SK281865B6

SK281865B6 - Indolový derivát a jeho optický izomér, spôsob jeho prípravy a farmaceutický prostriedok

Info

Publication number: SK281865B6
Application number: SK656-97A
Authority: SK
Inventors: Shiro Kato; Hiroshi Harada; Yoshimi Hirokawa; Naoyuki Yoshida; Hitoshi Kawashima
Original assignee: Dainippon Pharmaceutical Co., Ltd.
Priority date: 1994-11-29
Filing date: 1995-11-27
Publication date: 2001-08-06
Also published as: WO1996016938A1; CZ290871B6; NO972427L; CA2206307A1; AU3936695A; RO118426B1; TW349091B; IL116178A; FI972275A0; NO309648B1; CY2247B1; CN1174549A; JP3100165B2; DE69521529D1; HUT77308A; ZA9510130B; EP0801059A1; AU688165B2; PT801059E; HK1003886A1

Abstract

Indolové deriváty všeobecného vzorca (I), ich soli a optické izoméry, ktoré majú veľkú stimulujúcu aktivitu proti beta3-adrenergickým receptorom a výbornú adrenoceptorovú selektivitu a sú vhodné na profylaxiu a liečenie obezity a cukrovky; spôsob ich prípravy a farmaceutický prostriedok, ktorý ako účinnú zložku obsahuje indolový derivát alebo jeho soľ samotný alebo spolu s farmaceuticky vhodným nosičom alebo riedidlom.ŕ

Description

Vynález sa týka indolového derivátu a jeho optického izoméru, spôsobu jeho prípravy a farmaceutického prostriedku s jeho obsahom. Tento indolový derivát má veľkú stimulačnú aktivitu proti p₃-adrenergickým receptorom a výbornú adrenoceptorovú selektivitu.

Doterajší stav techniky

Je známe, že β receptory sympatického nervového systému sú dvojakého typu; β,-receptory a p₂-receptory. Doteraz boli klinicky používané ako promótory srdcovej činnosti alebo vazopresory, stimulátory p₁-adrenergických receptorov a ako bronchodilatátory, β₂- adrenergických receptorov.

V súčasnosti boli objavené a izolované ako tretí typ β-adrenergických receptorov β₃^Γβηβ^^έ receptory, ktoré sa odlišujú od menovaných podtypov (Emorine, L. J. a spol., Science, 245. 1118 - 1121 (1989). β₃^Γβηε^κ±έ receptory sú prítomné v hnedých tukových bunkách a predpokladá sa, že majú termogenickú aktivitu pri lipolýze bielych tukových buniek naviazaných k podkožným tkanivám alebo vnútorným orgánom, čo znamená, že p₃-adrenergické receptory sú jednou z príčin obezity. Okrem toho bolo publikované, že rozhodujúce štádium cukrovky nezávislej od inzulínu, môže byť spájané s β₃-adrenergickými receptormi.

Pokiaľ látky stimulujúce p₃-adrenergické receptory pôsobia súčasne aj na βι-adrenergické a P₂-adrenergické receptory, môžu tieto mať niektoré vedľajšie účinky, ako je hyperfunkcia srdca, trasenie rúk a nôh a podobne, preto bolo potrebné vyvinúť liek, ktorý má stimulujúcu aktivitu na β^ύΓεηε^^έ receptory, ale zároveň neaktivujúci (alebo veľmi slabo aktivujúci) βι-adrenergické ani p₂-adrenergické receptory. V predloženom opise a v nárokoch sú látky, ktoré majú také vlastnosti a ktoré sa nazývajú ako látky s výbornou adrenoreceptorovou selektivitou“. Ako „látky stimulujúce β₃^Γεηε^^έ receptory boli publikované BRL35135 hydrobromid metylesteru (R*,R*)-(±)-14-[2-[(3-chlorofenyl)-2-hydroxyetylaminolpropylfenoxyloctovej kyseliny; Japanese Patent Second Publication (Kokoku) No. 26744/1988 a European Patent Publication No. 23385, SR-58611A (R,S)-N-(7-etoxykarbonylmetoxy-1,2,3,4-tetrahydronaft-2-y 1)-2-(3 -chlórfenyl)-2-hydroxyetánamín hydrochlorid; Japanese Patent First Publication (Kokai) No. 66152/1989 and European Patent Publication No. 255415), atď. Uvedené zlúčeniny BRL35135 a SR-58611 A sa ale úplne odlišujú od zlúčenín v súlade s predkladaným vynálezom, a to tým, že to nie sú indolové deriváty.

Ďalej v tabuľke 1 sú uvedené známe indolové deriváty.

Tabuľka 1

Chemická átruktúr*	Farmakológ.aktivita	Literatúra
HW0P<> H	stimuluje ía-adrenergická receptory	Germán Patent Publication No. 340786í
«-O“ yK-atrMWH-c»»! ~ΓΎ^) HO OH CH, u	inhibítor centrálnej nervovej sústavy	British Patent Publication No. 861,428
	anti. bakteriálna aktivita	J Org. Chem. 5½. 4403-4407 <13111
HO-O-CH-CHHW-ppcH,-qQi CHjOH OH CH,	stimuluje 4—adrenergieká receptáry	Japanese Patent Second F'uhliration (Kokoku)No. 2653/1971
CRjCN OH Ot,	stimuluje 4-adrenergieké receptory	Japanese Fatent First Publication (KokaiJNo. 139041/1977
— pt-atrHH-CH-CM, CO«K, OH CH,	blokuje aktivitu ô-adrenergických receptorov	J.Med,Chem.75. 670-679 <19821

Tieto látky však majú chemickú štruktúru odlišnú od zlúčenín v súlade s predpokladaným vynálezom, pretože na benzénovom kruhu majú dva substituenty a na indolovom jadre nemajú žiadne substituenty. Ďalej v týchto prácach nebola nikde uvedená aktivita stimulujúca β^βύτβηβΓβ^έ receptory.

O nasledujúcich zlúčeninách je známe, že majú chemickú štruktúru podobnú viac zlúčeninám v súlade s predpokladaným vynálezom ako látky, ktoré sú uvedené v tabuľke 1.

Napríklad J. Farm. Farmacol., 17, 742 - 746 (1965) uvádza nasledujúcu zlúčeninu A.

OH

H

Zlúčenina A

Acta. Polon. Farm., 31. 407 - 410 (1981), Chem. Abstrs., 96.142543k (1982) uvádza nasledujúcu zlúčeninu B.

H Zlúčenina B

Uvedené zlúčeniny A a B majú inú chemickú štruktúru ako zlúčeniny v súlade s predkladaným vynálezom, pretože nemajú žiadny substituent na benzénovom kruhu a ani žiaden substituent zodpovedajúci substituentu Rs uvedenej zlúčeniny v súlade s predpokladaným vynálezom.

Chem. Abstr., 109. 128763η (1988) uvádza N-indolylalkylamino-l-aryl substituovaný alkanolový derivát všeobecného vzorca (VIII):

R- CH — CHj — NH — CH — CH₂ —j-Ah Á· ^H (VIII), kde R je fenyl, m- alebo p-nitrofenyl, atď. a R₃ je atóm vodíka alebo metyl, uvedená zlúčenina má inú chemickú štruktúru ako zlúčeniny v súlade s predpokladaným vynálezom, pretože substituent na benzénovom kruhu je nitroskuipna a na indolovom jadre nie je žiaden substituent. Zlúčenina uvedeného vzorca (VIII) je hlavne zlúčenina nasledujúceho vzorca C.

no₂

CH - CH_a -NH - CH, - CH, —t—

OH ^H Zlúčenina C

Zlúčenina v súlade s predpokladaným vynálezom lepšie stimuluje aktivitu p₃-adrenergických receptorov ako uvedené zlúčeniny A, B a C, čo dokazujú uvedené farmakologické experimenty.

Predmetom predpokladaného vynálezu je teda získanie nového indolového derivátu alebo jeho soli, ktoré majú veľkú stimulujúcu aktivitu na β,-adrenergické receptory a výbornú adrenoreceptorovú selektivitu.

Podstata vynálezu

Predpokladaný vynález sa týka indolového derivátu všeobecného vzorca (I):

kde R¹ je nižší alkyl nesubstituovaný alebo substituovaný hydroxy skupinou, fenylsulfonylamino skupinou, nižšou alkylsulfonylamino skupinou nižšou mono alebo dialkylaminosulfonyl skupinou a až d, alebo spolu s R² tvorí metyléndioxy skupiny. Uvedená metyléndioxy skupina je nesubstituovaná alebo substituovaná karboxy skupinou alebo nižšou alkoxykarbonyl skupinou, a skupina vzorca: -X-Ra (kde X je O, S alebo NH, Raje atóm vodíka alebo nižší alkyl, za predpokladu, že pokiaľ X je S potom Raje nižší alkyl);

b skupina vzorca:

Rb 1 -[CKCHjfeCHjí-Rbb , (kde Rb je atóm vodíka, nižší alkyl, nižšia alkoxykarbonylová skupina alebo karboxylová skupina, Rbb je nižšia alkoxykarbonylová skupina alebo karboxylová skupina, m je celé číslo 0 až 3, a n je 0 alebo 1);

c skupina vzorca: -O(CH₂)_P-Rc (kde Rc je nižšia alkanoylová skupina, hydroxy skupina, kyano skupina, fenylová skupina, nižšia mono- alebo dialkylaminokarbonylová skupina alebo skupina vzorca:

O (kde R^a je atóm vodíka alebo nižší alkyl), p je celé číslo 1 až 4);

d skupina vzorca: -Y-(CH₂)_q-Rd (kde Y je NH alebo S, Rd karboxylová skupina alebo nižšia alkoxykarbonylová skupina, q je celé číslo 1 až 4);

R² je atóm vodíka, halogénu, nižšia alkylová skupina nesubstituovaná alebo substituovaná hydroxy skupinou, hydroxy skupina, nižšia alkoxy skupina alebo uvedená skupina b alebo c, alebo spolu s R¹ tvorí metyléndioxy skupiny.

Uvedená metyléndioxy skupina je nesubstituovaná alebo substituovaná karboxy skupinou alebo nižšou alkoxykarbonylovou skupinou,

R³ je atóm vodíka alebo nižší alkyl;

W je skupina vzorca (II), ktorá sa viaže v pozícii 2- alebo 3- k indolovému jadru:

kde R⁴ je atóm halogénu alebo trifluórmetylová skupina a R⁵ je nižšia alkylová skupina, alebo jej soľ.

Charakteristické znaky štruktúry zlúčeniny (I) v súlade s predkladaným vynálezom sú:

1. v polohe 3 benzénového kruhu substituentu W je špecifický atóm alebo skupina;

2. substituent R⁵ j e nižší alkyl;

3. v polohách 4 až 7 indolového jadra špecifické substituenty R¹ a R²;

4. v polohách 2 a 3 indolového jadra substituent W.

Na uvedených charakteristických znakoch štruktúiy zlúčenín v súlade s predpokladaným vynálezom je založená veľká stimulujúca aktivita na P3-adrenergické receptory a výborná adrenoceptorová selektivita zlúčenín v súlade s predpokladaným vynálezom.

Ďalej nasleduje vysvetlenie pojmov použitých v opise a v nárokoch.

Skupina označená ako „nižšia“ má 1 až 4 uhlíkové atómy. „Nižší alkyl“ označuje metyl, etyl, propyl, izopropyl, butyl, izobutyl, sekundárny butyl, terciálny butyl atď. výhodne metyl, etyl, propyl a izopropyl. „Nižší alkyl substituovaný hydroxy skupinou“ označuje hydroxymetyl a 2-hydroxyetyl. „Nižšia alkylsulfonylamino skupina“ označuje metylsulfonylamino, etylsulfonylamino. „Nižšia mono- alebo dialkylaminosulfonylová skupina“ označuje monometylaminosulfonyl, dimetylaminosulfonyl, monoetylaminosulfonyl, dietylaminosulfonyl. „Nižšia alkoxykarbonylová skupina“ označuje metoxykarbonyl, etoxykarbonyl, propoxykarbonyl, butoxykarbonyl. „Nižšia alkanoylová skupina“ označuje acetyl, propionyl. „Nižšia mono- alebo dialkylaminokarbonylová skupina“ označuje metylaminokarbonyl, dimetylaminokarbonyl, metyletylaminokarbonyl. ,Atóm halogénu“ označuje fluór, chlór, bróm, jód, výhodne fluór, chlór, bróm, výhodnejšie fluór a chlór. „Nižšia alkoxy skupina“ označuje metoxy, etoxy, propoxy, izopropoxy, butoxy, izobutoxy, sekundárne butoxy, terciálne butoxy skupiny. „Nižší alkoxykarbonyl-nižšia alkoxy skupina“ označuje metoxykarbonylmetoxy, 1-metoxykarbonyletoxy, 2-metoxykarbonyletoxy, 1 -metoxykarbonylpropoxy, 3-metoxykarbonylpropoxy. „Karboxy-nižsia alkoxy skupina“ označuje karboxymetoxy, l-karboxyetoxy,2-karboxyetoxy, 1-karboxypropoxy, 3-karboxypropoxy. „Fenyl-nižšia alkoxy skupina“ označuje benzyloxy, fenetyloxy.

Soľ zlúčeniny (I) v súlade s predkladaným vynálezom je kyslá adičná soľ, výhodne farmaceutický vhodná kyslá adičná soľ. Kyslá adičná soľ je soľ anorganickej kyseliny (chlorovodíkovej, brómovodíkovej, jódovodíkovej, sírovej, fosforečnej) alebo organickej kyseliny (šťaveľovej, maleínovej, filmárovej, mliečnej, malónovej, citrónovej, vínnej, benzoovej, metánsulfónovej). Okrem toho, zlúčeniny v súlade s predkladaným vynálezom, ktoré majú v substituente R¹ alebo R² karboxylovú skupinu, tvoria soli alkalických kovov alebo organických zásad (sodík, draslík, trietylamín,

SK 281865 Β6 tributylamín, diizopropyletylamín, N-metylmorfolín, dicyklohexylamín).

Tieto kyslé adičné soli a soli alkalických kovov alebo organických zásad tvoria hydráty a solváty, ktoré tiež obsahuje predkladaný vynález.

Zlúčeniny v súlade s predkladaným vynálezom všeobecného vzorca (I) majú dva asymetrické atómy uhlíka. Vo vzorci (II) je to uhlík nesúci hydroxy skupinu a uhlík nesúci R⁵. Zlúčeniny v súlade s predkladaným vynálezom preto tvoria štyri stereoizoméry. Predkladaný vynález obsahuje opticky aktívne a racemické zlúčeniny a ich zmesi.

Výhodná zlúčenina v súlade s predkladaným vynálezom je zlúčenina (a jej soľ) všeobecného vzorca (la)

kde v polohe 3 indolového jadra substituent W a R¹, R², R³, R⁴ a R⁵ sú definované.

Zvlášť výhodná zlúčenina v súlade s predkladaným vynálezom je zlúčenina (a jej soľ) všeobecného vzorca (la), kde R¹ je v polohe 5, 6 alebo 7 indolového jadra a R² je atóm vodíka, alebo zlúčenina (a jej soľ) všeobecného vzorca (la), kde R² je skupina iná ako vodík a jedna zo skupín R¹ a R² je v polohe 6 indolového jadra a druhá v polohe 7.

Inou výhodnou zlúčeninou v súlade s predkladaným vynálezom je indolový derivát (a jeho soľ) všeobecného vzorca (la), kde R¹ je nižší alkyl substituovaný skupinou hydroxy, fenylsulfonylamino, nižším alkylsulfonylamino, nižším dialkylsulfonylamino alebo nasledujúcou skupinou a, b-1, c-1 alebo d;

a skupina všeobecného vzorca -X-Ra (kde X a Ra sú definované);

b-1 skupina všeobecného vzorca

Rb-1 i

Rbb (kde Rb-1 je atóm vodíka alebo nižší alkyl a Rbb, m a n sú definované);

c-1 skupina všeobecného vzorca -O(CH₂)_p-Rc-l (kde Rc-1 je nižší alkanoyl, fenyl, nižšia monoalkylaminokarbonylová skupina a p je definované);

d skupina všeobecného vzorca -Y-(CH₂)_q-Rd (kde Y, Rd a q sú definované);

R² je atóm vodíka, halogénu, nižší alkyl nesubstituovaný alebo substituovaný hydroxy skupinou, nižšou alkoxy skupinou alebo uvedenou skupinou ad b-1 alebo c-1 a alebo jej soľ.

Z uvedených zlúčenín je výhodný hlavne indolový derivát vzorca (la), kde R¹ je nižšia alkoxy skupina, nižší alkyl, nižšia alkoxykarbonylová skupina, nižší alkoxykarbonyl-nižšia alkoxy skupina, karboxy nižšia alkoxy skupina, fenyl nižšej alkoxy skupiny alebo nižšia dialkylaminosulfonylová skupina, R² atóm vodíka, halogénu, alkoxy skupina, nižší alkyl, nižšia alkoxykarbonylová skupina, nižší alkoxykarbonyl-nižšia alkoxy skupina, karboxy nižšia alkoxyskupina alebo fenyl nižšia alkoxyskupina, R³ je vodíkový atóm, R⁴ je atóm halogénu a R⁵ je metyl alebo jej soľ.

Ešte výhodnejší je indolový derivát vzorca (la), kde R¹je metoxy, etoxy, propoxy, izopropoxy, metyl, metoxykarbonyl, metoxykarbonylmetoxy, karboxymetoxy, benzyloxy alebo dimetylaminosulfonylová skupina, R² je atóm vodíka alebo metoxy skupina, R³ je vodíkový atóm, R⁴ je atóm chlóru a R je metyl alebo jeho soľ.

Najvýhodnejší je indolový derivát vzorca (la), kde R¹ je metoxy, etoxy, metoxykarbonyl, metoxykarbonylmetoxy alebo karboxylmetoxylová skupina, ktorá je v polohe 6 alebo Ί indolového jadra, R² a R³ sú atómy vodíka, R⁴ je atóm chlóru a R⁵ je metyl alebo jej soľ.

Reprezentanti najvýhodnejších zlúčenín:

1. 2- [3 (7-Metoxyindol-3 -yl)-2-propylaminoj-1 -(3 -chlórfenyl)etanol

2. 2-[3(7-Etoxyindol-3-yl)-2-propylamino]-l-(3-chlórfenyl)etanol

3. 2-[3(7-Metoxykarbonylmetoxyindol-3-yl)-2-propylaminoj-1 -(3-chlórfenyl)etanol

4. 2-[3(7-Karboxymetoxyindol-3-yl)-2-propylamino]-l-(3 -chlórfenyl)etanol a ich optické izoméry a soli.

V tabuľke 2, 3 a 4 sú uvedené reprezentatívne zlúčeniny, ktorých sa týka predkladaný vynález tento obsahuje aj ich soli).

Tabuľka 2

CH —CH,—NH*-CH —CH, -pA._Rl

OH CHj '·Ν^Λ<Α

H

R	R*	R¹	R*
6-OH	α	7-OC₂H₄COOH	Q
6-COOH	Cl	7-OCH(CHj)₂	α
6-OCH₂COCH₃	α	7-OC₂H₄COOCH₃	Cl
6-OCH₂CONHCH₃	α	7-OCH₂COCH₃	α
6-SCH₂COOH	α	7-OCH₂CONHCH₃	Cl
6-SCH₂COOCH₃	α	7-OCH₂CH₂OH	α
6-NHCH₂COOH	α	7-OCH₂CN	C
ä-NHCH₂COOCH₃	ci	7-ÔCH(COOH)j	α
6-NHSO₂CH₃	C1	7-OCH(COOCH₃)2	Cl
6-NHSO₂Ph	CI	7-SCH₃	Cl
7-OH	α	7-SCH2COOH	Cl
7-SCH₂COOCH₃	C1	7-CH₂OH	Cl
7-NHCH₂COOCH₃	α	7-COOH	Cl
7-NHCH₂COOH	α	7-COOCH₃	Cl
7-NHSO₂Ph	α	7-OCH(CH₃)COOH	Cl
7-NHSO₂CH₃	C1	7-OCH(CH₃)COOCH₃	Cl
7-NH₂	C1	7-SO₂N(CH₃)₂	α
7-OCH₃	CF₃	ó-COOCH₃	cf₃
7-OC₂H₅	CF_S	6-OCH₂COOH	cf₃
7-COOCH₃	cf₃	«-OCH₂COOCH₃	cf₃
7-OCH₂COOH	cf₃	7-OCH₂COOCH₃	cf₃
7-OCH₃	CI	7-OC₂H₅	Cl
6-OCH₃	α	7-OCH₂Ph	α
6-CH₃	α	7-CH₃	Cl
6-OCH₂COOCH₃	α	6-COOCH₃	Cl
4-OCH₃	CI	4-CH₃	α
ô-SOjNÍCHjJj	CI	6-OCH₂COOH	Cl
7-OCH₂COOCH₃	Ci	6-CH₂OH	Cl
7-O(CH2)₂CH₃	CI	7-QCH₂CQOH	α

SK 281865 Β6

Tabuľka 3

CH—CH, —NH —CH —CH, —j--/S

ÓH CH, W‘₍l

H .R¹

7-----	-	R^J	R*
OCHj	F	OCHj	OC₂H₄COOCH₃
OCHj	OCHjCOOH	OC₂H₅	F
och₃	OC₂H_s	OC₂H_s	OCH₃
OCHj	OH	oc₂h₅	oc₂h₄cooh
OCHj	OCH(CH₃)COOH	oc₂h₅	oc₃h₃
OCHj	och₂cooch₃	oc₂h₅	OCHjCOOH
OCHj	OCH(CH₃)COÔCH3	och₂cooh oc₂h₅
OCHjCOOH	OCHjCOOH	OH	OCHj
OCHjCOOCHj	och₃	OH	OCH(CHj)COOH
OCjHiCOOH	oc₂h₅		-O-CHrO-
OCHjCOOH	och₃		-0-C(CO0H)2-O-
oc₂h₄cooh	oc₂h₄cooh		-O-CtCOOCHjlj-O-
och₃	och₃

Tabuľka 4

CH —CH,—NH — CH—CH, --A „I

CH,

R**	R*	R¹	r»
OCHj ch₃	OCHjCOOH COOCH₃	OCH₂COOCH₃OC₂H_s	OC₂H₄COOH O(CH₂)₂CH₃

* Substituent R¹ je v polohe 6 alebo 7 indolového jadra.

Zlúčeniny v súlade s predkladaným vynálezom sa pripravujú nasledujúcimi postupmi.

Postup a

Zlúčenina všeobecného vzorca (I) v súlade s predkladaným vynálezom sa pripraví reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca (III):

(ΠΙ), kde R⁴ je definovaný so zlúčeninou všeobecného vzorca (IV):

(IV), kde R¹, R², R³ a R⁵ sú definované, alebo ich soli.

Reakcia prebieha vo vhodnom rozpúšťadle alebo bez rozpúšťadla. Rozpúšťadlo sa vyberie podľa typu východiskových látok. Použiť sa môžu alkoholy (metanol, etanol, izopropanol), ketóny (acetón, metyletylketón), halogénované uhľovodíky (metylénochlorid, chloroform), étery (dietyléter, tetrahydroíurán, dioxán), aromatické uhľovodíky (benzén, toluén), etylacetát, Ν,Ν-dimetylformamid, dimetylsulfoxid. Tieto rozpúšťadlá je možné použiť samostatne ďebo v zmesi. Okrem toho, pokiaľ je zlúčenina (IV) vo forme kyslej adičnej soli kyseliny chlorovodíkovej, brómovodíkovej alebo šťaveľovej, maleínovej, filmárovej, prebieha reakcia v prítomnosti zásady. Príkladom zásady je hydrouhličitan alkalického kovu ako hydrouhličitan sodný, hydrouhličitan draselný, uhličitan alkalického kovu ako uhličitan sodný, uhličitan draselný alebo organické zásady ako trietylamín, tributylamín, diizopropyletylamín, N-metylmorfolín. Ďalej reakcia prebieha v prítomnosti uvedenej zásady, pokiaľ substituenty R¹ alebo R² obsahujú karboxylové funkcie.

Reakčná teplota závisí od použitých východiskových látok. Obvykle je v rozsahu od izbovej teploty do 150 °C, výhodne od 25 do 100 °C.

Pri postupe a majú obidve východiskové látky III a IV asymetrické uhlíkové atómy. Reakcia prebieha pri zachovaní konfigurácie (získaním požadovanej látky I s rovnakou konfiguráciou).

Zlúčenina všeobecného vzorca (I) s R,R konfiguráciou sa teda získa z východiskovej látky III s konfiguráciou R a látky TIV tiež s konfiguráciou R.

Opticky aktívnu zlúčeninu všeobecného vzorca (III) je možné pripraviť podľa publikácie Bloom, J. O. a spol., J. Med. Chem, 35, 3081 - 3084 (1992) alebo Eliel, E. L. a Delmonte, D. W, J. Org. Chem., 21,596 - 597 (1956). Opticky aktívnu zlúčeninu všeobecného vzorca (IV) je možné pripraviť podľa publikácie Repke, D. B. a Ferguson, W. J, J. Heterocycl, Chem, 12,775 - 778 (1976).

Východiskovú zlúčeninu všeobecného vzorca (IV) je možné pripraviť podľa publikácie J. Org. Chem, 25, 1548 - 1558 (1960).

Okrem východiskovej zlúčeniny (IV), je možné pripraviť aj zlúčeninu (IV), kde je v polohe 3 indolového jadra zvyšok

HjN —CH —CHj —

kde R⁵ je definovaný (J. Org. Chem, 51, 4294 - 4295 (1986)).

Postup b

Zlúčenina všeobecného vzorca (I) v súlade s predkladaným vynálezom, kde je substituent R¹ viac ohraničený substituent R¹, t. j. zlúčenina všeobecného vzorca (I-b):

CH- CHj- NH- CH- CH₃xr—

OH R®

RJ (I-b), kde R¹ je nižší alkyl nesubstituovaný alebo substituovaný hydroxy skupinou, fenylsulfonylamino skupinou, nižšou alkylsulfonylamino skupinou, nižšou mono- alebo dialkylsulfonylamino skupinou alebo skupinou a', b, c, alebo ď, alebo v spojení s R² tvorí metyléndioxy skupinu nesubstituovanú, alebo nesubstituovanú karboxy skupinou, alebo nižšou alkokykarbonylovou skupinou;

a' je skupina -X'-Ra (kde X' je O alebo S, Raje definovaný s tým, že pokiaľ X' je síra, potom je Ra nižší alkyl;

SK 281865 Β6 b skupina

Rb I -[OíCH^CH]—Rbb ,

(kde Rb, Rbb m a n sú definované;

c skupina -O-(CH₂)_P-Rc (kde Rc a p sú definované);

ď skupina -Y'-(CH₂)_q-Rd (kde Y' je S a Rd a q sú definované);

sa pripraví reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca (V):

kde R⁴ je definovaný, so zlúčeninou všeobecného vzorca (VI):

(VI), kde R¹, R², R³ a R⁵ sú definované, pri redukčných podmienkach.

„Reakcia pri redukčných podmienkach“ znamená v tomto postupe reakciu zlúčeniny (V) so zlúčeninou (VI) v prítomnosti redukčného činidla alebo katalyzátora, ktorý redukuje len imínovú časť vzniknutú reakciou a nie karbonylovú skupinu.

Redukčným činidlom je kyanobórohydrid sodný a katalyzátorom paládium, oxid platičitý.

Reakcia sa uskutočňuje v prítomnosti redukčného činidla alebo katalyzátora vo vhodnom rozpúšťadle. Rozpúšťadlom sú alkoholy, výhodne etanol a metanol. Reakcia sa vykonáva pri teplote 20 až 80 °C pri použití redukčného činidla a pri teplote 10 až 250 °C pri použití katalyzátora.

Postup e

Zlúčeninu všeobecného vzorca (I), kde substituenty R¹a R² neobsahujú karbonylovú skupinu alebo kyanoskupinu, t. j. zlúčeninu všeobecného vzorca (Ic):

kde R¹ je nižší alkyl nesubstituovaný alebo substituovaný hydroxy skupinou, fenylsulfonylamino skupinou, nižšou alkylsulfonylamino skupinou, nižšou mono- alebo dialkylsulfonylamino skupinou alebo skupinou a až c, alebo R¹v spojení s R² tvorí metyléndioxyskupinu, a je skupina -X-Ra (kde X a Ra sú definované);

c skupina -O(CH₂)_p-Rc (kde Rc je hydroxy skupina, fenyl alebo skupina (kde R^Aatóm vodíka alebo nižší alkyl) a p sú definované); R² je atóm vodíka, halogénu, nižší alkyl nesubstituovaný alebo substituovaný hydroxy skupinou, hydroxy skupina, nižšia alkoxy skupina alebo skupina c, alebo v spojení s R¹ tvorí metyléndioxy skupinu a R³, R⁴ a R⁵ sú definované;

je možné pripraviť redukciou zlúčeniny všeobecného vzorca (VII):

kde R¹ , R² , R³, R⁴ a R⁵ sú definované.

Reakcia sa uskutočňuje v prítomnosti redukčného činidla (diboran, LAH, alebo jeho alkoxy komplex alebo sof prechodného kovu, nátriumborohydrid s chloridom hlinitým, fluoridom boritým, oxichloridom fosforečným, kyselinou octovou alebo trifluóroctovou. Ako rozpúšťadlo sa používa dietyléter, tetrahydrofurán, dimetoxyetán, dioxán, diglym. Reakčná teplota je rôzna, závisí od použitého redukčného činidla, aleje zvyčajne od 0 do 160 °C.

Uvedený postup zachováva stereo konfiguráciu asymetrického uhlíka východiskovej zlúčeniny (VII).

Východisková zlúčenina (VII) je nová látka, ktorá sa pripraví reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca (IX):

R^

OH (ix), kde R⁴ je definovaný so zlúčeninou všeobecného vzorca (X):

«), kde R¹ , R ² , R³ a R⁵ sú definované alebo ich soli.

Reakcia zlúčeniny (IX) so zlúčeninou (X) sa vykonáva v prítomnosti kondenzačného činidla (N,N'-dicyklohexylkarbodiimid, l-etyl-3-(3-dimetyl aminopropyl)karbidiimid hydrochlorid, Ν,Ν'-karbonyldiimidazol, N,N'-karbonyldisukcinimid, l-etoxykarbonyl-2-etoxy-l, 2-dihydrochinolín, difenylfosforylazid, propánfosfonanhydrid.

Keď sa ako kondenzacné činidlo použije N,N'-dicyklohexylkarodiimid alebo l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl) karbodiimid hydrochlorid, reakcia sa vykoná pridaním N-hydroxysukcinimidu alebo 1-hydroxybenzotriazolu.

Reakcia sa vykonáva vo vhodnom rozpúšťadle, ktoré je rovnaké ako v postupe a. Zlúčeninu (XI) je možné použiť aj vo forme kyslej adičnej soli uvedenej v postupe a. V tom prípade sa reakcia vykonáva v prítomnosti organickej zásady ako je trietylamín, tributylamín, diizopropyletylamín, N

SK 281865 Β6

-metylmorfolín. Reakcia sa vykonáva pri teplote 20 až 50 °C.

V zlúčenine (VII) je zachovaná absolútna konfigurácia zlúčeniny (IX) i (X).

Zlúčenina (IX) sa získa v opticky čistej forme podľa publikácie Collet, A. a Jacques. J., Bull., Soc. Chim. France, 3350-3334(1973).

Zlúčenina (X) sa získa v opticky čistej forme podľa japonského patentu First Publication (Kokai) No. 22559/1988.

Produkty získané uvedenými spôsobmi sa čistia bežnými metódami, ako sú chromatografia, kryštalizácia, zrážanie.

Uvedenými postupmi je možné získať produkty vo forme kyslej adičnej soli alebo voľnej zásady (podľa použitých reakčných podmienok). Tieto produkty je možné previesť bežnými postupmi na kyslé adičné soli alebo voľné zásady.

Vo všetkých uvedených postupoch, pokiaľ je R¹ alebo R² aminoskupina alebo nižšia alkoxyskupina substituovaná skupinou všeobecného vzorca

O II — P-OH I OH >

alebo keď substituenty R¹ alebo R² obsahujú karboxylové alebo hydroxylové funkcie, je možné požadované zlúčeniny získať reakciou východiskových látok, kde sú uvedené substituenty chránené bežnými ochrannými skupinami, ktoré sa potom z produktu odstránia.

Pokiaľ sa zlúčeniny v súlade s predkladaným vynálezom získavajú uvedenými postupmi alebo z racemických východiskových látok, alebo vo forme zmesi diastereomérov, je možné jednotlivé stereoizoméry oddeliť bežnými metódami (napríklad pozri Európsky patent č. 455006).

Najvýhodnejšie uskutočnenia vynálezu

Farmakologické experimenty

Na zistenie aktivity reprezentatívnych zlúčenín v súlade s predkladaným vynálezom boli uskutočnené nasledujúce farmakologické experimenty:

1. aktivita voči ľudským β₃ a β₂ adrenergickým receptorom,

2. aktivita pri znižovaní hladiny cukru v krvi,

3. aktivita pri znižovaní obezity.

Nasleduje spôsob získania buniek s vysokou expresiou ľudských β₃ a β₂ adrenergických receptorov a potom príklady uskutočnených pokusov.

Spôsob získania buniek s vysokou expresiou ľudských β₃^Γεηβ^ίό$ο1ι receptorov

1. Konštrukcia expresného vektora

Expresný vektor živočíšnych buniek pKCRH2 (Mishina a spol., Náture 307: 604 - 608 (1984) bol zmiešaný s reštrukčnou endonukleázou Sali a bol stlmený pomocou DNK Blunting Kitu (Takara Shuzo Co., Ltd.). Zvlášť bol zmiešaný iný expresný vektor živočíšnych pSV2-neo (Southem and Berg, J. Mol. Appl. Genet. 1: 327 - 341 (1982)) s reštrikčnými endonukleázami Accl a Aatn. a stlmený pomocou DNK Blunting Kitu. Tieto DNK boli spojené pomocou DNK spojovacieho zariadenia (Takara Shuzo

Co., Ltd.) a boli získaním transformovaných buniek vložené bežným spôsobom do E. coli HB 101. Z transformovaných buniek boli pripravené plazmidy DNK a boli zmiešané s reštrikčnou endonukleázou Pstl. Na poskytnutie plazmidu pKCNO bol vybraný kloň tvorený 3,8 kbp, 2,2 kbp, 1,4 kbp a 0,9 kbp fragmentárni. Tento plazmid bol zmiešaný s reštrikčnou endonukleázou HindlII a spojený pomocou DNK spojovacieho zariadenia s nasledujúcim umelým adaptérom 1 reprezentovaným identifikačnou sekvenciou číslo 1.

5-AGCTCCTGCAOGCGCGCCOATATCTCOAOCGGCCGCGGTACCA-3' 3-GGACGTCCGCGCGGCTATAGAGCTCGCCGGCGCCATGGTTCGA-5'

Na transformáciu E. coli HB101 bola použitá reakčná zmes. Z vybraných transformovaných buniek boli pripravené plazmidové DNK, ktoré boli zmiešané s reštrikčnými endonukleázami Dral a HindlII a na poskytnutie plazmidu pKCNl boli vybrané klony, ktoré poskytli 430 bp fragment.

2. Konštrukcia expresného plazmidu

Z ľudských neuroblastomových buniek SK-N-MC (ATCC HTB 10) bola extrahovaná všetka RNK a použitím SuperScript Systému (Life Tech nologies) bola syntetizovaná cDNK, ktorá bola potom pomocou nasledujúcich oligonukleotidov 1 a 2 reprezentovaných identifikačnými sekvenciami primérov 2 a 3 rozvedená pomocou GeneAMp PCR Kitu (PerkinElmer). Do Teakčnej zmesi bolo pri PCR reakcii pridané 10 % dimetylsulfoxidu.

-CCACCTGCAGGTGAMGGGAGACCCC-3' oligonukleotid 1

-TTCTCGAGCCGGGGAATCCCATGGGAC-3' oligonukleotid 2

Po natrávení reakčnej zmesi reštrikčnými endonukleázami Sse83871 a Stul bol oddelený elektroforézou fragment 1,3 kbp, ktorý bol spojený s expresným vektorom pKCN 1, ktorý bol natrávený endonukleázami Sse83871 a EcoRV. Produkt bol konvenčným spôsobom zavedený do E. coli HB 101. Z vybraných transformovaných buniek bol pripravený DNK plazmid a bola získaná sekvencia nukleotidu fragmentu s 1.3 kbp získaného natrávením plazmidu DNK reštrikčnými endonukleázami Sse83871 a Xhol. Sekvencia bola rovnaká ako u. cDNK ľudských 3₃-adrenergických receptorov, ktorá publikoval Lelias a spol. (FEBS Lett. 324: 127 - 130 (1994)). Tento plazmid na expresiu ^-adrenergických receptorov bol označený ako pKREXIO.

3. Získanie bunkovej kultúry s vysokou expresiou

Kultúra vaječníkových buniek čínskeho škrečka CHO-K1 (ATCC CCL 61) bola pomocou fosforečnanu vápenatého transformovaná plazmidom pKREXIO s expresiou ľudských p₃-adrenergických receptorov. Transformované bunky boli vybrané 600 pg/ml G-418 (Life Technologies) do MEM-Dulbecco média (ICN Biomedicals) doplneného 10 % plodového hovädzieho séra a 11.5 pg/ml prolínu. Po odstránení média boli tieto bunky uvoľnené v kultúre 69 G-418 rezistentných klanov inkubáciou s fosforečnanom pufrovaným salínom obsahujúcim 0,5 mM etyléndiamíntetraacetátu (EDTA) pri 37 °C 10 minút. Bunky boli odstredené a

SK 281865 Β6 suspendované do 10 mM Tris-HCl pufru (pH 7,5) obsahujúceho 1 mM EDTA pri koncentrácii 5 x 10^s buniek/ml. Táto suspenzia (20 μΐ) a (-)3-( 125)jódokyano pindololu (1,5 nM) (Amersham) boli zmiešané v RPMI-1640 médiu (200 μΐ) (ICN Biomedicals) obsahujúcom 1 % hovädzieho sérového albumínu, 0,1 % NaN₃ a 20 mM HEPES pufra (pH 7,4). Zmes bola inkubovaná pri 4 °C dve hodiny. Reakčná zmes bola prefiltrovaná cez sklenený filter GF/C (Uhatman) navlhčený 0,3 % polyetylénimínom a premytá pomocou BIO-DOT aparátu (Bio-Rad Laboratories). Rádioaktivita na filtri bola zistená gama-lúčovým meračom. Kloň označený CHO/pKREX 10-36, ktorý mal najväčšiu rádioaktivitu, bol použitý ako expresná bunková kultúra ľudských Pj-adrenergických receptorov.

Získanie bunkovej kultúry s vysokou expresiou p₃-adrenergických receptorov

Použitím SuperScript Systému (Life Technologies) bola pomocou Poly(A)+RNK odvodenej z ľudského mozgu (Clontech: trade number, CL 6516-1) syntetizovaná cDNK. Táto cDNK bola rozvedená GeneAmp PCR Kitom (PerkinElmer) použitím nasledujúcich oligonukleotidov 3 a 4 reprezentovaných identifikačnými sekvenciami primérov číslo 4 a 5.

'-ACACCTGCAGGTGAGGCTTCCAGGCGTCC-3' oligonukleotid 3

5'-TOTAAGCTTCTOCMACAOCAGTOAOTC-3' oligonukleotid 4

Reakčná zmes bola natrávená reštrikčnými endodukleázami Sse83871 a HindlII a elektroforézou bol izolovaný fragment 1.4 kbp. Tento fragment bol spojený s expresným vektorom PKCN1 natráveným reštrikčnými endonukleázami Sse83871 a HindlII a zavedený do E. coli HB 101. Z vybraných transformovaných buniek bola pripravená plazmidová DNK. Z transformovaných buniek bola pripravená plazmidová DNK a sekvencia nukleotidu fragmentu 1,4 kbp bola stanovená po natrávení tohto plazmidu DNK reštrikčnými endonukleázami Sse83871 a HindlII. Táto sekvencia bola rovnaká ako pri cDNK ľudských p₂-adrenergických receptoroch, ktorú publikoval Kobilka B. K. a spol. (Proc. Natl. Acad. Sci U.S.A. 84: 46 - 50 (1987)). Tento plazmid na vysokú expresiu ľudských p₂-adrenergických receptorov bol označený ako pKREX21 a bol rovnakým spôsobom vložený do CHO-K1 ako pri získavaní bunkovej kultúry na vysokú expresiu ľudských p₃-adrenergických receptorov.

Klan označený CHO/pKREX21-8, ktorý mal najväčšiu rádioaktivitu bol použitý ako expresná bunková kultúra ľudských p2-adrenergických receptorov.

Pokus 1

Stimulujúca aktivita proti ľudským β-adrenergickým receptorom.

Bunková kultúra CHO/pKREX 10-36 s vysokou expresiou ľudských β₃^Γ6η6^ϊο1ςΜι receptorov bola kultivovaná tri dni s MEM-Dulbecco médiom doplneným 10 % plodového hovädzieho séra, 11.5 pg/ml prolinu a 200 pg/ml G-418. Bunky boli uvoľnené inkubáciou s fosforečnanom pufrovaným salínom obsahujúcim 0,5 mM etyléndiamintetraacetátu (EDTA) pri 37 °C desať minút. Potom bolo odstránené médium. Bunky CHO/pKREX 10-36 boli odstredené a suspendované do Hanksovho pufra (ICN Biomedicals) obsahujúceho 1 mM L-askorbovej kyseliny 1 mM 3-izobutyl-l-metylxantínu pri koncentrácii 2 x 10⁶buniek/ml. Táto suspenzia (100 μΐ) a testovaná zlúčenina boli zmiešané s rovnakým pufrom (500 μί) a inkubované pri 37 °C tridsať minút. Reakcia bola ukončená päťminútovým povarením. Po odstredení reakčnej zmesi bolo množstvo cAMP v roztoku stanovené pomocou cAMP EIA Systému (Amersham).

Rovnako bolo zmerané aj množstvo cAMP na vysokú expresiu ľudských p₂-adrenergických receptorov použitím CHO/PKREX21-8 namiesto CHO/pKREX 10-36 na vysokú expresiu ľudských β^ίΙτβηε^ίΗφΛ receptorov.

Množstvo cAMP pri pridaní 10'⁵ M(-)-izoproterenolu do reakčnej zmesi bolo považované za 100 % množstvo. Množstvo cAMP bez pridania (-)izoproterenolu bolo považované za 0 % množstvo. Relatívna maximálna odpoveď na každú zlúčeninu v súlade s predkladaným vynálezom je potom vyjadrená ako vnútorná aktivita (LA.(%)).

EC₅₀ hodnota, čo je koncentrácia testovanej zlúčeniny potrebná na dosiahnutie 50 % cAMP bola vypočítaná regresiou, metódou najmenších štvorcov.

Výsledky sú uvedené v tabuľke 5. Ako porovnávacie látky boli použité uvedené zlúčeniny A, B, C.

Tabuľka 5

	4TihuL4c.^wxjrf AienifiTA σθ€Ί
Test.	ECjo	(nM)	Ροκ·<	LA.	(%)
zlúč.	Pj-rtccptor	P2-receptor	IMb	^-rccqxor	P^recqMor
1*1	1,7	25	14,7	113	33
1-A	0,67	13	19,4	114	36
1-A-b	0,36	3,6	10,0	89	35
2	2,0	55	27,5	117	31
2-A	096	15	15,6	96	23
3	22	no	7,7	102	22
4	16	43	2,7	116	36
5	12	33	2,8	95	41
6	35	88		91	19
7	25	33	•P	76	15
8	31	-•2	-	92	5
12	4,0	31	7,8	98	13
13	31	_*2	-	101	6
14	0,43	6.0	14,0	95	29
zlúS.^A	910	410	0.5	92	16
ζΐύδίθ	180	_*2	-	100	8
zlúč.C	540	_*2	-	105	5
IP»3	v	5.«	1,0	100	100

* 1 zlúčenina z príkladu 1 *2 nestanoviteľné - nízka aktivita *3 (-)-izoproteienol

Zlúčenina, ktorá má nízku hodnotu EC50 a vysokú hodnotu I.A. sa považuje za zlúčeninu silne stimulujúcu aktivitu voči ľudským β₃ alebo p₂-adrcnergickým receptorom. Preto tabuľka 5 ukazuje, že zlúčeniny v súlade s predkladaným vynálezom, hlavne zlúčeniny z príkladu 1, 1-A, A-A-b, 2, 2-A a 14 majú veľkú stimulujúcu aktivitu proti β₃-adrenergickým receptorom. Okrem toho je táto aktivita väčšia proti ľudským p₃-adrenergickým receptorom ako proti β₂-ΓεοβρΐθΓοηι. Hlavne výbornú selektivitu proti ľudským β₃^τεηβ^ίό^ιη receptorom majú zlúčeniny z príkladu 1,1-A, 1-A-b, 2, 2-A a 14.

V porovnaní so zlúčeninami v súlade s predkladaným vynálezom majú uvedené porovnávacie zlúčeniny A, B a C

SK 281865 Β6 slabšiu stimulujúcu aktivitu proti 0₃-adrenergickým receptorom.

Okrem toho, pri sledovaní zvýšenia aktivity spontánnej koncentrácie v izolovanom pravom átriu morčiat vykázali zlúčeniny v súlade s predkladaným vynálezom stimulujúcu aktivitu proti ľudským 3₃-adrenergickým receptorom.

Uvedené výsledky teda dokazujú, že zlúčeniny v súlade s predkladaným vynálezom je možné použiť ako činidlá stimulujúce aktivitu proti P₃-adrenergickým receptorom s veľkou adrenoceptorovou selektivitou.

Pokus 2

Hypoglykemická aktivita v krvi myší

Testovaná zlúčenina suspendovaná v 0,5 % roztoku tragantu bola orálne podávaná ddY myším samcom (hmotnosť 20 - 30 g), ktorí nedostávali potravu. Pred a tri hodiny po podaní testovanej zlúčeniny bol vykonaný odber krvi. Hladina glukózy v krvi bola stanovená metódou podľa Kunsta A., a spol., (hexokináza/G6PDH) (Bergmeyer, H. U. (eds.), Methods in Enzymology, diel VI, 3. vydanie, Verlag Chémie GmbH, Weinheim-Deerfield Beach, Florida-Basel, 163 - 172 (1984)). Redukčná aktivita testovanej zlúčeniny proti krvnej glukóze bola vyjadrená hodnotou ED25, čo je koncentrácia testovanej zlúčeniny potrebná na zníženie hladiny krvnej glukózy o 25 %. Ako porovnávacia zlúčenina bol použitý Gliclazid (komerčne dostupný liek pri liečbe diabetes mellitus).

Výsledky sú uvedené v tabuľke 6.

Tabuľka 6

Testovaná zlúčenina	Redukčná aktivita na krvnú elukózu <ED25, M«/ks PC>
1* 1-A 2 3 5 6 7 B 10	0,05 0,003 0,03 3.3 4,5 4.5 1.5 1.4 O.l
Gliclatid	0,07

* zlúčenina z príkladu 1 (ďalej rovnako)

Pokus 3

Aktivita proti obezite u diabetických obéznych myší

Testovaná zlúčenina suspendovaná v 0,5 % roztoku tragantu bola orálne podávaná diabetickým obéznym myšiam (KK-Ay/Ta, Jcl. samičky, 50 - 60 g, Clea Japan Inc.). Podávané boli 3 mg/kg/deň počas troch týždňov. Potom bolo odobrané tukové tkanivo za podbrušnicou a tukové tkanivo medzi lopatkami. Ich hmotnosť bola stanovená ako hmotnosť bieleho tukového tkaniva a hnedého tukového tkaniva. Výsledky sú uvedené v tabuľke 7.

Tabuľka 7

Skupina	Haot.bieleho tuk.tkan.(«>	Hmôt,hnedého tuk.tkan.
porovnávacia	4,92±0,2Θ	0,40010.03
ilúč.a Príkl.l	2,35±O,12*	0,20910,04*

* veľmi odlišné od porovnávacích údajov s p < 0,01

Zlúčeniny v súlade s predkladaným vynálezom majú malú toxicitu. Napríklad, zlúčenina z príkladu 1-A bola pri pokusoch na myšiach na akútnu toxicitu úplne netoxická pri orálnom podávaní 300 mg/kg (hmotnosti). Preto, keď vezmeme do úvahy liečebne účinnú dávku, nie je nebezpečná pre živý organizmus. Zlúčeniny v súlade s predkladaným vynálezom majú veľkú stimulujúcu aktivitu proti P₃-adrenergickým receptorom a výbornú adrenoreceptorovú selektivitu a sú použiteľné na profylaxiu, pri liečení obezity a cukrovky cicavcov aj človeka. Okrem toho je možné zlúčeniny v súlade s predkladaným vynálezom použiť pri liečení príznakov zápalu čriev, akútnej alebo chronickej hnačky, bolestí brucha, nevoľnosti a dávenia súvisiaceho s vredmi tráviaceho ústrojenstva, akútnej alebo chronickej gastritíde, žlčníkovej dyskinzie a zápale žlčníka.

Zlúčeniny I v súlade s predkladaným vynálezom alebo ich farmaceutický vhodné soli je možné podávať ako činidlá s veľkou stimulujúcou aktivitou voči P₃-adrenergickým receptorom orálne, mimo tráviacej trubici alebo rektálne, výhodne orálne. Dávkovanie zlúčeniny v súlade s predkladaným vynálezom sa odlišuje podľa spôsobu podania, stavu a veku pacienta a účelu (profylaxia alebo liečba). Zvyčajne je to 0,01 - 20 mg/kg/deň, výhodne 0,05 -10 mg/kg/deň.

Zlúčeniny v súlade s predkladaným vynálezom sa podávajú zvyčajne vo forme farmaceutického prostriedku, ktorý sa pripraví zmiešaním zlúčeniny s farmaceutický vhodným nosičom alebo riedidlom. Farmaceutický vhodný nosič alebo riedidlo sú vo farmácii bežne používané látky, ktoré so zlúčeninou v súlade s predkladaným vynálezom nereagujú. Vhodnými príkladmi sú laktóza, glukóza, manitol, dextrín, škrob, biely cukor, hlinitokremičitan horečnatý, umelý kremičitan hlinitý, kryštalická celulóza sodná, hydroxypropyl škrob, karboxymetylcelulóza vápenatá, ionomeničová živica, metylcelulóza, želatína, arabská guma, hydroxypropyl celulóza, nižšia substituovaná hydroxypropyl celulóza, hydroxypropylmetyl celulóza, polyvinylpyrolidon, polyvinyl alkohol, ľahká bezvodá kyselina kremičitá, stearan horečnatý, mastenec, karboxyvinyl polymér, oxid titaničitý, sorbitan-ester mastnej kyseliny, laurylsulfát sodný, glycerín, glycerínový ester mastnej kyseliny, čistený lanolín, glyceroželatína, polysorbát, makrogél, rastlinný olej, vosk, neionogénna povrchovo aktívna látka, propylénglykol, voda.

Farmaceutické prostriedky sú napríklad tabletky, kapsuly, granuly, prášky, sirupy, suspenzie, čapíky, gélové prostriedky, injekcie. Tieto prostriedky sa pripravujú bežnými spôsobmi. Pri príprave kvapalných prostriedkov sa zlúčenina v súlade s predkladaným vynálezom pri podávaní rozpustí alebo suspenduje vo vode alebo v inom vhodnom rozpúšťadle. Tabletky a granuly je možné potiahnuť bežnými spôsobmi. Injekcie sa výhodne pripravujú rozpustením farmaceutický vhodnej kyslej adičnej soli zlúčeniny I v súlade s predkladaným vynálezom vo vode, prípadne v izotonickom roztoku a pridaním pufra alebo konzervačnej látky.

Tieto prostriedky obsahujú zlúčeninu v súlade s predkladaným vynálezom v množstve aspoň 0,01 % hmotnostného, výhodne 0,05 - 70 % hmotnostných. Môžu zároveň obsahovať aj iné farmaceutický účinné zlúčeniny.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Predkladaný vynález je ďalej ilustrovaný príkladmi prípravy, ktoré však nie sú obmedzením vynálezu.

SK 281865 Β6

Charakterizácia zlúčenín bola uskutočnená elementárnou analýzou, hmotnostným spektrom, IČ spektrom, NMR spektrom.

V opise sú na zjednodušenie použité nasledujúce skratky;

Me:	Metyl
Et:	Etyl
F:	Fenyl
E:	Etanol
M:	Metanol
H:	n-Hexan
DE:	Dietyléter
CF:	Chloroform
EA:	Etylacetát
DMF: s:	Dimetylformamid Singlet
d:	Dublet
dt:	Dublet tripletu
dd: t:	Dublet dubletu Triplet
m: q:	Multiplet Kvartet
MS:	Hmotnostné spektrum

Referenčný príklad 1

Príprava 3-(2-aminopropyl)-7-metoxyindolu

Uvedená zlúčenina bola pripravená nasledujúcim postupom podľa britskej patentovej prihlášky č. 974,893.

1. Dimetylformamid (DMF, 16 ml) bol ochladený v ľadovom kúpeli a po kvapkách bol pridaný oxichlorid fosforu (5 ml). Zmes bola miešaná 10 minút. Potom bol k zmesi po kvapkách pridaný roztok 7-metoxyindolu (6,5 g) v DMF (16 ml), pripravený z 3-metyl-2-nitroanizolu podľa Heterocycles, 16, 1119 - 1124 (1981). Zmes sa potom miešala 2 hodiny pri izbovej teplote. Do zmesi počas chladenia ľadom bol pridaný 30 % vodný roztok hydroxidu sodného (30 ml). Zmes sa potom zahrievala päť minút v teplom kúpeli s teplotou 80 °C, potom sa nechala vychladiť. Vzniknutá zrazenina bola oddelená filtráciou, premytá vodou a vysušená. Získal sa surový 7-metoxyindol-3-aldehydu (4,6 g).

2. A zmes octanu amónneho (3,6 g), acetanhydridu (1 ml) a kyseliny octovej sa miešala a zahrievala 20 minút na 50 °C. Potom bol pridaný produkt z časti 1, kyselina octová (19,2 ml) a nitroetán (16 ml). Zmes bola zahriata na 100 °C a bol pridaný octan sodný (2,25 g). Potom sa zmes zahrievala dve hodiny k varu a po kvapkách bol pridávaný acetanhydrid (3,2 ml). Po vychladení bola do zmesi pridaná voda a vzniknutá zrazenina bola oddelená filtráciou, premytá vodou a vysušená. Získal sa surový l-(7-metoxyindol-3-yl)-2-nitropropén (3,35 g).

3. Roztok nitropropénu (3,2 g) získaného podľa časti 2 v tetrahydrofuráne (60 ml), bol po kvapkách pridaný do suspenzie lítiumalumíniumhydridu (3,2 g) v dietyléteri (60 ml) počas chladenia ľadom. Potom bola zmes zahrievaná 5,5 hodiny k varu. Počas chladenia ľadom bol do zmesi pridaný nasýtený vodný roztok vínanu sodnodraselného a pevná látka bola oddelená filtráciou. Filtrát bol vysušený síranom horečnatým a rozpúšťadlo bolo odparené vo vákuu. Získala sa tým požadovaná surová zlúčenina (3,2 g) vo forme olejovitého produktu, ktorý sa použil ako východisková látka v príklade 1.

MS (M/z): 205 (MH⁺)

Referenčný príklad 2

Príprava 3 -(2-aminopropy l)-6-metoxykarbonylmetoxyindolu

1. 6-Hydroxyindol (2,9 g), chlóroctan metylnatý (2,7 g), uhličitan draselný (5,5 g) a jodid draselný (0,2 g) boli pridané do acetónu (100 ml). Zmes bola zahrievaná 8 hodín k varu. Reakčná zmes bola ochladená na izbovú teplotu a pevná látka bola oddelená filtráciou. Filtrát bol vysušený síranom horečnatým a rozpúšťadlo bolo odparené vo vákuu. Zvyšok bol čistený stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent, chloroform). Získal sa tým 6-metoxykarbonylmetoxyindol (2,83 g).

H-NMR spektrum (CDC1₃): 3,78 (3H, s, COOCH₃), 4,67 (2H, s, OCH₂), 6,49 (IH, m), 6,83 (IH, m), 6,88 (IH, s), 7,11 (IH, m), 7,53 (IH, m), 8,2 (IH, s, NH)

2. Do roztoku uvedeného produktu (2,77 g) v benzéne (50 ml) bol pridaný roztok 2-nitrapropénu (3,56 g) v benzéne (17,8 ml), zmes bola zahrievaná 15 hodín k varu. Zo zmesi bolo vákuom odstránené rozpúšťadlo. Zvyšok bol čistený stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; chloroform). Získal sa tým 3-(2-nitropropyl)-6-metoxykarbonylmetoxyindol (2,15 g) vo forme olejovitého produktu.

H-NMR spektrum (CDC1₃): 1,56 (3H, d, J = 7 Hz, CHCB-3), 3,10 - 3,48 (2H, m, CH₂CHNO₂), 3,77 (3H, s, COOCH₃), 4,64 (2H, s, OCH₂), 4,92 (IH, m, CHNO₂), 6,76 - 7,05 (3H, m), 7,48 (IH, m), 8,08 (IH, s, NH)

Uvedený produkt (2,1 g) bol rozpustený v etanole (50 ml) a bol pridaný Raneyov nikel. Zmes bola redukovaná pri 50 “C za atmosférického tlaku. Keď bolo spotrebované teoretické množstvo vodíka, Raney-nikel sa odstránil filtráciou. Filtrát bol vo vákuu zbavený rozpúšťadla a získal sa surový 3-(2-aminopropyl) -6-metoxy karbonylmetoxyindol (1,98 g) vo forme olejovitého produktu, ktorý bol použitý ako východisková látka v príklade 7.

MS (M/z): 263 (ΜΗ*)

Referenčné príklady 3-13

Rovnakým spôsobom ako v referenčnom príklade 1 alebo 2 boli získané východiskové látky uvedené v nasledujúcej tabuľke 8.

Tabuľka 8

Ref.pribi.	R.I	pi	MS (m/z) (MH+)	Postup
3	7-OCaHe	H	219
4	é-OCHs	H	205	1
5	7-OCHeFh	H	281	L
á	6-CHs	H	189	l
7	7-CH3	H	109	1
S	6-COOĽH3	H	233	2*2
9	4-OCHa	H	205	1
10	4-CH3	H	189	1
11	íj-SDaNÍCHs )₂	H	281	2
12	ó-OCHa	7-OCHa	219	1
13	7-OCH2COOCH3	H	263	2

*' pripravená rovnakým spôsobom ako v referenčnom príklade 1 *² pripravená rovnakým spôsobom ako v referenčnom príklade 2

Príklad 1

Príprava 2-(3-(7-metoxyindol-3-yl)-2-propylamino)-l-(3-chlórfenyl)-etanolu

Postup a

Do metanolu (20 ml) bol pridaný (3-chlórfenyl)oxiran (0,77 g) a 3-(2-aminopropyl)-7-metoxyindol (2,16 g). Zmes bola miešaná pri izbovej teplote 64 hodín, potom bolo vo vákuu odstránené rozpúšťadlo a zvyšok bol prečistený stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; chloroform : : metanol = 12 : 1). Frakcie, ktoré obsahovali požadovaný produkt boli vo vákuu zbavené rozpúšťadla, čím sa získal olejovitý produkt (1,06 g).

H-NMR spektrum (CDC1₃): 1,12 (3H, d, J = 7 Hz, CHCHj), 2,61 (1H, m), 2,78 - 2,86 (2H, m), 2,88 - 3,12 (2H, m), 3,95 (3H, s, OCH₃), 456 (1H, m, CH-OH), 6,65 (1 H, m), 6,93 - 7,09 (2H, m), 7,11 - 7,29 (4H, m), 7,33 (1H, m), 8,25 (1H, s, indol-NH)

Uvedený olejovitý produkt (0,3 g) bol zmiešaný s kyselinou filmárovou za vzniku fúmarátu požadovanej zlúčeniny (0,15 g) (fúmarát zlúčeniny z príkladu 1).

Bod topenia: 143 - 147 °C (rekryštalizované z etanol/dietyléteru)

Postup b

Do metanolu (10 ml) bol pridaný 7-metoxoindol-3-acetón (0,4 g) pripravený metódou podľa britského patentu č. 974,893, hydrochlorid 2-(3-chlórfenyl)etanolaminu (0,45 g) a pri chladení ľadom kyanobórhydrid sodný (0,2 g). Zmes bola miešaná 5 minút pri teplote 0 °C a potom 18 hodín pri izbovej teplote. Potom bolo zo zmesi vo vákuu odstránené rozpúšťadlo a ku zvyšku bol pridaný nasýtený vodný roztok hydrouhličitanu sodného. Zmes bola extrahovaná etylacetátom a extrakt sa postupne premyl vodou a nasýteným vodným chloridom sodným, potom sa vysušil síranom horečnatým. Z extraktu bolo vo vákuu odstránené rozpúšťadlo a zvyšok bol prečistený stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; chloroform: metanol = 15 :1). Získalo sa (0,58 g) požadovanej zlúčeniny vo forme olejovitého produktu.

Postup c

1. Do DMF (80 ml) obsahujúceho 3-(2-aminopropyl)-7-metoxyindol (12,24 g) a 3-chlórmandlovú kyselinu (7,46 g) bol pridaný benzotiazol-N-oxytris(dimetylamino)fosfónium hexafluór fosfát (17,68 g) a po kvapkách trietylamín (9,8 ml). Zmes bola miešaná pri izbovej teplote päť hodín a potom bol pridaný etylacetát. Potom sa zmes postupne premyla vodou, 10 % vodnou kyselinou citrónovou, vodou, nasýteným vodným hydrouhličitanom sodným, vodou a nasýteným vodným chloridom sodným. Po vysušení bezvodým síranom horečnatým bolo zo zmesi vo vákuu odstránené rozpúšťadlo a zvyšok bol prečistený stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; etylacetát: n-hexán = 1 : : 1 —► 2 : 1). Získal sa N-(3-(7-metoxyindol-3-yl)-2-propyl)-3-chlórmandloamid (14,02 g) vo forme olejovitého produktu.

H-NMR spektrum (CDC1₃): 1,12 - 1,18 (3H, d, J = 7 Hz, CHCH₃), 2,82 - 412,95 (2H, m, CH₂CH), 3,97 (3H, s, OCH₃), 4,33 (1H, m CHCH₃), 4,85 (1H, s, CH-OH), 6,65 (1H, m), 6,86 - 7,37 (7H, m), 8,26 (1H, d, J = 13 Hz, CONH)

2. Roztok uvedeného amidu (13,4 g) v tetrahydrofuráne (144 ml) bol po kvapkách pridaný do 1 M roztoku komplexu bóran-tetratrahydrofurán (144 ml) pri teplote 20 °C. Zmes bola štyri hodiny zahrievaná k varu. Do zmesi bol za chladenia ľadom pridaný po kvapkách metanol (150 ml). Zmes bola opäť zahrievaná 1 hodinu k varu, aby sa rozložil prebytočný bóran, potom bolo zo zmesi vo vákuu odstránené rozpúšťadlo a k zvyšku bol pridaný chloroform. Zmes bola premytá postupne nasýteným vodným hydrouhličitanom sodným a nasýteným vodným chloridom sodným. Po vysušení bezvodým síranom horečnatým bolo zo zmesi vo vákuu odstránené rozpúšťadlo a zvyšok bol prečistený stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; chloroform : metanol = 20 : 1 -> 10 : 1). Získala sa požadovaná zlúčenina (7,35 g) vo forme olejovitého produktu)

Príklad 1-A

Príprava 2-(3-(7-metoxyindol-3-yl)-2-propylamino)-( 1R)-1 -(3-chlórfenyletanolu)

Rovnakým spôsobom ako v príklade 1, postupe a, ale s použitím (R)-(3-chlórfenyl)oxiranu (od firmy SEPRACO, Ltd; optická čistota: 99,2 % e.e.) namiesto (3-chlórfenyl)oxiranu bola získaná požadovaná zlúčenina vo forme olejovitého produktu.

MS(M/z): 359 (MH⁺)

Príklad 1-A-a a 1-A-b

Príprava 2-((2R alebo S)-3-(7-mctoxyindol-3-yl)-2-propylamino)-(lR)-l-(3-chlórfenyl)etanolu a 2-((2S alebo 2R)-3-(7-metoxyindol-3-yl)-2-propylamino)-(lR)-1 -(3-chlórfenyl)etanolu

2-(3-(7-Metoxyindol-3-yl)-2-propylamino)-(lR)-l-(3-chlórfenyl)etanol (3,0 g) získaný v príklade 1-A, ktorý je zmesou dvoch diastereomérov bol delený stĺpcovou chromatorafiou. Získalo sa (0,82 g) zlúčeniny (1-A-a) pri elúcii menej polárnym rozpúšťadlom a (1,12 g) zlúčeniny (1-A-b) pri elúcii viac polárnym rozpúšťadlom.

Zlúčenina (1-A-a)

Retenčný čas pri HPCL: 20,3 min. (optická čistota: > 99 % d.e.)

Separačné podmienky HPCL:

L kolóna; CHIRALPAK AD (4.6 mm priemer x 250 mm, Daicel Chemical Industries) eluent; n-hexán s etanol: dietylamín = 85 :15 : 0,1

3. prietok; 0,4 ml/min.

4. teplota; 40 °C

5. vlnová dĺžka detektoru; 254 nm

Bod topenia: 129 - 130 °C (rekryštalizované z etylacetát/n-hexán)

H-NMR spektrum (CDC1₃): 1,12 (3H, d, J = 7 Hz, CHCHj), 2,57 (1H, dd, J = 12,7 Hz), 2,81 (2H, d, J = 7 Hz, CH₂CH), 2,91 - 3,09 (2H, m), 3,95 (3H, s, OCH₃), 4,59 (1H, dd, J = 8,4 Hz, CHOH), 6,64 (1H, d, J = 8Hz) 6,95

SK 281865 Β6 (1H, d, J = 2 Hz), 7,03 (1H, t, J = 8 Hz), 7,10 - 7,24 (4H, m), 7,32 (1H, m), 8,25 (1H, s, indol-NH)

Zlúčenina (1-A-b)

Retenčný čas pri HPCL: 2,5 min. (optická čistota: > 99 % d.e.) Separačné podmienky HPCL: rovnaké ako pre zlúčeninu (1-A-a) Bod topenia: 86 - 87 °C (rekryštalizované z etylacetát/n-hexán)

H-NMR spektrum (CDClj): 1,12 (3H, d, J = 7 Hz, CHCHj), 2,62 (1H, dd, J = 12,9 Hz), 2,82 (2H, d, J = 7 Hz, CH₂CH), 2,87 (1H, dd, J = 12,4 Hz), 3,05 (1H, m, CHCHj), 3,96 (3H, s, OCHj), 4,49 (1H, dd, J = 4 Hz, CHOH), 6,65 (1H, d, J = 8 Hz), 6,99 (1H, d, J = 2 Hz) 7,04 (1H, t, J = 8 Hz), 7,12 - 7,25 (4H, m), 7,33 (1H, m), 8,26 (1H, s, indol-NH)

Príklad 2

Príprava 2-(3-(7-etoxyindol-3-yl)-2-propylamino)-l-(3-chlórfenyl) etanolu (3-Chlórfenyl)oxirán (0,92 g) a 3-(2-aminopropyl)-7-etoxyindol (2,18 g) reagovali spolu rovnakým spôsobom ako v príklade 1, v postupe a, získala sa požadovaná zlúčenina (1,16 g) vo forme olejovitého produktu.

H-NMR spektrum (CDClj): 1,12 (3H, d, J = 6 Hz, CHCHj), 1,48 (3H, t, J = 7 Hz, CH₂CH₃), 2,4 (2H, br, NH, OH), 2,60 (1H, d, t, J = 12,8 Hz), 2,77 - 2,96 (3H, m), 3,04 (1H, m), 4,20 (2H, q, J = 7 Hz, CH₂CH₃), 4,55 (1H, dd, J = 9, 4 Hz, CHOH), 6,63 (1H, d, J = 7 Hz), 6,91 - 7,06 (2H, m), 7,10 - 7,25 (4H, m), 7,32 (1H, m), 8,27 (1H, s, indol-NH)

Príklad 2-A

Príprava 2-(3 -(7-etoxyindol-3 -yl)-2-propylamino)-( 1 R)-1 -(3 -chlórfeny l)etanolu (R)-(3-Chlórfenyl)oxirán a 3-(2-aminopropyl)-7-etoxyindol získané podľa uvedeného referenčného príkladu 3, reagovali rovnakým spôsobom ako v príklade 1-A. Získala sa požadovaná zlúčenina vo forme olejovitého produktu. MS (M/z): 373 (Mtf)

Príklady 3-12

Použitím odpovedajúcej indolovej zlúčeniny získanej v referenčnom príklade 2 a 4-12 namiesto 3-(2-aminopropyl)-7-metoxyindolu v príklade 1, boli získané zlúčeniny uvedené v tabuľke 9 rovnakým spôsobom ako v príklade 1, postupe a.

Tabuľka 9

Pr.	R*	R¹	kyslá diCná soľ	b.t. <oc>	rozpili, pre rekry*.	M3(m/z) (MH+)
3	A-OCHa	H		Olej		359
4	7-OCHaPH	H		□ lej		435
S	6-CH3	H	-	103-107	CF7H	343
6	7-CHs	H	-	97-104	DE/H	343
7	6-OCHa-COOCH»	H	3/4 HC1. 1/2 HaD	55-65	CF/DE	417
8	6-CDOCH»	H	-	118-123	EA/H	387
9	4-OCHj	H		□lej		359
10	4-CH»	H	-	134-139	DE/H	343
11	6-80aN-(CH> )a	H	3/4 HCi. 1/2 HaO	109-114	E/DE	436
12	6-OCHy	7-OCHi	1/2 Fuma-	203-207	E/DE	3Θ9

Príklad 13

Príprava sodnej soli 2-(3-(6-karboxymetaxyindol-3-yl)-2-propylamino)-1 -(3 -chlórfeny l)etanolu

Zlúčenina z príkladu 7 (0,42 g) a hydroxid sodný (0,3 g) boli pridané do vodného roztoku metanolu (metanol/voda = 2 : 1,9 ml) a zmes bola zahrievaná k varu štyri hodiny. Potom sa nechala stáť dve hodiny pri 0 °C. Zrazenina bola oddelená filtráciou. Získala sa požadovaná zlúčenina (0,24 g) ako 1/2 hydrátu.

Bod topenia: 236 - 242 °C

Príklad 14

Príprava 2-(3-(7-metoxykarbonylmetoxyindol-3-yl)-2-propy lamino)-( 1 R)-1 -(3 -chlórfenyl)etanolu (R)-(3-Chlórfenyl)oxirán a 3-(2-aminopropyl)-7-metoxykarbonylmetoxyindol získaný v referenčnom príklade 13 reagovali spolu rovnakým spôsobom ako v príklade 1-A. Získala sa požadovaná zlúčenina vo forme olejovitého produktu.

MS (M/z): 417 (MH¹)

H-NMR spektrum (CDClj): 1,13 (3H, d, J = 6 Hz, CHCHj), 2,62 (1H, dt, J = 12,8 Hz), 2,77 - 3,13 (4H, m), 3,81 (3H, s, CO₂CH₃), 4,47 - 4,68 (1H, m, CHOH), 4,75 (2H, s, OCH₂), 6,57 (1H, d, J = 8 Hz), 6,92 - 7,06 (2H, m), 7,11 - 7,36 (5H, m), 8,77 (1H, s, indol-NH)

Príklad 15

Príprava 2-(3-(7-karboxymetoxyindol-3-yl)-2-propylamino)-(l R)-1 -3 -chlórfenyl)etanolu

Zlúčenina získaná v príklade 14 a hydroxid sodný boli pridané do vodného metanolu (metanol/voda = 2:1), Zmes prešla rovnakým postupom ako v príklade 13. Získala sa požadovaná zlúčenina.

Ms (M/z): 403 (MH⁺)

Príklad 16

Príprava tabletiek

Nasledujúce zložky sa zmiešajú a premiešajú. Zmes sa potom granuluje a lisuje do tabletiek. Získa sa 100 tabletiek po 100 mg.

SK 281865 Β6

Zlúčenina z príkladu 1	5g
Kukuričný škrob	25 g
Laktóza	54 g
Kryštalická celulóza	11 g
Hydroxypropylcelulóza	3g
Ľahká bezvodá kyselina kremičitá	1 g
Stearan horečnatý	1 g
Priemyselná využiteľnosť

Zlúčeniny v súlade s predkladaným vynálezom je možné použiť ako lieky na cukrovku a obezitu, hlavne ako stimulujúce činidlo p₃-adrenergických receptorov, cicavcov vrátane človeka.

ZOZNAM SEKVENCIÍ

Identifikačné číslo sekvencie: 1

Dĺžka: 47 párov báz Reťazec: dvojitý Typ: nukleová kyselina Typológia: lineárna

Typ molekuly: nová nukleová kyselina, chemicky syntetizovaná DNK ďalšie: bázy 5 až 43 majú komplementárny reťazec, bázy 44 až 47 sú TCGA

Sekvencia:

AGCTCCTGCAGGCGCGCCGATATCTCGAGCOGCCOCOGTACCA 43

Identifikačné číslo sekvencie: 2

Dĺžka: 27 párov báz Reťazec: jednoduchý Typ: nukleová kyselina Typológia: lineárna

Typ molekuly: nová nukleová kyselina, chemicky syntetizovaná DNK

Proti zmyslu: nie

Sekvencia:

CCACCTGCAGGTGATTTGGAGACCCC 27

Identifikačné číslo sekvencie: 3

Typ molekuly: nová nukleová kyselina, chemicky syntetizovaná DNK

Proti zmyslu: áno

Sekvencia:

GAGCCGGGGAATCCCATGGGAC 27

Identifikačné číslo sekvencie: 4

Dĺžka: 29 párov báz Reťazec: jednoduchý Typ: nukleová kyselina Typológia: lineárna

Typ molekuly: nová nukleová kyselina, chemicky syntetizovaná DNK

Proti zmyslu: nie Sekvencia:

ACACCTGCAGGTGAGGMCCAGGCGTCC 29

Identifikačné číslo sekvencie: 5

Dĺžka: 29 párov báz

Reťazec: jednoduchý

Typ: nukleová kyselina

Typológia: lineárna

Typ molekuly: nová nukleová kyselina, chemicky syntetizovaná DNK

Proti zmyslu: áno

Sekvencia:

TGTAAGMCTGCMACAGCAGTGAGTC 29

PATENTOVÉ NÁROKY

Claims

1. Indolový derivát všeobecného vzorca (I) kde R¹ je nižšia alkylová skupina voliteľne substituovaná hydroxyskupinou, fenylsulfonylaminoskupinou, nižšou alkylsulfonylaminoskupinou, mono- alebo di-nižšou alkylaminosulfonylskupinou alebo skupinou vybranou z množín a až d, pričom množinu a tvoria skupiny vzorca -X-Ra, kde X je O, S alebo NH, Raje atóm vodíka alebo nižšia alkylová skupina, s podmienkou, že ak X je S, potom Ra je nižšia alkylová skupina, množinu b tvoria skupiny vzorca

Rb I

- [O(CH₂)-CHj—Rbb kde Rb je atóm vodíka, nižšia alkylová skupina, nižšia alkoxykarbonylová skupina alebo karboxylová skupina, Rbb je nižšia alkoxykarbonylová skupina alebo karboxylová skupina, mje celé číslo 0 až 3 an je 0 až 1, množinu c tvoria skupiny vzorca -O(CH₂)_p-Rc, kde Rc je nižšia alkanoylová skupina, hydroxyskupina, kyanoskupina, fenylová skupina a mono- alebo di-nižšia alkylaminokarbonylová skupina, alebo skupina vzorca

O kde R^a je atóm vodíka alebo nižšia alkylová skupina a p je celé číslo 1 až 4, množinu d tvoria skupiny vzorca -Y-(CH₂)_q-Rd, kde Y je NH alebo S, Rd je karboxylová skupina alebo nižšia alkoxykarbonylová skupina a q je celé číslo 1 až 4, R² je atóm vodíka, atóm halogénu, nižšia alkylová skupina voliteľne substituovaná hydroxyskupinou, hydroxyskupina, nižšia alkoxyskupina alebo skupina z uvedených množín b alebo c, alebo R¹ a R² môžu spolu vytvoriť metyléndioxyskupinu, ktorá môže byť voliteľne substituovaná karboxylovou skupinou alebo nižšou alkoxykarbonylovou skupinou,

R³ je atóm vodíka alebo nižšia alkylová skupina W je skupina vzorca (II)

R**

CH-CH₂ -NH-CH-CH₂ —

OH Ŕr (II), kde R⁴ je atóm halogénu alebo trifluórmetylová skupina a R⁵ je nižšia alkylová skupina, ktorá sa viaže v pozícii 2alebo 3- na indolové jadro, alebo jeho soľ.

2. Indolový derivát podľa nároku 1, všeobecného vzorca (la), kde v polohe 3 indolového jadra substituent W a R¹, R², R³, R⁴ a R⁵ majú význam uvedený v nároku 1, alebo jeho soľ.

3. Indolový derivát podľa nároku 1, kde R¹ je v polohe 5,6 alebo 7 indolového jadra a R² je atóm vodíka, alebo jeho soľ.

4. Indolový derivát podľa nároku 2, v ktorom R² je atóm halogénu, nižšia alkylová skupina voliteľne substituovaná hydroxyskupinou, nižšia alkylová skupina alebo skupina vybraná z množín b alebo c, definovaných v nároku 1, alebo R¹ a R² môžu spolu tvoriť metyléndioxyskupinu, ktorá môže byť voliteľne substituovaná karboxylovou skupinou alebo nižšou alkoxykarbonylovou skupinou, a jeden zo substituentov R¹ a R² je v polohe 6 a druhý v polohe 7 indolového jadra, alebo jeho soľ.

5. Indolový derivát podľa nároku 2, kde R¹ je nižšia alkylová skupina substituovaná hydroxyskupinou, fenylaminoskupinou, nižšou alkylsulfonylaminoskupinou, nižšou dialkylsulfonylaminoskupinou alebo nasledujúcou skupinou a, b-1, c-1 alebo d, pričom a je skupina všeobecného vzorca -X-Ra, kde X a Ra sú definované v nároku 1, b-1 je skupina všeobecného vzorca

Rb-1

-[O(CH₂)-CH]—Rbb kde Rb-1 je atóm vodíka alebo nižšia alkylová skupina a Rbb, m a n sú definované v nároku 1, c-1 je skupina všeobecného vzorca -0(CH2)_p-Rc-l, kde Rc-1 je nižšia alkanoylová skupina, fenylová skupina, nižšia monoalkylaminokarbonylová skupina a p má význam definovaný v nároku 1, d je skupina všeobecného vzorca -Y-(CH₂)_q-Rd, kde Y, Rd a q sú definované v nároku 1,

R² je atóm vodíka, halogénu, nižší alkyl nesubstituovaný alebo substituovaný hydroxyskupinou, nižšou alkoxyskupinou alebo skupinou b-1 alebo c-1 a R³, R⁴ a R⁵ majú význam definovaný v nároku 1, alebo jeho soľ.

6. Indolový derivát podľa nároku 2, kde R¹ je nižšia alkoxyskupina, nižšia alkylová skupina, nižšia alkoxykarbonylová skupina, nižšia alkoxykarbonyl-nižšia alkoxyskupina, karboxy-nižšia alkoxyskupina, fenyl-nižšia alkoxysku pina alebo nižšia dialkylaminosulfonylová skupina, R² je atóm vodíka, halogénu, alkoxyskupina, nižšia alkylová skupina, nižšia alkoxykarbonylová skupina, nižšia alkoxykarbonylnižšia alkoxyskupina, karboxy-nižšia alkoxyskupina alebo fenyl-nižšia alkoxyskupina, R³ je atóm vodíka, R⁴ je atóm halogénu a R⁵ je metyl, alebo jeho soľ.

7. Indolový derivát podľa nároku 6, kde R¹ je metoxy, etoxy, propoxy, izopropoxy, metyl, metoxykarbonyl, metoxykarbonylmetoxy, karboxymetoxy, benzyloxy alebo dimetylaminosulfonylová skupina, R² je atóm vodíka alebo metoxyskpina, R³ je atóm vodíka, R⁴ je atóm chlóru a R⁵ je metyl, alebo jeho soľ.

8. Indolový derivát podľa nároku 6, kde R¹ je metoxy, etoxy, metoxykarbonyl, metoxykarbonylmetoxy alebo karboxymetoxylová skupina, ktorá je v polohe 6 alebo 7 indolového jadra, R² a R³ sú atómy vodíka, R⁴ je atóm chlóru a R⁵ je metyl, alebo jeho soľ.

9. Indolový derivát všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, ktorým je 2-(3-(7-metoxyindol-3-yl)-2-propylamino-l-(3-chlórfenyl)etanol alebo jeho soľ.

10. Indolový derivát všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, ktorým je 2-(3-(7-etoxyindol-3-yl)-2-propylamino-l-(3-chlórfenyl)etanol alebo jeho soľ.

11. Indolový derivát všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, ktorým je 2-(3-(7-karboxymetoxyindol-3-yl)-2-propylamino-l-(3-chlórfenyl)etanol alebo jeho soľ.

12. Optický izomér indolového derivátu všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, ktoiým je 2-(3-(7-karboxymetoxyindol-3 -yl)-2-propylamino-1 -(3 -chlórfenyl)etanol alebo jeho soľ.

13. Indolový derivát všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, ktorým je 2-(3-(7-metoxykarbonylmetoxyindol-3-yl)-2-propylamino-l-(3-chlórfenyl)etanol alebo jeho soľ.

14. Optický izomér indolového derivátu všeobecného vzorca (I), podľa nároku 1, ktorým je 2-(3-(7-metoxykarbonylmetoxy indol-3 -yl)-2-propylamino-1 -(3-chlórfeny 1)etanol alebo jeho soľ.

15. Indolový derivát všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, ktorým je 2-(3-(7-karboxymetoxyindol-3-yl)-2-propylamino-l-(3-chlórfenyl)etanol alebo jeho soľ.

16. Optický izomér indolového derivátu všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, ktorým je 2-(3-(7-karboxymetoxyindol-3 -yl)-2-propylamino-1 -(3 -chlórfenyl)etanol alebo jeho soľ.

17. Farmaceutický prostriedok stimulujúci p₃-adrenergickéreceptory,vyznačujúci sa tým, že ako aktívnu zložku obsahuje terapeuticky účinné množstvo indolového derivátu podľa nároku 1 alebo jeho farmaceutický vhodnú soľ.

18. Farmaceutický prostriedok na liečenie cukrovky, vyznačujúci sa tým, že ako aktívnu zložku obsahuje terapeuticky účinné množstvo indolového derivátu podľa nároku 1 alebo jeho farmaceutický vhodnú soľ.

19. Farmaceutický prostriedok na liečenie obezity, vyznačujúci sa tým, že ako aktívnu zložku obsahuje terapeuticky účinné množstvo indolového derivátu podľa nároku 1 alebo jeho farmaceutický vhodnú soľ.

20. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa t ý m , že obsahuje indolový derivát podľa nároku 1 alebo jeho farmaceutický vhodnú soľ a farmaceutický vhodný nosič alebo riedidlo.

21. Spôsob prípravy indolového derivátu všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, alebo jeho soli, vyznačujúci sa tým, že zlúčenina všeobecného vzorca (III)

SK 281865 Β6 kde R⁴ má význam definovaný v nároku 1, reaguje so zlúčeninou všeobecného vzorca (IV) i

h₂n-ch-ch kde R¹ je definovaný a R², R³ a R³ sú definované v nároku 1, v prítomnosti redukčného činidla alebo katalyzátora, ktoré redukujú len imínovú, nie karbonylovú skupinu, v rozpúšťadle a pri teplote 20 až 80 °C pri použití redukčného činidla alebo pri teplote 10 až 25 °C pri použití katalyzátora.

23. Spôsob prípravy indolového derivátu podľa nároku 1 všeobecného vzorca (Ic) kde R¹, R², R³ a R⁵ majú význam definovaný v nároku 1, alebo ich soli, v prítomnosti rozpúšťadla alebo bez rozpúšťadla, pri teplote v rozsahu od izbovej teploty až 150 °C.

22. Spôsob prípravy indolového derivátu všeobecného vzorca (I-b)

R¹* ch-ch₂-nh-ch-ch₂

OH R⁵ u

(Ic),

R*

i) kde R¹ je nižšia alkylová skupina substituovaná alebo nesubstituovaná hydroxyskupinou, fenylsulfonylaminoskupinou, alkylsulfonylaminoskupinou, nižšou mono- alebo dialkylaminosulfonylskupinou alebo skupinou á, b, c alebo ď alebo spolu s R² tvorí metyléndioxyskupinu nesubstituovanú alebo substituovanú karboxyskupinu alebo nižšiu alkoxykarbonylskupinu, pričom a'je skupina -X'-Ra, kde X'je O alebo S a Raje definované v nároku 1 s tým, že pokiaľ je X' síra, potom Ra je nižšia alkylová skupina, b je skupina kde R' je nižšia alkylová skupina nesubstituovaná alebo substituovaná hydroxyskupinou, fenylsulfonylaminoskupinou, alkylsulfonylaminoskupinou, nižšou mono- alebo dialkylaminosulfonylskupinou alebo skupinou a alebo c alebo spolu s R²' tvorí metyléndioxyskupinu, pričom a je skupina -X-Ra, kde X a Ra sú definované v nároku 1, c je skupina -O(CH₂)p-Rc, kde Rc je hydroxyskupina, fenylová skupina alebo skupina

Rb

1 -(0(0¾ CH]—Rbb , kde Rb, Rbb, m a n sú definované, c je skupina -O(CH₂)_P-Rc, kde Rc a p sú definované v nároku 1, ď je skupina -Y'-(CH₂)_q-Rd, kde Y' je S a Rd a q sú definované v nároku 1, a R², R³, R⁴ a R⁵ sú definované v nároku 1, alebo ich soli, vyznačujúci sa tým, že sa nechá reagovať zlúčenina všeobecného vzorca (V) kde R^a je atóm vodíka, nižšia alkylová skupina a p je definované v nároku 1, R² je atóm vodíka, halogénu, nižšia alkylová skupina nesubstituovaná alebo substituovaná hydroxyskupinou, hydroxyskupina, nižšia alkoxyskupina alebo skupina c, alebo spolu s R¹ tvorí metyléndioxyskupinu a R³, R⁴ a R³ sú definované v nároku 1, vyznačujúci sa tým, že sa zlúčenina všeobecného vzorca (VII) n

(VII), ch-ch₂— nh₂

OH kde R¹, R²' sú definované a R³, R⁴ a R³ sú definované v nároku 1, redukuje redukčným činidlom v prítomnosti vhodného rozpúšťadla pri teplote 0 až 160 °C.

(V), kde R⁴ je definovaný v nároku 1, so zlúčeninou všeobecného vzorca (VI)