SK57693A3

SK57693A3 - Linear peptides and pharmaceutical agents on their base

Info

Publication number: SK57693A3
Application number: SK576-93A
Authority: SK
Inventors: Alfred Jonczyk; Felding-Habermann; Quido Melzer; Beate Diefenbach; David Cheresch
Original assignee: Merck Patent Gmbh
Priority date: 1992-06-18
Filing date: 1993-06-08
Publication date: 1994-07-06
Also published as: KR940005667A; EP0576898A2; HUT66469A; JPH0665290A; MX9303638A; CZ118593A3; HU9301768D0; CN1083075A; NO932237L; CA2098535A1; ZA934353B; AU4125193A; EP0576898A3; NO932237D0; PL299367A1

Description

3blasť techniky

Vynález s= týka lineárnych peptidov, ktorá m cenné farmakologické vlastnosti a farmaceutických pri na ich báze.

Doterajší stav techniky

Podobné, ale cyklické zlúčeniny, sú známe z prihlášky Evro'oskeho patentu č. 3 40ó 42E.

Podstata vynálezu

Dkclom vynálezu .bolo vyvinúť nové zlúčeniny ? užitočnými vlastnosťami, ktorých by bolo možno použiť pri výrobe liečiv.

Predmety vynálezu a výhody, ktoré vynález pri sú odborníkovi v tomto obore zrejmé z nesledujúceho o; a nárokov.

Vynález sa opiera o vyvinutie novvch lin^ármv o — - _v pepticov obecného vzorca la až In.

a jú pravkov najmä unáša, jisu •ch (la) H-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OH;

(lb) H-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OH;

(lc) H-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OH;

(ld) H-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OH;

(le) H-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OH;

(lf) H-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val~Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OH;

(lg) R-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OH;

(lh) H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;

(li) H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-OH;

(lj) H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-OH;

(lk) H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-OH;

(ll) H-Gly-Asp-GIy-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-OH;

(lm) Ac-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-OH;

(ln) Ac-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-OH;

kde Ac predstavuje acetylskupinu a ich solí.

Zistilo.sa, že zlúčeniny vzorcov la až in a ich soli majú-veími užitočné vlastnosti, Sú najmä inhibítormi adhézie buniek, takže sú užitočné napríklad pri inhibícii agregácie krvných doštičiek a nádorových buniek.-Zlúčenín podl'a vynálezu sa tedy môže používať k inhibícii adhézie buniek živočíchov, napríklad somatických buniek alebo rakovinových buniek u cicavcov.

Tieto inki-bíčne' účinky je možno zistiť napríklad metódami, ktoré sú opísané v E? 0 435 42S, FE3S Lett.,

251, 50 až 54 (1951 ) alebo Smith, J. ’.ľ., Euggery, 2. .4., Kunicki, ľ. -J., Cheresch, D. A., -J. 3iol. Chem., 255, 12257 až 12271 (1590).

Zlúčenín podía vynálezu sa môže používať ako farmaceutický účinných látok v humánnom a veterinárnom lekárstve najmä pre liečbu a profylaxiu trombózy, infarktu myokardu, angíny pectoris, apoplexie a nádorových, t. j. rakovinných ochorení.

Skratky zvyškov «aminokyselín, ktoré boli uvedené hore alebo ktoré sú uvedené ďalej, označujú zvyšky náslecujúcich aminokyselín.

I

Ala	slanín
Arg	arginín
Asp	asparágová kyselina
Gly	glycín
His	histidín
Leu	leucín
Pro	prolín
Tyr	tyrozín
Val	val ín

Okrem toho, sa v opise používa ešte ďalších skratiek, ktorá majú nasledujúci význam:

Ac acetyl

BOC terc.butoxykarbonyl

CSZ	benzyloxyka r bony1
DCCI	.dicyklohexylkarbod i imid
DAíF	dímetylf ormamid
LĽCI	N-etyl-N - í3-dimetylami karbodiimidhydrochlorid
F.'.iOC	S-f1uorenyImetoxykarbon
Me	metyl
OMe	□etoxv
OEt	etoxy
TFA	trif luoroc tové. kyselina
POA	f enoxyacetyl

jedno vždy inak.

Pokial¹ boli hore alebo pokiaí sú ďalej uvádzané tlivé zlúčeniny, potom skratky týchto aminokyselín sa vzťahujú k L-forme, ak nie je výslovne uvedené

Vvnález sa ďale v

j týka sposobu výroby lineárnych peptidov vzorca I, ktorý sa vyznačuje tým, že sa tieto deriváty uvoľnia z niektorého zo svojich funkčných derivátov pôsobením solvolytického alebo hydrogenolytického činidla alebo že sa dva peptidy s kratšími sekvenciami spoja kondenzačnou reakciou peptidových fragmentov, za vzniku niektorého s peptidov vzorca í a/alebo že sa zlúčenina vzorca I prevedie spracovaním s kyselinou na niektorú zo svojich solí.

Zlúčeniny vzorca í a tiež východiskové látky pre ich výrobu sa inak pripravujú známymi postupmi, ktoré sú opísané v literatúre (napríklad v štandardných publikáciách, ako je Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart, SRN), najmä* .ý takých reakčných podmienkach,ktoré sú pre také reakcie známe a vhodné. V tomto kontexte sa dá tiež použiť známych variantov týchto postupov, ktoré tu nie sú podrobnejšie opísaná.

Východiskové látky môžu byť tiež poprípade vyrábané in situ, tj. tak, že sa neizolujú z reakčnej zmesi, ale sa ihneď nechávajú ďalej reagovať na zlúčeniny vzorca 1.

Zlúčeniny vzorca 1 je možno pripravovať ich uvoľnením z funkčných derivátov solvolýzou, najmä hydrolýzou, alebo hydrogenolýzou.

Prednostnými východiskovými látkami pre solvolýzu alebo hyčrogenolýzu sú látky, ktoré obsahujú, miesto jednej alebo viacej voľných aminoskupín a/alebo hydroxyskupín, príslušným spúsobom chránenej aminoskupiny a/alebo hydroxyskupiny, prednostne také látky, ktoré nesú miesto atómu vodíka viazaného k atómu dusíka chrániacu skupinu aminoskupiny, napríklad látky,zodpovedajúce vzorci 1, ktoré miesto skupiny NH2 obsahujú skupinu obecného vzorca NHR , kčé R predstavujú chrániacu skupinu aminoskupiny, napríklad 3DC alebo C3Z.

Okrem toho sa dáva prednosť takým východiskovým t

látkám, ktoré nesú, miesto atómu vodíka hydroxylovú skupiny, chrániace skupinu hvdroxylovej skupiny, napríklad látkam, zodpovedajúcim vzorci I, ktoré však miesto hydroxyŕenylskupiny obsahujú skupinu obecného vzorca R’’-1-fenyl, kde R predstavuje chrániacu skupinu hydroxyskupiny.

V molekule východiskovej látky môže byť prítomno niekoľko •rovnakých alebo rSznych chránených aminoskupín a/alebo hydroxyskupín. Pokiaľ sú prítomné chrániace skupiny navzájom odlišné, v mnohá prípadoch je možno ich odstraňovať selektív- . ne.

Výraz chrániaca skupina aminoskupiny je obecne známy a vzťahuje sa k . skupinám, ktoré sa hodia pre ochranu ci blokovanie aminoskupiny pred chemiekýiti reakciami, ale ktoré 3Ú ľahko odstrániteľné po prevádzaní požadovanej chemickej reakcie, prebiehajúcej v iných polohách molekuly.

Ako typické skupiny tohto typu je možno najmä uviesť: nesubstituovanú alebo substituovanú acyl-, arvl-, aralkoxymetylm alebo aralkyskupinu. Pretože sa chrániace skupiny aminoskupiny po prevádzaní požadovanej reakcie (alebo reakčnej sekvencie) odstráňujú, ich povaha a veľkosť inak nie sú kritické. Ale prednosť sa dáva skupinám, ktoré obsahujú 1 až 21 a najma 1 až 5 atomov uhlíka. Výraz acylskupina je treba v súvislosti so spdsobom podľa vynálezu chápať v najširšom slova zmysle. Zahrnuje teda acylskupiny odvodené od alifatických, aralifatických, aromatických alebo heterocyklických karboxylových kyselín alebo sulfónových kyselín a najmä sa jedná o alkox.ykarbonyl-, aryloxykarbonyl-, a predovšetkým o aralkoxykarbonylskupiny. Ako príklady acylskupín tohto typu je možno uviesť alkanoyl, ako acetyl, propionyl alebo butyryl; aralkanoyl, ako fenylacetyl; aroyl, ako benzoyl alebo toluoyl; aryloxyalkanoyl, ako PDA; alkox.ykarbonyl, ako met oxy karbonyl, etoxykarbonyl, á , 2,2-trichlóretoxykarbonyl, 3CC, 2-jodetoxykarbonyl;

aralkyloxykarbonyl, ako 332 (karbobenzoxy), 4-metoxybenzyloxykarbonyl a Fí.íOC. Prednostnými chrániacimi skupinami aminoskupiny sú skupiny SOC a d'alej potom C32, F.4OC, benzyl a acetyl.

Tiež výraz.chrániaca skupina hydroxyskupiny je. •obecne známy a vzťahuje sa k ; skupinám, ktoré sa hodia pre ochranu hydroxylovej skupiny pred chemickými reakciami, ale ktorá sú íahko odstrániteíné po prevádzaní požadovanej chemickej reakcie v iných polohách molekuly. Ako typické skupiny tohto typu je možno uviesť hore zmienené nesubstituované alebo substituované arylové, aralkylová alebo acylové skupiny a okrem toho tiež alkylové skupiny. Povaha a veíkosť chrániacich skupín hydroxyskupiny nie je kritická, pretoža sa tieto skupiny po prevádzaní požadovanej chemickej reakcie alebo reakčnej sekvencie opäť odštiepujú. Av-ak prednostnými skupinami tohto typu sú skupiny obsahujúce 1 až 20 a najmä 1 až 10 atómov uhlíka. Ako príklady chrániacich skupín hydroxyskupiny je m.j. možno uviesť benzyl, p-nitrobenzoyl, terc.butyl, p-toluénsulfonyl a acetyl, pričom obzvláštna prednosť sa dáva benzvlskupine, terc.butylshupina a acetylskupine.

Funkčné deriváty zlúčenín vzorca x, ktorých sa má používať ako východiskových látok, je možno pripravovať obvyklými postupmi 3yntézy aminokyselín a peptidov, ak sú napríklad opísané v štandardných odborných publikáciách a patentových prihláškach, ktoré boli uvedené hore a napríklad tiež úlerrifieldovou metodou syntézy v tuhej fáze (3. F. Gysin a R. 3. .Jerrifield, J. Am. Chem. Soc. 9i, 3l3<t a d\alej (1972)).

Uvoíňovanie z'Lú/enín vzorca I z ich funkčných derivátov sa prevádza, v závislosti na použitej chrániacej skupine, napríklad silnými kyselinami, prednostne kyselinou trifluóroctovou (TFA) alebo kyselinou chloristou, ale tiež inými silnými anorganickými kyselinami, ako je napríklad kyselina chlorovodíková alebo kyselina sírová alebo silnými organickými karboxylovými kyselinami, ako je kyselina trichlóroctová, alebo sulfónovými kyselinami, ako je kyselina benzén- alebo p-toluénsulfónová. Prítomnosť prídavného inertného rozpúšťadla.je možná, ale nie je vždy nutná.

.Vhodnými inertnými rozpúšťadlami sú prednostne organické, napríklad karboxylové kyseliny, ako je kyselina octová,

- étery, ako je tetrahydrofurán alebo dioxán, amidy, ako je dimetylformamid (DMF), halogénované uhľovodíky, ako je dichlórmetán a okrem toho tiež alkoholy, ako je metanol, etanol alebo izopropylalkohol a tiež voda.

Okrem toho sú tiež vhodné zmesi hore uvedenvch v

rozpúšťadiel. Kyseliny trifluóroctovej sa prednostne používa v nadbytku bez toho, že by sa pridávalo d'°lsie rozpúšťadlo. Kyseliny chloristej sa požíva vo forme zmesi kyseliny octovej s-. 70^ kyselinou chloristou v pomere 9:1. Reakčná teplota pre štiepenie leží prednostne od asi O do asi 53 °C, prednostne od asi 15 do asi 33 °C (teplota miestnosti).

Skupinu 33C je možno odštieoovať napríklad prednostne za použitia 43i TFA v dichlórmetáne alebo približne 3 až 5N kyseliny chlorovodíkovej v dioxáne. pri 15 až 33 °C. Skupinu Fh:3C možno odštiepovať za použitia približne 5 až 20# roztoku dimetylamínu, dietylamínu alebo piperidínu v ĽmF pri 15 až 33 ³C.

Chrániace skupiny, ktoré sa dajú odštiepovať hydrogenolýzou (napríklad C3Z alebo benzyl) je napríklad možno odštiepovať pôsobením vodíka v prítomnosti katalyzátoru (napríklad katalyzátoru na báze vzácneho kovu, ako je paládium, prednostne na nosiči, ako je uhlík). Vhodnými rozpúšťadlami sú v tomto prípade hore uvedené rozpúšťadlá, najma napríklad alkoholy, ako je metanol alebo etanol, alebo amidy, ako je DMF. Hydrogenolýza sa spravidla prevádza pri teplote v rozmedzí od asi 0 do 100 °C a za tlaku v rozmedzí od asi 0,1 do 20 MPa, prednostne pri teplote 20 až 30 °C a. tlaku 0,1 až 1 MPa. Hydrogenolýza skupiny CBZ sa íahko · prevádza napríklad za použitia 5 až 10# paládia na uhlík# v metanole alebo za použitia formiátu amónneho (miesto vodíka) na paládie na uhlíku vo zmesi metanolu a dimetylformamidu pri 20 až 30 C.

Zlúčeniny vzorca I je tiež možno získať kondenzáciou peptidov-s kratšími sekvenciami v podmierikách syntézy peptidov V tomto prípade sa reakcia prednostne prevádza obvyklými metódami syntézy peptidov, ktoré sú napríklad opísané v

Houben-v.’eyl·, hore citovaná publikácia, sv. lp/II, strana 1 až =0ó (1974).

Táto reakcia sa prednostne prevádza v prítomnosti dehydratačného činidla, ako sú napríklad karbodimidy, ako DC01 alebo 2DC.I a okrem toho anhydrid propánfosfónovej kyseliny (xrov. Angew. Chemie 92, 12$ (193$)), difenylfooforylazid -'lebo 2-etoxy-H-etoxykarbonyl-1,2-dihydrochinolín, · v inertnom rozpúšťadle, napríklad halogénovanom uhl’ovodíku, ako je dichlórmetán, éteru, ako je tetrahydrofurán alebo dioxán, amidu, ako je DMF alebo dimetylacetamid, nitrilu, ako j.e acetonitril, alebo zmesiach takých rozpúšťadiel, pri teplote v rozmedzí od asi -10 do 40, prednostne od asi 0 do

O 'λ <1 j'Báza vzorca I sa môže previesť na zodpovedájúcu adičnú soí s kyselinou pôsobením -kyseliny. Ako vhod.n? kyseliny pre túto reakciu je možno najma uviesť kyseliny, ktoré poskytujú fyziologicky vhodné soli. ,;ôže sa tedy použiť anorganických kyselín, napríklad kyseliny sírovej, kyseliny dusičnej, halogenovodíkových kyselín, ako kyseliny chlorovodíkovej alebo kyseliny bromovodíkove j , kyseliny fosforečnej, ako kyseliny ortofosforečnej a kyseliny amidosulfónovej. I?alej sa môže použiť organických kyselín, najmä alifatických, alicyklických, aralifatických, aromatických alebo heterocyklických jednosýtnych alebo viacejsýtnych karboxylových alebo sulfónových kyselín alebo kyselín odvodených od kyseliny sírovej, ak je napríklad kyselina mravčia, •kyselina octová, kyselina propiónová, kyselina pivalová, kyselina dietyloctová, kyselina malónová, kyselina

- jantárová, kyselina pimelová, kyselina fumarová, kyselina maleínová, kyselina mliečna, kyselina vínna, kyselina jablčná, kyselina benzoová, kyselina salicylová, kyselina

2- alebo 3-fenylpr-ópionová, kyselina citrónová, kyselina glukonová, kyselina askorbová, kyselina nikotínová, kyselina izonikotínová, kyselina metán- alebo etá.nsulf ónová, kyselina etándisulfónová, kyselina 2-hydroxyetsnsulŕónová, kyselina benzénsulfónová, kyselina p-toluénsulfónová, kyseliny naftalánmonosulfónove' a kyseliny naftaléndisulfSnové? a kyselina laurylsÍrova. Solí fyziologicky nevhodných kyselín, napríklad pikrátov, je možno používať pre izoláciu a/alebo čistenie zlúčenín vzorca I.

Nové zlúčeniny vzorca í a ich fyziologicky vhodné soli moču byť používané pri výrobe farmaceutických prípravkov. Pri tejto výrobe se miesi s alespoň jedným excipientom alebo pomocnou látkou a poprípade alespoň jednou d'alšou účinnou látkou, načež sa vzniknutá zmes prevedie na vhodnú dávkovaciu formu. Takto získaných prípravkov sa môže používať ako fsrm.aceutík v humánnom alebo veterinárnom lekárstve. Ako vhodné excipienty je možno uviesť organické a anorganické látky, ktoré sa hodia pre enterálne (napríklad orálne alebo rektálne),'parenterálne alebo lokálne (napríklad topické) podávanie alebo, pre podávanie vo forme inhalačných sprejov a ktoré nereagujú s novými zlúčeninami, ako je napríklad voda, nižšie alkoholy, rastlinné pleje, benzylalkoholy, polyetylénglykoly, triacetát glycerolu a iné glyceridy mastných kyselín, želatína, sojový lecitín, uhlohydréty, ako je laktóza alebo škrob, stearan horečnatý, mastek, celulóza a vazelína. Pre orálne podávanie sa používa najmä tabliet, potiahovaných tabliet, kapslí, sirupov, kvapalín alebo kvapiek. Zaujímavé sú najmä tablety potiahnuté film.om a kapsle, ktoré majú film, povlak alebo obal kapsle vzdorujúce žalúdočným šťiavám. Pre rektalne podávanie sa používa čípkov a pre parenterálne podávanie roztokov, najmä olejových alebo vodných roztokov a ďalej tiež·suspenzií, emulzií alebo implantátov. Pre topickú aplikáciu sú vhodné roztoky, napríklad roztoky, ktorých sa dá používať vo forme očných kvapiek a ďalej napríklad suspenzie, emulzie, krémy, masti alebo obväzy ktoré nesú účinné látky. '.lSže sa tiež používať sprejov, ktoré obsahujú účinnú zlúčeninu buď rozpustenú alebo suspendovanú vo zmesi hnacích plynov (napríklad chlórfluorovaných uhľovodíkov alebo ich z ekologického hľadiska neškodných náhražiek), ktoré sa hodia pre inhalačné podávanie. Účinnej zlúčeniny sa v tomto prípade používa v mikronizovanej forme a moče byť prítomno jedno alebo viacej prídavných fyziologicky tolerovateľnýeh rozpúšťadiel, napríklad etanol. Inhalačné roztoky sa m3žu podávať pomocou obvyklých inhalátorov. Nové zlúčeniny je tiež možno lyofylizovať a získaných lyofilizátov sa môže používať* napríklad pri výrobe injekčných prípravkov. Tieto prípravky je možno sterilizovať a/alebo je možno k nim pridávať pomocné látky, ako konzervačné činidlá, stabilizátory a/alebo zmášadlá, emulgátory, sali pre ovplyvnenie osmotického tlaku, tlmivé látky, farbivá a/alebo oríc'nute. Môžu tiež· obsahovať poprípade jednu alebo viac ďalších účinných látok napríklad jeden alebo viac vitamínov.

Látky podlá vynálezu sa spravidla podávajú analogicky ako iné známe obchodne dostupné peptidy, najmä' potom analogicky ako zlú'eniny opísané v US patente 4 474 315, prednostne v dávke v rozmedzí od asi 0,05 do asi 500 mg, najmä od 0,5 do 100 mg, vztiahnuté na dávkovaciu jednotku. Denná dávka prednostne leží v rozmedzí od asi 0,01 do asi 2 mg/kg telesnej hmotnosti. Konkrétna dávka pre každého pacienta bude však závisieť na mnohá rôznych faktoroch, napríklad na účinnosti konkrétne použitej zlúčeniny, veku, telesnej hmotnosti, všeobecnom zdravotnom stave, pohlaví a strave pacienta, dobe a sposobu podávania a rýchlosti vylučovania, použitej kombinácii farmaceutických prípravkov.a závažnosti ochorenia, na ktoré je liečba orientovaná. Parenterálnomu podávaniu sa dáva prednosť.

Na základe hore a dalej uvedeného opisu mdže odborník v plnom rozsahu realizovať vynález. Špecifické prevádzania vynálezu, ktorá sú obsahom nasledujúcich príkladov majú len ilustratívny charakter ale v žiadnom chlade neomedzujú rozsah vynálezu.

V príkladoch, ktoré boli uvedené hore a ktoré sú uvedené d'alej, sú všetky teploty uvádzané vo stupňoch Celsia a nie sú korigované. Pokial nie je uvedené inak, všetky údaje uvedené v dieloch a percentách sú hmotnostné.

Citácie všetkých prihlášok patentov a publikácií sú uvádzané náhradou z.a prenesenie ich textu do tohto opisu.

rod pojmom obvyklé spracovanie sa v nasledujúcich príkladoch rozumie tento postup: pokial' to je potrebné, prid sa voda, zmes sa neutralizuje a extrahuje éterom alebo dichlórmetanom, organická fáza sa oddelí, vysuší síranom sodným, prefiltruje a odparí a zvyšok sa prečistí chromatografiou na silikagéle a/alebo kryštalizáciou. Pokial nie je uvedené inak, RT predstavuje retenčnú dobu v minútach pri HPLC na stĺpci Ľichroscrt> ' RP Salect 3 až 4,7 ' m); elučné činidlo: a = 3,3» kyselina trifluóroctová vo vode, b = izoprop/lalkohol (gradient 3 až 33 £ objemových).

Molekulová hmotnosť zlúčenín bola stanovovaná bombardovaním rýchlymi atómami (FA3; M⁺: pík molekulárneho iónu).

-Príklady prevádzania vynálezu

Príklad 1

2,3 g 33C-Leu-Leu-Val-0H (ktorý sa dá napríklad získať modifikovanou Merrifieldovou technikou syntézy peptidov) sa rozpustí vo zmesi 153 ml dichlórmetánu a 23 ml DMF a roztok sa ochladí na 3 °C. Postupne sa za miešania pridá 3,ô g DCCI, 3,3 g H33t, 3,23 ml ľí-metylmorfolínu a 1 ekvivalent H-Gly-Ala-Pro-Leu-ľyr-OMe a zmes sa mieša d'alších 24 hodín pri 3 °C a 12 hodín pri 25 °C. Potom sa roztok skoncentruje a spracuje vo zrnesnom ionexovom lóži, aby sa zbavil solí. Potom sa roztok prefiltruje a odparí a zvyšok sa prečistí. Získa sa 33C-Leu-Leu-Val-vly-Ala-Pro-Leu-Tyr-3.de.

Podobným sposobom sa získajú tiež následujúce peptidy:

BOC-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OMe;

BOC-His-Aep-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OMe;

BOC-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-dy-Ala-Pro-Leu-Tyr-OMe;

BOC-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Ĺeu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OMe;

BOC-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr—OMe; BOC-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OMe;

BOC-Gly-Asp-Qy-Arg-His-Asp-Leu-OMe;

BOC-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-OMe;

BOC-Gly-Aop-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-OMe;

BOC-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Aep-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-OMe;

BOC-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-PrtJ-Leu-OMe;

BOC-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-OMe;

BOC-GIy-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-OMe.

Príklad 2 l,č g BOC-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OMe sa rozpustí-v 60 ml metanolu, k roztoku sa pridá l,ô ml 2N roztoku hydroxidu sodného zmes sa 3 hodiny mieša pri 20 °C. Potom sa zmes odparí, zvyšok sa dá do vody, okyslí na pH 3 zredenou kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje etylacetátom. Extrakt sa vysuší síranom sodným, opát' odparí a- získaný BOC-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OH sa 2 hodiny mieša pri 20 °C s 20 ml 2i< kyseliny chlorovodíkovej v dioxáne. Potom sa zmes odparí zvyšok 3a prečistí HPLC. Získa sa H-Leu-Leu-Val-C-iy-Ala-Pro--eu-ľyr-OH; L⁺ ô4o.

Podobným spôsobom sa získajú tiež nasledujúce peotidy:

H-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OH; M* 961;

H-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OH; M* 1098;

H-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OH; M* 1252;

H—Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val—Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr—OH; M* 1309; H-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OH; M* 1425; H-Gly-Asp-Gly-Arg-Hia-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OH; M* 1482; H-Gly-Asp-Gly-Arg-HiB-Asp-Leu-OH; M* 769;

- 14 H-Gly-Αερ—Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-OH; M* 882;

H-Gly-Asp-Gly-Arg-Hie-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-OH; M* 1038;

H-Gly-Asp-^Gly-Arg-Hie-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-OH; M* 1109;

H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-OH; M* 1319;

H-Hie—Aep—Leu-Leu—Val—Gly-Ala-Pro-Leu—OH; M* 935;

g—Gly—Arg—His—Asp—Leu— Leu—Val—Gly-Ala—Pro—Leu—OH; M* 1146.

Príklad 3

2,7 g H-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-OH sa 'rozpustí vo 200 ml vodného dimetylformamidu ak: vzniknutému roztoku sa za miešania prikvapká roztok 1,0 g acetylchloridu v 10 ml dichlórmetánu. Vzniknutý roztok sa 10 minút mieša a potom sa skoncentruje. Výsledný peptid Ac-His-Asp-Leu-LeuVal-Gly-Äla-Pro-Ľeu-OH sa odfiltruje; í.l⁺ 97o·

P. r í k 1 a d 4

Podobným sposobom ako v príklade 3 sa tiež získa

Ac-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-OH (;’⁺ 11S9).

rJásledujúce príklady ilustrujú farmaceutické prípravky, ktorá obsahujú zlúčeniny vzorca 1 alebo ich adične soli s kyselinami.

Príklad A

Tablety

Zmes 1 kg n-Oly-Asp-Oly-Arg-nis-Asp-^eu-OH, 10 kg laktózy, ó kg mikrokryštalickej celulózy, 5 kg zemiakového škrobu, 1 kg polyvinylpyrolidónu, 0,3 g mastku a 0,1 g staaranu horečnatáho sa obvyklým spôsobom zlisuje na tablety tak , z nich o' mg účianej zlúčeníny.

Príklad 3

Potiahované tablety

Tablety sa vyrobia podobným sposobom ako v príklade .A, ale dodatočne sa potiahnu obvyklým sposobom povlakom zo sacharózy, zemiakového škrobu, mastku, tragantu a farbiacej . látky.

Príklad C

Kapsle

Kapsle z tvrdej želatíny sa obvyklým spôsobom naplnia 1 kg H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Aso-Ľeu-IH tak, že každá z nich obsahuje ô mg účinnej zlúčeniny.

Príklad D

Injekcie

Roztok 1 kg 1 1,2-propandiolu sa injekcií, v nichž sa Potom sa injekcia za injekcia obsahuje ž

H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Otf vo sterilizuje filtráciou a naplní do za sterilných podmienok lyofilizuje sterilných podmienok zataví. Každá mg účinnej látky.

Príklad E klásť?

511 mg H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH sa zmieša za aseptických podmienok s 99,5 g ropnej vazelíny.

Príklad F

Fľaštičky s injekčným roztokom

Roztok 100 g H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH a 5 hydrogenfosforečnanu dvojsečného .v\ 3 1 rečestilovanej vody sa uvedie na hodnotu pH 5,5 pomocou žN kyseliny chlorovodí kovej, sterilizuje sa filtráciou a naplní čo injekčných fľaštičiek, kde sa za sterilných podaienok lyofilizuje. Fľaštičky sa sterilným sposobom uzavrú. Každá z nich obsahuje 5 mg účinnej látky.

Podobným sposobom je možno získat? farmaceutické prípravky, ktoré obsahujú niektorú z iných účinných zlúčenín vzorca I a/alebo ich fyziologicky vhodných adičných solí s kyselinami.

opakovať?

podmienky konkrétne podmienka

Hore uvedené prípady je možno s podobným úspechom tak, že sa reakčné činidlá a/alebo prevozné , ktoré sú v nich uvedené nahradia obecne alebo opísanými reakčnými činidlami a/alebo prevoznými mi podľa tohto vynálezu.

Na základe zhora uvedeného opisu môže odborník v tomto obore ľahko poznat' základné znaky tohto vynálezu a aniž by sa uchýlil od ducha a rozsahu vynálezu, môže v ňom urobil) rôzne zmeny a modifikácie, za účelom prispôsobenia vynálezu ráznym použitiam a podmienkam.

TV

Claims

PATENTOVÉ N Á R O K Y

1. Lineárne peptidy obsahujúce základnú sekvenciu aminokyselín -His-Asp-Leu- zvolené zo súboru zahrnujúceho peptidy vzorca lc až'In (lc) H-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OH;

(ld) H-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OH;

(le) H-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OH;

(lf) H-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OH;

(lg) H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-Tyr-OH;

(lh) Η-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-OH;

(li) H-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-OH;

(lj) Η-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-OH;

(lk) Η-Gly-Asp-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-OH;

(ll) Η-Gly-Asp-Gly-Ar g-His-Asp- Leu-Leu-Val-Gly-Ala- Pro- Leu-OH;

(lm) Ac-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-OH;

(ln) Ac-Gly-Arg-His-Asp-Leu-Leu-Val-Gly-Ala-Pro-Leu-OH;

kde Ac cre '.stavuje ac?tylskupinu - ich soli.
2. - armacsuticky prípravok, v v z n a c n n u sa t ý m, že obsahuje zlúčeninu podl’a nároku 1 v účinnom množstve pre inhibíciu adhézie buniek a farmaceutický vhodný nosič.
3. Farmaceutický prípravok pódia nároku 2, vyzná č, u j ú c i sa ·. ý a , že množstvo zlúčeniny leží v rozmedzí od 0,05 do 500 mg.
4. Farmaceutický prípravok podía nároku 2, v y značujúci sa t ý m, že množstvo zlúčeniny leží v rozmedzí od 0,
5 do 100 mg.

1S ô. Zlúčeniny podlá nároku 1, pre profylaxiu trombózy, infarktu myokardu, a apoplexie alebo nádorových ochorení.
6. Zlúčeniny podlá nároku 1, pre buniek živočíchov.
7. Zlúčeniny podlá nároku 1, pre somatických buniek živočíchov.
8. Zlúčeniny podlá nároku 1, pre rakovinných buniek cicavcov.