SU1532877A1

SU1532877A1 - Method of quantitative analysis of polypeptoid components of average molecular mass in blood

Info

Publication number: SU1532877A1
Application number: SU874256437A
Authority: SU
Inventors: Анатолий Михайлович Горчаков; Лира Батуевна Юсупова
Original assignee: Белорусский Научно-Исследовательский Санитарно-Гигиенический Институт
Priority date: 1987-06-02
Filing date: 1987-06-02
Publication date: 1989-12-30

Abstract

Изобретение относитс к медицине, а именно к способам исследовани крови при диагностике патологических состо ний, и может быть использовано дл количественного определени полипептидных компонентов средней молекул рной массы в крови. С целью ускорени способа за счет полного выделени из пробы полипептидных компонентов, осаждение сывороточных белков провод т обработкой пробы 1 М ацетатным буфером, рН 4,5-4,6, с последующей инкубацией на кип щей вод ной бане в течение 2-3 мин. 1 табл.The invention relates to medicine, in particular to methods for examining blood in the diagnosis of pathological conditions, and can be used to quantify the polypeptide components of average molecular weight in blood. In order to speed up the process by completely isolating the polypeptide components from the sample, the precipitation of whey proteins is carried out by treating the sample with 1 M acetate buffer, pH 4.5-4.6, followed by incubation in a boiling water bath for 2-3 minutes. 1 tab.

Description

Изобретение относитс к медицине, а именно к способам исследовани крови при диагностике патологических состо ний, и может быть использовано в ранней диагностике рака, при оценке эффективности лечени онкологических и почечных заболеваний.The invention relates to medicine, in particular to methods for examining blood in the diagnosis of pathological conditions, and can be used in the early diagnosis of cancer, in evaluating the effectiveness of treatment of cancer and kidney diseases.

Целью изобретени вл етс ускорение способа.The aim of the invention is to accelerate the method.

Способ осуществл етс следующим образом.The method is carried out as follows.

0,05 мл плазмы (сыворотки) крови развод т 0,90 мл физиологического раствора хлористого натри , добавл ют 0,05 мл 1 М ацетатного буфера (рН 4,5-4,6) и инкубируют 2-3 мин на кип щей вод ной бане, охлаждают и центрифугируют 8-10 мин при 1500 об/мин. Из супернатанта отбирают 0,1 мл, смешивают с реагентом Bradford, спектрофотометрируют через 2-3 мин при длине волны 595 км и по калибровочной кривой, построенной дл человеческого сывороточного альбумина, рассчитывают количество полипептидных компонентов в плазме (сыворотке) крови, которое выражаетс в мг/1 мл плазмы (сыворотки) крови 0.05 ml of blood plasma (serum) was diluted with 0.90 ml of physiological sodium chloride solution, 0.05 ml of 1 M acetate buffer (pH 4.5-4.6) was added and incubated for 2-3 minutes in boiling water Noah bath, cool and centrifuge for 8-10 min at 1500 rpm. 0.1 ml is taken from the supernatant, mixed with Bradford reagent, spectrophotometrized after 2-3 minutes at a wavelength of 595 km, and using a calibration curve for human serum albumin, the amount of polypeptide components in the blood plasma (serum) is calculated, expressed in mg / 1 ml of plasma (serum) blood

В таблице приведены результаты измерений количества полипептидных компонентов в сыворотке крови, рас- считанные по их содержанию в супер- натанте в зависимости от условий обработки пробы: рН и времени инкубации на кип щей вод ной бане, а также при использовании известного способа (прототипа).The table shows the results of measuring the amount of polypeptide components in blood serum, calculated from their content in the supernatant depending on the sample processing conditions: pH and incubation time in a boiling water bath, as well as using a known method (prototype).

Как видно из таблицы, дл полного осаждени сывороточных белков оптимальным вл етс добавление буфера с рН Ј,5-4,6 с последующей инкубаци- ей пробы на кип щей вод ной бане в течение не менее 2 мин.As can be seen from the table, for complete precipitation of whey proteins, it is optimal to add a buffer with a pH of -4, 5-4.6, followed by incubation of the sample in a boiling water bath for at least 2 minutes.

Изменение рН буфера как в сторону увеличени , так и в сторону уменыпе- ни делает осаждение сывороточных беЛков менее полным, что приводит к снижению точности.A change in the pH of the buffer, both upward and downward, makes the precipitation of serum proteins less complete, which leads to a decrease in accuracy.

Увеличение времени инкубации пробы на кип щей вод ной бане мало вли ет на степень осаждени сывороточных белков.An increase in the incubation time of the sample in a boiling water bath has little effect on the degree of precipitation of whey proteins.

Использование предлагаемого способа количественного определени полипептидных компонентов средней моле- The use of the proposed method for the quantitative determination of the polypeptide components of the average molecular

кул рной массы позвол ет при сохранении точности сократить врем центрифугировани до 8-10 мин.Culinary mass allows, while maintaining accuracy, to shorten the centrifugation time to 8-10 minutes.

Claims

Invention Formula

The method for quantitative determination of polypeptide components of average molecular weight in blood, including dilution of a blood sample, precipitation of proteins, centrifugation followed by spectrophotometry of the supernatant, is distinguished by; In order to speed up the process, the precipitation of proteins is carried out by treating the sample with 1 M acetate buffer pH 4.5-4.6, followed by incubation in a boiling water bath for at least 2 minutes.

No precipitate - 4.9 3.8 3.9 4.5 Not precipitated - 2.1 were heard

4.3 2.9 3.0 4.1 5

No precipitation - 4.2 2.8 2.8 3.5 Not precipitated

4.1 2.9 2.8 3.4

Prototype data