim International GmbH Anti il-36r antibodies
MX2017013080A (es) 2015-04-15 2018-02-09 Anaptysbio Inc Anticuerpos dirigidos contra receptor de interleucina 36 (il-36r).

Also Published As

Publication number Publication date
KR102038310B1 (ko) 2019-11-01
CN104080808A (zh) 2014-10-01
DK2780373T3 (da) 2019-11-04
FR23C1023I2 (fr) 2024-03-29
PL2780373T3 (pl) 2020-03-31
EP2780373B1 (en) 2019-08-21
ES2755732T3 (es) 2020-04-23
CA2852994C (en) 2023-02-14
CA2852994A1 (en) 2013-05-23
CY1122278T1 (el) 2020-11-25
MX347164B (es) 2017-04-18
CL2014001123A1 (es) 2015-01-23
MX2014005759A (es) 2014-09-08
IL272035A (en) 2020-02-27
UA115540C2 (uk) 2017-11-27
HUS2300021I1 (hu) 2023-07-28
JP6289375B2 (ja) 2018-03-07
HUE047437T2 (hu) 2020-04-28
WO2013074569A1 (en) 2013-05-23
SG11201402283PA (en) 2014-06-27
KR102159109B1 (ko) 2020-09-23
NL301233I1 (zh) 2023-06-07
FIC20230020I1 (fi) 2023-06-01
CN107007833A (zh) 2017-08-04
BR112014011594B1 (pt) 2021-11-09
ZA201402491B (en) 2021-09-29
HRP20191835T1 (hr) 2019-12-27
US20150203584A1 (en) 2015-07-23
PH12014501108A1 (en) 2014-08-04
CN107007833B (zh) 2020-12-11
KR20140101738A (ko) 2014-08-20
PE20142041A1 (es) 2014-12-18
EA031948B1 (ru) 2019-03-29
US9023995B2 (en) 2015-05-05
RS59248B1 (sr) 2019-10-31
ECSP14004976A (es) 2015-11-30
TWI573804B (zh) 2017-03-11
NL301233I2 (nl) 2023-09-13
IL232100A0 (en) 2014-05-28
US20130236471A1 (en) 2013-09-12
CN104080808B (zh) 2016-11-16
NZ623425A (en) 2015-12-24
JP6719490B2 (ja) 2020-07-08
CO7020871A2 (es) 2014-08-11
AP2014007571A0 (en) 2014-04-30
EP2780373A1 (en) 2014-09-24
US10550189B2 (en) 2020-02-04
AU2012339734B2 (en) 2017-02-16
AR089178A1 (es) 2014-08-06
US20200231684A1 (en) 2020-07-23
JP2020156506A (ja) 2020-10-01
KR20200110476A (ko) 2020-09-23
PT2780373T (pt) 2019-11-27
UY34456A (es) 2013-05-31
EP3536710A1 (en) 2019-09-11
MY195289A (en) 2023-01-12
SI2780373T1 (sl) 2019-12-31
BR112014011594A2 (pt) 2017-07-04
JP2018093885A (ja) 2018-06-21
AU2012339734A1 (en) 2014-04-24
EA201400579A1 (ru) 2014-10-30
FR23C1023I1 (fr) 2023-07-21
JP2015500633A (ja) 2015-01-08
LT2780373T (lt) 2019-09-25
IL232100B (en) 2020-04-30
CN112812183A (zh) 2021-05-18
LTPA2023518I1 (zh) 2023-06-12
PH12014501108B1 (en) 2014-08-04
KR20190122877A (ko) 2019-10-30
US20170298135A9 (en) 2017-10-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI573804B (zh) 抗ｉｌ－３６ｒ抗體
US20230044739A1 (en) Anti il-36r antibodies combination therapy
TWI653242B (zh) 抗-ｉｌ-２３抗體
TWI631957B (zh) 抗－ｉｌ－２３抗體
EP3099715B1 (en) Novel anti-baff antibodies
NZ623425B2 (en) Anti il-36r antibodies
EA040834B1 (ru) ГУМАНИЗИРОВАННОЕ АНТИТЕЛО К IL-23p19 ИЛИ ЕГО АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЙ ФРАГМЕНТ, ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ УКАЗАННОЕ АНТИТЕЛО