SE466788B - Komposition innefattande ett stannoreduceringsmedel och n-substituerade iminodiaettiksyror - Google Patents

Description

466 788 2 undersökningar innefattar intravenös administration av märkta partiklar, såsom Tc-99m svavelkolloid, som effektivt fångas upp av Kupffer-cellerna. Den så erhållna diagnostiska informationen är användbar för studium av levermorfologin och Kupffer-cellfunk- tionen. Det optimala medlet för dessa undersökningar skall ha snabb, exklusiv upptagning i friska Kupffer-celler och skall vara bionedbrytningsbart och icke-toxiskt.

Radionuklidundersökningar har även använts för att mäta hepato- cytfunktionen och gallgångsöppenheten (inklusive gallblås- funktionen). Det optimala medlet för dessa undersökningar skall ha snabb, exklusiv upptagning genom hepatocyterna, snabb intra- hepatitisk transitering och snabb utsöndring i det biliära systemet. Hög specificitet erfordras för att erhålla maximal diagnostisk information, under det att patientens strålnings- dos begränsas. Tiden för maximal leverkoncentration (tmax) och tiden för en minskning av leverkoncentrationen till 50 % av koncentrationen vid tm (t5O) skall båda vara korta för att reducera den tid, som âïfordras för en undersökning. Detta är viktigt när det gäller patienter, som inte kan immobiliseras under långa tidsperioder. Kortare undersökningstider ger ett ökande antal patienter, som kan behandlas inom en given tidsperiod, och maximerar användningen av den åskådliggörande utrustningen.

En kort t50-tid innebär även en ökning i förhållandet mellan radioaktiviteten i gallan och den i levern, varigenom de intra- hepatitiska gångarna separeras från levern och sålunda kvali- teten hos bilden och den resulterande diagnosen förbättras.

Tills nyligen har de flesta nukleära medicinska biliära funk- tionsundersökningar genomförts med I-l3l rose bengal eller I-l3l bromsulfoftalein. Fastän I-l3l rose bengal vanligtvis är standard för jämförelse av leverfunktionsmedel, är dess fotonenergi inte optimal för gamma-kamerabild, och patientens exponering för icke-diagnostisk beta-strålning be- gränsar den dos, som säkert kan administreras. Bilduppspjälk- i ningen och darmed den diagnostiska informationen är begränsad.

Utvecklingen av Tc-99m penicillamin av Tubis et al. (Radio- 3 466 788 pharmaceuticals, Subramanian et al., eds., The Society of Nuclear Medicine, Inc., New York, l975, sid. 55-62) 1974 var ett väsentligt steg för att övervinna begränsningarna med jod-l3l-märkningen och att stimulera forskningsintresset för teknetium-99m-märkta hepatobiliära medel. Bland de mest använd- bara teknetium-99m-märkta medel som utvecklats hittills är de N-substituerade iminodiättiksyrorna (hepatoiminodiättiksyror- HIDA's). Loberg et al. beskriver i det amerikanska patentet nr 4 017 596 bl.a. användningen av ett kelat av teknetium-99m och en substituerad iminodiättiksyra för âskädliggörande av exter- na Ofqafl-Eckelman et al. beskriver i det amerikanska patentet nr 3 725 295 märkningen av dietylentriaminpentaättiksyra (DTPA) med teknetrium-99m.

De olika HIDA-derivaten, som har beskrivits i litteraturen, kan åskådliggöras av formeln 3 Rn 3 /cnz-c-OH (CHZ) -NH-c-cH2-N n \cH -c-on 2 H o Dediskuterade analogerna innefattar 2,6-dimetyl-derivatet (Lo- berg et al., amerikanska patentet nr 4 017 596); 2,6-dietyl-, 2,6-diisopropyl-, 2-butoxi-, 4-butoxi-, 4-butyl-, 4-isopropyl-, 4-etoxi- och 4-jod-derivat (Wistow et al., Radiology, lgåz 793-794, 1978); 2,3-dimetyl-, 2,4-dimetyl-, 2,5-dimetyl-, 3,4-dimetyl- och 3,5-dimetyl-derivat (Van Wyk et al., Eur.

J. Nucl. Med., 4:445-448, l979); och 2,4,6-trisubstituerade derivat, vari minst två av substituenterna är alkyl med l-4 kolatomer, den tredje substituenten väte eller alkyl med l-4 kolatomer och substituenterna tillsammans innehåller minst 3 kolatomer (belgiska patentet nr 855 107); och 2,6-dimetyl-, 2,6-dietyl-, 2,6-diisopropyl-, 4-metyl-, 4-etyl-, 4-isopropyl-, 4-n-butyl-, 4-n-pentyl-, 4-t-butyl-, 4-fenyl-, 4-metoxi-, 3,5-dimetyl-, 2,4,6-trimetyl-, 2,4,5-trimetyl-, 4-fluor-, 466 788 4 2,4-difluor-, 2,5-difluor- och 2,3,4,5,6-pentafluor-derivaten (Molten et al., 3rd Int. Symp. Radiopharm. Chem., St. Louis, Mo., juni 1980). Fields et al., Journal of Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals, XV: 387-399 (1978) beskriver N-(2- fenetylkarbamoylmetyl)-iminodiättiksyra.

Van Wyk et al., Eur. J. Nucl. Med., g:445-448, 1979, har i sitt arbete med dimetyl-HIDA-derivat visat att substituenternas steriska effekter är viktiga för biliärupptagningen.

Chiotellis et al., Int. J. Nucl. Med. Biol., 7:l-7, 1980, som arbetat med 4-butyl-HIDA-föreningar, har visat att substi- tuenternas molekylstorlek är viktig för biliärupptagningen.

Föreningarna med formeln I enligt föreliggande uppfinning och salterna därav kan märkas med teknetium-99m och därefter admi- nistreras intravenöst till en patient i syfte att åskådliggöra det hepatobiliära systemet. Radiomärkningen av föreningarna med formeln I och salterna därav kan åstadkommas med användning av förfaranden som är välkända inom tekniken. Enligt en föredragen utföringsform kombineras teknetium-99m i form av en vattenhaltig natriumperteknetatlösning (Na99mTcO4) med ett stannoreduce- ringsmedel och en förening med formeln I eller ett salt därav. Även om ordningsföljden vid blandningen av de tre ovan beskriv- na komponenterna inte är kritiskt, föredrar man att reducerings- medlet först kombineras med en förening med formeln I enligt föreliggande uppfinning. Denna komposition (en icke-radioaktiv komposition) kan därefter lämnas till radiokemister, tekniker, radiofarmaceuter, läkare och liknande för märkning med tekne- tium-99m strax före användningen.

Exempel på stannoreduceringsmedel är stannoklorid och stannofluorid. Teknetium-99m i form av en vattenlösning av natriumperteknetat kan lätt erhållas av kommersiellt till- gänliga molybden-99/teknetium-99m-alstraresom konventionellt elueras med saltlake.

Föreningarna med formeln I enligt föreliggande uppfinning kan framställas med användning av nitrilotriättiksyra, ättiksyra- s 466 788 anhydrid och ett aminderivat med formeln som utgångsmaterial. Nitrilotriättiksyra och ättiksyraanhydrid får första reagera till framställning av nitrilotriättiksyra- anhydrid, som därefter får reagera med en amin med formeln II till motsvarande förening med formeln I. Reaktionen sker lättast om reaktanterna finns närvarande i stökiometriska mängder.

Föreningarna med formeln I kan överföras till farmaceutiskt acceptabla, vattenlösliga salter med användning av förfaranden som är kända inom tekniken. Föredragna salter är alkalimetall- salter och alkaliska jordartsmetallsalter.

Föreningarna med formeln I (och salterna därav) kan framställas för komplexering med teknetium-99m med användning av förfaranden kända inom tekniken. Exempelvis kan ett “våt-set" (wet kit) framställas genom att en förening med formeln I (eller ett salt därav) först upplöses i en bas (t.ex. natriumhydroxid) till framställning av en lösning med ett pH av ungefär 6-7. Till denna lösning sättes en sur lösning av reduceringsmedel (t.ex. stannofluorid) i saltsyra. Vatten kan tillsättas för att ge den önskade volymen. Till denna lösning kan teknetium-99m, före- trädesvis en vattenlösning av natriumperteknetat, sättas. Lyo- filiserade set kan framställas med användning av det ovan beskrivna förfarandet, förutom att lösningen lyofiliseras före tillsatsen av teknetrium-99m. Det lyofiliserade materialet kan lagras i inert atmosfär.

Föredragna föreningar enligt föreliggande uppfinning är sådana föreningar med formeln I, vari n är 0. Speciellt fördragna är sådana föreningar med formeln 466 788 6 III CH O 3 0 H 1 H /CH2-C-OH R2 NH-C-CH2-N\CH _C_OH I H 2 I R3 3 0 eller ett farmaceutiskt acceptabelt vattenlösligt salt därav, vari en av Rå och Rš är metyl eller etyl och den andra är brom eller jod.

Följande exempel avser framställning av föreningarna med formeln I.

Exempel l. 2,2'-[[2-[(brom-2,4,6-trimetylfenyl)amino]-2-oxoetyl]imino]bis- 'attiksïra A) 3-brom-2,4,6-trimetylanilin Koncentrerad saltsyra (80 ml) kyles i isvattenbad till SOC. 2,4,6-Trimetylanilin (l3,5 g) tillsättes under 20 minuter under kraftig omrörning medan temperaturen hålles under l5°C. Den tjocka uppslamningen kyles till 30C och 16,8 g brom i 80 ml koncentrerad saltsyra tillsättes under 25 minuter. Uppslamningen upphettas i vattenbad i en timme och kyles därefter i isbad i en time. Reaktionsblandningen filtreras därefter och saltet tvättas med tre 50 ml portioner kallt destillerat vatten.

Efter torkning upplöses den orena produkten i 600 ml destille- rat vatten, behandlas med 3,0 g Darco och filtreras på en I Hyflo-bädd och ger en lösning. Neutralisation med koncentrerad ammoniumhydroxid ger en mjölkaktig lösning, ur vilken produkten Åstelnar vid kylning till 1o°c. Efter att ha fått Stå 1 kylskåp i ungefär l6 timmar filtreras den gulbruna produkten, tvättas: -med kallt destillerat vatten och torkas under vakuum i ungefär “l6 timmar och ger l2,0 g av titelföreningen, smältpunkt 34,0- ,o°c. '-1 7 466 788 B) 2,2'-[[2-[(3-brom-2,4,6-trimetylfenyl)amino]-2-oxoetyl]imino]- bisättiksyra En suspension av 9,56 g nitrilotriättiksyra i pyridin (torkad över molekylsikt) framställes under fuktuteslutning (CaSO4 torkningsrör) och upphettas till 50°C. Ättiksyraahydrid (5,ll g) tillsättes droppvis. Reaktionsblandningen klarnar och upphettas till loo°c. Efter det ett temperaturen hållits i 40 minuter kyles reaktionsblandningen till 55°C och en lösning av 10,7 g 3-brom-2,4,6-trimetylanilin i 25 ml torr pyridin tillsättes sakta. Reaktionsblandningen upphettas till l00oC och efter l,5 timmar vid denna temperatur kyles lösningen på isbad. Reaktions- blandningen rotationsindunstas till en halvfast substans, som upplöses i l25 ml l0 %-ig natriumhydroxid vikt/volym. Det basiska* skiktet extraheras därefter med två l00 ml portioner metylenklo- rid. Destillerat vatten (l00 ml) sättes till det basiska skiktet, som därefter överföres till pH 3 med koncentrerad saltsyra och ger en fällning. Efter att ha fått stå i kylskåp i ungefär l6 timmar filtreras den orena produkten, tvättas med kallt destil- lerat vatten och torkas under vakuum vid 40°C. Den orena produk- ten upplöses i l00 ml 60 %-ig vattenhaltig etanol, behandlas med 3,0 g Darco och filtreras het genom en Hyflo-bädd och ger en lös- ning. Kristaller utfälles och filtreras, tvättas med tre 25 ml portioner 50 %-ig vattenhaltig etanol och torkas under vakuum i 400C. Reaktionen ger 9,1 g av titelföreningen, smältpunkt las-2oo°c., sönaeraelning.

Exempel 2. 2,2'-[[2-[(3-I(3-brom-2,6-dietyl-4-metylfenyl)-amino]-2-oxoetyl]- imino]bisättiksyra A) 3-brom-2,6-dietyl-4-metylanilin Koncentrerad HCl (10 ml) kyles till SOC i isvattenbad och 1,63 g 2,6-dietyl-4-metylanilin tillsättes droppvis och ger en uppslam- ning. Brom (l,59 g) med l0 ml koncentrerad HCl tillsättes dropp- vis i 30 minuter. Reaktionsblandningen omröres i 3,75 timmar och ml destillerat vatten tillsättes. Efter kylning i l,0 timme filtreras reaktionsblandningen och tvättas två gånger med 25 ml kallt destillerat vatten. Efter torkning under vakuum i ungefär _ l6 timmar upplöses den orena fasta substansen (2,3 g) i l00 ml 466 78.8 s %-ig NaOH och extraheras med en l50 ml portion och en 100 ml portion metylenklorid. Efter torkning över natriumsulfat rota- tionsindunstas metylenkloridlösningen till 1,9 g oren produkt.

B) 2,2'-[[2-[(3-brom-2,6-dietyl-4-metylfenyl)amino]-2-oxoetyl]- imino]bisättiksyra En uppslamning av 1,34 g nitrilotriättiksyra i 15 ml torr pyri- din (torkad över molekylsikt) framställes och upphettas till 46OC. Ättiksyraanhydrid (0,72 g) tillsättes (l ml pyridinskölj- ning), och lösningen upphettas till l00oC. Efter upphettning i 0,5 timmar får lösningen kallna till 46oC och en lösning av 1,7 g oren 3-brom-2,6-dietyl-4-metylanilin i 6 ml pyridin tillsättes sakta. Lösningen upphettas vid l00OC i 2 timmar, kyles, och rotationsindunstas till en pastaliknande produkt. Produkten upp- löses i 25 ml 10 %-ig natriumhydroxid och den erhållna lösningen extraheras två gånger med 25 ml portioner metylenklorid. Vatten- lösningen spädes med 50 ml destillerat vatten, neutraliseras med koncentrerad HCl till pH 3,0, och får stå i kylskåp i ungefär 16 timmar. Filtrering ger en fast substans, som vid torkning i 3 timmar vid 60°C under vakuum ger 1,4 g oren produkt. Omkristal- lisation ur 25 ml 50 %-ig etanol ger l,04 g nålar, smältpunkt 194,5-195,5°c, ~ Exempel 3. 2,2'-[[2-[(3-jod-4-metylfenyl)amino]-2-oxoetyl]imino]bisättiksyra En uppslamning av 4,78 g nitrilotriättiksyra i 40 ml torr pyri- din (torkad över moiekylsikt) upphettas till 6o°c. Ättiksyra- anhydrid (2,55 g) tillsättes sakta och lösningen upphettas till l00°C. Efter upphettning i 0,5 timmar kyles lösningen till 40°C, och en lösning av 5,8 g 3-jod-4-metylanilin i 20 ml torr pyridin tillsättes under 25 minuter. Lösningen upphettas vid l0OoC i 1,0 timme. Reaktionsblandningen kyles och rotationsindunstas till en återstod, som upplöses i 65 ml 10 %-ig natriumhydroxid.

Denna lösning extraheras två gånger med 50 ml portioner metylen- klorid utspädd med 100 ml destillerat vatten och neutraliseras å med koncentrerad HCl till pH 3,2. Den orena produkten får stå i kylskåp i ungefär l6 timmar, filtreras, tvättas två gånger med 50 ml portioner destillerat vatten och torkas under vakuumr. 9 466 788 vid 40OC. Den orena produkten (8,0 g) omkristalliseras efter Darco-behandling och ger 5,7 g produkt, smältpunkt 2l3,5-2l5,0OC (sönderdelning).

Exempel 4. 2,2'-[[2-[(4-brom-3-metylfenyl)amino]-2-oxoetyl]imino]bisättik- EXEÉ En uppslamning av 9,56 g nitrilotriättiksyra i 80 ml torr pyri- din (torkad över molekylsikt) upphettas till 55oC. Ättiksyra- anhydrid (7,66 g) tillsättes och lösningen upphettas till l00OC.

Efter upphettning i 0,5 timmar kyles lösningen till 55oC, och 9,30 g 4-brom-3-metylanilin tillsättes med en 5 ml pyridinskölj- ning. Lösningen upphettas vid l00°C i l,0 timme. Reaktionsbland- ningen kyles och rotationsindunstas till en pastaliknande fast substans, som upplöses i l20 ml vattenhaltig ammoniumhydroxid (30 ml koncentrerad ammoniumhydroxid/90 ml destillerat vatten).

Den klara bruna lösningen extraheras med två l00 ml portioner metylenklorid och neutraliseras till pH 3 med 35 ml koncentre- rad HCl. Den vita fasta substansen filtreras, tvättas med tre ml portioner kallt destillerat vatten och torkas under va- kuum i 2,75 timmar vid 60oC. Den orena produkten (l2,9 g) om- kristalliseras ur 360 ml 50 %-ig etanol och ger 9,85 g produkt, smältpunkt 206,5-2o9,o°c.

Exempel 5. 2,2'-[[2-[(3-brom-4-metylfenyl)amino]-2-oxoetyl]imino]bisättik- ÉZEÉ.

En uppslamning av 4,78 g nitrilotriättiksyra i 40 ml torr pyri- din (torkad över molekylsikt) framställes och upphettas till 50°C. Ättiksyraanhydrid (2,55 g) tillsättes sakta och lösningen upphettas till loo°c. Efter uppnettning 1 0,5 tinnar kyles lös- ningen till 42°c och 4,81 g 3-bron-4-netyianiiin 1 5 m1 pyridin tillsättes sakta. Lösningen upphettas till l00°C. Efter upphett- ning i 2,0 timmar kyles reaktionsblandningen ooh rotationsin- dunstas. Detta material upplöses i 75 ml 10 %-ig natriumhydroxid och extraheras tvâ gånger med 50 ml portioner metylenklorid. i Den vattenhaltiga delen utspädes med l00 ml destillerat vatten, neutraliseras till pH 3,2 med koncentrerad HCl och får stå i 466 788 . 10 kylskåp i ungefär l6 timmar över natten. Reaktionsblandningen filtreras och tvättas med kallt destillerat vatten. Efter torkning i 3 timmar under vakuum vid 60°C erhålles 7,14 g oren produkt, smältpunkt 206,0-208,OOC. Omkristallisation ur l50 ml 75 %-ig etanol ger 6,4 g fast substans, smältpunkt 209,0-2lo,o°c.

II Exempel 6. (Exempel på komposition enligt uppfinningen) Beredningar för komplexbildning med teknetium-99m Tabellen nedan åskådliggör exempel på beredningar av föreningar med formeln I med stannofluoridreduceringsmedel. Beredningarna framställes genom att liganden upplöses i 0,46 M natriumhydroxid och ger en lösning med ett slutligt pH av ungefär 6-7,5. Till denna sättes 0,01 ml av en 70 mg/ml-lösning av stannofluorid i 6 M saltsyra och volymen överföres till 5 ml med vatten för injektion. Beredningarna i följande tabell har ett föredraget molförhållande ligandztenn av l50:l.

IX 466 788 ll mm_ß mm_m mm_ß mm_m mß_w äl wH_o a_wv w4_o m_ww wH_o w_om vH_o m_Hm vH_o w_wv Ufluoøflwoflsmuw mmmwmfi ^HE\mEv Gofiumnucmocom mnmmxfluummfinfionfiäflfiflmuwoxolm Ifionflam^H>øwwH>»wa|«|eo~n|mv_|~_H|.~_~ mnæmxfluumwfinfioflflšflfiAmuwoxolm |HonflEm^AæQwmamuwE|m|E0HQ|wvHINHH|.N_N mflwmxflpßmwflnfiønflaflfiflænwoxozw |Hoafism^H>aww+>pwa|«|wofi|mv_|NH.|.~_~ mnwmxflupmwfin |H0cfiEfi~Hm#w0x0|N|H0QflEm^fl>Gwm4>uwE |«|«>»wfiø|m_~|aoHn|mv.|mv.|~..|.~_~ mummxflwumwflnfiosflëfifiHM»moN0|m|~oQfiEm .. fiæcmwflwumëflunTw _ w _ mLuounnmv TÉ T. N _ N Uflmwflq AAQQMH

Claims (9)

466 788 Ü PATENTKRAV

1. l. Komposition innefattande ett etannoreduceringsmedel och en förening med formeln: Rl N H /CHZ-c-OH R2 (cH2)n-NH-c-cH2-N \cH2-E-os, R3 R4 O _ eller ett farmaceutiskt acceptabelt, vattenlösligt salt därav, vari Rl och R4 vardera oberoende av varandra betecknar väte, metyl eller etyl; en av R2 och R3 är alkyl med l-4 kolatomer och den andra är brom eller jod; och n är 0, l eller 2.

2. Komposition enligt patentkravet l, innefattande en förening med formeln: o Rl o ll * || /CHZ-C-OH R2 NH-c-CH -N \cH2-o-on, 3 R4 eller ett farmaceutiskt acceptabelt, vattenlösligt salt därav.

3. Komposition enligt patentkravet l eller 2, k ä n n e - t e c k n a d av att både Rl och R4 är metyl.

4. Komposition enligt patentkravet l, 2 eller 3, k ä n n e - t e c k n a d av att en av R2 och R3 är metyl eller etyl.

5. Komposition enligt patentkravet l, k ä n n e t e c k n a d av att föreningen utgör 2,2'-//2-/(3-brom-2,4,6-trimetyl- fenyl)amino/-2-oxoetyl/imino/bisättiksyra.

6. Komposition enligt patentkravet l, k ä n n e t e c k n a d av att föreningen utgör 2,2'-//2-/(3-brom-2,6-dietyl-4-metyl- /3 4» 0\ Ch \J O) CD fenyl/amino/-2-oxoetyl/imino/bisättiksyra.

7. Komposition enligt patentkravet l, k ä n n e t e c k n a d av att föreningen utgör 2,2'-//2-/(3-jod-4-metylfenyl)amino/- 2-oxoetyl/imino/bisättiksyra,

8. Komposition enligt patentkravet l, k ä n n e t e c k n a d av att föreningen utgör 2,2'-//2-/(4-brom-3-metylfenyl)amino/- 2-oxoetyl/imino/bisättiksyra.

9. Komposition enligt patentkravet l, k ä n n e t e c k n a d av att föreningen utgör 2,2'-//2-/(3-brom-4-metylfenyl)amino/- 2-oxoetyl/imino/bisättiksyra.