SU867315A3

SU867315A3 - Способ получени хлоргидратов замещенных антрациклинов

Info

Publication number: SU867315A3
Application number: SU792763508A
Authority: SU
Inventors: Пенко Серджио; Гоцци Фаусто; Ангелуччи Франческо; Аркамоне Федерико
Original assignee: Фармиталиа Карло Эрба С.П.А. (Фирма)
Priority date: 1978-05-09
Filing date: 1979-05-08
Publication date: 1981-09-23
Also published as: HU180298B; NO791520L; FR2425446A1; IL57219A; IE790906L; AU4668479A; GB2021571A; BE876099A; US4199571A; JPS5513264A; IT7823151A0; NO147310C; SE7903972L; IT1098212B; ZA792177B; US4216157A; AT363186B; NO147310B; GB2021571B; US4229355A

Description

Изобретение относитс к способу получени новых хлоргидратов замеще ных антрациклинов, обладающих ценны . ми противоопухолевыми свойствами. Известна реакци взаимодействи тетрациклиновых агликонов с произво ными даунозамина 1 . Цель изобретени - получение новых соединений, расшир ющих арсенал срЬдств воздействи на живой организм . Поставленна цель достигаетс получением хлоргидратов замещенных антрациклинов общей формулы группа COCHj или СОСН/ ОН-, ОН; R - OCHjf R - Н, -группа COCHj или COCHijOHj или R -ОН; R - Н; R - OCHj,, аключающийс в том, что 9,10-ангидо- N -трифторацетилдауномицин фор О ОН NHtOCF, растворенный в метиловом спирте, сначала восстанавливают цианоборогидридом натри в присутствии 0,1 н. водной сол ной кислоты ири комнатной температуре до соответствующего 9, 10-ангидро-13-дигидро- N -трифторацетилдауномицина формулы ОН . СНОНСН,

затем раствор соединени III в хлороформе эпоксидируют метахлорпербензойной кислотой, при температуре кипени реакционной смеси 3-3,5 ч с получением 9-дезокси-9,10-эпоксид-13-дигидро- N-трифторацетилдауномицина в виде смеси зпимерных эпоксидов, которые подвергают взаимодействию с диметилсульфоксидбм и дициклогексилкарбодиимидом , использу в качестве катализатора трифторацетат пиридини , с получением 9-дезокси-9,10-эпоксиддауномицинона формулы

О

О ОН

который,в свою очередь, обрабатыва ,ют метиловым спиртом при кип чении реакционной смеси в течение 15 ч в присутствии каталитического количества пара-толуолсульфокислоты, полученную сМесь раздел ют хроматографическина колонке с силикагелем и с применением в качестве элюирующего растворител смеси этилового эфира уксусной кислоты, толуола и петролейного эфира (3:2:2 об/об) с получением эпимерных 10-метокси-дауномицинЬна формулы V и 9,10-диэпи-10-метокси-дауномицинона формулы VI

О ОН

ОН

О ОН Н ,0(На - ОН

COCHj

Si

ОН он

осуществл ют реакцию соединений Y или VI в безводном хлористом метилене с 1-хлор- N, 0-трифторацетилдаунозамином в присутствии эфирного раствора трифторметансульфоната серебра . используемого в качестве катализатора , о получением соответствующих N, О-защищенных трифторацетилглюкозидов , затем последовательно отщепл ют 0-защищающую трифторадетильную rpyfiny путем реакции с метанолом при комнатной температуре в течение 5ч и отщепл ют N-защищающую трифторацетильную группу гидролизом 0,1 н. водной гидроокисью натри в течение 30 мин при 0°С, в результате чего получают 10-метоксидауномицин и 9, 10-диэпи-10-метоксидауномицин и выдел ют их в виде хлоргидратов; эти глюкозиды в хлороформе затем подвергают реакции с бромом с получением их соответствующих 14-бром-производных бромпроизводные гидролизуют при комнатной температуре в течение 100ч муравьинокислым натрием с получением соответственно 10-метокси-адриамицина и 9,10-диэпи-10-метоксиадриамицина , которые выдел ют в виде их хлоргидратов .

В качестве исходных реагентов дл получени новых глюкозидов примен ютс антрациклиноны V и V/ , которые ранее были неизвестны. Их синтезируют из 9,10-ангидро- N - трифтораЦетил-даунорубицина формулы VII .

Чтобы осуществить эпоксидирование сопр женной двойной св зи при С-9 и С-10 в соединении VII , сначала восстанавливают кетонную функциональную группу до соответствующего oL, ft ненасыщенного спирта. Восстановлением с использованием цианоборогидрида натри в приемлемом смешивающимс с водой органичееком растворителе , таком как диоксан, или диметоксиэтан , в присутствии минеральной кислоты получают с количественным выходом соответствующее 13-дигидропроизводное формулы Viit . Это соединение затем подвергают реакции эпоксидировани , использу мета-хлорпербензойную кислоту в апротонном растворителе , таком как хлористый метилен ,, хлороформ или ацетон.

Реакци эпоксиидировани протекает в диапазоне температур от 25 до , с образованием 9,10-эпоксид13-дигидро- N -трифторацетилдаунорубицина формулы Х в виде эпимерной смеси. Регенерацию кетонной функциональной группы с одновременным расщепленйем глюкозидной св зи осуществл ют окислением диметилсульфоксидом и дициклогексилкарбодиимидом,использу в качестве катализатора трифторацетат пиридини . Выход реакции окислени определ етс количеством катализатора: при отношении вещества к соли 1:1 с высоким .выходом получают соединение формулы х .

Последующее введение метоксильной группы, которое достигаетс раскры тием оксиранового кольца соединени X с помощью метилового спирта в присутствии каталитического количества пара-толуолсульфокислоты., позвол ет получить смесь агликонов формул V и VI в отношении 7:2 (приблизительно). Эту смесь раздел ют хроматографическ на силикагеле. Соединени V и VI различаютс стереохимически при С-9 и С-10 центрах. Фактически, толь.ко соединение V дает 7,9-изопропилиденовое производное формулы )( путем обработки 2,2-диметоксипропаном, с гидроксильными группами при С-7 и С-9 в циположении .

Спектр ЯМР соединений .V и VI показал , что С-10 Н имеет эквагориальную ориентацию в соединении V и осевую ориентацию в соединении VI . Обработкой соединени VI 2,2-диметокси-пропаном получают 7-метокси-9,10-диэпи10-метоксидауномицинон формулы Х1 . Реакцию сочетани упом нутых агли конов формул V и VI с N, О-защищенны галоидированным сахаром формулы с целью образовани глюкозидной св зи осуществл ют в приемлемом органическом растворителе, таком как хлорофор хлористый метилен, тетрагидрофуран, в присутствии соли серебра, вл ющей с катализатором. Таким образом, полученный N.О-защищенный глюкозид сна чала обрабатывают метиловым спиртом дл отщеплени 0-защищающей тоифторацетильной группы у остатка сахара в результате чего получают N-защишен ные глюкоз иды VIV и XV . Эти продукты путем м гкой щелочной обработки прев ращают с количественным выходом в 10 метоксидаунорубицин и 9,10-диэпи-10метоксидаунорубицин (целевые продукты , где R СОСНз; R rt ° ОСНз: R Н; R ОН; R СОСНЗ; R Н;. R ОСНг,) . Другие два аналога доксорубицина получают из приведенных целевых прогдуктов через их 14-бромпроизводные. Новые соединени формулы I обладают противоопухолевой активностью и могу использоватьс в качестве лечебных -препаратов дл лечени опухолевых за болеваний у млекопитакиаих. Пример 1. 9,10 ангидро-.13дигидро-м-трифторацетилдаунорубицин формулы V11I . В 2000 мл метилового спирта раствор ют 6,0 г (10 ммоль) 9ДО-ангидро- N -трифторацетил-даунорубицина формулы VU. PacTBOD подкисл ют 50 мл 0,1 раствора сол ной кислоты в воде и затем осуществл ют реакцию с водным раствором NaCNBH (4,0 г в 200 м Н,О) . Реакционную смесь перемешиваю при комнатной температуре в течение 48 ч, поддержива рн ниже 4 добавлением 0,1 н. водной сол ной кислоты. После нейтрализации избытком твердого бикарбоната натри раствор испар ют досуха в вакууме, и остаток, раст воренный в хлороформе, промывают водой . Хлороформовый раствор сушат над безводным сульфатом натри , и раство ритель окончательно удал ют в вакууме дл получени сырого соединени Vlil. Чистый 9,10-ангидро-13-дигидроN-трифторацетил-даунорубицин получают путем хроматографической очистки на колонке с кремневой кислотой,, использу в качестве элюируюшего растворител , систему хлороформ-ацетон (95:5 об/об). Продукт плавитс при (с разложением). Максимумы поглощени в видимом спектре (СНСЦ) наход тс при 520 и 556 мкм. Пример 2. Синтез 9-дезокси9 ,10-эпоксидо-13-дигидро- N -трифторацетилдаунорубицина формулы IX . К раствору 8 г (13,28 ммоль) 9,10ангидро-13-дигидро- N -трифторацетилдауномицина формулы V/C в 400 мл хлороформа добавл ют 1,08 г (6 ммоль) мета-хлорналбензойной кислоты и реакционную смесь выдерживают при кипении в течение 3 ч. Первоначальный вишневый цвет раствора постепенно мен етс на красный. Реакционную массу затем охлаждают и промывают водным насьиценным раствором NaHCOgi водой, и сушат над безводным сульфатом натри . Растворитель вьшаривают досуха в вакууме. Остаток (2,0 г) с максимумом в спек;тре видимого света (CHClg) при 490, 504, 540 мкм (что согласуетс с исчезновением двойной св зи при С-9, С-10 соединени Vif ) представл ет собой эпимерные эпоксиды и примен етс в псследуклцих отгщи х без дополнительной очистки. Пример 3. 9-Дезокси-9,10эпоксид-дауномицинон формулы X . К перемешиваемому раствору 3,85 г (6 ммоль) 9-дезокси-9,10-зпоксид13-дигидро- N -трифторацетилдауномилина формулы IX в 100 мл безводного диметилсульфоксида в атмосфере азота последовательно добавл ют 3,8 г (18 юль) дициклогексилкарбодиимида, 0,5 мл (6 мадоль) безводного пиридина и 0,23 мл (3 ммоль) трифторуксусной кислоты. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 мин, затем разбавл ют 500 мл хлорофорйа . Хлороформовый раствор тщателы. но промывают водой, сушат и выпаривают досуха. Остаток раствор ют в этиловом эфире уксусной кислоты, отфильтровывают нерастворимую дициклогексилмочевину и фильтрованный раствор выпаривают досуха, получа соединение X с количественным выходом. ИК-спектр: 1720 см- 1580 и 1620 см хинон.. ЯМР-спектр (CDCU)cr : при 2,27 . (1, СНг-С 0) 4,10 (синглет, OGHj) и 4,81 Л1, Н-10). П р и ме.р 4. Синтез 10-метокси-дауноми .цинона формулы V и 9,10диэпи-10-метоксидауномицинона формулы VI . Раствор 4,3 г 9-дезокси-9,10-эпоксид-дауномицинона формулы X в 500 мл безводного метилового спирта нагревают при температуре кипени с обратным холодильником в течение 15 ч в присутствии каталитического количестг а пара-толуолсульфокислоты. Реакционную смесь затем охлаждают и выпаривают досуха. Остаток раствор ют в 300 мл хлороформа, промывают водным . 5%-ным раствором бикарбоната натри , водой, сушат над безводным сульфатом атри и выпарив ают досуха. Сырой атериал представл ет собой смесь соединений Y и V/ в отношении 7:2,при лизительно. Его подвергают хроматографическому . разделению иа колонке с кремневой кислотой, использу в к честве элюирующего вещества смесь этилацетата, толуола и петролейного эфира (3:2:2 об/об). Получают 1,5 г чистого соединени формулы V и 0,42 г чистого соединени , формулы У/ с 72%-ным выходом 10 метокси-дауномицинона формулы у . Т пл. 22оРс (с разложением). +206 (с 0,1, СНС1э). Масс-спектр: т/ё 428 (М), 396 (М-СНзОН), 353 (M-CHaOH-CHjCO)J ЯМР (CDCU) сЛ : 3,51 (синглет, C-lO-dCHj); 4,66 (дуплет, С-10 Н)j 5,31 (квадруплет, С-7Н), 13,6 и 14, (синглет, ОН фенола). 9,10-диэпи-10-метоксидауномицино формулы VI т.пл. 15бс (с разложени ем),. Масс-спектр: т/е 428 (М ). ЯМР-спектр (CDCl) : 3,64 (син глет, C-10-OCH,j)j 4,89 (синглет, С10Н ), 5,12 (квадруплет, С-7Н), 13,8 и 14,21 (синглет, фенольный ОН). Пример 5. 7,9-Изопропилиден-10-метоксидауномицинон формулы XI . К раствору 0,1 г соединени VII в 10 мл безводного диоксана добавл ют 5 мл 2,2-диметОксипропана и каталитическое количество пара-толуолсуль фокислоты. Реакционную смесь выдер . живают при 50°С в течение 48 ч, затем разбавл ют 50 мл хлороформа и промывают водным насыщенным раствором бикарбоната натри , водой и сушат над безводным сульфатом натри . Получаемый выпариванием органическо го растворител сырой остаток подве гают хроматографической о 1истке на колонке с кремневой кислотой, испол зу в качестве элюирующего раствори тел смесь хлороформа и ацетона в отношении 95-5 об/об. Получают чи тый 7,9-изопропилиден-10-метокси-да номицинон формулы XI . Масс-спектр продукта: т/е 468 (М-) 410 (М-(СНз)о,СО) 378 (М-(СНа)2СО-СНо,ОН) . ЯМР-(СОС1з) СЛ : 1,2 и 2,47 (синглет , 2CHj)-, 5,47 (мультиплет, С-7Н Пример 6. 7-Метокси-9,10диэпи-10-метоксидауномицинон .формулы XII . Обработкой соединени VI 2,2-дим тoкdипpoпaнoм в соответствии.с мето дик (й. примера 5 получают 7-метоксй9 ,10-ДИЭПИ-10-метоксидауномицинон формулы XV . Масс-спектр: т/е 422 ()-i Пример 7. Синтез хлоргидрата 10-метоксидаунорубицина МАР87. К раствору 0,43 г (1 ммоль) 10метоКСидауномицинона формулы Y в 200 мл безводного хлористого метиле на добавл ют 0,43 г (1,2 ммоль) 1хлор- N,0-трифт6рацетилдаунозамина. Затем при сильном перемешивании в течение Ю мин при комнатной температуре добавл ют к раствору 0,32 г (1,2 ммоль) в 26 мл безводного серного эфира. Затем к реакционной смеси добавл ют 0,2 мл (1,4 ммоль) безводного этилметилпиридина. Спуст 40 мин смесь обрабатывают насыщенным водньии раствором бикарбоната натри и отделившуюс органическую фазу испар ют в вакууме. Остаток раствор ют в 100 мл метанола и выдерживают при комнатной температуре в течение 5 ч. Остаток, который получают при удалении растворител , прдвергают хроматографической очистке на колонке с кремневой кислотой, ис .пользу смесь хлороформа и ацетона в отношении 4:1 об/об., в качестве элюирующего растворител . Помимо непрореагировавшего соединени V получают 0,26 г чистого 10-метокси- N трифторацетилдаунорубицина формулы I. Т.пл. продукта 190°С (с разложением ) . Осуществл ют тонкослойную хроматографию на пластинке Кизельгель F (Мерк) с использованием системы растворителей хлороформ и ацетон .(4:1 об./об. R 0,3) ; ЯМР-спектр (СОС1з)сА : 1,30 (дуплет , СН 2,-CH)V 3,52 (синглет, С-10 ОСИ ); 5,30 (мультиплет, С - 7Н) и 5,53 (мультиплет, С-1 - HcixWH 7 Гц). 10-Метоксидаунорубицин (0,26 г) раствор ют в 0,-1 н. водной гидроокиси натри (50 мл) и после выдержки его при О С в течение 30 мин рН раствора регулируют до 8,6 и повторно экстрагируют раствор хлороформом. Объединенные экстракты, высушенные над безводным сульфатом натри , концентрируют до малого объема и подкисл ют до рН.4,5 0,1 н. метанольным хлористым водородом, в результате чего выдел ют кристаллический -; тхлоргидрат Ю-метоксидаунорубицина. Т. пл. 159°С (с разложением). + 316 (с 0,05, СНзОН); тонкослойна хроматографи на пластинке Кизельгель (Мерк) , использу в качестве растворител систему из хлороформа, метилового спирта и воды (13:6:1 об./об). Rf 0,37. Пример 8. 9,10-диэпи-10метоксидаунорубицин MAR 96. Осуществл реакцию сочетани между антрациклоном формулы V) и 1гхлорN ,0-трифторацетилдаунозамином, как описано в примере 7v получают 9,10диэпи-10-метокси- N -трифторацетилдаунорубицин , из которого после щелочной обработки в м гких услови х 0,1 н. водной гидроокисью натри в течение 30 мин при получают , 10-диэпи-10-метокси-даунорубицин в виде хлоргидрата. Продукт имеет т.

пл. 140С (с разложением) . + 252 (С 0,05, CHjOH).

Пример 9. Синтез 10-метокси-доксорубицина MAR 95.

Pac-FBOp 10-метоксидаунорубицина в смеси метилового спирта и диоксана обрабатывают бромом, в результате чего получают его 14-бромпроиз видное, последующей обработкой водным раствором муравьинокислого натри при комнатной температуре в течение 100 ч получгиот 10-метокси-доксорубицин , выдел емый в виде хлоргидрата , Т. пл. (с разложением).

Осуществл ют тонкослойную хроматографию на пластинке Кизельгель (мерк) HF254 использу в качестве

Противоопухолева активность

10 (R)-метоксидоксорубицина и 9,10-диэпи 10-метокси-даунорубицина в сравнении с активностью даунорубицина и доксорубицйна ъ

раствор к цей системы смесь хлороформа , метилового спирта, воды и уксусной кислоты (8:2:0,6:1,4 об./об) Rf - 0,45.

. Пример 10. Синтез 9,10 диэпи-10-1«ютоксидоксорубицина.

Как и в примере 9, путем обработки 9,10-диэпи-10-метоксидаунорубицина бромом и затем муравьинокислым натрием получают 9,10-диэпй-10-метtq оксидрксорубицин формулы YI , который вьщел ют в видe хлоргидрата.

Приведенные в табл. данные иллюстрируют противоопухолевую активность новых антрациклиновых производных 1 & против лимфолейкоз а Р зев 10-(R)-метоксидаунорубицина,

Даунорубицин

10- (R) -Метоксидаунорубицин

Доксррубицин

10- (R) -Метоксидоксорубицин

9,10-Дизпи-10-метоксидаунорУбицин

90 98

119

124 133

115 110

108 171 133 129 119

104 115 127 125 108

126 132 118 102

Соединени испытывали in vivo на мышах СДГ, зарс1женных опухолевыми клетками. После трансплантации мьошам опухоли на 5,9 и 13-й дни им делали интрэперитониально инъекции (четырехдневный перерыв после каждой инъекции ). Средн продолжительность выживани в процентах от контрольной группы В/К,% приведена в таблице.

Claims

Формула изобретени

Способ получени хлоргидратов замещенных антрациклинов общей формулы

он «VV

где R - группа СОСН j или СОСН,ОН; R - ОН; R - ОСНз : R - Н i

R;

R- - .группа СОСНо или СОСН.ОН;

или R

R - ОН; R - Н; R - ОСИ,,, отличающийс тем, что 9,10-ангидро- N -трифторацетилдауномицин формулы II

ОН9

гС-СН,

НО

NHtOtF

де смеси эпимерных эпоксидов, которые подвергают взаимодействию с диме||: тилсульфоксидом и дициклогексилкарбодиимидом в присутствии катализатора-трифторацетатпиридини , с получением 9-дезокси-9,10-эпоксид-дауномицинона формулы IV

о он OCHj

о он н ,оснз

UH

COCHj I

о он он

1386731514

V.. нокислым натрием с получением соответ-Источники информации,

ственно 10-метокси-адриамицина и 9,10-прин тые во внимание при экспертизе диэпи-10-метоксиадриамицина, которые 1. Патент СССР 583763,

выдел ют в виде их хлоргидратов.кл. С 07 Н 15/24, опублик. 05.12.77.