TW199165B

TW199165B -

Info

Publication number: TW199165B
Application number: TW80106436A
Authority: TW
Original assignee: Vertex Pharma
Priority date: 1990-08-29
Filing date: 1991-08-14
Publication date: 1993-02-01
Also published as: WO1992004370A1; AU8727491A

Description

A6 B6 199165 五、發明說明（f ) 發明1SP署 {請先《請背面之注意事項再填寫本1) 手術後的移植排斥反蠹主要是受骨《及器官移植的彩》。然而，經使用免疫抑制劑的治療，器官移植的排斥反應己大輻下»。自鼸免疫疾病為一種多樣性的疾病，除了排斥的是自身组雄外，自tt免疫疾病與移植的排斥反應相類似，免疫抑制療法亦可用於預防或治療不適當的自體排斥反應。目前鼸泛地用來預防移植排斥的免疫抑制_為環孢蛮A (Cyclosporin A(CsA>)它是霉菌代謝下的天然産物且已證明在睡床的器官移檀上有免疫抑制的效能。Caine, R.Y· 等，Br . Ned . J... 282.： 934-93£ (1981) ； White, D.J.C. Drugs 24:322-334(1982)雖然環孢S A廣泛用在免疫抑制療法中，但它的使用（待別在高_置時 > 常伴明着腎毒性，肝毒性及其它中樞神經糸統疾病等副作用。用琛孢SA治療下列的疾病會有Μ性的结果，它確定逋些疾病自讎免疫成份的重要性並且用埴些化合物有效地襄擇性抑制Τ 一細胞的免疫功能。 1)眼科學：« 萄膜炎（Uveitis),貝森病（Behcet’s disease) 及突眼性甲狀腺腫（Grave's ophthalmopathy)。 leetnan. A.P.等，Lancet 486-489 ( 1 982),突眼性甲职腺腫

Nussen blatt, R.B.等· Lancet 235-238(1983),葡萄膜炎

French-Constant, C.等，Lancet 454(1983),貝森病 C J - 3 - 冬纸張尺度適用中國國家樣準(CNS)甲4規格(210x297公釐} 經濟部屮央標-f-局*=工消^合作杜印災

199165 S 五、發明説明（么）

Sanders, Μ 等，Lancet 454-455(1983),貝森病註：目前日本可使用琛孢里A治療貝森病，貝森病是第一用來指徵琛孢SA之自鼸卑疫疾病。 2) 皮虜病學：包括牛皮蘚（Psoriasis)的不同自鼸免疫皮虜病 Zabel, P.等，Lancet 343 (1984)急性皮肌炎（Acate deraatoiyositis ) van Joost, T . I? ,Arch. Der*atol. 123:166-167(1987)異位皮虜病（Atopic skin disease) A p p 1 e b ο ο η · T 等，A m e r*. J . M e d . 8 2 : 8 6 6 - 8 6 7 ( 1 9 8 7 )硬皮病（S c 1 e r o d e r* a ) L o g a n , R A 及 R · P . R . C a 騰 o , J . R o y · Soc. Med. 81:417-418(1988)，添症（Eczena)Griffiths· C.E.M.等，Brit. Med. J. 293:731-732 (1 986),牛皮癣 3) 向液學：包括貧血的不間疾病

Toetteraan· T.H.等，Lancet 693 (1984)純紅血球發育不金（PRCA)

Stryck^ans, P.A.等，Her Engl. J· Med. 310: 655-656 (1984),再生障褰性贫血 G 1 u c k a η，E ·等，Β ο n e M a r r 〇 w T r a n s p 1 a n t 3 S u p p 1 . 1,241 (1988),再生障礙性貧血 4) S腸病學/肝臓學：初级肝«化·自體免疫肝炎，潰瘍性结腸炎，局部性迺腸炎（Crohn's disease)及其它费腸的自讎免疫疾病。 W i e s η 〇 r · R.. Η .等，H e p a t ο 1 〇 g y 7 : 1 0 2 5 · A b s t，# 9，（ 1 9 8 7 ) 初级膽道的肝硬化

Hya^s, J.S.等，Gastroenterology 93:890-893(1987) C J - 4 -

本紙ft尺度適用中國囲家標準(CNS)«F4規格(210x297公；iH ......................................t...........Γ装，..............,...............打…：Μ ................綠 (請先閲讀背面之注意本項再填寫本页) Α6 Β6 χ9916δ 五、發明説明（3〉自《免疫肝炎 (請先聞讀背面之注意事項再瑱荈本頁)

Allison, M.C.等，Lancet 902-903(1984)局部性迺腸炎 Brynskov, J.等，Gastroenterology 92:1330(1987), 局部性遛腸炎

Porro, G.B.等，Ital. J. Gastroenterol. 19:40-41 (1987),潰瘍性结腸炎 5) 神經病學：肌萎縮性脊《側索硬化（ALS,"努格靈病（Lou Gehring’s diseose)),重肌無力症及多發性硬化 Appel, S.·等，Arch Neurol 45:38卜386(1988) ALS. Tindall, R.S.Α·等，He» Engl. J. Med. 316:719-724 (1987)重肌無力症

Doiaasch, D.等.Neurology 38 SuppI. 2,28-29(1988) 多發性硬化 •訂· 6) 腎病症候群：腎病症候群，膜性增生之血管球性腎炎 (MPGN)及相鼷疾病

Vatzon. A.R·等，Clin. Nephrol· 25: 273-274(1986) 腎病症候群

Tejani, A.等，Kidney Int. 33:729-734(1988)» 病症候群 •線· M e y r i e r , A .等· T r a n s p 1 a n t P r 〇 c . 2 0 , S u p p 1 . 4 (Β ο 〇 k III), 259-261 (1988)轚病症候群

LaGrue· G.等· Nephron. 44:382-382(1986),膜性增生之血管球轚络炎 7>風灞性鼸節炎（RA) 本紙ft尺度適用中國國家«準(CNS) T4規格(210x297公釐） A6 B6 x99165 五、發明說明（4) (請先閱讀卄面之：江意事項再填寫木頁)

Harper. J.I·等，Lancet 981-982 (1984)風灞性两節炎 Van Rijthoven, A.V.等，Ann Rheu·. Dis.45:726-731 (1986)風皤性鼷節炎

Dougados, Η.等，Ann. Rheu·. Dis.47:127-133(1988) 風湛性n節炎 8)胰島素一依賴性之糖尿病（IDDH)

Stiller, C.R.等，Science 223 : 1 362-1 367 (1984),胰島素一依賴性之糖尿病

Assan, R.等.Lancet 67-71(1985) IDDM Bougneres, P.F.等· New Engl J. Med. 318 ： 663-670 (1988) IDDH 經濟部屮央標平局齊工消赍合作社卬製

Diabetes. 37:1574-1582(1988) IDDM 許多家畜疾病亦可視為自鼸免疫疾病的待撤，上面所列的自«免疫疾病可在哺乳動物中發現到，Papa, F.O.等， Equine vt. J. 22:145-146(1990),發生在種馬之自鼸免疫不孕症；G 〇 r a n , H . T .及 L . L . ii e r n e r , B r i t. V e t. J . 142:403-410, 491-497及 498-505(1986),貓及狗的免疫介· 質病；George, L.V.及 S.L. Vhite, Vet. Clin· North Aier. G:203-213(1984),大型晡乳動物的自體免疫皮虜病 ;Bennett, D. In Pract. 6:74-86 (1984),狗的自鼸免疫疾病：Hallivell， R.E., J. Aaer. V，t. Assoc. 181: 1088-1096(1982),家畜的自體免疫疾病。有鼷琛孢鼸引起免疫抑制反應的機制業己確立，活鼸外的琛孢靈A抑制淋巴素（1YMPH0KIKES)如白血球間質素2 C J - 6 - 本紙張尺度適用中國Η家橾準(CNS)«P4規格(2丨0x297公釐) Α6 Β6 χ9916δ 五、發明説明（5 ) (LI-2)的釋放（Bunjes，D.等，Eur. J. Ι··ιιηο1 11:657-661 ( 1 98 1 )),並且預防助性Τ細胞及胞毒性Τ细胞之純条擴苄（1 A R S S 0 N , E . J . I 麗麗 u n ο 1 . 1 2 4 : 2 8 2 8 - 2 8 3 3 ( 1 9 8 0 )。環孢SA可結合至胞液性蛋白質，環非林（CYCLOPHILIN), 且能抑制此蛋白質肽基一脯胺醏基順一反異構繭（PPIase) 的活性。Fischer, G等，Nature 337:476-478(1989); Takahashi, N等，Nature 337:473-475(1989)。近來，從鍵徽薗分離出第二種天然産物·（參考FK-506) 證實為一種有效的免疫抑制剤，Tancika, Η·等，J.Ab. Che·. Soc. 109:5031-5033(1987)舆琛孢轚 A — 懞，FK-506 :能f制白IT球ΠΤ資素（1丄：2)的製进，在混肴.淋巴球的培餐：反應及在活體外産生胞毒性T細胞；然而，在逭些分析法中FK-50B的濰度比璣抱證A低一百倍時仍然有效力。Kino, T.等，J. Antibiot· 15:1256-1265(1987), Fk-506 與琢孢SA有截然不同的结構且结合至不同的標的蛋白質稱為 PK-506结合蛋白質（PKBP),因此，FKBP可提供免疫抑制爾 ‘另」《«T移的目標。發明»沭本發明像鼷一新親類的化合物，它對结合蛋白質有親和力，同時對値《有抑制免疫的反應，施給偁釅至少一種化合物的At使笛》充份産生所要的效果（就是，免疫抑制运應），此化合物為線性，改良的二一或三肽。如在此所指敘的，本發明的化合物能抑制FKBP的肽基一脯胺醣其順反異構鼸的活性，更甚的，本發明化合物能抑制t縝胞的活 CJ - 7 - 本紙》尺度適用中Η Η家楳準(CNS) Ή規格(210x297公釐） (請先W讀背面之注意事項再瑱寫本頁) •义· -打· 讀1¾” ^ ⑶年丨I ;&aj 36 r- .:------- 格充-- 五、發明説明（）性，本發明的化合物可視為一種免疫抑制劑用來預防或降低费髓的移植排斥反應*器官移植反應及用來治療自«免疫疾病。園呆篛垂銳明此圖顯示本發明八倨化合物的結構。 A銥明註钿說明本發明係闞新穎類的化合物，它與FK— 506结合蛋白質 (FKBP)有親和性並且它是免疫抑制劑*某些此類化合能抑制FKBP的肽基一脯胺皤基順一反異構酶的活性並且藉著與 FKBP相结合此化合顯示能抑制PPIase的活性。雖然*本發明的化合物對其它的FK-506结合蛋白質或其它的肽基一脯胺醢基順-反異構酶（包括環莽林）有親和性*但仍無法確認是蛋白質或是複合體，也許免疫抑制現象是靠此類化合物的抑制作用而成的。M FKBP的蛋白質或複合體在 FK-506親和力或其免疫抑制相似作用上有相同的反應。因此，此處FK-506结合蛋白質或FKBP與FK-506结合蛋白質或 ΡΚΒΡ-相似的蛋白質或複合體相當親近，對FK-506或它的免疫抑制相似物有親和性。本發明更進一步係闞個體（如人或其它哺乳動物）的免疫抑制法，改良的二-三肽化合物有線性骨架，這些化合物都可用作為免疫抑制劑•他們所包含的一般分子式如下：甲 4(210X2971'沒) (請先《讀背面之注意事項再填寫本頁) •装· _訂· .綠· -8 - 199165

6 6 A B 五、發明説明（）

GN,

K

0八LM 在此一般分子式中： A 為 NH，〇，S ，或 CH。假如A是NH，0或S則B是PCO-或POCO-，此處P是代表 C：L-Ce直鏈或支鏈的烷基或烯^，Cs-Ce環烷基或環烯基，或者是用c5_c6 (請先閑讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝_ -訂. _綠. 甲 4(210X 297公发） 199165 Λ 6 13 6 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製五、發明説明（7) 環烷基，Cb - Ce琢烯基，苯基，1 一禁基，2 —禁基， 9 一箱基或1 一金網烷基所取代的甲基。若A是CH,則B為反式及鐽，Cs -C4直式支鏈的烷基或為甲基，或用Cb -C4琛烷基或Ar所取代的甲基或乙基，此處是自1 一禁基，2 —禁基，2 —呋喃基，3 —呋喃基，2 —睡盼基苯基及有一至三值取代物之苯基，逭些取代物可分別從羥基，鹵素，硝基，三氬化磺，Ci 直鏈或支鏈之烷或烯基，0— （Ct _C4 )直鏈或支鐽之烷基或烯基及Ar ,此處Ar是選自1 一萘基，2_萘基， 2 —呋喃基，3 —呋喃基.2 —唾盼基，苯基及有一至三 > 傾取代物之苯基，-逭些取代物可分別從翔基，由素，涵基，三«化硪，Ci —C4直鍵或支_之烷或烯基，0_ (Ci -C4 )直鍵或支鰱之烷基，在此 Ar基圓不可有二餹以上相連在一起。 D為氫原子；_C4直鐽或支鰱之烷基或烯基；羥基 ;三级一丁氧基，苄«基；4_苄氧一苯基；琛己基； ' _(CH8 >n，C0B -Q”，此處η等於零或爱，Q為甲基，乙基 ,異丙基•三级一丁基苄基，1 一萘基，2 —萘基一或璨己基；或ΑΓ ,此處Ar逸自1 一禁基，2 —禁基，2 —呋喃基，3 -呋喃基，2 -睡~盼基，苯基及有一至三匍取代物之苯基，，些取代物可分別從翔基，斑素，硝基，三藏化硪，Ci — C4直«或支雄之烷或烯基，0 — （Ci -C4 ) 直鏈或支鰱之烷基，此處 Ar選自1 一禁基，2 —第基， 2 —呋喃基，3 —呋喃基，2_睡吩基，苯基，及有一至 CJ - 9 - (請先閲誚背面之注意事項再蜞寫本頁) ，裝· 訂- 線· 本紙張尺度埭用中a國家樣準(CNS)甲4規格(210x297公釐) 199165 Λ 6 13 6 經濟部中央楳準局兵工消費合作社印製五、發明説明（8) 三籲取代物之苯基，逭些取代物可分別從羥基，鹵素，硝基，三氣化«· Ci -C4直鰱或支鏈之烷或烯基，0 — (Ci - C4 )直鏈或支鏈之烷基，在此Ar基_不可有二 «以上相連在一起β Ε和Κ分別為氲或甲基 G不是甲基就是乙基；J是氫.Ci _Ce直鏈或支鰱之烷基或烯基，C6 —C.e琛烷基或環烯基，硫酵基，羥基，苯基，3 —吲睬基或苄基；在此可藉由鍵结使G與J形成一值五琛或六琢狀物。 L為0或附在2 —氮原子上之α —胺基酸殘基，所S的基包括：丙胺酸，2〜胺基丁酸，纈胺酸，正緬胺酸，甶胺酸，正白胺酸，異白胺酸，苯丙胺酸，環己丙胺酸，色胺酸，1 一禁丙胺酸，2 —禁丙胺酸·蘇氨酸（儼_為苄基或三级一丁酯），麩胺酸（供鰱為苄基或三级一丁酯），甲硫胺酸，或絲胺酸（侧鍵為苄基或三级一丁酯）若L是0則Μ是Ci 一 Ce直鋪或支鏈之烷基或烯基，或 -(CHs )n -Ar* ·此處η等於1至6 · Ar理自：1 一禁基 ,2 —禁基，2_呋喃基，3 —呋喃基，2_睡吩基，苯基及有一至三健取代物之苯基•逭些取代物可單猜逸自理基，Λ素•《基，三氟化磺· Ct -C*直鰱或支_之烷烯基Γ 0 - ( Gi——Ci )直鍵或支鍵之院基及Ar ，此處Λγ 襄自1 一禁基，2 —桊基，2 —呋喃基· 3 —呋_基，2 _暖吩基，苯基及有一至三儀取代物之苯基•逭些取代物可單»從羥基•鹵素，硝基•三《化Ci C4直鰱或cJ -10- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝. 訂· .L· 捧本紙張尺度專用中家樣準(CNS)甲4規格(210 X 297公«) 199165 經濟部中央標準局员工消費合作社印製 Λ 6 136__ 五、發明説明（9) 支鍵之烷或成基，Ο — （Ci -C4 >直鱅或支鏈之烷基，在此 Ar基麵不可有兩傾以上相連在一起。假如L是胺基酸，則Μ是0 - （Ci — C4 )直《或支鐽之烷基，0 —苄基· NH—苯基，或HH — 4 一硝苯基及接在胺基酸上的羰基。立β化學上所有位置可為（R)或（S) 假若L為α —胺基酸且逭些位置都欏上星號•則立讎化學上較佳地構形為（S)。然而•當J為硫酵基，立«化學構形上的星號位置迅速龈接氮原子，則一般分子式較佳的立81構形為（R )。本發明8®化合物的结構可在鼷中顯示，逭些化合物及其它化合物—般分子式（用上述取代物Α至Μ >為猱性，· 改良的二一或三肽。本發明改良的肽含有一線性的《架，不似巨璨抗生素FK -506或琛狀肽琢孢雄Α。雖然本發明化合物可含有琛狀的基，（分子未端的取代物，由B及Μ特化），但僅連接相鄰Α輿L成分（分別地 ,且彼此1«互帝連接）本發明的改良肽為含有肽骨架的化合物•它的胺蜩及/ 或羧嫌I可改變，且理想上至少要有内部改良。由於胺及/ 或羧嫌可以改變因此他們可擁自取玳物•或者取代N -嫌‘ ^胺基，在一般分子式中骨幹的藥胺基能由取*代相所改良〆胺基酸《鐽可藉由加成，消去或取代以形成不含蛋白霣生成性的胺基酸之供鍵。可以有許多改良的型式，以最終改良结構的觀黏•胜肽 CJ -11- 本紙張尺A埠用中B 家«準(CNS)甲4規格(210X297公«) (請先閲讀背面之注意事項再構寫本頁) 線· 199165 A6 B6 五、發明説明（/D ) 之N端胺基能被實例B所取代，或替或CH, C —端的羧基亦可被修飾，就一般。内部良的肽 Μ互相梅（鏈接 L為a 而有所式之特 )之化如上俚肢基在此化似，以以上的 ,G的與Κ可分子式所選的改良肽圓9如出。良肽你步地定舆二或學構造修飾為随意的，有一種 ”。舉例而言，D , E 互鍵合成琢狀物），丁附在α —磺上（即一般 -胺基酸，它的側鏈隨不同，此類化合物定為異變種，然而含霣荷基合物可從本改良肽出排所述，本發明之線性改酸之短肽如此，可進一學構造之骨幹在長度上下顯示的為肽费幹的化換，在此Α為0， S 如同發生在Μ之變種内部修飾物包含”改某些取代物（當G與渐渐使基麵轉變或使中星號的位置）在此殘基或所改良的側鏈並非限制在一般分子，胺或羧酸或其鹽類在结構上鼷於二或三義逭些肚待性長度，三值胺基酸之肽相類 (請先閱讀背面之注意事項再瑱穷本页) 0 0 0 0 ,0fill •C-C-H-C-C 畢回顧園中的化合物的構迪，三單位之中間部份或α —硪（一同。當L為α —胺基酸時，則。成分Β (包含Ρ)及Μ相酋胺基酸見於化般分子第三籲於保謹單位輿化合物，相雷合捵4 ,二種胺基齒式中里號位置）相雷胺基酸單位可定為L 基、Ρ為較佳之巨型

CJ 12- 本纸張尺度適用中國國家楳準(CNS) Τ4規格(210X297公釐） 199165 A6 __ B6_ 五、發明説明（） f T、YWf'月也 1桃充 _ - 厭水基（P為B的取代物），D亦為較佳之巨型厭水基* 若L為胺基酸，則殘基含有厭水的側鐽•或較佳地改良成厭水性，這些化合物最好含有一涸亞胺基酸殘基。本發明的化合物對FK-506结合蛋白（發現在淋巴球的细胞液中，特別為T淋巴球）有親和性。 FKBP，與環非林相似，為肤基一脯胺醢基顧一反異構》 ;這二個蛋白質僅知與酶活性有關，FK-50 6與環孢《Α視為他們掘別結合蛋白的肽基-脯胺醢基頗一反異構W活性之特異性抑制劑•這些结合蛋白的抑制常數與產生细胞免疫抑制必須濃度相一致（HarclUg, H.W.等，Nature 341: 758-760(1989)，Siekierka, J-.J.等，Nature 341:75-759 (1 989))更甚，近來報導顯示·系多FK-506相似物與這些活性有相當高的關瞄性（N. Sigal, Merck, Sharp & Doh»e, lecture presented at Dana Farbpr Cancer Center * 1990)這些資料顯示該化合物可視為FKBP呔基一脯胺醣基順反異構_活性之抑制劑並可視作為T 一细胞特異性免疫抑制劑。

Hording, M.W.等，Nature 341:758-760 (1989)業已確認了特別的FK-506结合蛋白，並可用來評估FKBP化合物的结合親和性UD)之檷準，如上所述，本發明化合物與其它的FK-506结合蛋白或其它的呔基一脯胺醣基順-反異構酶*包拮了環非林尚未證實的蛋白質或複合體及搏此抑制作用之此類抑制劑均有親和性，下表為本發明一些樣本化合物的Ki值與用在FKBP結合之親和性UD)。 13 甲 4 (210X297 公沒） (請先《讀背面之注意事項再填寫本页) •装· •打- .線· I991G5 Λ6 13 6 _ 五、發明説明（12) 仆会物；>宑化辦 KUl/U) Fboc-丙肢S*-璣六fillfc«基-苯丙胺醯基-4-搬苯⑴ 4 0.15 Fioc-(三级-丁基)-羥丁胺睡基-脯胺醯基-苯丙胺基-4-硝胺苯⑵ 1.6 1.0 Boc -纈胺睡基-脯胺醯基-苯基胺基-4-硝胺苯⑶ 14 大於10 P«oc-琢己丙按基六氫iitie苄酯⑷ 7 0.3 Boc -丙胺酸-脯胺醯基-白胺酸苄醋⑸ 200 NO F«oc-(三级-丁基)-想按酿讎-脯胺醒基苯丙胺基-4-硝胺苯(6) 15 0.1 Boc -丙按越-脯胺酸苄酯⑺ ND ND Boc -丙胺隹基-脯胺酵基-丙胺酸苄酯⑻ 大於250 ND Boc -丙肢睡基-脯胺醛基-苯丙胺酸苄酯⑼ 大於500 ND Boc -丙胺B基-脯胺醯基-(三级-丁基)麩胺酸甲酯(10) 500 ND Boc -丙肢醯基-脯肢釀基-苯丙肢酸甲酯(11) 大於15 ND Boc -丙胺醒基-脯按酵基-苯丙胺酸-4-赚苯(12) ND ND · Boc -丙肢醯基-脯胺结基-苯丙肢B-4-硝肢苯(13) ND ND Boc _(节基)-酿按趙明&£节酯(14) 1.5 ND Boc -(苄基)-筋孩醒基-脯按釀基进丁織(15) 50 ND Fioc-丙按磨基-2-搂六软减酸苄酯⑽ 5 ND • CJ -14- 本紙張尺度遑用中《國家«準(CNS) Τ 4規格(210X297公釐) 八6 13 6 經濟部中央橾準局员工消費合作社印製 4 USU%- 五、發明説明（13) 人類FK-506结合蛋白可由Horcling, M.V.等，Nature 341:758-760(1989)描教中獲知，從競争性LH-20结合分析中得知顯着的Kp值可由Harcling, M.V.等，Nature 341: 758-760 ( 1989)描敘中決定，可由 Horclim Μ.V.等， Nature 341 : 758-760 (1989)用 32-[l-14C]-笨甲蕖基，亦或由 Siekierka, J.J.等在，Nature 341 : 755-757 (1989) 中用[8 Η〕二羥一FK-5 06來決定。於表1中KD值可用後法獲得，該法是用不平均化合物〔3 Η〕一二羥FK-506與 FK-50 6结合蛋白相互鏑争而澜得該值。 FKBP上PPIase(rotaiase)醑活性的抑制作用而81得亦可由 Harding, M.V.等，Nature 341:758-760(1989)或 Siekierka, J.J.等，Nature 341 : 755-757 (1989)描敘在典型结構中（N-琥珀基一丙按醣基一丙按釀基-醣胺酵基-苯丙胺醒基4-硝苯胺）丙胺酸胺酸肚鍵的順一反異構化作用可用_籌乳蛋白鼸ft析法去監看·（胰 •«乳蛋白_可使受霣的反式釋出4-硝苯肢，Fisher.G等 ,Nature 341 ί 476-478 (190)可決定反應範中抑制_在不同濰度的加成抑制放鼴並且分析一级速率常數當作抑制爾濃度的功能以評估顯着變化的ΙΠ值。在與FKBP親和性上化合物1, 2, 3, 4及6很相似/ 且舆 ΡΚ-506化合物 1 , 2 · 3 · 4 · 6 , 8 , 9 , 14, Ή 及16均顯示能抑制FKBP的肽基一醣胺醯基順一反異_ (PPIase)活性。FK-506 (Fisher, G.等，Nature 337:476-478(1989)Takahashi, N等，Nature 337: 473-475(1989) C J -15- (請先M讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張Λ衣埠用中國家《準(CNS) T4規格(210X297公釐) 經濟部中央搮準局貝工消費合作社印製 199165___Be_ 五、發明説明（14) 中用及環孢蛋 AHarding, M.W.等，Nature 341:758-760 (1989) ί Siekierka, J.J.等.Nature 341:755-757(1989) 。此值可決定他fl相對應结合蛋白的解釀常數以及PPIase 抑制作用的Ki常數，此值的濃度一致（此濃度對毎籲化合拽在活《外免疫反應（偵拥T细胞撖活與增殖作用）分析中有效用），Kino, T 等，J. Antibiot. 15: 1256-1265 ，如此，本發明線性，改良的肽化合物預期在活醴内外均有免疫抑制的效用，如此•被視為免疫抑制爾的此類化合物才可用在器官移植的預防或慢性移植排斥的治療以及用在自饑免疫疾病的治療。本發明的免疫抑制作用化合物可以給# «或器官移植盼病人版用或者為了某些理由須降低或抑制病人的免疫反慝 .(不同類自鼸免疫）的病人服用，本發明化合物亦可给非人的晡乳類服用以治療不间哺乳類的自鼸免疫疾病。由於本發明的化合物對FKBP有親和性且對FKBP的PPIase 活性有抑制作用，所以本發明的化合物對受抗原剌激後增生T细胞，特別是對有雀助特性的T细胞有抑制作用。在罌官移植排斥作用的初步預防，在挽救移植器官的偶發事件中•以及治療任何的自體免疫疾病，逭些免疫病會有不鳙當的自鑛免疫反應，逭些自體免疫疾病包括萄膜龙 •貝森病•突眼性私狀朦腫，牛皮蘑，急性'皮肌炎·，異-位皮虜症，磺皮病，灞症•純紅血球發育不全，再生障礙性貧血•初级肝嫌化•自鳢免疫肝炎·潰瘍性结腸炎，局部性fi腸炎，肌萎鏞性脊鰱《索硬化，重肌無力症及多發性 C J -1 6 _ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺本每用中國國家«準(CNS)甲4規格(210X297公*) ϊ9916δ Λ 6 13 6 經濟部中央標準局员工消費合作社印製五、發明説•明（15) 硬化，腎病症候群，腰性增生之血管性罾炎，風藤性η節炎，胰島素一依賴性之耱尿病。有效治療上列所有的自釀免疫疾病，降低谊些病的症狀，滅纽逭些病的進展，在胰島素一依賴性之糖尿病例中，自然胰烏素完全停止製造前且轉變成全然要依靠外來的胰島索時，治療此種耱尿病就有效。基於這些目的，本發明化合物可採用不同的路徑（如；口服，腸外，藉吸入性噴蓀器，局部地頦，直腸，陰道或經由植入性貯器），》量配方中含有藥物上一可接受的載體，佐劑及媒在此所用的術語”腸外”包括皮下的，靜脈·内的，肌肉内的，胸费内的及顱内的注射或漫 _法。本藥物的组成可用滅醣注射製（如滅鷓注射的水溶液及油性的懸浮液）的型式出現，依照先前已知的技s採用敢劑，湛用及懸浮用來鼸配本懸浮液，滅篇注射製_亦可由滅篇注射溶液或無毒性颺外可接受的稀轉液或溶剤之驗浮液，如在1,-3 — r二酵溶液中可用水，林格氏液及等笮氰化》溶液作為可接受的溶媒或溶繭。此外.習知滅鹧，固化的油可用來作為溶_或戀浮介質-根鐮逭《目的任何棍合的固化油均可使用，包括合成的單或雙一甘油賭，勝' 肪酸如油酸及具贫油_的衍生物可用在注射μ的《備中彳就似用來作為天然藥杨上一可接受的油），如橄纜油，趙麻油，尤其是他η在聚乙烯型中，逭些油液或鐮浮液亦可含有長鏈酒精的稀_掖或分散液如Ph. Helv或相似的酒精。 CJ -17- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -装- "訂_ 本紙張尺禾專用中《飄家樣準(CHS> T 4規格(210X297公釐) Λ 6 13 6

經濟部中央標準局贝工消費合作社印M χ991(>^ 五、發明説明（16) 本化合物可用口服（以膠囊或錠劑的型式）例水溶性懸浮液或溶液一口服用的錠雨其戰鼸一般使用乳耱或玉米澱粉，0»劑如硬脂酸鎂，方可局部加入其中。用於口服以驪囊形態出現，有用的稀釋液包括乳耱及乾燥的玉米澱粉。酋口服時必須使用水溶性想浮液，則活性成分輿乳化W 及《浮薄相结合•若有希求，則某些甜化爾及/或風味_ 及/或色素可加入。用在直腸投藥時本發明的化合物亦可以栓檷的型式投藥，道些化合物亦可藉迪宜且不刺瀲的賦形Μ混在藥中而製 m 備，逭些賦形劑在室粗時里固醱狀但在直腸祖度中呈液體狀因此逭些化合物曾在直腸中轉出槩物，此類物質包括可可坊油，蛛蠟及聚乙二酵。本發明的化合物亦可局部性投麵，尤其藉局部使用來治療一些到逢的部位或器官，如眼，皮虜或下消化道之自體免疫疾病。逭些部位可很容易製備合宜的局部處方β 使用在局部皮庸的化合栴可鼸配成合適的軟蕾，此軟膏含有懸浮性或溶解性化合物，舉例而言，含有下列一鶴或多的混合物··鑛油，液態石油.白石油.聚丙二烯.聚氣乙烯，聚«丙烯化合枚，乳化臟及水，本化合物亦可轉變成合適的塗劑或乳用，逭些剤中含有活性化合物懸浮或溶解其中，舉例，下列一傾或多值潺合物••礦袖， Sorbitan aonostearate·聚山梨酸 _60·餘蟠篇蠛（cetyl e s t e r s v a X)鲸蟝芳基酵（c e t e a r y 1 a 1 c 〇 h ο 1) · 2 -辛基+二酵，苄鸚及水。 CJ -18- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張凡羊缘用中困《家#準(CNS)T4規格(210 X 297公*) 199165 Λ6 13 6 經濟部中央標準局Λ工消费合作社印製五、發明説明（17) 本化合物可用在眼中，可調配此化合物一如在等节溶中的微懸浮液，用喊豳的食鹽水諝整酸齡度·或者更佳地是在等苄溶液中•用滅菌的食水調整酸_度，並加入或不加防腐爾如b β n z y 1 a 1 k ο n i u c h 1 〇 r i d e，本化合物亦可S8 成軟蕾（如軟石蕾）以使用在眼中。直腾栓用配方（參見上面）或適宜灌腸蕹配方可作用在下腸道的局部使用。治療上述情形中，活性成份的化合物其劑置要固定在每天0.01至100毫克/公斤，才有用活性成扮的量可结合載鱧材料以産生單一爾董形式，至於»量的形式完金是依照治療宿主或投藥的待殊棋式而定。然而，咸倍任何待殊的病人所用的待別Λ悬完金依照下列的變因，包括所採用特別化合物的活性，年齡，鼸重，一般健康狀況，性別，飲食，服麵時間，排池速率，_合併作用及治療駸重的待殊疾病。本化合物亦可調配舆類固酵如甲基脱氫皮酵》酸酯 -(aethyl prednisalone acetate >_+_'，可用在增強免疫抑制的效果》類固酵可藉由口，靜脈内，直腸，局部或吸入法來投蕖。可毎天使用0·1至0.5%毫克/公斤的两董（根鐮甲基脱氲皮酵醑酸醮）。《初負載的劑量為1〇〇至500毫克·’ 在Β床醫皤指示下，類固醇的麵鸶可逐次由离劑量往低黹 «減少。其它的免疫抑制劑如笛帕徽索（rapaiycin),確睡嗔除 (azathiopurine)，15-deoxy spergualin,琛抱靈，FK-506 CJ -19- (請先Μ讀背面之注意事項再蜞寫本頁) 本紙張尺Α蟓用中Β 家樣毕(CNS)甲4規格(210x 297公*) 199165 經濟部中央樣準局貝工消費合作社印製五、發明説明（1句或逋些抑制劑的结合繭亦可與本化合物相投蕖以增加免疫抑制效果。 0KT3是老鼠針對人類T细胞之CD3表面抗原所産生的單株抗鳢，本發明化合物亦可與0KT3共同行靜脈内投藥以拯救或改菩急性異鼸拂斥作用，待別是轚臓移檀。下面的實例將進一步描敘本發明，逭些實例並無任何限制。奮例1 一般性材料在逭些實驗中：以下列矽膠步«探作色層分析法，逭些步»為：將純化部份的化合物溶液被用來作為一遽宜的溶質，如二氛甲烷或洗脱液，加至管柱中，此管柱由60至100 部份的230至400網孔E. Merck矽謬所组成，在5至10 Psi 壓力及》宜的洗脱酒下把此矽醪預包住。藉使用5至10 ps i B力使額外的洗脱雨通遇此柱，洗出物依適宜的大小部分收集•然後分析毎部份的樣本<2“1)，藉使用0.25··厚的 E· Mock 60F254矽騵板及柱狀洗脱爾洗出作用看看所想的東西有否出現及純化·釅露在U V燈下或用適宜的染色如溶於10%乙®的磷鉬酸溶液，再加熱處理，使此化合物能测出來〇由下法可以實行分析性之逆相HPLC 法A : 30ciL CJ -20- (請先閲讀背面之注意事項再構寫本頁) -装- 訂線- 本紙張足矣蟓用中B 家«1MCKS) T 4規格(210X297公*) Λ 6 13 6 經濟部中央標準局员工消货合作社印製五、發明説明（1句動相：Α =溶於水中的0.1%磷酸 Β =溶於丙钃請的0.1%磷酸梯度：Τ = 0 分，A (95% > , Β ( 5 % ) T = 15分，A (0 % )，B ( 100% ) T = 16分· A (0 % · B ( 100% ) 流動率=2毫升/分，溫度= 23° 用U V吸收波長在214nn下偵測法B : 柱=V a t e r s M i c r ο Β ο n d a p a k C 1 8， 5 « Η 砂土 · 3 , 9 b ID 1 5 c L 動相：A =溶於水中的0.1%¾酸 B =溶於丙酮牌中的0.1%碟酸梯度：T = 0 分，A(95%), B (5%) T = 20分，A ( 0 % ) · B ( 100% ) T = 24分，A ( 0 % ) , B ( 100¾ ) 流動率= 1.5«升/分，溫度= 23° 用U V吸收波長在214η·下偵澜在下鼷敘述中，用於五種化合物之合成法實例1 Fmc -丙胺睡碁-2 -羧六氫tt啶基-笨丙胺醯基-4 -硝胺苯（1)之合成法。 l.F«oc-丙胺S基_ 2 -羧六氳tt啶用0.21毫升（·17··〇1)的氛三甲基矽烷處理（溶於10毫升的二氦甲烷）189毫克（S) — 2 —羧六氫tt啶酸的想浮液並 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝. -訂. 線-

JLL 21. 私紙ft尺度埠用中B國家樣準(CNS)甲4規格(210x297公釐） 199165 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製五、發明説明（2 0) «拌1.5小時，在冰/水浴中冷凍结果溶液，稍後再用520 毫克的F«oc丙胺酸氱化物及7 42 //1(3.2β·〇1)的二異丙乙胺處理，接着在《氣中播拌此混合物16小時•慢慢地瀑熱至適宜灞度，此混合物被供入3倍釀稹的乙醚中且先用1〇 %二硫酸»然洗然後再用水洗之，接著再用飽和的W酸氳 «溶液處理有檐雇•以形成油狀黄色的第三曆•此層沿著水靥而被收集•用水性硝酸氫納可宰取醚靥二次以上，每次收集第三層，用6Ν鹽酸處理結合水及油黃色的混合層· 使混合層ΡΗ至1 ·並用乙醚荦取三次•以水及飽和的磺酸氬納溶液淸洗有機萃取物.然後在硫酸鎂上乾燥·遇濾混合物，並在典空中濃缠以産生0.66克的17之黄色泡沫狀固釀，此固讎用在以後的反應用（不用純化）。 2.F«oc —丙孩醯基一 2 -羧六氫W:啶基一苯丙胺_基一 4 一硝按苯（1) 化合物 17,328 ·&(1.15 uole)中 460 的（S) —苯丙歧 S基一 4 一硝肢苯之驗浮掖及（溶於20毫升的二«甲烷） 155毫克（1.15··ο1β)的1- (3 —二甲基孩脯胺醯基> _3—甲基Β二味唑氬氰化物，在硫酸鈣出現下此混合物攪拌18小時，在試管中乾择，然後倒入三倍體積量的醚，接著以水飽和的磺酸《Τ納溶液，水，10%二硫酸鉀溶液，水洗此涯合物。及飽和的氨化納溶液。在硫酸钱上乾嫌有機曆，真空中遇濾及濃縮之，洩餘物可藉矽0»色層分析法純化，用2 比1的己烷fcb上丙酮做為洗脱劑，以産生0.56克的1之白 22 本紙張尺寒蟓用中B B家«年(CNS)甲4規格(210 X297公*) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁). 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 _nj_ 五、發明説明（21) 色泡沫狀固醴。薄層色層分析法：在3%的甲酵/二氯甲烷中RfS〇.29; 用法 A 的 HPLC，室溫= 15.11; 〔1H〕NMR(300 MHz)包含结構，元素分析，用0.25其耳的丙_溶合物來計算： C, 67.79, H, 6.80, N, 9.94 结果發現，C, 67.79, H, 6.80. H, 9.69〇 W m P. Fnoc-(第三丁基）-羥丁胺醯基-脯胺醯基-苯丙胺醯基一4 一硝胺苯（2) 1. Boc-臃胺釀基一笨丙胺g基一 4 一硝胺苯（18) 用4.42克（10 〇〗）的苯三唑一 1 一基氧盎（二甲胺基）雄六氟铒酸酯處理（溶於250毫升的乙Μ )2.85克（10 aaole) 的B 〇 c -脯胺酸及2 . 7 9毫升（2 0.0 〇丨e )的三乙胺溶液•此混合物攪拌6小時，並在硫酸0中乾燥試管，然後在真空中囊细，殘餘物溶於二氱甲烷中接著用水、10%的硫酸氫押溶掖，隹和的碩酸氫納洛液及半飽和的氰化銷洛液洗之，在硫酸钱上乾嫌有機靥•過濂及_结，再用矽謬®色層分析法純化殘餘物，並逐渐以25%, 30%, 50¾ (溶於已烷）的丙酮洗脱出•濃縮至少置以産生一淡黄的沈澱物•過濾此物並真空乾燥之：産生4. 11克· HPLC,法A，Rt等於 14.7U 2. 腩胺醣基-苯丙胺醯基一 4 一硝胺笨氳氨化鹽（19) 在氫氣下以*理18化合物的部份1.93克（4.0 〇丨e)，S 合物攪拌1小時，然後在氫氣化押上以离空中濰缠，産生 CJ -23- (請先閲讀背面之注意事項再蜞寫本頁) 本紙張尺A4用中BII家«毕(CNS) T 4規格(210X297公*) 經濟部中央標準局员工消費合作社印製 199165 Λ6 ___ 13 6_ 五、發明説明（2 2) 1.6克的檫題化合物·此化合物似溶合物的白色固並不霈要進一步純化。薄β色層分析法：Rf = 0 (在40%丙_ /己烷中） 3.F»〇c — （第三丁基）一羥丁胺醯基一脯胺醯基—笨丙胺醯基一 4 一硝肢苯（2) 以0.35毫升的二異丙乙胺«理（溶於12毫升的二氰甲烷 > 405毫克的19化合物之懸浮液，並在氰氣中，冰/水浴下冷细之加人P*oc-(第三丁基）一羥丁胺醯（397毫克， 1.0 〇〇·接著加入442毫克（1.0 "ol)的苯三唑一 1 -基氧#(二甲肢基）雄六«磷酸酯，在Ca下10分後，以8 奄升的乙»處理洛液，在適宜溫度下《拌此混合物16小時 *在真空中潰縮此*混合物，並以二氯甲烷吸收此殘餘物，接著以，10炻碱酸氬押溶液，飽和的磺酸氫納溶液及半飽和的氱化納溶液洗之.在硫酸鎂上乾燥有機靥，_滅及 _缠，再用矽0»色層分析法純化殘餘物，並以（溶於己烷）30%的丙酮洗脱出。以産生64/毫克稍灰白固鼸的2 化合物。薄層色層分析法：Rf=〇.33(在35¾丙期/己烷中）； C'H〕NMR(300MHz)結構相一致；以元索分析法計算0.25 契耳的丙酮溶合物；C,67.68 H,6.30, H,9.02,發現 C.67.81, H, 6.51, H, 8.79 竇俐2 Boc-緬肢醯基一脯胺醯基一苯丙胺醯基一4 -硝胺苯（3) 如同2化合物之裂備法，以241*克（0.5 ·βο1>18化合物 CJ -24- (請先Μ讀背面之注意事項再蜞寫本頁} 本紙張尺尽蟓《中家《毕(CNS) Τ4規格(210ΧΜ7公;St) 199165 Λ 6 136 經濟部中央標準局貝工消#合作社印製五、發明説明（23) 製備19化合物的部份，以4毫升的二氰甲烷吸收此反臁的全部産物，在冰/水浴中冷卻，並以110«克（0.5 ι·〇1) 的Boc-纈胺酸，68毫克（0.5 〇0的1 -羥苯三唑單水合物及0.6毫克（0.5 0〇的1- (3 -二甲胺丙基）一 3 一乙羰二亞胺氫«酸·藉加入二異丙乙胺並«拌一小畤以調整结果混合物之pH逢6至7之間，移除冷浴，並持鳙播拌16小時，用三倍髏積的乙醚稀釋此涯合物，並以水，供和的碩酸氳鈉溶液，10%的硫酸氫鉀溶液，及飽和的氨化納溶液，在硫酸鎂上乾堞有機層，遇濾，並且在輿空中潰缠以産生268毫克淡黄，泡沫固饉狀的3化合物薄靥色層析法：Rf=0.37(在35%丙酮/己烷中> ; 〔1〕NMR (300 MHz)结構相一致；以元素分析法計算： C.61.95 H.6.76. H,912.04 發現 C, 61.62, H, 6.89, K, 11.70 審俐4· F^oc-琢己丙胺醯基一 2 —羧六氫肚啶苯酯（4) 以630毫克的氣化鉑ft理（溶於50毫升的醋酸及35«升的水）12.5克（75.7 «mol)之（S) —苯丙胺酸溶掖，抽出此混合物並置於47 psi氬之琢塊中，經激烈搖晃此混合物，以矽土赵遇濾之，並在真空中蠹蹁遇濾物，殘餘物用乙_撝碎二次並遇濾之，在典空中乾嫌以産生13. 77克白色固體的20化合物。 2.Fboc- (S)-琛己丙胺醯基（21) 以1·59毫升（12.5 ι·〇1)的氛三甲基矽烷處理（懸浮於 CJ -25- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝. 訂· 線' 本紙張尺本考用中《家«準(CNS)甲4規格(210x297公*) 199165 Λ 6η 6 經濟部中央標準局貝工消t合作社印製五、發明説明（24) 30¾升的二氛甲烷）1.82克之20化合物部份，並攪拌40分，用30毫升的乙請及額外1毫升的氰三甲基矽烷此理此混合物。«拌10分後，在冰/水浴中冷细此结果溶液•接著以3.92毫升（22.5 "〇1)的二異丙乙胺及2.72克（10.5 >>〇1)的9-葙甲基氯甲酯處理，此混合物在氮氣中嫌拌14 小時，緩慢加粗至鳙宜租度•此混合物在真空中濃縮，殘餘物分敵在乙醚及10%硫酸氳押溶液中，接著用10%硫酸氫鉀溶液及水洗有機層然後以飽和用硪酸氫納溶液處理，形成油黄色的第三靥，此第三層沿著水溶性磨收集•用水溶性«酸氫納萃取鼸靥二次，毎次均收集第三靥及水溶性曆，用6H鼗處理此水及油黄混合層使PH變為1 ,用3比1的乙醚比上二«甲烷萃取此混合物三次以结合逭些有機萃取物，接著用水及餹和的氰化納溶液洗之，然後在硫酸錤上乾嫌，遇濾1混合物並在真空中乾燥以産生3.55克淡黃色固讎的21化合物·，〔'Η〕H MR (300MHz>结構相一致。 3.F«oc-琛己丙胺B基一 2 —羧六氫llfc啶苯酯（4) 藉與0.52«升的乙二醯《(溶於20*升的二氰甲烷）起反應並在二甲B5胺催化量（3滴）出現情形下持鏞1.5小時接瞽再真空濃结使得1.18克（3.00 >·〇1)的21化合物部份被轉變成其氣化酸，用691毫克（3.15 bboU的157 - 2 Μ 羧六1BW:啶苄醢4 一甲苯«酸蠹處理（溶於10毫升的二氫甲烷）此氰化酸溶液接著以10毫升齙和的硪酸氫納溶液處理，激烈攪拌此混合物5分後分離此層•在碡酸鎂上乾嫌有機層，在真空中濃缠以産生黄色泡沫狀物，此物用矽謬 CJ -26- (請先閲讀背面之注意事項再蜞寫本頁) 裝. 訂· -線· 本紙》尺度遑用中* 家揉準(CNS)甲4規格(210 X 297公Λ) 199165 Λ 6 136 經濟部中央標準局負工消费合作社印製五、發明説明（25) *色層分析法純化以15%丙酮（溶於己烷中）洗出，以産生566毫克無色油狀的2化合物，薄層色層分析法：Rf=〇.19 (溶於15%丙酮/己烷中）；HPLC法B · Rt等於22.81 ; 〔•H〕HMR(300MHz)结構相一致奮5 Boc -丙胺醯基一脯胺S基一白胺酸苄醋（5>的合成 1. Boc —丙胺醒基一脯胺睡基（22) 6.79克（18.0 bboUBoc -丙按醛基一腺胺睡苄酯的溶液加入（溶於50毫升的乙酵）0.7克的5X把/硪泥狀物，此混合物被置於氬氣中並攪拌20小時，然後以矽藻土酋遇濾，用20毫升的乙酵洗此遇濾魅，在真空中濃縮此结合性過濾物，溶於300毫升的館和磺酸氫接著以150毫升的乙醚洗二次，用硪酸氲»酸化水溶性部份使其PH值為2並150 毫升的乙酸乙酯萃取三次。以结合逭些有機的荦取樹，用飽和的氯化納洗之，在硫酸錤上乾嫌，虐濾並濃编以産生 4.9克白色固體的22化合物：〔’1〇})»^(300»<»12):<11.35 (d,3H), 1.43(S,9H). 2.07(·,3Η), 2.35(·,1Η). 3.59 (·,1Η), 3.74 (·.1Η),4.48 (·.1Η). 4.81(·,1Η), 5.35(d, 1Η) 2. Boc -丙胺醯基一脯胺醯基一白胺酸苄酯（5) jt 在Ot, 0.177毫升（1.02 uol)的二異丙乙按，0,15克 (0.85 uol)的1 -羥苯三哇水合物及243毫克（0.85 uol) 的22化合物中加入（溶於10毫升的二《甲烷）白胺酸苄酯 4 一甲苯磁酸鹽之泥狀物用額外的三異丙乙胺並加入182 CJ -27- (請先Μ讀背面之注意事項再填寫本頁) 装- 訂· 線- 本紙張尺來或用中«家樣準(CNS)甲4規格(210 X297公釐) 199165 Λ 6 13 6 五、發明説明（2 6) 毫克（0.9 〇"的1 一（3-二甲胺丙基）一3 —乙醯二亞胺氫«化物以諝整此溶液ΡΗ值至6,此混合物攪拌14小時•然後以水（75«升）及乙酸乙酷（75*升）處理，用額外的乙酸乙酯萃取水溶性靥二次，接著用水洗此結合的有機層二次•然後再用0.5 Ν鹽酸，飽和的碘酸氫納溶液及鉋和的氨化納溶液處理，在真空中瀑縮此遇濾物，殘餘物以矽膠《色層分析法純化，用25%乙醚（溶於二氰甲烷）洗脱之以産生0.34克白色泡沫狀固體的5化合物薄層色層分析法：Rf=0.43 (溶於5%甲酵/二氯甲烷）；HPLC法八，1^等於12.75; 〔· H〕HMR (300MHz)结構相一致 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 C J - 2 8 _ 表《張尺度卑用中國家樣準(CNS)甲4規格(210x297公！It)

Claims

經濟部中央標準扃印装 A?

1. -種線性改良肽，具有對FK-506结合蛋白的肽基一脯胺醑—反異構_活性有抑制效果，其中該肽係壤自由下列姐成之姐群： (a) F»〇c-丙胺醮基-2-羧六氫吡啶侧-苯丙胺鼸基-4-¾ 胺笨 <b> Fboc-(三级-丁基）-羥丁胺鼸基-鯆胺醮基-苯丙胺基-4-硝胺苯 Fr〇c-環己丙胺基-2-羧六氫吡啶酸苄_ (d) Boc -丙胺酸-脯肢鼸基-白肢酸苄醮 (e> Fioc-(三級-丁基）-麩胺醢胺醢基-鯆胺麵基苯丙胺基-4-硝胺笨 (f> Boc -丙胺醮基-脯胺鼸基-丙胺酸苄醮 (» Boc -丙胺醴基-脯胺釀基-笨丙胺酸苄釀 (h) Boc-丙胺醯基-脯胺酿基-(三級-丁基）麩胺酸甲醮 (i) Boc -丙胺醯基-脯胺釀基-苯丙肢酸甲_ (j) Boc -(苄*)-酪胺醯基-脯肢醢基苄酯 (k) Boc -(苄基）-酪胺釀基-脑胺醯基三級-丁基酯 (l) Fboc-丙胺醣基-2-羧六氫吡啶酸苄》 2. 一棰用Μ抑制僩Μ的免疫反應之藥學姐成物•包括根據申請專利範園第1項之繚性改良的肽及其生理上可接受的溶媒。 3. 根撺申請専利範園第2項之藥學姐成物’其中該免疫反懕偽一種由姐纖或器官移植所造成之免疫反應（例如· 與贵髓或器官移植有闞之移植排斥反應）或是一種自髓 (請先閱讀背面之注意事項再填弈本页) •装， .打· •線· f 4(210X297公沒) A B c D x991Cb 〃、申請專利範面 (請先閑讀背面之注意事項再填鸾本頁) 免疫反應。 4·—種用K抑制個《的免疫反應之藥學姐成物*包含缠自下列之線性改良的呔： (a) Fmoc-丙胺«基-2羧六氫吡啶基-笨丙胺釀基-4-礴胺苯 <b) F»〇c-(三鈒-丁基）-羥丁胺釀基胺醮基-苯丙胺基-4-硝胺苯 (〇 B<rc -縹胺釀基-黼胺藤基-苯基胺基-4-硝胺苯 (d) Fioc-環己丙胺基-2-羧六氬吡啶酸苄_ _ (e> Boc -丙胺酸-籣胺釀基-白胺酸苄釀 (f) Fmoc-(三级-丁基）-麩胺釀胺釀基-Μ胺釀基苯丙胺基-4-硝胺苯 (® Boc -丙胺臁基-脯胺鼸基-丙胺酸苄酯 (h) Boc -丙胺醢基-脯胺釀基-笨丙胺酸苄_ (i> Boc-丙胺醣基-脯胺鼸基-(三级-丁基）麩胺酸甲_ (J) Boc -丙胺釀基-脯胺釀基-苯丙赅酸甲醮 <k) Boc -(苄基）-»胺鼸基-Μ肢釀基苄_ (1> Boc -(苄基）-酪胺釀基-脯胺_基三級-丁基醮，及 m Fboc-丙胺醯基-2-羧六氲吡啶酸苄_ 經濟邡中央搮準局印装 5. 根據申請専利範圃第4項之藥學姐成物，其中該免疫反應係一種由姐織或器官移植所造成之免疫反應（例如，與骨餹或器官移植有«之移植排斥反應）或是一種自麵免疫反應。 f 4(210X297 公灃)