TW201206429A - Substituted oxadiazole derivatives - Google Patents

Description

201206429 R表^~鹵素或具有i i 3個碳原子之直鍵或分支鍵烧‘ 基，其中1至3個η原子可經鹵素置換； R表不ii素、具有1JL 3個碳原子之直鍵或分支鍵烷 基’其中1至3個η原子可經幽素、〇CH3、He%置 換； G1、G2彼此獨立地表示H、齒素、A ; A表不具有1至6個碳原子、較佳i至3個碳原子之直 鏈或分支鏈烷基，其中i至3個H原子可經㈣、〇ch” OH置換； C 1、C 2為碳原子； 丫1 丫1 〇- 及其基團人經氧化成人/之氧化形式、醫藥學上 可接受之衍生物、溶劑合物、互變異構體、鹽、對映異構 體、非對映異構體，包括其所有比率之混合物。 在另-具體實例中’ Cl< C2均不為手性。換言之，χΐ 與X2相同且Ζ1與ζ2相同。 在另-具體實例中，Cl A C2中之至少一者為手性中 心。X1與X2及/或Z1與Z2不相同。 在-特定具體實例中，本發明提供呈一種非對映異構 體形式之式U)化合物，其中^為^^且。為（R)，或其中 C】為0)且C2為（S)，或其所有比率之混合物。 在另一特定具體實例中’本發明提供呈一種非對映異 構體形式之式（I)化合物，其中6為（3)且C2為（R)，或其 中C丨為（R)且C2為（S) ’或其所有比率之混合物。 八 〇 201206429 在另一特定具體實例中，本發明提供呈對映異構體IA 形式之式（I)化合物，其中（:丨為⑻且匕為⑺）。 在另—特定具體實例中，本發明提供呈對映異構體IB 形式之式（I)化合物，其中（^為（11)且c2為（s)。 在另—特定具體實例中，本發明提供呈對映異構體Ic 形式之式（Ϊ)化合物，其中Cl為（3)且為。 在另—特定具體實例中，本發明提供呈對映異構體ID 形式之式（I)化合物，其中（^為（尺）且c2為（R)。 在及C：2中僅一者為手性中心的情況下，本發明可提 供呈一種對映異構體形式之式（1)化合物，其中在Cl或 C2處之手性中心為（S)。 或者，本發明可提供呈—種對映異構體形式之式（1) 化D物，其中在Cl或C2處之手性中心為（R)。C!及c2中一 者為手性的式（1)化合物亦可以所有比率之對映異構體混 口物的形式獲得’包括比率為50/50之外消旋混合物。當式 (I )化α物係以光學活性化合物之形式獲得時，一種對映異 構體與另一對映異構體之比率高於約，較佳高於約 80/20 ’更佳尚於約90/10，更佳高於約95/5，甚至 98/2。 中Cl為（S)且c2為 映異構體IB (其中 在另—具體實例中，式（！）化合物之對映異構體认（其 C2為（R))可以任何比率與式（丨）化合物

係以等量混合。當式（I)化 且c2為（s))混合。當式（工） I得時’兩種對映異構體IA及IB 化合物係以光學活性化合物之形 201206429 式獲得時’對映異構體IA與對映異構體IB之比率高於約 60/40 ’較佳高於約8〇/2〇 ’更佳高於約9〇/1〇，更佳高於約 95/5，甚至更佳高於98/2。 在另—具體實例中，式（I)化合物之對映異構體Ic(其 中為〇且a為（S))可以任何比率與式（1)化合物之對 映異構體ID (其中C丨為⑻且。為⑻）混合。當式⑴ 化合物係以光學活性化合物之形式獲得時，對映異構體K 與對映異構體m之比率高於約6〇/4〇,較佳高於約8〇/2〇, 更佳高㈣9G/1G’ t佳高於約95/5，甚至更佳高於助。 在-較佳具體實例中，一種對映異構體與另一對映異 構體之比率高於98/2 ^在—特定、 特疋具體貫例中，式（I)化合 物為一種對映異構體，其中： b) χΐ、X2 及 Z2 為 η c) Ζ1、Ζ2 及 X2 為 Η d) Ζΐ、Ζ2 及 χΐ 為 Η 單獨或以所有比率與 a) X1、X2 及 Ζι 為 H，且"為 a; 且Zi為A ; 且X1為A ;或 且X2為A， 或多種其他對映異構體組合。 在另一特定具體實例中，式Γ n几人此 » +Jt 式（1)化合物為一種非對眛 異構體，其中： T映 a) X1及Ζ1為Η，X2及Ζ2兔 χ1 κ 1 夂Ζ為Α及/或X2及乙2為Η， Χ及Ζ1為A ;或 b) X1 及 Z2 為 Η，X2 及 7丨 & Δ n /二， κ 2 及Ζ為Α及/或X2及以為Η， Χ及Ζ2為A， n 單獨或以所有比率組合。 201206429 丄對映異構增濃之混合物表示如由熟習此項技術者熟 斤量測，具有10%或1〇〇/。以上、較佳5〇%或5〇% :上2佳超過95%之對映異構過量的具有式⑴或相關 9二：。經對映異構增濃之混合物最佳表示具有超過 98/°之對映異構過量的具有式⑴或相關式之化合物。 在另一具體實例中’本發明提供式 W、W、_及妒中之至少-或二者為單鍵。 在另-具體實例中，^、…^及⑺均表示單鍵。 在另—具體實例中，本發明提供式⑴化合物， Z及Z可與c2__起形成3至8員環。 在另一具體實例中，本發明提供具有式（Ia)之化合物：

(la) 其中 G1、G2、V、Rb、Rl、χ1、χ2、zl、z2 及 γ1 如上 文所定義。 在另一具體實例中’本發明提供具有式（Ib )之化合物：

201206429 其中 Gi、Ra ' Rb、R1、χ 、Xz、z1 ' z2及Y1如上文所 定義。 在一特定具體實例中’本發明提供具有式（〗）、式（Ia) 或式（lb )之化合物，其中Rb為CF3或ch2OCH3且Ra為 CF3或CH3 ’較佳地，Rb為CF3且Ra為CH3。 在另一特定具體實例中，本發明提供具有式（1)、式（Ia) 或式（ib)之化合物，其中r^_CF3或_CH2〇CH^尺3為 -CF3 或-CH3，較佳地，Rb 為-CF3 且 Ra 為 _ch3。 在另一特定具體實例中，本發明提供具有式（j)、式（Ia) 或式（lb)之化合物’其中Rb為_cf3或-CH2OCH3且113為 -CF3 或 _CH3，較佳地，Rb 為-CF3 且 Ra 為 _Ch3。 在另一特定具體實例中，本發明提供具有式（〗）或式 (la)之化合物’其中R為-CF3或-CH2〇CH3且Ra為-CF3 或-CH3，較佳地，Rb為-CF3且Ra為-Cjj3，且γ2為η。 在另一特定具體實例中，本發明提供具有式（1)、式（Ia) 或式（lb )之化合物，其中Ra及Rb之一為_cf 在另一具體實例中， 本發明&供具有式（ic)之化合物：

CR (lc) 8 0 201206429 G1、G: z1

W W2、W3、W4、χΐ、X2、 z 、Y及γ2如上文所定義 及其醫藥學上可接受之衍生物、溶劑合物、互變異構 鹽及立體異構體’包括其所有比率之混合物。 在另一較佳具體實例中，本發明提供具有式（Id)之化 合物： 體

在另一特定具體實例中，本發明提供具有式（I )、式 〔Ia)、式（Ib)、式（Ic)或式（Id)之化合物，其中Rb為 _CH3、·〇Η2〇ϋ3、F、Br、C1 或 _CF3，較佳為 F、-CH3 或-CF3， G〗、〇2彼此獨立地表示Η、i素或-CH3，較佳為Η。且其 中 Rb、w、Rl、w1、w2、w3、w4、χ1、χ2、ζ丨、ζ2、γ1 及Υ2如上文所定義。 在一更佳具體實例中，本發明提供具有式（Ie )之化合 物： S:: 9 201206429 ‘Η

其中Ra、G1、G2 ' X1 ' χ2、ζι、Ζ2、γι如上文所定義β 在一更佳具體實例中’本發明提供具有式（lf)之化合 物：

其中Ra、G1、G2、X〗、X2、zi、z2、γ1如上文所定義。 在另一較佳具體實例中，本發明提供具有式（Ig)之化 合物：

其中 R1、. 。 、G、G、X1、X2、z1、Z2、Y1 如上文所 鮫佳具體實例中，本發明提供具有式（Ih)之化

10 201206429 合物：

中 式 在另一特定具體實例 :Ia)、式（ib)、式（Id)、 其中 Rb 為-ch2〇ch3。 本發明提供具有式（丨）、式 (Ig )或式（Ih)之化合物， 式（I)化合物（其中 , 為例如故γ T1、 及/或γ為葡萄糖醒·酸苷）可 巧（Ik)之化合物：

11 £ 201206429

其中 、G2、R_a、Rb、Rl、、w2、W3、W4、X1、 x2、γ1、Y2、Z1及Z2如上文所定義。 具有式（I )及相關式之化合物較佳結合於神經朝胺醇 1-磷酸酯（S1P)受體上。S1P為由造血細胞分泌且由活化 企小板儲存及釋放的生物活性鞘脂代謝物。其充當G蛋白 偶合受體（GPCR )家族之促效劑。已鑑別5種神經鞘胺醇 1-破酸醋受體（S1P,、S1P2、S1P3、S1P4及S1P5，亦稱為 内皮分化基因，分別為Edg卜Edg5、Edg3、Edg6及Edg8 )， 其在人類及齧齒動物物種中具有廣泛細胞及組織分佈並且 完整保存。 S 1 P涉及許多細胞功能，諸如存活、增殖及免疫反應。 本發明化合物較佳充當s 1 Pi/Edg 1受體促效劑，且因而藉由 調節白血球運輸（trafficking )、螯合二級淋巴組織中之淋 巴球及干擾有效免疫反應所需之細胞_細胞相互作用而具有 免疫抑制活性《本發明亦針對含有該等化合物之醫藥組成 物及治療或預防方法。 FTY720或芬戈莫德（flng〇Hm〇d )為非選擇性up〗促 效劑，其在治療復發-緩解型多發性硬化症時發揮免疫抑制 )·生且顯示/α療效應。許多出版物已公開使用此化合物： Cyster JG Annu Rev Immunol 23:127-59, 2005 ； R〇Sen H Nat s 12 201206429

Rev Immunol 5:560-570, 2005 ； Rosen H Trends Immunol 28:102-107, 2007 ; Y〇pp AC Clin Transplant 20:788-795, 2006; Kappos L N Engl J Med 355:1124-1140, 2006; Massberg S N Engl J Med 355:1088-1089, 2006。 此外，免疫抑制劑可用於多種自體免疫疾病及慢性發 炎性疾病’包括多發性硬化症、全身性紅斑狼瘡、慢性類 風濕性關節炎、第I型糖尿病、發炎性腸病、膽汁性肝硬化 症、葡萄膜炎及其他病症，諸如克羅恩氏病（Cr〇hn,s diseases )、潰瘍性結腸炎、大水疱性天孢瘡樣病、類肉瘤病、 牛皮癖、自體免疫肌炎、韋格納氏肉芽腫病（Wegener,s granul〇matosis )、魚鱗癬、葛瑞夫兹氏眼病變（Graves· ophthalmopathy)、異位性皮膚炎及哮喘。其亦可用作治療 癌症、淋巴瘤及白血病之化學治療方案的一部分。 專利申請案WO2006/131336描述含有聯苯環之吟二唑 行生物自 Bl00rg Med· Chem. Lett. 16 (2006) 3679-3683 中可獲知含有經環烷基取代之苯基的其他垮二唑衍生物。 其他吟一唑衍生物描述於專利申請案 中0 已發現本發明化合物為具有改良之類藥性質及/或其伯 性質的選擇性S1P,促效劑。 本發明使用式⑴化合物及其醫藥學上可用之衍生物 Μ異構體'溶劑合物及立體異構體，包括其所有吐 ==物:來製備用於治療及/或預防對叫受體信號朝 Ρ、活化、調控及/或調節發揮作用之疾病的藥物。 13 201206429 因而，本發明較佳包含作為SlPi/Edgl受體之促效劑、 尤其具有超過S nvEdg3受體之選擇性的化合物。s iPi/Edgi 受體選擇性促效劑與現行療法相比具有優勢’且擴展淋巴 球螯合劑之治療窗口，從而對較高劑量給藥具有較佳耐受 性且因而改良功效。 此外，本發明係關於製造單獨或與其他活性化合物或 療法組合用於改良血管功能的藥物。 此外，本發明係關於由具有以下各物之獨立包裝組成 之集合（set)或套組（kit): (a)有效量之具有式（〗）或相關式之化合物及/或其醫 藥學上可用之衍生物 '互變異構體、鹽、溶劑合物及立體 異構體’包括其所有比率之混合物；及 .... (b )有效量之另一藥物活性成分。 以下縮寫分別係指以下定義： aq (水溶液）、h (小時）、g (公克）、l (公升）、mg (毫克）、MHz (兆赫茲）、μΜ (微莫耳濃度）、min (分鐘）、 mm (毫米）、mmol (毫莫耳）、mM (毫莫耳濃度）、m p (熔 點）、eq (當量）、mL (毫升）、(微升）、ACN (乙腈）、 BINAP ( 2,2'-雙（二苯基膦基）-1，1·-聯萘）、BOC (第三丁氧 基-幾基）、CBZ(苄氧羰基）、CDCl3(氘化三氣曱烷）、cd3〇D (氘化甲醇）、CH3CN (乙腈）、c_hex (環己烷）、DCC (二 環己基碳化二亞胺）、DCM (.二氯甲烷）、dppf ( 1}1，雙（二 苯基膦基）二茂鐵）、DIC (二異丙基碳化二亞胺）、DIEA (二 異丙基乙胺）、DMF (二甲基甲醯胺）、DMSO (二甲亞砜）、 201206429 DMSO-d6(氣化二曱亞砜>EDC( 1-(3-二曱基-胺基·丙基）-3- 乙基奴化一亞胺）、ESI (電噴霧電離）、EtO Ac (乙酸乙g旨）、

Et20 (乙趟）、EtOH (乙醇）、FM0C (苐基曱氧基羰基）、 HATU (六氟磷酸二曱胺基-([H3]三唑并[4,5-b]吼啶-3·基 氧基）-亞甲基]-二甲基-銨）、HPLC (高效液相層析法）、 i-PrOH ( 2-丙醇）、K2C〇3 (碳酸鉀）、LC (液相層析法）、 MD Autoprep (質量導向型自動分取儀（Mass directed Autoprep ) )、MeOH (曱醇）、MgS04 (硫酸鎂）、MS (質譜）、 MTBE (甲基第二丁基鱗）、Mtr. (4 -曱氧基- 2,3,6-三曱基苯 石黃醯基）、MW(微波）、NBS ( N-溴代丁二醯亞胺）、NaHC〇3 (碳酸氫鈉）、NaBH4 (硼氫化鈉）、NMM ( N_曱基嗎啉）、 NMR(核磁共振）、P〇A(苯氧基乙酸酯）、py(吡啶）、pyB〇p⑧ (六氟磷酸苯并三唑_1_基-氧基_三_吡咯啶基_鱗）、RT (室 溫）、Rt (滯留時間）、SFC (超臨界流體層析法）、spE (固 相萃取）、Tj (丙基膦酸酐）、TBAF (氟化四正丁基銨）、

(薄層層析法）、UV (紫外線）。 一般而言，可 言，可由容易購得之起始物質製備本發明之式

取代基而定，該等因素為一 。可採用下文 於實施例令所述之以下一般方 之合成路徑將視各分子之特定 叙技術者所瞭解。可採用下文 去及程序來製備具有式（I) 15 201206429 及相關式之化合物。以下流程中所述之反應條件，諸如溫 度、溶劑或輔助試劑，僅以實例形式提供，且不具限制性。 應瞭解，雖然提供典型或較佳實驗條件（亦即反應溫度、 時間、試劑莫耳數、溶劑等），但除非另外說明，否則亦可 使用其他實驗條件。最佳反應條件可隨所使用之特定反應 物或溶劑而變化’但該等條件可由熟習此項技術者使用常 規最佳化程序確定。關於所有保護及脫除保護基方法，參 見 Philip J. Kocienski，「Protecting Groups」，Georg Thieme Verlag Stuttgart，New York，1994 ;及 Theodora W. Greene 及 Peter G. M. Wuts，

Protective Groups in Organic

Synthesis」，Wiley Interscience，第 3 版，1999。 視 R1 ' Ra、Rb、G1、G2、W1 至 W4、χ1、Χ2、γι、γ2、 zi及z2之性質而定，可選擇不同合成策略來合成式（1)化 除非另作說明，否 、γΐ、γ2、ζι 及 Z2 合物。在以下流程中所說明之方法中， 則 Ra、Rb、、G2、W1 至 W4、X1、X2 如說明書之上文所定義。 -般而言，可藉由在約20。。至約50。。之溫度下，較佳 在室溫下’使用熟習此項技術者所熟知之條件，諸如金屬 氫氧化物，例如氫氧化鋰、氫氧化鈉或氫氧化鉀，在諸如 而、甲醇、乙醇或水或其混合物之適合溶劑中，或使用酸， 例如㈣或TFA，在諸如二㈣、DCM之適合溶劑中，使 式（I)之酯衍生物（其中Y2如上文所定義，且γ2更佳為 甲基或第三丁基）水解數小日夺（例如i小時至Μ小時）來 製備式（I·)化合物，其中Rl、R、Rb、〇1、妒至w4、 16 201206429 x χ2、Υι、Ζι及z2如上文所定義且γ: 為Η (流程

當獲得呈對映異構體混合物形式之式（〗）之酯衍生物 時，其可藉由手性HPLC管柱加以分離，諸如（但不限於） 以下實施例中所述之方法。 用於製備選自以下之式（丨）酯衍生物的方法： 2-[(2-氟-4-{5-[2，-甲基_2-(三氟曱基）聯苯-4-基]-l，2,4- 口可—唆_3-基}苯甲基）（曱基）胺基]丁酸第三丁酯； N-[(lR)-l_(4-{5-[2，-(二氟甲基）-2_ 曱基聯苯-4- 基]-1，2,4-〇号二唑_3_基}苯基）乙基]_D_丙胺酸曱酯； N-[(lS)-l_(4-{5_[2_(甲氧基曱基）_2·_ 曱基聯苯 _4_ 基]-1，2,4-口号二唑·3_基}苯基）乙基]_D_丙胺酸曱酯； N-[(lR)-l-(4-{5-[2-(曱氧基曱基）·2，_ 曱基聯苯·4-基]-1，2,4-〇号二唑_3_基}笨基）乙基]_D·丙胺酸曱酯； 17 201206429 N-[(lS)-l-(4-{5-[2-(曱氧基曱基）-2，-甲基聯苯 基]-1，2,4-α等二唑_3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯， N-[(lR)-l-(4-{5-[2-甲基-2，-(三氟甲基）聯苯 /4 基]-1，2,4-口咢二唑_3-基}苯基）乙基]_D-丙胺酸甲酯； N-[(lR)-l-(4-{5-[2'-(二氟甲基）-2-甲基聯苯 _4_ 基]-1，2,4-d号二唑_3_基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； N-[(lR)-l-(4-{5-[2-曱基-2，-(三氟曱基）聯苯-4-基]-1，2,4-d等二唑_3_基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； N-[(lR)-l-(4-{5-[2-(曱氧基曱基）·2，_ 甲基聯苯-4-基]-1，2,4-卩等二唑_3_基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； (2S)-2-{[(lR)-i_(4_{5_[2，_ 曱基 _2_(三氟甲基）聯笨-4_ 基]-1，2,4-口咢二嗤_3_基}苯基）乙基]胺基丨丁酸乙酯； 甲基 _2(三氟甲基）聯笨-4_ 基]-1，2,4-口号二唑_3_基}苯基）乙基]胺基丨丁酸乙酯； >^-(3-氟-5-{5-[2’-曱基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基]-1，2,4_ 口等一0坐-3-基}苯甲基）白胺酸第三丁酯； N-(2-氟-4-{5-[2’-甲基-2·(三氟甲基）聯苯_4_基 口等一嗤-3-基}苯曱基）·Ν_甲基纈胺酸第三丁酯； Ν-甲基-N-[l-(4-{5-[2-曱基-2'-(三氟曱基）聯苯_4_ 基]-1，2,4-卩亏二唑_3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； Ν-[1-(4·{5-[2-(甲氧基甲基）_2ι_曱基聯苯·心基卜^心 〇夸二唑-3-基}苯基）乙基]七_甲基甘胺酸第三丁酯； Ν-(2-氟-4-{5_[2_(甲氧基甲基）_2，_甲基聯苯{ 基]-1，2,4-垮二唑_3-基}苯甲基）_2_曱基丙胺酸第三丁酯； 18 201206429 N-[(lS)-l-(4-{5-[2i-甲基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基]-1，2,4-口号二唑-3-基}苯基）乙基]-D-丙胺酸甲酯； N-[(lS)-l-(4-{5-[2·-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基]-1,2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙基]-L-丙胺酸曱酯； N-[(lR)-l-(4-{5-[2’-甲基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基]-1,2,4-哼二唑-3-基}苯基）乙基]-1^-丙胺酸曱酯； N-[(lR)-l-(4-{5-[2'-甲基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基]-1，2,4-口号二唑-3-基}苯基）乙基]-D-丙胺酸曱酯； N-[(lS)-l-(4-{5-[2·-甲基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基]-1,2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； N-[(lR)-l-(4-{5-[2’-曱基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基]-1，2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； N-[l-(4-{5-[2-曱基-2’-(三氟甲基）聯苯-4-基]-1，2,4-口咢 二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； N-[(lS)-l-(4-{5-[2-曱基-2'-(三氟曱基）聯苯-4-基]-1，2,4-d号二唑-3-基}苯基）乙基]-L-丙胺酸曱酯； N_[(1S)_1_(4_{5_[2-曱基-2’-(三氟曱基）聯苯-4-基]-1，2,4-d号二唑-3-基}苯基）乙基]-D-丙胺酸曱酯； N-[(lR)-l-(4-{5-[2-曱基-2·-(三氟曱基）聯苯-4-基]-1，2,4-d号二唑-3-基}苯基）乙基]-L-丙胺酸曱酯； N-曱基-N-[l-(3-{5-[2-曱基-2’-(三氟曱基）聯苯-4-基]-1，2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙基]丙胺酸酯； N-曱基-N-[l-(3-{5-[2’-曱基_2_(三氟曱基）聯苯-4-基]-1，2,4 -口号二。坐-3 -基}苯基）乙基]丙胺酸酉旨； 19 201206429 N-甲基-N-[l-(3-{5-[2-曱基-2，-(三氟甲基）聯苯_4-基]-1，2,4-d号二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； N-(2_氟-4-{5-[2'-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基l·1，2,4-口号二嗤-3-基}苯曱基）_n，2-二曱基丙胺酸第三丁酯； N-[l-(4-{5-[2，-曱基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基]-1，2,4_ 口号 二。坐-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； N-甲基-N-[(lS)-l-(4-{5-[2-甲基-2'-(三氟甲基）聯苯-4_ 基]-1，2,4-〇咢二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； >^-甲基-：^-[(13)-1-(4-{5-[2,-甲基-2-(三氟曱基）聯苯_4_ 基]-1，2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； N-甲基-N-[(lR)-l-(4-{5-[2-曱基-2'-(三氟甲基）聯苯 _4_ 基]-1，2,4-〇号二唑_3_基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； 1^-甲基-1^-[(111)-1-(4-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基]-1，2,4-〇咢二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； N-[l-(4-{5-[2-(甲氧基曱基）_2'_甲基聯苯-4-基l·1，2,4-口亏二。坐-3-基}苯基）乙基]·Ν_甲基丙胺酸曱酯； N-[l-(3-{5-[2-曱基-2，·（三氟甲基）聯苯 _4_基]-I，2,4-口兮 一。坐-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； Ν_曱基_Ν-[1-(4-{5-[2，-甲基-2-(三氟曱基）聯苯_4_ 基]-1，2,4-〇号二唑_3_基}苯基）乙基]丙胺酸曱酯； N_甲基·Ν-[ι_(4_{5_[2，_曱基·2_(三氟曱基）聯苯_4-基]-1，2,4-哼二唑_3_基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； 2_[(2-氟-4·{5-[2·-甲基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基 l·1，2,4- 口夸二。坐-3-基}苯曱基）胺基]丁酸第三丁酯； 20

S 201206429 N-[l-(3-{5-[2'-甲基-2-(三氟曱基）聯苯_4_基卜口号 二嗤-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； N-(2-氟-4-{5-[2-(甲氧基甲基）_2’_曱基聯苯_4_ 基]-1，2,4-〇号二唑_3-基}苯甲基）_N，2_二甲基丙胺酸第三丁 酯； N-(2-氟-4-{5-[2-(甲氧基曱基）_2，·甲基聯苯_4_ 基]-1，2,4-〇号二唑_3-基}苯曱基）_N_f基丙胺酸第三丁酯； 〇-(第三丁基）_N-(2-氟-4-{5-[2，-曱基-2-(三氟曱基）聯 苯-4-基]-1，2,4-d号二。坐_3-基}苯曱基）_n_甲基絲胺酸第三丁 酯； N-(3-氟-5-{5-[2’-甲基-2-(三氟曱基）聯苯 _4_基]-1，2,4- 口号一坐-3_基}本曱基）-2 -甲基丙胺酸第三丁酯； N-(2-氟-4-{5-[2’-甲基·2-(三氟甲基）聯苯 _4-基]-1，2,4- 0号一。坐-3 -基}苯甲基）纈胺酸第三丁酯； 1^-(2-氟-4-{5-[2-曱基-2'-(三氟曱基）聯苯_4-基]-1，2,4- 口可一唑-3-基}苯曱基）_2_甲基丙胺酸第三丁酯； N-(2_ 氟-4-{5-[2，-甲基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基]-1，2,4-口号二唑-3-基}苯甲基）_2_曱基丙胺酸第三丁酯； Ν·(2-氟-4-{5-[2’-甲基·2-(三氟甲基）聯苯 _4_基]-1，2,4- 口可一唑-3-基}苯曱基基丙胺酸第三丁酯； N-[2-曱氧基- 曱基_2_(三氟甲基）聯苯-4_ 基]-1，2,4-〇亏二唾_3_基}苯基）乙基]_N_曱基甘胺酸第三丁 酯； N-[2-羥基曱基_2_(三氟甲基）聯苯_4_ 21 201206429 基]-1，2,4-d咢二唑_3_基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； (2s)-3-曱基-2-(4-(5-(2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯_4· 基）-1，2,4-〇号二唑-3-基）苯乙基胺基）丁酸第三丁酯； N_[GR)-l-(4-{5-[2-(曱氧基曱基）-2’_曱基聯笨_4· 基]-1，2,4-〇号二唑_3_基}苯基）乙基]_N_曱基甘胺酸第三丁 酉旨； N_[(ls)-i_(4-{5-[2·(曱氧基曱基）-2'_ 曱基聯笨 _4- 基]-1，2’4-d号二。坐_3_基}苯基）乙基]_N_曱基甘胺酸第三 酯； - Ν_[2·經基-1-(4-{5-[2，-甲基-2-(三氟曱基）聯苯·4_ 基]-1，2,4-d号二唑_3_基}苯基）乙基]_D•丙胺酸第三丁酯； N-[2-{[第三丁基（二曱基）矽烷基]氧基曱 基_2·(三氟曱基）聯笨·4-基]-1，2,4-枵二唑-3-基}笨基）乙 基]-D-丙胺酸第三丁酯， 更特定地描述於實施例中。 根據一較佳合成路徑，可用如流程2中所概述之2 方案獲得式（I )化合物，其中r1、Ra、Rb丨2 ^ VJ ' \ 至W、χ1、χ2、γ1、γ2、〜Z2如上文所定義。第— 為式（II )之羧酸（其中、Rb、G1及G2如上文所定義 與式（III)之醯胺肟（其中Ri、W1至W4、X1 , 八、、γΐ υ 'ζ1及ζ2如上文所定義）偶合。該偶合之一般方案提, 於以下實施例中，其使用熟習此項技術者所熟知之條件 方法。可在存在或不存在諸如DIEA、1^八或ΝΜμ之驗j 情況下，在諸如DMF、ACN、THF或iPrOAc之適合溶劑中1

S 22 201206429 在自約o°c升至室溫之溫度下，較佳在〇°c下使用諸如 HATU、EDC或氯甲酸異丁酯之標準偶合劑，持續30分鐘 至數小時。或者，可使用熟習此項技術者所熟知之條件及 方法，在諸如吨α定或DIE A之驗存在下，在諸如甲苯、d CM、 THF或DMF之適合溶劑中’在自約〇〇c升至室溫之溫度下， 較佳在室溫下，使羧酸衍生物（例如醯氯）與醯胺肟（ΙΠ ) 偶合數小時。第二步包括使〇上經取代之醯胺肟（)環 化並脫水形成d号二唑（I)。使用熟習此項技術者所熟知之 方法來製備垮二唑的條件提供於以下實施例中，諸如在自 80 C升至約120°C之溫度（典型地為9〇。(3 )下，在諸如甲苯、 吡啶、ACN、THF、 DMF或iPr0Ac之適合溶劑或溶劑混合 物中， 在存在或不存在諸如DIEA、 況下熱解，持續12小時與72 / 佳為1 5小時。 、TEA或NMM之鹼的情 ，J、時之間所包含之時間，較 流程2 23 201206429

li V·.·’ v 0 妒厂 (I) 或者，可將式（V)之醇衍生物轉化成式（〗）之相應 月女何生物，如流程3中所概述。首先，可使用熟習此項技 術者所熟知之條件將式（V )化合物之醇官能基轉化成諸如 氣離子或磺酸根之離去基。作為說明，可在諸如（但不限 於）三級胺（例如TEA或DIEA)之鹼存在下，在諸如DCM 之適合溶劑中’在約2(rc至約5(rc之溫度下、較佳在室溫 下’使式（V )之醇衍生物與甲烷磺醯氯反應數小時。接著， 可使所得化合物與式HN(Y1)w3c2(z1)(z2)w4c〇〇y2之適合 胺反應，得到式（1)化合物。或者，可使用熟習此項技術 者所熟知之條件，諸如（但不限於）斯文（Swern)氣化條 件或使用Mn〇2作為苯甲醇氧化劑，將式（v)之 % T生物 軋匕成相應醛。在諸如（但不限於）氰基硼氫化鈉之還原 劑存在下，用具有式HNCYywY^XZiw^OOY2之適合 胺對所得醛進行還原胺化，得到式（Z)化合物。 24 201206429 流程3

可以式（II)之羧酸（其中Ra、Rb、G1及G2如上文所 定義）與適合之式（ΠΓ )醯胺肟（其中r丨、w w 、χι 及X2如上文所定義）為起始物，製備式（ν)之醇衍生物。 當獲得呈對映異構體混合物形式之式（V )醇衍生物 時，其可藉由手性HPLC管柱加以分離，諸如（但不限於） 以下實施例中所述之方法。 用於製備選自以下之式（V)醇衍生物的方法： 1-(4-{5-[2'-甲基-2-(三氟甲基）聯苯_4_基]_i，2,4_d等二 25 201206429 峻-3-基}苯基）乙醇； (4-(5-(2-(甲氧基甲基）-2’_甲基聯苯_4·基口夸二 °坐基）苯基）f醇； (4-(5·(2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基）-1，2,4-0号二唑 -3-基）苯基）甲醇； (3-(5-(2，-甲基·2-(三氟甲基）聯苯-4-基）-1，2,4-口号二唑 -3-基）苯基）甲醇； (4-(5-(2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基）-1，2,4-口号二唑 -3-基）苯基）乙醇； (3-(5-(2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基）-1，2,4-口号二唑 _3_基）本基）乙醇， 更特定地描述於實施例中。 或者，可將式（V，）之胺衍生物轉化成式之相應 胺衍生物，如流程3a中所概述。可使式（ν，）之胺與式 LG-(Yi)W3C2(zi)(z2)w4c〇〇y2之適合親電子試劑反應，'其 中LG為離去基。較佳離去基為函素，諸如（但不限於）。 該反應得到式（I )化合物。 ' 流程3a 26 201206429

可以式（II)之羧酸（其中Ra、Rb、G1及G2如上文所 定義）與適合之式（ΙΙΓ )醯胺肟（其中R1、W1、W2、χ1 及X如上文所定義，且PG為保護基’諸如（但不限於） b〇c)為起始物，製備式（V·)之胺衍生物，如流程π中所 述。可藉由一個脫除保護基步驟將所得式（V")胺衍生物 轉化成式（V，）之胺衍生物。 流程3b

當獲 衍生物時 得呈對映異構體混合物形式之式（V,)或（v”） ’其可藉由手性肌c管柱加以分離，諸如（但不 27 201206429 限於）以下實施例中所述之方法。 用於製備選自以下之式（ν')胺衍生物的方法： (lR)-l-(4-{5-[2'_ 曱基 _2_(三氟甲基）聯苯_4-基]-1，2,4-口号二唑_3-基}苯基）乙胺； Ν-曱基-1-(3-{5-[2，-曱基-2-(三氟曱基）聯苯_4_ 基]-1，2,4-〇号二唑_3-基}苯基）甲胺， 更特定地描述於實施例中。 用於製備選自以下之式（V")衍生物的方法： [(lR)-l-(4-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基]4,2,4-口等二唑-3-基}苯基）乙基]胺基甲酸第三丁酯； 甲基（3-{5-[2·-甲基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基]_ι，2,4-口号 二嗤-3-基}苯甲基）胺基甲酸第三丁酯， 更特定地描述於實施例中。 用於製備選自以下之式（ΙΙΓ )醯胺肟的方法： ((1R)-1-{4-[胺基（羥基亞胺基）曱基]苯基}乙基）胺基曱 酸第三丁酯； {3-[胺基（羥基亞胺基）曱基]苯甲基}曱基胺基甲酸第三 丁醋， 更特定地描述於實施例中。 可藉由如下文於實施例中所述之標準合成技術，使用 熟習此項技術者所熟知的條件及方法來製備式（π)化合 物’其中Ra、Rb、G1及G2如上文所定義（流程4 )。在第 '種合成路徑中’可藉由金屬催化交叉偶合反應，接著水 解所得酯（VI )來獲得式（π )化合物，其中、Gi s 28 201206429 及G2如上文所定義。更特定言之，其可藉由苯曱酸烷酯 (VII )(其中LG,較佳可為Br、I或磺酸酯，諸如三氟甲磺 酸醋）與式（VIII )之硼酸或酯的鈴木-宮浦偶合反應 (Suzuki-Miyura coupling reaction )獲得（Miyaura，N.;

Suzuki, A· Chem. Rev· 1995, 95, 2457; Takahir〇 j 及 T〇shiaki M·’ Tetrahedron Lett· 2005，46，3573-3577 )。在典型程序 中’在諸如Κζ(：〇3之鹼及催化量之鈀催化劑（諸如 Pd(PPh3)4 )存在下，在可能添加有膦配位體（諸如pph3 ) 之情況下，在適合溶劑（諸如曱苯與水之混合物）中加熱 笨甲酸烷酯（vii)與硼酸（VIII)。可在諸如Me〇H、Et〇H、 水或其混合物之適合溶劑中，在自約2〇。〇升至6〇。〇之溫度 下，較佳在室溫下，使用金屬氫氧化物（諸如Na〇H)水解 所得酯（VI)數小時。 流程4 29 201206429

(II)

LG'~^}~CN R (X) 在第二種合成路徑中’可藉由偶合反應， 得腈（IX)來獲得式(„)化合物，其中Ra、Rb、Gi:: 如上文戟義。可在自室溫升至回流之溫度下，較佳在= 流下，在適合溶劑（諸如Me0H或Et0H)中，用金屬氫氧 化物（諸如Na〇H)水溶液處理數小時（例如1至24小時） 而使所得式（IX )之苯甲腈水解成相應羧酸（π )。 在第三種合成路徑中，根據流程4，可在兩步方法中自 式（XI )之芳基溴製備式（Η )化合物，其中Ra、Rb、G, 及G如上文所定義。第一步為齒素-金屬與烧基鐘（諸如 «BuLi或iBuLi)在較低溫度下、較佳在-78°C下’在適合溶 30 201206429 对J (諸如EhO )中交換。第二步為藉由添加氣態或固態c〇2 作為親電子試劑來中止有機鋰化衍生物。 當獲得呈對映異構體混合物形式之式（π)化合物時， 八可藉由手性HPLC管柱加以分離，諸如（但不限於）以下 實施例中所述之方法。 用於製備選自以下之式（Π)化合物的方法： 2’·曱基-2-(三氟甲基）聯苯·4_甲酸； 2'-(二氟曱基）-2-曱基聯苯-4-甲酸； 2-(曱氧基甲基）-2’-曱基聯笨-4-曱酸； 2-甲基-2’-(三氟曱基）聯苯_4·甲酸， 更特定地描述於實施例中。 式（ΠΙ )化合物（其中 R1、W1 至 W4、X1、X2、Y1、 y、z及z2如上文所定義）可購自市面，或可根據流程5， 藉由在室溫至約8(TC範圍内之溫度下，較佳在室溫下，在 存在或不存在鹼（諸如TEA )的情況下，向於適合溶劑（諸 如EtOH )中之式（XII)之相應經取代苯甲腈中添加羥胺水 溶液或羥胺鹽酸鹽持續數小時來製備。

流程S

當獲得呈對映異構體混合物形式之式（ΙΠ)化合物時， 31 201206429 其可藉由手性hplc管柱加以分離，諸如（但不限於）以下 實施例中所述之方法。 用於製備選自以下之式（III )化合物的方法： 2-[{4-[胺基（羥基亞胺基）甲基]-2-氟苯甲基}(甲基）胺 基]丁酸第三丁酯； ]^-((111)-1-{4-[胺基（羥基亞胺基）曱基]苯基}乙基）_1)_ 丙胺酸甲醋； N-[(1R)-1-(4-氰基苯基）乙基]-L-丙胺酸曱酯； 1^((13)-1-{4-[(羥基胺基）（亞胺基）甲基]苯基}乙基）甘 胺酸第三丁酯； >1-((111)-1-{4-[(羥基胺基）（亞胺基）曱基]苯基}乙基）甘 胺酸第三丁酯； N-((lS)-l-{4-[(羥基胺基）（亞胺基）曱基]苯基}乙基）_D_ 丙胺酸甲酯； 义（（13)-1-{4-[(羥基胺基）（亞胺基）甲基]苯基}乙基）·!^ 丙胺酸曱酯； (2S)-2-[((lR)-l-{4-[胺基（經基亞胺基）甲基]苯基}乙基） 胺基]丁酸乙酯； (2R)-2-[((l R)-1 - {4-[胺基（羥基亞胺基）曱基]苯基}乙基） 胺基]丁酸乙酯； 2-( {3-[胺基（羥基亞胺基）曱基]-5-氟苯曱基}胺基）-4-甲 基戊酸乙酯； N-{4-[胺基（羥基亞胺基）甲基]-2-氟苯曱基}-：^-甲基纈 胺酸第三丁酯；

S 32 201206429 N-(l-{4-[胺基（羥基亞胺基）甲基]苯基}乙基）-N-曱基甘 胺酸第三丁酯； 2-({4-[胺基（羥基亞胺基）曱基]-2-氟苯甲基}胺基）-2-曱 基丙酸第三丁酯； (1-{4-[胺基（羥基亞胺基）曱基]苯基}乙基）胺基曱酸第 三丁酯； >^-(1-{3-[(羥基胺基）（亞胺基）曱基]苯基}乙基）-：^-曱基 丙胺酸曱酯； >^-(1-{3-[胺基（羥基亞胺基）甲基]苯基}乙基）-；^-曱基甘 胺酸曱基第三丁酯； 2-[ {4-[胺基（羥基亞胺基）曱基]-2-氟苯曱基}(曱基）胺 基]-2-甲基丙酸第三丁酯； N-(l-{4-[胺基（羥基亞胺基）甲基]苯基}乙基）甘胺酸第 三丁酯； N-((lS)-l-{4-[胺基（經基亞胺基）甲基]苯基}乙基）-N_ 曱基甘胺酸第三丁酯； 〜（（11〇-1-{4-[胺基（羥基亞胺基）曱基]苯基}乙基）_义 曱基甘胺酸第三丁酯； N-(l-{4-[胺基（羥基亞胺基）曱基}苯基}乙基）-Ν·曱基 丙胺酸甲酯； N-(l-{3-[胺基（羥基亞胺基）曱基]苯基}乙基）甘胺酸第 三丁酯； 2-({4-[胺基（羥基亞胺基）甲基]-2-氟苯曱基}胺基）丁酸 第三丁酯； 33 201206429 2-[{4-[胺基（羥基亞胺基）甲基]-2_氟笨曱基}(曱基）胺 基]-2-甲基丙酸第三丁酯； 2-[{4-[胺基（羥基亞胺基）甲基]-2-氟苯曱基η甲基）胺 基]丙酸第三丁酯； Ν-{4-[(胺基（羥基亞胺基）曱基]-2·氟苯甲基）_〇_(第三 丁基）-Ν-曱基絲胺酸第三丁酯； 2-({3-[胺基（經基亞胺基）曱基]-5-氧苯甲基丨胺基）_2_曱 基丙酸第三丁酯； 2-({4-[胺基（經基亞胺基）曱基]-2-氟苯曱基丨胺基）_3_甲 基丁酸第三丁酯； 2-({4-[胺基（羥基亞胺基）曱基]-2-氟笨甲基丨胺基）_2_曱 基丙酸第三丁酯； 2-((1-(4-(Ν’-羥基甲脒基）苯基）-2-甲氧基乙基）（曱基）胺 基）乙酸第三丁酯； 2-(2-(第三丁基二甲基矽烷氧基）_ι_(4_(ν，-羥基曱脒基） 苯基）乙基胺基）乙酸第三丁酯； Ν'-羥基-4-(羥基甲基）苯曱醯亞胺醯胺； Ν'-經基-3-(經基甲基）苯曱脒； Ν·-羥基-4-(羥基乙基）苯曱醯亞胺醢胺； Ν'-經基-3-(羥基乙基）苯甲醯亞胺醢胺； Ν-(1-{4-[(Ζ)-胺基（羥基亞胺基）曱基]苯基卜2-{[第三丁 基（二曱基）矽烷基]氧基}乙基）_D丙胺酸第三丁酯， 更特定地描述於實施例中。 式（XII)化合物（其中 r1、wi 至 W4、χΐ、χ2、γι、

S 34 201206429 y、z丨及z2如上文所定義）可購自市面，或可使用諸如下 文於實施例巾所述之適合相互轉化程序或熟f此項技術者 所熟知的習知相互轉化程序自式（ΧΙΙ)之替代化合物製備。 或者（但不限於）’可藉由在還原劑（諸如但不限於氰基硼 氫化鈉）存在下，用式HN(Y1)w3c2(z〗）(z2)w4c〇〇y2之適 π胺使式（Xlla )之醛或酮進行還原胺化來製備式（) 化合物。或者’可藉由在乙醇鈦存在下與手性助劑（諸如 但不限於第三丁烧續醯胺基團）反應將式（xnb)之酿或嗣 轉化成手性亞胺（XIIe ) ( Ellman ; A等人，心細 ’ 35，984·995 )。可藉由使用熟習此項技術者已知的條 件’經由還原或親核加成將其進一步轉化成亞續酿胺 (XIId )。接著’藉由在質子性溶劑中進行酸處理（諸如HC1) 移除亞續醯基，得到呈鹽酸鹽形式之所要手性胺（Xlle)。 月“ Xlle )《絕對組態視手性助劑之組態及還原或親核加成 所使用之條件而定。作為說明，亞胺（)可用還原劑（諸 如但不限於硼氫化鈉或鋰硼化物（L-selectride))進行非對 、體、擇11還原’在移除手性助劑後產生手性胺（Xlle ) (Eilman J. a 笙又 r ^ •寻人 Org. C/zm. 2007, 72, 626-629 )。手性 =(Xlle )可㈣與適合搭或_之還原性院基化或經由與適 親電子忒劑（諸如烷基溴或烷基磺酸酯衍生物）之直接 烧基化而進—步轉化成式（XII)化合物。 流程6 35 201206429

(ΧΗβ) (XII) 田U付呈對映異構體混合物形式之式（xm化合物時， 其可藉由手性HPLC管柱加以分離，諸如（但不限於）以下 實施例中所述之方法。 用於製備選自以下之式（XII)化合物的方法： 2-[(2-氟-4-異氰基苯曱基）（甲基）胺基]丁酸第三丁酯； N [(lR)-l-(4-氰基苯基）乙基]_D_丙胺酸甲酯及 N [(lR)-l-(4-氰基本基）乙基]_l_·丙胺酸甲酉旨； N-[(lS)-l-(4-氰基苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； N-[(lR)-l-(4-氰基苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； N-[(lS)-l-(4-氰基苯基）乙基]_d_丙胺酸甲酯及 N-[(lS)-l-(4 -氰基苯基）乙基]丙胺酸甲酯； (23)-2-{[(111)-1-(4-氰基苯基）乙基]胺基}丁酸乙酯及 (2R)-2-{[(lR)-1 -(4-氰基苯基）乙基]胺基} 丁酸乙酯； 2-[(3 -氰基-5-氟苯f基）胺基]-4 -甲基戊酸第三丁醋； 36 201206429 2-[(4-氰基-2 -氟苯甲基）（甲基）胺基]_3_曱基丁酸第三丁 酯； N-[l-(4-氰基苯基）乙基]-N-曱基甘胺酸第三丁酯； 2-[(4-氰基- 2-1苯曱基）胺基]-2-曱基丙酸第三丁酿： [1-(4-氰基苯基）乙基]胺基甲酸第三丁酯； Ν-Π-(3-氰基苯基）乙基]-N-甲基丙胺酸曱酯； N-[l-(3-氰基苯基）乙基]-N-曱基丙胺酸曱酯； 2-[(2-氟-4-異氰基苯曱基）（甲基）胺基]_2_曱基丙酸第三 丁酯； N-[l-(4-氰基苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； N-[l-(4-氰基苯基）乙基]-N-甲基甘胺酸第三丁酯； N-[l-(4 -亂基苯基）乙基]曱基丙胺酸甲g旨； Ν·[1-(3-氰基苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯； 2·[(4-氰基-2-氟苯曱基）胺基]丁酸第三丁酯； 2- [(2-氟-4-異氰基苯曱基）（曱基）胺基]_2_曱基丙酸第三 丁酯； 2_[(4-氰基-2-氟苯甲基）（甲基）胺基]丙酸第三丁酯； 3- 第三丁氧基_2-[(4-氰基-2-氟苯曱基）（曱基）胺基]丙酸 第三丁酯； 2_[(3-氰基-5-氟苯甲基）胺基]-2-曱基丙酸第三丁酯； 2-[(4-氰基-2-氟苯曱基）胺基]-3-曱基丁酸1-第三丁酯； 2_[(4-氰基-2-氟苯甲基）胺基]-2-甲基丙酸第三丁酯； 2-((1-(4-氰基苯基）-2-甲氧基乙基）（甲基）胺基）乙酸第 三丁酯； 37 201206429 2-(2-(第二丁基二甲基矽烷氧基）_丨_(4氰基苯基）乙基 胺基）乙酸第三丁酯； 更特定地描述於實施例中。 可使用諸如3 -氣過氧苯曱酸之氧化劑將式（j )化合物 轉化成其式（10 )之氧化形式，如流程7中所述。 流程7

用於製備選自以下之式（10 )化合物的方法： 1- [曱基（4-{5-[2，-曱基-2-(三氟甲基）聯笨·4_基]_1,2,4_ 口号二》坐-3-基}苯曱基）硝醯基]環戊烷羧酸； 2- [(2-氟-4-{5-[2，-甲基-2-(三氟曱基）聯笨_4_基]1,2 4_ 口等二。坐-3_基}苯曱基）（甲基）硝醯基]丙酸； {曱基[1-(4-{5-[2，-曱基-2-(三氟曱基）聯苯基]_丨2 4_ 口号二唑-3-基}苯基）乙基]硝醯基}乙酸， 更特定地描述於實施例中。 在一特定具體實例中，本發明提供一種製備式（1)化 合物及其鹽之方法，其特徵在於：

S 38 201206429 使式A之化合物

其中G1、G2、Ra及Rb具有上文所提供之含義，且τ 為OH或離去基，諸如C1、Br、I、咪唑基、五氟苯氧基， 或氣甲酸異丁酯與式A (其中T為OH)之反應產物， 與式B化合物

其中 R1、W1 至 W4、C1、C2、X1、X2、γΐ、Υ2、ζι 及 Z具有上文所提供之含義’在適合驗（諸如胺，如TEA、 DIEA或NMM)存在下反應，或在T為OH的情況下，在 適合縮合試劑（諸如EDC)存在下反應，且將所得產物環 化，並視情況將式（Ϊ )之鹼或酸轉化成其鹽之一。 式（Π )至式（ΧΙΙ)之化合物可獲自商業來源，或其 可使用諸如下文於實施例中所述之程序或熟習此項技術者 所熟知的習知程序自已知化合物製備。 式（II )至式（χΠ )之化合物（其中Rl、Ra、Rb、Gl、 39 201206429 G2、wi 至 w4、χΐ、X2、γ1、γ2 ' Z1、Z2 及 LGl 如上文所 定義）可使用諸如下文於實施例中所述之適合相互轉化程 序或熟習此項技術者所熟知的習知相互轉化程序分別轉化 成式（II )至式（ΧΠ )之替代化合物。 若以上一般合成方法之集合不適用於獲得式（I)化合 物及/或用於合成式（I )化合物之必需中間物，則應使用熟 習此項技術者已知的適合製備方法。 本發明化合物已根據 Advanced Chemistry Development 公司之程式「ACD/Name Batch」、ACD/Labs ( 7.00 版）（產 品版本：7.10，創建時間：2003年9月15曰）及程式 AUTONOM GOLD 1.0.1.1版中所使用之標準進行命名。 式（I )及相關式亦涵蓋此等化合物之光學活性形式（立 體異構體）、對映異構體、外消旋物、非對映異構體及水合 物及溶劑合物。 使用熟習此項技術者所熟知的標準命名規則確定立體 化學（S)或（R) » 根據另一種一般方法，式（I )化合物及任何子式化合 物均可採用熟習此項技術者所熟知的適合相互轉化技術轉 化成式（I )及任何子式之替代化合物。 一般而言，任何個別式（I )化合物之合成路徑將視各 分子之特定取代基及必需中間物之易獲得性而定；同樣， 該等因素為一般技術者所瞭解。關於所有保護及脫除保護 基方法’參見 Philip J. Kocienski, ，

Georg Thieme Verlag Stuttgart, New York，1994;及 Theodora 40 201206429 W. Greene 及 Peter G，M_ Wuts，「户^ G，心 办《Mab」，Wiley Interscience，第 3 版，Η”。 本發明化合物可藉由蒸發適當溶劑進行結晶而以與溶 劑分子缔合之形式分離。可以習知方式製備含有鹼性中心 之式（I)化合物的醫藥學上可接受之酸加成鹽。舉例而言， 可用呈純形式或適合溶液形式之適合酸處理自由鹼溶液， 且藉由過濾或藉由在真空下蒸發反應溶劑分離所得鹽。可 乂類似方式，藉由用適合驗處理含有酸中心之式（！）化合 物之溶液來獲得醫藥學上可接受之鹼加成鹽。可形成兩^ 類型鹽或使用離子交換樹脂技術相互轉化。 視所使用之條件而定，反應時間一般為數分鐘至14 天，且反應溫度為約_3〇。〇至14〇。〇,通常為_1〇。〇至9〇它， 尤其為約〇°C至約70。(：。 此外可藉由用浴劑分解劑（solvolysing agent)或氫 解劑（hydrogen〇lySingagent)處理式（1)化合物之功能衍 生物之一來釋放式（丨）化合物而獲得式化合物。 溶劑分解或氫解之較佳起始物質為與式（^ )相符但含 有相應受保護胺基及/或羥基而非一或多個自由胺基及/或 經基的化合物’較佳為帶有胺基保護基而非結合至N原子 之Η原子的化合物’尤其為帶有R，_N基團（其中R，表示胺 基保護基）而非HN基團的化合物，及/或帶有羥基保護基 而非經基之Η原子的化合物，例如與式（χ)相符但帶有 -C00R”基團（其中R"表示羥基保護基）而非_c〇〇h基團 的化合物。 41 201206429 起始物當公. 亦可;3b存在多個相同或不同的受保護 ‘ 胺基及/或經基。兹卢斤；， 斤存在之保護基彼此不同，則在許多情 況下可選擇性地裂解來將其除去。 術居「胺基保護基（amin〇pr〇tecting㈣叩）」一般為 已夫的且係才曰適合保護（封端）胺基以免受化學反應影 響但在分子其他處已進行所要化學反應後易於移除的基 團。羊Q之，典型S亥等基團為未經取代或經取代之醯基、 芳基、芳坑氧基甲基或芳烧基。因為胺基保護基在所要反 應（或反應序列）後經移除，因此其類型及大小不再重要； 然而，較佳為具有1至20個、尤其i至8個碳原子之基團。 術語「醯基（acyl group)」應結合本發明方法以其最廣泛意 義理解。其包括源自脂族、芳脂族、芳族或雜環幾酸或磺 酸之醯基，且詳言之，烧氧基罗炭基、芳氧基獄基及尤其芳 烷氧基羰基。該等醯基之實例為烷醯基，諸如乙醯基、丙 醯基及丁醯基；芳烷醯基，諸如苯乙醯基；芳醯基，諸如 苯甲醯基及甲苯基；芳氧基烷醯基，諸如p〇A ;烷氧基羰 基，諸如甲氧基羰基、乙氧基羰基、2,2,2_三氣乙氧基羰基、 BOC (第三丁氧基羰基）及2_碘乙氧基羰基；芳烷氧基羰 基’諸如CBZ(「苄氧羰基（carb〇_benz-oxy )」' 4 -甲氧基苯 甲氧基羰基及FMOC ;及芳基續醯基，諸如Mtr〇較佳胺基 保5蒦基為BOC及Mtr ’此外為CBZ、Fmoc、苯曱基及乙酿 基。 同樣，術語「羥基保護基（hydroxyl-protecting gr〇up)」 一般為已知的’且係指適合保護羥基以免受化學反應影響

S 42 201206429 但在分子其他處已進行所要化學反應後易於移除的基團。 典型的该等基團為上述未經取代或經取代之芳基、芳烷基 或醯基，此外亦為烷基。羥基保護基之性質及大小不重要， 因為其在所要化學反應或反應序列後又經移除；較佳為具 有1至20、尤其1至丨〇個碳原子之基團。 羥基保護基之實例尤其為苯甲基、4_甲氧基苯甲基、對 硝基苯甲醯基、對甲苯磺醯基、第三丁基及乙醯基，其中 苯甲基及第三丁基尤其較佳。 術語「化合物之溶劑合物（s〇lvates 〇f the⑶出㈧仙心）」 應視為意謂由於相互吸引力而形成惰性溶劑分子加合於化 合物上。溶劑合物為例如單水合物或二水合物或醇合物。 式（I)化合物視所使用之保護基而自其功能衍生物釋 放，例如使用強酸，宜使用TFA或高氯酸，但亦使用其他 強無機酸，諸如鹽酸或硫酸；強有機羧酸，諸如三氯乙酸 或磺酸，諸如苯甲磺酸或對曱苯磺酸。可能存在另一種惰 杜/合劑’但並不總是必冑&。適合的惰性溶劑較佳為有機 溶劑，例如羧酸（諸如乙酸）、醚（諸如THF或二吟烷）、 酿胺（諸如DMF)、函代烴（諸如DCM),此外亦為醇（諸 如甲醇、乙醇或異丙醇）及水。㈣，上述溶劑之混合物 亦適合。較佳過量使用TFA而不添加另一溶劑，且較佳使 用呈乙酸與70¼高氣酸之比率為9:1之混合物形式的高氣 酸。裂解之反應溫度宜為約〇〇C至約5(rc，較佳為15；)(：至 3〇°C (室溫）。 BOC、OBut及Mtr基團例如較佳可在15。〇至3〇。〇下使 43 201206429 用於DCM中之TFA或使用於二口号烧中之約3N至5n節 裂解除去’且FMOC基團可在听至贼下使用二甲胺、 二乙胺或哌啶於DMF中之約5%至5〇%溶液裂解除去。 可經氫解移除之保護基（例如CBZ、苯曱基或自其口号 二唑衍生物釋放之曱脒基）可例如藉由在催化劑（例如貴 金屬催化劑’諸如把，宜在諸如碳之支撐物上）存在下用 氫氣處理而裂解除去。本文之適合溶劑為上文所指示之溶 劑’洋舌之例如醇（諸如曱醇或乙醇）或醯胺（諸如DMF )。 氫解一般在約〇乞至10(rc之溫度及約1巴至2〇〇巴之壓力 下進仃，較佳在20°C至30t及1巴至10巴下進行。CBZ基 團之氫解例如在20。。至30t：下在曱醇中於5%至1〇%魔 上或使用甲酸銨（替代氫氣）在甲醇/DMF中於pd/c上順 利進行® 適合的惰性溶劑之實例為烴，諸如己烷、石油醚、苯、 曱苯或二甲苯；氣化烴’諸如三氯乙烯、U-二氯乙烷、四 氣曱烧、三I甲苯、三氯曱烧或DCM ;醇，諸如甲醇、乙 醇、異丙醇、正丙醇、正丁醇或第三H，諸如乙鍵、 二異丙醚、四氫呋喃（THF)或二垮烷；二醇醚，諸如乙二 醇單曱醚或乙二醇單乙醚或乙二醇二甲醚（二乙二醇二甲 醚酮，諸如丙酮或丁酮；酼胺，諸如乙醯胺、二甲基乙 醯胺、N-甲基吡咯啶酮（NMP)或二甲基甲醢胺（dmf); 腈，諸如乙猜；亞碾，諸如二曱亞石風（DMS〇);二硫化碳； 羧酸，諸如甲酸或乙酸；硝基化合物，諸如硝基曱烷或硝 基笨；酯，諸如EtOAc ;或該等溶劑之混合物。

S 44 201206429 可例如在0°C至100°C之溫度下，於水、水/THF、水/THF/ 乙醇或水/二π号烧中使用LiOH、NaOH或KOH，使醋專化。 此外’可例如使用乙酸、TFA或HC1使酿水解。 此外，自由胺基可以習知方式使用醯氯或酸酐酿化， 或使用未經取代或經取代之烷基齒化物烷基化，或宜在 -60°C至+30°C之溫度下，在惰性溶劑（諸如DCM或THF ) 中及/或在鹼（諸如三乙胺或吡啶）存在下與 CH3-C(=NH)-OEt 反應。 在本說明書中’術語離去基較佳表示Cl、Br、I或反應 性修飾之OH基團’諸如活性酯、咪嗤或具有1至6個碳原 子之烷基磺醯基氧基（較佳為甲基磺醯基氧基或三氟甲基 磺醯基氧基）或具有6至10個碳原子之芳基磺醯基氧基（較 佳為苯基磺醯基氧基或對甲苯基磺醢基氧基）。用於在典型 醯化反應中活化羧基之此類型基團描述於文獻中（例如權 威著作，諸如 Houben-Weyl，Methoden der organischen Chemie [Methods of Organic Chemistry], Georg_Thieme-Verlag，Stuttgart 中）。宜就地形成活性酯，例 如經由添加HOBt或N-經基丁二醯亞胺。 術s吾「醫藥學上可用之衍生物（pharrnaceutically usable derivatives )」應視為意謂例如式i化合物之鹽及所謂的前 樂化合物。 術s吾「前藥衍生物（pr〇drUg derivatives )」應視為意謂 已經例如烷基或醯基、糖（如葡萄糖醛酸苷或寡肽）修飾 且在生物體中快速裂解形成活性化合物之式I化合物。 45 201206429 此等化合物亦包括本發明化合物之可生物降解聚舍物 衍生物，如例如 Int· j. Pharm· 1 15,61 67 (1995)中所述。 式（I)及相關式之化合物之代謝物亦為本發明之一部 分。舉例而言，式（I)化合物之代謝物可為其中γ1及/或 Υ2為葡萄糖醛酸苷的式（1)化合物。該等代謝物之實例為 例如式（Ik)化合物。 式（I )及相關式之化合物之代謝物亦可為其中結合之 NY _W3已裂解的式（I)及相關式之化合物，如式（)所 7]\ °

dM) 其中 π、χ1、χ2、w2、γ1 如上 文所定義。該等代謝物之實例為以下表〗中所提及之化合物 Ml 及 M2 » 式（I )及相關式之化合物之代謝物亦可為其中一气— 干個氮原子已經氧化的式⑴及相關式之化合物。實施： 101、102及103之化合物代表該等代謝物之實例。

式（I )及相關式之化合物之代謝物亦可為其中一咬w 干個芳族系統（如苯環）經氧化的式（1)及相關式之化2 物。該等代謝物可由下式（IM2 )定義： Q 46 201206429

其中G3、 或3，較佳為 Υ2、Ζ】、22、

G 、G可彼此獨立地表示OH，t為ο」」 1 或 2 ’ G1、G2、Ra、Rb、Rl、X丨 χ· w1 > w2

Y 、及w4如上女此—M 文所定義。該等代謝 下化合物M3、M6及M9 : 物之實例為以

本發明涵蓋單獨或、與其一或若干種代謝物組合的式（〇 及相關式之化合物。 式（I )亦涵蓋式I化合物之混合物，例如 J如兩種非對映 47 201206429 八構體之混合物’例如 ,1ΛΛ , , L3 ' 1：4 ' 1:5 ' 1:10 1:100或1:1000之比率。 此等化合物尤其較 佳為立體異構化合物之混合物。 在另一較佳具體實例中，^ M f式（〇化合物展現對受 體之㈣性超過對W受體之選擇性，以如以下實施例中 所測疋之IC5。值計，超過2〇倍，較佳超過倍，更佳超 過100倍，甚至更佳超過1000倍。 車乂佳本發明化合物且右高口服；i -Γ m 叨/、有同口服生物可用性及/或低清除 率。 在另一較佳具體實例中，本發明化合物展現對SiPi受 體之選擇性超過對Slp3受體之選擇性，以如以下實施例中 所測定之ICw值計，超過20倍，較佳超過5〇倍，更佳超 過1〇〇倍，甚至更佳超過1000倍，且本發明具有高口服生 物可用性及/或低清除率。 較佳為選自以下實施例1至實施例96之本發明化合 物：

S 48 201206429

49 201206429

50 201206429

實施例 編號 式 16 / ^ 0-N 17 F HO^"0 18 (W 、C〇 F HO 19 F HO^0 20 (W^：k〇r ^ f-|Lf nh F HO^〇 21 F H〇4 22 F HO^O 23 FV-rF P'N 51 201206429 實施例 編號 式 24 25 26 27 28 OH 29 O-N F OH 30 故％ 0 31 十 Y- HO入Ο 52 201206429

53 201206429

s 54 201206429 實施例 編號 式 47 F 48 0 49 50 c^p^rVr 51 52 F F °'N HO 53 54 C^lrK^^ 0 55 201206429

56 201206429

57 201206429 實施例 編號 式 70 0 F 0 71 C 72 0 73 ^yCr^ F F 74 75 y\ ο-Ν r F 76 F Ο-Ν 77 HO 乂」0H Γ F 〇〜Ν 58 201206429

59 201206429

s 60 201206429

61 201206429 式 102 ------ ----- HO 103 ----- 62^。 F HO M1 ---— rjHs ———.· \ M2 ^—-- 及其醫藥签l m 苯干上可用之衍生物、溶劑合物'鹽及立體異 構體’包括盆户斤古方 八所有比率之混合物。 气（1)亦涵蓋此等化合物之光學活性形式（立體異構 )對映異構體'外消旋物、非對映異構體及水合物、鹽 今劑0物。在一特定具體實例中，當存在2個或2個以 上手丨生中心時，獲得呈一種非對映異構體形式之式（I)化 合物。 「非對映異構體（diastere〇is〇mer)」意謂式（〇化合物 中所存在之各手性中心相對於其他手性中心經定義。 對於相同化學結構内出現超過一次之所有基團及指 數，其含義彼此無關。 在上文及下文中，除非另外明確陳述，否則基團或參

S 62 201206429

Gl、A、A、Ζ1 Υ‘ 數 Ra、Rb、Χι、X2、γΐ Ζ: w2、w3、w4具有式（Ι)及子式下所指示之含義。 環烧基為含有3至12個碳原子之環狀烧基。環 佳表^哀丙基、環丁基、環戊基、環己基或環庚基。乂 壤烧基㈣基為經由碳鏈與分子之其餘部分鍵結 二 Μ、3、4、5、6、7、8、9，、"、。、"、"、。、 其個碳原子的㈣基。環烧基伸烧基 丙基亞甲基、環丁基盱甲其样丄、 ^ % 基或環庚基亞f基。*》基亞甲基、環己基亞甲 較佳為-ch3、-ch2ch3、-CF3、_CHF2。 R 較佳為-Cp3 或-ch2och3。 中Ra在及一^定j體實例中，本發明提供式⑴化合物，其 之為-CF3或_CH2OCH3，較佳為_Cf3。

=較佳為F、_r，且尤其為UC卜 或_〇CH表不？或〇八’其中A如上文所定義，尤其為F 式（1)中基團 基團：

之實例係選自以下 63 201206429 ^Λ〇η H 'OH H OH A。 ^ v^° OH A。 Η" OH 'eh： OH γΛπ ^OH ^NH ••l· ^ H H OH HO-^° HO、^〇 K Ή s 64 201206429 H〇^h HN 〇^ΟΗ ^f° OH ν·^ΝΝ^ΟΗ 女又Η 厂又 ,〇 •厂Η 、OH OH V OH ^Μ° Λ 0Η Άη \ J/N^X〇H 7 HO (Η η y*〇H 0 H V-〇H 0 -K Jbr 9-^-oh 0 Η V-OH 0 ''^•ΝΗ OH (H ^~^〇h 0 0 • OH .· H V-OH 味 0 \ H-oh H "t0H 0 ，'·ΐ ^ rOH Η Υ〇Η Ο xy r0H N"...s. HrH 〇 I OH Vx >〇Η η"^-ΟΗ 0 "vti \〇H H ^r-OH 0 KM-^H H Y^OH 0 Lh Η-^-〇Η 0 0 ，冬。H 0 U.广 〇H /* 卞。H 0 ^ V〇H Ν-\ / V0H 0 /N^O0H HO^° l0、 HO V /OH . 65 201206429 HO-^0 •厂 Np。 〈H OH OH H〇^>0 令 0 % TF~pir- °%-OH hVh0H HO’ HO’ AH+V〇 。吒 〇v<0 '>cK 0H .------- 式（i)化合物可具有一或多個手性中心， a*囚此可以 各種立體異構形式存在。式（I)涵蓋所有此等形式。 另外’式（I)化合物以及用於製備其之起始物質可藉 由如文獻（例如權威著作，諸如Houben-Weyl, Methoden dei· organischen Chemie [Methods of Organic Chemistry], Georg-Thieme-Veriag，Stuttgart )中所述之本身已知的方 法，在已知且適用於該等反應之反應條件下製備。關於所 有保護及脫除保護基方法，參見Philip j. Kocienski，

Proieciz'wg GVom/75」，Georg Thieme Verlag Stuttgart，New York，1994 ;及 Theodora W. Greene 及 Peter G. M. Wuts， r Protective Groups in Organic Synthesis Δ , Wi\ey Interscience，第 3 版，1999 » 亦可使用本身已知但本文未詳細提及之變異體。

S 66 201206429 祐要恰，亦可就地形成起始物質以便不用 物中將其分離，而是立即進—步轉化成式⑴化2 用於製備式⑴化合物之起始化合物一般為已知的。 然而’若其為新穎化合物，貝1其可藉由本身已知的方 備。 我 反應較佳在惰性溶劑中進行。 適合的惰性溶劑之實例為烴，諸如己烷、石油醚、苯、 甲苯或二甲苯；氯化烴，諸如三氣乙烯、1，2_二氣乙烷 '四 氣甲烷、二氣f烧或DCM;醇，諸如甲醇、乙醇、異丙醇、 正丙醇JL 丁醇或第三丁醇；醚，諸如乙醚、二異丙醚、 THF (THF)或口罢 p ·—高含 u 」飞一口可烷，一醇醚，諸如乙二醇單甲醚或乙二 醇單乙酸或乙二醇二甲喊（二乙二醇二甲喊）；酮，諸如丙 酮或丁酮；醯胺，諸如乙醯胺、=甲基乙醯胺或二甲基甲 ^腈渚如乙腈，亞砜，諸如二甲亞砜（1^3〇); 二硫化碳；幾酸，諸如甲酸或乙酸；石肖基化合物，諸如確 基甲烷或硝基苯"旨’諸如Et〇Ac;或該等溶劑之混合物。 醫藥鹽及其他形式 該等式（I)化合物可以其最終非鹽形式使用。另—方 面’本發明亦關於呈醫藥學上可接受之鹽形式的此等化合 物之用途，該等鹽可藉由此項技術中已知的程序由各種有 機酸及無機酸以及有機驗及無機驗獲得。式ι化合物之醫藥 學上可接受之鹽形式大部分藉由習知方法製備。若式工化合 物含有酸性中心，諸如敌基，則可藉由使該化合物與適合 鹼反應以獲得相應驗加成鹽來形成其適合鹽之一。該等鹼 67 201206429 為例如驗金屬氫氧化物，包括氫氧化鉀及氫氧化納；驗土 金屬氫氧化物，諸如氫氧化鎮及氫氧化妈；及各種有機驗， 諸如㈣、二乙醇胺及N_曱基_還原葡糖胺（葡甲胺）、节 星（benzathine )、膽鹼、二乙醇胺、乙二胺、苄苯乙胺 (benethamine)、二乙胺、哌畊、離胺酸、L_精胺酸、氨、 三乙醇胺、甜菜鹼（betaine )、乙醇胺、嗎啉及緩血酸胺 (tromethamine)。在某些式ϊ化合物含有鹼性中心的情況 下，可藉由用醫藥學上可接受之有機酸及無機酸處理此等 化合物來形成酸加成鹽，例如_化氫，諸如氣化氫或溴化 鼠、其他無機酸及其相應鹽’諸如硫酸鹽、；g肖酸鹽或磷酸 鹽及其類似物；及烷基磺酸鹽及單芳基續酸鹽，諸如甲烧 績酸鹽、乙烷磺酸鹽、甲苯磺酸鹽及苯磺酸鹽；及其他有 機酸及其相應鹽，諸如碳酸鹽 '乙酸鹽、三氟乙酸鹽、酒 石酸鹽、順丁烯二酸鹽、丁二酸鹽、檸檬酸鹽、苯曱酸鹽、 水楊酸鹽、抗壞血酸鹽及其類似物。因此，式I化合物之醫 藥學上可接受之酸加成鹽包括以下：乙酸鹽、己二酸鹽、 海藻酸鹽、天冬胺酸鹽、苯曱酸鹽、苯績酸鹽 (benzene-sulfonate/besylate)、硫酸氫鹽、亞硫酸氫鹽、溴 化物、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、氯化物、 氯苯甲酸鹽、檸檬酸鹽、環己胺磺酸鹽、肉桂酸鹽、二葡 糖酸鹽、磷酸二氫鹽、二硝基苯曱酸鹽、十二烷基硫酸鹽、 乙烷磺酸鹽、曱酸鹽、甘醇酸鹽、反丁烯二酸鹽、半乳糖 二酸鹽（來自黏液酸）、半乳糖醛酸鹽、葡糖庚酸鹽、葡糖 酸鹽、麩胺酸鹽、甘油磷酸鹽、半丁二酸鹽、半硫酸鹽、

S 68 201206429 庚酸鹽、&酸鹽、馬尿酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸 鹽、2-羥基-乙烷磺酸鹽、碘化物、羥乙基磺酸鹽 (isetlnonate )、異丁酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、蘋果酸鹽、 順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、杏仁酸鹽、偏填酸鹽、甲烧續 酸鹽、曱基笨曱酸鹽、磷酸氫鹽、2_萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、 硝酸鹽、草酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸鹽、果凍酸鹽、過氧硫 酸鹽、苯乙酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、膦酸鹽、鄰苯二 甲酸鹽，但此不表示限制。可形成兩種類型鹽或較佳使用 離子交換樹脂技術相互轉化。 此外’式I化合物之鹼鹽包括鋁鹽、銨鹽、鈣鹽、銅鹽、 鐵（III)鹽、鐵（II)鹽、鋰鹽、鎂鹽、錳（ΙΠ)鹽、錳（π)鹽、钟 鹽、鈉鹽及鋅鹽，但此不意欲表示限制。在上述鹽中，較 佳為銨鹽；鈉及鉀之鹼金屬鹽；以及鈣及鎂之鹼土金屬鹽。 衍生自醫藥學上可接受之無毒有機鹼的式I化合物之鹽包 括以下各物之鹽：一級胺、二級胺及三級胺、經取代胺（亦 包括天然存在之經取代胺）、環胺及鹼性離子交換樹脂，例 如精胺酸、甜菜鹼、咖啡鹼、氯普魯卡因（chloroprocaine )、 膽鹼、N，N，-二苯曱基-乙二胺（苄星）、二環己胺、二乙醇 胺、二乙胺、2-二乙基-胺基-乙醇、2-二曱基-胺基_乙醇、 乙醇胺、乙二胺、N-乙基嗎琳、N-乙基-α底α定、還原葡糖胺、 葡糖胺、組胺酸、海巴明（hydrabamine )、異丙胺、利多卡 因（lidocaine )、離胺酸、葡曱胺（N-甲基-D-還原葡糖胺）、 嗎琳、派口井、α底°定、多元胺樹脂、普魯卡因、β票吟、可可 豆驗、三乙醇胺、三乙胺、三曱胺、三丙胺及參（經基-曱基）.

69 S 201206429 甲胺（緩血酸胺），但此不意欲表示限制。 含有驗性含&基團之本發明式I化合物可使用諸如以 下之試劑四級銨化：（C!-C4)烷基鹵化物，例如曱基、乙基、 異丙基及第三丁基之氣化物、溴化物及碘化物；硫酸二 (C1-C4)烧基酯’例如硫酸二曱酯、硫酸二乙酯及硫酸二戊 酯；（C ! 0-C ! 8)烷基鹵化物’例如癸基、十二烷基、月桂基、 十四烧基及十八烷基之氣化物、溴化物及碘化物；及芳基 -(CVC：4)烧基鹵化物，例如苯甲基氣及苯乙基溴。可使用該 等鹽製備水溶性及油溶性式I化合物。 較佳的上述醫藥鹽包括乙酸鹽、三氟乙酸鹽、苯磺酸 鹽（besylate)、檸檬酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡糖酸鹽、半丁 二酸鹽、馬尿酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、羥乙基磺酸鹽、 杏仁酸鹽、葡甲胺、硝酸鹽、油酸鹽、膦酸鹽、特戍酸鹽、 磷酸鈉、硬酯酸鹽、硫酸鹽、磺基水揚酸鹽 '酒石酸鹽、 硫代蘋果酸鹽、曱苯續酸鹽及緩血酸胺，但此不意欲表示 限制》 藉由使自由鹼形式與足量所要酸接觸從而以習知方式 形成鹽來製備鹼性式（I )化合物之酸加成鹽。可藉由使鹽 形式與鹼接觸且以習知方式分離自由鹼來再生自由鹼。自 由驗形式與其相應鹽形式在某些物理性質方面在一定程度 上不同，諸如於極性溶劑中之溶解度；然而，就本發明而 言’該等鹽在其他方面與其各別自由鹼形式相當。 如所提及’式I化合物之醫藥學上可接受之鹼加成鹽係 用金屬或胺形成’諸如驗金屬及驗土金屬或有機胺。較佳

S 70 201206429 金屬為鈉、鉀、鎂及鈣。較佳有機胺為N，N，_二苯甲基乙二 胺、氣普魯卡因、膽鹼、二乙醇胺、乙二胺、N_甲基_d_還 原葡糖胺及普魯卡因。 藉由使自由酸形式與足量所要鹼接觸從而以習知方式 形成I來製備酸性式I化合物之驗加成鹽。可藉由使鹽形式 與酸接觸以習知方式分離自由酸來再生自由酸。自由酸 形式與其相應鹽形式在某些物理性質方面在一定程度上不 同，諸如於極性溶劑中之溶解度；然而，就本發明而言， 該等鹽在其他方面與其各別自由酸形式相當。 若式（I)化合物含有超過一個能夠形成此類型醫藥學 上可接受之鹽的基團，則式Ϊ亦涵蓋多重鹽。典型多重鹽形 式包括例如酒石酸氫鹽、二乙酸鹽、二反丁烯二酸鹽、二 葡甲胺鹽、二磷酸鹽、二鈉鹽及三鹽酸鹽，但此不意欲表 示限制。 關於上文所述’可見術語「醫藥學上可接受之鹽 (pharmaeeutically acceptable salt)」結合本發明應視為意謂 活性成分包含呈其鹽之一的形式的式T化合物，詳言之此鹽 形式與活性成分之自由形式或先前所使用之活性成分之2 何其他鹽形式相比，是否賦予活性成分以改良之藥物動力 學性質。活性成分之醫藥學上可接受之鹽形式亦可首次使 此活性成分具有其先前不曾具有之所要藥物動力學性質， 且甚至可對此活性成分在其體内治療功效方面之藥物動力 學具有積極影響。 式（I )化合物由於其分子結構而可為手性，且因此可 71 201206429 以各種對映異構形式存在。其可因此以外消旋或光學活性 形式存在。 因為本發明化合物之外消旋物或立體異構體之醫藥活 性可能不同，所以可能需要使用對映異構體。在此等情況 下’最終產物或甚至中間物可藉由熟習此項技術者已知的 =物理手段分離成對映異構化合物’或甚至依原樣用 於合成。 在外消旋胺的情況下，藉由與光學活性解析劑反應自 昆合物形成非對映異構體。適合解析劑之實例為光學活性 :二如酒石酸、：乙酿基酒石酸、二苯甲酿基酒石酸、 酉夂翱果酸、乳酸、適合义保護胺基 酿基捕《或Ν·苯《基脯胺酸）或各種光學 2 =?形式，藉助於光學活性解析劑(例= 苯甲酿基苯基甘胺酸、三乙酸纖維素或 物之其他衍生物或經手㈣生化之甲基 聚合物）進行層析對映異構體解析。用於此目的之適^ 提劑為水性或醇溶劑混合物， q洗 比率為82:15:3。 物#如己说/異丙^乙腈，例如 此外，本發明係關於式I及相關式之化合物之用途，盆 可與至少一種其他藥物活性成分組合，較佳為用於:、 劑，諸如干擾素，例：:乙克拉 較佳為干擾素t及/或盘 聚乙二醇化干擾素， 調節劑組合，例如芬 物成與免疫 戈莫仏（Flng〇limod )、環孢靈 72 201206429 (cyclosporins )、雷帕黴素（rapamycins )或子囊黴素 (ascomycins )，或其免疫抑制類似物，例如環孢靈A、環孢 靈 G、FK-506、ABT-281、ASM981、雷帕黴素、40-0-(2-羥基乙基）-雷帕黴素等；皮質類固醇、環磷醯胺 (cyclophosphamide )、硫唑嘌呤（azathioprene )、胺曱葉酸 (methotrexate )、來氟米特（leflunomide )、咪唾立賓 (mizoribine )、黴紛酸（mycophenolic acid )、黴酌·酸嗎淋乙 酯（mycophenolate mofetil )、15-去氧史帕胍淋 (15-deoxyspergualine )、戊酸二氟可龍（diflucortolone valerate )、二氟潑尼酯（difluprednate )、二丙酸阿氣米松 (Alclometasone dipropionate )、安西奈德（amcinonide )、安 。丫 °定（amsacrine )、天冬醯胺酶（asparaginase )、硫 °坐嗓吟 (azathioprine )、巴利昔單抗（basiliximab )、二丙酸倍氯米 松 (beclometasone dipropionate ) 倍 他米松 (betamethasone )、乙酸倍他米松（betamethasone acetate )、 二丙酸倍他米松（betamethasone dipropionate )、倍他米松 填酸納（betamethasone phosphate sodique )、戊酸倍他米松 (betamethasone valerate )、亞丁 皮質醇（budesonide )、卡托 普利（captopril)、鹽酸氮芥（chlormethine chlorhydrate )、 克拉屈濱（cladribine )、丙酸氯貝皮質醇（ci〇betasol propionate )、乙酸可體松（cortisone acetate )、可體伐唾 (cortivazol )、環磷醯胺、阿拉伯糖基胞嘧啶（cytarabine )、 達利珠單抗（daclizumab)、更生黴素（dactinomycine)、地 奈德（desonide )、去經米松（desoximetasone )、地塞米松 73 £ 201206429 (dexamethasone )、乙酸地塞米松（dexamethasone acetate )、 異煙酸地塞米松（dexamethasone isonicotinate )、地塞米松 間續基苯甲酸納（dexamethasone metasulfobenzoate )、磷酸 地塞米松（dexamethasone phosphate )、第三丁基乙酸地塞 米松(dexamethasone tebutate) ' 乙酸二氣松(dichlorisone acetate )、鹽酸小紅每（doxorubicine chlorhydrate )、鹽酸表 柔比星（epirubicine chlorhydrate )、氯奈德（fluclorolone acetonide )、乙酸氟氫可的松（fludrocortisone acetate )、氣 氫縮松（fludroxycortide )、特戊酸氟米松（flumetasone pivalate)、氟尼縮松（flunisolide)、氟輕松（fluocinolone acetonide )、乙酸氟輕松（fluocinonide )、IL 可龍 (fluocortolone )、己酸氟可龍（fluocortolone hexanoate.)、. 特戍酸氟可龍 （fluocortolone pivalate )、氟米龍 (fluorometholone )、乙酸氟潑尼定（fluprednidene acetate )、 丙酸氟替卡松（fluticasone propionate )、鹽酸吉西他濱 (gemcitabine chlorhydrate )、哈西奈德（halcinonide )、氫化 可體松（hydrocortisone )、乙酸氫化可體松（hydrocortisone acetate )、丁酸敷化可體松（hydrocortisone butyrate )、半丁 二酸氫化可體松（hydrocortisone hemisuccinate )、美法余 (melphalan )、甲潑尼松（meprednisone )、疏 °票吟 (mercaptopurine )、曱潑尼龍（methylprednisolone )、乙酸 甲潑尼龍（methylprednisolone acetate )、半丁二酸曱潑尼龍 (methylprednisolone hemisuccinate )、米索前列醇 (misoprostol )、莫羅單抗-cd3 ( muromonab-cd3 )、黴紛酸嗎 74 201206429 乙S旨、乙酸帕拉米松（pararnethasone acetate )、潑那。坐琳 (prednazoline)、潑尼松龍（prednis〇1〇ne)、乙酸潑尼松龍 (prednisolone acetate )、己酸潑尼松龍（prednisolone caproate )、潑尼松龍間確基苯曱酸鈉（pre(jnis〇i〇ne metasulfobenzoate )、潑尼松龍填酸納（prednis〇i〇ne phosphate sodique )、潑尼松（prednisone )、潑尼立定 (prednylidene )、利福黴素（rifampjcine )、利福黴素納 (rifampicine sodique )、他克莫司（tacr〇iimus )、特立氟胺 (teriflunomide )、沙立竇邁（thalid〇mide )、噻替派 (thiotepa)、特戊酸替可的松（tix〇c〇rt〇lpivalate)、曲安西 龍（triamcinolone )、半丁 二酸曲安奈德（triamcin〇1〇ne acetonide hemiSuccinate )、苯曲安奈德（triamcin〇1〇ne benetonide)、二乙酸曲安西龍（triamcin〇1〇ne diacetate)、 己酸曲安奈德（triamcinolone hexacetonide );免疫抑制單 株抗體’例如白血球受體單株抗體，例如MHC、CD2、CD3、 CD4、CD7、CD25、CD28、B7、CD40、CD45 或 CD58 或 其配位體，或其他免疫調節化合物，例如CTLA41 g，或其 他黏附分子抑制劑，例如mAbs，或低分子量抑制劑，包括 選擇素（Selectin)拮抗劑及VLA_4拮抗劑。較佳組成物具 有環孢鼓A、FK506、雷帕黴素或40-(2-羥基）乙基-雷帕黴 素及芬戈莫德。此等其他藥物（諸如干擾素口）可經例如皮 下、肌肉内或口服途徑伴隨或依序投藥。此等組成物可在 人類及獸醫學中用作藥物。 醫藥調配物可以每劑量單位包含預定量之活性成分的 75 201206429 劑量單位形式投藥。該單位可包含例如〇 5呵至lg、較佳 為lmg至700 mg、尤其較佳為⑽至⑽邮本發明化合 物視所治療之疾病病狀、投藥方法及患者之年齡、體重 及狀况而疋，或醫藥調配物可以每劑量單位包含預定量之 八成刀的劑量單位形式投藥。較佳劑量單位調配物為包 文所彳曰不之日劑量或部分劑量或其相應部分之活性 成=的劑量單位調配物。此外，此類型醫藥調配物可使用 醫樂技術中一般已知的方法來製備。 醫藥s周配物適宜經由任何所要適合方法投藥，例如經 口（包括經口腔或經舌下）、經直腸、經鼻、經局部（包括 經口腔、經舌下或經皮）、經陰道或腸胃外（包括皮下、肌 肉内、靜脈内或皮内土 ♦松丄 方法。S亥等调配物可使用醫藥技術 I:知的所有方法藉由例如組合活性成分與賦形佐 來製備。 適宜經口投藥之醫藥調配物可以獨立單位形式投華， ❹膠囊或鍵劑，·散劑或顆粒劑；於水性或非水性液體中 之^液或懸浮液；可^冷^4 、成，了食用發泡體或發泡體食物；或水包油 液體乳液或油包水液體乳液。 因而’例如，在以錠劑或膠囊形式經口投藥的情況下， 活性成分組分可與經口無毒且 劑組合，諸如乙醇、甘、，由… 接又之惰性賦形 粉碎至適合精細尺寸且將其;二類藉由將“物 劑(諸如可食用碳水化合物，諸如::::樂:： 來製備散劑。亦可存在調味劑、防腐劑、分合

S 76 201206429 藉由製備如上文所述之粉末混入物 不此Q物且用其填充成形明 膠滅來製造膠囊。在填充操作前， 心剛 ·τ向粉末混合物中添 加滑動劑及潤滑劑，諸如呈固體形式 組π/ % ι巧分散性矽酸、滑 石、硬脂酸鎮、硬脂酸妈或聚乙二醇。亦可添加崩解劑或 增溶劑，諸如瓊脂“炭酸妈或碳酸鈉，以改良服用膠囊後 之藥物可用率。 此外，必要時或必需時’亦可在混合物中併入適合黏 合劑、潤滑劑及崩解劑以及染料。適合的黏合劑包括澱粉、 明膠、天然糖類（諸如葡萄糖或心乳糖）、由玉米製造之甜 味劑、天然及合成橡膠（諸如阿拉伯膠、冑蓍膠或海藻酸 鈉）、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟及其類似物。用於此等 劑型中之潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲 酸鈉、乙酸鈉、氣化鈉及其類似物。崩解劑包括（但不限 於）澱粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、三仙膠及其類似 物。例如藉由製備粉末混合物，造粒或乾式壓製該混合物， 添加潤滑劑及崩解劑且壓製整個混合物以獲得錠劑來調配 鍵劑°藉由將以適合方式粉碎之化合物與如上文所述之稀 釋劑或驗且視情況與黏合劑（諸如羧曱基纖維素、海藻酸 鹽、明膠或聚乙烯吡咯啶酮）、溶解延緩劑（諸如石蠟）、 吸收促進劑（諸如四級鹽）及/或吸收劑（諸如膨潤土、高 嶺土或磷酸二鈣）—起混合來製備粉末混合物。可藉由用 黏合劑（諸如糖漿、澱粉糊、阿卡迪亞膠漿劑（acadia mucilage )或者纖維素或聚合材料之溶液）濕潤粉末混合物 且壓製其穿過篩網來將其造粒。作為造粒之替代方案，可 77 201206429 使=合物穿過製錠機，獲得具有不均-形狀之結塊， 、。鬼破碎开》成顆粒。可藉由添加硬脂酸、硬酯酸鹽、 /月石或礦物油來潤滑顆粒以免黏附至錠劑鑄造模^接著壓 製’左潤⑺之混合物以獲得錠劑。亦可將活性成分與自由流 動丨“生賦形劑組合，接著直接壓製以獲得錠劑而不進行造 粒或乾式壓製步驟。可存在由蟲膠密封層、糖或聚合材料 層及躐光澤層組成的透明或不透明保護層。可向此等塗料 中添加染料以能夠區分不同劑量單位。 可製備呈劑量單位形式之口服液體，諸如溶液、糖漿 及酏劑以使得指定量包含預定量之化合物《可藉由將化 合物溶解於具有適合調味劑之水溶液中來製備糖漿，而酏 劑係使用無毒醇媒劑製備。可藉由使化合物分散於無毒媒 劑中來調配懸浮液。亦可添加增溶劑及乳化劑（諸如乙氧 基化異硬脂醯基醇及聚氧乙烯山梨糖醇醚）、防腐劑、調味 劑添加劑（諸如薄荷油或天然甜味劑或糖精，或其他人造 甜味劑）及其類似物。 必要時，可將用於經口投藥之劑量單位調配物囊封於 微膠囊中。亦可以延長或延遲釋放之方式製備調配物，諸 如藉由以聚合物、蠟及其類似物塗佈或嵌埋顆粒材料。 式（I)化合物及其鹽、溶劑合物及生理學功能衍生物 及其他活性成分亦可以脂質體遞送系統形式投藥，諸如單 層小微脂粒（small unilamellar vesicles )、單層大微脂粒 (large unilamellar vesicles)及多層微脂粒（muitnameii訂 vesicles)。可由各種磷脂形成脂質體，諸如膽固醇、十八烷

S 78 201206429 胺或磷脂醯膽鹼。 式（I)化合物及其鹽、溶劑合物及生理學功能衍生物 及其他活性成分亦可使用單株抗體作為化合物分子所偶合 之個別載劑來遞送。化合物亦可偶合至作為目標藥物载劑 之可溶性聚合物。該等聚合物可涵蓋經棕櫚醯基取代之聚 乙烯吡咯啶酮、哌喃共聚物、聚羥基丙基曱基丙烯醯胺苯 紛聚經基乙基天冬醯胺苯紛或聚氧化乙稀聚離胺酸。此 外，化合物可偶合至一類適合達成藥物之控制釋放的可生 物降解聚口物，例如聚乳酸、聚兴_己内酯、聚羥基丁酸、 聚原l S曰、聚縮醛、聚二羥基哌喃、聚氰基丙烯酸酯及水 凝膠之交聯或兩性嵌段共聚物。 適於銓皮投藥之醫藥調配物可以獨立硬膏（plaster)形 式杈藥以便與接受者之表皮延長緊密接觸。因@，例如， 可藉由電離子读人、土 ^ . 、 逐入法（iontophoresis )自硬膏遞送活性成 般如 Pharmaceutical Research，3(6)，3 18 (1986)中所 述。 …I於局°卩投藥之醫藥化合物可調配成軟膏、乳膏、懸 +液' ;先劑、散劑 '溶液、糊劑、凝膠、喷霧、氣霧劑或 油狀物。 、對：治療眼睛或其他外部組織，例如口腔及皮膚，較 、。軟B或乳膏形式施用調配物。在調配成軟膏的情 兄下#性成分可與石蠟或水可混溶性乳膏基質一起使 用或者，可調配活性成分與水包油乳膏基質或油包 質以獲得乳膏。 79 201206429 適於局部施用於眼部之醫藥調配物包括滴眼劑，其中 活性成分溶解或懸浮於適合載劑、尤其水性溶劑中。 適於局部施用於口腔之醫藥調配物涵蓋口含鍵、片劑 及漱口水。 適於經直腸投藥之醫藥調配物可以栓劑或灌腸劑形式 投藥。 適於經鼻投藥之醫藥調配物（其中載劑物質為固體） 包含粒度例如在20微米至500微米範圍内之粗粒粉末其 以鼻吸之方式投藥，亦即經由鼻孔自保持在鼻子附近的含 有粉末之容器中快速吸入。供以經鼻喷霧或滴鼻劑形式投 藥之以液體作為載劑物質之適合調配物涵蓋於 活性成分溶液。. ;g由吸入投藥之醫藥調配物涵蓋精細微粒狀粉劑 s、霧齊I /、可藉由各種類型具有氣霧劑之加壓分配器、喷 霧器或吹入器來產生。 適於經陰道投藥$盤越π h _ 锻之醫樂调配物可以子宮托、棉塞、乳 膏、凝膠、糊劑、發泊辦+ 赞/包體或喷霧調配物形式投藥。 適於腸胃外投藥J._ 、之醫樂调配物包括水性及非水性無菌 >主射溶液，其句合於 ,, 氧化劑、緩衝劑、抑菌劑及溶質，藉

此可使調配物與待治瘵接A Ί± h ^ '又者之血液等張；及水性及非水 f生無菌懸夺液，其可白入“ 罝淑丨θ a 3憨洋介質及增稠劑。調配物可於 早劑I或多劑量容器中 ^ ^ ^ ^ 仅糸，例如密封之安瓿及小瓶，且 在冷凍乾燥（凍乾）狀能

Bp ^ 心丁儲存’因此僅需要在使用前立 即添加無菌载液，例如注射用水。 80 201206429 根據配方製備之注射溶液及懸浮液可由無菌散劑 粒劑及錠劑製備。 顆

頒然’除上文特別提及之組分以夕卜，調配物亦可包含 特定類型調配物技術中常見之其他試劑1而，例如適1 經口投藥之調配物可包含調味劑。 D 式I化合物及其他活性成分之治療有效量視許多因素 而定’包括例如動物之年齡及體重、需要治療之確切疾病 病狀及其嚴重程度、調配物之性質及投藥方法，且最終由 主治醫師或獸醫確定、然而’化合物之有效量一般在每天 每公斤接受者（哺乳動物）體重0.丨至100毫克之範圍内， 且尤其典型地在每天每公斤體重1至10毫克之範圍内。因 而，體重70公斤之成年哺乳動物之每天實際量通常為 至700 mg，其中此量可作為每天個別劑量投予，或通常以 每天一系列部分劑量（諸如2份、3份、4份、5份或6份） 形式投予，以使得總日劑量相同。其鹽或溶劑合物或生理 學功能衍生物之有效量可根據化合物本身之有效量之部分 來確定。 此外，本發明係關於一種治療罹患神經鞘胺醇卜磷酸 酿相關病症之個體的方法，該方法包含投予該個體以有效 量之式（I )化合物。本發明較佳係關於一種方法，其中神 經鞘胺醇1 -磷酸酯· 1相關病症為與過度活性免疫反應相關 之自體免疫病症或病狀。 此外，本發明係關於一種治療罹患免疫調節異常之個 體的方法，該方法包含投予該個體以有效治療該免疫調節

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S 201206429 pi、口 :广罝的式（1)化合物β本發明較佳係關於一種免疫調 卽異常為選自由以下組成之群的自體免疫疾病或慢性發炎 11疾病的方法：肌萎縮性側索硬化症（ALS )、全身性紅斑 狼瘡、慢性類風濕性關節炎、第I型糖尿病、發炎性腸病、 膽汁f生肝硬化症、葡萄膜炎、多發性硬化症、克羅恩氏病、 潰瘍性結腸炎、大水疱性天孢瘡樣病、類肉瘤病、牛皮癖、 自體免疫肌炎、韋格納氏肉芽腫病、魚鱗癬、葛瑞夫茲氏 眼病變及哮喘《此外，本發明係關於一種免疫調節異常為 骨髓或器官移植排斥反應或移植物抗宿主疾病的方法。此 外，本發明係關於一種免疫調節異常係選自由以下組成之 群的方法·器g或組織移植；由移植所引起之移植物抗宿 主疾病，自體免疫症候群，包括類風濕性關節炎、全身性 紅斑狼瘡、橋本曱狀腺炎（Hashim〇t〇，s thyr〇idiHs )、多發 性硬化症、重症肌無力、第：型糖尿病、葡萄膜炎、後葡萄 膜炎、過敏性腦脊髓炎、絲球體腎炎、感染後自體免疫疾 病（包括風濕熱及感染後絲球體腎炎）；發炎性及過度增殖 性皮膚病、牛皮癬、異位性皮炎、接觸性皮炎、濕疹性皮 炎、脂溢性皮炎、扁平苔癣、天疱瘡、大水疱性天孢瘡樣 病、大孢性表皮鬆解、蓴麻疹、血管性水腫、血管炎、紅 療' 皮膚嗜伊紅血球增多、紅斑狼瘡、痤瘡、斑充；角膜 結膜炎、春季結膜炎、與白塞氏病（Behcet，s disease )相關 之葡萄膜炎、角膜炎、疱疹性角膜炎、圓錐形角膜、角膜 上皮營養不良、角膜白斑、眼天疱瘡、莫倫氏潰瘍（M〇〇ren，s ulcer)、鞏膜炎、葛瑞夫茲氏眼病變、沃格特小柳_原田症 82 201206429 ，候群（v〇gt-K〇yanagi_Harada syndr〇me);類肉瘤病；花粉 匕敏症’可逆性氣★阻塞疾病、支氣管哮喘、過敏性哮喘、 内因性哮。而、外因性氣喘、塵埃性哮喘、慢性或頑固性哮 喘、晚期哮喘及氣管過度反應 '支氣管炎；胃潰癌；由缺 血性疾病及血检形成所致之血管損傷；缺金性腸病、發炎 陡腸病、壞死性小腸結腸炎、與熱灼傷相關之腸道病變、 腹腔疾病、直腸炎、嗜酸性腸胃《、肥大細胞增多症、克 羅心氏病、>貝瘍性結腸炎；偏頭痛、鼻炎、濕疹、間質腎 炎、古德帕斯徹氏症候群（G〇〇dpasture,ssyndr〇me)、溶血 性尿毒癥症候群、糖尿病性腎病、多發性肌炎、古立安白 瑞症候群（Guillain-Barre syndrome)、美尼爾氏病（Meniere's chsease)、多神經炎、多發性神經炎、單神經炎、神經根病 變、曱狀腺機能充進、巴塞多氏病（Based〇w,s disease )、 單純紅血球再生不良、再生障礙性貧血、再生不良性貧血、 特發性血小板減少性紫癜、自身免疫溶血性貧血、粒性白 血球缺乏症、惡性貧血、巨紅血球貧血、紅細胞發生不能 (anerythroplasia )、骨質疏鬆症、類肉瘤病、肺纖維瘤、特 叙性間質性肺炎、皮肌炎、尋常性白斑病、尋常性魚鱗廯、 光過敏性敏感、皮膚τ細胞淋巴瘤、慢性淋巴球白血病、 動脈硬化、動脈粥樣硬化、主動脈炎症候群、結節性多動 脈k、非炎性心肌病（my〇card〇sis )、硬皮病、韋格納氏肉 芽腫、休格連氏症候群（Sjogren’s syndrome )、肥胖症、嗜 k性筋膜炎、齒齦病變、牙周組織病變、槽骨病變、牙骨 質（substantia ossea dentis)病變、絲球體腎炎、男性型脫 83 201206429 髮或老年脫髮（藉由預防脫髮或提供毛髮催生（hair germination)及/或促進毛髮產生及毛髮生長）、肌肉萎縮 症、膿皮病及塞紮里氏症候群（Sezary,s syndr〇me )、艾迪 森氏病（Addison’s diSease)、在保藏、移植或缺血性疾病後 出現之局部缺血性再灌注損傷、内毒素性休克、假膜性結 腸炎、由藥物或輻射所致之結腸炎、缺血性急性腎功能不 全、慢性腎功能不全、由肺氧或藥物所致之毒素病、肺癌、 肺氣腫、白内障、鐵質沉著症（sider〇sis )、色素性視網膜 炎、老年性黃斑變性、玻璃體瘢痕（vitreal scardng )、角膜 鹼燒傷、皮炎性多形性紅斑、線狀IgA大皰性皮炎及水泥 皮炎、齒齦炎、牙周炎、敗血症、胰臟炎、由環境污染、 老化、癌發生、癌瘤轉移及高空病所致之疾病、由組織胺 或白二烯-C4釋放所致之疾病、白塞氏病、自體免疫肝炎、 原發性膽汁性肝硬化症、硬化性膽管炎、部分肝切除、急 性肝壞死、由毒素、病毒性肝炎、中風或缺氧所致之壞死、 B型病毒性肝炎、非A/非B型肝炎、肝硬化、酒精性肝硬 化、肝衰竭、爆發性肝衰竭、晚發型肝衰竭、慢性肝衰竭 急性發作（「acute_〇n_chr〇nic」 Hver fauure)、化學治療效 應增強、細胞巨大病毒感染、HCMV感染、AIDS、癌症、 老年癡呆、外傷及慢性細菌感染。 在一較佳具體實例中，本發明化合物用於治療多發性 硬化症’包括復發-緩解型多發性硬化症。 根據本發明實施例所測定’較佳的式（〗）化合物展現 與S1P i受體結合之幻小於約1 〇 μΜ，較佳小於約5 μΜ， 84 201206429 • 更佳小於約1 μΜ，且甚至更佳小於約0· 1 μΜ。式（I )化合 物最佳展現結合SIP,之Ki小於0.01 μΜ。 在下文中，將利用一些實施例說明本發明，該等實施 例不應視為限制本發明之範疇。 實施例 可藉由若干合成方法，使用溶液相及固相化學方案或 混合溶液及固相方案，自容易獲得之起始物質製備式（I ) 之枵二唑化合物。合成路徑之實例描述於下文之實施例 中。除非另外說明，否則以外消旋混合物形式獲得之式（I ) 及相關式之化合物可經分離以獲得經對映異構增濃之混合 物或純對映異構體。 除非另外報告，否則以下實驗描述中所使用之市售起 始物質賭自Aldrich或Fluka。 如下獲得下文所述之實施例中所提供的HPLC、NMR 及MS資料： HPLC資料·. 方法 A : HPLC 管柱：XbridgeTM C8 管柱 50 mmx4.6 mm，流速 2 mL/min ; 8 min 梯度自 0.1 % TFA/H20 至 0.07% TFA/ACN。 方法 B : HPLC 管柱：CHIRALCEL OJ-H，250x4.6 mm， 5 pm，30°C。梯度：己烷_/ISOH : 80/20 0.1% TEA，流速 1 mL/min 〇 方法 C : HPLC 管柱：Hichrom，Kromasil Eternity，2.5 ]1〇11(1；18，150><4.6 111111，流速1〇1[/111111;6.〇111111梯度自95:5 85 201206429 ([10 mM碳酸氫銨/H20]:MeCN)至5:95 ( [10 mM碳酸氫銨 /H20]:MeCN)，接著在 5:95( [10 mM 碳酸氫銨/H20]:MeCN) 下保持4.6分鐘。 方法 D : HPLC 管柱：Phenomenex Luna 5 μνη Cl 8 (2) > 100x4.6 mm (加保護濾筒），流速2 mL/min ; 3.5 min梯度 自 95:5( [0·1%( V/V)曱酸/H20]:[〇.1%( V/V)曱酸/MeCN]) 至 5:95( [0.1%( V/V)甲酸/H20]:[〇.1%( V/V)甲酸/MeCN])’ 接著在 5:95([0.1〇/〇(V/V)曱酸/H2O]:[0.1%(V/V)甲酸 /MeCN])下保持2分鐘。 方法 E : HPLC 管柱：Waters Sunfire 5 jitm C18，150χ4·6 mm(加保護濾筒），流速i mL/min; 30 min梯度自95:5( [0.1% (V/V)甲酸/H2O]:[0.10/o( V/V)甲酸/MeOH])至 0·1%( V/V) 甲酸/MeOH，接著在〇.1〇/0 ( V/V)曱酸/MeOH下保持5分 鐘。 方法 F : HPLC 管柱：Phenomenex，Gemini NX，3 jum C18’ 10〇χ4·6 mm;流速 2 mL/min ;3.5min 梯度自 95:5([10 niM碳酸氫銨/H20]:MeCN )至5:95 ( [ 10 mM碳酸氫銨 /H20]:MeCN)，接著在 5:95( [10 mM 碳酸氫銨/H20]:MeCN) 下保持1.5分鐘。 方法 G : HPLC 管柱：Waters Xterra MS 5 jLtm C18， 100χ4.6 mm (加保護渡筒），流速2 mL/min ; 3.5 min梯度 自 95:5 ( [10 mM 碳酸氫銨/H20]:MeCN)至 5:95 ( [10 mM 碳酸氫銨/H20]:MeCN )’接著在5:95( [10 mM碳酸氫銨/H20]: MeCN)下保持1.5分鐘。

S 86 201206429 - 方法Η:方法Η之梯度適用於HPLC管柱：Supelco，

Ascentis® Express C18 或 Hichrom Halo C18，2.7 /xm C18， 1 0〇χ4·6 mm。 方法 I : HPLC 管柱：Waters Xbridge 5 μιη C18，150x4.6 mm(加保護滤筒），流速1 mL/min ; 22 min梯度自95:5( [10 mM碳酸氫銨/H20]:Me0H)至MeOH，接著在MeOH下保 持4分鐘。 方法 J : HPLC 管柱：Chiralpak 1C，5 jLtm，25〇x4.6 mm (Chiral Technologies)，流速 1 mL/min;等強度己烷-EtOH -TFA-DEA 70:30:0.1:0.1。 方法 K: HPLC 管柱：Chiralpak OJH，5 μιτι, 250χ4_6 mm (Chiral Technologies )，流速 1 mL/min ;等強度己烧 -EtOH-TFA 97:3:0.1。 方法 L : HPLC 管柱：Chiralpak AD-RH，5 μπι，150χ4.6 mm ( Chiral Technologies)，流速 1 mL/min，40°C ;等強度 緩衝液 pH 2，0.1 M KPF6-ACN 65:35。 方法 M : HPLC 管柱：Chiralpak OD-RH，5 /im，150χ4·6 mm ( Chiral Technologies )，流速 1 mL/min ;等強度缓衝液 pH 2，0·1 M HC104/NaC104_ACN 60:30。 所有方法均為UV偵測（maxplot)。 質譜： 方法 A : LC/MS Waters ZMD (ESI); GC/MS : GC Agilent 6890N & MS Agilent 5973 ° 方法 B: UPLC/MS·· Waters Acquity，管柱 Waters Acquity 87 201206429 UPLC BEH C18 1.7 m 2.1x50 mm，條件：溶劑 A ( 10 mM 乙酸銨/水+5% ACN)，溶劑B ( ACN)，梯度：5% B至100% B 經 3 min，UV 偵測（PDA，230-400 nm)及 MS 偵測（SQ 偵測器，土ESI模式，錐孔電壓30 V )。 1H-NMR 資料： 除非另外報告，否則為Bruker DPX-300 MHz。 製備型HPLC純化： 除非另外報告，否則用裝備管柱®PrepMS C18 ( 10 m， 50x300 mm)之 HPLC Waters Prep LC 4000 系統進行製備型 HPLC純化。所有HPLC純化均以ACN/H20或ACN/H20/TFA (0.1%)之梯度進行。 質量導向型自動分取儀（MD Autoprep )純化： 除非另外報告，否則用裝備Sunfire Prep C18 OBD管柱 (1 9x 100 mm，5m)之質量導向型自動純化（mass directed autopurification ) Fractionlynx (來自 Waters )進行製備型 HPLC 純化。所有 HPLC 純化均以 ACN/H20 或 ACN/H20/HC00H ( 0.1%)之梯度進行。 利用單模式微波反應器 Emrys™ Optimiser 或 Initiator™ Sixty (來自 Biotage)或 Explorer (來自 CEM) 進行微波化學反應。 一般程序： 一般程序1:形成醯胺肟部分之一般程序 向腈衍生物（1當量）於EtOH ( 1至5 mL/mmol腈衍 生物）中之溶液中添加50% NH2OH水溶液（5當量）。在室 88 201206429 ， 溫至80°c範圍内之溫度下攪拌所得混合物1至72小時。在 預期化合物沈澱的情況下，濾出沈澱物且用適當溶劑（諸 如EtOH、iPrOH或水）洗滌，接著在減壓下乾燥，獲得預 期醯胺两衍生物。在所有其他情況下，在減壓下濃縮反應 混合物’用適當溶劑（諸如水或iPr〇H )稀釋，直至沈澱。 漉出沈殿物且用適當溶劑（諸如iPr〇H或水）洗條，接著 在減壓下乾燥，獲得預期醯胺肟衍生物。當不發生沈澱時， 將經濃縮之混合物溶解於EtOAc及水中，用水（兩次）及 鹽水（兩次）洗滌有機層，接著經MgS〇4脫水，過濾且在 真空下濃縮，獲得預期醯胺肟衍生物。 一般程序2:形成醯胺肟部分之一般程序 向猜衍生物（1當量）於EtOH ( 1至5 mL/mmol腈衍 生物）中之溶液中添加NH2〇H.HCl (丨」當量）及玢川（i .2 田里）。在室溫至80°c範圍内之溫度下攪拌所得混合物^至 2】時。在預期化合物沈澱的情況下，濾出沈澱物且用適 =冷劑（諸如EtOH、iPr0H或水）洗滌，接著在減壓下乾 燥:獲得預期醯胺肪衍生物。在所有其他情況下，在減壓 下辰縮反應混合物，用適當溶劑（諸如水或)稀釋， 沈澱。濾出沈澱物且用適當溶劑（諸如iPr〇H或水） 洗滌’接著在減壓下乾燥’獲得預期醯胺肪衍生物。當不 發生沈搬時’將經濃縮之混合物溶解於Et〇Ac及水中:用 =，（兩次）及鹽水（兩次）洗務有機層，接著經Μ0〇4脫 過;慮且在真空下濃縮，獲得預期酿胺月亏衍生物。 一般程序3:形成哼二唑環之一般程序 89 201206429 將DIEA ( 2.0至2.2當量）及HATU ( 1.0至1.1當量） 添加至在0C下冷卻的級酸衍生物（1當量）於無水DMF ( 4 mL/mmol羧酸衍生物）中之溶液中。在〇〇c下授拌所得混合 物持續5至3 0分鐘之時段。接著，添加呈純形式或d μ F 溶液（2 mL/mmol醯胺肟衍生物）形式之醯胺肟衍生物（1 〇 至1.2當量）。在0 C或室溫下授拌所得混合物持續3〇分鐘 至1 8小時之時段。用適當溶劑（諸如Et2〇、MTBE或EtOAc ) 稀釋反應混合物’接著用水及鹽水洗滌。萃取水層一次。 合併有機層，脫水（MgS〇4或Na2S04)，且在減壓下移除溶 劑。用曱苯（6 mL/mmol羧酸衍生物）及吡啶（2 mL/mm〇1 羧酸衍生物）或用ACN ( 8.5 mL/mmol羧酸衍生物）溶解 殘餘物。在8 0 C至回流之溫度下加熱所得混合物持續丨2小 時至72小時之時段。用適當溶劑（諸如Et2〇、MTBE或 EtOAc )稀釋反應混合物’接著用水及鹽水洗滌。萃取水層 一次。合併有機層，脫水（MgS〇4或Na2S04)，且在減壓下 蒸發溶劑。藉由急驟層析法或沈澱加以純化，獲得預期口号 二°坐衍生物。 一般程序4:形成ρ号二唾環之一般程序 將DIEA ( 2.0至2.2當量）及HATU ( 1.0至1.丨當量） 添加至在ot下冷卻的羧酸衍生物（丨當量）於無水DMF ( 4 mL/mmol羧酸衍生物）中之溶液中。在下搜拌所得混合 物持續5至30分鐘之時段。接著，添加呈純形式或DMF 溶液（2 mL/mmol醯胺肟衍生物）形式之醯胺肟衍生物（i 〇 至1.2當量）^在〇。〇或室溫下攪拌所得混合物持續3〇分鐘

S 90 201206429 至18小時之時段。用適當溶劑（諸如Et20、MTBE或EtOAc) 稀釋反應混合物’接著用水及鹽水洗務。萃取水層一次。 合併有機層’脫水（MgS〇4或Na2S〇4)，且在減壓下移除溶 劑。用ACN ( 8.5 mL/mmol羧酸衍生物）溶解殘餘物。在 1 5 0 °C下，在M W照射下加熱所得混合物3 〇分鐘。用適當 溶劑（諸如Et20、ΜΤΒΕ或EtOAc)稀釋反應混合物，接 著用水及鹽水洗滌。萃取水層一次。合併有機層，脫水 (MgS〇4或NaaSO4 )，且在減壓下蒸發溶劑。藉由急驟層析 法或沈滅加以純化，獲得預期U号二。坐衍生物。 一般程序5:形成D号二唑環之一般程序 在被波谷器中添加敌酸衍生物（1當量）、醯胺將衍生 物（1.1當S )、1-乙基-3-(3-二曱基胺基丙基）碳化二亞胺鹽 酉夂鹽（1.4當量）及CH3CN ( 1 mL/mmol羧酸）。在室溫下 攪拌反應混合物2至1 8小時。接著，添加吡啶（〇 3 mL/mm〇1 羧酸）且在150°C下在微波照射下加熱混合物3〇分鐘。在 真空中移除溶劑且使殘餘物分配在DCm與h20之間。分離 各層’用.KUO洗滌有機層，且使混合物穿過疏水性玻璃料。 在真空中移除 >谷劑’且藉由再結晶、沈澱或急驟層析法純 化殘餘物，得到預期卩号二唑衍生物。 一般程序6:苯甲醇氧化 將苯甲醇衍生物（1當量）溶解於二口号烷（7 mL/mmol 苯曱醇）中且添加二氧化錳（8當量）。在7〇。。下加熱混合 物隔夜且在真空中移除溶劑。用汽油/乙醚混合物濕磨殘餘 物，獲得相應苯甲醛衍生物。 91 201206429 一般程序7:用胺基酸衍生物還原胺化 將氰基硼氫化鈉（1.1當量）添加至醛衍生物（i當量； 0.25 mmol)及適當胺基酸（2當量）於1:1甲醇/DCM混合 物（24 mL/mmol )及乙酸（2.5當量）中之溶液中。在室溫 下搜拌混合物隔夜，且在正壓力下經由玻璃料過減。向淚 液中添加曱越（37%水溶液；1〇當量），接著添加Ac〇h直 至pH值在3至4範圍内。向所得混合物中添加氰基硼氫化 納（5當量）’搜拌混合物1 6小時’在真空中移除溶劑且藉 由逆相HPLC純化殘餘物。 一般程序8:第三丁酯水解 向第二丁醋衍生物（1當量）中添加於二[j号烧（4N， 20至50當量）中之鹽酸，且在室溫下攪拌反應混合物i小 時至24小時。接著將溶液蒸發至乾燥，且藉由自諸如 CHaCN、DCM、MTBE或EtzO之溶劑中沈澱來純化殘餘物， 得到標題化合物。當不發生沈殿時，藉由逆相或質量 導向型自動分取儀純化標題化合物。 一般程序9:甲酯或乙酯水解 向於MeOH或EtOH ( 5 mL/mmol酯衍生物）或 MeOH/THF 1:1 或 EtOH/THF 1:1 ( 5 mL/mmol 酯衍生物）.之 溶液中的曱酯或乙酯衍生物（丨當量）中添加氫氧化鈉（5M， 5 s量）且在室溫下攪拌反應混合物1小時至24小時。將 冷液蒸發至乾燥。用EtOAc溶解殘餘物且用1 n HC1水溶液 及鹽水洗滌。將有機層脫水（MgS〇4 ),且在真空下濃縮， 得到標題化合物。

S 92 201206429 • 一般程序1〇:用·-級胺及二級胺取代溴甲苯 向溴甲苯衍生物（i當量）於CH3cn或DMF ( 1.5至3 mL/mmol溴甲苯衍生物）中之溶液中添加k2C03或NaHC03 (2至3當量）及一級胺或二級胺（丨2當量）。在室溫或6(rc 下攪拌反應混合物隔夜。在真空下移除溶劑，且用水稀釋 所得混合物，用EtOAc萃取，用飽和NaCl溶液洗滌，經 MgS〇4脫水且在真空下濃縮。藉由急驟層析法或再結晶加 以純化，獲得預期苯甲胺衍生物。 一般程序11 :苯甲胺之取代 向苯曱胺衍生物（1當量）於CH3CN或DMF ( 1.5至3 mL/mmol苯甲胺衍生物）中之溶液中添加K2C〇3或NaHc〇3 (2至3备里）及諸如溴乙酸烷酯衍生物之親電子試劑（^ 2 當量）。在室溫或6(TC下攪拌反應混合物隔夜。在真空下移 除命劑，且用水稀釋所得混合物，用Et〇Ac萃取，用飽和 NaC丨溶液洗縣，經MgS〇4脫水且在真空下濃縮。藉由急驟 層析法或再結晶加以純化，獲得預期苯曱胺衍生物。 一般程序12 : N-氧化物製備 四一將式（I)化合物（1當量）溶解於DCM(i〇mL/mm〇i :坐何生物）中。在0C下’添加3'氣過氧苯曱酸。當 ^在室溫下攪拌混合物1小時。接著蒸發，且利用質量 導向型自動分取儀純化粗產物，得 于W預期N-氧化物衍生物。 中間物1:2，_甲基_2-(三氟甲基）聯苯+甲酸 93 201206429

步驟1 : 4-溴-3-(三氟甲基）苯甲酸曱酉旨 在室溫下經15分鐘向4-漠-3-(三氟甲基）苯曱酸 (Acceledev 000625，15 g ; 56 mmol )於 MeOH ( 300 mL ) 中之懸浮液中逐滴添加亞硫醯氯（16 mL ; 223 mmol )。在 室溫下攪拌反應混合物12小時。濃縮溶劑且用EtOAc ( 500 mL )稀釋粗殘餘物。用飽和NaHC03水溶液（200 mL )、水 (200 mL)、鹽水（200 mL)洗滌有機層，經MgS04脫水且 濃縮，得到橙色固體狀標題化合物（14.8 g，94%)。4 NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.26 (m, 1H), 8.14-8.13 (m, 2H)} 3.93 (s，3H)。HPLC (方法 A) Rt 4.71 min (純度：99.0%)。 步驟2 : 2’-甲基_2·(三氟甲基）聯苯_4_甲酸甲醋 在N2氛圍下，將4-溴-3-(三氟甲基）苯曱酸曱酯（6 g ; 21 mmol )、鄰甲苯基硼酸（3.2 g ; 23 mmol )、碳酸鉀（14.7 g ; 106 mmol)、肆（三苯膦）鈀（〇) ( 2 5 g ; 2.12 mm〇1)溶解 於曱苯（30 mL)及水（30 mL)中。用真空淨化反應混合 物5分鐘，接著用&脫氣，接著回流3小時。使反應混合 物冷卻至室溫，經矽藻土墊過濾且用甲苯（2〇〇mL)洗滌。 濃縮濾液，得到棕色油狀物，將其溶解於Et〇Ac ( 2〇〇 mL ) 中。用飽和NaHC〇3水溶液（50 mL )、水（5〇 mL)及鹽水 (50 mL )洗滌有機層，經MgS〇4脫水且濃縮，得到棕色油 狀標題化合物（6.4 g，定量）。HPLC (方法A) Rt 5·33 min (純 s 94 201206429 度：60.0%)。 步驟3 : 2’-曱基_2-(三氟甲基）聯苯_4-曱酸 在室溫下’用氫氧化鈉（1〇 2 mL ; 5 Μ ; 51 mmol)處 理2 -曱基-2-(二氟曱基）聯苯_4_甲酸甲酯（5 g ; 17 mm〇1) 於EtOH ( 150 mL )中之溶液。在6〇。〇下攪拌反應混合物2 小時。濃縮反應混合物，獲得棕色固體，將其溶解於水（3〇〇 mL· )中且用EtOAc洗滌水相兩次。用HC1 cc將水相酸化至 pH 2，接著將其濃縮直至沈澱（一半體積）。過濾懸浮液， 得到米色固體狀標題化合物。iH NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 13.55 (br s, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.26-8.23 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.51-7.48 (d, J = 7.9 Hz 1H), 7.37-7.12 (m, 4H), 1.99 (s, 3H)。LC/MS (方法 A): 278.9 (M-H)·。HPLC (方法 A) Rt 4_57 min (純度：98.7%)。 中間物2 : 2’-(二氟甲基）_2·甲基聯苯_4-甲酸

步驟1 : 2’-(二氟甲基）_2_甲基聯苯-4-甲酸曱醋 在Ν2氛圍下，製備3_甲基_4_(4,4,5,5_四曱基 氧硼口東-2-基）苯甲酸曱酯（combiblocks ΡΝ-8756，1·9 g， 6.7 mmol )、1-漠-2-二氟甲基-苯（Fiuorochem 023878’ 1.7 g， 8· 1 mmol )、氟化鉋（3.1 g，20 mmol)及 PdCl2(PPh3)2 ( 142 mg ’ 0.20 mmol)於二 d号烷（20 mL)及水（l〇 mL)中之混 95 201206429 合物。在90°C下加熱所得混合物2小時。用ΜΤΒΕ ( 60 mL ) 稀釋反應混合物’接著用水（2 x 5 0 mL )及鹽水（5 〇 mL ) 洗務。用MTBE ( 50 mL )萃取水層。合併有機層，脫水 (MgSCU )，且在減壓下濃縮《藉由急驟層析法（二氧化矽、 DCM/庚烷）純化後，獲得無色油狀標題化合物（1 4 g， 76%)。HPLC (方法 A) Rt 5.0 min (純度：99.1%)。4 NMR (DMSO-d6, 300 ΜΗζ) δ 7.93 (s，1H)，7.84 (dd，J = 7.9, 1.4 Hz， 1H), 7.75 (m, 1H), 7.67-7.56 (m, 2H), 7.28 (m, 2H), 6.55 (t5 J =55 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H)，2.06 (s，3H)。 步驟2 : 2'-(二氟甲基）-2-甲基聯苯-4-甲酸 將 5 N NaOH 水溶液（1.5 mL ’ 7.5 mmol )添加至 2，-(二 氟曱基）-2-曱基聯苯-4-曱酸甲酯·（ 1.4 g，5.1 mmol)於EtOH (15 mL )中之溶液中。在70°C下加熱所得混合物1小時，

接著蒸發。將殘餘物溶解於水（25 mL )及5N HC1水溶液 (3 mL)中，接著用MTBE( 2x50 mL)萃取。用鹽水（25 mL) 洗滌有機層，合併，脫水（MgS〇4)且減壓濃縮，獲得白色 粉末狀標題化合物（Ug，93%>HPLC (方法A)Rt4.2min (純度：98.9%)。LC/MS (方法 B): 261.1 (M-H)'。iH-NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 13.1 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.82 (dd, J =7.9, 1.4 Hz, 1H), 7.74 (m, 1H), 7.66-7.55 (m, 2H), 7.26 (m, 2H)，6.55 (t，J = 55 Hz，1H)，2.05 (s，3H)。 中間物3 : 2-(甲氧基甲基）-2，-甲基聯苯_4-甲酸

S 96 201206429

步驟1 . 4 -漠- 3- (漠曱基）笨甲酸甲酉盲 在N2氛圍下，向4-溴-3-曱基苯曱酸甲酯（Aldrich 532878，50 g ; 218 mmol)於 CHC13 ( 1 L)中之溶液中添 加整份 NBS ( 47 g ; 262 mmol )及 α，α，_偶氮二異丁腈（720 mg ; 4_4 mmol >在70°C下攪拌混合物2天。將反應混合物 冷卻至室溫且添加水（500 mL)。依序用50 mL NaHC03飽 和溶液、水（340 mL)及鹽水（500 mL)洗滌有機層，經 MgSCU脫水且濃縮，得到黃色固體狀標題化合物。用戊烷 (2x500 mL)洗滌，得到黃色固體狀標題化合物。NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.24 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.88-7.82 (m5 2H)，4.87 (s，2H)，3.91 (s，3H)。HPLC (方法 A) Rt 4.44 min (純度：97_9%)。 步驟2 : 4-溴-3-(甲氧基甲基）苯甲酸曱醋 使4-溴-3-(溴曱基）苯曱酸甲酯（38 g ; 122 mmol)於 MeOH ( 1 · 1 L )中之溶液回流4天。濃縮後，使混合物分配 在 EtOAc ( 500 mL)與水（200 mL)之間。用 5% NaHC03 水溶液（200 mL)、鹽水（200 mL)洗滌有機層，經MgS04 脫水且濃縮，得到米色固體狀標題化合物（3〇 g，94% )。 NMR (DMSO-d6} 300 MHz) δ 8.06-8.05 (m, 1Η), 7.83 (m, 2H), 4.54 (m，2H)，3.90 (s，3H)，3.45 (s，3H)。LC/MS (方法 B): 227.2 (M-H)-。HPLC (方法 A) Rt 4.42 min (純度：93.0%)。 97 201206429 步驟3 : 2-(甲氧基甲基）-2·-甲基聯苯_4_甲酸甲醋 在N2氛圍下’將4-溴-3-(甲氧基甲基）苯曱酸甲酯（4〇 g ; 154 mmol)、鄰甲苯基硼酸（23 g ; mm〇1)、K2C〇3 (107 g ; 772 mmol)、肆（三苯膦）把（〇) ( i.8 g ; 15 mm〇1) 浴解於甲本（200 mL)及水（200 mL)中。用真空淨化反 應混合物’接著用n2脫氣，接著回流1小時。使反應混合 物冷卻至室溫，經石夕藻土塾過爐，且用Et〇Ac ( 1 L )洗務。 濃縮濾液，得到黃色油狀物，將其溶解於EtOAc ( 800 mL ) 中。用飽和NaHC03水溶液（250 mL)、水（25 0 mL)及鹽 水（250 mL )洗滌有機層，經MgS04脫水且濃縮，得到黃 色油狀標題化合物（42 g，定量），其不經進一步純化即使 用。HPLC (方法 a) Rt 5.34 min (純度：89.4%)。 步驟4 : 2-(甲氧基甲基）-2，-甲基聯苯-4-甲酸 在室溫下用NaOH ( 89 mL ; 5 Μ ; 445 mmol)處理2-(甲 氧基甲基）-2’-曱基聯苯-4-曱酸甲酯（40 g ; 148 mmol ; 1當 量）於EtOH ( 1.2 L)中之溶液。在60°C下攪拌反應混合物 1小時。將反應混合物冷卻至室溫且濃縮，獲得黃色固體， 將其溶解於水（800 mL)中且用EtOAc洗滌水相兩次。用 HC1 cc( 40 mL )將水相酸化至 pH 2，且用 EtOAc( 2x400 mL ) 進行萃取。用鹽水洗滌所合併之有機物，經MgS04脫水且 濃縮，得到黃色固體狀標題化合物（35 g，92% )。4 NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 6 12.99 (br s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.92-7.89 (m，1H)，7.33-7.22 (m，4H)，7.10-7.08 (m，1H), 4·11 (m，2H)，3.18 (s，3H)，1.99 (s，3H)。LC/MS (方法 B): 98 201206429 • 255.2 (M_H)-。HPLC (方法 A) Rt 4·52 min (純度：96.4%)。 中間物4 : 2-甲基_2，_(三氟曱基）聯苯_4_甲酸

在A氛圍下’製備4_溴_3_曱基苯甲酸甲酯（2〇 g，87 mmol)、2-(三氟甲基）苯硼酸（24.9g，131 mmol)、碳酸鉀 (24 g，175 mmol)及二氯化雙（三環己基膦）纪（η) ( 65 mg , 0.1 mmol)於二卩等烧（2〇〇 mL )及水（50 mL )中之混合物。 在100°C下加熱混合物3小時。添加5N NaOH水溶液（100 mL )且在1 〇〇°C下再擾拌反應混合物1小時。在室溫下冷卻 反應混合物並移除水層《經由矽藻土墊過濾有機層，在減 壓下濃縮直至75 mL’用水（125 mL)稀釋且用MTBE( 2x200 mL· )洗滌。用5N HC1水溶液（25 mL )將水層酸化至pH 1 且用MTBE( 2x100 mL)萃取。合併有機層，脫水（Na2S04) 且經由石夕藤土墊過濾。濃縮溶液至1〇〇 mL，接著添加庚烷 (200 mL )。濃縮混合物至1〇〇 mL。濾出沈澱物且用庚烷沖 洗兩次’接著在減壓下乾燥，獲得白色粉末狀標題化合物 (22.5 g ’ 92%)。HPLC (方法 A) Rt 4.4 min (純度：1〇〇%)。 LC/MS (方法 B): 279.0 (M-Η)·。NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 13.0 (s, 1Η), 7.87 (m, 2H), 7.80 (dd, J = 7.9, 1.6 Hz, 1H), 7.75 (m，1H)，7.64 (m，1H)，7,34 (d，j = 7 6 Hz, 1H)，7.23 (d， J = 7.9 Hz，1H)，2.02 (s，3H) 〇 99 201206429 中間物5: 2-[{4-[胺基（羥基亞胺基）甲基】_2-氟笨甲 基}(甲基）胺基]丁酸第三丁酯

OH 步驟1 : 3-氟-4-[(曱基胺基）曱基]苯曱腈 在5°C至l〇°C下將4-氰基-2-氟-苯甲基溴（15 g，〇.07 mol )於無水THF ( 50 mL )中之溶液添加至40%曱胺水溶 液（40〇mL)中且攪拌5分鐘。用DCM萃取混合物，且使 有機層經NaaSCU脫水且在真空下濃縮，得到棕色液體狀標 題化合物（10 g，89%)。巾 NMR (DMSO-d6, 400 ΜΗζ) δ 7.77 (m，1Η)，7.68-7.61 (m，2Η)，3.71 (s，2Η)，2.24 (s，3Η)。 步驟2 : 2-[(2-氟-4-異氰基苯曱基）（甲基）胺基]丁酸第 三丁酯 按照一般程序11，以3-氟_4_[(甲基胺基）曱基]苯曱腈 及2-溴丁酸第三丁酯為起始物製備標題化合物。其以無色 液體形式分離（9.5 g，71% ) NMR (DMS〇_d6, 4〇〇 MHz) δ 7.80 (m, in), 7.68 (m, lH)s 7.61 (t, J =7.4 Hz, 1H), 3.85-3.70 (dd, J = 14.9, 32.1 Hz, 2H), 3.08-3.04 (t, J = 7.6 Hz 1H), 2.19 (3H, S), 1.70-1.63 (m, 2H), 1.42 (s, 9H), 0.87-0.83 (t，J = 7·3 Hz, 3H) o 100 201206429 步驟3:2-[{4-[胺基（羥基亞胺基）曱基]-2-氟苯甲基}(甲 基）胺基]丁酸第三丁醋 按照一般程序2，以2-[(2-氟-4-異氰基苯甲基）（曱基） 胺基]丁酸第三丁酯為起始物製備標題化合物。其以白色固 體形式分離。4 NMR (DMSO-d6, 400 ΜΗζ) δ 9.72 (s，1H)， 7.49 (m, 1H), 7.39 (m, 2H), 5.85 (s, 2H), 3.77-3.62 (m, 2H), 3.04 (t, J =7.5 Hz, 1H), 2.19 (s, 3H), 1.61 (m, 2H), 1.44 (s, 9H)，0.85 (t, J =7.3 Hz，3H)。LC/MS (方法 A) 307.3 (M + H)+。HPLC (方法 A) Rt: 2.3 min (純度：98.2%)。 中間物6 : N-((lR)-l-{4-[胺基（羥基亞胺基）甲基〗苯基} 乙基）-D-丙胺酸甲酯

步驟1 :N-[(lR)-l-(4-氰基苯基）乙基]-丙胺酸甲醋及 N-[(lR)-l-(4-氰基苯基）乙基]-L-丙胺酸曱醋 向於DMF (34 mL)中之4-[(lR)l-胺基乙基）]苯曱腈 (Haoyuan Chemexpress > 3.4 g ； 23 mmol)中添力口碳酸氫鈉 (3.9 g ; 46 mmol)及 2-溴丙酸甲 g旨（2.8 mL ; 25 mmol)。 在75°C下攪拌反應混合物隔夜。向反應混合物中添加 EtOAc，且用H20洗滌有機相3次，且用鹽水洗務1次，接 著使有機層經MgS〇4脫水，過濾且濃縮。藉由急驟層析法 (EtOAc/庚烷梯度自5:95至25:75 )純化粗產物，得到白色 101 201206429 固體狀N-[(1R) 氰基苯基）乙基]-D-丙胺酸甲酯（第一 洗提化合物）（2.1 g，40%)及橙色固體狀N-[(lR)-l-(4-氰 基苯基）乙基]-L-丙胺酸曱酯（第二洗提化合物）（2.3 g， 43%)。 N-[(1R)-1-(4-氰基苯基）乙基]-D-丙胺酸甲酯： (DMSO-d6, 300 MHz) δ 7.78 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.51 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 3.75 (q, J = 6.3 Hz, 1H), 3.62 (s, 3H), 2.95-2.81 (m, 1H), 2.71-2.58 (m, 1H), 1.22 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.14 (d, J = 7.0 Hz，3H)。LC/MS (方法 B): 233.0 (M+H)+。HPLC (方 法 A) Rt 1.58 min (純度：70_7%)。 心[(11〇-1-(4-氰基苯基）乙基]-1^丙胺酸曱酯：\}\从^ (DMSO-d6, 300 MHz) δ 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.53 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 3.86 (q5 J = 6.1 Hz, 1H), 3.46 (s, 3H), 3.26-3.13 (m，1H)，2.53 (m，1H)，1.23 (d，J = 6.6 Hz，3H)，1.17 (d，J = 6.8 Hz，3H^LC/MS (方法 B): 233.0 (M + H)，n.d (M-H)°HPLC (方法 A) Rt 1.49 min (純度：72.4%)。 步驟2 : N-((lR)-i-{4_[胺基（經基亞胺基）甲基]苯基}乙 基）-D -丙胺酸甲酉旨 按照一般程序1，以N-[(lR)-l-(4-氰基苯基）乙基]-D-丙胺酸甲醋為起始物製備標題化合物。其以淺黃色油狀物 形式分離（2.3 g’ 93%)。咕 NMR (DMSO-d6, 3 00 ΜΗζ) δ 9.5 6 (s，1Η)，7.59 (d，j = 8 3 Hz，2H)，7 28 (d，j = 8 3 Ηζ，2Η)， 5.76 (s, 2H), 3.72-3.57 (m, 4H), 3.03-2.82 (m, 1H), 2.49-2.41 (m，1H)，1.21 (d，j = 6.6 Hz，3H)，1.13 (d，J = 7.1 Hz, 3H)。 102 201206429 LC/MS (方法 B): 266.1 (M + H)+。 中間物 7 : N-[(1R)-1_(4_« 某贫 I、 Η虱丞本基）乙基]-L-丙胺酸甲酯

按照一般程序卜以N-[(1R)小(4-氣基苯基）乙基].L 丙胺酸"旨（合成描述於中間物iir)為起始物製 備標題化合物。其以黃色油狀物形式分離（2i g，8〇%)。 'H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 9.57 (Sj ιΗ), 7.59 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.30 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.76 (s, 2H), 3.82-3.70 (mj 1H)，3.49 (s，3H)，3.26-3.13 (m，1H)，2,35-2.26 (m，1H)，1 23 (d, J = 6.6 Hz, 3H)，1.17 (d, J = 6.8 Hz，3H)。LC/MS (方法 A): 266.1 (M + H)+ 〇 中間物8 : N-((lS)-l-{4-[(羥基胺基亞胺基）甲基]苯基} 乙基）甘胺酸第三丁酯

手性 步驟1:『[(18)-1-(4-氰基苯基）乙基]甘胺酸第三丁醋 按照一般程序 11，以4-[(lS)-：l-胺基乙基）]笨甲猜 (Haoyuan Chemexpress )及溴乙酸第三丁酯為起始物製備標 103 201206429 題化合物。其以黃色油狀物形式分離（1.3 g，73。/。）。4 NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 7.78 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.51 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 3.81 (m, 1H)，3.00 (m, 2H)，2.45 (m，1H)，1.37 (s，9H)，1.24 (d，J = 6·6 Hz，3H)。LC/MS (方法 B): 233.0 (M + H)+。 步驟2:1^-((13)-1-{4-[(羥基胺基）（亞胺基）甲基]苯基} 乙基）甘胺酸第三丁醋 按照一般程序1，以N-[(lS)-l-(4-氰基苯基）乙基]甘胺 酸第三丁酯為起始物製備標題化合物，且以白色泡沫形式 分離（1.3 g，87%)。4 NMR (DMSO-d6, 300 ΜΗζ) δ 9.57 (s， 1Η), 7.60 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.28 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.76 (br s，2H)，3.73 (m，1H)，3.43 (m，1H)，3.01 (m，2H)，1.38 (s， 9H)，1.24 (d，J = 6.6 Hz，3H)。 中間物9: N-((lR)-l-{4-【（羥基胺基）（亞胺基）甲基】苯基} 乙基）甘胺酸第三丁酯

步驟1 : N-[(1R)-1-(4-氰基苯基）乙基]甘胺酸第三丁醋 按照一般程序11，以4_[(1R)_卜胺基乙基）]苯曱腈 (Haoyuan Chemexpress )及溴乙酸第三丁醋為起始物製備標 題化合物且以黃色油狀物形式分離。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 7.78 (d, J = 8.2 Hz, 2H)} 7.51 (d} J = 8.2 Hz, 2H), 104 201206429 3.82 (m, 1H), 3.00 (m} 2H), 2.47 (m, 1H), 1.37 (s, 9H), 1.24 (d，J = 6.6 Hz, 3H)。HPLC (方法 A) Rt 2.77 min (純度： 99.4%)。 步驟2 : N-((1R)-：i_{4_[(羥基胺基）（亞胺基）曱基]苯基} 乙基）甘胺酸第三丁醋 按照一般程序1，以N-[(ir)-1-(4-氰基苯基）乙基]甘胺 酸第三丁醋為起始物製備標題化合物，且以黃色油狀物形 式分離（800 mg，86%)。咕 NMR (DMSO-d6, 300 ΜΗζ) δ 9.57 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.28 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 5.76 (br s, 2H), 3.73 (m, 1H), 3.43 (m, 1H), 3.01 (m, 2H), 1.3 8 (s，9H)，1.24 (d, J = 6.6 Hz, 3H)。 中間物10 : N-((lS)-l-{4-[(羥基胺基）（亞胺基）甲基】苯 基}乙基）-D -丙胺酸甲輯

步驟1 . N-[(lS)-l-(4-氰基苯基）乙基]丙胺酸甲酯及 N-[(lS)-l-(4-氰基苯基）乙基]丙胺酸甲酉苣 向於DMF ( 15 mL)中之4-[(lS)-l-胺基乙基）]苯曱腈 (Haoyuan Chemexpress，：[ g; 6.8 mmol )中添加碳酸氫鈉（i 2 g ; 14 mmol)及 2-溴丙酸曱酯（0.84 mL ; 7 5 mm〇i)。在 75°C下攪拌反應混合物隔夜。添加Et0Ac，且用H2〇洗蘇 有機相3次’且用鹽水洗j條1次，接菩伸右她旺y 按f便有機層經MgSC^ 105 201206429 脫水，過濾且濃縮。藉由急驟層析法（EtOAc/庚烷梯度自 5:95至25:75 )純化粗產物，得到淺黃色固體狀N-[(1S)-1-(4-氰基苯基）乙基]-L-丙胺酸曱酯（第一洗提化合物）（480 mg; 30%)及黃色固體狀N-[(lS)-l-(4-氰基苯基）乙基]-D-丙胺酸甲酯（第二洗提化合物）（470 mg ; 30%)。 N-[(1S)-1-(4-氰基苯基）乙基]-L-丙胺酸甲酯： (DMSO-d6} 300 MHz) δ 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.51 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 3.74 (m, 1H), 3.61 (s, 3H), 2.93-2.81 (m, 1H), 2.64 (m, 1H), 1.21 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.13 (d, J = 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (方法 B): 233.1 (M+H)+。HPLC (方法 A) Rt 1.57 min (純度：79%)。 N-[(lS)-l-(4-氰基苯基）乙基]-D-丙胺酸甲酯：1ιΆ NMR (DMS0-d6j 300 MHz) δ Ί.11 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.53 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 3.85 (q, J = 6.1 Hz, 1H), 3.45 (s, 3H), 3.25-3.13 (m, 1H), 2.53 (m, 1H), 1.23 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.16 (d, J = 6.8 Hz，3H)。LC/MS (方法 B): 233.0 (M+H)+。HPLC (方法 A) Rt 1.52 min (純度：89.2%)。 步驟2 : N-((lS)-l-{4-[(羥基胺基）（亞胺基）甲基]苯基} 乙基）-D-丙胺酸甲醋 按照一般程序1，以N-[(lS)-l-(4-氰基苯基）乙基]-D-丙胺酸曱酯為起始物製備標題化合物。其以無色油狀物形 式分離（500 mg，93%)。4 NMR (DMSO-d6, 300 ΜΗζ) δ 9·57 (s, 1Η), 7.59 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.29 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.76 (br s, 2H), 3.76 (m, 1H), 3.49 (s, 3H), 3.27-3.12 (m, 1H), 106 201206429 2.31 (m, 1H), 1.23 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.17 (d, J = 6.8 Hz, 3H)。LC/MS (方法 B): 266.1 (M + H)+。 中間物11 : N-((lS)-l-{4-[(羥基胺基）（亞胺基）甲基】苯 基}乙基）-L-丙胺酸曱酯 h2n

手性 按照一般程序1，以N-[(lS)-l-(4-氰基苯基）乙基]-L-丙胺酸甲酯（合成描述於中間物1 0步驟1下）為起始物製 備標題化合物。其以無色油狀物形式分離。1H NMR (DMSO-d6s 300 MHz) δ 9.56 (s5 1Η), 7.59 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.27 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.75 (br s, 2H), 3.66 (m ,1H), 3.61 (s, 3H), 2.92 (m, 1H), 2.49-2.41 (m, 1H), 1.21 (d, J = 6.6 Hz, 3H)，1.13 (d, J = 6.9 Hz, 3H)。LC/MS (方法 A): 266.1 (M+H)+ 0 中間物12:(28)-2-[((111)-1-{4-[胺基（羥基亞胺基）曱基】 苯基}乙基）胺基]丁酸乙酯

步驟1 : (2S)-2-{[(lR)-l-(4-氰基苯基）乙基]胺基} 丁酸 107 201206429 乙酯及（2R)-2-{[(lR)-l-(4·氰基苯基）乙基]胺基} 丁酸乙醋 按照一般程序11，以4-[(lR)-l-胺基乙基）]苯曱腈 (Haoyuan Chemexpress )及2-漠丁酸乙S旨為起始物製備標題 化合物。藉由急驟層析法（EtOAc/庚烷梯自5:95至25:75 ) 純化粗產物，得到無色油狀（28)-2-{[(111)-1-(4-氰基苯基）乙 基]胺基}丁酸乙酯（第二洗提化合物）（345 mg，19%)及 無色油狀（2R)-2-{[(lR)-l-(4-氰基苯基）乙基]胺基} 丁酸乙 酯（第一洗提,化合物）（460 mg，26% )。 (2S)-2-{[(lR)-l-(4-氰基苯基）乙基]胺基} 丁酸乙酯： NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 7.76 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.52 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 3.86 (m, 2H), 3.05 (m, 1H), 2.42 (m, 1H), 1.51 (m, 2H), 1.23 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.07 (t, J = 7.1 Hz, 3H)，0.82 (t，J = 7.4 Hz，3H)。LC/MS (方法 B): 261.0 (M + H)+。 (211)-2-{[(11〇-1-(4-氰基苯基）乙基]胺基}丁酸乙酯：\\{ NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 7.78 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.51 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 4.09 (q, J = 7.01 Hz, 2H), 3.72 (m, 2H), 2.51 (m, 4H), 1.50 (m, 2H), 1.22 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.17 (t, J = 7.1 Hz，3H)，0.82 (t，J = 7.5 Hz，3H)。LC/MS (方法 B): 261.0 (M+H)+。HPLC (方法 A) Rt 2.17 min (純度：99%)。 步驟2 : (2S)-2-[((lR〉-i-{4_[胺基（羥基亞胺基）甲基]苯 基}乙基）胺基]丁酸乙S旨 按照一般程序1’以（28)-2-{[(1尺)-1-(4-氰基苯基）乙基] 胺基} 丁酸乙酯為起始物製備標題化合物且以無色油狀物

S 108 201206429 • 形式分離（330 mg，85%)。4 NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 9.57 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.29 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.76 (br s, 2H), 3.95-3.85 (m, 2H), 3.71 (m, 1H), 3.07 (m, 1H), 2.19 (m, 1H), 1.55 (m, 2H), 1.24 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.10 (t，J = 7.1 Hz，3H)，0.82 (t, J = 7_4 Hz, 3H)。LC/MS (方 法 B): 294.0 (M+H)+。 中間物13: (2R)-2-[((lR)-l_{4_丨胺基（羥基亞胺基）曱基] 苯基}乙基）胺基]丁酸乙酯

按照一般程序1’以（211)-2-{[(111)-1-(4-氰基苯基）乙基] 胺基} 丁酸乙酯（合成描述於中間物12步驟1下）為起始 物製備標題化合物且以固體形式分離（480 mg，93°/。）。*11 NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 9.57 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.2 Hz, 2H)，7.29 (d，J = 8.2 Hz，2H)，5.76 (br s，2H)，4.10 (q，2H，J = 7.1 Hz), 3.63 (m, 1H), 2.72 (m, ih), 2.34 (m, 1H), 1.49 (m, 2H)，1.25-1.13 (m，6H)，0·81 (t，J = 7.5 Hz，3H)。LC/MS (方 法 B): 294.0 (M+H)+。 中間物14:2-({3-[胺基（羥基亞胺基）甲基]-5-氟苯甲基} 胺基）-4-甲基戊酸乙酯 109 201206429

步驟1 : 3-(溴甲基）-5-氟苯甲腈 在25°C下’在氮氣氛圍下將3-氟-5-曱基苯曱腈（Hognda Trading ; 1〇〇 g’ 〇 74 mol)溶解於乙腈（1 L)中。添加 N-溴代丁二醯亞胺（1〇5 g，〇 59 m〇i)及 AIBN( 2.4 g，0.014 mol )且在70°C下加熱反應混合物1小時20分鐘。將反應 混合物冷卻至25。〇且濃縮。稀釋殘餘物，冷卻至〇至5。(：， 且在同一溫度下撥拌15分鐘。過濾沈澱之丁二醯亞胺且濃 縮遽液，獲得黃色油狀粗產物（9〇 g )❶將其溶解於石油醚 (200 mL)中且冷卻至_20°C ’攪拌30分鐘。過濾沈澱之固 體且乾燥，獲得白色固體狀標題產物。iH NMR (DMSO-d6; 400 MHz): δ 7.83 (m, 2Η)} 7.73 (m, 1Η), 4.72 (s, 2H) 〇 HPLC (方法 A) Rt: 4.17 min (純度：99.4%)。 步驟2 : 2-[(3-氰基-5-氟苯甲基）胺基卜4_甲基戊酸第三 丁醋 向於無水DMF( 40 mL)中之3-(溴曱基）_5_氟苯曱腈（4 〇 g，0.02 mol)中添加碳酸氫鈉（3.9 g，〇 〇46 m〇1)及乙基 D-白胺酸第三丁醋鹽酸鹽（4.2g，〇_〇19m〇1)。在室溫下授 拌反應混合物16小時。將其用水稀釋且用乙酸乙酯萃取。 用水、鹽水洗滌有機相’乾燥且濃縮。藉由層析法使用石 油醚/乙酸乙酯作為洗提劑來純化粗產物，得到無色液體狀 110 201206429 標題化合物》4 NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 7.68 (d，J = 9.5 Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.53 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 3.78 (d, 1H), 3.64 (d, 1H), 2.97 (d, 1H), 2.60 (br s, 1H), 1.97-1.71 (m, lH)，1.36(m，11H)，0.86 (d，3H), 0.80 (d，3H)。 步驟3 : 2-({3-[胺基（羥基亞胺基）甲基]_5_氟苯甲基}胺 基）-4-甲基戊酸乙酉旨 向於乙醇（30 mL)中之2_[(3_氰基·5_氟苯曱基）胺基]_4_ 甲基戊Sjl第二丁醋（3.0g’ 9.4 mmo 1)中添加經胺（1 · 2 mL， 0.019 mol)且在（TC下將其攪拌16小時。用水（25〇如） 稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取。分離有機層，用鹽水

基}-N-甲基綠胺酸第三丁自旨

111 201206429 步驟1 : 2_胺基_3-甲基丁酸第三丁醋 在〇°C下向DL-纈胺酸（25 g，0.213 mol)於乙酸第三 丁醋（250 mL)中之攪拌溶液中逐份添加HC104 ( 64.2 g， 0.320 mol)。在室溫下授拌反應混合物36小時。將其用水 稀釋且在乙酸乙酯（5 00 mL)中萃取。用1 〇〇/〇碳酸氫鈉溶 液（2x150 mL)洗滌有機層，經Na2S〇4脫水且濃縮，得到 棕色液體狀標題化合物。1H NMR (DMSO-d6，400 MHz) δ 7.31 (br s, 2H), 3.62(d, J = 4.4 Hz, 1H), 1.98 (d, J = 1.7 Hz, 1H)，1.44(s，9H)，0.95 (m，6H)。 步驟2 : 2-[(4-氰基-2-氟苯甲基）胺基]_3_平基丁酸第三 丁輯 在氮氣下’向2-胺基-3-甲基丁酸第三丁酯（8 5 g，〇 〇5 mol)於無水DMF ( 50 mL)中之攪拌溶液中添加4_氰基·2_ 氟-苯曱基溴（FluoroChem有限公司，9.4 g，0.044 mol)及

NaHC〇3 ( 10.2 g，0.12 mol)。在室溫下攪拌所得混合物16 小時。添加水（70 mL )且用乙酸乙酯（2x 10〇 mL )萃取所 要產物。用水（3x 100 mL )洗滌有機層且使溶劑經Na2S〇4 脫水並在真空下濃縮。藉由管柱層析法使用石油醚/乙酸乙 醋作為洗提劑來純化所得殘餘物’得到無色液體狀標題化 合物。4 NMR (DMSO-d6, 400 ΜΗζ) δ 7.77 (d，J = 10.2 Hz 1H)，7.67 (t，J = 1.5 Hz，1H)，3.85-3.79 (m，2H)，2.72 (m，1H)， 2.49 (m, 1H)，1.81 (m，1H)，1.37(s，9H)，0.86 (m，6H)。 步驟3 :2-[(4-氰基-2-氟苯甲基）（甲基）胺基]_3甲基丁

S 112 201206429 . 酸第三丁醋 在0°〇下’將於〇]^?(2〇1111〇中之2-[(4-氰基-2-氟苯 甲基）胺基]-3-曱基丁酸第三丁酯（7.2 g，〇_〇23 mol )逐滴 添加至氫化鈉（2.2 g，0.047 mol )於無水DMF ( 10 mL ) 中之攪拌懸浮液中。在室溫下攪拌所得混合物20分鐘。接 著，在0°C下逐滴添加峨甲烷（6 mL，0.094 mol)，且在室 溫下攪拌混合物3小時。在冰水中中止反應混合物且用乙 酸乙酯（250 mL)萃取。用水（3xl〇〇 mL)洗滌有機層且 經NadC»4脫水且在減壓下濃縮。藉由管柱層析法使用石油 醚及乙酸乙酯作為洗提劑來純化粗產物，得到無色液體狀 標題化合物。4 NMR (DMSO-d6, 400 ΜΗζ) δ 7.80 (d，J = 10 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.60 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 3.79 (d, J = 15 Hz, 1H), 3.64 (d, J = 15 Hz, 1H), 2.65 (d, J = 10.7 Hz，1H)，2.18 (s，3H)，1.44 (s，9H)，0.92-0.83 (m，6H)。 步驟4 : N-{4-[胺基（羥基亞胺基）甲基]-2-氟苯甲基}-1 甲基纈胺酸第三丁酯 向2-[(4-氰基-2-氟苯甲基）（甲基）胺基]-3-曱基丁酸第 三丁酯（3.4 g，0_011m〇i)於乙醇（30 mL)中之攪拌溶液 中添加50%羥胺水溶液（i_4 mL，0.021 mol)。在-20°C下授 拌混合物12小時。用水稀釋反應混合物且在二氯曱烷（1 〇〇 mL )中萃取’經Na2S04脫水且在減壓下濃縮。用乙酸乙酯 (5 mL )使固體再結晶，過濾且在真空下乾燥，得到白色固 體狀標題化合物。1H NMR (DMSO-d6，400 ΜΗζ) δ 9.73〇, 1Η), 7.49 (m, 1H), 7.38 (m, 2H), 5.85 (s, 2H), 3.71 (d, J = 113 201206429 14.2 Hz，1H)，3.57 (d，J = 14.2 Hz，1H)，2.66 (d，J = 10.7 Hz， 1H), 2.18 (s, 3H),1.99-1.93 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 0.91-0.81 (m，6H)。LC/MS (方法 B) 354.3 (M+H)+。HPLC (方法 A) Rt: 2.66 min (純度 98_6%)。 中間物16 : N-(l-{4-[胺基（羥基亞胺基）甲基】苯基}乙 基）-N-甲基甘胺酸第三丁酯

步驟1 : 4-[1-(曱基胺基）乙基]苯甲腈 在THF ( 50 mL)中添加4-乙醯基苯甲腈（5 〇 g ; 34 mmol )、甲基胺（20.5 mL; 2M; 41 mmol)及異丙醇敛（iv) (5.6 mL ; 18.9 mm〇l)。在室溫下攪拌混合物隔夜。添加硼 氫化鈉（5.5 g ; 145 mmol)且在室溫下攪拌反應2小時。 添加25%氫氧化銨溶液（100 mL)且在室溫下攪拌反應i 小時30分鐘。接著經由矽藻土墊過濾，用Et〇Ac洗滌3次。 將濾液傾入分液漏斗中，且用NaHC〇3飽和溶液及鹽水洗滌 有機相，經MgS〇4脫水，過濾且在減壓下濃縮，得到淡黃 色油狀標題化合物（5.4 g ; 97%：^其不經進一步純化即用 於下一步驟。 步驟2 : N-[l-(4-氰基苯基）乙基]_Ν_甲基甘胺酸第三丁 m 按照一般程序U ’以4-Π-(甲基胺基）乙基]苯甲腈及溴 114 201206429 乙酸第三丁酯為起始物來製備標題化合物。其以無色油狀 物形式分離。H NMR (DMSO-d6, 300 ΜΗζ) δ 7.79 (d，J = 8.4

Hz, 2H), 7.54 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 3.89 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 3.27 (d, J - 16.7 Hz, 1H), 3.07 (d, J = 16.7 Hz, 1H), 2.21 (s, 3H)，1.41 (s, 9H)，1.26 (d, J = 6.8 Hz, 3H)。HPLC (方法 A) Rt 2.83 min (純度：96.8%)。 步驟3:N-(l-{4-[胺基（羥基亞胺基）甲基]苯基}乙基〉_N_ 甲基甘胺酸第三丁醋 按照一般程序1，以N-[l-(4-氰基苯基）乙基]曱基甘 胺酸第三丁酯為起始物製備標題化合物且以白色粉末形& 分離（2.68 g，定量）。4 NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 9.58 f

Vs J 1H)，7.61 (d, J = 8.2 Hz，2H)，7.30 (d，J = 8.3 Hz，2H)，5.78 (s 2H)，3.80 (q，J = 6.7 Hz，1H)，3.23 (d，J = 16.8 Hz，1H)，3 〇3 (d，J = 16.8 Hz，1H)，2.22 (s，3H)，1.41 (s, 9H)，1.26 (d，j = 6.8 Hz，3H)。LC/MS (方法 B): 308.2 (M + H)+。HPLC (方法 A) Rt 1.33 min (純度：88.5°/❶）。 中間物17: 2-({4-[胺基（羥基亞胺基）甲基]-2-氟笨τ基^ 胺基）_2_甲基丙酸第三丁酯

115 201206429 步驟1 : 2-(苯甲基胺基）·2_甲基丙酸第三丁醋 按照一般程序10，以2-溴異丁酸第三丁酯及苯曱胺為 起始物製備標題化合物。其以無色液體形式分離。iH NMr (DMSO-d6, 400 MHz) δ 7.30-7.26 (m, 4H), 7.23-7.20 (m> 1H) 3.55 (s，2H)，2.10 (s，1H)，1.42 (s, 9H)，1.20 (s, 6H)。 步驟2 . 2 -胺基-2-甲基丙酸第三丁醋 向2-(苯曱基胺基）-2-曱基丙酸第三丁酯（2〇 g，〇 〇8 mol )於乙酸乙酯（1 L )中之溶液中添加催化劑鈀_碳（〖〇%， 2.2 g )。在室溫下將所得混合物置於5 Kg/cm2之氫氣壓力下 18小時《過濾反應混合物。濃縮濾液，得到淺綠色液體狀 標題化合物。4 NMR (DMSO-d6, 400 ΜΗζ) δ 1.38 (br s，2H), 1.14 (s, 9Η)，1.14-1.11 (d，J = 10.7 Ηζ，6Η)。 步驟3 : 2-[(4-氰基-2-氟笨甲基）胺基]-2-曱基丙酸第三 丁酉旨 按照叙程序1〇’以2 -胺基-2-甲基丙酸第三丁醋及4· 氰棊-2-氟苯甲基溴為起始物來製備標題化合物。標題化合 物以無色液體形式分離。1H NMR (：DMSO-d6，400 ΜΗζ) δ 7.78-7.75 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 7.71-7.65 (m5 2H), 3.70-3.68 (d，J = 6.9 Hz，2H)，2.55 (s，1H)，1.44 (s，9H), 1.19 (s，6H)。 步驟4 : 2-({4-[胺基（羥基亞胺基）甲基卜2-氟苯甲基}胺 基）-2-甲基丙酸第三丁醋 按照一般方法1，以2-[(4-氰基-2-氟苯甲基）胺基]-2-甲基丙酸第二丁醋為起始物製備標釋化合物，且以白色固 體形式分離。4 NMR (DMSO-d6, 400 ΜΗζ) δ 9.71 (s，1H), s 116 201206429 7.49-7.38 (m, 3H), 5.85 (s, 2H), 3.61 (s, 2H), 2.29 (s, 1H), 1.41 (s, 9H), 1.20 (s, 6H)。LC/MS (方法 B) 326.3 (M+H)+。 HPLC (方法 A) Rt: 2.25 min (純度：99.4%)。 中間物18: (l-{4-[胺基（羥基亞胺基）甲基]苯基}乙基） 胺基甲酸第三丁酯

步驟1 : [1-(4-氰基苯基）乙基]胺基甲酸第三丁醋 製備4-(1-胺基-乙基）·苯甲腈（Ukrorgsynthsis有限公 司，2 g; 11 mmol )及 N，N-二異丙基乙胺（2.2 mL; 13_ 1 mmol ) 於ACN(30mL)中之溶液。在0°C下添加二碳酸二第三丁 5旨（2.9 g ; 13 · 1 mmol )於 ACN ( 10 mL )中之溶液，且在 室溫下攪拌所得溶液隔夜。濃縮溶劑且用MTBE ( 100 mL ) 稀釋反應混合物，且用H20 ( 2x50 mL)及鹽水（50 mL) 洗條。用MTBE( lOOmL)萃取水層。合併有機層，經Na2S04 脫水並蒸發。藉由急驟層析法加以純化，得到黃色糊狀標 題化合物（2.2 g，82%)。LC/MS (方法 B): 246.9 (M+H)+, 245_2 (M-Η)·。HPLC (方法 A) Rt 1.20 min (純度：100%)。 步驟2 : (1_{4_[胺基（羥基亞胺基）甲基]苯基}乙基）胺基 甲酸第三丁 m 按日g _奴 t…、—叙程序1’以[1-(4-氰基苯基)乙基]胺基甲酸第三 丁 8曰為起始物製備標題化合物且以白色粉末形式分離（2.3 117 201206429 g，94%)。LC/MS (方法 B) 280.3 (M+H)+。HPLC (方法 A) Rt 2.11 min (純度：99.6%)。 中間物19 : N-(l-{3-[(羥基胺基）（亞胺基）甲基】苯基}乙 基）-N-甲基丙胺酸甲輯

步驟1 : 3-[1-(曱基胺基）乙基]苯甲腈 按照中間物16步驟1所使用之程序，以3_乙醯基苯甲 腈為起始物來製備標題化合物。其以無色油狀物形式分離 (1 g ; 92% )。HPLC (方法 A) Rt 1.54 min (純度：74%)。 步驟2 : N-[l-(3氰基苯基）乙基]-N-甲基丙胺酸甲醋 按照一般程序11，以3-[1-(曱基胺基）乙基]苯甲腈及2-溴丙酸甲酯為起始物來製備化合物，得到無色油狀標題化 合物。HPLC (方法 A) Rt 1.54 min (純度：74%)。 步驟3 : N-(l-{3-[(羥基胺基）（亞胺基）甲基]苯基}乙 基）甲基丙胺酸甲醋 按照一般程序1，以N-[ 1-(3-氰基苯基）乙基]-N-曱基丙 胺酸甲酯為起始物製備標題化合物且以無色油狀物形式分 離（330 mg，88%)。LC/MS (方法 B): 280.0 (M+H)+。 中間物20 : N-(l-{3-[胺基（羥基亞胺基）甲基】苯基}乙 基）-N-甲基甘胺酸第三丁酯 118 201206429

步驊1 : N-[l-(3-氰基苯基）乙基]-N-甲基丙胺酸甲醋 按照一般程序11 ’以3 - [ 1 -(曱基胺基）乙基]苯曱腈（中 間物1 9，步驟1 )及溴乙酸第三丁酯為起始物來製備標題 化合物。其以無色油狀物形式分離。HPLC (方法a) Rt 2 42 min (純度：1〇〇%)。 步驟2:Ν-(1-{3-[胺基（羥基亞胺基）甲基]苯基}乙基）N_ 曱基甘胺酸第三丁醋 按照一般程序1，以N- [ 1 -(3 -氰基苯基）乙基]_N_曱基丙 胺酸曱醋為起始物製備標題化合物且以無色黏性油狀物形 式分離（1.43 g，98%)。LC/MS (方法 B): 308.1 (M+H)+。 HPLC (方法 A): 1.78 min (純度：78.4%)。 中間物21: 2_[{4_[胺基（經基亞胺基）甲基卜2·氟苯曱 基}(甲基）胺基】-2_甲基丙酸第三丁酯

步驟1 : 3-氟-4-[(曱基胺基）甲基]苯曱猜 在5°C至l〇°C下將4-氰基-2-氟-苯曱基溴（Flu〇r〇chem 有限公司，16 g，74 mmol)於無水thf ( 50 mL)中之溶 119 201206429

液添加至40%甲胺水溶液（700 mL )中且攪拌5分鐘。用 DCM萃取反應混合物’且使溶劑經NazSO4脫水且在真空下 濃縮’得到棕色液體狀標題化合物（12. 〇 g，95 % )。1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 7.79-7.75 (m，1Η)，7.68-7.61 (m，2Η), 3.71 (s，2H)，2.24 (s，3H)。 步驟2 : 2-[(2-氟-4-異氰基苯甲基）（ψ基）胺基]_2甲基 丙酸第三丁醋 按照一般程序11，以3-氟-4-[(甲基胺基）曱基]苯甲腈 及2 -溴異丁酸第三丁酯為起始物製備標題化合物。其以無 色油狀物形式分離。/H NMR (DMSO-d6，400 ΜΗζ) δ 7.78-7.76 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 7.73-7.67 (m, 2H), 3.68 (s, 2H)，2.13 (s，3H)，1.41 (s，9H)，1.27 (s，6H)。 步驟3:2-[{4-[胺基（羥基亞胺基）甲基]-2-氟苯甲基}(甲 基）胺基]-2-甲基丙酸第三丁醋 按照一般程序1，以2-[(2-氟-4-異氰基苯曱基）（甲基） 胺基]-2-曱基丙酸第三丁酯為起始物製備標題化合物，且以 白色固體形式分離。4 NMR (DMSO-d6, 400 ΜΗζ) δ 9.71 (s， 1Η)，7.49-7.37 (m，3Η)，5.85 (s，2Η)，3.59 (s，2Η)，2.12 (s， 3H)，1.42 (s，9H)，1.28 (s，6H)。LC/MS (方法 B): 340.3 (M+H)+。HPLC (方法 A) Rt: 2.14 min (純度：98.1%)。 中間物22:N-(l-{4-丨胺基（羥基亞胺基）甲基]苯基}乙基） 甘胺酸第三丁酯

S 120 201206429

步驟1 · Ν-[1-(4-·01基苯基）乙基]甘胺酸第三丁醋 將4-乙醯基苯曱腈（500 mg; 3.4 mmol ; 1當量）及甘 胺酸第三丁酯（588 mg ; 4.5 mmol)溶解於曱苯（1〇 mL) 中。添加AcOH ( 103 μΐ ; 1.7 mmol )。在用迪恩-斯達克收 集器（dean stark trap )回流下攪拌混合物隔夜。蒸發溶劑， 且將所得N-[l-(4-氰基苯基）亞乙基]甘胺酸第三丁酯（889 mg ’ 3,4 mmol)溶解於MeOH ( 18 mL)中。逐份添加硼氫 化納（390 mg ; 1〇_3 mmol) ’引起放熱反應（回流）。將反 應物在室溫下擾拌隔夜。蒸發溶劑。使粗殘餘物懸浮於 EtOAc中，用NH4C1飽和溶液、NaHC03飽和溶液、鹽水洗 條，且經MgS〇4脫水。蒸發溶劑後，藉由急驟層析法純化 所得黃色油狀物，得到無色油狀標題化合物。LC/MS (方法 B): 261 .〇 (M+H)+。HPLC (方法 A): 2.77 min (純度：98.2%)。 步驟2 : N-(l-{4-[胺基（羥基亞胺基）甲基]苯基}乙基）甘 胺酸第三丁醋 按照一般程序1 ’以N-[l-(4-氰基苯基）乙基]甘胺酸第 三丁酯為起始物製備標題化合物且以無色泡沫形式分離 (290 mg，94%)。LC/MS (方法 B): 294_1 (M+H)+。HPLC (方 法 A): 1.31 min (純度：1〇〇%)。 中間物23: N-((lS)-l-(4-[胺基（羥基亞胺基）甲基】苯基} 121 201206429 乙基）-N-甲基甘胺酸第三丁輯及中間物24 : N-((lR)-l-(4-[胺基（羥基亞胺基）甲基】苯基}乙基）_N_甲基 甘胺酸第三丁酯 伟 性 0 0

H2N^|v| H2N^|sJ

OH OH 步驟1 :N-[l-(4 -氰基苯基）乙基]-N-甲基甘胺酸第三丁 酯 在THF ( 50 mL)中添加4-乙醯基苯曱腈（5 〇 g ; 34 mmol)、曱基胺（21 mL;於 THF 中之 2.00 Μ 溶液；42 mmol) 及異丙醇鈦（5.6 mL; 19 mmol)。在室溫下授拌混合物隔 夜。添加硼氫化納（5.5 g; 145 mmol)且在室溫下授摔反 應混合物2小時。添加25%氫氧化錄溶液（1 〇〇 )且在 室溫下揽摔反應混合物1小時3 0分鐘。接著經由石夕薄土塾 過滤，用EtOAc洗滌。用NaHCO；}飽和溶液、鹽水洗務有 機相，經MgSCh脫水，過濾且在減壓下濃縮。接著將粗產 物溶解於CH3CN ( 4 1 mL )中。在室溫下添加碳酸鉀（j 〇 3 g ; 74 mmol)及溴乙酸第三丁酯（5.5 mL ; 37 mmol)且在 室溫下攪拌反應混合物1小時30分鐘。添加EtOAc，且用 水及鹽水洗滌有機相’經MgS〇4脫水，過濾且濃縮，得到 油狀物，藉由急驟層析法加以純化，得到無色油狀標題化 合物。NMR (DMSO-d6, 300 ΜΗζ) δ 7.79 (d，J = 8 4 Hz s 122 201206429 2H), 7.54 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 3.89 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 3.27 (d, J = 16.7 Hz, 1H), 3.07 (d, J = 16.7 Hz, 1H), 2.21 (s, 3H), 1·41 (s，9H)，1.26 (d，J = 6.8 Hz, 3H)。LC/MS (方法 B): 275.1 (M + H)+ « HPLC (方法 A) Rt 2.83 min (純度：96.8%)。 步驟2 : N-((lS)-l-{4-[胺基（羥基亞胺基）甲基]苯基}乙 基）甲基甘胺酸第三丁酯及[胺基（羥基亞胺 基）甲基]苯基}乙基）-N-曱基甘胺酸第三丁醋 按照一般程序1，以步驟1中所獲得之Ν — μ _(4·氰基苯 基）乙基]-Ν-曱基甘胺酸第三丁酯（14 g; 5.1 mmol)為起 始物製備兩種標題化合物，得到1·6 g (定量）白色固體。 藉由手性 HPLC 利用 Chiralcell OJ-H 250 mm><20 mm><5 μΜ 管柱（用異丙醇/庚烷（ν:ν=15:85 )以8.0 mL/min之速率洗 提）進行純化’得到白色固體狀\-((13)-1-{4-[胺基（羥基亞 胺基）曱基]苯基}乙基）-N-甲基甘胺酸第三丁酯（第二洗提 化合物）（677 mg ; 48%)及白色固體狀N-((lR)-l-{4-[胺基 (羥基亞胺基）甲基]苯基}乙基）-N-曱基甘胺酸第三丁酯（第 一洗提化合物）（606 mg ; 43% )。 仏（（18)-1-{4-[胺基（羥基亞胺基）曱基]苯基}乙基）-^[-曱基甘胺酸第三丁酯：4 NMR (DMSO-d6, 300 ΜΗζ) δ 9.58 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.30 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.78 (s, 2H), 3.80 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 3.23 (d, J = 16.7 Hz, 1H), 3.03 (d, J = 16.7 Hz, 1H), 2.22 (s, 3H), 1.41 (s, 9H), 1.26 (d，J = 6.7 Hz，3H)。LC/MS (方法 B): 308.2 (M + H)+。 HPLC (方法 B) Rt 12.5 5 min (純度：100.0%)。[a]D = -52.8 (c 123 201206429 0.90, EtOH)。 义（（111)-1-{4-[胺基（羥基亞胺基）曱基]苯基}乙基）->^ 甲基甘胺酸第三丁酯：4 NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 9.58 (s, 1Η), 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.30 (d5 J = 8.3 Hz, 2H), 5.78 (s, 2H), 3.80 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 3.23 (d, J = 16.7 Hz, 1H), 3.03 (d, J = 16.7 Hz, 1H), 2.22 (s, 3H), 1.41 (s, 9H), 1.26 (d，J = 6·7 Hz，3H)。LC/MS (方法 A): 308.2 (M + H)+。 HPLC (方法 B) Rt 8.99 min (純度：100.0%)。[4f = 50.5 (c 1.13, EtOH) 〇 中間物25 : N-(l-(4-[胺基（羥基亞胺基）曱基.】苯基}乙 基）-N-甲基丙胺酸甲酯

步驟1 :Ν-[1-(4_氰基苯基）乙基]-N-甲基丙胺酸甲酉旨 在THF ( 50 mL)中添加4-乙醯基苯曱腈（5 〇 g ; 34 mmol)、甲基胺（21mL;於THF中之2.00M溶液；42職〇1) 及異丙醇欽（5.6 mL ; 19 mmol)。在室溫下攪拌混合物隔 仪。添加ί朋氫化納（5 · 5 g ; 14 5 mmol )且在室溫下授掉反 應混合物2小時。添加25%氫氧化敍溶液（丨〇〇 mL )且在 室溫下攪拌反應混合物丨小時3〇分鐘。接著經由矽藻土墊 過濾，用EtOAc洗滌。用NaHC〇3飽和溶液、鹽水洗滌有 124 201206429 機相，經]yigS〇4脫水， 過濾且在減壓下濃縮。接著將粗產 物溶解於CH3CN( 15mL)中。在室溫下添加碳酸鉀〇 8g; 27 mmol)及2-溴丙酸甲醋（1.5 mL ; 13.7 mm〇1)且在室溫 下搜拌反應混合物1小時30分鐘。添加Et〇Ac且用水及鹽 水洗滌有機相，經MgS〇4脫水，過濾且濃縮。藉由急驟層 析法純化所得油狀物’得到無色油狀標題化合物β 1H nmr (DMSO-d6, 300 MHz) δ 7.83-7.76 (m, 2H), 7.54 (t, J = 8 7 Hz 2H), 3.94-3.79 (m, 1H), 3.70-3.63 (m, 0.5H), 3.63-3.59 (m, 3H), 3.35-3.26 (m, 0.5H), 2.20 (s, 1.5H), 2.09 (s, 1.5H) 1.30-1.23 (m, 3H), 1.20 (d, J = 7.0 Hz, 1.5H), 1.12 (d, J = 7.〇

Hz，1.5H)。LC/MS (方法 B): 247.1 (M + H)+ « HPLC (方法 a)

Rt 1.51 min (純度：70.1%)。 步驟2.N-(l-{4-[胺基（經基亞胺基）曱基]苯基}乙基 甲基丙胺酸甲醋 按照一般程序1，以N-[ 1-(4-氰基苯基）乙基]-Ν-曱基兩 胺酸甲酯為起始物製備標題化合物。其以無色油狀物形式 分離（113 mg ;定量）。LC/MS (方法 Β): 280.1 (Μ+Η)+。 中間物26:Ν-(1-{3-[胺基（羥基亞胺基）甲基】苯基}乙基） 甘胺酸第三丁酯

125 201206429 步驟1 . N-[1-(3-氰基苯基）乙基]甘胺酸第三丁 _ 將4乙酿基本甲腈（1.〇 g; 6.9 mmo 1)及甘胺酸第三 丁酯（1.2 g ; 9.0 mmol)溶解於甲苯（2〇 mL)中。在用迪 恩-斯達克收集器回流下攪拌混合物。添加Ac〇H ( 2〇7; 3.4 mmol )且進一步加熱混合物隔夜。蒸發溶劑。將粗產物 溶解於MeOH ( 35 mL )中。將溶液冷卻至〇ac且逐份添加 硼氫化鈉（781 mg ; 21 mmol)。在〇°c下攪拌反應i小時且 在至m·下攪拌隔夜。蒸發溶劑。使粗殘餘物懸浮於Et〇Ac 中’用ΝΗπΐ飽和溶液、NaHC〇3飽和溶液、鹽水洗滌且 經MgS〇4脫水。蒸發溶劑後，藉由急驟層析法純化所得黃 色油狀物，得到716 mg無色油狀標題化合物。LC/MS (方 法 B): 261.0 (M + H)+。HPLC (方法 a) Rt 2.79 min (純度： 99.2%)。 步驟2 : N-(l-{3-[胺基（羥基亞胺基）平基]苯基}乙基）甘 胺酸第三丁酯 按照一般程序1 ;以步驟1中所獲得之N_[ i _(3_氰基苯 基）乙基]甘胺酸第二丁醋（716 mg ; 2.8 mmol )為起始物製 備標題化合物。其以無色泡沫形式分離（646 mg ; 8〇% )。 'H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 9.58 (br s, 1H), 7.64-7.58 (m, 1H), 7.56-7.48 (m, 1H), 7.35-7.26 (m, 2H), 5.78 (s, 2H), 3.73 (q, J = 6.3 Hz, 1H), 3.06 (d, J = 17.1 Hz, 1H)} 2.96 (d, J = 17.1 Hz，1H)，1.38 (s，9H)，1.25 (d，J = 6.3 Hz，3H)。LC/MS (方法 B):294.1 (M+H)、HPLC(方法 A)Rtl_77min (純度： 97.3%)。 126 5 201206429 中間物27:2-((4-[胺基（羥基亞胺基）甲基】-2·氟苯甲基} 胺基）丁酸第三丁酿

步驟1 : 2-胺基丁酸第三丁醋 在室'置下向2_溴丁酸第三丁酯（1〇 g，44.8 mmol)於 無水THF ( 5G mi )中之溶液中添加25%氫氧化錢溶液（剛 mL )在至/風下攪拌反應24小時。在較低溫度（Μ。。至m ) 下在真空下濃縮反應混合物。接著用DCM ( 3χ2〇〇 萃 取所δ併之有機相經Na2S〇4脫水且在真空下濃縮，得到 無色液體狀標題化合物（6.2 g，85% )。lH nmr (DMs〇_d6, 400 MHz) 5 3.09-3.06 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 1.75-1.71 (m, 2H), 1.63-1.57 (m, 2H) 1.46 (s, 9H), 0.96-0.92 (t, J = 7.5 Hz, 3H)〇 步驟2 ·· 2-[(4-氰基-2-氟苯曱基）胺基]丁酸第三丁醋 按照一般程序10，以步驟丨中所獲得之4_氰基_2_氟_ 苯甲基溴（Fluorochem，8.2g，38mm〇1)及2·胺基丁酸第 三丁酯（6.2 g，38 mmol)為起始物來製備標題化合物。其 以無色液體形式分離。1H NMR (DMS〇_d6, 4〇〇 ΜΗζ) δ 7.79-7.76 (d, J = 10.2 Hz, lH)s 7.68-7.67 (t, J = 2-1 Hz, 2H), 3.84-3.79 (m，1H) 3.71_3.66 (m，1H)，2 95 2 9i (m，m)， 2.52-2.48 (m, 1H), 1.58-1.53 (m, 2H)5 1.49 (Sj 9H), 0.87-0.83 127 201206429 (m，3H)。 步驟3 : 2-({4-[胺基（羥基亞胺基）甲基]-2-氟苯甲基}胺 基）丁酸第三丁 S旨

按照一般程序1’以步驟2中所獲得之2-[(4-氰基-2-I笨曱基）胺基]丁酸第三丁酯為起始物製備標題化合物，且 以白色固體形式分離。1H NMR (DMSO-d6, 300 ΜΗζ) δ 9.72 (s, 1Η), 7.49-7.38 (m, 3H) 5.85 (s, 2H), 3.75-3.72 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 3.64-3.60 (d, J = 14 Hz, 1H), 2.94 (m, 1H), 2.31 (m, 1H), 1.55-1.50 (m, 2H), 1.39 (s, 9H), 0.86-0.82 (t, J =7.4 Hz, 3H)。LC/MS (方法 B): 326.3 (M + H)+。HPLC (方 法 A) Rt 2.140 min (純度：98.6%)。 中間物29 : 2-[{4-[胺基（經基亞胺基）甲基卜2_氟苯甲 基）（甲基）胺基】-2-甲基丙酸第三丁輯

步驟1 : 2-[(2-氟-4-異氰基笨甲基）（曱基）胺基卜2甲基 丙酸第三丁醋 按照一般程序11，以3-氟-4-[(甲基胺基）曱基]苯甲腈 及2-溴異丁酸第三丁酯為起始物製備標題化合物。其以無 色液體形式分離。4 NMR (DMS〇.d6, 400 ΜΙίΖ：) δ 7 (d j =10.3 Hz, 1H), 7.73-7.67 (m, 2H), 3.68 (s, 2H), 2.13 (s, 3H), s 128 201206429 • 1.41 (s，9H)，1.27 (S，6H)。 步驟2:2-[{4-[胺基（羥基亞胺基）甲基]-2-氟苯甲基}(甲 基）胺基]-2-甲基丙酸第三丁酯 按照一般程序2，以2-[(2-氟-4-異氰基苯曱基）（曱基） 胺基]-2-甲基丙酸第三丁酯為起始物製備標題化合物且以 白色固體形式分離。4 NMR (DMSO-d6, 400 ΜΗζ) δ 9.71 (s， 1Η), 7.49-7.37 (m, 3H), 5.85 (s, 2H), 3.59 (s, 2H)S 2.12 (s, 3H), 1.42 (s, .9H), 1.28 (s, 6H)。LC/MS (方法 A) 340.3 (M + H)+。HPLC (方法 A) Rt: 2.14 min (純度：98%)。 中間物30 : 2-【{4-[胺基（羥基亞胺基）甲基]_2_氟苯甲 基}(甲基）胺基】丙酸第三丁酯

步驟1 : 2-[(4-氰基-2-氟苯甲基）（甲基）胺基]丙酸第三 丁醋 按照一般程序11，以3-氟-4-[(曱基胺基）甲基]苯曱腈 及2-溴丙酸第三丁醋為起始物製備標題化合物。其以無色 液體形式分離》]H NMR (DMSO-d6, 400 ΜΗζ) δ 7.80-7.77 (t， J = 9.9 Hz, 1H), 7.68-7.61 (m, 2H), 3.83-3.70 (dd, 2H), 3.35-3.32 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 2.19 (s, 3H), 1.42 (s5 9H), 1.19 (d，J = 7.1 Hz，3H)。 步驟2:2-[{4-[胺基（羥基亞胺基）甲基]_2_氟苯甲基}(甲 129 201206429 基）胺基]丙酸第三丁醋 按照一般程序2,以2-[(4-氰基-2-氟苯曱基）（曱基）胺基] 丙酸第三丁酿為起始物製備標題化合物且以白色固體形式 分離。NMR (DMSO-d6, 400 ΜΗζ) δ 9.73 (s，1H), 7.49 (m， 1Η), 7.40 (m, 2H), 5.86 (s, 2H), 3.75-3.62 (m, 2H), 3.33-3.10 (t, J = 8.7 Hz, 1H), 2.19 (s, 3H), 1.43 (s5 9H), 1.18 (d, J = 7.1 Hz，3H)。LC/MS (方法 A) 326.3 (M+H)+。HPLC (方法 A) Rt: 2.05 min (純度：98.3%)。 中間物31 : N-{4-[(胺基（羥基亞胺基）甲基]_2·氟苯甲 基}-0-(第三丁基）_Ν-甲基絲胺酸第三丁酯

步驟1 : 3-第三丁氧基-2-[(4-氰基-2-氟苯甲基）胺基]丙 酸第三丁醋 向4-氰基-2-氟苯甲基溴（5 g，0_024 mol)及碳酸氫鈉 (3.9 g ’ 0.047 mol )於無水DMF ( 50 mL )中之攪拌溶液中 添加鄰第三丁基-L-絲胺酸第三丁酯鹽酸鹽（6 g，0.024 mol )。在室溫下攪拌混合物12小時。用水（1 〇〇 mL )稀釋 反應物質且在乙酸乙酯（100 mL)中萃取。用水（2x100 mL) 洗滌有機層，經NazSO4脫水且在減壓下濃縮。藉由管柱層 析法使用石油醚及乙酸乙酯作為洗提劑來純化粗產物，得

S 130 201206429 -到無色液體狀標題化合物（6.7 g, 82〇/〇)。iHNMR(DMSO-d6, 400 MHZ)S7.77(d5j = 1〇1Hz lH)j7 67 (t J = 2 2HZ) 2H)} 3-90-3.74 (m, 2H),3.47 (m5 1H), 3.41 (m, 1H), 3.1 6 (m, 1H), 1.43 (s，9H)，1.17 (s, 9H)。 步驟2 . 3-第三了氧基_2_[(4_氰基2_i苯甲基）（甲基) 胺基]丙酸第三丁醋 在〇°C下向氫化鈉（U g’ 0.038 mol)於無水DMF( 10 mL )中之攪拌懸浮液中逐滴添加於dmf ( 2〇 )中之3_ 第三丁氧基-2-[(4-氰基_2_氟苯曱基）胺基]丙酸第三丁酯 (6.7 g’ 0.019 m〇i)。在室溫下攪拌所得混合物2〇分鐘。接 著，在〇°C下逐滴添加碘甲烷（3 5mL，〇 〇〇57m〇i)，且在 室溫下搜拌混合4勿3小時。在冰水中中止反應混合物且用 乙酸乙醋（250 mL)萃取。用水（3xl〇〇 mL)洗滌有機層， 經硫酸鈉脫水且在減壓下濃縮。藉由管柱層析法使用石油 醚及乙酸乙酯作為洗提劑來純化粗產物，得到無色液體狀 標題化合物。4 NMR (DMSO-d6, 400 ΜΗζ) δ 7.78 (d，J = 9.8 Hz，1H)，7.67 (t，J = 2.5 Hz，2H)，3.92 (d，J = 15.2 Hz，1H), 3.81-3.70 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 3.63 (m, 1H), 3.52 (m, 2H), 2_26 (s, 3H), 1.42 (s，9H)，1.08 (s，9H)。 步驟3 : N-{4-[(胺基（羥基亞胺基）甲基]—2_氟苯子 基}-〇-(第三丁基）-N-曱基絲胺酸第三丁醋 按照一般程序2,以3-第三丁氧基_2-[(4-氰基-2-氣苯曱 基）（f基）胺基]丙酸第三丁酯為起始物製備標題化合物且以 白色固體形式分離。4 NMR (DMSO-d6, 4〇〇 ΜΗζ) δ 9 〇 131 201206429 1H)，7.49 (d，J = 8 Hz，1H)，7.40 (m，2H)，5.85 (s，2H)，3.80 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 3.71-3.63 (m, 2H)S 3.47 (m, 1H), 3.26 (t, J = 5.5 Hz, 1H)，2.25 (s，3H)，1.43 (s，9H)，1.09 (s，9H)。 LC/MS (方法 A) 398.0 (M+H)+。HPLC (方法 A) Rt 3.13 min (純度 94.9%)。 中間物32:2-({3-[胺基（羥基亞胺基）甲基】-5-氟苯甲基} 胺基）-2-甲基丙酸第三丁酯

步驟1 : 3-(胺基甲基）-5-氟苯甲猜 向於THF ( 50 mL)中之3-(溴甲基）_5_氟苯曱腈（中間 物14,步驟卜10g，0.47m〇1)中添加25〇/〇氫氧化銨溶液 (2·0 在85°d拌所得混合物2小時。接著將其冷卻

至室溫萃取。用水、鹽水絲有機層，乾燥 且濃縮，得到微黃色液體狀標題化合物（5g，71%>lHNMR

(DMSO-d6, 400 ΜΗζ)：δ7.6(ί1,Ι = 6.6Η2 ΐΗ))7 57 (^ = 0.6 Hz, 1Η), 7.55 (s51H), 3.74 (d, 2H)}1.97 (s, 2H) 〇 LC/MS (方法 A) 151_0 (M+H)+。HPLC (方法 A) Rt: 〇 88 Mn (純度 98%)。 步驟2 : 氰基-5-敗苯甲基）胺基]_2_甲基丙酸第三

132 201206429 丁醋 按照一般程序π，以3_(胺基甲基;)_5_氟苯甲腈及2_溴 異丁酸酯為起始物製備標題化合物，得到淡黃色液體狀標 題化合物（5 g，91%)。咕 NMR (DMSO-d6, 400 ΜΗζ): δ 7.67 (d, J = 7 Hz, 2H), 7.57 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 3.67 (d, 2H), 2.67 (t，1H)，1.40 (s，9H)，1.19 (s，6H)。LC/MS (方法 A) 293.2 (M+H)+。HPLC (方法 A) Rt: 2.29 min (純度：99.7%)。 步驟3 : 2-({3-[胺基（經基亞胺基）甲基]-5-氟苯甲基}胺 基）-2- f基丙酸第三丁醋 按照一般程序2,以2-[(3-氰基-5-氟苯曱基）胺基]-2- 甲基丙酸第三丁酯為起始物製備標題化合物且以白色固體 形式分離（5.1 g’ 92%)。NMR (DMSO-d6, 400 ΜΗζ): δ 9.72 (s，1H)，7.49 (s，1H)，7.29 (d，J = 10.1 Hz，1H)，7.15 (d，J = 9.7 Hz, 1H)，5.85 (s，2H)，3.60 (d，2H)，2.39 (d，1H)，1.41 (s, 9H)，1·20 (s，6H) » LC/MS (方法 A) 326.3 (M-H)·。HPLC (方 法 A) Rt 2.26 min (純度：98.7%)。 中間物33: 2-({4_[胺基（羥基亞胺基）甲基】_2_氟苯甲基} 胺基）-3-曱基丁酸第三丁酯

步驟1 :2-[(4-氰基-2-氟苯甲基）胺基]·3_甲基丁酸丨_第 133 201206429 三丁醋 在氮氣下向2-胺基-3-甲基丁酸第三丁醋（Bachem，6 3 g，0.036 mol)於無水DMF ( 5〇 mL)中之攪拌溶液中添加 4-氰基-2-氟-苯甲基溴（6.2 g，0.029 mol)及 NaHC03 ( 6.09 g ’ 0.073 mol >在室溫下攪拌所得混合物i 6小時。添加水 (70 mL)且用乙酸乙酯（2x100 mL)萃取。用水（3x100 mL) 洗滌有機層，且使溶劑經NaaSO4脫水且在真空下濃縮。藉 由管柱層析法使用石油醚/乙酸乙酯作為洗提劑來純化所得 殘餘物，得到無色液體狀標題化合物。1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 7.78 (d, J = l〇.2 Hz, 1H), 7.67 (t, J = 1.5 Hz, 2H) 3.81 (m，2H)，2.71 (m，1H)，2.49 (m 1H)，1.81 (m，1H)，1.37 (s, 9H), 0.88-0.84 (m, 6H) 〇 步驟2 : 2-({4-[胺基（羥基亞胺基）曱基]-2-氟苯甲基}胺 基）-3-甲基丁酸第三丁醋 按照一般程序2’以2-[(4-氰基-2-氟苯曱基）胺基]-3-曱基丁酸第三丁醋為起始物製備標題化合物且以白色固體 形式分離。LC/MS (方法 A) 340.3 (M+H) +。HPLC (方法 A) Rt: 2.47 min (純度：98.7%)。 中間物34: 2-({4-丨胺基（羥基亞胺基）甲基】-2-氟苯甲基} 胺基）-2-甲基丙酸第三丁酯

S 134 201206429

步驟1 : 2-[(4-氰基_2-氟苯甲基）胺基]-2-甲基丙酸第三 丁醋 在氮氣下向2-胺基-2-曱基丙酸第三丁酯（Bachem，7.9 g，0.05 mol)於無水DMF (5〇 mL)中之攪拌溶液中添加 4-氰基-2-氟笨甲基溴（1〇6 g，〇〇5 m〇1)及固體 (8·3 8，〇·099 m〇1)。在70°C下攪拌反應混合物16小時。添 加水（70 mL)且用乙酸乙酯（1〇〇 mL)萃取。用水（3xl〇〇 mL )洗滌有機層，且使溶劑經脫水且在真空下濃 縮。错由管柱層析法使用石夕膠（6〇至12〇目）及石油趟/乙 酸】-3作為洗提劑純化殘餘物，得到無色液體狀標題化合 ^ 0 H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 7.78 (d, J = l〇.〇 Hz, 1H) 7.71-7.65 (m, 2H), 3.69 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 2.55 (s, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.19 (S,6H) 〇 ^ 2 (H-[胺基（經基亞胺基）甲基]_2-氟苯甲基）胺 基）·2_甲基丙酸第三丁醋 按照一般程序2，以2_[(4_氰基_2_氟苯甲基）胺基]_2_ 甲基丙酸第三丁酯為起始物製備標題化合物且以白色固體 瓜式刀離。H NMR (DMS〇_d6, 4〇〇 μηζ)谷 m ⑷ a)， 7-49-7.38 (m, 3H), 5.85 (S} 2H), 3.61 (s, 2H), 2.29 (s, 1H), 135 s 201206429 1.41 (s，9H)，1_20 (s，6H)。LC/MS (方法 A) 326 3 (M+H)+。 HPLC (方法 A) Rt: 2.26 min (純度：99 4%)。 中間物35: 2-((l-(4-(N，-羥基甲脒基）苯基）_2_f氧基乙 基）（甲基）胺基）乙酸第三丁酯

步驟1 : 4-(2-甲氧基乙醯基）苯甲腈 將異丙基氣化鎂（於THF中之2 Μ溶液；3.0 mL; 6.0 mmol)添加至4-碘苯曱腈（Μ g，5.0 mm〇1)於無水thF (10 mL )中之冰冷〉谷液中。在此溫度下授摔此溶液1 〇分鐘， 接著逐滴添加至沁2-二甲氧基曱基乙醯胺（0.998 g，7 5〇 mmol)於無水THF (5mL)中之冷卻（"ye)溶液中。在 此酿度下攪拌反應混合物1小時’接著在室溫下授拌1小 時。接著用1 0%硫酸氫鉀水溶液處理反應混合物且用dcm 萃取。使有機相穿過疏水性玻璃料且在減壓下蒸發。藉由 急驟層析法（用異己烷/Et0Ac ( 3:2 )洗提）純化殘餘物， 得到標題化合物。iH NMR (CDC13, 400 ΜΗζ) δ 8.06-8.04 (ms 2Η)，7.80-7.77 (m，2Η), 4·67 (s，2Η), 3.50 (s，3Η)。 步驟2 : 2-((1-(4-氰基苯基）-2-甲氧基乙基）（甲基）胺基) 乙酸第三丁醋 在環境溫度下將4-(2-曱氧基乙醯基）苯甲腈（0.338 g ; 136 201206429 1.93 mmol)及甘胺酸第三丁酯（0.3 82 mg ; 2.90 mmol)於 DCM/MeOH ( 1:1 ； 10 mL)中之溶液攪拌1小時。向反應 混合物中添加氰基硼氫化鈉（0.182 g ; 2.90 mmol)及乙酸 (0.166 mL ; 2_90 mmol)且攪拌混合物18小時。添加三聚 甲越水溶液（0.787 mL)及氰基删氫化鈉（〇_182 g; 2.90 mmol )且再攪拌反應混合物72小時。用DCM及水稀釋反 應混合物，接著傾倒穿過疏水性玻璃料。在真空中蒸發濾 液。藉由急驟層析法（用異己烷/EtOAc ( 3:2)洗提）純化 殘餘物，得到標題化合物。4 NMR (CDC13，400 ΜΗζ) δ 7.62- 7.61 (m, 2H), 7.51-7.49 (m, 2H), 4.09-4.06 (m, 1H), 3-62 (m5 2H), 3.42-3.37 (m, 1H)S 3.29 (s, 3H), 3.21-3.17 (m, 1H)，2_39 (s，3H)，1_47 (s，9H)。 步驟3 : 2-(( l-(4-(：N’-羥基甲脒基）苯基）-2-甲氧基乙 基）（甲基）胺基）乙酸第三丁醋 在80°C下將2-((1-(4-氰基苯基）-2-甲氧基乙基）（甲基） 胺基）乙酸苐二丁酯（〇.136g; 0.45 mmol )及50%經胺水溶 液（0.137 mL ; 2.24 mmol)於乙醇（2 mL·)中之溶液加熱 1 8小時。在真空中蒸發溶劑。使殘餘物分配在DCM與水之 間。將有機相傾倒穿過疏水性玻璃料且在真空中蒸發，得 到標題化合物（0·141 g , 93%)。咕 NMR (CDC13, 400 MHz) δ 7.78 (d，J =8,4 Hz，2H)，7.59-7.57 (m，2H)，6.70 (br s，1H)， 4·84 (br s’ 2 H)，4.05-4.02 (m，1H)，3.71-3.67 (m’ 1H)’ 3.63- 3.60 (m，1H)，3.40-3.35 (m，1H)，3.34 (s，3H)，3.21·3.ι6 (m，1H)，2.40 (s，3H)，1.49 (s，9H)。 137 201206429 中間物36 : 2-(2-(第三丁基二甲基矽烷氧基）_U(4_(N， 羥基曱脒基）苯基）乙基胺基）乙酸第三丁酯

步驟1 : 4-(2-羥基乙醢基）苯甲腈 將三氟乙酸（3.5 mL ; 47.1 mmol )添加至4-乙醯基苯 甲腈（3.40g;23.4 mmol )及[雙（三氟*乙醢氧基）峨]苯（2〇 1 g ; 46.7 mmol)於乙腈/水（5:1 ; 300 mL)中之溶液中。在 回流下加熱反應混合物1 8小時β在真空中移除溶劑且使殘 餘物分配在DCM與10%碳酸鉀水溶液之間。將有機相傾倒 穿過疏水性玻璃料且在真空中蒸發溶劑。藉由急驟層析法 (用異己烷/EtOAc ( 10:1至4:1)洗提）純化殘餘物，得到 標題化合物。1h NMR (CDC13, 400 ΜΗζ) δ 8.04 (d，J = 8.4 Hz 2H)，7.84 (d，J = 8.4 Hz，2H)，4.91 (d，J = 2 Hz, 2H)，3.37 (t， J = 2.0 Hz，2H)。 步驟2 : 2-(1-(4-氰基苯基）-2-羥基乙基胺基）乙酸第三 丁醋 在環境溫度下將4-(2-羥基乙醯基）苯甲腈（〇.730 g; 4.53 mmol )及甘胺酸第三丁酯（0.896 mg ; 6.80 mmol )於 DCM/MeOH ( 1:1 ; 12 mL)中之溶液攪拌1小時。向反應 138 201206429 混合物中添加氰基硼氫化鈉（0 342 g ; 6.80 mmol)及乙酸 (0.389 mL ; 6_80 irnnol)且攪拌混合物18小時。用DCM及 水稀釋反應混合物，接著傾倒穿過疏水性玻璃料。在真空 中蒸發濾液。藉由急驟層析法（用異己烷/Et〇Ac ( 3:2 )洗 提）純化殘餘物，得到標題化合物。NMR (CDC13, 400 MHz) δ 7.65 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.49 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 3.88-3.85 (m, 1H), 3.76-3.72 (m, 1H), 3.59-3.55 (m, 1H), 3.32 (d, J = 17.6 Hz，1H)，3.15 (d，J = 17.6 Hz, 1H)，1.49 (s，9H)。 步驟3 : 2-(2-(第三丁基二甲基矽烷氧基）“-(扣氰基苯 基）乙基胺基）乙酸第三丁醋 將第二丁基一曱基石夕烧氯（0.579 g; 3.84 mmol )及咪 唑（0·261 g ; 3.83 mmol)添加至2-(1-(4-氰基苯基）-2-羥基 乙基胺基）乙酸第三丁 S旨（0.709g; 2_56 mmol )於DMF ( 1 〇 mL )中之溶液中。在周圍溫度下攪拌反應混合物1 8小時。 用EtOAc稀釋混合物，且依序用水及鹽水洗滌。將有機相 傾倒穿過疏水性玻璃料且在真空中蒸發溶劑。藉由急驟層 析法（用異己烷/EtOAc ( 10:1)洗提）純化殘餘物，得到標 題化合物。1H NMR (CDC13, 400 ΜΗζ) δ 7.63-7.61 (m，2H)， 7.48 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 3.86-3.83 (m, 1H), 3.66-3.55 (m, 2H), 3.23 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 3.06 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 2.53 (br s, 1H), 1.47 (s, 9H), 0.90 (s, 9H), 0.10 (s, 3H), 0.09 (Sj 3H) 〇 步驟4 : 2-(2-(第三丁基二甲基矽烷氧基）-1-(4-(n，-羥基 甲脒基）苯基）乙基胺基）乙酸第三丁醋 139 201206429 在70°C下將2-(2-(第三丁基二甲基矽烷氧基）4-(4-氰基 苯基）乙基胺基）乙酸第三丁酯（ 0.496 g; 1.27 mmol)及50% 經胺水溶液（0.389 mL ; 6.49 mmol)於乙醇（5 mL )中之 溶液加熱18小時。在真空中蒸發溶劑。使殘餘物分配在 DCM與水之間。將有機相傾倒穿過疏水性玻璃料且在真空 中蒸發’得到標題化合物（0.566 g，1 〇〇% )。4 NMR (CDC13, 400 MHz) δ 7.59 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.39 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.00 (br s, 1H), 4.84 (br s, 2H), 3.84-3.81 (m, 1H), 3.68-3.57 (m, 2H), 3.25 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 3.08 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 2.60 (br s, 1H), 1.44 (s5 9H), 0.88 (s, 9H), 0.03 (s, 3H), 0.01 (s, 3H) 〇 中間物37 · Nf -經基-4-(經基甲基）苯甲醯亞胺酿胺

向4-(羥基甲基）苯曱腈（ii_〇5 g ; 83.08 mmol)於EtOH (100 mL)中之溶液中添加羥胺（27.4 mL; 415 mmol)( 50%， 5.6 Hz,

於水中）且將混合物加熱至74°C後持續16小時。將混合物 傾入結晶皿中且蒸發溶劑。用大量EtOAc、無水MeOH及 無水MeCN洗滌殘餘物，經由疏水性玻璃料過濾，且在真 空中移除溶劑’獲得白色固體狀標題化合物（131 g，95%)β 'Η NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 9.58 (s, 1H), 7.70-7.62 (m, 2H), 7.34 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 5.79 (s, 2H), 5.23 (t, J 140 201206429 1H)，4·54 (d，J = 5.6 Hz, 2H)。 中間物38 : N，-羥基-3-(羥基甲基）笨甲脉

按照關於中間物37所述之程序，伯，、， 但从3-(羥基甲基）苯 曱腈（8.4g; 63.4 mmo 1 )為起始物來劁扯 水裂備標題化合物，獲 得白色固體狀標題化合物（9.2 g，86% )。lH讀汉（DMs〇 d6, 400 MHz) δ 9.63 (s, 1H), 7.67 (s5 lH), 7.58-7.54 (m 1H) 7·35 (d’ J = 4·7 Hz’ 2H)’ 5·82 (s’ 2H)’ 5·27 ； = 5 7 叫吼 4.54 (d，J = 5·7 Hz，2H)。 中間物39: N，-經基-4-(經基乙基）笨甲醢亞胺醯胺

按照關於中間物37所述之程序，但以4-(羥基乙基）苯 曱腈（2.4 g; 16.5 mmol)為起始物來製備標題化合物，獲 得白色固體狀標題化合物（3.0 g，99% )。4 NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 9.58 (s, 1H), 7.60 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.24 (d, J =7.9 Hz, 2H), 5.75 (s, 2H), 4.75-4.69 (m, 1H)S 3.64 (d, J = 6.5 Hz，2H)，2.80-2.72 (m，2H)。LC/MS (方法 b): 181 (M + H)+。HPLC (方法 I) Rt 8_15 min (純度：98.7%)。 141 201206429 中間物40 : Ν’-羥基-3-(經基乙基）苯甲醯亞胺醯胺

按照關於中間物37所述之程序’但以3-(羥基乙基）苯 曱腈（9.1 g，6.2 mmol)為起始物來製備標題化合物，獲得 白色固體狀標題化合物（1.1 g ; 94%)。4 NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 9.59 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.51 (d, J = 7.7 Hz, 1H)，7.33-7.21 (m，2H)，5.77 (s，2H)，4.66 (t，J = 5·2 Hz，1H)， 3.65 (q，J = 6.2 Hz，2H)，2.77 (t，J = 7.1 Hz，2H)。LC/MS (方 法 B): 181 (M+H)+。HPLC (方法 I) Rt 8.26 min (純度： 99.9%) 〇 中間物41 : ((lR)-l-{4-[胺基（羥基亞胺基）曱基】苯基} 乙基）胺基甲酸第三丁酯

步驟1 : [(1R)-1-(4-氰基苯基）乙基]胺基甲酸第三丁醋 在置於氮氣氛圍下且裝備機械攪拌器、溫度計及加料 漏斗之5頸圓底燒瓶（2.5 L)中製備4-(R)-l-胺基-乙基）-苯甲腈（81.30 g ; 556.13 mmol ; 1.0 當量）於 DCM( 500 ml). s 142 201206429 中之溶液且在5 °C下冷卻。經3 0分鐘逐滴添加二碳酸二第 三丁酯（121.38 g; 556.13 mmol ; 1_0 當量）於 DCM( 400 ml) 中之溶液，將溫度保持在5°C至10°C。約20分鐘後出現沈 澱物，但隨後再次溶解。2小時後移除冷卻浴。5.5小時後， 用 0.1 N HC1 水溶液（300 ml)、水（300 ml )及水（250 ml ) /NaHCCh飽和水溶液（50 ml)之混合物洗滌反應混合物。 將有機層脫水（MgS〇4 )且在真空下濃縮，獲得淺黃色油狀 標題化合物（139.43 g，定量產率）。LC/MS (方法B): 246.9 (M+H)+，244.9 (M-Η).。HPLC (方法 A) Rt 3·89 min (純度： 98.8%)。 步騾2. ((1R)-1_{4-[胺基（經基亞胺基）甲基]苯基}乙基) 胺基曱酸第三丁 S旨 按照一般程序1，以[(1R)-1_(4_氰基苯基）乙基]胺基曱 酸第二丁自曰為起始物製備標題化合物且以白色粉末形式分

離（139.2 g ’ 89%)。LC/MS (方法 b) 279.9 (M+H)+。HPLC (方法 A) Rt 2.10 min (純度：99.7%)。 中間物42 : {3-[胺基（羥基亞胺基）甲基】苯甲基}甲基胺 基曱酸第三丁酯

步驟1 : 3-[(曱基胺基）曱基]苯甲猜 143 201206429 在置於氮氣氛圍下的 小時將3-(溴甲基）苯曱腈 頊圓底燒瓶（250 ml)中，經1 5 g ; 25.5 mmol ; 1 當量）於無 水THF ( 20 ml )中之溶液逐滴 Μ ; 127.52 mmol ; 5 當量）（於 添加至曱基胺（63.76 ml ; 2 THF中之2M溶液）中。在 室溫下擾拌反應混合物2小時。觀察到__定程度的雙苯甲 基化（7%)。過濾反應混合物以移除鹽。在減壓下蒸發滤液。 用DCM溶解殘餘物並再次蒸發，獲得黃色油狀標題化合物 (3.78 g ’定量產率）。其不經任何進—步純化即用於下一步 驟。LC/MS (方法 B) 146.8 (M+H)+。 步驟2: (3-氰基苯甲基）甲基胺基甲酸第三丁醋 在置於氮氣氛圍下之圓底燒瓶（1〇〇ml)中，製備粗產 物3-[(甲基胺基）甲基]苯甲腈（3.78§;23 79匪〇1;1當量） 於DCM (37_80 ml)中之溶液且在冰浴中冷卻’接著經2 分鐘添加二碳酸二第三丁酯（5.19g; 23 79 mm〇1; i當量） 於DCM ( 18.90 ml )中之溶液。在〇。〇至室溫下攪拌反應混 合物30分鐘。在減壓下濃縮反應混合物’獲得黃色油狀物 (6.87 g)。藉由急驟層析法（庚烷/Et〇Ac梯度自90:10至 70:30 )加以純化，得到無色油狀標題化合物（513 g，88% )。 ’H NMR (DMSO-d6, 300 ΜΗζ) δ 7.76 (ddd，J = 6.9, 1.9 1 8 1H), 7.65 (s, 1H), 7.62 - 7.48 (m, 2H), 4.41 (s, 2H), 2.79 (s 3H)，1.62-1.16 (m，9H)。HPLC (方法 A) Rt 4.28min (純度·· 100.0%)。 步驟3 : {3 - [ (Z)-胺基（經基亞胺基）甲基]苯甲基）甲基胺 基曱酸第三丁醋 144 201206429 • 按照一般程序1，以（3-氰基苯曱基）甲基胺基曱酸第三 τ §旨為起始物製備標題化合物且以白色粉末形式分離（4 95 g ’ 87%)° NMR (DMSO-d6，300 ΜΗζ) δ 9.63 (s，1H)， 7.62-7.48 (m，2η)，7.42-7.29 (m，1Η)，7.21 (d，J = 7.6，1Η)， 5.79 (S，2H)，4.38 (s，2H)，2.76 (s，3H)，1.59-1.24 (m，9H)。 LC/MS (方法 B): 280.3 (M + H)+。HPLC (方法 A) Rt 2.73 min. (純度：99.9°/〇)。 t間物43 : [{3-[胺基（羥基亞胺基）甲基]苯甲基}(甲基） 胺基】乙酸第三丁醋

步驟1 : [(L氰基苯甲基）（甲基）胺基]乙酸第三丁醋 在〇°C下，經1 〇分鐘之時段向肌胺酸第三丁酯鹽酸鹽 (8.1 g，44.9 mmol)及三乙胺（17 mL，122.4 mmol)於 ACN (100 mL)中之攪拌溶液中逐份添加3-(溴曱基）苯甲腈（8.0 g ’ 40.8 mmol )。在室溫下攪拌3小時後，將反應混合物傾 入水中且用DCM萃取。接著，用鹽水洗滌有機層，經硫酸 鈉脫水且在減壓下濃縮，得到淺綠色液體狀標題化合物（9.0 g s 85%) 〇 !H NMR (DMSO-de, 400 MHz) δ 7.72 (2H, m), 7.64 (1H, m), 7.54 (1H, m), 3.66 (2H, s), 3.18 (2H, s), 2.22 (3H, s), 1.41 (9H，s)。 步驟2 : [{3-[胺基（羥基亞胺基）曱基]苯甲基}(甲基）胺 145 201206429 基]乙酸第三丁醋 根據一般程序1 ’以[(3-氰基苯甲基）（甲基）胺基]乙酸第 三丁酯為起始物製備標題化合物。其以白色粉末（8.5 g , 84。/。）形式獲得 JHNMR(DMS〇_d6 4〇〇MHz)5 9 57 (iH， s), 7.59 (1H) s)5 7.53 (1H, m), 7.30 (2Hj m), 5.75 (2H, s),

3.61 (2H, s)，3.15 (2H，s)，2.23 (3H，s)，1.4i (9H，s)。LC/MS (方法 B): 294.0 (M + H)+。HPLC (方法 A) Rt 3 3 i min (純度： 97.5%)。 中間物44 : (lR)-l-(4-{5-[2，-甲基_2·(三氟甲基）聯苯_4_ 基】-1,2,4-D号二唑_3-基}苯基）乙胺

手性 步驟1 : [(lR)-l-(4-{5-[2’_甲基-2-(三氟甲基）聯苯 基]-1,2,4-碎二唑_3-基}苯基）乙基]胺基甲酸第三丁醋 在置於氮氣氛圍下之3頸圓底燒瓶（ 250 ml)中，製備 中間物1 ( 10.03 g ; 35.8 mmol ; 1·〇當量）及n-甲基嗎啉 、4.13 ml ’ 37.5 9 mmol ; 1.05 當量）於無水 THF ( 100 ml) 中之溶液且在5t下用冰浴冷卻。經2至3分鐘逐滴添加氣 曱酸異丁酯（4.66 ml ; 35.8 mmol ; 1.0當量），將溫度保持 在5 C至9 C。處於5°C下1小時後，經2至3分鐘添加中間 物41。2.5小時後，用MTBE (2〇()以）稀釋反應混合物，

S 146 201206429 - 接著用水（2χ 100 ml )、〇. 1 N NaOH 水溶液（loo mi )、水 (100 ml )及鹽水（100 ml )洗滌。將有機層脫水（MgS04) 且在真空下濃縮直至約35 g(出現一些晶體）。相繼用MTBE (30 ml，快速結晶）、戊烧（45 ml)、MTBE ( 15 ml)及戊 烧（1 5 ml )稀釋混合物。遽出沈殿物，用MTBE/戊烧1:1 (1 X，75 ml )及戊烷（2χ )洗滌。在真空下乾燥（4(TC，45 分鐘）。分離白色粉末狀[(lR)-l-(4-{(Z)-胺基[({[2'-甲基 -2-(三氟曱基）聯苯-4-基]羰基}氧基）亞胺基]甲基}苯基）乙 基]胺基甲酸第三丁酯（17.55 g，91%)。LC/MS (方法B): 542.3 (M+H)+，540.4 (M-Η)·。HPLC (方法 A) Rt 5.58 min (純 度：99.6%)。 在置於氮氣氛圍下之圓底燒瓶（500 ml )中，使 [(1R)-1_(4-{(Z)-胺基[({[2'-曱基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基]羰 基}氧基）亞胺基]曱基}苯基）乙基]胺基甲酸第三丁酯（17 g ; 31.3 9 mmol ; 1.0當量）懸浮於曱苯（17〇 ml)中，接著 在1 〇〇°C下加熱。一夜後，在減壓下濃縮反應混合物，獲得 淺黃色油狀標題化合物（19.06 g，定量產率）。此化合物不 經進一步純化即用於下一步驟。LC/MS (方法B): 582.4 (M+AcO)·。HPLC (方法 a) Rt 6.57 min (純度：99.1%)。 步驟2 : (lR)-l-(4-{5-[2·-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基]-1，2,4-ΰ号二唑-3-基}苯基）乙胺 在圓底燒瓶（500 ml )中，製備[(1R)-；L - (4- {5-[2’_甲基 -2·(二氟曱基）聯本-4-基]-1，2,4-〇号二〇坐-3-基}苯基）乙基]胺 基曱酸第三丁酯（19 g; 30.85 mmol ; 1當量）於AcOH ( 95 147 201206429 ml )中之溶液。接著添加氣化氫（9.09 ml ; 92.54 mmol ; 3 當量）（32%水溶液）。在室溫下攪拌反應混合物1小時。在 真空下濃縮反應混合物以移除大部分AcOH。用MTBE( 300 ml )溶解殘餘物且用3 N NaOH水溶液（300 ml)、水（150 ml)及鹽水（150 ml)洗滌。用MTBE( 100 mL)萃取水層。 合併有機層，脫水（MgS04 )且濃縮，獲得淺黃色油狀標題 化合物（13.13g，定量產率 h1!! NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.51 (d, J = 1.4, 1H), 8.47 (dd, J = 8.0, 1.4, 1H), 8.10-8.01 (m, 2H), 7.69 - 7.55 (m3 3H), 7.44 - 7.22 (m, 3H), 7.16 (d, J = 7.4, 1H), 4.08 (q, J = 6.6, 1H), 2.01 (s, 3H), 1.91 (s, 2H), 1.29 (d，J = 6.6，3H)。LC/MS (方法 B): 407.1 (M-NH2)+。 HPLC (方法 A) Rt 4.37 min (純度：99.8%)。 中間物45: N-甲基甲基_2_(三氟甲基）聯苯 基】-I，2,4·口号二唑_3_基）苯基）甲胺鹽睃鹽

步驟1」f基（3-{5'[2'-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4- 土 1，2,4-〇可一唑_3-基}笨甲基）胺基甲酸第三丁醋 物，置於氮氣氛圍下之圓底燒瓶（5()⑷中，製備中間 之 J2.〇lg;7.16mm〇1;1 當量）於無水 THF(20ml)中 ^谷液且在冰浴中冷卻。添加N-甲基嗎琳（0.83 ml;7.52

S 148 201206429 mmol ; 1·〇5當量）’接著添加氯曱酸異丁酯（〇 93 ml ; 7.16 mmol ; 1當量）。在冰浴中攪拌混合物1小時。添加一份中 間物42 ( 2 ·0 g ; 7.10 mmol ; 1當量）且移除冷卻浴。在室 溫下攪拌反應混合物1小時。接著用MTBE ( 40 ml)稀釋， 且用水（30 ml)、0_1N NaOH ( 20 ml)、水（20 ml)及鹽水 (20 ml )洗滌。將有機層脫水（MgS04 )且在真空下濃縮， 獲得3.97 g白色泡沫狀物。用甲苯（3〇 ml)溶解泡沫狀物， 且在95°C下加熱所得溶液24小時。在真空下濃縮反應混合 物，獲得黃色膠質物，藉由急驟層析法（庚烷/Et〇Ac梯度 自95:5至80:20 )加以純化。分離無色油狀標題化合物（3 25 g « 87%) ° 'H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.53 (d, J = \A, 1H), 8.48 (dd, J = 8.0, 1.4, 1H), 8.15 - 7.96 (m, 2H), 7.66 (d, J = 8.0, 1H), 7.64 - 7.56 (m, iH), 7.56 - 7.46 (m, 1H), 7.41-7.33 (m，2H)，7.32-7.25 (m, 1H)，7.17 (d，J = 7.3，iH)

4.49 (s，2H)，2.81 (s，3H)，2.02 (s，3H)，1.47 (s，9H)。LC/MS (方法 B): 54U (M + NH4+) β Ηριχ (方法 A)幻 6 % _ (純 度：98.7%)。 步驟2甲基小（3·{5_[2，_甲基_2 (三i f基）聯苯j 基]-1,2,4-ΰ亏二唑基}笨基）甲胺鹽酸鹽 在圓底燒瓶（l〇〇ml)中，製備甲基（3_{5_[2,_甲基·二 氟甲基）聯苯_4.基苯甲基^ 三丁醋（3.12g; 5.96mm〇1; i 當量）於 Ac〇H(m2 中之溶液，接著添力口鹽酸水溶液（2.93ml32%水溶液，· mmol; 5.00當量）。在室溫下攪拌反應混合物2小時。在真 !； 149 201206429 空下濃縮反應混合物，獲得無色油狀物。緩慢添加Et2〇 (約 ·. 40 ml ) ’且濾出所得沈澱物，用Et20 ( 3 X )洗滌，接著用 戊烷（3 X )洗滌’且在真空下乾燥（4(rc，隔夜）。分離白 色粉末狀標題化合物（2.44 g，89%)。NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 9.34 (s, 2H), 8.55 (s, 1H), 8.50 (d, J = 8.0, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.18 (d, J = 7.8, 1H), 7.83 (d, J = 7.8, 1H), 7.77 -7.62 (m, 2H), 7.44 -7.33 (m, 2H), 7.32 - 7.23 (m, 1H), 7.17 (d5 J = 7.4, 1H)，4.27 (s，2H)，2.58 (s，3H)，2.02 (s, 3H)。LC/MS (方法 B): 424.3 (M + H)+。HPLC (方法 A) Rt 4.45 min (純度： 99.7。/。）。元素分析：[C24H2〇N3OF3-HC1]修正值：C 62.68%，H 4.60%，N 9·14%，Cl 7.71% ;實驗值：C 62.56%，Η 4.76%，N 8.81%，Cl 7.45% 〇 中間物46 : N-(l-{4-[(Z)-胺基（羥基亞胺基）甲基】苯 基}-2-{丨第三丁基（二甲基）矽烷基】氧基丨乙基丙胺酸第 三丁酯

步驟1 : 2-羥基-1-(4-氰基苯基）乙酮 在室溫下向2-溴-1-(4-氰基苯基）乙酮（15g，〇〇67 ^οΐ ) 於甲醇（200 ml)中之溶液中添加甲酸鈉（136 g，〇2〇l

S 150 201206429 • mo1 )。使反應混合物回流15小時並過濾。在減壓下濃縮濾 液。用乙酸乙酯溶解殘餘物，用水及鹽水溶液洗滌，經 NazSO4脫水並蒸發。藉由管柱層析法，使用石油醚及乙酸 乙酯（60:40 )作為洗提劑純化粗物質，得到灰白色固體狀 標題化合物（5.4 g，50%)。4 NMR: (DMSO-d6, 400 ΜΗζ) δ 8.06-8.04 (dd，J = 1.9, 6.7 Ηζ，2Η)，8.00-7.98 (dd，J = 1 9 6.7 Hz, 2H), 5.27-5.24 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 4.82-4.80 (d, J = 5.9 Hz，2H)。 步驟2 : N-[l-(4-氰基苯基）_2_羥基乙基]_D•丙胺酸第三 丁輯 在至>皿下向2 -經基-1-(4 -氛基苯基）乙嗣（3.2 g，0.0198 mol)於曱醇及DCM ( 1:1 ) ( 100 ml)中之溶液中添加D_ 丙胺酸第三丁酯鹽酸鹽（3.6 g’ 0.0198 mol)及三乙胺（6 9 m卜0.0495 mol)。在70°C下加熱反應混合物18小時。將反 應混合物冷卻至〇°C且逐份添加NaBH4 ( 0.9 g，0.0237 mol )，並且在室溫下攪拌丨小時。用冰中止反應混合物， 用DCM ( 2x 100 ml )萃取，經硫酸鈉脫水並蒸發。藉由管 柱層析法，使用三氣甲烷及曱醇（90:10)作為洗提劑純化 粗物質’得到棕色油狀標題化合物（2.5 g，43%)。4 NMR: (CD3〇D, 400 MHz) δ 7.71-7.69 (d, J = 8.36 Hz, 2H), 7.59-7.56 (d, y = 8.08 Hz, 2H), 4.76-4.74 (t, 6.32 Hz, 1H), 3.64-3.61 (q, 2H), 3.44-3.42 (d5 J = 7.04 Hz, 1H), 1.47 (s, 9H)，1,30-1.28 (d，7.04 Hz, 3H)。LC/MS (方法 A): 291.3 (M+H)+。HPLC (方法 A) Rt 2.95 min.(純度：76.8%)。 151 201206429 步驟3 : N-[2-{[第三丁基（二甲基）矽烷基]氧基卜 氰基苯基）乙基]-D-丙胺酸第三丁醋 在室溫下向N-[ 1-(4-氰基苯基）-2-羥基乙基]-D-丙胺西楚 第三丁酯（2 g，0.0068 mol)於DCM ( 30 ml )中之溶液中 添加咪唑（0.92 g ’0_0 136 mol )及第三丁基二曱基矽燒氣 (1.25 g，0.0082 mol)。在室溫下攪拌反應混合物6小時， 且使其分配在DCM與水之間，分離各層且在減壓下濃縮。 藉由管柱層析法，使用石油醚及乙酸乙酯（80:20 )作為洗 提劑純化粗物質，得到棕色油狀標題化合物（2 g，74% )。 'H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) δ 7.80-7.77 (m, 2H) 7.53-7.50 (m，2H)，4.86-4.85 (t，J = 3.9 Hz，1H )，3.17-3.13 (m，1H)，2.61-2.55 (m，1H)，1.95-1.89 (m，1H)，1.39 (s，9H) 1.09-1.07 (d，= 7·1 Hz，3H)，0.80 (s，9H), 0.04 (s，3H)’ -0.12 (s，3H)。LC/MS (方法 A): 405.3 (M + H)+。HPLC (方法 A) Rt 5.13 min.(純度：73.7%)。 步驟4 : N-(l-{4-[(Z)-胺基（羥基亞胺基）甲基]苯 基}-2-·[[第三丁基（二曱基）矽烷基]氧基}乙基）D丙胺酸第 三丁醋 在室溫下向N-[2-{[第三丁基（二甲基）矽烷基]氧 基}-1-(4-氰基苯基）乙基]_D_丙胺酸第三丁酯（2 g，〇〇〇49 mol)於乙醇（4〇 mi)中之溶液中添加5〇%羥胺水溶液〇 ml，0·0247 m〇1)<)在7(rc下加熱反應混合物6小時，冷卻 至室&且在減壓下濃縮。將殘餘物溶解於乙酸乙酯中，用 水肌水洗滌’經Na2S〇4脫水並蒸發，得到棕色油狀標題

S 152 201206429 . 化合物（2 g ’ 90%)。4 NMR: (DMSO_d6, 400 MHz) δ 9.5 7 (s, 1H), 7.61-7.59 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.30-7.28 (d, J = 8.3

Hz，2H)，5.76-5.74 (d，J = 5·00 Hz，2H )，4.77-4.74 (m, 1H), 3.21-3.19 (m，1H)，2.69-2.59 (m，1H)，1.95-1.72 (m，1H)， 1.39 (s, 9H), 1.10-1.06 (m, 3H), 0.86-0.82 (m, 9H), 〇.〇3

(s，3H)，-0.12 (s，3H)。LC/MS (方法 A): 438.3 (M+H)+。HPLC (方法 A) Rt 3.82 min.(純度：71.1%)。 實施例1 : 2-[(2-氣-4-{5-[2’-甲基_2_(三氣曱基）聯苯_4_ 基】-1，2,4·α号二唑_3_基}苯甲基曱基）胺基]丁酸鹽酸鹽

按照一般程序3，以中間物1及中間物5為起始物來製 備2-[(2-氟-4-{5-[2，-甲基-2-(三氟曱基）聯苯冰基]]々，‘吟 二。坐-3-基}笨曱基）（曱基）胺基]丁酸第三丁酯。按照—般程 序8將其水解，得到白色粉末狀標題化合物。1h (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.55 (br s，1H)，8.51 (m，iH)，8 〇7 (d J = 8_0 Hz，1H)，8.00 (d，J = 10.4 Hz，1H)，7.93 (m，1H) 7 68 (d，J = 8 Hz，1H)，7.43-7.33 (m，2H)，7.29 (m，1H)，7.17 (d j =7.5 Hz，1H)，4.41 (m，2H)，3.91 (m，1H)，2.71 (br s 3H)

2.02 (s，3H)，1.97 (m，2H)，1.00 (t，J = 6.9 Hz，3H)。lc/MS (方法 B): 528.3 (M + H) +，526.3 (M-H)·。HPLC (方法 A) Rt 4.48 min (純度：99.7%)。 153 201206429 實施例2 : N-[(lR)-l-(4-{5-[2，-(二氟甲基）-2-甲基聯笨 -4-基】-1,2,4-0号二唑-3-基}苯基）乙基】_D-丙胺酸鹽酸鹽

按照一般程序3，以中間物2及中間物6為起始物來製 備1^-[(111)-1-(4-{5-[2，-(二氟甲基）-2-甲基聯苯-4-基]-1，2,4-口号二唑-3-基}笨基）乙基]-D-丙胺酸甲酯。按照一般程序9 將其水解，得到白色粉末狀標題化合物。1H NMR: (DMS〇-d6 300 MHz) δ 8.17 (m，3H)，8.08 (m，1H)，7.76 (m，3H)，7.65 (m，2H)，7.44 (d，1H，J = 7.9 Hz)，7.33 (m，1H)，6.64 (t，1H，J =54.6 Hz)，4.50 (m，1H)，3.51 (m，1H)，2.14 (s，3H)，1.59 (m， 3H)，1.40 (m，3H)。LC/MS (方法 B): 479.4 (M+H) +，477.5 (M-H)_。HPLC (方法 A) Rt 4.15 min (純度：98.3%)。 實施例3 : N-【（lS)-l-(4-{5-[2-(甲氧基甲基）·2，-甲基聯 苯-4-基】-1，2,4-d号二咬-3-基}苯基）乙基]-D -丙胺酸鹽酸鹽

按照一般程序3，以中間物3及中間物1 〇為起始物來 製備N-[(lS)-l-(4-{5-[2-(曱氧基曱基）-2，-曱基聯苯_4_

S 154 201206429 基]-1，2，4- σ号二唾-3 -基}苯基）乙基]-D-丙胺酸曱酯。按照— 般程序9將其水解’得到白色泡沫狀標題化合物。] (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.33 (m，1H)，8.18 (m，3H)，7 8〇 (m 2H)，7.43 (d，1H，J = 7.9 Hz), 7.39-7.23 (m，3H)，7 l4 (功 1H)，4.53 (m，1H)，4.20 (m，2H)，3.66 (m，1H)，3.25 (s，3h) 2.03 (s，3H)，1.62 (m，3H)，1.44 (m，3H)。LC/MS (方法 b). 471.9 (M+H)+，469.9 (M-Η)·。HPLC (方法 A) Rt 4.08 min (純 度：99_2%)。 實施例4 : N-[(lR)-l-(4-{5-[2-(甲氧基甲基）-2，-甲基聯 苯-4-基】-1，2,4-d号二唑-3-基}苯基）乙基】-D-丙胺酸鹽駿發

按照一般程序3，以中間物3及中間物6為起始物來製 備N-[(lR)-l-(4-{5-[2-(甲氧基甲基）-2'-甲基聯笨_4_ 基]-1，2,4-α号二唑-3-基}苯基）乙基]-D-丙胺酸曱酯。按照一 般程序9將其水解，得到白色固體狀標題化合物。NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.32 (m, 1Η), 8.18 (m, 3H), 7.77 (m, 2H), 7.43 (d, 1H, J = 7.9 Hz), 7.39-7.25 (m, 3H), 7.14 (m, 1H), 4.57 (m, 1H), 4.20 (m5 2H), 3.59 (m, 1H), 3.25 (s, 3H), 2.03 (s，3H)，1.62 (m，3H)，1.43 (m，3H)。LC/MS (方法 B): 472.2 (M+H) +，470.2 (M-H)·。HPLC (方法 A) Rt 4.07 min (純 155 201206429 度：99.3%)。 實施例5 : ]\-[(18)-1-(4-{5-[2-(甲氧基甲基）-2，-甲基聯 苯-4_基】-1，2,4-D号二唑_3_基}苯基）乙基】甘胺酸鹽酸鹽

按照一般程序3，以中間物3及中間物8為起始物來製 備N-[(lS)-l-(4-{5-[2-(甲氧基甲基）_2，·甲基聯苯-4-基]-1，2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯。按照一 般程序8將其水解’得到白色粉末狀標題化合物。1 η nmR: (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.32 (m, 1Η), 8.18 (m, 3H), 7.78 (m, 2H), 7.44 (d5 1H, J = 7.9 Hz), 7.39-7.25 (m, 3H), 7.14 (m, 1H), 4.51 (m, 1H), 4.20 (m, 2H), 3.84 (m, 1H), 3.59 (m, 1H), 3.25 (s，3H)，2.03 (s，3H), 1.64 (m, 3H)。LC/MS (方法 B): 456.0 (M-H)。HPLC (方法 a) Rt 4.05 min (純度：97.1%)。 實施例6: N-KIR)]·。」5」2-甲基_2，_(三氟甲基）聯苯 -4-基】-1，2,4-d号二唑_3_基}苯基）乙基】丙胺酸鹽酸鹽

按照一般程序3 ’以中間物4及中間物ό為起始物來製 156 201206429

α等二唑-3-基}笨基）乙基]_D_ -丙胺酸曱酯。按照一般程序9 將其水解，知到白色粉末狀標題化合物。lfI NMR: (DMS〇_d6 300 MHz) δ 8.18 (m，3H)，8.06 (m，1H), 7.91 (m，1H)， 7.83-7.65 (m, 4H), 7.14 (m, 2H), 4.52 (m, 1H), 3.51 (m, 1H), 2.11 (s，3H)，1.60 (m，3H)，i.4i (m，3H)。LC/MS (方法 B): 496.0 494.0 (M-Η).。HPLC (方法 A) Rt 4.76 min (純 度：97.6%)。 實施例7 : N-[(lR)-l-(4-{5-[2，-(二氟曱基）·2-甲基聯苯 -4 -基】-I，2,4· α号二嗤_3-基}苯基）乙基】甘胺酸鹽酸鹽

按照一般程序3，以中間物2及中間物9為起始物來製 備^^[(1汉)-1-(4-{5-[2，-(二氟曱基）-2-曱基聯苯-4-基]-1，2,4_ 口兮'一 α坐-3 -基}•苯基）乙基]甘胺酸第三丁 g旨。按照一般程序§ 將其水解，得到白色粉末狀標題化合物》NMR: (DMS〇_d6, 300 MHz) δ 8.19 (m, 3H), 8.09 (m5 1H), 7.78 (m, 3H), 7.65 (m, 2H), 7.44 (d, 1H, J = 7.9 Hz), 7.33 (m, 1H), 6.64 (t, 1H, J =54.6 Hz), 4.51 (m, 1H), 3.84 (m, 1H), 3.59 (m5 1H), 2.14 (s, 3H)，1.64 (m，3H)。LC/MS (方法 B): 462.0 (M-Η)·。HPLC (方 法 A) Rt 4.10 min (純度：99.3°/〇)。 157 201206429 實施例8 : -4-基】-1，2,4-υ 号 甲基_2，_(三氟甲基）聯苯 二唾-3-基}苯基）乙基】甘胺酸鹽酸里

按照—般裎序程序3，以中間物4及 來製備Ν「ηϋ、， 為起始物

Um)-l-(4-{5-[2-甲基-2，-(三氟曱基）聯笨— 基]_1，2,4-枵二唑_3_基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯。按照— 般程序8將其水解’得到白色粉末狀標題化合物。4 n败 (DMSO-d6，綱 ΜΗζ) δ 8，18 (m，3H)，8.〇8 (m，1H)，7 : 1H)，7.78 (m，3H)，7.69 (m，1H)，7 42 (m，2H)，4 51 (功’ 3.83 (m’ 1H)，3·58 (m，⑸），2.12 (s，3H)，1·63 (m，扭’ LC/MS (方法 B): 480.0 (M_H)-。HpLC (方法 (純度：99.6%)。 -24min 實施例9:n-[(1RKu(M5介（甲氧基甲基）_2 苯-4-基】-M’4-口号二唾_3_基}苯基）乙基】甘胺酸里酸鹽

按照一般程序3 ’以中間物3及中間物9 備 ’ ^始杨夾遛 N-[(1R)-1_(4_{5_[2_(曱氧基甲基）_2， T基聯苯-4- 158 201206429 基]-l，2,4-〇等二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯。按照一 般程序8將其水解，得到白色粉末狀標題化合物。1 H NMR: (DMSO-d6j 300 MHz) δ 8.32 (m, 1Η), 8.18 (m, 3H), V.79 (m, 2H), 7.43(d, 1H, J = 7.9 Hz), 7.38-7.26 (m, 3H), 7.14 (m, 1H), 4.51 (m, 1H), 4.20 (m, 2H), 3.81 (m, 1H), 3.57 (m5 lH), 3.25 (s，3H)，2·03 (s，3H)，1.64 (m，3H)。LC/MS (方法 B): 456.0 (M-H)·。HPLC (方法 A) Rt 3.87 min (純度：95.1%)。 實施例 10: (2S)-2-{[(1R)_i_(4_{5_[2，-甲基-2-(三氟甲基） 聯苯-4-基]-1，2,4-α号二唑_3_基}苯基）乙基]胺基丨丁後鹽酸鹽

按照一般程序3 ’以中間物1及中間物12為起始物來 製備（2S)-2-{[(lR)-l-(4-{5-[2，-曱基-2-(三氟甲基）聯苯 _4_ 基]-1，2,4-〇号二唾-3-基}苯基）乙基]胺基}丁酸乙酯。按照一 般程序9將其水解，得到白色泡沫狀標題化合物NMR: (DMSO-d6} 300 MHz) δ 8.54 (br s, 1H), δ.50 (m, 1H), 8.17 (m, 2H)，7.75 (m，2H)，7.67 (m，ih)，7.42-7.25 (m，3H)，7.17 (m， 1H)，4.35 (m，1H)，3.52 (m，iH)，2.02 (s，3H)，1.92-1.72 (m, 2H)，1.56 (m，3H)，0.91 (t，3H，J = 7.4 Hz)。LC/MS (方法 B): 510.0 (M+H)+，508.0 (M-H)·。HPLC (方法 A) Rt 4.42 min (純 度：97.5%)。 159 201206429 實施例 11: (2R)-2-{[(lR)_l-(4-{5-[2’_ 甲基-2-(三氟甲 基）聯苯-4-基】-1，2,4-α号二唑-3-基}苯基）乙基】胺基}丁酸鹽 酸鹽

按照一般程序3，以中間物1及中間物13為起始物來 製備（2R)-2-{[(lR)-l-(4-{5-[2'_ 曱基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基]-1,2,4-垮二唑-3-基}苯基）乙基]胺基}丁酸乙酯。按照一 般程序9將其水解，得到白色粉末狀標題化合物。1H NMR: (DMSO-d6,300 MHz) δ 8.54 (br s, 1H), 8.50 (m, 1H), 8.20 (m, 2H), 7.75 (m, 2H), 7.68 (m, 1H), 7.42-7.33 (m, 2H), 7.29 (m5 1H), 7.17 (m, 1H), 4.48 (m, 1H), 2.02 (s, 3H), 1.92-1.72 (m, 2H)，1.62 (m，3H)，0.90 (t，3H, J = 7.4 Hz)。LC/MS (方法 B): 510.0 (M + H) +，508.0 (M-H)·。HPLC (方法 A) Rt 4.43 min (純 度：99.3%)。 實施例12: N-(3-氟-5-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基】-1，2,4-α号二唑-3-基}苯甲基）白胺酸鹽酸鹽

160 201206429 按照一般程序3，.以中間物1及中間物14為起始物來 製備N (3-氟_5-{5-[2·-甲基-2-(三氟甲基）聯苯_4-基]_ι，2,4_ 咢一坐3基}苯甲基）白胺酸第三丁酯。按照一般程序8將 其水解，得到白色粉末狀標題化合物。lH NMR: (DMS〇 d6, 300 MHz) δ 8.55 (br s3 1H), 8.51 (m, 1H), 8.20 (m, 1H), 7.98 (m, 1H), 7.70 (m, 2H), 7.45-7.22 (m, 3H), 7.17 (m, 1H), 4.35 (m, 2H), 3.94 (m> 1H), 2.02 (s, 3H), 1.85-1.68 (m, 3H), 0.93 (m，6H)。LC/MS (方法 B): 542.3 (M+H) + , 540.3 (M-Η)·。 HPLC (方法 A) Rt 5.29 min (純度：98.9%)。 實施例13: N-(2-氟_4_{5_[2，_甲基_2_(三氟曱基）聯苯_4· 基]-l，2,4-o号二唑_3_基}苯曱基）_N_甲基纈胺酸鹽酸鹽

按照一般程序3，以中間物1及中間物15為起始物來 製備N-(2-氟-4-{5-[2，-曱基_2-(三氟曱基）聯苯-4-基 〇号二。坐-3-基}苯甲基）_N_甲基纈胺酸第三丁酯。按照一般程 序8將其水解’得到白色粉末狀標題化合物。lH NMR: (CD3OD，300 MHz) δ 8.63 (br s，1H)，8.50 (m，1H)，8.15 (m， 1H)，8_08 (m，1H)，7.81 (m，1H)，7.58 (m，1H)，7.39-7.20 (m， 3H)，7.14 (m，1H)，4.54 (m，2H)，4.01 (m，1H)，2.89 (s，3H)， 2.58 (m，1H)，2.06 (s，3H)，1.24 (m，3H)，1.09 (m，3H)。 161 201206429 LC/MS (方法 B): 540.4 (M-H)、HPLC (方法 A) Rt 5.16 min (純度：97%)。 實施例14 : N-甲基-N-[l-(4_{5-[2-甲基_2’-(三氟曱基） 聯苯-4_基】-1，2,4-卩号二唑-3-基}苯基）乙基】甘胺酸鹽酸鹽

按照一般程序3，以中間物4及中間物16為起始物來 製備N-甲基-N-[l-(4-{5-[2-曱基-2，-(三氟甲基）聯苯-4-基]-1，2,4-d号二唑_3_基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯。按照一 般程序8將其水解，得到白色粉末狀標題化合物。丨11 NMR: (DMS〇-d6, 300 MHz) δ 8.19 (m, 3H), 8.07 (m, 1H), 7.91 (m, 1H)，7.87-7.75 (m，3H)，7.69 (m，1H)，7.42 (m, 2H)，4.78 (m， 叫，4.02 (m，2H)，2.80 (s，3H)，2.11 (s，3H)，1.71 (m，3H)。 LC/MS (方法 B): 496 2 (m+H) +，494.3 (M-H).。HPLC (方法 A) Rt 4.78 min (純度：99%)。 實施例15: Ν-[1-(4-{5·[2-(甲氧基甲基）-2，-甲基聯苯·4_ 基]-1，2,4-0号二唑_3_基}苯基）乙基】_N_甲基甘胺酸鹽酸鹽

按照—般程序3,以中間物3及中間物16為起始物來 162 201206429 製備1^-[1-(4-{5-[2-(曱氧基曱基）_21_曱基聯苯_4_基]1,2,4_ 口号二唑-3-基}苯基）乙基]_N_甲基甘胺酸第三丁酯。按照一 般程序8將其水解，得到無色油狀標題化合物。NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.33 (br s，1H)，8.19 (m，3H)，7.82 (m， 2H)，7.43 (m，1H)，7.39-7.25 (m，3H)，7.14 (m，1H)，4.74 (m， 1H)，4.19 (m，2H)，3.98 (m，2H)，3.25 (s, 3H)，2.76 (s, 3H)， 2.04 (s，3H)，1_69 (m，3H)。LC/MS (方法 B): 472.2 (M+H)+， 470.3 (M-H)。HPLC (方法 a) Rt 4.05 min (純度：98.8。/〇)。 實施例16: N-(2-氟-4_{5-丨2-(甲氧基甲基）-2，-甲基聯苯 -4-基】-1，2,4-〇号二唑-3-基}苯甲基）_2_曱基丙胺酸鹽酸鹽

按照一般私序3，以中間物3及中間物丨7為起始物來 製備N-(2-氟-4-{5-[2-(曱氧基曱基）_2，_曱基聯苯_4_ 基]-1，2,4-口号二唑-3-基}苯甲基）_2_甲基丙胺酸第三丁酯。按 照一般程序8將其水解，得到白色粉末狀標題化合物。ιΗ NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.33 (br s, 1H), 8.18 (m, 1H), 8.08 (m, 1H), 7.98 (m, 1H), 7.89 (m, 1H), 7.44 (m, 1H), 7.39-7.25 (m, 3H), 7.14 (m, 1H), 4.28 (m, 2H), 4.19 (m, 2H), 3.25 (s, 3H)，2.04 (s, 3H), 1,61 (s，6H)。LC/MS (方法 B): 490.2 (M + H)，488.3 (M-H)-。HPLC (方法 A) Rt 4.08 min (純 度：98.7%)。 163 201206429 實施例17: N-[(lS)-l-(4-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯 -4-基】-1，2,4-D号二唑-3-基}苯基）乙基】-D-丙胺酸鹽酸鹽

按照一般程序3，以中間物1及甲基中間物1 〇為起始 物來製備N-[(lS)-l-(4-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基]-1，2,4-〇等二唑_3_基}苯基）乙基]_D-丙胺酸甲酯。按照一 般程序9將其水解，得到白色泡沫狀標題化合物。1 H NMR: (DMS〇-d6, 300 MHz) δ 8.54 (br s, 1H), 8.50 (m, 1H), 8.21 (m, 2H), 7.83 (m, 2H), 7.67 (m, 1H), 7.36 (m, 2H), 7.29 (m, 1H), 7.17 (ms in), 4.54 (m, lH),3.67(m, 1H), 2.02 (s, 3H), 1.63 (d, J = 6.8 Hz，3H)，1.46 (d，J = 7.1 Hz，3H)。LC/MS (方法 B): 496.4 (M + H)+。HPLC (方法 A) Rt 4.85 min (純度：98.4%)。 實施例18: N-【（lS)-l-(4-{5-[2，-甲基-2_(三氟甲基）聯苯 -4-基】-1,2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙基卜L-丙胺酸鹽酸鹽

按照一般程序3，以中間物1及甲基中間物11為起始

S 164 201206429 物來製備N-[(lS)-l-(4-{5-[2'-曱基-2-(三氟曱基）聯苯-4- 基]-1，2,4-口号二唑-3_基}苯基）乙基]_L_丙胺酸甲酯。按照一 般程序9將其水解，得到白色泡沫狀標題化合物。lH nmR: (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.54 (br s, 1H), 8.50 (m, 1H), 8.21 (m, 2H), 7.80 (m, 2H), 7.66 (m, 1H), 7.42-7.33 (m, 2H), 7.29 (m, !Η), 7.16 (m, 1H), 4.59 (m, 1H)S 3.57 (m, 1H), 2.02 (s, 3H), 1.63 (d，J = 6.9 Hz，3H)，1.45 (d，J = 7.0 Hz，3H)。LC/MS (方 法 B): 496,4 (M + H)+。HPLC (方法 A) Rt 4.86 min (純度： 96.9%)。 實施例1S>: N-【（lR)-l-(4-{5-[2，-甲基_2_(三氟甲基）聯苯 -4-基】-1，2,4-d号二唑_3_基}苯基）乙基卜L-丙胺酸鹽酸鹽

按照一般程序程序3，以中間物1及中間物7為起始物 來製備甲基_2-(三氟曱基）聯苯-4-基]-1，2,4-d号二唑-3_基}苯基）乙基]_L-丙胺酸曱酯。按照一 般程序9將其水解，得到白色泡沫狀標題化合物。1η NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.54 (br s, 1H), 8.50 (m, 1H), 8.21 (m, 2H)，7.80 (m，2H)，7.67 (m, 1H)，7.42-7.33 (m，2H)，7.29 (m， 1H), 7.17 (m, 1H), 4.53 (m, lH), 3.65 (m, 1H), 2.02 (s, 3H), 1.61 (d，J = 6.8 Hz, 3H)，1,44 (d，J = 7.0 Hz，3H)。LC/MS (方 165 201206429 法 B): 496.5 (M+H) +，494.5 (M-Η)-。HPLC (方法 A) Rt 4.89 min (純度：100%)。 實施例20: N-[(lR)-l-(4-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯 -4-基]-1,2,4-0号二唑-3-基}苯基）乙基】-〇-丙胺酸鹽酸鹽

按照一般程序3，以中間物1及中間物6為起始物來製 備1^-[(111)-1-(4-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基]-1，2,4-口号二唑-3-基}苯基）乙基]-D-丙胺酸甲酯。按照一般程序9 將其水解，得到白色固體狀標題化合物。1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.55 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.50 (dd, J = 8.0, 1.6 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.80 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.68 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.44-7.25 (m, 3H), 7.17 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.59 (q> j = 6.8 Hz, 1H), 3.59 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 2.02 (s, 3H)，1.64 (d，J = 6.8 Hz，3H)，1_45 (d，J = 7.1 Hz，3H)。 LC/MS (方法 b): 496.5 (M+H)+，494.4 (M-H)、HPLC (方法 A) Rt 4.88 min (純度：100%)。 實施例21 : N-[(lS)-l-(4-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯 -4-基】-1，2,4-卩号二唑-3-基}苯基）乙基】甘胺酸鹽酸鹽 166 201206429

按照一般程序3，以中間物1及中間物8為起始物來製 備 N-[(lS)-l-(4-{5-[2，-曱基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基]-1，2,4-〇夸二吐-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯。按照一般程序8 將其水解，得到淺黃色粉末狀標題化合物。1H NMR: (DMSO-d6s 300 MHz) δ 8.54 (br s, 1H), 8.50 (m, 1H), 8.21 (m, 2H), 7.79 (m, 2H), 7.69 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.44-7.25 (m, 3H), 7.17 (m, 1H), 4.51 (m, 1H)S 3.82 (m, 1H), 3.57 (m, 1H), 2.02 (s，3H)，1.64 (d，J = 6.8 Hz, 3H)。LC/MS (方法 B): 482.4 (M + H) +，480.4 (M-H).。HPLC (方法 A) Rt 4.28 min (純度： 96.4%)。 實施例22: N-[(lR)-l-(4-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯 -4-基】-1，2,4-d号二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸鹽酸里

按照一般程序3’以中間物1及中間物9為起始物來製 備N-[(lR)-l-(4-{5-[2’-曱基-2-(三氟曱基）聯笨-4_基]·丨2 4 口号二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯。按照—般程序名 167 201206429 將其水解，得到淺黃色粉末狀標題化合物。NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.54 (br s, 1H), 8.50 (m，1H)，8.21 (m， 2H), 7.79 (m, 2H), 7.69 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.43-7.24 (m, 3H), 7.17 (m, 1H), 4.51 (m, 1H), 3.79 (m, 1H), 3.55 (m, 1H), 2.02 (s, 3H)，1.63 (d，J = 6.8 Hz, 3H)。LC/MS (方法 B): n.d (M + H) +，480.5 (M-H)_。HPLC (方法 A) Rt 4.30 min (純度： 99%) ° 實施例23 : N_丨l-(4-{5-[2-曱基-2’-(三氟甲基）聯苯-4-基】-1，2,4-ο号二唑-3-基}苯基）乙基】甘胺酸鹽酸鹽

步驟1 : [1-(4-{5-[2-甲基-2’-(三氟甲基）聯苯-4-基]-I，2，4-ό号二唑3_基}苯基）乙基]胺基甲酸第三丁輯 按照一般程序3，以中間物4及中間物1 8為起始物來 製備標題化合物《其以白色泡沫狀物形式分離。LC/MS (方 法 B): 524.3 (M+H)+。HPLC (方法 A) Rt 6.31 min (純度： 99.6%)。 步驟2 : 曱基_2，·（三氟甲基）聯苯_4_ 基]-1，2,4-ώ号二唑_3_基}苯基）乙胺鹽酸鹽 按照—般程序8, α[1-(4_{5_[2_曱基_2，_(三氟曱基）聯 本基]，2,4-〇号一 °坐-3-基}苯基）乙基]胺基曱酸第三丁醋 為起始物來製備標題化合物且以白色泡沫狀物形式分離 (620 mg > ^ * ) 〇 iH NMR (DMS〇.d6, 300 MHz) δ 8.60 (br s, 168 201206429 3H)，8·18 (m，3H)，8 〇7 (m，1H), 7 91 】=8 Hz，1H)’ 7 77 (m，3H)，7.68 (m，iH)，7 41 (m，1H), 4 53 (m，1H)，2 n (s， 3H)，1.56 (d，J = 6.8 Hz，3H)。LC/MS (方法 B): n.dp (M+H)， n.dp (M-H)。HPLC (方法 A) Rt 4 22 min (純度：99 7%)。 ^~[l-(4-{5-[2- ψ S -2f-(=： M f S)0 ^-4-基]-1，2,4-〇夸一唑~3-基}苯基）乙基]甘胺酸鹽酸鹽 按照一般程序U ’以曱基_2，(三氟曱基）聯 苯-4-基]-1 ’2’4卩号一唾-3-基}苯基）乙胺鹽酸鹽及溴乙酸第 三丁酯為起始物來製備N-[l-(4-{5-[2-甲基-2'-(三氟曱基）聯 苯-4-基]-1，2,4-哼二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯。 按照一般程序8將其水解，得到白色粉末狀標題化合物。ιΗ NMR： (DMSO-d6s 300 MHz) δ 8.18 (m, 3H), 8.08 (m, 1H), 7.91 (d, J - 7.90 Hz, 1H), 7.77 (m, 3H), 7.69 (m, 1H), 7.41 (m, 2H), 4.74 (m, 1H), 3.74 (m, 1H), 3.52 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.61 (d, J = 6.8 Hz，3H)。LC/MS (方法 B): 482.2 (M+H)+, 480.2 (M-H)。HPLC (方法 A) Rt 4.25 min (純度：99.9%)。 實施例24 : N-[(lS)-l-(4-{5_[2_曱基_2，_(三氟曱基）聯苯 -4-基】-1，2,4-π等二唑-3-基}苯基）乙基卜l-丙胺酸鹽酸鹽及 N-[(lR)-l-(4-{5-[2_ 甲基-2，_(三氟甲基）聯苯 _4_基】-i，2,4-口号 二唑-3-基}苯基）乙基】-D-丙胺酸鹽酸鹽

169 201206429 按照一般程序U，以甲基_2,_(三氟甲基）聯 苯-4-基]-1，2,4-垮二唑-3-基}笨基）乙胺鹽酸鹽（實施例23 步驟2)及2-溴丙酸曱自曰為起始物來製備甲 基-2’-(三氟甲基）聯苯-4-基]_1，2,4_〇号二唑_3_基}苯基）乙 基]-丙胺酸甲酯。藉由急驟層析法（庚烷/Et〇Ac梯度自95:5 至85:15 )分離所產生之一對兩種非對映異構體，得到 1^-[(18)-1-(4-{5-[2-甲基-2’-(三氟曱基）聯苯_4_基]_1，2,4_口号 二°坐-3-基}苯基）乙基]-0-丙胺酸甲酯及]^_[(11^)_1_(4_{5_[2_ 甲基-2'-(三氟甲基）聯苯-4-基]-1，2,4-π号二嗤小基}苯基）乙 基]-L-丙胺酸曱酯（75 mg ’ 27% )作為一種洗提份以及 N-[(lS)-l-(4-{5-[2-曱基-2'-(三氟甲基）聯苯_4_基]4,2,4-0号 二唾-3-基}苯基）乙基]-L-丙胺酸曱酯及N-[(lR)-l-(4-{5-[2-曱基-2’-(三氟曱基）聯苯-4-基]-1，2,4-d号二唑_3_基}苯基）乙 基]-D-丙胺酸甲酯（50 mg，1 8% )作為第二洗提份。 按照一般程序9,使含有N-[(lS)-l-(4_{5-[2 -曱基-2'-(三 氟曱基）聯苯-4-基]-1，2,4-α号二唑-3-基}苯基）乙基]_L_丙胺 酸甲酯及N-[(lR)-l-(4-{5-[2-甲基-2’-(三氟甲基）聯苯_4-基]-1，2,4-〇夸二唑-3-基}苯基）乙基]-D-丙胺酸曱酯之第二洗 提份水解，得到白色粉末狀標題化合物。1H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) δ 8.15 (m，3H)，8·07 (m，1H)，7.91 (m，1H)， 7.83-7.64 {m，4H)，7.41 (m，2H)，4_35 (m，ih)，2.11 (s，3H)， 1.53 (d，J = 6.5 Hz，3H)，1.35 (d，J = 7.0 Hz，3H)。LC/MS (方 法 B): 496.2 (M+H)+，494.3 (M-Η)-。HPLC (方法 A) Rt 4.28 min (純度：100%)。可藉由手性 HPLC 法分離

S 170 201206429

N-[(lS)-l-(4-{5-[2-曱基_2，_(三氟甲基）聯苯口号 二唑-3-基}苯基）乙基;j_L_丙胺酸甲酯及N_[(1R)_1_(4_{5_[2_ 甲基-2|-(三氟甲基）聯苯_4-基]_1，2,4_IJ号二唑_3_基}苯基）乙 基]-D-丙胺酸曱醋D 實施例25: N-[(lS)-l_(4-{5-[2-甲基_2，_(三氟甲基）聯苯 _4·基】-I，2,4- D号二唑-3_基}苯基）乙基】_D丙胺酸及 N-[(lR)-l-(4-{5-[2-曱基 _2,·（三氟甲基）聯苯 _4_基】·124_口号 一唾-3-基}苯基）乙基卜丙胺酸

按照一般程序9’使n-[(1S)-1-(4-{5-[2-甲基-2，-(三氟 甲基）聯笨-4-基]-1，2,4-d号二唑_3_基}苯基）乙基]_D_丙胺酸 甲醋及N-[(1R)_i_(4_{5_[2·曱基_2，_(三氟曱基）聯苯·4_ 基}-1，2,4-[1号二嗤_3_基}苯基）乙基]_L_丙胺酸甲酯（在實施 例24中製備）水解，得到白色粉末狀標題化合物。1h nmr: (DMSO-d6, 400 MHz) δ 8.15 (m, 3H), 8.07 (ms 1H), 7.91 (m, 1H), 7.79 (m, 1H), 7.69 (m, 3H), 7.41 (m, 2H), 4.34 (m, 1H), 2·11 3H), 1.51 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.32 (d5 J = 7.1 Hz, 3H)。LC/MS (方法 B): 496.2 (M+H) +，494.3 (M-H)-。HPLC (方法A) Rt 4.29 min (純度：86.5%)。可藉由手性HpLC法 分離甲基_2’_(三貌甲基）聯苯·4· 基]-ϊ，2,4- d咢二唑_3_基}苯基）乙基]丙胺酸酯及 171 201206429 N-[(lR)-l-(4-{5-[2-甲基_2，-(三氟甲基）聯苯-4·基卜口号 二唑-3-基}苯基）乙基]_L-丙胺酸甲醋° 實施例26: N-[(lS)-l-(4-{5_{2’-甲基-2-(三氟甲基）聯苯 _4·基】-1，2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙基卜L-丙胺酸農酸鹽及 N-[(lR)-l-(4-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯笨-4-基】·口号 二唑-3-基}苯基）乙基]-D-丙胺酸鹽酸鹽

步驟1 : [1-(4-{5-[2，_甲基-2-(三氟甲基）聯苯·4_ 基]-1,2, 4 -v号二唾-3-基}苯基）乙基]胺基甲酸第三丁酉匕 按照一般程序3，以中間物1及中間物18 in 丄 為起始物來 製備標題化合物’且以白色泡沫狀物形式分離。(方 法 B): 524.4 (M+H) +，522.4 (M-Η).。HPLC (方法 A) Rt 6 43 min (純度：99.6%)。 步驟2^ ，甲基-2·(三氟甲基）聯苯冬 基]-1，2,4-ΰ号二唑_3_基}苯基）乙胺鹽酸鹽 按照-般程序8’ α[1-(4_{5_[2，·曱基·2_(三氟曱基）聯 苯-4-基]-1，2,4-卩号二唑_3_基}苯基）乙基]胺基甲酸第三丁酯 為起始物來製備標題化合物且以黃色泡沫狀物形式分離 (880 mg，91%)。lH NMR: (DMSO-d6, 400 ΜΗζ) δ 8.58-8.47 (m, 4Η), 8.20 (d, j = 8 3 HZj 2H), 7.76 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.67 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.42-7.25 (m, 3H), 7.17 (d, J = 7.3 172 201206429

Hz, 1H), 4.54 (m, 1H), 2.02 (s, 3H), 1.56 (d5 J = 6,8 H：z, 3H)。LC/MS (方法 B): 459.2 (M-H)·。HPLC (方法 a) Rt 4.32 min (純度：98.7%)。 步驟 3 : N-[(lS)-l-(4-{5-[2’-甲基-2-(三氟 ψ 基）聯苯_4_ 基]-1，2,4-口咢二σ坐-3-基}苯基）乙基]-L-丙胺酸鹽酸鹽及 ^-[(1厌)-1-(4-{5-[2’-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基]-1,2,4-〇号 二°坐-3-基}本基）乙基]-0-丙胺酸鹽酸鹽 按照一般程序11 ’以1-(4-{5-[2，-曱基-2-(三氟曱基）聯 苯-4-基]-1，2,4-d夸二吐-3-基}苯基）乙胺鹽酸鹽及2-溴丙酸 曱酯為起始物來製備N-[l-(4-{5-[2，-曱基-2-(三氟曱基）聯苯 -4-基]-1，2,4·α号二唑_3_基}苯基）乙基；]_丙胺酸曱酯。可藉由 急驟層析法（庚烷/EtOAc梯度自95:5至85:15 )分離所產 生之一對兩種非對映異構體，得到N-[(1S)-1-(4-{5-[2，-曱基 -2-(三氟甲基）聯笨_4_基]·号二唑-3-基}苯基）乙基]-D_ 丙胺酸甲酯及N-[(ir)_i_(4-{5-[2'-曱基-2-(三氟甲基）聯苯 -4-基]-1，2,4-d号二唑-3_基}苯基）乙基]_L-丙胺酸曱酯（90 mg ’ 33%)作為第一洗提份以及n-[(1S)-1-(4-{5-[2，-曱基 _2_(二乳曱基）聯笨·4_基]_ι,2,4 - 〇号二吐_3-基}苯基）乙基]_L·. 丙胺酸曱酯及N-[(ir)_i_(4-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯 -4-基]-1，2,4-口号二唑_3_基}苯基）乙基]丙胺酸甲酯（85 mg，31%)作為第二洗提份。 按照一般程序 9,使含有 N_[(lS)_l-(4-{5-[2，-f*-2-(S 氟甲基）聯苯-4-基]_1，2,4_〇号二唑_3-基}苯基）乙基]-^丙胺 酸曱酯及N-[(lH)-l-(4-{5-[2，-甲基_2_(三氟曱基）聯苯_4· 173 201206429 基]·1，2,4-ο号二唑-3-基}苯基）乙基]-D-丙胺酸甲酯之第二洗 提份水解，得到白色粉末狀標題化合物。1H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) δ 8.54 (br s，1H)，8.49 (m，1H)，8.19 (d，J = 8.3 Hz， 2H)，7.79 (d，J = 8.3 Hz，2H)，7.67 (d，J = 8.3 Hz，1H)， 7.42-7.25 (m, 3H), 7.16 (m, 1H), 4.44 (m5 1H), 3.50 (m, 1H), 2.02 (s, 3H), 1.58 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.40 (d, J = 7.0 Hz, 3H)。LC/MS (方法 B): 496.2 (M + H) +，494·3 (M-H).。HPLC (方法A) Rt 4.36 min (純度：97.8%)。可例如藉由手性HPLC 按照上述方法J來分離N-[( IS)-1-(4-{5-[2·-曱基-2-(三氟曱 基）聯苯_4_基]-1，2,4-d夸二唑-3-基}苯基）乙基]-L-丙胺酸酯 及 N-[(lR)-l-{4-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基]-1，2,4-口号二唑-3-基}苯基）乙基]-D-丙胺酸甲酯》 實施例27: N-[(lS)-l-(4-{5-[2’-甲基-2-(三氟甲基）聯苯 -4-基卜1，2,4-π号二唑-3-基}苯基）乙基】-D-丙胺酸鹽酸鹽及 N-[(lR)-l-(4-(5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基]-1，2,4_口号 二唑-3-基}苯基）乙基】-L-丙胺酸鹽酸鹽

按照一般程序9’使N-[(lS)-l-(4-{5-[2' -甲基- 2- (三氟 曱基）聯苯-4-基]-1，2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙基]-D-丙胺酸 甲酯及N-[(1R)-卜(4-{5-[2i-曱基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基]-1，2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙基]-L-丙胺酸甲酯（在實施

S 174 201206429 例26中製備）水解，得到白色粉末狀標題化合 (DMSO-d6j 400 MHz) δ 8.54 (br s, 1H), 8.50 (m, 1H), 8.20 (d J = 8-3 Hz, 2H), 7.75 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.67 (d, J = 8.〇 Η2> 1H), 7.42-7.25 (m, 3H), 7.16 (m, 1H), 4.53 (m, 1H), 3.55 (m> 1H), 2.02 (s5 3H), 1.60 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.41 (d, J = 7<〇 Hz

3H)。LC/MS (方法 B): 496.2 (M+H) +，494.3 (M-Η)·。HPLC (方法A) Rt 4.34min (純度：91.1%)。可例如藉由手性HpLC 按照上述方法j來分離{5_[2,·曱基·2_(三氟甲 基）聯苯基]·丨二‘卩号二唑_3 —基}苯基）乙基]_D_丙胺酸酯 及 N-[(1R)_i_(4-{5-[2·-曱基-2-(三氟曱基）聯苯 基] ‘口亏·一嗤-3-基}苯基.）乙基]-L-丙胺酸曱醋。 實施例28 : N-甲基-Ν-[1-(3·{5-[2-甲基_2，_(三氟甲基） 聯苯-4-基]-l，2,4-D号二唑-3-基}苯基）乙基】丙胺酸鹽酸鹽

按照一般程序3 ’以中間物4及中間物19為起始物來 製備N-甲基·ν·[ι_(3-{5_[2_曱基_2，_(三氟曱基）聯苯_4· 基]-1，2,4-d号二唑_3-基}苯基）乙基]丙胺酸酯。按照一般程序 9將其水解，得到無色油狀標題化合物。1{1 nmr: (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.27 (m, 1H), 8.17 (br s, 1H), 8.09 (m, 2H), 7.91 (d, J - 8 Hz, 1H), 7.78 (m, 2H), 7.68 (m, 2H), 7.41 (m, 2H), 175 201206429 4.48 (m, 1H)，3.81 (m，1H)，2.54 (m，3H)，2.11 (s，3H)，1.58 (m，3H)，1·37 (m，3H)。LC/MS (方法 B): 510.3 (M+H)+，508.4 (M-H)·。HPLC (方法 A) Rt 4.33 min (純度：95.1%)。 實施例29 : N-甲基-]\-[1-(3-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基） 聯苯-4-基卜1，2,4-卩号二唑_3-基}苯基）乙基】丙胺酸鹽酸鹽

按照一般程序3，以中間物1及中間物19為考始物來 製備N-甲基-Ν_Π-(3_{5_[2，_甲基1(三氟甲基）聯苯_4_ 基]-l’2,4-D号二唑_3_基}苯基）乙基]丙胺酸酿。按照一般程序 9將其水解，得到白色泡沫狀標題化合物。^^^^ (DMS〇-d6> 300 MHz) δ 8.54 (br s, 1H),8.51 (m, lH)i 8.3〇 1H)> 8-H (m3 1H)} 7.80 (m, 1H), 7.68 (m, 2H)) 7.43-7.33 (m， 2H)} 7'29 (ms 1H), 7.17 (m, 1H), 4.51 (m, 1H)5 3.88 (m, 1H)， 2 57 (m3 3H), 2.02 (s, 3H), 1.59 (m3 3H), 1.39 (m, LC/MS (方法 B): 51〇 3 (M+H)+, 5〇8 4 (M h)·。(方法 A) Rt 4.41 min (純度：.％ 1%)。 實施例3〇 : N-甲基-N-丨1-(3]5]2.甲基_2，·（三氟甲基） 聯苯_4-基卜1，2,4-垮二唑-3-基}苯基）乙基】甘胺酸鹽酸鹽 176 201206429

按照一般程序3，以中間物基4及中間物20為起始物 來製備N-曱基-N-[l-(3-{5-[2-曱基-2，-(三氟甲基）聯苯-4-基]-1，2，4- 〇夸二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯。按照一 般程序8將其水解’得到白色粉末狀標題化合物。1 η NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.33 (m, 1Η), 8.20 (m, 2H), 8.08 (m, 1H), 7.92 (m, 1H), 7.85 (m, 1H), 7.81-7.65 (m, 3H), 7.42 (m, 2H), 4.76 (m, 1H), 3.95 (m, 2H), 2.77 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.71 (m，3H)。LC/MS (方法 b): 496.2 (M + H)+，494.3 (M-H) ° HPLC (方法 A) Rt 4.28 min (純度：98.6%)。 實施例31: N-(2-氟-4-{5-【2，-甲基-2-(三氟曱基）聯苯_4·. 基]-1，2,4-ο号二唑_3-基}苯甲基卜Ν，2·二曱基丙胺酸鹽酸鹽

,按照一般程序3，以中間物i及中間物21為起始物來 製。備1(2-敦-4-{5_[2，·曱基_2_(三氟曱基）聯苯基w#· 口可一唑-3-基}苯曱基）_N，2-二曱基丙胺酸第三丁酯。一 又私序8將其水解，得到白色粉末狀標題化合物β iH NMR 177 201206429 (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8·56 (m，1H)，8 52 (m, 1Η)，8·11 (m， 1H), 8.03 (m, lH),7.93(m, 1H), 7.69 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.43-7.33 (m, 2H), 7.29 (m, 1H), 7.17 (m, 1H), 3.48 (m, 2H), 2.66 (br s，3Η)，·2·03 (s，3H)，1.61 (br s，6H)。LC/MS (方法 B): 528.1 (M + H)+，526.3 (M-H)·。HPLC (方法 A) Rt 4.45 min (純度：97.6%)。 實施例32 : N-丨1-丨4-{5-[2’-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基】-1，2,4-〇号二唾-3-基}苯基）乙基】甘胺酸鹽酸鹽

按照一般程序3 ’以中間物1及中間物22為起始物來 製備N-[l-(4-{5-[2' -甲基- 2-(三氟甲基）聯苯_4_基]_ι,2,4-口号 二。坐-3 -基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯。按照一般程序8將 其水解，得到白色粉末狀標題化合物》4 NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.55 (m, 1H), 8.51 (m, 1H), 8.22 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.68 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.43-7.25 (m5 3H), 7.17 (m, 1H), 4.51 (m, 1H), 3.85 (m, 1H), 3.59 (m，1H)，2.02 (s，3H)，1.63 (d，J = 6.8 Hz，3H)。LC/MS (方法 B): 482.0 (M+H)+，480.1 (M-H)·。HPLC (方法 A) Rt 4.82 min (純度：99.7%)。 實施例33: N-甲基-N-[(lS)-l-[4-{5-丨2-甲基-2’-(三氟曱 基）聯苯-4-基】-l，2,4-0号二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸鹽酸鹽 178 201206429

按照一般程序4，以中間物4及中間物23為起始物來 製備N-曱基·N-Kispw-WK曱基_2，（王氟甲基）聯苯_4_ 基]-1，2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯。按照一 般程序8脫除其保護基，得到白色粉末狀標題 化合物。溶 點：217°C。[ag = -28.2 (c 1.47, EtOH)。4 NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.25-8.14 (m, 3Η), 8.07 (dd, J = 8.0, 1.4 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.86-7.74 (m, 3H), 7.68 (t, J = 7.6 Hz，1H)，7.46-7.35 (m，2H), 4.76 (q，J = 6.9 Hz，1H)， 4.11-3.89 (m，2H)，2.79 (s，3H), 2.11 (s，3H)，1.71 (d，J = 7.0

Hz，3H)。LC/MS (方法 B): 494_3 (M_H)-, 496.2 (M + H)+。 HPLC (方法 A) Rt 4.78 min (純度：99.7%)。元素分析： [C27H24N3O3F3-HCl-0.2 H20]修正值：C 60·55ο/。，Η 4.78%，N 7.85%，Cl 6.62% ;實驗值：c 60.41%，Η 4.83%，Ν 7·91%，Cl 6.71%。 實施例 34 : Ν-曱基-N-[(lS)-l-(4-{5-[2，-甲基-2_(二氟曱 基）聯苯-4-基】-1,2,4-d等二唑_3_基}苯基）乙基]甘胺酸鹽酸鹽

179 i!：： 201206429 按照一般程序4，以中間物1及中間物23為起始物來 製備N-甲基-N-[(1S)-1-(4-{5-[2，-曱基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基]-1，2,4-卩夸二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯》按照一 般程序8脫除其保護基，得到白色粉末狀標題化合物。熔 點：22Γ〇 [α]? = -27·4 (c 1.54, EtOH)。4 NMR (DMSO-d6, 3 00 MHz) δ 8.55 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.50 (dd, J = 8.0, 1.5 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.82 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.66 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.41-7.25 (m, 3H), 7.16 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.75 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.10-3.88 (m, 2H), 2.78 (s5 3H), 2.01 (s，3H)，1.70 (d，J = 6.9 Hz, 3H)。LC/MS (方法 A): 494.3 (M-Η).，496.2 (M + H)+。HPLC (方法 A) Rt 4.85 min (純度： 99.8%)。元素分析：[C27H24N3O3F3-HCl-0.2H2O]修正值：C 60.55%，H 4.78%，N 7.85%，Cl 6.62% ;實驗值：C 60.52%，H 4_63%，N 7_90%，Cl 6.65% ° 實施例 35: N-甲基-]\_[(111)-1-(4-{5-[2-甲基-2’-(三氟甲 基）聯苯-4-基】-1，2,4-d号二唑-3-基}苯基）乙基】甘胺酸鹽酸鹽

按照一般程序4，以中間物4及中間物24為起始物來 製備1^-甲基->1-[(111)-1-(4-{5-[2-曱基-2’-(三氟甲基）聯苯-4-基]-1，2,4-〇夸二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯。按照一 180 201206429 般程序8脫除其保護基，得到白色粉末狀標題化合物。熔 點.217 C。[〇：]2〇5= 28.1 (c 1.41，EtOH)。4 NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.25-8.14 (m，3H)，8.07 (dd，J = 8.0，1.4 Hz，1H)， 7.91 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.86-7.74 (m, 3H), 7.68 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.46-7.35 (m, 2H), 4.76 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.11-3.89 (m, 2H), 2.79 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.71 (d, J = 7.0 Hz，3H)。LC/MS (方法 b): 494.3 (M-H).，496.2 (M + H)+。 HPLC (方法 A) Rt 4.79 min (純度：99.8%)。元素分析： C27H24N3O3F3-HCl-0.2H2O]修正值：C 60.55%，H4_78%，N 7_85%，Cl 6·62% ;實驗值：c 60.44%，Η 4.64%，N 7.89%，Cl 6.67%。 實施例36: N-甲基-N-[(lR)-l-(4-{5_[2，-曱基-2-(三氟曱 基）聯苯-4-基]-1，2,4-π号二唑-3-基}笨基）乙基】甘胺酸鹽睃鹽

按照一般程序4，以中間物1及中間物24為起始物來 製備Ν-曱基-N-[(lR)_l-(4-{5-[2，-曱基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基]-1，2,4-〇号二°坐-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯。按照一 般程序8脫除其保護基’得到白色粉末狀標題化合物。熔 點：221°C。26.1 (c 1.44, EtOH)。4 NMR (DMS0-d6, 300 MHz) δ 8.55 (d，J = 1.5 Hz，1H)，8·50 (dd，J = 8.0, 1.5 Hz， 1H), 8.23 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.82 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.66 181 201206429 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.41-7.25 (m, 3H), 7.16 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.75 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.10-3.88 (m, 2H), 2.78 (s, 3H), 2.01 (s, 3H)，1.70 (d，J = 6.9 Hz，3H)。LC/MS (方法 B): 494.3 (M-Η)·，496.2 (M + H)+。HPLC (方法 A) Rt 4.87 min (純度： 99.8%)。元素分析：[C27H24N3O3F3-Ha-0.2H2O]修正值： C 60.5 5%，Η 4·78%，N 7.85%，Cl 6.62% ;實驗值：C 60.37%， Η 4.79%，N 7.84%，Cl 6.65% 0 實施例37: N-[l-(4-{5-[2_(甲氧基甲基）-2，-甲基聯苯_4_ 基】-l，2,4_〇号二唑-3-基}苯基）乙基】-N-甲基丙胺酸

按照一般程序4，以中間物3及中間物25為起始物來 製備N-[l-(4-{5-[2-(甲氧基曱基）_2，-甲基聯苯-4·基]_丨2心 口号二。坐-3-基}笨基）乙基]_N_曱基丙胺酸曱酯。按照—般程 序9脫除其保護基’得到白色粉末狀標題化合物。l〇ms (方 法 B): 484.4 (M-Η)' 486.3 (M + H)+。HPLC (方法 A) Rt 4 62 min (純度：98.3%)。 實施例

基]-1，2,4-d号二唑_3_基丨苯基）乙基】甘胺酸鹽酸鹽

S 182 201206429

按照一般程序4，以中間物4及中間物26為起始物來 製備N-[l-(3-{5-[2-甲基-2’-(三氟曱基）聯苯-4-基]-hi卩号 二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯。按照一般程序8脫 除其保護基，得到微黃色粉末狀標題化合物。熔點：1 76^。 !H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.33 (s, 1Η), 8.20-8.13 (m 2H), 8.08 (dd, J = 8.0, 1.5 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 7.7 Hz, 1H) 7.80 (t，J = 7.4 Hz，2H)，7.70 (td，J = 7.7, 2.6 Hz，2H), 7.42 (t J = 8.6 Hz，2H)，4.54 (q，J = 6.7 Hz，1H)，3.83 (d，J = 17.0 H:z， 1H), 3.56 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 2.12 (s, 3H), 1.65 (d, J = 6.8

Hz，3H)。LC/MS (方法 A): 484.5 (M-H)·，486.4 (M+H)+。 HPLC (方法 A) Rt 4.76 min (純度：96.3%)。 實施例39 : N-甲基-N-Il-(4-{5-【2，-甲基-2-(三氟甲基） 聯苯基卜1，2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙基】丙胺睃

步驟1 : 4-(1-羥基乙基）苯甲腈 將4-乙醯基苯曱腈（2.0 g ; 13.8 mmol)溶解於THF( 10 mL)及MeOH( 10 mL)中。在（TC下逐份添加硼氫化鈉（782 183 201206429 mg，20.7 mmol)且在室溫下攪拌反應4〇分鐘。在真空下 移除溶劑，添加Et0AC，且用^〇洗滌有機相，經MgS〇4 脫水，過濾且濃縮，得到無色油狀標題化合物（23 g，定 量）。HPLC (方法 a) Rt 4.3 1 min (純度：99.2%)。 步驟2 : Ν’-羥基_4_(1_羥基乙基）苯甲醢亞胺醯胺 按照一般程序1，以步驟丨中所獲得之4 (1_羥基乙基） 苯甲腈（2.3 g ; i6_8 mm〇1)為起始物來製備標題化合物， 知到2.5 g ( 88%)無色泡沫狀物。LC/MS (方法〇 (M+H)+。 步驟3 : 1-(4-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯_4_ 基]-1’2,4-〇夸二唑-3-基}苯基）乙醇 按照一般程序3，以中間物1及步驟2中所獲得之N，_ 羥基-4-(1-羥基乙基）苯甲醯亞胺醯胺為起始物來製備 1-(4-{5-[2’-曱基·2-(三氟甲基）聯苯-4-基]-1，2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙醇，得到微黃色油狀標題化合物（丨.9 g，8〇% )。 'H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.64 (d3 J = 1.3 Hz, 1H), 8.40 (dd, J = 8.0, 1.4 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.55 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.47 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.38-7.21 (m, 3H)，7.16 (d，J = 7.5 Hz，1H)，5.01 (q，J = 6.5 Hz，2H)，2.07 (s， 3H)，1.56 (d，J = 6.6 Hz，3H)。LC/MS (方法 B): 425.1 (M+H)。HPLC (方法 a) Rt 5.60 min (純度：100.0%)。 步驟4 : l-(4-{5-[2，-曱基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基]-1，2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙酮 在-68°C下’經5分鐘之時段向乙二醯氣（758叫；8·8

S 184 201206429 mmol)於無水DCM (50 mL)中之攪拌溶液中添加二甲亞 颯（1.3 mL ; 17.7 mmol)溶解於 DCM ( 1〇 mL)中之溶液。 攪拌反應混合物1 5分鐘，接著在1 5分鐘内添加步驟3中 所獲得之1-(4-{5-[2’-甲基_2-(三氟曱基）聯苯_4_基]· 口号一。坐-3-基}本基）乙醇（15 g; 3.5 mmol )於 DCM ( 10 mL ) 中之溶液。在-68°C下攪拌1小時後，使反應達到_3〇。〇，攪 拌15分鐘’接著再冷卻至_68。〇。添加三乙胺（1 8 mL ; 12 7 mmol)且允許混合物達到室溫。使澄清黃色溶液分配在飽 和碳酸氫鈉水溶液與乙酸乙酯之間，用鹽水洗滌有機層， 經MgS〇4脫水，過濾且濃縮。藉由急驟層析法純化粗混合 物’得到白色粉末狀標題化合物。iH NMR (DMSO-d6，300 MHz) δ 8.67-8.47 (m, 2Η), 8.29 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 8.19 (d, J =8.3 Hz, 2H), 7.67 (d, J = 7.9 Hz, 1H)S 7.43-7.25 (m, 3H), 7.17 (d，J = 7.7 Hz, 1H)，2.67 (s，3H), 2.02 (s, 3H)。HPLC (方 法 A) Rt 6.00 min (純度：99 〇%)。 β-m 5 . N- r fS-2-(=: μ f ^-4- 基]-1，2,4-ΰ号二唑4_基}苯基）乙胺 向步驟4中所獲得之1-(4-{5-[2，-曱基-2-(三氟甲基）聯 苯-4-基]-1，2,4-口号二唑_3_基}苯基）乙酮（515 mg; i.2mm〇1) 於THF ( 5 mL)中之溶液中添加曱基胺（732 pL ; 2.00 Μ ; Ummol)及異丙醇鈦（199灶；〇 67inm〇i)。在室溫下授 拌混合物隔仪。添加硼氫化鈉（194mg; 5丨mm〇i)且在室 恤下授拌反應2小時。接著，添加2〇紅nH4〇h且在室溫 下攪拌反貞1小時30分鐘。接著經由矽藻土墊過濾，用 185 201206429

EtOAc洗蘇。用NaHC03飽和溶液、鹽水洗務有機相，經 MgS04脫水，過滤且濃縮’藉由急驟層析法純化後得到無 色油狀標題化合物。4 NMR (DMS0-d6, 300 ΜΗζ) δ 8.66 (s, 1Η), 8.43 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.49 (t, J = 8.8 Hz, 3H), 7.42-7.23 (m, 3H), 7.17 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 3.94-3.80 (m, 1H), 3.61 (br s, 1H), 2.44 (d, J = 5.7 Hz, 3H), 2.09 (s，3H), 1.77 (d, J = 6.8 Hz, 3H)。LC/MS (方法 b): 438.2 (M+H)+。HPLC (方法 A) Rt 6.07 min (純度：78·6°/〇)。 步驟6 : N-甲基-N-[l-(4-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯 -4-基]-1，2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙基]丙胺酸甲醋 按照一般程序10，以步驟5中所獲得之N-曱基 -1-(4-(5-[2'-甲基-2-(三氣曱基）聯苯’-4-基]-'1:，2,4’_口等二唾二3_ 基}苯基）乙胺（40 mg ’ 0.09 mmol )為起始物來製備標題化 合物，得到46 mg( 96%)無色油狀物。LC/MS (方法B): 524.3 (M+H)、HPLC (方法 A) Rt 4.61 min (純度：70.5%) 〇 步驟7 : N-甲基-N-[l-(4-{5-[2，-甲基-2-(三氟曱基）聯苯 -4-基]-1，2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙基]丙胺酸 按照一般程序9 ’以步驟6中所獲得之N-甲基 ·Ν-[1-(4·{5-[2，-甲基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基]-1，2,4-口号二唑 -3-基}苯基）乙基]丙胺酸曱酯（4〇 mg; 0.08 mmol)為起始 物來製備標題化合物。用質量導向型自動分取儀純化後其 以白色固體形式分離。LC/MS (方法B): 508_3 (M-H)·，510.2 (M+H)+。HPLC (方法 A) Rt 4.92 min (純度：99.8%)。 實施例40 : N-甲基-N-(l-(4-{5-[2，-甲基-2·(三氟甲基）

S 186 201206429 聯苯-4-基】-1，2,4-卩号二唑_3_基丨苯基）乙基】甘胺酸鹽酸鹽

按照一般程序4，以中間物丨及中間物丨6為起始物來 製備N-甲基-Ν-[1-(4·{5-[2，-曱基-2-(三氟甲基）聯笨_4_ 基]-1，2,4-卩号二唾-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯。按照— 般程序8脫除其保護基’得到白色粉末狀標題化合物。炫 點：204°C。LC/MS (方法 Β): 494.0 (Μ-Η)·，496.0 (μ+η)+。 HPLC (方法 A) Rt 4.36 min (純度：98.1%)。 實施例41: 2-[(2·氟_4-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯_心 基】-1，2,4-口号二嗤-3-基}苯曱基）胺基】丁酸鹽睃鹽

按照一般程序4，以中間物丨及中間物27為起始物來 製備2-[(2-H{5-[2，-曱基-2-(三氣曱基）聯苯-4-基]_ι,2,4-口号二唑-3-基}苯甲基）胺基]丁酸第三丁酯。按照一般程序8 脫除其保護基’得到白色粉末狀標題化合物。熔點：214°C。 H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.56 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8·51 (dd，J = 7·9, 15 Hz, 1H)，8.08 (dd，J = 7.8, 1.5 Hz，1H)， 187 201206429 7.99. (dd, J = 10.2, 1.5 Hz, 1H), 7.91 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.43-7.25 (m, 3H), 7.17 (d, J = 7.3 Hz, 1H)} 4.30 (m, 2H), 4.06-3.96 (m, 1H), 2.08-1.87 (m, 5H), 0.97 (t, J = 7.4 Hz，3H)。LC/MS (方法 B): 512.2 (M-Η)·, 5 14.2 (M+H)+。HPLC (方法 A) Rt 4.88 min (純度：99.7%)。 實施例42 : N-[l-(3-{5-丨2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯_4_ 基】-1,2,4-0号二唑-3-基}苯基）乙基】甘胺酸鹽酸鹽

按照一般程序4，以中間物1及中間物26為起始物來 製備N-[l-(3-{5-[2，-甲基-2-(三氟曱基）聯笨-4-基]·ΐ，2,4_ 口号 一唾-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁醋。按照一般程序8脫 除其保護基，得到白色粉末狀標題化合物。熔點：i77〇G。 'Η NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 9.76(br s, 1H), 8.56 (d, J = 1.3 Hz, 1H)，8.51 (dd，J = 7.9, 1.7 Hz，1H)，8.36 (s，1H)，8.19 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.75-7.65 (m, 2H), 7.42-7.25 (m, 3H), 7.17 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.58 (q, J = 6.5 Hz, 1H)，3.89 (d, J = 16.8 Hz，1H)，3.60 (d，J = 17.2 Hz， 1H)，2.03 (s，3H)，1.66 (d，J = 6.8 Hz，3H)。LC/MS (方法 B): 480.2 (M-H)·，482.1 (M+H)+。HPLC (方法 A) Rt 4.83 min (純 度：99_4%)。 201206429 實施例43 : N-(2-氟-4-{5-[2-(甲氧基曱基）-2’-曱基聯笨 -4-基】-1，2,4-口号二唑-3-基}苯曱基）-N，2-二曱基丙胺酸鹽酸 鹽

按照一般程序3，以中間物3及中間物29為起始物來 製備 N-(2-氟-4-{5-[2-(曱氧基甲基）-2’-甲基聯苯-4-基]-1,2,4-〇号二唑-3-基}苯曱基）-：^,2-二曱基丙胺酸第三丁 酯。按照一般程序8將其水解，得到白色粉末狀標題化合 物。1H NMR: (DMSO-d6, 300 ΜΗζ) δ 8_34 (m，1H)，8.18 (dd, J = 8.0 Hz, 1H), 8.09 (dd, J = 8.0 Hz, 1H), 8.03-7.91 (m, 2H), 7.45 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.40-7.26 (m, 3H), 7.15 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.38 (br s, 2H), 4.20 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 2.69 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 1.65 (s，6H)。LC/MS (方法 B): 504.3 (M + H) +， 5 02.4 (M-Η)·。HPLC (方法 A) Rt 4.16 min (純度：99.8%)。 實施例44 : N-(2-氟-4-{5-[2-(曱氧基甲基）-2’-甲基聯苯 -4-基]-1,2,4-〇号二唑-3-基}苯甲基）-]\-甲基丙胺酸鹽酸鹽

189 201206429 按照一般程序3，以中間物3及中間物30為起始物來 製備N-(2-氟-4·{5-[2-(曱氧基曱基）_2，_曱基聯苯-4-基]-1，2,4-〇号二唾-3-基}苯甲基）_ν-曱基丙胺酸第三丁酯。按 照一般程序8將其水解’得到白色粉末狀標題化合物。ιΗ NMR: (DMSO-d6s 300 MHz) δ 8.33 (m, 1Η), 8.17 (dd, J = 8.0 Hz, 1H), 8.06 (dd, J = 8.0 Hz, 1H), 8.02-7.93 (m, 2H), 7.43 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.39-7.25 (m, 3H), 7.14 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.47 (m, 2H), 4.33-4.12 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 2.76 (s, 3H), 2.03 (s，3H)，1_59 (d，J = 7.2 Hz, 3H)。LC/MS (方法 B): 504.3 (M+H)+，502.4 (M-H)-。HPLC (方法 a) Rt 4.10 min (純度： 99.5%) » 實施例45: Ν·(2-氟-4-{5-丨2，-甲基_2_(三氟甲基）聯苯_4_ 基卜1，2,4-〇号二唾_3-基}苯甲基甲基絲胺酸鹽酸鹽

按照一般程序3，以中間物1及中間物3丨為起始物來 製備〇-(第二丁基）-N-(2 -氟-4-{5-[2，-曱基-2-(三氟曱基）聯 苯-4-基]-1，2,4·ο号二唑_3-基}苯曱基）_N_甲基絲胺酸第三丁 酯。按照一般程序8將其水解，得到白色粉末狀標題化合 物。1H NMR: (DMSO-d6, 300 ΜΗζ) δ 8.55 (br s, 1H)，8.51 (m， 1H)，8.06 (m，1H)，7.97 (d，J = 10.2 Hz，1H)，7.91 (t，J = 7 7

Hz, 1H), 7.68 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.37 (m, 2H), 7.29 (m, 1H), 190 201206429 ' 7.17 (d5 J = 7.7 Hz, 1H), 4.41 (m, 2H), 4.40 (m, 3H), 2.73 (s, 3H), 2.03 (s, 3H)。LC/MS (方法 B): 530.2 (M+H)+，528.3 (M-H)-。HPLC (方法 A) Rt 4.27 min (純度：100%)。 實施例46: N-[3-氟-5-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基]-1，2,4-〇号二唑_3_基}苯甲基）_2_甲基丙胺酸鹽酸鹽

按照一般程序3，以中間物1及中間物32為起始物來 製備N-(3-氟_5_{5_[2，-曱基_2-(三氟甲基）聯苯-4-基；u 口号二°坐_3-基}苯曱基）-2-曱基丙胺酸第三丁酯。按照—姻^ 序8將其水解，得到白色粉末狀標題化合物。 (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.51 (br s，1H)，8.47 (m，1H)，8 ι5 (ηι 1H)，7.88 (m，1H)，7.67 (m，2H)，7.36 (m，2H)，7.28 (m，1H) 7.16 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.20 (br s, 2H), 2.02 (s, 3H), i 5l ^ 6H)。LC/MS (方法 B): 514.3 (M+H)，512.3 (M-H)。HPLC (方’ 法 A) Rt 4.44 min (純度：99.2%)。 實施例47: N-[2-氟-4-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯笨、4 基】-1，2,4-D号二唑-3-基}苯甲基）纈胺酸鹽酸鹽

191 201206429 按照一般程序3，以中間物1及中間物33為起始物來 製備N-(2-氟-4-{5-[2，-甲基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基）4,2,4-口号二《•坐-3-基}苯曱基）纈胺酸第三丁酯。按照一般程序8將 其水解’得到白色粉末狀標題化合物。1HNMR: (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.55 (br s, 1H), 8.50 (m, 1H), 8.07 (m, 1H), 7.96 (m，2H)，7.68 (d，J = 8.2 Hz，2H)，7.37 (m，2H)，7.29 (m，1H)， 7.17 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.30 (m, 2H), 3.90 (m, 1H), 2.41 (m, 1H), 2.02 (Sj 3H), 1.08 (d, J = 7 Hz, 3H), 097 (d, J = 6 8 HZ}

3H)。LC/MS (方法 b): 528.3.(M + H) +，526.4 (M-H)·。HPLC (方法 A) Rt 4.48 min (純度：100%)。 實施例48 : N-2-氟-4_{5-[2-甲基-2，-(三氟甲基）聯苯_4_ 基】-1,2,4-d号二唑_3_基丨苯甲基）_2_甲基丙胺酸鹽酸鹽

按照一般程序3，以中間物4及中間物34為起始物來 製備N-(2-氟-4-{5-[2-甲基-2，-(三氟甲基）聯苯-4-基]· 口号二唑-3-基}苯甲基）_2_甲基丙胺酸第三丁酯。按照一般程 序8將其水解，得到白色粉末狀標題化合物。lfI NMR: (DMSO-d6，300 MHz) δ 8.17 (br s，1H)，8.06 (m，2H)， 8.01-7.89 (m，3H)，7.79 (m，1H)，7.68 (m，1H)，7.72 (m，2H)， 192 201206429 4.27 (br s，2H)，2.11 (s，3H)，1.63 (s，6H)。LC/MS (方法 B): 514.3 (M+H)+，512.4 (M-Η)·。HPLC (方法 A) Rt 4.31 牆（純 度：99_7%)。 實施例49: N-(2-氟·4:{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯_4_ 基]-1，2,4-d号二唑_3_基}苯甲基）_2-甲基丙胺酸鹽駿鹽

按照一般程序3，以中間物1及中間物34為起始物來 製備N-(2-氟-4-{5-[2，-曱基-2-(三氟甲基）聯苯·4_基 口号二嗤-3-基}笨曱基）_2_甲基丙胺酸第三丁酯。按照一般程 序8將其水解，得到白色粉末狀標題化合物。1只nmr: (DMSO-d6, 300 MHz) δ 9.87 (m, 1Η), 8.55 (br s, 1H), 8.50 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.07 (m, 1H), 7.99 (m, 2H), 7.68 (d, J = 8 Rz, 1H), 7.37 (m, 2H), 7.29 (m, 1H), 7.16 (m, 1H), 4.27 (br s? 2H), 2.02 (s，3H)，1·63 (s, 6H)。LC/MS (方法 b): 514.4 (M+H) +，512.4 (M-Η).。HPLC (方法 A) Rt 4.37 min (純度： 100%)。 實施例50: N-(2-氟-4·{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯_4-基]-1，2,4-口号二嗤_3_基}苯甲基）_N_甲基丙胺酸鹽酸鹽 193 201206429

按照一般程序3，以中間物1及中間物30為起始物來 製備N-(2-氟-4-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯 口号二。坐-3-基}苯甲基）·ν-曱基丙胺酸第三丁酯。按照一般程 序8將其水解，得到白色粉末狀標題化合物。NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8·55 (br s，1H), 8.51 (m，1H)，8.09 (m， 1H)，7.99 (m，2H)，7.68 (d，J = 8.1 Hz, 1H)，7.37 (m，2H)， 7.29 (m, 1H), 7.17 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.47 (m, 2H), 4.26 (br s，1H)，2.75 (s，3H)，2.02 (s，3H)，1.59 (d，J = 7.1 Hz，3H)。 LC/MS (方法 b): 514.4 (M+H)+，512.4 (M-H)-。HPLC (方法 A) Rt 4.40 min (純度：100%)。 實施例51: 2-((2-甲氧基·1-(4-(5-(2, ·甲基-2-(三氟甲基） 聯苯-4-基）-12,44号二唑_3_基）苯基）乙基）（甲基）胺基）乙酸

步驟1 : Ν-[2-甲氧基-1-(4-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯 苯-4-基]~ 1,2,4-鸣二唑-3-基}苯基）乙基]-Ν-甲基甘胺酸第三

S 194 201206429 丁酯 向中間物 35 ( 0.141 g ; 0.42 mmol)及中間物 i ( 〇129 11^;0.46 111111〇1)於]^〇>〇1111〇中之溶液中添加叩(：（〇121 g ; 0_63 mmol)。在環境溫度下攪拌反應混合物18小時。用 吡啶（2 mL )稀釋反應混合物且在丨5〇〇c下於微波中加熱 30为1里。在真空中移除溶劑且使殘餘物溶解於dcm中。用 水洗務混合物，且使有機相穿過疏水性玻璃料。在真空中 蒸發溶劑。藉由二氧化矽急驟層析法（用異己烷/Et〇Ac (100 /〇/0至4:1 )洗提）純化殘餘物，得到標題化合物。 NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8.63 (1 H, d, /= 1.2 Hz), 8.40 (1 Η, dd, J = 8, 1.7 Hz), 8.17-8.15 (2 H, m), 7.55-7.53 (2 H, m), 7.48-7.46 (1 H, m), 7.34-7.16 (4 H, m), 4.11 (1 H, m), 3.74-3.68 (2 H, m), 3.44 (1 H, / = 17.2 Hz), 3.33 (3 H} s), 3.25 (1 H, d, / = 17.2 Hz), 2.45 (3 H, s), 2.07 (3 H, s), 1.47 (9 H， s)。 步驟2 : 2-((2-甲氧基小(4_(5_(2，_甲基_2 (三氟τ基）聯 苯-4-基）-l，2,4-碎二唑_3_基）苯基）乙基）（甲基）胺基）乙酸 向N-[2-甲氧基-ΐ_(4-{5·[2，-甲基_2_(三氟甲基）聯苯_4.. 基]-1，2,4-σ号一唑-3-基}苯基）乙基]_Ν_甲基甘胺酸第三丁酯 (0.078 g，0.13 mmol)中添加於二口号烷中之HC1溶液（4 Μ ; 4 mL)，且在環境溫度下攪拌反應混合物18小時且在8〇。〇 下稅拌2小時。使反應混合物冷卻且在真空中蒸發溶劑。 用乙醚濕磨殘餘物且在真空下乾燥。將固體溶解於 DMSO-de中並蒸發，得到無色膠狀標題化合物（〇 〇55 g， 195 201206429 75%)。4 NMR·· (DMS0-d6/D20, 400 MHz) δ 8.57 (1 H，s)， 8.54-8.52 (1 H, d, 8 Hz), 8.24 (2 H, d, / = 8 Hz), 7.79 (2 H, d, / = 8 Hz), 7.69 (1 H, d, J = 8 Hz), 7.40-7.37 (2 H, m), 7.33-7.31 (1 H, m), 7.19 (1 Η, d, J = 7.2 Hz), 4.78 (1 H, m), 4.13-4.10 (1 H, m)} 3.97 (1 H, m), 3.87-3.83 (2 H, m), 3.36 (3 H，s), 2.75 (3 H，s)，2.03 (3 H，s)。LC/MS (方法 B): 526 (M+H)+。HPLC (方法 c) Rt 9.13 min (純度：98.2 %)。 實施例52 : 2-(2-羥基-l_(4-(5-(2，-甲基-2-(三氟甲基）聯 苯-4-基）-1，2,4-〇号二唑_3·基）苯基）乙基胺基）乙酸

步驟1 : N-[2-羥基-1-(4-{5-[2·-甲基-2-(三氟甲基）聯苯 -4-基]-1,2,4-吗二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁 _ 向中間物 36 ( 0.563 g ; 1.27 mmol)及中間物 1 ( 0.391 mg; 1_40 mmol)於 MeCN( 3 mL)中之溶液中添加 EDC( 0.321 g ; 1.67 mmol )。在環境溫度下攪拌反應混合物1 8小時。用 °比啶（2 mL )稀釋反應混合物且在1 5 〇 t下於微波中加熱 30分鐘。在真空中移除溶劑且使殘餘物溶解於dcm中。用 水洗滌混合物，且使有機相穿過疏水性玻璃料。在真空中 蒸發溶劑。藉由二氧化矽急驟層析法（用異己烷/Et〇Ac (10:1 )洗提）純化殘餘物’得到標題化合物。1h NMR (CDC13, s 196 201206429 400 MHz) δ 8.63 (1 H, s), 8.41-8.39 (1 Η, dd, J = 7.6, 1.2 Hz) 8.17 (2 H, d, /.= 8.4 Hz), 7.54-7.46 (3 H, m), 7.34-7.15 (4 H, m), 3.90-3.88 (1 H, m), 3.74-3.65 (2 H, m), 3.30 (1 H, d, J = 17.2 Hz), 3.13 (1 H, d, J = 17.2 Hz), 2.61 (1 H, br s), 2.07 (3 H, s), 1.46 (9 H, s), 0.91 (9 H} s), 0.06 (3 H, s), 0.05 (3 H, s)〇 步驟2 : 2-(2-羥基-甲基·2_(三氟f基）聯苯 -4-基）-1，2,4-ΰ号二唑-3-基）苯基）乙基胺基）乙酸 向N-[2-羥基-1-(4-{5-[2·-曱基-2-(三氟甲基）聯苯_4_ 基]-1，2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙基]甘胺酸第三丁酯（〇.2〇〇 g ; 0.13 mmol)中添加於二卩号烷中之HC1溶液（4 Μ ; 4 mL) 且在8 0 °C下擾拌反應混合物1小時。使反應混合物冷卻且 在真空中蒸發溶劑《藉由製備型HPLC純化殘餘物，得到標 題化合物。1H NMR: (CDC13, 400 ΜΗζ) δ 8.57 (1 H，d，《/= 1.2

Hz), 8.54-8.52 (1 H, m), 8.14 (2H, d, J = 8 Hz), 7.70 (1 H, d, 7=8 Hz), 7.63 (2 H, d, J = 8.4 Hz), 7.44-7:38 (2 H, m), 7.34-7.30 (1 H, m), 7.21-7.20 (1 H, m), 3.94-3.91 (1 H, m), 3.65-3.56 (1 H, m), 3.52-3.47 (1 H, m), 3.20 (1 H, d, 7 = 16.8 Hz)，3.06 (1 H，d，= 16.8 Hz)，2.06 (3 H，s)。LC/MS (方法 B): 496 (M + H)+。HPLC (方法 D) Rt 3·04 min (純度：94.9%)。 實施例53 : 1-((4-(5-(2-(曱氧基甲基）-2’-甲基聯苯-4_ 基）-l，2,4_D号二哇-3-基）苯甲基）（甲基）胺基）環戊烷甲酸 197 201206429

步騾 1 : (4-(5-(2-( ψ 备 I基曱基）-2’-甲基聯苯-4- 基）-1，2,4-喝二唑-3-基）苯基）甲醇 按照一般程序5 ’以令間 1物3及中間物37為起始物來

製備標題化合物。其以白色固舻π L U體形式分離。NMR: (CDC13,

4〇〇MHZ)“.43(1H，S)，8.22、8.l5(3H，m)，7_53(2H，U = 8.0HZ)，7.36-7.24(4H，m)，7 l3(iH d j=74Hz) 4 8i (2H，d，J = 5.6HZ)，4.23(2H，d，J=18Hz) 3 33 (3 H，s)， 2.08(3 H，s)，1.80-1.75 (1 H，lc/ms (方法 B) 387 (M+H)+。HPLC (方法 E) Rt = 1〇 9 min (純度：％ 7%)。 步驟2 : 4-(5-(2-(甲氧基甲基）_2,甲基聯苯_4基），24_ ΰ咢二唑-3-基）苯甲搭 按照一般程序6 ’以步驟1中所獲得之（4-(5-(2-(甲氧基 甲基）-2’-甲基聯苯-4-基）-1，2,4-口等二唑_3_基）苯基）甲醇（75〇 mg ; 1.94 mmol )為起始物來製備標題化合物。其以白色固 體形式分離（732 mg ; 98%)。〗H nmR: (CDC13, 400 ΜΗζ) δ 10.12 (1 Η，s)，8.45(1 Η，s)，8·4〇 (2 Η，d，·/= 8.1 Ηζ)，8.19 (1 Η, dd, J= 7.9, 1.9 Hz), 8.05 (2 Η, d, J= 8.2 Hz), 7.37-7.23 (4 H, m), 7.13 (1 H, d, J = 7.4 Hz), 4.27-4.18 (2 H, m), 3.34 (3 H，s)，2.09 (3 H, s)。LC/MS (方法 b) 385 (M + H)+。HPLC (方 s 198 201206429 法 D) Rt = 4.71 min (純度：95.9%)。 步驟3 : 1-((4_(5_(2_(甲氧基甲基）_2,甲基聯苯_4_ 基）-1，2,4-ΰ可一唑基）苯甲基）（甲基）胺基）環戊烷甲酸 按照一般方案7 ’以步驟2中所獲得之4_(5_(2_(曱氧基 曱基）·2’_甲基聯苯_4-基）_ι，2,4_〇号二唑_3·基）苯曱醛（1〇4 mg ; 0.27 mmol)為起始物且使用j胺基環戊酸（65 mg ; 0.50 mmol)來製備標題化合物。其以白色固體形式分離t !H NMR (DMSO-d6} 400 MHz) δ 12.2 (1 H, br s), 8.35 (1 H, d, J = 1.8 Hz)，8.20 (1 H，dd，J = 7.9, 19 hz)，8.16-8.07 (2 H， m), 7.59 (2 H, d, J = 8 Hz), 7.45 (1 H, d, J = 8 Hz), 7.40-7.29 (3 H, m), 7.18 (1 H, d, y = 7.4 Hz), 4.27 (1 H, d, 7 = 12 Hz), 4.22 (1 H, d, J = 12 Hz), 3.76 (2 H, s), 3.28 (3 H, s), 2.26-2.21 (5 H, m), 2.07 (3 H, s), 1.79-1.76 (4 H, m), 1.69-1.65 (2 H，m)。LC/MS (方法 b): 512 (M+H)+。HPLC (方 法 D) Rt 2.81 min (純度：94.0%)。 實施例54: (2S)-2-(4-(5-(2，-甲基-2-(三氟曱基）聯苯-4_· 基）-1，2,4-口号二唾-3-基）苯甲基胺基）丁酸

步驟1 : (4-(5·(2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯_4_基）-124_ 199 201206429 吟二唑基）苯基）甲醇 按‘系般程序5，以中間物1及中間物37為起始物來 製備‘題化合物。使粗產物自EtOAc及汽油中再結晶，獲 知白色固體狀標題化合物。咕NMR: (CDC13, 4〇〇 ΜΗζ) δ 8'63 (1 H，S), 8,40 〇 H, d, /= 8.0 Hz), 8.20 (2 H, d, J = 8.0

Hz)，7.54 (2 H，d，= 7 9 Hz)，7.47 (1 H，d，</ = 7.9 Hz)， 7.38-7.21 (3 H, m), 7.16 (1 H, d, J =7.5 Hz), 4.81 (2 H, d, y = 5.7 Hz)，2.14-1.94 (3 H，m)。LC/MS (方法 B): 411 (M + H)+。 HPLC (方法 G) Rt = 4.50 min (純度：97.9%)。 步驟2 : 4-(5-(2'-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基 〇咢二唑-3-基）苯甲链 按照一般程序6，以步驟1中所獲得之（4-(5-(2·-甲基 -2-(二氟甲基）聯苯_4-基）-ΐ，2,4- α号二唑-3-基）苯基）甲醇為 起始物來製備標題化合物。用汽油/乙醚混合物濕磨粗產

物，獲得白色固體狀標題化合物（5.72 g ; 97%)。士 NMR (CDC13, 300 ΜΗζ) δ 10.13 (1 H，s), 8.64 (1 H，s)’ 8.43-8.36 (3 H，m)，8.06 (2 H，d，J = 8.0 Hz), 7.49 (1 H，d，J = 8.0 Hz) 7.3 8-7.21 (3 H，m)，7.15 (1 H，d，J = 7.6 Hz)，2.07 (3 H，s)。 LC/MS (方法 B): 409 (M+H)+。HPLC (方法 G) Rt = 4.89 min (純度：95.7%) « 步驟3 · (2S)-2-(4-(5-(2’-甲基-2-(三氟甲基）聯苯 基）-1,2,4 -時二°坐-3-基）苯曱基胺基）丁酸 將氰基硼氫化姻（34.7 mg; 0.55 mmol )添加至步驟2 中所獲得之4-(5-(2·-曱基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基）-i，2,4_Df

S 200 201206429 土）笨甲酸（205 mg ; 0.50 mm〇i )及（s)-2-胺基丁酸 (103 ’ I00 mmol)於甲醇（3 mL)、DCM ( 3 mL)及乙 I ( 75 /il )之混合物中的溶液中。在室溫下攪拌混合物隔 夜’接著在真空中移除溶劑。藉由製備型HPlc純化殘餘 物，獲得白色固體狀標題化合物。]H NMR: (DMS〇_d6, 4卯 MHz) δ 8.58-8.52 (1 Η, m), 8.53-8.48 (1 Η, m), 8.12 (2 Η, cJ J =8·〇 Hz), 7.67 (1 Η, d, J = 7.9 Hz), 7.62 (2 H, d, J = 8.〇 Hz), 7.41-7.35 (2 H, m), 7.33-7.27 (1 H, m), 7.18 (1 H, d, J ：= 7-5 Hz), 3.96 (1 H, d, J = 14.1 Hz), 3.78 (1 H, d, J = 14.0 Hz)> 3.07-3.00 (i h, m), 2.03 (3 H, s), 1.69-1.58 (2 H, m)j 0.94-0.88 (3 H，m)。LC/MS (方法 B): 496 (M+H)+。HPLC (方 法 D) Rt = 3.16 min (純度：99.6%)。 下表中所示之實施例係藉由與實施例54相同之方案， 使用關於各實施例適當之胺基酸製備： 201 201206429 實施例 編號 結構 HPLC 方法 純度 (%) RT [min] 質量峰 [M]+ 質量峰 [Μ]' 55 OC-, 手性 0 方法D 99.8 3.23 510 508 56 方法D 99.8 3.34 510 508 57 方法H 99.4 8.94 496 494 58 0 方法H 96.3 9.03 496 494 59 方法D 99.1 3.13 522 520 60 Κκ>>/ 0 方法D 98.1 3.11 512 510 61 cc. 0 方法D 96.6 3.14 512 510 62 ^Prt〇-^0H 0 方法D 98.1 3.24 510 508 63 / OH 方法H 99.0 8.66 496 494 202 201206429 64 0 方法D 98.6 3.14 512 510 65 、ΟΗ 方法Η 99.8 3.12 512 510 66 0 方法D 98.1 3.1 508 506 67 CC. 手性 方法Η 95.1 3.12 482 480 68 cc, 手性 方法D 99.3 3.11 482 - 實施例69 : (2S)-2-(甲基（4-[5-(2’_甲基-2-(三氟曱基） 聯苯-4-基）-l，2,4-D等二唑-3-基）苯甲基）胺基）丁酸

將氰基石朋氫化納（1 8 mg ; 0.28 mmol )添加至4-(5-(2’-曱基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基）-1，2,4-α号二唑-3-基）苯曱醛 (實施例54步驟2，103 mg ; 0.25 mmol )及（S)-2-胺基丁酸 C1 203 201206429 (52 mg ; 0.50 mm〇1)於甲醇（3 灿）、dcm ( 3 虹）及乙 酸（38 μ1)之混合物中的溶液中。在室溫下㈣混合物隔 夜:且在正壓力下經由玻璃料過渡。向德液中添加甲醛(咖 水溶液；204 mg ’ 2.51 mmol) ’接著添加Ac〇H直至ρΗ值 在3至4範圍内（ 240 mL)。向所得混合物中添加氰基棚灸 化鈉（79mg，l.26mmol)，攪拌混合物16小時在真空中 移除溶劑’且藉由逆相HPLC純化殘餘物，獲得白色固：狀 標題化合物。丨H NMR (DMS〇_d6, 4〇〇 ΜΗζ) δ 8 57 8 Μ G & m), 8.52-8.48 (1 H} m), 8.10 (2 Η, d, ./= 8.〇 Ηζ)} 7.67 (1 Η, d, J 7·9 Hz), 7.57 (2 Η, d, / = 8.0 Hz), 7.40-7.35 (2 Η, m), 7·32-7.27 (1 Hs m), 7.18 (1 H, d, y = 7.5 Hz), 3.86 (1 d, / =14.3 Hz), 3.72 (1 H, d, / = 14.3 Hz), 3.15 (1 H, t5 / = 7.4 Hz)} 2.24 (3 H, s), 2.03 (3 H, s)3 1.76-1.60 (2 H, m)5 0.95 (3 H’ t’ J - 7.3 Hz)。LC/MS (方法 B): 5i〇 (M+H)+。HpLC (方 法 D) Rt 3.39 min (純度：99.8%) »

S 下表中所示之實施例係藉由與實施例69 .相同之方案， 使用關於各實施例適當之胺基酸來製備：

204 201206429 72 CC.手性 0 方法D 99.9 3.24 512 510 73 /Νδ 方法D 99.8 3.46 536 534 74 方法G 90.7 2.8 526 524 75 %, Ν^Ο^ηο /Ν^Ο0Η 方法D 99.5 3.29 526 524 實施例76 : 3-甲氧基-2-{3·[5-(2’-曱基-2-三氟曱基-聯 苯-4-基）-[1，2,4】口号二唑-3-基]-苯甲基胺基}-丙酸

步驟1 : (3-(5-(2'_甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基 咢二唑-3-基） 苯基） 甲醇 按照一般程序5，以中間物1及中間物38為起始物來 205 201206429 製備標題化合物’且以白色固體形式分離。1H NMR (CDC13, 400 MHz) δ 8.65-8.58 (2 H，m)，8.40 (1 H，d，·/ = 7.9 Hz)， 8.22 (1 H, s), 8.13 (1 H, d, J = 7.3 Hz), 7.60-7.50 (2 H, m), 7.47 (1 H, d, 7 = 7.9 Hz), 7.3 7-7.20 (2 H, m), 7.15 (1 H, d, J = 7.5 Hz), 4.83 (2 H, d, /=4.2 Hz), 2.07 (3 H, s), 1.93-1.81 (1 H，m)。LC/MS (方法 B): 411 (M+H)+。HPLC (方法 G) Rt 4.54 min (純度：96.8%)。 步驟2 : 3-(5-(2'-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基）-1,2,4-v咢二唑-3-基）苯甲路 按照一般程序6’以（3-(5-(2，-曱基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基）-1，2,4-口号二唑-3-基）苯基）曱醇（ 452 mg; 1.10 mmol )為 起始物來製備標題化合物，且以白色固體形式分離（392 mg ; 87%)。4 NMR (CDC13，400 ΜΗζ) δ 10.16 (1 H，s)， 8.72-8.71 (1 H, m), 8.68-8.62 (1 Η, m), 8.48 (1 Η, dt, J= 7.7, 1.4 Hz), 8.43-8.40 (1 H, m), 8.09 (1 H, dt, J = 1.1, 1.4 Hz), 7.73 (1 H, t, J = 7.7 Hz), 7.49 (1 H, d, J = 7.9 Hz), 7.35-7.24 (3 H，m)，7.16 (1 H，d，《/= 7.5 Hz)，2.07 (3 H, s)。LC/MS (方 法 B): 409 (M + H)+。HPLC (方法 G) Rt 4·68 min (純度： 97.4%)。 步驟3 : 3-曱氧基-2-{3-[5-(2’-甲基-2-三氟甲基-聯苯-4-基-[1,2,4] ΰ号二唑-3-基]-苯甲基胺基}-丙酸 按照與關於實施例54步驟3所述相同之方案，以 4-(5-(2’-曱基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基）-1，2,4-〇号二唑-3-基） 笨甲醛及Ο-甲基絲胺酸為起始物來製備標題化合物。其以

S 206 201206429 . 灰白色固體形式分離。LC/MS (方法B): 5 12 (M+H)+ e HPLC (方法 G) Rt 6.75 min (純度：97.3%)。 下表中所示之實施例係藉由與實施例76相同之方案， 使用關於各實施例適當之胺基酸或胺基酯來製備： 實施例 編號 77 結構 Fy\4 H0Y° 純化方法 方法I 純度 (%) 98.2 RT 17.21 質量峰 —[M]+ 質量峰 [Μ]' 512 510 78 方法E 97.2 15.97 512 510 79 & η〇ύ° 方法D 99.7 3.24 510 508 80 ο~ Λ 方法D 98.9 3.07 508 506 81 手性^ 方法D 96.5 3.28 496 - 82 方法E 97.5 15.89 482 480 實施例83: 2-甲基-2-(曱基-{3-[5-(2，-甲基-2-三氟甲基- 207 201206429 聯苯-4-基）-[1，2,4] 口夸二唑基】-苯甲基卜胺基）_丙酸

按照與關於實施例69所述相同之方案’以4-(5-(2，-曱 基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基）-1，2,4-〇号二唑-3-基）苯曱醛及2_ 甲基丙胺酸為起始物來製備標題實施例。其以灰白色固體

形式分離。LC/MS (方法 B): 508 (M-H)·，510 (M+H)+。HPLC (方法 D) Rt 3.35 min (純度 99.8%)。 下表中所示之實施例係藉由與實施例83相同之方案， 使用關於各實施例適當之胺基酸或胺基酯來製備：

S

208 201206429

實施例87 : (R)-2-(乙基-{3-[5-(2’-曱基-2-三氟甲基-聯 苯-4-基）-[1，2,4】時二唑-3-基】-苯甲基}-胺基）-3-羥基-丙酸

按照與關於實施例69所述相同之方案，以4-(5-(2’-曱 基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基）-1，2,4-〇等二唑-3-基）苯曱醛、乙 醛及D-絲胺酸為起始物來製備標題化合物。其以灰白色固 體形式分離。LC/MS (方法 B): 524 (M-H)·，526 (M+H)+。 HPLC (方法 D) Rt 3.35 min (純度：99.0%)。 實施例88 : 2-(乙基-{3-[5-(2’_曱基-2-三氟曱基-聯苯-4-_ 基）-[1，2,41〇号二唑-3-基]-苯曱基卜胺基）-2-曱基-丙酸

按照與關於實施例87所述相同之方案，用2-甲基丙胺 209 201206429 酸替代D-絲胺酸來製備標題化合物。纟以淺冑色油狀物形 式分離。LC/MS (方法 B): 522 (M-H)·，524 (M+H)+。HPLC (方 法 D) Rt 3.49 min (純度：99.1%)。 實施例89 : (2S)-2·(乙基（4-(5-(2,-甲基-2-(三氟甲基） 聯苯-4-基）-l，2,4-ti号二唑_3_基）苯甲基）胺基）丙酸

按照與關於實施例69所述相同之方案，但使用乙酸 (134 mg ; 3.06 mmol)及（S)-2-胺基丙酸（55 mg; 0·62 mmol) 來製備標題化合物。其以白色固體形式分離。】H NMR (DMSO-d65 400 MHz) δ 8.56 (1 H, s), 8.52 (1 Η, d, 7 = 8.0 Hz), 8.11 (2 H, d, / = 7.9 Hz), 7.68 (1 H, d, 7 = 7.9 Hz), 7.63 (2 H, d, /= 8.0 Hz), 7.44-7.37 (2 H, m), 7.34-7.29 (1 H, m), 7.20 (1 H, d, y = 7.5 Hz), 3.92 (1 H, d, / = 15.0 Hz), 3.79 (1 H, d5 / = 15.1 Hz), 3.55-3.44 (1 H, m), 2.72-2.57 (2 H, m), 2.05 (3 H, s), 1.26 (3 H, d, / = 7.0 Hz), 1.06-0.97 (3 U, t, J = 7.0 Hz)。LC/MS (方法 B): 510 (M+H)+ 〇 HPLC (方法 D) Rt 3.3 8 min (純度：98.6%)。 實施例90: (R)-2-(乙基-{4·丨5-(2’-甲基-2-三氟甲基-聯 苯-4-基）-[1，2,4】口号二唑-3-基】-苯甲基}-胺基）·丙酸

210 S 201206429

分離。LC/MS (方法 b):5〇8(m_h)_，5i〇 之方案，用D-丙胺酸替 分。其以無色油狀物形式 ，510(腕)+。hplc (方 代（s: 法 D) Rt = 3.39 min (純度：99.08%)。 實施例91 : (2S)-3·甲基-2-(4-(5·(2，·甲基-2-(三氟甲基） 聯苯-4-基）-1，2,4-π号二唑_3-基）苯乙基胺基）丁酸

步驟1 : (4-(5-(2、曱基·2-(三氟甲基）聯苯-4-基）4,2,4.. 碎二唑-3-基）苯基）乙醇 按照一般程序5，以中間物丨及中間物39為起始物來 製備標題化合物。其以白色固體形式分離。NMR (CDC13, 400 MHz) δ 8.63 (1 Ή，s)，8 40 (1 H，dd, = 8,0, 1.7 Hz)， 8.15 (2 H，d，J = 8.1 Hz)，7.47 (1 H, d，J = 8.0 Hz)，7.41 (2 H， d5 J = 8.0 Hz), 7.39-7.22 (3 H, m), 7.15 (1 H, d, J = 7.6 Hz), 211 201206429 3.94 (2 H, s), 2.97 (2 Η, t, J = 6.5 Hz), 2.06 (3 H, s), 1.44 (1 H，s)。LC/MS (方法 B): 425 (M + H)+。HPLC (方法 G) Rt 4.31 min (純度：99.3%)。 步驟2 : (2S)-3-甲基-2-(4-(5-(2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯 -4-基）-1,2,4-枵二唑-3-基）苯乙基胺基）丁酸第三丁醋 在0°C下向於DCM ( 2 mL )中之（4-(5-(2'·甲基-2-(三氟 甲基）聯苯-4-基）-1，2,4-〇号二唾-3-基）苯基）乙醇（84mg; 〇·2 mmol)中添加 DIEA( 71 /aL; 0.4 mmol)及曱續醯氣（17 μΐ ; 0·22 mmol)»在〇°C下攪拌所得混合物ι〇分鐘，使其溫至 室溫且攪拌2小時。用DCM ( 20 mL )稀釋混合物，且添加 飽和NaHC03水溶液。用DCM ( 3x20 mL)萃取水層，將所 合併之有機份脫水（MgS〇4 )，過濾且在真空中移除溶劑。 粗殘餘物均不經進一步純化即用於下一步驟。將其溶解於 二口夸烷（2 mL)中。添加碳酸鉀（165 mg，1.2 mmol)及 (S)·2-胺基-3-曱基丁酸第三丁酯（104 mg ; 0_60 mmol)。在 130°C下加熱混合物72小時，用DCM ( 5 mL )及水（5 mL) 稀釋。用DCM ( 3 X 20 mL· )萃取水層，將所合併之有機份 脫水（MgSCU )，過濾且在真空中移除溶劑。藉由急驟層析 法（用含有增加量之Et0Ac之汽油洗提）純化殘餘物，獲 得無色膠狀標題化合物（86 mg; 72%)。iH NMR (CDC13, 400 MHz) δ 8.63 (1 Η, S), 8.39 (1 Η, dd, / = 8.0, 1.7 Hz), 8.12 (2 Η, d, / = 8.1 Hz), 7.47 (1 H, d, J = 8.0 Hz), 7.43-7.21 (5 H, m), 7.16 (1 H, d, y = 7.6 Hz), 2.99-2.68 (5 H, m), 2.07 (3 H, s), 1.94-1.79 (1 H, m), 1.46 (9 H, s)5 0.94 (6 H, dd, J = 6.8, s 212 201206429 ， 3.7 Hz)。LC/MS (方法 B): 58〇 (M + H) +。HpLC (方法 D) Rt 3 7 min (純度：94.9%)。 步驟3:(2S)-3-甲基_2-(4_(5_(2,·甲基-2-(三氟f基）聯笨 -4-基）-1，2,4-枵二唑_3_基）苯乙基胺基）丁酸 向（2S)-3 -曱基_2-(4-(5-(2，-曱基-2-(三氟甲基）聯苯_4- 基）-l，2,4-口号二唑-3-基）苯乙基胺基）丁酸第三丁酯（86 mg ; 0· 1 5 mmol )中添加於二0号烷中之4M HC1，且在7〇〇c下於 官中加熱混合物3小時。接著在真空中移除溶劑，且藉由 製備型HPLC純化殘餘物，獲得白色固體狀標題化合物。lH NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 8.56 (1 Η, s), 8.50 (1 Η, d, J -= 8.1 Hz), 8.08 (2 H, d, y = 7.8 Hz), 7.65 (1 H, d, J = 8.1 Hz), 7.51 (2 H, d, /= 8.0 Hz), 7.40-7.38 (2 H, m), 7.31 (1 H, td, ./ 7.0, 2.3 Hz), 7.18 (1 H, d, J = 7.6 Hz), 3.09-2.80 (5 H, m), 2.16 (3 H, s), 1.99-1.90 (1 H, m), 0.96 (6 H, dd, J = 6.8, 2.1

Hz)。LC/MS (方法 B): 524 (M+H)+。HPLC (方法 H) Rt 9.20 min (純度：97.7%)。 下表中所示之實施例係藉由與實施例9 1相同之方案， 使用關於各實施例適當之胺基酸或胺基酯來製備： 實施例 編號 結構 純化方法 純度 (%) RT 質量峰 [Μ]+ 質量峰 [Μ]' 八^ 怖 ---- 92 方法D 99,7 2.54 496 494 ----- 213 201206429

實施例94 : (2S)-2-(3-(5-(2’-甲基 _2-(三氟甲基）聯苯-4- 一唑-3-基）苯乙基胺基）丙酸

基）-1，2,4-口咢 甲基）聯苯-4-基）-1,2,4- 步驟】：（3-(5-(2,1基_2_(三 時二唑-3-基）苯基）乙醇 按照一般程序5 ’以中間物1及中間物40為起始物來 製備標題化合物，且以白色固體形式分離（1Q3g，8〇%)。 H NMR (CDC13, 400 MHz) δ 8.66 (s, 1Η), 8.42 (dd, J = 8 〇 1.7 Hz，1H)，8.11-8.08 (m，2H)，7.54-7.21 (m，6H), 7.17 (d j =7.7 Hz，1H), 3.98 (dd，J = 12.1，6·〇 Hz，2H)，3.02 (t，j = 6 5

Hz，2H)，2.08 (s，3H)，1.50-1.43 (m，1H)。LC/MS (方法 B)_ 425 (M+H)+。HPLC (方法 G) Rt 4.30 min (純度：95.8%)。 步驟2 : (2S)-2-(3-(5-(2’_甲基-2-(三氟曱基）聯苯_4 基）-1,2,4-枵二唑-3-基）苯乙基胺基）丙酸 按照實施例91步驟2及步驟3所使用之方案，彳日、 *—'以 (3-(5_(2’_甲基-2-(二氟曱基）聯苯-4-基）-1，2,4·口等二。坐·]義） 214 201206429 苯基）乙醇（84 mg，0.2 mmol )及（s)_2-胺基丙酸第三丁酯 (87mg，〇.6mmol)為起始物來製備標題化合物。其以白色 固體形式分離（133 mg，96%)。4 NMR; (DMSO-d6, 400 MHz) δ 8.57 (s, 1Η), 8.53 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.07-8.03 (m, 2H), 7.69 (d, J = 8:0 HZ) 1H)j 7.65-7.53 (m, 2H), 7.44-7.37 (m, 2H), 7.33 (td, J = 4.0, 2.1 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 7.6 Hz, 1H),

3-31 (q, J = 7 2 Hz, 2H), 3.18-3.02 (m, 3H), 2.06 (s, 3H), 1.3 3 (d，J = 7 〇 Hz，3H)。LC/MS (方法 B): 496 (m + h)+。HpLC (方法 G) Rt 3 24 min (純度：99.1%)。 下表中所示之實施例係藉由與實施例94相同之方案， 使用關於各實施例適當之胺基酸或胺基酯來製備： 實施例 編號 結構 純化方法 純度 (%) RT 質量峰 [M]+ 質量峰 [Μ]' 95 方法D 99.9 2.79 496 494 96 方法F 93.5 9.07 524 522 實施例97: 1\-[(111)-1-(4-{5-[2-(甲氧基甲基）-2，-甲基聯 苯-4-基卜1，2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙基卜N-甲基甘胺酸鹽酸 鹽

215 S 201206429

按照一般私序3，以中間物24及中間物3為起始物來 製備N-[(lR)-l-(4-{5-[2-(曱氧基甲基）_2，_甲基聯苯_4_ 基]-1，2,4- d号一唑_3-基}苯基）乙基]_N_曱基甘胺酸第三丁 酯。按照一般程序8將其水解，得到白色粉末狀標題化合 物。1H NMR: (DMSO-d6, 400 ΜΗζ) δ 8.31 (s，1H)，8.20-8.14 (m, 3Η) 7.81 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.42 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.3 5 (d, 7 = 3.8 Hz, 2H), 7.29 (q, J = 5.5 Hz, 2H), 7.13 (d, / =7.0 Hz, 1H), 4.72 (d, / = 6.4 Hz, 1H), 4.17 (dd, J = 12.7 Hz, 2H), 4.00-3.92 (m, 2H), 3.24 (s, 3H), 2.75 (s, 3H), 2.02 (s, 3H )，1.68 (d，J = 6.7 Hz，3 H)。LC/MS (方法 A): 472.3 (M + H)+，526.3 (M-H)-。HPLC (方法 A) Rt 4.62 min (純度： 97.8%)。 實施例98: 1^-【（18)-1-(4-{5-[2-(甲氧基甲基）-2，-甲基聯 苯-4-基】-1,2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙基】-]\-甲基甘胺酸鹽酸 鹽

216 201206429 按照一般程序3，以中間物23及中間物3為起始物來 製備N-[(1S)-卜(4-{5-[2-(曱氧基f基）·2，_曱基聯苯_4_ 基]-1，2,4-口号二唑-3-基}苯基）乙基]甲基甘胺酸第三丁 酯。按照一般程序8將其水解，得到白色粉末狀標題化合 物。NMR: (DMSO-d6, 400 ΜΗζ) δ 8.31 (s，1Η)，8.21-8.15 (m, 3Η), 7.81 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.42 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.35 (d，J = 4.1 Hz，2H)，7.30-26 (m，1H)，7.13 (d，= 7.2 Hz， 1H), 4.72 (d, / = 5.9 Hz, 1 H), 4.23-4.14 (dd, J = 1 2.7 Hz, 2H), 3.97-3.96 (m, 2H)，3.24 (s，3H)，2.75 (s，3H)，2.02(s，3H)， 1.68 (d，J = 6.8 Hz，3 H)。LC/MS (方法 a): 472.3 (M+H) +， 526.3 (M-H)-。HPLC (方法 A) Rt 4.64 min (純度：98.8%)。 實施例 99 及實施例 100:N-[(lS)-2-羥基-l-(4-{5-[2，-甲基-2-(三氟曱基）聯苯-4-基】_ΐ，2,4·口号二唑-3-基}苯基）乙 基]-D-丙胺酸鹽酸鹽及N-[(ir)-2·羥基-1-(4-{5-[2，-甲基 -2-(三氟甲基）聯苯-4-基卜1，2,4-〇号二唑-3-基}苯基）乙基1-D·· 丙胺酸鹽酸鹽

步驟1 : N-[2-{[第三丁基（二甲基）矽烷基]氧 基}-1-(4-{5-[2'-甲基-2-(三氟甲基）聯苯-4-基]-1，2,4-ϋ号二。坐 -3-基}苯基）乙基]-D-丙胺酸第三丁醋 在室溫下向中間物46 ( 2 g , 0.0045 mol)於DMF ( 30 217 201206429 ml)中之溶液中添加中間物！（1 54g，〇〇〇54m〇i)、三乙 胺（2.5 ml，0.018 mol)及 Τ3ρ ( 3 57 g，〇 〇112 则】）。在 7(TC下加熱反應混合物15丨日^在減壓下濃縮反應混合 物。用乙酸乙醋溶解殘餘物，用水& 1〇%㈣叫溶液洗 條，經Na2S04脫水並蒸發，得到標色油狀標題化合物（j 2 g，38%)。此粗物質不經純化即用於下一步驟。lc/ms (方 法 A)·· 682.3 (Μ+ΗΓ。HPLC (方法 A) Rt 7」偷（純度： 70.3%)。 步驟2 ·· N-[(lS)-2-經基小（4_{5_[2,_甲基_2(三氟甲基) 聯苯-4-基]·1，2,4-ϋ号二哇·3·Μ}苯基）乙基]D丙胺酸鹽酸鹽 及N-[⑽-2-經基小(4·{5_[2’_甲基_2 (三聯苯_4_ 基]-1，2,4-碍二唑4-基}笨基）乙基]_£>_丙胺酸鹽酸鹽 在室溫下向N-[2-{[第三丁基（二甲基）矽烷基]氧 基}-1-(4-{5-[2’-甲基-2_(三1甲基）聯苯_4基]_12,4_口夸二唑 -3-基}苯基）乙基]-D-丙胺酸第三丁酯（丨2 g，〇 〇〇17m〇i) 於THF(25ml)中之溶液中添加TBAF(5〇mg 〇」當量）。 在室溫下攪拌反應混合物30分鐘且用水中止，用乙酸乙酯 萃取且在減壓T濃縮。藉自管柱層析法使用三氣甲炫及甲 醇（90:10)作為洗提劑來純化粗物質，得到呈兩種非對映 異構體之混合物形式的棕色油狀N_[2_羥基_丨_(心{5[2,曱 基-2-(三氟甲基）聯苯_4_基]号二唑_3_基}苯基）乙 基]-D-丙胺酸第三丁醋（0_7g，77%)。藉由層析（μ，於 ChiralpakADH 上，20%共溶劑：〇.5%DEA/乙醇，總流速·· 3 ml/rnin)分離兩種非對映異構體，第一洗提異構體之尺丈

S 218 201206429 為4.06分鐘且第二洗提異構體之Rt為5 25分鐘。 將各非對映異構體溶解於二垮烷（4 ml )中之4 M HC1 中。在室溫下攪拌所得混合物丨〇小時，接著在肋它下加熱 2小時。接著在減壓下濃縮。藉由製備型HpLC，以水/乙腈 作為洗提劑來純化粗物質，得到灰白色固體狀標題化合物。 水解後’第一洗非對映異構體：50 mg，43%。 ^NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) δ 8.51 (s5 1H)S 8.50^8.45 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 8.12-8.08 (d5 J = 8.2 Hz, 2H), 7.66-7.58 (m, 3H), 7.38-7.33 (m, 2H), 7.30-7.24 (m, 1H), 7.17-7.13 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.92-4.88 (m, 1H), 3.28-3.24 (m, 1H), 3-03-2.97 (m, 1H), 2.90-2.80 (m, 1H), 2.00 (s, 3H), 1.30-1.26

(d，= 7.2 Hz，3H)。LC/MS (方法 A): 512.3 (M + H)+。HPLC (方法 A) Rt 4.83 min (純度：99.2%)。 水解後，第二洗提非對映異構體：50 mg，43%。 *H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) δ 8.51 (s, 1Η), 8.50-8.45 (d> J = 7.9 Hz, 1H), 8.12-8.08 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.66-7.58 (m, 3H), 7.38-7.33 (m, 2H), 7.30-7.24 (m, 1H), 7.17-7.13 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.97-4.94 (m, 1H), 3.37-3.33 (m, 1H), 3-〇8-3.03 (m, 1H), 2.95-2.80 (m, 1H), 2.01 (s, 3H), 1.31-1.27 (d，J = 7.2 Hz, 3H)。LC/MS (方法 A): 512.3 (M + H)+。HPLC (方法 A) Rt 4.90 min (純度：99.4%)。 實施例101 : 1-[甲基（4-{5-[2’_甲基-2-(三氟曱基）聯苯 -4-基卜1，2,4-〇寻二唑-3-基}苯甲基）硝醯基（nitroryl)】環戊烷 甲酸 219 201206429

根據一般程序丨2，以眘 耳施例 53 ( 95.7 mg ; 0.18 mmol) 為起始物來製備標題化合

， 明 癟發溶劑後，在DMSO/MeCN 1:1混合物（2 mL )中涡磨鈿、'?人， 趨祖/見合物，過濾且用MeCN洗滌， 得到白色固體狀標題化合物广 0 物（69.50 mg ; 70.5%)。iH NMR: (CDC13} 300 MHz) δ 8 65 ibr Η τ ^ 03(br d，J = 1.4 Hz, 1Η), 8.43 (br dd， J 1-4, 8.0 Hz, 1H), 8.35-8.28 (m> 2H), 7.78-7.70 (m, 2H), 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.41-7.23 (m, 3H), 7.17 (br d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.97 (br d, J = 12.6 Hz, 1H), 4.48 (br d, J = 12.6 Hz, 1H), 3.06 (s, 3H), 2.96-2.70 (m5 1H), 2.70-2.32 (m, 2H), 2.20-1.66 (m, 5H)，2.08 (s，3H)。LC/MS (方法 A): 552.5 (M+H)+，550.5 (M + H)+。HPLC (方法 A) Rt 5.15 min (純度： 98.4%) 〇 實施例102 : 2-【(2-氟-4-{5-[2’-甲基-2-(三氟曱基）聯苯 -4-基卜1,2,4-0等二唑-3-基}苯甲基）（甲基）硝醯基]丙酸

0 將實施例50 ( 1 〇〇 mg ; 0· 1 8 mmol)溶解於EtOAc中

S 220 201206429 用NaHC〇3飽和溶液洗滌。添加冰醋酸（1 mL )且用水及 鹽水洗滌所得溶液。使其經MgS〇4脫水，過濾並蒸發。接 著，按照一般程序12，以實施例5〇作為母體（92.4 mg ; 0.1 8 mmol )來開始。蒸發溶劑後，將粗混合物溶解於 DMSO/MeCN之1:1混合物（1 mL)中，且藉由質量導向型 自動分取儀加以純化。分離出呈47:53非對映異構混合物形 式之白色固體狀標題化合物（LC/MS方法A )。4 NMR. (CDC13, 300 MHz) δ 8.64 (br d5 J = 1.5 Hz, 1H), 8.42 (br dd, J= 1.5, 8.0 Hz, 1H), 8.18-8.12 (m, 1H), 8.10-8.03 (m, 1H), 7.99-7.84 (m, 1H), 7.51 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.41-7.23 (m, 3H)，7.16 (br d, J = 7·4 Hz，1H), 4.87 及 4.81 (2 br s，2H)， 4.47-4.31 及 4.24-4.07 (2 m，1H)，3.28 及 3.19 (2 s，3 H), 2.08 (s, 3H)，1.92 及 1.80 (2 d，J = 6.9 Hz，3H)。LC/MS (方法 A): 在Rt 1.87 min (47%)及1.94 min (53%)時之2對非對映異構 體· 530·4 (M+H)。HPLC (方法 A) Rt 4.84 min (純度： 94.1%)。 實施例103 : {甲基[l-[4-{5-[2，-甲基-2-(三氟甲基）聯苯 -4-基】-1，2,4-D号二唑-3-基}苯基）乙基]硝酿基丨乙睃

將實施例40 ( 50 mg ; 0.09 mmol )溶解於EtOAc中， 用NaHC〇3飽和溶液洗滌。添加冰醋酸（1 mL )且用水及

S 221 201206429 鹽水洗滌所得溶液。使其經MgSCU脫水，過濾並蒸發。接 著’按照一般程序12，以實施例40作為母體（44.6 mg ; 0_09 mmol )來開始。蒸發溶劑後’將粗混合物溶解於 DMSO/MeCN之1:1混合物（imL)中且藉由質量導向型自 動分取儀加以純化。分離出呈22:78非對映異構混合物形式 之白色固體狀標題化合物（LC/MS方法A)〇iHNMR.· (CDC13 300 MHz) δ 8.68-8.61 (m, 1Η), 8.50-8.08 (m5 3H), 7.84-7.56 (m, 2H), 7.55-7.45 (m, 1H), 7.42-7.22 (m, 3H), 7.17 (br d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.47-5.27 (m, 1H), 4.80 (br d, J = 14.2 Hz, 1H), 4.62 (br d，J = 14.2 Hz，1H)，3.90 及 3.48 (2 s，3H)，2.08 (s， 3H)，2.02-1.88 (m，3H)。LC/MS (方法 A):在 Rt L87 min (22%)及1.94 mm (7 8%)a夺之2對非對映異構體：512.5 (M+H)。HPLC (方法 A) Rt 5.15 min (純度：98.4%)。 實施例104 :試管内檢定 膜製備：由表現S1P1或S1P3之CHO細胞製備膜以供 用於配位體結合研究。使細胞懸浮於5〇 mM TRIS ( pH 7·4)、2 mM EDTA、25 0 mM蔗糖（緩衝液a)及lx完全蛋 白酶抑制劑混合液（Roche )中，且在4。〇下藉由n2減壓使 用細胞破碎彈（Parr Instrument)使其破碎。在4。〇下以1000 RPM離心10分鐘後’在缓衝液a中稀釋（2X )上清液且在 4C下以19000 RPM再離心75分鐘。接著將離心塊懸浮於 10 mM HEPES ( pH 7.4)、1 mM EDTA、250 mM 蔗糖（緩 衝液B )及1 x無EDTA之完全蛋白酶抑制劑混合液中，且 使用棒磨器（potter )均質化。將臈急驟冷凍於液體n2中且 222 201206429 在-80°C下儲存。 文體結合檢定：就競爭而言，將[np]神經鞘胺醇丨_磷 酸醋（3000 Ci/mmol ; American Radiolabeled Chemicals 公 司）添加至於20% DMS0中之測試化合物中。添加膜及WGA SPA珠粒（GE Healthcare)以在96孔培養板中獲得ι〇〇… 之最終體積或在384孔培養板中獲得50 μ1之最終體積，檢 定濃度為30 ρΜ或15 ρΜ [33Ρ]神經鞘胺醇丨_磷酸酯（分別 對於 S1P1 或 SlP3)、50mMHEPES(PH7.5)、5mMMgCl2、 100 mM NaC卜0.4%無脂肪酸之BSA、每孔i至5料蛋白 質（96孔培養板）/每孔〇.6至1 蛋白質（384孔培養板）. 及每孔100 /xg WGA SPA珠粒（96孔培養板）/每孔75 WGA SPA珠粒（384孔培養板）^在室溫下於震盪器上結合 60分鐘，且利用perkinElmer 1450 MicroBeta計數器量測結 合放射性。對二份樣品取平均值，且校正為相對於總結合 (孔中僅存在DMSO )及非特異性結合（1 〇〇〇倍過量之未標 s己S1P )之抑制百分比。使用GraphPad Prism程式或 Genedata軟體分析結合資料。 細胞功能檢定：使用細胞成像分析（Cell Imaging analysis )以384孔格式研究人類細胞株（U20S )中神經勒 胺醇1-磷酸酯受體1 ( SIPi )之内化。

Jo, E.; Sanna, M. G.; Gonzalez-Cabrera, P. J.; Thangada, S.; Tigyi, S.; Osborne, D. A.; Hla, T.； Parrill, A. L; Rosen, H. Chem. Biol. 2005, 12, 703 在3 84孔培養板（Corning® 384黑色透明底3712 )中 丨1:: 223 201206429 使用得自Bi〇lmage之S1P1-U20S細胞（C039A)人類上皮 細胞株（人類骨肉瘤上皮細胞）進行slPi内化檢定。此等 細胞表現融合至綠色螢光蛋白（EGFP)之人類slPi受體。 標準CMV啟動子（細胞巨大病毒啟動子）控制slpi_EGFp 之表現，且藉由向培養基中添加遺傳黴素來維持連續表現。 sip!受體去敏誘導膜定位之slPi_EGFP融合蛋白内化 至核内體’可藉由細胞成像分析加以監測。 將細胞接種於低血清培養基（含Gluumaxq及高葡萄 糖、1%青黴素/鍵黴素、1%胎牛血清（FCS)、〇 5叫/〇11遺 傳黴素之杜爾貝科氏改良伊格爾培養基（Dulbecc〇，s

Modified Eagle Medium ; DMEM))中隔夜。 第一天，在37 C/5% C02下在20 μΐ無血清培養基（含 Ghitamax-1及高葡萄糖、〇.1%無脂肪酸之牛血清白蛋白 (BSA) 10 mM、N’-2-經基乙基哌口井_；^_2_乙烧磺酸（HEPES) 1 M)中培育SlP^mOS細胞2小時。接著用4 μΐ化合物/ 促效劑（6x/3% DMSO)處理細胞，總體積為24 μΐ，且在 37°C/5% C〇2下培育培養板1小時。 用25 μΐ 8%三聚曱醛固定slPi_U2〇s細胞，且用 Hoechst 33345 染料（1:1000)染色 2〇 分鐘。 接著用磷酸鹽緩衝鹽水（PBS)將其洗滌3次，且密封 培養板。利用Cellomics藉由計算「斑點計數/目標（spot count per object )」（「目標」對應於細胞核且「斑點」對應 於S1P丨-EGFP受體）來量測受體s1Pi_EGfp之内化。藉助 於vHCS View觀測内化資料且使用Genedata®軟體加以分

224 S 201206429 析。 式（i)化合物具有用作免疫調節劑之效用，如藉由茛 作為slPl受體之有隸效狀活性㈣示如在上述檢^ 中所量測。式⑴及子式化合物以匕之幻低於^⑽。 較佳的式（1)化合物展現對Slpi受體之幻低於〇 〇ι^Μ。 更佳的式（I)化合物展現對SlPl< Ki低於〇〇〇1 ^M。式 〔工）化合物展現對SlPl受體之選擇性超過對§11>3受體之選 擇性^如由對slPl受體之Ki相對於對SiP3受體之幻的比 率所里測，如在上述結合檢定中所評估。幻心匕相對於幻 s〗Pi之比率超過2〇，較佳超過5〇’更佳超過1〇〇且甚至更 佳超過1 0 0 〇。 藉由如上述96孔培養板或384孔培養板結合檢定之一 所4估之Ki值來確定化合物之「效能」或「活性」。根據 本發明’最低Ki值表徵最有效或最具活性之化合物。 獲得以下結果： -；> S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1结合 S1P3結合l 貪施 .例 編k 式 ----— ECSO Ki[M] (384孔 培養板） Ki[M] (3 84孔 培養板） Ki[M] (96孔 培養板） Ki[M] (96孔 培養板） ，尺。Η N 0 1 4.33E-08 2.81 E-09 1.77E-06 225 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 EC50 Ki [M] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (384孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） 2 A 1.03E-08 1.42E-09 >2.000Ε- 05 2.800Ε-10 — 3 8.19E-09 2.00E-09 2.59Ε-06 3.400Ε-10 --- 4 方、 2.00E-09 9.18E-10 8.63Ε-07 1.450Ε-10 2.200Ε-06 5 /^y oh ^=( X)" 4.33E-09 1.27E-09 1.23Ε-06 --- — 226 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 EC50 Ki [Μ] (384孔 培養板） Ki[M] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） 6 Q- 7.57E-09 2.18Ε-09 > 2.000E-05 9.920Ε-10 > 2.000Ε-05 7 Λ： Λ 1.79E-08 1.64Ε-09 5.24E-06 3.700Ε-10 >2.000Ε- ! 05 8 2.69E-08 3.68Ε-09 6.38E-06 9.130Ε-10 > 2.000Ε-05 9 (^V OH ο^Γ 4.34E-09 1.11Ε-09 4.94E-07 1.750Ε-10 7.700Ε-07 227 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編說 式 ec5〇 Ki [Μ] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） 10 °H 1.87E-07 1.94Ε-08 — 11 〇γΝ 2.60E-08 3.96Ε-09 2.32Ε-06 -一 — 12 〇γΝ 合 2.89E-Q8 2.58Ε-09 6.43Ε-07 — ---

S 228 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 EC50 Ki[M] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (384孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） 13 ΟΗ r 2.83E-07 5.23E-09 1.53Ε-06 "— — 14 j 8.62E-08 4.78E-09 > 2.000Ε-05 一· — 15 Λη u 4 8.93E-08 1.98E-09 5.68Ε-07 — --- 229 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 EC50 Ki [Μ] (3 84孔 培養板） ~Ki[MT (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki [Mf (96孔 培養板） 16 >Aoh -NH Λ 8.43E-09 1.23Ε-09 7.20E-07 — … 17 2.10E-08 2.01 Ε-09 2.25E-06 — 18 ip 1.16E-07 1.03Ε-08 3.65E-06 — —

S 230 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 EC50 Ki[M] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） 19 办。 合 4.56E-08 3.98E-09 2.56Ε-06 — — 20 办。 合 7.57E-09 1.63E-09 2.27Ε-06 8.670Ε-10 .6.830Ε-06 21 OK 合 1.12E-08 2.19E-09 1.21Ε-06 1 22 丫 合 6.51 E-09 1.72E-09 4.70Ε-07 4.140Ε-10 5.980Ε-07 231 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編說 式 EC50 Ki [Μ] (3 84孔 培養板） Ki[M] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） KilMf (96孔 培養板） 23 HO 了。 2.13Ε-08 1J1E-09 7.05E-06 — — 24 ΗΟ-^° )*，·.U 8.94Ε-08 4*29Ε»09 — 一 — 25 Η0Χ °γΝ 2.81 Ε-08 2.59Ε-09 > 2.000E-05 一- 一

S 232 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編說 式 EC50 Ki[M] (384孔 培養板） "ΚΓ[ΜΙ~ (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） κΓρτ (96孔 培養板） 26 HO^° /·_*”·/ 2.16E-08 2.24E-09 1.65Ε-06 一 ~ 27 H0X ”彳 7.84E-09 2.21 E-09 1.33Ε-06 — — 28 5.17E-06 1.38E-08 — 29 Ον^Ν ^ 1 丫 〇^ΟΗ 4.60E-O8 5.95E-10 5.84Ε-08 — 一· 233 201206429 SIPI内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 EC50 Ki[M] (384孔 培養板） Ki [Μ] (384孔 培養也） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） 30 4.10Ε-07 1.43E-08 — — — 31 °γΝ 合 3.66Ε-08 5.32E-09 2.54Ε-06 — -一 32 〆丫 °γΝ 合 7.58Ε-09 1.69E-09 4.33Ε-07 一- . -** 33 γ^ΟΗ 9.10Ε-08 5.77E-09 — 234 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 EC50 Ki [Μ] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (3 84孔 養板） Κί [Μ] (96孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板} 34 Ύ^οη 2.63Ε-08 4.47Ε-09 6.00Ε-06 — 35 2.11Ε-07 6,14Ε-09 — — -一 36 γ^ΟΗ j 6ί 3.36Ε-08 2.55Ε-09 7.93Ε-07 — — 37 γ^〇Η 1.51 Ε-08 1.44Ε-09 3.40Ε-06 — — 235 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 SIP】結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 EC50 Κί [Μ] (384孔 培養;k) Ki [Μ] (384孔 培養板） Ki(M] (96孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） 38 p 丫 7.79E-08 2.84E-09 1.43Ε-06 一 一 39 °γΝ 2.09E-08 4.34E-09 3.18Ε-06 一- 一 40 f^^〇H 〇-Γ 1.78E-08 2.17E-09 5·32Ε·07 — -一 41 %/ d 1.28E-08 4.88E-09 8.72Ε-06 — … 236 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 ECS0 Κί [Μ] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki [Μ] .(96 孔 培養板） 42 J \ HN、 7.17Ε-09 1.02Ε-09 1.06Ε-07 — — 43 f 2.41 Ε-08 2.32Ε-09 8.40Ε-07 6.300Ε-10 3.150Ε-06 44 6.29Ε-09 1.58Ε-09 8.69Ε-07 — 45 F 厂-Ν ,〇 γ=^ οη Ν—Λ ώΤ 3.08Ε-08 2.68Ε-09 4.36Ε-07 — — C1 237 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 ECSO Ki [M] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki [MJ (96孔 培養板） 46 9.34E-09 7.94E-10 9.55Ε-08 一-. ___ 47 3.91 E-08 4.26E-09 1.95Ε-05 一- 一- 48 4 2.38E-08 4.68E-09 > 2.000Ε-05 — — 49 户V 1.38E-08 1.06E-09 9.71Ε-07 ·— — 50 F /—Ν OH J、 2.58E-08 3,02E-09 6,61 Ε-07 — … 238 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 ECSO Ki[M] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (384孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） 51 r 0i JJ > άΓ 2.98E-08 7.52E-09 — ~ — 52 Ϊ d 1.02E-08 3.76E-09 1.08Ε-06 — — 53 dt.. 4.22E-08 3.97E-09 3.64Ε-06 — — 54 .NH o^F 3.97E-08 7.95E-09 6.69Ε-06 — ~ 239 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編說 式 EC50 Ki [M] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (384孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） 55 9 1.68Ε-Ό8 2.20E-09 8.02Ε-07 — — 56 令。h f F 5.78E-08 4.13E-09 8.54Ε-06 — — 57 0. ^-ΟΗ N F 1.99E-08 5.69E-09 > 2.000Ε-05 — — 58 (/0H cTh F 4.87E-09 3.39E-09 5.22Ε-06 — 一 S' 240 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 EC50 Ki[M] (384孔 培養板） Ki [M] (3 84孔 培養板） Ki [M] (96孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） 59 F 4.44E-08 6.83E-09 > 2.000E-05 — 一_ 60 HO ^〇H 0 άΤ" F 2.42E-08 3.46E-09 1.03E-06 — — 61 4 OH 乂 H 0 p 2.33E-08 4.27E-09 1.15E-06 一- —- 62 \_/0H /-fl 0 F 7.33E-08 3.81 E-09 — — — 丨1:: 241 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 acso Ki [M] (384 孔 培養板） Ki [Μ] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 $養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） 63 f F 3.47E-09 1.15E-09 2.02Ε-07 -- 二 64 OH ρ όΤ F 4.59E-08 6.78E-09 1.99Ε-06 一 — 65 〇v ^-OH O〇h f F 7.53E-09 4.82E-09 2.56Ε-06 — — 66 ςκΗ /ή ° 6T F 2.76E-08 3.86E-09 9.31 Ε-07 -- — s 242 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 EC50 Ki [M] (3 84孔 培養板） Ki [l\rt] (3 84 孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） ，67 厂K 2.85E-08 3.45E-09 4.49E-06 一_ 68 2.05E-08 2.47E-09 7.57E-06 — 一- 69 %, N>O^Hcy。 Η 4.91 E-08 5.20E-09 4.07E-06 — 70 OH V^〇 f ώ d 1.88E-08 2.98E-09 7.53E-07 丨1:: 243 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S]P〗結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 ec5〇 Κί [M] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） 71 OH 5.66E-09 2.00E-09 7.70Ε-07 — 7.010Ε-07 72 ΡΗ Κ f ιΛ F 3.19E-08 3.94E-09 2.66Ε-06 一- — 73 π 2.98E-08 2.27E-09 5.42Ε-06 一 — 74 f 1 > 1.06E-07 8.53E-09 — — 244 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 编號 式 EC50 Ki[M] (3 84孔 培養板） Ki[M] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki [MJ (96孔 培養板） 75 β HO 7^* / 3.02E-08 5.30E-09 2.30E-06 -一 —- 76 m nf 1.33E-07 1.50E-08 — — — 77 HO hH： P 3.99E-08 5.47E-09 — — — 78 HO .ho3>〇 Λ 2.23E-08 2.16E-09 2.78E-07 一- — 245 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 ecso Ki [M] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (384孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki [Ml (96孔 培養板） 79 ηλλ .ΝΗ F F 1.51 E-08 1.07E-09 2.67Ε-07 — 3.320E-08 80 οΛ 1.22E-09 3.18E-10 3.51 Ε-08 — 一 81 Hy〇 > 4.95E-08 1.72E-09 1.72Ε-07 — — 82 :r > 2.51 E-08 1.01E-09 1.17Ε-07 — — s 246 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編說 式 EC50 Κί [Μ] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (384孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） 83 γ 7.55E-08 3.56Ε-09 — — 84 HO > 8.46E-08 4.25Ε-09 — — — 85 ά5 Λ ρ ： 4.79E-08 5.26Ε-09 7.93Ε-07 — 86 άί ρ 3.97E-08 5.88Ε-09 5.55Ε-07 一_ —- 247 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 EC50 Ki [M] (384孔 培養板） κι m (3 84孔 培養板） Ki[M] (96孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） 87 1 °-y.0H 6? 2.49E-08 2.29E-09 4.68E-07 — — 88 〇>v Ρ 6ί。 6.97E-08 2.85E-09 — — 89 ^Χ〇 今 Λ 3.22E-08 2.56E-09 2.03E-06 90 f。 J 0^vF 7.92E-09 2.48E-09 9.48E-07 — **—

S 248 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 EC50 Ki[M] (384孔 培養板） Ki [Μ] (3 84孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） 91 HO、 ri 3.45Ε-08 8.12E-09 7.36Ε-06 一 — 92 Η〇ν Λ X 2.95Ε-08 6.94E-09 1.24Ε-06 — 93 ΗΟ Γ 2.86Ε-08 1.22E-08 4.67Ε-06 — 249 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 EC50 Ki [Μ] (3 84孔 培養板） Ki[M] (384孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki [MJ (96孔 培養板） 94 OH Viixll 2.91 Ε-09 1.01Ε-09 7.40E-08 1850Ε-10 95 卞 > 6^r 4.25Ε-09 8.46Ε-10 1.12E-07 2.150Ε-10 — 96 OH °Λ...，_( \ 3.73Ε-09 5.33Ε-10 1.78E-07 — — s 250 201206429 S1P1内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編號 式 EC50 Ki[M] (3 84 孔 培養板） Ki[M] (384孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） 97 ,.Ν·^^·〇Η Ν^·Ν ~ — — 7.800Ε-10 4.800Ε-07 98 ί-.,^Ν^^'0Η — -一 一· 6.200Ε-10 > 2.000Ε-05 99 \ y〇H nft 各 — — 8.850Ε-10 2.300Ε-06 251 201206429 SIP〗内化 S1P1結合 S1P3結合 S1P1結合 S1P3結合 實施 例 編妩 式 EC50 Ki[M] (384孔 培養板） Ki[M] (384孔 培養板） Ki [Μ] (96孔 培養板） Ki[Wl] (96孔 培養板） 100 ' .OH "Ο 〇H --- — 1.090Ε-09 2.450E-06 M1 Η2Ν 丫 1、 9 F^p … — 4.050Ε-10 1.450E-06 M2 y&N — 一 一 5.600Ε-10 2.400E-08 實施例105:評估S1P促效劑之活體内功效的動物模型 S1P促效劑誘導之小鼠淋巴球減少症模型 雌性 C57BL/6 小鼠（Elevage Janvier) ( 8 週齡）經由 口服途徑接受S1P促效劑。藥物處理後2至丨2〇小時，在 異敗烧麻醉下藉由心臟内穿刺或後眼眶穿刺獲取肝素化 (100IU/kg’腹膜内）小鼠之企液樣品。使用Beckrnan/c〇ulter 計數器對白血球（淋巴球及嗜中性白血球）進行計數。藉

S 252 201206429 由對紅血球及血小板進行計數來評估血液取樣之品質。 MOG誘導之小鼠實驗性自體免疫腦脊髓炎（EAE )模 型 藉由針對MOG免疫而在9週齡雌性小鼠（C57BL/6， Elevage Janvier )中誘導EAE。小鼠經由腹膜内途徑接受百 曰咳毒素（Alexis，300 ng/小鼠，於200 μΐ PBS中）且藉 由背部皮下注射接受100 μΐ含有MOG35-55肽（NeoMPS， 200 /ig/小鼠）、結核分枝桿菌（Mycobacterium Tuberculosis ) (0.25 mg/小执）於完全弗氏佐劑（Complete Freund's Adjuvant) ( DIFCO)中之乳液。兩天後，再經由腹膜内途 徑注射百曰咳毒素（Alexis，300 ng/小鼠，於200 μΐ PBS 中）。EAE誘導後’每天對小鼠稱重，且使用評估麻痹（尾 巴、後肢及前肢）、失禁及死亡之15點臨床量表來定量神 經學損傷。 藥物動力學資料： 實施例31之化合物2-({2-氟-4-[5-(2，-甲基-2-三氟甲基 -聯苯-4-基）-[1，2,4] 口号二唾-3-基]-苯曱基}-曱基-胺基）-2 -曱 基-丙酸之藥物動力學性質如下： 小鼠在48小時之淋巴球減少症％ 67+/-6 淋巴球減少症之PK參數（小鼠） PK-PD (30mpk) 金漿 AUC〇〇 (h*ng/ml) 74978 Cmax (ng/ml) 7423 Tmax (小時） 2 Τι/2 (小時） 6.3 Cl/F (L/kg/h) 0.4 腦/血漿比率：AUCZ ( h*ng/ml) 3.5 淋巴結/血漿比率：24小時/48小時 2.5/2.7 253 £ 201206429 臨床得分 -1-尾巴 付刀0正常小鼠在運動時保持其尾巴豎直。 于刀 右尾端軟垂而傾向於落下。 得刀2若尾巴完全軟垂且拖在工作台上。 -2-後肢 -付为-0正常小鼠剛健有力地行走而不會拖動爪子。 -得分=1以下測試中任一者為陽性： +翻轉測試：將尾巴保持在拇指與食指之間，同時 翻轉動物使其背部著地並觀察其恢復常態所需之時間。健 康小鼠將立即自己翻轉。延遲表明後肢虛弱。 i將小鼠置於鐵絲籠頂部並觀察其自一側橫越至另 -側。若-隻或兩隻後肢頻繁在柵間滑動，則認為存在部 -得分=2兩個先前測試均為陽性。 传刀-3 一隻或兩隻後肢顯示麻痹跡象但保留一些 運動；例如動物可抓住並抓宗 亚孤牛鐵絲籠頂部下側持續較短時 間然後放開。 腿時-。得分=4當兩隻後腿均麻^小鼠在運動時拖動後 _3·•前肢： 其前爪抓握及行走並保 -得分=0正常小鼠積極使用 持其頭部豎直。 -得分=1 可行走但由於一 隻或兩隻爪子虛弱 而較為 254 201206429 困難，例如，當小鼠難以抓住鐵絲頂籠之下側時，認為前 爪虛弱。虛弱之另一跡象為頭部下垂。 -得分=2當一隻前肢麻痹時（不能抓握且小鼠圍繞該 麻痹前肢轉動）。此時頭部亦損失許多肌張力。 -得分=3小鼠不能運動，且無法獲取食物及水。 -4- 膀胱： 得分=〇正常小鼠完全控制其膀胱。 得分=1當小鼠下體經尿液浸濕時，認為小鼠失禁。 -5- 死亡： 得分=15 藉由所有上述類目相加來確定各動物之最終得分。活 動物之最高得分為1 〇。 在第12天（首批麻痹跡象），根據臨床得分及體重損 失將小鼠分在各實驗組（n=10)中。在第14天開始半治療 性處理。 實施例106 :製備醫藥調配物 調配物1·錠劑：將呈乾粉形式之式（1)化合物與無水 明膠黏合劑以約1:2重量比混合。添加少量硬脂酸鎂作為潤 滑劑。在製錠機中將混合物成形為24〇至27〇mg錠劑（每 個錠劑80至90 mg本發明活性化合物）。 調配物2-膠囊··將呈乾粉形式之式⑴化合物與澱粉 稀釋劑以約1:1重量比混合。將混合物填充於25〇叫膠囊 中（每個膠囊125 mg本發明活性化合物）。 調配物3-液體：摻合式⑴化合物（125〇mg)、嚴搪

255 S 201206429

(1.75 g)及三仙膠（4 mg)，穿過10號篩目U.S.篩網，接 著與先前製備之微晶纖維素及羧甲基纖維素鈉（11:89，50 mg )之水溶液混合。用水稀釋苯甲酸鈉（1 〇 mg )、調味劑 及著色劑，且在攪拌下添加。接著添加足夠水以產生5 mL 之總體積。 調配物4-錠劑：將呈乾粉形式之式（化合物與無水 月膠黏合劑以約1:2重量比混合。添加少量硬脂酸鎂作為潤 滑劑。在製錠機中使混合物成形為45〇至9〇〇mg錠劑（15〇 至3 00 mg本發明活性化合物）。 化合物溶解於緩衝無菌鹽 nig/mL之濃度。 調配物5-注射液：將式（〇 水 可注射水性介質中，達到約5 【圖式簡單說明】 無 【主要元件符號說明】 益

S 256 201206429 發明專利說明_ (本說明書格式、順序，請勿任意更動，※記號部分請勿填寫） ※申請案號：（令 ※申請日：（价」I ^pc分類： 一、發明名稱：（中文/英文） 經取代D号二嗤衍生物

Substituted Oxadiazole Derivatives 祕'％ 〇〇 06. 〇υ C20〇6,〇|^ 二、中文發明摘要： 本發明提供作為選擇性S1P1抑制劑之式（I)化合物， 以及其用於治療多發性硬化症及其他疾病之用途。

三、英文發明摘要：

The present invention provides compounds of Formula (I), as selective S1P1 inhibitors, as well as their use for treating multiple sclerosis and other diseases.

Claims (1)

1. 201206429 C 1、C 2為碳原子； γ1 γ1 - 及其基團/Ν\經氧化成/Ν、 之氧化形式、醫藥 上可接受之衍生物、溶劑合物、互變異構體、鹽、對 異構體、非對映異構體，包括其所有比率之混合物。 2. 如申請專利範圍第1項之式（I )化合物，其中X1 Ζ1均為Η且其中X2及Ζ2表示A，及/或X2及Ζ2均為Η 其中X1及Ζ1表示Α。 3. 如申請專利範圍第1項之式（I )化合物，其中X1 Z2均為Η且其中X2及Z1表示A，及/或X2及Z1均為Η 其中X1及.Ζ2表示Α。 4. 如申請專利範圍第1項至第3項之式（I)化合物 其中基團 學 映 及 且 及 且

   表示以下基團之一： S 258 201206429 H OH iH H OH / νγ OH 、为V OH '为 ' (h： (Hh ^ y〇H ^OH .NH ϊΗ ^Vr 、广 -Γ Η OH Ά 〇 HO 了0 HO々〇 、、'H OH •Vh^° H〇^h HN Ί。 γ^ΟΗ 、ΛΗ 〇’OH OH //◦Η •Λ1- 广乂 p M < OH OH 259 201206429 'X^NH OH ^Vf° A 0Η \ V〇h /.n-^Aoh 7 HO —N 〇 (Μη Η \^〇Η 0 H y-OH 0 H V-OH 0 Η V-OH ο ^ΝΗ V ΟΗ -K 0 Η \-〇Η 〇〆 ΟΗ 0 h>h H y〇H 0 \ 'VOH H ^r-OH hOH Ν"...C Η V-ΟΗ Ο rOH «"•y〇H o’ 、、之 H y-OH V\ 〇 / OH V〇H Η Ο 'OH Άη 0 H V-OH o ΚΝ-<Η Η \-〇Η 〇’ 0 V\ Ih ，冬。H 0 厂·0Η •千 Va_>oh / V0H 0 ^HV〇 /N-yO〇H HO-^0 ^ Λ^°- ΗΟ^·° -r\J 〇H OH HO^° •>rvj A: ^ 〇 1 w 0 t ντ rN 0 % S 260 201206429 0、 Voh y〇H Η / kn_V〇h HO” ^>〇H HO ：ΗΟ Ή o；V^° -/rK oh 5. 如申請專利範圍第1項之式（I)化合物，其中該基 團 Ra 係選自鹵素、CH3、CHF2、CF3、CH2CH3。 6. 如申請專利範圍第1項之式（I )化合物，其中該基 團

   如申請專利範圍第4項中所定義 且Ra係選自基團鹵素、CH3、CHF2、CF3、CH2CH3。 7.如申請專利範圍第1項至第6項之式（I )化合物， 其屬於以下群組1至96 : 實施例 編號 式 1 2 Η0^° 3 &9^: ΐ χ0 ΗΟ ° 261 201206429

   s 262 201206429 實施例 編號 式 12 13 (5^n5x〇 必。η F 14 C^^yO^。 / 〇^N OH 15 S>^nr / O-N 16 / 一 O-N 17 F ；t^〇y C YH hoA〇 18 rV^ F - HO 19 όί /Η>γ ,NH P 。二。 263 201206429

   s 264 201206429 實施例 編號 式 28 29 F OH 30 - O-N 31 F H〇X 32 O-N KJ F F HN F 。丄 OH 33 / O-N OH 34 FXF O-N OH C 265 201206429

   266 201206429 實施例 編號 式 42 o-N OH 43 0-N OH 44 c^>v0o；。 45 ^πΛς。 F H0 HO 46 F 47 F 48 0 49 267 201206429 實施例 編號 式 50 51 \ 52 F F °'N HO 53 54 0 55 o 56 57 268 201206429 實施例 編號 式 58 C^xrvcK^： 卜 °^N H y-OH 0 59 〇/\)Η 60 0 61 C^cVk>>|: 0’ 62 0 63 / OH 64 0 t 269 201206429 實施例 編號 式 65 、OH 66 0 67 %V〇Y^H 0 68 69 ^yCT?? 70 0 F 0 71 c h心4. 72 0’ 270 201206429

   271 201206429 實施例 編號 式 81 82 83 84 OH 85 86 F 〇~Ν 87 88 F O-N 272 201206429 實施例 編號 式 89 F^F 90 91 0 F 〇〜N N^ 92 c 93 0 F ’ v_/H 〇 94 0 F kv/" 〇-N W 95 0 f y〇H O'H W 96 0 f 0、 V-OH ； O-N W 丨i:: 273 201206429 實施例 編號 式 97 /0 ΟΗ 98 為。 yO OH 99 U H0,。、。H 100 101 0 F~y(^^ o-N F F 102 F r HO 103 构 ">〇 M1 M2 及其醫藥學上可接受之衍生物、溶劑合物、互變異 274 201206429 構體、鹽及立體異構體， 5馎體，包括其所有比率 8.—種用於製備如由▲主* 此〇物。 I備如申晴專利範圍第丨項至 或多項之式（I)化合物項中之. 使式A之化合物 x牡％

   4及其鹽的方法，财法之 所其中㈣^及…具有如申請專利範圍第㈠中 斤給出之含義，且τ為⑽或離去基，其中τ為〇h， 構混之化合物或其非對映異構混合物及/或對映異

   其中 R1、Wl 至 w4、C|、C2、Xl、X2、γ]、LI 及乙具有如申請專利範圍第i項中所給出之含義，1 人在適合鹼存在下反應，或在T為OH之情況下，在適 合縮合試劑存在下反應，且使所得產物環化，並且視情 況將式（I)之鹼或酸轉化成其鹽或其任何醫藥學上可= 跫之衍生物、溶劑合物、互變異構體、對映異構體、非 對映異構體之一，包括其所有比率之混合物， 及視情況分離所得產物混合物。 9 · 一種醫藥組成物’其包含至少一種如申請專利範圍第 1項至第ό項中一或多項之化合物及/或其醫藥學上可用之 衍生物、互變異構體、鹽、溶劑合物及立體異構體，包括 275 201206429 其所有比率之混合物，及視情況選用之賦形劑及/或佐劑。 1 〇· —種醫藥組成物，其包含至少一種如申請專利範圍 第1項至第6項及第9項中一或多項之化合物及/或其醫藥 學上可用之衍生物、互變異構體、鹽、溶劑合物及立體異 構體，包括其所有比率之混合物，及至少一種其他活性成 分0 其係由具有以下各 11.一種集合（36〖）（套組（1^))， 物之獨立包裝組成： (a)有效量之如申請專利範圍第i項至第6項、第9 項及第10項中一或多項之化合物及/或其醫藥學上可用 之衍生物、互變異構體、鹽、溶劑合物及立體異構體， 包括其所有比率之混合物；及 (b)有效量之另一藥物活性成分。 12· 一種用⑨製備供治療及/或預防神經勒胺醇卜磷趣 酯相關病症之藥物的如申請專利範圍第！項至第6項中一 或多項之化合物及其醫藥學上可 求子工』用之何生物、鹽、互變I 構體 '溶劑合物及立體異構艚，白 井褥體包括其所有比率之混合物 13.如申請專利範圍第ι2 貝ϋ匕〇物，其中該神經鞘聪 醇1-構酸醋-(1)相關病症為與過度 、幻戾活性免疫反應相關之自 體免疫病症或病狀。 14. 一種用於製備供治療及/或預防免疫調節異常 /人 tV〇J g 卩 .币 物的如申請專利範圍第丨項至 八 $°貝肀一或多項之化合 及其醫藥學上可用之衍生物、瞄' ι 互隻異構體、溶劑合 及立體異構體，包括其所有比率之思合物。 276 3 201206429 15.如申請專利範圍第 昱堂盔ώ丄 *項之化合物’其中該免疫調節 異吊為選自由以下組成之 被# .入6 f的自體免疫疾病或慢性發炎性 :、’·王身性紅斑狼瘡、慢性類風漁性關節炎、發炎性腸 病、多發性硬化症、肌萎縮性側索硬化症（A⑻、動脈硬 化、動脈粥樣硬化、硬皮病、自體免疫肝炎。 八、圖式· (無） 277 201206429 15.如申請專利範圍第 昱堂盔ώ丄 *項之化合物’其中該免疫調節 異吊為選自由以下組成之 被# .入6 f的自體免疫疾病或慢性發炎性 :、’·王身性紅斑狼瘡、慢性類風漁性關節炎、發炎性腸 病、多發性硬化症、肌萎縮性側索硬化症（A⑻、動脈硬 化、動脈粥樣硬化、硬皮病、自體免疫肝炎。 八、圖式· (無） 277