SK63194A3 - Peptide derivatives - Google Patents

Peptide derivatives Download PDF

Info

Publication number
SK63194A3
SK63194A3 SK631-94A SK63194A SK63194A3 SK 63194 A3 SK63194 A3 SK 63194A3 SK 63194 A SK63194 A SK 63194A SK 63194 A3 SK63194 A3 SK 63194A3
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
cha
pro
nag
hooc
pic
Prior art date
Application number
SK631-94A
Other languages
English (en)
Inventor
Ann C E Teger-Nilsson
Ruth E Bylund
Original Assignee
Astra Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Astra Ab filed Critical Astra Ab
Publication of SK63194A3 publication Critical patent/SK63194A3/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/04—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C237/06—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having the nitrogen atoms of the carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C279/04—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C279/04—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
    • C07C279/12—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/022—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -X-C(=O)-(C)n-N-C-C(=O)-Y-; X and Y being heteroatoms; n being 1 or 2
    • C07K5/0222—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -X-C(=O)-(C)n-N-C-C(=O)-Y-; X and Y being heteroatoms; n being 1 or 2 with the first amino acid being heterocyclic, e.g. Pro, Trp
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06191—Dipeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Peptidové deriváty
Oblasť techniky
Tento vynález sa týka nových kompetitívnych inhibítorov trombínu, spôsobu ich syntézy, farmaceutických prostriedkov obsahujúcich tieto zlúčeniny ako účinné látky a použitie týchto . zlúčenín ako antikoagulantov pre profylaxiu a ošetrovanie ' tromboembolických ochorení, ako je trombóza žíl, plúcna embólia, arteriálna trombóza, zvlášť infarkt myokardu a mozgová trombóza, všeobecné hyperkoagulovatelné stavy a miestne hyperkoagulovatelné stavy, napríklad po angioplastických operáciách a tiež koronárnych operáciách premostením.
Tento vynález sa rovnako týka nového použitia zlúčenín ako východzích látok pre syntézu inhibítorov serínproteázy. Vynález sa ďalej týka nového štruktúrneho fragmentu v inhibítore serínproteázy.
Doterajší stav techniky
Koagulácia krvi je kľúčovým procesom, ktorý zahrňuje ako hemostázu (to znamená prevenciu straty krvi z poškodenej cievy), tak trombózu (to znamená patologické uzatvorenie krvnej cievy zrazeninou krvi). Koagulácia je výsledkom komplexnej *rady enzymatických reakcií, kde jedným z konečných stupňov je konverzia proenzýmu protrombínu na aktívny enzým trombín.
Trombín hrá hlavnú úlohu pri koagulácii. Táto látka aktivuje krvné doštičky, prevádza fibrinogén na monomérny fibrín, ktorý spontánne polymeruje na vlákna a aktivuje koagulačný faktor XIII, ktorý naopak zosieťuje polymér na nerozpustý fibrín. Trobmín ďalej aktivuje faktor V a faktor VIII v reakcii s pozitívnou spätnou väzbou. Preto sa očakáva, že inhibítory trombínu budú účinnými antikoagulantami inhibícií krvných doštičiek, tvorbou fibrínu a stabilizáciou fibrínu. Na základe inhibicie mechanizmu pozitívnej spätnej väzby sa u tejto látky očakáva, že vyvolá inhibíciu na začiatku v reťazci v prípade, ktorý vedie ku koagulácii a trombóze.
Je známy tento doterajší stav tecniky.
Inhibítory trombínu založené na sekvencii aminokyseliny v okolí štiepiaceho miesta pre fibrinogénový Aa reťazec prvý raz popísal Blombäck a kol. v J. Clin. Lab. Invest. 24, dopi. 107, 59 /1969/, ktorý zaznačil, že sekvencia Phe-Val-Arg (Pg-P2-Pi, ktorá je tu označovaná ako P3-P2-P1 sekvencia) má byť najlepším inhibítorom.
V US patente č. 4 346 078 (Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar R T, dátum priority zo dňa 7. októbra 1980) a S. Bajusz a kol. v publikácii Peptides, str. 643 až 347, Walter de Gruyter & Co. /Berlín 1983/ popisujú trombínový inhibítor H-DPhe-Pro-Agm, dipeptidylový derivát s amínoalkylguanínom v polhe Ρχ.
S. Bajusz a kol. v J. Med. Chem. 33., 1729-1735 /1990/ a Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar R T v EP-A2-0 185 390 (dátum priority 21. decembra 1984) tiež uvádzajú, že pri náhrade agmatínu argininaldehydom sa dostane tronbinový inhibítor, ktorý má omnoho väčší účinok.
Predpokladá sa, že príčinou zvýšeného účinku tohoto trombínového inhibítoru, je možnosť, že v dôsledku interakcie aldehydovej funkcie sa Ser-OH v aktívnom mieste enzýmu sa vytvára hemiacetal. Nie je možné mať rovnaký typ interakcie v dipeptídovom deriváte H-DPhe-Pro-Agm, pretože neobsahuje derivát aminokyseliny s karbonylovou skupinou v polohe Ρχ.
Z iných prác týkajúcich sa sa oblasti trombínového inhibítoru, sú serinproteinázové inhibitory, ktoré sú založené na elektrofilných ketónoch miesto na aldehydoch v polohe Ρχ, zahrnuté v d’ajej uvedených publikáciách :
E. N. Shaw a kol. (Research Corporation), Us patent č. 4 318 904 (dátum priority 25. apríla 1980), popisujúci peptidchlórmetylketóny, napríklad H-DPhe-Pro-Arg-CH2Cl.
M. Szelke a D. M. Jones v v EP-A1-0 118 280 (dátum priority
4.marca 1983), popisujúci zlúčeniny od P3 -P2' pentapeptidové sekvencie fibrínogénového Aa reťazca, v ktorom ľahko štiepiteľná Ρχ- ’ peptidová väzba je nahradená zvyškom -CO-CH2~, ktorý tvorí keto izosterk odpovedajúcim peptidom.
M. Kôlb a kol. (Merrel-Dow), EP-A2-0 195-212 (dátum priority
4. február 1985) popisujúci peptidyl-a-ketoestery a peptidil-a-ketoamidy.
B. Imperiáli a R. H. Abeles, Biochemistry 25 , 3760 /1986/, popisujúci peptidylfluóralkylketóny.
D. Schirlin a kol. (Merrell-Dow) EP-A1-0 362 002 (dátum priority 1.september 1988), popisujúci fluóralkylamidketóny.
. P. Bey a kol. (Merrell-Dow) EP-A2-0 364 344 (dátum priority
1. september 1988) , popisujúci a, B, δ-triketozlúčeniny.
Ueda a kol., Biochem. J. 265, 539 /1990/, popisujúci peptidylfluóralkylketóny.
Inhibitory trombínu založené na C-terminálnych derivátoch kyseliny ortoboritej, odvodených od arginínových a izotiouroníových analógov, popisuje A. D. Kettner a kol. (Du Pont), EP A2-0 293 881 (dátum priority 5. jún 1987 a 6. apríl 1988 ) .
Predmet trombínových proti svojim tohoto vynálezu sa týka nových a účinných inhibítorov s kompetitívnym inhibítorovým účinkom enzýmom, to znamená, že sú príčinou reverzibilnej inhibície. Ďalším znakom je dosiahnutie inhibítorov, ktoré sú orálne biologicky dostupné a selektívne pri inhibícii trombínu v čom predstihne iné serínproteázy. Stabilita, trvanie účinku a nízka toxicita v terapeutických dávkach sú ešte ďalšími znakmi tohoto vynálezu.
Podstata vynálezu
Zlúčeniny
Zlúčeniny podlá tohoto vynálezu sa vzťahujú k peptidovej sekvencii ľudského fibrínogénového Aa reťazca, reprezentujúce modifikované miesta Pg, P2 a Ρχ
H-Ala-Asp-Ser-Gly-Glu-Gly-Asp-Phe
Leu-Ala-Glu-Gly-Gly-Gly-
Val-Arg ----- Gly-Pro-Arg-ValPri tomto vynáleze bolo uvedeného všeobecného vzorca I, fyziologicky prijateľných soli, inhibítormi trombínu.
nájdené, že zlúčeniny ďalej i buď ako také, alebo vo forme vrátane stereomérov, sú silnými
Zlúčeniny podľa vynálezu majú všeobecný vzorec I
A predstavuje metylénovú skupinu alebo
A znamená etylénovú skupinu a výsledný päťčlenný kruh môže alebo nemusí obsahovať jeden alebo dva atómy fluóru, hydroxyskupinu alebo oxoskupinu v polohe 4, alebo môže alebo nemusí byť nasýtený, alebo
A predstavuje skupinu vzorca -CH2-O-, -CH2~S- alebo -CH2~SOs funkcionalitou heteroatómu v polohe 4, alebo
A predstavuje n-propylénovú skupinu a výsledný šesťčlenný kruh môže alebo nemusí obsahovať jeden atóm fluóru, hydroxyskupinu alebo oxoskupinu v polohe 5, dva atómy fluóru v jednej z polôh 4 alebo 5 alebo je nenasýtený v polohe 4 a 5 alebo nesie v polohe 4 alkylovú skupinu s 1 až 4 atórpami uhlíka, alebo
A predstavuje skupinu vzorca -CH2-O-CH2-, -CH2“S-CH2- alebo -ch2-so-ch2-,
Ί
R predstavuje atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, hydroxyalkylovú skupinu s 2 alebo 3 atómami uhlíka alebo skupinu vzorca R11OOC-alkyl, kde alkyl ako alkylová skupina obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka a R11 predstavuje atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka alebo alkylénovú skupinu s 2 alebo 3 atómami uhlíka a *1 intramolekulárne viazanú ku karbonylovej skupine v R , alebo
R1 predstavuje skupinu R12OOC-1,4-fenyl-CH2-, kde R12 znamená atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, alebo ’R1 predstavuje skupinu vzorca R^-NH-CO-alkyl-, kde alkyl ako alkylová skupina obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka a je poprípade substituovaná v polohe a ku karbonylovej skupine alkylovou skupinou s 1 až 4 atómami uhlíka a kde R13 predstavuje atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, alebo znamená skupinu vzorca -CH2COOR , kde R ma význam uvedený vyššie, alebo
R1 predstavuje skupinu vzorca R12OOC-CH2-OOC-alkyl-, kde alkyl ako alkylová skupina obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka a je prípadne substituovaná v polohe a ku karbonylovej skupine alkylovou skupinou s 1 až 4 atómami uhlíka a kde R12 má význam uvedený vyššie, alebo
R1 znamená skupinu vzorca CH3SO2~, alebo
R1 predstavuje skupinu vzorca R12OCOCO-, kde R12 má význam uvedený vyššie, alebo
R1 predstavuje skupinu vzorca -CH2PO(OR14)2, -CH2SO3H alebo -CH9-/5(1H)-tetrazolyl/, kde R14 znamená jednotlivo za z I všetkých okolností atóm vodíka, metylovú alebo etylovú skupinu,
R2 znamená atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami P *1 uhlíka alebo skupinu vzorca R*0xOOC-alkyl-, kde alkyl ako alkylová skupina obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka a je prípadne substituovaná v polohe a ku karbonylovej skupine, a substituentom v polohe a je skupina vzorca R22-(CH2)p-, kde p predstavuje číslo 0 az 2a R znamena metyl, fenyl, hydroxyskupinu alebo skupinu vzorca COOR21 a kde R21 znamená atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, m znamená číslo 0, 1 alebo 2,
R3 predstavuje cyklohexylovú skupinu a
R4 znamená atóm vodíka, alebo ‘ m znamená číslo 1,
R3 predstavuje cyklohexylovú alebo fenylovú skupinu a
R4 tvorí etylénový mostík dohromady s R3·, alebo m znamená číslo 1 a.
R3 a R4 predstavujú vždy cyklohexylovú alebo fenylovú skupinu, znamená atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, n znamená celé číslo od 2 do 6 a
B predstavuje skupinu vzorca -N(R6)-C(NH)-NH2, kde R6 znemená atóm vodíka alebo metylovú skupinu, alebo
B znamená skupinu vzorca -S-C(NH)-NH2 alebo -C(NH)-NH2·
Alkylová skupina môže mať priamy alebo rozvetvený reťazec, pokiaľ nie je uvedené inak. Alkylové skupiny obsahujúce 1 až 4 atómy uhlíka sú metyl, etyl, n-propyl, izopropyl, n-butyl, izobutyl, sek.-butyl a terc.-butyl. Pokiaľ sa uvádza nenasýtenie, je tým myslená dvojitá väzba uhlík-uhlík. Skratky používané v niektorých prípadoch na označenie zlúčenín, sú zhrnuté na konci tohoto popisu.
Podľa výhodného postupu sa tento vynález týka zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R1 predstavuje R11OOC-alkyl-, kde * 11 alkyl ako alkylová skupina obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka a R predstavuje atóm vodíka. Z týchto zlúčenín sú výhodné zlúčeniny, kde A predstavuje etylén a R5 znamená atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, obzvlášť potom tie zlúčeniny, kde predstavuje atóm vodíka.
Zo zlúčenín všeobecného vzorca I predstavujú inú výhodnú podskupinu zlúčeniny, kde R3 predstavuje cyklohexylovú skupinu a m znamená číslo 1 alebo 2, obzvlášť potom m znamená číslo 1 a R4 predstavuje atóm vodíka.
Inou výhodnou skupinou zlúčenín sú zlúčeniny, kde A ‘predstavuje n-propylén a výsledný šesťčlenný kruh môže alebo nemusí mať v polohe 4 alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka a R5 predstavuje atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s 1 až 4 X » X 5 .
atómami uhlíka, obzvlašt tie zlúčeniny, kde R predstavuje atóm vodíka.
Podlá iného výhodného postupu n znamená číslo 3.
Zlúčeniny všeobecného vzorca I, ktoré majú S-konfiguráciu na α-amínokyseline v polohe P2, sú výhodné. Z nich sú obzvlášť výhodné zlúčeniny, ktoré tiež majú R-konfiguráciu na a-amínokyseline v polohe P3.
Výhodné zlúčeniny podlá tohoto vynálezu sú:
Príklad č.
Zlúčenina
H-(R)Cha-Pro-Agm
Me-(R)Cha-Pro-Agm
HO-(CH2)3~(R)Cha-Pro-Agm
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Agm iprOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Agm
HOOC-CH2(Me)-(R)Cha-Pro-Agm
HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm
HOOC—(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm/a
HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm/b
HOOC-(R alebo S)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm/a HOOC-(R alebo S)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm/b
HOOC-(R alebo S)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/b
HOOC-(R,S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm
HOOC-(R alebo S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/a HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm
EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Agm (R,S)Bla-(R)Cha-Pro-Agm
HOOC-(R alebo S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/b H-(R)Cha-Pro-Nag nBu-(R)Cha-Pro-Nag
HO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag iprOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag tBuOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-CH2-OOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag (HOOC-CH2)2~(R)Cha-Pro-Nag HOOC-CH2-(Me)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-CH2-(nBu)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/a HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/b EtOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-(R alebo S)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Nag/a HOOC-(R)CH(CH2-OH)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC- (R, S ) CH (Ph) - (R) Cha-Pro-Nag
HOOC-(S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-(R)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
Eto'oc-CH2-CH2- (R) Cha-Pro-Nag HOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag EtOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag MeOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag (R,S)Bla-(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-(R,S)CH(CH2COOH)-(R)Cha-Pro-Nag
MeOOC-(R,S)CH(CH2COOMe)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-Nag (HO)2P(O)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
EtO(HO)P(O)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag (EtO)2P(O)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
H-(R,S)Pro(3-Ph)-Pro-Agm
H-(R,S)Pro(3-(trans)Ch)-Pro-Agm
HOOC-CH2-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-Agm
HOOC-CH2~(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-Nag
HOOC-CH2-(R,S)Cha-Pic-Agm
HOOC-CH2-(Me)-(R)Cha-(R,S)Pic-Agm
HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm
HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm/a
HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm/b HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Agm
H-(R)Cha-Pic-Nag
Me- (R) Cha- (R, S) Pic-Nag
HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag
MeOOC-CH2~(R)Cha-pic-Nag iPrOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag HOOC-CH2(Me)-(R)Cha-(R alebo S)Pic-Nag/b HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-(R,S)Pic-Nag
HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-(R alebo S)Pic-Nag/c
HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-(R alebo S)Pic-Nag/d
HOOC-CH2CH2-(R)Cha-Pic-Nag
HOOC-CH2-(R)Cha-(R,S)Mor-Agm
HOOC-CH2-(R)Cha-(R alebo S)Mor-Nag
H-(R)Cha-Aze-Nag
HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Nag
H-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag
HOOC-CH2-(R)Cha-(R alebo S)Pic(4,5-dehydro)-Nag/b
HOOC-CH2-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag
HOOC-CH2-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag
HOOC-CH2-(R)Cgl-Pic-Nag
H-(jR)Hoc-Pro-Nag
HOOC-CH2-(R)Hoc-Pro-Nag
HOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Nag
HOOC-CH2-(R)Dph-Pic-Nag
HOOC-CH2-(R)Dch-Pic-Nag
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro(5-(R,S)Me)-Nag
H-(R)Cha-Pic(4-(R)Me)-Nag
2 HOOC-CH2-(R)Cha-Pic(4-(R)Me)-Nag
HOOC-CH2-(R)Cha-Pic(6- (S)Me)-Nag
Z týchto zlúčenín sú obzvlášť výhodné zlúčeniny, ktoré majú označenie ako príklad č. 4, 6, 9, 22, 30, 34, 59, 63, 67, 73, 80 a 82. Z nich sú najvýhodnejšie tieto zlúčeniny:
HOOC-CH2-(Me)-(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/b
HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag
Vo vyššie uvedených tabuľkách zlúčenín sa písmená /a, /b, /c a /d vzťahujú v podstate k čistému stereoméru na atóme uhlíka, ktorý je označený ako R alebo S. Steomér môže byť identifikovaný pre každú zlúčeninu v súvislosti s experimentálnou časťou tu uvedenou. R,S” sa vzťahuje k zmesi stereomérov.
Ďalšie stelesnenie tohoto vynálezu sa týka nového použitia zlúčeninyj vzorca
ako východzej zlúčeniny na syntézu serinproteázového inhibítoru a obzvlášť na syntézu trombínového inhibítora. Táto zlúčenina sa môže používať ako taká alebo s guanidinoskupinou, buď raz chránená na δ-dusíku alebo dvakrát chránená na δ-dusíkoch alebo τ,δ-dusíkoch, výhodne chrániacou skupinou, ako je benzyloxykarbonylová skupina. Chránenie noragmatinových derivátov sa uskutočňuje spôsobmi známymi v odbore guanidinových zlúčenín. Táto zlúčenina je pomenovaná noragmatín alebo skrátene ako Nag. Zlúčenina bola už skôr uvedená, mimo iného ako urýchľovač odfarbovania vlasov v GB patente č. 1 599 324 (Henkel, dátum priority 5. február 1977). Štruktúrny fragment vzorca
NH
však skôr nebol opísaný ako štruktúrny prvok farmaceutický účinnej zlúčeniny. Ako taký štruktúrny prvok pôsobí noragmatínový fragment v serinproteázovom inhibitore a obzvlášť pôsobí ako hodnotný trombínový inhibítor.
Lekárske a farmaceutické použitie
Pódia ďalšieho stelesnenia sa tento vynález týka ošetrovania ľudského alebo zvieracieho organizmu pri stavoch, ktoré vyžadujú 'inhibíciu trombínu. Predpokladá sa, že zlúčeniny pódia tohoto vynálezu sú vhodné obzvlášť u živočíchov vrátane človeka na ošetrovanie alebo profylaxiu trombózy a hyperkoagulovatelnosti v krvi a tkanivách. Ďalej sa očakáva, že tieto zlúčeniny majú byť použitelné v situáciách, keď sa prejavuje nežiadúci prebytok trombínu bez znakov hyperkoagulovatelnosti. Chorobne stavy, pri ktorých zlúčeniny nachádzajú j
ošetrovanie a/alebo profylaxiu, embóliu, arteriálnu trombózu, nestabilnú angínu, mŕtvicu na arteriálnu trombózu. Ďalej sa arteroslerotických ochorení, ako cerebrálne arteriálne choroby Ďalej sa u zlúčenín očakáva, potenciálnu použitelnosť na zahrňujú trombózu žíl, pľúcnu ako pri infarkte myokardu, základe trombózy a periférnu očakáva použitie v profylaxii sú koronárne arteriálne choroby, a periférne arteriálne choroby, že sú použiteľné dohromady s trombolytikami pri trombotických chorobách, obzvlášť infarkte myokardu. Okrem toho sa pri zlúčeninách predpokladá, že sú použitelné pri profylaxii pre reoklúziu po trombolýze, perkutánnej transluminálnej angioplastike (PTCA) a koronárnych operačných premosteniach. Ďalej sa u zlúčenín očakáva ich použitelnosť pri prevencii retrombózy po drobných chirurgických zákrokoch. Ešte ďalej sa predpokladá, že zlúčeniny sú vhodné pri antikoagulačnom ošetrovaní v súvislosti s umelými náhradami orgánov a srdcových chlopní. Od zlúčenín sa ďalej očakáva, že sú ‘ použitelné pri antikoagulačnom ošetrovaní pri hemodialýze a pri roztrúsenej intravaskulárnej koagulácii i
Ďalšie očakávané použitie je pri preplachovaní cievok a mechanických zariadení používaných u pacientov in vivo, a ako antikoagulačný prostriedok na ochranu krvi, plazmy a iných krvných produktov in vitro.
Farmaceutické prostriedky
Zlúčeniny všeobecného vzorca I sa zvyčajne podávajú orálnou, rektálnou, dermálnou, nasálnou alebo parenterálnou cestou vo forme farmaceutických prostriedkov, ktoré obsahujú účinnú látku buď ako volnú zásadu alebo ako farmaceutický prijatelnú netoxickú .adičnú sol s kyselinou, napríklad hydrochlorid, hydrobromid, laktát, acetát, citrát, p-toluénsulfonát, trifluóracetát a podobne, vo farmaceutický prijateľnej dávkovej forme.
Dávková forma môže tvoriť tuhý, polotuhý alebo kvapalný prostriedok, ktorý sa pripravuje o sebe známym spôsobom. Zvyčajne účinná látka bude tvoriť od 0,1 až do 99 % hmotnostných prostriedkov, najmä od 0,1 do 50 % hmotnostných pre prostriedky určené k parenterálnemu podaniu a od 0,2 do 75 % hmotnostných pre prostriedky vhodné na orálne podanie.
Vhodná denná dávka zlúčenín podlá tohoto vynálezu na terapeutické ošetrovanie ľudí je okolo 0,001 až 100 mg/kg telesnej hmotnosti pri perorálnom podávaní a od 0,001 do 50 mg/kg telesnej hmotnosti pri parenterálnom podávaní.
Spôsob výroby
Ďalším znakom tohoto vynálezu je spôsob výroby zlúčenín. Zlúčeniny všeobecného vzorca I sa môžu vyrobiť kopuláciou N-koncovo chránenej aminokyseliny alebo dipeptidu alebo vopred vyrobeného N-koncovo alkylovaného chráneného dipeptidu na zlúčeninu všeobecného vzorca
H2N-(CH2)n-X, v ktorom n má význam uvedený pod všeobecným vzorcom I a
X predstavuje nechránenú alebo chránenú guanidinoskupinu, chránenú aminoskupinu alebo skupinu, ktorú je možné premeniť na aminoskupinu, pričom amínoskupina sa následne prevedie na guanidinoskupinu.
Kopulácia sa preto uskutočňuje jedným z ďalej uvedených spôsobov.
Spôsob I
Kopulácia štandardnou nechráneným uskutočňuje dipeptidu, vyrobeného s buď chráneným alebo alkylamínom s priamym reťazcom sa alebo maskovaní aminoskupiny na konci alkylového reťazca, pri použití štandardnej peptidovej kopulácie, - znázornenej vzorcami
N-koncovo chráneného peptidovou kopuláciou, guanidínom alebo pri chránení
H2N-(CH2)n-X
pričom vo vzorcoch
R3, R4, R5, n, m a A majú výzmamy uvedené pod všeobecným vzorcom I,
R6 znamená atóm vodíka alebo alkylovú skupinu,
W-l znamená skupinu chrániacu aminoskupinu, ako je terc.-butoxykarbonyl a benzyloxykarbonyl a
X znamená skupinu .vzorca -NH-C(NH)NH2, -NH-.C (NH) NH-W2,
-n(w2)-c(nh)nh-w2, '-nh-c(nw2)nh-w2 alebo -NH-W2, kde w2 znamená skupinu chrániacu aminoskupinu, ako je ter.-butoxykarbonyl a benzyloxykarbonyl, alebo
X znamená maskovanú aminoskupinu, ako je azidový zvyšok, za vzniku chráneného peptidu. Konečné zlúčeniny sa môžu vyrobiť ľubovoľným z ďalej uvedených spôsobov, v závislosti na povahe použitej skupiny X-. Odstránenie chrániacej skupiny alebo chrániacich skupín (kde X znamená skupinu vzorca -NH-C(NH)NH2, -N(W2)-C(NH)NH-W2, -NH-C(NW2)NH-W2 alebo -NH-C(NH)NH-W2)., alebo selektívne odstránenie skupiny (napríklad pokiaľ X znamená skupinu vzorca -NH-C(NH)NH-W2, -N(W2)-C(NH)NH-W2, -NH-C(NW2)NH-W2, pričom W2 v tomto prípade musí byt umiestnený ortogonálne k Wj s nasledujúcou alkyláciou N-koncového atómu dusíka a odstránením alebo selektívnym odstránením alebo odmaskovaním koncovej alkylamínovej funkcie (X znamená NH-W2, kde W2 v tomto prípade musí byť umiestnený ortogonálne k alebo X znamená maskovanú amínoskupinu, ako je azidový zvyšok) s nasledujúcou guanidizačnou reakciou, sa uskutočňuje za použitia štandardných spôsobov, z volného amínu a odstránením skupiny W·^.
Spôsob II
Kopulácia N-koncovo chránenej aminokyseliny, vyrobenej štandardnými spôsobmi, s buď chráneným alebo nechráneným aminoguannidínom alebo alkylamínom s priamym reťazcom sa uskutočňuje pri chránení alebo maskovaní amínoskupiny na konci alkylového reťazca, za použitia štandardnej peptidovej kopulácie, znázornenej vzorcami
R5
H2N-(CH2)n-X
NH-(CH2)n-X v ktorých vzorcoch
Wj, A, R5 a X majú význami uvedené vyššie, s nasledujúcim odstránením skupiny W-] a kopuláciou s N-koncovou aminokyselinou, v chránenej forme, čo vedie k chránenému peptidu opísanému v spôsobe I alebo III, v závislosti na voľbe substitučného vzoru na atóme dusíka N-koncovej aminokyseliny použitej na kopuláciu. Syntéza potom pokračuje podlá spôsobu I alebo spôsobu III pri vzniku konečných peptidov.
Spôsob III
Kopulácia vopred vyrobeného N-koncovo alkylovaného alebo chráneného dipeptidu, vyrobeného . štandardnou peptidovou kopuláciou, s buď chráneným lebo nechráneným amínoguanidínom alebo alkylamínom s priamym reťazcom sa uskutočňuje pri chránení alebo maskovaní amínoskupiny na konci alkylového reťazca, za použitia štandardnej peptidovej kopulácie, znázornenej vzorcami
H2N-(CH2)n-X
pričom vo vzorcoch
R2, R3, R4, R5, n, m, A a X majú význami uvedené vyššie, s podmienkou, že R2 má iný význam ako atóm vodíka a
W3 znamená acylovú chrániacu skupinu, ako je trifluóracylová skupina.
Konečné zlúčeniny sa môžu vyrobiť ľubovolným z ďalej ‘uvedených spôsobov, v závislosti na povahe použitej skupiny X- a to odstránením chrániacich skupín (kde X- znamená skupinu vzorca *-nh-c(nh)nh2, -nh-c(nh)nh-w2, -n(w2)-c(nh)nh-w2, -nh-c(nw2)nh-w2 alebo -NH-W2) alebo selektívnym odstránením chrániacich skupín alebo odmaskovaním koncovej alkylamínovej funkcie ( X znamená skupinu vzorca -NH-W2, kde W2 v tomto prípade musí byť umiestnený ortogonálne k W3 alebo X znamená maskovanú amínoskupinu, ako je azidový zvyšok) s nasledujúcim guanidizačným odstránením skupiny w3.
Ďalej je uvedený detailný popis tohoto vynálezu.
Nasledujúci popis je ilustráciou rôznych aspektov tohoto vynálezu.
Experimentálna časť t
Syntéza zlúčením podľa tohoto vynálezu je ilustrovaná v schémach I až VI pripojených k tomuto patentu.
Všeobecné experimentálne postupy
Meranie NMR spektra a 13c NMR spektra sa uskutočňuje na
spektrometroch BRUKER AC-P 300 a BRUKER AM 500, pričom
spektrometer BRUKER AC-P 300 sa prevádzkuj e pri frekvencii
500, 14 MHz a ^3C frekvencii 125,76 MHz a spektrometer BRUKER AM 500 sa prevádzkuje pri frekvencii 300,13 MHz a 13C frekvencii 75,46 MHz.
Vzorky s hmotnosťou 10 až 50 mg sa rozpustia v 0,6 ml niektorého z týchto rozpúšťadiel: CDC13 (izotopická čistota vyššia ako 99,8 %, Dr. Glaser AG., Bazilej, Švajčiarsko), CD3OD (izotopická čistota vyššia ako 99,95 %, Dr. Glaser AG., Bazilej,
Švajčiarsko) alebo D20 (izotopická čistota vyššia ako 99,98 %,
Dr. Glaser AG., Bazilej, Švajčiarsko).
Hodnoty 1H a 13C chemických posunov v CDC13 a CD3OD sú vo vzťahu k tetrametylsilanu ako vonkajšiemu štandardu. 3H chemické ;posuny v D20 sú vo vzťahu k sodnej soli kyseliny 3-(trimetylsilyl)-d4-propánovej a 13C chemické posuny v D2O sa vzťahujú 'vzhľadom k 1,4-dioxánu (67,3 ppm), pričom obe tieto látky sú vonkajšími štandardami. Kalibrovanie s vonkajšími štandardami môže byť v niektorých prípadoch príčinou odlišných malých posunov v porovnaní s vnútorným štandardom, avšak rozdiely v 3Η chemických posunoch sú menšie ako 0,02 ppm a v 13C chemických posunoch menšie ako 0,1 ppm.
1H NMR spektrum peptidových sekvencií obsahujúcich prolínový zvyšok často vykazuje dva súbory rezonancií. To zodpovedá existencii prispievajúcich konformerov s ohľadom na rotáciu okolo amidovej väzby, kde prolín je N-časťou dusíkovej väzby. Konforméry sa označujú ako cis a trans. V zlúčeninách podľa tohoto vynálezu sa sekvencia (R)Cha-Pro- a (R)Cha-Pic- často vyskytujú nad rovnovážnym stavom cis-trans s jedným konformerom ako predominantným (viac ako 90 %). V týchto prípadoch sa
Ί z uvadzaju iba 1 chemické posuny majoritného rotameru.
Chromatografia na tenkej vrstve sa uskutočňuje na povlečených sklenených alebo hliníkových doskách, komerčne dostupných u firmy Merck ako Silicagel 60F254· Vizualizácia sa dosahuje kombináciou pôsobenia ultrafialového svetla, potom postriekaním roztokom činidla, ktoré bolo vyrobené zmiešaním 372 ml 95 % etanolu, 13,8 ml koncentrovanej kyseliny sírovej, 4,2 ml koncentrovanej kyseliny octovej a 10,2 ml p-metoxybenzaldehydu alebo kyseliny fosfomolybdénovej (5 až 10 % hmotnostných v 95 % etanolu) a potom zahriatím.
Velmi rýchla chromatografia sa uskutočňuje na silikageli (Silicagel 60 Merck, s veľkosťou častíc 40 až 63 mm) pri pretlaku dusíka.
Vysoko účinná kvapalinová chromatografia s reverznou fázou (niekedy tiež označovaná ako RPLC) sa uskutočňuje na zariadení Waters M-590 vybavenom troma kolónami naplnenými reverznou fázou 10Q, C8 (Eka-Nobel), ktoré majú rozdielne rozmery na analytickú chromatografiu (4,6 x 250 mm), semipreparatívna chromatografia ’(2,54 cm x 250 mm) a preparatívna chromatografia (5,08 cm x 500 mm) pri vlnovej dĺžke 226 nm.
Sušenie vymrazovaním alebo lyofiliozácia sa uskutočňuje na zariadení Leybold-Heraeus, model Lyovac GT 2.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Spôsob ochrany zlúčenín
Spôsob výroby Boc-(R)Cha-0H
K roztoku 21,55 g (125,8 mmol) H-(R)Cha-OH v 130 ml
1-molárneho roztoku hydroxidu sodného a 65 ml tetrahydrofuránu sa pridá 30 g (137,5 mmol) (Boc)20 a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 4,5 hodiny. Tetrahydrofurán sa odparí a pridá sa ďalších 150 ml vody. Alkalická vodná fáza sa dvakrát premyje etylacetátom, potom okyselí 2-molárnym roztokom hydrogénuhličita nu draselného a trikrát extrahuje Spojené organické fázy sa premyjú sodného a vysušia síranom sodným, dostane 30,9 g zlúčeniny pomenovanej vždy 150 ml etylacetátu. vodou, roztokom chloridu Odparením rozpúšťadla sa v nadpise vo forme bielej tuhej látky. Výťažok je 90,5 % teórie.
Spôsob výroby Z-(R)Cha-OH
Postupuje sa rovnakým spôsobom ako opisujú M. Bodanszky a A.
Bodanszky v The Practice of Peptide Synthesis, 12,
Springer-Verlag /1984/, pričom sa vychádza z H-(R)Cha-OH.
Spôsob výroby Boe-(Me)-Phe-OH
Vyrobí sa rovnakým spôsobom ako Boc-(R)Cha-OH z Me-(R)Phe-OH.
Spôsob výroby Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-0H
Do dobre miešaného roztoku 2,0 g (8,8 mmol, 1 ekvivalent) ' H(R,S)Pro(3-(trans)Ph-0H x HC1 (vyrobený ako je opísané v J. Org.
Chem. 55, 270-275 /1990/ a J. Org. Chem. 39, 1710-1716 /1974/) v *17,6 ml 1-normálneho roztoku hydroxidu sodného, 12 ml vody a 12 ml tetrahydrofuránu sa pri teplote +5 °C pridá 2,33 g (10,7 mmol,
1,2 ekvivalentu) (Boc)20. Reakčná zmes sa nechá ohriať na teplotu miestnosti a v miešaní sa pokračuje ďalších 18 hodín. Organický roztok sa odparí a k odparku sa pridá 50 ml vody. Bázická vodná fáza sa dvakrát premyje vždy 50 ml etylacetátu a okyselí
2-molárnym roztokom hydrogenuhličitanu draselného (hodnota pH je približne 1). Kyslá vodný fáza sa štyrikrát extrahuje vždy 75 ml etylacetátu a spojené organické fázy sa premyjú raz 40 ml vody a raz 40 ml roztoku chloridu sodného a vysušia síranom horečnatým. Odparením rozpúšťadla sa· získajú 2,0 g čistej pripravovanej zlúčeniny ako biela tuhá látka. Výťažok je 78 % teórie.
1H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13, zmes 2 rotamerov): δ 1,4 a
1,5 (2s, 9H), 2,0 až 2,1 (m, 1H), 2,3 až 2,4 (m, 1H), 3,45 až
3,88 (m, 3H), 4,3 až 4,45 (2d, 1H), 7,2 až 7,4 (m, 5H) ppm.
Spôsob výroby Boe-(R,S)-Pro(3-Ph)-OH
Vyrobí sa ako je opísané vyššie, pričom sa vychádza z cis/trans-zmesi H-(R,S)Pro(3-Ph)-OH.
Spôsob výroby Boc-(R)Dph-OH
Vyrobí sa spôsobom, ktorý opísal K. Hsich a kol. v J. Med. Chem. 32, 898 /1989/ z H-(R)Dph-OH.
Spôsob výroby Boc-(R)Hop-OH
Vyrobí sa rovnakým spôsobom ako je opísané pre Boe-(R)Cha-OH, pričom sa vychádza z H-(R)Hop-OH.
1H-NMR spektrum (300 MHz, CDC13): δ 1,45 (s, 9H), 2,00 (m,
1H), 2,22 (m, 1H), 2,75 (široký t, 2H), 4,36 (široký s, 1H), 5,05 (široký s, 1H), 7,15 až 7,33 (m, 5H) ppm.
‘spôsob odstránenia chrániacich skupín
a) Chránený peptid sa rozpustí v 95 % etanole a hydrogenuje v prítomnosti 5 % palládia na uhlí pri atmosférickom tlaku v prítomnosti prebytku kyseliny trifluóroctovej alebo kyseliny octovej, ktorý je väčší ako 2 ekvivalenty, počas približne 1 až 4 hodín. Katalyzátor sa odfiltruje, rozpúšťadlo sa odparí ä konečný peptid (vo forme soli s kyselinou trifluóroctovou alebo kyselinou octovou) sa izoluje ako biely prášok, po odstránení vody lyofilizáciou.
b) Postupuje sa rovnako ako ad a) s tým rozdielom, že sa ako rozpúšťadlo použije zmes etanolu a·vody v pomere približne 5:1.
» c) Postupuje sa rovnako ako ad a) s tým rozdielom, že sa ako rozpúšťadlo použije metanol.
d) Postupuje sa rovnako ako ad a) s tým rozdielom, že sa ako kyselina použije 2-molárna kyseliny chlorovodíková a dostane sa hydrochlorid.
ΐ
e) Hydrolýza esterov, uvádza sa ako ilustratívny príklad:
0,4 mmol EtOOC-CH2~(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc sa rozpustí v 1,5 ml metanolu a 1,2 ml (1,2 mmol) 1-molárneho roztoku hydroxidu sodného pri teplote miestnosti. Po 3 hodinách sa metanol odparí a k odparku sa pridá prebytok kyseliny octovej. Zmes sa lyofilizuje a čistí vysoko účinnou kvapalinovou chromátografiou s reverznou fázou, pri použití acetonitrilu a 0,1-molárneho octanu amónneho v pomere 70:30 ako elučného činidla. Čistá látka sa dostane ako prášok vo výťažku 73 % teórie, po lyofilizácii z vody.
f) Štiepenie terc.-butylesterov, uvádza sa ako ilustratívny príklad:
terc.-Butylester sa rozpustí v prebytku kyseliny trifluóroctovej. Roztok sa mieša počas 2 hodín pri teplote ‘miestnosti a potom sa kyselina trifluóroctová odparí. Potom sa uskutoční spracovanie s aktívnym uhlím vo vodnom etanole a nato ’lyofilizácia z vody. Tak sa získajú požadované zlúčeniny.
Výroba východzích zlúčenín
Spôsob výroby H-Pic-OEt x HCI
4,0 g (0,031 mol) kyseliny L-pipekolínovej sa suspendujú v 100 ml absolútneho etanolu a suspenziou opatrne prebubláva plynný chlorovodík, pokiaľ sa nezíska číry roztok. Tento roztok sa ochladí na ladovom kúpeli počas 15 minút sa prikvapká 17 ml tionylchloridu. Odstráni sa ľadový kúpeľ a zmes sa varí pod spätným chladičom počas 2,5 hodiny. Rozpúšťadlo sa odparí a pripravovaná látka sa získa ako hydrochlorid v kvantitatívnom výťažku.
’’Η-NMR spektrum (3 00 MHz, D2O): δ 1,3 3 (m, 5H), 2,3 až 2,5 (m, 1H), 3,1 až 3,3 (m, (t, 3H), 1,8 až 2,1
1H), 3,5 až 3,7 (m,
1H), 4,14 (dd, 1H), 4,44 (q, 2H) ppm.
Spôsob výroby H-Pic-OMe x
HCI
Zlúčenina sa vyrobí
H-Pic-OEt x HCI, a pritom ako je opísaný rovnakým spôsobom, sa nahradí etanol metanolom.
pre
Spôsob výroby H-Aze-OEt x
HCI
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom, ako je opísaný pre
H-Pic-OEt x HC1 z H-Aze-OH.
Spôsob výroby H-Pic(4-(S)Me)-OEt x HC1
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom, ako je opísaný pre H-Pic-OEt x HC1 z H-Pic(4-(S)Me)-OH (dostupným u firmy Synthelec, Lound, Švédsko).
Spôsob výroby H-(R)Pic(4-(R)Me)-OEt x HC1 a
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom, ako je opísaný pre H-Pic-OEt x HC1 z H-(R)Pic(4-(R)Me)-0H (dostupným u firmy Synthelec, Lund, Švédsko).
Spôsob výroby H-(R)Dph-OH
Zlúčenina sa vyrobí všeobecnou metódou, ktorú uvádza A. Evans a kol. v JACS, 112, 4011 /1990/.
Spôsob výroby H-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-OEt
3,05 g (18,1 mmol) H-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-OH (vyrobený podlá spôsobu, ktorý opísal Burgstahler a kol. v J. Org. Chem., . 25(4) , 489-492 /1960/) sa rozpustí v 75 ml nasýteného etanolického roztoku chlorovodíka a zmes sa varí pod spätným •chladičom počas 5 hodín. Rozpúšťadlo sa odparí a zostávajúci odparok sa rozpustí vo vode, zalkalizuje vodným roztokom hydroxidu sodného a trikrát extrahuje etylacetátom. Vysušením síranom sodným a starostlivým odparením sa získa 2,05 g zlúčeniny pomenovanej v nadpise. Výťažok je 71 % teórie.
•’-H-NMR spektrum (CDC13) : S 1,28 (t, 3H) , 1,88 (široký s,
NH), 2,2 až 2,4 (m, 2H), 3,45 (široký s, 2H), 3,57 (dd, 1H), 4,21 (q, 2H), 5,68 až 5,82 (m, 2H) ppm.
Spôsob výroby Boc-(R)Cgl-OH
Boc-(R)Pgl-OH sa hydrogenuje v prítomnosti 5% rodia na oxide hlinitom v metanole pri tlaku 5 MPa. Filtráciou a odparením rozpúšťadla sa získa zlúčenina pomenovaná v nadpise, ktorá sa použije bez ďalšieho čistenia.
1H-NMR spektrum (300 MHz, CDC1) : δ 0,9 až 1,7 (m, 20H), 4,0 až 4,2 (m, 1H), 5,2 (d, 1H) ppm.
Spôsob výroby Boc-(R)Dch-OH
0,75 g (2,2 mmol) Boc-(R)Dph-OH sa rozpustí v 25 ml metanolu a k roztoku sa pridá katalytické množstvo 5% rodia na oxide hlinitom. Zmes sa hydrogenuje pri tlaku 5 MPa pri teplote 50 °C počas 40 hodín. Filtráciou a odparením sa získa 0,72 g zlúčeniny pomenovanej v nadpise. Výťažok je 93 % teórie.
•Lh-NMR spektrum (CDClg) : δ 0,9 až 2,0 (m, 32H, z toho 1,45 (široký s, 9H)), 4,55 (široký d) a 4,9 (široký d), dva rotamery spojené pre celkový 1H, 5,7 až 6,1 (široký, NH) ppm.
Spôsob výroby H-(R)Pro(5-(S)Me)0Me
Zlúčenina sa vyrobí spôsobom, ktorý uviedol B. Gopalan a kol. v J. Org. Chem., 51, 2405 /1986/.
Spôsob výroby H-Mor-OH
Zlúčenina sa vyrobí spôsobom, ktorý uviedol K. Nakajima a kol. v Bull. Chem. Soc. Jpn., 51!(5) , 1577-1578 /1978/ a tamtiež
60, 2963-2965 /1987/.
Spôsob výroby H-Mor-OEt x HCI
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom ako H-Pic-OEt x HCI z
H-Mor-OH.
Spôsob výroby Boc-(R)Cha-OSu ekvivalent Boc-(R)Cha-OH, 1,1 ekvivalentu
N-hydroxysukcinimidu a dicyklohexylkarbodiimidu alebo 1,1 ekvivalentu CME-CDI sa rozpustí v acetonitrile (približne 2,5 ml/mmol kyseliny) a mieša pri teplote miestnosti cez noc. Zrazenina vzniknutá počas reakcie sa odfiltruje, rozpúšťadlo sa odparí a vyrobená látka sa vysuší pri zníženom tlaku. (Pokial sa pri reakcii použije CME-DCI, po odparení acetonitrilu sa odparok 'rozpustí v etylacetáte a organická fáza sa premyje a vysuší. Odparením rozpúšťadla sa dostane zlúčenina pomenovaná v nadpise.) ^H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13, 2 rotamery v pomere približne 1 : 1): δ 0,85 až 1,1 (m, 2H), 1,1 až 1,48 (m, 4H),
1,51 až 1,98 (m, 16H, z toho 1,55 (široký s, 9H), 2,82 (široký s, 4H), 4,72 (široký s, 1H, majoritný rotamer), 4,85 (široký s, 1H, minoritný rotamer) ppm.
Spôsob výroby Boc-(Me)-(R)Cha-OSu (i) Spôsob výroby Boc-(Me)-(R)Cha-OH
Roztok 11,9 g (42,6 mmol) Boc-(Me)-(R)Phe-OH v 150 ml jnetanolu sa hydrogenuje v prítomnosti 5% rodia na oxide hlinitom pri tlaku 0,28 MPa počas 24 hodín. Odfiltrovaním katalyzátora a odparením rozpúšťadla sa dostane produkt vo forme bielej tuhej látky, ktorá sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho čistenia. Výťažok je 95 % teórie.
^H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13, zmes 2 rotamerov v pomere približne 1 : 1): δ 0,8 až 1,1 (m, 2H), 1,1 až 1,9 (m, 20H, z toho 1,47 a 1,45 (s, 9H)), 2,82 a 2,79 (s, celkovo 3H), 4,88 a
4,67 (m, celkovo 1H) ppm.
(ii) Spôsob výroby Boc-(Me)-(R)Cha-OSu
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom ako je opísaný pre
Boe-(R)Cha-OSu z Boe-(Me)-(R)Cha-OH.
Spôsob výroby Boc-(R)Cha-Pro-OSu (i) Spôsob výroby Boc-(R)Cha-Pro-OH
680 mmol H-(S)Pro-H sa rozpustí v 750 ml 0,87-molárneho roztoku hydroxidu sodného. K roztoku sa počas 20 minút prikvapká 170 mmol Boe-(R)Cha-Pro-OSu rozpusteného v 375 ml • dimetylformamidu. Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 20 hodín. Zmes sa okyselí 2-molárnym roztokom hydrogénuhličitanu draselného a trikrát extrahuje etylacetátom. Organické vrstvy sa spoja a premyjú trikrát etylacetátom. Organické vrstvy sa spoja a premyjú trikrát vodou a raz roztokom chloridu sodného. Po vysušení síranom sodným a odparení rozpúšťadla sa sirupovitý olej rozpustí v dietylétere, rozpúšťadlo sa odparí a nakoniec sa produkt vysuší pri zníženom tlaku. V takpovediac kvantitatívnom výťažku sa vo forme bielej látky získa Boc-(R)Cha-Pro-OH.
l-H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13, minoritný rotamer: 10 %): δ 0,8 až 1,05 (m, 2H), 1,05 až 1,55 (m, 15H, z toho 1,5 (široký s, 9H) ) , 1,55 až 1,8 (m, 5H), 1,8 až 2,15 (m, 3H), 2,47 (m, 1H),
3,48 (m, 1H), 3,89 (m, 1H), 4,55 (m, 2H), 5,06 (m, 1H), signály .minoritného rotameru: 2,27 (m, 1H), 3,58 (M, 1H), 4,33 (m, 1H),
5,0 (m, 1H) ppm.
(ii) Spôsob výroby Boe-(R)Cha-Pro-OSu
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom ako je opísaný pre Boc-(R)Cha-OSu z Boe-(R)Cha-Pro-OH.
i l-H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13, 2 rotamery v pomere 5 : 1): δ 0,78 až 1,05 (m, 2H), 1,05 až 1,83 (m, 20H, z toho 1,43 (široký s, 9H)), 1,83 až 2,26 (m, 3H), 2,32 (m, 1H), 2,72 až 2,9 (m, 4H),
3,2 (m, 1H, minoritný rotamer), 3,52 (m, 1H, majoritný rotamer),
3,68 (m, 1H, minoritný rotamer), 3,89 (m, 1H, majoritný rotamer),
4,31 (široký q, 1H, minoritný rotamer), 4,56 (široký q, 1H, majoritný rotamer), 4,71 (široký t, 1H, majoritný rotamer), 4,93 (široký t, 1H, minoritný rotamer), 5,22 (široký d, 1H, majoritný rotamer), 5,44 (široký d, 1H, minoritný rotamer) ppm.
Spôsob výroby Z-(R)Cha-Pro-OSu
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom ako je opísaný pre Boe-(R)Cha-Pro-OSu zo Z-(R)Cha-OH.
‘Spôsob výroby Boc-(R)Cha-Pic-OSu (i) Spôsob výroby Boc-(R)Cha-Pic-OEt
6,3 g (0,023 mol) Boe-(R)Cha-OH sa rozpustí v 150 ml dichlórmetánu. Roztok sa ochladí na ľadovom kúpeli a pridá sa 6,3 g (0,047 mol) N-hydroxybenzotriazolu a 11,2 g (0,0265 mol) CME-CDI. ťadový kúpeľ sa odstráni po 15 minútach a reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 4 hodín. Rozpúšťadlo sa odparí a odparok rozpustí v 150 ml dimetylformamidu a ochladí na ľadovom kúpeli. K roztoku sa pridá 4,1 g (0,021 mol) H-PiCc-OEt x x HCI a hodnota pH sa upraví na približne 9 prídavkom N-metylmorfolínu. radový kúpeľ sa odstráni'· a reakčná zmes sa mieša počas 3 dní. Rozpúšťadlo sa odparí a odparok sa rozpustí v jetylacetáte a premyje zriedeným vodným roztokom hydrogénuhličitanu draselného, vodným roztokom hydrogénuhličitanu draselného a vodou. Organická vrstva sa vysuší síranom sodným a odparí. Získa sa 7,7 g Boc-(R)Cha-Pic-OEt, ktorý sa použije bez ďalšieho čistenia. Výťažok je 89 % teórie.
•^H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13, 2 rotamery v pomere 3 : 1): δ 0,7 až 1,0 (m, 2H), 1,1 až 1,9 (m, 29H, z toho 1,28 (t, 3H)),
1,45 (široký s, 9H), 2,01 (široký d, 1H, majoritný rotamer), 2,31 (široký d, 1H), 2,88 (široký t, 1H, minoritný rotamer), 3,30 (široký t, 1H, majoritný rotamer), 3,80 (široký d, 1H, majoritný rotamer), 4,15 až 4,3 (m, 2H), 4,5 až 4,7 (m, 2H, minoritný rotamer), 4,77 (široký q, 1H, majoritný rotamer), 4,90 (široký d, 1H, minoritný rotamer), 5,28 (široký d, 1H, majoritný rotamer),
5,33 (široký d, 1H, majoritný rotamer) ppm.
(ii) Spôsob výroby Boe-(R)Cha-Pic-OH
5,6 g (0,014 mol) Boe-(R)Cha-Pic-OEt sa zmieša so 100 ml tetrahydrofuránu, 100 ml vody a 7 g hydroxidu lítneho. Zmes sa mieša pri teplote miestnosti cez noc. Tetrahydrofurán sa odparí a vodný roztok sa okyselí vodným roztokom hydrogenuhličitanu draselného a trikrát extrahuje etylacetátom. Spojená organická fáza sa premyje vodou, vysuší síranom sodným a odparí. Získa sa
4,9 g Boc-(R)Cha-Pic-OH, ktorý sa použije bez ďalšieho čistenia.
* Zlúčenina sa kryštalizuje zo zmesi diizopropyléteru a hexánu.
^H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13, 2 rotamery v pomere 3,5 : : 1): δ 0,8 až 1,1 (m, 2H), 1,1 až 2,1 (m, 27H, z toho 1,43 (s,
9H, majoritný rotamer), 1,46 (s, 9H, minoritný rotamer)),2,33 (široký d, 1H), 2,80 (široký t, 1H, minoritný rotamer), 3,33 (široký t, 1H, majoritný rotamer), 3,85 (široký d, 1H, majoritný rotamer), 4,57 (široký d, 1H, minoritný rotamer), 4,68 (m, 1H, minoritný rotamer), 4,77 (široký q, 1H, majoritný rotamer), 5,03 (široký s, 1H, minoritný rotamer), 5,33 (široký d, 1H, majoritný rotamer), 5,56 (m, 1H, majoritný rotamer) ppm.
(iii) Spôsob výroby Boc-(R)Cha-Pic-0Su , 1 g (2,6 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-OH sa rozpustí v 15 ml dimetylformamidu pri teplote miestnosti a potom ochladí na .teplotu -18 °C. Táto teplota sa udržuje počas pridávania reakčných zložiek. K reakčnej zmesi sa pridá 0,60 g (5,2 mmol) hydroxysukcinimidu a reakčná zmes sa mieša niekoľko minút, pokiaľ sa kryštály rozpustia. 0,56 g (2,7 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu sa rozpustí v 10 ml dimetylformamidu a vopred ochladený roztok sa prikvapká k reakčnej zmesi. Po udržovaní reakčnej zmesi pri teplote -18 °C počas niekoľko minút sa reakčná zmes dá na vodný kúpeľ s teplotou 20 °C na dobu 2 hodín za miešania. Rozpúšťadlo sa odparí, k odparku sa pridá 40 ml etylacetátu a vyzrážaná močivina sa odfiltruje. Organická fáza sa premyje raz vodou, dvakrát 0,3-molárnym roztokom hydrogenuhličitanu draselného, dvakrát zriedeným roztokom hydrogenuhličitanu draselného, raz vodou a raz roztokom chloridu sodným. Rozpúšťadlo sa odparí pri g požadovanej zlúčeniny. Výťažok sodného a nato vysuší síranom zníženom tlaku a získa sa 1,16 je 93 % teórie. Podľa ^-H-NMR spektra táto zlúčenina obsahuje dva diastereoméry (epiméry v Pic,
S/R) v pomere 95 : 5.
^H-NMR spektrum (300 MHz, CDC13, majoritný diastereomer): δ 0,7 až 2,0 (m, 27H, z toho 1,46 (široký s, 9H)), 2,29 (široký d, 1H), 2,85 (široký s, 4H), 3,40 (m, 1H), 4,5 až 4,8 (m, 1H), 5,1 ‘až 5,4 (m, 1H), 5,70 (široký d, 1H, majoritný rotamer) ppm.
4 Spôsob výroby Boc-(R)Cha-Mor-OSu
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom ako je opísaný pre Boe-(R)Cha-Pic-OSu z H-Mor-OEt x HCI s tým rozdielom, že sa acetonitril použije ako rozpúšťadlo namiesto dimetylformamidu pri výrobe OSu-esteru.
Spôsob výroby Boc-(Me)-(R)Cha-Pro-OSu
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom Boc-(R)Cha-Pro-OSu z Boe-(Me)-(R)Cha-OH.
ako je opísaný pre .Spôsob výroby Boc-(Me)-(R)Cha-Pic-OSu . Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom Boc-(R)Cha-Pic-OSu z Boe-(Me)-(R)Cha-OH.
ako je opísaný pre
Spôsob výroby Boc-(R,S)Pro(3-Ph)-Pro-0Su
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom
Boc-(R)Cha-Pro-OSu z Boe-(R,S)Pro(3-Ph)-OH.
ako je opísaný pre (i) Spôsob výroby Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-OBn
Spôsob výroby Boe-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-OSu
K suspenzii 1,0 g (3,43 mmol, 1 ekvivalent) Boc-(R,S)Pro(3-trans)Ph)-OH, 1,04 g (4,29 mmol, 1,25 ekvivalentu) H-Pro-OBn x x HC1 a 0,04 g (0,24 mmol, 0,07 ekvivalentu) N-hydroxybezotriazolu v 15 ml dimetylformamidu sa pridá 1,83 g (4,29 mmol, 1,25 ekvivalentu) CME-CDI a 0,525 ml (4,73 mmol, 1,38 ekvivalentu) N-metylmorfolínu pri teplote miestnosti. Všetko sa mieša ďalšie 4 dni, rozpúšťadlo sa odparí a odparok vyjme 200 ml etylacetátu. Organická fáza sa premyje dvakrát vždy 40 ml vody, dvakrát vždy 25 ml l-molárneho roztoku hydrogensíranu draselného, dvakrát vždy ’ 25 ml l-molárneho roztoku hydroxidu sodného, dvakrát vždy 25 ml vody a vysuší síranom horečnatým. Odparením rozpúšťadla a velmi rýchlou chromatografiou, pri eluovaní zmesou dichlórmetánu a metanolu v pomere 97 : 3, sa získa čistá pripravovaná zlúčenina, ako zmes diastereomérov v pomere približne 1:1. Výťažok je 44 % teórie.
(ii) Spôsob výroby Boe-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-OH
Benzylester sa zo zlúčeniny z predchádzajúceho stupňa odstráni hydrogenáciou za použitia 5 % palládia na uhlí v etanole pri atmosférickom tlaku počas 4 hodín. Filtráciou a odparením sa získa čistá látka, ako zmes diastereomérov v pomere 1 : 1, v kvantitatívnom výťažku.
1H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13, 2 diastereoméry, každý •pozostávajúci z 2 rotamérov): δ 1,3 až 2,4 (m + 4s z Boe skupín, celkovo 14H), 2,5 až 2,9 (m, celkovo H), 3,2 až 3,9 (m, celkovo 5H), 4,3 až 4,65 (m, celkovo 2H), 7,2 až 7,5 (m, 5H) ppm.
(iii) Spôsob výroby Boe-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-OSu
I
Zlúčenina sa vyrobí podlá spôsobu opísaného pre Boc-(R)Cha-OSu z Boe-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-OH.
Spôsob výroby Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ch)-Pro-OSu (i) Spôsob výroby Boe-(R,S)Pro(3-(trans)Ch)-Pro-OH
Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-0H sa hydrogenuje v prítomnosti 5% rodia na oxide hlinitom v metanole v prítomnosti malého množstva kyseliny octovej počas 7 dní pri tlaku 0,34 MPa. Katalyzátor sa odfiltruje, rozpúšťadlo sa odparí a odparok podrobí velmi rýchlej chromatografii, za použitia zmesi dichlórmetánu a metanolu v pomere 94 : 6 ako elučného činidla. Vo forme bielej tuhej látky sa získa čistá zlúčenina, ako zmes dvoch diastereomérov.
’(ii) Spôsob výroby Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ch-Pro-0Su
Zlúčenina sa vyrobí podľa spôsobu opísaného pre Boc-(R)Cha-OSu z Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-0H
Spôsob výroby Boc-(R)Hoc-Pro-OH (i) Spôsob výroby Boe-(R)Hoc-OH
3,2 g (11,46 mmol) Boc-(R)Hop-0H sa rozpustí v 75 ml metanolu. K roztoku sa pridá 0,5 g rodia na aktivovanom oxide hlinitom a zmes sa mieša vo vodíkovej atmosfére pri tlaku 0,41 MPa počas 18 hodín. Katalyzátor sa odfiltruje cez vrstvu celitu (rozsivkové zeminy) a rozpúšťadlo sa odparí. Tak sa získa .požadovaná zlúčenina v takpovediac kvantitatívnom výťažku.
. 1H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13): δ 0,90 (m, 2H), 1,08 až
1,33 (m, 6H), 1,43 (s, 9H), 1,60 až 1,74 (m, 6H), 1,88 (široký s, 1H), 4,27 (široký s, 1H) ppm.
(ii) Spôsob výroby Boc-(R)Hoc-0Su i
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom ako je opísaný pre Boe-(R)Cha-OSu z Boc-(R)Hoc-OH.
(iii) Spôsob výroby Boc-(R)Hoc-Pro-OH
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom ako je opísaný pre
Boc-(R)Cha-Pro-OH z Boc-(R)Hoc-OSu.
1H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13): δ 0,80 až 0,94 (m, 1,05 až 1,36 (m, 7H), 1,36 až 1,48 (široký s, 9H), 1,48 až (m, 7H), 1,98 až 2,14 (m, 2H), 2,34 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 4,52 (široký d, 1H), 5,26 (široký d, signály z minoritného rotameru sú zrejmé pri δ 1,92,
4,20 a 4,93 ppm.
2H) ,
1,78
3,85
1H) ,
2,25, 3,58, • Spôsob výroby Boc-(R)Hoc-Pic-OH • (i) Spôsob výroby Boc-(R)Hoc-Pic-OMe
Zlúčenina sa
Boe-(R)Cha-Pic-OEt vyrobí rovnakým spôsobom ako je z Boe-(R)Hoc-OH a H-Pic-OMe x HCI.
opísaný pre (ii) Spôsob výroby
Boe-(R)Hoc-Pic-OH vyrobí rovnakým spôsobom ako je
Zlúčenina sa
Boc-(R)Cha-Pic-OH z Boc-(R)Hoc-Pic-OMe.
opísaný pre ^H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13): δ 0,82 1,10 až 1,36 (m, 7H), 1,36 až 1,50 (široký (m, 11H), 2,35 (široký d, 1H), 3,28 (široký «
d, 1H), 4,63 (m, 1H), 5,33 (široký s, 1H), .signály minoritného rotameru sú zrejmé pri 4,55 a 4,97 ppm.
s, t, až 0,97 (m, 2H),
9H), 1,50 až 1,82
1H), 3,85 (široký
5,44 (široký d, 1H), δ 1,88,
2,80, 4,25,
Spôsob výroby Boc-(R)Cha-Aze-OH
Zlúčenina sá vyrobí rovnakým spôsobom Boc-(R)Cha-Pic-OH z H-Aze-OEt x HCI.
ako je opísaný pre
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom
Boe-(R)Cha-Pic-OH z H-Pic(4-(S)Me)-OEt x HCI opísaný pre že
Spôsob výroby Boc-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-0H ako je s tým rozdielom, sa ako rozpúšťadlo použije dichlórmetán.
Spôsob výroby Boc-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-0Su (i) Spôsob výroby Boc-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-0Et
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom ako je opísaný pre Boe-(R)Cha-Pic-OEt z H-(R)Píc(4)(R)Me)-OEt X HC1.
•(ii) Spôsob výroby Boc-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-0H
Zlúčenina sa vyrobí pri aplikácii spôsobu odstránenia chrániacej skupiny (e) na produkt (i) uvedený vyššie.
(iii) Spôsob výroby Boc-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-0Su
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom ako je opísaný pre Boc-(R)Cha-Pic-OSu z Boe-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-OH.
Spôsob výroby Boc-(R)Cha-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-0H
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom ako je opísaný pre Boc-(R)Cha-Pic-OH z H-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-OEt.
Spôsob výroby Boe-(R)Cgl-Pic-OH (i) Spôsob výroby Boc-(R)Cgl-Pic-OMe
1000 ml (8,1 mmol) pivaloylchloridu sa pridá k roztoku 2,086 g (8,1, mmol) Boc-(R)Cgl-0H a 1,13 ml (8,1 mmol) trietylamínu v zmesi 25 ml toluénu a 5 ml dimetylformamidu a potom sa postupne pridá 1,46 g (8,1 mmol) H-Pic-OMe x HC1 a 1,13 ml (8,1 mmol) trietylamínu v 20 ml dimetylformamidu na ladovom kúpeli. Reakčná zmes sa nechá pomaly ohriať na teplotu miestnosti a po 24 hodinách sa zriedi vodou a extrahuje toluénom. Po premytí 0,3-molárnym roztokom hydrogensíranu draselného, 10 % roztokom uhličitanu sodného a roztokom chloridu sodného sa rozpúšťadlo odparí pri zníženom tlaku a získa sa 2,52 g bezfarebného oleja, ktorý sa použije bez ďalšieho čistenia. Výťažok je 81 % teórie.
^H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13, 2 rotamery v pomere 5 : 1): δ 0,8 až 1,8 (m, 25H), 2,25 (d, 1H), 2,75 (t, 1H, minoritný rotamer), 3,3 (t, 1H), 3,7 (s, 3H), 3,85 (d, 1H), 4,3 (t, 1H, minoritný rotamer), 4,5 až 4,6 (m, 1H), 5,25 (d, 1H), 5,30 (d, 1H) ppm.
•(ii) Spôsob výroby Boe-(R)Cgl-Pic-OH
Zlúčenina sa vyrobí podľa spôsobu opísaného pre hydrolýzu Boc-(R)Cha-Pic-OEt za použitia zlúčeniny z časti (i) uvedenej vyššie. Látka sa kryštalizuje zo zmesi diizopropyléteru a hexánu.
1H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13, 2 rotamery v pomere 5 : 1): δ 0,8 až 1,8 (m, 25H), 2,3 (d, 1H), 2,8 (t, 1H, minoritný rotamer), 3,3 (t, 1H) , 3,9 (d, 1H), 4,4 (t, 1H, minoritný rotamer), 4,5 až 4,6 (m, 1H), 5,1 (s, 1H, minoritný rotamer), 5,3 (d, 1H), 5,40 (d, 1H) ppm.
Spôsob výroby Boc-(R)Dph-Pic-OH
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom Boc-(R)Cha-Pic-OH z Boc-(R)Dph-0H. ako je opísaný pre
Spôsob výroby Boe-(R)Dch-Pic-OH
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom Boe-(R)Cha-Pic-OH z Boc-(R)Dch-0H. ako je opísaný pre
Spôsob výroby Boc-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-0H
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom ako je opísaný pre
Boe-(R)Cha-Pic-OH z H-Pro(5-(S)Me)-OMe.
Spôsob výroby Boc-Nag(Z) (i) Spôsob výroby N-benzyloxykarbonyl-O-metylmočoviny
K miešanému roztoku 2,8 litra (53 mol) vodného roztoku hydroxidu sodného s hmotnostnou koncentráciou 50 % a 32 litrov vody sa pri teplote 18 °C vnesie v dvoch dieloch celkom 1,7 kg (13,0 mol) 94% hemisulfátu O-metylisomočoviny a 1,57 kg (9,0 mol) 99% hydrogensulfátu O-metylisomočoviny. Reakčná zmes sa ochladí na teplotu 3 až 5 °C a počas 20 minút sa pri chladení a intenzívnom miešaní pridá 3,88 kg (20,9 mol) 92% benzyl-chorformiátu. Počas pridávania Z-Cl sa teplota reakčnej zmesi upraví z 3 na 8 ’C. Kvapkacia nálevka sa prepláchne 5 litrami vody, ktorá sa ’pridá do reaktoru. Reakčná zmes sa mieša pri teplote 0 až 3 ’C počas 18 hodín, filtruje a kryštály sa premyjú 10 litrami studenej vody s teplotou 3 ’C. Reakčná zmes sa suší pri zníženom tlaku 1 až 2 kPa pri teplote 25 ’C počas 48 hodín. Získa sa 3,87 kg zlúčeniny pomenovanej v nadpise ako biely kryštalický prášok. Výťažok je 89 % teórie.
(ii) Spôsob výroby Boc-Nag(Z)
K miešanému roztoku 3,9 kg (18,5 mol) Boc-NH-(CH2)3-NH2 x x HC1 (vyrobenému ako uvádza P. G. Mattingly v Synthesis, 367 /1990/) v 24 kg izopropánu sa pri teplote 60 až 70 ’C pridá po Častiach počas 30 minút 4,2 kg (42 mol) hydrogenuhličitanu draselného. Nastane pomalé uvolňovanie plynného oxidu uhličitého. Zmes sa mieša ďalších 30 minút a potom sa po častiach počas 30 minút pridá 3,741 kg (18,0 mol) N-benzyloxykarbonyl-O-metylmočoviny. Reakčná zmes sa mieša pri teplote 65 až 70 °C počas 16 hodín, ochladí na teplotu 20 ’C a filtruje. Zrazenina sa premyje 10 a potom 5 litrami izopropanolu. Spojené filtráty sa odparia pri zníženom tlaku a udržovaní topného plášťa pri teplote, ktorá nie je vyššia ako 65 až 70 ’C. Keď sa oddestiluje približne 45 litrov kvapaliny, pridá sa 90 litrov etylacetátu. Reakčná zmes sa ochladí na teplotu 20 až 25 ’C, premyje sa 10 a 5 litrami vody a 5 litrami roztoku chloridu sodného a vysuší 2 kg síranu sodného. Reakčná zmes sa mieša, potom filtruje a filtračný koláč sa premyje 11 a 7 litrami etylacetátu. Spojené filtráty sa odparia pri zníženom tlaku, pri udržovaní topného plášťa pri teplote, ktorá nie je vyššia ako 40 až 50 'C. Keď sa oddestiluje približne 90 litrov etylacetátu, pridá sa 25 litrov toluénu a v odparovaní sa pokračuje. Po zachytení približne ďalších 18 litrov destilátu sa za intenzívneho miešania pridá 20 litrov toluénu a výsledná zmes sa ochladí na teplotu -1 až 0 °C a opatrne mieša cez noc, počas 17 hodín. Kryštalická suspenzia sa filtruje a získaná látka sa premyje 10 a 5 litrami studeného toluénu. Sušením pri zníženom tlaku, pri 1 až 2 kPA, pri teplote 40 °C počas 24 hodín, sa získa
4,83 kg (13,8 mol) Boc-Nag(Z). Výťažok je 76 % teórie.
1H-NMR spektrum (300 MHz, CDC13): δ 1,41 (s, 9H), 1,6 až 1,7 (m, 2H), 3,0 až 3,3 (m, 4H) , 4,8 až 5,0 (široký s, 1H), 5,10 (s, 2H), 7,2 až 7,4 (m, 5H) ppm.
Spôsob výroby Boc-Agm(Z) (i) Spôsob výroby Boc-Agm
K suspenzii 14,95 g (65,5 mmol, 1 ekvivalent) agmatinsulfátu (Aldrich), 13,7 ml (98,25 mmol, 1,5 ekvivalentu) trietylamínu, 165 ml vody a 165 ml tetrahydrofuránu sa pridá 21,5 g (98,25 mmol, 1,5 ekvivalentu) (Boc)20 pri teplote miestnosti počas 5 minút. Zmes sa intenzívne mieša cez noc, odparí dosucha a odparok ’sa premyje dvakrát vždy 100 ml dietyléteru. Získa sa Boc-Agm ako biely prášok, ktorý sa použije bez ďalšieho čistenia v nasledujúcom stupni.
(ii) Spôsob výroby Boc-Agm(Z)
K studenej suspenzii (s teplotou +51 °C) približne 65,5 mmol surového Boc-Agm z predchádzajúceho stupňa v 180 ml 4-normálneho roztoku hydroxidu sodného a 165 ml tetrahydrofuránu sa pridá 24 ml (169 mmol, 2,5 ekvivalentu) benzyl-chlórformiátu počas 10 minút. Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 4 hodín, potom sa pridá 150 ml metanolu a v miešaní pri teplote miestnosti sa pokračuje počas ďalších 20 hodín. Organické rozpúšťadlo sa odparí a k odparku sa pridá 200 ml vody. Zásaditá vodná fáza sa extrahuje raz 300 ml a potom dvakrát vždy 200 ml etylacetátu. Spojené organické fázy sa premyjú dvakrát vždy 100 ml vody a raz 100 ml roztoku chloridu sodného a vysušia síranom horečnatým. Odparením rozpúšťala a veľmi rýchlou chromatografiou, pri použití zmesi dichlórmetánu a metanolu so stupňovitým gradiantom 97:3, 95:5 a 9:1 ako elučným činidlom sa získa 14,63 g čistého Boc-Agm(Z) ako bieleho prášku. Výťažok je 58 % teórie.
s 1H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13): δ 1,35 až 1,40 (m, 2H),
1,45 (s, 9H), 1,5 až 1,6 (m, 2H), 3,0 až 3,2 (m, 4H), 4,65 ‘(široký s, 1H), 5,1 (s, 2H), 7,25 až 7,40 (m, 5H) ppm.
13C-NMR spektrum (75,5 MHz, CDC13):6 25,44, 27,36, 28,21,
65,83, 79,15, 127,47, 127,66, 128,14, 137,29, 156,47, 161,48,
163,30 ppm.
Spôsob výroby Boc-NH-(CH2)3-N3
Zlúčenina sa vyrobí spôsobom, ktorý opísal P.. G. Mattingly v Synthesis, 367 /1990/.
Spôsob výroby Z-NH-(CH2)2~NH2 •
K studenému roztoku 6 g (0,1 mol) etyléndiamínu a 22 ml trietylamínu v 20 ml chloroformu sa pridá 2,5 g Z-OSu rozpusteného v 5 ml chloroformu. Zmes sa nechá ohriať na teplotu miestnosti a potom sa nechá miešať cez noc. Filtráciou, odparením rozpúšťadla a veľmi rýchlou chromatografiou, pri eluovaní zmesou dichlórmetánu a metanolu nasýteného amoniakom v pomere 95 : 5, sa získa 0,9 g zlúčeniny pomenovanej v nadpise. Výťažok je 46 % teórie.
1H-NMR spektrum (300 MHz, CDC13): δ 1,27 (s, 2H), 2,85 (t,
2H), 3,24 (q, 2H), 5,14 (s, 2H), 7,22 až 7,40 (m, 5H) ppm.
Spôsob výroby Agm x HC1
Zlúčenina sa vyrobí z Agm x H2SO4 (Aldrich) výmenou hydrogensulfátového iónu za ión chloridový na ionomeničovej kolóne.
Spôsob výroby H-Nag(Z) x 2 HC1
Zlúčenina sa vyrobí prebublávaním chlorovodíka (e) roztokom Boc-NAg(Z) v etylacetáte a potom odparením rozpúšťadla.
Spôsob výroby BnOOC-CH2-NH-CO-CH2~Br
K roztoku 5 mmol H-Gly-OBn x p-TsOH a 5 mmol trietylamínu v 10 ml dichlórmetánu sa pridá 5 mmol kyseliny 2-brómoctovej, ktorá je rozpustená v 10 ml dichlórmetánu, a 5 mmol dicyklohexylkarbodiimidu. Zmes sa mieša pri teplote miestnosti cez noc a filtruje. Organická fáza sa premyje dvakrát 0,2-molárnym roztokom hydrogenuhličitanu draselného, 0,2-molárnym roztokom hydroxidu sodného, roztokom chloridu sodného a vysuší. Odparením a veľmi rýchlou chromatografiou, pri eluovaní zmesou dichlórmetánu a metanolu v pomere 95 : 5, sa v kvantitatívnom výťažku získa požadovaná zlúčenina.
1H-NMR spektrum (300 MHz, CDC13): δ 3,89 (s, 2H), 4,05 až
4,11 (d, 2H), 5,19 (s, 2H), 7,06 (široký s, 1H), 7,3 až 7,4 (m,
5H) ppm.
Spôsob výroby BnOOC-CH2~OCO-CH2-Br
Zmes 2,8 g (0,020 mmol) kyseliny brómoctovej, 4,2 g (0,020 mmol) benzyl-brómacetátu a 2,0 g (0,020 mmol) trietylamínu v 25 ml etylacetátu sa varí pod spätným chladičom počas 3 hodín. Reakčná zmes sa potom zriedi väčším množstvom etylacetátu a ochladí. Roztok sa premyje zriedenou kyselinou chlorovodíkovou a potom vodným roztokom hydrogenuhličitanu draselného a nakoniec vodou. Vysušením síranom sodným a odparením, s nasledujúcou veľmi rýchlou chromatografiou, pri eluovaní zmesou heptánu a etylacetátu v pomere 75 : 25, sa získa zlúčenina pomenovaná v nadpise vo výťažku 26 % teórie.
1H-NMR spktrum (300 MHz, CDC13): δ 3,95 (s, 2H), 4,75 (s,
2H), 5,23 (s, 2H), 7,35 až 7,45 (m, 5H) ppm.
Spôsob výroby BnO-(CH2)3-OTf
0,83 zmesi 0,6 roztok sa g (5 mmol) g (7 mmol) ochladí na monobenzyléteru propándiolu sa rozpustí v suchého pyridínu a 20 ml dichlórmetánu a teplotu -15 °C. K reakčnej zmesi kyseliny trifluómetánsulfónovej, ktorý je anhydrid sa pridá vopred ochladený na teplotu -15 “C, a vzniknutá reakčná zmes sa mieša počas 45 minút, pričom sa teplota nechá vystúpiť na 15 “C.
Rozpúšťadlo sa odparí a odparok sa rozpustí v 10 ml zmesi hexánu a etylacetátu v pomere 4 : 1. Roztok sa filtruje cez oxid kremičitý. Rozpúšťadlo sa nakoniec odparí a odparok suší pri zníženom tlaku. Získa sa 0,95 g 1-benzyloxy-(3-trifluórmetánsulfonylpropánu), ktorý sa priamo ďalej použije (viď. príklad 21). Výťažok zodpovedá 64 % teórie.
1H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13): δ 2,12 (m, 2H), 3,6 (t, ,2H) , 4,51 (s, 2H), 4,72 (t, 2H), 7,22 až 7,42 (m, 5H) ppm.
Spôsob výroby BnO-(CH2)2-CHO
Zlúčenina sa vyrobí Swernovou oxidáciou ako opísal D. Swern a kol. v J. Org. Chem. 2480-2482 /1978/ z BnO-(CH2)β-0Η.
Ί í
J-H-NMR spektrum (300 MHz, CDC13): δ 2,63 (dt, 2H) , 3,80 (t, 2H), 4,51 (s, 2H), 7,30 (m, 5H), 9,76 (široký t, 1H) ppm.
Spôsob výroby Br-(S)CH(CH2OBn)-COOBn (i) Spôsob výroby Br-(S)CH(CH2OBn)-COOH
3,9 g (19 mmol) O-benzylserínu v 10 ml vody sa pridá k roztoku 11 g (107 mmol) bromidu sodného v 20 ml vody a 2 g (20 mmol) kyseliny sírovej. Reakčná zmes sa ochladí na teplotu -10 C a pri intenzívnom miešaní sa pridá 1,73 g (25 mmol) dusitanu sodného. K hustej zmesi sa pridá ďalší podiel vody a po niekolkých minútach 1 g (10 mmol) kyseliny sírovej. Zmes sa mieša pri teplote miestnosti cez noc a potom sa dvakrát extrahuje vždy 100 ml etylacetátu. Spojené organické fázy sa premyjú dvakrát vodou a raz roztokom chloridu sodného a vysušia síranom sodným. Odparením rozpúšťadla sa získa 3,7 g zlúčeniny pomenovanej v nadpise, ako žltý olej, ktorý je dostatočne čistý na použitie * priamo v nasledujúcom stupni. Výťažok je 75 % teórie.
(ii) Spôsob výroby Br-(S)CH(CH2OBn)-COOBn
K roztoku 2,6 g (10 mmol) surovej zlúčeniny z časti.(i) uvedenej vyššie v 25 ml suchého benzénu sa pridá 2,6 g (20,5 mmol) oxalylchloridu a 1 g molekulového sita 4 (4 x 10 m).
Zmes sa mieša pri teplote miestnosti pod argónovou atmosférou počas 18 hodín. Molekulové sito sa odfiltruje a roztok odparí. Slabo žltý odparok sa rozpustí v 10 ml acetonitrilu a k roztoku sa pridá 1 g (9,2 mmol) benzylalkoholu. Vzniknutá zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 5 hodín. Rozpúšťadlo sa odparí a .odparok sa rozpustí v dietylétere a premyje raz 1-molárnym roztokom hydroxidu sodného, vodou a roztokom chloridu sodného a nato vysuší síranom sodným. Odparením rozpúšťadla a potom velmi rýchlou chromatografiou, pri eluovaní zmesou dichlórmetánu a metanolu v pomere 95 : 5, sa získa 1,8 g požadovanej zlúčeniny. Výťažok je 67 % teórie.
n i 1H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13): δ 3,82 (dd, 1H), 3,99 (dd, 1H), 4,38 (dd, 1H), 4,56 (s, 2H), 5,23 (s, 2H), 7,23 až 7,46 (m,
5H) ppm.
Pracovné príklady
Príklad 1
Spôsob výroby H-(R)Cha-Pro-Agm x 2 HOAc (i) Spôsob výroby Boc-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc
1,7 mmol Boc-(R)Cha-Pro-OSu a 2,0 mmol (1,18 ekvivalentu) ' agmatín-dihydrochloridu sa rozpustí v 35 ml zmesi dimetylformamidu a vody v pomere 95:5. K roztoku sa pridá trietylamín, na úpravu hodnoty pH nä zhruba 10, a roztok sa mieša pri teplote miestnosti počas 2 dní. Roztok sa odparí pri teplote 60 °C a tlaku 665 Pa dosucha a surová látka sa čistí vysoko účinnou kvapalinovou chromátografiou s reverznou fázou, pri eluovaní zmesou acetonitrilu a 0,1-molárneho octanu amónneho v pomere 38 : 62. Požadovaná zlúčenina sa získa ako biely prášok po lyofilizácii.
•*-H-NMR spektrum (500 MHz, zmes CDC13 a DMSO-d6 v pomere 5:2, dva rotamery v pomere 9:1): δ (majoritný rotamer): 0,75 až 0,90 (m, 2H), 1,1 až 2,05 (m, 19H), 1,35 (s, 9H), 2,98 až 3,14 (m,
4H), 3,37 (q, 1H), 3,76 (m, 1H), 4,20 (m, 1H), 4,33 (dd, 1H), ,6,30 (d, 1H), 7,05 až 7,80 (široký m, 5H), 8,67 (široký d, 1H) ppm.
Zmeny rozriedených signálov minoritného rotaméru sa nezreteľne pozorujú pri δ 3,44 (m, 1H), 3,62 (m, 1H), 4,10 (m, 1H), 4,64 (m, 1H), 5,56 (d, 1H), 9,08 (m, 1H) ppm.
(ii) Spôsob výroby H-(R)Cha-Pro-Agm x 2 HOAc
Roztok 0,2 mmol Boe-(R)Cha-Pro-Agm v 2 ml kyseliny trifluóroctovej sa mieša pri teplote miestnosti počas 4,5 hodiny. Rozpúštadlo sa odparí a zostávajúci olej sa podrobí vysoko účinnej kvapalinovej chromátografii s reverznou fázou, pri eluovaní zmesou acetonitrilu a 0,1-molárneho roztoku octanu amónneho v pomere 25:75. Po opakovanej lyofilizácii sa získa diacetátová soí vo forme bieleho prášku.
^H-NMR spektrum (500,13 MHz, D2O) : δ 0,80 až 0,95 (m, 2H) , 1,00 až 1,21 (m, 3H), 1,32 (m, 1H), 1,40 až 1,78 (m, 12H), 1,83 až 2,00 (m, 2H), 1,90 (s, acetát), 2,20 (m, 1H), 3,06 až 3,14 (m, 4H), 3,50 (m, 1H), 3,67 (m, 1H), 4,20 až 4,30 (m, 2H) ppm.
33C-NMR spektrum (75,6 MHz, D2O): guanidín: δ 157,4, ’ karbonylové uhlíky: δ 169,9, 174,5 ppm.
Príklad 2
Spôsob výroby Me-(R)Cha-Pro-Agm x 2 HOAc (i) Spôsob výroby Boc-(Me)-(R)Cha-Pro-Agm
K roztoku 479,6 mg (1 mmol, 1 ekvivalent) Boc-(Me)-(R)Cha-Pro-OSu a 500 ml N-metylmorfolínu v 16 ml zmesi dimetylformamidu a vody v pomere 15:1 sa pridá 166,5 mg (1,2 mmol, 1,2 ekvivalentu) agmatín-hydrochloridu pri teplote miestnosti. -Reakčná zmes sa mieša ďalších 70 hodín a rozpúšťadlo sa odparí. Získa sa surová zlúčenina, ktorá je vo forme oleja. Táto látka sa použije bez ďalšieho čistenia v nasledujúcom stupni.
(ii) Spôsob výroby (Me)-(R)Cha-Pro-Agm x 2 HOAc
Surový olej z predchádzajúceho stupňa sa rozpustí v 10 ml zmesi kyseliny, trifluóroctovej a dichlórmetáne v pomere 1:4 pri teplote miestnosti. Všetko sa mieša počas 2 hodín 25 minút, potom sa rozpúšťadlo odparí a surová látka sa čistí vysoko účinnou kvapalinovou chromátografiou s reverznou fázou, pri eluovaní zmesou acetonitrilu a 0,1-molárneho roztoku octanu amónneho v pomere 35:65. Lyofilizáciou sa získa požadovaná zlúčenina ako biely prášok.
^H-NMR spektrum (500 MHz, D2O): δ 0,93 až 1,05 (m, 2H), 1,10
až 1, ,29 (m, 3H), 1,33 až 1,43 (m, 1H), 1,50 až 1,80 (m, 12 H),
1,88 až 2,10 (m, 2H), 1,92 (s, acetát), 2, 27 až 2,36 (m, 1H),
2,68 (s, 3H) , 3,15 až 2 !,23 (m, 3H), 3,24 až 3 ,31 (m, 1H), 3,57 až
3,66 (m, 1H) , 3,76 až 3,83 (m, 1H), 4,28 (t , 1H), 4,39 (dd, 1H)
ppm.
13c -NMR spektrum (125,76 MHZ, D20): guanidín: δ 157,24,
karbonylové uhlíky: δ 174,03, 168,24 ppm.
Príklad 3
Spôsob výroby HO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Agm x 2 HCI (i) Spôsob výroby Boc-(R)Cha-Pro-Agm(Z) ekvivalent Boc-Agm(Z) sa rozpustí v zmesi kyseliny trifluóroctovej a dichlórmetánu v pomere 1:4 (približne 6 ml/mmol) a mieša pri teplote miestnosti počas približne 2 hodín. Rozpúšťadlo sa odparí a odparok sa rozpustí dohromady s 1 ekvivalentom Boc-(R)Cha-Pro-OSu v dimetylformamide (asi 1 ml/mmol), hodnota pH sa upraví približne na 9 pridaním N-metylmorfolínu a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 20 .hodín. Rozpúšťadlo sa odparí pri zníženom tlaku a surová látka sa rozpustí v dichlórmetáne a trikrát premyje vodou a raz roztokom .chloridu sodného. Potom čo sa roztok vysuší síranom sodným, rozpúšťadlo sa odparí a zlúčenina sa podrobí veľmi rýchlej chromatografii, pri eluovaní zmesou dichlórmetánu a metanolu. Tak sa vo forme bieleho prášku získa Boc-(R)Cha-Pro-Agm(Z).
I
I (ii) Spôsob výroby H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
Boe-(R)Cha-Pro-Agm(Z) sa rozpustí v zmesi kyseliny trifluóroctovej a dichlórmetánu v pomere 1:4 (približne 6 ml/mmol) a mieša pri teplote miestnosti počas 2 hodín. Rozpúšťadlo sa odparí a odparok sa rozpustí v 0,2-molárnom roztoku hydroxidu sodného (20 ml/mmol) a dvakrát extrahuje dichlórmetánom. Organické vrstvy sa spoja a premyjú roztokom chloridu sodného, vysušia síranom sodným a potom sa rozpúšťadlo odparí. Ako biely prášok sa získa H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)...
(iii) Spôsob výroby BnO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Agm(Z) mmol H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) sa rozpustí v 10 ml metanolu. K roztoku sa pridá 1 mmol trietylamoniumhydrochloridu, 0,7 mmol natriumkyanborhydridu a potom 1,05 mmol BnO-(CH2)2~CHO a reakčná * zmes sa mieša pri teplote miestnosti cez noc. Rozpúšťadlo sa odparí a surová látka sa rozpustí v etylacetáte, premyje dvakrát ' vodou, raz roztokom chloridu sodného a vysuší síranom sodným.
Rozpúšťadlo sa odparí a surová látka sa čistí veľmi rýchlou chromatografiou, pri eluovaní zmesou etylacetátu a metanolu.
(iv) Spôsob výroby HO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Agm x 2 HCI
Zlúčenina sa vyrobí pri aplikácii spôsobu (d) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (iii) uvedený vyššie.
1H-NMR spektrum (500 MHz, D22): δ 0,72 (m, minoritný rotamer), 0,84 (m, minoritný rotamer), 0,87 až 1,03 (m, 2H), 1,03 až 1,26 (m, 3H), 1,28 až 1,40 (široký s, 1H), 1,44 až 1,80 (m, .11H), 1,80 až 1,95 (široký s, 3H), 1,95 až 2,10 (široký s, 2H),
2,28 (m, 1H), 3,04 (m, 1H) , 3,08 až 3,27 (m, 5H), 3,58 (široký s, ,1H), 3,67 (široký s, 2H) , 3,78 (m, 1H), 4,12 (široký d, minoritný rotamer), 4,30 (m, 1H), 4,37 (m, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (125 MHz, D20): guanidín: δ 157,26, karbonylové uhlíky: δ 174,06, 168,36 ppm.
Príklad 4
Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc
Všeobecný spôsob alkylácie koncového atómu dusíka
Tento spôsob je opísaný v súvislosti so všeobecnejšími údajmi a bude uvedený v príkladoch d’alej , dohromady s alkylačným činidlom použitým v každom zvláštnom príklade.
ekvivalent peptidu určeného na alkyláciu a 1,1 až 1,2 ekvivalentu alkylačného činidla sa rozpustí v približne 10 ml/mmol acetonitrilu. K roztoku sa pridajú 2,0 až 2,2 ekvivalenty uhličitanu draselného a reakčná zmes sa mieša pri teplote 50 až 60 °C, pokial sa nepotrebuje východzia látka (podlá * chromátografie na tenkej vrstve zvyčajne za 1 až 5 hodín).
Filtráciou, odparením rozpúšťadla a veľmi rýchlou chromatografiou, pri eluovaní zmesou dichlórmetánu a metanolu, dichlórmetánu a metanolu nasýteného amoniakom alebo etylacetátu a metanolu v pomere približne 9:1, sa získa alkylová látka, po odparení rozpúšťadla.
(i) Spôsob výroby BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (viď príklad ) a Br-CH2COOBn podľa spôsobu opísaného vyššie.
(ii) Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc . Zlúčenina sa vyrobí pri aplikácii spôsobu (b) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (i) uvedený vyššie.
1H-NMR spektrum (300 MHz, MeOD): δ 0,9 až 1,1 (m, 2H), 1,1 až 2,3 (m, 19H), 1,95 (s, acetát), 3,1 až 3,2 (m, 4H), 3,2 až
3,65 (m, 3H), 3,85 (m, 1H), 4,0 (široký t, 1H), 4,35 (dd, 1H) j ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D2O): guanidín: δ 157,55, karbonylové uhlíky: δ 168,71, 171,37 a 174,3 ppm.
Príklad 5
Spôsob výroby 1Pr-OOC-CH2-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc
Alkyluje sa ako v príklade 4 za použitia H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (viď príklad 3) a Br-Ct^COO-’-Pr, s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny podlá spôsobu (b). Získa sa titulná zlúčenina.
1H-NMR spektrum (300 MHz, MeOD): δ 0,85 až 1,05 (m, 2H), 1,1 až 1,35 (m, 9H, z toho 1,23 (d, 3H), 1,25 (d, 3H)), 1,35 až 2,02 (m, 14H), 1,92 (s, acetát), 2,08 (m, 1H), 2,2 (m, 1H), 3,07 až
3,45 (m, 6H), 3,55 (m, 1H), 3,7 až 3,8 (m, 2H), 4,3 (dd, 1H), 5,05 (m, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (125 MHz, D2O): guanidín: δ 157,39, ’ karbonylové uhlíky: δ 171,10, 172,76 a 174,44 ppm.
Príklad 6
Spôsob výroby HOOC-CH2-(Me)-(R)Cha-Pro-Agm x 2 TFA (i) Spôsob výroby Me-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z Boc-(Me)-(R)Cha-Pro-OSu rovnakým spôsobom ako je opísaný pre H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) v príklade 3.
(ii) Spôsob výroby HOOC-CH2-(Me)-(R)Cha-Pro-Agm x 2 TFA
Alkyluje sa ako v príklade 4, za použitia Me-(R)Cha-Pro0-Agm(Z) a Br-CH2COOBn s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny podlá spôsobu (b). Získa sa titulná zlúčenina.
•LH-NMR spektrum (300 MHz, D2O) : δ 0,9 až 1,35 (m, 6H), 1,5 až 2,2 (m, 14H), 2,25 až 2,45. (m, 1H), 3,12 (s, 3H), 3,15 až 3,35 (m, 4H), 3,6 až 3,75 (m, ΙΗ^β,δ až 3,95 (m, 1H), 4,22 (zdanlivo široký s, 2H), 4,45 (m, 1H), 4,6 (široký t, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (75,47 MHz, D2O): guanidín: δ 157,52, karbonylové uhlíky: δ 173,86, 168,79 a 167,38 ppm.
Príklad 7
Spôsob výroby HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc
Alkyluje sa ako v príklade 4, za použitia H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (viď príklad 3) a Br-CH(Me)COOBn s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny podľa spôsobu (a). Získa sa titulná zlúčenina ako zmes 2 diastomerov.
' Príklad 8
Spôsob výroby HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm/a x HOAc
Zlúčenina sa príklade 7, chromatograf ie acetonitrilu a získa delením diastereomérov vzniknutých v účinnej kvapalinovej pri eluovaní octanu amónneho za zmesou pomere použitia vysoko reverznou fázou,
0,1-molárneho roztoku a
1:4. Diastereomér vychádza z kolóny ako prvý diastereomérov.
oboch 1H-NMR spektrum (500 MHz, D2O, 2 rotamery v pomere približne
5:1) : δ 0,74 (m, minoritný rotamer) , i,oi (m, 2H), 1,10 až 1,33
(m, 3H), 1,48 až 1,88 (m, 15H, z toho 1,51 (d, 3H)), 1,92 až 2,12
. (m, 3H), 1,96 (s, acetát), 2,30 (m, 1H) , 3,20 (m, 3H), 3,38 (m,
1H) , 3,47 (q, minoritný rotamer), 3, 53 až 3,68 (m, 2H), 3,73 (m,
•1H) , 4,20 (d , minoritný rotamer), 4,33 (m, 1H), 4,38 (m, 1H),
4,51 (d, minoritný rotamer) ppm.
13C-NMR spektrum (125 MHz, D2O): guanidín: δ 157,38, karbonylové uhlíky: δ 174,11, 173,45 a 168,64 ppm.
Príklad 9
Spôsob výroby HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm/b x HOAc
Diastereomer, ktorý vychádza po prvom diastereomere z kolóny pri delení v príklade 8 je titulná zlúčenina pomenovaná vyššie.
1H-NMR spektrum (500 MHz, D2O, 2 rotam®ry v pomere približne 9:1): δ 0,88 (m, minoritný rotamer), 1,05 (m, 2H), 1,12 až 1,33 (m, 3H), 1,42 (široký s, 1H), 1,50 až 1,88 (m, 15H, z toho 1,55 (d, 3H)), 1,93 až 2,13 (m, 3H), 1,95 (s, acetát), 2,30 (m, 1H),
2.40 (m, minoritný rotamer), 3,22 (t, 2H), 3,28 (t, 2H), 3,64 (m,
1H), 3,70 (q, 1H), 3,98 (t, minoritný rotamer), 4,35 (t, 1H),
4.41 (dd, 1H) ppm.
Príklad 10
Spôsob výroby HOOC-(R alebo S)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm/a x HOAc
Alkyluje sa ako v príklade 4, za použitia H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (viď príklad 3) a Br-CH(nPr)COOEt a spôsobu (e) odstránenia chrániacej skupiny, po ktorom nasleduje spôsob (b), čo poskytne zlúčeniny HOOC-(R,S)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm. Titulná zlúčenina sa získa delením diastereomérov vysoko účinnou kvapalinovou chromatografiou acetonitrilom a 0,1-molárnym 1:4, a lyofilizáciou vody, diastereomér vychádza ako prvý s reverznou fázou, pri eluovaní roztokom octanu amónneho v pomere po odparení rozpúšťadla. Tento z oboch kolón.
1H-NMR spektrum (300 MHz, MeOD): δ 0,8 až 1,1 (m, 5Η, z toho 0,92 (t, 3H)), 1,1 až 2,1 (m, 22H), 1,95 (s, acetát), 2,2 (m, 1H), 3,1 až 3,35 (m, 5H), 3,48 (m, 1H), 3,88 (m, 1H), 4,0 (m, 1H), 4,4 (dd, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D2O): guanidín: δ 157,50, karbonylové uhlíky: δ 168,55 a 174,16 ppm.
Príklad 11
Spôsob výroby HOOC-(R alebo S)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm/b x HOAc
Ďalší diastereomer z delenia v príklade 10, ktorý vychádza po prvom diastereomére z kolóny, je titulná zlúčenina pomenovaná vyššie.
1H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD): δ 0,85 až 1,05 (m, 5H, z toho 0,95 (t, 3H)), 1,1 až 2,08 (m, 22H), 1,9 (s, acetát), 2,14 (m, 1H), 3,1 až 3,4 (m, 5H), 3,45 (m, 1H), 3,62 (m, 1H), 3,80 (m, 1H), 4,34 (dd, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D2O): guanidín: δ 157,53, karbonylové uhlíky: δ 169,0,1 a 174,27 ppm.
Príklad 12
Spôsob výroby HOOC-(R alebo S)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/b x HOAc (i) Spôsob výroby ^BuOOC-(R alebo S)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
Zmes 0,55 mmol H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (viď príklad 3), 0,66 mmol terc.-butyl-(R,S)fenyl(brómacetátu) a 1,4 mmol uhličitanu draselného v 10 ml acetonitrilu sa mieša pri teplote miestnosti počas 28 hodín a potom ďalších 5 hodín pri teplote 60 C. Diastereomérna zmes (v pomere 3:1, podľa NMR spektra) sa filtruje a odparí. Zostávajúci olej sa dvakrát podrobí veľmi rýchlej chromatografii, pri eluovaní zmesou dichlórmetánu a metanolu v pomere 92:8. Výsledkom je úplné oddelenie oboch diastereomérov [ (Rf = 0,36 (minoritný izomér) a 0,27 (majoritný izomér)].
^•H-NMR spektrum majoritného izoméru (500,13 MHz, CDC13): δ .0,79 (q, 1H), 0,90 (q, 1H), 1,06 až 1,70 (m, H), 1,37 (s, 9H), 1, 85 až 2,03 (m, 3H), 2,20 (m, 1H) , 3,10 až 3,24 (m, 3H), 3,25 až
3,38 (m, 2H), 3,42 (m, 1H), 3,53 (m, 1H), 4,30 (s, 1H), 4,49 (dd, 1H), 5,08 (s, 2H), 7,19 až 7,40 (m, 10H), široké NH signály sa pozorujú v oblasti 6,7 až 8,6 ppm.
i (ii) Spôsob výroby HOOC-(R alebo S)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/b x HOAc mmol majoritného izoméru a 0,5 mmol tioanisolu sa rozpustí v kyseline trifluóroctovej a udržuje pri teplote miestnosti počas 8 hodín. Po odparení pri tlaku 13 Pa počas 5 hodín sa zostávajúci olej čistí vysoko účinnou kvapalinovou chromatografiou s reverznou fázou, pri eluovaní zmesou acetonitrilu a 0,1-molárneho roztoku octanu amónneho v pomere 2:3. Získa sa zlúčenina pomenovaná v nadpise, po odparení rozpúšťadla a lyofilizácii.
1H-NMR spektrum (500,13 MHz, MeOD): δ 0,85 až 1,01 (m, 2H),
1,13 až 1,38 (m, 4H), 1,53 až 2,05 (m, 14H), 1,92 (s, acetát),
2,18 (m, 1H), 3,08 až 3,26 (m, 3H), 3,32 až 3,45 (m, 2H), 3,64 (m, 1H), 3,93 (t, 1H), 4,37 (dd, 1H), 4,43 (s, 1H), 7,28 až 7,50 • (m, 5H) ppm.
• 1313C-NMR spektrum (125,6 MHz, MeOD): guanidín: δ 158,7, karbonylové uhlíky: δ 173,8, 174,7, 177,0 ppm.
Príklad 13
Spôsob výroby HOOC-(R,S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc
Alkyluje sa ako v príklade 4, za použitia H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (viď príklad 3) a Br-CH(CH2-CH2-Ph)-COOEt a spôsobu (a) na odstránenie chrániacej skupiny, po ktorom nasleduje spôsob (e), čo poskytne zlúčeninu HOOC-(R,S)CH(CH2-CH2-Ph)-(R)Cha-Pro-Agm.
Príklad 14
Spôsob výroby HOOC-(R alebo S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Amg/a x 2 TFA
Zlúčenina pomenovaná v nadpise sa získa delením diastereomérov získaných v príklade 13 vysoko účinnou kvapalinovou chromatografiou s reverznou fázou, pri eluovaní zmesou acetonitrilu a 0,1-molárneho roztoku octanu amónneho v pomere 2:3, a lyofilizáciou vody a kyseliny trifluóroctovej, po odparení rozpúšťadla. Tento diastereomér, vychádzajúci ako prvý z oboch diastereomérov z kolóny, je zlúčenina pomenovaná v nadpise.
XH-NMR spektrum (500 MHz, MeOD): δ 0,93 až 1,11 (m, 2H),
1,24 (m, 1H), 1,29 až 1,40 (m, 2H), 1,52 až 1,85 (m, 11H), 1,89 až 2,11 (m, 4H), 2,14 až 2,32 (m, 3H), 2,83 (t, 2H), 3,14 (t, 2H), 3,24 (t, 2H), 3,50 (q, 1H), 3,70 (m, 1H), 4,00 (t, 1H), 4,36 až 4,42 (m, 2H), 7,17 až 7,31 (m, 5H) ppm.
13C-NMR spektrum (125 MHz, MeOD): guanidín: δ 158,66, karbonylové uhlíky: δ 168,08, 171,53, 174,16 ppm.
' Príklad 15
Spôsob výroby HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc (i) Spôsob výroby BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
1,1 ekvivalentu benzylakrylátu a 1 ekvivalent H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (viď príklad 3) sa rozpustí v etanole (20 ml/mmol) a mieša pri teplote miestnosti počas 20 hodín. Rozpúšťadlo sa odparí a surová látka sa čistí velmi rýchlou chromátografiou, pri eluovaní zmesou dichlórmetánu a metanolu nasýteného amoniakom v pomere 95:5. Nakoniec sa rozpúšťadlo odparí a látka sa vysuší pri . zníženom tlaku.
1H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13): δ 0,7 až 0,95 (m, 2H), 1,0 až 1,5 (m, 10H), 1,5 až 1,75 (m, 5H), 1,75 až 1,92 (m, 2H), 2,0 .(m, 1H), 2,17 (široký s, 1H), 2,45 (m, 2H), 2,63 (m, 1H), 2,79 (m, 1H), 2,97 až 3,25 (m, 4H), 3,33 (m, 2H), 3,52 (široký t, 1H),
4,45 (široký d, 1H) , 4,95 až 5,12 (m, 4H), 7,13 až 7,4 (m, 10H) ppm.
i : (ii) Spôsob výroby HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc
Zlúčenina sa vyrobí pri aplikácii spôsobu (a) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (i) uvedený vyššie.
1H-NMR spektrum (500 MHz, D2O): δ 0,88 (m, 2H), 1,00 až 1,23 (m, 3H), 1,33 (široký s, 1H), 1,42 až 1,72 (m, 11H), 1,78 až 2,00 (m, 3H), 1,94 (s, acetát), 2,18 (m, 1H), 2,52 (m, 2H), 3,03 až
3,20 (m, 6H), 3,50 (m, 1H), 3,72 (m, 1H), 4,23 (m, 1H), 4,30 (m, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (125 MHz, D2O): guanidín: δ 157,25, karbonylové uhlíky: δ 178,07, 173,96, 168,24 ppm.
Príklad 16 . Spôsob výroby EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc . (i) Spôsob výroby EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
K studenému roztoku 0,46 g (0,89 mmol) H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (vid príklad 3) a 199 mg (1,97 mmol) N-metylmorfolínu v 10 ml tetrahydrofuránu s teplotou -10 °C sa pridá 134 mg (0,98 mmol) Cl-COCOOEt rozpusteného v 3 ml tetrahydrofuránu. Zmes sa udržuje pri teplote -10 °C počas 1 hodiny a potom sa mieša pri teplote miestnosti ďalšiu hodinu. Rozpúšťadlo sa odparí a odparok sa rozpustí v etylacetáte. Organická fáza sa premyje dvakrát vodou a vysuší síranom sodným. Odparením rozpúšťadla a kryštalizáciou z etylacetátu sa získa 0,275 g zlúčeniny pomenovanej v nadpise ako biele kryštály. Výťažok je 50 % teórie.
(ii) Spôsob výroby EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Agm x HOAc
Zlúčenina sa vyrobí pri aplikácii spôsobu (b) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (i) uvedený vyššie.
1H-NMR spektrum (300 MHz, MeOD): δ 0,9 až 2,25 (m, 24H, z
toho 1,17 (t, 3H)), 1,90 (s, acetát) , 3,1 až 3,25 (m, 4H) , 3,5 až
3,65 (m, 3H, z toho 3,59 (q, 2H)), 3,88 (m, 1H), 4,35 (m, 1H),
4,69 (dd, 1H) ppm.
13c-nmr spektrum (75,5 MHz, MeOD) • guanidín: δ 157,56,
karbonylové uhlíky: δ 159,21, 160,74, 172,81, 174,56 ppm.
Príklad 17
Spôsob výroby (R,S)Bla-(R)Cha-Pro-Agm x 2 TFA
Alkyluje sa ako v príklade 4, za použitia H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (viď príklad 3) a α-brómbutyrolaktonu s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny podľa spôsobu (a). Získa sa titulná zlúčenina ako zmes 2 diastereomérov.
^H-NMR spektrum (500 MHz, D2O, zmes diastereomérov v pomere asi 1:1): δ 0,93 až 1,06 (m, 2H), 1,09 až 1,30 (m, 3H), 1,37 až
1,49 (m, 1H), 1,50 až 1,87 (m, 11H), 1,89 až 2,10 (m, 3H), 2,24 až 2,36 (m, 1H), 2,44 až 2,56 (m, 1H), 2,72 až 2,85 (m, 1H), 3,10 až 3,30 (m, 4H), 3,56 až 3,65 (m, 1H) , 3,75 až 3,84 (m, 1H), 4,2 až 5,0 (m, 5H, čiastočne prekryté H-O-D signálom) ppm 13C-NMR spektrum (125,76 MHz, D2O): guanidín: δ 157,34 (piky sa prekrývajú), karbonylové uhlíky: δ 174,34, 173,90, 173,62, 167,88, 167,58 (2 piky sa prekrývajú) ppm.
Príklad 18
Spôsob výroby HOOC-(R alebo S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/b x 2 TFA
Zlúčenina uvedená v nadpise sa získa spracovaním diastereoméru z príkladu 13 rovnakým spôsobom, ako je opísaný v príklade 14. Tento diastereomér výchádza za prvým diastereomérom z kolóny.
1H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD): 6^,95 až 1,06 (m, 2H),
1,14 až 1,40 (m, 4H), 1,48 až 1,84 (m, 11H), 1,87 až 2,30 (m, 6H), 2,72 až 2,90 (m, 2H), 3,12 až 3,32 (m, 4H), 3,52 (m, 1H),
3,72 (m, 1H), 4,04 (dd, 1H), 4,27 (t, 1H), 4,37 (dd, 1H), 7,17 až
7,32 (m, 5H) ppm.
•'3C-NMR spektrum (125 MHz, MeOD): guanidín: δ 158,68, karbonylové uhlíky: δ 168,14, 171,46, 174,03 ppm.
Príklad 19
Spôsob výroby H-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc (i) Spôsob výroby Z-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH(Boc)
K roztoku 1 mmol Z-(R)Cha-Pro-OSu v 1 ml dimetylformamidu • pri teplote 0 °C sa pridá H2N-(CH2)3-NH(Boc) (viď výroba východzích látok), ktorý je rozpustený v 1 ml dimetylformamidu a hodnota pH sa upraví na približne 9 prídavkom N-metylmorfolínu. Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne 3 dní a potom sa vyleje na vodu. Vodná fáza sa extrahuje štyrikrát etylacetátom. Spojené organické fázy sa premyjú dvakrát 0,3-molárnym roztokom hydrogensiranu draselného, 0,2-molárnym roztokom hydroxidu sodného, roztokom chloridu sodného a vysušia. Odparením a velmi rýchlou chromatografiou, pri eluovaní zmesou etylacetátu a petroléteru v pomere 4:1, sa získa zlúčenina pomenovaná v nadpise. Výťažok je 59 % teórie.
(ii) Spôsob výroby Z-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2
0,6 mmol Z-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH(Boc) sa rozpustí v 8 ml dichlórmetánu. K roztoku sa pridajú 2 ml kyseliny trifluóroctovej .a reakčná zmes sa mieša počas 1 hodiny. Rozpúšťadlo sa odparí a odparok rozpustí v dichlórmetáne, premyje dvakrát 0,2-molárnym roztokom hydroxidu sodného a vysuší síranom sodným. Odparením rozpúšťadla sa získa amín. Výťažok je 93 % teórie..
1H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13): δ 0,79 až 1,031 (m, 2H), 1,05 až 1,75 (m, 15H), 1,84 až 2,08 (m, 4H), 2,36 (m, 1H), 2,66 (m, 2H), 3,25 (m, 2H), 3,43 (q, 1H), 3,85 (m, 1H), 4,45 (m, 1H),
4,56 (d, 1H), 5,09 (m, 2H), 5,35 (d, 1H), 7,30 až 7,45 (m, 5H) ppm.
(iii) Spôsob výroby Z-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
0,55 mmol (1 ekvivalent) Z-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3~NH2 sa rozpustí v 2 ml dimetylformamidu a hodnota pH sa upraví trietylamínom na 8 až 9. 0,55 mmol (1 ekvivalent) 3,5-dimetyl-l-pyrazolylformamidiniumnitrátu rozpusteného v 1 ml dimetylformamidu sa pridá k roztoku a reakčná miestnosti počas 3 dní. Rozpúšťadlo lyofilizuje na odstránenie vody zmes sa mieša pri teplote sa odparí, surová látka sa a čistí vysoko účinnou • kvapalinovou chromatografiou s reverznou fázou, pri eluovaní zmesou acetonitrilu a o,l-molárneho octanu amónneho v pomere 4:6. Získa sa zlúčenina pomenovaná v nadpise, po odparení rozpúšťadla a lyofilizácii vedúcej k odstráneniu vody. Výťažok je 93 % teórie.
(iv) Spôsob výroby H-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc
Zlúčenina sa vyrobí pri aplikácii odstránenia chrániacej skupiny spôsobom (a) na produkt (iii) uvedený vyššie.
1H-NMR spektrum (500 MHz, D2o): δ 0,82 až 1,03 (m, 2H), 1,03 až 1,28 (m, 3H), 1,35 (m, 1H), 1,53 až 1,82 (m, 9H), 1,82 až 2,05 (m, 3H), 1,89 (S, acetát), 2,24 (m, 1H), 3,15 (t, 2H), 3,23 (q,
2H), 3,55 (m, 1H), 3,72 (m, 1H), 4,27 až 4,34 (m, 2H) ppm.
13C-NMR spektrum (75,5 MHz, D2O) guanidín: δ 157,37, karbonylové uhlíky: δ 169,81, 174,52 ppm.
Príklad 20
Spôsob výroby nBu-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc (i) Spôsob výroby H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z Boe-(R)Cha-Pro-OSu a Boc-Nag(Z) za použitia rovnakého spôsobu, ako je opísaný pre
H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) v príklade 3.
- 57 ^H-NMR spektrum (500 MHz, CDCI3): δ 0,8 až 1,03 (m, 2H) ,
1,10 až 1,50 (m, 6H), 1,60 až 1,83 (m, 8H), 1,87 až 2,20 (m, 3H),
3,15 (m, 1H), 3,25 (m, 2H) , 3,42 (m, 2H), 3,63 (dd, 1H), 3,70 (m, 1H), 4,36 (široký s, 1H), 5,07 (s, 2H), 7,22 až 7,43 (m, 5H) ppm.
(ii) Spôsob výroby nBu-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
0,5 g (1 mmol) H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) sa rozpustí v 10 ml metanolu. K roztoku sa pridá 0,1 g (1 mmol) trietylamoniumhydrochloridu, 44 mg (0,7 mmol) natriumkyanborhydridu a potom 76 mg (1,05 mmol) butyraldehydu a reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 20 hodín. Rozpúšťadlo sa odparí a surová látka sa rozpustí v etylacetáte, premyje dvakrát vodou, raz roztokom chloridu sodného a vysuší síranom sodným. Rozpúšťadlo sa odparí a surová látka sa čistí veľmi rýchlou chromatografiou, pri eluovaní zmesou etylacetátu, etanolu a trietylamínu v pomere 88:10:2. Nakoniec sa rozpúšťadlo odparí a látka sa vysuší pri zníženom tlaku. Tak sa získa 0,22 g nBu-(R)Cha-Pro-Nag(Z). Výťažok je 40 % teórie.
1H-NMR spektrum (500 MHz, CDCI3): δ 0,82 až 1,0 (m, 5H, z toho 0,88 (t, 3H));.1,08 až 1,49 (m, 10H), 1,58 až 1,8 (m, 7H),
1,88 až 2,22 (m, 3H), 2,4 (m, 1H), 2,5 (m, 1H), 3,05 (široký s, 41H), 3,3 (m, 1H), 3,4 až 3,53 (m, 3H), 3,73 (m, 1H), 4,42 (široký s, 1H), 5,1 (s, 2H), 7,25 až 7,43 (m, 5H) ppm.
(iii) Spôsob výroby nBu-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc
Zlúčenina sa vyrobí pri aplikácii spôsobu (a) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (ii) uvedený vyššie.
I ^H-NMR spektrum (300 MHz, D2O): δ 0,94 (t, 2H) , 1,10 až 1,31 (m, 3H), 1,38 (m, 3H), 1,55 až 1,88 (m, 11H), 1,88 až 2,15 (m,
3H), 1,95 (s, acetát) , 2,34 (m, 1H), 2,95 (m, 1H), 3,08 (m, 1H),
3,24 (t, 2H), 3,30 (m, 2H), 3,66 (m, 1H), 3,82 (m, 1H), 4,32 (t, 1H), 4,41 (dd, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (125 MHz, D20): guanidín: δ 157,40, karbonylové uhlíky: δ 180,39, 174,28, 168,55 ppm.
Príklad 21
Spôsob výroby HO-(CH2)3~(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA (i) Spôsob výroby BnO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
0,5 g (1 mmol) 1-benzyloxy-(3-trifluórmetánsulfonylpropánu) (viď výroba východzích látok) a H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (viď príklad 20) sa rozpustí v 10 ml tetrahydrofuránu. K reakčnej zmesi sa pridá 0,28 g (2 mmol) uhličitanu draselného a všetko sa mieša pri teplote miestnosti počas 2 hodín. Rozpúšťadlo sa odparí a surová látka sa extrahuje zmesou etylacetátu a vody. Organická fáza sa premyje raz vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného, raz vodou a raz roztokom chloridu sodného. Po vysušení síranom sodným sa rozpúšťadlo odparí a surová látka sa podrobí velmi rýchlej chromatografii, pri eluovaní zmesou dichlórmetánu a metanolu nasýteného amoniakom v pomere 95:5. Nakoniec sa rozpúšťadlo odparí a látka sa vysuší pri zníženom tlaku. Získa sa 0,29 g zlúčeniny pomenovanej v nadpise. Výťažok je 45 % teórie.
: 1H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13): δ 0,77 až 1,03 (m, 2H),
1,03 až 2,18 (m, 19H), 2,52 (m, 1H), 2,64 (m, 1H), 3,03 (široký .s, 1H), 3,1 až 3,6 (m, 7H), 3,66 (m, 1H), 4,41 (široký s, 1H),
4,46 (s, 2H), 5,08 (s, 2H), 7,2 až 7,4 (m, 5H), 7,55 (m, 1H) ppm.
(ii) Spôsob výroby HO-(CH2)3~(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Zlúčenina sa vyrobí pri aplikácii odstránenia chrániacej skupiny spôsobom (a) na produkt (i) uvedený vyššie.
^H-NMR spektrum (500 MHz, D2O): δ 1,00 (široký s, 2H), 1,10 až 1,32 (m, 3H), 1,40 (široký s, 1H), 1,55 až 2,15 (m, 14H), 2,30 (m, 1H), 3,05 až 3,35 (m, 6H), 3,57 až 3,75 (m, 3H), 3,81 (široký s, 1H), 4,35 (široký s, 1H), 4,42 (široký s, 1H) ppm.
Príklad 22
Spôsob výroby HOOC-CH2~(R)Cha-Pro-Nag x HOAc (i) Spôsob výroby H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-N3
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom ako H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (viď príklad 3), pričom sa výchádza z Boc-(R)Cha-Pro-OSu a Boc-NH-(CH233-N3, ktorý nahradzuje Boc-Agm(Z).
(ii) Spôsob výroby EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2 x HOAc
Alkylácia ako v príklade 4 za použitia H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3~N3 a EtOOC-CH2~Br s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny spôsobom (a), slúžiacim na redukciu azidu, poskytne titulnú zlúčeninu.
(iii) Spôsob výroby EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Rovnaký spôsob, ako je opísaný v príklade 19 (iii) pre Z-(R)Cha-Pro-Nag, sa použije na dosiahnutie guanidácie amínu z časti (ii) uvedenej vyššie. Zlúčenina pomenovaná v. nadpise sa získa v čistej forme po vysoko účinnej kvapalinovej chromatografii s reverznou fázou, pri eluovaní zmesou acetonitrilu a 0,1-molárneho roztoku octanu amónneho v pomere ,3:7, odparení rozpúšťadla a odstránení vody lyofilizáciou.
(iv) Spôsob výroby HOOC-CH2~(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Zlúčenina sa vyrobí pri aplikácii spôsobu (e) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (iii) uvedený vyššie) 1 XH-NMR spektrum (500 MHz, D2o): δ 0,99 (m, 2H), 1,09 až 1,30 (m, 3H), 1,44 (m, 1H), 1,59 až 2,09 (m, 12H), 1,92 (s, acetát),
2,29 (m, 1H), 3,20 (t, 2H), 3,28 (m, 2H), 3,52 až 3,63 (m, 3H),
3,76 (m, 1H), 4,38 (dd, 1H), 4,42 (t, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (125 MHz, D2O) guanidín: δ 157,43, karbonylové uhlíky: δ 168,72, 171,36, 174,35 ppm.
Príklad 23
Spôsob výroby EtOOC-CH2~(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Zlúčenina sa vyrobí podľa príkladu 22 (iii).
‘ ^H-NMR spektrum (300 MHz, D2O) : δ 1,07 (m, 2H), 1,17 až 1,59 (m, 7H, z toho 1,38 (t, 3H)), 1,60 až 2,24 (m, 12H), 2,04 (s, ‘acetát), 2,39 (m, 1H), 3,31 (t, 2H), 3,39 (t, 2H), 3,63 až 3,90 (m, 4H), 4,12 (t, 1H), 4,36 (q, 2H), 4,46 (dd, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D2O): guanidín: δ 157,37, karbonylové uhlíky: δ 173,73, 175,09, 175,70 ppm.
Príklad 24
Spôsob výroby 1PrOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Alkylácia ako v príklade 4 za použitia H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (viď príklad 20) a Br-CH2COO1Pr s nasledujúcim odstránením .chrániacej skupiny spôsobom (b) poskytne titulnú zlúčeninu.
4 ’-H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD) : δ 0,85 až 1,05 (m, 2H), 1,1 až 2,15 (m, 22H, z toho 1,23 (d, 3H), 1,25 (d, 3H)), 1,92 (s, acetát), 2,2 (m, 1H) , 3,10 až 3,35 (m, 5H), 3,4 (m, 1H), 3,55 (m, 1H), 3,65 až 3,8 (m, 2H), 4,28 (dd, 1H), 5,03 (m, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (125 MHz, D2O): guanidín: δ 157,39, karbonylové uhlíky: δ 170,40, 172,00 a 174,50 ppm.
Príklad 25
Spôsob výroby tBuOOC-CH2~(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Alkylácia ako v príklade 4 za použitia H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (viď príklad 20) a Br-CH2COO^Bu s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny spôsobom (b) poskytne titulnú zlúčeninu.
1H-NMR spektrum (300 MHz, MeOD): δ 0,9 až 1,15 (m, 2H), 1,15 až 2,15 (m, 25H, z toho 1,55 (široký s, 9H)), 2,3 (m, 1H), 3,15 až 3,45 (m, 4H), 3,55 (m, 1H), 3,7 až 3,95 (m, 3H), 4,3 až 4,4 (m, 2H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D2O) : guanidín: δ 157,55, karbonylové uhlíky: δ 166,55, 168,13 a 174,33 ppm.
Príklad 26
Spôsob výroby HOOC-CH2-OOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc (i) Spôsob výroby BnOOC-CH2-OOC-CH2~(R)Cha-Pro-Nag(Z)
0,20 g (0,40 mmol) H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (viď príklad 20) sa zmieša s 0,115 g (0,40 mmol) benzyloxykarbonylmetylbrómacetátu, 55 mg (0,40 mmol) uhličitanu draselného a 5 ml acetonitrilu. Zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 6 hodín. Rozpúšťadlo sa odparí a surová látka sa chromátografuje, pri eluovaní zmesou adichlórmetánu a metanolu v pomere 9:1. Získa sa 0,20 g požadovanej zlúčeniny, po odparení rozpúšťadla. Výťažok je 71 % .teórie.
(ii) Spôsob výroby HOOC-CH2-OOC-CH2~(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Zlúčenina sa vyrobí pri aplikácii spôsobu (a) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (i) uvedený vyššie.
1H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD): δ 0,85 až 1,1 (m, 2H), 1,1 až 1,6 (m, 8H), 1,6 až 2,15 (m, 10H), 1,99 (s, acetát), 2,23 (m,
1H), 3,1 až 3,4 (m, 4H), 3,45 až 3,65 (m, 4H), 3,7 až 3,9 (m,
3H), 4,34 (m, 1H), 4,48 (dd, 2H) ppm.
13C-NMR spektrum (125 MHz, MeOD): guanidín: δ 158,8, karbonylové uhlíky: δ 176,1, 175,2, 174,9, 173,1 ppm.
Príklad 27
Spôsob výroby H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Alkylácia (vid’ príklad ä množstva (10 nasledujúcim poskytuje zlúčeninu pomenovanú v nadpise.
ako v príklade 4 za použitia H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) 20) a C1-CH2CONH2 v prítomnosti katalytického % molárnych) jodidu draselného pri reakcii, s odstránením chrániacej skupiny spôsobom (a) (m, 3H),
2,34 (m,
4,22 (t, 1H-NMR spektrum (500 MHz, D2O): δ
1,46 (m, 1H), 1,61 až 2,13
1H) ,
1H) ,
3,25 (t,
4,41 (dd, l, 2 (m, 2H), 1,12 až 1,34 m, 9H), 1,99 (s, acetá), ) , 3,60 až 3,82 (m, 4H), 13C-NMR (75 MHz, D2O): karbonylové uhlíky: δ 168,94, 169,40, 174,43 ppm.
spektrum guanidín: δ 157,5,
Príklad 28 .Spôsob výroby HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Alkylácia ako v príklade 4 za použitia H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (viď príklad 20) a Br-CH2CONHCH2COOBn (viď výroba východzích látok) s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny spôsobom (a) poskytne titulnú zlúčeninu.
1H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD): δ 1,01 (m, 2H) , 1, 15 až
1,38 (m, 3H), 1,47 (m, 1H) , 1,64 až 2,13 (m, 12H), 2,27 (m, 1H) ,
3,17 až 3,26 (m, 3H), 3,37 (m, 1H), 3,51 (m, 1H), 3,83 (m, 1H),
3,88 (s, 2H), 3,93 až 4,06 (m, 2H), 4,35 až 4,45 (m, 2H) ppm •
13c-nmr spektrum (75 MHz, MeOD): guanidín: δ 158,71,
karbonylové uhlíky: δ 166,94, 168,35, 172,44, 174,17 ppm.
Príklad 29
Spôsob výroby (HOOC-CH2)2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc (i) Spôsob výroby (EtOOC-CH2)2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2 x HOAc
Alkylácia ako v príklade 4 za použitia H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-N3 (viď príklad 22) a Br-CH2-COOEt (k alkylácii sa použije 10 ekvivalentov) s nasledujúcim odstránením chrániacej * skupiny spôsobom (a) poskytne titulnú zlúčeninu.
‘ (ii) Spôsob výroby (EtOOC-CH2)2“(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Použije sa rovnaký spôsob ako je opísaný v príklade 19 (iii) pre Z-(R)Cha-Pro-Nag k uskutočneniu guanidácie amínu získaného vyššie. Čistenie sa uskutočňuje vysoko účinnou kvapalinovou chromatografiou s reverznou fázou, pri použití acetonitrilu a 0,1-molárneho roztoku octanu amónneho v pomere 4:6 na eluovanie.
(iii) Spôsob výroby (HOOC-CH2)2“(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Hydrolýza esterovej skupiny sa uskutočňuje spôsobom slúžiacim na odstránenie chrániacej skupiny, uvedeným pod (e), za použitia dvojnásobného množstva hydroxidu sodného. Konečná zlúčenina sa získa po vyčistení vysoko účinnou kvapalinovou chromatografiou s reverznou fázou, za použitia zmesi acetonitrilu a 0,1-molárneho roztoku octanu amónneho v pomere 2:8 na eluovanie, odparenie rozpúšťadla a odstránenie vody lyofilizáciou.
π I ^H-NMR spektrum (300 MHz, D20) : δ 0,92 až 1,49 (m, 6H) , 1,60 až 2,54 (m, 10H), 2,05 (s, acetát), 3,25 až 3,50 (m, 4H), 3,65 až 4,03 (m, 6H, Z toho 3,95 (s, 4H)), 4,49 (m, 1H), 4,71 (m, 1H, čiastočne prekryté H-O-D pikom) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D20): guanidín: δ 157,64, karbonylové uhlíky: δ 168,62, 171,39, 174,30 ppm.
Príklad 30
Spôsob výroby HOOC-CH2-(Me)-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA (i) Spôsob výroby Me-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z Boe-(Me)-(R)Cha-Pro-OSu a Boc-Nag(Z) rovnakým spôsobom, ako je opísaný pre H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) v príklade 3.
(ii) Spôsob výroby HOOC-CH2 -(Me)-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Alkylácia ako v príklade 4 za použitia Me-(R)Cha-Pro-Nag(Z) a Br-CH2COOBn s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny spôsobom (b) poskytne titulnú zlúčeninu.
1H-NMR spektrum (500 MHz, D20): δ 0,8 až 1,06 (M, 2H), 1,08 až 1,27 (m, 4H), 1,55 až 2,10 (m, 12H), 2,30 (m, 1H), 3,04 (s,
3H), 3,14 až 3,33 (m, 4H), 3,63 (m, 1H), 3,81 (m, 1H), 4,13 (zrejme široký s, 2H), 4,38 (široký dd, 1H), 4,56 (široký t,lH) ppm.
13C-NMR spektrum (125,76 MHz, D20): guanidín: δ 157,40, , karbonylové uhlíky: δ 174,05, 168,83, 167,44 ppm.
•Príklad 31
Spôsob výroby HOOC-CH2-(nBu)-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Alkylácia ako v príklade 4 za použitia nBu-(R)Cha-Pro-Nag(Z) í
(vidí príklad 20) a Br-CH2~C00Bn s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny spôsobom (a) poskytne titulnú zlúčeninu.
^•H-NMR spektrum (500 MHz, D20): δ 0,78 až 0,88 (m, 3H),0,88 až 1,02 (m, 2H), 1,02 až 1,23 (m, 4H) , 1,23 až 1,38 (m, 2H),1,45 až 1,84 (m, 11H), 1,84 až 2,10 (m, 3H), 2,24 (m, 1H), 3,05 až
3,18 (m, 3H), 3,18 až 3,38 (m, 3H) , 3,57 (m, 1H), 3,77 (m,1H),
4,05 až 4,25 (m, 2H), 4,32 (m, 1H), 4,50 (m, 1H) ppm.
c-NMR spektrum (125 MHz, D20): guanidín: δ 159,17, karbonylové uhlíky: δ 175,66, 171,13, 169,31 ppm.
Príklad 32
Spôsob výroby HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Alkylácia ako v príklade 4 za použitia H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (viď príklad 20) a Br-CH(Me)C00Bn s nasledujúcim odstránením • chrániacej skupiny spôsobom (a) poskytne titulnú zlúčeninu ako zmes dvoch diastereomérov.
Príklad 33
Spôsob výroby HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/a x HOAc
Zlúčenina sa získa delením diastereomérov vzniknutých v príklade 32 za použitia vysoko účinnej kvapalinovej chromátografie s reverznou fázou, pri eluovaní acetonitrilom a 0,1-molárnym roztokom octanu amónneho v pomere 1:4, s nasledujúcim odparením rozpúšťadla. Diastereomér odchádza z kolóny ako prvý z oboch diastereomérov.
η ^H-NMR spektrum (300 MHz, D20, 2 rotaméry v pomere približne 9:1): δ 0,78 (m, minoritný rotamer), 1,07 (m, 2H), 1,17 až 1,42 .(m, 3H), 1,48 až 1,64 (m, 4H, z toho 1,56 (d, 3H)), 1,64 až 1,95
(m, 9H), 1,95 i až 2,20 (m, 3H), 2,00 (s, acetát; 1, 2,37 (m, 1H),
3,28 (t, 2H) , 3,38 (t, 2H), 3,53 (m, minoritný rotamer), 3,63 (m,
2H) , 3,77 (m, 1H), 4,24 (d, minoritný rotamer), 4,35 až 4,50 (m,
2H) , 4,60 (d, minoritný rotamer) ppm.
Príklad 34
Spôsob výroby HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/b x HOAc
Zlúčenina pomenovaná v nadpise sa získa aplikáciou rovnakého spôsobu, ako je opísaný v príklade 33, na zlúčeninu vzniknutú v príklade 32. Tento diastereomér sa eluuje z kolóny za prvým diastereomérom.
η
H-NMR spektrum (300 MHz, D20, 2 rotamery v pomere približne 9:1): δ 0,95 (m, minoritný rotamer), 1,12 (m, 2H), 1,22 až 1,40 (m, 3H), 1,40 až 1,67 (m, 4H, z toho 1,60 (d, 3H)), 1,67 až 2,00 (m, 9H), 2,00 až 2,25 (m, 3H), 2,03 (s, acetát), 2,40 (m, 1H) ,
3,25 až 3,48 (m, 4H), 3,66 až 3,84 (m, 2H), 3,93 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 4,50 (m, 1H), 4,93 (m, minoritný rotamer) ppm.
I 13C-NMR spektrum (75,5 MHz, D20): guanidín: δ 157,42, 'karbonylové uhlíky: δ 168,05, 171,99, 174,04 ppm.
Príklad 35
Spôsob výroby EtOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom ako je opísaný v príklade 22 za použitia EtOOC-CH(Me)-Br namiesto Br-CH2COOEt pri alkylácii.
^H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD, 2 diastereomery v pomere približne 2,5:1 a tiež 4 rotamery): δ 0,88 až 2,43 (m, 25H), 3,1 .až 4,55 (m, 11H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, MeOD): guanidín: δ 158,65, karbonylové uhlíky: δ 174,33, 170,66, 168,20 ppm.
Príklad 36
Spôsob výroby HOOC-(b alebo S)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Nag/a x HOAc
Alkylácia ako (viď príklad 20) skupiny spôsobom v príklade 4 za použitia H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) a Br-CH(nPr)COOEt a odstránení chrániacej (e) a potom spôsobom (e) poskytne
HOOC-(R,S)Ch(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm. Zlúčenina pomenovaná v nadpise sa získa delením diastereomérov (tento diastereomer sa eluuje ako
- 67 prvý z dvoch diastereomérov z kolóny) pri použití vysoko účinnej kvapalinovej chromatografie s reverznou fázou, pri eluovaní zmesou acetonitrilu a 0,1-molárneho roztoku octanu amónneho v pomere 1:4, odparení rozpúšťadla a odstránení vody lyofilizáciou.
1H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD): δ 0,85 až 1,05 (m, 5H, z toho 0,95 (t, 3H)), 1,1 až 2,05 (m, 20H), 1,95 (s, acetát), 2,18 (m, 1H), 3,15 až 3,3 (m, 4H), 3,35 (m, 1H), 3,46 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 4,04 (m, 1H), 4,38 (dd, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (125 MHz, MeOD): guanidín: δ 158,73, * karbonylové uhlíky: δ 171,63, 174,43 a 176,78 ppm.
Príklad 37
Spôsob výroby HOOC-(R)CH(CH2-OH)-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Alkylácia ako v príklade 4 za použitia H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (vid’ príklad 20) a Br-(S )CH( CH2-OBn)-COOBn s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny spôsobom (a) poskytne titulnú zlúčeninu.
1H-NMR spektrum (300 MHz, D2O): δ 0,75 až 1,56 (m, 7H), 1,56 „až 2,30 (m, 11H), 2,40 (m, 1H), 3,15 až 3,55 (m, 4H), 3,55 až
4,60 (m, 7H) ppm.
•
Príklad 38
Spôsob výroby HOOC-(R,S)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Alkylácia ako v príklade 4 za použitia H-(R)Cha-Pro-kag(Z) (viď príklad 20) a Br-CH(Ph)COO^Bu a odstránenie chrániacej skupiny spôsobom (a) a potom spôsobom (f) poskytne titulnú zlúčeninu ako zmes 2 diastereomérov.
1H-NMR spektrum (300 MHz, MeOD): δ 0,8 až 1,1 (m, 2H), 1,1 až 2,18 (m, 16H), 2,26 (m, 1H), 3,04 až 3,35 (m, 5H), 3,45 (m,
1Η), 3,7 (m, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,85 (s, 1H, jeden izomér), 5,05 (s, 1H, druhý izomér), 7,4 až 7,6 (m, 5H), 7,75 (široký t, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, MeOD): guanidin: δ 158,68, karbonylové uhlíky: δ 174,39, 174,15, 170,5, 170,06 a 168,32, 167,78 ppm.
Príklad 39
Spôsob výroby HOOC-(S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Alkylácia ako v príklade 21 z použitia H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (viď príklad 20) a TfO-ÍRjCHÍC^C^PhJ-COOEt a odstránenie chrániacej skupiny spôsobom (e) a potom spôsobom (a) poskytne titulnú zlúčeninu.
l-H-NMR spektrum (300 MHz, MeOD): δ 0,77 až 1,05 (m, 2H),
1,05 až 1,35 (m, 5H), 1,35 až 2,16 (m, 14H), 1,88 (s, acetát),
2,71 (t, 2H), 3,07 až 3,53 (m, 7H), 3,73 (m, 1H), 4,32 (m, 1H),
7,03 až 7,25 (m, 5H) ppm.
13c-nmr spektrum (75 MHz , MeOD) : guanidin: δ 158,71,
.karbonylové uhlíky: δ 174,15, 177,31, 182,61 ppm.
.Príklad 40
Spôsob výroby HOOC-(R)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Alkyluje sa ako v príklade 4 za použitia H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (viď príklad 20) a Br-CH(CH2CH2Ph)COOEt s následným odstránením chrániacej zlúčeninu zlúčenina skupiny spôsobom (a) a potom spôsobom (e) poskytne
H00C-(R,S)CH(CH2-CH2-Ph)-(R)Cha-Pro-Nag. sa získa delením diastereomérov vysoko
Titulná účinnou kvapalinovou chromátografiou s reverznou fázou, pri použití acetonitrilu a 0,1-molárneho roztoku octanu amónneho v pomere 2:3 na eluovanie a lyofilizáciu vody, po odparení rozpúšťadla.
1H-NMR spektrum (300 MHz, MeOD): δ 0,97 (m, 2H) , 1,10 až
1,41 (m, 3H), 1,43 až 2,30 (m, 16H), 1,96 (s, acetát), 2,70 (m, 2H), 3,06 až 3,26 (m, 3H), 3,28 až 3,66 (m, 3H), 3,84 (m, 1H), 4,14 (široký t, 1H), 4,39 (dd, 1H) , 7,11 až 7,28 (m, 5H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D2O) : guanidín: δ 158,66 ppm.
Príklad 41 ’ Spôsob výroby HOOC-CH2-CH2-(R)cha-Pro-Nag x HOAc ‘ (i) Spôsob výroby EtOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3~NH2
Alkylácia ako je opísaná v príklade 15, za použitia H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3~N3 namiesto H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny spôsobom (a), poskytuje titulnú zlúčeninu.
(ii) Spôsob výroby EtOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Guanidácia amínu vedeného vyššie rovnakým spôsobom ako je opísaný v príklade 19 pré^ Z-(R)Cha-Pro-Nag poskytne zlúčeninu pomenovanú v názve (ii).
(iii) Spôsob výroby HOOC-CH2~CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc «·
Zlúčenina sa vyrobí pri aplikácii spôsobu (e) na odstránenie chrániacej skupiny na produkt (ii) uvedený vyššie.
1H-NMR spektrum (500 MHz, D20): δ 1,12 (m, 2H), 1,22 až 1,48 (m, 3H), 1,54 (široký s, 1hÍ, 1,70 až 2,37 (m, 12H), 2,14 (s, acetát), 2,53 (m, 1H), 2,70 (široký s, 2H), 3,15 (t, 1H), 3,25 až
3,55 (m, 5H), 3,75 (m, 1H), 3,93 (m, 1H), 4,43 (t, 1H), 4,52 (m,
1H) ppm.
Príklad 42
Spôsob výroby EtOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Zlúčenina sa vyrobí podlá príkladu 41 (ii) ^H-NMR spektrum (500 Mhz,D20): δ 0,97 (m,2H), 1,11 až 1,39 (m, 7H, z toho 1,30 (t, 3H)), 1,50 (t, 2H), 1,61 až 1,76 (m, 5H),
1,76 až 2,14 (m, 5H), 1,93 (s,acetát), 2,29 (m, 1H), 2,62 (t,
2H),2,77 až 2,94 (m, 2H), 3,23 (t, 2H), 3,32 (t,2H), 3,60 až 3,87 (m, 3H), 4,20 (q, 2H), 4,36 (dd,lH) ppm.
, 13C-NMR spektrum (125 MHz, D20): guanidín: δ 157,39, karbonylové uhlíky: δ 182,05, 175,13, 175,02 ppm.
Príklad 43
Spôsob výroby HOOC-(CH2)3~(R)Cha-Pro-Nag x HOAc (i) Spôsob výroby EtOOC-CH=CH-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(Z) ekvivalent H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (viď príklad 20) a 1,1 ekvivalentu etyl-3-brómkrotonátu sa rozpustí v 15 ml/mmol acetonitrilu. K reakčnej zmesi sa pridá uhličitan draselný a všetko sa mieša pri teplote miestnosti počas 2 hodín. Po filtrácii a odparení rozpúšťadla sa surová látka čistí veľmi rýchlou chromátografiou, pri eluovaní zmesou dichlórmetánu a metanolu. Nakoniec sa rozpúšťadlo odparí a zlúčenina sa suší pri zníženom tlaku.
1H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13): δ (t, 3H)), 1,43 až 2,15 (m, 12H),í2,96 1H), 3,16 až (široký s, 1H), (široký s, 1H)
0,73 až 1,0 (m, 2H), 1,0
8H, z toho 1,33
1H), 3,12 (dd, (q, 2H), 4,35 (dt, 1H), 7,05
4,15
6,85 (široký s, 1H) ppm.
3,48 (m, 6H),
5,03 (s, 1H), , 7,17 až 7,37
3,56 (m,
6,0 (d, (m, 5H), (ii) Spôsob výroby EtOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Zlúčenina sa vyrobí aplikáciou spôsobu (a) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (i) uvedený vyššie.
(iii) Spôsob výroby HOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc
Zlúčenina sa vyrobí aplikáciou spôsobu (e) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (ii) uvedený vyššie.
1H-NMR spektrum (500 MHz, D2O):
• až 1,32 (m, 3H), 1,42 (široký s, 1H), δ 1,02 (široký s, 2H),
1,55 až 2,15 (m, 14H),
1,08
1,92
3,00 (široký s, 1H)
3,62 (široký s, 1H)
3,07
3,82 (široký s, 1H), 4,33 (široký s, 1H), 4,40 (široký s, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (125 MHz, D2O): guanidín: δ 157,42, karbonylové uhlíky: δ 181,87, 174,34, 168,64 ppm.
Príklad 44
Spôsob výroby EtOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Zlúčenina sa vyrobí podľa príkladu 43 (ii).
1H-NMR spektrum (300 MHz, MeOD/D2O): δ 0,63 až 1,30 (m, 9H, z toho 1,02 (t, 3H)), 1,30 až 1,97 (m, 14H), 2,06 (široký s, 1H), .2,28 (m, 2H), 2,72 až 3,20 (m, 6H), 3,36 (m, 1H), 3,60 (m, 1H),
3,94 (m, 2H), 4,06 (m, 1H), 4,17 (m, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, MeOD/D2O): guanidín: δ 158,10, karbonylové uhlíky: δ 175,40, 174,23, 168,54 ppm.
I
I
Príklad 45
Spôsob výroby HOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc (i) Spôsob výroby EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
0,50 g (0,97 mmol) H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) sa rozpustí v 0,54 ml trietylamínu a 8 ml dichlórmetánu. K reakčnej zmesi sa pridá 0,146 g (1,07 mmol) etyloxylylchloridu rozpusteného v 2 ml dichlórmetánu, pričom teplota vzrastie z 22 na 28 “C. Reakčná zmes sa nato mieša pri teplote miestnosti počas 2 hodín. Organická fáza sa premyje dvakrát vodou, vysuší síranom sodným a podrobí veľmi rýchlej chromatografii, pri eluovaní zmesou etylacetátu a 99 % etanolu v pomere 9:1. Získa sa 92 mg zlúčeniny pomenovanej v nadpise. Výťažok je 15 % teórie.
b (ii) Spôsob výroby HOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Aplikáciou odstránenia chrániacej skupiny spôsobom (b) na produkt a potom spôsobom (e) sa získa titulná zlúčenina.
1H-NMR spektrum (300 MHz, MeOD) : δ 0,88 až 1,14 (m, 2H) ,
1,15 až 1,5 (m, 4H), 1,5 až 2,3 (m, 13H), 1,9 (s, acetát), 3,1 až
3,43 (m, 4H), 3,6 (m, 1H), 4,05 (m, 1H) , 4,43 (dd, 1H), 4,5 (m,
1H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D2O) : guanidín: δ 157,57, karbonylové uhlíky: δ 165,94, 173,95, 174,85 a 181,22 ppm.
. Príklad 46
Spôsob výroby MeOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc (i) Spôsob výroby MeOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
Metylester sa získa transesterifikáciou EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (viď príklad 45) v kolóne počas veľmi rýchlej chromatografie, pokial sa ako eluent použije zmes etylacetátu a metanolu v pomere 9:1. Výťažok je 55 % teórie.
(ii) Spôsob výroby MeOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Zlúčenina sa vyrobí aplikáciou spôsobu (b) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (i) uvedený vyššie.
- 73 1H-NMR spektrum (300 MHz, MeOD): δ 0,9 až 1,1 (m, 2H), 1,1 až 2,3 (m, 17H), 1,9 (s, acetát), 3,12 až 3,4 (m, 4H), 3,52 až
3,67 (m, 2H), 3,9 (s, 3H), 4,35 (m, 1H), 4,65 (m, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D2O): guanidín: δ 157,52, karbonylové uhlíky: δ 159,11, 161,20, 173,17 a 174,90 ppm.
Príklad 47 • Spôsob výroby (R,S)Bla-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Alkyluje sa ako v príklade 4 za použitia H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (viď príklad 20) a α-brómbutyrolaktónu s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny spôsobom (a). Získa sa titulná zlúčenina ako zmes 2 diastereomérov.
^H-NMR spektrum (300 MHz, D2O, zmes diastereomérov): δ 1,0 až 1,43 (m, 5H), 1,45 až 1,60 (široký s, 1H), 1,64 až 2,28 (m, 12H), 2,31 až 2,50 (m, 1H), 2,80 až 2,98 (m, 1H), 3,23 až 3,46 (m, 4H), 3,66 až 3,79 (m, 1H), 3,82 až 3,96 (m, 1H), 4,33 až 5,08 (m, 5H, čiastočne prekryté H-O-D signálom) ppm.
Príklad 48
Spôsob výroby HOOC-(R,S)CH(CH2COOH)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc «
(i) Spôsob výroby BnOOC-(R,S)CH(CH2COOBn)-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
0,21 g (0,42 mmol) H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (viď príklad 20) a 0,12 g (0,42 mmol) dibenzylmaleátu sa rozpustí v 10 ml acetonitrilu. Zmes sa varí pod spätným chladičom cez noc, odparí a podrobí veľmi rýchlej chromatografii, pri eluovaní zmesou dichlórmetánu a metanolu v pomere 94:6. Odparením rozpúšťadla sa získa požadovaná zlúčenina. Výťažok je 22 % teórie.
(ii) Spôsob výroby HOOC-(R,S)CH(CH2COOH)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Zlúčenina sa vyrobí aplikáciou spôsobu (a) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (i) uvedený vyššie.
•'•H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD) : δ 0,9 až 2,4 (m, 19H) , 2,00 (s, acetát), 2,7 až 3,0 (m, 2H), 3,1 až 3,6 (m> 5H), 3,75 až 3,9 (m, 2H), 4,2 až 4,5 (m, 2H) ppm.
Príklad 49 • Spôsob výroby MeOOC-(R,S)CH(CH2COOMe)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc ‘ (i) Spôsob výroby MeOOC-(R,S)CH(CH2COOMe)-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
0,21 g (0,42 mmol) H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (viď príklad 20) a 0,24 g (1,7 mmol) dimetylmaleátu sa rozpustí v 15 ml metanolu. Zmes sa varí pod spätným chladičom cez noc, odparí a podrobí veľmi rýchlej chromátografii, pri eluovaní zmesou dichlórmetánu a metanolu v pomere 9:1. Odparením rozpúšťadla sa získa požadovaná zlúčenina. Výťažok je 45 % teórie.
(ii) Spôsob výroby MeOOC-(R,S)CH(CH2COOMe)-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Zlúčenina sa vyrobí aplikáciou spôsobu (c) odstránenia . chrániacej skupiny na produkt (i) uvedený vyššie.
. 1H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD): δ 0,85 až 1,1 (m, 2H), 1,15 až 2,3 (m, 17H), 1,91 (s, acetát), 2,6 až 2,8 (m, 2H), 3,1 až 3,5 (m, 5H), 3,5 až 3,8 (m, 10H, z toho 4 singlety 3,66, 3,68, 3,71, 3,73), 4,29 (m, 1H) ppm.
Príklad 50 1
Spôsob výroby HOOC-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA (i) Spôsob výroby tBuOOC-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-N3
0,39 g (1,1 mmol) H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-N3 (viď príklad 22) a 0,33 g (1,2 mmol) terc.-butyl-p-brómmetylbenzoátu sa rozpustí v ml acetonitrilu a k roztoku sa pridá 0,19 g (2,4 mmol) uhličitanu draselného. Zmes sa varí pod spätným chladičom cez noc a odparí. Surová látka sa podrobí velmi rýchlej chromatografii, pri eluovaní zmesou dichlórmetánu a metanolu v pomere 92:8. Získa sa 0,50 g zlúčeniny pomenovanej v nadpise. Výťažok je 84 % teórie.
(ii) Spôsob výroby tBuOOC-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2 • K roztoku 0,60 g (1,8 mmol) bis-fenyltiostannanu, 0,20 g (1,8 mmol) tiofenolu a 0,18 g (1,8 mmol) trietylamínu v 50 ml • dichlórmetánu sa pri teplote 0 °C pridá 0,50 g (0,92 mmol) tBuOOC-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)2-N3. Zmes sa mieša pri teplote 0 °C počas 30 minút a pri teplote miestnosti počas 4 hodín. Reakčná zmes sa potom zriedi dichlórmetánom a premyje vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a postupne trikrát premyje 2% peroxidom vodíka. Organická vrstva sa extrahuje zriedenou kyselinou chlorovodíkovou. Spojené kyslé vodné fázy sa premyjú etylacetátom a potom zalkalizujú vodným roztokom hydroxidu sodného. Vodný vrstva sa extrahuje dvakrát etylacetátom. Spojená organická vrstva sa vysuší síranom sodným a odparí. Velmi rýchlou chromatograf iou, pri eluovaní zmesou dichlórmetánu a metanolu nasýteného amoniakom v pomere 8:2, sa získa 0,12 g zlúčeniny pomenovanej v nadpise. Výťažok je 26 % teórie.
(iii) Spôsob výroby HOOC-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x 2 TFA
Guanidácia amínu uvedeného vyššie rovnakým spôsobom ako je opísaný v príklade 19 pre Z-(R)Cha-Pro-Nag, s následným odstránením chrániacej skupiny spôsobom (f), poskytne titulnú zlúčeninu.
1H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD): δ 0,9 až 1,5 (m, 7H), 1,4 až 1,9 (m, 9H), 1,95 až 2,1 (m, 2H), 2,16 (m, 1H), 2,32 (m, 1H),
3,2 až 3,3 (m, 3H), 3,41 (pentet, 1H), 3,53 (m, 1H), 3,77 (m, 1H), 4,2 až 4,3 (m, 3H), 4,42 (dd, 1H), 7,15 (d, 2H), 8,10 (d,
2H) ppm.
- 76 13C-NMR spektrum (125 MHz, MeOD): guanidín: δ 160,8, karbonylové uhlíky: δ 174,3, 168,9 a 168,2 ppm.
Príklad 51
Spôsob výroby (HO)2P(0)-CH2~(R)Cha-Pro-Nag x HOAc mg (92 mmol) (EtO)2PO-CH2“(R)Cha-Pro-Nag(Z) (viď príklad
53) sa rozpustí v 3 ml acetonitrilu. 0,15 ml trimetylsilylbromidu sa pridá k reakčnej zmesi miestnosti počas 21 hodín. Po sa zistí, že zostáva určité a všetko sa nechá pri teplote odparení a NMR spektrálnej analýze množstvo esteru. Surová látka sa znova rozpustí v 3 ml acetonitrilu a k roztoku sa pridá 0,15 ml trimetylsilylbromidu. Po 5 hodinách sa zmes odparí a čistí vysoko účinnou kvapalinovou chromatografiou s reverznou fázou, pri eluovaní zmesou acetonitrilu a 0,1-molárneho roztoku octanu amónenho v pomere 30:70. Po filtrácii, odparení a lyofilizácii sa získa zlúčenina pomenovaná v nadpise. Výťažok je 8 % teórie.
1H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD): δ 0,8 až 1,1 (m, 2H), 1,15 až 1,4 (m, 4H), 1,5 až 1,9 (m, 10H), 1,9 až 2,1 (m, 4H), 1,96 (s, acetát), 2,20 (m, 1H) , 2,95 (m, 1H), 3,0 až 3,2 (m, 3H), 3,4 až
3,5 (m, 2H), 4,09 (m, 1H), 4,39 (široký d, 1H), 4,59 (m, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (125 MHz, MeOD): guanidín: δ 158,6, .karbonylové uhlíky: δ 174,2 a 170,6 ppm.
Príklad 52
Spôsob výroby EtO(HO)P(0)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(Z) x 2 HOAc (i) Spôsob výroby (EtO)(HO)PO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(Z) )
mg (77 mmol) (EtO)2PO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (viď príklad sa rozpustí v 2 ml etanolu a 2 ml 2-molárneho roztoku hydroxidu sodného. Zmes sa čistí vysoko účinnou sa mieša cez noc a odparí. Surová látka kvapalinovou chromatografiou s reverznou fázou, pri eluovaní zmesou acetonitrilu a 0,1-molárneho roztoku octanu amónneho v pomere 30:70. Po filtrácii a odparení rozpúšťadla sa získa zlúčenina pomenovaná v nadpise.
(ii) Spôsob výroby (EtO)(HO)P0-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc
Zlúčenina sa vyrobí aplikáciou spôsobu (c) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (i) uvedený vyššie.
1H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD): δ 0,9 až 1,1 (m, 2H), 1,15 až 1,35 (rn, 6H, Z toho 1,28 (t, 3H)), 1,35 až 1,5 (m, 2H), 1,5 až
1,6 (m, 1H), 1,65 až 1,8 (m, 6H), 1,9 až 2,1 (m, 3H), 1,95 (s, acetát), 2,19 (m, 1H), 2,8 až 3,0 (m, 2H), 3,1 až 3,25 (m, 2H),
3,27 (m, 1H), 3,36 (m, 1H) , 3,48 (m, 1H), 3,9 až 4,05 (m, 4H),
4,36 (široký d, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (125 MHz, MeOD): guanidín: δ 158,6, karbonylové uhlíky: δ 175,0 a 174,7 ppm.
Príklad 53
Spôsob výroby (Et0)2P(0)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc (i) Spôsob výroby (EtO)2PO-CH2~(R)Cha-Pro-Nag(Z)
0,2 g (0,40 mmol) H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (viď príklad 20) sa rozpustí v 5 ml tetrahydrofuránu a k roztoku sa pridá 0,11 g (0,80 mmol) uhličitanu draselného a 0,12 g (0,40 mmol) diéty1-triflylmetylfosfonátu (ako kyseliny trifluórmetánsulfónovej). miestnosti počas 2 hodín. Reakčná triflát sa označuje soľ Zmes sa mieša pri teplote zmes sa spracuje s vodou a vodná vrstva sa extrahuje trikrát etylacetátom. Spojené organické vrstvy sa vysušia síranom sodným a odparia. Získa sa 0,14 g zlúčeniny pomenovanej v nadpise. Výťažok je 53 % teórie.
(ii) Spôsob výroby (EtO)2PO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Zlúčenina sa vyrobí aplikáciou spôsobu (c) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (i) uvedený vyššie.
^H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD): δ 0,85 až 1,05 (m, 2H),
1,15 až 1,3 (m, 5H), 1,34 (t, 6H), 1,5 až 1,85 (m, 8H), 1,9 až 2,05 (m, 3H), 1,91 (s, acetát), 2,10 (m, 1H), 2,22 (m, 1H), 2,90 (dd, 1H), 3,05 (dd, 1H), 3,1 až 3,3 (m, 3H), 3,42 (m, 1H), 3,53 (m, 1H), 3,71 (dd, 1H), 3,82 (m, 1H), 4,1 až 4,2 (m, 4H), 4,28 (dd, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (125 MHz, MeOD): guanidín: δ 158,7, • karbonylové uhlíky: δ 176,0 a 175,1 ppm.
Príklad 54
Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Mag x HOAc (i) Spôsob výroby H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)2-NH(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z Boc-(R)Cha-Pro-OSu a NH2~(CH2)2 _NH(Z) rovnakým spôsobom, ako je opísaný pre H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) v príklade 3.
(ii) Spôsob výroby EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)2--NH2 x HOAc
Uskutoční sa alkylácia ako v príklade 4 s nasledujúcim ,odstránením chrániacej skupiny spôsobom (a), čím sa získa zlúčenina pomenovaná v nadpise.
(iii) Spôsob výroby HOOC-CH2~(R)Cha-Pro-Nag x HOAc
Guanidacia amínu uvedeného vyššie rovnakým spôsobom ako je opísaný v príklade 19 pre Z-(R)Cha-Pro-Nag, s následným odstránením chrániacej skupiny spôsobom (e), poskytne titulnú zlúčeninu, potom čo sa uskutoční jej prečistenie vysoko účinnou kvapalinovou chromatografiou s reverznou fázou, pri eluovaní zmesou acetonitrilu a 0,1-molárneho roztoku octanu amónneho a odstránení vody lyofilizáciou.
XH-NMR spektrum (300 MHz, D2O): δ 0,90 až 1,18 (m, 2H), 1,19 až 1,43 (m, 3H), 1,52 (m, 1H) , 1,63 až 2,20 (m, 10H), 2,06 (s, acetát), 2,31 až 2,47 (m, 1H), 3,44 (m, 2H), 3,50 (m, 2H), 3,60 až 3,75 (m, 3H), 3,85 (m, 1H), 4,46 až 4,54 (m, 2H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D20): guanidín: δ 157,82, karbonylové uhlíky: δ 168,80, 171,41 a 174,81 ppm.
Príklad 55
D
Spôsob výroby H-(R,S)Pro(3-Ph)-Pro-Agm x 2 TFA
Zlúčenina sa vyrobí z Boc-(R,S)Pro(3-Ph)-Pro-OSu (viď výroba východzích látok) rovnakým spôsobom, ako je opísaný pre H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) v príklade 3, s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny spôsobom (b).
XH-NMR spektrum (300 MHz, D2O, zmes 2 diastereomérov s neznámou relatívnou stereochemiou): δ 1,0 až 1,8 (m, 7H), 2,0 až
2,5 (m, 3H), 2,8 až 4,3 (m, 10H), 4,56 (d, 1H, majoritný rotamer), 4,90 (d, 1H, majoritný rotamer), 7,2 až 7,5 (m, 5H) ppm.
X3C-NMR spektrum (125,76 MHz, D2O) : guanidín: δ 157,36 (minoritný a majoritný rotamér), karbonylové uhlíky: δ 174,1 ( , majoritný rotamer), 174,0 (minoritný rotamer), 167,8 (majoritný rotamer), 167,0 (minoritný rotamer) ppm.
Príklad 56
Spôsob výroby H-(R,S)Pro(3-(trans)Ch)-Pro-Agm x 2 TFA
Táto zlúčenina sa vyrobí z Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ch)-Pro-OSu (viď výroba východzích zlúčenín) podlá spôsobu opísaného pre H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) v príklade 3, s následným odstránením chrániacej skupiny spôsobom (b).
^H-NMR spektrum (500 MHz, D2O, zmes 2 diastereomértov v pomere 1,8:1): δ 0,95 až 1,32 (m, 5H), 1,35 až 1,46 (m, 1H), 1,50 až 1,92 (m, 10H), 1,93 až 2,15 (m, 4H), 2,23 až 2,43 (m, 2H),
3,15 až 3,30 (m, 4H), 3,35 až 3,50 (m, 2H), 3,57 až 3,68 (m, 1H),
3,74 až 3,82 (m, 1H), 4,34 až 4,41 (m, 1H), 4,51 (d, 1H, minoritný rotamer), 4,48 (d, 1H, majoritný rotamer) ppm.
13C-NMR spektrum (125,76 MHz, D2O): guanidín: δ 157,36 (minoritný a majoritný rotamer), karbonylové uhlíky: δ 174,34 • (majoritný rotamer), 174,07 (minoritný rotamer), 168,94 (minoritný a majoritný rotamer) ppm.
Príklad 57
Spôsob výroby HOOC-CH2~(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-Agm x 2 TFA (i) Spôsob výroby H-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-Agm(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z Boc-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-OSu (viď výroba východzích zlúčenín) rovnakým spôsobom, ako je opísaný pre zlúčeninu H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) v príklade 3.
(ii) Spôsob výroby HOOC-CH2-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-Agm x TFA • Alkyluje sa ako v príklade 4 za použitia Br-CH2COOBn s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny spôsobom (b). Získa • sa titulná zlúčenina ako zmes 2 diastereomérov.
1H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD, zmes 2 diastereomérov v pomere 1,1:1): δ 1,40 až 1,80 (m, 6H), 1,85 až 2,05 (m, 1H), 2,10 až 2,30 (m, 1H), 2,50 až 2,65 (m, 2H), 3,10 až 3,40 (m, 6H), 3,50 až 3,70 (m, 2H), 3,9 až 4,40 (m, 4H), 4,63 (d, 1H, majoritný rotamer), 4,67 (d, 1H, minoritný rotamer), 7,30 až 7,60 (m, 5H) ppm.
13C-NMR spektrum (125,76 MHz, D2O): guanidín: δ 157,52 (oba izoméry), karbonylové uhlíky: δ 173,87, 173,73, 169,12, 168,94,
167,21 a 167,00 ppm.
Príklad 58
Spôsob výroby HOOC-CH2-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-Nag x 2 TFA (i) Spôsob výroby H-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z Boe-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-OSu (viď výroba východzích zlúčenín) a Boc-Nag(Z) podlá rovnakého spôsobu, ako je opísaný pre H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) v príklade 3.
(ii) Spôsob výroby HOOC-CH2~(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-Nag x TFA
Alkyluje sa ako v príklade 4 za použitia Br-CH2COOBn s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny podlá spôsobu (b). Získa sa titulná zlúčenina ako zmes 2 diastereomérov.
•^H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD, zmes 2 diastereomérov v pomere približne 1,5:1): δ 1,40 až 1,85 (m, 4H), 1,90 až 2,00 (m, 1H), 2,10 až 2,30 (m, 1H), 2,45 až 2,70 (m, 2H), 3,08 až 3,46 (m, 6H), 3,57 až 3,70 (m, 2H), 3,90 až 4,0 (m, 1H), 4,32 až 4,40 (m, 1H), 4,04 a 4,29 (AB-kvartet, 2H, majoritný rotamer), 4,16 a 4,37 (AB-kvartet, 2H, minoritný rotamer), 4,60 (d, 1H, majoritný rotamer), 4,64 (d, 1H, minoritný rotamer), 7,3 až 7,6 (m, 5H) ppm.
^C-NMR spektrum (125,76 MHz, D20): guanidín: δ 157,48 (oba izoméry), karbonylové uhlíky: δ 173,90, 173,71, 169,01, 168,94 a 167,07 (oba izoméry) ppm.
Príklad 59
Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Agm x 2 TFA (i) Spôsob výroby H-(R)Cha-Pic-Agm(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z Boe-(R)Cha-Pic-OSu (viď výroby východzích zlúčenín) podlá rovnakého spôsobu, ako je opísaný pre H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) v príklade 3.
(ii) Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Agm x .2 TFA
Alkyluje sa ako v príklade 4 za použitia Br-CH2COOBn s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny spôsobom (a). Tak sa získa titulná zlúčenina.
l-H-NMR spektrum (75 MHz, MeOD): δ 1,2 (m, 2H) , 1,13 až 2,00 (m, 20H), 2,24 (široký d, 1H), 3,12 až 3,45 (m, 5H), 3,71 (široký d, 1H), 3,87 (s, 2H), 4,65 (široký t, 1H), 5,06 (m, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D20): guanidín: δ 157,47, *karbonylové uhlíky: δ 169,42, 170,03 a 172,71 ppm.
Príklad 60
Spôsob výroby HOOC-CH2-(Me)-(R)Cha-(R,S)Pic-Agm x HOAc (i) Spôsob výroby Me-(R)Cha-(R,S)Pic-Agm(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z Boc-(Me)-(R)Cha-Pic-OSu rovnakým spôsobom, ako je opísaný pre H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) v príklade 3.
(ii) Spôsob výroby HOOC-CH2-(Me)-(R)Cha-(R,S)Pic-Agm x HOAc
Alkyluje sa ako v príklade 4 za použitia Br-CH2COOBn s . nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny spôsobom (b). Získa sa titulná zlúčenina.
Poznámka: V určitom rozsahu počas syntézy dochádza k epimerácii kyseliny S-pipekolínovej.
i ^H-NMR spektrum je tvorené komplexom pozostávajúcim z 2 diastereomérov v pomere približne 1:1 a ich rotamérov.
•^H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD): δ 0,75 až 2,15 (niekoľko m, 20H), 1,95 (široký s, acetát), 2,2 až 2,7 (6H, pozorujú sa 2 vzdialené súbory signálov v pomere asi 1:1, z toho 2,35 a 2,55 (s, 3H)), 3,0 až 3,5 (m, 6H), 3,9 až 4,17 (m, 2H, z toho 4,14 (dd)), 4,4 až 4,5 (m, 1H), 4,97 až 5,15 (dva široké dd, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D2O) : guanidín: δ 157,50, karbonylové uhlíky: δ 169,65, 170,01, 170,54, 172,67 a 172,89 ppm.
Príklad 61
Spôsob výroby HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm x TFA ‘ Alkyluje sa ako v príklade 4 za použitia H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (viď príklad 59) a Br-CH(Me)C00Bn s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny spôsobom (a). Získa sa titulná zlúčenina ako zmes dvoch diastereomérov.
Príklad 62
Spôsob výroby HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm/a x 2 TFA
Zlúčenina sa získa delením diastereomérov vzniknutých v príklade 61 za použitia vysoko účinnej kvapalinovej chromatografie s reverznou fázou, pri eluovaní zmesou acetonitrilu a 0,1-molárneho roztoku octanu amónneho v pomere 1:3, s nasledujúcim odparením rozpúšťadla a odstránením vody a , kyseliny trifluóroctovej lyofilizáciou. Tento diastereomer sa eluuje ako prvý z oboch diastereomérov z kolóny.
^H-NMR spektrum (300 MHz, D2O, 2 rotamery v pomere približne 5:1): δ 0,70 (m, minoritný rotamer), 0,75 až 1,0 (m, 2H), 1,0 až
1,28 (m, 3H), 1,28 až 1,83 (m, 20H, z toho 1,57 (d, 3H)), 2,14 (široký d, 1H), 2,92 (t, minoritný rotamer), 3,03 až 3,32 (m,
5H), 3,59 (široký d, 1H), 3,85 (q, minoritný rotamer), 3,98 (q, 1H), 4,30 až 4,50 (m, minoritný rotamer), 4,54 (m, 1H), 4,95 (s, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D20): guanidín: δ 157,39, karbonylové uhlíky: δ 172,26 (2 uhlíky) a 169,92 ppm.
Príklad 63
Spôsob výroby HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm/b x TFA
Zlúčenina pomenovaná v nadpise sa získa za použitia rovnakého spôsobu ako je opísaný v príklade 62 pre zlúčeninu vzniknutú v príklade 61. Tento diastereomér sa eluuje ako prvý z kolóny.
^H-NMR spektrum (500 MHz, D2O, 2 rotamery v pomere približne 5:1): δ 0,72 (m, minoritný rotamer), 0,82 (m, minoritný rotamer), '0,97 (m, 2H), 1,0 až 1,23 (m, 3H), 1,23 až 1,40 (m, 2H), 1,40 až
1,83 (m, 18H, z toho 1,63 (d, 3H)), 2,11 (d, 1H), 2,17 (d, minoritný rotamer), 2,92 (t, minoritný rotamer), 3,05 až 3,25 (m, 4H), 3,29 (t, 1H), 3,74 (d, 1H), 4,02 (q, 1H), 4,34 (d, minoritný rotamer), 4,41 (dd, minoritný rotamer), 4,52 (t, 1H), 4,95 (s, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (125 MHz, D2O): guanidín: δ 154,68, karbonylové uhlíky: δ 169,81, 169,60 a 167,36 ppm.
Príklad 64 .Spôsob výroby HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Agm x 2 TFA . Zlúčenina sa vyrobí z H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (viď príklad 59) rovnakým spôsobom ako je opísaný pre HOOC-CH2-CH2~(R)Cha-Pro-Agm v príklade 15 s tým rozdielom, že sa použije 1,2 ekvivalentu benzylakrylátu namiesto 1,1 ekvivalentu.
η
H-NMR spektrum (500 MHz, D2O, 2 rotamery v pomere približne 4:1): δ 0,70 až 0,90 (m, minoritný rotamér), 0,90 až 1,0 (m, 2H), 1,05 až 1,25 (m, 3H), 1,39 až 1,45 (m, 2H), 1,45 až 1,85 (m,
15H), 2,1 (široký d, 1H), 2,2 (široký d, minoritný rotamer), 2,75 (t, 2H), 2,95 (t, minoritný rotamer), 3,1 až 3,4 (m, 7H), 3,75 (široký d, 1H), 4,55 (t, 1H), 4,95 (m, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D20) : guanidín: δ 157,48, karbonylové uhlíky: δ 170,10, 172,58 a 174,75 ppm.
Príklad 65
Spôsob výroby H-(R)Cha-Pic-Nag x 2 TFA (i) Spôsob výroby Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z) • (ia) Zlúčenina sa vyrobí z Boe-(R)Cha-Pic-OSu rovnakým spôsobom ako je opísaný pre Boc-(R)Cha-Pro-Agm(Z) v príklade 3.
A (ib) Spôsob výroby vychádzajúci z Boc-(R)Cha-Pic-OH
0,432 ml (2 mmol) difenylfosaforylazidu sa pridá k miešanému roztoku 765 mg (2 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-OH v 5 ml dimetylformamidu pri teplote -10 °C. Po 10 minút sa vnesie 600 mg (2,1 mmol) H-Nag(Z) x 2 HC1 (viď výroba východzích zlúčenín) v 5 ml tetrahydrofuránu a 615 mg (4,4 mmol) trietylamínu. Reakčná zmes sa udržuje na ľadovom kúpeli počas 3 hodín a potom sa pri teplote miestnosti počas 12 hodín a nato sa vyleje do vody. Extrakciou vodnej 'fázy etylacetátom s nasledujúcim vysušením organickej fázy síranom horečnatým a odparením rozpúšťadla pri zníženom tlaku sa získa 1,18 g látky, ktorú tvorí zmes diastereomérov (epimerov kyseliny S-pipekolínovej) v pomere 97:3 (RS/RR). Výťažok je 96 % .teórie.
(ic) Spôsob výroby vychádzajúci z Boc-(R)Cha-Pic-OH
4,2 g (21,9 mmol) EDC-hydrochloridu sa pri teplote -15 “C
I pridá k miešanému roztoku 8 g (20,9 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-OH, 10,6 g (88 mmol) Ν,Ν-dimetylamínopyridínu a 6,3 g (19,5 mmol) H-Nag(Z) x 2 HC1 (viď výroba východzích zlúčenín) v acetonitrile. Reakčná zmes sa nechá ohriať na teplotu +15 C počas 16 hodín. Rozpúšťadlo ssa odparí pri zníženom tlaku a odparok sa rozpustí v etylacetáte. Premytím vodou, 0,3-molárnym roztokom hydrogensíranu draselného, 0,3-molárnym hydrogenuhličitanom sodným, vodou a roztokom chloridu sodného s nasledujúcim vysušením síranom sodným a odparením rozpúšťadla sa získa 11,9 g látky, ktorú tvorí zmes diastereomérov (epimérov kyseliny S-pipekolínovej) v pomere 98:2 (RS/RR). Výťažok je 92,5 % teórie.
1H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13): δ 0,85 až 2,0 (m, 29H, z toho 1,40 (široký s, 9H)), 2,46 (široký d, 1H), 3,1 až 3,4 (m, 5H), 3,92 (Široký d, 1H), 4,53 (široký q, 1H), 5,10 (s, 2H), 5,22 (široký s, 1H), 5,29 (široký d, 1H), 6,7 až 7,2 (široký, 3H), - 7,25 až 7,45 (m, 5H) ppm.
• 13C-NMR spektrum (125 MHz, CDC13): guanidín: δ 156,9, karbonylové uhlíky: δ 173,6, 170,3, 163,7 a 161,7 ppm.
(ii) Spôsob výroby H-(R)Cha-Pic-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom, ako je opísaný pre H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) v príklade 3, pričom sa vychádza z Boc-(R)Cha-Pic-Nag (Z).
1H-NMR spektrum (500 MHz, CDC13): δ 0,8 až 2,0 (m, 22H),
2,24 (široký d, 1H), 3,1 až 3,4 (m, ;5H), 3,72 (široký d, 1H),
3,84 (široký q, 1H), 5,05 (široký d, 1H), 5,08 (s, 2H), 7,3 až
7,5 (m, 5H) ppm.
.(iii) Spôsob výroby H-(R)Cha-Pic-Nag x 2 TFA
Zlúčenina sa vyrobí aplikáciou spôsobu (a) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (ii) vyrobený vyššie.
1H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD): δ 0,9 až 1,1 (m, 2H), 1,2 až 2,0 (m, 18H), 2,32 (široký d, 1H), 3,20 (t, 2H), 3,30 (t, 2H),
3,36 (m, 1H), 3,69 (široký d, 1H), 4,49 (dd, 1H), 5,05 (široký d, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (125 MHz, MeOD): karbonylové uhlíky: δ 172,7 a 171,4 ppm.
guanidín:
δ 158,7,
Príklad 66
Spôsob výroby Me-(R)Cha-(R,S)Pic-Nag x 2 TFA (i) Spôsob výroby Me-(R)Cha-(R,S)Pic-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom ako je opísaný pre H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) v príklade 3, pričom sa vychádza z Boc-(Me)-(R)Cha-Pic-OSu a Boc-Nag(Z). Epimerácia kyseliny - S-pipekolíhovej prebieha počas syntézy a látka sa získa ako zmes dvoch diastereomérov.
(ii) Spôsob výroby Me-(R)Cha-(R,S)Pic-Nag x 2 TFA
Zlúčenina sa vyrobí aplikáciou spôsobu (b) odstránenia chrániacej skupiny.
Ί
H-NMR spektrum je komplexom pozostávajúcim z 2 diastereomérov s pomerom okolo 4:1 a ich rotamérov.
1H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD): δ 0,8 až 1,08 (m, 2H), 1,15 až 2,4 (niekoľko m, 19H), 2,6 až 2,75 a 2,9 až 2,95 (niekoľko s, 3H), 3,1 až 3,6 (niekoľko m, 5H), 3,75 až 4,1 (niekoľko m, 1H),
4,4 až 4,7 (niekoľko m, 1H), 5,05 až 5,15 (dva dd, 1H) ppm.
, 13C-NMR spektrum (125 MHz, D2O): guanidín: δ 154,84, karbonylové uhlíky: δ 167,60 a 169,99 ppm.
Príklad 67
Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag (i) Spôsob výroby BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag(Z)
Alkyluje sa ako v príklade 4 za použitia H-(R)Cha-Pic-Nag(Z) (viď príklad 65) a Br-CH2COOBn. Získa sa titulná zlúčenina.
XH-NMR spektrum (500 MHz, CDC13): δ 0,8 až 1,0 (m, 2H), 1,1 až 1,7 (m, 19H), 1,79 (široký d, 1H), 2,3 až 2,5 (m, 2H, z toho
2,38 (široký d, 1H)), 3,00 (široký t, 1H), 3,1 až 3,4 (m, 5H, z toho 3,38 (d, 1H)), 3,58 (d, 1H), 3,6 až 3,7 (m, 2H), 5,06 (dd, 2H), 5,07 (s, 2H), 5,16 (široký s, 1H), 6,7 až 7,1 (široký signál, 1H), 7,15 (široký s, 1H), 7,2 až 7,4 (m, 10H) ppm.
13C-NMR spektrum (125 MHz, CDC13): guanidin a karbonylové uhlíky: δ 176,0, 173,6, 170,8, 163,8 a 161,7 ppm.
(iia) Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag x 2 HCI
Odstránenie chrániacej skupiny spôsobom (a), s nasledujúcim čistením vysoko účinnou kvapalinovou chromátografiou s reverznou fázou, za použitia zmesi acetonitrilu a 0,1-molárneho roztoku octanu amónneho v pomere 1:3 ako elučného činidla, odparením pri teplote 40 až 50 °C a lyofilizácii, poskytuje zlúčeninu pomenovanú v nadpise vo forme acetátu. Spracovaním s dvadsaťnásobným prebytkom kyseliny chlorovodíkovej, odparením a opätovnou lyofilizáciou sa získa bis-hydrochlorid požadovanej zlúčeniny.
1H-NMR spektrum (500 MHz, D2O, zmes 2 rotamerov): δ 0,7 až 2,0 (m, 20H), 2,17 (široký d, 1H), 2,95 (t, minoritný rotamer), '*3,17 (t, 2H), 3,25 až 3,35 (m, 3H) , 3,72 (Široký d, 1H), 3,86 (dd, minoritný rotamer), 3,90 (s, 2H), 4,72 (t, 1H), 4,99 (široký s, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D2O): guanidin δ 157,4, karbonylové uhlíky: δ 169,9, 170,2 a 173,0 ppm.
i (iib) Spôsob výroby HOOC-CH2~(R)Cha-Pic-Nag x 2 HBr
BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag(Z) sa rozpustí v zmesi izopropylalkoholu a vody v pomere 95:5 a hydrogenuje na 5 % palládiu na uhlí pri atmosférickom tlaku v prítomnosti 2,2 ekvivalentov kyseliny bromovodíkovej. Katalyzátor sa odfiltruje a rozpúšťadlo sa odparí. Získa sa žltý olej. (Podlá iného prevedenia sa kyselina môže pridať po hydrogenácii a filtrácii.) Kryštalizáciou z izopropanolu (alebo etanolu) a etylacetátu v pomere 1:1 sa získa zlúčenina pomenovaná v nadpise, ako biely kryštalický prášok.
1H-NMR spektrum (500 MHz, D2O, zmes 2 rotamérov): 8 1,15 až 2,0 (m, 20H), 2,30 (Široký d, 1H), 3,30 (m, 2H), 3,40 až 3,50 (m, 3H), 3,85 až 3,90 (m, 1H), 3,95 (zrejmé s, 2H), 4,75 až 4,85 (m, 1H, čiastočne prekryté H-O-D čiarou), 5,10 (široký s, 1H) ppm.
’ 33C-NMR spektrum (125 MHz, D2O): guanidín 8 157,6, karbonylové uhlíky: 8 169,7, 170,2 a 173,0 ppm.
Príklad 68
Spôsob výroby MeOOC-CH2~(R)Cha-Pic-Nag x 2 TFA
Metylester MeOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag(Z) sa získa transesterifikáciou 1PrOOC-CH2~(R)Cha-Pic-Nag(Z) (viď príklad 69) na kolóne počas veľmi rýchlej chromátografie, pokiaľ sa ako elučné činidlo použije zmes dichlórmetánu a metanolu. Zlúčenina pomenovaná v nadpise sa získa odstránením chrániacej skupiny spôsobom (a).
1H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD): δ 0,95 až 1,15 (m, 2H), 1,2 . až 1,6 (m, 6H), 1,65 až 2,0 (m, 13H), 2,25 (široký d, 1H), 3,21 (t, 2H), 3,30 (t, 2H), 3,37 (m, 1H), 3,71 (m, 1H), 3,83 (s, 3H),
3,97 (dd, 2H), 4,67 (široký t, 1H), 5,05 (široký s, 1H) ppm.
33C-NMR spektrum (125 MHz, MeOD): guanidín: δ 158,0, karbonylové uhlíky: δ 173,0, 171,1 a 168,3 ppm. 1
Príklad 69
Spôsob výroby 1PrOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag x 2 TFA
Alkyluje sa ako v príklade 4 za použitia H-(R)Cha-Pic-Nag(Z) (viď príklad 65) a Br-CH2COOxPr s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny spôsobom (a). Získa sa titulná zlúčenina.
spektrum (500 MHz, MeOD): δ 0,95 až 1,1 (m, 2H) , 1,15 až 1,6 (m, 12H, z toho 1,25 (d, 3H) , 1,28 (d, 3H)), 1,65 až 1,95 (m, 12H), 2,28 (široký d, 1H), 3,21 (t, 2H), 3,30 (t, 2H), 3,36 (m, 1H), 3,93 (dd, 2H), 4,67 (t, 1H) , 5,04 (široký s, 1H), 5,11 (pentet, 1H) ppm.
l^c-NMR spektrum (125 MHz, MeOD): guanidín: δ 157,9, karbonylové uhlíky: δ 173,1, 171,0 a 168,3 ppm.
Príklad 70
Spôsob výroby H00C-CH2-(Me)-(R)Cha-(R alebo S)Pic-Nag/b x 2 TFA
Alkyluje sa ako je opísané v príklade 4 za použitia Me-(R)Cha-(R,S)Pic-Nag(Z) (viď príklad 66) a Br-CH2COOBn s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny spôsobom (b). Získa sa HOOC-CH2-(Me)-(R)Cha-(R alebo S)Pic-Nag. Oba diastereoméry sa oddelia vysoko účinnou kvapalinovou chromátografiou s reverznou -fázou, pri eluovaní zmesou acetonitrilu a octanu amónneho v pomere 1:3, s nasledujúcim odstránením vody a kyseliny trifluóroctovej lyofilizáciou. Tento diasteromer sa eluuje ako posledný z oboch diastereomérov z kolóny.
1H-NMR spektrum (500 MHz, MeOD): δ 0,9 až 1,1 (m, 2H) , 1,15 až 1,35 (m, 4H), 1,4 až 1,55 (m, 2H), 1,6 až 1,85 (m, 12H), 2,3 (m, 1H), 2,85 (s, 3H), 3,15 až 3,45 (m, 5H), 3,65 (široký s, 2H), 4,0, (m, 1H), 4,65 (m, 1H) , 5,08 (dd, 1H) ppm.
l^c-NMR spektrum (75 MHz, D2O): guanidín: δ 157,65, karbonylové uhlíky: δ 169,86 a 172,48 ppm.
Príklad 71
Spôsob výroby HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-(R,S)Pic-Nag x 2 TFA
Alkyluje sa ako v príklade 4 za použitia H-(R)Cha-Pic-Nag(Z) (viď príklad 65) a Br-CH(Me)-COOBn s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny spôsobom (a). Získa sa titulná zlúčenina ako zmes 4 diastereomérov.
Príklad 72
Spôsob výroby HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-(R alebo S)Pic-Nag/c x TFA
Zlúčenina pomenovaná v nadpise sa získa delením ” diastereomérov vzniknutých v príklade 71 za použitia vysoko účinnej kvapalinovej chromatografie s reverznou fázou, pri eluovaní zmesou acetonitrilu a 0,1-molárneho roztoku octanu amónneho v pomere 1:4, potom odparením a odstránením vody a kyseliny trifluóroctovej lyofilizáciou. Tento diastereomér sa eluuje ako tretí zo štyroch diastereomérov z kolóny.
^H-NMR spektrum (300 MHz, D20, 2 rotamery v pomere približne 5:1): δ 0,88 (m, minoritný rotamer), 0,98 až 1,63 (m, 7H), 1,63 až 2,02 (m, 16H, Z toho 1,68 (d, 3H)), 2,28 (m, 1H), 3,10 (t, minoritný rotamer), 3,25 až 3,50 (m, 5H, z toho 3,33 (t, 2H) a
3,43 (t, 2H)), 3,82 (široký d, 1H), 4,02 (q, 1H), 4,55 (d, minoritný rotamer), 4,65 (d, minoritný rotamer), 4,72 (m, 1H),
5,10 (m, 1H) ppm.
Príklad 73
Spôsob výroby HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-(R alebo S)Pic-Nag/d x TFA
Zlúčenina pomenovaná diastereomérov vzniknutých v nadpise sa získa delením v príklade 71 za použitia vysoko účinnej kvapalinovej chromatografie s reverznou fázou, pri eluovaní amónneho kyseliny zmesou acetonitrilu a 0,1-molárneho roztoku octanu v pomere 1:4, trifluóroctovej potom odparením a odstránením vody a lyofilizáciou. Tento diastereomér sa eluuje ako posledný zo štyroch diastereomérov z kolóny.
^•H-NMR spektrum (500 MHz, D2O, 2 rotamery v pomere približne 5:1): δ 0,80 (m, minoritný rotamer), 0,90 (m, minoritný rotamer), 1,03 (m, 2H), 1,10 až 1,33 (m, 3H), 1,42 (m, 2H), 1,51 až 1,92 (m, 16H, z toho 1,57 (d, 3H)), 2,18 (d, 1H), 2,24 (d, minoritný rotamer), 2,98 (t, minoritný rotamer), 3,21 (t, 2H), 3,28 až 3,40 (m, 3H, Z toho 3,44 (t, 2H)), 3,82 (d, 1H), 4,02 (q, 1H), 4,42 (d, minoritný rotamer), 4,50 (t, minoritný rotamer), 4,62 (t, - 1H), 4,67 (s, minoritný rotamer), 5,03 (s, 1H) ppm.
' Príklad 74
Spôsob výroby HOOC-CH2-CH2~(R)Cha-Pic-Nag x 2 TFA
Zlúčenina sa vyrobí z H-(R)Cha-Pic-Nag(Z) (viď príklad 65) rovnakým spôsobom ako je opísaný pre HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm v príklade 15 s tým rozdielom, že sa použije 1,2 ekvivalentu benzylakrylátu namiesto 1,1 ekvivalentu.
η
H-NMR spektrum (500 MHz, D20, 2 rotamery v pomere približne 4:1): δ 0,7 až 0,9 (m, minoritný rotamer), 0,9 až 1,0 (m, 2H), 1,05 až 1,3 (m, 3H), 1,3 až 1,45 (m, 2H), 1,5 až 1,8 (m, 13H), *2,10 (d, 1H), 2,20 (d, minoritný rotamer), 2,75 (t, 2H), 2,95 (t, minoritný rotamer), 3,15 (t, 2H), 3,2 až 3,35 (m, 5H), 3,75 (d, ,1H), 4,55 (t, 1H), 4,95 (m, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D2O): guanidín: δ 157,57, karbonylové uhlíky: δ 170,16, 172,82 a 174,75 ppm.
Príklad 75 1
Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Cha-(R,S)Mor-Agm x 2 TFA (i) Spôsob výroby H-(R)Cha-Mor-Agm(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z Boc-(R)Cha-Mor-OSu (viď výroba východzích zlúčenín) rovnakým spôsobom ako je opísaný pre H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) v príklade 3.
(ii) Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Cha-(R,S)Mor-Agm x 2 TFA
Alkyluje sa ako v príklade 4 za použitia Br-CH2COOBn s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny spôsobom (b). Získa sa titulná zlúčenina. Epimerácia kyseliny S-morfilín-2-karboxylovej prebieha v určitom rozsahu počas syntézy a v konečnej látke sa pozoruje zmes dvoch diastereomérov, obsiahnutých v pomere približne 9:1.
1H-NMR spektrum (300 MHz, MeOD): δ 0,92 až 1,95 (m, 17H),
3,12 až 3,39 (m, 4H), 3,44 až 4,05 (m, 7H), 4,37 (d, 1H), 4,63 (m, 1H), 4,79 (široký d, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (75,47 MHz, MeOD): guanidín: δ 158,63, karbonylové uhlíky: δ 170,87, 170,82 a 169,08, ostatné δ 69,06 a 67,01 (C-O-C) ppm.
Príklad 76
Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Cha-(R alebo S)Mor-Nag x 2 TFA (i) Spôsob výroby H-(R)Cha-Mor-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z Boe-(R)Cha-Mor-OSu (vid’ výroby východzích zlúčenín) a Boc-Nag(Z) rovnakým spôsobom ako je opísaný pre H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) v príklade 3.
(ii) Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Cha-(R alebo S)Mor-Nag x 2 TFA
Alkyluje sa ako v príklade 4 za použitia Br-CH2COOBn s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny spôsobom (b). Získa sa titulná zlúčenina.
TH- NMR spektrum (300 MHz, MeOD): δ 0,92 až 1,13 (m, 2H) ,
1,15 až 1,42 (m, 3H), 1,50 (široký s, 1H), 1,62 až 1,95 (m, 9H) ,
3,14 až 3,40 (m, 4H), 3,46 až 4,13 (m, 7H), 4 ,41 (d, 1H) , 4,63
(široký d, 1H) ppm.
(m, 1H), 4,80 13C-NMR spektrum (75,47 MHz, karbonylové uhlíky: δ 171,19, 170,90 67,00 (C-O-C) ppm.
MeOD): guanidín:
a 169,46, ostatné δ 158,68, δ 68,81 a
- Príklad 77 ’ Spôsob výroby H-(R)Cha-Aze-Nag x 2 HOAc (i) Spôsob výroby Boc-(R)Cha-Aze-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z Boe-(R)Cha-Aze-OH rovnakým spôsobom ako je opísaný pre Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z) a to podľa príkladu 65(ic).
(ii) Spôsob výroby H-(R)Cha-Aze-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom ako je opísaný pre H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (viď príklad 3).
(iii) Spôsob výroby H-(R)Cha-Aze-Nag x 2 HOAc
Zlúčenina sa vyrobí aplikáciou spôsobu (a) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (ii) uvedený vyššie.
1H-NMR spektrum (300 MHz, D20): δ 0,85 až 1,10 (m, 2H), 1,10 až 2,04 (m, 13H), 1,95 (s, acetát), 2,20 až 2,37 (m, 1H), 2,60 až
2,82 (m, 1H), 3,15 až 3,40 (m, 4H), 3,96 až 4,15 (m, 2H), 4,18 až
4,30 (m, 1H), 4,30 až 4,42 (m, 1H), signály minoritného rotameru sa ukazujú pri δ 0,70, 3,90 a 5,10 ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D2O): guanidín: δ 157,39, karbonylové uhlíky: δ 170,22 a 172,38 ppm.
Príklad 78
Spôsob výroby HOOC-CH2-(R) Cha-Aze-Nag x HOAc (i) Spôsob výroby BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z H-(R)Cha-Aze-Nag(Z) (viď príklad 77) podľa spôsobu opísaného v príklade 4.
(ii) Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Nag x HOAc
Zlúčenina sa vyrobí aplikáciou spôsobu (a) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (i) uvedený vyššie.
íh- -NMR spektrum (500 MHz, MeOD): δ 0,90 až 1,10 (m, 2H)
1,15 až 2,00 (m, 13H] I, i, 95 (s, acetát), 2,20 až 2,30 (m, 1H)
2,58 až 2,7Ó (m, 1H), 3,17 až 3,30 (m, 4H) , 3,35 až 3,50 (m, 2H)
3,55 až 3,68 (m, 1H), 4,10 až 4,20 (m, 1H) , 4,30 až 4,38 (m, 1H)
4,65 až 4,77 (m, 1H), signály minoritného rotameru sa ukazujú pri δ 3,75, 3,98, 4,03 a 5,08 ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D20): guanidin: δ 157,40, karbonylové uhlíky: δ 169,16, 171,92 a 172,13 ppm.
Príklad 79
Spôsob výroby H-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag x 2 HC1 (i) Spôsob výroby Box-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag(Z)
Rovnaký postup, ako sa použil pre kopuláciu (R)Cha-OH a H-Pic-OEt x HC1 (viď výroba východzích zlúčenín) sa použije na dosiahnutie kopulácie medzi Boc-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-0H a H-Nag(Z) x 2 HC1.
(ii) Spôsob výroby H-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag(Z)
Použije sa rovnaký postup ako je opísaný pre syntézu
H-(R)-Cgl-Pic-Nag(Z) (viď príklad 84 (ii)).
(iii) Spôsob výroby H-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag x 2 HCI
Zlúčenina sa vyrobí aplikáciou spôsobu (d) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (ii) získaný vyššie.
l-H-NMR spektrum (300 MHz, D2O) : δ 1,0 až 2,3 (m, 21H, z toho - 1,47 (d, 3H)), 2,4 až 2,55 (m, 1H), 3,3 až 3,6 (m, 4H), 4,40 (široký t, 1H), 4,38 (dd, 1H), 4,47 (široký t, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D20): guanidín: δ 157,6, karbonylové uhlíky: δ 174,6 a 169,6 ppm.
Príklad 80
Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag x HOAc
Alkyluje sa ako v príklade 4 za použitia H-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag(Z) (viď príklad 79) a zlúčeniny Br-CH2C00Bn s nasledujúcim odstránením chrániacej skupiny spôsobom (a). Získa sa titulná zlúčenina.
^H-NMR spektrum (300 MHz, D20): δ 0,9 až 1,9 (m, 19H, z toho ,1,34 (široký d, 3H)), 1,93 (s, acetát), 2,0 až 2,2 (m, 3H), 2,34 (m, 1H), 3,1 až 3,5 (m, 7H), 3,97 (m, 1H), 4,20 (m, 1H), 4,31 (široký t, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D20): guanidín: δ 157,4 ppm.
Príklad 81
Spôsob výroby HOOC-CH2~(R)Cha-(R alebo S)Pic(4,5-dehydro)-Nag/b x x HOAc (i) Spôsob výroby Boe-(R)Cha-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-Nag(Z)
- 97 Táto zlúčenina sa vyrobí zo zlúčeniny
Boc-(R)Cha-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-OH rovnakým spôsobom ako je opísaný pre Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z) (vid príklad 65(ic)).
(ii) Spôsob výroby H-(R)Cha-(R,S)Pic(4,5-dehydro)~Nag(Z)
Zlúčenina pomenovaná v nadpise sa vyrobí rovnakým spôsobom ako je opísaný pre H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (viď príklad 3).
(iii) Spôsob výroby zlúčeniny BnOOC-CH2-(R)Cha-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí zo zlúčeniny H-(R)Cha-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-Nag(Z) podlá spôsobu opísaného v príklade 4.
(iv) Spôsob výroby zlúčeniny HOOC-CH2-(R)Cha-(R alebo S)Pic(4,5-dehydro)-Nag/b x HOAc
Zmes 356 mg (0,539 mmol) zlúčeniny BnOOC-CH2~(R)Cha-(R,S)Pic-(4,5-dehydro)-Nag(Z), 10,8 ml kyseliny trifluóroctovej a 3,4 ml tioanisolu sa mieša pri teplote miestnosti počas 3,5 hodiny. K reakčnej zmesi sa pridá voda a zmes sa premyje dvakrát dichlórmetánom a rozpúšťadlo sa odparí. Získa sa zlúčenina HOOC-CH2-(R)Cha-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-Nag. Zlúčenina pomenovaná v nadpise sa získa delením diastereomérov vysoko účinnou kvapalinovou chromátografiou s reverznou fázou, pri eluovaní zmesou acetonitrilu a 0,1-molárnemu roztoku octanu amónneho v pomere 3:7 a potom odstránením vody lyofilizáciou, po odparení rozpúšťadla. Diastereomér sa eluuje z kolóny ako druhý z oboch diastereomérov.
^H-NMR spektrum (300 MHz, D2O): δ 0,85 až 1,95 (m, 15H),
2,50 až 2,80 (m, 2H), 3,25 (t, 2H), 3,35 (t, 2H), 3,55 (široký s, 2H), 3,85 až 4,6 (m, 3H), 4,92 (minoritný rotamer), 5,30 (d, 1H),
5,85 až 6,1 (m, 2H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, D20): guanidín: δ 157,59, karbonylové uhlíky: δ 171,46, 172,58 a 173,03 ppm.
Príklad 82
Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag x 2 HC1 (i) Spôsob výroby Boc-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z Boe-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-OH rovnakým spôsobom, ako je opísaný pre Boe-(R)Cha-Pic-Nag(Z), v súlade so spôsobom podľa príkladu 65(ic).
(ii) Spôsob výroby H-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag(Z)
Zlúčenina pomenovaná v nadpise sa vyrobí rovnakým spôsobom ako je opísaný pre H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (viď príklad 3).
(iii) Spôsob výroby BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z H-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag(Z) podľa spôsobu opísaného v príklade 4.
(iv) Spôsob výroby HOOC-CH2~(R)Cha-Pic(4-(R)Me)-Nag x 2 HC1 , Zlúčenina sa vyrobí aplikáciou spôsobu (d) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (iii) uvedený vyššie.
1H-NMR spektrum (500 MHz, D20): δ 0,95 až 2,05 (m, 22H, z toho 1,05 (d, 3H)), 2,30 až 2,38 (široký d, 1H), 3,28 až 3,36 (m, 2H), 3,36 až 3,50 (m, 3H), 3,85 až 3,95 (m, 1H), 3,98 (s, 2H),
4,70 až 4,90 (m, 1H, čiastočne prekryté H-O-D signálmi), 5,22 až
5,27 (d, 1H), signál minoritného rotameru sa ukazuje pri δ 0,93,
3,13 a 4,57 ppm.
13C-NMR spektrum (125 MHz, D20): guanidín: δ 157,58, karbonylové uhlíky: δ 171,12, 170,32 a 172,82 ppm.
Príklad 83
Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag x 2 HCI (i) Spôsob výroby Boc-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z Boe-(R)Cha-Pic(4-(R)Me)-OSu a Boc-Nag(Z) rovnakým spôsobom, ako je opísaný pre Boc-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (viď príklad 3).
(ii) Spôsob výroby H-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag(Z)
Zlúčenina pomenovaná v nadpise sa vyrobí rovnakým spôsobom, ako je opísaný pre H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (viď príklad 3).
(iii) Spôsob výroby Bn00C-CH2-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z H-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag(Z) podlá spôsobu opísaného v príklade 4.
(iv) Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Cha-(R)Pic(4-(R)Me)-Nag x 2 HCI
Zlúčenina sa vyrobí aplikáciou spôsobu (d) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (iii) uvedený vyššie.
XH-NMR spektrum (500 MHz, D2O): δ 1,00 až 2,05 (m, 22H),
2,18 až 2,26 (široký d, 1H), 3,28 až 3,36 (m, 2H), 3,36 až 3,55 (m, 3H), 3,85 až 4,05 (m, 3H), 4,70 až 4,90 (m, 1H, čiastočne prekryté H-O-D signálmi), 5,35 až 5,30 (d, 1H), signály minoritného rotameru sa ukazujú pri δ 2,40, 2,90, 4,10, 4,42,
4,55 a 5,23 ppm.
X3C-NMR spektrum (125 MHz, D20): guanidín: δ 157,56, karbonylové uhlíky: δ 169,69, 169,84 a 173,20 ppm.
100
Príklad 84
Spôsob výroby HOOC-CH2·(R)Cgl-Pic-Nag x 2 HC1 (i) Spôsob výroby Boc-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z Boc-(R)Cgl-Pic-OH rovnakým spôsobom, ako je opísaný pre Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z), a to podľa spôsobu uvedeného v príklade 65 (ic).
1H-NMR spektrum (300 MHz, CDC13): δ 0,9 až 1,8 (m, 27H), 2,4 • (d, 1H), 3,1 až 3,3 (m, 5H), 3,9 (d, 1H), 4,2 (t, 1H), 5,1 (s, 2H), 5,2 (široký d, 2H), 6,7 až 7,4 (m, 9H) ppm.
(ii) Spôsob výroby H-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)
Roztokom 1,38 g (2,22 mmol) Boc-(R)Cgl-Pic~Nag(Z) v 25 ml etylacetátu sa prebubláva plynný chlorovodík. Po 10 minútach sa rozpúšťadlo odparí a odparok sa rozpustí v etylacetáte a 10% roztoku uhličitanu sodného. Organická fáza sa oddelí, premyje roztokom chloridu sodného a vysuší síranom horečnatým. Odparením rozpúšťadla sa získa 1,02 g zlúčeniny pomenovanej v nadpise. Výťažok je 92 % teórie.
1H-NMR spektrum (300 MHz, MeOD): δ 1,0 až 1,9 (m, 18H), 2,2 ' až 2,3 (m, 1H), 3,2 až 3,3 (m, 5H), 3,6 (d, 1H), 3,8 až 3,9 (široký d, 1H), 4,2 (t, 1H), 4,7 až 4,8 (široký s, 5H), 5,1 (s,
2H), 5,2 (s, 1H), 7,2 až 7,3 (m, 5H) ppm.
(iii) Spôsob výroby BpOOC-CH9-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)
I
Roztok 291 mg (0,98 mmol) esteru kyseliny trifluórmetánsulfónovej s benzylglykolom v 2 ml dichlórmetánu sa pridá pri teplote -25 °C k miešanej zmesi 0,52 g (1,04 mmol) H-(R)Cgl-Pic-Nag(Z) v 494 mg (3,58 mmol) uhličitanu draselného v 5 ml acetonitrilu a 1 ml dichlórmetánu. Počas kopulácie sa za 1 hodinu teplota nechá vystúpiť na teplotu miestnosti a po 5 dňoch
101 sa reakčná zmes zriedi vodou a extrahuje etylacetátom a toluénom. Organická fáza sa vysuší síranom horečnatým a rozpúšťadlo sa odparí. Získa sa 319 mg bezfarebných kryštálov. Výťažok je 47 % teórie.
XH-NMR spektrum (500 MHz, CDC13): δ 1,0 až 1,1 (m, 1H), 1,1 až 1,3 (m, 4H), 1,35 až 1,6 (m, 5H), 1,6 až 1,85 (m, 8H), 1,8 až
2,2 (Široký S, 1H), 2,23 až 2,5 (rn, 2H), 2,9 (t, 1H), 3,1 až 3,5 (m, 6H), 3,6 až 3,7 (m, 2H), 5,0 až 5,1 (m, 4H), 5,2 (s, 1H), 6,5 až 7,4 (m, 13H) ppm.
(iv) Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Cgl-Pic-Nag x 2 HC1
319 mg (0,49 mmol) BnOOC-CH2~(R)Cgl-Pic-Nag(Z) sa rozpustí pri zahrievaní v 50 ml izopropanolu a 5 ml vody a hydrogenuje na 228 mg 10 % palládia na uhlí počas 24 hodín. Po filtrácii a odparení rozpúšťadla s nasledujúcim rozpustením v kyseline chlorovodíkovej sa uskutoční lyofilizácia. Vo forme bieleho prášku sa izoluje 223 mg peptidu. Výťažok je 91 % teórie.
XH-NMR spektrum (500 MHz , ^2θ : δ 1,1 až 2,1 (m, 18H), 2,3
(d, 1H), 3,3 (t, 2H), 3,4 (t, 3H) , 3,85 až 4,05 (m, 3H) ' 4'6 (d,
1H), 5,15 (s, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum ( 75 MHz, D2°): guanidín: δ 157, ,43,
karbonylové uhlíky: δ 169, 2 a 172,94 ppn.
Príklad 85
Spôsob výroby H-(R)Hoc-Pro-Nag x 2 TFA i
(i) Spôsob výroby Boc-(R)Hoc-Pro-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z Boe-(R)Hoc-Pro-OH rovnakým spôsobom, ako je opísaný pre Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z) a to podlá príkladu 65(ic).
102 (ii) Spôsob výroby H-(R)Hoc-Pro-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom ako je opísaný pre H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (viď príklad 3).
(iii) Spôsob výroby H-(R)Hoc-Pro-Nag x TFA
Zlúčenina sa vyrobí aplikáciou spôsobu (a) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (ii) uvedený vyššie.
1H-NMR spektrum (300 MHz, D2O) : δ 0,90 až 1,05 (m, 2H), 1,16 až 1,48 (m, 6H), 1,48 až 1,84 (m, 6H), 1,84 až 2,24 (m, 6H), 2,40 (m, 1H), 3,25 až 3,45 (m, 4H), 3,74 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 4,42 (m, 1H), 4,51 (m, 1H) ppm.
Príklad 86
Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Hoc-Pro-Nag x HOAc (i) Spôsob výroby BnOOC-CH2~(R)Hoc-Pro-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z H-(R)Hoc-Pro-Nag(Z) (viď príklad 85) podľa spôsobu opísaného v príklade 4.
(ii) Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Hoc-Pro-Nag x HOAc
Zlúčenina sa vyrobí aplikáciou spôsobu (a) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (i) uvedený vyššie.
1H-NMR spektrum (300 MHz, D2O) : δ 0,76 až 0,97 (m, 2H), 1,00 až 1,37 (m, 6H), 1,50 až 2,12 (m, 12H), 1,89 (s, acetát), 2,27 (m, 1H), 3,10 až 3,33 (m, 4H), 3,41 (široký s, 2H), 3,61 (m, 1H),
3,77 (m, 1H), 4,12 (m, 1H), 4,37 (m, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (75 MHz, karbonylové uhlíky: δ 170,8, 173,9 a
D20): guanidín:
174,5 ppm.
δ 157,4,
103
Príklad 87
Spôsob výroby H00C-CH2~(R)Hoc-Pic-Nag x HOAc (i) Spôsob výroby Boc-(R)Hoc-Pic-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z Boc-(R)Hoc-Pic-OH rovnakým spôsobom, ako je opísaný pre Boc-(R)Chaa-Pic-Nag(Z) a to spôsobom podľa príkladu 65(ic).
(ii) Spôsob výroby H-(R)Hoc-Pic-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom ako je opísaný pre H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (viď príklad 3).
(iii) Spôsob výroby BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí podľa spôsobu opísaného v príklade 4.
(iv) Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Nag x HOAc
Zlúčenina sa vyrobí pri aplikácii spôsobu (a) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (iii) uvedený vyššie.
1H-NMR spektrum (300 MHz, D2O): δ 0,75 až 0,95 (m, 2H), 1,00 .až 1,30 (m, 6H), 1,30 až 1,50 (m, 2H), 1,50 až 1,82 (m, 12H),
1,82 až 1,95 (široký s, acetát), 2,23 (široký d, 1H), 3,08 až
3,32 (m, 6H), 3,52 (široký s, 2H), 3,77 (široký d, 1H), 4,50 (široký s, 1H), 5,00 (široký s, 1H) ppm.
Príklad 88 1
Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Dph-Pic-Nag x 2 HC1 (i) Spôsob výroby Boc-(R)Dph-Pic-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z Boc-(R)Dph-Pic-OH rovnakým spôsobom, ako je opísaný pre Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z) (podľa príkladu 65(ic)).
104 (ii) Spôsob výroby H-(R)Dph-Pic-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom ako je opísaný pre H-(R)Cgl-Pic-Agm(Z) (viď príklad 84(ii)).
(iii) Spôsob výroby BnOOC-CH2-(R)Dph-Pic-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z H-(R)Dph-Pic-Nag(Z) podľa spôsobu opísaného v príklade 4.
(iv) Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Dph-Pic-Nag x 2 HC1
Zlúčenina sa vyrobí pri aplikácii spôsobu (d) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (iii) uvedený vyššie).
1H-NMR spektrum (500 MHz, D20): δ 0,46 (m, 1H), 1,2 až 1,35 (m, 2H), 1,45 (m, 1H), 1,53 (m, 1H), 1,89 (pentet, 2H), 2,03 (široký d, 1H), 3,24 (široký t, 1H), 3,29 (t, 2H), 3,38 (t, 2H),
3,72 (d, 1H), 3,78 (d, 1H), 3,79 (m, 1H), 4,68 (d, 1H), 4,89 (m, 1H), 5,73 (d, 1H), 7,4 až 7,6 (m, 6H), 7,65 (t, 2H), 7,81 (d, 2H) ppm.
Príklad 89
Spôsob výroby HOOC-CH2-(R)Dch-Pic-Nag x HOAc (i) Spôsob výroby Boc-(R)Dch-Pic-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí z Boc-(R)Dch-Pic-OH rovnakým spôsobom, ako je opísaný pre Boc-(R)cha-Pic-Nag(Z) (podľa príkladu 65(ic)).
I (ii) Spôsob výroby H-(R)Dch-Pic-Nag(Z)
Zlúčenina sa vyrobí rovnakým spôsobom ako je opísaný pre H-(R)Cgl-Pic-Nag(Z) (viď príklad 84(ii)).
(iii) Spôsob výroby BnOOC-CH2-(R)Dch-Pic-Nag(Z)
105
Zlúčenina sa vyrobí z H-(R)Dch-Pic-Nag(Z) podlá spôsobu opísaného v príklade 4.
(iv) Spôsob výroby HOOC-CH2~(R)Dch-Pic-Nag x HOAc
Zlúčenina sa vyrobí aplikáciou spôsobu (a) odstránenia chrániacej skupiny na produkt (iii) uvedený vyššie.
3H-NMR spektrum (500 MHz, D20): δ 1,2 až 2,0 (m, 30H), 2,09
- (s, acetát), 2,30 (široký d, 1H), 3,32 (t, 2H), 3,4 až 3,5 (m,
3H), 3,65 (d, 1H), 3,70 (d, 1H), 3,86 (široký d, 1H), 4,86 (m, • 1H), 5,09 (m, 1H) ppm.
13C-NMR spektrum (125 MHz, D20): guanidín: δ 159,4, karbonylové uhlíky: δ 172,5, 173,3 a 174,9 ppm.
Príklad PI
Roztok na parenterálne podanie
Roztok sa pripraví z týchto zložiek:
HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag x 2 HBr chlorid sodný na injekcie kyselina octová voda na injekcie do 1000 ml
Účinná zložka, chlorid sodný a kyselina octová sa rozpustia vo vode. Hodnota pH sa upraví 2-molárnym roztokom hydroxidu sodného na 3 až 7. Roztok sa filtruje cez sterilný filter 0,2 μπι a pri aseptických podmienkach plní do sterilných ampulí.
Príklad P2
Tablety na orálne podanie
1000 tabliet sa pripraví z týchto zložiek:
106 trombinový inhibitor laktóza
100
200.
polyvinylpyrrolidon mikrokryštalická celulóza stearát horečnatý laktóza
Zmes sa primieša sa zmiešajú s suší a melie na mikrokryštalická vodným roztokom formu granulí a celulóza a nato
Účinná zložka a polyvinylpyrrolidónu.
potom sa ku granuliam stearát horečnatý. Zmes sa potom lisuje na tabletovacom stroji a ★ získa sa 1000 tabliet, z ktorých každá obsahuje 100 mg účinnej zložky.
Biologické skúšky
Stanovenie doby zrážania trombínu a IC50TT
Ľudský trombín (T 6769, Sigma Chem. Co.) v 100 μΐ roztoku pufru s hodnotou 7,4 a 100 μΐ inhibítorového roztoku sa inkubuje počas 1 minúty. K roztoku sa potom pridá 100 μΐ zásobnej normálnej ľudskej plazmy spracovanej s citrátom a meria sa doba zrážania na automatickom prístroji KC 10 (Amelung).
a
Doba zrážania, vyjadrená v sekundách, sa vynesie proti λ koncentrácii inhibítoru a hodnoty IC5QTT sa stanoví interpoláciou.
IC50TT predstavuje koncentráciu inhibítora, ktorá vedie k dvojnásobnej dobe zrážania trombínu pre ľudskú plazmu. pIC5QTT je -log 10 z IC^qTT v mol/1. Výhodné zlúčeniny podľaa 'tohoto vynálezu majú hodnoty pIC5QTT v rozmedzí od 6,6 do 8,2.
Stanovenie doby čiastočného aktivovania tromboplastínu (APTT)
APTT sa stanovuje v zásobní normálnej ľudskej plazmy spracovanej s citrátom, ktorá bola uvedená do styku s reakčným
107 činidlom PTT Automated 5, vyrábaným firmou Stago. K inhibitorom sa pridá plazma (10 μΐ inhibítorového roztoku na 90 μΐ plazmy) a APTT sa meria v zmesi za použitia analyzátora koagulácie KC 10 (Amelung) podlá inštrukcií výrobcu reakčného činidla. Doba zrážania, vyjadrená v sekundách, sa vynesie proti koncentrácii inhibítoru v plazme a hodnoty IC5qAPTT sa stanovia interpoláciou.
IC50APTT je definovaný ako koncentrácia inhibítora v plazme, ktorá vedie k dvojnásobnej dobe čiastočného aktivovania tromboplastínu. pIC55QPTT je -log 10 z IC50ÄPTT v mol/1. Zo zlúčenín sú výhodné zlúčeniny podlá tohoto vynálezu, u ktorých testy ukazujú hodnoty pIC^gAPTT v rozmedzí od 5,1 do 6,4.
Prehľad všeobecne používaných skratiek
Agm = agmatín
Agm(Z) = oo-N-benzyloxykarbonylagmatín
AA-^ = aminokyselina 1
AA2 = aminokyselina 2
Aze = kyselina (S)-azetidín-2-karboxylová
Bla = α-substituovaný butyrolaktón
Boe = terc.-butoxykarbonyl
Bu = butyl
Bn = benzyl
Cgl = (S)-cyklohexylglycín
Ch - cyklohexyl
Cha = (S)-β-cyklohexylalanín
CME-CDI = meto-p-toluénsulfonát ,l-cyklohexyl-3-(2-morfolinoetyl)karbodiimidu
DCC = dicyklohexylkarbodiimid
Dch = (S)-dicyklohexylalanín
DMAP = N,N-dimetylamínopyridín
DMF = dimetylformamid
DMSO = dimetylsulfoxid
Dph = (S)-difenylalanín
EDC = hydrochlorid l-(3-dimetylamínopropyl)-3-etylkarbodiimidu
108
Et = etyl
EtOAc = etylacetát
HOAc = kyselina octová
HOBt = N-hydroxybenzotriazol
Hoc = (S)-homocyklohexylalanín
Hop = HOSu = (S)-homofenylalanín N-hydroxysukcinimid
Mag = Me = miniagmatín metyl
Mor = kyselina (S)-morfolín-2-karboxylová
MPa = tlak vyjadrený v 106 pascalu
Nag = Nag(Z) = NMM = noragmatín 8-N-benzyloxykarbonylnoragmatín N-metylmorfolín
Pgl = Ph = (S)-fenylglycín fenyl
Phe = (S)-fenylalanín
Pic = kyselina (S)-pipekolínová
Pr = propyl
Pro = (S)-prolín
RPLC = vysoko účinná kvapalinová chromatografia s reverznou fázou
Tf = trifluórmetylsulfonyl
. TFA = kyselina trifluóroctová
THF - tetrahydrofurán
. p-TsOH = Val = kyselina p-toluénsulfónová (S)-valín
Z = benzyloxykarbonyl
Prefixy n, s, i a t, prípadne n-, sek.-, izo- a terc.- majú i svoje zvyčajné významy a znamenajú normálny, izo, sekundárny a terciárny.
Schéma I (príklady 3 až 18, 20 a 21, 24 až 28, 30 až 34, 36 až
40, 43 až 49, 51 až 53, 57 až 64 a 67 až 93)
109
Boc-AA1-AA2-OH kopulácia s H-NAG(Z) alebo
H-Agm(Z)
Boc-AA1-AA2-Nag(Z) (alebo Agm(Z))
1. odstránenie chrániacej skupiny z koncového dusíka . reakcia koncového dusíka s elektrofilnou zlúčeninou (viď zvláštne príklady na detailné informácie )
AA1-AA2-Nag(Z) (alebo Agm(Z)) odstránenie chrániacej skupiny alebo skupín
AA^-AA2~Nag (alebo Agm)
ΑΑχ =H-(R)Cha-OH, Me-(R)Cha-0H, H-(R,S)Pro(3-(trans)Ph-OH, H-(R)Hoc-0H, H-(R)Cgl-OH, H-(R)Dph-OH, H-(R)Dch-OH
AA2 =H-Pro-0H, H-Pic-OH, H-Mor-OH, H-Aze-OH, H-Pic(4-(S)Me)-OH, H-Pic(4-(R)Me)-OH, H-(R,S)Pic(4,5-dehydro)-OH, H-(R)Pic(4-(R)Me)-0H, H-Pro(5-(R,S)Me)-OH, H-Pro(5-(S)Me)-OH,
H-Pic(6-(S)Me)-OH
N-koncová skupina v konečnej zlúčenine =
H, HO-(CH2)3~, nBu-, HOOC-CH2-, MeOOC-CH2-, iPrOOC-CH2-, tBuOOC-CH2-, HOOC-CH(Me)-, HOOC-CH(nPr)-, HOOC-CH(Ph), HOOC-CH(CH2CH2Ph)-, HOOC-CH2CH2-, HOOC-CH2CH2CH2-, EtOOC
110
-CH2CH2CH2-, Bla, HOOC-CH2-OOC-CH2-, EtOOC-CO-, MeOOC-CO-, hooc-co-, h2noc-ch2-, hooc-ch(ch2cooh)-, MeOOC-CH(CH2COOMe)-, HOOC-CH2-NH-CO-CH2-, HOOC-CH(CH2OH)-, (HO)2P(O)-CH2-, EtO(HO)P(O)-CH2-, (EtO)2P(O)-CH2~.
111
Schéma II (príklady 55, 56, 65 a 66)
Boe-(R,S)Pro(3-Ph)-OH
1. H-Pro-OBn, HOBt, NMM, DMF
2. H2, Pd/C
3. HOSu, CME-CDI, CHgCN
H-Agm(Z), NMM
Boc-(R,S)Pro(3-Ph)-Pro-OSu ---> Boe-(R,S)Pro(3-Ph)-Pro-Agm(Z)
DMF, tepl. mistnosti
1. TFA, CH2C12 ,,· 2. H2, Pd/C
H-(R,S)Pro(3-Ph)-Pro-Agm príklad 55
Rh/Al2O3, H2
Boe-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-OH —> Boe-(R,S)Pro(3-(trans)Ch)-OH HOAc, MeOH viz príklad 55 (uveden vyše)
Boe-(R)CharOH
H-(R,S)Pro(3-(trans)Ch)-Pro-Agm príklad 56
1. HOBt, CME-CDI, ch2ci2
2 . HClxH· -Pic-OEt, NMM, DMF
3 . LiOH, THF, H2O
4 . HOSU, DCC, DMF
Boe-(R)Cha-Pic-OSu nebo
H-Nag(Z), NMM
-------------->
Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z) nebo
DMF, tepl·. mistnosti
Boc-(Me)(R)Cha-(R,S)Pic-OSu Boc-(Me)(R)Cha-(R,S)Pic-Nag(Z)
112
l 1. HOBt, CME-CDI, CH2 C1 2
2 . HC1XH -Pic-OEt, NMM, DMF i
3 . LiOH, THF, H2O
4 . HOSu, DCC, DMF H-(R)Cha-Pic-Nag
nebo
1. TFA
2. H2, Pd/C (príklad 65)
Boc-(Me)(R)Cha-OH (Me)(R)Cha-(R,S)Pic-Nag príklad 66
113
Schéma III (príklady 1 a 2)
H-AgmxHCl, Et-jN
Boe-(R)Cha-Pro-OSu -------------—> Boe-(R)Cha-Pro-Agm
DMF, tepl. miestnosti
TFA 1 f
H-(R)Cha-Pro-Agm príklad 1
H-AgmxHCl, NMM
Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OSu -------------> Boe-(Me)(R)Cha-Pro-Agm
DMF, tepl. miestnosti
TFA
Me-(R)Cha-Pro-Agm príklad 2
114
Schéma IV (príklad 19)
H2N-(CH2)3-NH(Boc)
Z-(R)Cha-Pro-OSu ---------------> Z-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH(Boe)
NMM, DMF, tepl. miestnosti
TFA
V
Z-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2
1. 3,5,-dimetyl-l-pyrazolylformamidiniumnitrát, Et3N DMF 1' 2. H2, Pd/C
H-(R)Cha-Pro-Nag príklad 19
115
Schéma V (príklad 54)
Boe-(R)Cha-Pro-OSu h2n-(ch2)2-nh(z),
NMM, DMF, tepl. miestnosti
Boe-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)2-NH(Z)
1. TFA
2. BrCH2COOEt, CHgCN, K2CO3
EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)2~NH(Z)
1. H2, Pd/C
2. 3,5-dimetyl-l-pyrazolylformamidiniumnitrát, Et3N, DMF
3. NaOH/EtOH /;EtOOC-CH2- (R) Cha-Pro-Mag príklad 54
116
Schéma VI (príklady 22, 23,
29, 35, 41, 42 a 50)
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag príklad 22
NaOH/EtOH
EtOOC-CH2“(R)Cha-Pro-Nag príklad 23 (HOOC-CH2)2-(R)Cha-Pro-Nag príklad 29
A
NaOH/EtOH (EtOOC-CH2)2-(R)Cha-Pro-Nag
1. BrCH2COOEt, CH3CN, K2CO3
I
2. H2, Pd/C
3. 3,5-dimetyl-l-pyrazolyl-
1. BrCH2COOEt(prebytok), K2CO3, ch3cn
2. H2, Pd/C
3. 3,5-dimetyl-l-pyrazolylform- formamidiniumnitrát, amidiniumnitrát, Et3N, DMF
Et3N, DMF
Boe-(R)Cha-Pro-OSu
-> H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-N3
2. TFA
1. BrCH(Me)C00Et, K2CO3, ch3cn
2. H2, Pd/C
3. 3,5-dimetyl-l-pyrazolylformamidiniumnitrát, Et3N, DMF
1. CH2=CHCOOEt, EtOH
2. H2, Pd/C
3. 3,5-dimetyl-l-pyrazolylf ormamidiniumnitrát, Et3N, DMF
EtOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag príklad 35
EtOOCCH2CH2-(R)Cha-Pro-Nag príklad 42
117
NaOH/EtOH
H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3~N3 HOOCCH2CH2-(R)Cha-Pro-Nag príklad 41
1. tBuOOC-Ph-4-CH2Br, K2CO3, CH3CN
2. bis-fenyltiostannan, PhSH, Et3N
3. 3,5-dimetyl-l-pyrazolyl-formamidiniumnitrát, Et3N, DMF
TFA tBuOOC-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-Nag----->> HOOC-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-Nag príklad 50

Claims (30)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY (Upravené znenie , ako základ pre prieskumové konanie)
    1. Zlúčenina všeobecného vzorca I (CH2)n--B (I) v ktorom
    A predstavuje metylénovú skupinu alebo
    A znamená etylénovú skupinu a výsledný päťčlenný kruh môže alebo nemusí obsahovať jeden alebo dva atómy fluóru, hydroxyskupinu alebo oxoskupinu v polohe 4, alebo môže alebo nemusí byť nasýtený, alebo
    A predstavuje skupinu vzorca -CH2-O-, -CH2~S- alebo -CH2-SO- s funkcionalitou heteroatómu v polohe 4, alebo i
    A predstavuje n-propylénovú skupinu a výsledný šesťčlenný kruh môže alebo nemusí obsahovať jeden atóm fluóru, hydroxyskupinu alebo oxoskupinu v polohe 5, dva atómy fluóru v jednej z polôh 4 alebo 5 alebo je nenasýtený v polohe 4 a 5 alebo nesie v polohe 4 alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, alebo
    119
    A predstavuje skupinu vzorca -CH2-O-CH2-, -CH2-S-CH2~ alebo
    -ch2-so-ch2-,
    R3 predstavuje atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, hydroxyalkylovú skupinu s 2 alebo 3 atómami uhlíka ί n alebo skupinu vzorca ROOC-alkyl, kde alkyl ako alkylova skupina obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka a R11 predstavuje atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka alebo alkylénovú skupinu s 2 alebo 3 atómami uhlíka a intramolekulárne viazanú ku karbonylovéj skupine v R1, alebo
    R1 predstavuje skupinu R12OOC-1,4-fenyl-CH2~, kde R12 znamená atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, alebo
    R1 predstavuje skupinu vzorca R13-NH-CO-alkyl, kde alkyl ako alkylová skupina obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka a je prípadne substituovaná v polohe a ku karbonylovej skupine alkylovou skupinou s 1 az 4 atómami uhlíka a kde R predstavuje atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, alebo znamená skupinu vzorca -CH2COOR12, kde R12 má význam uvedený vyššie, alebo
    R1 predstavuje skupinu vzorca R12OOC-CH2-OOC-alkyl-, kde alkyl ako alkylová skupina obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka a je prípadne substituovaná v polohe a ku karbonylovej skupine alkylovou skupinou s 1 až 4 atómami uhlíka a kde R12 má význam uvedený vyššie, alebo
    Ί
    R znamena skupinu vzorca CH3SO2-, alebo
    Ί 17 19
    R predstavuje skupinu vzorca R OCOCO-, kde R má význam uvedený vyššie, alebo
    R1 predstavuje skupinu vzorca -CH2PO(OR14)2, -CH2SO3H alebo
    -CH2-/5(lH)-tetrazolyl/, kde R14 znamená jednotlivo za všetkých okolností atóm vodíka, metylovú alebo etylovú skupinu,
    120
    R2 znamená atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlín η ka, alebo skupinu vzorca R OOC-alkyl-, kde alkyl ako alkylová skupina obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka a je prípadne substituovaná v polohe a ku karbonylovej skupine, a substituentom v polohe a je skupina vzorca R22-(CH2)p-, kde * 9 9 p predstavuje číslo 0 az 2a R znamena metyl, fenyl, hydroxyskupinu alebo skupinu vzorca COOR x a kde R znamena atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, m znamená číslo 0, 1 alebo 2, o z
    R predstavuje cyklohexylovú skupinu a
    R4 znamená atóm vodíka, alebo m znamená číslo 1,
    R3 predstavuje cyklohexylovú alebo fenylovú skupinu a
    R4 tvorí etylénový mostík dohromady s R1, alebo m znamená číslo 1 a
    R3 a R4 predstavujú vždy cyklohexylovú alebo fenylovú skupinu,
    R z z v
    R znamena atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s 1 az 4 atómami uhlíka, n znamená celé číslo od 2 do 6 a
    B predstavuje skupinu vzorca -N(R6)-C(NH)-NH2, kde R6 znamená atóm vodíka alebo metylovú skupinu, alebo
    B znamená skupinu vzorca -S-C(NH)-NH2 alebo -C(NH)-NH2, pričom zlúčenina je bud’ ako taká alebo vo forme fyziologicky prijateľnej soli a zahrňujúce izoméry.
  2. 2. Zlúčenina podlá nároku 1, kde Rx predstavuje skupinu Ί Ί vzorca R OOC-alkyl-, kde alkyl ako alkylova skupina obsahuje 1 . / / Ί Ί - * az 4 atómy uhlíka a R predstavuje atóm vodíka.
    121 > - 5
  3. 3. Zlúčenina podlá nároku 2, kde A predstavuje etylen a R znamená atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka.
  4. 4. Zlúčenina podľa nároku 2, kde A predstavuje n-propylén a výsledný šesťčlenný kruh môže alebo nemusí mať v polohe 4 alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka a R5 predstavuje atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka.
  5. 5. Zlúčenina podľa aspoň jedného z predchádzajúcich nárokov, kde R3 predstavuje cyklohexylovú skupinu, m znamená číslo 1 alebo ‘ 2 a R4 predstavuje atóm vodíka.
  6. 6. Zlúčenina podľa aspoň jedného z prechdádzajúcich nárokov, kde n znamená číslo 3.
  7. 7. Zlúčenina podľa aspoň jedného z predchádzajúcich nárokov, ktorá má S-konfiguráciu na α-amínokyseline v polohe P2.
  8. 8. Zlúčenina podľa nároku 7, ktorá má R-konfiguráciu na α-mínokyseline v polohe P3.
  9. 9. Zlúčenina zvolená zo súboru zahrňujúceho
    H-(R)Cha-Pro-Agm . Me-(R)Cha-Pro-Agm
    HO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Agm iprOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Agm
    HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm
    HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm/a
    HOOC-(R alebo S)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm/a
    HOOC-(R alebo S)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm/b
    HOOC-(R alebo S)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/b
    HOOC-(R,S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm
    HOOC-(R alebo S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/a
    HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm
    EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Agm
    122 (R,S)Bla-(R)Cha-Pro-Agm
    HOOC-(R alebo S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/b H-(R)Cha-Pro-Nag nBu-(R)Cha-Pro-Nag
    HO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag iprOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag tBuOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-CH2-OOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag (HOOC-CH2)2-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-CH2-(nBu)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/a EtOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-(R alebo S)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Nag/a HOOC-(R)CH(CH2-OH)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-(R,S)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-(S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-(R)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Nag EtOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag EtOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag MeOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag (R,S)Bla-(R)Cha-Pro-Nag
    HOOC-(R,S)CH(CH2COOH)-(R)Cha-Pro-Nag MeOOC-(R,S)CH(CH2COOMe)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-Nag (HO)2P(0)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag EtO(HO)P(O)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag (EtO)2P(O)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Mag H-(R,S)Pro(3-Ph)-Pro-Agm
    H-(R,S)Pro(3-(trans)Ch)-Pro-Agm
    123
    HOOC-CH2-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-Agm
    HOOC-CH2-(R,S)Pro(3-(trans)Ph)-Pro-Nag
    HOOC-CH2(Me)-(R)Cha-(R,S)Pic-Agm
    HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm
    HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm/a
    HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Agm
    H-(R)Cha-Pic-Nag
    Me-(R)Cha-(R,S)Pic-Nag
    MeOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag iPrOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag
    HOOC-CH2(Me)-(R)Cha-(R alebo S)Pic-Nag/b
    HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-(R,S)Pic-Nag
    HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-(R alebo S)Pic-Nag/c
    HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Nag
    HOOC-CH2-(R)Cha-(R,S)Mor-Agm
    HOOC-CH2-(R)Cha-(R alebo S)Mor-Nag
    H-(R)Cha-Aze-Nag
    HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Nag
    H-(R)Cha-Pro-(5-(S)Me)-Nag
    HOOC-CH2“(R)Cha-(R alebo S)Pic(4,5-dehydro)-Nag/b
    HOOC-CH2-(R)Cha-(R)Pic-(4-(R)Me)-Nag
    HOOC-CH2-(R)Cgl-Pic-Nag
    H-(R)Hoc-Pro-Nag
    HOOC-CH2-(R)Hoc-Pro-Nag
    HOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Nag
    HOOC-CH2-(R)Dph-Pic-Nag
    HOOC-CH2-(R)Dch-Pic-Nag
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pro(5-(R,S)Me)-Nag
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(4-(R)Me)-Nag
    H-(R)Cha-Pic(4-(R)Me)-Nag
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pic(6-(S)Me)-Nag, pričom zlúčenina je buď ako taká alebo vo forme fyziologicky prijateľnej soli a zahrňujúce izoméry.
    124
  10. 10. Zlúčenina zvolená zo súboru zahrňujúceho
    H00C-CH2-(R)Cha-Pro-Agm
    HOOC-CH2-(Me)-(R)Cha-Pro-Agm HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm/b
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Agm
    HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm/b
    HOOC-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-(R alebo S)Pic-Nag/d
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pro(5-(S)Me)-Nag
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pic(4-(S)Me)-Nag pričom zlúčenina je buď ako taká alebo vo forme fyziologicky prijateľnej soli a zahrňujúce izoméry.
  11. 11. Zlúčenina HOOC-CH2-(Me)-(R)Cha-Pro-Nag, buď ako taká alebo vo forme fyziologicky prijateľnej soli a zahrňujúce izoméry.
  12. 12. Zlúčenina H00C-(R alebo S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/b, buď ako taká alebo vo forme fyziologicky prijateľnej soli a zahrňujúce izoméry.
  13. 13. Zlúčenina HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag, buď ako taká alebo vo forme fyziologicky prijateľnej soli a zahrňujúce izoméry.
  14. 14. Spôsob výroby zlúčeniny podľa niektorého z nárokov 1 až
    13,vyznačujúci sa tým, že sa kopuluje N-koncovo chránená aminokyselina alebo dipeptid alebo vopred vyrobený N-koncovo alkylovaný chránený dipeptid na zlúčeninu všeobecného vzorca 1 h2n-(ch2)n-x, v ktorom n znamená celé číslo od 2 do 6 a
    125
    X predstavuje nechránenú alebo chránenú guanidinoskupinu, chránenú aminoskupinu alebo skupinu, ktorú je možné premeniť na aminoskupinu, pričom aminoskupina sa následne prevedie na guanidinoskupinu, a pokiaľ je žiaduce, vyrobí sa fyziologicky prijateľná soľ, a v takýchto prípadoch, keď má reakcia za výsledok zmes stereomérov, tieto stereoméry sa prípadne delia štandardným chromatografickým alebo rekryštalizačným technickým postupom, a ak je žiadúce, izoluje sa jediný stereomér.
  15. 15. Spôsob podľa nároku 14, na výrobu zlúčeniny podľa niektorého z nárokov 1 až 13,vyznačujúci sa tým, že
    a) (spôsob I) kopuluje sa chráneným alebo nechráneným priamym reťazcom, pri chránení konci alkylového reťazca, za kopulácie, znázornenej vzorcami
    N-koncovo chránený dipeptid, s buď guanidínom alebo alkylamínom s alebo maskovaní amínoskupiny na použitia štandarnej peptidovej
    R5
    NH-(CH2)n-X
    126 v ktorých vzorcoch
    R3, R4, R5, n t m a A majú významy uvedené pod všeobecným vzorcom I,
    R6 znamená atóm vodíka alebo alkylovú skupinu,
    W3 znamená skupinu chrániacu aminoskupinu, ako je terc.-butoxykarbonyl a benzyloxykarbonyl a
    X znamená skupinu vzorca -NH-C(NH)NH2, -NH-C(NH)NH-W2, -N(W2)-C(NH)NH-W2, -NH-C(NW2)NH-W2 alebo -NH-W2, kde W2 znamená skupinu chrániacu aminoskupinu, ako je terc.-butoxykarbonyl a benzyloxykarbonyl, alebo
    X znamená maskovanú aminoskupinu, ako je azidový zvyšok za vzniku chráneného peptidu, alebo
    b) (spôsob II) kopuluje sa N-koncovo chránená aminokyselina, s buď chráneným alebo nechráneným amínoguanidinom alebo alkylamínom s priamym reťazcom, pri chránení alebo maskovaní amínoskupiny na konci alkylového reťazca, za použitia štandardnej peptidovej kopulácie, znázornenej vzorcami
    R5
    W-
    H2N-(CH2)n-X
    127 v ktorých vzorcoch
    Wj, Ä, R a X majú význami uvedené vyššie, s nasledujúcim odstránením aminokyselinou v chránenej skupiny Wj a kopuláciou s forme, alebo
    N-koncovou
    c) (spôsob III) kopuluje sa vopred vyrobený N-koncovo alkylovaný alebo chránený dipeptid, vyrobený štandardnou peptidovou kopuláciou, s buď chráneným alebo nechráneným amínoguanidínom alebo alkylamínom s priamym reťazcom, pri chránení alebo maskovaní amínoskupiny na konci alkylového reťazca, za použitia štandardnej peptidovej kopulácie, znázornenej vzorcami
    H2N-(CH2)n-X
    I
    128
    Ο
    NH-(CH2)n-X v ktorých vzorcoch
    R2, R3, R4, R5, n, m, A a X majú významy uvedené vyššie, s podmienkou že R2 má iný význam ako atóm vodíka a
    W3 znamená acylovú chrániacu skupinu, ako trifluóracylová skupina, na čo sa vyrobia konečné zlúčeniny lubovolným z ďalej uvedených spôsobov, v závislosti na povahe použitej skuiny X- a to odstránením chrániacej skupiny alebo chrániacich skupín, pokial X- znamená skupinu vzorca -NH-C(NH)NH2, -NH-C(NH)NH-W2, -N(W2)-C(NH)NH-W2 alebo -NH-C(NW2)NH-W2, alebo selektívnym odstránením chrániacej skupiny Wj-, napríklad pokial X znamená skupinu vzorca -NH-C(NH)NH-W2, -N(W2)-C(NH)NH-W2 alebo
    -NH-C(NW2)NH-W2, kde W2 v tomto prípade musí byť umiestnený ortogonálne k Wp s nasledujúcou alkyláciou N-koncového dusíka a odstránením alebo selektívnym odstránením chrániacich skupín alebo odmaskovaním koncovej alkylamínovej funkcie, pokial X znamená skupinu vzorca -NH-W2, kde W2 v tomto prípade musí byť
    I umiestnený ortogonálne k W3 a W3, alebo X znamená maskovanú amínoskupinu, ako je azidový zvyšok, s nasledujúcou guanidizačnou reakciou volného amínu, za použitia štandardných spôsobov, a odstránením skupiny Wj- alebo W3~, a pokiaľ je žiadúce, vyrobí sa fyziologicky prijateľná soľ, a v takýchto prípadoch, keď má reakcia za výsledok zmes stereomérov, tieto stereoméry sa prípadne delia štandardným chromatografickým alebo
    12.9 rekryštalizačným technickým postupom, a ak je žiadúce, izoluje sa jediný stereomér.
    buď ako takej alebo vo forme soli a ako takej alebo obsahujúcej guanidinoskupinu, buď raz chránené na δ-dusíku alebo dvakrát chránené na δ-dusíkoch alebo τ,δ-dusíkoch, ako východzie zlúčeniny na syntézu serinproteázového inhibitora a obzvlášť na syntézu trombínového inhibitora.
  16. 17. Použitie podlá nároku 16, 26 a 27, vyznačujúce sa t ý m, že serinproteázovým inhibítorom je peptidová zlúčenina.
  17. 18. Zlúčenina podlá niektorého z nárokov 1 až 13 na použitie v terapii.
  18. 19. Zlúčenina podlá nároku 1.8 na použitie ako antikoagulačný a antitrombotický prípravok.
  19. 20. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje účinné množstvo zlúčeniny podl'a nároku 1 až 13 dohromady s aspoň jednou farmaceutickou nosnou látkou.
    ! :
  20. 21. Farmaceutický prostriedok podlá nároku 20 na použitie ako antikoagulačný a antitrombotický prípravok.
  21. 22. Použitie zlúčeniny podlá niektorého z nárokov 1 až 13 ako účinnej látky na výrobu farmaceutického prostriedku na inhibíciu trombínu v ľudskom alebo zvieracom organizme.
    130
  22. 23. Spôsob dosahovania inhibicie trombínu v ludskom alebo zvieracom organizme, ktorý potrebuje takúto inhibíciu, vyznačujúci sa tým, že sa tomuto organizmu podá inhibične účinné množstvo zlúčeniny podlá niektorého z nárokov 1 až 13.
  23. 24. Spôsob ošetrovania alebo profylaxie trombózy a hyperkoagulovatelnosti v krvi a tkanivách v ludskom alebo zvieracom organizme, vyznačujúci sa tým, že sa pacientovi potrebujúcemu takéto ošetrenie alebo profylaxiu podá účinné množstvo zlúčeniny podlá niektorého z nárokov 1 až 13.
  24. 25. Zlúčenina, spôsob , farmaceutický prostriedok, použitie a spôsob použitia podlá niektorého z nárokov 1 až 24 a v podstate ako je opísané.
  25. 26. Použitie podlá nároku 16,vyznačujúce sa tým, že zlúčeninou je S-N-benzyloxykarbonylnoragmatín, buď ako taký alebo vo forme soli, alebo ktorý má chránený δ- alebo T-dusík.
  26. 27. Použitie podlá nároku 26,vyznačujúce sa tým, že zlúčeninou je a-N-terc.-butoxykarbonyl-6-N-benzyloxykarbonylnoragmatín, buď ako taký alebo vo forme soli, alebo ktorý má chránený δ alebo τ-dusík.
  27. 28. Zlúčenina δ-Ν-benzyloxykarbonylnoragmatín, buď ako taký alebo vo forme soli, alebo ktorý má chránený δ- alebo τ-dusík.
  28. 29. Zlúčenina podlá nároku 28, ktorou je δ-Ν-benzyloxykarbonylnoragmatín.
    í
  29. 30. Zlúčenina a-N-terc.-butoxykarbonyl-6-N-benzyloxykarbonylnoragmatín, buď ako taký alebo vo forme soli, alebo ktorý má chránený δ alebo τ-dusík.
  30. 31. Zlúčenina podlá nároku 30, ktorou je a-N-terc.-butoxykarbonyl-δ-N-benzyloxykarbonylnoragmatín.
SK631-94A 1991-12-04 1992-12-01 Peptide derivatives SK63194A3 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE9103612A SE9103612D0 (sv) 1991-12-04 1991-12-04 New peptide derivatives
PCT/SE1992/000832 WO1993011152A1 (en) 1991-12-04 1992-12-01 New peptide derivatives

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SK63194A3 true SK63194A3 (en) 1994-12-07

Family

ID=20384531

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK631-94A SK63194A3 (en) 1991-12-04 1992-12-01 Peptide derivatives

Country Status (27)

Country Link
US (4) US5614499A (sk)
EP (1) EP0618926B1 (sk)
JP (1) JP3306826B2 (sk)
CN (1) CN1076199A (sk)
AP (1) AP353A (sk)
AT (1) ATE190066T1 (sk)
AU (2) AU670052B2 (sk)
CA (1) CA2125175C (sk)
CZ (2) CZ333895A3 (sk)
DE (1) DE69230727T2 (sk)
EE (1) EE9400455A (sk)
FI (1) FI115770B (sk)
HU (1) HUT70431A (sk)
IL (1) IL103910A0 (sk)
IS (1) IS3954A (sk)
MA (1) MA22729A1 (sk)
MX (1) MX9206938A (sk)
NO (1) NO311361B1 (sk)
NZ (2) NZ246106A (sk)
SE (1) SE9103612D0 (sk)
SI (1) SI9200363A (sk)
SK (1) SK63194A3 (sk)
TN (1) TNSN92109A1 (sk)
TW (1) TW223078B (sk)
WO (1) WO1993011152A1 (sk)
YU (1) YU104592A (sk)
ZA (1) ZA929099B (sk)

Families Citing this family (73)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6534536B1 (en) 1994-03-16 2003-03-18 Bristol-Myers Squibb Company Alkylsulfonamido heterocyclic thrombin inhibitors
US5583146A (en) * 1992-12-02 1996-12-10 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic thrombin inhibitors
SE9301916D0 (sv) * 1993-06-03 1993-06-03 Ab Astra New peptides derivatives
US6984627B1 (en) 1993-06-03 2006-01-10 Astrazeneca Ab Peptide derivatives
SE9900043D0 (sv) * 1999-01-11 1999-01-11 Astra Ab New use
EP0648780A1 (en) * 1993-08-26 1995-04-19 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic thrombin inhibitors
GB9318637D0 (en) * 1993-09-08 1993-10-27 Ferring Res Ltd Enzyme inhibitors
US5726159A (en) * 1994-03-04 1998-03-10 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5707966A (en) * 1994-03-04 1998-01-13 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5602101A (en) * 1994-03-04 1997-02-11 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5488037A (en) * 1994-03-04 1996-01-30 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
ZA951618B (en) * 1994-03-04 1996-08-27 Lilly Co Eli Antithrombotic agents
US5439888A (en) * 1994-03-04 1995-08-08 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5484772A (en) * 1994-03-04 1996-01-16 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5705487A (en) * 1994-03-04 1998-01-06 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
ZA951617B (en) * 1994-03-04 1997-02-27 Lilly Co Eli Antithrombotic agents.
US5885967A (en) * 1994-03-04 1999-03-23 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5691356A (en) * 1994-03-21 1997-11-25 Bristol-Myers Squibb Company Disubstituted heterocyclic thrombin inhibitors
US5681844A (en) * 1994-04-18 1997-10-28 Corvas International, Inc. Methionine sulfone and s-substituted cysteine sulfone derivatives as enzyme inhibitors
US5561146A (en) * 1994-06-10 1996-10-01 Bristol-Myers Squibb Company Modified guanidino and amidino thrombin inhibitors
DE4421052A1 (de) 1994-06-17 1995-12-21 Basf Ag Neue Thrombininhibitoren, ihre Herstellung und Verwendung
DE4436772A1 (de) * 1994-10-14 1996-04-18 Boehringer Mannheim Gmbh Neues Dipeptid-Derivat, Verfahren zu seiner Herstellung sowie diese Verbindung enthaltende Arzneimittel
SE504185C2 (sv) * 1994-11-08 1996-12-02 Astra Ab Lagringsstabil vattenlösning för infusion av trombininhibitorer
SE9404196D0 (sv) * 1994-12-02 1994-12-02 Astra Ab New antithrombotic formulation
DE4443390A1 (de) * 1994-12-06 1996-06-13 Basf Ag Neue dipeptidische p-Amidinobenzylamide mit N-terminalen Sulfonyl- bzw. Aminosulfonylresten
MX9706069A (es) * 1995-02-17 1997-10-31 Basf Ag Nuevos inhibidores de la trombina.
US5914319A (en) * 1995-02-27 1999-06-22 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5710130A (en) * 1995-02-27 1998-01-20 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
DE19512484A1 (de) 1995-04-04 1996-10-17 Bayer Ag Kohlenhydratmodifizierte Cytostatika
SA96170106A (ar) 1995-07-06 2005-12-03 أسترا أكتيبولاج مشتقات حامض أميني جديدة
TW541316B (en) * 1995-12-21 2003-07-11 Astrazeneca Ab Prodrugs of thrombin inhibitors
SE9600216D0 (sv) * 1996-01-18 1996-01-18 Hans Arne Hansson Styrning av läkningsprocesser
CA2200163A1 (en) * 1996-03-22 1997-09-22 Michael Robert Wiley Antithrombotic diamides
US5811402A (en) * 1996-03-22 1998-09-22 Eli Lilly And Company Antithrombotic diamides
SE9602263D0 (sv) 1996-06-07 1996-06-07 Astra Ab New amino acid derivatives
WO1997049404A1 (en) 1996-06-25 1997-12-31 Eli Lilly And Company Anticoagulant agents
US6200967B1 (en) 1996-06-25 2001-03-13 Eli Lilly And Company Anticoagulant agents
SE9602646D0 (sv) 1996-07-04 1996-07-04 Astra Ab Pharmaceutically-useful compounds
SE9603724D0 (sv) * 1996-10-11 1996-10-11 Astra Ab New pharmaceutical parenteral formulation of a thrombin inhibitor
US5877156A (en) * 1997-04-24 1999-03-02 Akzo Nobel, N.V. Thrombin inhibitors
AR013084A1 (es) 1997-06-19 2000-12-13 Astrazeneca Ab Derivados de amidino utiles como inhibidores de la trombina, composicion farmaceutica, utilizacion de dichos compuestos para la preparacion demedicamentos y proceso para la preparacion de los compuestos mencionados
SE9704543D0 (sv) 1997-12-05 1997-12-05 Astra Ab New compounds
CA2317761A1 (en) 1998-01-26 1999-07-29 Basf Aktiengesellschaft Thrombin inhibitors
AU750561B2 (en) * 1998-04-24 2002-07-25 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Amino acid amidinohydrazones, alkoxyguanidines and aminoguanidines as protease inhibitors
SE9802938D0 (sv) 1998-09-01 1998-09-01 Astra Ab Improved stability for injection solutions
SE9802973D0 (sv) 1998-09-03 1998-09-03 Astra Ab Immediate release tablet
SE9804313D0 (sv) 1998-12-14 1998-12-14 Astra Ab New compounds
CA2355792A1 (en) 1999-01-13 2000-07-20 Astrazeneca Ab New amidinobenzylamine derivatives and their use as thrombin inhibitors
KR20000060566A (ko) * 1999-03-17 2000-10-16 이경하 치환된 방향족 아미딘 유도체 및 이를 함유하는 의약조성물
AR023510A1 (es) 1999-04-21 2002-09-04 Astrazeneca Ab Un equipo de partes, formulacion farmaceutica y uso de un inhibidor de trombina.
AR023819A1 (es) * 1999-05-03 2002-09-04 Astrazeneca Ab FORMULACIoN FARMACEUTICA, KIT DE PARTES Y UTILIZACION DE DICHA FORMULACION
US6290662B1 (en) * 1999-05-28 2001-09-18 John K. Morris Portable, self-contained apparatus for deep vein thrombosis (DVT) prophylaxis
SE9902202D0 (sv) 1999-06-10 1999-06-10 Astra Ab Production of aggregates
SE0001803D0 (sv) 2000-05-16 2000-05-16 Astrazeneca Ab New compounds i
US6433186B1 (en) 2000-08-16 2002-08-13 Astrazeneca Ab Amidino derivatives and their use as thormbin inhibitors
JP2002155086A (ja) * 2000-11-16 2002-05-28 Ube Ind Ltd ７ａ−アルコキシ−４Ｈ−ピラノ［３，２−ｄ］−オキサゾール−２（３Ｈ）−オン類、及びその製造法
AR035216A1 (es) 2000-12-01 2004-05-05 Astrazeneca Ab Derivados de acido mandelico ,derivados farmaceuticamente aceptables, uso de estos derivados para la fabricacion de medicamentos, metodos de tratamiento ,procesos para la preparacion de estos derivados, y compuestos intermediarios
US7129233B2 (en) 2000-12-01 2006-10-31 Astrazeneca Ab Mandelic acid derivatives and their use as thrombin inhibitors
AR034517A1 (es) 2001-06-21 2004-02-25 Astrazeneca Ab Formulacion farmaceutica
SE0201659D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
SE0201661D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab New salts
US7332227B2 (en) * 2003-03-14 2008-02-19 Becton, Dickinson And Company Non-volatile lubricant system for medical devices
WO2004091463A2 (en) 2003-04-11 2004-10-28 Hill-Rom Services, Inc. System for compression therapy
US7795205B2 (en) 2004-04-12 2010-09-14 Canyon Pharmaceuticals, Inc. Methods for effecting regression of tumor mass and size in a metastasized pancreatic tumor
GB0507577D0 (en) 2005-04-14 2005-05-18 Novartis Ag Organic compounds
WO2007044278A2 (en) * 2005-10-05 2007-04-19 Gurbel Paul A The detection of restenosis risk in patients receiving a stent
TW200827336A (en) 2006-12-06 2008-07-01 Astrazeneca Ab New crystalline forms
CN102924567B (zh) * 2008-10-28 2014-06-04 上海医药工业研究院 一类肽化合物、其制备方法及用途
CN102464701B (zh) 2010-11-08 2015-10-21 上海医药工业研究院 一类新型化合物、其制备方法及用途
WO2012171987A1 (en) * 2011-06-16 2012-12-20 Lonza Ltd A process for extraction of peptides and its application in liquid phase peptide synthesis
US9737454B2 (en) 2012-03-02 2017-08-22 Hill-Rom Services, Inc. Sequential compression therapy compliance monitoring systems and methods
EP3207911B1 (en) 2016-02-18 2019-04-03 Hill-Rom Services, Inc. Patient support apparatus having an integrated limb compression device
RU2712194C1 (ru) * 2019-10-02 2020-01-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов Национального исследовательского центра "Курчатовский институт" (НИЦ "Курчатовский институт" - ГосНИИгенетика) Антикоагулянтное лекарственное средство, представляющее собой синтетический дипептид Ac-Trp-Arg-Pip ⋅HCl, фармацевтическая композиция, включающая это антикоагулянтное лекарственное средство

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HU178398B (en) * 1979-06-12 1982-04-28 Gyogyszerkutato Intezet Process for producing new agmatine derivatives of activity against haemagglutination
US4568636A (en) * 1981-03-25 1986-02-04 Pentapharm Ag Tripeptide derivatives
US4395401A (en) * 1981-09-09 1983-07-26 Smithkline Beckman Corporation Renally active dipeptides
DE3505555A1 (de) * 1985-02-18 1986-09-11 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Neue oligopeptidylargininolderivate und deren homologe, verfahren zu deren herstellung, deren verwendung und diese enthaltende mittel
US4906659A (en) * 1985-06-18 1990-03-06 Takeda Chemical Industries, Ltd. Antibiotic tan-749, its derivatives, production and use thereof
DE3606480A1 (de) * 1986-02-28 1987-09-03 Behringwerke Ag Oligopeptidylnitrilderivate, diese enthaltende mittel, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung
US5187157A (en) * 1987-06-05 1993-02-16 Du Pont Merck Pharmaceutical Company Peptide boronic acid inhibitors of trypsin-like proteases
US5110812A (en) * 1990-06-04 1992-05-05 Bristol-Myers Squibb Co. Azetidin-2-one derivatives as serine protease inhibitors
US5037819A (en) * 1990-06-04 1991-08-06 Bristol-Myers Squibb Company Azetidin-2-one derivatives as serine protease inhibitors
TW201303B (sk) * 1990-07-05 1993-03-01 Hoffmann La Roche
GB9019558D0 (en) * 1990-09-07 1990-10-24 Szelke Michael Enzyme inhibitors
GB9024129D0 (en) * 1990-11-06 1990-12-19 Thrombosis Research Trust Inhibitors and substrates of thrombin
EP0503203A1 (en) * 1991-03-15 1992-09-16 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Novel thrombin inhibitors
SE9102462D0 (sv) * 1991-08-28 1991-08-28 Astra Ab New isosteric peptides
CZ333492A3 (en) * 1991-11-12 1993-09-15 Lilly Co Eli Dipeptide of l-azetidine-2-carboxylic acids and l-argininaldehyde, process of its preparation and pharmaceutical preparation in which said dipeptide is comprised

Also Published As

Publication number Publication date
MX9206938A (es) 1993-06-01
NO311361B1 (no) 2001-11-19
SE9103612D0 (sv) 1991-12-04
CA2125175C (en) 2001-09-11
CA2125175A1 (en) 1993-06-10
AU670052B2 (en) 1996-07-04
NZ280762A (en) 1998-08-26
IS3954A (is) 1993-06-05
YU104592A (sh) 1995-12-04
SI9200363A (en) 1993-06-30
CZ333895A3 (en) 1996-04-17
US5614499A (en) 1997-03-25
MA22729A1 (fr) 1993-07-01
AP9200457A0 (en) 1993-01-31
US5736521A (en) 1998-04-07
JPH09500356A (ja) 1997-01-14
DE69230727D1 (de) 2000-04-06
FI942645A (fi) 1994-06-03
ZA929099B (en) 1993-06-07
IL103910A0 (en) 1993-04-04
NO942066D0 (no) 1994-06-03
CZ129694A3 (en) 1994-12-15
AU5061696A (en) 1996-08-01
US5955433A (en) 1999-09-21
NZ246106A (en) 1996-07-26
JP3306826B2 (ja) 2002-07-24
AU3120993A (en) 1993-06-28
ATE190066T1 (de) 2000-03-15
TW223078B (sk) 1994-05-01
EP0618926A1 (en) 1994-10-12
TNSN92109A1 (fr) 1993-06-08
AU683793B2 (en) 1997-11-20
US5747460A (en) 1998-05-05
EP0618926B1 (en) 2000-03-01
HU9401474D0 (en) 1994-08-29
FI942645A0 (fi) 1994-06-03
EE9400455A (et) 1996-06-17
DE69230727T2 (de) 2000-08-03
AP353A (en) 1994-08-14
NO942066L (no) 1994-06-03
FI115770B (fi) 2005-07-15
CN1076199A (zh) 1993-09-15
HUT70431A (en) 1995-10-30
WO1993011152A1 (en) 1993-06-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SK63194A3 (en) Peptide derivatives
JP3205558B2 (ja) 新規ペプチド誘導体
EP0605462B1 (en) New isosteric peptides
JPH05504775A (ja) トロンビンの阻害剤および基質
EP0253190B1 (en) Partially retro-inverted tuftsin analogues, method for the preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them
JPH03386B2 (sk)
JPS62207251A (ja) オリゴペプチジルニトリル誘導体
IE49653B1 (en) Mercaptoacyldipeptides
HUT65359A (en) Process for producing of amidinophenylalanine derivatives and pharmaceutical compositions comprising them
JP4023554B2 (ja) アミノスルホン酸の誘導体、プソイドペプチドの合成における同誘導体の利用、およびその製造法
CA2070983A1 (en) Cyclic renin inhibitors
HU208427B (en) Process for producing renine-inhibiting amino-acid derivatives and pharmaceutical compositions containing them
EP0587767A1 (en) Hydroxyazido derivatives and related compounds as renin inhibitors
AU600549B2 (en) Novel compounds
KR890000769B1 (ko) 프롤린 유도체의 제법
HU187808B (en) Process for the preparation of n-bracket-carboxy-alkyl-bracket-prolina containing tripeptides
JPS6345252A (ja) プロリン誘導体
PT87693B (pt) Processo para a preparacao de novos compostos analogos de peptidos com accao inibidora da renina e de composicoes farmaceuticas que os contem