SU741805A3 - Питательна среда дл идентификации - Google Patents

Description

(54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ESCHERiCHfA COli

I

Изобретение относитс  к области микробиологии и может быть использовано дл  идентификации микроорганизмов.

Известна питательна  среда дл  идентификации Escherichia соП, содержаща  питательную основу, лактозу, индикатор, ингибитор грамположительной микрофлоры и воду 1.

Однако известна  среда не обеспечивает быстрой идентификации Escherichia coli.

Целью изобретени   вл етс  ускорение ;идентификации Escherichia col i.

Эта цель достигаетс  тем, что среда дополнительно содержит арабинозу, п-кумаровую кислоту, дигидроксибензойную кислоту, сапонин, экстракт, в качестве питательной основы она содержит гелизат, в качестве индикатора - анилиновый голубой, а в качесгве ингибитора грам-положительной микрофлоры - желчные соли при следующем соотношении компонентов , г/л:

Гелизат

5,0 - 6,0 4,0 - 6,0 Лактоза

4,0 - 6,0 Арабиноза 0,75 - 1,25 Дрожжевой экстракт

ИДЕНТИФИКАЦИИ

- 1,25

0,75

Сапонин -- 1.5 0,05

п-Кумарова  кислота

Дигидробензойна 

0,05 - 1,5

кислота

1,5 - 4,5

Желчные солн , 15 - 35 (мл)

АНИЛИНОВЫЙ голубой

Вода Остальное

Предлагаема  среда содержит источники сахара , которые избирательно ферментируютс 

10 бактери ми с образованием кислот, и также содержит чувствительный к рН индикатор анилиновый голубой, цвет которого переходит в голубой в кислой среде. Среда также содержит ингибиторы дл  других грам-отрицательных ор19 ганизмов, глжным образом К labs ie На. Комбинаци  ингибиторов содержит кумариновую кислоту, 3,4-дигидроксибензойную кислоту и сапонин .

20

Эта комбинаци  ингибирует Klebsiella к позвол ет расти Escherichia соП.

Среда содержит тдкже поверхностно-активные вещества и ингибиторы дл  грам-положительных организмов. Дл  предлагаемой среды примен ют также источники питательных веществ, способствую (1цих росту Escherichia coli, биологический индикатор рН, реагирующий на кислоту, образуемую Е.со1 i, и комбинацию п-кумаро кислоты, сапонина и 3,4-дигидроксибензойной кислоты дл  ингибировани роста Klebsiella, также другие ингибиторы дл  ингибировани  роста грам-положительных микроорганизмов. Большинство штаммов E.col i ферментируют лактозу с образованием кислоты, о-ара&1нозу примен5пот в детектирующих средах. Подход щим заменителем гелизата  вл етс  триптиказа, финтон и псиишептон. Смеси желчных солей примен ют дл  ингабировани  роста грам-положительных организмов . Эти смеси содержат экстрактивные вещества желчи и  вл ютс  смесью поверхностно-активных веществ, ингибирующих грам-положительные организмы. Другим подход щим поверхностно-активным веществом  вл етс  таурохолева  кислота. Комбинаци  3,4-дигидроксибензойной кислоты , сапонина и п-кумаровой кислоты прим н ют дл  ингибировани  роста Klebsiella и других подобных E.coli организмов. Может примен тьс  о- и м-кумарова  кислоты. Предпочтительным индикатором дл  среды  вл етс  анилиновый . В качестве источника витаминов добавлАю дрожжевой или др5той подход щий биологический экстракт в количестве 0,95-1,05 г/л. Перед применением среды ее рН должно быть 7,5. Среду приготавливают следующим образо Смешивают 0,2 г п-кумаровой кислоты, 0,2 г 3,4-дигидроксибензойной кислоты с 3 1 н. МаОН/100 мл среды и 1/4 требуемого объема дастиллированной воды и получают 100 мл среды двойной крепости. 1 Эту смесь нагревают до растворени  всех твердых веществ . Раствор довод т до 95 мл дистиллир ванной водой и к нему добавл ют 1,0 г гелизата, 1,0 г лактозы, 1,0 г L-арабинозы, 0,6 г смеси желчных солей и 0,2 г дрожжев экстракта. рН устанавливают 6,2 и добавл ют 5 мл индикатора - восстановленного анилин вого голубого с ОД г сапонина. Провер ют и довод т до 7,2 добавлением основани . Раствор стерилизуют фильтрованием, помеща в стершп1ную емкость и мет т. Питательную среду примен ют следующим образом. Среду загружают в углублени  карточек дл  анализа мочи, сушат при температуре ниже О С и карточки покрывают дл  защиты среды. Углублени  заполн ют средой наполовину их объема. Затем, когда остающийс  объем углублений заполн ют образцом мочи, то среда снова гидратируетс  до нормальной однократной концентрации крепости, при которой и работает . Эта среда может обнаруживать концентрации EiColi в 10 клеток/мл за 12 ч. Более долгое врем  требуетс  при более низких концентраци х . Предлагаема  среда ускор ет идентификацию Escherichia coli. Фор м у ла изобретени  Питательна  среда дл  идентификации Escherichia coli, содержаща  питательную основу, лактозу, шздикатор, ингибитор грам-подожительной микрофлоры и воду, отличающа с  тем, что, с целью ускорени  идентификации Escheridiia coli, она дополнительно содержит арабинозу, п-кумаровую кислоту, дигидроксибензойную кислоту, сапонин, дрожжевой экстракт, в качестве питательной основьь она содержит гелизат, в качестве индикатора анилиновый голубой, а в качестве ингибитора грам-положительной микрофлоры - желчные соли 1ФИ следующем соотнощении компонентов , г/л: Гелизат5,0 - 6,0 Лактоза4,0 - 6,0 Арабиноза4,0-6,0 Дрожжевой экстракт0,75 - 1,25 Сапонин0,75 - 1,25 п-Кумфова  кислота0,05 - 1,5 Дигидроксибензойна  кислота0,05 - 1,5 Желчные соли1,5 - 4,5 Анилиновый голубой15 - 35 (мл) ВодаОстальное. Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе 1. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследовани . Под ред. М. О. Биргера. М., Медицина, 1973, с. 58.

Claims (1)

1. Фор му ла изобретения

   20 ^!

   Питательная среда для идентификации Esche* rich fa coli, содержащая питательную основу, лактозу, индикатор, ингибитор грам-положительной микрофлоры и воду, отлиЧающа₂₅ яся тем, что, с целью ускорения идентификации Escherichia coli, она дополнительно содержит арабинозу, п-кумаровую кислоту, дигидроксибензойную кислоту, сапонин, дрожжевой экстракт, в качестве питательной основьь она содержит гелизат, в качестве индикатора анилиновый голубой, а в качестве ингибитора грам-положительной микрофлоры - желчные соли при следующем соотношении компонен-

   тов, г/л: _з5 Гелизат 5,0 - 6,0 Лактоза 4,0 - 6,0 Арабиноза 4,0 - 6,0 Дрожжевой экстракт 0,75 - - 1,25 Сапонин 0,75 - 1,25 п-Кумаровая кислота Дигидроксибензо иная 0.05 - 1,5 кислота 0,05 - 1,5 Желчные соли 1,5 - 4,5 Анилиновый голубой 15 - -35 (мл) Вода Остальное.