SU726473A1

SU726473A1 - Способ количественного определени тиолов

Info

Publication number: SU726473A1
Application number: SU772536713A
Authority: SU
Inventors: Алексей Иванович Бусев; Лев Иванович Тетерников
Original assignee: Центральный научно-исследовательский институт шерстяной промышленности
Priority date: 1977-10-26
Filing date: 1977-10-26
Publication date: 1980-04-05

Description

Изобретение относитс к области аналитической химии, а именно к споЬобу количественного определени сульфгидрильной группы, и мо сет.быть использовано дл экстракционно-фотометрического определени микрогра дмовых количеств тиолов. Известен способ количественного определени тиолов, заключающийс в обработке анализируемой пробы пхлормеркурбензоатом , с последующим фотометрированием полученного окрашенного раствора ., Недостатком способа вл етс низка точность определени . Наиболее близким- к изобретению по технической сущности и достигаемому результату вл етс способ количественного определени тиолов, заключающийс в последовательной обработк анализируемой пробы дифенилкарбазоном , ацетатом натри в смеси этанола и бензола с последующим титрованием полученного раствора п-диалкиламинофенилмеркурацетатЬм до по влени устойчивой сиреневой окраски 2. Недостатком способа вл етс низка чувствительность,т.е.способ позвол ет определ ть только милиграммовые количества тиолов в пробе. Целью изобретени вл етс повышение чувствительности определени . ПосФавленна цель достигаетс способом количественного определени тиолов , заключающимс в обработке анализируемой пробы п-диалкиламинофенилмеркурацетатом при мольном соотношении между тиолом и п-диалкиламинофенилмеркурацетатом 1:1,5-2 с последующей обработкой полученного раствора дифенилкарбазоном в бензоле при рН среды 5,8-10,2 и спектрофотометрированием окрашенного бензольного сло . . Отличительным признаком .способа вл етс обработка анализируемой пробы п-диалкиламинофенилмеркурацетатом при мольном соотношении между тиолом и п-диалкиламинофенилмеркурацетатом 1:1,5-2, последующа обработка полученного раствора дифенилкарбазоном в бензоле при рН среды 5,8-10,2 и спектрофотометрирование окрашенного бензольного сло . Пример 1. б экстракционную пробирку с .притер той пробкой ввод т 10 МП водного 10 М раствора диэтилдитиофосфата , приливают 10 мл

vi

2 10 М водно-этанольного стандарт .ногораствора п-диметиламинофенилмеркурацетата , добавл ют буферный раствор с рН 10,2, приливаю 10 мл 5-10 М раствора дифенилкарбазона в .бензоле, довод т объем водной фазы до 40 мл дистиллированной водой, стр хивают не менее 1,5 миН и измер ют оптическую плотность бензольного сло при 540 мм на любом фотозлектроколориметре на фоне холостого опыта. Ко ичеЬтво непрореагировавшего п-диметиламинофе нилмеркурацеТата наход т по калибровочному графику , построенному в тех же услови х в координатах oпти :ecкa плотность количество 2 -Ю . М раствора п-диметиламйнофенилмеркурацетата . Количество диэтилдитофосфата вычисл ют по формуле:

а T.V.r, где а - количество найденного тиола,

мкг; .

Т - концентраци п-диметиламинофенилмеркурацетата , мкг/мл; V - объем п-диМетиламинофенил- меркурацетата , пошедшего на св зывание определ емого тиола , мл;

Г - отношение ЙоЙёкул Ё)НогЬ определ емого тиола к молекул рному весу п--диметиламинофенилмёркурацетата . Объем V . наход т как разность между введенным объемом п-дйметиламиноКосвенное экстракционнтиолов (п 5

фенилмеркурацетата (10 мл) и объемом найденным по калибровочному графику, т,е. по измеренной оптической плотности бензольного сло .

Результаты определений приведены в таблице.

Примеры 2-4. Определение провод т с помощью стандартного раствора п-диметиламинофенилмеркурацетата с экстракцией при рН 6,5 или 8,0 в услови х примера 1.

Примеры 5и6 Определение провод т с помощью стандартного раствора п-диэтиламинофенилмеркурацетата при рН 8,5 или 7,0 в услови х примера 1.

К преимуществам предлагаемого способа относ тс повышение чувствительности определени по сравнению с чувствительностью известного титриметрического сгособа на пор док; универсальность способа, который позвол ет определ ть различные тиолы в одинаковых услови х; возможность определени микрограммовых количеств .тиолов, что необходимо дл биологи- . ческих и других p6bekTOB; больша разница в спектрах поглощени исходных веществ и фотометрируемого комплекса; большой коэффициент мол рного погашени фотометрируемого комплекса (0,) и степень однократного извлечени (95%). .

Таблица :

отометрическое определение х: 0,95)

Ди этилди тирфосфат

Claims

Цистеин Примечание. .R 2 - Формула изобретени Способ количественного определен тиолов с использованием п-диалкиламинофенилмеркурацетата и дифенилкарбазона , отличающийс тем, что, с целью повышени чувстви тельнос и определени , анализируему прибу обрабатывают п-диалкиламинофенилмеркурацетатом при мольном соотношении между тиолом п-диалкилами 41 енилмеркурацетатом. 1:1,5-2 с последующей обработкой получен-ного раствора дифенилкарбазоном в бензоПродолжение таблицы п-диметиламинофенилмеркурацетат, п-диэтиламинофенилмеркурацетат. ле при рНСреды 5,8-10,2 и спектрофотометрированием окрашенного бен .зольнего сло . Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе Г. Воуег Р. &. Фотометрическое определение SH-групп белков с п-хлормеркурбензой кислотой. - j. Amer. Chem. Soc.,1964, 76. 4331-4336.
2. Авторское свидетельство СССР № 295058, кл. G 01 N 3/40, 1971 (прототип).