SU940650A3 - Способ получени 11 @ -оксистероидов - Google Patents

Description

(5) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 1Ш-ОКСИСТЕРОИДОВ

Изобретение относитс  к усовершенствованному способу получени  11 (Ь -оксистероидов общей формулы СНгОН -ОН :-- проста  или двойна  св з X - водород, метил; V - метилен, этилен,  вл ющихс  ценными лекарственными веществами. Известен способ получени  роксилированных 17 oL-гидроксистерои дов прегнанового р да путем ферментативного гидроксилировани  предварительно этерифицированных в положении П-дезоксистероидов пре-гнанового р да, после чего полученные П( -гидрокси-17(1-ацилоксистеро иды омыл ют l. Недостатками способа  вл етс  многостадийность и необходимость проведени  гидролиза 1 1/Ь -гидpoкcи-17dL-aцилoкcиcтepoидoв , при котором образуетс  большое количество побочных продуктов, с чем св зана необходимость дорогосто щей очистки конечных продуктов. Цепь изобретени  - упрощение процесса . Поставленна  цель достигаетс  тем, что в способе получени  11/Ь-оксистероидов общей формугы (1 ) путем ферментативного гидроксилировани  11-дезоксистероидов с помощью культуры species Curvularia Lunata ферментативному гидроксилированию подвергают 11-дезоксистероид общей формулы о9 .,-0

где , X иЛГ имеют указанные значени ;

R - д алкил) алкил,

с последующим выделением целевых продуктов.

Предлагаемый способ обеспечивает проведение процесса в одну стадию, вместо трех по известному способу, что упрощает процесс. Кроме того, способ обеспечивает возможность получени  11-ГИДРОКСИ-Д1 ,-стероидов общей формулы (1 ) с высоким выходом.

Следует также отметить, что дл  осуществлени  предлагаемого способа необ зательно в качестве исходных соединений примен ть чистые продукты 1 1-дезоксистероиды общей формулы (П если их, например, полумают как сырой продукт по следующему методу.

Из раствора 1 г ( ммоль ) тозилата пиридини  и 10 г (28 ммоль) 17c 21-дигидроксистероида в 80 мл диметилформамида и 700 мл бензола дл  удалени  следов воды при температуре бани IIO-IBO C {глицеринова  бан ) отгон ют 300 мл бензола при применении водоотделител . Затем в течение непродолжительного времени охлаждают , добавл ют 2Ц мл (110-1 0 ммоль) триалкилового эфира ортокарбоновой кислоты и 1 ,5 ч отгон ют остаточный бензол. После добавлени  5,2 г пиридина реакционный продукт в высоком вакууме концентрируют далее до сухого остатка.

Реакци  протекает количественно. Остающийс  после концентрировани  17 оС, 21-(1-алкокси-алкилидендиокси) -стероид имеет сначала масл ную консистенцию , однако чаще быстро кристаллизуетс . Степень чистоты дл  последующего микробиологического гидроксилировани   вл етс  совершенно достаточной, если прилипшие к кристаллизату остатки примен емых реактивов не мешают ферментативному катализу. Аналогично получают D-roмостероиды общей формулы (П).

Пример. а.Вг тозилата пиридини  и 80 г 17, 21-дигидрокси- -прегнен-3 ,20-диона в 5бО мл диметилформамида раствор ют и разбавл ют с л бензола. После этого отгон ют 1 ,5 л бензола при температуре бани 120с через водоотделитель . В гор чий реакционный раствор медленно приливают 192 мл триэтилового эфира орто-уксусной кисЛОТЫ и затем 1 ч отгон ют бензол и другие легколетучие реакционные компоненты, добавл ют 96 мл пиридина и при температуре бани в глубоком вакууме сгущают полностью до сухого остатка в течение 2 ч. Получающийс  сначала масл ный остаток быстро кристаллизуетс .

Получают 113 г 1 7й1-21 - (1-этокси0 -этилидендиокси)- -прегнен-3,2О-диона в форме желтых кристаллов с т.пл. 89-90°С.

б). 2-литрова  колба Эрленмейера, котора  содержит 500 мл стерилизованного 30 мин при в автоклаве питательный раствор из .3% глюкозы , .: corn steep 1, НаМОз 0,2, К Н2Р040,1; 0,2; ИдЗОд Н О 0,05, Ре5047Нг О 0,002 и КС1 0,05, засевают лиофильной культурой Culvularia Lunata NRRL (2380) и 60 ч при 30 С передвигают в ротационном встр хивателе. Эта культура выращивани  (250 мл)служит дл  прививки 20-литрового ферментатора, который загружен с 15 л стерилизованной при 121С и 1,1 ати питательной среды, состо щей из 2 глюкозы и 2 corn steep.

Далее при добавлении силикона SH в качестве антивспенивател  при 29° С и 0,7 ати при аэрировании (10 л/мин) и перемешивании смесь герметизируют 2k ч. Затем 1,5 л этой культуры при стерильных услови х отбирают и ею заполн ют 20-литровый основной ферментатор, который содержит 14 мл ранее стерилизованной питательной среды из 3% Corn steep и 0,7% глюкозы , при рН 6,5.

После фазы выроста (12 ч) при услови х предварительной ферментации при стерильных услови х добавл ют 7,5 г сырого 17oL , 21-(1-этокси-этилдендиокси )-4-прегнен-3,20-диона, со держащего 6,43 г чистого-вещества, растворенного в 100 мл диметилформамида , перемешивают и аэрируют. Ход ферментации контролируют путем отбора проб, которые анализируют с помощью тонкослойной хроматографии после экстрагировани  метилизобутилкетоном . Через 38 ч контакта превращение субстрата заканчивают.

Claims (1)

1. Патент ФРГ № 1618599, кл.12 о 25/05,опублик.197(прототип).