SE443372B - Forfarande och anordning for pavisande av mikroorganismer - Google Patents

Description

7801870-2 Enligt föreliggande uppfinning undvikes nämnda olägenheter genom att transporten av det fasta näringssubstratet till förbrukaren före inkubationen eller till ett ställe för vidarebehandling efter in- kubationen är separat från transporten av näringsbuljonen, men varvid ympningen av det fasta näringssubstratet ändå kan genomföras såsom vid de konventionella dubbelkulturflaskorna i en sluten anordning genom att man helt enkelt skakar och överskiktar ytan av det fasta näringssubstratet med näringsbuljongen. V 'Uppfinningen avser närmare bestämt ett förfarande för på- visning av mikroorganismer i ett prov, varvid man . a) inför provet iden första behållare, innehållande ett flytande näringsmedium, b) förbinder den första behållaren, eventuellt efter inkubation, med en andra behållare, innehållande minst ett fast näringsmedium, på så sätt att behållarnas inre står i kontakt, 7 c) W bringar ytan av det fasta näringsmediet i den andra be- hållaren i kontakt med innehållet i den första behållaren, d) inkuberar och e) undersöker närvarande kolonier på ytan av det fasta närings- mediet.

Uppfinningen avser vidare en anordning för pâvisning av mikroorganismer, bestående av en första behållare, innehållande ett flytande näringsmedium, och en andra behållare, innehållande minst ett fast näringsmedium, varvid det inre av de båda behållarna står i kontakt och dessa behållare är förbundna med varandra på så sätt att de åter kan skiljas åt. _ Uppfinningen avser vidare en anordning för påvisning av mikroorganismer, bestående av ett på båda sidor med en låsanordning för- sett genomsynligt rör, varvid en med ett eller med olika, fasta närings- medier beskiktat bärare, vilken sträcker sig in i röret, är fixerad med den ena av de båda låsanordningarna. 7 Ytterligare detaljer vid uppfinningen framgår av följande detaljerade beskrivning av en särskilt lämplig utföringsform för genom- förande av förfarandet enligt uppfinningen.

Fig. l visar den första behållaren med flytande närings- buljon i längdsnitt; Fig. 2 visar den andra behållaren med fast näringssubstrat i iängdsnitt; ' Fig. 3 visar den genom kombinationen av behållarna l och 10 bildade enheten i längdsnitt. 78018702-2 Den första behållaren l består av en flaska 2, som före- trädesvis är tillverkad av ett transparent material, såsom glas eller plast. Flaskan l är tillsluten med en propp 6, företrädesvis en gummi- propp, vilken för införing av en kroppsvätska, såsom blod, kan genom- stickas med en nål. Proppen 6 är inspänd i en på flaskhalsen påskruvad, företrädesvis metallisk kappa 4, varigenom vid öppning av kappan 4 proppen 6 automatiskt medföljer. För att man utan problem skall kunna sticka en nål genom proppen 6 uppvisar kappan 4 en avlägsningsbar del 5.

Behållaren l, som innehåller ett flytande näringsmedium 7, står före- trädesvis under C02-atmosfär och partiellt vakuum.

Den andra behållaren 10 består av ett genomsynligt rör ll av glas eller plast och uppvisar en skruvgänga 12 på insidan av den cylindriska förträngningen 14 vid den undre änden och en skruvgänga 13 på utsidan av den övre änden. Skruvgängan 12 överensstämmer med den på halsen av flaskan 2 befintliga skruvgängan och möjliggör förbindelse mellan behållarna. Röret ll är i sin ena ände tillslutet med en skruv- anordning 16.

För att erhålla en tät förbindelse mellan de båda behållarna är röret ll inuti den undre cylindriska förträngningen 14 försedd med en tätningsring 17, företrädesvis av polyeten. Behållaren lO är i sin övre ände försedd med en på skruvgängan 13 påskruvad låsanordning 15.

Låsanordningen 15 är förbunden med en med ett eller flera olika närings- substrat en- eller dubbelsidigt beskiktad objektbärare 18, företrädesvis av glas eller plast.

Vid användning för man med hjälp av en med nål försedd över- föringsanordning blod från en patient till behållaren l. För detta ända- mål stickes nålen i överföringsanordningen efter avlägsning av delen 5 genom proppen 6. Blodflödet in i flaskan 2 underlättas exempelvis genom att man pålägger flaskan ett partiellt vakuum.

När flaskan 2 innehåller den önskade blodmängden, avlägsnas nålen, varvid det av nålen i proppen 6 bildade hålet tillslutes av sig självt. Blodkulturflaskan 2 inkuberas ungefär l timme upp till ungefär 10 dagar vid 20-37°C. Därefter avskruvas kappan 4 flaskan 2 och samtidigt avlägsnas proppen 6. Behållaren l avskruvas från behållaren 10, vilken genom sin ena ände öppnats medelst uppskruvning av låsanordningen 16.

Den på så sätt erhållna anordningen, innehållande minst ett fast och ett flytande näringsmedium, tippas flera gånger för att man skall tillförsäkra en optimal kontakt mellan näringsmedierna. Efter en inkuba- tionstid av 1 timme till lO dagar vid 20-370C undersökes på det fasta näringssubstratet odlingen noggrant och värderas. Om någon tillväxt icke 780187Ü-2 kan fastställas, kan detta förlopp upprepas flera gånger. Vid längre inkubation tippas anordningen minst en gång dagligen för tillförsäkran av optimal kontakt mellan det flytande och det fasta näringsmediet.

Föreliggande uppfinning är givetvis icke begränsad till den ovan beskrivna specifika utföringsformen.

Således kan inom ramen för föreliggande uppfinning exempel- vis behållarna loch 10 uppvisa en godtycklig form och vara förbundna på olika sätt. Behållaren lO behöver exempelvis icke uppvisa en låsan- ordning i båda ändarna och det fasta näringssubstratet kan i stället för på en objektbärare vara anbringat på en av väggarna i denna behållare.

För förbindning av behållarna behöver man vidare icke nöd- vändigtvis använda skruvlåsanordningar. Man kan även förbinda de båda behållarna på annat sätt än genom påskruvning, såsom med hjälp av en instickningshylsa.V I ' Vidare kan låsanordningarna i de båda behållarna vara an- ordnade på så sätt att man vid förbindning av de båda behållarna, såsom genom påskruvning, bringar det inre av dessa behållare i kontakt, utan föregående avlägsnande av de båda låsanordningarna eller att någon öppning utåt i de båda behållarna är nödvändig.

Den i steget b) av förfarandet enligt uppfinningen nämnda inkubationen av behållaren med ett flytande näringsmedium för förbindel- sen med den andra behållaren, som innehåller ett fast näringsmedium, är fakultativ. ' Inkubationen i steg d) är därför nödvändig och kan utföras såväl under aeroba som under anaeroba betingelser. I det sistnämnda fallet kan locket till behållaren innehållande det fasta näringsmediet _vara försett med en öppning för inledning av en inert gas, såsom kväve eller C02 och för förträngning av luften. Den inerta gasen, såsom C02, kan även tillföras med hjälp av en i behållaren med det fasta närings- mediet närvarande eller på dess lock anbringad gaskälla.

Föreliggande uppfinning möjliggör påvisning av mikroorganismer såsom bakterier, svampar, jästsvampar, etc., i ett prov. Detta prov kan härleda sig ifrån en godtycklig vätska, varvid företrädesvis kroppsvät- skor, såsom blod, likvor eller urin, undersökes.

Slutligen är föreliggande uppfinning icke begränsad till användning av ett enda fast näringsmedium. Således kan man för identi- fiering av mikroorganismer samtidigt använda en eller flera typer av näringsmedier. Vidare kan näringsmedierna innehålla antibiotika och/eller kemoterapeutika, varigenom en känslighetsundersökning av mikroorganismer- naåmöjliggöres.

Claims (5)

7801870-2 PATENTKRAv
1. l. Förfarande för påvisande av mikroorganismer i ett prov, varvid man a) inför provet i en första behållare, b) förbinder den första behållaren med en andra behållare, som innehåller minst ett fast näringsmedium, nå sådant sätt, att det inre utrymmet i de båda behållarna är i kontakt men i huvudsak utan att de båda behållarna sträcker sig in i varandra, c) bringar ytan av det fasta näringsmediet i den andra behålla- ren i beröring med innehållet i den första behållaren, d) inkuberar, och e) undersöker närvaron av kolonier på ytan av det fasta närings- mediet, . k ä n n e t e c k n a t därav, att den första behållaren (1) innehålller ett flytande näringsmedium samt att i denna första behållare (l) eventuellt genomföres en inkubering innan den förbindes med den andra behållaren (10).
2. 2. Förfarande enligt patentkravet 1, k ä n n e t e c k n a t därav, att den första behållaren och den andra behållaren för- bindes genom påskruvning.
3. 3. Anordning för användning vid förfarandet enligt patent- kravet 1 bestående av en första behållare samt en andra be- hållare, vilken innehåller minst ett fast näringsmedium, var- vid de inre utrymmena i de båda behållarna står i kontakt men i huvudsak utan att de båda behållarna sträcker sig in i varand- ra, varvid de båda behållarna är förenade med varandra på sådant sätt, att de åter kan åtskiljas, k ä n n e t e c k n a d därav, att den första behållaren (l) innehåller ett flytande näringsmedium, och att den andra behållaren (10) är utformad såsom ett vid båda sidor med tillslutningsorgan försett genom- synligt rör, varvid på ett av de båda tillslutningsorganen är anordnad en med näringssubstratet eller näringssubstraten be- lagd bärare, som sträcker sig in i röret. , ...__-rn- __.....~<..<_.- V ......,.-w,-_.-~v-v~.v..--.__..._.~_.., , 7801870-2_
4. 4. Anordning enligt patentkravet 3, kuä n n e t e c k n a d därav, att den första behållaren och den andra behållaren är förenade genom påskruvning.t
5. 5. Anordning enligt patentkravet 3, k ä n n e t e c k n a d därav, att bäraren har formen av en objektbärare.