TR201815856T4 - Bradikinin-aracılı rahatsızlıkların değerlendirilmesi ve tedavisi. - Google Patents
Bradikinin-aracılı rahatsızlıkların değerlendirilmesi ve tedavisi. Download PDFInfo
- Publication number
- TR201815856T4 TR201815856T4 TR2018/15856T TR201815856T TR201815856T4 TR 201815856 T4 TR201815856 T4 TR 201815856T4 TR 2018/15856 T TR2018/15856 T TR 2018/15856T TR 201815856 T TR201815856 T TR 201815856T TR 201815856 T4 TR201815856 T4 TR 201815856T4
- Authority
- TR
- Turkey
- Prior art keywords
- hmwk
- cleaved
- subject
- disease
- kininogen
- Prior art date
Links
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 title claims abstract description 122
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 106
- 102100035792 Kininogen-1 Human genes 0.000 title abstract description 45
- 101800004538 Bradykinin Proteins 0.000 title abstract description 42
- QXZGBUJJYSLZLT-UHFFFAOYSA-N H-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg-OH Natural products NC(N)=NCCCC(N)C(=O)N1CCCC1C(=O)N1C(C(=O)NCC(=O)NC(CC=2C=CC=CC=2)C(=O)NC(CO)C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC=2C=CC=CC=2)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(O)=O)CCC1 QXZGBUJJYSLZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract description 42
- QXZGBUJJYSLZLT-FDISYFBBSA-N bradykinin Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)CCC1 QXZGBUJJYSLZLT-FDISYFBBSA-N 0.000 title abstract description 42
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 title abstract description 22
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 158
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 105
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 90
- 108090000113 Plasma Kallikrein Proteins 0.000 claims abstract description 61
- 102000003827 Plasma Kallikrein Human genes 0.000 claims abstract description 60
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 53
- 208000028185 Angioedema Diseases 0.000 claims abstract description 14
- 102000010631 Kininogens Human genes 0.000 claims description 224
- 108010077861 Kininogens Proteins 0.000 claims description 224
- 108010000487 High-Molecular-Weight Kininogen Proteins 0.000 claims description 183
- 102000002261 High-Molecular-Weight Kininogen Human genes 0.000 claims description 183
- 206010019860 Hereditary angioedema Diseases 0.000 claims description 130
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 55
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 55
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 52
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 52
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 claims description 47
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 claims description 47
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 claims description 43
- 238000001262 western blot Methods 0.000 claims description 32
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims description 29
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims description 26
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 21
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 21
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 18
- 230000008961 swelling Effects 0.000 claims description 18
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 claims description 17
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims description 16
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims description 16
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 claims description 12
- GUGOEEXESWIERI-UHFFFAOYSA-N Terfenadine Chemical compound C1=CC(C(C)(C)C)=CC=C1C(O)CCCN1CCC(C(O)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)CC1 GUGOEEXESWIERI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 230000001387 anti-histamine Effects 0.000 claims description 11
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 claims description 8
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 claims description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 6
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 claims description 5
- 208000024780 Urticaria Diseases 0.000 claims description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 claims 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 56
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 131
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 79
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 75
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 58
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 50
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 48
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 46
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 45
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 44
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 44
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 44
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 43
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 43
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 42
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 42
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 40
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 40
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 38
- 102000001399 Kallikrein Human genes 0.000 description 37
- 108060005987 Kallikrein Proteins 0.000 description 37
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 37
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 35
- 108010011867 ecallantide Proteins 0.000 description 34
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 31
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 30
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 27
- VBGWSQKGUZHFPS-VGMMZINCSA-N kalbitor Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]2C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC=CC=3)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]3CSSC[C@H](NC(=O)[C@@H]4CCCN4C(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=4NC=NC=4)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC3=O)CSSC2)C(=O)N[C@@H]([C@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=2NC=NC=2)C(=O)N2CCC[C@H]2C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N1)[C@@H](C)CC)[C@H](C)O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 VBGWSQKGUZHFPS-VGMMZINCSA-N 0.000 description 27
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 26
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 25
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 25
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 25
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 25
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 24
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 23
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 22
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 21
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 21
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 101000975003 Homo sapiens Kallistatin Proteins 0.000 description 20
- 101001077723 Homo sapiens Serine protease inhibitor Kazal-type 6 Proteins 0.000 description 20
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 20
- 229940122920 Kallikrein inhibitor Drugs 0.000 description 20
- 102100023012 Kallistatin Human genes 0.000 description 20
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 20
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 19
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 19
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 19
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 17
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 16
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 16
- 108700040183 Complement C1 Inhibitor Proteins 0.000 description 15
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 15
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 15
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 15
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 15
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 15
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 15
- 206010042674 Swelling Diseases 0.000 description 14
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 14
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 14
- 230000004044 response Effects 0.000 description 14
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 13
- 230000008859 change Effects 0.000 description 13
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 13
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 13
- 208000004262 Food Hypersensitivity Diseases 0.000 description 12
- 206010016946 Food allergy Diseases 0.000 description 12
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 12
- 108010058188 Low-Molecular-Weight Kininogen Proteins 0.000 description 12
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 12
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 12
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 12
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 12
- 235000020932 food allergy Nutrition 0.000 description 12
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 12
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 12
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 12
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 12
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 11
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 11
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 10
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 10
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 10
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 10
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 10
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 10
- PIEPQKCYPFFYMG-UHFFFAOYSA-N tris acetate Chemical compound CC(O)=O.OCC(N)(CO)CO PIEPQKCYPFFYMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 9
- 102100027637 Plasma protease C1 inhibitor Human genes 0.000 description 9
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 9
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 9
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 9
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 9
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 9
- 101000984722 Bos taurus Pancreatic trypsin inhibitor Proteins 0.000 description 8
- 206010048962 Brain oedema Diseases 0.000 description 8
- 208000007342 Diabetic Nephropathies Diseases 0.000 description 8
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 8
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 8
- 208000006752 brain edema Diseases 0.000 description 8
- 208000033679 diabetic kidney disease Diseases 0.000 description 8
- -1 for example Substances 0.000 description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 8
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 8
- 210000003657 middle cerebral artery Anatomy 0.000 description 8
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 8
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 8
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 8
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 8
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 7
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 7
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 7
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 239000012723 sample buffer Substances 0.000 description 7
- 241000894007 species Species 0.000 description 7
- 102000055157 Complement C1 Inhibitor Human genes 0.000 description 6
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 6
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 6
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 6
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 6
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 6
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 6
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 6
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 6
- 150000001945 cysteines Chemical class 0.000 description 6
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 6
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 5
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 5
- 102100030951 Tissue factor pathway inhibitor Human genes 0.000 description 5
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 5
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 5
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 5
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 5
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 5
- OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N bis-tris Chemical compound OCCN(CCO)C(CO)(CO)CO OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 5
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 5
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 5
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 5
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 5
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 5
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 5
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 4
- 206010002198 Anaphylactic reaction Diseases 0.000 description 4
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 description 4
- 206010003178 Arterial thrombosis Diseases 0.000 description 4
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 4
- 208000018380 Chemical injury Diseases 0.000 description 4
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 4
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 description 4
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 201000005569 Gout Diseases 0.000 description 4
- 206010019196 Head injury Diseases 0.000 description 4
- 206010062506 Heparin-induced thrombocytopenia Diseases 0.000 description 4
- 206010055171 Hypertensive nephropathy Diseases 0.000 description 4
- 206010073257 Idiopathic angioedema Diseases 0.000 description 4
- 206010065390 Inflammatory pain Diseases 0.000 description 4
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 4
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 4
- 208000001344 Macular Edema Diseases 0.000 description 4
- 206010025415 Macular oedema Diseases 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 4
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 4
- 208000011623 Obstructive Lung disease Diseases 0.000 description 4
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 4
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 4
- 208000010378 Pulmonary Embolism Diseases 0.000 description 4
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 208000029033 Spinal Cord disease Diseases 0.000 description 4
- 208000001435 Thromboembolism Diseases 0.000 description 4
- 101710139626 Tissue factor pathway inhibitor Proteins 0.000 description 4
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010047249 Venous thrombosis Diseases 0.000 description 4
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 4
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 4
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 4
- 230000036783 anaphylactic response Effects 0.000 description 4
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 4
- 238000002399 angioplasty Methods 0.000 description 4
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 4
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 4
- 208000007474 aortic aneurysm Diseases 0.000 description 4
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 4
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 4
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 4
- 239000000701 coagulant Substances 0.000 description 4
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 4
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 4
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 208000030533 eye disease Diseases 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 208000003243 intestinal obstruction Diseases 0.000 description 4
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 4
- 201000010230 macular retinal edema Diseases 0.000 description 4
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 4
- 208000004296 neuralgia Diseases 0.000 description 4
- 208000021722 neuropathic pain Diseases 0.000 description 4
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 4
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 4
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 4
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 4
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 4
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 4
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037803 restenosis Diseases 0.000 description 4
- 206010039083 rhinitis Diseases 0.000 description 4
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- 208000005198 spinal stenosis Diseases 0.000 description 4
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 4
- 208000003265 stomatitis Diseases 0.000 description 4
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 4
- 208000037816 tissue injury Diseases 0.000 description 4
- 230000002861 ventricular Effects 0.000 description 4
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 description 3
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 3
- 108010080865 Factor XII Proteins 0.000 description 3
- 102000000429 Factor XII Human genes 0.000 description 3
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 3
- 101710111227 Kininogen-1 Proteins 0.000 description 3
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- 208000032912 Local swelling Diseases 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 101000836058 Mus musculus Serine protease inhibitor A3C Proteins 0.000 description 3
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 3
- 101000836071 Rattus norvegicus Serine protease inhibitor A3K Proteins 0.000 description 3
- 206010063837 Reperfusion injury Diseases 0.000 description 3
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 3
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 3
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 3
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 238000003491 array Methods 0.000 description 3
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 3
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 3
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 3
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000003147 glycosyl group Chemical group 0.000 description 3
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-N mesalamine Chemical compound NC1=CC=C(O)C(C(O)=O)=C1 KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960004963 mesalazine Drugs 0.000 description 3
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 3
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 3
- 239000012474 protein marker Substances 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 3
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 3
- AIDBEARHLBRLMO-UHFFFAOYSA-M sodium;dodecyl sulfate;2-morpholin-4-ylethanesulfonic acid Chemical compound [Na+].OS(=O)(=O)CCN1CCOCC1.CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O AIDBEARHLBRLMO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 3
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- HKMZRZUEADSZDQ-DZJWSCHMSA-N (2s)-2-[[(2s,3as,7as)-1-[(3r)-2-[(2s)-2-[[(2s)-2-[[2-[[(2s,4r)-1-[(2s)-1-[(2s)-2-[[(2r)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]-4-hydroxypyrrolidine-2-carbonyl]amino]acetyl]amino]-3- Chemical compound CC(O)=O.NC(N)=NCCC[C@@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=2SC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N2[C@H](CC3=CC=CC=C3C2)C(=O)N2[C@@H](C[C@@H]3CCCC[C@@H]32)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)C[C@@H](O)C1 HKMZRZUEADSZDQ-DZJWSCHMSA-N 0.000 description 2
- UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N (R)-adrenaline Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 229930182837 (R)-adrenaline Natural products 0.000 description 2
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 description 2
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 229940123765 Bradykinin B2 receptor antagonist Drugs 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010062466 Enzyme Precursors Proteins 0.000 description 2
- 102000010911 Enzyme Precursors Human genes 0.000 description 2
- 101150072419 F12 gene Proteins 0.000 description 2
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 2
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 2
- 102000012745 Immunoglobulin Subunits Human genes 0.000 description 2
- 108010079585 Immunoglobulin Subunits Proteins 0.000 description 2
- 229940127379 Kallikrein Inhibitors Drugs 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 206010052904 Musculoskeletal stiffness Diseases 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 2
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 2
- 101150097162 SERPING1 gene Proteins 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 2
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 2
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 2
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 description 2
- 229940075791 berinert Drugs 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 239000003359 bradykinin B2 receptor antagonist Substances 0.000 description 2
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 2
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 2
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 2
- 150000002019 disulfides Chemical class 0.000 description 2
- 230000002497 edematous effect Effects 0.000 description 2
- 238000001378 electrochemiluminescence detection Methods 0.000 description 2
- 229960005139 epinephrine Drugs 0.000 description 2
- 208000017691 erythema palmare hereditarium Diseases 0.000 description 2
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 229940050762 firazyr Drugs 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000012921 fluorescence analysis Methods 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 2
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 2
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 2
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 2
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 229960000598 infliximab Drugs 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 239000008239 natural water Substances 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 2
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 2
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 2
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 2
- 239000002985 plastic film Substances 0.000 description 2
- 238000009117 preventive therapy Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 2
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 229940121649 protein inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 239000012268 protein inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 2
- 238000005204 segregation Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate group Chemical group S(=O)(=O)([O-])[O-] QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- UEUXEKPTXMALOB-UHFFFAOYSA-J tetrasodium;2-[2-[bis(carboxylatomethyl)amino]ethyl-(carboxylatomethyl)amino]acetate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC([O-])=O UEUXEKPTXMALOB-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- HMLGSIZOMSVISS-ONJSNURVSA-N (7r)-7-[[(2z)-2-(2-amino-1,3-thiazol-4-yl)-2-(2,2-dimethylpropanoyloxymethoxyimino)acetyl]amino]-3-ethenyl-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid Chemical compound N([C@@H]1C(N2C(=C(C=C)CSC21)C(O)=O)=O)C(=O)\C(=N/OCOC(=O)C(C)(C)C)C1=CSC(N)=N1 HMLGSIZOMSVISS-ONJSNURVSA-N 0.000 description 1
- 108010031110 1-Sarcosine-8-Isoleucine Angiotensin II Proteins 0.000 description 1
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 11-dehydrocorticosterone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 206010000060 Abdominal distension Diseases 0.000 description 1
- 208000000884 Airway Obstruction Diseases 0.000 description 1
- JBVSSSZFNTXJDX-YTLHQDLWSA-N Ala-Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)N JBVSSSZFNTXJDX-YTLHQDLWSA-N 0.000 description 1
- PAIHPOGPJVUFJY-WDSKDSINSA-N Ala-Glu-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O PAIHPOGPJVUFJY-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- AWZKCUCQJNTBAD-SRVKXCTJSA-N Ala-Leu-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN AWZKCUCQJNTBAD-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- UWIQWPWWZUHBAO-ZLIFDBKOSA-N Ala-Leu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 UWIQWPWWZUHBAO-ZLIFDBKOSA-N 0.000 description 1
- ARHJJAAWNWOACN-FXQIFTODSA-N Ala-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ARHJJAAWNWOACN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- BUQICHWNXBIBOG-LMVFSUKVSA-N Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N BUQICHWNXBIBOG-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- RCENDENBBJFJHZ-ACZMJKKPSA-N Asn-Asn-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O RCENDENBBJFJHZ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- VKCOHFFSTKCXEQ-OLHMAJIHSA-N Asn-Asn-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O VKCOHFFSTKCXEQ-OLHMAJIHSA-N 0.000 description 1
- ORRJQLIATJDMQM-HJGDQZAQSA-N Asp-Leu-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O ORRJQLIATJDMQM-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- LIVXPXUVXFRWNY-CIUDSAMLSA-N Asp-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O LIVXPXUVXFRWNY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- NTQDELBZOMWXRS-IWGUZYHVSA-N Asp-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O NTQDELBZOMWXRS-IWGUZYHVSA-N 0.000 description 1
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XHVAWZZCDCWGBK-WYRLRVFGSA-M Aurothioglucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](S[Au])[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O XHVAWZZCDCWGBK-WYRLRVFGSA-M 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 208000027496 Behcet disease Diseases 0.000 description 1
- 229920002799 BoPET Polymers 0.000 description 1
- 201000007120 C1 inhibitor deficiency Diseases 0.000 description 1
- 101100454807 Caenorhabditis elegans lgg-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100217502 Caenorhabditis elegans lgg-3 gene Proteins 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010008609 Cholangitis sclerosing Diseases 0.000 description 1
- 101800004419 Cleaved form Proteins 0.000 description 1
- 206010009895 Colitis ischaemic Diseases 0.000 description 1
- 206010056979 Colitis microscopic Diseases 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N Cortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N Cortisone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)(O)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 1
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 1
- YNJBLTDKTMKEET-ZLUOBGJFSA-N Cys-Ser-Ser Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YNJBLTDKTMKEET-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- VVNCNSJFMMFHPL-VKHMYHEASA-N D-penicillamine Chemical compound CC(C)(S)[C@@H](N)C(O)=O VVNCNSJFMMFHPL-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical compound [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000003556 Dry Eye Syndromes Diseases 0.000 description 1
- 206010013774 Dry eye Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 206010015216 Erythema marginatum Diseases 0.000 description 1
- 108010008165 Etanercept Proteins 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 1
- 108010008177 Fd immunoglobulins Proteins 0.000 description 1
- 208000028387 Felty syndrome Diseases 0.000 description 1
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- QXQDADBVIBLBHN-FHWLQOOXSA-N Gln-Tyr-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O QXQDADBVIBLBHN-FHWLQOOXSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- LNCFUHAPNTYMJB-IUCAKERBSA-N His-Pro Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(O)=O)C1=CN=CN1 LNCFUHAPNTYMJB-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- 101000979735 Homo sapiens NADH dehydrogenase [ubiquinone] 1 beta subcomplex subunit 8, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGTOKVBDZXJHNZ-WZLNRYEVSA-N Ile-Thr-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)N DGTOKVBDZXJHNZ-WZLNRYEVSA-N 0.000 description 1
- AUIYHFRUOOKTGX-UKJIMTQDSA-N Ile-Val-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N AUIYHFRUOOKTGX-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 1
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 102000051628 Interleukin-1 receptor antagonist Human genes 0.000 description 1
- 108700021006 Interleukin-1 receptor antagonist Proteins 0.000 description 1
- UETNIIAIRMUTSM-UHFFFAOYSA-N Jacareubin Natural products CC1(C)OC2=CC3Oc4c(O)c(O)ccc4C(=O)C3C(=C2C=C1)O UETNIIAIRMUTSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010023203 Joint destruction Diseases 0.000 description 1
- 206010023230 Joint stiffness Diseases 0.000 description 1
- 206010023232 Joint swelling Diseases 0.000 description 1
- 102100038297 Kallikrein-1 Human genes 0.000 description 1
- 101710176219 Kallikrein-1 Proteins 0.000 description 1
- 101800000201 Kininogen-1 heavy chain Proteins 0.000 description 1
- 102400000965 Kininogen-1 heavy chain Human genes 0.000 description 1
- 102000002397 Kinins Human genes 0.000 description 1
- 108010093008 Kinins Proteins 0.000 description 1
- 102100031607 Kunitz-type protease inhibitor 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710165137 Kunitz-type protease inhibitor 1 Proteins 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- KKXDHFKZWKLYGB-GUBZILKMSA-N Leu-Asn-Glu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N KKXDHFKZWKLYGB-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEGLGAOVLFODGC-GUBZILKMSA-N Lys-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VEGLGAOVLFODGC-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- SEZADXQOJJTXPG-VFAJRCTISA-N Lys-Thr-Trp Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)O SEZADXQOJJTXPG-VFAJRCTISA-N 0.000 description 1
- BWECSLVQIWEMSC-IHRRRGAJSA-N Lys-Val-His Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N BWECSLVQIWEMSC-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 102100033320 Lysosomal Pro-X carboxypeptidase Human genes 0.000 description 1
- AFVOKRHYSSFPHC-STECZYCISA-N Met-Ile-Tyr Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 AFVOKRHYSSFPHC-STECZYCISA-N 0.000 description 1
- 101100042271 Mus musculus Sema3b gene Proteins 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 208000000112 Myalgia Diseases 0.000 description 1
- 239000005041 Mylar™ Substances 0.000 description 1
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-proline Natural products NCC(=O)N1CCCC1C(O)=O KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100024975 NADH dehydrogenase [ubiquinone] 1 beta subcomplex subunit 8, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N Naproxen Natural products C1=C(C(C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XOJVVFBFDXDTEG-UHFFFAOYSA-N Norphytane Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C XOJVVFBFDXDTEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000123069 Ocyurus chrysurus Species 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- 208000031481 Pathologic Constriction Diseases 0.000 description 1
- 108010088535 Pep-1 peptide Proteins 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 206010034829 Pharyngeal oedema Diseases 0.000 description 1
- JTKGCYOOJLUETJ-ULQDDVLXSA-N Phe-Val-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 JTKGCYOOJLUETJ-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- 229920000388 Polyphosphate Polymers 0.000 description 1
- GLEOIKLQBZNKJZ-WDSKDSINSA-N Pro-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 GLEOIKLQBZNKJZ-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 208000006311 Pyoderma Diseases 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000009921 Rheumatoid Nodule Diseases 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 1
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010041660 Splenomegaly Diseases 0.000 description 1
- DDPVJPIGACCMEH-XQXXSGGOSA-N Thr-Ala-Gln Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O DDPVJPIGACCMEH-XQXXSGGOSA-N 0.000 description 1
- BWUHENPAEMNGQJ-ZDLURKLDSA-N Thr-Gln Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O BWUHENPAEMNGQJ-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- QNCFWHZVRNXAKW-OEAJRASXSA-N Thr-Lys-Phe Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O QNCFWHZVRNXAKW-OEAJRASXSA-N 0.000 description 1
- KDGBLMDAPJTQIW-RHYQMDGZSA-N Thr-Met-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N)O KDGBLMDAPJTQIW-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- JXNRXNCCROJZFB-RYUDHWBXSA-N Tyr-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 JXNRXNCCROJZFB-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- TYGHOWWWMTWVKM-HJOGWXRNSA-N Tyr-Tyr-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 TYGHOWWWMTWVKM-HJOGWXRNSA-N 0.000 description 1
- SLLKXDSRVAOREO-KZVJFYERSA-N Val-Ala-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O SLLKXDSRVAOREO-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- ISERLACIZUGCDX-ZKWXMUAHSA-N Val-Asp-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N ISERLACIZUGCDX-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- GVJUTBOZZBTBIG-AVGNSLFASA-N Val-Lys-Arg Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N GVJUTBOZZBTBIG-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- JOOSFXXMIOXKAZ-UHFFFAOYSA-H [Au+3].[Au+3].[O-]C(=O)CC(S)C([O-])=O.[O-]C(=O)CC(S)C([O-])=O.[O-]C(=O)CC(S)C([O-])=O Chemical compound [Au+3].[Au+3].[O-]C(=O)CC(S)C([O-])=O.[O-]C(=O)CC(S)C([O-])=O.[O-]C(=O)CC(S)C([O-])=O JOOSFXXMIOXKAZ-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- QCGGXGCODUUTLZ-UHFFFAOYSA-N [Na].[Na].[Na].[Na] Chemical compound [Na].[Na].[Na].[Na] QCGGXGCODUUTLZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 206010000059 abdominal discomfort Diseases 0.000 description 1
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 1
- FKNHDDTXBWMZIR-GEMLJDPKSA-N acetic acid;(2s)-1-[(2r)-2-amino-3-sulfanylpropanoyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound CC(O)=O.SC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O FKNHDDTXBWMZIR-GEMLJDPKSA-N 0.000 description 1
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 229960002964 adalimumab Drugs 0.000 description 1
- 230000009824 affinity maturation Effects 0.000 description 1
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 1
- 108010028939 alanyl-alanyl-lysyl-alanine Proteins 0.000 description 1
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 1
- 229960004238 anakinra Drugs 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940125715 antihistaminic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 239000003435 antirheumatic agent Substances 0.000 description 1
- 210000000436 anus Anatomy 0.000 description 1
- 230000004596 appetite loss Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 108010019902 bradykininogen Proteins 0.000 description 1
- 210000004900 c-terminal fragment Anatomy 0.000 description 1
- 229940009550 c1 esterase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 125000001314 canonical amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 229960004630 chlorambucil Drugs 0.000 description 1
- JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N chlorambucil Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 1
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 1
- 229910052956 cinnabar Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001427 coherent effect Effects 0.000 description 1
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 1
- 208000008609 collagenous colitis Diseases 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 238000002052 colonoscopy Methods 0.000 description 1
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 1
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 229960004544 cortisone Drugs 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 1
- 239000002852 cysteine proteinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 108010060199 cysteinylproline Proteins 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 229960000633 dextran sulfate Drugs 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 239000012470 diluted sample Substances 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 230000009266 disease activity Effects 0.000 description 1
- 201000008243 diversion colitis Diseases 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008029 eradication Effects 0.000 description 1
- 229960000403 etanercept Drugs 0.000 description 1
- 229960005293 etodolac Drugs 0.000 description 1
- XFBVBWWRPKNWHW-UHFFFAOYSA-N etodolac Chemical compound C1COC(CC)(CC(O)=O)C2=N[C]3C(CC)=CC=CC3=C21 XFBVBWWRPKNWHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 206010016256 fatigue Diseases 0.000 description 1
- 230000020764 fibrinolysis Effects 0.000 description 1
- 238000009459 flexible packaging Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000010230 functional analysis Methods 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 108010077515 glycylproline Proteins 0.000 description 1
- 150000002343 gold Chemical class 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108010040030 histidinoalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010085325 histidylproline Proteins 0.000 description 1
- 229960004171 hydroxychloroquine Drugs 0.000 description 1
- XXSMGPRMXLTPCZ-UHFFFAOYSA-N hydroxychloroquine Chemical compound ClC1=CC=C2C(NC(C)CCCN(CCO)CC)=CC=NC2=C1 XXSMGPRMXLTPCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 1
- 238000007455 ileostomy Methods 0.000 description 1
- 210000003405 ileum Anatomy 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 1
- 230000009851 immunogenic response Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 description 1
- 238000005462 in vivo assay Methods 0.000 description 1
- 208000027138 indeterminate colitis Diseases 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001524 infective effect Effects 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 238000003331 infrared imaging Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 229940125425 inverse agonist Drugs 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 201000008222 ischemic colitis Diseases 0.000 description 1
- 239000010977 jade Substances 0.000 description 1
- 210000001503 joint Anatomy 0.000 description 1
- 229940018902 kalbitor Drugs 0.000 description 1
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940039088 kininogenase Drugs 0.000 description 1
- 108010053037 kyotorphin Proteins 0.000 description 1
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 1
- 229960000681 leflunomide Drugs 0.000 description 1
- VHOGYURTWQBHIL-UHFFFAOYSA-N leflunomide Chemical compound O1N=CC(C(=O)NC=2C=CC(=CC=2)C(F)(F)F)=C1C VHOGYURTWQBHIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 201000002364 leukopenia Diseases 0.000 description 1
- 231100001022 leukopenia Toxicity 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 108010013555 lipoprotein-associated coagulation inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 239000012160 loading buffer Substances 0.000 description 1
- 208000019017 loss of appetite Diseases 0.000 description 1
- 235000021266 loss of appetite Nutrition 0.000 description 1
- 208000030208 low-grade fever Diseases 0.000 description 1
- 208000004341 lymphocytic colitis Diseases 0.000 description 1
- 108010057284 lysosomal Pro-X carboxypeptidase Proteins 0.000 description 1
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 206010025482 malaise Diseases 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 230000005906 menstruation Effects 0.000 description 1
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 208000013465 muscle pain Diseases 0.000 description 1
- 230000000869 mutational effect Effects 0.000 description 1
- CLVOYFRAZKMSPF-UHFFFAOYSA-N n,n-dibutyl-4-chlorobenzenesulfonamide Chemical compound CCCCN(CCCC)S(=O)(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CLVOYFRAZKMSPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002009 naproxen Drugs 0.000 description 1
- CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N naproxen Chemical compound C1=C([C@H](C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 238000001151 non-parametric statistical test Methods 0.000 description 1
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000003973 paint Substances 0.000 description 1
- 239000004031 partial agonist Substances 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 230000008807 pathological lesion Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 229960001639 penicillamine Drugs 0.000 description 1
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 1
- 208000008494 pericarditis Diseases 0.000 description 1
- 210000003516 pericardium Anatomy 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 208000008423 pleurisy Diseases 0.000 description 1
- 239000001205 polyphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011176 polyphosphates Nutrition 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 230000003334 potential effect Effects 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 1
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- 201000000742 primary sclerosing cholangitis Diseases 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 108020001580 protein domains Proteins 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 238000003118 sandwich ELISA Methods 0.000 description 1
- 208000010157 sclerosing cholangitis Diseases 0.000 description 1
- 238000012764 semi-quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 1
- 238000000528 statistical test Methods 0.000 description 1
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N sulfasalazine Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(\N=N\C=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N 0.000 description 1
- 229960001940 sulfasalazine Drugs 0.000 description 1
- NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N sulfasalazine Natural products C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(N=NC=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 201000004595 synovitis Diseases 0.000 description 1
- 210000001138 tear Anatomy 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- BXDAOUXDMHXPDI-UHFFFAOYSA-N trifluoperazine hydrochloride Chemical compound [H+].[H+].[Cl-].[Cl-].C1CN(C)CCN1CCCN1C2=CC(C(F)(F)F)=CC=C2SC2=CC=CC=C21 BXDAOUXDMHXPDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 108010077037 tyrosyl-tyrosyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 1
- 210000005166 vasculature Anatomy 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/36—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against blood coagulation factors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/573—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes
- G01N33/5735—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes co-enzymes or co-factors, e.g. NAD, ATP
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/10—Antioedematous agents; Diuretics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/56—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving blood clotting factors, e.g. involving thrombin, thromboplastin, fibrinogen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/745—Assays involving non-enzymic blood coagulation factors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/914—Hydrolases (3)
- G01N2333/948—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- G01N2333/95—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99)
- G01N2333/964—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue
- G01N2333/96425—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals
- G01N2333/96427—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals in general
- G01N2333/9643—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals in general with EC number
- G01N2333/96433—Serine endopeptidases (3.4.21)
- G01N2333/96441—Serine endopeptidases (3.4.21) with definite EC number
- G01N2333/96455—Kallikrein (3.4.21.34; 3.4.21.35)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/06—Gastro-intestinal diseases
- G01N2800/065—Bowel diseases, e.g. Crohn, ulcerative colitis, IBS
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/08—Hepato-biliairy disorders other than hepatitis
- G01N2800/085—Liver diseases, e.g. portal hypertension, fibrosis, cirrhosis, bilirubin
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/10—Musculoskeletal or connective tissue disorders
- G01N2800/101—Diffuse connective tissue disease, e.g. Sjögren, Wegener's granulomatosis
- G01N2800/102—Arthritis; Rheumatoid arthritis, i.e. inflammation of peripheral joints
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/52—Predicting or monitoring the response to treatment, e.g. for selection of therapy based on assay results in personalised medicine; Prognosis
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/70—Mechanisms involved in disease identification
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Dermatology (AREA)
Abstract
Mevcut açıklama, bir süjenin, örneğin, bir pKal-aracılı veya bradikinin-aracılı rahatsızlık riskinde olan veya bundan muzdarip bir süjenin, süjenin bir numunesindeki bozulmamış ve/veya klevaj edilmiş kininojenin değerlerine (örneğin, yüzdelerine) dayalı olarak değerlendirilmesinin yöntemlerini sağlamaktadır. Sağlanan yöntemler, plazma kallikrein-aracılı anjiyoödemi (KMA) veya pKal'in aracılık ettiği diğer hastalıkları olan hastaların, değerlendirmede ve tedavide faydalı analizine izin verir. Bu tip yöntemler, klevaj edilmiş kininojeni veya bozulmamış kininojeni tercihli olarak bağlayan bir saptama ajanının kullanımını içerebilir.
Description
TARIFNAME
BRADIKININ-ARACILI RAHATSIZLIKLARIN DEGERLENDIRILMESI VE TEDAVISI
ILGILI BASVURULARA ÇAPRAZ BASVURU
ALT YAPI
Plazma kallikrein (pKal) dolasimdaki birincil bradikinin-üreten enzimdir. pKaI'in
aktivasyonu, herediter anjiyoödem (HAE) ile iliskili hastalik patolojisine baglanmis olan
temas sistemi vasitasiyla meydana gelir. Bradikinin, agrinin, enflamasyonun, ödemin
ve anjiyojenezin kilit bir aracisidir.
Bradikinin ve kallikrein gibi kininojenler kininin öncülleridir. Uç birlestirici varyantlar olan
iki tip insan kininojeni bulunmaktadir, yüksek moleküler-agirlikli kininojen (HMWK) ve
düsük moleküler-agirlikli kininojen (LMWK). HMWK esas olarak koagülasyon ve
enflamasyon üzerinde bir kofaktör görevi görür ve pKaI-aracili bradikinin üretimi için
tercih edilen substrattir. Hem HMWK'Ier hem LMWKIIer sistein proteazi inhibitörleridir.
tip 1 reseptör-uyarimli retinal vasküler geçirimlilige aracilik ettigini belirtmektedir. Zhang
kisminin ayrica LMWK'de de sunuldugunu açiklamaktadir.
BULUSUN KISA AÇIKLAMASI
Bulus, bir plazma kallikrein (pKal)-aracili rahatsizlik riskinde olan veya buna sahip olan
bir süjenin tanimlanmasi için bir yöntem saglamakta olup, yöntem asagidakileri
içermektedir:
bir süjenin bir numunesinde bir klevaj edilmis yüksek moleküler agirlikli
kininojenin (HMWK) bir seviyesinin ve opsiyonel olarak bozulmamis bir (HMWK)
seviyesinin ölçülmesi;
klevaj edilmis HMWK'nin bir degerinin belirlenmesi; ve
klevaj edilmis HMWK degeri bir referans degerinin üzerindeyse, süjenin bir
pKaI-aracili rahatsizlik riski altinda veya buna sahip olarak tanimlanmasi olup,
burada referans degeri, saglikli bir süjedeki klevaj edilmis HMWK degerini ifade
etmektedir;
ve burada pKaI-aracili rahatsizlik herediter anjiyoödem (HAE), romatoid artirit,
ülseratif kolit veya Crohn hastaligidir.
Bulus ayrica, bir süjedeki bir pKaI-aracili rahatsizligin bir tedavisinin degerlendirilmesi
için bir yöntem saglamakta olup, yöntem asagidakileri içermektedir:
süjeden, tedaviden önce ve sonra veya tedavi süresi esnasinda alinan
numunelerdeki klevaj edilmis bir HMWK'nin seviyelerinin ve opsiyonel olarak
bozulmamis bir HMWK'nin seviyelerinin ölçülmesi;
her bir numunedeki klevaj edilmis HMWK”nin bir degerinin, ayni numunedeki
klevaj edilmis ve opsiyonel olarak bozulmamis HMWK seviyelerine dayali
olarak belirlenmesi; ve
numunelerdeki klevaj edilmis bir HMWK'nin degerlerde, tedaviden önce ve
sonra veya tedavi süresi boyunca degisikliklere dayali olarak tedavinin
etkililiginin degerlendirilmesi,
burada pKaI-aracili rahatsizlik herediter anjiyoödem (HAE), romatoid artirit,
ülseratif kolit veya Crohn hastaligidir.
Bulus ayrica, bir süjedeki bir pKaI-aracili rahatsizligin tedavisinde kullanim için bir
farmasötik bilesim saglamakta olup, burada bilesim bir pKaI inhibitörü ve farmasötik
olarak kabul edilen bir tasiyici içerir, burada süje, saglikli bir süjedeki klevaj edilmis
HMWK degerini ifade eden bir referans degerinin üzerinde olan, bir klevaj edilmis
yüksek moleküler agirlikli kininojen (HMWK) degerine sahiptir; ve burada pKal-aracili
hastalik herediter anjiyoödem (HAE), romatoid artirit, ülseratif kolit veya Crohn
hastaligidir.
Plazma kallikrein (pKal), temas sisteminin bir serin proteaz bilesenidir ve dolasimdaki
birincil bradikinin-üreten enzimdir. Temas sistemi, ya faktör Xlla tarafindan yabanci
veya negatif yüklü yüzeylere maruz kalma üzerine veya endotelyal hücre yüzeyleri
üzerinde prolilkarboksipeptidazlar tarafindan aktive edilir (Sainz LM. et al., Thromb
aktivasyonu vasitasiyla intrinsik koagülasyonu güçlendirir ve proenflamatuar nonapeptit
bradikinin üretimi vasitasiyla enflamasyonu arttirir. Dolasimdaki birincil kininojenaz
olarak, pKaI büyük ölçüde vaskülatürdeki bradikinin üretiminden sorumludur. Plazma
kallikreinin ana dogal inhibitörü olan C1-inhibitörü proteininde (Ci-INH) genetik bir
yoksunluk, herediter anjiyoödeme (HAE) yol açar. HAE hastalari, siklikla bilinmeyen
tetikler tarafindan hizlandirilan akut agrili ödem ataklarindan muzdariptir (Zuraw B.L. et
veya genetik çalismalarin kullanimi yoluyla, plazma kallikrein-kinin sistemi (plazma
KKS) çesitli hastaliklara dahil olmustur.
Burada tarif edildigi üzere, bozulmamis (1-zincirli) ve klevaj edilmis (2-zincirli) yüksek
moleküler agirlikli kininojenin (HMWK), ya bozulmamis kininojeni veya klevaj edilmis
kininojeni spesifik olarak (yani, tercihen) baglayan ve opsiyonel olarak LMWK”yi
baglamayan bir saptama reaktifi (örnegin, bir antikor) kullanilarak saptanmasi için bir
Western blot analizi gelistirilmistir. Bu tip bir saptama belirteci, hasta plazmasinda 1-
zincirli ve 2-zincirli HMWK'kin nispi miktarlarini izlemek için kullanilabilir. Bu yöntemin
uygulanmasiyla, bir hasta numunesindeki klevaj edilmis kininojen seviyesinin (örnegin,
yüzde), ödemli HAE ataklari gibi asiri pKal aktivasyonunun aracilik ettigi bilinen
hastalik durumlarinda yükseldigi bulunmustur. Diger hastaliklari olan hastalarin
plazmasindaki klevaj edilmis kininojen yüzdesi müteakiben, aktif pKal'in hastalikla
iliskili olup olmadiginin belirlenmesi için test edilebilir. Test edilmis ve saglikli plazmaya
göre klevaj edilmis kininojen yükselmelerine sahip oldugu gösterilmis olan diger
hastaliklara romatoid artirit (RA), ülseratif kolit (UC) ve Crohn hastaligi dahildir.
Dolayisiyla, mevcut açiklamanin bir yönü, bir pKaI-aracili rahatsizlik riskinde olan veya
bu rahatsizliga sahip bir süjenin tanimlanmasi için bir yöntemle ilgili olup yöntem
asagidakileri içermektedir: (a) bir süjenin bir numunesindeki (örnegin, bir kan numunesi
veya bir plazma numunesi) bir klevaj edilmis kininojenin (örnegin, HMWK) bir
seviyesinin ve bir bozulmamis kininojenin (örnegin, HMWK) bir seviyesinin, örnegin, bir
Western blot analizi vasitasiyla ölçülmesi; (b) numunede klevaj edilmis kininojenin bir
degerinin (örnegin, yüzde), bozulmamis kininojenin bir degerinin (örnegin, yüzde) veya
her ikisinin belirlenmesi; ve (c) eger klevaj edilmis kininojenin degeri, bozulmamis
kininojenin degeri veya her ikisi bir referans degerinden saparsa, süjenin bir pKal-
aracili rahatsizlik riskinde olarak veya bu rahatsizliga sahip olarak tanimlanmasi. Bazi
örneklerde, numunedeki klevaj edilmis kininojenin yüzdesi belirlenir ve klevaj edilmis
kininojenin yüzdesi bir referans degerindeyse veya bu degerin üzerindeyse, süje hedef
hastalik riskinde veya bu hastaliga sahip olarak tanimlanir.
Bazi uygulamalarda, klevaj edilmis kininojenin ve bozulmamis kininojenin seviyeleri, ya
klevaj edilmis veya bozulmamis kininojeni spesifik olarak (örnegin, tercihen) baglayan
bir saptama ajani (örnegin, bir antikor) tarafindan ölçülür. Bu tip bir saptama ajani
(örnegin, bir antikor) hem bozulmamis hem klevaj edilmis kininojeni baglayabilir ama
LMWK'yi baglamaz. Diger uygulamalarda, klevaj edilmis kininojenin ve bozulmamis
kininojenin seviyeleri, bozulmamis kininojene kiyasla klevaj edilmis kininojeni spesifik
olarak baglayan veya klevaj edilmis kininojene kiyasla bozulmamis kininojeni spesifik
olarak baglayan bir saptama ajani (örnegin, bir antikor) tarafindan ölçülür. Bir örnekte,
saptama ajani, bozulmamis kininojene kiyasla klevaj edilmis kininojeni spesifik olarak
baglayan bir antikordur. Bir baska örnekte, saptama ajani, klevaj edilmis kininojenin,
LMWKide mevcut olmayan hafif zincirinin C-ucuna baglanan bir antikordur.
pKaI-aracili rahatsizlik herediter anjiyoödem (HAE), romatoid artirit, ülseratif kolit veya
Crohn hastaligi olabilir. Süje bir pKal-aracili rahatsizlik riskinde veya buna sahip olarak
tanimlanirsa, burada tarif edilen sekildeki yöntem ayrica, bir pKaI inhibitörünün etkili bir
miktarinin süjeye verilisini içerebilir. Bazi örneklerde, pKaI inhibitörü DX-88, EPIKAL-2
veya DX-2930'dur.
Bazi uygulamalarda, numune, bir pKaI-aracili rahatsizligin, bunlarla sinirli kalmamak
kaydiyla, ödem, tekrarlayan sisme ataklari, burada söz konusu sismenin tamamen
veya baskin olarak periferik oldugu sismeler, ürtiker, kizariklik, agri ve enfeksiyon
kaniti yoklugunda sisme; veya histamin-araciIi-olmayan ödem dahil olmak üzere bir
semptomuna sahip olan bir süjedendir. Diger uygulamalarda, numune, numunenin
alindigi esnada bir pKaI-aracili rahatsizligin hiç semptomuna sahip olmayan, bir pKal-
aracili rahatsizligin bir semptomunun hiç hikayesi olmayan veya bir pKaI-aracili
rahatsizligin hiç hikayesi olmayan bir süjedendir. Alternatif veya ek olarak, süje bir anti-
histamin terapisine, bir kortikosteroid terapisine veya her ikisine de dirençlidir.
Bir baska yönde, mevcut açiklama, bir rahatsizligin bir pKaI-inhibitörüyle tedaviye
duyarli olup olmadiginin belirlenmesi için bir yöntem saglamakta olup yöntem
asagidakileri içermektedir: (a) rahatsizligi olan bir süjenin bir numunesinde (örnegin, bir
kan numunesi veya bir plazma numunesi) bir klevaj edilmis kininojenin (örnegin,
HMWK) bir seviyesinin ve bir bozulmamis kininojenin (örnegin, HMWK) bir seviyesinin
ölçülmesi; (b) numunede klevaj edilmis kininojenin bir degerinin (örnegin, yüzde),
bozulmamis kininojenin bir degerinin (örnegin, yüzde) veya her ikisinin belirlenmesi; ve
(c) klevaj edilmis kininojenin degeri, bozulmamis kininojenin degeri veya her ikisi bir
referans degerinden saparsa, rahatsizligin bir pKaI inhibitörüyle tedaviye duyarli olarak
tanimlanmasi. Bir örnekte, klevaj edilmis kininojenin yüzdesi belirlenir ve klevaj edilmis
kininojenin yüzdesi bir referans degerindeyse veya üzerindeyse, hastalik tedaviye
duyarli olarak tanimlanir.
Bazi uygulamalarda, klevaj edilmis kininojenin ve bozulmamis kininojenin seviyeleri,
bozulmamis kininojene kiyasla klevaj edilmis kininojeni spesifik olarak baglayan veya
klevaj edilmis kininojene kiyasla bozulmamis kininojeni spesifik olarak baglayan br
saptama ajani (örnegin, bir antikor) tarafindan Ölçülür. Bazi örneklerde, saptama
belirteci, bozulmamis kininojene kiyasla klevaj edilmis kininojeni spesifik olarak
baglayan bir antikordur. Diger örneklerde, saptama belirteci, klevaj edilmis kininojenin
hafif zincirinin C-ucuna baglanan bir antikordur. Burada tarif edilen yöntemlerin
herhangi birinde, bozulmamis kininojen ve klevaj edilmis kininojen seviyeleri Western
blot analizi ile ölçülebilir.
Rahatsizlik bir pKaI inhibitörünün tedavisine duyarli olarak tanimlanirsa, yöntem ayrica
süjeye, bunlarla sinirli kalmamak kaydiyla, DX-88, EPIKAL-2 veya DX-2930'u içeren bir
pKaI inhibitörünün etkili bir miktarinin verilisini içerebilir.
Yine bir baska örnekte, mevcut açiklama, bir süjedeki bir pKaI-aracili rahatsizligin bir
tedavisinin degerlendirilmesi için bir yöntem saglamakta olup yöntem asagidakileri
içerir: (a) süjeden tedaviden önce ve sonra veya tedavi süreci esnasinda toplanan
numunelerde (örnegin, kan numuneleri veya plazma numuneleri) bir klevaj edilmis
kininojenin (örnegin, HMWK) ve bir bozulmamis kininojenin (örnegin, HMWK)
seviyelerinin ölçülmesi; (b) her bir numunede klevaj edilmis kininojenin bir degerinin
(örnegin, yüzde), bozulmamis kininojenin bir degerinin (örnegin, yüzde) veya her
ikisinin, ayni numunedeki klevaj edilmis ve bozulmamis kininojen seviyelerine dayali
olarak belirlenmesi; ve (c) tedaviden önce ve sonra veya tedavi süreci boyunca klevaj
edilmis ve/veya bozulmamis kininojen degerindeki degisikliklere dayali olarak tedavinin
etkililiginin degerlendirilmesi. Örnegin, tedaviden sonra veya tedavinin süreci boyunca
klevaj edilmis kininojen yüzdesinde bir azalma, tedavinin süje üzerinde etkili oldugunu
göstermektedir. Bazi uygulamalarda, tedavi süjeye, bir pKal inhibitörünün, örnegin, DX-
88, EPlKAL-2 veya DX-2930'un etkili bir miktarinin verilisini içerir.
Burada tarif edilen degerlendirme yöntemlerinin herhangi birinde, klevaj edilmis
kininojen ve bozulmamis kininojen seviyeleri, bozulmamis kininojene kiyasla klevaj
edilmis kininojeni spesifik olarak baglayan veya klevaj edilmis kininojene kiyasla
bozulmamis kininojeni spesifik olarak baglayan bir saptama ajani (örnegin, bir antikor)
tarafindan ölçülebilir. Bazi örneklerde, saptama belirteci, bozulmamis kininojene
kiyasla klevaj edilmis kininojeni spesifik olarak baglayan bir antikordur. Diger
örneklerde, saptama ajani, klevaj edilmis kininojenin hafif zincirinin C-ucuna baglanan
bir antikordur. Burada tarif edilen yöntemlerin herhangi birinde, bozulmamis kininojen
ve klevaj edilmis kininojen seviyeleri, Western blot analizi ile Ölçülebilir.
Bazi uygulamalarda, pKal-aracili rahatsizlik herediter anjiyoödem (HAE), romatoid
artirit, ülseratif kolit veya Crohn hastaligidir.
Ayrica, mevcut açiklama, bir numunede klevaj edilmis kininojenin bir degerinin,
bozulmamis kininojenin bir degerinin veya her ikisinin saptanmasi için, (a) bozulmamis
ve klevaj edilmis kininojen ihtiva eden bir numunenin (örnegin, bir kan numunesi veya
bir plazma numunesi), saptama ajaninin, bozulmamis kininojene kiyasla spesifik olarak
klevaj edilmis kininojeni bagladigi veya bozulmamis kininojene kiyasla klevaj edilmis
kininojeni spesifik olarak bagladigi saptama ajaniyla bozulmamis ve klevaj edilmis
kininojen arasinda etkilesime olanak saglayan kosullar altinda bir saptama belirteciyle
temas ettirilmesini; (b) numunedeki klevaj edilmis kininojen ve/veya bozulmamis
kininojen seviyesinin, saptama belirteciyle etkilesimlerine dayali olarak ölçülmesini; ve
(c) numunede klevaj edilmis kininojenin bir degerinin (örnegin, yüzde), bozulmamis
kininojenin bir degerinin (örnegin, yüzde) veya her ikisinin, klevaj edilmis kininojen ve
bozulmamis kininojen seviyelerine dayali olarak belirlenmesi. Bazi uygulamalarda,
saptama belirteci, bozulmamis kininojene kiyasla klevaj edilmis kininojene spesifik
olarak baglanan antikor gibi bir antikordur veya klevaj edilmis kininojenin hafif zincirinin
C-ucuna baglanan bir antikordur. Bazi uygulamalarda, bozulmamis kininojenin ve
klevaj edilmis kininojenin miktarlari Western blot analizi ile ölçülür.
Ayrica, mevcut açiklamanin kapsami dahilinde (i) bir pKal-aracili hastaligin tedavisi
için, ihtiyaç duyan, süjenin bir referans degerinden sapan bir klevaj edilmis kininoejn
degerine (örnegin, yüzde), bir bozulmamis kininojen degerine (örnegin, yüzde) veya
her ikisine sahip olan bir süjeye burada tarif edilen sekildeki bir pKal inhibitörünün
verilisini içeren bir yöntem, (ii) bir referans degere kiyasla, klevaj edilmis kininojenin
ve/veya bozulmamis kininojenin sapmis bir degerine sahip bir süjenin bir pKal-aracili
hastaligin tedavisinde kullanim için, bir pKal inhibitörü ve farmasötik olarak kabul edilen
bir tasiyici içeren bir farmasötik bilesim ve (iii) bir pKal-aracili hastaligin, örnegin,
HAE'nin tedavisinde kullanim için bir ilacin üretimi için farmasötik bilesimin kullanimi
bulunmaktadir. Bazi uygulamalarda, klevaj edilmis ve/veya bozulmamis kininojenin
degeri, numunedeki klevaj edilmis ve/veya bozulmamis kininojenin yüzdesidir.
Asagidaki uygulamalar da mevcut açiklamanin kapsami dahilindedir:
Burada, br süjenin, örnegin, bir pKal-aracili veya bradikinin-aracili rahatsizlik riskinde
olan veya bu rahatsizliktan muzdarip bir süjenin degerlendirilmesinin yöntemleri
saglanmaktadir. Saglanan yöntemler, plazma kallikrein-aracili anjiyoödemi (KMA) veya
pKal'in aracilik ettigi diger hastaliklari olan hastalarin, degerlendirme ve tedavide
faydali olan analizine izin vermektedir.
Mevcut açiklamanin uygulamalari bir biyomarkör ve bunun hastalarin, örnegin, plazma
kallikrein tarafindan üretilen bradikininin neden oldugu ödemden muzdarip hastalarin
tanimlanmasinda ve tedavisinde kullanimini saglamaktadir. Burada açiklanan
yöntemler, bilesimler ve cihazlar bir takim sekillerde faydalidir. Örnegin, bir pKal
markörünün seviyeleri, yükselmis temas sistemi aktivasyonuyla iliskili rahatsizliklarin
tanimlanmasi için kullanilabilir. Ilk taramayi, örnegin, hastaligin klinik öncesi
modellerinde plazma kallikrein inhibitörleriyle (örnegin, DX-88, EPIKAL2 veya DX-
2930) in vitro veya in vivo testler takip edebilir. Burada açiklanan bir markör ayrica, bir
farmakodinamik biyomarkör olarak veya baska durumlarda bir süjenin bir kallikrein
inhibitörüne yanitinin izlenmesi için de kullanilabilir. Burada açiklanan bir markör,
plazma kallikreinin aracilik ettigi hastaliklarin tedavisinin saglanmasi için bir refakatçi
teshiste kullanilabilir, bir pKal-aracili veya bradikinin-aracili rahatsizligin, örnegin,
asagidaki hastaliklarin profilaktik terapisi esnasinda dozlamayi yönetebilir; HAE,
histamin-bagimli-olmayan idiopatik anjiyoödem, romatoid artirit, Crohn hastaligi,
ülseratif kolit, Iupus, Alzheimer hastaligi, septik sok, yanik yaralanmasi, beyin
iskemisi/reperfüzyon yaralanmasi, serebral ödem, diyabetik retinopati, diyabetik
nefropati, maküler ödem, vaskülit, arteriyel veya venöz tromboz, ventriküler destek
cihazlariyla veya stentlerle iliskili tromboz, trombozlu heparin-indüklü trombositopeni,
tromboembolik hastalik ve stabil olmayan gögüs anjinli koroner kalp hastaligi, ödem,
göz hastaligi, gut, bagirsak hastaligi, oral mukozit, nörpatik agri, enflamatuar agri,
spinal stenoz-dejeneratif omurilik hastaligi, ameliyat sonrasi bagirsak tikanmasi, aortik
anevrizma, osteoartirit, herediter anjiyoödem, akciger embolisi, felç, kafa travmasi veya
peri-tümör beyin ödemi, sepsis, akut orta serebral arter (MCA) iskemik olayi (felç),
restenoz (örnegin, anjiyoplastiden sonra), sistemik Iupus eritematoz nefrit, bir
otoimmün hastaligi, bir enflamatuar hastalik, bir kardiyovasküler hastalik, bir nörolojik
hastalik, yanlis protein katlanmasiyla iliskili bir hastalik, anjiyojenezle iliskili bir
hasrtalik, hipertansif nefropati ve diyabetik nefropati, alerjik ve solunum hastaliklari
(örnegin, anafilaksi, astim, Crohnik obstrüktif akciger hastaligi, akut solunum sikintisi
sendromu, kistik fibroz, persistan rinit) ve doku yaralanmalari (örnegin, yanik veya
kimyasal yaralanma).
Mevcut açiklama, bir süjenin degerlendirilmesinin veya tedavi edilmesinin, örnegin, bir
pKaI-aracili rahatsizligin, örnegin, bradikinin-aracili anjiyoödemin bir histamin-aracili
rahatsizliktan ayirt edilmesinin veya bir pKaI-aracili rahatsizligin ilerideki bir ataginin
öngörülmesinin, örnegin burada açiklanan pKaI aktivasyonuyla iliskilendirilen bir veya
daha fazla markörün (bir pKal markörü), örnegin, bozulmamis kininojenin ve klevaj
edilmis kininojenin edinilmesini, böylelikle söz konusu hastanin degerlendirilmesini
veya tedavi edilmesini içeren bir yöntem saglamaktadir. Bazi uygulamalarda, yöntem,
bir histamin-aracili enflamatuar yanitla iliskilendirilen bir veya fazla markörün (bir H-
markörü), örnegin, triptazin seviyesinin edinilmesini, örnegin, saptanmasini içerir.
Bazi uygulamalarda, söz konusu pKaI-aracili rahatsizlik HAE, IAE, lBD veya IBS'dir.
Bazi uygulamalarda, söz konusu pKaI-aracili rahatsizlik sunlardan seçilir; histamin-
bagimli-olmayan idiopatik anjiyoödem, romatoid artirit, Crohn hastaligi, ülseratif kolit,
yaralanmasi, serebral ödem, diyabetik retinopati, diyabetik nefropati, maküler ödem,
vaskülit, arteriyel veya venöz tromboz, ventriküler destek cihazlariyla veya stentlerle
iliskili tromboz, trombozlu heparin-indüklü trombositopeni, tromboembolik hastalik ve
stabil olmayan gögüs anjinli koroner kalp hastaligi, ödem, göz hastaligi, gut, bagirsak
hastaligi, oral mukozit, nöropatik agri, enflamatuar agri, spinal stenoz-dejeneratif
omurilik hastaligi, ameliyat sonrasi bagirsak tikanmasi, aortik anevrizma, osteoartirit,
herediter anjiyoödem, akciger embolisi, felç, kafa travmasi veya peri-tümör beyin
ödemi, sepsis, akut orta serebral arter (MCA) iskemik olayi (felç), restenoz (örnegin,
anjiyoplastiden sonra), sistemik Iupus eritematoz nefrit, bir otoimmün hastaligi, bir
enflamatuar hastalik, bir kardiyovasküler hastalik, bir nörolojik hastalik, yanlis protein
katlanmasiyla iliskili bir hastalik, anjiyojenezle iliskili bir hastalik, hipertansif nefropati ve
diyabetik nefropati, alerjik ve solunum hastaliklari (örnegin, anafilaksi, astim, Crohnik
obstrüktif akciger hastaligi, akut solunum sikintisi sendromu, kistik fibroz, persistan
rinit) ve doku yaralanmalari (örnegin, yanik veya kimyasal yaralanma).
Mevcut açiklama ayrica, bir süjenin degerlendirilmesinin veya tedavi edilmesinin bir
yöntemini de saglamakta olup söz konusu süje hem bir pKal-aracili rahatsizlikla,
örnegin, bradikinin-aracili anjiyoödemle ve histaminle ilgili bir rahatsizlikla birbirini tutan
bir semptoma sahiptir, yöntem a) opsiyonel olarak, söz konusu süjenin, bir pKaI-aracili
rahatsizliktan ve bir histaminle ilgili rahatsizliktan biriyle veya her ikisiyle tutarli bir
semptoma, örnegin, ödeme veya abdominal rahatsizlik hissine sahip olup olmadiginin
belirlenmesini; b) söz konusu süje söz konusu semptom için bir anti-histamin terapisiyle
tedavi edilmemisse, bu durumda söz konusu süjenin bir anti-histamin terapisiyle tedavi
edilmesini; c) pKal aktivasnonuyla iliskilendirilen bir veya daha fazla markörün (bir pKal
markörü), örnegin, bozulmamis kininojenin ve klevaj edilmis kininojenin seviyesinin
edinilmesini, örnegin, saptanmasini; d) söz konusu seviye önceden belirlenmis bir
kriteri karsiliyorsa, örnegin, bir referans seviyesindeyse veya bunun üzerindeyse:
süjenin kallikrein inhibitör terapisi için seçilmesini; veya söz konusu süjeye bir kallikrein
inhibitörünün verilisini, böylelikle söz konusu süjenin degerlendirilmesini veya tedavi
edilmesini içerir. Bazi uygulamalarda, yöntem süjenin kallikrein inhibitör terapisi için
seçilmesini içerir. Belirli uygulamalarda, yöntem söz konusu süjeye bir kallikrein
inhibitörünün verilisini içerir. Belirli uygulamalarda, süjelerin kallikrein inhibitör terapisi
için seçilmesi; veya söz konusu süjeye bir kallikrein inhibitörünün verilisi, süjenin söz
konusu anti-histamin terapisine cevap vermediginin belirlenmesinden önce meydana
gelir, örnegin, bir anti-histamin terapisiyle söz konusu tedavinin 1nci, 2nci, 3ncü, 4ncü,
5nci, 6nci, 7nci, 8nci, 9ncu veya 10ncu saati içerisinde meydana gelir. Bazi
uygulamalarda, söz konusu süjenin hem bir pKaI-aracili rahatsizlikla hem bir histaminle
ilgili rahatsizlikla birbirini tutan bir semptoma sahip oldugunun belirlenisi ve bir pKaI
markörünün seviyesinin belirlenmesi için söz konusu hastadan bir numunenin alinisi:
birbirinden 30 dakika, 1, 2 veya 3 saat içerisinde; veya bir saglik uzmanina yapilan ayni
ziyarette meydana gelir.
Bazi uygulamalarda, söz konusu pKal inhibitörü DX-88, DX-293O veya EpiKal-Z'den
seçilir.
Bazi uygulamalarda, yöntem, bir histamin-aracili enflamatuar yanitla iliskilendirilen bir
veya daha fazla markörün (bir H-markörü) seviyesinin edinilmesini, örnegin,
belirlenmesini içerir. Belirli uygulamalarda, söz konusu süje, bir pKaI-aracili rahatsizliga
yatkinlik açisindan degerlendirilir. Belirli uygulamalarda, söz konusu süje, bir pKal-
aracili rahatsizligin, örnegin, HAE'nin, örnegin, bu rahatsizlikla birbirini tutan bir
semptomuna, örnegin, ödeme sahiptir. Belirli uygulamalarda, söz konusu süje,
istenmeyen pKaI aktivasyonuyla karakterize bir rahatsizligin bir semptomuna sahiptir
ve söz konusu süjeye bir anti-histamin terapisi verilmistir. Belirli uygulamalarda, söz
konusu anti-histamin terapisi, burada açiklandigi sekilde bir belirleme adimindan önce
yöntem ayrica, söz konusu süjeye, örnegin, burada açiklandigi sekilde degerlendirme
veya belirlemelerden önce, sonra veya bunlar esnasinda bir anti-histamin terapisinin
verilisini içerir.
Bazi uygulamalarda, söz konusu belirlemeye veya degerlendirmeye yanit olarak, söz
konusu süjeye bir kallikrein inhibitörü verilir. Belirli uygulamalarda, söz konusu süje
asagicaki semptomlarin veya özelliklerin birine veya daha fazlasina veya tamamina
sahiptir: tekrarlayan sisme ataklari; söz konusu sismenin tamamen veya baskin olarak
periferik oldugu sisme, örnegin, süje hiç kayda deger abdominal veya hava yolu
sismesine sahip degildir; üitiker; enfeksiyon kanitinin yoklugunda kizariklik, agri ve
sisme; antihistamin veya kortikosteroid terapisine yanit verememe; veya histamin-
aracili olmayan ödeme sahip olma. Belirli uygulamalarda, söz konusu süje, kalici veya
tekrar eden ödeme sahiptir ve anti-histamin ve steroid terapisinden biri veya ikisine
yanit vermez. Belirli uygulamalarda, süjede bir pKaI-aracili rahatsizlik, örnegin, HAE,
hikayesi vardir; süjede bir IAE hikayesi yoktur; süjede bir IAE hikayesi vardir; süjede bir
lBD veya lBS hikayesi yoktur; süjede bir IBD veya IBS hikayesi vardir; süjede bir
histamin aracili rahatsizlik, örnegin, bir gida alerjisi hikayesi yoktur; süjede bir histamin
aracili rahatsizlik, örnegin, bir gida alerjisi hikayesi vardir; süjede bir pKal-aracili
rahatsizlik, örnegin, HAE, IAE, IBD veya IBS hikayesi yoktur ve bir histamin-aracili
rahatsizlik, örnegin, bir gida alerjisi hikayesi yoktur; veya süjede bir pKaI-aracili
rahatsizlik, örnegin, HAE, IAE, IBD veya IBS hikayesi yoktur ve bir histamin-aracili
rahatsizlik, örnegin, bir gida alerjisi hikayesi vardir; süjede bir pKaI-aracili rahatsizlik,
örnegin, HAE, IAE, IBD veya IBS hikayesi vardir ve bir histamin-aracili rahatsizlik,
örnegin, bir gida alerjisi hikayesi yoktur; veya süjede bir pKaI-aracili rahatsizlik,
örnegin, HAE, IAE, IBD veya IBS hikayesi vardir ve bir histamin-aracili rahatsizlik,
örnegin, bir gida alerjisi hikayesi vardir.
Bazi uygulamalarda, süje, örnegin, HAE için, örnegin, bir profilaktik terapide bir
kallikrein inhibitörüyle tedavi edilmistir ve süjenin kallikrein inhibitörüne yaniti
degerlendirilir veya izlenir ve opsiyonel olarak söz konusu izlemeye yanit olarak, bir
terapi seçilir veya verilir, örnegin, belirlemeye yanit olarak, kallikrein inhibitörünün
dozaji ayarlanir. Bazi uygulamalarda, bir pKaI markörünün belirlenisi, bir refakatçi tani
baglaminda gerçeklestirilir ve opsiyonel olarak, bir terapötigin verilisi belirleyise
dayanilarak verilir veya kisitlanir. Belirli uygulamalarda, söz konusu tedaviye yanit,
yaklasan bir akut atagin, örnegin, bir HAE veya IEA ataginin tanimlanmasina dayalidir.
Belirli uygulamalarda, söz konusu süje, idiopatik anjiyoödeme yatkinlik açisindan
degerlendirilir. Belirli uygulamalarda, söz konusu degerlendirme, söz konusu süjenin bir
pKaI-aracili rahatsizliktan, örnegin, bir bradikinin-aracili rahatsizliktan, örnegin, bir
pKal-aracili anjiyoödemden veya bir histamin-aracili rahatsizliktan, örnegin, bir alerjk
gida reaksiyonundan muzdarip olup olmadiginin belirlenmesini içerir.
Bazi uygulamalarda, süjede bir pKaI-aracili rahatsizlik, örnegin, HAE veya IAE hikayesi
yoktur. Bazi uygulamalarda, süjede bir pKaI-aracili rahatsizlik, örnegin, HAE veya IAE
hikayesi vardir. Bazi uygulamalarda, süjede bir pKal-aracili rahatsizlik, örnegin, HAE,
lAE, lBD veya IBS hikayesi yoktur; süjede bir pKal-aracili rahatsizlik, örnegin, HAE,
hikayesi vardir; süjede bir IAE hikayesi yoktur; süjede bir IAE hikayesi vardir; süjede bir
histamin aracili rahatsizlik, örnegin, bir gida alerjisi hikayesi yoktur; süjede bir histamin
aracili rahatsizlik, örnegin, bir gida alerjisi hikayesi vardir; süjede bir pKaI-aracili
rahatsizlik, örnegin, HAE, IAE, IBD veya IBS hikayesi yoktur ve bir histamin-aracili
rahatsizlik, örnegin, bir gida alerjisi hikayesi yoktur; veya süjede bir pKaI-aracili
rahatsizlik, örnegin, HAE, lAE, IBD veya IBS hikayesi yoktur ve bir histamin-aracili
rahatsizlik, örnegin, bir gida alerjisi hikayesi vardir; süjede bir pKaI-aracili rahatsizlik,
örnegin, HAE, IAE, IBD veya IBS hikayesi vardir ve bir histamin-aracili rahatsizlik,
örnegin, bir gida alerjisi hikayesi yoktur; veya süjede bir pKaI-aracili rahatsizlik,
örnegin, HAE, IAE, IBD veya IBS hikayesi vardir ve bir histamin-aracili rahatsizlik,
örnegin, bir gida alerjisi hikayesi vardir.
Bazi uygulamalarda, bir pka markörü, örnegin, burada açiklanan bir pKaI markörü, bir
antikor-tabanli belirteçle saptanir. Belirli uygulamalarda, bir pKaI markörü, sandviç
bagisiklik-analizi ile saptanir. Belirli uygulamalarda, yöntem, kininojenin, örnegin,
bozulmamis veya klevaj edilmis kininojenin birinin veya her ikisinin seviyesinin,
örnegin, bir elektroforetik ayirma analizi ile, örnegin, bir Western blot edinilmesini,
örnegin, saptanmasini içerir. Bazi uygulamalarda, bir pKaI markörü, örnegin, kininojen,
analitin diger ürünlerden örnegin, Western blot ayrilmasina, örnegin, elektroforetik
ayrilmasina dayali bir analizde saptanir.
Bazi uygulamalarda, bir pKaI markörü sandviç bagisiklik-analizi ile saptanir ve bir ikinci
pKaI markörü, örnegin, kininojen, analitin diger ürünlerden örnegin, Western blot
ayrilmasina, örnegin, elektroforetik ayrilmasina dayali bir analizde saptanir. Belirli
uygulamalarda, bir pKaI markörünün saptanmasi niteldir. Belirli uygulamalarda, bir pKaI
markörünün saptanmasi niceldir. Belirli uygulamalarda, bozulmamis kininojenin ve
klevaj edilmis kininojenin her birinin bir seviyesi saptanir.
Bazi uygulamalarda, yöntem, bir pKal markörünün, örnegin, bozulmamis kininojenin
veya klevaj edilmis kininojenin bir referans degeriyle karsilastirilmasini içerir. Belirli
uygulamalarda, söz konusu referans deger, söz konusu pKaI markörünün bir HAE'deki,
örnegin, bir veya daha fazla HAE süjesindeki seviyesinin bir fonksiyonudur. Belirli
uygulamalarda, söz konusu referans degeri, söz konusu pKal markörünün bir atak
esnasinda bir HAE'deki, örnegin, bir akut atak esnasinda bir veya daha fazla HAE
süjesindeki seviyesinin bir fonksiyonudur. Belirli uygulamalarda, söz konusu referans
deger, pKaI markörünün bir IAE'deki, örnegin, bir veya daha fazla IAE süjesindeki
seviyesinin bir fonksiyonudur. Belirli uygulamalarda, söz konusu referans degeri, pKaI
markörünün bir akut atak esnasinda bir lAE'deki, örnegin, bir akut atak esnasinda bir
veya daha fazla IAE süjesindeki seviyesinin bir fonksiyonudur. Belirli uygulamalarda,
söz konusu referans degeri, bir pKaI markörünün HAE veya IAE yoklugundaki, örnegin,
hiç HAE veya IAE hikayesi olmayan bir veya daha fazla süjedeki seviyesinin bir
fon ksiyonudur.
Belirli uygulamalarda, yöntem, örnegin, bir karsilastirmaya yanit olarak süjenin
siniflandirilmasini, örnegin, süjenin bir pKaI-aracili rahatsizlik riski açisindan
siniflandirilmasini veya söz konusu süjeye bir terapinin verilisini veya kisitlanmasini
içerir. Belirli uygulamalarda, yöntem, örnegin, bir karsilastirmaya yanit olarak, söz
konusu süje için bir tedavinin seçilmesini içerir. Bazi uygulamalarda, yöntem, örnegin,
bir karsilastirmaya yanit olarak, söz konusu süjeye bir terapinin, örnegin, bir kallikrein
baglayici ajanin, bir bradikinin 82 reseptörü antagonistinin; veya bir C1-INH replasman
ajaninin verilisini veya ksiitlanmasini içerir. Belirli uygulamalarda, söz konusu tedavi,
bir pKal inhibitörünün, örnegin, DX-88, EpiKaI2 ve DX-2930'dan sçeilen bir pKal
inhibitörünün verilisidir.
Bazi uygulamalarda, söz konusu süjeden bir numune, iki veya daha fazla markör için,
örnegin, bir pKal marköründen veya bir H marköründen bir yakalama ajanini, örnegin,
bir anti-H markörü antikorunu içeren bir substratla temas ettirilmekte olup; opsiyonel
olarak burada en az bir yakalama ajani bir pKal markörü için bir yakalama ajanidir.
Bazi uygulamalarda, yöntem, söz konusu süjeden bir numunenin, örnegin bir kan veya
plazma numunesinin edinilmesini içerir.
Bazi uygulamalarda, (bir birinci markör için) bir birinci yakalama ajani ve (bir ikinci
markör için) bir ikinci yakalama ajani, birinci markörün varligi için bir sinyalin, ikinci
markörün varligi için bir sinyalden ayirt edilebilecegi sekilde bir substrat Üzerine
birakilir. Belirli uygulamalarda, (bir birinci markör için) söz konusu birinci yakalama
ajani bir birinci konumda veya adreste yer alir ve (bir ikinci markör için) söz konusu
ikinci yakalama ajani bir ikinci konumda veya adreste yer alir. Belirli uygulamalarda,
söz konusu birinci konum veya adres ve söz konusu ikinci konum veya adres söz
konusu substrat üzerinde örtüsmez. Belirli uygulamalarda, söz konusu birinci yakalama
ajani bir birinci pKal markörü içindir. Belirli uygulamalarda, söz konusu birinci yakalama
ajani bir birinci pKal markörü içindir ve söz konusu ikinci yakalama ajani bir ikinci pKal
markörü içindir. Belirli uygulamalarda, söz konusu birinci yakalama ajani bir pKal
markörü içindir ve söz konusu ikinci yakalama ajani bir H-markörü içindir.
Belirli uygulamalarda, yöntem, bir pKal markörünün varliginin veya miktarinin
belirlenmesi için bir substratin, örnegin, saptanabilir bir antikorla temas ettirilmesini
içerir. Belirli uygulamalarda, söz konusu antikorlar, renkli bir ürün üreten, bir foton
yayan, bir foton emen, bir substrati degistiren veya substratin iletkenligini degistiren bir
bölütle etiketlenir. Belirli uygulamalarda, söz konusu antikorlar,
elektrokemilüminesanstan faydalanan bir bölütle etiketlenir. Belirli uygulamalarda, söz
konusu antikorlar rezinyum ile etiketlenir. Belirli uygulamalarda, söz konusu substrat,
bir mezo ölçegi kesif cihazinda saglanir. Belirli uygulamalarda, söz konusu substrat,
kan ve plazmanin biriyle veya her ikisiyle kullanim için uygun bir daldirma çubugu
olarak saglanir. Belirli uygulamalarda, söz konusu birinci yakalama ajani ve söz konusu
ikinci yakalama ajani bir ortak veya sivisal olarak baglantili bir hazne, örnegin, bir çok
hazneli cihaz, örnegin, bir çok-gözlü plakadaki bir hazne, örnegin, bir göz veya girinti
içinde yer alir. Belirli uygulamalarda, söz konusu birinci yakalama ajani ve söz konusu
ikinci yakalama ajani bir substrat üzerine basilir.
Bazi uygulamalarda, bir birinci pKal markörü için söz konusu yakalama ajani söz
konusu substrat üzerinde bir birinci konumdadir ve bir ikinci pKal markörü için söz
konusu yakalama ajani söz konusu substrat üzerinde bir ikinci konumdadir ve söz
konusu birinci ve ikinci konumlar söz konusu substrat üzerine, birinci pKal markörün
varligi için bir sinyalin bir ikinci pKal markörü için bir sinyalden ayirt edilebilecegi
sekilde birakilir. Belirli uygulamalarda, söz konusu substrat, bir üçüncü konumdaki bir
üçüncü markör için bir yakalama ajani içerir ve üçüncü konum söz konusu substrat
üzrine, üçüncü markörün varligi için bir sinyalin, söz konusu birinci ve ikinci markörden
bir sinyalden ayirt edilebilecegi sekilde birakilir.
Bazi uygulamalarda, bir numunedeki bir pKal markörünün seviyesinin belirlenisi,
substratin söz konusu numuneyle temasinin 1nci, 2nci, 3ncü, 4ncü veya 5nci saati
içerisinde yapilabilir. Bazi uygulamalarda, bir numunedeki iki pKal markörünün
seviyesinin belirlenisi, substratin söz konusu numuneyle temasinin 1nci, 2nci, 3ncü,
4ncü veya 5nci saati içerisinde yapilabilir. Bazi uygulamalarda, iki pKal markörünün
seviyesinin belirlenisi, eszamanli olarak gerçeklestirilen analizlerde, örnegin,
inkübasyon veya birbiriyle örtüsen testler için diger araliklarda yapilabilir.
Bir baska yönde, mevcut açiklama, örnegin, burada tarif edilen sekilde birden fazla
pKal markörü için yakalama ajanlari içeren bir substrat saglamaktadir.
Bir diger yönde, mevcut açiklama, bir rahatsizligin bir pKal inhibitörüyle tedaviye
duyarli olup olmadiginin belirlenmesi için sunlari içeren bir yöntem saglamaktadir:
örnegin, söz konusu rahatsizliktan muzdarip bir süjede veya söz konusu rahatsizlik için
bir hayvan modelinde, örnegin, burada tarif edildigi sekilde bir veya birden fazla pKal
markörünün seviyelerinin degerlendirilmesi; belirlenen seviyenin bir referansla
karsilastirilmasi olup, burada önceden belirlenen bir kriteri karsilayan bir seviye,
örnegin, bir referans seviyesinde veya bunun üzerinde olup olmadigi, bir pKaI
inhibitörüyle tedaviye duyarli bir rahatsizligin göstergesidir. Bazi uygulamalarda,
yöntem, bir kallikrein inhibitörünün, söz konusu rahatsizligin bir hayvan modelinde in
vitro veya in vivo etkisinin degerlendirilmesini içerir.
Bir baska yönde, mevcut açiklama, bir pKaI aracili rahatsizligi, örnegin, bir bradikinin
aracili rahatsizligi olan bir süjenin tedavi edilmesinin, burada tarif edilen bir pKaI
markörünün seviyesinin, örnegin, burada tarif edilen bir yöntemle degerlendirilmesini,
belirlenmesini ve söz konusu degerlendirmeye yanit olarak, bir tedavinin seçilmesini,
örnegin, bir kallikrein inhibitörünün bir dozaj miktarinin veya dozlama sikliginin birinin
veya her ikisinin seçilmesini içeren bir yöntem saglamaktadir. Bazi uygulamalarda,
yöntem, bir kallikrein inhibitörünün söz konusu süjeye verilisini içerir. Bazi
uygulamalarda, söz konusu hastaya söz konusu degerlendirme öncesinde bir kallikrein
inhibitörü verilmistir. Belirli uygulamalarda, yöntem, bir kallikrein inhibitörünün söz
konusu seçilen dozajda veya siklikta verilisini içerir.
Bir diger uygulamada, mevcut açiklama, bir rahatsizligin bir pKal inhibitörüyle tedaviye
duyarli olup olmadiginin belirlenmesinin sunlari içeren bir yöntemini saglamaktadir:
örnegin, söz konusu rahatsizliktan muzdarip bir süjede veya söz konusu rahatsizlik Için
bir hayvan modelinde, örnegin, burada tarif edildigi sekilde bir veya birden fazla pKaI
markörünün seviyelerinin degerlendirilmesi; belirlenen seviyenin bir referansla
karsilastirilmasi olup, burada önceden belirlenen bir kriteri karsilayan bir seviye,
örnegin, bir referans seviyesinde veya bu seviyenin üzerinde olup olmadigi, bir pKaI
inhibitörüyle tedaviye duyarli bir rahatsizligin göstergesidir. Bazi uygulamalarda,
yöntem, bir kallikrein inhibitörünün, söz konusu rahatsizligin bir hayvan modelinde in
vitro veya in vivo etkisinin degerlendirilmesini içerir.
Bir baska yönde açiklama, bir numunenin, örnegin, kanin, minimum temas
aktivasyonuyla toplanmasi için yöntemler ve cihazlar içermektedir. Bir uygulamalada,
açiklama, içine burada açiklanan bir yakalama belirtecinin, örnegin, bir kallikrein
inhibitörünün, örnegin, DX-88'e dizi olarak benzer, örnegin, DX-88'den 1, 2 veya 5
amino asit kalintisindan fazla olmayacak sekilde farklilik gösteren bir polipeptidin,
örnegin, EPIKAL-2'nin konuldugu bir konteynir içerir. Konteynir, bir süjeden bir
numunenin, örnegin, kanin alinmasina ve numunedeki bir pKal-iliskili markörün,
örnegin, pKal'in ayni konteynirda yakalama ajaniyla baglanmasina olanak saglamak
amaciyla, örnegin, bir menfezle, açiklikla, septumla vb yapilandirilir. Baglanan türün,
örnegin, pKal'in ölçümü ayni konteynirda gerçeklestirilebilir veya uygulamalarda,
substrat ölçümden önce konteynirdan çikarilir, Örnegin, ölçün bir baska cihaz içinde
1-50, 1-25 mlldir. Bir uygulamada yakalama belirteci, örnegin, bir pKal yakalama
belirteci, konteynirin iç yüzeyine birakilir. Yakalama belirteci yüzeye, yüzeye baglanan
bir birinci spesifik baglayici partnerle ve yakalama belirtecine baglantili bir ikinci
spesifik baglayici partnerle baglantilanabilir. Spesifik baglayici partnerlerin örnekleri
biyotin ve avidindir. Bir uygulamada, biyotinlenmis yakalama belirteci, örnegin, bir pKal
yakalama belirteci, örnegin, bir kallikrein inhibitörü, örnegin, DX-88'e dizi olarak benzer
olan, örnegin, DX-88`den 1, 2 veya 5 amino asit kalintisindan fazla olmayacak sekilde
farklilik gösteren bir polipeptit, örnegin, Epikal-2, avidinle kapli konteynirin bir yüzeyi
üzerine birakilir.
Mevcut açiklama, plazma kallikrein-aracili anjiyoödemi (KMA) veya pKaI”in aracilik
ettigi diger hastaliklari olan hastalari tanimlayabilen, degerlendirme ve tedavide faydali
biyomarkörler saglamaktadir.
Bir biyomarkör vasitasiyla pKal aktivasyonu sergiledigi gösteren hastalar, pKaI'in, HAE
ile iliskili akut ödemli ataklarin tedavisi için onaylanan bir küçük protein inhibitörü olan
DX-88 gibi bir pKal inihibitörüyle tedavi için adaydir. Diger pKal inhibitörlerine, bir
tamamen insan antikor inhibitörü olan DX-2930 dahildir. Bazi uygulamalarda, bir
biyomarkör vasitasiyla pKal aktivasyonu sergiledigi gösterilen hastalar, bir bradikinin
82 reseptörü antagonisti, örnegin, lncatibant (Firazyr®) ile tedavi için adaydir. Bazi
uygulamalarda, bir biyomarkör vasitasiyla pKal aktivasyonu sergiledigi gösterilen
hastalar, bir C1-INH replasman ajaniyla, örnegin, bir saflastirilmis insan pastörüze
nano-filtrelenmis C1-INH konsantratiyla (Berinert®) tedavi için adaydir.
Açiklamanin uygulamalari, hastalarin, örnegin, plazma kallikrein tarafindan üretilen
bradikininin neden oldugu ödemden muzdarip hastalarin tanimlanmasinda ve
tedavisinde faydali bir biyomarkör ve bunun kullanmini saglamaktadir. Burada
açiklanan yöntemler, bilesimler ve cihazlar bir dizi sekilde faydalidir. Örnegin, bir pKal
markörünün seviyeleri, yükselmis temas sistemi aktivasyonuyla iliskili rahatsizliklarin
tanimlanmasi için kullanilabilir. Ilk taramayi, örnegin, hastaligin klinik öncesi
modellerinde plazma kallikrein inhibitörleriyle (örnegin, DX-88, EPIKAL-2 veya DX-
2930) in vitro veya in vivo testler takip edebilir. Burada açiklanan bir markör ayrica, bir
farmakodinamik biyomarkör olarak veya baska durumlarda bir süjenin bir kallikrein
inhibitörüne yanitini izlemek için de kullanilabilir. Burada açiklanan bir markör, plazma
kallikreinin aracilik ettigi hastaliklarin tedavisinin saglanmasi, HAE'nin profilaktik
terapisi esnasinda dozlamanin yönetilmesi veya yaklasan bir akut HAE ataginin
tanimlanmasini saglamak için bir refakatçi tanida kullanilabilir.
SEKILLERIN KISA AÇIKLAMASI
SEKIL 1, plazma kallikreinin temas sistemi aktivasyonunda yer alan ögelerin bir
tasviridir.
SEKIL 2, Western blot analiziyle kIevaj edilmis kininojen saptanmasini
göstermektedir. Numuneler, indirgenmis kosullar altinda SDS-PAGE (%3-8
Tris-Asetat) kullanilarak, ardindan PVDF membranina aktarilarak ve immün-
blotlama ile analiz edildi. Kulvar1 - 50 nM Bozulmamis Kininojen; Kulvar 2 - 50
nM kIevaj edilmis Kininojen; Kulvar 3 - 50 nM Düsük Moleküler Agirlikli
Kininojen; Kulvar 4 - 1:20 Sodyum Sitratlanmis Insan Plazmasi (Cam Toplama
Tüpü); Kulvar 5 - 1:20 Sodyum Sitratlanmis Insan Plazmasi (Plastik) Kallikrein
Muameleli; Kulvar 6 - 1:20 Sodyum Sitratlanmis Insan Plazmasi (Plastik);
Kulvar 7 - 1:20 Sodyum Sitratlanmis Insan Plazmasi (Plastik) 20nM 2 Zincir
Kininojen Eklenmis.
SEKIL3, bir atak esnasinda elde edilen bir hasta numunesinde bozulmamis
kininojenin (yani, 1-zincirli) saptanmasini göstermektedir. Hasta plazmasi
numunesi, bir anti-proteaz kokteyli ihtiva eden sitratlanmis plazma tüplerinde
toplandi.
SEKIL 4, pKaI ile kIevajin ve kIevaj edilmis kininojenin hafif zincirine baglanan
bir antikor kullanilarak HMWK'nin zincir-1 ve zincir-2'sini saptayan bir Western
blotlamanin ardindan 1-Zincirli HMWK'nin ve 2-Zincirli HMWK'nin alan yapisinin
bir sematigini göstermektedir. C1: 1-zincirli HMWK, C2 = 2-zincirli HMWK, G =
cam, P: plastik.
SEKIL 5, bir yari-kantitatif analiz olarak saflastirilmis HMWK`nin LICOR
saptanmasini göstermektedir. Saflastirilmis insan HMWK ve kIevaj edilmis
HMWK, HMWK-yetersiz insan plazmasinda 9,0 pg/mL ile 5.6 pg/mL arasinda
titre edildi. Numuneler TBS ve (DTTIII) numune yükleme tamponuna 1:20
oraninda seyreltildi. Seyreltilmis numuneler bir %4-12 bis-tris jel üzerinde
çalistirildi ve elektroforezin ardindan bir nitroselüloz membranina aktarildi.
Bloklamadan sonra, blot, HMWK'nin hafif zincirine spesifik bir fare anti-insan
HMWK antikoru (klon #11H05) ve bir keçi anti-fare IR Boyasi 680 kullanilarak
görsellestirildi. Jeller, IR Boyasi 680'in eksitasyon sinyalini saptayabilen Ll-COR
Odyssey IR Tarayici kullanilarak tarandi.
SEKIL 6, HAE hastasi numunesinin bir Western blotlamasini ve LICOR
analizini göstermektedir ve HAE hastasi numunelerinin, klevaj edilmis
HMWKinin daha yüksek endojen seviyelerini sergiledigini ortaya koymaktadir.
Hem bazal hem atak HAE hastasi plazmasi, Licor analiziyle hasta-olmayan
durumdaki plazmayla kiyaslandiginda daha yüksek klevaj-yüzdeli HMWK'ye
sahip oldu. Analiz edilen plazma numuneleri, ayni hastadan ayni toplama
zamaninda alinan sodyum sitratlanmis plazma numuneleriyle kiyaslandiginda
HAE hastasi plazmasini daha fazla temas aktivasyonundan koruyan bir anti-
proteaz solüsyonunda toplandi. Grafikteki hata çubuklari standart sapmayi
temsil etmektedir.
SEKIL 7, FXlla aktivasyon kosullarinin degerlendirilmesini tasvir eden bir
Western blotlamayi ve grafigini göstermektedir. SEKIL 7A: farkli sicakliklarda
(buza karsilik 37°C) ve inkübasyon sürelerinde (10'a karsi 30 dakika) FXlla'nin
farkli konsantrasyonlariyla aktive edilen normal Insan plazmasinin LICOR
saptanmasiyla Western blotlama. Kulvar 1: moleküler agirlik markörleri; Kulvar
2: saflastirilmis 1-zincirli ve 2-zincirli HMWK; Kulvar 3: normal insan plazmasi;
Kulvar 4: normal insan plazmasi + 2.5 nM FXlla 10 dakika süreyle 37 C'de;
Kulvar 5: normal insan plazmasi + 2.5 nM FXlla 30 dakika süreyle 37 C'de;
Kulvar 6: normal insan plazmasi + 2.5 nM FXlla 10 dakika süreyle buz
üzerinde; Kulvar 7: normal insan plazmasi + 2.5 nM FXlla 30 dakika süreyle
buz üzerinde; Kulvar 8: normal insan plazmasi + 5 nM FXlla 10 dakika süreyle
37 C'de; Kulvar 9: normal Insan plazmasi + 5 nM FXlla 30 dakika süreyle 37
C'de; Kulvar 10: normal insan plazmasi + 5 nM FXlla 10 dakika süreyle buz
üzerinde; Kulvar 11: normal insan plazmasi + 5 nM FXlla 30 dakika süreyle buz
üzerinde; Kulvar 12: normal insan plazmasi + 7.5 nM FXlla 10 dakika süreyle
Cide; Kulvar 14: normal insan plazmasi + 7.5 nM FXlla 10 dakika süreyle buz
üzerinde; Kulvar 15: normal insan plazmasi + 7.5 nM FXlla 30 dakika süreyle
buz üzerinde. SEKIL 7B: Her bir kulvardaki iki-zincirli HMWK'nin, Licor sinyali
yogunluklari [2-zincirli HMWK %'si = (46 kDa sinyal + 56 kDa sinyaI)/(46 kDa
sinyal + 56 kDa sinyal + ] kullanilarak belirlenen yüzdesi.
SEKIL 8, DX-88 ve DX-2930iun, pKal aktivitesinin FXIIa aktivasyonu üzerindeki
inhibitör etkilerini tasvir eden bir Western blot ve grafigi göstermektedir. SEKIL
8A: Ekalantid'in ve DX-2930'un, insan plazmasina ex w'vo eklendiginde pKAL
tarafindan HMWK'nin klevajini önledigini gösteren Western blot analizi. SEKIL
8B: DX-88 ve DX-2930'un, FXIIa varliginda klevaj edilmis HMWK üretimi
üzerindeki etkilerini gösteren bir sema. Havuzlanmis sodyum sitratlanmis insan
veya ekalantid ile ön muamele edildi. (Muamele edilmemis bir numune dahil
olmak üzere) tüm numuneler 2,5nM FXlIa eklenmesiyle aktive edildi. Enzimler
daha sonra bir proteaz inhibitörü kokteyli eklenmesiyle inhibe edildi. Ekalantid
ve DX-29307un esit molar konsantrasyonlari, muamele edilmemis plazma
numunesiyle kiyaslandiginda havuzlanmis insan plazmasinda esdeger olarak
klevaj edilmis HMWK miktarini indirger. C = 25 nM 1 ve 2 Zincirli HMWK; N =
Normal plazma; + = Aktive edilmis insan plazmasi (ilaç yok).
SEKIL 9, ülseratif koliti (UC) ve romatoid artiriti (RA) olan hastalardaki temas
sistemi aktivasyonunun bir Western blot analizini göstermektedir. Kulvar 1:
moleküler agirlik markörleri; Kulvar 2: saflastirilmis 1-zincirli ve 2-zincirli
HMWK; 3 ila 5 arasindaki Kulvarlar: normal insan plazmasi; 6 ila 10 arasindaki
Kulvarlar: UC hastalarindan alinan plazma; 11 ila 15 arasindaki Kulvarlar: RA
hastalarindan alinan plazma. Her bir kulvardaki numunelerle ilgili diger ayrintilar
Tablo 3'de sunulmaktadir.
SEKIL 10, Crohn hastaligi (CD) olan hastalardaki temas sistemi
aktivasyonunun bir Western blot analizini göstermektedir. Kulvar 1: moleküler
agirlik isaretleri; Kulvar 2: saflastirilmis 1-zincirli ve 2-zincirli HMWK; 3 ila 5
arasindaki Kulvarlar: normal insan plazmasi; 6 ila 10 arasindaki Kulvarlar: CD
hastalarindan alinan plazma. Her bir kulvardaki numunelerle ilgili diger ayrintilar
Tablo 4'te sunulmaktadir.
DETAYLI AÇIKLAMA
Tanimlar
Kolaylik açisindan, mevcut açiklamanin ayrintili tarifnamesindenönce, spesifikasyonda,
örneklerde ve ekli istemlerde kullanilan belirli terimler burada tanimlanmaktadir. Diger
terimler, spesifikasyonda görüldükleri yerde tanimlanmaktadir.
Tekil biçim “bir”, “bir” ve “bu” metin aksini açik bir sekilde belirtmedigi sürece çogul
referanslari içerir.
Burada kullanildigi sekilde, ”edinmek" veya “edinme”, bir fiziksel varligin veya bir
degerin, örnegin, bir sayisal degerin, fiziksel varligin veya degerin “dogrudan
edinilmesiyle” veya “dolayli olarak edinilmesiyle" sahipliginin elde edilmesini ifade
etmektedir. “Dogrudan edinme”, fiziksel varligin veya degerin elde edilmesi için bir
islemin gerçeklestirilmesi (örnegin, bir numune üzerinde bir analizin veya testin
gerçeklestirilmesi veya 0 terimin burada tanimlandigi sekilde “bir numunenin analiz
edilmesi”) anlamina gelmektedir. ”Dolayli olarak edinme”, fiziksel varligin veya degerin
bir baska taraftan veya kaynaktan (örnegin, fiziksel varligi veya degeri dogrudan
edinen bir üçüncü taraf laboratuar) alinmasini ifade etmektedir. Bir fiziksel varligin
dogrudan edinilmesi, bir fiziksel maddede, örnegin, bir baslangiç materyalinde bir
fiziksel degisikligi içeren bir islemin, örnegin, bir numunenin analiz edilmesinin
gerçeklestirilmesini içerir. Emsal degisikliklere, bir fiziksel varligin iki veya daha fazla
baslangiç materyalinden yapilmasi, bir maddenin kesilmesi veya bölüntülenmesi, bir
maddenin ayristirilmasi veya saflastirilmasi, iki veya daha fazla ayri varligin bir
karisima birlestirilmesi, bir esdegerli veya esdegerli-olmayan bagin koparilmasini veya
olusturulmasini içeren bir kimyasal tepkimenin gerçeklestirilmesi dahildir. Bir degerin
dogrudan edinilmesine, bir numunede veya bir baska maddede bir fiziksel degisikligi
içeren bir islemin gerçeklestirilmesi, örnegin, bir maddede, örnegin, bir numunede,
analitte veya belirteçte bir fiziksel degisikligi içeren (burada bazen “fiziksel analiz"
olarak ifade edilen) bir analitik islemin gerçeklestirilmesi, bir analitik yöntemin, örnegin,
asagidakilerin birini veya daha fazlasini içeren bir yöntemin gerçeklestirilmesi dahildir:
bir maddenin, örnegin, bir analitin veya bunun bir fragmaninin veya diger türevinin bir
baska maddeden ayristirilmasi veya saflastirilmasi; bir analitin veya bunun
fragmaninin veya diger türevinin bir baska maddeyle, örnegin, bir tamponla, çözücüyle
veya reaktan ile birlestirilmesi veya bir analitin veya bunun bir fragmaninin veya diger
türevinin yapisinin, örnegin, analitin bir birinci ve bir ikinci atomu arasinda bir esdegerli
veya esdegerli-olmayan bag kopararak veya olusturarak veya bir reaktanin veya bunun
bir fragmaninin veya diger türevinin yapisinin, örnegin, reaktanin bir birinci ve bir ikinci
atomu arasinda bir esdegerli veya esdegerli-olmayan bagi kopararak veya olusturarak
degistirilmesiyle degistirilmesi.
Burada kullanildigi sekliyle, bir numunenin “analiz edilmesi", bir numunede veya bir
baska maddede, örnegin, bir baslangiç materyalinde fizikseli bir degisikligi içeren bir
islemin gerçeklestirilmesini içerir. Emsal degisikliklere, iki veya daha fazla baslangiç
materyalinden fiziksel bir varligin yapilmasi, bir maddenin kesilmesi veya
bölüntülenmesi, bir maddenin ayristirilmasi veya saflastirilmasi, iki veya daha fazla ayri
varligin bir karisimda birlestirilmesi, bir esdegerli veya esdegerli-olmayan bir bagin
koparilmasini veya olusturulmasini içeren bir kimyasal tepkimenin gerçeklestirilmesi
dahildir. Bir numunenin analiz edilmesi, bir maddede, örnegin bir numunede, analitte
veya belirteçte fiziksel bir degisikligi içeren (burada bazen “fiziksel analiz” olarak da
ifade edilen) bir analitik islemin gerçeklestirilmesini, bir analitik yöntemin, örnegin,
asagidakilerin birini veya daha fazlasini içeren bir yöntemin gerçeklestirilmesini
içerebilir: bir maddenin, örnegin, bir analitin veya bunun bir fragmaninin veya diger
türevinin bir baska maddeden ayristirilmasi veya saflastirilmasi; bir analitin veya bunun
fragmaninin veya diger türevinin bir baska maddeyle, örnegin, bir tamponla, çözücüyle
veya reaktan ile birlestirilmesi; veya bir analitin veya bunun bir fragmaninin veya diger
türevinin yapisinin, örnegin, analitin bir birinci ve bir ikinci atomu arasinda bir esdegerli
veya esdegerli-olmayan bag kopararak veya olusturarak; veya bir reaktanin veya
bunun bir fragmaninin veya diger türevinin yapisinin, örnegin, reaktanin bir birinci ve
bir ikinci atomu arasinda bir esdegerli veya esdegerli-olmayan bagi kopararak veya
olusturarak degistirilmesiyle degistirilmesi.
Burada kullanildigi sekliyle “agonist” terimi, bir proteinin biyoaktivitesini taklit eden veya
yukari regüle eden (örnegin, gücünü arttiran veya tamamlayan) bir ajani ifade etme
amaçlidir. Bir agonist bir dogal-sus protein veya bunun, dogal-sus proteinin en az bir
biyoaktivitesine sahip türevi olabilir. Bir agonist ayrica, bir proteinin en az bir
biyoaktivitesini arttiran bir bilesik de olabilir. Bir agonist ayrica, bir polipeptidin bir baska
molekül ile, örnegin, bir hedef peptit veya nükleik asitle etkilesimini artiran bir bilesik de
olabilir.
Burada kullanildigi sekliyle “antagonist” terimi, bir proteinin en az bir biyoaktivitesini
asagi regüle eden (örnegin, baskilayan veya önleyen) bir ajani ifade etme amaçlidir.
Bir antagonist, bir proteinle bir baska molekül, örnegin, bir hedef peptit veya enzim
substrati arasindaki etkilesimi önleyen veya azaltan bir bilesik olabilir. Bir antagonist
ayrica, mevcut olan eksprese edilmis protein miktarinin indirgeyen veya önleyen bir
bilesik de olabilir. Tipik olarak, bir proteinin veya bir genin önlenmesi, burada tarif
edilen veya teknikte taninan bir veya daha fazla yöntemle ölçüldügü üzere, proteinin
veya genin ekspresyonunun veya ilgili bir aktivitesinin en az %10 veya daha fazla,
indirgenmesini veya ekspresyonda veya ilgili aktivitede 1-kattan, 2-kattan, 3-kattan, 4-
kattan, 5-kattan, 10-kattan, 50-kattan, 100-kattan veya daha fazlasindan daha fazla bir
azalmayi ifade etmektedir.
Burada kullanildigi sekliyle, “baglanma afinitesi”, görünür iliski sabitini veya Ka”yi ifade
etmektedir. Ka, ayrisma sabitinin (Kd) karsitidir. Bir baglayici protein, örnegin, belirli bir
sahip olabilir. Bir baglayici proteinin bir ikinci hedefe göre bir birinci hedefe daha
yüksek afinite baglanmasi, ikinci hedefe baglanma için, birinci hedef baglanma için olan
Ka'dan (veya sayisal deger Kd) daha yüksek bir Ka (veya daha küçük bir sayisal deger
Kd) ile gösterilebilir. Bu tip durumlarda, baglayici protein ikinci hedefe (örnegin, bir ikinci
konfirmasyondaki veya bunun taklidindeki ayni protein; veya bir ikinci protein) göre
birinci hedef (örnegin, bir birinci konfirmasyondaki veya bunun taklidindeki bir protein)
için özgüllüge sahiptir. Baglanma afinitesindeki (örnegin, özgüllük veya diger
Baglanma afinitesi, denge diyalizi, denge baglanma, jel filtrasyon, ELISA, yüzey
plazmon rezonansi veya (örnegin, bir floresans analizi kullanilarak) spektroskopi dahil
olmak üzere çesitli yöntemlerle belirlenebilir. Baglanma afinitesinin degerlendirilmesi
için emsal kosullar TRIS-tamponundadir (pH7,5`ta 50mM TRIS, 150mM NaCI, 5mM
CaClz). Bu teknikler, baglayici proteinin (veya hedefin) konsantrasyonunun bir
fonksiyonu olarak baglanmis ve serbest baglayici proteinin konsantrasyonunun
ölçülmesi için kullanilabilir. Bagli baglayici proteinin ([Bagli]) konsantrasyonu, asagidaki
denklemle serbest baglayici proteinin ([Serbest]) konsantrasyonuyla ve hedefteki
baglayici protein için baglayici alanlarin konsantrasyonuyla ilgili olup burada (N), hedef
molekül basina baglayici alanlarin sayisidir:
Ka'nin tam bir belirlenmesini yapmak her zaman gerekli degildir, yine de, bazen
afinitenin, örnegin, ELISA veya FACS analizi gibi bir yöntem kullanilarak belirlenen bir
nicel ölçümünü elde etmek yeterli oldugundan, Ka'ya orantilidir ve böylelikle, afinitenin
nitel bir ölçümünün elde edilmesi için veya örnegin, bir fonksiyonel analizde, örnegin,
bir in vitro veya in vivo analizde aktiviteyle afinitenin bir çikarimini elde etmek için daha
yüksek bir afinitenin, örnegin, 2-kat daha yüksek olup olmadiginin belirlenmesi gibi
karsilastirmalar için kullanilabilir.
Terim “ligand” ile degisimli olarak kullanilir. Bir “plazma kallikrein baglayici protein”,
plazma kallikreinle etkilesebilen (örnegin, baglanabilen) bir proteini ifade etmektedir ve
özellikle, tercihen veya spesifik olarak plazma kallikreinle etkilesebilen ve/veya
önleyebilen proteinleri içerir. Bir protein plazma kallikreini, proteinin yoklugunda ve ayni
kosullar altinda plazma kallikreinin aktivitesine kiyasla plazma kallikreinin aktivitesinde
bir azalmaya neden olursa önler. Bazi uygulamalarda, plazma kalliklrein baglama
proteini bir antikordur.
Burada kullanildigi sekliyle, ”kompleks” veya ”kompleks olusumu”, birbirleri için spesifik
bir afiniteye sahip üyeler arasinda bir kompleksi ifade etmektedir.
Bir “konservatif amino asit süstitüsyonu”, amino asit kalintisinin, benzer bir yan zincire
sahip bir amino asit kalintisiyla degistirildigi süstitüsyondur. Benzer yan zincirlere sahip
amino asit kalintilari familyalari teknikte tanimlanmistir. Bu familyalara, bazik yan
zincirlere (örnegin, Iisin, arjinin, histidin), asitli yari zincirlere (örnegin, aspartik asit,
glutamik asit), yüksüz polar yari zincirlere (örnegin, glisin, asparajin, glutamin, serin,
treonin, tirosin, sistein), polar-olmayan yan zincirlere (örnegin, alanin, valin, lösin,
izolösin, prolin, fenilalanin, metionin, triptofan), beta-dalli yan zincirlere (örnegin,
treonin, valin, izolösin) ve aromatik yan zincirlere (örnegin, tirosin, fenilalanin, triptofan,
histidin) sahip amino asitler dahildir.
Biyopolimerler için motif dizileri, degisken amino asitler olabilen konumlar içerebilir.
Örnegin, bu tip bir baglamdaki “X" sembolü genellikle, aksi belirtilmedigi sürece,
örnegin, herhangi bir sistein-olmayan amino asidi ifade etmek için herhangi bir amino
asidi (örnegin, yirmi dogal amino asidin herhangi birini) ifade etmektedir. Diger izin
verilen amino asitler ayrica, örnegin, parantezler ve kesmeler kullanilarak gösterilebilir.
Örnegin, “(ANV/F/N/Q)”, o konumda alanine, triptofana, fenilalanine, asparajine ve
glutamine izin verildigi anlamina gelmektedir.
Burada kullanildigi sekliyle, bir “saptama belirteci”, saptanaoak bölüte baglanan bir
bölütü ifade etmektedir. Tipik olarak bir sinyal, örnegin, floresans olusturur veya
ölçülebilir bir bilesik üretir.
Bir “epitop”, bir hedef bilesik üzerindeki, bir baglayici protein (örnegin, bir Fab veya tam
boy antikor gibi bir antikor) tarafindan baglanan alani ifade etmektedir. Hedef bilesigin
bir protein oldugu durumda, alan tamamen amino asit bilesenlerinden olusabilir,
tamamen protein amino asitlerinin kimyasal modifikasyonlarindan (örnegin, glikosil
bölütleri) olusabilir veya bunlarin kombinasyonlarindan olusabilir. Örtüsen epitoplar en
az bir ortak amino asit kalintisi, glikosil grubu, fosfat grubu, sülfat grubu veya diger
moleküler özellik içerir.
Bir birinci baglayici protein (örnegin, antikor), birinci baglayici protein bir hedef bilesik
Üzerinde ikinci baglayici proteinin baglandigi ayni alana baglanirsa veya ikinci
baglayici proteinin baglandigi alanla örtüsen (örnegin, amino asit dizisi veya diger
moleküler özellik (örnegin, glikosil grubu, fosfat grubu veya sülfat grubu) açisindan,
baglayici protein (örnegin, antikor) olarak ”ayni epitopa baglanir”.
Bir birinci baglayici protein (örnegin, antikor) bir ikinci baglayici proteinle (örnegin,
antikor), birinci baglayici proteinin epitopuna baglanmasi, epitopuna baglanan ikinci
dogrudan (örnegin, birinci baglayici protein, ikinci baglayici protein tarafindan baglanan
epitopla ayni veya bununla Örtüsen bir epitopa baglanirsa) veya dolayli (örnegin, birinci
baglayici proteinin epitopuna baglanmasi hedef bilesikte, ikinci baglayici proteinin
epitopuna baglanma yetisini azaltan sterik bir degisiklige neden olursa) olabilir.
Burada kullanildigi sekliyle, bir “fonksiyonel” biyolojik moleküli karakterize oldugu bir
özellik ve/veya aktivite sergiledigi bir formda bir biyolojik moleküldür.
Iki dizi arasindaki ”homolojii' veya “dizi özdesligi” (terimler burada degisimli olarak
kullanilmaktadir) hesaplamalari asagidaki sekilde gerçeklestirilir. Diziler optimal
karsilastirma amaciyla hizalanir (örnegin, optimal hizalama için bir birinci ve bir ikinci
amino asit veya nükleik asit dizisinin birine veya her ikisine bosluklar eklenebilir ve
homolog-olmayan diziler karsilastirma amaciyla dikkate alinmayabilir). Optimal
hizalama, 12'lik bir bosluk cezasi, 4ylük bir bosluk uzatma cezasi ve 5'Iik bir çerçeve
kaymasi boslugu cezasi olan bir Blossum 62 puanlama matrisine sahip GCG yazilim
paketindeki GAP programi kullanilarak en iyi skor olarak belirlenir. Daha sonra karsilik
gelen amino asit konumlarindaki veya nükleotid konumlarindaki amino asit kalintilari
veya nükleotidleri karsilastirilir. Birinci dizideki bir konum ikinci dizide karsilik gelen
konumla ayni amino asit kalintisiyla veya nükleotidle isgal edilirse, bu durumda
moleküller o konumda özdestir (burada kullanildigi sekliyle amino asit veya nükleik asit
özdeslik yüzdesi, diziler tarafindan paylasilan özdes konumlarin sayisinin bir
fon ksiyonudur.
Tercih edilen bir uygulamada, karsilastirma amaciyla hizalanan bir referans dizisinin
uzunlugu, referans dizisinin uzunlugunun en az %30'u, tercihen en az %40'i, daha
tercihen en az %50'si, daha da tercihen en az %60`i ve daha da tercihen en az %70,
immünoglobülin degisken alan dizisinin uzunlugu olabilir.
Burada kullanildigi sekliyle, “düsük sertlik, orta sertlik, yüksek sertlik veya çok yüksek
sertlik kosullari altinda melezlenir" terimi, melezleme ve yikama için kosullari tarif
etmektedir. Melezleme tepkimelerinin gerçeklestirilmesi için rehber, Current Protocols
ve susuz yöntemler o referansta tarif edilmektedir ve her ikisi de kullanilabilir. Burada
anilan spesifik melezleme kosullari su sekildedir: (1) yaklasik 45°C'de 6X sodyum
klorür/dosyum sitrat (SSC) içinde düsük sertlik melezleme kosullari, ardindan en az
50°C'de 0,2X SSC, %0,1 SDS içinde iki yikama (yikamalarin sicakligi düsük sertlik
kosullari için 55°C'ye çikarilabilir); (2) yaklasik 45°C'de 6X SSC içinde orta sertlik
melezleme kosullari, ardindan 60°C'de 0,2X SSC, %0,1 SDS içinde bir veya daha fazla
yikama; (3) yaklasik 45°C'de 6X SSC içinde yüksek sertlik melezleme kosullari,
ardindan 65°C”de
65°C`de 0,5M sodyum fosfat, %7 SBS çok yüksek sertlik melezleme kosullari, ardindan
65°C'de 0,2X SSC, %1 SDS içinde bir veya daha fazla yikama. Çok yüksek sertlik
kosullari (4) tercih edilen kosullardir ve aksi belirtilmedigi sürece bu kosullar
kullanilmalidir. Açiklama, burada tarif edilen bir nükleik aside veya bunun bir
komplemanina, örnegin, burada tarif edilen bir baglayici proteini kodlayan nükleik
asitlere düsük, orta, yüksek veya çok yüksek sertlikle melezlenen nükleik asitleri
içermektedir. Nükleik asitler, referans nükleik asitle ayni uzunlukta veya bunun
uzunlugunun %30, 20 veya 10'u içerisinde olabilir. Nükleik asit, burada tarif edilen bir
immünoglobülin degisken alan dizisini kodlayan bir bölgeye karsilik gelebilir.
Bir “izole bilesim", izole bilesimin elde edilebildigi bir dogal numunenin en az bir
bileseninin en az %90'indan çikarilan bir bilesimi ifade etmektedir. Yapay veya dogal
olarak üretilen bilesimler, ilgi konusu tür veya tür popülasyonu bir agirlik-agirlik
saflik derecesindeki bilesimler” olabilir.
Burada kullanildigi sekliyle, ”in vitro” terimi, bir çok-hücreli organizmanin içinden ziyade
yapay bir ortamda, örnegin, bir test tüpünde veya tepkime kabinda, hücre kültüründe
vb. meydana gelen olaylari ifade etmektedir.
Burada kullanildigi sekliyle, “in vivo” terimi, bir insan veya insan-olmayan hayvan gibi
bir çok-hücreli organizmada meydana gelen olaylari ifade etmektedir.
Bir "izole bilesim”, izole bilesimin elde edilebildigi bir dogal numunenin en az bir
bileseninin en az %90'indan çikarilan bir bilesimi ifade etmektedir. Yapay veya dogal
olarak üretilen bilesimler, ilgi konusu tür veya tür popülasyonu bir agirlik-agirlik
saflik derecesindeki bilesimler” olabilir.
Bir “izole” protein, izole proteinin elde edilebildigi bir dogal numunenin en az bir
bileseninin en az %90'indan çikarilan bir proteini Ifade etmektedir. Proteinler, ilgi
konusu tür veya tür popülasyonu bir agirlik-agirlik esasinda en az %5, 10, 25, 50, 75,
olan peptidazlari (proteinlerde peptit baglarini klevaj eden enzimler) ifade etmektedir.
Plazma kallikrein, kininlerin, kuvvetli pro-enflamatuar peptitlerin üretilmesi için kininojeni
klevaj eder.
etmektedir. Örnegin, (burada ”PEP-1” olarak da ifade edilen) DX-88, plazma kallikreinin
(NP_000883) kuvvetli (Ki < 1 nM) ve spesifik bir inhibitörüdür. (Bakiniz ayrica, örnegin,
Burada kullanildigi sekliyle, “DX-2922” terimi, “X101-AO1” terimiyle degisimli olarak
kullanilmaktadir. Bu antikorun diger varyantlari asagida tarif edilmektedir.
Antikor Tarif
X63-GOG ROLIC kullanilarak kesfedilen germ hatli-olmayan Fab, M160-
012 ile ayni HC ancak farkli LC
X81-BO1 HEK 293T hücrelerinde üretilen germ hatli lgG
X101 -AO1 CHO hücrelerinde üretilen germ hatli IgG, ayni HC ve X81-BOl
ile ayni HC ve LC
DX-2922 X101-AO1 için alternatif isimlendirme
kullanilmaktadir. Bu antikorun diger varyantlari asagida tarif edilmektedir.
Antikor Kimligi Tarif
M162-A04 Faj görüntüleme kullanilarak kesfedilen germ hatli
olmayan Fab
M199-AO8 M162-A04iün afinite olgunlasmasiyla türetilen agir Zincirli
CDR3 degismis Fab
ayni degisken agir zincir
Antikor Kimligi Tarif
X124-GOt veya CHO hücrelerinde üretilen germ hatli IgG, HC'nin C-ucu
çikarilmasi haricinde X115-F02 ile ayni LC ve HC dizisi.
küçük molekülü, bilesigi, türü veya (dogal olusumlu veya dogal olusumlu olmayan)
benzerlerini veya bakteriler, bitkiler, mantarlar veya hayvan hücreleri veya dokulari gibi
biyolojik materyallerden yapilan, modülasyona neden olabilen bir ekstrakti ifade
etmektedir. Modülatörler, analizlerde dahil edilerek bir fonksiyonel özelligin, biyolojik
aktivitenin veya islemin veya bunlarin kombinasyonunun (dogrudan veya dolayli)
inhibitörleri veya aktivatörleri (örnegin, agonist, kismi antagonist, kismi agonist, ters
agonist, antagonist, anti-mikrobiyal ajanlar, mikrobiyal enfeksiyonun veya
proliferasyonun inhibitörleri ve benzerleri) olarak potansiyel aktivite açisindan
degerlendirilebilir. Bu tip analizlerde, birçok modülatör tek seferde taranabilir. Bir
modülatörün aktivitesi bilinebilir, bilinmeyebilir veya kismen bilinebilir.
Bir “esansiyeI-olmayan” amino asit kalintisi, baglayici ajanin, örnegin, antikorun dogal-
sus dizisinden, bir biyolojik aktiviteyi bozmadan veya daha tercihen büyük ölçüde
degistirmeden degistirilebilen bir kalintiyken, bir “esansiyel” amino asit kalintisinin
degistirilmesi aktivitenin büyük önemli bir kaybiyla sonuçlanir.
Konu yöntemle tedavi edilecek olan bir “hasta", “süje" veya “konak" (bu terimler
degisimli olarak kullanilmaktadir), bir insan veya insan-olmayan hayvan anlamina
gelebilir. Bazi uygulamalarda, bir süjenin bir kallikrein-aracili rahatsizlik, örnegin, bir
bradikinin-aracili rahatsizlik, örnegin, herediter anjiyoödem (HAE) riskinde oldugundan
veya bu hastaliklardan muzdarip oldugundan süphelenilir. Bazi uygulamalarda, bir süje
histamin-bagimli-olmayan idiopatik anjiyoödem, romatoid artirit, Crohn hastaligi,
ülseratif kolit, Iupus, Alzheimer hastaligi, septik sok, yanik yaralanmasi, beyin
iskemisi/reperfüzyon yaralanmasi, serebral ödem, diyabetik retinopati, diyabetik
nefropati, maküler ödem, vaskülit, arteriyel veya venöz tromboz, ventriküler destek
cihazlariyla veya stentlerle iliskili tromboz, trombozlu heparin-indüklü trombositopeni,
tromboembolik hastalik ve stabil olmayan gögüs anjinli koroner kalp hastaligi, ödem,
göz hastaligi, gut, bagirsak hastaligi, oral mukozit, nörpatik agri, enflamatuar agri,
spinal stenoz-dejeneratif omurilik hastaligi, ameliyat sonrasi bagirsak tikanmasi, aortik
anevrizma, osteoartirit, herediter anjiyoödem, akciger embolisi, felç, kafa travmasi veya
peri-tümör beyin ödemi, sepsis, akut orta serebral arter (MCA) iskemik olayi (felç),
restenoz (örnegin, anjiyoplastiden sonra), sistemik Iupus eritematoz nefrit, bir
otoimmün hastaligi, bir enflamatuar hastalik, bir kardiyovasküler hastalik, bir nörolojik
hastalik, yanlis protein katlanmasiyla iliskili bir hastalik, anjiyojenezle iliskili bir hastalik,
hipertansif nefropati ve diyabetik nefropati, alerjik ve solunum hastaliklari (örnegin,
anafilaksi, astim, Crohnik obstrüktif akciger hastaligi, akut solunum sikintisi sendromu,
kistik fibroz, persistan rinit) ve doku yaralanmalari (örnegin, yanik veya kimyasal
yaralanma) riskindedir veya bunlardan muzdariptir.
kullanilmaktadir ve aktif plazma kallikreinin, ön-kallikrein olarak da bilinen proenzim
formunu ifade etmektedir.
Bir süjedeki bir hastaligin “engellenmesi” veya “engellemek" terimi, süjenin, hastaligin
en az bir semptomunun engellendigi sekilde, yani, istenmeyen durumun (örnegin,
hastalik veya konak hayvanin diger istenmeyen durumu) klinik belirtileri öncesinde
verilen ve böylece konagi istenmeyen durumun gelismesine karsi koruyan bir
farmasötik tedaviye, örnegin, bir ilacin verilisine tabi tutulmasini ifade etmektedir. Bir
hastaligin “engellenmesi” ayrica, “profilaksi” veya “profilaktik tedavi" olarak da ifade
edilebilir.
Burada kullanildigi sekliyle, "büyük ölçüde özdes” (veya “büyük ölçüde homolog") terimi
burada, birinci ve ikinci amino asit veya nükleik asit dizilerinin benzer aktivitelere,
örnegin, bir baglama aktivitesine, bir baglama tercihine veya bir biyolojik aktiviteye
sahip oldugu (veya bunlara sahip proteinleri kodladigi) sekilde, bir ikinci amino asit
veya nükleik asit dizisine yeterli sayida özdes veya esdeger (örnegin, bir benzer yan
zincirine sahip, örnegin, korunmus amino asit süstitüsyonlari) amino asit kalintisi veya
kullanilmaktadir. Antikorlar durumunda, ikinci antikor ayni özgüllüge sahiptir ve ayni
antijene göre afinitenin en az %50'sine, en az %25`ine veya en az %1 O'una sahiptir.
Burada açiklanan dizilere benzer veya homolog (örnegin, en az yaklasik %85 dizi
özdesligi) diziler de bu basvurunun parçasidir. Bazi uygulamalarda, dizi özdesligi
yüksek olabilir.
Ek olarak, büyük ölçüde özdeslik, nükleik asit segmentleri sarmalin komplemanina
seçimli melezleme kosullari (örnegin, oldukça sert melezleme kosullari) altinda
melezlendiginde var olur. Nükleik asitler tam hücrelerde, bir hücre Iizatinda veya bir
kismen saflastirilmis veya büyük ölçüde saf formda mevcut olabilir.
Biyopolimerler için motif dizileri, degisken amino asitler olabilen konumlar içerebilir.
Örnegin, bu tip bir baglamdaki “X" sembolü genellikle, aksi belirtilmedigi sürece,
örnegin, herhangi bir sistein-olmayan amino asidi ifade etmek için herhangi bir amino
asidi (örnegin, yirmi dogal amino asidin herhangi birini) ifade etmektedir. Diger izin
verilen amino asitler ayrica, örnegin, parantezler ve kesmeler kullanilarak gösterilebilir.
Örnegin, ”(ANV/F/N/Q)”, bu konumda alanine, triptofana, fenilalanine, asparajine ve
glutamine izin verildigi anlamina gelmektedir.
Istatistiksel anlamlilik teknikte bilinen herhangi bir yöntemle belirlenebilir. Emsal
istatistiksel testlere sunlar dahildir: Ögrenciler T-testi, Mann Whitney U parametrik-
olmayan test ve Wilcoxon parametrik-olmayan istatistiksel test. Bazi istatistiksel olarak
anlamli iliskiler 0,05 veya 0,02'den az bir P degerine sahiptir. Örnegin, iki durum
arasindaki ayirt edilebilir nitel veya nicel farkliliklari simgeleyen “indükleme , onleme",
arasindaki bir farki, örnegin, istatistiksel olarak anlamli bir farki ifade edebilir.
Burada kullanildigi sekliyle, bir ”numune", bir süjeden doku, örnegin, kan, plazma veya
protein içeren bir bilesimi ifade etmektedir. Bir numune bir süjeden alinan bir ilk
islenmemis numunenin yani sira büyük ölçüde islenmis, örnegin, kismen saflastirilmis
veya korunmus formlari da içerir. Emsal numunelere kan, plazma, gözyasi veya mukus
dahildir. Bazi uygulamalarda, numune bir kan veya plazma numunesidir.
Bir “terapötik olarak etkili dozaj” tercihen ölçülebilen bir parametreyi, örnegin, plazma
kallikrein aktivitesini tedavi edilmemis süjelere göre, istatistiksel olarak anlamli bir
derecede veya en az yaklasik %20, daha tercihen en az yaklasik %40, daha da
tercihen en az yaklasik %60 ve yine daha da tercihen en az yaklasik %80 oraninda
modüle eder. Bir bilesiginin ölçülebilir bir parametreyi, örnegin, bir hastalikla-iliskili
parametreyi modüle edebilme yetisi, insan rahatsizliklarindaki ve durumlarindaki
etkinligin tahmini olan bir hayvan modeli sisteminde degerlendirilebilir. Alternatif olarak,
bir bilesimin bu özelligi, bilesigin bir parametreyi in vitro modüle edebilme yetisinin
incelenmesiyle degerlendirilebilir.
Bir süjedeki bir hastaligin (veya durumun) "tedavi edilmesi" veya bir hastaligi olan bir
süjenin “tedavi edilmesi”, hastaligin en az bir semptomunun iyilestirildigi, hafifletildigi
veya azaltildigi sekilde süjenin farmasötik bir tedaviye tabi tutulmasini, örnegin, bir
ilacin verilisini ifade etmektedir.
Bir süjedeki bir hastaligin “engellenmesi" terimi, süjenin, hastaligin en az bir
semptomunun engellendigi sekilde, yani, istenmeyen durumun (örnegin, hastalik veya
konak hayvanin diger istenmeyen durumu) klinik belirtileri öncesinde verilen ve böylece
konagi istenmeyen durumun gelismesine karsi koruyan bir farmasötik tedaviye,
örnegin, bir ilacin verilisine tabi tutulmasini ifade etmektedir. Bir hastaligin
Bir “profilaktik olarak etkili miktar”, arzu edilen profilatik sonucun elde edilmesi için
gereken dozajlarda ve zaman periyotlarinda etkili olan bir miktari ifade etmektedir. Tipik
olarak, bir profilaktik doz süjelerde hastaligin öncesinde veya erken bir asamasinda
kullanildigindan, profilaktik olarak etkili miktar terapötik olarak etkili miktardan daha az
olacaktir.
Alfabetik veya sayisal basliklar dahil olmak üzere, basliklar yalnizca anlama ve okuma
kolayligi içindir ve aksi belirtilmedigi sürece tercihlerin zamansal siralamasini veya bir
hiyerarsisini düzenlemez.
Klevai Edilmis ve Bozulmamis HMWK'nin Saptanmasi
Plazma kallikrein, çogunlukla substrati olan yüksek moleküler agirlikli kininojene
(HMWK) baglanan, ön-kallikrein denilen aktif olmayan bir proenzim olarak dolasimda
bulunur. Bir uyariyiciya yanit olarak, FXII, FXIIa'ya aktive edilir. FXIIa, aktif plazma
kallikreini olusturmak için ön-kallikrerini klevaj eder (Sekil 1). Dolasimdaki ön-
kallikrerinin yaklasik %75-90'i HMWK'ye, HMWK'nin alan 6'siyla bir aktif-olmayan alan
etkilesimi yoluyla baglanir. Serbest ve HMWK-bagli aktif pKal, klevaj edilmis HMWK ve
bradikinin üretir. Plazma kallikrein aktivasyonunun biyomarkörleri Tablo 2'de
gösterilmektedir. Bir biyomarkörün uygunlugu, HAE'nin bir akut ataginin varligindaki ve
yoklugundaki seviyeleri takip edilerek ortaya konulabilir. Bu biyomarkörlerin seviyeleri
ayrica, bradikinin aracili ödemin veya pKaI aktivitesinin aracilik ettigi diger hastaligin bir
atagi esnasinda degisebilir. Bakiniz Tablo 2.
Tablo 2. KMA ile iliskili biyomarkörler
Tablo 2, süjelerin pKal veya bradikinin aracili rahatsizliklar açisindan degerlendirilmesi
için Tablo 2'de ve burada baska yerlerde tarif edilen yöntemlerle degerlendirilebilen
markörleri saglamaktadir. Tablo 2, bir pKal veya bradikinin aracili rahatsizliklarla iliskili
markörün seviyesindeki degisimdeki yönü göstermektedir.
Biyomark Analiz Normale Temas Yorumlar
ör göre HAE aktivasyo
hastasind nu
aki Bazal nedeniyle
Seviye A
Bozulma ELISA, Degismemi azalma Kininojen yoksunu plazmaya sahip APTT
mis Weste s Artmis veya immün-analizler kullanilarak
HMWK rn blot Artmis bozulmamis kininojenin ölçülmesi için
Klevaj ELISA, testler mevcuttur:
edilmis Weste www.diapharma.com/downloads/6820102
HMWK rn blot 5811.9df
Klevaj edilmis kininojen bir HAE atagi
esnasinda ~%47 toplam kininojene
artabilir. - Klevaj edilmis kininojen ayrica
sepsis, siroz esnasinda da yükselir.
Analizler ya a) bozulmamis kininojenin
aksine klevaj edilmis kininojene spesifik
bir antikor; veya b) klevaj edilmis ve
bozulmamis kininojeni ayirabilen ve
miktarini belirleyebilen bir analiz formati
(örnegin, Western blot) kullanabilir. Bu
analiz dolasimdaki anti-pKal antikoruna
duyarli olmayabilir ve hücre yüzeyine
Tablo 2, süjelerin pKal veya bradikinin aracili rahatsizliklar açisindan degerlendirilmesi
için Tablo 2'de ve burada baska yerlerde tarif edilen yöntemlerle degerlendirilebilen
markörleri saglamaktadir. Tablo 2, bir pKal veya bradikinin aracili rahatsizliklarla iliskili
markörün seviyesindeki degisimdeki yönü göstermektedir.
Biyomark Analiz Normale Temas Yorumlar
ör göre HAE aktivasyo
hastasind nu
aki Bazal nedeniyle
Seviye A
bagli aktif pKal'in lokalize bradikinin-aracili
anjiyoödeminde ana sorumlu olup
olmadigina bagli degildir.
Mevcut açiklama, en azindan kismen, bir hasta numunesindeki NMWK'nin spesifik bir
formunun bir degerinin (örnegin, klevaj edilmis HMWK yüzdesinin) belirli pKaI-aracili
hastaliklarla (örnegin, HAE) ve otoimün hastaliklariyla (örnegin, RA, UC ve Crohn
hastaligi) iliskili oldugunun kesfine dayalidir. Böylelikle, klevaj edilmis HMWK'nIn,
bozulmamis HMWK'nin veya her ikisinin bir degeri (örnegin, yüzdesi), bu tip hastaliklari
olan veya risk altinda olan süjelerin tanimlanmasi için, büyük olasilikla bir pKal
inhibitörüyle tedaviye duyarli olan bir rahatsizligin tanimlanmasi için ve bir veya daha
fazla pKaI inhibitörü içeren bir hastalik tedavisinin etkililiginin degerlendirilmesi için bir
biyomarkör olarak kullanilabilir.
Sagtama Belirteci
Bazi uygulamalarda, HMWK'nin diger formuna kiysla HMWKlnin bir formuna spesifik
olarak (tercihen) baglanan bir saptama belirteci (örnegin, bir antikor), bir aday hastadan
bir biyolojik numune (örnegin, bir kan numunesi veya bir plazma numunesi) olabilen bir
numunedeki klevaj edilmis HMWK seviyesinin belirlenmesi için burada tarif edilen
analiz yöntemlerinde kullanilabilir. Bir örnekte, saptama belirteci, bozulmamis
HMWK'ye kiyasla klevaj edilmis HMWK'ye spesifik olarak baglanan bir antikordur. Bir
baska örnekte, saptama belirteci, klevaj edilmis forma kiyasla bozulmamis HMWKSye
spesifik olarak baglanan bir antikordur. Alternatif veya ek olarak, antikor spesifik olarak,
klevaj edilmis HMWK'nin hafif zincirinin C-ucuna baglanir. Bu tip bir antikor HMWK'nin
LMWK'den ayirt edilmesi için kullanilabilir, çünkü LMWK, alternatif uç birlestirme
nedeniyle klevaj edilmis HMWK'nin hafif zincirinin C-terminal fragmanini ihtiva etmez.
Bir antijene veya bir epitopa “spesifik olarak baglanan” bir saptama belirteci teknikte iyi
anlasilan bir terimdir ve bu tip spesifik baglanmayi belirlemek için yöntemler de teknikte
iyi bilinmektedir. Bir antikoru gibi bir saptama belirtecinin, belirli bir hedef antijenle,
alternatif hedeflerle yaptigindan daha sik, daha hizli, daha uzun sürelerle ve/veya daha
yüksek afiniteyle tepkimeye girerse veya iliskili olursa “spesifik baglama" sergiledigi
söylenebilir. Bir saptama belirteci bir hedef antijene (Örnegini klevaj edilmis HMWK)
veya bunun epitopuna, diger maddelere (örnegin, bozulmamis HMWK) baglandigindan
daha yüksek afiniteyle, aviditeyle, daha kolayca ve/veya daha uzun sürelerle
baglanirsa “spesifik olarak baglanir". Örnegin, bir antijene (örnegin, klevaj edilmis
HMWK veya klevaj edilmis HMWK'nin hafif zincirinin C-ucu) veya bunun bir antijenik
epitopuna spesifik olarak (veya tercihli olarak) baglanan bir antikor, bu hedef antijene,
diger anjenlere (örnegin, bozulmamis HMWK) veya ayni antijendeki diger epitoplara
baglandigindan daha yüksek afiniteyle, aviditeylei daha kolayca ve/veya daha uzun
sürelerle baglanan bir antikordur. Ayrica bu tanimlama okunarak, örnegin, bir birinci
hedef antijene spesifik olarak baglananbir antikorun, bir ikinci hedef antijene spesifik
olarak veya tercihli olarak baglanip baglanamayacagi da anlasilir. Bu itibarla, “spesifik
baglanma” veya “tercihli baglanma”, (her ne kadar bunu Içerebilse de) münhasir
baglanmayi gerektirmez. Genellikle, baglanma yapilan atif tercihli baglanmayi ifade
etmektedir ancak bu sart degildir. Bazi örneklerde, bir hedef antijene veya bunun bir
epitopuna "spesifik olarak baglanan” bir antikor diger antijenlere veya ayni antijendeki
diger epitoplara baglanmayabilir.
Bazi uygulamalarda, burada tarif edilen analiz yöntemlerinde kullanim için bir antikor,
bir hedef antijen veya antijenik epitop (örnegin, klevaj edilmis kininojen, bozulmamis
HMWK veya klevaj edilmis kininojenin hafif zincirinin C-ucu) için uygun bir baglanma
afinitesine sahiptir. Burada kullanildig sekliyle, ”baglanma afinitesi”, görünen iliski
sabitini veya KA'yi ifade etmektedir. KA, ayrisma sabitinin (KD) karsitidir. Burada tarif
afinitesine (KD) sahip olabilir. Artan bir baglanma afinitesi azalanbir KD'ye karsilik
gelebilir. Bir antikorun bir ikinci antijene göre bir birinci antijene daha yüksek afinite
baglanmasi, ikinci antijene baglanma için KA'dan (veya sayisal deger KD) daha yüksek
bir KA (veya daha küçük bir sayisal deger KD) ile gösterilebilir. Bu tip durumlarda,
antikor ikinci antijene göre birinci antijen için özgüllüge sahiptir. Baglanma afinitesindeki
(örnegin, özgüllük veya diger karsilastirmalar için) farkliliklar, en az 1,5, 2, 3, 4, 5, 10,
Burada kullanildigi sekliyle, “antikor” terimi, en az bir adet immünoglobülin degisken
alani veya immünoglobülin degisken alan dizisi içeren bir proteini ifade etmektedir.
Örnegin, bir antikor bir agir (H) zincir degisken bölgesi (burada VH olarak kisaltilmistir)
ve bir hafif (L) zincir degisken bölgesi (burada VL olarak kisaltilmistir) içerebilir. Bir
baska örnekte, bir antikor iki adet agir (H) zincir degisken bölgesi ve iki adet hafif (L)
zincir degisken bölgesi içerir. “Antikor” terimi, anitkorlarin antijen-baglayici
fragmanlarinin (örnegin, tek zincirli antikorlar, Fab ve sFab fragmanlari, F(ab')2, Fd
fragmanlari, Fv fragmanlari, scFv ve alan antikorlari (dAb) fragmanlari (de Wildt et al.,
antikor, lgA, IgG, IgE, lgD, lgM'nin (ve yani sira bunlarin alt türlerinin) yapisal
özelliklerine sahip olabilir. Antikorlar herhangi bir kaynaktan olabilir, ancak primat
(insan ve insan-olmayan primat) ve primatlastirilmis olanlar tercih edilmektedir.
VH ve VL bölgeleri ayrica, hiperdegiskenlik, ”tamamlayicilik belirleme bölgeleri”
(“CDR”) olarak isimlendirilen bölgeler ayrilabilir, “çerçeve bölgeleri” (“FR") olarak
isimlendirilen daha korunmus olan bölgelere dagitilabilir. Çerçeve bölgesinin ve
CDRilerin derecesi kesin olarak tanimlanmistir (bakiniz, Kabat, E.A., et al. (1991)
Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of
J. Mol. Biol. 196:901-917, bakiniz ayrica www.hgmp.mrc.ac.uk). Burada Kabat
tanimlamalari kullanilmaktadir. Her bir VH ve VL tipik olarak, amino-ucundan karboksi-
ucuna asagidaki siralamada düzenlenen üç CDR'den ve dört FR'den olusur: FR1,
Antikorun VH veya VL zinciri ayrica, sirasiyla, bir agir veya hafif immünoglobülin zinciri
olusturmak için bir agir veya hafif zincir sabit bölgesinin tamamini veya bir parçasini
içerebilir. Bir uygulamada, antikor, iki agir immünoglobülin zincirinin ve iki hafif
immünoglobülin zincirinin bir tetrameri olup, burada agir ve hafif immünoglobülin
zincirleri, örnegin, disülfit baglariyla birbirine baglidir. lgG'Ierde, agir zincir sabit bölgesi
üç immünoglobülin alani, CH1, CH2 ve CH3 içerir. Hafif zincir sabit bölgesi bir CL alani
içerir. Agir ve hafif zincirlerin degisken bölgesi, bir antijenle etkilesen bir baglanma
alani ihtiva eder. Antikorlarin sabit bölgeleri tipik olarak antikorun, bagisiklik sisteminin
çesitli hücreleri (örnegin, efektör hücreler) ve klasik kompleman sisteminin birinci
bileseni (Clq) dahil olmak üzere konak dokulara veya faktörlere baglanmasina aracilik
eder. Immünoglobülinin hafif zincirleri kappa veya Iambda tipinde olabilir. Bir
uygulamada, antikor glikosilatlidir. Bir antikor, antikor-bagimli sitotoksisite ve/veya
kompleman-aracili sitotoksisite için fonksiyonel olabilir.
Bir antikorun bir veya daha fazla bölgesi insan veya etkili olarak insan olabilir. Örnegin
degisken bölgelerin biri veya daha fazlasi, insan veya etkili olarak insan olabilir.
Örnegin, CDR'Ierin biri veya daha fazlasi insan, örnegin, HC CDR1, HC CDR2, HC
CDR3, LC CDR1, LC CDR2 ve LC CDR3 olabilir. Hafif zincir CDR'lerinin her biri insan
olabilir. HC CDRS insan olabilir. Çerçeve bölgelerinin biri veya daha fazlasi insan,
örnegin, HC veya LC'nin FR1'i, FR2'si, FRS'ü ve FR4”ü olabilir. Örnegin, Fc bölgesi
insan olabilir. Bir uygulamada, çerçeve bölgelerinin tamami insandir, örnegin, bir insan
somatik hücresi, örnegin, immünoglobülinleri üreten bir hematopoietik hücre veya bir
hematopoietik-olmayan hücre tarafindan üretilen bir antikorun bir çerçevesinin bir
dizisine sahiptir. Bir uygulamada, insan dizileri, örnegin, bir germ hatti nükleik asit
tarafindan kodlanan germ hatti dizileridir. Bir uygulamada, seçilen bir Fab'nin çerçeve
(FR) kalintilari, en benzer primat germ hatti genindeki, özellikle insan germ hatti
genindeki karsilik gelen kalintinin amino-asit tipine dönüstürülebilir. Sabit bölgelerin biri
veya daha fazlasi insan veya etkili olarak insan olabilir. Örnegin, bir immünoglobülin
degisken alaninin, sabit bölgenin, sabit alanlarin (CH1, CH2, CH3, CL1) en az %70,
olabilir.
Bir antikorun tamami veya bir parçasi bir immünoglobülin geni veya bunun bir segmenti
tarafindan kodlanabilir. Emsal insan immünoglobülin genlerine kappa, Iambda, alfa
(IgA1 ve IgA2), gama (lgG1, IgGZ, lgG3, lgG4), delta, epsilon ve mu sabit bölge
genlerinin yani sira, birçok immünoglobülin degisken bölge genleri dahildir. Tam-boy
immünoglobülin “hafif zincirleri” (yaklasik 25 KDa veya yaklasik 214 amino asit), NH-2
ucunda (yaklasik 110 amino asit) bir degisken bölge geni ve COOH--ucunda bir kappa
veya Iambda sabit bölge geni tarafindan kodlanir. Tam-boy immünoglobülin “agir
zincirleri” (yaklasik 50 KDa veya yaklasik 446 amino asit), benzer sekilde bir degisken
bölge geni (yaklasik 116 amino asit) ve yukarida belirtilen diger sabit bölge genlerinin
biri, örnegin, gama (yaklasik 330 amino asidi kodlar) tarafindan kodlanir. Insan
HC'sinin uzunlugu önemli ölçüde degiskenlik gösterir çünkü HC CDR3 yaklasik 3
amino-asit kalitisiyla 35'in üzerinde amino-asit kalintisi arasinda degisir.
Bir tam boy antikorun “antijen-baglayici fragmani” terimi, bir tam-boy antikorun, bir ilgi
konusu hedefe spesifik olarak baglanma yetisini muhafaza eden bir veya daha fazla
fragmanini ifade etmektedir. Bir tam boy antikorun "antijen-baglayici fragmani” terimi
dahilinde kapsanan baglayici fragmanlarin örneklerine (i) bir Fab fragmani, VL, VH, CL
ve CH1 alanlarindan olusan bir tek degerli fragman; (ii) bir F(ab')2 fragmani, destek
bölgesinde bir disülfit köprüsüyle baglantili iki Fab fragmani içeren bir iki degerli
fragman; (iii) VH ve CH1 alanlarindan olusan bir Fd fragmani; (iv) bir antikorun bir tek
kolunun VL ve VH alanlarindan olusan bir Fv fragmani; (v) bir VH alanindan olusan bir
muhafaza eden bir izole tamamlayicilik belirleme bölgesi (CDR) dahildir. Ayrica, her ne
kadar Fv fragmaninin iki alani olan VL ve VH ayri genler tarafindan kodlansa da,
rekombinan teknikler kullanilarak, bunlarin, VL ve VH bölgelerinin tek zincirli Fv (scFv)
olarak bilinen tek degerli molekülleri olusturmak için eslestigi bir tek protein zincir haline
getirilmelerini saglayan bir sentetik baglayici tarafindan birlestirilebilirler. Bakiniz
Antikor fragmanlari, teknikte uzman kisilerce bilinen konvansiyonel teknikler dahil
olmak üzere uygun herhangi bir teknik kullanilarak elde edilebilir. “Monospesifik
antikor” terimi, belirli bir hedef, örnegin, epitop için tek bir baglanma özgüllügü ve
afinitesi sergileyen bir antikoru ifade etmektedir. Bu terim, burada kullanildigi sekliyle
antikorun nasil üretildigine bakilmaksizin tekli moleküler bilesimde olan antikorlarin
veya bunlarin fragmanlarinin bir hazirlanmasini ifade eden bir “monoklonal antikor”
veya “monoklonal antikor bilesimini” içerir.
Burada kullanildigi sekliyle, bir “hümanize” immünoglobülin degisken bölgesi,
immünoglobülin degisken bölgesinin normal bir insanda immünojen bir yanit
saglamadigi sekilde, yeterli sayida insan çerçeve amino asit konumu içermek için
modifiye edilen bir immünoglobülin degisken bölgesini ifade etmektedir. “Hümanize”
dahildir.
Önleme sabiti (Ki) inhibitör kuvvetinin bir ölçümünü saglamaktadir; enzim aktivitesini
yari yariya indirgemek için hereken inhibitör konsantrasyonudur ve enzim veya substrat
konsantrasyonlarina bagli degildir. Görünür Ki (Krapp), inhibitörün (örnegin, inhibitör
baglayici proteinin) farkli konsantrasyonlarinin, tepkimenin (örnegin, enzim
aktivitesinin) derecesi üzerindeki inhibitör etkisi ölçülerek farkli substrat
konsantrasyonlarinda elde edilir; degisikligin psödo-birinci siralama hizi sabitinde
Morrison denklemine (Denklem 1) inhibitör konsantrasyonunun bir fonksiyonu olarak
yerlestirilmesi, görünür Ki degerinin bir tahminini saglar. Ki, Ki,app,ye karsilik substrat
konsantrasyonunun bir çiziminin bir dogrusal regresyon analizinden çikarilan y-
kesismesinden elde edilir.
Denklem 1
Burada v = ölçülen velosite; v0 = inhibitör yoklugundaki velosite; Kivapp = görünür önleme
sabiti; I = toplam inhibitör konsantrasyonu ve E = toplam enzim konsantrasyonu.
Bazi uygulamalarda, burada tarif edilen sekildeki saptama belirteci saptanabilir bir
etikete konjuge edilebilir ve saptama belirtecinin ilgi konusu antijene (örnegin, klevaj
edilmis HMWK ve bozulmamis HMWK) baglanmasi, saptanabilir etiketten yayilan
sinyalin yogunluguna dayali olarak belirlenebilir. Alternatif olarak, saptama belirtecine
spesifik bir ikincil antikor da kullanilabilir. Bir veya daha fazla antikor saptanabilir bir
etikete baglanabilir. Burada tarif edilen analiz yöntemlerinde, teknikte bilinen herhangi
bir uygun etiket kullanilabilir. Bazi uygulamalarda, saptanabilir bir etiken bir florofor
içerir. Burada kullanildigi sekliyle, ("floresan etiket” veya “floresan boya" olarak da ifade
edilen) “florofor” terimi, isik enerjisini tanimli bir eksitasyon dalga boyunca emen ve isik
enerjisini farkli bir dalga boyunda yayan bölütleri ifade etmektedir. Bazi uygulamalarda,
bir saptama bölütü bir enzimdir veya bunu içerir. Bazi uygulamalarda, bir enzim,
renksiz bir substrattan renkli bir ürün üretendir (örnegin, ß-galaktosidaz).
Yüksek Moleküler-Agirlikli Kininojen
Yüksek moleküler-agirlikli kininojen (HMWK) plazmada, yaklasik 110 kDa'lik bir
moleküler agirliga sahip bir tekli polipeptit (1-zincirli) çok-alanli (1-6 alan) protein olarak
mevcuttur (SEKIL 4). HMWK pKaI tarafindan alan 4 içerisinde 9 amino asit, pro-
enflamatuar peptit bradikinin ve HMWK'nIn 2-zincirli bir formu (klevaj edilmis kininojen)
salmak için klevaj edilir. HMWK'nin 2 zinciri, HMWK'nin 1-3 alanlarini ihtiva eden agir
zincir ve HMWKinin 5 ve 6 alanlarini ihtiva eden hafif zincirdir. Agir ve hafif zincirler,
sirasiyla, yaklasik 56 ve 46 kiloDalton'luk bir moleküler agirliga sahiptir. Sekil 4.
Bozulmamis HM WK
Burada “bozulmamis kininojen" olarak da ifade edilen bozulmamis yüksek moleküler-
agirlikli kininojen (HMWK), örnegin, koagülan veya immünolojik yöntemler, örnegin,
radyoimmün-analizi kullanilarak analiz edilebilir (bakiniz, örnegin, Kerbiriou-Nabias,
monoklonal bir antikor bilinmektedir. Bakiniz, örnegin, Reddigari, SR. & Kaplan, AP.,
HMWK'yI kodlayan insan geni kininojen 1'dir (KNG1). KNG1, ya HMWK'yI veya düsük
moleküler agirlikli kininojeni (LMWK) kodlayan mRNA'larin olusturulmasi için transkribe
edilir ve alternatif olarak uç birlestirilir. HMWK”nin emsal bir protein dizisi asagida
gösterilmektedir:
KIevaj Edilmis HMWK
Burada “klevaj edilmis kininojen” olarak da ifade edilen klevaj edilmis yüksek moleküler
agirlikli kininojen (HMWK), örnegin, Örnekler 1 ve 3 ila 7 arasinda tarif edilen
yöntemler, örnegin, Western blot kullanilarak analiz edilebilir. Bazi uygulamalarda,
klevaj edilmis HMWK'nin hafif zinciri analiz edilebilir. klevaj edilmis HMWK'nin hafif
zincirine (örnegin, C-ucu kalintilari içeren bir epitop) baglanan antikorlar gibi, klevaj
edilmis HMWK'yi baglayan antikorlar kullanilabilir. Bir örnek, fare mAb klonu 11H05'tir.
Ek olarak, klevaj edilmis HMWK, kütle spektrometri kullanilarak analiz edilebilir. klevaj
edilmis HMWK*nin seviyelerinin analiz edilmesi için Immün-blotlama teknikleri teknikte
bilinmektedir. Bakiniz, örnegin, Buhler R. et al. Blood Coagul Fibrinolysis, 1995,
6(3):223-232.
Klevaj edilmis kininojenin agir ve hafif zincirlerinin emsal dizileri asagida
saglanmaktadir.
> klevaj edilmis kininojen-1 agir zincir
Analiz Formati
Burada açiklanan biyomarkörlerin degerleri (örnegin, mutlak miktarlar veya seviyeler
veya nispi miktarlar veya seviyeler, mesela yüzdeler) veya burada açiklanan
biyomarkörlerin degerlerindeki degisiklikler, burada tarif edilen analizler ve/veya
teknikte bilinen analizler kullanilarak analiz edilebilir. Bazi uygulamalarda, bir süjeden
alinan bir numunedeki klevaj edilmis kininojen yüzdesi, burada tarif edilen yöntemlerin
herhangi birinde kullanilir.
Biyomarkörlerin seviyelerinin analiz edilmesi için kullanilabilen analizlere, örnegin,
immün-analizler, örnegin, Western blot, enzime bagli bagisiklik analizler (ELlSA“lar)
(örnegin, sandviç ELISA'lar), radyoimmün-analizler, elektrokemilüminesans-tabanli
saptama analizleri ve ilgili teknikler dahildir. Kütle spektrometri esasli yaklasimlar da
kullanilabilir. Kromojenik bir substrata dayali analizler de kullanilabilir. Analizler,
örnegin, Western blot analizleri ayrica, piyasada bulunan bir nicel görüntüleme sistemi,
örnegin, LICOR görüntüleme teknolojisi kullanimini da içerebilir (bakiniz, örnegin, Ll-
COR Biosciences firmasindan Odyssey® CLx kizilötesi görüntüleme sistemi). Bazi
uygulamalarda, bir elektrokemilüminesans saptama analizi veya
elektrokemilüminesans ve örüntülü siralama teknolojisinin bir kombinasyonuna dayali
bir analiz kullanilir (örnegin, Meso Scale Discovery (MSD) firmasindan bir ECL veya
MULTI-ARRAY teknolojisi analizi).
Burada kullanildigi sekliyle, “ölçme” veya “ölçüm" veya alternatif olarak “saptamak”
veya “saptama” terimleri, bir numune içindeki bir maddenin, bu tip maddelerin nitel
veya nicel konsantrasyon seviyelerinin türevleri dahil olmak üzere, varliginin,
yoklugunun, niceliginin veya (etkili bir miktar olabilen) miktarinin analiz edilmesi veya
baska sekillerde bir süjenin degerlerinin veya kategorizasyonunun degerlendirilmesi
anlamina gelmektedir.
Bazi uygulamalarda, saglanan analizler yüksek hacimli platformlarda gerçeklestirilebilir.
Bazi uygulamalarda, yüksek hacimli analizler için çok-gözlü plakalar, örnegin, 24-, 48-,
96-, 384- veya daha çok gözlü plakalar kullanilabilir. Münferit analizler her bir gözde
paralel olarak gerçeklestirilebilir. Bu nedenle, analiz hacmini arttirmak için birden fazla
gözün paralel olarak ölçülmesi için genellikle bir plaka okuyucusunun kullanilmasi arzu
göz) paralel olarak görüntüleyebilen plaka okuuycular bu platform için kullanilabilir.
Örnegin, piyasada bulunan bir plaka okuyucu (örnegin, Perkin Elmer, Waltham, MA
firmasindan temin edilebilen plaka::görüntü sistemi) kullanilabilir. Bu plaka okuyucu,
kinetik-tabanli floresans analizini yapabilir. Plaka::görüntü sistemi yüksek toplama
etkililigi optiklerine sahiptir ve 96 gözün paralel analizi için tasarlanan özel optiklere
sahiptir. Ilave uygun paralel plaka okuyucularina, bunlarla sinirli kalmamak kaydiyla,
SAFIRE (Tecan, San Jose, CA), FLIPRTETRA® (Molecular Devices, Union City, CA),
dahildir. Bazi uygulamalarda, bulusun yüksek hacimli tarama analizleri otomatiktir
(örnegin, robotik analizlere uyarlanmistir).
Kitler
Mevcut açiklama ayrica, örnegin, insan hastalardan biyolojik numuneler içerenler gibi
numunelerdeki klevaj edilmis ve/veya bozulmamis kininojenin degerlendirilmesinde
kullanim için kitler de saglamaktadir. Bu tip kitler, diger biçime kiyasla ya klevaj edilmis
kininojene veya bozulmamis kininojen spesifik olarak baglanan bir saptama belirteci ve
opsiyonel olarak, kontroller olarak klevaj edilmis kininojen ve/veya bozulmamis
kininojen içerebilir. Bazi uygulamalarda, kitler ayrica, saptama belirtecinin klevaj
edilmis ve/veya bozulmamis kininojene baglanmasinin saptanmasi için ikincil antikorlar
ve/veya belirteçler içerir.
Bazi uygulamalarda, kit, burada tarif edilen yöntemlerin herhangi birine göre kullanim
için talimatlar içerebilir. Içerilen talimatlar, bir insan hastadan alinan bir biyolojik
numune olabilen bir numunedeki klevaj edilmis ve/veya bozulmamis kininojen
seviyesinin ölçülmesi için kitte yer alan bilesenlerin nasil kullanilacaginin bir tarifini
içerebilir.
Kitin kullanimiyla ilgili talimatlar genellikle, burada tarif edilen analiz yöntemlerinin
gerçeklestirilmesi için her bir bilesenin miktariyla ve uygun kosullarla ilgili bilgi içerir.
Kitlerdeki bilesenler ünite dozlarinda, toplu paketlerde (örnegin, çoklu-dozlu paketler)
veya alt-ünite dozlarinda olabilir. Açiklamanin kitlerinde tedarik edilen talimatlar tipik
olarak, bir etiket vaye paket eki (örnegin, kitte yer alan bir kagit) üzerindeki yazili
talimatlardir, ancak makinece-okunabilen talimatlar da (örnegin, bir manyetik veya optik
saklama diski) kabul edilebilir.
Etiket veya paket eki, kitin, klevaj edilmis ve/veya bozulmamis kininojen seviyesinin
degerlendirilmesi için kullanildigini göstermektedir. Talimatlar, burada tarif edilen
yöntemlerin herhangi birinin uygulanmasi için saglanabilir.
Açiklamanin kitleri uygun ambalaj içindedir. Uygun ambalaja, bunlarla sinirli kalmamak
kaydiyla, flakonlar, siseler, kavanozlar, esnek ambalajlar (örnegin, sizdirmaz Mylar
veya plastik torbalar) ve benzerleri dahildir. Ayrica, bir inhaler, nazal verilis cihazi
(örnegin, bir atomizer) veya bir mini-pompa gibi bir infüzyon cihazi gibi spesifik bir
cihazla kombinasyon halinde kullanim paketler de düsünülmüstür. Bir kit steril bir erisim
portuna sahip olabilir (örnegin konteynir bir intravenöz solüsyon torbasi veya bir
hipodermik enjeksiyon ignesiyle delinebilir bir tapaya sahip bir flakon olabilir). Konteynir
da steril bir erisim portuna sahip olabilir (örnegin konteynir bir intravenöz solüsyon
torbasi veya bir hipodermik enjeksiyon ignesiyle delinebilir bir tapaya sahip bir flakon
olabilir).
Kitler opsiyonel olarak, tamponlar ve yorumsal bilgiler gibi ilave bilesenler içerebilir.
Normalde, kit bir konteynir ve konteynir üzerinde veya bununla iliskili bir etiket veya
paket ek(ler)i içerir. Bazi uygulamalarda, mevcut açiklama, yukarida tarif edilen kitlerin
muhtevasini içeren üretim kalemleri saglamaktadir.
Analiz Yöntemlerinin Hastalik Tanisind_a ve Prognozunda Uvgulanmag
Burada tarif edilen analiz yöntemleri ve kitler, hastaligin, örnegin, bir hastaligin
tanisinin veya prognozunun degerlendirilmesi için uygulanabilir. Degerlendirme, bir
süjenin burada tarif edildigi üzere bir hastalik örnegin, HAE gibi bir pKal-aracili
rahatsizlik ve RA, UC ve Crohn hastaligi gibi bir otoimmün hastaligi riskinde veya bu
hastaliga sahip olarak tanimlanmasini içerebilir. Degerlendirme ayrica, HAE gibi bir
pKaI-aracili rahatsizlik için bir tedavinin etkililiginin degerlendirilmesi gibi, bir hastaligin
tedavisinin izlenmesini de içerebilir. Ayrica, degerlendirme, bir pKaI inhibitörüyle tedavi
edilebilen bir hastaligin tanimlanmasini içerebilir.
Bazi uygulamalarda, analiz yöntemleri ve kitler, bir aday süjeden (örnegin, HAE gibi bir
pKal-araoili rahatsizligi veya RA, UC ve Crohn hastaligi gibi bir otoimmün hastaligi
oldugundan süphelenilen bir insan hastadan) alinan bir biyolojik numunedeki (örnegin,
bir kan numunesi veya bir plazma numunesi) klevaj edilmis kininojen ve/veya
bozulmamis kininojen seviyesini belirlemek için gerçeklestirilir. Klevaj edilmis
kininojenin seviyesi daha sonra, numunedeki klevaj edilmis kininojenin bir degerinin
(örnegin, yüzde), bozulmamis kininojenin bir degerinin veya her ikisinin belirlenmesi
için ya bozulmamis kininojenle veya numunedeki kininojenin toplam miktariyla
karsilastirilabilir. Klevaj edilmis kininojenin ve/veya bozulmamis kininojenin degeri,
süjenin pKal-aracili rahatsizlik, örnegin, HAE veya RA, UC ve Crohn hastaligi gibi bir
otoimmün hastaligina sahip veya risk altinda olup olmadiginin belirlenmesi için bir
referans degerle karsilastirilabilir. Örnegin, klevaj edilmis kininojenin yüzdesi bir
referans sayisindaysa veya daha yüksekse, süje, HAE, RA, UC ve Crohn hastaligi gibi
bi pKaI-aracili rahatsizliga sahip veya risk altinda olarak tanimlanabilir. Alternatif
olarak, bozulmamis kininojenin yüzdesi bir referans sayisindaysa veya daha düsükse,
süje HAE, RA, US ve Crohn hastaligi gibi bir pKaI-aracili rahatsizliga sahip veya risk
Referans degeri, klevaj edilmis kininojen yüzdesinin bir kontrol seviyesi olabilir. Bazi
uygulamalarda, kontrol seviyesi, bir saglikli süjeden veya tercihen aday süjeyle ayni
türden olan saglikli süje popülasyonundan elde edilen bir numune (örnegin, kan veya
plazma numunesi) gibi bir kontrol numunesindeki klevaj edilmis kininojen yüzdesidir.
Burada kullanildigi sekliyle, saglikli bir süje, klevaj edilmis ve/veya bozulmamis
kininojen seviyesinin ölçüldügü anda görünürde hedef hastaligi (örnegin, HAE gibi bir
pKaI-aracili rahatsizlik veya RA, UC ve Crohn hastaligi gibi bir otoimmün hastaligi)
olmayan veya hiç hastalik hikayesi olmayan bir süjedir.
Kontrol seviyesi ayrica, önceden belirlenmis bir seviye de olabilir. Bu tip bir önceden
belirlenmis seviye, hedef hastaligi olmayan veya risk altinda olmayan süjelerin bir
popülasyonundaki klevaj edilmis kininojen yüzdesini temsil edebilir. Ayrica, hedef
hastaligi olan süjelerin bir popülasyonundaki klevaj edilmis kininojen yüzdesini de
temsil edebilir.
Önceden belirlenmis seviye çesitli biçimlerde olabilir. Örnegin, bir medyan veya
ortalama gibi bir tekli kesme degeri olabilir. Bazi uygulamalarda, bu tip bir önceden
belirlenmis seviye, bir tanimli grubun hedef bir hastaliga sahip oldugunun bilindigi ve
bir baska tanimli grubun hedef hastaliga sahip olmadiginin bilindigi seklinde,
karsilastirma gruplarina dayali olarak olusturulabilir. Alternatif olarak, önceden
belirlenmis seviye bir aralik, örnegin, önceden belirlenmis bir yüzde dilimi içerisindeki
bir kontrol popülasyonundaki klevaj edilmis kininojen yüzdesini temsil eden bir aralik
olabilir.
Burada tarif edilen sekildeki kontrol seviyesi rutin teknolojiyle belirlenebilir. Bazi
örneklerde, kontrol seviyesi, yine burada tarif edilen sekildeki bir kontrol numunesi
üzerinde konvansiyonel bir yöntem (örnegin, burada tarif edildigi üzere bir test
numunesindeki klevaj edilmis ve/veya bozulmamis kininojen seviyesinin elde edilmesi
için olanla ayni analiz) gerçeklestirilerek elde edilebilir. Baska örneklerde, klevaj edilmis
ve/veya bozulmamis kininojen seviyeleri bir kontrol popülasyonunun üyelerinden elde
edilebilir ve sonuçlar, kontrol popülasyonundaki klevaj edilmis ve/veya bozulmamis
kininojeni temsil eden kontrol seviyesinin (önceden belirlenmis bir seviye) elde edilmesi
için, örnegin, bir bilgsayar programiyla elde edilebilir.
Bir aday süjeden elde edilen bir numunedek klevaj edilmis kininojen yüzdesinin burada
tarif edilen sekilde referans degeriyle karsilastirilmasiyla, aday süjenin >PKaI-aracili
hastaliga (örnegin, HAE veya RA, UC ve Crohn hastaligi gibi bir otoimmin hastaligi)
sahip olup olmadigi veya risk altinda olup olmadigi belirlenebilir. Örnegin, aday süjenin
bir numunesindeki klevaj edilmis kininojen yüzdesi referans degerden saparsa
(örnegin, referans degere kiyasla artarsa), aday süje hastaliga sahip veya risk altinda
olarak tanimlanabilir. Referans deger, hedef hastaligi olan süjelerin bir
popülasyonundaki klevaj edilmis kininojenin yüzde araliklarini temsil ettiginde, bir
adayin numunesindeki klevaj edilmis kininojenin araliga denk gelen yüzdesi, aday
süjenin hedef hastaligi oldugunu veya risk altinda oldugunu gösterir.
Burada kullanildigi sekliyle, “bir yükselmis seviye veya bir referans degeri üzerindeki bir
seviye”, klevaj edilmis kininojen seviyesinin/yüzdesinin, bir kontrol numunesindeki
klevaj edilmis kininojenin bir seviyesinin/yüzdesinin önceden belirlenmis bir esigi gibi bir
referans degerden daha yüksek oldugu anlamina gelmektedir. Kontrol seviyeleri
burada ayrintili olarak tarif edilmektedir. Klevaj edilmis kininojenin yükselmis bir
olan bir klevaj edilmis kininojen yüzdesini içerir. Klevaj edilmis kininojenin yükselmis bir
yüzdesi ayrica, bir sifir durumundan (örnegin, bir numunede bir yakalama belirtecine
baglanan sifir veya saptanamaz klevaj edilmis kininojen ve/veya bozulmamis kininojen)
bir sifir-olmayan duruma (örnegin, bir miktar veya saptanabilir klevaj edilmis kininojen
ve/veya bozulmamis kininojen) bir olgunun artmasini da içerir.
Burada kullanildigi sekliyle, “azalan bir yüzde/seviye veya bir referans degerinin
altindaki bir yüzde/seviye”, klevaj edilmis kininojen yüzdesinin/seviyesinin, bir kontrol
numunesindeki klevaj edilmis kininojenin önceden-belirlenmis bir esigi gibi bir referans
degerinden daha düsük oldugu anlamina gelmektedir. Kontrol seviyeleri burada
ayrintili olarak tarif edilmektedir. Klevaj edilmis kininojenin azalmis bir yüzdesi, örnegin,
kininojen içerir. Klevaj edilmis kininojenin azalmis bir yüzdesi ayrica, bir sifir-olmayan
durumdan (örnegin, bir miktar veya saptanabilir klevaj edilmis kininojen) ve/veya bir
sifir durumuna (örnegin, bir numunede sifir veya saptanamaz klevaj edilmis kininojen)
ve/veya bir numunede bir olgunun azalmasini da içerenbir yakalama belirtecine
baglanir.
Bazi uygulamalarda, aday süje, örnegin, HAE gibi bir pKaI-aracili rahatsizligi veya RA,
UC ve Crohn hastaligi gibi bir otoimmün hastaligi olan bir insan hastadir. Örnegin,
süjede ödem, söz konusu sismenin tamamen veya baskin olarak periferik oldugu
sisme; ürtiker; enfeksiyon kanitinin yoklugunda kizariklik, agri ve sisme; histamin-
araciIi-olmayan ödem, tekrarlayan sisme ataklari veya bunlarin bir kombinasyonu
vardir. Diger uygulamalarda, süje, numunenin alindigi esnada bir pKaI-aracili
rahatsizligin hiç semptomuna sahip degildir, bir pKaI-aracili rahatsizligin bir
semptomunun hikayesine sahip degildir veya HAE gibi bir pKaI-aracili rahatsizlik
hikayesine sahip degildir. Yine baska uygulamalarda, süje bir anti-histamin terapisine,
bir kortikosteroid terapisine veya her ikisine dirençlidir.
Bazi uygulamalarda, plazma kallikrein aktivitesi içeren hastalik veya durum, herediter
anjiyoödemdir (HAE). Herediter anjiyoödem (HAE) ayrica “Quincke ödemi”, C1 esterazi
inhibitörü yoksunlugu, C1 inhibitörü yoksunlugu ve herediter anjiyonörotik ödem
(HANE) olarak da bilinmektedir. HAE, örnegin, bacaklari, yüzü, cinsel organlari,
sindirim sistemini ve hava yolunu etkileyebilen, tekrarlayan siddetli sisme (anjiyoödem)
epizotlariyla karakterizedir. HAE'nin semptomlarina, örnegin, kollarda, bacaklarda,
dudaklarda, gözlerde, dilde ve/veya bogazda sisme; bogaz sismesini ve ani ses
kisikligini içerebilen hava yolu tikanikligi; bariz neden olmadan tekrarlayan karin
krampi epizotlari ve/veya siddetli olabilen ve karin krampina, kusmaya, dehidrasyona,
ishale, agriya ve/veya soka yol açabilen bagirsaklarin sismesi dahildir. Bu HAE'si olan
bireylerin yaklasik üçte biri, bir atak esnasinda eritema marjinatum olarak adlandirilan
kasintili olmayan bir kurdesen gelistirir.
Hava yolunun sismesi hayati tehdit edebilir ve bazi hastalirda ölüme neden olur.
Mortalite oranlarinin %15-33 oldugu tahmin edilmektedir. HAE, yilda yaklasik 15.000-
.000 acil servis ziyaretine yol açar.
Travma veya stres, örnegin, dental islemler, hastalik (örnegin, soguk alginligi ve nezle
gibi viral hastaliklar), adet görme ve ameliyat, bir anjiyoödem atagini tetikleyebilir.
HAE'nin akut ataklarinin engellenmesi için, hastalar. önceden ataklara neden olmus
olan spesifik uyaranlari görmezden gelmeye tesebbüs edebilir. Ancak, birçok durumda,
bir atak bilinmeyen bir tetik olmadan meydana gelir. Tipik olarak, HAE semptomlari ilk
olarak çocuklukta ortaya çikar ve ergenlikte kötülesir. Ortalama olarak, tedavi
edilmemis hastalar her 1 ila 2 haftada bir bir atak geçirir ve birçok epizot yaklasik 3 ila 4
gün sürer (ghr.nlm.nih.gov/condition/hereditary-angioedema). Ataklarin sikligi ve
süresi, herediter anjiyoödemi olan hastalar arasinda, ayni aileden olan insanlar
arasinda bile büyük oranda degisiklik gösterir.
HAE'nin, tip I, II ve III olarak bilinen üç tipi vardir. HAE'nin 50.000ide 1 kisiyi etkiledigi,
tip I'in vakalarin yaklasik yüzde 85'inden sorumlu oldugu, tip Il'nin vakalarin yaklasik
yüzde 15'inden sorumlu oldugu ve tip III'ün çok ender oldugu tahmin edilmektedir. Tip
düsünülmüstür, ancak etkilenen erkeklerin oldugu aileler tanimlanmistir.
HAE, etkilenen bir kisinin mutasyonu etkilenen bir ebeveynden miras alabildigi sekilde
bir otozomal baskin örüntüde miras alinir. Gende yeni mutasyonlar da ortaya çikabilir
ve böylelikle HAE ayrica, ailede hiç rahatsizlik hikayesi olmayan insanlarda da ortaya
çikabilir. Vakalarin %20-25'inin yeni bir spontan mutasyondan kaynaklandigi tahmin
edilmektedir.
SERPING1 genindeki mutasyonlar tip I ve tip II herediter anjiyoödeme neden olur.
SERPING1 geni, enflamasyonun kontrol edilmesi için önemli olan C1 inhibitörünün
yapilmasi için komutlar saglar. Ct inhibitörü, enflamasyonu tesvik eden belirli
proteinlerin aktivitesini bloke eder. Tip l herediter anjiyoödemine neden olan
mutasyonlar, kanda indirgenmis C1 inhibitörü seviyelerine yol açar. Aksine, tip ll'ye
neden olan mutasyonlar, anormal islev gören bir C1 inhibitörünün üretimiyle sonuçlanir.
Fonksiyonel C1 inhibitörünün uygunseviyeleri olmadan, asiri miktarlarda bradikinin
üretilir. Bradikinin enflamasyonu, kan damarlarinin duvarlari üzerinden vücut
dokularinin içine sivi sizintisini arttirarak tesvik eder. Vücut dokularinda sivilarin asiri
birikmesi, tip I ve tip II herediter anjiyoödemi olan bireylerde görülen sisme epizotlarina
neden olur.
F12 genindeki mutasyonlar, bazi tip I" herediter anjiyoödem vakalariyla iliskilidir. F12
geni, koagülasyon faktör XII yapilmasi için komutlar saglamaktadir. Kan
pihtilasmasinda (koagülasyon) kritik bir rol oynamaya ek olarak, faktör XII ayrica
enflamasyonun önemli bir uyarioisidir ve bradikinin üretiminde yer alir. F12 genindeki
belirli mutasyonlar, artan aktiviteye sahip faktör XII üretimiyle sonuçlanir. Bunun bir
sonucu olarak, daha fazla bradikinin üretilir ve kan damarlari daha sizintili hale gelir, bu
da sisme epizotlarina yol açar. Tip III herediter anjiyoödemin diger vakalarinin nedeni
halen bilinmemektedir. Henüz tanimlanmamis bir veya daha fazla gendeki
mutasyonlar, bu vakalardaki rahatsizliktan sorumlu olabilir.
HAE, anjiyoödemin diger biçimlerine benzer sekilde alerjilerden veya diger tibbi
durumlardan ortaya çikabilir ancak nedenve tedavi açisindan kayda deger ölçüde
farklilik gösterir. Herediter anjiyoödem bir alerji olarak yanlis teshis edildiginde, en
yaygin olarak, her ne kadar epinefrin hayati tehdit eden reaksiyonlarda kullanilabilse
de, HAE'de tipik olarak etkisiz olan antihistaminiklerle, steroidlerle ve/veya epinefrinle
tedavi edilir. Yanlis teshisler ayrica, karin sisligi olan hastalar için gereksiz inceleme
ameliyatlariyla sonuçlanmistir ve bazi HAE hastalarinda karin agrisi, psikosomatik
seklinde yanlis olarak teshis edilmistir.
HAE'nin semptomlari, örnegin, anketler, örnegin, hastalar, klinisyenler veya aile üyeleri
tarafindan doldurulan anketler kullanilarak analiz edilebilir. Bu tip anketler teknikte
bilinmektedir ve örnegin, görsel analog ölçekler içerir. Bakiniz, örnegin, McMiIIan, C.V.
(ii) Romatoid Artirit
Romatoid artirit (RA), eklem sismesine ve agriya neden olan ve normalde eklem
tahribatiyla sonuçlanan bir otoimmün, Crohnik enflamatuar hastaliktir. RA genellikle,
hastalik semptomlarinin yinelemeleri arasinda hastalik aktivitesinin “alevlenmeleriyle”
tekrarlayan/yineleyen bir seyir izler. RA, Sjogren sendromu (gözyasi ve tükürük
bezlerinin enflamasyonunun neden oldugu kuru gözler ve agiz), plörit (akciger zarinin,
derin soluma ve öksürme üzerine agriya neden olan enflamasyonu), romatoid nodüller
(akcigerler içerisinde gelisen enflamasyonun nodüler alanlari), perikardit
(perikardiyumun, yatildiginda veya öne egilindiginde agriya neden olan enflamasyonu),
Felty sendromu (süjeyi enfeksiyona yatkin hale getiren, RA ile birlikte gözlemlenen
splenomegali ve lökopeni) ve vaskülit (kan damarlarinin, kan akisini bloke edebilen bir
enflamasyonu) dahil olmak üzere bir dizi ilave enflamatuar rahatsizlikla iliskilidir.
Plazma kallikrein romatoid artirite dahil edilmistir.
Aktif RA semptomlarina yorgunluk, istah kaybi, düsük dereceli ates, kas ve eklem
agrilari ve sertligi dahildir. Kas ve eklem sertligi çogunlukla sabahlari ve inaktivite
periyotlarindan sonra daha fazla görülür. Alevlenmeler esnasinda, eklemler siklikla,
genellikle sinovitin bir sonucu olarak kizarik, sismis, agrili ve hassas hale gelir.
Romatoid artiritin tedavisi ilaçlarin, istirahatin, eklem germe egzersizlerinin ve eklem
korumasinin bir kombinasyonunu içerir. Romatoid artiritin tedavisinde iki ilaç sinifi
kullanilmaktadir: anti-enflamatuar “birinci-sira ilaçlar" ve “Hastalik-Modifiye Edici
Antiromatizmal Ilaçlar” (DMARD'Iar). Birinci-sira ilaçlara NSAID'Ier (örnegin, aspirin,
naproksen, ibuprofen ve etodolak) ve kortizon (kortikosteroid) dahildir. Altin (örnegin,
altin tuzlari, altin tiyoglukoz, altin tiyomalat, oral altin), metotreksat, sülfasalazin, D-
penisilamin, azatioprin, siklofosfamit, klorambusil ve siklosporin, leflunomid, etanersept,
infliksimab, anakinra ve adalimumab ve hidroksiklorokuin gibi DMARD'Iar hastalik
gerilemesini tesvik eder ve ilerleyici eklem tahribatini engeller, ancak anti-enflamatuar
ajanlar degillerdir.
RA ve RA semptomlarinin analiz edilmesi için faydali ölçeklere, örnegin, Romatoid
Artirite Özcü Saglik Endeksi (ASHI: Ware et al., (1999) Med. Care. 37(5 Suppl):MS40-
50), Artirit Etki Ölçümü Ölçekleri veya Artirit Etki Ölçümü Ölçekleri 2 (AIMS veya
Degerlendirmesi Anketi (HAQ), HAQII veya modifiye HAQ (bakiniz, örnegin, Pincus et
(iii) Enflamatuar Bagirsak Hastaligi (IBD) - Crohn hastaligi ve ülseratif kolit
Enflamatuar bagirsak hastaligi (IBD) kalin bagirsagin ve bazi vakalarda ince
bagirsagin enflamatuar durumlarinin bir grubudur. IBD'nin ana formlari Crohn hastaligi
ve ülseratif kolittir (UC). Çok daha az vakadan sorumlu olanlar IBD'nin diger
biçimleridir: kolajenöz kolit, Ienfositik kolit, iskemik kolit, diversiyon kolit, Behçet
hastaligi, enfektif kolit ve belirsiz kolit. Crohn hastaligiyla UC arasindaki temel fark,
enflamatuar degisikliklerin yeri ve yapisidir. Crohn, her ne kadar vakalarin çogunlugu
terminal ileumda baslasa da, agizdan anüse kadar sindirim sisteminin herhangi bir
parçasini etkileyebilir (atlama Iezyonlari). Bunun aksine, ülseratif kolit, kolonla ve
rektumla sinirlidir. Mikroskopik olarak, ülseratif kolit mukozayla (bagirsagin epitelyal
astari) sinirliyken, Crohn hastaligi tüm bagirsak duvarini etkiler. Son olarak, Crohn
hastaligi ve ülseratif kolit, farkli orantilarda bagirsak-disi belirtilerle (mesela karaciger
problemleri, artirit, deri belirtileri ve göz problemleri) kendini gösterir.
çesitli iliskili sikayetler veya hastaliklar (artirit, kangrenli piyodermi, primer sklerozan
kolanjit) dahildir. Teshis genellikle patolojik lezyonlarin biyopsisiyle kolonoskopi ile
konulur.
immünosupresyon gerektirebilir. Azatioprin, metotreksat veya 6-merkaptopürin gibi
immünosupresifler kullanilabilir. Daha yaygin olarak, IBD'nin tedavisi mezalaminin bir
formunu gerektirir. Siklikla, hastalik alevlenmelerini kontrol etmek için steroidler
kullanilir bir zamanlar bunlar bir idame ilaci olarak kabul edilmistir. Infliksimab gibi
biyolojikler, Crohn hastaligi veya Ülseratif Koliti olan hastalarin tedavi edilmesi için
kullanilmistir. Ciddi vakalar, bagirsak rezeksiyonu, striksiyon plasti veya geçici veya
kalici bir kolostomi veya ileostomi gibi cerrahi gerektireblir. IBD için alternatif ilaç
tedavileri çesitli formlarda mevcuttur ancak bu tip yöntemler, uzatilmis steroidal
maruziyetin veya cerrahi eksizyonun önlenmesi amaciyla altta yatan patolojinin kontrol
edilmesine odaklidir. Çogunlukla tedavi, yüksek anti-enflamatuar etkilere sahip,
prednizon gibi ilaçlarin verilisiyle baslatilir. Enflamasyon basarili olarak kontrol
edildiginde, hasta çogunlukla, hastaligin gerilemede tutulmasi için, - bir mezalamin olan
- azakol gibi daha hafif bir ilaca geçirilir. Basarisiz olunursa, yukarida belirtilen
immünosupresan ilaçlarin (bir anti-enflamatuar etkiye sahip olabilen) bir mezalaminle
bir kombinasyonu, hastaya bagli olarak verilebilir veya verilmeyebilir.
(iv) Qiger pKaI-aracili veya Bradikinin-aracili Rahatsizliklar
Plazma kallikrein aktivitesiyle iliskili diger emsal hastaliklara veya durumlara histamin-
bagimli-olmayan anjiyoödem, romatoid artirit, Crohn hastaligi, ülseratif kolit, Iupus,
Alzheimer hastaligi, septik sok, yanik yaralanmasi, beyin iskemisi/reperfüzyon
yaralanmasi, serebral ödem, diyabetik retinopati, diyabetik nefropati, maküler ödem,
vaskülit, arteriyel veya venöz tromboz, ventriküler destek cihazlariyla veya stentlerle
iliskili tromboz, trombozlu heparin-indüklü trombositopeni, tromboembolik hastalik ve
stabil olmayan gögüs anjinli koroner kalp hastaligi, ödem, göz hastaligi, gut, bagirsak
hastaligi, oral mukozit, nörpatik agri, enflamatuar agri, spinal stenoz-dejeneratif
omurilik hastaligi, ameliyat sonrasi bagirsak tikanmasi, aortik anevrizma, osteoartirit,
herediter anjiyoödem, akciger embolisi, felç, kafa travmasi veya peri-tümör beyin
ödemi, sepsis, akut orta serebral arter (MCA) iskemik olayi (felç), restenoz (örnegin,
anjiyoplastiden sonra), sistemik Iupus eritematoz nefrit, bir otoimmün hastaligi, bir
enflamatuar hastalik, bir kardiyovasküler hastalik, bir nörolojik hastalik, yanlis protein
katlanmasiyla iliskili bir hastalik, anjiyojenezle iliskili bir hasrtalik, hipertansif nefropati
ve diyabetik nefropati, alerjik ve solunum hastaliklari (örnegin, anafilaksi, astim,
Crohnik obstrüktif akciger hastaligi, akut solunum sikintisi sendromu, kistik fibroz,
persistan, rinit) ve doku yaralanmalari (örnegin, yanik veya kimyasal yaralanma)
dahildir.
Burada tarif edildigi sekilde bir pKaI-aracili rahatsizligi olan veya risk altinda olarak
tanimlanan bir süje, burada tarif edilenler gibi uygun bir tedaviye tabi tutulabilir.
B. Mavi E_tkililiginin Merlengirilmesi
Burada tarif edilen analiz yöntemleri ayrica, bir pKaI-aracili rahatsizlik (örnegin, HAE)
için bir tedavinin etkililiginin degerlendirilmesi için de uygulanabilir. Örnegin, birden
fazla biyolojik numune (örnegin, kan veya plazma numuneleri), bir tedavinin tedaviden
ya önce veya sonra veya tedavi süresi esnasinda gerçeklestirildigi bir süjeden
alinabilir. Klevaj edilmis ve/veya bozulmamis kininojen seviyeleri, burada tarif edildigi
sekildeki analiz yöntemlerinin herhangi biriyle ölçülebilir ve klevaj edilmis ve/veya
bozulmamis kininojenin degerleri (örnegin, yüzdeler) buna bagli olarak belirlenebilir.
Klevaj edilmis kininojenin yüzdesi tedaviden sonra veya tedavi süresi boyunca azalirsa
(daha önce alinan bir numunekedine kiyasla daha sonra alinan bir numunedeki klevaj
edilmis kininojen yüzdesi) veya bozulmamis kininojen yüzdesi tedaviden sonra veya
tedavi süresi boyunca artarsa, bu durum, tedavinin etkili oldugunu gösterir. Bazi
örneklerde, tedavi, burada tarif edildigi üzere bir kallikrein baglayici ajan gibi bir
terapötik ajan, burada tarif edildigi üzere bir bradikinin B2 reseptörü antagonisti veya
burada tarif edildigi üzere bir Ct-INH replasman ajani içerir. Terapötik ajanlarin
örneklerine, bunlarla sinirli kalmamak kaydiyla, DX-2930 veya DX88 dahildir.
Süje tedaviye yanit vermiyor olarak tanimlanirsa, terapötik ajanin daha yüksek bir dozu
ve/veya dozaj sikligi tanimlanan süjeye verilir. Bazi uygulamalarda, terapötik ajanin
dozaji veya dozaj sikligi, tedaviye yanit veriyor olarak tanimlanan veya Ileri tedaviye
ihtiyaç duymayan bir süjede idame ettirilir, düsürülür veya durdurulur. Alternatif olarak,
birinci tedaviye yanit vermiyor olarak bulunan süjeye farkli bir tedavi uygulanabilir.
pKal Inhibitörlerivle Tedaviye Duyarli Rahatsizliklarin Tanimlanmasi
Klevaj edilmis kininojenin ve/veya bozulmamis kininojenin degerlerine ayrica, bir pKal
inhibitörüyle tedavi edilebilen bir rahatsizligin tanimlanmasi için dayanilabilir. Bu
yöntemin uygulanmasi için, bir hedef hastaligi olan bir süjeden alinan bir numunedeki
(örnegin, bir kan numunesi veya bir plazma numunesi) yarimli kininojen seviyesi
ve/veya bozulmamis kininojen seviyesi uygun bir analiz ile, örnegin, bir Western blot
analizi gibi burada tarif edilenlerle ölçülebilir. Klevaj edilmis ve/veya bozulmamis
kininojen yüzdeleri gibi degerler burada tarif edildigi sekilde belirlenebilir. Klevaj edilmis
kininojen ve/veya bozulmamis kininojen degerleri, burada tarif edildigi üzere bir
referans degerle karsilastirilabilir. Klevaj edilmis kininojen/bozulmamis kininojenin
degeri referans degerinden saparsa (örnegin, yükselirse veya azalirsa), bu durum, bir
pKal inhibitörünün hastaligin tedavisinde etkili olabilecegini gösterir. Örnegin, klevaj
edilmis kininojenin yüzdeleri tedaviden sonra veya tedavi süresi boyunca azaliyorsa,
tedavi etkili oluyor olarak tanimlanabilir. Alternatif olarak, bozulmamis kininojenin
yüzdeleri tedaviden sonra veya tedavi süresi boyunca artiyorsa, tedavi etkili oluyor
olarak tanimlanabilir.
Bazi uygulamalarda, klevaj edilmis ve/veya bozulmamis kininojen seviyesi, kininojenin
diger formuna kiyasla ya klevaj edilmis kininojene veya bozulmamis kininojene spesifik
olarak baglanan bir saptama belirteci (örnegin, bir antikor) kullanilarak ölçülebilir. Bazi
örneklerde, antikor, bozulmamis kininojene kiyasla klevaj edilmis kininojene spesifik
olarak baglanir. Baska örneklerde, antikor, klevaj edilmis kininojenin hafif zincirinin C-
ucuna spesifik olarak baglanir.
Hastalik bir pKal inhibitörüne duyarli olarak (bununla tedavi edilebilir olarak)
tanimlanirsa, yöntem ayrica hastaligi olan süjeye, bir pKal inhibitörünün, örnegin, DX-
88, EPlKAL-2 veya X-29307un etkili bir miktarinin verilisini içerebilir.
Burada tarif edilen yöntemlerin herhangi biriyle tanimlandigi üzere, bir pKaI-aracili veya
bradikinin-aracin rahatsizlik riskinde olan veya bundan muzdarip olan (örnegin,
hastaliga sahip olan olan) bir süje, herhangi br uygun terapötik ajanla tedavi edilebilir.
Bazi uygulamalarda, saglanan yöntemler, saglanan bir analizin, örnegin, biyomarkör
saptanmasinin çiktisina dayali olarak bir süje için bir tedavinin seçilmesini içerir.
Bazi uygulamalarda, yöntem, bir terapötik ajanin, örnegin, burada tarif edildigi sekilde
bir kallikrein baglayici ajanin, örnegin, burada tarif edildigi üzere bir bradikinin B2
reseptörü antagonistinin, örnegin, burada tarif edildigi üzere bir Ci-INH replasman
ajaninin, analizin, örnegin, biyomarkör saptanmasinin çiktisina dayali olarak süjeye
verilis için seçilmesinin veya verilisinin birini veya her ikisini içerir.
Bazi uygulamalarda, bir plazma kallikrein baglayici protein veya polipeptit bir süjeye
verilir. Bazi uygulamalarda, kallikrein baglayici ajan bir kallikrein inhibitörü, örnegin,
peptit, bir küçük molekül inhibitörü, bir kallikrein antikoru veya bunun bir fragmanidir.
Bazi uygulamalarda, bradikinin 82 reseptörünün bir antagonisti bir süjeye verilir. Bazi
uygulamalarda, bir C1-INH replasman terapötik ajan bir süjeye verilir.
Terapötik ajan, örnegin, kallikrein inhibitörü, örnegin, bradikinin 82 reseptörü
antagonisti, örnegin, C1-INH replasman ajani, plazma kallikrein ve/veya bradikinin
aktivitesi içeren hastaligin veya durumun tedavisi için bir kombinasyon terapisinin
parçasi olarak bir baska terapiyle birlikte verilebilir. Örnegin, bir kallikrein inhibitörünün,
bradikinin BZ reseptörü antagonistinin veya C1-INH replasman ajaninin biriyle veya
daha fazlasiyla, örnegin, bir kallikrein inhibitörünün, bradikinin B2 reseptörü
antagonistinin veya C1 -INH replasman ajaninin ve bir baska terapinin biriyle veya daha
fazlasiyla kombinasyon terapisi, birden fazla farkli yapilandirmalarda saglanabilir.
Birinci ajan, diger terapinin verilisinden önce veya sonra verilebilir. Bazi durumlarda,
birinci ajan ve bir baska terapi (örnegin, bir terapötik ajan) eszamanli olarak veya yakin
zamansal yakinlikta (örnegin, ayni tedavi seansi esnasinda gibi, iki enjeksiyon
arasindaki kisa bir zaman araliginda) verilir. Birinci ajan ve diger terapi ayrica daha
büyük zamansal araliklarda da verilebilir.
Plazma kallikrein baglayici ajanlar
Plazma kallikrein baglayici ajanlar (örnegin, baglayici proteinler, örnegin, polipeptitler,
örnegin, inhibitör polipeptitler, örnegin, antikorlar, örnegin, inhibitör antikorlar veya diger
baglayici ajanlar, örnegin, küçük moleküller) çesitli hastaliklar ve durumlar, örnegin,
plazma kallikrein aktivitesini içeren hastaliklar ve durumlar için faydali terapötik
ajanlardir. Örnegin, bazi uygulamalarda, plazma kallikrein aktivitesini içeren hastalik
veya durum herediter anjiyoödemdir (HAE). Bazi uygulamalarda bir plazma kallikrein
baglayici protein veya polipeptit, bir pKaI-aracili veya bradikinin-aracili rahatsizlik
riskinde olan veya bundan muzdarip olan bir süjeye verilir.
Doku ve/veya plazma kallikrein olan kallikreinin bir dizi faydali protein inhibitörlerine bir
Kunitz alani dahildir. Burada kullanildigi sekliyle, bir “Kunitz alani”, en az 51 amino
aside sahip ve en az iki, tercihen üç disülfit ihtiva eden bir polipeptit alanidir. Alan,
birinci altinci sisteinlerin, ikinci ve dördüncü ve üçüncüyle besinci sisteinlerin disülfit
baglari olusturacagi sekilde katlanir (örnegin, 58 amino aside sahip bir Kunitz alaninda,
sisteinler, asagida verilen BPTI homolog dizilerin numaralandirilmasina göre 5, 14, 30,
38, 51 ve 55 amino asitlere karsilik gelenkonumlarda mevcut olabilir ve disülfitler, 5 ve
mevcutsa, bunlarin sisteinlerinin karsilik gelen bir alt kümesi arasinda olusabilirler. Ilgili
sisteinler arasindaki aralik, sunlara karsilik gelen konumlar arasindaki asagidaki
araliklarin 7, 5, 4, 3, 2, 1 veya 0 amino asitleri içerisinde olabilir: asagida verilen BPTI
herhangi bir jenerik Kunitz alanindaki spesifik konumlarin ifade edilmesi için bir
referans olarak kullanilabilir. Ilgi konusu bir Kunitz alaninin BPTI ile karsilastirilmasi,
hizali sisteinlerin sayisinin maksimize edildigi en iyi oturma hizalamasinin
tanimlanmasiyla gerçeklestirilebilir.
BPTIlnin Kunitz alaninin (yüksek çözünürlükte) 3D yapisi bilinmektedir. X-isini
yapilarinin biri, Brookhaven Protein Data Bankta “6PTI” olarak bulunmaktadir. Bazi
Kunitz alani dizisi bilinmektedir. Bilinen insan homologlarina, doku faktörü yolaki
inhibitörü (TFPI) olarak da bilinen LACI'nin üç Kunitz alani (Wun et al., (1988) J. Biol.
3357), hepatosit büyüme faktörü aktivatörü inhibitörü tip 1'in Kunitz alanlari, Hepatosit
büyüme faktörü aktivatörü inhibitörü tip 2'nin Kunitz alanlari, US Patenti Yayini No.:
agirliga sahip (Tablo 1”deki amino asit dizisi), üç Kunitz alani ihtiva eden bir insan
serumu fosfoglikoproteinidir.
Tablo 1: Emsal Dogal Kunitz Alanlari
LACI: (SEO
in NO. 4› ' 1:::: :' .::::çizi-:pgga ;:î::: ; _';.:__-
Sinyal dizisi (1-28) büyük harftir ve alti çizilidir.
LACI-K2 (121-178) alti çizilidir
BPTI (SEQ
olarak ifade edilmektedir. LACl'nin CDNA dizisi, Wun et
mutasyonal çalismalari bildirmektedir. LACI-K1, F.Vlla doku faktörüne
komplekslendiginde ve LACI-K2 faktör Xa'yi önlediginde Faktör Vlla'yi (F.Vlla) önler.
Emsal Kunitz alanlarini ihtiva eden proteinlere, SWISS-PRO Erisim Numalarari
parantez içinde yazili sekilde asagidakiler dahildir:
A4_HUMAN (P,
A4_MOUSE (P,
AMBP_PLEPL (P,
AXP1_ANTAF (P,
BPT2_BOVIN (P,
CA36_HUMAN (P,
ELAC_TRIVU (Q,
HTIB_MANSE (P,
lVBI_DENPO (P,
SBPI_SARBU (P,
TKD1_SHEEP (Q,
AMBP_BOVIN (P,
AMBP_MESAU (Q,
AMBP_RAT (Q,
SPT1_HUMAN (,
SPT2_MOUSE (Q9WU03), TFP2_HUMAN (P,
TFPI_HUMAN (P,
TFPI_RABIT (P
Bir dizi veritabanindan bir Kunitz alaninin tanimlanmasi için çesitli yöntemler
kullanilabilir. Örnegin, bir Kunitz alaninin bilinen bir amino asit dizisi, bir konsensüs
dizisi veya bir motif (örnegin, ProSite Motifi), örnegin, BLAST kullanilarak GenBankasi
dizi veritabaninda (National Center for Biotechnology Information, National Institutes of
Health, Bethesda MD); örnegin, Pfam arastirmasi için varsayilan parametreler
kullanilarak HMM'nin (Sakli Markov Modelleri) Pfam veritabaninda; SMART
veritabaninda veya ProDom veritabaninda aranabilir. Örnegin, Pfam Yayin 9'un Pfam
Erisim Numarasi PF00014, Kunitz alanlarinin tanimlanmasi için sayisiz Kunitz alani ve
bir HMM saglar. Pfam veritabaninin bir tarifi Sonhammer et al. (1997) Proteins
28(3):405-420'de bulunabir ve HMM'lerin ayrintili bir tarifi, örnegin, Gribskov et al.
HMM'Ierin SMART veritabani (Basit Modüler Mimari Arastirma Araci, EMBL,
Heidelberg, DE). SMART veritabani, HMMer2 arama programinin (R. Durbin et al.
(1998) Biological sequence analysis: probabilistic models of proteins and nucleic acids.
Cambridge University Press) sakli Markov modelleriyle profillemeyle tanimlanan alanlar
ihtiva eder. Veritabani da açimlanir ve izlenir. ProDom protein alani veritabani,
homolog alanlarin otomatik bir derlemesinden olusur (Corpet et al. (1999), Nucl. Acids
veritabanlarinin tekrarlamali PSl-BLAST arastirmalari kullanilarak olusturulur (Altschul
Chemistry 23:333-340.). Veritabani otomatik olarak her bir alan için bir konsensüs dizisi
üretir. Prosite, Kunitz alanini bir motif olarak listeler ve bir Kunitz alani içeren proteinleri
Kunitz alanlari, birincil olarak, iki kivrim bölgesindeki (“baglayici kivrimlar”) amino
asitleri kullanarak hedef proteazla etkilesir. Birinci kivrim bölgesi yaklasik olarak,
BPTI'nin 13-20 amino asitlerine karsilik gelen kalintilar arasindadir. Ikinci kivrim
bölgesi yaklasik olarak, BPTI'nin 31-39 amino asitlerine karsilik gelen kalintilar
arasindadir. Kunitz alanlarinin emsal bir kitapligi, birinci ve/veya ikinci kivrim
bölgelerindeki bir veya daha fazla amino asit konumlarini degistirir. Kallikreinle
etkilesen Kunitz alanlari için tarama yapilirken veya gelismis afinite varyantlari için
seçim yapilirken, degistirmek için özellikle faydali konumlara sunlar dahildir: BPTIlnin
azindan bazilarinin, hedef proteazla yakin temasta olmasi beklenir. Ayrica, diger
konumlari, örnegin, üç-boyutlu yapida yukarida belirtilen konumlara bitisik konumlari
degistirmek de faydalidir.
Bir Kunitz alaninin ”çerçeve bölgesi”, Kunitz alaninin bir parçasi olan, ancak spesifik
olarak birinci ve ikinci baglayici, yani, BPTI'nin 13-20 amino asitlerine ve BPTI'nin 31-
39 amino asitlerine karsilik gelen kivrim bölgelerindeki kalintilari hariç birakan kalintilar
olarak tanimlanir. Aksine, baglayici kivrimda olmayan kalintilar daha genis çapli amino
asit sübstitüsyonlarini (örnegin, konservatif ve/veya konservatif-olmayan
sübstitüsyonlar) tolere edebilir.
Bir uygulamada, bu Kunitz alanlari, insan Iipoprotein-iliskili koagülasyon inhibitörü
(LACI) proteininin Kunitz alani 1 dahil olmak üzere kivrimli yapinin varyant biçimleridir.
LACI, paradigma Kunitz alanlari olan üç adet dahili, iyi-tanimli, peptit kivrim yapisi
Kunitz alani 1'in varyantlari taranmistir, izole edilmistir ve güçlendirilmis afinite ve
Bu yöntemler ayrica, kallikreinle, örnegin, plazma kallikreinle etkilesen diger Kunitz
alanlarinin elde edilmesi için diger Kunitz alani çerçevelerine de uygulanabilir.
Kallikrein fonksiyonunun faydali modülatörleri tipik olarak, kallikrein baglama ve önleme
analizleri kullanilarak belirlendigi üzere, kallikreini baglar ve/veya önler.
Bazi yönlerde, bir kallikrein baglayici ajan (örnegin, baglayici protein, örnegin,
polipeptit, örnegin, inhibitör polipeptit, örnegin, antikor, örnegin, inhibitör antikor veya
diger baglayici ajan, örnegin, küçük molekül) plazma kallikreinin aktif formuna baglanir.
Bazi uygulamalarda, kallikrein baglayici ajan plazma kallikreine, örnegin, insan plazma
kallikreine ve/veya murin kallikreine baglanir ve önler.
Plazma kallikrein baglayici proteinleri tam-boy olabilir (örnegin, bir IgG (örnegin, bir
antijen-baglayici fragman (örnegin, Fab, F(ab')2 veya scFv fragmani) içerebilir.
Baglayici protein iki agir zincir immünoglobülin ve iki hafif zincir immünoglobülin
içerebilir veya bir tek zincirli antikor olabilir. Plazma kallikrein baglayici proteinler,
hümanize, CDR asili, kimerik, bagisikligi alinmis veya in vitro üretilmis antikorlar gibi
rekombinan proteinler olabilir ve opsiyonel olarak insan germ hatti immünoglobülin
dizilerinden türetilen sabit bölgeler içerebilir. Bir uygulamada, plazma kallikrein
baglayici protein bir monoklonal antikordur.
Bazi uygulamalarda, kallikrein baglayici protein plazma kallikreine, örnegin, insan
plazma kallikreine ve/veya murin kallikreine baglanir ve önler. Emsal plazma kallikrein
uygulamalarda, kallikrein baglayici protein, sunlardan olusan gruptan seçilen
antikorlarin hafif ve/veya agir zincirlerine sahip bir antikordur (örnegin, bir insan
veya baglanir. Bazi uygulamalarda, plazma kallikrein baglayici protein DX-2930'dur.
DX-2930'un agir zincir ve hafif zincir degisken bölge dizileri asagida verilmektedir.
DX-2930 Agir zincir degisken bölgesi:
Bazi yönlerde, bir kallikrein baglayici polipeptit (örnegin, inhibitör polipeptit) plazma
kallikreinin aktif formuna baglanir. Emsal polipeptit plazma kallikrein ajanlari, U.S.
açiklanmaktadir. Bazi uygulamalarda, kallikrein baglayici polipeptit DX-88'dir
(KALBITOR® (ekalantid) olarak da bilinen bir dogal olusuqu-olmayan kallikrein
inhibitörü, SEQ ID No:8). Bazi uygulamalarda, kallikrein inhibitörü SEO ID NO:8'in 3-
60 amino asitlerinin yaklasik 58-amin0 asitli bir dizisini veya SEQ ID NO:8'in 60-amino
asitlik dizisine sahip DX-88 polipeptidini içerir veya bundan olusur.
(ilii Alu Mal Hu Ser Ph»` (Sa i\l;i Pin` [ _xx Alu !hp (hp (ily Pm (5," .Mg .›'\|.^i Alu ”h
(:11: (il) Asil (iln Am Ar:: Plic (ilii Sci' Lou (ilu Ulu( _h 1.5` l._\-~. NICI (`_u` llii' Ari;
Asi" ISI-:Q IL) NLHH
Bazi uygulamalarda, plazma kallikrein baglayici protein, EPlKAL-2'dir (SEQ lD No:9),
burada dogal olarak olusmayan kallikrein inhibitörü, 58 kalinti amino asit dizisine (SEO
39lda Glu ila Gly'nin amino asit substitüsyonlarina sahiptir. EPIKAL-2'nin dizisi asagida
gösterilir:
HI.` Pi'i'› Ari; `l rp Plic l'hc ,~\\ii ll: l'hc `Ilii' .Mg (ilii (5.` (ilii (ilii l'hc Sci' lsr (ils- (il).
('_xx (jly (jljv r\.\l`l (jln Axii `^\r±.' PIR` (jlii S-:r Lcii Ulu (ilu (3" [5" lg› \'1c1(`_\-,x'l`hr
Ari; Asp (Sl-.Q ll.) NOT!)
Bazi uygulamalarda, bir plazma kallikrein baglayici proteini, burada tarif edilen bir
kallikrein baglayici proteini, burada tarif edilen bir baglayici proteine, HC ve/veya LC
olabilir. Bazi uygulamalarda, bir plazma kallikrein baglayici proteini, burada tarif edilen
bir baglayici proteine, HC ve/veya LC CDRilerinde (örnegin, HC ve/veya LC CDR 1, 2
yüksek dizi özdesligine sahip olabilir. Bazi uygulamalarda, bir plazma kallikrein
baglayici proteini, burada tarif edilen bir baglayici proteine, sabit bölgede (örnegin,
Bazi yönlerde, bir küçük molekül plazma kallikreinin aktif formuna baglanir.
Bradikinin BZ Reseptörü Antagonistleri
Bazi uygulamalarda, bir bradikinin 82 reseptörü antagonisti bir süjeye verilir. Emsal
bradikinin BZ reseptörü antagonistlerine, natif bradikininin bradikinin 82 reseptörüne
baglanmasini bloke eden 10 amino asit ihtiva eden bir peptidomimetik ilaç olan
lncabitant (Firazyr®) dahildir.
C1 -INH Replasman Ajan/ari
Bazi uygulamalarda, bir replasman C1-INH ajani bir süjeye verilir. Emsal C1-INH
replaSman ajanlari kamuya açiktir ve örnegin, bir saflastirilmis insan pastörize nano-
filtre edilmis C1-INH konsantrati olan Berinert® dahildir.
ÖRNEKLER
Örnek 1: Klevaj edilmis kininojen
Temas sisteminin analizine dayali olarak, klevaj edilmis kininojen, temas sistemi
aktivasyonunun ölçülmesi için uygun bir biyomarkördür. Daha önceden, klevaj edilmis
kininojenin HAE ataklari esnasinda, sirozda ve temas sistemi aktivasyonunun bir
sonucu olarak sepsis esnasinda yükseldigi gösterilmistir. Antikor faj görüntüleme
kitapliklari, bozulmamis kininojen üzerindeki tüketmeyle kombinasyon halinde klevaj
edilmis kininojene karsi çevrildi. Paralel olarak, fareler, klevaj edilmis kininojenle ve
hibridom hücre çizgilerinden elde edilen monoklonal antikorlarla bagisiklandi. Her iki
çaba da, hem klevaj edilmis hem bozulmamis kininojene baglanan bir dizi farkli
monoklonal antikor saglamis ancak yalnizca klevaj edilmis kininojene baglanmis hiç
antikor saglamamistir.
Bir dizi antikor bir Western blot analizinde uygunluk için taranmis ve fare mAb (klon
11H05) dahil olmak üzere iyi isleyen birçogu Sekil 2'de gösterilmistir. Bu analizin, insan
plazma numunelerinde klevaj edilmis kininojeni saptayabildigi asikardir. Dahasi, Sekil
2'deki veriler, camda plazma toplanmasinin, temas aktivasyonunu ve kininojen klevaj
edilmesini engellemek için yeterli oldugunu onaylamaktadir.
Hasta plazmasinda klevaj edilmis kininojen saptamak için kütle spektrometri esasli
yaklasim da kulanilabilir. Bu yaklasimda, bir bagisiklik kininojeni hasta numunesinden
adzorbe eder, ayristirilmis kininojeni proteolitik olarak sindirir ve peptit fragmanlarini
LC-MC ile analiz eder.
Örnek 2: Bozulmamis ve Klevaj edilmis kininojen
Bir hastadan bir atak esnasinda elde edilen ve bir anti-proteaz kokteyli ihtiva eden
sitratlanmis plazma tüplerinde toplanan plazmanin, bozulmamis kininojenin (yani, 1-
zincirli) miktarinda bir azalma sergiledigini göstermek için Western blot kullanildi (Sekil
3). Klevaj edilmis kininojende (yani, 2-zincirli) bir artis gözlemlendi.
Örnek 3: Klevaj edilmis Kininojen Seviyelerinin Ölçülmesi için Analiz
Bozulmamis (1-zincirli) ve klevaj edilmis (2-zincirli) yüksek moleküler agirlikli
kininojenin (HMWK) saptanmasi için bir Western blot analizi, Licor saptanmasi
kullanilarak daha da optimize edildi. Burada tarif edilen bu analiz, hayvanlar 2-zincirli
HMWK ile bagisiklanarak ve ELISA ile hem 1-zincirli hem 2-zincirli HMWK'ye karsi
hibridom füzyonlarini tarayarak hibridom teknolojisiyle üretilmis olan bir fare
monoklonal antikorunu (klon 11H05) kullanmaktadir. 11H05 mAb, bir Western blot
analizindeki performansina ve HMWK'nin hafif zincirine spesifik olarak baglanabilme ve
agir zincirine baglanmama yetisine dayali olarak seçildi. Hafif zincir baglayicilari tercih
edildi çünkü bir pKal substrati olmayan diger plazma kininojeninde (düsük moleküler
agirlikli kininojen, LMWK) hafif zincir mevcut degildir. analiz ayrica, cam tüplerde
toplama temas sistemi aktivasyonuyla sonuçlandigi için plazmanin plastik tüplerde
toplanmasinin önemini ortaya koymak için de kullanildi (Sekil 4).
Bazi örneklerde, burada tarif edilen Western blot analizinde asagidaki materyaller ve
kosullar kullanildi.
Materyaller
. XCeII SureLock® Mini-Cell, Life Technologies (lnvitrogen), Kat. # El0001
o Gel Box Power Supply
. iBIot® Western Blotlama Aktarma Cihazi, Life Technologies (Invitrogen), Kat. #
iBIot® Aktarma Yigini, nitroselüloz, mini, Life Technologies (Invitrogen), Kat. #
Matrix Laboratories Impact 2 Çok kanalli Pipet veya muadili
Rainin Pipetman, çesitli hacim araliklari, Rainin, Kat #: P-10, P-20, P-100, P-
200 ve P-1000 veya muadili
Sema Çizelgeli 2-8°C Sogutucu
Filtre Sistemleri, Coming, Kat # 431096 veya
muadili
Deiyonize ve saflastirilmis su (DI su), Ricca Chemical, Kat # 9150-5 veya
muadili
NuPAGE %7 Tris-Asetat Jelleri, 15-göz, Life Technologies (Invitrogen), Kat. #
EAOSSSSBox
Tris-Asetat SDS Çalistirma Tamponu (20X), Life Technologies (Invitrogen), Kat.
NuPAGE Numune Indirgeme Ajani (10X), Life Technologies (Invitrogen), Kat.
NuPAGE Numune Tamponu (4X), Life Technologies (Invitrogen), Kat. #NP0007
NuPAGE 4-12% Bis-Tris Jeller, 15-göz, Life Technologies (Invitrogen), Kat. #
MES SDS Çalistirma Tamponu (20X), Life Technologies (Invitrogen), Kat.
Odyssey Bloklama Tamponu, LI-COR, Kat. #927-40000
Tween20, Sigma, Kat. #P1379
Fosfat tamponlu salin pH 7,4, Sigma, Kat# P-3813 veya muadili
Tris, Fisher Scientific, Kat. # T393-5000
Sodyum Klorür, JT Baker, Kat. # 3824-19
6N Hidroklorik Asit, EMD, Kat. #HX0603M-6
SM Sodyum Asetat Tamponu pH 5,2, Teknova, Kat. #80296
Bovin Serum Albümini (BSA), IgG ve Proteaz Içermez, Jackson
Fare monoklonal anti-LC HMWK antikor klonu, Klon 11H05 (#16), 1,4 mg/mL,
Odyssey Tek-Renkli Moleküler Agirlik Isaretleri, LI-COR, Kat. # 928-40000
Anti-Proteaz Inhibitörü Kokteyli (10X), Dyax tarafindan Tedarik edilmistir
Faktör Xlla, 1,47 mg/mL (, Enzyme Research Labs, Dyax tarafindan
Tedarik edilmistir
Kininojen Yetersiz Plazma, Hyphen-Biomed, Dyax tarafindan Tedarik edilmistir
- Tek-Zincirli HMWK, 1,61 mg/mL, Enzyme Research Labs, Kat. #HK 2700
. Iki-Zincirli HMWK, 2,01 mg/mL, Enzyme Research Labs, Kat. # HK 2362
. Normal Insan Plazmasi Numuneleri, HAE Hasta Numuneleri ve Biyo-islah
Numuneleri Dyax tarafindan tedarik edilmistir
. DX2930, Dyax, Lot# PURDX1-LO1, 32,1 mg/mL
Protokol Ana hatlari:
indirgenmemis Test
Numunesi
Hazirlanmasi
Jel Yükleme ve
Çalistirma
Jel Aktarilmasi
indirgenmemis test numuneleri, 15 pL ~%5 test
numunelerine 5 pL 4X numune tamponu eklenerek
hazirlanir. Numuneler 5 dakika süreyle 95°C'ye isitilir.
Numuneler test numunesi mikro-santrifüj tüp kapagindan
herhangi bir yogunlasmanin yok edilmesi için kisaca
santrifüjlenir.
indirgenmis numuneler %4-12 Bis-tris jeller kullanilarak
çalistirilir ve indirgenmemis numuneler %7 Tris-Asetat
jeller kullanilarak çalistirilir. Bir tek-renkli protein
markörü, her birjelin kulvar1'inin içine yüklenir. Bir QC
numunesi, her birjelin kulvar 2'sinin içine yüklenir.
indirgenmis ve indirgenmemis test numuneleri, uygun jel
tipinin 3-15 kulvarlarinin içine yüklenir. Jeller ~75 dakika
süreyle 125Vtde çalistirilir.
Her birjel, iBlot aktarma yiginlari, mini ve iBlot
kullanilarak bir nitroselüloz membranina aktarilir. Jelin
ve aktarma yigininin iBIot'a eklenmesinden sonra PO
programi seçilir ve ~7 dakika süreyle çalistirilir. Aktarma
tamamlandiktan sonra, membran, 20 mL Odyssey
bloklama tamponu ihtiva eden bir plastik tepsiye aktarilir.
Membranlar 20 mL Odyssey bloklama tamponuyla
Membran Bloklama bloklanir. Membranlar 1 saat süreyle bir plaka
çalkalayici üzerinde bloklama tamponuyla inkübe edilir.
Fare anti-HMWK LC mAb, %O,2 Tween-20 ihtiva eden
Fare anti-HMWK Odyssey bloklama tamponu içinde 1 pg/mL'ye seyreltilir.
LC mAb Bloklama tamponu her bir membrandan atilir. 1 pg/mL
Hazirlanmasi ve birincil antikor solüsyonunun 20 mL'lik bir hacmi her bir
Eklenmesi membrana eklenir ve membranlar 1 saat süreyle oda
sicakliginda bir plaka çalkalayici üzerinde inkübe edilir.
Keçi anti-fare IR Boyasi 680 1:15.00'Iik bir seyreltmede
hazirlanir. Keçi anti-fare IR Boyasi 680 ilk olarak 1:10
seyreltmede, ardindan 1:15.000'Iik bir nihai seyreltme
Keçi anti-Fare IR
Boyasi 680
Hazirlanmasi ve
için 1:1.500'Iük bir seyreltmede hazirlanir. Keçi anti-fare
bloklama tamponu içinde hazirlanir. ikincil antikor
Eklenmesi
solüsyonu her bir membrana eklenir ve membranlar 1
saat süreyle oda sicakliginda bir plaka çalkalayici
üzerinde inkübe edilir.
PBS ile bir durulamadan sonra, membranlar Li-Cor
Membran Okuma .. _ _ __
Odyysey uzerine yerlestirilir ve membranlar okunur.
Membranlar, birincil antikor inkübasyonundan ve ikincil
antikor inkübasyonundan sonra yikama basina 5 dakika
Membran Yikama __ __
sureyle toplamda dort yikamayla %0,1 Tween-20 ihtiva
eden PBS ile yikanir.
mAb 11H05'ib 1-zincirli ve 2-zincirli HMWK'yi saptama yetisinin analiz edilmesi için,
saflastirilmis proteinler, normal plazmada gözlemlenen seviyeleri içeren
konsantrasyonlarda HMWK-yetersiz plazma içine saplandi (Sekil 5). Indirgeyici kosullar
altinda, 11H05'in 1-zinciri 2-zincirli HMWK`den daha yüksek hassasiyetle saptadigi
asikardi. mAbinin HMWK'nin iki biçimi için farkli hassasiyeti hesaba katilarak, bu analiz,
hasta plazmasinda 1-zincirli ve 2-zincirli HMWK konsantrasyonunun miktarini dogru
sekilde belirlemek için kullanilabilir. Alternatif olarak, 2-zincirli sinyal yüzdesi, temas
aktivasyonu içerdiginden süphelenilen plazma numunelerinde belirlenebilir ve normal
saglikli bireylerden alinan plazmaninkiyle karsilastirilabilir. Bu ikinci yaklasim
kullanilarak, bu analiz farkli hastaliklardan gelen numunelerin taranmasi ve temas
sistemi aktivasyonuyla iliskili hastaliklarin tanimlanmasi için kullanilabilir.
Analiz-arasi ve içi kesinlik ve dogruluk testleri de gerçeklestirirli. Indirgeyici-olmayan ve
indirgeyici kosullar altinda, analiz, test edilen tüm parametler içerisinde 5%25'Iik CV
degeri yüzdelerini kabul edilir sekilde gerçeklestirdi.
Donma-çözme stabilite testleri de normal insan plazmasi üzerinde gerçeklestirildi.
HMWKinin, O ile 3 donma-çözme döngüleri arasinda çözünüyor gibi görünmedigi
belirlendi.
Western blot analizi, asiri temas sistemi aktivasyonunun ve pKaI aktivitesinin neden
oldugu bilinen bir hastalik olan herediter anjiyoödemi (HAE) olan hastalardan alinan
plazma numuneleri kullanilarak dogrulandi. Sekil 6'de gösterildigi üzere, HAE
plazmasindaki klevaj edilmis HMWK yüzdesi, normal plazmaninkinden kayda deger
sekilde daha yüksek olarak yaklasik %20'dir. Bir HAE atagi esnasinda, bu analiz
kullanilarak saptanan klevaj edilmis HMWK yüzdesi daha da yükselir. Bu veri, sakin
(bazal) hastalik durumu esnasinda HAE plazmasinda artan klevaj edilmis HMWK'yi
bariz bir sekilde ortaya koymaktadir. Bu analiz bu nedenle, klevaj edilmis kininojenin
normal seviyelerin geri dönme seviyelerinin bir analizi vasitasiyla terapötik pKaI
inhibitörlerin etkililiginin izlenmesi için kullanilabilir.
Negatif yüklü yüzeylerin veya fosfolipitler veya polifosfatlar gibi partiküllerin temas
sisteminin etkili aktivatörleri oldugu, bunun da aktif pKaI olusumuna ve 1-zinxcirli
HMWK'nin proteolizinden bradikinin üretilmesine yol açtigi bilinmektedir. HAE
ataklarinda temas sistemi aktivasyonuna yol açan fizyolojik yüzeyin tanimi
bilinmemektedir. Ancak, HAE ataklari FXIIa üretimiyle iliskilidir. Dekstran sülfat veya
kaolin gibi yüklü maddelerden ziyade FXIIa'nin bir temas sistemi baslaticisi olarak
kullanilmasi, daha fazla çogaltilabilir temas sistemi aktivasyonunu ve optimize analiz
performansini saglar. FXIIa konsantrasyonu ve tepkime kosullari, HAE hastalarinda
gözlemlenen klevaj edilmis kininojen yüzdesini (~%2050) tahim etmek için belirlendi
(Sekil 7, Tablo 1).
Tablo 1 - FXlla Muameleli Insan Plazma Numunelerinin Licor Sinyali
Yogunluklari*
Faktör Xlla Aktivasyon Kosullarinin indirgenmis Karsilastirmasi
Konsantrasy
Kulvardaki Iki-Zincir %: Iki-Zincirli Sinyal Toplami/Toplam Kulvar Sinyali
Towami
Inkübasy Inkübasy Tek-
Sicakligi
on Süresi Zinci Zinc
Iki- Topla
r(46 Sinyal
300 30002
2370 28280
2370 26110
1220 22567
3950 15490
2950 16040
3770 16320
2780 19350
9420 16860
6920 16730
7560 18400
2520 17130
Kulvarda Muamel
Edilmem
Sinyalde
Faktör Xlla Aktivasyon Kosullarinin indirgenmis Karsilastirmasi
FXlla Inkübasy Inkübasy Tek- Iki- Iki- Topla Kulvarda Muamel
Konsantrasy on on Süresi Zinci Zinc Zinci m ki Iki- e
on (nM) Sicakligi (dakika) r ir r(46 Sinyal Zincir% Edilmem
(56 kDa) is
kDa) Sinyalde
Muamele Edilmemis Sinyalden Iki-Zincir %: 1 - (Muamele Edilmis Tek-Zincirli
Sinyal/Muamele Edilmemis Tek-Zincirli Sinyal)
* Sekil 5“teki Western Blot numunelerin sinyal analizi.
2,5 nM'lik bir FXIIa konsantrasyonu ve optimize tepkime kosullari kullanilarak, 15
erkekten ve 15 disiden alinan normal insan numuneleri 10 ug/mL (pKaI aktivitesinin
kuvvetli bir antikor inhibitörü olan) DX-2930 varliginda veya yoklugunda incelendi ve 2-
zincirli HMWK yüzdesi belirlendi (Tablo 2) Bu analizin, plazmada HMWK proteolizinin
plazma kallikrein önlenmesini saptayabildigi asikardir. DX-2930'un, bu analizde, HAE
ataklarinin tedavisi için onaylanmis bir pKaI inhibitörü olan ekalantide yaklasik olarak
esdeger bir kuvvet sergiledigi gösterilmistir (Sekil 8). Bu in vitro analizde ekalantide esit
kuvvet, esdeger ilaç seviyelerinin HAE'de esit sekilde etkili olabilecegini ortaya
koymaktadir.
Tablo 2. Kulvardaki Iki-Zincirin Ortalama Yüzdesi, indirgenmis ve Indirgenmemis
Kulvardaki Iki-Zincirin Ortalama Yüzdesi
Numune Xlla (nM) DX2930(uglmL) indirgenmis Indirgenmemis
Erkek Ortalamasi 2,5 0 %42,0 %61,2
Disi Ortalamasi
2,5 0 %43,8 %502
Kulvardaki Iki-Zincirin Ortalama Yüzdesi
Numune Xlla (nM) DX2930 (pglmL) Indirgenmis Indirgenmemis
* 15 erkek ve 15 disiden plazma ortalamasi.
Ülseratif koliti (UC) ve romatoid artiriti (RA) olan hastalardan numuneler de bu western
blot analizi kullanilarak test edildi. Hasta plazma numuneleri Bioreclamation
kurulusundan temin edildi ve plastik tüplerde antikoagülanda toplandi. klevaj edilmis
kininojen yüzdesinin, normal kontrol hastalarina kiyasla hem UC hem RA hastalarinda
yükselmis oldugu bulundu (Sekil 9, Tablo 3).
Tablo 3. Ülseratif Kolit ve Romatoid Artirit Numunelerinin Western Blot Analizinin Kisa
Açiklamasi
Kulva K2EDTA ve Sodyum Sitrat, Ülseratif Kolitte ve Romatoid Artiritte
r indirgenmis Hastalik Durumu Numuneleri
Numune anti- Hastalik HMWK Sinyali Kulvardak
Koagula Tek- Iki- Iki- Topla i lki-Zincir
Zincir Zinci Zincir m
(110 r (56 (46 Sinyal
Moleküler
Agirlik
Standartlar
1-zincir ve
2-zincir
Standartlar
Kulva K2EDTA ve Sodyum Sitrat, Ülseratif Kolitte ve Romatoid Artiritte
Indirgenmis Hastalik Durumu Numuneleri
Koagüla
Sodyum
K2 EDTA
Sodyum
Sodyum
Sodyum
Sodyum
K2 EDTA
K2 EDTA
K2 EDTA
Sodyum
Sodyum
Hastalik
Normal
Ülseratif
Ülseratif
Ülseratif
Ülseratif
Ülseratif
Romatoi
Romatoi
Romatoi
Romatoi
Romatoi
HMWK Sinyali
(110 r (56
O 3030
O 1220
0 1700
O 1 170
88 N/A
6600 1860
Sinyal
25875
21770
19314
1 2440
16396
16540
Kulvardak
i Iki-Zincir
Crohn hastaligi (CD) olan hastalardan numuneler de western blot analizi kullanilarak
test edildi. Hasta plazma numuneleri Bioreclamation kurulusundan temin edildi ve
plastik tüplerde antikoagülanda toplandi. Klevaj edilmis kininojen yüzdesinin, normal
kontrol hastalarina kiyasla CD hastalarinda yükselmis oldugu bulundu (Sekil 10, Tablo
Tablo 4. Crohn hastaligi Numunelerinin Western Blot Analizinin Kisa Açiklamasi
Kulva Numune anti- Hastali HMWKSinyali Kulvarda
r r r(56 r(46 Sinyal
(150 (
Moleküler
Agirlik
Standartla
1-zincir ve
2-zincir
Standartla
A2992, Sodyum 1290
BRH74504 Sodyum
BRH74507 Sodyum 1230
BRH71502 hastali 1210
Kulva Numune anti- Hastali HMWKSinyali Kulvarda
r magma k Tek- Tek- Iki- Iki- Topla ki'ki'
r r r(56 r(46 Sinyal
(150 (
7 hastali O
BRH71502 hastali
BRH71502 hastali 1410
BRH71503 hastali
Örnek 4: FXlla'nin ve DX Numuneleri
üzerindeki etkileri
Bu deneyin amaci, DX-2930'un FXIIa temas sistemi aktivasyonu üzerindeki etkilerini
belirlemekti. DX2930, iki-zincirin bir-zincire ölçülen oranini FXIIa ile tedaviye yanit
olarak indirgeyerek, plazma kallikreini önleyebilir. Bes erkekten ve bes disiden sodyum
sitratlanmis NHP numuneleri muamele edilmemis olarak, FXIIa aktivasyonundan sonra
ve numuneler 10 ug/mL DX-2930 ile ön-muamele gördügünde FXIIa aktivasyonundan
sonra test edildi. Her bir numune grubu indirgenmemis ve indirgenmis kosullar altinda
analiz edildi.
Prosedür:
Numune Hazirlanmasi
1. NHP numuneleri donmus depodan çikarildi ve oda sicakligina dengelenmeleri
mg/mL) 496,65 uL 1X TBS'ye eklenmesiyle hazirlandi.
uL 1:10 ara maddenin 195.55 uL TBS'ye eklenmesiyle hazirlandi.
eklenmesiyle 10 pg/mL DX2930 ile hazirlandi.
. Her bir NHP numunesi, 2 uL 56,25 nM FXIIa solüsyonunun her bir numunenin 43
uL'sine eklenmesiyle 2,5 nM FXIIa ile, DX2930 ile veya olmadan hazirlandi.
6. Numuneler 37°C`de 10 dakika süreyle FXIIa ile inkübe edildi. Tepkime 5 uL 10X
anti-proteaz inhibitörünün eklenmesiyle durduruldu.
7. FXIIa, DX2930 ve FXIIa içeren her bir NHP numunesi ve muamele edilmemis
numune, 5 uL numunenin 95 iJL TBS'ye eklenmesiyle %5 plazmaya seyreltildi.
8. Indirgenmemis numuneler 5 uL 4X numune tamponunun 15 uL numuneye
eklenmesiyle hazirlandi.
9. indirgenmis numuneler 5 uL 4X numune tamponunun ve 2 |JL 10X indirgeyici
ajanin 13 uL numuneye eklenmesiyle hazirlandi.
. Numunelerin tamami bir isi bloku kullanilarak 5 dakika süreyle 95°C'de isitildi.
Jel Yüklemesi, Çalistirmasi ve Aktarilmasi
1. Bir hacim 1 L 1X Tris-Asetat SDS çalistirma tamponu, 50 mL 20X Tris-Asetat
SDS çalistirma tamponunun 950 mL DI suya eklenmesiyle hazirlandi.
2. Bir hacim 1L 1X MES çalistirma tamponu, 50 mL 20X MES SDS çalistirma
tamponunun 950 mL DI suya eklenmesiyle hazirlandi.
3. analiz tamponu (%02 Tween içeren Odyssey Bloklama tamponu), 1 mL Tween-
'nin 499 mL Odysset bloklama tamponuna eklenmesiyle hazirlandi.
4. Yikama tamponu (%. 1 paket PBS'nin ve 1 mL Tween-
201nin 900 mL DI suya eklenmesiyle hazirlandi. Solüsyon iyice karistirildi ve DI su
kullanilarak 1 L'ye getirildi. Nihai solüsyon 0,22 uM'Iik bir PES filtrasyon sistemi
üzerinden filtre edildi.
. Bir hacimlik 4 pL tek-renkli protein markörü, iki jelin kulvar 1'ine eklendi.
6. 13 uL indirgenmemis numunelerin hacimleri. %7 Tris-Asetat jelinin uygun
kulvarlarina eklendi.
7. 13 uL indirgenmis numunelerin hacimleri, %4-12 Bis-Asetat jelinin uygun
kulvarlarina eklendi.
8. Jeller 125 voltta ~75 dakika süreyle çalistirildi.
9. Her birjel münferit olarak, iBlot mini aktarma yiginlari ve iBlot aktarma sisteminin
PO Programi kullanilarak bir membrana aktarildi.
. Her bir membran, 20 mL Odyssey blokleme tamponu ihtiva eden bir plastik
tepsiye aktarildi. Membranlar oda sicakliginda 1 saat süreyle bir plaka çalkalayici
üzerinde Odyssey bloklama tamponunda inkübe edildi.
11. 1 ug/mL'lik bir birincil antikor solüsyonu, 28,58 uL fare anti-HMWK mAb, klon#
12. Bloklama tamponu plastik tepsilerden çikarildi. Bir hacimlik 10 mL birincil
antikor solüsyonu her bir tepsiye eklendi ve membranlar oda sicakliginda 1 saat
süreyle bir plaka çalkalayici üzerinde inkübe edildi.
13. Bir 1:10 ara madde keçi anti-fare IgG IRDye 680, 5 uL keçi anti-fare IgG IR
Boyasinin 45 uL analiz tamponuna eklenmesiyle hazirlandi. Ikincil antikor
ara maddesinin 39.973,34 pL analiz tamponuna eklenmesiyle hazirlandi.
14. Birincil antikor solsüyonu tepsilerden çikarildi.
. Her bir membran bes dakika süreyle 20 mL yikama tamponuyla yikandi ve
daha sonra yikama solüsyonu atildi. Yikama toplamda 4 yikama olarak tekrarlandi.
16. Bir hacimlik 20 mL ikincil antikor solüsyonu her bir tepsiye eklendi ve
membranlar oda sicakligin 1 saat süreyle bir plaka çalkalayici üzerinde inkübe
17. Ikincil antikor solüsyonu tepsilerden çikarildi.
18. Her bir membran bes dakika süreyle 20 mL yikama tamponuyla yikandi ve
daha sonra yikama solüsyonu atildi. Yikama toplamda 4 yikama olarak tekrarlandi.
19. Her bir membran PBS ile 5 dakika süreyle durulandi.
. Membranlar LiCor Odyssey CLX kullanilarak tarandi.
Sonuçlar:
Tablolar 5 ve 6 indirgenmemis numune verisini ihtiva etmektedir. Tablolar 7 ve 8
indirgenmis numune verisini ihtiva etmektedir. Klevaj edilmis HMWK yüzdesi iki yöntem
kullanilarak hesaplandi. Kulvardaki iki-zincirin yüzdesi, asagidaki denklem kullanilarak
belirlendi: Iki-Zincirli Sinyalin Toplami/Toplam Sinyalin Toplami. Muamele edilmemis
sinyalden iki-zincirin yüzdesi, asagidaki formül kullanilarak belirlendi: 1 - (Muamele
Edilmis Tek-Zincir SinyaIi/Muamele Edilmemis Tek-Zincir Sinyali). Muamele edilmis ve
edilmemis numuneler, ayni hazirlikta hafifçe daha yüksek plazma yüzdesine sahip
uamele edilmemis sinyallerden hafifçe farkli olarak hazirlandi. Bu nedenle, muamele
edilmemis numuneler, muamele edilmemis numunelerden hafifçe daha yüksek genel
sinyal üretti. Kulvardaki iki-zincir yüzdesi degeri, muamele edilmis ve edilmemis
numuneler arasindaki hafifçe farkli numune hazirlanmasi nedeniyle klevaj edilmis
HMWK yüzdesinin belirlenmesi için kullanildi.
Tablo 16, aktivasyon ve önleme sonuçlarinin bir özetini ihtiva etmektedir. Indirgenmis
kosullar altinda, muamele edilmemis erkek ve disi NHP numuneleri, sirasiyla, ortalama
NHP numuneleri, sirasiyla, ortalama %42,0 ve %43,8 klevaj edilmis HMWK ihtiva etti.
DX-2930 ile ön-muamele edilen ardindan FXIIa ile muamele edilen erkek ve disi NHP
numuneleri, sirasiyla, ortalama %29,5 ve %26,4 klevaj edilmis HMWK ihtiva etti.
Indirgenmemis kosullar altinda, muamele edilmemis erkek ve disi NHP numuneleri,
sirasiyla, %320 ve %21,5 klevaj edilmis HMWK ihtiva etti. FXIIa ile muamele edilen
erkek ve disi NHP numuneleri, sirasiyla, ortalama %612 ve %502 klevaj edilmis
HMWK ihtiva etti. DX-2930 ile ön-muamele edilen ardindan FXIIa ile muamele edilen
erkek ve disi NHP numuneleri, sirasiyla, ortalama %43,6 ve %30,3 klevaj edilmis
HMWK ihtiva etti.
NHP numunelerinin FXIla ile muamele edilmesi, muamele edilmemis numunelere
kiyasla klevaj edilmis HMWK yüzdesini arttirdi. DX-293O ile ön-muamele edilen
ardindan FXIIa ile muamele edilen NHP numuneleri, yalnizca FXIIa ile muamele edilen
numunelerden daha az klevaj edilmis HMWK ancak muamele edilmemis numunelere
kiyasla hafifçe daha yüksek yüzdede klevaj edilmis HMWK üretti. indirgenmis muamele
edilmemis NHP numuneleri, indirgenmemis mualeme edilmemis NHP numunelerinde
daha az klevaj edilmis HMWK ihtiva etti. Ayrica, muamele edilmemis, FXIIa ile
muamele edilmis ve DX2930 ile ön-muamele edilmis ve ardindan FXIIa ile muamele
edilmis NHP numunelerinin, çogaltilabilir sonuçlar ürettigi de bulundu.
Tablo 5. FXIIa Aktivasyonunun Indirgenmemis DX2930 Inhibisyonu, Erkek
Numuneleri, Tek/Iki-Zincirli HMWK Sinyalleri, Toplam Sinyal, Iki-Zincirli HMWK
Yüzdesi
Erkek NHP'sinin Faktör Xlla ile Indirgenmemis Aktivasyonu, Faktör Xlla'nin
DX2930 ile Önlenmesi
Erkek NHP
Numunesi
DX293
HMWK Signal
(1 20k Da (1 00
17900 4670
8160 7750
12600 6620
19600 3450
10000 9430
15300 6480
22500 8570
11000
Sinyal
22570
17680
20032
23050
21570
22695
32170
24750
Kulvardak
i Iki-Zincir
Muamele
Edilmemi
Sinyalden
Iki-Zincir
Erkek NHP'sinin Faktör Xlla ile Indirgenmemis Aktivasyonu, Faktör Xlla°nin
DX2930 ile Önlenmesi
Erkek NHP
Numunesi
DX293
HMWK Signal
(120kDa (100 (90
6370 0 7390
1710 8310 O
Sinyal
26500
26860
20520
20160
33000
23650
22194
Kulvardak
i Iki-Zincir
Kulvardaki Iki-Zincir %'si: Iki-Zincir Sinyalinin Toplami/Toplam Kulvar
Sinyalinin Toplami
Muamele Edilmemis Sinyalden Iki-Zincir %'si: 1 - (Muamele Edilmis
Tek-Zincir SinyalilMuameIe Edilmemis Tek-Zincir Sinyali)
Muamele
Edilmemi
Sinyalden
Iki-Zincir
Tablo 6. FXIIa Aktivasyonunun Indirgenmemis DX2930 Önlenmesi, Disi
Numuneleri, TeklIki-Zincirli HMWK Sinyalleri, Toplam Sinyal, Iki-Zincirli HMWK
Yüzdesi
Disi NHP'nin Faktör Xlla ile Indirgenmemis Aktivasyonu, Faktör Xlla'nin DX2930
ile Önlenmesi
Disi NHP
Numunesi
DX293
HMWK Sinyali
(120kDa O kDa) r (90
Sinyal
17361
13460
14223
27677
26580
21225
34910
24580
29475
34791
29310
Kulvarda
(%255
Muamele
Edilmemi
Sinyalde
Disi NHP'nin Faktör Xlla ile Indirgenmemis Aktivasyonu, Faktör Xlla'nin DX2930
ile Önlenmesi
HMWK Sinyali Muamele
Disi NHP FXII DX293 Tek- iki- iki- Topla Kulvarda Ed“memi
Numunesi a 0 Zincir Zincir(10 Zinci m ki Iki- s
. . . Sinyalde
(nM) (ug/mL (120kDa OkDa) r(90 Sinyal Zincir _
Kulvardaki Iki-Zincir %'si: Iki-Zincir Sinyalinin Toplami/Toplam Kulvar
Sinyalinin Toplami
Muamele Edilmemis Sinyalden Iki-Zincir %'si: 1 - (Muamele Edilmis
Tek-Zincir Sinyali/Muamele Edilmemis Tek-Zincir Sinyali)
Tablo 7. FXIIa Aktivasyonunun indirgenmis DX2930 Önlenmesi, Erkek
Numuneleri, Tek/Iki-Zincirli HMWK Sinyalleri, Toplam Sinyal, Iki-Zincirli
HMWK,nin Yüzdesi
Erkek NHP'sinin Faktör Xlla ile indirgenmis Aktivasyonu, Faktör Xlla'nin DX2930
ile Önlenmesi
HMWK Sinyali
Erkek NHP FXIIa DX2930 Tek- Iki- Iki- Toplam Kulvardaki Muamele
Numunesi (nM) (pglmL) Zincir Zincir Zincir Sinyal Iki-Zincir Edilmemis
(56 (46 %,Si Sinyalden
kDa) kDa) Iki-Zincir
Kulvardaki Iki-Zincir %'si: Iki-Zincir Sinyalinin Toplami/Toplam
Kulvar Sinyalinin Toplami
Muamele Edilmemis Sinyalden Iki-Zincir %'si: 1 - (Muamele Edilmis
Tek-Zincir SinyaIi/Muamele Edilmemis Tek-Zincir Sinyali)
Tablo 8. FXIIa Aktivasyonunun indirgenmis DX2930 Önlenmesi, Disi Numuneleri,
Tek/Iki-Zincirli HMWK Sinyalleri, Toplam Sinyal, Iki-Zincirli HMWK Yüzdesi
Disi NHP'nin Faktör Xlla ile indirgenmis Aktivasyonu, Faktör Xlla'nin DX2930 ile
Önlenmesi
Disi NHP
Numunesi
(nM) (ugImL)
2,5 10
2,5 10
2,5 10
2,5 10
2,5 10
HMWK Sinyali
17300
21300
13600
21900
11900
19000
29400
19600
25100
19900
12000
15000
(56 (46
2080 1240
4880 3450
3740 1960
1770 753
4280 2760
3990 1780
375 1850
5120 3430
3610 2440
525 966
5660 5130
4050 3260
500 688
2910 2560
1790 1350
Toplam Kulvardaki Muamele
Sinyal
20620
12430
15470
23823
16750
19370
24125
20450
25050
30891
30390
32410
21088
17470
18140
Iki-Zincir
9616J
Kulvardaki Iki-Zincir %'si: Iki-Zincir Sinyalinin Toplami/Toplam
KuNarShyamünTomami
Muamele Edilmemis Sinyalden Iki-Zincir %'si: 1 - (Muamele Edilmis
Tek-Zincir Sinyali/Muamele Edilmemis Tek-Zincir Sinyali)
Edilmemis
Sinyalden
Iki-Zincir
9639]
Tablo 9. Kulvardaki Iki-Zincir Ortalama Yüzdesi, indirgenmis ve Indirgenmemis
Kulvardaki Iki-Zincir Ortalama Yüzdesi
Numune Xlla(nM) DX2930(pglmL) indirgenmis Indirgenmemis
Örnek 6. FXIIa Aktivasyonunun DX-293O ve DX-88 Kullanilarak Önlenmesi
Bu deneyin amaci, DX-2930 ve DX-88'in FXlIa aktivasyonunun önlenmesi üzerindeki
2930 ve DX-88 ile ön-muamele edilen numunelere FXIla ile muamele edildi. Ön-
muamele edilmis numunelere ek olarak bir adet muamele edilmemis numune ve
yalnizca FXIla ile muamele edilmis iki numune de test edildi. Numuneler indirgenmis
kosullar altinda test edildi.
Prosedür:
hazirlandi ve karistirildi.
solüsyonu, 15 uL 4500 p/mL solüsyonunun 15 uL TBS'ye eklenmesiyle hazirlandi.
solüsyonu, 10 uL 270 ug/mL solüsyonun 14 pL TBS'ye eklenmesiyle hazirlandi.
3. DX-2930 ile ön-muamele edilmis bes plazma numunesi her bir DX2930
solüsyonunun 2 uL'sinin 41 uL NHP havuzuna eklenmesiyle hazirlandi.
solüsyonu, 15 uL 211,5 u/mL solüsyonunun 15 uL TBS”ye eklenmesiyle hazirlandi.
solüsyonun 18 uL TBSiye eklenmesiyle hazirlandi. Bir 5,4 ug/mL DX88 solüsyonu,
. DX-88 ile ön-muamele edilmis bes plazma numunesi her bir DX-88
solüsyonunun 2 uL'sinin 41 uL NHP havuzuna eklenmesiyle hazirlandi.
6. FXIIa”nin bir 1:10 ara maddesi, 5 uL stok solüsyonunun ( 45 uL
maddenin 195,55 pL TBS'ye eklenmesiyle hazirlandi.
nM FXIIa solüsyonunun her bir numuneye eklenmesiyle 2,5 nM FXlla ile muamele
8. Yalnizca FXIIa ihtiva eden iki numune, 2 uL TBS”nin ve 2 uL 56,25 nm FXIla
solüsyonunun 41 uL NHP havzuna eklenmesiyle hazirlandi.
9. Bir adet muamele edilmemis numune, 4 uL TBS'nin 41 uL NHP havuzuna
eklenmesiyle hazirlandi.
. FXIIa ihtiva eden numunelerin tümü 37°C'de 10 dakika süreyle inkübe edildi.
11. Bir hacimlik 5 uL anti-proteaz inhibitörü, muamele edilmemis numune dahil
olmak üzere her bir numuneye eklendi. Her bir kopya için toplam numune hacmi 50
12. Her bir numune 5 uL numunenin 95 uL TBS'ye eklenmesiyle ~%5 plazmaya
seyreltildi.
13. Numuneler 5 uL 4X numune tamponunun ve 2 uL 10X indirgeyici ajanin 13 uL
numuneye eklenmesiyle hazirlandi.
14. Numunelerin tamami 95°C'de 5 dakika süreyle bir isi blogu kullanilarak isitildi.
. Bir hacimlik 1L 1X MES çalistirma tamponu, 50 mL 20X MES SDS çalistirma
tamponunun 950 mL DI suya eklenmesiyle hazirlandi.
16. analiz tamponu (%0,2 Tween içeren Odyssey Bloklama tamponu), 1 mL
Tween-20'nin 499 mL Odyssey bloklama tamponuna eklenmesiyle hazirlandi.
17. Yikama tamponu (%O,1 Tween içeren PBS), 1 paket PBS'nin ve 1 mL Tween-
'nin 900 mL DI suya eklenmesiyle hazirlandi. Solüsyon iyice karistirildi ve DI su
kullanilarak 1 L'ye getirildi. Nihai solüsyon 0,22 uM'Iik bir PES filtrasyon sistemi
üzerinden filtre edildi.
18. Bir hacimlik 4 uL tek-renkli protein markörü iki jelin kulvar1'ine eklendi.
19. 13 uL indirgenmis numunelerin hacimleri, bir %4-12 Bis-Tris jelinin uygun
kulvarlarina eklendi.
. Jel 125 voltta ~75 dakika süreyle çalistirildi.
21. Jel, iBIot mini-aktarma yigini ve iBIot aktarma sisteminin PO Programi
kullanilarak bir membrana aktarildi.
22. Membran, 20 mL Odyssey bloklama tamponu ihtiva eden bir plastik tepsiye
aktarildi. Membran, Odyssey bloklama tamponu içinde oda sicakliginda 1 saat
süreyle bir plaka çalkalayici üzerinde inkübe edildi.
23. Bir 1 ug/mL birincil antikor solüsyonu, 14,29 uL fare anti-HMWK mAb, klon#
24. Bloklama tamponu plastik tepsiden çikarildi. Bir hacimlik 20 mL birincil antikor
solüsyonu membrana eklendi ve oda sicakliginda 1 saat süreyle bir plaka
çalkalayici üzerinde inkübe edildi.
. Keçi anti-fare IgG IRDye 680'in bir 1:10 ara maddesi, 5 uL keçi anti-fare lgG ID
Boyasi 680`in 45 uL analiz tamponuna eklenmesiyle hazirlandi. Ikincil antikor
analiz tamponuna eklenmesiyle 1:15.000'Iik bir seyreltide hazirlandi.
26. Birincil antikor solüsyonu tepsiden çikarildi.
27. Membran bes dakika süreyle 20 mL yikama tamponuyla yikandi ve yikama
solüsyonu atildi. Yikama toplamda 4 yikama olarak tekrarlandi.
28. Bir hacimlik 20 mL ikincil antikor solüsyonu membrana eklendi ve oda
sicakliginda 1 saat süreyle bir plaka çalkalayici üzerinde inkübe edildi.
29. Ikincil antikor solüsyonu tepsiden çikarildi.
. Membran bes dakika süreyle 20 mL yikama tamponuyla yikandi ve yikama
solüsyonu atildi. Yikama toplamda 4 yikama olarak tekrarlandi.
31. Membran PBS le 5 dakika süreyle durulandi.
32. Membran LiCor Odyssey CLx kullanilarak tarandi.
Sonuçlar:
Tablo 10, DX-2930 ve DX-88 önleme deneyinin sonuçlarini ihtiva etmektedir. Iki-
zinoirin yüzdesi her bir kulvar içinde hesaplandi ve muamele edilmis sinyalin muamele
edilmemis sinyalle karsilastirilmasiyla hesaplandi. Bu karsilastirma için. kulvardaki iki-
zincirin yüzdesi kullanildi. Muamele edilmemis NHP havuzu, %3,8`lik bir iki-zincir yüzde
degeri üretti. NHP havuzu yalnizca FXIIa ile muamele edildiginde, iki kopya numune,
numuneler, DX-88 ile hazirlanan numunelere kiyasla iki-zincir degerlerinin hafifçe daha
numuneler, sirasiyla, %22,3 ve %23,9 iki-zincir degeri yüzdesi gösterdi. Bu degerler,
yalnizca FXIIa ile muamele edilen numunedeki iki-zincir degeri yüzdesine çok yakindir.
DX-2930 ile ön-muamele edilen numuneler, DX-88 ile ön-muamele eidlen
numunelerden hafifçe daha düsük iki-zincir deger yüzdesi olusturdu.
Tablo 10. FXlla'nin DX-2930 ve DX-88 kullanilarak Önlenmesi, HMWK Sinyalleri,
Iki-Zincirli HMWK'nin Yüzdesi
FXlla Temas Aktivasyonunun DX-88 ve DX-2930 kullanilarak önlenmesi
HMWK Sinyali
FXlla DX2930 DX88 Tek- Iki- Iki- Toplam Kulvardaki Muamele
(nM) (pglmL) (pglmL) Zincir Zincir Zincir Sinyal Iki-Zincir Edilmemis
(110 (56 (46 %'si Sinyalden
kDa) kDa) kDa) Iki-Zincir
FXlla Temas Aktivasyonunun DX-88 ve DX-2930 kullanilarak önlenmesi
HMWK Sinyali
(110 (56 (46
Toplam
Sinyal
25870
23878
23441
24980
25930
25610
Kulvardaki
Iki-Zincir
Kulvardaki Iki-Zincir %'si: Iki-Zincir Sinyalinin Toplami/Toplam
Kulvar Sinyalinin Toplami
Muamele Edilmemis Sinyalden Iki-Zincir %'si: 1 - (Muamele Edilmis
Tek-Zincir SinyaIiIMuameIe Edilmemis Tek-Zincir Sinyali)
Muamele
Edilmemis
Sinyalden
Iki-Zincir
Örnek 7. HAE, RA, UC ve CD Hastasi Numunelerinde klevaj edilmis Kininojen
Seviyelerinin Belirlenmesi
Bu deneyin amaci, hereditet anjiyoödemi (HAE) olan hastalardan alinan anti-proteaz
muameleli plazma numunelerinin degerlendirilmesiydi. Bir bazal numune ve bir atak
numunesi olmak üzere iki HAE numunes her bir hastadan test edildi. Numuneler
indirgenmis ve indirgenemis kosullar altinda test edildi. Ek olarak, Crohn hastaligi,
romatoid artirit ve ülseratif kolit teshisi konmus hastalardan alinan numuneler de test
edildi. Normal insan plazma numuneleri de test edildi. Ilave numuneler yalnizca
indirgenmis kosullar altinda test edildi.
Prosedür:
1. Alti grup HAE hastasi numunesi test edildi. Her bir plazma numunesi 5 pL
numunenin 95 pL TBS'ye eklenmesiyle hazirlandi.
2. Bes Crohn hastaligi plazma numunesi, bes romatoid artirit plazma numunesi ve
bes ülseratif kolit numunesi test edildi. Her bir plazma numunesi 5 uL numunenin
95 pL TBS'ye eklenmesiyle hazirlandi.
3. Yedi normal insan plazma numunesi, kontrol olarak kullanim için 5 pL
numunenin 95 uL TBS'ye eklenmesiyle hazirlandi.
4. Indirgenmemis numuneler 5 uL 4X numune tamponunun 15 uL numuneye
eklenmesiyle hazirlandi.
. indirgenmis numuneler 5 uL 4X numune tamponunun ve 2 pL 10X indirgeyici
ajanin 13 uL numuneye eklenmesiyle hazirlandi.
6. Numunelerin tamami 95°C'de 5 dakika süreyle bir isi blogu kullanilarak isitildi.
7. Bir hacimlik 1 L 1X Tris-Asetat SDS çalistirma tamponu, 50 mL 20X Tris-Asetat
SDS çalistirma tamponunun 950 mL DI suya eklenmesiyle hazirlandi.
8. Bir hacimlik 2L 1X MES çalistirma tamponu, 100 mL 20X MES SDS çalistirma
tamponun 1900 mL DI suya eklenmesiyle hazirlandi.
9. analiz tamponu (%02 Tween içeren Odyssey Bloklama tamponu), 2 mL Tween-
'nin 998 mL Odyssey bloklama tamponuna eklenmesiyle hazirlandi.
. Yikama tamponu (%, 1 paket PBS'in ve 1 mL Tween-
,nin 900 mL DI suya eklenmesiyle hazirlandi. Solüsyon iyice karistirildi ve DI su
kullanilarak 1 L'ye getirildi. Nihasi solüsyon, 0,22 uM”Iik bir PES filtrasyon sistemi
üzerinden filtre edildi.
11. Bir hacimlik 4 pL tek-renkli protein markörü, dört jelin kulvar 1'ine eklendi.
12. 13 pL indirgenmemis numunelerin hacimleri, bir %7 Tris-Asetat jelinin uygun
kulvarlarina eklendi.
13. 13 iJL indirgenmis numunelerin hacimleri, %4-12 Bis-Tris jellerinin uygun
kulvarlarina eklendi.
14. Jeller 125 voltta ~75 dakika süreyle çalistirildi.
. Her bir jel münferit olarak, iBlot mini-aktarma yiginlari ve iBlot aktarma
sisteminin PO Programi kullanilarak bir membrana aktarildi.
16. Her bir membran, 20 mL Odyssey bloklama tamponu ihtiva eden bir plastik
tepsiye aktarildi. Membranlar Odyssey bloklama tamponunda oda sicakliginda 1
saat süreyle bir plaka çalkalayici üzerinde inkübe edildi.
17. Bir 1 pg/mL birincil antikor solüshonu, 57,14 pL fare anti-HMWK mAb, klon#
18. Bloklama tamponu plastik tepsilerden çikarildi. Bir hacimlik 20 mL birincil
antikor solüsyonu her bir tepsiye eklendi ve membranlar oda sicakliginda 1 saat
süreyle bir plaka çalkalayici üzerinde inkübe edildi.
. Birincil antikor solüsyonu tepsilerden çikarildi.
21. Her bir membran bes dakika süreyle 20 mL yikama tamponuyla yikandi ve
daha sonra yikama solüsyonu atildi. Yikama toplamda 4 yikama olarak tekrarlandi.
22. Bir hacimlik 20 mL ikincil antikor solüsyonu her bir tepsiye eklendi ve
membranlar oda sicakliginda 1 saat süreyle bir plaka çalkalayici üzerinde inkübe
23. Ikincil antikor solüsyonu tepsilerden çikarildi.
24. Her bir membran bes dakika süreyle 20 mL yikama tamponuyla yikandi ve
daha sonra yikama solüsyonu atildi. Yikama toplamda 4 yikama olarak tekrarlandi.
. Her bir membran PBS ile 5 dakika süreyle durulandi.
26. Membranlar LiCor Odyssey CLX kullanilarak tarandi.
Sonuçlar:
Beklendigi üzere, birçok hasta numunesi, bazal numunelerin aksine atak
numunelerinde iki-Zincirli HMWK'nin yükselmis bir seviyesini sergiledi. Tablolar 11 ve
12, bu deney için HAE verisini ihtiva etmektedir. Tablo 13, ülseratif kolit ve romatoid
artirit hasta numuneleri için veri gruplarini ihtiva etmektedir. Tablo 14, Crohn hastaligi
hasta numuneleri için verileri ihtiva etmektedir.
Tablo 11. Indirgenmemis HAE Hasta Numuneleri, Bazal ve Atak, HMWK
Sinyalleri, Kulvardaki Iki-Zincir Yüzdesi
Indirgenmemis anti-Proteaz HAE Hasta Numuneleri, Bazal ve Atak
HMWK Sinyali
Hasta Kimligi Hasta HAE 120 100 90 Toplam Kulvardaki
Bas kDa kDa kDa Sinyal Iki-Zincir%'si
harfleri
Kulvardaki Iki-Zincir %,si: Iki-Zincirli Sinyalin Toplami/Toplam Kulvar Sinyalinin
Toplami
Tablo 12. Indirgenmis HAE Hasta Numuneleri, Bazal ve Atak, HMWK Sinyalleri,
Kulvardaki Iki-Zincirin Yüzdesi
Indirgenmis anti-Proteaz HAE Hasta Numuneleri, Bazal ve Atak
HMWK Sinyali
Hasta Kimligi Hasta HAE 110 56 46 Toplam Kulvardaki
Bas kDa kDa kDa Sinyal Iki-Zincir %'si
harfleri
Indirgenmis anti-Proteaz HAE Hasta Numuneleri, Bazal ve Atak
Hasta Kimligi
A4908
A5564
A5353
A4607
A4619
A5346
A5422
A4183
A4671
A5248
A2315
harfleri
HMWK Sinyali
12400
10900
11200
13900
13500
19000
1 6400
Toplam
Sinyal
14710
16940
15580
15010
12580
14309
11289
16322
16192
22280
21640
Kulvardaki
Iki-Zincir %,si
Kulvardaki Iki-Zincir %'si: Iki-Zincirli Sinyalin Toplami/Toplam Kulvar Sinyalinin
Toplami
Tablo 13. Ülseratif Koliti ve Romatoid Artiriti olan Bireylerden Plazma
Numuneleri, HMWK Sinyalleri, Kulvardaki Iki-Zincir Yüzdesi
K2EDTA ve Sodyum Sitratta indirgenmis Hastalikli Durum Numuneleri, Ülseratif
Kolit ve Romatoid Artirit
Numune anü-
Hastalik
Koagülan
A3005, N17 anti-
Normal
HMWK Sinyali
20500 775
Zincir Sinyal
(56kDa) (46
Toplam Kulvardaki
21641
Iki-Zincir
K2EDTA ve Sodyum Sitratta indirgenmis Hastalikli Durum Numuneleri, Ülseratif
Kolit ve Romatoid Artirit
Koagülan
proteaz
Sodyum
Sodyum
K2EDTA
Sodyum
Sodyum
Sodyum
Sodyum
K2EDTA
K2EDTA
K2EDTA
Sodyum
Hastalik
Normal
Normal
Ülseratif
Ü Iseratif
Ü Iseratif
Ü Iseratif
Ü Iseratif
Romatoid
Romatoid
Romatoid
Romatoid
HMWK Sinyali
18700
24200
17400
17400
14100
13300
(56kDa)
10300
Toplam
Sinyal
20842
25875
21770
19314
12440
16396
16540
Kulvardaki
Iki-Zincir
K2EDTA ve Sodyum Sitratta indirgenmis Hastalikli Durum Numuneleri, Ülseratif
Kolit ve Romatoid Artirit
Numune anti-
Koagülan
Sodyum Romatoid
BRH715045 Sitrat
Hastalik
HMWK Sinyali
(110 (56kDa) (46
6600 1860
Toplam Kulvardaki
Sinyal Iki-Zincir
9980 %33,9
Kulvardaki Iki-Zincir %'siz Iki-Zincirli Sinyalin Toplami/Toplam
Kulvar Sinyalinin Toplami
Tablo 14. Crohn Hastaligi olan Bireylerden Plazma Numuneleri, HMWK Sinyalleri,
Kulvardaki Iki-Zincir Yüzdesi
K2EDTA ve Sodyum Sitratta indirgenmis Hastalikli Durum Numuneleri, Crohn
Hastaligi ve Sedef Hastaligi
Numune anti-
Koagülan
Sodyum
A2992, N14 Sitrat
Sodyum
BRH745047 Sitrat
Sodyum
BRH745076 Sitrat
BRH715026 K2EDTA
BRH715027 K2EDTA
Hastalik Tek-
HMWK Sinyali
(150 (110 (56
Normal 1560 5820 N/A
Hastaligi MA 12100 1230
Hastaligi N/A
16300 668
Zincir Zincir Sinyal
Toplam Kulvardaki
Iki-Zincir
14564 %6,6
7572 °/o2,5
18882 %4,6
15280 %20,8
18518 %12,0
K2EDTA ve Sodyum Sitratta indirgenmis Hastalikli Durum Numuneleri, Crohn
Hastaligi ve Sedef Hastaligi
HMWK Sinyali
Numune anti- Hastalik Tek- Tek- Iki- Iki- Toplam Kulvardaki
Koagülan Zincir Zincir Zincir Zincir Sinyal Iki-Zincir
Kulvardaki Iki-Zincir %'si: Iki-Zincirli Sinyalin Toplami/Toplam
Kulvar Sinyalinin Toplami
DIGER UYGULAMALAR
Bu spesifikasyonda açiklanan özelliklerin tamami, herhangi bir kombinasyonda
birlestirilebilir. Bu spesifikasyonda açiklanan her bir özellik, ayni, esdeger veya benzer
amaca hizmet eden alternatif bir özellikle degistirilebilir. Böylelikle, aksi açik sekilde
ifade edilmedigi sürece, açiklanan her bir özellik, esdeger veya benzer özelliklerin
kapsamli bir serisinin yalnizca bir örnegidir.
DIZI LISTESI
<110> Dyax Corp.
Sexton, Daniel J.
Faucette, Ryan
Kenniston, Jon A.
Conley, Greg
Nixon, Andrew
TenHoor, Christopher
Adelman, Burt
Chyung, Yung
<120> BRADIKININ-ARACILI RAHATSIZLIKLARIN DEGERLENDIRILMESI VE
TEDAVISI
<140> TBD
<160> 9
<170> Patentln versiyon 3.5
<210> 1
<211> 644
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 1
Met Lya Leu Ile Thr Iie Leu ?ne Leu Cys Ser Arg Leu Leu Leu Ser
1 5 10 15
Leu Thr Gln Glu Ser Gln Ser Glu Glu Ile Asp Cys Asn Asp Lys Asp
25 30
Leu Phe Lya Ala Vai Asp Ala Ala Leu Lys Lys Ty: Asn Ser Gin &an
40 45
Gln Ser Asn Aan Gln Phe Val Leu Tyr Arg Ile Tht Glu Ala Thr Lys
50 55 60
Thr Val Gly Ser Asp Thr Phe Tyr Ser Phe Lys Tyr Glu Ile Lys Glu
65 70 75 80
Gly Asp Cys Pro Val Gln Ser Gly Lys Thr Trp Gln Asp Cya Glu Tyr
B5 90 95
Lys Asp Ala Ala Lys Ala Ala Thr Gly Glu Cys ?hr &la Thr Va] Gly
100 105 110
Lys Arg Sir Sor Thr Lys Ph. S.: Val Ala Thr Gln Th: Cy: Gln Il.
115 120 125
01'.:
011.)
Lys GLu Ser Tyr Tyr Phe Asp Leu Thr
<210> 2
<211> 362
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 2
Gin Giu Ser Gin Ser Giu Giu Ile Asp
Lys Ala Val Asp Ala Ala Leu Lys Lya
Asn Asn Gln Phe Val Leu Tyr Arg Ile
Giy Sir Asp Thr Ph. Ty: Sir Ph. Ly:
Cys Pro Vai Gin Ser Giy Lys Thr Trp
Ala Ala Lys Ala Ala Thr Giy Giu Cys
Ser Ser Thr Lys Phe Ser vai Ala Thr
100 105
Ala Glu Gly Pro Val Vai Thr Ala Gln
115 120
His Pro 110 Sir Thr Gln Sir Pro Asp
130 135
Gly Ile Gln Tyr Phe Aan Asn Asn Thr
145 150
Leu Asn Glu Val Lys Arg Ala G1n Arq
Phe Arq Ile Thr Tyr Sar Ile Val Gln
180 185
<210> 3
<211> 255
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 3
<210>4
<211> 304
<212> PRT
<213> Yapay Dizi
<220>
<223> Sentetik polipeptit
<400> 4
(31)*
Met Ile Tyr Thr Met Lys Lys Val His Ala Leu Trp Ala Ser Val Cys
<210> 5
<211> 58
<212> PRT
<213> Yapay Dizi
<220>
<223> Sentetik polipeptit
<400> 5
<210> 6
<211> 122
<212> PRT
<213> Yapay Dizi
<220>
<223> Sentetik polipeptit
<400> 6
119 Her Met frp Val Arq
<210> 7
<211> 105
<212> PRT
<213> Yapay Dizi
<220>
<223> Sentetik polipeptit
<400> 7
<210>8
<211> 60
<212> PRT
<213> Yapay Dizi
<220>
<223> Sentetik polipeptit
<400> 8
<210> 9
<211> 58
<212> PRT
<213> Yapay Dizi
<220>
<223> Sentetik polipeptit
<400> 9
+ Eradiknm
3 4 5 6 7
HAE Hastasi ANTI-PROTEAZ Plazmasinda Western
Blot ile Bozulmamis 1 Zincirli Kininojenin Kantitasyonu
0 Hasta DG
Claims (13)
- Bir plazma kallikrein (pKaI)-aracili rahatsizlik riskinde olan veya buna sahip olan bir süjenin tanimlanmasi için bir yöntem olup, özelligi yöntemin asagidakileri içermesidir: bir süjenin bir numunesinde bir klevaj edilmis yüksek moleküler agirlikli kininojenin (HMWK) bir seviyesinin ve opsiyonel olarak bozulmamis bir klevaj edilmis HMWK'nin bir degerinin belirlenmesi ve klevaj edilmis HMWK degeri bir referans degerinin üzerindeyse, süjenin bir pKaI-aracili rahatsizlik riskinde veya buna sahip olarak tanimlanmasi, burada referans degeri, saglikli bir süjedeki klevaj edilmis HMWK degerini ifade etmektedir ve burada pKaI-aracili rahatsizlik herediter anjiyoödem (HAE), romatoid artirit, ülseratif kolit veya Crohn hastaligidir.
- Istem 1'e göre yöntem olup, özelligi klevaj edilmis HMWK degerin, numunedeki klevaj edilmis HMWK yüzdesi olmasidir.
- Istemler 1-2'nin herhangi birine göre yöntem olup, özelligi klevaj edilmis
- HMWK'nin ve opsiyonel olarak bozulmamis HMWK'nin seviyelerinin, bozulmamis HMWK”ye kiyasla spesifik olarak klevaj edilmis HMWK”yi baglayan veya klevaj edilmis HMWK'ye kiyasla spesifik olarak bozulmamis HMWK'yi baglayan bir saptama ajaniyla ölçülmesidir, burada opsiyonel olarak saptama ajani düsük moleküler agirlikli kininojene (LMWK) baglanmaz.
- Istem 3'e göre yöntem olup, özelligi saptama ajaninin bir antikor olmasidir; tercihen, burada antikor bozulmamis HMWKlye kiyasla spesifik olarak klevaj edilmis HMWK'yi baglar ve opsiyonel olarak LMWK'yi baglamaz, daha tercihen burada saptama ajani, klevaj edilmis HMWK`nin hafif zincirinin C-ucuna baglanan bir antikordur.
- Istemler 1 ila 4'ten herhangi birine göre yöntem olup, özelligi bozulmamis
- HMWK ve klevaj edilmis HMWK seviyelerinin Western blot analizi ile ölçülmesidir.
- Istemler 1 ila 5'ten herhangi birine göre yöntem olup, özelligi numunenin bir kan numunesi veya bir plazma numunesi olmasidir.
- Istemler 1 ila öldan herhangi birine göre yöntem olup, özelligi süjenin, pKaI- aracili rahatsizligin bir semptomuna sahip olmasidir; veya burada süje bir antihistamin terapisine, bir kortikosteroid terapisine veya her ikisine dirençlidir. istem 7'ye göre yöntem olup, özelligi semptomun ödem olmasidir.
- Istem 7'ye göre yöntem olup, özelligi semptomun asagidakiler olmasidir: tekrarlayan sisme ataklari; sisme, burada söz konusu sisme tamamen veya baskin olarak periferiktir; ürtiker; enfeksiyon kaniti yoklugunda kizariklik, agri ve sisme; veya
- Istemler 1 ila 9'dan herhangi birine göre yöntem olup, özelligi süjenin, numunenin alindigi esnada pKaI-aracili rahatsizligin hiç bir semptomuna sahip olmamasidir, pKaI-aracili rahatsizligin bir semptomunun bir hikayesine veya pKal-aracili rahatsizligin bir hikayesine sahip olmamasidir. .Önceki istemlerin herhangi birine göre yöntem olup, özelligi ayrica, rahatsizligin bir kPal inhibitörüyle tedavi edilmesine duyarli olup olmadigini belirlenmesini içermesidir, burada rahatsizlik, klevaj edilmis HMWK'nin degeri referans degerinin üzerindeyse bir pKal inhibitörüyle tedaviye duyarlidir.
- Bir süjedeki bir pKal-aracili rahatsizligin bir tedavisinin degerlendirilmesi için bir yöntem olup, özelligi yöntemin asagidakileri içermesidir: süjeden, tedaviden önce ve sonra veya tedavi süresi esnasinda alinan numunelerdeki klevaj edilmis bir HMWK`nin seviyelerinin ve opsiyonel olarak bozulmamis bir HMWK'nin seviyelerinin ölçülmesi; her bir numunedeki klevaj edilmis HMWK'nin bir degerinin, ayni numunedeki klevaj edilmis ve opsiyonel olarak bozulmamis HMWK seviyelerine dayali olarak belirlenmesi; ve numunelerdeki klevaj edilmis bir HMWK'nin degerlerinde, tedaviden önce ve sonra veya tedavi süresi boyunca degisikliklere dayali olarak tedavinin etkililiginin degerlendirilmesidir. burada pKal-aracili rahatsizlik herediter anjiyoödem (HAE)i romatoid artirit, ülseratif kolit veya Crohn hastaligidir.
- 13.Bir süjedeki bir pKal-aracili hastaligin tedavisinde kullanim için bir farmasötik bilesim olup, Özelligi bilesimin bir pKal inhibitörü ve farmasötik olarak kabul edilen bir tasiyici içermesidir, burada süje, saglikli bir süjedeki klevaj edilmis HMWK degerini ifade eden bir referans degerinin üzerinde olan, bir klevaj edilmis yüksek moleküler agirlikli kininojen (HMWK) degerine sahiptir; ve burada pKaI-aracili hastalik herediter anjiyoödem (HAE), romatoid artirit, ülseratif kolit veya Crohn hastaligidir.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201361754607P | 2013-01-20 | 2013-01-20 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
TR201815856T4 true TR201815856T4 (tr) | 2018-11-21 |
Family
ID=51210106
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
TR2018/15856T TR201815856T4 (tr) | 2013-01-20 | 2014-01-17 | Bradikinin-aracılı rahatsızlıkların değerlendirilmesi ve tedavisi. |
Country Status (21)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US11156612B2 (tr) |
EP (3) | EP4234583A3 (tr) |
JP (4) | JP6444315B2 (tr) |
KR (3) | KR102381478B1 (tr) |
CN (2) | CN105073778B (tr) |
AU (3) | AU2014207420B2 (tr) |
CA (2) | CA2897336C (tr) |
CY (1) | CY1122164T1 (tr) |
DK (1) | DK2948479T3 (tr) |
ES (1) | ES2692408T3 (tr) |
HK (1) | HK1215266A1 (tr) |
HR (1) | HRP20181734T1 (tr) |
HU (1) | HUE041332T2 (tr) |
IL (2) | IL239428B (tr) |
LT (1) | LT2948479T (tr) |
PL (1) | PL2948479T3 (tr) |
PT (1) | PT2948479T (tr) |
RS (1) | RS57890B1 (tr) |
SI (1) | SI2948479T1 (tr) |
TR (1) | TR201815856T4 (tr) |
WO (1) | WO2014113712A1 (tr) |
Families Citing this family (25)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SI2521568T1 (sl) | 2010-01-06 | 2019-01-31 | Dyax Corp. | Proteini, ki vežejo plazemski kalikrein |
IL269565B2 (en) | 2011-01-06 | 2024-06-01 | Dyax Corp | KALLIKREIN PLASMA BINDING PROTEINS |
EP4234583A3 (en) | 2013-01-20 | 2024-01-24 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Evaluation and treatment of bradykinin-mediated disorders |
EP2970502A4 (en) | 2013-03-15 | 2016-11-30 | Dyax Corp | ANTI-PLASMA KALLIKREIN ANTIBODY |
TWI636047B (zh) | 2013-08-14 | 2018-09-21 | 英商卡爾維斯塔製藥有限公司 | 雜環衍生物 |
CA2927824A1 (en) | 2013-10-21 | 2015-04-30 | Dyax Corp. | Assays for determining plasma kallikrein system biomarkers |
WO2015061182A1 (en) | 2013-10-21 | 2015-04-30 | Dyax Corp. | Diagnosis and treatment of autoimmune diseases |
KR20220107077A (ko) | 2014-01-21 | 2022-08-01 | 다케다 파머수티컬 컴패니 리미티드 | 혈장 칼리크레인 결합 단백질 및 유전성 혈관부종을 치료하는 데 있어서의 이의 용도 |
BR112016022318A2 (pt) | 2014-03-27 | 2017-10-31 | Dyax Corp | método, composição farmacêutica para uso no tratamento de doenças de retina e uso de um anticorpo |
GB201421083D0 (en) | 2014-11-27 | 2015-01-14 | Kalvista Pharmaceuticals Ltd | Enzyme inhibitors |
MX2017012423A (es) * | 2015-03-30 | 2018-01-26 | Dyax Corp | Inhibidores de calicreina plasmatica y uso de los mismos para prevenir el ataque del angioedema hereditario. |
MX2018004763A (es) * | 2015-10-19 | 2018-09-06 | Dyax Corp | Inmunoensayo para detectar quininogeno escindido de alto peso molecular. |
JP7003354B2 (ja) | 2015-12-11 | 2022-03-04 | 武田薬品工業株式会社 | 遺伝性血管性浮腫の発作を治療するための血漿カリクレイン阻害薬およびその用途 |
MX2018007493A (es) * | 2015-12-15 | 2018-09-18 | Dyax Corp | Ensayo de cuantificacion de peptido para diferenciar quininogeno de alto peso molecular (hmwk) de longitud completa y hmwk escindido. |
KR20220107319A (ko) | 2016-05-31 | 2022-08-02 | 칼비스타 파마슈티컬즈 리미티드 | 혈장 칼리크레인 저해제로서 피라졸 유도체 |
GB201609607D0 (en) | 2016-06-01 | 2016-07-13 | Kalvista Pharmaceuticals Ltd | Polymorphs of N-(3-Fluoro-4-methoxypyridin-2-yl)methyl)-3-(methoxymethyl)-1-({4-((2-oxopy ridin-1-yl)methyl)phenyl}methyl)pyrazole-4-carboxamide and salts |
CN117192130A (zh) | 2016-09-16 | 2023-12-08 | 武田药品工业株式会社 | 用于接触活化系统相关的疾病的蛋白生物标记 |
WO2018053247A1 (en) | 2016-09-16 | 2018-03-22 | Dyax Corp. | Metabolite biomarkers for diseases associated with the contact activation system |
GB201719881D0 (en) | 2017-11-29 | 2018-01-10 | Kalvista Pharmaceuticals Ltd | Solid forms of plasma kallikrein inhibitor and salts thereof |
HRP20220367T1 (hr) | 2017-11-29 | 2022-05-27 | Kalvista Pharmaceuticals Limited | Oblici za doziranje koji sadrže plazmatski kalikrein inhibitor |
US20200407771A1 (en) * | 2018-02-22 | 2020-12-31 | The Regents Of The University Of California | Threshold-stimulated plasma kallikrein activity as a biomarker for diagnosis of bradykinin-mediated angioedema |
EP4010333A1 (en) | 2019-08-09 | 2022-06-15 | Kalvista Pharmaceuticals Limited | Plasma kallikrein inhibitors |
US20230174674A1 (en) * | 2020-04-04 | 2023-06-08 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Plasma kallikrein inhibitors and uses thereof for treating acute respiratory distress syndrome |
CN113777331A (zh) * | 2020-06-09 | 2021-12-10 | 张曼 | 尿液激肽原-1及其多肽片段在烧伤中的应用 |
WO2024003617A2 (en) * | 2022-06-30 | 2024-01-04 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Protein biomarkers for lanadelumab treatment |
Family Cites Families (54)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA1312564C (en) | 1985-07-12 | 1993-01-12 | Robert W. Colman | Monoclonal antibodies to human plasma prekallikrein and methods of preparing and using same |
US5047323A (en) | 1986-01-22 | 1991-09-10 | Temple University Of The Commonwealth System Of Higher Education | Method for detecting human kininogen using monoclonal antibodies thereto |
US4908431A (en) * | 1986-01-22 | 1990-03-13 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education | Monoclonal antibodies to human kininogen and methods of preparing same |
US4881175A (en) | 1986-09-02 | 1989-11-14 | Genex Corporation | Computer based system and method for determining and displaying possible chemical structures for converting double- or multiple-chain polypeptides to single-chain polypeptides |
US4946778A (en) | 1987-09-21 | 1990-08-07 | Genex Corporation | Single polypeptide chain binding molecules |
US5260203A (en) | 1986-09-02 | 1993-11-09 | Enzon, Inc. | Single polypeptide chain binding molecules |
JPS63185398A (ja) | 1986-09-10 | 1988-07-30 | Nippon Zoki Pharmaceut Co Ltd | 生理活性物質測定法 |
US4882272A (en) | 1986-10-01 | 1989-11-21 | Temple University - Of The Commonwealth System Of Higher Education | High molecular weight kininogen assay |
US5025796A (en) | 1988-12-01 | 1991-06-25 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Apparatus and methods for determining in vivo response to thermal stimulation in in an unrestrained subject |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
DK0590058T3 (da) | 1991-06-14 | 2004-03-29 | Genentech Inc | Humaniseret heregulin-antistof |
US5472945A (en) * | 1991-08-13 | 1995-12-05 | Temple University- Of The Commonwealth System Of Higher Education | Modulation of blood pressure and inhibition of platelet activation with kininogen fragment |
US6057287A (en) | 1994-01-11 | 2000-05-02 | Dyax Corp. | Kallikrein-binding "Kunitz domain" proteins and analogues thereof |
ATE275583T1 (de) | 1994-01-11 | 2004-09-15 | Dyax Corp | KALLIKREINHEMMENDE ßKUNITZ-DOMÄNEß-PROTEINE UND DERIVATEN DAVON |
JPH1084995A (ja) | 1996-09-12 | 1998-04-07 | Nippon Zoki Pharmaceut Co Ltd | 血液凝固第xii因子活性化法 |
US5789261A (en) | 1996-10-30 | 1998-08-04 | Temple University Of The Commonwealth System Of Higher Education | Solid phase immunoassay |
US6242210B1 (en) | 1997-05-20 | 2001-06-05 | Actinova Limited | Treatment of bacterial infections |
JP4346798B2 (ja) | 1999-08-19 | 2009-10-21 | 協和メデックス株式会社 | Hcvコア抗原の検出または定量方法およびそれに用いる検出または定量試薬。 |
US6994852B1 (en) * | 1999-11-12 | 2006-02-07 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education | Inhibition of angiogenesis by antibodies against high molecular weight kininogen domain 5 |
US7067713B2 (en) | 2000-01-31 | 2006-06-27 | Pharming Intellectual Property B.V. | C1 Inhibitor produced in the milk of transgenic non-human mammals |
US7678541B2 (en) | 2000-11-21 | 2010-03-16 | Hologic, Inc. | Methods and compositions for the detection of a nucleic acid using a non-invasive cleavage reaction |
JP2002221519A (ja) | 2001-01-29 | 2002-08-09 | Sysmex Corp | 抗凝固剤およびそれを用いた抗凝固剤処理方法 |
US20040152633A1 (en) | 2001-05-31 | 2004-08-05 | Jorgensen Marianne Ulrich | Kunitz-type sequences and polypeptides |
US6913900B2 (en) | 2001-08-29 | 2005-07-05 | Nippon Zoki Pharmaceutical Co., Ltd. | Plasma prekallikrein activation and kallikrein production assay |
CA2488558C (en) | 2002-06-07 | 2013-08-20 | Dyax Corp. | Prevention and reduction of blood loss |
AU2003281287A1 (en) * | 2002-07-04 | 2004-01-23 | Oxford Glycosciences (Uk) Ltd | Toxicity markers |
US20070003552A1 (en) | 2002-07-09 | 2007-01-04 | Gebbink Martijn F B | Cross-beta structure comprising amyloid binding proteins and methods for detection of the cross-beta structure, for modulating cross-beta structures fibril formation and for modulating cross-beta structure-mediated toxicity and method for interfering with blood coagulation |
EP1598428A1 (en) | 2004-05-18 | 2005-11-23 | Georg Dewald | Methods and kits to detect Hereditary angioedema type III |
US7235530B2 (en) * | 2004-09-27 | 2007-06-26 | Dyax Corporation | Kallikrein inhibitors and anti-thrombolytic agents and uses thereof |
LT1981519T (lt) | 2005-12-29 | 2018-04-25 | Dyax Corp. | Proteazės slopinimas |
US7276480B1 (en) | 2005-12-30 | 2007-10-02 | Dyax Corp. | Prevention and reduction of blood loss |
CA2658523C (en) * | 2006-07-31 | 2012-06-12 | Activesite Pharmaceuticals, Inc. | Inhibitors of plasma kallikrein |
CA2696208A1 (en) | 2007-08-21 | 2009-02-26 | Genzyme Corporation | Treatment with kallikrein inhibitors |
JP2009051259A (ja) | 2007-08-23 | 2009-03-12 | Yanmar Co Ltd | 作業車両用独立型サスペンションの制御機構 |
JP5424331B2 (ja) * | 2007-10-18 | 2014-02-26 | 国立大学法人 鹿児島大学 | 肝疾患診断用バイオマーカー |
AU2008315938B2 (en) | 2007-10-22 | 2014-11-27 | Georg Dewald | Disorders of vasoregulation and methods of diagnosing them |
WO2010062663A1 (en) | 2008-11-03 | 2010-06-03 | Schering Corporation | Inflammatory bowel disease biomarkers and related methods of treatment |
WO2010065656A1 (en) | 2008-12-02 | 2010-06-10 | Joslin Diabetes Center | Method for reducing blood pressure using inhibitors of plasma kallikrein |
AU2013205086A1 (en) * | 2009-01-06 | 2013-05-16 | Dyax Corp. | Treatment of mucositis with kallikrein inhibitors |
FR2942233B1 (fr) | 2009-02-19 | 2015-03-13 | Lfb Biotechnologies | Moyens pour la purification d'une proteine du plasma sanguin, et procedes pour sa mise en oeuvre |
US9206123B2 (en) | 2009-12-18 | 2015-12-08 | Activesite Pharmaceuticals, Inc. | Prodrugs of inhibitors of plasma kallikrein |
WO2011075684A1 (en) | 2009-12-18 | 2011-06-23 | Activesite Pharmaceuticals, Inc. | Prodrugs of inhibitors of plasma kallikrein |
SI2521568T1 (sl) * | 2010-01-06 | 2019-01-31 | Dyax Corp. | Proteini, ki vežejo plazemski kalikrein |
WO2012009447A2 (en) | 2010-07-13 | 2012-01-19 | University Of Rochester | THE cAMP/PKA/HDAC5 PATHWAY AND USES THEREOF |
US10299714B2 (en) | 2010-12-02 | 2019-05-28 | Becton, Dickinson And Company | Blood collection devices containing blood stabilization agent including variegin or analog thereof and/or a polysulfated disaccharide |
IL269565B2 (en) | 2011-01-06 | 2024-06-01 | Dyax Corp | KALLIKREIN PLASMA BINDING PROTEINS |
CA2838984A1 (en) | 2011-06-10 | 2012-12-13 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for modulating kallikrein (klkb1) expression |
WO2012170947A2 (en) | 2011-06-10 | 2012-12-13 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for modulating factor 12 expression |
EP4234583A3 (en) | 2013-01-20 | 2024-01-24 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Evaluation and treatment of bradykinin-mediated disorders |
MX2015009914A (es) | 2013-02-01 | 2015-09-25 | Becton Dickinson Co | Dispositivos de recogida de sangre que contienen aditivos de inhibicion de la via de contacto. |
CA2927824A1 (en) | 2013-10-21 | 2015-04-30 | Dyax Corp. | Assays for determining plasma kallikrein system biomarkers |
WO2015061182A1 (en) | 2013-10-21 | 2015-04-30 | Dyax Corp. | Diagnosis and treatment of autoimmune diseases |
KR20220107077A (ko) | 2014-01-21 | 2022-08-01 | 다케다 파머수티컬 컴패니 리미티드 | 혈장 칼리크레인 결합 단백질 및 유전성 혈관부종을 치료하는 데 있어서의 이의 용도 |
MX2018004763A (es) | 2015-10-19 | 2018-09-06 | Dyax Corp | Inmunoensayo para detectar quininogeno escindido de alto peso molecular. |
-
2014
- 2014-01-17 EP EP23164279.4A patent/EP4234583A3/en active Pending
- 2014-01-17 LT LTEP14740444.6T patent/LT2948479T/lt unknown
- 2014-01-17 KR KR1020217000831A patent/KR102381478B1/ko active IP Right Grant
- 2014-01-17 CA CA2897336A patent/CA2897336C/en active Active
- 2014-01-17 TR TR2018/15856T patent/TR201815856T4/tr unknown
- 2014-01-17 PL PL14740444T patent/PL2948479T3/pl unknown
- 2014-01-17 PT PT14740444T patent/PT2948479T/pt unknown
- 2014-01-17 SI SI201430933T patent/SI2948479T1/sl unknown
- 2014-01-17 CN CN201480005158.6A patent/CN105073778B/zh active Active
- 2014-01-17 KR KR1020157022389A patent/KR102203880B1/ko active IP Right Grant
- 2014-01-17 RS RS20181235A patent/RS57890B1/sr unknown
- 2014-01-17 EP EP14740444.6A patent/EP2948479B1/en active Active
- 2014-01-17 DK DK14740444.6T patent/DK2948479T3/en active
- 2014-01-17 US US14/761,690 patent/US11156612B2/en active Active
- 2014-01-17 AU AU2014207420A patent/AU2014207420B2/en active Active
- 2014-01-17 KR KR1020227010217A patent/KR102523810B1/ko active IP Right Grant
- 2014-01-17 WO PCT/US2014/012107 patent/WO2014113712A1/en active Application Filing
- 2014-01-17 CN CN201911415224.8A patent/CN111044725B/zh active Active
- 2014-01-17 EP EP18186356.4A patent/EP3456744B1/en active Active
- 2014-01-17 CA CA3209608A patent/CA3209608A1/en active Pending
- 2014-01-17 ES ES14740444.6T patent/ES2692408T3/es active Active
- 2014-01-17 HU HUE14740444A patent/HUE041332T2/hu unknown
- 2014-01-17 JP JP2015553864A patent/JP6444315B2/ja active Active
-
2015
- 2015-06-15 IL IL239428A patent/IL239428B/en active IP Right Grant
-
2016
- 2016-03-18 HK HK16103203.9A patent/HK1215266A1/zh unknown
-
2018
- 2018-10-22 HR HRP20181734TT patent/HRP20181734T1/hr unknown
- 2018-11-01 CY CY20181101140T patent/CY1122164T1/el unknown
- 2018-11-07 AU AU2018260845A patent/AU2018260845B2/en active Active
- 2018-11-27 JP JP2018221155A patent/JP6772237B2/ja active Active
-
2020
- 2020-03-29 IL IL273688A patent/IL273688A/en unknown
- 2020-09-30 JP JP2020164435A patent/JP2021008483A/ja active Pending
- 2020-11-25 AU AU2020277178A patent/AU2020277178B2/en active Active
-
2021
- 2021-10-01 US US17/491,813 patent/US20220170936A1/en active Pending
-
2022
- 2022-02-28 JP JP2022029441A patent/JP7496380B2/ja active Active
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU2020277178B2 (en) | Evaluation and treatment of bradykinin-mediated disorders | |
JP7441662B2 (ja) | pKal関連疾病の評価、アッセイおよび治療 | |
BR112015016231B1 (pt) | Método para identificar um sujeito em risco de ou tendo um distúrbio mediado por pkal, método para avaliar um tratamento de um distúrbio mediado por pkal em um sujeito, método para tratar uma doença mediada por pkal, composição farmacêutica para uso notratamento de uma doença mediada por pkal de um sujeito e método para determinar um valor de cininogênio clivado, cininogênio intacto ou ambos, em uma amostra |