SK322192A3 - Substituted pyrimidines, process for their preparation, pharmaceutical composition containing the same and their use - Google Patents

Description

Substituované pyrimidíny, spôsob ich výroby, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie

Oblasť techniky

Vynález sa týka substituovaných pyrimidínov, ktoré sú účinné pri liečbe vysokého krvného tlaku. Tieto látku sú antagonisty angiotenzinu II, ktorý je aktívnou zložkou systému renín - angiotenzín. Vynález sa týka aj spôsobu ich výroby a farmaceutického prostriedku s jeho obsahom.

Doterajší stav techniky

Angiotenzinogén je premenený na angiotenzín I pôsobením enzýmu renínu. Angiotenzín II (A II) vzniká pôsobením enzýmu konvertujúceho angiotenzín na angiotenzín I. A II má veľmi silný vazokonstrikčný účinok a je považovaný za príčinu vysokého krvného tlaku u celého radu živočíšnych druhov a aj u človeka. A II vyvoláva presorickú odpoveď tak, že sa viaže na špecifické receptorové miesta. Zlúčeniny, ktoré sú predmetom tohto vynálezu, súťažia s A II o tieto väzbové miesta a sú antagonisty presorického účinku A II.

E. E. Alien a ďalší opisujú N-substituované oxopyrimidíny v EP 0419048A.

F. E. Alien a ďalší opisujú 4-oxochinazolíny v EP 0411766A.

D. A. Roberts a ďalší opisujú chinolínové étery v EP 0412848A.

D. J. Carini a ďalší opisujú N-substituované benzimidazoly v US patente 4 880 804. P. Chakravarty a ďalší uvádzajú podobné imidazolové štruktúry v EP 0401030 A, v ktorých je fenylový aromatický kruh nahradený sedemčlenným heterocyklom. Azabenzimidazoly sú opísané P. Heroldom a ďalšími v EP 0415886 A.

D.J. Carini a ďalší opisujú N-substituované imidazoly v EP 0253310, EP 0324377 a US patente 4 916 129.

D. J. Carini a ďalší opisujú N-substituované pyrazoly, pyroly a triazoly v EP 0323841. Podobné pyrazolové deriváty sú opísané N. Naka a ďalšími v EP 0411 507 a iné triazoly sú uvedené L. L. Changom v EP 0412594 A.

-2Všetky vyššie uvedené zlúčeniny sú prehlásené za antagonisty A II.

Zlúčeniny, ktoré sú predmetom tohto vynálezu, sa líšia od predchádzajúcich zlúčenín tým, že obsahujú pyrimidínový kruh, fúzovaný s kruhom pyrolónovým, pyridinónovým, azepinónovým alebo azocinónovým. S výnimkou prvého odkazu (E. E. Alien a ďalší v EP 0419048 A) sú všetky nepeptidové antagonisty A II uvedené vyššie, päťčlenné dusíkaté kruhy, ktoré sú buď samostatné alebo fúzované sfenylovými kruhmi alebo šesťčlenné dusíkaté kruhy, fúzované s fenylovými kruhmi. Zlúčeniny opísané v EP 0419148 sú pyrimidín-4-óny.

R. F. Shuman a ďalší opisujú v US patente 5 039 814 spôsob na syntézu 1(tetrazol-5-yl)benzénov, substituovaných v pozícii 2, ktorý zahrnuje riadenú ortolitiáciu 1-(tetrazol-5-yl)benzénov a následnú reakciu litiovaného medziproduktu elektrofilom. Ako chrániaca skupina na tetrazole sa používa trifenylmetylová skupina.

Jeden postup, ktorý je predmetom tohto vynálezu, sa odlišuje tým, že 2bróm-1-(tetrazol-5-yl)aryl, chránený terc.butylovou skupinou, je konvertovaný na 2(tetrazol-5-yl)aryl-boritovú kyselinu priamo pridaním Mg a súčasne trialkylborátu.

Podstata vynálezu

Podstatu vynálezu tvoria substituované pyrimidíny všeobecného vzorca I

AH

R‘ (O

-3kde R¹, R², R³ a R⁴ sú buď H, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka alebo perfluóralkyl s 1 až 6 atómami uhlíka; R⁵ je atóm vodíka alebo keď n = 1, R⁵ spolu s R³ znamenajú dvojitú väzbu; n je 0 alebo 1; p je 0 až 2; m je 0 až 3; Ar¹ je

kde W je atóm vodíka, : alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, atóm halogénu, hydroxyskupina alebo : alkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka;

Ar² je

kde R⁶ je atóm vodíka, terc.butyl, tri-n-butylstanyl alebo trifenylmetyl; farmaceutický prijateľné soli a N-oxidy týchto zlúčenín.

Výhodnejšie uskutočnenie vynálezu predstavuje všeobecný vzorec II

(II)

-4kde R¹, R², R³ a R⁴ sú buď atóm vodíka, nižší alkyl, obsahujúci 1 až 6 atómov uhlíka alebo perfluóralkyl, obsahujúci 1 až 6 atómov uhlíka; R⁵ je atóm vodíka alebo keď n sa rovná 1, R⁵ spolu s R³ znamenajú dvojitú väzbu; n je 0 alebo 1; Ar¹ znamená

alebo

Ar² znamená •X /

alebo

kde X je

C0jH, cn alebo

R kde R⁶ je atóm vodíka, terc.butyl, tri-n-butylstanyl, trifenylmetyl a farmaceutický prijateľné soli týchto zlúčenín.

Ešte výhodnejšie uskutočnenie tohto vynálezu predstavuje všeobecný vzorec III

-5kde R¹, R^2, R³ a R⁴ sú buď atóm vodíka, metyl, trifluórmetyl, R⁵ znamená atóm vodíka, keď je n rovné 1, R⁵ spolu s R³ znamenajú dvojitú väzbu; n je 0 alebo 1; Ar¹ znamená

a farmaceutický prijateľné soli týchto zlúčenín.

Najvýhodnejšie zlúčeniny, ktoré sú predmetom tohto vynálezu, sú nasledujúce:

2.4- dimetyl-5,7-dihydro-7-[[2‘-(1H-tetrazol-5-yl)[1,1-bifenyl]-4-yl]metyl]-6H-pyrolo[2,3-d]pyrimidín-6-ón a jeho farmaceutický prijateľné soli;

5,7-dihydro-2-metyl-7-[[2‘-(1H-tetrazol-5-yl)[1,1-bifenyl]-4-yl]metyl]-4-trifiuórmetyl)6H-pyrolo[2,3-d]pyrimidín-6-ón a jeho farmaceutický prijateľné soli;

2.4- dimetyl-5,6,8-trihydro-8-[[2‘-(1 H-tetrazol-5-yl)[1,1 -bifenyl]-4-yl]metyl}-7Hpyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón a jeho farmaceutický prijateľné soli;

2-metyl-4-trifluórmetyl-5,6,8-trihydro-8-[[2‘-(1 H-tetrazol-5-yl)[1,1 -bifenyl]-4-yl]metyl]7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón a jeho farmaceutický prijateľné soli;

2.4- dimetyi-5,6,8-trihydro-8-[[6-[2-(1 H-tetrazol-5-yl)fenyl]-3-pyridinyl]metyl]-7Hpyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón a jeho farmaceutický prijateľné soli;

2-metyl-4-trifluórmetyI-5,6,8-t r i hy d ro-8-[[6-[2-(1H-tet razo l-5-y l)fe ny l]-3-py rid i ny I]metyl]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón a jeho farmaceutický prijateľné soli;

2.4- dimetyl-5,6,8-trihydro-8-[[5-[2-(1H-tetrazol-5-yl)fenyl]-2-pyridinyl]-metyl]-7Hpyrido[2,3-d]pyrimidíη-7-όη a jeho farmaceutický prijateľné soli;

-62,4,6-trimetyl-5,6,8-trihydro-8-[[2‘-(1 H-tetrazol-5-yl)[1,1 -bifenyl]-4-yl]-metyl]-7Hpyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón a jeho farmaceutický prijateľné soli;

2,4-dimety l-8-[[2‘-( 1 H-tetrazol-5-yl)[1,1 -bifenyl]-4-yl]-metyl]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón a jeho farmaceutický prijateľné soli.

Zlúčeniny, ktoré sú predmetom vynálezu, môžu byť pripravené spôsobom, ktorý zahrnuje:

a) kondenzáciu, napríklad v prítomnosti anorganickej alebo organickej zásady, pyrimidínu všeobecného vzorca

kde R¹, R², R³, R⁴, R⁵, n a p majú vyššie uvedený význam, Z¹ je odštiepiteľná skupina, ako napríklad halogén (napríklad chlór), metánsulfonyloxyskupina alebo p-toluénsulfonyloxyskupina a R⁷ je nižšia alkylová skupina, s amínom všeobecného vzorca

H₂N - (CH₂)m - Ar¹ - Ar² kde m, Ar¹ a Ar² majú vyššie uvedený význam, alebo

b) reakciu bicyklickej zlúčeniny všeobecného vzorca

kde R¹, R², R³, R⁴, R⁵, n, m, p a Ar¹ majú vyššie uvedený význam a Y je para-bróm alebo para-jód, s kyselinou arylboritou (ako je zlúčenina všeobecného vzorca Ar²B(OH)₂, kde Ar² má vyššie uvedený význam) alebo s arylstanánom v prítomnosti paládiového katalyzátora, alebo

c) kondenzáciu (napríklad v prítomnosti zásady ako je NaH) bicyklickej zlúčeniny všeobecného vzorca

kde R¹, R², R³, R⁴, R⁵, n a p majú vyššie uvedený význam, s biarylovou zlúčeninou všeobecného vzorca

Z’ - (CH₂)_m - Ar' - Ar² kde m, Ar¹ a Ar² majú vyššie uvedený význam a Z¹ je odštiepiteľná skupina, napríklad halogén, metánsulfonyloxyskupina alebo p-toluénsulfonyloxyskupina,

-8alebo

d) odstránenie chrániacej skupiny zo zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde X je

N-'’ kde R⁶ je terc.butyl, tri-n-butylstanyl alebo trifenylmetyl, tak že sa použije napríklad kyslá alebo bázická hydrolýza alebo katalytická hydrogenácia za vzniku zlúčeniny, kde R⁶ je vodík.

alebo

e) reakciu zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde X je -CN, s azidovým činidlom, napríklad s trialkylcíničitým azidom alebo kyselinou azidovodíkovou/azid sodný/chlorid amónny, za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde X je

alebo

f) vytvorenie soli zlúčeniny všeobecného vzorca I s anorganickou alebo organickou zásadou alebo kyselinou, alebo

g) konverziu zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo jej soli na N-oxid pomocou peroxidačného činidla.

Tieto postupy a príprava určitých východiskových látok, používaných pri týchto postupoch, sú uvedené v ďalšom texte s odvolaním sa na predchádzajúce schémy. Príprava nie je uvedená pre tie východiskové látky, ktoré sú všeobecne známe alebo ktoré môžu byť pripravené analogickými metódami zo známych východiskových látok.

-9Schéma

CO,E( •vk /

R⁴ -(CH)„ (^CH2)Pv^-COjEI zásada

R²' '•'O 1

NH

R^,/XNHj

COjEl »^!vL /

R⁴ --(CH^O

A.Ä

NH

R²^ -ri J

POCIj

-Ar¹.

^Afí zásada _H .,--(CHj , h₂n -Ar'.

Ar²

CO,El

R⁴ *(CH)_n Cl <^CHz)P\Us i

r^n^rkde R¹, R², R³, R⁴, R⁵, n, m, p, Ar¹ a Ar² majú význam, definovaný v predchádzajúcom texte.

-10Schéma II

zásada

HjN-(^CH2)m__Ari_y

kde R¹, R², R³, R⁴, R⁵, n, m, p, Ar¹ a Ar² majú význam, definovaný vyššie a Y je para-bróm alebo para-jód.

V schéme I sa kondenzuje β-ketoester 1 s amidínom 2 v prítomnosti zásady, ako je nátriumetanolát v alkoholickom rozpúšťadle, ako je etanol, pri teplote miestnosti alebo pri zahrievaní pod spätným chladičom, za vzniku pyrimidónu 3. Pôsobením oxychloridu fosforečného na pyrimidón 3 pod spätným chladičom vzniká chlórpyrimidínu 4. Reakcia 4 s aminom 5 v prítomnosti organickej zásady, ako je uhličitan draselný v polárnom rozpúšťadle, ako je etanol, butanol alebo dimetylsulfoxid, pri teplote miestnosti alebo pod spätným chladičom poskytuje cieľové pyrimidíny I. Amín 5 môže byť pripravený krížovou kopuláciou arylstanánu alebo arylboritej kyseliny s arylbromidom alebo aryljodidom za katalýzy paládiom a následnou funkcionalizáciou na amín.

- 11 V schéme II môže byť chlórpyrimidín 4 vystavený pôsobeniu amínu 7 v prítomnosti anorganickej zásady, ako je hydrogénuhličitan sodný v alkoholickom rozpúšťadle, ako je etanol alebo n-butanol, pri teplotách v rozmedzí 80 až 150 °C, vznikne tak bicyklická zlúčenina 8. Reakciou zlúčeniny 8 s kyselinou arylboritou 9 v prítomnosti paládiového katalyzátora v rozpúšťadle, ako je dimetylformamid alebo toluén, vzniknú požadované pyrimidíny I. Ak je substituentom na Ar³ nitril, môže byť konvertovaný na tetrazol za štandardných podmienok pomocou azidového činidla.

Kyselina arylboritá 9 môže byť pripravená nasledujúcim spôsobom:

1/ Mg, B/OR7j

Ar²-Br -:-► Ar²-B/OH/₂

2/H* 9 kde Ar² má vyššie uvedený význam a R⁷ je nižšia alkylová skupina, obsahujúca 1 až 6 atómov uhlíka.

Na arylbromid 10 môže takto pôsobiť Mg a triakylborát v aprotickom rozpúšťadle, ako je tetrahydrofurán, pri teplote v rozmedzí -20 až 80 °C. Kyslá alebo bázická hydrolýza poskytuje kyselinu arylboritú 9.

V schéme III chlórpyrimidín 4 môže byť konvertovaný na bicyklickú zlúčeninu 11 pôsobením amoniaku v alkalickom rozpúšťadle, ako je etanol, pri teplote v rozmedzí 100 až 150 °C. Alkylácia zlúčeniny 11 biarylovou zlúčeninou 12 môže byť dosiahnutá napríklad v prítomnosti zásady, ako je NaH v rozpúšťadle, ako je dimetylformamid alebo tetrahydrofurán, za vzniku pyrimidínov I. Ak je substituentom na Ar² nitril, môže byť konvertovaný na tetrazol za štandardných podmienok použitím azidového činidla. Biarylová zlúčenina 12 môže byť pripravená krížovou kopuláciou arylstanánu alebo arylboritej kyseliny s arylbromidom alebo aryljodidom za katalýzy paládiom.

Ak je X tetrazol, výhodnými chrániacimi skupinami tohto tetrazolu sú tie, kde R⁶ je terc.butyl, tri-n-butylstanyl alebo trifenylmetyl. Tieto skupiny môžu byť najlepšie odstránené kyslou alebo bázickou hydrolýzou alebo katalytickou

- 12hydrogenáciou, ako uvádza T. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley-lnter-science (1980).

Schéma ill

kde R¹, R^2, R³, R⁴, n, m, Ar¹ a Ar² majú vyššie definovaný význam a Z predstavuje halogén.

Zlúčeniny, ktoré sú predmetom tohto vynálezu, môžu tiež vytváraž soli s anorganickými alebo organickými kyselinami a zásadami. Do toho vynálezu sú zahrnuté akékoľvek farmaceutický prijateľné soli týchto zlúčenín. Ako príklad týchto solí môžu byť uvedené amónne soli, soli alkalických kovov, ako sú sodík a draslík, soli kovov alkalických zemín, ako je vápnik, soli dicyklohexylamínu, soli Trisu a soli aminokyselín. Je tiež možné tvoriť soli s anorganickými alebo organickými kyselinami, ako je HCI, HBr, maleínová kyselina a fumarová kyselina. Zlúčeniny,

-13ktoré sú predmetom tohto vynálezu, môžu byť bežnými spôsobmi premenené na N-oxidy za použitia peroxidačného činidla.

Tento vynález sa tiež týka farmaceutického prostriedku, zloženého zo zlúčeniny tohto vynálezu a farmaceutický prijateľného nosiča. Vynález sa zvlášť týka antihypertenzného farmaceutického prostriedku, ktorý obsahuje účinné množstvo antihypertenznej zlúčeniny tohto vynálezu spolu s farmaceutický prijateľným nosičom.

Farmaceutické prostriedky sú výhodne určené na orálne podanie. Môžu však byť upravené aj na iné spôsoby podávania, ako napríklad na parenterálne podanie pacientom so zlyhaním srdca.

Pre spoľahlivosť dávkovania je vhodné, aby farmaceutický prostriedok podľa tohto vynálezu bol vo forme dávkovej jednotky. Vhodnými formami dávkových jednotiek sú tablety, kapsuly a prášok v sáčkoch alebo vo fľaštičke. Tieto formy dávkových jednotiek môžu obsahovať od 0,1 do 100 mg zlúčeniny podľa tohto vynálezu, s výhodou 1 až 50 mg.

Zlúčenina podľa tohto vynálezu môže byť podávaná perorálne v rozmedzí dávok približne 0,01 až 100 mg/kg alebo vhodnejšie v rozmedzí dávok 0,1 až 10 mg/kg. Takýto farmaceutický prostriedok môže byť podaný raz alebo šesťkrát denne. Zlúčeniny môžu byť tiež podané parenterálne vo vhodnej liekovej forme.

Farmaceutické prostriedky podľa tohto vynálezu môžu byť pripravované s bežne používaným vehikulom, ako je plnivo, rozvlákňovacie činidlo, spojivo, mazadlo, ochucovacie prísady a podobne. Použité sú zavedené liekové formy, podobné napríklad tým, používaným na prípravu známych antihypertenzných liekov, diuretík, β-blokátorov alebo inhibítorov acetylcholínesterázy.

Tento vynález sa ďalej týka zlúčeniny podľa vynálezu a jej použitia ako účinnej terapeutickej látky. Zlúčeniny, opísané týmto vynálezom, sú zvlášť vhodné na liečbu vysokého krvného tlaku.

Tento vynález ďalej poskytuje spôsob liečby vysokého krvného tlaku u cicavcov vrátane človeka. Liečba spočíva v podávaní antihypertenzne účinného množstva zlúčeniny alebo farmaceutického prostriedku podľa vynálezu postihnutému cicavcovi.

, 14Na prípravu farmaceutických prostriedkov na terapeutické použitie a na liečebné postupy sú s výhodou použité zlúčeniny podľa vynálezu, u ktorých X je CO2H, CN alebo

Vysoká afinita týchto zlúčenín pre receptor angiotenzínu II bola zistená spôsobom, ktorý stanoví väzbu na receptory z potkaních nadobličiek meraním vytlačenia rádioaktívne značeného angiotenzínu II z receptora, ako je opísané v nasledujúcom texte.

Príprava membrán:

1) Anestézia potkaních cicavcov Sprague-Dawley, vážiacich 300 až 400 g, bola uskutočnená CO2 a potom im bol zlomený väz.

2) Nadobličky boli vypreparované a vložené do ľadového sacharózového pufra (0,2M sacharóza, 1 mM EDTA, 10 mM Trizma bázy, pH 7,2).

3) Drieň bola odstránená rozdrvením. Kôre bola rozkrájaná, opláchnutá a homogenizovaná v sklenenom zábrusovom homogenizátóre s 15 ml sacharózového pufra.

4) Centrifugácia prebiehala pri 3000 x g 10 minút (Sorvall RCSC centrifúga, rotor SS34, 6200 otáčok/minútu). Supernatant bol prefiltrovaný cez gázu.

5) Spojené supernatanty boli centrifugované 13 minút pri 12000 x g (ultracentrifúga Beckman, 80Ti rotor, 13000 otáčok/minútu).

6) Supernatant, získaný krokom 5, bol centrifugovaný 60 minút pri 102000 x g (ultracentrifúga Beckman, rotor 80Ti, 38200 otáčok/minútu). Všetky kroky boli uskutočnené pri 4 °C.

7) Peleta bola suspendovaná v 0,5 ml testovacieho pufra (50 mM Tris HCl, 5 mM MgCI₂, 0,2 % hovädzí sérový albumín bez proteáz, pH 7,4 pri 25 °C).

8) Suspenzia bola uschovaná v ľade.

-159) Membránové bielkoviny boli stanovené podľa Lowryho alebo Bradforda, štandardom bol hovädzí sérový albumín.

Stanovenie väzby

Stanovenie bolo uskutočňované trojmo v skúmavkách z umelej hmoty s rozmermi 12 x 75 mm, alebo na platni s 96 prehĺbeninami v konečnom objeme 0,25 ml.

1) Bolo pridaných 140 ml testovacieho pufra.

2) 10 μΙ neznačeného A II, pripraveného v takej koncentrácii, aby konečná koncentrácia pre štandardnú krivku bola v rozmedzí 10'¹° až 10'⁷ a pre nešpecifickú väzbu 10⁴ a testovanej zlúčeniny (napríklad konečná koncentrácia môže byť 25 μΜ, 100 μΜ, 1 μΜ, 10 nM a 100 nM) v 50% dimetylsulfoxide (DMSO) alebo 50% DMSO v kontrolnej vzorke.

3) 50 μΙ suspenzie membrán (10 pg bielkovín)

4) Preinkubácia prebiehala 30 minút pri 25 °C.

5) Bolo pridaných 50 μΙ ¹²⁵I-A II, pripraveného spôsobom, opísaným nižšie (konečná koncentrácia 1 μΜ).

6) Inkubácia prebiehala 35 minút pri 25 °C.

7) Inkubácia bola ukončená pridaním 1 ml testovacieho pufra bez hovädzieho sérového albumínu, vychladeného na 0 °C.

8) Vzorky boli prefiltrované na GF/C filtroch, vopred namočených v testovacom pufri, obsahujúcom 1 % polyetylénimínu.

9) Testovacie skúmavky boli trikrát vypláchnuté 5 ml testovacieho pufra bez hovädzieho sérového albumínu, 0 °C.

10) Filtrové disky boli rozstrihané a vložené do nádobiek. Meranie pomocou čítača gama žiarenia trvalo 1 minútu.

Príprava ¹²⁵I-A II

Špecifická rádioaktivita ¹²⁵I-A II, zakúpeného od New England Nuclear, bola upravená na 500 pCi/nmol pridaním neznačeného AII vo vode.

-161) Po vypočítaní množstva značeného A II a neznačeného A II, nutného na príslušné stanovenie, boli roztoky nariedené, rozdelené, uzavreté a zmrazené až do doby použitia.

2) Bola vypočítaná koncentrácia celkového A II (značeného + neznačeného) po zriedení.

3) V deň pokusu bol rozmrazený príslušný, podiel a objem bol upravený tak, aby koncentrácia bola 5 pmol/ml (alebo 0,25 pmol/50 μΙ) pridaním testovacieho pufra s hovädzím sérovým albumínom bez preteáz. Na dosiahnutie konečnej koncentrácie 1 nM ¹²⁵I-A II v teste bolo pridaných 50 μΙ (alebo 0,25 pmol) na skúmavku do konečného objemu 250 μΙ.

Výsledky týchto pokusov sú uvedené ako inhibičné koncentrácie testovanej zlúčeniny, t.j. koncentrácie nutné na to, aby 50 % rádioaktívne značeného A II bolo vytlačené z receptora (IC50) alebo ako percentá vytlačenia A II z väzby na receptor pri 10‘⁸ M koncentrácii testovanej zlúčeniny (% I). Všetky zlúčeniny, uvedené v príkladoch uskutočnenia vynálezu významne inhibovali väzbu A II v tomto teste. Najčastejšie mali tieto zlúčeniny v tomto teste IC50 rovné 50 μΜ alebo menšie.

Schopnosť antagonizovať účinok angiotenzínu II, ktorou sa vyznačujú zlúčeniny podľa toho vynálezu, sa prejavuje aj v ich antihypertenznom účinku, skúšanom na modeli potkana, infundovanej A II.

Postup skúšky

Potkany boli anestetizované Dial-Uretanom (0,60 ml/kg intraperitoneálne) a do trachey bola zavedená kanyla PR 240. Kanyly PE 50 boli zavedené buď do jednej femorálnej tepny a do oboch femorálnych žíl, alebo do karotidy a zodpovedajúcej jugulárnej žily. Pri kanylácii jugulárnej žily boli zavedené dve kanyly do jednej žily. Začiatok dvanástnika (za žalúdkom) bol kanylovaný cez malý stredový rez (PE 50). Arteriálny tlak a tepová frekvencia boli merané v kanyle v tepne. Po operácii bolo 10 až 15 minút ponechaných na stabilizáciu krvného tlaku. Potom boli podané 3 mg/kg mecamylamínu (1 mg/kg roztoku 3 mg/ml intravenózne) na gangliovú blokádu, ktorá je uskutočňovaná poklesom arteriálneho tlaku o približne 50 mm Hg. Mecamylamín je potom podávaný v 90-minútových

-17intervaloch počas celej doby pokusu. Infúzia A II je podávaná do žilovej kanyly rýchlosťou 0,25 pg/kg.min (0,6 μΙ/min). Pri tejto infúzii sa arteriálny tlak zvýšil na základnú úroveň alebo mierne vyššiu. Hneď ako sa arteriálny tlak stabilizoval infúziou A II, boli zmerané základné hodnoty priemerného arteriálneho tlaku a tepové frekvencie. Potom bola podaná testovaná zlúčenina v suspenzii s metylcelulózou cez kanylu do dvanástnika v dávkach 0,1, 3 alebo 30 mg/kg v objeme 1 ml/kg. Priemerný arteriálny tlak bol tabelovaný 15, 30, 60, 120, 150, 180 210 a 240 minút po podaní testovanej zlúčeniny. Napríkald podanie zlúčeniny, uvedenej v príklade 1 v dávke 3 mg/kg znížilo krvný tlak, závislý na A II, v priemere o 41 % štyri hodiny po podaní.

Je teda zrejmé, že zlúčeniny podľa tohto vynálezu sú účinnými antagonistami A II a hodia sa preto na liečbu vysokého krvného tlaku. Majú tiež význam pri liečbe akútneho a chronického venostázového srdcového zlyhania, primárneho a sekundárneho pľúcneho hyperaldosteronizmu, sekundárneho hyperaldosteronizmu, primárnej a sekundárnej pľúcnej hypertenzie, vyvolanej používaním orálnej antikoncepcie, cievnej poruchy, ako je migréna, Raynaudovej choroby, luminálnej hyperplazie a aterosklerotického procesu, chorôb obličiek alebo obličkovej komplikácie iných chorôb, alebo pri terapiách ako je proteinúria, glomerulonefritis, glomerulárna skleróza, skleroderma, diabetická nefropatia, konečná fáza chorôb obličiek, transplantácie obličiek a iné. Tieto zlúčeniny môžu byť tiež použité na liečbu dysfunkcie ľavej komory, diabetickej retinopatie, Alzheimerovej choroby, posilnenia vedomia, liečbe zvýšeného vnútroočného tlaku a v zlepšení prekrvenia sietnice. Tieto zlúčeniny budú vhodné ako antidepresíva a anxiolytiká a na prevenciu alebo na liečbu opätovného zúženia ciev po angioplastike. Využitie zlúčenín podľa tohto vynálezu na liečbu vyššie uvedených a ďalších chorôb bude zrejmé pracovníkom z danej oblasti techniky.

V nasledujúcich príkladoch sú opísané špecifické postupy. Tieto príklady majú slúžiť na ilustráciu tohto vynálezu, ale nemajú nijako obmedziť vynález, ako je reprezentovaný v priložených príkladoch.

Príklady uskutočnenia vynálezu

-18Príklad 1

2,4-dimetyl-5,7-dihydro-7-[[2'-(1 H-tetrazol-5-yl)[1,1-bifenyl]-4-yl]metyl]-6Hpyrolo[2,3-d]pyrimidín-6-ón

Krok 1) Etyl-[(2,6-dimetyl-3H-pyrimidín-4-ón-5-yl)acetát]

Zmes nátrium-etanolátu (0,060 mol) v etanole (pripravené z 1,6 g sodíka a

100 ml etanolu), acetamidínhydrochloridu (6,5 g, 0,069 mol) a dietyl-(2acetyljantarát)u (15,0 g, 0,060 mol) bola zahrievaná 16 hodín pod spätným chladičom. Zmes bola zahustená, rozmiešaná vo vode (50 ml) a okyslená kyselinou chlorovodíkovou (2 mol.ľ¹, 12 ml). Vodná zmes bola extrahovaná dichlórmetánom, extrakty boli vysušené (MgSO₄) a zahustené. Po rozotrení s éterom bol výťažok 3,9 g (27 %) bieleho tuhého produktu s teplotou topenia 175 až177°C.

¹NMR (DMSO-d₆): Ô 1,10 (t, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 3,20 (s, 2H), 4,05 (q, 2H), 12,2 (br s, 1H).

Analýza pre C10H14N2O3: vypočítané: C 57,13, H 6,71, N 13,32 % nájdené: C 57,10, H 6,63, N 13,25 %.

Krok 2) Etyl-[(4-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-5-yl)acetát]

Zmes etyl-[(2,6-dimetyl-3H-pyrimidín-4-ón-5-yl)acetát]u (1,13 g, 5,4 mmol), oxidochloridu fosforečného (10 ml) a N,N-dimetylanilínu (1,3 ml, 10,3 mmol) bola zahrievaná 3,5 hodiny pod spätným chladičom. Reakčná zmes bola zahustená, naliata na ľad a výsledná zmes bola extrahovaná éterom. Spojené extrakty boli premyté vodou, vysušené (MgSO₄) a po zahustení bolo získaných 1,2 g (98 %) žltého olejovitého produktu.

¹H NMR (DMSO-d₆: δ 1,20 (t, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,60 (s, 3H), 3,80(s, 2H), 4,10 (q, 2H).

Krok 3) 2,4-dimetyl-5,7-dihydro-7-[[2^,-(1 H-tetrazol-5-yl)[1,1 -bifenyl]-4-yl]metyl]-6Hpyrolo[2,3-d]pyrimidín-6-ón

- 19Zmes etyl-[(4-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-5-yl)acetát]u (0,55 g, 2,4 mmol), [5[(4'-aminometyl)[1,1-bifenyl-2-yl]]-1H-tetrazol]hydrochloridu (0,69 g, 2,4 mmol), trietylamínu (0,73 g, 7,2 mmol), nátrium-acetátu (0,60 g, 7,2 mmol) a etanolu (14 ml) bola zahrievaná 5 dní pod spätným chladičom. Zmes bola zahustená a po prečistení rýchlou chromatografiou (10% metanol/trichlóretán) bola získaná žltá tuhá látka. Výťažok po rozotrení s 10% zmesou etanol/dietyléter a rekryštalizáciou z etanolu bol 0,17 g (17 %) bieleho tuhého produktu s teplotou topenia 228 až 229 °C.

¹H NMR (DMSO-de): δ 2,29 (s, 3H), 2,47 (s, 3H), 3,67 (s, 2H), 4,83 (s, 2H), 7,05 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,57 (m, 2H), 7,63 (m, 2H).

Analýza pre C22H19N7O:

vypočítané: C 66,48, H 4,82, N 24,67 %, nájdené: C 66,09, H 4,84, N neurčené (%).

Príklad 2

5,7-dihydro-2-metyl-7-[[2'-(1H-tetrazol-5-yl)[1,1-bifenyl]-4-yl]metyl]-4-(trifluórmetyl)6H-pyrolo[2,3-d]pyrimidín-6-ón

Krok 1) Ety l-[(2-mety l-6-trifluórmety I-3 H-pyrim id í n-4-ón-5-y l)acetát]

Zmes nátrium-etanolátu (0,074 mol) v etanole (pripravené z 1,7 g sodíka a ml etanolu), acetamidínhydrochloridu (3,5 g, 0,037 mol) a dietyl-(2-trifluóracetyljantarát)u (10,0 g, 0,037 mol) bola zahrievaná 20 hodín pod spätným chladičom. Zmes bola zahustená, rozmiešaná vo vode, okyslená koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou na pH 4 a extrahovaná etylacetátom. Extrakty boli premyté soľankou, vysušené (MgSO₄) a po zahustení bola získaná tuhá olejovitá látka. Výťažok po rozotrení so zmesou éter/hexán bol 2,63 g (27 %) bieleho tuhého produktu. Vzorka pre analýzu bola rekryštalizovaná zo zmesou éter/hexán, teplota topenia 108 až 110 °C.

¹H NMR (DMSO-de): δ 1,25 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 2,51 (s, 3H), 3,72 (s, 2H), 4,17 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 13,25 (brs, 1H).

Analýza pre C10HHF3N2O3:

-20vypočítané: C 45,46, H 4,20, N 10,60 % nájdené: C 45,43, H 4,18, N 10,53 %.

Krok 2) Etyl-[(4-chlór-2-metyl-6-trifluórmetylpyrimidín-5-yl)acetát]

Roztok etyl-[(2-metyl-6-trifluórmetyl-3H-pyrimidín-4-ón-5-yl)acetát]u (2,50 g,

9,46 mmol) Ν,Ν-dimetylanilínu (tri kvapky) a oxychloridu fosforečného (35 ml) bola zahrievaná 4,5 hodiny pod spätným chladičom. Zmes bola zahustená, ochladená a bola pridaná ľadová voda. Zmes bola neutralizovaná prídavkom tuhého hydroxidu draselného a extrahovaná éterom. Spojené extrakty boli premyté soľankou, vysušené (MgSO₄) a po zahustení bolo získaných 2,61 g (98 %) žltého olejovitého produktu.

¹H NMR (DMSO-de): δ 1,24 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 2,77 (s, 3H), 3,93 (s, 2H), 4,19 (q, J = 7,0 Hz, 2H).

Krok 3) 5,7-dihydro-2-metyl-7-[[2'-(1 H-tetrazol-5-yI)[ 1,1 -bifenyl]-4-yIjmetyl]-4-(trifluórmetyl)-6H-pyrolo[2,3-d]pyrimidín-6-ón

Zmes Etyl-[(4-chlór-2-metyl-6-trifluórmetylpyrimidín-5-yl)acetát]u (848 mg, 3,00 mmol), [5[(4'-aminometyl)[1,1-bifen-2-yl]]-1H-tetrazol]-hydrochloridu (863 mg, 3,00 mmol), trietylamínu (1,25 ml, 9,00 mmol), nátrium-acetátu (738 mg, 9,00 mmol) a etanolu (10 ml) bola zahrievaná 16 hodín pod spätným chladičom. Zmes bola zahustená, rozmiešaná v hydroxide sodnom (1 mol.ľ¹) a extrahovaná éterom. Vodná fáza bola okyslená koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou na pH 3 a tmavohnedá zrazenina bola oddelená filtráciou. Po prečistení rýchlou chromatografiou (dvakrát 5 až 10% zmes metanol/dichlórmetán) bola získaná hnedá pena. Výťažok po kryštalizácii zo zmesi éter/hexán bol 109 mg (8 %) bieleho tuhého produktu s teplotou topenia 195 až 197 °C.

¹H NMR (DMSO-dg): δ 2,59 (s, 3H), 3,92 (s, 2H), 4,90 (s, 2H), 7,05 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,28 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,52 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,66 (m, 2H).

IR (KBr, cm’¹): 1750 (C=O).

Analýza pre C₂2Hi6F3N₇O:

vypočítané: C 58,54, H 3,57, N 21,72%

-21 nájdené: C 58,58, H 3,71, N 21,44%.

Príklad 3

2,4-dimetyl-5,6,8-trihydro-8-[[2'-(1 H-tetrazol-5-yl)[1,1 -bifenyl]-4-yl]metylj-7Hpyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Krok 1) Etyl-[3-(2,6-dimetyl-3H-pyrimidín-4-ón-5-yl)propionát]

Zmes nátrium-etanolátu (0,069 mol) v etanole (pripravené z 1,6 g sodíka a ml etanolu), acetamidínhydrochloridu (3,3 g, 0,035 mol) a dietyl-acetylglutarátu (8,0 g, 0,035 mol) bola zahrievaná 22 hodín pod spätným chladičom. Zmes bola zahustená, rozmiešaná vo vode, okyslená na pH 4 s koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou a extrahovaná etylacetátom. Extrakty boli premyté soľankou, vysušené (MgSO₄) a zahustené. Po rozotrení s hexánom boli získané 4,0 g (51 %) bieleho tuhého produktu. Vzorka na analýzu bola kryštalizovaná zo zmesi éter/hexán, teplota topenia 114 až 116 °C.

¹H NMR (DMSO-de): δ 1,22 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,40 (s, 3H), 2,54 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 2,81 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 4,10 (q, J = 7,2 Hz, 2H).

Analýza pre CHH16N2O3:

vypočítané: C 58,91, H 7,19, N 12,49 %, nájdené: C 59,18, H 7,25, N 12,20%.

Krok 2) Etyl-[3-(4-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-5-yl)propionát]

Zmes etyl-[3-(2,6-dimetyl-3H-pyrimidín-4-ón-5-yl)propionát]u (3,87 g, 0,017 mol) oxidochloridu fosforečného (40 ml) a N,N-dimetylanilínu (10 kvapiek) bola zahrievaná 2 hodiny pod spätným chladičom. Zmes bola zahustená, ochladená a bola pridaná ľadová voda. Prídavkom tuhého hydroxidu draselného bolo upravené pH na 6 a zmes bola extrahovaná éterom. Extrakty boli vysušené (MgSO₄) a po zahustení bolo získaných 2,95 g (72 %) hnedého olejovitého produktu.

¹H NMR (DMSO-de): δ 1,24 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 2,54 (s, 3H), 2,56 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 2,82 (s, 3H), 3,04 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 4,14 (q, J = 7,2 Hz, 2H).

-22Krok 3) 2,4-d imetyl-5,6,8-trihyd ro-8-[[2'-( 1 H-tetrazol-5-yI)[ 1,1 -bifenyl]-4-yI]metyI]7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes etyl-[3-(4-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-5-yl)propionát]u (1,27 g, 5,21 mol) [5-[(4‘-aminometyI)[1,1-bifen-2-yl]]-1H-tetrazol]hydrochloridu (1,50 g, 5,21 mmol), trietylamínu (2,2 ml, 15,64 mmol), nátriumacetátu (1,28 g, 15,64 mmol) a etanolu (20 ml) bola zahrievaná 5 dní pod spätným chladičom. Zmes bola ochladená a prefiltrovaná, aby sa odstránili nerozpustné látky. Filtrát bol okyslený na pH 4 metanolickou kyselinou chlorovodíkovou a zahustený. Po rýchlej chromatografii (10% metanol/dichlórmetán) a kryštalizáciou zo zmesi etanol/éter bolo získaných 91 mg bieleho tuhého produktu s teplotou topenia 197 až 199 °C.

¹H NMR (DMSO-de): δ 2,35 (s, 3H), 2,42 (s, 3H), 2,72 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,87 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 5,17 (s, 2H). 6,99 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,18 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,54 (m, 2H), 7,65 (m, 2H).

IR (KBr, cm'¹): 1710 (C=O).

Analýza pre C23H21N7O:

vypočítané: C 67,14, H 5,14, N 23,83 %, nájdené: C 67,38, H 5,39, N 24,19%.

Zlúčenina 2,4-d imety I-5,6,8-trihyd ro-8-[[2'-( 1 H-tet razol-5-y I) [ 1,1 -b ifeny l]-4yl]-metyl]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón môže byť tiež pripravená nasledujúcim alternatívnym postupom podľa schémy II.

Krok 1) 2,4-dimetyl-5,6,8-trihydro-8-[(4-brómfenyl)metyl]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín7-ón

Zmes etyl-[3-(4-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-5-yl)propionát]u (8,4 g, 0,035 mol), (4-brómbenzylarnín)hydrochloridu (8,5 g, 0,038 mol), hydrogénuhličitanu sodného (5,8 g, 0,070 mol) a 1-butanolu (75 ml) bola zahrievaná 48 hodín pod spätným chladičom. Zmes bola zriedená etylacetátom (30 ml) a premytá vodou (100 ml), 10% vodným roztokom kyseliny octovej (50 ml), opäť vodou (100 ml), nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného (2 x 100 ml), vysušená (MgSO₄) a po zahustení bola získaná žltá tuhá látka. Výťažok po rozotrení s hexánom (50 ml) bol 8,3 g (69 %) belavého tuhého produktu s teplotou topenia 123 až 124 °C.

-23¹H NMR (DMSO-de): δ 2,34 (s, 3H), 2,42 (s,3H), 2,71 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 2,86 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 5,13 (s, 2H), 7,22 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,44 (d, J = 8,3 Hz, 2H).

Krok 2) 5-(2-brómfenyl)-1 H-tetrazol

Zmes 2-brómbenzonitrilu (10,0 g, 0,055 mol), azidu sodného (3,9 g, 0,060 mol), chloridu amónneho (3,2 g, 0,060 mol) a dimetylformamidu (90 ml) bola zahrievaná 18 hodín na 100 °C. Zmes bola zahustená, rozmiešaná vo vode a alkalizovaná (pH 9) hydroxidom draselným (1 mol.ľ¹). Vodná zmes bola extrahovaná éterom (extrakt bol odstránený) a okyslená kyselinou chlorovodíkovou (2 mol.ľ¹). Vyzrážaný produkt bol oddelený filtráciou, výťažok bol 9,1 g (73 %) belavej tuhej látky s teplotou topenia 179 až 181 °C.

¹H NMR (DMSO-d₆); δ 7,56 (m, 2H), 7,69 (dd, J = 7,0 Hz, 2,1 Hz, 1H), 7,86 (dd, J = 7,6 Hz, 1,3 Hz, 1H).

Krok 3) 1-terc.butyl-5-(2-brómfenyl)-1 H-tetrazol

K roztoku 5-(2-brómfenyl)-1H-tetrazolu (7,9 g, 0,035 mol) v kyseline trifluóroctovej (35 ml) bol pridaný terc.butylalkohol (5,2 g, 0,070 mol) a kyselina sírová (1,0 ml, 0,0175 mol). Po 18 hodinách bol roztok zahustený a zvyšok bol rozmiešaný v etylacetáte. Zmes bola premytá vodou, hydroxidom sodným (2,5 mol.ľ¹), opäť vodou, vysušená (MgSO₄) a zahustená. Výťažok po prečistení rýchlou chromatografiou (20% etylacetát/hexán) bol 6,6 g (67 %) svetložltého olejovitého produktu.

¹H NMR (DMSO-de): δ 1,74 (s, 9H), 7,55 (m, 2H), 8,06 (m, 2H).

Krok 4) Kyselina 2-[(1 -terc.butyl)-1 H-tetrazol-5-yIjfenylboritá

K suchým horčíkovým hoblinám (76 mg, 3,13 mmol) v tetrahydrofuráne (1 ml) bol pridaný roztok 1-terc.butyl-5-(2-brómfenyl)-1H-tetrazolu (733 mg, 2,61 mmol) v tetrahydrofuráne (1,5 ml). Bol pridaný 1,2-dibrómetán (20 ml) a zmes bola mierne zohriata teplometom. Po 5 minútach bol pridaný triizopropylborát (564 mg, 3,00 mmol) a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 23 hodín. Bol pridaný ľad a kyselina chlorovodíková (0,5 mol.ľ¹, 7 ml) a zmes bola miešaná 5 minút. Zmes bola extrahovaná éterom a spojené extrakty boli extrahované hydroxidom sodným

-24(1 mol.ľ¹, 10 ml). Vodné extrakty boli prefiltrované a okyslené na pH 3 kyselinou chlorovodíkovou (2 mol.ľ¹). Vyzrážaný produkt bol oddelený filtráciou, výťažok bol 306 mg (4 %) belavej tuhej látky s teplotou topenia 112 až 115 °C.

¹H NMR (DMSO-d₆): δ 1,72 (s, 9H), 7,46 (m, 2H), 7,90 (m, 2H).

Krok 5) 2,4-dimetyl-5,6,8-trihydro-8-[[2^,-(1 -terc.butyl-1 H-tetrazol-5-yl)[1,1-bifenyl]4-yl]-metyl]-7H-pyrido[2,3-djpyrimidín-7-ón

Zmes 2_l4-dimetyl-5,6,8-trihydro-8-[(4-brómfenyl)metyl]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu (1,08 g, 3,43 mmol), kyseliny 2-[(1-terc.butyl)-1H-tetrazol-5-yl]fenylboritej (844 mg, 3,12 mmol), trietylamínu (1,30 ml, 9,36 mmol), tetrakis(trifenylfosfín)paládia (108 mg, 0,094 mmol) a dimetylformamidu (15 ml) bola zahrievaná 22 hodín pri 100 °C. Zmes bola zahustená, rozmiešaná v trichlórmetáne a premytá soľankou. Organická fáza bola vysušená (MgSO₄) a zahustená. Výťažok po prečistení rýchlou chromatografiou (60 % etylacetát/hexán) bol 1,05 g (66 %) žltého penovitého produktu.

¹H NMR (DMSO-de): δ 2,35 (s, 3H), 2,43 (s, 3H), 2,71 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 2,85 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 5,18 (s, 2H), 6,97 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,18 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,44 (dd, J = 7,3 Hz, 1,3 Hz, 1H), 7,55 (m, 2H), 7,76 (dd, J = 7,5 Hz, 1,3 Hz, 1H).

Krok 6) 2,4-dimetyI-5,6,8-trihydro-8-[[2'-( 1 H-tetrazol-5-yl)[1,1 -bifenyl]-4-yl]-metyI]7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 2,4-dimetyl-5,6,8-trihydro-8-[[2'-(1 -terc.butyl-1 H-tetrazol-5-yl)[1,1-bifenyl]-4-yl]-metyI]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu (200 mg, 0,428 mmol), kyseliny metánsulfónovej (280 ml, 4,28 mmol) a toluénu (4 ml) bola zahrievaná 18 hodín pod spätným chladičom. Zmes bola zahustená a po pridaní vody (2 ml) a hydroxidu draselného (1 mol.ľ¹, 4,5 ml) bol získaný roztok s pH 8. Zmes bola extrahovaná etylacetátom, aby boli odstránené nezreagované vstupné látky, a vodná fáza bola okyslená kyselinou chlorovodíkovou (1 mol.ľ¹1) na pH 5. pričom sa vytvorila gumovitá zrazenina. Zrazenina bola extrahovaná do etylacetátu, roztok bol vysušený (MgSO₄) a po zahustení bol získaný bezfarebný olejovitý produkt. Výťažok po rozotrení produktu so zmesou acetón/éter, bol 70 mg (40 %) bielej tuhej látky s teplotou topenia 197 až 198 °C.

-25¹H NMR (DMSO-de): δ 2,35 (s, 3H), 2,42 (s, 3H), 2,72 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,87 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 5,17 (s, 2H), 6,99 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,18 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,54 (m, 2H), 7,65 (m, 2H).

IR (KBr, cm’¹): 1710 (C=O).

Príklad 4

2-metyl-4-trifluórmetyl-5,6,8-trihydro-8-[[2'-(1 H-tetrazol-5-yl)[1,1-bifenyl]-4-yl]metyl]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Krok 1) Dietyl-(trifluóracetylglutarát)

K roztoku nátrium-etanolátu (0,217 mol) v etanole (pripravenému z 5,0 g sodíka a 220 ml etanolu) bol pridaný etyl-(trifluóracetoacetát) (40,0 g, 217 mol). Po 10 minútach bol pridaný etyl-(3-brómpropionát) (35,0 g, 0,194 mol) zmes bola zahrievaná 24 hodín pod spätným chladičom. Reakčná zmes bola zahustená, rozmiešaná v éteri a premytá vodou. Éterové vrstvy boli vysušené (MgSO₄) a po zahustení bolo získaných 50 g žltého oleja. Výťažok po destilácii (100 až 110 °C/3333 Pa) bol 14,0 g (23 %) bezfarebného olejovitého produktu.

¹H NMR (DMSO-de): δ 1,20 (m, 6H), 2,93 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,62 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 4,13 (m, 5H).

Krok 2) Etyl-[3-(2-metyl-6-trifluórmetyl-3H-pyrimidín-4-ón-5-yl)propionát]

K roztoku nátrium-etanolátu (0,026 mol) v etanole (pripraveného z 0,60 g sodíka a 30 ml etanolu) bol pridaný dietyl-(trifluóracetylglutarát) (3,70 g, 0,013 mol) a acetamidínhydrochlorid (1,23 g, 0,013 mol). Reakčná zmes bola zahrievaná 18 hodín pod spätným chladičom, zahustená a rozmiešaná vo vode. Zmes bola okyslená kyselinou chlorovodíkovou (2 mol.ľ¹) na pH 4 a extrahovaná dichlórmetánom. Extrakty boli vysušené (MgSO₄) a po zahustení bola získaná biela tuhá látka. Výťažok po rozotrení v hexáne bol 0,87 g bieleho tuhého produktu.

¹H NMR (DMSO-d₆): δ 1,16 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,45 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 2,70 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 4,06 (q, J = 7,0 Hz, 2H).

-26Krok 3) Etyl-[3-(4-chlór-2-metyl-6-trifluórmetyl-pyrimidín-5-yl)propionát]

Zmes etyl-[3-(2-metyl-6-trifluórmetyl-3H-pyrimidín-4-ón-5-yl)propionát]u (0,61 g, 2,20 mmol), N,N-dietylanilínu (0,33 g, 2,2 mmol) a oxychloridu fosforečného (8 ml) bola zahrievaná 2 hodiny pod spätným chladičom. Zmes bola zahustená, vliata na ľad a extrahovaná éterom. Kombinované extrakty boli vysušené (MgSO₄) a po zahustení bolo získaných 0,65 g hnedého olejovitého produktu.

¹H NMR (DMSO-de): δ 1,18 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 2,56 (t, J = 8,5 Hz, 2H), 2,67 (s, 3H), 3,06 (i, J = 8,5 Hz, 2H), 4,10 (m, 2H).

Krok 4) 2-metyl-4-trifluórmetyl-5,6,8-trihydro-8-[[2'-(1 H-tetrazol-5-yl)[1,1 -bifenyl]-4yl]-metyl]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes etyl-[3-(4-chlór-2-metyl-6-trifluórmetyl-pyrimidín-5-yl)propionát]u (1,30 g, 4,40 mmol), 5-[(4‘-aminometyl)[1,1-bifen-2-ylÍ]-1H-tetrazol]hydrochloridu (1,26 g, 4,40 mmol), nátrium-acetátu (1,08 g, 13,20 mmol) a trietylamínu (1,33 g, 13,20 mol) v 1-butanole (25 ml) bola zahrievaná 24 hodín pod spätným chladičom. Zmes bola zahustená a roztrepaná medzi trichlórmetán a vodu. Vrstvy boli oddelené a organická fáza bola premytá vodou, vysušená (MgSO₄) a po zahustení bol získaný žltý olej. Výťažok po prečistení rýchlou chromatografiou (7% zmes metanol/dichlórmetán) a po rekryštalizácii zo zmesi acetón/éter (dvakrát) bol 0,07 g bieleho tuhého produktu s teplotou topenia 219 až 220 °C.

¹H NMR (DMSO-d₆): δ 2,53 (s, 3H), 2,81 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 3,07 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 5,2 (s, 2H), 7,00 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,22 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,56 (m, 2H), 7,65 (m, 2H).

Analýza pre C23H18F3N7O:

vypočítané: C 59,35, H 3,90, N 21,07%, nájdené: C 59,12, H 3,85, N 21, 29%.

Príklad 5

-272,4-dimetyl-5_I6,8-trihydro-8-[[6-[2-(1 H-tetrazol-5-yl)fenyl]-3-pyridinyl]metyl]-7Hpyrido-[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Krok 1) 2,4-dimetyl-5,6,8-trihydro-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

K podchladenému (-78 °C) roztoku etyl-[3-(4-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-5yl)-propionát]u (27,1 g, 0,111 mol) pripraveného podľa postupu, opísaného v kroku 2 príkladu 3, v etanole (110 ml) bol pridaný kvapalný amoniak (20 ml). Zmes bola 12 hodín zahrievaná v tlakovej nádobe na 150 °C a zahustená. Bola pridaná voda (20 ml) a zmes bola extrahovaná díchlórmetánom. Extrakty boli vysušené (MgSO₄) a po zahustení bola získaná hnedá tuhá látka. Výťažok po prečistení rýchlou chromatografiou (2% zmes metanol/dichlórmetán) a rozotrení so zmesou éter/hexán bol 14,9 g (76 %) belavého kryštalického produktu s teplotou 167 až 168 °C.

¹H NMR (DMSO-de): δ 2,30 (s, 3H), 2,40 (s, 3H), 2,52 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 2,80 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 10,64 (s, 1 H).

IR (KBr, cm'¹): 1690.

Analýza pre C9HHN3O:

vypočítané: C 61,00, H 6,26, N 23,71 % nájdené: C 61,04, H 6,07, N 24,10%.

Krok 2) 2-bróm-5-hydroxymetylpyridín

K vychladenej (0 °C) suspenzii kyseliny 6-brómnikotínovej (13,8 g, 0,068 mol) pripravenej podľa Campbella a kol. Aust. J. Chem. 1971, 24, 277, v tetrahydrofuráne (20 ml) bol za miešania pridaný roztok 1 mol.ľ¹ boranu(3) v tetrahydrofuráne (204 ml, 0,204 mol). Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 3 hodiny, ochladená na 0 °C a bol pridaný nasýtený vodný roztok uhličitanu draselného a voda. Zmes bola extrahovaná etylacetátom, spojené extrakty boli premyté vodou, vysušené (MgSO₄) a po zahustení bol získaný žltý olej. Výťažok po prečistení rýchlou chromatografiou (2% zmes metanol/dichlórmetán) bol 7,5 g (59 %) žltého tuhého produktu s teplotou topenia 49 až 51 °C.

¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4,50 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 5,40 (t, J = 5,7 Hz, 1 H), 7,57 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,70 (dd, J = 8,3 Hz, 1,5 Hz, 1H), 8,35 (d, J = 1,5 Hz, 1H).

-28Krok 3) 2-bróm-5-(terc.butyldimetylsilyloxy)metylpyridín

K zmesi 2-bróm-5-hydroxymetylpyridínu (4,7 g, 0,023 mol) a trietylamínu (3,4 ml, 0,024 mol) v dimetylformamide (30 ml) bol za miešania pridaný (terc.butyldi-metylsilyl)chlorid. Po hodine bola zmes zriedená éterom a premytá vodou. Éterová fáza bola vysušená (MgSO₄) a po zahustení bolo získaných 6,8 g (97 %) bezfarebného olejovitého produktu.

¹H NMR (DMSO-d₆): δ 0,10 (s, 6H), 0,90 (s, 3H), 4,73 (s, 2H), 7,65 (m, 2H), 8,25 (d, J = 1,5 Hz, 1 H).

Krok 4) [5-(terc. buty Id imety Is ily loxymety l)pyrid í η-2-y Ijtri-1 -butylstanán

K podchladenému (-78 °C) roztoku 2-bróm-5(terc.butyldimetylsilyloxy)metyl-pyridínu (6,8 g, 0,022 mol) v tetrahydrofuráne (60 ml) bol za miešania pridaný 1,6 mol.ľ¹ roztok lítium-1-butanolátu v hexáne (14,1 ml, 0,022 mol). Po jednej hodine bol pridaný tri-1 -butylchlórstanán (6,1 ml, 0,022 mol) a miešanie pokračovalo ešte tri hodiny. Bola pridaná voda a zmes bola oteplená na teplotu miestnosti a extrahovaná éterom. Spojené extrakty boli vysušené (MgSO₄) a po zahustení bolo získaných 11,5 g (100 %) hnedého produktu.

¹H NMR (DMSO-d₆): δ 0,10 (s, 6H), 0,80 (m, 18H), 1,10 (m, 6H), 1,25 (m, 6H), 1,50 (m, 6H), 4,73 (s, 2H), 7,55 (m, 2H), 8,61 (d, J = 2,2 Hz, 1H).

Krok 5) 2-[5-(terc.butyldimetylsilyloxymetyl)pyridín-2-yl]benzonitril

Zmes [5-(terc.butyldimetylsilyloxymetyl)pyridín-2-yl]tri-1 -butylstanánu (11,5 g, 0,022 mol), 2-jódbenzonitrilu (5,1 g, 0,022 mol), jodidu meďnatého (0,43 g, 0,002 mol) a [bis(trifenylfosfín)paládium]chloridu (0,80 g, 0,001 mol) v tetrahydrofuráne (40 ml) bola zahrievaná 48 hodín pod spätným chladičom. Zmes bola zriedená éterom a premytá nasýteným vodným roztokom chloridu amónneho, vodným roztokom amoniaku, vodou a soľankou, vysušená (MgSO₄) a po zahustení bolo získaných 4,9 g (67 %) hnedého olejovitého produktu.

¹H NMR (DMSO-d₆):ô 0,10 (s, 6H), 0,90 (s, 9H), 4,73 (s, 2H), 7,45 (m, 1H), 7,60 (m, 4H), 7,75 (dd, J = 7,9 Hz, 2,2 Hz, 1H), 8,50 (d, J = 2,2 Hz, 1H).

-29Krok 6) 2-[5-(hydroxymetyl)pyridín-2-yl]benzonitril

Zmes 2-[5-(terc.butyldimetylsilyloxymetyl)pyridín-2-yl]benzonitrilu (4,9 g,

0,021 mol) a (tetra-l-butylamónium)fluoridu (hydrát) (8,1 g, 0,031 mol) v tetrahydrofuráne (60 ml) bola miešaná 18 Hodín pri teplote miestnosti. Zmes bola zriedená etylacetátom, premytá vodou a soľankou, vysušená (MgSO₄) a po zahustení bolo získaných 3,5 g (8 %) hnedého tuhého produktu s teplotou topenia 152 až 153 °C.

¹H NMR (DMSO-de): δ 4,5)61 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 5,42 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 7,57 (dd, J = 7,3 Hz, 1,5 HZ, 1H), 7,65 (m, 4H), 7,80 (dd, J = 7,9 Hz, 1H), 8,52 (d, J = 2,2 Hz, 1H).

Krok 7) 2-[5-(chlórmetyl)pyridín-2-yl]benzonitril

K vychladenému (0 °C) roztoku 2-[5-(hydroxymetyl)pyridín-2-yl]benzonitrilu (4,3 g, 0,020 mol) a chloridu zinočnatého (0,09 g, 0,61 mmol) v 1,4-dioxáne (40 ml) bol pridaný po kvapkách tionyl dichlorid (1,50 ml, 0,020 mol). Zmes bola miešaná 18 hodín pri teplote miestnosti, rozriedená éterom, premytá vodou a soľankou, vysušená (MgSO₄) a po zahustení bolo získaných 4,30 g (92 %) hnedého tuhého produktu s teplotou topenia 97 až 98 °C.

¹H NMR (DMSO-de): δ 4,90 (s, 2H), 7,63 (dd, J = 7,7 Hz, 1,3 Hz, 1 H), 7,80 (m, 1 H), 7,85 (m, 2H), 7,95 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 8,01 (dd, J = 8,0 Hz, 2,2 Hz, 1H), 8,80 (d, J = 2,2 Hz, 1H).

Krok 8) 2,4-dimetyl-5,6,8-trihydro-8-[[6-(2-kyanofenyl)-3-pyridinyl]metyl]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

K suspenzii hydridu sodného (60% disperzia v minerálnom oleji; 0,42 g, 9,18 mmol) v dimetylformamide (20 ml) bol za miešania pridaný 2,4-dimetyl-5,6,8trihydro-7H-pyrido-[2,3-d]pyrimidín-7-ón (1,55 g, 8,75 mmol). Po hodine bol v niekoľkých dávkach pridaný 2-[5-(chlórmetyl)pyridín-2-yl]benzonitril (2,00 g, 8,75 mmol). Miešanie pokračovalo 4 hodiny a zmes bola zahustená. Bola pridaná voda a zmes bola extrahovaná dichlórmetánom. Spojené extrakty boli vysušené

-30(MgSO₄) a po zahustení bolo získaných 3,20 g (100 %) tuhého hnedého produktu s teplotou topenia 161 až 162 °C.

¹H NMR (DMSO-ds): δ 2,36 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,78 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 2,87 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 5,27 (s, 2H), 7,61 (m, 1H), 7,80 (m, 4H), 7,93 (dd, J = 7,8 Hz, 1,3 Hz, 1 H), 8,70 (d, J = 1,3 Hz, 1 H).

Krok 9) 2,4-dimetyl-5,6,8-trihydro-8-[[6-(2-(1 H-tetrazol-5-yl)fenyl)-3-pyridinyl]metyl]7H-pyrido-[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 2,4-dimetyl-5,6,8-trihydro-8-[[6-(2-kyanofenyl)-3-pyridinyl]metyl]-7Hpyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu (4,0 g, 10,8 mmol), azidu sodného (0,8 g, 11,9 mmol) a tri-1-butylchlórstanánu (3,9 g, 11,9 mmol) v xyléne (100 ml) bola zahrievaná 24 hodín pod spätným chladičom. Bolo pridaných ďalších 1,5 ekvivalentov azidu sodného a tri-1-butylchlórstanánu a zahrievanie pokračovalo 24 hodín. Reakčná zmes bola zahustená a bola pridaná 2 mol.ľ¹ kyselina chlorovodíková. Zmes bola extrahovaná éterom, extrakt bol odstránený, pH zmesi bolo upravené 50% hydroxidom sodným na hodnotu 5. Vodná fáza bola extrahovaná dichlórmetánom a extrakty boli premyté vodou, vysušené (MgSO₄) a zahustené. Po prečistení rýchlou chromatografiou (5% métanol/dichlórmetán) a rekryštalizácii zo zmesi etanol/voda bolo získaných 2,8 g (63 %) bieleho tuhého produktu s teplotou topenia 217 až 218 °C.

¹H NMR (DMSO-d₆): δ 2,35 (s, 3H), 2,44 (s, 3H), 2,73 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 2,85 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 5,18 (s, 2H), 7,33 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,65 (m, 5H), 8,36 (s, 1H).

IR (KBr, cm'¹): 1690.

Analýza pre C₂3H₂oN₈0:

vypočítané: C 64,07, H 4,89, N 27,17 %, nájdené: C 63,87, H 4,81, N 27,56 %.

Príklad 6

2-metyl-4-trifluórmetyl-5,6,8-trihydro-8-[[6-(2‘-(1H-tetrazol-5-yl)fenyl)-3-pyridinyl]metyl]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

-31 Krok 1) 2-metyl-4-trifluórmetyl-5,6,8-trihydro-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Roztok etyl-[(3-(4-chlór-2-metyl-6-trifluórmetyl-pyrimidín-5-yl)propionát]u (0,50 g, 1,70 mmol), pripravený podľa postupu opísaného v odstavci krok 3) v príklade 4, v etanole nasýtenom amoniakom (15 ml) bol zahrievaný v zatavenej trubici 18 hodín pri 110 °C. Zmes bola zahustená, rozmiešaná v dichlóretáne a premytá vodou. Organická vrstva bola vysušená (MgSO₄) a po zahustení bolo získaných 0,33 g (84 %) bieleho tuhého produktu s teplotou topenia 147 až 150 °C. ¹H NMR (DMSO-de): δ 2,53 (s, 3H), 2,61 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 3,01 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 11,30 (s, 1H).

Krok 2) 2-metyl-4-trifluórmetyl-5,6,8-trihydro-8-[[6-(2-kyanofenyl)-3-pyridinyl]metyl]7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

K suspenzii hydridu sodného (60% disperzia v minerálnom oleji, 33 mg, 1,40 mmol) v dimetylformamide bol pridaný pri teplote miestnosti 2-metyl-4-trifluórmetyl5,6,8-trihydro-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón (0,32 g, 1,40 mmol). Po 30 minútach bol pridaný 2-[5-(chIórmetyl)pyridín-2-yI]benzonitril (0,32 g, 1,40 mmol), pripravený podľa postupu, uvedeného v kroku 7 príkladu 5. Zmes bola miešaná 42 hodín, rozdelená vodou a extrahovaná dichlórmetánom. Spojené extrakty boli vysušené (MgSO₄) a po zahustení bolo získaných 0,51 g (86 %) žltého penovitého produktu. ¹H NMR (DMSO-de): δ 2,58 (s, 3H), 2,86 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 3,11 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 5,31 (s, 2H), 7,62 (m, 1H), 7,85 (m, 5H), 8,75 (s, 1H).

Krok 3) 2-metyl-4-trifluórmetyl-5,6,8-trihydro-8-[[6-[2‘-(1 H-tetrazol-5-yl)fenyl]-3pyridinyl]metyl]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 2-metyl-4-trifluórmetyl-5,6,8-trihydro-8-[[6-(2-kyanofenyl)-3-pyridinyl]metyl]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu (0,50 g, 1,23 mol), azidu sodného (0,08 g, 1,23 mmol) a tri-1-butylchlórstanánu (0,40 g, 1,23 mmol) v xyléne (9 ml) bola zahrievaná pod spätným chladičom. Bola pridaná kyselina chlorovodíková (1 mol.ľ ¹, 1,2 ml) a zmes bola zriedená dichlórmetánom, premytá vodou, vysušená (MgSO₄) a zahustená. Po prečistení rýchlou chromatografiou (5% zmes metanol/dichlórmetán) bol získaný penovitý produkt. Výťažok po rozotrení a 10%

-32zmesou etylacetát/éter bol 0,145 g (25 %) belavej tuhej látky s teplotou topenia 189 až 191 °C.

¹H NMR (DMSO-de): δ 2,55 (s, 3H), 2,82 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 3,07 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 5,20 (s, 2H), 7_;31 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,65 (m, 5H), 8,39 (s, 1 H).

Analýza pre C22H17F3N8O:

vypočítané: C 56,65, H 3,67, N 24,03 %, nájdené: C 56,22, H 4,11, N 23,44 %.

Príklad 7

2,4-dimetyl-5,6_l8-trihydro-8-[[5-[2-(1H-tetrazol-5-yl)fenyl]-2-pyridinyl]metyl]-7Hpyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Krok 1) (6-metylpyridín-3-yl)-trifluórmetánsulfonát

K vychladenému (0 °C) roztoku 3-hydroxy-6metylpyridínu (14,0 g, 0,128 mol) v pyridíne (70 ml) bol za miešania po kvapkách pridaný trifluórmetánsulfónanhydrid (39,8 g, 0,141 mol). Zmes bola miešaná 5 hodín pri teplote miestnosti. Bola pridaná voda a zmes bola extrahovaná éterom. Extrakt bol premytý soľankou, vysušený (MgSCU) a po zahustení bolo získaných 27,3 g (88 %) hnedého olejovitého produktu.

¹H NMR (DMSO-de): δ 2,50 (s, 3H), 7,45 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,90 (dd, J = 9,2 Hz, 2,3 Hz, 1H), 8,60 (d, J = 2,3 Hz, 1H).

Krok 2) (6-metylpyrídín-1-oxid-3-yl)-trifluórmetánsulfonát

K roztoku (6-metylpyridín-3-yl)-trifluórmetánsulfonátu (27,3 g, 0,113 mol) v dichlórmetáne (140 ml) bola za miešania po častiach pridaná kyselina 3chlórperoxybenzoová (21,5 g, 0,124 mol). Po 16 hodinách bola odfiltrovaná zrazenina a filtrát bol zahustený. Výťažok po prečistení rýchlou chromatografiou (2% metanol/dichlórmetán) bol 25,0 g (86 %) bezvodého kryštalického produktu s teplotou topenia 47 až 48 °C.

¹H NMR (DMSO-d₆): δ 2,36 (s, 3H), 7,56 (dd, J = 8,9 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,9 Hz,

1H), 8,84 (d, J = 2,3 Hz, 1H).

-33Krok 3) (6-hydroxymetylpyridín-3-yl)-trifluórmetánsulfonát

K vychladenému roztoku (0 °C) (6-metylpyridín-1 -oxid-3-yl)-trifluórmetánsulfonátu (25,0 g, 0,097 mol) bol za miešania po kvapkách pridaný trifluóracetanhydrid (69,0 ml, 0,487 mol). Zmes bola miešaná 30 minút pri teplote miestnosti a potom zahrievaná jednu hodinu pod spätným chladičom. Zmes bola ochladená na teplotu miestnosti a bol pridaný 10% vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného (400 ml). Výsledná zmes bola extrahovaná dichlórmetánom a extrakty boli premyté soľankou, vysušené (MgSO₄) a zahustené. Výťažok po prečistení rýchlou chromatografiou (2% metanol/dichlórmetán) bol 10,0 g (4 %) bezfarebného olejovitého produktu.

¹H NMR (DMSO-de): δ 4,60 (s, 1H), 5,60 (s, 1H), 7,64 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,03 (dd, J = 8,8 Hz, 2,8 Hz, 1 H), 8,67 (d, J = 2,8 Hz, 1 H).

Krok 4) 2-(2-terc.butyl-1 H-terazol-5-yl)fenyltri-1-butylstanán

K podchladenému (-78 °C) roztoku 1-terc.butyl-5-(2-brómfenyl)-1H-tetrazolu (12,3 g, 0,043 mol), ktorý bol pripravený podľa postupu, opísaného v kroku 3 alternatívnej syntézy podľa príkladu 3, v tetrahydrofuráne (80 mi) bol pridaný 1,6 mol.ľ¹ roztok lítium-(1-butanolát)u v hexáne (32,7 ml, 0,052 mol). Po jednej hodine bol pridaný tri-1-butylchlórstanán (17,1 g, 0,052 mol) a zmes bola miešaná 3 hodiny pri -78 °C. Zmes bola zohriata na teplotu miestnosti a miešaná 18 hodín. Bola pridaná voda a zmes bola extrahovaná éterom. Spojené extrakty boli premyté vodou, soľankou, vysušené (MgSO₄) a po zahustení bol získaný hnedý olej. Po odstránení prebytku tri-1-butylchlórstanánu a zvyšných východiskových látok destiláciou pod vysokým vákuom bolo získaných 9,6 g (45 %) hnedého olejovitého produktu.

¹H NMR (DMSO-de): δ 0,78 (t, J = 7,3 Hz, 9H), 0,93 (t, J = 8,3 Hz, 6H), 1,21 (m, 6H), 1,43 (m, 6H), 7,43 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,60 (dd, J =

8,9 Hz, 2,3 Hz, 1H), 8,0 (dd, J = 8,5 Hz, 2,3 Hz, 1H).

Krok 5) 2-terc.butyl-5-[2-[(2-hydroxymetyl)pyridín-5-yl]fenyl]tetrazol

-34Zmes (6-hydroxymetylpyridín-3-yl)trifluórmetánsulfonátu (5,0 g, 0,019 mol), 2-(2-terc.butyl-1H-terazol-5-yl)fenyltri-1-butylstanánu (9,5 g, 0,019 mol) [bis(trifenylfosfín)paládium]chloridu (0,70 g, 0,97 mmol), jodidu meďnatého (0,37 g, 1,97 mmol) a dimetylformamidu (30 ml) bola zahrievaná 18 hodín pri 100 °C. Bol pridaný 20% roztok fluoridu draselného a zmes bola miešaná 30 minút pri teplote miestnosti. Filtráciou bola odstránená zrazenina a filtrát bol extrahovaný éterom. Extrakty boli premyté vodným amoniakom, nasýteným vodným roztokom chloridu amónneho, vodou, soľankou, vysušený (MgSO^ a zahustené. Výťažok po prečistení rýchlou chromatografiou (5% etyl-acetát/hexán) bol 0,5 g (8 %) žltého olejovitého produktu.

¹H NMR (DMSO-d₆): δ 1,55 (s, 9H), 4,56 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 5,40 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,60 (m, 4H), 7,90 (dd, J = 8,8 Hz, 2,3 Hz, 1H), 8,20 (d, J = 2,3 Hz, 1 H).

Krok 6) 2-terc.butyl-5-[2-[(2-brómmetyl)pyridín-5-yl]fenyl]tetrazol

Zmes 2-terc.butyl-5-[2-[(2-hydroxymetyl)pyridín-5-yl]fenyl]tetrazolu (0,50 g, 1,62 mmol), trifenylfosfanu (0,51 g, 1,94 mmol) a tetrabrómmetánu (0,64 g, 1,94 mmol) v tetrahydrofuráne (30 ml) bola miešaná 16 hodín pri teplote miestnosti. Zmes bola zahustená a výťažok po prečistení rýchlou chromatografiou (20% etylacetát/hexán) bol 0,40 g (66 %) bezfarebného olejovitého produktu.

¹H NMR (DMSO-d₆): δ 1,56 (s, 9H), 4,70 (s, 2H), 7,60 (m, 5H), 7,95 (dd, J = 8,8 Hz, 1,6 Hz, 1H), 8,28 (d, J = 1,6 Hz, 1H).

Krok 7) 2,4-dimetyI-5,6,8-trihydro-8-[[5-[2-(1 H-tetrazol-5-yl)fenyl]-2-pyridinyI]metyI]ľH-pyrido^.S-djpyrimidín-ľ-ón

K suspenzii hydridu sodného (60% disperzia v minerálnom oleji, 41 mg, 1,03 mmol) v dimetylformamidu (1 ml) bol pridaný za miešania 2,4-dimetyl-5,6,8trihydro-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón (170 mg, 0,94 mmol), pripevnený podľa postupu, opísaného v kroku 1 príkladu 5. Po 30 minútach bol pridaný roztok 2terc.butyl-5-[2-[(2-brómmetyl)pyridín-5-yl]fenyl]tetrazolu (350 mg, 0,94 mmol) v dimetylformamide (5 ml) a zmes bola miešaná 3 hodiny. Zmes bola zahustená, rozmiešaná v etylacetáte a premytá vodou. Organická fáza bola vysušená

-35(MgSO₄), zahustená a po prečistení rýchlou chromatografiou (3% metanol/dichlórmetán) bola získaná žltá pena. Pena bola zahrievaná v 6 mol/l kyseline chlorovodíkovej (2 ml) 16 hodín, ochladená a pH bolo upravené na 4 roztokom hydroxidu sodného (50%). Zmes bola extrahovaná trichlórmetánom a spojené extrakty boli vysušené (MgSO₄) a zahustené. Výťažok po rozotrení so zmesou etanol/éter bol 40 mg (10 %) ako biely tuhý produkt s teplotou topenia 208 až 209 °C.

¹H NMR (DMSO-d₆): δ 2,35 (s, 3H), 2,37 (s, 3H), 2,77 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 2,90 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 5,30 (s, 2H), 7,10 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,36 (dd, J = 8,8 Hz, 1,6 Hz, 1H), 7,60 (m, 4H), 8,23 (d, J = 1,6 Hz, 1H).

IR (KBr, cm·¹): 1690.

Analýza pre C22H20N8O:

vypočítané: C 64,07, H 4,89, N 27,17%, nájdené: C 63,87, H 5,16, N 27,22 %.

Príklad 8

2,4,6-trimety I-5,6,8-tri hyd ro-8-[[2‘-( 1 H-tetrazol-5-yl)[1,1 -bifeny l]-4-y I] mety l]-7 Hpyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Krok 1) 2,4-dimetyl-5,6,8-trihydro-8-[[2‘-kyano[1,1-bifenyl]-4-yl]metyl]-7Hpyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

K suspenzii hydridu sodného (60% disperzia v minerálnom oleji, 0,115 g, 4,80 mmol) v dimetylformamidu (5 ml) bol pridaný za miešania 2,4-dimetyl-5,6,87H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón (0,85 g, 4,80 mmol), pripravený podľa postupu, opísaného v kroku 1 príkladu 5. Po 45 minútach bol pridaný roztok 2-[4(brómmetyl)fenyl]benzonitrilu (1,00 g, 3,7 mmol) v dimetylformamide (4 ml) a zmes bola miešaná 18 hodín pri teplote miestnosti. Bola pridaná voda a zmes bola extrahovaná dichlórmetánom. Extrakty boli zahustené a surový produkt bol prečistený rýchlou chromatografiou (2% metanol/dichlórmetán). Po rozotrení s éterom bolo získaných 0,80 g (6 %) žltého tuhého produktu s teplotou topenia 133 až 137 °C.

-36¹H NMR (DMSO-de): δ 2,37 (s, 2H), 2,45 (s, 3H), 2,76 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 2,88 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 5,27 (s, 2H), 7,42 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,50 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,58 (m, 2H), 7,77 (m, 1H), 7,93 (d, J = 7,6 Hz, 1H).

Krok 2) 2,4,6-trimetyl-5,6,8-trihydro-8-[[2‘-kyano[1,1 -bifenyl]-4-yl]metyl]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

K podchladenému roztoku 2,4-dimetyl-5,6,8-trihydro-8-[[2‘-kyano[1,1bifenyl]-4-yl]metyl]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu (0,40 g, 1,10 mmol) v tetrahydrofuráne (2,0 ml) bol pridaný lítium-diizopropylamín (2 mol/l, 0,55 ml, 1,10 mmol). Po 45 minútach bol pridaný jódmetán (0,16 g, 1,15 mmol), zmes bola ponechaná, aby sa oteplila na teplotu miestnosti a bola 18 hodín miešaná. Zmes bola zahustená a roztrepaná medzi vodu a dichlórmetán. Organická fáza bola vysušená (MgSO₄) a po zahustení bol získaný oranžový olej. Výťažok po prečistení rýchlou chromatografiou (60% etylacetát/hexán) bol 0,15 g (36 %) žltého tuhého produktu s teplotou topenia 153 až 156 °C.

¹H NMR (DMSO-de): δ 1,21 (d, J = 6,3 Hz, 3H), 2,37 (s, 3H), 2,44 (s, 3H), 2,60 (m, 1H), 2,80 (m, 1H), 3,05 (dd, J = 9,6, 6,0 Hz, 1H), 5,21 (d, J = 15,1 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,49 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,58 (m, 2H), 7,80 (m, 1H), 7,91 (dd, J = 6,9, 0,9 Hz, 1H).

Krok 3) 2,4,6-trimetyl-5,6,8-trihydro-8-[[2‘-(1 H-tetrazol-5-yl)[1,1-bifenyl]-4-yl]metyl]7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Zmes 2,4,6-trimetyl-5,6,8-trihydro-8-[[2‘-kyano[1,1-bifenyl]-4-yl]metyl]-7Hpyri-do[2,3-d]pyrimidín-7-ónu (0,57 g, 1,50 mol) azidu sodného (0,13 g, 1,90 mmol) a tri-1-butylchlórstanánu (0,62 g, 1,90 mmol) v xyléne (5 ml) bola zahrievaná 48 hodín pod spätným chladičom. Zmes bola ochladená a bola pridaná kyselina chlorovodíková (1 mol/l, 2 ml). Bol pridaný trichlórmetán a voda, organická fáza bola vysušená (MgSO₄) a zahustená. Po rekryštalizácii z etylacetátu bolo získaných 0,25 g (39 %) bieleho tuhého produktu s teplotou topenia 161 až 163 °C. ¹H NMR (DMSO-de): δ 1,19 (d, J = 6,7 Hz), 2,37 (s, 3H), 2,43 (s, 3H), 2,59 (m, 1H), 2,80 (m, 1H), 3,02 (dd, J = 15,7, 7,0 Hz, 1H), 5,12 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 5,22 (d, J =

-3715,0 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,18 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,57 (m, 2H), 7,63 (m, 2H).

Príklad 9

2,4-dimetyl-8-[[2‘-(1H-tetrazol-5-yl)[1,1-bifenyl]-4-yl]metyl]-7H-pyrido-[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Krok 1) 2,4-dimetyl-8-[[2‘-kyano-[1,1-bifenyl]-4-yl]metyl]-7H-pyrido-[2,3-d]pyrimidín-7-ón

Bol použitý ten istý postup, ktorý je opísaný v kroku 1 príkladu 8. K suspenzii hydridu sodného (60% disperzia v minerálnom oleji) v dimetylformamide bol pridaný za miešania 2,4-dimetyl-7H-pyrido-[2,3-d]-pyrimidín-7-ón, pripravený podľa T. Sakamoto a kol., Chem. Pharm. Bull., 1982, 30, 2410. Po 45 minútach bol pridaný roztok 2-[(4-brómmetyl)fenyi]benzonitriÍu v dimetylformamide a zmes bola miešaná 18 hodín pri teplote miestnosti. Bola pridaná voda a zmes bola extrahovaná dichlórmetánom. Extrakty boli zahustené a surový produkt bol prečistený rýchlou chromatografiou (2% metanol/dichlórmetán). Po rozotrení s éterom bol získaný produkt.

Krok 2) 2,4-dimetyl-8-[[2‘-(1 H-tetrazol-5-yI)[1,1 -bifenyl]-4-yl]metyl]-7H-pyrido-[2,3d]-pyrimidín-7-ón

Bol použitý ten istý postup, ktorý bol opísaný v kroku 3 príkladu 8. Zmes 2,4dimetyl-8-[[2‘-kyano-[1,1 -bifeny l]-4-y I] mety l]-7 H-py rid o-[2,3-d]-pyrim id í η-7-όη u, azidu sodného a tri-1-butylchlórstanánu v xyléne bola zahrievaná 48 hodín, pod spätným chladičom. Zmes bola ochladená a bola pridaná kyselina chlorovodíková (1 mol/l, 2 ml). Bol pridaný trichlórmetán a voda, organická fáza bola vysušená (MgSO₄) a zahustená. Produkt bol získaný po rekryštalizácii z etylacetátu.

Príklad 10

-382,4,6,6-tetrametyl-5,6,8-trihydro-8-[[2'-(1 H-tetrazol-5-yl)[1,1-bifenyl]-4-yl]metyl]-7Hpyrido[2,3-d]-pyrimidín-7-ón

Krok 1) 5,8-dÍhydro-2,4.6-trimetyl-8-[(4-brómfenyl)metyl]-pyrido[2,3-d]-pyrimidín7(6H)-ón

K roztoku 2,50 g, 7,20 mmol 2,4-dimetyl-5,6,8-trihydro-8-[(4-brómfenyl)metyl]-7H-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-7-ónu v 25 ml THF, ochladenému na -78 °C a pripravenému podľa kroku 1 príkladu 3, sa pridá 3,70 ml, 7,40 mmol 2,0M roztoku LDA. Po 45 minútach sa pridá ešte 1,03 g, 7,20 mmol CH₃I a zmes sa nechá v priebehu 16 hodín otepliť na teplotu miestnosti. Potom sa zmes odparí a surový produkt sa čistí rýchlou chromatografiou za použitia 60% etylacetátu v hexáne, čím sa vo výťažku 54 % získa 1,40 g produktu ako žltá tuhá látka s teplotou topenia 108 až 110 °C.

¹H NMR (DMSO-d₆): δ 1,44 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 2,36 (s, 3H), 2,43 (s, 3H), 2,53 (m, 1H), 2,78 (m, 1H), 3,05 (dd, J = 15,7, 6,2 Hz, 1H), 5,11 (m, 2H), 7,22 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,45 (d, J = 8,3 Hz, 2H).

Krok 2) 5,8-dihydro-2,4,6,6-tetrametyl-8-[(4-brómfenyl)metyl]-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-7(6H)-ón

K roztoku 1,36 g, 3,80 mmol 5,8-dihydro-2,4,6-trimetyl-8-[(4brómfenyl)metyl]-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-7(6H)-ónu v 8 ml THF, ochladenému na 78 °C sa pridá 2,00 ml, 4,00 mmol 2,0M roztoku LDA. Po 45 minútach sa pridá ešte 0,54 g, 3,80 mmol CH₃I, zmes sa nechá otepliť na teplotu miestnosti a mieša sa 64 hodín. Potom sa zmes odparí a surový produkt sa čistí rýchlou chromatografiou za použitia 60% etylacetátu v hexáne, čím sa vo výťažku 77 % získa 1,10 g produktu ako tuhá žltá látka s teplotou topenia 134 až 136 °C.

¹H NMR (DMSO-d₆): δ 1,11 (s, 6H), 2,37 (s, 3H), 2,44 (s, 3H), 2,79 (s, 2H), 5,13 (s, 2H), 7,20 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,47 (d, J = 8,4 Hz, 2H).

Analýza pre Οι₈Η₂οΒγΝ₃0:

vypočítané: C 57,76, H 5,39, N 11,23%, nájdené: C 57,84, H 5,34, N 11,05 %.

-39Krok 3) 2,4,6,6-tetrametyl-5,6,8-trihydro-8-[[2'-(1 H-tetrazol-5-yl)[1,1-bifenyl]-4-yljmetyl]-7H-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-7-ón

1,43 g, 3,82 mmol 5,8-dihydro-2,4,6,6-tetrametyl-8-[(4-brómfenyl)metyl]pyrido[2,3-d]-pyrimidín-7(6H)-ónu sa spracováva podľa príkladu 3, kroku 5 a 6, čím sa vo výťažku 19 % získa 300 mg produktu ako bielej tuhej látky s teplotou topenia 208 až210°C.

Analýza pre C25H25N7O:

vypočítané: C 68,34, H 5,69, N 22,32 %, nájdené: C 68,27, H 5,70, N 21,98%.

Príklad 11

2,4-dimetyl-5,6,8-trihydro-8-[3-fluór-[2^,-(1 H-tetrazol-5-yl)[1,1 -bifenylj-4-yljmetyl]7H-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-7-ón

Krok 1) 2-kyano-4‘-(brómmetyl)-3‘-fluórbifenyl

Produkt je možné pripraviť spôsobom podľa publikácie D. J. Carini a ďalší, J. Org. Chem., 1991, 34, 2525 až 2547, v ktorej je opísaná výroba 2-kyano-4‘metylbifenylu.

Krok 2) 2,4-dimetyl-5,6,8-trihydro-8-[[2'-kyano-3-fIuór-[1,1-bifenyl]-4-yl]metyl]-7Hpyrido[2,3-d]-pyrimidín-7-ón

K roztoku 484 mg, 2,73 mmol 2,4-dimetyl-5,6,8-trihydro-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu v 3 ml DMF, pripravenému podľa kroku 1 príkladu 5 a ochladenému na 5 °C, sa pridá 120 mg, 3,0 mmol 60% disperzie hydridu sodíka v minerálnom oleji. Po 5 minútach sa chladiaci kúpeľ odstráni a zmes sa ešte 30 minút mieša. Potom sa zmes znova ochladí, pridá sa roztok 890 mg, 2,73 mmol 2kyano-4‘-(brómmetyl)-3‘-fluórbifenylu v 93 ml MF a zmes sa mieša ešte 1 hodinu a 15 minút. Potom sa pridá voda a zmes sa extrahuje etylacetátom. Extrakty sa spoja, premyjú sa nasýteným roztokom chloridu sodného, vysušia sa odparia. Čistením rýchlou chromatografiou za použitia 2% metanolu v metylénchloride sa vo výťažku 57 % získa 600 mg špinavobielej tuhej látky. Po prekryštalizovaní zo

-40zmesi acetónu a éteru sa produkt získa ako biela tuhá látka s teplotou topenia 153 až 155 °C.

¹H NMR (DMSO-d₆): δ 2,37 (s, 3H), 2,40 (s, 3H), 2,77 (m, 2H), 2,93 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 5,29 (s, 2H), 7,25 (m, 2H), 7,45 (dd, J = 11,1 a 1,3 Hz, 1H), 7,59 (m, 2H), 7,77 (m, 1 H), 7,39 (dd, J = 6,9 a 0,9 Hz, 1 H).

Analýza pre C₂₃H₁₉FN₄O:

vypočítané: C 71,49, H 4,96, N 14,50 %, nájdené: C 71,36, H 5,09, N 14,00%.

Krok 3) 2,4-dimetyl-5,6,8-trihydro-8-[3-fluór-[2'-(1 H-tetrazol-5-yl)[1,1 -bifenyl]-4-yljmetyl]-7H-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-7-ón

Zmes 550 mg, 1,42 mmol 2,4-dimetyI-5,6,8-trihydro-8-[[2'-kyano-3-fluór-[1,1bifenyl]-4-yl]metyl]-7H-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-7-ónu, 602 mg, 1,85 mmol nBu₃SnCI, 120 mg, 1,85 mmol NaN3 a 5 ml xylénu sa zahrieva na teplotu varu pod spätným chladičom 48 hodín, potom sa zmes ochladí a zriedi éterom. Pridá sa 1N roztok HCI a zmes sa ešte 10 minút mieša. Potom sa organická vrstva oddelí, vodná fáza sa upraví na pH 4 pridaním 2,5N roztoku NaOH. Vzniknutá zrazenina sa odfiltruje a rozotrie s éterom. Po kryštalizácii z filtrátu sa vo výťažku 16 % získa 98 mg produktu s teplotou topenia 223 až 225 °C.

¹H NMR (DMSO-de): δ 2,37 (s, 3H), 2,39 (s, 3H), 2,75 (m, 2H), 2,90 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 5,21 (s, 2H), 6,73 (dd, J = 7,9 a 1,7 Hz, 1H), 6,97 (m, 2H), 7,56 (m, 2H), 7,67 (m, 2H).

Analýza pre C₂₃H₂oFN₇0:

vypočítané: C 64,33, H 4,69, N 22,83 %, nájdené: C 64,47, H 4,88, N 22,37 %.

Príklad 12

Draselná soľ kyseliny 4‘-(2,4-dimetyl-7-oxo-6,7-dihydro-5H-pyrido[2,3-d]-pyrimidín8-ylmetyl)bifenyl-2-karboxylovej

-41 Krok 1) metyl-4‘-(2,4-dimetyl-7-oxo-6,7-dihydro-5H-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-8-ylmetyl)bifenyl-2-karboxylát

K roztoku 500 mg, 7,82 mmol 2,4-dimetyl-5,6,8-trihydro-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ónu v 5 ml DMF, pripravenému podľa stupňa 1 príkladu 5, sa pridá 124 mg, 3,10 mmol 60% disperzie hydridu sodíka v minerálnom oleji pri teplote miestnosti. Po 30 minútach sa pridá ešte 1,08 g, 2,82 mmol metyl-4‘(brómmetyl)bifenyl-2-karboxylátu, pripraveného podľa publikácie D. J. Carini a ďalší, J. Org. Chem., 1991, 34, 2525 až 2547. Zmes sa mieša 2 a pol dňa a potom sa zriedi etylacetátom, premyje sa nasýteným roztokom chloridu sodného a organická fáza sa vysuší a odparí. Surový produkt sa čistí rýchlou chromatografiou za použitia 1% metanolu v metylénchloride, čím sa vo výťažku 71 % získa 800 mg produktu vo forme hnedej peny.

¹H NMR (CDCI₃): δ 2,42 (s, 3H), 2,59 (s, 3H), 2,75 (m, 2H), 2,85 (m, 2H), 3,60 (s, 3H), 5,35 (s, 2H), 7,20 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,32 (m, 1H), 7,37 (dd, J = 7,6 a 1,3 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,46 (m, 1H), 7,77 (dd, J = 7,6 a 1,0 Hz, 1H).

Krok 2) kyselina 4-(2,4-dimetyl-7-oxo-6,7-dihydro-5H-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-8-ylmetyl)bifenyl-2-karboxylová

Roztok 800 mg, 1,99 mmol metyl-4^,-(2,4-dimetyl-7-oxo-6,7-dihydro-5Hpyrido[2,3-d]-pyrimidín-8-yl-metyl)bifenyl-2-karboxylátu a 797 mg, 3,98 mmol jódtrimetylsilánu sa zahrieva 22 hodín na teplotu varu pod spätným chladičom. Potom sa pridá ešte 797 mg, 3,98 mmol jódtrimetylsilánu a zmes sa zahrieva ešte 20 hodín. Potom sa pridá nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného a etylacetát a vrstvy sa oddelia. Organická fáza sa extrahuje nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného, vodné vrstvy sa spoja, pridá sa Na2S2O3, zmes sa extrahuje metylénchloridom, extrakt sa odloží a zmes sa okyslí na pH 4 koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou. Potom sa zmes extrahuje metylénchloridom, extrakt sa vysuší a odparí, čím sa získa 400 mg špinavobieleho surového tuhého produktu. Po prekryštalizovaní z etanolu sa vo výťažku 40,1 % získa 316 mg produktu vo forme bielej tuhej látky s teplotou topenia 215 až 216 °C. Analýza pre C23H21N3O3:

vypočítané: C 71,30, H 4,56, N 10,85%,

-42nájdené: C 71,06, H 5,44, N 10,60%.

Krok 3) draselná soľ kyselina 4‘-(2,4-dimetyl-7-oxo-6,7-dihydro-5H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-8-yl-metyl)bifenyl-2-karboxylovej

Kyselina 4‘-(2,4-dimetyl-7-oxo-6,7-dihydro-5H-pyrido[2,3-d]-pyrimidín-8-ylmetyl)bifenyl-2-karboxylo.vá sa premení na draselnú soľ nasledujúcim spôsobom: zmes 300 mg, 0,774 mmol kyseliny a 736 μΙ 1N roztoku KOH sa 10 minút mieša. Potom sa zmes prefiltruje a filtrát sa odparí, čím sa vo výťažku 99 % získa 310 mg draselnej soli vo forme špinavobielej tuhej látky s teplotou topenia viac ako 300 °C. ¹H NMR (DMSO-d₆):8 2,36 (s, 3H), 2,48 (s, 3H), 2,73 (m, 2H), 2,89 (m, 2H), 5,22 (s, 2H), 7,12 (m, 3H), 7,20 (m, 3H), 7,39 (dd, J = 6,6 a 1,7 Hz, 2H).

IR spektrum v KBr, cm'¹: 1680.

Analýza pre C23H2oKN₃03.0,6H₂0 vypočítané: C 63,31, H 4,90, N 9,63 %, nájdené: C 63,07, H 4,87, N 9,72 %.

Príklad 13

4-etyl-2-metyl-8-[2'-(1H-tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl-metyl]-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3d]-pyrimidín-7-ón

Výsledný produkt je možné získať spôsobom podľa príkladu 3 za použitia dietylpropionylglutarátu namiesto dietylacetylglutarátu v kroku 1. Produkt sa získa ako biela tuhá látka s teplotou topenia 187 až 189 °C.

Príklad 14

2-etyl-4-metyl-8-[2‘-(1H-tetrazol-5-yl)bifenyl-4-yl-metyl]-5,8-dihydro-6H-pyrido[2,3d]-pyrimidín-7-ón

-43Výsledný produkt je možné získať spôsobom podľa príkladu 3 tak, že sa v kroku 1 použije propiónamidínhydrochlorid namiesto acetamidínhydrochloridu. produkt sa získa ako biela tuhá látka s teplotou topenia 231 až 232 °C.

Claims (13)

1. Ar (D kde R¹, R², R³ a R⁴ sú buď H, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka alebo perfluóralkyl s 1 až 6 atómami uhlíka; R⁵ je atóm vodíka alebo keď n = 1, R⁵ spolu s R³ znamenajú dvojitú väzbu; n je 0 alebo 1; p je 0 až 2; m je 0 až 3; Ar¹ je alebo kde W je atóm vodíka, : alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, atóm halogénu, hydroxyskupina alebo alkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka;

   Ar² je kde X je

   -45kde R⁶ je atóm vodíka, terc.butyl, tri-n-butylstanyl alebo trifenylmetyl; farmaceutický prijateľné soli a N-oxidy týchto zlúčenín.
2. 2. Substituované pyrimidíny všeobecného vzorca II podľa nároku 1 kde R¹, R², R³ a R⁴ sú buď atóm vodíka, . alkyl, obsahujúci 1 až 6 atómov uhlíka alebo perfluóralkyl, obsahujúci 1 až 6 atómov uhlíka; R⁵ je atóm vodíka alebo keď n sa rovná 1, R⁵ spolu s R³ znamenajú dvojitú väzbu; n je 0 alebo 1; Ar¹ znamená

   Ar² znamená kde X je

   COjH, CN alebo

   R

   -46kde R⁶ je atóm vodíka, terc.butyl, tri-n-butylstanyl, trifenylmetyl a farmaceutický prijateľné soli týchto zlúčenín.
3. 3. Susbtituované pyrimidíny podľa nároku 1 alebo 2, v ktorých X znamená CO2H, CN alebo
4. 4. Substituované pyrimidíny všeobecného vzorca III podľa nároku 3 kde R¹, R²' R³ a R⁴ sú buď atóm vodíka, metyl, trifluórmetyl, R⁵ znamená atóm vodíka, keď je n rovné 1, R⁵ spolu s R³ znamenajú dvojitú väzbu; n je 0 alebo 1; Ar¹ znamená alebo a farmaceutický prijateľné soli týchto zlúčenín.
5. 5. Substituovaný pyrimidín podľa nároku 4, ktorým je 2,4-dimetyl-5,
6. 6,8trihydro-8-[[2‘-(1H-tetrazol-5-yl)[1,1-bífenyl]-4-yl]metyl]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7ón a jeho farmaceutický prijateľné soli.

   -476. Substituované pyrimidíny podľa nároku 4, ktoré sú vybrané zo skupiny:

   2.4- dimetyl-5,7-dihydro-7-[[2‘-(1H-tetrazol-5-yl)[1,1-bifenyl]-4-yl]metyl]-6H-pyrolo[2,3-d]pyrimidín-6-ón a jeho farmaceutický prijateľné soli;

   alebo

   5,7-dihydro-2-metyl-7-[[2‘-(1 H-tetrazol-5-yl)[1,1-bifenyi]-4-yl]metyl]-4-trifluórmetyl)6H-pyrolo[2,3-d]pyrimidín-6-ón a jeho farmaceutický prijateľná soľ;

   alebo

   2-metyl-4-trifluórmetyl-5,6,8-trihydro-8-[[2‘-(1H-tetrazol-5-yl)[1,1-bifenyl]-4-yl]metyl]7H-pyrido[2₎3-d]pyrimidín-7-ón a jeho farmaceutický prijateľná soľ;

   alebo

   2.4- dimetyl-5,6,8-trihydro-8-[[6-[2-(1H-tetrazol-5-yl)fenyl]-3-pyridinyl]metyl]-7Hpyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón a jeho farmaceutický prijateľná soľ;

   alebo

   2-metyl-4-trifluórmetyl-5,6,8-trihydro-8-[[6-[2-(1H-tetrazol-5-yl)fenyl]-3-pyridinyl]metyl]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón a jeho farmaceutický prijateľná soľ; alebo

   2.4- dimetyl-5,6,8-trihydro-8-[[5-[2-(1H-tetrazol-5-yl)fenyl]-2-pyridinyl]-metyl]-7Hpyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón a jeho farmaceutický prijateľná soľ;

   alebo

   2,4,6-trimetyl-5,6,8-trihydro-8-[[2‘-(1H-tetrazol-5-yl)[1,1-bifenyl]-4-yl]-metyl]-7Hpyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón a jeho farmaceutický prijateľná soľ;

   alebo

   2.4- dimetyl-8-[[2‘-(1 H-tetrazol-5-yl)[1,1-bifenyl]-4-yl]-metyl]-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidín-7-ón a jeho farmaceutický prijateľná soľ.
7. 7. Spôsob výroby substituovaných pyrimidínov všeobecného vzorca I podľa nároku 1, v y z n a č u j ú c i sa tým, že sa

   a) pyrimidín všeobecného vzorca kde R¹, R², R³, R⁴, R⁵, n a p majú vyššie uvedený význam, Z¹ je odštiepiteľná skupina a R⁷ je nižšia alkylová skupina, kondenzuje s amínom všeobecného vzorca

   H₂N - (CH₂)m - Ar¹ - Ar² kde m, Ar¹ a Ar² majú význam, definovaný v nároku 1, alebo

   b) bicyklická zlúčenina všeobecného vzorca kde R¹, R², R³, R⁴, R⁵, n, m, p a Ar¹ majú význam, definovaný v nároku 1, reaguje s kyselinou arylboritou alebo s arylstanánom v prítomnosti paládiového katalyzátora,

   -49alebo sa

   c) bicyklická zlúčenina všeobecného vzorca kde R¹, R², R³, R⁴, R⁵, n a p majú význam, definovaný v nároku 1, kondenzuje s biarylovou zlúčeninou všeobecného vzorca

   Z¹ - (CH₂)_m - Ar¹ - Ar² kde m. Ar¹ a Ar² majú vyššie uvedený význam a Z¹ je odštiepiteľná skupina, alebo

   d) sa odstráni ochranná skupina zo zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde X je kde R⁶ je terc.butyl, tri-n-butylstanyl alebo trifenylmetyl, za vzniku zlúčeniny, v ktorej R⁶ je vodík alebo

   e) zlúčenina všeobecného vzorca I, v ktorej X je -CN, reaguje s azidovým činidlom, za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde X je

   Η alebo

   f) sa vytvorí soľ zlúčeniny všeobecného vzorca I s anorganickou alebo organickou zásadou alebo kyselinou, alebo

   g) zlúčenina všeobecného vzorca I alebo jej soľ sa premení na N-oxid pomocou peroxidačného činidla.
8. 8. Spôsob výroby substituovaných pyrimidínov všeobecného vzorca I podľa nároku 1,

   Ar (D kde R¹, R², R³ a R⁴ sú buď H, nižší alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka alebo perfluóralkyl s 1 až 6 atómami uhlíka; R⁵ je atóm vodíka alebo keď n = 1, R⁵ spolu s R³ znamenajú dvojitú väzbu; n je 0 alebo 1; p je 0 až 2; m je 0 až 3; Ar¹ je alebo

   -51 kde W je atóm vodíka, nižší alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, atóm halogénu, hydroxyskupina alebo nižšia alkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka;

   Ar² je kde R⁶ je atóm vodíka, terc.butyl; a ich farmaceutický prijateľných solí, vy z n a čuj ú c i s a tým, že

   a) zlúčenina všeobecného vzorca 1 kde R¹, R², R³, R⁴, R⁵, n a p majú vyššie definovaný význam, reaguje s amínom všeobecného vzorca 2

   H₂N /CH,/_n

   Ar'Y (2)

   -52kde m a Ar¹ majú vyššie uvedený význam a Y je para-bróm alebo para-jód, za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca 3

   R^J

   R' ‘Ar Y /^CH2/p-

   N (3) kde R¹, R², R³, R^R⁵, n, m, p, Ar¹ a Y majú vyššie definovaný význam, a zlúčenina všeobecného vzorca 3 sa zlúči s arylboritou kyselinou všeobecného vzorca 4

   I B/OH/j kde Ar² má vyššie uvedený význam, v prítomnosti paládiového katalyzátora, a ak je R⁶ terc.butylová skupina, odstráni sa chrániaca skupina kyslou hydrolýzou a vznikne zlúčenina všeobecného vzorca I

   Ar (O

   -53kde R¹,·R², R³, R⁴, R⁵, n, m, p, Ar¹ a Ar² majú vyššie uvedený význam.
9. 9. Spôsob podľa nároku 8, vyznačujúci sa tým, že sa použije zlúčenina všeobecného vzorca 4

   B/OHA

   I '

   Ar^J (4) kde Ar² je kde X je ,6 kde R⁶ je terc.butyl, pripravená reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca 5

   Ar?- Br (5) kde Ar² má vyššie uvedený význam, s Mg a trialkylborátom, B(OR⁷)₃, kde R⁷ je nižší alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, v aprotickom rozpúšťadle a po pôsobení kyseliny alebo zásady vzniká arylboritá kyselina všeobecného vzorca 4

   -54(4)

   B/OH/j kde Ar² má vyššie definovaný význam.
10. 10. Farmaceutický prostriedok na liečenie zvýšeného krvného tlaku alebo venostázového srdcového zlyhania, vyznačujúci sa tým, že ako účinnú zložku obsahuje substituovaný pyrimidín podľa ktoréhokoľvek z nárokov 3 až 6 a farmaceutický prijateľný nosič.
11. 11. Substituované pyrimidíny podľa ktoréhokoľvek z nárokov 3 až 6 na použitie na liečebné účely.
12. 12. Substituované pyrimidíny podľa ktoréhokoľvek z nárokov 3 až 6 na použitie pri liečení vysokého krvného tlaku alebo venostázového srdcového zlyhania.
13. 13. Substituované pyrimidíny podľa ktoréhokoľvek z nárokov 3 až 6 na použitie na prevenciu alebo liečenie opakovanej stenózy po angioplastike u cicavcov.