SK282598B6 - Aniónové zlúčeniny obsahujúce triazínový kruh, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie - Google Patents

Aniónové zlúčeniny obsahujúce triazínový kruh, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie Download PDF

Info

Publication number
SK282598B6
SK282598B6 SK179-97A SK17997A SK282598B6 SK 282598 B6 SK282598 B6 SK 282598B6 SK 17997 A SK17997 A SK 17997A SK 282598 B6 SK282598 B6 SK 282598B6
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
bis
anionic compound
ylamino
aminophenyl
acid
Prior art date
Application number
SK179-97A
Other languages
English (en)
Other versions
SK17997A3 (en
Inventor
Yakov Gluzman
James Paul Larocque
Bryan Mark O'hara
John Edward Morin
George Alfred Ellestad
Boris Mitsner
Wei-Dong Ding
Yuri Efimovich Raifeld
Antonina Aristotelevna Nikitenko
Original Assignee
American Cyanamid Company
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US08/789,038 external-priority patent/US5852015A/en
Application filed by American Cyanamid Company filed Critical American Cyanamid Company
Publication of SK17997A3 publication Critical patent/SK17997A3/sk
Publication of SK282598B6 publication Critical patent/SK282598B6/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/18—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D211/20—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by singly bound oxygen or sulphur atoms
    • C07D211/22—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by singly bound oxygen or sulphur atoms by oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/18—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D211/34—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/80—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/82—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/80—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/84—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/90—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D223/02—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D223/04—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings with only hydrogen atoms, halogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D223/02—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D223/06—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D251/00—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings
    • C07D251/02—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings
    • C07D251/12—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D251/26—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hetero atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C07D251/40—Nitrogen atoms
    • C07D251/42—One nitrogen atom
    • C07D251/44—One nitrogen atom with halogen atoms attached to the two other ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D251/00—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings
    • C07D251/02—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings
    • C07D251/12—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D251/26—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hetero atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C07D251/40—Nitrogen atoms
    • C07D251/48—Two nitrogen atoms
    • C07D251/50—Two nitrogen atoms with a halogen atom attached to the third ring carbon atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D251/00—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings
    • C07D251/02—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings
    • C07D251/12—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D251/26—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hetero atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C07D251/40—Nitrogen atoms
    • C07D251/48—Two nitrogen atoms
    • C07D251/52—Two nitrogen atoms with an oxygen or sulfur atom attached to the third ring carbon atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D251/00—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings
    • C07D251/02—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings
    • C07D251/12—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D251/26—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hetero atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C07D251/40—Nitrogen atoms
    • C07D251/54—Three nitrogen atoms
    • C07D251/70—Other substituted melamines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

Aniónové zlúčeniny všeobecného vzorca (I) obsahujúce triazínový kruh, ich farmaceuticky prijateľné soli, farmaceutický prostriedok obsahujúci tieto zlúčeniny a použitie týchto zlúčenín a ich farmaceuticky prijateľných solí na výrobu liečiva na liečenie vírusových infekcií, zvlášť infekcií respiračným syncyciálnym vírusom.ŕ

Description

Vynález sa týka nových aniónových zlúčenín obsahujúcich triazínový kruh, ktoré sú užitočné na liečenie vírusových infekcií a zvlášť ľudského respiračného syncyciálneho vírusu (HRSV). Vynález sa tiež týka metód liečenia vírusových infekcií a farmaceutických zmesí určených na tento účel.
Doterajší stav techniky
Ľudský respiračný syncyciálny vírus (HRSV) bol prvý raz objavený v roku 1956 a je svetovo rozšírený. Je významnou príčinou chorôb horných a dolných dýchacích ciest spôsobujúci ochorenia kojencov a malých detí, čo vedie v Spojených štátoch približne k 100000 hospitalizáciám a 5000 úmrtiam ročne (Chanock, R. M., Kim, H. K., Brandt, C. D. a Parrott, R. H. 1982. Respiračný syncyciálny vírus, str. 471 až 489, Vírusové infekcie ľudí, druhé vydanie, A. S. Evans, editor (Plénum Press, NY). Glezen, W. P., Taber, L. H., Frank, A. L. a Kasel, J. A. 1986. Riziko primárnej infekcie a opakovanej infekcie respiračným syncyciálnym vírusom. Am. J. Dis. Chil. 140, 543 až 546. MacDonald, N. E., Halí, C. B., Suffin, S. C., Alexson, C., Harris, P. J. a Manning, J. A. 1982. Infekcia respiračným syncyciálnym vírusom kojencov s vrodenou chorobou srdca. New England Joumal of Medicíne 307,397 až 400.
Asi 30 percent malých detí s akútnou respiračnou chorobou má infekciu respiračným syncyciálnym vírusom. U starších detí a dospelých je choroba miernejšia. HRSV sa tiež javí ako hlavná príčina (ekvivalent ku chrípke) chorobnosti a úmrtnosti starších osôb. (Fleming D. M. a Cross, K. W. 1993. Respiračný syncyciálny vírus alebo chrípka? Lancet 342, 1507 až 1510.). Infekcie respiračným syncyciálnym vírusom sú prisúditeľné všetkým častiam respiračných ciest, obvykle sú spojené s horúčkou, kašľom, nachladnutím a únavou, sú klinicky diagnostikované ako bronchitída, bronchiolitída, zápal pľúc, krupózna laryngitída alebo vírusová infekcia. U starších detí a dospelých je vírus všeobecne obmedzený na replikáciu v horných dýchacích cestách. Kojenci môžu byť zasiahnutí silnejšie, keď vírus zasiahne pľúca, poškodenie pľúc môže byť trvalé.
Primárna infekcia s respiračným syncyciálnym vírusom sa objavuje zavčasu v živote, obvykle pred 4 rokmi veku. U detí má choroba spôsobená týmto vírusom tendenciu vyskytovať sa najmenej raz do roka v dosť ostro definovaných vypuknutiach niekoľkomesačného trvania. Epidémie sú ostro ohraničené, všeobecne od 3 do 5 mesiacov. Pri sledovaní rodín sa zistilo, že deti v mladšom školskom veku často zanesú vírus domov, pričom infikujú mladších členov rodiny silnejšie než ostatných členov rodiny, klinické dôsledky infekcie sú silnejšie pri prvej infekcii a stanú sa miernejšími u starších jedincov, ktorí sú po imunologickej reakcii.
Účinky respiračného syncyciálneho vírusu sú v rozsahu od nezjavnej infekcie po silný zápal pľúc a smrť. Zápal dýchacích ciest je zodpovedný za väčšinu symptómov. Úplné zotavenie vo väčšine prípadov nastáva o jeden až tri týždne s tvorbou protilátok, ktoré zdá sa pretrvávajú po celý život. V Spojených štátoch asi 30 percent jednoročných kojencov a 95 percent detí vo veku päť rokov má v obehu protilátku respiračného syncyciálneho vírusu. Opakovaná infekcia starších detí a dospelých s protilátkami dáva väčšinou miernu chorobu horných dýchacích ciest vo forme nachladnutia. U kojencov a malých detí sa infekcia lieči ribavirinom, širokospektrálnym antivírusovým liečivom. Pou žitie tejto látky je silne obmedzené jej toxicitou. Preto je veľká potreba nových terapeutických činidiel na liečenie HRSV infekcie.
U. S. Patent č. 5,359,131 ukazuje stilbény sulfónovej kyseliny, ktoré blokujú infekciu buniek vírusom herpes simplex (HSV), vírusom ľudskej imunitnej nedostatočnosti (HIV) a cytomegalovírusom (CMV).
Podstata vynálezu
Tento vynález sa týka nových aniónových látok s triazínovým kruhom, ktoré majú antivírusovú aktivitu a zvlášť aktivitu proti ľudskému respiračnému syn-cyciálnemu vírusu (HRSV).
Vynález sa týka nových látok vybraných z látok so všeobecným vzorcom (I):
kde
A je skupina vybraná zo skupiny pozostávajúcej z
C'
C'
C' C'
C' je vybrané z -SO3H, -OSO3H, -OH alebo -COOH;
B' je vybraný z -NH, -NR1 alebo O;
R1 je vybraný z H, (C|.6)nižšieho alkylu, priameho alebo rozvetveného, kde uhlíkové atómy môžu byť voliteľne substituované s Cl, Br, F, OH alebo CN;
X je Cl, F alebo skupina
U' je vybrané zo skupiny -SO2, -CO, -NC(O) alebo
-NC(S);
W' je vybrané zo skupín:
alebo ·Ν
Yje-(CH2)n-;
n je 0 až 6;
m je 0 až 2;
Z je vybrané z H, CH3, CF3, -CH2-(halogén), kde halogénom je Cl, Br, F alebo I, -CH2OH, -COOH,
-COO(Ci.6)nižší alkyl, priamy alebo rozvetvený, -CONR2R2, CN alebo
R2 /
-CH \
OH; a
R2 je vo všetkých výskytoch nezávisle vybraný z H alebo (Cj.j-nižšieho alkylu;
a ich farmaceutický prijateľných soli a esterov.
Rozumie sa, že v prípadoch, kde m je 0, W' môže byť päť-členným kruhom.
Farmaceutický prijateľné soli látok podľa tohto vynálezu sú soli, ktorých katióny nie sú podstatne toxické pri dávke podávanej na dosiahnutie požadovaného účinku a nemajú samostatne významnú farmakologickú aktivitu. Ilustratívne tieto soli zahrnujú soli alkalických kovov, napríklad Na alebo K; kovov alkalických zemín, ako je napríklad Ca alebo Mg; ľahké kovy skupiny Hla vrátane Al; a organické primáme, sekundárne a terciáme amíny alebo amónium. Výhodné sú sodné soli.
Schéma I
A<B'-h]2 (2)
(3)
O'C; pH 6.5-7.2
i 45-55’C; pH 6.5 7.2 ii 100-120'C; pH 6.5-7.2
Podrobný opis vynálezu
V skupine látok definovaných vzorcom (I) sú veľmi výhodné niektoré podskupiny látok. Veľmi výhodné sú tie látky alebo ich farmaceutický prijateľné soli, kde A je
C' c
Zvlášť výhodné sú látky, kde
C' = -SO3H, B’ = -NH, Y = -CH2-, Z = -CH2OH Veľmi výhodné sú látky, kde
C' = -SO3H, B' = -NH, Y = -CH2CH2-, Z = -CONH2 Najvýhodnejšie sú látky, kde A je
C' c
Ú)
V alternatívnom spôsobe prípravy látok so vzorcom (I), ako je uvedený v schéme II, reakcia triazínu 3, kde X je Cl, Br alebo F, s látkami 5, kde B' a W' sú ako je definované skôr, pri teplote od asi -5 °C do asi 5 °C a pH 6,5 až 7,2, poskytne kondenzačný produkt 6. Reakcia 6, kde B' a W' sú ako je definované a X je Cl, Br alebo F, a 2, kde A a B' sú ako je definované, pri teplote asi 45 °C až asi 55 °C a pH od asi 6,5 do asi 7,2, po čom nasleduje zahriatie na teplotu od asi 100 °C do asi 120 °C a pH 6,5 až 7,2, poskytne 1.
Schéma II
(3)
-5 -5'C, pH 6.5 - 7.2 a C' = -SO3H, B1 = -NH, Y = -CH2CH2-, Z = -CONH2.
Nové látky podľa tohto vynálezu sa môžu pripraviť podľa nasledujúcich schém. Podľa schémy I, kondenzácia 2, kde A a B' sú ako je uvedené, s triazínmi, ktoré majú štruktúru 3, kde X je Cl, F alebo Br, pri 0 °C a pH od asi
6,5 do asi 7,2, poskytuje medziprodukt 4. Ďalšia reakcia látky so vzorcom (4) s látkou so vzorcom (5), kde U', B' a W’ sú ako je definované, pri teplote od asi 45 °C do asi 55 °C a pH 6,5 až 7,2, po čom nasleduje zahrievanie na 100 °C až 120 °C pri pH 6,5 až 7,2, poskytne požadované produkty so vzorcom (I) uvedené vyššie, ktoré sú označené v schémach, ktoré nasledujú ako 1.
i 45-55‘C; ii I00 120-C (1)
Stupňovitá kondenzácia východiskových látok 2, ako je ukázané na schéme I, a 5, ako je ukázané na schéme II, s triazínmi 3, kde X je Cl, Br alebo F, prebieha podobne vo vodnom alebo organicko-vodnom prostredí, v prítomnosti vhodnej zásady, ako je napríklad hydroxid, uhličitan, fosforečnan alebo hydrogénuhličitan sodný alebo draselný. Výhodný je fosforečnanový pufer pri pH 7,0.
Prvý krok kondenzácie sa uskutočňuje v pH v rozsahu od asi 4 do asi 8, výhodne pri pH od asi 6,5 do asi 7,2 a pri teplotách od asi -10 °C do asi 30 °C, výhodne od asi -5 “C do asi 5 °C. Výmena druhého halogénového atómu triazínových derivátov sa uskutočňuje v tom istom rozsahu pH a od asi 10 °C do asi 70 °C, výhodne pri teplote od asi 45 °C do asi 55 °C. Výmena tretieho halogénového atómu triazínových derivátov sa uskutočňuje pri tom istom rozsahu pH a pri teplotách od asi 80 °C do asi 150 °C, výhodne od asi 100 °C do 120 °C.
Výmena druhého alebo tretieho halogénového atómu triazínových derivátov so vzorcom (6) (schéma II) sa uskutočňuje tiež v organickom prostredí v prítomnosti organických zásad, ako sú napríklad trialkylamíny, vrátane trietylamínu, diizopropyletylamínu alebo N-(nižšieho)alkylpiperidínu.
Východiskové materiály na použitie vo všeobecných syntetických postupoch vyznačené v schéme I a II sú komerčne dostupné alebo sa môžu syntetizovať podľa H. Adkinsa, E.F. Steinbringa, E. Pickeringa, J. Amer. Chem. Soc., 46, 1917 (1924), G.B. Pat. č. 1,194,388 (10. jún 1970) a U.S. Pat.č. 5,359,131 (25. október 1994). Východiskové látky so vzorcom (2), kde B'je kyslík, sa môžu pripraviť zo substituovaných látok so vzorcom (2) (B1 = -NH2), ako je uvedené v schéme III
Schéma III hno2 h3o+
A[-NH21 -----------> A[N+-N]2 ------------ A[-DH]2 <73 (8) C9)
Primárne aromatické amíny 7, kde A je podľa skôr uvedenej definície, reagujú s kyselinou dusitou alebo s inými chemickými činidlami (napríklad organickými estermi kyseliny dusitej) tak, aby sa primárny amín diazotoval, čím vznikne diazóniová soľ 8, ktorá sa hydrolyzuje na látky so vzorcom (9), ktoré obsahujú fenolové skupiny.
Schéma IV
Podľa schémy IV látky 10 stilbénového radu sa môžu transformovať na látky 11 bibenzylového radu katalytickými redukčnými podmienkami (vodík - Pd/C) alebo príbuznými redukčnými podmienkami známymi v odbore na konvertovanie substituovaných stilbénových látok na bibenzvlové látky (Huang-Minlon, J. Amer. Chem. Soc. (1948) 70, 2802).
Látky 12 a 13 so vzorcom (1) so Z = -COOH sa môžu pripraviť zásaditou hydrolýzou z látok 14 v rozsahu pH od
7,5 do 10,0, výhodne 8,0 až 8,5 a od 80 °C do 150 °C, výhodne 100 °C až 120 °C (schéma V):
Schéma V
R = xCHjCH2CONH2 so2n SCHjCH2C00H (13): R* -
CH2CH2COOH ch2ch2cooh
R — HN-Q
SO2N(CI!2CH2CONH2)2 m-Aminobenzamidy 17, kde U'je -SO2 alebo -CO, Y a Z sú podľa uvedenej definície, sa syntetizujú podľa schémy VI.
Schéma VI
(lí)
U'W'
Imidy 15 sa transformujú na m-nitrosulfonáty 16, s použitím vhodného variantu amidačnej alebo tozylačnej metódy (T. W. Greene, P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Chcmistry, John Wiley & Sons, New York 1991, str. 349 až 379). Nitro zlúčeniny 16 sa potom redukujú na amino zlúčeniny 17 katalytickou hydroge-náciou (vodík Pd/C).
Piperazínové deriváty 21, 22, kde Z je -COOH alebo -CONH: sa syntetizujú podľa schémy VII z kyseliny 3,5-piperidíndikarboxylovej 18. Redukcia aromatického kruhu a m-nitrotozylácia piperidínového derivátu 19 vedie k látke 20, ktorá sa buď redukuje na látku 21 obsahujúcu karboxyl, alebo sa konvertuje na látku 22 obsahujúcu karbamoyl, esterifikáciou a amonolýzou.
Schéua VII
Vynález tiež zahrnuje spôsoby liečenia cicavcov, výhodne človeka, postihnutých vírusovou infekciou, spôsoby, ktoré zahrnujú podávanie takto postihnutým cicavcom jednej alebo viacerých látok podľa tohto vynálezu, a/alebo jednej alebo viacerých farmaceutický prijateľných solí týchto látok. Vírusové infekcie liečiteľné pomocou týchto látok a metódy liečenia podľa tohto vynálezu zahrnujú tieto infekcie spôsobené ľudským respiračným syncyciálnym vírusom, vírusmi herpes simplex, ľudským cytomegalovírusom a vírusmi chrípky, zvlášť vírusom paramfluenza 3.
Látky podľa tohto vynálezu sa môžu podávať cicavcom, ktoré to potrebujú akýmkoľvek predpísaným spôsobom, vrátane intranazálne, orálne, topikálne, transdermálne, parenterálne a intraperitoneálne. Je pochopiteľné, že liečenie cicavcov, výhodne človeka, bude vyžadovať rôzne dávky aktívnej látky a rôzne režimy liečenia v závislosti od rôznych faktorov, vrátane veku, pohlavia, veľkosti, všeobecného zdravia a rozsahu poruchy pozorovanej u daného jedinca, dávky a režim má určiť vlastný praktický lekár. Antivírusovo účinné množstvo týchto podávaných látok bude všeobecne v rozsahu od asi 0,5 mg/kg do asi 500 mg/kg telesnej hmotnosti organizmu v jednej alebo viacerých dávkach za deň. Dávky sú výhodne podávané v rozdelených dávkach dva až štyrikrát za deň alebo vo forme so spomaleným uvoľňovaním. Pre väčšinu veľkých cicavcov je celková denná dávka od asi 1 do 100 mg, výhodne od asi 2 do 80 mg. Dávková forma, vhodná na vnútorné použitie zahrnuje od asi 0,5 do 500 mg aktívnej látky v tesnej zmesi s tuhým alebo kvapalným farmaceutický prijateľným nosičom. Tento dávkový režim sa môže upraviť tak, aby poskytol optimálnu terapeutickú odpoveď. Napríklad sa môžu denne podávať viaceré oddelené dávky alebo sa môže dávka proporcionálne zmenšiť podľa indikácie požiadavkami terapeutickej situácie. Látky podľa tohto vynálezu sa môžu podávať s inými proti vírusovými činidlami alebo bez nich.
Vynález tiež zahrnuje farmaceutické zmesi, ktoré sa môžu použiť pri týchto spôsoboch liečenia. Farmaceutické zmesi môžu obsahovať jednu alebo viaceré látky podľa tohto vynálezu, alebo ich farmaceutický prijateľné soli a jeden alebo viaceré farmaceutický prijateľné nosiče, zrieďovadlá, vehikulá, plnivá, spojivá, ochucovacie činidlá atď.. Na orálne podávanie zmesi obsahujúce látky podľa tohto vynálezu zahrnujú tuhé alebo kvapalné zmesi, ako napríklad kapsuly, pastilky, pilulky, tablety, prášky, taveniny, roztoky, suspenzie a emulzie. Tuhé formy môžu byť zapuzdrené v tvrdých alebo mäkkých želatínových kapsuliach a môžu obsahovať bežne používané farmaceutický prijateľné vehikulá, plnivá, adjuvanty, zrieďovadlá, mastivá, dezintegranty, suspenzačné a stabilizačné činidlá a viazacie činidlá, vrátane, ale bez obmedzenia na ne, stearátu horečnatého, laurylsíranu sodného, mikrokryštalickej celulózy, polyvinylpyrolidónu, želatíny, kyseliny algínovej, arabskej gumy, citranu sodného, komplexných kremičitanov, uhličitanu vápenatého, glycínu, dextrínu, sacharózy, sorbitolu, fosforečnanu vápenatého, hydrogenfosforečnanu vápenatého, síranu vápenatého, laktózy, kaolínu, manitolu, chloridu sodného, mastenca, suchého škrobu (napríklad kukuričného, zemiakového alebo tapiokového škrobu) a práškového cukru. Prípravky tiež môžu obsahovať antioxidanty, napríklad vitamín E, kyselinu askorbovú, BHT a BHA. Takéto farmaceutické prípravky môžu obsahovať napríklad od asi 0,05 do asi 90 % hmotnostných aktívnej zložky v spojení s nosičom, obvyklejšie medzi asi 5 % hmotnostných a 60 % hmotnostných.
Vhodné vehikulá pre kvapalné orálne prípravky zahrnujú zrieďovadlá, ako je napríklad voda a alkoholy, ako je napríklad etanol, benzylalkohol a polyetylénalkoholy, s povrchovo aktívnou látkou alebo bez nej, suspenzačné činidlo alebo emulzifikačné činidlo. Disperzie sa môžu pripraviť v glycerole, kvapalných polyetylénglykoloch a ich zmesiach v olejoch. Za obyčajných podmienok skladovania a použitia obsahujú tieto prípravky konzervačné látky na zabránenie rastu mikroorganizmov.
Látky podľa tohto vynálezu sa tiež môžu podávať parenterálne ako injektovateľná dávková forma vo fyziologicky prijateľnom zrieďovadle, ako sú napríklad sterilné kvapaliny alebo ich zmesi s vodou, vrátane vody, soľného roztoku, vodného dextrózového roztoku a iných roztokov farmaceutický prijateľných cukrov, alkoholov, ako je napríklad etanol, izopropanol alebo hexadecylalkohol, glykolov, ako je napríklad propylénglykol alebo polyetylénglykol, ketálov glycerolu, ako je napríklad 2,2-dimetyl-l,3-dioxolán-4-metanol, éterov, ako je napríklad poly(etylénglykol)400, farmaceutický prijateľný olej, mastná kyselina, ester mastnej kyseliny alebo glycerid, alebo acetylovaný glycerid mastnej kyseliny s prídavkom farmaceutický prijateľnej povrchovo aktívnej látky alebo bez neho, ako je napríklad mydlo alebo detergent, suspenzačného činidla, ako je napríklad pektín, škroby, metylcelulóza, hydroxy-metylcelulóza alebo karboxymetylcelulóza, emulzifíkač-ného činidla alebo farmaceutických adjuvantov. Vo všetkých prípadoch musí byť táto forma sterilná a musí byť tekutá v takom rozsahu, že je ľahko aplikovateľná striekačkou. Musí byť stabilná za podmienok výroby a uskladnenia a musí byť chránená proti kontaminačnému pôsobeniu mikroorganizmov, napríklad baktrérií a húb.
Farmaceutický prijateľné oleje, ktoré sú užitočné v týchto prípravkoch, zahrnujú oleje z ropy, živočíšneho, rastlinného alebo syntetického pôvodu, vrátane podzemnicového oleja, sójového oleja, sézamového oleja, bavlníkového oleja, slnečnicového oleja, vazelíny a minerálneho oleja. Mastné kyseliny, ktoré sa môžu použiť, zahrnujú ky selinu olejovú, kyselinu stearovú a kyselinu izostearovú, kým estery mastných kyselín užitočné na tieto účely zahrnujú etyloleát a izopropylmyristát. Vhodné mydlá zahrnujú soli alkalických kovov mastných kyselín, amónne soli a trietanolamínové soli mastných kyselín. Prijateľné detergenty zahrnujú katiónové detergenty, napríklad dimetyldialkylamóniumhalogenidy, alkylpy-ridíniumhalogenidy a alkylamínacetáty a aniónové detergenty, ako sú napríklad alkyl-, aryl- a olefín-sulfonáty, alkyl-, olefín-, éter- a monoglycerid-sulfáty a sulfojantarany. Užitočné neiónové detergenty môžu zahrnovať mastné aminooxidy, alkanolamidy mastných kyselín a polyoxyetylénpolypropylénové kopolyméry. Amfotéme detergenty môžu zahrnovať alkylbeta-aminopropionáty a 2-alkylimidazolinové kvartéme soli a ich zmesi.
Parenterálne zmesi podľa tohto vynálezu budú obsahovať od asi 0,5 do 25 % hmotnostných aktívnych látok opísaných v tomto dokumente v roztoku. Parenterálne prípravky vo forme sterilných injektovateľných roztokov alebo suspenzií budú tiež výhodne obsahovať od asi 0,05 % hmotnostného do 5 % hmotnostných suspenzačného činidla v izotonickom prostredí. Môžu sa pridávať pufŕe a konzervačné látky. Môže sa tiež pridávať vhodná povrchovo aktívna látka. Tieto povrchovo aktívne látky môžu zahrnovať polyetylénsorbitanové estery mastných kyselín, ako napríklad sorbitanmonooleát a adukty etylénoxidu s vysokou molekulovou hmotnosťou s hydrofóbnym základom, ktoré sa tvoria kondenzáciou propylénoxidu s propylénglykolom.
Farmaceutické zmesi podľa tohto vynálezu tiež zahrnujú tieto zmesi, ktoré sú užitočné na topikálne a transdermálne podávanie. Tieto prípravky môžu zahrnovať kožné aplikácie látok podľa tohto vynálezu v rozpúšťadlovom systéme určenom na zvýšenie transdermálnej absorpcie, vrátane etanolu alebo dimetylsulfoxidu, s inými vehikulami alebo bez nich. Výhodne tieto topikálne alebo transdermálne zmesi obsahujú prídavok látok podľa tohto vynálezu do náplasti typu zásobníka a pórovitej membrány alebo v náplasti typu s tuhou matricou. Transdermálne náplaste týchto typov sú opísané v U.S. patentoch č. 3,742,951, 3,797,494, 3,996,934,4,031,894,4,573,996 a 4,956,171.
Intranazálne prípravky a aplikácie podľa tohto vynálezu sa môžu podávať ako nosné kvapky alebo ako nosný sprej, napríklad ako inhalačný prostriedok. Prípravky môžu zahrnovať akúkoľvek kombináciu farmaceutický prijateľných zložiek, ktoré sú užitočné pri intranazálnom podávaní, vrátane sterilnej vody, soľného roztoku, stabilizačných činidiel, ako je napríklad polyetylénglykol, ktorý má molekulovú hmotnosť v rozsahu od asi 200 do asi 7500, alebo ich zmesi.
Látky podľa tohto vynálezu sa môžu použiť na liečenie vírusových infekcií buď profylaktický, alebo terapeuticky. Na profylaktické použitie by látka mohla byť podávaná intranazálne ako sprej alebo hmla, alebo ako kvapky na dennom základe na zabránenie inťekcií vírusom, zvlášť RSV. DÍžka času, počas ktorého by sa liečenie malo uskutočňovať, bude odrážať pravdepodobnosť infekcie konkrétnym vírusom a môže byť ovplyvnená epidemiologickou situáciou a rizikovými ťaktormi, ktoré má daný pacient. Látky dodávané týmito cestami môžu byť v rozsahu koncentrácií od 0,1 do 30 mg/ml, dodávaný objem v rozsahu od 0,1 do 1 ml/nosnú dierku. Alternatívne sa tieto látky môžu dodávať systemický orálnym alebo intravenóznym dávkovaním. Na terapeutické použitie môžu byť tieto látky dodávané topikálne do pľúc ako aerosól alebo by mohli byť dodávané systemický orálnym alebo intravenóznym dávkovaním. Takéto dávkovanie môže byť aplikované v čase potrebnom na zvládnutie vírusovej infekcie.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Látky podľa tohto vynálezu a ich príprava môže byť ďalej pochopená pomocou nasledujúcich neobmedzujúcich príkladov. Reakčné medziprodukty, produkty a potenciálne vedľajšie produkty sa analyzovali tenkovrstvovou chromatografiou (TLC) na silikagéli s použitím zmesi propan-2-oletylacetát - 4 % amoniak vo vode (8:1:1, v/v) ako rozpúšťadla a vysokoúčinnou kvapalinovou chroma-tografiou s obrátenými fázami (RP-HPLC) (kolóna: Vydac C|8 (4,6 mm x 25 cm), 5 mm; mobilná fáza: A - acetonitril, B - 0,1 mol/1 octan amónny vo vode (pH 5,5), C - metanol; gradient: zo zmesi A - B - C (20:65: :15, v/v) ku zmesi A - B - C (20:55:25, v/v) za 10 minút). Preparatívna RP-HPLC sa uskutočnila na gradientovom HPLC systéme Rainin s použitím preparatívnej kolóny Vydac C18 Peptide/proteine (10 mm, 22 mm x 25 cm); mobilná fáza: A - metanol - 0,1 mol/1 octan amónny vo vode (pH 5,5) (1:4, v/v) B - metanol - acetonitril (1:4, v/v); gradient: 18 až 32 % B za 10 minút.
Príklad 1
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-stilbén-2,2'-disulfónovej
Roztok kyanurchloridu (3,87 g, 21 mmol) v dioxáne (25 ml) sa pridal do fosfátového pufra (100 ml, 0,3 mol/1, pH 7) za premiešavania pri -3 °C až 0 °C. Počas 20 minút sa pridal roztok kyseliny 4,4'-diaminostilbén-2,2'-disulfónovej (3,70 g, 10 mmol) v 1 mol/1 NaOH (20 ml) a pH s udržiavalo na hodnote 6,5 až 7,2 prídavkom 1 mol/1 NaOH. Premiešavanie pokračovalo počas ďalšej 1 hodiny pri rovnakej teplote a pH, pričom sa úplnosť reakcie monitorovala pomocou analytickej HPLC (výťažok 95 %). Počas 20 minút sa pridal roztok 3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimínu (13,20 g, 42 mmol) (G.B. pat. č. 1,194,388; 10. jún 1970) v dimetylsulfoxide (DMSO) (100 ml) a teplota sa zvýšila na 50 °C.
Premiešavanie pokračovalo počas 2,5-hodiny pri tejto teplote a potom 40 hodín pri 100 až 110 °C s udržiavaním pH na hodnote 6,6 až 7,2 prídavkom 1 mol/1 NaOH. Keď sa reakcia skončila podľa určenia pomocou analytickej HPLC (alebo TLC), zmes sa ochladila na 20 °C a okyslila sa pomocou 5,6 mol/1 kyseliny chlorovodíkovej na pH 2. Pridal sa chlorid sodný (60 ml, 4 mol/1) a vyzrážaný produkt sa odfiltroval, znova rozpustil v minimálnom objeme vody s prídavkom 1 mol/1 NaOH na pH 7 a prezrážal sa prídavkom chloridu sodného. Zrazenina sa odfiltrovala, premyla sa so studenou vodou (20 ml), propan-2-olom (40 ml), acetónom (60 ml) a sušila sa za vákua pri 50 °C. Výťažok 13,0 g (72 %). t. t. >250 °C, rozklad; UV (voda): 273 nm (loge 5,11), 350 nm (loge 4,89); MS(ES) (m/z): M'2 887,9; M. h. 1821,2.
Príklad 2
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-stilbén-2,2'-disulfónovej
Suspenzia disodnej soli kyseliny 4,4'-diaminostilbén-2,2'-disulfónovej (1,21 g, 2,92 mmol) a 2-chlór-4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-1,3,5-triazínu (príklad 6) 4,47 g, 6,44 mmol) v tetrametylénsulfóne (70 ml) a diizopropyletylamínu (1,5 ml) sa zahrievala v uzavretej hrubostenej sklenej skúmavke na 115 °C. Zahrievanie pokračovalo 40 hodín. Keď sa reakcia skončila podľa určenia pomocou analytickej HPLC (alebo TLC), zmes sa ochladila na 30 °C. Pridal sa 1 mol/1 NaOH (6,6 ml) a produkt sa vyzrážal prídavkom propan-2-olu (200 ml). Zrazenina sa odfiltrovala, premyla sa acetónom (30 ml) a znova sa rozpustila v minimálnom objeme vody a prezrážala sa prídavkom etanolu. Zrazenina sa po filtrácii premyla éterom (30 ml) a sušila sa za vákua pri 50 °C. Výťažok 4,84 g (91 %).
Príklad 3 Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino] -stilbén-2,2'-disulfónovej
Látka z názvu tohto príkladu bola pripravená s použitím všeobecných podmienok z príkladu 1, kde 2,4,6-trifluór-1,3,5-triazín (304 mg, 2,25 mmol) reagoval s kyselinou 4,4'-diaminostilbén-2,2'-disulfónovou (455 mg, 1,10 mmol) počas 1 hodiny a potom s 3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyl-etyl)-sulfonylimínom (1,45 g, 4,62 mmol) (G. B. pat. č. 1,194,388; 10. jún 1970), nasledovalo čistenie, ktoré poskytlo požadovaný produkt (1,21 g, 61 %).
Látky syntetizované podľa postupov z príkladov 1 až 3 boli podľa HPLC, UV a hmotnostných spektier identické.
Príklad 4
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-bifenyl-2,2'-disulfónovej
Látka z názvu tohto príkladu bola pripravená podľa postupu z príkladu 2 s použitím disodnej soli kyseliny 4,4'-diaminobifenyl-2,2'-disulfónovej (1,02 g, 2,62 mmol) a 2-chlór-4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonyl-imino]-l,3,5-triazínu (príklad 6) (4,26 g, 5,76 mmol) v 60 ml zmesi DMSO-tetrametylénsulfóne (1:3, v/v) a diizopropyletylamínu (1,2 ml). Produkt sa získal ako bezfarebná tuhá látka (3,90 g, 83 %); 1.1. > 250 °C, rozklad; UV (voda): 272 nm (loge 4,86); MS(ES) (m/z): M’2 874,1; M. h. 1794,2.
Príklad 5 Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-hydroxyetyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-stilbén-2,2'-disulfónovej
Látka z názvu tohto príkladu bola pripravená podľa postupu z príkladu 2 s použitím disodnej soli kyseliny 4,4'-diaminostilbén-2,2'-disulfónovej (28 mg, 0,075 mmol) a 95 mg (0,15 mmol) 2-chlór-4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-hydroxyetyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazínu (príklad 6) v tetrametylénsulfóne (20 ml) a diizopropyletylamínu (35 ml) pri teplote 110 °C počas 18 hodín. Ochladená reakčná zmes sa zmiešala s deionizovanou vodou (40 ml) a roztok surového produktu sa čistil preparatívnou RP-HPLC. Frakcie, ktoré obsahovali požadovaný produkt sa spojili, organické rozpúšťadlá sa odparili za vákua (1,33 kPa) pri 30 °C, a produkt sa skoncentroval, zbavil sa soli a izoloval sa pomocou oktadecylovej (C]8) patróny (900 mg, získanej od Burdick & Jackson). Patróna sa premyla vodou (30 ml) a produkt sa reextrahoval metanolom (50 ml). Odparenie metanolu poskytlo 12 mg (11 %) požadovaného produktu; t. t. >250 °C, rozklad; UV (voda): 273 nm (loge 4,97), 350 nm (loge 4,81); MS(ES) (m/z): M’2 779,0; M. h. 1604,0.
Príklad 6 2-Chlór-4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino] -1,3,5-triazín
Roztok kyanurchloridu (4,2 g, 22,7 mmol) v dioxáne (55 ml) sa pridal po kvapkách za premiešavania do fosfátového pufra (120 ml, 0,3 mol/1, pH 7) a rozdrveného ľadu (10 g) pri -2 °C až 0 °C. Ku výslednej jemnej suspenzii sa po kvapkách pridal počas 30 minút roztok 3-aminofenylN,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonyl-imínu (15,0 g, 47,8 mmol) (G. B. pat. č. 1,194,388; 10. jún 1970) v N,N-dimetylformamide (125 ml) a pH sa udržiavalo na hodnote
6.5 až 7,2 prídavkom 1 mol/1 NaOH. Premiešavanie pokračovalo ďalšiu 1 hodinu (0 °C, pH 7,0) a teplota sa zvýšila na 55 °C. Premiešavanie pokračovalo počas 2,5-hodiny, pričom sa monitorovala úplnosť reakcie pomocou analytickej HPLC (alebo TLC). Keď sa reakcia skončila podľa určenia pomocou analytickej HPLC (alebo TLC), zmes sa ochladila na 0 °C, pridala sa voda (160 ml) a vyzrážaný produkt sa odfiltroval, premyl so studenou vodou (50 ml), acetónom (50 ml) a sušil sa za vákua pri 40 °C. Výťažok
14.5 g (86 %). 1.1. >250 °C, rozklad; UV (DMSO): 282 nm (loge 4,77); MS(CI) (m/z): MH 740,1.
Príklad 7
Disodná soľ kyseliny 4-[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-4'-[4-chlór-6-[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-stilbén-2,2'-disulfónovej
Roztok kyanurchloridu (205 mg, 1,12 mmol) v dioxáne (1,5 ml) sa pridal do fosfátového pufra (10 ml, 0,3 mol/1, pH 7) za premiešavania pri -3 až 0 °C. Pridal sa roztok kyseliny 4,4l-diaminostilbén-2,2'-disulfónovej, disodnej soli (225 mg, 0,54 mmol) vo fosfátovom pufri (3 ml) a pH sa udržiavalo na hodnote 6,5 až 7,2 prídavkom 1 mol/1 NaOH. Premiešavanie pokračovalo počas ďalšej 1 hodiny pri rovnakej teplote a pH, pričom sa úplnosť reakcie monitorovala pomocou analytickej HPLC (výťažok 97 %). Počas 10 minút sa pridal roztok 3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimínu (700 mg, 2,23 mmol) v N,N-dimetylformamide (10 ml) a teplota sa zvýšila na 60 °C. Premiešavanie pokračovalo počas 3 hodín pri tejto teplote a 20 hodín pri 100 až 110 °C s udržiavaním pH na hodnote 6,6 až 7,2 prídavkom 1 mol/1 NaOH. Keď sa reakcia skončila podľa určenia pomocou analytickej HPLC, zmes sa ochladila na 20 °C a okyslila sa pomocou 5,6 mol/1 kyseliny chlorovodíkovej na pH 2, pridal sa chlorid sodný (5 ml, 4 mol/1) a vyzrážaný produkt sa odfiltroval, premyl so studenou vodou (2 ml) a sušil sa za vákua pri 40 °C. Dva podiely roztoku surového produktu (asi 1 g) v deionizovanej vode (250 ml) sa čistili oddelene preparatívnou RP-HPLC. Frakcie obsahujúce požadovaný produkt sa spojili, organické rozpúšťadlá sa odparili za vákua (1,33 kPa) pri 30 °C a produkt sa skoncentroval, zbavil soli a izoloval sa pomocou oktadecylovej (C18) patróny (900 mg, získanej od Burdick & Jackson). Patróna sa premyla vodou (30 ml) a produkt sa reextrahoval metanolom (50 ml). Odparenie metanolu poskytlo 268 mg (32 %) požadovaného produktu; 1.1. >250 °C, rozklad; UV (voda): 273 nm (loge 4,83), 350 nm (loge 4,44); MS(ES) (m/z): M’2 749,15; M. h. 1544,3.
Príklad 8
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis[4-chlór-6-[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-stilbén-2,2'-disulfónovej
Roztok kyanurchloridu (0,91 g, 4,95 mmol) v dioxáne (8 ml) sa pridal do fosfátového pufra (30 ml, 0,3 mol/1, pH 7) za premiešavania pri -3 až 0 °C. Pridal sa roztok kyseliny 4,4'-diaminostilbén-2,2'-disulfónovej, disodnej soli (1,00 g, 2,41 mmol) v deionizovanej vode (9 ml) a pH sa udržiavalo na hodnote 6,5 až 7,2 prídavkom 1 mol/1 NaOH. Premiešavanie pokračovalo počas ďalšej 1 hodiny pri rovnakej teplote a pH, pričom sa úplnosť reakcie monitorovala pomocou analytickej HPLC (výťažok 98 %). Počas 10 minút sa pridal roztok 3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyljsulfonylimínu (1,57 g, 5,00 mmol) v Ν,Ν-dimetylformamide (25 ml) a teplota sa zvýšila na 50 °C. Premiešavame pokračovalo počas 6 hodín pri tejto teplote s udržiavaním pH na hodnote 6,6 až 7,2 prídavkom 1 mol/1 NaOH. Keď sa reakcia skončila podľa určenia pomocou analytickej HPLC (alebo TLC), zmes sa ochladila na 0 °C a okyslila sa pomocou 5,6 mol/1 kyseliny chlorovodíkovej na pH 2. Pridal sa chlorid sodný (5 ml, 4 mol/1) a vyzrážaný produkt sa odfiltroval, premyl so studenou vodou (8 ml) a éterom (20 ml), a sušil sa za vákua pri 40 °C. Výťažok 2,37 g (80 %), t. t. >300 °C, rozklad; UV (voda): 273 nm (loge 4,57), 350 nm (loge 4,42); MS(ES) (m/z): M'2 610,1; M. h. 1266,2.
Príklad 9
Disodná soľ kyseliny 4-[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyljsulfonylimino]-1,3,5-triazín-2-ylamino]-4'-[4-[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-6-[3-aminofenyl-N-(2-karbamoyletyl)-N'-(3-propiónová kyselina)]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-stilbén-2,2'-disulfónovej a
Príklad 10
Disodná soľ kyseliny 4-[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-4'-[4-[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-6-[3-aminofenyl-N,N-bis(3-propiónová kyselina)]-1,3,5-triazín-2-yl-ammo]-stilbén-2,2'-disulfónovej
K roztoku z príkladu 1 (200 mg, 0,11 mmol) v deionizovanej vode (20 ml) sa pridal 1 mol/1 NaOH (300 ml) a zmes sa zahriala do varu. Reakčná zmes sa udržiavala horúca počas 3 hodín, ochladila sa na 0 °C a okyslila sa pomocou 5,6 mol/1 kyseliny chlorovodíkovej na pH 2. Pridal sa chlorid sodný (10 ml, 4 mol/1) a vyzrážaný produkt sa odfiltroval, premyl sa so studenou vodou (2 ml) a sušil sa za vákua pri 40 °C. Roztok surového produktu (asi 180 mg) v destilovanej vode (125 ml) sa čistil preparatívnou RP-HPLC. Frakcie obsahujúce požadovaný produkt (príklad 9) sa spojili, organické rozpúšťadlá sa odparili za vákua (1,33 kPa) pri 30 °C a produkt sa skoncentroval, zbavil soli a izoloval sa pomocou oktadecylovej (C18) patróny (900 mg, získanej od Burdick & Jackson). Patróna sa premyla vodou (30 ml) a produkt sa reextrahoval metanolom (50 ml). Odparenie metanolu poskytlo 24 mg (12 %) požadovaného produktu; t. t. >250 °C, rozklad; UV (voda): 273 nm (loge 5,02), 350 nm (loge 4,76); MS(ES) (m/z): M'2 888,3; M. h. 1822,6.
Druhý produkt (príklad 10) sa izoloval z iných frakcií obsahujúcich požadovanú látku (príklad 10) pomocou RP-HPLC-separácie, pričom sa použil rovnaký postup skoncentrovania, zbavenia soli a izolácie pomocou oktadecylovej (Cis) patróny opísaný v príklade 9. Výťažok 18 mg (9 %) požadovaného produktu; 1.1. >250 °C, rozklad; UV (voda): 273 nm (loge 4,92), 350 nm (loge 4,69); MS(ES) (m/z): M’2 889,2; M. h. 1824,4.
Príklad 11
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis-(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-bibenzyl-2,2'-disulfónovej
Roztok z príkladu 1 (30 mg) v 30 ml zmesi voda-metanol (1 : 1, v/v) sa premiešaval s paládiom na uhlí (10 % hmotnostných Pd) v atmosfére vodíka počas 5 dní. Reakčná zmes sa prefiltrovala a rozpúšťadlo sa odparilo.
Produkt sa izoloval pomocou preparatívnej RP-IIPLC. Frakcie obsahujúce požadovaný produkt sa spojili, organické rozpúšťadlá sa odparili za vákua (1,33 kPa) pri 30 °C a produkt sa izoloval pomocou oktadecylovej (C18) patróny (300 mg, získanej od Burdick & Jackson). Patróna sa premyla vodou (30 ml) a produkt sa reextrahoval metanolom (50 ml). Odparenie metanolu zanechalo 16 mg (50 %) požadovaného produktu; 1.1. >250 °C, rozklad; UV (voda): 274 nm (loge 4,96); MS(ES) (m/z): M2 889,2; M. h. 1824,4.
Príklad 12
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis[4,6-di[4-aminofenyl-N,N-bis-(2-karbamoyletyl)sulfonylimino] -1,3,5-triazín-2-ylamino] -stilbén-2,2'-disulfónovej
Látka z názvu tohto príkladu bola pripravená podľa postupu syntézy z príkladu 2 s použitím kyseliny 4,4'-diaminostilbén-2,2'-disulfónovej (48 mg, 0,125 mmol) a 2-chlór-4,6-di[4-aminofenyl-N,N-bis(2-hydroxyetyl)su1fonylimino]-l,3,5-triazínu (príklad 18) (230 mg, 0,310 mmol) v dimetylsulfoxide (12 ml) a diizopropyletylamínu (260 ml). Produkt sa získal ako bezfarebná tuhá látka (173 mg, 77 %); 1.1. >250 °C, rozklad; UV (voda): 296 nm (loge 4,57); MS(ES) (m/z): M’2 883,2; M. h. 1822,4.
Príklad 13
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis[4,6-di[4-aminofenyl-N,N-bis-(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-bifenyl-2,2'-disulfónovej
Látka z názvu tohto príkladu bola pripravená podľa postupu syntézy z príkladu 2 s použitím kyseliny 4,4'-diaminobifenyl-2,2'-disulfónovej, disodnej soli (113 mg, 0,33 mmol) a 2-chlór-4,6-di[4-aminofenyl-N,N-bis(2-hydroxyetyl)-sulfonylimino]-l,3,5-triazínu (príklad 18) (535 mg, 0,72 mmol) v 25 ml zmesi DMSO-tetrametylén-sulfón (2:3, v/v) a diizopropyletylamínu (350 ml). Produkt sa získal ako bezfarebná tuhá látka (450 mg, 76 %); 1.1 > 250 °C, rozklad; UV (voda): 296 nm (loge 5,13); MS(ES) (m/z): M’2 874,4; M. h. 1794,8.
Príklad 14
2-Chlór-4,6-di(3 '-sulfoamidoanilíno)-1,3,5-triazín
Roztok kyanurchloridu (2,37 g, 12,9 mmol) v acetóne (25 ml) sa pridal po kvapkách za premiešavania do fosfátového pufra (60 ml, 0,3 mol/1, pH 7) pri -2 °C až 0 °C. Ku výslednej jemnej suspenzii sa po kvapkách pridal počas 20 minút roztok m-sulfanilamidu (4,35 g, 25,3 mmol) v acetóne (30 ml) a pH sa udržiavalo na hodnote 6,5 až 7,2 prídavkom 1 mol/1 NaOH. Premiešavanie pokračovalo ďalších 30 minút (0 °C, pH 7,0) a teplota sa zvýšila na 55 °C. Premiešavanie pokračovalo počas 3 hodín, pričom sa monitorovala úplnosť reakcie pomocou analytickej HPLC (alebo TLC). Keď sa reakcia skončila podľa určenia pomocou analytickej HPLC (alebo TLC), zmes sa ochladila na 0 °C, pridala sa voda (100 ml) a vyzrážaný produkt sa odfiltroval, premyl so studenou vodou (50 ml), sušil sa na filtri a čistil sa rozpustením v horúcom acetóne (40 ml) a vyzrážaním s benzénom (150 ml). Produkt sa prefíltroval, premyl propan-2-olom (20 ml) a éterom (30 ml), sušil sa za vákua pri 30 °C. Výťažok 3,72 g (64 %). t. t. >250 °C, rozklad; UV (MeOH): 277 nm (loge 4,68); MS(CI) (m/z): MH 456,0.
Príklad 15
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenylsulfonylamido]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-stilbén-2,2'-disulfónovej
Látka z názvu tohto príkladu bola pripravená podľa postupu syntézy z príkladu 2 s použitím kyseliny 4,4'SK 282598 B6
-diaminostilbén-2,2'-disulfónovej, disodnej soli (216 mg, 0,52 mmol) a 2-chlór-4,6-di(3'-sulfoamidoanilíno)-l,3,5-triazínu (príklad 14) (524 mg, 1,15 mmol) v tetrametylénsulfóne (15 ml) a diizopropyletylamínu (250 ml) počas 40 hodín pri 115 °C. Po ochladení na 20 °C sa reakčná zmes zriedila éterom (100 ml) a pridal sa 1 mol/1 NaOH (2,08 ml). Po centrifugácii sa zvyšok premiešaval s propan2-olom (50 ml), kým kryštalizácia nebola úplná. Tuhá látka sa odcentrifugovala, premyla metanolom (2 x 30 ml) a éterom (2 x 30 ml) a sušila sa za vákua pri 30 °C. Výťažok (570 mg, 92 %); 1.1. >250 °C, rozklad; UV (voda): 273 nm (loge 4,76), 350 nm (loge 4,52).
Príklad 16
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenylsulfonylamido]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-bifenyl-2,2'-disulfónovej
Látka z názvu tohto príkladu bola pripravená podľa postupu syntézy z príkladu 2 s použitím kyseliny 4,4'-diaminobifenyl-2,2'-disulfónovej (208 mg, 0,60 mmol) a 2-chlór-4,6-di(3'-sulfoamidoanilíno)-l,3,5-triazínu (príklad 14) (607 mg, 1,33 mmol) v tetrametylénsulfóne (20 ml) a diizopropyletylamínu (850 ml) počas 40 hodín pri 115 °C. Po ochladení na 20 °C sa reakčná zmes zriedila éterom (150 ml) a pridal sa 1 mol/1 NaOH (2,40 ml). Po centrifugácii sa zvyšok premiešaval s propan-2-olom (50 ml), kým kryštalizácia nebola úplná. Tuhá látka sa odcentrifugovala, premyla metanolom (40 ml) a éterom (2 x 20 ml) a sušila sa za vákua pri 30 °C.
Výťažok 505 mg (72 %); 1.1. >250 °C, rozklad; UV (voda): 276 nm (loge 4,93).
Príklad 17
Kyselina 4,4'-dihydroxybifenyl-2,2'-disulfónová
K suspenzii kyseliny 4,4'-diaminobifenyl-2,2'-disulfónovej (4,44 g, 12,9 mmol) vo vode (20 ml) sa pridal roztok uhličitanu sodného (8,6 ml, 1,5 mol/1) pri zahrievaní, kým sa nezískal číry roztok. Po ochladení na 5 °C sa k tomuto roztoku pridal roztok dusitanu sodného (1,78 g, 12,9 mmol) vo vode (3 ml). Výsledný roztok sa po kvapkách pridal za premiešavania k roztoku koncentrovanej kyseliny sírovej (3,8 ml) vo vode (13 ml) a rozdrveného ľadu (10 g) pri -5 až -2 °C. Premiešavame pokračovalo počas ďalších 30 minút a reakčná zmes sa zahriala na 65 °C. Teplota sa udržiavala, kým prebiehal vývoj dusíka. Zmes sa ochladila na 10 °C a neutralizovala sa so suchým uhličitanom sodným a roztok sa odparil, čím vznikol zvyšok. Zvyšok sa sušil za vákua pri 50 °C, zmiešal sa s etanolom (225 ml) a prefiltroval sa. Filtrát sa odparil a sušil za vákua pri 40 °C. Výťažok 3,88 (87 %); t. t. >250 °C, rozklad; UV (0,05 mol/1 NaOH: 252 nm (loge 4,16), 311 nm (loge 3,40); MS(ES) (m/z): (M-H)’1345,0; M. h. 346,0.
Príklad 18 2-Chlór-4,6-di[4-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín
Látka z názvu tohto príkladu sa pripravila podľa postupu použitého na prípravu príkladu 6 s použitím 4-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimínu (3,3 g,
10,5 mmol) (G.B. pat. č. 1,194,388; 10. jún 1970) a kyanurchloridu (1,0 g, 5,4 mmol). Produkt sa získal ako bezfarebná tuhá látka (3,5 g, 88 %). t. t. > 250 °C, rozklad; UV (DMSO): 303 nm (loge 4,84); MS(CI) (m/z): MH 740,1.
Príklad 19
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-yloxy] -bifeny l-2,2’-disulfónovej
Suspenzia kyseliny 4,4'-dihydroxybifenyl-2,2'-disulfónovej (príklad 17) (131 mg, 0,34 mmol) a 2-chlór-4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-1,3,5-triazínu (príklad 6) (550 mg, 0,74 mmol) v zmesi tetrametylénsulfón-N,N-dimetylformamid (15 ml, 2 : 1 v/v) a NaOH (1 mol/1, 1,48 ml) sa zahrievala v uzavretej hrubostenej sklenej skúmavke na 115 °C. Zahrievanie pokračovalo 50 hodín. Keď sa reakcia skončila podľa určenia pomocou analytickej HPLC (alebo TLC), zmes sa ochladila na 20 °C a produkt sa vyzrážal prídavkom propan-2-olu (70 ml), premyl sa na filtri studeným etanolom (15 ml) a sušil sa za vákua pri 40 °C. Dva podiely roztoku surového produktu (asi 0,6 g) v deionizovanej vode (200 ml) sa čistili oddelene preparatívnou RP-HPLC. Frakcie obsahujúce požadovaný produkt sa spojili, organické rozpúšťadlá sa odparili za vákua (1,33 kPa) pri 30 °C a produkt sa skoncentroval, zbavil sa soli a izoloval sa pomocou oktadecylovej (C18) patróny (900 mg, získanej od Burdick & Jackson). Patróna sa premyla vodou (30 ml) a produkt sa reextrahoval metanolom (50 ml). Odparenie metanolu poskytlo 171 mg (28 %) požadovaného produktu; 1.1. >250 °C, rozklad; UV (voda): 272 nm (loge 4,86); MS(ES) (m/z): M'2 875,2; M. h. 1796,4.
Príklad 20
Disodná soľ kyseliny 5,5’-dimetyl-4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonyliminoj-l,3,5-triazín-2-ylamino]-bifenyl-2,2'-disulfónovej
Látka sa pripravila podľa postupu použitého na prípravu príkladu 2 s použitím kyseliny 5,5'-dimetyl-4,4'-diaminobifenyl-2,2'-disulfónovej, disodnej soli (206 mg, 0,49 mmol) a 2-chlór-4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazínu (príklad 6) (805 mg, 1,08 mmol) v 30 ml zmesi DMSO-tetrametylénsulfón (1:1 v/v) a diizopropyletylamínu (200 ml) počas 50 hodín pri 115 °C.
Po HPLC čistení sa získal produkt ako bezfarebná tuhá látka (191 mg, 22 %); t. t. >250 °C, rozklad; UV (voda): 274 nm (loge 5,08); MS(ES) (m/z): M'2 883,3; M. h. 1822,6.
Príklad 21
2- Chlór-4,6-di[4-aminofenyl-N,N-bis(3-hydroxyetyl)sulfonylimino] -1,3,5-triazin
Roztok kyanurchloridu (135 mg, 0,73 mmol) v dioxáne (55 ml) sa pridal po kvapkách za premiešavania do fosfátového pufra (120 ml, 0,3 mol/1, pH 7) a rozdrveného ľadu (10 g) pri -2 °C až 0 °C. Ku výslednej jemnej suspenzii sa po kvapkách pridal počas 20 minút roztok
3- amino-N,N-bis(2-hydroxyetyl)sulfonylimínu (365 mg, 1,4 mmol) v N,N-dimetylformamide (125 ml) a pH sa udržiavalo na hodnote 6,5 až 7,2 prídavkom 1 mol/1 NaOH. Premiešavame pokračovalo ďalšiu 1 hodinu (0 °C, pH 7,0) a teplota sa zvýšila na 55 °C. Premiešavanie pokračovalo počas 2,5-hodiny, pričom sa monitorovala úplnosť reakcie pomocou analytickej HPLC (alebo TLC). Keď sa reakcia skončila podľa určenia pomocou analytickej HPLC (alebo TLC), zmes sa ochladila na 0 °C, pridala sa voda (160 ml) a vyzrážaný produkt sa odfiltroval, premyl so studenou vodou (50 ml), acetónom (50 ml) a sušil sa za vákua pri 40 °C. Výťažok 395 mg (89 %). t. t. >250 °C, rozklad; UV (DMSO): 284 nm.
Príklad 22
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-hydroxyetyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-bifenyl-2,2'-disulfónovej
Táto látka sa pripravila podľa postupu použitého na prípravu príkladu 2 s použitím kyseliny 4,4'-diaminobifenyl-2,2'-disulfónovej (28 mg, 0,08 mmol) a 115 mg (0,17 mmol) 2-chlór-4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(3-hydroxyetyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazínu (príklad 21) v tetrametylénsulfóne (10 ml) a diizopropyletylamínu (25 ml) počas 18 hodín pri 110 °C. Po HPLC čistení sa získal produkt ako bezfarebná tuhá látka (16 mg, 13 %); t. t. > 250 °C, rozklad; UV (voda): 272 nm (loge 4,88); MS(ES) (m/z): M'2 776,0; M. h. 1534,0.
Príklad 23
Disodná soľ kyseliny 9,9-dioxo-2,7-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoylyetyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-yl-amino]-dibenzotiofén-3,6-disulfónovej
Táto látka sa pripravila podľa postupu použitého na prípravu príkladu 1 s použitím roztoku kyanurchloridu (59 mg, 0,32 mmol), kyseliny 9,9-dioxo-2,7-diaminodibenzotiofén-3,6-disulfónovej (77 mg, 0,16 mmol) a 2-chlór-4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazínu (príklad 6) (300 mg, 0,96 mmol) v dioxáne (15 ml) a fosfátovom pufri (20 ml, 0,3 mol/1, pH 7) počas 18 hodín pri 110 °C. Po HPLC čistení sa získal produkt ako bezfarebná tuhá látka (64 mg, 11 %); 11. >250 °C, rozklad; MS(ES) (m/z): M'2 905,1; M. h. 1858,2.
Príklad 24
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis[4-chlór-6-di[4-amino-N'-[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-benzamid]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-stilbén-2,2'-disulfónovej
Táto látka sa pripravila podľa postupu použitého na prípravu príkladu 2 s použitím kyseliny 4,4'-diaminostilbén-2,2'-disulfónovej (20 mg, 0,054 mmol) a 112 mg (0,12 mmol) 2,4-dichlór-6-[4-amino-N'-[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-benzamid]-l,3,5-triazínu (príklad 26) v tetrametylénsulfóne (20 ml) a diizopropyletylamínu (38 ml) počas 18 hodín pri 110 °C. Po HPLC čistení sa získal produkt ako bezfarebná tuhá látka (20 mg, 23 %); 1.1. > 250 °C, rozklad; UV (voda): 295 nm (loge 4,54), 350 nm (loge 4,39); MS(ES) (m/z): M'2 727,1; M. h. 1482,2.
Príklad 25
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis[4,6-di[4-amino-N'-[3-aminofenyl-N,N-bis(2-hydroxyetyl)sulfonylimino]-benzénsulfónamid]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-stilbén-2,2'-disulfónovej
Látka z názvu tohto príkladu sa pripravila podľa postupu použitého na prípravu príkladu 2 s použitím kyseliny 4,4'-diaminostilbén-2,2'-disulfónovej (20 mg, 0,054 mmol) a 203 mg (0,22 mmol) 2-chlór-4,6-di[4-amino-N'-[3-aminofenyl-N,N-bis(2-hydroxyetyl)-sulfonyl-imino]-benzénsulfónamid]-l,3,5-triazínu (príklad 27) v tetrametylénsulfóne (20 ml) a diizopropyletylamínu (38 ml) počas 18 hodín pri 110 °C. Po HPLC čistení sa získal produkt ako bezfarebná tuhá látka (30 mg, 25 %); t. t. >250 °C, rozklad; UV (voda): 295 nm (loge 5,21), 350 nm (loge 4,69); MS(ES) (m/z): M’2 1089,3; M. h. 2226,6.
Príklad 26 2,4-Dichlór-6-[4-amino-N'-[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-benzamid]-l,3,5-triazín
Roztok kyanurchloridu (56 mg, 0,3 mmol) v dioxáne (1 ml) sa pridal za premiešavania do fosfátového pufra (12 ml, 0,3 mol/1, pH 7) pri -2 °C. K výslednej jemnej suspenzii sa po kvapkách pridal roztok 4-amino-N'-[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimíno]benzamidu (130 mg, 0,3 mmol) v N,N-dimetylformamide (2 ml) a pH sa udržiavalo na hodnote 6,5 až 7,2 prídavkom 1 mol/1 NaOH. Premiešavame pokračovalo ďalšiu 1 hodinu (0 °C, pH 7,0), potom sa pridala voda (20 ml) a vyzrážaný produkt sa odfiltroval, premyl so studenou vodou (10 ml), acetónom (5 ml) a sušil sa za vákua pri 20 °C, čím poskytol 108 mg (62 %) požadovaného produktu; 1.1. >250 °C, rozklad; UV (DMSO): 285 nm.
Príklad 27 2-Chlór-4,6-di[4-amino-N'-[3-aminofenyl-N,N-bis(2-hydroxyetyl)sulfonylimino]-benzénsulfónamid]-1,3,5-triazín
Látka z názvu tohto príkladu sa pripravila podľa postupu použitého na prípravu príkladu 6 s použitím 4-amino-N'-[3-hydroxyetyl)sulfonylimino]benzénsulfónamidu (125 mg, 0,31 mmol) a kyanurchloridu (28 mg, 0,15 mmol). Produkt sa získal ako bezfarebná tuhá látka (105 mg, 74 %). t. t. >250 °C, rozklad; UV (DMSO): 298 nm.
Príklad 28
Kyselina 4,4'-dinitro-2,2'-bifenyldikarboxylová
Kyselina 2,2'-bifenyldikarboxylová (Aldrich, 50,0 g, 206 mmol) sa po častiach pridala do 500 ml zmesi 3 : 1 90 % HNO3/H2SO4 za udržiavania teploty nižšej ako 10 °C. Číry roztok sa premiešaval v ľadovom kúpeli počas jednej hodiny, potom sa opatrne reakcia zastavila pomocou približne 750 g ľadu. Biela tuhá látka sa izolovala pomocou vákuovej filtrácie a má pomer uvedených izomérov 2:1. Zmes sa čistila chromatografovaním cez 1,5 kg silikagélu zmiešaná na kašu so zmesou 8 : 2 izopropanol/hydroxid amónny a eluovala sa rovnakou rozpúšťadlovou zmesou. Produkt prechádza kolónou prvý, prakticky sa pohybuje s čelom rozpúšťadla. Minoritný izomér prechádza kolónou neskôr (pozri P.R. 232-11). Produktové frakcie sa skoncentrovali na rotačnej vákuovej odparovačke. Koncentrovaný roztok sa okyslil na pH 1 pomocou HCl a prefiltroval sa, čím poskytol 31,9 g kyseliny 4,4'-dinitro-2,2'-bifenyldikarboxylovej. 300 MHz NMR (DMSO-d6): δ 7,55 (1H, d, J = 8,7); 8,45 (1H, dd, J = 2,5, 8,7); 8,68 (1H, d, J = 2,5); 13 (1H, široký s). CHN: teória: C: 48,60 %; H: 2,77 %, N: 8,10 %. Teoretický obsah je počítaný s 0,75 molmi vody. Nájdené: C: 48,68 %; H: 2,72 %, N: 7,42 %.
Príklad 29
Kyselina 4,4'-diamino-2,2'-bifenyldikarboxylová
Kyselina 4,4'-dinitro-2,2'-bifenyldikarboxylová (príklad 28, 10,0 g, 30,1 mmol; P.R. 232-9) sa suspendovala v 90 ml vody a titrovala sa na pH 7 pomocou nasýteného roztoku NaHCO3 (môže sa použiť NaOH). Pridalo sa 10 % hmotnostných Pd/C (0,5 g; Aldrich) a zmes sa redukovala pri 207 kPa H2 počas jednej hodiny. Katalyzátor sa odstránil filtráciou a filtrát sa skoncentroval do asi 20 ml. Opatrne sa do koncentrovaného roztoku pridal acetón (40 ml), čo spôsobilo zrážanie produktu ako disodnej soli. Oddelil sa vákuovou filtráciou a sušil sa za vákua, čím poskytol 9,2 g kyseliny 4,4’-diamino-2,2'-bifenyldikar-boxylovej ako disodnej soli.
300 MHz NMR (D2O): δ 4,70 (-NH2, s); 6,71 (1H, dd, J = = 2,4, 8,25); 6,79 (1H, d, J = 2,4); 7,00 (1H, d, J = 8,25). CHN: teória: C: 49,64 %; H: 3,72 %, N: 8,27 % (počítané s
1,25 molmi vody). Nájdené: C: 49,55 %; H: 3,72 %, N: 7,90 %.
Príklad 30
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis-[4,6-bis{3-[bis-(2-karbamoyletyl)-sulfamoyl]-fenylamino}-l,3,5-triazin-2-ylamino]-bifenyl-2,2'-disulfónovej
Suspenzia kyseliny 4,4'-diamino-2,2'-bifenyldikarboxylovej, disodnej soli (príklad 29, 66 mg, 0,19 mmol) a
2- chlór-4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazínu (príklad 6) (300 mg, 0,40 mmol) v tetrametylénsulfóne (10 ml) a diizopropyletylamínu (0,3 ml) sa zahrievala v uzavretej hrubostennej sklenej skúmavke na 115 ’C. Zahrievanie pokračovalo 50 hodín. Keď sa reakcia skončila podľa určenia pomocou analytickej HPLC (alebo TLC), zmes sa ochladila na 20 °C a produkt sa vyzrážal prídavkom propan-2-olu (70 ml), premyl sa na filtri studeným etanolom (15 ml) a sušil sa za vákua pri 40 ’C. Dva podiely roztoku surového produktu (asi 0,3 g) v deionizovanej vode (200 ml) sa čistili oddelene preparatívnou RP-HPLC. Frakcie obsahujúce požadovaný produkt sa spojili, organické rozpúšťadlá sa odparili za vákua (1,33 kPa) pri 30 ’C a produkt sa skoncentroval, zbavil soli a izoloval sa pomocou oktadecylovej (C[8) patróny (900 mg, získanej od Burdick & Jackson). Patróna sa premyla vodou (20 ml) a produkt sa reextrahoval metanolom (40 ml). Odparenie metanolu poskytlo 112 mg (34 %) požadovaného produktu; t. t. >250 °C, rozklad; MS(ES) (m/z): M’2 840,2; M. h. 1724,4.
Príklad 31
3- Aminofenyl-N,N-bis(2-metoxykarbonyl-etyl)sulfonylimín
3-Aminobenzénsulfónamid (3 g, 17,4 mmol) sa rozpustil v nitrobenzéne (55 ml) pri 100 °C. Teplota sa znížila na 90 ’C a pridali sa metylakrylát (5 ml, 55,5 mmol) a Triton B (0,4 ml, 40 % hmotnostných v MeOH). Reakčná nádoba bola opatrená so silným chladičom a reakcia sa ponechala prebiehať 20 hodín. TLC ukázala úplnosť reakcie. Do reakčnej zmesi sa pridal roztok HCI (30 ml, 1 mol/1 v dietyléteri), čím sa vytvoril lepkavý olej. Tento sa rozpustil v zmesi 50 % hmotnostných etylacetát/hexán a naniesol sa na silikagélovú kolónu. Požadovaný produkt sa eluoval hexánom. Rozpúšťadlo sa odparilo, čím poskytlo 3,9 g (65 %) požadovaného produktu; (m/z): MH 343,2,1.1. 59 až 60 °C.
Príklad 32 3-Aminofenyl-N,N-bis(2-metylkarbamoyl-etyl)sulfonylimín
K roztoku metylamínu (10 ml, 8,03 mol/1, 33 % hmotnostných v etanole) sa pridal roztok 3-aminofenyl-N,N-bis(2-metoxykarbonyl-etyl)sulfonylimínu (príklad 31, 0,5 g, 1,45 mmol) v etanole (10 ml) za premiešavania pri laboratórnej teplote. Po 24 hodinách ukázala TLC úplnosť reakcie. Do reakčnej zmesi sa pridala voda a látka sa extrahovala chloroformom a sušila sa nad síranom sodným (50 mg). Výťažok 300 mg (60 %); MS(ES) m/z 345,2 (M+H)+.
Príklad 33 3-[[3-(4-{3-[bis-(2-Metylkarbamoyl-etyl)-sulfamoyl]-fenylamino}-6-chlór-[l,3,5]triazín-2-ylamino)-benzénsulfonyl]-(2-metylkarbamoyl-etyl)-amino]-N-metyl-propiónamid
K fosfátovému pufru (15 ml, pH = 7) pri 0 °C sa pridal roztok kyanurchloridu (550 mg, 2,98 mmol) v dioxáne (4 ml). Ku mliečnej zmesi sa pridal roztok 3-aminofenyl-N,N-bis(2-metylkarbamoyl-etyl)sulfonyliminu (príklad 32, 2,0 g, 5,84 mmol) v dimetylformamide (25 ml), pričom sa pH udržiavalo na hodnote 6,5 až 7,2 prídavkom 1 mol/1
NaOH. Po pridaní sa teplota zvýšila na 55 °C počas 2 hodín, po ktorých HPLC analýza zistila úplnosť reakcie. Zmes sa zriedila vodou (100 ml), nasýtila sa chloridom sodným a extrahovala sa etylacetátom (4 x 150 ml). Spojené extrakty sa skoncentrovali na viskózny olej (3,5 g), ktorý sa rozpustil v acetonitrile (30 ml) a nechal sa počas noci v chladničke. Gumovitá zrazenina sa premiešavala s éterom (20 ml), kým sa celá zrazenina nepremenila na jemný prášok, ktorý sa izoloval filtráciou. Získala sa jantárová tuhá látka (1,8 g, 78 % výťažok); t. t. >250 ’C, MS(ES) m/z
795.7 (M+H)+.
Príklad 34
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis-[[4,6-bis-[[3-[[bis-[3-(metylamino)-3 -oxopropyl] amino] sulfonyl] fenyl] amino] -1,3,5-triazín-2-yl]amino]-[l ,ľ-bifenyl]-2,2'-disulfónovej
Roztok 3-[ [3-(4- {3-[bis-(2-metylkarbamoyl-etyl)-sulfamoyl]-fenylamino}-6-chlór-[l,3,5]triazin-2-ylamino)-benzénsulfonyl]-(2-metylkarbamoyl-etyl)-amino]-N-metylpropiónamidu (príklad 33, 200 mg, 0,25 mmol), kyseliny 4,4'-diaminobifenyl-2,2'-disulfónovej, disodnej soli (41 mg, 0,11 mmol) a diizopropyletylamínu (50 ml), 0,28 mmol) v dimetylsulfoxide (4 ml) sa zahrieval v uzavretej skúmavke na 110 °C počas 25 hodín. Podobný postup izolácie ako je uvedené poskytol bielu tuhú látku (40 mg, 19 %); 1.1. > 250 °C, rozklad; MS(ES) m/z 930,5 (M2’); M. h. 1908,1.
Príklad 35
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis-(4,6-bis-{3-[bis-(2-metylkarbamoyl-etyl)sulfamoyl]fenylamino)-[l,3,5]triazín-2-yl]amino)-bifenyl-2,2'-dikarboxylovej
K roztoku 3-[[3-(4-{3-[bis-(2-metylkarbamoyletyl)sulfamoyl] fenylamino} -6-chlór-[ 1,3,5]triazín-2-y lamino)benzénsulfonyl]-(2-metylkarbamoyl-etyl)-amino]-N-metylpropiónamidu (príklad 33, 200 mg, 0,25 mmol) sa pridala kyselina 4,4'-diaminobifenyl-2,2'-dikarboxylová, disodná soľ (37 mg, 0,12 mmol) v dimetylsulfoxide (4 ml), roztok (37 mg, 0,12 mmol) vo fosfátovom pufri (3 ml, pH 7). Zmes sa zahrievala na 110 ’C počas 24 hodín. Po ochladení sa pridala voda (100 ml) a zmes sa rozdelila preparatívnou HPLC kolónou. Výťažok je 60 mg (27 %) bielej tuhej látky; 1.1. > 250 ’C, rozklad; MS(ES) m/z 894,5 (M2 ); M. h. 1836,0.
Príklad 36
Dimetylester kyseliny 4,4'-bis-(4,6-bis-{3-[bis-(2-karbamoyl-etyl)sulfamoyl]fenylamino]-[l,3,5]triazín-2-ylamino)-bifenyl-2,2'-dikarboxylovej
Zmes 2-chlór-4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)-sulfonylimino]-l,3,5-triazínu (príklad 6) (200 mg, 0,27 mmol), dimetylesteru kyseliny 4,4'-diamino-2,2'-bifenyldikarboxylovej (38 mg, 0,13 mmol) a diizopropyletylamínu (55 ml), 0,31 mmol) sa zahrievala na 110 ’C počas 30 hodín. Po ochladení sa pridal izopropylalkohol (50 ml). Zrazenina sa odfiltrovala, premyla izopropylalkoholom. Vysušená tuhá látka (190 mg) sa čistila pomocou HPLC, čím poskytla bielu tuhú látku (53 mg, 24 % výťažok); 1.1. >250 ’C, rozklad; MS(ES) m/z
854.8 (M+2H)2+; M. h. 1707,8.
Príklad 37 3-Nitrofenyl-N,N-bis(2-hydroxypropyl)sulfonylamín
Ku premiešavanému roztoku diizopropanolamínu (50,0 g, 75 mmol) vo vode (500 ml) sa pridal m-nitrobenzénsulfonylchlorid (57,1 g 35 mmol). Zmes sa prudko premiešavala počas 25 hodín pri laboratórnej teplote. Výsledná zmes sa prefiltrovala, tuhá látka sa premyla s H20 (2 x 400 ml), sušila sa a rekryštalizovala z zmesi etylacetát/hexán, čím poskytla požadovaný produkt ako biele kryštály. Výťažok bol 65,8 g (88 %); t. t. 114 až 116 °C; 'H NMR (CDC13, 300 MHz) δ 8,67 (d, J 5,1 Hz, IH), 8,44 (d, IH), 8,15 (t, J 6,0 Hz, IH), 7,77 (m, IH), 4,78 (s, 2H), 4,18 (m, 2H), 3,10 (d, J 5,9 Hz, 4H), 1,16 (d, 6H); MS(ES) m/z 319,5 (M+H/.
Príklad 38 3-Aminofenyl-N,N-bis(2-hydroxypropyl)sulfonylimín
Roztok 3-nitrofenyl-n,N-bis(2-hydroxypropyl)sulfonylaminu (príklad 37, 10,0 g, 31,4 mmol) v metanole 100 ml) sa hydrogenoval nad paládiovým katalyzátorom (10 % hmotnostn. Pd/C, 1 g) počas 1,5-hodiny. Výsledná zmes sa prefiltrovala cez vrstvu Celíte, rozpúšťadlo sa odstránilo a výsledný viskózny olej sa čistil kolónovou chromatografiou na silikagéli elúciou zmesou etylacetát/hexán 4:1. Požadovaný produkt sa získal ako svetložlté kryštály. Výťažok 8,2 g (90,5 %); NMR (CDC13, 300 MHz) δ 7,28 (d, IH), 7,13 (m, IH), 4,20 (m, IH), 4,13 (dd, IH), 3,37 (dd, IH), 3,02 (d, 2H), 2,80 (dd, IH), 1,16 (dd, 6H); MS(ES) m/z 289,5 (M+H/.
Príklad 39 2-Chlór-4,6-bis-{3-[bis-(2-hydroxy-propyl)sulfamoyl]-fenylamino} -[ 1,3,5]-triazín
Látka z názvu tohto príkladu sa pripravila podľa postupu príkladu 33 s použitím kyanurchloridu (160 mg, 0,87 mmol), 3-aminofenyl-N,N-bis(2-hydroxypropyl)sulfonylimínu (700 mg, 2,0 mmol), dioxánu (3 ml), fosfátového pufra (10 ml, 0,3 mol/1, pH 7), N,N-dimetylformamidu (5 ml) a 1 mol/1 NaOH. Produkt sa prezrážal z ochladenej reakčnej zmesi vodou ako viskózny jantárovožltý olej, odcentrifugoval sa, premyl sa vodou a sušil sa za vysokého vákua, čím poskytol 640 mg (93 %) chlórtriazínu. t. t. >250 °C, rozklad; MS(ES) m/z 687,7,689,7 (M+H)+.
Príklad 40
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis-(4,6-bis-{3-[bis-(2-hydroxypropyl)sulfamoyl]-fenylamino}-[l,3,5]-triazin-2-yl]amino]-bifenyl-2,2'-disulfónovej
Zmes 2-chlór-4,6-bis-{3-[bis-(2-hydroxy-propyl)sulfamoyl]-fenylamino}-[l,3,5]-triazínu (príklad 39, 300 mg, 0,44 mmol), disodnej soli kyseliny 4,4'-diaminobifenyl-2,2'-disulfónovcj (77 mg, 0,2 mmol), 2 ml DMSO, 2 ml fosfátového pufra (1 mol/1, pH 7) a 0,25 ml 1 mol/1 NaOH sa exponovala mikrovlnovým zahrievaním (jednotka PROLABO, režim monomód) pri 110 °C počas 2 hodín. Po ochladení sa reakčná zmes bez spracovania podrobila preparatívnej HPLC v systéme voda/ acetonitril na YMC Prodigy C18 polymémej kolóne. Produkt sa získal ako bezfarebná tuhá látka (170 mg, 50,2 %); t. t. >250 °C, rozklad; MS(ES) m/z 822,3 (M-2H)2’; M. h. 1691,9 (M+2Na)
Príklad 41
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis-(4,6-bis-{3-[bis-(2-hydroxypropyl)sulfamoyl]-fenylamino}-[l,3,5]-triazin-2-yl]amino]-bifenyl-2,2'-dikarboxylovej
Zmes 2-chlór-4,6-bis-{3-[bis-(2-hydroxy-propyl)sulfamoyl]-fenylamino)-[l,3,5]-triazínu (príklad 39, 178 mg, 0,25 mmol), dihydrochloridu soli kyseliny 4,4'-diamino-2,2'-bifenyldikarboxylovej (35 mg, 0,11 mmol), 3 ml DMSO, 0,5 ml fosfátového pufra (1 mol/1, pH 7) a 0,5 ml 1 mol/1 NaOH sa zahrievala v piecke v uzavretej skúmavke počas 18 hodín, potom sa bez spracovania podrobila preparatívnej HPLC, čím poskytla 90 mg (50,5 %) požadované ho produktu; t. t. >250 °C, rozklad; MS(ES) m/z 788,1 (M+2H)2+; M. h. 1619,8 (M+2Na)
Príklad 42 2-Chlór-4,6-bis-(3-[bis-karbamoylmetyl-l-sulfamoy]]-fenylamino) -[1,3,5]-triazín
Látka z názvu tohto príkladu sa pripravila podľa postupu príkladu 33 s použitím kyanurchloridu (0,42 g, 2,27 mmol), 3-aminofenyl-N,N-bis-karbamoylmetyl-sulfonylimínu (CL 55675, 1,43 g, 5,0 mmol), dioxánu (2 ml), fosfátového pufra (10 ml, 0,3 mol/1, pH 7), N,N-dimetylformamidu (4 ml) a 1 mol/1 NaOH. Počas celého postupu bola reakčná zmes heterogénna. Vzniknutá ružová zrazenina sa odcentrifugovala, premyla sa vodou a znova sa rozpustila v DMF a opätovne sa prezrážala vodou. Konečná separácia a sušenie poskytli 0,7 g (45,1 %) požadovaného produktu; 1.1. > 250 °C, rozklad; MS(ES) m/z 683,7, 685,7 (M+H/.
Príklad 43
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis-{4,6-bis-[3-(bis-karbamoylmetyl-l-sulfamoyl)-fenylamino]-[l,3,5]triazin-2-ylamino}-bifenyl-2,2'-disulfónovej
Látka z názvu tohto príkladu sa pripravila podľa postupu príkladu 40 s použitím 2-chlór-4,6-bis-{3-[bis-karbamoylmetyl-l-sulfamoyl]-fenylamino}-[l,3,5]-triazínu (príklad 42, 500 mg, 0,73 mmol), disodnej soli kyseliny 4,4'-diaminobifenyl-2,2'-disulfónovej (114 mg, 0,29 mmol),
2,5 ml DMSO, 2,5 ml fosfátového pufra (1 mol/1, pH 7) a 1,0 ml 1 mol/1 NaOH. Mikrovlnové zahrievanie (jednotka PROLABO, režim monomód) pokračovalo 1 hodiny pri 105 °C. Výsledná zmes sa podrobila preparatívnej HPLC, ktorá poskytla 50 mg (10,2 %) produktu ako ružovú tuhú látku; t. t. >250 °C, rozklad; MS(ES) m/z 818,2 (M-2H)2’; M. h. 1683,7 (M+2Na)
Príklad 44 Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis-{4,6-bis-[3-(bis-karbamoyImetyl-l-sulfamoyl)-fenylamino]-[l,3,5]triazin-2-ylamino}-bifenyl-2,2'-dikarboxylovej
Látka z názvu tohto príkladu sa pripravila podľa postupu príkladu 40 s použitím 2-chlór-4,6-bis-(3-[bis-karbamoylmetyl-1 -sulfamoylj-fenylamino} -[1,3,5]-triazinu (príklad 42, 500 mg, 0,73 mmol), dihydrochloridu kyseliny 4,4'-diamino-2,2'-bifenyldikarboxylovej (100 mg, 0,29 mmol), 2,5 ml DMSO, 2,5 ml fosfátového pufra (1 mol/1, pH 7) a 1,0 ml 1 mol/1 NaOH. Mikrovlnové zahrievanie (jednotka PROLABO, režim monomód) pokračovalo 1 hodiny pri 105 °C. Výsledná zmes sa podrobila preparatívnej HPLC, ktorá poskytla 20 mg (4,3 %) produktu ako ružovú tuhú látku; t. t. >250 °C, rozklad; MS(ES) m/z 784,0 (M+2H)2+; M. h. 1619,8 (M+2Na)
Príklad 45
Kyselina l-(3-nitro-benzénsulfonyl)piperidín-3,5-dikarboxylová
Roztok kyseliny 3,5-pyridíndikarboxylovej (3,34 g, 20 mmol) v 50 ml vody a 10 ml koncentrovaného hydroxidu amónneho sa hydrogenoval v Parrovom prístroji pri 152 kPa s 1 g ruténiového katalyzátora (5 % hmotnostných ruténia na práškovom oxide hlinitom) počas 48 hodín. Po odfiltrovaní katalyzátora a odstránení rozpúšťadla sa surová kyselina 3,5 piperidíndikarboxylová rozpustila v 60 ml 1 mol/1 NaOH a opracovala sa so 6,6 g (30 mmol) mnitrobenzénsulfochloridu. Reakčná zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote a pH sa udržiavalo na hodnote 9,5 prídavkom 1 mol/1 NaOH, kým sa nezastavil jeho pokles.
Reakčná zmes sa premiešavala počas ďalšej 1,5 hodiny, vytvorená zrazenina sa prefiltrovala a filtrát sa okyslil koncentrovanou HC1 na pH 2 až 3. Vytvorená biela zrazenina sa odfiltrovala,premyla vodou a sušila sa vo vysokom vákuu počas noci, čím poskytla 5,3 g (74 %) požadovaného produktu. ‘H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8,55 (d, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,15 (d, 1H), 7,95 (t, 1H), 3,14 (m, 4H), 1,65 (m, 2H), 1,45 (m, 2H); MS(ES) m/z 359 (M+H)+.
Príklad 46
Dimetylester kyseliny l-(3-nitro-bcnzcnsulfonyl)pipcridín-3,5 -dikarboxylovej
Suspenzia kyseliny l-(3-nitro-benzénsulfonyl)piperidín-3,5-dikarboxylovej (príklad 45, 3,6 g, 10 mmol) v THF (200 ml) sa opracovala pri 0 °C prebytkom diazometánu a premiešaval sa pri tejto teplote, kým sa suspenzia nepremenila na číry ostrožltý roztok. Reakčná zmes sa zahriala na laboratórnu teplotu, prefiltrovala sa, odparila a čistila sa kolónovou chromatografiou na silikagéli elúciou chloroformom, čím poskytla 2,5 g (64 %) požadovaného produktu ako bezfarebné kryštály. 'H NMR (CDC13, 300 MHz) δ 8,65 (s, 1H), 8,49 (d, 1H), 8,11 (d, 1H), 7,81 (t, 1H), 3,73 (s, 6H), 3,40 (m, 4H), 2,95 (m, 2H), 2,05 (t, 2H); MS(ES) m/z 387,2 (M+H)+.
Príklad 47
Diamid kyseliny l-(3-nitro-benzénsulfonyl)piperidín-3,5-dikarboxylovej
Roztok dimetylesteru kyseliny l-(3-nitro-benzénsulfonyl)piperidín-3,5-dikarboxylovej (príklad 46, 2,5 g,
6,5 mmol) v 200 ml metanolu, nasýtený amoniakom pri 0 °C sa uzavrel a nechal sa pri laboratórnej teplote počas 7 dní. Výsledný žltý roztok sa skoncentroval na objem 100 ml, vytvorená zrazenina sa prefiltrovala, premyla metanolom a sušila sa, čím poskytla 1,8 g (77,7 %) produktu ako slabokrémové kryštály. MS(ES) m/z 357,1 (M+H)+.
Príklad 48
Kyselina 1 -(3-amino-benzénsulfonyl)piperidín-3,5-dikarboxylová
Roztok kyseliny l-(3-nitro-benzénsulfonyl)piperidín-3,5-dikarboxylovej (príklad 45, 2,5 g, 4,2 mmol) v 150 ml metanolu sa hydrogenoval v Parrovom prístroji pri 173 kPa nad 0,15 g paládiového katalyzátora (10 % hmotnostných paládia na uhlíku) počas 1 hodiny. Filtrácia katalyzátora a odstránenie rozpúšťadla poskytlo 1,8 g (79 %) požadovaného produktu ako bielu tuhú látku. MS(ES) m/z 329,1 (M+H)+.
Príklad 49
Diamid kyseliny l-(3-amino-benzénsulfonyl)piperidín-3,5-dikarboxylovej
Roztok diamidu kyseliny l-(3-nitro-benzénsulfonyl)piperidín-3,5-dikarboxylovej (príklad 47, 1,5 g, 4,2 mmol) v 300 ml metanolu sa hydrogenoval v Parrovom prístroji pri 173 kPa nad 0,1 g paládiového katalyzátora (10 % hmotnostných paládia na uhlíku) počas 1 hodiny. Filtrácia katalyzátora a odstránenie rozpúšťadla poskytla 1,26 g (92 %) požadovaného produktu ako slabošedú tuhú látku. MS(ES) m/z 327,1 (M+H)+.
Príklad 50 2-Chlór-4,6-bis-[3-(3,5-dikarbamoyl-piperidín-l-sulfonyl)fenylamino]-[ 1,3,5]-triazín
Roztok kyanurchloridu (280 mg, 1,5 mmol) v dioxáne (5 ml) sa pridal za premiešavania do fosfátového pu&a (10 ml, 0,3 mol/1, pH 7) pri 0 až -2 °C. Ku výslednej sus penzii sa po kvapkách pridal roztok diamidu kyseliny 1-(3 -aminobenzénsulfonyl)piperidín-3,5-dikarboxy lovej (príklad 49, 1,0 g, 3,1 mmol) v N,N-dimetylformamide (5 ml) a pH sa udržiavalo na hodnote 6,5 až 7,2 prídavkom 1 mol/1 NaOH. Po ukončení pridávania sa reakčná zmes zahriala na 50 až 55 °C a pri tejto teplote sa premiešavala počas 2 hodín (kým HPLC neukázala úplnosť reakcie), potom sa ochladila na laboratórnu teplotu, zriedila sa vodou, vyzrážaný produkt sa odfiltroval, premyl so studenou vodou (10 ml), acetónom (5 ml) a sušil sa za vákua pri 20 °C, čím poskytol 845 mg (74,2 %) požadovaného produktu; t. t. >250 °C, rozklad; MS(ES) m/z 765,0 (M+H)+, M. h. 764,2.
Príklad 51 2-Chlór-4,6-bis-[3-(3,5-dikarboxyl-piperidín-l-sulfonyl)fenylamino]-[ 1,3,5]-triazín
Látka z názvu tohto príkladu sa pripravila podľa postupu príkladu 50 s použitím kyanurchloridu (280 mg,
1,5 mmol), kyseliny l-(3-amino-benzénsulfonyl)piperidín-3,5-dikarboxylovej (príklad 48, 1,0 g, 3,1 mmol), dioxánu (3 ml), fosfátového pufra (10 ml, 0,3 mol/1, pH 7), N,N-dimetylformamidu (5 ml) a 1 mol/1 NaOH. Po skončení reakcie sa zmes ochladila na laboratórnu teplotu, zriedila sa vodou, okyslila pomocou HC1 na pH 5, vyzrážaný produkt sa odfiltroval, premyl so studenou vodou (10 ml) a sušil sa za vákua pri 20 °C, čím poskytol 845 mg (74,2 %) požadovaného produktu; 1.1. >250 °C, rozklad; MS(ES) m/z 769,0 (M+H)+, M. h. 767,8.
Príklad 52
Disodná soľ (E)-2,2'-(l,2-eténdiyl)bis[5-[[4,6-bis[[3-[[3,5-bis(aminokarbonyl)-1 -piperidinyljsulfonyljfenyljamino]-l,3,5-triazin-2-yl]amino]-benzénsulfónovej kyseliny]
Suspenzia kyseliny 4,4'-diaminostilbén-2,2'disulfónovej, disodnej soli (0,41 g, 0,1 mmol) a 2-chlór-4,6-bis-[3-(3,5-dikarbamoyl-piperidín-l-sulfonyl)fenylamino]-[1,3,5]-triazínu (príklad 50) (1,62 g, 0,21 mmol) v tetrametylénsulfóne (3ml) a dimetylformamide (5 ml) v prítomnosti diizopropyletylamínu (0,08 ml) sa zahrievala v uzavretej hrubostenej sklenej skúmavke na 115 °C. Zahrievanie pokračovalo 40 hodín. Keď sa reakcia skončila podľa určenia pomocou analytickej HPLC (alebo TLC), zmes sa ochladila na 30 °C, pridal sa 1 mol/1 NaOH (0,5 ml) a produkt sa vyzrážal prídavkom propan-2-olu (50 ml). Zrazenina sa odfiltrovala, premyla sa acetónom (30 ml) a znova sa rozpustila v minimálnom objeme vody a prezrážala sa prídavkom etanolu. Zrazenina sa po filtrácii premyla éterom (30 ml) a sušila sa za vákua pri 50 °C. Výťažok 1,59 g (85 %); MS(ES) m/z 911,8 (M-2H)2’; M. h. 1869,9 (M+2Na).
Príklad 53
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis-{4,6-bis-[3-(3,5-dikarbamoylpiperidín-1 -sulfonyl)-fenylamino]-[ 1,3,5]triazin-2-ylamino}-bifenyl-2,2'-disulfónovej
Látka z názvu tohto príkladu sa pripravila podľa postupu príkladu 52 s použitím kyseliny 4,4'-diaminobifenyl-2,2'-disulfónovej, disodnej soli (40 mg, 0,1 mmol) a 2-chlór-4,6-bis-[3-(3,5-dikarbamoylpiperidín-l-sulfonyl)fenylamino]-[l,3,5]triazínu (príklad 50) (176 mg, 0,23 mmol) v 60 ml zmesi DMSO-tetrametylénsulfón (1 : 3, v/v) a diizopropyletylamínu (0,08 ml). Produkt sa získal ako krémová tuhá látka (153 mg, 83 %); t. t. > 250 °C, rozklad; MS(ES) m/z 898,3 (M-2H)2’; M. h. 1843,9 (M+2Na).
Príklad 54
Kyselina 1,2', 1, 1[(2,2'-disulfo[ 1,1 ’-bifenyl] -4,4'-diyl] -bis-[imino-1,3,5-triazín-6,2,4-triylbis(imino-3,1 -fenylénsulfonyl)]tetrakis-3,5-piperidíndikarboxylová
Látka z názvu tohto príkladu sa pripravila podľa postupu príkladu 52 s použitím kyseliny 4,4'-diaminobifenyl-2,2'-disulfónovej, disodnej soli (270 mg, 0,68 mmol) a 2-chlór-4,6-bis-[3-(3,5-dikarboxylpiperidín-l-sulfonyl)fenylamino]-[l,3,5]-triazínu (príklad 51) (1,1 g, 1,43 mmol) v 60 ml zmesi DMSO-tetrametylénsulfón (1 : 1, v/v) a diizopropyletylamínu (1,2 ml). Produkt sa po vyzrážaní prídavkom propan-2-olu odfiltroval, premyl sa acetónom (30 ml), sušil, znova sa rozpustil v minimálnom objeme vody a prezrážal sa okyslením (HC1) na pH 1 až 2. Požadovaný produkt sa získal ako krémová tuhá látka (1,0 g, 80 %); t. t. >250 °C, rozklad; MS(ES) m/z 902,2 (M-2H)2'; M. h. 1807,8.
Príklad 55 3-Nitrofenyl-N,N-bis(2-hydroxyetyl)sulfonylimín
Dietanolamín (Aldrich; 25,0 g, 0,238 mol) sa rozpustil v 55 ml zmesi 9:1 dichlórmetán/THF a ochladil sa na 5 °C. Počas 10 minút sa pridal roztok 3-nitrobenzénsulfonylchloridu (Aldrich; 25,0 g, 0,113 mol) v 35 ml THF. Ľadový kúpeľ sa odstránil; reakčná zmes sa premiešavala ďalších 30 minút. Potom sa rozpúšťadlá odobrali a zvyšok sa rozdelil medzi vodu (100 ml) a etylacetát (150 ml). Vodná vrstva sa extrahovala tromi 25 ml podielmi etylacetátu. Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4, prefiltrovali sa cez vrstvu oxidu kremičitého a skoncentrovali sa za vákua. Produkt vykryštalizoval počas tohto odparovania a odfiltroval sa, čím poskytol 17,4 g (53,2 %) bielych ihličiek, t. t. 99 až 100 °C. MS(ES) m/z 291,2 (M+H)1+.
Príklad 56 3-Aminofenyl-N,N-bis(2-hydroxyetyl)sulfonylimín
Nitrozlúčenina (príklad 55, 17,2 g, 59,3 mmol) a 1,72 g 10 % hmotnostných Pd/C sa suspendovali v 170 ml etanolu. Zmes sa redukovala pod tlakom 276 kPa vodíka počas dvoch hodín. Katalyzátor sa odfiltroval a číry bezfarebný filtrát sa odparil do sucha, čím poskytol 15,4 g (98 % výťažok) zodpovedajúcej aminozlúčeniny. MS(ES) m/z 261,0 (M+H)1+.
Príklad 57
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis-(4,6-bis-{3-[bis-(2-hydroxyetyl)-sulfamoyl]-fenylamino}-[l,3,5]-triazín-2-ylamino]bifenyl-2,2'-dikarboxylovej
Roztok trichlórtriazínu (1,55 g; 8,4 mmol) v 20 ml dioxánu sa pridal do 60 ml pufra s pH 7 pri 0 °C. Do výslednej jemnej suspenzie sa po kvapkách pridal roztok kyseliny 4,4'-amino-2,2'-bifenyldikarboxylovej (P.R. 232-10; 1,55 g, 4,0 mmol) v 10 ml vody, pričom pH sa udržiavalo na hodnote 6,5 až 7,2 prídavkom 1 mol/1 NaOH. Keď sa pridávanie skončilo a pH sa stabilizovalo, ponechala sa reakčná zmes zahriať sa na teplotu okolia. Pridal sa roztok dietanolsulfónamidu (2,6 g, 10 mmol) v 20 ml dioxánu a tuhý hydrogenuhličitan sodný (0,84 g, 10 mmol) a výsledná zmes sa zahrievala pod refluxom (92 °C) počas dvoch dní. Číry žltý roztok sa ochladil a dioxán sa odstránil. Produkt sa vyzrážal z vodného roztoku a oddelil sa vákuovou filtráciou, čím poskytol 3,16 g požadovaného produktu, približne 65 % čistoty podľa HPLC, ako bielu amorfnú tuhú látku, t. t. >250 °C, rozklad; MS(ES) m/z 732,5 (M+2H)2+; M. h. 1507,6 (M+2Na).
Príklad 58 3-Aminofenyl-N,N-bis(3-hydroxypropyl)sulfonylimín
Roztok 3-aminofenyl-N,N-bis(2-metoxykarbonyl-etyl)sulfonylimínu (príklad 31, 150 mg, 0,4 mmol) v THF (15 ml) sa pridal do roztoku LiAlH4 (3 ml, 1 mol/1 v THF) za premiešavania pod dusíkom pri 0 °C. Po 45 minútach TLC ukázala úplnosť reakcie. Do roztoku sa pridal roztok chloridu amónneho (15 ml, 1 mol/1) a vytvorila sa biela zrazenina a roztok ožltol. Žltkastý roztok sa dekantoval a biela zrazenina sa premyla etylacetátom. Organické fázy sa sušili nad síranom sodným a odparili v rotačnej odparovačke, čím poskytli požadovaný produkt ako žltý olej. Výťažok je 110 mg (95,6 %), (m/z); MH 289,2.
Príklad 59
Disodná soľ kyseliny 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(3-hydroxypropyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-bifenyJ-2,2'-disulfónovej
Látka z názvu tohto príkladu bola pripravená použitím všeobecných podmienok z príkladu 1, kde kyanurchlorid (92 mg, 0,50 mmol) reagoval s disodnou soľou kyseliny 4,4'-diaminobifenyl-2,2'-disulfónovej (93 mg, 0,24 mmol) počas 1 hodiny a potom s 3-aminofenyl-N,N-bis(3-hydroxypropyl)-sulfonylimínom (708 mg, 2,5 mmol) (príklad 58). Keď reakcia bola úplná podľa určenia pomocou analytickej HPLC (alebo TLC), zmes sa ochladila na 20 °C a produkt sa vyzrážal prídavkom propan-2-olu (40 ml), premyl sa na filtri studeným propan-2-olom (15 ml) a sušil sa za vákua pri 40 °C. Dva podiely roztoku surového produktu (asi 0,35 g) v deionizovanej vode (200 ml) sa čistili oddelene preparatívnou RP-HPLC. Frakcie obsahujúce požadovaný produkt sa spojili, organické rozpúšťadlá sa odparili za vákua (1,33 kPa) pri 30 °C a produkt sa skoncentroval, zbavil sa soli a izoloval sa pomocou oktadecylovej (C18) patróny (900 mg, získanej od Burdick & Jackson). Patróna sa premyla vodou (40 ml) a produkt sa reextrahoval metanolom (60 ml). Odparenie metanolu poskytlo 162 mg (40 %) požadovaného produktu; 1.1. >300 °C, rozklad; MS(ES) (m/z): M'2 822,4; M. h. 1609,8. Účinky látok v skúškach zníženia množenia sa vírusov
Tieto látky sa testovali na biologickú aktivitu pomocou skúšok zníženia množenia sa vírusov. Hostiteľské bunky (v tabuľkách lala označené ako HF pre ľudské predkožkové fibroblasty a ako „vero, bežne používaný kmeň buniek Africkej zelenej opice) sa naniesli na platne v množstve s 4.104 buniek/kalíšok v rastovom bunkovom médiu s 2 % fetálnym hovädzím sérom alebo s 2 % teľacím sérom na 96 kalíškových platniach (0,1 ml/kalíšok) a inkubovali sa počas noci. Testované látky sa pridali do jednotlivých kalíškov tak, aby dali konečné koncentrácie v rozsahu 50 až 0,1 pg/ml v dvojnásobkových koncentračných krokoch. Po jednej hodine sa pridal vírus a inkubácia pokračovala počas 4 dní s RSV alebo CMV a počas 2 dní s HSV. Na konci pokusu sa kvantifikovalo množstvo vírusov a vypočítalo sa zníženie množenia vírusu pre rôzne koncentrácie. To umožnilo odhad koncentrácie látky poskytujúcej 50 % zníženie rastu vírusu (IC50).
Tabuľky 1 a la (súhrn biologickej aktivity) zhŕňajú aktivitu látok v skúškach zníženia množenia sa vírusov. Účinky látok v skúškach zníženia plakov vírusov
Tieto látky sa testovali na schopnosť inhibovať tvorbu vírusových plakov. Hostiteľské bunky, podľa označenia ako v tabuľkách 1, la a 2, sa naniesli na platne s koncentráciou 106 buniek/kalíšok na 6 kališkové platne a inkubovali sa počas noci. Potom nasledoval jeden z dvoch postupov. V normálnom (pred-pôsobenie) postupe, rastové prostredie buniek sa nahradilo 1 ml prostredia obsahujúceho látku da
SK 282598 Β6 nej koncentrácie. Po jednej hodine sa pridal vírus (cca 100 plak-tvoriacich jednotiek v 40 μΐ). Po štyroch hodinách sa prostredie nahradilo 4 ml prostredia, ktoré obsahovalo látku s testovanou koncentráciou. Potom sa bunky inkubovali počas dostatočne dlhého času na tvorbu vírusových plakov. Občas sa látka pridávala len potom, ako začala infekcia (post-pôsobenie). V tomto prípade sa rastové prostredie nahradilo 1 ml prostredia obsahujúceho približne 100 plaktvoriacich jednotiek. Po 1 hodine bolo toto nahradené 2 ml rastového prostredia. Po ďalšom čase špecifikovanom v tabuľke 2, sa pridali ďalšie 2 ml obsahujúce testovanú látku. V oboch prípadoch sa porovnával počet plakov v sérii kalíškov obsahujúcich rôzne koncentrácie testovanej látky s kalíškom bez testovanej látky a hodnoty IC5Í) sa určili nakreslením grafov z dát a identifikovaním koncentrácie látky, ktorá poskytuje 50 % zníženie počtu vírusových plakov.
Tabuľky 1, la a 2 uvádzajú súhrn antivírusovej aktivity v plakových skúškach. Vidno, že látky z príkladov 1 a 4 sú aktívne proti všetkým RSV testovaným kmeňom pri približne 0,1 až 0,7 pg/ml. Tiež možno vidieť aktivitu s niektorými členmi iných vírusových rodín (v rozsahu 3 až 20 qg/ml). Tieto výsledky potvrdzujú a rozširujú údaje zo skúšok zníženia množenia sa vírusov, čo značí, že tieto látky sú silnými a špecifickými inhibítormi RSV.
Tabuľka 1
In vitro aktivita látok proti respiračnému syncyciálnemu vírusu, cytomegalovírusu a vírusu Herpes simplex
Látka z Príkladu v ínnibicn rastu IC5p gg/ml v platovej skúške
RSV/ HF RSV/ VERO CMV/ HF HSV/ HF HSV/ VERO RSV/ VERO CMD/ HF HSV/ VERO
11 10 10 >50
9 <3 0,4 0,3 10
10 <3 0,7
6 >50 >50 >50
1 0,3 0,5 0,3 7 8
4 0,1 0,1 35 20 35 0.1 >30 35
5 0,4 8
7 0,7 0,8 10
8 >50 >50 >50
12 8 10
13 8 8 20 10 30
15 7 >8.3 2 1
16 5 “8,3 3 3
17 >50 >50 >50
19 2 3 12 30 “50
20 0.5 40
22 0,15 0.25 4 2
23 8 20
24 50
25 30
Tabuľka 1. Päťdesiatpercentné inhibičné koncentrácie na inhibíciu rastu (zníženie množenia sa) a pre tvorbu plakov sa určili ako je opísané v texte. Použili sa vírusové kmene RSV (A2), CMV (Ad 169), HSV (Patton). Použité hostiteľské bunky boli ľudské predkožkové fibroblasty (HF) a vero bunky.
Tabuľka la
In vitro aktivita látok proti respiračnému syncyciálnemu vírusu, cytomegalovírusu a vírusu Herpes simplex
Látka z Príkladu Anxivírusová ICjq gg/ml Indikovaný účinok na bunky @ pg/nl
RSV/ HF RSV/ VERO CMV/ HF HSV/ VERO HF VERO
Príklad 52 1.5 1,5 L@37
Príklad 53 2 7 >50 N@75 N@75
Príklad 54 35 >50 >50 N@75
Príklad 57 1.5 4 30 N@75
Príklad 34 1.2 >50 >50 N@75 L@75
Príklad 35 6 >50 >50 N@75
Príklad 43 o.l 2.5 6 N@75 N@75
Príklad 44 0.6 1,5 15 L@75 L@75
Príklad 40 0.2 4 20 N@75 N075
Príklad 41 2 8 >50
Príklad 30 0.35 40 >50 N@75
Príklad 59 0.5 4 20
Päťdesiatpercentné inhibičné koncentrácie pre inhibíciu rastu (zníženie množenia sa) a pre tvorbu plakov sa určili ako je opísané v texte. Použili sa vírusové kmene RSV (A2), CMV (Adl69), HSV (Patton). Použité hostiteľské bunky boli ľudské predkožkové fibroblasty (HF) a vero bunky. N, bez účinku na vzhľad alkoholom-fixovanej a kryštálovou fialovou vyfarbenej bunkovej monovrstvy pri vyznačenej koncentrácii
L, zosvetlenie intenzity vyfarbenia (v porovnaní s kontrolnou vzorkou) alkoholom-fixovanej a kryštálovou fialovou vyfarbenej bunkovej monovrstvy pri vyznačenej koncentrácii, ale nie pri polovici tejto koncentrácie.
Tabuľka 2
Účinok príkladov 1 a 4 na tvorbu vírusových plakov
Vírusový kmeň ICjq (gg/ml)
Príklad 1 Príklad 4 (bunky) pred post(hodiny) pred post (hodínv)
24 2
RSV(VERO)
A2 0,3 0,3 0,4 0.1 0,28
LONG 0.2 0,21
3A 0,5 0.15
9320 0.2 0.18
2B 0.1 0,08
RSS2 0.20
18736 RSV(HF) 0,06
A2 RSV(SKNSH) 0.4 <3
A2 RSV(MBDK) 0,4
A2 HPIV3(VERO) 0.4
VASH. FLU(MDCK) 20
Al/FM/1/47 >50
A2/HK/8/68 >50
A2/JPN/305/57 >50
A/Texas/36/91 5
A/Beij/32/92 >20
B/Pana/45/90 HCMV(HF) >20
Ad!A( HSV1(VERO) 15 >30
Patxon HSV2(VERO 35
333 3
12 >1Q
MS 5
V protokole pred-pôsobenia sa súbežné bunky v 6-kalíškovej platni opracovali s rôznymi koncentráciami látky počas 1 hodiny. Pridal sa vírus (asi 100 pfu) v malom objeme a po inkubácii sa spočítali plaky (RSV, CMV a HPIV3 (ľudský vírus parainfluenzy typu 3, kmeň Washington), 5 až 8 dní; vírus chrípky a herpes simplex, dni). Pre post-pôsobenie sa bunky najprv infikovali 1 hodinu a potom sa prostredie (obsahujúce neabsorbovaný vírus) vymenilo. Prostredie obsahujúce látku s rôznymi koncentráciami sa pridalo po 2 hodinách alebo po 24 hodinách po skončení infekčnej periódy. Použité bunky zahrnovali vero (bunky Africkej zelenej opice), HF (ľudské predkožkové fibroblastové bunky), SKNSH (ľudské neuroblastomové bunky), MDBK (Madin-Darby hovädzie ľadvinové bunky) a MDCK (Madin-Darby psie ľadvinové bunky).
Mechanizmus pôsobenia
Určenie času v životnom cykle vírusu, keď sa uplatňuje účinok látky z príkladu 1 sa považuje ako potrebné na pochopenie mechanizmu pôsobenia. Toto sa uskutočnilo pridávaním a odoberaním látky v rôznych časoch vo vzťahu k infekcii a zhodnotením účinku na syntézu vírusovej bielkoviny. Vero bunky sa infikovali na ľade počas 1 hodiny, neadsorbovaný vírus sa odstránil a potom sa infikované bunky inkubovali pri 37 °C počas 18 hodín (adsorpcía vírusu sa deje na ľade, ale roztopenie nepostupuje, kým sa teplota nezvýši na 18 °C alebo vyššie). Po 18 hodinách inkubácie pri 37 °C (keď objem pokračujúcej proteínovej syntézy bol nasmerovaný na vírusové RNA), sa pridal 35S-metionín, po dvoch hodinách sa bunky lyžovali a označené proteíny sa analyzovali na SDS-PAGE géloch. Dokázali sa vírusové N, P a M proteíny. Ak sa látka z príkladu 1 pridala v množstve 10 pg/ml ihneď po adsorpcii vírusu a pred vzrastom inkubačnej teploty na 37 °C, syntéza vírusových bielkovín bola úplne zastavená. Ale ak sa látka z príkladu 1 pridala aj len po 5 minútach inkubácie pri 37 °C, produkcia vírusovej bielkoviny bola bez prekážok. Preto inhibovaným procesom bol proces fúzie alebo niektorý tesne nasledujúci krok, ktorý sa vyžaduje pre neskoršiu vírusovú génovú expresiu.
Je známe, že RSV infikované bunky v tesnom kontakte sa spájajú a tvoria syncýciá a že tento proces je závislý len od vírusových F, SH a G proteínov (Hemingway, B.R., Yu Y., Tanaka Y., Perrine K. G., Gustafson E. Bemstein J. M., Galinski M. S. 1994. Analysis of respirátory syncytial vírus F, G a SH proteins in celí fusion. Virology 200. 801 až 805. Tvorba syncycií by nemala zahrnovať vírusové funkcie, ako napríklad odstránenie obalu alebo transkripciu, ktoré normálne nasledujú a ktoré sú požadované pre neskoršiu génovú expresiu.
Na určenie či látky podľa tohto vynálezu inhibujú fúziu alebo nasledujúci krok, sa tieto látky testovali na schopnosť brániť tvorbe syncycií v bunkách vopred infikovaných s RSV. To sa urobilo infikovaním vero buniek pri opakovaní infekcie 3-krát počas 1 hodiny, potom nahradením pôvodného prostredia čerstvým prostredím. Po 6 hodinách inkubácie sa pridala testovaná látka. Po 24 a 48 hodinách sa infikované bunky sledovali pod mikroskopom na určenie rozsahu tvorby syncýcií. Rozdiely v rozsahu tvorby syncýcií v dôsledku prítomnosti látky sa ľahko rozpoznali a látky sa ľahko usporiadali podľa schopnosti v tejto skúške. Aktuálne IC30 určené touto metódou sú približné. Boli to 0,3 a 0,05 mg/ml pre látky 16 a 17. Schopnosť týchto látok inhibovať tvorbu syncýcií demonštruje, že tieto látky pôsobia pri kroku fúzie vo vírusovom životnom cykle. Látky z príkladov 1 a 4 bránia RSV rast in vivo
RSV infekcia laboratórnych potkanov nasledovaná dávkou liečiva aerosólom s malými časticami (SPA) sa použila na zhodnotenie antivírusového potenciálu látok in vivo. (Gilbert B. E., Wyde P. R., Wilson S. Z. a Meyerson L. R. 1993. SP-303 small particle aerosól treatment of influenza A vírus infection in mice and respirátory syncytial vírus infection in cottonrats. Antiviral Research 21. 37 až 45.)
Látky podľa tohto vynálezu sa testovali v tomto systéme na určenie, či inhibujú rast RSV pri laboratórnych potkanoch. V experimente 1 (pozri tabuľku 3), sa zvieratá infikovali intranazálne s RSV A2 (deň 0), čo viedlo k respiračnej infekcii. Ribavirin sa použil pri 60 mg/ml vo vode v aerosólovej komore a podával sa počas 2 hodín dvakrát denne v dňoch 1, 2 a 3 po infekcii. Látka 16 sa použila pri
4,5 mg/ml v 25 mmol/1 NaHCO3 v aerosólovej komore a podávala sa 4 hodiny pred infekciou a počas 8 hodin každý z dní 1, 2 a 3. Placebom bola voda použitá v rovnakom režime ako látka 16. Zvieratá sa usmrtili na 4. deň, pľúca sa vypláchli a určili sa titre RSV vo výplachoch. V experimente 2 slúžili infikované neliečené zvieratá a zvieratá exponované aerosólom z 25 mmol/1 NaHCO3 ako kontrolné vzorky. Látky z príkladov 1 a 4 boli pripravené do 5 mg/ml v 25 mmol/1 NaHCO3. Jedna skupina sa liečila látkou z príkladu 1 počas 4 hodín pred infekciou v deň 0 a počas 8 hodín v každý z dní 1, 2 a 3 (profylaktický režim). Jedna skupina sa liečila látkou z príkladu 1 počas 8 hodín len každý z dní 1, 2 a 3 (terapeutický režim). Posledná skupina sa liečila látkou z príkladu 4 počas 8 hodín každý z dní 1, 2 a 3 (terapeutický režim). Vo 4. deň sa všetky zvieratá usmrtili, pľúca sa vypláchli a vo výplachu sa určili titre RSV. V experimente 3 bola placebom voda dodávaná intranazálne jedenkrát za deň. Látka z príkladu 4 sa testovala intranazálnym dodávaním dávkovaním pred očkovaním a 1 deň potom (deň O a 1), dávkovaním pred očkovaním a v dňoch 1 až 3 a dávkovaním len po očkovaní v dňoch 1 až 3. Táto látka sa tiež testovala dávkovaním intraperitoneálne. Vo 4. deň sa všetky zvieratá usmrtili, ich pľúca sa vypláchli a vo výplachu sa určili titre RSV. Toto sa urobilo na určenie koncového bodu zriedenia, ktoré má cytopatický účinok (CPE) na vero bunky a tiež plakovou skúškou na vero bunkách. Pľúca sa tiež homogenizovali a titre vírusu v pľúcach sa určili odcentrifugovaním časticového materiálu (1000 x g, 10 minút) a použitím zriedení supematantu v plakových skúškach. Vidno, že látky z príkladov 1 a 4 inhibujú RSV in vivo.
Tabuľka 3
Účinnosť príkladov 1 a 4 proti respiračnému syncyciálnemu vírusu pri laboratórnych potkanoch.
Priemerný tlter Násobok
Exp. poklesu
Aplikácia režim N vzorka/ loglO/κ SD laglO
skúžka pľúc
1 H2O aerosol 2x2h/d 5 dl,2,1 Výplach/CPE 4.1 0,27
Ribavirin 60 mg/ml
aerosol 2x2h/d 4 dl,2,3 Výplach/CPE 3.3 0 0,S
Príklad 1 4,5 mg/ml 5 4h dO Výplach/CPE 2.8 0,35 1.3
aerosol 8h dl,2,3
2 Neliečené 4 Výplach/CPE 3,68 0.48
Placebo 4h dO 4 Výplach/CPE 3,43 0,25 0.25
aerosol 8h dl,2,3
Príklad 1 5 mg/nl 4 4h dO Výplach/CPE 1,73 1,15 1.95
aerosol 8h dl,2,3
Príklad 1 5 mg/ml 4 Výplach/CPE 3,43 0,25 0,25
aerosol 8h dl,2,3
Príklad 4 5 mg/ml 4 Výplach/CPE 2,05 0,5 1.63
aerosol 8h dl,2,3
3 H20 i.n. dO,1,2,3 4 Výplach/CPE 4,18 0.25
Výplach/plak 4,29 0,13
Pľúca/plak 4,55 0,24
Príklad 4 dO 15 mg/k 4 Výplach/CPE 1,66 0,25 2,52
i. n. dl 30 mg/k Výplach/plak 2,26 0,11 2.03
Pľúca/p]ak 2,32 0,23 2.23
PrlkLad 4 dO 15 mg/k 4 Výplach/CPE 1.66 0 .15 2 i 52
i.n. dl 30 mg/k Výplach/plak 2.26 0,11 2.03
Pľúca/plak 2,32 0,23 2.23
Príklad 4 dO 15 mg/k 4 Výplach/CPE 2,05 0,87 2,13
i.n. dl,2.3 Výplach/plak 2,25 0 2,04
30 mg/k Pľúca/plak 2,25 0 2.3
Príklad 4 dl,2,3 4 Výplach/CPE 1,66 0,48 2,51
i. n. 30 mg/k Výplach/plak 3,09 0,65 1,2
Pľúca/plak 3,37 1,09 1.18
Príklad 4 dl,2,3 4 Výplach/CPE 4,18 0,25 0
i.p. 30 mg/k Výplach/plak 4,1 0,22 O.D9
PTúca/plak 3,92 0,97 0.26

Claims (38)

1. Aniónová zlúčenina obsahujúca triazínový kruh všeobecného vzorca (I)
Aje skupina vybraná z množiny pozostávajúcej z c·
C’je vybrané z -SO3H, -OSO3H, -OH alebo -COOH;
B' je vybraný z -NH, -NR1 alebo O;
R1 je vybraný z H, C1.Ďnižšieho alkylu, priameho alebo rozvetveného, kde uhlíkové atómy môžu byť voliteľne substituované s Cl, Br, F, OH alebo CN;
X je Cl, F alebo skupina kde
U'je vybrané zo skupiny -SO2, -CO, -NC(O) alebo -NC(S); W'je vybrané zo skupín:
-N (CH2)m
M
Z alebo •N (CH2)m
Z
Yje-(CH2)n-; n je 0 až 6; m je 0 až 2;
Z je vybrané z H, CH3, CF3, -CH2-(halogén), kde halogénom je Cl, Br, F alebo I, -CH2OH, -COOH, -COOC^nižší alkyl, priamy alebo rozvetvený, -CONR2R2, CN alebo
R2 /
-CH
OH; a
R2 je vo všetkých skupinách nezávisle vybraný z H alebo Cj.6 nižšieho alkylu;
alebo jej farmaceutický prijateľná soľ alebo ester.
2. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, kde Aje skupi-
C'je-SO3H;
B'je-NH;
W je skupina:
v-2 /
Y je-CH2-;
Zje -CH2OH; a
U', X, Y, n a m majú význam definovaný v nároku 1;
alebo jej farmaceutický prijateľná soľ alebo ester.
3. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, kde A je skupi- na:
c·
C'je-SO3H;
B'je-NH;
W'je skupina:
/
N \
Y.
Yje-CH2CH2-;
Zje -CONH2a
U', X, Y, n a m majú význam definovaný v nároku 1;
alebo jej farmaceutický prijateľná soľ alebo ester.
4. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, kde Aje skupi- na:
C' C
Cje-SO3H;
B'je-NH;
W'je skupina:
v-z /
Yje-CH2CH2-;
Zje -CONH2a
U', X, Y, n a m majú význam definovaný v nároku 1; alebo jej farmaceutický prijateľná soľ alebo ester.
5. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, kde farmaceutický prijateľnou soľou je disodná soľ.
6. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je kyselina 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]stilbén-2,2'-disulfónová alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
7. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je kyselina 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]bifenyl-2,2'-disulfónová alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
8. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je kyselina 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-hydroxyetyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]stilbén-2,2'-di-sulfónová alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
9. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je kyselina 4-[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino] -l,3,5-triazín-2-ylamino]-4'-[4-chlór-6-[3-aminofenyl-N,N-bis (2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-1,3,5
-triazín-2-ylamino]-stilbén-2,2'-disulfónová alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
10. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je kyselina 4,4'-bis[4-chlór-6-[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-stil-bén2,2'-disulfónová alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
11. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je kyselina 4-[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-4'-[4-[3-ami-nofenylN,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-6-[3-ami-nofenylN-(2-karbamoyletyl) -N'-(3-propiónová kyselina)]-1,3,5-triazín-2-ylamino]-stilbén-2,2'-disulfónová alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
12. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je kyselina 4-[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-],3,5-triazín-2-ylamino]-4'-[4-[3-ami-nofenylN,N-bis(2-karbamoyletyl)-sulfonylimino]-6-[3-aminofenyl-N,N-bis(3-propiónová kyselina)]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-stilbén-2,2'-disulfónová alebo jej farmaceutic-ky prijateľná soľ.
13. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je kyselina 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]bibenzyl-2,2’-disulfónová alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
14. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je kyselina 4,4'-bis[4,6-di[4-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]stilbén-2,2'-disulfónová alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
15. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je kyselina 4,4'-bis[4,6-di[4-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]bifenyl-2,2'-disulfónová alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
1 6. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je kyselina 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenylsulfonylamido]-1,3,5-triazín-2-ylamino]-stilbén-2,2'-disulfónová alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
17. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je kyselina 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenylsulfonylamido]-l ,3,5-triazín-2-ylamino]-bifenyl-2,2'-disulfónová alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
18. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je kyselina 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-yloxy]bifenyl-2,2'-disulfónová alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
19. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je kyselina 5,5'-dimetyl-4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)-sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-yla-mino]bifenyl-2,2'-disulfónová alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
20. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je kyselina 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-hydroxyetyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]bifenyl-2,2'-disulfónová alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
21. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je kyselina 9,9-dioxo-2,7-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoylyetyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-dibenzotiofén- 3,6-disulfónová alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
22. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je kyselina 4,4'-bis[4-chlór-6-di[4-amino-N'-[3-aminofenyl-N,N-bis(2-karbamoyletyl)sulfonylimino]-benzamid]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-stilbén-2,2'-disulfónová alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
23. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je kyselina 4,4'-bis[4,6-di[4-amino-N'-[3-aminofenyl-N,N-bis(2-hydroxyetyl) sulfonylimino] -benzénsulfónamid] -1,3,5 -triazín-2-ylamino]-stilbén-2,2'-disulfónová alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
24. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je disodná soľ kyseliny 4,4'-bis-[4,6-bis{3-[bis-(2-karbamoyletyl)-sulfomoyl]-fenylamino]-l,3,5-triazín-2-ylamino]-bifenyl-2,2'-disulfónovej.
25. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je disodná soľ kyseliny 4,4'-bis-[[4,6-bis-[[3-[[bis-[3-(metylamino)-3-oxopropyl]amino]sulfonyl]fenyl]amino]-l,3,5-triazín-2-yl] amino]-[ 1,1 ’-bifeny 1] -2,2'-disulfóno vej.
26. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je disodná soľ kyseliny 4,4'-bis(4,6-bis{3-[bis(2-metylkarbamoyl-etyl) sulfamoyI]fenylamino}-[l,3,5]tríazín-2-yl]amino)-bifenyl-2,2'-dikarboxylovej.
27. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je dimetylester kyseliny 4,4'-bis-(4,6-bis-{3-[bis-(2-karba-moyletyl)sulfamoyl]-fenylamino}-[l,3,5]triazín-2-ylamino)bifenyl-2,2' -dikarboxylovej alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
28. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je disodná soľ kyseliny 4,4'-bis-(4,6-bis-{3-[bis-(2-hydroxypropyl)sulfamoyl]-fenylamino] -[1,3,5]-triazin-2-yl]amino]bifenyl-2,2'- disulfónovej.
29. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je disodná soľ kyseliny 4,4'-bis-(4,6-bis-{3-[bis-(2-hydroxypropyl)sulfamoyl]-fenylamino}-[l,3,5]-triazin-2-yl]amino]bifenyl-2,2'- dikarboxylovej.
30. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je disodná soľ kyseliny 4,4'-bis-{4,6-bis-[3-(bis-karbamoylmetyl-l-sulfamoyl)-fenylamino]-[l,3,5]-triazin-2-ylamino}-bifenyl-2,2'- disulfónovej.
31. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je disodná soľ kyseliny 4,4'-bis-{4,6-bis-[3-(bis-karbamoylmetyl-l-sulfamoyl)-fenylamino]-[l,3,5]triazin-2-ylamino}bifenyl-2,2'- dikarboxylovej.
32. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je disodná soľ (E)-2,2'-(l,2-eténdiyl)-bis[5-[[4,6-bis[[3-[[3,5-bis (aminokarbonyl)-l-piperidinyl]-sulfonyl]-fenyl]-amino]-l ,3,5-triazin-2-yl]amino]-benzénsulfónovej kyseliny].
33. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je disodná soľ kyseliny 4,4'-bís-{4,6-bis-[3-(3,5-dikarbamoylpiperidín-l-sulfonyl)-fenylamino]-[l,3,5]triazin-2-ylamino} -bifenyl-2,2'-disulfónovej.
34. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je kyselina 1,2', 1 ,ľ-[(2,2'-disulfo[l ,ľ-bifenyl]-4,4'-diyl]-bis-[imino-l,3,5-triazín-6,2,4-triylbis-(imino-3,l-fenylénsulfonyl)]tetrakis-3,5-piperidíndikarboxylová alebo jej farmaceutický prijateľná soľ.
35. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je disodná soľ kyseliny 4,4'-bis-(4,6-bis-{3-[bis-(2-hydroxyetyl)sulfamoyl]fenylamino}-[l,3,5]-triazín-2-ylamino]bifenyl-2,2’-dikarboxylovej.
36. Aniónová zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je disodná soľ kyseliny 4,4'-bis[4,6-di[3-aminofenyl-N,N-bis(3-hydroxypropyl)sulfonylimino]-l,3,5-triazín-2-ylami-no]bifenyl-2,2'-disulfónovej.
37. Použitie zlúčeniny podľa nároku 1 až 36 na výrobu farmaceutického prostriedku na liečenie vírusovej infekcie cicavcov, ktorou je infekcia respiračným syncyciálnym vírusom, vírusom herpes simplex, infekcia vírusom ľudskej imunitnej nedostatočnosti a infekcia cytomegalovírusom.
38. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa t ý m , že obsahuje zlúčeninu podľa nároku 1 alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ, alebo ester a jeden alebo viac farmaceutický prijateľných nosičov alebo vehikúl.
SK179-97A 1996-02-13 1997-02-06 Aniónové zlúčeniny obsahujúce triazínový kruh, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie SK282598B6 (sk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US1154296P 1996-02-13 1996-02-13
US08/789,038 US5852015A (en) 1997-01-27 1997-01-27 Triazine containing anionic compounds useful as antiviral agents

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK17997A3 SK17997A3 (en) 1997-09-10
SK282598B6 true SK282598B6 (sk) 2002-10-08

Family

ID=26682512

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK179-97A SK282598B6 (sk) 1996-02-13 1997-02-06 Aniónové zlúčeniny obsahujúce triazínový kruh, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie

Country Status (11)

Country Link
EP (1) EP0795549A1 (sk)
JP (1) JPH09309882A (sk)
KR (1) KR19980067752A (sk)
CN (2) CN1163401A (sk)
CZ (1) CZ290450B6 (sk)
HU (1) HUP9700436A1 (sk)
IL (1) IL120206A (sk)
MX (1) MXPA97001106A (sk)
NO (1) NO308469B1 (sk)
RU (1) RU2170731C2 (sk)
SK (1) SK282598B6 (sk)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6335339B1 (en) 1998-01-13 2002-01-01 Scriptgen Pharmaceuticals, Inc. Triazine antiviral compounds
US6495580B1 (en) 1998-01-29 2002-12-17 Viropharma Incorporated Compounds, compositions and methods for treating or preventing pneumovirus infection and associated diseases
JP2002501894A (ja) * 1998-01-29 2002-01-22 バイロファーマ・インコーポレイテッド ニューモウイルス感染および関連疾患の治療または予防のための化合物、組成物および方法
EP0945447A1 (en) * 1998-03-27 1999-09-29 Janssen Pharmaceutica N.V. Trisubstituted 1,3,5-triazine derivatives for treatment of HIV infections
CN1115561C (zh) * 1998-06-04 2003-07-23 梁建华 一种血液分析计数仪用稀释液和清洗液
ES2258018T3 (es) 1999-09-24 2006-08-16 Janssen Pharmaceutica N.V. Dispersiones solidas antivirales.
GB9928418D0 (en) * 1999-12-01 2000-01-26 Novartis Ag Organic compounds
WO2001085700A2 (en) * 2000-05-08 2001-11-15 Janssen Pharmaceutica N.V. Hiv replication inhibiting pyrimidines and triazines
EP1282607B1 (en) 2000-05-08 2015-11-11 Janssen Pharmaceutica NV Prodrugs of hiv replication inhibiting pyrimidines
WO2002062769A2 (en) 2001-02-02 2002-08-15 Wyeth Preparation and purification of antiviral disulfonic acid disodium salt
EP1545513A2 (en) 2002-08-09 2005-06-29 Viropharma Incorporated Compounds, compositions and methods for treating or preventing pneumovirus infection and associated diseases
CA2495245A1 (en) 2002-08-09 2004-02-19 Viropharma Incorporated Compounds, compositions and methods for treating or preventing pneumovirus infection and associated diseases
CN103353534A (zh) * 2007-10-30 2013-10-16 松下电器产业株式会社 血红蛋白及血红蛋白衍生物的测定方法、测定试剂盒
US20190209572A1 (en) * 2016-08-19 2019-07-11 Yale University Bifunctional antifungal agents and methods of treating fungal infection
CN108088781B (zh) * 2016-11-23 2020-07-21 上海迈泰君奥生物技术有限公司 一种用于细胞计数仪的试剂组合
CN107884588A (zh) * 2017-11-13 2018-04-06 重庆艾维迪生物科技有限公司 用于检测糖化血红蛋白的溶血剂及其制备方法和应用

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1052988A (sk) * 1962-07-03
US3209003A (en) * 1963-06-26 1965-09-28 Sterling Drug Inc 2-amino-4-arylamino-6-(h-)-1, 3, 5-triazines
US3897430A (en) * 1973-09-24 1975-07-29 American Cyanamid Co Substituted s-triazines and method of use
DD268110A3 (de) * 1984-12-28 1989-05-24 Adl Inst Phytopathologie Mittel zur induktion von resistenz gegen viren bei kultur- und nutzpflanzen
DD298196A5 (de) * 1989-02-24 1992-02-13 Chemie Ag Bitterfeld-Wolfen,De Mittel zum schutz von kultur- und nutzpflanzen gegen viren
EP0498095B1 (en) * 1991-02-05 1995-01-04 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Sulfonic stilbene derivatives in the treatment of viral diseases
JPH0616561A (ja) * 1991-07-09 1994-01-25 Tsumura & Co 抗レトロウイルス剤
WO1993016992A1 (en) * 1992-02-20 1993-09-02 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Sulfonic acid derivatives in the treatment of viral diseases

Also Published As

Publication number Publication date
JPH09309882A (ja) 1997-12-02
CN1163401A (zh) 1997-10-29
HU9700436D0 (en) 1997-04-28
NO308469B1 (no) 2000-09-18
KR19980067752A (ko) 1998-10-15
IL120206A0 (en) 1997-06-10
CZ42397A3 (en) 1997-10-15
MXPA97001106A (es) 2003-07-14
CN1163890A (zh) 1997-11-05
CN1062860C (zh) 2001-03-07
CZ290450B6 (cs) 2002-07-17
SK17997A3 (en) 1997-09-10
EP0795549A1 (en) 1997-09-17
RU2170731C2 (ru) 2001-07-20
HUP9700436A1 (hu) 2000-08-28
NO970652D0 (no) 1997-02-12
IL120206A (en) 2000-02-17
NO970652L (no) 1997-08-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SK282598B6 (sk) Aniónové zlúčeniny obsahujúce triazínový kruh, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie
CN114437159B (zh) 一种环状碳酸酯核苷类化合物及其应用
EP3472154B1 (en) Compounds
AU2016359907B2 (en) Heterocyclic indoles for use in influenza virus infection
JP2019048898A (ja) インフルエンザウイルスの複製の阻害剤
AU2011336764A1 (en) Novel compounds as respiratory stimulants for treatment of breathing control disorders or diseases
JP2002511390A (ja) Ｈｉｖ感染の処置のための三基置換された１，３，５−トリアジン誘導体
AU2015298876A1 (en) Indoles for use in influenza virus infection
CN114149415A (zh) 一种拟肽类化合物及其衍生物、制备方法、药物组合物和应用
SK287647B6 (sk) Amínované deriváty dihydro-1,3,5-triazínu, farmaceutické kompozície s ich obsahom a ich terapeutické použitie
DK152430B (da) Analogifremgangsmaade til fremstilling af heterocyclisk substituerede 4-amino-6,7-dimethoxy-2-piperazinoquinazolin-derivater eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf
KR101913789B1 (ko) 코로나 바이러스 감염으로 인한 질환 치료용 화합물
KR20200069381A (ko) 글루타르이미드 유도체, 이의 용도, 이를 기반으로 한 약학 조성물 및 글루타르이미드 유도체를 생산하는 방법
EP0720603A1 (en) Bis(amidinobenzimidazolyl)alkanes as antiviral agents
EP0763523A1 (en) Naphthalene derivative
CN100361975C (zh) 5－羟基－3－羧酸酯吲哚类衍生物及其制备方法
US5852015A (en) Triazine containing anionic compounds useful as antiviral agents
CN107108584A (zh) 抗病毒剂及其应用
MX2014015648A (es) Cianoguanidinas y usos de las mismas.
US5543413A (en) Heterocyclic thioamides and related analogs as antiviral agents with a unique mode of action
NZ314225A (en) Bis-triazine derivatives and pharmaceutical compositions thereof, useful in the treatment of viral infections
AU710536B2 (en) Triazine containing compounds useful as antiviral agents
US6433016B1 (en) Drugs for treating viral infections
US20020193443A1 (en) Drugs for treating viral infections
WO2021234414A1 (en) Antiviral polymers