TW200904399A - Compositions and kits for treating influenza - Google Patents

Description

200904399 九、發明說明 【發明所屬之技術領域】 本發明領域爲抗病毒組合及彼等於治療或預防病患的 流感上之用途。 【先前技術】 目前有4種抗病毒藥物經FDa核可用於治療急性、無 倂發的流感。Μ 2抑制劑金剛胺（a m a n t a d i n e )鹽酸鹽（ SYMMETREL®)及金剛乙胺（r i m an t a d i n e，F L U M A D IN E ® )經核可用於治療和預防A型流感（influenza A )。金剛 胺和金剛乙胺兩者都是以經口投予的1 〇 〇毫克片劑和5 0毫 克/毫升糖漿之形式提供。兩種藥物的一般成人劑量爲每 天200毫克’分成兩劑（BID)。對於9歲病患之兒科 金剛胺劑量爲4_4至8.8毫克/公斤/天，不超過每天150毫克 ’對於金剛乙胺’其劑量爲5毫克/公斤，每日一服（QD )，不超過每天150毫克。 神經胺酸苷酶（neuraminidase)抑制劑、札那米韋（ zanamivir ( RELENZA® )和磷酸奧斯他偉（oseltamivir phosphate ( TAMIFLU®)皆經核可用於A型和B型流感的治 療和預防。札那米韋經提供爲僅供吸入裝置使用之經口吸 入。札那米韋用於流感的預防和治療之建議劑量，分別爲 10毫克/天QD與2〇毫克/天BID。磷酸奧斯他偉可取得爲供 口服的裝有7 5毫克奧斯他偉之膠囊，及粉末供口服懸浮液 用者’其在按指示用水調和時含有丨2毫克/毫升的奧斯他 -5- 200904399 偉。對於超過1 3歲的病患’用於流感的預防和治療之奧斯 他偉建議劑量分別是75毫克/天QD與150毫克BID。 抗病毒藥物的多種組合業經提出用於治療流感。美國 專利第5,8 6 6,6 0 1號揭示將神經胺酸苷酶抑制劑組成物與 抗病毒藥（諸如金剛胺、金剛乙胺和利巴韋林（ribavirin ))組合。對於抗流感藥物的多種雙重組合之影響所作試 管內（i n v i t r 〇 )和活體內（i n v i v 〇 )動物模型硏究已經 有報導（參閱例如包括利巴韋林與金剛胺的組合（Wilson e t al_, Antimi crob Agents Chemother ( 1 9 8 0) 17:642-648; Hayden et a 1., Antimicrob Agents Chemother ( 1 980) 1 8: 5 3 6 - 4 1 ;及 B u r 1 i n g t ο n e t a 1.， J · A n t i m i c r o b C h e m o t h e r (1983) 11: 7-14)，與金剛乙胺的組合（Hayden etal·，上文 ；Galegov et al., Experientia ( 1 9 7 7) 3 3: 905 -906;及

Madren et al., Antivir Chem Chemother ( 1 995) 6: 1 09- 113),與皮拉馬韋（peramivir)的組合（Smee et al.， Chemotherapy (2002) 48: 8 8-93)，及與奧斯他偉的組合（ Smee et al., Antiviral Chem Chemother (2006) 1 7: 1 8 5 - 92);以及奧斯他偉與金剛胺的組合（iiyUShina et al.， Antiviral Res. (2006) 70: 1 21 -3 1 )及與金剛乙胺的組合 (Govorkova et al., Antimicrob Agents Chemother (2004) 4 8: 4 8 5 5 -48 63; Galabov et al., Antivir Chem Chemother (2006) 17: 251-8;和 Leneva et al·, Antiviral Res (2000) 4 8 : 1 0 1 -1 5 )。有數篇此等文章報導利巴韋林與金剛胺的 組合對於抗流感病毒的增效作用比單一藥物治療具有加成 -6- 200904399 性（參閱例如Wilson et al·，上文；Hayden et al·,上文；及 Burlington et al.，上文）。於某些硏究中，組合治療經報 導相較於單一療法治療具有不良結果。例如，奧斯他偉與 金剛乙胺的組合，於各藥物的低濃度下，經報導會導致抗 A型流感病毒的拮抗性交互作用（Govorkova et al.，上文） 。Smee et al·，（2 0 0 6)報導用奧斯他偉加利巴韋林的組合 治療經A型流感病毒感染的小鼠不會比單用利巴韋林時爲 佳，且在感染3至4天後起始治療時，用組合藥治療的組比 單用利巴韋林治療的動物具有較少的存活者。 因爲在Μ 2蛋白質中的某些單點突變可能賦予對金剛 胺和金剛乙胺兩者的抗性’所以在治療期間可能迅速發展 出對Μ 2抑制劑金剛乙胺和金剛胺之病毒抗性。於2 〇 〇 6年 一月中’ C D C檢驗揭露出在美國境內流行的a型流感病毒 中有高比例對金剛胺和金剛乙胺有抗性，促使C D C建議反 對此等藥物在流感的治療和預防上之用途（CDC Health Alert, January 1 4, 2006 )。目前，奧斯他偉被認爲是A型 流感病毒的第一線治療。不過，也有抗奧斯他偉株的報導 (de Jong et al., N Engl J Med. (200 5 ) 3 5 3: 2667-72;

Euro Surveill (2005) 1 0 (1 0): E05 1 02.2 )，引掀起對於可 傳染、致病性、抗藥性株可能減低抗病毒藥在大流行性防 治中的使用效益之顧慮（Lipsitc.h et al.，PLoS Med (2007) Jan 23; 4 (1): el5 [Epub ahead of print])。另外，奧斯 他治療也被5忍爲與嚴重的神經精神病事件有關，尤其是 在兒科病人中（參閱 Prescrire Int. (2006) 15: 182-3)。 200904399 鑑於前述’本發明的一項目的爲提供用於治療或預防 流感的改良治療劑’特別是大流行性流感及/或對M2抑 制劑及/或神經胺酸苷酶抑制劑有抗性的流感株。 本發明的另一目的爲提供用以治療或預防流感的改良 治療劑’其可防止在一病患或群體內產生抗藥性株。 本發明的另一目的爲提供用於治療或預防流感的改良 治療劑’其相較於現行單一療法具有明顯較少或不具不良 事件或毒性效應。 【發明內容】 本發明的一方面爲一種用於治療或預防病患流感之組 成物’該組成物包含：10- 60重量百分比（重量、25 —50重量％、或50— 75重量％的金剛胺或金剛乙胺；及30 一 80重量％、50— 75重量％、或25— 50重量％的利巴韋林 或韋拉米啶（viramidine )，其中該等重量百分比係以組 成物中活性劑總重量爲基準。於特定具體實例中，該組成 物進一步包含0.5 - 3 0重量％的奧斯他偉。 於一具體實例中，該組成物爲適合口服或經胃投予的 調合物’諸如液體、糖漿、懸浮液、片劑、膠囊、膠囊中 的珠粒、或小藥囊中的珠粒。於特定具體實例中，該組成 物係呈口服用之單位劑型，其中包含2 5 — 1 2 5毫克的金剛 胺或金剛乙胺及5 0 - 2 0 0毫克的利巴韋林或韋拉米啶。於 —特定具體實例中，該單位劑型包含至少125毫克呈延長 釋放形式的金剛胺，及少於200毫克的利巴韋林。於另一 200904399 具體實例中，該單位劑型包含25 - 1 25毫克金剛胺和50- 2 0 0毫克利巴韋林。 於另一具體實例中，該組成物係呈適合非經腸投予用 的形式，諸如冷凍乾燥粉，其在投予之前才重組，或管瓶 裝的無菌液體。 本發明的另一方面爲治療或預防病患流感用之套組， 其包含金剛胺或金剛乙胺，及利巴韋林或韋拉米啶，及隨 意的神經胺酸苷酶抑制劑諸如奧斯他偉、札那米韋或皮拉 馬韋。 於一特定具體實例中，提供一種用於口服治療或預防 病患流感的套組，其包含複數種劑型，該複數種劑型包括 一或多劑，每一劑包含治療上或預防上有效量的利巴韋林 與金剛胺之組合。該金剛胺和利巴韋林可經調配成分開的 劑型或共調配成單一劑型。金剛胺可呈延長釋放形式。於 一特定具體實例中，金剛院和利巴韋林係經調配成分開的 劑型，每一金剛胺劑型包含7 5 - 25 0毫克金剛胺，且每一 利巴韋林劑型包含50 - 200或100 — 400毫克利巴韋林。於 多個具體實例中，該套組包含選自80毫克、180毫克、和 3 3 0毫克劑量強度之金剛胺劑型，及選自由丨丨5毫克、3 3 0 晕;克和6 6 0毫克所組成的群組中的劑量強度之利巴韋林。 於一具體實例中，每一劑進一步包含奧斯他偉。 於另一具體實例中，提供一種用於非經腸地治療人類 患者流感的套組，該套組包含適用於非經腸投予形式之金 剛胺；及適合非經腸投予形式之利巴韋林。該金剛胺可包 -9- 200904399 含在複數個第一管瓶內，且該利巴韋林 二管瓶內。或者，該金剛胺和利巴韋林 複數個管瓶之內。該套組可進一步包括 形式的奧斯他偉、皮拉馬韋、或札那米 本發明另一方面爲一種治療或預防 該方法包括：給該病患投予有效量的三 不同作用機制的抗病毒劑之組合，彼等 附抑制劑、M2抑制劑、IMP脫氫酶抑制 制劑、流感特異性干擾性低聚核苷酸、 制劑所組成的群組。 於一特定具體實例中，該方法包括 第一、第二和第三種包含下列的抗病毒 抑制劑，選自金剛胺和金剛乙胺所組兵 聚合酶抑制劑，選自利巴韋林和韋拉米 和c )神經胺酸苷酶抑制劑（NAi )，選 米韋、和皮拉馬韋所組成的群組。 於一較佳具體實例中，該第一和第 予量爲使流感病毒對第三種抗病毒劑的 種抗病毒劑用於單一療法時，病毒對該 敏感性增加超過至少2倍。於一特定具 和第二種抗病毒劑爲利巴韋林和奧斯他 病毒劑爲金剛胺。 於該方法的一具體實例中’該等抗 口、非經腸、吸入、和彼等的組合所組 可包含在複數個第 可經共調配且裝在 呈適合非經腸投予 韋。 病患流感之方法， 種各具對應的三種 係選自流感病毒吸 劑、RNA聚合酶抑 和神經胺酸苷酶抑 投予病患有效量的 :劑之組合：a ) M2 它的群組；b ) RNA 啶所組成的群組： 自奧斯他偉、札那 二種抗病毒劑的投 敏感性，比該第三 第三種抗病毒劑的 體實例中，該第一 偉，且該第三種抗 病毒劑係以選自經 成的群組中之方法 -10- 200904399 投予病人。 於一特定具體實例中，係以可維持在0.1至3_0微克/毫 升、0.1至1.5微克/毫升、或0.3至1.5微克/毫升之間的血漿 濃度至少4 8連續小時之量的金剛胺或金剛乙胺投予病人。 於另一具體實例中，係以5至5 00毫克/天、20至2 5 0毫 克/天、100至800毫克/天、100至600毫克/天、200至700毫 克/天、或200至500毫克/天的量之金剛胺或金剛乙胺非經 腸地或經口投予病人。在經口投予時，金剛胺係隨意地呈 延長釋放形式。 於另一具體實例中，係以1至5 0毫克/小時、3至4 0毫 克/小時、或5至30毫克/小時的速度至少48連續小時經由 靜脈內注輸將金剛胺投予病患。 於另一具體實例中，係以可維持0.1至10.0微克/毫升 、0.5至8微克/毫升、0.5至5.0微克/毫升、1至6微克/毫升 、1至4微克/毫升、2至6微克/毫升、2至4微克/毫升、0.01 一 2微克/毫升、或0.2 - 2微克/毫升的血漿濃度至少48連續 小時之量的利巴韋林或韋拉米啶投予病人。利巴韋林係以 50至2000毫克/天、50至1 600毫克/天、100至1 200毫克/天 、400至8 00毫克/天、50至600毫克/天、75至5 00毫克/天、 或7 5至2 0 0毫克/天的量非經腸或經口地投予病人。 於一特定具體實例中，係以5至200毫克/小時、10至 15 0毫克/小時' 15至1〇〇、或20至80毫克/小時的速率連續 至少4 8小時經由靜脈內注輸將利巴韋林投予病患。 於一特定具體實例中，係以上述量之一的金剛胺或金 -11 - 200904399 剛乙胺，與上述量之一的利巴韋林或韋拉米啶一起投予病 患’該病患係以選自奧斯他偉'殘酸奧斯他偉、札那米韋 、和皮拉馬韋所組成的群組中之神經胺酸苷酶抑制劑用可 維持0.001— 5微克/毫升、0.02至5微克/毫升、0.1至3微克/ 毫升、0.1至1微克./毫升、0.3至3微克/毫升、或〇.3至1微 克/暈升的血漿神經胺酸苷酶抑制劑濃度之量進一步至少 4 8連續小時投予。 於一特定具體實例中，病患係用札那米韋以0」至；! 〇 毫克/小時、0_4至7毫克/小時、或1至5毫克/小時的速率至 少4 8連續小時經靜脈內注輸投予。 於另一具體實例中，該病患可用奧斯他偉以0.〗至20 毫克/小時、0 · 4至7毫克/小時、1至7毫克/小時、1至5毫克 /小時、或2至7毫克/小時的速率至少4 8連續小時經由靜脈 內注輸投予。 於多個具體實例中，病患可用奧斯他偉以10至150毫 克/天、10至50毫克/天、50至100毫克/天、75至150毫克/ 天、150至3 00毫克/天、1〇〇至5 00毫克/天、或1至50毫克/ 天之量非經腸地或經口投予。 本發明提供同時分開或依序地投予用的第一種抗病毒 劑、第二種抗病毒劑和第三種抗病毒劑，其中該三種藥劑 各具對應的二種不同的作用機制，其係選自流感病毒吸附 抑制劑、M2抑制劑、IMP脫氫酶抑制劑、RNA聚合酶抑制 劑、流感特異性干擾性低聚核苷酸、與神經胺酸苷酶抑制 劑所組成的群組。 -12- 200904399 本發明也提供在療法中組合使用的第一種抗病毒劑、 第二種抗病毒劑和第三種抗病毒劑’其中該三種抗病毒劑 各具對應的三種不同的作用機制，其係選自流感病毒吸附 抑制劑、M2抑制劑、IMP脫氫酶抑制劑、RNA聚合酶抑 制劑、流感特異性干擾性低聚核苷酸、與神經胺酸苷酶抑 制劑所組成的群組。 本發明也提供在流感傳染的治療及/或預防中組合使 用的第一種抗病毒劑、第二種抗病毒劑和第三種抗病毒劑 ，其中該三種抗病毒劑各具對應的三種不同的作用機制， 其係選自流感病毒吸附抑制劑、M2抑制劑、IMP脫氫酶 抑制劑、RNA聚合酶抑制劑、流感特異性干擾性低聚核 苷酸、與神經胺酸苷酶抑制劑所組成的群組。 本發明也提供將第一種抗病毒劑、第二種抗病毒劑和 第三種抗病毒劑用於製造供治療及/或預防流感傳染用藥 劑的用途，其中該三種抗病毒劑各具對應的三種不同的作 用機制，其係選自流感病毒吸附抑制劑、M2抑制劑、 IMP脫氫酶抑制劑、RNA聚合酶抑制劑、流感特異性千擾 性低聚核苷酸、與神經胺酸苷酶抑制劑所組成的群組。如 下文所述者，該三種抗病毒劑可彼此分開地或以二重組合 或三重組合地投予。 本發明也提供將抗病毒劑用於製造供治療及/或預防 流感傳染用藥劑的用途，其中該抗病毒劑係選自流感病毒 吸附抑制劑、M2抑制劑、IMP脫氫酶抑制劑、RNA聚合 酶抑制劑、流感特異性干擾性低聚核苷酸、與神經胺酸苷 -13- 200904399 酶抑制劑所組成的群組，且其中該藥劑係經製備用於與兩 種其他抗病毒劑組合投予病患，其中該三種抗病毒劑係選 自流感病毒吸附抑制劑、M2抑制劑、IMP脫氫酶抑制劑 、RNA聚合酶抑制劑、流感特異性干擾性低聚核苷酸、 與神經胺酸苷酶抑制劑所組成的群組。 本發明也提供將第一種抗病毒劑用於製造供治療及/ 或預防流感傳染用藥劑的用途，其中該藥劑係經製備用於 與第二種抗病毒劑和第三種抗病毒劑組合投予病患，其中 =a )該第一種抗病毒劑係選自流感病毒吸附抑制劑和M2 抑制劑所組成的群組；b )該第二種抗病毒劑係選自IMP 脫氫酶抑制劑、和RNA聚合酶抑制劑所組成的群組；且 c )該第三種抗病毒劑係選自干擾性低聚核苷酸與神經胺 酸苷酶抑制劑所組成的群組。 本發明也提供將第二種抗病毒劑用於製造供治療及/ 或預防流感傳染用藥劑的用途，其中該藥劑係經製備用於 與第一種抗病毒劑和第三種抗病毒劑組合投予病患，其中 :a )該第一種抗病毒劑係選自流感病毒吸附抑制劑和M2 抑制劑所組成的群組；b )該第二種抗病毒劑係選自IMP 脫氫酶抑制劑、和RNA聚合酶抑制劑所組成的群組；且 c )該第三種抗病毒劑係選自干擾性低聚核苷酸與神經胺 酸苷酶抑制劑所組成的群組。 本發明也提供將第三種抗病毒劑用於製造供治療及/ 或預防流感傳染用藥劑的用途，其中該藥劑係經製備用於 與第一種抗病毒劑和第二種抗病毒劑組合投予病患，其中 -14- 200904399 :a )該第一種抗病毒劑係選自流感病毒吸附抑制劑和M2 抑制劑所組成的群組；b )該第二種抗病毒劑係選自IMP 脫氫酶抑制劑、和RNA聚合酶抑制劑所組成的群組；且 c )該第三種抗病毒劑係選自干擾性低聚核苷酸與神經胺 酸苷酶抑制劑所組成的群組。 本發明也提供將第一和第二種抗病毒劑用於製造供治 療及/或預防流感傳染用藥劑的用途，其中該藥劑係經製 備用於與第三種抗病毒劑組合投予病患，其中：a )該第 一種抗病毒劑係選自流感病毒吸附抑制劑和M2抑制劑所 組成的群組；b )該第二種抗病毒劑係選自IMP脫氫酶抑 制劑、和RNA聚合酶抑制劑所組成的群組；且c )該第 三種抗病毒劑係選自干擾性低聚核苷酸與神經胺酸苷酶抑 制劑所組成的群組。 本發明也提供將一或多種抗病毒劑用於製造供治療及 /或預防流感傳染用藥劑的用途，其中該等抗病毒劑各具 不同的作用機制，其係選自流感病毒吸附抑制劑、M2抑 制劑、IMP脫氫酶抑制劑、RNA聚合酶抑制劑、流感特異 性干擾性低聚核苷酸與神經胺酸苷酶抑制劑所組成的群組 ，且其中該藥劑係經製備用於與一或多種其他抗病毒劑，袓 合投予病患使得該病患接受三種各具選自該群組中的不同 作用機制之抗病毒劑。 本發明也提供一種將抗病毒劑用於製造供治療及/ $ 預防病患流感傳染用藥劑的用途，其中該抗病毒劑係選自 流感病毒吸附抑制劑、M2抑制劑、IMP脫氫酶抑制劑、 -15- 200904399 RNA聚合酶抑制劑、流感特異性干擾性低聚核苷酸與神 經胺酸苷酶抑制劑所組成的群組，且其中該病患先前已經 用至少兩種其他抗病毒劑治療過，其中該等抗病毒劑各具 不同的作用機制，該等不同作用機制係選自流感病毒吸附 抑制劑、M2抑制劑、IMP脫氫酶抑制劑、RNA聚合酶抑 制劑、流感特異性干擾性低聚核苷酸與神經胺酸昔酶抑制 劑所組成的群組。 本發明也提供將第一種抗病毒劑用於製造供治療及/ 或預防病患的流感傳染用藥劑的用途，且其中該病患先前 已經事先用第二種抗病毒劑和，隨意地，第三種抗病毒劑 治療過，其中：a )該第一種抗病毒劑係選自流感病毒吸 附抑制劑和M2抑制劑所組成的群組；b )該第二種抗病 母劑係^自IΜ P脫氨酶抑制劑、和R N A聚合酶抑制劑所 組成的群組；且c )該第三種抗病毒劑係選自干擾性低聚 核苷酸與神經胺酸苷酶抑制劑所組成的群組。 本發明也提供將第—·種抗病毒劑用於製造供治療及/ 或預防病患流感傳染用藥劑的用途，且其中該病患先前已 經用第一種抗病毒劑和，隨意地，第三種抗病毒劑治療過 ’其中：a )該第一種抗病毒劑係選自流感病毒吸附抑制 劑和M2抑制劑所組成的群組；b )該第二種抗病毒劑係 選自IMP脫氫酶抑制劑、和RNA聚合酶抑制劑所組成的 群組；且c )該第三種抗病毒劑係選自干擾性低聚核苷酸 與神經胺酸苷酶抑制劑所組成的群組。 本發明也提供將第三種抗病毒劑用於製造供治療及/ -16- 200904399 或預防病患流感傳染用藥劑的用途，且其中該病患先前已 經用第一和第二種抗病毒劑治療過，其中：a )該第一種 抗病毒劑係選自流感病毒吸附抑制劑和Μ2抑制劑所組成 的群組；b )該第二種抗病毒劑係選自IMP脫氫酶抑制劑 、和RN A聚合酶抑制劑所組成的群組；且^ )該第三種 抗病毒劑係選自干擾性低聚核苷酸與神經胺酸苷酶抑制劑 所組成的群組。 於此等用途中，該病患的先前治療通常係於投予該藥 劑之前不超過7天（例如於先前的7、6、5、4、3、2天 中，或於先前的2 4小時中）。 本發明也提供一種抗病毒劑，其係用於治療及/或預 防流感傳染’其中該抗病毒劑係選自流感病毒吸附抑制劑 、M2抑制劑、IMP脫氫酶抑制劑、RNA聚合酶抑制劑、 流感特異性干擾性低聚核苷酸、與神經胺酸苷酶抑制劑所 組成的群組，且其中該抗病毒劑係與至少一種其他抗病毒 劑組合投予（或經製備用於投予），其中該等其他抗病毒 劑各具不同的作用機制，該等不同作用機制係選自係選自 流感病毒吸附抑制劑、Μ 2抑制劑' IΜ P脫氫酶抑制劑、 RN Α聚合酶抑制劑、流感特異性干擾性低聚核苷酸、與 神經胺酸苷酶抑制劑所組成的群組。 本發明也提供第一種抗病毒劑，其係用於治療及/或 預防流感傳染，其中該第一種抗病毒劑係與第二種抗病毒 劑和隨意地，第三種抗病毒劑組合投予（或經製備用於投 予），其中：a )該第一種抗病毒劑係選自流感病毒吸附 -17- 200904399 抑制劑和M2抑制劑所組成的群組；b )該第二種抗病毒 劑係選自IMP脫氫酶抑制劑、和RNA聚合酶抑制劑所組 成的群組；且c)該第三種抗病毒劑係選自干擾性低聚核 苷酸與神經胺酸苷酶抑制劑所組成的群組。 本發明也提供第二種抗病毒劑，其係用於治療及/或 預防流感傳染，其中該第二種抗病毒劑係與第一種抗病毒 劑和隨意地，第三種抗病毒劑組合投予（或經製備用於投 予）’其中：a)該第一種抗病毒劑係選自流感病毒吸附 抑制劑和M2抑制劑所組成的群組；b )該第二種抗病毒 劑係選自IMP脫氫酶抑制劑、和RNA聚合酶抑制劑所組 成的群組：且c )該第三種抗病毒劑係選自干擾性低聚核 苷酸與神經胺酸苷酶抑制劑所組成的群組。 本發明也提供第三種抗病毒劑，其係用於治療及/或 預防流感傳染’其中該第三種抗病毒劑係與第一和第二種 抗病毒劑組合投予（或經製備用於投予），其中：a )該 第一種抗病毒劑係選自流感病毒吸附抑制劑和M2抑制劑 所組成的群組；b )該第二種抗病毒劑係選自I μ P脫氫酶 抑制劑、和RN Α聚合酶抑制劑所組成的群組；且c )該第 三種抗病毒劑係選自干擾性低聚核苷酸與神經胺酸苷酶抑 制劑所組成的群組。 發明詳細說明 本發明提供用於治療具有流感病毒感染或疑似受流感 病毒感染或有曝露於流感病毒的風險之病患的方法、用途 -18- 200904399 、組成物、和套組。本發明可用來防止抗藥性株的產生或 減低其產生槪率，用於治療疑似被耐藥性流感病毒所感染 或有曝露風險之病人，及減少與單一療法相關的副作用和 毒性。 本發明一方面係一種治療或預防病患流感或減低或預 防與流感病毒感染相關的徵候。該病患可爲易罹患流感之 人類或任何其他動物（如家庭動物諸如貓和狗；家畜和農 場動物諸如馬、牛、豬、雞、等）。其中採用醫護標準來 決定病患可能受流感病毒所感染或處於曝露於流感病毒之 風險。流感病毒可能爲A型或B型病毒。於特定具體實例 中，該病毒爲A型流感病毒（如H1N1、H1N2、H2N2、 H3N2、H5N1、H7N7、H9N2、等）。 該方法包括給病患投予三種不同抗病毒劑之組合（於 本文中稱爲&三重組合〃），各具選自流感病毒吸附抑制 劑、M2抑制劑、IMP脫氫酶抑制劑、RNA聚合酶抑制劑、 流感特異性干擾性低聚核苷酸、和神經胺酸苷酶抑制劑所 組成的群組中之三種不同的作用機制。於該三重組合中可 添加一或更多種附加的抗病毒劑（如第四種抗病毒劑，其 具有不同於該三重組合的三種機制或相同於三重組合所具 諸機制之一的作用機制）。本文提及的特定抗病毒劑（如 金剛胺、奧斯他偉、等）也包括該等抗病毒劑的藥學上可 接受之鹽（如’鹽酸金剛胺' 磷酸奧斯他偉、等等）。 該等抗病毒劑較佳係以經例示針對病毒載量、徵候、 疾病持續期等的減少、耐藥性株的防止等方面有加成性或 -19- 200904399 增效性之相對比例和劑量來投予。增效性（Synergy )爲 組合物的效益大於組合中每一藥物以單劑使用的效益之累 積値的情況（Prichard and Shipman, Antiviral Res. (1990) 1 4:1 8 1 -206 )。抗病毒劑藥物增效性的測量方法述於後文 的實施例中，且爲技藝中一般所知者（參閱，例如， Schinazi et al., Antimicrob Agents Chemother. ( 1 982) 22:499-507 ；及 Prichard and Shipman,上文；及 Prichard et a 1., Antibicrob Agents Chemother ( 1 9 9 3 ) 37:540-545 ； 每一者都以引用方式納入本文）。圖5繪出得自後文實施 例1 B中所述實驗的數據之三維增效標繪圖；其分析係使用 前文所述之Prichard et al. ( 1 993 )所述方法作成者。 增效量的抗病毒劑之使用提供比現行單一療法所用者 更大的效益及/或可允許較低量的一或多種所用的藥物， 藉此導致對病患較少的副作用且促成從有限量主體藥物的 更多治療劑量之產生。於一特定具體實例中，該組合可以 使一或多種流感病毒株對至少一種抗病毒劑的敏感性比病 毒對以單一療法使用的藥物之敏感性增加至少2-倍、5-倍 、1 0 -倍、2 0 -倍、5 0 -倍或1 0 0 -倍。例如，在一種藥物因爲 單一療法對抗流感病毒經試管內檢驗測定出有1 .〇微克/毫 升的E C 5 〇時，且在與兩種別的抗病毒劑組合使用時具有 0.0 1微克/毫升的E C 5 〇値，則該組合即可增加該流感病毒 對藥物的敏感性至少1 〇 〇 -倍。較佳者，組合中二或所有三 種藥物的敏感性經改善至少2-倍、5-倍、10-倍、20-倍、 5 0 -倍或1 0 0 -倍。後文的實施例1 B敍述一種試管內檢定， -20- 200904399 用於使用H3N2流感病毒測定藥物敏感 檢定可用來測量對其他流感株的藥物敏 性時，抗病毒劑的組合可因組合仍內每 獻及沒有添加毒性的組合整體效益而獲 三重組合的使用相較於先前單一療 藥株產生的槪率。這在大流行或區域性 上特別有利。另外，該三重組合可用來 病毒感染或有曝露風險的人類患者。因 法即時獲得快速的病毒基因定型以便其 析進行合適的藥物選擇，所以本發明提 數據下，廣泛且有效的抗病毒範圍。於 抗藥性流感病毒會抗拒所用組合中的一 者，用該三重組合物治療可對該抗藥性 況但排除以病毒有抗性的藥物進行單一 更大的抗流感效用。使用標準醫療程序 性病毒感染或有曝露風險之可能性（如 Alerts的指導，等等）。 較佳的是，該組合物中的各藥物係 環中的不同階段具有活性。例如，流感 M2抑制劑係在生命循環的開始具有活值 劑和RNA聚合酶抑制劑係在生命循環的 擾性低聚核苷酸和神經胺酸苷酶抑制劑 端具有活性。 流感病毒吸附抑制劑的例子包括β 性之增加。相同的 感性。在沒有增效 種藥物的加成性貢 益。 法可明顯地減低抗 爆發中的流感治療 治療被耐藥性流感 爲臨床醫師通常無 根據抗藥性數據分 供在即使沒有此等 特定具體實例中， 種藥物。令人訝異 病毒提供比相同情 療法之治療時提供 來評估病患被抗藥 ，透過 CDC Health 在流感病毒生命循 病毒吸附抑制劑和 E ; IMP脫氫酶抑制 中間具活性；且干 係在生命循環的終 1球凝集素-特異性 -21 - 200904399 單株抗體(hemagglutinin-specific monoclonal antibodies )(參閱如，Palladino et al·，J Virol. ( 1 995 ) 69: 2075-8 1 )、聚金屬氧酸鹽（polyoxometalates)(參閱如， Shigeta et al., Antimicrob Agents Chemother. (1 997) 41: 1423-7)、硫酸化多醣、唾液酸酶融合蛋白（如，Fludase )、與唾液酸的〇-糖苷（參閱，如，Guo et al·, Glycobiology (2002) 12: 183-90)。此等和其他的流感病 毒吸附抑制劑都是技藝中已知者（參閱，如，Combating the Threat Of Pandemic Influenza: Drug Discovery Approaches, Ed. Paul F. Torrence, John Wiley And Sons Ltd (2 00 7)，其以引用方式倂入本文）。 M2抑制劑的例子包括胺基金剛烷化合物諸如金剛胺 (1 一胺基金剛烷）、金剛乙胺（1 一（ 1 一胺基乙基）金 剛院）、螺[環丙院一 1，2 ’ 一金剛院]一 2 -胺、螺[耻咯U定 _ 2，2’ 一金剛烷]、螺[哌啶一 2,2’ 一金剛烷]、2—（2 —金 剛烷基）哌啶、3 -（ 2 —金剛烷基）吡咯啶、2 —（ 1 _金 剛烷基）哌啶、2—（1—金剛烷基）吡咯啶、及2—（1 — 金剛烷基）一 2 —甲基—吡咯啶；及M2-特異性單株抗體 (參閱，如 US 20050170334;及 Zebedee and Lamb, J Virol. ( 1 98 8) 62: 2762-72 )。於一較佳具體實例中，在三 重組合中的其中一種抗病毒劑爲金剛胺或金剛乙胺。 IMP脫氫酶抑制劑的例子包括利巴韋林、韋拉米啶（ 利巴韋林的前藥）-和美利美波（merimepodib) ( VX-497 );參閱’如’ Markland et al·，Antimicrob Agents -22- 200904399

Chemother. (20 00) 44:8 5 9-66 )。 於用在本文中時’術語a RN A聚合酶抑制劑〃係指一 種抗病毒劑，其可抑制病毒RN A聚合酶複合物或其次單元 之一（即，PB1、PB2和ΡΛ)的聚合酶、蛋白酶、及/或 核酸內切酶的活性。範例RNA聚合酶抑制劑包括抗病毒性 核苷類似物諸如利巴韋林、韋拉米啶、6 -氟—3 -羥基一 2—吡Π并羧醯胺（T-705) 、2，—去氧—2，—氟鳥嘌呤核苷 、吡唑毗喃菌素（pyrazofurin ) 、3 —脫氮鳥嘌呤、卡伯 丁（ carbodine)(參閱，例如 Shannon et al.，Antimicrob

Agents Chemother· (198 1 ) 20:769-76 )、及環戊基胞嘧啶 (黎閱’例如 Shigeta et al., Antimicrob Agents Chemother· ( 1 9 8 8) 3 2: 9 06- 1 1 );及核酸內切酶抑制劑氟 他亞胺（flutimide )(參閱例如 Tomassini et al., Antimicrob Agents Chemother. ( 1 9 9 6) 40: 1189-93)。於 一較佳具體實例中，該三重組合中的其中一種抗病毒劑爲 利巴韋林或韋拉米啶。 流感特異性干擾性低聚核苷酸的例子包括s i RN A s (參 閱例如 Zhou et al., Antiviral Res. (2007) 76: 1 86-93 ) 反義低聚核苷酸、硫代磷酸酯低聚核苷酸、核醣酵素（ 1^〇27111以）（參閱例如〇^061'美國專利第6,258,585號） 、嗎啉低聚物（morpholino oligomers)和肽核酸（參閱 ’例如，Schubert and Kurreck, Handb Exp Pharmacol. (2006) 173:261-87)。 神經胺酸苷酶抑制劑的例子包括奧斯他偉、羧酸奧斯 -23- 200904399 他偉（GS407 1 ;參閱例如 Eisenberg et al., Antimicrob Agents Chemother. ( 1 9 9 7) 41: 1949-52 )、札那米韋、皮 拉馬韋（RWJ-27021; BXC-1812、BioCryst) 、2,3 -二脫 氫_2—脫氧—N —乙醯基神經胺酸（DANA) 、2—脫氧 一 2,3-脫氫一 N-三氟乙醯基神經胺酸（FANA)、 A-322278、及 A-315675 (參閱 Maring et al·，美國專利第 6,45 5,5 7 1 號、及 Kati et al., Antimicrob Agents

Chemother. (2002) 46: 1014-21)。於一較佳具體實例中 ’三重組合中的其中一種抗病毒劑爲奧斯他偉、皮拉馬韋 、或札那米韋。 於一具體實例中，第一種抗病毒劑爲M2抑制劑，較 仏者金剛fe ’第二種抗病毒劑爲抗病毒核苷類似物，較佳 者利巴韋林或韋拉米啶；且第三種抗病毒劑爲神經胺酸苷 酶抑制劑，較佳者奧斯他偉或札那米韋。於另一具體實例 中’第一種抗病毒劑爲金剛胺或金剛乙胺；第二種抗病毒 劑爲利巴韋林或韋拉米啶’且第三種抗病毒劑爲奧斯他偉 、羧酸奧斯他偉、皮拉馬韋、或札那米韋。 Μ組㈡的每一種抗病毒劑係使用適合該特別藥劑的一 或多種投予途徑投〗（如經口、非經腸、吸入、透皮、鼻 內、經胃投予（如通過G-、NG-、J- '等饋入管）、等等 )笊夕個具體實例中，該等抗病毒劑係經製備用於經口 宇又予及/ 經胃投"？（如通過饋人管），且呈液體、糖獎 α浮液片劑、膠囊、珠粒（膠囊內）或珠粒（小藥囊 內）於某些具體實例中’至少一種抗病毒劑係經由一種 -24- 200904399 投予途徑（如非經腸地）投予，且至少一種抗病毒劑係以 另一種投予途徑投予（如經口或吸入）。 於經口投藥具體實例中，一或多種抗病毒劑可提供成 立即釋放（IR)形式或延長釋放（ER)形式。ER劑型（ 於技藝中也稱爲'、控制釋放〃、 '、持續釋放〃及、調節釋 放"劑型）的製備係熟知者。適當的Μ 2抑制劑E R劑型經 載於1；88>1 11/285,905 和1]88^^ 11/399,879中，兩者皆爲 Went et al·，所有，彼等的內容皆以引用方式倂入本文。 該等抗病毒劑可用分開的調合物，同時或依序地投予。或 者，可將二或多種抗病毒劑提供爲在單一劑型中的組合組 成物。 在治療呈現嘔吐及/或腹瀉徵候之病患的確診流感病 毒感染時，特佳者爲非經腸投予，因經口投予可能不會有 效地快速達到合宜的抗病毒劑血漿濃度。非經腸投予較佳 係選自靜脈內注輸、靜脈內注射、或肌肉內注射。最佳者 爲靜脈內注輸。非經腸投予用的較佳套組包括Μ 2抑制劑 (金剛胺或金剛乙胺）、抗病毒核苷類似物（利巴韋林或 韋拉米啶）、及隨意地神經胺酸苷酶抑制劑（奧斯他偉、 羧酸奧斯他偉、或札那米韋），彼等係與藥學上可接受的 載劑一起在單一藥學組成物中非經腸地投予。於其他具體 實例中’係將]VI2抑制劑、抗病毒核苷類似物，及隨意地 神經胺酸苷酶抑制劑，以分開的劑型非經腸地投予。於某 些具體實例中’該Μ 2抑制劑、抗病毒核苷類似物、及若 含有時之神經胺酸苷酶抑制劑中至少一者，於初始以冷凍 -25- 200904399 乾燥組成物形式提供’而於非經腸投予之前用藥學上可接 受的載劑予以重組。於某些具體實例中，該Μ 2抑制劑、 抗病毒核苷類似物及若含有時之神經胺酸苷酶抑制劑係分 別於初始提供於分開的容器內，且於其後’在非經腸投予 之前與藥學上可接受的載劑組合。於某些具體實例中，諸 抗病毒劑之一可提供成冷凍乾燥形式，而與一種其他抗病 毒劑的液體調合物重組。 三重組合的每一種藥物之血漿濃度較佳地係維持在合 宜的 Cmin 與 Cm ax 之間達至少 24、48、72、96、120、144 或1 6 8連續小時。可使用例行性臨床實驗經由各種服藥法 來測定一病患群的平均Cmin、Cmax、與Cmean血漿濃度 。治療持續期典型地爲5 - 1 〇天治療、或直到病毒從病患 廓清爲止。用於預防時，所投予的抗病毒劑之每日劑量典 型地爲用於治療者之50%且在二或更多週，典型地多達6 週或更多週的過程內投予，或直到感染風險消除爲止。 於下文中將針對特定抗病毒劑及抗病毒劑組合的用途 ，及彼等所用劑量和濃度進一步例示本發明。於下文中沒 有進一步例示的其他抗病毒劑之適當劑量和濃度可以使用 文獻中可取得的資訊及經由例行性實驗操作予以決定，諸 如在下面的實施例中所述及在技藝中一般所知者。 於本發明一特定具體實例中，三重組合的第一種抗病 毒劑爲金剛胺或金剛乙胺，其投予病患的量爲維持金剛胺 或金剛乙胺的血漿濃度在0.05微克/毫升（Cmin)至5.0微 克/毫升（Cmax)，較佳者0.1至3.0微克/毫升，更佳者0.1 -26- 200904399 至1.5微克/毫升’且最佳者0.3至1.5微克/毫升之間至少48 連續小時。合宜的血漿濃度可經由以5至500毫克/天、2〇 至250毫克/天、100至800毫克/天、100至600毫克/天、2〇〇 至700毫克/天、或200至500毫克/天之量非經腸地或經口 地投予金剛胺或金剛乙胺而達到。金剛乙胺的特佳每臼口 服劑量爲從約50 — 400¾克/天、75 — 300毫克/天、1〇〇 — 2 5 0毫克/天、或1 00 — 200毫克/天。 於某些具體實例中，範例的金剛胺和金剛乙胺口服劑 型係每劑型含有至少約25、50、75、100、125、150、175 或 200 毫克且至多達約 75、100、125、150、175、200、 225 > 250、275、300、350 或 400 毫克。—、二、三或四份 該等劑型可每天投予一或二次用以預防或治療。所得每曰 劑量可爲每天至少25、50、75、100、125、150、175或 200 毫克且至多達約 75、100、125、150、175、200、225 、250 、 275 、 300 、 325 、 350 、 400 、 450 、 500 、 550 、 600 、650、700、750或800毫克/天。於一範例治療中，病患 自行投予兩份1 25毫克金剛胺ER單位劑型（如膠囊或片劑 )，每1 2小時（即B ID )投予而達總計約5 0 0毫克/天的金 剛胺，典型地係與利巴韋林組合服用，如後文所述者。於 此例中，其預防劑量爲一份125毫克ER劑型BID。 對於金剛胺或金剛乙胺2〇〇毫克/天或更多者之經口投 予，較佳者爲ER調合物’因彼等可促成較低的Cmax/Cmin 比例，由是使M2抑制劑濃度保持在高於ED 5 〇同時使毒性 最小化之時間得以最佳化。於較佳ER調合物中’金剛胺 -27- 200904399 或金剛乙胺具有一小時內小於約7 0重量％，二小時內小於 約9 0重量％ ’ 6小時內大於4 0重量％及1 2小時內大於約8 5 重量％的試管內溶解數據變化，其係使用USP第2類（槳 型）溶解系統’在50rpm，37±0.5。(：的溫度，使用5 00毫升 水作爲溶解介質測量者。進一步較佳的金剛胺或金剛乙胺 E R調合物爲具有一小時內小於2 0重量％，二小時內小於 約5 0 % ’ 6小時內大於約4 0 %，且1 2小時內大於約9 0 %之 按上述測量的試管內溶解數據變化者。此種溶解率的減低 可以有利地減低活性劑血漿濃度的劑間變異性或改善活性 劑的耐受性，尤其是在以BID或QD投予之時。於某些具體 實例中，金剛胺或金剛乙胺係呈口服劑型且具有至少4、5 、6、 7、 8、 9、 10、 11、 12、 13、 14、 15、 16、 17、 18、 1 9或20小時之Tmax。 於一特定具體實例中，病患係以1至50毫克/小時、3 至4 0毫克/小時、或5至3 0毫克/小時之速率經靜脈內注輸 投予金剛胺至少48、72、或96連續小時。 於本發明一具體實例中，該三重組合的第二種抗病毒 劑爲利巴韋林或韋拉米啶。於一較佳具體實例中，利巴韋 林或韋拉米啶係與金剛胺或金剛乙胺一起以上文所述之量 投予。利巴韋林或韋拉米啶係以達到0.1微克/毫升（Cmin )至10.0微克/毫升（Cmax ) ，0 · 5至8微克/毫升、〇 . 5至5 微克/毫升、1至6微克/毫升、1至4微克/毫升、2至6微克/ 毫升、2至4微克/毫升、o.oi至2微克/毫升、或〇·2至2微克 /毫升之血漿濃度至少4 8、7 2或9 6連續小時之量投予病患 -28- 200904399 。合宜的血漿濃度可經由以50至2400毫克/天、50至2000 毫克/天、50至1 600毫克/天、1〇〇至1 200毫克/天、400至 800毫克/天、50至600毫克/天、75至5 00毫克/天、或75至 2〇〇毫克/天的量非經腸或經口地投予利巴韋林而達到。於 一較佳具體實例中，係以低每日劑量投予利巴韋林或韋拉 米啶’使得在與金剛胺或金剛乙胺及神經胺酸苷酶抑制劑 諸如奧斯他偉、皮拉馬韋、或札那米韋組合投予時具有加 成或增效作用。該低劑量典型地爲約10— 800毫克/天、25 一 600毫克/天、50— 600毫克/天，且較佳者爲約75 — 500 毫克/天。於一範例治療中，病患自行投予一份1 60毫克利 巴韋林單位劑型，BID，共320毫克/天的利巴韋林。 於一特定具體實例中，係以至少約1 0、25、30、40、 50' 75、1〇〇、125、150、175或200毫克每劑型且高達約 150、 175、 200、 250、 300、 350、 400、 450或 500毫克每 劑型的量經口投予利巴韋林或韋拉米啶。可用一、二、三 或四份該劑型每天投予一或二次用以預防或治療。所得每 日劑量可爲至少 10、25、30、40、50、75、100、125、 150、175或200毫克每天且至高達約1〇〇、125、150、175 、200 ' 225 、 250 、 275 、 300 、 325 、 350 、 400 、 450 、 500 ' 550、 600、 650、 700、 750、 800、 1200、 1600、或2000 毫克/天。於一範例治療中，病患係自行投予2 x200毫克劑 型BID共8 00毫克每天。此外，於此例中，預防劑量爲lx 2〇〇毫克劑型BID。 利巴韋林或韋拉米啶（及隨意地一或兩種其他抗病毒 -29- 200904399 劑）可於初$口以負何劑量（l〇ading dose)投予，且於甘 後以每日維持劑量投予，其中該負荷劑量爲該每日維持劑 量的約1 . 5至約3倍。該負荷劑量可用與後續維持劑量相同 或不同的途徑投予。負荷劑量較佳地係非經腸或經口投予 ，且最佳者係非經腸地投予。該負荷劑量較佳係經由靜脈 內注輸、靜脈內注射、或肌肉內注射投予。採用靜脈內注 輸時，可在注輸到病患的第一靜脈內注輸（iv.)袋中使 用較闻的抗病毒劑濃度來達到該負荷劑量。或者，初始 1 · v ·注輸袋可具有與後續i v ·袋相同的活性劑濃度，但以增 加的注輸速率投予（如3 - 6小時相對於8小時）。 於一特定具體實例中，病患係以5至2 0 0毫克/小時、 10至150毫克/小時、15至1〇〇毫克/小時、或20至80毫克/小 時的速率經由靜脈內注輸利巴韋林或韋拉米啶至少4 8、7 2 或96連續小時。 於本發明一特別具體實例中，係用利巴韋林或韋拉米 啶與金剛胺和奧斯他偉一起投予以治療對金剛胺或奧斯他 偉單一療法有抗性之流感病毒。 於本發明一具體實例中，該三重組合的第三種抗病毒 劑爲選自奧斯他偉、羧酸奧斯他偉、札那米韋、和皮拉馬 韋所組成的群組中之神經胺酸苷酶抑制劑。奧斯他偉和札 那米韋爲特佳者。該神經胺酸苷酶抑制劑，較佳者奧斯他 偉或札那米韋，係以可達到0.001至5微克/毫升、0.02微克 /毫升至5微克/毫升、0.1至3微克/毫升、〇.1至1微克/毫升 、0.3至3微克/毫升、0.3至1微克/毫升、0.001至0·1微克/ -30- 200904399 毫升、或0.0001至0.01微克/毫升之間的血漿濃度至少48、 72或96連續小時之量投予病患。合宜的血漿濃度可經由以 10至150毫克/天、10至50毫克/天、50至100毫克/天、75至 150毫克/天、15〇至300毫克/天、或100至500毫克/天的量 非經腸或經口地投予奧斯他偉而達到。札那米韋典型地係 以25 — 150毫克/天，較佳者40 — 100毫克/天的量投予。 於一較佳具體實例中，係以低每日劑量投予神經胺酸 苷酶抑制劑，其在與金剛胺和利巴韋林或韋拉米啶組合投 予時具有加成或增效性作用。於特定具體實例中，係當病 患體內維持0.15 - 1.5微克/毫升的金剛胺、0.000 1 — 〇.〇1 微克/毫升的奧斯他偉、和0_6 - 6微克/毫升的利巴韋林之 血漿濃度至少4 8、7 2或9 6連續小時的時候達到增效作用。 達到此等血漿濃度的特定劑量係使用例行性計算予以決定 且以臨床實驗予以確定。奧斯他偉的低劑量典型地爲約1 —50毫克/天’較佳者約1— 25毫克/天，且更佳者爲約2.5 —1 0毫克/天。於一範例治療中，病患以q D或B ID自行投 予2 5毫克奧斯他偉單位劑型。於較佳具體實例中，係以任 何上述劑量的奧斯他偉與任何上述量的金剛胺和利巴韋林 組合服用。於一特定具體實例中，係以2 5毫克奧斯他偉與 1 60毫克金剛胺和1 60毫克利巴韋林（以分開的單位劑型， 或組合單位劑型）一起皆以QD或BID服用。於另一特定具 體實例中’係以7 5毫克奧斯他偉Q D或B ID服用配合1 〇 〇毫 克金剛胺QD或BID及600毫克利巴韋林qd或BID。 於一特定具體實例中’病患係以。.丨至20毫克/小時、 -31 - 200904399 〇 · 4至7毫克/小時、1至7毫克/小時、1至5毫克/小時、或2 至7毫克/小時的速率經由靜脈內注輸投予奧斯他偉至少4 8 、7 2或9 6連續小時。合宜的札那米韋血漿濃度可經由以5 至250毫克/天、1〇至200毫克/天、或25至150毫克/天的量 非經腸地投予而達到。於一特定具體實例中，係以〇. 1至 10毫克/小時、0.4至7毫克/小時、或1至5毫克/小時經由靜 脈內注輸投予病患札那米韋至少4 8、7 2或9 6連續小時。 於一特定具體實例中，係以1至75毫克/天、1至50毫 克/天、1至25毫克/天、10至150毫克/天、50至100毫克/天 、75至150毫克/天、或150至3 00毫克/天的量經口投予病 患奧斯他偉。於多個具體實例中，根據本發明，若含有時 ’奧斯他偉的投予量可爲至少約1、2、5、10、15、20、 25、 30、 40、 50、 60、 70、 75、 80、 90、 1〇〇、 11〇、 120 、130' 140或150毫克每劑型且至多達約75、80、90、100 、110、 120、 130、 140、 150、 160、 170、 180、 190或200 毫克每劑型。一、二、三或四份該劑型可每天投予一或二 次用於預防或治療。所得每日劑量可爲至少1、2、5、i 〇 、15、 20、 25' 30、 40、 50、 60、 70、 75、 80、 90、 100 、110、120、130、140或150毫克每天且至多達約75、1〇〇 、120、 140、 150、 160、 180' 200' 220' 240 > 250' 260 、2 8 0或3 0 0毫克每天。於一範例治療中，病患係自行投予 75毫克劑型BID，共約150毫克每天；用於預防時，該劑 量爲75毫克每24小時服一次（QD)。 除了三重抗病毒療法之外，可給病患施以輔助療法以 -32 - 200904399 增強自然抗病毒反應。範例輔助療法包括用干擾素、聚乙 二醇化干擾素、維生素D (參閱，如Cannell et &1., Epidemiol Infect. (2006) 1 3 4: 1 1 29-40 )、香葉草基香葉 草基丙酮（參閱’如 Unoshima et al., Antimicrob Agents Chemother. (2003) 47: 29 1 4-2 1 )、聚 I C L C ( p 〇 1 y I C L C ) ( 1 995) 3 9: 25 74-6 ) 、Ampligen®、和 CpG-低聚脫氧核苷 酸（參閱如 Lopez et al., Vet Immunol Immunopathol. 2006 Nov 15; 114 (1·2): 103-10)。此等輔助療法對於流感的 預防特別有益。不過，對於發作中的流感傳染的治療，可 能需要避開某些輔助療法（如干擾素治療）。但可用抗病 毒齊!1配合抗-免疫/抗-發炎治療諸如皮質類固醇（如甲基去 氫皮質醇（methylprednisolone )、氫皮質酮、等）或他 汀類（statins )(如阿伐他汀（atorvastatin )、辛伐他汀 (simvastatin)、等）以減低 '、細胞激素風暴（c y t o k i n e storm )夕之可能性。 本發明的另一方面爲一種組成物及其用於人類病患的 流感之治療或預防上之用途。於多個具體實例中，該組成 物係I衣備成液體、糖漿、懸浮液、片劑、膠囊、珠粒（ 於膠囊內）或珠粒（於小藥囊內）之形式供經口、非經腸 、或胃部投予（如通過饋入管）所用。 於一特定具體實例中，該組成物包含金剛胺或金剛乙 胺’及利巴韋林或韋拉米啶，及隨意地，奧斯他偉’於單 劑型中，供經口、胃或非經腸投予所用。於一特定具體 -33- 200904399 實例中’一單一劑型包含任一上述量（即，25、5〇、75… 3 0 〇毫克）的金剛胺組合著任一上述量（即2 5、5 〇、7 5… 500毫克）的利巴韋林與隨意地，任一上述量（即25、3〇 、40…200毫克）的奧斯他偉。於一具體實例中，該組成 物包含利巴韋林與較佳地具有上述試管內溶解數據變化及 /或Tmax的ER金剛胺之組合。 於一具體實例中，該組成物包含10至60重量百分比（ 重量％ )、25至50重量％、或5〇至75重量％的金剛胺或金 剛乙胺；和30至80重量％、50至75重量％、或25至50重量 %的利巴韋林或韋拉米啶，其中諸重量百分比係以組成物 中的諸活性劑之總重量爲基準。該組成物可進一步包含 0 · 5 - 3 0重量％的奧斯他偉。於較佳具體實例中，該組成 物包含，在與神經胺酸苷酶抑制劑諸如奧斯他偉、皮拉馬 韋或札那米韋的三重組合中用來治療或預防流感時，展現 出加成或增效作用的量之金剛胺和利巴韋林。 用於非經腸投予時，該組成物可呈裝在管瓶中的冷凍 乾燥粉末或無菌液體形式。該管瓶可配置一橡膠隔板讓注 射針刺入以重組或抽取管瓶的內容物。 用於經口投予時，該組成物可呈單位劑型諸如膠囊或 片劑。一種經口投予用的範例單位劑型包含25 - 1 25毫克 或1 5 0 — 3 00毫克金剛胺，隨意地呈ER形式，和50 — 200毫 克利巴韋林，於片劑或膠囊之中。本發明一種劑型包含 1 60毫克ER金剛胺HCL和1 20毫克IR利巴韋林。另一範例劑 型爲包含160毫克金剛胺和160毫克利巴韋林，及75毫克奧 -34- 200904399 斯他偉的膠囊。 本發明另一方面爲套組，其包含Μ 2抑制劑 胺或金剛乙胺）、抗病毒核苷類似物（如利巴韋 米啶）及隨意地神經胺酸苷酶抑制劑（如皮拉馬 米韋、或奧斯他偉）。該套組中的抗病毒劑可提 的劑型中，再共包裝在一起，此舉可使按適當治 需要的患者之容易度最大化。 於一特定具體實例中，該套組包括小藥囊， 一或多種活性劑。該小藥囊可裝著適合經口、經 予（如通過G-、NG-、或J-管）的單位劑量之活 〇 在以供經口投予的套組形式提供時，該等抗 於泡殼包裝中提供。個別泡殼中可裝著一種、或 全部三種抗病毒劑。在以泡殼包裝提供時，較佳 投藥間隔提供的抗病毒劑都分開地鑑別-此可經 劑的所有劑型裝在單一泡殼內’或若包裝在分開 時，將裝著每一劑的劑型之泡殼分組或識別爲一 由在泡殻周圍印刷等而完成。典型地’該套組包 明。於某些具體實例中，該套組可包括在第一包 或多個Μ 2抑制劑（如金剛胺）和抗病毒核苷類 利巴韋林）之容器’且於第二分開的包裝中的神 酶抑制劑容器。例如，該套組可包括共包裝在第 裝中的金剛胺和利巴韋林’及在弟一泡威包裝中 奧斯他偉膠囊。此等套組可經由將TAMIFLU®的 (如金剛 林或韋拉 韋、札那 供在分開 療量投予 其中裝有 腸或胃投 性劑珠粒 病毒劑可 二種、或 者在每一 由將每一 的泡殻中 組，如經 括使用說 裝內的一 似物（如 經胺酸苷 一泡殼包 的75毫克 泡殻包裝 -35- 200904399 與包著利巴韋林和金剛胺的泡殻包裝共包裝在一起而製備 。於本發明另一套組中，使用整個供給的TAMIFLU® (如 ，政府的必需品儲備）作爲奧斯他偉的來源。將 TAMIFLU®膠囊排空，隨意地重新檢驗儲存壽命穩定性， 然後以少於75毫克/膠囊（如1〇、25、35、50毫克）的量 重新封裝，且與加成或增效量的利巴韋林和金剛胺共包裝 。延長奧斯他偉的儲存壽命及減低流感治療或預防所需的 每曰劑量具有大幅擴充政府對大流行性感冒的抗病毒治療 儲備品之效益。 於一具體實例中，套組包含以複數個分開的口服劑型 提供之金剛胺和利巴韋林，每一金剛胺劑型包含7 5 - 2 5 0 毫克的金剛胺且每一利巴韋林劑型包含5 0 - 4 0 0毫克的利 巴韋林。於一特定具體實例中，套組可包括一或多個包著 —或多個劑型的泡殻包裝，每一劑型包含125毫克呈延長 釋放劑型的鹽酸金剛胺；及一或多個包含20〇毫克利巴韋 林的劑型。包裝中的泡殻可經排列或標誌使得每一類劑型 之一可每日投予一或二次。或者，泡殼中的劑型可經排列 以表明一金剛胺劑型應每日投予二次且一利巴韋林劑型應 每曰投予一次’或可將泡殻中的劑型安排成表明應每日投 予一次二金剛胺劑型和一利巴韋林劑型。隨意地，泡殼包 裝可經配置成包括一或多個包著75毫克奧斯他偉的劑型， 彼等經類似地配置或標誌以每日投予一或二次。附圖中的 圖1和圖2示出代表性配置。或者，該套組可經格式化以使 其與市售神經胺酸苷酶抑制劑（如TAMIFLU® )的輔助使 -36- 200904399 用最佳化。 於另一具體實例中’套組可提供成包括一或多個泡殼 包裝，其中每一泡殼包裝包含一或多組泡殼且於每組泡殼 的一個泡殻內，裝著一或二份片劑或膠囊劑型，各含60至 300毫克呈延長釋放調合物的金剛胺，且一泡殼裝著一或 二份包含25至200毫克利巴韋林的片劑或膠囊劑型。在一 泡殼包裝內的組數或一套組內提供的組數可從一變異到約 5、 7、 10、 14、 15、 20、 21、 28、 30、 40、 42、或60° 隨 意地，該套組包括每日投予一或二次之指示。 另一用於將金剛胺與利巴韋林一起經口投予用的範例 套組包含呈立即釋放或延長釋放形式的80毫克、180毫克 、或330毫克金剛胺單位劑型；及330毫克或660毫克利巴 韋林單位劑型。於一範例治療中，係對病患投予660至 2400毫克RBV和3 60至660毫克金剛胺作爲第一劑（如第！ 天上午）；其後（如第2天上午至第1〇天）對病患投予660 至1320毫克的RBV和180至660毫克金剛胺，每日一次（ QD )。 在以非經腸治療用的套組形式提供時，該組合中的二 或多種抗病毒劑係以適合非經腸投予用的形式提供。例如 ，抗病毒劑可經個別地調配或共調配後，裝塡在適當的容 器諸如注射筒、針藥瓶、或管瓶之中。活性劑可提供成冷 凍乾燥組成物形式裝在管瓶內，且在非經腸投予之前用藥 學上可接受的載劑予以重組。於其他具體實例中，可將活 性劑提供成液體形式，裝在容器內，其可不經稀釋就投予 -37- 200904399 (如用於i.v.或i.m.大九劑投予），或者丈 。於某些具體實例中，可將一種抗病毒劑 提供，其在投予病患之前，用在套組中提 毒劑液體形式予以重組。於某些具體實1 劑（如金剛胺或金剛乙胺）、抗病毒核苷 韋林或韋拉米啶），與若含有時的神經胺 如奧斯他偉、札那米韋、或皮拉馬韋）分 內，且於其後，在非經腸投予之前，將諸 可接受的載劑組合。每一容器可裝單位劑 每一套組可含治療個別病患至少1 2、24、 數個容器。該套組可具有經鮮明標誌的容 劑量的一或多種活性劑，加上說明指示該 在起始病患治療時所首次使用者。或者， 開包裝且可具有分開的使用指示。經口治 在下面實施例5 - 9中有進一步詳細說明。 範例套組在下面實施例1 1中予以說明。 【實施方式】 實施例 1 A :於經 A/Albany/1/98 ( H3N2 ) 中，在燒瓶內培養下，金剛胺、奧斯他偉 單獨地及在二重和三重組合中，抗病毒活 究 吾人實施的實驗係經設計用於評定金 和利巴韋林在抑制A/Albany/1/98 ( H3N2 ]到i.v.注輸袋內 以冷凍乾燥形式 供的另一種抗病 可中，將M2抑制 類似物（如利巴 酸苷酶抑制劑（ 別置於個別容器 活性劑與藥學上 量的活性劑，且 48或72小時的足 器用以裝載負荷 鮮明標誌容器爲 可將負荷劑量分 療用的範例套組 非經腸投予用的 感染M D C Κ細胞 、和利巴偉林， 性的劑量反應硏 剛胺、奧斯他偉 )病毒複製中的 -38- 200904399 抗病毒活性之劑量反應。實驗的目標爲展示相對於無藥物 之病毒負載（viral load )的減少及二重和三重組合相對 於單一療法之增效作用。 使用每一藥物以單一療方式在劑量評等硏究中展示出 每一藥物的EC25、EC5Q、和EC75(此處，EC5Q，爲在72小 時減少5 0 %病毒之藥物濃度）。槪述之，以變異劑量的成 分添加到使用先前所述方法在燒瓶內生長之MDCK細胞（ Smee et al.，Chemotherapy (2002) 48: 88-93 ) ° 藥物添加 30分鐘後，於每一孔中以0.001PFU每細胞的感染倍數（ mulitplicity of infection)力d 入病毒。〜24 — 78 小時之後 ，取出每一孔的細胞外病毒介質，以3,200g離心5分鐘， 且滴定病毒。結果提供於表1 A中。

表1A 藥物 抑制程度 試管內C 目標血清C 金剛胺 EC25 0.054微克/毫升 0.28 8 // m 金剛胺 EC5〇 0.091微克/毫升 0.480 // m 金剛胺 EC75 0.153微克/毫升 0.815// m 奧斯他偉 EC25 0.025微克/毫升 0.080nM 奧斯他偉 E C 5 0 0.050微克/毫升 0.1 60ηΜ 奧斯他偉 EC75 0.075微克/毫升 0.240ηΜ 利巴韋林 ec25 0.310微克/毫升 0.760 // Μ 利巴韋林 E C 5 0 0.420微克/毫升 1.03 0 ^ Μ 利巴韋林 EC75 0.615微克/毫升 1.500 // Μ 每一種藥物都單獨地及於所有可能的一重和二重組合 針對組織培養物中的病毒複製之加成及/或增效性作用檢 -39- 200904399 驗EC25、EC5G、和EC75濃度，總共檢驗64種狀況（即，無 藥物、9種單獨處理、2 7種二重組合處理、及2 7種三重組 合處理）。槪述之，將MDCK細胞在燒瓶中單層生長’於 培養物中加入藥物，且透過以一感染倍數（MOI )導入 A/Albany病毒感染該細胞，亦即，感染病毒粒子對被感染 細胞的數目之比例爲0.001 PFU每細胞。維持培養〜48小時 或直到單層中有明顯細胞病變效應爲止。於離心後，以3 X 5〇〇微升液份供TCID5Q、PFU、和NA分析用及1 x200微升供 QPCR用之形式貯存在-70。。。 使用 MacSynergy II軟體（如 Prichard et al·， Antimicrob Agents Chemother (1993) 37: 540-545 所述） 測定藥物組合。若其實際病毒複製之抑制大於所計算的抑 制率，則判定爲具增效性。對於金剛胺與利巴韋林及金剛 胺與奧斯他偉的二重組合看到強增效性，且係在可導致在 人體中較少不良副作用的充分低濃度下。此外，於金剛胺 在ECU和EC5e下的三重組合也展示出在可減少或避免副作 用之濃度下的強增效作用。 實施例1B :在A/Sydney/05/97 H3N2感染的MDCK細胞中 ’金剛胺、奧斯他偉、利巴韋林組合的抗病毒活性之劑量 反應硏究 此硏究的目標爲展示金剛胺、奧斯他偉和利巴韋林三 重組合相對於無藥物減少病毒負載的效應及顯現出相對於 單一療法的增效作用。除了下面提及者之外，所用方法與 -40- 200904399 實施例1 A中所用者相同。 將M D C K細胞在9 6 -孔板中以單層形式生長且透過以 0.01PFU每細胞的ΜΟΙ導入A/Sydney/05/97 Η3Ν2病毒予以 感染。藥物係以2 1 6種可能組合中之一者以下述濃度添加 :0、0_032、0·1、〇.〇32、1.0、和3.2微克/毫升的金剛胺 ;0、 0·001、 0.0032、 0.01、 0.032和 0.1微克/毫升的奧斯 他偉；及〇、0.032、0.1、0.32、1.0和3.2微克/毫升的利巴 韋林。 使用上文所述之 Prichard and Shipman (1990)，及 Prichard et al.，（ 1 993 )中所述之三維分析法來撿視圖5中所 繪示之數據。金剛胺與利巴韋林或奧斯他偉的二重組合展 示出增效性，而奧斯他偉與利巴韋林的二重組合則不具增 效性。於下列濃度範圍看到增效性··金剛胺，〇 . 1 - 1微克 /毫升；利巴韋林’ 0.032 — 1.0微克/毫升；及奧斯他偉， 0.001— 0.〇32微克/毫升。此等濃度對應於約50 — 200毫克 金剛胺，200 - 600毫克利巴韋林，和2.5 — 25毫克奧斯他 偉之人體每曰劑量。金剛胺濃度超過1微克/毫升時，因偵 測檢定的限制而沒有展示出增效性（即，病毒負載的完全 抑制）。 該實驗進一步證明三種藥物組合使用時的增效性交互 作用。於使用三重組合時病毒對每一種藥物的敏感性相較 於每種藥物單一療法使用時改善10-倍到超過100-倍。例 如，用金剛胺以1微克/毫升濃度單一療法導致約60%病毒 負載減低率，而大約相同的病毒負載減低率可用0 · 1微克/ -41 - 200904399 毫升的金剛胺組合〇·〇ι微克/毫升的奧斯他偉和〇.32微克/ 毫升利巴韋林達到，展示出對金剛胺的敏感度之10 -倍增 加。用奧斯他偉以〇 _ 1微克/毫升濃度單一療法導致約5 0 % 病毒負載的減低率，而o.ool微克/毫升的奧斯他偉與〇·32 微克/毫升金剛胺和0.32微克/毫升利巴韋林的組合導致病 毒負載65%減低率，展示出在對奧斯他偉的敏感度上超過 1 0 0 -倍的增加。用利巴韋林以1微克/毫升和3.2微克/毫升 濃度單一療法分別導致約1 0 %和9 5 %的病毒負載減低率， 而0.032微克/毫升利巴韋林與0.32微克/毫升金剛胺和0.01 微克/毫升奧斯他偉的組合導致病毒負載約95 %的減低率 ，展示出對利巴韋林的敏感度上1 00-倍的增加。 實施例1C:於試管內動力學檢定中測定單一療法與組合療 法的效力之硏究 此硏究的目標爲在流感A/Victoria/3/75 ( H3N2 )病毒 感染的試管內動力學模型中，評定金剛胺、奧斯他偉、和 利巴韋林的抗病毒效力。效力係以CCID5〇和qPCR測量病 毒負載的減低，及經由視覺檢查測定的病毒細胞病變效應 (CPE )之抑制予以評定。第二目標爲測定每一種藥物在 單劑與組合劑的形式之最優感染劑量及大約劑量範圍。 表1 C槪述出處理組別。每一組皆以二次重複檢測，且 在M D C K和s IA T -1兩種細胞系中進行。 -42- 200904399 表ic :硏究設計 組別 氺 治療 金剛胺 (微克/毫升） 奧斯他偉 (微克/毫升） 利巴韋林 (微克/毫升） 單劑治療組 1 無效對照劑 • 2 金剛胺(0.15) 0.15 3 金剛胺(0.5) 0.5 4 金剛胺(1.5) 1.5 5 奧斯他偉(0.0001) 0.0001 6 奧斯他偉(〇_〇〇1) 0.001 7 奧斯他偉(〇.〇1) 0.01 8 利巴韋林(0.6) 0.6 9 利巴韋林(2.0) 2.0 10 利巴韋林(6.0) 6.0 組合治療組 11 組合(0.15/0.0001/0.6) 0.15 0.0001 0.6 12 組合（0.5/0.001/2.0) 0.5 0.001 2.0 13 組合（1.5/0.01/6.0) 1.5 0.01 6.0 a每組係以重複（in duplicate)，且都是在MDCK和SIAT- 1兩細胞系中檢驗。 將MDCK和SIAT-1細胞以4xl〇5細胞/毫升的細胞密度 接種在Τ25燒瓶中總共5毫升的生長培養基內。讓細胞黏附 到燒瓶過夜，且於隔日檢視燒瓶以驗證細胞處於〜7 0 %匯 合率。用有或無藥物的5毫升感染培養基洗滌細胞一次。

於 Τ = 0，用 A/Influenza/3/75 ( Η3Ν2)以〜lO^CCIDSO 毫升/的感染劑量感染該燒瓶。2小時後’取出培養基且用 5毫升有藥物的感染培養基洗細胞一次。丟棄洗淌培養基 且加入5毫升有藥物的新鮮感染培養基。 -43- 200904399 於24小時處，從保溫箱取出燒瓶且目視檢查CPE ° C P E，細胞存活率的指標，係經由以〇至4的標度將燒瓶計 分予以定性地評定，其中4爲最大CPE。計分爲％存活率 的估測。100%死亡的燒瓶經計分爲4。75%死亡的燒瓶計 分爲3，50%爲2，25%爲1，且0%爲〇。然後從燒瓶中將 培養基完全取出且取一液份冷凍供後面以C C1D 5 0分析法 進行病毒負載定量測定作用。用5毫升有或無藥物的感染 培養基洗細胞單層兩次，再加入5毫升有或無藥物的新鮮 感爲培養基。然後將燒瓶送回保溫箱。於T = 48、72、90、 120、144、和168小時處，重複上述程序。實施CPE評定 且對每一樣組於每一時點採取病毒負載定量測定用的樣品 〇 於最後時點之後，將所有病毒負載樣品解凍且用 CCID50分析法測定每一時點的病毒負載。將MDCK細胞以 4 X 1 0 5細胞每毫升接種到3 8 4 -孔板中，每孔體積爲5 0微升 。使細胞黏附過夜。然後於板中添加50微升經系列稀釋的 病毒，且將板送回到保溫箱中。於第3和第6天從保溫箱取 出諸板且以目視計分CPE。6天之後，將諸板冷凍於-80 °C ，準備供勝格氏定序（sanger sequencing)用。 CCID50，經定義爲有50%孔洞被感染之劑量，係使 用 Karber 計算 Karber ， 1931 )，以方程式：log CCID50 = L-d ( S-0.5 )，計算，此處：L =檢測中所用最低 稀釋率的對數値；d = log (稀釋步驟）之間的差値；且S = 1陽性〃檢測（即，顯示CPE的培養物）的比例總和。 -44 - 200904399 在沒有藥物時，無效對照分組在SIAT-1與MDCK兩細 胞系中於感染48小時後產生病毒滴度（viral titers)峰値 。SITA-1與MDCK兩細胞系具有相似的病毒滴度峰値，在 感染後48小時，SIAT-1於24小時測量期間產生6·75 log10 CCID 5 0/0.05 毫升，而 MDCK 細胞產生 6.25 logi〇 CCID50/0.05毫升。在SIAT細胞中病毒複製顯得比在 M D C K細胞中較爲快；在感染2 4小時後，於S IA T細胞中病 毒滴度爲4 logl〇 CCID5 0/0.05毫升，而於MDCK細胞中爲 2.25 l〇gl〇 CCID5 0/0.05毫升。於達到峰値之後，在兩細胞 系中的病毒產量都下降。也許，該病毒滴度的下降係因所 有細胞被感染且被感染所殺死所致。 在病毒負載與細胞存活率之間有良好的關聯性，其中 所有細胞死亡係伴隨著同時發生病毒滴度峰値或其後短暫 時刻。例如，對於SIAT細胞，無效對照組的病毒負載峰 値係在48小時處發生，且完全細胞死亡（0%細胞存活率 )也在48小時處發生；對於MDCK細胞，病毒負載峰値係 在48小時處發生，而完全細胞死亡係在72小時處發生。 用藥物以單劑形式處理在SIAT與MDCK兩細胞系中於 24小時處給出病毒負載的劑量相關性抑制。於24小時之時 點，每一藥物於單劑形式，高劑量下，相較於無效對照組 ，可在SIAT細胞中減少3— 4 logs的病毒負載且在MDCK細 胞中減少2 logs。對於所有三種藥物，呈單劑時，在24小 時之時點看到的抑制率都不能持續下去，且在後面的時點 可偵測到高病毒滴度。如此，沒有一種單劑處理法可成功 -45- 200904399 地完全抑制病毒複製，雖然在所有情況中’單劑處理可相 較於無效對照劑將病毒複製尖峰延後24至4 8小時。 單劑處理法的細胞存活率數據與病毒負載數據一致： 單劑處理能延後但不能抑制細胞死亡。於SI AT細胞中， 所有單劑組都在72小時處發生完全細胞死亡，相對於無效 對照組，高劑量的每種藥物都將細胞死亡延後24小時。於 MDCK細胞中，單劑處理相較於無效對照組將細胞死亡延 後最長48至72小時。就細胞存活性而論，最佳的單劑法爲 0.5微克/毫升劑量的金剛胺，其中感染後144小時之前都 未看到實質的細胞死亡。 組合投藥法也顯示出對病毒複製的劑量相關性抑制。 於S I AT細胞中，相較於無效對照組，低劑量組合組可將 尖峰病毒產生延後24小時，且中劑量組合組可將尖峰病毒 產生延後4 8小時。於兩組中，低劑量和中劑量分別達到 6.1和4.9 logl〇 CCID50/0.05毫升的相當高效價，雖於所有 測量時間，病毒負載與時間的相關性都增效地減低大於2-倍。不過，高劑量處理組可在長達感染後1 6 8小時的最後 時點將病毒產生完全抑制到不可偵測的水平。與病毒產生 的完全抑制一致者’高劑量組合組中的細胞也被完全保護 免於死亡長到感染後1 6 8小時之最後測量時點。於整個硏 究過程中，在此投藥法下SIAT和MDCK兩細胞系都有1〇〇 %存活率之事實下，可以判斷在所試高劑量下所有三種藥 物的組合都不具細胞毒性’且病毒產生的抑制係因組合中 該等藥物的增效性抗病毒效應所致，而非人爲細胞毒性的 -46- 200904399 後果。低和中劑量組合劑量確實可在SI AT細胞中分別延 後細細胞死亡24和96小時，且在MDCK細胞中分別延後72 和96小時。再者，於此等低病毒複製率下，三重組合可完 全壓制耐藥性的形成。 因此，三重組合可導致流感病毒生長速率和耐藥性之 增效性減低。更特定言之，在使用M2抑制劑（如金剛胺 )、神經胺酸苷酶抑制劑（如奧斯他偉、札那米韋）及複 製抑制劑（如，利巴韋林）之中，於0.15 - 1.5微克/毫升 金剛胺、0.0001— (KOI微克/毫升奧斯他偉、和0.6— 6微克 /毫升利巴韋林的濃度範圍內，對生長速率有大於2-倍的 增效性減低。 實施例2 :金剛胺、奧斯他偉、和利巴韋林的三重組合在 中空纖維系統中對野生型Η 3 N 2流感之影響 吾人設計此實驗，經由使用先前所述方法（Drusano et a 1., Antimicrob Agents Chemother (2002) 46: 464-470 )檢測金剛胺、奧斯他偉和利巴韋林的三重組合在中空纖 維模型中對病毒複製的·影響。單獨及組合的藥物係以穩態 濃度經由穩態連續注輸遞送1 68小時。槪述之，將1 〇8 MDCK細胞在中空纖維中生長且透過導入102經流感病毒感 染的細胞，施加於雙儲器中空纖維系統中的細胞培養基內 予以感染。使用野生型A/Albany ( H3N2 )株進行試驗。 培養物係經維持1 6 8小時。於τ=感染後2 4、4 8、7 2、9 6、 120、144和168小時處，從中空纖維取出樣品且滴定以測 -47- 200904399 定病毒滴度。於中空纖維的藥物側，執行1 2個獨立實驗以 測試表2中所示藥物組合與濃度。 表2 藥物 分組 金剛胺 (微克/毫升） 奧斯他偉 (毫微克/毫升） 利巴韋林 (微克/毫升） 1 0 0 0 2 0.1 3 1.0 4 1 5 10 6 0.5 7 5 8 0.1 1 0.5 9 0.1 10 5 10 1 1 0.5 11 1 10 0.5 12 1 10 5 在不同時點取出樣品以測定流感病毒的數目。得自不 同時點的病毒也用勝格氏法（Sanger method )予以定序 以測定N A、Η A、和M2等基因的序列。三重處理相較於單 藥物處理的序列變異性之減低證實三重處理可抑制對任何 種藥物的耐性突變株之產生。 金剛胺在低劑量下具有可忽視的影響而於高劑量下可 於4 8小時處使滴度有2 - 3 1 〇 g減低；奧斯他偉單獨地在高 劑量有〜1 log減低；且利巴韋林單獨地在低劑量下具有 可忽略的效應而在高劑量下於4 8小時處有〜3 1 〇 g減低。 -48- 200904399 所有三種藥物的組合在低劑量下於4 8小時處導致〜8 1 〇 g 的滴度減低，於病毒生長上有4 - 1 〇 g增效性減低。所有三 種藥物的組合在高劑量下，在所有時點都導致增效性且完 全的抑制作用（即，> 8 1 〇 g s )。三重組合因而在下列濃 度展現出增效性：金剛胺，0 _ 1 - 1微克/毫升；奧斯他偉 ，0.001— 0.01微克/毫升；及利巴韋林，0.5—5微克/毫升 。此等濃度係對應於約50 — 700毫克金剛胺、200 — 2500毫 克利巴韋林、和2 ·5 — 1 0毫克奧斯他偉之人類每日劑量。 此外，金剛胺和奧斯他偉的單一療法分組導致可察覺 的M2和NA抗藥性，而三重高劑量分組則不會。 實施例3 A :金剛胺、奧斯他偉和利巴韋林三重組合對小 鼠流感治療之效應 吾人設計此實驗來測定金剛胺、奧斯他偉、和利巴韋 林的三重組合在流感傳染小鼠模型中的效應。 將雌小鼠（17—18克）用氯胺酮（ketamine) (100 毫克/公斤）經由腹膜內（i.p.)注射予以麻醉。將裝有金 剛胺的Alzet滲透栗在病毒挑激前約1 2小時在小鼠背部中 經由皮下途徑以外科方式插置入。於感染時，再用氯胺酮 麻醉小鼠。用約2 X 1 0 4細胞培養物感染劑量（C C ID 5 〇 )的 A/Victoria3/75 ( H3N2 )病毒每小鼠於90-微升接種體積中 經由鼻內（i.n.)感染彼等。在感染前短暫時間用奧斯他 偉和利巴韋林給予第一次經口處理（經由灌食法），然後 繼續7連續日中每一次（12小時間隔）。有20隻經無效對 -49- 200904399 照劑處理的動物係經由經口灌食法接受水且初始爲丨2隻小 鼠每藥物處理組。將小鼠保持2 1天以觀察死亡情況，且每 隔一天以整組方式稱取重量。 金剛胺係用Alzet泵以3毫克/毫升或1〇毫克/毫升投予 ，分別遞送4毫克/公斤/天或13毫克/公斤/天；奧斯他偉係 以3 0毫克/公斤/天或10毫克/公斤/天經口灌食投予；且利 巴韋林係以7毫克/公斤/天或2 1毫克/公斤/天經口灌食投予 。諸藥物係以單一療法及6種可能的三重組合投予。 所有單一療法處理，除了 3毫克/毫升的金剛胺和7毫 克/公斤/天的利巴韋林之外，都可高度有效地對抗感染防 止死亡。於此等劑量下，到死亡的時間都明顯地增長，且 使用3毫克/毫升的金剛胺所得27%存活率（11隻中有3隻 存活）明顯不同於無效對照組。 所有組合療法都可有90 — 1 00 %防止死亡。此非意料 外者，其所根據的事實爲奧斯他偉單一療法本身就可在1 〇 和30毫克/公斤/天下提供92 — 1 00 %的存活效益，且於此 等有效劑量下的奧斯他偉爲所有該等組合的一成分。1 〇毫 克/毫升劑量的金剛胺同樣有92 %保護率，所以與此藥劑 的組合同樣係高度有效者。 3毫克/毫升的金剛胺和7毫克/公斤/天的利巴韋林足夠 使在此等組中死亡的小鼠顯示出死亡的延遲，此係不同於 無效對照組者。每一種化合物的其他劑量都具有高度保護 性。組合中所用的化合物顯示出的死亡型態類似於兩種劑 量的奧斯他偉或1 0毫克/毫升劑量的金剛胺。 -50- 200904399 所有三重組合服藥法都等於或優於所有單一療法服藥 法之事實可堆測出該三種藥物在所試劑量的組合中都沒有 诘抗性。若在任何該三種藥物之間有明顯拮抗性，則可預 料該三重組合會產生比單一療法更低的效力。 整體而言，存活數據無法用來評估經由組合地使用諸 藥物所達到的效益。不過，體重數據經證明可用來評估化 合物組合之效益。於無效對照組中，感染造成體重的嚴重 下降。感染期間的體重減損在10毫克/毫升金剛胺組中最 低’但在其他五個單一療法組中都有實質的重量減損（即 ，在3毫克/毫升金剛胺、1 0或3 0毫克/公斤/天的奧斯他偉 、及7或2 1毫克/公斤/天的利巴韋林）。使用對動物硏究 的UK/EU致死率準則（死亡=20%體重減損）’我們發現 1 〇毫克/公斤/天的奧斯他偉可保護4 0 %的小鼠’ 3毫克/毫 升的金剛胺保護1 0 %，而7毫克/公斤/天的利巴韋林保護〇 %。在以相同的藥物濃度三重組合地使用時’ 1 〇〇 %小鼠 受到保護。因爲1 0毫克/毫升的金剛胺作爲單一療法時就 具高度保護性，所以在單一療法與組合之間沒有大幅重量 差異，但仍有些差異有利於使組合成爲較優者。三重分組 中的耐藥性形成遠低於單一療法分組中所記錄者（0相對 於 2% )。 此等結果證明含金剛胺、奧斯他偉、和利巴韋林的三 重組合可對A型流感（H3 N2 )病毒感染的小鼠有效地提供 在效力和耐藥性上的效益。 -51 - 200904399 實施例3 B :金剛胺、奧斯他偉、和利巴韋林的三重組合對 小鼠流感治療上的效應 重複上述實驗，不同處在於直到小鼠被病毒感染24或 48小時’才開始治療，且採用下列藥物濃度：金剛胺、28 毫克/公斤/天；奧斯他偉、10毫克/公斤/天；和利巴韋林 、40毫克/公斤/天。 於感染24小時後起始治療的硏究中，到感染後第9天 ，金剛胺單一療法組和奧斯他偉單一療法組兩者都具有 100%死亡率（使用UK/EU死亡率準則）；利巴韋林單— 療法組具有2 〇 %存活率；且三重組合療法組具有9 〇 %存活 率。 於感染4 8小時後起始治療的硏究中，到第9天，所有 組都有超過2 0 %的重量減損。不過，三重組合療法組具有 約2 2 %的最低量重量減損；利巴韋林單—療法組具有約2 6 %重量減損；而金剛胺單一療法組和奧斯他偉單一療法組 分別都具有近乎3 5 %的重量減損。到第丨3天，所有治療組 都開始增加重量’但在三重組合療法組中的重量增加明顯 地爲較商者-於此組中的動物具有其原體重的約9 〇 %。相 較之下，在利巴韋林單一療法組中的動物爲其原體重之約 8 0 % ’而於奧斯他偉單一療法組和金剛胺單一療法組中的 動物則沒有比未治療對照組好（爲彼等原體重的約6 5 - 7 0 % )。 實施例4 :金剛胺、奧斯他偉和利巴韋林組合在燒瓶中培 -52- 200904399 養的H5N1感染MDCK細胞中的抗病毒活性之劑量反應硏究 吾人設計此實驗來評定金剛胺、奧斯他偉和利巴韋林 的組合在 A/Indonesia/05/2005 (H5N1)和 A/Vietnam/1204/2 004 ( H5N1 )病毒複製和耐藥性突變株 的產生之抑制中的抗病毒活性之劑量反應。該實驗的目標 爲展示出相較於無藥物的病毒負載之減低及組合療法相較 於單一療法的增效作用。 在96-孔板中以單層形成生長MDCK細胞。於T = 0時， 於細胞中添加150微升濃度爲20 TCID50/毫升之病毒。其 後不久，於諸孔中加入各50微升，單獨或組合的藥物，而 給出所示最後濃度。於單一療法中，藥物係於下列濃度下 試驗：金岡！1 胺，0.00 03 2 ' 0.001、0.0032、0.01、0.032、 0.1、0.32、1、3.2、10、32和100微克/毫升；奧斯他偉， 0.000 1 ' 0.0003 2、0.00 1、0.0032、0.0 1、0.032、0.1 和 0.32、1.0、3.2、10、32微克/毫升；及利巴韋林， 0.00032、0.001、0.0032、0.01、0.032、0.1、0.32、1、 3.2、10、32和100微克/毫升。每一種藥物以6種劑量在組 合中試驗：金剛胺，0、0.01、0.032、0.1、0.32、和 1.0 微克 /毫升；奧斯他偉，〇、0.00032、0.001、0.0032、 〇.〇1、0.032微克/毫升；及利巴韋林，0、0.032、0.1、 0.32、1和3.2微克/毫升。 於Τ = 7 2小時，將1 0 0微升取自二重複樣品每一孔的上 澄液合倂且冷凍供TCID 5 0分析所用。對剩餘細胞單層以 MTS染色檢定細胞存活性。 -53- 200904399 實施例5 :延長釋放性鹽酸金剛胺、利巴韋林和磷酸奧斯 他偉的套組 參照圖1 A，本發明泡殼包裝（1 0 )係配置成提供複 數列（12 )，每一列（12 )包括複數劑（1 4 )。於本實施 例中，有兩個這種列（1 2 )，每一列包括7劑，不過列或 劑的數目可合宜地變異。 每一劑包括複數種不同類型的劑型，彼等一起以類型 分組裝於每一列內的個別泡殼（20 )中而形成分列（丨8 ) 。第一類型的劑型（A )含有金剛胺，第二類型（b )含 利巴韋林，且第三類型（C )含奧斯他偉。對一所給劑的 不同類型劑型係以此方式分組在一起以幫助遵守所給之投 藥法。於此實施例中，單劑包括二種金剛胺膠囊（A )， 兩粒利巴韋林膠囊（B )和一粒奧斯他偉膠囊（C )，不 過每一劑中每一類型劑型的數目也可視需要而變異。圖 1 A中所示泡殼包裝係經配置用於7天期內每一種活性劑的 方便BID投藥所用。圖1B中所示泡殼包裝與圖1 A中所示者 相同，但奧斯他偉係QD投予。 此實施例的金剛胺膠囊（A )含有1 2 5毫克延長釋放 形式的鹽酸金剛胺（如根據USSN 11/285,905製備者）且 經分配在第一和第四分列（1 8 )的個別泡殻（20 )中，不 過每一膠囊可視需要裝著更多或更少的金剛胺或不同的金 剛胺鹽形式。 此實施例的利巴韋林膠囊（B)各裝有立即釋放形式 -54- 200904399 的 200 毫克利巴韋林；如 Ribavirin USP Capsules ( Schering )且係分配在第二和第五分列（18 )的每一泡殼 (20)中，不過每一膠囊可視需要裝更多或更少的利巴韋 林。 此實施例的奧斯他偉膠囊（C )各裝有75毫克奧斯他 偉，如 TAMIFLUTM( Roche Pharmaceuticals)且係分配在 第三和第六分列（1 8 )的個別泡殼（20 )內，不過每一膠 囊可視需裝更多或更少的奧斯他偉。 該泡殻包裝也包含說明書，指明每天二次的兩粒金剛 胺膠囊、兩粒利巴韋林膠囊和一粒奧斯他偉膠囊之典型成 人劑量。可理解的是，本實施例的泡殼包裝包含足供一週 投藥用的劑型，包括28粒各裝125毫克鹽酸金剛胺的膠囊 、28粒各裝200毫克利巴韋林的膠囊和14粒各裝75毫克磷 酸奧斯他偉的膠囊。如此，每日劑量的每一種活性劑之相 對百分比爲3 5重量％鹽酸金剛胺、5 5重量％利巴韋林和1 〇 重量％的磷酸奧斯他偉。 實施例6 :鹽酸金剛胺、利巴韋林和磷酸奧斯他偉的套組 配置類似實施例5泡殻包裝的泡殼包裝以提供包括三 分列（1 8 )的兩列（12 )，每列含七個泡殼（2 0 )。於第 —和第四分列（18)的每一泡殼（20)中包裝著二片劑或 二粒膠囊，各含1 0 0毫克立即釋放形式的鹽酸金剛胺（A )，如 Symmetrel™ ( Endo Pharmaceuticals 或 Novartis ) 。在第二和第五分列的每一泡殼（20)中包裝著兩粒各裝 -55- 200904399 200毫克立即釋放形式的利巴韋林之膠囊，如Ribavirin USP Capsules ( Schering)。在第三和第六分列的每一泡 殼（20 )中各裝一粒膠囊，內含75毫克奧斯他偉，如 Tamiflu™ ( Roche Pharmaceuticals)。該泡殼包裝也包括 說明書，指明每天二次的二粒金剛胺片劑或膠囊、兩粒利 巴韋林膠囊及一粒奧斯他偉膠囊之典型成人劑量。該泡殼 包裝含有足供一週投藥用的劑型。 實施例7 :延長釋放性鹽酸金剛胺和利巴韋林之套組 參照圖2，一根據本發明的不同泡殻包裝（3 0 )包括 兩列（32 )，每列含各有7個泡殻（40 )的兩分列（38 ) 以提供每列各7劑（3 4 )的兩列。每一劑（3 4 )包括兩種 不同的活性劑、金剛胺（A )和利巴韋林（B )，各包含 在不同個別類型的劑型中。每劑（3 4 )的每一劑型類型係 經分配在個別泡殼（40 )中。每一劑的金剛胺（A )和利 巴韋林（B )劑型都經分組在一起以幫助對投藥法的遵守 〇 於此實施例中，每劑（3 4 )包括兩粒金剛胺膠囊（A )和兩粒利巴韋林膠囊（B )。於第一和第三分列（3 8 ) 的每一泡殼（40)中包裝著兩粒膠囊（A)，各含125毫 克呈延長釋放形式的鹽酸金剛胺（根據USSN 11/285,905 製備者）。於第二和第四分列（38)的每一泡殼（40)中 包裝著兩粒膠囊（B)，各含2〇〇毫克立即釋放形式的利巴 早林’如 Ribavirin USP Capsules ( Schering)。 -56- 200904399 該泡殻包幫（30)也包括說明書，指示每天二次（ BID )各二粒延長釋放形式的金剛胺膠囊（a )和兩粒利 巴韋林膠囊（B)之典型成人劑量（34)。該泡殼包裝含 有足夠一週投藥用的劑型。該套組可與分開包裝的神經胺 酸苷酶抑制劑諸如奧斯他偉或札那米韋配合使用。所以， 隨意地，該說明書可包括另一說明指示每日一或二次配合 金剛胺和利巴韋林劑型共投予一粒含7 5毫克奧斯他偉的膠 囊，如 Tamiflu™ ( Roche Pharmaceuticals )(沒有顯示出 )。隨意地，可與該套組分閧地對患者提供奧斯他偉或札 那米韋作爲附加地處方藥物。 實施例8 :延長釋放形鹽酸金剛胺' 利巴韋林和奧斯他偉 的套組 參照圖3 A，供鹽酸金剛胺、利巴韋林和奧斯他偉組 合投予用的另一套組包括一泡殼包裝（5 0 )，其界定二列 (52 )泡殼，每一列（52 )包括各含7泡殼（60 )的二分 列（58 )，而界定每列7劑（54 )。諸列（52 )係用來將 每劑（5 4 )所需兩種不同類型的劑型（D、E )組合在一 起。每一劑（54 )包括複數個一種類型（D )的膠囊與一 粒另一類型（E)的膠囊。 於本實施例中，每劑有三粒一種類型（D )的膠囊， 不過可視需要使用更少或更多的此等膠囊。該等一種類型 (D )的膠囊包含利巴韋林和鹽酸金剛胺，其中鹽酸金剛 胺係經提供爲延長釋放調合物形式，且利巴韋林係立即釋 -57- 200904399 放性調合物，兩種調合物係經共封裝者。 另一類型（E )的膠囊包括奧斯他偉且與金剛胺-利巴 韋林膠囊（D )組合以幫助遵守所給的指示。視需要每劑 (54)可用一粒以上的另一類型（E)膠囊。本實施例的 泡殼包裝（5 0 )因而係經配置用於在7天期內的活性成分 BID投藥。圖3B中所示泡殼包裝除了奧斯他偉係經QD投藥 之外，與圖3A中所示者相同。 實施例9 :延長釋放性鹽酸金剛胺、利巴韋林和奧斯他偉 的套組 圖4示出根據本發明的一不同泡殼包裝（70)。該泡 殼包裝（7〇)界定兩列（72)泡殼（80)，其方式類似於 上面的實施例5 - 8。不過，於本實施例中，沒有分列，每 一列包括單行7個泡殼（8 0 )，每泡殼容納複數個全部都 是相同類型的劑型（F )，使得每一泡殼內都是形成單劑 (7 4 )的足夠劑型（F )。每一列（7 2 )因而提供7劑（7 4 )0 於此實施例中的每一劑型（F )包含延長釋放形式的 鹽酸金剛胺、利巴韋林和隨意的奧斯他偉。 泡殼包裝（7〇 )係經如此配置用於在7天期間BID投 服每一活性劑。此一套組可單獨使用，尤其是在劑型包含 金剛胺、利巴韋林和奧斯他偉時’或配合經分開包裝的神 經胺酸苷酶抑制劑’如奧斯他偉。 -58- 200904399 實施例1 〇 :用E R金剛胺、E R奧斯他偉和IR利巴韋林的組 合對病患的多重劑量安全性硏究 吾人設計表4中所述臨床硏究來測定金剛胺和奧斯他 偉的延長釋放組合調合物與IR利巴韋林共投予時的安全性 和藥物代謝動力學。 表4 目的 測定重複藥物劑量的安全性和藥物代謝動力學 劑量： 根據先前的單一漸增劑量(SAD)硏究選擇投藥量:如100毫克 金剛胺SR+75毫克奥斯他偉+400毫克利巴韋林,1〇〇毫克金 剛胺SR+75毫克奧斯他偉+600毫克利巴韋林，200毫克金剛 胺SR+75毫克奧斯他偉+400毫克利巴韋林,200毫克金剛胺 SR+75毫克奧斯他偉+600毫克利巴韋林，200毫克金剛胺 SR+150毫克奧斯他偉+600毫克利巴韋林，或200毫克金剛 胺SR+150毫克奧斯他偉+800毫克利巴韋林，QD 7天 同時對照組： 金剛胺IR或金剛胺IR+奧斯他偉IR(兩者都是根據製造商的 標示投藥） 途徑： 經口 對象群 經診斷有流感的男性或女性 結構： 4分組 硏究場所： TBD 盲蔽： 病患盲蔽 對象分配法： 等數的男性和女性隨機分在每一組且在諸組內等年齡分配 總樣本大小： 24個對象，每劑量分組6個 主要療效終點： 姐 y\ 不良事件： 每天監測至少兩次，對高劑量金剛胺或奧斯他偉報導過的行 爲、心血管和胃腸道的影響（包括暈眩、頭痛、迷茫、便秘 、高血壓、咳嗽、噁心、腹瀉、嘔吐）。 血液收集： 從硏究期間第一天，接著於硏究的其餘期間中每天2-4次以 導管採集 分析： 測量金剛胺、奧斯他偉、利巴韋林和潛在的其他生理參數， 不良事件之檢定 59 - 200904399 實施例1 1 ··靜脈內三重組合抗病毒藥物療法對於嚴重禽流 感的治療之安全性和效率-第2期臨床實驗 吾人設計此硏究用以：1 )評估靜脈內三重組合抗病 毒藥物療法（T C A D )在患有嚴重禽流感的病患之治療中 的安全性和耐受性’ 2 )經由在上和下呼吸道、胃腸道（ 糞便）、和血液（病毒血症）、鼻和喉之內以陰性反轉錄 酶-聚合酶鏈型反應（RT-PCR)偵測病毒核糖核酸（RNA )來評估在治療過程中TCAD的抗病毒效力之等級和程度 ;及3)經由焦磷酸定序（pyrosequencing (或等效法）評 估在治療過程中對TCAD的抗病毒藥物耐性之等級和程度 硏究大小：1 2個病患 包涵準則：1)年齡歲；2)發燒338.01 ; 3)至 少一種呼吸徵候：咳嗽、呼吸困難（呼吸短促）、及/或 候痛；4 )病情（發燒起始、呼吸徵候、或全身徵候）在 至少7天內開始；及5 )在病情起始時之前1 4天內具有經由 符合下列準則之一所定義的禽流感流行病風險跡象：（a )在對象村落或鄰居（2公里半徑之內）內有死鳥或病鳥 ;(b)對象具有直接的鳥或禽類接觸（健康或生病的鳥 或禽）；（c)對象與具有已知或疑似禽流感的某人有面 對面的接觸；或（d )對象可能在實驗室暴露於H5N 1病毒 〇 排除準則：1 )對鹽酸金剛胺、札那米韋、及/或利 -60- 200904399 巴韋林、及/或對此等藥物產品的任何成分有過敏性或嚴 重不耐性（由硏究員判斷）之歷史；及2)由硏究員用可 立即取得的資訊判定患者的臨床徵候有不同的解釋（即， 非流感）。 篩選準則：對下述樣品以定性RT-PCR檢驗H5，不過 起始TCAD療法的決定不取決於接到此等檢驗所得結果： 鼻抹片x2; 口咽（喉）抹片χ2;鼻咽抽吸物（NPA:於 ΝΡΑ爲對某些患者的強迫檢驗（obtrusive test)時，可刪 除NPA或可用鼻洗液取代NPA，由硏究員決定）；枝氣管 小泡灌洗液（B AL )或氣管內管抽吸物；血樣（用於病毒 血症、CBC、和血清化學）：及尿姙娠，2 1 2歲的女性。 TCAD投藥法：治療持續期爲最少5天，但由醫師根據 對每一個別病患的效益/風險評估可決定予以延長。5天 治療用的套組含有：1 ) 10管瓶，內裝〜4毫升100毫克/毫 升的金剛胺於有或無緩衝劑的水中；2 ) 1 0管瓶，內裝1 5 毫升的7 5毫克/毫升的利巴韋林，於有或無緩衝劑的水中 :和3 ) 10管瓶，內裝〜7毫升的10毫克/毫升之札那米韋 ，於有或無緩衝劑的水中或，替代札那米韋者，1 〇管瓶的 冷凍乾燥奧斯他偉。 用於治療時，從金剛胺管瓶抽取3 .3毫升於注射筒中 且注射到500毫升裝有0.9%或5%右旋糖/0.45%食鹽水之 注輸袋內，產生0.66毫克/毫升金剛胺濃度；注輸體積速 率經設定到40毫升/分鐘，導致26毫升/小時（ 63 0毫克/天 )之注輸劑量速率。從利巴韋林管瓶抽取1 3.5毫升到注射 -61 - 200904399 筒內且注射到500毫升食鹽水注輸袋內產生2.03毫克/毫升 之利巴韋林濃度；注輸體積速率經調定到4 0毫升/分鐘， 此導致84··6毫克/小時（2030毫克/天）之注輸劑量速率。 抽取6 _ 5鼋升札那米韋到一注射筒且注射到5 〇 〇毫升食鹽水 注輸袋內產生0_13毫克/毫升的札那米韋濃度；注輸體積 速率經調定在40毫升/分鐘，此導致5.3毫克/小時（127毫 克/天）的注輸劑量速率。取代札那米韋者，抽取5毫升水 到一注射筒內且注射到冷凍乾燥的奧斯他偉管瓶內以重組 該無菌粉末，產生46毫克/毫升的磷酸奧斯他偉濃度，注 射體積速率經調定到40毫升/分鐘，其導致18.4毫克/小時 (442毫克/天）之注輸劑量速率。於此等注輸速率下，需 要每1 2小時製備新的每一抗病毒劑袋。

安全性：監測不良事件。使用國家衛生硏究院（NIH )愛滋病部門（Division of AIDS )的成人和兒科不良事 件嚴重性評等用表（The NIH Division 〇f AIDS Table for

Grading the Severity of Adult and Pediatic Adverse

Events ) ( DAIDS AE評等表）來評定不良事件的嚴重性 〇 臨床評估：臨床評估包括：院內死亡率；治療過程內 臨床失敗的等級和程度[臨床失敗經定義爲死亡，嚴重氣 促（年齡3 12歲的呼吸率230; 6至12歲的呼吸率^40; 3 至ό歲的呼吸率245;i至3歲的呼吸率250);嚴重呼吸 困難（不能說出完整句子，或使用輔助呼吸肌）；動脈氧 氣飽和率’於室內空氣以透皮法測定爲<92 %，需要機械 -62- 200904399 通氣或入住ICU];患者的28天死亡率；患者的180天死亡 率；任何時間對患者施以機械通氣；對於患有禽流感的患 者之ICU入住數；對患者於任何時間發展出急性呼吸窘迫 徵候群（ARD S ) •，對於患者的住院治療持續期；徵候持 續期，如由到沒有發燒爲止，到沒有或最低徵候，到不需 減輕醫療，及到重獲正常活動等之時間所定義者。 病毒學終點：病毒學評估包括：由陰性RT-PCR對鼻 和喉抹片血液、NAL和BAL樣品中的病毒RNA評定所得療 程中的病毒負載和排出（shedding )之速率和程度；由焦 磷酸定序測定的金剛胺或札那米韋抗病毒藥物耐性的出現 速率和程度；及耐藥性突變株之基因鑑定。 【圖式簡單說明】 圖1A-4爲6種包含本發明不同具體實例的劑型之不同 個別泡殼包裝之平面圖。 圖5爲從實施例1B所述實驗產生的數據之增效量（ synergy volume)標繪圖。 【主要元件符號說明】 10，30，50，70:泡殼包裝 12，32，52，72 ：歹丨J 14， 34， 54， 74:齊!| 18，38，58:分歹 IJ 20， 40， 60， 80:泡殼 -63- 200904399 A :金剛胺膠囊 B :利巴韋林膠囊 C :奧斯他偉膠囊 -64

Claims (1)

1. 200904399 十、申請專利範圍 1. 一種用於治療或預防人類病患的流感之組成物， 該組成物包含：1 0 - 60重量百分比（重量％ )的金剛胺（ amantadine)和 30— 80 重量 ％ 的利巴韋林（ribavirin)， 其中該等重量百分比係以組成物中的活性劑之總重量爲基 準。 2 ·如申請專利範圍第1項之組成物，其進一步包含 0.5 — 30重量％的奧斯他偉（oseitamivir)。 3 _如申請專利範圍第丨項之組成物，其係呈經口投予 用的單位劑型。 4 .如申請專利範圍第3項之組成物，其包含2 5 _ 1 2 5 毫克的金剛胺和5 0 - 2 0 0毫克的利巴韋林。 5 ·如申請專利範圍第3項之組成物，其包含至少1 2 5 毫克呈延長釋放形式的金剛胺和少於20〇毫克的利巴韋林 〇 6.如申請專利範圍第5項之組成物，其中該金剛胺 係呈延長釋放形式。 1'如申請專利範圍第1項之組成物，其係呈裝在管 瓶中的冷凍乾燥粉末形式。 8 ·如申請專利範圍第丨項之組成物，其係呈裝在管 瓶中的無菌液體形式。 9. 一種第一種抗病毒劑、第二種抗病毒劑和第三種 抗病毒劑的組合用於製造供治療或預防病患之流感用之藥 劑的用途，該組合包括： -65- 200904399 a )選自金剛胺和金剛乙胺（rimantadine )所組成的 群組中之M2抑制劑； b )選自利巴韋林和韋拉米啶（viramidine )所組成的 群組中之RNA聚合酶抑制劑；和 c)選自奧斯他偉、殘酸奧斯他偉（oseltamivir carboxylate)、札那米韋（zanamivir)、和皮拉馬韋（ p e r a m i v i r )所組成的群組中之神經胺酸苷酶抑制劑（N A i )； 其中該第一種抗病毒劑、第二種抗病毒劑和第三種抗 病毒劑係同時地或分開地或依序地投予該病患。 10. 如申請專利範圍第9項之用途，其中該第一種抗 病毒劑和第二種抗病毒劑係以可使流感病毒對該組合的第 三種抗病毒劑的敏感性比該病毒對用於單一療法時的該第 三種抗病毒劑之敏感性增加至少2 -倍之量投予。 11. 如申請專利範圍第9項之用途，其中該等抗病毒 劑係經由選自經口、非經腸地、經吸入、和彼等的組合所 組成的群組中之方法投予。 12. 如申請專利範圍第9項之用途，其中該金剛胺係 以可維持在〇 3至1 . 5微克/毫升之間的血漿濃度至少4 8 連續小時之量投予該病患。 1 3 .如申請專利範圍第9項之用途，其中該金剛胺係 以200至500毫克/天的量非經腸地或經口地投予該病患 〇 1 4 _如申請專利fe圍第9項之用途，其中該金剛胺係 -66- 200904399 以延長釋放形式經口投予該病患。 15.如申請專利範圍第9項之用途，其中該流感病毒 對金剛胺或奧斯他偉的單一療法有抗性。 1 6. —種用於治療或預防病患的流感之套組，該套組 包含金剛胺和利巴韋林。 1 7 .如申請專利範圍第1 6項之套組，其係用於經口 治療或預防，該套組包含： 複數種劑型，該複數種劑型構成一或多劑’每一劑包 含治療或預防有效量的利巴韋林和金剛胺之組合。 1 8 .如申請專利範圍第1 6項之套組，其中該金剛胺 和利巴韋林係經調配成分開的劑型。 1 9 ·如申請專利範圍第1 6項之套組’其中該金剛胺 和利巴韋林係經共-調配成單一劑型。 2 0 .如申請專利範圔第1 6項之套組’其進一步包括 奧斯他偉。 -67-