TW200403052A - Use of organic compounds - Google Patents

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玖、發明說明： 發明所屬之技術領域 本I明係關於一種含血小板凝集抑制量之改質胺基酸或 其醫藥可接受性鹽之醫藥組合物用以製造供抑制血小板凝 集作用之醫藥之用途。 先前技術 血小板活化及凝集作用涉及不穩定之狹心症及急性心肌 棱塞、血栓療法及血管造型術後之再阻塞、暫時性絕血侵 氣及各種其他心臟血管疾病。當血管因急性調停作用而損 k ’如血管造型術或更慢性地因動脈硬化之病理過程所引 起之損傷時，血小板會活化而黏附至該受損表面或彼此黏 附。此血小板活化、黏附及凝集作用可在血管腔内形成閉 合性检。 多年來已研究各種藥劑作為抑制血小板凝集及血栓形成 之潛在標的。例如阿斯匹靈已使用作為預防抗血栓劑，因 為其可抑制血小板凝集。 us專利號 55773,647(，647)及 5,866,536(’536)描述含改質 胺基酸如N-(5-氯水楊醯基）-8-胺基辛酸（5-CNAC)、 N-(10-[2-羥基苯甲醯基；]胺基癸酸八snad)&Nj8-[2羥基 苯甲酿基]胺基）辛酸（SNAC)之經口遞送藥理活性劑之組合 物。此外，WO 〇〇/〇59863(，863)揭示式I之二鈉鹽：

86474.DOC 200403052 其中 R1、R2、R3及 R4獨立為氫、-OH、-NR6R7、鹵素、C】-C4 燒基或C1-C4燒氧基，· R為經取代或未經取代之cvc 16伸垸基、經取代或未經 取代之C 2 - c i 6伸埽基、經取代或未經取代之c } - C ! 2境基 (伸芳基）或經取代或未經取代之芳基（Ci-Cu伸烷基）；及 R6及R7獨立為氳、氧或Cl-C4烷基；及其水合物及溶劑化 物，特別有效地用以經口遞送活性劑。 現在意外地發現，647,，536及，863之改質胺基酸為血小板 凝集作用之有效抑制劑。因此，，647,，536及，863之利用改 質胺基酸作為藥理活性劑之載體可增加抑制血小板凝集作 用之優點。 發明内容 據此，本發明提供一種於哺乳類（較好為人類）中抑制血 小板凝集之方法，包括投予血小板凝集抑制量之改質胺基 酸或其醫藥可接受性鹽。 另一具體例中，本發明提供一種於哺乳類（較好為人類） 中抑制血小板凝集之方法，包括投予含血小板凝集抑制量 之改質胺基酸或其醫藥可接受性鹽之醫藥組合物。 又其他具體例中，本發明提供—種於接受藥理活性劑之 哺乳類（較好為人類）中抑制血小板凝集之方法，包括投予 含該藥理活性劑及改質胺基酸或其醫藥可接受性鹽之醫藥 組合物，纟中該改質胺基酸或其鹽存在量為可有效抑制血 小板凝集。

86474.DOC 200403052 本發明因此有關一種於哺乳類（較好為人類）中抑制血小 板凝集之方法，包括對該病患投予血小板凝集抑制量之 N-(5-氯水楊醯基）_8_胺基辛酸（5_CNAc)或其醫藥可接受 性鹽。 又 其他具體例中，本發明提供一種於哺乳類（較好為人類） 之血^板凝集之方法’包括投予含血小板抑制量之5_cnac 或其醫藥可接受性鹽之醫藥組合物。 又其他具體例中，本發明提供—種於接受藥理活性劑之 哺乳類（較好為人類）中抑制血小板凝集之方法，包括投予 含該藥理活性劑及5-CNAC或其醫藥可接受性鹽之醫：组 合物，其中該5-CNAC或其鹽存在量為可有效抑制血小板凝 需了解本發明包括醫藥活性劑及改質胺基酸兩者之具體 例中，該血小板凝集抑制活性為改質胺基酸之功能。此血 小板凝集活性並非藥理活性劑之功能。 其他具體例中，本發明提供—種於接受肝素、胰島辛、 副甲狀腺激素或_素治療之哺乳類中抑制血小板凝集之 万法，包括投予含該肝素、胰島素、副甲狀腺激素或制 素及改質胺基酸或其醫藥可接受性鹽之醫藥組合物，立中 該改質胺基酸存在量為可有效抑制血小板凝集。’ 、其他具體例中，本發明提供—種抑制血小板凝集作用之 方法，其中攜鈣素為鮭魚攜鈣素。

其他具體例中，本發明接征 S4- X X 、一種抑制血小板凝集作用之 方法，其中改質胺基酸之存在量約25毫克至約_毫克，較

86474.DOC 200403052 好約100毫克至約200毫克。 又其他具體例中，本發明提供— 搜抑制血小板凝集 之方法，其中藥理活性,在A旦4 乍用 以存在里相對於醫藥组合物總重之 0.05重量％至70重量％。 〜置< 又，、他』例中，本發明提供—種於接受肝素 、副甲狀腺激素或攜料治療之哺乳類中抑制血小板凝隹 之万法，包括投予含該肝素、胰島素、副甲狀腺激素或； 妈素及5-CNAC或其醫藥可接受性鹽之醫藥組合物，其中梦 5-CNAC存在量為可有效抑制血小板凝集。 、μ 又”他具to例中，本發明提供_種抑制血小板凝集之方 法，其中該醫藥組合物包括歸及5_CNAC或 受性鹽，且該哺乳類為人類。 要 又其他具體例中，本發明提供_種抑制 法’其巾制料輕錢料。 本發明有關-種含血小板凝集抑制量之改質胺基酸或其 w藥可接文性鹽之醫藥組合物用以製造供抑制血小板凝集 作用之醫藥之用途。 $ 本發明又有關一種含藥理活性劑及改質胺基酸或其醫藥 可接文性鹽之醫藥組合物用以製造供抑制血小板凝集作用 之醫藥之用途，其中該改質胺基酸或其鹽存在量為可有效 抑制血小板凝集。 較佳具體例中，本發明有關一種含藥理活性劑及改質胺 基酸或其醫藥可接受性鹽之醫藥組合物用以製造供抑制血 小板焚集作用之醫藥之用途，其中該改質胺基酸或其鹽存

86474.DOC 在量為可有效抑制血小板凝集，該改質胺基酸為N_(5_氣水 楊醯基）-8-胺基辛酸（5-CNAC)或其醫藥可接受性鹽。 本發明又有關一種含該肝素、胰島素、副甲狀腺激素或 攜躬素及改免胺基酸或其醫藥可接受性鹽之醫藥組合物用 以製造供於接文肝素、胰島素、副曱狀腺激素（ρτΗ)或攜 鈣素治療之哺乳類（較好人類）中抑制血小板凝集之醫藥之 用途，其中該改質胺基酸或其鹽存在量為可有效抑制血小 板凝集。 本發明較佳具體例有關本發明之醫藥組合物之用途，其 中該攜#5素為鼓魚攜_素。 本發明另一具體例有關本發明之醫藥組合物之用途，其 中琢改質胺基酸存在量約25毫克至約4〇〇毫克。 本發明較佳具體例有關本發明之醫藥組合物之用途，其 中該改質胺基酸存在量約100毫克至約2〇〇毫克。 本發明另一具體例有關本發明之醫藥組合物之用途，其 中該藥理活性劑存在量，相對於醫藥組合物總重，為0.05 重量％至70重量％。 本發明又有關本發明之醫藥組合物之用途，其中該醫藥 組合物包括攜鈣素及5_CNAC或其醫藥可接受性鹽，真該哺 乳類為人類。 本發明又有關-種用以抑制血小板凝集之醫藥雜舍物’ 其包括血小板凝集抑制量之改質胺基酸或其醫藥町接受性 鹽〇 本發明有關-種用以抑制血小板凝集之醫藥組舍物’其

86474.DOC -10- 200403052 包括藥理活性劑及改質胺基酸或其醫藥可接受性鹽，其中 薇改質胺基酸或其鹽存在量為可有效抑制血小板凝集。 本發明其他特徵及優點將由下列本發明之詳細說明及附 屬之申凊專利圍變得顯而易見。 實施方式 使用5 μΜ腺甞二磷酸鹽（ADP)作為血小板凝集刺激劑及 各種濃度之5-CNAC作為血小板凝集抑制劑，在由12位健康 個體所得之冨含血漿之血小板（PRP)進行劑量抑制實驗。對 由5 μΜ ADP所刺激之3個個別個體建立血小板凝集曲線。 使用5 μΜ腺苷二磷酸鹽（ADP)作為血小板凝集刺激劑及 各種濃度之5-CNAC作為血小板凝集抑制劑，在由12位健康 個體所得之富含血漿之血小板（PRP)進行劑量抑制實驗。對 由5 uMADP所刺激之3個個別個體建立血小板凝集曲線。 使用3 μΜ ADP作為血小板凝集刺激劑及各種濃度之 5-CNAC作為血小板凝集抑制劑，於PRp中進行劑量抑制余 驗。對由3 μΜ ADP所刺激之2個個別個體建立血小板赛 曲線。 級集 使用2 μΜ ADP作為血小板凝集刺激劑及各種濃戶、 5-CNAC作為血小板凝集抑制劑，於pRp中進行劑量抑制〜 驗。對由2 μΜ ADP所刺激之4個個別個體涂上 、 及乂血小板凝集 曲線。 使用5微克/毫升膠原 'r孤规呆利敬劑及各種濃 之5-CNAC作為血小板凝集抑制劑，於pRp中進^ 曰 實驗。對由5微克/毫升膠原所刺激之2個個別個體建十立 86474.DOC -11- 200403052 板凝集曲線。 使用2 · 5微克/宅升膠原作為血小板凝集刺激劑及夂種、、心 度之5-CNAC作為血小板凝集抑制劑，於PRP中進行劑量抑 制實驗。對由2·5微克/毫升膠原所刺激之2個個別個建立 血小板凝集曲線。 使用2.0微克/毫升膠原作為血小板凝集刺激劑及各種濃 度之5-CNAC作為血小板凝集抑制劑，於PRP中進行劑量抑 制實驗。對由2.0微克/毫升膠原所刺激之個體建立血小板 凝集曲線。 使用1微克/毫升膠原作為血小板凝集刺激劑及各種濃产 之5_CNAC作為血小板凝集抑制劑，於PRP中進行劑量抑制 實驗。對由1微克/毫升膠原所刺激之個體建立血小板凝集 曲線。 使用0.7 5微克/毫升膠原作為血小板凝集刺激劑及各種 濃度之5-CNAC作為血小板凝集抑制劑，於PRP中進行劑量 抑制實驗。使用0.5微克/毫升膠原作為血小板凝集刺激劑 及各種濃度之5-CNAC作為血小板凝集抑制劑，於pRp中進 行劑量抑制實驗。對由0.5微克/毫升膠原所刺激之個體建 立血小板凝集曲線。 本發明可用之改質胺基酸包含前述，536所揭示之123個 胺基之任何一種或前述’647所揭示之1 93個胺基酸之任 何一種或其任何組合。前述，647及，536所述之内容併於本文 供參考’尤其是其申請專利範圍以及對應之操作例。此外 ’該改質胺基酸可為前述任何改質胺基酸之二鈉鹽以及其 86474.DOC -12- 200403052 乙醇溶劑化物及水合物。適宜化合物包含下列式i之化合物： R4 Ο

其中

Ri、R2、R3及 R4獨立為氫、_〇H、_NR6R7、鹵素、Cl_C4 燒基或C「C4燒氧基； R5為經取代或未經取代之C^C i6伸燒基、經取代或未經 取代之C 2 - C!6伸晞基、經取代或未經取代之c i - C i 2燒基 (伸芳基）或經取代或未經取代之芳基（C^-Cu伸烷基）；及 R6及R7獨立為氫、氧或C「C4烷基；及其水合物及溶劑化 物。式I化合物以及其二鈉鹽及醇溶劑化物及水合物以及 其製備方法揭示於WO 00/059863。 該二鈉鹽之製備可自乙醇溶劑化物藉本技藝已知方法蒸 發或乾燥該乙醇溶劑化物而形成無水二鈉鹽。 溫度約8〇°c至約12(rc之間進行，較好約以它至 好約8 5 C。乾燥步驟一般在2 6，，u ~ 士 $丨_疏、I 約12(TC之間進行，較好約8rc至約9〇它且最 燥步驟一般在％” n〖下進行。該

中之漿液並添加二 、烷氧化鈉等之水 。乾燥一般在 纾少於約2重 ’乂無水二鈉鹽之100重量％為準。 亦可藉由製造該改質胺基酸於水 —莫耳當量之氫氧化鈉、烷

86474.DOC -13- 200403052 溶液而製備。適宜之院氧化納包含（但不限於）甲氧化鋼、 乙氧化鈉及其組合。 製備二鈉鹽之又其他方法係使該改質之胺基酸與一莫耳 當量之氫氧化納反應產生二鈉鹽。 該二鈉鹽可藉使含二鈉鹽之溶液真空蒸餾濃縮成濃稠糊 料而以固體單離。此糊料在真空烘箱中乾燥獲得固體之該 改質胺基酸之二鈉鹽。該固體亦可藉使該二鈉鹽之水溶液 噴霧乾燥而單離。 該改質之胺基酸可藉本技藝已知方法製備，如上述’647 及’536所述者。 前述f863所述之乙醇溶劑化物包含（但不限於）乙醇溶劑 之分子或離子與該改質胺基酸之二鈉鹽之分子或離子之分 子或離子錯合物。一般，該乙醇溶劑化物中每分子之該改 質胺基酸之分子或離子含一個乙醇分子或離子。 該改質之胺基酸之二鈉鹽之乙醇溶劑化物可藉溶解該改 質之胺基酸於乙醇中製備。一般，每克之改質胺基酸溶入 約1毫升至約50毫升乙醇中，且通常約2毫升至約10毫升乙 醇中。該改質胺基酸/乙醇溶液接著與過量莫耳當量之含鈉 之鹽如含單鈉之鹽（相對於改質之胺基酸），亦即對每莫耳 改質胺基酸為一莫耳以上之鈉陽離子，產生乙醇溶劑化物 。適宜之單鈉鹽包含（但不限於）氫氧化鈉；烷氧化鈉如甲 氧化鈉及乙氧化鈉；及前述之任何組合物。較好，至少約2 莫耳當量之含單鈉之鹽添加至乙醇溶液中，亦即對每莫耳 改質胺基酸使用至少約2莫耳鈉陽離子。通常，該反應係在 86474.DOC -14- 200403052 混合物之回流溫度或低於回流溫度下進行，如在周圍溫度 乙酉予/谷劑化物接著藉本技藝已知方法回收，如所得漿料 在大氣壓下蒸餾而濃縮，使濃縮之漿液冷卻並過濾固體。 回收之固體接著真空乾燥獲得乙醇溶劑化物。 改質胺基酸之二鈉鹽之水合物可藉以乙醇溶劑化物乾燥 形成如上述之無水二鈉鹽，並使該無水二鈉鹽水合。較好 开y成一鈉鹽之單水合物。由於無水二鈉鹽極具吸濕性，因 此暴露至大氣溼度下可形成水合物。通常，該水合步驟係 在約周圍溫度至約50°C，較好在周圍溫度至約3(rc之溫度 並在具有至少50%相對溼度之環境下進行。或者，該無水 二鈉鹽可以蒸氣水合。 較佳之改質胺基酸為5-CNAC(稱為8-(N-2-羥基-5-氯苯 甲醯基）胺基辛酸）、SNAD、SNAC及其單鈉及二鈉鹽、其 鈉鹽之乙醇溶劑化物及其鈉鹽之單水合物及其任何組合。 最佳之改質胺基酸為5-CNAC之二鈉鹽及其單鈉鹽。 適用於本發明之藥理活性劑包含治療劑以及預防劑。該 藥理活性劑包含（但不限於）蛋白質、聚肽、激素、多糖包 含黏多糖之混合物、碳水化合物、脂質及其組合。 樂理活性劑之特定實例包含（但不限於）下列（包含其合 成、天然或重組來源）··生長激素，包含人類生長激素、重 組人類生長激素、牛生長激素及豬生長激素；生長激素釋 出激素；干擾素，包含α、冷及T -干擾素；介白素_ 1 ;介 白素-2 ;胰島素、包含豬、牛、人類及人類重組體，視情 况具有平衡離子包含鋼、鋅、妈及铵；似胰島素生長因子 86474.DOC -15- 200403052 ’包含IGF-1 ;肝素，包含未分餾之肝素、類肝素、皮膚素 、軟骨素、低、極低及超低分子量肝素；攜鈣素，包含鼓 魚、豬、鰻魚、難及人類攜鈣素；紅血球生成素；前房降 壓因子（atrial naturetic factor);抗原；單株抗體；生長激 素釋放抑制因子；蛋白質抑制劑；促腎上腺皮質素、促性 腺釋放因子；催產素；促黃體生成激素；促卵泡成熟激素 ;葡萄糖腦苷脂腌；血小板生成素；菲格絲汀（filgrastim) 、前列腺素；環范素；後葉加壓素；色甘酸鈉（色甘酸鈉或 二鈉）；萬古黴素；去鐵噁胺（deSfenri〇xamine);副甲狀腺 激素，包含其片段丨抗微生物劑，包含抗真菌劑；維他命 ，孩等化合物之類似物、片段、擬藥或聚乙二醇改質之衍 生物或其任何組合。 、較佳之藥理活性劑為藥理活性肽，尤其是攜鈣素。藥理 活性劑之已知類中，㈣素具有變化之醫藥利用性且慣用 以/口療例如配吉氏（Paget，s)疾病、高鈣血症及斷經後骨質 ㈣^各種攜㈣包含經魚、豬及鰻魚攜約素可商業獲 =且慣用以治療例如配吉氏疾病、惡性高舞血症及骨質疏 鬆症。攜_素可為任何攜躬素包含天然、合成或其重组來 源，以及攜荀素衍生物，如以㈣el攜料。該組合物 可包括早-攜躬素或兩種或多種攜转素之組合。較佳攜鈣 素為口成Ιέ魚攜舞素。該攜舞素為商業獲得或 法合成。 两u力口万 較佳之藥理活性劑為肝素、胰島素及ΡΤΗ。 藥理活性杳丨丨夕香_ ^ 1丄 瓜為有效完成所需目的之量，亦即治

86474.DOC -16- 200403052 療有效量。但當欲投予數種成分時，該量可較少，亦即可 乂累权心單x投予總有效量。當組合物提供持續釋出 藥理活性劑時’活性劑之量亦可大㈣有效量。欲使用之 活性劑總量可藉已知方法由熟知本技藝者決定。但由於該 組合物可比習知組合物更有效遞送活性劑，因此可對個體 投予比習知劑量衫更少量之活性劑同時仍達到相同之血 液量及/或治療效果。 §樂理活性劑域魚_素時，該適當劑量當然將隨例 如宿主及欲治療病況之性質及嚴重性而異。但通常在約〇5 微克/公斤至約10微克/公斤動物體重之日劑量時，將可全 身性地獲彳于令人滿意之結果，較好為丨微克/公斤至約6微克 /公斤體重。 孫藥理活性劑一般包括總醫藥組合物之〇 〇5重量％至7〇 重量％，較好相對於總醫藥組合物總重，該量為〇 〇1重量％ 至50重量％，更好0.3重量％至30重量％。 本务明所用之醫樂組合物典型上包括血小板凝集抑制量 < 一或多種改質胺基酸，亦即足以抑制血小板凝集之量。 般遠改質胺基酸存在之劑量範圍約25毫克至約4〇〇毫克 之間。最好該改質胺基酸存在之劑量範圍約1〇〇毫克至約 200毫克之間。 本發明所用之醫藥組合物典型上包括醫藥活性劑及血小 板凝集抑制量之一或多種改質胺基酸，亦即足以抑制血小 板凝集之量。 本發明所用之醫藥組合物可以膠囊提供，包含軟凝膠膠 86474.DOC -17- 200403052 暴J疋剜、樂囊或其他固體口服劑型，其均可藉本技藝已 知方法製備。 = 厶本發明所用之醫藥組合物可又包括慣用量之添加劑，包 但不限於）pH調節劑；保存劑；矯味劑；味遒遮蔽劑； 曰料，保濕劑；營養劑；著色劑；界面活性劑；塑化劑； ^如硬脂酸鎂；流動助劑；壓縮助劑；溶解劑；賦形 劑；、稀釋劑如微晶纖維素如FMC公司提供之pH丨〇2 ^或，、任何組合。其他添加劑可包含磷酸鹽緩衝劑鹽、檸 才冡酸、二醇及其他分散劑。 &本U月所用之|藥組合物可又可包括交聯$乙缔吡洛淀 酮其可為任何叉聯聚乙烯吡咯啶酮。交聯聚乙晞吡咯啶 酮為N-乙缔基-2_峨口各淀酉同之合成交聯均聚物，亦稱為卜乙 稀基2-吡咯哫酮，其分子量為IQ⑻，或以上。市售之交 聯聚乙晞吡咯啶酮包含購自ISP之P〇lyplasd〇ne XL、

Polyplasdone XL_l〇、polyplasd〇ne INF_1〇及購自 BAS][^ 司之 Kollidon CL。 氷乙烯吡咯哫酮為分子量在2,5〇〇至3,〇⑻，〇⑻間之直鏈 1乙烯基2-吡咯啶酮基之合成聚合物。市售聚乙婦吡咯啶 鲷包含購自BASF公司之KGmdQn K 3G、KGUidGn ^卿及 購自 isp之PiaSd〇neK_30及piasd〇ne K-29/32。 如上述，摄父聯聚乙烯吡咯啶酮及聚乙晞吡咯啶酮為商 業獲得。或者，其可藉已知製程合成。 父聯聚乙烯吡咯啶酮、聚乙烯吡咯啶酮或其組合一般在 組口物中之存在！ ’相對於總醫藥組合物之總重，為

86474.DOC -18- 200403052 重量％至50重量％ ’較好2重量％至25重量％，更好5重量％ 至20重量％。 該醫藥組合物亦可包含-或多種酵素抑制劑如放線醯胺 素或表面放線酿胺素及其衍生物；抑肽酶、催絲醇 (Trasylol)及包曼-必克（Bowman-Birk)抑制劑。 再者，運載抑制劑如P -糖蛋白質如酮基普分 (KetoproHn)可存在於本發明之組合物中。 較好，本發明之固體醫藥組合物包含稀釋劑如Avicel; 及潤滑劑如硬脂酸鎂。 本發明之固體醫藥組合物可藉習知方法製備，如使活性 劑、輸送劑及其他成分之混合物摻合，衫及填入膠囊中 «或替代填人膠囊中’而係模t接著進_步製錠或壓縮模 製獲得錠劑。此外，可藉已知方法形成固體分散液接著進 一步加工形成錠劑或膠囊。 較好，本發明醫藥組合物中之成分在整個劑型中均質或 均勻混合。 一本發明之醫藥組合物可投藥以對需要之任何哺乳類遞送 樂理活性劑’該哺乳類包含（但不限於）餐齒類、牛、諸、 狗、貓及靈長類，尤其是人類。 貫驗程 PRP(冨含血小板之血漿）之製備 自健康志财靜脈新抽出之血液收集於G.丨體積.毫莫耳/ 升之檸檬H該志願者在採血前2週未服用任何藥物。 使新抽出之血液離心⑽g，在饥15分鐘）製備阳且最

86474.DOC 200403052 終血小板濃度藉稀釋於自體無血小板之血漿中（藉離心 (1200 g，在22°C 10分鐘））而標準化至200000細胞/微升。 收集上澄液。PRP樣品以含各種濃度之5-CNAC之食鹽水 (儲存在-20°C)預培育1分鐘（22°C)。 血小板凝集作用研究 為了評估5-CNAC對血小板凝集脂抑制效果，進行下列研 究。如上述製備含5-CNAC之0.400毫升PRP樣品。於該等樣 品中添加0.005毫升凝集刺激劑（為ADP(Roche分子生化公 司，Mannheim)或膠原（Horm化學公司，Munich))。ADP或 膠原之終濃度顯示於’’結果’’段落中。在Chronolog 4通道凝 集測量計（型號CH570VS-CH810)中進行凝集研究。該凝集 測量計自動校正特定捐血者之不含血小板之血漿（0%光學 密度）與PRP(1 〇〇%光學密度）間之光學密度之捐血者-相關 之差異。凝集程度藉表示光學密度之最大差異而測量（添加 凝集刺激劑亦即ADP或膠原後與時間無關）並取對照曲線 (無5-CNAC)作為設定在100%之内標準以公稱化。 結果 5-CNAC對由ADP誘發之血小板凝集之效果 需注意僅添加5-CNAC至PRP無法約制血小板凝集。 使用5 μ M ADP作為血小板凝集刺激劑及各種濃度之 5-CNAC作為血小板凝集抑制劑，在由12位健康個體所得之 PRP進行劑量抑制實驗。測試濃度包含0.1、1、2、5、10 、25、100、200及500 μΜ。可看出5-CNAC濃度增加時， 在約2 μΜ 5-CNAC或以上時血小板凝集抑制作用變得更明 86474.DOC -20- 200403052 顯。建立由5 μΜ ADP所誘發之三個個別個體之凝集曲線。 需注意5 μΜ ADP刺激最大之血小板凝集。 為了 5-CNAC在低於最佳ADP刺激作用之抑制效果，以較 低濃度之ADP藉改變濃度之5-CNAC挑釁而重複研究。使用 3 μΜ ADP進行劑量抑制研究。建立個別個體之對應凝集曲 線。進行使用2 μΜ ADP作為刺激劑之相同實驗。建立個別 個體之凝集曲線。結果顯示當血小板凝集刺激劑（ADP)濃 度降低時，血小板凝集受低濃度之5-CNAC所抑制。再者， 觀察到所有測試之ADP濃度中，在第二期凝集曲線中證明 血小板受5-CNAC之抑制，但在凝集曲線最初期時並未觀察 到。此效果類似於可干擾血小板-血小板偶合之整合素lib 3(糖蛋白Ilb-IIIa)拮抗劑。 5-CNAC對膠原所刺激之血小板凝集之效果 與ADP相較，膠原為更強效血小板凝集謗發劑。在變活 化之前有其中血小板結合至膠原不溶纖維之黏著相。此結 果顯示當血小板因高濃度凝集刺激劑膠原（5微克/毫升）而 刺激時，血小板對凝集抑制作用具有抗性。血小板不受1 〇〇 μΜ 5-CNAC之影響。但在約1 mM 5-CNAC時，血小板凝集 之抑制作用變成可偵測。 在較低膠原濃度（2.5微克/毫升）下進行實驗並顯示在一 個體之富含血小板之血漿中200 μΜ 5-CNAC對血小板凝集 有些許抑制作用，但在2微克/毫升膠原下，在較低濃度之 5-CNAC貝ij否，再約1 mM 5-CNAC有一個體顯現血小板凝 集抑制作用同時在較低膠原濃度（1微克/毫升）下，在50 μΜ 86474.DOC -21 - 200403052 或以上時從明文5-CNAC之抑制。較低濃度之刺激劑膠原顯 示類似於5-CNAC之抑制圖形。以人〇1>-刺激之凝集作用， 5-CNAC對膠原-刺激之凝集作用之抑制效果在；疑集曲線第 二期中變得明《 ’同時主要凝集曲線中未觀察到凝集抑制 作用。又，當膠原濃度降低，血小板對5_CNAC抑制作用變 得更敏感。 進一步觀察包含下列：1)5_CNAC未改變血小板型態，因 成’’旋渦，’之細胞維持完整；屮添加ADP後，光學密度增加 。此朝下之圖形係由細胞形狀改變所引起，其首先反應於 血小板凝集。此反應在5_CNAC存在下未受干擾； 5-CNAC以劑量無關地抑制凝集曲線之後段部分（亦稱為次 級凝集作用）；iv)個體間PRP對5-CNAC之敏感度不同；及 v) 5 CNAC之效果顯示與可干擾凝血膦μ產生或干擾來自 患有先天分泌缺陷之病患之血小板（所謂”儲存收集缺陷，，) 之似阿斯匹靈藥物類似之抑制作用。 由前述可看出，本發明之改質胺基酸可有效抑制血小板 凝集。 86474.DOC -22·

Claims (1)

1. 200403052 拾、申請專利範圍： 1.—種含血小板凝集抑制量之改質胺基酸或其醫藥可接受 性鹽之醫藥組合物用以製造供抑制血小板凝集作用之二 藥之用途。 胃 2·如申請專利範圍第1項之用途，其中該醫藥組合物包括藥 理活性劑及改質胺基酸或其醫藥可接受性鹽，其中該改 質胺基酸或其鹽存在量為用以製造供抑制血小板凝集作 用之醫藥時可有效抑制血小板凝集之量。 3 ’如申請專利範圍第1或2項之用途，其中該改質胺基酸為 n_(5•氯水楊醯基>8-胺基辛酸（5-CANC)或其醫藥可接 雙性鹽。 4·如申請專利範圍第2項之用途，其中該藥理活性劑包括肝 素、胰島素、副甲狀腺激素或攜鈣素及改質胺基酸或其 醫藥可接受性鹽，其中該改質胺基酸或其鹽存在量為用 以製造供於接受肝素、胰島素、副甲狀腺激素（PTH)或攜 趟素治療之哺乳類中抑制血小板凝集作用之醫藥時可有 政抑制血小板凝集之量。 5·如申請專利範圍第4項之用途，其中該哺乳類為人類且攜 鈣素為鮭魚攜鈣素。 6·如申請專利範圍第1至5項中任一項之用途，其中該改質 胺基酸存在量約25毫克至約400毫克。 7·如申請專利範圍第6項之用途，其中該改質胺基酸存在量 約100毫克至約200毫克。 8·如申請專利範圍第2至7項中任一項之用途，其中該樂理 86474.DOC 200403052 活性劑存在量，相對於醫藥組合物總重，為0·05重量％ 至70重量％。 9. 10. 11. 12. 13. 如申請專利範圍第2至8項中任一項之用途，其中該醫藥 組合物包括攜鈣素及5-CNAC或其醫藥可接受性鹽。 種用以抑制血小板凝集之醫藥組合物，其包括血小板 凝集抑制量之改質胺基酸或其醫藥可接受性鹽。 如申請專利範圍第1〇項之組合物，其包括藥理活性劑及 改貝胺基酸或其醫藥可接受性鹽，其中該改質胺基酸或 y、鹽存在1為用以抑制血小板凝集作用時可有效抑制血 小板凝集之量。 種抑制哺乳類血小板凝集之方法，包括對該哺乳類投 予含血小板凝集抑制量之改質胺基酸或其醫藥可接受性 鹽之醫藥組合物。 如申請專利範圍第12項之方法，包括投予含藥理活性劑 及改質胺基酸或其醫藥可接受性鹽之醫藥組合物，其中 該改質胺基酸或其鹽存在量為可有效抑制血小之 量。 86474.DOC 200403052 柒、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：第（ ）圖。 (二) 本代表圖之元件代表符號簡單說明： 捌、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式： 86474.DOC