Изобретение относитс к .аналитической химии, а именно к способам количественного определени тиамина бромида - 4-метил-5-|9-оксиэтил-Ы (2-метил-4-амино-5-метилпиримидил)тиаэолий бромида гидробромида (витамина В), примен емого в медицинской практике в качестве средства, регулирующего водный, жировой и белковый обмен. Известен способ количественного определени витамина В методом кислотно-основного титровани в неводной среде, заключающийс в испол зовании в качестве титранта 0,1н. раствора хлорной кислоты, а как рас ворител - безводной уксусной кислоты l. Недостатками этого способа влаютс низка чувствительность (используетс навеска около 0,1 г), кроме того, способ малоспецифичен, так как в этом случае определ ютс в соединени основного характера. Вы полнение способа требует применени агрессивных растворителей и титрантов . Наиболее близким к изобретению по технической сзгщности и достигаем му результату вл етс способ опред лени тиамина бромида, заключакмцийс в обработке анализируемой пробы рас вором рейнеката аммони в безводном метиловом спирте в среде ацетатного буфера в течение 30 мин при перемешивании с последующим отфильтровыванием осадка двух - трехкратным промьшанием его водой, растворении осадка в ацетоне промыванием фильтра этиловым спиртом с последующим фотометрированием полученного спирто-ацетонового раствора 2}. Недостатками известного способа вл ютс его низка чувствительност ( 0,1-1 мг/мл фотометрируемого раствора ), низка избирательность - в аналогичных услови х с рейнекатом аммони реагируют все органические препараты основного характера (алка лоиды и четвертичные основани аммони ), больша продол ритапьность анализа (более 60 мин ). Целью изобретени вл етс повышение чувствительностн и селективности способа. Поставленна цель достигаетс тем, что при способе количественного определени тиамина бромида, заключающемс в обработке анализируемой пробы цветореагентом с последующим фотометрированием полученного раствора, в качестве цветгрреагента используют раствор М-хлор-1,4бензохинонимина в изопропаноле и обработку ведут в среде боратного буферного раствора рН 10,5.Пример , Количественное определение тиамина бромида в субстанции . Точную навеску препарата в пределах- 0,015-0,025 г раствор ют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл и довод т до метки тем же растворителем . 3 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавл ют 3 мл 0,1%-ного раствора -хлор-1,4-бензохинонимина в изопропаноле и довод т до метки боратным буферным раствором рН 10,5. Параллельно провод т опыт со стандартным раствором тиамина бромида и контролем. Через 14 мин измер ют оптическую плотность анализируемых растворов на фоне контрол при помощи спектрофотометра при 445 нм в кюветах с тохициной сло 1 см. Расчет количественного содержани -тиамина бромида провод т по формуле D-2SOO-Cj втрггде D - оптическа плотность анали-. зируемого раствора} BO - оптическа плотность стандартного раствора-, Сс,- концентраци стандартного спектрофотометрируемого раствора .( 0,0024 г в 100 мл), Р - навеска, г-, 8 - толщина сло , см. Результаты количественного определени тиамина бромида в субстанции приведены в табл. 1. Сравнительна характеристика предлагаемого способа и известного приведена в табл. 2. Как видно из табл. 2, величина чувствительности предлагаемого способа повышаетс в сравнении с известным в 5,6-33 раза, а врем проведени анализа сокращаетс в 4 раза.The invention relates to analytical chemistry, namely to methods for the quantitative determination of thiamine bromide - 4-methyl-5- | 9-hydroxyethyl-Y (2-methyl-4-amino-5-methylpyrimidyl) thiaeolium hydrobromide (vitamin B), used in medical practice as a means of regulating water, fat and protein metabolism. A known method for the quantitative determination of vitamin B by the method of acid-base titration in a non-aqueous medium, consisting in the use of 0.1n as a titrant. perchloric acid solution, and as a solvent, anhydrous acetic acid l. The disadvantages of this method are low sensitivity (a weight of about 0.1 g is used), and the method is not very specific, as in this case they are defined in the basic compound. The implementation of the method requires the use of aggressive solvents and titrants. The closest to the invention in technical terms and the achieved result is a method for determining thiamine bromide, concluding in processing the analyzed sample by dissolving ammonium reinemate in anhydrous methyl alcohol in an acetate buffer for 30 minutes with stirring, followed by filtering the precipitate with two or threefold washes its water, dissolving the precipitate in acetone by washing the filter with ethyl alcohol, followed by photometry of the obtained alcohol-acetone solution 2}. The disadvantages of this method are its low sensitivity (0.1-1 mg / ml of photometric solution), low selectivity — all organic preparations of the basic character (alkaloids and quaternary ammonium bases) react with ammonium reinecate under similar conditions, ammonia (more than 60 min.) The aim of the invention is to increase the sensitivity and selectivity of the method. The goal is achieved by the method of quantifying thiamine bromide, which consists in processing the analyzed sample with a color reagent followed by photometry of the resulting solution, using a solution of M-chloro-1,4-benzoquinone imine in isopropanol and processing in the medium of pH 10 borate solution 5. Example. Quantitative determination of thiamine bromide in a substance. The exact weight of the drug in the range of 0.015-0.025 g is dissolved in water in a 100 ml volumetric flask and made up to the mark with the same solvent. 3 ml of the resulting solution was placed in a 25 ml volumetric flask, 3 ml of a 0.1% solution of chloro-1,4-benzoquinone imine in isopropanol was added and the pH of the solution was adjusted to pH 10.5. In parallel, experiments were carried out with a standard thiamine bromide solution and control. After 14 min, the optical density of the analyzed solutions was measured against the background of the control using a spectrophotometer at 445 nm in cuvettes with a 1 cm tochicyc layer. } BO solution is the optical density of the standard solution, Cc, is the concentration of the standard spectrophotometric solution. (0.0024 g in 100 ml), P is the weight, g-, 8 is the layer thickness, see. Results of quantitative determination of thiamine bromide in the substance are given in table. 1. Comparative characteristics of the proposed method and the known are given in table. 2. As can be seen from the table. 2, the sensitivity of the proposed method is increased in comparison with the known 5,6-33 times, and the analysis time is reduced by 4 times.
Использование в качестве цветореагбнта Н-хлор-1,4-бензохинонимина , повышает селективность способа,тйк какUse as a color reagent N-chloro-1,4-benzoquinoneimine, increases the selectivity of the method, like
ЛЛ-хлор-1,4-бензохинонимин не реагирует с препаратами основного характера и четвертичными основани ми аммони .LL-chloro-1,4-benzoquinone imine does not react with the drugs of the main character and quaternary ammonium bases.
Таблица 1Table 1
Таблица 2table 2