SK283002B6 - Prípravok s obsahom koagulačného faktora VIII - Google Patents
Prípravok s obsahom koagulačného faktora VIII Download PDFInfo
- Publication number
- SK283002B6 SK283002B6 SK1383-95A SK138395A SK283002B6 SK 283002 B6 SK283002 B6 SK 283002B6 SK 138395 A SK138395 A SK 138395A SK 283002 B6 SK283002 B6 SK 283002B6
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- factor viii
- aqueous solution
- viii
- solution
- coagulation factor
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- A61K38/37—Factors VIII
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/16—Blood plasma; Blood serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
Abstract
Je opísaný prípravok s obsahom koagulačného faktora VIII, pričom je vo forme vodného roztoku bez albumínu s aktivitou koagulačného faktora VIII od 10 až 100 000 IU/ml, kde koncentrácia kyslíka v roztoku je menej ako 200 ppm a ďalej obsahuje inertný plyn.ŕ
Description
Oblasť techniky
Vynález sa týka prípravku s obsahom koagulačného faktora VIII.
Doterajší stav techniky
Stabilita proteínov je všeobecným problémom farmaceutického priemyslu. Väčšinou sa rieši sušením proteínu rôznymi metódami, najmä vymrazovacím sušením. Proteíny sa potom distribuujú a skladujú v sušenom stave. Roztok proteínu pred sušením či vymrazovacím sušením rovnako ako rekonštituovaný produkt by mali byť stabilné, aby sa zabránilo nadmerným stratám aktivity pri sušiacom procese, skladovaní a manipulácii.
Vymrazovacie sušenie predstavuje drahý a časovo náročný stupeň a bolo by veľkou výhodou úplne sa tohto stupňa pri výrobe komerčného výrobku zbaviť. Navyše je pacient nútený sušený protein pred použitím rekonštituovať v rozpúšťadle, ktoré je preňho neškodné.
Hemofília patrí medzi choroby, ktoré sú známe po storočia, ale iba v posledných tridsiatich rokoch sa prišlo k rozdeleniu na formy, ktoré predstavujú: hemofília A, hemofília B a hemofília C. Hemofília A je najčastejšou formou. Postihuje mužov s počtom výskytu jeden až dva prípady na 10 000 živo narodených mužov. Choroba je spôsobená silne zníženou hladinou alebo neprítomnosťou biologicky aktívneho faktora VIII (antihemofilného faktora), čo je proteín, normálne prítomný v krvnej plazme. Klinickým prejavom hemofílie A je silná tendencia ku krvácaniu. V čase, keď ešte nebola zavedená terapia koncentrátmi faktora VIII, bol priemerný vek pacientov kratší ako 20 rokov. Koncentráty faktora VIII, získavané z plazmy, sú už dostupné asi tridsať rokov. To výrazne zlepšilo situáciu v liečení hemofylikov a umožnilo im žiť normálnym spôsobom života.
Terapeutické koncentráty faktora VIII boli doteraz pripravované frakcionáciou plazmy. Sú však už známe spôsoby prípravy faktora VIII v bunkovej kultúre získané s použitím techniky rekombinácie DNA, ako uvádza napríklad J. Gitschier v Náture 312, str. 340 až 337, 1984 a EP-A-160 457.
Koncentráty faktora Vili, odvodené od ľudskej plazmy, obsahujú faktor VIII v niekoľkých oddelených plne aktívnych formách (Andersson et al, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, Vol 83, str. 2975 až 2983, máj 1986). Aktívna forma s najmenšou molekulou má molekulovú hmotnosť 170 kDa a pozostáva z dvoch reťazcov 90 kDa a 80 kDa navzájom spojených mostíkom kovového iónu. S odkazom na EP-A-197901 Kabi Pharmacia vyvinula výrobok obsahujúci rekombinatný vektor VIII, ktorý zodpovedá 170 kDa plazmového faktora VIII vo forme koncentrátov. Rozšírený rekombinatný faktor VIII je zakončený r-VIII SQ a produkujú ho bunky Chinese Hamster Ovary (CHO) v bunkovej kultúre v kutivačnom médiu bez obsahu séra v konečnej fáze.
Špecifická aktivita r-VIII SQ je približne 15 000 IU V1II:C na mg proteínu.
Rekombinatný faktor r-VIII SQ sa používa na liečenie klasickej hemofílie. Dávkovanie je podobné ako pri koncentrátoch plazmového faktora VIII.
Štruktúra a biochémia produktov na báze rekombinantného faktora VIII je všeobecne opísaná Kaufmanom v Tibtoch, Vol 9,1991 a v Hcmatology 63, str. 155 až 165, 1991. Štruktúra a biochémia r-VIII SQ je opísaná v WO-A-91/09122.
Faktor VIII, získaný frakcionáciou z plazmy, sa zvyčajne predáva v podobe vymrazovaním sušeného prášku, ktorý sa má rekonštituovať vo vode.
Prostriedky s nízkym obsahom proteínu všeobecne strácajú aktivitu pri čistení, sterilnej výrobe, pri balení a v priebehu podávania. Tento problém sa zvyčajne rieši prísadou ľudského albumínu, ktorý' výrazne straty proteínu znižuje. Stabilizačné účinky ľudského albunínu v priebehu čistenia, sterilnej výroby a vymrazovacieho sušenia (pozri review Wang a kol., Parenteral Sci and Tech. Vol 42, Number 2S, suplement. 1988). Použitie albumínu na stabilizáciu faktora VIII je známe a používané vo všetkých vysoko čistých výrobkoch na báze faktora VIII, ktoré sú v súčasnosti na trhu.
Viac-menej by bolo žiaduce sa tejto prísady ľudského albumínu do terapeutických proteínov, vyrábaných technológiou rekombinantnej DNA, zbaviť. Navyše použitie ľudského albumínu ako zložky prostriedku často obmedzuje použitie najpresnejších a najvýhodnejších analytických metód na stanovenie proteínu.
Na stabilizáciu proteínov bolo navrhnutých niekoľko roztokov. Tak EP 35 204 (Cutter) opisuje spôsob, ktorým sa dá dodať teplotná stabilita kompozícii proteínov za prítomnosti polyolov. Ďalej WO-A-89/09614 (Genentech) opisuje stabilizovanú formuláciu ľudského rastového hormónu, ktorá obsahuje glycín, mannitol a pufer, výhodne ešte s prísadou neionogénneho surfaktantu, ako je polysorbat 80. Neionogénny surfaktant sa pridáva na zamedzenie agregácie a denaturácie. Formulácia má zvýšenú stabilitu pri vymrazovacom sušení a pri rekonštitúcii. Tiež US-A -4 783 441 (Hoechst) uvádza vodný roztok, obsahujúci protein, ako inzulín a povrchovo aktívnu látku.
EP 77 870 (Green Cros) uvádza prísadu aminokyselín, monosacharidov, oligosacharidov alebo alkoholov cukrov alebo uhľovodíkových karboxylových kyselín na zlepšenie stability roztoku, obsahujúceho faktor VIII. EP 117 064 (Green Cros) uvádza prísadu alkoholov cukrov alebo disacharidov do vodných roztokov faktora VIII na zvýšenie stability v priebehu spracovania za tepla.
WO-A-91/10439 (Octapharma) chráni stabilné roztoky faktorov VIII alebo faktora IX pre injekcie, obsahujúce disacharid, výhodne sacharózu, a jednu alebo viac aminokyselín. EP 315 968 a EP 314 095 (Rorer) chráni stabilné formulácie faktora VIII s rôznou iónovou silou.
US-A-4 727 027 (Diamond Scientific) je zameraný na spôsob fotochemickej dekontaminácie vodných kompozícií obsahujúcich biologicky aktívne proteíny, odvodené od krvi alebo jej zložiek, pri ktorom sa minimalizujú straty aktivity. Spôsob zahŕňa pridávanie aspoň jedného furokumarínu do kompozície a ožarovanie tejto kompozície ultrafialovým (UV) svetlom. Pred ožarovaním sa môže znížiť koncentrácia kyslíka vo vodnej kompozícii, aby sa predišlo denaturácii. Toto sa dá dosiahnuť napríklad pridaním odstraňovačov kyslíka, albumínov a/alebo enzýmových systémov a/alebo preháňaním inertného plynu. Do roztokov, obsahujúcich faktor VIII bol zavádzaný argón za prítomnosti askorbátu alebo bez prítomnosti askorbátu počas až 6 hodín. US-A-4 727 027 neuvádza nič o skladovaní roztokov na dlhší čas a rovnako sa v ňom neuvádza možný účinok zníženia koncentrácie kyslíka na aktivitu faktora VIII pri takomto skladovaní.
EP-A-0 212 040 (Immuno) sa zaoberá vírusovou inaktiváciou faktora VIII zahrievaním suchej substancie v prostredí so zníženým obsahom kyslíka. Zahrievanie sa uskutočňuje bez prítomnosti stabilizátorov, pretože stabilizátory zvyšujú odolnosť vírusov a tým znižujú účinnosť inaktivácie. Testy sa uskutočňujú pri 90 °C počas 30 hodín.
EP-A-0 212 040 neuvádza nič k problému nízkej stability vodných roztokov obsahujúcich faktor VIII, čo je vo všeobecnosti oveľa väčší problém ako stabilita suchých výrobkov. Je to spôsobované tým, že chemické zmeny, napríklad hydrolýza a deamidácia, sa oveľa viac prejavujú v roztoku ako v suchom stave.
Z hľadiska fyziologicko-chemických vlastností sa proteíny líšia. Pri príprave farmaceutického prípravku, ktorý by mal byť fyziologicky prijateľný a dlhodobo stabilný sa musia brať do úvahy nie iba vlastnosti proteínu, ale i ďalšie aspekty. Napríklad je nutné zvážiť priemyselnú vyrobiteľnosť, ľahkosť manipulácie a bezpečnosť pacienta. V dôsledku toho nie sú tieto aspekty vopred vždy jednoznačne ľahko riešiteľné pri testovaní rôznych formulácií a často sa používa roztok špecifického zloženia pre každý proteín.
Aplikáciu i výrobu faktora VIII by bolo možné uľahčiť distribúciou takej formulácie, ktorá by bola dlhodobo stabilná pri skladovaní a neobsahovala by prísadu albumínu. Tiež pre pacienta by znamenal takýto roztok uľahčenie manipulácie s hotovým liekom. Bolo by možné aplikovať priamo výrobok vo forme injekčného roztoku bez predchádzajúcej rckonštitúcic.
Vodné roztoky obsahujúce chemické zlúčeniny, citlivé na kyslík, vrátane liečivých látok iných ako proteínov, je možné zbaviť kyslíka (deoxygénovať) nasledujúcim spôsobom:
Voda na prípravu injekčného roztoku sa prebubláva dusíkom, čím sa zníži koncentrácia kyslíka. Komponenty sa rozpustia a roztok sa prebubláva dusíkom a potom sa ponecháva pod dusíkovou atmosférou. V priebehu plnenia sa z fľaštičiek vyfúkava plynným dusíkom vzduch a po naplnení sa zatvárajú v prúde dusíka.
Nie je však možné prebublávaním plynom odstraňovať kyslík z roztokov obsahujúcich proteín, pretože silno pení, a tiež preto, že veľa účinných proteínov, ako jc koagulačný faktor VIII, podlieha pri tomto kroku denaturácii. To je dôvod, prečo dosiaľ nebolo nikdy odporúčané skladovať roztoky s obsahom koagulačného faktora VIII pod inertným plynom, ako je dusík.
Podstata vynálezu
Teraz sme zistili, že roztoky obsahujúce koagulačný faktor VIII sa dajú zbaviť kyslíka bez denaturácie proteínu. S veľkým prekvapením sme zistili, že koagulačný faktor sa dá stabilizovať bez albumínu, a že získaný vodný roztok s nízkym obsahom kyslíka je stabilný pri skladovacej teplote napríklad 2 až 8 °C.
Vynález sa týka prípravku s obsahom koagulačného faktora VIII, ktorý je podľa vynálezu vo forme vodného roztoku bez albumínu s aktivitou koagulačného faktora VIII od 10 až 100 000 IU/ml, pričom koncentrácia kyslíka v roztoku je menej ako 200 ppm. Prípravok ďalej obsahuje inertný plyn.
Faktorom VIII môže byť buď plazmový alebo rekombinantný faktor VIII. Ak ide o rekombinantný faktor VIII, môže ísť buď o formu plnej dĺžky molekulového reťazca alebo výhodne o derivát, odvodený vypustením časti reťazca. Veľmi výhodný je skrátený derivát FVIII SQ (r-VHI SQ).
Aktivita faktora VIII môže byť v rozsahu od 10 až do 100 000 IU/ml, výhodne od 50 do 10 000 IU/ml.
Faktor VIII, používaný v príkladoch uskutočnenia, je vysoko čistý, t. j. má špecifickú aktivitu nad 5 000 lU/mg proteínu a kompozícia podľa vynálezu je stabilizovaná bez prísady albumínu.
Koncentrácia kyslíka sa dá znížiť buď pôsobením inertnej atmosféry na vodný roztok, alebo znížením tlaku a následným zavádzaním inertného plynu. Druhý postup sa výhodne opakuje v niekoľkých cykloch. Touto metódou sa dá znížiť obsah kyslíka v roztoku na nízku úroveň bez podstatných strát na aktivite faktora VIII. Obsah kyslíka v roztoku môže byť pod 200 ppm, vhodne pod 50 ppm, výhodne 10 ppm a ešte výhodnejšie pod 2 ppm. Obsah kyslíka v používanej nádobe sa dá znížiť rovnakým spôsobom, najmä pomocou inertnej atmosféry. Finálne vyrábané preparáty tvoria formulácie účinnej látky v nádrži. Vhodné nádrže na účely vynálezu sú napríklad liekovky, injekčné striekačky a iné injekčné zariadenia.
Roztok sa dá skladovať pod inertnou atmosférou, ako je dusík, argón alebo hélium, aby sa udržal Čo najnižší obsah kyslíka. Inertný plyn je výhodne iný ako vzácny plyn. Veľmi výhodné je použiť na tento účel dusík.
Nízky obsah kyslíka je možné udržiavať pridaním antioxidantu k vodnému roztoku. Výhodne teda môže ďalej roztok obsahovať aspoň jeden antioxidant, ako je glutation, acetylcysteín, metionín, tokoferol, butylhydroxytoluén, butylhydroxyanizol alebo fenolické zlúčeniny. Výhodne je antioxidantom aspoň jedna zlúčenina, vybraná zo skupiny, zahrnujúcej glutation, acetylcysteín a metionín. Ďalej môžu ešte stabilitu faktora VIII zvýšiť komplexotvorné činidlá, ako EDTA a kyselina citrónová.
Množstvo antioxidantu závisí od toho, ktoré konkrétne z nich sa použijú, a preto nie je vo všeobecnosti daná ich koncentrácia alebo množstvo. Je však dôležité, aby bolo množstvo pridaného antioxidantu, ak sa používa, farmakologicky únosné.
Vhodné pH roztoku je 6,5 až 8,5 a výhodne okolo 7.
Výhodne je v roztoku prítomný surfaktant. Ak sa používa prísada neionogénneho surfaktantu, je výhodne zvolený z blokových kopolymérov, ako je poloxamér alebo polyoxyetylénsorbitan ester mastnej kyseliny, ako polysorbát 20 alebo polysorbát 80.
Neiónový surfaktant, ak je v roztoku prítomný, sa používa v množstve nad kritickou micelámou koncentráciou (CMC). Pozri Wang a Lee, Joumal of Pharm Sci, 63, str. 136, (1974). Polyoxyetylénsorbitan ester mastnej kyseliny sa teda výhodne používa v množstve aspoň 0,01 mg/ml.
Vodný roztok môže ďalej obsahovať chlorid sodný alebo draselný, výhodne v množstve 0,1 mol/1.
Združovanie ťažkých a ľahkých reťazcov faktora VIII závisí od prítomnosti vápnika (alebo iných dvojmocných iónov kovov). Tu bol pridávaný chlorid vápenatý' (CaCl2), ale je možné použiť i iné soli, ako glukonát vápenatý, glubionát vápenatý alebo gluceptát vápenatý, výhodne v množstve na 0,5 mmol/1.
Vodný roztok výhodne obsahuje aminokyselinu, ako L-histidín lyzín a/alebo arginín, v množstve nad 1 mmol/1. Môže byť pridaný tiež nomo- alebo disacharid, ako sacharóza, alebo sa môžu tiež pridať alkoholy cukrov. Výhodne roztok obsahuje L-histidín.
Finálny výrobok výhodne obsahuje vodný roztok, obsahujúci:
1. 10 až 100 000 IU/ml rekombinatného koagulačného faktora VIII,
Π. aspoň 0,01 mg/ml polyoxyetylénsorbitan esteru mastnej kyseliny,
III. chlorid sodný, výhodne v množstve nad 0,1 mol/1,
IV. vápenatú soľ, ako je chlorid vápenatý alebo glukonát vápenatý, výhodne v množstve nad 0,5 mmol/1,
V. aminokyselinu, ako L-histidín, v množstve nad 1 mmol/1,
VI. mono alebo disacharid, alebo alkohol cukru, výhodne sacharózy alebo mannitolu.
Do tohto roztoku sa môže pridať vo farmaceutický prijateľnom množstve antioxidant.
Finálny výrobok teda obsahuje stabilný vodný roztok, pripravený na farmaceutické použitie.
Roztok podľa vynálezu je možné pripraviť spôsobom, pri ktorom sa koagulačný faktor VIII mieša s vodným roztokom alebo sa koagulačný faktor VIII vymýva z posledného čistiaceho stupňa vodným roztokom. Vodný roztok výhodne obsahuje aspoň jednu prísadu, zvolenú zo skupiny obsahujúcej neionogénny surfaktant, antioxidant, aminokyselinu ako L-histidín, sodnú soľ, vápenatú soľ a sacharózu.
Uchovávanie koagulačného faktora VIII vo vodnom roztoku v inertnej atmosfére zlepšuje stabilitu faktora. Skladovaním faktora pri teplote 2 až 10 °C a pri pH 6,5 až 8,5 je možné uchovať počas aspoň 6 mesiacov najmenej 50 %, ale dokonca i 80 % pôvodnej účinnosti faktora VIII.
Pri využití vynálezu je možné skladovať finálny výrobok s obsahom faktora VIII vo vodnom roztoku počas 12 a dokonca i 24 mesiacov, bez značnej straty aktivity faktora VIII. Predovšetkým, ak je faktorom VIII r-VIII SQ, pretože z výsledkov priložených príkladov vyplýva, že r-VIII SQ je v podstate stabilný počas minimálne 6 mesiacov pri skladovaní pod dusíkom pri teplote 5 ±3 °C.
Nasledujúce príklady ilustrujú vynález a ukazujú zistenú stabilitu rôznych vodných roztokov, ak sa s nimi pracovalo v dusíku a argóne podľa vynálezu a na vzduchu pri porovnávacom uskutočnení. Patentová ochrana nie je týmito príkladmi obmedzená.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Experimentálna časť - Materiály a metódy:
Rekombinatný faktor VIII (r-VIII SQ) bol pripravený v podstate podľa príkladov 1 až 3 patentu WO-A-91/0912. DHFR deficitný CHO bunková línia (DG44 N.Y.) bola elektroporovaná s expresným vektorom obsahujúcim gén r-VIII SQ a expresným vektorom obsahujúcim dihydrofolatreduktázový gén. Nasledujúca selekcia kolónií, prežívajúcich na selekčnej pôde, bola zosilnená stupňovitým zvyšovaním množstva metotrexátu. Potom bol supematant, získaný z výsledných kolónií, individuálne testovaný na aktivitu faktora VIII. Vybraný produkčný kloň bol týmto postupom adaptovaný na suspenznú kultiváciu bez prítomnosti séra v definovanom prostredí a nakoniec bol vyvinutý spôsob veľkoobjemovej fermentácie. Pri tomto postupe sa supernatant v určitých časových intervaloch zhromažďuje a čistí ďalej opísaným postupom.
Čistená tekutina bola po úprave pH podrobená deleniu v kolóne s náplňou S-Sepharosy FF a zachytený faktor VIII bol eluovaný soľným pufŕom, obsahujúcim 5 mmol/1 CaCl2.
Imunoadsorpcia bola uskutočňovaná na imunoafinitnej živici, kde ligandy boli monoklonálne protilátky (8A4) proti ťažkému reťazcu faktora VIII. Pred plnením kolóny bol S-eluát spracovaný 0,3 % TNBM a Oktoxynolom 9.
Kolóna bola uvedená do rovnováhy, premytá a faktor VIII bol eluovaný pufrom s obsahom 0,05 CaCl2 a 50 % etylénglykolu.
Potom bol mAb-eluát uvedený na kolónu s náplňou Q-Sepharosy FF, a tá bola v imunoafinitnom stupni uvedená do rovnováhy premytím pufrom. Po premytí bol eluovaný faktor VIII roztokom s obsahom 0,05 mol/1 L-histidínu, 4 mmol/1 CaCl2 a 0,6 mmol/1 NaCl s pH 6,8.
Q-eluát bol uvedený do gélovej filtračnej kolóny (Superdex 200 p. g.). Vyrovnanie a elúcie boli uskutočnené pufrom so zložením, uvedeným ďalej pre jednotlivé príklady.
V poslednom čistiacom stupni bol získaný r-VIII SQ ako práškový materiál. Aktivita faktora VIII a koncentrácie neúčinných zložiek boli odjustované zriedením vhodným pufrom. Potom bol roztok sterilné sfiltrovaný (0,22 pm), dávkovaný a zbavený kyslíka znížením tlaku privádzaním inertného plynu v niekoľkých cykloch.
Aktivita koagulačného faktora VIII bola hodnotená skúškou na chromogénnom substráte (Coatest Faktor VIII, Chromogenix AB, Môlndal, Švédsko). Aktivovaný faktor X (Xa) je generovaný vnútornou cestou, pričom faktor VIII pôsobí ako kofaktor. Faktor Xa sa potom stanovuje pomocou syntetického chromogénneho substrátu S-2222 za prítomnosti inhibítora trombínu 1-2581, aby sa zabránilo hydrolýze substrátu trombínom. Reakcia sa zastaví kyselinou a VIILC, ktorému je úmerný uvoľnený pNa (para-nitroanilín), sa stanoví fotometrický pri 450 nm proti porovnávacej hodnote samotných činidiel. Aktivita faktora VIILC je vyjadrená medzinárodnými jednotkami (IU), ktoré sú definované platnou normou Intemational Concentration Štandard (IS) zavedenou WHO.
Príklad 1
Porovnanie roztokov pri skladovaní pod vzduchom a pod dusíkom
Rekombinatný faktor VIII bol pripravený, opísaný v experimentálnej časti.
Roztoky boli skladované pri troch rôznych teplotách, 7 °C, 25 °Č a 30 °C.
Dávkovaný objem v ampulách bol 2 ml.
Tabuľka 1 zloženie bolo nasledujúce:
1 A | 1 B | 1 C | 1 D | 1 E | l F | ||
L-Histidín | mmol/1 | 2,27 | 2,27 | 2,27 | 2,27 | 2,27 | 2,27 |
Chlorid sodný | mol/1 | 18,1 | 18,1 | 18,1 | 18,1 | 18,1 | 18,1 |
Chlorid vápenatý | mmol/1 | 3,7 | 3,7 | 3,7 | 3,7 | 3,7 | 3,7 |
Polysorbát | mg/ml | 0,23 | 0,23 | 0,23 | 0,23 | 0,23 | 0,23 |
pH | 7 | 6 | 7 | 7 | 7 | 7 | |
Atmosféra nad vzorkou | n2 | n2 | vzduch | n2 | n2 | vzduch | |
VIILC | IU/ml | ||||||
Počiatočná | 267 | 258 | 267 | 260 | 259 | 260 | |
3 mesiace | 7 °C | 238 | 209 | - | 224 | 151 | - |
6 mesiacov | 7 °C | 217 | 186 | 158 | 204 | 84 | 20 |
1 mesiac | 25 °C | 220 | - | 232 | - | - | |
3 mesiace | 25 °C | 198 | - | 186 | - | - | |
1 mesiac | 30 °C | 210 | 181 | 136 | 210 | 160 | 8 |
3 mesiace | 30 °C | 158 | 126 | 26 | 152 | 54 | 2 |
Z tohto príkladu je zrejmé, že neprítomnosť kyslíka pri 7 “C umožňuje prijateľné uchovanie VIILC po 6 mesiacoch skladovania v podobe roztoku. Dokonca pri 25 či 30 °C mohol byť roztok podľa vynálezu skladovaný bez príliš veľkého poklesu aktivity. Ďalej vidieť, že stabilita je lepšia pri pH 7 ako pri pH 6.
Príklad 2
Roztoky s obsahom antioxidantu a sacharózy
Rekombinatný faktor VIII bol pripravený spôsobom opísaným v experimentálnej časti.
Roztoky boli skladované pri dvoch rôznych teplotách, 7°Ca25 °C.
Dávkovaný objem v ampulách bol 2 ml.
Tabuľka 2 zloženie bolo nasledovné:
2 A | 2B | ||
Chlorid sodný | mol/1 | 18,1 | 18,1 |
Chlorid vápenatý | mmol/1 | 3,7 | 3,7 |
Polysorbát | mg/ml | 0,23 | 0,23 |
L-Histidín | mmol/1 | 2,27 | 59 |
Sacharóza | mg/ml | 200 | 200 |
Glutation | mg/ml | 0,3 | - |
Acetylcysteín | mg/ml | - | 3 |
PH | 7 | 7 | |
Atmosféra nad vzorkou | |||
VIII:C | IU/ml | n2 | n2 |
Počiatočná | 105 | 108 | |
3 mesiace | 7 °C | 99 | 105 |
6 mesiacov | 7 °C | 90 | 91 |
2 mesiace | 25 °C | 85 | 78 |
3 mesiace | 25 °C | 198 | 66 |
Oba roztoky mali prijateľnú stabilitu VIII:C po 6 mesiacoch skladovania pri teplote 7 °C.
Príklad 3
Porovnanie roztokov obsahujúcich glutation alebo kyselinu askorbovú a skladovaných pod vzduchom a pod dusíkom
Rekombinantný faktor VIII bol pripravený spôsobom opísaním v experimentálnej časti.
Roztoky boli skladované pri teplote 25 °C.
Dávkovaný objem v ampulách bol 2 ml.
Tabuľka 3 zloženie bolo nasledujúce:
3 A | 3B | 3C | 3 D | 3 E | 3F | ||
L-Histidin | mmol/1 | 2,27 | 2,27 | 2,27 | 2,27 | 2,27 | 2,27 |
Chlorid sodný | mol/1 | 18,1 | 18,1 | 18,1 | 18,1 | 18,1 | 18,1 |
Chlorid vápenatý | mmol/1 | 3,7 | 3,7 | 3,7 | 3,7 | 3,7 | 3,7 |
Polysorbát | mg/ml | 0,23 | 0,23 | 0,23 | 0,23 | 0,23 | 0,23 |
Glutation | mg/ml | 0 | 0 | 0,3 | 0,3 | 0 | 0 |
Kyselina askorbová | mg/ml | 0 | 0 | 0 | 0 | 4 | 4 |
PH | 7 | 6 | 7 | 7 | 7 | 7 | |
Skladovacia teplota °C | 25 | 25 | 25 | 7 | 7 | 7 | |
Atmosféra nad vzorkou | |||||||
VIII: C | IU/ml | N? | vzduch | N, | vzduch | n2 | N2 |
Počiatočná | 231 | 231 | 225 | 225 | 220 | 220 | |
l mesiac | 212 | 15 | 203 | 170 | 169 | 2 | |
2 mesiace | 200 | 6 | 177 | 113 | - | ||
3 mesiace | 210 | - | 163 | - | - | - |
Po 2 mesiacoch skladovania sa udržala aktivita faktora VIII na úrovni asi 80 % pôvodnej hodnoty alebo viac. Bolo tak bez ohľadu na následky prítomnosti alebo neprítomnosti glutationu. Viac-menej glutation zvyšuje značne stabilitu, pokiaľ je roztok skladovaný za prítomnosti vzduchu vo voľnom priestore ampulky. Kyselina askorbová stabilitu faktora VIII znižuje.
Príklad 4
Porovnanie roztokov s glutationom a bez glutationu a skladovaných pod vzduchom alebo pod argónom
Rekombinantný faktor VIII bol pripravený spôsobom opísaním v experimentálnej časti.
Roztoky boli skladované pri teplote 25 °C.
Dávkovaný objem v ampulách bol 2 ml.
Tabuľka 4
Zloženie bolo nasledujúce:
4A | 4B | 4C | 4D | 4E | 4F | ||
L-Histidín | mg/ml | 2,29 | 2,29 | 2,29 | 2,2 9 | 2,2 9 | 2,29 |
Chlorid sodný | mg/ml | 18,1 | 18,1 | 18,1 | 18,1 | 18,1 | 18,1 |
Chlorid vápenatý | mmol/1 | 3,7 | 3,7 | 3,7 | 3,7 | 3,7 | 3,7 |
Polysorbát | mg/ml | 0,23 | 0,23 | 0,23 | 0,23 | 0,23 | 0,23 |
Glutation | mg/ml | - | 0,6 | 0,6 | - | 0,6 | 0,6 |
pH | 7 | 7 | 7 | 7 | 7 | 7 | |
Skladovacia teplota °C | 25 | 25 | 25 | 7 | 7 | 7 | |
Atmosféra nad vzorkou | |||||||
VIII: C | IU/ml | Ar | Ar | vzduch | Ar | Ar | vzduch |
Počiatočná | 234 | 176 | 234 | 234 | 176 | 234 | |
1 mesiac | 213 | 157 | 133 | 232 | 172 | 160 | |
2 mesiace | 187 | 139 | 90 | 200 | 153 | 148 | |
3 mesiace | 185 | 138 | 72 | 207 | 159 | 131 | |
4 mesiace | 158 | 116 | - | 186 | 144 | 125 | |
6 mesia- cov | 149 | 111 | - | 188 | 147 | 114 | |
9 mesiacov | - | - | 130 | 106 | 67 |
Po 6 mesiacoch skladovania sa udržala aktivita faktora VIII na úrovni asi 65 % pôvodnej hodnoty alebo viac pri teplote 25 °C. Pri teplote 7 °C bola táto hodnota 80 % alebo viac.
Claims (9)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Prípravok s obsahom koagulačného faktora VIII, vyznačujúci sa tým, že je vo forme vodného roztoku bez albumínu s aktivitou koagulačného faktora VIII od 10 až 100 000 IU/ml, pričom koncentrácia kyslíka v roztoku je menej ako 200 ppm a ďalej obsahuje inertný plyn.
- 2. Prípravok podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že inertný plyn je dusík.
- 3. Prípravok podľa nárokov 1 alebo 2, vyznačujúci sa tým, že ďalej obsahuje aspoň jeden antioxidant.
- 4. Prípravok podľa nároku 3, vyznačujúci sa tým, že antioxidant je vybraný zo skupiny, obsahujúcej glutation, acetylcysteín a metionín.
- 5. Prípravok podľa nárokov laž4, vyznačujúci sa tým, že koagulačný faktor VIII je rekombinantný faktor VIII.
- 6. Prípravok podľa nároku 5, vyznačujúci sa tým, že rekombinantný faktor VIII je skrátený derivát označený ako r-VIII SQ.
- 7. Prípravok podľa nárokov laž4, vyznačujúci sa tým, že koagulačný faktor Vili je plazmovo derivovaný.
- 8. Prípravok podľa nárokov laž7, vyznačujúci sa tým, že obsahuje vodný roztok obsahujúci:I. 10 až 100 000 IU/ml rekombinantného koagulačného faktora VIII,II. aspoň 0,01 mg/ml polyoxyetylénsorbitan esteru mastnej kyseliny,III. chlorid sodný,IV. vápenatú soľ,V. aminokyselinu v množstve nad 1 mM,VI. mono alebo disacharid, alebo alkohol cukru.
- 9. Prípravok podľa nárokov 1 až 8, vyznačujúci sa tým, že vodný roztok má pH od 6,5 do 8,5.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SE19939301581A SE9301581D0 (sv) | 1993-05-07 | 1993-05-07 | Protein formulation |
PCT/SE1994/000265 WO1994026286A1 (en) | 1993-05-07 | 1994-03-24 | Oxygen-reduced aqueous solution of factor viii |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SK138395A3 SK138395A3 (en) | 1997-02-05 |
SK283002B6 true SK283002B6 (sk) | 2003-01-09 |
Family
ID=20389868
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SK1383-95A SK283002B6 (sk) | 1993-05-07 | 1994-03-24 | Prípravok s obsahom koagulačného faktora VIII |
Country Status (24)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5962650A (sk) |
EP (1) | EP0700299B1 (sk) |
JP (1) | JP3751633B2 (sk) |
KR (1) | KR100304143B1 (sk) |
CN (1) | CN1113655C (sk) |
AT (1) | ATE218354T1 (sk) |
AU (1) | AU681883B2 (sk) |
CA (1) | CA2161350C (sk) |
CZ (1) | CZ293527B6 (sk) |
DE (1) | DE69430745T2 (sk) |
DK (1) | DK0700299T3 (sk) |
EE (1) | EE03118B1 (sk) |
ES (1) | ES2177579T3 (sk) |
FI (1) | FI111910B (sk) |
HU (1) | HU215263B (sk) |
NO (1) | NO321769B1 (sk) |
NZ (1) | NZ266031A (sk) |
PL (1) | PL174866B1 (sk) |
PT (1) | PT700299E (sk) |
RU (1) | RU2142290C1 (sk) |
SE (1) | SE9301581D0 (sk) |
SK (1) | SK283002B6 (sk) |
WO (1) | WO1994026286A1 (sk) |
ZA (1) | ZA942251B (sk) |
Families Citing this family (49)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SE504074C2 (sv) * | 1993-07-05 | 1996-11-04 | Pharmacia Ab | Proteinberedning för subkutan, intramuskulär eller intradermal administrering |
IL113010A (en) * | 1994-03-31 | 1999-10-28 | Pharmacia & Upjohn Ab | Pharmaceutical formulation comprising factor viii with an activity of at least 500iu/ml and an enhancer for improved subcutaneous intramuscular or intradermal administration |
SE9403915D0 (sv) * | 1994-11-14 | 1994-11-14 | Annelie Almstedt | Process A |
SE9501189D0 (sv) * | 1995-03-31 | 1995-03-31 | Pharmacia Ab | Protein formulation |
US5929031A (en) * | 1995-05-02 | 1999-07-27 | Baxter Biotech Technology Sarl | Storage stable hemoglobin solutions |
US5925738A (en) * | 1995-12-01 | 1999-07-20 | The American National Red Cross | Methods of production and use of liquid formulations of plasma proteins |
US7560107B2 (en) | 1996-06-26 | 2009-07-14 | Emory University | Modified factor VIII |
US5763401A (en) * | 1996-07-12 | 1998-06-09 | Bayer Corporation | Stabilized albumin-free recombinant factor VIII preparation having a low sugar content |
CA2634663C (en) * | 1999-02-22 | 2009-08-25 | University Of Connecticut | Novel albumin-free factor viii formulations |
EP1194161B1 (en) * | 1999-07-13 | 2005-11-23 | Biovitrum Ab | Stable factor viii compositions |
JP3466516B2 (ja) | 1999-09-07 | 2003-11-10 | 科学技術振興事業団 | 安定保存可能な酸素輸液剤 |
AU2002351756A1 (en) | 2001-12-21 | 2003-07-15 | Novo Nordisk Health Care Ag | Liquid composition of factor vii polypeptides |
IL162618A0 (en) * | 2001-12-21 | 2005-11-20 | Novo Nordisk As | Liquid composition of modified factor vii polypeptides |
GB0207092D0 (en) | 2002-03-26 | 2002-05-08 | Sod Conseils Rech Applic | Stable pharmaceutical composition containing factor VIII |
US20040009918A1 (en) * | 2002-05-03 | 2004-01-15 | Hanne Nedergaard | Stabilised solid compositions of modified factor VII |
AU2003240438A1 (en) * | 2002-06-21 | 2004-01-06 | Novo Nordisk A/S | Stabilised solid compositions of factor vii polypeptides |
US7897734B2 (en) | 2003-03-26 | 2011-03-01 | Novo Nordisk Healthcare Ag | Method for the production of proteins |
AU2004241698A1 (en) * | 2003-05-23 | 2004-12-02 | Novo Nordisk Health Care Ag | Protein stabilization in solution |
ES2382157T3 (es) * | 2003-06-25 | 2012-06-05 | Novo Nordisk Health Care Ag | Composición líquida de polipépttidos del factor VII |
JP5306597B2 (ja) * | 2003-07-01 | 2013-10-02 | ノボ ノルディスク ヘルス ケア アクチェンゲゼルシャフト | 第vii因子ポリペプチドの液体水性薬学的組成物 |
ES2574581T3 (es) | 2003-08-14 | 2016-06-20 | Novo Nordisk Health Care Ag | Composición farmacéutica líquida acuosa de polipéptidos de tipo Factor VII |
TR201809670T4 (tr) | 2003-12-19 | 2018-07-23 | Novo Nordisk Healthcare Ag | Faktör VII polipeptitlerinin stabilize edilmiş kompozisyonları. |
WO2005107776A1 (en) * | 2004-05-03 | 2005-11-17 | Emory University | METHOD OF ADMINISTERING PORCINE B-DOMAINLESS fVIII |
US7494974B2 (en) | 2006-10-24 | 2009-02-24 | Ikor, Inc. | Carboxymethylated cross-linked tetrameric hemoglobin |
US7504377B2 (en) | 2006-10-23 | 2009-03-17 | Ikor, Inc. | Nitric oxide-blocked cross-linked tetrameric hemoglobin |
PT1982731E (pt) * | 2007-04-17 | 2010-07-06 | Schwabe Willmar Gmbh & Co | PROCESSO PARA PRODUÃO DE SOLUÃES DE EXTRACTOS DE PELARGËNIO ESTáVEIS EM ARMAZENAMENTO |
ATE503763T1 (de) * | 2007-07-11 | 2011-04-15 | Novo Nordisk As | Aufreinigung von faktor viii unter verwendung eines mixed-mode oder multimodalen harzes |
EP2113564A1 (en) | 2008-05-01 | 2009-11-04 | Arecor Limited | Protein formulation |
JP2012500250A (ja) | 2008-08-21 | 2012-01-05 | オクタファルマ アクチェン ゲゼルシャフト | 組換えにより産生したヒト第viii及び第ix因子 |
KR101691443B1 (ko) * | 2008-09-03 | 2016-12-30 | 옥타파마 아게 | 재조합에 의해 제조된 인자 ⅷ을 위한 신규한 보호 조성물 |
JP5779780B2 (ja) | 2008-11-07 | 2015-09-16 | バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッドBaxter International Incorp0Rated | 第viii因子製剤 |
US10172949B2 (en) | 2009-06-09 | 2019-01-08 | Prolong Pharmaceuticals, LLC | Hemoglobin compositions |
US10172950B2 (en) | 2009-06-09 | 2019-01-08 | Prolong Pharmaceuticals, LLC | Hemoglobin compositions |
LT2440239T (lt) | 2009-06-09 | 2017-12-11 | Prolong Pharmaceuticals, LLC | Hemoglobino kompozicijos |
GB0915480D0 (en) * | 2009-09-04 | 2009-10-07 | Arecor Ltd | Stable formulation of factor viii |
US11284616B2 (en) | 2010-05-05 | 2022-03-29 | Hemanext Inc. | Irradiation of red blood cells and anaerobic storage |
US9199016B2 (en) | 2009-10-12 | 2015-12-01 | New Health Sciences, Inc. | System for extended storage of red blood cells and methods of use |
PT2608816T (pt) | 2010-08-25 | 2023-10-12 | Dartmouth College | Método para melhorar a qualidade e a sobrevivência dos glóbulos vermelhos durante o armazenamento |
BR112013011041B1 (pt) | 2010-11-05 | 2021-05-25 | Baxalta GmbH | variante de fator viii, método para produzir uma variante de fviii, uso da variante de fator viii, e, composição farmacêutica |
ES2957338T3 (es) | 2010-11-05 | 2024-01-17 | Hemanext Inc | Irradiación de glóbulos rojos y almacenamiento anaeróbico |
US9067004B2 (en) | 2011-03-28 | 2015-06-30 | New Health Sciences, Inc. | Method and system for removing oxygen and carbon dioxide during red cell blood processing using an inert carrier gas and manifold assembly |
EP3533507B1 (en) | 2011-08-10 | 2022-03-30 | Hemanext Inc. | Integrated leukocyte, oxygen and/or co2 depletion, and plasma separation filter device |
US9877476B2 (en) | 2013-02-28 | 2018-01-30 | New Health Sciences, Inc. | Gas depletion and gas addition devices for blood treatment |
ES2524516B1 (es) * | 2014-05-29 | 2015-03-31 | Grifols Worldwide Operations Limited | Procedimiento de preparación de albúmina humana con nivel de oxígeno disuelto reducido |
KR20180012242A (ko) | 2015-03-10 | 2018-02-05 | 뉴 헬스 사이언시즈 인코포레이티드 | 산소 감소 1회용 키트, 장치 및 이의 사용 방법 |
IL285359B2 (en) | 2015-04-23 | 2024-01-01 | Hemanext Inc | Anaerobic blood storage containers |
US11013771B2 (en) | 2015-05-18 | 2021-05-25 | Hemanext Inc. | Methods for the storage of whole blood, and compositions thereof |
IL282627B2 (en) | 2016-05-27 | 2023-10-01 | Hemanext Inc | Anaerobic blood storage and pathogen inactivation method |
BR112021000965A2 (pt) | 2018-08-07 | 2021-04-27 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | processos e vacinas |
Family Cites Families (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2896381A (en) * | 1954-05-27 | 1959-07-28 | Hodes Lange Corp | Method and apparatus for treating and filling ampoules |
US3143471A (en) * | 1962-01-18 | 1964-08-04 | Merck & Co Inc | Argon method of drying and preserving lyophilized therapeutic products |
US4165370A (en) * | 1976-05-21 | 1979-08-21 | Coval M L | Injectable gamma globulin |
US4783441A (en) * | 1979-04-30 | 1988-11-08 | Hoechst Aktiengesellschaft | Aqueous protein solutions stable to denaturation |
DE3144705C2 (de) * | 1981-11-11 | 1983-12-08 | Biotest-Serum-Institut Gmbh, 6000 Frankfurt | Verfahren zur Herstellung eines lagerstabilen, vernetzten Hämoglobinpräparates mit hoher Sauerstoff-Transportkapazität, sowie das nach diesem Verfahren hergestellte Hämoglobinpräparat |
US4481189A (en) * | 1982-04-14 | 1984-11-06 | New York Blood Center Inc. | Process for preparing sterilized plasma and plasma derivatives |
US4727027A (en) * | 1983-05-02 | 1988-02-23 | Diamond Scientific Co. | Photochemical decontamination treatment of whole blood or blood components |
US4597966A (en) * | 1985-01-09 | 1986-07-01 | Ortho Diagnostic Systems, Inc. | Histidine stabilized immunoglobulin and method of preparation |
DE3577801D1 (de) * | 1985-08-05 | 1990-06-28 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung von praeparationen auf basis von blutgerinnungsfaktoren. |
US4709819A (en) * | 1986-07-23 | 1987-12-01 | Environmental Diagnostics, Inc. | Method for preserving plated media and product |
CA1292686C (en) * | 1986-10-27 | 1991-12-03 | Ze'ev Shaked | Pharmaceutical compositions of recombinant interleukin-2 and formulation process |
CA1329760C (en) * | 1987-10-29 | 1994-05-24 | Ted C. K. Lee | Plasma and recombinant protein formulations in high ionic strength media |
US4877608A (en) * | 1987-11-09 | 1989-10-31 | Rorer Pharmaceutical Corporation | Pharmaceutical plasma protein formulations in low ionic strength media |
FR2630115B1 (fr) * | 1988-04-14 | 1994-10-28 | Merieux Inst | Procede de stabilisation des solutions d'albumine humaine et solution obtenue |
GB8808810D0 (en) * | 1988-04-14 | 1988-05-18 | Biopharm Clinical Research Ltd | Heparin-containing formulations |
US5096885A (en) * | 1988-04-15 | 1992-03-17 | Genentech, Inc. | Human growth hormone formulation |
SE465222C5 (sv) * | 1989-12-15 | 1998-02-10 | Pharmacia & Upjohn Ab | Ett rekombinant, humant faktor VIII-derivat och förfarande för dess framställning |
DE4001451A1 (de) * | 1990-01-19 | 1991-08-01 | Octapharma Ag | Stabile injizierbare loesungen von faktor viii und faktor ix |
DE4111393A1 (de) * | 1991-04-09 | 1992-10-15 | Behringwerke Ag | Stabilisierte faktor viii-praeparationen |
EP0789612B1 (en) * | 1994-10-31 | 2002-09-04 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | High density nonwoven filter media |
-
1993
- 1993-05-07 SE SE19939301581A patent/SE9301581D0/xx unknown
-
1994
- 1994-03-24 PT PT94915307T patent/PT700299E/pt unknown
- 1994-03-24 PL PL94311567A patent/PL174866B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1994-03-24 CN CN94192021A patent/CN1113655C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1994-03-24 EP EP94915307A patent/EP0700299B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-03-24 SK SK1383-95A patent/SK283002B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1994-03-24 JP JP52470394A patent/JP3751633B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1994-03-24 HU HU9503171A patent/HU215263B/hu not_active IP Right Cessation
- 1994-03-24 WO PCT/SE1994/000265 patent/WO1994026286A1/en active IP Right Grant
- 1994-03-24 NZ NZ266031A patent/NZ266031A/en not_active IP Right Cessation
- 1994-03-24 AU AU66597/94A patent/AU681883B2/en not_active Ceased
- 1994-03-24 DE DE69430745T patent/DE69430745T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-03-24 US US08/535,251 patent/US5962650A/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-03-24 AT AT94915307T patent/ATE218354T1/de active
- 1994-03-24 KR KR1019950704933A patent/KR100304143B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1994-03-24 CZ CZ19952869A patent/CZ293527B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1994-03-24 CA CA002161350A patent/CA2161350C/en not_active Expired - Fee Related
- 1994-03-24 DK DK94915307T patent/DK0700299T3/da active
- 1994-03-24 RU RU95121755A patent/RU2142290C1/ru not_active IP Right Cessation
- 1994-03-24 ES ES94915307T patent/ES2177579T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-04-02 ZA ZA942251A patent/ZA942251B/xx unknown
- 1994-11-17 EE EE9400380A patent/EE03118B1/xx not_active IP Right Cessation
-
1995
- 1995-11-06 FI FI955305A patent/FI111910B/fi not_active IP Right Cessation
- 1995-11-07 NO NO19954457A patent/NO321769B1/no not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2142290C1 (ru) | Водный раствор фактора viii со сниженной концентрацией кислорода | |
EP0627924B1 (en) | Composition comprising coagulation factor viii formulation, process for its preparation and use of a surfactant as stabilizer | |
ES2193159T5 (es) | Una formulación de factor de coagulación viii. | |
EP0819010B1 (en) | Protein formulation comprising coagulation factor viii or factor ix in an aqueous sucrose solution | |
KR20050123356A (ko) | 동결건조된 알부민 비함유 재조합 사람 혈액응고 제 8인자 제제 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | Patent lapsed due to non-payment of maintenance fees |
Effective date: 20120324 |