PT87693B

PT87693B - Processo para a preparacao de novos compostos analogos de peptidos com accao inibidora da renina e de composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT87693B
Application number: PT8769388A
Authority: PT
Inventors: Rolf Christer Westerlund; Carl Ingemar Starke; Jan Olle Karlsson; Erik Morgan Herman Sohtell
Original assignee: Haessle Ab
Priority date: 1988-06-09
Filing date: 1988-06-09
Publication date: 1994-11-30
Also published as: PT87693A

Description

Antecedentes da invenção

A renina é um enzima proteolítico natural libertado no sangue pelos rins. A sua única função conhecida é cindir o angiotensinogénio em angiotensina I, um decapéptido que exibe a estrutura seguinte:

Asp-Arg-Va1-Tyr-Ile-Hi s-Pro-Phe-His-L eu e que por sua vez é cindido pelo enzima conversor da angiotensina (ACE) obtendo-se o octapéptido angiotensina II:

A sp-Arg-Val-Tyr-11e-His-Pro-Phe

Este péptido e um dos mais potentes agen tes conhecidos susceptíveis de elevarem a pressão arterial. A suêi actividade biológica é, em parte, consequência de um efei to vasoregulador e, parcialmente, consequência de um efeito antidiurético mediado pela aldosterona e de utn efeito antissa 1i-uré tico.

Ate ha pouco tempo os esforços para con-

trolar a hipertensão por meio do sistema resina-angiotensina foram realizados, principalmente, no sentido de inibir o ACE.

Embora este princípio tenha provado a sua utilidade sob o ponto de vista clínico tem-se defendido que a não especificidade do ACE é a causa de diferentes efei tos secundários. Uma vez que a renina e altamente específica relativamente ao angiotensinogeno os inibidores deste enzima deviam distinguir-se no combate contra as diferentes formas de hipertensão.

Antecedentes da Invenção

Os primeiros esforços para preparar inibidores da renina foram orientados, principalmente, no sentido dos analogos simples do substrato. Mediante variações na sequência de aminoácidos Haber et al aumentaram a potência des tes inibidores. Conseguiu-se ainda maior eficácia substituindo nos inibidores uma unidade do dipéptido cindido com uma unidade não cindível como, nor exemplo, estatina [_ Boger et al Nature, 303, 8l (ΐ9θ3/7 ou isósteros diferentes (Szelke et al Nature, -99, 555 (1982)). Compostos deste tipo demonstravam elevada potência mas exibiam um curto período de acção. Atribuiu-se este facto à instabilidade proteolítica dos pêptidos pelo que a maior parte dos trabalhos mais recentes desta área têm sido dirigidos no sentido de preparar inibidores mais pequenos com um numero reduzido de ligações peptídicas potencial mente cindíveis. Exemplos de publicações disponíveis respeitan tes a este assunto são [_ Matsuda et al, Chem. Lett. 104l

(1985), Plattner et al·, 191th ACS—meeting, New York, (ΐ9θ6), Hanson et al, Biochem. Biophys. Res. Comm. 132, 155 (1985) θ

Toda et al, Eur. J. Pharm. 12 9, 393 (1986). Pedidos recentes de patente de invenção que dizem respeito a inibidores de cadeia mais curta são, por exemplo, as patentes de invenção europeias N?s. 186977 (Sankyo), 189182 (Abbott), 190891 (Kissei), 1723^6 (Abbott), 189203 (Abbott), 1723^7 (Abbott) e 181110 (Kissei).

Definições e abreviaturas

Definições

As definições seguintes aplicam-se à memória descritiva e às reivindicações da presente invenção sem pre que não se apresentem outras definições:

1. 0 termo aminoácido inclui aminoácidos quer de origem na tural quer sintéticos.

2. Todos os aminoácidos podem exibir quer a configuração L quer a configuração D mas preferem-se os aminoácidos de configuração L a não ser que se afirme o contrario.

3. Todos os centros assimétricos podem exibir uma configura ção R ou 5 a não ser que se afirme o contrário.

Abrevia tura s

Asp = ácido aspártico

Arg = Arginina

Val

Valina

Tyr = tirosina

Ile = Isoleucina

His = Histidina

Pro = Prolina

Phe = Fenilalanina

Leu = Leucina

Nva = Norvalina

Nle = Norleucina

Cha = Ciclo-hexilalanina

Ala = Alanina

Trp = Triptofano

Abu = Ácido 2-aminobutírico

Tyr(Me) = O-metiltirosina hPhe = Homofenilalanina

Me-Nva - N-metilnorvalina

Me-Nle = N-metilnorleucina

Boc = t-Butoxicarbonilo

Dba = Oibenzilacetilo

Z = Benziloxicarbonilo

Su = Succinimido

Descrição da invenção

A presente invenção diz respeito a novos tipos de inibidores de renina de cadeia curta, à sua s a composições farmacêuticas que os contêm como ingredientes activos e a utilização destes compostos no tratamento da hi- 3 pertensão, colapso cardíaco congestivo e outras perturbações de ordem cardiovascular.

na qual

X representa um átomo de hidrogénio ou um grupo protector do átomo de azoto de fórmula geral R^-(CHp) -0-C(0)- na qual n representa zero ou um numero inteiro de 1 a 4 e representa um grupo a.1 quilo de cadeia linear ou ramificada comportando 1 a 6 átomos de carbono;

B representa um grupo fenilalaninilo, O-rae til tiro sini. lo, homofenilalaninilo,ciclo-hexilalaninilo ou diben zilace tilo;

C representa uni grupo norvalinilo, valinilo, norleucjnilo, leucinilo ou histidinilo quer tal qual quer

N-alquilados, representa um grupo alquilo de cadeia linear mificada comportando 1 a 6 átomos de carbono clo-hexilmetilo ou ra ou c i representa um átomo de lo de cadeia linear ou átomos de carbono, e hidrogénio ramificada ou um grupo alqui.

contendo 1 a 6

Ύ representa um grupo de fórmula -SCH(CH^)_? ou

-s(o)₂ch(ch₃)₂ quer tal qual quer sob a forma de sais aceitáveis sob o pon to de vista fisiológico e incluindo isómeros opticos, são inibidores da renina específicos e potentes.

Preferem-se os compostos em que X reprç senta um átomo de hidrogénio ou um grupo t-butoxicarbonilo; B representa um grupo fenilalanina, O-metiltirosina, ciclo-hexilalanina, homofenilalanina e 6a; C representa um grupo histidina, norleucina, norvalina, N-metilnorvalina, X—metilnor1eucina ou Me-His ; R_ representa um grupo ciclo-hexilmetilo e Rg representa um grupo metilo. Compostos específicos preferidos são os exibidos no Quadro 1.

Um outro objectivo da presente invenção é o modo de preparação dos compostos de acordo com a mesma. Assim a síntese dos compostos de formula geral

Y realiza-se, essencialmente, mediante uma primeira função da porção que de agora em diante se designa por isostero, segui.

da por uma ou duas reacções de .acoplamento e eventualmente seguida ou intercalada por outras manipulações do isostero, obtendo-se assim as estruturas do tipo citado antes.

I Síntese dos isosteros

Os isosteros preparara-se de acordo com os métodos seguintes

em que um reagente organometalico de formula geral 2 ataca um aminoaldeído de fórmula geral 1 que se apresenta sob uma forma protegida para se obter um composto de fórmula geral 3 na qual Z representa um átomo de oxigénio.

Método Β

3a em que um derivado apropriado de um acido carboxílico de for mula geral 4 e um aldeído alifático de fórmula geral 5 reagem no solo de urna reacção aldolica obtendo-se, depois de um roar ranjo de Curtius do ácido carboxílico libertado, uma oxazolidinona de fórmula geral 6 que se pode cindir por hidrólise al calina para se obter o aminoálcool pretendido de fórmula geral 3^a na qual Z representa um atomo de oxigénio.

Fase 2

Conversão do átomo de oxigénio represen tado pelo símbolo Z num grupo de fórmula geral ^(θ) átomo de oxigénio introduz-se sob a forma de um éter ou de um éster. Em determinada fase da sína redução dos ésteres, respectiva de formula geral

OH tese, a cisão dos eteres e mente, dá origem ao álcool

D - CH₂- OR dch₉ D - CO₉R de oxigénio do composto de féré substituído por um átomo de en transformação do álcool primário atomo mula geral 22, citada antes, xofre mediante uma primeira num grupo eliminável.

Introduz-se depois o atomo de enxofre m_e diante tratamento de um composto de férmula geral D-CH₉-L (2'-i) com um tiolato.

Pode oxidar-se o tioeter resultante de fórmula geral. D-CH_O-SR, (28) até à formação de uma sulfona -I de formula geral 30 antes ou depois do acoplamento dos arninoa c idos.

D — CH₂ — S0_?R^

D-CH₂-L

R^S

D - CH₉-SR, ί' .

Quando se sintetiza um composto de fórmula geral 24 é necessário ter em atenção determinadas precau ções :

Nestes hidroxi isósteros tem de se prote ger o grupo hidroxi secundário, por exemplo sob a forma de uma oxazolidinona de formula geral 24a

a

Pode cindir-se depois o anel de oxazolidinona obtendo-se um aminoálcool livre de fórmula geral

Este acoplamento realiza—se utilizando técnicas convencionais de síntese dos péptidos, tal como o acoplamento dos isosteros com os ésteres de hidroxibenzotria zol e hidroxi-succinimida derivados de aminoácidos Íi-proteg_i dos apropriados, em duas fases separadas, protegendo o aminoa eido C, de preferência, com um grupo protector t-butoxicarbonilo e o aminoácido B com um grupo protector representado pelo símbolo X. Nos casos em que B representa um grupo dibenzilacetilo utilizam-se reacçõespadrão que permitem preparar amidas. Alternativamente pode acoplar-se o iséstero com um derivado de acilo activado de uin resíduo de formula geral

X-B-C

III Separação dos diastereómeros

Nos casos eni que as reacções resultam numa mistura de diastereómeros estes separam-se por técnicas convencionais de cromatografia e de recristalizaçâo.

Os símbolos utilizados nas formulas citadas antes nos paragrafos I a III representam o seguinte:

Z um átomo de oxigénio ou um grupo de fórtnula geral S(o) ;

Mt um metal

R	um	alquilo inferior
^Ri	ia tn	grupo protector do átomo de azoto
r₂	um	grupo alquilo ou	ciclo-hexilmetilo
^R3	um	átomo de hidrogénio ou	um grupo alquilo	-6
^RU	um	grupo isopropilo
*9	um	grupo amino ou um resi	duo alcoxi
W	um	átomo de hidrogénio ou	de oxigénio
L	um	grupo eliminável	OH	^R6
D	um	grupo de fórmula geral

			5
eventualmente com resíduos de	aminoácidos ligados	ao átomo
de	azoto.
n	zero	ou o número inteiro 2

A presente invenção diz ainda respeito a compostos de formula geral

Xa na qual

L representa um grupo hidroxi ou um grupo eliminavel ou aos seus sais de adição de ácido, uteis como compostos in termedios na síntese de compostos de formula geral

- η -

definidos na reivindicação 1 da mesma invenção.

Um outro objectivo de acordo com a presente invenção diz respeito a composições farmacêuticas contendo compostos de acordo com a presente invenção. Estas podem apresentar—se sob a forma de formas galenicas que se utilizam na redução da pressão sanguínea como, por exemplo, comprimidos, cápsulas ou elixires para administração oral ou rec tal ou sob a forma de soluções estéreis ou suspensões para ad ministração parenterica ou nasal. Utilizando uma técnica ace_i tável em farmácia mistura-se cerca de 0,001 a 50 mg de uin com posto com um veículo, excipiente, aglutinante, conservante, agente estabilizador, aromatizante, etc., aceitavel sob o pon to cie vista fisiológico, numa forma de dosagem unitária. Nestas composições inclui—se uma quantidade tal de composto activo que se obtém uma dose apropriada entre os limites indicados. Pretende-se que as variações e alterações obvias para os entendidos na matéria sejam abrangidas pelo âmbito da pre sente invenção.

Utn outro objectivo de acordo com a presente invenção e a utilização destes compostos no tratamento da hipertensão, colapso cardíaco congestivo ou outras pertur bações cardiovasculares. Assim, por exemplo, mediante adini- 14 / /

( r

t nistração de uma composição contendo um composto de acordo com a presente invenção, como ingrediente activo, a um doen te hipertenso obtém-se uma redução na pressão sanguínea. 0 composto administra-se, de preferência, por via oral embora também se possam utilizar outras vias como, por exemplo, a parentérica, a rectal e a nasal. De preferência administra-se uma dose de ingrediente activo compreendida entre 0,001 e 50 mg 1 a 3 vezes ao dia.

Descrição da técnica mais apropriada para realizar a presente invenção.

Exemplo 1

Preparação de um composto de formula

a) Preparação do composto de férmula

OH

I

Preparou-se o composto intermédio II de acordo com a técnica de N. Cohen et al., descrita em J. Org.

Chem. 4l, 35θ5 (l97ó) e o composto intermédio III de acordo com a técnica descrita por J. Boger et al., em J. Med. Chem.

28, 1779 (1985).

Br

Boc-ΝΉ

II

CHO

III

A uma mistura agitada de 1,4 g (0,057 mole) de magnésio em pé em 14 ml de tetra-hidrofurano anidro adicionou-se um cristal de iodo e algumas gotas de uma solução de 9,9 g (O,O48 mole) do composto intermédio de férmuia II em 20 ml de tetrahidrofurano anidro. Aqueceu-se a mistura ao refluxo e depois da reacção se iniciar adicionou-se a solução restante contendo o composto de formula II a uma velocidade tal que se manteve o refluxo. Concluída a adição agitou-se a mistura reaccional ao refluxo durante inais 1 hora depois do que se arrefeceu até uma temperatura compreendida entre 0° e 5° C. Adicionou-se depois, gota a gota, uma solui ção de 4,9 g (0,019 mole) do composto de formula III em 35 ml de tetra-hidrofurano anidro conservando a temperatura entre valores inferiores a 10° C. Agitou—se a mistura reaccional re sultante durante 3 horas a temperatura, ambiente e verteu-se depois sobre 3θ ml Be uma solução saturada de cloreto de amo nio e 30 ml de agua. Adicionou-se 120 ml de eter e agitou-se

a mistura energicamente. Extraiu-se a fase aquosa com 2 x 40 ml de éter. Secaram-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfa to de sódio e evaporou-se o éter. Cromatografou-se o produto bruto sobre gel de sílica e eluiu-se com éter de petróleo/ace; tato de etilo (5íl). Obtiveram-se 3,4 g (rendimento 467) de um composto de fórmula geral Ia e 0,65 g (rendimento 97) Be um composto de fórmula geral Ib.

b) Preparação do composto de fórmula

A uma solução de 1,5 g (3,9 mmoles) do compo_s to de fórmula I em 15 ml de dimetilformamida adicionnu-se °,24 g (10 mmoles) de hidreto de sódio disperso a 557 em óleo mineral. Agitou-se a mistura durante 5 horas à temperatura am biente e verteu-se depois sobre 7 ml de uma solução saturada de cloreto de amónio e 7 ml de água. Extraiu-se a mistura com 3 x 30 ml de cloreto de metileno. Secaram-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de sódio e evaporaram-se obtendo-se 1,1 g (rendimento 9l7) 8o composto de fórmula geral VIII que se utilizou tal e qual na fase seguinte.

c) Preparação do composto de fórmula

Ο

IX

Aqueceu-se durante 1 hora num banho de água a 90° C uma solução de 1,1 g do composto de fórmula VIII em 6 ml de ácido clorídrico e 6 ml de dioxano. Evaporou-se a mistura reaccional e cromatografou-se depois sobre gel de sílica com acetato de etilo. Obteve-se 0,50 g (rendimento 56$) do com posto de fórmula IX. Como alternativa pode tratar-se o composto de fórmula VIII com 2 equivalentes de iodeto de trimetilsililo durante 30 minutos. Lavou-se depois a fase orgânica com uma solução aquosa de hipo-sulfito de sódio, água e sulfato de magnésio anidro obtendo-se o composto de formula

Arrefeceu-se até à temperatura de 0° C uma solução de 0,50 g (l,9 mmoles) do composto de fórmula IX e g (2,2 mmoles) de trietilamina em 5 ^ml de cloreto de me

tileno. Adicionou-se 0,24 g (2,1 mmoles) de cloreto de metano-sulf onilo . Agitou-se a mistura reaccional durante 2 horas e controlou-se a reacção por cromatografia em camada fina (TLC). A uma temperatura compreendida entre 40 e 60° C adicio naram-se 5 nil de éter de petróleo e separou-se, por filtração, o cloreto de trietilamónio. Evaporou-se a solução obtendo-se θ»75 g (rendimento 100$) do composto de fórmula X que se utilizou directamente na fase seguinte.

e) Preparação do composto de fórmula

A uma solução de 0,75 g (l,9 mmoles) do composto de fórmula X em 5 ml de tetra-hidrofurano anidro adicic, nou-se uma suspensão de isopropiltiolato de sódio, obtido a partir de 0,18 g (2,3 mmoles) de isopropiltiol e 0,11 g (2,5 mmoles) de hidreto de sódio disperso a 55$ em óleo mineral, em 5 ml de tetra-hidrofurano anidro. Agitou-se a mistura reac cional durante 2 horas. Controlou-se a reacção por cromatogra fia em camada fina (TLC). Adicionaram-se depois 15 ml de cloreto de metileno e 5 ml de água e agitou-se a mistura energicamente. Separaram-se as duas camadas e extraiu-se a aquosa com 5 ml de cloreto de metileno. Secaram-se as fases organi19

cas reunidas sobre sulfato de sódio e evaporaram-se depois obtendo-se 0,62 g (rendimento 100$) do composto de fórmula XI que se utilizou directamente na fase seguinte.

f) Preparação do composto de fórmula

À temperatura ambiente agitou—se durante 3 horas uma solução de 0,5θ g (l,6 mmoles) do composto de fórmula XI e 1,0 g (3,2 mmoles) de ácido meta-cloro-perbenzóico a 55$ em 20 ml de cloreto de metileno. Lavou—se depois a mis tura com 50 ml de hidróxido de sódio 1M e água e finalmente secou-se sobre sulfato de sódio e evaporou—se. Cromatográfou -se o produto bruto sobre gel de sílica utilizando como agen te de eluição uma mistura de éter de petróleo-acetato de eti. lo (l:l). Obteve-se 0,43 g (rendimento 7θ$)·

g) Preparação do composto de fórmula

XV / - 20

Agitou-se e aqueceu-se até à temperatura de 100° C, durante toda a noite, uma suspensão de 0,43 g (l,2 mmoles) do composto de fórmula XIV e 0,28 g (5 mmoles) de hi. dróxido de potássio em 10 ml de etanol. Verteu-se a mistura reaccional sobre água e extraiu-se três vezes com cloreto de metileno. Lavaram-se as fracções orgânicas reunidas com água, secaram-se sobre sulfato de sódio e evaporaram-se. 0 produto bruto que começou a cristalizar utilizou-se tal e qual na fa. se seguinte. Obteve-se 0,34 g (rendimento 86$).

h) Preparação do composto de fórmula

0H

Arrefeceu-se até à temperatura de 0° C uma mistura de 0,29 g (l,4 mmoles) de Boc-Nva-0H e 0,37 g(2,7 mmoles) de N-hidroxibenzotriazol em 6 ml de cloreto de metileno. Adicionou-se 0,66 g (l,6 mmoles) de N-ciclo-hexil-n'-(2-morfolinoetil)-carbodiimida-meto-p-toluenosulfonato, CME-CDI. Quando a mistura atingiu a temperatura ambiente agi. tou-se durante 3 horas. Evaporou-se o solvente, adicionou-se uma solução de 0,34 g (l,l mmoles) do composto de fórmula XV em 5 ml de dimetilformamida e ajustou-se o pH a 8 mediante adição de N-metilmorfolina. Agitou-se a mistura, durante tc> da a noite, à temperatura ambiente. Verteu—se depois sobre agua e extraiu-se com 3 x 50 ml de acetato de etilo. Lavaram-se as fases orgânicas reunidas com 2 x 50 ml de acido clorídrico 0,5 Μ, 1 x 50 ml de hidróxido de sódio 1M e finalmente coin água, secaram-se sobre sulfato de sódio e evaporaram-se. Obteve-se 0,4l g (rendimento 75/) do produto bruto que se utilizou tal e qual na fase seguinte.

i) Preparação do composto de fórmula XVII citada antes.

Preparou-se o éster hidroxibenzotriazol do ácido dibenzilacético a partir de 0,21 g (0,87 mmole) desse ácido, 0,24 g (l,7 mmoles) de N-hidroxibenzotriazol e 0,42 g (o,99 mmole) de CME-CDI em 10 ml de cloreto de metilo como se descreveu na fase anterior.

Em 1,8 ml de cloreto de metileno dissolveu-se 0,4l g (O,79 mmole) do composto de fórmula XVI e adicionou-se 0,6 ml de ácido trifluoro-acético. Noventa minutos depois evaporou-se a mistura, dissolveu-se o resíduo resultante em 5 ml de dimetilformamida e adicionou-se à mis tura evaporada citada antes. Mediante adição de N—metilmorfolina ajustou-se o pH a 8 e continuou-se a agitar durante 60 horas. Utilizou-se depois uma técnica igual à utilizada na fase seguinte. Submeteu-se o produto bruto resultante a uma cromatografia rápida sobre gel dc sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de éter de petrólco/acetato de etilo (l:l). Obteve-se 0,33 g (rendimento 65/).

Exemplo 2

Preparação do composto de fórmula

OH

XIII

a) Preparação do composto de fórmula

Aqueceu—se à temperatura de 100° C durante 4 toras uma suspensão de 0,62 g (l,9 inrnoles) do composto de fórmula XI e 6,2 g de hidróxido de bário em 10 ml de agua e 10 ml de dioxano. Arrefeceu-se a mistura reaccio nal até à temperatura ambiente e adicionou-se cloreto de me tileno. Separaram—se as fases líquidas do resíduo sólido e extraiu-se diversas vezes com cloreto de metileno. Secaram-se as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de sodio, fig trarani-se e evaporaram-se. Purificou-se o produto sobre sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de aceta to de etilo/nietanol/acido acetico/agua ( 48 :'3 :'3 : 2 ) . Obteve-se 0,47 g (rendimento 8P&) do composto do fórmula XII.

b) Preparação do composto de formula XIII

Mediante reacções convencionais de con densação de péptidos utilizando Boc-Xva—OH e Boc-Phe-OH, sintetizou-se o composto pretendido. Obtiveram-se rendimentos destas reacções compreendidos entre ó2 e 35$ respectivamente .

Exemplos 3 a 6 (ver quadros 2 e 3)

Prepararam-se estes compostos utilizando uma técnica semelhante à descrita nos exemplos 1 e 2.

Exemplo 7

Solução para injectáveis

Utilizando os ingredientes seguintes preparou-se a solução:

Inibidor da renina	1	CT c J
Etanol (99,5$)	100	ml
Polietilenoglicol 400	400	ml
água para injectáveis q.b.p.	1.000	ml

Dissolveu—se o ingrediente activo na mistura etanol/po1ietilenoglicol. Adicionou—se agua ate ao volume final depois do que se filtrou a solução através de um filtro esleril de 0,2 mp e se acondicionou assepticamente em ampolas estereis de 5 ml.

Exemplo 8

Solução para injectáveis

- 2U -SF'

Prepara-se a solução utilizando os seguintes ingredientes

Inibidor da renina Cloreto de sódio	1 g 9 g
p-hidroxibenzoato de metilo	0,5 g
p-hidroxibenzoato de propilo	0,2 g
Água para injectáveis q.b.p.	1 000 ml

Dissolvem-se o ingrediente activo, o cloreto de sódio e os agentes conservantes numa grande parte da água depois do que se ajusta o volume até 1000 ml. Filtra-se a solução através de um filtro estéril de 0,2 mjj e acondicio na-se assepticamente em ampolas estereis de 5 ml.

Exemplo 9

Solução para administração nasal

Prepara-se a solução utilizando os seguintes ingredientes

Inibidor da reninn 10 g

Glicerol 200 g p-hidroxibenzoato de metilo 1 g p-hidroxibenzoato de propilo 0,2 g

Agua para injectaveis q.b.p. 1 000 ml

Dissolverain-se o ingrediente activo e os conservantes em glicerol e numa grande parte da agua. Ajustou-se depois o volume ate 1000 ml e acondicionou-se a solu25

ção em recipientes estéreis de polietileno.

Exemplo 10

Comprimidos para administraçao oral

Utilizando os ingredientes seguintes preparam-

-se 1000 comprimidos
Inibidor da renina	10
lactose	100
polivinilpirrolidona	20
Avicel	20
Estearato de Magnésio	2

Misturam-se o ingrediente activo e a lactose com uma solução aquosa de polivinilpirrolidona. Seca-se a mistura e granula—se. Adicionam-se depois o estearato de magnésio e o avicel que se misturam. Comprime-se esta mistura obtendo—se

1000 comprimidos contendo, cada um, 10 mg do ingrediente activo .

Exemplo 11

Cápsulas de gelatina para administração oral

Misturam-se os ingredientes seguintes que se acondicionam em capsulas de gelatina

Inibidor da renina

Estearato de magnésio

Lactose mg ² mg mg

188

Elementos biológicos

A capacidade dos compostos de acordo com a presente invenção para inibir a renina determinou-se in vitro uti^ lizando uma reacção humana renina/angiotensinogéno. Este dosea mento que se baseia no método de Ikeda et al descrito em J. Clin. Endocrinal Metab. 54, 423 (1982) utiliza uma determinação radioimunométrica da quantidade de angiotensina I libertada a partir do angiotensinogéno pela renina num concentrado de plasma humano.

Dissolveram-se os compostos de acordo com a presente invenção em 10 pl de ácido acético O,1M e adicionaram-se depois a 200 pl de plasma humano contendo EDTA e 20 pl de tampão de citrato 0,6 M. Incubou-se durante 6θ minutos à temperatura de 37° C depois do que se utilizou angiotensina I marcada com ’ΐ e contendo 0,5 mg/ml de pepstatina.A. Adicionaram-se esferas revestidas de anticorpos e incubou-se a mistura resul tante durante 3 horas à temperatura ambiente. Adicionaram—se depois 2 ml de água destilada e eliminou-se o líquido por aspi. ração. Avaliou-se depois a radioactividade das esferas utilizando uma técnica de cintilação de radiações gama.

As potências assim obtidas destes compostos (ver quadro 4) apresentam—se sob a forma de uma média de pelo menos quatro experiências e exprimem-se em ΟΙρ^θ isto é o logaritmo negativo da concentração molar necessária para provocar uma inibição de 5θ$.

(

Quadro 4

Exemplo N* CIp_^

1	8,3
2	8,0
3	9,3
4	6,7
5	8,2
6	7,4

Quadro 1

OH

X-B-C-NH

Y

X	B	C	Y
Boc	Phe	Nva	sch(ch₃)₂
Boc	Phe	Nva	so₂ch(ch₃)₂
H	Dba	Nva	so₂ch(ch₃)₂
Boc	Tyr (Me)	Nva	SO₂CH(CH₃)₂

Quadro 2. Resumo dos exemplos descritos

Ex	X	B	C	Y	Método para preparar o isóstero	Elementos de identi ficação
1	H	Dba	Nva	^S02-	A	RMN	^ΣΗ
2	Boc	Phe	Nva	s —	A	RMN	^ςη
3	Boc	Phe	Nva	S°₂ -ζ	A	RMN	^ΧΗ
4	Boc	> Tyr(Me)Nva	^s —<	A	RMN	^ςη
5	Boc	Tyr(M	e)Nva	^S02-f	A	RMN	¹Η
6	Boc	Phe	Me-Nva	^s°2 —<2.	A	RMN

/

Elemsntos de identificação para os compostos de acordo com a presente invenção

Ex

RMN ¹H, 500 MHz ppm (CDC1„)

1. 0,6-2,0 (m, 31H): em que 0,70 (t, 3H) , 1,14 (d,

3H), 1,14 (d, 3H), 1,38 (d, 3H), i,4o (d, 3H), 2,20 (m, ÍH); 2,3-3,12 (m, 8H); 3,37 (m, ÍH);

3,59 (M, ÍH); 3,88 (d, ÍH); 4,20 (m, ÍH); 5,60 (d, ÍH); 5,87 (d, ÍH); 7,1-7,4 (m, 10H).

2. 0,90 (t, 3H); 1,05 (d, 3«); 1,10-1,95 (m, 20H);

1,25 (dd, ÓH); 1,40 (s, 9H); 2,40 (dd, ÍH); 2,60 (dd, ÍH); 2,90 (m, ÍH); 3,00 (dd, ÍH); 3,10 (dd, »

ÍH); 3,65 (m, ÍH); 3,90 (m, ÍH); 4,30 (m, 2H);

4,90 (d, ÍH); 6,35 (bs, 2H); 7,15-7,35 (m, 5«)

3. 0,7-1,9 (m, 40H) ; em que0,91 (t, 3Il) ; 1,21 (d, 3H), 1,39 (d, 3H), l,4l (d, 3H), 1,42 (_s, 9H);

2,41 (m, ÍH); 2,78 (dd, ÍH); 3,00 (dd, ÍH) ; 3,l4 (m, 3H); 3,83 (m, ÍH); 3,90 (m, ÍH); 4,27 (m, 2H); 4,95 (bd, ÍH); 6,39 (m, 2H); 7,1-7,4 (m, pH).

0,8-2,0 (m, 4lH); _em que 0,93 (t, 3H), 1,02 (d,

3H) ,	1,23	(d, 3H),	1,28 (d, 3H),	1,	4 5 (s,	9H) ;
2,40	( dd,	III); 2,6	-2,75 (m, 2H);		8-3,15	( m,
3H);	3,65	(m, ÍH);	3,81 (s, 3H);	3,	93 (m,	ÍH) ;
4,11	(m,	ÍH); 4,22	(m, ÍH); 4,32	(m	, 1H);	4,91
( bd,	ÍH) ;	6,3-6,5	(in, 2H); 6,8l	(d,	2H);	7,10

(d, 2H)

0,75	-1,9	(m,	40H) ;	em que o	•,92 (t, 3H); 1,21
(d,	3H),	1,38	(d,	3H), 1,41	(d, 3H); 1,43 (s,
9H) ;	2,44	(m,	IH) ;	2,78 (dd,	IH); 2,96 (dd,
IH) ;	3,0-	3,25	(rn,	4H); 3,62	(m, IH); 3,80 (s,
3H);	3,93	(m,	IH);	4,21 (m,	IH); 4,26 (m, IH) ;
4,89	(m,	IH);	6,30	(m, IH);	6,4o (:n, IH);
6,87	(d,	2H);	7,12	(d, 2H)
	Este	com	posto	existe so	b duas formas cu-

jas especificações coincidem

0,7-2,0 (m, 40H); em que 0,87 (t, 3H); 1,14 (d, 3H), 1,35 (d, 3H); 1,38 (s, 9H); 1,4o (d, 3H); 2,3-2,5 (m, IH); 2,6-3,2 (m, 5H); 2,68 (s, 3H, forma principal); 2,81 (s, 3H, forma secundária); 3,59 (m, IH); 3,75-3,95 (m, IH); 4,00 (m, IH); 4,43 (m, IH, forma principal); 4,48 (m, IH, forma secundária); 4,57 (m, IH, forma principal); 4,90 (m, IH, fornia secundaria); 5,26 (d, IH); 7,1-7,4 (m, 5H)

Claims

Reivindicações

1,- Processo para a preparaçao de compostos de fórmula geral

ΠΗ R V na qual

X representa um ãtomo de hidrogénio ou um grupo protector do átomo de azoto de fórmula geral ^-^^CH2^n ^na <9^ual n representa zero ou ura número inteiro de 1 a 4 e R^ representa ura grupo alquilo de cadeia linear ou ramificada comportando 1 a 6 átomos de carbono;

B representa um grupo fenilalaninilo, O-metiltirosinilo, homofenilalaninilo, ciclohexilalaninilo ou dibenzilacetilo;

C representa ura grupo norvalinilo, valinilo, norleucinilo, leucinilo ou histidinilo quer tal qual quer N-alquilados;

R^ representa ura grupo alquilo de cadeia linear ou ramificada comportando 1 a 6 átomos de carbono ou um grupo ciclohexilmetilo;

Rg representa um ãtomo de hidrogénio ou um grupo alquilo de cadeia linear ou ramificada comportando 1 a 6 átomos de carbono , e

Y representa um grupo de fórmula

a) -SCH(CH₃)₂ ou ¹

b) -S(O)₂CH(CH₃)₂ ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista fisiológico ou dos seus isómeros ópticos, caracterizado pelo facto de se acoplar um isõstero de fórmula geral na qual R^, Rg e Y têm os significados definidos antes,a aminoácidos apropriados mediante a realização de técnicas convencionais de síntese de pêptidos; e, nos casos em que se obtém, como resulta do das reacções, uma mistura de diastereómeros, de se separar estes últimos, por técnicas convencionais de cromato grafia ou de recristalização, e eventualmente de se formar um isõmero ôptico aceitável sob o ponto de vista fisiológico e/ou de se isolar um isómero óptico.
2,- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral I n? qual X representa um ãtomo

-33Ζ de hidrogénio ou um grupo butoxicarbonilo, ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista fisiológico e dos seus isómeros õpticos, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
3. - Processo de acordo com as reivindicações 1 ou 2, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual B representa um grupo fenilalanina O-metiltirosina, ciclohexilalanina, homofenilalanina ou dibenzilacetilo, ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista fisiológico e dos seus isómeros ópticos, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
4. - Processo de acordo com uma ou mais das reivindicações anteriores, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual C representa um grupo histidina, norleucina, N-metilnorvalina,

N-metilnorleucina ou metil-histidina, ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista fisiológico e dos seus isómeros ópticos, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspon dentemente substituídos.
5.- Processo de acordo com uma ou mais anteriores, para a preparação de compostos de qual representa um grupo ciclohexilmetilo, aceitáveis sob o ponto de vista fisiológico e das reivindicações fórmula geral I na ou dos seus sais dos seus isómeros ópticos, .caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
6. - Processo de acordo com uma ou mais das reivindicações anteriores, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual Rg representa um grupo metilo, ou dos seus sais aceitáveis sob s o ponto de vista fisiológico e dos seus isómeros ópticos, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
7. - Processo de acordo com uma ou mais das reivindicações anteriores, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual Y representa um grupo de fórmula SCH(CH₃)₂, ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista fisiológico e dos seus isómeros ópticos, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
8. - Processo de acordo com uma ou mais das reivindicações 1 a 7, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual Y representa um grupo S(0)₂CH(CH^)₂, ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista fisiológico e dos seus isómeros ópticos, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspon dentemente substituídos.
9. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a prepara

-35ção do composto de fórmula (X) ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista fisiológico e dos seus isómeros Ópticos, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
10.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do composto de fórmula

OH

Boc-Tyr(Me)-Nva-NH (X¹) ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista fisiológico e dos seus isómeros ópticos, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos
11.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do composto de fórmula ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista fisiológico e dos seus isómeros ópticos, caracterizado pelo facto de se utilizar com postos iniciais correspondentemente substituídos.
12.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do composto ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista fisiológico e dos seus isómeros ópticos, caracterizado pelo facto de se utilizar com postos iniciais correspondentemente substituídos.
13,- Processo de acordo~com a reivindicação 1, para a preparação de um composto intermédio de fõrmula geral

HN O (Xa) na qual

L representa um grupo eliminãvel, caracterizado pelo facto de se introduzir um ãtomo de enxofre para substituir o grupo representado pelo símbolo L, mediante a utilização de um grupo isopropiltio, e de se oxidar, eventualmente, o mesmo grupo até ã obtenção de uma sulfona e de se cindir o núcleo oxazolidinona.
14.- Processo para a preparação de composições farmacêuticas apropriadas para o tratamento da hipertensão, colapso cardíaco con gestivo ou outras perturbações cardiovasculares, caracterizado pelo facto de se misturar, como ingrediente activo, uma quantidade eficaz, de um composto de fõrmula geral

OH R

X-B-C-NH

R preparado pelo processo de acordo com as reivindicações 1 a 12, como ingrediente activo, e que apresenta uma acção inibidora da renina, com um.veículo aceitável sob o ponto de vista farmacêutico

Lisboa, 09 de Junho de 1988

-3 9Processo para a preparação de novos compostos análogos de péptidos com acção inibidora da renina e de composições farmacêuticas que os contêm

Descreve-se um processo para a preparação de compostos de fórmula geral (I) ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista fisiológico ou dos seus isómeros ópticos que consiste em acoplar um isóstero de fórmula geral a aminoácidos apropriados mediante a realização de técnicas convencionais de síntese de péptidos; e em separar, por técnicas convencionais de cromatografia ou de recristalização, os diastereómeros individuais das misturas resultantes.

Estes compostos, que exibem uma acção inibidora da renina, utilizam-se no tratamento de perturbações cardiovasculares hipertensão ou colapso cardíaco congestivo.