SU1579465A3

SU1579465A3 - Способ получени 4 @ -галоид-антрациклингликозидов

Info

Publication number: SU1579465A3
Application number: SU843781800A
Authority: SU
Inventors: Суарато Антонино; Пенко Серджио; Джиулиани Фернандо; Аркамоне Федерико
Original assignee: Фармиталиа Карло Эрба С.П.А. (Фирма)
Priority date: 1983-08-11
Filing date: 1984-08-07
Publication date: 1990-07-15
Also published as: FR2554450A1; DK381884D0; CA1250833A; DE3428945A1; CS270411B2; FI843110A; JPS6058997A; FI78109B; CS605284A2; IT8422232A0; AU563396B2; GR80046B; HU194266B; GB8321676D0; AT384226B; SE8404005L; HUT35691A; FI843110A0; GB8420237D0; AU3168584A

Abstract

Изобретение касаетс гликозидов, в частности получени 4-деокси-4-бромдаунорубицина или 4-деокси-4-бромдоксорубицина, или 4-деокси-4-хлордаупорубицина, или 4-деокси-4-хлордоксорубицина, обладающих противоопухолевой активностью, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых более активных веществ указанного класса. Синтез ведут реакцией 4 1-эпи-4 1-0-трифторметансульфонил-N-трифторацетилзамещенного даупорубицина в водном CH 2CL 2 с тетра(N-бутил)аммоний бромидом (хлоридом) при комнатной температуре с последующим сн тием защитных групп в полученном веществе с помощью м гкого щелочного гидролиза водным раствором 0,1N. NAOH. Целевой продукт выдел ют в виде хлоргидрата или, при необходимости, его подвергают реакции с раствором брома в CHCL 3 с последующим гидролизом водным раствором формиата натри . Новые вещества эффективны против общей лейкомии. 4 табл.

Description

сд i

;с

Изобретение относитс к способу получени новых производных 4 -гало- ид-антрациклингликозидов общей формулы

0 он ,сосн2х

Н3СО О ОН

нз Ь-0-7

Ri NH2

где X - водород или гидроксильна

группа;

R( - бром или хлор,

обладающих противоопухолевой активностью .

Цель изобретени - получение новых 4 -галоид-антрациклингликозидов, обладающих большей активностью по сравнению с родоначальниками данного р да соединений - доксорубицином и да- унорубицином и ближайшим структурным аналогом-соответствующпм 4 -йодпро- изводным.

СЛ

О

Поставленна цель достигаетс путем взаимодействи 4 -эпи-4 -0-три- фторметансульфонил-Ы-замещенного да- унорубицина в водном метиленхлориде с тетра (н-бутил)аммоний бромидом или тетра (н-бутил)аммоний хлоридом с-получением соответствующих 4 -бром- или 4 -хлорпроизводных, которые подвергают м гкому щелочному гидролизу с це- лью сн ти зардитных групп, и полученный 4 -галоиддаунорубицин в случае необходимости перевод т в соответствующее 4 -галоидпроизводное доксоруби- цина.( f

Пример 1. 4 -Деокси-4 -бром- даунорубицин (Х-Н, R4-OCH3, ), 2 г бромида тетра (н-бутил)аммони ввод т в раствор 4,0 г 4 -эпи-4 -О-трифторметансульфонил-И-трифтор- ацетилдаунорубицина (2:R -OCHj, R -COCFj) в 80 мл водного метилен- хлорида. Через 1.ч при комнатной температуре реакционную смесь промывают водой и органическую фазу выпаривают в вакууме. Остаточный продукт выпаривани очищают на силикагеле, использу смесь метиленхлорид: ацетон в качестве элюента, в результате чего получают 3,5 г 4 -деокси-4 -бром-N- -трифторацетилдаунорубицина с т.пл. 130°С; FD, MS 685 (М). Тонкослойна хроматографи на пластинках Kiesel- gel (Merck F 254) с использованием системы растворител метиленхлорид: ацетон (в объемном отношении 10:1), Rf 0,5.,

В раствор 3 г 4 -деокси-4 -бром- -N-трифторацетилдаунорубицина в 20 мл ацетона ввод т 160 мл 0,1 N водного раствора гидрата окиси натри . Через 4 ч при комнатной температуре величину рН раствора довод т до 8,6 пос- редством 0,1 N кислоты и экстрагируют раствор метиленхлоридом. Растворитель выпаривают и остаточный продукт выпаривани подвергают обработке мета- нольным раствором хлористого водорода , в результате чего получают хлор- гидрат целевого продукта (2,2 г, т.пл. 180°С с одновременным разложением ) ; тонкослойна хроматографи на пластинках Kieselgel (Merck F 254) с использованием системы растворителей метиленхлорид: метанол: вода: уксусна кислота в объемном отношении 80: :20:7:3, Rf - 0,32.

Пример 2. 4 -Деокси-4 -бром- доксорубицин (Х-ОН, Rf-Br).

JQ к

94654

2 г 4 -деокси-4 -бромдаунорубици- на, полученного как описано в примере 1, раствор ют в смеси метанола с ди- оксаном. Раствор подвергают обработке обычным образом сначала бромом, в результате чего получаетс 14-бром

Q 5

5

0

5

0

5

0

результате обработки 4 -эпи-4 производное , а затем - водным раствором формиата натри , в результате чего получают 4 -деокси-4 -бромдоксору- бицин. Это соединение превращают в его хлоргидрат путем обработки мета- нольным раствором хлористого водорода . Т.пл. этого продукта Составл ет 170°С (с разложением), FD, MS 605 (М), тонкослойна хроматографи на пластинках Kieselgel (Merck F 254) с использованием системы растворител метиленхлорид: метанол: вода: уксусна кислота в объемном отношении 80:20:7:3, Rf 0,20.

ПримерЗ. 4 -Деокси-4 -хлор- даунорубицин (Х-Н, ).

В

-0-трифторметансульфонил-М-трифтор- ацетилдаунорубицина (2, R -OCHj, R -COCF) хлоридом тетра (н-бутил)аммони , как описано в примере 1, получают 4 -деокси-4 -хлордаунорубицин, т.пл. 175 С с разложением, FD, MS 545 (М), тонкослойна хроматографи на пластинках Kieselgel (Merck F 254) с использованием системы растворител метиленхлорид: метанол: вода: уксусна кислота в объемном отношении 8:20:7:3, Rf 0,32.

П р и м е р 4. 4J-Деокси-4 -хлор- доксорубицин (X - ОН, Rj- C1).

По методике примера 2 4 -деокси-4 - -хлордаунорубицин превращают в 4 -деокси-4 -хлордоксорубицин и выдел ют его в виде хлоргидрата: т.пл. 180°С с разложением; FQ масс-спектр 551 (М+). Тонкослойна хроматографи на пластинках Kieselgel (Merr-k F 254) с использованием системы растворител хлористый метилен: метанол: вода: уксусна кислота в объемном отношении 80:20:7:3 Rf 0,2.

Испытани на биологическую активность .

Соединени примеров 1,2 и 3 подвергались испытанию в услови х in vitro в сопоставлении с даунсрубици- ном (DNR) и доксорубицином (DX) на действие против клеток HeLa, клеток Р388 чувствительных и стойких и пу (Р388(ПХ).

Результаты цитотоксической активности соединений примеров 4,3 и 2 представлены в табл. 1.

Все новые производные показали себ более цитотоксичными, чем их родоначальные соединени против клеток HeLa и Р388, чувствительных к ДХ. Однако эта повышенна цитотоксич- ность вл етс более вно выраженной , если рассматривать активность данных соединений против Р 388 10 . В данном случае эти новые производные показывают 100-250-кратное увеличение цитотоксичности по сравнению с родоначальным препаратом. Данные соединени подвергались испытанию в услови х in vivo против трех различных видов экспериментальной лейкемии.

Противоопухолевое действие на ас- цитическую лейкемию Р388 приведено в табл. 2.

Как видно из табл. 2, активность действи , про вленна соединени ми примера 3 равна активности DNR, в то врем как другое производное DNR (соединение примера 1) про вл ет активность противоопухолевого действи вно более высокую, чем DNR.

Соединение примера 2 при максимально допустимой дозе (4,15 мг/кг) имеет примерно такую же активность действи , как и DX. Все эти новые соединени про вл ют активность действи против лейкемии P388/DX (см. табл. 3), в то врем как DNR и DX неэффективны.

Эти три новых соединени подвергали испытанию после их внутривенной инъекции на действие их против рассе нной общей лейкемии (Gross heuke- mia), результаты испытани приведены в табл. 4.

В данной системе соединение 3 вл етс таким же активным, как и DNR, в то врем как соединение примера 1 вл етс более активным, чем родона- чальное соединение. Соединение примера 2 показывает примерно такую же эффективность, как и соединение DX. Оба эти соединени подвергались испытанию после ввода в организм через рот и показали значительную активност действи , в то врем как DNR и 1)Х не были активны при вводе таким же образом.

, Цитотоксическое действие на клетки HeLa сопоставимо (3 нг/мл) дл 4 - бромдоксорубицина и структурного ана

лога - 4 -иодоксорубицина, в то врем как действие in -vitro против Р 388 опухолевых клеток, 4 -бромдоксоруби- цин намного более активно (0,2 нг/мл) по сравнению со структурным аналогом (5+2 нг/мл).

Аналогичным образом (по отношению к действию .in vivo против Гросс - лейкемии) был найден показатель Т/С 258% дл 4 -бромдоксорубицина при дозе 5,27 мг/кг; 4 -иодоксорубицин имеет показатель Т/С 150-183% при дозе 6,0 мг/кг.

Кроме того, смертельные случаи от отравлени составл ют 2/17 дл 4 -иод- доксорубицина и 0/20 дл аналогичного бромпроизводного.

5

Claims

20Формула изобретени

Способ получени 4 -галоид-антра- циклингликозидов общей формулы

25

СОСН2Х

ОН

/

Н3СО О ОН X нзс ---О-/

ч Mh

где X - водород NH2 или гидроксильна

группа;

R(- бром или хлор, отличающийс тем, что 41-эпи-4 -О-трифторметансульфонил-N- -замещенный даунорубицин общей формулы

о

so CFjSop где R - трифторацетил, растворенный в водном метиленхлориде, при комнатной температуре подвергают взаимодействию с тетра (.н-бутил)аммоний бромидом или тетра (н-бутил)аммоний хлоридом, получа N-защищенный гликозид общей формулы

О ОН

Н3СО О ОН I Н3С-°

1

-0- NHR2

где R, и R имеют указанные значени ,

который подвергают сн тию защитных групп путем м гкого щелочного гидролиза водным раствором 0,Ш гидроксида натри с последующим выделением целевого продукта, где X - водород, в виде хлоргидрата и в случае необходимости полученное соединение подвергают взаимодействию с раствором брома в хлороформе, полученное соответствуТаблица 2

Активность действи против асцитической лейкемии Р388

ер 1

ер 3

ер 2

2,9

4,4

6,6

2,9

4,4

6,6 10

2,9

4,4

6,6 10

4,4

6,6 10

2,4

2,88

3,46

4,15

Эксперименты осуществл лись на мышах CDF , ино кулированных клетками (10 ) лейкемии, путем внутрибрюшинной инъекции.

Лечение путем внутрибрюшинной инъекции через день после ввода опухолевого инокулума.

Среднее врем выживани подвергнутых лечению мышей (среднее врем выживани контрольных мышей х 100).

Выжившие в течение длительного времени организмы ( 60 дн)

«

Определено по аутоптическим измерени м.

ющее 14-бромпроизводное гидролизуют водным раствором формиата натри с последующим выделением целевого продукта , где Х-ОН, в .виде хлоргидрата.

Таблица 1

#

Испытание на ингибирование после действи лекарства в течение 24 ч. Цитотоксичность, определ ема после действи лекарства в течение 48 ч. (данные нескольких экспериментов).

155 135 115

0/20

0/18

0/20

0/10

0/10

0/10

3/10

0/10

0/10

0/10

0/8

0/10

0/10

4/10

0/10

0/10

0/10

4/10

0/20 0/18 12/20 0/10 0/10 0/10 0/10 0/10 0/10 0/10 6/8 0/10 0/10 0/10 0/10 0/10 0/10 1/10

157946510

Таблица 3

Активность действи против асцитической лейкемии Р388/Х

Эксперименты проводились на мышах BDF,, ино- кулированных клетками (10), введенными путем внутрибрюшинной инъекции. Лечение путем внутрибрюшинной инъекции через один день после ввода опухолевого инокулума. Среднее врем выживани подвергнутых лечению мышей (среднее врем выживани контрольных мышей х 100). Определено по утоптическим измерени м.

Таблица 4 Эффективность действи против общей лейкемии

DNR

Внутривенно

Пример 1 Так же Пример 3 - Через рот

DX

Внутривенно

Пример 2 Так же

11

157946512

Продолжение табл.4

Через рот

Эксперименты осуществл ли на мышах СЭН, иноку- лированных клетками лейкемии (2x10 ), путем

внутривенной инъекции.

Лечение путем ввода препарата путем внутривеной инъекции или через рот через день после ввода опухолевого инокулума.

Среднее врем выживани подвергнутых лечению мышей (ср.еднее врем выживани контрольных .мышей х 100).

Определено по аутентическим измерени м.

Редактор М. Келемеш

Составитель Г. Коннова

Техред Л.Олийнык Корректор В. Гирн к

Заказ 1925

Тираж 302

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретени м и открыти м при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушска наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат Патент, г.Ужгород, ул. Гагарина,101

242 114 157

3/10 0/10 0/10

Подписное