TW200838502A - Triazole derivative - Google Patents

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200838502 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係基於發現具有有價值特性之新穎化合物之目 標’尤其彼等可用於製備藥物者。 本發明係關於與HSP90之抑制、調控及/或調節作用相關 之化合物，此外係關於包含此化合物之醫藥組合物，且係 關於該化合物用於治療與HSP9〇相關之疾病的用途。 【先前技術】 細胞中蛋白之正確摺疊及構形係由分子伴隨蛋白確保且 對於蛋白合成與降解之間的平衡調控而言至關重要。伴隨 蛋白對細胞之許多主要功能之調控而言為重要的，諸如細 胞增殖及細胞凋亡（Jolly及M〇rimoto，2000 ; Smith等人， 1998 ； Smith, 2001) 〇 熱休克蛋白（HSP) 組織之細胞對諸如熱、低氧、氧化應力或毒性物質（諸 如重金屬或醇）之外應力起反應，使稱為術語，，熱休克蛋白，， (HSP)之眾多伴隨蛋白活化。 HSP之活化保護細胞免受由該等應力因素引發之破壞， 加速生理學狀態之恢復且導致細胞對應力耐受之狀態。 除此初始發現的由HSP促進之對抗外應力之保護機制 外’其他重要伴隨蛋白功能亦已描述於個別^81>在正常無 應力條件下之時間過程中。因此，各種HSp調控（例如）細 胞之眾多生物重要蛋白的正確摺疊、胞内定位及功能或受 調控降解。 127120.doc 200838502 HSP形成一個基因家族，其中個別基因產物之細胞表 現、功能及定位在不同細胞中不同。該家族之命名及分類 係基於其分子量而進行，例如HSP27、HSP70及HSP90。 一些人類疾病係基於錯誤蛋白摺疊（參見（例如）Tytell等 人，2001 ; Smith等人，1998之綜述）。與伴隨蛋白依賴性 蛋白摺疊之機制吻合的療法研發因此可適用於該等狀況 下。舉例而言，錯誤摺疊之蛋白導致在阿茲海默症 (Alzheimer's disease)、朊病毒症或亨廷頓症候群（Himtington’s syndrome)狀況中神經退化性進展之蛋白聚集。錯誤蛋白 摺疊亦可導致喪失野生型功能，此可具有錯誤調控分子及 生理學功能之結果。 HSP在腫瘤疾病中亦具有較大重要性。舉例而言，存在 某些HSP關係之表現與腫瘤進展階段相關之指示（Martin等 人，2000 ; Conroy 等人，1996 ; Kawanishi 等人，1999 ; Jameel 等人，1992 ; Hoang 等人，2000 ; Lebeau 等人， 1991) 〇 HSP90在細胞中及某些具有抑癌活性標靶HSP90之天然 產物的眾多主要致癌信號轉導路徑中起作用之事實已產生 如下概念：HSP90之功能抑制在腫瘤疾病治療中將為明智 的。HSP90抑制劑17-烯丙基胺基-17-去甲氧基格爾德黴素 (17AAG)(格爾德黴素（geldanamycin)衍生物）目前正經歷臨 床試驗。 HSP90 HSP90代表約1-2%總細胞蛋白質量。其一般在細胞内為 127120.doc 200838502 二聚體形式且與蛋白多樣性有關，稱作輔助伴隨蛋白（參 見（例如）Pratt，1997)。HSP90對細胞生命力而言必不可少 (Young等人，2001)，且藉由與許多天然摺疊已由外應力 (諸如，熱休克）修飾之蛋白相互作用而在對細胞應力之反 應中起關鍵作用，從而儲存原始摺疊或防止蛋白聚集 (Smith等人，1998)。 亦表明由突變引起之錯誤蛋白摺疊之校正推測，HSP90 作為針對突變作用之緩衝劑具有重要性（Rutherford及 Lindquist，1998)。此外，HSP90亦具有調控重要性。在生 理學條件下，HSP90以及其内質網同系物GRP94在確保各 種關鍵客戶蛋白之構形穩定性及成熟的細胞平衡中起作 用。此等可分為三組：類固醇激素之受體，Ser/Thr或酪胺 酸激酶（例如ERBB2、RAF-1、CDK4及LCK)及多種蛋白之 集合（諸如突變p53或端粒酶hTERT之催化子單元）。此等蛋 白中之每一者在細胞之生理學及生化過程之調控中起關鍵 作用。人體内之保留HSP90家族由四種基因組成，即胞質 HSP90oc、誘導性HSP90p同功異型物（Hickey等人， 1989)、内質網中之GRP94(Argon等人，1999)及粒線體基 質中之HSP75/TRAP1 (Felts等人，2000)。假定該家族之所 有成員具有類似作用模式，但視其在細胞内之定位而與不 同客戶蛋白結合。舉例而言，ERBB2為GRP94之特異性客 戶蛋白（Argon等人，1999)，同時已發現腫瘤壞死因子之1 型受體（TNFR1)或視網膜母細胞瘤蛋白（Rb)為TRAP1之客 戶（Song等人，1995 ; Chen等人，1996)。 127120.doc 200838502 HSP90涉及大量客戶蛋白及調控蛋白之眾多複雜相互作 用（Smith，2001)。儘管尚未闡明精確分子細節，但近年來 藉助於X光結晶學之生化實驗及研究已愈加能夠譯解 HSP90之伴隨蛋白功能的細節（Prodromoii等人，1997 ; Stebbins等人，1997)。因此，HSP90為一種ATP依賴性分 子伴隨蛋白（Prodromoii等人，1997)，其中二聚作用對ATP 水解而言為重要的。ATP之結合導致環形二聚體結構之形 成，其中兩個N末端結構域彼此緊密接觸且在構形中起開 關作用（Prodromou及 Pearl，2000)。 已知HSP90抑制劑 待發現之第一類HSP90抑制劑為苯醌安莎黴素 (ansamycin)及化合物除莠黴素A(herbimycin A)及格爾德黴 素（geldanamycin)。最初，對其摘測到由v-Src致癌基因之 轉型作用引發之纖維母細胞中之惡性表型的反轉（Uehara 等人，1985)。 隨後，在動物模型内活體外（Schulte等人，1998)及活體 内（Supko等人，1995)證明有強抗腫瘤活性。 接著，免疫沈澱及對親和基質之研究展示格爾德黴素作 用之主要機制涉及與HSP90結合（Whitesell等人，1994 ; Schulte及Neckers，1998)。此外，X光結晶學研究已展示格 爾德黴素為ATP結合部位而競爭且抑制118?90之固有 ATPase 活性（Prodromoii 等人，1997 ; Panaretou 等人， 1998)。藉此防止多聚體HSP90錯合物之形成，其特性為充 當客戶蛋白之伴隨蛋白。因此，客戶蛋白經泛素蛋白酶體 127120.doc 200838502 路徑降解。 格爾德黴素衍生物17-烯丙基胺基_17-去甲氧基格爾德黴 素（17AAG)在HSP90抑制、客戶蛋白之降解及細胞培養及 異種移植腫瘤模型中之抗腫瘤活性中展示不變之特性 (Schulte等人，1998 ; Kelland等人，1999)，但比格爾德黴 素具有顯著低之肝細胞毒性（Page等人，1997)。17AAG目 ^ 前正經歷I/II期臨床試驗。 根赤殼菌素（Radicicol)(—種巨環抗生素）同樣展示V-Src ⑩ 及v-Ha_Ras引發之纖維母細胞惡性表型的反轉（Kwon等 人，1992 ; Zhao等人，1995)。根赤殼菌素因HSP90抑制而 使大量信號蛋白降解（Schulte等人，1998)。X光結晶學研 究已展示根赤殼菌素同樣與HSP90之N末端結構域結合且 抑制固有ATPase活性（Roe等人，1998)。 如已知，香豆素型抗生素在細菌中與HSP90同系DNA旋 轉酶之ATP結合部位結合。香豆素、新生黴素（Novobiocin) 0 與HSP90之羧基末端結合，亦即與不同於苯醌安莎黴素及 根赤殼菌素（其與HSP90之N末端結合）之HSP90部位結合 (Marcu等人，2000b)。 • 新生黴素對HSP90之抑制導致大量HSP90依賴性信號蛋 . 白降解（Marcu等人，2000a)。 證明例如ERBB2之信號蛋白之降解使用衍生自嘌呤之 HSP90抑制劑PU3。PU3引起乳癌細胞株之細胞週期停滯及 分化（Chiosis等人，2001)。 作為治療標靶之HSP90 127120.doc -10- 200838502 由於HSP90參與大量信號轉導路徑之調控（其對腫瘤表型 具有至關重要性）且發現某些天然產物經HSP90之活性抑制 發揮其生物作用，因此HSP90目前測試為腫瘤治療劑研發 之新穎標靶（Neckers等人，1999)。 格爾德黴素、17AAG及根赤殼菌素之主要作用機制包括 抑制ATP與ATP結合部位在蛋白N末端之結合及HSP90之固 有ATPase活性的所得抑制（參見（例如）Prodromoii等人， 1997 ; Stebbins 等人，1997 ; Panaretou 等人，1998) 〇 HSP90之ATPase活性抑制防止輔助伴隨蛋白的募集且有利 於形成HSP90雜絡物，此使客戶蛋白經由泛素-蛋白酶體路 徑經歷降解（參見（例如）Neckers等人，1999 ; Kelland等 人，1999)。以HSP90抑制劑處理腫瘤細胞導致對諸如細胞 增殖、細胞週期調控及細胞凋亡之過程具有基本重要性的 重要蛋白的選擇性降解。此等過程通常在腫瘤中解除（參 見（例如）Hostein等人，2001)。HSP90抑制劑研發值得關注 的基本原理為可藉由複數種與經轉型表型有關的蛋白之同 時降級達成強腫瘤治療作用。 詳言之，本發明係關於一種抑制、調控及/或調節HSP90 之化合物，係關於包含此化合物之組合物，且係關於將其 用於治療HSP90引發之疾病的方法，該等疾病諸如腫瘤疾 病、病毒疾病（諸如B型肝炎（Waxman，2002));移植之免疫 抑制（Bijlmakers，2000及Yorgin，2000);發炎引發之疾病 (Bucci，2000)，諸如類風濕性關節炎、哮喘、多發性硬 化、1型糖尿病、紅斑性狼瘡症、牛皮癣及發炎性腸病； 127120.doc -11. 200838502 囊腫性纖維化（Fuller，2000) ’·與血管生成有關之疾病 2002及Kurebayashi，2001)，諸如糖尿病性視網膜病變、血 管瘤、子宮内膜異位症及腫瘤血管生成；傳染病；自體免 疫疾病，·局部缺血；促進神經再生（R〇sen等人，w〇

02/09696 ; Degranco 等人，WO 99/51223 ; Gold，US 6,210,974 Bl);致纖維化疾病，諸如硬皮症、多發性肌 炎、全身性狼瘡症、肝硬化、瘢痕瘤形成、間質性腎炎及 肺纖維化（Strehlow，WO 02/02123)。本發明亦係關於本發 明化合物用於保護正常細胞免於化學療法引起之毒性的用 途，且係關於在錯誤蛋白摺疊或聚集為主要誘因之疾病中 的用途，該等疾病諸如綿羊癢病、庫賈氏病（Creutzfeldt_ Jakob disease)、亨廷頓症或阿茲海默症（siuler，Hum. M〇1

Genet” 10，1307，2001 ; Tratzelt等人，？1*0(：.心1八。&(1·

Sci·，92, 2944, 1995 ; Winklhofer等人，J· Biol· Chem·， 276, 45160, 2001)。WO 01/72779描述嘌呤化合物及其用於 冶療GRP94(HSP90之同系物或旁系同源物）引發之疾病（諸 如腫瘤疾病）的用途，其中癌症組織包括選自由以下癌症 組成之群的肉瘤或癌瘤：纖維肉瘤、黏液肉瘤、脂肉瘤、 軟骨肉瘤、骨肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、内皮肉瘤、淋巴 管肉瘤、淋巴管内皮瘤、滑膜瘤、間皮瘤、尤因氏瘤 (Ewing’s tumour)、平滑肌瘤、橫紋肌肉瘤、結腸癌、胰腺 癌、乳癌、卵巢癌、前列腺癌、鱗狀細胞癌、基底細胞 癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭狀癌、乳頭狀腺癌、 囊腺癌、骨髓癌、支氣管癌、腎細胞癌、肝癌、膽管癌、 127120.doc -12- 200838502 賊膜癌、精原細胞瘤、胚胎癌、威姆氏瘤（Wilm，s tumour)、子宮頸癌、睾丸瘤、肺癌、小細胞肺癌、膀胱 癌、上皮癌、膠質瘤、星形細胞瘤、神經管胚細胞瘤、顱 咽管瘤、室管膜瘤、松果體瘤、血管母細胞瘤、聽神經 瘤、少枝膠質瘤、腦膜瘤、黑素瘤、神經母細胞瘤、視網 膜胚細胞瘤、白血病、淋巴瘤、多發性骨髓瘤、瓦爾登斯 特倫巨球蛋白血症（Waldenstr6m，s macroglobulinaemia)及 重鏈疾病。 A· Kamal 等人在 Trends in Molecular Medicine，第 1〇 卷’第6期，2004年6月中描述HSP90活化之治療及診斷應 用’尤其用於治療中樞神經系統疾病及心血管疾病。 特異性抑制、調控及/或調節HSP9〇之小化合物的鑑別因 此為所要的且為本發明之一目標。 已發現5-[4-(2-曱基苯基羥基-4H-1，2,4-噻唑-5-基> 2,4-二羥基-N-曱 基—N—丁基苯甲醯胺及其鹽具有極有價值 的藥理學特性，同時係良好耐受的。詳言之，其展示 HSP90抑制特性。 本發明因此係關於在該等疾病之治療及/或預防中作為 藥物及/或藥物活性成份之5-[4_(入甲基苯基）·3•羥基·4h_ 1，2,4-三唑-5-基]_2,4-二羥基_N_甲基_N-丁基苯曱醯胺，且 係關於5·[4-(2-甲基苯基）·3_羥基_4H-1，2,4_三唑_5_基]·2，‘ 二羥基·Ν-甲基-N•丁基苯曱醯胺用於製備供治療及/或預防 該等疾病用之藥物的用途，且亦係關於一種用於治療該等 疾病之方法’其包含將5-[4_(2_曱基笨基）_3_羥基-4仏 127120.doc -13- 200838502 1，2,4-三唑-5-基]-2,4-二羥基-N-曱基-N-丁基苯曱醯胺投與 需要該投與之患者。 該主體或患者可屬於任何哺乳動物種類，例如靈長類， 尤其為人類；齧齒類，包括小鼠、大鼠及倉鼠；兔；馬、 牛、犬、貓等。因實驗研究而關注動物模型，其中其提供 治療人類疾病之模型。 先前技術 WO 2006/087077描述作為HSP90抑制劑之其他三唑衍生 物。應認為本發明係其選擇性發明。由此應提及之最接近 先前技術為化合物5-[4-(2-甲基苯基）-3-羥基-4H-1，2,4-三 唑-5-基]-2,4-二羥基-N-甲基-N-丙基苯甲醯胺（ΠΑ47Π)。 WO 00/53 169描述以香豆素或香豆素衍生物進行HSP90 抑制。 WO 03/041643 Α2描述HSP90抑制性玉米赤黴醇衍生 物。 在3-位或5-位經芳族基團取代之HSP90抑制性吡唑衍生 物揭示於 WO 2004/050087 Α1 及 WO 2004/056782 Α1 中。 WO 03/055860 Α1描述作為HSP90抑制劑之3,4·二芳基吡 σ坐 〇 具有HSP90抑制特性之嘌呤衍生物揭示於WO 02/36075 Α2中。 WO 01/72779描述嘌呤化合物及其用於治療GRP94 (HSP90之同系物或旁系同源物）引發之疾病（諸如腫瘤疾病） 的用途，其中癌症組織包括選自由以下癌症組成之群的肉 127120.doc •14- 200838502 瘤或癌瘤：纖維肉瘤、黏液肉瘤、脂肉瘤、軟骨肉瘤、骨 肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、内皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴 官内皮瘤、滑膜瘤、間皮瘤、尤因氏瘤、平滑肌瘤、橫紋 肌肉瘤、結腸癌'胰腺癌、乳癌、卵巢癌、前列腺癌、鱗 • 狀細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭 狀癌、乳頭狀腺癌、囊腺癌、骨髓癌、支氣管癌、腎細胞 癌、肝癌、膽管癌、絨膜癌、精原細胞瘤、胚胎癌、威姆 _ 氏瘤、子宮頸癌、睾丸瘤、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、 上皮癌膠貝瘤、星形細胞瘤、神經管胚細胞瘤、顧咽管 至$膜瘤、松果體瘤、血·管母細胞瘤、聽神經瘤、少 枝膠貝瘤、腦膜瘤、黑素瘤、神經母細胞瘤、視網膜胚細 胞瘤、白血病、淋巴瘤、多發性骨髓瘤、瓦爾登斯特倫巨 球蛋白血症及重鏈疾病。 WO 01/72779另外揭示其中所提及之化合物用於治療病 毒疾病之用途，其中病毒病原體係選自由以下各病原體組 • 成之群：A型肝炎、㈣肝炎、C型肝炎、流感、水痘、腺 病毒、第一型單純疱疹（HSVq)、第二型單純疱疹（hsv_ )牛疫鼻病毒、埃可病毒（echovirus)、輪狀病毒 (rotav_)、呼吸道融合性病毒（RSV)、乳頭瘤病毒、腫瘍 • 病毋、巨細胞病毒、艾奎諾病毒（equin〇virus)、節足動物 攜帶性病、亨特病毒（huntavinis)、科沙奇病毒如 ^)、月思腺炎病毒、麻療病毒、風療病#、小兒麻痒病 毒、人免疫缺陷病毒1型洱以屮及人免疫缺陷病毒^型 (鮮⑴。W〇 01/72779此外描述其中提及之化合物用於 127120.doc -15· 200838502 GRP94調即之用途，其中經調節生物GRP94活性引起個體 内之免疫反應、蛋白自内質網之輸送、自低氧/缺氧應力 m自營養不良之恢復、自熱應力之恢復或其組合， 及/或’、中該病症為一定類型之癌症、傳染病、與經破壞 蛋白自内f網之輸送有關之病症、與局部缺血/再灌注有 關之病症’或其組合，纟中與局部缺血/再灌注有關之病 症為心跳驟停、心博停止及延遲心室心律不整、心臟手 術、心肺繞道手術、器官移植、脊髓損傷、頭部外傷、中 風、栓塞性中風、出血性中a、腦血管痙攣、張力減退、 低血糖、癲癇持續狀態、癲癇發作、焦慮、精神分裂症、 神經退化性病症、阿兹海默症、亨廷頓氏病、肌萎縮性側 索硬化（ALS)或新生應力所引起之結果。 最後，WO 01/72779描述有效量iGRP94蛋白調節劑在 製備用以在個體組織部位中改變隨後至缺血狀態之細胞反 應之藥物中的用途’藉由以GRP94蛋白調節劑處理組織部 位之細胞從而使細胞内GRP94活性增加至隨後至缺血狀態 之細胞反應得以改變的程度，其中隨後缺血狀況較佳為心 跳驟停、心博停止及延遲心室心律不整、心臟手術、心肺 繞道手術、器官移植、脊髓損傷、頭部外傷、中風、栓塞 性中風、出血性中風、腦血管痙攣、張力減退、低血糖、 癲癇持續狀態、癲癇發作、焦慮、精神分裂症、神經退化 性病症、阿兹海默症、亨廷頓氏病、肌萎縮性側索硬化 (ALS)或新生應力所引起之結果，或其中組織部位為移植 之供體組織。 127120.doc -16 - 200838502 以下提及之說明書描述HSP90抑制劑格爾德黴素與其他 藥物活性成份之組合·· WO 2004/108080 A2、WO 2005/002506 A2 > WO 2005/000211 A2 > WO 2005/000212 A2、WO 2005/000213 A2、WO 2005/000214 A2、WO 2005/000314 A1 〇 其他文獻：

Argon Y及 Simen BB. 1999 ”Grp94，an ER chaperone with protein and peptide binding properties’’，Semin. Cell Dev. Biol·，第 10卷，第 495-505 頁。

Bijlmakers M-JJE, Marsh M. 2000 ,fHsp90 is essential for the synthesis and subsequent membrane association, but not the maintenance, of the Src-kinase p561ck”，Mol. Biol. Cell，第 11 卷（5)，第 1585-1595 頁。

Bucci M; Roviezzo F; Cicala C; Sessa WC, Cirino G. 2000 ’’Geldanamycin，an inhibitor of heat shock protein 90 (Hsp90) mediated signal transduction has anti-inflammatory effects and interacts with glucocorticoid receptor in vivo’’， Brit. J· Pharmacol·，第 131 卷（1)，第 13-16 頁。

Carreras CW、Schirmer A、Zhong Z、Santi VS. 2003 "Filter binding assay for the geldanamycin-heat shock protein 90 interaction’’，Analytical Bio-chem.，第 317卷， 第40-46頁。

Chen C-F、Chen Y、Dai KD、Chen P-L、Riley DJ及 Lee W-H. 1996 f,A new member of the hsp90 family of 127120.doc -17- 200838502 molecular chaperones interacts with the retinoblastoma protein during mitosis and after heat shock11, MoL Cell. Biol.，第 16卷，第 4691-4699 頁。

Chiosis G、Timaul MN、Lucas B、Munster PN、Zheng FF、Sepp-Lozenzino L及 Rosen N. 2001 "A small molecule designed to bind to the adenine nucleotide pocket of HSP90 causes Her2 degradation and the growth arrest and differentiation of breast cancer cells’’，Chem. Biol.，第 8 卷，第289-299頁。

Chiosis G5 Lucas B3 Shtil A, Huezo H5 Rosen N 2002 "Development of a purine-scaffold novel class of HSP90 binders that inhibit the proliferation of cancer cells and induce the degradation of her2 tyrosine kinase’’· Bio-organic Med. Chem•，第 10卷，第 3555-3564 頁。

Conroy SE及 Latchman DS. 1996 ’’Do heat shock proteins have a role in breast cancer?"，Brit· J. Cancer，第 74卷，第 717-721 頁。

Felts SJ、Owen BAL、Nguyen P、Trepel J、Donner DB 及 Toft DO. 2000 f,The HSP90-related protein TRAP1 is a mitochondrial protein with distinct functional properties’’， J. Biol. Chem.，第 5卷，第 33 05-33 1 2頁。

Fuller W、Cuthbert AW. 2000 n Post-translational disruption of the delta F5 08 cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR)-mole-cular Chaperone 127120.doc -18 - 200838502 complex with geldanamycin stabilises delta F508 CFTR in the rabbit reticulocyte lysate"，J. Biol· Chem.，第 275 卷 (48)，第 37462-37468頁。

Hickey E、Brandon SE、Smale G、Lloyd D及 Weber LA. 1999 HSequence and regulation of a gene encoding a human 89-kilodalton heat shock protein"，Mol. Cell· Biol·，第 9 卷，第 2615-2626頁。

Hoang AT、Huang J、Rudra-Gonguly N、Zheng J、 Powell WC、Rabindron SK、Wu C及 Roy-Burman P. 2000 ’’A novel association between the human heat shock transcription factor 1 (HSF1) and prostate adenocarcinoma， Am· J. Pathol·，第 156卷，第 857-864 頁。

Hostein I、Robertson D、Di Stefano F、Workman P及

Clarke PA. 2001 "Inhibition of signal transduction by the HSP90 inhibitor 17-allylamino-1 7-demethoxygeldanamycin results in cytostasis and apoptosis"，Cancer Res.，第 61 卷，第 4003-4009 頁。

Hur E、Kim H-H、Choi SM、Kim JH、Yim S、Kwon HJ 、 Choi Y 、 Kim DK 、 Lee M-0 、 Park H. 2002 "Reduction of hypoxia-induced transcription through the repression of hypoxia-inducible factor-1 α/aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator DNA binding by the 90-kDa heat-shock protein inhibitor radicicol"，Mol· Pharmacol.， 第 62卷（5)，第 975-982 頁。 127120.doc -19- 200838502

Jameel A、Skilton RA、Campbell ΤΑ、ChanderSK、 Coombes RC 及 Luqmani YA. 1992 ’’Clinical Jolly C and Morimoto Rl. 2000 !lRole of the heat shock response and molecular chaperones in oncogenesis and cell death’、J. Natl. Cancer Inst•，第 92卷，第 1564_1572 頁。

Kawanishi K、Shiozaki Η、Doki Y、Sakita I、Inoue M、Yano M、Tsujinata T、Shamma A及 Monden M. 1999 ’’Prognostic significance of heat shock proteins 27 and 70 in patients with squamous cell carcinoma of the esophagus’’， Cancer，第 85卷，第 1649-1657 頁。

Kelland LR、Abel G、McKeage MJ、Jones Μ、Goddard PM 、 Valenti M 、Murrer BA 及 Harrap KR. 1993 ’’Preclinical antitumour evaluation of bis-acetalo-amino-d i chi or o-cyclo hexyl amine platinum (IV): an orally active platinum drug"，Cancer Research，第 53卷，第 2581 - 2586 頁。

Kelland LR、Sharp SY、Rogers PM、Myers TG 及 Workman P. 1999 ’’DT-diaphorase expression and tumor cell sensitivity to 17-allylamino，17-demethoxygeldanamycin，an inhibitor of heat shock protein 90”，J. Natl. Cancer Inst.， 第 91卷，第 1940-1949 頁。

Kurebayashi J、Otsuki T、Kurosumi M、Soga S、 Akinaga S、Sonoo， H. 2001 ’’A radicicol derivative， KF5 83 33, inhibits expression of hypoxia-inducible factor- 127120.doc -20- 200838502 la and vascular endothelial growth factor, angiogenesis and growth of human breast cancer xenografts'1, Jap. J. Cancer Res.，第 92卷（12)，1342-1351。

Kwon HJ、Yoshida Μ、Abe K、Horinouchi S及 Bepple T. 1992 ’’Radicicol，an agent inducing the reversal of transformed phentoype of src-trans-formed fibroblasts， Biosci·，Biotechnol·，Biochem·，第 56卷，第 538-539 頁。

Lebeau J? Le Cholony C? Prosperi MT and Goubin G. 1991 ’’Constitutive overexpression of 89 kDa heat shock protein gene in the HBL100 mam- mary cell line converted to a tumorigenic phenotype by the EJE24 Harvey-ras oncogene1’，Oncogene，第 6卷，第 1125-1 132 頁。

Marcu MG、Chadli A、Bouhouche I、Catelli Μ 及 Neckers L. 2000a flThe heat shock protein 90 antagonist novobiocin interacts with a previously unrecognised ATP-binding domain in the carboxyl terminus of the chaper-onen, J. Biol. Chern.，第 275卷，第 37181-37186頁。

Marcu MG、Schulte TW及Neckers L. 2000b ’’Novobiocin and related coumarins and depletion of heat shock protein 90-dependent signaling proteins11, J. Natl. Cancer Inst. ^ 第 92卷，第 242-248 頁。

Martin KJ、Kritzman BM、Price LM、Koh B、Kwan CP、Zhang X、MacKay A、0*Hare MJ、Kaelin CM、 Mutter GL、Pardee AB 及 Sager R. 2000 "Linking gene 127120.doc -21- 200838502 expression patterns to therapeutic groups in breast cancer11, Cancer Res·，第 60卷，第 2232-2238 頁。

Neckers L、Schulte TW 及 Momnaaugh E. 1999 "Geldanamycin as a potential anti-cancer agent: its molecular target and biochemical activity"，Invest. New Dmqs，第 17卷，第 361-373 頁。

Page J、Heath J、Fulton R、Yalkowsky E、Tabibi E、 Tomaszewski J、Smith A及 Rodman L. 1997 "Comparison of geldanamycin (NSC-122750) and 17- ally 1 amino geldanamycin (NSC-330507D) toxicity in rats,’， Proc. Am. Assoc. Cancer Res.，第 38卷，第 308 頁。

Panaretou B、Prodromou C、Roe SM、OBrien R、 Ladbury JE、Piper PW 及 Pearl LH. 1998 ’’ATP binding and hydrolysis are essential to the function of the HSP90 molecular chaperone in vivo”，EMBO J·，第 17卷，第 4829-4836 頁。

Pratt WB. 1997 !fThe role of the HSP90-based chaperone system in signal transduction by nuclear receptors and receptors signalling via MAP kinase”， Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol·，第 37卷，第 297-326 頁。

Prodromou C、Roe SM、O’Brien R、Ladbury JE、Piper PW 及 Pearl LH. 1997 "Identification and structural characterisation of the ATP/ADP-binding site in the HSP90 molecular chaperone' Cell，第 90卷，第 65-75 頁。 127120.doc -22- 200838502

Prodromou C、Panaretou B、Chohan S、Siligardi G、 O’Brien R、Ladbury JE、Roe SM、Piper PW及 Pearl LH. 2000 ’’The ATPase cycle of HSP90 drives a molecular "clamp" via transient dimerisation of the N-terminal domains”，EMBO J·，第 19卷，第 4383-4392頁。

Roe SM、Prodromou C、O’Brien R、Ladbury JE、Piper PW及 Pearl LH· 1999 "Structural basis for inhibition of the

HSP90 molecular chaperone by the antitumour antibiotics radicicol and geldanamycin’’，J. Med. Chem.，第 42卷，第 260-266頁。

Rutherford SL及 Lindquist S_ 1998 "HSP90 as a capacitor for morphological evolution. Nature，第 396卷，第 336-342 頁。

Schulte TW、Akinaga S、Murakata T、Agatsuma T、 Sugimoto S、Nakano H、Lee YS、Simen BB、Argon Y、 Felts S、Toft DO、Neckers LM 及 Sharma SV. 1999 "Interaction of radicicol with members of the heat shock protein 90 family of molecular chaperones"， Mol. Endocrinoloqy，第 13卷，第 1435-1448 頁。

Schulte TW ^ Akinaga S ^ Soga S ^ Sullivan W ^ Sensgard B、Toft D 及 Neckers LM. 1998 "Antibiotic radicicol binds to the N-terminal domain of HSP90 and shares important biologic activities with geldanamcyin’’， Cell Stress and Chaperones 5 第 3 卷，第 100-108 頁 〇 127120.doc -23- 200838502

Schulte TW 及 Neckers LM. 1998 "The benzoquinone ansamycin 17-allylamino -17-demethoxygeldanamcyin binds to HSP90 and shares important biologic activities with geldanamycin”，Cancer Chemother. Pharmacol. 5 第 42卷， 第 273-279頁。

Smith DF. 2001 "Chaperones in signal transduction”，in: Molecular chaperones in the cell (P Lund，編.；Oxford University Press，Oxford and NY)，第 165-178 頁。

Smith DF、Whitesell L及 Katsanis E. 1998 "Molecular chaperones: Biology and prospects for pharmacological intervention丨丨，Pharmacological Reviews，第 50卷，% 493- 513 頁。

Song HY、Dunbar JD、Zhang YX、Guo D及 Donner DB. 1995 ’’Identification of a protein with homology to hsp90 that binds the type 1 tumour necrosis factor receptor’*，J. Biol· Chem.，第 270卷，第 3574-3581 頁。

Stebbins CE、Russo A、Schneider C、Rosen N、Hartl FU &PavletichNP.1997’’CrystalstructureofanHSP90-geldanamcyin complex: targeting of a protein chaperone by an antitumor agent"，Cell，第 89卷，第 239-250頁 〇

Supko JG、Hickman RL、Grever MR及 Malspeis L. 1995 ’’Preclinical pharmacologic evaluation of geldanamycin as an antitumour agent’’，Cancer Chemother. Pharmacol.，第 36 卷，第305-315頁。 127120.doc -24- 200838502

Tytell Μ及 Hooper PL. 2001 "Heat shock proteins: new keys to the development of cytoprotective therapies·’， Emerging Therapeutic Tarqets，第 5 卷，第 267-287 頁。

Uehara U、Hori Μ、Takeuchi T 及 Umezawa Η· 1986 "Phenotypic change from transformed to normal induced by benzoquinoid ansamycins accompanies inactivation of p60src in rat kidney cells infected with Rous sarcoma virus' Mol. Cell· Biol.，第 6卷，第 21 98-2206 頁。

Waxman, Lloyd H. Inhibiting hepatitis C virus processing and replication· (Merck & Co.，Inc.，USA)· PCT國際申請案 (2002)，WO 0207761

Whitesell L，Mimnaugh EG，De Costa B，Myers CE及 Neckers LM. 1994 "Inhibition of heat shock protein HSP90-pp60v-src heteroprotein complex formation by benzoquinone ansamycins: essential role for stress proteins in oncogenic transformation”， Proc. Natl. Acad. Sci. USA·，第 91卷，第 8324-8328 頁。

Yorgin等人.2000 "Effects of geldanamycin，a heat-shock protein 90-binding agent，on T cell function and T cell nonreceptor protein tyrosine kinases"，J. Immunol.，第 164 卷（6)，第 2915-2923 頁。

Young JC、Moarefi I 及 Hartl FU. 2001 flHSP90: a specialised but essential protein-folding tool’、J. Cell· Biol·，第 154卷，第 267-273 頁。 127120.doc -25- 200838502

Zhao JF、Nakano H及 Sharma S· 1995 "Suppression of RAS and MOS transformation by radicicol”，Oncogene，第 11卷，第 161-173 頁。 【發明内容】 本發明係關於化合物5-[4-(2-曱基苯基）-3-羥基-4H-1，2,4-三唑-5-基]-2,4-二羥基甲基-N-丁基苯曱醯胺及其 醫藥學上可用之衍生物、鹽、溶劑合物、互變異構體及立 體異構體，包括其所有比率之混合物。 詳言之’本發明係關於化合物5_[4_(2_甲基苯基>3_羥 基-4H-1，2,4-三唑-5·基]·2,4_二羥基甲基·N_丁基苯甲醯 胺及其醫藥學上可用之衍生物、互變異構體及立體異構 體’包括其所有比率之混合物。 本發明尤其較佳係關於化合物5-[4-(2-甲基苯基）_3…羥 基-4H-1，2,4-二唑。-基]。，扣二羥基_N_甲基_N•丁基苯甲醯 胺及其單魏及二射衍生物、翻基衍生物、單葡糖盤 酸及二葡糖醛酸衍生物、互變異構體及立體異構體，包括 其所有比率之混合物。 本發明極尤其較佳係關於化合物5-[4·(2-甲基苯基）_3•經 基11’2’4-三唾_5_基]_2,4_二經基_Ν-甲基·ν_ 丁基苯甲醯 胺。 本毛月亦係關於此等化合物之水合物及溶劑合物，化合 物之溶劑合物意謂惰性溶劑分子與化合物由於其相互引： 而加合，溶劑合物為(例如)單水合物或二水合物或醇合 I27120.doc -26- 200838502 本發明化合物為亦可以如下互變異構形式存在

醫藥學上可用之衍生物意謂（例如）本發明化合物之鹽亦 及所謂前藥化合物。

前藥衍生物意謂經（例如）烷基或醯基、糖或募肽改質之 本發明化合物’且其在生物體内迅速裂解而產生本發明之 活性化合物。其亦包括本發明化合物之生物可降解的聚合 物衍生物’如（例如）Int. L Pharm. 115, 6i 67(i995)中所 述。 尤其較佳之前藥為鱗酸酉旨衍生物，諸如單構酸醋及/或 t磷酸醋衍生物；糖衍生物，諸如單葡萄糖普酸及/或二 葡萄糖音酸或5 -硫®g基衍生物。 表述"有效量"意謂引起研究者或内科醫師在組織、系 統、動物或人體内探尋或期望之生物或醫學反應的藥物或 醫藥活性成份之量。此外，表述"治療有效量"意謂具有以 消未接受此量之相應個體相比）： s疾病、疾病形態、疾病狀況、病痛（C〇mplaint)、病症或 Μ作用之改良治癒治療、治癒、預防或㈣，亦或降低疾 病、病痛或病症的進展。 術語"治療有效量"亦涵蓋有效增加正常生理學功能之 127120.doc -27· 200838502

本發明亦係關於本發明化合物之混合物，例如兩種非對 映異構體之混合物，例如比率為1:1、1:2、1:3、1:4、 1:5、1:1〇、ι:ι00或1:10〇〇。此等為立體異構化合物之尤 其較佳混合物。 此外’本發明化合物亦及用於其製備之起始物質係由描 述於文獻（例如在標準著作中，諸如H〇uben-Weyl，

Methoden der organischen Chemie [Methods of Organic

Chemistry]，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart)中之本身已知 方法在已知且適於該等反應之反應條件下製備。本文亦可 使用本文中未更詳細提及之本身已知之變體。 若需要，起始物質亦可藉由不自反應混合物分離而代之 以將其立即進一步轉化為本發明化合物從而原位形成。 一起始物質一般為已知的。然而，若其為新穎❸，則其可 藉由本身已知之方法加以製備。 本發明化合物係藉由wo 2006/087077中所述之方 備。 汉應係猎由熟習此項技術者已知之方法進行。 反應係在合適惰性溶劑中 Τ進仃合適惰性溶劑之實例為 烴，诸如己烷、石油醚、苯、 ,_ ^ x T本或一曱本；氯化烴，諸 如 一^風i 乙^fji、1 2 -二_ 备 ^ LA> ? 一、、元、四氯化碳、氯仿或二氯甲 烷，知，诸如甲醇、乙醇、 -丁 ，、丙知、正丙醇、正丁醇或第 一丁％，醚，諸如乙醚、二里 -椏γ ^ 一 t ，、丙基醚、四氫呋喃（THF)或 一心机，〇 —醇_，埃L 7 一 & 一醇單曱基醚或乙二醇單乙基 127120.doc -28- 200838502 醚、乙二醇二甲醚(二乙二醇二曱醚)；酮，諸如丙酮或丁 酮；醢胺’諸如乙蕴胺、二甲基乙醯胺 (讀）；腈，諸如乙腈；㈣，諸如二甲亞卿咖甲）= 硫化碳；錢’諸如甲酸或乙酸；磺基化合物，諸如石肖基 甲烧或硝基苯；醋’諸如乙酸乙_，或該等溶劑之混合 物。溶劑尤其較佳為（例如）四氫呋喃。

視所用之條件而定’反應時間係介於數分鐘與μ天之 間’且反應溫度係介於約_3(rcw4(rc之間，通常介於_1〇 t與130°C之間，尤其介於約3〇〇c與約125。〇之間。 藉由熟習此項技術者已知之方法移除保護基。 醚(例如甲基醚)之裂解係如上文所指$，在合適溶劑 中、較佳藉由添加三溴化硼而進行。 反應尤其較佳係在二氯甲烷中在介於約·3〇它與5〇(>c之 間、通常介於-2(TC與2(rc之間、尤其介於約_ir(：與約代 之間的反應溫度下進行。 此外，本發明化合物可藉由溶劑解（尤其水解）或藉由氫 解自其功能衍生物而將其釋放獲得。 溶劑解或氫解之較佳起始物質為彼等含有相應經保護胺 基及/或經基代替一或多個游離胺基及/或羥基者，較佳為 彼等攜帶胺基保護基代替與N原子鍵結之H原子者，例如 彼等符合式I但含有！^^^，基團（其中尺，表示胺基保護基，例 如BOC或CBZ)代替NH2基團者。 此外，較佳為攜帶羥基保護基代替羥基之Η原子的起始 物質，例如彼等符合式j但含有R”〇-苯基（其中Rn表示羥基 127120.doc -29- 200838502 保濩基）代替羥基苯基者。 。物貝刀子中亦可能存在複數個相同或不同經保護胺 土及/或羥基。若所存在之保護基彼此不同，則在許多狀 况下其可選擇性裂解。 - ^胺基保遵基在通用術語中為已知的且係關於適於 ^ ㈣(阻斷)胺基使其免於化學反應之基團，但其易於在分 子其他部位之所要化學反應已進行後移除。詳言之，該等 φ 1團中之典型者為未經取代或經取代之ϋ基、芳基、芳烧 氧基甲基或芳烧基。因為胺基保護基在所要反應（或反應 序列）後移除，所以此外其類型及尺寸並不關鍵；然而， U為彼等具有12()個、尤其卜8個碳原子者。應瞭解術語 醯基係在廣義上與本發明方法有關。其包括衍生自以下 各物之ι基·脂族、芳脂族、芳族或雜環魏酸或石黃酸，且 尤，、為垸氧魏基、芳氧幾基及尤其芳燒氧魏基。該等酸基 κ例為燒基’諸如乙g盘基、丙醯基及丁醯基；芳燒酿 馨基諸如苯基乙酸基；芳醯基，諸如苯甲酿基及甲苯基； 芳氧基燒醯基，諸如P0A ;院氧幾基，諸如甲氧幾基、乙 箪.土 2,2’2-_氣乙氧羰基、B〇c及蛾乙氧幾基；芳 ’ ⑥氧幾基，諸如CBZ(”苯甲氧絲，·）、4-甲氧基苯甲氧羰 、基及FM〇C，及芳基磺基，諸如Mtr、Pbf或pmc。較佳 之胺基保護基為B0C及Mtr，此外為CBZ、Fm〇c、苯甲基 及乙醯基。 土 術語’，經基保護基，，在通用術語中同樣為已知的且係關於 適於保護羥基使其免於化學反應之基團，但其易於在分子 127120.doc -30- 200838502 1他部位之所要化學反應已進行後移除。該等基團中之典 型者為上述未經取代或經取代之芳基、芳烷基或醯基，此 外亦為烷基。羥基保護基之種類及尺寸並不關鍵，此係因 為其在所要化學反應或反應序列後被移除。較佳為具有 2〇個、尤其1.10個碳原子之基團。經基保護基之實例尤其 為苯甲基、對硝基苯甲醯基、對甲苯磺醯基、第三丁基及

乙醯基，其中苯甲基及第三丁基尤其較佳。COOH基團較 佳以其第三丁酯形式經保護。 視所用保護基而定，使用以下各物將本發明化合物自其 B月b衍生物釋放：例如使用強酸，有利地使用TF A或過氯 酉文但亦使用其他無機強酸（諸如鹽酸或硫酸）、有機強羧 酸（諸如三氯乙酸）或磺酸（諸如苯磺酸或對甲苯磺酸）。其 他惰性溶劑之存在為可能的，但並非總是必要。合適惰性 >谷劑較佳為有機溶劑，例如羧酸（諸如乙酸）、醚（諸如四氫 呋喃或二噁烷）、醯胺（諸如〇]^17)、鹵化烴（諸如二氯曱 烷），此外亦為醇（諸如甲醇、乙醇或異丙醇）及水。此外， 上述溶劑之混合物亦合適。TFA較佳為過量使用而不添加 其他溶劑，且過氣酸較佳以乙酸與7〇%過氯酸之9:1比率之 混合物形式使用。裂解之反應溫度有利地介於約與約 50°C之間，較佳介於15°c與30cC(室溫）之間。 B〇C、OBut、Pbf、Pmc及Mtr基團可（例如）較佳在15 3〇 °c下使用二氯甲烷中之TFA或使用二噁烷中約3^至51^ HC1 裂解，且FMOC基團可在15-30°C下使用二甲胺、二乙胺或 哌啶於DMF中之約5%至50%溶液裂解。 127120.doc -31 - 200838502 可氫解移除之保護基（例>CBZ或苯甲基）可（例如）藉由 在催A例如’有利地在諸如碳之载體上的貴金屬催化 劑⑼如纪）)存在下以氫處理而得以裂解。此處之合適溶劑 為彼等上文所指示者，尤其（例如）醇，諸如甲醇或乙醇； 或醯胺，諸如卿。氫解一般係在介於約代與⑽。c之溫 度下及"於約1巴與200巴之屢力下進行，較佳在2〇_抑 及M0巴下進行。CBZ基團之氫解在(例如)2〇销下在甲 鮮中之 5% 至 1〇% PH/Γ* u 斗、«η /0 Pd/C上或使用甲酸銨（代替氫）在甲醇 /DMF中之Pd/C上良好進行。 醫樂用鹽及其他形式 本發明之該化合物可呈其最終非鹽形式使用。另一方 面，本發明亦涵蓋以醫藥學上可接受之鹽形式使用此化合 物之用途’該等鹽可藉由此項技術中已知之程料生自各 種有機及無機酸及驗。本發明化合物之醫㈣上可接受之 皿形式大。P刀係猎由習知方法製備。合適鹽可藉由使化合 物與合適驗反應產生相應驗加成鹽而形成。該等驗為(例 如）驗金屬氫氧化物，包括氫氧切、氫氧錢及氯氧化 !醇：土t屬氫氧化物’諸如氫氧化鋇及氫氧化約；驗金 屬知鹽，tj如乙醇鉀及丙醇納；及各種有機驗，諸如派 乙醇胺及N·甲基麩醯胺。同樣包括本發明化合物之 =而nt由化合物經醫藥學上可接受之有機及無機酸 處理而形成酸加成鹽’例如’齒化氣，諸如氯化氯、淳化 氫或t氯；其他無機酸及其相應鹽，諸如硫酸鹽、硝酸 鹽或％酉文鹽及其類似物，及院基及單芳基石黃酸鹽，諸如乙 127120.doc -32- 200838502 磺酸鹽、甲苯磺酸及苯磺酸鹽；及其他有機酸及其相應 鹽，諸如乙酸鹽、三氟乙酸鹽、酒石酸鹽、順丁烯二酸 鹽、琥珀酸鹽、檸檬酸鹽、苯曱酸鹽、水楊酸鹽、抗壞血 酸鹽及其類似物。因此，本發明化合物之醫藥學上可接受 之酸加成鹽包括以下各物：乙酸鹽、己二酸鹽、海藻酸 ^ 鹽、精胺酸鹽、天冬胺酸鹽、苯曱酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸 。 氫鹽、亞硫酸氫鹽、溴化物、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺 酸鹽、辛酸鹽、氯化物、氯苯甲酸鹽、檸檬酸鹽、環戊烷 _ 丙酸鹽、二葡糖酸鹽、磷酸二氫鹽、二硝基苯甲酸鹽、十 二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、半乳糖二酸鹽 (galacterate，來自黏液酸）、半乳糖酸酸鹽、葡糖庚酸 鹽、葡糖酸鹽、麩胺酸鹽、甘油磷酸鹽、半琥珀酸鹽、半 硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、馬尿酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸 鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、碘化物、羥乙基磺酸 鹽、異丁酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二 0 酸鹽、丙二酸鹽、扁桃酸鹽、偏磷酸鹽、甲磺酸鹽、甲基 苯曱酸鹽、磷酸氫鹽、2-萘磺酸鹽、菸酸鹽、硝酸鹽、草 酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸鹽、果膠酸鹽、過氧硫酸鹽、苯基 0 乙酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、膦酸鹽、對苯二甲酸 . 鹽，但此不代表其限制範圍。 此外，本發明化合物之驗性鹽包括銘鹽、銨鹽、約鹽、 銅鹽、鐵（III)鹽、鐵（II)鹽、鋰鹽、鎂鹽、錳（III)鹽、錳 (Π)鹽、鉀鹽、鈉鹽及鋅鹽，但此不欲代表限制。上述鹽 中，較佳為銨鹽；鹼金屬鹽（鈉鹽及鉀鹽），及鹼土金屬鹽 127120.doc -33- 200838502 (舞鹽及鎂鹽）。衍生自醫藥學上可接受之有機無毒鹼之本 發明化合物之鹽包括以下各物之鹽：第一、第二及第三 胺、經取代之胺（亦包括天然存在之經取代胺）、環胺及鹼 性離子交換樹脂，例如精胺酸、甜菜鹼、咖啡鹼、氯普魯 卡因、膽鹼、N，N，-二苯甲基乙二胺（苄星青黴素）、二環己 胺、二乙醇胺、二乙胺、2-二乙胺基乙醇、2-二甲胺基乙 醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基嗎啉、N_乙基哌啶、葡萄 胺、葡糖胺、組胺酸、海卓胺、異丙胺、利多卡因 (lidocaine)、離胺酸、葡甲胺、N-甲基_D-葡萄胺、嗎|、 旅嗪、旅唆、聚胺樹脂、普魯卡因、σ票呤、可可豆驗、三 乙醇胺、三乙胺、三曱胺、三丙胺及參（羥基甲基）曱胺（緩 血酸胺），但此不欲代表限制。 含有驗性含氮基團之本發明化合物可使用以下試劑季銨 化：諸如（CpC：4)烧基鹵化物，例如甲基、乙基、異丙基及 第二丁基之氯化物、溴化物及埃化物；硫酸二烧基 酯，例如硫酸二甲酯、硫酸二乙酯及硫酸二戊酯；（c『 Cl8)烷基鹵化物，例如癸基、十二烷基、月桂基、肉豆蔻 基及硬脂酷基之氯化物、溴化物及換化物；及芳基（Cl 烷基i化物，例如苯甲基氯及苯乙基溴。可使用該等鹽製 備水溶性及油溶性之本發明化合物。 較佳之上述醫藥鹽包括乙酸鹽、三氟乙酸鹽、苯磺酸 鹽、檸檬酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡糖酸鹽、半琥珀酸鹽、 馬尿酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、羥乙基磺酸鹽、扁桃酸 鹽、葡甲胺鹽、硝酸鹽、油酸鹽、膦酸鹽、特戊酸鹽、磷 127120.doc -34- 200838502 酸鈉、硬脂酸鹽、硫酸鹽、次水揚酸鹽、酒石酸鹽、硫蘋 果酸鹽、甲苯磺酸鹽及緩血酸胺鹽，但此不欲代表限制。

藉由使游離鹼形式與足量之所要酸接觸，使得以習知方 式幵/成鹽’從而製備本發明化合物之酸加成鹽。可藉由使 鹽形式與驗接觸且以習知方式分離游離鹼從而產生游離 鹼。在特定態樣中’游離鹼形式與其相應鹽形式之區別在 ;某二物理特性，諸如在極性溶劑中之溶解度；然而為本 發明之目的’鹽另外對應於其各別游離鹼形式。 如所述，本發明化合物之醫藥學上可接受之鹼加成鹽係 與金屬或胺形成，諸如鹼金屬及鹼土金屬或有機胺。較佳 孟屬為鈉、鉀、鎂及鈣。較佳有機胺為N，N，_二苯甲基乙 一胺、氯普魯卡因、膽鹼、二乙醇胺、乙二胺、n_甲基_ D-葡萄胺及普魯卡因。 错由使游離酸形式與足量之所要鹼接觸，使得以習知方 式开^成1從而製備本發明化合物之驗加成鹽。可藉由使 鹽形式與酸接觸且以習知方式分離游離酸從而產生游離 酸。在特定態樣中，游離酸形式與其相應鹽形式之區別在 於某些物理特性，諸如在極性溶财之溶解度1而為本 發明之㈣，鹽另外對應於其各別游離酸形式。 鑒於上述，可見本文中之表述"醫藥學上可接受之鹽"意 謂包含以其鹽中之—者形式存在之本發明化合物的活性成 份’尤其若此鹽形式職予活性成份相較於游離形式活性成 份或先前所用之活性成份^h甘^ _ 動力、、… 何其他鹽形式有改良之藥物 動力予特性。活性成份之醫藥學上可接受之鹽形式亦可首 127120.doc -35- 200838502 次提供此活性成份以先前未具有之所要藥物動力學特性， 且甚至可對此活性成份關於其在體内之治療功效的藥物動 力學產生積極影響。 本發明此外係關於本發明化合物及/或其生理學上可接 欠之鹽之用途，其係用於（尤其）藉由非化學方法製備藥物 (醫藥組合物）。其可與至少一種固體、液體及/或半液體賦 形劑或佐劑一起，且若需要則與一或多種其他活性成份組 合而轉化為本文之合適劑型。 本發明此外係關於包含5_[4_(2_曱基苯基）_3_羥基 1’2,4—一唑_5_基]_2,4_二羥基_N_甲基·Ν·丁基苯甲醯胺及/或 其醫藥學上可用之衍生物、冑、溶劑合物、互變異構體及 立體異構體’包括其所有比率之混合物，以及視情況之賦 形或佐劑的藥物。醫藥調配物可以每劑量單位包含 預定量之活性成份的劑量單位形式投與。該單位可包人 (例如）〇.1啤至3g、較佳lmg至· mg、尤其較佳5咐 ⑽^本發明化合物，此係視所治療之疾病病況、投藥方 ^及者年齡、體重及病況而定，或醫藥調配物可以每巧 ，^立包含騎量活性成份之劑量單位形式投與。_ 1早位調配物為包含如上文所述之每日劑量或部分劑量， 或其相應分率之活性成份的調配物。此外，此類型之殺華 調配物可使用醫藥技術中-般已知之方法加以製備。 醫藥調配物可•經任何所要合適方法投與，例如夢由 口服（包括經頰或經舌下）、經直腸、經鼻、 _ 頰、經舌下或經皮）、铖 。51 (匕括經 、I陰道或非經腸（包括皮下、肌肉 127120.doc -36- 200838502 内、靜脈内或皮内）方法。該等調配物可使用醫藥技術中 已知之所有方法藉由（例如）使活性成份與賦形劑或佐劑組 合加以製備。 適於口服投與之醫藥調配物可作為單獨單位投與，諸如 膠囊或錠劑，散劑或顆粒劑；水性或非水性液體中之溶液 或懸浮液；可食用泡沫體或泡沫體食物；或水中油液體乳 液或油中水液體乳液。

/大此，舉例而言，在口服投與狀況下，在為錠劑或膠囊 幵/式¥ ’可將活性成份組份與口服、無毒且醫藥學上可接 :之丨“生賦形劑組合，諸如乙醇、甘油、水及其類似物。 糟由將化合物粉碎為合適精細尺寸且將其與以類似形式粉 碎之醫藥賦形劑（諸 ^ J 用石反水化合物，諸如澱粉或甘 鉻糖醇）混合而製備散~ 散劑及染料。可存在香料、防腐劑、分 來製造膠囊。：二::粉:混合物且以其填充成型明膠殼 及潤滑劑，諸如以^ 粉末混合物中添加助流劑 酸i伽形式酸、滑石、硬脂酸鎮、硬脂 (諸如瓊脂-•、碳酸以^同樣可添加崩解劑或增溶劑 物之可用性。 ，弓或心納)以在服用膠囊後改良藥 劑 膠 劑 潤滑劑及崩解劑以及¥料ΓΓ 合適黏 天然糖（諸如，葡萄撼,… 合劑包括搬粉、 fe萄糖或β_乳糖）、由玉 天然及合成橡膠（諸如 去、成之甜 7拉伯膠、黃耆膠或海藻 127120.doc 200838502 納、緩甲基纖維素、聚乙二醇、壤）及其類似物。此等劑 型中所用之潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯 甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉及其類似物。崩解劑包括（但不 限於）澱粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、三仙膠及其類 似物。藉由（例如）製備粉末混合物，使該混合物粒化或乾 式壓縮，添加潤滑劑及崩解劑且將整個混合物擠壓產生錠 . 劑，從而調配錠劑。藉由將以合適方式粉碎之化合物與如 上文所述之稀釋劑或鹼及視情況之黏合劑（諸如，羧甲基 纖維素、海藻酸鹽、明膠或聚乙烯吡咯啶酮）、阻溶劑（諸 如，石蠟）、吸收促進劑（諸如，第四鹽）及/或吸收劑（諸如 膨潤土、高嶺土或墙酸二約）混合從而製備粉末混合物。 可藉由將粉末化合物以黏合劑（諸如，糖漿、澱粉糊狀 物、黏膠阿卡迪（acadia mucilage)或纖維素或聚合物材料 之/谷液）濕潤且將其經篩擠壓而使其粒化。作為粒化之替 代，可使粉末混合物流經製錠機，產生非均勻形狀之塊， • 將其研碎以形成顆粒劑。可藉由添加硬脂酸、硬脂酸鹽、 滑石粉或礦物油將顆粒劑潤滑，從而防止黏在錠劑澆鑄模 上。接著擠壓經潤滑混合物產生錠劑。亦可將本發明化合 物與無流動惰性賦形劑組合且接著直接擠壓產生鍵劑，而 ' 不進行粒化或乾式擠壓步驟。可存在由蟲膠密封層、糖或 聚口物材料層及蠟光亮層組成之透明或不透明保護層。可 向此專塗層中添加染料從而可區分不同劑量單位。 可將口服液體（諸如，溶液、糖漿及酏劑）製備為劑量單 位开y式彳疋而產生包含預指定量化合物之給定量。可藉由將 127120.doc -38· 200838502 化合物與合適香料一 係使用無毒醇媒劑二二:水溶液中製備糖漿，劑 中而調配懸浮液合物分散於無毒媒劑 氧化異硬脂醇及聚 ^加w劑及礼化劑（諸如，乙 添加劑（諸如，^由知山梨糖_)、防腐劑、香味 味劑及其類似物或天然甜味劑或糖精）或其他人工甜 中與之劑量軍位調配物可（若需要）囊封於微膠囊 以聚：以延長或延遲釋放之方式藉由（諸如）將微粒物質 …蠟及其類似物塗佈或嵌埋而製備調配物。 :亦：：：發明化合物及/或其醫藥學上可用之衍生物、 /合μ 口物、互變異構體及立體異構體，包括其所有比 混合物，以及視情況之賦形劑及/或佐劑及其鹽、、容 ::物及生理學功能衍生物以脂質體傳遞系統形式投盥： ㈣平Λ小微脂粒、單層大微脂粒及多層微脂粒。可由多 體 邊如’膽固醇、硬脂胺或鱗脂醯膽鹼）形成脂質 生物使1$1^明化合物及其鹽、溶劑合物及生理學功能街 〃化°物分子偶合之單株抗體作為個別載劑來傳 將化合物與作為乾向藥物載劑之可溶聚合物偶 σ。該4聚合物可涵蓋經軟脂醯基取代之聚乙烯吼㈣ :、派喃共聚物、聚經基丙基甲基丙稀醯胺基苯"經 土乙基天冬胺醯胺基㈣或聚氧化乙烯聚離胺酸。此外， 可將化D物與-類適於達成藥物之受控制釋放的生物可降 解聚合物偶合，例如聚乳酸、聚-己内醋、聚經基丁酸、 127120.doc -39- 200838502 水原敲、聚縮醛、聚二羥基哌喃、聚氰基丙烯酸酯及水 凝膠之交聯或兩性嵌段共聚物。 適於ι皮投與之醫藥調配物可作為獨纟t藥與接受者真 皮延展、緊密接觸而投與。因此，例如，可藉由離子導入 療法自膏藥傳遞活性成份，如Pharmaeeutieai Research， 3(6)，318 (1986)中之通用術語所述。 、適於局部投與之醫藥化合物可調配為軟膏、乳膏、懸浮

液洗液、散劑、溶液、糊狀物、凝膠、喷霧、氣溶膠或 油狀物。 為…療眼睛或其他外部組織（例如口及皮膚），調配物較 佳作為局部軟膏或乳膏應用。在調配物為軟膏之狀況下， 活性成份可以石蝶抑或或水可混溶乳膏基質形式採用。或 者活！生成伤可經调配以產生具有水中油乳膏基質或油中 水基質之乳膏。 、適於局部應用至眼睛之醫藥調配物包括滴眼劑，其中將 活性成份溶解錢浮於合適载财，尤其為水性溶劑中。 適於局部應用於π中之醫藥調配物涵蓋口含劑、片劑及 漱口劑。 適於直腸投與之醫藥調配物可以栓劑或灌腸劑形式投 載劑物質為固體之適於經鼻投與之醫藥調配物包含粒徑 在（例如）20-500微米範圍内之粗輪粉末，其係以使用鼻粉 之方式投與，_由用鼻孔自固持於鼻子附近之含有粉 劑之容器迅速吸人。心作為鼻噴霧或鼻滴劑（將液體用 127120.doc 200838502 作載劑物質）投與之合適調配物涵蓋水或油中之活性成份 溶液0 习 適於藉由吸入投與之醫藥調配物涵蓋精細微粒粉塵或薄 霧，其可由各種類型之具有氣溶膠之加壓分散器、噴霧哭 或吹入器產生。 °° 適於陰道投與之醫藥調配物可作為子宮托、棉球、乳 貧、凝膠、糊狀物、泡沫體或噴霧調配物投與。 適於非經腸投與之醫藥調配物包括水性及非水性無菌注 射/合液，其包含抗氧化劑、緩衝劑、抑菌劑及溶質，調配 物藉此與待治療之接受者的血液等張；及水性及非水性無 菌懸浮液，其可包含懸浮介質及增稠劑。調配物可在單劑 ϊ或多劑量容器（例如密封安瓶及小瓶）中投與，且以冷凍 乾秌（凍乾）狀態儲存，從而在必須使用前僅需添加無菌載 劑液體（例如水）以達注射之目的。 根據處方製備之注射溶液及懸浮液可由無菌散劑、顆粒 劑及錠劑製備。 勿庸置疑’除上文特定提及之組份外，調配物亦可包含 此項技術中關於特定調配物類型可用之其他試劑；因此， 例如，適於口服投與之調配物可包含香料。 t月化s物之治療有效量係視多種因素而定，包括 (例如）人類或動物之年齡及體重，需要治療之準確疾病病 况及其嚴重程度，調配物種類及其投與方法，且由醫師或 被醫最終決定。然而，本發明化合物之有效量一般在每天 每公斤接受者（哺乳動物)體重〇·1 mg至100 mg範圍内且尤 127120.(j〇e -41 - 200838502 其通常在每天每公斤體重1 mg至10 mg範圍内。因此，體 重70 kg之成年哺乳動物每天之實際量一般介於7〇 與 700 mg之間，其中此量可作為單獨劑量每天投與或一般以 系列部分劑量（諸如，兩個、三個、四個、五個或六個）每 • 天投與’使得每日總劑量相同。有效量之鹽或溶劑合物或 其生理學功能衍生物可作為本發明化合物本身之有效量的 • 分率加以確定。可假定類似劑量適於治療上文所述之其他 病況。 此外，本發明係關於包含至少一種本發明化合物及/或 其醫藥學上可用之衍生物、溶劑合物及立體異構體，包括 其所有比率之混合物，以及至少一種其他藥物活性成份的 藥物。 其他藥物活性成份較佳為化學治療劑，尤其彼等抑制血 官生成且因此抑制腫瘤細胞生長及傳播者；本文中較佳為 VEGF受體抑制劑，包括針對VEGF受體之核酶及反義物， • 及血管抑制素及内皮抑制素。 可與本發明化合物組合使用之抗腫瘤劑之實例一般包括 烧基化抗代5射物，表鬼臼毒素（epidophyllotoxin);抗 • 腫瘤酶；拓撲異構酶抑制劑；丙卡馬肼（procarbazin);米 • 托恩S昆（mitoxantron)或鉑配位錯合物。 抗腫瘤；=j彳較彳土係選自以下類別：蒽環黴素（anthraCyCHn)、 長春花（vinca)藥物、絲裂黴素（mh〇mycin)、博萊黴素 (bleomycin)、細胞毒性核苷、埃博黴素（ep〇thii〇ne)、迪斯 德莫來（discormolide)、喋啶、二炔烯（diynene)及鬼白毒素 127120.doc -42 - 200838502 (podophyllotoxin) 〇

尤其較佳為以下該等類別：例如，洋紅黴素 (carminomycin)、道諾黴素（daunorubicin)、胺基蝶吟 (aminopterin)、甲胺嗓呤（methotrexate)、甲嗓呤 (methopterin)、二氯曱胺嗓呤、絲裂黴素C、泊非黴素 (porfiromycin)、5-氟尿嘴唆、5-氟脫氧尿_單填酸醋、阿 糖胞苷（cytarabine)、5 -氮雜胞苷、硫鳥嗓呤、硫嗤嘌呤、 腺苷、喷司他丁（pentostatin)、赤經基壬基腺嘌吟、克拉 屈濱（cladribine)、6-M 基 σ票呤、吉西他濱（gemcitabine)、 阿糖胞苷（cytosinarabinoside)、鬼臼毒素或鬼臼毒素衍生 物（諸如依託泊苷（etoposide)、磷酸依託泊苷或替尼泊甙 (teniposide))、美法侖（melphalan)、長春驗（vinblastine)、 長春瑞濱（vinorelbine)、長春新鹼（vincristine)、異長春驗 (leurosidine)、長春地辛（vindesine)、環長春驗 (leurosine)、多烯紫杉醇（docetaxel)及紫杉醇（paclitaxel) 〇 其他較佳抗腫瘤劑係選自以下各物之群：迪斯德莫來、埃 坡黴素 D(epothilone D)、雌二醇氮界、卡舶（carboplatin)、 順始（cisplatin)、奥賽力銘（oxaliplatin)、環填醯胺 (cyclophosphamide)、博萊黴素、吉西他濱、異環麟醯胺 (ifosamide)、美法侖、六甲基三聚氰胺、嗟替派（thiotepa)、 伊達曲沙（idatrexate)、三甲曲沙（trimetrexate)、達卡巴口秦 (dacarbazine)、L-天冬醯胺酶、喜樹驗（camptothecin)、 CPT-11 、 拓朴替康 （topotecan)、 阿糖胞苷 (arabinosylcytosine)、比卡魯胺（bicalutamide)、氟他胺 127120.doc -43 - 200838502 (flutamide)、亮丙瑞林Geiiprolide)、吡啶幷苯并吲哚衍生 物、干擾素及介白素。 其他藥物活性成份較佳為抗生素。較佳抗生素係選自以 下各物之群··更生黴素（daciin〇mycin)、道諾黴素、黃膽 素（idarubicm)、表柔比星（epinjbicin)、米托蒽醌 (mit〇Xantr〇ne)、博萊黴素、普卡黴素（plicamycin)、絲穿

黴素。 X 其他藥物活性成份較佳為酶抑制劑。較佳酶抑制劑係選 自乂下各物之群·組蛋白去乙醯抑制劑（例如，辛二酹苯 胺異經㈣[SAHA])及路胺酸激酶抑制劑（例如，如皿 [Iressa])。 其他藥物活性成份較佳為核輸出抑制劑。核輸出抑制劑 防止生物聚合物（例如，rna)自細胞核 抑制劑係選自以下各物之群……， 住核輸出 物之群·卡利他〉丁㈣lystatin)、細黴 (Pt+〇myCin B)、瑞特雅酮（ratjadone)。 防止味=m成μ佳為核輸出抑制劑。核輸出抑制劑 :止生物聚合物(例如，RNA)自細胞核 二 出抑制劑係選自以下^… 田μ土核輸 特_。 物之群：卡料、細黴素Β、瑞 其他藥物活性成份較佳 劑係選自以下各物之群劑。較佳之免疫抑制 (wy, ' rAD001 雷帕黴素（rapamycin)、CCI_779 心nnaceuticals)。 （N_他）、AP23573 (Ariad 本發明亦係關於一插 套件（套組），其係由以下各物單獨 127120.doc -44· 200838502 封裝組成 (a) 有效量之本發明化合物及/或其醫藥學上可用之衍生 物、溶劑合物及立體異構體，包括其所有比率之混合 物， 以及 (b) 有效量之另一藥物活性成份。 該套件包含合適容器，諸如各星猫 碎如孤早獨珉、包或安瓶。該 套件可（例如）包含獨立安瓶，其各 八合a 3有有效量之本發明 化合物及/或其醫藥學上可用夕料#仏 τ用之何生物、溶劑合物及立體 ”構體，包括其所有比率之混合物， 卿以及有效ϊ之溶解或 /東乾形式之另一藥物活性成份。 用途 本發明化合物適用作供哺乳 HSPQn, g礼動物（尤其人類）治療與 HSP90相關之疾病用的醫藥活性成份。 本發明因此係關於5_[4_(2· 、r暴本基）·3-經基-4H-1 2 4-三唑-5-基]-2,4-二羥基·Ν_τ ，2,4 &Μ u ^ m 丁基本甲醯胺，及其醫 桌予上可用之衍生物、溶劑合 女L十 月J 口物及立體異構體，包括i所 有比率之混合物之用逯，苴及m ^ n 、^、，、用於製備供治療與HSP90之 抑制、調控及/或調節作用相 ^ 關之疾病用的藥物。 本發明涵蓋5-[4-(2_甲其贫甘、 其1〇 (甲基本基基H，2,4-三唑j 基]-2,4_二羥基_；^_$基卞 丁基本甲醯胺及其醫藥學上可用 之何生物、溶劑合物及立體 合物t ^ , ”構體，包括其所有比率之混 口物之用途，其係用於製備 、商广— 侑供冶療以下疾病用之藥物··腫 瘤疾病，例如纖維肉瘤、 黏液肉瘤、脂肪肉瘤、軟骨肉 127120.doc -45· 200838502 瘤、骨肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、内皮肉瘤、淋巴管肉 瘤、淋巴内皮肉瘤、滑膜瘤、間皮瘤、尤因氏瘤、平滑肌 瘤、検紋肌肉瘤、結腸癌、胰腺癌、乳癌、卵巢癌、前列 腺癌、鱗狀細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺 癌、礼頭狀癌、乳頭狀腺癌、囊腺癌、骨髓癌、支氣管 癌、腎細胞癌、肝癌、膽管癌、絨膜癌、精原細胞瘤、胚 胎癌、威姆氏瘤、子宮頸癌、睾丸瘤、肺癌、小細胞肺 癌、膀胱癌、上皮癌、膠質瘤、星形細胞瘤、神經管胚細 胞瘤、顱咽官瘤、室管膜瘤、松果體瘤、血管母細胞瘤、 聽神經瘤、少枝膠質瘤、腦膜瘤、黑素瘤、神經母細胞 瘤、視網膜胚細胞瘤、白血病、淋巴瘤、多發性骨髓瘤、 瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症及重鏈疾病； 病毒疾病，其中病毒病原體係選自由以下各病原體組成 之群·· A型肝炎、b型肝炎、c型肝炎、流感、水痘、腺病 毒、第一型單純疱疹（HSV-I)、第二型單純疱疹、 牛疫、鼻病毋、埃可病毒、輪狀病毒、呼吸道融合性病毒 (RSV)、乳頭瘤病毒、腫瘍病毒、巨細胞病毒、艾奎諾病 毒、節足動物攜帶性病、亨特病毒、科沙奇病毒、腮腺炎 病毒、麻疹病毒、風疹病毒、小兒麻痺病毒、人免疫缺陷 病毒I型（HIV-Ι)及人免疫缺陷病毒！丨型（Ηϊν·π); 移植之免疫抑制；發炎引發之疾病，諸如類風濕性關節 炎、哮喘、多發性硬化、1型糖尿病、紅斑性狼瘡症、牛 皮癬及發炎性腸病；囊腫性纖維化；與血管生成有關之疾 病，諸如糖尿病性視網膜病變、血管瘤、子宮内膜異位 127120.doc -46- 200838502 症、腫瘤灰管峰忐·趨 、木病，自體免疫疾病；局部缺血； 致纖維化疾病，諸如硬皮症、多發性肌 肺纖維化；狼瘡症、肝硬化、瘢痕瘤形成、間質性腎炎及 HM2-甲基苯基)_3_羥基-购二‘三唑_5_基]_2,4·二羥 基4甲基·Ν_丁基苯甲酸胺尤其可抑制癌症、腫瘤細胞之 生長及腫瘤新陳代謝且因此適於腫瘤療法。

本發明此外涵蓋5_[4_(2-甲基苯基）-3-羥基-4Η-1，2,4-三 =-5-基卜2,4-二羥基_Ν_曱基丁基苯甲醯胺及/或其生理 干上可接又之鹽及溶劑合物之用途，其係用於製備供保護 正系細胞免於化學療法引起之毒性，以及供治療錯誤蛋白 摺豐或聚集為主要誘因之疾病（諸如，錦羊癢病、庫賈氏 病、予廷頓症或阿茲海默症）的藥物。 本發明亦係關於5-[4-(2-甲基苯基）-3-羥基三 唑-5-基]·2,4-二羥基甲基_N_丁基苯甲醯胺及/或其生理 學上可接受之鹽及溶劑合物之用途，其係用於製備供治療 中樞神經系統疾病、心血管疾病及惡病質的藥物。 在另一實施例中，本發明亦係關於5-[4-(2-甲基苯基）_3_ 說基-411-1，2,4_三唑_5_基]-2,4-二經基->1-甲基->^丁基苯曱 酿胺及/或其生理學上可接受之鹽及溶劑合物之用途，其 係用於製備供調節HSP90之藥物，其中所調節之生物 HSP90活性在個體内引起免疫反應、自内質網輸送蛋白 貝、自低氧/缺氧應力中恢復、自營養不良中恢復、自熱 應力中恢復，或其組合，及/或其中該病症為一種癌症、 127120.doc -47- 200838502 傳染病、與自内質網輸送之已破壞 衣贪白貝有關之病症、與 局部缺血/再灌注有關之病症，或 甘士 ^ 乂具組合，其中與局部缺 血/再灌注有關之病症為心跳驟停、心博停止及延遲心室 心律不整、心臟手術、心肺繞道手術、器官移植、脊歸指 傷、頭部外傷、中風、栓塞性中風、出血性中風、腦血管 痙攣、張力減退、低域、癲癇持續狀態、癲癇發作、焦 慮、精神分裂症、神經退化性病症、阿兹海默症 '亨廷頓 氏病、肌萎縮性側索硬化（ALS)或新生應力所引起之处 果。 、、。 〜在另-實施例中，本發明亦係關於5_[4_(2_甲基苯基 經基·4Η_1，2,4_三唾其1 9 4 -〜甘、 土 h2,4-一搜基甲基丁基苯甲 醯胺及/或其生理學上可接受之鹽及溶劑合物之用途，其 係用於製備供治療局部缺血之藥物，該局部缺血係心跳驟 停、心博停止及延遲心室心律不整、心臟手術、心肺繞道 手術、器官移才直、脊髓損傷、頭部外傷、中風、栓塞性中 風1血性中ϋ血管痙攣、張力減退、低血糖、_ 持續狀態、癲癇發作、焦慮、精神分裂症、神經退化性病 症阿β海,,,犬症、予廷頓氏病、肌萎縮性側索硬化（als) 或新生應力所引起之結果。 【實施方式】 量測HSP90抑制劑之測試方法 可利用格爾德黴素或17，丙基胺基-17_去甲氧基格爾德 徽素（17AAG)與HSP90之結合及其ϋ爭性抑制來測定本發 月化口物之抑制劑活性（Carreras等人，2〇〇3，等 127I20.doc -48- 200838502 人，2002)。在特定狀況下，使用放射性配位子過濾結合 測試。本文所用之放射性配位子為氣標記之17-烯丙基胺 基格爾德黴素，[3H]17AAG。此過濾結合測試允許干擾 ATP結合部位之抑制劑的靶向搜索。 材料 重組人類HSP90a(由大腸桿菌表現，95%純度）； ^ [3H]17AAG(17-烯丙基胺基格爾德黴素，[烯丙基胺基- 2,3·3Η·特異性活性：l.llxlO12 Bq/mmol (Moravek，MT-• 1717)； HEPES過濾緩衝液（50 mM HEPES，pH 7.0，5 mM MgCl2，BSA 0.01 %)

Multiscreen FB(1 μπι)過濾、培養盤（Millipore，MAFBNOB 50) 〇 方法 首先沖洗96孔微量滴定過濾培養盤且以0.1%聚伸乙基亞 ^ 胺將其塗佈。 測試係在以下條件下進行：

反應溫度22°C > 反應時間：30分鐘，在800 rpm下振盪 、 測試體積：50 μΐ 最終濃度：

50 mM HEPES HC卜 pH 7.0，5 mM MgCl2，0.01% (w/v) BSA HSP90 :每次檢定1.5 127120.doc -49- 200838502 [3H]17AAG:0.08 μΜ。 在反應結束時，藉助於真空歧管（Multiscreen Separation System，Millipore)抽吸來移除過濾培養盤中之上清液，且 將過濾器洗滌兩次。 接著將過濾培養盤在β計數器（Microbeta，Wallac)中以閃 爍計數器（Microscint 20，Packard)計數。 ”對照％”係由π每分鐘計數”值測定且化合物之IC5〇值係由 其計算。 下表展示本發明化合物與來自最接近先前技術之化合物 ”Α47Π之比較量測。本發明之化合物”0：1"在HSP90抑制上 具有高出約10倍的活性。

測試結果 表I HSP90抑制 化合物 IC5〇 [mol/1] 5-[4-(2·曱基苯基)-3-羥基-4H-1，2,4-三唑-5-基]-2,4· 二羥基-Ν-甲基-Ν-丙基苯甲醯胺(ηΑ47π) 1.60E-07 5-[4-(2-甲基笨基>)-3-經基4H-l，2,4二ϋ坐-5基]-2,4-二羥基-N-甲基-N·丁基苯甲醯胺(”CΓ) 2.90E-08 在上文及下文中，所有溫度係以°C表示。在以下實例 中，”習知處理"意謂··若必要，則添加水，若必要，則將 pH調整至介於2與10之間，其係視最終產物之組成而定， 將混合物以乙酸乙酯或二氯曱烷萃取，使各相分離，將有 機相經硫酸鎂乾燥且蒸發，且將產物藉由矽膠層析法及/ 或結晶法純化。矽膠上之Rf值；溶離劑：乙酸乙酯/甲醇 127120.doc -50- 200838502 9:1。 LC-MS條件 HP 1100系列Hewlett Packard System具有以下特徵：離 子源：電喷霧（正離子模式）；掃描：100-1000 m/e ;斷裂 電壓·· 60 V ;氣體溫度：300°C，DAD : 220 nm。 • 流動速率：2.4 ml/min。所用分裂器在DAD後將MS之流 . 動速率降低至0.75 ml/min。 管柱：Chromolith SpeedROD RP-18e 50-4.6 _ 溶劑：Merck KGaA之 LiChrosolv 品質 溶劑 A ·· Η20(0·01% TFA) 溶劑Β : ACN(0.008% TFA) 梯度： 20% B— 100% Β : 0分鐘至2·8分鐘 100% Β : 2.8分鐘至3.3分鐘 100% Β->20% Β : 3.3 分鐘至 4分鐘 ⑩ 以下實例中指示之滯留時間Rf或Rt [分鐘]及Μ+Η+資料 MW為LC-MS量測之量測結果。 參考實例1 • 5-(2,4·二羥基-5-苯乙基苯基）-4-(2-氟苯基）_3_羥基-4H- . 1，2,4-三唑（，，Α1Π)之製備： 1.1將15 g 5·溴-2,4-二羥基苯甲酸、14·4 ml碘甲烷及 62.9 g石炭酸铯於1〇〇 ml N，N-二甲基甲酿胺（dmF)中之溶液 在回流下加熱16小時。使混合物經受習知處理，產生16.7 g 5·溴-2,4-二甲氧基苯甲酸（π1")。 127120.doc -51- 200838502 1·2將4 g ”1”及2滴DMF於40 ml亞硫醯氯中之混合物在室 溫下攪拌16小時。移除溶劑產生4·3 g 5-溴-2,4-二甲氧基 苯甲酿氯（，，2")，Rf 1.610 ; MW 280.5。 產物未經進一步純化即反應。 1·3在冰冷卻下將3.8 g ”2”於25 ml二氯甲烷中之溶液逐 滴添加至1.314 ml 2-氟苯胺及1.13 ml吡啶於25 ml二氯甲 烧中之溶液中，且將混合物在室溫下攪拌5小時。習知處 理且由異丙醇結晶產生4.5 g 5_溴-N_(2_氟苯基）-2,4_二甲 氧基苯曱醯胺（”3n)，Rf 2.217 ; MW 3 5 5.2。 1·4在氮氣氛下將2.9 g PC15添加至4·5 g，，3"於60 ml甲苯 中之溶液中，且將混合物在回流下加熱3小時。移除溶 劑’將殘餘物溶解於1〇〇 ml THF中，且在〇。(：下將溶液逐 滴添加至1 Μ肼於THF中之138 ml溶液中。將混合物再搜 拌16小時，經受習知處理且由異丙醇結晶產生3.6 g n_(2_ 氟苯基）-3-溴-4,6-二曱氧基苯曱醯胺腙（”4")，Rf 〇 952 ; MW 369·2 〇 Η2Ν\

1·5將1·86 g 1，1，-羰基二咪唑（”5”）添加至3·6 g ”4"於別〇 ml THF中之溶液中，且將混合物再攪拌16小時。使混合物 經受習知處理’將殘餘物以MTB醚煮沸且冷卻，且分離出 晶體，產生700 mg 5-(2,4-二甲氧基溴苯基）_4·(2_氟苯 127120.doc -52- 200838502 基）-3-經基-4Η-1，2,4·三唑（"6")，Rf 1.413 ; MW 395.2。 1·6將 600 mg ”6”、178·4 μΐ苯乙烯（經穩定化）、430.2 μΐ 二乙胺、14_1 mg乙酸鈀（^)(470/0 Pd)、a 17 mg三鄰甲苯 基膦及4 ml乙腈引入1〇 ml小瓶中。在i7(rc下，將混合物 在微波中照射30分鐘。添加少量催化劑，且將混合物再照 射兩次。向混合物中添加甲苯，接著將其以水萃取數次。 將有機相乾燥且蒸發。將殘餘物經由rP層析法純化，產生 140 mg ”7”（Rf 1.765 ; MW 418.4)及 40 mg "8”。

F

OH

F OH 1·7在標準條件下，將140 mg ”7”在10 ml THF中於〇.14 g Pt/C(5%)存在下氫化。隨後分離出催化劑且使其經受習知 處理，產生 140 mg，，9”，Rf 1.920，MW 420.5。

127120.doc -53· 200838502 加158_5 μΐ二溴化硼，且將混合物在室溫下再攪拌μ小 時。在〇cC下添加甲醇，且分離出溶劑，且將殘餘物經由 RP層析法純化產生 74 mg ” A1" (Rf 1537 ; mw 392.4)及 27 mg nA2”（Rf 1.884 ; MW 398.4)。

參考實例2 5-[4-(2_氟苯基）_3_羥基三唑_5_基]_2,4·二羥基_ N-甲基丙基苯甲醯胺（，，a46”）之製備 2,1在10〇 C及7·5巴下，將1〇〇 mg 5-(2,4-二曱氧基 溴苯基）-4-(2-氟苯基）·3-羥基-4H-1，2,4-三唑（，，6")、7 mg氯

化[(R)-(+)_2,2-雙-(二苯膦基）-1，1，_聯萘]!巴⑴）、57瓜卜 氧化碳及35 pi三乙胺於20 ml甲醇中之溶液在高壓釜中處 理20小時。隨後將所得溶液濃縮且由乙醇結晶，產生91 mg如下之5-[4-(2·氟苯基）·3-羥基-4H-1，2,4-三唑-5-基]-2,4· 二曱氧基苯甲酸甲酯，Rt 1.057分鐘，m/e 374。

127120.doc 200838502 2·2類似於實例1.8，使90 mg 5-[4-(2-氟苯基）-3_羥基_ 4Η-1，2,4-二嗤-5-基]-2,4-二甲氧基苯甲酸曱酯反應產生 57.2 mg化合物 5-[4-(2-氟苯基）-3-羥基-4Η-1，2,4-三唑-5- 基]-2,4-二羥基苯甲酸，Rt〇 598分鐘，m/e 332。 2.3 將 55 mg 5-[4·(2-氟苯基）-3-羥基-4H-1，2,4-三唑-5- 基]-2,4-二羥基苯甲酸、2莫耳當量第三丁基二甲基氯矽烷 及2 ml THF中之3莫耳當量咪唑在室溫下攪拌3小時，產生 如下化合物。

2,4將2.3中獲得之產物溶解於1.5 ml THF中，且添加2 ¥ II-(3-一曱胺基丙基乙基碳化二亞胺鹽酸鹽。在室 溫下1小時後，添加12當量丙基曱基胺，且將混合物再櫈 拌18小時。隨後添加3當量氟化四曱基銨，且將混合物在 室溫下攪拌2小時。濃縮後，分離出產物，產生42 mg ’’A46” ； Rt 1.139分鐘，m/e 387 ; MW 386。

127120.doc -55- 200838502 類似地獲得以下化合物： 5-[4-(2-甲基苯基）-3-羥基-4H-1，2,4-三唑-5-基]-2,4-二羥 基·Ν-曱基-N-丙基苯甲醯胺（nA47n)，MW 3 83.4。 實例1 類似於"Α47"之製備獲得本發明化合物5-[4-(2-甲基苯 基）-3-羥基-4Η-1，2,4-三唑-5-基]-2,4-二羥基-Ν-甲基-Ν-丁 基笨曱醯胺（nCln);

!H NMR (500 MHz，DMSO-d6) δ 11.86 (s，1H)，9·92 (s， 1Η)，7.28-7.23 (m，2Η)，7.14-7.10 (m，1Η)，7·03-7·01 (m， 1H)，6·88 (s，1H)，6.26 (s，1H)，3.16 (寬峰，m，2H)，2.73 (寬峰，s，3H)，2.14 (s，3H)，1.40 (寬峰，m，2H)，1.15 (寬 峰，m，2H)，0.81 (寬峰，m，3H)。 實例2 可如下進行nCln之合成：

0

127120.doc -56- 200838502

2.1 5 -溴-2,4 -二經基苯甲酸（！）··

將3.55 kg 2,4-二羥基苯甲酸溶解於3〇 1冰乙酸中。隨後 在15°C下，經8小時逐滴添加1〇6〇 ml溴於1〇 1冰乙酸中之 溶液。接著在20 °C下繼續攪拌16小時，將混合物真空蒸 發’且將結晶殘餘物在201:氯甲烷中漿化且攪拌1小時。 過濾且在空氣中乾燥產生4·9 kg白色粗產物。由3〇 1甲苯/ 乙腈（1:1)再結晶且乾燥產生3 549 kg(66%產率）5_溴_2，心二 經基苯甲酸（熔點 21〇_211.5°C ; MW 233.0)。 2·2 5-溴-2,4-二羥基苯甲酸曱酯（足）： 將8.9 kg 5-溴-2,4-二羥基苯甲酸溶解於70 1曱醇中且將 其加熱至55°C。隨後計量添加800 ml硫酸（w = 95_98。/〇)， 且將混合物在溫和回流下攪拌4天，每日再添加5〇〇 ―硫 酸（w - 95-98%)(3次）。將反應混合物攪拌入9 kg碳酸氫鈉 於100 1水中之冷溶液（5°C)中。過濾且在50°C下真空乾燥 127120.doc -57- 200838502 產生7.87 kg(83%)5-溴-2,4_二羥基苯甲酸甲酯（白色晶體）， MW 247.1 〇 2·3 2，4-雙苯曱乳基-5-漠苯甲酸曱酯（3): 在0C下，將7·86 kg(83%)5-溴-2,4-二羥基苯甲酸甲酯及 9·65 kg碳酸鉀懸浮於1〇〇 1乙腈中。隨後將混合物加熱至肋 °C，且經40分鐘由滴液漏斗添加7575如苯甲基溴。在 . °C下攪拌16小時後，過濾混合物，且將所收集之濾液真空 蒸發· 12·95 kg(95%)2,4-雙苯甲氧基-5-溴苯甲酸曱酯（微 •黃色晶體）；MW 427·3。 2.4 2，4-雙苯甲氧基-5-溴苯甲酸（生）： 將18 1 THF中之6·4 kg 2,4·雙苯甲氧基-5_溴苯曱酸甲酯 添加至3 kg氫氧化鈉於30 1水中之溶液中。在68。〇下攪拌 隔仪後，將混合物冷卻至1(TC，且經由滴液漏斗（pH 〇添 加7.5 1 HCl(w: 37%)。將混合物再攪拌1小時，且隨後過 濾。在60 °C下將殘餘物真空乾燥至恆定重量；5.687 • kg(91%)2,4-雙苯甲氧基-5-溴-苯甲酸（熔點15〇-152〇c ; MW 413.3)。 2·5 2,4-雙苯曱氧基-5-溴-N-鄰甲苯基笨甲醯胺（^) ·· • 將80 DMF添加至42 1亞硫醯氯中。將混合物冷卻至2_ - 9 C，且經1小時時段添加11.55 kg 2,4-雙苯曱氧基_5_溴苯 甲酸。在此溫度下再繼續攪拌1小時，且接著在25χ：下擾 拌16小時。接著真空（300毫巴，46。〇蒸餾除去亞硫醯氯。 接著將3 1曱苯添加至所得殘餘物中，且將混合物再次蒸發 至乾燥，且將此程序再重複2次。不經進一步純化而將所 127120.doc -58- 200838502 得產物用於隨後反應中。13 6kg(加上甲苯 在3 C下’將2·8 1鄰甲笑脸芬，《^ 州T本胺及2_5 1吡啶添加至50 1二氯甲 烧中。將懸浮於35 1二氯甲烷中夕w ^ ^ _ 軋Τ沉f之13.6 kg 2,4-雙苯甲氧基-

5-漠苯甲耗（甲苯職）經2小時之難添加至此溶液中。 隨後將混合物在饥下攪拌隔夜，且遽出固體且以二氯甲 烷沖洗(2χ ’每次5 〇該固體。將以此方式獲得之粗產物(8 kg)溶解於40 !二氯甲燒中且以4〇】蒸顧水、5〇 i鹽酸（約i mol/1;由5 i HC1 w: 37%與5〇 i水製備）連續萃取。隨後將 有機相以50 1水洗滌。將有機相使用6 kg硫酸鈉乾燥3天。 經吸濾器抽吸濾出乾燥劑，且將濾液在旋轉蒸發器中蒸發 至乾燥。由乙醇（35 1，65。〇再結晶且乾燥（5(rc/35毫巴） 至恆定重量產生10.84 kg(82%)2,4-雙苯甲氧基_5_溴_%鄰 甲苯基苯甲醯胺（熔點174.5°C -176°C ; MW 。 2.6 5-(2,4-雙苯甲氧基-5-溴苯基）_4_(2_甲基苯基羥基_ 411-1，2,4-三唾（色）： 在3°C下，將1.75 kg五氯化麟添加至6〇 1曱苯中之3.5 kg 2,4-雙苯甲氧基-5-溴-N-鄰甲苯基苯甲醯胺中。隨後將混 合物在135°C下加熱4小時，且接著在25°C下繼續攪拌16小 時。真空蒸發產生3 · 6 kg結晶物質。將後者溶解於1 8 1 THF中且在3°C下經1.5小時之過程將其添加至^以kg Boc-肼於30 1 THF中之溶液中。溫至251且攪拌16小時後，以 抽吸濾出產物（4.3 kg白色產物-THF濕氣）且將其直接用 於隨後反應中。 將產物溶解於30 1 THF中，且在rc下經20分鐘之過程 127120.doc -59- 200838502 添加7 1鹽酸（w : 37%)。將、、日人此丄 將此合物在23t下攪拌16小時， 且冷卻至-5°C，且經1·5小時夕、两扣、r、 ， 、之耘逐滴添加7·5 1氫氧化鈉 洛液（w: 32〇/〇)。使各相分離， 1將有機相以25 1飽和氯化 鈉〉谷液（由8 ·75 kg氣化鈉與25〗士制扯 1水製備）洗滌。將有機相使 用6 kg硫酸納乾燥，以抽吸渡出乾燥劑且將攄液在旋轉暮 發器中蒸發至乾燥。向殘餘物中添加2x 5 i甲苯，且進行" 峰式"蒸餾以"帶走"剩餘之水。# ^ 將以此方式獲得之殘餘物

直接進行進-步反應。將h3 kg幾基二咪唾（cdi)溶解於 1〇0 1THF中。冷卻至代後，絲自前述反應之產物緩慢 逐滴添加至25 i THF+。隨後將混合物在说下擾掉叫、 時’且以30 i飽和氣化納溶液萃取，且接著將有機相以251 IN HC1萃取。隨後將有機相以25丨飽和氣化鈉溶液洗務且 使用10 kg硫酸鈉乾燥。過濾且真空蒸發有機相產生固體 殘餘物，將其溶解於5 1甲苯中且在真空中再次蒸發至乾 燥。在70°C下由20 1 2-丙醇再結晶產生2 7 kg(76%)5_(2,4· 雙苯曱氧基-5-溴苯基）_木(2_甲基苯基>3 一羥基“札^心三 唑，MW 542.4。 2·7 5-[4-(2-甲基苯基）·3·羥基-4H-1，2,4-三唑-5-基]-2,4-雙 苯甲氧基-N-甲基-N- 丁基苯甲醢胺⑺： 在120°C及5-10巴下將2 kg 5-(2,4-雙苯曱氧基漠苯 基）-4_(2-甲基苯基）-3-經基-4Η-1，2,4·三唾、90 g氯化（1 ι，_ 雙（二苯膦基）二茂鐵）鈀（II)、83 !一氧化碳、479 g三乙胺 及400 g N-甲基丁基胺於25 1 THF中之溶液在高壓爸中處 理20小時。隨後將所得溶液蒸發且由乙醇結晶，產生1 4 127120.doc -60 - 200838502 kg(70%)5_[4-(2-甲基苯基）-3·羥基-4H-1，2,4-三唑-5-基]-2,4-雙苯甲氧基甲基-N-丁基苯甲酸胺，MW 476.7。 2.8 5-[4-(2-甲基苯基）-3-髮基-41!-1，2,4-三峻-5-基]-2,4-二 羥基-N-甲基·Ν-丁基苯甲醯胺（"A1"): 在 23 C 下，將 1.1 kg 5-[4-(2-甲基苯基）_3-羥基 _4H· 二唑-5-基]-2,4-雙苯曱氧基甲基丁基苯甲醯胺、5% • Pd/q50·5。/0^^及85 1氫於10 1 THF中之溶液在高壓釜中處 理7小時。隨後將所得溶液蒸發且由乙醇結晶產生8 鲁 g(95%)5-[4-(2·甲基苯基）-3,基-4H-1，2,4-三啥 _5_基]_2,4· 二羥基-N·甲基-N-丁基苯甲醯胺（"Cl") ; Mw 396 5。 可分離本發明化合物"C1"之兩種多晶型形式ai&a2。 熔點： 形式八1:熔點 238.5 士〇.1。〇(11==6) 形式 A2 ··熔點 209.6 士 〇.2°C (η = 6) 形式A1為熱力學上較穩定之形式。 • ㈣多晶型形式之粉末x光繞射譜展示於圖i中。 形式A2可（例如）藉由在諸如甲醇、乙醇、丙酮、DMF、 乙酸、曱酸、THF或異丙醇之溶劑中㈣而轉化為ai。 • 多晶型A1及A2之粉末XRD譜資料： ^ 在各狀況下將10個特徵峰用於評估。 —-—---—_ 樣本 [__ XRD原始眘姐 批次7，形式A1 RT 1 批次12，形式A2 -------- -----一 1 I xJjC^XJ / ----RT 2214-07__ 程序及結果： 127120.doc -61 - 200838502 X光粉末繞射（XRD) 所有樣本係藉由XRD量測。 RT 162-07 ： • D5 000繞射儀[Bruker AXS] •透射模式

' •發生器功率30 kV/40 mA ' · CuKal-輻射1.5406 A(第一單色儀） •位置敏感偵測器 _ XRD量測條件： 範圍：3-65。20 解析度：0.05°2Θ 步長時間：1.4 s RT 2214-07 ： • Stoe粉末X光繞射儀系統STADIP611KL •透射模式

^ •發生器功率40 kV/40 mA • Cu-Kal-輻射1.5406人（第一單色儀） •位置敏感偵測器 XRD量測條件： „ 範圍：3 - 65°2Θ 解析度：0.5°2Θ 步長時間：15 s 形式 Al ; RT 162-07 · 127120.doc -62- 200838502 編號 d[A] 2Θ I/Io 1 9.3 9.5 100 2 6.8 13.0 43 3 5.3 16.8 60 4 4.7 18.9 50 5 4.6 19.5 75 6 4.1 21.8 15 7 3.6 24.7 96 8 3.4 26.4 21 9 3.2 27.8 16 10 2.5 36.6 11 形式 A2 ; RT 2214-07 : 編號 d[A] 2Θ I/Io 1 11.8 7.5 38 2 8.4 10.5 100 3 5.4 16.4 32 4 4.4 20.2 60 5 4.2 20.9 64 6 4.0 22.4 46 7 3.8 23.5 28 8 2.9 31.2 11 9 2.3 38.8 13 10 2.2 41.3 9

前藥化合物之製備 實例3 磷酸單-[2-(丁基甲基胺甲醯基）-5-羥基-4-(5-側氧基-4-鄰 甲苯基-4,5-二氫-1H-1，2,4-三唑-3-基）苯基]酯之製備 127120.doc -63 - 200838502

首先在冷卻下將700 mg 5-[4_(2-甲基苯基）_3_羥基_4h_ 1，2,4_二唑-5-基]-4-苯甲氧基-2_羥基-沁甲基卞_丁基苯甲 醯胺引入20 ml乙腈中，且添加1〇㈤丨四氯化碳。接著將〇·5 ml Ν乙基一異丙基胺及5〇 mg 4_(二曱基）吡啶及326 μ亞 膦酸二苯甲基酯在_1〇艺下緩慢逐滴添加。將混合物在此 皿度下再攪拌3〇分鐘，添加〇·5 μ ΚΗ2Ρ〇4於水中之1〇 ml 溶液，且將混合物以乙醚萃取，經硫酸鈉乾燥、過濾且蒸 發。藉由管柱層析法產生550 mg(5 1%)5-[4-(2-甲基苯基）_ 3-羥基-4Η·1，2,4-三唑-5-基]-4-苯曱氧基-2-(二苯甲基磷酸 酉曰）->^甲基-：^_丁基苯甲醯胺（1^2.196分鐘；1^\^ 746.8)。 在23°C下’將550 mg 5-[4-(2·甲基苯基）_3_羥基-4H-1，2,4-三唑-5-基]-4·苯甲氧基-2-(二苯曱基亞磷酸酯曱 基-Ν-丁基苯甲醯胺、5% Pd/c(5〇_5%4)及49·5 ml氫於1〇 ml THF中之溶液在高壓釜中處理19小時。隨後將所得溶液 蒸發且由乙醚結晶；280 mg(79.8%)磷酸單—[2-(丁基曱基 127120.doc -64- 200838502

鐘。 實例6

N-丁基-2,4-二羥基-N-甲基-5-(5-硫酮基-4-鄰甲苯基-4,5-二 氫-1Η·1，2,4-三唑-3-基）苯甲醯胺（G)之製備

實例7 "C1"葡糖醛酸衍生物之製備 127120.doc -66- 200838502

將4 ml磷酸鉀緩衝液（0.1 M/pH 7.4，具有1〇 mM MgCl2) 100 mg尿苷_5，_二膦醯葡糖醒酸納鹽、邮 m "C1"(懸浮於lml2〇%乙腈中）及^諸肝組織句衆引入樣 本小瓶中。將批料在坑下培育。24小時後乙猜， «； 將混合物離心，且接著將上清液蒸發至乾燥。 三種區位異構體之分離及分析係藉助於L(：_Ms進行。 LC-MS條件 具有以下特徵之Hewlett Packard HP 11 〇〇系列系統：離子 源：電喷霧（正離子模式）；掃描：1〇0_1000 m/e ; 斷裂電壓：60 V ; 氣體溫度：300°C ; DAD : 220 nm 〇 流動速率：2·4 ml/min。所用之分裂器在DAD後將MS之 127120.doc -67- 200838502

以下實例係關於醫藥組合物 實例A ··注射小瓶 使用2 N鹽酸將100 g本菸 ^明之活性成份及5 g磷酸氫二 納於3 1再療館水中之溶液带敕 收調整至PH 6.5，將其無菌過濾， 轉移至注射小瓶，在益菌检放 牡…、囷條件下凍乾且在無菌條件下密

封。各注射小瓶含有5 mg活性成份。 實例B :栓劑 將20 g本發明之活性成份與1〇〇 g大豆印填脂及^⑽g可 可脂之混合物㈣，將其倒人模具中且使其冷卻。各检劑 含有20 mg活性成份。 實例C :溶液 由940 ml再蒸餾水中之1 g本發明之活性成份、9 38 g NaH2P04 · 2 H20、28.48 g Na2HP04 · 12 h2〇及 〇·! g氯化 苯甲烴銨製備溶液。將pH調整至6.8，且將溶液補足至1 i 127120.doc -69 - 200838502 且藉由照射將其無菌化。此溶液可以滴眼劑形式使用。 實例D :軟资 在防腐條件下將500 mg本發明之活性成份與99·5 g凡士 林（Vaseline)混合。 實例E ··錠劑 將1 kg本發明之活性成份、4 kg乳糖、1 ·2 kg馬鈴薯澱 粉、0.2 kg滑石粉及〇1 kg硬脂酸鎂之混合物以習知方式擠 L產生叙9彳’使传各錠劑含有1 〇 mg活性成份。 實例F :糖衣藥丸 類似於實例E壓縮錠劑且隨後以習知方式將其用蔗糖、 馬鈴薯澱粉、滑石粉、黃耆膠及染料之包衣將其塗佈。 實例G :膠囊 將kg本务明之活性成份以習知方式引入至硬明膠膠 囊中，使得各膠囊含有2〇mg活性成份。 實例Η :安瓶 將1 kg本發明之活性成份於6〇 1再蒸餾水中之溶液無菌 過濾，將其轉移至安瓶中，在無菌條件下凍乾且在無菌條 牛下#丄封各女瓶含有1 〇 mg活性成份。 【圖式簡單說明】

圖1展示化合物，，C1”之兩種多晶型形式A1及A2的粉末X 光繞射譜。 127120.doc

Claims (1)

1. 200838502 十、申請專利範圍： 1 · 一種化合物 一 5-[4你甲基苯基，基-.R4三嗤|基卜2,4·二 搜基·N•甲基丁基笨甲醯胺， 一 w某+上可用之衍生物、鹽、溶劑合物、互變異 構體及立體異構體，包括其所有比率+物^ • 2·=求項1之化合物，其中該等醫藥學上可用之衍生物 久、乂下各物之群群··單石粦酸及二填酸衍生物、硫酮 ^ 衍生物、單葡糖趁酸及二葡糖駿酸衍生物。 3· T種藥物’其包含5K2-曱基苯基）-3,基-4H-1，2,4-三 Λ 5基]_2,4_二羥甲基·N•丁基苯甲醯胺及/或其醫 藥學上可用夕# 1 Μ λ, J用之何生物、鹽、溶劑合物、互變異構體及立 體異構體，包括其所有比率之混合物，以及視情況之賦 形劑及/或佐劑。 4·種5_[4·(2-甲基苯基）-3-羥基·4Η-1，2,4-三唑-5-基]-2,4_ 龜 一搜基_1甲基-丁基苯曱醯胺，及其醫藥學上可用之 鹽、彡谷劑合物互變異構體及立體異構體，包括 其所有比率之混合物之用途，其係用於製備供治療及/或 • 預防與HSP90之抑制、調控及/或調節作用相關之疾病用 ， 的藥物。 5·如明求項4之5-[4-(2_曱基苯基）_3_羥基·4Η-1，2,4-三唑-5-基]-2,4-二經基_Ν•曱基_Ν_ 丁基苯甲醯胺及其醫藥學上可 用之街生物、鹽、溶劑合物 '互變異構體及立體異構 體’包括其所有比率之混合物的用途，其係用於製備如 127120.doc 200838502 下藥物 ;/Q療或預防腫瘤疾病、病毒疾病、移植之免疫抑 制、發炎引發之疾病、囊腫性纖維化、與血管生成有關 之疾病、傳染病、自體免疫疾病、局部缺血、致纖維化 疾病， 瘳 用於促進神經再生， 用於抑制癌症、腫瘤細胞之生長及腫瘤新陳代謝用， _ 用於保護正常細胞免於化學療法引起之毒性， 用於治療以錯誤蛋白摺疊或聚集為主要誘因之疾病。 如明求項5之用途，其中該等腫瘤疾病為纖維肉瘤、黏 液肉瘤、脂肉瘤、軟骨肉/廇、骨肉瘤、脊索瘤、血管肉 瘤、内皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管内皮瘤、滑膜瘤、 間皮瘤、尤因氏瘤（Ewing，s tum〇ur)、平滑肌瘤、橫紋肌 肉瘤、結腸癌、胰腺癌、乳癌、卵巢癌、前列腺癌、鱗 狀細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳 _ 頭狀癌、乳頭狀腺癌、囊腺癌、骨髓癌、支氣管癌、腎 細胞癌、肝癌、膽管癌、絨膜癌、精原細胞瘤、胚胎 癌、威姆氏瘤（Wilm’s tumour)、子宮頸癌、睾丸瘤、肺 . 癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、膠質瘤、星形細胞 • 瘤、神經管胚細胞瘤、顱咽管瘤、室管膜瘤、松果體 瘤、血管母細胞瘤、聽神經瘤、少枝膠質瘤、腦膜瘤、 黑素瘤、神經母細胞瘤、視網膜胚細胞瘤、白血病、淋 巴瘤、多發性骨髓瘤、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症 (Waldenstr5m’s macroglobulinaemia)及重鏈疾病。 127120.doc 200838502

   i ’如明求項5之用途’其中該等病毒疾病之病原體係選自 由以下各病原體組成之群：A型肝炎、B型肝炎、c型肝 火、流感、水痘、腺病毒、第一型單純疱疹（j^vq)、第 二型單純疱疹（HSV-II)、牛疫、鼻病毒、埃可病毒 (ech〇vlrus)、輪狀病毒（r〇tavirus)、呼吸道融合性病毒 (RSV)乳頭瘤病毒、腫瘍病毒、巨細胞病毒、艾奎諾 病毒（equinovirus)、節足動物攜帶性病、亨特病毒 ( ^rUS)、科沙可病毒（(^0乂8&〇]<^¥11*118)、肥腺炎病 毒:麻療病毒、風療病毒、小兒麻痺病毒、人免疫缺陷 病毋1型（mv·1)及人免疫缺陷病毒II型（Ηΐν-π)。 如明：項5之用途’其中該等發炎引發之疾病為類風濕 〖生關即九、哮喘、多發性硬化、1型糖尿病、紅斑性狼 瘡症、牛皮癖及發炎性腸病。 9·如明求項5之用途，其中該等與血管生成有關之疾病為 ㈣病性視網膜病f管瘤、子宮内膜異位症及腫瘤 10·如請求項田、合 ^ 、之用途，其中該等致纖維化疾病為硬皮症、 夕發性肌炎、令I 身14狼瘡症、肝硬化、瘢痕瘤形成、間 貝性腎炎及肺纖維化。 項5之用途，其中該等錯誤蛋白摺疊或聚集為主 H. § *之疾病為綿羊瘪病、庫賈氏病（Creutzfeldt-Jakob disease)、亨娃 負症（Huntington’s)或阿兹海默症 (Alzheimer，s) 〇 12· —種藥物，发 〆、 [_(2·甲基苯基）-3-經基·4Η-1，2,4-三 127120.doc 200838502 唾，*二趣基— 藥學上可用之衍生物、蹿丁基苯p醯胺及/或其醫 體異構體，包括其 i、溶劑合物、互變異構體及立 他藥物活性成份「 比率之混合物，以及至少-種其 J3. —種套件（套組 ⑷有效量之”: 下各物單獨封裝組成： 5-基]_24 _ [4_(2·甲基苯基）·3,基.！，2,4_ 三哇· 上可用之、Γ羥基-N•甲基_Ν·丁基苯甲醯胺及/或其醫藥學 構體，~ 4丁生物、鹽、溶劑合物、互變異構體及立體異 匕括其所有比率之混合物，以及 (b)有 # ^里之另一藥物活性成份。 127120.doc