TH7004A3 - กรรมวิธีการเตรียมดีเอ็นเอจากหยดเลือดแห้งบนกระดาษกรอง เพื่อนำไปเพิ่มปริมาณในหลอดทดลอง - Google Patents
กรรมวิธีการเตรียมดีเอ็นเอจากหยดเลือดแห้งบนกระดาษกรอง เพื่อนำไปเพิ่มปริมาณในหลอดทดลองInfo
- Publication number
- TH7004A3 TH7004A3 TH703000648U TH0703000648U TH7004A3 TH 7004 A3 TH7004 A3 TH 7004A3 TH 703000648 U TH703000648 U TH 703000648U TH 0703000648 U TH0703000648 U TH 0703000648U TH 7004 A3 TH7004 A3 TH 7004A3
- Authority
- TH
- Thailand
- Prior art keywords
- filter paper
- minutes
- volume
- solution
- dna
- Prior art date
Links
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title claims abstract 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims abstract 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract 7
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 5
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 4
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 claims abstract 4
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 claims abstract 4
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 claims abstract 3
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 claims abstract 3
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims abstract 3
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims abstract 3
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims abstract 3
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 claims abstract 3
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 claims abstract 3
- 239000011736 potassium bicarbonate Substances 0.000 claims abstract 3
- 229910000028 potassium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims abstract 3
- 235000015497 potassium bicarbonate Nutrition 0.000 claims abstract 3
- TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M potassium hydrogencarbonate Chemical compound [K+].OC([O-])=O TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 6
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims 3
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 claims 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 claims 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims 1
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 claims 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract 4
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract 1
Abstract
DC60 กรรมวิธีการเตรียมดีเอ็นเอจากหยดเลือดแห้งบนกระดาษกรองเพื่อนำไปเพิ่มปริมาณใน หลอดทดลอง ตามการประดิษฐ์นี้ เป็นการพัฒนาวิธีการการเก็บตัวอย่างเลือด และพัฒนาวิธีการ เตรียมดีเอ็นเอจากหยดเลือดแห้งบนกระดาษกรองชนิด Cellulose Filter Paper และ/หรือ Nylon Filter Paper โดยใช้สารละลาย Phenol red, Sodium deoxycholate และสารละลายผสม EDTA และ NH4CI และ KHCO3 มาใช้ในการเตรียมดีเอ็นเอ ซึ่งดีเอ็นเอที่ได้สามารถนำไปเพิ่มปริมาณใน หลอดทดลองด้วยปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส ได้อย่างมีประสิทธิภาพ และรวดเร็ว สามารถนำไปใช้ ในการตรวจวิเคราะห์ ช่วยลดค่าใช้จ่ายในการตรวจวิเคราะห์ และสามารถนำไปประยุกต์ใช้ในงาน ด้านการแพทย์ และงานด้านนิติวิทยาศาสตร์ได้ กรรมวิธีการเตรียมดีเอ็นเอ จากหยดเลือดแห้งบนกระดาษกรอง เพื่อนำไปเพิ่มปริมาณใน หลอดทดลอง ตามการประดิษฐ์นี้ เป็นการพัฒนาวิธีการเก็บตัวอย่างเลือด และพัฒนาวิธีการ เตรียมดีเอ็นเอจากหยดเลือดแห้งบนกระดาษกรองชนิด Cellulose Filter Paper และ/หรือ Nylon Filter Paper โดยใช้สารละลาย Phenol red,Sodium deoxycholate และสารละลายผสม EDTA และ NH4 CI และ KHCO3 นำมาใช้ในการเตรียมดีเอ็นเอ ซึ่งดีเอ็นเอที่ได้สามารถนำไปเพิ่มปริมาณใน หลอดทดลองด้วยปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส ได้อย่างมีประสิทธิภาพ และรวดเร็ว สามารถนำไปใช้ ในการตรวจวิเคราะห์ ช่วยลดค่าใช้จ่ายในการตรวจวิเคราะห์ และสามารถนำไปประยุกต์ใช้ในงาน ด้านการแพทย์ และงานด้านนิติวิทยาศาสตร์ได้
Claims (2)
1. กรรมวิธีการเตรียมดีเอ็นเอ จากหยดเลือดแห้งบนกระดาษกรอง เพื่อนำไปเพิ่มปริมาณในหลอด ทดลอง มีขั้นตอนดังนี้ 1.1 หยดเลือดลงบนกระดาษกรอง ทิ้งไว้ให้แห้งที่อุณหภูมิห้อง 1.2 ตัดกระดาษกรองที่มีหยดเลือดให้มีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางประมาณ 2.5 มิลลิเมตรใส่ ลงในหลอดทดลอง 1.3 ล้างเซลล์เม็ดเลือดแดงออกจากกระดาษกรองโดยใส่สารละลายที่เลือกได้จาก Phenol red หรือ sodium deoxycholate หรือสารละลายผสมที่ประกอบด้วย EDTA และ NH4C1 และ KHCO3 อย่างใดอย่างหนึ่ง ดังนี้ - ใช้สารละลาย Phenol red ความเข้มข้น 9-12 มิลิดมลาร์ ปริมาตร 150-300 ไมโครลิตร ทิ้งไว้ที่อุณหภุมิห้อง เป็นเวลา 5 นาที จากนั้นล้างด้วยสารละลายผสม ispropanol ควมเข้มข้น 70-90 % โดยปริมาตร และ Tris ความเข้มข้น 4-6 % โดยน้ำหนักต่อปริมาตร ปริมาตร 200-300 ไมโครลิตร ทิ้งไว้ 5 นาที เทสารละลายออกแล้วทิ้งให้กระดาษกรองแห้งที่อุณหภูมิ 50-60 องศาเซลเซียส - ใช้สารละลาย Sodium deoxycholate ความเข้มข้น 0.2-0.3 % โดยน้ำหนักต่อ ปริมาตร ปริมาตร 150-300 ไมโครลิตร ทิ้งไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาที จากนั้นล้างด้วย สารละลายผสม Tris ความเข้มข้น 8-12 มิลิโมลาร์ และ EDTA ความเข้มข้น 0.5-1.5 มิลิโมลาร์ ปริมาตร 150-300 ไมโครลิตร ทิ้งไว้ 5 นาที จากนั้นล้างด้วยน้ำกลั่น ทิ้งไว้ 5 นาที แล้วล้างด้วย 100 % เอทธิลแอลกอฮอล์ ปริมาตร 150-300 ไมโครลิตร ทิ้งไว้ 5 นาที เทสารละลายออก ทิ้งให้กระดาษ กรองแห้งที่อุณหภูมิห้อง - ใช้สารละลายผสม EDTA ความเข้มข้น 0.08-0.12 มิลิโมลาร์ และ NH4Cl ความ เข้มข้น 150-160 มิลิโมลาร์ และ KHcO3 ความเข้มข้น 8-12 มิลิโมลาร์ ปริมาณ 150-300 ไมโครลิตร ทิ้งไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาที จากนั้นล่างด้วยสารละลายผสม Tris ความ เข้มข้น 8-12 มิลิโมลาร์ และ EDTA ความเข้มข้น 0.5-1.5 มิลิโมลาร์ ปริมาตร 150-300 ไมโครลิตร ทิ้งไว้ 5 นาที จากนั้นล้างด้วยน้ำกลั่น ทิ้งไว้ 5 นาที แล้วล้างด้วย 100 % เอทธิล แอลออฮอล์ ปริมาตร 150-300 ไมโครลิตร ทิ้งไว้ 5 นาที เทสารละลายออก ทิ้งให้กระดาษกรอง แห้งที่อุณหภูมิห้อง 1.4 นำกระดาษกรองที่ได้จาก 1.3 ไปทำการเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอด้วยปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส
2. กรรมวิธีการเตรียมดีเอ็นเอตามข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่งกระดาษกรองที่ใช้คือ Cellulose Filter Paper และ /หรือ Nylon Filter Paper ในการเก็บตัวอย่างเลือด
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TH7004C3 TH7004C3 (th) | 2012-03-01 |
| TH7004A3 true TH7004A3 (th) | 2012-03-01 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Choi et al. | based sample-to-answer molecular diagnostic platform for point-of-care diagnostics | |
| RU2010123015A (ru) | Способ и набор для получения образца для применения в амплификации нуклеиновой кислоты | |
| CN106525839B (zh) | 一种基于膜富集比色快速检测纸质包装材料中甲醛含量的方法 | |
| TH7004C3 (th) | กรรมวิธีการเตรียมดีเอ็นเอจากหยดเลือดแห้งบนกระดาษกรอง เพื่อนำไปเพิ่มปริมาณในหลอดทดลอง | |
| TH7004A3 (th) | กรรมวิธีการเตรียมดีเอ็นเอจากหยดเลือดแห้งบนกระดาษกรอง เพื่อนำไปเพิ่มปริมาณในหลอดทดลอง | |
| CN101358247B (zh) | 用于鉴别ⅰ型鸭肝炎病毒的引物组 | |
| CN103525951A (zh) | 用于检测传染性造血器官坏死病毒的lamp引物及应用 | |
| CN101629217A (zh) | 猪流感病毒rt-lamp检测试剂盒及其检测方法 | |
| CN102329893B (zh) | 猪圆环病毒ⅱ型、猪细小病毒和猪伪狂犬病毒的多重pcr检测及其专用引物 | |
| WO2011025329A3 (en) | Detecting methods of dna amplification using new intercalating agent | |
| CN103756999A (zh) | 一种适用于从鱼血液中快速提取基因组dna的方法 | |
| CN106884056A (zh) | 检测寨卡病毒的引物、试剂盒和方法 | |
| CN103940922B (zh) | 一种化妆品中五种禁用除螨剂的测定方法 | |
| CN101921844B (zh) | 松材线虫快速检测方法及试剂盒 | |
| CN101307350A (zh) | 一种鳗弧菌快速检测试剂盒及其检测方法 | |
| CN103725801B (zh) | 鸭黄病毒与鸭圆环病毒二重rt-pcr检测试剂盒 | |
| CN103583508A (zh) | 一种液基细胞处理保存液的制备方法及其应用 | |
| WO2007032817A3 (en) | Pure mirna sample preparation method | |
| JP2004180637A (ja) | 核酸の分離精製装置 | |
| JP2004113042A (ja) | 核酸の分離精製装置 | |
| Paylan et al. | A comparison of six total Rna isolation methods for diagnosis of GYSVd-1 (grapevine yellow speckle Viroid-1) on vitis vinifera L. leaves | |
| CN103320541B (zh) | 鸭黄病毒与鸭瘟病毒二重rt-pcr检测试剂盒 | |
| CN103305631A (zh) | 小双节rna病毒检测试剂盒及其检测方法 | |
| CN109619659A (zh) | 一种烟草核酸提取物的制备方法及其在烟草中的应用 | |
| RU2012149631A (ru) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ aRNA И СПОСОБ АНАЛИЗА ЭКСПРЕССИИ ГЕНА |