SI9520080A

SI9520080A - Substituirane pirimidinske spojine in njihova uporaba

Info

Publication number: SI9520080A
Application number: SI9520080A
Authority: SI
Inventors: Beate Hellendahl; Annegret Lansky; Rainer Munschauer; Siegfried Bialojan; Liliane Unger; Hans-Juergen Teschendorf; Karsten Wicke; Karla Drescher
Original assignee: Basf Aktiengesellschaft
Priority date: 1994-07-15
Filing date: 1995-07-14
Publication date: 1998-04-30
Also published as: KR970704702A; FI970150A; FI970150A0; EP0772603A1; KR100395394B1; CA2195241A1; ES2178676T3; EP0772603B1; AU703857B2; IL114599A0; HUT77535A; HU9700113D0; DK0772603T3; NO970162D0; AU3111695A; CZ295346B6; DE4425143A1; PT772603E; US6444674B1; DE59510244D1

Abstract

Predloženi izum se nanaša na uporabo pirimidinskih spojin z naslednjo formulo, kjer imajo R1, R2, R3, A, B in Ar v opisu navedene pomene. Spojine v smislu predloženega izuma imajo visoko afiniteto za dopamin-D3-receptor in so zato uporabne za zdravljenje bolezni, ki se odzivajo na dopamin-D3-ligande.ŕ

Description

BASF AKTIENGESELLSCHAFT

Substituirane pirimidinske spojine in njihova uporaba

Predloženi izum se nanaša na substituirane pirimidinske spojine in uporabo takšnih spojin. Navedene spojine imajo pomembne terapevtske lastnosti in so predvsem uporabne za zdravljenje bolezni, ki se odzivajo na dopamin-D₃-ligande.

Spojine iz vrste, o kateri je tukaj govor, s fiziološko aktivnostjo so delno že znane. Tako opisujeta DE 21 39 082 in DE 22 58 561 bazično substituirane pirimidinske oz. pirimidonske derivate kot zdravila za znižanje krvnega tlaka. Ti pirimidinski oz. pirimidonski derivati imajo formuli:

(A)

N

GO' (B) kjer v formuli (A) X med drugim pomeni atom žvepla, A pomeni Cj-C^alkilensko skupino in R¹, R², R³ in Z stojijo za različne substituente. V (B) stojita X in Y za atom kisika ali žvepla, A stoji za C₂-C₆-alkilensko skupino ter R in Z stojita za različne substituente.

Nevroni dobijo svoje informacije med drugim tudi od receptorjev, povezanih preko proteina-G. Obstajajo številne substance, ki izvajajo svoje učinke preko teh receptorjev. Ena od teh je dopamin.

Obstajajo gotova spoznanja o prisotnosti dopamina in njegovi fiziološki funkciji kot nevrotransmiterja. Celice, ki se odzivajo na dopamin so povezane z etiologijo shizofrenije in Parkinsonove bolezni. Zdravljenje teh in drugih bolezni poteka z zdravili, ki učinkujejo vzajemno z dopaminskimi receptorji.

Do 1990 sta bila farmakološko jasno definirana dva podtipa dopaminskih receptorjev in sicer D_t- in D₂-receptorji.

Sokoloff et al., Nature 1990, 347 : 146 - 151, so ugotovili tretji podtip in sicer D₃receptorje. Le-ti so eksprimirani predvsem v limbičnem sistemu. Strukturno se razlikujejo D₃-receptorji od D₃- in D₂-receptorjev v približno polovici aminokislinskih ostankov.

Učinek nevroleptikov na splošno pripisujejo njihovi afiniteti za D₂-receptorje. Nove študije receptorskih vezav so to potrdile. Glede na to ima večina dopaminskih antagonistov kot nevroleptikov visoko afiniteto za D₂-receptorje, vendar le majhno za D₃-receptorje.

DE-A-19 46 172 opisuje heterociklične etre s formulo

kjer R¹ pomeni enojedrni nenasičeni dušik vsebujoči heterociklični obročni sistem, ki je lahko substituiran z nižjimi alkilnimi, nižjimi alkoksi, fenilalkilnimi ali fenilnimi skupinami, R² pomeni fenilni ostanek, ki je v danem primeru lahko substituiran z nižjimi alkilnimi ali nižjimi alkoksi skupinami ali z atomi klora ali broma, in ki lahko v obroču vsebuje tudi 1 do 2 atoma dušika, A pa stoji za ravnoverižni ali razvejeni alkilenski ostanek z 2 do 6 atomi ogljika. Te spojine imajo α-simpatikolitičen učinek in zato učinkujejo kot sedativi, znižujejo krvni tlak in razširjajo žile.

Presenetljivo smo ugotovili, da imajo določene pirimidinske spojine visoko afiniteto za dopamin-D₃-receptor in majhno afiniteto za D₂-receptor. Tako gre za selektivne D₃-ligande.

Predmet predloženega izuma je zato uporaba pirimidinskih spojin s splošno formulo I

R‘

A —B —Ar

A stoji za Cj-C^-alkilensko skupino, ki v danem primeru obsega vsaj eno skupino, izbrano izmed O, S, NR⁴, CONR⁴, NR⁴CO, COO, OCO in dvojne ali trojne vezi,

B stoji za

R¹, R², R³ so izbrani neodvisno eden od drugega izmed H, halogena, OR⁴, NR⁴R⁵, SR⁴, CF₃, CN, CO₂R⁴ in Cj-Cg-alkila, ki je v danem primeru substituiran z OH, OCj-Cg-alkilom ali halogenom,

R⁴ stoji za H, Cj-Cg-alkil, ki je v danem primeru substituiran z OH, OC_t-C₈alkilom ali halogenom,

R⁵ ima za R⁴ navedene pomene ali stoji za COR⁴ ali CO₂R⁴,

Ar stoji za fenil, piridil, pirimidil ali triazinil, pri čemer ima lahko Ar v danem primeru enega do štiri substituente, ki so neodvisno eden od drugega izbrani izmed OR⁵, Cj-C₈-alkila, C₂-C₆-alkenila,

C₂-C₆-alkinila, halogena, CN, CO₂R⁴, NO2, SO2R⁴, SO3R⁴, NR⁴R⁵,

SO₂NR⁴R⁵, SR⁴, CF₃, CHF₂, 5- ali 6-členskega karbocikličnega, aromatskega ali nearomatskega obroča in 5- ali 6-členskega heterocikličnega aromatskega ali nearomatskega obroča z 1 do 3 heteroatomi, izbranimi izmed O, S in N, pri čemer je lahko obroč v danem primeru substituiran s C^Cg-alkilom, Hal, OCj-Cg-alkilom, OH, NO₂, CF₃ in pri čemer je

Ar v danem primeru lahko kondenziran tudi s karbocikličnim ali heterocikličnim obročem zgoraj definirane vrste, in njihovih soli s fiziološko prenesljivimi kislinami za pripravo farmacevtskega sredstva za zdravljenje bolezni, ki se odzivajo na dopamin-D₃-receptorske antagoniste oz. agoniste.

Predloženi izum se nanaša tudi na pirimidinske spojine s formulo Γ

R’

kjer imajo

A, B, Ar, R¹, R² in R³ v zahtevkih 1 do 8 navedene pomene, in njihove soli s fiziološko prenesljivimi kislinami, razen na spojine s formulo

kjer R¹ stoji za OH ali SH ter R² in R³ neodvisno eden od drugega stojita za H, Cy C6-alkil, OCj-C^-alkil, SC^C^alkil, CO2H, OH, SH, NR⁴R⁵ ali halogen, pri čemer R^zin R⁵ stojita za H ali Cj-C^alkil, A stoji za SCj-C6-alkilen, NHCj-C^-alkilen ali N(CjC₆-alkil)-Cj-C₆-alkilen,

B stoji za ___{_} ^J r\ —N N—

YJ in Ar stoji za fenil, ki ima v danem primeru enega ali več substituentov, izbranih izmed C/C/alkila, OC_fC₄-alkila, SC^-alkila, N0₂, CF₃, F, Cl ali Br.

Pri spojinah, ki pridejo v poštev za uporabo v smislu izuma, gre za selektivne dopamin-D₃-receptor-ligande, ki učinkujejo regioselektivno v limbičnem sistemu in imajo na osnovi svoje majhne afinitete za D₂-receptor manj stranskih učinkov kot klasični nevroleptiki, pri katerih gre za D₂-receptorske antagoniste. Spojine so zato uporabne za zdravljenje bolezni, ki se odzivajo na dopamin-D₃-receptorske antagoniste oz. agoniste, npr. za zdravljenje bolezni centralnega živčnega sistema, zlasti shizofrenije, depresij, nevroz in psihoz. Razen tega so uporabne za zdravljenje motenj spanja, navzeje in kot antihistaminiki.

V okviru predloženega izuma imajo naslednji izrazi navedene pomene:

Alkil (v ostankih tudi kot alkoksi, alkilamino itd.) pomeni ravnoverižno ali razvejeno alkilno skupino z 1 do 8 atomi ogljika, prednostno z 1 do 6 atomi ogljika in zlasti z 1 do 4 atomi ogljika. Alkilna skupina ima lahko enega ali več substituentov, ki so neodvisno eden od drugega izbrani izmed OH in OCj-Cg-alkila.

Primeri za alkilno skupino so: metil, etil, n-propil, i-propil, n-butil, izo-butil, t-butil, itd.

Alkilen stoji za ravnoverižen ali razvejen ostanek, ki ima prednostno 2 do 15 atomov ogljika, posebno prednostno 3 do 10 atomov ogljika.

Alkilenske skupine lahko v danem primeru obsegajo vsaj eno od zgoraj navedenih skupin. Le-te se lahko nahajajo - prav tako kot navedene dvojne ali trojne vezi - v alkilenski verigi na poljubnem položaju ali na koncu verige, tako da povezujejo verigo s pirimidinskim ostankom. Slednje je prednostno. Kadar alkilenska skupina obsega dvojno ali trojno vez, ima le-ta vsaj 3 atome ogljika v verigi.

Halogen pomeni F, Cl, Br, J in posebno Cl, Br in J.

Prednostno stojijo R¹, R² in R³ neodvisno eden od drugega za H, Cj-C_g-alkil, NR⁴R⁵,

SR⁴ ali OR⁴, pri čemer stojita R⁴ in R⁵ neodvisno eden od drugega za H ali C₁-C_g6 alkil.

Prednostno ima ostanek Ar enega ali dva substituenta, ki sta neodvisno eden od drugega izbrana izmed OR⁵, Cj-C₈-alkila, Hal, CN, CO₂R⁴, NO2, SO2R⁴, SO3R⁴, NR⁴R⁵, SO₂NR⁴R⁵, SR⁴, CF₃, CHF₂, 5- ali 6-členskega karbocikličnega aromatskega ali nearomatskega obroča in 5- ali 6-členskega heterocikličnega aromatskega ali nearomatskega obroča z 1 do 3 heteroatomi, izbranimi izmed O, S in N, pri čemer je lahko obroč v danem primeru substituiran s C^Cg-alkilom, Hal, OC₁-C₈-alkilom, OH, NO₂, CF₃ in pri čemer je lahko Ar v danem primeru kondenziran tudi s karbocikličnim ali heterocikličnim obročem zgoraj definirane vrste.

Kadar ima ostanek Ar enega ali dva substituenta, se ta dva prednostno nahajata v m-položaju. Prednostno sta neodvisno izbrana izmed halogena, CF₃, CHF₂, CN, NO₂, OR⁴, NR⁴R⁵, C^Cg-alkila, OCj-C8-alkila, fenila in SR⁴, pri čemer R⁴ in R⁵stojita za H ali C1-C_g-alkil. Kadar eden od substituentov stoji za C^Cg-alkil je prednostna razvejena skupina, posebno izopropil ali t-butil.

Ar ima prednostno vsaj enega substituenta in stoji zlasti za γ

X kjer D¹, D² in D³ stojijo neodvisno eden od drugega za CR ali N ter R, X in Y stojijo za H ali imajo zgoraj oz. naknadno navedene pomene.

Prednostno stoji Ar za v danem primeru substituiran fenil, 2-, 3- ali 4-piridinil ali 2-, 4(6)- ali 5-pirimidinil.

Kadar eden od substituentov ostanka Ar stoji za 5- ali 6-členski heterociklični obroč, gre npr. za pirolidinski, piperidinski, morfolinski, piperazinski, piridinski, 1,4dihidropiridinski, pirimidinski, triazinski, pirolni, tiofenski, tiazolni, imidazolni, ok7 sazolni, izoksazolni, pirazolni ali tiadiazolni ostanek.

Kadar eden od substituentov ostanka Ar stoji za karbociklični ostanek, gre zlasti za fenilni, ciklopentilni ali cikloheksilni ostanek.

Kadar je Ar kondenziran s karbocikličnim ali heterocikličnim ostankom, gre zlasti za naftalenski, di- ali tetrahidronaftalenski, kinolinski, di- ali tetrahidrokinolinski, indolni, dihidroindolni, benzimidazolni, benzotiazolni, benzotiadiazolni, benzopirolni ali benzotriazolni ostanek.

Prednostna izvedba je uporaba spojin s formulo I, kjer A stoji za C₁-C₁₀-alkilen, ki v danem primeru obsega vsaj eno skupino, izbrano izmed O, S, NR⁴, cikloheksilena in dvojne ali trojne vezi. Posebno prednostne so spojine s formulo I, kjer A stoji za C₃C_1Q-alkilen, ki v danem primeru obsega vsaj eno skupino, izbrano izmed O, S, NR⁴ in dvojne ali trojne vezi.

Nadaljnja prednostna izvedbena oblika je uporaba spojin s formulo I, kjer R¹, R² in R³ neodvisno eden od drugega stojijo za H, C/Cg-alkil, ki je lahko v danem primeru substituiran z OH, OC1-C8-alkilom ali halogenom, OH, OCj-Cg-alkil, SR⁴ ali NR⁴R⁵, pri čemer R⁴ in R⁵ neodvisno stojita eden od drugega za H ali Cj-C8-alkil,

Ar stoji za fenil, piridil ali pirimidil, ki ima v danem primeru enega, dva, tri ali štiri substituente, ki so izbrani izmed H, Cj-C₈-alkila, ki je v danem primeru substituiran z OH, OCj-Cg-alkilom ali halogenom, OR⁴, pri čemer R⁴ stoji za H, C_x-C₈-alkil, ki je v danem primeru substituiran z OH, OCjCg-alkilom ali halogenom, CHF₂, CF₃, CN, halogena, C₂-C₆-alkenila, C₂-C₆-alkinila, C₅-C₆-cikloalkila, fenila, naftila in 5- ali 6-členskega heterocikličnega aromatičnega obroča z 1 do 3 heteroatomi, izbranimi izmed O, N in S.

Nadaljnja prednostna izvedbena oblika je uporaba spojin s formulo I, kjer

B stoji za

N- ali

Nadaljnja prednostna izvedbena oblika je uporaba spojin s formulo I, kjer Ar stoji za fenil, ki ima enega do štiri substituente, ki so izbrani neodvisno eden od drugega izmed H, C/Cg-alkila, ki je v danem primeru substituiran z OH, OCj-Cg-alkilom ali halogenom, fenila, naftila, pirolila, CN, NO₂, CF₃, CHF₂, halogena, SO₂R⁴ ali SR⁴, pri čemer R⁴ stoji za H ali C^Cg-alkil ali kjer so substituenti neodvisno eden od drugega izbrani izmed C^Cg-alkila, fenila, CF₃, CHF₂, CN, NO₂, halogena, OCj-Cgalkila ali SR⁴, pri čemer R⁴ stoji za H ali Cj-Cg-alkil.

Nadaljnja prednostna izvedbena oblika je uporaba spojin s formulo I, kjer R¹ stoji za H, Cj-Cg-alkil, ki je v danem primeru substituiran z OH, OC^Cg-alkilom ali halogenom, OR⁴, SR⁴ ali NR⁴R⁵, pri čemer R⁴ in R⁵ neodvisno eden od drugega stojita za H ali Cj-Cg-alkil, R² stoji H, OR⁴ ali C₁-C_g-alkil in R³ stoji za H.

Nadaljnja prednostna izvedbena oblika je uporaba spojin s formulo I, kjer Ar stoji za pirimidinil, ki ima enega do tri substituente, ki so neodvisno eden od drugega izbrani izmed H, Cj-Cg-alkila, fenila, naftila, C₅-C₆-cikloalkila, OH, OC^Cg-alkila, halogena, CN, NO₂, CF₃, CHF₂ in 5- ali 6-členskega heterocikličnega, aromatskega ali nearomatskega ostanka z 1 do 3 heteroatomi, izbranimi izmed O, N in S.

Nadaljnja prednostna izvedbena oblika je uporaba spojin s formulo I, kjer Ar stoji za piridinil, ki ima 1 do 4 substituente, ki so neodvisno eden od drugega izbrani izmed H, Cj-Cg-alkila, fenila, naftila, OH, OC^Cg-alkila, halogena, CF₃, CN, C₂-C₆-alkenila, C₂-C₆-alkinila in 5- ali 6-členskega heterocikličnega, aromatskega ostanka z 1 do 3 heteroatomi, izbranimi izmed O, N in S.

Predloženi izum obsega tudi kislinske adicijske soli spojin s formulo I s fiziološko prenesljivimi kislinami. Kot fiziološko prenesljive organske in anorganske kisline pridejo npr. v poštev klorovodikova, bromovodikova, fosforjeva, žveplova, oksalna, maleinska, fumarna, mlečna, vinska, adipinska ali benzojska kislina. Nadaljnje uporabne kisline so opisane v Fortschritte der Arzneimittelforschung, zvezek 10, str. 224 in dalje, Birkhauser Verlag, Basel in Stuttgart, 1966.

Spojine s formulo I imajo lahko enega ali več asimetričnih centrov. K izumu ne spadajo torej samo racemati ampak tudi ustrezni enantiomeri in diastereomeri. Prav tako spadajo k predloženemu izumu tudi vsakokratne tavtomerne oblike.

Priprava spojin s formulo Γ lahko poteka analogno običajnim postopkom, kot jih npr. opisujejo A.R. Katritzky, C.W. Rees (izd.), Comprehensive Heterocyclic Chemistry,

1. izd. Pergamon Press 1984, zlasti vol. 3, del 2A; D.J. Brown, The Pyrimidines v The Chemistry of Heterocyclic Compounds, E.C. Taylor (izd.), John Wiley & Sons Inc. NY, zlasti Vol. 16 + dod. I + II (1985), kot tudi Vol. 52 (1994) in le-tam navedene literature.

Postopek za pripravo spojin izvedemo tako, da

i) spojino s splošno formulo II r'

kjer Υ¹ stoji za običajno zapuščajočo skupino, presnovimo s spojino s splošno formulo III

H-B-Ar ii) za pripravo spojine s formulo Γ, kjer A obsega atom kisika ali žvepla ali NR⁴, presnovimo spojino s splošno formulo IV

—Z’H kjer Z¹ stoji za O, S ali NR⁴ in A¹ stoji za C₀-C₁₈-alkilen, s spojino s splošno formulo VI

Y¹-A²-B-Ar kjer ima Υ¹ zgoraj navedene pomene in A² stoji za Cj-Cj_g-alkilen, pri čemer imata A¹ in A² skupaj 1 do 18 atomov ogljika, iii) za pripravo spojine s formulo Γ, kjer A obsega skupino COO ali CONR⁴, presnovimo spojino s splošno formulo VII

R¹

R ali njeno sol, pri čemer Y² stoji za OH, OCj-C₄-alkil, Cl ali skupaj s CO za aktivirano estrsko skupino in ima A¹ zgoraj navedene pomene, s spojino s formulo VIII

Z¹-A²-B-Ar kjer ima A² zgoraj navedene pomene in Z¹ stoji za OH in NHR⁴, iv) za pripravo spojine s formulo Γ, kjer A obsega skupino OCO ali NR⁴CO presnovimo spojino s formulo IV

-Z’h kjer Z¹ stoji za O ali NR⁴, s spojino s formulo X

Y²CO-A²-B-Ar kjer imajo A², B in Y² zgoraj navedene pomene, pri čemer imajo R¹, R², R³, A, B in Ar zgoraj navedene pomene.

Zgoraj navedene presnove potekajo na splošno v topilu pri temperaturah med sobno in vreliščem uporabljenega topila. Uporabna topila so npr. etilacetat, tetrahidrofuran, dimetilformamid, dimetoksietan, toluen, ksilen ali keton, kot aceton ali metiletilketon.

Po želji delamo v prisotnosti sredstva, ki veže kislino. Sredstva, ki vežejo kisline so anorganske baze, kot je natrijev ali kalijev karbonat, natrijev metilat, natrijev etilat, natrijev hidrid ali organske baze, kot je trietilamin ali piridin. Slednje lahko rabijo istočasno kot topila.

Izoliranje surovega produkta poteka na običajen način, npr. s filtracijo, oddestiliranjem topila ali ekstrakcijo iz reakcijske zmesi itd. Čiščenje dobljene spojine lahko poteka na običajen način, npr. s prekristalizacijo iz topila, kromatografijo ali prevedbo v kislinsko adicijsko spojino.

Kislinske adicijske soli pripravimo na običajen način, tako da zmešamo prosto bazo z ustrezno kislino, v danem primeru v raztopini v organskem topilu, npr. nižjem alkoholu, kot je metanol, etanol ali propanol, etru, kot je metil-t-butileter, ketonu, kot je aceton ali metiletilketon ali estru, kot je etilester ocetne kisline.

Zgoraj navedeni izhodni materiali so znani iz literature ali jih lahko pripravimo po znanih postopkih.

Za zdravljenje zgoraj navedenih bolezni damo spojine v smislu izuma na običajen način oralno ali parenteralno (subkutano, intravenozno, intramuskularno, intraperitonealno). Aplikacija pa lahko poteka tudi z inhaliranjem ali pršenjem v nosno-žrelno votlino.

Doziranje je odvisno od starosti, stanja in mase pacienta, kot tudi načina aplikacije. Na splošno je dnevna doza učinkovine približno 10 do 1000 mg na pacienta na dan pri oralnem dajanju in približno 1 do 500 mg na pacienta na dan pri parenteralnem dajanju.

Predloženi izum se nanaša tudi na farmacevtska sredstva, ki vsebujejo spojine v smislu predloženega izuma. Ta sredstva so v običajnih galenskih aplikacijskih oblikah v trdni ali tekoči obliki, kot so npr. tablete, prevlečene tablete, kapsule, praški, granulati, dražeji, supozitoriji, raztopine ali pršila. Učinkovine lahko pri tem predelamo z običajnimi galenskimi pomožnimi sredstvi, kot so tabletna vezivna sredstva, polnila, konzervirna sredstva, tabletna razpadna sredstva, sredstva za reguliranje tekočnosti, mehčala, omočila, dispergirna sredstva, emulgatorji, topila, zadrževalna sredstva, antioksidanti in/ali potisni plini (prim. H. Sucker et al., Pharmazeutische Technologie, Thieme-Verlag, Stuttgart, 1978). Tako dobljene aplikacijske oblike vsebujejo učinkovino navadno v količini od 1 do 99 mas.%.

Naslednji primeri so namenjeni za ponazoritev predloženega izuma, ne da bi ga omejevali.

Primer 1

4-f3-(4-{3-trifluormetilfenil}piperazinil)-propiltio]-pirimidin

a) l-(3-klorfenil)-4-(3-trifluormetilfenil)piperazin g (0,13 mol) m-trifluormetilfenilpiperazina, 23 g (0,146 mol) l-brom-3klorpropana in 15 g (0,148 mol) trietilamina segrevamo v 200 ml THF 4 ure ob refluksu. Po ohladitvi odsesamo in uparimo. Viskozni ostanek prevzamemo v etilacetatu, izperemo z vodo, posušimo nad MgSO₄ in nato uparimo. Kot ostanek dobimo 39 g produkta kot rumenkasto olje (kvantitativni dobitek).

b) 4-[3-(4-{3-trifluormetilfenil}piperazinil)-propiltio}pirimidin

1,5 g (13,4 mmol) 4-merkaptopirimidina, 4,3 g (14 mmol) l-(3-klorpropil)-4(3-trifluormetiIfeniI)piperazina in 1,5 g (15 mmol) trietilamina mešamo v 5 ml DMF 1 uro pri 100 °C. Nato zlijemo v 5 % klorovodikovo kislino in ekstrahiramo z MTB-etrom. Po naalkaljenju vodne faze z natrijevim hidroksidom ekstrahiramo z etilacetatom, organsko fazo posušimo nad MgSO₄ in uparimo. Ostanek kromatografsko očistimo (eluirno sredstvo: CHjCl^CHjOH = 98/2). Dobimo 3,0 g produkta kot rumenkasto olje (dobitek je 59 %).

Ή-NMR [S, ppm]: 1,95 (2H); 2,55 (2H); 2,65 (4H); 3,25 (6H),

7,06 (3H); 7,15 (IH); 7,35 (IH); 8,33 (IH); 8,9 (IH).

Primer 2

2-(5-(4-{3-trifluormetilfenil}piperazinil)-pentilmerkapto1-pirimidin

a) 2-(5-klorpentilmerkapto)-pirimidin

2,8 g (25 mmol) 2-merkaptopirimidina, 4,64 g (25 mmol) l-brom-5klorpentana in 2,58 g (25,5 mmol) trietilamina segrevamo v 100 ml THF 4 ure ob refiuksu. Po ohlajenju odsesamo, uparimo in ostanek kromatografsko očistimo (eluimo sredstvo : cikloheksan/etilacetat = 92/8). Dobimo 2,8 g produkta (dobitek = 52 %).

b) 2-[5-(4-{3-trifluormetilfenil}piperaziniI)-pentilmerkapto]-pirimidin

2,8 g (12,9 mmol) 2-(5-klorpentilmerkapto)-pirimidina, 3,27 g (14,2 mmol) m-trifluormetilfenilpiperazina in 1,44 g (14,2 mmol) trietilamina mešamo v 5 ml DMF 1 uro pri 90 °C. Nato zlijemo v vodo in 3-krat ekstrahiramo s CH₂C1₂, posušimo nad MgSO₄ in uparimo. Ostanek zmešamo z metil-t-butiletrom, odsesamo in matično lužnico uparimo. Po kromatografskem čiščenju (eluirno sredstvo: CH₂C17CH₃OH = 97/3) dobimo 4,0 g produkta kot olje (dobitek = 75 %).

‘H-NMR [δ, ppm]: 1,54 (4H); 1,78 (2H); 2,4 (2H); 2,6 (4H); 3,18 (2H); 3,23 (4H);

6,95 (IH); 7,01 (3H); 7,1 (3H); 7,33 (IH); 8,5 (IH).

Na analogen način pripravimo spojine, ki so navedene v tabeli 1:

TABELA 1

Št.	Primer	-- fizikalni podatki,H-NMR 14, ppm) tal. (°C)
1³	CH, Av.gA’ '	2,O(2H);2,5(3H);2,55(2H); 2,63(4H);3,23(6H);6.8(1 H); 7,1 (3H);7,35(1H);8,36(1H)
4	OH	1.8(2H);2,45(6H\|; 3.K2H); 3,2(4H\|; 5,0(1H); 7,05\|1H); 7,15(1H); 7,2(1 HI. 7.4(1 Hi
5	hoXA_SW0_^	1,5(4H);1,75(2H);2,4(2H); 2,6(4H);3,2(2H);3,25(6H); 6,22<1H); 7,1 (3H);7,35< 1 H); 7,85(1H); 11.3UH)
6	Ž„,V7 \=/	129 - 130
7	H₃tC^tC^S Y N N—(^Z ') ž„,V7 \=/	0,97(3H);2,0-2,3(3H); 2,5(4H);2,8(1H);3,2(6H);6,1 (IH); 6,85(2H);7,07(1H);7,2 (IH); 7,4{1H); 7,9 (IH)
8	CH,	2,0(2H);2,4(6H);2,55(2H); 2,43(4H);3,23(6H);6,7(1H); 7,1(3H); 7,36(1 H)

•	Λ/j ¹ x HCI	2.OI2H); 2,62(2H); 2,7(4H); 3.2I2H); 3.28(4H); 5.95( 1 H); 6.95ΠΗΙ; 7.1 I3HI; 7.35UHI; 8.55(2H),
10	,^crs	1,95(2H\|; 2,5(2H\|; 2.6I4H). 3,15(2H); 3,27(4H); 4.87I2H); 6.15I1H); 7.1<3H);7.35(1H\|; 8,06(1H)
11		1.7514H); 2,45(2H\|; 2,62(4H); 3.22I6H); 6.98(1 HI; 7.Κ3Η1; 7,35(1H); 8,5(2H)
12	CFj	1,98(2H); 2.55<2H); 2.65I4H); 3.25(6H); 6,21 (1H); 7.K3H); 7.35I1H); 7,85(1H)
13	x 2 HCI	131 - 132
14	,XW}<f	2.6J4H); 3,03(2H); 3.23I4H); 3.78C2HJ; 4,85(2H); 5.8 (2H); 6.13(1 H); 7,06(3H); 7,33(IH); 8.05(1 H)
15	^Cl H0'\G_s/Vv’O^,~C^ x HCI Cl	232 -234 !

16	.Χλ,ννΌΌ χ HCl	188-190
17	CHj hoXXsV_nQ_n/^^CK5	1,26 (6H); 2,0 (2H); 2,59 I2H); 2,66 14H); 2,88 \|1H\|; 3,2(6H); 6,2(1H); 6,78 (3H); 7,2 (IH); 7,8 (1H)
18	SOjCHj „_oXAs^A^hQn-0	70-83
19	r^N /^cr3 H O^N^S^N^A-^Λ	2.OI2H); 2.6514H); 2,8(2H); 3,28{4H); 6,15<1H); 6,2<1H>; 7,5(3H); 7,63(1HJ; 7.85UH)
20	Χχ,νν/Χ,	1.5I1H); 2 (7H); 2,58 (2H); 3,05(3H); 3.2{2H); 6.18OHJ; 7,45(4H); 7.8I1H)
21	hoXA_sVvOx5	151 - 153
22	Ca₀ m H CF j	180-186 !

23	„oXa/vYj Η Cl	170-174
24	hoXA_sAA/vO~0	1,45{6H); 1,75(2H), 2,4(2H\|; 2,6(4H); 3.2(2H\|; 3,25(4H); 6.2(1 H); 7,1(3H); 7.32(1 H); 7,88(1H\|
25	/^Cfi	1,8-2,2(8H);2,6(3H); 3.1(2H);3,25(2H),6,2(1H); 7,45(4H);7,8(1 H)
26	_ksXXw2k5 ¹	144 - 156
27	H_SXl₀AA_HQ_N_^j ’	200 - 205
28	SH _ΝΛη /^CF’	165 - 171
29	OH «A« /^r’	169-172

30	cf _} CFj	161-165
31	hoXamq.-(5 CFj	174-176
32	Xl_sw>-O HO ^N \ J \=l O	60-71
33	,,ΧΧλοΧ	2,O\|2H);2,6(6H);3,25\|6H); 1 6.2(1H\|;6,85(1 H\|.6,95(1H\|; 7,15(1H\|;7.25(1H\|.7,85(1HJ
34	/^Hf2	2,O\|2H);2,56(2H);2,65(4HJ; 3,25(6H);6,18(1H);6,6(1H); 7,0(2H\|;7,04(1H\|;7,33<1H); 7,82(1HJ
35	_/“C HO N S ^V N N—C ') H	1,15\|6H);1,82{2H);2,4(2HJ; 2,5(8HJ;3,1(6H);6,1(1H);6,5 (1H\|;6,58(2H);7,85(1H)
36	,ΧΜη/ί	1,3\|18H);2,O(2HI; 2.55(2H\|; I 2,65(4H); 3,25(6H\|; \| 6,2(1H\|; 6,8 (2HJ; 7,0 (1HJ; 1 7,85 (IH) 1

Pri- mer
37	NH_?
38	H(X Xk—,·> ;	1S1-1S3=C
39	J a_s—a _{f F}	170-175°C hidroklorid
40	'³ ’ W	189-19O°C hidroklorid
41	OH _e y. Cl-	15B-16O°C hidroklorid

Pri- mer
42	Λ 0 .. (j N	132-134-C
43
44		118-125°C
45	cVtA Cl°	163-166°C
46	OH tn Χ- \=N ^X— v N_/ \_H N_/ \ v_?	109-114°C

Pri- mer
47		201-203°C
48	OH r Γ ^γΛ Κ,Ν P^F F	138-140°C
49	J r ^N A ⁰	138-140°C
50	r f^^N _r 1 Cl	77-80°C
51	0 °γ^Α₀ hA^_s^(3~cF	290-295°C (Fumarat)

Pri- mer
52	/° 0=/ \ F /=0 F,/ HO V/	128-130³C (Fumarat)
53	₀_^/0 Vf	158-160°C (Fumarat)
54	-⁰⁼s Cl	138-141^CC (Fumarat)
55	• '—N N—(v _z)—Cl 0“ v_/ lT	55-60°C
56	OH Cl - ji	62-70°C ..

Pri- mer
57	OH N S N J G	70-73°C
58	* OH 1 Cl- Cl- 1	127-134°C hidroklorid
59	OH 1	85-90°C
60	i j/^cf) ^XN^SH	204-210°C
61	OH r~\ A O	137-19l°C

Na analogen način lahko pripravimo spojine, ki so navedene v naslednjih tabelah 2-6.

Tabela

1 rt	_rt	1 JJ?	1 JJ?	1 JJ?	rt	n	rt	v	rt	rt
OJ	CM	oj	CM	OJ	CM	cm	cm		rt	rt
I	I	I	I	I	I	I	I	I	I	I
O	o	O	o	O	υ	O	o	o	O	O
			τ'

co

CM

I ω 9 w w

OJ i

o

OJ

I

O

I

Z	o	o	o	z	o	o	z	z	z	o
CM		1	1	rt	1		rt	rt	CM	1
I	I	I	I	I	I	I	I	I	I	I
o	o	o	o	o	υ	o	o	o	o	o

III

CD

CC

JC

O.

•H a

i

I

z

I I O u.

(S

r* cc (O cc rt cc

CM cc cc

P >w

CD

UJ ffi rt

U.

O

H Cl iProp H CH₂-N -CH₂- -(CH₂)₃tBut H H OMe CH-C S (CH₂)₃•Prop H H OMe CH₂-N CH₂ (CH₂)₄v£>

o.

• « 2

2 A:

IIIOOIOIIIII

CM

I z

Φ

I z

CM

I z

e

I z

in \d r* ’X> LC VO v£>

CD

III

CsJ rt to

Γ» p. rx co σ>

(X co oc r* a

to oc n

cr oc

Tabela 2 (nadaljevanje) rt n v» z**»

CM CM CM

XII o o o

J?

'oi

I

O n n 'oi *CM I I o υ n >λ

I

O

5?

CM 04 +4

III υ o o jrt 'oi

I o

CM

I o

i o

I o

CM

I o

CM

I

O i

o i

I o

CM

I o

ί o

i

I q

CM

I o

X υ

x o

i z—«·.

n

I υ

»*«·» o

CM

I υ

i

Q i

'n

I

O

CM

X o

CM

I υ

χ o

I o

0J

X

O

X υ

I 'n

I o

CM

X υ

CM χ

υ

CM

I i

o i

X

CM

I o

CM

I

O i

o i

I

CM

I o

CM

X o

I

CM

I o

04

I I o 9

I o

CM CM x x o o

04

I I o o

I o

<Λ (Λ

I o

CM

I o

4J >C0

O z Z Z o

04 04 ·

I I I I I o o o o o ~ o

CM · I I o υ

XXI

5ⁿ_ co 0 ώ ffl cr o i

Z O 5 2 O

04 · 04 04 I

I I X I I I o o o o o o

OO5O

I I CM «

I I I I o o o o o

I CM CM 04 XIII o o o o

Z Z V Z Z z o o υ o υ u. o nH ♦H γΊ •H č g

- ci

CD

ΧΙΙΙΙΙΙΟ _ _ 8 _ _ _ _ g_ O 3 > - 33 3 3 S

u. zn zn u. - zn zn zn zn a ft oo co

IA m ··

0. CD CD CD CD

Ul U. φ O rt « o u u. >

o o 9 i

Φ Φ φ Φ Φ Φ

S 2 2 2 2

OOOIIIOiOIOII «

cm cm S

ΧΙΙΧΙΙΙΙΙΙΙΙΙ

OOOZOOZZOOOOO

0) s

IIIOOIOI «

cm 2 X X X I

Z O Z O

ΧΧΧΣΙΙΙΙΙ

ID r» r* r*

G0 ros r* o

cn rs oo oo co oo m

oo

Γ* co os co 00 o

σ>

r-l fN

Os Os rs

Os

T os in lo os &

L0 co

Cl Cl CJ Cl I I X I o o o o i i x x υ o a o

CJ

I

CJ

X cj cj X I O i

CJ X O o

CJ υ o o

I I

Cl

X

O i

o

Cl

X o

cu -ΤΙ i o P

CO

To

00

co

X

I

ω

CO

co

*co

I

*o

X

I

X

o

I

X

o

I

o

I

X

ΐ

o >»/

υ «M*

o

X

o

O

o

Čl

ČJ

I

X

I

X

I

X

o

O

o

O

o

X o

o «

I o

cj

X

O (Λ ci

X

O cj

X

O

CJ

I o 9

CJ x

o

CJ cj X I o o o

CJ N X X < o

Cl I X I

CJ

X o

z o ci CJ K XIX o o o

6- o

Cl I X I

CJ

X

Cl

X

CJ

I υ

i υ

To x

□

Tabela 2 (nadaljevanje) co

CC <o

CC ω

CC cu

OC

JJ >tn •S &

O iP 3 O 3 u?33

CD O. j *j· O q CD CD 0. ffl CD CD

- z z ¥ z z z

u. O X X I I I O O O O O u. o ^3 2 p P _£ _

SfeSSocofSScf «But F H H CH₂-N -CH₂- -CH₂-CH-CH-CH₂ φ φ φ φ φ φ

2 2 2 Σ Σ

ΖΙΧΧΟΟΟΧΧΧΟΙΟΧΟ φ ® _ cj 2 cj ci 2

ΧΧΧΙΙΙΙΧΙΧΧΧΙΙΧ

OZZOOOOZOOZZOOO φ ©

Ι2ΧΧΙΙΙΙ5ΙΙΧΙΙΙ

ΙΙΧΧΧΧΣΧΧΧΧΧΙΙΙ r* co c o -icio^mvo t-- jo σ> o θ' Ο'ΟΟΟΟΟΟΟΟ o o c

CM ČM ČM <Μ

I O Ϊ

I o i

ČM 2

I o i

CM I

I υ i

OJ I

o

o 1

O 1

O

o

O 1

i υ

cn I

To I

i o

7? I

i υ

n I

io X—»K

Jo

1 I υ

o o 1 (M I o

Jo

o o

I o CM I υ

Jo

o o

n

I o

υ υ

fM I o

CM I o

CM I Q

CM I o

CM I O

CM I o

(M I o

ČM I o

ČM

I

Z O W (Λ (Λ cm

I υ

Tabela <

o (Λ

z

o

z

o

2

z

υ

CM

ČM

1

ČM

1

I

O

υ

o

O

III β φ λ ® ®

22122. o o o o o υ

CM cc cc

I

U >m

x ©

I c

s 1

O ?x I

o.

CD m m <£>

o.

CD £

O.

CM

I z

(M

I z

CM

I z

III

CM m Ό

III

Φ

I 2 I

r*	to		O		CM	cn
rH	rH	rH	CM	Oi	CM	CM	CM
rH	rH	rH	rH	rH	rH	rH	rH

125 H H OH 2-naft iBul Me CH₂-N S -(CH₂)₃126 H H OH »But CF₃ OMe CH₂-N -CH₂- -CH₂-C(CH₃)-CH-CH₂29 c

CD

Tabela

O r·

a.

σ>

cr

CO cr r*· cr

CM cr tr

I >n

ČM CM

		CJ	Z o				CJ			Z o
		z	X				z			i
		o	o H				o			o 1
		i o	Ά z				ž o			ci Z
j?	CO	B z o	o o	J?	Jo	Ž?	z o	Jj	J?	O o CM X	h «·“«»
CM	CM	ČM Z o	CJ Γ	CM	CM	CM	CJ T	CM	CM	CM
I	Z	Z	Z	Z	Z	Z	Z
o	o	o	o	o	υ	o	o	o	O	o
			» CM		ČM						ČM
		X	Z		Z		I				Z
ω	ω	z	o	w	O	w	z	ω	o	W	O
z CM	z CM	z	o	z ČM	o	o	z	z ČM	z	O	z ČM
CM	1	1	1	ČM	CM	I
Z	Z	z	z	z	Z	z	z	Z	Z	Z	I
o	o	o	o	o	o	o	o	o	o	O	o
		0)				v			«
		5				2			2
I	z	O	z	z	z	O	z	z	O	X	I
					a	fc
3			3	3	2	3			3	3
m	z	z	co	m	0.	0.	ω	z	Z	CD ··	ffl
	z		z					z		z
z	o	z	o	z	z	Z	z	o	Z	o	I
				o	a						o
3	3	3		Ll			3	3	3		Ll
ffl	m	CD ·*	z	o	CL C	z	m	ffl	ω	z	o
Z	z	z	z	CM Z	z	z	z	z	CM Z	z	z
o	o	o	o	z	o	o	O	o	z	o	o
						Φ
z	z	z	z	z	z	Σ	z	z	z	z	I
		v								«
z	Z	5	z	z	z	Z	z	X	z	2	z
r*	00	σ\	o		CJ	ro		in	U5	r*	co
<N	ΓΝ	CM	ro	CO	Γ0	ro	ro	ro	ro	ro	ro
r—4	r—4	« i 4	—4	—	—4	r·^	—		—4	r·^	r—*

nProp H iProp H CH₂-N S -(CH₂)₃30 o

r·

CC o v Ri Ri I I o o

CM I o x o a

I O

Rl N I X

Ri X

9. o o ω ω to &

•ο

Η rt •p d

CC •S^- rt r-1 co

CC f«.

CC n

CC

CM

CC

4J >m u, ©

CM X o X o a

R x o O X

CM

X o

tn

Ri

X o

m n Ri Ri

CM

I o

i o

a

I

O

Ri

I o

CM

X

O i' i o O

X o

I

I o

Ri

I

X—»

CO

X o

o «

CM

I

CM

I o

CM x

o (0 to

CM

X o

zzzz_oz_OQzz_oz

CM CM CM CM a CM a | CM CM * CM ΙΙΧΙΙΙΙΙΙΧΙΙ oooooooooooo φ φ φ φ φ Φ

S Σ 5 5 φ φ Σ 2

ΟΙΧΙΙΟΟΟΣ5ΟΟ

z z ¥ z _

CM <M χιιχχχχχχχχχ zoooozoooozo

ΙΙΧΙΙΙΙΣΧΧΙΧ

ΙΙΧΣΙΙΙΙΙΙΙΙ θ »-i cMcn^a· i/ί p' 'T Ό· 'T V T? φ φ ω cr«

O r-1 ι/Ί ιΛ

CJ

I cj

I

O

Tabela o J? o O ⁰⁰ JZ? ? X~ £ * χ x θ O O 9 9 , T ’ zz, · ⁿ O ^v J? O 5? JE?

Γ £ ? I _X I~ I o 9 9 5 9 9

*	OJ	1 OJ
X ω ω z	X 9 w	I O

so

OJ

CC +5 (h

z	z	z f	o	z	o
CJ	01	OJ	1	CJ	1
I	I	X	I	X	X
o	o	O	o	o	o

(Λ	I z	w	o	ω	OJ I o
O	z	z	z	o	z
1	Čj	01	OJ	a	CJ
X	I	I	X	X	I
O	o	o	o	a	o

I I I X X X

v	Φ	Φ
s	Σ	Σ	ώ
o	O I	O	O X

ii 3 3 3 C cd q ffl m ω a

	3	n u.	3	3
Q_	CD *w	O I	a •r	ffi

Z

I X I O u_ O

Z	Z
X X X o	X o

I X X X X X

0 0 0 2 0

Φ

I I 5 I X I cj n xr in jo r~ m in m m in in

X	X	Z o	X	X	I
I	X	I	OJ X	X	T
o	o	o	z	o	o
Φ
5	I	X	I	X	I
X	I	X	I	Φ s	I
00	σι	o	rH	CJ
in	m	\D	KD	KD	sO
rH	rH	r-H	rH	rH

165 H H NHMe OMe H iProp H CH₂-N S (CH₂)₃32

J?

(Μ

I α

j?

'Čj

I

O

CM

I o

i o

I o

CM

I o

Č

I g

i o

i n

I

O o

Čl

X g

jn J?

Tm fM X I o α

I 'cm

I

O

CM

I o w w z v </)

CM

I o

Z	z	Z	o	z	o	o
1 Al	CM	CM	1	CM	1	1
I	X	I	I	X	I	X
o	o	o	o	o	o	o

o r£ e>

£

CD

CO

in co <0 £

CM

X >n

CM

I z

XXIX

-3 C

V0 Φ oo <3

i co

Tm

I

O

CM i

o i

o

CM I υ i o i

I

O o

CM

I o

CM

I o

J£?

Tm

I o

o n Tm 7m I I o o

CM

I o

CM

I o

2 o

CM CM III o o o “r O CM I I o o o

I

I o

Tabela 6 (nadaljevanje) o

v cr o>

GC

Φ

GC

O

GC

P »n φ o a>

2 2

I I I O O O u? 5 3 s (f

GD θ O CD CO θ

I I I I I* I O O O O Z o co os o <-t cm

00 00 Os Os Os i

Primeri za galenske aplikacijske oblike

A) Tablete

Na stiskalnici za tablete stisnemo na običajen način tablete, ki imajo naslednjo sestavo:

mg substance primera 1

120 mg koruznega škroba

13,5 mg želatine mg mlečnega sladkorja

2,25 mg Aerosila® (kemično čista kremenična kislina v submikroskopsko fini porazdelitvi)

6,75 mg krompirjevega škroba (kot 6 % škrobno lepilo)

B) Dražeji mg substance primera 4 mg mase jedra mg zasladilne mase

Masa jedra je sestavljena iz 9 delov koruznega škroba, 3 delov mlečnega sladkorja in 1 dela vinilpirolidon-vinilacetatnega mešanega polimerizata 60:40. Zasladilna masa je sestavljena iz 5 delov surovega sladkorja, 2 delov koruznega škroba, 2 delov kalcijevega karbonata in 1 dela smukca. Na tako pripravljene dražeje nato nanesemo prevleko, ki je odporna proti želodčnemu soku.

Biološke raziskave - študije receptorske vezave

1) Test vezave P₃

Za študije vezave uporabljamo klonirane mišje fibroblaste CCL 1,3, ki eksprimirajo humani D₃-receptor, dobimo pa jih pri Res. Biochemicals Internat. One Strathmore

Rd., Natick, MA 01760-2418, ZDA.

Priprava celic

D₃ eksprimirajoče celice vzgojimo v RPMI-1640 z 10 % fetalnega telečjega seruma (GIBCO št. 041-32400 N), 100 E/ml penicilina in 0,2 % streptomicina (GIBCO BRL, Gaithersburg, MD, ZDA). Po 48 urah izperemo celice s PBS in inkubiramo 5 minut s PBS, ki vsebuje 0,05 % tripsina. Nato nevtraliziramo z medijem in celice zberemo s centrifugiranjem pri 300 g. Za lizo celic pelet na hitro speremo z liznim pufrom (5 mM Tris-HCl, pH 7,4, z 10 % glicerola) in nato inkubiramo pri koncentraciji 10⁷celic/ml liznega pufra 30 minut pri 4 °C. Celice nato centrifugiramo 10 minut pri 200 g in pelet shranimo v tekočem dušiku.

Testi vezave

Za test D₃-receptorske vezave suspendiramo membrane v inkubacijskem pufru (50 mM Tris-HCl, pH 7,4 s 120 mM NaCl, 5 mM KC1, 2 mM CaCl₂, 2 mM MgCl₂,10 μΜ kinolinola, 0,1 % askorbinske kisline in 0,1 % BS A) pri koncentraciji pribl. 10⁶celic/250 μΐ testnega nastavka in inkubiramo pri 30 °C z 0,1 nM ¹²⁵jodsulpirida v prisotnosti in odsotnosti testne substance. Nespecifično vezavo določimo z 10'⁶M spiperona.

Po 60 minutah ločimo prosti in vezani radioligand s filtracijo preko filtra iz steklenih vlaken GF/B (Whatman, Velika Britanija) na zbiralniku za celice Skatron (Skatron, Lier, Norveška) in filter izperemo z ledeno-hladnim Tris-HCl-pufrom, pH 7,4. Radioaktivnost, zbrano na filtrih, kvantitativno določimo s tekočinskim scintilacijskim števcem Packard 2200 CA.

Določitev vrednosti K poteka z nelinearno regresijsko analizo s programom LIGAND.

2) Test vezave P₂

Priprave membran

a) Nucleus caudatus (govedo)

Nuclues caudatus odstranimo iz govejih možganov in izperemo v ledenohladni 0,32 mM saharozni raztopini. Po določitvi mase material razdrobimo in homogeniziramo v 5-10 volumnih saharozne raztopine s homogenizatorjem

Potter-Elvehjem (500 obr./min). Homogeno zmes centrifugiramo pri 3000 g 15 minut (4 °C) in dobljeni preostanek nadalje centrifugiramo 15 minut pri 40000 g. Nato ostanek izperemo 2-krat s 50 mM Tris-HCl, pH 7,4 z resuspendiranjem in centrifugiranjem. Membrane do uporabe shranimo v tekočem dušiku.

b) Striatum (podgana)

Striata podgan Sprague-Dawley izperemo v ledeno-hladni 0,32 M saharozni raztopini. Po določitvi mase dele možganov homogeniziramo v 5-10 volumnih saharozne raztopine s homogenizatorjem Potter-Elvehjem (500 obr./min). Homogeno zmes centrifugiramo pri 40000 g 10 minut (4 °C), nato ostanek speremo s 50 mM Tris-HCl, 0,1 mM EDTA in 0,01 % askorbinske kisline (pH 7,4) večkrat z resuspendiranjem in centrifugiranjem. Izprani ostanek resuspendiramo z zgoraj navedenim pufrom in inkubiramo 20 minut pri 37 °C (za razgradnjo endogenega dopamina). Nato izperemo membrane dvakrat s pufrom in zamrznemo po deležih v tekočem dušiku. Membranski pripravek je stabilen največ 1 teden.

Test vezave

a) ³H-spiperon (D_2nizek)

Membrane Nucleus caudatus prevzamemo v inkubacijskem pufru (mM: TrisHCl 50, NaCl 120, KC1 5, MgCl₂ 1, CaCl₂ 2, pH 7,4). Pripravimo različne nastavke po 1 ml:

Celotna vezava: 400 μ% membran + 0,2 nmol/1³H-spiperona (Du Pont de Nemours, NET-565).

Nespecifična vezava: kot nastavki za celotno vezavo + 10 μΜ (+)butaclamola.

Preskusna substanca: kot nastavki za celotno vezavo + naraščajoče koncentracije preskusne substance.

Po končani 60 minutni inkubaciji pri 25 °C filtriramo nastavke preko filtra iz steklenih vlaken GF/B (Whatman, Velika Britanija) na celičnem zbiralniku

Skatron (firma Zinsser, Frankfurt) in filter izperemo z ledeno-hladnim 50 mM

Tris-HCl-pufrom, pH 7,4. Na filtru zbrano radioaktivnost kvantitativno določimo s tekočinskim scintilacijskim števcem Packard 2200 CA.

Določitev vrednosti K poteka z nelinearno regresijsko analizo s programom LIGAND ali z izračunavanjem IC₅₀-vrednosti s formulo od Chenga in Prusoffa.

b) ’H-ADTN(D_Mso()

Striatumske membrane prevzamemo v inkubacijskem pufru (50 mM TrisHCl, pH 7,4,1 mM MnCl₂ in 0,1 % askorbinske kisline).

Pripravimo različne nastavke po 1 ml:

Celotna vezava: 300 ju,g mokre mase + 1 nM ³H-ADTN (DuPont de Nemours, sinteza za kupca) + 100 nM SCH 23390 (zasedba Dl-receptorjev).

Nespecifična vezava: kot nastavki za celotno vezavo + 50 nM spiperona.

Po končani 60-minutni inkubaciji pri 25 °C filtriramo nastavke preko filtra iz steklenih vlaken GF/B (Whatman, Velika Britanija) na zbiralniku celic Skatron(firma Zinsser, Frankfurt) in filter izperemo z ledeno-hladnim 50 mM Tris-HCl-pufrom, pH 7,4. Radioaktivnost, zbrano na filtrih, kvantitativno določimo s tekočinskim scintilacijskim števcem Packard 2200 CA.

Ovrednotenje poteka kot pri a).

Spojine v smislu izuma imajo pri teh testih zelo dobro afiniteto in visoko selektivnost glede na D₃-receptor. Dobljene vrednosti so zbrane za reprezentativne spojine v naslednji tabeli 7.

Tabela 7
	Receptorska vezava
Primer št.	d₃	^D2	selektivnost
	¹²⁵J-sulpirid	³H-spiperon
	K. [nM]	K [mM]
12	4,2	357	85
13	2,3	142	61
17	2,8	200	71
19	3,0	175	58
48	4,0	480	120
		Za
		BASF Aktiengesellschaft:

Claims

PATENTNI ZAHTEVKI

1. Uporaba pirimidinskih spojin s formulo I

R'

A stoji za Cj-Cjg-alkilensko skupino, ki v danem primeru obsega vsaj eno skupino, izbrano izmed O, S, NR⁴, CONR⁴, NR⁴CO, COO, OCO in dvojne ali trojne vezi,

B stoji za

R¹, R², R³ so izbrani neodvisno eden od drugega izmed H, halogena, OR⁴, NR⁴R⁵, SR⁴, CF₃, CN, CO₂R⁴ in Cj-Cg-alkila, ki je v danem primeru substituiran z OH, OCj-Cg-alkilom ali halogenom,

R⁴ stoji za H, Cj-Cg-alkil, ki je v danem primeru substituiran z OH, OC₁-C_galkilom ali halogenom,

R⁵ ima za R⁴ navedene pomene ali stoji za COR⁴ ali CO₂R⁴,

Ar stoji za fenil, piridil, pirimidil ali triazinil, pri čemer ima lahko Ar v danem primeru enega do Štiri substituente, ki so neodvisno eden od drugega izbrani izmed OR⁵, Cj-Cg-alkila, C2-C6-alkenila, C2-C6-alkinila, halogena, CN, CO2R⁴, NO2, SO₂R⁴, SO3R⁴, NR⁴R⁵, SO2NR⁴R⁵, SR⁴, CF₃, CHF₂, 5- ali 6-členskega karbocikličnega, aromatskega ali nearomatskega obroča in 5- ali 6-členskega heterocikličnega aromatskega ali nearomatskega obroča z 1 do 3 heteroatomi, izbranimi izmed O, S in N, pri čemer je lahko obroč v danem primeru substituiran s Cj-Cg-alkilom, Hal, OC₁-C_g-alkilom, OH, NO₂, CF₃ in pri čemer je

Ar v danem primeru lahko kondenziran tudi s karbocikličnim ali heterocikličnim obročem zgoraj definirane vrste, in njihovih soli s fiziološko prenesljivimi kislinami za pripravo farmacevtskega sredstva za zdravljenje bolezni, ki se odzivajo na dopamin-D₃-receptorske antagoniste oz. agoniste.
2. Uporaba po zahtevku 1 pirimidinskih spojin s formulo I, kjer

A stoji za Cj-Cjg-alkilensko skupino, ki v danem primeru obsega vsaj eno skupino, izbrano izmed O, S, NR⁴, CONR⁴, NR⁴CO, COO, OCO in dvojne ali trojne vezi,

B stoji za ali —N

R¹, R², R³ so izbrani neodvisno eden od drugega izmed H, halogena, OR⁴, NR⁴R⁵, SR⁴, CF3, CN, CO2R⁴ in Cj-C8-alkila, ki je v danem primeru substituiran z OH, OCj-Cg-alkilom ali halogenom,

R⁴ stoji za H, C₁-C₈-alkil, ki je v danem primeru substituiran z OH, OCj-C₈alkilom ali halogenom,

R⁵ ima za R⁴ navedene pomene ali stoji za COR⁴ ali CO₂R⁴,

Ar stoji za fenil, piridil, pirimidil ali triazinil, pri čemer ima lahko Ar v danem primeru enega ali dva substituenta X in Y, ki sta neodvisno eden od drugega izbrana izmed OR⁵, Cj-C₈-alkila, Hal, CN,

6-členskega karbocikličnega aromatskega ali nearomatskega obroča in 5- ali 6-členskega heterocikličnega aromatskega ali nearomatskega obroča z 1 do 3 heteroatomi, izbranimi izmed O, S in N, pri čemer je lahko obroč v danem primeru substituiran s Cj-Cg-alkilom, Hal, OC^C^alkilom, OH, NO₂, CF₃ in pri čemer je Ar v danem primeru lahko kondenziran tudi s karbocikličnim ali heterocikličnim obročem zgoraj definirane vrste.
3. Uporaba po zahtevku 1 ali 2 spojin s formulo I, kjer A stoji za C₃-C₁₀-alkilen, ki obsega v danem primeru vsaj eno skupino, izbrano izmed O, S, NR⁴ in dvojne ali trojne vezi.
4. Uporaba spojine s formulo I, kjer R¹, R² in R³ neodvisno eden od drugega stojijo za H, Cj-Cg-alkil, ki je lahko v danem primeru substituiran z OH, OCj-Cg-alkilom ali halogenom, OH, OCj-Cg-alkil, SR⁴ ali NR⁴R⁵, pri čemer R⁴ in R⁵ neodvisno stojita eden od drugega za H ali C^-Cg-alkil,

Ar stoji za fenil, piridil ali pirimidil, ki ima v danem primeru enega, dva, tri ali štiri substituente, ki so izbrani izmed Cj-Cg-alkila, ki je v danem primeru substituiran z OH, OC^Cg-alkilom ali halogenom, OR^4a, pri čemer R^4a stoji za H, C^Cg-alkil, ki je v danem primeru substituiran z OH, OCj-Cg-alkilom ali halogenom, CHF* CF* CN, halogena, C₂-C₆-alkenila, C₂-C₆-alkinila, C₅-C₆-cikloalkila, fenila, naftila in 5- ali 6-členskega heterocikličnega aromatskega obroča z 1 do 3 heteroatomi, izbranimi izmed O, N in S, ter imata A in B pomene, navedene v enem od zahtevkov 1 do 3, in njenih soli s fiziološko prenesljivimi kislinami za pripravo farmacevtskega sredstva za zdravljenje bolezni, ki se odzivajo na dopamin-D₃-receptorske antagoniste oz. agoniste.
5. Uporaba po zahtevku 4 spojin s formulo I, kjer B stoji za
6. Uporaba po zahtevku 4 ali 5 spojin s formulo I, kjer R¹ stoji za H, C^Cg-alkil, ki je v danem primeru substituiran z OH, OCj-Cg-alkilom ali halogenom, OR⁴, SR⁴ ali NR⁴R⁵, pri čemer stojita R⁴ in R⁵ neodvisno eden od drugega za H ali C^Cg-alkil, R²stoji za H, OR⁴ ali Cj-Cg-alkil in R³ stoji za H.
7. Uporaba spojine s formulo I, kjer Ar stoji za fenil, ki ima enega do štiri substituente, ki so izbrani neodvisno eden od drugega izmed H, Cj-Cg-alkila, ki je v danem primeru substituiran z OH, OCj-Cg-alkilom ali halogenom, fenila, naftila, pirolila, CN, NO* CF* CHF* halogena, SO₂R⁴ ali SR⁴, pri čemer R⁴ stoji za H ali C^Cg-alkil in imajo R¹, R², R³, A in B pomene, ki so navedeni v enem od zahtevkov 1 do 6, in njenih soli s fiziološko prenesljivimi kislinami za pripravo farmacevtskega sredstva za zdravljenje bolezni, ki se odzivajo na dopamin-D₃-receptorske antagoniste oz. agoniste.
8. Uporaba po zahtevku 7, označena s tem, da so substituenti neodvisno eden od drugega izbrani izmed Cj-Cg-alkila, fenila, CF* CHF* CN, NO* halogena, OCj-C₈alkila ali SR⁴, pri čemer R⁴ stoji za H ali Cj-Cg-alkil.
9. Uporaba po zahtevku 7 ali 8, pri čemer ima ostanek Ar enega ali dva substituenta, ki se vsakokrat nahajata v m-položaju.
10. Uporaba po enem od zahtevkov 1 do 6 spojin s formulo I, kjer Ar stoji za pirimidinil, ki ima enega do tri substituente, ki so neodvisno eden od drugega izbrani izmed H, Cj-Cg-alkila, fenila, naftila, C₅-C₆-cikloalkila, OH, OCj-Cg-alkila, halogena, CN, NO₂, CF₃, CHF₂ in 5- ali 6-členskega heterocikličnega, aromatskega ali nearomatskega ostanka z 1 do 3 heteroatomi, izbranimi izmed O, N in S.
11. Uporaba po enem od zahtevkov 1 do 6, 8 ali 9 spojin s formulo I, kjer Ar stoji za piridinil, ki ima 1 do 4 substituente, ki so neodvisno eden od drugega izbrani izmed H, Cj-Cg-alkila, fenila, naftila, OH, OC^Cg-alkila, halogena, CF₃, CN, C₂-C₆-alkenila, C₂-C₆-alkinila in 5- ali 6-členskega heterocikličnega aromatskega ostanka z 1 do 3 heteroatomi, izbranimi izmed O, N in S.
12. Pirimidinske spojine, označene s tem, da imajo formulo P

R’ kjer imajo A, B, Ar, R¹, R² in R³ v zahtevkih 1 do 8 navedene pomene, in njihove soli s fiziološko prenesljivimi kislinami, razen spojin s formulo:

kjer R¹ stoji za OH ali SH ter R² in R³ neodvisno eden od drugega stojita za H, CjC₆-alkil, OCj-C₆-alkil, SCj-C₆alkil, CO₂H, OH, SH, NR⁴R⁵ ali halogen, pri čemer R⁴ in R⁵ stojita za H ali Cj-C₆alkil, A stoji za SC,-C₆-alkilen, NHCj-C₆-alkilen ali Ν(Ο₂C₆-alkil)-Cj-C₆-alkilen,

B stoji za

ΛΛ in Ar stoji za fenil, ki ima v danem primeru enega ali več substituentov, izbranih izmed C^C^alkila, OCj-C^alkila, SCj-C₄-alkila, N0₂, CF₃, F, Cl ali Br, in razen naslednjih spojin:

2-[2-(4-o-tolil)-piperazinil(l)]-etoksi-4,6-dimetilpirimidinhidroklorid;

2-[2-(4-m-tolil)-piperazinil(l)]-etoksi-4,6-dimetilpirimidinhidroklorid;

2-[2-(4-p-tolil)-piperazinil(l)]-etoksi-4,6-dimetilpirimidinhidroklorid;

2-[2-(4-fenil)-piperazinil(l)]-etoksi-4,6-dimetilpirimidinhidroklorid.
13. Spojina po zahtevku 12, označena s tem, da ima formulo

OH
14. Spojine, označene s tem, da imajo formule:

HO in njihove fiziološko prenesljive soli.
15. Postopek za pripravo spojin po zahtevku 12,13 ali 14, označen s tem, da

i) spojino s splošno formulo II

R’ r’ kjer Υ¹ stoji za običajno zapuščajočo skupino, presnovimo s spojino s splošno formulo III

H-B-Ar ii) za pripravo spojine s formulo Γ, kjer A obsega atom kisika ali žvepla ali NR⁴, presnovimo spojino s splošno formulo IV

R¹ kjer Z¹ stoji za O, S ali NR⁴ in A¹ stoji za C₀-C₁₈-alkilen, s spojino s splošno formulo VI

Y¹-A²-B-Ar kjer ima Υ¹ zgoraj navedene pomene in A² stoji za Cj-C_lg-alkilen, pri čemer imata A¹ in A² skupaj 1 do 18 atomov ogljika, iii) za pripravo spojine s formulo Γ, kjer A obsega skupino COO ali CONR⁴, presnovimo spojino s splošno formulo VII kjer stoji Y² za OH, OC,-C₄-alkil, Cl ali skupaj s CO za aktivirano estrsko skupino in ima A¹ zgoraj navedene pomene, s spojino s formulo Vili

Z¹-A²-B-Ar kjer ima A² zgoraj navedene pomene in Z’ stoji za OH ali NHR⁴, *

iv) za pripravo spojine s formulo Γ, kjer A obsega skupino OCO ali NR⁴CO presnovimo spojino s formulo IV

R'

Tm^a’ -2’h r’ kjer Z¹ stoji za O ali NR⁴, s spojino s formulo X

Y²CO-A²-B-Ar kjer imajo A², B in Υ² zgoraj navedene pomene, pri čemer imajo v zgornjih formulah R¹, R², R³, A, B in Ar pomene, navedene v zahtevkih 1 do 8.
16. Farmacevtsko sredstvo, označeno s tem, da vsebuje vsaj eno spojino s formulo I po enem od zahtevkov 12, 13 ali 14 v danem primeru skupaj s fiziološko sprejemljivimi nosilci in/ali pomožnimi snovmi.