SU1071208A3 - Способ разделени жидкости,содержащей вещества крови - Google Patents

Description

Изобретение относитс  к способам отделени  из жидкости, содержащей ве щества крови, производных гемогловина - соединений железа от протеина, главным образом-глобина, который мо жет быть впоследствии использован ил в пищевой промышленности в св зи с его питательной ценностью, или при сохранении его функциональных свойст в качестве структурного агента. Известен лабораторный способ разделени  жидкостей, содержащих вещест ва крови (соединени  железа и глобин путем экстракции, при которой исполь зуют такие растворители, как метилэтилкетон , ацетон и диметилформамид ClJ .... Однако получаемый по указанному способу.продукт непригоден дл  использовани  в качестве корма дл  ско та или в качестве пищевого продукта. Наиболее близким к предлагаемому  вл етс  способ разделени  жидкости, содержащей вещества крови, охлаждени  раствора гемоглобина, добав лени  осадктел , фильтрации полученной смеси С23. Однако известный способ достаточно сложен. Цель изобретени  - упрощение . . Поставленна  цель достигаетс  тем что при осуществлении способа разде лени  жидкости, содержащей ве ества крови, путем охлаждени  раствора гемоглобина , добавлени  осадител , фил -трации полученной смеси, раствор гемоглобина охлаждают до температуры +8 - , добавл ют этанол до кондентрации 40-70%, довод т рН до 2,54 ,5, добавл ют неорганические соли натри  или кали , пульпу красных кро в ных телец, выделившиес  агломераты отдел ют от раствора глобина известным образом. Пример 1. Пульпу красных кров ных телец из крови с бойни вмес те с цитратом натри -; в качестве антикоагулирующего агента, обрабатывают этанолом и водой таким образом, чтобы вызвать разрыв клеточных мембран . Фрагменты, клеточных мембран v удал ют центрифугированием. Получают раствор гемоглобина, содержащий 15% сухого вещества, в основном гемоглобина , 33 об.% этанола, остальное воду . Значение рН составл ет 5,3, цвет темно-красный.. 3 г этого раствора гемоглобина охлаждают до температуры в химическом стакане, и в раствор капают при непрерывном перемешивании и охлаждении раствор, состо щий из . 0,5 мл 1М сол ной кислоты и из 10 мл 96%-ного этанола при -12°С. После добавлени  раствора температура со-; ставл ет -12°С, а значение рН 3,1. Содержание этанола в смеси 78 об.%. Значение рН определ ют таким образом , что образцы смеси разбавл ют трехкратным объемом воды перед определением . Смесь, имеющую черно-коричневый цвет, центрифугируют при 27000 в , в течение 10 мин в центрифуге Сорвалла (Sorvait) при температуре и получают черную пасту в количестве 1,5 ГС содержанием сухих веществ 2,9%, и светло-коричневую жидкость поверхностного сло . Из жидкости поверхностного сло  осаждают светло-серый осадок, добавл   воду до 50% и довед  значение рН до 7,5. Температуру поддерживают при -7С. Осадок удал ют центрифугированием и получают серую пасту в количестве 0,95 г с содержанием сухих веществ 28%. Из результатов следует, что сера  паста состоит из протеина с содержанием железа примерно 5% от общего содержани  железа в гемоглобине . Пример 2. Зг раствора гемоглобина (с характеристиками как в примере 1) при -7°С добавл ют по капл м при непрерывном перемешивании и охлаждении в химический стакан с раствором 0,45 мл 1М сол ной кислоты, 7,5 мл воды и 10 мл 96%ного этанола при . После добавлени  температура стает , а значение рН составл ет 3,3. Содержание этанола в смеси довод т до 50 об.%. Смесь, имеющую черно-коричневый цвет, центрифугируют при 10000 g в течение 10 мин и получают черную пасту с количеством сухого вещества 0,03 г и светло-желтую жидкость поверхностного сло . Жидкость поверхностного сло  раздел ют на две равные части. Из одной части .осаждают при рН 7,5 серый осадок, который после выделени  центрифугированием и сушки дает 0,12 г сухого вещества. Другую часть смешивают с 5 мл этанола и 0,2 мл -хлористого натри  в 10%-ном водном растворе при непрерывном перемешивании и охлаждении и подвергают ультрафильтрации при температуре -6°С .в  чейке Амикон Диафлоу (.Amicpn DiafBo) с мембраной ХМ 300. Получают фильтрат светложелтого Цвета, при этом мембрана покрыта темной пленкой. Из фильтрата после разбавлени  водой до содержани  воды 50% и при рН 7,5, осаждают осадок, цвет которого от белого до светло-серого, из которого после выделени  центрифугированием и сушки получают 0,11 г сухого вещества. Пример 3. Зг раствора гемоглобина (с такими же характеристиками , как и в примере 1) при 4°С добавл ют по капл м при непрерывном перемешивании и охлаждении в химиче кий стакан с раствором 0,45 мл лед  ной уксусной кислоты, 0,8 мл воды и 5 мл 96%-ного этанола при -4°С. .Пос ле добавлени  температура составл е -4°С, а.значение рН 3,8. Содержание этанола в смеси составл ет 62 об.%. Черно-коричневую смесь центрифугируют при 27000 g в течение 10 мин и получают черную пасту с содержанием сухого вещества 0,11г и светло-желтую жидкость поверхностного сло . Из жидкости поверхностного сло  после разведени  водой до содержани  воды 50% и при значении рН 7,5 осаждают осадок, имеющий цвет от светло-коричневого до серого, из ко торого после центрифугировани  и сушки получают 0,25 г сухого вещества . Пример 4. Зг раствора гемоглобина (с такими же характеристиками , как и в примере 1) при добавл ют по капл м при непрерывном перемешивании и охлаждении в химический стакан с раствором 0,45 мл 1м сол ной кислоты, 0,2 мл 20%-ного водного хлористого натри  и 10 мл 96%-ного этанола при -15°С. После добавлени  температура составл ет -10°С, а значение рН 3,3. Содержани этанола в смеси составл ет 77 об.%. Смесь черно-коричневого цвета центрифугируют при 10000 g в течение 10 мин и получают черную пасту с содержанием сухого вещества 0,09 и жидкость поверхностного сло , имеющую цвет от светло-желтого до светло-коричневого. Из жидкости поверхностного сло  после разбавлени  водой до содержани  воды 50% при значении рН 7,5, осаждают серрй осадок, из которого после центрифугировани  и сушки получают .0,30 гсухого вещества. Пример 5. 6 мл 96%-ного этанола добавл ют по капл м при,непрерывном перемешивании и охлаждении в химический стакан с 3 г раствора гемоглобина (с такими же харак теристиками, как и в примере 1).. Температура составл ет -10°С. В эту суспензию гемоглобина капают пр.и не прерывном перемешивании и охлаждении 0,4 мл 1М сол ной кислоты в 3 мл 96%-ного этанола. После добавлени  температура стает -10°С, а :значение рН 3,4. Содержание этанола в смеси составл ет 77 об.%. Черно-коричневую смесь центрифугируют при 20000 R10 мин и получают черную пасту с содержанием сухих ве ществ 0,08 г и светло-желтую жидкос поверхностного сло . , 0,19 мл 0,5М гидрата окиси натри в 10 мл 96%-ного этанола добавл ют по капл м при непрерывном перемешиваНИИ и охлажцении в жидкость поверхностного сло . После добавлени  температура составл ет -10°С, а значение рН 4,35. Содержание этанола в смеси составл ет 85 об.%. Полученный осадок,фракцию протеина крови с адсорбированными соединени ми железа удал ют центрифугированием и получают черно-красную пачзту с содержанием сухого вещества 0,08 г. Из очень слабо желтоватоокрашенной жидкости поверхностного сло  после добавлени  воды до содержани  воды 50% и увеличени  рН до 7,5 при непрерывном охлаждении, осаждают светло-серый осадок, из которого после отделени  центрифугированием и сушки получают 0,22 г сухого вещает- ва. . Пример 6. Зг раствора гемоглобина (с такими же характеристиками , как и в примере 1) при добавл ют по капл м при непрерывном перемешивании и охлаждении в химический стакан с раствором 0,45 мл . 1м сол ной кислот л и 10 мл 96%-ного этанола при -8°С. После добавлени  температура стает , а значение рН 3,3. Содержание этанола в смеси составл ет 78 Ьб.%. Черно-коричневую смесь центрифу- . гир5тот при 100QO g 10 мин,в результате чего получают черную пасту с содержанием сухого вещества 0,06 г и светло-коричневую жидкос- ь поверхностного сло . 1 мл суспензии с 0,1 г пульпы красных кров ных телец в равных объемах этанола и воды при -8°С и при рН 5,3 добавл ют по капл м при непрерывном перемешивании и охлаждении в жидкость поверхностного сло . После добавлени  температура стает -8°С,а содержание этанола составл ет 75 об.%. Смесь центрифугируют при 10000 g 10 мин, в результате чего получатот небольшое количество черной пасты и жидкость поверхностного сло , имеющую цвет от светло-коричневого до светло-желтого. Из жидкости поверхностного сло  осаждают тем же способом , как -и в примере 5, светлосерый осадок, из которого после выделени  центрифугированием и сушки получают 0,25 г сухого вещества. Пример 7. Зг раствора гемоглобина (с теми же характеристиками , как и в примере 1) при добавл ют по капл м при непрерывном перемешивании и охлаждении в химический стакан с раствором 0,50 мл 1м сол ной кислоты, 8 мл 96%-ного : этанола и 2 мл глицерина, при 8°С. После добавлени  температура стает -8°С, а значение рН 3,1. Полное ко

Claims (1)

1. СПОСОБ РАЗДЕЛЕНИЯ ЖИДКОСТИ, СОДЕРЖАЩЕЙ ВЕЩЕСТВА КРОВИ, путем охлаждения раствора гемоглобина, до- ? бавления осадителя, фильтрации полу-, ченной смеси, отличающийс я тем, что, с целью упрощения процесса, раствор гемрглобина охлаждают до температуры 4-8- -20°C, добавляют этанол до концентрации 40-70%, доводят pH до 2,5-4,5, добавляют неорганические соли натрия или калия, пульпу красных кровяных телец, выделившиеся агломераты отделяют от раствора глобина известным образом.

   1 1071208,