SU1168834A1

SU1168834A1 - Method of quantitative determining of cysteine

Info

Publication number: SU1168834A1
Application number: SU843714318A
Authority: SU
Inventors: Степан Степанович Артемченко; Владимир Васильевич Петренко
Original assignee: Запорожский медицинский институт
Priority date: 1984-03-22
Filing date: 1984-03-22
Publication date: 1985-07-23

Abstract

СПОСОБ КОЛтЕСТВЕННОГО OlfPEДЕЛЕНИЯ ЦИСТЕИНА путем обработки анализируемой пробы цветореагентом с последующим фотометрированием- полученного раствора, отличающийс тем, что, с целью повышени чувствительности и сокращени длительности определени , в качестве цветореагента используют раствор N-xлop-1,4-бензохинонимина в изопропаноле и обработку ведут в среде универсального буферного раствора с рН 9,0. (Л сTHE METHOD OF THE COLLECTIVE Olivet of Tsystein by treating the analyzed sample with a color reagent followed by photometry of the resulting solution, characterized in that, in order to increase the sensitivity and reduce the duration of the determination, N-chlorophenol-1,4-benzoquinoneimine in isopropanol is used as the color reagent in environment universal buffer solution with a pH of 9.0. (L with

Description

93 ЭО93 EO

0000

11168834 Изобретение относитс к аналитической химии, а именно к способам количественного определени цистеина 1-амино-2 -меркаптопропидновой кислоты, примен емого в медицинской практике 5 дл задержки развити катаракты и просветлени хрусталика глаза. Известен способ количественного определени цистеина потенциометрическим титрованием с серебр но-суль- Ю фидным электродом в 0,1 М растворе гидроксида натри J . Недостатком способа вл етс низка чувствительность (12 мкг). Наиболее близким к изобретению по 15 технической сущности и достигаемому результату вл етс способ количественного определени цистеина, заключающийс в обработке анализируемой пробы 0,5 мл 0,02 М раствора тетра- 20 хлорпалладата аммони в 1 н. хлористоводородной кислоте с последующим измерением (через 1 ч) величины оптической плотности при 350 нм 2 . Недостатками способа вл ютс от- 25 носительно невысока чувствительность (2., 33 мкг/мл) и больша продолжительность анализа (более 1ч). Целью изобретени вл етс повышение чувствительности и сокращение зо длительности определени . Поставленна цель достигаетс тем, что согласно способу количественного определени цистеина путем обработки анализируемой пробы раствором М- хлор-,„ -1,4-бензохинонимина в изопропаноле в среде универсального буферного раствора с рН 9,0 и последующим фотометрированием полученного раствора, в качестве цветореагента раствора N-хлор-1 ,4-бензохинонимина в изопропаноле и обработку ведут в среде, универсального буферного раствора с рН 9,0. Универсальный буферный раствор 5 описан в ЗЗ. I Пример. Количественное определение цистеина в субстанции. Навеску цистеина в пределах 0,015-0,025 г раствор ют в воде в мерной колбе 50 вместимостью 200 мл и довод т до метки тем же растворителем. 2 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавл ют 3 мл О,1%-ного раствора Н-хлор-1,4- S5 -бензохинонимина в иэопропаноле и довод т до метки универсальным буферным раствором с рН 9,0. Параллельно про ром 15 ана рол 423 1 с цис лен в т лаг вед Чу но Пр но за вод т опыт со стандартным раствоцистеина и контролем. Через мин измер ют оптическую плотность лизируемых растворов на фоне конт при помощи спектрофотометра при нм в кюветах с толщиной сло м. . Расчет количественного содержани теина провод т по формуле D-2500-Со DO-P-I оптическа плотность анализируемого pacTBopai оптическа плотность стандартного спектрофотометрируемого раствора} концентраци стандартного спектрофотометрируемого раствора (0,0008 г в 100мл); навеска, rj толщина сло , см. Результаты количественного опредеи цистеина в субстанции приведены абл.1. Таблица 1 Сравнительна характеристика пред- аемого способа и известного приены в табл.2. Т а б. л и ц а 2 ствительть , мкг/мл 2,33 должительть анали , мин 3 Как видно из табл.2, величина чувствительности данного способа ше. чем у известного более чем в 11688344 3 раза. По технике вьшолнени данный вы- способ требует в 4 раза меньших временных затрат на проведение анализа.11168834 The invention relates to analytical chemistry, in particular to methods for the quantitative determination of cysteine of 1-amino-2-mercaptopropic acid used in medical practice 5 for delaying the development of cataracts and the lumen of the lens. A known method for the quantitative determination of cysteine by potentiometric titration from a silver with a sulphide electrode in a 0.1 M solution of sodium hydroxide J. The disadvantage of this method is low sensitivity (12 µg). The closest to the invention according to the technical essence and the achieved result is the method of quantitative determination of cysteine, which consists in processing the sample being analyzed with 0.5 ml of a 0.02 M solution of tetra-20 ammonium chloropalladate in 1N. hydrochloric acid, followed by measurement (after 1 h) of the optical density at 350 nm 2. The disadvantages of the method are relatively low sensitivity (2., 33 µg / ml) and longer analysis time (more than 1 hour). The aim of the invention is to increase the sensitivity and shorten the detection time. The goal is achieved by the method of quantifying cysteine by treating the sample being analyzed with a solution of M-chloro-, -1,4-benzoquinone imine in isopropanol in a universal buffer solution with a pH of 9.0 and then photometric the resulting solution as a color reagent of the solution N-chloro-1, 4-benzoquinoneimine in isopropanol and the treatment is carried out in an environment, universal buffer solution with a pH of 9.0. Universal buffer solution 5 is described in ZZ. I Example. Quantitative determination of cysteine in substance. A portion of cysteine in the range of 0.015-0.025 g is dissolved in water in a 200-ml measuring flask 50 with a capacity of 200 ml and adjusted to the mark with the same solvent. 2 ml of the resulting solution is placed in a 25 ml volumetric flask, 3 ml of O, 1% H-chloro-1,4-S5-benzoquinone imine solution in isopropanol is added and the mixture is made up to the mark with a universal buffer solution with pH 9.0. At the same time, proxy 15 anurol 423 1 s cys lene in lag ved Chu no Pr ov but with experience with standard solution cysteine and control. After min, the optical density of the lysable solutions against the background is measured using a spectrophotometer at nm in cuvettes with a layer thickness. The calculation of the quantitative content of theine is carried out according to the formula D-2500-Co DO-P-I optical density of the analyzed pacTBopai optical density of a standard spectrophotometry solution} concentration of a standard spectrophotometry solution (0.0008 g per 100 ml); sample, rj layer thickness, see. The results of quantitative determination of cysteine in the substance are given in abl. 1. Table 1 Comparative characteristics of the proposed method and known prieny in table 2. T a b. l and c a 2 boom tube, mcg / ml 2.33 hold analysis, min 3 As can be seen from table 2, the sensitivity of this method is higher. than the famous more than 11688344 3 times. According to the technique of implementation, this method requires 4 times less time spent on the analysis.

Claims

METHOD FOR QUANTITATIVE DETERMINATION OF CISTEINE by processing the analyzed sample with a color reagent followed by photometric measurement of the resulting solution, characterized in that, in order to increase sensitivity and shorten the determination time, a solution of N-chloro-1,4-benzoquinoneimine in isopropanol is used as a color reagent and processing is carried out in a universal buffer solution with a pH of 9.0.

53E eo 00 ’>

1 1168834