FI61515C - Anordning foer paovisande av mikroorganismer - Google Patents

Description

[Bl (11) KuULUTUSjUI.KAISU .

J/STa l J 1 J UTLÄGGNINGSSKRIFT 61515 C (45) Patentti c.y3n:-tty 10 G3 1902 Patent midtf . lit V * / (51) Kv.ik.3/int.ci.3 C 12 M 1/24, C 12 Q 1/02 SUOMI —FINLAND (21) — PttuncaiMMcnlnc 780033 (22) Hakemispäivä — AnsMmlnpdag 05.01-78 ^ ^ (23) Alkuptlv·—Giltighatadag 05.01.78 (41) Tullut luikitaksl — Bllvlc offuntlig 19.06.78 M· ), raklrtflhftllltut (44) NlktlvIlulpanM |b luwi)ullulMn pvm.» ,0 01. 82

Patent- och regicterctyralaan 1 ' Anrtkun uttefd och utl.tkrtfMn put>Uc«r*d (32)(33)(31) *Tt*«*1 atuoikaus—ftajird priorim ΐδ· 02 *77

Sveitsi-Schweiz(CH) 2063/77 (71) F. Hoffmann-La Roche & Co. Aktiengesellschaft, Grenzacherstrasse 12U-181, Basel, Sveitsi-Schweiz(CH) (72) Hans Forrer, Basel, Sveitsi-Schweiz (CH), Hans-Gunther Zeller, Rheinfelden, Saksan Liittotasavalta-Förbundsrepubliken Tyskland(DE) (7^) Oy Roister Ab (5M Laite mikro-organismien toteamiseksi - Anordning för pävisande av mikro-organismer

Esillä olevan keksinnön kohteena on laite mikro-organismien toteamiseksi sisältäen yhtä nestemäistä ja ainakin yhtä kiinteätä elatusainetta.

Mikro-organismien toteamiseksi kehon nesteissä, erityisesti bakteerien toteamiseksi veressä, on nestemäistä elatusainetta viljeltävä ja kasvu sen jälkeen siirrettävä edelleen kiinteälle elatusalustalle. Jo vuosia on käytetty järjestelmiä, joissa molemmat elatusai-neet yhdistetään samassa astiassa, jotta vältyttäisiin hankalalta ja joissakin tapauksissa vaaralliselta nestemäisessä elatusaineessa olevien esiviljelmien siirrolta astian ulkopuolella olevalle kiinteälle elatusalustalle.

Tunnetut laitteet, joissa yhdistetään kiinteä ja nestemäinen elatusaine, eivät kuitenkaan monestakaan syystä johtuen ole tyydyttäviä. Varsinkin koska vaarana on, että kiinteän elatusaineen aineosia liukenee nestemäiseen elatusliemeen, voidaan useimmiten käyttää ainoastaan nestemäiseen elatusliemeen sopivaa kiinteää elatusainetta. Tällöin on mm. huomattavana haittana se, ettei aktivoijän erottelu ole mahdollinen.

61515 Tähän asti ehdotetut ratkaisut kiinteän elatusalustan ja nestemäisen elatusliemen erottamiseksi inkuboinnin ja kuljetuksen aikana ovat hankalia ja kalliita ja/tai mahdollistavat molempien aineiden erotuksen ainoastaan inkuboinnin aikana, mutta ei kuitenkaan kuljetuksen aikana.

Esillä olevan keksinnön mukaisesti vältetään edellä olevat haitat siten, että kiinteän elatusalustan kuljetus - käyttäjälle ennen inkubointia tai jatkokäsittelypisteeseen inkuboinnin jälkeen -tapahtuu elatusliemestä erillään. Kiinteän elatusalustan ymppääminen voidaan kuitenkin suorittaa suljetussa laitteessa kuten tavanomaisissa kaksoisviljelypulloissa yksinkertaisesti ravistelemalla ja huuhte-lemalla kiinteän elatusalustan pintaa elatusliemellä.

Keksinnön mukainen laite on tunnettu siitä, että se muodostuu ensimmäisestä astiasta, joka sisältää nestemäistä elatusainetta ja toisesta astiasta, joka sisältää ainakin yhtä kiinteää elatusainetta, jolloin astiat on yhdistetty siten, että molempien astioiden sisätilat ovat kosketuksessa keskenään ja että ne voidaan tarvittaessa erottaa toisistaan.

Esillä olevan keksinnön muut yksityiskohdat ja tunnusmerkit käyvät ilmi patenttivaatimuksista 2-4 ja seuraavasta yksityiskohtaisesta selityksestä, joka koskee keksinnön mukaisen laitteen erästä edullista suoritusmuotoa.

Kuvio 1 esittää ensimmäistä astiaa nestemäisine elatusliemineen pituusleikkauksena, kuvio 2 esittää toista astiaa kiinteine elatusalustoineen pituusleikkauksena, kuvio 3 esittää astioiden 1 ja 10 yhdistelmän muodostamaa yksikköä pituusleikkauksena.

Ensimmäinen astia 1 muodostuu pullosta 2, joka on edullisesti läpinäkyvää ainetta, kuten lasia tai muovia. Pullo 1 on suljettu tulpalla 6, edullisesti kumitulpalla, jonka läpi voidaan pistää neula, jotta siihen voidaan viedä kehon nestettä kuten verta. Tulppa 6 on puristettu pullon kaulaan kierrettyyn edullisesti metallikapseliin 4 siten, että kun kapseli 4 avataan, se ottaa automaattisesti tulpan 6 mukaansa. Jotta neula voidaan pistää tulpan 6 läpi ilman vaikeuksia, on kapselissa 4 irrotettava osa 5. Nestemäistä elatus-ainetta 7 sisältävä astia 1 on edullisesti COj-kehän ja osittaisen tyhjön alaisena.

Toinen astia muodostuu läpinäkyvästä lasi- tai muoviputkesta 11. Siinä on ruuvikierre 12 lieriömäisen seinän 14 alapään sisäpin- 3 61515 naila. Ruuvikierre 12 vastaa pullon 2 kaulassa olevaa ruuvikierrettä ia mahdollistaa kummankin astian yhdistämisen. Putki 11 on alapääs-tään suljettu ruuvisulkimella 16.

Molempien astioiden tiivistämiseksi on putki 11 varustettu lieriömäisen seinän 14 alaosan sisäpuolella tiivistysrenkaalla 17, joka on edullisesti polveteeniä. Astia 10 on yläpäästään varustettu ruuvikierteeseen 13 kierretyllä sulkimella 15. Sulkimeen 15 on yhdistetty kiinteästi yhdellä tai erilaisilla elatusalustoilla yksi- tai molemminpuolisesti päällystetty obiektialusta 18, joka on edullisesti lasia tai muovia.

Käytön aikana johdetaan neulalla varustetun siirtolaitteen avulla potilaan verta astiaan 1. Tätä tarkoitusta varten siirtolaitteen neula pistetään osan 5 poistamisen jälkeen tulpan 6 läpi. Veren valumista pulloon 2 helpottaa edullisesti pullossa vallitseva osittainen tyhjö.

Kun pullo sisältää halutun määrän verta, poistetaan neula, jolloin neulan tulppaan 6 aikaansaama reikä sulkeutuu itsestään. Verenviljelypulloa 2 inkuboidaan noin 1 tunnista noin 10 päivään 20-37°C:ssa.

Sen jälkeen kierretään pullon 2 kapseli 4 auki, jolloin tulppa 6 samalla poistetaan. Astia 10, joka on avattu alapäästään kiertämällä suljin 16 auki, kierretään kiinni astian 1 päälle.

Tällä tavoin muodostettua laitetta, joka sisältää ainakin yhtä kiinteää ja yhtä nestemäistä elatusainetta, kallistetaan useita kertoja, jotta molempien elatusaineiden välille saadaan paras mahdollinen kosketus. Kun laitetta on inkuboitu 20-37°C:ssa 1 tunnista 10 päivään, tarkkaillaan ja arvioidaan kiinteällä elatusalustalla mahdollisesti olevaa kasvua. Jos kasvua ei ole todettavissa, voidaan tämä menettely toistaa useita kertoja. Jos inkubointia jatketaan kauemmin, kallistetaan laitetta vähintään päivittäin, jotta nestemäisen ja kiinteän elatusaineen välille varmistetaan paras mahdollinen kosketus.

Astioilla 1 ja 10 voi olla mielivaltainen muoto ja ne voidaan sulkea eri tavoin. Astiassa 10 ei esim. tarvitse olla suljinta molemmissa päissä, ja kiinteä elatusalusta voidaan objektialustan sijasta sijoittaa tämän astian jollekin seinälle.

Lisäksi astioiden sulkemiseen ei välttämättä tarvitse käyttää ruuvisulkimia. Molemmat astiat voidaan yhdistää toisiinsa myös muulla tavoin kuin kiertämällä, kuten esim. pistämällä ne päällekkäin.

Edelleen molempien astioiden sulkimet voidaan tehdä sellaisiksi, että molempia astioita esim. kiertämällä yhdistettäessä niiden 4 61515 sisätilat joutuvat keskenään kosketukseen tarvitsematta tätä ennen poistaa molempia sulkimia ja avata molempia astioita ulkoapäin.

Nestemäistä elatusainetta sisältävän astian inkubointi ennen toiseen kiinteään elatusainetta sisältävään astiaan yhdistämistä on valinnainen. Yhdistämisen jälkeinen inkubointi sen sijaan on pakollinen. Se voi tapahtua sekä aerobisissa että anaerobisissa olosuhteissa. Jälkimmäisessä tapauksessa voi kiinteää elatusainetta sisältävän astian kannessa olla aukko, jonka kautta johdetaan sisään inerttlä kaasua kuten esim. typpeä tai C02:a ja poistetaan ilmaa. Inerttiä kaasua, esim. CC^ia voidaan myös kehittää kiinteää elatusainetta sisältävässä astiassa olevan tai sen kanteen kiinnitetyn kaasulähteen avulla.

Esillä oleva keksintö mahdollistaa mikro-organismien kuten esim. bakteerien, sienien, hiivojen jne. toteamisen näytteessä. Tämä näyte voi olla peräisin jostakin nesteestä, jolloin edullisesti tutkitaan kehon nesteitä kuten esim. verta, virtsaa ym.

Lopuksi esillä oleva keksintö ei rajoitu yhden ainoan kiinteän elatusaineen käyttöön. Niinpä voidaan esim. mikro-organismien toteamiseen käyttää samanaikaisesti monenlaisia elatusaineita. Lisäksi elatusaineet voivat sisältää antibiootteja tai kemoterapeutteja, mikä mahdollistaa mikro-organismien herkkyystutkimuksen.